HRP20000297A2 - 5-ht1f agonists - Google Patents

5-ht1f agonists Download PDF

Info

Publication number
HRP20000297A2
HRP20000297A2 HR20000297A HRP20000297A HRP20000297A2 HR P20000297 A2 HRP20000297 A2 HR P20000297A2 HR 20000297 A HR20000297 A HR 20000297A HR P20000297 A HRP20000297 A HR P20000297A HR P20000297 A2 HRP20000297 A2 HR P20000297A2
Authority
HR
Croatia
Prior art keywords
alkyl
pyridine
pyrrolo
hydroxy
compound
Prior art date
Application number
HR20000297A
Other languages
English (en)
Inventor
Sandra Ann Filla
Brian Michael Mathes
John Mehnert Schaus
Original Assignee
Lilly Co Eli
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Lilly Co Eli filed Critical Lilly Co Eli
Publication of HRP20000297A2 publication Critical patent/HRP20000297A2/hr

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D471/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00
    • C07D471/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D471/04—Ortho-condensed systems
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/44—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/14—Prodigestives, e.g. acids, enzymes, appetite stimulants, antidyspeptics, tonics, antiflatulents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P15/00—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P15/00—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives
    • A61P15/10—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives for impotence
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/04—Centrally acting analgesics, e.g. opioids
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/06—Antimigraine agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/14—Drugs for disorders of the nervous system for treating abnormal movements, e.g. chorea, dyskinesia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/18—Antipsychotics, i.e. neuroleptics; Drugs for mania or schizophrenia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/20—Hypnotics; Sedatives
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/22—Anxiolytics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/24—Antidepressants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/28—Drugs for disorders of the nervous system for treating neurodegenerative disorders of the central nervous system, e.g. nootropic agents, cognition enhancers, drugs for treating Alzheimer's disease or other forms of dementia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/30—Drugs for disorders of the nervous system for treating abuse or dependence
    • A61P25/32—Alcohol-abuse
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/30—Drugs for disorders of the nervous system for treating abuse or dependence
    • A61P25/34—Tobacco-abuse
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P27/00—Drugs for disorders of the senses
    • A61P27/16—Otologicals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/04—Anorexiants; Antiobesity agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/08—Antiallergic agents

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Neurology (AREA)
  • Neurosurgery (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Psychiatry (AREA)
  • Addiction (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Reproductive Health (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Child & Adolescent Psychology (AREA)
  • Hospice & Palliative Care (AREA)
  • Pulmonology (AREA)
  • Obesity (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Anesthesiology (AREA)
  • Nutrition Science (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Psychology (AREA)
  • Gynecology & Obstetrics (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Nitrogen Condensed Heterocyclic Rings (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Pyrrole Compounds (AREA)

Description

Serotonin (5-HT) pokazuje raznoliko fiziološko djelovanje, posredovano sa najmanje sedam klasa receptora, od kojih je izgleda najviše heterogeni 5-HT1. Ljudski gen koji eksprimira jedan od tih 5-HT1 podtipova receptora, nazvan 5-HT1F, su izolirali Kao i suradnici (Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 90, 408-412 (1993)). Taj 5-HT1F receptor pokazuje farmakološki profil različit od bilo kojeg dosad opisanog serotonergičkog receptora.
Moskowitz je pretpostavio da trenutno nepoznati okidači za bol stimuliraju trigeminalne ganglije, koji inerviraju žile unutar moždanog tkiva, povećavajući otpuštanje vazoaktivnih neuropeptida iz aksona na žilama. Ti otpušteni neuropeptidi zatim pokreću niz događaja, čija je posljedica bol. Tu neurogenu upalu blokiraju sumatriptan i ergot alkaloidi, mehanizmima koji uključuju 5-HT receptore, za koje se vjeruje da su vrlo srodni 5-HT1D podtipu, smještenom na trigeminovaskularnim vlaknima (Neurology, 43 (suppl. 3), S16-S20 (1993)). Pokazano je da agonisti 5-HT1F receptora inhibiraju peptidnu ekstravazaciju zbog stimulacije trigeminalnih ganglija (Audia i Nissen, U.S. Patent #5.521.196).
Spojevi koji pokazuju afinitet za 5-HT1F receptor predstavljaju nov pristup u liječenju bolesti povezanih s abnormalnim serotonergičkim neuroprijenosom. Dalje, spojevi selektivni za 5-HT1F podtip receptora su potencijalno korisni za liječenje takvih bolesti, a i uzrokuju manje neželjenih nuspojava.
Ovaj izum pruža 5-supstituirane-3-(piperidin-4-il)- i 5-supstituirane-3-(1,2,3,6-tetrahidropiridin-4-il)pirolo[3,2-b]piridine formule I:
[image]
gdje
A-B je -C=CH- ili -CH-CH2-;
R je H, C1-C6 alkil, benzil, ili feniletil;
X je halo, hidroksi, C1-C4 alkoksi, -NHR1, -C(O)OR2, ili -C(O)NHR3 gdje:
R1 je C1-C4 alkil, fenil (C1-C4 alkilenil), ili heteroaril (C1-C4 alkilenil);
R2 je vodik ili C1-C4 alkil;
R3 je C1-C4 alkil, heterocikl, ili fenil opcionalno monosupstituiran s halo ili hidroksi; i njihove farmaceutski prihvatljive adicijske soli s kiselinama i solvate, pod uvjetom da kad A-B je -C=CH-, onda X nije hidroksi, halogen ili C1-C4 alkoksi.
Ovaj izum također pruža farmaceutski pripravak koji sadržava, zajedno s farmaceutski prihvatljivim nosačem, razrjeđivačem ili ekscipijentom, spoj formule I.
Daljnje utjelovljenje ovog izuma je postupak za povećavanje aktiviranja 5-HT1F receptora, za liječenje raznih poremećaja koji su povezani sa smanjenim neuroprijenosom serotonina kod sisavaca. Među tim poremećajima se nalaze depresija, migrenska bol, bulimija, predmenstrualni sindrom ili sindrom kasne lutealne faze, alkoholizam, zloupotreba duhana, panični poremećaj, anksioznost, opća bol, kronična bol, post-traumatski sindrom, gubitak pamćenja, starosna demencija, socijalna fobija, hiperaktivni poremećaj nedostatka pažnje, poremećaji podvojenog ponašanja, poremećaji kontrole impulzivnosti, granični poremećaj ličnosti, opsesivno kompulzivni poremećaj, sindrom kroničnog umora, prerana ejakulacija, teško postizanje erekcije, anorexia nervosa, poremećaji spavanja, autizam, mutizam, alergijski rinitis, trihotilomanija, trigeminalna neuralgija, dentalna bol ili bol disfunkcije temperomandibularnog spoja. Spojevi iz ovog izuma su također korisni za profilaktično liječenje migrene. Bilo koji od tih postupaka upotrebljava spoj formule II:
[image]
gdje
A-B je -C=CH- ili -CH-CH2-;
R je H, C1-C6 alkil, benzil, ili feniletil;
X je halo, hidroksi, C1-C4 alkoksi, -NHR1, -C(O)OR2, ili -C(O)NHR3 gdje:
R1 je C1-C4 alkil, fenil (C1-C4 alkilenil), ili heteroaril (C1-C4 alkilenil);
R2 je vodik ili C1-C4 alkil;
R3 je C1-C4 alkil, heterocikl, ili fenil opcionalno monosupstituiran s halo ili hidroksi; i njegove farmaceutski prihvatljive adicijske soli s kiselinama i solvate.
Upotreba spoja formule II za aktiviranje 5-HT1F receptora, za inhibiciju peptidne ekstravazacije općenito ili specifično zbog stimulacije trigeminalnih ganglija, i za liječenje bilo kojeg od gore opisanih poremećaja, su sve utjelovljenja ovog izuma.
Ovaj izum također pruža postupke i sintetske međuprodukte koji se upotrebljavaju za pripravu spojeva iz ovog izuma.
Općeniti kemijski termini upotrijebljeni u gornjim formulama imaju svoja uobičajena značenja. Na primjer, termin “alkil” uključuje takve skupine kao što su metil, etil, n-propil, izopropil, n-butil, izobutil, sec-butil, tert-butil, pentil, 2-pentil, 3-pentil, neopentil, heksil i slično. Termin “alkoksi” uključuje takve skupine kao što su metoksi, etoksi, izopropoksi, sec-butoksi, tert-butoksi, i slično. Termin “halo” uključuje fluoro, kloro, bromo i jodo.
Termin “fenil (C1-C4 alkilenil)” znači razgranati ili linearni alkilni lanac od 1 do 4 ugljikova atoma, supstituiran na nekom mjestu s fenilnim prstenom i uključuje takve skupine kao što su benzil, fenetil, fenpropil i fenbutil.
Termin “heteroaril (C1-C4 alkilenil)” znači razgranati ili linearni alkilni lanac od 1 do 4 ugljikova atoma, supstituiran na nekom mjestu s heterociklom.
Termin “heterocikl” znači stabilne aromatske i ne-aromatske 5- i 6-člane prstenove koji sadržavaju ugljik i od 1 do 3 heteroatoma, odabrana iz skupine koju sačinjavaju dušik, kisik i sumpor, spomenuti prstenovi su po potrebi monobenzokondenzirani. Ovi prstenovi uključuju furil, tienil, piridinil, piridinil-N-oksid, pirolil, N-metilpirolil, oksazolil, izoksazolil, pirazolil, imidazolil, triazolil, oksadiazolil, tiadiazolil, tiazolil, pirimidinil, pirazinil, piridazinil, i slično. Benzokondenzirani prstenovi uključuju izokinolil, izokinolil-N-oksid, benzoksazolil, benztiazolil, kinolinil, kinolinil-N-oksid, benzofuranil, tionaftil, indolil, i slično.
Iako su svi spojevi iz ovog izuma korisni kao 5-HT1F agonisti, poželjne su određene skupine. Sljedeći odlomci opisuju takve poželjne skupine.
a) A-B je -C=CH-;
a) A-B je -CH-CH2-;
a) R je C1-C6 alkil;
a) R je metil;
a) R je H;
a) X je halo;
a) X je kloro;
a) X je hidroksi;
a) X je C1-C4 alkoksi;
a) X je -NHR1;
a) X je -C(O)OR2;
a) X je C(O)NHR3;
a) R1 je C1-C4 alkil;
a) R1 je fenil(C1-C4 alkilenil);
a) R1 je heteroaril(C1-C4 alkilenil);
a) R2 je vodik;
a) R2 je C1-C4 alkil;
a) R3 je C1-C4 alkil;
a) R3 je fenil;
a) R3 je fenil monosupstituiran s halo ili hidroksi;
a) R3 je halofenil;
a) R3 je hidroksifenil;
a) R3 je heterocikl;
a) spoj je slobodna baza;
a) spoj je sol.
Spojevi iz ovog izuma mogu, ovisno o njihovoj strukturi i načinu sinteze i izolacije, egzistirati kao farmaceutski prihvatljivi solvati. Ti solvati uključuju vodu, metanol, i etanol. Solvatizirani oblici spojeva iz ovog izuma predstavljaju daljnje utjelovljenje ovog izuma.
Spojevi iz ovog izuma gdje X je hidroksi mogu postojati kao smjesa keto/enolnih tautomernih oblika. Ovaj izum obuhvaća keto oblik, enolni oblik, i sve njihove tautomerne smjese.
Spojevi iz ovog izuma su korisni u postupku za povećavanje aktiviranja 5-HT1F receptora, za liječenje raznih poremećaja koji su povezani sa smanjenim neuroprijenosom serotonina kod sisavaca. Poželjno je da sisavac, kojeg treba liječiti primjenom spojeva iz ovog izuma, bude čovjek.
Budući da su spojevi iz ovog izuma amini, oni su bazične prirode i prema tome reagiraju s bio kojom od brojnih anorganskih i organskih kiselina, da formiraju farmaceutski prihvatljive adicijske soli s kiselinama. Poželjno je prevesti slobodne amine u njihove adicijske soli s kiselinama zbog lakoće rukovanja i primjene. Kiseline koje se obično upotrebljavaju za formiranje takvih soli su anorganske kiseline, kao npr. kloridna kiselina, bromidna kiselina, jodidna kiselina, sulfatna kiselina, fosfatna kiselina, i slično, i organske kiseline, kao npr. p-toluen-sulfonska kiselina, metansulfonska kiselina, oksalna kiselina, p-brom-fenilsulfonska kiselina, karbonatna kiselina, sukcinska kiselina, limunska kiselina, benzojeva kiselina, octena kiselina, i slično. Primjeri takvih farmaceutski prihvatljivih soli su, dakle, sulfat, pirosulfat, bisulfat, sulfit, bisulfit, fosfat, monohidrogenfosfat, dihidrogenfosfat, metafosfat, pirofosfat, klorid, bromid, jodid, acetat, propionat, dekanoat, kaprilat, akrilat, formijat, izobutirat, kapronat, heptanoat, propiolat, oksalat, malonat, sukcinat, suberat, sebakat, fumarat, maleat, butin-1,4-dioat, heksin-1,6-dioat, benzoat, klorbenzoat, metilbenzoat, dinitrobenzoat, hidroksibenzoat, metoksibenzoat, ftalat, sulfonat, ksilensulfonat, fenilacetat, fenilpropionat, fenilbutirat, citrat, laktat, β-hidroksibutirat, glikolat, tartarat, metansulfonat, propansulfonat, naftalen-1-sulfonat, naftalen-2-sulfonat, mandelat, i slično. Poželjne farmaceutski prihvatljive soli su one formirane s kloridnom kiselinom.
Sljedeća skupina prikazuje spojeve formule I i II predviđene unutar opsega ovog izuma:
5-fluor-3-(1-heksilpiperidin-4-il)pirolo[3,2-b]piridin;
5-brom-3-(1-benzilpiperidin-4-il)pirolo[3,2-b]piridin;
5-jod-3-(1-(1-fenilet-2-il)piperidin-4-il)pirolo[3,2-b]piridin;
5-etoksi-3-(1-pentilpiperidin-4-il)pirolo[3,2-b]piridin;
5-propoksi-3-(1-butilpiperidin-4-il)pirolo[3,2-b]piridin;
5-izopropoksi-3-(1-izobutilpiperidin-4-il)pirolo[3,2-b]piridin;
5-(N-[metil]amino)-3-(1-izopropilpiperidin-4-il)pirolo[3,2-b]piridin;
5-(N-[propil]amino)-3-(1-etilpiperidin-4-il)pirolo[3,2-b]piridin;
5-(N-[izopropil]amino)-3-(1-metilpiperidin-4-il)pirolo[3,2-b]piridin;
5-(N-[butil]amino)-3-(1-benzilpiperidin-4-il)pirolo[3,2-b]piridin;
5-(N-[fenetil]amino)-3-(1-(1-fenilet-2-il)piperidin-4-il)pirolo[3,2-b]piridin;
5-(N-[fenpropil]amino)-3-(1-metilpiperidin-4-il)pirolo[3,2-b]piridin;
5-(N-[fenbutil]amino)-3-(1-metilpiperidin-4-il)pirolo[3,2-b]piridin;
5-(N-[furilmetil]amino)-3-(1-metilpiperidin-4-il)pirolo[3,2-b]piridin;
5-(N-[piridin-2-iletil]amino)-3-(1-metilpiperidin-4-il)pirolo[3,2-b]piridin;
5-(N-[3-(piridin-4-il-N-oksid)prop-1-il]amino)-3-(1-metilpiperidin-4-il)pirolo[3,2-b]piridin;
5-(N-[4-(2-pirolil)but-1-il]amino)-3-(1-metilpiperidin-4-il)pirolo[3,2-b]piridin;
5-(N-[3-furilmetil]amino)-3-(1-metilpiperidin-4-il)pirolo[3,2-b]piridin;
5-(N-[(oksazol-2-il)metil]amino)-3-(1-metilpiperidin-4-il)pirolo[3,2-b]piridin;
5-(N-[(pirimidin-4-il)metil]amino)-3-(1-metilpiperidin-4-il)pirolo[3,2-b]piridin;
5-(N-[(indol-4-il)metil]amino)-3-(1-metilpiperidin-4-il)pirolo[3,2-b]piridin;
5-(N-[(kinolin-6-il)metil]amino)-3-(1-metilpiperidin-4-il)pirolo[3,2-b]piridin;
N-[3-furil]-3-(1-metilpiperidin-4-il)pirolo[3,2-b]piridin-5-karboksamid;
N-[piridin-2-il]-3-(1-metilpiperidin-4-il)pirolo[3,2-b]piridin-5-karboksamid;
N-[piridin-4-il-N-oksid]-3-(1-metilpiperidin-4-il)pirolo[3,2-b]piridin-5-karboksamid;
N-[pirol-2-il]-3-(1-metilpiperidin-4-il)pirolo[3,2-b]piridin-5-karboksamid;
N-[pirazol-3-il]-3-(1-metilpiperidin-4-il)pirolo[3,2-b]piridin-5-karboksamid;
N-[oksazol-2-il]-3-(1-metilpiperidin-4-il)pirolo[3,2-b]piridin-5-karboksamid;
N-[pirimidin-4-il]-3-(1-metilpiperidin-4-il)pirolo[3,2-b]piridin-5-karboksamid;
N-[indol-4-il]-3-(1-metilpiperidin-4-il)pirolo[3,2-b]piridin-5-karboksamid;
N-[kinolin-6-il]-3-(1-metilpiperidin-4-il)pirolo[3,2-b]piridin-5-karboksamid;
5-fluor-3-(1-heksil-1,2,3,6-tetrahidropiridin-4-il)pirolo[3,2-b]piridin;
5-brom-3-(1-benzil-1,2,3,6-tetrahidropiridin-4-il)pirolo[3,2-b]piridin;
5-jod-3-(1-(1-fenilet-2-il)-1,2,3,6-tetrahidropiridin-4-il)pirolo[3,2-b]piridin;
5-etoksi-3-(1-pentil-1,2,3,6-tetrahidropiridin-4-il)pirolo[3,2-b]piridin;
5-propoksi-3-(1-butil-1,2,3,6-tetrahidropiridin-4-il)pirolo[3,2-b]piridin;
5-izopropoksi-3-(1-izobutil-1,2,3,6-tetrahidropiridin-4-il)pirolo[3,2-b]piridin;
5-(N-[metil]amino)-3-(1-izopropil-1,2,3,6-tetrahidropiridin-4-il)pirolo[3,2-b]piridin;
5-(N-[propil]amino)-3-(1-etil-1,2,3,6-tetrahidropiridin-4-il)pirolo[3,2-b]piridin;
5-(N-[izopropil]amino)-3-(1-metil-1,2,3,6-tetrahidropiridin-4-il)pirolo[3,2-b]piridin;
5-(N-[butil]amino)-3-(1-benzil-1,2,3,6-tetrahidropiridin-4-il)pirolo[3,2-b]piridin;
5-(N-[fenetil]amino)-3-(1-(1-fenilet-2-il)-1,2,3,6-tetrahidropiridin-4-il)pirolo[3,2-b]piridin;
5-(N-[fenpropil]amino)-3-(1-metil-1,2,3,6-tetrahidropiridin-4-il)pirolo[3,2-b]piridin;
5-(N-[fenbutil]amino)-3-(1-metil-1,2,3,6-tetrahidropiridin-4-il)pirolo[3,2-b]piridin;
5-(N-[3-furilmetil]amino)-3-(1-metil-1,2,3,6-tetrahidropiridin-4-il)pirolo[3,2-b]piridin;
5-(N-[piridin-2-iletil]amino)-3-(1-metil-1,2,3,6-tetrahidropiridin-4-il)pirolo[3,2-b]piridin;
5-(N-[3-(piridin-4-il-N-oksid)prop-1-il]amino)-3-(1-metil-1,2,3,6-tetrahidropiridin-4-il)pirolo[3,2-b]piridin;
5-(N-[4-(2-pirolil)but-1-il]amino)-3-(1-metil-1,2,3,6-tetrahidropiridin-4-il)pirolo[3,2-b]piridin;
5-(N-[3-furilmetil]amino)-3-(1-metil-1,2,3,6-tetrahidropiridin-4-il)pirolo[3,2-b]piridin;
5-(N-[(oksazol-2-il)metil]amino)-3-(1-metil-1,2,3,6-tetrahidropiridin-4-il)pirolo[3,2-b]piridin;
5-(N-[(pirimidin-4-il)metil]amino)-3-(1-metil-1,2,3,6-tetrahidropiridin-4-il)pirolo[3,2-b]piridin;
5-(N-[(indol-4-il)metil]amino)-3-(1-metil-1,2,3,6-tetrahidropiridin-4-il)pirolo[3,2-b]piridin;
5-(N-[(kinolin-6-il)metil]amino)-3-(1-metil-1,2,3,6-tetrahidropiridin-4-il)pirolo[3,2-b]piridin;
N-[3-furil]-3-(1-metil-1,2,3,6-tetrahidropiridin-4-il)pirolo[3,2-b]piridin-5-karboksamid;
N-[piridin-2-il]-3-(1-metil-1,2,3,6-tetrahidropiridin-4-il)pirolo[3,2-b]piridin-5-karboksamid;
N-[piridin-4-il-N-oksid]-3-(1-metil-1,2,3,6-tetrahidropiridin-4-il)pirolo[3,2-b]piridin-5-karboksamid;
N-[pirol-2-il]-3-(1-metil-1,2,3,6-tetrahidropiridin-4-il)pirolo[3,2-b]piridin-5-karboksamid;
N-[pirazol-3-il]-3-(1-metil-1,2,3,6-tetrahidropiridin-4-il)pirolo[3,2-b]piridin-5-karboksamid;
N-[oksazol-2-il]-3-(1-metil-1,2,3,6-tetrahidropiridin-4-il)pirolo[3,2-b]piridin-5-karboksamid;
N-[pirimidin-4-il]-3-(1-metil-1,2,3,6-tetrahidropiridin-4-il)pirolo[3,2-b]piridin-5-karboksamid;
N-[indol-4-il]-3-(1-metil-1,2,3,6-tetrahidropiridin-4-il)pirolo[3,2-b]piridin-5-karboksamid;
N-[kinolin-6-il]-3-(1-metil-1,2,3,6-tetrahidropiridin-4-il)pirolo[3,2-b]piridin-5-karboksamid;
Spojevi iz ovog izuma se dobivaju postupkom opisanim u sintetskoj shemi I gdje X’ je halo ili C1-C4 alkoksi; i R je kako je ranije definirano.
[image]
5-supstituirani-pirolo[3,2-b]piridin se kondenzira s 4-piperidonom u nižem alkanolu, tipično metanolu ili etanolu, u prisutnosti prikladne baze. Prikladne baze uključuju kalij ili natrij hidroksid, i natrij alkokside kao npr. natrij metoksid. Reakcija se izvodi pri temperaturi refluksa, da se dobiju odgovarajući 5-supstituirani-3-(1,2,3,6-tetrahidropiridin-4-il)pirolo[3,2-b]piridini iz ovog izuma. Produkt se može izolirati filtracijom ili ekstrakcijom, i može se pročistiti prekristalizacijom ako je potrebno ili poželjno.
5-supstituirani-3-(1,2,3,6-tetrahidropiridin-4-il)pirolo[3,2-b]piridini iz ovog izuma, osim što su i sami korisni kao 5-HT1F agonisti, mogu se hidrogenirati da nastanu 5-supstituirani-3-(piperidin-4-il)pirolo[3,2-b]piridini iz ovog izuma. Tipično se prevođenje provodi u standardnim uvjetima hidrogeniranja, na primjer, hidrogeniranjem otopine supstrata u nižem alkanolu, tipično metanolu ili etanolu, ili smjesi nižeg alkanola i tetrahidrofurana, u prisutnosti plemenitog metalnog katalizatora, tipično ili platine ili paladija na ugljiku.
Spojevi iz izuma, gdje X je C1-C4 alkoksi, su također korisni međuprodukti za dobivanje ostalih spojeva iz izuma, kako je prikazano na sintetskoj shemi II, gdje R2’ je C1-C4 alkil, i A-B, R, i R3 su kako je ranije definirano.
[image]
Prikladni 5-alkoksipirolo[3,2-b]piridin se zagrijava s vodenom kiselinom, tipično bromidnom kiselinom, da se dobije odgovarajući 5-hidroksipirolo[3,2-b]piridin. Ovaj 5-hidroksi derivat se zatim obrađuje s anhidridom trifluormetan-sulfonske kiseline u prikladnom otapalu, tipično piridinu, da se dobije odgovarajući triflat formule III. Triflati formule III su novi i predstavljaju daljnje utjelovljenje ovog izuma.
Triflati formule III su korisni za dobivanje spojeva iz ovog izuma gdje X je -C(O)NHR3 ili C(O)OR2 podvrgavanjem triflata uvjetima karbonilacije katalizirane paladijem, u prisutnosti prikladnog amina ili alkohola. Smjesa triflata, paladij(II) acetata, 1,1’-bis(difenilfosfin)ferocena, protonske klopke kao npr. trietilamina ili kalij karbonata, i prikladnog amina ili alkohola se spoji u prikladnom otapalu, tipično acetonitrilu ili dimetilformamidu. Smjesa se zasiti s ugljik monoksidom i zatim se zagrijava dok reakcija ne završi. Odgovarajući amidi ili esteri se tipično izoliraju standardnim ekstraktivnim postupkom i pročiste kristalizacijom ili kromatografijom. Stručnjak će razumjeti da se spojevi iz izuma gdje X je -C(O)OH dobivaju podvrgavanjem prikladnog estera iz ovog izuma uvjetima kisele ili bazične hidrolize.
Spojevi iz ovog izuma gdje X je -C(O)OH, osim što su vrijedni 5-HT1F agonisti, također su korisni međuprodukti za dobivanje spojeva iz izuma gdje X je C(O)NHR3. Ovi spojevi se dobivaju reakcijom amina formule R3NH2 s prikladnom karboksilnom kiselinom ili derivatom karboksilne kiseline u standardnim uvjetima formiranja amidne veze.
Spojevi iz izuma gdje X je -NHR1 se dobivaju funkcionaliziranjem odgovarajućeg 5-aminopirolo[3,2-b]piridina kroz standardne uvjete acilacije/redukcije ili reduktivne alkilacije. Ukratko, otopina 5-aminopirolo[3,2-b]piridina u prikladnom otapalu, kao što je tetrahidrofuran, dioksan, ili dietil eter, na temperaturi od sobne do oko 0 °C, reagira s prikladnim acilirajućim sredstvom u prisutnosti prikladne baze kao što je piridin ili trietilamin. Taj acilirani produkt se zatim otopi u prikladnom otapalu, kao što je tetrahidrofuran ili dietil eter, na temperaturi od oko sobne do oko 0 °C, i obrađuje se s prikladnim hidridnim reducirajućim sredstvom kao što je diboran ili litij aluminij hidrid. Reakcijska smjesa se miješa od 1 do 24 sata i zatim se obrađuje s vodenom otopinom natrij sulfata. Dobivena suspenzija se filtrira, i filtrat se koncentrira pod sniženim tlakom da se dobije željeni produkt.
Alternativno, otopina 5-aminopirolo[3,2-b]piridina u otapalu prikladnom za azeotropno uklanjanje vode, kao što je toluen, benzen ili cikloheksan, reagira pri refluksu s prikladnim aldehidom ili ketonom u prisutnosti 0,1-10% protonskog izvora kao što je p-toluensulfonska kiselina. Kad je reakcija dovršena, hlapljive tvari se uklone pod sniženim tlakom i ostatak se ponovno otopi u alkanolu, kao npr. metanolu ili etanolu. Ova otopina se zatim podvrgne uvjetima hidrogeniranja, ili se obrađuje s prikladnim hidridnim reducirajućim sredstvom, kao npr. natrij borhidridom, ili, poželjno, natrij cijanobor-hidridom, u prisutnosti bezvodne kiseline, kao npr. klorovodika. Produkt se izolira normalnom ekstrakcijom.
Traženi 5-supstituirani pirolo[3,2-b]piridini potrebni za pripravu spojeva iz ovog izuma se mogu pripraviti kako je opisano u sintetskoj shemi III, gdje X” je halo ili C1-C4 alkoksi.
[image]
2-metil-3-nitro-6-supstituirani piridin može reagirati ili s dimetilformamid dimetilacetalom u dimetilformamidu ili tris(dimetilamino)metanom u toluenu na povišenoj temperaturi da se dobije odgovarajući iminoenamin. Kad je X” C1-C4 alkoksi, iminoenamin se hidrogenira u nižem alkanolu, tipično etanolu, ili smjesi nižeg alkanola ili tetrahidrofurana, iznad Raney nikal ili plemenitog metalnog katalizatora, tipično ili platine ili paladija na ugljiku, da nastane odgovarajući 5-(C1-C4 alkoksi)pirolo[3,2-b]piridin. Kad X” je halo, iminoenamin reagira s metalnim željezom u toluenu/octenoj kiselini da nastane željeni 5-halopirolo[3,2-b]piridin. 5-supstituirani pirolo[3,2-b]piridini se mogu pročistiti prekristalizacijom ili kromatografijom po potrebi ili želji, prije upotrebe za dobivanje spojeva iz ovog izuma.
6-supstituirani 3-nitro-2-pikolini potrebni za dobivanje odgovarajućih 5-supstituiranih-pirolo[3,2-b]piridina su ili komercijalno dostupni ili se mogu pripraviti postupcima dobro poznatim stručnjaku.
Traženi 5-supstituirani-pirolo[3,2-b]piridin potreban za dobivanje spojeva iz ovog izuma gdje X je -NHR1 se mogu pripraviti kako je opisano u sintetskoj shemi IV.
[image]
Nitriranje se izvodi dodavanjem jednog ekvivalenta 90%-tne nitratne kiseline otopljene u jednakom volumenu koncentrirane sulfatne kiseline, koja je bila prethodno ohlađena na 0 °C, otopini 6-amino-2-pikolina (6-amino-2-metilpiridina) u pet volumena (s obzirom na volumen otopine nitratne kiseline) koncentrirane sulfatne kiseline pri -6 °C. Otopina nitratne kiseline se dodaje takvom brzinom, da se temperatura reakcijske smjese održava na oko -2 °C. Reakcijska smjesa se miješa pri oko 0 °C jedan sat i zatim se ostavi da se ugrije do oko 10 °C tijekom jednog sata. Temperatura reakcijske smjese se održava pri oko 10 °C jedan sat i zatim se ostavi da se ugrije do oko 20 °C tijekom jednog sata. Reakcijska smjesa se održava pri oko 20 °C 2 sata. Reakcijska smjesa se zatim izlije na led, zaluži (pH oko 9) dodatkom prikladne hidroksidne baze, tipično kalij, natrij, ili amonij hidroksida, održavajući temperaturu pri oko 20 °C dodavanjem leda po potrebi. Dobivena suspenzija se filtrira, ispere s vodom, i osuši da nastane 2:1 smjesa 3-nitro-:5-nitro-6-amino-2-pikolina.
Neželjeni 5-nitro-6-amino-2-pikolin izomer se može ukloniti destilacijom parom, sublimacijom, ili frakcijskom kristalizacijom iz prikladnom otapala, poželjno toluena. Željeni 3-nitro-6-amino-2-pikolin zatim reagira s dimetilformamid dimetilacetalom ili tris(dimetilamino)metanom u prikladnom otapalu, tipično dimetilformamidu. Kad je reakcija završena, reakcijska smjesa se obrađuje ili s vodom ili izopropanolom da se istaloži željeni međuprodukt IV, koji se izolira filtracijom.
Alternativno, međuprodukt IV se može pripraviti direktnim obrađivanjem smjese nitriranih izomera, prethodno opisane, s dimetilformamid dimetilacetalom ili tris(dimetilamino)metanom. Obrađivanjem nastale reakcijske smjese s vodom dolazi do taloženja međuprodukta IV koji se može izolirati filtracijom.
Međuprodukt IV se zatim može hidrogenirati u nižem alkanolu, tipično etanolu, u prisutnosti paladijskog katalizatora, tipično 10%-tnog paladija na ugljiku. Kad je hidrogeniranje završeno, reakcijska smjesa se filtrira i filtrat se koncentrira pod sniženim tlakom. Željeni 5-(dimetilaminometilimino)pirolo[3,2-b]piridin se može upotrijebiti kako se stvara, u subsekventnim reakcijama ili najprije pročistiti ispiranjem suspenzije ili kromatografijom na silikagelu po potrebi ili želji. Podvrgavanjem 5-(dimetilaminometilimino)pirolo[3,2-b]piridina reakcijskim uvjetima opisanim u sintetskoj shemi I nastaju 5-aminopirolo[3,2-b]piridini potrebni za dobivanje odgovarajućih spojeva iz ovog izuma.
Alternativno, spojevi iz ovog izuma gdje X je -NHR1 se mogu pripraviti postupkom opisanim u sintetskoj shemi V.
[image]
Međuprodukt IV se hidrogenira u metanolu koji sadržava klorovodik u prisutnosti paladijskog katalizatora, tipično 10%-tnog paladija na ugljiku. Dobiveni 1-hidroksi-5-(dimetilaminometanimino)pirolo[3,2-b]piridin dihidroklorid se izolira filtracijom reakcijske smjese i može dalje pročistiti i odvojiti od katalizatora prekristalizacijom. Amidinska funkcionalna skupina na 5-položaju pirolo[3,2-b]piridina se može ukloniti da se dobije odgovarajući amin, zagrijavanjem amidinskog supstrata u etanolu u kiselim uvjetima ili u neutralnim uvjetima za hidrogeniranje. Amidinska funkcionalna skupina na 5-položaju se može ukloniti ili prije ili odmah nakon reakcije s prikladnim 4-piperidonom u uvjetima opisanim za sintetsku shemu I, da se dobiju potrebni 5-aminopirolo[3,2-b]piridini. Bez obzira na to, kad se amidinska funkcionalna skupina ukloni, 1-hidroksi supstituent se uklanja hidrogeniranjem u nižem alkanolu, tipično metanolu, u prisutnosti paladijskog katalizatora, tipično 10%-tnog paladija na ugljiku.
Sposobnost spojeva iz ovog izuma da se vežu na 5-HT1F podtip receptora se izmjeri uglavnom kako je opisano u US Patentu #5.521.196.
Priprava membrana: Membrane se pripreme iz transfektiranih Ltk-stanica koje se uzgoje do 100% pokrivenosti. Stanice se isperu dvaput sa fosfat-puferiranom otopinom soli, ostružu sa posudica za uzgajanje u 5 mL ledene fosfat-puferirane otopine soli, i centrifugiraju pri 200×g 5 minuta pri 4 °C. Peleta se resuspendira u 2,5 mL ledenog Tris-pufera (20 mM Tris HCl, pH = 7,4 pri 23 °C, 5 mM EDTA) i homogenizira pomoću Wheaton uređaja za mljevenje tkiva. Lizat se nakon toga centrifugira pri 200×g 5 minuta pri 4 °C do fragmenata veličine peleta, koji se odbace. Supernatant se sakupi i centrifugira pri 40.000×g 20 minuta pri 4 °C. Peleta koja se dobije tim centrifugiranjem se jednom ispere u ledenom Tris puferu za ispiranje i resuspendira u konačnom puferu koji sadržava 50 mM Tris HCl i 0,5 mM EDTA, pH = 7,4 pri 23 °C. Pripravci membrana se drže na ledu i upotrijebe unutar dva sata za ispitivanja vezanja radioliganda. Koncentracije proteina se odrede Bradford-ovim postupkom (Anal. Biochem., 72, 248-254 (1976)).
Vezanje radioliganda: [3H-5-HT] vezanje se izvede upotrebom malih modifikacija uvjeta za ispitivanje 5-HT1D koje su opisali Herrick-Davis i Titeler (J. Neurochem., 50, 1624-1631 (1988)), uz izostavljanje maskirajućih liganda. Analize vezanja radioliganda su provedene pri 37 °C u ukupnom volumenu od 250 µL pufera (50 mM Tris, 10 mM MgCl2, 0,2 mM EDTA, 1 µM pargilin, 0,1% askorbat, pH = 7,4 pri 37 °C) u mikrotitracijskim pločama sa 96 otvora. Analize zasićenja su provedene upotrebom [3H]5-HT u 12 različitih koncentracija koje su se kretale od 0,5 nM do 100 nM. Analize istiskivanja su provedene upotrebom 4,5-5,5 nM [3H]5-HT. Profil vezanja lijekova u pokusima kompeticije je dobiven upotrebom 6-12 koncentracija spoja. Vrijeme inkubacije je bilo 30 minuta i za analize zasićenja i istiskivanja, bazirano na početnim istraživanjima kojima su određeni ravnotežni uvjeti vezanja. Nespecifično vezanje je određeno u prisutnosti 10 µM 5-HT. Vezanje je počelo dodatkom 50 µL homogenata membrana (10-20 µg). Reakcija je završena brzim filtriranjem kroz prethodno namočene (0,5% polietilenimin) filtre pomoću 48R Brandel sakupljača stanica (Gaithersburg, MD). Nakon toga, filtri se ispiru 5 sekundi s ledenim puferom (50 mM Tris HCl, pH = 7,4 pri 4 °C), osuše i stave u bočice koje sadržavaju 2,5 mL Readi-Safe (Beckman, Fullerton, CA) i radioaktivnost se izmjeri pomoću Beckman LS 5000TA tekućinskog scintilacijskog brojača. Efikasnost brojanja [3H]5-HT je bila prosječno između 45-50%. Podaci o vezanju su analizirani nelinearnom regresijskom analizom uz pomoć kompjutora (Accufit i Acucomp, Lunden Software, Chagrin Falls, OH). IC50 vrijednosti su prevedene u Ki vrijednosti pomoću Cheng-Prusoff jednadžbe (Biochem. Pharmacol., 22, 3099-3108 (1973). Svi pokusi su izvedeni trostruko.
Ustanovljeno je da reprezentativni spojevi iz ovog izuma imaju afinitet za 5-HT1F receptor, kako je izmjereno postupkom opisanim iznad.
Kako su opisali R.L. Weinshank, i sur., WO93/14201, 5-HT1F receptor je funkcionalno spojen za G-protein, što se mjeri sposobnošću serotonina i serotonergičnih lijekova da inhibiraju proizvodnju cAMP stimuliranu forskolinom u NIH3T3 stanicama transfektiranim sa 5-HT1F receptorom. Aktiviranje agonista receptora spojenih za G-protein također rezultira otpuštanjem GDP iz α-podjedinice G proteina i subsekventnim vezanjem GTP. Vezanje stabilnog analoga [35S]GTPγS je indikator aktiviranja ovog receptora.
Priprava membrana
Mišje LM(tk-) stanice stabilno transfektirane s ljudskim 5-HT1F receptorom i uzgojene u suspenziji se sakupe centrifugiranjem, resuspendiraju u 50 mM Tris-HCl, pH 7,4, u alikvotima od 2 × 108 stanica i zamrznu na -70 °C do dana analize. Na dan ispitivanja, alikvot stanica se otopi, resuspendira u 35 mL 50 mM Tris-HCl, pH 7,4, i centrifugira pri 39.800×g 10 minuta pri 4 °C. Dobivena peleta se resuspendira u 50 mM Tris-HCl, pH 7,4, inkubira 10 minuta pri 37 °C i centrifugira pri 39.800×g 10 minuta pri 4 °C. Peleta se još jednom resuspendira i centrifugira, i konačna peleta se resuspendira u 4 mM MgCl2, 160 mM NaCl, 0,267 mM EDTA, 67 mM Tris-HCl, pH 7,4, tako da alikvot od 200 µL sadržava približno 15-25 µg proteina.
[35S]GTPγS vezanje
Sve inkubacije se izvedu trostruko u ukupnom volumenu od 800 µL. Otopina lijeka u vodi, 200 µL, koja obuhvaća 6 nakupljenih jedinica, se doda u 400 µL Tris-HCl, pH 7,4, koji sadržava 3 mM MgCl2, 120 mM NaCl, 0,2 mM EGTA, 10 µM GDP, i 0,1 nM [35S]GTPγS. Doda se homogenat membrane, 200 µL, i zatim se epruvete inkubiraju 30 minuta na 37 °C. Zatim se pomoću Brandel sakupljača stanica (model MB-48R, Brandel, Gaithersburg, MD), inkubacije prekinu vakuum filtracijom kroz Whatman GF/B filtre koji su bili navlaženi s vodom ili 20 mM Na4P2O7 i prethodno ohlađeni sa 4 mL ledenog 50 mM Tris-HCl, pH 7,4. Filtri se zatim brzo isperu sa 4 mL ledenog 50 mM Tris-HCl, pH 7,4. Količina radioaktivnosti uhvaćena na filtrima se odredi tekućinskom scintilacijskom spektrometrijom pomoću LS6000IC (Beckman Instruments, Fullerton, CA). GTPγS, 10 µM, određeno nespecifično vezanje. Protein se odredi postupkom prema Bradford-u (Anal. Biochem., 72, 248-254 (1976)).
Statistička analiza
Vrijednosti djelotvornosti za ispitivane spojeve su izražene kao postotak vezanja s obzirom na 10 µM 5-HT. Nelinearna regresijska analiza je provedena na krivuljama koncentracija-odgovor upotrebom logističke jednadžbe s četiri parametra koju su opisali De Lean i sur., (Mol. Pharmacol., 21, 5-16 (1982)). Analiza odstupanja, zatim Tukey-Kramer-ov test signifikantne različitosti (JMP; SAS Institute Inc., Cary, NC) su provedeni za pEC50 vrijednosti i Emax vrijednosti.
Reprezentativni spojevi i ovog izuma su ispitani [35S]GTPγS testom i ustanovljeno je da su agonisti 5-HT1F receptora.
Otkriće, da se bol povezana s migrenom i povezanim poremećajima, inhibira aktiviranjem 5-HT1F receptora primjenom 5-HT1F agonista, zahtijeva analizu podataka iz raznih ispitivanja farmakološke aktivnosti. Da bi se ustanovilo da je 5-HT1F podtip receptora odgovoran za posredovanje neurogene meningealne ekstravazacije koja dovodi do migrenske boli, prvo je izmjeren afinitet vezanja skupine spojeva za serotoninske receptore, upotrebom standardnih postupaka. Na primjer, sposobnost spoja za vezanje za 5-HT1F podtip receptora se ispita kako je opisano iznad. U svrhu usporedbe, afiniteti vezanja spojeva za 5-HT1D, 5-HT1B, i 5-HT1E receptore se također odrede kako je opisano iznad, osim što se upotrijebe drugačiji klonirani receptori umjesto 5-HT1F klona receptora upotrijebljenog ovdje. 5-HT1D i 5-HT1B su nedavno preimenovani, ranije su se nazivali 5-HT1Dα i 5-HT1Dβ, pojedinačno. (Hartig, i sur., Trends in Pharmaceutical Science, 17, 103-105 (1996)). Ista skupina je zatim ispitana u cAMP testu, da bi se odredio njihov agonistički ili antagonistički karakter. Konačno, izmjerena je sposobnost tih spojeva da inhibiraju neuronsku ekstravazaciju proteina, funkcionalno ispitivanje za migrensku bol.
Skupina spojeva upotrijebljenih u ovoj studiji predstavlja distinktivne strukturalne klase spojeva za koje se pokazalo da iskazuju širok raspon afiniteta za ispitane serotoninske receptore. Dodatno, za skupinu spojeva je također pokazano da imaju širok raspon djelovanja u ispitivanjima neuronske ekstravazacije proteina. Skupina spojeva odabranih za ovu studiju je opisana ispod.
Spoj I
3-[2-(dimetilamino)etil]-N-metil-1H-indol-5-metansulfonamid butan-1,4-dioat (1:1)
(Sumatriptan sukcinat)
[image]
Sumatriptan sukcinat je komercijalno dostupan kao Imitrex™ ili se može pripraviti kako je opisano u US Patentu #5.037.845, izdanom 6. kolovoza 1991, koji je ovdje u svojoj cijelosti uklopljen po referenci.
Spoj II
5-fluoro-3-(1-(2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)etil)-4-piperidinil)-1H-indol hidroklorid
[image]
Spoj III
5-hidroksi-3-(4-piperidinil)-1H-indol oksalat
[image]
Spoj IV
8-kloro-2-dietilamino-1,2,3,4-tetrahidronaftalen hidroklorid
[image]
Spoj V
6-hidroksi-3-dimetilamino-1,2,3,4-tetrahidrokarbazol
[image]
Dobivanje spojeva II-V je opisano u US Patentu #5.521.196, izdanom 28. svibnja 1996, koji je ovdje u svojoj cijelosti uklopljen po referenci.
Testovi vezanja
Afiniteti vezanja spojeva za razne serotoninske receptore se odrede uglavnom kako je opisano iznad, osim što se upotrijebe drugačiji klonirani receptori umjesto 5-HT1F klona receptora ovdje upotrijebljenog. Rezultati tih pokusa vezanja su prikazani u tablici I.
TABLICA I
VEZANJE ZA SEROTONINSKE (5-HT1) PODTIPOVE RECEPTORA (Ki nM)
[image]
Stvaranje cAMP
Kako su opisali R.L. Weinshank, i sur., WO93/14201, 5-HT1F receptor je funkcionalno spojen za G-protein, što se mjeri sposobnošću serotonina i serotonergičnih lijekova da inhibiraju proizvodnju cAMP stimuliranu forskolinom u NIH3T3 stanicama transfektiranim sa 5-HT1F receptorom. Aktivnost adenilat ciklaze se određuje upotrebom standardnih tehnika. Maksimalni učinak se postiže serotoninom. Emax se odredi dijeljenjem inhibicije test spoja s maksimalnim učinkom i određivanjem postotka inhibicije. (N. Adham, i sur., R.L. Weinshank, i sur., Proceedings of the National Academy of Sciences (USA), 89, 3630-3634 (1992)), i referencama ondje uklopljenim.
Mjerenje stvaranja cAMP
Transfektirane NIH3T3 stanice (procijenjena Bmax iz studije kompetitivnosti s jednom točkom = 488 fmol/mg proteina) se inkubiraju u DMEM, 5 mM teofilina, 10 mM HEPES (4-[2-hidroksietil]-1-piperazinetansulfonska kiselina) i 10 µM pargilina 20 minuta pri 37 °C, 5% CO2. Zatim se povuku krivulje doza lijeka-efekt, dodavanjem 6 različitih konačnih koncentracija lijeka, nakon čega slijedi dodavanje forskolina (10 µM). Nakon toga, stanice se inkubiraju dodatnih 10 minuta pri 37 °C, 5% CO2. Medij se aspirira i reakcija zaustavi dodavanjem 100 mM HCl. Da se pokaže kompetitivni antagonizam, paralelno se povuče krivulja doza-odgovor za 5-HT, upotrebom fiksne doze metiotepina (0,32 µM). Ploče se pohrane pri 4 °C 15 minuta i zatim centrifugiraju 5 minuta pri 500×g do pelete staničnog ostatka, i supernatant se u alikvotima pohrani pri -20 °C prije ispitivanja formiranja cAMP radioimunoispitivanjem (komplet za radioimunoispitivanje; Advanced Magentics, Cambridge, MA). Radioaktivnost se kvantitativno odredi pomoću Packard COBRA Auto Gamma brojača, opremljenog programom za redukciju podataka.
Svi spojevi iz skupine su ispitani testom formiranja cAMP opisanim iznad, i za sve je ustanovljeno da su agonisti 5-HT1F receptora.
Ekstravazacija proteina
Harlan Sprague-Dawley štakori (225-325 g) ili zamorci iz Charles River Laboratories (225-325 g) se anesteziraju s natrij pentobarbitalom intraperitonejski (65 mg/kg ili 45 mg/kg pojedinačno) i stave u stereotaksični okvir (David Kopf Instruments) s pregradom za zarezivanje namještenom na -3,5 za štakore ili -4,0 za zamorce. Slijedeći središnji sagitalni rez skalpa, izbuše se dva para bilateralnih rupa kroz lubanju (6 mm posteriorno, 2,0 i 4,0 lateralno za štakore; 4 mm posteriorno i 3,2 i 5,2 mm lateralno za zamorce, sve koordinate se odnose na bregmu). Parovi stimulirajućih elektroda od nerđajućeg čelika (Rhodes Medical Systems, Inc.) se spuste kroz rupe u obje hemisfere, do dubine od 9 mm (štakori) ili 10,5 mm (zamorci) od dure.
Izloži se femoralna vena i intravenski se injicira doza test spoja (1 mL/kg). Približno sedam minuta kasnije, također intravenski se injicira 50 mg/kg doza Evans plavila, fluorescentne boje. Evans plavilo stvara komplekse s proteinima iz krvi i djeluje kao marker za ekstravazaciju proteina. Točno deset minuta nakon injekcije test spoja, lijevi trigeminalni ganglij se stimulira 3 minute intenzitetom struje od 1,0 mA (5 Hz, 4 msec trajanje) uz potenciostat/galvanostat Model 273 (EG&G Princeton Applied Research).
Petnaest minuta nakon stimuliranja, životinje se žrtvuju i ukloni im se krv s 20 ml otopine soli. Vrh lubanje se ukloni da se olakša sakupljanje duralnih membrana. Iz obje hemisfere se uzmu uzorci membrana, isperu s vodom, i rašire jednolično na mikroskopska objektna stakalca. Kad se osuše, tkiva se pokriju sa 70%-tnom otopinom glicerol/voda.
Fluorescentni mikroskop (Zeiss) opremljen rešetkastim monokromatorom i spektrofotometrom se upotrijebi za određivanje količine Evans plave boje u svakom uzorku tkiva. Upotrijebi se ekscitacijska valna duljina od približno 535 nm i odredi se intenzitet emisije na 600 nm. Mikroskop je opremljen s motoriziranim stolićem i spojen je s osobnim računalom. To olakšava pomicanje stolića kontrolirano kompjutorom, s mjerenjima fluorescencije na 25 točaka (500 µm koraci) na svakom duralnom uzorku. Srednju i standardnu devijaciju mjerenja određuje kompjutor.
Ekstravazacija inducirana električnom stimulacijom trigeminalnog ganglija je ipsilateralni efekt (tj. javlja se samo na strani dure na kojoj se stimulira trigeminalni ganglij). To omogućuje da druga, nestimulirana polovica dure služi kao kontrola. Izračuna se omjer količine ekstravazacije u duri na stimuliranoj strani, u usporedbi s nestimuliranom stranom. Kontrolne otopine soli su rezultirale omjerom od približno 2,0 kod štakora i 1,8 kod zamoraca. Suprotno, spoj koji djelotvorno sprečava ekstravazaciju u duri na stimuliranoj strani bi imao omjer od približno 1,0. Razvije se krivulja doza-odgovor i procijeni se doza koja inhibira ekstravazaciju kod 50% (ID50). Ovi podaci su prikazani u tablici II.
Tablica II
Inhibicija ekstravazacije proteina (ID50 mmol/kg)
Spoj i.v. ID50 mmol/kg
I 2,6 × 10-8
II 8,6 × 10-10
III 8,9 × 10-9
IV 1,2 × 10-7
V 8,7 × 10-9
Da bi se odredio odnos vezanja za razne serotoninske receptore prema inhibiciji neuronske proteinske ekstravazacije, afinitet vezanja svih spojeva za svaki od 5-HT1D, 5-HT1B, 5-HT1E i 5-HT1F receptora se unese u dijagram prema njihovim ID50 vrijednostima u modelu ekstravazacije proteina. Za svaki set podataka se provede linearna regresijska analiza i izračuna se faktor korelacije, R2. Rezultati te analize su sažeti u tablici III.
Tablica III
Faktor korelacije (R2) za specifični afinitet vezanja za 5-HT1 podtip u odnosu na inhibiciju proteinske ekstravazacije
5-HT1 podtip Faktor korelacije (R2)
5-HT1D 0,07
5-HT1B 0,001
5-HT1E 0,31
5-HT1F 0,94
Idealno linearni odnos bi imao faktor korelacije od 1,0, ukazujući na uzročno-posljedičnu povezanost između dvije varijable. Eksperimentalno određeni faktor korelacije između inhibicije neuronske ekstravazacije proteina i afiniteta za vezanje za 5-HT1F je 0,94. Ova skoro idealna ovisnost ID50 vrijednosti u modelu ekstravazacije proteina o afinitetu vezanja za 5-HT1F receptor jasno pokazuje da 5-HT1F posreduje pri inhibiciji ekstravazacije proteina do koje dolazi zbog stimulacije trigeminalnih ganglija.
Sumatriptan pokazuje slabu bioraspoloživost i relativno kratkotrajno djelovanje. Njegov afinitet za određeni broj serotoninskih podtipova receptora povećava neželjene nuspojave, naročito vazokonstrikciju, što ozbiljno ograničava njegovu korisnost u liječenju migrene. Međutim, spojevi iz ovog izuma su vrlo bioraspoloživi iz nekoliko putova primjene, uključujući, ali ne ograničeno na, oralni, bukalni, intravenski, subkutani, intranazalni, intraokularni, transdermalni, rektalni i inhalacijski. Oni pokazuju brz početak djelovanja i dugotrajno djelovanje, tipično zahtijevajući samo jednu dozu dnevno za održavanje terapijske razine. Budući da su spojevi iz ovog izuma snažni agonisti 5-HT1F receptora, za održavanje terapijske razine su potrebne iznimno niske doze. Dodatno, zbog visoke selektivnosti spojeva iz ovog izuma za 5-HT1F receptor, izbjegnute su komplikacije zbog vazokonstrikcije. Spojevi iz ovog izuma također inhibiraju ekstravazaciju proteina ako se primjenjuju prije ili odmah nakon stimulacije trigeminalnih ganglija, što znači da se oni mogu primijeniti prije početka napada migrene da spriječe bol, ili za vrijeme napada migrene da ublaže bol.
Sposobnost agonista 5-HT1F receptora općenito, i spojeva iz ovog izuma specifično, da ublaže bol, je pokazana ispitivanjem u standardnom modelu kronične boli (Clavino, i sur., Behavioural Brain Research, 24, 11-29 (1987); Colpaert, Pain, 28, 201-222 (1987)). Na primjer, kod štakora se može proizvesti stanje slično artritisu nekoliko dana nakon jedne injekcije Freund’s Complete Adjuvant ili sintetičkog adjuvansa kao što je lipoidalni amin (N,N-dioktildecil-N’,N-bis(2-hidroksietil)propandiamin) u ulju (Benslay i Bendele, Agents Actions 34 (1-2), 254-6, (1991); Bendele i sur., J Pharmacol Exp Ther 260 (1), 300-5 (1992); Meacock i sur., Ann Rheum Dis 53(10), 653-8 (1994)). Životinje tretirane na taj način razvijaju kronično otečene i bolne stražnje šape, što rezultira povećanom iritabilnošću, i smanjenom pokretljivošću. Idealni analgetik bi povećao istraživačku aktivnost artritičnih životinja prema normalnima, bez povećavanja ili smanjivanja tog ponašanja kod normalnih životinja. Za analgetske spojeve, na primjer morfin i citalopram, je pokazano da poboljšavaju istraživačko ponašanje kod tih životinja (Larsen i Arnt, Acta Pharmacol Toxicol (Copenh) 57(5), 345-51 (1985)).
Ispitivanje analgezije
Muški Lewis štakori (Harlan-Sprague Dawley, Inc., Indianapolis, IN), teški oko 225 grama se smjeste u prozirne plastične kaveze sa slobodnim pristupom hrani i vodi. Štakori se održavaju u ciklusu 12 sati svjetla i 12 sati tame.
Da se proizvede poliartritis, polovici štakora se subkutano na dorzalnoj bazi repa injicira 7,5 mg/štakoru lipoidalnog amina u 0,1 ml Incomplete Freund’s Adjuvant. Ta jedna injekcija lipoidalnog amina rezultira upalom stražnjih šapa koja postaje očita nakon oko deset dana. Druga polovica štakora prima injekcije vehikuluma. Jedanaest dana nakon injekcije lipoidalnog amina ili vehikuluma, životinje se tretiraju oralno ili subkutano sa test spojem ili vodenim vehikulumom. Jedan sat nakon tretiranja, pojedinačne životinje se stave na monitore aktivnosti (Omnitech Electronics, Columbus, OH) koji predstavljaju novi okoliš. Monitori aktivnosti imaju područje “otvorenog polja” od 42 × 42 cm i, pomoću infracrvenih zraka svjetla i fotoćelija, kvantificiraju istraživačko ponašanje. To se postiže upotrebom rešetke fotosenzora postavljenih u razini poda da se izmjeri horizontalna aktivnost. Kompjutor analizira podatke od senzorskog niza. Istraživačko ponašanje se kvantificira tijekom prvih 5 minuta u komori. Izmjereni parametar upotrijebljen u ovoj studiji je ukupna prijeđena udaljenost tijekom 5 minuta perioda ispitivanja.
Iako je moguće primijeniti spoj upotrijebljen u postupcima iz ovog izuma direktno bez ikakve formulacije, spojevi se obično primjenjuju u obliku farmaceutskih pripravaka koji sadrže farmaceutski prihvatljivi ekscipijent i najmanje jedan aktivni sastojak. Ti pripravci se mogu primijeniti raznim putovima uključujući oralni, bukalni, rektalni, intranazalni, transdermalni, subkutani, intravenski i intramuskularni. Mnogi od spojeva upotrijebljenih u postupcima iz ovog izuma su djelotvorni i kao injektibilni i oralni pripravci. Takvi pripravci se dobivaju na način poznat u farmaceutskoj struci i sadrže najmanje jedan aktivni spoj. Vidi, npr., Remington’s Pharmaceutical Sciences (16th ed. 1980).
U izradi pripravaka upotrijebljenih u ovom izumu aktivni sastojak se obično miješa s ekscipijentom, razrjeđuje s ekscipijentom ili ulaže unutar takvog nosača koji može biti u obliku kapsule, vrećice, papirnog ili drugog spremnika. Kad ekscipijent služi kao razrjeđivač, može biti krutina, polu-krutina, ili tekući materijal, koji djeluje kao vehikulum, nosač ili medij za aktivni sastojak. Dakle, pripravci mogu biti u obliku tableta, pilula, prašaka, pastila, vrećica, kapsula, eliksira, suspenzija, emulzija, otopina, sirupa, aerosola (kao krutina ili u tekućem mediju), masti koje sadrže na primjer do 10% po masi aktivnog spoja, mekih i tvrdih želatinskih kapsula, supozitorija, sterilnih injektibilnih otopina, i sterilno pakiranih prašaka.
U pripravi formulacije, može biti potrebno samljeti aktivni spoj da se dobije prikladna veličina čestica, prije spajanja s ostalim sastojcima. Ako je aktivni spoj vrlo netopljiv, redovno se melje do veličine čestica od manje od 200 oka. Ako je aktivni sastojak vrlo topljiv u vodi, veličina čestica se normalno prilagođuje mljevenjem, da se dobije vrlo jednolična raspodjela u pripravku, npr. oko 40 oka.
Neki primjeri prikladnih ekscipijenata uključuju laktozu, dekstrozu, saharozu, sorbitol, manitol, škrobove, arapsku gumu, kalcij fosfat, alginate, tragant, želatinu, kalcij silikat, mikrokristalnu celulozu, polivinilpirolidon, celulozu, vodu, sirup, i metil celulozu. Formulacije mogu dodatno uključivati: lubrikante kao npr. talk, magnezij stearat, i mineralna ulja; ovlaživače; sredstva za emulgiranje i suspendiranje; konzervanse kao npr. metil- i propilhidroksibenzoate; zaslađivače; i sredstva za aromatiziranje. Pripravci iz izuma se mogu formulirati tako da pruže brzo, produženo ili odgođeno otpuštanje aktivnog sastojka nakon primjene pacijentu upotrebom postupaka poznatih u struci.
Pripravci se poželjno formuliraju u obliku jedinične doze, svaka doza sadrži od oko 0,001 do oko 100 mg, češće oko 1,0 do oko 30 mg, aktivnog sastojka. Termin “oblik jedinične doze” se odnosi na fizički zasebne jedinice prikladne kao jedinične doze za ljudske subjekte i ostale sisavce, svaka jedinica sadrži prethodno određenu količinu aktivne tvari izračunatu da proizvede željeni terapijski efekt, povezanu s prikladnim farmaceutskim ekscipijentom.
Aktivni spojevi su općenito djelotvorni u širokom rasponu doza. Na primjer, dnevne doze se normalno nalaze unutar opsega od oko 0,0001 do oko 30 mg/kg tjelesne težine. Za liječenje odraslih ljudskih osoba je naročito poželjan opseg od oko 0,1 do oko 15 mg/kg/dan, u jednoj ili podijeljenoj dozi. Međutim, razumljivo je, da će količinu spoja koja će se stvarno primijeniti će odrediti liječnik, s obzirom na određene okolnosti, uključujući stanje koje treba liječiti, odabrani put primjene, spoj ili spojeve koji će se zapravo primjenjivati, dob, težinu, i odgovor pojedinog pacijenta, i ozbiljnost pacijentovih simptoma, i zbog toga gornji opseg doza nije namijenjen da ograničavanju opsega izuma ni na koji način. U nekim uvjetima razina doze ispod donje granice ranije spomenutog opsega može biti više nego dovoljna, dok se u drugim slučajevima mogu upotrijebiti još veće doze bez izazivanja štetnih nuspojava, pod uvjetom da se takve veće doze najprije podijele u nekoliko manjih doza za primjenu tijekom dana.
Primjer formulacije 1
Tvrde želatinske kapsule koje sadrže sljedeće sastojke se pripremaju na sljedeći način:
sastojak količina (mg/kapsula)
spoj iz primjera 7 30,0
škrob 305,0
magnezij stearat 5,0
Gornji sastojci se pomiješaju i napune u tvrde želatinske kapsule u količinama od 340 mg.
Primjer formulacije 2
Formulacija tableta se načini upotrebom sastojaka navedenih ispod:
sastojak količina (mg/tableta)
spoj iz primjera 9 25,0
celuloza, mikrokristalna 200,0
koloidni silicij dioksid 10,0
stearinska kiselina 5,0
Sastojci se pomiješaju i komprimiraju da se formiraju tablete, svaka mase 240 mg.
Primjer formulacije 3
Supozitoriji, svaki sadrži 25 mg aktivnog sastojka, se načine kako slijedi:
sastojak količina
spoj iz primjera 3 25 mg
gliceridi zasićenih masnih kiselina do 2.000 mg
Aktivni sastojak se protisne kroz US sito veličine otvora 60, i suspendira u gliceridima zasićenih masnih kiselina prethodno rastaljenim upotrebom najmanje potrebne temperature. Smjesa se zatim izlije u kalup za supozitorije nominalnog kapaciteta od 2,0 g i ostavi da se ohladi.
Primjer formulacije 4
Intravenska formulacija se može načiniti kako slijedi:
sastojak količina
spoj iz primjera 13 250,0 mg
izotonična otopina soli 1000 ml
Druga poželjna formulacija upotrijebljena u postupcima iz ovog izuma koristi transdermalne sustave primjene (“flasteri”). Takvi transdermalni flasteri se mogu upotrijebiti da pruže kontinuiranu ili diskontinuiranu infuziju spojeva iz ovog izuma u kontroliranim količinama. Konstrukcija i upotreba transdermalnih flastera za davanje farmaceutskih sredstava je dobro poznata u struci. Vidi, npr., US Patent 5.023.252, izdan 11. lipnja, 1991, ovdje uklopljen po referenci. Takvi flasteri mogu biti konstruirani za kontinuirano, pulsirajuće, ili na zahtjev davanje farmaceutskih sredstava.
Često, bit će poželjno ili potrebno uvođenje farmaceutskog pripravka u mozak, bilo direktno ili indirektno. Direktne tehnike obično uključuju postavljanje katetera za davanje lijeka u ventrikularni sustav domaćina, da se zaobiđe krvno-moždana barijera. Jedan takav implantabilni sustav za davanje, koji se upotrebljava za transport bioloških faktora u specifične anatomske regije tijela, je opisan u US Patentu 5.011.472, izdanom 30. travnja, koji je ovdje uklopljen po referenci.
Indirektne tehnike, koje su općenito poželjne, obično uključuju formuliranje pripravaka da se omogući latentacijom lijeka konverzijom hidrofilnih lijekova u lijekove ili pro-lijekove topljive u lipidima. Latentacija se općenito postiže blokiranjem hidroksi, karbonil, sulfat, i primarnih amino skupina prisutnih na lijeku, da lijek postane više topljiv u lipidima i podložan transportu preko krvno-moždane barijere. Alternativno, apsorpcija hidrofilnih lijekova se može pojačati intra-arterijskom infuzijom ili hipertoničnim otopinama koje mogu prolazno otvoriti krvno-moždanu barijeru.
Tip formulacije upotrijebljen za primjenu spojeva koji se koriste u postupcima iz ovog izuma može biti određen pojedinim upotrijebljenim spojevima, tipom farmakokinetičkog profila koji je poželjan za put primjene i spoj(eve), i stanjem pacijenta.
Priprava I
5-trifluormetansulfoniloksi-3-(1-metilpiperidin-4-il)pirolo[3,2-b]piridin
Otopina 0,90 g (3,89 mmol) 5-hidroksi-3-(1-metilpiperidin-4-il)pirolo[3,2-b]piridina u 80 mL piridina se ohladi do 0 °C. Toj otopini se zatim doda 1,71 mL (10,13 mmol) anhidrida trifluormetansulfonske kiseline i reakcijska smjesa se ostavi da se postupno ugrije do sobne temperature. Nakon četiri sata reakcijska smjesa se ugasi dodavanjem zasićenog vodenog natrij bikarbonata i zatim se koncentrira pod sniženim tlakom. Ostatak se otopi u 3:1 kloroformu:izopropanolu i ova otopina se ispere sa zasićenim vodenim natrij kloridom. Organska faza se osuši iznad natrij sulfata i koncentrira pod sniženim tlakom. Ostatak se podvrgne kromatografiji na silikagelu, razvijanjem s diklormetanom koji sadrži od 0-20% metanola. Frakcije koje sadrže produkt se sjedine i koncentriraju pod sniženim tlakom da se dobije 1,12 g (79%) naslovnog spoja.
talište = 171 - 174 °C (raspad)
MS (m/e): 364 (M+1)
Izračunato za C14H16N3O3SF3 · 0,25 H2O: Teorijski: C, 45,73; H, 4,52; N, 11,42. Ustanovljeno: C, 45,63; H, 4,45; N, 11,20.
Priprava II
5-klorpirolo[3,2-b]piridin
6-hidroksi-3-nitro-2-pikolin
Suspenzija 3,0 g (19,6 mmol) 6-amino-3-nitro-2-pikolina u 50 mL vode, koja sadrži 3,5 mL koncentrirane sulfatne kiseline, se zagrije da nastane otopina. Dobivena otopina se ohladi do 0 °C i doda se otopina 2,0 g (29,4 mmol) natrij nitrita u 10 mL vode uz snažno miješanje, takvom brzinom da se reakcijska smjesa održi ≤10 °C. Nakon 4 sata reakcijska smjesa se filtrira. Krutina se ispere s vodom i osuši pod sniženim tlakom da nastane 2,4 g (80%) željenog spoja kao blijedo žute krutine.
MS (m/e): 153 (M+)
6-klor-3-nitro-2-pikolin
Smjesa 2,4 g (15,7 mmol) 6-hidroksi-3-nitro-2-pikolina, 1,0 g fosfor pentaklorida, i 0,5 mL fosfor oksiklorida se zagrijava pri 110 °C 2,5 sata. Reakcijska smjesa se ohladi do sobne temperature i zatim se doda dodatnih 0,5 g fosfor pentaklorida i 0,5 mL fosfor oksiklorida. Grijanje se nastavi još jedan sat, nakon kojeg vremena se reakcijska smjesa ulije u 100 mL smjese led/voda. Dobivena suspenzija se filtrira i krutina se osuši u vakuumu da nastane 2,3 g (85%) željenog spoja kao smeđe krutine.
2-(2-dimetilaminoeten-1-il)-3-nitro-6-klorpiridin
Otopina 5 g (29 mmol) 6-klor-3-nitro-2-pikolina u 40 mL dimetilformamida se obrađuje s 5,83 mL (44 mmol) dimetilformamid dimetilacetala i dobivena smjesa se zagrijava pri 100 °C 1,5 sat. U toj točki, dodaju se 2 kapi trietilamina i zatim 1,9 mL dimetilformamid dimetilacetala i zagrijavanje nastavi još 2 sata. Reakcijska smjesa se koncentrira pod sniženim tlakom da nastane željeni spoj.
Redukcija/zatvaranje prstena
Smjesa 3,07 g (13,5 mmol) 2-(2-dimetilaminoeten-1-il)-3-nitro-6-klorpiridina, 6,5 g (0,116 mol) željeza i 16,4 g silikagela u 170 mL 5:3 toluena:octene kiseline se zagrijava pri 110 °C 1 sat. Reakcijska smjesa se filtrira kroz filtar celita. Filtrat se ispire sekvencijalno s vodenim natrij bisulfitom, zasićenim vodenim natrij bikarbonatom dok tekućina od ispiranja ne ostaje lužnata, i zasićenim vodenim natrij kloridom. Preostale organske tvari se osuše iznad natrij sulfata i koncentriraju pod sniženim tlakom. Preostala krutina se podvrgne kromatografiji na silikagelu, razvijanjem s diklormetanom koji sadrži od 0-5% metanola. Frakcije koje sadrže produkt se sjedine i koncentriraju pod sniženim tlakom da se dobije naslovni spoj.
MS (m/e): 153 (M+)
Priprava III
5-metoksipirolo[3,2-b]piridin
6-metoksi-3-nitro-2-pikolin
0,46 g (20 mmol) natrija se otopi u 15 mL bezvodnog metanola. Toj otopini se doda 2,3 g 6-klor-3-nitro-2-pikolina u obrocima. Dobivena smjesa se miješa 18 sati na sobnoj temperaturi i zatim 1 sat refluksira. Reakcijska smjesa se izlije u 100 mL ledene vode uz snažno miješanje. Suspenzija se filtrira i krutina suši pri 30 °C pod sniženim tlakom 18 sati da nastane 2,04 g (91%) željenog spoja kao žućkastosmeđe krutine.
2-(2-dimetilaminoeten-2-il)-3-nitro-6-metoksipiridin
Smjesa 2,0 g (11,9 mmol) 6-metoksi-3-nitro-2-pikolina i 16 mL (119 mmol) dimetilformamid dimetilacetala u 20 mL dimetilformamida se zagrijava pri 100 °C 7 sati. Reakcijska smjesa se koncentrira pod sniženim tlakom. Ostatak se obrađuje s toluenom i koncentrira pod sniženim tlakom. Preostala krutina se suši na 50 °C pod sniženim tlakom 1 sat da se dobije 2,70 g (100%) željenog spoja kao crvene krutine.
Redukcija/zatvaranje prstena
Smjesa 2,5 g (11,2 mmol) 2-(2-dimetilaminoeten-2-il)-3-nitro-6-metoksipiridina i 0,30 g 10%-tnog paladija na ugljiku se hidrogenira na sobnoj temperaturi 18 sati uz početni tlak vodika od 30 psi (oko 2 bara). Reakcijska smjesa se filtrira i filtrat koncentrira pod sniženim tlakom. Ostatak se podvrgne kromatografiji na silikagelu, razvijanjem s diklormetanom. Frakcije koje sadrže produkt se sjedine i koncentriraju pod sniženim tlakom da se dobije 1,22 g (74%) naslovnog spoja kao bezbojne krutine.
Priprava IV
5-amino-3-(1-metil-1,2,3,6-tetrahidropiridin-4-il)pirolo[3,2-b]piridin
Nitriranje 6-amino-2-pikolina
110 g (1,02 mol) rastaljenog 6-amino-2-pikolina se dodaje kap po kap u 500 mL koncentrirane sulfatne kiseline koja je bila prethodno ohlađena na -15 °C, takvom brzinom da temperatura otopine sulfatne kiseline ostane ispod 20 °C. Otopina se zatim ohladi do oko -6 °C i zatim se kap po kap dodaje otopina 49 mL 90%-tne nitratne kiseline (1,16 mol) u 49 mL sulfatne kiseline prethodno ohlađena na oko 0 °C tijekom oko 30 minuta, održavajući temperaturu pri oko 0 °C. Reakcijska smjesa se miješa na oko 0 °C jedan sat i zatim se ostavi da se ugrije do oko 10 °C tijekom jednog sata. Temperatura reakcijske smjese se održava pri oko 10 °C jedan sat i zatim se ostavi da se ugrije do oko 20 °C tijekom jednog sata. Reakcijska smjesa se održava pri oko 20 °C 2 sata. Reakcijska smjesa se izlije u 8 L leda u snažno miješanje. Reakcijska smjesa se zatim podesi na pH ~9 dodatkom 1,5 L koncentriranog amonij hidroksida, održavajući temperaturu reakcijske smjese na oko 24 °C dodavanjem leda po potrebi. Dobivena suspenzija se filtrira i krutina ispere nekoliko puta s vodom. Krutina se suši na 70 °C pod vakuumom 3 dana da se dobije 135,4 g (87%) 2:1 smjese 3-nitro-:5-nitro-6-amino-2-pikolina.
Odvajanje nitriranih izomera sublimacijom
Dijelovi od 20 g smjese od nitriranja se sublimiraju dvaput pod vakuumom pri 125 °C, svaki po 6 sati. 5-nitro izomer sublimira kao svijetlo žuti prašak i odbacuje se. 3-nitro izomer, koji je ostao na dnu aparature za sublimaciju, se sakupi. Ukupno 121 g sublimira, da nastane 60,9 g (75,5%) sirovog 3-nitro izomera. 58 g sirovog 3-nitro izomera se razmulji u 200 mL vrućeg 95:5 etanola:vode. Smjesa se ohladi do sobne temperature i razrijedi s 200 mL vode. Nakon dva sata talog se sakupi filtracijom i ispere nekoliko puta s vodom. Krutina se osuši pod vakuumom na sobnoj temperaturi da nastane 38 g (65% s obzirom na 58 g sirovog) 3-nitro-6-amino-2-pikolina.
MS (m/e): 153 (M+)
Izračunato za C6H7N3O2: Teorijski: C, 47,05; H, 4,61; N, 27,44. Ustanovljeno: C, 47,08; H, 4,53; N, 27,53.
Odvajanje nitriranih izomera prekristalizacijom
Smjesa 20 g smjese od nitriranja i 800 mL toluena se refluksira 15 minuta. Smjesa se filtrira pri 95 °C i izvorna tekućina se ostavi da se ohladi do sobne temperature. Nakon 4 sata kristalna krutina se sakupi, ispere sa 100 mL toluena, i suši pod sniženim tlakom pri 50 °C 16 sati, da nastane 13,7 g (68%) 3-nitro-6-amino-2-pikolina.
Dobivanje 2-(2-dimetilaminoeten-1-il)-5-nitro-6-(dimetilaminometilimino)pirolo[3,2-b]piridina (međuprodukt IV)
Smjesa 60 g (0,39 mol) 3-nitro-6-amino-2-pikolina u 260 mL dimetilformamida se obrađuje sa 260 mL (1,83 mol) 94%-tnog dimetilformamid dimetilacetala i otopina se refluksira 48 sati. Reakcijska smjesa se koncentrira pod sniženim tlakom i preostala krutina se razmulji s toluenom. Toluen se upari pod sniženim tlakom. Ovaj postupak se ponovi 5 puta. Konačni ostatak se razmulji sa 300 mL metil tert-butil etera i zatim filtrira. Ova krutina se ispere 3 puta sa 300 mL metil tert-butil etera i crna krutina se konačno osuši pod sniženim tlakom da nastane 90,6 g (88%) željenog spoja.
MS (m/e): 263,1 (M+)
Izračunato za C12H17N5O2: Teorijski: C, 54,74; H, 6,51; N, 26,60. Ustanovljeno: C, 54,85; H, 6,49; N, 26,79.
Dobivanje 5-(dimetilaminometilimino)pirolo[3,2-b]piridina
Smjesa 90 g (0,43 mol) međuprodukta IV i 6 g 10%-tnog paladija na ugljiku u 650 mL etanola se hidrogenira na pri 50 psi (3,45 bar) 45 sati. Reakcijska smjesa se filtrira i filtrat koncentrira pod sniženim tlakom. Preostala krutina se razmulji 30 minuta sa 70:30 metil tert-butil eterom:etil acetatom, filtrira i ispere sa 3 × 300 mL 70:30 metil tert-butil eterom:etil acetatom. Krutina se smrvi i zatim razmulji sa 200 mL 70:30 metil tert-butil etera:etil acetata. Krutina se filtrira i osuši pod sniženim tlakom da nastane 54,5 g (85%) naslovnog spoja kao žute krutine.
MS (m/e): 188,2 (M+)
Kondenzacija s 1-metil-4-piperidonom
Otopina 19,2 g (0,10 mol) 5-(dimetilaminometilimino)pirolo[32-b]piridina u 208 mL metanola se obrađuje s 20 g (0,30 mol)kalij hidroksida, zatim sa 16,3 mL (0,13 mol) 1-metil-4-piperidona. Reakcijska smjesa se refluksira 24 sata i zatim se koncentrira pod sniženim tlakom. Preostala krutina se obrađuje sa 250 mL 9:1 etil acetata:tetrahidrofurana i 50 mL metanola. Otopina se ohladi do 0 °C i zatim se doda 200 mL hladne vode. Faze se odvoje i vodena faza se dobro ekstrahira s 9:1 etil acetatom:tetrahidrofuranom. Sve organske faze se sjedine, osuše iznad natrij sulfata i koncentriraju pod sniženim tlakom. Preostala krutina se razmulji nekoliko puta s hladnom vodom da se uklone crna onečišćenja. Preostala krutina se osuši pod sniženim tlakom da se dobije 17 g (74%) naslovnog spoja kao žutog praška.
MS (m/e): 228,1 (M+)
Izračunato za C13H16N4: Teorijski: C, 68,39; H, 7,06; N, 24,54. Ustanovljeno: C, 68,13; H, 7,06; N, 24,38.
Priprava V
5-amino-3-(1-metilpiperidin-4-il)pirolo[3,2-b]piridin
Smjesa 21 g (89,9 mmol) 5-amino-3-(1-metil-1,2,3,6-tetrahidropiridin-4-il)pirolo[3,2-b]piridina i 10%-tnog paladija na ugljiku, prethodno navlaženog s 30 mL etanola, u 180 mL metanola se hidrogenira pri 65 psi (4,5 bar) 3 dana. Katalizator se ukloni filtracijom i filtrat se koncentrira pod sniženim tlakom. Preostala krutina se razmulji u 120 mL etil acetata, filtrira, i ispere sa 3 × 30 mL etil acetata. Preostala krutina se osuši pod sniženim tlakom da nastane 19 g (92%) naslovnog spoja kao svijetlo smeđe krutine.
MS (m/e): 230 (M+)
Izračunato za C13H18N4: Teorijski: C, 67,80; H, 7,88; N, 24,32. Ustanovljeno: C, 67,21; H, 7,79; N, 24,24.
Priprava VI
Alternativna izolacija međuprodukta IV
Otopina 38,8 g (0,25 mol) 3-nitro-6-amino-2-pikolina u 172 mL dimetilformamida se obrađuje sa 172 mL dimetilformamid dimetilacetala i smjesa se zagrijava na oko 97 °C 42 sata. Reakcijska smjesa se zatim ohladi do sobne temperature i razrijedi sa 650 mL izopropanola. Reakcijska smjesa se ostavi da stoji 18 sati na sobnoj temperaturi i zatim se hladi pri 3-5 °C uz miješanje dodatna 2 sata. Suspenzija se filtrira, krutina ispere s 2 × 75 mL izopropanola, i suši pod sniženim tlakom pri 45 °C 16 sati, da se dobije 58,9 g (88%) međuprodukta IV.
Priprava VII
Sinteza međuprodukta IV iz smjese nitriranih izomera
Smjesa 133 g (0,86 mol) 2:1 smjese 3-nitro-:5-nitro-6-amino-2-pikolina u 500 mL dimetilformamida se obrađuje sa 500 mL (3,5 mol) 94%-tnog dimetilformamid dimetilacetala i refluksira 40 sati. Nakon hlađenja do sobne temperature, reakcijska smjesa se podijeli na pola i svaka polovica se ulije u 10 L vode pri 0 °C uz snažno miješanje. Nakon 10 minuta, smjesa se filtrira i krutina se razmulji/ispere sa 3 × 1 L vode. Krutina se suši pod vakuumom pri 65 °C 2,5 dana, da se dobije 183 g (81%) naslovnog spoja kao crvene krutine.
Priprava VIII
Alternativna sinteza 5-amino-3-(1-metilpiperidin-4-il)pirolo[3,2-b]piridina
Dobivanje 1-hidroksi-5-(dimetilaminometilimino)pirolo[3,2-b]piridin dihidroklorida
Smjesa 23,4 g (89 mmol) međuprodukta IV i 0,7 g 10%-tnog paladija na ugljiku u 234 mL bezvodnog metanola se obrađuje sa 140 mL 5,9 N etanolnog klorovodika. Dobivena smjesa se hidrogenira 1,5 sat pod početnim tlakom vodika od 30 psi (2,01 bar). Reakcijska smjesa se razrijedi sa 585 mL etanola i miješa na sobnoj temperaturi 1 sat. Talog se sakupi i ispere s 50 mL etanola. Krutina se stavi u 1,1 L metanola, filtrira, i zatim koncentrira pod sniženim tlakom. Preostala krutina se osuši pod sniženim tlakom da nastane 20,5 g (83%) željenog spoja (koji sadržava 5% 5-(dimetilaminometilimino)pirolo[3,2-b]piridina) kao žute krutine.
Dobivanje 1-hidroksi-5-(dimetilaminometilimino)-3-(1-metil-1,2,3,6-tetrahidropiridin-4-il)pirolo[3,2-b]piridina
Smjesa 13,5 g (48,7 mmol) 1-hidroksi-5-(dimetilaminometilimino)pirolo[3,2-b]piridina i 17,5 g (155 mmol) 1-metil-4-piperidona u 270 mL bezvodnog etanola se miješa dok ne postane homogena. Tad se doda 19,4 mL (109 mmol) 5,6 N dimetilamina u etanolu i reakcijska smjesa se miješa na sobnoj temperaturi 4 sata. Žuti talog se filtrira, ispere s 2 × 27 mL etanola, i osuši pod sniženim tlakom pri 45 °C da nastane 13,4 g (92%) željenog spoja kao žute krutine.
Hidrogeniranje/hidrogenoliza
Smjesa 0,28 g (0,94 mmol) 1-hidroksi-5-(dimetilaminometilimino)-3-(1-metil-1,2,3,6-tetrahidropiridin-4-il)pirolo[3,2-b]piridina i 0,10 g 10%-tnog paladija na ugljiku u 20 mL metanola se hidrogenira oko 18 sati pod početnim tlakom vodika od 50 psi (3,44 bar). Reakcijska smjesa se filtrira i filtrat koncentrira pod sniženim tlakom da se dobije 0,21 g (96%) naslovnog spoja.
PRIMJER 1
5-(N-[etil]amino)-3-(1-metilpiperidin-4-il)pirolo[3,2-b]piridin
Smjesa 0,200 g (0,74 mmol) 5-(N-[acetil]amino)-3-(1-metilpiperidin-4-il)pirolo[3,2-b]piridina i 0,125 g (3,31 mmol) litij aluminij hidrida u 40 mL tetrahidrofurana se zagrijava pri 75 °C 18 sati. Reakcijska smjesa se ohladi do 0 °C i zatim se obrađuje s natrij sulfat dekahidratom. Nakon snažnog miješanja reakcijska smjesa se filtrira kroz filtar celita i filtrat koncentrira pod sniženim tlakom. Ostatak se podvrgne flash kromatografiji na silikagelu, razvijanjem s diklormetanom koji sadrži 0-20% metanola. Frakcije koje sadrže produkt se sjedine i koncentriraju pod sniženim tlakom da se dobije 0,10 g (54%) naslovnog spoja.
talište = 132,5 - 133,9 °C
MS (m/e): 258 (M+)
PRIMJER 2
5-(N-[benzil]amino)-3-(1-metilpiperidin-4-il)pirolo[3,2-b]piridin
Smjesa 0,25 g (1,09 mmol) 5-amino-3-(1-metilpiperidin-4-il)pirolo[3,2-b]piridina, 0,5 g molekulskih sita, i 0,22 mL (2,17 mmol) benzaldehida u 10 mL metanola se zagrijava pri 40 °C 5 sati. Reakcijska smjesa se zatim ohladi do sobne temperature i zatim se doda 0,124 g (3,27 mmol) natrij borohidrida. Reakcijska smjesa se zatim miješa 30 minuta na sobnoj temperaturi i zatim se reakcijska smjesa ugasi s 1N natrij hidroksidom. Reakcijska smjesa se koncentrira pod sniženim tlakom i vodeni ostatak se dobro ekstrahira s 3:1 kloroformom:izopropanolom. Organska faza se sjedini, ispere sa zasićenim vodenim natrij kloridom, osuši iznad natrij sulfata i koncentrira pod sniženim tlakom. Ostatak se podvrgne flash kromatografiji na silikagelu, razvijanjem s diklormetanom koji sadrži 0-10% metanola. Frakcije koje sadrže produkt se sjedine i koncentriraju pod sniženim tlakom da se dobije naslovni spoj.
MS (m/e): 321 (M+1)
PRIMJER 3
5-(N-[tien-2-ilmetil]amino)-3-(1-metilpiperidin-4-il)pirolo[3,2-b]piridin
Počevši s 0,25 g (1,09 mmol) 5-amino-3-(1-metilpiperidin-4-il)pirolo[3,2-b]piridina i 0,20 mL (2,17 mmol) tiofen-2-karboksaldehida, naslovni spoj se pripravi uglavnom kako je opisano u primjeru 2.
MS (m/e): 327 (M+1)
PRIMJER 4
5-klor-3-(1-metil-1,2,3,6-tetrahidropiridin-4-il)pirolo[3,2-b]piridin
Otopini 0,66 g (4,3 mmol) 5-klorpirolo[3,2-b]piridina u 50 mL metanola se doda 1,09 g (47,6 mmol) natrija. Reakcijska smjesa se miješa dok se sav natrij ne otopi i zatim se doda 1,6 mL (13 mmol) 1-metil-4-piperidona. Reakcijska smjesa se refluksira 7,5 sati i zatim ohladi do 0 °C. Toj smjesi se zatim dodaje kloridna kiselina dok pH otopine ne bude oko 8. Reakcijska smjesa se zatim koncentrira pod sniženim tlakom do ulja. Ovo ulje se otopi u 3:1 kloroformu:izopropanolu i dobivena otopina se ispere sekvencijski sa zasićenim vodenim natrij bikarbonatom i zasićenim vodenim natrij kloridom. Preostale organske tvari se osuše iznad natrij sulfata i koncentriraju pod sniženim tlakom. Ostatak se podvrgne flash kromatografiji na silikagelu, razvijanjem s diklormetanom koji sadrži 0-10% metanola. Frakcije koje sadrže produkt se sjedine i koncentriraju pod sniženim tlakom da se dobije 0,30 g (28%) naslovnog spoja.
talište = 230 °C (raspad)
MS (m/e): 247 (M+)
Izračunato za C13H14N3Cl: Teorijski: C, 63,03; H, 5,70; N, 16,96. Ustanovljeno: C, 63,20; H, 5,90; N, 16,82.
PRIMJER 5
5-metoksi-3-(1,2,3,6-tetrahidropiridin-4-il)pirolo[3,2-b]piridin
Otopina 0,20 g (1,35 mmol) 5-metoksipirolo[3,2-b]piridina, 0,23 mg (0,05 mmol) kalij hidroksida, i 0,31 g (2,03 mmol) 4-piperidon hidroklorid monohidrata u 5 mL metanola se refluksira 18 sati. Reakcijska smjesa se zatim koncentrira pod sniženim tlakom i ostatak razdijeli između vode i 3:1 kloroforma:izopropanola. Organska faza se ispere sa zasićenim vodenim natrij kloridom, osuši iznad natrij sulfata i koncentrira pod sniženim tlakom. Ostatak se podvrgne radijalnoj kromatografiji (2 mm silikagel ploča) razvijanjem s diklormetanom koji sadrži 20-40% metanola i 1% amonij hidroksida. Frakcije koje sadrže produkt se sjedine i koncentriraju pod sniženim tlakom da se dobije 0,21 g (68%) naslovnog spoja kao žute krutine. Analitički uzorak se prekristalizira iz metanola.
MS (m/e): 229 (M+)
Izračunato za C13H15N3O: Teorijski: C, 68,10; H, 6,59; N, 18,33. Ustanovljeno: C, 68,03; H, 6,74; N, 18,50.
PRIMJER 6
5-metoksi-3-(1-metil-1,2,3,6-tetrahidropiridin-4-il)pirolo[3,2-b]piridin
Počevši s 0,80 g (5,4 mmol) 5-metoksipirolo[3,2-b]piridina i 1,2 mL (10,1 mmol) 1-metil-4-piperidona, dobije se 1,1 g (84%) naslovnog spoja kao žute krutine postupkom uglavnom kako je opisano u primjeru 5. Analitički uzorak se prekristalizira iz metanola.
talište = 202,9 °C (sublimacija)
MS (m/e): 243 (M+)
Izračunato za C14H17N3O: Teorijski: C, 69,11; H, 7,04; N, 17,27. Ustanovljeno: C, 69,22; H, 7,13; N, 17,47.
PRIMJER 7
5-metoksi-3-(1-metilpiperidin-4-il)pirolo[3,2-b]piridin
Počevši s 0,50 g (2,1 mmol) 5-metoksi-3-(1-metil-1,2,3,6-tetrahidropiridin-4-il)pirolo[3,2-b]piridina, dobije se 0,294 g (57%) naslovnog spoja, postupkom uglavnom kako je opisano u primjeru 5. Analitički uzorak se prekristalizira iz vodenog etanola.
MS (m/e): 245 (M+)
Izračunato za C14H19N3O: Teorijski: C, 68,54; H, 7,81; N, 17,13. Ustanovljeno: C, 68,40; H, 7,52; N, 16,90.
PRIMJER 8
5-hidroksi-3-(1-metilpiperidin-4-il)pirolo[3,2-b]piridin
Otopina 1,00 g (4,1 mmol) 5-metoksi-3-(1-metilpiperidin-4-il)pirolo[3,2-b]piridina u 20 mL bromovodika (30% u octenoj kiselini) se refluksira 48 sati. Dodatni alikvoti od 5 mL bromovodika u octenoj kiselini se dodaju nakon oko 8 i 24 sata. Reakcijska smjesa se koncentrira pod sniženim tlakom i ostatak obrađuje s 1mL zasićenog vodenog natrij bikarbonata. Dobivena smjesa se stavi u metanol i propusti preko VARIAN BOND ELUT SCX™ (Varian, Harbor City, CA, SAD) stupca za izmjenu iona koji je bio prethodno aktiviran s 10%-tnom octenom kiselinom u etanolu. Stupac se ispere s tri volumena metanola koji se odbace, i zatim s metanolom koji sadrži amonijak. Frakcije koje sadrže produkt se sjedine i koncentriraju pod sniženim tlakom da se dobije 0,892 g (94%) naslovnog spoja. Analitički uzorak se dalje podvrgne flash kromatografiji na silikagelu, razvijanjem s diklormetanom koji sadrži 10-40% metanola. Frakcije koje sadrže produkt se sjedine i koncentriraju pod sniženim tlakom. Ostatak se prekristalizira iz metanola.
MS (m/e): 231 (M+)
Izračunato za C13H17N3O: Teorijski: C, 67,51; H, 7,41; N, 18,17. Ustanovljeno: C, 67,24; H, 7,37; N, 18,38.
PRIMJER 9
metil 3-(1-metilpiperidin-4-il)pirolo[3,2-b]piridin-5-karboksilat
Smjesa 0,225 g (0,62 mmol) 5-trifluoro-metansulfoniloksi-3-(1-metilpiperidin-4-il)pirolo[3,2-b]piridina, 0,035 g (0,15 mmol) paladij(II) acetata, 0,17 g (1,2 mmol) trietilamina i 0,75 mL (18,5 mmol) metanola u 15 mL dimetilformamida se zasiti s ugljik monoksidom propuštanjem mjehurića ugljik monoksida kroz reakcijsku smjesu oko 5 minuta. Reakcijska smjesa se zagrijava pri 60 °C pod atmosferom ugljik monoksida koja se održava pomoću balona 24 sata. Reakcijska smjesa se razrijedi sa zasićenim vodenim natrij kloridom i zatim dobro ekstrahira s 3:1 kloroformom:izopropanolom. Organska faza se sjedini, osuši iznad natrij sulfata i koncentrira pod sniženim tlakom. Ostatak se podvrgne flash kromatografiji na silikagelu, razvijanjem s diklormetanom koji sadrži 0-20% metanola. Frakcije koje sadrže produkt se sjedine i koncentriraju pod sniženim tlakom da se dobije 0,10 g (59,3%) naslovnog spoja.
talište = 199,7 - 201,0 °C
MS (m/e): 273 (M+)
Izračunato za C15H19N3O2: Teorijski: C, 65,91; H, 7,01; N, 15,37. Ustanovljeno: C, 65,62; H, 6,77; N, 15,07.
PRIMJER 10
N-[etil] 3-(1-metilpiperidin-4-il)pirolo[3,2-b]piridin-5-karboksamid
Smjesa 0,150 g (0,41 mmol) 5-trifluoro-metansulfoniloksi-3-(1-metilpiperidin-4-il)pirolo[3,2-b]piridina, 0,023 g (0,10 mmol) paladij(II) acetata, 0,12 g (0,21 mmol) 1,1’-bis(difenilfosfino)ferocena, i 0,457 g (3,30 mmol) kalij karbonata u 40 mL acetonitrila se zasiti s ugljik monoksidom pri 0 °C. Ovoj smjesi se zatim doda 0,202 g (2,48 mmol) etilamin hidroklorida i reakcijska smjesa se zagrijava pri 65 °C pod atmosferom ugljik monoksida koja se održava pomoću balona. Nakon 72 sata reakcijska smjesa se razrijedi s vodom i zatim ekstrahira jednom s etil acetatom i nakon toga s 3:1 kloroformom:izopropanolom. Organska faza se sjedini, osuši iznad natrij sulfata i koncentrira pod sniženim tlakom. Ostatak se podvrgne flash kromatografiji na silikagelu, razvijanjem s diklormetanom koji sadrži 0-20% metanola. Frakcije koje sadrže produkt se sjedine i koncentriraju pod sniženim tlakom da se dobije 0,10 g (84%) naslovnog spoja.
talište = 117 - 120 °C
MS (m/e): 286 (M+)
Izračunato za C16H22N4O: Teorijski: C, 67,11; H, 7,74; N, 19,56. Ustanovljeno: C, 67,17; H, 7,61; N, 19,43.
PRIMJER 11
N-[fenil] 3-(1-metilpiperidin-4-il)pirolo[3,2-b]piridin-5-karboksamid
Počevši sa 0,125 g (0,34 mmol) 5-trifluoro-metansulfoniloksi-3-(1-metilpiperidin-4-il)pirolo[3,2-b]piridina i 0,16 mL (1,72 mmol) anilina, 0,065 g (56%) naslovnog spoja se pripravi postupkom uglavnom kako je opisano u primjeru 10.
MS (m/e): 334 (M+)
PRIMJER 12
N-[2-hidroksifenil] 3-(1-metilpiperidin-4-il)pirolo[3,2-b]piridin-5-karboksamid
Počevši sa 0,125 g (0,34 mmol) 5-trifluoro-metansulfoniloksi-3-(1-metilpiperidin-4-il)pirolo[3,2-b]piridina i 0,19 mL (1,72 mmol) 2-hidroksianilina, 0,093 g (77%) naslovnog spoja se pripravi postupkom uglavnom kako je opisano u primjeru 10.
MS (m/e): 351 (M+1)
PRIMJER 13
N-[4-fluorofenil] 3-(1-metilpiperidin-4-il)pirolo[3,2-b]piridin-5-karboksamid
Počevši sa 0,15 g (0,41 mmol) 5-trifluoro-metansulfoniloksi-3-(1-metilpiperidin-4-il)pirolo[3,2-b]piridina i 0,12 mL (1,24 mmol) 4-flluoroanilina, 0,058 g (40%) naslovnog spoja se pripravi postupkom uglavnom kako je opisano u primjeru 10.
talište = 114 - 116 °C
MS (m/e): 353 (M+1)
Izračunato za C20H21N4OF: Teorijski: C, 68,16; H, 6,01; N, 15,90. Ustanovljeno: C, 68,40; H, 6,08; N, 16,07.
PRIMJER 14
3-(1-metilpiperidin-4-il)pirolo[3,2-b]piridin-5-karboksilna kiselina dihidroklorid
Otopina 0,125 g (0,46 mmol) metil 3-(1-metilpiperidin-4-il)pirolo[3,2-b]piridin-5-karboksilata u 30 mL 1N kloridne kiseline se refluksira 18 sati. Reakcijska smjesa se koncentrira pod sniženim tlakom da nastane 0,10 g (87%) naslovnog spoja.
MS (m/e): 259 (M+1)

Claims (11)

1. Spoj formule I: [image] naznačen time, što A-B je -C=CH- ili -CH-CH2-; R je H, C1-C6 alkil, benzil, ili feniletil; X je halo, hidroksi, C1-C4 alkoksi, -NHR1, -C(O)OR2, ili -C(O)NHR3 gdje: R1 je C1-C4 alkil, fenil (C1-C4 alkilenil), ili heteroaril (C1-C4 alkilenil); R2 je vodik ili C1-C4 alkil; R3 je C1-C4 alkil, heterocikl, ili fenil opcionalno monosupstituiran s halo ili hidroksi; i njegove farmaceutski prihvatljive adicijske soli s kiselinama i solvati, pod uvjetom da kad A-B je -C=CH-, onda X nije hidroksi, halogen ili C1-C4 alkoksi.
2. Spoj prema zahtjevu 1, naznačen time, što A-B je -CH-CH2-.
3. Spoj prema zahtjevu 1, naznačen time, što X je -C(O)NHR3.
4. Farmaceutski pripravak, naznačen time, što sadrži, zajedno s farmaceutski prihvatljivim nosačem, razrjeđivačem, ili ekscipijentom, spoj formule I: [image] gdje A-B je -C=CH- ili -CH-CH2-; R je H, C1-C6 alkil, benzil, ili feniletil; X je halo, hidroksi, C1-C4 alkoksi, -NHR1, -C(O)OR2, ili -C(O)NHR3 gdje: R1 je C1-C4 alkil, fenil (C1-C4 alkilenil), ili heteroaril (C1-C4 alkilenil); R2 je vodik ili C1-C4 alkil; R3 je C1-C4 alkil, heterocikl, ili fenil opcionalno monosupstituiran s halo ili hidroksi; i njegove farmaceutski prihvatljive adicijske soli s kiselinama i solvate, pod uvjetom da kad A-B je -C=CH-, onda X nije hidroksi, halogen ili C1-C4 alkoksi.
5. Postupak za aktiviranje 5-HT1F receptora kod sisavaca, naznačen time, što sadrži davanje sisavcu, kojem je takvo aktiviranje potrebno, djelotvorne količine spoja formule II: [image] gdje A-B je -C=CH- ili -CH-CH2-; R je H, C1-C6 alkil, benzil, ili feniletil; X je halo, hidroksi, C1-C4 alkoksi, -NHR1, -C(O)OR2, ili -C(O)NHR3 gdje: R1 je C1-C4 alkil, fenil (C1-C4 alkilenil), ili heteroaril (C1-C4 alkilenil); R2 je vodik ili C1-C4 alkil; R3 je C1-C4 alkil, heterocikl, ili fenil opcionalno monosupstituiran s halo ili hidroksi; i njegovih farmaceutski prihvatljivih adicijskih soli s kiselinama i solvata.
6. Postupak prema zahtjevu 5, naznačen time, što 5-HT1F posredovani poremećaj je migrena.
7. Postupak za prevenciju migrene kod sisavaca, naznačen time, što sadrži davanje sisavcu, koji pati od migrene, djelotvorne količine spoja formule II: [image] gdje A-B je -C=CH- ili -CH-CH2-; R je H, C1-C6 alkil, benzil, ili feniletil; X je halo, hidroksi, C1-C4 alkoksi, -NHR1, -C(O)OR2, ili -C(O)NHR3 gdje: R1 je C1-C4 alkil, fenil (C1-C4 alkilenil), ili heteroaril (C1-C4 alkilenil); R2 je vodik ili C1-C4 alkil; R3 je C1-C4 alkil, heterocikl, ili fenil opcionalno monosupstituiran s halo ili hidroksi; i njegovih farmaceutski prihvatljivih adicijskih soli s kiselinama i solvata.
8. Postupak za prevenciju ili inhibiciju neuronske proteinske ekstravazacije, naznačen time, što sadrži davanje sisavcu, kojem je to potrebno, djelotvorne količine spoja formule II: [image] gdje A-B je -C=CH- ili -CH-CH2-; R je H, C1-C6 alkil, benzil, ili feniletil; X je halo, hidroksi, C1-C4 alkoksi, -NHR1, -C(O)OR2, ili -C(O)NHR3 gdje: R1 je C1-C4 alkil, fenil (C1-C4 alkilenil), ili heteroaril (C1-C4 alkilenil); R2 je vodik ili C1-C4 alkil; R3 je C1-C4 alkil, heterocikl, ili fenil opcionalno monosupstituiran s halo ili hidroksi; i njegovih farmaceutski prihvatljivih adicijskih soli s kiselinama i solvata.
9. Spoj formule III: [image] naznačen time, što A-B je -C=CH- ili -CH-CH2-; i R je H, C1-C6 alkil, benzil, ili feniletil; i njegove adicijske soli s kiselinama.
10. Spoj prema zahtjevu 9, naznačen time, što A-B je -CH-CH2-.
11. Spoj prema zahtjevu 10, naznačen time, što R je metil.
HR20000297A 1997-11-14 2000-05-12 5-ht1f agonists HRP20000297A2 (en)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US08/970,637 US5905084A (en) 1997-11-14 1997-11-14 5-HTIF -agonists effective in treating migraine
PCT/US1998/024256 WO1999025348A1 (en) 1997-11-14 1998-11-13 5-ht1f agonists

Publications (1)

Publication Number Publication Date
HRP20000297A2 true HRP20000297A2 (en) 2000-12-31

Family

ID=25517243

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
HR20000297A HRP20000297A2 (en) 1997-11-14 2000-05-12 5-ht1f agonists

Country Status (22)

Country Link
US (1) US5905084A (hr)
EP (1) EP0916670B1 (hr)
JP (1) JP2001522887A (hr)
KR (1) KR20010032085A (hr)
CN (1) CN1284874A (hr)
AT (1) ATE240326T1 (hr)
AU (1) AU1407299A (hr)
BR (1) BR9814188A (hr)
CA (1) CA2310248A1 (hr)
DE (1) DE69814563T2 (hr)
DK (1) DK0916670T3 (hr)
EA (1) EA200000522A1 (hr)
ES (1) ES2198657T3 (hr)
HR (1) HRP20000297A2 (hr)
HU (1) HUP0004317A3 (hr)
ID (1) ID25478A (hr)
IL (1) IL135634A0 (hr)
NO (1) NO20002408L (hr)
PL (1) PL340459A1 (hr)
PT (1) PT916670E (hr)
TR (1) TR200001724T2 (hr)
WO (1) WO1999025348A1 (hr)

Families Citing this family (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2001012629A1 (en) * 1999-08-12 2001-02-22 Nps Allelix Corp. Azaindoles having serotonin receptor affinity
AU1570701A (en) * 1999-10-19 2001-04-30 Genaissance Pharmaceuticals, Inc. Drug target isogenes: polymorphisms in the 5-hydroxytryptamine (serotonin) receptor 1e gene
TWI263497B (en) 2002-03-29 2006-10-11 Lilly Co Eli Pyridinoylpiperidines as 5-HT1F agonists
ES2388547T3 (es) 2003-04-18 2012-10-16 Eli Lilly And Company Compuestos de (piperidiniloxi)fenilo, (piperidiniloxi)piridinilo, (piperidinilsulfanil)fenilo y (piperidinilsulfanil)piridinilo como agonistas de 5-HT 1F
UA82711C2 (en) 2003-09-12 2008-05-12 Эли Лилли Энд Компани Substituted 2-carbonylamino-6-piperidinaminopyridines and substituted 1-carbonylamino-3-piperidinaminobenzenes as 5-ht1f agonists
ES2291978T3 (es) 2003-12-17 2008-03-01 Eli Lilly And Company Compuestos de (4-aminociclohexen-1-il)fenilo y (4-aminociclohexen-1-il)piridinilo sustituidos como agonistas de 5-ht1f.
US8030344B2 (en) * 2007-03-13 2011-10-04 Methylgene Inc. Inhibitors of histone deacetylase
US8697876B2 (en) 2010-04-02 2014-04-15 Colucid Pharmaceuticals, Inc. Compositions and methods of synthesis of pyridinolypiperidine 5-HT1F agonists
TWI776175B (zh) 2019-07-09 2022-09-01 美商美國禮來大藥廠 大規模製備2,4,6-三氟-n-[6-(1-甲基-哌啶-4-羰基)-吡啶-2-基]-苯甲醯胺半琥珀酸鹽的方法及中間體，以及2,4,6-三氟-n-[6-(1-甲基-哌啶-4-羰基)-吡啶-2-基]-苯甲醯胺醋酸鹽之製備

Family Cites Families (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO1990007926A1 (en) * 1989-01-20 1990-07-26 Pfizer Inc. 3-(1,2,5,6-tetrahydropyridyl)-pyrrolopyridines
US5521196A (en) * 1994-10-05 1996-05-28 Eli Lilly And Company 5-HT1F agonists for the treatment of migraine
GB9423460D0 (en) * 1994-11-21 1995-01-11 Merck Sharp & Dohme Therapeutic agents
US5521197A (en) * 1994-12-01 1996-05-28 Eli Lilly And Company 3-<1-alkylenearyl>-4-<1,2,3,6-tetrahydropyridinyl>-and 3-<1-alkylenearyl>-4-piperidinyl-1h-indoles: new 5-HT1F agonists
CN1184425A (zh) * 1995-03-20 1998-06-10 伊莱利利公司 5－取代－3－(1,2,3,6－四氢吡啶－4－基)－和3－(哌啶－4－基)－1h－吲哚:新型5－ht1f激动剂
US5942536A (en) * 1995-10-10 1999-08-24 Eli Lilly And Company N- 2-substituted-3-(2-aminoethyl)-1H-indol-5-YL!-Amides: new 5-HT1F agonists
ZA979961B (en) * 1996-11-15 1999-05-05 Lilly Co Eli 5-HT1F agonists

Also Published As

Publication number Publication date
TR200001724T2 (tr) 2000-11-21
JP2001522887A (ja) 2001-11-20
CN1284874A (zh) 2001-02-21
US5905084A (en) 1999-05-18
DE69814563D1 (de) 2003-06-18
ES2198657T3 (es) 2004-02-01
KR20010032085A (ko) 2001-04-16
EP0916670A3 (en) 2001-05-23
PL340459A1 (en) 2001-02-12
HUP0004317A2 (hu) 2001-10-28
BR9814188A (pt) 2000-10-03
HUP0004317A3 (en) 2002-03-28
DK0916670T3 (da) 2003-09-15
EA200000522A1 (ru) 2000-10-30
NO20002408D0 (no) 2000-05-09
ID25478A (id) 2000-10-05
PT916670E (pt) 2003-09-30
NO20002408L (no) 2000-07-12
IL135634A0 (en) 2001-05-20
CA2310248A1 (en) 1999-05-27
ATE240326T1 (de) 2003-05-15
EP0916670B1 (en) 2003-05-14
EP0916670A2 (en) 1999-05-19
DE69814563T2 (de) 2004-04-08
AU1407299A (en) 1999-06-07
WO1999025348A1 (en) 1999-05-27

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US5817671A (en) 5-HT1F agonists
US5521197A (en) 3-&lt;1-alkylenearyl&gt;-4-&lt;1,2,3,6-tetrahydropyridinyl&gt;-and 3-&lt;1-alkylenearyl&gt;-4-piperidinyl-1h-indoles: new 5-HT1F agonists
US5721252A (en) 5HT1F agonists for the treatment of migraine
US6358972B1 (en) 5-HT1F agonists
US5698571A (en) 5-HT1F mediated inhibition of neurogenic meningeal extravasation: a method for the treatment of migraine
US5874427A (en) Substituted heteroaromatic 5-HT1F agonists
WO2003084949A1 (en) Pyridinoylpiperidines as 5-ht1f agonists
EP0978514B1 (en) Indazole derivatives as 5-HT1F agonists
US5905084A (en) 5-HTIF -agonists effective in treating migraine
EA011274B1 (ru) Замещенные 2-карбониламино-6-пиперидинаминопиридины и замещенные 1-карбониламино-3-пиперидинаминобензолы как агонисты 5-ht
US6608079B1 (en) Indole derivatives and their use as 5-HT1F agonists
Filla et al. 5-HT IF-agonists effective in treating migraine
MXPA00004480A (en) 5-ht1f
CZ20001716A3 (cs) 5-HT1F agonisté
EP1082958A2 (en) 5-HT1F agonists in chronic pain
Filla et al. 5-HT 1F agonists intermediates
Filla et al. Substituted heteroaromatic 5-HT 1F agonists
Krushinski Jr et al. 5-HT 1F agonists

Legal Events

Date Code Title Description
A1OB Publication of a patent application
OBST Application withdrawn