FI86078C - Foerfarande foer bildning av resistensvektorer foer thiobacillus ferrooxidans -bakterie. - Google Patents
Foerfarande foer bildning av resistensvektorer foer thiobacillus ferrooxidans -bakterie. Download PDFInfo
- Publication number
- FI86078C FI86078C FI843386A FI843386A FI86078C FI 86078 C FI86078 C FI 86078C FI 843386 A FI843386 A FI 843386A FI 843386 A FI843386 A FI 843386A FI 86078 C FI86078 C FI 86078C
- Authority
- FI
- Finland
- Prior art keywords
- plasmid
- coli
- ferrooxidans
- recombinant plasmid
- replication
- Prior art date
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
- C12N15/74—Vectors or expression systems specially adapted for prokaryotic hosts other than E. coli, e.g. Lactobacillus, Micromonospora
Landscapes
- Genetics & Genomics (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Plant Pathology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Enzymes And Modification Thereof (AREA)
Description
1 86078
Resistenssivektoreiden muodostaminen Thiobacillus ferrooxi-dansille Tämä keksintö kohdistuu yhdistelmä-DNA:11a aikaansaatujen kloonattavien plasmidien vektoreiden muodostamiseen Thiobacillus ferrooxidans -bakteeria varten, jotka vektorit sisältävät valikoitavissa olevan kloramfenikoliresistenssin geenin ja jotka kykenevät replikoitumaan sekä T. ferrooxidans- että E. coli -bakteerissa.
Vaikka valikoitavissa olevia kloonattavia vektoreita onkin muodostettu muille bakteereille, niin tiettävästi aikaisempia raportteja sellaisten valikoitavissa olevien kloonattavien vektoreiden muodostamisesta T. ferrooxidans -bakteerille ei ole julkaistu, jotka vektorit kykenevät replikoitumaan myös E. colissa.
Tämän keksinnön mukaisesti plasmidivektori muodostetaan uuttamalla T. ferrooxidans -kannasta kryptinen DNA-plasmidi, pilkkomalla T. ferrooxidans -bakteerin plasmidi ja toinen plasmidi, joka sisältää kloramfenikoliresistenssin geenin, samalla re-striktioentsyymillä, ja ligatoimalla plasmidit yhdistelmäplas-midin muodostamiseksi. Keksinnön oleelliset tunnusmerkit on esitetty oheisissa patenttivaatimuksissa.
Toinen plasmidi voi olla plasmidi pBR325, vaikka muitakin sopivia plasmideja voitaisiin mahdollisesti käyttää pBR325:n sijasta.
Tuloksena on E. colissa replikoiva yhdistelmäplasmidi pDR401.
Keksinnön lisäpiirteen mukaisesti pDR401-plasmidi voidaan eristää uudestaan ja se voidaan modifioida pilkkomalla vähintään yhdellä restriktioentsyymillä E. colin replikaation alkamiskohdan poistamiseksi.
Vajaa yhdistelmäplasmidi pDR412 sisältää kloramfenikoliresistenssin geenin ja se replikoituu E. colissa T. ferrooxidans -bakteerin replikaation alkamiskohtaa hyväksi käyttäen.
, 86078
Keksintö käsittää myös yhd i s I e I map I asm i d i I pl>R40l ja |>UR4I2, kuten ne ohessa on määritelty, ja jotka plasmidit oval uusia valikoitavissa olevia sukkuIavekloreLta, ja joita voidaan käyttää geneettisen manipuloinnin kokeissa, joissa käytetään myös T. f en oox i dans- ja K . <·<> I i -bak I opi e i I a .
Täten keksinnön I η I oksm.» on plasm id i pl)R4<>l , jonka koko un noin 17,8 kb, ja joka on jaettu kolmeen fragmenttiin, kooltaan 3,5 kb, 6,2 kb ja 8,1 kb, vastaavasti, testt ik I ioentsyymi 1ίä Pvu 1 .
Keksinnön tuloksena on myös plasmidi. pl>R41.2, jonka koko on noin 14,8 kb, ja joka on jaettu kolmeen fragmenttiin, koollaan 3,5 kb, 5,1 kb ja 6,2 kb, vastaavast i, restrikt ioentsyymiI Iä Pvul.
Eräs tämän keksinnön esimerkki esitetääti oheiseen kuvaan viitaten, joka esittää kryptisen pLasmidin restriktiokarttaa, ja keksinnön mukaisia yhdis te Imäplasmideja.
12,4 kiloemäksen (kb) kryptinen plasmidi ρΊΤ-!·’(’2 uutettiin T.ferrooxidans-kannasta EC, joka oli eristetty kaivoksesta Fairview Mine, General Mining Union Corporation Limited,
Etelä-Afrikka, peräisin olevasta happamasta uuttones teestä. pTF-FC2:n restriktiokartoittaminen osoittaa, että siinä on ainoastaan yksi Pstl, Xhol, Kpnl, EcoRl, Apal, Cla L-restriktio-kohta ja kaksi Pvul-restrikt iokohtaa, (katso oheinen piirustus).
♦ m ·*·*: Yhdistelmäplasmidi. pl)R401 muodostettiin istuttamalla E.colin .j· plasmidi pBR325 pTF-l'’C2:n Pst l-koh taan. pBR325 sisältää ampisilliini- (Ap), kl oramfen ikol i - (Cm) ja tetrasykliini- (Te) resistenssin geenit. Pstl-koht aan suori Lettu kloonaus Lnaktivoi . . Λρ^-geonin istuttamisesta johtuen ja K.co1i IransIormanlit , jotka tyypiltään olivat Cm**, Te** ja Ap'’ eristettiin. Yhdistelmäplas- • · * •# midi pDR401 (noin 17,8 kb) uutettiin F.. co l i - t r ans f orman te i s t a ; ja sen ominaisuudet selvitettiin res t r i k t ioanalyys i L l ä . Tämä * * r n uusi yhdistelmäplasmidi sisältää Cm - ja Te -geenit, ja se kyke- • · *. nee replikoitumaan T.Ferrooxidans- ja E.colj-bakteereissa.
mm· m m
II
’ 86078
Vajaa plasmidi pDR4 I 7 (noin 14,H kb) muodost et t i in s f n jälkeen, kun pl>R40.1:n Sal1/Xho| oli pilkotin ja kun SnI 1/Xho1 - fragmentti (noin 3,0 kb) oli poisteltu, joka fragmentti slsäLsi pBR325:n repi i kna l: i.on alkamiskohdan, ja arviolla puolet Te-qeen i s tn ja T.Ierrooxidansin ρΊΤ |'(V DNA : n noin 0,1 kiloemäksen suuruisen kappaleen. Restrik I .ivana Iyysi I Iä varmistuttiin siitä, että 3,1 kiloemäksen Sal 1 /Xhol - f ragmen 11 i puuttui plasmidista pl)R412.
Tämä uusi yhdistelmäplasmidi sisältää Cm -geenin ja se kykenee replikoituinaan T. f erroox i dans- ja F . co 1 i-bak teere i ssa .
Näiden kahden plasm id in pbIMOl ja pl>R4 I 2 omi naisuudet sc'lvi lettiin endonukleolyy11isei Iä pilkkomisella restriktioentsyymiä käyttäen.
Täten restriktioentsyymi Pvul pilkkoo plasmidin kolmeen fragmenttiin, jotka ovat kooltaan 3, r> kb, 0,2 kb ja H,1 kb, vastaavasti .
Sama restrikt ioent syymi Pvul pilkkoo plasmidin pl)R412 kolmeen fragmenttiin, jotka ovat kooltaan 1,0 kb, Γ>, I kb ja (>, 2 kb, vastaavasti.
« i · · » » · • · • « • 0 * • · · • · • * · » · · • · • m ♦ · · • · • · · • · * • · • * · • * • · · • · * — ! V--; i j
Claims (5)
1. Menetelmä resistensslvektoreiden muodostamiseksi Thio-bacillus ferrooxidansille, tunnettu siitä, että menetelmä käsittää seuraavat vaiheet: (a) uutetaan kryptinen DNA-plasmidi T. ferrooxidans -kannasta, pilkotaan T. ferrooxidans -plasmidi ja plasmidi pBR325, joka sisältää kloramfenikoliresistenssin geenin ja E. colin replikaation alkamiskohdan, samalla restriktioentsyymillä, ja ligatoidaan plasmidit yhdistelmäplasmidin muodostamiseksi, (b) transformoidaan E. coli -solut yhdistelmäplasmidilla ja valikoidaan kloramfenikoliresistentit transformantit, jotka kykenevät replikoitumaan E. colissa, ja (c) poistetaan E. colin replikaation aloituskohta yhdistel-mäplasmidista pilkkomalla restriktioentsyymillä deletoidun yhdistelmäplasmidin muodostamiseksi, joka kykenee replikoitumaan sekä E. colissa että T. ferrooxidansissa.
2. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että kryptinen DNA-plasmidi on pTF-CF2, jonka koko on 12,4 kb.
3. Patenttivaatimuksen 1 tai 2 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että plasmidi pBR325 istutetaan pTF-CF2-plasmidin Pstl-kohtaan.
4. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että toisessa pilkkomisvaiheessa yhdistelmäplasmidis-ta poistetaan noin 3,0 kiloemäksen kokoinen fragmentti, joka sisältää toisen plasmidin replikaation alkamiskohdan.
4 86078
5. Deletoitu yhdistelmäplasmidi pDR412, joka on muodostettu patenttivaatimuksen 1 (c)-kohdassa ja joka on tunnettu siitä, että se on kooltaan noin 14,8 kb, ja jaettu kolmeen fragmenttiin kooltaan 3,5 kb, 5,1 kb ja 6,2 kb, vastaavasti, restriktioentsyymillä Pvul. Il 5 86078
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| ZA8306375 | 1983-08-29 | ||
| ZA836375 | 1983-08-29 |
Publications (4)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| FI843386A0 FI843386A0 (fi) | 1984-08-28 |
| FI843386A FI843386A (fi) | 1985-03-01 |
| FI86078B FI86078B (fi) | 1992-03-31 |
| FI86078C true FI86078C (fi) | 1992-07-10 |
Family
ID=25576885
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| FI843386A FI86078C (fi) | 1983-08-29 | 1984-08-28 | Foerfarande foer bildning av resistensvektorer foer thiobacillus ferrooxidans -bakterie. |
Country Status (12)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US4711849A (fi) |
| JP (1) | JPS6091988A (fi) |
| AT (1) | AT391143B (fi) |
| AU (1) | AU584584B2 (fi) |
| BE (1) | BE900457A (fi) |
| BR (1) | BR8404310A (fi) |
| CA (1) | CA1226538A (fi) |
| DE (1) | DE3431780A1 (fi) |
| FI (1) | FI86078C (fi) |
| FR (1) | FR2551086B1 (fi) |
| GB (1) | GB2148300B (fi) |
| SE (1) | SE460055B (fi) |
Families Citing this family (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CA1226539A (en) * | 1983-09-09 | 1987-09-08 | David R. Woods | Construction of arsenic resistance vectors for thiobacillus ferrooxidans |
| JPS63209591A (ja) * | 1987-02-27 | 1988-08-31 | Dowa Mining Co Ltd | チオバチルス属菌のための組換えプラスミド、水銀耐性ベクタ−プラスミドおよびそれらの作製法 |
| US5132221A (en) * | 1989-05-10 | 1992-07-21 | The United States Of America As Represented By The United States Department Of Energy | Lysogenic bacteriophage isolated from acidophilium |
| USH1074H (en) | 1990-02-27 | 1992-07-07 | The United States Of America As Represented By The United States Department Of Energy | Bacterio-electric leaching of metals |
Family Cites Families (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4340674A (en) * | 1980-05-05 | 1982-07-20 | The Upjohn Company | Cointegrate plasmids and their construction from plasmids of Escherichia and Streptomyces |
| FR2512058A1 (fr) * | 1981-08-25 | 1983-03-04 | Centre Nat Rech Scient | Nouveaux plasmides destines a ameliorer les capacites d'oxydation des thiobacillus, souches transformees et application a l'oxydation des metaux |
| CA1226539A (en) * | 1983-09-09 | 1987-09-08 | David R. Woods | Construction of arsenic resistance vectors for thiobacillus ferrooxidans |
-
1984
- 1984-08-28 FI FI843386A patent/FI86078C/fi not_active IP Right Cessation
- 1984-08-28 AU AU32453/84A patent/AU584584B2/en not_active Ceased
- 1984-08-28 CA CA000461928A patent/CA1226538A/en not_active Expired
- 1984-08-29 BE BE0/213557A patent/BE900457A/fr not_active IP Right Cessation
- 1984-08-29 SE SE8404290A patent/SE460055B/sv not_active Application Discontinuation
- 1984-08-29 FR FR8413393A patent/FR2551086B1/fr not_active Expired
- 1984-08-29 AT AT2767/84A patent/AT391143B/de not_active IP Right Cessation
- 1984-08-29 DE DE19843431780 patent/DE3431780A1/de active Granted
- 1984-08-29 JP JP59180227A patent/JPS6091988A/ja active Pending
- 1984-08-29 GB GB08421834A patent/GB2148300B/en not_active Expired
- 1984-08-29 BR BR8404310A patent/BR8404310A/pt not_active IP Right Cessation
- 1984-11-01 US US06/667,254 patent/US4711849A/en not_active Expired - Fee Related
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| GB8421834D0 (en) | 1984-10-03 |
| DE3431780A1 (de) | 1985-04-18 |
| SE8404290L (sv) | 1985-03-01 |
| CA1226538A (en) | 1987-09-08 |
| AU584584B2 (en) | 1989-06-01 |
| SE8404290D0 (sv) | 1984-08-29 |
| FI843386A0 (fi) | 1984-08-28 |
| AT391143B (de) | 1990-08-27 |
| BR8404310A (pt) | 1985-07-30 |
| FI86078B (fi) | 1992-03-31 |
| DE3431780C2 (fi) | 1988-07-28 |
| JPS6091988A (ja) | 1985-05-23 |
| SE460055B (sv) | 1989-09-04 |
| FI843386A (fi) | 1985-03-01 |
| FR2551086A1 (fi) | 1985-03-01 |
| FR2551086B1 (fi) | 1988-08-26 |
| GB2148300A (en) | 1985-05-30 |
| AU3245384A (en) | 1985-03-07 |
| ATA276784A (de) | 1990-02-15 |
| BE900457A (fr) | 1984-12-17 |
| GB2148300B (en) | 1988-07-13 |
| US4711849A (en) | 1987-12-08 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Old et al. | Principles of gene manipulation: an introduction to genetic engineering | |
| Jayaram et al. | The yeast plasmid 2μ circle encodes components required for its high copy propagation | |
| Fuller | A family of cloning vectors containing the lacUV5 promoter | |
| Kaufman et al. | Improved vectors for stable expression of foreign genes in mammalian cells by use of the untranslated leader sequence from EMC virus | |
| EP0309237B1 (en) | A transient expression system for producing recombinant protein | |
| JPS59173096A (ja) | ポリシストロン性発現ベクターおよびそれを用いた方法 | |
| Stragier et al. | Regulation of diaminopimelate decarboxylase synthesis in Escherichia coli: I. Identification of a lysR gene encoding an activator of the lysA gene | |
| US4418149A (en) | Fused hybrid gene | |
| Comai et al. | A new technique for genetic engineering of Agrobacterium Ti plasmid | |
| EP0331961B1 (en) | Method for protein synthesis using CKS fusion proteins | |
| US4503142A (en) | Open reading frame vectors | |
| NO167674B (no) | Fremgangsmaate for fremstilling av et plasmid. | |
| Schäfer et al. | Cloning and characterization of a DNA region encoding a stress-sensitive restriction system from Corynebacterium glutamicum ATCC 13032 and analysis of its role in intergeneric conjugation with Escherichia coli | |
| Raibaud et al. | A technique for integrating any DNA fragment into the chromosome of Escherichia coli | |
| DD158918A5 (de) | Verfahren zur erzeugung eines verbesserten clonierungsverktors | |
| AU2008203185B2 (en) | Plasmids for transforming bacteria of the Acidithobacillus spp. Genus, and transformation method | |
| FI86078C (fi) | Foerfarande foer bildning av resistensvektorer foer thiobacillus ferrooxidans -bakterie. | |
| Riechmann et al. | Identification of the initiation codon of plum pox potyvirus genomic RNA | |
| Redaschi et al. | Posttranscriptional Regulation ofEcoP1I andEcoP15I Restriction Activity | |
| FI86888B (fi) | Foerfarande foer konstruering av arsenresistenta plasmider. | |
| HORINOUCHI et al. | The cloned Streptomyces bikiniensis A-factor determinant | |
| Michalides et al. | Site-specific rearrangements in the long terminal repeat of extra mouse mammary tumor proviruses in murine T-cell leukemias | |
| Rasmussen et al. | In vivo and in vitro synthesis of Escherichia coli maltose-binding protein under regulatory control of the lacUV5 promoter-operator | |
| Perez et al. | Expression of the Rous sarcoma virus env gene from a simian virus 40 late-region replacement vector: effects of upstream initiation codons | |
| Moreau et al. | Site-specific integration of corynephage ε 16: construction of an integration vector |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM | Patent lapsed | ||
| MM | Patent lapsed |
Owner name: GENERAL MINING UNION CORPORATION LIMITED |