FI107808B - Menetelmä verisuoni- sekä syöpäsairaudelle riskialttiin yksilön identifioimiseksi - Google Patents

Menetelmä verisuoni- sekä syöpäsairaudelle riskialttiin yksilön identifioimiseksi Download PDF

Info

Publication number
FI107808B
FI107808B FI991836A FI19991836A FI107808B FI 107808 B FI107808 B FI 107808B FI 991836 A FI991836 A FI 991836A FI 19991836 A FI19991836 A FI 19991836A FI 107808 B FI107808 B FI 107808B
Authority
FI
Finland
Prior art keywords
concentration
homocysteine
serum
pgi
risk
Prior art date
Application number
FI991836A
Other languages
English (en)
Swedish (sv)
Other versions
FI19991836A (fi
Inventor
Osmo Suovaniemi
Matti Haerkoenen
Pentti Sipponen
Original Assignee
Biohit Oyj
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Biohit Oyj filed Critical Biohit Oyj
Priority to FI991836A priority Critical patent/FI107808B/fi
Priority to PCT/FI2000/000733 priority patent/WO2001016356A1/en
Priority to JP2001520901A priority patent/JP2003508059A/ja
Priority to AU68456/00A priority patent/AU6845600A/en
Priority to CNB008122261A priority patent/CN1158389C/zh
Priority to RU2002107982/15A priority patent/RU2247389C2/ru
Priority to EP00956556A priority patent/EP1210452A1/en
Publication of FI19991836A publication Critical patent/FI19991836A/fi
Application granted granted Critical
Publication of FI107808B publication Critical patent/FI107808B/fi

Links

Classifications

    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/82—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving vitamins or their receptors
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/5005—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving human or animal cells
    • G01N33/5091—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving human or animal cells for testing the pathological state of an organism
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/68—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving proteins, peptides or amino acids
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/68—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving proteins, peptides or amino acids
    • G01N33/6803—General methods of protein analysis not limited to specific proteins or families of proteins
    • G01N33/6806—Determination of free amino acids
    • G01N33/6812—Assays for specific amino acids
    • G01N33/6815—Assays for specific amino acids containing sulfur, e.g. cysteine, cystine, methionine, homocysteine

Description

107808
Menetelmä verisuoni- ja syöpäsairaudelle riskialttiin yksilön identifioimiseksi
Keksintö koskee diagnostista yhdistelmämenetelmää sepelvaltimo- ja verisuoni- sekä myös syöpäsairauksille alttiiden yksilöiden identifioimiseksi.
5
Keksinnön mukainen menetelmä perustuu kahden testin yhdistelmään, jotka testit suoritetaan veri- tai seeruminäytteellä yksilöiden identifioimiseksi, joille on taipumus kehittyä tai joilla osoitetaan olevan homokysteiinin kohonneet pitoisuudet ja joille siten on alttius kehittyä tällaisista kohonneista pitoisuuksista johtuvia 10 sairauksia, kuten sydän- tai aivoverisuonisairaus, mukaan lukien valtimon hauraus-kovetustauti ja iskeeminen halvaus, sekä syöpäsairaudet.
Monet erilaiset gastriset sairaudet tai tilat, kuten krooninen atrofinen gastriitti, pernisiöösi anemia, mahahaava, gastrinen polyyppitauti ja Mdndtrierin tauti 15 (jättiläishypertrofinen gastriitti) edeltävät mahasyöpää. Limakalvon selvästi identifioitavia muutoksia ovat dysplasia ja adenooma. On arveltu, että melkein kaikissa sairauksissa alttius välittyy kroonisen atrofisen gastriitin kautta.
Krooninen gastriitti merkitsee mahan limakalvon pitkittynyttä tulehdustilaa. Sairaus . 20 voidaan karkeasti jakaa superfisiaaliseen ja atrofiseen muotoon. Superfisiaalisessa **·*: gastrikissä inflammatorinen soluinfiltraatio konsentroituu pintaepiteelin alle. Kun • · :V: tulehdus etenee ja diffimdoituu spesifisten gastristen eritysrauhasten väliin, on ·:··: kyseessä krooninen atrofinen gastriitti. Tällöin metaplastiset muutokset korvaavat *·» > ainakin osittain mahan limakalvon normaalit rauhasrakenteet.
·«» • · · o r ·.· · 25
Potilailla, jotka kärsivät atrofisesta gastriitista mahan koipus-alueella, on ma- * * hasyövän suhteellisen riskin arvioitu, laskettuna suomalaisista syöpätilastoista, ' · · · • · ···* olevan noin 4- - 5-kertainen verrattuna henkilöihin, joilla on terve limakalvo.
• · ·,*·· Lisäksi on olemassa riski sairastua pernisiöösiin anemiaan, joka johtuu intrinsic- *«· :: 30 tekijän puutoksesta ja B12-vitamiinin imeytymishäiriöstä. Antrum-alueen vaikeassa •: · ·: atrofiassa riski on jopa 18-kertainen. Jos atrofisia muutoksia esiintyy sekä antrum- että korpus-alueella (pangastriitti), riski voi kasvaa jopa 90-kertaiseksi.
2 107808
Julkaisussa WO 96/15456 esitetään menetelmä mahasyövän riskin seulomiseksi, jonka menetelmän mukaan atrofia joko korpus- tai antrum-alueen tai molempien limakalvossa osoitetaan määrittämällä pepsinogeeni I:n (PGI) ja gastriini-17:n (G- 17) analyyttipitoisuudet seeruminäytteessä ja vertaamalla näin määritettyjä pitoi-5 suuksia vastaavan analyytin menetelmäspesifiseen cut-off-arvoon. Määritettyjä pitoisuuksia verrataan edullisesti myös vastaavan analyytin menetelmäspesifiseen viitearvoon.
Seerumin PGI-arvo, joka on alle PGI.n spesifisen cut-off-arvon, on osoitus 10 atrofisesta gastriitista mahan korpus-alueella. Jos seerumin G-17-konsentraatio on alle sen cut-off-arvon, atrofia sijaitsee mahan antrum-alueella. Pangastriitissa seerumin PGI on alle cut-off-arvon ja seerumin G-17-arvo on sen viitearvon alemmalla rajalla.
15 Metyleenitetrahydrofolaattireduktaasi (MTHFR) on solunsisäinen entsyymi, jota tarvitaan homokysteiinin uudelleenmetyloimiseksi metioniiniksi. Tämän entsyymin heikentynyt toiminta johtuu MTHFR-geenin rakenteessa esiintyvistä puutteista tai . mm. folaatin, B6-vitamiinin ja/tai B12-vitamiinin ravintopuutoksista. MTHFR- • ♦ • ♦ ♦ entsyymin heikentynyt toiminta johtaa homokysteiinin seerumi/plasmapitoisuuden • ♦ · *. I 20 kohoamiseen (homokystenemia) ja homokystinuriaan. Homokysteiinin kohonneiden • · · ] seerumi/plasmapitoisuuksien on monissa tutkimuksissa osoitettu liittyvän erilaisten • · #···( sydän- ja verisuonisairauksien kohonneeseen riskiin, homokysteiinin korkean seeru- • · 1 mi/plasmapitoisuuden, joka on yli viitearvon, ollessa sydän-ja verisuonisairauden ja iskeemisen halvauksen vakava riippumaton riskitekijä.1'5 25 • ♦ **’1; Homokysteiinin aterogeenisen vaikutuksen on ajateltu perustuvan reaktiivisten • 1 1 ,·[ ; happilajien kohonneeseen tuotantoon, mikä mahdollistaa lipidiperoksidaation.
* 1 · .···, Riittävä B12-vitamiinitarjonta on välttämätön folaattimetabolialle ja normaalille , verituotannolle, sekä hermosolujen toiminnalle. B12-vitamiini muodostaa komplek- • · . 3 0 sin proteiinin, intrinsic-tekijän, kanssa, jonka mahan korpus-alueen limakalvo • · · muodostaa ja joka kompleksi resporboituu sykkyräsuolen alemmassa osassa. Tämä 3 107808 on B12-vitamiinin edullisin resorptiomuoto.
Intrinsic-tekijän puutos, joka johtuu atrofisesta gastriitista tai mahasyövästä, erityisesti mahan korpus-alueella, johtaa lopulta B12-vitamiinin puutokseen kehossa 5 ja siten homokysteiinikonsentraation kohoamiseen. Olisi siten erityisen arvokasta identifioida ne yksilöt, joilla on tai joilla on suuri riski saada atrofisesta gastriitista johtuva B12-vitamiinin puutos ja joilla tästä syystä saattaisi olla homokysteiinin kohonnut seerumi- tai plasmapitoisuus. Näillä henkilöillä B12-vitamiinin lisäannos-tuksen varhaisesta aloittamista olisi hyötyä verisuonisairauksien ehkäisemisessä.
10 Olisi myös arvokasta kyetä identifioimaan ne yksilöt, joilla olisi solunsisaisten happiradikaalien ylituotannosta johtuva syöpäriski, ja joille olisi etua B12-vitamiinin lisäannostuksesta tai muusta hoidosta.
Keksinnön kohteena on menetelmä, jossa seeruminäytteestä tehtävä atrofisen 15 gastriitin markkerin määrityskoe yhdistetään homokysteiinikokeeseen, yksilön verisuoni- sekä syöpäsairauksien diagnoosin edesauttamiseksi, tai näiden riskin arvioimiseksi, jolloin termin verisuoni on ymmärrettävä laajasti käsittävän minkä tahansa sydän- tai verisuonisairauden, joka voi johtua homokysteiinin aterogeeni- . sesta vaikutuksesta.
»·· :v.20 • · « · : *: [: Keksinnön mukainen menetelmä on menetelmä verisuoni- j a syöpäsairaudelle riskialttiin yksilön identifioimiseksi, menetelmän käsittäessä vaiheet, joissa • · · : - määritetään kvantitatiivisesti pepsinogeeni I:n (PGI) analyyttikonsentraatiot • · · : mainitun yksilön seeruminäytteessä 25 - määritetään menetelmäspesifinen cut-off-arvo mainitulle analyytille λ * * - verrataan näin määritettyä analyyttikonsentraatiota analyytin menetelmä- »·· • · ·♦·* spesifiseen cut-ofF-arvoon, ja • · - määritetään homokysteiinikonsentraatio yksilön seeruminäytteessä ja • «« •... · verrataan sitä homokysteiinin menetelmäspesifiseen viitearvoon.
,:.=30 • · :· j Seerumin PGI- j a homokysteiinikonsentaatioiden määritys voi tapahtua missä 4 107808 tahansa järjestyksessä, jotta saadaan samanaikaisesti tietoa sekä seerumin PGI- että homokysteiinipitoisuuksista, jonka tiedon tarkoituksena on olla avuksi verisuonisairauden tai syövän diagnostisoimisessa tai riskin arvioimisessa. Kuitenkin keksinnön erään suoritusmuodon mukaisesti määritetään seerumin PGI-konsentaatio 5 ja sitä verrataan sen määritettyyn tai valittuun menetelmäspesifiseen cut-ofF-arvoon sekä määritetään homokysteiinipitoisuus kun seerumin PGI-konsentraatioarvo on alle sen menetelmäspesifisen cut-ofF-arvon. Tässä suoritusmuodossa homokyste-iinimääritys suoritetaan yksilöille, joille on määritetty alhaiset seerumin PGI-arvot, osoituksena korpus-atrofiasta.
10
Keksinnön erään suoritusmuodon mukaisesti määritetään myös mainitun yksilön seerumin B12-konsentraatio ja sitä verrataan Bl2-vitamiinin menetelmäspesifiseen viitearvoon.
15 Näin ollen edullisen suoritusmuodon mukaan keksinnön tarkoituksena on erityisesti seuloa sellaiset yksilöt, joilla ei vielä ole B12-vitamiinin puutosta, toisin sanoen joilla on olennaisesti normaalit B12-vitamiinipitoisuudet mutta joilla, johtuen alhaisista PGI-arvoista, on diagnostisoitu mahan korpus-alueen atrofia ja joilla on myös seerumin korkeat homokysteiinipitoisuudet. Tälläinen identifiointi mahdollis- . 20 taa jo aikaisessa vaiheessa turvautumisen ennalta ehkäiseviin toimenpiteisiin, esi-« · • · · .ΓΙ merkiksi B12-vitamiinin lisäannostukseen, kohonneisiin homokysteiinipitoisuuksiin • « *. l liittyvien vaurioiden kehittymisen estämiseksi.
• » · • · • · 1. Pepsinogeeni I:n (PGI) määritys • · · ·♦· 25 • « ·
Menetelmä PGI: n määrittämiseksi seeruminäytteessä voidaan suorittaa julkaisussa •: ♦ · · WO 96/15456 esitetyllä tavalla, joka julkaisu liitetään tähän viitteenä.
♦ · · • · ··· : Mainittu menetelmä sisältää edullisesti pepsinogeeni I:n poly- tai monoidonaalisten • «· • · .*' *.3 0 vasta-aineiden käytön immunologisessa menetelmässä pepsinogeeni I: n määrittämi- • · · ' . seksi. Reaktio suoritetaan edullisesti sopivalla kantajalla, kuten muovi-, lasi- tai ♦ · • · • · · • · · • · 5 107808 selluloosakantajalla, esimerkiksi mikrolevyllä. Immunologiset menetelmät voidaan suorittaa tunnetulla tavalla käyttäen esim. absorbanssi-, luminesenssi- tai fluo-resenssitekniikoita mainitun pepsinogeeni I-konsentraation mittaamiseksi näytteessä.
5 Jos seerumin pepsinogeeni I-konsentraatio on alle cut-off-arvon, joka, riippuen kyseessä olevan menetelmän spesifisyydestä ja sensitiivisyydestä, on 20-30 lg/1, joka vastaa noin 450-690 pmoolia/1, kyseessä on atrofia mahan korpus-alueella. Normaali- tai viitearvo PGIille on alueella 25-120 jg/1.
10 2. Homokysteiinin määritys
Homokysteiinipitoisuudet seerumissa voidaan määrittää minkä tahansa, tähän tarkoitukseen tunnetun menetelmän mukaan, jotka menetelmät ovat myös kaupallisesti saatavissa olevia, esim. testipakkauksen muodossa. Tunnettu menetelmä 15 kokonaishomokysteiinin kvantitatiiviseksi määrittämiseksi plasmassa tai seerumissa on korkean erotuskyvyn nestekromatografia, jossa on radioaktiivinen, fluoresoiva tai elektrokemiallinen detektio. Myös entsyymi-immunokoemenetelmä (EIA) on kehitetty (Bio-Rad Laboratories; Axis-Shield A/S) samoin fluo- •. ·.: resenssipolarisaatioimmunokoe (FPIA; Abbot Laboratories), joka immunokoe • » · : V 20 sisältää näytteiden esikäsittelyn ditiotreitolilla ja adenosiinilla, jonka jälkeen seuraa • · entsymaattinen vaihe S-adenosyyli-L-homokysteiinin muodostamiseksi, ja kokonais- * * homokysteiini mitataan esim. käyttäen monoldonaalisia anti-S-adenosyyli-L- • · * * · « ' homokysteiinivasta-aineita, katso esim. US 5,631,127.
i · · # 25 Homokysteiinin viitearvot ovat jossain määrin menetelmäspesifisiä, mutta yleensä * ... ne vaihtelevat välillä noin 5-15 pnoolia/l. Seerumin homokysteiinipitoisuus, joka on • · homokysteiinin menetelmäspesifisen viitetason yläpuolella, muodostaa riskin, kuten • · *·’*: edellä esitettiin. Homokysteiinipitoisuus, joka on yli 15 pnoolia/l, voidaan useim.
• · ’·;·* missä tapauksissa arvioida niin korkeaksi pitoisuudeksi, että se muodostaa selvän 1 riskitekijän.
• · • · · • · · • · 6 107808 3. B12-vitamiinin määritys
Keksinnön mukaan diagnoosimenetelmä käsittää seeruminäytteen B12-vitamiinikon-sentraation vaihtoehtoisen määritysmenetelmän. B12-vitamiinin (kobalamiini) 5 konsentraatio voidaan määrittää minkä tahansa, tähän tarkoitukseen tunnetun menetelmän mukaan. Tällaisia tunnettuja menetelmiä ovat seerumin B12:n mikrobiologinen koe, jossa käytetään organismia, kuten Euglena gracilista. tai Lactobacillus leichmanniia, joka vaatii kobalamiinia kasvaakseen. Myös B12-vitamiinin radi-oisotooppisia laimennuskokeita on käytetty ja tällaiset koetekniikat on hyvin esitetty 10 kiijallisuudessa, esim. Lau et ai, "Measurement of serum B12 levels using
Radioisotope Dilution and Coated Charcoal", Blood, 26 (1965), 202. Radioisotoop-pilaimennusmenetelmät ovat nopeampia ja antavat tulokset, jotka ovat vertailukelpoisia esim. Euglena-kokeella saatuihin tuloksiin, edellyttäen, että sidosproteiini on spesifinen biologisesti aktiiviselle kobalamiinille. Standardisoitu puhdas tai puhdis-15 tettu intrinsic-tekijän valmiste on kaikkein tyydyttävin sidosproteiinina, koska se sitoutuu spesifisesti todelliseen kobalamiiniin mieluummin kuin kobala-miinianalogeihin.
:*; B12:n radioisotooppilaimennuskoe sisältää yleensä vaiheen, jossa endogeeninen B12 • · · ;*«*; 20 vapautetaan sen luonnollisesta sidosproteiinista, esim. keittämällä valitussa pHrssa, « · ; V: jonka jälkeen lisätään mitattu määrä radioisotooppia 57C0-B12 ja rajoitettu määrä • i *:**: sidosproteiinia. Kaikki sidosproteiini tulee sidottua jollain B12-muodolla, koska lisätyn radioisotoopin B12 määrä on riittävä sitomaan pienen määrän proteiinia.
#«· :.·* ·' Koska sekä luonnollinen että radioaktiivinen B12 kilpailevat sitoutumisesti sidospro- 25 teiiniin, aste, johon proteiinisidotun B12:n radioaktiivinen määrä inhiboituu, on *·**· osoitus B12:n määrästä näytteessä. Tätä menetelmää on muuntanut Lau, supra, • « ... * erottamalla sitoutumaton B12 proteiiniin sitoutuneesta B12: sta proteeiinipäällyste- tyllä aktiivihiilellä ja supematanttinesteen, joka sisältää sitoutuneen radioaktiivisen • · · B12:n ja sitoutuneen ei-radioaktiivisen B12:n seoksen, radioaktiivisuus lasketaan.
·;··;* 30 Sen jälkeen seerumin B12-konsentaario lasketaan saadusta tuloksesta, usein :*·.· vertaamalla standarditaulukkoon. Radiotestipakkauksia on kaupallisesti saatavissa • · 7 107808 menetelmän suorittamiseksi.
B12-vitamiinin puutos on myös määritetty käyttäen esim. kemiluminisenssi-reseptorikokeita (Wentworth, S. et ai., Clin.Chem., Voi 40, 537-549), radioim-5 munokokeita (Enders, D.B., et ai., Clin.Chem., Voi. 24, 460-465) sekä myös ei-isotooppisia sitoutumiskokeita, CEDIA, kloonatun entsyymidonorin immunokokeita (van der Weide, J. et ah, Clin.Chem., Voi 38, 766-768).
Viitearvo B12:lle vaihtelee välillä 200-900 ng/1, vastaten noin 170-700 pmooiia/i.
10 Äskettäin tehdyssä, julkaisemattomassa työssämme havaitsimme, että 50 % niistä potilaista, jotka kärsivät korpus-atrofiasta (S-PGI < 25 l&V ja joiden seerumin B12-vitamiinikonsentraatio oli alle viitearvon alemman rajan (< 170 pmoolia/1), oli merkittävästi kohonnut seerumin homokysteiinikonsentraatio (keskiarvo 33,3 15 pnoolia/l, 16-157 pnoolia/l). Lisäksi 22 % niistä potilaista, joilla seerumin B12- vitamiinikonsentraatio oli välillä 180-230 pmoolia/1 (viitearvot 170-700 pmoolia/1), oli myös kohonnut homokysteiinikonsentraatio (keskiarvo 18,9 pnoolia/l, 16-25 pnoolia/l).
• · • · · >1· *· · * · * : .*20 Keksintö koskee myös testipakkausta käytettäväksi keksinnön mukaisessa menetel-• · • · · * · * · * mässä, j oka testipakkaus sisältää - välineet PGI-konsentraation määrittämiseksi seerumi näytteessä, • · · - välineet homokysteiinikonsentraation määrittämiseksi seeruminäytteessä.
• · · * · « . 2 5 Keksinnön mukainen testipakkaus voi sisältää yhdistelmän, joka muodostuu niistä • · ... yksittäisistä komponenteista, joita tarvitaan määritettäessä kvantitatiivisesti seerumin • ^ pepsinogeeni I-ja homokysteiinikonsentraatio veriseeruminäytteessä. Tätä · · · tarkoitusta varten testipakkaus voi sisältää tarvittavien komponenttien, kuten vasta- • # *:** aineiden ja substraattien, erillisiä ampulleja tai säiliöitä käytettäväksi analyytin » * ** 30 määritykseen.
• * » • · · • ♦ 8 107808
Viitteet 1. Boushey, C.J., Beresford, S.A.A., Omenn, G.S., Motulsky, A.G., JAMA 1995;274:1049-57 5 2. Graham, I.M., Daly, L.E., Rafsum, H.M. et. al., The European Concerted Action Project, JAMA 1997; 277:1775-81 3. Jacobsen, O.W., Clin Chem 1998; 44:1833-43 10 4. Mogadashian, M. H., McManus, B.M., Frohlich, J.J., Arch Intern Med 1997; 157: 2299-2308 5. Rafsum, H., Ueland, P.M., Nygärd, O., Vollset, S.E., Rev Medicine 1998; 15 49:31-62.
• · • · · • · · • · · • 1 1 • · • · • · • · · • · • · ♦ 1 · • · · • · · • · · « · · • · · • « • · · ,-• « ··· • · • · · • · · • · • · · • · • · • · · · • · • · · • · · • 1

Claims (5)

9 107808
1. Menetelmä verisuoni-ja syöpäsairaudelle riskialttiin yksilön identifioimiseksi, tunnettu siitä, että menetelmä käsittää vaiheet, joissa 5. määritetään kvantitatiivisesti pepsinogeeni I:n (PGI) analyyttikonsent- raatio mainitun yksilön seeruminäytteessä, - määritetään menetelmäspesifinen cut-off-arvo mainitulle analyytille, - verrataan näin määritettyä analyyttikonsentraatiota analyytin mene-telmäspesifiseen cut-off-arvoon, ja 10. määritetään homokysteiinikonsentraatio yksilön seeruminäytteessä ja verrataan sitä homokysteiinin menetelmäspesifiseen viitearvoon.
2. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että yksilön seeruminäytteestä määritetään PGI-konsentraatio ja sen jälkeen 15 homokysteiinikonsentraatio, kun seerumin PGI-konsentraatio on alle sen cut-of¥- arvon.
3. Patenttivaatimuksen 1 tai 2 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että se sisältää myös vaiheen, jossa määritetään näytteen B12-vitamiinikonsentraatio ja verrataan sitä 20 menetelmäspesifiseen viitearvoon. » · * · »
4. Testipakkaus patenttivaatimuksen 1 mukaisen menetelmän suorittamiseksi, joka pakkaus sisältää • · •: · ·: - välineet PGI-konsentaation määrittämiseksi seeruminäytteessä, :Tö5 - välineet homokysteiinikonsentraation määrittämiseksi seeruminäyt- • · · : teessä.
5. Patenttivaatimuksen 4 mukainen testipakkaus, jossa välineet pepsinogeeni I- ja • · 1 » ···’ homokysteiinikonsentraation määrittämiseksi ovat immunologisia välineitä. V-bo ··♦ m 4 m · • ♦ · • · • · • · ♦ • ♦· • · 10 107808
FI991836A 1999-08-31 1999-08-31 Menetelmä verisuoni- sekä syöpäsairaudelle riskialttiin yksilön identifioimiseksi FI107808B (fi)

Priority Applications (7)

Application Number Priority Date Filing Date Title
FI991836A FI107808B (fi) 1999-08-31 1999-08-31 Menetelmä verisuoni- sekä syöpäsairaudelle riskialttiin yksilön identifioimiseksi
PCT/FI2000/000733 WO2001016356A1 (en) 1999-08-31 2000-08-30 Method for identifying an individual at risk for vascular and cancer disease
JP2001520901A JP2003508059A (ja) 1999-08-31 2000-08-30 管疾患及び癌の危険性のある人を同定する方法
AU68456/00A AU6845600A (en) 1999-08-31 2000-08-30 Method for identifying an individual at risk for vascular and cancer disease
CNB008122261A CN1158389C (zh) 1999-08-31 2000-08-30 一种用于鉴别有血管及癌症疾病患病风险的个体的方法
RU2002107982/15A RU2247389C2 (ru) 1999-08-31 2000-08-30 Способ идентификации индивидуума с риском сосудистого и ракового заболевания
EP00956556A EP1210452A1 (en) 1999-08-31 2000-08-30 Method for identifying an individual at risk for vascular and cancer disease

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
FI991836A FI107808B (fi) 1999-08-31 1999-08-31 Menetelmä verisuoni- sekä syöpäsairaudelle riskialttiin yksilön identifioimiseksi
FI991836 1999-08-31

Publications (2)

Publication Number Publication Date
FI19991836A FI19991836A (fi) 2001-02-28
FI107808B true FI107808B (fi) 2001-10-15

Family

ID=8555217

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
FI991836A FI107808B (fi) 1999-08-31 1999-08-31 Menetelmä verisuoni- sekä syöpäsairaudelle riskialttiin yksilön identifioimiseksi

Country Status (7)

Country Link
EP (1) EP1210452A1 (fi)
JP (1) JP2003508059A (fi)
CN (1) CN1158389C (fi)
AU (1) AU6845600A (fi)
FI (1) FI107808B (fi)
RU (1) RU2247389C2 (fi)
WO (1) WO2001016356A1 (fi)

Families Citing this family (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2453001C1 (ru) * 2010-10-18 2012-06-10 Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Курский государственный медицинский университет Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию" Способ коррекции гипергомоцистеин индуцированного дефицита оксида азота l-норвалином в эксперименте
CN114924016B (zh) * 2022-04-28 2024-03-08 中国医学科学院北京协和医院 同时检测硫酸化及未硫酸化胃泌素g17的方法及其检测试剂盒

Family Cites Families (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
FI97304C (fi) * 1994-11-16 1996-11-25 Locus Genex Oy Menetelmä mahasyövän riskin seulonnaksi

Also Published As

Publication number Publication date
WO2001016356A1 (en) 2001-03-08
CN1158389C (zh) 2004-07-21
FI19991836A (fi) 2001-02-28
RU2247389C2 (ru) 2005-02-27
JP2003508059A (ja) 2003-03-04
CN1371427A (zh) 2002-09-25
EP1210452A1 (en) 2002-06-05
AU6845600A (en) 2001-03-26

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CA1298536C (en) Assay for sulfhydryl amino acids and methods for detecting and distinguishing cobalamin and folic acid deficiency
Ducros et al. Methods for homocysteine analysis and biological relevance of the results
Ueland et al. Total homocysteine in plasma or serum: methods and clinical applications
US7749729B2 (en) Methods for assessing the risk for development of cardiovascular disease
JP2009520957A (ja) 便試料中のヘモグロビンおよびｍ２−ｐｋを測定することによる結腸直腸癌の評価方法
US20050064422A1 (en) Polypeptide quantitation
Maldonado et al. Simultaneous electrochemical measurement method of histamine and Nτ-methylhistamine by high-performance liquid chromatography–amperometry with o-phthalaldehyde–sodium sulfite derivatization
Lavoinne et al. Serum cardiac troponins I and T in early posttraumatic rhabdomyolysis
Sheabar et al. Quantitative analysis of aflatoxin-albumin adducts
Umenishi et al. Comparison of three methods to quantify urinary aquaporin-2 protein
FI107808B (fi) Menetelmä verisuoni- sekä syöpäsairaudelle riskialttiin yksilön identifioimiseksi
US20030124616A1 (en) Homocysteinylated transthyretin
Manolov et al. Serum hepcidin levels in Bulgarian population
Harrington Methods for assessment of vitamin B12
CN108896771B (zh) Guca2a蛋白在骨关节炎中的用途
Blanco-Vaca et al. Comparison of the Abbott IMx® and a high-performance liquid chromatography method for measuring total plasma homocysteine
Nilsson et al. Clinical utility of serum holotranscobalamin as a marker of cobalamin status in elderly patients with neuropsychiatric symptoms
WO2016100117A2 (en) Accurate assay measurement of hydrophobic haptenic analytes
US7727972B2 (en) Methods for determining absorption of cobalamin or analogues thereof
EP1173764B1 (en) Method for identifying an individual at risk for irreversible neurodamages, comprising the steps of determining quantitatively the concentration of pepsinogen i (pgi) and vitamin b12
CN112595851A (zh) 一种强稳定性的同型半胱氨酸测定试剂盒及其制备方法
Zappacosta et al. Comparing different methods for homocysteine determination
Mansoor Comparison of Abbott IMx total homocysteine assay with a high pressure liquid chromatography method for the measurement of total homocysteine in plasma and serum from a Norwegian population
Sarma et al. Direct microtitre plate enzyme immunoassay of folic acid without heat denaturation of serum
SHINOGI et al. Measurement of metallothionein in rat tissues by a chromatographic method using the fluorometry of thiol groups