FR3034314B1 - Traitement cosmetique topique de la peau et du cuir chevelu et ingredient actif correspondant a base d'un extrait d'apium graveolens - Google Patents
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Abstract
Il est proposé l'utilisation d'au moins un alkyl-phthalide ou d'un extrait de plante en comprenant majoritairement, pour le traitement topique cosmétique de la peau et du cuir chevelu, notamment un traitement anti-pelliculaire. Selon l'invention, on peut utiliser notamment un extrait CO2 supercritique de graines d'Apium graveolens comprenant majoritairement du sédanénolide.
Description
La présente invention se rapporte à un nouveau traitement cosmétique topique de la peau et du cuir chevelu et un ingrédient actif cosmétique pour ce traitement à base d’un extrait ftApium graveolens.
Elle concerne les industries des cosmétiques, des produits d’hygiène et de soins personnels et de la dermo-pharmacie.
Un des enjeux de la cosmétique est de lutter efficacement contre les pellicules, une affection souvent bénigne du cuir chevelu, mais désagréable sur le plan esthétique. Cet état est caractérisé par la présence de cellules mortes ou squames blanchâtres sur le cuir chevelu, dans les cheveux et sur les vêtements, souvent accompagnées de démangeaisons. L’origine des pellicules est liée au dérèglement d’un ou de plusieurs facteurs. Ainsi, l’augmentation de la production de sébum, qui débute à l’adolescence, constitue un facteur important bien que non suffisant. Ce sébum sert de carburant à des levures de type Malassezia qui se multiplient et produisent des lipides irritants perturbant l’équilibre (l’homéostasie) du cuir chevelu. Avoir du sébum, des levures ou un cuir chevelu sec ne suffit pas pour avoir des pellicules, la susceptibilité individuelle et des facteurs externes jouent un rôle important également. Parmi ceux-ci on peut citer entre-autres : des traitements capillaires trop agressifs, des conditions climatiques extrêmes, une mauvaise alimentation, la fatigue, le stress ou la pollution.
Deux types de pellicules sont distingués. Dans la forme relative aux pellicules sèches, le cuir chevelu semble trop sec, la quantité de pellicules est souvent faible à modérée, les squames petites et isolées. Il y a souvent des démangeaisons légères bien que le cuir chevelu ne soit pas rouge. Cet état peut évoluer vers une forme représentée par des pellicules grasses bien que cette dernière puisse apparaître d’emblée associée à une abondante production de sébum. Les squames sont plus épaisses, plus grandes et associées entre elles pour former des plaques grasses, humides et jaunâtres. Le cuir chevelu présente alors souvent des modifications de type inflammatoire avec des rougeurs plus ou moins étalées, un état irritatif et des démangeaisons.
La présente invention a pour but notamment de proposer un moyen pour prévenir ou traiter les pellicules inesthétiques et les signes qui les accompagnent comme une peau grasse et luisante, des irritations et des démangeaisons. AAApium graveolens, appelé communément céleri, fait partie de la famille des Apiacées ou famille des ombellifères, qui comprend beaucoup d’autres plantes comestibles comme la carotte ou la coriandre. Cette plante n’est pas toxique, toutes ses parties se consommant en légumes cuits ou crus. Les graines sont utilisées également comme aromates. L’Italie est le pays d’origine, cette plante s’étant largement répandue dans le monde, en particulier en Europe, Egypte, Algérie, Ethiopie, Asie et en Inde.
Les graines de céleri contiennent environ 3% d’huile volatile et 15% d’huile végétale non volatile.
Une huile essentielle extraite des graines de céleri comprend des terpènes (D-limonène >60% et sélinène 10-20%) et des phthalides (1-4%). Parmi les phthalides majoritaires, on trouve le 3-n-butyl-phthalide, le sédanolide et le sédanénolide (appelé aussi senkyunénolide A).
La partie non volatile comprend des acides gras pétrosélénique, oléique, linoléique, myristique, palmitique, palmitoléique, stéarique et myristoléique. CApium graveolens comprend donc potentiellement de très nombreux composés actifs. En tant que plante médicinale, elle est préconisée depuis des milliers d’années pour de très nombreuses propriétés : aphrodisiaque, vermifuge, antispasmodique, anti-inflammatoire, carminative, diurétique, emménagogue, laxatif, sédative, stimulante et tonique. La plante peut être utilisée contre l'asthme, la bronchite et les rhumatismes. Les graines de céleri sauvage sont utilisées dans la médecine traditionnelle en Inde et dans d’autres pays ayant adopté les traditions ayurvédiques pour guérir, en tant que tranquillisant, antispasmodique, tonique nerveux, diurétique et antirhumatismal. Les phthalides compris dans YApium graveolens sont décrits comme actifs contre le cancer, l'hypertension artérielle et le cholestérol.
Le monde du vivant et les végétaux en particulier représente donc une source très importante de molécules actives innovantes pour la cosmétique et la pharmacie. Pour les extraire et les concentrer, il existe différentes méthodes et la composition de l’extrait obtenu dépendra bien évidemment de la méthode choisie et des conditions opératoires.
La technique d’extraction par CO2 supercritique est déjà très utilisée dans les industries alimentaires, pharmaceutiques et pour la parfumerie. Le CO2 gazeux, présent en faible concentration dans l’air, est comprimé de façon à ce qu’il devienne liquide. Il constitue alors un excellent solvant pour les molécules liposolubles. Inerte, il réagit peu avec les molécules extraites et il ne laisse aucun résidu, puisqu’il est évaporé au final et capté pour être réemployé.
Une huile essentielle de céleri, obtenue par hydro-distillation, comprenant très majoritairement du D-limonène a déjà été proposée en cosmétique pour traiter les tâches pigmentaires.
La présente invention propose l’utilisation d’au moins un alkyl-phthalide ou d’un extrait de plante en comprenant majoritairement pour le traitement topique cosmétique non thérapeutique de la peau ou du cuir chevelu.
Par traitement cosmétique, on entend un traitement qui s’adresse à une peau ou un cuir chevelu normal, sain, ledit traitement étant destiné à en améliorer l’apparence et l’état général dans le but d’embellir et/ou réduire d’éventuelles sensations d’inconfort. Un tel traitement n’a pas de visée thérapeutique. « Alkyl-phthalide » englobe selon l’invention les phthalides dans lesquels le cycle à 6 carbones est aromatique et les hydro-phthalides dans lesquels le cycle à 6 carbones possède seulement 1 ou 2 insaturations.
Un alkyl-phthalide selon l’invention répond donc à la formule générale I suivante :
R étant une chaîne alkyle de 1 à 8 atomes de carbones, de préférence 1 à 4, et de préférence 4 (butyl-phthalides), linéaire ou ramifiée, pouvant être substituée par une fonction OH ou amine (secondaire ou tertiaire).
La présente invention couvre des alkyl-phthalides purs qui peuvent être obtenus par synthèse chimique ou par extraction et purification à partir d’une plante en comprenant.
Elle couvre également des extraits de plante, comme Apium graveolens, qui sont caractérisés en ce qu’ils comprennent majoritairement au moins un alkyl-phthalide en tant que composé actif.
Des tests in vitro et in vivo détaillés plus loin dans la description démontrent les effets du traitement cosmétique selon l’invention, notamment sur le cuir chevelu, pour prévenir et/ou traiter les états pelliculaires, pour améliorer les propriétés mécaniques de la matrice extracellulaire dermique (densité, fermeté, rides et ridules notamment) et pour prévenir et/ou traiter une peau grasse.
De manière spécifique, il a été montré que le traitement cosmétique selon la présente invention est capable d’agir à 5 niveaux sur le cuir chevelu et/ou la peau :
La microflore cutanée ;
La quantité de sébum ;
La barrière cutanée ;
Les irritations / démangeaisons cutanées ; et La matrice extracellulaire du derme. 1) Au niveau de la microflore cutanée
Des levures du genre Malassezia sont présentes sur presque tous les cuirs chevelus au niveau des follicules pileux. Leur présence en elle-même ne pose aucun problème chez beaucoup de personnes sans pellicules, mais leur proportion dans la microflore cutanée est corrélée avec l’état pelliculaire. Elles excrètent des lipases et phospholipases spécifiques dont le rôle est d’extraire l’énergie des triglycérides du sébum ou des phospholipides. Ceci forme en retour des sous-produits lipidiques, comme l’acide arachidonique ou l’acide oléique, qui peuvent être irritants s’ils sont présents en trop grandes quantités. Par ailleurs, certaines levures appartenant au genre Malassezia, dont Malassezia furfur et Malassezia globosa, provoquent la formation d’interleukine-8 par les kératinocytes et induisent une hyperprolifération de ces cellules avec pour conséquence une altération de la fonction de la barrière cutanée (le stratum corneum) qui favorise d’autant l’action négative des sous-produits des bactéries et des levures comme l’acide oléique ou arachidonique et rend le cuir chevelu plus sensible.
L’amélioration de l’état du cuir chevelu passe donc par un contrôle de ces levures appartenant au genre Malassezia qui peuvent être à l’origine d’importants dérèglements.
Des tests in vitro et in vivo donnés plus loin montrent que selon l’invention, on lutte contre ces microorganismes et contre les pellicules. 2) Au niveau de la production de sébum
Le sébum est un mélange de lipides complexes (triglycérides, acides gras, cires, stérols estérifiés, cholestérol et dérivés, et squalène) produit par les sébocytes. D’un point de vue physiologique, le sébum vise à protéger la peau en l’isolant de l’extérieur. On sait maintenant clairement qu’il joue un rôle dans l’émergence des états pelliculaires. En effet, la surproduction de sébum à la puberté et l’incidence des états pelliculaires augmentent en parallèle l’un de l’autre. Par ailleurs, les pellicules ne s’observent que sur les zones riches en sébum.
Comme on l’a vu ci-dessus, ces lipides servent de carburant aux levures Malassezia impliquées dans les états pelliculaires.
Par ailleurs, en ce qui concerne les pellicules grasses, une séborrhée plus importante accompagne la surproduction de cellules immatures, les englue et les maintient sur le cuir chevelu et les cheveux. Concernant les peaux dites grasses, trop de sébum va leur donner un aspect luisant, boucher et dilater les pores, entraîner une prolifération bactérienne et provoquer des imperfections cutanées dont des rougeurs.
Il convient donc que ce soit pour les états pelliculaires ou les peaux grasses de réduire la production de sébum par les sébocytes.
Des tests in vitro et in vivo donnés plus loin dans la description montrent que selon l’invention, on réduit avantageusement la quantité de lipides dans les cellules sébocytaires productrices du sébum. 3) Au niveau de la barrière cutanée
La peau et le cuir chevelu sont des épithéliums qui forment le stratum corneum. Ils se renouvellent continuellement par la desquamation. Ceci forme une barrière très efficace vis-à-vis des agressions externes et permet de limiter les pertes en eau du corps. Cette barrière est un assemblage d’une grande complexité associant, d’une part, des cellules sans noyau, plates et fortement liées entre elles et, d’autre part, des lipides dont la composition et l’assemblage assurent les propriétés uniques de cette structure très résistante aux agressions physiques, chimiques et biologiques de l’environnement.
Dans une peau saine, le stratum corneum est formé par la maturation terminale des cellules sous-jacentes viables de la couche granuleuse. Les cellules viables superficielles de l’épiderme, au contour lipidique, sont transformées en petites briques plates sans noyau, les coméocytes, grâce notamment à des protéines comme l’involucrine, la loricrine, la filaggrine et les SPRR [small proline-rich région proteins) toutes liées entre elles. Les SPRR fonctionnent comme des agents de pontages renforçant l’enveloppe cornée et conditionnant les propriétés de dureté, de force et de flexibilité. D’autres protéines sont exprimées telle la LCE3B (Laie Cornified Enveloppe protein 3B), induite lorsqu’il est nécessaire de réparer la barrière cutanée. Les coméocytes sont fortement liés entre eux par les coméodesmosomes et « cimentés » par des couches organisées de lipides complexes extracellulaires : le cholestérol, les céramides et les lipides neutres.
Une fonction barrière cutanée optimale assure grâce à la desquamation que la peau et le cuir chevelu éliminent leurs cellules superficielles de façon insensible et non visible. La desquamation est permise par des protéases à sérine, les KLK (Kallikrein-related peptidases). qui rompent les attaches des coméocytes entre eux (coméodesmosomes), les SPINK5 (Serzhe Protease Inhibitor Kazal type-5) régulant leur activité. La perte de fonction de SPINK5 cause une hyper-desquamation de cellules immatures et une perte d’homéostasie du stratum corneum.
La perte d’intégrité de la barrière est souvent observée dans les états pelliculaires. La division des cellules de la couche basale de l'épiderme devient trop rapide, les cellules qui montent vers la surface de la peau n'ont pas le temps de finir leur maturation et de se transformer en petit coméocyte. A la place, il se forme des structures cellulaires plus grandes et donc plus visibles possédant un reste de noyau (pellicules). Cette accélération anormale de la desquamation facilite la pénétration des molécules et agents externes qui peuvent irriter la peau. Il s’en suit une perturbation des fonctions protectrices et régulatrices du stratum dont la fonction antimicrobienne.
Des tests in vitro et in vivo donnés plus loin dans la description montrent que selon l’invention, on renforce la barrière cutanée, en stimulant la synthèse de protéines et lipides qui la constituent, ainsi que des protéines fonctionnelles LCE3B et SPINK5. 4) Au niveau des démangeaisons et irritations cutanées
La perturbation du cuir chevelu et l’état pelliculaire provoqués par une barrière cutanée déficiente, la présence de levures du genre Malassezia en quantité importante, un excès éventuel de sébum finit par induire chez le porteur des démangeaisons et irritations ; des plaques rouges pouvant même apparaître. Des tests in vitro et in vivo donnés plus loin dans la description montrent que selon l’invention, on diminue les démangeaisons et irritations cutanées. 5) Au niveau de la matrice dermique
La perte de densité et d’épaisseur du derme sont liées à une réduction des synthèses notamment de collagène I, par les fibroblastes dermiques, lors du vieillissement cutané. Le collagène I, constituant la protéine la plus abondante de la matrice extracellulaire dermique, est donc essentiel pour avoir une peau ferme et moins ridée.
En complément d’activité, il a été montré que les alkyls-phthalides ou un extrait de graines à'Apium graveolens en contenant ont la propriété de stimuler la production de collagène chez des fibroblastes dermiques.
Plus généralement, la présente invention propose ainsi l’utilisation d’alkyl-phthalide(s) ou d’un extrait de plante en contenant majoritairement pour un traitement cosmétique non thérapeutique topique : - anti-pelliculaire ; et/ou - des irritations et/ou démangeaisons du cuir chevelu ; et/ou - pour limiter la production de sébum de la peau et du cuir chevelu ; et/ou - des peaux grasses et/ou des pores dilatés ; et/ou - pour renforcer la barrière cutanée pour restaurer l’homéostasie cutanée ; et/ou - antirides et ridules et pour améliorer les propriétés mécaniques de la peau (perte de densité, donc de fermeté par exemple) grâce à une stimulation de la synthèse de collagène.
De manière préférée selon l’invention, les alkyl-phthalides utilisés comprennent du sédanénolide, du sédanolide et/ou du 3-n-butylphthalide. Ces trois alkyls phthalides, représentés ci-dessous, sont ceux compris dans la partie volatile des graines de la plante Apium graveolens.
Ainsi, selon une caractéristique préférée de l’invention, on utilise selon l’invention un extrait de graines $ Apium graveolens comprenant du sédanénolide, du sédanolide et du 3-n-butylphthalide. Il va de soi que d’autres plantes peuvent être utilisées pour extraire un alkyl-phthalide selon l’invention ou produire un extraire en contenant majoritairement, notamment préférentiellement l’un des 3 alkyl-phthalides présents dans les graines & Apium graveolens.
Et selon d’autres caractéristiques préférées encore, on utilise selon l’invention un extrait obtenu par une extraction au CO2 supercritique qui permet d’obtenir un extrait comprenant majoritairement des alkyls-phthalides, avantageusement au moins 50%, préférentiellement au moins 65%, le reste des composés étant majoritairement constitués de terpènes et de traces d’acides gras.
Selon l’invention les teneurs en poids de ces 3 phthalides par rapport aux phthalides totaux varient entre : Sédanolide : 0-45% Sédanénolide : 45-90% 3-n-butylphthalide : 0-30%
Avantageusement, on utilisera un extrait comprenant de préférence parmi les 3 alkyl-phthalides majoritairement le sédanénolide, de préférence au moins 50%, et de préférence au moins 60%, et de préférence encore au moins 70% de sédanénolide par rapport aux phthalides totaux. L’extrait pourra être obtenu par CO2 supercritique dans un intervalle de pression de 75 à 300 bars et dans un intervalle de température de 30°C à 80°C. De préférence, l’extraction se fera sous 90 bars de pression et à40°C.
Il va de soi que d’autres modes d’extraction peuvent être utilisés pour obtenir un extrait selon l’invention comprenant majoritairement au moins un alkyl-phthalide, notamment une extraction avec un solvant apolaire comme l’hexane.
La présente invention propose aussi un ingrédient actif cosmétique comprenant dans une matrice physiologiquement acceptable un extrait huileux comprenant majoritairement des alkyl-phthalides ledit extrait pouvant être obtenu par extraction au CO2 supercritique de graines & Apium graveolens et une composition cosmétique comprenant au moins ledit ingrédient actif dans un excipient physiologiquement acceptable.
La présente invention sera mieux comprise à la lumière de la description détaillée qui va suivre et des exemples d’illustration.
Préparation de compositions pour la mise en œuvre de l’invention
Une composition cosmétique, notamment topique, comprend au moins un alkyl-phthalide ou un extrait de plante en contenant majoritairement dans un milieu physiologiquement acceptable. Selon l’excipient et le dosage en alkyl-phthalides, cette composition constituera un ingrédient actif concentré ou une composition finale moins concentrée directement destinée à l’utilisateur final.
Par « milieu physiologiquement acceptable » on entend selon la présente invention, sans être limitatif, une solution aqueuse ou hydro alcoolique, une émulsion eau-dans-huile, une émulsion huile-dans-eau, une microémulsion, un gel aqueux, un gel anhydre, un sérum, une dispersion de vésicules, une poudre. « Physiologiquement acceptable » signifie que les compositions conviennent à une utilisation topique en contact avec la peau et le cuir chevelu de mammifères et plus particulièrement humaine, sans risque de toxicité, d’incompatibilité, d’instabilité, de réponse allergique, entre autres. Ce « milieu physiologiquement acceptable » forme ce que l’on appelle classiquement l’excipient de la composition.
Le(s) alkyl-phthalide (s) ou l’extrait de plante en contenant peuvent être associés à d’autres ingrédients actifs à des concentrations efficaces pouvant agir de façon synergique ou en renfort pour atteindre les effets souhaités décrits pour l’invention, tels que les agents suivants : filtrant les radiations, notamment UVA et/ou UVB, hydratant, humectant, calmant, myorelaxant, amincissant, restructurant, raffermissant, repulpant, tenseur, antipelliculaire, agissant sur la microcirculation, agissant sur l’inflammation, sur les radicaux libres, anti-rides, éclaircissants, agissant sur l’éclat du teint, anti-glycation, pro-pigmentants, agissants sur la couche cornée, sur la jonction derme-épiderme, sur la production de protéine HSPs, sur la fermeté, l’élasticité, la tonicité de la peau, la repousse des poils, peptides, vitamines etc.
Pour un traitement du cuir chevelu, on utilisera préférentiellement, en complément ou renfort d’activité : - un actif anti-pelliculaire agissant comme antifongique : tel que le zinc pyrithione, le kétoconazole, le climbazole, la piroctone olamine ou le disulfure de sélénium ; un actif hydratant tel que le DuraQuench™ (CRODA) ; un actif rééquilibrant la microflore cutanée tel que HAIRSPA™ (SEDERMA) ; un actif calmant tel que PACIFEEL™ (SEDERMA) ; et/ou des actifs cosmétiques pour prévenir la chute des cheveux et stimuler leur croissance tels que CAPIGENE™, CAPILECTINE™, PROCAPIL™ (SEDERMA); ou pour renforcer la structure des cheveux abîmés tels que CERAMIDE A2™, HELIOGENOL™ (SEDERMA) ; ou pour lisser le cheveu tel que FRUIT BIO™ (SEDERMA).
Le traitement selon l’invention peut être appliqué sur toutes les parties du corps, et plus spécifiquement selon l’indication préconisée sur le visage, le corps, le décolleté ou le cuir chevelu, sous n’importe quelle forme ou véhicule connus de l’homme de l’art, notamment sous forme de solution, de dispersion, d'émulsion, de pâte ou de poudre, individuellement ou en pré-mélange ou être véhiculée individuellement ou en pré-mélange par des vecteurs comme les macrocapsules, les microcapsules ou les nanocapsules, les macrosphères, les microsphères, ou les nanosphères, les liposomes, les oléosomes ou les chylomicrons, les macroparticules, les microparticules ou les nanoparticules, macroéponges, les microéponges ou les nanoéponges, les microémulsions ou les nanoémulsions, ou adsorbé sur des polymères organiques poudreux, les talcs, bentonites, spores ou exines et autres supports minéraux ou organiques.
En cosmétique notamment, des applications peuvent être proposées notamment dans les gammes de soins de la peau du visage, du corps et du cuir chevelu. D’une manière générale, le(s) phthalides ou extrait(s) de plante selon la présente invention peuvent être utilisés sous n'importe quelle forme, dans une forme liée, incorporée ou adsorbée sur des macro -, micro -, et nanoparticules, ou sur macro-, micro- et nanocapsules, pour le traitement des textiles, des fibres naturelles ou synthétiques, des laines, et tous matériaux destinés à entrer en contact avec la peau et qui peuvent être employés dans l'habillement, les sous-vêtements de jour ou de nuit, les mouchoirs, ou les tissus, afin d’exercer son effet cosmétique par l'intermédiaire de ce contact peau/textile et permettre une délivrance topique continue.
Le CTFA («International Cosmetic Ingrédient Dictionary & Handbook » (15ème édition, 2014) publié par « the Cosmetic, Toiletry, and Fragrance Association, Inc. », Washington, D.C.) décrit une grande variété, sans limitation, d’ingrédients cosmétiques habituellement utilisés dans l’industrie du soin de la peau et du cuir chevelu, qui conviennent pour être utilisés comme ingrédients additionnels dans les compositions selon la présente invention. D’autres actifs de soin de la peau additionnels qui sont particulièrement utiles peuvent être trouvés dans la documentation commerciale de Sederma et sur le site www.sederma.fr.
On peut aussi citer à titre d’exemples les actifs commerciaux suivants : la bétaïne, le glycérol, l’Actimoist Bio 2™ (Active organics), AquaCacteen™ (Mibelle AG Cosmetics), Aquaphyline™ (Silab), AquaregulK™ (Solabia), Carciline™ (Greentech), Codiavelane™ (Biotech Marine), Dermaflux™ (Arch Chemicals, Inc), Hydra'Flow™ (Sochibo), Hydromoist L™ (Symrise), RenovHyal™ (Soliance), Seamoss™ (Biotech Marine), Argireline™ (nom commercial de l’acétyl hexapeptide-3 de Lipotec), le spilanthol ou un extrait d’Acmella oleracea connu sous le nom Gatuline Expression™, un extrait de Boswellia serrata connu sous le nom Boswellin™, Deepaline PVB™ (Seppic), Syn-AKE™ (Pentapharm), Ameliox™, Bioxilift™ (Silab), PhytoCellTec™Argan (Mibelle), Papilactyl D™ (Silab), Preventhelia™ (Lipotec), Subliskin™ (Sederma), Venuceane™ (Sederma), Moist24™ (Sederma), Vegesome Moist 24™ (Sederma), Essenskin™ (Sederma), Juvinity™ (Sederma), Revidrat™ (Sederma), Resistem™ (Sederma), Chronodyn™ (Sederma), Kombuchka™ (Sederma), Chromocare™ (Sederma), Calmosensine™ (Sederma), Glycokin factor S™ (Sederma), Biobustyl™ (Sederma), Idealift™ (Sederma), Ceramide 2™, Ceramide A2™ et Ceramide HO3™ (Sederma), Legance™ (Sederma), Intenslim™ (Sederma), Prodizia™ (Sederma), Senestem™ (Sederma), Beautifeye™ (Sederma), Pacifeel™ (Sederma), Sebuless™ (Sederma), NG Insaponifiables de Beurre de Karité™ (Sederma), Majestem™ (Sederma) ou des mélanges de ceux-ci.
Parmi les extraits de plante pouvant être combinés avec le(s) alkyl(s)-phthalide(s) ou extrait(s) de plante en comprenant selon l’invention, on peut mentionner, en outre et en particulier, les extraits de lierre, par exemple de lierre grimpant (Hedera Hélix), de Bupleurum chinensis, de Bupleurum Falcatum, d’arnica (Arnica Montana L), de romarin (Rosmarinus officinalis N), de souci (('alendula officinalis), de sauge (Salvia officinalis L), de ginseng (Panax ginseng), de ginko biloba, de millepertuis (Hyperycum Perforatum), de fragon (Ruscus aculeatus L), d’ulmaire (Filipendula ulmaria L), d'orthosiphon (Orthosiphon Stamincus Benth), d’algues (Fucus Vesiculosus), de bouleau (Betula alha), de thé vert, de noix de cola (Cola Nipida), de marronniers d'Inde, de bambou, Centella asiatica, de bruyère, fucus, saule, piloselle, les extraits d'escine, les extraits de cangzhu, les extraits de chrysanthellum indicum, de plantes du genre Armeniacea, Atractylodis Platicodon, Sinnomenum, Pharbitidis, Flemingia, de Coleus comme C. forskohlii, C. blumei, C. esquirolii, C. scutellaroides, C. xanthantus et C. barbatus, comme un extrait de racines de Coleus barbatus, des extraits de Ballote, Guioa, Davallia, Terminalia, Barringtonia, Tréma, Antirobia, Cecropia, Argania, Dioscoreae comme Dioscorea opposita ou mexicain, des extraits de Ammi visnaga, de Siegesbeckia, en particulier Siegesbeckia orientalis, des extraits végétaux de la familles des Ericaceae, en particulier des extraits de myrtilles {Vaccinium angustifollium) de Arctostaphylos uva ursi, Aloe vera, de plantes contenant des stérols (notamment des phytostérols), de Manjistha (extrait de plantes du genre Rubia, en particulier Rubia cordifolia), de Guggal (extrait de plantes du genre Commiphora, en particulier Commiphora mukul), un extrait de kola, camomille, treffle violet, de Piper methysticum (Kava Kava de Sederma), de Bacopa monieri (Bacocalmine™, Sederma) et de fouet de mer, de Glycyrrhiza glabra, de mûrier, de melaleuca (arbre à thé), de Larrea divaricata, de Rabdosia rubescens, de Euglena gracilis, de Fibraurea recisa hirudinea, de Chaparral sorghum, de fleur de tournesol, d’Enantia chlorantha, de Mitracarpe du genre Spermacocea, de Buchu barosma, de Lawsonia inermis L., à'Adiantium capillus-veneris L., de Chelidonium majus, de Luffa cylindrical, de « Japanese Mandarin » (C il rus reticulata Blanco var. unshiu), de Camélia sinensis, de Imperata cylindrical, de Glaucium flavum, de Cupressus sempervirens, de Polygonatum multiflorum, de loveyly hemsleya, de Sambucus nigra, de Phaseolus lunatus, de Centaurium, de Macrocystis pyrifera, de Turnera diffusa, de Anemarrhena asphodeloides, de Portulaca pilosa, à'Humulus lupulus, de café Arabica, d’/Zex paraguariensis, de Globularia cordifolia, d’Oxydendron arboreum, à’Albizzia julibrissin et de Zingiber zerumbet smith.
Les compositions selon la présente invention peuvent comprendre un ou plusieurs peptides, incluant, sans se limiter, les, di-, tri-, tetra-, penta- et hexapeptides et leurs dérivés. Selon un mode de réalisation particulier, la concentration du peptide additionnel, dans la composition, varie entre lxl0"7% et 20%, de préférence entre lxl0"6% et 10%, préférentiellement entre lxl0"5% et 5%, en poids. Le terme «peptide» désigne ici les peptides contenant 10 acides aminés ou moins, leurs dérivés, isomères et complexes avec d’autres espèces telles qu’un ion métal (e.g. cuivre, zinc, manganèse, magnésium, et autres). Le terme "peptides" se réfère à la fois à des peptides naturels et à des peptides de synthèse. Il se réfère également à des compositions qui contiennent des peptides et qui se rencontrent dans la nature, et/ou qui sont commercialement disponibles.
Des exemples non limitatifs de dipeptides utilisables dans le cadre de la présente invention, comprennent la Camosine (beta-AH), YR, VW, NF, DF, KT, KC, CK, KP, KK ou TT. Des exemples non limitatifs de tripeptides comprennent RKR, HGG, GKH, GGH, GHG, KFK, KPK, KMOK, KM02K ou KAvaK. Des exemples non limitatifs de tétrapeptides sont RSRK (SEQ ID NO: 1), GQPR (SEQ ID NO: 2) ou KTFK (SEQ ID NO: 3). Un exemple non limitatif de pentapeptide est le KTTKS (SEQ ID NO: 4) et d’hexapeptides les GKTTKS (SEQ ID NO: 5) et VGVAPG (SEQ ID NO: 6). D’autres peptides utilisables dans le cadre de la présente invention peuvent être choisis parmi, sans que cette liste soit limitative : les dérivés lipophiles de peptides, de préférence les dérivés palmitoyl, et les complexes avec les ions métal mentionnés plus haut (e.g. complexe cuivre du tripeptide HGG). Les dipeptides préférés comprennent par exemple le N-Palmitoyl-béta-Ala-His, N-Acetyl-Tyr-Arg-hexadecylester (Calmosensine™, Idealift™, Sederma), le Pal-KT, le Pal-RT (Sederma). Les tripeptides préférés comprennent notamment le N-Pal-Gly-Lys-His, (Pal-GKH, Sederma), le dérivé cuivre de HGG (Lamin™, Sigma), la lipospondin (N-Elaidoyl-KFK) et ses analogues de substitution conservative, N-Acetyl-RKR-NH2 (Peptide CK+), le N-Biot-GHK (Sederma), le Pal-KMO2K (Sederma) et leurs dérivés. Des dérivés tétrapeptides utilisables dans le cadre de la présente invention comprennent, sans y être limités, le N-Pal-GQPR (Sederma) (SEQ ID NO: 7), le Ela-KTFK (SEQ ID NO: 8). Des dérivés pentapeptides utilisables sont, sans y être limités, le N-Pal-KTTKS (SEQ ID NO: 9) (MATRIXYL™, Sederma), le N-Pal-Tyr-Gly-Gly-Phe-X (SEQ ID NO: 10) avec X étant Met ou Leu ou leur mélange. Des dérivés hexapeptides utilisables, comprennent sans y être limités : N-Pal-VGVAPG (SEQ ID NO: 11), Pal-GKTTKS (SEQ ID NO: 12) et dérivés. On peut citer aussi le mélange Pal-GHK et Pal-GQPR (SEQ ID NO: 7) (Matrixyl™ 3000, Sederma).
Les compositions préférées disponibles dans le commerce contenant un tripeptide ou dérivé comprennent le Biopeptide-CL™, Maxilip™ ou Biobustyl™ de Sederma. Les compositions préférées, disponibles dans le commerce, sources de tétrapeptides comprennent : RIGIN™, Eyeliss™, Matrixyl™ Reloaded et Matrixyl 3000™, qui contiennent entre 50 et 500 ppm de palmitoyl-GQPR (SEQ ID NO: 7) et un excipient, proposées par Sederma.
Les peptides commerciaux suivants peuvent également être mentionnés comme ingrédients actifs additionnels : le Vialox™ (nom INCI = Pentapeptide-3 (peptide synthétique comprenant alanine, arginine, isoleucine, glycine et proline)), le Syn-ake™ (β-Ala-Pro-Dab-NH-Bzl) ou le Syn-Coll™ (Pal-Lys-Val-Lys-OH) vendus par la société Pentapharm, l’Argireline™ (Ac-Glu-Glu-Met-Gln-Arg-Arg-NH2 (Nom INCI = Acetyl hexapeptide-3) (SEQ ID NO: 13), le Leuphasyl™ (Tyr-D-Ala-Gly-Phe-Leu) (SEQ ID NO: 14), l’Aldenine™ (Gly-His-Lys), le Trylagen™ (Nom INCI = Pseudoalteromonas Ferment Extract, Hydro lyzed Wheat Protein, Hydro lyzed Soy Protein, Tripeptide-10 Citrulline (produit de la réaction de Citrulline et du Tripeptide-10 (peptide synthétique constitué d’acide aspartique, d’isoleucine et de lysine)), Tripeptide-1), l’Eyeseryl™ (Ac-P-Ala-His-Ser-His)(SEQ ID NO: 15), le Serilesine™ (Ser-Ile-Lys-Val-Ala-Val) (SEQ ID N°16) ou le Decorinyl™ (Nom INCI: Tripeptide-10 Citrulline = produit de la réaction de Citrulline et du Tripeptide-10 (peptide synthétique constitué d’acide aspartique, d’isoleucine et de lysine) vendus par la société Lipotec, le Collaxyl™ (Gly-Pro-Gln-Gly-Pro-Gln (SEQ ID N°17)) ou la Quintescine™ (Cys-Gly) vendus par la société Vincience, le Cytokinol™LS (hydrolysat de caséine) vendu par les Laboratoires Serobiologiques/Cognis, - le Kollaren™ (Gly-His-Lys), 1ΊΡ2000™ (Pal-Val-Tyr-Val) ou le Meliprene™ (Nom INCI = Monofluoroheptapeptide-1 : produit de la réaction d’acide acétique et d’un peptide synthétique contenant arginine, glycine, acide glutamique, histidine, norleucine, p-fluorophenylalanine et tryptophan) vendus par l’Institut Européen de Biologie Cellulaire, le Neutrazen™ (Pal-His-D-Phe-Arg-NH2) vendu par la société Innovations, ou le BONT-L-Peptide™ (Nom INCI = Palmitoyl Hexapeptide-19 : produit de la réaction d’acide palmitique et d’Hexapeptide-19 (peptide synthétique constitué d’asparagine, d’acide aspartique, de lysine et de méthionine), le Timp-Peptide™ (Nom INCI = Acetyl Hexapeptide-20 : produit obtenu par acétylation d’Hexapeptide-20 (peptide synthétique constitué d’alanine, glycine, lysine, valine et proline) ou l’ECM Moduline™ (Nom INCI = Palmitoyl Tripeptide-28 : produit de la réaction de l’acide palmitique et de Tripeptide-28 (peptide synthétique constitué d’arginine, lysine et de phénylalanine) vendus par la société lnfinitec Activos.
Plus spécifiquement, selon l’invention le(s) alkyl(s)-phthalide(s) ou extrait(s) de plante en contenant peuvent être combinés avec au moins l’un des composés choisis parmi les composés de la vitamine B3, les composés comme la niacinamide ou le tocophérol, les composés rétinoïdes comme le rétinol, l’hexamidine, l’acide α-lipoïque, le resvératrol ou la DHEA, les peptides, notamment le N-acétyl-Tyr-Arg-O-hexadécyl, le Pal-VGVAPG (SEQ ID NO: 11), le Pal-KTTKS (SEQ ID NO: 9), le Pal-GHK, le Pal-KM02K et le Pal-GQPR (SEQ ID NO: 7), qui sont des ingrédients actifs classiques utilisés dans les compositions topiques cosmétiques ou dermo-pharmaceutiques.
La présente invention propose également encore une méthode de traitement topique cosmétique pour l’amélioration de l’apparence et de l’état général de la peau et du cuir chevelu, comprenant l’application topique sur la peau d’un sujet qui en a besoin d’une quantité efficace d’au moins un alkyl-phthalide ou d’un extrait de plante en comprenant majoritairement ou d’une composition les comprenant, dans un excipient physiologiquement acceptable.
Par « traitement topique » ou « utilisation topique » on entend une application qui est destinée à agir à l’endroit où elle est appliquée : peau ou cuir chevelu.
Une composition selon l'invention peut être appliquée localement sur les zones ciblées, par exemple à l’aide d’un applicateur de type canule adapté pour le cuir chevelu.
La quantité « efficace » dépend de divers facteurs, comme l’âge, l’état du patient, la gravité du désordre ou de la pathologie et du mode d’administration. Une quantité efficace signifie une quantité non toxique suffisante pour obtenir l’effet désiré.
Tous les pourcentages et ratios utilisés dans la présente demande sont par poids de la composition totale et toutes les mesures sont faites à 25 °C à moins que cela ne soit précisé autrement. A titre d’exemple, pour un traitement cosmétique du visage, la Directive Européenne sur les Cosmétiques a fixé une quantité standard d’application d’une crème de 2,72 mg/cm2/jour/personne et pour une lotion pour le corps de 0,5 mg/cm2/jour/personne. À titre d’exemple, pour un traitement capillaire du cuir chevelu, on préconise d’appliquer une dose de phthalides totaux de 0,5 à 2 mg par semaine pendant au moins 1 semaine, de préférence au moins 3 semaines. Par exemple sous forme d’un traitement au moins 3 fois par semaine, en appliquant une dose de 10 grammes de shampooing, puis 10 grammes d’une lotion après shampooing non rincée (ou « Leave-on ») avec respectivement 2% (shampooing) et 3% (« Leave-on ») de l’ingrédient actif contenant l’extrait selon l’invention (selon les formules 1.1 et 1.2 du §D de Galénique données ci-dessous).
Selon d’autres particularités, le procédé de traitement cosmétique selon l’invention peut être associé avec un ou plusieurs autres procédés de traitement visant la peau, comme par exemple les traitements par luminothérapie, par la chaleur ou par aromathérapie.
Selon l’invention, il est possible de proposer des dispositifs à plusieurs compartiments ou kits destinés à la mise en œuvre du procédé décrit ci-dessus, et qui pourrait comprendre, à titre d’exemple, et sans que ce soit limitatif, dans un premier compartiment une composition contenant au moins un alkyl-phthalide ou un extrait en comprenant selon l’invention et dans un second compartiment un excipient et/ou actif additionnel, les compositions contenues dans lesdits premier et second compartiments étant ici considérées comme composition de combinaison pour une utilisation simultanée, séparée ou étalée dans le temps notamment dans l’un des traitements définis ci-dessus.
Le procédé de traitement selon l’invention est plus particulièrement adapté à un traitement cosmétique du cuir chevelu, et en particulier des états pelliculaires, des peaux grasses (traitement de la brillance et/ou des pores dilatés), des rides et ridules et de la perte des propriétés mécaniques de la peau (perte de fermeté notamment). A) Exemple d’obtention d’un extrait de graines d'Apium graveolens pouvant être utilisé dans le cadre de l’invention
Les graines d'Apium graveolens sont broyées pour obtenir une poudre de granulométrie autour de 800pm. Cette poudre est ensuite extraite par CO2 supercritique sous 90 bars de pression et à 40°C. L’eau résiduelle pouvant être présente dans l’extrait final est ensuite éliminée si besoin (par décantation, évaporation sous vide, lyophilisation notamment). Le rendement de l’extraction se situe autour de 2,5%. L’extrait se présente sous la forme d’un liquide huileux, limpide à légèrement opalescent, incolore à jaune pâle. L’extrait obtenu est passé en Ultra High Performance Liquid Chromatography (UHPLC) sur une colonne 08 avec comme phase mobile un gradient eau/acétonitrile, de façon à doser les différents phthalides.
Cette analyse confirme la présence de 71% de phthalides totaux dans l’extrait comprenant les 3 alkyl-phthalides : 10% de 3-n-butylphthalide, 30% de sédanolide et 60% sédanénolide, en poids par rapport aux phthalides totaux. L’extrait peut être utilisé pur ou dilué. B) Formulation d’un ingrédient actif utilisable dans le cadre de l’invention L’ingrédient actif est une composition comprenant l’extrait de graine dYApium graveolens obtenu selon A) ci-dessus solubilisé dans une matrice formant un milieu physiologiquement acceptable. Cet ingrédient actif est notamment destiné à l’industrie cosmétique pour la préparation de produits cosmétiques, crèmes, gels, etc. (voir les exemples galéniques au point D) ci-après).
Un extrait obtenu selon A) ci-dessus peut être dilué dans tout excipient gras physiologiquement acceptable pour atteindre au final une concentration de 500ppm d’alkyl-phthalides. On utilisera de préférence une huile estérifiée de type Caprylic/Capric Triglycéride pour cette dilution. A titre d’exemple, et pour la description des tests in vivo et de la galénique du point D), c’est cette dilution qui a été préférentiellement utilisée. Il s’agit là de l’ingrédient actif qui sera mis lui-même préférentiellement entre 1 et 5% dans une composition cosmétique applicable sur la peau C) Résultats de tests in vitro
Les tests in vitro ont été réalisés à partir d’un extrait brut d’huile de graines (YApium graveolens fabriqué selon le mode d’obtention décrit en A) ci-dessus. En général, 8, 16 et 24 ppm de cet extrait, correspondant respectivement à 5, 10 et 15 ppm de phthalides totaux, ont été testés. Ces quantités correspondent elles-mêmes à une dose d’application sur la peau ou le cuir chevelu de 1%, 2% et 3% de l’ingrédient actif en B) ci-dessus. 1. Réduction de la prolifération des germes impliqués dans la formation des pellicules a) Action sur la production d’un peptide antimicrobien naturel (hBD2)
Pour contrôler les perturbations de sa flore microbienne, le cuir chevelu produit des peptides naturels antimicrobiens (PAM) destinés à réduire la prolifération des germes (bactéries, levures) et leur nocivité. Les PAM protègent donc le cuir chevelu. L’un d’eux, le peptide béta-défensine 2 (hBD2), est fabriqué par les cellules cutanées et agit en perforant les parois des cellules des bactéries ou levures. Principe : Des kératinocytes humains sont cultivés jusqu’à mi-confluence et reçoivent pendant 4jours le produit selon l’invention dans leur milieu de culture, le milieu étant changé régulièrement. A l’issu du contact, les cellules sont lysées et les concentrations de hBD2 sont évaluées par ELISA. Le nombre de cellules est estimé en parallèle à l’aide d’un colorant de l’ADN pour quantifier les cellules et normaliser les données.
Tableau 1 : Modulation de la production du peptide anti-microbien hBD2 dans les kératinocytes au contact de l’extrait selon l’invention pendant 4jours (n=3).
Aucun effet cytotoxique n ’a été noté.
Les résultats montrent que l’extrait selon l’invention permet d’augmenter significativement et de façon dose-dépendante la production du peptide antimicrobien hBD2 et donc d’inhiber la prolifération de germes impliqués dans la formation des pellicules. b) Action sur la production d’un récepteur microbien (TLR9)
Les cellules de l’épithélium possèdent à leur surface externe ou à la surface de leurs endosomes des récepteurs appelés Toll-Like (ou TLR). Ces structures jouent un rôle crucial dans l’immunité innée de la peau, elles visent en effet à capturer les bactéries, levures et virus, et à déclencher une réponse immunitaire. Mais trop abondantes, elles favorisent l’inflammation. Outre les TLR2 et 4 très connus et extracellulaires, on trouve notamment dans les kératinocytes la TLR-9 impliquée dans la reconnaissance de plusieurs levures dont Malassezia furfur et Malassezia globasa, responsables de la formation des pellicules.
Principe : Des expiants cutanés (5 mm de diamètre) venant de 4 donneurs féminins (moyenne 69ans (45-90 ans)) sont mis en contact pendant 3 jours, dans leur milieu de culture, avec une suspension de levures Malassezia. Après élimination de la suspension de levures, les peaux reçoivent tous les jours, pendant 3jours, une solution après-shampooing non rincée («Leave-on»; formule 1.2 du § D Galénique ci-après) contenant un extrait d Apium graveolens selon l’invention (correspondant à une dose de 15 ppm de phthalides totaux) ou de son placebo. Après rinçage, les peaux sont coupées et un marquage TLR-9 est réalisé sur ces coupes.
Tableau 2 : Modulation de l’expression du TLR-9 dans des expiants cutanés après contact de Malassezia, effet de l’extrait selon l’invention et de son placebo (n=4 ; 12photos/donneur).
* UFA : Unité de Fluorescence Arbitraire.
Le contact avec les levures Malassezia a augmenté le marquage TLR-9 dans les expiants. L’utilisation de l’extrait selon l’invention a permis de contrôler cette augmentation (-16%) de façon significative par rapport au placebo (p<0,01).
Ces deux tests montrent que l’extrait selon l’invention défavorise le métabolisme des levures responsables de la formation de pellicules et permet ainsi d’assainir et donc d’embellir le cuir chevelu. 2. Réduction de la production de sébum
La peau grasse est liée à une production trop abondante de sébum par des cellules appelées sébocytes. Trop de sébum conduit souvent à modifier les propriétés de la peau et du cuir chevelu.
Le sébum englue les peaux mortes, piège les bactéries et levures (comme Malassezia furfur au niveau du cuir chevelu, à l’origine des pellicules) qui s’en nourrissent et y prolifèrent.
Baisse de la synthèse des lipides chez le sébocyte
Principe : Des sébocytes humains (femme 26 ans, visage) ont été ensemencés dans leur milieu de croissance. A confluence, les cellules sont mises au contact de l’extrait selon l’invention pendant 48heures. Après élimination des milieux, les tapis cellulaires sont incubés avec du Rouge Nil marqueur des lipides intracellulaires ce qui permet d’estimer la quantité de lipides présents dans les cellules. L’estimation de la viabilité est réalisée en parallèle sur les même tapis à l’aide d’un colorant fluorescent.
Tableau 3 : Modulation de la synthèse des lipides dans des sébocytes en présence ou non de l’extrait selon l’invention (n=3).
* UFA : Unité de fluorescence arbitraire ; aucun effet cytotoxique n ’a été noté. Acide Linoléique : +66% de lipides
Ces résultats montrent que l’exposition des sébocytes à l’extrait selon l’invention permet de réduire significativement et de façon dose-dépendante la quantité de lipides dans ces cellules productrices du sébum. L’extrait selon l’invention peut donc être utilisé pour traiter les désordres cutanés liés aux peaux grasses ou à tendance grasse comme l’aspect brillant, luisant, la taille et le nombre des pores.
Le cuir chevelu peut être « assaini » avec moins de sébum, terrain pour les bactéries et les levures, et piège pour les pellicules.
3. Renfort de la barrière cutanée et de ses fonctions
Le cuir chevelu des personnes ayant un état pelliculaire présente des cellules mal différenciées, peu comifiées, moins cohésives, une moindre prédominance des lipides de type céramides, une perte insensible en eau augmentée et une perturbation de l’hydratation. L’amélioration de la barrière cutanée en amont permet de prévenir également l’état pelliculaire. a) Etude préliminaire en DNA-Array
Une étude de DNA-Array, sur des kératinocytes humains normaux au contact de l’extrait selon l’invention a montré l’induction de plusieurs gènes associés au renforcement de la barrière épidermique par rapport au contrôle. 1) L’expression des gènes codants pour la loricrine, l’involucrine et de deux formes de filaggrine (la filaggrine et la filaggrine-2) est augmentée au contact de l’extrait selon l’invention. Ces protéines sont bien connues pour être des acteurs majeurs de la comification et de l’hydratation du stratum corneum. 2) En parallèle, l’augmentation de l’expression du gène de la comuline est aussi observée au contact de l’extrait selon l’invention. Cette protéine, retrouvée sur le cuir chevelu, est un marqueur de la différenciation terminale de l’épiderme, son importance dans l’homéostasie du stratum est soulignée par le fait qu’elle est diminuée dans l’eczéma, une maladie inflammatoire chronique de la peau. 3) Enfin, l’extrait selon l’invention augmente la production de SPINK5 et, en parallèle, modère l’expression des gènes des KLK6 et 13. La desquamation résulte d’un équilibre entre les KLK (Kallikrein-related peptidases), qui rompent les attaches des coméocytes entre eux et SPINK5 (Serine Protease Inhibitor Kazal type-5) qui modère leur activité. La perte de fonction de SPINK5 cause une hyper-desquamation de cellules immatures et une perte d’homéostasie du stratum corneum. b) Amélioration de la qualité de la différenciation des kératinocytes
Des kératinocytes humains normaux presque à confluence sont mis en contact avec l’extrait selon l’invention (8 ppm) dans un milieu de culture approprié afin d’étudier leur différenciation au microscope en suivant l’aspect des tapis. A 3 jours, l’aspect de la différenciation est évalué visuellement. On observe avec l’extrait selon l’invention une accélération nette de la différenciation avec une stimulation de la formation de structures typiques des couches supérieures de l’épiderme (présence de structures ramifiées caractéristiques de la matrice rigide protéo-lipidique et en multicouches de l’enveloppe cornée ; réseau réfringent). c) Marqueurs protéiques de la différenciation épidermique L’involucrine, la loricrine, la filaggrine, la LCE3B (« Late Cornified Enveloppe protein 3B ») et la SPRR (« small proline-rich région proteins ») font partie des protéines responsables de la bonne qualité de la fonction de barrière dévolue au stratum corneum.
Principe : les mêmes tapis cellulaires que ceux étudiés ci-dessus à l’état frais dans la partie b) sont fixés et immunomarqués afin de visualiser la synthèse de ces 5 protéines marqueurs de la différenciation épidermique. 5 photos sont réalisées sur chacun des 3 répliquas. Une quantification des marquages est réalisée par analyse d’image. Une contre-coloration des noyaux cellulaire permet d’estimer le nombre de cellules et de normaliser ainsi les données.
Involucrine
Tableau 4 : Modulation de l’expression de TInvolucrine par des kératinocytes au contact de l’extrait selon l’invention (15 photos/cas)
* UFA : Unité de Fluorescence Arbitraire \ aucun effet cytotoxique n ’a été noté.
Loricrine
Tableau 5 : Modulation de l’expression de la Loricrine par des kératinocytes au contact de l’extrait selon l’invention (15photos/cas)
* UFA : Unité de Fluorescence Arbitraire \ aucun effet cytotoxique n ’a été noté.
Filaggrine
Tableau 6 : Modulation de l’expression de la Filaggrine par des kératinocytes au contact de l’extrait selon l’invention (15photos/cas)
* UFA : Unité de Fluorescence Arbitraire \ aucun effet toxique n ’a été noté.
En parallèle, la production de la protéine SPRR2B (marqueur des SPRR) est augmentée dans les kératinocytes en culture de 103% à 139% (p<0,01) au contact de 16 à 20 ppm d’extrait selon l’invention par rapport au contrôle.
En outre, la LCE3B, induite lorsqu’il est nécessaire de réparer la barrière cutanée, voit sa production augmenter avec 16 à 24 ppm d’extrait selon l’invention de +41% à +70% (p<0,01).
Tous ces résultats concordent pour montrer l’intérêt de l’extrait de graines d’Apium graveolens selon l’invention dans l’établissement, le renfort et la restauration de la barrière cutanée. Les marqueurs protéiques connus de la qualité de la formation de cette barrière : Involucrine, Loricrine, Filaggrines, mais aussi SPRR2B ou LCE3B sont tous en augmentation grâce à l’extrait selon l’invention. d) Lipides épidermiques : cholestérol, céramide 2, acides gras libres neutres
Le cuir chevelu des personnes ayant des pellicules est caractérisé par des niveaux plus faibles de lipides intercellulaires au niveau de la couche cornée (incluant les céramides, le cholestérol et les lipides neutres). Ceci participe à l’affaiblissement de la barrière cutanée.
Cholestérol L’étude en DNA-Array a également montré, en présence de l’extrait selon l’invention, l’induction du gène CYP51A1, codant pour une protéine de la famille cytochrome P450, qui participe à la synthèse du cholestérol en catalysant l'enlèvement du groupe 14alpha-méthyl lanostérol.
Lipides neutres
Une culture similaire à celle réalisée pour les protéines (ci-dessus) est marquée à l’aide d’un colorant spécifique des lipides neutres (cholestérol et dérivés, triglycérides, acide gras). Après photos, une analyse d’images permet d’estimer la quantité de lipides neutres. La quantité de cellules est estimée à l’aide d’une contre-coloration des noyaux.
Tableau 7 : Modulation de la production de lipides neutres par des kératinocytes au contact de l’extrait selon l’invention (15 photos/cas)
* UFA : Unité de Fluorescence Arbitraire \ aucun effet cytotoxique n ’a été noté.
Céramides sur culture de kératinocytes et expiants
Une culture similaire à celle réalisée ci-dessus est marquée à l’aide d’un anticorps spécifique du céramide 2. Après prise de photos, une analyse d’images permet d’estimer sa quantité. La quantité de cellules est estimée à l’aide d’une contre-coloration des noyaux.
Par ailleurs, les mêmes 4 expiants que ceux utilisés pour l’étude TLR9 sont immuno-marqués pour révéler les variations de teneur en céramide 2. Après photos (n=12), une analyse d’images a permis de les quantifier.
Tableau 8 : Modulation de la production de céramide 2 par des kératinocytes et des expiants au contact de l’extrait selon l’invention (15photos/cas)
* en UFA 106cell. : Unité de Fluorescence Arbitraire ; aucun effet cytotoxique n ’a été noté. ** Extrait selon l’invention : 16ppm pour les kératinocytes ; 24ppm dans la solution «Leave-on » pour les expiants.
En plus de l’augmentation d’expression d’une enzyme participant à la formation du cholestérol, on note l’augmentation des lipides neutres et de céramide 2, éléments constitutifs de la barrière cutanée. Tous ces résultats montrent ainsi que le contact avec l’extrait selon l’invention permet de renforcer la composante lipidique de la barrière cutanée. 4. Apaisement du cuir chevelu - diminution des signaux irritants a) Effet de l’extrait selon l’invention sur la production d’IL-8 L’IL-8 est un médiateur produit entre autres par les kératinocytes à la suite de la détection d’agents microbiens, chimiques ou suite à un traitement UV. L’IL-8 guide les cellules de l’immunité vers l’origine de l’irritation et on retrouve de hauts niveaux d’IL-8 dans les squames des personnes ayant des pellicules. Avec l’histamine, il fait partie des marqueurs clairs d’un état pelliculaire.
Les levures, à cause de leurs lipases, excrètent des sous-produits lipidiques irritants du type acides gras insaturés ou des substrats de la voie des éicosanoïdes. Une solution modèle de ces sous-produits lipidiques (SPL) est préparée et est utilisée pour évaluer les propriétés apaisantes de l’extrait selon l’invention.
Principe : Des kératinocytes humains normaux presque à confluence sont mis 24h au contact du milieu de croissance contenant ou non l’extrait selon l’invention. Les milieux sont remplacés par les
mêmes milieux additionnés ou non de la solution modèle de SPL. 24 heures après, les surnageants sont dosés pour leur contenu en IL-8 et une estimation du nombre de cellules est faite par la méthode MTT. Tableau 9 : Modulation de la production d’IL-8 par des kératinocytes après contact avec des SPL -Effet de l’extrait selon l’invention (n=5).
* aucune cytotoxicité n ’a été observée.
Les SPL augmentent la production d’IL-8 par les kératinocytes (+62%, p<0,01), modélisant ainsi ce qui est observé dans les états pelliculaires. L’extrait selon l’invention permet de réduire nettement et significativement cette surproduction de 40 à 65% (p<0,01). Par ailleurs l’extrait selon l’invention réduit aussi nettement et significativement la production basale d’IL-8 de 41 à 75% (p<0,01). 5. Action sur la Matrice Extra Cellulaire dermique - Stimulation de la synthèse de collagène
La matrice extracellulaire est la clef de voûte du maintien du dynamisme cutané et des propriétés viscoélastiques du derme. Les composants de cette matrice subissent des modifications structurelles qualitative et quantitative au cours du temps et sous l’effet de processus radicalaires (principalement le soleil, la pollution et de mauvaises conditions de vie), conduisant au vieillissement de la peau et à l’apparition de rides et ridules.
Le collagène I est un élément crucial pour l’équilibre de cette matrice. Sa production baisse avec l’âge et ses fibres sont dégradées par les processus radicalaires endogènes et exogènes. Les UV, par ailleurs, stimulent la synthèse de certaines enzymes protéolytiques qui vont dégrader des protéines de la matrice extracellulaire. Il en résulte une perte de fermeté, d’élasticité et de densité de la peau. La stimulation du collagène est donc un facteur clé dans le traitement cosmétique pour embellir la peau.
Principe : Des fibroblastes humains normaux (FHN) sont cultivés pendant 24h. Les cellules sont mises au contact ou non des produits à tester ou de leur excipient à différentes concentrations pendant 7 jours. La synthèse de collagène I produit par les cellules sous forme de matrice extracellulaire est ensuite quantifiée par immuno-marquage sur les tapis fixés. Un comptage des noyaux marqués au Hoechst est réalisé en parallèle afin d’avoir une estimation de la viabilité et de pondérer les données. Tableau 10 : Stimulation de la synthèse de Collagène I par des fibroblastes, après contact avec l’extrait selon l’invention
D) Galénique
Différentes formulations cosmétiques sont décrites ci-après. Des ingrédients actifs additionnels, venant le cas échéant en soutien et/ou en complément de l’activité de l’ingrédient actif selon l’invention peuvent être ajoutés dans la phase appropriée selon leur nature hydrophobe ou hydrophile. Ces ingrédients peuvent être de toute catégorie selon leur(s) fonction(s), le heu d’application (cuir chevelu, visage, corps, cou, buste, mains, etc.), l’effet final recherché et le consommateur ciblé.
Ingrédient actif selon l’invention utilisé dans les formulations galéniques données ci-après : extrait CO2 supercritique de graines d’Apium graveolens repris dans une huile estérifiée de type Caprylic/Capric Triglycéride de façon à être en final à 500 ppm d’alkyl-phthalides totaux.
Cet ingrédient est préconisé entre 0,1 et 10%, de préférence entre 1 et 5%, de préférence encore entre 2 et 3%. 1) Traitement du cuir chevelu 1.1 Shampooing
Protocole : Peser la phase A et mettre à chauffer à 75 °C au bain-marie. Bien mélanger. Peser la phase B et mettre à chauffer à 75°C au bain-marie. Bien mélanger. Ajouter la phase B à la phase A sous agitation staro v = 1200 tr/min. Rajouter les ingrédients de la phase C, un par un, dans la phase précédente sous agitation staro v = 500 tr/min. Bien homogénéiser.
Exemples d’ingrédients commercialisés par Sederma pouvant être ajoutés à cette formulation : • CERAMIDE A2 PH™ : analogue chimique du céramide 2, une molécule naturelle du cheveu. Agit en renforçant la structure du cheveu, en protégeant et gainant les cheveux abîmés, notamment les cheveux colorés ou permanentés. • CAPIGENE SP™ : ingrédient composé de trois actifs complémentaires : l’homotaurine, un filtrat bactérien riche en peptides et un extrait de sulfomucopolysaccharides d’origine marine. Agit en ralentissant la perte de cheveux, en stimulant le renouvellement et la régénération des cheveux et intervient dans la régulation de la séborrhée souvent impliqués dans les phénomènes d'alopécie. Contribue à l'hygiène et la force du cuir chevelu et des cheveux. • HELIOGENOL™ : extrait hydroglycolique de tourteau de tournesol titré en polyphénols. Contient naturellement un capteur de radicaux libres. Protège et répare les cheveux naturels et colorés contre l’agression des shampooings et des rayons UV. • CAPILECTINE SP™ : glycoprotéine avec un poids moléculaire d'environ 20 000 daltons, purifiée à partir de Solanum tuberosum L. qui possède des caractéristiques similaires à celles des lectines.
Stimule la vitalité des cheveux. 1.2 « Leave on »
Protocole : Saupoudrer la gomme xanthane sous agitation rapide dans la phase A et laisser gonfler pendant 30 min. Mettre la phase A à chauffer à 75°C au bain-marie. Peser la phase B et mettre à chauffer à 75°C au bain-marie. Bien mélanger. Rajouter la phase C, en dessous de 35°C, bien mélanger. Ajouter la phase C à la phase précédente sous agitation staro v = 1000 tr/min, bien homogénéiser. Rajouter la phase D lentement. Bien homogénéiser.
Exemples d’ingrédients pouvant être ajoutés à cette formulation : comme précédemment pour le shampooing. • PACIFEEL™ : comprend un extrait d’origine naturelle issu de la plante Mirabilis jalapa (Belle de nuit) qui soulage des sensations d’inconfort (démangeaisons, picotements), atténue la rougeur des peaux sensibles et réactives. 1.3 Emulsion tonique
Protocole : Peser la phase A. Homogénéiser sous agitation staro v = 300 tr/min. Peser la phase B et bien homogénéiser. Ajouter la phase B à la phase A sous agitation Staro v = 300 tr/min. Laisser gonfler pendant 30 min. Mettre la phase A+B à chauffer à 55°C au bain-marie. Peser la phase C et mettre à chauffer à 55°C au bain-marie. Rajouter la phase C dans la phase A+B sous agitation staro rapide v = 1000 tr/min. Ajouter la phase E dans la précédente sous agitation douce. Bien homogénéiser.
On obtient une émulsion fluide opaque.
Exemple d’ingrédient commercialisé par Sederma pouvant être ajouté à cette formulation : • PROCAPIL™ : Combinaison de 3 actifs complémentaires en solution : une matrikine vitaminée (biotinyl-GHK), l’apigénine (un flavonoïde extrait du citrus) et l’acide oléanolique (extrait de racines de Loveyly Hemsleya). Combat le processus de vieillissement capillaire pour prévenir la chute des cheveux. Cible les principales causes de l’alopécie : la micro-circulation, l’atrophie du follicule causée par la dihydrotestostérone et le vieillissement folliculaire. 1.4 Sérum apaisant (émulsion de crème)
Protocole : Phase A : saupoudrer le Carbomer dans l’eau. Laisser gonfler 30 minutes. Peser la phase B et mélanger. Ajouter la phase B et mélanger. Ajouter la phase B à la phase A sous agitation normale staro v = 650 tr/min (15%). Peser la phase C et mélanger. Ajouter la phase C à la phase A+B. Bien
homogénéiser sous agitation staro plus forte v = 1000 tr/min. Peser la phase D. Extemporanément verser la phase D dans la phase A+B+C sous agitation staro v = 2000 tr/min. Neutraliser avec la phase E vers pH = 5 ,60 +/- 0,10 sous agitation normale staro v = 2500 tr/min. Peser la phase F et mélanger. Ajouter la phase F dans la phase précédente sous agitation normale. 1.5 Masque
Protocole : Peser la phase A. Mettre à chauffer à 85°C au bain-marie. Peser la phase B et mettre à chauffer à 85°C au bain-marie. Peser la phase C et bien homogénéiser. Ajouter la phase C à la phase A sous agitation Staro v = 20%. Ajouter la phase B à la phase A+C sous agitation rapide Staro v = 35% pendant 30s. Ajouter la phase D vers 35°C sous agitation Staro v = 20%.
On obtient une crème visqueuse opaque.
Exemples d’ingrédients commercialisés par Sederma pouvant être ajoutés à cette formulation : • HAIRSPA™ : Lactitol, xylitol et glycérine. Combat les inconforts du cuir chevelu (sécheresse, démangeaisons, pellicules, irritations) en rééquilibrant la microflore cutanée. Apaisant et hydratant du cuir chevelu. • FRUITBIO™ : Complexe d’a-hydroxyacides associé à l’extrait de thé vert. Lissage des cuticules du cheveu.
1.6 Huile
Protocole : Peser la phase A et mettre sous agitation douce à hélice v = 300 tr/min. Peser la phase B et bien homogénéiser. Ajouter la phase B dans la phase A sous agitation douce à l’hélice v = 300 tr/min. Bien homogénéiser.
On obtient une huile limpide incolore. 1.7 Conditionner lavant
Protocole : Peser la phase A et mettre à chauffer au bain-marie à 85°C. Peser la phase B et mettre à chauffer au bain-marie à 85°C. Peser la phase C et bien homogénéiser. Ajouter la phase C à la phase A sous agitation normale Staro v = 30%. Ajouter la phase B à la phase A+C sous agitation rapide Staro v = 50%. Ajouter la phase D vers 35°C sous agitation Staro v = 20% et bien homogénéiser.
Exemple d’ingrédient commercialisé par Sederma pouvant être ajoutés à cette formulation : CERAMIDE A2 PH™ 1.8 Spray biphasique
Protocole : Peser la phase A et mettre sous agitation lente à l’hélice v=300tr/min. Peser la phase B et bien homogénéiser. Ajouter la phase B à la phase A. Bien homogénéiser sous agitation rapide à l’hélice v = 300 tr/min. Peser la phase C et bien homogénéiser. Ajouter la phase C dans la phase A+B sous agitation à l’hélice v= 650 tr/min.
Exemple d’ingrédient commercialisé par Sederma pouvant être ajoutés à cette formulation : • FRUIT BIO™ 2) Traitement de la peau
Crème visage peau grasse et/ou anti-âge
Protocole : Phase A : Saupoudrer le Carbomer dans l’eau et laisser gonfler lh sans agitation. Peser et ajouter la phase B dans la phase A. Homogénéiser. Mettre la phase A+B à chauffer au bain marie à 75°C. Peser et mettre à chauffer la phase C dans le bain marie à 75°C, bien Homogénéiser. Peser la phase D. Ajouter la phase D dans la phase C, bien homogénéiser. Ajouter la phase C+D dans la phase A+B sous agitation Staro v = 2000 tr/min. Extemporanément, ajouter la phase E dans l’émulsion, sous agitation staro v = 3000 tr/min. Ajouter la phase F dans l’émulsion. Laisser refroidir sous agitation staro v = 1800 tr/min. Ajuster le pH à 5,90 +/- 0,10 à l’aide de la phase F, en dessous de 35°C. Ajouter la phase G, bien homogénéiser.
Exemples d’ingrédients commercialisés par Sederma pouvant être ajoutés à cette formulation : • MATRIXYL 3000™ : ingrédient actif anti-rides à base de peptides (W02005/048968) qui aide à réparer les dommages cutanés causés par le vieillissement. • MATRIXYL synthe’6™ : ingrédient actif anti-rides à base de peptides (W02010/082175) qui aide à réparer les dommages cutanés causés par le vieillissement. • PACIFEEL™
• Ac-NET™ : ingrédient actif comprenant une association d’acide oléanolique et d’acide nordihydroguaïarétique (NDGA) dans un gel osmotique. Traitement complet des peaux grasses et à tendance acnéique. • EVERMAT™ : ingrédient actif comprenant une association d’un extrait d'Enantia chlorantha riche en protoberbérines et d’acide oléanolique. La régulation de la prolifération et de la différenciation des sébocytes et l’inhibition de l’activité de la 5a-réductase diminuent la sécrétion de sébum. E) Tests in vivo
Principe
Deux études indépendantes ont été effectuées sur un total de 106 volontaires : • une étude A sur un panel de 46 volontaires d’âge moyen 38 ans (21 - 59 ans), présentant un cuir chevelu sensible, des démangeaisons et, dans la majorité des cas, des pellicules. • une étude B sur un panel de 60 volontaires d’âge moyen 38 ans (19 - 63 ans), présentant pour moitié des pellicules grasses et pour moitié des pellicules sèches et dans la quasi-totalité des cas des démangeaisons. L’évaluation de l’efficacité de l’extrait selon l’invention a été menée sur leur cuir chevelu autour de 3 axes majeurs : 1. L’amélioration des états pelliculaires : par une évaluation dermatologique, une visualisation sur macro photos, une quantification par microscopie laser confocale et une autoévaluation 2. La restauration de la barrière cutanée : avec une mesure de la PIE au Vapomètre, de l’hydratation au Dermalab™ et au Cornéomètre et du taux de sébum au Sébumètre 3. La diminution des démangeaisons : avec une évaluation dermatologique et une autoévaluation
Protocole
Critères d’inclusion particuliers
Pour les 2 études, les volontaires ont observé une période de « wash-out » avec un shampooing neutre. Il était demandé aux femmes une constance hormonale durant les 3 mois précédant le test et pendant le test. Lors du test, une exposition solaire modérée, l’usage exclusif des produits capillaires fournis et s’abstenir d’aller chez le coiffeur étaient demandés.
Type d’études et durée
Ces études ont été menées en simple aveugle sur l’ensemble du scalp. Le traitement consistait à utiliser, au moins 3 fois par semaine, pendant 3 semaines, un shampooing puis une lotion après shampooing non rincée (ou « Leave-on ») soit placebo soit contenant respectivement 2% (shampooing) et 3% (« Leave-on ») de l’ingrédient contenant l’extrait selon l’invention (selon les formules 1.1 et 1.2 données ci-dessus au §D).
Le synopsis de l’étude peut se résumer selon le schéma ci-dessous.
Les études statistiques ont été effectuées à l’aide du test t de Student ou si besoin avec un test non paramétrique de Wilcoxon ou de Mann-Withney. Pour comparer l’effet par rapport à TO, des tests bilatéraux ont été effectués sur séries appariées. Pour comparer les produits entre eux, des tests bilatéraux ont été effectués sur séries non appariées. Pour les évaluations par questionnaire, un test du Khi2 a été utilisé.
Résultats 1) Evaluation des états pelliculaires. a) Evaluation clinique par un dermatologue (Etude B) A chaque temps, un dermatologue a évalué le nombre et la taille des pellicules selon le tableau suivant :
Ces résultats montrent que Tutilisation du traitement avec les produits selon l’invention entraîne une très nette diminution des pellicules sèches et grasses par rapport à TO et par rapport au placebo. Après 3 semaines, les scores sont améliorés de 61% (pellicules sèches, p<0,01 vs. placebo) et de 64% (pellicules grasses, p<0,05 vs. placebo). L’état du cuir chevelu devient ainsi quasiment normal avec une présence faible de petites pellicules (scores de 2 et 1,9). L’utilisation du traitement placebo ne provoque aucune diminution significative concernant les pellicules sèches (score passant de 5,0 à 4,2) et, pour les pellicules grasses, une réduction du score (de 5,1 à 3,9 p<0,01) moindre de celle obtenue avec les produits selon l’invention.
Avantageusement, on constate une efficacité après seulement 7 jours sur les 2 types de pellicules, avec -31% pour les pellicules grasses (p<0,01 vs. TO) et -20% pour les pellicules sèches (p<0,05, vs. TO). b) Auto-évaluation par les volontaires (Etude B)
Dans le même temps, les volontaires ont eux-mêmes évalué les effets du traitement. Les résultats confortent l’analyse du dermatologue.
Après 3 semaines d’application :
Que ce soit pour les pellicules sèches ou grasses, 93% des volontaires appliquant le traitement avec les produits selon l’invention voient une amélioration significative de leur état (moins de pellicules) par rapport à TO (p<0.01). Ces valeurs sont significatives aussi par rapport au placebo (p<0,01 et p<0,05). Ils sont beaucoup moins nombreux à voir une amélioration avec le placebo (40% pour les peaux sèches et 53% pour les peaux grasses ; non significatif dans les 2 cas).
Une très grande proportion (73 à 80%) voit même une disparation des pellicules suite au traitement avec le produit selon l’invention. L’écart avec le panel ayant appliqué un placebo est très net et significatif (p<0.05).
c) Évaluation sur macrophotos (Étude A)
Les pellicules ont été visualisées et évaluées par 8 experts à partir de photos standardisées prises par une caméra dermatoscopique Vivacam™ (Mavig-Visiomed™, Allemagne). Chaque image comprend 1600xl200pixels pour un champ de mesure de 9 x 7mm.
Les photos des volontaires montrant des pellicules clairement visibles et suffisantes à TO ont été sélectionnées pour l’analyse, soit un total de 17 volontaires pour le produit et 17 volontaires pour le placebo (environ 70% du panel). Les photos capturées à T3semaines ont été comparées à celles de TO. Les experts devaient pour chaque photo répondre à la proposition suivante : « le cuir chevelu présente moins de squames à l’issu du traitement ».
On constate sur le panel ayant utilisé les produits selon l’invention que 68% des réponses indiquent une diminution des squames. Ce taux de réponse de 68% est significativement différent de l’ensemble des réponses non positives (8 % Pas d’accord + 24% ni d’accord ni pas d’accord). On constate en outre avantageusement une différence significative par rapport au panel placebo où seulement 35% des réponses sont en faveur d’une amélioration de l’état pelliculaire, les indécis étant presque deux fois plus nombreux par rapport aux produits selon l’invention (46% vs. 24%). d) Évaluation par microscopie confocale (Étude A)
On admet communément que les personnes ayant un état pelliculaire installé ont un épiderme hyperprolifératif et un stratum corneum plus épais bien qu’imparfait. Afin d’évaluer l’effet des produits selon l’invention sur ce paramètre, une mesure de l’épaisseur du stratum a été réalisée avec un microscope confocal laser (Vivascope® 3000 ; Mavig, Allemagne).
La lumière laser émise par cet appareil dans la peau est reflétée différemment selon les structures rencontrées (kératine, mélanine, collagène). Un système optique particulier permet de reconstituer une image nette de ces structures à une profondeur choisie. On obtient ainsi des sections optiques verticales, de l’épiderme et du derme, espacées entre elles de quelques microns de profondeurs.
Lors de cette étude, des acquisitions ont été faites à différentes profondeurs espacées de 2,6 μιη pour imager l’épiderme au complet et plus particulièrement le stratum corneum.
Tableau 10 : Évaluation de l’épaisseur du stratum corneum, sur le cuir chevelu après 3 semaines d’application des produits selon l’invention (n=23) ou des placebos (n=22)
L’analyse des résultats montre une augmentation de l’épaisseur du stratum corneum de 8,1% (p<0,05) après 3 semaines d’utilisation des placebos. En parallèle l’utilisation du produit selon l’invention permet une diminution significative de l’épaisseur du stratum corneum de 13,3%. Cette baisse est aussi significativement différente de ce qui est observé du côté placebo (p<0,01). Ces données semblent donc indiquer une amélioration de la qualité du stratum corneum grâce au produit selon l’invention, les résultats de PIE et d’hydratation ci-dessous confirment ces résultats. 2) Evaluation de la barrière cutanée.
Il est connu que la qualité de la barrière cutanée du cuir chevelu est reliée notamment à une bonne valeur de la perte insensible en eau (ou PIE) et une bonne hydratation.
La mesure de la PIE a été effectuée dans l’étude A, deux mesures d’hydratation ont été effectuées respectivement sur le panel de l’étude A et sur le panel pellicules sèches de l’étude B. a) Mesure de la PIE au Vapomètre (Etude A)
Un repérage précis a été effectué sur le scalp à l’aide de masques en plastique et de repères anatomiques. 9 mesures de PIE (3 par site x 3sites) ont été faites à l’aide du Vapomètre (Delfin Technologies, Finlande) sur les mêmes sites à TO et T3semaines.
Tableau 11 : évaluation de la PIE moyenne sur le cuir chevelu après 3 semaines d’application des produits selon l’invention (n=20) ou des placebos (n=22)
dns : différence non significative
Ces résultats montrent que la valeur de la PIE moyenne augmente de façon non significative de +4,5% suite à l’utilisation des placebos. En parallèle, sur le panel ayant utilisé les produits selon l’invention pendant 3semaines, on note une baisse de 6,9% de la PIE moyenne, significative à p<0,07 vs. TO et significative à p<0,05 vs. placebos. Ces données montrent donc l’effet bénéfique et restructurant des produits selon l’invention sur la barrière cutanée du cuir chevelu. b) Evaluation de l’hydratation du cuir chevelu (Etudes A et B) L’hydratation du cuir chevelu a été évaluée, par impédancemétrie, à l’aide d’un Cornéomètre (C&K, Allemagne) pour le panel à pellicules sèches de l’étude B (Farcoderm) et à l’aide d’un Dermalab muni
d’une sonde à picots (Cortex, Danemark) pour le panel complet de l’étude B. Concernant le Dermalab, il est particulièrement adapté à la mesure de l’hydratation sur le cuir chevelu en raison de la structure de sa sonde munie de 8 broches de 6mm permettant d’une part de mieux accéder au cuir chevelu et d’autre part de diminuer l’accumulation d’eau sur la sonde.
Les mesures au Coméomètre ont été réalisées en triplicate sur la lisière des cheveux alors que les mesures au Dermalab ont été réalisées en triplicate sur 2 sites distincts du cuir chevelu.
Tableau 12 : Evaluation de l’hydratation du cuir chevelu après 1 et 3 semaines d’application des produits selon l’invention ou des placebos. Coméomètre n=15pour les 2 cas; Dermalab : n= 20pour les produits selon l'invention, n = 22 pour les placebos
Ces résultats, obtenus sur deux panels différents, dont un plus spécifiquement « sec », lors de deux études indépendantes et par deux méthodes différentes, montrent que l’application des produits selon l’invention augmente l’hydratation du cuir chevelu. Sur des cuirs chevelus secs, dès 7jours on note une augmentation de +8,2% (p<0,01 vs. placebos) puis de +9% à T3semaines (p<0,01 vs. placebos). En utilisant la méthode de la sonde à picots, les résultats montrent une augmentation de 20,2% (p<0,05 vs. placebos). Ces résultats sont très complémentaires, la différence pouvant venir du panel, de la méthode ou de la sonde. 3) Evaluation du taux de sébum.
Le taux de sébum du cuir chevelu est un critère clé dans l’émergence de l’état pelliculaire. Ce paramètre est également central dans le profil d’une peau grasse. Il a été suivi sur le panel pellicules grasses de l’étude B à l’aide du Sébumètre (C&K, Allemagne) qui mesure de façon directe la sécrétion sébacée par photométrie. La sonde du Sébumètre est constituée d’un miroir sur lequel est apposé un film opaque qui devient plus ou moins transparent en fonction du sébum adsorbé par lui après une
application reproductible sur la peau. Une cellule photoélectrique analyse la transparence du film et permet de déduire un taux de sébum.
Tableau 13 : Evaluation du taux de sébum sur le cuir chevelu après 1 et 3 semaines d’application des produits selon l’invention (n=15) ou des placebos (n=15).
L’application des produits selon l’invention permet une diminution très nette du taux de sébum de -27%, dès la première semaine, qui s’intensifie après 3semaines pour atteindre -34%. Ces diminutions sont hautement significatives par rapport à TO (p<0,01) et par rapport aux placebos (p<0,01). L’état du cuir chevelu des personnes à pellicules grasses a donc été nettement amélioré. 4) Démangeaisons. a) Evaluation des démangeaisons par dermatologue et autoévaluation (Etude B) 44% de la population française déclare avoir un cuir chevelu sensible, et il est démontré par ailleurs que les états pelliculaires entraînent une prévalence environ trois fois plus forte des démangeaisons et irritations.
Après 1 et 3 semaines d’utilisation des produits selon l’invention, par les panels pellicules sèches et grasses, un dermatologue a évalué la fréquence et l’intensité des démangeaisons, sur la base des déclarations des volontaires et selon le tableau suivant :
Il ressort de cette étude : 7jours après l’application des produits selon l’invention, une diminution des démangeaisons, tant sur le cuir chevelu sec que gras est observée (environs -15%, p<0.05). Ces diminutions s’amplifient pour atteindre après 21 jours de traitement -40% (p<0.01 vs. TO etp<0.05 vs. placebos) et cela sur les 2 panels. Les scores de sensation obtenus après 21jours d’application correspondent pratiquement à une absence de démangeaisons. Dans le même temps l’application des
placebos ne provoque quasiment pas de changement. Cette analyse vaut à la fois pour la fréquence et pour l’intensité des démangeaisons.
Dans le même temps, les volontaires ont eux-mêmes évalué la diminution des irritations, des démangeaisons, ainsi que l’effet calmant des traitements. Les résultats confortent l’analyse du dermatologue.
On constate que dans les 2 panels 100% des volontaires ressentent moins de démangeaisons après utilisation des produits selon l’invention. Ce pourcentage tombe à 66% après utilisation des placebos. La variation par rapport aux placebos est significative àp<0,05 pour les 2 panels.
Concernant l’irritation, les résultats sont également en faveur des produits selon l’invention avec 93% (panel pellicules grasses) et 100% (panel pellicules sèches) de diminution contre seulement 80% et 60% pour les placebos. Pour le panel pellicules sèches, cette variation est significative par rapport au panel placebo àp<0,01.
Enfin, les volontaires sont très majoritairement d’accord pour mentionner un effet calmant durable des produits selon l’invention : 80% sur le panel pellicules grasses et 93% sur le panel pellicules sèches alors que les placebos n’entraînent cet effet calmant que sur une plus faible proportion de 53% dans les 2 panels. Pour le panel pellicules sèches, cette variation est significative par rapport au panel placebo à p<0,05. b) Histamine sur cuir chevelu
En parallèle du ressenti des volontaires, nous avons recherché l’histamine dans des squames. L'histamine est une molécule de signalisation du système immunitaire retrouvée aussi dans la peau où elle agit sur certains récepteurs et provoque le prurit (démangeaison de la peau). Des quantités d’histamine deux fois plus importantes ont été observées sur le cuir chevelu des personnes ayant des pellicules, ces quantités baissant très nettement à la suite d’un traitement antipelliculaire efficace. La baisse du niveau de cette molécule permet de prédire et suivre l’apaisement du cuir chevelu.
Pour ce dosage d’histamine, nous avons prélevé, à l’aide d’adhésifs, les squames de personnes ayant nettement un état pelliculaire. Ces prélèvements, reproductibles, ont eu heu sur une ligne allant du milieu du front au cortex, un repérage à l’aide de points anatomiques et de masques a été fait entre T0 et T3semaines. Une fois chargés de squames, ces adhésifs ont été extraits dans un tampon et la quantité d’histamine a été dosée à l’aide d’un kit ELISA. En parallèle, un dosage de la quantité de protéines par la méthode BCA a été effectué pour normaliser les résultats. 43 prélèvements ont été réalisés (3 n’étant pas dosables) sur 20 personnes ayant appliqué pendant 2 lj le traitement placebo (shampooing + solution Leave-on) et sur 23 autres ayant utilisé le traitement avec les produits selon l’invention (shampooing à 2% + solution « Leave-on » à 3% de l’ingrédient contenant l’extrait selon l’invention) avec les formules 1.1 et 1.2 données au § D) Galénique ci-dessus.
Tableau 14 : Modulation de la quantité d’histamine dans des squames, effet des produits selon l’invention ou des placebos.
Les résultats ci-dessus montrent que l’utilisation du traitement du cuir chevelu avec les produits selon l’invention a permis de réduire la quantité d’histamine retrouvée dans les squames. La baisse est importante (-46% par rapport à TO et significative à p<0,01) et significative par rapport aux placébos (-33%, p<0.05). La réduction de cet agent, connu pour causer des démangeaisons confirme les données d’autoévaluation et du dermatologue.
Claims (27)
- REVENDICATIONS1. Utilisation d’un mélange d’au moins deux alkyl-phthalides choisi parmi le sédanénolide, le sédanolide ou le 3-n-butylphtalide, ou d’un extrait de plante comprenant majoritairement ledit mélange, pour le traitement topique cosmétique non thérapeutique de la peau ou du cuir chevelu.
- 2. Utilisation selon la revendication 1, caractérisée en ce que ledit extrait de plante est un extrait de graines d’Apium grctveolens comprenant un mélange d’alkyl-phthalides constitué de sédanénolide, sédanolide et 3-n-butylphthalide.
- 3. Utilisation selon la revendication 2, caractérisée en ce que ledit extrait est un extrait huileux.
- 4. Utilisation selon la revendication 3, caractérisée en ce que ledit extrait est obtenu par une extraction au CO2 supercritique.
- 5. Utilisation selon l’une des revendications 1 à 4, caractérisée en ce que ledit extrait comprend au moins 50% dudit mélange d’alkyl-phthalides.
- 6. Utilisation selon l’une des revendications 1 à 5, caractérisée en ce que ledit mélange d’alkyl-phthalides comprend majoritairement le sédanénolide.
- 7. Utilisation selon la revendication 6, caractérisée en ce que ledit mélange d’alkyl-phthalides comprend au moins 50% de sédanénolide.
- 8. Utilisation selon l’une des revendications 1 à 7, pour un traitement des irritations et/ou démangeaisons du cuir chevelu.
- 9. Utilisation selon l’une des revendications 1 à 8, pour un traitement destiné à limiter la production de sébum de la peau et du cuir chevelu.
- 10. Utilisation selon la revendication 9, pour un traitement des peaux grasses et/ou des pores dilatés.
- 11. Utilisation selon l’une des revendications 1 à 10, pour stimuler la production de collagène, pour un traitement antirides et ridules et pour améliorer les propriétés mécaniques de la peau.
- 12. Utilisation selon l’une des revendications 1 à 11, caractérisée en ce que ledit mélange d’alkylphthalides ou ledit extrait est dilué dans un milieu physiologiquement acceptable.
- 13. Composé alkyl-phthalide ou extrait de plante comprenant majoritairement ledit composé pour un traitement topique antipelliculaire.
- 14. Composé ou extrait selon la revendication 13, caractérisé en ce que ledit composé est choisi parmi le sédanénolide, le sédanolide et le 3-n-butylphthalide ou un mélange d’au moins deux de ces alkylphthalides.
- 15. Composé ou extrait selon la revendication 14, caractérisé en ce que ledit composé est le sédanénolide.
- 16. Composé ou extrait selon l’une des revendications 13 à 15, caractérisé en ce que ledit extrait de plante est un extrait de graines à'Apium graveolens comprenant un mélange d’alkyl-phthalides constitué de sédanénolide, sédanolide et 3-n-butylphthalide.
- 17. Composé ou extrait selon l’une des revendications 13 à 16, caractérisé en ce que ledit extrait est un extrait huileux.
- 18. Composé ou extrait selon l’une des revendications 13 à 17, caractérisée en ce que ledit extrait est obtenu par une extraction au CO2 supercritique.
- 19. Composé ou extrait selon l’une des revendications 13 à 18, caractérisée en ce que ledit extrait comprend au moins 50% dudit mélange d’alkyl-phthalides.
- 20. Composé ou extrait selon l’une des revendications 13 à 19, caractérisée en ce que ledit mélange d’alkyl-phthalides comprend majoritairement le sédanénolide.
- 21. Composé ou extrait selon l’une des revendications 13 à 20, caractérisée en ce que ledit mélange d’alkyl-phthalides comprend au moins 50% de sédanénolide.
- 22. Ingrédient actif cosmétique comprenant dans une matrice physiologiquement acceptable un extrait huileux comprenant un mélange d’alkyl-phthalides pouvant être obtenu par extraction au CO2 supercritique de graines à'Apium graveolens.
- 23. Ingrédient selon la revendication 22, caractérisé en ce que ledit extrait est obtenu par une extraction au CO2 supercritique de graines broyées entre 75 et 300 bars de pression et entre 30 et 80°C.
- 24. Ingrédient selon la revendication 22 ou 23, caractérisé en ce que ledit extrait comprend au moins 50% d’alkyl-phthalides.
- 25. Ingrédient selon l’une des revendications 22 à 24, caractérisé en ce que ledit mélange d’alkyl-phthalides comprend majoritairement le sédanénolide.
- 26. Ingrédient selon la revendication 25, caractérisé en ce que ledit mélange d’alkyl-phthalides comprend au moins 50% de sédanénolide.
- 27. Composition cosmétique comprenant au moins l’ingrédient actif selon l’une quelconque des revendications 22 à 26 dans un excipient physiologiquement acceptable.
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