FR2793141A1 - Extrait de bourgeons de peuplier et son association avec le squalane pour son utilisation en tant que medicament anti-inflammatoire et dans un procede de traitement cosmetique - Google Patents

Extrait de bourgeons de peuplier et son association avec le squalane pour son utilisation en tant que medicament anti-inflammatoire et dans un procede de traitement cosmetique Download PDF

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Abstract

La présente invention concerne un extrait de bourgeons de peuplier Populus nigra L. non allergisant caractérisé en ce qu'il contient des polyphénols en quantité comprise entre 5 et 20% par rapport à la matière sèche de l'extrait, des acides phénoliques et qu'il ne contient pratiquement pas d'esters d'acides phénoliques un procédé d'extraction de bourgeons de peuplier Populus nigra L. caractérisé en ce que les étapes suivantes sont effectuées : au moins une extraction du principe actif des bourgeons de peuplier Populus nigra L. à l'eau à une température voisine de la température ambiante, concentration totale ou partielle des solutions obtenues, filtration des concentrats; elle concerne encore une association d'extrait de bourgeon de peuplier et de squalane. L'extrait de bourgeon de peuplier, éventuellement en combinaison avec du squalane peut être utilisé en tant que médicament, plus particulièrement en tant que médicament anti-inflammatoire ou encore pour la mise en oeuvre d'un procédé de traitement cosmétique.

Description

La présente invention concerne un extrait de bourgeons de peuplier Populus nigra L. non allergisant, son procédé de préparation ainsi que son utilisation pour préparer des compositions cosmétiques et des compositions possédant une activité anti-inflammatoire. La présente invention concerne encore la combinaison d'un extrait de bourgeons de peuplier avec du squalane pour son utilisation pour préparer des compositions cosmétiques ainsi que des compositions possédant une activité anti-inflammatoire.
Le problème posé par les extraits de bourgeons de peuplier lorsqu'on souhaite les utiliser pour préparer des compositions destinées à une application cosmétique ou thérapeutique est leur caractère allergisant. Le but de la présente invention est de proposer un extrait de bourgeon de peuplier non allergisant qui possède des propriétés anti-inflammatoires.
En outre, il a été mis en évidence que la combinaison de 1'extrait de bourgeons de peuplier selon l'invention avec du squalane présente des propriétés antiinflammatoires exaltées.
Le peuplier, Populus nigra L. appartient à la famille botanique des Salicacées. II se distingue du peuplier blanc, Populus alba par la couleur sombre de son feuillage.
Cet arbre qui peut atteindre 20 à 25 mètres, croît communément sur les terrains humides, son besoin en eau est très important.
Ses rameaux sont étalés ou dressés le long de son tronc, comme c'est le cas du peuplier d'Italie ou Populus pyramidalis qui est considéré comme une variété du
Populus nigra. Ses feuilles sont alternes, stipulées, simples à longs pétioles, le limbe est triangulaire finement denté. Les fleurs sont unisexuées, groupées en chatons pendants à l'aisselle des feuilles : les fleurs males produisent un pollen abondant, les fleurs femelles sont réduites à un seul ovaire. Le fruit est une capsule loculicide renfermant de nombreuses graines.
Les peupliers produisent des bourgeons qui se récoltent en fin d'hiver à partir de février. Ces bourgeons sont de forme ovoïde aiguë, légèrement courbés, glabres, brun clair. Ils sont rendus visqueux par une matière résineuse odorante. Ces bourgeons sont formés d'écailles imbriquées. Les bourgeons de peuplier renferment des substances phénoliques. Ces substances sont des flavono'ides tels que la chrysine et dérivés, la galangine, la pinocembrine et izalpinine (Egger K. Tissut M., 1968, C. R. Acad. Sci. Paris 267, 1329-1332) mais aussi de t'apigénine. quercétine, kaempférol, rhamnetine (Wolienweber E, Egger K, 1971, Phytochemistry 10, 225226). La résine recouvrant ses bourgeons, véritable exsudat, a été particulièrement étudiée pour sa composition chimique.
De nombreux auteurs ont décrit des esters d'acides phénoliques : esters d'acide caféique (Greenaway W, Wollenweber E, Scaysbrook T, Whatley F. R., 1988, Z.
Naturforsh. 43 c, 795-798) des esters d'acide cinnamique (Bankova V. S. Popov
S. S., Marekov N. L., 1989, Phytochemistry, 28,3,871-873). Ces auteurs ont effectué t'étude chimique comparative de l'exsudat avec la propolis et y ont trouvé ces molécules. La propolis est la résine qu'emploient les abeilles pour calfeutrer les fissures de la ruche et assurer son étanchéité à t'eau. Elle est récoltée à partir d'exsudats de différents arbres selon la proximité avec la ruche. La principale source est l'exsudat des bourgeons de peuplier. La propolis est décrite pour son allerginicité et des travaux scientifiques ont permis d'identifier les allergènes dans les exsudats de bourgeons de peuplier (Hausen M., Evers P., Stûwe H. T., König
W. A., Wollenweber E., 1992, Contact Dermatitis, 26,34-44 ; Oliwiecki S., Beck
M. H., Hansen B. M., 1992, Contact Dermatitis, 27, 127-128). Les molécules responsables de ces phénomènes sont les esters d'acides phénoliques.
Les bourgeons de peuplier sont utilisés traditionnellement pour leurs propriétés antiseptiques, en usage externe ou interne, en particulier dans le cas de cystites.
Ces activités sont dues aux huiles essentielles qu'ils contiennent.
Traditionnellement, ils sont également utilisés comme adoucissant et antiinflammatoire. Cette activité est également reprise en usage vétérinaire associée avec des analgésiques. Malheureusement, ces utilisations sont limitées par le potentiel allergique des bourgeons.
Le squalane est un hydrocarbure saturé composé d'une chaîne de 30 atomes de carbone saturés. II est obtenu par hydrogénation du squalène d'où la dénomination perhydrosqualène. Le squalène fut dans un premier temps isolé de l'huile de foie de
requin, puis, il fut identifié dans le sébum humain dans une proportion de 10% où fut
également dosé du squalane à 2,5%. Le squalane de par sa structure chimique
saturée est beaucoup plus stable que ! e squaténe qui se peroxyde très facilement. II
fut donc particulièrement étudié. C'est ainsi qu'on démontre des activités
émollientes, et l'industrie cosmétique l'utilise, comme tel, dans des préparations galéniques.
Si l'extraction du squalane s'effectua tout d'abord à partir de foie de requin, actuellement son origine industrielle est I'huile d'olive. On le trouve également dans les huiles de germe de blé, de son, de riz ou dans les amidons d'olive.
La présente invention concerne un extrait de bourgeons de peuplier Populus nigra L. non allergisant contenant des polyphénols en quantité comprise entre 5 et 20% par rapport à la matière sèche de l'extrait, des acides phénotiques et qu'il ne contient pratiquement pas d'esters d'acides phénoliques (teneur inférieure à environ 0,1%), son utilisation en tant que médicament notamment en tant que médicament anti-inflammatoire et un procédé de traitement cosmétique comprenant I'application topique de cet extrait selon l'invention.
Les acides phénoliques auxquels il est fait référence sont plus particulièrement les acides hydroxy-cinnamiques, notamment les acides caféïque et férulique. Les esters d'acides phénoliques sont plus particulièrement les esters d'acides hydroxycinnamiques, notamment les esters d'acides cafeïque et férulique.
La présente invention concerne en outre un procédé d'extraction de bourgeons de peuplier Populus nigra L. tel que les étapes suivantes sont effectuées :
au moins une extraction du principe actif des bourgeons de peuplier
Populus nigra L. à l'eau à température voisine de la température ambiante,
concentration totale ou partielle des solutions obtenues,
éventuellement dilution des concentrats liquides dans un solvant choisi par
exemple dans le groupe formé par le propylène glycol, le butylène glycol, la
glycérine, dans des proportions eau/solvant comprises entre 10/90 et
90/10 v/v.
filtration des concentrats, elle concerne aussi l'extrait de bourgeons de peuplier obtenu par ce procédé d'extraction, son utilisation en tant que médicament notamment en tant que médicament anti-inflammatoire et un procédé de traitement cosmétique comprenant
I'application topique d'une composition contenant l'extrait de bourgeons de peuplier selon la présente invention.
La présente invention concerne aussi l'association d'un extrait de bourgeons de peuplier non allergisant selon la présente invention et de squalane pour son utilisation en tant que médicament, en particulier en tant que médicament antiinflammatoire et un procédé de traitement cosmétique comprenant l'application topique d'une association d'un extrait de bourgeons de peuplier et de squalane. Les compositions d'extrait de bourgeons de peuplier et de squalane dans lesquelles la teneur en extrait de bourgeons de peuplier est comprise entre 0, 1% et 5% poids et la teneur en squalane est comprise entre 0,1% et 10% poids sont préférées.
L'extrait de bourgeons de peuplier selon la présente invention peut tre obtenu selon le procédé suivant : les bourgeons de peuplier sont broyés puis placés dans un réacteur. La drogue est extraite avec de l'eau à une température voisine de la température ambiante, c'est-à-dire comprise entre 5 C et 35 C. Les volumes d'eau utilisés varient de 5 à 20 parties.
L'extraction peut tre menée sous agitation ou statiquement pendant une durée variant de 1 à 10 heures.
Après extraction, les solutions sont récupérées par essorage ou par filtration. La drogue peut tre re-extraite dans les mmes conditions. Les solutions sont alors jointes.
Les solutions obtenues peuvent tre concentrées complètement de façon à obtenir une poudre.
La concentration peut aussi tre partielle de façon à obtenir un extrait dont la matière sèche varie de 2 à 50% p/p. Dans tous les cas, la concentration est effectuée sous pression réduite.
Les concentrats liquides obtenus peuvent tre utilisés tels quels ou dilués dans des solvants comme le propylène glycol, le butylène glycol, la glycérine dans des proportions variant de 10/90 à 90/10 v/v, eau/solvant. Les solutions obtenues sont filtrées de façon à obtenir une solution limpide.
Les extraits obtenus sont examinés en chromatographie sur couche mince : les
esters d'acides phénoliques sont absents (teneur inférieure à environ 0,1%), par
contre on visualise des acides phénoliques sous forme libre comme I'acide caféique.
La teneur en potyphénots est également dosée par dosage colométrique avec le réactif de Folin-Ciocalteu. Leur teneur varie selon les extraits de 5 à 20% par rapport à la matière sèche.
Nous avons associé le squalane avec l'extrait aqueux de bourgeons de peuplier et avons démontré la potentialisation de l'activité anti-inflammatoire de l'extrait de bourgeons de peuplier par le squalane.
La fonction barrière de la peau permet d'assurer une protection vis-à-vis de l'environnement extérieur, et les kératinocytes de I'épiderme peuvent directement répondre à une large variété d'agents irritants ou allergènes et participer activement aux processus inflammatoires et immunitaires cutanés, en particulier à travers l'élaboration de cytokines proinflammatoires et immunomodulatrices. Parmi ces molécules biologiquement actives, I'IL1 a (Interleukin 1 a) et le TNF a (Tumor
Necrosis Factor a) sont considérées comme des cytokines primaires, leur libération étant insuffisante pour induire l'inflammation en vertu de leur induction de molécules d'adhésion au niveau des cellules endothéliales, de leur induction de facteurs chimiotactiques pour les leucocytes, et d'autres facteurs d'activation tel que l'interleukine 6, cytokine secondaire, qui est ainsi fortement impliquée dans l'amplification de la réponse inflammatoire. De plus, outre cette activation directe des kératinocytes au contact de molécules exogènes, d'autres facteurs régulent la réponse kératinocytaire pendant l'inflammation ; ce sont notamment les cytokines lymphocytaires telle l'interféron y (IFN y), produites par les cellules mononucléées infiltrées à ce moment-là dans le derme et capables de modifier significativement le microenvironnement cutané.
Les exemples qui suivent illustrent l'invention sans en limiter la portée.
Exemple 1 100 kg de bourgeons de peuplier broyés sont introduits dans un réacteur avec 700 litres d'eau. L'extraction est réalisée à température ambiante (20 C) sous agitation pendant 1 heure. La drogue épuisée est écartée par essorage. Les solutions sont concentrées sous pression réduite jusqu'à l'obtention d'une matière sèche de 5%
P/p.
Du propylène glycol est ajouté de façon à obtenir une matière sèche de 2% p/p.
L'extrait obtenu est filtré, on obtient 350 kg d'extrait. L'absence d'esters d'acide
phénolique est vérifiée par chromatographie sur couche mince ainsi que la présence d'acide caféique. Le dosage en polyphénols permet de quantifier leur teneur à 10% par rapport à la matière sèche de l'extrait.
Exemple 2 10 kg de bourgeon de peuplier broyé sont extraits par 100kg d'eau à température ambiante (20 C) et sous agitation pendant 2 heures. La drogue épuisée est éliminée par essorage. La solution obtenue est concentrée sous pression réduite puis séchée en étuve jusqu'à l'obtention de 2kg de poudre de couleur brune. La présence d'acide caféique et I'absence d'esters d'acide phénolique sont déterminées par chromatographie sur couche mince. La teneur en polyphenols est de 15%.
L'étude du pouvoir allergisant de l'extrait de bourgeons de peuplier a été effectuée sur 30 cobayes après application d'un extrait hydroglycolique à 2% de résidu sec.
L'effet recherché a été maximisé par injection d'adjuvant complet de Freund. Les animaux ont été exposés à l'extrait par injection intradermique et application topique dans des conditions irritantes (exposition d'induction). Après une période de repos de 10 à 14 jours (période d'induction), les animaux ont été exposés à une dose de déclenchement.
L'étendue et le degré de la réaction cutanée des animaux ont été comparés à ceux de la réaction observée chez les animaux témoins ne recevant que le véhicule lors de l'induction et soumis à l'exposition de déclenchement. L'extrait de bourgeons de peuplier a été testé pur, à 50%, à 25% et 12,5% p/p.
A aucune de ces concentrations l'extrait de bourgeons de peuplier n'a provoqué de réaction allergique chez les animaux.
Nous nous sommes proposés d'évaluer les propriétes anti-inflammatoires de l'extrait de bourgeons de peuplier et du squalane sur le modèle de libération d'interleukine 6 par les kératinocytes humains stimulés par l'interféron y.
Les kératinocytes sont exposés dans un milieu de culture adéquat pendant 24 heures à l'extrait de bourgeons de peuplier à des concentrations de 0, 03%, 0,05% et 0,08% p/p. Le squalane est testé à la concentration de 1mg/ml ; puis, ces deux produits sont testés associés aux concentrations suivantes : extrait de bourgeons de peuplier 0, 03% p/p + squalane 1mg/ml et bourgeons de peuplier 0,05% p/p + squaiane 1mgiml.
La stimulation à l'interféron y est effectuée à une concentration de 500 unités/ml pendant 24 heures supplémentaires.
Enfin, les milieux de culture sont récupérés par centrifugation et la production d'interleukine 6 est mesurée par kit Elisa.
Cette étude in vitro d'évaluation, après exposition à 1'extrait de bourgeons de peuplier, de la libération d'interleukine 6 par les kératinocytes humains stimulés par l'interféron y montre que :
-L'extrait de bourgeons de peuplier inhibe significativement et de façon
dose-dépendante la production d'interleukine 6 induite par l'interféron y :
-29% et-66% d'inhibition aux concentrations respectives de 0, 05% et 0,08%.
-La concentration 0,03% de bourgeons de peuplier ne module pas la
production d'interleukine 6.
-Le squalane à la concentration 1mg/ml évaluée présente une activité
inhibitrice très discrète (-2%) et non significative sur la production
d'interleukine 6.
-L'association des 2 actifs bourgeons de peuplier/squalane montre une
potentialisation de l'activité inhibitrice sur la production d'interleukine 6, ceci
aux 2 concentrations 0,03% et 0,05% de bourgeons de peuplier associées
au squalane 1mg/ml :
Figure img00070001
<SEP> % <SEP> ACTIVITE <SEP> SQUALANE <SEP> 1 <SEP> mg/ml <SEP>
<tb> <SEP> ---2% <SEP>
<tb> Bourgeons <SEP> Peuplier <SEP> 0, <SEP> 03% <SEP> +3%-11% <SEP>
<tb> Bourgeons <SEP> Peuplier <SEP> 0,05%-29%-39%
<tb>
L'extrait de bourgeons de peuplier (0, 03%) associé au squalane (1mg/ml)
présente une activité inhibitrice de la production d'interleukine 6 potentialisée
--11 % (contre 1 % qu'on aurait pu attendre dans un effet additif).
L'extrait de bourgeons de peuplier (0, 05%) associé au squalane (1mg/ml)
présente une activité inhibitrice de la production d'interleukine 6 potentialisée
-a-39% (contre-31 % qu'on aurait pu attendre dans un effet additif).
Cette étude permet de montrer les effets synergiques de l'extrait de bourgeons de peuplier et du squalane en terme d'inhibition de la production d'interleukine 6 par les kératinocytes humains stimulés par de l'interféron y.
Dans cette étude, nous avons démontré que l'extrait aqueux de bourgeons de peuplier, solubilisé ou non dans un solvant, comme le propylène glycol, le butylene glycol et la glycérine, caractérisé par la présence d'acide caféique, par sa teneur en polyphénols (5 à 20% par rapport à la matière sèche de l'extrait) et par l'absence d'esters d'acides phénoliques (teneur inférieure à environ 0, 1%), ne présente aucun pouvoir allergisant et conserve son activité anti-inflammatoire.
De plus, I'association avec le phytosqualane augmente cette activité antiinflammatoire.
Les exemples de formulations galéniques présentées ci-après illustrent l'invention sans toutefois en limiter la portée.
Exemple 1 SYNDET PEAUX SENSIBLES
SULFOSUCCINATE DE LAURYL DISODIQUE 24.50%
SULFATE DE LAURYL DISODIQUE 24. 50%
AMIDON DE MAIS 18. 2652%
ALCOOL CETEARYLIQUE 9. 329%
PARAFFINE 8, 329%
SQUALANE1. 00%
EAU 7. 265%
EXT. BOURGEON DE PEUPLIER 0. 200%
ACIDE STEARIQUE 4. 419%
HUILE DE CALENDULA 1. 000%
ACIDE CITRIQUE 0. 2946%
ALCOOL PHENETHYLIQUE 0. 100%
EXT. D'AMANDE DOUCE 0. 500%
DIOXIDE DE TITANE 0. 2982%
Exemple 2 SAVON DE TOILETTE
HUILE D'AMANDE DOUCE RAFFINE 0.50%
EXT. BOURGEON DE PEUPLIER 0. 25%
SQUALANE 1. 05%
PARFUM 2. 00%
COPEAUX SAVONS 96. 0%
Eau q. s. p. 100
Exemple 3 GEL DE DOUCHE
SQUALANE 0. 10%
EXT. BOURGEON DE PEUPLIER 1. 00%
GLYCEROL 1. 00%
SULFATE DE LAURETH SODIQUE 20. 0%
ORAMIX NS10 8%
TEGOBETAINE F50 12. 0%
ELFACOS GT 282 S 1. 00% OPACIFIANT E 295 0. 50%
NAOH 0.05%
DMDM HYDANTOIN 0.20%
PARFUM 1. 00%
BENZOPHENONE-4 0.10%
EAU 55.05%
Exemple 4 LAIT CORPOREL
EXTRAIT FLUIDE DE BOURGEON DE PEUPLIER 0, 1 à 1 g
SQUALANE 0, 5 a 5 g
VITAMINE E ACETATE 0, 2 à 0, 5 g
MONOSTEARATE DE GLYCEROL OE 100 MOLES 5 g PARAFFINE LIQUIDE 10 g
DECAMETHYL CYCLOPENTASILOXANE 5 g
POLYMERE CARBOXYVINYLIQUE 0, 2 g TRIETHANOLAMINE 0, 25 g
CONSERVATEURS q. s.
PARFUM q. s.
EAU POTABLE q. s. p. 100 g
Exemple 5 CREME CORPORELLE NUTRITIVE ET APAISANTE
EXTRAIT FLUIDE DE BOURGEONS DE PEUPLIER 0, 1 à 1 g
DIMETHICONE COPOLYOL ET CYCLOMETHICONE 5 g
PALMITATE D'ISOPROPYLE 2 g
PARAFFINE LIQUIDE 10 9
GLYCERINE 10 g POLYETHYLENE GLYCOL400 10 g
CHLORURE DE SODIUM 1 g
CONSERVATEURS q. s.
PARFUM q. s.
EAU POTABLE q. s. p. 100 g
Exemple 6 CREME REPARATRICE POUR LES
MAINS OU SOIN APRES EPILATION
EXTRAIT FLUIDE DE BOURGEONS DE PEUPLIER 0, 1 b 5 g
SQUALANE 0, 5 à 5 g
STEARATE DE GLYCEROL OE 10 g
ALCOOLCETO STEARYLIQUE 1 g
HYDROXYPROLINE 0, 5 g
HUILE DE PARAFFINE EPAISSE 7 g
GLYCEROL 5 g
CONSERVATEURS q. s.
PARFUM q. s.
EAU POTABLE q. s. p. 100 g

Claims (14)

  1. phénoliques.
    phénoliques et qu'il ne contient pratiquement pas d'esters d'acides
    entre 5 et 20% par rapport à la matière sèche de l'extrait, des acides
    caractérisé en ce qu'il contient des polyphénols en quantité comprise
    REVENDICATIONS 1. Extrait de bourgeons de peuplier Populus nigra L. non allergisant
  2. 2. Extrait selon la revendication 1 caractérisé en ce que les acides
    phénoliques sont des acides hydroxy-cinnamiques et les esters
    d'acides phénoliques sont des esters d'acides hydroxy-cinnamiques.
  3. 3. Procédé d'extraction de bourgeons de peuplier Populus nigra L.
    caractérisé en ce que les étapes suivantes sont effectuées :
    eau moins une extraction du principe actif des bourgeons de
    peuplier Populus nigra L. à !'eau à une température voisine de la
    température ambiante,
    'concentration totale ou partielle des solutions obtenues,
    filtration des concentrats.
  4. 4. Procédé d'extraction selon la revendication 3 caractérisé en ce que,
    après l'étape de concentration des solutions, les concentrats liquides
    sont dilués dans un solvant.
  5. 5. Procédé d'extraction selon la revendication 4 caractérisé en ce que le
    solvant est choisi dans le groupe formé par le propylène glycol, le
    butylène glycol, la glycérine, dans des proportions eau/solvant
    comprises entre 10/90 et 90/10 v/v.
  6. 6. Extrait de bourgeons de peuplier obtenu par le procédé d'extraction
    selon l'une des revendications 3 à 5.
  7. 7. Extrait de bourgeon de peuplier selon la revendication 1,2 ou 6 pour
    son utilisation en tant que médicament.
  8. 8. Extrait selon la revendication 7 pour son utilisation en tant que
    médicament anti-inflammatoire.
  9. 9. Procédé de traitement cosmétique caractérisé en ce qu'il comprend
    l'application topique d'une composition contenant un extrait de
    bourgeons de peuplier selon la revendication 1,2 ou 6.
  10. 10. Association d'un extrait de bourgeons de peuplier selon la
    revendication 1,2 ou 6 et de squalane pour son utilisation en tant que
    médicament.
    inflammatoire.
  11. 11. Association selon la revendication 10 en tant que médicament anti
  12. 12. Association selon la revendication 10 ou 11 caractérisée en ce que la
    teneur en extrait de bourgeons de peuplier est comprise entre 0, 1% et
    5% poids et la teneur en squalane est comprise entre 0,1% et 10%
    poids.
  13. 13. Procédé de traitement cosmétique comprenant l'application topique
    d'une association d'un extrait de bourgeons de peuplier selon la
    revendication 1,2 ou 6 et de squalane.
  14. 14. Procédé selon la revendication 13 caractérisé en ce que l'association
    est telle que la teneur en extrait de bourgeons de peuplier est comprise
    entre 0,1% et 5% poids et la teneur en squalane est comprise entre
    0,1% et 10% poids.
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