FI92202C

FI92202C - Menetelmä uusien terapeuttisesti käyttökelpoisten 4-substituoitujen pyratsolo/3,4-d/pyrimidiinijohdannaisten valmistamiseksi

Info

Publication number: FI92202C
Application number: FI891004A
Authority: FI
Inventors: Jeffrey B Press; Zoltan Hajos
Original assignee: Ortho Pharma Corp
Priority date: 1988-03-03
Filing date: 1989-03-02
Publication date: 1994-10-10
Also published as: KR940002827B1; FI92202B; IL89459A; CN1030605C; ZA891620B; NZ228168A; PH25999A; FI891004A0; NO890894L; NO169966B; EP0331510A2; FI891004A; CN1036766A; DK101689D0; NO169966C; PT89904B; NO890894D0; HUT49353A; PT89904A; US5001127A

Description

92202

MenetelmS uusien terapeuttisesti kåyttokelpoisten 4-subs-tituoitujen pyratsolo[3,4-d]pyrimidiinijohdannaisten val-mistamiseksi 5 Tåmå hakemus koskee menetelnråS uusien terapeutti sesti kayttOkelpoisten 4-substituoitujen pyratsolo-[3,4-d]pyrimidiinijohdannaisten valmistamiseksi, joilla on kaava

10 °.H

iU I

2 Ar 3 joka måSriteliaan tarkemmin myohemmin. Yhdisteillå on int-ravenoosi ja/tai positiivinen inotrooppinen vaikutus, ja 20 ne ovat hyOdyllisiS kardiovaskulaarisina aineina. Yhdis-teet ovat erityisen hyttdyllisiå kardiotonisina aineina veren tyOntymisen tehostamiseksi sydåmestå valtimoon, eri-tyisesti sydSmen akuutin tai kroonisen vajaatoiminnan såå-telysså. Yhdisteet ovat hyGdyllisia myos antiarytmisinå 25 aineina sydåmen rytmihåiriiiiden hoitamiseksi tai eståmi-seksi.

GB-patenttihakemus 2 186 573 ja DE-patenttihakemus 3 703 633 (vast. FI-patenttijulkaisua 86 728) koskevat puriinijohdoksia, joilla on kardiotonista ja antiaryt-30 mista vaikutusta ja joilla on seuraava kaava:

X N

JtQiCX"· cvy^ n* N3^Ns oh i 2 92202 jossa R on mahdollisesti substituoitu difenyylialkyyli-ryhma. Edelia esitetyssa kaavassa sivuketju on sitoutunut renkaan typpiatomiin.

US-patenttijulkaisu 4 460 586 koskee 3-aminopro-5 poksiaryylijohdoksia, joilla on kaava:

OH

fl I 7—CN \

H

15 Yhdisteet ovat hyodyllisia kardiotonisina, anti- arytmisinS ja adrenergisiS a- ja β-reseptoreita salpaavi-na alneina. US-patenttijulkaisu kuuluu niiden patenttien sarjaan, jotka on julkaistu vaatien erilaisia 4-substitu-oituja indolijohdoksia.

20 TamSn keksinnOn kohteena ovat 4-substituoidut py- ratsolo[3,4-d]pyrimidiinijohdannaiset, joilla on yleinen kaava:

OH

i XV T

30 3 jossa

Arx ja Ar3 kukin erikseen on fenyyli tai substituoitu fenyyli, jossa substituentti on kloori tai fluori.

35 Mukaan kuuluvat my5s 4-substituoitujen pyratsolo- pyrimidiinijohdannaisten optisesti aktiiviset isomeerit.

3 92202

Yleisen kaavan mukaiset yhdisteet ovat hyddyllisia kardiovaskulaarisina aineina ja erityisesti kardiotoni-sina aineina, ja ne ovat erityisen hyOdyllisia antiaryt-misinå aineina.

5 Keksintd laajimmissa muodoissaan koskee 4-substi- tuoituja pyratsolo[3,4-d]pyrimidinyylipiperatsiinij ohdok-sia, joilla on positiivista inotrooppista vaikutusta.

Keksinndlle on tunnusomaista, etta annetaan yhdis-teen, jolla on kaava 10

SH

15 N

reagoida natriumhydridin l&snåollessa alkylointiaineen kanssa, joka on 20

OH

A\ /-\ X 1“ )-Y N-X X-C!

Ar3 \-/ .. 25 tai 30 A 0

Ar/ \_/ 35 4 92202 TSssS tapauksessa sopivasti substituoitua 4-mer-kaptopyratsolo[3,4-d]pyrimidiinijohdosta 1 kasiteliaan emakselia, joita ovat esimerkiksi amiinit (esim. trietyy-liamiini), metallihydroksidit (esimerkiksi natrium- tai 5 kaliumhydroksidi), metallihydridit (esimerkiksi natrium-hydridi), inertissa liuottimessa kuten dimetyyliformami-dissa (DMF) tai tetrahydrofuraanissa (THF). NSin muodos-tuneen anionin annetaan reagoida sopivasti substituoitu-jen alkyloimisaineiden kuten kloridin 2 tai epoksidin 3 10 kanssa, ja reagenssien annetaan reagoida noin 2 - 200 tun-tia låmpdtilassa noin 0 - 100 °C keksinndn mukaisten yh-disteiden 4 muodostamiseksi. Alkyloimisaineina kSytetyt kloridit 2 ja epoksidit 3 ovat joko kaupallisesti saata-via, tai ne voidaan valmistaa kemian kirjallisuudessa esi-15 tetyilia ja ammattimiesten kåytettSvisså olevilla menetel-milia.

Farmaseuttisia koostumuksia, jotka sisaitavat vai-kuttavana aineena taman keksinndn mukaista yhdistetta se-koitettuna taydellisesti kantajan kanssa, voidaan valmis-20 taa tavanomaisten farmaseuttisten seostamismenetelmien mukaan. Kantaja voi olla erilaisissa muodoissa riippuen siita, missa muodossa valmiste halutaan annostella, esimerkiksi laskimonsisaisesti, suun kautta tai parenteraa-lisesti. Koostumus voidaan annostella myOs aerosolina. ·; 25 Valmistettaessa koostumuksia oraalissa annosmuodossa voi daan kayttaa mita tahansa farmaseuttista vaiiainetta kuten esimerkiksi vesi, glykolit, Oljyt, alkoholit, maku-aineet, sailytysaineet, variaineet ja muut sellaiset, kun kyseessa ovat nestemaiset oraaliset valmisteet (kuten esi-30 merkiksi suspensiot, eliksiirit ja liuokset), tai kantajia ,! kuten tarkkelykset, sokerit, laimentimet, rakeistusaineet, liukastinaineet, sideaineet, hajotusaineet ja muut sellaiset, kun kyseessa ovat kiinteat oraaliset valmisteet (kuten esimerkiksi jauheet, kapselit ja tabletit). Table-35 tit ja kapselit edustavat edullisimpia oraalisia annosyk- • 5 92202 sikkdmuotoja, mikå johtuu niiden annostelun helppoudesta, jolloin luonnollisesti kaytetaan kiinteita farmaseuttisia kantajia. Jos halutaan, tabletit voidaan paailystaa soke-rilla tai suolessa hajoavalla påailysteelia kayttamaiia 5 tavanomaisia menetelmiå. Parenteraalisissa valmisteissa kantaja koostuu tavallisesti steriilista vedesta, joskin voidaan siihen voidaan sisailyttaa muita aineosia esimer-kiksi liukenemisen edistamis- tai sailytystarkoituksia vårten; voidaan valmistaa mytts injisoitavia suspensioita, 10 jolloin voidaan kayttaa sopivia nestemåisia kantajia, sus-pendoimisaineita ja muita sellaisia. Farmaseuttiset koost-umukset sisaitåvat yleensa annosyksikdssa, esim. tabletis-sa, kapselissa, jauheessa, injektiossa, teelusikallisessa ja muussa sellaisessa, noin 0,01 - noin 50 mg/kg ja edul-15 lisesti noin 0,1 - noin 10 mg/kg vaikuttavaa aineosaa.

Aikuiset sekarotuiset koirat anestesoitiin nat-riumpentobarbitaalilla (45 mg/kg, i.p.) ja niiden hengi-tyksesta huolehdittiin keinotekoisesti. Keskimaarainen valtimopaine (MAP) rekisterOitiin katetrisoidusta reisi-20 valtimosta, ja laakkeet annettiin infuusiona katetrisoi-tuun reisivaltimoon. Valtimopaineen pulssia kaytettiin antamaan sykays sydamen pulssimittarille sydamen lyiinti-tiheyden (HR) maarittamiseksi. Vasemman kammion paine mi-tattiin Millar-katetrilla ja dP/dtoax derivoitiin. Suoritet-.. 25 tiin rintaontelon avaus oikealta puolelta, ja mitattiin sydanlihaksen supistusvoima (CF) Walton-Brodie jannityk-senmittaimella, joka oli ommeltu oikeaan kammioon. Kammio-lihasta venytettiin niin, etta saatiin aikaan 100 g:n pe-rusjannitys. Annettiin standariannos dopamiinia (10 - 15 30 pg/kg/min 3 minuuttia) sydanlihaksen herkkyyden maarit-tamiseksi inotrooppiselle stimulaatiolle.

Testattavat yhdisteet liuotettiin pieneen tilavuu-teen DMF:aa, joka oli laimennettu lopulliseen 10 %:n pi-toisuuteen fysiologisessa suolaliuoksessa. Vaihtoehtoi-35 sesti, silloin kun se oli mahdollista, valmistettiin liu- 6 92202 koinen hydrokloridisuola lisSamSlia fysiologisella suola-liuoksella laimennettua 0,1 M HCl:åå. valiaineita testat-tiin kSyttSen sopivia tilavuuksia, ja niiden havaittiin aiheuttavan alle 5 %:n vaikutuksen supistusvoiraaan. I.v.-5 tutkimuksia vårten yhdisteet annosteltiin infuusiopumpul-la (yhta laaketta eiainta kohti) nopeuksilla 0,58 - 2,2 ml/min kolmesta neljaan portaittain kasvavana annoksena. Kukin annos annettiin infuusiona viiden minuutin kuluessa vaiittOmasti aikaisemman annoksen aiheuttaman vaikutuksen 10 huipun jaikeen. MAP-, HR-, dP/dtmax- ja CF-vaster ta seurat-tiin jatkuvasti Beckman- tai Gould-rekisterdintilaitteen avulla, ja ne ilmaistiin prosentuaalisena muutoksena esi-laakkeen kontrolliarvoista annostellun laakkeen kumulatii-visen annoksen funktiona. Naissa tutkimuksissa n tarkoit-15 taa kaytettyjen koe-eiainten lukumaaraa

Inotrooppisen tehon maara saatiin laskemalla su-pistusvoiman (CF) ED50. Tama maariteltiin yhdisteen annoksena, joka sai aikaan sydanlihaksen supistusvoiman 50 %:n kasvun ylia esitetysta perusarvosta. Arvo saatiin 3-4 20 pisteen annos-vastekayrista kayttamailå joko graafista arviointia (n < 3) tai lineaarista regressioanalyysia (n >_3). Tastå arvioinnista saadut luvut on esitetty tau-lukossa 1. Suluissa olevat luvut ovat testattujen elåinten lukumaaria. 1

II

« 7 92202

Taulukko 1

KeksinnOn mukaisten yhdisteiden kardiovaskulaari-nen vaikutus.

5 Esi- (% kontrollista)

merkki Annos (mg/kg)__n MAP HR dPdt CF

1 1,875 2 -3 -10 124 205 (ED50=225 ug/kg) 2 1,875 1 -12 -11 48 97 10 3 1,875 1 -13 1 1 14 4 1,875 2 8 1 90 163 (ED50=450 ug/kg) 5 1,875 1 -8 -14 28 38

Seuraavat esimerkit selittavåt keksintba tarkemmin, 15 ja ne on tarkoitettu keksintba kuvaaviksi mutta ei rajoit-taviksi. Jotkut esimerkkien yhdisteet saatiin hydraattina. Vesi voidaan poistaa hydraateista kuivaamalla yhdisteen sulamispisteen alapuolella olevissa lampbtiloissa. Esimerkki 1 20 4- [ 1- [ 1- [bis( 4-fluorifenyyli )metyyli]piperatsin-4- yyli]-2-hydroksi-3-propanyylitio]-lH-pyratsolo[3,4-d]pyr-imidiini

Pentaania (30 ml) lisattiin natriumhydridiin (0,28 g, 5,8 mmol, 50-% suspensio mineraaliOljyssa) typ-. 25 pikehassa. Pentaani dekantoitiin Oljyn poistamiseksi. Li sattiin vedetOnta DMF:aa (12 ml), ja reaktioseos jaahdy-tettiin 0 °C:seen. Lisattiin 4-merkapto-lH-pyratsolo-[3,4-d]pyrimidiinia (0,76 g, 5 mmol) pienina annoksina 10 minuutin aikana. Kun viela 10 minuuttia oli kululunut, 30 saatuun vaalean vihreaan liuokseen lisattiin 0 °C:ssa 1-'· (l-kloori-2-hydroksi-3-propanyyli )-4- [bis( 4-f luorifenyy- li)metyyli]piperatsiinia (2,0 g, 5,1 mmol) pienina annoksina viiden minuutin aikana. Kun lisays oli suoritettu, reaktioseoksen annettiin lammita huoneen lampbtilaan, ja 35 sita sekoitettiin typpikehassa kuusi paivaa. DMF haihdu- 8 92202 tettiin vakuumissa (133 Pa) 50 °C:ssa. JSånnos dispergoi-tiin dikloorimetaaniin ja suodatettiin seliitin lSpi. Suo-dosta pestiin vedellS (2 x 50 ml), se kuivattiin (natrium-sulfaatti), suodatettiin ja haihdutettiin vakuumissa, jol-5 loin saatiin Oljyå (2,44 g). Flashkromatografiointi sili- kageelillS kåyttSen 10-% metanoli/dikloorimetaania antoi puhdistettua tuotetta (0,84 g), joka flashkromatografioi-tiin uudelleen kåyttåen 5-% metanoli/dikloorimetaania, jolloin saatiin puhdasta tuotetta (0,3 g, 15 %), sp. 88 -10 91 °C.

100 MHz 1H-NMR (CDC13) 6: 8,70 (s, IH), 8,14 (s, IH), 7,29 (m, 4H), 6,95 (m, 4H), 4,21 (s, IH), 4,10 (m, IH), 3,50 (m, 2H), 2,6 (m, 2H), 2,5-2,6 (m, 8H).

DCI/MS: (M+l) = 497.

15 Analyysi, C25H26F2N6OS: Ile laskettu: C 60,46; H 5,28; N 16,92 saatu; C 60,76; H 5,31; N 16,33.

Esimerkki 2 4-[2-hydroksi-l-[(difenyylimetyyli)piperatsin-4-20 yyli] -3-propanyylitio] -lH-pyratsolo[3,4-d]pyrimidiinihe-mihydraatti

Pentaania (30 ml) lisSttiin natriumhydridiin (0,28 g, 5,8 mmol, 50-% suspensio mineraaliOljyssd), ja seosta sekoitettiin typpikehSssS. Pentaani dekantoitiin.

25 Lisåttiin vedetdntå DMF:åå (12 ml), ja suspensio jååhdy-tettiin 0 °C:seen. LisSttiin 4-merkapto-lH-pyratsolo-[3,4d]pyrimidiiniå (0,76 g, 5 mmol) pieninå annoksina 10 minuutin aikana. Saatuun vaalean vihreSSn liuokseen lisat-tiin 0 °C;ssa l-(l-kloori-2-hydroksi-3-propanyyli)-4-di-30 fenyylimetyylipiperatsiinia (1,72 g, 5 mmol) pieninS an-• noksina viiden minuutin aikana. Kun lisåys oli suoritet- tu, seoksen annettiin lammitå huoneen lampOtilaan, ja sita sekoitettiin typpikehésså 48 tuntia. DMF haihdutettiin vakuumissa (133 Pa) 50 °C:ssa. JaannOsta hierrettiin dikloo-35 rimetaanissa, ja se suodatettiin. Suodosta pestiin vedellå 9 92202 (2 x 50 ml), se kuivattiin (Na2S04), suodatettiin ja haihdutettiin vakuumissa, jolloin saatiin kiinteS aine (1,83 g). Flashkromatografiointi silikageelilia kåyttSen 10-% metanoli/dikloorimetaania antoi haluttua tuotetta 5 (0,45 g, 25 %), sp. 78 - 80 °C.

100 MHz ^-NMR (CDC13) 6: 8,71 (s, 1H), 7,2-7,4 (m, 10H), 4,22 (s, 1H), 4,11 (m, 1H), 3,55 (m, 2H), 2,6 (m, 2H), 2,5-2,6 (m, 8H).

DCI/MS: (M+l) = 461.

10 Analyysi, C25H28N6OS· 1/2H20: lie laskettu: C 63,94; H 6,23; N 17,89 saatu: C 64,22; H 6,40; N 17,51.

Esimerkki 3 4- [3- [4- [bis( 4-fluorifenyyli )metyyli] piperatsin-1-15 yyli] -2-hydroksipropoksi] -1-( tetrahydropyran-2-yyli )pyrat- solo[3,4-d]pyrimidiini

Tolueeniliuosta (30 ml), jossa oli 3-[4-[bis(4-fluorifenyyli)metyyli]-1-piperatsinyyli]-1,2-propaani-diolia (3,98 g, 11 mmol), lisåttiin pisaroittain 20 mi-20 nuutin aikana sekoitettuun seokseen, jossa oli 4-kloori-1-(tetrahydropyran-2-yyli)pyratsolo[3,4-d]pyrimidiinia (2,387 g, 10 mmol) jauhemaista K0H:a (0,485 g, 8,51 mmol) ja 18-kruunu-6;ta (3, 90,2 mg, 0,34 mmol) tolueenissa (70 ml). Seosta sekoitettiin huoneen lampotilassa kolme 25 tuntia, ja sita pestiin vedelia (3 x 70 ml). Orgaaninen « kerros kuivattiin (Na2S04), suodatettiin ja haihdutettiin kuiviin. Oljymainen jaannOs (7,0 g) puhdistettiin keski-paine-silikageelikolonnissa eluoimalla metanolilla dik-loorimetaanissa siten, etta metanoliosuudet kasvoivat. Ot-30 sikon yhdiste saatiin paatuotteena (1,49 g, 41 %), ; sp. 101 - 105 °C.

IR(KBr) cm'1: 2466, 2446, 2401, 1603, 1568, 1506, 1347, 1222; 1H-NMR (CDC13) 6: 8,35 (s, 1H, 3- tai 6-H), 8,12 (s, 1H, 35 3- tai 6-H), 6,9-7,4 (m, 8H, Ar-H), 5,0 (m, 1H, 10 92202 N-O-CH-C), 4,6 (m, 2H, OCH2), 4,23 [s, IH, CH(0)2], 4,15 (m, 2H, HCOH, O-CHN), 3,8 (m, IH, OCNH), 1,6-2,9 (m, 16H, CH2, NCH2); MS(DCI): 565 (MH)\ 5 Analyysi, C30H34F2N6O3: Ile laskettu: C 63,82; H 6,07; N 14,88 saatu: C 63,49; H 6,04; N 15,06.

Esimerkki 4 4- [ 1- [ 1- [bis( 4-kloorifenyyli )metyyli]piperatsin-4-10 yyli] -2-hydroksi-3-propanyylitio] -lH-pyratsolo[3,4-d]py- rimidiini

Pentaania (30 ml) lisSttiin natriumhydridiin (0,28 g, 5,8 mmol, 50-% suspensio mineraaliOljyssS), ja seosta sekoitettiin typpikehSssS. Pervtaani dekantoitiin. 15 Lis&ttiin vedetdnta DMF:åå (6,0 ml), ja suspensio jaahdy-tettiin 0 °C;seen. Lisåttiin 4-merkapto-lH-pyratsolo-[3,4-d]pyrimidiinia (0,76 g, 5 mmol) pienina annoksina 10 minuutin aikana. Saatuun vaalean vihreaan liuokseen lisat-tiin 1—(l-kloori-2-hydroksi-3-propanyyli)-4-[bis(4-kloo-20 rifenyyli)piperatsiinia (1,8 g, 4,35 mmol) DM:aan (12 ml) liuotettuna, pienina annoksina viiden minuutin aikana. Kun lisays oli suoritettu, seoksen annettiin lammita huoneen lampotilaan, ja sita sekoitettiin 72 tuntia. DMF haih-dutettiin vakuumissa (133 Pa) 50 °C;ssa. jaannOsta hier-25 rettiin dikloorimetaanissa (50 ml), ja se suodatettiin. Suodosta pestiin vedelia (25 ml), se kuivattiin (Na2S04), suodatettiin ja haihdutettiin vakuumissa, jolloin saatiin 61jya (2,7 g).

Flashkromatografiointi kayttamaiia 10-% metanoli/- 30 dikloorimetaania antoi mainitun tuotteen (380 mg, 20 %), sp. 115 - 118 "C.

300 MHz 1H-NMR (CDC13) 6; 8,70 (s, IH), 8,14 (s, IH), 7,27 (m, 8H), 4,18 (s, IH), 4,10 (m, IH), 3,50 (m, 2H), 2,4- 2,6 (m, 10H).

35 DCI/MS: 529/531.

* ti 11 92202

Analyysi, C25H26Cl2N6OS: lie laskettu: C 56,71; H 4,96; N 15,87 saatu: C 56,79; H 5,01; N 14,99.

Esimerkki 5 5 1-(1,2-epoksi-3-propanyyli)-4-[1-(difenyylimetyy- lipiperatsin-4-yyli]-2-hydroksi-3-propanyylitio]-lH-py-ratsolo[3,4-d]pyrimidiini

Trietyyliamiinia (0,7 ml, 5 mmol) ja l-(l-kloori-2-hydroksi-3-propanyyli )-4-( difenyylimetyyli )piperatsii-10 nia (1,72 g, 5 mmol) lisattiin annoksittain viiden minuu-tin alkana 4-merkapto-lH-pyratsolo[3,4-d]pyrimidiiniin (0,78 g, 5 mmol), joka oli DMF:ssS (10 ml). Liuosta se-koitettiin typpikehassa nelja paivaa, ja DMF haihdutet-tiin vakuumlssa (66,5 Pa, 50 °C). jaannOs liuotettiin di-15 kloorimetaaniin, ja liuosta pestiin vedellS (1 x 100 ml), kyliaiselia suolaliuoksella (1 x 100 ml), ja orgaaninen kerros suodatettiin seliitin lapi ja haihdutettiin, jol-loin saatiin vaahtoa (1,47 g). Raakatuote eluoitiin sili-kageelin lapi kayttamaiia 10-% metanoli/dikloorimetaania, 20 jota uutettiin dikloorimetaanilla, ja orgaaninen kerros kuivattiin Na2S04:lia ja haihdutettiin ja kuivattiin vakuu-missa, jolloin saatiin otsikon yhdiste (0,36 g, 13,9 %), sp. 87 - 92 eC.

400 MHz "H-NMR (CDC13) 6: 8,70 (s, 1H), 8,1 (s, 1H), 7,4 . 25 (m, 5H), 7,15 (m, 5H), 4,25 (s, 1H), 4,11 (m, 1H), 3,55 (m, 2H), 3,7-2,4 (m, 15H).

DCI/MS: (M+l) = 517.

Analyysi, C28H32N602S: lie laskettu: C 65,09; H 6,24; N 16,27; S 6,21 30 saatu: C 65,59; H 6,47; N 16,42; S 6,18.

Esimerkki 6 ( 2S )-( + )-4- [l-bis( 4-f luorifenyyli )metyyli] piperat-sinyyli]-2-hydroksi-3-propanyylitio]-lH-pyratsolo[3,4-d]-pyrimidiini 35 Kayttamaiia esimerkissa 1 selitetyn menetelman kanssa analogista menetelmaa 4-merkapto-lH-pyratsolo- 12 92202 [3,4-d]pyrimidiinin (1,52 g, 10,0 mmol), natriumhydridin (0,50 g, 10 mmol) ja (2S)-(-)-(1,2-epoksipropyyli)-4-[bis(4-fluorifenyyli)metyyli]piperatsiinin (3,3 g, 9,6 mmol) annettiin reagoida 72 tuntia DMFrssa (kokonais-5 tilavuus 25 ml). Jalostamalla ja puhdistamalla saatiin otsikon yhdiste (0,8 g, 25 %) vaalean beigenS kiinteSna alneena, sp. 102 - 105 'C, [a]” +5,7° (5 % EtOH). Analyysi, C25H26F2N6OS: Ile laskettu: C 60,46; H 5,28; N 16,92 10 saatu: C 60,67; H 5,48; N 16,29.

LShtSaineiden valmistus

MenetelmS 1 1-(1-kloori-2-hydroksi-3-propanyyli)-4-[bis(4-fluorifenyyli)metyyli]piperatsiinimonohydraatti 15 [Bis(4-fluorifenyyli)metyyli]piperatsiinia (14,4 g, 0,05 mol), joka oli etanolissa (200 ml), lisat-tiin pisaroittain 45 minuutin aikana epikloorihydriiniin (3,5 ml, 0,05 mol), joka oli etanolissa (12 ml) 0 °C:ssa vedettbmån NaHC03:n (4,2 g, 0,05 mol) kanssa, N2-kehassS. 20 Jaahaude poistettiin, ja seoksen annettiin lammita huo-neen låmpdtilaan. 18 tunnin kuluttua NaHC03 poistettiin suodattamalla lasisintterisuppilon lapi, ja etanoli poistettiin suodoksesta vakuumissa, jolloin saatiin raakatuo-te (21,3 g). Flashkromatografiointi silikageelilia kSyt-25 tSen 2,0-% metanoli:dikloorimetaania antoi puhdasta tuo-tetta (10,05 g, 52,9 %) kullanruskeana dljynå.

DCI/MS: (M+l) = 381.

400 MHz 1H-NMR (CDC13) 6: 7,3 (m, 4H), 6,95 (m, 4H), 4,2 (s, IH), 3,95 (m, IH), 3,55 (m, 2H), 2,7 (m, 2H), 2,5 (m, 30 4H), 2,4 (m, 4H).

Analyysi, C20H23ClF2N2O*H2O;Ile laskettu: C 60,22; H 6,32; N 7,02 saatu: C 60,29; H 6,21; N 6,83.

I! 13 92202

Menetelma 2 1-( l-kloori-2-hydroksi-3-propanyyli) -4-( difenyylime-tyyli)piperatsiini

Difenyylimetyylipiperatsiinia (16,4 g, 0,065 mol), 5 joka oli etanolissa (250 ml), lisattiin pisaroittain 45 minuutin aikana huoneen l&mpdtilassa, N2-kehéss3 epikloo-rihydriiniin (5,1 ml, 0,065 mol), joka oli etanolissa (13 ml) vedettdmån NaHC03:n (0,065 mol, 5,46 g) kanssa 0 °C:ssa. 17 tunnin kuluttua NaHC03 poistettiin suodatta-10 malla lasisintterisuppilon lapi, ja etanoli poistettiin suodoksesta vakuumissa, jolloin saatiin vaalean kellerta-va kiintea aine (21,5 g). Tasta kiinteasta aineesta saatiin Et20:ssa (300 ml) hiertamisen jaikeen saostuma, joka suodatettiin ja kuivatiin vakuumissa, jolloin saatiin puh-15 das tuote (5,11 g, 22,8 %), sp. 114 - 116 °C.

DCI/MS: (M+l) = 345.

400 MHz XH-NMR (CDC13) 6: 7,2-7,4 (m, 10H), 4,2 (s, IH), 3,9 (m, IH), 3,55-3,7 (m, 2H), 2,7 (m, 2H), 2,45 (m, 8H). Analyysi, C20H25C1N20: Ile 20 laskettu: C 69,60; H 7,20; N 8,10 saatu: C 69,59; H 7,44; N 7,96.

Menetelma 3 3-[4-[bis( 4-f luorifenyyli )metyyli ] -1 - piper at si-nyyli]-1,2-propaanidioli‘O,25-hydraatti 25 Sekoitettuun ja lammitettyyn liuokseen, jossa oli 4-fluoribentshydryylipiperatsiinia (6,343 g, 22 mmol) MeOHrssa (75 ml), lisattiin typpikehassa hitaasti liuos-ta, jossa oli glysidia (1,63 g, 22 mmol) MeOHrssa (25 ml). Seosta sekoitettiin huoneen lampOtilassa 18 tuntia, palau-30 tusjaahdytettiin kaksi tuntia, ja se haihdutettiin kui-*: viin. Siirappimaiseen jåanndkseen lisåttiin CH2Cl2:ta (4 x 100 ml), ja seos haihdutettiin kuiviin. Siirappimainen jaannOs puhdistettiin kromatografisesti silikageelikolon-nissa (keskipaine). Eluoimalla 2 - 5-% MeOH/CH2Cl2:11a saa-35 tiin otsikon yhdiste varittOmana siirappina, josta pitkan 14 92202 alipainekSsittelyn jaikeen muodostui hygroskooppista vaah-toa (5,84 g, 73 %), sp. 40 - 50 °C.

IR(KBr) cm'1: 3625, 3575; 1H-NMR (CDC13) 6: 6,9-7,4 (m, 8H, Ar-H), 4,21 [s, IH, 5 CH(O)2] , 3,80 (m, IH, HCOH), 3,73 ja 3,49 (kumpikin m, kum- pikin IH, HOCH2), 3,8-2,3 (m, 10H, N-CH2); MS(DCI): 363 (MH)\

Analyysi, C20H24F2N202· 1/4H20: Ile laskettu: C 65,46; H 6,73; N 7,63 10 saatu: C 65,09; H 6,66; N 7,49.

Menetelma 4 1- (l-kloori-2-hydroksi-3-propanyyli) -4-(difenyylime-tyyli)piperatsiini

Seokseen, jossa oli epikloorihydriiniå (5,1 ml, 15 0,065 mol) etanolissa (13 ml) ja vedetdntå NaHC03;a (0,065 mol, 5,46 g) 0 °C:ssa, lisåttiin pisaroittain 45 minuutin aikana difenyylimetyylipiperatsiinia (16,4 g, 0,065 mol) etanolissa (250 ml) huoneen lampdtilassa, N2-kehåssS. 17 tunnin kuluttua NaHC03 poistettiin suodatta-20 malla lasisintterisuppilon låpi, ja etanoli poistettiin suodoksesta vakuumissa, jolloin saatiin vaalean kellerta-vå kiinteS aine (21,5 g). Tasta kiinteåsta aineesta saatiin Et20:ssa (300 ml) hiertåmisen j&lkeen saostuma, joka suodatettiin ja kuivatiin vakuumissa, jolloin saatiin puh-25 dasta tuotetta (5,11 g, 22,8 %), sp. 114 - 116 °C.

DCI/MS: (M+l) = 345.

400 MHz 1H-NMR (CDC13) 6: 7,2-7,4 (m, 10H), 4,2 (s, IH), 3,9 (m, IH), 3,55-3,7 (m, 2H), 2,7 (m, 2H), 2,45 (m, 8H). Analyysi, C20H25C1N20; Ile 30 laskettu: C 69,60; H 7,20; N 8,10 saatu: C 69,59; H 7,44; N 7,96.

Menetelma 5 1-(1-kloori-2-hydroksi-3-propanyyli)-4-[bis(4-kloorifenyyli)metyyli]piperatsiini 35 4,4'-diklooribentshydryylipiperatsiinin (6,0 g, 18,7 mmol) annettiin reagoida epikloorihydriinin kanssa 15 92202 kuten ylia, jolloin saatiin otsikon yhdiste kullanruskea-na Sljyna (3,67 g, 49,8 %).

100 MHz ^-NMR (CDC13) 6: 7,3 (s, 8H), 4,2 (s, IH), 3,9 (m, IH), 3,6 (d, 2H, J * 10 Hz), 2,9 (m, 2H), 2,7-2,4 (m, 5 10H).

Menetelma 6 (2S)-(-)-(1,2-epoksipropyyli)-4-[bis(4-fluorifenyy-li)metyyli]piperatsiini·1/4-hydraatti

NaH:iin (0,9 g, 18,75 mmol, 50-% suspensio mineraa-10 lidljyssa), jota oli aikaisemmin pesty pentaanilla ja joka oli DMFrssa (8 ml), lisåttiin 4,4'-difluoribentshydryyli-piperatsiinia (5,0 g, 17,4 mmol) DMF:ssS (15 ml) pisaroit-tain 15 minuutin aikana, 0 °C:ssa, typpikehassa. Kun seos oli ollut 15 minuuttia 0 °C:ssa, se lammitettiin huoneen 15 lampdtilaan. Kahden tunnin kuluttua seos jaahdytettiin 0 °C:seen, lisåttiin pisaroittain (2R)-(-)-glysidyylitosy-laattia (4,0 g, 17,5 mmol) DMF:ssa (16 ml), ja seosta se-koitettiin huoneen lamptttilassa, typpikehassa 24 tuntia. Sen jålkeen, kun seos oli suodatettu seliitin lapi, se 20 vakevbitiin vakuumissa (133 Pa, 55 °C), ja jaannds liuo-tettiin CH2Cl2:een. Suodattamalla liuos uudelleen, vake-viiimaiia ja flashkromatografioimalla saatu 01 jy silikagee-lin lapi kayttaen 10-% MeOH: CH2Cl2:ta saatiin otsikon yhdiste kullanruskeana Oljyna (4,66 g, 82,6 %); 25 DCI/MS: (M+l) = 345; 400 MHz 1H-NMR (CDC13) 6; 7,4 (m, 4H), 7,0 (m, 4H), 4,25 (s, IH), 3,1 (m, IH), 2,8 (m, 2H), 2,7-2,4 (m, 8H), 2,3 (m, 2H), [a] d2 = -7,5° (5 % EtOH:ssa).

30 Analyysi, C20H22F2N2O· 1/4H20: Ile i; laskettu: C 68,89; H 6,50; N 8,03.

saatu: C 69,17; H 6,53; N 8,02.

16 92202

Menetelma 7 (2R)-(+)-(1,2-epoksipropyyli)-4-[bis(4-fluorifenyy-li)metyyli]piperatsiinihydraatti Kåyttamaiia samanlaista menetelmåå, kuin ylia on 5 selitetty, kaytettiin (2S)-(+)-glysidyylitosylaattia (2,0 g, 8,76 mmol) otsikon yhdisteen valmistamiseksi kul-lanruskeana Oljyna (2,57 g, 77,8 %)? DCI/MS: (M+l) = 345; 400 MHz 1H-NMR (CDC13) 6: 7,35 (m, 4H), 6,95 (m, 4H), 4,2 10 (s, IH), 3,1 (m, IH), 2,55 (m, 2H), 2,45-2,3 (m, 8H), 2,2 (m, 2H); [a]\2 - +7,2° (5 % EtOH:ssa).

Analyysi, C20H22F2N20*H2O: Ile laskettu: C 66,68; H 6,67; N 7,73.

15 saatu; C 66,51; H 6,38; N 7,73.

Menetelma 8 1—[1—(2,3-epoksi)propyyli]-4-[bis(4-fluorifenyyli)-metyyli]piperatsiini

Liuos, jossa oli 4,4'-difluoribentshydryylipiperat-20 siinia (28,83 g, 100 mmol) asetonitriilisså (250 ml), li-såttiin 40 minuutin kuluessa jaakylmaån seokseen, jossa oli epibromihydriiniå (9,1 ml, 110 mmol) ja vedetOntå ka-liumkarbonaattia (15,2 g, 110 mmol) asetonitriilisså (150 ml). Seosta sekoitettiin huoneen lampotilassa 100 25 tuntia, se suodatettiin, ja kiiteita aineita pestiin di-kloorimetaanilla. Yhdistetyt suodokset vakevOitiin kui-viin, jolloin saatiin oljy, joka eluoitiin flashkromato-grafisesti silikageelikolonnin lapi kayttåmailå 2-3-% me-tanoli/dikloorimetaania, jolloin saatiin otsikon yhdiste 30 lasimaisena aineena (23,98 g, 69,6 %); 300 MHz 1H-NMR (CDC13) 6: 7,4-6,9 (m, 8H), 4,22 (s, IH), 3,09 (levea m, IH), 2,8-2,25 (m, 12H); MS: 345 (MH+).

Analyysi, C20H22F2N2O:Ile 35 laskettu: C 69,75; H 6,44; N 8,13; F 11,50 saatu: C 69,73; H 6,49; N 8,19; F 11,66.

Il 17 92202

Menetelma 9 l-amino-3- [4- [bis( 4-fluorifenyyli )metyyli] -1-pipe-ratsinyyli]-2-propanoli

Lluosta, jossa oli 1-[l-(2,3-epoksi)propyyli]-4-5 [bis(4-fluorifenyyli)metyyli]piperatsiinia (8,9 g, 25,8 mmol) ja nestemaistå ammoniakkia (20 ml) EtOHrssa (40 ml), kuumennettiin teflonreaktorissa, pommissa 110 °C:ssa 28 tuntia. Sitten liuos haihdutettiin kuiviin, jolloin saatiin noin 10 g lasimaista ainetta, joka puh-10 distettiin kayttamaiia flashkromatografiointia silikagee- lilia ja lisaten metanolin osuuksia dikloorimetaanissa, jolloin tuote saatiin dljyna, joka jahmettyi kuivattaessa vakuumissa, (5,7 g, 61 %), sp. 45 - 47 °C.

IR( sellaisenaan): 3350 cm'1; 15 300 MHz 1H-NMR (CDC13) 6: 7,4-6,9 (m, 8H), 4,21 (s, IH), 3,68 (levea m, IH), 2,8-2,2 (m, 12H); MS; 362 (MH*) .

Analyysi, C20H25F2N3O: Ile laskettu: C 66,46; H 6,97; N 11,63 20 saatu: C 66,21; H 7,10; N 11,63.

Menetelma 10 1-(l-kloori-2-hydroksi-3-propanyyli)-4-[bis(3,4'-trifluorimetyylifenyyli)metyyli]piperatsiini·5/4-hydraat-ti .. 25 3,4'-trifluorimetyylifenyylipiperatsiinin (1,7 g, 4,4 mmol) annettiin reagoida epikloorihydriinin kanssa kuten ylia, jolloin saatiin otsikon yhdiste kullanruskeana Oljyna (1,23 g, 72 %).

DCI/MS: (M+l) = 481; 30 400 MHz 1H-NMR (CDC13) 6; 7,68 (s, IH), 7,6-7,4 (s, 7H), 4,39 (s, IH), 3,9 (m, IH), 3,55 (m, 2H), 2,7 (m, 2H), 2,55-2,4 (m, 8H).

Analyysi, C22H23C1F6N20· 5/4H20: Ile laskettu; C 52,54; H 5,11; N 5,57 35 saatu: C 52,48; H 5,41; N 5,22.

• * ·

Claims

18 92202

1. Menetelmfi uusien terapeuttisesti kåyttdkelpois-ten 4-substituoitujen pyratsolo[3,4-d]pyrimidiinijohdan-5 naisten valmistamiseksi, joilla on kaava OH T N H Ar 3 jossa

15 Ar1 ja Ar3 kukin erikseen on fenyyli tai substituoltu fenyyli, jossa substituentti on kloori tai fluori; ja niiden optisesti aktiivisten isomeerien valmista-miseksi, tunnettu siitå, ettå annetaan yhdisteen, jolla on kaava 20 SH 11 I ;n : 25 reagoida natriumhydridin lSsnSollessa alkylointiaineen kanssa, joka on

30 OH A\ / \ 1 in )-Y N-' \-Cl Ar3X \-/ 35 tai II 19 92202 Ar\ _y<! )-Y N—x ^ IV

2. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelma, tunnet t u siita, etta valmistetaan (2R)-(-)-4-[1-[1-[bis- 10 (4-fluorifenyyli)metyyli]piperatsin-4-yyli]-2-hydroksi-3- propanyylitio]-lH-pyratsolo[3,4-d]pyrimidiini.

3. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelma, tunnet t u siita, etta valmistetaan (2S)-(+)-4-[1-[1-[bis-(4-fluorifenyyli)metyyli]piperatsin-4-yyli]-2-hydroksi-3- 15 propanyylitio]-lH-pyratsolo[3,4-d]pyrimidiini.

4. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmå, tunnet t u siita, etta valmistetaan 4-[2-hydroksi-3-(1- (difenyylimetyyli )piperatsin-4-yyli)3-propanyylitio]-lH-pyratsolo[3,4-d]pyrimidiini.

5. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelma, tun net t u siitå, ettå valmistetaan 1-(1,2-epoksi-3-propa-nyyli)-4- [ 1—(difenyylimetyyli )piperatsin-4-yyli )-2-hydrok-si-3-propanyylitio-lH-pyratsolo[3,4-d]pyrimidiini.

5 Ar3 \-/

6. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelma, t u n- 25. e t t u siita, etta valmistetaan 4-[l-[l-[bis-(kloori- fenyyli)metyyli]piperatsin-4-yyli]-2-hydroksi-3-propanyy-litio]-lH-pyratsolo[3,4-d]pyrimidiini.

7. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelma, tunnet t u siita, etta valmistetaan 4-[1-[1-[bis(4-fluori- 30 fenyyli)metyyli]piperatsin-4-yyli]-2-hydroksi-3-propanyy-‘ litio]-lH-pyratsolo[3,4-d]pyrimidiini. 20 92202