FR2479261A1 - Procede pour la determination d'acides gras libres - Google Patents

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Sakayu Shimizu
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    • C12Q1/00Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
    • C12Q1/25Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving enzymes not classifiable in groups C12Q1/26 - C12Q1/66

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Abstract

LA PRESENTE INVENTION CONCERNE UN PROCEDE POUR LA DETERMINATION D'ACIDES GRAS LIBRES, QUI COMPREND UN PREMIER SYSTEME REACTIONNEL OU ON LAISSE AGIR L'ACYL COENZYME A SYNTHETASE SUR LES ACIDES GRAS LIBRES EN PRESENCE D'ADENOSINE TRIPHOSPHATE ET DE COENZYME A POUR DONNER L'ACYL COENZYME A ET UN DEUXIEME SYSTEME REACTIONNEL OU ON LAISSE AGIR L'ACYL COENZYME A OXYDASE SUR L'ACYL COENZYME A POUR FORMER DU PEROXYDE D'HYDROGENE, POUR DETERMINER ENSUITE CELUI-CI. SELON L'INVENTION, DE LA MYOKINASE EST AJOUTEE DANS LE PREMIER SYSTEME REACTIONNEL POUR OBTENIR RAPIDEMENT L'ACHEVEMENT DE LA REACTION; LE DESSIN JOINT MONTRE LA RELATION ENTRE L'ACTIVITE DE L'ACYL-COA SYNTHETASE ET L'ABSORBANCE A 500NM EN PRESENCE ET EN L'ABSENCE DE MYOKINASE. L'INVENTION S'APPLIQUE NOTAMMENT A UN PROCEDE ENZYMATIQUE POUR LA DETERMINATION DES ACIDES GRAS LIBRES.

Description

La présente invention se rapporte généralement à un procédé enzymatique
pour la détermination d'acides gras libres, et elle se rapporte plus particulièrement à un procédé pour l'estimation d'acides gras libres en utilisant l'acyl coenzyme A (ci-après acyl-CoA) synthétase et l'acyl-CoA oxydase, o une séquence de réactions mises en cause est accélérée par addition de myokinase, afin de permettre ainsi une détermination rapide et précise des
acides gras libres.
e1C En général, les procédés de détermination des acides gras libres dépendent de procédés chimiques comme une extraction au solvant organique, qui sont difficiles à manipuler. En conséquence, il y a une forte demande d'un
procédé plus simplifié.
Récemment, cependant, un procédé enzymatique pour la détermination d'acides gras libres dans le sérum en utilisant l'acyl-CoA synthétase a été développé (voir
publication du brevet japonais nO 52-17085).
Ce type de détermination est basé sur une séquence de systèmes enzymatiques o l'acyl-CoA synthétase peut agir sur les acides gras libres en présence d'adénosine triphosphate (ci-après ATP) pour donner de l'adénosine monophosphate (ci-après AMP). La formation d'AMP est alors suivie de la production d'acide pyruvique par l'action de myokinase et de pyruvate kinase. La quantité d'acide pyruvique formé est principalement proportionnelle aux quantités des acides gras libres. Comme le sérum contient habituellement des enzymes décomposant ATP, comme des ATPases et des phosphatases, plus ou moins, 1'ATP dans le système de mesure se rompt sous l'action de ces enzymes en adénosine diphosphate (ADP), mesuré sous forme d'acide pyruvique. Une autre réaction apparente dûe à l'acide pyruvique endogène a lieu dans ce procédé. Ces défauts posent un problème parce que la valeur résultante est
peu fiable.
En_ plus du type ci-dessus mentionné de quantification, les procédés de détermination utilisant d'autres systèmes enzymatiques sont introduits. Dans ces procédés,on mesure
l'acyl-CoA formé d'acides gras libres par l'action d'acyl-
CoA synthétase comme la production de péroxyde d'hydrogène en utilisant l'acyl-CoA oxydase. Le péroxyde d'hydrogène
formé est suivi colorimétriquement par l'action de péroxy-
dase 4-aminoantipyrine et de phénol. Le procédé d'un tel type présente un grand avantage parce que l'influence de la réaction apparente est hors de considération, même si des ATPases, des phosphatases et de l'acide pyruvique sont présents dans le sérum. On trouve cependant qu'il y a encore beaucoup à demander
du point de vue pratique.
Quand l'acyl-CoA synthétase agit sur les acides gras libres en présence d'ATP, l'AMP résultant gêne la formation d'acyl-CoA. Par conséquent, les acides gras libres dans
ce sérum ne sont pas totalement convertis en acyl-CoA.
Même si une quantité donnée d'acyl-CoA oxydase est alors forcée à agir sur l'acyl-CoA pour donner du péroxyde d'hydrogène, les aciaes gras libres du sérum ne sont pas
totalement convertis en péroxyde d'hydrogène; par consé-
quent la mesure obtenue des acides gras est inférieure
à la valeur réelle.
Pour éliminer ce défaut d à un faible taux de
réaction, il faut soit appliquer une plus forte concentra-
tion d'acyl-CoA synthétase ou avoir une durée de mesure considérable. Une telle opération supplémentaire nuit
à la valeur commercialeda procédé.
Par suite de recherches intensives effectuées afin de remédier à ces défauts, les présents inventeurs ont trouvé qu'une séquence de réactions mises en cause pouvait être favorisée en convertissant AMP formé sous
l'actioncelacyl-CoA synthétase en ADP par la myokinase.
En introduisant cette conception, c'est-à-dire l'enlèvement de AMP des systèmes réactionnels, il est possible de supprimer les restrictions placées sur la formation d'acyl-CoA par AMP et de forcer la formation d'acyl-CoA
jusqu'à un achèvement rapide.
Ainsi, la présente invention concerne un procédé pour la détermination d'acides gras libres comprenant unpremier système réactionnel o l'acylCoA synthétase peut agir sur les acides gras libres en présence d'ATP et du coenzyme A pour formerl'acyl-CoA et un deuxième système réactionnel o on laisse agir l'acyl-CoA oxydase sur l'acyl-CoA obtenu dans le premier système pour donner du péroxyde d'hydrogène, caractérisé en ce que l'on ajoute de la myokinasedans le premier système réactionnel pour forcer la réaction
à s'achever rapidement, et le péroxyde d'hydrogène résul-
tant est soumis à un développement de couleur pour sa
quantification en utilisant une colorimétrie.
Si l'on fait agir l'acyl-CoA oxydase sur l'acyl-CoA pour permettre la formation rapide de peroxyde d'hydrogène, alors celui-ci se forme proportionnellement par rapport aux acides gras libres. Le peroxyde d'hydrogène résultant est traité avec de la 4-aminoantipyrine et du phénol comme réactifs avec coexistence de péroxydase pour développer une couleur d'o sont déterminées, à leur tour, les quantités réelles des acides gras libres dans le sérum, par colorimétrie. Cela contribue également à une réduction
considérable de la durée de la réaction.
L'invention sera mieux comprise et d'autres buts,
caractéristiques, détails et avantages de celle-ci apparaî-
tront plus clairement au cours de la description explicative
qui va suivre faite en référence aux dessins schématiques annexés donnés uniquement à titre d'exemple illustrant un mode de réalisation de l'invention et dans lesquels: - la figure 1 illustre la relation entre l'activité de l'acyl-CoA synthétase, sur l'axe des abscisses et l'absorbance à 500 nm, sur l'axe des ordonnées, dans un système pour mesurer les acides gras libres selon la présente invention en présence et en l'absence de myokinase; - la figure 2 est un graphique illustrant l'inhibition des réactions imposées par AMP dans le. système de mesure selon la présente invention, le temps étant indiqué en abscisse et l'absorbance à 500 nm en ordonnée; et - la figure 3 montre une courbe standard obtenue dans le système demesure selon l'exemple de lInvention, le palmitate étant indiqué en abscisse et l'absorbance à
500 nm en ordonnée.
On peut illustrer comme suit une séquence de réactions enzymatiques selon l'invention: 1) RCOOH + ATP + CoA RCO - CoA + H4P207 + AMP
2) AMP-+ ATP (2) 2ADP
3) RCO - CoA > H202
4) H202 + CH3- = C -NH2
CH -H 0=0
H3 - \ e N o 4-aioti I 4-aminoantipyrine (4) + 0H phénol CH- CH3
f = Y -
N\ C = ô
N O{ = V = o colorant rouge quinone (1)
(2)
(3) (4) Acyl-CoA synthétase Myokinase Acyl-CoA oxydase
Péroxydase -
Dans le procédé pour la détermination des acides gras libres selon la présente invention, qui est très simplifié et tout à fait souhaitable comme on l'a mentionné
ci-dessus, on utilise divers enzymes. Par exemple, l'acyl-
CoA synthétase peut provenir d'animaux ou de micro-
organismes,mais on préfère celle provenant de Pseudomonas aeruginosa IFO 3919 (voir publication du brevet japonais nO 54-151187). Pour la myokinase, on peut utiliser celle ayant pour origine les animaux ou les micro-organismes, mais on4réfère celle des levures et qui est commercialisée par Sigma Chemical Company. L'acyl-CoA oxydase utilisée peut comprendre celle obtenue de sources animales ou de micro-organismes, de préférence celle de Candida tropicalis
IAM 4965.
Les activités enzymatiques dans le système de mesure selon l'invention sont exprimées en termesd'unités: à 200 milliunités pour l'acyl-CoA synthétase; I à 20
unités pour la myokinase; et 0,5 à 5,0 unités pour l'aoyl-
CoA oxydase.
La présente invention sera maintenant mieux expliquée
en se référant aux essais et à l'exemple qui suivent.
Essai 1.
Une recherche a été effectuée sur la relation entre la quantité d'acylCoA synthétase et l'absorbance à 500 nm dans des systèmes réactionnels contenant de la myokinase et sans myoklinase. Pour les systèmes réactionnels, on peut
se référer à l'exemple ci-après.
Les résultats sont illustrés sur la figure 1, et indiquent que l'absorbance à 500 nm et le taux de réaction sont plus élevés, quelle que soit la quantité de l'acyl-CoA synthétase, dans le système contenant de la myokinase
(+I4) que dans le système sans myokinase (-MK).
Cela est dD au faitquel'AMP formé en laissant l'acyl-
CoA synthétase agir sur les acides gras libres en présence d'ATP est converti en ADP du fait de la présence de la myokinase et n'inhibe plus la formation de l'acyl-CoA, avec pour résultat que la quantité de péroxyde d'hydrogène formé en laissant l'acyl-CoA oxydase agir sur l'acyl- CoA obtenu
est proportionnelle aux quantités des acides gras libres.
Essai 2.
Une comparaison a été faite entre les systèmes de mesure (voir l'exemple) o AMP est présent à partir du début et o il n'y a pas de AMP du tout, et une recherche
a été entreprise sur l'effet de la myokinase ajoutée à mi-
chemin du système de mesure, o une quantité donnée de AMP est ajoutée à partir du début en terme de la durée de
réaction et l'absorbance à 500 nm A 500).
Ces résultats sont illustrés sur la figure 2. Sur le graphique, la courbe 1 indique une première séquence des systèmes réactionnels o une quantité donnée de myokinase, sans ADP, est ajoutée à partir du début; la courbe 2 indique une seconde séquence des systèmes réactionnels o ni AMP ni myokinase n'est ajouté au début, et une quantité donnée de myokinase est incorporée à mi-chemin; la courbe 3 indique une troisième séquence des systèmes réactionnels o une quantité donnée (60 n moles)de AMP, sans myokinase, est présente dès le début, et une quantité donnée de myokinase est ajoutée à mi-chemin; et la courbe 4 indique
une quatrième séquence des systèmes réactionnels, modifica-
tion de la troisième séquence o on utilise 2100 n moles
de AMP.
Il est évident, sur la figure 2, qu'une certaine restriction est imposée sur la formation d'acyl-CoA dans le système réactionnel, o AMP est ajouté à partir du début,
mais est retiré par la myokinase qui est ajoutée à mi-
chemin.
Exemple.
On a incubé, à 37 C pendant 5 minutes, 0,45 ml d'un
miliUeu réactionnel (pH: 8,0) consistant en 9 F molesde tam-
pon tris-HC1, 10 à 50 n molesd'acide palmitique, 0,9 u mole d'ATP, 0,2 y mole de MgCl, 0,2 p mole dc'EDTA (acide 2j éthylène diamine tétracétique), 0,34 r mole de CoA, 0,045 mg de Triton X-100, 138 milliunités d'acyl-CoA synthétase et 14 unités de myokinase. Au produit ainsi obtenu, on ajouta alors, 0,15 ml d'un milieu mélangé (pH: 7,4) consistant en 30 molesde tampon au phosphate de potassium (pH: 7,4), 0,006 u mole de flavine adénine dinucléotide (FAD), 0,5 fi mole de 4-aminoantipyrine, 0,36 p mole de phénol, 0,4 p mole de N-éthylmaléimide, 0,2 unité d'acyl-CoA oxydase et 3,0 unités de péroxydase. On incuba encore le liquide résultant à 37 C pendant 10 minutes pour produire une
couleur, et on mesura alors à 500 nm par rapport à l'absor-
bance, afin de préparer ainsi une courbe standard (figure 3). Ensuite, on traita 0,05 ml de sérum de la même façon qu'on l'a mentionné ci-dessus, afin de préparer ainsi une courbe de travail, permettant de trouver une valeur indiquant
les quantités d'acides gras libres contenues.
Bien entendu l'invention n'est nullement limitée au mode de réalisation décrit et représenté qui n'a été donné qu'à titre d'exemple. En particulier elle comprend tous les moyens constituant des équivalents techniques des moyens décrits ainsi que leurs combinaisons si celles-ci sont exécutées suivant son esprit et mises en oeuvre dans le cadre
de la protection comme revendiquée.

Claims (1)

  1. R E V E N D I C A T I ON
    Procédé pour la détermination d'acides gras libres du type comprenant un premier système réactionnel o on laisse l'acyl coenzyme A synthétase agir sur les acides gras libresen présence d'adénosine triphosphate et de coenzyme A pour donner de l'acyl coenzyme A et un deuxième système réactionnel o on laisse agir l'acyl coenzyme A oxydase sur l'acyl coenzyme A pour former du peroxyde d'hydrogène, et ensuite on détermine celui-ci, caractérisé en ce que de la myokinase est ajoutée dans le premier système réactionnel pour arriver rapidement à un achèvement
    de la réaction.
FR8026322A 1979-12-12 1980-12-11 Procede pour la determination d'acides gras libres Granted FR2479261A1 (fr)

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Families Citing this family (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPS58124360A (ja) * 1982-01-20 1983-07-23 Tokyo Tatsuno Co Ltd 電話受信方法
JPS5966252A (ja) * 1982-10-08 1984-04-14 Nitsuko Ltd 発信者選択電話機
JPS59208965A (ja) * 1983-05-12 1984-11-27 Nippon Telegr & Teleph Corp <Ntt> 電話機の呼出方式
JPS6046160A (ja) * 1983-08-23 1985-03-12 Nippon Resuko:Kk 電話装置
JPS6068743U (ja) * 1983-11-05 1985-05-15 ニツセイ電機株式会社 選択電話装置
JPS60134655A (ja) * 1983-12-23 1985-07-17 Matsushita Electric Works Ltd 自動応答装置
JPS61296846A (ja) * 1985-06-25 1986-12-27 Sony Corp 選択機能付留守番電話装置
US5958714A (en) 1996-10-02 1999-09-28 Safety Associates, Inc. Test kits for determining at least two specific analytes in foods and other complex matrices

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP0009781A1 (fr) * 1978-09-29 1980-04-16 Mitsubishi Kasei Corporation Procédé de purification de synthétase d'acyl-coenzyme A à longue chaîne acyle et l'enzyme, acyl-CoA synthétase, ainsi purifié
DE2944498A1 (de) * 1978-11-06 1980-05-14 Nippon Shoji Kaisha Ltd Methode zur bestimmung von acyl-coenzym a und reagens hierfuer
EP0019875A1 (fr) * 1979-05-25 1980-12-10 Mitsubishi Kasei Corporation Méthode pour la détermination d'acides gras

Family Cites Families (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
IT986838B (it) * 1972-05-12 1975-01-30 Sclavo Inst Sieroterapeut Complesso di reagenti per la deter minazione enzimatica del glucosio sistema glucosio ossidasi perossi dasi con metodo manuale e automati co con lettura a termine o in cinetica
JPS5217085A (en) * 1975-07-30 1977-02-08 Ono Pharmaceut Co Ltd Method of quantitative determination of free fatty acids in serum usin g fatty acid activating enzymes
JPS5425892A (en) * 1977-07-29 1979-02-27 Wako Pure Chem Ind Ltd Quantitative determination of hydrogen peroxide
JPS55108297A (en) * 1979-02-13 1980-08-20 Toyobo Co Ltd Determining method of free fatty acid
DE3005379A1 (de) * 1979-02-13 1980-08-14 Toyo Boseki Verfahren zur quantitativen analyse von freien fettsaeuren und reagens zur bestimmung von freien fettsaeuren
JPS5915625B2 (ja) * 1979-03-01 1984-04-10 東洋紡績株式会社 新規なアシルコエンザイムaオキシダ−ゼおよびその製法

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP0009781A1 (fr) * 1978-09-29 1980-04-16 Mitsubishi Kasei Corporation Procédé de purification de synthétase d'acyl-coenzyme A à longue chaîne acyle et l'enzyme, acyl-CoA synthétase, ainsi purifié
DE2944498A1 (de) * 1978-11-06 1980-05-14 Nippon Shoji Kaisha Ltd Methode zur bestimmung von acyl-coenzym a und reagens hierfuer
EP0019875A1 (fr) * 1979-05-25 1980-12-10 Mitsubishi Kasei Corporation Méthode pour la détermination d'acides gras

Also Published As

Publication number Publication date
JPS5685300A (en) 1981-07-11
DE3044786C2 (de) 1984-09-13
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US4360591A (en) 1982-11-23
FR2479261B1 (fr) 1985-04-05
DE3044786A1 (de) 1981-09-17

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