FI97304C - Menetelmä mahasyövän riskin seulonnaksi - Google Patents

Menetelmä mahasyövän riskin seulonnaksi Download PDF

Info

Publication number
FI97304C
FI97304C FI945391A FI945391A FI97304C FI 97304 C FI97304 C FI 97304C FI 945391 A FI945391 A FI 945391A FI 945391 A FI945391 A FI 945391A FI 97304 C FI97304 C FI 97304C
Authority
FI
Finland
Prior art keywords
gastrin
pepsinogen
serum
gastric cancer
risk
Prior art date
Application number
FI945391A
Other languages
English (en)
Swedish (sv)
Other versions
FI945391A0 (fi
FI97304B (fi
FI945391A (fi
Inventor
Matti Haerkoenen
Original Assignee
Locus Genex Oy
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Locus Genex Oy filed Critical Locus Genex Oy
Publication of FI945391A0 publication Critical patent/FI945391A0/fi
Priority to FI945391A priority Critical patent/FI97304C/fi
Priority to PT95937917T priority patent/PT804737E/pt
Priority to AT95937917T priority patent/ATE213332T1/de
Priority to DK95937917T priority patent/DK0804737T3/da
Priority to JP51577496A priority patent/JP3433231B2/ja
Priority to DE69525476T priority patent/DE69525476T2/de
Priority to EP95937917A priority patent/EP0804737B1/en
Priority to PCT/FI1995/000634 priority patent/WO1996015456A1/en
Priority to AU38743/95A priority patent/AU3874395A/en
Priority to ES95937917T priority patent/ES2171564T3/es
Publication of FI945391A publication Critical patent/FI945391A/fi
Publication of FI97304B publication Critical patent/FI97304B/fi
Application granted granted Critical
Publication of FI97304C publication Critical patent/FI97304C/fi
Priority to US09/809,549 priority patent/US6696262B2/en

Links

Classifications

    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
    • G01N33/574—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for cancer
    • G01N33/57407—Specifically defined cancers
    • G01N33/57446—Specifically defined cancers of stomach or intestine
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
    • G01N33/573—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for enzymes or isoenzymes
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/74—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving hormones or other non-cytokine intercellular protein regulatory factors such as growth factors, including receptors to hormones and growth factors
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61B—DIAGNOSIS; SURGERY; IDENTIFICATION
    • A61B10/00—Other methods or instruments for diagnosis, e.g. instruments for taking a cell sample, for biopsy, for vaccination diagnosis; Sex determination; Ovulation-period determination; Throat striking implements
    • A61B10/0045—Devices for taking samples of body liquids

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Hospice & Palliative Care (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
  • Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)

Description

97304
Menetelmä mahasyövän riskin seulonnaksi
Tausta
Seuraavassa esitetään taustaa menetelmille mahasyövän riskin seulonnaksi käyttäen ensisijaisesti pepsinogeeni I:n ja gastriini-17:n määrittämistä verinäytteestä.
Vaikka uusien mahasyöpätapauksien esiintyminen onkin vähentynyt viime vuosina, on mahasyöpä edelleen yksi tavallisimmista maligniteeteista. Suomessa uusia syöpätapauksia rekisteröidään n. 250-300 tapausta / milj. henkilöä / vuosi. Yli 50-vuotiaiden ikäryhmässä Suomessa on arviolta 2350 mahalaukun syöpätapausta, joka on noin 3 promillea ikäryhmän väestöstä (Finnish Cancer Registry - The Institute for Statistical and Epidemiological Cancer Research 1993).
Suomen lisäksi Islannissa, Etelä-Amerikassa ja erityisesti Japanissa on korkea mahasyöpä-insidenssi.
Mahasyövän prognoosi on yleensä huono, koska spesifistä hoitoa ei ole. Tällä hetkellä ainoa mahdollisuus hoitaa mahasyöpä menestyksellisesti on sen varhaistoteaminen ja totaali poistaminen kirurgisin toimenpitein.
Mahasyöpä ei varhaisvaiheessa anna välttämättä mitään oireita. Oireiden myöhäinen esiintyminen luonnollisesti viivästyttää potilaan hoitoon hakeutumista. Toisaalta mahasyövän varhaisvaiheessa kliiniset löydökset ovat usein epäspesifisiä. Mahasyövän primaari diagnostinen menetelmä tällä hetkellä on gastroskopia ja siihen liittyvät biopsiat, irtosolu- ja aspiraatiosytologia.
. Koska rutiinigastroskopiat suoritetaan oireiden, kuten ylävatsavaivojen tai maha-suolikanavan verenvuotojen selvittämiseksi, on näin löydetty oireinen mahasyöpä yleensä jo pitkälle edennyt ja siten inoperaabeli. Primaaridiagnostiikkaa on yritetty parantaa myös monin immunologisin menetelmin. Kuitenkaan ei ole onnistuttu kehittämään riittävän spesifistä immunologista maha-syöpämarkkeria.
Keskeistä on löytää keinot, joilla voitaisiin helposti ja kohtuullisin kustannuksin tunnistaa yleis- 2 97304 väestöstä ne oireettomat henkilöt, joilla saattaa olla alkuvaiheen mahasyöpä. Nämä henkilöt tulisi heti tunnistuksen jälkeen tutkia gastroskopialla. Samalla voidaan tunnistaa ne henkilöt, joiden mahassa on seurantaa vaativia premaligneja muutoksia.
Mahasyöpää voi edeltää joukko erilaisia mahasairauksia tai tiloja (ns. precancerous conditions), joita ovat krooninen atrofinen gastriitti, pernisiöösi anemia, ventrikkeliulcus, polyyppimaha sekä Mdndtrier’n tauti (giant hypertrophic gastritis). Selkeästi tunnistettavia limakalvon muutoksia ovat dysplasia ja adenooma. Edellä mainittuihin tautitiloihin liittyy keskimäärin noin 4-5-kertai-nen suhteellinen syöpäriski verrattuna väestöön yleensä. Riskin on todettu välittyvän lähes kaikissa taudeissa kroonisen atrofisen gastriitin välityksellä.
Kroonisella gastriitilla tarkoitetaan mahan limakalvon pitkäaikaista tulehdustilaa. Tauti voidaan jakaa karkeasti ns. superficielliin ja atrofiseen muotoon. Superficiellissa gastriitissa tulehdus-soluinfiltraatio keskittyy pintaepiteelin alle. Mikäli tulehdus etenee diffuusisti myös mahan spesifisten sekretoivien rauhasten väliin, puhutaan kroonisesta atrofisesta gastriitista. Tällöin mahalaukun limakalvon normaalit rauhasrakenteet korvautuvat ainakin osittain metaplastisilla muutoksilla.
Suomalaisesta syöpäaineistosta laskettu suhteellinen mahasyövän riski mahan korpus-alueen atrofisesta gastriitista kärsivillä potilailla on arvioitu n. 4-5-kertai seksi terveen limakalvon omaaviin henkilöihin verrattuna. Lisäksi tähän tilaan liittyy vaara saada intrinsic-factorin puutoksesta ja B12-vitamiinin imeytymishäiriöstä johtuva pernisiöösi anemia. Antrumin alueen vaikeassa atrofiassa riski on peräti 18-kertainen. Jos atrofisia muutoksia esiintyy sekä antrumin että korpuksen alueella (pangastriitti), voi riski kohota jopa 80-90 prosenttiin (Sipponen, Kekki, Haapakoski, Ihamäki & Siurala 1985).
4
Mahasyövän esiasteiden seulonta seerumista tehtävillä pepsinogeeni- ja gastriini-17 -määrityksillä ' Mahan pepsinogeenit
Ihmisen mahan limakalvossa voidaan erottaa elektroforeettisesti 7 erilaista pepsinogeenia (Samloff 1969). Näistä viisi nopeinta muodostaa immunologisesti yhtenäisen pepsinogeeni I -ryhmän. Muut kaksi muodostavat pepsinogeeni Π -ryhmän. Ryhmän I pepsinogeeneja syntetisoidaan ainoastaan mahan korpus-alueen rauhasten pääsoluissa ja limaa erittävissä soluissa.
Sen sijaan ryhmän Π pepsinogeeneja muodostuu koko mahalaukun alueella sijaitsevissa rauha- 3 97304 sissa sekä jossain määrin myös duodenumin yläosan Brunnerin rauhasissa (Samloff & Liebman 1973; Weinstein, Lechago, Samloff et ai 1977). Terveen ihmisen seerumissa pepsinogeeni I -pitoisuus on n. 6-kertainen verrattuna pepsinogeeni II -pitoisuuteen (Samloff 1982). Mahan korpus-osan atrofisessa gastriitissa seerumin pepsinogeeni I -pitoisuus laskee, kun taas seerumin pepsinogeeni Π -pitoisuus säilyy entisellä tasolla. Näin ollen seerumin pepsinogeeni I -pitoisuus kuvastaa melko selvästi mahan korpus-osan pepsinogeenia erittävien solujen määrääjä niiden tilaa. Mitä vaikeampi atrofinen gastriitti mahan korpus-osassa on, sitä matalampi on seerumin pepsinogeeni I -pitoisuus (Tamm, Villako, Härkönen & Karonen 1984; Kekki,
Samloff, Varis & Ihamäki 1991). Matala seerumin pepsinogeeni I -pitoisuus ilmaisee vaikean atrofisen korpusgastriitin yli 90 %:n sensitiivisyydellä ja lähes 100 %:n spesifisyydellä (Varis,
Kekki Härkönen, Sipponen & Samloff 1991).
Suomalaisessa tutkimuksessa (Varis, Sipponen, Laxön, Härkönen & Heinonen, vielä julkaisematon työ), jossa seulottiin yli 50-vuotiaita oireettomia tupakoivia miehiä matalan seerumin pepsinogeeni I -pitoisuuden avulla gastroskopiatutkimusta varten, todettiin gastroskopoitujen keskuudessa 4.7 %:lla (5.8 %:lla atrofista gastriittia sairastavista potilaista) neoplastinen muutos ja 1 %:lla oireeton alkuvaiheen syöpä (taulukko 1 ja taulukko 2). Tämän tutkimuksen perusteella matalan seerumin pepsinogeeni I -määrityksen avulla voitiin tunnistaa joukko välitöntä operaatiota vaativia mahasyöpätapauksia ja myöhempää gastroskopiaseurantaa vaativia syövän esiastetapauksia (dysplasia). Samalla voitiin määritellä se väestöryhmä, jolla on vaara saada pernisiöösi anemia ja jonka veriarvoja tulee tästä syystä jatkossa seurata.
Epidemiologiset tutkimukset osoittavat, että vain n. 25 % :11a mahasyöpäpotilaista on vaikea atrofinen korpusgastriitti, joka on todettavissa matalasta seerumin pepsinogeeni I -tasosta (Sipponen, Kekki, Haapakoski, Ihamäki & Siurala 1985). Mahasyövästä siis n. 75 % ei liity atrofiseen korpusgastriittiin.
Taulukko 1: Mahasyövän seulontatutkimuksen tulos suomalaisilla tupakoivilla yli 50-vuotiailla miehillä seerumin matalan pepsinogeeni I (S-PGI) -tason perusteella.
Seulontatulos Lukumäärä % % edellisestä gastroskopoiduista
Tutkittujen lukumäärä 22431
Matala S-PG I 2215 9.9
Gastroskopoitiin 1347 60.8
Atrofinen korpusgastriitti 1092 81.1
Karsinooma 63 5.8 4.7 4 97304
Taulukko 2. Mahalaukun limakalvon neoplastiset (kasvaimenomaiset) muutokset seerumin pepsinogeeni I määrityksen perusteella Suomessa tutkituilla yli 50-vuotiailla miehillä (ks. taulukko 1).
Neoplasiatyyppi Lukumäärä
Kohtalainen dysplasia (epänormaali kasvu) 42
Vaikea dysplasia 7
Karsinooma 11 (alkava 70 %)
Karsinoidituumori 3
Kokonaismäärä 63
Antrum-alueen gastriitti
Gastriinia erittyy maha-suolikanavasta ainakin kolmessa eri muodossa, joiden yhteinen ns. immunoreaktiivinen aktiviteetti mitataan määritettäessä seerumin gastriiniarvo (seerumin totaali gastriini). Gastriinin alalajeja ovat ns. minigastriini (G-14), pikkugastriini (G-17) ja isogastriini (G-34) (Gregory 1974). Fysiologisesti tärkeimmät ovat G-17 ja G-34. G-17:n vaikutus suolahapon eritykseen on 6 kertaa suurempi kuin G-34:n vaikutus (Walsh, Isenberg, Ansfield &
Maxwell 1976). Gastriinia erittyy ns. G-soluista, joita tavataan sekä antrumissa että duode-numissa. Gastriinin erityksen tärkeimmät kiihdyttäjät ovat vagus-hermon tonus ja proteiinien hajoamistuotteet. Gastriinin eritystä jarruttaa pH:n lasku alle 2.5 (Walsh, Richardson & Fordtran 1975). Antrumista erittyvä gastriini on yli 90-prosenttisesti G-17-tyyppiä, kun taas duodenaalinen gastriini on pääosin G-34-tyyppiä (Berson & Yalow 1971). Paastotilanteessa seerumissa tavataan etupäässä G-34:ä, kun taas aterian jälkeen seerumin gastriini on G-17-tyyppiä (Lamers, Harrison, Ippoliti & Walsh 1979). Gastriini-17 :n eritystä voidaan tutkia myös ns. proteiinistimulaatiokokeella. Siinä otetaan aamulla paastoverinäyte, jonka jälkeen potilas nauttii proteiinipitoisen standardiaterian ja verinäytteet otetaan 15 min välein kahden tunnin ajan. Maksiminousu havaitaan n. 20 min kuluttua.
Atrofisessa antrumgastriitissa antrumin limakalvo atrofioituu ja näin ollen sen gastriini-17 :n eritys vähenee ja pitoisuus seerumissa on pienentynyt. Alentunut G-17 -seerumitaso osoittaisi siten antrumin atrofian ja tämän alueen lisääntyneen syöpäriskin. Atrofioituneessa antrumin limakalvossa on alentunut vaste myös proteiinistimulaatiokokeessa, joka on ilmeisesti herkempi atrofian osoittaja kuin pelkkä pitoisuusmääritys.
ia m i t:iii i i » »f 5 97304
Mahalaukun helicobacter pylori infektio
Helicobacter pylori on spiraalinmuotoinen, gram-negatiivinen bakteeri, joka viihtyy mahan limakalvon pintaepiteelisolujen välittömässä läheisyydessä limassa ja solujenvälisessä liitoskohdassa. Bakteeri siirtyy ilmeisesti peioraalista tietä ihmisestä toiseen. Bakteerin vaikutus mahan limakalvoon on tulehdusreaktio, joka välittyy komplementin kautta vapauttamalla voimakkaita tulehduksen välittäjäaineita. Akuutin vaiheen jälkeen tulehdus muuttuu krooniseksi gastriitiksi. Kroonista gastriittia sairastavilla potilailla todetaan 70-90-prosenttisesti helicobacter pylori -infektio (Calam 1994). Koska helicobacter pylori -infektio ja mahalaukun krooninen gastriitti liittyvät hyvin läheisesti toisiinsa, on ajateltu, että tämä bakteeri-infektio olisi eräs etio-loginen tekijä mahalaukun syövän synnylle. Tämän vuoksi on mahdollista, että helicobacter pylori -bakteerien hävittäminen tulehduksen alkuvaiheessa voisi estää krooniseen gastriittiin liittyvän atrofian synnyn ja siten vähentää syöpäriskiä.
Mahasyövän riskin seulonta käyttäen kombinoitua pepsinogeeni I - gastriini-17 - helicobacter pylori -vasta-ainemääritystä seerumista
Seulontaan voidaan käyttää sopivimmin menetelmää, jossa kuoppalevyllä samanaikaisesti voidaan määrittää seerumin pepsinogeeni I ja gastriini-17-pitoisuus sekä helicobacter pylori -vasta-aineet. Tällöin on mahdollista diagnosoida joko korpusgastriitti, antrumgastriitti tai pangastriitti sekä atrofian eräs aiheuttaja, helicobacter pylori -infektio. On huomattava, että vaikeassa atrofisessa gastriitissa helicobacter pylori -bakteereita ei enää löydy mahalaukun limakalvolta ja myös vasta-aineet seerumissa ovat normalisoituneet.
Pepsinogeeni I -määritystä varten on ihmisen mahalaukun limakalvolta eristetty pepsinogeeni I -antigeeni. Se on kiinnitetty karboanhydridimenetelmällä kanin ja lampaan punasoluihin ja tällä on immunisoitu klassiseen tapaan kanit ja lampaat tuottamaan vasta-ainetta pepsinogeeni I:tä kohtaan. Spesifinen vasta-aine gastriitti-17:ää kohtaan on tuotettu samalla tekniikalla kiinnittämällä gastriitti-17:stä saatu gastriinifragmentti 1-13 kanin autologisiin punasoluihin karboimidi-tekniikalla ja immunisoimalla normaaliin tapaan kanit tuottamaan spesifistä vasta-ainetta gastriini-17:ää kohtaan. Spesifiset vasta-aineet on puhdistettu proteiini-A-affmiteettikromato-grafialla tai joissakin tapauksissa pepsinogeeni I- tai gastriini-17-affiniteettikromatografialla. Puhdistettu IgG-fraktio on leimattu entsyymillä (peroksidaasi tai alkalinen fosfataasi).
Kuoppalevyn kuopat on päällystetty leimatulla antiseerumilla käyttäen passiivista adsorptiota. Seuraavassa yksityiskohtaisempi kuvaus eräästä sopivimmin käytettävästä menetelmästä.
1. Kuopat päällystetään vasta-aineella inkuboimalla yli yön +4°C:sa.
2. Kuopat tyhjennetään ja pestään pesuliuoksella.
6 97304 3. Lisätään näyte sopivana laimennoksena, inkuboidaan maksimaalisesta 1 h +37°C:ssa.
4. Pestään kuopat.
5. Lisätään entsyymileimattu vasta-aine sopivana laimennoksena, inkuboidaan maksimaalisesti 1 h +37°C:ssa.
6. Pestään kuopat 7. Lisätään substraatti (kromogeeninen, fluoresoiva tai luminoiva substraatti), ja inkuboidaan maksimaalisesti 30 min huoneenlämmössä.
8. Pysäytetään reaktio ja luetaan absorbanssi, fluoresenssi tai luminisenssi, ja verrataan sitä kalibraatiokäyrään.
Menetelmää voidaan nopeuttaa inkuboimalla näyte ja entsyymileimattu vasta-aine yhtäaikaa ns. one-step-Elisa-mentelmänä. On myös muita vaihtoehtoja, joita voidaan soveltaa.
Vaihtoehto 2 (kilpailu-Elisa) 1. Leimataan antigeeni entsyymileimalla.
2. Inkuboidaan näytettä ja vasta-ainetta koeputkessa, jolloin näytteen antigeeni sitoutuu vasta-aineeseen.
3. Lisätään tunnettu määrä leimattua antigeeniä, joka kilpailee näytteen sisältämän antigeenin kanssa vapaasta vasta-aineesta.
4. Siirretään liuos kuoppalevyn kuoppaan, joka on päällystetty kakkos-vasta-aineella (anti-kani-vasta-aine) ja inkuboidaan maksimaalisesti 1 h.
5. Pestään sitoutumaton materiaali pois.
6. Lisätään substraatti ja inkuboidaan maksimaalisesti 30 min huoneenlämmössä.
7. Pysäytetään reaktio ja luetaan tulokset vertaamalla kalibratiokäyrään.
Tässä menetelmässä voidaan kilpailutilanne jäljestää myöskin leimatulla vasta-aineella.
Helicobacter pylori -vasta-aineiden määrittämistä varten on saatavana useita kaupallisia “kittejä” (mm. Orion Pyloriset EIA-G, Pyloriset EIA-A, Rochen EIA 2G, Whittaker Bioproductsin Pyloristat). Helicobacter pylori -bakteereista voidaan valmistaa antigeenejä eri tavoin (katso Lelwala-Guruge, Nilsson, Ljungh, Wadstrom 1992) ja niitä on myös kaupallisesti saatavana. Käyttämämme menetelmä helicobacter pylori -vasta-aineiden määrittämiseen on yleisesti tunnettu ja siinä kiinnitetään bakteereista happamalla glysiinillä uutettu antigeeni adsorptiolla kuoppalevyn kuoppiin. Kakkosvasta-aine (rabbit anti-human IgG) on leimattu entsyymillä (alkalinen fosfataasi tai joissakin tapauksissa peroksidaasi). Entsyymin substraattina käytetään p-nitrofenyylifosfaattia (absorbanssi) tai umbelliferyylifosfaattia (fluoresenssi), jolloin voidaan mitata absorbanssi (405 nm) tai fluoresenssi (360 nm/460 nm).
< · *#.» i>Mi I I 4 M
7 97304
Mittausherkkyydet
Seerumin pepsinogeeni! -määrityksessä cut-off-arvo atrofiselle gastriitille on aikaisempien tutkimustemme mukaan 20 - 30 μ§/1 sovitusta menetelmän spesifisyydestä ja herkkyydestä riippuen, joka vastaa noin 450 - 690 pmol/1 (Varis, Sipponen Lax6n, Härkönen & Heinonen, vielä julkaisematon työ). Normaalitilanteessa seerumin gastriini- 17:n pitoisuudet ovat välillä 2 -25 pmol/1. Näin ollen gastriini-17:n pitoisuus seerumissa on noin 100 kertaa pienempi kuin pepsinogeeni I:n pitoisuus. Koska atrofisessa antrumgastriitissa mitataan tästäkin matalampia arvoja edellyttää tämä kehitetyltä menetelmältä erittäin suurta herkkyyttä. Antrum-alueen atrofiassa cut-off-arvo on seerumin gastriini-17 -määrityksessä välillä 0.1-2 pmol/1. Riittävän suuri herkkyys on mahdollista saavuttaa entsyymileimalla ja käyttämällä herkkää detektointi-jäijestelmää esim. luminisenssimittausta. Herkkyyttä voidaan edelleen lisätä suorittamalla ns. entsymaattinen recycling reaktio, jota olemme soveltaneet mm. steroidien määrittämisessä (Härkönen, Adlercreutz & Groman 1974). Tässäkin tapauksessa syntynyt produkti voidaan mitata joko fluoresenssitekniikalla tai luminisenssilla. Helicobacter pylori -positiivisuudelle cut-off-tiitteri on 200 - 500.
Taulukossa 3 on patentoitava yhdistelmämenetelmä kuvattu kaavamaisesti.
Taulukko 3 Seerumin pepsinogeeni I ja gastriini-17 -yhdistelmämenetelmä mahalaukun vaikea-asteisen korpus-alueen, antrum-alueen tai koko mahalaukun limakalvon (pangastriitti) atrofisen gastriitin toteamiseksi.
Vaikea-asteisen Seerumin Seerumin Seerumin gastriini-17 atrofian sijainti pepsinogeeni I gastriini-17 pitoisuuden nousu (vaste) mahalaukussa p.g/l pmol/1 proteiinistimulaatiossa
Korpus < cut-off-arvo > viitearvojen normaali tai yläraja suurentunut vaste
Antrum > cut-off-arvo < cut-off-arvo voimakkaasti pienentynyt vaste
Koko mahalaukun < cut-off-arvo viitearvojen pienentynyt vaste limakalvo (korpus alarajalla . ! ja antrum)
Viitearvot: Seerumin pepsinogeeni I 25- 120 μg/l
Seerumin gastriini-17 2 -25 pmol/1
Cut-off-arvot: Seerumin pepsinogeeni I 20-30 μg/l
Seerumin gastriini-17 0.1-2 pmol/1 97304 8
Kirjallisuus
Berson S A & Yalow, RS (1971) Nature of immunoreactive gastrin extracted from tissues of gastrointestinal tract. Gastroenterology 60:215-222
Calam, J (1994) Helicobacter pylori (Review) Eur. J Clin Invest 24: 501-510
Gregory, RA (1974) The gastrointestinal hormones: a review of recent advances. J Physiol.
241: 1-32
The Finnish Cancer Registry - The Institute for Statistical and Epidemiological Cancer Research (1993) Cancer Incidence in Finland 1991. Cancer Statistics of the National Research and Development Centre for Welfare and Health Härkönen, M, Adlercreutz, H & Groman, EV (1974) Enzymatic techniques in steroid assay. J. Steroid Biochem. 5: 717-725
Kekki, M, Samloff, IM, Varis, K & Ihamäki, T (1991) Seram pepsinogen I and serum gastrin in the screening of severe atrophic corpus gastritis. Scand J Gastroenterology 26 (suppl 186):109-116
Lamers, C, Harrison, A, Ippoliti, A & Walsh, J (1979) Molecular forms of circulating gastrin in normal subjects and duodenal ulcer patients. Gastroenterology 76: 1179
Lelwala-Guruge, J, Nilsson, I, Ljungh, A & Wadström, T (1992) Cell surface proteins of Helicobacter pylori as antigens in an ELISA and a comparison with three commercial ELISA. Scand J Infect Dis 24:457-465
Samloff, IM & Liebman.WM (1972) Purification and immunochemical characterization of . group Π pepsinogens in human seminal fluid. Clin Exp Immunol 11:405-414
Samloff, IM (1969) Slow moving protease and the seven pepsinogens. Electrophoretic demonstration of the existence of eight proteolytic fractions in human gastric mucosa. Gastroenterology 57:659-69
Samloff, IM (1982) Pepsinogens I and Π: purification from gastric mucosa and radioimmuno-* assay in serum. Gastroenterology 82:26-33
Sipponen, P, Kekki, M, Haapakoski, J, Ihamäki, T & Siurala, M (1985) Gastric cancer risk in chronic atrophic gastritis: statistical calculations of cross-sectional data. Int J Cancer 35:173-77
Tamm, A, Villako, H, Härkönen, M & Karonen, S-L (1984) Seram pepsinogen I and the state of gastric mucosa in an Estonian population sample. Scand. J. Gastroenterol. 19: 1091-1094.
9 97304
Varis, K (1993) Mahan eritystoiminta. Kirjassa: Kliininen gastroenterologia (toim. Miettinen, T, Seppälä, K & Sivula, A). Duodecim, Jyväskylä ss. 55-69
Varis, K, Kekki, M, Härkönen, M, Sipponen, P & Samloff, IM (1991) Serum pepsinogen I and serum gastrin in the screening of atrophic pangastritis with high risk of gastric cancer.
Scand J Gastroenterology 26 (suppl 186): 117-123
Varis, K, Sipponen, P, Laxdn, F, Härkönen, M & Heinonen O-P, julkaisematon työ.
Walsh, JH, Isenberg JI, Ansfield, J & Maxwell, V (1976) Clearance and acid-stimulating action of human big and little gastrins in duodenal ulcer subjects. J Clin Invest 57:1125-1131
Walsh, JH, Richardson, CT & Fordtran, JS (1975) pH dependence of acid secretion and gastrin release in normal and ulcer subjects. J Clin Invest 55: 462-468
Weinstein, WM, Lechago, J, Samloff, IM et al. (1977) Pepsinogens in human gastric cardiac and esophageal glands (abstr). Clin Res 25:690 t

Claims (9)

97304
1. Menetelmä mahalaukun syövän riskin seulomiseksi veriseerumista toteamalla 5 mahalaukun korpus- tai antrum-osan atrofia tai koko mahan limakalvon atrofia, tunnettu siitä, että seerumista määritetään kvantitatiivisesti pepsinogeeni I ja gast-riini-17 -pitoisuudet ja verrataan saatuja arvoja kulloisenkin määriteltävän aineen menetel mäspesifiseen cut-off-arvoon.
2. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että lisäksi mitataan seerumin gastriini-17 -pitoisuus käyttämällä proteiinistimulaatiokoetta mittaamalla sanottu pitoisuus basaalitilanteessä ja proteiinipitoisen standardiaterian jälkeen.
3. Patenttivaatimuksen 1 ja 2 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että käytetään 15 kombinoitua immunologista pepsinogeeni I- ja gastriini- 17 -menetelmää muovi-, lasi- tai selluloosa-alustalla.
4. Patenttivaatimuksen 3 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että alusta on kuop-palevy. 20
5. Jonkin patenttivaatimuksen 1-4 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että pep- .: sinogeeni I- ja gastriini-17 -määritykseen käytetään absorbanssi-, fluoresenssi- tai luminisenssidetektio-menetelmää.
6. Jonkin patenttivaatimuksen 3 - 5 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että pepsinogeeni I -pitoisuuden määrittämiseksi käytetään polyklonaalista tai mono-klonaalista vasta-ainetta pepsinogeeni I:tä vastaan.
7. Jonkin patenttivaatimuksen 3-6 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että gast-30 riini-17 -pitoisuuden määrittämiseksi käytetään spesifistä poly- tai monoklonaalista vasta-ainetta gastriini-17:ää vastaan. 97304
8. Patenttivaatimuksen 7 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että polyklonaalinen vasta-aine gastriini- 17:ää vastaan saadaan immunisoimalla eläin, kuten kani, lammas tai sika, gastriinifragmentilla 1-13, tai käyttämällä jonkin eläimen, kuten sian, tai ihmisen mahalaukusta eristettyä gastriini-17:n antigeeniä. 5
9. Jonkin edellisen patenttivaatimuksen mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että se on yhdistetty Helicobacter pylori -vasta-ainemääritykseen. 97304
FI945391A 1994-11-16 1994-11-16 Menetelmä mahasyövän riskin seulonnaksi FI97304C (fi)

Priority Applications (11)

Application Number Priority Date Filing Date Title
FI945391A FI97304C (fi) 1994-11-16 1994-11-16 Menetelmä mahasyövän riskin seulonnaksi
EP95937917A EP0804737B1 (en) 1994-11-16 1995-11-15 Method for screening the risk of gastric cancer
AU38743/95A AU3874395A (en) 1994-11-16 1995-11-15 Method for screening the risk of gastric cancer
DK95937917T DK0804737T3 (da) 1994-11-16 1995-11-15 Fremgangsmåde til screening for risiko for mavecancer
JP51577496A JP3433231B2 (ja) 1994-11-16 1995-11-15 胃ガンのリスクのスクリーニング方法
DE69525476T DE69525476T2 (de) 1994-11-16 1995-11-15 Verfahren zum screenen des risikos auf magenkrebs
PT95937917T PT804737E (pt) 1994-11-16 1995-11-15 Metodo de avaliacao dos riscos do cancro gastrico
PCT/FI1995/000634 WO1996015456A1 (en) 1994-11-16 1995-11-15 Method for screening the risk of gastric cancer
AT95937917T ATE213332T1 (de) 1994-11-16 1995-11-15 Verfahren zum screenen des risikos auf magenkrebs
ES95937917T ES2171564T3 (es) 1994-11-16 1995-11-15 Metodo para explorar el riesgo de cancer gastrico.
US09/809,549 US6696262B2 (en) 1994-11-16 2001-03-14 Method for screening the risk of gastric cancer

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
FI945391 1994-11-16
FI945391A FI97304C (fi) 1994-11-16 1994-11-16 Menetelmä mahasyövän riskin seulonnaksi

Publications (4)

Publication Number Publication Date
FI945391A0 FI945391A0 (fi) 1994-11-16
FI945391A FI945391A (fi) 1996-05-17
FI97304B FI97304B (fi) 1996-08-15
FI97304C true FI97304C (fi) 1996-11-25

Family

ID=8541817

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
FI945391A FI97304C (fi) 1994-11-16 1994-11-16 Menetelmä mahasyövän riskin seulonnaksi

Country Status (11)

Country Link
US (1) US6696262B2 (fi)
EP (1) EP0804737B1 (fi)
JP (1) JP3433231B2 (fi)
AT (1) ATE213332T1 (fi)
AU (1) AU3874395A (fi)
DE (1) DE69525476T2 (fi)
DK (1) DK0804737T3 (fi)
ES (1) ES2171564T3 (fi)
FI (1) FI97304C (fi)
PT (1) PT804737E (fi)
WO (1) WO1996015456A1 (fi)

Families Citing this family (39)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6861510B1 (en) * 1989-01-24 2005-03-01 Aphton Corporation Immunogenic compositions against gastrin peptides
WO1997028821A1 (en) * 1996-02-08 1997-08-14 Aphton Corp. Immunological methods for the treatment of gastrointestinal cancer
US20040001842A1 (en) * 1997-05-12 2004-01-01 Dov Michaeli Immunogenic compositions to the CCK-B/gastrin receptor and methods for the treatment of tumors
EP1077721B8 (en) * 1998-05-15 2007-06-20 Receptor Biologix, Inc. Prevention and treatment of hypergastrinemia
EP1121597A1 (en) * 1998-10-01 2001-08-08 Medical College of Georgia Research Institute Screen for risk for gastric adenocarcinoma
US6372439B2 (en) 1998-10-01 2002-04-16 James R. Goldenring Screen for gastric adenocarcinoma
FI990991A (fi) * 1999-04-30 2000-10-31 Locus Genex Oy Menetelmä irreversiibeleille neurovahingoille riskialttiin yksikön identifioimiseksi
FI118653B (fi) * 1999-04-30 2008-01-31 Biohit Oyj Menetelmä peptisen haavan riskin määrittämiseksi
FI107808B (fi) * 1999-08-31 2001-10-15 Biohit Oyj Menetelmä verisuoni- sekä syöpäsairaudelle riskialttiin yksilön identifioimiseksi
CA2404852A1 (en) * 2000-04-10 2001-10-18 Timothy C. Wang Diagnosis and treatment of gastrointestinal disease
US7179609B1 (en) * 2000-10-04 2007-02-20 Atrophus Ab Screening method for gastritis
FI20010019A (fi) 2001-01-05 2002-07-06 Biohit Oyj Menetelmä atrofisen diagnostisoimiseksi
WO2002076499A2 (en) * 2001-03-23 2002-10-03 Aphton Corporation Combination treatment of pancreatic cancer
US20090191232A1 (en) * 2001-05-04 2009-07-30 Gevas Philip C Combination therapy for the treatment of tumors
JP4763149B2 (ja) * 2001-05-10 2011-08-31 わかもと製薬株式会社 ヘリコバクター・ピロリへの感染を判定する検査方法
KR20040049830A (ko) * 2001-07-09 2004-06-12 애프톤 코포레이션 간, 폐 및 식도의 암 및 전암 상태의 치료 및 예방
FI20011908A (fi) * 2001-09-28 2003-03-29 Biohit Oyj Menetelmä vatsasyövän osoittamiseksi
US7235376B2 (en) * 2003-03-28 2007-06-26 Receptor Biologix, Inc. Gastrin hormone immunoassays
FI119572B (fi) * 2004-03-05 2008-12-31 Biohit Oyj Menetelmä vatsan limakalvon tilan ennustamiseksi
AU2005228897B2 (en) * 2004-03-29 2009-12-10 Cancer Advances, Inc. Monoclonal antibodies to gastrin hormone
FI116942B (fi) * 2004-05-10 2006-04-13 Biohit Oyj Proteiini- ja peptidistabilointi
KR101333168B1 (ko) * 2004-09-22 2013-11-28 리셉터 바이오로직스 인크 프로가스트린에 대한 모노클로날 항체
ES2732623T3 (es) 2005-01-06 2019-11-25 Innate Pharma Sa Tratamientos y métodos de combinación anti-KIR
US20070207467A1 (en) * 2006-03-01 2007-09-06 Ming Xu Detection of lymph node metastasis from gastric carcinoma
FI20060501L (fi) * 2006-05-22 2007-11-23 Biohit Oyj Koostumus ja menetelmä asetaldehydin sitomiseksi vatsassa
US20070281305A1 (en) * 2006-06-05 2007-12-06 Sean Wuxiong Cao Detection of lymph node metastasis from gastric carcinoma
EP2203745A4 (en) * 2007-10-26 2010-12-08 Biohit Oyj METHODS AND PRODUCTS FOR DIAGNOSING AUTOIMMUNE DISEASES AND GASTRIC CANCER RELATED TO ATROPHIC GASTRITIS
CN102087279A (zh) * 2010-03-11 2011-06-08 北京美康生物技术研究中心 一种联合诊断胃病或评价胃癌风险的酶联免疫吸附试剂盒
RU2465597C1 (ru) * 2011-04-08 2012-10-27 Сергей Михайлович Котелевец Способ определения вероятности развития рака желудка
GB201121571D0 (en) 2011-12-15 2012-01-25 Astrimmune Ltd Compounds and uses thereof
CN105242045A (zh) * 2014-06-13 2016-01-13 拜奥希特公司 胃泌素-17作为具有增加的数种相关后发病风险的萎缩性胃炎的生物标志物的用途
ES2810760T3 (es) * 2015-02-10 2021-03-09 Shenzhen New Ind Biomedical Engineering Co Ltd Kit de reactivos utilizado para detectar gastrina-17 y método de preparación y aplicación para el kit de reactivos
CN106501532B (zh) * 2016-10-14 2019-02-19 北京正旦国际科技有限责任公司 一种用于检测胃泌素17的试剂盒
JP6885581B2 (ja) * 2017-02-06 2021-06-16 学校法人東京歯科大学 ガストリン測定におけるカットオフ値の推定方法
US11583576B2 (en) 2017-06-15 2023-02-21 Cancer Advances Inc. Compositions and methods for inducing humoral and cellular immunities against tumors and cancer
RU2677228C1 (ru) * 2017-12-08 2019-01-16 Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Национальный исследовательский Мордовский государственный университет им. Н.П. Огарёва" Способ иммунодиагностики заболеваний гастродуоденальной зоны
CN109991409B (zh) * 2018-12-03 2022-03-04 浙江聚康生物工程有限公司 胃蛋白酶原i/胃蛋白酶原ii检测试剂盒
FI20205255A1 (fi) 2020-03-11 2021-09-12 Biohit Oyj Gastriini-17 testi dyspepsian ja refluksioireiden, ja atrofisen gastriitin, seulontaan sekä niihin liittyvien riskien arvioimiseen
CN111638369B (zh) * 2020-04-30 2023-03-31 吉林省格瑞斯特生物技术有限公司 胃功能及胃癌发生风险的荧光微球检测装置及其制备方法

Family Cites Families (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2949474B2 (ja) * 1995-08-28 1999-09-13 隆久 古田 ペプシノーゲンｉ／ｉｉ比の変化率を基礎としたヘリコバクター・ピロリ除菌判定方法

Also Published As

Publication number Publication date
EP0804737A1 (en) 1997-11-05
US6696262B2 (en) 2004-02-24
US20010039025A1 (en) 2001-11-08
JP3433231B2 (ja) 2003-08-04
AU3874395A (en) 1996-06-06
JPH10509795A (ja) 1998-09-22
DK0804737T3 (da) 2002-04-29
WO1996015456A1 (en) 1996-05-23
DE69525476T2 (de) 2002-10-02
ATE213332T1 (de) 2002-02-15
DE69525476D1 (de) 2002-03-21
FI945391A0 (fi) 1994-11-16
FI97304B (fi) 1996-08-15
EP0804737B1 (en) 2002-02-13
FI945391A (fi) 1996-05-17
ES2171564T3 (es) 2002-09-16
PT804737E (pt) 2002-07-31

Similar Documents

Publication Publication Date Title
FI97304C (fi) Menetelmä mahasyövän riskin seulonnaksi
Cao et al. Screening of atrophic gastritis and gastric cancer by serum pepsinogen, gastrin‐17 and Helicobacter pylori immunoglobulin G antibodies
JP6646571B2 (ja) 膵臓がんを検出するための方法および組成物
Hebbar et al. Increased concentrations of the circulating angiogenesis inhibitor endostatin in patients with systemic sclerosis
FI118653B (fi) Menetelmä peptisen haavan riskin määrittämiseksi
RU2462719C2 (ru) Диагностика септических осложнений
AU2005297303B2 (en) Novel diagnostic kit for malignant melanoma
JP2014526682A (ja) 標的分子を検出する非侵襲的方法
EP1348129A1 (en) A method for diagnosing atrophic gastritis
Sato et al. Gastric carcinoid tumors without autoimmune gastritis in Japan: a relationship with Helicobacter pylori infection
JP4602078B2 (ja) ヒト心不全における血漿ウロテンシン
EP1552311B1 (en) Method for detecting a risk of acid related disease in an individual
Perez-Paramo et al. Changes in gastrin and serum pepsinogens in monitoring of Helicobacter pylori response to therapy
US7179609B1 (en) Screening method for gastritis
Pals et al. Enzyme-linked immunosorbent assay and radioimmunoassay of serum pepsinogen A
Sasaki et al. Elevated plasma thymosin-� 1 levels in lung cancer patients
Tan et al. Gastrointestinal fluids proteomics
JPS59501519A (ja) 炭水化物抗原決定基のための免疫検定
EP1488238B1 (en) Screening method for gastritis
Carlson et al. Lack of association between hyperprolactinemia and colon carcinoma
PETERSEN et al. Abnormal processing of antral gastrin in active duodenal ulcer disease
Fernández-Bañares et al. Fat composition may be a clue to explain the primary therapeutic effect of enteral nutrition in Crohn's disease: Results of a...
CN114518455A (zh) 胆汁Lipocalin-2在恶性胆管狭窄诊断以及制备诊断恶性胆管狭窄产品中的应用
JP2018201524A (ja) 標的分子を検出する非侵襲的方法
Hughes Duodenal gastrin concentration in upper gastrointestinal disorders

Legal Events

Date Code Title Description
BB Publication of examined application
MA Patent expired