FI86303B

FI86303B - Foerbaettrat foerfarande foer framstaellning av aminoalkylsulfonyl-pristinamycin iib -derivat.

Info

Publication number: FI86303B
Application number: FI873015A
Authority: FI
Inventors: Devnandan Chatterjee; Neil Victor Harris; Trevor Parker; Christopher Smith; Peter James Warren
Original assignee: May & Baker Ltd
Priority date: 1986-07-09
Filing date: 1987-07-07
Publication date: 1992-04-30
Also published as: JPS6323885A; ATE67506T1; EP0252720B1; PT85274B; IL83116A; GR3003048T3; IL83116A0; DK349887A; ES2029836T3; SU1639429A3; FI86303C; US4866172A; DK167360B1; KR880001645A; PT85274A; AU601445B2; DE3773066D1; NZ220984A; GB8616768D0; AU7529287A

Description

1 86303

Parannettu menetelmä aminoalkyylisulfonyyli-pristinamysiini JIB -johdannaisten valmistamiseksi 5 Esillä oleva keksintö koskee parannettua menetelmää terapeuttisesti käyttökelpoisten aminoalkyylisulfonyyli-pris-tinamysiini IIB -johdannaisten valmistamiseksi.

EP-patenttijulkaisussa 191 662 kuvataan mm. terapeuttisesti 10 käyttökelpoisia pristinamysiini IIB -johdannaisia, joilla on yleinen kaava 0

15 ^OH

ch3 1 ch3 'γ I 0 0 (A)

20 ν\Λ A v T

k 0 0 γγ 25 R-s(0)n 1-o ja niiden happoadditiosuoloja, jossa kaavassa R tarkoittaa: joko typpeä sisältävää 4-7-jäsenistä heterosyklistä rengas-ryhmää, joka voi sisältää yhden tai useamman muun hetero-atomin, jotka on valikoitu ryhmästä typpi, happi ja rikki : 30 sulfoksidin tai sulfonin muodossa, ja joka on substituoima- • ton tai substituoitu alkyylillä; tai 2-4 hiiliatomia sisäl- tävää alkyyliä, joka on substituoitu 1 tai 2 ryhmällä, jotka on valikoitu joukosta fenyyli, 3-6 rengasatomia sisältävä sykl°alkyyliamino, 3-6 rengasatomia sisältävä N-alkyyli-35 N-sykloalkyyliamino, alkyyliamino, dialkyyliamino ja dial-kyylikarbamoyylioksi, näiden kahden viimeksi mainitun ryhmän ....: alkyyliosien ollessa erillään tai liittyneinä yhteen muodos- ... taakseen sen typpiatomin kanssa, johon ne ovat kiinnitty- ·. neet, tyydytetyn tai tyydyttämättömän, 4-7 jäsentä sisältä- : : : 40 vän heterosyklisen renkaan, joka voi sisältää toisen hetero-·...· atomin, joka on valikoitu joukosta typpi, happi ja rikki sulfoksidin tai sulfonin muodossa, ja joka on substituoima- 2 86303 ton tai alkyylillä substituoitu; tai 2-4 hiiliatomia sisältävää alkyyliä, joka on substituoitu yhdellä tai useammalla typpeä sisältävällä 4-7-jäsenisellä heterosyklisellä renkaalla, jotka voivat sisältää 1 tai 2 muuta heteroatomia, 5 valikoituna joukosta typpi, happi ja rikki, sulfoksidin tai sulfonin muodossa, ja jotka ovat substituoimattomia tai alkyylillä substituoituja, näiden heterosyklisten renkaiden ollessa liittyneinä alkyyliin renkaan sisältämän hiiliatomin kautta, vähintään yhden substituenteista, jotka 10 sisältyvät mainittuun alkyyliketjuun, ollessa typpeä sisältävä substituentti, joka pystyy muodostamaan suoloja, tai [(S)-i-metyyli-2-pyrrolidinyyli]metyyliryhmää; ja n on 1 tai 2. Edellä referoidut alkyyliryhmät ja osat ovat lineaarisia tai haaroittuneita ja sisältävät, ellei toisin ole 15 mainittu, 1-10 hiiliatomia.

Kaavan (A) mukaisilla yhdisteillä on isomeerisia muotoja, ja niiden isomeerit ja niiden seokset luetaan mukaan tässä annettavan kuvauksen puitteissa.

20

Kun R tarkoittaa heterosyklistä ryhmää, tämä ryhmä voi olla esimerkiksi: 3-atsetidinyyli, 3-pyrrolidinyyli, 3- tai 4-piperidyyli tai 3- tai 4-atsepinyyli.

25 Kun R tarkoittaa heterosyklisellä rengasryhmällä substituoi-tua alkyyliryhmää, heterosyklinen rengasryhmä voidaan valikoida esimerkiksi edellä luetelluista ryhmistä tai ryhmistä 2-atsetidinyyli, 2-pyrrolidinyyli, 2-piperidyyli, 2-atsepi-nyyli, piperatsinyyli, 4-alkyylipiperatsinyyli, kinolyyli, 30 isokinolyyli tai imidatsolyyli.

Kun R sisältää dialkyyliamino- tai dialkyylikarbamoyylioksr-ryhmän, joissa alkyyliosat muodostavat heterosyklisen ren-"" kaan sen typpiatomin kanssa, johon ne kiinnittyvät, tämä : 35 rengas voidaan valita esimerkiksi joukosta: 1-atsetidinyyli, 1-pyrrolidinyyli, piperidino, 1-atsepinyyli, morfolino, tiomorfolino sulfoksidin tai sulfonin muodossa, 1-piperat- I! 3 86303 sinyyli, 4-alkyyli-l-piperatsinyyli, N-alkyyli-l-homopiper-atsinyyli tai 1-imidatsolyyli.

EP-patenttijulkaisun 191 662 mukaisesti yleisen kaavan (A) 5 mukaisia yhdisteitä voidaan valmistaa hapettamalla pris-tinamysiini IIg:n johdannaista, jolla on yleinen kaava

O

io ch3 I CH3 Γ | O 0 1 c CH3 1 1 1 (II) 15 V' X / \ nv

I 0 >-N \ / VX

ch3 / \ X

R-S -O

20 jossa R tarkoittaa samaa kuin edellä, tai sen suolaa tai suojattua johdannaista. On selvää, että tapauksissa, joissa R sisältää rikkiä sisältävän heterosyklisen renkaan, rikki-25 atomi voi olla sulfidin, sulfoksidin tai sulfonin muodossa.

Niiden hapettavien aineiden joukossa, joiden mainitaan olevan sopivia valmistettaessa yleisen kaavan (A) mukaista yhdistettä, jossa n = 1, ovat orgaaniset perhapot: perkar-30 boksyyli- tai persulfonihapot (esimerkiksi peretikka-, pertrifluorietikka-, permuurahais-, perbentsoe-, m-kloori-perbentsoe-, p-nitroperbentsoe-, permaleiini-, monoperftaa-li-, perkamferi- tai p-tolueenipersulfonihapot) ja epäor-9aanisei perhapot (esimerkiksi perjodi- tai perrikkihappo).

" 35 * 1 Silloin, kun tarkoituksena on valmistaa yleisen kaavan (A) mukaista yhdistettä, jossa kaavassa n = 2, hapettaminen voidaan toteuttaa seleenidioksidin ja vetyperoksidin kanssa, *.· käyttäen yleisen kaavan (II) mukaisen yhdisteen suolaa, tai 40 perhapon kanssa, jollaisiin viitattiin edellä, erityisesti ···_ pertrifluorietikkahapon tai m-klooriperbentsoehapon kanssa.

4 86303

Yleisen kaavan (II) mukaisia yhdisteitä voidaan valmistaa antamalla yleisen kaavan (III) mukaisen yhdisteen: R-SH (111) 5 jossa kaavassa R on määritelty kuten edellä, reagoida yhdisteen kanssa, jolla on kaava ch3 / CH3 I o f o o (IV)

15 CH3 I J I

CH3 T

20 U

so. pristinamysiini II^:n kanssa.

Reaktio toteutetaan tavallisesti orgaanisessa liuottimessa, 25 kuten esimerkiksi alkoholissa, kuten metanoli tai etanoli, tai klooratussa liuottimessa, kuten esimerkiksi metyleeni-kloridi, 1,2-dikloorietaani tai kloroformi, tai näitä liuottimia sisältävässä seoksessa (esimerkiksi metyleenikloridi/-metanolissa) lämpötilassa välillä -30 ja 50 C.

! 30

Joskus voi olla edullista suorittaa reaktio tertiäärisen amiinin, esimerkiksi trietyyliamiinin, tai etanoliamiinin (esimerkiksi dimetyylietanoliamiini) läsnäollessa. 1

II

· 35 Silloin kun R tarkoittaa ryhmää, joka sisältää sekundäärisen amiiniryhmän, joka kykenee häiritsemään reaktiota, tämä ryhmä tulee suojata etukäteen, ennen kuin yleisen kaavan (XII) mukaisen yhdisteen annetaan reagoida kaavan (IV) : mukaisen yhdisteen kanssa. Mitä tahansa tavallista menetel- 40 mää, jolla on mahdollista estää sekundäärinen amiinifunktio .···. labiilin ryhmän muodossa, voidaan käyttää tähän tarkoituk- seen. Estävänä ryhmänä on erityisen edullista käyttää tri- 5 86303 fluoriasetyyliryhmää, joka voidaan poistaa kuten edellä on kuvattu. Sellaisessa tapauksessa ei kuitenkaan ole ehdottoman välttämätöntä poistaa suojaavaa ryhmää, ja suojattua johdannaista voidaan käyttää suoraan hapetusreaktiossa.

5

Yleisen kaavan (A) mukaisia yhdisteitä, joissa n on 2, voidaan myös valmistaa hapettamalla yleisen kaavan (A) mukainen yhdiste, jossa n on 1.

10 Tämä reaktio voidaan suorittaa olosuhteissa, jotka ovat samanlaiset kuin olosuhteet, joita on kuvattu edellä, valmistettaessa yleisen kaavan (A) mukaista yhdistettä, jossa n = 2, lähtien yleisen kaavan (II) mukaisesta pristinamysii-ni IIB -johdannaisesta.

15 Tämä keksintö koskee parannettua menetelmää aminoalkyylisul-fonyyli-pristinamysiini IIB -johdannaisen valmistamiseksi, jolla on yleinen kaava

20 O

Cii3 jr"** 25 I 0 0 (I) ch3 II 1 CHq / \ ^ 30 /v

R-SO2 -O

jossa R on 2-4 hiiliatomia sisältävä alkyyli, joka on sub-stituoitu 3-6 rengasatomia sisältävällä sykloalkyyliaminol-35 la, 3-6 rengasatomia sisältävällä N-alkyyli-N-sykloalkyy- liaminolla, dialkyyliaminolla tai 1-pyrrolidinyyli-, piperi-dino- tai morfolinoryhmällä, jolloin edellä mainitut alkyy- liryhmät ja -osat ovat lineaarisia tai haaroittuneita ja sisältävät, ellei toisin ole mainittu, 1-10 hiiliatomia, : : : 40 ja sen isomeerien ja niiden seosten ja sen happoadditiosuo-: : lojen valmistamiseksi, hapettamalla sulfoksidiyhdiste, jolla on yleinen kaava 6 86303 o V. o - γ

“VVwVV

10 CH3 L / I

R-SO^ "-0 tai sulfidiyhdiste, jolla on yleinen kaava 15 ch3 J CH3 f o

20 Y o o ky0 Y'N'Vl VV

25 CH3 l..J> T

R-S ^ -O

30 joissa kaavoissa R tarkoittaa samaa kuin edellä, ja keksinnön mukaiselle menetelmälle on tunnusomaista, että hapettaminen suoritetaan perjodihapon suolalla ja katalyyttisellä määrällä ruteeni(VIII)yhdistettä, joka edullisesti valmiste-35 taan in situ hapettamalla alemmassa hapetustilassa olevaa ruteeniyhdistettä, edullisesti ruteenitrikloriditrihydraat-tia, joka hapettaminen voidaan suorittaa vesipitoisessa väliaineessa, joka edullisesti sisältää vettä ja dikloorime-taania, kun lähtöaine on mainittu sulfoksidiyhdiste, ja 40 vettä ja asetonitriiliä, kun lähtöaine on mainittu sulfidiyhdiste, lämpötilassa, joka on -5°C ja ympäristön lämpötilan välillä, jolloin perjodaatin suhde lähtöaineeseen on edullisesti 1,6:1-5:1, kun lähtöaine on mainittu sulfoksi-:-Y diyhdiste, ja edullisesti 5:1-7:1, kun lähtöaine on mainittu 45 sulfidiyhdiste.

Il 7 86303

Reaktio voidaan suorittaa vesipitoisessa väliaineessa, joka voi esim. olla asetoni-vesi tai asetonitriili-vesi, ase-tonitriili - laimea suolahapon vesiliuos, etanoli-vesi, dimetyyliformamidi-vesi tai laimea suolahapon vesiliuos, tai 5 neutraalissa orgaanisessa liuottimessa, joka on olennaisesti veteen sekoittumaton, esim. kloorattu hiilivety, esim. dikloorimetaani, lämpötilassa -5eC - ympäristön lämpötila (esim. 25°C).

10 Ruteeni(VIII)-katalysaattorin alkuperä voi olla esimerkiksi ruteenitetroksidi, ruteenidioksididihydraatti tai tris(tri-fenyylifosfiini)-ruteeni(II)kloridi, tai edullisesti rutee-nitrikloriditrihydraatti.

15 Esillä olevan keksinnön erään edullisen suoritusmuodon mukaan yleisen kaavan (II) mukainen yhdiste hapetetaan käyttäen perjodihapon suolaa ja katalyyttistä määrää ru-teenitrikloriditrihydraattia asetonitriilissä ja vedessä.

20 Esillä olevan keksinnön erään toisen edullisen suoritusmuodon mukaan mainittu sulfoksidiyhdiste hapetetaan käyttäen perjodihapon suolaa ja katalyyttistä määrää ruteenitriklo-riditrihydraattia dikloorimetaanissa ja vedessä.

^ Perjodihapon suolaa, joka voi olla alkalimetalliperjodaatti, esira· natrium- tai kaliummetaperjodaatti, käytetään suurena ekvivalenttina ylimääränä vesiliuoksessa tai kiinteänä.

- - Edullinen suhde on 1,6:1 - 5:1 (esimerkiksi 2,8:1 - 5:1) V moolia, edullisesti 1,6:1 - 3:1 moolia, silloin kun lähtöma- : 30 teriaali on mainittu sulfoksidiyhdiste tai 5:1 - 7:1 moolia, edullisesti 5:1 tai 6:1 moolia, silloin kun lähtömateriaali on mainittu sulfidiyhdiste.

Esillä olevan keksinnön mukainen edullinen menetelmä käsit- 35 tää mainitun sulfoksidiyhdisteen hapettamisen käyttäen perjodihapon suolaa ja katalyyttistä määrää ruteenitri-kloriditrihydraattia, jossa moolisuhde, perjodihapon suola: -t- sulfoksidiyhdiste on 1,6:1 dikloorimetaanissa ja vedessä.

8 §6303

Silloin kun lähtömateriaalina on yleisen kaavan (II) mukainen sulfidiyhdiste, keksinnön mukaisessa menetelmässä saadaan myös jonkin verran sulfoksidiyhdistettä.

5 Esillä olevan keksinnön mukainen menetelmä tuottaa paremman saannon ja puhtaamman tuotteen kuin EP-patenttijulkaisussa 191 662 kuvattu menetelmä.

Esillä olevan keksinnön mukaisesti voidaan myös valmistaa 10 yleisen kaavan (I) mukaisia yhdisteitä niiden B-isomeerien muodossa (kuten tämän jälkeen on määritelty) ja niiden farmaseuttisesti hyväksyttäviä happoadditiosuoloja. 26-(2-dietyyliaminoetyyli)sulfonyyli-pristinamysiini IIB:n (isomeeri B) biologinen aktiivisuus on samanlainen kuin EP-15 patenttijulkaisussa 191 662 kuvatun vastaavan A-isomeerin.

Esillä olevan keksinnön mukainen menetelmä on erityisen hyödyllinen valmistettaessa seuraavia yhdisteitä:

- 26-(2-dietyyliaminoetyyli)sulfonyyli-pristinamysiini IIB

20 - 26-(2-di-isopropyyliaminoetyyli)sulfonyyli-pristinamysiini ja seuraavia uusia yhdisteitä

- 26-(2-dipropyyliaminoetyyli)sulfonyyli-pristinamysiini IIB

- 26-(2-dibutyyliaminoetyyli)sulfonyyli-pristinamysiini IIB

25 - 26-(N-etyyli-N-isopropyyli-2-aminoetyyli)sulfonyylx-pris-

tinamysiini IIB

· ··: _ 26 - [2 -(1-pyrrolidinyyli )etyyli] sulfonyyli-pristinamysiini O τΐΒ

- 26-(2-morfolinoetyyli)sulfonyyli-pristinamysnni IIB

30 - 26-(2-dimetyyliaminoetyyli)sulfonyyli-pristinamysiini IIB

_ 26-(N-butyyli-N-metyyli-2-aminoetyyli)sulfonyyli-pristi-namysiini IIB ja

- 26-(2-piperidinoetyyli)sulfonyyli-pristinamysiini IIB

niiden A- tai B-isomeerien muodossa ja niiden farmaseut-35 tisesti hyväksyttäviä happoadditiosuoloja.

;; Yleisen kaavan (I) mukaisia yhdisteitä voidaan puhdistaa tunnetuilla menetelmillä, esimerkiksi kiteyttämällä, kroma- li 9 86303 tografian avulla tai perättäisillä uuttamisilla happamessa tai emäksisessä alustassa.

Seuraavissa esimerkeissä esitetään kuinka keksintöä voidaan 5 toteuttaa käytännössä. Näissä esimerkeissä valmistettujen yhdisteiden NMR-spektrit osoittavat yleisiä ominaisuuksia, jotka ovat yhteisiä kaikille yleisen kaavan (I) mukaisille yhdisteille, ja yksilöllisiä ominaisuuksia, jotka ovat spesifisiä kullekin yhdisteelle, riippuen substituenteista. 10 Ainoastaan yksilöllisiä, substituenttiryhmistä johtuvia ominaisuuksia mainitaan seuraavissa esimerkeissä. Yleisen kaavan (I) mukaisia yhdisteitä varten merkitään kaikki protonit sen numeroinnin mukaisesti, joka esitetään seuraa-vassa kaavassa (V).

15 0 9 11 13 oh 8 ch|3 I4[ k8 ? ? (v> 1 I 28 CH-a / \ I j18 31 d y(26 R If 20-0,9

Ellei toisin ole mainittu, kaikki spektrit rekisteröitiin 30 alueella 250 MHz deuterokloroformissa; kemialliset siirtymät ilmaistaan ppm:ssä suhteessa tetrametyylisilaanisignaaliin. Tekstissä käytetyt lyhenteet ovat seuraavat: s = singletti d = dubletti .y. 35 t = tripletti mt = multipletti m = erottumattomat vyöhykkeet dd = dublettien dubletti dt = triplettien dubletti : : : 40 ddd = dublettien dublettien dubletti ·...· dddd = dublettien dublettien dublettien dubletti 10 86303

On ymmärrettävä, että erilaiset isomeerit on luokiteltu keinotekoisesti NMRrssä todettujen kemiallisten siirtymien mukaisesti.

5 Yleistä kaavaa (I) vastaavien sulfoksidiyhdisteiden nimet isomeeri A^ ja isomeeri A2 annetaan isomeereille, joiden ominaisuudet ovat: suunnilleen 1,7 (s, -CH3 33:ssa); suunnilleen 3,8 (s,^CH2 17:ssa); < 5 (d, -H27) isomeeri A2 tai > 5 (d, -H27) isomeeri A^; suunnilleen 5,50 (leveä d,

10 -H13); suunnilleen 6,20 (d, -Hu); suunnilleen 6,6 ( ^-NH

8:ssa); > 8 (s, -H2q)·

Yleistä kaavaa (I) vastaavien sulfoksidiyhdisteiden isomeerien nimet isomeeri B1 ja isomeeri B2 annetaan isomeereille, 15 joiden ominaisuudet ovat: suunnilleen 1,5 (s, -CH3 33:ssa), suunnilleen 3,7 ja 3,9 (2d, ^CH2 17:ssa); suunnilleen 4,8 (mt, -H13); < 5 (d, -H27) isomeeri B2 tai > 5 (d, -H27) isomeeri B1; suunnilleen 5,70 (rajaviiva AB, -Hn ja -H10); suunnilleen 7,7 (l^NH 8:ssa); suunnilleen 7,8 (s, -H20).

20

Yleisen kaavan (II) mukaisen yhdisteen isomeeri A -nimi annetaan isomeerille, jonka NMR-ominaisuudet ovat samat kuin ne, jotka edellä on lueteltu sulfoksidiyhdisteiden isomeereille Ax ja A2, sen ollessa ymmärrettävää, että 25 H:lie on ominaista 27:ssä: 4,7 (d, J ί 1 Hz).

Yleisen kaavan (II) mukaisen yhdisteen isomeeri B -nimi annetaan isomeerille, jonka NMR-ominaisuudet ovat samat kuin ne, jotka edellä on lueteltu sulfoksidiyhdisteiden 30 isomeereille Bx ja B2, sen ollessa ymmärrettävää, että H:lle on ominaista 27:ssä: 4,6 (d, J ^ 2,5 Hz).

Seuraavissa esimerkeissä käytetään nimitystä "pika"-kromato-grafia ("flash" chromatography) puhdistusmenetelmälle, jossa 35 käytetään lyhyttä kromatografiakolonnia ja toimitaan keski-paineessa (50 kPa) käyttäen tietyn kokojakauman, 40-53 pm, sisältämää piihappoa W.C. Stillin, M. Kahnin ja A. Mitran mukaan (J. Org. Chem. 43, 2923 (1978).

I! 11 86303

Ellei toisin ole mainittu, voidaan jäljempänä kuvattavissa esimerkeissä kaikki yhdisteet liuottaa vähintään 2 % vahvuisina hydrokloridimuodossa.

5 Esimerkki 1 26-(2-di-isopropyyliaminoetyyli)sulfonyyli-pristinamysiini IIB (isomeeri A) 26-(2-di-isopropyyliaminoetyyli)sulfinyylipristinamysiini IIB:n (isomeeri A2) (10 g) sekoitettuun liuokseen dikloori-10 metaanissa (300 ml) lisättiin natriummetaperjodaatin (8,5 g) liuosta tislatussa vedessä (75 ml). Vesifaasin pH säädettiin 6:sta 7:ään lisäämällä kiinteätä natriumbikarbonaattia annoksittain seosta nopeasti sekoittaen. Sekoitettua kaksi-faasista systeemiä jäähdytettiin 10eC:een, ja ruteenidiok-15 sididihydraattia (10 mg) lisättiin. Neljän tunnin sekoittamisen jälkeen 10°C:ssa reaktioseoksen annettiin saavuttaa huoneen lämpötila, ja orgaaninen faasi erotettiin. Vesifaasin pH säädettiin arvoon 7,5 lisäämällä kiinteätä natriumbikarbonaattia, ja sen jälkeen sitä uutettiin kahdesti 20 dikloorimetaanin kanssa (70 ml). Yhdistettyjä orgaanisia faaseja kuivattiin vedettömän natriumsulfaatin päällä, haihdutettiin kuivaksi alennetussa paineessa 40-45°C:ssa, ja kiinteä kellanruskea jäännös (10 g) liuotettiin etyyliasetaattiin (300 ml). Liuosta pestiin toistuvasti sitraat-25 tipuskuriliuoksella (10 x 60 ml), jonka pH oli 4, kunnes etyyliasetaattiliuoksessa oli hyvin vähän tuotetta jäljellä (tarkkailtuna ohutlevykromatografiän ja h.p.l.c:n avulla). Sitraattipuskuripesuerien pH säädettiin arvoon 7,5 lisäämällä kiinteätä natriumbikarbonaattia annoksittain sekoittaen, 30 ja liuosta uutettiin dikloorimetaanin kanssa (100 ml, sen jälkeen 4 x 50 ml). Yhdistetyt uutteet kuivattiin vedettömän natriumsulfaatin päällä ja haihdutettiin alennetussa paineessa 40-45°C:ssa, mikä antoi keltaista ainetta (6,8 g), joka puhdistettiin "pika"-kromatografiän avulla (eluentti: 35 etyyliasetaatti-metanoli (92-8 tilavuuden mukaan)) ottaen ‘/· talteen 30 ml:n fraktioita. Fraktiot 14-30 yhdistettiin ja väkevöitiin kuivaksi alipaineessa 40-45°C:ssa, mikä tuotti valkoista kiinteätä ainetta (3,99 g). 2,56 g tätä materiaa- i2 86303 lia puhdistettiin lisäksi "pika"-kromatografiällä ( eluent-ti:kloroformi-metanoli (95-5 tilavuuden mukaan)) ottaen talteen 14 ml:n fraktioita. Fraktiot 32-50 yhdistettiin ja väkevöitiin kuiviksi alennetussa paineessa, jolloin saa-5 tiin valkoista kiinteätä ainetta (2,24 g), joka liuotettiin etyyliasetaattiin (10 ml). Liuosta lisättiin hitaasti kevytpetroliin (kp. 40-60°C) (100 ml), ja saostuma erotettiin suodattamalla, jolloin saatiin 26-(2-di-isopropyyli-aminoetyyli)sulfonyyli-pristinamysiini IIB:tä (isomeeri A) 10 valkoisena jauheena (2,1 g), joka suli hitaasti hajoten yli 110°C:ssa. Todettu: C, 60,3; H, 7,5; N, 7,6 %. Laskettuna: 035^4^098: lie: C, 60,1; H, 7,57; N, 7,79 %.

NMR-tulokset vahvistivat, että tämä on identtinen yhdiste 15 EP-patenttijulkaisun 191 662 esimerkissä 25 olevan yhdisteen kanssa.

Esimerkki 2 26-(2-dletyyllaminoetyyli)sulfonyyli-pristinamysiini IIB 20 (isomeeri A)

Puskuriliuoksen, jonka pH oli 8, (350 ml) ja dikloorimetaa-nin (350 ml) voimakkaasti sekoitettuun seokseen lisättiin yhdessä erässä natriummetaperjodaattia (9,1 g), vallitsevassa lämpötilassa, minkä jälkeen lisättiin välittömästi 25 26-(2-dietyyliaminoetyyli)sulfinyyli-pristinamysiini IIB:tä (isomeeri A2) (8,5 g). Yhden minuutin kuluttua lisättiin " ruteenidioksididihydraattia (50 mg), myös yhtenä eränä.

Kymmenen minuutin voimakkaan sekoittamisen jälkeen seos dekantoitiin erotussuppiloon, ja reaktiopullo pestiin vasta 30 valmistetulla dikloorimetaanilla (175 ml). Kerrokset erotettiin, ja orgaaninen faasi pestiin vedellä (200 ml), kuivattiin vedettömän magnesiumsulfaatin päällä ja haihdutettiin, jolloin saatiin vaalean ruskeata jauhetta (5,6 g). Tätä jauhetta ravisteltiin etyyliasetaatin (150 ml) ja 35 puskuriliuoksen, jonka pH oli 4, (100 ml) seoksen kanssa.

: Dekantoinnin jälkeen pienestä määrästä liukenematonta ter- vaa kerrokset erotettiin, ja orgaaninen faasi uutettiin uudelleen puskuriliuoksen kanssa, jonka pH oli 4, (2x50 ml).

li i3 86303

Yhdistetyt puskuriliuokset takaisinpestiin etyyliasetaatin kanssa (3x25 ml), kyllästettiin kiinteällä natriumvetykar-bonaatilla ja uutettiin dikloorimetaanin kanssa (100 ml, sen jälkeen 2x50 ml). Yhdistetyt orgaaniset uutteet kuivat-5 tiin vedettömän magnesiumsulfaatin päällä ja haihdutettiin, jolloin saatiin vaalean keltaista jauhetta (4,3 g). Tämä liuotettiin etyyliasetaattiin (40 ml), suodatettiin liukenemattoman materiaalin poistamiseksi ja haihdutettiin, jolloin saatiin 26-(2-dietyyliaminoetyyli)sulfonyylipristinamysiini 10 IIB:tä (isomeeri A) vaalean keltaisena jauheena (3,7 g), joka suli hitaasti hajoten 105°C:n yläpuolella.

Todettu: C, 59,1; H, 7,5; N, 7,9; S, 4,6 %:

Laskettuna: ¢34850^098: lie: C, 59,1; H, 7,3; N, 8,11; S, 4,6 %.

15 NMR-tulokset osoittivat, että tämä yhdiste on identtinen EP-patenttijulkaisun 191 662 esimerkissä 24 olevan yhdisteen kanssa.

20 Esimerkki 3 26-(2-di-etyyliaminoetyyli)sulfonyyli-pristinamysiini IIB (isomeeri A)

Natriummetaperjodaatin (16,2 g) vesiliuosta (500 ml) lisättiin niin nopeasti kuin mahdollista yhdessä erässä 26-(2-25 dietyyliaminoetyyli)tio-pristinamysiini IIB:n (isomeeri A) (10,0 g) voimakkaasti sekoitettuun liuokseen asetonissa (500 ml) huoneen lämpötilassa, jota seurasi 15 sekuntia myöhemmin ruteenidioksidihydraatin (50 mg) lisääminen, myös yhdessä erässä. Kymmenen minuutin sekoittamisen jälkeen 30 huoneen lämpötilassa, jona aikana oli muodostunut valkoinen sakka, lisättiin kiinteätä natriumvetykarbonaattia (20 g). Vielä yhden minuutin sekoittamisen jälkeen, seos suodatettiin piimään läpi, suodinpatjan tullessa pestyksi dikloori-metaanilla (750 ml). Suodos sekoitettiin perusteellisesti, 35 kerrosten annettiin erottua toisistaan, ja vesikerros uutet-:: tiin uudelleen vasta valmistetulla dikloorimetaanilla :*"· (250 ml); kiinteän natriumkloridin lisääminen tässä kohdassa helpotti kahden kerroksen erottumista. Yhdistetyt dikloori- i4 86303 metaaniuutteet kuivattiin vedettömän magnesiumsulfaatin päällä ja haihdutettiin, jolloin saatiin 7,8 g vaalean ruskeata jauhetta. Tätä tuotetta ravisteltiin hyvin etyyliasetaatin (150 ml) kanssa 5 minuutin ajan, se suodatet-5 tiin liukenemattoman materiaalin poistamiseksi, ja suo-dinpatja pestiin vasta valmistetulla etyyliasetaatilla (50 ml). Yhdistettyjen suodosten haihduttaminen tuotti 26-(2-di-etyyliaminoetyyli)sulfonyyli-pristinamysiini IIB:tä (isomeeri A) vaalean keltaisena jauheena (6,1 g).

10

Esimerkit 3a-h a) Menettelemällä samalla tavalla, mutta korvaamalla 26- (2-dietyyliaminoetyyli)tiopristinamysiini IIB (isomeeri A) yhdisteellä 26-(2-di-isopropyyliaminoetyyli)tio-pris-15 tinamysiini IIB (isomeeri A), valmistettiin 26-(2-di-iso- propyyliaminoetyyli)sulfonyyli-pristinamysiini IIB:tä (isomeeri A).

b) Menettelemällä samalla tavalla, mutta korvaamalla 26- 20 (2-dietyyliaminoetyyli)tio-pristinamysiini IIB (isomeeri A) yhdisteellä 26-(2-dietyyliaminoetyyli)tio-pristinamysiini IIB (isomeeri B), ja toteuttamalla reaktio 12°C:ssa, valmistettiin yhdistettä 26-(2-dietyyliaminoetyyli)sulfonyyli-pristinamysiini IIB (isomeeri B) keltaisena amorfisena 25 jauheena. Tämän materiaalin puhdistaminen toteutettiin "pika"-kromatografiällä ("flash" chromatography) [eluentti:-kloroformi-metanoli (95-5 tilavuuden mukaan)] ottaen talteen 30 ml:n näytefraktioita. Fraktiot 21-23 yhdistettiin ja väkevöitiin kuivaksi alennetussa paineessa, jolloin saatiin 30 26-(2-dietyyliaminoetyyliJsulfonyyli-pristinamysiini IIB:tä (isomeeri B) valkoisena jauheena, joka suli hitaasti alkaen 98ö C:sta.

. Todettu: C, 56,2; H, 7,0; N, 7,3; S, 4,55 %.

Laskettuna 0341150^0982· 2H20:lle: C, 56,2; H, 7,49; - ' 35 N, 7,71; S, 4,41 %.

il 15 86303 O Menettelemällä samalla tavalla, mutta korvaamalla 26-(2-dietyyliaminoetyyli)tio-pristinamysiini ΐιβ (isomeeri A) yhdisteellä 26-(2-dietyyliaminoetyyli)sulfinyyli-pristinamy-siini IIB (isomeeri A2), ja käyttämällä 2,8 ekvivalenttia 5 natriummetaperjodaattia, valmistettiin 26-(2-dietyyliamino-etyyli)sulfonyyli-Pristinamysiini IIB:tä (isomeeri A).

d) Menettelemällä samalla tavalla, mutta korvaten 26-(2-dietyyliaminoetyyli)tio-pristinamysiini liB (isomeeri A) 10 26-(2-dietyyliaminoetyyli)sulfinyyli-pristinamysiini IIB:llä (isomeerit Ax + a2), ja käyttämällä 2,8 ekvivalenttia natriummetaperjodaattia, valmistettiin 26-(2-dietyyliaminoetyyli )sulfonyyli-pristinamysiini IIB:tä (isomeeri A).

15 e) Menettelemällä samalla tavalla, mutta korvaten 26-(2-dietyyli-aminoetyyli)tio-pristinamysiini nB (isomeeri A) 26-(2-di-isopropyyiiaminoetyyli)sulfinyyli-pristinamysiini HB: Hä (isomeerit A1 + A2), ja käyttämällä 2,8 ekvivalenttia natriummetaperjodaattia, valmistettiin 26-(2-di-isopro- 20 pyyliaminoetyyli )sulfonyyli-pristinamysiini liB:tä (isomeeri A).

: f) Menettelemällä samalla tavalla, mutta korvaten 26-(2- dietyyiiaminoetyyli ) tio-pristinamysiini IIB (isomeeri A) .··. 25 yhdisteellä 26-(N-etyyli-N-isopropyyli-2-aminoetyyli )-tio-pnstinamysiini IIB (isomeeri A), esijäähdyttämällä natrium-metaperjodaattiliuos vedessä 12°C:een, ja toteuttamalla reaktio 6°C:ssa, valmistettiin 26-(N-etyyli-N-isopropyyli-2-aminoetyyli)sulfonyyli-pristinamysiini llB:tä (isomeeri A) 30 haalean keltaisena jauheena. Tämän materiaalin puhdistaminen toteutettiin "pika-'-kromatografian avulla [eluentti:kloro-... : formi-metanoli (95-5 tilavuuden mukaan)] ottaen talteen 25 ml:n ^aktioita. Fraktiot 10-13 yhdistettiin ja väkevöitiin kuiviksi, jäännöksen tullessa liuotetuksi etyyliasetaattiin, . 35 mitä seurasi haihduttaminen kloroformin jäännöstähteiden poistamiseksi, mikä tuotti 26-(N-etyyli-N-isopropyyli-2-amln°etyy]i ksulfonyyli-pristinamysiini IIB:tä (isomeeri A) ie 86303 haalean keltaisena jauheena, joka suli hitaasti 103-110°C:ssa.

Todettu: C, 58,7; H, 7,4; N, 7,6; S, 4,4 %.

Laskettuna: C35H52N409S . 0,5 CH3C02CH2CH3:lle: 5 C, 59,3; H, 7,54; N, 7,48; S, 4,28 %.

g, Menettelevällä savella tavalla, vutta korvaavalla 26- (2-dietyyliavinoetyyliItio-pristinavysiini IIB (rsoveer yhdisteellä 26-[2-(1-pyrrolidinyyli)etyyli]tio-pristinamy X0 siini IIB (isoveeri A), esijäähdyttävällä natriuvvetaper-jodaatln vesiliuos 12°C:een, ja toteuttavalla reaktio 6 ssa valvistettiin 26-[2-<1-pyrrolidinyyli>etyyli]su onyy li-pristinavysiini IIB:tä (isoveeri A) haalean keltaisena jauheena. Tävän vateriaalin puhdistavinen toteutettiin 15 "pika"-krovatografiän avulla [eluenttilkloroforvi-vetanoli (g5_5 tilavuuden vukaan,] ottaen talteen 25 vl:n ^aktioita. Fraktiot 23-32 yhdistettiin ja väkevöitiin nöksen tullessa liuotetuksi etyyliasetaattiin, mitä seuraa haihduttavien kloroforvin jäännöstähteiden !»««“·· '

20 vikä tuotti 26-(2-(1-pyrrolidinyyliletyyli]sulfonyyli-P

· TT -tä (isomeeri A) haalean keltaisena jauheena, tinamysiini IIB:ta (lsoraeen joka suli hitaasti 110-117 C.

Todettu: C, 59,6; H, 7,2; N, 7,7, S, 4,6 %.

Laskettuna: C34H48N409S . 0,5 CH3C02CH2CH3:lie 25 C, 59,0; H, 7,15; N, 7,65; S, 4,38 %.

h) Menettelevällä aavalla tavalla, vutta korvaavalla 26- ·- (2-dietyyliavinoetyyli)tio-pristinavysiini IIB (isoveeri A) yhdisteellä 26-(2-vorfolinoetyyli)tiopristinavysiini I B 30 (isoveeri A), esijäähdyttävällä natriuvvetaperjodaatin vesiliuos 12"C:een, ja toteuttavalla reaktio 6 C:ssa, valvistettiin 26-( 2-vorfolinoetyyli (sulfonyyli-pristinavysiinr^ : nB:tä (isoveeri A) haalean keltaisena jauheena. Tävän riaalin puhdistavinen toteutettiin "pika"-krovatografiän • ·· 35 avulla (eluentti =kloroforvl-vetanoli (95-5 kaan)1 ottaen talteen 25 ml:n fraktioita, fra o yhdistettiin ja väkevöitiin kuiviksi, jäännöksen tullessa liuotetuksi etyyliasetaattiin, vitä seurasi harhduttavrnen I! 17 86303 kloroformin jäännöstähteiden poistamiseksi, mikä tuotti 26-(2-morfolinoetyyli)sulfonyyli-pristinamysiini IlB:tä (isomeeri A) valkoisena jauheena, joka suli hitaasti 108°C:n yläpuolella.

5 Todettu: C, 57,7; H, 7,0; N, 7,6; S, 4,2 %.

Laskettuna: C34H48N4010S . 0,5 CH3CO2CH2CH3:lie: C, 57,7; H, 7,0; N, 7,48; S, 4,28 %.

Esimerkki 4

10 26-(2-dimetyyllamlnoe tyyli Jsulfonyyli-pristinamysHni IIB

(isomeeri A) -monohydraatti

Natriummetaperjodaatin (7,3 g) vesiliuosta (90 ml) lisättiin niin nopeasti kuin mahdollista yhdessä erässä 26-(2-dimetyy-liaminoetyyli)tio-pristinamysiini IIB:n (isomeeri A) 15 (4,66 g) voimakkaasti sekoitettuun liuokseen asetonissa (90 ml) 15°C:ssa, jota seurasi, yksi minuutti myöhemmin, ruteenidioksididihydraatin (50 mg) lisääminen, myös yhdessä erässä, (15 minuutin) sekoituksen jälkeen huoneenlämpötilassa, jona aikana oli muodostunut valkoinen sakka, lisättiin 20 kiinteätä natriumbikarbonaattia (4,6 g). Vielä yhden minuutin sekoittamisen jälkeen seos suodatettiin, suodinpatjan tullessa pestyksi dikloorimetaanilla (300 ml). Suodosta sekoitettiin voimakkaasti, kerrosten annettiin erottua toisistaan, ja vesikerros uutettiin uudestaan vasta valmis-. 25 tetulla dikloorimetaanilla (2 x 100 ml). Yhdistetyt di- kloorimetaaniuutteet kuivattiin vedettömän magnesiumsulfaatin päällä ja haihdutettiin, jolloin saatiin 3,6 g vaalean ruskeata jauhetta, joka puhdistettiin "pika"-kromato-grafian avulla [eluentti: kloroformi-metanoli (95-5 tilavuu-30 den mukaan)] ottaen talteen 20 ml:n fraktioita. Fraktiot ·:··: 23-45 yhdistettiin ja väkevöitiin kuiviksi alennetussa r paineessa, jolloin saatiin valkoista kiinteätä ainetta (1,3 9)' Joka luotettiin etyyliasetaattiin (10 ml). Liuosta ... lisättiin hitaasti kevytpetroliin (kp. 40-60eC) (300 ml), -·· 35 ja saostuma erotettiin suodattamalla, mikä tuotti 26-(2- dimetyyliaminoetyylijsulfonyyli-pristinamysiini IIB (iso- V-i meeri A) -mon°hydraattia valkoisena jauheena (0,7 g), Sp.

120-122 °C.

ie 86303

Todettu: C, 56,9: H, 6,96; N, 8,0; S, 4,61 *.

Laskettuna C32H46N409S . H20:lle: C. 56,5; H, 7,10; N. 8,23.

S, 4,70 %.

R Esimerkit 4a-c samalla tavalla kuin mitä tähän mennessä on kuvailtu, mutta korvaten 26-(2-dimetyyliaminoetyyli)tio- pristinamysiini IIB (isomeeri A) yhdisteellä 26 (N butyy N-metyyli-2-aminoetyyli )tio-pristinamysiini IIB (isomeer 10 A) valmistettiin 26-(N-butyyli-N-metyyli-2-aminoetyyli)su - fonyyli-pristinamysiini IIB (isomeeri A) -monohydraattia kermanvärisenä kiinteänä aineena, sp. U8-121"C.

Todettu: C, 58,7; H, 7,20; N, 7,70; S, 4,50 *.

Laskettuna: C35H52N4°9S · H20:lle‘ c' 58'2, 15 N, 7,75; S, 4,43 %.

b) Menettelemällä samalla tavalla kuin mitä tähän mennessä on kuvailtu, mutta korvaamalla 26-<2-dimetyyliaminoetyylr>^ tio-pristinamysiini IIB (isomeeri A) yhdisteellä 26-( -prpe 20 ridinoetyyliItio-pristinamysiini IIB (isomeeri A), valmrs- tettiin 26-(2-piperidinoetyyli )sulfonyyli-pristinamysrin IIB (isomeeri A) -monohydraattia valkoisena jauheena.

Todettu: C, 59,2; H, 7,20; N, 7,80; S, 4,6 %.

Laskettuna C35H50N4O9S · ®'5 ... 25 C, 59,0; H, 7,15; N, 7,86; S, 4,5 %.

c) Menettelemällä samalla tavalla kuin mitä tätä ennen on kuvailtu, mutta korvaamalla 26-(2-dimetyyliaminoetyyli)tro- pristinamysiini IIB (isomeeri A) yhdisteellä 26-(2-di-n-30 butyyliaminoetyyli)tio-pristinamysiini IIB (isomeer >.

valmistettiin 26-(2-di-n-butyyliaminoetyyli)sul£onyyli-P tinamysiini IIB:tä (isomeeri A) vaalean keltaisena jauheena, joka suli hitaasti 90°C:n yläpuolella.

; : Todettu: C, 60,9; H, 7,9; N, 7,0; S, 4,2 %.

··· 35 Laskettuna: C38H50N4OgS: Ile: C, 61,1, H, S, 4,3 %.

li 19 8 6 303

Esimerkki 5 26-(2-di-n-propyyli-aminoetyyli)sulfonyyli-pristinamysiini IIB -hydraatti (isomeeri A) 26-(2-di-n-propyyliaminoetyyli)tio-pristinamysiini IIB:n 5 (isomeeri A) (20,6 g) liuosta asetonissa (1030 ml) ja vedessä (1030 ml) jäähdytettiin 0°C:een (sisäinen lämpötila) sekoittaen. Ruteenidioksididihydraattia (0,103 g) lisättiin, minkä jälkeen lisättiin natriummetaperjodaattia (38,72 g). Yhden tunnin sekoittamisen jälkeen 0-5°C:ssa, 10 lisättiin kiinteätä natriumbikarbonaattia (20,6 g), seos suodatettiin, ja jäännös pestiin dikloorimetaanin (1000 ml) kanssa. Suodos ja pesuerät sekoitettiin perusteellisesti, orgaaninen faasi erotettiin, ja vesifaasia uutettiin vielä dikloorimetaanin kanssa (3x200 ml). Yhdistetyt or-15 gaaniset faasit kuivattiin vedettömän magnesiumsulfaatin päällä ja haihdutettiin alennetussa paineessa 40-45°C:ssa, mikä tuotti kermanväristä kiinteätä ainetta (16,9 g). 11,2 g tätä materiaalia kuumennettiin etyyliasetaatin kanssa (175 ml), ja seos suodatettiin liukenemattoman materiaalin pois-20 tamiseksi (1,2 g), jäähdytettiin sen jälkeen 0-5°C:een yön ajaksi ja suodatettiin jälleen. Suodos väkevöitiin 70 ml:n tilavuuteen, ja liuosta lisättiin hitaasti kevytpetroliin • (kp. 40-60°C) (700 ml). Muodostunut sakka erotettiin suo- ____ dattamalla, jolloin saatiin 26-(2-di-n-propyyli-aminoetyy- 25 li)sulfonyyli-pristinamysiini IIB -hydraattia (isomeeri A) kermanvärisenä kiinteänä aineena (7,8 g), sulamispiste 129-131°C hajoamisen yhteydessä.

Todettu: C, 58,4; H, 7,5; N, 7,4 %.

Laskettuna: C35H54N4O9S . H20:lle: 30 C, 58,7; H, 7,65; N, 7,6 %.

Esimerkki 6 26-(2-dietyyliaminoetyyli)sulfonyyli-pristinamysiini IIB (isomeeri A) *; 35 26-(2-dietyyliaminoetyyli)tio-pristinamysiini IIB:n (iso- meeri A) (10 g) sekoitettuun suspensioon asetonitriilissä (300 ml) lisättiin vettä (300 ml). Lähes kaikki liuennut kiinteä aine ja seos jäähdytettiin +2°C:een lisättäessä 20 8 6 303 ruteenitrikloriditrihydraattia (30 mg) yhdessä erässä, minkä jälkeen lisättiin yhtä minuuttia myöhemmin natriummetaper-jodaattia (16,2 g) myös yhdessä erässä. Sekoittamista jatkettiin 0-2°C:ssa 50 minuutin ajan, jolloin seos suodatet-5 tiin, ja suodinpatja pestiin asetonitriilillä (50 ml). Suodoksen ja pesuerien yhdisteeseen lisättiin kiinteätä natriumbikarbonaattia (6 g), minkä jälkeen lisättiin sekoittaen dikloorimetaania (150 ml) ja sitten natriumkloridia (10,6 g). Saostunut kiinteä aine suodatettiin, ja suodinpat-10 ja pestiin dikloorimetaanilla (50 ml). Suodos sekoitettiin perusteellisesti, ja ylempi orgaaninen faasi erotettiin. Alempi vesi faasi uutettiin edellisten dikloorimetaanipesu-erien kanssa. Yhdistetyt orgaaniset faasit pestiin kyllästetyllä suolaliuoksella (50 ml), kuivattiin vedettömän 15 magnesiumsulfaatin päällä ja suodatettiin, suodinpatjan tullessa pestyksi dikloorimetaanilla (50 ml). Siten saatua liuosta, 460 ml, käsiteltiin sekoittaen sitruunahapon aseto-niliuoksen kanssa (0,2 M) (68 ml), ja muodostunut maitomainen liuos dekantoitiin saostuneesta ruskeasta kumista (2,2 20 g), suodatettiin sen jälkeen piimään läpi, jolloin saatiin kirkasta haalean keltaista suodosta. Haihdutettaessa alennetussa paineessa saatiin vaaleankeltaista kiinteätä ainetta (9,84 g), jota pestiin etyyliasetaatilla (100 ml), jolloin saatiin 26-(2-dietyyliaminoetyyli)sulfonyyli-pristinamysiini 25 II3 (isomeeri A) -sitraattisuolaa vaaleankeltaisena kiinteänä aineena (9,6 g). Tämän materiaalin analyysiksi saatiin 85 % 26-(2-dietyyliaminoetyyli)sulfonyyli-pristinamysiini IIB:tä (isomeeri A) analyyttisen h.p.l.c.:n avulla käänteis-·.*.· faasipiihapon ollessa täytteenä.

30

Vaaleankeltainen kiinteä aine (9,5 g) liuotettiin veteen (100 ml), ja syntynyt keltainen liuos pestiin 1,1,2,2-tetra-kloorietaanilla (3x10 ml), sen jälkeen dikloorimetaanilla (2x10 ml). Vesifaasi oli käytännöllisesti katsoen väritöntä, 35 natriumkloridia (1 g) lisättiin, ja seosta uutettiin kuusi kertaa dikloorimetaanin kanssa (50 ml). Yhdistetyt uutteet kuivattiin vedettömän magnesiumsulfaatin päällä, väkevöitim 50 ml:n tilavuuteen, ja lisättiin kevytpetrolia (kp. 40- l! 21 86303 60°C) (100 ml). Muodostunut saostuma suodatettiin, mikä tuotti 26-(2-dietyyliaminoetyyli)sulfonyyli-pristinamysiini ΙΙβ (isomeeri A) -hemisitraattia valkoisena jauheena (3,5 g) · 5 Tämän materiaalin analyysiksi saatiin 97,3 % 26-(2-dietyyliaminoetyyli )sulfonyyli-pristinamysiini IIB:tä (isomeeri A) käänteisfaasisen h.p.l.c.:n avulla.

10 Meneteltäessä samalla tavalla kuin mitä tätä ennen on kuvattu, saatiin 26-(2-dietyyliaminoetyyli)sulfonyyli-pristinamy-siini IIB (isomeeri A) -sitraattisuolaa (8,0 g) vaaleankeltaisena kiinteänä aineena, joka liuotettiin veteen (160 ml). Keltainen liuos pestiin dikloorimetaanin kanssa (3x40 ml), 15 natriumsitraattia (10,6 g) lisättiin vesifaasiin, jota sitten uutettiin dikloorimetaanin kanssa (6x70 ml). Yhdistetyt dikloorimetaaniuutteet pestiin kyllästetyllä suolan vesiliuoksella, kuivattiin vedettömän magnesiumsulfaatin päällä ja väkevöitiin kuiviksi, mikä tuotti 26-(2-dietyy-20 liaminoetyyli)sulfonyyli-pristinamysiini IIB:tä (isomeeri A) haalean keltaisena kiinteänä aineena (3,27 g).

Todettu: C, 59,2; H, 7,3; N, 8,2; S, 4,6 %.

. Laskettuna: C34H50N4OgS: lie: c' 59,1; H, 7,29; N, 8,11; S, 4,64 %.

... 25

Esimerkki 7 26-(2-dietyyliaminoetyyli)sulfonyyli-pristinamysiini IIB (isomeeri A) 26-(2-dietyyliaminoetyyli)tio-pristinamysiini IIB:n (iso-30 meeri A) (5,0 g) liuos asetonissa (150 ml) ja vedessä (150 ml) jäähdytettiin 0°C:een (sisäinen lämpötila) voimakkaasti se-koittaen. Kiinteätä ruteenitrikloriditrihydraattia (25 m9) lisättiin, minkä jälkeen lisättiin välittömästi kiin-teätä natriummetaperjodaattia (8,1 g). Yhden tunnin sekoit-35 tamisen jälkeen 0°C:ssa, lisättiin kiinteätä natriumvetykar-...: bonaattia (5,0 g) seokseen. Vielä yhden minuutin kuluttua : seos suodatettiin piimään läpi, ja suodinpatja pestiin dikloorimetaanilla (200 ml). Suodos sekoitettiin perusteel- 22 86 303 lisesti, ja kerrokset erotettiin. Vesikerros uutettiin uudelleen vastavalmistetulla dikloorimetaanilla (100, sitten 50 ml), ja yhdistetyt uutteet kuivattiin vedettömän magnesiumsulfaatin päällä ja haihdutettiin, jolloin saatiin 5 26-(2-dietyyliaminoetyyli)sulfonyyli-pristinamysiini IIB.tä (isomeeri A) hiekkamaisena jauheena (4,1 g)·

Esimerkki 8

26-(2-dietyyliaminoetyyli)sulfonyyli-pristinamysiini IIB

10 (isomeeri A) 26-(2-dietyyliaminoetyyli)tio-pristinamysiini ΙΙβ:η (iso_ meeri A) (5,0 g) liuos asetonissa (150 ml) ja vedessä (150 ml) jäähdytettiin 0°C:een (sisäinen lämpötila) voimakkaasti se-koittaen. Tris(trifenyylifosfiini)ruteeni(II)kloridin 15 (100 mg) liuosta asetonitriilissä (10 ml) lisättiin, minkä jälkeen lisättiin välittömästi kiinteätä natnummetaper-jodaattia (8,1 g). Yhden tunnin sekoittamisen jälkeen 0°C:-ssa lisättiin kiinteätä natriumvetykarbonaattia (5,0 g).

Vielä yhden minuutin sekoittamisen kuluttua seos suodatet-20 tiin piimään läpi, suodinpatjan tullessa pestyksi dikloorimetaanilla (200 ml). Suodos sekoitettiin perusteellisesti, kerrosten annettiin erottua toisistaan, ja vesikerros uutettiin uudelleen vasta valmistetulla dikloorimetaanilla (100 ml, sitten 50 ml). Yhdistetyt uutteet kuivattiin vedettömän 25 magnesiumsulfaatin päällä ja haihdutettiin, jolloin saatiin 26-(2-dietyyliaminoetyyli)sulfonyyli-pristinamysiini IIB:tä (isomeeri A) vaalean ruskeana jauheena (3,9 g).

Esimerkki 9

30 26-(2-dietyyliaminoetyyli)sulfonyyli-pristinamysiini IIB

(isomeeri A) 26-(2-dietyyliaminoetyyli)sulfinyyli-pristinamysiini ΙΙβ·η (isomeeri Ax + A2) (1 g) liuokseen dikloorimetaanissa (40 ml) lisättiin vettä (20 ml). Seosta sekoitettiin nopeas- '.‘j 35 ti, se jäähdytettiin 0°C:een, ja ruteenitrikloriditrihyd- raatin (2 mg) liuosta vedessä (1 ml) lisättiin, minkä jäl-’· : keen lisättiin natriummetaperjodaatin liuosta (0,634 g) vedessä (6 ml) pimeässä. 25 minuutin kuluttua lisättiin I! 23 86303 ruteenitrikloriditrihydraattia (1 mg) ja natriummetaper-jodaattia (0,168 g), ja sekoitusta jatkettiin vielä 10 minuuttia. Reaktioseoksen pH säädettiin arvoon 7 lisäämällä kyllästettyä natriumbikarbonaatin vesiliuosta, ja se uutet-5 tiin dikloorimetaanilla (2 x 10 ml). Yhdistetyt uutteet pestiin vedellä (10 ml), uutettiin sen jälkeen laimeaan suolahappoon (0,01 N) (10 ml) plus veteen (20 ml). Orgaanista kerrosta, joka erosi hitaasti, uutettiin lisäksi laimealla suolahapolla (0,1 N) (1 ml) plus vedellä (20 ml). Yhdis-10 tettyjä happouutteita käsiteltiin etyyliasetaatin kanssa (40 ml), minkä jälkeen lisättiin kyllästettyä natriumbikarbonaatin vesiliuosta pH:n säätämiseksi arvoon 7. Orgaaninen kerros erotettiin, ja vesifaasia uutettiin vielä etyyliasetaatin kanssa (30 ml). Yhdistetyt orgaaniset uutteet kuivat-15 tiin vedettömän magnesiumsulfaatin päällä ja haihdutettiin alennetussa paineessa, jäännöksen tullessa kuivatuksi alipaineessa, mikä tuotti 26-(2-dietyyliaminoetyyli)sulfonyy-H'Pristinamysiini IIB:tä (isomeeri A) vaaleankeltaisena kiinteänä aineena (0,525 g).

20

Esimerkki 10 26-(2-dietyyliaminoetyyli)sulfonyyli-pristinamysiini Ilg (isomeeri A) 26—(2-dietyyliaminoetyyli)sulfinyyli-pristinamysiini IIB:n 25 (isomeeri A^ + A2) (1 g) liuokseen dikloorimetaanissa (40 ml) lisättiin vettä (20 ml), minkä jälkeen lisättiin ru-teenitrikloriditrihydraatin (2 mg) liuosta vedessä (1 ml). Seosta sekoitettiin, ja se jäähdytettiin 0°C:een silloin kun natriummetaperjodaatin (0,317 g) liuosta vedessä (3 ml) 30 lisättiin tipoittain. Neljän minuutin kuluttua lisättiin : ·: lisäerä natriummetaperjodaattia (0,317 g) vedessä (3 ml) tipoittain, minkä jälkeen, 11 minuuttia myöhemmin, lisättiin ruteeni trikloriditrihydraattia (0,5 mg) yhdessä erässä.

Kuusi minuuttia myöhemmin sekoittaminen lopetettiin, reak-··· 35 tioseos dekantoitiin, ja kyllästettyä natriumtiosulfaatin ··· vesiliuosta lisättiin, kunnes kaikki ylimääräinen natriumme- taperjodaatti oli tuhottu. Orgaaninen faasi erotettiin, ja vesifaasi uutettiin dikloorimetaanin kanssa (10 ml, sitten 24 86 303 vielä 10 ml vesifaasin kyllästämisen jälkeen natriumbikarbonaatilla ja natriumkloridilla). Yhdistetyt orgaaniset faasit pestiin natriumbikarbonaatin vesiliuoksella (10 1, pH 7), kuivattiin vedettömän magnesiumsulfaatin päällä ja 5 suodatettiin. Sekoitettuun suodokseen lisättiin piimaata (0,2 g), minkä jälkeen lisättiin tipoittain sitruunahapon liuosta (0,311 g) asetonissa (2 ml). Muodostunut seos suodatettiin, ja suodinpatja pestiin pienellä määrällä dikloori-metaania. Suodokseen lisättiin vettä (50 ml), ja sen jälkeen 10 laimeaa suolahappoa (0,1 N), joka antoi vesifaasille pH-arvon 2-3, joka erotettiin. Orgaanista faasia uutettiin vielä vedellä (10 ml) plus laimealla suolahapolla (0,1 N) (1 ml). Yhdistetyt happouutteet pestiin dikloorimetaanilla (10 ml), niitä käsiteltiin hiilimustalla, ja ne suodatettiin 15 piimään läpi. Suodosta käsiteltiin dikloorimetaanin (20 ml) ja natriumbikarbonaatin kyllästetyn vesiliuoksen kanssa, mikä antoi vesifaasille pH-arvon 7. Orgaaninen faasi erotettiin, ja vesifaasia uutettiin vielä dikloorimetaanin kanssa (2 x 20 ml). Yhdistetyt orgaaniset uutteet kuivattiin vedet-20 tömän magnesiumsulfaatin päällä, väkevöitiin kuiviksi, ja jäännös kuivattiin alipaineessa, mikä tuotti 26-(2-dietyyli-aminoetyyli Jsulfonyyli-pristinamysiini IIB:tä (isomeeri A) vaaleankeltaisena kiinteänä aineena (0,24 g).

25 Esimerkki 11

26-(2-dietyyliaminoetyyli)sulfonyyli-pristinamysiini IIB

(isomeeri A) 26-(2-dietyyliaminoetyyli)sulfinyyli-pristinamysiini IIB:n (isomeerit Aj. + A2) (882 g) liuosta dikloorimetaanissa 30 (15 1) lisättiin veteen (44 1). Seosta sekoitettiin, ja se jäähdytettiin l-2°C:een silloin kun ruteenitrikloriditrihyd-raattia (0,88 g) vedessä lisättiin, minkä jälkeen lisättiin natriummetaperjodaatin (447 g) liuosta vedessä (4,4 1), * jota lisättiin tipoittain. Ruteenitrikloriditrihydraattia 35 (0,88 g) vedessä (0,88 1) lisättiin jälleen, kun puolet natriummetaperjodaattiliuoksesta oli lisätty.

Il 25 86303

Menettelemällä samalla tavalla kuin mitä tätä ennen on kuvailtu lopputuotteen erottamiseksi, mutta muodostamalla ase-taattisuolaa, valmistettiin 26-(2-dietyyliaminoetyyli)sulfo-nyyli-pristinamysiini IIB:tä (isomeeri A) (510 g).

5 NMR-tulokset vahvistivat, että tämä yhdiste on identtinen EP-patenttijulkaisussa 191 661 olevan esimerkin 24 mukaisen yhdisteen kanssa.

Claims

26 86303 Patenttivaatimus Parannettu menetelmä aminoalkyylisulfonyyli-pristinamysiini Ilg -johdannaisen valmistamiseksi, jolla on yleinen kaava
5 O . OH ch3 f CH3 Γ o io joo (I) Wy^AysJ ch3 / \ 15 /\/ R-S02 -0 jossa R on 2-4 hiiliatomia sisältävä alkyyli, joka on sub-stituoitu 3-6 rengasatomia sisältävällä sykloalkyyliaminol-20 la, 3-6 rengasatomia sisältävällä N-alkyyli-N-sykloalkyy- liaminolla, dialkyyliaminolla tai 1-pyrrolidinyyli-, piperi-dino- tai morfolinoryhmällä, jolloin edellä mainitut alkyy-liryhmät ja -osat ovat lineaarisia tai haaroittuneita ja sisältävät, ellei toisin ole mainittu, 1-10 hiiliatomia, 25 ja sen isomeerien ja niiden seosten ja sen happoadditiosuo-lojen valmistamiseksi, hapettamalla sulfoksidiyhdiste, jolla on yleinen kaava 0 /'χ/' CH3 Jl CH3 o o o • : 35 ch3 II J| ^vV/Yv1 c-s AZ> T
40 R-SO 11-0 tai sulfidiyhdiste, jolla on yleinen kaava II 27 86303 ,
5 CH3 f CH3 Γ I 0 O ° aJ "" - i3> LI 15 joissa kaavoissa R tarkoittaa samaa kuin edellä, tunnettu siitä, että hapettaminen suoritetaan perjodihapon suolalla ja katalyyttisellä määrällä ruteeni(VIII)yhdistettä, joka 20 edullisesti valmistetaan in situ hapettamalla alemmassa hapetustilassa olevaa ruteeniyhdistettä, edullisesti ruteeni trikloriditrihydraattia, joka hapettaminen voidaan suorittaa vesipitoisessa väliaineessa, joka edullisesti sisältää vettä ja dikloorimetaania, kun lähtöaine on mainit-25 tu sulfoksidiyhdiste, ja vettä ja asetonitriiliä, kun lähtöaine on mainittu sulfidiyhdiste, lämpötilassa, joka on -5°C ja ympäristön lämpötilan välillä, jolloin perjodaatin suhde lähtöaineeseen on edullisesti 1,6:1-5:1, kun lähtöaine on mainittu sulfoksidiyhdiste, ja edullisesti 5:1-7:1, kun 30 lähtöaine on mainittu sulfidiyhdiste. 28 8 6 303 Förbättrat förfarande för framställning av ett aminoalkyl-sulfonyl-pristinamycin IIB -derivat med den allmänna formeln on ch3 f ch3 0
10 T 0 0 V (D CH3 -k Λ An k' N«/v<V' ch3 L > 15 /\/ R-S02 U-0 väri R betecknar en alkylgrupp med 2-4 kolatomer substi-tuerad med cykloalkylamino innehällande 3-6 ringatomer,
20 N-alkyl-N-cykloalkylamino innehällande 3-6 ringatomer, dialkylamino eller en 1-pyrrolidinyl-, piperidino- eller morfolinogrupp, varvid de ovan angivna alkylgrupperna och -delarna är rakkedjiga eller förgrenade och innehäller 1-10 kolatomer om inget annat anges, och isomerer därav och 25 blandningar av dessa och syraadditionssalter därav, genom oxidation av en sulfoxidförening med den allmänna formeln 30 - C»3 f CH3 0 [ 0 0 ch3 I II T
35 Xv'\ / \ /V J R-SO “-0 40 eller en sulfidförening med den allmänna formeln II 29 8 6 3 0 3 /Lh^^Y^Voh
5 CH3 f CHq J O 0 k^° CH3 X A A (11) ' -.ίο Yy 15 väri R har den ovan angivna betydelsen, kännetecknat av att oxldationen genomföres med ett perjodsyrasalt och en katalytisk mängd av en rutenium(VIII)förening, som före-20 trädesvis framställes in situ genom oxidation av en rute-niumförening med lägre oxidationstal, företrädesvis rute-niumtrikloridtrihydrat, vilken oxidation kan genomföras i ett vattenhaltigt medium, som företrädesvis innehäller vatten och diklormetan, när utgängsmaterialet är nämnda 25 sulfoxidförening, och vatten och acetonitril, när utgängs-materialet är nämnda sulfidförening, vid en temperatur mellan -5°C och omgivningens temperatur, varvid förhällandet mellan perjodatet och utgängsmaterialet företrädesvis är — 1,6:1-5:1, när utgängsmaterialet är nämnda sulfoxidförening, . 30 och företrädesvis 5:1-7:1, när utgängsmaterialet är nämnda sulfidförening.