FR2571726A1 - Nouveaux derives de nucleoside ayant des proprietes antiherpetiques, compositions pharmaceutiques les contenant et procede de preparation des composants actifs - Google Patents

Abstract

LA PRESENTE INVENTION EST RELATIVE A DES COMPOSES DE FORMULE I CI-APRES : (CF DESSIN DANS BOPI) DANS LAQUELLE R ET R SONT IDENTIQUES OU DIFFERENTS ET REPRESENTENT UN ATOME D'HYDROGENE OU UN GROUPE ACYLE OU CYCLO-ALCANOYLE OU AROYLE OU HETEROAROYLE EVENTUELLEMENT SUBSTITUES. APPLICATION : MEDICAMENTS A PROPRIETE ANTIHERPETIQUE.

Description

La présente invention est relative à des compositions antivirales

pharmaceutiques, à des méthodes pour

inhiber la multiplication virale, à de nouveaux dérivés nuclé-

osidiques utiles dans ces compositions et à des procédés pour les préparer. Plus spécifiquement, l'invention est relative à de nouveaux dérivés de nucléoside représentés par la formule générale (I) ci-après: Br

N C C

R'O OR et à leurs sels d'addition acides acceptables du point de vue pharmaceutique, dans laquelle: R et R1 sont identiques ou.différents et représentent un atome d'hydrogène ou un groupe acyle éventuellement substitué, de préférence un groupe alcanoyle à chaîne droite ou

ramifiée et éventuellement substitué, un groupe cyclo-

alcanoyle éventuellement substitué, un groupe aroyle éventuellement substitué ou hétéroaroyle éventuellement substitué.

L'invention se rapporte de plus, à des compo-

sitions pharmaceutiques comprenant ces composés, à leur utilisa-

tion comme agents antiviraux et à des procédés de préparation des composés de formule (I) et de leurs sels d'addition acides

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acceptables du point de vue pharmaceutique.

On sait dans l'art, que les 2'-désoxy-nucléo-

sides de la base uracile substituée en 5, manifestent un excellent effet antiviral in vitro et in vivo - Meth. and Find. Exptl. Clin. Pharmacol. 2, 253 (1980) 7. Parmi les

nucléosides connus, les (E)-5-(2-bromovinyl)-uracil-2'-

désoxynucléosides sont efficaces vis à vis de variétés du virus Herpès simplex. / Proc. Natl. Acad. Sci. USA 76, 2947 (1979) 7/. On sait également que ces composés ont l'inconvénient de se décomposer très vite dans des conditions in vivo et de se transformer en des composés inefficaces à la suite de processus qui se déroulent dans l'organisme vivant, au cours desquels la liaison 0-glycoside est coupée. ZBiomed. Biochem. Acta, 42, 35-38 (1983); Biochemical Pharmacology 32 (23)

3583-3590 (1983)/.

On a procédé à des transformations chimiques systématiques sur ces composés efficaces contre les variétés de Herpès simplex pour augmenter leur stabilité dans des

conditions in vivo et accroître ainsi leur activité thérapeu-

tique.

On sait bien que les dérivés 2,2'-anhydre de ces composés, sont beaucoup moins efficaces ou inefficaces du point de vue biologique, comme cela est décrit à propos du -éthyl-, 5-n-propyl- ou 5-isopropyl-2,2'-anhydro-

-1-e-D-arabinofuranoyl uracile (J. Carbohydrates, Nucle-

osides, Nucleotides 6, 295-308 (1979) 7.

Les dérivés de nucléoside conformes à la présente invention exercent un effet antiviral in vitro égal ou supérieur à celui des dérivés d'uracile connus, par exemple

à celui de la 5-éthyl-2'-désoxyuridine ou (E)-5-(2-bromovinyl)-

-2'-désoxyuridine, mais il ne se décomposent pas dans des conditions in vivo et des tests in vivo effectués avec les composés de la présente invention ont permis de vérifier que leur toxicité est bien inférieure à celle des dérivés connus

des nucléosides.

Les composés antiviraux préférés de formule (I) sont ceux dans lesquels R et R1 sont indépendamment l'un de l'autre, un atome d'hydrogène ou un groupe alcanoyle à chalne droite ou ramifiée et éventuellement substitué et leurs sels d'addition acides. Les composés antiviraux les plus avantageux représentés par la formule (I), sont les suivants: (E)-5-(2bromovinyl)-2,2'-anhydro-1-e-D-arabinofuranosyl uracile,

(E)-5-(2-bromovinyl)-2,2'-anhydro-3'-acétyl-1-$-D-arabino-

furanosyl uracile,

(E)-5-(2-bromovinyl)-2,2'-anhydro-3',5'-diacétyl-1-e-D-

-arabinofuranosyl uracile,

et leurs sels d'addition acides.

Dans la formule (I) ci-dessus, le groupe "alca-

noyle à chaîne droite ou ramifiée" est de préférence un groupe alcanoyle à chaîne droite ou ramifiée contenant 1 à 8 atomes de carbone, comme par exemple, les groupes formyle, acétyle, propionyle, i-propionyle, butyryle, i-butyryle, valéryle,

i-valéryle, caproyle, pivaloyle, heptanoyle, octanoyle.

Le groupe "cycloalcanoyle" est de préférence un groupe cycloalcanoyle ayant 4 à 9 atomes de carbone, comme

par exemple le groupe cyclohexanoyle.

Le groupe "aroyle" est de préférence un groupe aroyle ayant 7 à 11 atomes de carbone, comme par exemple les

groupes benzoyle ou naphtoyle.

Le groupe "hétéroaroyle" est de préférence un groupe aroyle ayant 4 à 11 atomes de carbone et 1 ou 2 atomes d'oxygène, de soufre et/ou d'azote à titre d'hétéroatomes,

comme par exemple les groupes furoyle, nicotinoyle ou iso-

nicotinoyle. Ces groupes peuvent porter 1 à 3 substituants

choisis de préférence parmi les groupes alcoyles et aryles.

Le groupe "alcoyle" est de préférence un groupe alcoyle ayant 1 à 6 atomes de carbone, comme par exemple, les groupes méthyle, éthyle, propyle, i-propyle, butyle, i-butyle,

pentyle, i-pentyle, hexyle ou i-hexyle.

Le groupe "aryle" est de préférence un groupe aryle ayant 6 à 10 atomes de carbone, par exemple un groupe phényle ou naphtyle. Les substituants les plus avantageux parmi les substituants énumérés ci-dessus, sont les radicaux méthyle

et phényle.

Des sels des composés de formule (I) pouvant être

utilisés commodément en thérapie, comprennent des sels accep-

tables du point de vue physiologique d'acides organiques,

comme des acides lactique, acétique, malique ou p-toluène-

sulfonique, ainsi que des sels acceptables du point de vue physiologique d'acides minéraux, comme l'acide chlorhydrique

ou l'acide sulfurique.

Les nouveaux composés de formule (I) dans laquelle

R et R1 sont indépendamment l'un de l'autre, un atome d'hy-

drogène ou un groupe protecteur, à condition que l'un au moins de ces radicaux soit un groupe protecteur, sont d'utiles intermédiaires pour la préparation de composés

antiviraux de formule (I).

Dans la formule ci-dessus, le groupe protecteur peut être un quelconque groupe protecteur utilisé en chimie organique, qui peut être détaché sans que cela n'endommage la

structure du (E)-5-(2-bromovinyl)-2,2'-anhydro-1-B-D-arabino-

furanosyl uracile.

Le groupe (4-méthoxy-triphényl)-méthyle consti-

tue un groupe protecteur préféré.

On peut préparer les composés de formule (I) en faisant réagir un composé de formule (II) ci-après, HM C= r { 0-N

HO OH

avec un composé de formule (III),

O.==.R (III)

C

dans laquelle R est tel que défini plus haut et ensuite, si

cela est désiré, en effectuant une acylation, une désacyla-

tion et une réacylation sur les composés ainsi obtenus, avec un agent acylant représenté par la formule (IV), y- C1 (IV) ou (V), y

0 (V)

Y0 o Y est tel que défini à propos dé R et R1 à l'exception d'hydrogène. Les composés de formule (I) dans laquelle R=R-=H sont préparés de la façon suivante: a) on désacyle avec du méthylate de sodium, un composé de formule (I), dans laquelle R et R sont identiques ou différents et représentent un groupe acyle, ou b) on désacyle avec du méthylate de sodium, un composé de formule (I), dans laquelle l'un des R et R1 est un groupe acyle tandis que l'autre est un groupe protecteur,

puis on coupe le groupe protecteur.

Les composés de formule (I) dans laquelle R et R1 sont tous deux un groupe acyle, sont préparés de la façon suivante: a) on acyle un composé de formule (I), dans laquelle R1 est un atome d'hydrogène et R est un groupe acyle, avec un composé de formule (IV) ou (V), o Y est tel que défini ci-dessus, ou b) on fait réagir un composé de formule (II) avec un composé de formule (III) o R est tel que défini ci-dessus, puis on fait réagir le composé de formule (I) ainsi obtenu avec un composé de formule (IV) ou (V) o Y est tel que défini ci-dessus, ou c) on acyle un composé de formule (I) dans laquelle l'un des groupes R et R1 est un atome d'hydrogène et l'autre un groupe acyle, avec un composé de formule (IV) ou (V), o

Y est tel que défini plus haut.

Les composés de formule (I) dans laquelle R représente un atome d'hydrogène et R1 est un groupe acyle sont préparés de la façon suivante: a) on traite avec de l'ammoniac méthanolique un composé de formule (I) dans laquelle R et R1 sont tous deux un groupe acyle, ou b) on élimine le groupe protecteur d'un composé de formule (I) dans laquelle R représente un groupe protecteur et

R1 est un groupe acyle.

Les composés de formule (I) dans laquelle R représente un groupe acyle et R1 est un atome d'hydrogène

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sont prépares de la façon suivante: a) on fait réagir un composé de formule (II) avec un composé de formule (III), dans laquelle R est tel que défini ci-dessus, ou b) on élimine le groupe protecteur d'un composé de formule (I) dans laquelle R représente un groupe acyle et R'

est un groupe protecteur.

Les réactions ci-dessus sont illustrées par le schéma réactionnel ciaprès: Schéma réactionnel 1

(II) + (III)

(I)

R' = H

R = acyle ('i R' = ac 1e R = acyie Racyle R = acyle désacylation méthylate de Na désacylation (I) R' = H R = H /ammoniac méthanolique R' = acyle R = H (I) () R = R' = acyle R' = groupe protecteur ou R = H R = acyle, R' = H acylation ou I r (I) R = H, R' = acyle R' = groupe protecteur R = acyle élimination du groupe protecteur R' = H, H = acyle t acylation R' = acyle R = acyle j 9 Lorsque la réaction est achevée, les composés

de formule (I) obtenus sous la forme de base libre, sont éven-

tuellement transformés en sels d'addition acides acceptables du point de vue pharmaceutique, ou bien la base libre est libérée à partir du sel. Le produit peut être séparé à partir du mélange réactionnel d'une façon connue en elle-même, par exemple, par extraction par solvant, évaporation du solvant, etc.. Le produit brut peut être davantage purifié par des méthodes connues en elles-mêmes, par exemple, par récristallisation,

chromatographie ou des méthodes analogues.

Les résultats des divers tests biologiques décrits ci-après, prouvent que les composés de la présente invention

ont la propriété de contrôler différentes variétés de virus.

On a utilisé deux variétés de virus Herpès simplex dans ces tests.HVS-1 est désigné par "HIL", tandis que HVS-2 est désigné par "NAH" dans la littérature internationale. Ces virus se multiplient une fois en 24 à 26 heures et leur

DICT50 est de 106.

Les virus sont cultivés sur une culture de fibro-

blastes de chromosomes diploides. Les cellules fraîchement isolées sont stockées dans de l'azote liquide et les cellules décongelées sont utilisées dans les tests. Les HVS-1 et HVS-2 peuvent tous les deux se multiplier facilement sur ces cellules. On n'a pas observé de mycoplasmes dans les cultures cellulaires. Le bouillon de culture utilisé dans les tests (pH = 7,4), est du Minimal Essential Eagle (MEM, GIBCO) avec des sels d'Earles, complétés avec de la mucine gastrique aqueuse

à 10% de porc, 10 NE/ml de pénicilline et 100 g/ml de strep-

tomycine. Les jeunes cultures presque confluentes des cellules sont infectées avec un virus capable de se multiplier très lentement (DICT50 = 0,01). Après absorption du virus (2 heures à 37 C), le virus qui n'est pas absorbé est éliminé de la culture de cellules et un nouveau bouillon de culture

est appliqué sur la culture cellulaire. Lorsqu'on peut obser-

ver un effet cytopathogène à 75 %, on congèle alors les cel-

lules et on les fait fondre à trois reprises. On élimine par centrifugation les fragments brisés des cellules (15 minutes, 000 tpm). La suspension de virus est stockée à -70 C

avant d'être utilisée.

On met en oeuvre une méthode standard de micro-

dilution (Conrath, Theodore, B., Handbook of Microtiter Pro-

cedures, 1972, Dynatech Corporation, Cambridge, Massachusetts) avec le bouillon mentionné ci-dessus pour déterminer la dose qui infecte à 50 % une culture de tissu (DICT50). Cette valeur indique la dose du virus qui peut infecter 50 % des cultures

cellulaires inoculées.

On détermine l'efficacité des composés de la présente invention en fonction de leur influence sur la

DICT50 des virus. Les suspensions diluées de virus sont absor-

bées sur les cultures cellulaires à une température de 37 C pendant 2 heures. On élimine le virus non-absorbé en lavant avec une solution saline tamponnée par du phosphate (PBS, pH = 2,4). Un nouveau bouillon de culture comprenant les composés de la présente invention à diverses concentrations,

est appliqué sur les cultures cellulaires ainsi infectées.

Chaque test est répété à quatre reprises. Les cultures de cellules sont incubées jusqu'à ce que la DICT50 maximum soit obtenue dans les cultures de cellules infectées

mais non traitées.

On détermine la plus faible concentration de composant actif qui est capable de diminuer la DICT50 du virus d'une unité logarithmique. Cette donnée peut bien caractériser l'efficacité des composés et ceux-ci peuvent être comparés entre eux. Les résultats ainsi obtenus sont résumés dans le

Tableau I ci-dessous.

TABLEAU I

Plus faible concentration inhibitrice (,ug/ml) Composés Variétés de virus

HSV-1 HSV-2

(E)-5-(2-bromovinyl)-2,2'-anhydro-

-1-e-D-arabinofuranosyl uracile 1,0 25

Chlorhydrate de (E)-5-(2-bromovinyl)-2,2'-

-anhydro-3'-acétyl-1-e-D-arabinofura-

nosyl-uracile 0,5 25

(E)-5-(2-bromovinyl)-2,2'-anhydro-

-3',5'-diacétyl-1-

-1-e-D-arabinofuranosyl uracile 2,5 50 L'efficacité antivirale in vivo des composés de

la présente invention est déterminée chez des souris aux-

quelles on a inoculé l'Herpès de l'encéphalite. Des souris

Balb/C pesant 18 g sont utilisées dans les expériences.

Les souris sont infectées par voie intracérébrale (i.c.) sans anesthésie avec une dose de 10 2DI50 d'un virus

dénommé virus 667 (dilué avec 0,05 ml d'un bouillon de cul-

ture MEM).

Chez la souris, la valeur de la DI50 du virus 667 est de 106/O,1 ml. Les animaux du groupe témoin ne sont traités qu'avec le bouillon de culture. Le jour de l'infection et ensuite chaque jour suivant, les souris reçoivent 140 mg/kg des composés d'essai par voie intrapéritonéa-le (0,2 ml, une fois par jour). Les composants actifs sont dissous dans une solution saline physiologique, le groupe témoin n'étant traité qu'avec la solution saline physiologique. On utilise la (E)-5-(2-bromovinyl)-2'désoxyuridine connue comme composé de comparaison. L'art antérieur indique que la dose efficace de (E)-5-(2-bromovinyl)-2'-désoxyuridine est de 140 mg/kg C'est pourquoi l'on utilise les composés d'essai à la même

dose ZAntiviral Research, 2, 255 (1983).

Les résultats obtenus sont rassemblés dans le

Tableau II ci-après.

TABLEAU II

Effet des composés de l'invention sur l'encéphalite

induite par HSV-1 chez la souris.

Jours suivant le jour Rapport du nombre de souris in-

Témoin fectées survivantes de l'infection BrVdU 1155 1153

1. 5/5 5/5 5/5 5/5

2. 5/5 5/5 5/5 5/5

3. 5/5 5/5 5/5 5/5

4. 5/5 5/5 5/5 5/5

5. 5/5 5/5 5/5 5/5

6. 5/5 4/5 5/5 5/5

7. 2/5 4/5 3/5 5/5

8. 1/5 3/5 2/5 5/5

BrVdU = (E)-5-(2-bromovinyl)-2'-désoxyuridine

1155 = (E)-5-(2-bromovinyl)-2,2 '-anhydro-1-e-D-arabino-

furanosyl uracile

1153 = (E)-5-(2-bromovinyl)-2,2'-anhydro-3'-acétyl-1- B-D-

-arabinofuranosyl uracile.

On détermine également chaque jour la toxicité des composés sur des cultures de cellules non-infectées. Les résultats sont comparés aux données qui sont obtenues avec des cultures cellulaires non-traitées. On a pu établir que les composés de la présente invention ne sont pas toxiques à la

dose administrée.

Les agents antiviraux conformes à la présente invention peuvent être administrés par un quelconque moyen qui produit un contact de l'agent actif avec le site d'action de l'agent, dans le corps. Ils peuvent être administrés par un quelconque

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moyen disponible, pouvant être utilisé en association avec

des produits pharmaceutiques, soit en tant qu'agents thérapeu-

tiques individuels, soit en tant que combinaison d'agents thérapeutiques. Ils peuvent être administrés seuls, mais il est habituel de les administrer avec un support pharmaceutique choisi en fonction du mode d'administration prévu et de la

pratique pharmaceutique standard.

La dose administrée dépendra bien sûr, de facteurs connus, comme des caractéristiques pharmacodynamiques de

l'agent particulier, de son mode et de sa voie d'administra-

tion; de l'âge, de la santé et du poids de la personne traitée; de la nature et de l'importance des symptômes, de

la nature du traitement simultané, de la fréquence du traite-

ment et de l'effet désiré. En général, la dose quotidienne de composant actif peut être d'environ 100 à 500 mg/kg de poids corporel, répartie en 2 à 4 prises par jour, ou bien fournie sous une forme à libération continue. Ces médicaments peuvent

aussi être administrés par voie parentérale.

Dans les compositions pharmaceutiques, le compo-

sant actif représentera ordinairement 0,5 à 95 % en poids du

poids total de la composition.

Le composant actif peut être administré par voie orale sous forme de doses solides, comme des capsules, des comprimés, des poudres, etc.. ou de doses liquides, comme des élixirs, des sirops, des suspensions, etc.. Il peut aussi être administré par voie parentérale, sous forme de doses

liquides stériles.

Des capsules de gélatine contiennent le composant actif et des supports pulvérulents, comme du lactose, du sucrose, du mannitol, de l'amidon, des dérivés cellulosiques, du stearate de magnésium, de l'acide stéarique, etc.. On peut

utiliser des diluants analogues pour préparer des comprimés.

Les capsules et les comprimés peuvent être fabriqués sous forme de produits à libération continue du.médicament pendant une période de quelques heures. Les comprimés peuvent être revêtus de sucre ou d'un film pour masquer un quelconque goût

désagréable et protéger ces pastilles vis à vis de l'atmos-

phère, ou bien pourvus d'un enduit entérique pour qu'ils se

désagrègent de façon sélective dans les voies gastrointesti-

nales. Les doses sous forme liquide à usage oral peuvent

renfermer des colorants et des parfums pour être mieux accep-

tées par le malade.

En général, l'eau, une huile convenable, une solu-

tion saline, des solutions aqueuses de dextrose (glucose) et de sucres apparentés et des glycoles, comme le propylène glycol ou des polyethylene glycols constituent des supports appropriés

pour des solutions parentérales. Des solutions à usage paren-

téral contiennent de préférence un sel soluble dans l'eau du composant actif, des agents stabilisants convenables et, si nécessaire, des substances tampons. Des antioxydants comme le sulfite acide de sodium, le sulfite de-sodium ou l'acide ascorbique, soit seuls soit en association, sont des agents stabilisants convenables. On utilise aussi l'acide citrique

et ses sels et l'EDTA sodique. De plus, les solutions paren-

térales peuvent renfermer des agents conservateurs comme un chlorure de benzalconium, du méthyl- ou propyl-paraben et

du chlorobutanol.

Des supports pharmaceutiques convenables sont décrits dans Remington's Pharmaceutical Sciences, A. Osol,

qui est un texte de référence standard dans ce domaine.

Outre les dispositions qui précèdent, l'invention comprend encore d'autres dispositions, qui ressortiront de

la description qui va suivre.

L'invention sera mieux comprise à l'aide du complé-

ment de description qui va suivre qui se réfère à des exem-

ples de mise en oeuvre du procédé, objet de la présente invention. I1 doit être bien entendu, toutefois, que ces exemples de mise en oeuvre sont donnés uniquement à titre

d'illustration de l'objet de l'invention, dont ils ne consti-

tuent en aucune manière une limitation.

Exemple 1

Préparation de chlorhydrate (E)-5-(2-bromovinyl)-

-2,2'-anhydro-3'-O-acétyl-l-$-D-arabinofuranosyl uracile.

g (0,071 mole) de (E)-5-(2-bromovinyl)-

uridine sont mis en suspension dans 250 ml d'acétonitrile anhy-

dre, puis additionnés de 35,5 g (0,179mole) de chlorure acétylsalicylique et le mélange réactionnel est agité pendant 10 minutes à une température externe de 50 à 60 C. On obtient une solution tout à fait claire après 10 minutes. Le chauffage extérieur est arrêté et le mélange réactionnel est agité

pendant une heure supplémentaire à la température ambiante.

Des cristaux précipitent après une période de 15 à 20 minutes.

Ceux-ci sont séparés par filtration, puis la liqueur-mère est concentrée à chaud (50 C). Le sirop résiduel est trituré avec ml d'éther, les cristaux ainsi obtenus sont séparés par

filtration et lavés avec 20 ml d'éther.

Le poids du produit brut est de 25 g; p.f. = 120-130 C. Le produit brut est dissous dans 50 ml de méthanol contenant 2 à 3 % d'acide chlorhydrique, éventuellement filtré, puis saturé avec 5 volumes d'éther. On laisse reposer le produit obtenu pendant une nuit dans un réfrigérateur, on sépare les cristaux en les filtrant et on les sèche. On obtient ainsi le chlorhydrate du composé recherché. Rendement:

-22 g (74-81 %). P.f. = 152-155 C.

Analyse élémentaire: Valeurs calculées (%) Trouvées (%)

C 35,53 35,35

H 3,76 4,10

N 7,68 7,50

Br 21,32 21,62 Cl 9,46 9,50

Exemple 2

Préparation du (E)-5-(2-bromovinyl)-2,2'-anhydro-

-3',5'-di-O-acétyl-l-e-D-arabinofuranosyl uracile 7 g du produit brut obtenu selon la procédure de l'Exemple 1, sont additionnés de 40 ml d'anhydride acétique, 42 ml de triéthylamine et de 20 mg de 4diméthylaminopyridine comme catalyseur. La plus grande partie des substances se dissout immédiatement. Le mélange réactionnel est laissé reposer une nuit, puis concentré sous vide à une température de 50 à 60 C. Le sirop résiduel est repris avec 50 ml de

chloroforme et extrait avec deux portions de 20 ml d'une solu-

tion aqueuse saturée de carbonate acide de potassium. La

phase organique est séparée, séchée sur du sulfate de magné-

sium anhydre et évaporée sous vide après élimination de l'agent de dessication. Le produit cristallin résiduel est

recristallisé dans l'éthanol.

Rendement: 5-5,5 g (64-70 %). P.f.: 177 C.

Analyse élémentaire: Valeurs calculées (%) Trouvées (%)

C 43,28 43,54

H 3,8 4,1

N 6,73 6,79

Br 19,19 19,20

Exemple 3

Préparation du (E)-5-(2-bromovinyl)-2,2'-anhydro-

-1-e-D-arabinofuranosyl uracile -, On ajoute 100 ml de méthylate de sodium, 0,5 M à 10 g du produit brut obtenu dans l'Exemple 1. On obtient

une solution très claire, qu'on laisse reposer à la tempéra-

ture ambiante pendant 3 heures. On neutralise la solution en ajoutant de la résine Dowex 50 H+, puis on filtre la résine,

on la lave et l'on évapore le mélange sous vide à une tempé-

rature de 50 C. Le produit cristallin est recristallisé dans l'eau.

Rendement: 5-6 g (63-79 %). P.f.: 193 C-.

Abalyse élémentaire: Valeurs calculées (%) Trouvées (%)

C 39,66 39,80

H 3,33 4,1

N 8,60 8,59

Br 23,99 24,00

Exemple 4

Préparation de (E)-5-(2-bromovinyl)-2,2'-anhydro-

-3'-O-propionyl-l-e-D-arabinofuranosyl uracile

3,49 g (10 millimoles) de (E)-5-(2-bromovinyl)-

* uridine sont mis en suspension dans 30 ml d'acétonitrile

anhydre, puis additionnés de 6,38 g (30 millimoles) de chlo-

rure propionyl salicylique et le mélange réactionnel est agité pendant 10 minutes à une température de 50 à 600C. On

obtient une solution tout à fait claire au bout de 10 minutes.

On arrête ensuite le chauffage extérieur et l'on agite la solution pendant une heure supplémentaire à la température ambiante. Le produit ainsi obtenu est concentré sous vide à C. On ajoute 20 ml de méthanol anhydre au résidu et l'on répète l'évaporation pour décomposer l'excès de chlorure d'acide. Le sirop résiduel est additionné de 100 ml d'éther et la solution est agitée pendant 2 heures à la température ambiante. On recueille ainsi le chlorhydrate du compose recherché, que l'on filtre et sèche. Le poids du produit brut

est de 3 g; p.f. = 150-160 C.

Le produit brut obtenu de la façon qui est décrite ci-dessus, est dissous dans 10 à 20 ml de méthanol et du méthylate de sodium est ajouté jusqu'à ce que le pH de la

solution soit de 5 (le pH est contrôlé avec un papier indi-

cateur). La solution ainsi obtenue est évaporée sous vide et

le résidu est repris avec 20 ml d'acétate d'éthyle. Le préci-

pité est séparé par filtration, lavé avec deux portions de ml d'acétate d'éthyle puis les solutions combinées sont concentrées sous vide à une température externe de 50 C. Le résidu ainsi obtenu est dissous dans 5 ml d'éthanol et laissé

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repoer à la température ambiante. Le produit final cristallise lentement, il est séparé par filtration et séché le jour suivant.

Rendement: 2,5 g (64,43 %). P.f. = 191-192 C.

Rf = 0,56 dans un mélange 95:5 d'acétate d'éthyle et de méthanol. Analyse élémentaire: (C14H15BrN206;PM = 387,19) Valeurs calculées (%) Trouvées (%)

C 43,42 43,13

H 3,90 4,03

N 7,23 7,00

Br 20,63 20,40 Exemples 5 à 10 Les nouveaux composés rassemblés dans le Tableau III sont préparés selon la procédure qui est décrite dans

les Exemples 1 à 4 avec les matières de départ appropriées.

TABLEAU III

N de 1' Matière de Agent Produit final Rendement p.f. R Exemple départ acylant R R' (%) (E)-(2-Bromo- Chlorure d'acide benzoyle H 8 240-241 0Q50 vinyl) uridine benzoylsalicylique 6 (E) - (2-Bromo- Chlorure d'acide pmethyl- H 5 219-220 0O54 vinyl)uridine p-Me-benzoyl- benzoyle salicylique 7 (E)-(2-Bromo- Chlorure d'acide cyclohexa- H 10 180 0,51 vinyl) uridine cyclohexanoyl noyle salicylique 8 (E)-(2-Bromo- Chlorure d'acide methyl- H 6 220-221 0,54

vinyl) uridirne 4-Méthylcyclo cyclo-

héxanoyl- hexanoyle salicylique 9 (E)-(2-Bromo- Chlorure d'acide furanoyle H 6 216-217 0,44

vinyl) uridine -Furanoyl-

salicylique

(E)-(2-Bromo- Chlorure d'acide i-butyr.y]e H 15 205 0 45.

vinyl) uridine Isoibutyl salicylique TABLEAU III (suite) N de 1' Matière de Analyse élémentaire ExempledFpart Formule Poids Valeurs calculees (%) Valeurs trouvées (%) Ermolaire C H N Br C H N Br (E)i(2-BromoC18H1506N2Br 435t23 49,67 3?47 6144 18,36 49,78 338 6,41 18,52 vinyl) uridine 6 (E)-(2-Bromo- C19H1706N2Br 449>26 50,79 3782 6,42 17t78 50785 3) 75 6,30 17;55 vinyl) uridine 7 (E)-(2-Bromo- C18H2606N2Br 446732 49,0 4, 80 6,30 17790 49;63 4,86 6;21 18,12 vinyl) uridine 8 (E)-(2-BromoC19H2306N2Br 455730 50,13 5?09 6416 17,55 50,31 5,15 6,20 17;34 vinyl) uridine 9 (E)-(2-Bromo- C16H1407N2Br 426 20 451'9 3908 6,59 19,91 4522 3, 0 6,60 19;86 O vinyl) uridine (E)-(2-Bromo- C15H1706N2Br 401f22 44e90 4 27 6e98 18,74 44,96 4729 6,88 18,58 vinyl) uridine NI hà -4 r 0%

2 5 71726

Exemple 11

Préparation du (E)-5-(2-bromovinyl)-2,2'-anhydro-

-5'-(4-méthoxytriphénylméthyl)-1-e-D-arabinofu-

ranosyl uracile 3,31 g (10 millimoles) de (E)-5-(2-bromovinyl- -2,2'-anhydro-1-B-D-arabinofuranosyl uracile sont dissous dans ml de pyridine anhydre, puis additionnés sous agitation de

3,12 g (11,4 millimoles) de chlorure de (4-méthoxytriphényl)-

méthyle. La solution est agitée pendant 20 minutes à la tempé-

rature ambiante, puis évaporée à siccité. Le résidu est dissous dans du chloroforme et extrait à l'eau. Après séchage, la phase organique est évaporée, puis dissoute dans du méthanol et séchée sur environ 20 g de gel de silice par distillation sous vide. La substance ainsi appliquée sur le gel de silice est disposée en couche dans une colonne de gel de silice, puis elle est éluée avec un mélange 8:2 d'acétate d'éthyle et d'éther de pétrole, et ensuite avec un mélange 8:2 d'acétate d'éthyle et de méthanol.Les fractions contenant le produit désiré sont évaporées et le produit est cristallisé à partir

d'un mélange de cyclohexane et de méthanol.

Rendement: 2,5-2,8 g (80-90 %). p.f.: 121 C.

Analyse élémentaire Valeurs calculées (%) Trouvées (%)

C 61,7 62,2

H 4,51 4,39

N 4,64 4,80

Exemple 12

Préparation des (E)-5-(2-bromovinyl)-2,2'-anhydro-

-3,-O-acyl-l-8-D-arabinofuranosyl uraciles

3,0 g (5 millimoles) de 5'-(4-méthoxytriphényl-

méthyl)-2,2'-anhydro-(E)-5-(2-bromovinyl) uridine sont dissous dans 10 ml de pyridine anhydre puis additionnés goutte à goutte de 11 millimoles du chlorure d'acide carboxylique approprié, sous agitation et avec refroidissement avec de la glace. Le mélange réactionnel est agité pendant une nuit, puis additionné de 50 ml de méthanol. La solution est évaporée sous vide, le résidu est dissous dans du chloroforme et extrait avec 3 portions de 5 ml d'eau. La phase organique est séchée sur du sulfate de magnésium anhydre et évaporée à siccité sous vide. Le résidu est dissous dans 150 ml d'acide acétique à % et laissé reposer à la température ambiante pendant 4 heures. La solution homogène est évaporée à siccité. Le résidu cristallise par addition de chloroforme. Les cristaux

sont séparés par filtration et lavés avec du chloroforme.

Rendement: 2,5 à 4 millimoles du produit désiré (50 à 80 %).

Exemple 13

Préparation du (E)-5-(2-bromovinyl)-2,2'-anhydro-

-3'-benzoyl-1-B-D-arabinofuranosyl uracile

3,02 g (5 millimoles) de 5'-(4-méthoxytriphényl-

méthyl)-2,2'-anhydro-(E)-5-(2-bromovinyl) uridine sont dissous dans 10 ml de pyridine anhydre et additionnés goutte à goutte de 1,28 ml (11 millimoles) de chlorure de benzoyle, sous

agitation et avec refroidissement avec de la glace. Le mélan-

ge réactionnel est agité à la température ambiante pendant une nuit, puis additionné de 50 ml de méthanol. La solution

est évaporée sous vide, le résidu est dissous dans du chloro-

forme et extrait avec de l'eau à trois reprises. La phase

organique est évaporée à siccité et le résidu solide est dis-

sous dans 150 ml d'acide acétique à 80 %, sous agitation.

Apres une période de 4 heures, le mélange réactionnel est évaporé sous vide et la teneur totale en eau est éliminée par distillation azéotropique répétée avec de l'éthanol. Le résidu est cristallisé dans du chloroforme. Le produit est séparé

par filtration et séché.

Rendement: 1,6 g (75 %); p.f. = 240-241"C. Rf = 0,50 (dans

un mélange 95:5 d'acétate d'éthyle et de méthanol).

Analyse élémentaire: Valeurs calculées (%) Trouvées (%)

C 49,67 49,78

H 3,47 3,38

N 6,44 6,41

257 1 2 6O

Les composés indiqués dans les Eemples 6 à 10

sont prépares selon la procédure qui est décrite ci-dessus.

Les constantes physiques des composés sont les mêmes que celles qui sont données dans le Tableau I, tandis que les rendements sont les suivants: Composé Rendement (%)

6 80

7 63

8 50

9 72

75

Exemples 14 à 16

Préparation des (E)-5-(2-bromovinyl)-2,2'-anhydro-

-5'-O-acyl-l-B-D-arabinofuranosyl uraciles

10 millimoles de (E)-5-(2-bromovinyl)-2,2'-

anhydro-3',5'-di-O-acyl-l-B-D-arabinofuranosyl uracile sont dissous dans 100 ml d'une solution méthanolique d'hydroxyde

d'ammonium (le méthanol est saturé d'ammoniac à une tempéra-

ture de 0 C et dilué jusqu'à ce que la concentration d'ammo-

niac soit réduite au dixième, avant utilisation). Le flacon contenant le mélange réactionnel et fermé avec un bouchon, est laissé reposer à la température ambiante pendant 10 à 20 minutes, puis évaporé à siccité. Le produit solide ainsi obtenu

est recristallisé dans du méthanol.

La structure chimique des produits est vérifiée par spectroscopie RMN, tandis que leur pureté est contrôlée par la mesure du point de fusion et par chromatographie sur couche mince (CCM). L'analyse par CCM est effectuée sur une couche de gel de silice, avec un mélange 9:1 de benzène et de méthanol comme éluant et les taches sont détectées en

lumière U.V.

Les constantes physiques et les rendements en

(E)-5-(2-bromovinyl)-2,2'-anhydro-5'-O-acyl-l-e-D-arabino-

furanosyl uraciles ainsi obtenus, sont rassemblés dans le

Tableau IV.

f7 17

TABLEAU IV

N de 1' Composé de départ Produit final Rende- p.f. Rf exemple R R' R R' ment % C 14 benzoyle benzoyle H benzoyle 82 228-229 0,4 e-phényl- 0phényl- H $-phényl- 84 250-251 0,8 propionyle propionyle propionyle 16 furoyle furoyle H furoyle 80 193-195 0,44 Exemples 17 à 29

Préparation de dérivés de (E)-5-(2-bromovinyl)-

-2,2'-anhydro-3',5'-di-O-acyl-l-e-D-arabinofu-

ranosyl uracile.

1. Préparation des (E)-5-(2-bromvinyl)-2,2'-anhydro-3'-acyl-1-

-e'-acyl-l-0-D-arabinofuranosyl uracile par acylation du (E)-5-

-(2-bromovinyl)-2,2'-anhydro-1-e-D-arabinofuranosyl uracile.

a) Acylation avec un anhydride d'acide:

1 millimole de (E)-5-(2-bromovinyl)-2,2'-

-anhydro-l-e-D-arabinofuranosyl uracile est additionné de millimoles de l'anhydride d'acide approprié (anhydride acétique, propionique, etc..), de 0,2 ml de triéthylamine et de 4 à 5 mg de 4-diméthylaminopyridine comme catalyseur, puis le mélange

réactionnel est chauffé à 60-80 C à l'abri de toute humidité.

On obtient une solution tout à fait claire que l'on laisse reposer à la température ambiante. Des cristaux commencent à cristalliser après 0,5 heure. Cinq à six heures plus tard, les cristaux ainsi obtenus séparés par filtration et lavés avec une petite quantité d'éther. Le produit brut est recristallisé

dans un alcool.

b) Acylation avec un chlorure d'acide.

On ajoute 3 ml de pyridine anhydre et 2,5 mil-

limoles du chlorure d'acide approprié à 1 millimole de (E)-5-

-(2-bromovinyl)-2,2'-anhydro-1-e-D-arabinofuranosyl uracile.

Le mélange réactionnel est chauffé à une température de 60 à C à l'abri de toute humidité. On obtient une solution tout à fait claire. Les premiers cristaux apparaissent au

bout d'environ une heure. Les cristaux précipités sont sépa-

rés par filtration après une période d'environ 3 à 4 heures, puis lavés abec une petite quantité d'éthanol froid et recris-

tallisés dans l'éthanol ou le diméthyl-formamide.

2. Préparation du composé recherché par acylation du

(E)-5-(2-bromovinyl)-2,2'-anhydro-3'-O-acyl-l-B-D-arabino-

furanosyl uracile.

a) Acylation avec un anhydre d'acide.

L'acylation peut être réalisée selon la pro-

cédure de la méthode la) ci-dessus, avec un anhydride d'acide

carboxylique inférieur.

b) Acylation avec un chlorure d'acide.

La procédure qui est décrite dans le point lb) ci-dessus peut être suivie, sauf que 1,25 millimole d'un chlorure d'acide est ajouté à la place des 2,5 millimoles de chlorure d'acide, quantité calculée pour 1 millimole du composé

de départ.

Les composés préparés suivant les méthodes ci-

dessus, leurs constantes physiques, rendement, données d'ana-

lyse élémentaire et les matières de départ mises en oeuvre dans la procédure, sont rassemblés dans le Tableau V.

TABLEAU V

N de 1' Composé de départ Agent d' Produit final Rendement p.f. R exemple R R' acylation R R' % C 17 H H Anhydride n-propionyl n-propionyl 59,77 215 0,64 propïonîque 5,7 2 506 18 H H Chlorure de i-butyryl i- butyryl 66,18 221-222 0.,72 i-butyryle 19 H H Chlorure de i-valéroyl i- valeryl 46,09 212-214 0,81 i-valéryle 2-HChlorure d'acide H H cyclohexare carcyclo- cyclo- 81161 263 0,75 boxylique -hexanoyl hexanoyl 21 H H Chlorure de furoyl furoyl 92129 242 0,67 2-furoyle 22 H H Chlorure de benzoyl benzoyl 91797 261 0173 benzoyle ! 23 H H Chlorure de p- p-methylp-methyl- 67,86 260 0,73 méthyle- benzoyl benzoyl benzoyle TABLEAU V (suite) N de 1' Composé de départ Formule Poids Analyse Elémentaire FormulePid Exemple R R' molaire Valeurs calculées(%) Trouvées (%) C H N Br C H N Br 17 H H C17H1907 2Br 443.25 46r04 4 32 6,32 18,02 46,40 4,65 6, 44 -16,76 18 H H C19H2307N2Br 471,30 48,84 4191 5,94 16778 48,26 5114 5193 16,64 19 H H C21H2707N2Br 499}26 50;49 5,45 5,61 16700 50)44 5t74 5, 54 16,28 H H C25H3107N2Br 551743 54 44 5766 5,08 14749 54,71 5t90 4196 15, 01 21 H H C21H15 09N2Br 519r26 48,57 2791 5139 15,38 48t82 3120 5/24 16/08 22 H H C25H1907N2Br 539T39 56,67 3e55 5,14 14782 56,22 4;43 4,92 14, 90 23 H H C27H1307N2Br 567,38 57,68 4,08 4;93 14,08 57,38 4,32 4,72 14,13

27 13_7 2

TABLEAU V (suite) N de 1' Composé de départ Agent Produit final Rendement p.f. R Exemple R R' d'acylation R R' % C 24 H H Chlorure d'acide nicotinoyl nicotinoyl 85;71 235 0,65 nicotinique H H Chlorure de 44-methyl- 4-methyl- 81,11, 266-267 0,85

méthyl-cyclohe- cyclohexa- cyclohexa-

xanoyle noyl noyl 26 acetyl H Chlorure de acetyl benzoyl 83,18 261 0,52 benzoyle Chlorure de 27 acetyl H Chlorure de acetyl furoy]. 79,87 238 0Z52 furanoyle 7,72805 ! 28 acetyl H hlorure de acetyl cyclo- 63,14 235 0, 52 Chlorure de hxny cyclo-hexanoyleexanoy 29 acetyl H Chlorure de acetyl i-valeryl 73,70 226 0/53 i-valêryle TABLEAU V (suite) No de Il Composé de départ Formule Poids Analyse Elémentaire ..od Exepl mp o ddpr omle Molaire Valeurs calculées % Trouvées % R R' C H N Br C H N Br 24 H H C23H1707N2Br 513730 51,02 3f16 10135 14176 50194 3y38 0lr23 14,81 H H C27H3507N2Br 579;48 56.,41 6,08 4183 13,78 56.23 6142 4768 13r82 26 acetyle H C20H1707N2Br 477>27 50,33 3r59 5787 16,74 50,42 3;65 5,84 16,54 27 acetyle H C18H1508N2Br 467,23 46,26 3,23 5,99 17,10 46,45 3173 5192 17r20 28 acetyle H C20H2307N2Br 483;31 49,67 4 79 5979 16,53 49,72 4184 6, O0 16,48 29 acetyle H C17H2107N2Br 445/25 45,86 4175 6129 17>51 46,01 4, 49 6w30 17,84

7 172

D'utiles formes d'administration de doses pharma-

ceutiques des composés conformes à la présente invention, peu-

vent être illustrées de la façon suivante: Comprimé 1: Composé de formule (I) o R = acétyle, R' = H 140 mg Support q.s.p. un comprimé Comprimé 2: Composé de formule (I) o R = acétyle, R' = H 500 mg Support q.s.p. un comprimé Composé 3: Composé de formule (I) o R = R' = H 140 mg Support q. s.p. un comprimé Capsule: Composé de formule (I) o R = R' = H 300 mg Ascorbinate de sodium 30 mg Support q.s.p. une capsule Gouttes: Chlorhydrate du composé de formule (I) o R = R' = acétyle 600 mg Vitamine C 3 mg

Diluant q.s.p. 100 ml.

Solution pour infusion: Chlorhydrate du composé de formule (I) o R = acétyle, R' = H 6 g dissous dans une solution saline physiologique, introduit dans des ampoules de 2,0 à 5,0 ml

après filtration pour stériliser, q.s.p. 1000 ml.

Ainsi que cela ressort de ce qui précède, l'inven-

tion ne se limite nullement à ceux de ses modes de mise en oeuvre, de réalisation et d'applications qui viennent d'être décrits de façon plus explicite; elle en embrasse au contraire toutes les variantes qui peuvent venir à l'esprit du technicien en la matière, sans s'écarter du cadre, ni de

la porrée de la présente invention.

257 1726

Claims (11)

REVENDICATIONS

1. Composé de formule (I)

0

R'O

OR

caractérisé en ce que R et R' sont identiques ou différents et

représentent un atome d'hydrogène ou un groupe acyle éventuel-

lement substitué, de préférence un groupe alcanoyle à chaîne droite ou ramifiée et éventuellement substitué, un groupe cycloalcanoyle éventuellement substitué, un groupe aroyle

éventuellement substitué ou un groupe hétéroaroyle éventuel-

lement substitué, et ses sels d'addition acides acceptables

du point de vue pharmaceutique.

2. Composé de formule (I) suivant la revendication 1 caractérisé en ce que: R et R' sont identiques ou différentes et représentent un atome d'hydrogène ou un groupe alcanoyle éventuellement

substitué à chaîne droite ou ramifiée ayant 1 à 8 ato-

mes de carbone, un groupe cycloalcanoyle éventuellement substitué ayant 4 à 9 atomes de carbone, un groupe aroyle éventuellement substitué ayant de 7 à 11 atomes de carbone ou un groupe hétéroaroyle ayant 4 à 11

atomes de carbone et 1 ou 2 atomes d'oxygène, de sou-

fre et/ou d'azote comme hétéroatomes, ou ses sels 717l26

d'addition acides acceptables du point de vue pharmaceutique.

3. Composé de formule (I) suivant la revendi-

cation 1, caractérisé en ce que: R et R' sont identiques ou différents et représentent un atome d'hydrogène ou un groupe alcanoyle éventuelle- ment substitué à chaîne droite ou ramifiée, ayant 1 à 4 atomes de carbone,

et ses sels d'addition acide acceptables du point de vue phar-

maceutique.

4. Composé de formule (I) suivant l'une quelcon-

que des revendications 1 à 3, caractérisé en ce que les subs-

tituants éventuellement présents, sont des groupes alcoyles

et/ou des aryles.

5. Composé de formule (I) suivant l'une quelcon-

que des revendications 1 à 4, caractérisé en ce que les subs-

tituants éventuellement présents sont des groupes alcoyles ayant 1 à 6 atomes de carbone et/ou aryles carbocycliques ayant

6 à 10 atomes de carbone.

6. Composé choisi dans le groupe comprenant le (E)-5-(2-bromovinyl)-2,2'anhydro-1- -D-arabinofuranosyl

uracile, le (E)-5-(2-bromovinyl)-2,2'-anhydro-3'-acétyl-1-B-

-D-arabinofuranosyl uracile, le (E)-5-(2-bromovinyl)-2,2'-

-anhydro-3',5 '-diacétyl L-e-D-arabinofuranosyl uracile et leurs sels

d'addition acides acceptables du point de vue pharmaceutique.

7. Composé de formule (I) caractérisé en ce que R et R' sont identiques ou différents et représentent un atome d'hydrogène ou un groupe protecteur convenable à condition

qu'au moins l'un des R et R' soit un groupe protecteur.

8. Composé de formule (I) caractérisé en ce que R et R' sont identiques ou différents et représentent un atome d'hydrogène ou un groupe (4méthoxytriphényl)-méthyl, à

condition qu'au moins l'un des R et R' soit le groupe (4-méthoxy-

triphényl)-méthyle.

9. Procédé de préparation d'un composé de for-

mule (I) et de ses sels d'addition acides pharmaceutiquement compatibles, dans laquelle: R et R' sont identiques ou différents et représentent un atome d'hydrogène ou un groupe acyle éventuellement substitué, de préférence un groupe alcanoyle éventuellement S substitué à chaine droite ou ramifiée, un groupe cycloalcanoyle éventuellement substitué, un groupe

aroyle éventuellement substitué ou un groupe hétéro-

aroyle éventuellement substitué, caractérisé en ce qu'on fait réagir un composé de formule (II) ci-après, 10 %Ok

H I H

avec un composé de formule (III), MUMR so o R est tel que défini plus haut, et qu'ensuite on effectue éventuellement une ou plusieurs des réactions suivantes: a) on acyle un composé de formule (I), o l'un au moins des R et R' est un atome d'hydrogène avec un composé de formule (IV) ci-après, Y C1 (Iv)

2 5 7 1 72 6

ou (V)

0 (V)

y o Y a la signification définie pour R ou R',

b) on désacyle un composé de formule (I), dans la-

quelle l'un au moins des R et R' représente un groupe acyle,

avec du méthylate de sodium ou de l'ammoniaque méthanolique.

c) on introduit un groupe protecteur dans le composé de formule (I), dans laquelle R et R' sont un atome d'hydrogène, on acyle le composé ainsi obtenu avec un agent acylant de formule (IV) ou (V) et l'on désacyle le composé ainsi

obtenu, puis l'on transforme le composé de formule (I) résul-

tant sous forme de base libre en un sel d'addition acide acceptable du point de vue pharmaceutique, ou l'on libère la

base libre à partir du sel.

10. Composition pharmaceutique antivirale, carac-

térisée en ce qu'elle comprend essentiellement au moins un

composé de formule (I) suivant l'une quelconque des revendi-

cations 1 à 6 et un support pharmaceutique convenable.

11. Application des compositions suivant la re-

vendication 10 à l'inhibition des infections virales par

l'administration d'une quantité convenable d'au moins un com-

posé de formule (I) suivant l'une quelconque des revendica-

tions 1 à 6.