FR2971940A1

FR2971940A1 - EXTRACT OF HIPPOPHAE PALM AND USE THEREOF IN A COSMETIC COMPOSITION

Info

Publication number: FR2971940A1
Application number: FR1100595A
Authority: FR
Inventors: Alain Meybeck
Original assignee: AM PHYTO CONSEIL
Current assignee: AM PHYTO CONSEIL
Priority date: 2011-02-28
Filing date: 2011-02-28
Publication date: 2012-08-31
Anticipated expiration: 2031-02-28
Also published as: CN103501761A; WO2012117170A4; WO2012117170A3; WO2012117170A2; FR2971940B1

Abstract

La présente invention est relative à un extrait de rameaux, notamment d'hiver, d'Hippophae en particulier d'Hippophae rhamnoides, ainsi qu'à l'utilisation d'un tel extrait dans une composition cosmétique.The present invention relates to an extract of twigs, in particular of winter, Hippophae in particular Hippophae rhamnoides, and the use of such an extract in a cosmetic composition.

Description

La présente invention est relative à l'utilisation d'un extrait de rameaux d'Hippophae, en particulier d'Hippophae rhamnoides dans une composition cosmétique pour atténuer la pigmentation de la peau, des poils et des cheveux. La coloration de la peau ainsi que des poils et des cheveux, est due à des pigments bruns appelés mélanines et secrétés par des cellules spécialisées appelées mélanocytes suivant un processus biochimique complexe faisant intervenir plus de 90 gènes (Tadokoro T., dans Mechanisms of Suntanning, édité par J-P Ortonne et R Ballotti, Martin Dunitz, 2002, p .67) . Dans beaucoup de cultures, et notamment en Asie, on préfère avoir la peau 10 la plus claire possible, en tout cas sans taches pigmentaires. C'est pourquoi l'industrie cosmétique commercialise un grand nombre de produits destinés à empêcher la peau de bronzer, ou à l'éclaircir, ou à en atténuer les taches. En outre, il existe aussi des préparations dermatologiques destinées à atténuer les taches de pigmentation telles que les éphélides (taches de rousseur) et 15 les chloasmas (masques de grossesse), ou à éclaircir la peau autour des taches blanches de vitiligo pour qu'elles se voient moins. Ainsi, on connaît des substances qui permettent de diminuer la synthèse de mélanine par les mélanocytes, et donc d'atténuer la pigmentation cutanée telles que : l'hydroquinone et ses dérivés comme l'arbutine, l'acide kojique, l'acide azélaique, 20 l'acide octadécènedidique, certains extraits de plantes comme Morus alba ou Glycyrrhiza glabra, l'acide ascorbique (vitamine C) et ses dérivés comme le phosphate d'ascorbyle ou le phosphate double de vitamine C et de vitamine E, certains dérivés de cystéine. Un exemple d'agent de dépigmentation et/ou blanchissant de la peau et/ou 25 des phanères est décrit dans le document FR-2.848.846-A: il s'agit en l'occurrence de dérivés de l'acide ascorbique. Un autre exemple est décrit dans le document FR-2.841.550-A : il s'agit là de molécules dérivées de la tyramine. Un autre exemple est décrit dans le document FR-2.886.843-A : il s'agit là 30 d'extraits de Griffonia. Mais les substances ci-dessus sont quelquefois cytotoxiques pour les mélanocytes, et/ou insuffisamment efficaces, et/ou trop coûteuses et/ou difficiles à utiliser : par exemple, les compositions à base d'hydroquinone sont actuellement interdites à la vente libre. 35 Aussi un des buts de la présente invention est-il relatif à l'utilisation d'une composition cosmétique ou dermatologique dont le principe actif ne présente pas les inconvénients exposés ci-dessus. Un autre but de l'invention est de fournir une telle composition présentant une meilleure efficacité et à un coût compétitif. The present invention relates to the use of an extract of Hippophae branches, in particular Hippophae rhamnoides in a cosmetic composition for attenuating the pigmentation of the skin, hair and hair. The coloration of the skin as well as the hair and the hair, is due to brown pigments called melanins and secreted by specialized cells called melanocytes following a complex biochemical process involving more than 90 genes (Tadokoro T., in Mechanisms of Suntanning, edited by JP Ortonne and R Ballotti, Martin Dunitz, 2002, p .67). In many cultures, and particularly in Asia, it is preferred to have the skin as light as possible, in any case without pigment spots. This is why the cosmetics industry markets a large number of products intended to prevent the skin from tanning, or to lighten it, or to reduce stains. In addition, there are also dermatological preparations intended to reduce pigmentation spots such as ephelides (freckles) and chloasmas (pregnancy masks), or to lighten the skin around the white spots of vitiligo so that they see each other less. Thus, there are known substances which make it possible to reduce melanin synthesis by melanocytes, and thus to reduce cutaneous pigmentation, such as: hydroquinone and its derivatives such as arbutin, kojic acid, azelaic acid, Octadecenedidic acid, certain plant extracts such as Morus alba or Glycyrrhiza glabra, ascorbic acid (vitamin C) and its derivatives such as ascorbyl phosphate or vitamin C double phosphate and vitamin E, certain cysteine derivatives. . An example of depigmentation agent and / or whitening of the skin and / or superficial body growths is described in document FR-2.848.846-A: these are derivatives of ascorbic acid. Another example is described in document FR-2.841.550-A: these are molecules derived from tyramine. Another example is described in document FR-2.886.843-A: these are extracts of Griffonia. But the above substances are sometimes cytotoxic for melanocytes, and / or insufficiently effective, and / or too expensive and / or difficult to use: for example, compositions containing hydroquinone are currently prohibited over-the-counter. One of the aims of the present invention is therefore the use of a cosmetic or dermatological composition whose active principle does not have the disadvantages described above. Another object of the invention is to provide such a composition having a better efficiency and at a competitive cost.

Ces buts, ainsi que d'autres qui apparaîtront par la suite, sont atteints par l'utilisation d'un extrait de Hippophae dans une composition cosmétique ou dermatologique pour atténuer la pigmentation de la peau, des poils ou des cheveux. Les extraits végétaux sont souvent utilisés dans des compositions cosmétiques ou dermatologiques. These and other goals which will become apparent are achieved by the use of a Hippophae extract in a cosmetic or dermatological composition to ameliorate the pigmentation of skin, hair or hair. Plant extracts are often used in cosmetic or dermatological compositions.

En dehors des molécules nécessaires au métabolisme des végétaux tels que les sucres qui stockent l'énergie, les alpha-aminoacides nécessaires à l'élaboration des protéines, le glucose qui sert à la synthèse de la cellulose constitutive des parois cellulaires ...il y a dans les plantes des métabolites secondaires de nature très variable selon les familles et les genres. Apart from the molecules necessary for the metabolism of plants such as the sugars that store energy, the alpha-amino acids necessary for the elaboration of proteins, the glucose which serves for the synthesis of the cell constitutive cellulose ... there In plants there are secondary metabolites of very variable nature according to families and genera.

Les métabolites secondaires jouent souvent un rôle protecteur dans les plantes contre les agressions bactériennes et fongiques, ou contre les prédateurs tels que les insectes ou les mammifères herbivores. Ce sont des molécules complexes qui présentent des activités biologiques recherchées en pharmacie ou dans le domaine phytosanitaire. Secondary metabolites often play a protective role in plants against bacterial and fungal attack, or against predators such as insects or herbivorous mammals. These are complex molecules that present biological activities sought in pharmacy or in the phytosanitary field.

Par ailleurs les métabolites secondaires peuvent avoir des effets intéressants sur les cellules de la peau recherchés pour l'élaboration de formulations cosmétiques plus performantes. La composition en métabolites secondaires varie selon les saisons, et selon les parties de la plante, racine, feuille, branche, fleur, fruit, graine... In addition, the secondary metabolites can have interesting effects on the skin cells sought for developing more effective cosmetic formulations. The composition of secondary metabolites varies according to the seasons, and according to the parts of the plant, root, leaf, branch, flower, fruit, seed ...

Ces molécules actives sont extraites des plantes en fonction de leurs propriétés de solubilité dans les solvants de nature plus ou moins polaire. Ainsi la polarité du solvant conditionne le type de molécules extraites et donc l'activité des extraits. D'une façon générale un extrait méthanolique ou hydro-éthanolique contient 30 la plupart des métabolites secondaires polaires. De plus, les extraits bruts peuvent être fractionnés en utilisant des solvants de polarité différente. Ainsi, un butanol pourra extraire les molécules les moins polaires d'un extrait brut aqueux ou méthanolique ou hydro-éthanolique. Les extraits bruts ou les fractions d'extraits peuvent être caractérisés par 35 chromatographie liquide sous haute pression (HPLC). Chaque molécule est caractérisée par un pic d'élution à un temps spécifique pour une colonne donnée, dans des conditions données d'élution (solvants et gradient). On peut également caractériser un extrait ou une fraction d'extrait par chromatographie sur couche mince (TLC). Cette technique permet de caractériser des molécules de structure complète encore inconnue, par la distance d'élution de chacune d'elle sur la plaque (Rf) et par leur révélation par des réactifs plus ou moins spécifiques d'une famille chimique donnée. Le genre Hippophae de la famille des Elaéagnacées, comprend notamment les espèces H.goniocarpa, H.gyantsensis, H.litangensis, H.neurocarpa, H.rhamnoides, H.salicifolia, H.tibetana (www.NCBl.nlm.nih.gov/Taxonomy/Browser). Hippophae rhamnoides est un arbuste buissonnant épineux à feuilles caduques très commun dans le nord de l'Asie et en Europe. Dans les régions désertiques, il sert de nourriture aux animaux domestiques. Les anciens grecs l'ont baptisé « Hippos phaos » ce qui veut dire « cheval luisant », parce que les chevaux nourris de ses feuilles ou rameaux avaient le poil brillant (Production et utilization de l'argousier Hippophae rhamnoides L., T. Li et T. Beveridge, Les Presses scientifiques du CNRC, Ottawa 2004). On l'appelle en français Argousier. Il pousse en France à l'état naturel dans les Alpes du Sud et dans le Nord-Ouest sur les rivages sablonneux de la Manche en Picardie et en Flandre (Pierre Lieuthaghi, Le livre des arbres arbustes et arbrisseaux. Robert Morel ed. 1969). Il est aussi commun sur le littoral en Belgique et en Hollande. II se cultive facilement pour la production des baies ou comme buisson ornemental. En anglais il se nomme « Sea Buckthorn », en allemand « Sanddorn », en chinois « Sha Ji » et en russe « Oblepika ». La Chine, la Mongolie et la Russie comptent au total plus de 800 000 ha de 25 peuplements naturels d'Hippophae rhamnoides et plus de 300 000 à 500 000 ha de cultures de cet arbuste (T. Li et T. Beveridge déjà cités). Les racines d'H.rhamnoides (H. r.) présentent des nodosités dues à une bactérie Actynomycete du genre Frankia symbiotique et fixatrice de l'azote atmosphérique (E. Small et al, Biodiversity, 2002, 3, 25-27). 30 Les fruits ou baies d'H.rhamnoides sont consommés tels quels ou en jus, en confitures, comme condiment, ou sous d'autres formes, en Russie, en Mongolie, en Chine aussi bien qu'en Europe, et au Canada où l'espèce a été introduite pour fixer les sols et comme culture agro-alimentaire. La teneur des baies d' H. r. en Vitamine C est extrêmement élevée. Une autre particularité de ces fruits est que leur pulpe, 35 comme celle de l'olive, renferme une huile. Une autre huile de composition en acides gras différente peut être extraite des graines. Les deux huiles contiennent du tocophérol et des caroténoïdes qui donnent aux baies leur couleur jaune, orange ou rouge (L'Argousier - Une culture polyvalente et prometteuse pour le Saskatchewan. Agriculture et Agroalimentaire Canada. 2007. http//www4.agr.gc.ca). These active molecules are extracted from plants according to their solubility properties in solvents of a more or less polar nature. Thus the polarity of the solvent conditions the type of molecules extracted and therefore the activity of the extracts. In general, a methanolic or hydroethanolic extract contains most of the polar secondary metabolites. In addition, the crude extracts can be fractionated using solvents of different polarity. Thus, a butanol can extract the less polar molecules of a crude aqueous or methanolic or hydro-ethanolic extract. The crude extracts or extract fractions can be characterized by high pressure liquid chromatography (HPLC). Each molecule is characterized by an elution peak at a specific time for a given column, under given elution conditions (solvents and gradient). An extract or an extract fraction can also be characterized by thin layer chromatography (TLC). This technique makes it possible to characterize molecules of complete structure still unknown, by the elution distance of each of them on the plate (Rf) and by their revelation by more or less specific reagents of a given chemical family. The genus Hippophae of the family Elaeagnaceae includes the species H.goniocarpa, H.gyantsensis, H.litangensis, H.neurocarpa, H.rhamnoides, H.salicifolia, H.tibetana (www.NCBl.nlm.nih.gov / Taxonomy / Browser). Hippophae rhamnoides is a deciduous bushy deciduous shrub very common in northern Asia and Europe. In desert areas, it serves as food for domestic animals. The ancient Greeks named it "Hippos phaos" which means "shining horse", because the horses fed on its leaves or twigs had shiny hair (Production and use of sea buckthorn Hippophae rhamnoides L., T. Li and T. Beveridge, NRC Research Press, Ottawa 2004). It is called in French Argousier. It grows in France in its natural state in the Southern Alps and in the North-West on the sandy shores of the English Channel in Picardy and Flanders (Pierre Lieuthaghi, The book of shrub and shrub trees, Robert Morel, 1969) . It is also common on the coast in Belgium and Holland. It is easily grown for the production of berries or as an ornamental bush. In English it is called "Sea Buckthorn", in German "Sanddorn", in Chinese "Sha Ji" and in Russian "Oblepika". China, Mongolia and Russia together account for more than 800 000 ha of 25 natural stands of Hippophae rhamnoides and more than 300 000 to 500 000 ha of this shrub (T. Li and T. Beveridge mentioned above). The roots of H. rhamnoides (H. r.) Show nodosities due to Actiomyomycete bacteria of the genus Frankia symbiotic and fixing atmospheric nitrogen (E. Small et al, Biodiversity, 2002, 3, 25-27). 30 The fruits or berries of H. rhamnoides are eaten as such or in juice, jam, condiment, or other forms, in Russia, Mongolia, China as well as in Europe, and in Canada where the species was introduced to fix soil and as agri-food culture. The content of berries of H. r. in Vitamin C is extremely high. Another peculiarity of these fruits is that their pulp, like that of the olive, contains an oil. Another oil of different fatty acid composition can be extracted from the seeds. Both oils contain tocopherol and carotenoids that give the berries their yellow, orange or red color (Sea Buckthorn - A Versatile and Promising Crop for Saskatchewan, Agriculture and Agri-Food Canada, 2007. http://www4.agr.gc. it).

Lorsque H.rhamnoides est cultivé pour la production de fruits, il est conseillé pour optimiser leur nombre et leur qualité, de tailler les branches en hiver. Il est _ déconseillé de couper les branches en été ou à la fin de l'automne pour éviter When H.rhamnoides is grown for fruit production, it is advisable to optimize their number and quality, to prune branches in winter. It is not recommended to cut branches in summer or late fall to avoid

l'introduction de maladies par les plaies de taille (Production et utilisation de l'argousier. Hippophae rhamnoides. Li T. et Beveridge T., 2004, Conseil national de 10 recherches Canada). the introduction of diseases by wounds (Production and use of sea buckthorn, Hippophae rhamnoides, Li T. and Beveridge T., 2004, National Research Council Canada).

En Chine du nord, H. rhamnoides a été semé par avion ou hélicoptère sur de vastes étendues du plateau de loess (Mongolie Intérieure, Shanxi) pour enrichir et fixer les sols ainsi que pour développer une activité économique autour de la valorisation des fruits. Mais il sert aussi de bois de chauffe et de fourrage pour les In northern China, H. rhamnoides was sown by plane or helicopter over large areas of the Loess Plateau (Inner Mongolia, Shanxi) to enrich and fix soils and to develop economic activity around fruit enhancement. But it also serves as firewood and fodder for

15 animaux domestiques (moutons, bovins...) dont la santé s'en trouve améliorée (prise de poids, meilleurs aspect du poil, meilleure résistance aux maladies) (Ruan Chengjiang et Li Daiqiong, Function and benefit of Hippophae rhamnoides L. Improving eco-environment of loess plateau of China.12th ISCO Conference, Beijing, 2002). 15 animals (sheep, cattle ...) whose health is improved (weight gain, better appearance of the hair, better resistance to disease) (Ruan Chengjiang and Li Daiqiong, Function and benefit of Hippophae rhamnoides L. Improving eco-environment of loess plateau of China.12th ISCO Conference, Beijing, 2002).

20 Dans la région aride et froide du Ladakh en Inde, les chameaux, yaks, moutons, chèvres...survivent à l'hiver grâce aux Hippophae qui constituent alors le seul fourrage disponible (Tsering Stobdan, DRDO Science Spectrum, mai 2008, 255-7). In the arid and cold region of Ladakh in India, camels, yaks, sheep, goats ... survive the winter thanks to Hippophae, which is the only forage available (Tsering Stobdan, DRDO Science Spectrum, May 2008, 255 -7).

Dans les pâturages du Mustang au Népal, les bergers conduisent leur bétail In the pastures of Mustang in Nepal, shepherds drive their cattle

25 au début de l'hiver pour qu'ils broutent les feuilles d'Hippophae tibetana. Les bergers de Lomanthang ont remarqué que leurs chevaux malades retrouvent leur poids et un poil brillant si on leur donne à manger des feuilles et des branches tendres de Hippophae tibetana ( Khilendra Gurung and Vimal Gupta, Traditional uses and commercial utilization of seabuckthorn ,Hippophae L., in Mustang district, Nepal. 30 2008). 25 early in the winter to graze the leaves of Hippophae tibetana. The shepherds of Lomanthang have noticed that their sick horses regain their weight and a shiny coat if they are fed soft leaves and branches of Hippophae tibetana (Khilendra Gurung and Vimal Gupta, Hippophae L., traditional uses and commercial utilization of seabuckthorn. , in Mustang district, Nepal, 30th 2008).

Hippophae rhamnoides L. pousse à l'état sauvage en Russie dans les républiques sibériennes de l'Altai, de Bouriatie ainsi que de Tuva, et des cultures ont été développées dans de nombreuses autres régions pour l'exploitation du fruit en agro-alimentaire, médecine et cosmétique (Terekhina NV, Interactive Agricultural Ecological Atlas of Russia and Neighboring Countries, 2003-2009. http://www.agroatlas.ru). Les utilisations des fruits et des feuilles d' Hippophae rhamnoides sont multiples en alimentaire, en médecine, et en cosmétique (E . Small déjà cité). Hippophae rhamnoides L. grows wild in Russia in the Siberian republics of Altai, Buryatia and Tuva, and crops have been developed in many other areas for the exploitation of fruit in the agri-food industry, medicine and cosmetics (Terekhina NV, Interactive Agricultural Ecological Atlas of Russia and Neighboring Countries, 2003-2009, http://www.agroatlas.ru). The uses of the fruits and leaves of Hippophae rhamnoides are numerous in food, medicine, and cosmetics (E. Small already cited).

En alimentaire, les fruits qui sont extrêmement riches en Vitamine C mais un peu trop acides pour être consommés tels quels, servent à faire des jus (purs ou en mélange), des gelées, des marmelades, des sauces et des liqueurs. En médecine traditionnelle, Hippophae est connue depuis fort longtemps. Cette plante est citée dans le livre Tibetain rGyud bzi datant de 618-907 A.D. (Lu Rongsen, Seabuckthorn, ICIMOD Paper N°20, Kathmandu, Nepal,1992) et une représentation très fidèle en est donnée dans le « Tibetan Medicinal Paintings. Illustrations to the Blue Berry treatise of Sangye Gyamtso (1653-1705)" de Gyurne Dorje et Fernand Meyer (Serindia Publications, 1992). Elle était utilisée notamment comme expectorant et fluidifiant du sang. In food, fruits that are extremely rich in Vitamin C but a little too acidic to be consumed as such, are used to make juices (pure or mixed), jellies, marmalades, sauces and liqueurs. In traditional medicine, Hippophae has been known for a long time. This plant is quoted in the Tibetan rGyud bzi book from 618-907 A.D. (Lu Rongsen, Seabuckthorn, ICIMOD Paper No. 20, Kathmandu, Nepal, 1992) and a very faithful representation is given in the Tibetan Medicinal Paintings. Illustrations to the Blue Berry treatise of Sangye Gyamtso (1653-1705) "by Gyurne Dorje and Fernand Meyer (Serindia Publications, 1992), used as an expectorant and blood thinning agent.

En médecine moderne, depuis 1966, l'huile d'Hippophae (nom vernaculaire Russe Oblipika) est la base de nombreux médicaments dans les pays de l'ancienne URSS destinés notamment à soigner la peau et les muqueuses (Lu Rongsen déjà cité). C'est surtout l'huile du fruit qui est utilisée. En Chine la production d'huile d'Hippophae a commencé en 1988, et des comprimés de Faavones des fruits d'Hippophae ont été lancés en 1986 pour le traitement de maladies coronariennes (Lu Rongsen déjà cité). Les principaux produits industriels tirés des Hippophae sont le jus du fruit obtenu par pressurage, la crème d'huile de pulpe obtenue par centrifugation du jus, l'huile de graine obtenue par extraction à l'hexane, les flavones extraites à l'alcool des peaux de fruits résultant de la séparation du jus et des graines (Li et Beveridge déjà cités). Les feuilles sont séchées en Chine pour faire des tisanes. En Cosmétique on utilise principalement les huiles de pulpe ou de graine pour protéger la peau, notamment contre le vieillissement (Li et Beveridge déjà cités). Ces huiles sont coûteuses car la cueillette des fruits d'Hippophae pose des problèmes en raison de leur petite taille et de leur fragilité (Li et Beveridge déjà cités). Ainsi le document JP-1238511-A décrit un cosmétique contenant l'huile extraite du péricarpe de Hippophae rhamnoides. Le document FR-2840808-A1 décrit une composition cosmétique, dermatologique ou pharmaceutique contenant une fraction hydrophile de fruit de 35 Hippophae rhamnoides. In modern medicine, since 1966, Hippophae oil (Russian vernacular name Oblipika) is the basis of many drugs in the countries of the former USSR intended in particular to heal the skin and mucous membranes (Lu Rongsen already cited). It's mostly the fruit oil that is used. In China production of Hippophae oil began in 1988, and Hippophae fruit Faavone tablets were launched in 1986 for the treatment of coronary heart disease (Lu Rongsen already cited). The main industrial products derived from Hippophae are the juice of the fruit obtained by pressing, the cream of pulp oil obtained by centrifugation of the juice, the seed oil obtained by extraction with hexane, the flavones extracted with the alcohol of the fruit peels resulting from the separation of the juice and seeds (Li and Beveridge already mentioned). The leaves are dried in China to make herbal teas. In cosmetics, we mainly use pulp or seed oils to protect the skin, especially against aging (Li and Beveridge already mentioned). These oils are expensive because the picking of Hippophae fruits is problematic because of their small size and fragility (Li and Beveridge already mentioned). Thus, JP-1238511-A describes a cosmetic containing the oil extracted from the pericarp of Hippophae rhamnoides. The document FR-2840808-A1 describes a cosmetic, dermatological or pharmaceutical composition containing a hydrophilic fraction of fruit of Hippophae rhamnoides.

Le document FR-2840809-A1 décrit également une composition cosmétique, dermatologique ou pharmaceutique contenant une fraction hydrophile de fruit de Hippophae rhamnoides, plus particulièrement pour la prévention ou le traitement du derme. The document FR-2840809-A1 also describes a cosmetic, dermatological or pharmaceutical composition containing a hydrophilic fraction of Hippophae rhamnoides fruit, more particularly for the prevention or treatment of the dermis.

Mais aucun document antérieur ne mentionne l'obtention d'extraits de rameaux de Hippophae pour la réalisation de compositions cosmétiques destinées à atténuer la pigmentation de la peau, des poils ou des cheveux. Or il a été découvert de façon surprenante comme le montre la description des exemples qui vont suivre, que des extraits par un solvant polaire de rameaux d'hiver de Hippophae rhamnoides (Hf.) inhibent la biosynthèse des pigments mélanine par les cellules spécialisées de la peau (mélanocytes). Par rameaux d'hiver, on entend des branches ou extrémités de branches prélevées sur des Hippophae ayant perdu leurs feuilles, ou n'ayant pas encore de feuilles. La période de récolte adéquate dépend évidemment de la latitude et de l'altitude du lieu de collecte ainsi que des conditions climatiques. However, no prior document mentions obtaining extracts of Hippophae branches for the production of cosmetic compositions intended to attenuate the pigmentation of the skin, hair or hair. It has surprisingly been found, as is shown by the description of the examples which follow, that extracts with a polar solvent of winter branches of Hippophae rhamnoides (Hf.) Inhibit the biosynthesis of melanin pigments by the specialized cells of the skin (melanocytes). Winter twigs are branches or ends of branches taken from Hippophae that have lost leaves or have no leaves. The appropriate harvest period obviously depends on the latitude and altitude of the collection site as well as the climatic conditions.

Exemple 1 . Extraction de branches d' Hippophae rhamnoides Kr. Des jeunes branches de Hippophae rhamnoides ont été collectées en février dans les dunes côtières aux Pays Bas. Ces rameaux (rameaux d'hiver) n'avaient pas de feuilles, portaient des bourgeons, et étaient pauvres en bois. Une portion de 300g de ce matériel végétal a été séché par lyophilisation, ce qui a donné 147g de produit sec qui a été broyé en une poudre de environ 100 mesh. 140g de cette poudre ont été extraits pendant une nuit par 700ml de méthanol. Example 1 Extraction of branches of Hippophae rhamnoides Kr. Young branches of Hippophae rhamnoides were collected in February in the coastal dunes in the Netherlands. These twigs (winter twigs) had no leaves, had buds, and were poor in wood. A 300g portion of this plant material was dried by lyophilization to yield 147g of dry product which was ground to a powder of about 100 mesh. 140 g of this powder were extracted overnight with 700 ml of methanol.

Après filtration, l'extrait brut méthanolique a été évaporé à sec à l'évaporateur rotatif, puis repris par 500ml d'eau. La suspension obtenue a alors été extraite successivement par 3 portions de 200ml de 2-butanol. Ces extraits butanoliques ont été rassemblés, puis évaporés à l'évaporateur rotatif. Le résidu a été gelé, puis lyophilisé pour donner la fraction butanolique. After filtration, the crude methanol extract was evaporated to dryness on a rotary evaporator and then taken up in 500 ml of water. The suspension obtained was then extracted successively with 3 portions of 200 ml of 2-butanol. These butanolic extracts were combined and then evaporated on a rotary evaporator. The residue was frozen and then lyophilized to give the butanol fraction.

La phase aqueuse restante a également été passée à l'évaporateur rotatif, et le résidu obtenu a été également lyophilisé pour donner la fraction aqueuse. On a ainsi obtenu 13,7g de fraction butanolique et 19,2g de fraction aqueuse. L'extrait brut ainsi que les fractions butanolique et aqueuse ont été soumis à des analyses par chromatographie liquide HPLC sur colonne Phenomex Luna C18 avec un gradient linéaire d'acétonitrile dans une solution aqueuse de TFA à 0,01 %, ainsi qu'à des analyses par chromatographie sur couche mince (TLC) éluée avec le mélange acétate d'éthyle-acide acétique-acide formique-eau (70-8-8-18 en volumes). Les plaques de TLC révélées avec les UV à 254 et 366 nm ainsi que par le réactif anisaldéhyde-acide sulfurique, montrent que les fractions butanolique et aqueuse sont assez similaires, mais que le composé principal de Rf voisin de 0,50 (révélé à l'anisaldéhyde) est plus important dans la fraction aqueuse. The remaining aqueous phase was also rotovapped, and the resulting residue was also lyophilized to give the aqueous fraction. 13.7 g of butanol fraction and 19.2 g of aqueous fraction were thus obtained. The crude extract as well as the butanolic and aqueous fractions were analyzed by HPLC liquid chromatography on a Phenomex Luna C18 column with a linear gradient of acetonitrile in an aqueous solution of 0.01% TFA, as well as with Thin layer chromatography (TLC) analyzes eluted with ethyl acetate-acetic acid-formic acid-water (70-8-8-18 by volume). TLC plates revealed with UV at 254 and 366 nm as well as with the anisaldehyde-sulfuric acid reagent, show that the butanolic and aqueous fractions are quite similar, but that the main compound of Rf close to 0.50 (revealed in FIG. anisaldehyde) is more important in the aqueous fraction.

Exemple 2 . Etude de l'activité des extraits de Hf. sur la synthèse de pigments mélanine par les cellules cutanées. Example 2 Study of the activity of the extracts of Hf. on the synthesis of melanin pigments by cutaneous cells.

On étudie l'action des fractions butanolique et aqueuse de l'extrait de H.r. obtenues à l'exemple 1 sur la biosynthèse de la mélanine par les cellules de la peau. La concentration maximum testée pour chaque fraction a été choisie en fonction des résultats d'un essai préalable de cytotoxicité. On cultive des mélanocytes épidermiques humains normaux pendant 10 jours en absence et en présence de quantités non cytotoxiques de ces fractions. On évalue la quantité de pigments mélaniniques par extraction à la soude 0,5 N suivie d'une mesure de densité optique. a) - Effet de la fraction butanol. La fraction butanol aux concentrations de 0,0004 0,002 ; et 0,01 mg/ml n'a 20 pas entraîné de diminution significative de la quantité de mélanine produite par les mélanocytes. b) - Effet de la fraction aqueuse. La fraction aqueuse aux concentrations de 0,0002 ; 0,001 ; et 0,005 mg/ml, a entraîné une diminution significative et dose-dépendante de la quantité de mélanine 25 produite par les mélanocytes qui passe respectivement à 990/o du témoin, 94% du témoin (p inférieur à 0,01) et 87% du témoin (p inférieur à 0,01). De cet exemple, il apparaît qu'un extrait de branches de Hippophae rhamnoides a une action significative sur la production de pigments mélanine par les cellules cutanées. 30 En conséquence, on peut réaliser des compositions cosmétiques ou dermatologiques ayant pour but d'atténuer la pigmentation de la peau, des poils et des cheveux. Quelques exemples, n'ayant aucun caractère limitatif, de telles compositions seront donnés ci-après. 35 s Exemple 3. Extraction de branches d'Hippophae rhamnoides. De jeunes branches d'Hf. ont été collectées en avril (rameaux d'hiver) dans les dunes côtières aux Pays Bas. On a choisi des rameaux n'ayant pas encore de feuilles, portant des bourgeons, et pauvres en bois. Une portion de 327g de ce matériel végétal a été séchée par lyophilisation, ce qui a donné 127g de produit sec qui a été broyé en une poudre de environ 100 mesh. 126g de cette poudre ont été extraits sous ultrasonication, pendant 30 mn, Io par 630ml d'éthanol à 70%. Après filtration, une nouvelle portion de 1000ml d'éthanol à 700/0 a été rajoutée sur la poudre et laissée pendant la nuit. Après filtration, ces extraits bruts éthanoliques ont été rassemblés, et évaporés à sec à l'évaporateur rotatif, puis repris par 400ml d'eau. La suspension obtenue a alors été extraite successivement par 3 portions de 160ml de 2-butanol. 15 Ces extraits butanoliques ont été rassemblés, puis évaporés à l'évaporateur rotatif. Le résidu a été gelé, puis lyophilisé pour donner la fraction butanolique. La phase aqueuse restante a également été passée à l'évaporateur rotatif, et le résidu obtenu a été également lyophilisé pour donner la fraction aqueuse. On a ainsi obtenu 11,6 g de fraction butanolique et 16,6 g de fraction 20 aqueuse. L'extrait brut ainsi que les fractions butanolique et aqueuse ont été soumis à des analyses par chromatographie liquide HPLC sur colonne Phenomex Luna C18 avec un gradient linéaire d'acétonitrile dans une solution aqueuse de TFA à 0,010/0, ainsi que des analyses par chromatographie sur couche mince TLC éluée avec le 25 mélange acétate d'éthyle-acide acétique-acide formique-eau (70-8-8-18 en volumes). Les plaques de TLC révélées avec les UV à 254 et 366 nm ainsi que par les réactifs anisaldéhyde-acide sulfurique, chlorure ferrique-acide perchlorique (Salkowski), ninhydrine, et p-diméthylaminobenzaldéhyde (Ehrlich), montrent que les fractions butanolique et aqueuse présentent des différences dans la zone des faibles 30 Rf. Le composé principal de Rf 0,47 ainsi que d'autres bandes de Rf 0,58 ; 0,55 ; 0,41 ; révélées au FeCl3 (qui réagit avec les groupements indole), et à la ninhydrine (qui réagit avec les groupements amine) pourrait être un composé de type indoleamine. The action of the butanolic and aqueous fractions of H.r. obtained in Example 1 on the biosynthesis of melanin by the cells of the skin. The maximum concentration tested for each fraction was chosen based on the results of a previous cytotoxicity test. Normal human epidermal melanocytes were cultured for 10 days in the absence and in the presence of non-cytotoxic amounts of these fractions. The quantity of melanin pigments is evaluated by extraction with 0.5 N sodium hydroxide followed by an optical density measurement. a) - Effect of the butanol fraction. The butanol fraction at concentrations of 0.0004 0.002; and 0.01 mg / ml did not result in a significant decrease in the amount of melanin produced by the melanocytes. b) - Effect of the aqueous fraction. The aqueous fraction at concentrations of 0.0002; 0.001; and 0.005 mg / ml, resulted in a significant and dose-dependent decrease in the amount of melanin produced by melanocytes which rose to 990 / o of the control, 94% of the control (p less than 0.01) and 87%, respectively. of the control (p less than 0.01). From this example, it appears that an extract of Hippophae rhamnoides branches has a significant effect on the production of melanin pigments by cutaneous cells. As a result, cosmetic or dermatological compositions can be made for the purpose of attenuating the pigmentation of skin, hair and hair. Some examples, having no limiting character, such compositions will be given below. 35 s Example 3. Extraction of Hippophae rhamnoides branches. Young branches of Hf. were collected in April (winter shoots) in coastal dunes in the Netherlands. Shoots with no leaves, budded, and poor in wood were chosen. A 327g portion of this plant material was dried by lyophilization to give 127g of dry product which was ground into a powder of about 100 mesh. 126 g of this powder were extracted under ultrasonication, for 30 minutes, Io by 630 ml of 70% ethanol. After filtration, a new portion of 1000 ml of ethanol at 700/0 was added to the powder and left overnight. After filtration, these crude ethanolic extracts were combined and evaporated to dryness on a rotary evaporator and then taken up in 400 ml of water. The suspension obtained was then extracted successively with 3 portions of 160 ml of 2-butanol. These butanolic extracts were combined and then evaporated on a rotary evaporator. The residue was frozen and then lyophilized to give the butanol fraction. The remaining aqueous phase was also rotovapped, and the resulting residue was also lyophilized to give the aqueous fraction. 11.6 g of butanol fraction and 16.6 g of aqueous fraction were thus obtained. The crude extract as well as the butanolic and aqueous fractions were subjected to analyzes by HPLC liquid chromatography on a Phenomex Luna C18 column with a linear gradient of acetonitrile in an aqueous solution of TFA at 0.010 / 0, as well as analyzes by chromatography. TLC thin layer eluted with ethyl acetate-acetic acid-formic acid-water (70-8-8-18 by volume). TLC plates revealed with UV at 254 and 366 nm as well as by the reagents anisaldehyde-sulfuric acid, ferric chloride-perchloric acid (Salkowski), ninhydrin, and p-dimethylaminobenzaldehyde (Ehrlich), show that the butanolic and aqueous fractions exhibit differences in the area of weak Rf. The main compound of Rf 0.47 as well as other bands of Rf 0.58; 0.55; 0.41; revealed to FeCl3 (which reacts with indole groups), and ninhydrin (which reacts with amine groups) could be an indoleamine compound.

9 Exemple 4 . Etude de l'activité des extraits de Hippophae r. sur la synthèse de pigments mélanine par les mélanocytes. Pour cet essai on a choisi des mélanocytes de la lignée B16 stimulés par un analogue de l'a MSH, la NDP-MSH. Example 4 Study of the activity of extracts of Hippophae r. on the synthesis of melanin pigments by melanocytes. For this assay, melanocytes of line B16 stimulated by an analog of MSH-a-NPH-MSH were chosen.

On a ensemencé des plaques à puits et laissé les mélanocytes croître à confluence. Puis on a changé le milieu de culture pour le remplacer suivant les puits par du milieu supplémenté ou non en NDP-MSH, ainsi qu'en différentes concentrations des fractions butanolique et aqueuse de l'extrait de Hippophae r. de l'Exemple 3. Well plates were seeded and melanocytes were allowed to grow at confluence. The culture medium was then changed to replace it according to the wells with medium supplemented or not with NDP-MSH, as well as with different concentrations of the butanolic and aqueous fractions of the Hippophae extract. of Example 3.

Après incubation pendant 72h, on a dosé la quantité de mélanine dans les cultures, en mesurant leur absorption à 405 nm. On a ainsi pu évaluer l'inhibition par les produits de la biosynthèse de mélanine par les mélanocytes stimulés par la NDP-MSH. La concentration maximum testée pour chaque fraction a été choisie en 15 fonction des résultats d'un essai préalable de cytotoxicité. Les résultats sont résumés dans le Tableau suivant : Réf. AMP-C Saison Solvant Fraction Concentration % mg/ml Mélanine Contrôle stimulé 100 (+NDP-MSH) Contrôle non 96 stimulé 35 hiver 70% éthanol H2O 0,004 105 0,020 71 0,100 54 36 hiver 70% éthanol BuOH 0,0008 104 0,004 97 0,020 72 On a ainsi trouvé que la fraction butanolique de l'Exemple 3 réduit de 100 à 20 72% de façon significative la mélanogénèse des cellules B16, à la concentration de 0,02 mg/ml. De plus, on a trouvé que la fraction aqueuse de l'extrait hydro-éthanolique de l'Exemple 3 réduit la mélanogénèse de 100 à 71% de façon significative à la concentration de 0,02 mg/ml, et de 100 à 54% de façon hautement significative à la concentration de 0,1 mg/ml. De cet exemple, il apparaît qu'un extrait de Hippophae rhamnoides a une action significative d'inhibition de la production de pigments mélanine par les cellules 5 cutanées. En conséquence, il paraît intéressant de réaliser des compositions cosmétiques ou dermatologiques ayant pour but d'atténuer la pigmentation de la peau, des poils et des cheveux. Quelques exemples, n'ayant aucun caractère limitatif, de telles compositions seront données ci-après. 10 Exemple 5 . Extraction de branches de Hippophae rhamnoides (Hf.). De jeunes branches de Hf. ont été récoltées le 8 septembre (rameaux d'été) au même endroit que pour les exemples 1 et 3. Ces rameaux d'été étaient porteurs de feuilles et de bourgeons. Seules les extrémités ont été prélevées de façon à ce que le 15 matériel végétal ne comporte pas trop de bois. Le matériel collecté a été immédiatement gelé à -80°C et séché par lyophilisation. Puis on l'a broyé en poudre de 100 mesh. On a procédé de même avec des rameaux d'hiver de l'exemple 3 stockés à - 20 80°C. On a alors réalisé sous traitement aux ultra-sons pendant 30 mn, les 3 extractions suivantes : - 75 g de rameaux d'hiver par 875 ml d'éthanol à 70% dans l'eau, 75 g de rameaux d'hiver par 875 ml d'eau, 25 - 144 g de rameaux d'été par 2050 ml d'éthanol à 70% dans l'eau. Après filtration, les extraits ont été évaporés à l'évaporateur rotatif, puis repris par 200 ml d'eau (400 pour l'extrait de rameaux d'été). Ces suspensions ou solutions ont été extraites par 3 fois 80 ml de n-butanol (3 fois 160 ml pour l'extrait de rameaux d'été) et les extraits butanoliques ont été évaporés à l'évaporateur rotatif puis séchés 30 par lyophilisation. Les rendements d'extraction ont été les suivants : Matériel Solvant d'extraction Fr. Bu, % d'extraction Fr. eau, % d'extraction r. hiver Ethanol 70 % 8,9 17,0 r. hiver Eau 3,2 16,6 r. été Ethanol 70 % 13,8 22,2 Exemple 6. Caractérisation des extraits et fractions. Les trois extraits bruts de l'Exemple 5 ainsi que leurs fractions butanolique et aqueuse ont été caractérisés par chromatographie. After incubation for 72 hours, the amount of melanin in the cultures was assayed by measuring their absorption at 405 nm. Inhibition by the products of melanin biosynthesis by NDP-MSH stimulated melanocytes was thus assessed. The maximum concentration tested for each fraction was chosen based on the results of a prior cytotoxicity test. The results are summarized in the following Table: Ref. AMP-C Season Solvent Fraction Concentration% mg / ml Melanine Control stimulated 100 (+ NDP-MSH) Control not 96 stimulated 35 winter 70% ethanol H2O 0.004 105 0.020 71 0.100 54 36 winter 70% ethanol BuOH 0.0008 104 0.004 97 0.020 It was found that the butanolic fraction of Example 3 reduced the melanogenesis of B16 cells significantly from 100 to 72%, at a concentration of 0.02 mg / ml. In addition, it was found that the aqueous fraction of the hydroethanolic extract of Example 3 reduced the melanogenesis significantly from 100 to 71% at the concentration of 0.02 mg / ml, and from 100 to 54% highly significant at the concentration of 0.1 mg / ml. From this example, it appears that an extract of Hippophae rhamnoides has a significant action of inhibiting the production of melanin pigments by cutaneous cells. Consequently, it seems advantageous to make cosmetic or dermatological compositions intended to reduce the pigmentation of the skin, hair and hair. Some examples, having no limiting character, such compositions will be given below. Example 5 Extraction of branches of Hippophae rhamnoides (Hf.). Young branches of Hf. were harvested on September 8 (summer twigs) at the same location as for examples 1 and 3. These summer twigs were carrying leaves and buds. Only the ends have been removed so that the plant material does not have too much wood. The collected material was immediately frozen at -80 ° C and dried by lyophilization. Then it was ground to a 100 mesh powder. The same was done with winter branches of Example 3 stored at -80 ° C. The following 3 extractions were then carried out under ultrasound treatment for 30 minutes: - 75 g of winter branches by 875 ml of 70% ethanol in water, 75 g of winter branches by 875 ml of water, 25 - 144 g of summer twigs per 2050 ml of 70% ethanol in water. After filtration, the extracts were evaporated on a rotary evaporator and then taken up in 200 ml of water (400 for the extract of summer branches). These suspensions or solutions were extracted with 3 times 80 ml of n-butanol (3 times 160 ml for the extract of summer branches) and the butanol extracts were evaporated on a rotary evaporator and then dried by freeze-drying. The extraction yields were as follows: Extraction solvent material Fr. Bu,% extraction Fr. water,% extraction r. winter Ethanol 70% 8.9 17.0 r. Winter Water 3.2 16.6 r. Ethanol 70% 13.8 22.2 Example 6. Characterization of extracts and fractions. The three crude extracts of Example 5 as well as their butanolic and aqueous fractions were characterized by chromatography.

Chromatographie Liquide Haute Pression (HPLC). On a utilisé une colonne Luna C18 3 microns et un gradient d'acétonitnle dans l'eau contenant 0,01 % d'acide trifluoroacétique passé à 0.75 ml/mn, et réalisé de la façon suivante : 0 -- 20 mn 5 - 95 % CH3CN 20 - 22 mn 95 % CH3CN 22 - 23 mn 95 - 5 % CH3CN 23 - 30 mn 5 % CH3CN lo La détection a été effectuée par une alignée de photodiodes à 220, 280, et 340 nm. Les extraits de rameaux d'hiver comportent un double pic caractéristique élué autour de 5 - 5,5 mn. L'extrait de rameaux d'été est plus riche en composés, mais contient très 15 nettement moins des composés formant le double pic à 5 - 5,5 mn. High Pressure Liquid Chromatography (HPLC). A 3 micron Luna C18 column and a gradient of acetonitrile in water containing 0.01% trifluoroacetic acid were passed at 0.75 ml / min and run as follows: 0-20 min 5 - 95 % CH3CN 20 - 22 min 95% CH3CN 22 - 23 min 95 - 5% CH3CN 23 - 30 min 5% CH3CN lo The detection was carried out by an alignment of photodiodes at 220, 280, and 340 nm. Extracts of winter twigs have a characteristic double peak eluted around 5 - 5.5 min. The summer branch extract is richer in compounds, but contains significantly fewer compounds forming the double peak at 5 - 5.5 min.

Chromatographie en couche mince (TLC). Les trois extraits bruts et leurs fractions butanolique et aqueuse ont été chromatographiés sur quatre plaques avec le solvant : acétate d'éthyle/ acide 20 acétique/ acide formique/ eau (70 :8 :8 :18 en volumes). Les plaques éluées ont été photographiées sous lumière visible, et UV à 254 et 366 nm. De plus, les 4 plaques ont été révélées chacune avec l'un des réactifs suivants : 25 anisaldéhyde/ acide sulfurique, un réactif non spécifique, chlorure ferrique dans l'acide perchlorique (réactif de Salkowski) qui révèle en particulier les indoles, ninhydrine, qui révèle les amines, - p-diméthylaminobenzaldéhyde (réactif d'Ehrlich), qui révèle les indoles. 30 Ces révélations mettent en évidence deux bandes intenses de Rf voisin de 0,5 dans les ,extraits de rameaux d'hiver, dont la plus importante est plus marquée dans les fractions aqueuses. Ces bandes qui sont les plus importantes dans les extraits de rameaux d'hiver, sont nettement moins marquées dans l'extrait de rameaux d'été, même dans sa fraction aqueuse. Thin layer chromatography (TLC). The three crude extracts and their butanolic and aqueous fractions were chromatographed on four plates with the solvent: ethyl acetate / acetic acid / formic acid / water (70: 8: 8: 18 by volume). The eluted plates were photographed under visible light, and UV at 254 and 366 nm. In addition, the 4 plates were each revealed with one of the following reagents: anisaldehyde / sulfuric acid, a non-specific reagent, ferric chloride in perchloric acid (Salkowski's reagent) which reveals in particular the indoles, ninhydrin, which reveals the amines, - p-dimethylaminobenzaldehyde (Ehrlich's reagent), which reveals the indoles. These revelations reveal two intense bands of Rf close to 0.5 in winter shoot extracts, the largest of which is more marked in aqueous fractions. These bands, which are the most important in winter shoot extracts, are markedly less marked in the extract of summer branches, even in its aqueous fraction.

De plus, étant donné que ces bandes sont révélées en particulier par le chlorure ferrique et le réactif d'Ehrlich qui réagissent avec les indoles, ainsi que par la ninhydrine qui réagit avec les amines, il pourrait s'agir de molécules de type indoleamine. Moreover, since these bands are revealed in particular by ferric chloride and Ehrlich's reagent which react with indoles, as well as by ninhydrin which reacts with amines, these could be indoleamine-like molecules.

lo Exemple 7 . Etude de l'activité des extraits de rameaux d'Hippophae r. sur la synthèse de pigments mélanine par les mélanocytes, en fonction de la saison de collecte. Quatre des fractions d'extraits obtenues à l'Exemple 5 ont été évaluées en ce qui concerne leur aptitude à inhiber la synthèse de pigments mélanine des 15 mélanocytes B16 stimulés par la NDP-MSH, suivant le même protocole que pour l'Exemple 4. La concentration maximum testée pour chaque fraction a été choisie en fonction des résultats d'un essai préalable de cytotoxicité. Les résultats sont résumés dans le tableau 1 suivant : 20 Tableau 1 Réf. AMP-C Saison Solvant Fraction Indoles Conc. % Mélanine mg/ml (contrôle 100%) 44 (3) hiver 70% EtOH H2O +++++ 0,008 83 0,04 52 0,2 23 46 (6) hiver H2O H2O ++++ 0,008 87 0,04 51 0,2 26 47 (8) été 70% EtOH BuOH + 0,0016 106 0,008 100 0,04 95 48 (9) été 70% EtOH H2O ++ 0,008 105 0,04 97 0,02 79 - L'analyse des résultats permet les conclusions suivantes : - les résultats confirment que des extraits de rameaux d'Hippophae rhamnoides inhibent la biosynthèse de mélanine par les mélanocytes, - les extraits de rameaux récoltés en hiver sont beaucoup plus actifs comme inhibiteurs de la mélanogénèse, - les extraits les plus actifs sur l'inhibition de la mélanogénèse sont également ceux qui contiennent le plus de composés indoliques. Il apparaît donc intéressant de réaliser de nouvelles formulations cosmétiques contenant des extraits de rameaux d'Hippophae rhamnoides. Example 7 Study of the activity of Hippophae branch extracts r. on melanin pigment synthesis by melanocytes, depending on the season of collection. Four of the extract fractions obtained in Example 5 were evaluated for their ability to inhibit melanin pigment synthesis of NDP-MSH-stimulated B16 melanocytes, following the same protocol as for Example 4. The maximum concentration tested for each fraction was chosen based on the results of a previous cytotoxicity test. The results are summarized in the following Table 1: Table 1 Ref. AMP-C Season Solvent Fraction Indoles Conc. % Melanin mg / ml (100% control) 44 (3) winter 70% EtOH H2O +++++ 0.008 83 0.04 52 0.2 23 46 (6) winter H2O H2O ++++ 0.008 87 0.04 51 0.2 26 47 (8) summer 70% EtOH BuOH + 0.0016 106 0.008 100 0.04 95 48 (9) summer 70% EtOH H2O ++ 0.008 105 0.04 97 0.02 79 - The analysis results allow the following conclusions: - the results confirm that extracts of branches of Hippophae rhamnoides inhibit melanocyte biosynthesis by melanocytes, - extracts of branches harvested in winter are much more active as inhibitors of melanogenesis, - extracts the most active on the inhibition of melanogenesis are also those which contain the most indole compounds. It therefore seems interesting to make new cosmetic formulations containing extracts of branches of Hippophae rhamnoides.

Composition N°1. Crème cosmétique pour atténuer la pigmentation cutanée. Pour réaliser une émulsion huile dans eau classique, on mélange sous agitation à 85°C une phase lipidique hydrophobe et une phase aqueuse contenant chacune des ingrédients destinés à conférer les propriétés d'usage habituelles d'une formulation cosmétique telles que la stabilité, la consistance, un étalement agréable, un pouvoir hydratant, une bonne stabilité microbiologique. On refroidit sous agitation, et lorsque la température est descendue à 45°C, on ajoute en poids d'une fraction aqueuse d'extrait hydro-éthanolique de rameaux 20 d'hiver d'Hippophae rhamnoides tel qu'à l'Exemple 3. Composition No. 1. Cosmetic cream to reduce skin pigmentation. In order to produce a conventional oil-in-water emulsion, a hydrophobic lipidic phase and an aqueous phase, each containing ingredients intended to impart the usual properties of a cosmetic formulation such as stability and consistency, are mixed with stirring at 85 ° C. , pleasant spreading, hydrating power, good microbiological stability. It is cooled with stirring, and when the temperature has dropped to 45 ° C., an aqueous fraction of hydroethanolic extract of winter branches of Hippophae rhamnoides is added by weight as in Example 3.

Composition N°2. Crème cosmétique pour prévenir la pigmentation cutanée. On réalise une émulsion huile dans eau comme ci-dessus avec une phase 25 lipidique hydrophobe contenant des filtres anti-UV A et B. Au cours du refroidissement sous agitation, lorsque la température est descendue à 45°C, on ajoute 1,5% en poids d'un extrait aqueux brut sec de rameaux d'hiver d'Hippophae rhamnoides tel qu'à l'Exemple 5. Composition N ° 2. Cosmetic cream to prevent skin pigmentation. An oil-in-water emulsion was made as above with a hydrophobic lipid phase containing UV-A and B-filters. During cooling with stirring, when the temperature had dropped to 45 ° C., 1.5% was added. by weight of a dry crude aqueous extract of winter shoots of Hippophae rhamnoides as in Example 5.

30 Composition N°3. Gel cosmétique pour éclaircir le teint. On prépare une suspension de liposomes contenant un extrait hydroéthanolique de rameaux d'hiver d'Hippophae rhamnoides (Hf.) de composition suivante : 1 Fraction aqueuse sèche d'extrait hydro-éthanolique telle qu'à l'Exemple 5 35 Phospholipides pro-liposomes 2 Eau avec conservateurs 50 Gel aqueux qsp 100 On dissout l'extrait sec d'H.r. dans l'eau, puis on disperse les phospholipides, et on homogénéise cette phase avant de rajouter le gel aqueux sous agitation modérée pour ajuster la consistance et stabiliser les liposomes. ingrédients actifs suivant la formule : 2 Fraction aqueuse d'extrait aqueux de rameaux d'hiver de Hf. tel qu'à l'Exemple 5 5-hydroxy-tryptophane extrait de Griffonia simplicifolia 0,5 Ecdystérone 0,2 Arbutine 1 Acide lactique 0,5 Excipient émulsionné de type HIE avec filtres UVB+A et conservateurs qsp 100 d'Hf. de composition suivante : 1 Extrait brut sec de Hf. tel qu'à l'exemple 5 Phospholipides pro-liposomes 1 Eau avec conservateurs 90 Gel aqueux qsp 100 Bien évidemment, une composition selon la présente invention peut aussi 30 contenir l'un ou l'autre des produits suivants: - au moins un autre produit actif dépigmentant tel que l'arbutine, l'acide kojique, l'acide azélaïque, l'acide octadécènedioïque, un extrait de Morus alba, un extrait de Glycyrrhiza glabra, un extrait de Griffonia simplicifolia, l'acide ascorbique et ses dérivés comme le glucoside d'ascorbyle, le phosphate d'ascorbyle ou le 35 phosphate double de vitamine C et de vitamine E, l'eddystérone, un dérivé de Composition N°4. Crème cosmétique pour améliorer l'éclat du teint. On réalise comme pour la composition N°1 une crème cosmétique pour 10 améliorer l'éclat du teint associant un extrait d'Hippophae rhamnoides (Hf.) à d'autres 15 20 Composition N°5. Lotion pour éclaircir les poils ou les cheveux. On prépare suivant le même mode opératoire que pour la composition N° 3, une suspension de liposomes contenant un extrait aqueux brut sec de rameaux d'hiver 25 cystéine, l'acide ellagique, le 5-hydroxytryptophane. - au moins une substance pour filtrer ou bloquer les rayonnements ultra-violets B et/ou A telle que des pigments à base d'oxyde de titane, des pigments nacrés, des molécules de type benzophénone, anthranilate, cinnamique, dibenzoyl méthane, salicylique, dérivés du camphre, ou tout autre produit cité à l'annexe VII de la Directive « cosmétique » N°76/7688/CEE modifiée. - au moins un produit anti-inflammatoire tel qu'un extrait de Glycyrrhiza glabra, l'acide glycyrrhétinique, un extrait de Scutellaria baicalensis, un extrait d'Aloe vera, le bisabolol. - au moins un agent favorisant la desquamation tel que l'acide salicylique, l'acide lactique ou un autre alpha-hydroxyacide, l'urée. - au moins un agent humectant tel que le glycérol, le sorbitol, la sérine, les sels de l'acide pyroglutamique (acide pyrrolidone carboxylique), l'acide hyaluronique. Cette composition peut être sous l'une des formes suivantes : - sous forme de lotion aqueuse ou hydro-alcoolique, d'un gel aqueux ou hydro alcoolique, d'une micro-émulsion, d'une émulsion liquide ou épaisse, d'une poudre libre ou compactée. - sous forme d'un patch, la composition étant disposée sur un support solide. Composition No. 3 Cosmetic gel to lighten the complexion. A suspension of liposomes containing a hydroethanolic extract of winter shoots of Hippophae rhamnoides (Hf.) Of the following composition is prepared: 1 Aqueous dry fraction of hydroethanolic extract as in Example 5 Phospholipids pro-liposomes 2 Water with preservatives 50 Aqueous gel qsp 100 The dry extract of Hr is dissolved in water, then the phospholipids are dispersed, and this phase is homogenized before adding the aqueous gel with moderate stirring to adjust the consistency and stabilize the liposomes. active ingredients according to the formula: 2 Aqueous fraction of aqueous extract of winter branches of Hf. as in Example 5 5-hydroxy-tryptophan extracted from Griffonia simplicifolia 0.5 Ecdysterone 0.2 Arbutin 1 Lactic acid 0.5 Excipient emulsion type HIE with UVB + A filters and preservatives qs 100 Hf. of following composition: 1 Dry crude extract of Hf. as in Example 5 Phospholipids pro-liposomes 1 Water with preservatives 90 Aqueous gel qs 100 Obviously, a composition according to the present invention can also contain one or other of the following products: - at least one other depigmenting active ingredient such as arbutin, kojic acid, azelaic acid, octadecenedioic acid, an extract of Morus alba, an extract of Glycyrrhiza glabra, an extract of Griffonia simplicifolia, ascorbic acid and its derivatives such as ascorbyl glucoside, ascorbyl phosphate or vitamin C and vitamin E double phosphate, eddysterone, a derivative of Composition No. 4. Cosmetic cream to improve the radiance of the complexion. As in the case of the composition No. 1, a cosmetic cream for improving the radiance of the complexion combining an extract of Hippophae rhamnoides (Hf.) With other compositions No. 5 was prepared. Lotion to lighten hair or hair. A suspension of liposomes containing a dry crude aqueous extract of winter cysteine branches, ellagic acid, 5-hydroxytryptophan, is prepared according to the same procedure as for composition No. 3. at least one substance for filtering or blocking ultraviolet B and / or A radiation such as pigments based on titanium oxide, pearlescent pigments, benzophenone, anthranilate, cinnamic, dibenzoyl methane, salicylic, derived from camphor, or any other product listed in Annex VII of the "Cosmetic" Directive No 76/7688 / EEC as amended. at least one anti-inflammatory product such as an extract of Glycyrrhiza glabra, glycyrrhetinic acid, an extract of Scutellaria baicalensis, an extract of Aloe vera, bisabolol. at least one desquamation promoting agent such as salicylic acid, lactic acid or another alpha-hydroxy acid, urea. at least one humectant such as glycerol, sorbitol, serine, salts of pyroglutamic acid (pyrrolidone carboxylic acid), hyaluronic acid. This composition may be in one of the following forms: in the form of an aqueous or aqueous-alcoholic lotion, an aqueous or hydroalcoholic gel, a microemulsion, a liquid or thick emulsion, a loose or compacted powder. in the form of a patch, the composition being placed on a solid support.

Par ailleurs, dans une composition selon la présente invention, l'extrait de rameaux d'hiver de Hippophae rhamnoides peut être incorporé dans des particules telles que des liposomes (comme décrit pour la composition N°3), des vésicules de molécules amphiphiles non-ioniques, des phases lamellaires dispersées, des capsules, des éponges, ou disposé à la surface de particules telles que des particules de polymères synthétiques, des particules de cellulose, ou des particules minérales. Ainsi la présente composition comporte de 0,05 à 20%, et de préférence de 0,5 à 5%, en poids d'extrait sec de rameaux d'Hippophae rhamnoides. Cette composition peut également contenir au moins un autre produit actif dépigmentant et/ou un agent pour favoriser la desquamation. Moreover, in a composition according to the present invention, the winter shoot extract of Hippophae rhamnoides can be incorporated in particles such as liposomes (as described for composition No. 3), vesicles of non-amphiphilic molecules ionic, dispersed lamellar phases, capsules, sponges, or disposed on the surface of particles such as particles of synthetic polymers, cellulose particles, or mineral particles. Thus the present composition comprises from 0.05 to 20%, and preferably from 0.5 to 5%, by weight of dry extract of Hippophae rhamnoides branches. This composition may also contain at least one other depigmenting active product and / or an agent for promoting desquamation.

Par ailleurs, la présente invention concerne non seulement les extraits aqueux ou hydroalcooliques de branches ou de rameaux d'Hippophae mais également les fractions plus ou moins purifiées de ces extraits. Furthermore, the present invention relates not only to the aqueous or hydroalcoholic extracts of branches or branches of Hippophae but also the more or less purified fractions of these extracts.

Claims

REVENDICATIONS1. - Hippophae branch extract

2. - Winter branch extract of Hippophae rhamnoides.

3. - Extract according to claim 1 or 2 as the solvent used water, methanol, ethanol, propylene glycol, glycerol or mixtures thereof.

4. - Extract according to one of claims 1 to 3 characterized in that it contains at least one molecule having an indole group.

5. - Use of an extract according to one of claims 1 to 4 in a cosmetic composition.

6. - Use of an extract according to claim 5 in a composition for attenuating the pigmentation of the skin, hair or hair.

7. - Use of an extract according to claim 6 characterized in that said composition contains from 0.05 to 200/0 by weight of dry extract of branches of Hippophae rhamnoides.

8. - Use of an extract according to claim 5 characterized in that said composition contains from 0.5 to 5% by weight of dry extract of branches of Hippophae rhamnoides.

9. - Use of an extract according to claim 6 characterized in that said composition also contains at least one other depigmenting active product.

10. - Use of an extract according to claim 6 characterized in that said composition also contains a substance for filtering UVB radiation and / or A.

11. - Use of an extract according to claim 6 characterized in that said composition also contains an agent to promote desquamation.