FR2985426A1

FR2985426A1 - Nouvelle utilisation de la zerumbone et compositions contenant de la zerumbone

Info

Publication number: FR2985426A1
Application number: FR1256579A
Authority: FR
Inventors: Arnaud Fournial; Claire-Marie Grizaud; Philippe Mondon
Original assignee: Sederma SA
Current assignee: Sederma SA
Priority date: 2012-01-10
Filing date: 2012-07-09
Publication date: 2013-07-12
Anticipated expiration: 2032-07-09
Also published as: WO2013105048A2; EP2802310B1; FR2985425A1; FR2985426B1; EP2802310A2; WO2013105048A3

Abstract

Selon l'invention, la zerumbone, ou un dérivé ou analogue, ou extrait de plante en contenant, est utilisée pour un traitement amincissant, notamment topique. La zerumbone est de préférence extraite de Zingiber zerumbet (L.) Smith. En outre selon l'invention la zerumbone peut être combinée à un agent mimant les effets positifs de la restriction calorique via une réponse hormétique, de préférence un extrait de Globularia cordifolia et/ou un agent actif complémentaire lipolytique, de préférence de la famille des méthylxanthines, notamment la caféine, la théophylline, la théobromine ou l'aminophylline.

Description

DESCRIPTION La présente invention se rapporte à une nouvelle utilisation de la molécule de zerumbone, dérivé et/ou analogue de celle-ci. Elle vise également de nouvelles compositions comprenant de la zerumbone, dérivé et/ou analogue de celle-ci. Les domaines d'application de la présente invention sont les ingrédients et compositions pour l'industrie des cosmétiques, cosméceutiques, de la dermo-pharmacie et des produits d'hygiène et de soins personnels, la zerumbone étant utilisée pour le traitement de la peau de mammiferes, humains ou animaux, et de ses phanères.

La zerumbone est un sesquiterpene (3 motifs isoprène) avec un squelette de type « humulane ». Son nom est le 2E, 6E, 9E-Humulatrien-8-one. Sa formule développée est la suivante : La Zerumbone a été isolée des racines de Zingiber zerumbet (L.) Smith (synonymes : Amomum zerumbet L., Zingiber amaricans Blume, Zingiber aromaticum Val. Zingiber littorale Val., Zingiber zerumbet (L.) Roscoe), appelée aussi « Shampoo Ginger », « Pinecone Ginger » ou « Awapuhi » à Taïwan ou « Wild ginger » en Chine), plante que l'on trouve dans le sud est de l'Asie. D'autres plantes en contiendraient comme l' Alpinia galanga ou Syringa pinnafolia. La zerumbone présente des propriétés anti-inflammatoires et anti-radicalaires. Des effets sur le cancer en général, la leucémie en particulier, et également des effets sur le virus VIH sont décrits.

Le brevet US7588788 décrit une composition nutraceutique contenant un extrait de racines de Zingiber zerumbet (L.) Smith pour réguler le système immunitaire et plus particulièrement pour prevenir et traiter les désordres allergiques. Le document JP10330243 décrit l'activité cosmétique blanchissante de la zerumbone extraite de Zingiber zerumbet smith.

La présente invention a pour but de proposer un nouvel actif notamment pour l'industrie des cosmétiques, des cosméceutiques de la dermo-pharmacie et des produits d'hygiène et de soins personnels toujours en demande A cet effet, elle propose l'utilisation de la zerumbone, dérivé et/ou analogue, pour un traitement cosmétique amincissant.

Des résultats de tests in-vitro sont donnés dans la description détaillée. Plus particulièrement selon l'invention, la zerumbone peut être utilisée : - pour diminuer l'expansion et/ou en prévenir l'installation de tissu adipeux ; et/ou - pour réduire le nombre et le volume des adipocytes ; et/ou - pour activer la combustion des acides gras ; et/ou - comme agent lipolytique ; et/ou - pour le traitement de la cellulite, des capitons, de la peau d'orange. Les tests in vitro donnés plus loin dans la description montrent également que la zerumbone permet avantageusement de renforcer la matrice extracellulaire, notamment en limitant sa dégradation face à divers agents. Cela permet d'apporter avantageusement une meilleure fermeté aux tissus en complément de l'amincissement. Il est également montré que la zerumbone peut être utilisée pour un traitement anti-vieillissement du tissu adipeux, notamment via la stimulation d'élastine par les adipocytes.

La zerumbone peut être d'origine synthétique ou apportée sous forme d'un extrait de plante en contenant, plus ou moins purifié, notamment un extrait de Zingiber zerumbet (L.) Smith., d' Alpinia galanga ou de Syringa pinnafolia. La présente invention propose de manière préférentielle l'utilisation d'un extrait de Zingiber zerumbet (L.) Smith (famille des zingibéracées et du genre zingiber).

Un extrait dit de plante selon l'invention peut être obtenu soit directement à partir de la plante soit par culture végétale. Le matériel biologique (plante ou culture végétale) est extrait par tout mode d'extraction, par exemple une extraction classique aqueuse et/ou au solvant organique (hydroalcoolique par exemple) ou par fluide sub-critique ou supercritique, micro-ondes ou ultrasons.

De préférence, selon l'invention, on utilise une extraction de la plante par fluide sub-critique ou supercritique, notamment par CO2 supercritique, permettant d'obtenir un rendement et une concentration optimale en zerumbone. Le CO2 liquide constitue un excellent solvant pour les produits lipidiques. Inerte, il réagit peu avec les molécules extraites et ne laisse aucun résidu puisqu'il est évaporé au final et capté pour être réemployé.

L'extraction peut être réalisée sur la plante entière ou de parties spécifiques de la plante. De préférence selon l'invention, l'extrait est obtenu à partir des racines ou rizomes de la plante. La présente invention couvre également les dérivés de la zerumbone notamment : - les substitutions simples sur le squelette : o OH et OAc en position 1 ; 5 ; 8 ; 14 ; 15 o COOH en position 14 ; 15 o C=0 en position 5 ; 8 o CHO en position 14 - l'oxydation des doubles liaisons en époxyde comme pour la zerumbone oxide ou quelques humulatrien-15,1-olides (Asteriscunolide A à D) ayant un cycle lactone entre les positions 1 (OH) et 15(COOH).

La présente invention couvre également les composés proches ou analogues de la zerumbone notamment : - les monoènes et les diènes (par exemple la Buddledone A (ou 2E, 9E-Humuladien-8-one)) ; - les composés ayant une structure cyclique dérivée proche comme celle du I3-Caryophyllene ou les carbones 2 et 10 sont réliés avec migration des doubles liaisons 9-10 en 10-2 et 2-3 en 3-15 : a-Humulene 13-Caryophyllene Buddledin B Un extrait de zerumbone selon l'invention peut être utilisé pur ou dilué dans un milieu ou matrice physiologiquement acceptable. La nature du milieu ou matrice est définie en fonction des propriétés de l'extrait, nature du solvant d'extraction utilisé pour la fabrication de l'extrait et également en fonction de la destination de la composition formée : simple ingrédient, forme galénique plus sophistiquée d'une composition finale pour le consommateur. La présente invention propose ainsi également une composition caractérisée en ce qu'elle contient dans un milieu physiologiquement acceptable une quantité efficace de zerumbone, dérivé et/ou analogue, pour un traitement médical amincissant. Pour simplifier la suite de la description, on utilisera le terme unique « zerumbone » pour englober « zerumbone, dérivé et/ou analogue ». Selon d'autres caractéristiques de l'invention, de manière particulièrement avantageuse, la zerumbone est combinée à un agent à réponse hormétique, mimant les effets positifs de la restriction calorique. Ce type d'agent active un ensemble de gènes notamment les Sirtuins 1, présente un fort pouvoir anti-oxydant (DPPH, 02°-, ROS, augmentation de la SOD et de la catalase) et antiglycation. Les Sirtuins agissent notamment sur la déacétylation du facteur FOX() et évitent qu'il ne déclenche la fabrication de protéines apoptotiques. Les Sirtuins stimulent par ailleurs les défenses anti- oxydantes et purificatrices de la cellule et permettent la préservation des fonctionnalités mitochondriales donc la production d'énergie. Ceci augmente la survie et la résistance aux stress. De préférence selon l'invention, on utilise à ce titre un extrait de Globularia, notamment de Globularia cordifolia. Un tel extrait fait l'objet de la demande de brevet FR1150739 à laquelle on peut se référer. Cet extrait peut être obtenu par extraction classique ou par culture végétale in vitro.

La description donne plus loin un exemple préféré d'obtention par culture végétale in vitro d'un extrait de Globularia cordifolia et le détail de ses activités biologiques, qui associées à celle de la zerumbone, conduisent à une action combinée sur l'amincissement particulièrement intéressante selon l'invention.

Parmi les autres actifs à réponse hormétique et mimant les effets positifs de la restriction calorique pouvant également être utilisés selon l'invention, on peut aussi citer à titre d'exemples les polyphénols dont le plus connu est le resvératrol. D'autres polyphénols à activité similaire sont : la butéine, le piceatannol, l'isoliquiritigénine et la quercetine. On peut également ajouter des hormétines, telles que curcumin, Kinetin (facteur de croissance de plante) ; rosmaric acid, alpha lipoic acid, Coenzyme Q10. De manière particulièrement avantageuse encore, selon l'invention un autre agent actif amincissant et/ou anti-cellulite peut être utilisé en complément et renfort de la zerumbone. De préférence selon l'invention on utilise un composé lipolytique de la famille des méthylxanthines, notamment la caféine, la théophylline, la théobromine ou l'aminophylline. De préférence on utilise selon l'invention la caféine. Ces composés sont connus pour leurs actions lipolytique (favorisant l'hydrolyse des triglycérides accumulés dans les adipocytes et leur libération) et anti-cellulite, et également pour leurs actions drainante (favorisant l'élimination de l'eau) et stimulante (augmentant l'activité métabolique des cellules). La caféine utilisée peut être d'origine végétale.

Ainsi, une association particulièrement préférée pour la mise en oeuvre de l'invention comprend la zerumbone, l'extrait de Globularia cordifolia et la caféine. On peut citer aussi à titre d'exemples les composés inhibiteurs de phosphodieterase, les composés alpha-2 bloqueurs capables de bloquer les récepteurs alpha-2 à la surface des adipocytes, les agonistes et antagonistes bêta-adrénergiques (e.g. l'alvérine ou un sel organique ou inorganique d'alvérine tel que le citrate d'alvérine), les composés inhibant la synthèse des récepteurs aux LDL ou VLDL, les inhibiteurs des enzymes de la synthèse des acides gras, tels que l'acétyl CoA carboxylase ou la fatty acid synthetase ou la cérulénine, les composés stimulant les récepteurs béta et/ou les protéines G, les bloqueurs du transport du glucose, tels que la sérine ou la rutine, les antagonistes du neuropeptide Y (NPY) capables de bloquer les récepteurs NPY à la surface des adipocytes, l'AMPc et ses dérivés cosmétiquement acceptables, les agents activateurs de adenylate cyclase tels la forskoline, les agents modifiant le transport des acides gras, les peptides lipolytiques et les protéines lipolytiques, comme des peptides ou protéines tels que les peptides dérivés de l'hormone parathyroïdienne. D'autres exemples d'agents lipolytiques utilisables dans le cadre de la présente invention comprennent, sans être limitatifs, des extraits d'origine végétale ou marine : - parmi les extraits végétaux, on peut notamment citer : l'extrait de lierre grimpant (Hedera Helix), de Bupleurum chinensis, d'arnica (Arnica Montana L), de romarin (Rosmarinus officinalis N), de souci (Calendula officinalis), de sauge (Salvia officinalis L) , de ginseng (Panax ginseng), de ginko biloba, de millepertuis (Hyperycum Perforatum), de fragon (Ruscus aculeatus L) , d'ulmaire (Filipendula ulmaria L) , d'orthosiphon (Orthosiphon Stamincus Benth), d'algues (Fucus Vesiculosus), de bouleau (Betula alba), de noix de cola (Cola Nipida), de thé vert, de marron d'inde, de bambou, de Centella asiatica, de bruyère, de fucus, de saule, de piloselle, les extraits d'escine, les extraits de cangzhu, les extraits de Chrysanthellum indicum, les extraits des plantes du genre Armeniacea, Atractylodis Platicodon, Sinommenum, Pharbitidis, Flemingia, les extraits de Coleus tels que C. Forskohlii, C. blumei, C. esquirolii, C. scutellaroides, C. xanthantus et C. Barbatus, tel que l'extrait de racine de Coleus Barbatus, les extraits de Ballote, les extraits de Guioa, de Davallia, de Terminalia, de Barringtonia, de Trema, d'Antirobia, de Cécropia, d'arganier, de dioscorées riches en diosgénine dont Dioscorea opposita ou mexican ou villosa. Comme extraits d'origine marine on peut citer les extraits d'algues ou de phytoplancton tels qu'un extrait de Laminaria digitata ou le rhodysterol. Selon l'invention on peut utiliser aussi conjointement à la zerumbone les combinaisons d'actifs anti-cellulite et d'amincissement commme les produits commercialisés par Sederma VexelTM CoaxelTM, CyclolipaseTM, PleurimincylTM, LipocareTM , ReduliteTM et UnislimTM D'autres actifs complémentaires peuvent également être utilisés selon l'invention choisis parmi: les actifs agissant sur la microcirculation (vasculoprotecteurs ou vasodilatateurs) tels que les flavonoides, les ruscogénines, les esculosides naturels ou de synthèse, l'escine, les nicotinates, Thépéridine méthyl chalcone, le petit houx, les huiles essentielles de lavande ou de romarin, les extraits d'Ammi visnaga; les actifs raffermissants et/ou anti-glycants tels que les extraits de Centella asiatica et de Siegesbeckia, le silicium, l'amadorine, I'ergothionéine et ses dérivés, les hydroxystilbènes et leurs dérivés, notamment le resvératrol, les extraits végétaux de la famille des Ericaceae, notamment les extraits de myrtille (Vaccinium angustifollium), la vitamine C et ses dérivés et le rétinol et ses dérivés. Selon d'autres caractéristiques encore, une composition selon l'invention peut incorporer un ou plusieurs autres ingrédients actifs additionnels pouvant par exemple être choisis parmi les actifs éclaircissants, anti-rougeurs, les filtres solaires UV, les actifs hydratants, humectants, exfoliants, anti-âges, anti-rides et ridules, volumateurs, améliorant les propriétés élastiques, anti-acné, anti-inflammatoires, anti-oxydants, anti-radicalaires, propigmentants ou dépigmentants, dépilatoires, anti-repousse, ou favorisant la pousse des poils et des cheveux, peptides, vitamines etc. Ces ingrédients actifs peuvent être obtenus à partir de matériaux végétaux, comme des extraits végétaux ou des produits de culture végétale ou de fermentation.

Plus spécifiquement, dans une composition cosmétique, l'extrait selon l'invention peut être combiné avec au moins l'un des composés choisis parmi les composés de la vitamine B3, les composés comme la niacinamide ou le tocophérol, les composés rétinoïdes comme le rétinol, l'hexamidine, l'acide a-lipoïque, le resvératrol ou la DHEA, les peptides, notamment le Pal-KT, le N- acétyl-Tyr-Arg-O-hexadécyl, le Pal-VGVAPG, le Pal-KTTKS, le Pal-GHK, le Pal-KMO2K et le Pal-GQPR, qui sont des ingrédients actifs classiques utilisés dans les compositions topiques cosmétiques. De préférence selon l'invention, pour une utilisation amincissante on peut proposer : un actif hydratant, un actif pouvant apporter une sensation de fraîcheur, un actif améliorant en outre la tonicité du derme, des muscles, drainant, apaisant, anti-repousse poil, anti-oxydant, agissant sur les sensations de lourdeurs, anti-oedèmes et/ou les vergétures. La présente invention couvre également une composition comprenant, dans un milieu physiologiquement acceptable, de la zerumbone et/ou un dérivé et/ou un analogue de la zerumbone et au moins un composé choisi parmi un agent à réponse hormétique et un agent actif lipolytique.

De manière préférentielle, la composition comprend la zerumbone et/ou dérivé et/ou analogue de la zerumbone, un agent à réponse hormétique et un agent lipolytique. De manière préférentielle encore : - l'agent à réponse hormétique est un extrait de Globularia cordifolia, préférentiellement obtenu par culture végétale in vitro ; et/ou - l'agent actif lipolytique est de la famille des méthylxanthines, notamment la caféine, la théophylline, la théobromine ou l'aminophylline, et préférentiellement la caféine ; et/ou - la zerumbone est extraite de Zingiber zerumbet (L.) Smith. Une composition particulièrement préférée selon l'invention, comme mentionnée plus haut, comprend de la zerumbone, un extrait de Globularia cordifolia et de la caféine.

La présente invention couvre l'utilisation d'une composition ainsi définie pour un traitement cosmétique en général, notamment un traitement amincissant, comme expliqué plus haut. La présente invention sera mieux comprise à la lumière de la description qui va suivre. Les exemples qui suivent illustrent l'invention sans pour autant la limiter à ces seules applications. Préparation de compositions pour la mise en oeuvre de la présente invention Par « milieu physiologiquement acceptable » on entend selon la présente invention, sans être limitatif, une solution aqueuse ou hydro alcoolique, une émulsion eau-dans-huile, une émulsion huile-danseau, une microémulsion, un gel aqueux, un gel anhydre, un sérum, une dispersion de vésicules, une poudre. « Physiologiquement acceptable » signifie que les compositions conviennent à une utilisation topique en contact avec les muqueuses, les ongles, le cuir chevelu, les cheveux, les poils et la peau de mammifere et plus particulièrement humaine, sans risque de toxicité, d'incompatibilité, d'instabilité, de réponse allergique, et autres. Ce « milieu physiologiquement acceptable » forme ce que l'on appelle classiquement l'excipient de la composition.

La quantité efficace de zerumbone selon l'invention, c'est-à-dire son dosage, dépend de la destination de la composition. Elle dépend de divers facteurs, comme l'âge, l'état du patient, la gravité du désordre. Une quantité efficace signifie une quantité non toxique suffisante pour obtenir l'effet désiré. Dans une composition cosmétique selon l'invention, la zerumbone, pour être présente en quantité efficace, se trouve en général dans des proportions comprises entre 0,000001% et 15% par rapport au poids total de la composition, de préférence encore entre 0.00001% et 10%, en fonction de la destination de la composition et de l'effet recherché plus ou moins prononcé. Tous les pourcentages et ratios utilisés dans la présente demande sont par poids de la composition totale et toutes les mesures sont faites à 25°C à moins que cela ne soit précisé autrement. Le choix de l'excipient de la composition est effectué en fonction des contraintes liées à la zerumbone ou à l'extrait en contenant (stabilité, solubilisation, etc.) et le cas échéant de la forme galénique envisagée ensuite. La zerumbone est soluble notamment dans l'huile et dans un alcool. Elle peut être incorporée dans une composition au moyen de solubilisants usuels physiologiquement acceptables, comme par exemple et sans limiter à cette liste : l'éthanol, le propanol, l'isopropanol, le propylène glycol, la glycérine, le butylène glycol, ou le polyéthylène glycol ou toute combinaison. Il peut être également intéressant de solubiliser l'extrait à l'aide d'émulsifiants. Un extrait de zerumbone selon l'invention peut être utilisé pur ou dilué. Toutes les formes galéniques pouvant contenir la zerumbone et le cas échéant les actifs additionnels selon l'invention, notamment l'extrait de Globularia cordifolia et/ou la caféine, peuvent être utilisées notamment, solution, émulsion, dispersion, suspension, onguent, crème, lotion, lait, pommade, gel, pâte, poudre, préparation anhydre (par exemple huile pour stick, « roll-on »), mousse, essence, sérum, spray, formulation pulvérisable, brossable, patch, matériel adhésif, individuellement ou en pré-mélange ou être véhiculée individuellement ou en pré-mélange dans une forme liée, incorporée ou adsorbée sur des vecteurs comme les macrocapsules, les microcapsules ou les nanocapsules, les macrosphères, les microsphères, ou les nanosphères, les liposomes, les oléosomes ou les chylomicrons, les macroparticules, les microparticules ou les nanoparticules, macroéponges, les microéponges ou les nanoéponges, les microémulsions ou les nanoémulsions, ou adsorbé sur des polymères organiques poudreux, les talcs, bentonites, spores ou exines et autres supports minéraux ou organiques.etc. La composition peut être incorporées sur un matériau non tissé ou tissé, en fibres naturelles ou synthétiques, laine, ou sur tout matériau destiné à entrer en contact avec la peau et qui peut être employé dans l'habillement, notamment collants et chaussettes, shorty, sous-vêtements de jour ou de nuit, les mouchoirs, ou les tissus, afin d'exercer son effet cosmétique par l'intermédiaire de ce contact peau/textile et permettre une délivrance topique continue (cosmétotextiles). Selon l'invention, il est ainsi aussi proposé un matériau tissé ou non-tissé comprenant de la zerumbone, dérivé et/ou analogue pour une utilisation dans un traitement cosmétique amincissant ou médical. Les formules galéniques peuvent entrer dans des gammes de produits personnels de soin et/ou de produits de beauté notamment des gammes de soins de la peau, de nettoyage, maquillage, démaquillage, anti-solaire, bronzage artificiel, pré-rasage, rasage, ou après-rasage, hydratant, humectant, émollient, conditionnant, exfoliant, astringent, dépilatoire, anti-transpirant ou antiperspirant, déodorant, désodorisant, etc. Le CTFA ("International cosmetic ingredient dictionary & handbook (13ème Ed. 2010) publié par "the Cosmetic, Toiletry, and Fragrance Association, Inc.", Washington, D.C.) décrit une grande variété, sans limitation, d'ingrédients cosmétiques et pharmaceutiques habituellement utilisés dans l'industrie du soin de la peau, qui conviennent pour être utilisés comme ingrédients additionnels dans les compositions selon la présente invention, tant qu'ils sont physiquement et chimiquement compatibles avec les autres ingrédients de la composition et spécialement avec les actifs de la présente invention. Par ailleurs la nature de ces ingrédients additionnels ne doit pas altérer de manière inacceptable les bénéfices des actifs de l'invention. Ces ingrédients additionnels peuvent être synthétiques ou naturels comme par exemple les extaits de plantes ou venir d'un procédé de biofermentation. D'autres actifs de soin de la peau qui sont particulièrement utiles en combinaison avec la composition selon l'invention peuvent être trouvés dans la documentation commerciale de Sederma et sur le site www.sederma.fr.

On peut aussi citer à titre d'exemples les actifs commerciaux suivants : la bétaïne, le glycérol, l'Actimoist Bio 2TM (Active organics), AquaCacteenTM (Mibelle AG Cosmetics), AquaphylineTM (Silab), AquaregulKTM (Solabia), CarcilineTM (Greentech), CodiavelaneTM (Biotech Marine), DermafluxTM (Arch Chemicals, Inc), Hydra'FlowTM (Sochibo), Hydromoist LTM (Symrise), RenovHyalTM (Soliance), SeamossTM (Biotech Marine), EssenskinTM (Sederma), Moist 24TM (Sederma), ArgirelineTM (nom commercial de l'acétyl hexapeptide-3 de Lipotec), le spilanthol ou un extrait d' Acmella oleracea connu sous le nom Gatuline ExpressionTM, un extrait de Boswellia serrata connu sous le nom BoswellinTM, Deepaline PVBTM (Seppic), Syn-AKETM (Pentapharm), AmelioxTM BioxiliftTM (Silab), JuvinityTM (Sederma), RevidratTM (Sederma), ou des mélanges de ceux-ci. Parmi les extraits de plante pouvant être combinés avec l'extrait selon l'invention, on peut mentionner en outre en particulier les extraits de lierre, par exemple de lierre grimpant (Hedera Helix), de Bupleurum chinensis, de Bupleurum Falcatum, d'arnica (Arnica Montana L), de romarin (Rosmarinus officinalis N), de souci (Calendula officinalis), de sauge (Salvia officinalis L), de ginseng (Panax ginseng), de ginko biloba, de millepertuis (Hyperycum Perforatum), de fragon (Ruscus aculeatus L), d'ulmaire (Filipendula ulmaria L), d'orthosiphon (Orthosiphon Stamincus Benth), d'algues (Fucus Vesiculosus), de bouleau (Betula alba), de thé vert, de noix de cola (Cola Nipida), de marronniers d'Inde, de bambou, Centella asiatica, de bruyère, fucus, saule, piloselle, les extraits d'escine, les extraits de cangzhu, les extraits de chrysanthellum indicumde chrysanthellum indicum, de plantes du genre Armeniacea, Atractylodis Platicodon, Sinnomenum, Pharbitidis, Flemingia, de Coleus comme C. Forskohlii, C. blumei, C. esquirolii, C. scutellaroides, C. xanthantus et C. Barbatus, comme un extrait de raciness de Coleus barbatus, des extraits de Ballote, Guioa, Davallia, Terminalia, Barringtonia, Trema, antirobia, cecropia, argania, dioscoreae comme Dioscorea opposita ou mexicain, des extraits de Ammi visnaga, de Sie gesbeckia, en particulier Sie gesbeckia orientalis, des extraits végétaux de la familles des Ericaceae, en particulier des extraits de myrtilles (Vaccinium angustifollium) de Arctostaphylos uva ursi, aloe vera, de plantes contenant des stérols (notamment des phytostérols), de Manjistha (extrait de plantes du genre Rubia, en particulier Rubia Cordifolia), de Guggal (extrait de plantes du genre Commiphora, en particulier Commiphora Mukul), un extrait de kola, camomille, treffle violet, de Piper methysticum (Kava Kava de Sederma), de Bacopa monieri (BacocalmineTM Sederma) et de fouet de mer, de Glycyrrhiza glabra, de mûrier, de melaleuca (arbre à thé), de Larrea divaricata, de Rabdosia rubescens, de Euglena gracilis, de Fibraurea recisa Hirudinea, de Chaparral Sorghum, de fleur de tournesol, d'Enantia chlorantha, de Mitracarpe du genre Spermacocea, de Buchu barosma, de Lawsonia inermis L., d' Adiantium Capillus-Veneris L., de Chelidonium majus, de Luffa cylindrica, de « Japanese Mandarin » (Citrus reticulata Blanco var. unshiu), de Camelia sinensis, de Imperata cylindrica, de Glaucium Flavum, de Cupressus Sempervirens, de Polygonatum multiflorum, de loveyly hemsleya, de Sambucus Nigra, de Phaseolus lunatus, de Centaurium, de Macrocystis Pyrifera, de Turnera Diffusa, de Anemarrhena asphodeloides, de Portulaca pilosa, d' Humulus lupulus, de café Arabica ou d' Ilex Paraguariensis. Les compositions pour la mise en oeuvre de la présente invention peuvent comprendre des peptides, incluant, sans se limiter, les, di-, tri-, tetra-, penta- et hexapeptides et leurs dérivés. Dans le cadre de la présente invention, le terme «peptide » désigne les peptides contenant 10 acides aminés ou moins, leurs dérivés, isomères et complexes avec d'autres espèces telles qu'un ion métal (e.g. cuivre, zinc, manganèse, magnésium, et autres). Le terme "peptides" se réfère à la fois à des peptides naturels et à des peptides de synthèse. Il se réfere également à des compositions qui contiennent des peptides et qui se rencontrent dans la nature, et/ou qui sont commercialement disponibles.

Des exemples non limitatifs de dipeptides utilisables dans le cadre de la présente invention, comprennent la Carnosine (beta-AH), YR, VW, NF, DF, KT, KC, CK, KP, KK ou TT. Des exemples non limitatifs de tripeptides comprennent RKR, HGG, GHK, GKH, GGH, GHG, KFK, GKH, KPK, KMOK, KM02K ou KAvaK. Des exemples non limitatifs de tetrapeptides sont RSRK, GQPR ou KTFK. Un exemple non limitatif de pentapeptide est le KTTKS et d'hexapeptides les GKTTKS et VGVAPG.

D'autres peptides utilisables dans le cadre de la présente invention peuvent être choisis parmi, sans que cette liste soit limitative : les dérivés lipophiles de peptides, de préférence les dérivés palmitoyl, et les complexes avec les ions métal mentionnés plus haut (e.g. complexe cuivre du tripeptide HGG). Les dipeptides préférés comprennent par exemple le N-Palmitoyl-beta-Ala-His, N-Acetyl-Tyr-Arg-hexadecylester (CalmosensineTM, IdealiftTM, Sederma). Les tripeptides préférés comprennent notamment le N-Pal-Gly-Lys-His, (Pal-GKH, Sederma), le dérivé cuivre de HGG (LaminTM, Sigma), la lipospondin (N-Elaidoyl-KFK) et ses analogues de substitution conservative, N-Acetyl-RKR-NH2 (Peptide CK+), N-Biot-GHK (Sederma), le Pal-KMO2K (Sederma) et leurs dérivés. Des dérivés tetrapeptides utilisables dans le cadre de la présente invention comprennent, sans y être limités, le N-Pal-GQPR (Sederma), des dérivés pentapeptides utilisables sont, sans y être limités, le N-Pal-KTTKS (MATRIXYLTM, Sederma), le N-Pal-Tyr-Gly-Gly-Phe-X avec X étant Met ou Leu ou leur mélange. Des dérivés hexapeptides utilisables, comprennent sans y être limités : N-Pal-VGVAPG et dérivés. On peut citer aussi le mélange Pal-GHK et Pal-GQPR (MatrixylTM 3000, Sederma). Les compositions préférées disponibles dans le commerce contenant un tripeptide ou dérivé comprennent le Biopeptide-CLTM, MaxilipTM ou BiobustylTM de Sederma. Les compositions préférées, disponibles dans le commerce, sources de tetrapeptides comprennent : RIGINTM EyelissTM, MatrixylTM Reloaded et Matrixyl 3000TM, qui contiennent entre 50 et 500 ppm de palmitoyl-GQPR et un excipient, proposé par Sederma. Les peptides commerciaux suivants peuvent également être mentionnés comme ingrédients actifs additionnels : VialoxTM, Syn-akeTM or Syn-CollTM (Pentapharm), Hydroxyprolisilane CNTM (Exsymol), ArgirelineTM, LeuphasylTM, AldenineTM, TrylgenTM, EyeserylTM, SerilesineTM or DecorinylTM (Lipotec), CollaxylTM or QuintescineTM (Vincience), BONT-L-PeptideTm (lnfinitec Activos), CytokinolTMLS (Laboratoires Serobiologiques/Cognis), Ko11arenTM, IP2000TM or MelipreneTM (institut Européen de Biologie Cellulaire), NeutrazenTM (Innovations), ECM- ProtectTM (Atrium Innovations), Timp-PeptideTM or ECM ModulineTM (lnfinitec Activos). Méthode de traitement cosmétique La présente invention propose également une méthode de traitement cosmétique amincissant, comprenant l'application topique sur la peau et/ou les phanères d'une quantité efficace d'une composition selon l'invention comprenant de la zerumbone.

La composition selon l'invention peut incorporer les ingrédients additionnels avantageux selon l'invention tels que décrits ci-dessus pour l'utilisation cosmétique, à savoir un extrait de Globularia, notamment de Globularia cordifolia, de préférence issu de culture végétale, et/ou un ingrédient amincissant additionnel favorisant notamment la lipolyse de la famille des méthylxanthines, tel que la caféine. La composition selon l'invention peut être appliquée localement sur les zones du corps et du visage.

L'un des grands avantages de la présente invention réside dans la possibilité de pouvoir procéder, chaque fois que nécessaire ou souhaitable, à des traitements "doux" localisés et sélectifs grâce au mode d'application par voie topique, non invasif. Il est aussi toutefois possible d'envisager une composition comprenant la zerumbone selon l'invention destinée à être injectée en sous-cutané.

Selon d'autres particularités, le procédé de traitement cosmétique selon l'invention peut être combiné avec un ou plusieurs autres procédés de traitement visant la peau, comme par exemple les traitements par luminothérapie, par la chaleur ou par aromathérapie. Selon l'invention, il est possible de proposer des dispositifs à plusieurs compartiments ou kits destinés à la mise en oeuvre de l'invention, et qui pourrait comprendre, à titre d'exemple, et sans que ce soit limitatif, dans un premier compartiment une composition compenant la zerumbone selon l'invention et dans un second compartiment une composition contenant un autre actif (notamment l'extrait de Globularia cordifolia et/ou la caféine) et/ou un excipient, les compositions contenues dans lesdits premier et second compartiments étant ici considérées comme composition de combinaison pour une utilisation simultanée, séparée ou étalée dans le temps notamment dans l'un des traitements définis ci-dessus. Le premier compartiment peut également contenir une composition incluant la combinaison selon l'invention de zerumbone, d'extrait de Globularia et de caféine, formant un seul et même ingrédient, et le second compartiment un excipient. Le procédé de traitement selon l'invention comprenant l'application topique d'une quantité efficace de zerumbone est plus particulièrement adaptée : - pour diminuer l'expansion et/ou en prévenir l'installation de tissu adipeux ; et/ou - pour réduire le nombre et le volume des adipocytes ; et/ou - pour activer la combustion des acides gras ; et/ou - comme agent lipolytique ; et/ou - pour le traitement de la cellulite, des capitons, de la peau d'orange; A) Exemple d'obtention d'un extrait de zerumbone pour la mise en oeuvre de l'invention Plante utilisée : Zingiber zerumbet (L.) Smith. Partie de plante utilisée : racines (rizomes) séchées et broyées. Mode opératoire : Extraction CO2 subcritique ou supercritique. Pression d'extraction : 70-1000 bars, de préférence 70-350 bars.

Température : 10-100°C, de préférence 20-70°C. Durée : 24 à 48 hrs. Purification (filtration, centrifugation cristallisation). B) Exemple d'obtention d'un extrait de Globularia par culture cellulaire indifférenciée de Globularia cordifolia 1) Création d'une lignée cellulaire Des plants de Globularia cordifolia sont obtenus à partir de graines. Des feuilles sont prélevées qui après nettoyage et rinçage à l'eau sont décontaminées puis à nouveau rincées. a) Etape d'induction de cellules indifférenciées ou cals Des morceaux de feuilles sont découpés et posés à la surface d'une gélose nutritive, contenant une source de carbone assimilable, une solution de micro et macroéléments et une combinaison hormonale et vitaminique adaptée. Ce milieu nutritif, par sa composition, va déclencher la production d'amas de cellules indifférenciées appelés cals au site de cicatrisation de la feuille.

Composition du milieu nutritif solide utilisé (selon Gamborg) : solution de macro éléments, micro éléments, saccharose, plante agar, hormones végétales et vitamines. Le pH est ajusté entre 5,5 et 6. On fera par la suite référence à ce milieu en l'appelant « milieu de base ». Cette étape d'induction dure de 1 à 4 mois. La culture se fait à 25°C et à l'obscurité. b) Etape de stabilisation et de sélection des cultures en milieu gélosé. La stabilisation des cals est obtenue après des repiquages successifs, toutes les 3 semaines, sur du milieu neuf. Elle permet d'obtenir des cultures homogènes de par leurs caractéristiques phénotypiques (couleur, friabilité, prolifération) et stables. La sélection consiste à choisir les meilleures cultures pour le transfert en milieu liquide, parmi les dizaines initiées précédemment. Les lignées retenues sont caractérisée par une forte croissance, une texture tendre et friable, une couleur homogène, une bonne dispersion en milieu liquide et une stabilité de ces paramètres au cours des repiquages. Cette étape dure de 6 mois à 1 an. c) Transfert en milieu liquide et optimisation de la production des métabolites secondaires Les lignées retenues sont transférées en milieu liquide en vue d'optimiser dans un premier temps leurs paramètres de croissance. La croissance cellulaire et l'appréciation des différentes phases (latence, exponentielle, stationnaire) sont évaluées par la mesure régulière du pourcentage du volume de la culture occupé par les cellules ou « packed cell volume » (PCV).

Différentes suspensions issues des cals sont placées sur une table orbitale, agitées à 110 rpm, à l'obscurité, à 25°C (dans des erlens contenant chacun 100 ml de milieu et 10 grammes de cals homogènes en texture, couleur et croissance). Plusieurs milieux et combinaisons hormonales sont testés et comparés, en vue d'optimiser la courbe de croissance. On cherche également à optimiser la densité initiale de l'inoculum pour diminuer la phase de latence et donc le temps global de la culture. En final, le milieu retenu est le milieu de base pour avoir un milieu liquide. Par ailleurs, la densité initiale retenue pour l'inoculum correspond à un PCV de 10%. L'étape suivante consiste à déterminer les conditions de milieu optimales pour orienter le métabolisme cellulaire vers la production des métabolites secondaires à la fin de la phase de croissance de la culture. Ces métabolites secondaires, ainsi que les autres composants du milieu extrait, participeront à l'activité de l'extrait obtenu en final. Ainsi, dans le milieu, il a pu être identifié une forte proportion de molécules polaires, notamment des sucres, amino-acides, métabolites primaires, dérivés de l'acide cinnamique et caféique et mélange de phényléthanoïdes glycosides. Ces derniers ont été choisis comme indicateurs de la production par la biomasse des métabolites secondaires, leur dosage total pouvant être réalisé aisément par la méthode d'Arnow, méthode spectrophotométrique basée sur l'oxydation des polyphénols totaux en milieu alcalin par le nitrite de sodium et le molybdate de sodium (lecture à 510 nm). D'autres classes de molécules sont supposées être présentes dans le milieu, comme des irridoïdes ou des flavonoïdes mais n'ont pu être mises en évidence. Il va de soi que c'est l'ensemble de ces molécules qui sera responsable de l'activité de l'extrait final. L'élicitation choisie selon l'invention pour conduire à la production de métabolites secondaires consiste ensuite à placer les cellules dans un milieu appauvri en saccharose et en macroéléments, de préférence dans les mêmes proportions (avec un ratio 1 :1).

Cette phase de transfert en milieu liquide et d'optimisation des paramètres de croissance et de production peut durer de 6 mois à 1 an. A l'issue de cette étape, une lignée donnant les meilleurs résultats a été sélectionnée. Elle fait l'objet d'un dépôt auprès de DSMZ (DSMZ-DEUTSCHE SAMMLUNG VON MIKROORGANISMEN UND ZELLKULTUREN GrnbH D-38124 Braunschweig) sous la 30 référence DSM25009. 2) Obtention de l'extrait a) Réalisation de précultures en bioréacteur Des précultures successives de la lignée cellulaire sélectionnée de 1 litre, puis de 5 litres, puis de 25 litres et enfin de 100 litres sont réalisées. Chacune est ensemencée à 10% de PCV et cultivée 35 ensuite jusqu'à 50% de PCV. La biomasse cellulaire ainsi produite est utilisée pour ensemencer la culture de taille supérieure. Cette étape peut durer de 1 à 3 mois. b) Passage en bioréacteur comprenant la phase d'élicitation Un bioréacteur à sac à usage unique de 600 litres (volume nominal) est alors ensemencé entre 5 et 20% de PCV. Le bioréacteur est équipé : - d'un système de bascule (rocker) permettant l'agitation et l'oxygénation des cellules et régulant la température de la culture ; choisi de préférence car plus adapté à la fragilité des cellules végétales par rapport à l'agitation cisaillante d'un bioréacteur classique ; - d'une tour de contrôle munie de différentes sondes (oxygène, pH et température), permettant la programmation des étapes de la culture ; - d'une poche stérile à usage unique pour la culture des cellules, munie de différentes sondes (pH, oxygène), d'un filtre pour l'apport de gaz et de systèmes d'échange pour prélèvement ou inoculation stériles de liquides. Après 10 à 15 jours de culture dans le bioréacteur, on atteint un PCV d'environ 30 à 45%. Le milieu carencé est alors ajouté pour déclencher la production des métabolites secondaires, ici notamment les phényléthanoïdes glycosides. L'ajoût de milieu frais représente 10 à 50% du volume final de la culture. Après 3 à 5 jours, la culture est arrêtée, à 35-50% de PCV, les phényléthanoïdes glycosides se trouvant alors autour de 2 grammes par litre dans la culture. L'ensemble de cette phase en bioréacteur se déroule sur 2 à 3 semaines. c) Récupération de l'extrait L'étape suivante va conduire à l'obtention d'un extrait aqueux et clarifié. Intervient une lyse cellulaire, conduisant à la libération des métabolites secondaires dans la phase liquide. Cette lyse s'effectue par acidification. Une cascade de filtrations est ensuite réalisée, la première en profondeur, suivi d'une filtration stérilisante, permettant d'obtenir l'extrait aqueux selon l'invention. Cette étape permet de stabiliser l'extrait.

L'extrait obtenu ici par culture végétale est limpide, incolore à jaune pâle, au contraire de l'extrait de plante « classique » qui lui est jaune vif, ce qui est un avantage indéniable pour une formulation subséquente directe de l'extrait en un ingrédient cosmétique ou autre. Il va de soi que des variantes de ce procédé existent, notamment : 1) Concernant l'extraction des molécules d'intérêt : L'étape de lyse cellulaire peut être réalisée par un traitement thermique de la biomasse ; par exemple par l'injection de vapeur dans la biomasse. Elle peut aussi se faire par un broyage des cellules à l'aide de microbilles. Après l'étape de lyse cellulaire, il est possible de purifier l'extrait brut obtenu, afin de l'enrichir en molécules d'intérêt. Pour cela la biomasse est d'abord éliminée par filtration ou centrifugation. La phase liquide clarifiée résultante est ensuite mise en contact avec une résine adsorbante, sélectionnée pour son affinité avec les molécules d'intérêt. Cette résine est ensuite chargée dans une colonne de chromatographie en verre. La résine est éluée avec des mélanges appropriés et le produit de l'élution concentré. La récupération de l'extrait peut être réalisée à l'aide de liposomes. 2) Concernant le mode d'élicitation des molécules d'intérêt : L'élicitation des composés d'intérêt peut se faire également par l'addition à la culture de fractions microbiennes ; l'addition à la culture de molécules d'origine biologique comme par exemple, le chitosan, le methylj asmonate, l'acide j asmonique, l'acide salicylique ; l'addition à la culture de molécules d'origine non biologique comme par exemple le paclobutrazol ; l'application à la culture d'une variation de température ; l'application à la culture d'une variation de pH ; l'application à la culture d'un stress osmotique induit par un sucre non métabolisable, comme par exemple le mannitol ; le recours à un appauvrissement encore plus drastique du milieu en macroéléments et sucre ; l'addition à la culture de résines adsorbantes qui en plus d'éliciter la production des composés d'intérêt pourront les piéger. 3) A la place de l'étape de création de la lignée cellulaire, on peut utiliser une lignée cellulaire selon l'invention déjà préparée et conservée. Dans ce cas, l'étape de création de la lignée cellulaire est remplacée par une étape classique d' implication des cellules végétales indifférenciées à partir de ladite lignée cellulaire existante d'abord en milieu gélosé puis en milieu liquide.

Le procédé peut également être mis en oeuvre pour d'autres espèces de Globularia. 3) Formulation d'un « ingrédient actif », matière première pour l'industrie des cosmétiques L'extrait aqueux obtenu ci-dessus peut préférentiellement être mélangé à hauteur de 20 à 80% à toute matrice de nature hydrophile comme un gel, un tampon aqueux, de la glycérine ou tout autre polyol à chaîne courte physiologiquement acceptable.

A titre d'exemple, et pour la description des tests et de la galénique, un extrait à 33% a été préférentiellement réalisé. C) Évaluations in vitro de la zerumbone 1. Activité amincissante a- Effet anti-différenciateur sur adipocytes- Effets anti-stockage - Sur la lignée 3T3-L1 Les fibroblastes murins 3T3-L1 sont ensemencés et induit à se différencier en adipocytes durant 6 jours à l'aide d'inducteurs spécifiques en présence des produits évalués. A l'obtention d' adipocytes matures, les tapis sont broyés et l'activité G3PDH intracellulaire est mesurée. Un test de quantification cellulaire (Hoechst) sur les mêmes extraits vient compléter le dosage.

Tableau 1 : [G3PDH] G3PDH- 3T3L1 % Var / contrôle mU/ 106 cell Contrôle 652,6 +/- 130,5 Réf lppm 304,2 +/- 9,9 -53% ; p<0,01 Zerumbone 3ppm 79,3 +/- 43,6 -88% ; p<0,01 5ppm 3,4 +/- 10,3 -99% ; p<0,01 La Zerumbone inhibe fortement de façon dose dépendante et sans cytotoxicité apparente, la différenciation des 3T3-L1. Cet effet atteint une inhibition totale de la différenciation à 5ppm. - Sur Adipocytes Humains Des préadipocytes humains sont ensemencés et induit à se différencier à confluence, en présence d'un cocktail spécifique d'inducteurs et des produits évalués. Après 10 jours, les tapis sont broyés et l'activité G3PDH intracellulaire est dosée. Un test de quantification cellulaire (Hoechst) sur les mêmes extraits vient compléter le dosage.

Tableau 2 : G3PDH- AH [G3PDH] % Var / contrôle mU/ 106 cell Contrôle 175 +/- 9 Réf TGFI31 io-6% 29 +/- 4 84% ; p<0,01 0,5ppm 144 +/- 15 -18% ; p<0,05 Zerumbone lppm 106 +/- 14 -39% ; p<0,01 3ppm 30 +/- 2 -83% ; p<0,01 5ppm 15 +/- 3 -91% ;p<0,01 La zerumbone inhibe très fortement de façon dose dépendante l'activité G3PDH et la différenciation des préadipocytes humains jusqu'à une inhibition totale à 5ppm d'extrait. Dosage du contenu en Triglycérides Des préadipocytes humains sont ensemencés en plaques 24 puits et induit à se différencier à confluence, en présence d'un cocktail spécifique d'inducteurs et des produits évalués. Après 10 jours, le contenu en triglycérides des cultures est estimé à l'aide d'un dosage du glycérol relargué après action d'une lipase.20 Tableau 3 : TG- AH [TG] % Var / contrôle lu U/ 106 cell Contrôle - 4181 +/- 304 Réf TGFI31 10-6% -22% ; p<0,01 Zerumbone 3ppm 3562 +/- 233 -15% ; p<0,05 Sppm 2966 +/- 128 -29% ; p<0,01 Une baisse du contenu en triglycérides après différenciation des préadipocytes en adipocytes en présence de zerumbone est observée. b- Effets lipolytiques par mesure du glycérol Des adipocytes humains matures ont reçu la zerumbone à évaluer tous les jours pendant 3 jours. Un dosage journalier du glycérol relargué, preuve de la lipolyse, a été effectué dans les milieux, juste avant les changements de milieux afin de suivre l'effet long terme. Tableau 4 : Temps de contact Zerumbone (6ppm) ; significativité 1 jour +72% ; p<0,01 2 jours +141% ; p<0,01 3 jours +246% ; p<0,01 Les résultats montrent un relargage fort de glycérol dès le 2' jour, l'ajoût de zerumbone au 3' jour renforçant encore cet effet. - Dosage des triglycérides Tableau 5 : comparaison de la quantité de triglycérides intracellulaires retrouvés dans les adipocytes matures Concentrations Triglycérides (g1V1/106cell.) Variation (%) ; significativité Contrôle 7847 ± 681 Réf. Zerumbone 6ppm 4947 ± 236 -37% ; p<0,01 Ces résultats confirment ceux observés précédemment : la zerumbone permet de disposer d'un effet lipolytique net puisque la quantité de triglycérides est réduite par rapport au contrôle négatif. c- Synthèse d'Adiponectine Des préadipocytes humains sont ensemencés et induit à se différencier à confluence en présence d'un cocktail spécifique d'inducteurs. Après 10 jours de différenciation, les cellules sont purgées des inducteurs dans leur milieu de base et laissées au contact des produits durant 3 jours dans ce même milieu A l'issue du contact, les surnageants sont prélevés et la quantité d'Adiponectine est mesurée dans ces derniers par dosage ELISA.

Tableau 6 : Adiponectine- AH [Adiponectine] % Var / contrôle ng/10E6 cell Contrôle - 152,7 +/- 14,9 Réf Zerumbone 2ppm 221,4 +/- 24,5 +45% ; p<0,01 Contrôle - 162,2 +/- 16,0 Réf Zerumbone 6ppm 19,0 +/- 0,6 +95% ; p<0,01 On observe bien une stimulation dose dépendante de la synthèse d'Adiponectine en présence de l'extrait de Zerumbone. d- Synthèse d'HO-1 L'enzyme HO-1 catalyse la dégradation de l'hème en biliverdine, fer et monoxyde de carbone. Sa surexpression est associée à une baisse de la taille des adipocytes du tissu adipeux, une augmentation de la sécrétion d'adiponectine et une baisse de sécrétion d'IL-6 et TNFa et s'accompagne d'une perte de poids. Des préadipocytes humains sont ensemencés et induit à se différencier à confluence en présence d'un cocktail spécifique d'inducteurs et des produits évalués. Après 10 jours, les tapis sont broyés et la quantité d'HO-1 est mesurée dans ces lysats par méthode ELISA. D'autre part après 10 jours de différenciation, des adipocytes matures sont mis au contact des produits durant 48h et de même la quantité d'HO-1 est mesurée dans les lysats cellulaires. Parallèlement, une estimation de la quantité de cellules est réalisée sur ces deux essais (test Hoechst).

Tableau 7 : Adipocytes en cours de Adipocytes matures différenciation (10j) (48h) [HO-1] % Var / [HO-1] % Var / HO-1 AH ng/ 106 cell contrôle ng/ 106 cell contrôle +45% ; p<0,01 +117% TGFI31 10-6% p=0.01 40908 +/- Réf 29046 +/- Réf Contrôle - 10488 2264 +29% 70229 +/- +142% 3ppm 51658 +/- 7985 Zerumbone p<0,05 10638 p<0,01 67243 +/- +68% 96700 +/- +233% Sppm 11428 P<0,01 4548 p<0,01 Sur adipocytes en cours de différenciation et sur adipocytes matures, on note une forte stimulation de la synthèse d'HO-1 en présence de zerumbone. e- Synthèse d'IL6 Des préadipocytes humains sont ensemencés en plaques 24 puits et induit à se différencier à confluence en présence d'un cocktail spécifique d'inducteurs et des produits évalués. En fin de différenciation (à 7 et 10 jours), la quantité d'IL6 synthétisée par les adipocytes est mesurée dans les surnageants de culture par méthode ELISA. D'autre part après 10 jours de différenciation, des adipocytes matures sont mis au contact des produits durant 72h et de même la quantité d'IL6 est mesurée dans les surnageants cellulaires. Parallèlement, une estimation de survie est réalisée sur ces deux essais (test Hoechst). Tableau 8 : Adipocytes en cours de Adipocytes après différenciation (10j) différenciation (3j) IL6 % Var / contrôle % Var / contrôle TGFI31 10-6M +246% ; p<0,01 Zerumbone 3ppm -49% ; p<0,01 -33% ; p<0,01 5PPm -50% ; p=0,09 -31% ; p<0,01 Sur adipocytes en cours de différenciation et sur adipocytes matures, on note une forte inhibition d'IL6 en présence de l'extrait de zerumbone. 2. Renforcement de la matrice extracellulaire : Renforcer la MEC, notamment en limitant sa dégradation face à divers agents, permet d'apporter une meilleure fermeté aux tissus en complément de l'amincissement. a- Effet sur la synthèse d'Elastine, lors d'un stress nitrosant Principe : Des expiants (femme, 41ans, abdomen), ont reçu en application topique une crème contenant le produit selon l'invention (crème selon l'exemple 1 ci-dessous à 18ppm de zerumbone) ou la crème placebo (la même sans la zerumbone) pendant 2jours. En parallèle le milieu de culture a reçu 18ppm de zerumbone sous forme liquide (ou son excipient) afin de potentialiser les effets. Un stress nitosant a ensuite été appliqué pendant 24h à l'aide d'un donneur de NO (NOC-5) mis dans le milieu de culture, enfin une application du produit a de nouveau été réalisée sur les expiants et dans le milieu de culture pendant 2jours.

Les expiants ont alors été fixés et les fibres élastiques ont été mises en évidence à l'aide d'une coloration de Verhoeff sur des coupes de 4pm. Une quantification a été réalisée sur les photos (50photos / cas) en filtrant les couleurs.

Tableau 9 : Concentration Elastine (UCA) % Variation ; significativité Contrôle sans NO 6,54 ± 4,5 Référence 1 Contrôle NO 1,18 ± 1,00 -82% ; p<0,01 Référence 2 18 ppm de Zerumbone 2,41 ± 1,40 +104% ; p<0,01 Les résultats montrent que les fibres d'élastine sont réduites en nombre et épaisseur par le traitement au NO par rapport au cas contrôle non stressé. L'utilisation de la zerumbone selon l'invention permet de maintenir l'intégrité de ces fibres par une action anti-NO. Une étude réalisée par ailleurs sur fibroblastes humains normaux (FHN) en culture a permis de montrer une protection de la synthèse d'élastine de +179% (p<0.01) avec 5ppm du produit selon l'invention, par rapport au cas contrôle, suite à un même stress nitrosant. Dosage par ELISA. b- Synthèse de fibromoduline et de la dermatopontine Ces 2 molécules bien qu'en faible quantité dans le derme, jouent un rôle crucial dans l'organisation de la matrice extracellulaire. Il est donc important de préserver et de favoriser leur synthèse. Principe : des FHN ont été mis au contact du produit selon l'invention pendant 2j (Fibromoduline) ou 3j (Dermatopontine). Les surnageants ont alors été dosés à l'aide de tests ELISA. Une quantification du nombre de cellules a été réalisée en parallèle à l'aide la méthode Hoescht.

Tableau 10 : Concentration Fibromoduline (ng/106cell.) % Variation ; significativité Contrôle 14,0 ± 2,2 Référence 1 - 5 ppm de Zerumbone 51,4 ± 13,4 - +268% ; p<0,01 Tableau 11 : Concentration Dermatopontine (ng/106cell.) % Variation ; significativité Contrôle 1073 ± 104 Référence 1 - 5 ppm de Zerumbone 2540 ± 361 - +137% ; p<0,01 La synthèse de ces deux éléments importants, fibromoduline et dermatopontine, de la matrice dermique est donc favorisée par la zerumbone. c- Inhibition des MMP1 et de la Cathepsine-S Principe : des FHN ont été mis au contact du produit selon l'invention pendant 24h puis ont été irradiés aux UVA afin de déclencher une augmentation expérimentale de synthèse de MMP1. Les cellules ont reçu à nouveau le produit pendant 24h puis les surnageants ont été dosés à l'aide de tests ELISA. Une quantification du nombre de cellules a été réalisée en parallèle à l'aide la méthode Hoescht. Tableau 12 : Concentration MMP1 (ng/106cell.) % Variation ; significativité Contrôle 1406 ± 168 Référence 1 5 ppm de Zerumbone 691 ± 225 -51% ; p<0,01 Ces résultats montrent que la zerumbone diminue la synthèse de MMP1 induite par un stress UVA. Cette inhibition des MMP1 permet un renforcement de la MEC. Principe : des FHN ont été mis au contact du produit selon l'invention pendant 24h puis ont subi un stress nitrosant pendant lh. Le donneur de NO, le NOC-5 est mis dans le milieu de culture. A la suite d'un deuxième contact de 24h avec l'extrait de zerumbone, un dosage de la Cathepsine-S a été réalisé par une méthode ELISA. Une quantification du nombre de cellules a été réalisée en parallèle à l'aide la méthode Hoescht. Tableau 13 : Concentration Cathepsine S (pg/106cell.) % Variation ; significativité Contrôle 405 ± 35 Référence - 5 ppm de Zerumbone 290 ± 40 - -34% ; p<0,01 Ces résultats montrent que la zerumbone diminue la synthèse de la cathepsine-S induite par un stress nitrosant. d- Effet sur la destruction du derme par des protéases Principe : des expiants de peaux (femme, 40ans, abdomen), une fois préparés, ont reçu une injection d'élastase ou de collagènase pouvant protéolyser 301,imol/min d'élastine ou de collagène.

Dans un autre cas, le produit selon l'invention (titré à 18ppm de zerumbone) a été co-injecté avec la protéase, afin d'évaluer ses capacités d'inhibition de la protéolyse des constituants du derme, et donc de protection du derme. Après 5jours d'incubation à 37°C, le résultat est observé au microscope confocal et comparé à ce qui est obtenu dans les cas sans protéase à la même profondeur (601,1m).

Dans le cas ou un stress par la collagénase ou l'élastase a été appliqué, on remarque très nettement que le derme est altéré (dénaturation des microfibres d' élastine ou de collagène) et désorganisé dans le contrôle mais garde son intégrité en présence de la solution contenant la zerumbone. Ainsi ces différents essais montrent que l'extrait de zerumbone permet de contrôler l'activité et la synthèse de protéases connues pour modifer la structure du derme et permet d'activer, maintenir ou protéger les synthèses d'éléments essentiels de la matrice extracellulaire dermique. D) Évaluations in vitro d'un extrait de Globularia cordifolia (2% d'un extrait tel qu'obtenu à l'exemple B ci-dessus) 1- Activité sur les Sirtuins 1 : Des kératinocytes humains ont été cultivés en présence ou en l'absence de l'extrait de Globularia cordifolia pendant 6 jours, puis ont été broyés, et la quantité intracellulaire de Sirtuin-1 a été évaluée par une méthode ELISA. En parallèle, un dosage protéique (BCA) a permis de normaliser les résultats. Tableau 14 : Sirtuin-1 % Variation ; (ng/mg protéine). significativité Kératinocytes ; Contrôle 2,10 ± 0,58 Référence n=5 Extrait de Globularia cordifolia 3,65 ± 0,33 +74% p<0,01 Contrôle positif Trolox à 500pm : +27%, p<0,05. En parallèle, des expiants de peau abdominale (femme ; 58ans) ont reçu 1 application topique par jour pendant 6 jours d'une crème contenant un extrait de Globularia cordifolia ou son placebo (test ex vivo). A l'issue de ce traitement, les expiants ont été préparés et marqués à l'aide d'anticorps fluorescents pour évaluer la quantité de Sirtuin-1. La quantification a été faite à l'aide d'un système d'analyse d'image après prise de photos (50 photos / cas). Tableau 15 : Sirtuin-1 % Variation ; (Intensité significativité Fluorescence). Expiants de peau ; Placebo 10,94 ± 2,40 Référence n=5 Extrait de Globularia 12,23 ± 2,80 +12% cordifolia p<0,03 La stimulation des sirtuin-1 fonctionne également sur fibroblastes humains normaux. Des fibroblastes humains normaux (FHN) prolifératifs à subconfluence sont ensemencés (dans des boites 100mm) et mis au contact des produits 24h après ensemencement, pendant une durée de 72h dans leur milieu de croissance (DMEMc à 10%SVF). A l'issue de cette première incubation, les tapis confluents sont remis en contact des produits pendant 48 heures dans leur milieu de croissance. Les tapis subissent une extraction avant le dosage des sirtuin-1 par ELISA dans l'extrait cellulaire. Un dosage de protéines (BCA) nous permet de pondérer les données obtenues. Tableau 16 : Sirtuin-1 % Variation ; (ng/mg protéine). significativité Fibroblastes ; Contrôle 0,658 +/- 0,077 Référence n=5 Extrait de Globularia cordifolia 1,047 +/- 0,139 +59% p<0,01 2- Activité anti-glycation : L'effet anti-glycation de l'extrait de Globularia cordifolia a été évalué à l'aide d'une protéine modèle, la BSA, et d'un sucre réducteur naturel : le fructose qui se lie à la protéine de façon non enzymatique. Le produit de cette liaison est fluorescent, détectable par un fluorimètre. Les résultats sont donnés dans le tableau 14 ci-dessous. Tableau 17 : Glycation % Variation ; (Intensité significativité Fluorescence). Protéine modèle BSA; Contrôle 21206 +/- 140 Référence n=4 Extrait de Globularia cordifolia 7668 +/- 121 -64% p<0,01 Contrôle positif aminoguanidine à 0,03% : -85%, p<0,01. 3- Inhibition de la formation des ROS sur FHN Des fibroblastes humains normaux (FHN) prolifératifs à subconfluence sont ensemencés (dans des boites 100mm) et mis au contact des produits 24h après ensemencement, pendant une durée de 72h dans leur milieu de croissance (DMEMc à 10%SVF). A l'issue de cette première incubation, les tapis confluents sont soumis à un stress au peroxyde d'hydrogène (H202 de 8001,1M) de 2h dans le même milieu sans les produits. Après rinçage, les tapis sont remis au contact des produits pendant une période de récupération de 48h toujours dans leur milieu de croissance. Puis les cellules sont trypsinisées, comptées et réensemencées en MW96 (avec les milieux contenant les actifs) et cultivées jusqu'à confluence ou elles sont mises au contact des produits à tester pendant 24h dans un tampon HBSS sans glucose. Les cellules sont chargées en sonde DCFH-DA (501,1M) durant 30min sans produits. Puis les cellules sont de nouveau mises en présence des produits pendant 2 heures dans un milieu de culture à 5% de SVF. Une lecture de la fluorescence est ensuite effectuée. La fluorescence est directement proportionnelle à la quantité de ROS intracellulaire. Tableau 18 : ROS % Variation ; (UFA / million de significativité cellules) Fibroblastes ; Contrôle 133812 +/- 8110 Référence n=5 Extrait de Globularia cordifolia 63528 +/- 4414 -53% ; p<0.01 E) Évaluations in vitro d'un mélange selon l'invention contenant de la zerumbone et de la caféine. a- Effets lipolytiques - Mesure du glycérol relargué Dans un premier test, des adipocytes humains matures ont reçu le produit à évaluer pendant 3h puis le glycérol relargué, preuve de la lipolyse, a été dosé dans le milieu Dans un deuxième test, des adipocytes humains matures ont reçu le produit à évaluer tous les jours pendant 3 jours. Un dosage journalier du glycérol relargué a été effectué dans les milieux, juste avant les changements de milieux afin de suivre l'effet long terme. Tableau 19 : comparaison de l'effet lipolytique de la caféine, de la zerumbone et d'un mélange caféine et zerumbone sur des adipocytes hypertrophiés en monocouche (n=4) à court et long terme Temps de contact Caféine 300 ppm Zerumbone 6 200ppm de caféine + 300ppm de caféine (ppm) 4ppm de zerumbone +6ppm de zerumbone 3 h +171% 0% ND ND 1 jour +200% +72% +133% +398% 2 jours +34% +141% +154% +533% 3 jours +18% +246% +318% +392% Toutes les valeurs sont significatives (au moins p<0,05) versus contrôle négatif Ces résultats montrent l'intérêt et l'effet synergique de l'association de la zerumbone avec la caféine dans le but de promouvoir la lipolyse dans l' adipocyte mature à court et long terme. Un net effet de la caféine à court terme est observé (+171% dans les premières heures). Cependant l'ajoût quotidien de caféine seule ne permet pas de maintenir cet effet sur quelques jours, l'adipocyte devenant comme indifférent. Au contraire, le contact avec un mélange de zerumbone et de caféine montre que l'adipocyte présente un relargage de glycérol fort dès le 2ème jour, l'ajoût au 3ème jour renforçant encore cet effet. En associant ces 2 composés, on note que dès le premier jour, la stimulation de la lipolyse est très forte (+398% avec le mélange à 6ppm de zerumbone) et meilleure que celle observée en ajoutant le résultat de la zerumbone seule (+72% avec le mélange à 6ppm de zerumbone) et de la caféine seule (+200% avec le mélange à 6ppm de zerumbone).On observe bien une synergie grâce au mélange. Cette stimulation, avec le mélange à 6ppm de zerumbone, augmente encore au 2ème jour (+533%). En outre, au 3ème jour de contact, cette stimulation reste importante et voisine des deux premières (+392%). - Dosage des triglycérides Tableau 20: comparaison de la quantité de triglycérides intracellulaires retrouvés dans les adipocyte matures ; effet comparé de la zerumbone, de la caféine et d'un mélange caféine et zerumbone. Concentrations Triglycérides (pM/106cell.) Variation (%) ; significativité Contrôle 7847 ± 681 Réf. Zerumbone 6ppm 4947 ± 236 -37% ; p<0,01 Caféine 300ppm 7120 ± 542 -9% ; dns 200ppm de caféine + 4ppm de zerumbone 5940 ± 309 -24% ; p<0,01 300ppm de caféine +6ppm de zerumbone 4129 ± 396 -47% ; p<0,01 Ces résultats confirment ceux observés précédemment : l'association zerumbone et caféine permet de disposer d'un effet lipolytique net puisque dans les deux exemples de mélange du tableau la quantité de triglycérides est réduite par raport au contrôle négatif. F) Évaluations in vitro d'un mélange selon l'invention contenant de la zerumbone, un extrait de Globularia cordifolia (3% de l'extrait tel qu'obtenu à l'exemple B ci-dessus) et de la caféine Les effets décrits ci-dessus attribués à la zerumbone et/ou au mélange zerumbone+caféine se retrouvent pour un mélange zerumbone+caféine+extrait de Globularia cordifolia. Les effets suivants complémentaires ont été en outre démontrés sur le mélange zerumbone+caféine+extrait de Globularia cordifolia. a- Desnutrine La desnutrine est une enzyme située à la surface des gouttelettes lipidiques des adipocytes. Elle favorise la lipolyse en coupant les triglycérides stockés. Elle augmente l'activité d'oxydation des acides gras ainsi libérés et la production d'énergie par les mitochondries de l'adipocyte.

Des adipocytes humains hypertrophiés en culture ont été mis en contact de la composition à tester pendant 7 jours. La quantité de desnutrine a été ensuite dosée par la méthode Elisa après extraction cellulaire. Un dosage BCA des protéines a permis de connaître la quantité de cellules. Tableau 21 : Variation de la desnutrine (exprimée en unité enzymatiques) dans les adipocytes matures ; effet du mélange (zerumbone + caféine + Globularia cordifolia) (n=3) après 7 jours : Concentrations Desnutrine Variation (%) ; significativité (gUlAug protéine) Contrôle 13,6 ± 4,00 Réf. Association (zerumbone 6ppm + caféine 300ppm + Globularia cordifolia 3%) 27,6 ± 3,20 +104% ; p<0,01 Ces résultats montrent une nette stimulation de la quantité de desnutrine dans l'adipocyte mature au contact de l'association (zerumbone + caféine + Globularia cordifolia). b- Effets néfastes des AGt sur les adipocytes L'organisme puise dans son alimentation les acides gras (AG) nécessaires à son fonctionnement. Le sucre en excès et les lipides de l'alimentation vont conduire à la fabrication et au stockage dans l'adipocyte de triglycérides. Le stockage des différents AG alimentaires dans le tissu adipeux est sélectif dépendant de leur quantité et de leur structure moléculaire. Les AG polyinsaturés limitent l'hypertrophie du tissu adipeux en orientant l'énergie ingérée vers son utilisation plutôt que vers son stockage. Au contraire, les AG saturés et mono-insaturés facilitent cette hypertrophie via des phénomènes inflammatoires. Les acides gras saturés et insaturés trans (AGt) sont des acides gras parmi les plus néfastes, notamment parce qu'ils réduisent la fluidité des membranes cellulaires et déréglent la réponse de l'adipocyte à l'insuline. Ces acides gras linéaires se retrouvent dans les graisses d'origine animale Les AGt sont porteurs d'une double liaison carbone qui les déforme en configuration trans et qui est souvent produite lors de la fabrication industrielle d'huiles d'origine végétale. Outre leur rôle sur les membranes cellulaires, les AGt, instables par nature, accélèrent le vieillissement du tissu adipeux via la stimulation des MAP-Kinases et d'AP-1 ce qui déclenche la fabrication de cytokines pro-inflammatoires et l'attraction macrophagique. Dans ces conditions, les macrophages augmentent fortement leur production de cytokines (IL-6, MIF, MCP-1...), de protéases (MMP et cathepsines), de NO et de 02°-. Tout ceci endommage les cellules et leurs matrices extracellulaires, effet renforcé par la production d'espèces réactives de l'oxygène ou du NO (peroxynitrite) qui attaquent les structures lipidiques et protéiques. Ceci concoure à réduire l'auto-assemblage de l'élastine et conduirait à la formation de structures moins efficaces tout en réduisant les liens d'ancrage entre protéines de la matrice et ses annexes. Un mélange expérimental d' AGt a été préparé d'après comprenant l'acide ruménique, vaccinique, élaidique et arachidonique. Ce mélange a été appliqué sur les cellules afin de vérifier les effets néfastes de ces adipotoxines. Trois méthodes ont été employées. - des pré-adipocytes humains en monocouche ont été induits à se différencier au contact de la solution d' AGt avec ou sans le mélange zerumbone + caféine + Globularia cordifolia pendant 7 jours. Une fois les adipocytes matures obtenus, un dosage des triglycérides intracellulaire a été réalisé pour comparer la différenciation. Un dosage Hoechst a permis d'estimer la quantité de cellules. - des adipocytes matures ont été mis au contact 7 jours de la solution d'AGt avec ou sans le mélange zerumbone + caféine + Globularia cordifolia). Une fois les adipocytes matures obtenus, un dosage des triglycérides intracellulaires a été réalisé pour comparer les stockages. Un dosage Hoescht a permis d'estimer la quantité de cellules. - des adipocytes matures ont été pré-incubés 3 jours avec ou sans le mélange zerumbone + caféine + Globularia cordifolia puis ont été mis au contact 24h de la solution d'AGt avec ou sans le mélange. Un dosage des IL-6 a été réalisé par Elisa dans le milieu de culture. Un dosage Hoechst a permis d'estimer la quantité de cellules.

Comme le montrent les résultats du tableau ci-après, les effets néfastes des AGt ont été confirmés. En culture, ils augmentent la différenciation par rapport au contrôle de +66% ; le stockage des triglycérides est augmenté dans l'adipocyte mature de +99% et la production d'IL-6 augmente par ces cellules de +41%. Tableau 22 : Protection grâce au mélange zerumbone + caféine + Globularia cordifolia ; (n=4) vis- à-vis des effets néfastes des AGt. Avec AGt Différenciation Variation Surcharges Variation IL-6 Variation Pré-adipocytes -> (%) ; (2) (%) ; (3) (%) ; Adipocytes (1) significativité significativité significativité 6684 Contrôle 1806 ± 209 Réf. 3038 ± 136 Réf. Réf. ± 666 Association 1469 ± 109 -19% ; p<0,05 1809 ± 42 -40% ; p<0,01 3094 -54% ; (6ppm zerumbone ± 375 p<0,01 + 300ppm caféine + Globularia cordifolia 3%) (1) : AGt = 50,uM ; (2 & 3) : AGt =120 ,uM ; (1 & 2) : en ,uM triglycérides / 106 cell. (3) : en pg/106 cell Le mélange (zerumbone + caféine + Globularia cordifolia 2%) réduit la différenciation par rapport au cas AGt de 19%, la surcharge lipidique de 40% et la production d'IL-6 de 54%. c- Effets anti-vieillissement du tissu adipeux - Synthèse d'élastine Des adipocytes humains matures ont reçu le mélange (zerumbone + caféine + Globularia cordifolia) pendant 4 jours puis la synthèse d'élastine a été évaluée à l'aide d'une méthode Elisa. Un dosage des protéines totales a été réalisé pour homogénéiser les données.

Tableau 23 : Variation de la synthèse d'élastine par des adipocytes matures ; effet de l'association (zerumbone + caféine + Globularia cordifolia) (n=3) après 4 jours. Concentration Élastine Variation (%) ; (ng/pg protéine) significativité Contrôle 58,2 ± 1,9 Réf. 4ppm de zerumbone + 200 ppm de caféine +37% ; 79,7 ± 12,3 + 3% de Globularia cordifolia) p<0,05 6ppm de zerumbone + 300ppm de caféine +162% ; 152,2 ± 11,2 + 3% d'extrait de Globularia cordifolia) p<0,01 Ces résultats, avec effet-dose, montrent une nette stimulation de la quantité d'élastine par l'adipocyte mature au contact de l'association zerumbone, caféine et extrait de Globularia cordifolia. La stimulation de la synthèse d'élastine renforce le tissu entourant les adipocytes et permet de lutter contre les effets néfastes des protéases macrophagiques. L'utilisation d'un mélange zerumbone, caféine et extrait de Globularia cordifolia selon la présente invention permet donc de lutter contre le vieillissement du tissu adipeux grâce à l'amélioration de sa matrice, notamment via une stimulation des synthèses d'élastine, qui maintient les adipocytes. - Attraction et homéostasie des macrophages - des adipocytes matures (3T3-L1) ont été cultivés en présence d'un mélange (zerumbone + caféine + un extrait de Globularia cordifolia) pendant 5 jours. A ce stade, des macrophages en lignée (RAW 264,7) cultivés dans des petites nacelles ont été déposés au dessus de la culture d' adipocytes mais sans être au contact des adipocytes. Ce système, couramment utilisé, permet d'évaluer à 24h par comptage le passage à travers la nacelle des macrophages attirés par les messagers adipocytaires. - des adipocytes humains matures ont été mis au contact d'un mélange (zerumbone + caféine + extrait de Globularia cordifolia) pendant 24h. Un dosage d' adiponectine, connu pour réduire l'état excité des macrophages et inhiber l'attraction des macrophages, a été réalisé par Elisa. Le nombre de cellules a été estimé par un test Hoechst. - des adipocytes humains matures ont été mis au contact d'un mélange (zerumbone + caféine + extrait de Globularia cordifolia) pendant 3 jours (IL-6) ou 7 jours (MCP-1 et MIF). Les dosages étaient des dosages Elisa. Le nombre de cellules a été estimé par un test Hoechst. Tableau 24 : Variation de l'attraction des macrophages par des adipocytes matures ; effet du mélange (zerumbone + extrait de Globularia cordifolia) (n=4) après 24h. Concentrations Nombre de Variation (%) ; significativité macrophages attirés (x103 cell.) Contrôle 140 ± 29 Réf. 6ppm de zerumbone + 300ppm de caféine + 3% d'extrait de Globularia cordifolia) 47 ± 10 -66% ; p<0,01 Tableau 25 : Variation de la synthèse d' adiponectine (inhibiteur de l'attraction macrophagique) par des adipocytes matures ; effet du mélange (zerumbone + caféine + extrait de Globularia cordifolia) (n=4) après 24h. Concentrations Adiponectine (pg/106 cell.) Variation (%) ; significativité Contrôle 162 ± 16 Réf. 6ppm de zerumbone + 300ppm de caféine + 3% d'extrait de Globularia cordifolia) 281 ± 31 +73% ; p<0,01 Tableau 26 : Variation de la synthèse de molécules attractrices des macrophages et pré-inflammatoires par les adipocytes matures ; effet du mélange (zerumbone + caféine + extrait de Globularia cordifolia) (n=4). Concentrations MCP-1 MIF IL-6 (ng/106 cell.) (ng/106 cell.) (ng/106 cell.) 6ppm de zerumbone -34% ; p<0,01 -40% ; p<0,01 -77% ; p<0,01 + 300ppm de caféine + 3% d'extrait de Globularia cordifolia) Les résultats montrant la diminution de l'attraction des macrophages par les adipocytes matures (-66%, p<0,01 ; tableau 24 s'explique par la réduction coordonnée des molécules attirants et rendant agressifs les macrophages (MCP-1, MIF, IL-6 ; tableau 26) obtenue avec le mélange (zerumbone + caféine + extrait de Globularia cordifolia). Par ailleurs, en favorisant la synthèse de l'adiponectine par l'adipocyte (+73%, p<0,01 ; tableau 25) et en réprimant les synthèses dans cette cellule d' IL-6, le mélange limite également l'attraction macrophagique. Ainsi, ceci conduirait à réduire la capacité des macrophages à développer un potentiel inflammatoire, à induire la synthèse de protéases dégradant la matrice et à favoriser l'expansion adipocytaires conduisant à un vieillissement prématuré du tissu adipeux.

G) Galénique Des exemples de formulations galéniques sont donnés ci-après contenant la zerumbone comme molécule active amincissante. Par ailleurs, ces formulations peuvent contenir également des autres actifs cosmétiques additionnels, ces derniers venant le cas échéant en soutien et/ou en complément de l'activité de l'ingrédient actif selon l'invention. Ces ingrédients peuvent être de toute catégorie selon leur(s) fonction(s), le lieu d'application (corps, visage, cou, buste, mains, etc.), l'effet final recherché et le consommateur ciblé, par exemple anti-âge, hydratant, raffermissant, anti-rougeurs, anti-vergétures, etc. Ingrédient cosmétique selon l'invention : 500ppm de zerumbone obtenu par extraction CO2 supercritique de Zingiber zerumbet (L.) Smith selon l'exemple A ci-dessus dans une matrice butylène Glycol. Exemple 1 : Gel crème amincissant Ingrédient % Nom INCI Phase A H2O Qsp100 Water Optasense G83 0.40 Carbomer Phase B Crodacol CS 90 2.00 Cetearyl Alcohol Crodamol GTCC 3.00 Caprylic/Capric Triglyceride Phase C Butylene glycol 4.00 Butylene glycol Phenoxyethanol 1.00 Phenoxyethanol Phase D Optasense G82 0.20 Acrylic Acid/Alkylmethacrylate Copolymer DC 200 5 cps 3.00 Dimethicone Phase E Sorbate de potassium 0.10 Potassium Sorbate Phase F H2O 6.00 Water NaOH 30% 0.60 Sodium Hydroxide Phase G Zerumbone extraite de Zingiber zerumbet (L.) Smith 4.00 / Phase H Tween 20 1.00 Polysorbate 20 Parfum 0.10 Fragrance Protocole : Phase A : Saupoudrer le carbomer dans l'eau et laisser gonfler sans agitation 60 min Mettre la phase A à chauffer à 75°C au bain-marie. Peser la phase B, mélanger et mettre à chauffer à 75°C au bain-marie. Peser la phase C et mélanger. Peser la phase D et mélanger. Rajouter la phase C dans la phase A sous agitation Hélice. Rajouter la phase B et la phase D dans la phase A+C sous agitation Hélice rapide. Rajouter la phase E, extemporanément, dans la phase A+B+C+D, puis bien homogénéiser pale pendant 1 heure. Neutraliser avec la phase F, en versant dans la phase précédente, bien homogénéiser. Vérifier le pH autour de 6. Ajouter la phase G vers 35°C, bien homogénéiser. Peser et ajouter la phase H vers 35°C ; bien homogénéiser. Exemple 2 : Crème de massage amincissante Ingrédient % Nom INCI Phase A H2O Qsp100 Water Ultrez 10 0.25 Carbomer Phase B Hydrolite-5 5.00 Pentylene Glycol Phenoxyethanol 1.00 Phenoxyethanol Keltrol CG-SFT 0.25 Xanthan Gum Phase C Brij S2 0.40 Steareth-2 Brij S10 1.20 Steareth-10 Crodafos CES 4.00 Cetearyl Alcohol Phosphate & Dicetyl Phosphate & Ceteth-10 Crodamol CSO 2.50 Cetearyl Ethylhexanoate BRB CM 56 2.00 Cyclohexasiloxane & Cyclopentasiloxane Crodamol OSU 7.00 Diethylhexyl Succinate Crodacol CS 90 1.50 Cetearyl Alcohol Phase D Sorbate de potassium 0.10 Potassium Sorbate Phase E H2O 4.00 Water NaOH 30 % 0.40 Sodium Hydroxide Phase F Zerumbone extraite de Zingiber zerumbet (L.) Smith 4.00 / Protocole : Phase A : Saupoudrer le Carbomer dans l'eau ; laisser gonfler 30 minutes. Mettre la phase A à chauffer à 75 °C au bain-marie. Peser et mélanger la phase B. Peser la phase C et mettre à chauffer à 75 °C au bain-marie. Ajouter la phase B dans la phase A, sous agitation staro. Verser la phase C dans la phase A+B sous agitation staro. Bien homogénéiser. Rajouter la phase D, extemporanément. Neutraliser jusqu'à pH=6 avec la phase E en dessous de 35 °C. Rajouter la phase F, bien homogénéiser. Exemples d'ingrédients pouvant être rajoutés à ces formulations (commercialisés par SEDERMA) : REVIDRATTm : ingrédient actif hydratant ; BODYFITTm : ingrédient actif 10 amincissant/raffermissant. Ces deux crèmes peuvent, données à titre d'illustration de l'invention, peuvent contenir en variante à la place de l'ingrédient cosmétique à base d'extrait de Zingiber zerumbet (L.) Smith, un ingrédient cosmétique selon l'invention comprenant l'association préférée selon l'invention d'un extrait de Zingiber zerumbet (L.) Smith et d'un extrait de Globularia cordifolia, avec par exemple : 15 dans du butylène glycol, 500ppm de zerumbone (obtenue par extraction CO2 supercritique de Zingiber zerumbet (L.) Smith selon l'exemple A ci-dessus) et 25 % en poids d'extrait de Globularia cordifolia (d'un extrait préparé selon l'exemple B ci-dessus à 33%). A cet ingrédient on peut également ajouté 0,75% de caféine.

Claims

REVENDICATIONS1. Utilisation de la zerumbone et/ou d'un dérivé et/ou d'un analogue pour un traitement cosmétique amincissant.
2. Utilisation selon la revendication 1, pour diminuer l'expansion et/ou prévenir l'installation de tissu adipeux, pour réduire le nombre et le volume des adipocytes, pour activer la combustion des acides gras, pour un traitement lipolytique, pour le traitement de la cellulite, des capitons, de la peau d'orange.
3. Utilisation selon la revendication 1 ou 2, pour un traitement anti-vieillissement du tissu adipeux, notamment via la stimulation d' élastine par les adipocytes.
4. Utilisation selon l'une des revendications 1 à 3, caractérisée en ce que la zerumbone est extraite de Zingiber zerumbet (L.) Smith.
5. Utilisation selon l'une des revendications 1 à 4, caractérisée en ce que la zerumbone est combinée à un agent à réponse hormétique, mimant les effets positifs de la restriction calorique.
6. Utilisation selon la revendication 5, caractérisée en ce que l'agent à réponse hormétique est un extrait de Globularia cordifolia.
7. Utilisation selon la revendication 6, caractérisée en ce que l'extrait de Globularia cordifolia est obtenu par culture végétale in vivo.
8. Utilisation selon l'une des revendications 1 à 7, caractérisée en ce que la zerumbone est combinée à un agent actif lipolytique.
9. Utilisation selon la revendication 8, caractérisée en ce que l'agent actif lipolytique est de la famille des méthylxanthines, notamment la caféine, la théophylline, la théobromine ou l' aminophylline.
10. Utilisation selon la revendication 9, caractérisée en ce que l'agent actif lipolytique est la caféine.
11. Composition comprenant, dans un milieu physiologiquement acceptable, de la zerumbone et/ou un dérivé et/ou un analogue de la zerumbone et au moins un composé choisi parmi un agent à réponse hormétique et un agent actif lipolytique.
12. Composition selon la revendication 11, caractérisée en ce qu'elle comprend la zerumbone et/ou un dérivé et/ou un analogue de la zerumbone, un agent à réponse hormétique et un agent lipolytique.
13. Composition selon la revendication 11 ou 12, caractérisée en ce que l'agent à réponse hormétique est un extrait de Globularia cordifolia.
14. Composition selon la revendication 13, caractérisé en ce que l'extrait de Globularia cordifolia est obtenu par culture végétale in vitro.
15. Composition selon l'une des revendications 11 à 14, caractérisée en ce que l'agent actif lipolytique est de la famille des méthylxanthines, notamment la caféine, la théophylline, la théobromine ou l' aminophylline.
16. Composition selon la revendication 15, caractérisée en ce que l'agent lipolytique est la caféine.
17. Composition selon l'une des revendications 11 à 16, caractérisée en ce qu'elle comprend de la zerumbone, un extrait de Globularia cordifolia et de la caféine.
18. Composition selon l'une des revendications 11 à 17, caractérisée en ce que la zerumbone est extraite de Zingiber zerumbet (L.) Smith.
19. Utilisation d'une composition selon l'une des revendications 11 à 18 pour un traitement cosmétique.
20. Composition comprenant de la zerumbone et/ou un dérivé et/ou un analogue de la zerumbone, dans un milieu physiologiquement acceptable, pour un traitement médical amincissant.
21. Composition selon la revendication 20, caractérisée en ce que la zerumbone est extraite de Zingiber zerumbet (L.) Smith.
22. Composition selon la revendication 20 ou 21, caractérisée en ce que la zerumbone est combinée à un agent à réponse hormétique, mimant les effets positifs de la restriction calorique.
23. Composition selon la revendication 22, caractérisée en ce que l'agent à réponse hormétique est un extrait de Globularia cordifolia.
24. Composition selon la revendication 23, caractérisée en ce que l'extrait de Globularia cordifolia est obtenu par culture végétale in vitro.
25. Composition selon l'une des revendications 20 à 24, caractérisée en ce que la zerumbone est combinée à un agent actif lipolytique.
26. Composition selon la revendication 25, caractérisée en ce que l'agent actif lipolytique est de la famille des méthylxanthines, notamment la caféine, la théophylline, la théobromine ou l' aminophylline.
27. Composition selon la revendication 26, caractérisée en ce que l'agent actif lipolytique est la caféine.
28. Matériau tissé ou non-tissé comprenant de la zerumbone, et/ou dérivé et/ou analogue, pour une utilisation selon l'une quelonque des revendications 1 à 10 ou selon la revendication 19.
29. Matériau tissé ou non-tissé comprenant une composition selon l'une des revendications 11 à 18 ou 20 à 27. 35