FI85140C - Foerfarande foer framstaellning av nya terapeutiskt anvaendbara n-(1h-indol-4-yl)-bensamidderivat. - Google Patents

Description

! 85140

Menetelmä uusien terapeuttisesti käyttökelpoisten N-(1H-indol-4-yyli)-bentsamidijohdannaisten valmistamiseksi

Keksintö koskee menetelmää N-(lH-indol-4-yyli)-5 bentsamidin uusien johdannaisten ja niiden suolojen valmistamiseksi .

N-(lH-indol-4-yyli)-bentsamidin johdannaiset on esitetty EP-hakemusjulkaisussa nro 213984 (= FI-hakemus nro 862909). Nämä johdannaiset vastaavat seuraavaa yleis-10 kaavaa ^ /R1 B c r2 20 jossa R ja tarkoittavat, riippumatta toisistaan, vety-atomia, 1-5 hiiliatomia sisältävää lineaarista alkyylira-dikaalia, 3-5 hiiliatomia sisältävää haarautunutta alkyy-liradikaalia, 3-7 hiiliatomia sisältävää sykloalkyylira-dikaalia, 4-7 hiiliatomia sisältävää sykloalkyylialkyyli-25 radikaalia tai 7-12 hiiliatomia sisältävää aralkyyliradi- kaalia, joka on mahdollisesti substituoitu 1, 2 tai 3:11a radikaalilla ryhmästä, jonka muodostavat halogeenit ja metyyli, etyyli, metoksi, etoksi, trifluorimetyyli, metyylitkö, amino tai nitroradikaalit, tai R ja Rx muodos-30 tavat yhdessä tyydyttyneen tai tyydyttymättömän hetero- syklin, joka voi sisältää toisen heteroatomin, joka voi olla happi-, rikki- tai typpiatomi, tämän typpiatomin ollessa mahdollisesti substituoitu 1-5 hiiliatomia sisältävällä alkyyliradikaalilla, fenyyliradikaalilla, substi-35 tuoidulla fenyylillä tai naftyylillä tai 7-12 hiiliatomia sisältävällä aralkyyliradikaalilla, R3 tarkoittaa vety- 2 85140 atomia, 1-5 hiiliatomia sisältävää alkyyliradikaalia, 1-3 hiiliatomia sisältävää alkoksiradikaalia, kloori-, bromi- tai jodiatomia, nitroradikaalia tai aminoradikaalia, joka on mahdollisesti substituoitu 2-5 hiiliatomia sisäl-5 tävällä alifaattisella asyyliryhmällä tai 1-5 hiiliatomia sisältävällä alkyyliradikaalilla, a tarkoittaa yhdessä b:n kanssa oksiryhmää, tai c:n kanssa hiili-hiilisidosta, b tarkoittaa vetyatomia tai yhdessä a:n kanssa oksiryhmää, c tarkoittaa vetyatomia tai yhdessä a:n kanssa hii-10 li-hiilisidosta, A tarkoittaa -(CH2)n- ketjua, jossa n voi saada arvot 2, 3, 4 tai 5 tai -(CH2)„-CH-CH2- ketjua,

OH

jossa m voi saada arvot 1, 2 tai 3, B tarkoittaa -CO-NH-tai -NH-CO- ketjua, R2 tarkoittaa vetyatomia, 1-5 hiili-15 atomia sisältävää lineaarista alkyyliradikaalia tai 3-5 hiiliatomia sisältävää haarautunutta alkyyliradikaalia.

Esitetyillä yhdisteillä on kiinnostavia farmakologisia ominaisuuksia ja etenkin huomattavia anti-arytmisiä ominaisuuksia. Keksintö koskee tämän EP-patentin yleis-20 kaavan piiriin kuuluvia uusia yhdisteitä, joilla on erityisen kiinnostavia anti-arytmisiä ominaisuuksia.

Keksinnön kohteena on menetelmä kaavan (I) mukaisten terapeuttisesti käyttökelpoisten N-(lH-indol-4-yyli)-bentsamidijohdannaisten ja niiden happoadditiosuolojen 25 valmistamiseksi, äo <« ·' H- /U-o OH H 3 fn

35 H

ii 3 85140 jossa X merkitsee vetyatomia tai 1-3 hiiliatomia sisältävää alkoksiradikaalia, ja Y merkitsee vetyatomia, kloori-, bromi- tai jodiatomia, nitroradikaalia tai aminora-dikaalia, joka on mahdollisesti substituoitu 2-5 hiili-5 atomia sisältävällä alifaattisella asyyliryhmällä tai yhdellä tai kahdella 1-5 hiiliatomia sisältävällä alkyyli-radikaalilla.

Kun X tarkoittaa alkoksiradikaalia, se on metoksi, etoksi, n-propoksi tai isopropoksiradikaali.

10 Kun Y tarkoittaa aminoradikaalia, joka on substi tuoitu 2-5 hiiliatomia sisältävällä alifaattisella asyyliryhmällä, se on edullisesti aminoradikaali, joka on substituoitu edullisesti asetyyli- tai propionyyliradi-kaalilla.

15 Kun Y tarkoittaa aminoradikaalia, joka on substi tuoitu yhdellä tai kahdella alkyyliradikaalilla, ovat nämä edullisesti metyyli- tai etyyliradikaaleja.

Mineraali- tai orgaanisten happojen additiosuolat voivat olla muodostettuja esimerkiksi kloorivety-, bromi-20 vety-, typpi-, rikki-, fosfori-, etikka-, muurahais-, propioni-, bentsoe-, maleiini-, fumariini-, meripihka-, viini-, sitruuna-, oksaali-, glyoksaali- ja asparagiini-hapoista, alkaanisulfonihapoista, kuten metaani- ja etaa-nisulfonihapoista, aryylisulfonihapoista, kuten bentsee-25 ni- Ja paratolueenisulfonihapoista sekä aryylikarboksyy- lihapoista.

Keksinnön kohteena on erityisesti edellä määritellyn kaavan (I) mukaisten yhdisteiden valmistaminen, joissa X tarkoittaa metoksiradikaalia ja Y tarkoittaa vety-30 atomia tai Y tarkoittaa klooriatomia, nitro-, amino- tai asetyyliaminoradikaalia ja X tarkoittaa vetyatomia, samoin kuin niiden happoadditiosuolojen valmistus, ja etenkin 2-[3-[(1,1-dimetyylietyyli)amino]-2-hydroksipropok-si]-N-(lH-indol-4-yyli)-5-nitrobentsamidin ja sen happo-35 additiosuolojen valmistus.

4 85140

Keksinnön mukaiselle menetelmälle on tunnusomaista, että kaavan (II) mukainen yhdiste

A

/^0 (II)

H-N

,o

H

jossa X ja Y tarkoittavat samaa kuin edellä, saatetaan reagoimaan kaavan (III) mukaisen halogenidin kanssa 15

Hal-CH0-CH-CH_ (III)

Z \ / Z

O

kaavan (IV) mukaisen yhdisteen saamiseksi 20 X

Yx f 0-CH2-CH-CHo s. V/2 <IV) 25 ho 0 H—li όφ

H

30 joka saatetaan reagoimaan tert.-butyyliamiinin kanssa kaavan (I) mukaisen yhdisteen saamiseksi, joka haluttaessa saatetaan reagoimaan mineraali- tai orgaanisen hapon kanssa suolan saamiseksi.

Kun X tai Y tarkoittavat alkoksiryhmää tai kloo-: 35 ri-, bromi- tai jodiatomia kaavan (II) mukaisessa yhdis- li 5 85140 teessä, Hai tarkoittaa edullisesti klooriatomia kaavan (111) mukaisessa yhdisteessä.

Reaktio kaavojen (II) ja (III) mukaisten yhdisteiden välillä suoritetaan edullisesti emäksen, kuten ka-5 lium- tai natriumkarbonaatin, NaOH:n tai KOH:n läsnä ollessa.

Kun Y tarkoittaa nitroryhmää kaavan (I) mukaisessa yhdisteessä, Hai tarkoittaa edullisesti bromiatomia kaavan (III) mukaisessa yhdisteessä. Reaktio suoritetaan 10 kuumentamalla kaavan (IV) mukaista yhdistettä samalla refluksoiden.

Kaavan (IV) mukaisen johdannaisen ja tert.-butyy-liamiinin välinen reaktio suoritetaan käyttämällä liuottimena alifaattista alkoholia kuten metanolia tai etano-15 lia.

Kun halutaan valmistaa kaavan (I) mukainen yhdiste, jossa Y tarkoittaa mahdollisesti substituoitua ami-noradikaalia, voidaan kaavan (I) mukainen yhdiste, jossa Y tarkoittaa nitroradikaalia, pelkistää ja haluttaessa 20 saatetaan aminojohdannainen reagoimaan sen substituentin johdannaisen kanssa, joka halutaan saada.

Vastaavat työskentelyolosuhteet ovat yleisesti tunnettuja.

Kaavan (II) mukaisen yhdisteen lähtöaine voidaan 25 valmistaa 4-aminoindolin ja X:llä tai Y:llä substituoidun hydroksibentsoehapon välisellä reaktiolla.

Keksinnön mukaisesti saaduilla johdannaisilla on erittäin kiinnostavia farmakologisia ominaisuuksia; niillä on erityisesti huomattavia antiarytmisiä ominaisuuksia 30 ja eräillä yhdisteillä on antikalsisia ominaisuuksia.

Näitä ominaisuuksia kuvataan edempänä kokeellisessa osassa.

Nämä ominaisuudet puoltavat kaavan (I) mukaisten N-(lH-indol-4-yyli)-bentsamidin johdannaisten, samoin - : 35 kuin niiden suolojen käyttöä lääkkeinä.

6 85140

Keksinnön mukaisten lääkkeiden joukosta erityisen kiinnostavia ovat ne, jotka koostuvat kaavan (I) mukaisen N-(lH-indol-4-yyli)-bentsamidin uusista johdannaisista, joissa X tarkoittaa metoksiradikaalia ja Y tarkoittaa ve-5 tyatomia tai Y tarkoittaa klooriatomia, nitro-, amino-tai asetyyliaminoradikaalia ja X tarkoittaa vetyatomia, samoin kuin niiden happoadditiosuoloista.

Näiden joukosta erityisen kiinnostava on 2-[3-[(1,1-dimetyylietyyli)amino]-2-hydroksipropoksi]-N-(1H-10 indol-4-yyli)-5-nitrobentsamidi samoin kuin sen happoad-ditiosuolat.

Keksinnön mukaisia lääkeaineita käytetään esimerkiksi rytmihäiriöiden ja kipujen hoidossa.

Tavanomainen annos, joka vaihtelee käytetyn joh-15 dannaisen, hoitokohteen ja taudin syyn mukaan, voi olla esimerkiksi 50 mg - 1 g/päivä. Esimerkin 1 johdannaista voidaan antaa potilaalle oraalisesti päivittäisenä annoksena esimerkiksi 200 mg - 800 mg, ventikulaaristen, sup-raventikulaaristen ja liitoskohtien rytmihäiriöiden hoi-20 toon, ts. 3 mg - 12 mg/kg ruumiinpainoa kohden.

Kaavan (1) mukaisia johdannaisia sekä niiden farmaseuttisesti hyväksyttäviä happoadditiosuoloja voidaan käyttää niitä vaikuttavana aineena sisältävien farmaseuttisten yhdisteiden valmistuksessa.

25 Lääkkeiksi tarkoitettavia keksinnön mukaisia joh dannaisia ja niiden farmaseuttisesti hyväksyttäviä happoadditiosuoloja voidaan yhdistää sellaisiin farmaseuttisiin seoksiin, jotka on tarkoitettu annettavaksi diges-tiivisesti tai parenteraalisesti.

30 Nämä farmaseuttiset seokset voivat olla esimerkik si kiinteitä tai nestemäisiä aineita ja esiintyä kaikissa ihmislääketieteessä tavallisesti käytetyissä farmaseuttisissa muodoissa, kuten esimerkiksi tavallisina tai päällystettyinä tabletteina, kapseleina, rakeina, suppositöö-35 reinä, injektoitavina valmisteina; ja ne valmistetaan ta- li 7 85140 vanomaisilla menetelmillä. Vaikuttava tai vaikuttavat aineet voidaan sekoittaa tavanomaisiin farmaseuttisissa seoksissa käytettyihin kantaja-aineisiin, kuten talkkiin, arabiku-miin, laktoosiin, tärkkelykseen, magnesiumstearaattiin, 5 kaakaovoihin, vesipitoiseen tai vettä sisältämättömään väliaineeseen, eläin- tai kasviperäisiin rasvoihin, paraffiinin johdannaisiin, glykoleihin, erilaisiin kosteuttaviin, dispergoiviin tai emulgoiviin aineisiin ja säilöntäaineisiin.

10 Seuraavat esimerkit kuvaavat keksintöä sitä miten kään rajoittamatta.

Esimerkki 1 2-/,3-/"(1 ,1-dimetyylietyyli) aminQ7-2-hydroksipropoksj7N-(1H-indol-4-yyli)-5-nitrobentsamidi ja sen hydrokloridi 15 Liuosta, jossa on 9,8 g 2-hydroksi-5-nitro-N-(1H- 3 indol-4-yyli)-bentsamidia ja 40 cm epibromihydriiniä. Ylimäärä epibromihydriinistä poistetaan alipaineessa 60°C:ssa, saatu hartsi otetaan ja liuotetaan 100 ml:aan etanolia ja o 40 cm :iin terbutyyliamiinia ja liuosta kuumennetaan ref-20 luksoimalla 2 tuntia. Ylimäärä liuottimesta ja reagenssis-ta poistetaan alipaineessa 60°C:n lämpötilassa ja saadaan 78 g karkeaa tuotetta. Puhdistus suoritetaan kahdella peräkkäisellä silikageelikromatografoinnilla (ensimmäinen: eluentti:kloroformi-8-metanoli-1-trietyyliamiini-1, toinen: .·. 25 eluentti:kloroformi-5-asetoni-4-trietyyliamiini-1). Saadaan -’ 4,4 g yhdistettä emäksenä, sp. = 208°C.

Hydrokloridin muodostus 3,5 g edellä saatua emästä liuotetaan litraan isopropanolia ja 250 cm:iin metanolia refluksoimalla, liuok-30 seen lisätään suolahapolla kyllästettyä etyyliasetaattia, kunnes pH on happaman puolella. Liuosta kuumennetaan 30 min '*"· refluksoimalla, se konsentroidaan noin 500 cm :iin, jääh- dytetään jäissä, suodatetaan ja kuivataan alipaineessa -t. 50°C:ssa. Saadaan 2,85 g haluttua yhdistettä, sp. = 260°C.

β 85140

Analyysi:

Laskettu: C % 57,08 H % 5,88 N % 12,10 Cl % 7,66 Saatu: 56,8 6,1 12,0 7,4 2-hydroksi-5-nitro-N-(1H-indol-4-yyli)-bentsamidin 5 valmistus 3

Liuosta, jossa on 6 g 4-aminoindolia, 150 cm tetra-hydrofuraania, 8,4 g 5-nitrosalisyylihappoa ja 12,5 g disykloheksyylikarbodi-imidiä kuumennetaan refluksoimalla 3 tuntia. Liuos jäähdytetään, suodatetaan, lisätään 200 cm^ 10 etyyliasetaattia, poistetaan ylimäärä 4-aminoindolista, joka ei ole reagoinut pesemällä 1N:lla suolahapolla, kuivataan, suodatetaan ja haihdutetaan kuiviin alipaineessa 50°C:ssa. Saadaan 20 g hartsia, joka liuotetaan kloroformin ja metanolin (50/50) seokseen, suodatetaan, kuivataan ali-15 paineessa ja saadaan 7,5 g haluttua yhdistettä, sp. > 260°C. Esimerkki 2 5-amino-2-/3-/~( 1 ,1 -dimetyylietyyli) amino7-2-hydroksi-propoksi_7N- (1 H-indol-4-yyli) -bentsamidi 3

Seosta, jossa on 142 g esimerkin 1 yhdistettä, 5 cm 3 20 metanolia, hyppysellinen Raneyn nikkeliä ja 0,2 cm hyd-ratsiinihydraattia, kuumennetaan 1 tunnin ajan refluksoimalla. Seos suodatetaan, metanoli poistetaan alipaineessa 50°C:ssa ja saadaan 128 mg haluttua yhdistettä.

UV Spektri: 25 etanoli:

Maks. 219 nm E11 = 443

Maks. 310 nm = 230

etanolissa, HC1 N

O.: 10 30 Maks. 299 nm E11 = 208 £= 8 200

Infl.: 275 ja 332 nm Esimerkki 3 5-asetyyliamino-2/3-/~|1,1 -dimetyylietyylff amino-2-hydroksi-propoksj7 N-(1H-indol-4-yyli)-bentsamidi ja sen neutraali 35 oksalaatti

Vaihe A: 5-amino-2-hydroksi-N-(1H-indol-4-yyli)-: bentsamidi 9 85140

Seosta, jossa on 6 g esimerkissä 1 valmistettua 5-nitro-2-hydroksi-N-(lH-indol-4-yyli)-bentsamidia, 600 cm^ metanolia ja 15 cm 64 %:sta hydratsiinihydraattia kuumennetaan 2 tuntia refluksoimalla 6 g Roneyn Nikkelin kanssa.

5 Saatu liuos suodatetaan, liuotin poistetaan alipaineessa 50°C:ssa, otetaan jäännös kloroformin ja metanolin (1-1) seokseen, suodatetaan kiteytynyt yhdiste, kuivataan ja saadaan 4 g haluttua yhdistettä, sp. > 260°c.

Vaihe B: 5-asetyyliamino-2-asetoksi-N-(1H-indol-4-10 yyli)-bentsamidi 2,6 g edellisessä vaiheessa valmistettua yhdistettä 70 emissä tetrahydrofuraania jäähdytetään 0/+5°C:seen,

O

jonka jälkeen lisätään 4,7 cm etikkahapon anhydridiä, ja liuosta pidetään 3 tuntia vallitsevassa lämpötilassa. Liuo-15 tin poistetaan alipaineessa 50°C:ssa, jäännös otetaan kloroformin ja metanolin (1-1) seokseen, suodatetaan ja kuivauksen jälkeen 80°C:ssa saadaan 2,7 g haluttua yhdistettä, sp. = 263°C.

Valhe C: 5-asetyyliamino-2-hydroksi-N-(1H-indol-4-20 yyli)-bentsamidi

Liuokseen, jossa on 1,5 g edellä saatua yhdistettä ja 150 cm metanolia, lisätään vallitsevassa lämpötilassa 1,5 g boori- ja natriumhydridiä, ja seosta kuumennetaan 2 tuntia ref luksoimalla. Metanoli poistetaan osittain ali- 25 paineessa 50°C:ssa, seos laimennetaan 200 cm^:llä vettä ja ‘ 3 200 cm :llä etyyliasetaattia, jonka jälkeen sitä uutetaan etyyliasetaatilla. Liuos kuivataan, liuottimet poistetaan alipaineessa 50°C:ssa ja saadaan 1,35 g haluttua yhdistettä, joka käytetään sellaisenaan seuraavassa vaiheessa.

30 Vaihe D: 5-asetyyliamino-2-/.(2-oksiranyyli)metoksi7- N-(1H-indol-4-yyli)-bentsamidi -· Liuosta, jossa on 3,5 g vaiheessa C valmistettua 3 : : · yhdistettä, 150 cm asetonia, 1,6 g kaliumkarbonaattia ja 9 cmJ epibromihydriiniä kuumennetaan ref luksoimalla 2 tun-35 tia. Liuokseen lisätään uudelleen 9 cm epibromihydriiniä 10 85Ί 40 ja refluksointia jatketaan 20 tunnin ajan. Liuos suodatetaan, pestään asetonilla, liuotin poistetaan alipaineessa 50°C:ssa, jäännös otetaan eetteriin, suodatetaan, kuivataan 80°C:ssa ja saadaan 3,4 g haluttua yhdistettä, sp. = 5 230°C.

Vaihe E: 5-asetyyliamino-2-/3-/~( 1 ,1 -dimetyylietyyli) - amino7-2-hydroksipropoksi?LT- (1 H-indol-4-yyli) -bentsamidi ja sen neutraali oksalaatti

Liuosta, jossa on 3,4 g yllä saatua yhdistettä 3 3 10 200 cm :ssä etanolia ja 20 cm terbutyyliamiinia, kuumenne taan refluksoimalla tunnin ajan. Liuottimet poistetaan alipaineessa 50°C:ssa, jäännös puhdistetaan silikageeli-kromatografiällä (eluentti:kloroformi-metanoli-trietyyli-amiini 8-1-1) ja saadaan 3,9 g haluttua emästä.

15 Oksalaatin valmistus 2,7 g emästä liuotetaan 200 cm^:iin etanolia ja lisätään 330 mg oksaalihappoa. Liuos suodatetaan, kuivataan 80°C:ssa alipaineessa, ja saadaan 2,2 g haluttua oksalaat-tia, sp. > 260°C.

20 Analyysi: C24H N^, 1/2 C2H2C>4 : 423,549 Laskettu: C % 62,10 H % 6,46 N % 11,59

Saatu: 61,9 6,2 11,5

Esimerkki 4 2~!_3~£( 1 ,1 -dimetyylietyyli) amino7~2-hydroksipropoksiy-25 N-(1H-indol-4-yyli)-4-metoksibentsamidi ja sen bentsoaatti Vaihe A: 4-metoksi-2-/1( 2-oksiranyy li) metoksi/- ... N- (1 H-indol-4-yy li) -bentsamidi

Toimitaan kuten esimerkin 3 vaiheessa D käyttämällä • - : 5 g 4-metoksi-2-hydroksi-N-(1II-indol-4-yyli)-bentsamidia , • 3 3 : : : 30 150 cm asetonia, 2,45 g kaliumkarbonaattia sekä 14 cm epikloorihydriiniä. Saadaan 7,3 g haluttua yhdistettä, sp. = 157°C.

Vaihe B: 2-/3-//( 1 ,1-dimetyylietyyli)aminq7-2-hyd- roksipropoksi7N-(lH-indol-4-yyli)-4-metoksibentsamidi ja 35 sen bentsoaatti

Toimitaan kuten esimerkin 3 vaiheessa E käyttämällä li 3 n 85140 6 g edellä vaiheessa A valmistettua yhdistettä, 100 cm 3 etanolia, 9,2 cm terbutyyliamiinia, ja seosta refluksoi-daan 3 tuntia. Saadaan 6,1 g haluttua emästä, joka liuote-taan 300 cm :iin isopropanolia refluksoimalla, jonka jäl-5 keen lisätään vielä 1,8 g bentsoehappoa. Liuos konsentroidaan osittain, jäähdytetään jäillä, suodatetaan, kuivataan alipaineessa ja saadaan 5,1 g haluttua bentsoaattia. Sp. = 195°C etanolissa uudelleenkiteytyksen jälkeen.

Analyysi: C23H29N3°4' C7H6°2 : ^33,629 10 Laskettu: C % 67,53 H % 6,61 N % 7,87

Saatu: 67,5 6,7 8,0 4-metoksi-2-hydroksi-N-(1H-indol-4-yyli)-bentsamidin valmistus, joka käytetään esimerkin 4 lähtöaineena 3

Liuosta, jossa on 3,96 g 4-amino-1H-indola, 70 cm 15 tetrahydrofuraania, 5 g 2-hydroksi-4-metoksibentsoehappoa ja 6,2 g disykloheksyylikarbodi-imidiä kuumennetaan ref-luksoimalla 24 tuntia. Liuottimet poistetaan alipaineessa 50°C:ssa, jäännös otetaan etyyliasetaattiin ja poistetaan reagoimaton 4-aminoindoli pesemällä 2N suolahapolla. Etyy-20 liasetaatti poistetaan alipaineessa, jäännös otetaan eetteriin ja kuivataan 50°C:ssa. Saadaan 7,1 g haluttua yhdistettä, sp. = 190°C.

Esimerkki 5 5-kloori-2/3-/~ (1,1-dimetyylietyyli)amino7-2-hydroksi-25 propoksi)N-1(1H-indol-4-yyli)-bentsamidi ja sen neutraali oksalaatti

Vaihe A: 5-kloori-1-^j(2-oksiranyyli)metoksi7N-(1H-indol-4-yyli)-bentsamidi

Toimitaan kuten esimerkin 3 vaiheessa D käyttämällä 30 3 g 5-kloori-2-hydroksi-N-(1H-indol-4-yyli)-bentsamidia, 3 3 100 cm asetonia, 1,47 g kaliumkarbonaattia ja 8,3 cm epikloorihydriiniä. Saadaan 3,35 g haluttua yhdistettä, -.T: sp. = 1 75°C.

12 85 1 40

Vaihe B: 5-kloori-2-/3-^"( 1 ,1 -dimetyylietyyli) - amino7-2-hydroksipropoksi7N-(1H-indol-4-yyli)-bentsamidi ja sen neutraali oksalaatti

Toimitaan kuten esimerkin 3 vaiheessa E käyttämällä 3 5 3 g vaiheessa A saatua yhdistettä, 60 cm etanolia ja 3 4,6 cm terbutyyliamiinia. Saadaan 2,6 g haluttua emästä, jonka jälkeen 2,4 oksalaattia, sp. > 260°C.

Analyysi: c22H26ClN303' 1/2 C2H2°4 : 460'941 Laskettu: C % 59,93 H % 5,90 N % 9,12 Cl % 7,69 10 Saatu: 60,2 5,8 9,1 7,9 5-kloori-2-hydroksi-N-(1H-indol-4-yyli)-bentsamidin valmistus, joka käytetään esimerkin 5 lähtöaineena 3

Liuosta, jossa on 3,96 g 4-amino-1H-indola 75 cm :ssä tetrahydrofuraania, ja 5,16 g 5-kloorisalisyylihappoa ja 15 6,2 g disykloheksyylikarbodi-imidiä, kuumennetaan refluk- soimalla 2 tuntia; lisätään uudelleen 0,62 g disykloheksyy-likarbodi-imidiä, kuumennetaan vielä 1 tunti refluksoimal-la, jäähdytetään, suodatetaan ja poistetaan liuottimet alipaineessa 50°C:ssa. Jäännös otetaan etyyliasetaattiin, 20 pestään 2N suolahapolla, kuivataan ja poistetaan etyyliasetaatti alipaineessa 50°C:ssa. Silikageelikromatografia puhdistuksen jälkeen (eluentti:kloroformi-etyyliasetaatti 9-1), saadaan 3,9 g haluttua yhdistettä, sp. = 248°C.

Esimerkki 6 25 On valmistettu seuraavan reseptin mukaisia puris- teitä: *" esimerkin 1 yhdistettä 50 mg --- täyteainetta q.s. lopulliseen puristeeseen 100 mg (Täyteaine tarkemmin: laktoosi, tärkkelys, talkki magne-30 siumstearaatti) .

Farmakologinen tutkimus 1. Antiarytminen vaikutus rottiin 300-350 g painavilta koirasrotilta, jotka oli nuku-.1. tettu intraperitoneaalisesti 1,20 g/kg annoksella uretaa- 35 nia, avattiin henkitorvi, ja ne laitettiin hengityskonee-seen (40-50 3 ml:aan sisäänhengitystä/min).

il 13 8 5 1 40

Neulat sijoitettiin ihon sisään rottien elektrokardiogrammin rekisterömiseksi DII johto signaalista.

Tutkittavat yhdisteet annettiin suonen sisäisesti tai oraalisesti.

5 Viisi minuuttia suonen sisäisesti annetun yhdisteen antamisen jälkeen, rottien kaulasuoneen tiputetaan 10 pg/mn 0,2 ml akonitiini-liuosta ja todetaan sydämen rytmihäiriöiden ilmaantumisaika (10 pg akonitiinia vastaa 0,2 ml liuoksen perfuusiota).

10 Tulokset on ilmoitettu prosentuaalisesti sydämen rytmihäiriöiden ilmaantumisajän pidentymänä suhteessa vertailueläimiin sekä tutkittavan yhdisteen annoksen funktiona. Tulokset, jotka on esitetty alla olevassa taulukossa osoittavat, että oheisen patenttivaatimuksen mukaisilla 15 yhdisteillä on hyviä antiarytmisiä ominaisuuksia.

Esimerkin Annos Ajan pidentymä yhdiste_mg/kg_prosentuaalisesti 1 2,5 +77 % 20 1 +39 % 0,5 +17 % 4 2,5 +38 % 1 +10 % • 25 2. Koe antikalsisen vaikutuksen määrittämiseksi in vitro !" Spiraalin muotoon leikatut rotan häntävaltimot yh- ; * distettiin jännitemittariin ja niitä pidettiin astioissa, 30 joissa oli 25 ml Krebs - natriumbikarbonaattipuskuria (NaCl ; 120,8 mM, KC1 : 5,9 mM, MgCl2 : 1,2 mM, NaH2P04 : 1,2 mM, NaHCO.j : 15,5 mM, glukoosi : 12,6 mM) 37°C:n lämpötilassa ja kaasuseoksessa 02 : 95 % - C02 : 5 %.

Valmisteet depolarisoitiin puskuriliuoksella, joka 35 sisälsi 100 mM K1 -ioneja (NaCl : 26,7 mM : 100 mM,

MgCl2 : 1,2 mM, NaH2P04 : 1,2 mM, NaHC03 : 15,5 mM, ; glukoosi : 12,6 mM) .

14 85 1 40

Lisätään 250 μ1:η tilavuudessa kalsiumkloridia siten, että saadaan suureneva liuossarja Ca+2 -ionin kon-sentraation suhteen välillä 0,1 - 3,0 mM; määritetään valtimoiden sisältämät pitoisuudet sekä valmistetaan myös 5 vertailusarja. Koe toistettiin Ca+ -ionisarjalla 15 min välein ja valmiste pestiin neljä kertaa, jokaisen sarjan jälkeen.

Kun saadaan stabiili arvo, koe Ca+ -ionisarjalla suoritetaan tutkittavan yhdisteen eri pitoisuuksilla, kun-10 nes stabiili arvo on saavutettu.

Pitoisuudet valtimoissa riippuvat Ca2+ -ionien pääsystä sileiden lihassolujen sisälle ja niihin vaikuttaa K+ -ionin sekä presynaptisesta tasosta vapautuneen noradrenaliinin aiheuttama sileän lihassyyn depolarisaatio.

15 Toistamalla koe valtimoilla, joita oli käsitelty 6-OH

dopamiinilla, estetään noradrenaliinin itsensä aiheuttama vaikutus.

Tulokset on ilmoitettu CI 50-arvona (inhiboiva konsentraatio 50) tutkittavan yhdisteen konsentraationa, 20 joka inhiboi 50 % K+ -ionien aiheuttamasta konsentraa-tiosta.

Alla olevan taulukon tulosten perusteella havaitaan, että oheisen patenttivaatimuksen mukaisilla yhdis-teillä on voimakas antikalsinen vaikutus.

25 • _ Esimerkin yhdiste_CI 50 / μΜ 4 8 5 5,4 30 3. Akuutin toksisuuden tutkiminen

Esimerkin 1 yhdisteen letaalia annosta LD^ arvioi-tiin hiirille oraalisesti annettujen annosten perusteella.

: : ' LDQ-arvoksi kutsutaan maksimaalista annosta, joka -I- ei aiheuttanut kuolemaa 7 päivän aikana.

35 Saatu LDQ-arvo on 200 mg/kg.

li

Claims (2)

1. Menetelmä kaavan (1) mukaisten terapeuttisesti käyttökelpoisten N-(lH-indol-4-yyli)-bentsamidijohdan-5 naisten ja niiden happoadditiosuolojen valmistamiseksi, X Y~fll /CH3 V^o^'V'' n_^ch3 (I)

10 H.. /W0 OH H CH3 όσ v i H 15 jossa X merkitsee vetyatomia tai 1-3 hiiliatomia sisältävää alkoksiradikaalia, ja Y merkitsee vetyatomia, kloori-, bromi- tai jodiatomia, nitroradikaalia tai aminora-dikaalia, joka on mahdollisesti substituoitu 2-5 hiili- 20 atomia sisältävällä alifaattisella asyyliryhmällä tai yhdellä tai kahdella 1-5 hiiliatomia sisältävällä alkyylira-dikaalilla, tunnettu siitä, että kaavan (II) mukainen yhdiste: 25

30 L. (II) /"° H-N

35 I H ie H5 HO jossa X ja Y tarkoittavat samaa kuin edellä, saatetaan reagoimaan kaavan (III) mukaisen halogenidin kanssa:

5 Hal-CHj-CH-CHj (m, V kaavan (IV) mukaisen yhdisteen saamiseksi: ^0-ch2-ch-ch2 pö CT IV H-» 15 ΜΓΊ) H joka saatetaan reagoimaan tert.-butyyliamiinin kanssa kaa-20 van (I) mukaisen yhdisteen saamiseksi, joka haluttaessa saatetaan reagoimaan mineraali- tai orgaanisen hapon kanssa suolan saamiseksi.

2. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että valmistetaan 2-[3-[(1,1-dime-25 tyylietyyli )amino]-2-hydroksipropoksi]N-(lH-indol-4-yyli )--5-nitrobentsamidi ja sen happoadditiosuolat. i, i7 85 1 40