FI92069B - Menetelmä uusien, farmaseuttisesti aktiivisten 1H,3H-pyrrolo/1,2-c/tiatsoli-7-karboksamidijohdannaisten valmistamiseksi - Google Patents

Description

92069

Menetelmä uusien, farmaseuttisesti aktiivisten lH,3H-pyr-rolo[l,2-c]tiatsoli-7-karboksamidijohdannaisten valmistamiseksi 5 Keksinnön kohteena on menetelmä uusien, kaavan (1) mukaisten, farmaseuttisesti aktiivisten lH,3H-pyrrolo-[1,2-c]tiatsoli-7-karboksamidijohdannaisten valmistami seksi, 10 f _Ar H-Λ »o-z-Rj <i) 15 jossa Rx on vety- tai halogeeniatomi tai 1-4 hiiliatomia sisältävä alkyylioksiradikaali, Ar on fenyyli-tai pyridyyliradikaali, ja p on kokonaisluku 0, 1 tai 2, 20 ja A) Z on yksinkertainen sidos ja R2 on 3-kinuklidi-nyyli-, 1-metyyli-3-piperidyyli- tai l-metyyli-4-piperi-dyyliradikaali, B) Z on 1 - 4 hiiliatomia käsittävä alkyleeniradi- .· 25 kaali ja R2 on radikaali, jonka yleinen kaava on ^R3 -CON^ (II) ^R4 30 * jossa R3 ja R4 ovat alkyyliradikaaleja, joissa on 1-4 hiiliatomia, tai R2 on radikaali, jonka yleinen kaava on 32069 2 ^R3 -N<^ (IV)

Xr4 5 jossa R3 ja R4, jotka voivat olla samanlaisia tai erilaisia, merkitsevät vetyatomia tai alkyyliradikaalia, joka sisältää 1-4 hiiliatomia, fenyylialkyyliradikaalia, jonka alkyyliosa sisältää 1-4 hiiliatomia, tai fenyyli-10 tai alkyyliaminoalkyyliradikaalia, jonka alkyyliosat sisältävät 1-4 hiiliatomia, tai R3 ja R4 yhdessä typpiato-min kanssa, johon ne ovat sitoutuneet, muodostavat piperi-diini-, morfoliini- tai piperatsiinirenkana, joka voi olla substiuoitu 4-asemassa alkyyliradikaalilla, joka sisältää 15 1-4 hiiliatomia, tai fenyyli-, bentsyyli- tai hydroksi- etyyliradikaalilla, mukaanlukien raseemiset seokset ja enantiomeerit, joita esiintyy johtuen asymmetrisen hiilen läsnäolosta pyrrolotiatsolirenkaan asemassa 3, näiden enantiomeerien seokset, puhtaat diastereomeerit tai näiden 20 seokset, joita esiintyy johtuen mahdollisen toisen kiraa-lisen keskuksen läsnäolosta, E- ja Z-isomeerit (joita kutsutaan myös syn- ja anti-isomeereiksi) ja näiden seokset, joita esiintyy johtuen oksiimifunktion ONO-Z-R2 läsnäolosta, sekä mainittujen yhdisteiden farmaseuttisesti hyväk- .. 25 syttävät suolat.

♦ FI-patenteissa 76 577, 84 727 ja 84 728 on kuvattu 3-(3-pyridyyli)-1H,3H-pyrrolo[1,2-c]tiatsoli-7-karbosami-dijohdannaisia, jotka ovat käyttökelpoisia allergia- ja tulehdustiloissa, joissa PAF-eetteri on osallisena. Kaavan 30 (I) mukaisten yhdisteiden aktiivisuus on parempi kuin näillä tunnetuilla yhdisteillä, ja lisäksi niillä on pa-remmat liukoisuusominaisuudet. Keksinnön mukaan yleisen kaavan (I) mukaiset yhdisteet voidaan valmistetaan siten, että 35 (i) hydroksyyliamiini, jonka yleinen kaava on 3 92069 h2no-z-r2 (VI) jossa Z ja R2 ovat edellä määriteltyjä, saatetaan 5 reagoimaan ketonin kanssa, jonka yleinen kaava on °Y“V^_CO-*r i° N-Λ <VII> h ylli—i—u «! 15 jossa p, R, ja Ar ovat edellä määriteltyjä, tai (ii) yhdiste, jonka yleinen kaava on X-Z-R2 (VIII) 20 jossa Z ja R2 ovat edellä määriteltyjä ja X on halo- geeniatomi, saatetaan reagoimaan yhdisteen kanssa, jonka yleinen kaava on 25 Π II 1 ® 11 \ höh Πα> Ö(0)pS |1 —li—i—Jl «i 30 jossa p, Rj ja Ar ovat edellä määriteltyjä tai (lii) sellaisten kaavan (I) mukaisten yhdisteiden valmistamiseksi, joissa p on 0, saatetaan yhdiste, jonka yleinen kaava on 4 92069 CO-Cl R- tai S-muodossa tai niiden seoksena, reagoimaan oksiimin kanssa, jonka yleinen kaava on 10 Νλλ,ο-Ζ-Rj " u"' 15 1 jossa Ar, Z, Rj ja R2 ovat edellä määriteltyjä, E-tai Z-muodossa tai niiden seoksena, tai (iv) sellaisten kaavan (I) mukaisten yhdisteiden valmistamiseksi, joissa p on 1, hapetetaan näin saatu kaa-20 van (I) mukainen yhdiste, jossa p on 0.

Menetelmävaihtoehdossa (i) yleisen kaavan (Vl) mukaista hydroksyyliamiinia käytetään sen hydrokloridina ja toimitaan orgaanisessa liuottimessa, kuten pyridiinissä tai alhaisen molekyylipainon omaavassa alkoholissa, kuten .. 25 propanolissa happovastaanottajan, kuten alkalimetallikar- bonaatin läsnäollessa lämpötilassa, joka on 20 °C:sta reak-tioseoksen palautusjäähdytyslämpötilaan.

Yleisen kaavan (VI) mukaiset yhdisteet voidaan valmistaa käyttämällä tai soveltamalla kirjallisuudessa 30 kuvattuja menetelmiä.

; Yleisen kaavan (VII) mukaiset yhdisteet, joissa p on 1 tai 2, voidaan saada hapettamalla yleisen kaavan (VII) mukaista yhdistettä, jossa p on 0, eli yhdistettä, jonka yleinen kaava on 5 92069 — CO- Ar <VIIA) jossa Rx ja Ar ovat edellä määriteltyjä.

Hapettaminen voidaan suorittaa esimerkiksi käyttämällä tavanomaisesti sulfidin muuttamiseksi sulfoksidiksi 10 tai sulfoniksi käytettyä reagenssia sopivassa liuottimes-sa. Esimerkiksi voidaan käyttää hapetettua vettä asetonissa tai etikkahapossa, alkaliperjodaattia alkoholissa tai asetonitriilissä, perkarboksyylihappoa (peretikkahappo, perbentsoehappo, m-klooriperbentsoehappo, p-nitroperbent-15 soehappo tai perftaalihappo) jossakin eetterissä (dioksaa-ni, tetrahydrofuraani, dietyylioksidi) tai klooratussa liuottimessa (dikloorimetaani, 1,2-dikloorietaani), etikkahapossa tai näiden liuottimien seoksessa. Reaktio suoritetaan tavallisesti lämpötilassa -10 - +20 °C.

20 Erityisen edullisesti käytetään dikloorimetaania m- klooriperbentsoehapon läsnäollessa lämpötilassa 0 - 20 °C.

Haluttaessa saada sulfoksidi reaktio on suoritettava käyttäen yksi ekvivalentti hapetinta. Haluttaessa saada sulfoni joudutaan käyttämään vähintään kaksi ekvi-25 valenttia hapetinta. Hapetusreaktio sinänsä suoritetaan vähintään yhden ekvivalentin happoa, kuten metaanisulfoni-happoa, läsnäollessa noin 20 °C:n lämpötilassa.

Yleisen kaavan (VII) mukaiset yhdisteet, joissa p on 0, eli yleisen kaavan (VIIA) mukaiset yhdisteet, voi-30 daan valmistaa menetelmän mukaan, jota kuvataan EP-hake-musjulkaisussa 0 253 711.

# ·

Menetelmävaihtoehdossa (ii) annetaan yhdisteen, jonka yleinen kaava on 35 x-z“R2 (VIII) 6 92069 jossa Z ja R2 ovat edellä määriteltyjä ja X on halo-geeniatomi, kuten kloori-, bromi- tai jodiatomi, tai reaktiivinen esterijäännös kuten mesyylioksi tai tosyylioksi, vaikuttaa yhdisteeseen, jonka yleinen kaava on 5 c _Ar "0H (Ia> O3-1-8 *' jossa p, Rx ja Ar ovat edellä määriteltyjä.

Reaktio suoritetaan yleensä orgaanisessa liuotti-messa, kuten dimetyyliformamidissa noin 20 °C:n lämpöti-15 lassa kondensoivan aineen, kuten alkalihydridin, esimerkiksi natriumhydridin, läsnäollessa, tai alhaisen molekyy-lipainon omaavassa alkoholissa, kuten etanolissa tai t-butanolissa alkalimetallialkoholaatin, kuten natriumety-laatin tai kalium-t-butylaatin läsnäollessa keittämällä 20 palautusjäähdyttäen.

Yleisen kaavan (IA) mukaiset yhdisteet voidaan valmistaa antamalla yleisen kaavan (VI) mukaisen yhdisteen, jossa Z on valenssisidos ja R2 on vetyatomi, vaikuttaa yleisen kaavan (VII) mukaiseen yhdisteeseen kuten 25 edellä on mainittu.

«

Yleisen kaavan (IA) mukaiset yhdisteet, joissa p on 1 tai 2, voidaan samoin valmistaa hapettamalla yleisen kaavan (I) mukaista yhdistettä, jossa p on 0, Rx ja Ar ovat kuten määritelty edellä kohdassa A), eli yhdistettä, jonka 30 yleinen kaava on c N0H (I'A) —j—O «Γ 7 92069

Hapettaminen voidaan suorittaa kuten mainittu edellä yleisen kaavan (VIIA) mukaisen yhdisteen lopettamiseksi .

Keksinnön mukaan yleisen kaavan (1) mukaiset yh-5 disteet, joissa p on 0, voidaan saada menetelmävaihtoehdon (iii) mukaisesti antamalla 7-klooriformyyli-3-(3-pyridyy-li)-lH,3H-pyrrolo[l,2-c]tiatsolijohdannaisen, jonka yleinen kaava on CO-Cl n—^ J_0 <IX) 15 R- tai S-muodossa tai niiden seoksena, vaikuttaa oksiimiin, jonka yleinen kaava on o-Z-Rj

Ri jossa Ar, Z, Rx ja R2 ovat edellä määriteltyjä, E-tai Z-muodossa tai niiden seoksena.

25 Yleensä kondensointi suoritetaan olosuhteissa, joita tavanomaisesti käytetään valmistettaessa amideja antamalla happokloridin vaikuttaa primääriseen amiiniin.

Yleisen kaavan (X) mukainen yhdiste voidaan saada antamalla yleisen kaavan (Vili) mukaisen yhdisteen vai- 30 kuttaa oksiimiin, jonka yleinen kaava on »·

N^vv. OH

Ri 8 92069 jossa Ar ja ^ ovat edellä määriteltyjä, E- tai Z-muodossa tai niiden seoksena.

Yleensä reaktio suoritetaan alkalimetallihydridin, kuten natriumhydridin läsnäollessa orgaanisessa liuotti' 5 messa, kuten dimetyyliformamidissa noin 20 °C:n lämpötilassa.

E- tai Z-muodossa oleva yleisen kaava (Xl) mukainen oksiimi voidaan saada erottamalla esimerkiksi kroraa-tografisesti E- ja Z-muotojen seoksia.

10 Yleisen kaavan (Xl) mukaisen oksiimin E- ja Z-muo- tojen seos voidaan saada antamalla hydroksyyliamiinisuo-lan (hydrokloridi, tosylaatti) vaikuttaa yhdisteeseen, jonka yleinen kaava on 15 αΛ0 ’ <xu>

Ri 20 jossa Ar ja Rx ovat edellä määriteltyjä.

Yleensä reaktio suoritetaan orgaanisessa liuotti-messa, kuten pyridiinissä tai alhaisen molekyylipainon omaavassa alkoholissa, kuten propanolissa happovastaanot-.. 25 tajän, kuten alkalimetallikarbonaatin, esimerkiksi nat riumkarbonaatin, läsnäollessa lämpötilassa, joka on 20 °C:sta reaktioseoksen kiehumislämpötilaan.

Yleisen kaavan (X) mukainen yhdiste voidaan saada myös antamalla yleisen kaavan (VI) mukaisen hydroksyyli- 30 amiinin vaikuttaa yleisen kaavan (XII) mukaiseen ketoniin olosuhteissa, jolta kuvattiin aiemmin yleisen kaavan (VI) « mukaisen hydroksyyliamiinin ja yleisen kaavan (VII) mukaisen ketonin väliselle reaktiolle.

Yleisen kaavan (I) mukaiset yhdisteet, joissa p on 35 1, voidaan saada hapettamalla yleisen kaavan (I) mukaista yhdistettä, jossa p on 0 (menetelmävaihtoehto (lii)).

'' ,> 9 92069

Yleensä hapettaminen suoritetaan käyttämällä hape-tinta, kuten hapetettua vettä tai m-klooriperbentsoehap-poa. Erityisen edullisesti käytetään hapetettua vettä.

Kun kyseisessä keksinnössä viitataan määrättyyn 5 yhdisteeseen sen kemiallisella nimellä, tulee huomata, että ellei spesifisesti toisin osoiteta, tarkoitetaan aina raseemista seosta tai syn- ja anti-isomeerien seosta.

Yleisen kaavan (I) mukaiset yhdisteet, joissa ok-siimifunktion substituentit Ar ja 0-Z-R2 ovat syn- tai 10 anti-asemassa (E tai Z), voidaan valmistaa käyttämällä lähtöaineina vastaavia seoksia ja perinteisiä tavallisia menetelmiä kuten korkeapainenestekromatografiaa (HPLC).

Yleisen kaavan (I) mukaiset yhdisteet voivat esiintyä raseemisessa muodossa tai puhtaina enantiomee-15 reinä johtuen siitä, että hiiliatomi pyrrolotiatsoliren-kaan asemassa 3 on asymmetrinen. Yleisen kaavan (I) mukaisten yhdisteiden saamiseksi puhtaina enantiomeereinä sovelletaan edullisesti aiemmin kuvattuja menetelmiä käyttäen jo kertaalleen erotettua yleisen kaavan (Vll) 20 mukaista yhdistettä; tämä voidaan valmistaa EP-hakemus-julkaisussa 0 253 711 kuvatun menetelmän mukaan.

Alan ammattilaiselle on ilmeistä, että edellä kuvattujen menetelmien toteuttamiseksi joudutaan mahdollisesti liittämään suojaavia ryhmittymiä tiettyihin, käyte-25 tyissä eri yhdisteissä esiintyvissä radikaaleissa Ar, Rx ja R2 läsnäoleviin funktioihin. Suojaava ryhmä voidaan sitten poistaa synteesin tältä kannalta suotuisimmassa vaiheessa. Täten radikaalin Ar, Rx ja/tai R2 käsittäessä amino- tai alkyyliaminofunktion tämä voidaan suojata esimer-30 kiksi t-butyylioksikarbonyyliradikaalilla, jolloin se vapautetaan reaktion jälkeen käyttäen hapon vesiliuosta, esimerkiksi kloorivetyhapon vesiliuosta, tai edullisemmin, käyttäen kaasumaisen kloorivedyn liuosta etikkahä-possa. Radikaalin Ar, R1 ja/tai R2 käsittäessä hydroksyy-35 lifunktion tämä voidaan edullisesti suojata tetrahydropy- 10 92069 ranyylioksi- tai metoksimetyylioksiradikaaliksi, ja vapauttaa sitten reaktion jälkeen hydrolysoimalla.

Yleisen kaavan (I) mukaisia uusia yhdisteitä voidaan puhdistaa tavanomaisilla menetelmillä, esimerkiksi 5 kiteyttämällä tai kromatografisesti.

Yleisen kaavan (I) mukaiset uudet yhdisteet voidaan muuttaa happoadditiosuoloiksi saattamalla ne reagoimaan hapon kanssa orgaanisessa liuottimessa, kuten alkoholissa, ketonissa, eetterissä tai klooratussa liuottimes-10 sa. Suola saostuu, mahdollisesti kun sen sisältävää liuosta on ensin konsentroitu; se erotetaan suodattamalla tai dekantoimalla eroon.

Keksinnön mukaiset uudet yhdisteet sekä niiden farmaseuttisesti hyväksyttävät suolat osoittavat kiinnos- 15 tavia ominaisuuksia, joihin liittyy alhainen myrkylli syys. Ne ovat yleensä aktiivisia pitoisuuksina alle 0,5 nM mitattaessa in vitro -inhibitioaktiivisuutta verihiutale-aggregaation suhteen, joka on indusoitu 1-0-oktadekyyli- 2-0-asetyyli-ns-3-glyserofosforyylikoliinilla (PAF-eette-20 ri), G.V.R. Bornin et.ai., J.Physiol. 168 (1963) 178, tekniikan mukaan.

Niiden myrkyllinen annos (LDS0-arvona ilmaistuna) hiirellä on yleensä 300 - 900 mg/kg p.o.

Seuraavasta taulukosta käy ilmi kaavan (1) mukais-25 ten yhdisteiden parempi terapeuttinen aktiivisuus Fl-pa- tentistä 76 577 tunnettuihin yhdisteisiin nähden. Kokeessa tutkittiin yhdisteiden kykyä estää PAF-eetterin indusoima verihiutaleiden kasaantuminen mittaamalla valon transmission lisääntyminen tutkittavasta seoksesta. Koemenetelmä 30 oli seuraava:

Kaniinista otettiin runsaasti verihiutaleita sisältävä näyte (400 000 verihiutaletta/mm3). Tätä näytettä lisättiin 0,2 cm3 polystyreeniputkeen, ja lisättiin 0,025 Tris-HCl (0,05 M, pH - 7,4). Putkea ravisteltiin voimak-35 kaasti ja sitä inkuboitiin 10 minuuttia 37°C:ssa. Tämän ♦ * ·* .

11 92069 esi-inkuboinnin jälkeen lisättiin 0,025 can3 PAF-eetteri-liuosta (0,1 mg/1). Valon transmissio mitattiin ennen PAF-eetterin lisäystä (ennen verihiutaleiden kasaantumista) ja sen jälkeen, ja laskettiin näiden erotus.

5 Tutkittavien yhdisteiden vaikutuksen testaamiseksi

Tris-HCl-liuokseen lisättiin kyseisiä yhdisteitä, tämä liuos saatettiin kosketukseen verihiutalenäytteen kanssa, esi-inkuboitiin 10 minuuttia 37 °C:ssa ja lisättiin PAF-eetteri. Mitattiin valon transmissio samalla tavalla kuin 10 edellä, ja transmissiomittaustuloksista laskettiin se tutkittavan yhdisteen pitoisuus, joka estää 50-%:isesti PAF-eetterin indusoiman verihiutaleiden kasaantumisen.

i « 12 92069

Esimerkki nro Verihiutaleiden kasaantu minen CI50 (mikromoolia) 1 0,012 5 2 0,010 3 0,035 4 0,054 5 0,008 6, oksalaatti 0,014 10 6, kloorihydraatti 0,022 7 0,016 8 0,086 9 0,014 10, oksalaatti 0,0046 15 10, kloorihydraatti 0,0025 11 0,030 12 1,559 13 0,292 14 0,109 20 16 0,0008 17 0,00093 18 0,039 19 0,131 20 0,048 25 21 0,015 22 0,042 23 0,047 24 0,0033 25 1,10 30 26 0,069 28 0,194 29 0,0168 31 0,029 32, kloorihydraatti 0,0305 35 32, sulfaatti 0,0011 • FI 76 577, esimerkki 3 3,3 Tärkeitä kaavan (1) mukaisia yhdisteitä ovat seu-40 raavat yhdisteet: (+)-N-{3-{a-[3-(1-metyyli-1-piperatsinyyli)propok-si-imino]bentsyyli}fenyyli}-3-(3-pyridyyli )-lH,3H-pyrrolo-[1,2-c]tiatsoli-7-karboksamidi, E- ja Z-muotojen seos; t (+)-N-{3-[a-(2-dimetyyliaminoetoksi-imino)bentsyy-45 li}fenyyli}-3-(3-pyridyyli)-lH,3H-pyrrolo[1,2-c]tiatsoli- 7-karboksamidi, E- ja Z-muotojen seos; , t 13 92069 ( + )-Ν-{3-[α-(2-morfolinoetoksi-imino)bentsyy-li]fenyyli)-3-(3-pyridyyli)-1Η,3H-pyrrolo[1,2-c]tiatsoli- 7-karboksamidi, E- ja Z-muotojen seos; (+)-N-{3-{a-[2-(4-metyyli-l-piperatsinyyli)etoksi-5 imino]bentsyyli)fenyyli)-3-(3-pyridyyli)-lH,3H-pyrrolo- [1,2-c]tiatsoli-7-karboksamidi, E- ja Z-muotojen seos; (+ )-Ν-{3-{α-[(l-metyyli-4-piperidyyli)oksi-lmino]-bentsyyli)fenyyli)-3-(3-pyridyyli )-1Η, 3H-pyrrolo [ 1,2-c] -tiatsoli-7-karboksamidi, E- ja Z-muotojen seos; 10 (+)-N-{3-{a-[3-(4-metyyli-l-piperatsinyyli Jpropok- si-imino]bentsyyli)fenyyli)-3-(3-pyridyyli)-lH,3H-pyrrolo-[l,2-c]tiatsoli-7-karboksamidi, muoto A; (+ )-N-{3-{o-[(l-metyyli-4-piperidyyli)oksl-lmino]-bentsyyli}fenyyl±)-3-(3-pyr±dyyli )-lH, 3H-pyrrolo[l, 2-c]-15 tiatsoli-7-karboksamidi, muoto B; (+)-N-{3-{a-[(l-metyyl±-4-piperidyyli)oksi-imino]-bentsyyli)fenyyli)-3-( 3-pyridyyli )-lH, 3H-pyrrolo[l, 2-c] -tiatsoli-7-karboksamidi, E- ja Z-muotojen seos; (+)-Ν-{3-{α-[(l-metyyli-4-piperidyyli)oksl-imino]-20 bentsyylijfenyyli )-3-( 3-pyridyyli) -1H, 3H-pyrrolo[l, 2-c] - tiatsoli-7-karboksamidi-(2RS,3R)-2-oksidi, E- ja Z-muotojen seos; ( + )-N-{3-{o-[3-( 1-piperatsinyyli )propoksi-imino] -bentsyyli )fenyyli )-3-(3-pyridyyli)-1H, 3H-pyrrolo[l, 2-c]-25 tiatsoli-7-karboksamidi, E- ja Z-muotojen seos; (+)-N-{3-{{α-3-[4-(2-hydroksietyyli)-l-piperat-sinyyli]propoksi-imino)bentsyyli)fenyyli)-3-(3-pyridyyli )-1H,3H-pyrrolo[1,2-c]tiatsoli-7-karboksamidi, E- ja Z-muotojen seos; 30 ( + )-Ν-{3-{α-[ (l-metyyli-(3RS)-3-piperidyyli )oksi- i imino]bentsyyli)fenyyli)-3-(3-pyridyyli)-1H,3H-pyrrolo- [1,2-c]tiatsoli-(3R)-7-karboksamidi, E- ja Z-muotojen seos.

Terapeuttista käyttöä silmälläpitäen uusia kaavan 35 (1) mukaisia yhdisteitä voidaan käyttää sellaisenaan tai 14 92069 tarvittaessa farmaseuttisesti hyväksyttävinä suoloinaan, eli suoloina, jotka eivät käytettyinä annoksina ole myrkyllisiä.

Farmaseuttisesti hyväksyttävinä suoloina voidaan 5 mainita mineraalihappojen kanssa muodostetut happoadditio- suolat, kuten hydrokloridit, sulfaatit, nitraatit, fosfaatit, tai orgaanisten happojen kanssa muodostetut suolat, kuten asetaatit, propionaatit, sukklnaatit, bentsoaatit, fumaraatit, maleaatit, metaanisulfonaatit, isetionaatlt, 10 teofylliiniasetaatit, salisylaatit, fenoliftalinaatit, metyleeni-bis-b-oksinaftoaatit tai näiden yhdisteiden substituentteja käsittävät johdannaiset.

Seuraavien ei-rajäävien esimerkkien avulla esitetään, miten keksintö voidaan käytännössä suorittaa.

15 Esimerkki 1

Lietteeseen, jossa on 21,27 g (+)-N-(3-bentsoyyli-f enyyli )-3-( 3-pyridyyli) - 1H, 3H-pyrrolo [ 1,2-c] tiatsoli-7 -karboksamidia 250 ml:ssa 1-propanolia, lisätään 5,30 g natriumkarbonaattia ja 6,95 g hydroksyyliamiini-hydroklo-20 ridia. Lietettä keitetään palautusjäähdyttäen ja sitä samalla sekoittaen 2 tunnin ajan. Liuotin poistetaan haihduttamalla kuiviin alipaineessa (20 mmHg; 2,7 kPa) noin 45 °C:een lämpötilassa. Jäännös lietetään 250 ml:aan tislattua vettä ja kiteytyminen saatetaan alkuun. Saadut kiteet suo-25 datetaan eroon, pestään 4 kertaan kaikkiaan 300 ml:11a tislattua vettä ja kuivataan sitten ilmassa. Näin saadaan 22,04 g tuotetta, jonka sulamispiste on 210 °C. 2 g tätä tuotetta liuotetaan 80 ml:aan kiehuvaa 1-propanolia. Saatu liuos suodatetaan kuumana ja suodos jäähdytetään noin 30 0 °C:seen 48 tunnissa. Saadut kiteet suodatetaan eroon, pestään 3 kertaan kaikkiaan 10 ml:11a vedetöntä etanolia ja kuivataan sitten alipaineessa (0,1 mmHg; 13,5 Pa) noin 60 °C:een lämpötilassa. Näin saadaan 1,74 g (+)-N-[3-(g-hydroksi-iminobentsyyli)fenyyli]-3-(3-pyridyyli)-lH,3H-35 pyrrolot1,2-c]tiatsoli-7-karboksamidia (E- ja Z-muotojen 15 92069 seos) valkeina kiteinä, joiden sulamispiste on 151 -155 °C.

(+) -N-(3-Bentsoyylifenyyli)-3-(3-pyridyyli)-1H,3H-pyrrolo[l,2-c]tiatsoli-7-karboksamidi valmistetaan EP-ha-5 kemusjulkaisussa 0 253 711 kuvatun menetelmän mukaan.

Esimerkki 2

Seokseen, jossa on 325 mg 50-%:ista natriumhydri-didispersiota parafiiniöljyssä ja 4 ml vedetöntä N,N-di-metyyliformamidia, lisätään typpisuojakaasussa noin 5 mi-10 nuutin aikana liuos, jossa on 2 g (+)-N-[3-(a-hydroksi-iminobentsyyli) fenyyli ] -3- (3-pyridyyli) -1H, 3H-pyrrolo [1,2- c]tiatsoli-7-karboksamidia (E- ja Z-muotojen seos) 10 ml:ssa vedetöntä Ν,Ν-dimetyyliformamidia. Seosta sekoitetaan 15 minuutin ajan ympäristön lämpötilassa, minkä jäl-15 keen siihen lisätään noin 2 minuutin aikana liuos, jossa on 1,19 g l-(3-klooripropyyli)-4-fenyylipiperatsiinia 3 ml:ssa Ν,Ν-dimetyyliformamidia, ja saatua liuosta sekoitetaan 16 tunnin ajan ympäristön lämpötilassa. Sitten lisätään 150 ml tislattua vettä ja saatetaan kiteytyminen 20 alkuun. Kun seosta on sekoitettu 3 tunnin ajan ympäristön lämpötilassa, saadut kiteet suodatetaan eroon, pestään 3 kertaan kaikkiaan 45 ml:11a tislattua vettä ja kuivataan alipaineessa (0,1 mmHg; 13,5 Pa) noin 20 °C:ssa, jolloin saadaan 2,74 g tuotetta. Tämä liuotetaan 15 ml:aan aseto-25 nia ja saatuun liuokseen lisätään 0,77 g oksaalihappoa, • · · minkä jälkeen seosta sekoitetaan 3 tunnin ajan ympäristön lämpötilassa. Saadut kiteet suodatetaan eroon, pestään 4 kertaan kaikkiaan 20 ml:11a asetonia ja kuivataan alipaineessa (0,1 mmHg; 13,5 Pa) noin 60 °C:een lämpötilassa.

30 Näin saadaan 2,74 g (+)-N-{3-{g-[3-(4-fenyyll-l-piperatsi-T nyyli )propoksi-lmlno] bent syy li } fenyyli)-3-(3-pyridyyli) - lH,3H-pyrrolo[l,2-c]tiatsoli-7-karboksamidin hapanta di-oksalaattia (E- ja Z-muotojen seos) kerman värisinä kiteinä, joiden sulamispiste on 130 °C.

35 l-(3-Klooripropyyli)-4-fenyylipiperatsiini voidaan valmistaa C.B. Pollardin, J.Org.Chem. 24 (1958) 764, mukaan.

16 92069 (+)-N-[3-(α-hydroksi-iminobentsyyli)fenyyli]-3-(3-pyridyyli)-1H,3H-pyrrolo[1,2-c]tiatsoli-7-karboksamidi saadaan kuten kuvattu esimerkissä 1.

Esimerkki 3 5 Liuokseen, jossa on 2 g (+)-N-[3-(a-hydroksi-imino- bentsyyli) f enyyli] -3- (3-pyridyyli) - 1H, 3H-pyrrolo [ 1,2-c] -tiatsoli-7-karboksamidia (E- ja Z-muotojen seos) 10 ml:ssa vedetöntä Ν,Ν-dimetyyliformamidia, lisätään ympäristön lämpötilassa typpisuojakaasussa ja samalla sekoittaen 10 0,44 g 50-%:ista natriumhydrididispersiota parafiiniöljys sä. Sitten lisätään liuos, jossa on 0,72 g 3-dimetyyliami-no-l-klooripropaani-hydrokloridia 20 ml:ssa vedetöntä Ν,Ν-dimetyyliformamidia, noin 1 minuutin aikana. Liuosta sekoitetaan sitten 6 tunnin ajan ympäristön lämpötilassa, 15 minkä jälkeen siihen lisätään 10 ml tislattua vettä. Liuotin poistetaan haihduttamalla kuiviin alipaineessa (0,1 mmHg; 13,5 Pa) noin 50 °C:een lämpötilassa. Jäännös lietetään 100 ml:aan asetonia. Kun liuosta on sekoitettu 15 minuutin ajan ympäristön lämpötilassa, kiinteä aine 20 suodatetaan eroon ja pestään 2 kertaan kaikkiaan 40 ml:11a asetonia. Suodos haihdutetaan kuiviin alipaineessa (20 mmHg; 2,7 kPa) noin 50 °C:een lämpötilassa. Saadaan 2,5 g:n oranssin värinen jäännös, jolla suoritetaan kroma-tografia-ajo 3 cm:n halkaisijan omaavassa kolonnissa, jos-:· 25 sa on 65 g silikageeliä (0,02 - 0,045 mm). Eluoinnissa käytetään etyyliasetaatin ja metanolin seosta (tilavuus-suhteessa 50:50) 0,5 baarin (51 kPa) paineessa ja kerätään 25 ml:n fraktioita. Ensimmäiset 19 fraktiota heitetään pois. Seuraavat 31 fraktiota yhdistetään ja haihdutetaan 30 kuiviin alipaineessa (20 mmHg; 2,7 kPa) noin 40 °C:ssa.

·* Näin saadaan 1,3 g tuotetta, joka liuotetaan 40 ml:aan etyylieetteriä. Saatuun liuokseen lisätään 1,65 ml kaasumaisen kloorivedyn 4 N liuosta etyylieetterissä ja sekoitetaan noin 20 °C:ssa 15 minuutin ajan. Saadut kiteet suo-35 datetaan eroon ja pestään 4 kertaan kaikkiaan 50 ml:11a etyylieetteriä sekä kuivataan alipaineessa (0,1 mmHg; 17 92069 13,5 Pa) noin 60 °C:n lämpötilassa. Näin saadaan 1,35 g (+)-N-(3-a-[(3-dlmetyyllaminopropoksl-imino)bentsyyll]fe-nyyli)-3-( 3-pyridyyli )-lH, 3H-pyrrolo[ 1,2-c] tiatsoli-7-kar-boksamidi-dihydroklorldia (E- ja Z-muotojen seos) kerman 5 värisinä kiteinä, joiden sulamispiste on 140 °C.

(+)-N-[3-(a-hydroksi-iminobentsyyli)fenyyli]-3-(3-pyridyyli)-1H,3H-pyrrolo[1,2-c]tiatsoli-7-karboksamidi saadaan kuten kuvattu esimerkissä 1.

Esimerkki 4 10 Liuokseen, jossa on 2,64 g (+)-N-[3-(α-hydroksi- iminobentsyyli ) fenyyli ] -3- ( 3-pyridyyli )-lH,3H-pyrrolo-[l,2-c]tiatsoli-7-karboksamidia (E- ja Z-muotojen seos) 10 ml:ssa vedetöntä Ν,Ν-dimetyyliformamidia, lisätään ympäristön lämpötilassa typpisuojakaasussa ja samalla se-15 koittaen 0,86 g 50-%:ista natriumhydrididispersiota parafiiniöljyssä, minkä jälkeen lisätään pieninä erinä 1,24 g l-(3-klooripropyyli)piperidiini-hydrokloridia noin 5 minuutin aikana. Sitten liuosta sekoitetaan 48 tunnin ajan ympäristön lämpötilassa noin 20 °C:ssa. Liuotin poistetaan 20 alipaineessa kuiviin haihduttamalla (20 mmHg; 2,7 kPa), jolloin saadaan 4,85 g:n tahnainen oranssin värinen jäännös, jolla suoritetaan kromatografia-ajo 4 cm:n halkaisijan omaavassa kolonnissa, jossa on 150 g silikageeliä (0,02 - 0,045 mm). Eluoinnissa käytetään etyyliasetaatin 25 ja metanolin seosta (tilavuussuhteessa 70:30) 0,5 baarin (51 kPa) paineessa ja kerätään 80 ml:n fraktioita. Ensimmäiset 10 fraktiota heitetään pois. Seuraavat 31 fraktiota yhdistetään ja haihdutetaan kuiviin alipaineessa (20 mmHg; 2,7 kPa) noin 40 °C:een lämpötilassa. Saadaan 30 2,8 g tuotetta, joka liuotetaan 30 ml:aan etyyliasetaat-

tia* Liukenematon aines suodatetaan eroon ja suodos haih-dutetaan alipaineessa (20 mmHg; 2,7 kPa) kuiviin noin 40 °C:een lämpötilassa. Saadut 2,70 g tuotetta liuotetaan 15 ml:aan kloorivetyhapon 1 N vesiliuosta. Saatu liuos 35 suodatetaan ja kylmäkuivataan sitten. Näin saadut 3,2 g liuotetaan 50 ml:aan tislattua vettä. Saadun liuoksen pH

18 92069 nostetaan noin 8:ksl lisäämällä natriumbikarbonaattia, minkä jälkeen sitä uutetaan 3 kertaan kaikkiaan 50 ml:11a etyyliasetaattia. Saadut orgaaniset faasit yhdistetään, kuivataan kidevedettömällä magnesiumsulfaatilla, suodate-5 taan ja haihdutetaan alipaineessa (20 mmHg; 2,7 kPa) kuiviin noin 35 °C:ssa, jolloin saadaan 2 g vaalean ruskeaa marenkia. Tällä suoritetaan kromatografia-ajo 3 cm:n halkaisijan omaavassa kolonnissa, jossa on 65 g silikageeliä (0,02 - 0,045 mm). Eluoinnissa käytetään etyyliasetaattia 10 0,5 baarin (51 kPa) paineessa ja kerätään 250 ml:n frak tioita. Ensimmäinen fraktio heitetään pois. Seuraavat 12 fraktiota yhdistetään ja haihdutetaan kuiviin alipaineessa (20 mmHg; 2,7 kPa) noin 40 °C:een lämpötilassa. Näin saadaan 1,3 g tuotetta, joka liuotetaan 3 ml:aan asetonit-15 rilliä. Saatuun liuokseen lisätään 20 ml etyylieetteriä ja sitten 2 ml kaasumaisen kloorivedyn 4 N liuosta etyylieet-terissä ja sekoitetaan noin 20 °C:een lämpötilassa 15 minuutin ajan. Saadut kiteet suodatetaan eroon ja pestään 4 kertaan kaikkiaan 50 ml:11a etyylieetteriä ja kuivataan 20 alipaineessa (0,1 mmHg; 13,5 Pa) noin 50 °C:ssa. Saadaan 1,3 g (+)-N-{3-[g-(3-piperidinopropoksi-imino)bentsyyli]-fenyyli}-3-(3-pyridyyli )-lH, 3H-pyrrolo[l, 2-c]tiatsoli-7-karboksamidi-dihydrokloridia (E- ja Z-muotojen seos) kerman värisinä kiteinä, joiden sulamispiste on 142 °C.

25 (+)-N-[3-(a-Hydroksi-iminobentsyyli)fenyyli]-3-(3- pyridyyli)-lH,3H-pyrrolo[1,2-c]tiatsoli-7-karboksamidi saadaan kuten kuvattu esimerkissä 1.

Esimerkki 5

Kiehuvaan ja palautusjäähdytettyyn liuokseen, jos-30 sa on 5,9 g (+)-N-(3-bentsoyylifenyyli)-3-(3-pyridyyli)-·' lH,3H-pyrrolo[l,2-c]tiatsoli-7-karboksamidia 100 ml:ssa 1- propanolia, lisätään samalla sekoittaen 3,1 g 2-morfolino-etoksiamiini-dihydrokloridia ja 1,5 g natriumkarbonaattia· Kiehuvaa ja palautusjäähdytettyä lietettä sekoitetaan 5,5 35 tunnin ajan, minkä jälkeen se jäähdytetään noin 20 °C:seen. Liukenematon aines suodatetaan eroon ja pestään 20 ml:11a 19 92069 1-propanolia. Suodos haihdutetaan kuiviin alipaineessa (20 mmHg; 2,7 kPa) noin 40 °C:een lämpötilassa, jolloin saadaan 9 g tahnaista oranssin väristä tuotetta. Tällä suoritetaan kromatografia-ajo kolonnissa, jonka halkaisija 5 on 6 cm ja jossa on 1 kg hapolla aktivoitua aluminiumoksi-dia (0,050 -0,200 mm). Eluoinnissa käytetään etyyliasetaatin ja sykloheksaanin seosta (tilavuussuhteessa 50:50) 0,5 baarin paineessa (51 kPa) ja kerätään 500 ml:n fraktioita. Ensimmäiset 20 fraktiota heitetään pois; 10 seuraavaa 10 fraktiota yhdistetään ja haihdutetaan kuiviin alipaineessa (20 mmHg; 2,7 kPa) noin 40 °C:ssa, jolloin saadaan 8,1 g tuotetta. Tällä suoritetaan kromatografia-ajo kolonnissa, jonka halkaisija on 3 cm ja joka sisältää 125 g silika-geeliä (0,02 - 0,045 mm). Eluoinnissa käytetään etyyli-15 asetaatin ja metanolin seosta (tilavuussuhteessa 90:10) 0,5 baarin paineessa (51 kPa) ja kerätään 25 ml:n fraktioita. Ensimmäiset 19 fraktiota heitetään pois; 7 seuraavaa fraktiota yhdistetään ja haihdutetaan kuiviin alipaineessa (20 mmHg; 2,7 kPa) noin 40 °C:ssa, jolloin saa-20 daan 4 g keltaista marenkia. Tällä suoritetaan kromatografia-ajo kolonnissa, jonka halkaisija on 6 cm ja joka sisältää 65 g neutraalia aluminiumoksidia (0,100 -0,125 mm). Eluoinnissa käytetään etyyliasetaatin ja sykloheksaanin seosta (tilavuussuhteessa 20:80) ja kerätään 25 300 ml:n fraktioita. Ensimmäiset 3 fraktiota heitetään pois; 3 seuraavaa yhdistetään ja haihdutetaan kuiviin alipaineessa (20 mmHg; 2,7 kPa), jolloin saadaan 2 g tuotetta valkoisena marenkina. Tällä suoritetaan kromatografia-ajo kolonnissa, jonka halkaisija on 4 cm ja joka sisältää 25 g 30 neutraalia aluminiumoksidia (0,100 - 0,125 mm). Eluoinnis-sa käytetään etyyliasetaatin ja sykloheksaanin seosta (ti-lavuussuhteessa 50:50) ja kerätään 100 ml:n fraktioita. Ensimmäiset 9 fraktiota heitetään pois; 7 seuraavaa yhdistetään ja haihdutetaan kuiviin alipaineessa (20 mmHg; 35 2,7 kPa) noin 40 °C:ssa, jolloin saadaan 1,55 g tuotetta.

850 mg tästä liuotetaan 15 ml:aan metaanisulfonihapon 20 92069 0,21 N vesiliuosta ja saatu vesiliuos kylmäkuivataan. Näin saadaan 0,98 g (+)-N-(3-[g-(2-morfolinoetoksi-lmlno)bent-syyli] fenyyll}-3-( 3-pyridyyli )~1H, 3H-pyrrolo[l, 2-c] tiatso-li-7-karboksamidi-dimetaanisulfonaattia (E- ja Z-muotojen 5 seos) kirkkaan keltaisina kiteinä, joiden sulamispiste on 122 °C.

2-Morfolinoetoksimiini-dihydrokloridi voidaan valmistaa lähteen D. Favara et.ai., Il Farmaco, Ed. Sei. 42 (1987) 697, mukaan.

10 (+)-N-(3-Bentsoyylifenyyli)-3-(3-pyridyyli)-1H,3H- pyrrolo[l,2-c]tiatsoli-7-karboksamidi saadaan kuten kuvattu EP-hakemusjulkaisussa 0 253 711.

Esimerkki 6

Liuokseen, jossa on 9,3 g (+)-N-(3-bentsoyylifenyy-15 li )-3-(3-pyridyyli)-lH,3H-pyrrolo[l,2-c]tiatsoli-7-kar-boksamidia 160 ml:ssa 1-propanolia ja joka on kuumennettu noin 75 °C:seen, lisätään samalla sekoittaen 6,2 g 3-(4-metyyli-l-piperatsinyyli )propoksiamiini-trihydrokloridia ja 3,8 g natriumkarbonaattia. Saatua lietettä keitetään 20 palautusjäähdyttäen 29 tunnin ajan, minkä jälkeen reaktio- seos haihdutetaan kuiviin alipaineessa (20 mmHg; 2,7 kPa) noin 60 °C:een lämpötilassa. Saatu jäännös lietetään seokseen, jossa on 300 ml vettä ja 300 ml metyleenikloridia. Orgaaninen faasi erotetaan ja vesifaasia uutetaan kahteen ·< 25 kertaan kaikkiaan 600 ml:11a metyleenikloridia. Saadut orgaaniset uutteet yhdistetään, pestään kahteen kertaan kaikkiaan 600 ml:11a tislattua vettä, kuivataan kidevedet-tömällä magnesiumsulfaatilla, suodatetaan ja haihdutetaan kuiviin alipaineessa (20 mmHg; 2,7 kPa) noin 50 °C:een läm-30 pötilassa. Näin saadaan 14,3 g raakatuotetta. Tällä suori-·* tetaan kromatografia-ajo kolonnissa, jonka halkaisija on 6 cm ja joka sisältää 450 g silikageeliä (0,02 ·? 0,045 mm). Eluoinnissa käytetään metyleenikloridin ja me-tanolin seosta (tilavuussuhteessa 50:50) 0,5 baarin pai-35 neessa (51 kPa) ja kerätään 500 ml:n fraktioita. Ensimmäiset 7 fraktiota heitetään pois ja 13 seuraavaa yhdiste- 21 92069 tään ja haihdutetaan kuiviin alipaineessa (20 mmHg; 2,7 kPa) noin 40 °C:ssa, jolloin saadaan 7,2 g tuotetta. Tämä yhdistetään 0,8 g:aan toista näytettä, joka on peräisin aiemmasta valmistuksesta, ja liuotetaan molemmat 200 5 ml:aan asetonia. Saatu liuos lisätään noin 20 °C:ssa toiseen liuokseen, jossa on 2,5 g oksaalihappoa 100 ml:ssa asetonia. Saatua lietettä sekoitetaan noin 20 °C:ssa 1,5 tunnin ajan; saadut kiteet suodatetaan eroon, pestään 3 kertaan kaikkiaan 150 ml:11a asetonia ja sitten kahteen 10 kertaan kaikkiaan 100 ml:11a etyylieetteriä, minkä jälkeen ne kuivataan alipaineessa (20 mmHg; 2,7 kPa) noin 20 °C:ssa. Näin saadaan 9,1 g (+)-N-{3-{a-[3-(4-metyyli- 1-piperatsinyyli ) propoksi-imino]bentsyyli}fenyyli}-3-(3-pyridyyll)-1H,3H-pyrrolo[1,2-c]tiatsoli-7-karboksamidin 15 hapanta dioksalaattia (E- ja Z-muotojen seos) valkeina kiteinä, joiden sulamispiste on 190 °C.

1,16 g(+)-N-{3-{a-[3-(4-metyyli-l-piperatsinyyli)-propoksi-imino] bentsyyli } f enyyli } -3- (3-pyridyyli) -1H, 3H-pyrrolo[l,2-c]tiatsoli-7-karboksamidia, emäksen muodossa, 20 liuotetaan 10 ml:aan etyyliasetaattia. Saatuun liuokseen lisätään 50 mg valkaisuhiiltä, minkä jälkeen se suodatetaan. Saatu ei-liukoinen aines pestään 10 ml:11a etyyliasetaattia. Suodokseen lisätään 1 ml kloorivedyn 4 N liuosta eetterissä ja sekoitetaan noin 20 °C:ssa 15 minuu-25 tin ajan. Saadut kiteet suodatetaan eroon, pestään 3 kertaan kaikkiaan 9 ml:11a etyyliasetaattia ja kuivataan alipaineessa (0,1 mmHg; 13,5 Pa) noin 20 °C:een lämpötilassa. Näin saadaan 1,27 g (+)-N-{3-{a-[3-(4-metyyll-l-piperatsl-nyyll )propoksi-imino] bentsyyli } f enyyli )-3-( 3-pyridyyli)-30 1H, 3H-pyrrolo [ 1,2-c] tiatsoli-7-karboksamidi-dihydroklori- dia E- ja Z-muotojen seoksena, kerman värisinä kiteinä, joiden sulamispiste on 150 - 155 °C.

(+)-N-(3-bentsoyylifenyyli)-3-(3-pyridyyli)-lH,3H-pyrrolo[l,2-c]tiatsoli-7-karboksamidi saadaan kuten ku-35 vattu EP-hakemusjulkaisussa 0 253 711.

22 92069 3-(4-metyyli-l-piperatsinyyli )propoksiamiini-tri-hydrokloridi voidaan saada seuraavasti: liuosta, jossa on 5.7 g N-[3-(4-metyyli-l-piperatsinyyli)propoksi]ftalimi-diä 30 ml:ssa 6 N kloorivetyhappoa, keitetään palautus- 5 jäähdyttäen 3 tunnin ajan. Kun liuosta on sekoitettu 18 tunnin ajan noin 20 °C:een lämpötilassa, saatu liete suodatetaan ja suodos haihdutetaan kuiviin alipaineessa (20 mmHg; 2,7 kPa) noin 60 °C:ssa. Näin saadaan 6 g raaka-tuotetta, joka lietetään 30 ml:aan etanolia. Saadut kiteet 10 suodatetaan eroon, pestään 3 kertaan kaikkiaan 45 ml:11a etanolia ja sitten 3 kertaan kaikkiaan 75 ml:11a etyyli-eetteriä ja kuivataan lopuksi alipaineessa (20 mmHg; 2.7 kPa) noin 20 °C:ssa. Näin saadaan 3,4 g 3-(4-metyyli- 1-piperatsinyyli)propoksiamiini-trihydrokloridia kerman 15 värisinä kiteinä, joiden sulamispiste on 240 °C.

N-[3-(4-metyylipiperatsinyyli)propoksi]ftalimidi voidaan saada seuraavasti: liuos, jossa on 8,4 g l-(3-hydroksipropyyli)-4-metyylipiperatsiinia, 8,2 g N-hydrok-siftalimidiä ja 13,1 g trifenyylifosfiinia 120 ml:ssa 20 tetrahydrofuraania, jäähdytetään noin 0 °C:seen ja siihen lisätään 30 minuutin aikana 10,1 g etyyliatsodikarboksy-laattia. Saatua liuosta sekoitetaan noin 20 °C:ssa 18 tunnin ajan, minkä jälkeen se haihdutetaan kuiviin alipaineessa (20 mmHg; 2,7 kPa) noin 60 °C:een lämpötilassa. Saa-25 dulla epäpuhtaalla öljyllä suoritetaan kromatografia-ajo kolonnissa, jonka halkaisija on 5 cm ja joka sisältää 400 g silikageeliä (0,063 - 0,2 mm). Eluoinnissa käytetään etyyliasetaatin ja metanolin eri seoksia ja kerätään 500 ml:n fraktioita. Ensimmäiset 5 fraktiota, jotka saa-30 daan eluoimalla pelkällä etyyliasetaatilla, ja 5 seuraavaa : fraktiota, jotka saadaan eluoimalla etyyliasetaatin ja metanolin seoksella (tilavuussuhde 70:30), heitetään pois. Seuraava fraktio, joka saadaan eluoimalla etyyliasetaatin ja metanolin seoksella (tilavuussuhde 70:30), 5 seuraavaa 35 fraktiota, jotka saadaan eluoimalla etyyliasetaatin ja 23 92069 metanolin seoksella (tilavuussuhde 50:50), ja 2 seuraavaa fraktiota, jotka saadaan eluoimalla pelkällä metanolilla, yhdistetään ja haihdutetaan kuiviin alipaineessa (20 mmHg; 2,7 kPa) noin 60 °C:een lämpötilassa. Näin saadaan 11,4 g 5 N-[3-(4-metyyli-l-piperatsinyyli)propoksi]ftalimidiä punaisena öljynä (Rf = 0,2; silikageeliohutlevykromatografia; eluenttina etyyliasetaatti-metanoli, tilavuussuhde 50:50).

E- ja Z-muodot voidaan erottaa seuraavasti: 50 mg edellä saatua (+ )-N-{3-{a-[3-(4-metyyli-l-piperatsinyyli)-10 propoksi-imino]bentsyyli}fenyyli}-3-( 3-pyridyyli )-lH, 3H-pyrrolo[l,2-c]tiatsoli-7-karboksamidia (E- ja Z-muotojen seoksena) liuotetaan 2 ml:aan asetonitriilin ja veden seosta (tilavuussuhde 50:50). Saatu liuos ruiskutetaan 25 cm:n pituiseen kromatografiakolonniin, jonka halkaisija 15 on 2 cm ja johon on stationäärifaasiksi täytetty C18-ok-sastettua silikageellä (silikageeli Ultrabase, joka nimi on talletettu laitokseen Societe Francaise de Chromato-graphie sur colonne, Neuilly-Plaisance, Ranska). Kolonnia eluoidaan seoksella, jossa on asetonitrilliä, vettä ja 20 trietyyliamiinia (tilavuussuhteessa 40:60:0,5) virtausnopeuden ollessa 5 ml/min. Analysoidaan eluaattifraktioiden UV-absorbanssi 270 nm:n aallonpituudella. Kyseiset kaksi isomeeriä todetaan retentioajoilla 90 ja vastaavasti 110 minuuttia. Haluttuja isomeerejä sisältävät eluaattifrak-25 tiot yhdistetään ja haihdutetaan kuiviin alipaineessa (20 ··« mmHg; 2,7 kPa) noin 40 °C:ssa ja jäännöksiä kuivataan alipaineessa (1 mmHg; 0,7 kPa) 20 °C:ssa yön yli. Näin saadaan (+)-N-{3-{a-[3-(4-metyyli-l-piperatsinyyli)propoksi-imino]bentsyyli}fenyyli}-3-(3-pyridyyli)-lH,3H-pyrrolo-30 [l,2-c]tiatsoli-7“karboksamidia happamana dioksalaattina 14 mg muodossa A ja 18 mg muodossa B.

150 mg (+)-N-{3-{a-[3-(4-metyyli-l-piperatsinyyli)-propoksi-imino]bentsyyli}fenyyli}-3- (3-pyridyyli )-lH, 3H-pyrrolo[l,2-c]tiatsoli-7-karboksamidin happaman dioksalaa-35 tin muotoa A, joka on saatu toistamalla edeltävä menette- i» - . - / '' 24 92069 ly, liuotetaan 5 ml:aan 1 N natriumhydroksidiliuosta. Liuosta uutetaan 3 kertaan kaikkiaan 25 ml:11a etyyliasetaattia. Orgaaniset faasit erotetaan, yhdistetään keskenään, kuivataan kldevedettömällä magnesiumsulfaatilla, 5 suodatetaan ja haihdutetaan kuiviin alipaineessa (20 mmHg; 2.7 kPa) noin 45 °C:een lämpötilassa. 145 mg saatua tuotetta liuotetaan 5,23 ml:aan 0,1 N kloorivetyhappoa ja saatu liuos kylmäkuivataan. Näin saadaan 153 mg (+)-N-(3-{a-[3-(4-metyyli-l-piperatsinyyli )propoksl-imino]bentsyyli}fe- 10 nyyll}-3-( 3-pyridyyll )~1H, 3H-pyrrolo[ 1,2-c] tlatsoli-7-kar- boksamidin muotoa A dihydrokloridina.

120 mg (+ )-N-{3-{a-[3-(4-metyyli-l-piperatsinyyli)-propoksi-imino]bentsyyli}fenyyli}-3-( 3-pyridyyli )-lH, 3H-pyrrolo[l, 2-c] tiatsoll-7-karboksamidin happaman dioksalaa-15 tin muotoa B, joka on saatu toistamalla edeltävä menettely, liuotetaan 5 ml:aan 1 N natriumhydroksidiliuosta. Liuosta uutetaan 3 kertaan kaikkiaan 30 ml:11a etyyliasetaattia. Orgaaniset faasit erotetaan, yhdistetään keskenään, kuivataan kldevedettömällä magnesiumsulfaatilla, 20 suodatetaan ja haihdutetaan kuiviin alipaineessa (20 mmHg; 2.7 kPa) noin 45 °C:een lämpötilassa. 100 mg saatua tuotetta liuotetaan 3,6 ml:aan 0,1 N kloorivetyhappoa ja saatu liuos kylmäkuivataan. Näin saadaan 108 mg (+)-N-{3-{a-[3-(4 -metyyl i -1 -piperatsinyy 1 i) propoksl - imino ] bent syy 11} f e- *· 25 nyyli}-3-( 3-pyridyyli )-lH, 3H-pyrrolo[ 1,2-c] tiatsoli-7-kar- boksamidin muotoa B dihydrokloridina.

Kyseiset kaksi muotoa identifioitiin vastaavien nmr-spektriensä perusteella (200 MHz, DMSO, d miljoona-osissa, J Hz:einä), jolloin symbolien merkitykset ovat 30 seuraavat: s - singletti; d - dubletti; t * tripletti; | Mf - massiivinen; Mt - multipletti; dd - kaksoisdubletti; dt - kaksoistripletti.

Muoto A: 2,2 (Mf, 2H: -CH2-CH2-CH2-); 2,86 (s, 3H: .NCH3); 35 3,24 (Mf, 2H: -CHj-CI^-N); 3,3 - 3,9 (Mt, 8H: .NCH2- pi- 25 92069 peratsiinista); 4,24 (t, J=7, 2H: -OCH2-); 4,45 ja 4,63 (d, J-15 ja dd, J-15 ja 1, 1H kukin: CH2 pyrrolotiatso-lista); 6,74 (d, J-2,5, 1H: CH pyrrolotiatsolin asemassa 6); 6,86 (d, J=l, 1H: CH pyrrolotiatsolin asemassa 3); 5 7,09 (dt, J-8, 1H, aromaatti para-asemassa ryhmään -NH-CO-); 7,11 (d, J-2,5, 1H: CH pyrrolotiatsolin asemassa 5) ; 7,4 - 7,6 (Mt, 6H: aromaatteja); 7,8 (Mt, 2H: H pyri-diinin asemassa 5, ja aromaatti orto-asemassa ryhmiin -NH-CO- ja .C-N-); 7,92 (leveä d, J-8, 1H: H pyridiinin 10 asemassa 4); 8,01 (dt, J=8, 1H: aromaatti orto-asemassa ryhmään -NH-CO-); 8,71 (leveä s, 1H: H pyridiinin asemassa 2); 8,78 (leveä d, J=5, 1H: H pyridiinin asemassa 6); 9,84 (s, 1H: -CONH-); noin 11,8 (levinnyt Mf, noin 1H: .NHs-).

15 Muoto B: 2,19 (Mt, 2H: -CH2-CH2-CH2); 2,87 (s, 3H: .NCH3); 3,20 (Mf, 2H: -CH^CHj-N); 3,3 - 3,9 (Mt, 8H: .NCH2- pi- peratsiinista); 4,23 (t, J-7, 2H: -OCH2-); 4,44 ja 4,63 (d, J-15 ja dd, J-15 ja 1, 1H kukin: CH2 pyrrolotiatso-20 lista); 6,73 (d, J-2,5, 1H: CH pyrrolotiatsolin asemassa 6) ; 6,86 (d, J-l, 1H: CH pyrrolotiatsolin asemassa 3); 7,08 (d, J-2,5, 1H: CH pyrrolotiatsolin asemassa 5); 7,08 (Mt, 1H: aromaatti para-asemassa ryhmään -NH-CO-); 7,3 - 7,65 (Mt, 6H: aromaatteja); 7,77 (dd, J=8 ja 5, 1H: H py- - 25 ridiinin asemassa 5); 7,85 - 8,05 (Mt, 3H: aromaatteja orto-asemassa ryhmään -NH-CO- ja pyridiinin asemassa 4); 8.7 (leveä s, 1H: H pyridiinin asemassa 2); 8,77 (d, J-5, 1H: H pyridiinin asemassa 6); 9,79 (s, 1H: -CONH-); noin 11.7 (levinnyt Mf, noin 1H: .NHs-).

30 Esimerkki 7 * Liuokseen, jossa on 9,15 g (+)-N-(3-bentsoyylife- nyyli)-3-(3-pyridyyli)-1H,3H-pyrrolo[1,2-c]tiatsoli-7-karboksamidia 110 ml:ssa 1-propanolia ja joka on kuumennettu noin 80 °C:seen, lisätään samalla sekoittaen 3,8 g 2-35 dimetyyliaminoetoksiamiini-dihydrokloridia ja 2,3 g nat- 26 92069 riumkarbonaattia. Saatua lietettä keitetään palautusjäähdyttäen 8 tunnin ajan, minkä jälkeen lisätään 0,23 g natriumkarbonaattia ja keitetään edelleen palautus jäähdyttäen vielä 8 tunnin ajan. Reaktioseos haihdutetaan kuiviin ali-5 paineessa (20 mmHg; 2,7 kPa) noin 60 °C:een lämpötilassa. Jäähdyttyään jäännös lietetään seokseen, jossa on 250 ml vettä ja 250 ml metyleenikloridia. Orgaaninen faasi erotetaan ja vesifaasia uutetaan kahteen kertaan kaikkiaan 500 ml:11a metyleenikloridia. Saadut orgaaniset uutteet 10 yhdistetään, pestään kahteen kertaan kaikkiaan 500 ml:11a tislattua vettä, kuivataan kidevedettömällä magnesiumsulfaatilla, suodatetaan ja haihdutetaan kuiviin alipaineessa (20 mmHg; 2,7 kPa) noin 50 °C:ssa. Näin saadaan 11 g raaka-tuotetta, jolla suoritetaan kromatografia-ajo kolonnissa, 15 jonka halkaisija on 6 cm ja joka sisältää 450 g silika-geeliä (0,02 - 0,045 mm). Eluoinnissa käytetään metylee-nikloridin ja metanolin seoksia 0,5 baarin paineessa (51 kPa) ja kerätään 500 ml:n fraktioita. Neljä ensimmäistä fraktiota, jotka saadaan eluoimalla metyleenikloridln 20 ja metanolin seoksella (tilavuussuhteessa 90:10), heitetään pois. Seuraavat 9 fraktiota, jotka saadaan eluoimalla metyleenikloridln ja metanolin seoksella (tilavuussuhteessa 90:10), ja seuraavat 7 fraktiota, jotka saadaan eluoimalla metyleenikloridln ja metanolin seoksella (tilavuus-.. 25 suhteessa 80:20), yhdistetään ja haihdutetaan kuiviin ali paineessa (20 mmHg; 2,7 kPa) noin 50 °C:een lämpötilassa. Näin saadaan 5,9 g tuotetta, josta 4 g:11a suoritetaan kromatografia-ajo silikageelikolonnissa, jonka halkaisija on 6 cm ja joka sisältää 450 g sillkageeliä (0,02 -30 0,045 mm). Eluoinnissa käytetään etyyliasetaatin ja meta- : nolin seoksia 0,5 baarin paineessa (51 kPa) ja kerätään 9 500 ml:n fraktioita. Kymmenen ensimmäistä fraktiota, jotka saadaan eluoimalla etyyliasetaatin ja metanolin seoksella (tilavuussuhteessa 50:50), heitetään pois; seuraavat 16 35 fraktiota, jotka saadaan eluoimalla pelkällä metanolilla.

27 92069 yhdistetään ja haihdutetaan kuiviin alipaineessa (20 nunHg; 2.7 kPa) noin 50 °C:een lämpötilassa. Näin saadaan 2,9 g tuotetta, joka lietetään 57 ml:aan kloorivetyhapon 0,1 N vesiliuosta. Saadun samean liuoksen pH säädetään noin 5 8:ksi lisäämällä natriumbikarbonaattia, minkä jälkeen sitä uutetaan 3 kertaan kaikkiaan 750 ml :11a metyleenikloridia. Saadut orgaaniset uutteet yhdistetään, kuivataan kideve-dettömällä magnesiumsulfaatilla, suodatetaan ja haihdutetaan kuiviin alipaineessa (20 mmHg; 2,7 kPa) noin 50 °C:een 10 lämpötilassa. Näin saadaan 2,2 g tuotetta, joka liuotetaan 43 ml:aan kloorivetyhapon 0,1 N vesiliuosta, minkä jälkeen saatu liuos kylmäkuivaamalla saadaan 2,1 g (+)-N-(3-[g-(2-dimetyyliamlnoetoksi-imino)bentsyy1i]fenyy1l}-3-(3-py-ridyyli)-lH,3H-pyrrolo[l,2-c]tiatsoli-7-karboksamidi-hyd-15 roklorldla (E- ja Z-muotojen seos) vaalean keltaisen lyo-filisaatin muodossa.

(+)-N-(3-bentsoyylifenyyli)-3-(3-pyridyyli)-1H,3H-pyrrolo[l,2-c]tiatsoli-7-karboksamidi saadaan kuten kuvattu EP-hakemusjulkaisussa julkaisunro 0 253 711.

20 2-dimetyyliaminoetoksiamiini-dihydrokloridi voi daan valmistaa menetelmän mukaan, jota kuvaavat D. Favara et. ai.. Il Farmaco, Ed. Sei. 42 (1987) 697.

Esimerkki 8

Liuokseen, jossa on 3 g (+)-N-(3-bentsoyylifenyy- 25 li)-3-(3-pyridyyli)-lH,3H-pyrrolo[l,2-cJtiatsoli-7-kar- boksamidia 50 ml:ssa 1-propanolia ja joka on kuumennettu noin 70 °C:seen, lisätään samalla sekoittaen 1,6 g 3-mor- folinopropoksiamiini-dihydrokloridia ja 0,74 g natrium- karbonaattia. Saatua lietettä keitetään palautusjäähdyt- 30 täen 8 tunnin ajan, minkä jälkeen reaktioseos suodatetaan :*· ja suodos haihdutetaan kuiviin alipaineessa (20 mmHg; „ · 20.7 kPa) noin 40 °C:ssa. Näin saadaan 4,7 g raakatuotet-ta, jolla suoritetaan kromatografia-ajo kolonnissa, Jonina halkaisija on 5 cm ja joka sisältää 500 g silikageeliä 35 (0,02 - 0,045 mm). Eluoinnissa käytetään etyyliasetaatin 28 92069 ja metanolin seoksia (tilavuussuhteessa 50:50) 0,5 baarin paineessa (51 kPa) ja kerätään 500 ml:n fraktioita. Ensimmäiset 26 fraktiota heitetään pois; seuraavat 14 fraktiota yhdistetään ja haihdutetaan kuiviin alipaineessa (20 mmHg; 5 2,7 kPa) noin 40 °C:een lämpötilassa. Saatu raakatuote lie- tetään 20 ml:aan etanolia. Liete suodatetaan ja suodos haihdutetaan kuiviin alipaineessa (20 mmHg; 2,7 kPa) noin 60 °C:ssa. Näin saadaan 1,08 g tuotetta, joka lietetään 9,3 ml:aan metaanisulfonihapon 0,205 N vesiliuosta. Samea 10 liuos suodatetaan ja suodos kylmäkuivataan, jolloin saadaan 1,2 g (+ )-N-{3-[g-(3-morfolinopropoksi-imino)bentsyy-li]fenyyli)-3-(3-pyridyyli)-lH,3H-pyrrolo[1,2-c]tiatsoli- 7-karboksamidi-metaanisulfonaattia (E- ja Z-muotojen seos) vaalean ruskeana lyofilisaattina.

15 (+)-N-(3-bentsoyylifenyyli)-3-(3-pyridyyli)-lH,3H- pyrrolo[l,2-c]tiatsoli-7-karboksamidi saadaan kuten kuvattu EP-hakemusjulkaisussa julkaisunro 0 253 711.

3-morfolinopropoksiamiini-dihydrokloridi voidaan saada seuraavasti: liuosta, jossa on 13,8 g N-(3-morfoli-20 nopropoksi)ftalimidiä 50 ml:ssa 6 N kloorivetyhappoa, keitetään palautusjäähdyttäen 6 tunnin ajan. Kun seosta on sekoitettu 18 tunnin ajan noin 20 °C:een lämpötilassa, saatu liete suodatetaan ja suodos haihdutetaan kuiviin alipaineessa (20 mmHg; 2,7 kPa) noin 50 °C:een lämpötilas-;· 25 sa. Näin saadaan 6,8 g raakatuotetta, joka lietetään 10 ml:aan etanolia. Saadut kiteet suodatetaan eroon ja kuivataan alipaineessa (20 mmHg; 2,7 kPa) noin 20 °C:ssa. Näin saadaan 6,1 g 3-morfolinopropoksiamiini-dihydroklo-ridia kerman värisinä kiteinä, joiden sulamispiste on 30 1602 °C.

N-(3-morfolinopropoksi)ftalimidi voidaan saada seuraavasti: liuos, jossa on 27,5 g 3-morfolinopropano-lia, 30,2 g N-hydroksiftalimidiä ja 47,2 g trifenyylifos-fiinia 400 ml:ssa tetrahydrofuraania, jäähdytetään noin 35 0 °C:seen, minkä jälkeen siihen lisätään 1,5 tunnin aikana 29 92069 37,65 g etyyliatsodikarboksylaattia. Saatua liuosta sekoitetaan noin 20 °C:ssa 18 tunnin ajan, minkä jälkeen se haihdutetaan kuiviin alipaineessa (20 mmHg; 2,7 kPa) noin 40 °C:een lämpötilassa. Jäännös lietetään 500 ml:aan etyy-5 liasetaattia ja saatu liete suodatetaan. Suodosta uutetaan 200 ml:11a kloorivetyhapon 1 N vesiliuosta. Vesifaasi de-kantoidaan eroon ja sitä uutetaan 3 kertaan kaikkiaan 600 ml:11a etyyliasetaattia. Vesifaasin pH säädetään noin 10:ksi lisäämällä natriumhydroksidin 1 N vesiliuosta, min-10 kä jälkeen sitä uutetaan 3 kertaan kaikkiaan 300 ml:11a etyyliasetaattia. Saadut orgaaniset uutteet yhdistetään, pestään 3 kertaan kaikkiaan 150 ml:11a tislattua vettä, kuivataan kidevedettömällä magnesiumsulfaatilla, suodatetaan ja haihdutetaan kuiviin alipaineessa (20 mmHg; 15 2,7 kPa) noin 40 °C:ssa. Näin saadaan 25,8 g raaka tuotetta, jolla suoritetaan kromatografia-ajo kolonnissa, jonka halkaisija on 8 cm ja joka sisältää 1 kg:n silikageeliä (0,060 mm). Eluoinnissa käytetään pelkkää etyyliasetaattia ja kerätään 500 ml:n fraktioita. Ensimmäiset 12 fraktiota 20 heitetään pois; seuraavat 48 fraktiota yhdistetään ja haihdutetaan kuiviin alipaineessa (20 mmHg; 2,7 kPa) noin 40 °C:een lämpötilassa. Näin saadaan 15,5 g N-(3-morfolino-propoksi)ftalimidiä valkeina kiteinä, joiden sulamispiste on 98 °C.

25 3-morfolinopropanoli voidaan saada 0. Hromatkan, * t

Ber. 75 (1942) 131, mukaan.

Esimerkki 9

Liuokseen, jossa on 4,7 g (+ )-N-(3-bentsoyylife-nyyli )-3-(3-pyridyyli)-lH,3H-pyrrolo[l,2-c]tiatsoli-7-30 karboksamidia 85 ml:ssa 1-propanolia ja joka on kuumen-*: nettu noin 70 °C:seen, lisätään samalla sekoittaen 3 g 2- (4-metyyli-l-piperatsinyyli)etoksiamiini-trihydrokloridia ja 1,8 g natriumkarbonaattia. Saatua lietettä keitetään palautusjäähdyttäen 10 tunnin ajan, minkä jälkeen reaktio-35 seos haihdutetaan kuiviin alipaineessa (20 mmHg; 2,7 kPa) 30 92069 noin 40 °C:een lämpötilassa. Saatu jäännös lietetään 100 ml:aan kloorivetyhapon 1 N vesiliuosta. Saatua liuosta uutetaan 3 kertaan kaikkiaan 150 ml:11a etyylieette-riä, minkä jälkeen sen pH säädetään noin 5:ksi lisäämällä 5 natriumbikarbonaatin kyllästettyä vesiliuosta ja uutetaan 3 kertaan kaikkiaan 300 ml:11a etyylieetteriä. Saadut eet-teriuutteet yhdistetään, pestään 100 ml:11a tislattua vettä, kuivataan kidevedettömällä magnesiumsulfaatilla, suodatetaan ja haihdutetaan kuiviin alipaineessa (20 mmHg; 10 2,7 kPa) noin 40 °C:een lämpötilassa. Näin saadaan 3,1 g raakatuotetta, jolla suoritetaan kromatografia-ajo kolonnissa, jonka halkaisija on 5 cm ja joka sisältää 300 g silikageeliä (0,02 - 0,045 mm). Eluoinnissa käytetään asetonitriilin ja ammoniakin (d - 0,92) seosta (tilavuus-15 suhteessa 95:5) 0,5 baarin paineessa (51 kPa) ja kerätään 200 ml:n fraktioita. Ensimmäiset 10 fraktiota heitetään pois ja seuraavat 2 fraktiota yhdistetään ja haihdutetaan kuiviin alipaineessa (20 mmHg; 2,7 kPa) noin 40 °C:een lämpötilassa. Näin saadaan 1,55 g tuotetta, joka liuotetaan 20 5 ml:aan asetonia. Saatu liuos lisätään noin 20 °C:een läm pötilassa liuokseen, jossa on 0,46 g oksaalihappoa 10 ml:ssa asetonia. Saatua lietettä sekoitetaan noin 20 °C:ssa 30 minuutin ajan, minkä jälkeen saadut kiteet suodatetaan eroon, pestään 2 kertaan kaikkiaan 5 ml:11a asetonia ja 25 kuivataan alipaineessa (20 mmHg; 2,7 kPa) noin 20 °C:een lämpötilassa. Näin saadaan 1,7 g (+)-N-{3-{a-[2-(4-metyyli -1-plperatsinyyll )etoksi-lmino]bentsyyli}fenyyll}-3-(3-pyridyyli)-lH,3H-pyrrolo[l,2-c]tiatsoli-7-karboksamidln hapanta dioksalaattia (E- ja Z-muotojen seos) valkeina ki-30 teinä, joiden sulamispiste on 172 °C.

V (+)-N-(3-Bentsoyylifenyyli)-3-(3-pyridyyli)-1H,3H- pyrrolofl, 2-c]tiatsoli-7-karboksamidi saadaan kuten kuvattu EP-hakemusjulkaisussa 0 253 711.

2-(4-Metyyli-l-piperatsinyyli)etoksiamiini-trihyd-35 rokloridi voidaan valmistaa menetelmän mukaan, jota kuvaavat R. Cricchio et.ai., J.Med.Chem. 17 (1974) 396.

31 92069

Esimerkki 10

Liuokseen, jossa on 3 g (+)-N-(3-bentsoyylifenyy-li)-3-(3-pyridyyli)-lH,3H-pyrrolo[l,2-c]tiatsoli-7-kar-boksamidia 50 ml:ssa 1-propanolia ja joka on kuumennettu 5 noin 70 °C:seen, lisätään 2,1 g (l-metyyli-4-piperidyyli)-oksiamiini-dihydrokloridia ja 0,72 g natriumkarbonaattia. Saatua lietettä kuumennetaan noin 90 °C:ssa 2,5 tunnin ajan, minkä jälkeen sitä sekoitetaan noin 20 °C:ssa 18 tunnin ajan ja suodatetaan lopuksi. Suodos haihdutetaan 10 kuiviin alipaineessa (20 mmHg; 2,7 kPa) noin 35 °C:een lämpötilassa, jolloin saadaan 6,1 g raakatuotetta, joka lie-tetään 60 ml:aan asetonitriiliä. Saadut kiteet suodatetaan eroon ja lietetään seokseen, jossa on 50 ml 1 N natrium-hydroksidiliuosta ja 20 ml etyyliasetaattia. Orgaaninen 15 faasi dekantoidaan eroon ja vesifaasia uutetaan 2 kertaan kaikkiaan 40 ml:11a etyyliasetaattia. Saadut orgaaniset uutteet yhdistetään, pestään 3 kertaan kaikkiaan 45 ml:11a tislattua vettä, kuivataan kidevedettömällä magnesiumsulfaatilla, suodatetaan ja haihdutetaan kuiviin alipaineessa 20 (20 mmHg; 2,7 kPa) noin 35 °C:ssa. Saadulla 3,2 g: 11a tuo tetta suoritetaan kromatografia-ajo kolonnissa, jonka halkaisija on 4 cm ja joka sisältää 35 g silikageeliä (0,02 -0,045 mm). Eluoinnissa käytetään 200 ml etyyliasetaatin ja metanolin seosta (tilavuussuhteessa 60:30). Saatu fraktio ... 25 haihdutetaan kuiviin alipaineessa (20 mmHg; 2,7 kPa) noin 35 °C:een lämpötilassa. Näin saadaan 1,25 g tuotetta, joka liuotetaan 5 ml:aan etyyliasetaattia. Saatuun liuokseen lisätään 0,42 ml kaasumaisen kloorivedyn 5,6 N liuosta etyylieetterissä. Saadut kiteet suodatetaan eroon ja kui-30 vataan alipaineessa (20 mmHg; 2,7 kPa) noin 20 °C:een läm-pötilassa. Näin saadaan 0,82 g tuotetta, joka liuotetaan 20 ml:aan tislattua vettä. Saadun liuoksen pH säädetään noin 10:ksi lisäämällä natriumhydroksidin 2 N vesiliuosta, minkä jälkeen uutetaan 3 kertaan kaikkiaan 30 ml:11a etyy-35 liasetaattia. Saadut orgaaniset uutteet yhdistetään ja pestään 2 kertaan kaikkiaan 20 ml:11a tislattua vettä, 1 1 .· *.

32 92069 kuivataan kidevedettömällä magnesiumsulfaatilla, suodatetaan ja haihdutetaan kuiviin alipaineessa (20 mmHg; 2,7 kPa) noin 40 °C:ssa. Saadut 0,65 g yhdistetään 0,55 g:aan aiemmin saman menetelmän mukaan saatua tuotetta 5 ja yhdistelmällä suoritetaan kromatografia-ajo kolonnissa, jonka halkaisija on 4 cm ja joka sisältää 300 g silikagee-liä (0,02 - 0,045 mm). Eluoinnissa käytetään etyyliasetaatin ja dietyyliamiinin seosta (tilavuussuhteessa 95:5) 0,5 baarin paineessa (51 kPa) ja kerätään 500 ml:n fraktioita.

10 Ensimmäiset 7 fraktiota heitetään pois ja seuraavat 5 fraktiota yhdistetään ja haihdutetaan kuiviin alipaineessa (20 mmHg; 2,7 kPa) noin 40 °C:een lämpötilassa. Näin saadaan 880 mg tuotetta, joka liuotetaan 16,4 ml:aan kloori vetyhapon 0,1 N vesiliuosta. Saatua liuosta uutetaan 2 15 kertaan kaikkiaan 40 ml:11a etyylieetteriä ja erotetun vesifaasin pH säädetään noin 10:ksi lisäämällä natriumhyd-roksidin 1 N vesiliuosta, minkä jälkeen sitä uutetaan 3 kertaan kaikkiaan 60 ml:11a etyyliasetaattia. Saadut orgaaniset uutteet yhdistetään, pestään 2 kertaan kaikkiaan 20 20 ml:11a tislattua vettä, kuivataan kidevedettömällä mag nesiumsulfaatilla, suodatetaan ja haihdutetaan kuiviin alipaineessa (20 mmHg; 2,7 kPa) noin 40 °C:een lämpötilassa. Näin saadaan 630 mg tuotetta, josta 530 mg liuotetaan 5 ml:aan asetonia. Saatu liuos lisätään liuokseen, jossa 25 on 0,17 g oksaalihappoa 5 ml:ssa asetonia. Saadut kiteet suodatetaan eroon, pestään ensin 2 ml:11a asetonia ja sen jälkeen 2 ml:11a asetonin ja etyylieetterin seosta (tilavuussuhteessa 50:50) ja kuivataan lopuksi alipaineessa (20 mmHg; 2,7 kPa) noin 20 °C:een lämpötilassa. Näin saa-30 daan 570 mg (+)-N-{3-(g-[(l-metyyli-4-piperldyyli)oksi-imino]bentsyyli}fenyyli}-3-(3-pyridyyli)-lH,3H-pyrrolo-[l,2-c]tiatsoll-7-karboksamldin hapanta dioksalaattia (E-ja Z-muotojen seos) kerman värisinä kiteinä, joiden sulamispiste on 170 °C.

35 1,0 g (+)-N-{3-{o-[(l-metyyli-4-piperidyyli)oksi- imino]bentsyyli)fenyyli}-3-(3-pyridyyli)-lH,3H-pyrrolo- 33 92069 [l,2-c]tiatsoli-7-karboksamidia, emäsmuodossa, liuotetaan 4 ml:aan vedetöntä etanolia. Saatuun liuokseen lisätään 0,93 ml kloorivedyn 4 N liuosta eetterissä, minkä jälkeen seosta laimennetaan lisäämällä ensin 20 ml etyyliasetaat-5 tia ja sen jälkeen 100 ml dietyylieetteriä. Kun seosta on sekoitettu 15 tunnin ajan noin 20 °C:een lämpötilassa, saadut kiteet suodatetaan eroon, pestään 4 kertaan kaikkiaan 20 ml:11a dietyylieetteriä ja kuivataan ilmassa noin 20 °C:ssa. Näin saadaan 1,1 g (-f )-N-{3-(g- [ (1-metyyli-4-10 piperidyyli )oksi-imino] bentsyyli } f enyyli } -3- (3-pyridyyli) - 1H,3H-pyrroloC1,2-c]tiatsoli-7-karboksamidi-dihydroklori-dia E- ja Z-isomeerien seoksen muodossa kerman värisinä kiteinä, joiden sulamispiste on 200 - 205 °C.

(+) -N-(3-Bentsoyylifenyyli)-3-(3-pyridyyli)-1H,3H-15 pyrrolo[l,2-c]tiatsoli-7-karboksamidi saadaan kuten kuvattu EP-hakemusjulkaisussa 0 253 711.

(l-Metyyli-4-piperidyyli)oksiamiini-dihydrokloridi voidaan valmistaa seuraavasti: vesiliuosta, jossa on 18.7 g N-(l-metyyli-4-piperidinyylioksi)ftalimidiä 20 100 ml:ssa kloorivetyhapon 6 N vesiliuosta, keitetään pa lautus j äähdyttäen 3 tunnin ajan. Saatu liete suodatetaan ja suodos haihdutetaan kuiviin alipaineessa (20 mmHg; 2.7 kPa) noin 45 °C:een lämpötilassa. Saatu tuote lietetään 100 ml:aan etanolia ja saadut kiteet suodatetaan eroon, ;· 25 pestään 2 kertaan kaikkiaan 100 ml:11a etanolia ja kuiva taan alipaineessa (20 mmHg; 2,7 kPa) noin 20 °C:een lämpötilassa. Näin saadaan 11,2 g (l-metyyli-4-piperidyyli)ok-siamiini-dihydrokloridia valkeina kiteinä, joiden sulamispiste on 220 °C.

30 N-(l-Metyyli-4-piperidyylioksi)ftalimidi voidaan saada seuraavasti: lietteeseen, jossa on 30,6 g 4-hydrok-si-l-metyylipiperidiiniä, 43,7 g N-hydroksiftalimidiä ja 68,3 g trifenyylifosfiinia 450 ml:ssa tetrahydrofuraania, lisätään 90 minuutin aikana noin 0 °C:ssa 53,8 g dietyyli-35 atsodikarboksylaattia. Saatua lietettä sekoitetaan noin 34 92069 20 °C:ssa 18 tunnin ajan, minkä jälkeen reaktioseos haihdutetaan kuiviin alipaineessa (20 mmHg; 2,7 kPa) noin 40 °C:ssa. Saatu tuote lietetään 500 ml:aan etyyliasetaattia ja saatu liete suodatetaan. Suodos haihdutetaan kui-5 viin alipaineessa (20 mmHg; 2,7 kPa) noin 40 °C:ssa. Saatu tuote lietetään 500 ml:aan kloorivetyhapon 1 N vesiliuosta. Saatu liete suodatetaan ja suodosta uutetaan 3 kertaan kaikkiaan 300 ml:11a etyylieetteriä, minkä jälkeen vesifaasin pH säädetään noin 10:ksi lisäämällä 500 ml nat-10 riumhydroksidin 1 N vesiliuosta. Saadut kiteet suodatetaan eroon, pestään 3 kertaan kaikkiaan 300 ml:11a tislattua vettä ja kuivataan alipaineessa (20 mmHg; 2,7 kPa) noin 20 °C:een lämpötilassa. Näin saadaan 19 g N-(1-metyyli-4-piperidyylioksi)ftalimidiä vaalean ruskeina kiteinä, joi-15 den sulamispiste on 90 °C.

Esimerkki 11

Liuokseen, jossa on 3 g (+)-N-[3-(a-hydroksi-imino-bentsyyli )fenyyli] -3- (3-pyridyyli) -1H, 3H-pyrrolo [ 1,2-c] -tiatsoli-7-karboksamidia (E- ja Z-muotojen seos) 15 ml:ssa 20 vedetöntä Ν,Ν-dimetyyliformamidia, lisätään ympäristön lämpötilassa typpisuojakaasussa ja samalla sekoittaen 0,36 g 50-%:ista natriumhydrididispersiota parafiiniöljyssä. Sitten lisätään noin 5 minuutin aikana liuos, jossa on 2,61 g 3-(bentsyylietyyliamino)propanoli-para-tolueenisul-' 25 fonaattia 13 ml:ssa vedetöntä N,N-dimetyyliformamidia, minkä jälkeen seosta sekoitetaan 12 tunnin ajan noin 20 °C:een lämpötilassa. Sitten seokseen lisätään 250 ml tislattua vettä ja liuosta uutetaan 3 kertaan kaikkiaan 240 ml:11a etyyliasetaattia. Orgaaniset uutteet yhdiste-30 tään ja pestään 80 ml:11a kloorivetyhapon 1 N vesiliuosta. Sitten vesif aasi erotetaan ja sen pH nostetaan 8:ksi li-säämällä natriumhydroksidin 1 N vesiliuosta ja seosta uutetaan 3 kertaan kaikkiaan 240 ml:11a etyyliasetaattia. Saadut orgaaniset uutteet yhdistetään, kuivataan kideve-35 dettömällä magnesiumsulfaatilla, suodatetaan ja haihdute- 35 92069 taan kuiviin alipaineessa (20 mmHg; 2,7 kPa) noin 45 °C:een lämpötilassa. Näin saadaan 1,61 g tahnaista punaruskeaa jäännöstä, jolla suoritetaan kromatografia-ajo kolonnissa, jonka halkaisija on 4 cm ja joka sisältää 200 g neutraa-5 lia aluminiumoksidia (0,032 - 0,063 mm). Eluoinnissa käytetään ensin 2,8 litraa etyyliasetaattia ja sitten 750 ml etyyliasetaatin ja metanolin seosta (tilavuussuhteessa 95:5) 0,5 baarin paineessa (51 kPa) ja kerätään 50 ml:n fraktioita. Ensimmäiset 27 fraktiota heitetään pois ja 10 seuraavat 39 fraktiota yhdistetään ja haihdutetaan kuiviin alipaineessa (20 mmHg; 2,7 kPa) noin 40 °C:een lämpötilassa. Näin saadaan 1 g tuotetta, joka liuotetaan 5 ml:aan etyyliasetaattia. Liuokseen lisätään 0,1 g valkaisuhiiltä, minkä jälkeen se suodatetaan kuumana ja suodin huuhdotaan 15 5 ml:11a etyyliasetaattia. Saatuun liuokseen lisätään 0,8 ml kaasumaisen kloorivedyn 4 N liuosta etyylieetteris-sä, minkä jälkeen sekoitetaan noin 20 °C:ssa 15 minuutin ajan. Saadut kiteet suodatetaan eroon, pestään 4 kertaan kaikkiaan 50 ml:11a etyylieetteriä ja kuivataan alipai-20 neessa (0,1 mmHg; 13,5 Pa) noin 60 °C:een lämpötilassa. Näin saadaan 0,96 g (+)-N-{3-{g-[3-(bentsyylietyyliamino)-propoksi-imlno]bentsyyli}fenyyli}-3-( 3-pyridyyll )-lH,3H-pyrrolo[l,2-c]tlatsoli-7-karboksamidi-dihydrokloridia E-ja Z-isomeerien seoksen muodossa kerman värisinä kiteinä, ;· 25 joiden sulamispiste on 175 °C.

(+)-N-(3-bentsoyylifenyyli)-3-(3-pyridyyli)-1H,3H-pyrrolo[l,2-c]tiatsoli-7-karboksamidi saadaan kuten kuvattu EP-hakemusjulkaisussa 0 253 711.

3-(bentsyylietyyliamino)propanoli-tosylaatti voi-30 daan valmistaa seuraavasti: liuokseen, jossa on 3,86 g 3-·* (bentsyylietyyliamino)propanolia 10 ml:ssa pyridiiniä, lisätään samalla sekoittaen noin 20 minuutin aikana 20 °C:ssa liuos, jossa on 3,8 g para-tolueenisulfonyyli-kloridia 10 ml:ssa pyridiiniä, ja reaktioseosta sekoite-35 taan 20 minuutin ajan noin 20 °C:een lämpötilassa. Liuok- 36 92069 seen lisätään 200 ml tislattua vettä, minkä jälkeen sitä uutetaan 2 kertaan kaikkiaan 160 ml:11a etyyliasetaattia. Saadut orgaaniset uutteet yhdistetään ja pestään kaikkiaan 200 ml:11a tislattua vettä, minkä jälkeen ne kuivataan 5 kidevedettömällä magnesiumsulfaatilla, suodatetaan ja haihdutetaan kuiviin alipaineessa (20 mmHg, 2,7 kPa) noin 40 °C:ssa. Saadaan 4,78 g 3-(bentsyylietyyliamino)propano-li-para-tolueenisulfonaattia oranssin värisenä öljynä, jota käytetään sellaisenaan myöhemmissä synteeseissä.

10 3-(bentsyylietyyliamino)propanoli voidaan valmis taa seuraavasti: liuosta, jossa on 6,76 g bentsyylietyy-liamiinia, 6,15 ml 3-klooripropyyliasetaattia ja 5,3 g natriumkarbonaattia 25 ml:ssa 2-propanolia, keitetään palautus j äähdyttäen ja samalla sekoittaen 48 tunnin ajan, 15 minkä jälkeen se jäähdytetään noin 20 °C:een lämpötilaan. Muodostunut natriumkloridi suodatetaan eroon ja liuotin poistetaan haihduttamalla kuiviin alipaineessa (20 mmHg; 2,7 kPa) noin 45 °C:ssa. Saadaan 17,4 g oranssin väristä öljyä, joka lietetään seokseen, jossa on 30 ml tislattua 20 vettä ja 30 ml kloorivetyhapon 10 N vesiliuosta. Saatua liuosta keitetään palautusjäähdyttäen 6 tunnin ajan, minkä jälkeen se jäähdytetään noin 20 °C:seen ja lisätään 200 mg valkaisuhiiltä. Liuos suodatetaan ja suodin huuhdotaan kaikkiaan 50 ml:11a tislattua vettä. Suodokseen lisä-25 tään 40 ml ammoniakkia (d - 0,92) ja uutetaan 3 kertaan « · kaikkiaan 240 ml:11a etyyliasetaattia. Saadut orgaaniset uutteet yhdistetään, kuivataan kidevedettömällä magnesium-sulfaatilla, suodatetaan ja haihdutetaan kuiviin alipaineessa (20 mmHg; 2,7 kPa) noin 45 °C:een lämpötilassa. 30 Jäännös alipaineessa tislaamalla saadaan 5,38 g N-etyyli-N-(3-asetoksipropyyli)bentsyyliamiinia, jonka kiehumapiste on 95°C 0,2 mmHg:n (13,4 Pa) paineessa.

Esimerkki 12 0,62 g:aan 50-%:ista natriumhydrididispersiota pa-35 rafiiniöljyssä lisätään typpisuojakaasussa 45 minuutin ai- I ' _ _ 37 92069 kana noin 20 °C:een lämpötilassa liuos, jossa on 4 g N-[3-(α-hydroksi-iminobentsyyli)fenyyli]-3-(3-pyridyyli-lH,3H-pyrrolo[l,2-c]tiatsoli-7-karboksamidia (E- ja Z-muotojen seos) 40 ml:ssa vedetöntä N,N-dimetyyliformamidia. Saatuun 5 liuokseen lisätään 40 minuutin aikana noin 18 °C:n lämpötilassa liuos, jossa on 1,77 g N-(2-kloorietyyli)morfOliini-dihydrokloridia 40 ml:ssa vedetöntä N,N-dimetyyliformamidia. Saatua lietettä sekoitetaan noin 20 °C:ssa 18 tunnin ajan. Sitten lisätään vielä 0,21 g 50-%:ista natriumhydri-10 didispersiota parafiiniöljyssä ja sen jälkeen 0,85 g N-(2-kloorietyyli)morfoliini-hydrokloridia. Saatua lietettä kuumennetaan noin 65 °C:een lämpötilassa 20 tunnin ajan, minkä jälkeen lietteen jäähdyttyä noin 20 °C:een lämpötilaan siihen lisätään 650 ml tislattua vettä ja uutetaan 3 15 kertaan kaikkiaan 300 ml:11a etyyliasetaattia. Saadut orgaaniset uutteet yhdistetään ja niitä uutetaan 100 ml:11a kloorivetyhapon 0,1 N vesiliuosta, minkä jälkeen vesifaasi erotetaan ja sitä uutetaan 2 kertaan kaikkiaan 100 ml:11a etyylieetteriä. Vesifaasin pH säädetään noin 10:ksi lisää-20 mällä natriumhydroksidin 1 N vesiliuosta ja uutetaan 3 kertaan 300 ml:11a etyyliasetaattia. Saadut orgaaniset uutteet yhdistetään, pestään 3 kertaan kaikkiaan 150 ml:11a tislattua vettä, kuivataan kidevedettömällä magnesiumsulfaatilla, suodatetaan ja haihdutetaan kuiviin 25 alipaineessa (20 mmHg; 2,7 kPa) noin 30 °C:ssa. Saadaan • · 5 g tuotetta, jolla suoritetaan kromatografia-ajo kolonnissa, jonka halkaisija on 5 cm ja joka sisältää 600 g silikageeliä (0,02 - 0,045 mm). Eluoinnissa käytetään etyyliasetaatin ja metanolin seosta (tilavuussuhteessa 30 90:10) 0,5 baarin paineessa (51 kPa) ja kerätään 500 ml:n fraktioita. Ensimmäiset 8 fraktiota heitetään pois ja seu-raavat 32 fraktiota yhdistetään ja haihdutetaan kuiviin alipaineessa (20 mmHg; 2,7 kPa) noin 40 °C:een lämpötilassa. Näin saadaan 3 g tuotetta, joka liuotetaan 30 ml:aan 35 etyyliasetaattia. Saatuun liuokseen lisätään 1,95 ml kaa- 38 92069 sumaisen kloorivedyn 5,6 N liuosta etyylieetterissä. Saadut kiteet suodatetaan eroon, pestään 2 kertaan kaikkiaan 10 ml:11a etyyliasetaattia ja kuivataan alipaineessa (20 mmHg; 2,7 kPa) noin 20 °C:ssa. Saadut 2,8 g tuotetta 5 liuotetaan 30 ml:aan tislattua vettä ja saadun liuoksen pH säädetään noin 10:ksi lisäämällä natriumhydroksidin 1 N vesiliuosta ja uutetaan 3 kertaan 60 ml:11a etyyliasetaattia. Saadut orgaaniset uutteet yhdistetään, pestään 2 kertaan kaikkiaan 20 ml:11a tislattua vettä, kuivataan kide-10 vedettömällä magnesiumsulfaatilla, suodatetaan ja haihdutetaan kuiviin alipaineessa (20 mmHg; 2,7 kPa) noin 35°C:ssa. Näin saadaan 1,77 g tuotetta, joka liuotetaan 23,2 ml:aan kloorivetyhapon 0,13 N vesiliuosta ja saatu liuos kylmäkuivataan. Saadaan 1,64 g N-{3-{g-[(2-morfoli-15 no)etoksi-imlno]bentsyyli}fenyyli}-3-(3-pyrldyyli)-lH,3H- pyrrolo[l,2-c]tiatsoli-7-karboksamldia (E- ja Z-muotojen seos) kerman värisenä lyofilisaattina.

N- [ 3- (α-hydroksi- iminobentsyyli) fenyyli] -3- (3-pyri-dyyli)-lH,3H-pyrrolo[l,2-c]tiatsoli-7-karboksamidi (E- ja 20 Z-muotojen seos) voidaan saada seuraavasti: liuokseen, jossa on 23 g N-(3-bentsoyylifenyyli)-3-(3-pyridyyli)-lH,3H-pyrrolo[l,2-c]tiatsoli-7-karboksamidia 270 ml:ssa 1-propanolia ja joka on kuumennettu noin 70 °C:seen, lisätään 7,5 g hydroksyyliamiini-hydrokloridia ja 5,7 g natriumkar-' 25 bonaattia. Saatua lietettä keitetään palautusjäähdyttäen 3 tunnin ajan ja sekoitetaan sitten noin 20 °C:ssa 18 tunnin ajan. Saadut kiteet suodatetaan eroon, pestään 3 kertaan kaikkiaan 150 ml:11a tislattua vettä ja kuivataan alipaineessa (20 mmHg; 2,7 kPa) noin 20 °:een lämpötilassa, jol-30 loin saadaan 8,3 g N-[3-(a-hydroksi-iminobentsyyli)fenyy-·] li] -3-(3-pyridyyli)-lH,3H-pyrrolo[l,2-c]tiatsoli-7-kar- boksamidia (E- ja Z-muotojen seos) kerman värisinä kiteinä, joiden sulamispiste on 210 eC.

N-(3-bentsoyylifenyyli)-3-(3-pyridyyli)-1H,3H-pyr-35 rolo[l,2-c]tiatsoli-7-karboksamidi voidaan saadaan mene- *· % 39 92069 telmän mukaan, jota kuvataan EP-hakemusjulkaisussa 0 253 711.

Esimerkki 13

Liuokseen, jossa on 1,63 g (+)-N-[3-(a-hydroksi-5 iminobentsyyli)fenyyli]-3-(3-pyridyyli)-lH,3H-pyrrolo-[1,2-c]tiatsoli-7-karboksamidia (E- ja Z-muotojen seos) 16 ml:ssa vedetöntä N,N-dimetyyliformamidia, lisätään ympäristön lämpötilassa typpisuojakaasussa ja samalla sekoittaen 0,22 g 50-%:ista natriumhydrididispersiota para-10 fiiniöljyssä. Sitten lisätään noin 5 minuutin aikana liuos, jossa on 0,9 g l-(2-kloorietyyli)-4-bentsyylipipe-ratsiini-dihydrokloridia 5 ml:ssa vedetöntä N,N-dimetyyliformamidia. Sitten liuosta sekoitetaan 20 tunnin ajan ympäristön lämpötilassa, minkä jälkeen se haihdutetaan 15 kuiviin alipaineessa (20 mmHg; 2,7 kPa) noin 40 °C:ssa. Tahnaista jäännöstä trituroidaan 40 ml:ssa asetonia, ja muodostunut natriumkloridi suodatetaan eroon ja pestään kaikkiaan 15 ml:11a asetonia, minkä jälkeen suodos haihdutetaan kuiviin alipaineessa (20 mmHg; 2,7 kPa) noin 20 40 °C:een lämpötilassa. Tällöin saadaan 3,1 g tahnaista oranssin väristä jäännöstä, jolla suoritetaan kromatogra-fia-ajo kolonnissa, jonka halkaisija on 3 cm ja joka sisältää 65 g silikageeliä (0,02 - 0,045 mm). Eluoinnissa käytetään etyyliasetaattiseosta 0,5 baarin paineessa 25 (51 kPa) ja kerätään 90 ml:n fraktioita. Ensimmäiset 15 r · « fraktiota heitetään pois ja seuraavat 19 fraktiota yhdistetään ja haihdutetaan kuiviin alipaineessa (20 mmHg; 2,7 kPa) noin 40 °C:een lämpötilassa. Näin saadaan 1,45 g tuotetta, joka liuotetaan 5 ml:aan etyyliasetaattia. Saatuun 30 liuokseen lisätään 10 ml etyylieetteriä ja 2 ml kaasuina!-sen kloorivedyn 4 N liuosta etyylieetterissä, minkä jälkeen seosta laimennetaan lisäämällä 20 ml etyylieetteriä ja sekoitetaan noin 20 °C:ssa 15 minuutin ajan. Saadut kiteet suodatetaan eroon ja pestään 4 kertaan kaikkiaan 40 35 ml:11a etyylieetteriä ja kuivataan sen jälkeen alipainees- 9 2069 40 sa (0,1 mmHg? 13,5 Pa) noin 20 °C:ssa. Näin saadaan 1,5 g (+ )-Ν-{3-{α- [2-( 4-bentsyyli-l-piperatsinyyli )etoksi-iml-no]bentsyyli}fenyyli}-3-( 3-pyridyyli )-lH, 3H-pyrrolo[l,2- c]tiatsoli-7-karboksamidi-dihydrokloridia (E-ja Z-muotojen 5 seos) valkeina kiteinä, joiden sulamispiste on 186 °C.

(+)-N-[3-(a-hydroksi-iminobentsyyli)fenyyli]-3-(3-pyridyyli)-lH,3H-pyrrolo[l,2-c]tiatsoli-7-karboksamidi saadaan kuten kuvattu esimerkissä 1.

l-bentsyyli-4-( 2-kloori-l-etyyli )piperatsiini-di-10 hydrokloridi voidaan valmistaa menetelmän mukaan, jota kuvaavat D.C. Kriesel ja 0. Grisvold, J.Pharm.Sei. 56 (1967) 325.

Esimerkki 14

Liuokseen, jossa on 3,0 g (+)-N-[3-(a-hydroksi-15 iminobentsyyli )fenyyli] -3- (3-pyridyyli)-lH,3H-pyrrolo- [1,2-c]tiatsoli-7-karboksamidia (E- ja Z-muotojen seos) 22 ml:ssa vedetöntä Ν,Ν-dimetyyliformamidia, lisätään ympäristön lämpötilassa typpisuojakaasussa ja samalla sekoittaen 0,68 g natriumhydridiä (50-%:inen dispersio pa-20 rafiiniöljyssä). Seosta sekoitetaan 15 minuutin ajan ympäristön lämpötilassa, minkä jälkeen siihen lisätään 0,9 g (2-kloorietyyli)metyyliamiini-hydrokloridia ja sekoittamista ympäristön lämpötilassa jatketaan 15 tunnin ajan, minkä jälkeen reaktioseos kaadetaan 250 ml:aan tislattua y 25 vettä. Kun seosta on sekoitettu tunnin ajan ympäristön lämpötilassa, kiinteä aine suodatetaan eroon ja sitä pestään tislatulla vedellä kunnes se on neutraali, minkä jälkeen se liuotetaan 16 ml:aan etyyliasetaattia ja liuos suodatetaan. Sitten liuokseen lisätään 1,57 ml kloorive-30 dyn 4,1 N liuosta eetterissä, minkä jälkeen kun on sekoi-tettu tunnin ajan ympäristön lämpötilassa, saadut kiteet suodatetaan eroon, pestään 6 ml:11a etyyliasetaattia ja 40 ml :11a dietyylieetteriä sekä kuivataan alipaineessa (0,, 1 mmHg; 13,5 Pa) noin 20 °C:een lämpötilassa. Saatu hydroklo-35 ridi (3,04 g) liuotetaan 30 ml:aan tislattua vettä, ja i _ ' i .

32069 41 saatuun liuokseen lisätään 6 ml 1 N natriumhydroksidi-liuosta, minkä jälkeen uutetaan 2 kertaan kaikkiaan 40 ml:lla etyyliasetaattia. Saadut orgaaniset uutteet yhdistetään, pestään 15 ml:11a tislattua vettä, kuivataan 5 kidevedettömällä magnesiumsulfaatilla, suodatetaan ja haihdutetaan kuiviin alipaineessa (20 mmHg; 2,7 kPa) noin 40 °C:ssa. Tällöin saadaan kellanruskea marenki (2,4 g), jolla suoritetaan kromatografia-ajo kolonnissa, jonka halkaisija on 4 cm ja joka sisältää noin 150 g silikagee-10 liä (0,02 - 0,045 mm). Eluoinnissa käytetään asetonitrii-lin ja ammoniakin (d « 0,92) seosta (tilavuussuhteessa 95:5) 0,5 baarin paineessa (51 kPa) ja kerätään 80 ml:n fraktioita. Ensimmäiset 14 fraktiota heitetään pois ja seuraavat 3 fraktiota yhdistetään ja haihdutetaan kuiviin 15 alipaineessa (20 mmHg; 2,7 kPa) noin 45 °C:een lämpötilassa. Näin saadaan 1,47 g tuotetta, joka liuotetaan 9 ml:aan etyyliasetaattia ja saatuun liuokseen lisätään 0,2 g val-kaisuhiiltä, se suodatetaan ja siihen lisätään 1,50 ml kloorivedyn 4 N liuosta eetterissä ja sen jälkeen 15 ml 20 dietyylieetteriä. Saadut kiteet suodatetaan eroon, pestään kaikkiaan 15 ml:11a dietyylieetteriä sekä kuivataan alipaineessa (0,1 mmHg; 13,5 Pa) noin 40 °C:een lämpötilassa . Näin saadaan 1,6 g (+)-N-{3-[a-(2-metyyliaminoetoksi-imino)bentsyyli]fenyyli}-3-(3-pyridyyli)~1H,3H-pyrrolo-25 [1,2-c]tiatsoli-7-karboksamidi-hydroklorldia E- ja Z-iso- meerien seoksen muodossa valkeina kiteinä, joiden sulamispiste on 150 - 155 °C.

(+)-N-[3-(o-hydroksi-iminobentsyyli)fenyyli]-3-(3-pyridyyli)-lH,3H-pyrrolo[1,2-c]tiatsoli-7-karboksamidi 30 (E-ja Z-muotojen seos) saadaan kuten kuvattu esimerkissä 1.

Esimerkki 15

Liuokseen, jossa on 1 g (+)-N-{3-{a-[(l-metyyli-4-piperidyyli )oksi-imino] bent syy li } f enyyli } -3- (3-pyridyyli) -35 lH,3H-pyrrolo[l,2-c]tiatsoli-7-karboksamidia (E- ja Z-muo- 42 92069 tojen seos) 20 ml:ssa 100-%:ista etikkahappoa, lisätään toisiaan seuraten 3,8 ml metaanisulfonihapon 1 N liuosta etanolissa ja sitten 0,2 ml 30-%:isesti hapetettua (110x tilavuutta) vettä; seosta sekoitetaan ympäristön lämpöti-5 lassa 15 tunnin ajan, minkä jälkeen liuotin poistetaan haihduttamalla kuiviin alipaineessa (0,1 mmHg; 13,5 Pa) noin 30 °C:ssa. Jäännös liuotetaan 25 ml:aan tislattua vettä ja saatu liuos tehdään alkaliseksi lisäämällä 8 ml li-peäliuosta (d * 1,33), minkä jälkeen seosta laimennetaan 10 lisäämällä 15 ml asetonia ja 30 ml etyyliasetaattia; orgaaninen faasi dekantoidaan eroon ja vesifaasia uutetaan 30 ml:11a etyyliasetaattia. Saadut orgaaniset uutteet yhdistetään, pestään 2 kertaan kaikkiaan 40 ml:11a tislattua vettä, kuivataan kidevedettömällä magnesiumsulfaatilla ja 15 haihdutetaan kuiviin alipaineessa (20 mmHg; 2,7 kPa) noin 45 °C:ssa. Näin saadaan 814 mg vaaleanpunaista marenkia, jolla suoritetaan kromatografia-ajo kolonnissa, jonka halkaisija on 3 cm ja joka sisältää noin 50 g silikageeliä (0,02 - 0,045 mm). Eluoinnissa käytetään asetonitriilin ja 20 ammoniakin (d » 0,92) seosta (tilavuussuhteessa 95:5) 0,5 baarin paineessa (51 kPa) ja kerätään 25 ml:n fraktioita. Ensimmäiset 10 fraktiota heitetään pois ja seuraavat 4 fraktiota yhdistetään ja haihdutetaan kuiviin alipaineessa (20 mmHg; 2,7 kPa) noin 40 °C:een lämpötilassa. Näin 25 saadaan 430 mg tuotetta, joka liuotetaan 3 ml:aan etyyli-asetaattia ja saatuun liuokseen lisätään 100 mg valkaisu-hiiltä, liuos suodatetaan ja suodin huuhdotaan kaikkiaan 1,5 ml:11a etyyliasetaattia. Saatuun liuokseen lisätään 0,47 ml kloorivedyn 3,25 N liuosta eetterissä ja sekoite-30 taan noin 20 °C:een lämpötilassa 30 minuutin ajan. Seokseen .· lisätään 9 ml dietyylieetteriä ja sekoittamista ympäristön lämpötilassa jatketaan edelleen tunnin ajan, minkä jälkeen saadut kiteet suodatetaan eroon ja pestään kaikkiaan 10 ml:11a dietyylieetteriä ja kuivataan ilmassa noin 35 20 °C:een lämpötilassa. Näin saadaan 460 mg (+ )-N-{3-{a- *’ w - 43 92069 [ (l-metyyli-4-plperidyyli )oksi-imino]bentsyyli}fenyyli}- 3-(3-pyridyyli)-1Η,3H-pyrrolo[1,2-c] tiatsoli-7-karboksami-di-(2RS#3R)-2-oksidin dlhydrokloridia E- ja Z-muotojen seoksena, jonka sulamispiste on 200 °C.

5 (+)-N-{3-{a-[(l-metyyli-4-piperidyyli)oksi-imin- o]bentsyyli}fenyyli}-3-(3-pyridyyli)-lH,3H-pyrrolo-[l,2-c]tiatsoli-7-karboksamidi, E- ja Z-muotojen seoksena, voidaan valmistaa kuten esimerkissä 10.

Esimerkki 16 10 Liuosta, jossa on 4,24 g (+)-N-{3-{a-[3-(tert-bu- tyylioksi-4-karbonyyli-l-piperatsinyyli )propoksi-imino] -bentsyyli}fenyyli}-3-(3-pyridyyli )-lH, 3H-pyrrolo[l, 2-c] -tiatsoli-7-karboksamidia (E- ja Z-muotojen seos) 100 ml:ssa etyyliasetaattia, sekoitetaan 8 ml:n kloorive-15 dyn 3,2 N liuosta eetterissä läsnäollessa 5 tunnin ajan ympäristön lämpötilassa, minkä jälkeen se suodatetaan. Saatu kiinteä aine pestään 10 ml:11a dietyylieetteriä ja 15 ml:11a etyyliasetaattia, minkä jälkeen se liuotetaan 50 ml:aan 10-%:ista natriumkarbonaattiliuosta ja uutetaan 20 3 kertaan kaikkiaan 150 ml:11a dikloorimetaania. Saadut orgaaniset uutteet yhdistetään ja pestään 50 ml:11a suolavettä, jonka pitoisuus on 250 g/litra, kuivataan kideve-dettömällä magnesiumsulfaatilla ja haihdutetaan kuiviin alipaineessa (20 mmHg; 2,7 kPa). Saadut 3,6 g lietetään 25 50 ml:aan dietyylieetteriä ja saatuun lietteeseen lisä

tään 25 ml kloorivedyn 3 N liuosta eetterissä, minkä jälkeen seosta laimennetaan lisäämällä 20 ml etyyliasetaattia ja sekoitetaan 4,5 tunnin ajan ympäristön lämpötilassa. Saadut kiteet suodatetaan eroon, pestään 20 ml:11a di-30 etyylieetteriä ja liuotetaan sitten 50 ml:aan tislattua .: vettä, minkä jälkeen saatu liuos tehdään alkaliseksi pH

9:ään lisäämällä 10-%:ista natriumkarbonaattiliuosta ja uutetaan kaikkiaan 450 ml:11a dikloorimetaania. Orgaaniset faasit erotetaan, yhdistetään ja kuivataan kidevedet-35 tömällä magnesiumsulfaatilla ja haihdutetaan kuiviin ali- 44 92069 paineessa (20 nunHg; 2,7 kPa) noin 45 °C:ssa. Näin saadaan 2.7 g vaaleanpunaista marenkia, jolla suoritetaan kroma-tografia-ajo kolonnissa, jonka halkaisija on 1,8 cm ja joka sisältää 50 g neutraalia aluminiumoksidia (0,032 - 5 0,063 mm), jonka aktiivisuus on alennettu käyttämällä 10 % vettä. Eluoinnissa käytetään etyyliasetaatin ja metanolin seosta (tilavuussuhteessa 80:20) 0,5 baarin (51 kPa) paineessa ja kerätään 20 ml:n fraktioita. Ensimmäiset 3 fraktiota heitetään pois ja seuraavat 17 fraktiota yhdiste-10 tään ja haihdutetaan kuiviin alipaineessa (20 mmHg; 2.7 kPa) noin 40 °C:een lämpötilassa. Näin saadaan 1,82 g vaaleanruskeaa marenkia, johon lisätään 0,4 g toisesta valmistuksesta saatua tuotetta, ja yhdistelmällä suoritetaan toinen kromatografia-ajo kolonnissa, jonka halkaisija 15 on 1,4 cm ja joka sisältää 20 g neutraalia aluminiumoksidia (0,032 - 0,063 mm), jonka aktiivisuus on alennettu käyttämällä 10 % vettä. Eluoinnissa käytetään 300 ml etyyliasetaattia, 180 ml etyyliasetaatin ja metanolin seosta (tilavuussuhteessa 95:5), 180 ml seosta 90:10 ja 400 ml 20 etyyliasetaatin ja metanolin seosta 80:20 0,5 baarin (51 kPa) paineessa ja kerätään 100 ml:n fraktioita. Ensimmäinen fraktio heitetään pois ja seuraavat 10 fraktiota yhdistetään ja haihdutetaan kuiviin alipaineessa (20 mmHg; 2.7 kPa) noin 40 °C:een lämpötilassa. Saadaan 1,7 g tuotet- .. 25 ta, joka liuotetaan 20 ml:aan etyyliasetaattia. Tähän liuokseen lisätään 0,7 ml kloorivedyn 3,05 N liuosta eetterissä ja sekoitetaan noin 20 °C:een lämpötilassa 10 minuuttia. Saadut kiteet suodatetaan eroon, pestään 10 ml:11a etyyliasetaattia ja 10 ml:11a dietyylieetteriä 30 ja kuivataan alipaineessa (0,1 mmHg; 13,5 Pa) noin .· 60 °C:een lämpötilassa. Näin saadaan 0,6 g (+ )-N-{3-{ct-[3- (1-piperatsinyyli)propoksi-imino]bentsyyli}fenyyli}-3-(3-pyridyyli)-lH,3H-pyrrolo[1,2-c]tiatsoli-7-karboksamidi-dihydrokloridia E- ja Z-muotojen seoksena, jonka sulamis-35 piste on 195 °C.

45 92069 (+ )-Ν-{3-{α-[3-(tert-butyylioksi-4-karbonyyli-l-piperatsinyyli )propoksi-imino] bent syyli } f enyyli )-3-(3-pyridyyli)-lH,3H-pyrrolo[1,2-c]tiatsoli-7-karboksamidi (E- ja Z-muotojen seoksena) voidaan valmistaa seuraavas-5 ti: liuokseen, jossa on 5,5 g (+)-N-[3-(a-hydroksi-imino-bentsyyli)fenyyli]-3-(3-pyridyyli )-lH, 3H-pyrrolo[l, 2-c] -tiatsoli-7-karboksamidia (E- ja Z-muotojen seos) 50 ml:ssa vedetöntä Ν,Ν-dimetyyliformamidia, lisätään ympäristön lämpötilassa typpisuojakaasussa ja samalla sekoittaen 10 0,56 g natriumhydridiä (60-%:isena dispersiona parafiini öljyssä). Seosta sekoitetaan 1 tunti ja 25 minuuttia ympäristön lämpötilassa, minkä jälkeen siihen lisätään liuos, jossa on 6,25 g 3-(tert-butoksi-4-karbonyyli-l-piperatsi-nyyli)propyyli-para-tolueenisulfonaattia 25 ml:ssa vede-15 töntä Ν,Ν-dimetyyliformamidia, noin 5 minuutin aikana. Sekoittamista ympäristön lämpötilassa jatketaan 19 tunnin ajan, minkä jälkeen liuotin poistetaan haihduttamalla kuiviin alipaineessa (0,1 mmHg; 13,5 kPa) noin 45 °C:ssa. Jäännös lietetään 100 ml:aan etyyliasetaattia ympäristön 20 lämpötilassa; liukenematon aines suodatetaan eroon ja pestään 40 ml:11a etyyliasetaattia, minkä jälkeen suodos haihdutetaan kuiviin alipaineessa (20 mmHg; 2,7 kPa) noin 35 °C:ssa. Jäännöksellä (13,5 g) suoritetaan kromatogra-fia-ajo kolonnissa, jonka halkaisija on 3,5 cm ja joka 25 sisältää 250 g neutraalia aluminiumoksidia (0,032 - 0,063 mm), jonka aktiivisuus on alennettu käyttämällä 10 % vettä. Eluoinnissa käytetään etyyliasetaatin ja syklohek-saanin seosta (tilavuussuhteessa 80:20) 0,5 baarin (51 kPa) paineessa ja kerätään 50 ml:n fraktioita. Ensim-30 mäiset 2 fraktiota heitetään pois ja seuraavat 2 fraktio-:· ta yhdistetään ja haihdutetaan kuiviin alipaineessa (20 mmHg; 2,7 kPa) noin 45 °C:een lämpötilassa. Näin saadaan 7,1 g tuotetta, jolla suoritetaan toinen kroma-tografia-ajo kolonnissa, jonka halkaisija on 2,7 cm ja 35 joka sisältää 150 g neutraalia aluminiumoksidia (0,032 - 46 92069 0,063 nun), jonka aktiivisuus on alennettu käyttämällä 10 % vettä. Eluoinnissa käytetään etyyliasetaatin ja syklohek-saanin seosta (tilavuussuhteessa 50:50). Ensimmäiset 4 fraktiota heitetään pois ja seuraavat 7 fraktiota yhdiste-5 tään ja haihdutetaan kuiviin alipaineessa (20 mmHg; 2,7 kPa) noin 40 °C:een lämpötilassa. Saadaan 4,4 g ( + )-N-{3-{a-[3-(tert-butyylioksi-4-karbonyyli-1-piperat-sinyyli )propoksi-imino] bentsyyli } f enyyli } -3- (3-pyridyyli) -lH,3H-pyrrolo[l,2-c]tiatsoli-7-karboksamidia (E- ja Z-muo-10 tojen seos) oranssin värisenä öljynä.

3-(tert-butoksi-4-karbonyyli-l-piperatsinyyli)pro-pyyli-para-tolueenisulfonaatti voidaan valmistaa seuraavasti: liuos, jossa on 11,6 g para-tolueenisulfonyyliklo-ridia 50 ml:ssa pyridiiniä, lisätään 1 tunti 50 minuutin 15 aikana liuokseen, jossa on 13,5 g l-(3-hydroksipropyyli)-tert-butoksi-4-karbonyylipiperatsiinia 50 ml:ssa pyridiiniä ja joka on jäähdytetty 0 °C:seen, ja sekoitetaan 15 tunnin ajan noin 20 °C:een lämpötilassa. Lämpötila lasketaan 10 - 15 °C:seen ja lisätään 8,5 ml trietyyliamiinia ja 20 sitten 170 ml tislattua vettä ja 170 ml etyyliasetaattia. Orgaaninen faasi dekantoidaan eroon ja vesifaasia uutetaan kaikkiaan 300 ml:11a etyyliasetaattia. Saadut orgaaniset uutteet yhdistetään ja pestään 750 ml:11a tislattua vettä, kuivataan kidevedettömällä magnesiumsulfaatilla ja lisä-25 tään 0,2 g valkaisuhiiltä, suodatetaan ja haihdutetaan kuiviin alipaineessa (20 mmHg; 2,7 kPa) noin 45 °C:ssa. Näin saadaan 16,3 g 3-(tert-butoksi-4-karbonyyli-l-pipe-ratsinyyli)propyyli-para-tolueenisulfonaattia punaisena öljynä.

30 l-(3-hydroksipropyyli )-tert-butoksi-4-karbonyyli- ' piperatsiini voidaan valmistaa seuraavasti: liuos, jossa on 12 g di-tert-butyylidikarbonaattia 100 ml:ssa dikloo-rimetaania, lisätään liuokseen, jossa on 7,2 g l-(3-hyd-roksipropyyli)piperatsiinia 100 ml:ssa dikloorimetaania; 35 seosta sekoitetaan 24 tunnin ajan ympäristön lämpötilassa, minkä jälkeen liuotin poistetaan haihduttamalla kui- 47 92069 viin alipaineessa (20 mmHg; 2,7 kPa) noin 45 °C:ssa. Näin saadaan 13,8 g l-(3-hydroksipropyyli)-tert-butoksi-4-kar-bonyylipiperatsiinia keltaisena öljynä. (Rf = 0,25; ohut-levykromatografia-ajo silikageelissä, eluenttina etyyli-5 asetaatti).

Esimerkki 17

Liuosta, jossa on 0,5 g (+)-N-(3-bentsoyylifenyy-li)-3-(3-pyridyyli)-1H,3H-pyrrolo[1,2-c]tiatsoli-7-kar-boksamidi-2,2-dioksidia ja 0,23 g (l-metyyli-4-piperidyy-10 li)oksiamiini-dihydrokloridia 10 ml:ssa pyridiiniä, kei tetään palautusjäähdyttäen 4 tunnin ajan. Seokseen lisätään 0,12 g (l-metyyli-4-piperidyyli)oksiamiini-dihydro-kloridia ja keittämistä palautusjäähdyttäen jatketaan tunnin ajan. Seos jäähdytetään noin 20 °C:seen, liuotin 15 poistetaan haihduttamalla kuiviin alipaineessa (20 mmHg; 2,7 kPa) noin 45 °C:ssa, minkä jälkeen jäännöstä laimennetaan lisäämällä 30 ml tislattua vettä ja saatuun liuokseen lisätään 3,4 ml 1 N natriumhydroksidiliuosta. Saadut kiteet suodatetaan eroon, pestään kaikkiaan 20 ml:11a tis-20 lattua vettä ja kuivataan alipaineessa (0,1 mmHg; 13,5 kPa) noin 20 °C:ssa. Saatu vaalean ruskea jauhe (0,59 g) liuotetaan 4 ml:aan asetonia. Saatu liuos suodatetaan, siihen lisätään 2,5 ml etyyliasetaattia ja sitten 0,49 ml kloorivedyn 4,1 N liuosta eetterissä. 15 minuutin :· 25 sekoituksen ympäristön lämpötilassa jälkeen saadut kiteet suodatetaan eroon, pestään kaikkiaan 15 ml:11a dietyyli-eetteriä ja kuivataan alipaineessa (0,1 mmHg; 13,5 Pa) noin 60 °C:ssa. Saatu dihydrokloridi (590 mg) liuotetaan 10 ml:aan tislattua vettä ja saatu liuos tehdään alkali-30 seksi lisäämällä 2 ml 1 N natriumhydroksidiliuosta, minkä ·* jälkeen saadut kiteet suodatetaan eroon, niitä pestään tislatulla vedellä kunnes ne ovat neutraaleja ja kuivataan sitten alipaineessa (0,1 mmHg; 13,5 Pa) noin 20 °C:.s-sa. Kiinteä aine (416 mg) liuotetaan 2 ml:aan vedetöntä 35 etanolia ja liuokseen lisätään 10 mg valkaisuhiiltä, se suodatetaan ja pestään 6 ml:11a etyyliasetaattia, minkä 48 92069 jälkeen lisätään 0,36 ml kloorivedyn 3,65 N liuosta eetterissä. 15 tunnin sekoituksen ympäristön lämpötilassa jälkeen saadut kiteet suodatetaan eroon, pestään kaikkiaan 30 ml:lla dietyylieetteriä ja kuivataan ilmassa.

5 Näin saadaan 470 mg N-(g-3-[ (l-metyyli-4-piperidyyli )oksi-iminobentsyyli] fenyyli}-3-( 3-pyridyyli) -1H, 3H-pyrrolo[ 1,2- c] tiatsoli-7-karboksamidi- (3RS) -2,2-dioksidi-dihydroklo-ridia E- ja Z-isomeerien seoksen muodossa kerman värisinä kiteinä, joiden sulamispiste on 200 °C.

10 (+)-N-(3-bentsoyylifenyyli)-3-(3-pyridyyli)-lH,3H- pyrrolo[l,2-c]tiatsoli-7-karboksamidi-2,2-dioksidisaadaan menetelmän mukaan, jota kuvataan EP-hakemusjulkaisussa 0 253 711.

(l-metyyli-4-piperidyyli)oksiamiini-dihydrokloridi 15 voidaan valmistaa kuten kuvattu esimerkissä 10.

Esimerkki 18

Liuokseen, jossa on 1,74 g (+)-N-{3-[a-hydroksi-imino-(4-metoksibentsyyli)]fenyyli}-3-(3-pyridyyli)-lH,3H-pyrrolo[l,2-c]tiatsoli-7-karboksamidia (E- ja Z-20 muotojen seos) 17,5 ml:ssa vedetöntä N,N-dimetyyliform-amidia, lisätään ympäristön lämpötilassa typpisuojakaasus-sa ja samalla sekoittaen 0,18 g natriumhydridiä (50-%:ise-na dispersiona parafiiniöljyssä). Liuosta sekoitetaan 30 minuutin ajan ympäristön lämpötilassa, minkä jälkeen sii-25 hen lisätään noin 5 minuutin aikana liuos, jossa on 2,61 g l-(3-klooripropyyli )-4-metyylipiperatsiinia 2 ml:ssa vedetöntä Ν,Ν-dimetyyliformamidia, ja liuosta sekoitetaan 15 tunnin ajan noin 20 °C:een lämpötilassa. Liuotin poistetaan haihduttamalla kuiviin alipaineessa (0,5 mmHg; 67,5 Pa) 30 noin 50 °C:ssa ja jäännökseen lisätään 25 ml tislattua vet-tä sekä saatetaan kiteytyminen alkuun. Kolmen tunnin sekoituksen ympäristön lämpötilassa jälkeen saadut kiteet suodatetaan eroon ja niitä pestään tislatulla vedellä kunnes ne ovat neutraaleja ja kuivataan sitten ilmassa. Sit-35 ten saadut 2,30 g kiinteää ainetta liuotetaan 40 ml:aan etyyliasetaattia ja liuokseen lisätään 37 ml 0,1 N kloori- 49 92069 vetyhappoa. Vesifaasi dekantoidaan eroon ja pestään 20 ml:11a etyyliasetaattia, minkä jälkeen se tehdään al-kaliseksi lisäämällä 3,7 ml 1 N natriumhydroksidiliuosta ja uutetaan 40 ml:11a etyyliasetaattia. Saadut orgaaniset 5 uutteet yhdistetään, kuivataan kidevedettömällä magnesium-sulfaatilla, lisätään 50 mg valkaisuhiiltä, suodatetaan ja haihdutetaan kuiviin alipaineessa (20 mmHg; 2,7 kPa) noin 45 °C:ssa. Näin saadaan 1,41 g vaalean keltaista marenkia, joka liuotetaan 10 ml:aan etyyliasetaattia, liuos suodate-10 taan, suodin huuhdotaan kaikkiaan 8 ml:11a etyyliasetaattia ja suodokseen lisätään 1,5 ml kloorivedyn 3 N liuosta eetterissä. Seosta sekoitetaan noin 20 °C:ssa tunnin ajan. Saadut kiteet suodatetaan eroon, pestään 3 kertaan kaikkiaan 12 ml:11a dietyylieetteriä ja kuivataan alipainees-15 sa (0,1 mmHg; 13,5 Pa) noin 50 °C:ssa. Näin saadaan 1,53 g (+ )-N-{3-(a-[3-( 4-metyyli-l-piperatsinyyli )propoksi-imi-no]-(4-metoksibentsyyli))fenyyli}-3-(3-pyridyyli-lH,3H-pyrrolo[l,2-c]tiatsoli-7-karboksamidi-dihydrokloridia E-ja Z-isomeerien seoksen muodossa kerman värisinä kiteinä, 20 joiden sulamispiste on 170 °C.

(+)-N-{3-a-[hydroksi-imino-(4-metoksibentsyyli ) ] fenyyli}-3-(3-pyridyyli)-1H,3H-pyrrolo[1,2-c]tiatso-li-7-karboksamidi (E- ja Z-muotojen seos) voidaan valmistaa seuraavasti: lietteeseen, jossa on 1,82 g (+)-N-[3-25 (4-metoksibentsoyyli) f enyyli) -3- (3-pyridyyli) -1H, 3H-pyr- ·· rolo[l,2-c]tiatsoli-7-karboksamidia 22 ml:ssa 1-propano-lia, lisätään 425 mg natriumkarbonaattia ja 280 mg hyd-roksyyliamiini-hydrokloridia. Lietettä keitetään palautus jäähdyttäen ja samalla sekoittaen 2 tunnin ajan. Liuo-30 tin poistetaan haihduttamalla kuiviin alipaineessa *: (20 mmHg; 2,7 kPa) noin 50 °C; jäännöstä laimennetaan li- . * säämällä 25 ml tislattua vettä ja kiteytyminen saatetaan alkuiin. Saadut kiteet suodatetaan eroon ja niitä pestään tislatulla vedellä kunnes ne ovat neutraaleja ja kuiva-35 taan sitten ilmassa. Näin saadaan 1,80 g (+)-N-{a-3- [hydroksi-imino-( 4-metoksibentsyyli ) ] fenyyli}-3-( 3-pyri- 50 92069 dyyli)-lH,3H-pyrrolo[l,2-c]tiatsoli-7-karboksamidia (E- ja Z-muotojen seos) valkeina kiteinä, joiden sulamispiste on 235 °C.

(+)-N-[3-(4-metoksibentsoyyli )fenyyli] -3-( 3-pyri-5 dyyli)-lH,3H-pyrrolo[l,2-c]tiatsoli-7-karboksamidivalmis tetaan menetelmän mukaan, jota kuvataan EP-hakemusjulkaisussa 0 253 711.

Esimerkki 19

Liuokseen, jossa on 480 mg (+)-N-[a-3-(hydroksi-10 iminobentsyyli)-6-kloorifenyyli]-3-(3-pyridyyli)-lH,3H-pyrrolo[l,2-c]tiatsoli-7-karboksamidia (E- ja Z-muotojen seos) 5 ml:ssa vedetöntä Ν,Ν-dimetyyliformamidia, lisätään ympäristön lämpötilassa typpisuojakaasussa ja samalla sekoittaen 9 mg natriumhydridiä (60-%:isena dispersiona pa-15 rafiiniöljyssä). Liuosta sekoitetaan 40 minuutin ajan ympäristön lämpötilassa, minkä jälkeen siihen lisätään 190 mg 4-(2-kloorietyyli)mor£oliinia ja liuosta sekoitetaan 23 tunnin ajan noin 20 °C:een lämpötilassa. Lisätään 23 mg natriumhydridiä (60-%:isena dispersiona parafiini-20 öljyssä) ja 43 mg 4-(2-kloorietyyli)morfoliinia ja jatketaan sekoittamista 24 tunnin ajan noin 20 °C:een lämpötilassa. Liuotin poistetaan haihduttamalla kuiviin alipaineessa (0,1 mmHg; 13,5 Pa) noin 60 °C:ssa. Lisätään 15 ml etyyliasetaattia, minkä jälkeen muodostunut natriumkloridi .. 25 suodatetaan eroon ja pestään 20 ml:11a etyyliasetaattia.

Liuotin poistetaan haihduttamalla kuiviin alipaineessa (20 mmHg; 2,7 kPa) noin 40 °C:ssa, minkä jälkeen jäännöksellä (660 mg) suoritetaan kromatografia-ajo kolonnissa, jonka halkaisija on 1,4 cm ja joka sisältää 20 g emäksis-30 tä aluminiumoksidia (0,050 - 0,200 mm). Eluoinnissa käy-tetään etyyliasetaattia 0,5 baarin (51 kPa) paineessa ja kerätään 5 ml:n fraktioita. Ensimmäiset 8 fraktiota heitetään pois ja seuraavat 58 fraktiota yhdistetään ja haihdutetaan kuiviin alipaineessa (20 mmHg; 2,7 kPa) noin 35 40 °C:een lämpötilassa. Näin saadaan 370 mg tuotetta, joka i - 7 ; ' 32069 51 liuotetaan 10 ml:aan etyyliasetaattia ja liuokseen lisätään 0,42 ml kloorivedyn 3 N liuosta eetterissä. Seosta sekoitetaan noin 20 °C:ssa 10 minuutin ajan, minkä jälkeen saadut kiteet suodatetaan eroon, pestään 5 ml:11a etyyli-5 asetaattia ja 10 ml:11a dietyylieetteriä sekä kuivataan alipaineessa (0,1 mmHg; 13,5 Pa) noin 25 °C:ssa. Näin saadaan 388 mg (+)-N-{3-{a-[(2-morfolino)etoksi-imino]bent-syyli}-6-kloori-fenyyli}-3-(3-pyridyyli)-lH,3H-pyrrolo-[1,2-c]tiatsoli-7-karboksamidi-dlhydrokloridia E- ja Z-10 isomeerien seoksen muodossa kerman värisinä kiteinä, joiden sulamispiste on 154 °C.

(+)-N-[3-(a-hydroksi-iminobentsyyli)-6-kloorifenyy-li]-3-(3-pyridyyli)-lH,3H-pyrrolo[l,2-c]tiatsoli-7-kar-boksamidi (E- ja Z-muotojen seoksena) voidaan valmistaa 15 seuraavasti: lietteeseen, jossa on 490 mg (+)-N-[3-bentso-yyli-6-kloorifenyyli]-3-(3-pyridyyli)-lH,3H-pyrrolo-[1,2-c]tiatsoli-7-karboksamidia 5,5 ml:ssa 1-propanolia, lisätään 113 mg natriumkarbonaattia ja 150 mg hydroksyyli-amiini-hydrokloridia. Lietettä keitetään palautusjäähdyt-20 täen ja samalla sekoittaen 2 tunnin ajan, minkä jälkeen liuotin poistetaan haihduttamalla kuiviin alipaineessa (20 mmHg; 2,7 kPa) noin 40 °C:ssa. Jäännöstä laimennetaan lisäämällä 40 ml tislattua vettä ja kiteytyminen saatetaan alkuun. Saadut kiteet suodatetaan eroon, pestään 20 ml:11a 25 tislattua vettä ja kuivataan ilmassa. Näin saadaan 490 mg (+) -N- (3-(α-hydroksi - iminobent syy 1 i) - 6 - kloori f enyyl i ] -3-(3-pyridyyli )-lH, 3H-pyrrolo[ 1,2-c] tiatsoli-7-karboksamidia (E- ja Z-isomeerien seos) valkeina kiteinä, joiden sulamispiste on 135 °C.

30 (+)-N-[3-bentsoyyli-6-kloorifenyyli]-3-(3-pyridyy- J li)-lH,3H-pyrrolo[l,2-c]tiatsoli-7-karboksamidi valmiste taan menetelmän mukaan, jota kuvataan EP-hakemusjulkaisussa 0 253 711.

Esimerkki 20 35 Liuokseen, jossa on 2,02 g (+)-N-{3-[hydroksi-imi- no- (2-pyridyyli)metyyli]fenyyli}-3-(3-pyridyyli)-lH,3H- 52 92069 pyrrolo[l,2-c]tiatsoli-7-karboksamidia (E- ja Z-muotojen seos) 20 ml:ssa vedetöntä Ν,Ν-dimetyyliformamidia, lisätään ympäristön lämpötilassa typpisuojakaasussa ja samalla sekoittaen 220 mg natriumhydridiä (50-%:isena disper-5 siona parafiiniöljyssä). Seosta sekoitetaan 25 minuutin ajan noin 20 °C:een lämpötilassa, minkä jälkeen siihen lisätään noin 5 minuutin aikana liuos, jossa on 813 mg 1-(3-klooripropyyli)-4-metyylipiperatsiinia 2 ml:ssa vedetöntä Ν,Ν-dimetyyliformamidia, ja sekoittamista ympäristön 10 lämpötilassa jatketaan 21 tunnin ajan. Liuotin poistetaan haihduttamalla kuiviin alipaineessa (0,5 mmHg; 67,5 Pa) noin 50 °C:een lämpötilassa, minkä jälkeen jäännökseen lisätään 40 ml tislattua vettä ja 40 ml etyyliasetaattia. Orgaaninen faasi dekantoidaan eroon ja vesifaasia uutetaan 15 40 ml:11a etyyliasetaattia. Saadut orgaaniset uutteet yh distetään, kuivataan kidevedettömällä magnesiumsulfaatilla, lisätään 50 mg valkaisuhiiltä, suodatetaan ja haihdutetaan kuiviin alipaineessa (20 mmHg; 2,7 kPa) noin 45 °C:ssa. Näin saadaan 2,32 g vaalean ruskeaa marenkia, 20 joka liuotetaan 23 ml:aan etyyliasetaattia. Liuos suodatetaan, suodin huuhdotaan 8 ml:11a etyyliasetaattia ja suodokseen lisätään 2,6 ml kloorivedyn 3 N liuosta eetterissä. Seosta sekoitetaan tunnin ajan ympäristön lämpötilassa, minkä jälkeen saadut kiteet suodatetaan eroon, pes-... 25 tään 3 kertaan kaikkiaan 12 ml:11a etyyliasetaattia ja kuivataan alipaineessa (0,1 mmHg; 13,5 Pa) noin 50 °C:ssa. Saatu dihydrokloridi (2,29 g) liuotetaan 40 ml:aan tislattua vettä, joka on tehty alkaliseksi lisäämällä 4 ml 2 N natriumhydroksidiliuosta. Lisätään 30 ml asetonia tuotteen 30 liuottamiseksi, minkä jälkeen lisätään 40 ml etyyliase-taattia ja 40 ml tislattua vettä. Orgaaninen faasi dekan- * toidaan eroon ja vesifaasia uutetaan 40 ml:11a etyyliasetaattia. Saadut orgaaniset uutteet yhdistetään, kuivataan kidevedettömällä magnesiumsulfaatilla ja haihdutetaan kui-35 viin alipaineessa (20 mmHg; 2,7 kPa) noin 45 °C:ssa. Saatu vaalean ruskea marenki (1,74 g) liuotetaan 10 ml:aan etyy- 53 92069 liasetaattia. Saatu liuos suodatetaan, suodin pestään 7,5 ml:11a etyyliasetaattia ja suodokseen lisätään 1,87 ml kloorivedyn 3 N liuosta eetterissä. Saadut kiteet suodatetaan eroon, pestään 15 ml:11a etyyliasetaattia ja kuiva-5 taan alipaineessa (0,1 mmHg; 13,5 Pa) noin 50 °C:ssa. Saadaan 1,65 g (+ )-N-{3-{[3-(4-metyyli-l-piperatsinyyli)pro-poksi-imino3-(2-pyridyyli )metyyli}fenyyli}-3-(3-pyrldyy-li)-lH,3H-pyrrolo[1,2-c]tiatsoll-7-karboksamidia E- ja Z-isomeerien seoksen muodossa kerman värisinä kiteinä, joi-10 den sulamispiste on 180 °C.

(+ )-N-{3-[hydroksi-imino-(2-pyridyyli Jmetyyli]fe-nyyli)-3-(3-pyridyyli)-1H,3H-pyrrolo[1,2-c]tiatsoli-7-karboksamidi (E- ja Z-muotojen seos) voidaan valmistaa seuraavasti: lietteeseen, jossa on 2,13 g (+)-N-[3-(2-py-15 ridyylikarbonyyli Jfenyyli]-3-(3-pyridyyli)-lH,3H-pyrrolo- [1,2-c)tiatsoli-7-karboksamidia 26 ml:ssa 1-propanolia, lisätään 530 mg natriumkarbonaattia ja 350 mg hydroksyy-liamiini-hydrokloridia. Lietettä keitetään palautusjäähdyttäen ja samalla sekoittaen tunnin ajan, minkä jälkeen 20 liuotin poistetaan haihduttamalla kuiviin alipaineessa (0,5 mmHg; 67,5 Pa) noin 50 °C:ssa, ja saatua jäännöstä laimennetaan lisäämällä 25 ml tislattua vettä ja kiteytyminen saatetaan alkuun. Seosta sekoitetaan 24 tunnin ajan ympäristön lämpötilassa, minkä jälkeen saadut kiteet suo-25 datetaan eroon, niitä pestään tislatulla vedellä kunnes ne ovat neutraaleja ja kuivataan sitten ilmassa. Näin saadaan 2,11 g (+)-N-{3-[hydroksi-imino-(2-pyridyyli)metyyli]fe-nyyli }-3-(3-pyridyyli )-lH, 3H-pyrrolo[ 1,2-c) tiatsoli-7-kar-boksamidia (E- ja Z-isomeerien seos) valkeina kiteinä, 30 joiden sulamispiste on 150 - 160 °C.

·' ( + )-N- [3- (( 2-pyridyyli )karbonyyli Jfenyyli] -3-( 3- pyridyyli )-lH, 3H-pyrrolo[ 1,2-c] tiatsoli-7-karboksamidi valmistetaan menetelmän mukaan, jota kuvataan EP-hakemus-julkaisussa 0 253 711.

54 92069

Esimerkki 21

Lietettä, jossa on 1 g (+)-N-{3-{a-[3-(l-piperatsi-nyy 1 i) propoksi - imino ]bentsyyli) f enyy 1 i } - 3 - (3 - pyr idyy 1 i) -1H,3H-pyrrolo[l,2-c]tiatsoli-7-karboksamidia (E- ja Z-muo-5 tojen seos), 134 mg kaliumkarbonaattia ja 0,134 ml 2-bro-mietanolia 20 ml:ssa asetonitriiliä, sekoitetaan noin 20 °C:ssa 24 tunnin ajan. Liukenematon aines suodatetaan eroon ja suodos haihdutetaan kuiviin alipaineessa (20 mmHg; 2,7 kPa) noin 40 °C:ssa. Saadaan 1,13 g keltais-10 ta öljyä, jolla suoritetaan kromatografia-ajo kolonnissa, jonka halkaisija on 1,7 cm ja joka sisältää 50 g neutraalia aluminiumoksidia (0,032 - 0,063 mm), jonka aktiivisuutta on alennettu käyttämällä 10 % vettä. Eluoinnissa käytetään etyyliasetaatin ja metanolin seosta (tilavuus-15 suhteessa 80:20) 0,5 baarin (51 kPa) paineessa ja kerätään 25 ml:n fraktioita. Ensimmäiset 2 fraktiota heitetään pois; 2 seuraavaa fraktiota yhdistetään ja haihdutetaan kuiviin alipaineessa (20 mmHg; 2,7 kPa) noin 40 °C:s-sa. Saadaan keltainen marenki (800 mg), jolla suoritetaan 20 toinen kromatografia-ajo kolonnissa, jonka halkaisija on 1,4 cm ja joka sisältää 25 g neutraalia aluminiumoksidia (0,032 - 0,063 mm), jonka aktiivisuutta on alennettu käyttämällä 10 % vettä. Eluoinnissa käytetään etyyliasetaatin ja metanolin seosta (tilavuussuhteessa 90:10) 0,5 baarin « 25 (51 kPa) paineessa ja kerätään 15 ml:n fraktioita. Ensim mäiset 5 fraktiota heitetään pois ja 7 seuraavaa yhdistetään ja haihdutetaan kuiviin alipaineessa (20 mmHg; 2,7 kPa) noin 40 °C:ssa. Saadut 465 mg tuotetta liuotetaan 5 ml:aan etyyliasetaattia ja saatuun liuokseen lisätään 30 0,51 ml kloorivedyn 3 N liuosta eetterissä. Kun seosta on | sekoitettu 15 minuutin ajan noin 20 °C:een lämpötilassa, muodostuneet kiteet suodatetaan eroon, pestään 2 ml:11a etyyliasetaattia ja 5 ml:11a dietyylieetteriä ja kuivataan alipaineessa (0,1 mmHg; 13,5 Pa) noin 20 °C:ssa. Näin saa-35 daan 460 mg (+ )-N-{3-{{3-ct-[4-(2-hydroksietyyli )-l-pi- i 1 - 55 92069 peratsinyyli]propoksi-lmino}bentsyyli}fenyyli}-3-(3-pyri-dyyli) -1H,3H-pyrrolo[1,2-c]tiatsoli-7-karboksamidi-dlhyd-rokloridia E- ja Z-isomeerien seoksena valkeina kiteinä, joiden sulamispiste on 178 °C.

5 ( + )-N-{3-{a-[3-(l-piperatsinyyli)propoksi-imino]- bentsyyli}fenyyli}-3-(3-pyridyyli )-lH, 3H-pyrrolo[l, 2-c] -tiatsoli-7-karboksamidi (E- ja Z-isomeerien seos) saadaan kuten kuvattu esimerkissä 16.

Esimerkki 22 10 Lietettä, jossa on 3,11 g (+)-N-{3-{{a-2-[N-(2- kloorietyyli)anilino]etoksi-imino}bentsyyli}fenyyli}-3-(3-pyridyyli)-1H,3H-pyrrolo[1,2-c]tiatsoli-7-karboksami-dia (E- ja Z-muotojen seoksena), 680 mg metyyliamiini-hydrokloridia, 2,07 g kaliumkarbonaattia ja 950 mg kupa-15 rijodidia 62 ml:ssa asetonitriiliä, kuumennetaan autoklaavissa 6 tunnin ajan 100 °C. Liukenematon aines suodatetaan eroon ja huuhdotaan 3 kertaan kaikkiaan 60 ml:11a asetonitriiliä. Suodos haihdutetaan kuiviin alipaineessa (20 mmHg; 2,7 kPa) noin 45 °C:een lämpötilassa, jolloin 20 saadaan 1,30 g vihreää lakkaa. Saatu kiinteä aine liete-tään 300 ml:aan ammoniakkia (d = 0,92) ja lietteeseen lisätään 300 ml etyyliasetaattia, minkä jälkeen orgaaninen faasi dekantoidaan eroon, pestään 200 ml:11a tislattua vettä, kuivataan kidevedettömällä magnesiumsulfaatilla ja • 25 haihdutetaan kuiviin alipaineessa (20 mmHg; 2,7 kPa) noin 45 °C:ssa. Jäännöstä laimennetaan lisäämällä 20 ml etyyliasetaattia ja seokseen lisätään 20 ml 0,5 N kloorivety-happoa, minkä jälkeen vesifaasi dekantoidaan eroon, tehdään alkaliseksi lisäämällä 2,2 ml 5 N natriumhydroksidi-30 liuosta ja uutetaan kaikkiaan 40 ml:11a etyyliasetaattia.

;· Saadut orgaaniset uutteet yhdistetään, kuivataan kideve- dettömällä magnesiumsulfaatilla ja haihdutetaan kuiviin alipaineessa (20 mmHg; 2,7 kPa) noin 40 °C:een lämpötilassa. Saadaan 1,15 g kellanruskeaa marenkia, johon lisätään 35 1/7 g aiemmin saatua vihreää lakkaa ja suoritetaan kroma- tografia-ajo kolonnissa, jonka halkaisija on 3,5 cm ja 56 92069 joka sisältää noin 125 g silikageeliä (0,02 - 0,045 mm). Eluoinnissa käytetään asetonitriilin ja ammoniakin (d = 0,92) seosta (tilavuussuhteessa 95:5) 0,3 baarin (30,6 kPa) paineessa ja kerätään 80 ml:n fraktioita. En-5 simmäiset 15 fraktiota heitetään pois ja 3 seuraavaa fraktiota yhdistetään ja haihdutetaan kuiviin alipaineessa (20 mmHg; 2,7 kPa) noin 50 °C:ssa. Näin saadaan 370 mg keltaista marenkia, joka liuotetaan 3,7 ml:aan etyyliasetaattia, saatu liuos suodatetaan ja liukenematon aines huuhdo-10 taan 1,7 ml:11a etyyliasetaattia. Saatuun liuokseen lisätään 0,39 ml kloorivedyn 3 N liuosta eetterissä ja seosta sekoitetaan noin 20 °C:ssa 15 minuutin ajan. Lietettä laimennetaan lisäämällä 20 ml dietyylieetteriä, sekoitetaan tunnin ajan noin 20 °C:een lämpötilassa ja suodatetaan 15 eroon muodostuneet kiteet, pestään ne kaikkiaan 20 ml:11a dietyylieetteriä ja kuivataan alipaineessa (0,1 mmHg; 13,5 Pa) noin 50 °C:ssa. Näin saadaan 370 mg (+)-N-{3-{(q- 2- [N-( 2-metyyliaminoetyyli )anilino]etoksi-imino}bentsyy-li}fenyyli}-3-(3-pyridyyli)-1H,3H-pyrrolo[1,2-c]tiatsoli-20 7-karboksamidi-dihydrokloridia (E- ja Z-muotojen seos) kellertävinä kiteinä, joiden sulamispiste on 150 - 155 °C.

(+ )-N-{3-{{a-2-[N-( 2-kloorietyyli )anilino]etoksi-imino}bentsyyli}fenyyli}-3-(3-pyridyyli)-lH,3H-pyrrolo-[1,2-c]tiatsoli-7-karboksamidi (E- ja Z-muotojen seos) ' 25 voidaan valmistaa seuraavasti: lietteeseen, jossa on • · 480 mg natriumhydridiä (50-%:isena dispersiona parafiiniöljyssä) 10 ml:ssa vedetöntä Ν,Ν-dimetyyliformamidia, lisätään typpisuojakaasussa noin 25 minuutin aikana liuos, jossa on 4,4 g (+)-N-[a-3-(hydroksi-iminobentsyyli)fenyy-30 li] -3-(3-pyridyyli)-1H,3H-pyrrolo[1,2-c]tiatsoli-7-kar- • \ boksamidia (E- ja Z-muotojen seoksena) 10 ml:ssa vedetöntä Ν,Ν-dimetyyliformamidia. Seosta sekoitetaan 15 minuutin ajan ympäristön lämpötilassa, minkä jälkeen siihen lisätään noin 2 minuutin aikana liuos, jossa on 2,18 g N,N-35 bis-(2-kloorietyyli)aniliinia 10 ml:ssa vedetöntä Ν,Ν-dimetyyliformamidia. Sitten liuosta sekoitetaan 16 tunnin

, I

57 92069 ajan ympäristön lämpötilassa, minkä jälkeen liuotin poistetaan haihduttamalla kuiviin alipaineessa (0,1 mmHg, 13,5 Pa) noin 45 °C:een lämpötilassa. Jäännös lietetään 80 ml:aan tislattua vettä ja sekoitetaan tunnin ajan noin 5 20 °C:ssa, minkä jälkeen saadut kiteet suodatetaan eroon, pestään kaikkiaan 20 ml:11a tislattua vettä ja kuivataan alipaineessa (0,1 mmHg; 13,5 Pa) noin 20 °C:ssa. Näin saadaan 6,32 g jäännöstä, jolla suoritetaan kromatografia-ajo kolonnissa, jonka halkaisija on 5,5 cm ja joka sisäl-10 tää noin 250 g silikageeliä (0,02 - 0,045 mm). Eluoinnissa käytetään etyyliasetaattia 0,5 baarin (51 kPa) paineessa ja kerätään 100 ml:n fraktioita. Ensimmäiset 10 fraktiota heitetään pois ja 8 seuraavaa yhdistetään ja haihdutetaan kuiviin alipaineessa (20 mmHg; 2,7 kPa) noin 45 °C:ssa.

15 Näin saadaan 3,41 g (+)-N-{3-{{a-2-[N-(2-kloorietyyli)- anilino] etoksi-imino}bentsyyli } f enyyli } -3- (3-pyridyyli) -1H,3H-pyrrolo[l,2-c]tiatsoli-7-karboksamidia (E- ja Z-muo-tojen seos) keltaisena marenkina (Rf - 0,54; ohutlevykroma-tografia-ajo silikageelissä; eluentti etyyliasetaatti).

20 (+)-N- [3-(o-hydroksi-iminobentsyyli)fenyyli]-3-(3- pyridyyli)-lH,3H-pyrrolo[1,2-c]tiatsoli-7-karboksamidi (E-ja Z-isomeerien seoksena) saadaan kuten kuvattu esimerkissä 1.

Esimerkki 23 25 Liuokseen, jossa on 4,18 g (+)-N-[3-(a-hydroksi- iminobentsyyli)fenyyli]-3-(3-pyridyyli)-lH,3H-pyrrolo-[1,2-c]tiatsoli-7-karboksamidia (E- ja z-isomeerien seoksena) 40 ml:ssa vedetöntä Ν,Ν-dimetyyliformamidia, lisätään ympäristön lämpötilassa typpisuojakaasussa ja samal-30 la sekoittaen 0,42 g natriumhydridiä (60-%:isena disper- • ' siona parafiiniöljyssä). Lietettä sekoitetaan tunnin ajan ,· noin 20 °C:ssa, minkä jälkeen siihen lisätään noin 5 minuutin aikana liuos, jossa on 3,27 g (3RS)-3-kinuklidi.i-ni-para-tolueenisulfonaattia 25 ml:ssa vedetöntä N,N-di-35 metyyliformamidia. Liuosta sekoitetaan 18 tunnin ajan ympäristön lämpötilassa, minkä jälkeen sitä kuumennetaan 58 92069 70 °C:ssa 6 tunnin ajan. Kun seos on jäähdytetty 20 °C:een tietämille, liuotin poistetaan haihduttamalla kuiviin alipaineessa (0,1 mmHg; 13,5 Pa) noin 40 °C:ssa. Jäännöstä laimennetaan lisäämällä 40 ml etyyliasetaattia; liukenema-5 ton aines suodatetaan eroon ja pestään 20 ml:11a etyyliasetaattia, minkä jälkeen suodos haihdutetaan kuiviin alipaineessa (20 mmHg; 2,7 kPa) noin 40 °C:ssa. Näin saadaan 7,5 g punaista tahnaista jäännöstä, jolla suoritetaan kro-matografia-ajo kolonnissa, jonka halkaisija on 2,4 cm ja 10 joka sisältää 150 g neutraalia aluminiumoksidia (0,050 -0,200 mm). Eluoinnissa käytetään etyyliasetaatin ja meta-nolin seosta (tilavuussuhteessa 90:10) ja kerätään 100 ml:n fraktioita. Ensimmäiset 12 fraktiota heitetään pois; 4 seuraavaa fraktiota yhdistetään ja haihdutetaan 15 kuiviin alipaineessa (20 mmHg; 2,7 kPa) noin 40 °C:ssa. Saadulla 3,34 g:11a tuotetta suoritetaan toinen kromato-grafia-ajo kolonnissa, jonka halkaisija on 1,9 cm ja joka sisältää 60 g aluminiumoksidia (0,050 - 0,200 mm). Eluoinnissa käytetään 1000 ml etyyliasetaattia ja 1000 ml etyy-20 liasetaatin ja metanolin seosta (tilavuussuhteessa 90:10) ja kerätään 100 ml:n fraktioita. Ensimmäiset 10 fraktiota heitetään pois ja 10 seuraavaa yhdistetään ja haihdutetaan kuiviin alipaineessa (20 mmHg; 2,7 kPa) noin 40 °C:s-sa. Näin saadaan 0,97 g oranssin väristä marenkia, jolla 25 suoritetaan kromatografia-ajo kolonnissa, jonka halkaisi- <44 ja on 3 cm ja joka sisältää 65 g silikageeliä (0,02 -0,045 mm). Eluoinnissa käytetään etyyliasetaatin ja di-etyyliamiinin seosta (tilavuussuhteessa 95:5) 0,5 baarin (51 kPa) paineessa ja kerätään 40 ml:n fraktioita. Ensim-30 mäiset 21 fraktiota heitetään pois ja 19 seuraavaa yhdis-tetään ja haihdutetaan kuiviin alipaineessa (20 mmHg; 2,7 kPa) noin 40 °C:ssa. Näin saadaan 0,64 g tuotetta, joka liuotetaan 10 ml:aan etyyliasetaattia, ja liuokseen lisätään 0,81 ml kloorivedyn 3 N liuosta eetterissä. Seosta 35 sekoitetaan 10 minuutin ajan ympäristön lämpötilassa, minkä jälkeen muodostuneet kiteet suodatetaan eroon ja pes- » -i .

59 92069 tään 20 ml:11a etyyliasetaattia ja kaikkiaan 20 ml:11a dietyylieetteriä sekä kuivataan alipaineessa (0,1 mmHg; 13,5 Pa) noin 50 °C:ssa. Näin saadaan 0,64 g (+ )-N-(3-(g-[((3RS )-3-kinuklidlnyyli)oksi-imino]bentsyyli}fenyyli}-3-5 (3-pyridyyli) -1H, 3H-pyrrolo [ 1,2-c] tiatsoli-7-karboksami- di-dihydrokloridia (E- ja Z-muotojen seoksena) vaalean ruskeana jauheena, jonka sulamispiste on 200 °C.

(+)-N-[3-(a-hydroksi-iminobentsyyli)fenyyli]-3-(3-pyridyyli )-lH,3H-pyrrolo[l,2-c]tiatsoli-7-karboksamidi 10 saadaan kuten kuvattu esimerkissä 1.

(3RS)-3-kinuklidiini-para-tolueenisulfonaatti voidaan valmistaa seuraavasti: typpisuojakaasussa ja samalla sekoittaen noin 1,5 tunnin aikana liuos, jossa on 6,3 g para-tolueenisulfonyylikloridia 15 ml:ssa pyridiiniä, li-15 sätään liuokseen, jossa on 3,8 g (3RS)-3-kinuklidinolia 15 ml:ssa pyridiiniä ja joka on jäähdytetty 0 °C:seen, ja saatua seosta sekoitetaan ensin 2 tunnin ajan 5 - 10 °C:een lämpötilassa ja sitten 12 tunnin ajan noin 20 °C:ssa. Lämpötila lasketaan jälleen 15 °C:seen ja lisätään 4,63 ml 20 trietyyllamiinia. Reaktioseos kaadetaan 100 ml:aan tislattua vettä ja lisätään 100 ml etyyliasetaattia; tämän jälkeen vesifaasi dekantoidaan eroon ja pestään kaikkiaan 200 ml:11a etyyliasetaattia. Saadut orgaaniset uutteet yhdistetään, pestään 2 kertaan kaikkiaan 200 ml:11a tis-25 lattua vettä, kuivataan kidevedettömällä magnesiumsulfaa- t tiliä ja haihdutetaan kuiviin alipaineessa (20 mmHg; 2,7 kPa) noin 35 °C:een lämpötilassa. Näin saadaan 6,5 g (3RS)-3-kinuklidiini-para-tolueenisulfonaattia punaisena öljynä, jota käytetään sellaisenaan edelleen.

30 Esimerkki 24 : : Liuokseen, jossa on 2,0 g ( + )-N-[3-(a-hydroksi- iminobentsyyli )fenyyli]-3-(3-pyridyyli)-1H,3H-pyrrolo-[1,2-c]tiatsoli-7-karboksamidia (E- ja Z-isomeerien seoksena) 10 ml:ssa vedetöntä Ν,Ν-dimetyyliformamidia, lisä-35 tään noin 20 °C:ssa typpisuojakaasussa ja samalla sekoittaen 220 mg natriumhydridiä (50-%:isena dispersiona para- ( -f.

60 92069 fiiniöljyssä). Saatua lietettä sekoitetaan 30 minuutin ajan noin 20 °C:ssa, minkä jälkeen se jäähdytetään 0 eC:seen ja lisätään noin 30 minuutin aikana liuos, jossa on 1,2 g l-metyyli-(3RS)-3-piperidyyli-para-tolueenisulfo-5 naattia 6 ml:ssa vedetöntä Ν,Ν-dimetyyliformamidia. Liuosta sekoitetaan ensin 2 tunnin ajan 0 °C:ssa ja sen jälkeen 16 tunnin ajan ympäristön lämpötilassa, minkä jälkeen se kaadetaan 100 ml:aan tislattua vettä. Lietettä uutetaan 3 kertaan kaikkiaan 150 ml:11a etyyliasetaattia ja uute pes-10 tään 2 kertaan kaikkiaan 100 ml:11a tislattua vettä. Orgaaninen faasi erotetaan ja tehdään happamaksi lisäämällä 50 ml 0,1 N kloorivetyhappoa, minkä jälkeen vesifaasi de-kantoidaan eroon ja neutraloidaan lisäämällä 1,2 ml 5 N natriumhydroksidiliuosta. Sitten sitä uutetaan 2 kertaan 15 50 ml:11a etyyliasetaattia ja erotettuun orgaaniseen faa siin lisätään 100 mg valkaisuhiiltä, se kuivataan kideve-dettömällä magnesiumsulfaatilla ja haihdutetaan kuiviin alipaineessa (20 mmHg; 2,7 kPa) noin 45 °C:een lämpötilassa. Näin saadaan 1,6 g kellanruskeaa marenkia, jolla suo-20 ritetaan kromatografia-ajo kolonnissa, jonka halkaisija on 3,5 cm ja joka sisältää 125 g silikageeliä (0,020 - 0,045 mm). Eluoinnissa käytetään asetonitriilin ja ammoniakin (d - 0,92) seosta (tilavuussuhteessa 97:3) 0,3 baarin (21 kPa) paineessa ja kerätään 80 ml:n fraktioita. Ensimmäi-25 set 20 fraktiota heitetään pois ja 7 seuraavaa yhdistetään ja haihdutetaan kuiviin alipaineessa (20 mmHg; 2,7 kPa) noin 45 °C:ssa. Näin saadaan 1,6 g vaalean keltaista marenkia, joka liuotetaan 6,6 ml:aan etyyliasetaattia, saatu liuos suodatetaan ja suodokseen lisätään 1,4 ml 30 kloorivedyn 3 N liuosta eetterissä, minkä jälkeen sitä • · laimennetaan lisäämällä 20 ml dietyylieetteriä. Seosta sekoitetaan 30 minuutin ajan ympäristön lämpötilassa, minkä jälkeen saadut kiteet suodatetaan eroon, pestään kaikkiaan 20 ml:11a dietyylieetteriä ja kuivataan alipai-35 neessa (0,1 mmHg; 13,5 Pa) noin 50 °C:ssa. Näin saadaan 1,3 g (+)-N-{3-{g-[(l-metyyli-(3RS)-3-piperidyyli)oksi- 61 92069 imino]bentsyyli}fenyyli}-3-(3-pyridyyli)-1Η,3H-pyrrolo-[1,2-c]tiatsoli-7-(3R)-karboksamidia (E- ja Z-isomeerien seoksena) keltaisena jauheena, jonka sulamispiste on 165° -170 °C.

5 (+)-N-[3-(α-hydroksi-iminobentsyyli)fenyyli]-3-(3- pyridyyli)-lH,3H-pyrrolo[1,2-c]tiatsoli-7-karboksamidi saadaan kuten kuvattu esimerkissä 1.

1-metyyli- (3RS) -3-piperidyyli-para-tolueenisulfo-naatti voidaan saada seuraavasti: samalla sekoittaen noin 10 30 minuutin aikana liuos, jossa on 9,5 g para-tolueeni- sulfonyylikloridia 25 ml:ssa pyridiiniä, lisätään liuokseen, jossa on 5,8 g 1-metyyli-(3RS)-3-piperidinolia 25 ml:ssa pyridiiniä ja joka on jäähdytetty 0 °C:seen, ja saatua seosta sekoitetaan ensin 2 tunnin ajan 5° - 10 °C:s-15 sa ja sitten 12 tunnin ajan noin 20 °C:ssa. Seokseen lisätään 7,1 ml trietyyliamiinia pitäen lisäyksen ajan lämpötila 20 °C:een vaiheilla. Reaktioseos kaadetaan 150 ml:aan tislattua vettä ja seokseen lisätään 150 ml etyyliasetaattia; vesifaasi dekantoidaan eroon ja pestään kaikkiaan 20 100 ml:11a etyyliasetaattia. Saadut orgaaniset faasit yh distetään ja pestään 2 kertaan kaikkiaan 80 ml:11a tislattua vettä, kuivataan kidevedettömällä magnesiumsulfaatilla ja haihdutetaan kuiviin alipaineessa (20 mmHg; 2,7 kPa) noin 45 °C:een lämpötilassa. Näin saadaan 8,8 g 1-metyyli-25 (3RS)-3-piperidyyli-para-tolueenisulfonaattia punaisena öljynä [Rf « 0,72; ohutlevykromatografia-ajo silikageelis-sä; eluentti asetonitriili-ammoniakki (d * 0,92) (tilavuussuhde 95:5)].

Esimerkki 25 30 Liuokseen, jossa on 2,2 g (+)-N-[3-(o-hydroksi- : ; iminobentsyyli ) fenyyli]-3-(3-pyridyyli )-lH, 3H-pyrrolo- [1,2-c]tiatsoli-7-karboksamidia (E- ja Z-muotojen seoksena) 20 ml:ssa vedetöntä Ν,Ν-dimetyyliformamidia, lisätään ympäristön lämpötilassa typpisuojakaasussa ja samalla se-35 koittaen 0,29 g natriumhydridiä (50-%:isena dispersiona parafiiniöljyssä). Seosta sekoitetaan 45 minuutin ajan 62 92069 ympäristön lämpötilassa, minkä jälkeen siihen lisätään noin 1 minuutin aikana liuos, jossa on 0,75 g N,N-dietyy-liklooriasetamidia 5 ml:ssa vedetöntä N,N-dimetyyliform-amidia, ja sekoittamista ympäristön lämpötilassa jatke-5 taan 15 tunnin ajan, minkä jälkeen liuotin poistetaan haihduttamalla kuiviin alipaineessa (0,1 mmHg; 13,5 Pa) noin 60 °C:een lämpötilassa. Jäännöstä laimennetaan lisäämällä 30 ml asetonia ja liukenematon aines suodatetaan eroon ja pestään kaikkiaan 20 ml:11a asetonia. Suodos 10 haihdutetaan kuiviin alipaineessa (20 mmHg; 2,7 kPa) noin 40 °C:ssa, jolloin saadaan 3,4 g oranssiin vivahtavaa tuotetta, jolla suoritetaan kromatografia-ajo kolonnissa, jonka halkaisija on 3 cm ja joka sisältää noin 150 g si-likageeliä (0,02 - 0,045 mm). Eluoinnissa käytetään etyy-15 liasetaattia 0,5 baarin (51 kPa) paineessa ja kerätään 30 ml:n fraktioita. Ensimmäiset 18 fraktiota heitetään pois ja 13 seuraavaa yhdistetään ja haihdutetaan kuiviin alipaineessa (20 mmHg; 2,7 kPa) noin 45 °C:ssa. Saadut 2,15 g tuotetta liuotetaan 6 ml:aan asetonitriiliä ja 20 liuokseen lisätään 2,9 ml kloorivedyn 4 N liuosta eetterissä. Seosta sekoitetaan 15 minuutin ajan ympäristön lämpötilassa, minkä jälkeen saadut kiteet suodatetaan eroon, pestään 2 kertaan kaikkiaan 20 ml:11a dietyylieetteriä ja kuivataan sitten alipaineessa (0,1 mmHg; 13,5 Pa) noin 25 20 °C:ssa. Näin saadaan 2 g (+) -N-{3 - [a- (dietyylikarbamoyy- limetoksi-imino)bentsyyll]fenyyli}-3-(3-pyridyyli)-lH,3H-pyrrolo[1,2-c]tiatsoli-7-karboksamidi-dihydrokloridia E-ja Z-isomeerien seoksen muodossa valkeina kiteinä, joiden sulamispiste on 135 °C.

30 (+)-N-[3-(α-hydroksi-iminobentsyyli)fenyyli]-3-(3- pyridyyli)-lH,3H-pyrrolo[1,2-c]tiatsoli-7-karboksamidi (E- ja Z-isomeerien seos) saadaan kuten kuvattu esimerkissä 1.

Esimerkki 26 35 Liuokseen, jossa on 2,2 g (+)-N-[3-(a-hydroksi- iminobentsyyli )fenyyli] -3-( 3-pyridyyli )-lH, 3H-pyrrolo- 63 92069 [1,2-c]tiatsoli-7-karboksamidia (E- ja Z-muotojen seoksena) 20 ml:ssa vedetöntä N,N-dimetyyliformamidia, lisätään ympäristön lämpötilassa typpisuojakaasussa ja samalla sekoittaen 0,5 g natriumhydridiä (60-%:isena dispersiona 5 parafiiniöljyssä). Lietettä sekoitetaan tunnin ajan ympäristön lämpötilassa, minkä jälkeen siihen lisätään 0,72 g 4-(2-kloorietyyliJmorfoliini-hydrokloridia. Seosta sekoitetaan 15 tunnin ajan ympäristön lämpötilassa, minkä jälkeen liuotin poistetaan haihduttamalla kuiviin alipainees-10 sa (0,1 mmHg; 13,5 Pa) noin 45 °C:een lämpötilassa. Saadaan 3,8 g oranssin väristä tahnaista jäännöstä, jolla suoritetaan kromatografia-ajo kolonnissa, jonka halkaisija on 3 cm ja joka sisältää noin 65 g silikageeliä (0,02 -0,045 mm). Eluoinnissa käytetään etyyliasetaattia 0,5 15 baarin (51 kPa) paineessa ja kerätään 50 ml:n fraktioita. Ensimmäiset 7 fraktiota heitetään pois ja 43 seuraavaa yhdistetään ja haihdutetaan kuiviin alipaineessa (20 mmHg; 2,7 kPa) noin 40 °C;ssa. Jäännöksellä (1,8 g) suoritetaan toinen kromatografia-ajo kolonnissa, jonka halkaisija on 20 3 cm ja joka sisältää 65 g silikageeliä (0,02 - 0,045 mm).

Eluoinnissa käytetään etyyliasetaattia 0,5 baarin (51 kPa) paineessa ja kerätään 150 ml:n fraktioita. Ensimmäiset 15 fraktiota heitetään pois ja 21 seuraavaa yhdistetään ja haihdutetaan kuiviin alipaineessa (20 mmHg; 2,7 kPa) noin 25 40 °C:ssa. Saatu marenki (1,4 g) liuotetaan 40 mitään etyy liasetaattia ja liuokseen lisätään 2 ml kloorivedyn 4 N liuosta eetterissä. Saadut kiteet suodatetaan eroon ja pestään toisiaan seuraten 15 ml:11a etyyliasetaattia ja 20 ml:11a dietyylieetteriä sekä kuivataan sitten alipai-30 neessa (0,1 mmHg; 13,5 Pa) noin 60 °C:ssa. Saatu valkea : jäännös (1,4 g) liuotetaan 10 ml:aan tislattua vettä ja liuokseen lisätään 10 ml 10-%:ista natriumkarbonaatti-liuosta, minkä jälkeen saatua liuosta uutetaan 3 kertaan kaikkiaan 50 ml:11a etyyliasetaattia. Saadut orgaaniset 35 faasit yhdistetään ja pestään 40 ml:11a tislattua vettä, kuivataan kidevedettömällä magnesiumsulfaatilla, niihin 92069 64 lisätään 0,2 g valkaisuhiiltä, ne suodatetaan ja haihdutetaan kuiviin alipaineessa (20 mmHg; 2,7 kPa) noin 35 °C:een lämpötilassa. Näin saadaan 0,95 g vaalean keltaista maren-kia, jolla suoritetaan kromatografia-ajo kolonnissa, jonka 5 halkaisija on 1,7 cm ja joka sisältää 30 g neutraalia alu-miniumoksidia, jonka aktiivisuutta on alennettu käyttämällä 10 % vettä (0,032 - 0,063 mm). Eluoinnissa käytetään 200 ml etyyliasetaattia ja 210 ml etyyliasetaatin ja meta-nolin seosta (tilavuus-) suhteessa 95:5 0,5 baarin 10 (51 kPa) paineessa ja kerätään 10 ml:n fraktioita. Ensim mäiset 21 fraktiota heitetään pois ja 25 seuraavaa yhdistetään ja haihdutetaan kuiviin alipaineessa (20 mmHg; 2,7 kPa) noin 40 °C:ssa. Jäännös (0,55 g) liuotetaan 2 ml:aan etyyliasetaattia ja saatuun liuokseen lisätään 15 0,58 ml kloorivedyn 3,9 N liuosta eetterissä, 2 ml etyyli asetaattia ja 5 ml dietyylieetteriä. Seosta sekoitetaan 5 minuutin ajan noin 20 °C:ssa, minkä jälkeen saadut kiteet suodatetaan eroon, pestään 2 ml:11a etyyliasetaattia ja 5 ml:11a dietyylieetteriä sekä kuivataan alipaineessa 20 (0,1 mmHg; 13,5 kPa) noin 60 °C:ssa. Näin saadaan 0,58 g (+ )-N-(3-[q-( 2-morfolinoetoksi-imino )bentsyyli] fenyyli}- 3-( 3-pyridyyli)-lH,3H-pyrrolo[l,2-c]tiatsoli-7-karboks-amidi-dihydrokloridia E- ja Z-muotojen seoksena, jonka sulamispiste on 163 °C.

25 (+)-N-[3-(a-hydroksi-iminobentsyyli)fenyyli]-3-(3- pyridyyli)-lH,3H-pyrrolo[1,2-c]tiatsoli-7-karboksamidi saadaan kuten kuvattu esimerkissä 1.

Esimerkki 27

Liuokseen, jossa on 1 g (+)-N-[3-(c-hydroksi-imino-30 bentsyyli) f enyyli] -3-(3-pyridyyli )-lH, 3H-pyrrolo[l, 2-c] - tiatsoli-7-karboksamidia (E- ja z-muotojen seoksena) 7,4 ml:ssa vedetöntä Ν,Ν-dimetyyliformamidia, lisätään ympäristön lämpötilassa typpisuojakaasussa ja samalla sekoittaen 0,12 g natriumhydridiä (50-%:isena dispersiona 35 parafiiniöljyssä). Sitten lisätään noin 5 minuutin aikana liuos, jossa on 0,67 g l-metyyli-4-piperidyyli-para-to- 65 92069 lueenisulfonaattia 6,7 mlzssa vedetöntä Ν,Ν-dimetyyliform-amidia. Liuosta sekoitetaan 15 tunnin ajan ympäristön lämpötilassa, minkä jälkeen lisätään vielä 0,14 g 1-metyyli- 4-piperidyyli-para-tolueenisulfonaattia ja jatketaan se-5 koittamista edelleen 3 tunnin ajan. Tämä menettely toistetaan 3 kertaan, minkä jälkeen reaktioseosta laimennetaan lisäämällä 100 ml tislattua vettä. Sitten sekoitetaan 15 minuutin ajan ympäristön lämpötilassa, minkä jälkeen kiinteä aine suodatetaan eroon ja pestään 2 kertaan kaikkiaan 10 40 ml:11a tislattua vettä. Jäännös liuotetaan 50 ml:aan etyyliasetaattia ja liuokseen lisätään 46 ml 0,1 N kloori-vetyhappoa. Vesifaasi dekantoidaan eroon ja tehdään alka-liseksi lisäämällä 5 ml natriumhydroksidiliuosta (d 1,33). Seosta sekoitetaan 2 tunnin ajan ympäristön lämpö-15 tilassa, minkä jälkeen saadut kiteet suodatetaan eroon ja pestään kaikkiaan 20 ml:11a tislattua vettä. Näin saadaan 0,82 g (+ )-N-{3-(g-[(1-metyyli-4-piperidyyli)oksi-imino]-bentsyyli}fenyyli}-3-( 3-pyridyyli) -1H, 3H-pyrrolo[ 1,2-c] -tiatsoli-7-karboksamidia (E- ja Z-muotojen seoksena) ker-20 man värisenä jauheena [R, = 0,33; ohutlevykromatografia-ajo? eluentti asetonitriili-ammoniakki (d = 0,92) (tilavuussuhde 95:5)].

(+)-N-[3-(a-hydroksi-iminobentsyyli)fenyyli]-3-(3-pyridyyli )-lH, 3H-pyrrolo[l, 2-c] tiatsoli-7-karboksamidi * 25 saadaan kuten kuvattu esimerkissä 1.

• i l-metyyli-4-piperidyyli-para-tolueenisulfonaatti voidaan saada seuraavasti: noin 1,5 tunnin aikana 19,60 g para-tolueenisulfonyylikloridia lisätään liuokseen, jossa on 11,50 g 4-hydroksi-l-metyylipiperidiiniä 50 ml:ssa py-30 ridiiniä ja joka on jäähdytetty 0 °C:seen, ja seosta se-koitetaan ensin 4 tunnin ajan 0 °C:ssa ja sitten 12 tunnin ajan noin 20 °C:ssa. Sitten lisätään 14,10 g trietyyliamii-nia ja sekoitetaan vielä 15 minuuttia, minkä jälkeen lisätään 300 mltislattua vettä ja 300 ml etyyliasetaattia. Ve-35 sifaasi dekantoidaan eroon ja pestään 200 ml:11a etyyliasetaattia. Saadut orgaaniset uutteet yhdistetään, pestään 66 92069 kaikkiaan 500 ml:11a tislattua vettä, kuivataan kidevedet-tömällä magnesiumsulfaatilla sekä haihdutetaan kuiviin alipaineessa (20 mmHg? 2,7 kPa) noin 45 °C:ssa. Pyridiini-jäämät poistetaan tehokkaammassa alipaineessa (0,1 mmHg; 5 13,5 Pa), jolloin saadaan 19,6 g l-metyyli-4-piperidyyli- para-tolueenisulfonaattia ruskeana öljynä. [Rf « 0,56; ohutlevykromatografia-aj o silikageelissä; eluentti asetoni triili-ammoniakki (d = 0,92) (tilavuussuhde 95:5)].

Esimerkki 28 10 Liuokseen, jossa on 3,5 g 0-[3-(4-metyyli-l-piper- atsinyyli)propyyli]-3-aminobentsofenoni-(Z)-oksiimia 45 ml:ssa dikloorimetaania, lisätään toisiaan seuraten noin 5 minuutin aikana 3,3 g 7-klooriformyyli-3-(3-pyri-dyyli)-lH,3H-pyrrolo[l,2-c]tiatsoli-hydrokloridia ja sen 15 jälkeen 2,3 ml trietyyliamiinia ja seosta sekoitetaan ympäristön lämpötilassa 12 tunnin ajan. Seokseen lisätään vielä 0,6 g 7-klooriformyyli-3-(3-pyridyyli)-lH,3H-pyrro-lo[l,2-c]tiatsoli-hydrokloridia ja 0,6 g trietyyliamiinia, minkä jälkeen sitä sekoitetaan edelleen tunnin ajan ja 20 poistetaan sitten liuotin haihduttamalla kuiviin alipaineessa (20 mmHg; 2,7 kPa) noin 35 °C:ssa. Saatuun jäännökseen lisätään 50 ml tislattua vettä ja 50 ml etyyliasetaattia; orgaaninen faasi dekantoidaan eroon, pestään kaikkiaan 35 ml:11a tislattua vettä, kuivataan kidevedet-,: 25 tömällä magnesiumsulfaatilla ja haihdutetaan kuiviin ali paineessa (20 mmHg; 2,7 kPa) noin 40 °C:ssa. Jäännöksellä (6,6 g) suoritetaan kromatografia-ajo kolonnissa, jonka halkaisija on 6 cm ja joka sisältää noin 400 g silikagee-liä (0,063 - 0,200 mm), jolloin eluoinnissa käytetään seu-30 raavaa gradienttia: 280 ml asetonitriilin ja ammoniakin (d - 0,92) seosta, tilavuussuhde 99:1; tämä fraktio heitetään pois; 350 ml seosta 95:5 ja 280 ml asetonitriilin ja ammoniakin seosta 90:10. Viimemainitut kaksi fraktiota yhdistetään ja haihdutetaan kuiviin alipaineessa (20 mmHg; 35 2,7 kPa) noin 50 °C:ssa. Saatu kerman värinen marenki (4,6 g) liuotetaan 60 ml:aan etyyliasetaattia ja liuokseen 67 92069 lisätään 0,5 g valkaisuhiiltä, se suodatetaan ja suodok-seen lisätään 4,8 ml kloorivedyn 3,25 N liuosta eetterissä. Seosta sekoitetaan 30 minuutin ajan ympäristön lämpötilassa, minkä jälkeen saadut kiteet suodatetaan eroon, 5 pestään kaikkiaan 100 ml:11a etyyliasetaattia ja kuivataan alipaineessa (0,1 mmHg; 13,5 Pa) noin 50 °C:ssa. Näin saadaan 4,8 g (+ )-N-{3-{g-[3-(4-metyyll-l-piperatsinyyli)pro-poksl-imino]bentsyyli}fenyyli>-3-(3-pyridyyli)-!H,3H-pyr-rolo[l,2-c]tiatsoli-7-karboksamidi-dihydrokloridia muoto-10 na B, jonka sulamispiste on 168 °C.

7-kloroformyyli-3-(3-pyridyyli)-lH,3H-pyrrolo-[1,2-c]tiatsoli-hydrokloridi valmistetaan kuten kuvattu EP-patenttijulkaisussa nro 115 979.

O- [ 3— (4-metyyli-l-piperatsinyyli Jpropyyli] -3-ami-15 nobentsofenoni-(Z)-oksiimi valmistetaan seuraavasti: liuos, jossa on 5 g 3-aminobentsofenoni-(Z)-oksiimia 35 ml:ssa vedetöntä Ν,Ν-dimetyyliformamidia, lisätään noin 15 minuutin aikana lietteeseen, jossa on 1,14 g natrium-hydridiä (50-%:isena dispersiona parafiiniöljyssä) 20 35 ml:ssa vedetöntä N,N-dimetyyliformamidia. Seosta sekoi tetaan 15 minuutin ajan ympäristön lämpötilassa, minkä jälkeen siihen lisätään 5 minuutin aikana noin 2 °C:een lämpötilassa liuos, jossa on 4,17 g l-(3-klooripropyyli)- 4-metyylipiperatsiinia 35 ml:ssa vedetöntä N,N-dimetyyli-25 formamidia. Seosta sekoitetaan 12 tunnin ajan ympäristön lämpötilassa, minkä jälkeen liuotin poistetaan haihduttamalla kuiviin alipaineessa (0,1 mmHg; 13,5 Pa) noin 50 °C:ssa. Saatua jäännöstä laimennetaan lisäämällä 50 ml etyyliasetaattia, mineraalisuolat suodatetaan eroon, pes-30 tään kaikkiaan 50 ml:11a etyyliasetaattia ja yhdistetyt "j suodokset haihdutetaan kuiviin alipaineessa (20 mmHg; 2,7 kPa) noin 45 °C:ssa. Näin saadaan 9,2 g 0-[3-(4-metyy-li-l-piperatsinyyli Jpropyyli]-3-aminobentsofenoni-(Z)-ok-siimia oranssiin vivahtavana öljynä [Rf 0,23; ohutlevy-35 kromatografia-ajo silikageelissä; eluentti etyyliasetaat-ti-dietyyliamiini (tilavuussuhde 95:5)].

/ . t .

68 92069 3-aminobentsofenoni-(Z)-oksiimi voidaan valmistaa seuraavasti: liuosta, jossa on 32 g 3-aminobentsofenonia ja 22,6 g hydroksyyliamiini-hydrokloridia 600 ml:ssa py-ridiiniä, keitetään palautusjäähdyttäen 4 tunnin ajan, 5 minkä jälkeen liuotin poistetaan haihduttamalla kuiviin alipaineessa (20 mmHg; 2,7 kPa) noin 50 °C:ssa. Sitten jäännöstä laimennetaan lisäämällä 400 ml tislattua vettä ja kiteytyminen saatetaan alkuun. Kun seosta on sekoitettu 2 tunnin ajan ympäristön lämpötilassa, saadut kiteet 10 suodatetaan eroon ja pestään kaikkiaan 1 litralla tislattua vettä. Näin saadaan 35,4 g 3-aminobentsofenonioksii-mia (E- ja Z-muotojen seoksena) vaalean ruskeana jauheena. Yhdistetään kolme 11,8 g:n fraktiota, ja suoritetaan kromatografia-ajo kolonnissa, jonka halkaisija on 7 cm ja 15 joka sisältää 600 g silikageeliä (0,02 - 0,045 mm), jolloin eluoinnissa käytetään metyleenikloridin ja etyyliasetaatin seosta (tilavuussuhteessa 80:20) 0,5 baarin (51 kPa) paineessa ja kerätään 100 ml:n fraktioita. Ensimmäiset 19 fraktiota heitetään pois. Seuraavat kahdeksan, 20 Z-muotoa vastaavat fraktiot kerätään talteen, seuraavat 13, jotka edustavat E- ja Z-muotojen seoksia, heitetään pois, ja viimeiset 26 yhdistetään E-muodon suhteen rikastetun erän saamiseksi. Kyseiset kaksi erää haihdutetaan kuiviin tahollaan alipaineessa (20 mmHg; 2,7 kPa) noin 25 40 °C:ssa. Saadaan 11,2 ja vastaavasti 9,5 g tuotetta. Kum- * pikin tuote tahollaan lietetään 50 ml:aan di-isopropyyli-oksidia, saadut kiteet suodatetaan eroon, pestään kaikkiaan 20 ml:11a di-isopropyylioksidia ja kuivataan alipaineessa (20 mmHg; 2,7 kPa) noin 20 °C:ssa. Näin saadaan 30 10,43 g 3-aminobentsofenoni-(Z)-oksiimia ja 5,7 g seosta, : joka on 80-%:isesti rikastettu 3-aminobentsofenonioksiimin E-muodon suhteen ja jota käytetään edelleen sellaisenaan.

Esimerkki 29

Liuokseen, jossa on 2,9 g 0-[3-(4-metyyli-l-piper-35 atsinyyli)propyyli]-3-aminobentsofenoni-oksiimin E-muotoa (puhtausaste 80 %) 30 ml:ssa dikloorimetaania, lisätään I .

' Γ. ' 69 92069 toisiaan seuraten noin 5 minuutin aikana 3,5 g 7-kloro-formyyli-3-(3-pyridyyli)-lH,3H-pyrrolo[l,2-c]tiatsoli-hydrokloridia ja sen jälkeen 3,0 ml trietyyliamiinia, ja seosta sekoitetaan ympäristön lämpötilassa 1,5 tunnin 5 ajan. Lisätään vielä 0,25 g 7-kloroformyyli-3-(3-pyridyy-li)-1H,3H-pyrrolo[1,2-c]tiatsoli-hydrokloridia, minkä jälkeen liuosta sekoitetaan edelleen 2 tunnin ja 15 minuutin ajan ja laimennetaan sitten lisäämällä 30 ml tislattua vettä. Orgaaninen faasi dekantoidaan eroon, pes-10 tään kaikkiaan 60 ml:11a tislattua vettä, kuivataan kide-vedettömällä magnesiumsulfaatilla ja haihdutetaan kuiviin alipaineessa (20 mmHg; 2,7 kPa). Saadulla 4,1 g:11a vaalean ruskeaa marenkia suoritetaan kromatografia-ajo kolonnissa, jonka halkaisija on 6 cm ja joka sisältää noin 15 400 g silikageeliä (0,02 - 0,045 mm), jolloin eluoinnissa käytetään etyyliasetaatin ja dietyyliamiinin seosta (tilavuussuhteessa 95:5) 0,5 baarin (51 kPa) paineessa ja kerätään 100 ml:n fraktioita. Ensimmäiset 25 fraktiota heitetään pois ja 30 seuraavaa fraktiota yhdistetään ja haih-20 dutetaan kuiviin alipaineessa (20 mmHg; 2,7 kPa) noin 40 °C:ssa. Saadaan 2,9 g marenkia, joka lietetään 120 ml:aan etyyliasetaattia, ja saatua lietettä keitetään palautusjäähdyttäen kunnes liukeneminen on täydellinen, minkä jälkeen liete jäähdytetään noin 25 °C:seen. Tähän 25 liuokseen lisätään 3,0 ml kloorivedyn 3,25 M liuosta eetterissä ja sekoitetaan noin 5 °C:ssa 30 minuutin ajan. Saadut kiteet suodatetaan eroon, pestään 25 ml:11a etyyliasetaattia ja 50 ml:11a dietyylieetteriä sekä kuivataan alipaineessa (0,1 mmHg; 13,5 Pa) noin 50 °C:ssa. Näin saa-30 daan 2,6 g (+ )-N-{3-{g- [3- (4-metyyli-1 -piperatsinyy-: li)propoksi-imino]bentsyyli}fenyyli}-3-(3-pyridyyll)-lH,- 3H-pyrrolo[l, 2-c]tiatsoli-7-karboksamidi-dihydrokloridin muotoa A, jonka sulamispiste on 160 °C.

7-kloroformyyli-3-(3-pyridyyli)-lH,3H-pyrrolo-35 [1,2-c]tiatsoli-hydrokloridi valmistetaan menetelmän mu kaan, jota kuvataan EP-patenttijulkaisussa nro 0 115 979.

70 92069 0- [3-( 4-metyyli-l-piperatsinyyli )propyyli] -3-ami-nobentsofenoni-(E)-oksiimi voidaan valmistaa seuraavasti: liuokseen, jossa on 3,2 g 3-aminobentsofenoni-(E)-oksii-mia 20 ml:ssa vedetöntä Ν,Ν-dimetyyliformamidia, lisätään 5 ympäristön lämpötilassa typpisuojakaasussa ja samalla sekoittaen 0,7 g natriumhydridiä (60-%:isena dispersiona parafiiniöljyssä). Seosta sekoitetaan tunnin ajan, minkä jälkeen siihen lisätään noin 15 minuutin aikana liuos, jossa on 2,7 g l-(3-klooripropyyli)-4-metyylipiperatsii-10 nia 20 ml:ssa vedetöntä Ν,Ν-dimetyyliformamidia. Kun seosta on sekoitettu 1 tunnin ja 15 minuutin ajan ympäristön lämpötilassa, liuotin poistetaan haihduttamalla kuiviin alipaineessa (0,1 nunHg; 13,5 Pa) noin 50 °C:ssa. Jäännös lietetään 50 ml:aan etyyliasetaattia; mineraali-15 suolat suodatetaan eroon, pestään 50 ml:11a etyyliasetaattia ja liuotin poistetaan haihduttamalla kuiviin alipaineessa (20 mmHg; 2,7 kPa) noin 35 °C:ssa. Jäännöstä laimennetaan lisäämällä 40 ml etyyliasetaattia ja uutetaan 3 kertaan kaikkiaan 40 ml:11a 1 N kloorivetyhappoa, 20 minkä jälkeen saadut vesifaasit yhdistetään, pH säädetään 8:ksi lisäämällä 2 N natriumhydroksidiliuosta ja seosta uutetaan 2 kertaan kaikkiaan 50 ml:11a etyyliasetaattia. Saadut orgaaniset uutteet yhdistetään, kuivataan kideve-dettömällä magnesiumsulfaatilla, suodatetaan ja haihdute-; 25 taan kuiviin alipaineessa (20 mmHg; 2,7 kPa) noin 4 40 °C:ssa. Saadulla 4,5 g:11a oranssin väristä öljyä suoritetaan kromatografia-ajo kolonnissa, jonka halkaisija on 6 cm ja joka sisältää noin 500 g silikageeliä (0,02 -0,045 mm), jolloin eluoinnissa käytetään etyyliasetaatin 30 ja dietyyliamiinin seosta (tilavuussuhteessa 95:5) 0,5 * baarin (51 kPa) paineessa ja kerätään 80 ml:n fraktioita.

Ensimmäiset 16 fraktiota heitetään pois ja 16 seuraavaa fraktiota yhdistetään ja haihdutetaan kuiviin alipaineessa (20 mmHg; 2,7 kPa) noin 40 °C:ssa. Näin saadaan 3,8 g 0-35 [3-(4-metyyli-l-piperatsinyyli)propyyli]-3-aminobentsofe- noni-(E)-oksiimia oranssiin vivahtavana öljynä [Rf - 0,32; 71 92069 ohutlevykromatografia-ajo silikageelissä; eluenttl etyyli-asetaattl-dietyyliamiini (tilavuussuhde 95:5)].

3-Aminobentsofenonioksiimi, joka on 80-%:iin rikastettu E-muodon suhteen, saadaan kuten edellä kuvattu.

5 Esimerkki 30

Yhdellä grammalla (1 g) (+)-N-{3-{a-[(l-metyyli-4-piperidyyli )oksi-imino]bentsyyli}fenyyli}-3- (3-pyridyyli)-1H,3H-pyrrolo[1,2-c]tiatsoli-7-karboksamidia, E- ja Z-muo-tojen seoksena, suoritetaan kromatografia-ajo kolonnissa, 10 jonka halkaisija on 4 cm ja joka sisältää noin 100 g sili-kageeliä (0,02 - 0,045 mm). Eluoinnissa käytetään dietyy-lieetterin ja dietyyliamiinin seosta (tilavuussuhteessa 85:15) 0,2 baarin (20 kPa) paineessa ja kerätään 25 ml:n fraktioita. Ensimmäiset 20 fraktiota heitetään pois. Seu-15 raavat 11 fraktiota, jotka vastaavat eluoidun oksiimin ensimmäistä, A:ksi nimettyä muotoa, yhdistetään, samoin kuin 15 seuraavaa fraktiota, jotka vastaavat seosta, joka on 70-%:isesti rikastettu oksiimin toisen, B:ksi nimetyn muodon suhteen. Liuotin alipaineessa (20 mmHg; 2,7 kPa) 20 haihduttamalla noin 40 °C:ssa saadaan 0,4 g muotoa A ja vastaavasti 0,6 g B-muodon suhteen rikastettua seosta.

Esimerkki 31

Muoto A (0,4 g) liuotetaan 1 ml:aan vedetöntä etanolia, liuos suodatetaan ja suodokseen lisätään toisiaan 25 seuraten 0,9 ml kloorivedyn 0,4 N liuosta eetterissä, 3 ml etyyliasetaattia, 0,9 ml kloorivedyn 0,4 N liuosta eetterissä ja 5 ml dietyylieetteriä. Seosta sekoitetaan 3 tunnin ajan ympäristön lämpötilassa, minkä jälkeen saadut kiteet suodatetaan eroon ja kuivataan alipaineessa 30 (0,1 mmHg; 13,5 Pa) noin 20 °C:ssa. Saadaan 0,18 g (+ )-N- .: {3-{q- [ (l-metyyli-4-piperidyyli )oksi-imino] bentsyyli }f e- nyyli}-3-(3-pyridyyli )-lH, 3H-pyrrolo[l, 2-c] tiatsoli-7-karboksamidi-dihydrokloridia muotona A, jonka sulamispiste on 175 - 180 °C.

72 92069

Esimerkki 32

Tuotteella, joka on 70-%:isesti rikastettu muodon B suhteen (0,6 g), suoritetaan toinen kromatografia-ajo kolonnissa, jonka halkaisija on 4 cm ja joka sisältää noin 5 150 g silikageeliä (0,02 - 0,045 mm). Eluoinnissa käyte tään dietyylieetterin ja dietyyliamiinin seosta (tilavuus-suhteessa 85:15) 0,2 baarin (20 kPa) paineessa ja kerätään 25 ml:n fraktioita. Ensimmäiset 20 fraktiota heitetään pois ja 18 seuraavaa yhdistetään ja haihdutetaan kuiviin 10 alipaineessa (20 mmHg; 2,7 kPa) noin 40 °C:ssa. Näin saadaan 0,39 g muotoa B puhtaana, ja se liuotetaan 2 ml:aan vedetöntä etanolia, liuokseen lisätään 0,1 g valkaisuhiil-tä, se suodatetaan ja lisätään 2 ml vedetöntä etanolia ja 10 ml etyyliasetaattia. Sitten lisätään samalla sekoittaen 15 0,18 ml kloorivedyn 4 N liuosta eetterissä, minkä jälkeen kun on kulunut tunti ympäristön lämpötilassa, saadut kiteet suodatetaan eroon ja kuivataan alipaineessa (0,1 mmHg; 13,5 Pa) noin 20 °C:ssa. Saadaan 0,31 g (+ )-N-{3-{g-[ (l-metyyli-4-piperidyyli )oksi-imino]bentsyyli}fe-20 nyyll}-3- (3-pyrldyyli) -1H, 3H-pyrrolo [ 1,2-c] tiatsoli-7-kar- boksamldi-monohydroklorldia muotona B, jonka sulamispiste on 264 °C.

Esimerkki 33 11,8 g (+)-N-{3-{a-[(l-metyyli-4-piperidyyli)oksi-.. 25 imino]bentsyyli}fenyyli}-3-(3-pyridyyli)-lH,3H-pyrrolo- [1,2-c]tiatsoli-7-karboksamidia (E- ja Z-muotojen seoksena) liuotetaan 55 ml:aan vedetöntä etanolia, ja liuokseen lisätään 6 ml kloorivedyn 3,65 M liuosta eetterissä. Seosta sekoitetaan 2 tunnin ajan ympäristön lämpötilassa, min-30 kä jälkeen saadut kiteet suodatetaan eroon ja kuivataan ·* alipaineessa (0,1 mmHg; 13,5 Pa) noin 20 °C:ssa. Saadaan 8,0 g tuotteen monohydrokloridia, joka on 85 %:iin rikastunut muodon B suhteen. Suodos haihdutetaan kuiviin alipaineessa (20 mmHg; 2,7 kPa) noin 40 °C:ssa. Saadaan 73 92069 4,9 g punaruskeaa öljyä, joka on 90 %:iin rikastunut muodon A suhteen.

Kiinteä aine (valtaosin muotoa B) lietetään 100 ml:aan vedetöntä etanolia ja lietettä keitetään palau-5 tusjäähdyttäen 5 minuutin ajan, minkä jälkeen lämpötila lasketaan 20 °C:seen. Saadut kiteet suodatetaan eroon ja kuivataan alipaineessa (0,1 mmHg; 13,5 Pa) noin 20 °C:ssa. Saadaan 6,6 g puhdasta muotoa B monohydrokloridina. Suo-dos haihdutetaan kuiviin alipaineessa (20 mmHg; 2,7 kPa) 10 noin 40 °C:ssa, jolloin saadaan 3,7 g keltaista marenkia, jota käytetään oksiimin A-muodon valmistuksessa. Saatuihin 6,6 g:aan puhdasta B-muoto-monohydrokloridia lisätään siten 25 ml asetonia ja sen jälkeen 14 ml 1 N natriumhyd-roksidiliuosta ja seosta uutetaan kaikkiaan 50 ml:11a 15 etyyliasetaattia. Saatuja orgaanisia uutteita pestään tislatulla vedellä kunnes ne ovat neutraaleja, ne kuivataan kidevedettömällä magnesiumsulfaatilla ja haihdutetaan kuiviin alipaineessa (20 mmHg; 2,7 kPa) noin 40 °C:ssa. Saadaan 6,2 g valkoista marenkia. 4 g tuotetta liuotetaan 20 140 ml:aan asetonitriiliä ja liuokseen lisätään 7,4 ml rikkihapon 1 M liuosta etanolissa. Seosta sekoitetaan 15 minuutin ajan ympäristön lämpötilassa, minkä jälkeen muodostuneet kiteet suodatetaan eroon, pestään 20 ml:11a asetonitriiliä ja 40 ml:11a dietyylieetteriä ja kuivataan 25 alipaineessa (0,1 mmHg; 13,5 Pa) noin 20 °C:ssa. Näin saadaan 3,5 g ( + )-N-{3-{a-[(l-metyyli-4-piperidyyli)oksl-imi-no]bentsyyli}fenyyli}-3-(3-pyridyyli)-lH,3H-pyrrolo-[1,2-c]tiatsoll-7-karboksamidin muotoa B happamana sulfaattina, jonka sulamispiste on 145 °C.

30 Toisaalta saadut 4,9 öljyä (90-%:isesti muotoa A) ·* lietetään 35 ml:aan asetonia ja lietteeseen lisätään 20 ml 1 N natriumhydroksidiliuosta. Vesifaasi uutetaan 2 kertaan kaikkiaan 100 ml:11a etyyliasetaattia. Saadut orgaaniset uutteet yhdistetään, niitä pestään tislatulla vedellä kun-35 nes neutraaleja, ne kuivataan kidevedettömällä magnesium- 74 92069 sulfaatilla, suodatetaan ja haihdutetaan kuiviin alipaineessa (20 mmHg; 2,7 kPa) noin 45 °C:ssa. Näin saadaan 4,85 g tahnaista oranssin väristä jäännöstä. Tällä tuotteella suoritetaan kromatografia-ajo kolonnissa, jonka 5 halkaisija on 6 cm ja joka sisältää noin 500 g silikagee-liä (0,02 - 0,045 mm). Eluoinnissa käytetään dietyylieet-terin ja dietyyliamiinin seosta (tilavuussuhteessa 85:15) 0,5 baarin (51 kPa) paineessa ja kerätään 100 ml:n fraktioita. Ensimmäiset 33 fraktiota heitetään pois ja 19 seu-10 raavaa, jotka koostuvat puhtaasta muodosta A, yhdistetään yhdeksi eräksi; viimeiset 17 fraktiota, jotka ovat rikastuneet muodon A suhteen, muodostavat toisen erän. Liuotin poistetaan haihduttamalla kuiviin alipaineessa (20 mmHg; 2,7 kPa) noin 40 °C:ssa. Näin saadaan 2,0 g muotoa A puh-15 taana ja 1,5 g tuotetta, jossa A on pääkomponenttina.

Tämä 1,5 g ja edellä B-muodon puhdistuksen yhteydessä saadut 3,7 g marenkia yhdistetään ja niillä suoritetaan kromatografia-ajo kolonnissa, jonka halkaisija on 4 cm ja joka sisältää 150 g silikageeliä (0,043 -20 0,063 mm). Eluoinnissa käytetään dietyylieetterin ja di etyyliamiinin seosta (tilavuussuhteessa 88:12) 0,5 baarin (51 kPa) paineessa ja kerätään 100 ml:n fraktioita. Ensimmäiset 46 fraktiota heitetään pois ja 20 seuraavaa yhdistetään ja haihdutetaan kuiviin alipaineessa (20 mmHg; y 25 2,7 kPa) noin 40 °C:ssa. Näin saadaan 2,5 g muotoa A puh taana .

Tämä erä ja edellä saadut 2 g yhdistetään ja liuotetaan 40 ml:aan etyyliasetaattia ja liuokseen lisätään 0,2 g valkaisuhiiltä. Liuos suodatetaan, minkä jälkeen 30 siihen lisätään 4,1 ml kloorivedyn 3,65 N liuosta eette-·’ rissä ja sekoitetaan noin 20 °C:ssa 15 minuutin ajan. Saa- dut kiteet suodatetaan eroon, pestään toisiaan seuraten 20 ml:11a etyyliasetaattia ja kaikkiaan 20 ml:11a dietyy-lieetteriä sekä kuivataan alipaineessa (0,1 mmHg; 13,5 Pa) 35 noin 20 °C:ssa. Näin saadaan 4,1 g (+ )-N-(3-(a-[(1-metyy- 75 92069 li-4-piperidyyli)oksi-imino]bentsyyli}fenyyli}-3-(3-pyri-dyyli)-lH,3H-pyrrolo[l,2-c]tiatsoli-7-karboksamidia, muoto A, sen dihydrokloridina, jonka sulamispiste on 166 °C.

Esimerkki 34 5 Liuokseen, jossa on 4,1 g 0-(l-metyyli-4-piperidyy- li )-3-aminobentsofenoni-(Z )-oksiimia 50 ml:ssa dikloorime-taania, lisätään samalla sekoittaen 4,8 g 7-kloroformyyli- 3-(3-pyridyyli)-1Η, 3H-pyrrolo [ 1,2-c] tiatsoli-hydrokloridia ja 4,5 ml trietyyliamiinia. Lietettä sekoitetaan 15 tunnin 10 ajan ympäristön lämpötilassa, minkä jälkeen lisätään vielä 0,48 g 7-kloroformyyli-3-(3-pyridyyli)-lH,3H-pyrrolo-[1,2-c]tiatsoli-hydrokloridia. Seosta sekoitetaan tunnin ajan, minkä jälkeen siihen lisätään 50 ml tislattua vettä, orgaaninen faasi dekantoidaan eroon ja pestään kaikkiaan 15 100 ml:11a tislattua vettä. Saadut orgaaniset uutteet kui vataan kidevedettömällä magnesiumsulfaatilla, lisätään valkaisuhiiltä, suodatetaan ja haihdutetaan kuiviin alipaineessa (20 mmHg; 2,7 kPa) noin 45 °C:ssa. Näin saadaan 6,8 g tahnaista oranssin väristä jäännöstä. Tällä tuot-20 teella suoritetaan kromatografia-ajo kolonnissa, jonka halkaisija on 6 cm ja joka sisältää noin 450 g silikagee-liä (0,02 - 0,045 mm). Eluoinnissa käytetään etyyliasetaatin ja dietyyliamiinin seosta (tilavuussuhteessa 95:5) 0,5 baarin (51 kPa) paineessa ja kerätään 100 ml:n fraktioita.

·· 25 Ensimmäiset 16 fraktiota heitetään pois ja 24 seuraavaa yhdistetään ja haihdutetaan kuiviin alipaineessa (20 mmHg; 2.7 kPa) noin 40 cC:ssa. Näin saadaan 4,4 g tuotetta vaalean ruskeana marenkina, johon lisätään 1,7 g toisesta valmistuksesta peräisin olevaa tuotetta, ja suoritetaan 30 toinen kromatografia-ajo kolonnissa, jonka halkaisija on 2.7 cm ja joka sisältää noin 80 g silikageeliä (0,02 -0,045 mm). Eluoinnissa käytetään etyyliasetaatin ja dietyyliamiinin seosta (tilavuussuhteessa 95:5) 0,5 baarin (51 kPa) paineessa ja kerätään 30 ml:n fraktioita. Ensim- 35 mäiset 15 fraktiota heitetään pois ja 35 seuraavaa yhdis-

' (I

76 92069 tetään ja haihdutetaan kuiviin alipaineessa (20 mmHg; 2,7 kPa) noin 40 °C:ssa. Näin saadaan 5,5 g vaalean ruskeaa marenkia, joka liuotetaan 120 ml:aan asetonitriiliä ja liuokseen lisätään 10,2 ml rikkihapon 1 M liuosta etano-5 lissa. Seosta sekoitetaan tunnin ajan ympäristön lämpötilassa, minkä jälkeen muodostuneet kiteet suodatetaan eroon, pestään 50 ml:11a etyylieetteriä ja kuivataan alipaineessa (0,1 mmHg; 13,5 Pa) noin 20 °C:ssa. Saadaan 5,9 g (+)-N-¢3-{a-[(l-metyyli-4-piperidyyli)oksl-imino]-10 bentsyyli}fenyyli}-3-(3-pyridyyli )-lH, 3H-pyrrolo[l, 2-c] -tiatsoli-7-karboksamidia, muoto B, happamana sulfaattina, jonka sulamispiste on 153 °C.

0— (l-metyyli-4-piperidyyli)-3-aminobentsofenoni-(Z)-oksiimi voidaan valmistaa seuraavasti: liuokseen, jos-15 sa on 3,48 g 3-aminobentsofenoni-(Z)-oksiimia 30 ml:ssa vedetöntä Ν,Ν-dimetyyliformamidia, lisätään ympäristön lämpötilassa typpisuojakaasussa ja samalla sekoittaen 0,72 g natriumhydridiä (60-%:isena dispersiona parafiiniöljyssä). Lietettä sekoitetaan ympäristön lämpötilassa 45 20 minuutin ajan, minkä jälkeen siihen lisätään noin 15 minuutin aikana liuos, jossa on 5,4 g l-metyyli-4-piperidyy-li-para-tolueenisulfonaattia 50 ml:ssa vedetöntä Ν,Ν-dimetyyliformamidia. Sitten liuosta sekoitetaan 1 tunnin ja 20 minuutin ajan ympäristön lämpötilassa, minkä jälkeen sii-25 hen lisätään 0,2, 0,3 ja 0,6 g 1-metyyli-4-piperidyyli-para-tolueenisulfonaattia 1, 15 ja vastaavasti 4 tunnin välein. Sitten lisätään 0,14 g natriumhydridiä (60-%:isena dispersiona parafiiniöljyssä) ja liuos, jossa on 1,8 g 1-metyyli-4-piperidyyli-para-tolueenisulfonaattia 5 ml:ssa 30 vedetöntä Ν,Ν-dimetyyliformamidia. Liuosta sekoitetaan 15 tunnin ajan ympäristön lämpötilassa, minkä jälkeen siihen lisätään 300 ml tislattua vettä ja liuosta uutetaan 4 kertaan kaikkiaan 400 ml:11a etyyliasetaattia. Saadut orgaaniset uutteet yhdistetään, pestään 500 ml:11a tislattua 35 vettä, kuivataan kldevedettömällä magnesiumsulfaatilla, 77 92069 suodatetaan ja haihdutetaan kuiviin alipaineessa (20 mmHg; 2,7 kPa) noin 45 °C:ssa. Näin saadaan 6,8 g tahnaista oranssin väristä jäännöstä. Tällä tuotteella suoritetaan kromatografia-ajo kolonnissa, jonka halkaisija on 6 cm ja 5 joka sisältää noin 500 g silikageeliä (0,02 - 0,045 mm). Eluoinnissa käytetään etyyliasetaatin ja dietyyliamiinin seosta (tilavuussuhteessa 95:5) 0,5 baarin (51 kPa) paineessa ja kerätään 80 ml:n fraktioita. Ensimmäiset 15 fraktiota heitetään pois ja 25 seuraavaa yhdistetään ja 10 haihdutetaan kuiviin alipaineessa (20 mmHg; 2,7 kPa) noin 40 °C:ssa. Näin saadaan 4,13 g 0-(l-metyyli-4-piperidyy-li)-3-aminobentsofenoni-(Z)-oksiimia keltaisena öljynä.

3-aminobentsofenoni-(Z)-oksiimi voidaan valmistaa kuten esimerkissä 28.

15 l-metyyli-4-piperidyyli-para-tolueenisulfonaatti voidaan valmistaa kuten kuvattu esimerkissä 27.

Keksinnön mukaisia lääkkeitä voidaan käyttää suun kautta, ruoansulatuskanavan ulkopuolisesti, peräsuolen kautta tai paikallisesti.

20 Koostumusesimerkki:

Valmistetaan tavanomaisen tekniikan mukaan ruiskeena annettavia yksittäisannoksia, jotka sisältävät 25 mg vaikuttavaa ainetta, liuottamalla 366,79 mg (+)-N-{3-[a-(2-morfolinoetoksi-imino)bentsyyli]fenyyli}-3-(3-pyrid-’·< 25 yyli)-lH,3H-pyrrolo[l,2-c]tiatsoli-7-karboksamidi-dimetaa- nisulfonaattia (E- ja Z-muotojen seos) 25 ml:aan tislattua vettä, minkä jälkeen saatu liuos jaetaan tasaisesti kymmeneen (10) keskenään samanlaiseen ampulliin.

Claims (6)

1. 78 92069 Patenttivaatimus Menetelmä uusien, kaavan (1) mukaisten, farmaseuttisesti aktiivisten lH,3H-pyrrolo[l,2-c]tiatsoli-7-karbok-5 samidijohdannaisten valmistamiseksi, Oy»» ^ n _Ar .Jv. SL-^ HO-z-s, (n - Γ jossa Rx on vety- tai halogeeniatomi tai 1-4 hii-15 liatomia sisältävä alkyylioksiradikaali, Ar on fenyyli- tai pyridyyliradikaali, ja p on kokonaisluku 0, 1 tai 2, ja A) Z on yksinkertainen sidos ja R2 on 3-kinuklidi-nyyli-, l-metyyli-3-piperidyyli- tai l-metyyli-4-piperi- 20 dyyliradikaali, B) Z on 1 - 4 hiiliatomia käsittävä alkyleeniradi-kaali ja R2 on radikaali, jonka yleinen kaava on Ro y 3
2. 25 -CON^ (II) Xr4 jossa R3 ja R4 ovat alkyyliradikaaleja, joissa on 1-4 hiiliatomia, tai R2 on radikaali, jonka yleinen kaava 30 on ^yR3 -NC" (IV), R4 35 79 92069 jossa R3 ja R4, jotka voivat olla samanlaisia tai erilaisia, merkitsevät vetyatomia tai alkyyliradikaalia, joka sisältää 1-4 hiiliatomia, fenyylialkyyliradikaalia, jonka alkyyliosa sisältää 1-4 hiiliatomia, tai fenyyli-5 tai alkyyliaminoalkyyliradikaalia, jonka alkyyliosat sisältävät 1-4 hiiliatomia, tai R3 ja R4 yhdessä typpiato-min kanssa, johon ne ovat sitoutuneet, muodostavat piperi-diini-, morfOliini- tai piperatsiinirenkaan, joka voi olla substiuoitu 4-asemassa alkyyliradikaalilla, joka sisältää 10 1-4 hiiliatomia, tai fenyyli-, bentsyyli- tai hydroksi- etyyliradikaalilla, mukaanlukien raseemiset seokset ja enantiomeerit, joita esiintyy johtuen asymmetrisen hiilen läsnäolosta pyrrolotiatsolirenkaan asemassa 3, näiden enantiomeerien seokset, puhtaat diastereomeerit tai näiden 15 seokset, joita esiintyy johtuen mahdollisen toisen kiraa-lisen keskuksen läsnäolosta, E- ja Z-isomeerit (joita kutsutaan myös syn- ja anti-isomeereiksi) ja näiden seokset, joita esiintyy johtuen oksiimifunktion C=NO-Z-R2 läsnäolosta, sekä mainittujen yhdisteiden farmaseuttisesti hyväk-20 syttävät suolat, tunnettu siitä, että (i) hydroksyyliamiini, jonka yleinen kaava on h2no-z-r2 (VI) .. 25 jossa Z ja R2 ovat edellä määriteltyjä, saatetaan reagoimaan ketonin kanssa, jonka yleinen kaava on 30 Ογ^γ^ρΟΟ-ΛΓ Ö(0)p?^Vil <vn> -1—Ä—U 35 f 80 92069 jossa p, Rx ja Ar ovat edellä määriteltyjä, tai (ii) yhdiste, jonka yleinen kaava on x-z-r2 (VIII) 5 jossa Z ja R2 ovat edellä määriteltyjä ja X on halo-geeniatomi, saatetaan reagoimaan yhdisteen kanssa, jonka yleinen kaava on 10 °T"HT^rirAr »-Λ <°Μ^[Λ W *» 15 jossa p, Rj ja Ar ovat edellä määriteltyjä tai (iii) sellaisten kaavan (I) mukaisten yhdisteiden valmistamiseksi, joissa p on 0, saatetaan yhdiste, jonka 20 yleinen kaava on co-ci 25 R- tai S-muodossa tai niiden seoksena, reagoimaan 30 oksiimin kanssa, jonka yleinen kaava on Ν-λλ,Ο-Ζ-Rj “V· Ri *' I ; 81 92069 jossa Ar, Z, Rj ja R2 ovat edellä määriteltyjä, E-tai Z-muodossa tai niiden seoksena, tai (iv) sellaisten kaavan (I) mukaisten yhdisteiden valmistamiseksi, joissa p on 1, hapetetaan näin saatu kaa-5 van (I) mukainen yhdiste, jossa p on 0. • · • · 82 92069 Förfarande för framställning av nya, farmaceutlskt aktiva 1H,3H-pyrrolo[1,2-c]tiazol-7-karboxamidderivat med 5 formeln (I), 0^. NHv^^nv__c _Ar
3. 10. V—-i-»—il R1 där Rx är en väte- eller halogenatom eller en alkyloxiradi-kal lnnehällande 1-4 kolatomer, Ar är en fenyl- eller 15 pyridylradikal, p är ett heitai 0, 1 eller 2, och A) Z är en enkel bindnlng och R2 är en 3-kinuklidi-nyl-, l-metyl-3-piperidyl- eller l-metyl-4-piperidylradi-kal, B) Z är en alkylenradikal med 1-4 kolatomer och R2 20 är en radlkal med den allmänna formeln ✓R3 -CON ^ (II) R4 ·· 25 där R3 och R4 är alkylradlkaler med 1-4 kolatomer, eller R2 är en radlkal med den allmänna tonnein ^R3
4. 30 -N^ (IV) R4 där R3 och R4, vilka kan vara lika eller ollka, betecknar en väteatom eller en alkylradlkal innehällande 1-4 kol-35 atomer, en fenylalkylradikal med 1-4 kolatomer 1 alkyl- 83 92069 delen, eller en fenyl- eller alkylaminoalkylradikal med 1-4 kolatomer i alkyldelarna, eller R3 och R4 tillsanunans med kväveatomen, till vilken de är bundna, bildar en pipe-ridin-, morfolin- eller piperazinring, som i 4-ställning 5 kan vara substituerad med en alkylradikal, som innehäller 1-4 kolatomer, eller med en fenyl-, bensyl- eller hyd-roxietylradikal, inklusive racemiska blandningar och enantiomerer, som förekommer ρά grund av närvaro av en asymmetrisk kol- 10 atom i pyrrolotiazolringens ställning 3, blandningar av dessa enantiomerer, rena diastereomerer eller blandningar därav, vilka förekommer pä grund av näravo av ett annat möjligt kiraliskt centrum, E- och Z-isomerer (som även kallas för syn- och anti-isomerer) och blandningar därav, 15 vilka förekommer pä grund av närvaro av oximfunktionen C=N0-Z-R2, samt farmaceutiskt godtagbara salter av nämnda föreningar, kännetecknat därav, att (i) en hydroxylamin, som har den allmänna formeln
5. 20 H2NO-Z-R2 (VI) där Z och R2 är ovan definierade, omsätts med en keton, som har den allmänna formeln 25 ΟγΝ*γ^__ C0Ar ^ (VII) // y-J—i—u ri 30 • < 9 1 där p, Rx och Ar är ovan definierade, eller (il) en förening med den allmänna formeln 35 x_z_R2 (VIII) i 84 92069 där Z och R2 är ovan definierade och X är en halo-genatom, omsätts med en förenlng, sora har den allmänna formeln /v SNOH (Ia> Ö<0)pS il _!]—i_ll Rl 10 där p, Rj och Ar är ovan definierade, eller (iii) för framställning av sädana föreningar med formeln (I), där p är 0, omsätts en förening, som har den 15 allmänna formeln co-ci N—Λ SAA
6. 20 GM-N—^ i R- eller S-form eller som blandning av dessa, med en oxim, som har den allmänna formeln ·: 25 Ν«λλ. 0-Z-Rj -V' R. 30 1 där Ar, Z, Rx och R2 är ovan definierade, i E- eller Z-form eller som blandning av dessa, eller (iv) för framställning av sädana föreningar med formeln (1), där p är 1, oxideras en sä erhällen förenlng, 35 där p är 0. / I - * t: