FI83785C - Med tritium staemplade radioaktivt estradienderivat och foerfarande foer framstaellning av detta och dess mellanprodukter samt dess tillaempning foer radioimmunolog bestaemning av steroider och undersoekning av biologiska vaetskor. - Google Patents
Med tritium staemplade radioaktivt estradienderivat och foerfarande foer framstaellning av detta och dess mellanprodukter samt dess tillaempning foer radioimmunolog bestaemning av steroider och undersoekning av biologiska vaetskor. Download PDFInfo
- Publication number
- FI83785C FI83785C FI842398A FI842398A FI83785C FI 83785 C FI83785 C FI 83785C FI 842398 A FI842398 A FI 842398A FI 842398 A FI842398 A FI 842398A FI 83785 C FI83785 C FI 83785C
- Authority
- FI
- Finland
- Prior art keywords
- compound
- general formula
- propynyl
- reacted
- estra
- Prior art date
Links
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K51/00—Preparations containing radioactive substances for use in therapy or testing in vivo
- A61K51/02—Preparations containing radioactive substances for use in therapy or testing in vivo characterised by the carrier, i.e. characterised by the agent or material covalently linked or complexing the radioactive nucleus
- A61K51/04—Organic compounds
- A61K51/0493—Steroids, e.g. cholesterol, testosterone
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07J—STEROIDS
- C07J41/00—Normal steroids containing one or more nitrogen atoms not belonging to a hetero ring
- C07J41/0005—Normal steroids containing one or more nitrogen atoms not belonging to a hetero ring the nitrogen atom being directly linked to the cyclopenta(a)hydro phenanthrene skeleton
- C07J41/0016—Oximes
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07J—STEROIDS
- C07J41/00—Normal steroids containing one or more nitrogen atoms not belonging to a hetero ring
- C07J41/0033—Normal steroids containing one or more nitrogen atoms not belonging to a hetero ring not covered by C07J41/0005
- C07J41/0077—Normal steroids containing one or more nitrogen atoms not belonging to a hetero ring not covered by C07J41/0005 substituted in position 11-beta by a carbon atom, further substituted by a group comprising at least one further carbon atom
- C07J41/0083—Normal steroids containing one or more nitrogen atoms not belonging to a hetero ring not covered by C07J41/0005 substituted in position 11-beta by a carbon atom, further substituted by a group comprising at least one further carbon atom substituted in position 11-beta by an optionally substituted phenyl group not further condensed with other rings
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/531—Production of immunochemical test materials
- G01N33/532—Production of labelled immunochemicals
- G01N33/534—Production of labelled immunochemicals with radioactive label
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/74—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving hormones or other non-cytokine intercellular protein regulatory factors such as growth factors, including receptors to hormones and growth factors
- G01N33/743—Steroid hormones
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K2123/00—Preparations for testing in vivo
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Immunology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Hematology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Pathology (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Optics & Photonics (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Endocrinology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Steroid Compounds (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
Description
1 83785
Tritiumilla merkitty radioaktiivinen estradieenijohdannainen ja menetelmä sen valmistamiseksi ja sen valmistuksessa käyttökelpoiset välituotteiden valmistamiseksi sekä sen soveltaminen steroidien radioimmunologiseksi määrittä-5 miseksi ja tutkimiseksi biologisista nesteistä Tämän keksinnön kohteena on uusi, tritiumilla merkitty radioaktiivinen johdannainen, menetelmä sen valmistamiseksi, sen valmistuksessa käyttökelpoiset välituotteet 10 sekä sen soveltaminen steroidien tutkimiseksi ja annoste-lemiseksi biologisiin nesteisiin.
Erityisesti keksinnön kohteena on tritiumilla merkitty radioaktiivinen 178-hydroksi-116-(4-dimetyyliamino-fenyyli)-17a-(1-propynyyli)-estra-4,9-dien-3-oni (6,7-3H), 15 joka on käyttökelpoinen radioimmunologisissa määrityksissä ja jonka yleinen kaava on (I):
CH, — N
3 chTSL^N—/ 20 c - en, a) 25 jossa 3H on tritiumi.
FR-hakemusjulkaisusta 2 397 426 tunnetaan kortiso-lijohdannaisten valmistus, jotka on histaminoitu kortisolin oksiimissa. Esillä oleva keksintö koskee tritiumilla 30 merkittyjen steroidijohdannaisia, joiden rungon substi-tuentit eroavat olennaisesti tunnetun julkaisun substituenteista. SE-patentista 430 894 tunnetaan radioim-munoanalyysissä käytettäviä kortisolijohdannaisia, joissa 6-asemassa on ryhmä SCH2C0R, jolloin R on jokin radiojodat-35 tu ryhmä.
2 83785
Kaavan (I) mukaista uutta yhdistettä kutsutaan jatkossa yhdiste A:ksi.
Yleisen kaavan (I) mukaisella yhdisteellä voidaan tutkia etenkin ei-radioaktiivista 17fi-hydroksi-llö-(4-5 dimetyyliaminofenyyli )-17a-( 1-propynyyli )estra-4,9-dien-3-onia ja annostella sitä radioimmunologisesti, tätä yhdistettä kutsutaan jatkossa yhdiste B:ksi.
Keksinnön kohteena on myös menetelmä yhdisteen valmistamiseksi, jonka yleinen kaava (I) on edellä.
10 Tälle menetelmälle on tunnusomaista, että yhdis teessä, jonka kaava on (II)
7 H
20 . . jossa 3H on tritium, suojataan 3-asemassa oleva ketoniryh- mä ketaalin muodostavan aineen avulla yhdisteen saamiseksi, jonka kaava on (III) - 30 jossa A on oksoryhmä, joka on suojattu avoimella tai syklisellä ketaalimuodolla, että yhdiste (III) saatetaan 35 reagoimaan propynylointiaineen kanssa yhdisteen saamisek-
II
3 83785 si, jonka yleinen kaava on (IV): 5 c - CH3 (IV)
3h H
10 ja joka saatetaan reagoimaan epoksointiaineen kanssa yhdisteen saamiseksi, jonka yleinen kaava on (V) 15 c _ CH3 (v) i h 20 ja joka saatetaan reagoimaan 4-dimetyyliaminofenyylimag-nesiumhalogenidin kanssa yhdisteen saamiseksi, jonka yleinen kaava on (VI)
25 CH3~CH®SW_/°H
C - CH3 (vi) A ΟήΤ^Η 30 ja joka hydrolysoidaan.
Parhaassa toteuttamistavassa tälle menetelmälle on myös tunnusomaista, että ketaalin muodostava aine, jonka avulla suojataan 3-asemassa oleva ryhmä, on 1-4 hiiliatomia käsittävä alkanoli tai 2 hiiliatomia käsittävä glyko- 35 li, joka on substituoimaton tai substituoitu yhdellä tai 4 83785 kahdella alkyyliryhmällä, kuten metyyliryhmällä, ja reaktio suoritetaan inertissä atmosfäärissä; propynyloiva aine, joka saatetaan reagoimaan yleisen kaavan (III) mukaisen yhdisteen kanssa, on propynyylimagnesiumbromidi ja 5 reaktio suoritetaan inertissä atmosfäärissä; epoksoiva aine, joka saatetaan raegoimaan yleisen kaavan (IV) mukaisen yhdisteen kanssa, on perhappo kuten m-klooriperbent-soehappo tai vetyperoksidi, heksafuoriasetonihydraatin läsnäollessa ja reaktio suoritetaan inertissä atmosfääris-10 sä; 4-dimetyyliaminofenyylimagnesiumhalogenidi, joka saa tetaan reagoimaan yleisen kaavan (V) mukaisen yhdisteen kanssa, on bromidi ja reaktio suoritetaan inertissä atmosfäärissä; yleisen kaavan (VI) mukainen yhdiste hydrolysoidaan kloorivetyhapolla ja reaktio suoritetaan inertissä 15 atmosfäärissä.
Keksinnön menetelmän erään muunnelman mukaan, joka myös on keksinnön kohteena: kaavan (II) mukaisen yhdisteen 3-asemassa oleva ketoniryhmä suojataan avoimen ketaalin muodossa yleisen kaavan RjOH mukaisen ketaalia muodostavan 20 aineen avulla, jossa Rj on 1-4 hiiliatomia käsittävä alkyy-liryhmä; syntynyt yleisen kaavan (VII) mukainen yhdiste:
Rl° % H
saatetaan reagoimaan propynyloivan aineen kanssa, jolloin 30 saadaan yleisen kaavan (VIII) mukainen yhdiste: 'c= c ~ CH3 (VIII) 35 rV V”
II
5 83785 ketaaliryhmän transketalisaatio suoritetaan kaavan R2CHOH-CHOHR3 mukaisen glykolin avulla happamassa ympäristössä, jolloin saadaan yleisen kaavan (IX) mukainen yhdiste: 5
^1 „ OH
C Ξ C-CH3 (ix) 10 R3 jossa R2 ja R3 ovat samanlaisia tai erilaisia ja tarkoittavat vetyatomia tai alkyyliryhmää kuten metyyliä, ja joka 15 saatetaan reagoimaan edellä esitetyn menetelmän mukaisesti epoksoivan aineen kanssa, sitten syntynyt yhdiste saatetaan reagoimaan 4-dimetyyliaminofenyylimagnesiumhalogeni-din kanssa ja lopuksi saatu yhdiste hydrolysoidaan, jolloin saadaan haluttu yleisen kaavan (I) mukainen yhdiste. 20 Eräälle keksinnön mukaisen menetelmän muunnelman parhaista toteuttamistavoista on vielä tunnusomaista, että ketaalin muodostava aine, jonka avulla suojataan kaavan (II) mukaisen yhdisteen 3-asemassa oleva ketoniryhmä, on metanoli ja reaktio suoritetaan inertissä atmosfäärissä; 25 propynyloiva aine, joka saatetaan reagoimaan yleisen kaavan (VII) mukaisen yhdisteen kanssa, on propynyylimagne-siumbromidi ja reaktio suoritetaan inertissä atmosfäärissä; glykoli, jonka avulla suoritetaan yleisen kaavan (VIII) mukaisen yhdisteen ketoniryhmän transketalisaatio, 30 on etyleeniglykoli ja reaktio suoritetaan inertissä atmosfäärissä .
Keksinnön mukaiselle menetelmälle on vielä kuvaavaa että inertiksi atmosfääriksi, jossa reaktio suoritetaan, valitaan edullisesti argonatmosfääri; 4-dimetyyliaminofe-35 nyylimagnesiumhalogenidi saatetaan reagoimaan yleisen kaa- 6 83785 van (V) mukaisen yhdisteen kanssa kuparisuolan läsnäollessa; alkanolin annetaan toimia ketaalia muodostavana aineena, jonka avulla 3-asemassa oleva ryhmä suojataan happamassa ympäristössä kuten paratolueenisulfoniahappokloori-5 vetyhapposeoksessa tai kloorivetyhappopyridiiniseoksessa ja mahdollisesti dehydratoivan aineen läsnäollessa; ketaalia muodostava aine, jonka avulla suojataan 3-asemassa oleva ryhmä, saa reagoida dehydratoivan aineen läsnäollessa; propynyloiva aine saatetaan reagoimaan yleisen kaavan 10 (III) mukaisen yhdisteen kanssa tetrahydrofuraanissa; epoksoiva aine, joka saatetaan reagoimaan yleisen kaavan (IV) mukaisen yhdisteen kanssa, on m-klooriperbentsoehap-po; 4-dimetyyliaminofenyylimagnesiumbromidi saatetaan reagoimaan yleisen kaavan (V) mukaisen yhdisteen kanssa tet-15 rahydrofuraanissa ja kuparisuolan läsnäollessa; glykolin avulla suoritettava yleisen kaavan (VIII) mukaisen yhdisteen ketaaliryhmän transketalisaatio suoritetaan happamassa ympäristössä esimerkiksi pyridiinihydrokloridin läsnäollessa.
20 Keksinnön kohteena on myös yleisen kaavan (I) mu kaisen yhdisteen soveltaminen eli yhdiste A:n soveltaminen yhdiste B:n ja sen metaboliittien tutkimiseen ja radioimmunologiseen määrittämiseen ihmisen ja eläimen biologisista nesteistä.
25 Keksinnön kohteena on myös keinot tutkia ja määrit tää radioimmunologisesti yhdiste B ja sen metaboliitit käyttämällä yleisen kaavan (I) mukaista yhdistettä eli yhdistettä A.
Kliinisillä ja farmakologisilla kokeilla voidaan 30 seurata yhdiste A;n kulkua ja käyttäytymistä biologisissa nesteissä sen annostelun jälkeen.
Näiden tutkimusten mukaan yhdiste A:n avulla voidaan määrittää helposti ja spesifisesti muutamien kymmenien pikogrammojen suuruisia määriä ml:ssa biologista n-35 tettä, ilman että jouduttaisiin käyttämään erotusmenetel- li 7 83785 miä ja kromatografisia puhdistusmenetelmiä ennen varsinaisia määrityksiä.
Ei-radioaktiivisen 17fl-hydroksi-118-(4-dimetyyli-aminofenyyli)-17a-(1-propynyyli)estra-4,9-dien-3-onin(yh-5 diste B:n) tutkimiseksi ja määrittämiseksi radioimmunologisilla menetelmillä valmistetaan ensin viimeksi mainitusta antigeenejä sinänsä tunnetuilla menetelmillä konju-goimalla sen nauden seerumin albumiiniin (BSA) tai ihmisen seerumin albumiiniin (HSA).
10 Tuloksena olevat antigeenit voivat aiheuttaa vasta- aineiden muodostumista, kun niitä ruiskutetaan eläimeen adjuvantin kanssa. Niiden avulla saadaan näin vasta-aineita sisältävää seerumia.
Vasta-aineet toimivat sitten radioaktiivisten ja/-15 tai ei-radioaktiivisten yhdisteiden reseptoreina, nimit täin yleisen kaavan (I) 178-hydroksi-llB-(4-dimetyyliami-nofenyyli)-17a-(1-propynyyli)estra-4,9-dien-3-onin (6,7-3H) (yhdiste A:n) sekä ei-radioaktiivisen 17B-hydroksi-118-( 4-dimetyyliaminofenyyli)-17a-(1-propynyyli)-estra-4,9-20 dien-3-onin (yhdiste B:n) reseptoreina.
Vasta-aineiden olemassaolo todistetaan yleisen kaavan (I) mukaisen yhdisteen avulla.
Sitten määritetään yhdiste B:tä konventionaalisten radioimmunologisten menetelmien mukaan, kuten alla olevat 25 tekijät ovat kuvanneet: - S.A. Berson ja R.S. Yalow, Hormone 4, s. 557 (1964), - C.E. Abrahali, J. of Endocrinol. Metab. 29, s. 866 (1969).
Yleisen kaavan (I) mukaista yhdistettä voidaan li- 30 säksi käyttää steroidireseptorien, kuten glukokorti- koidi-, progestageeni- ja androgeenireseptorien määrittämiseen ja paikallistamiseen kohdesolujen kudoksissa.
Reseptorien määrä ja paikka voidaan määrittää tavanomaisilla menetelmillä, kuten alla olevat tekijät ovat 35 kuvanneet: β 83785 - Raynaud J.P., Philibert D. et ai., J. of Steroid Biochem. 12 (1980), s. 309-314.
Keksinnön kohteena ovat myös uusina teollisina yhdisteinä ja etenkin keksinnön mukaisen menetelmän toteut-5 tamisessa tarvittavina välituotteina: - 3,3-dimetoksi-7B-hydroksi-17a-(1-propynyyli)-estra-5(10),9(11)-dieeni (6,7-3H), - 3,3-etyleenidioksi-17B-hydroksi-17a-(1-propynyyli) est-ra-5( 10 ), 9( 11)-dieeni (6,7-3H), 10 - 3,3-etyleenidioksi-5a-10a-epoksi-17B-hydroksi-17a- (1-propynyyli)-estr-9(11)-eeni (6,7-3H), 3,3-etyleenidioksi-5a,17B-dihydroksi-llS-(4-dimetyyli-aminofenyyli)-17a-(1-propynyyli)-estr-9(11)-eeni (6,7 3H). Seuraava esimerkki valaisee keksintöä.
15 Esimerkki 176-hydroksi-llB-(4-dimetyyliaminofenyyli)-17α-(1-propynyyli)-estra-4,9-dien-3-oni (6,7-3H)
Valhe A
3,3-dimetoksi-17-oksoestra-5(10,9(11)-dieeni (6,7-20 3H)
Inertissä atmosfäärissä pannaan 8 Ci eli 40 mg 3,17 dioksoestra-5(10),9(11)-dieeniä (6,7-3H) 0,5 mitään asetonin dimetyyliketaalia, sitten lisätään 50 μΐ metano-lia, joka sisältää 0,5 % asetyylikloridia, reaktioseoksen . 25 annetaan seistä noin 15 minuuttia, sitten lisätään 20 μΐ trietyyliamiinia ja konsentroidaan vakuumissa. Näin saadaan haluttua yhdistettä, jota käytetään sellaisenaan seu-raavaan synteesivaiheeseen.
Silikageeliohutkerroskromatografiällä saadaan Rf= 30 0,25 käyttämällä eluanttina sykloheksaani/etyyliasetaat- tiseosta (75:25).
Lähtöainetta on kuvattu J. Salmonin julkaisussa: "Synth6se et application de la 17a-m6tyl triönolone tri-ti6e" (Syposium sur le progr6s des techniques nuclöares en 35 pharmacodynamie - Saclay 11-13 Mars 1970, Toim.; Masson; 9 83785 G. Valette ja Y. Cohen, s. 237-248).
Vaihe B
3.3- dimetoksi-17B-hydroksi-17a-( 1-propynyyli )estra-5(10),9( 11 )-dieeni (6,7-3H) 5 Edellisessä vaiheessa saatu yhdiste liuotetaan inertissä atmosfäärissä 0,5 ml:aan tetrahydrofuraania, lisätään 0,5 ml IM propynyylimagnesiumbromidisuspensiota tetrahydrofuraanissa ja reaktioseosta sekoitetaan huoneen lämpötilassa noin 1 tunnin ajan.
10 Sitten lisätään 1 ml 10 % ammoniumkloridin vesi- liuosta, uutetaan etyyliasetaatilla, pestään vedellä, haihdutetaan kuiviin alennetussa paineessa, jolloin saadaan haluttu yhdiste, jota käytetään sellaisenaan seuraa-vassa synteesivaiheessa.
15 Silikageeliohutkerroskromatografiällä saadaan Rf= 0,22 käyttämällä eluanttina sykloheksaani/etyyliasetaat-tiseosta (75/25).
Vaihe C
3.3- etyleenidioksi-176-hydroksi-17a-( 1-propynyyli )- :‘ 20 estra-5(10),9(11)-dieeni (6,7-3H)
Edellisessä vaiheessa saatu yhdiste liuotetaan inertissä atmosfäärissä 1 ml:aan vedetöntä glykolia, lisätään 0,5 mg pyridiinihydrokloridia, lämmitetään noin 30 minuuttia 60°C:ssa, lisätään 2 ml vettä, uutetaan etyyli- 25 asetaatilla, pestään vedellä, kuivataan, haihdutetaan kuiviin, jolloin saadaan haluttu yhdiste.
Silikageeliohutkerroskromatografiällä saadaan Rf= 0,2 käyttämällä eluanttina sykloheksaani/etyyliasetaatti-seosta (75/25).
30 Yhdiste voidaan puhdistaa korkeapainenestekromato grafiällä silikageelipylväässä eluoimalla seoksella, jossa on sykloheksaania 0,06 % etyyliasetaattia/vedessä/tri-etyyliamiinia (75:24:1).
Näin saadaan 2,44 Ci eli 15 mg haluttua yhdistettä.
: 35 Vaihe D
10 83785 3.3- etyleenidioksi-5a,10a-epoksi-17B-hydroksi-17a- estr-9(11)-eeniä (6,7-3H) 15 mg edellisessä kohdassa saatua yhdistettä liuotetaan inertissä atmosfäärissä 0,5 mlraan metyleeniklori-5 dia, lisätään 10 mg magnesiumoksidia, jäähdytetään -10°C:seen, lisätään sitten sekoittamalla 12 mg klooriper-bentsoehappoa, sekoitusta jatketaan noin 1 tunti-10°C:ssa, lisätään sitten 1 ml 0,2N natriumtiosulfaatin vesiliuosta, uutetaan etyyliasetaatilla, pestään vedellä ja haihdute-10 taan kuiviin alennetussa paineessa. Näin saadaan haluttua yhdistettä, jota käytetään sellaisenaan seuraavassa syn-teesivaiheessa.
Silikageeliohutkerroskromatografiällä saadan Rf= 0,1 käyttämällä eluenttina sykloheksaani/etyyliasetaatti-15 seosta (75/25).
Vaihe E
3.3- etyleenidioksi-5a,173-dihydroksi-113-(4-di- metyyliaminofenyyli )-17a-( 1-propynyyli )estr-9-eeniä (6,7-3H) 20 Edellisessä vaiheessa saatu yhdiste liuotetaan inertissä atmosfäärissä 0,5 mitään tetrahydrofuraania, lisätään 20 mg kuparijodidia, sekoitetaan noin 20 minuuttia, lisätään sitten 0,5 ml IM 4-dimetyyliaminofenyyli-magnesiumbroimidia tetrahydrofuraanissa. Reaktioseosta 25 sekoitetaan huoneen lämpötilassa noin 1 tunnin ajan, hydrolysoidaan sitten 0,5 ml:11a 10 % ammoniumkloridin vesi-liuosta ja 0,2 ml:11a 0,2M natriumtiosulfaatin vesiliuosta. Uutetaan etyyliasetaatilla, pestään vedellä, kuivataan, jolloin saadaan haluttu yhdiste.
30 Silikageeliohutkerroskromatografiällä saadaan Rf= 0,22 käyttämällä eluenttina sykloheksaani/etyyliasetaatin seosta (50:50).
Yhdiste voidaan puhdistaa korkean erotuskyvyn neste kromatografiällä silikageelipylväässä, eluoimalla seok-35 sella sykloheksaani/0,06 % etyyliasetaatti vedessä li 11 83 785 (70:30), joka sisältää 0,05 % trietyyliamiinia. Näin saadaan 1,08 Ci eli 10 mg haluttua yhdistettä.
Vaihe F
17B-hydroksi-llB-(4-dimetyyliaminofenyyli)-17α-(1-5 propynyyli)-estra-4,9-dien-3-oni (6,7-3H)
Edellisessä vaiheessa saatu yhdiste liuotetaan inertissä atmosfäärissä 0,5 ml:aan metanolia, lisätään sekoittaen 20 μΐ väkevää kloorivetyhappoa, sekoitusta jatketaan puoli tuntia huoneen lämpötilassa, lisätään 1 ml 10 etyylisetaattia, sitten 1 ml IN natriumhydroksidia, orgaaninen faasi erotetaan, pestään vedellä, kuivataan ja haih-duteaan kuiviin alennetussa paineessa, jolloin saadaan haluttua raakatuotetta.
Silikageeliohutkerroskromatografiällä saadaan Rf=-15 0,25 käyttämällä eluanttina sykloheksaani/etyyliasetaat- tiseosta (50:50).
Tämä yhdiste voidaan puhdistaa korkean erotuskyvyn nestekromatografialla silikageelipylväässä eluoimalla seoksella sykloheksaani/0,06 % etyyliasetaatti vedessä 20 (70:30). Näin saadaan 6,3 mg haluttua yhdistettä, jonka spesifinen aktiivisuus on 37,5 Ci mol'1.
Claims (8)
1 H saatetaan reagoimaan propynylointiaineen kanssa yhdisteen saamiseksi, jonka yleinen kaava on (VIII) : 20 . OH I |///c=c-ch3 (VIII) Ri°J Ti T 25 V 31 3h H ja että yhdisteen (VIII) ketaaliryhmän transketalisaatio 30 suoritetaan kaavan R2CHOH-CHOHR3 mukaisen glykolin avulla happamassa ympäristössä yhdisteen saamiseksi, jonka yleinen kaava on (IX) 35 16 83785 OH 5 fP ~J\:=c-ch3 R2 (IX) R3 3H 10 jossa R2 ja R3, jotka voivat olla samoja tai erilaisia, tarkoittavat vetyatomia tai alkyyliryhmää, kuten metyyliä, ja joka saatetaan reagoimaan vaatimuksessa 3 esite-15 tyllä tavalla epoksointiaineen kanssa, sitten saatu yhdiste saatetaan reagoimaan 4-dimetyyliarninofenyylimagne-siumhalogenidin kanssa ja lopuksi saatu yhdiste hydrolysoidaan.
1. Tritiumilla merkitty radioaktiivinen 176-hyd-roksi-llfi-(4-dimetyyliaminofenyyli)-17a-(1-propynyyli)- 5 estra-4,9-dien-3-oni (6,7-3H), joka on käyttökelpoinen radioimmunologisissa määrityksissä ja jonka yleinen kaava on (I):
10 CH3_ Soi /OH ^-iC I y> c=c-ch3 οΧλγΧ3η 3h jossa 3H on tritiumi.
2. Menetelmä patenttivaatimuksen 1 mukaisen yhdis-20 teen valmistamiseksi, tunnettu siitä, että yhdisteessä, jonka kaava on (II) xJ^ 3H 30 jossa 3H on tritium, suojataan 3-asemassa oleva ketoni-ryhmä ketaalin muodostavan aineen avulla yhdisteen saamiseksi, jonka kaava on (III) 35 i3 83785 5 (III) 3h 10 jossa A on oksoryhmä, joka on suojattu avoimella tai syklisellä ketaalimuodolla, että yhdiste (III) saatetaan reagoimaan propynylointiaineen kanssa yhdisteen saamiseksi, jonka yleinen kaava on (IV): 15 | |/////C=C-CH3 20 J 1- ’h ja joka saatetaan reagoimaan epoksointiaineen kanssa yh-25 disteen saamiseksi, jonka yleinen kaava on (V) .^1___OH Il rfc^C-CH, v JJ 1 J 1 (V)
30 I 'l 35 h i4 83785 ja joka saatetaan reagoimaan 4-dimetyyliaminofenyylimag-nesiumhalogenidin kanssa yhdisteen saamiseksi, jonka yleinen kaava on (VI) CsJy- CmC-Cn3 (VI)
10. I A OH3I \ 3H ja joka hydrolysoidaan.
3. Patenttivaatimuksen 2 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että ketaalin muodostava aine, jonka avulla 3-asemassa oleva ryhmä suojataan, on 1-4 hiiliatomia sisältävä alkanoli tai 2 hiiliatomia sisältävä glykoli, joka on substituoimaton tai on substituoitu 20 yhdellä tai kahdella alkyyliryhmällä, kuten metyyliryh-mällä, ja reaktio suoritetaan inertissä atmosfäärissä, että propynylointiaine, joka saatetaan reagoimaan yleisen kaavan (III) mukaisen yhdisteen kanssa, on propynyyli-magnesiumbromidi ja reaktio suoritetaan inertissä atmos-25 fäärissä, että epoksointiaine, joka saatetaan reagoimaan yleisen kaavan (IV) mukaisen yhdisteen kanssa, on perhap-po kuten m-klooriperbentsoehappo tai vetyperoksidi heksa-fluoriasetonihydraatin läsnäollessa ja reaktio suoritetaan inertissä atmosfäärissä, että 4-dimetyyliaminofenyy-30 limagnesiumhalogenidi, joka saatetaan reagoimaan yleisen kaavan (V) mukaisen yhdisteen kanssa, on bromidi ja reaktio suoritetaan inertissä atmosfäärissä, ja että yleisen kaavan (VI) mukainen yhdiste hydrolysoidaan kloorivetyha-polla ja reaktio suoritetaan inertissä atmosfäärissä.
4. Menetelmä patenttivaatimuksen 1 mukaisen yhdis- l! 15 83785 teen valmistamiseksi, tunnettu siitä, että kaavan (II) mukaisen yhdisteen 3-asemassa oleva ketoniryhmä suojataan avoimen ketaalin muodossa yleisen kaavan R1OH mukaisen ketaalia muodostavan aineen avulla, jossa on 5 1-4 hiiliatomia sisältävä alkyyliryhmä, ja että saatu yleisen kaavan (VII) mukainen yhdiste R, 0 3
5. Patenttivaatimuksen 4 mukainen menetelmä, 20 tunnettu siitä, että ketaalin muodostava aine, jonka avulla kaavan (II) mukaisen yhdisteen 3-asemassa oleva ketoniryhmä suojataan, on metanoli ja reaktio suoritetaan inertissä atmosfäärissä, että propynylointiaine, joka saatetaan reagoimaan yleisen kaavan (VII) mukaisen 25 yhdisteen kanssa, on propynyyylimagnesiumbromidi ja reaktio suoritetaan inertissä atmosfäärissä, ja että glykoli, jonka avulla suoritetaan yleisen kaavan (VIII) mukaisen yhdisteen ketoniryhmän transketalisaatio, on etyleenigly-koli ja reaktio suoritetaan inertissä atmosfäärissä.
6. Patenttivaatimuksessa 1 määritellyn yleisen kaavan (I) mukaisen yhdisteen 176-hydroksi-lie-(4-dime-tyyliaminofenyyli)-17a-(1-propynyyli)-estra-4,9-dien-3-onin (6,7-3H) soveltaminen ei-radioaktiivisen 176-hydrok-si-llB-(4-dimetyyliaminofenyyli)-17a-(1-propynyyli)-35 estra-4,9-dien-3-onin ja sen metaboliittien tutkimiseksi <i 17 83785 ja radioimmunologiseksi määrittämiseksi ihmisen tai eläimen biologisista nesteistä.
7. Menetelmä ei-radioaktiivisen 178-hydroksi-lie-(4-dimetyyliaminofenyyli)-17a-(1-propynyyli)-estra-4,9- 5 dien-3-onin ja sen metaboliittien radioimmunologiseksi tutkimiseksi ja määrittämiseksi ihmisen tai eläimen biologisista nesteistä, tunnettu siitä, että käytetään patenttivaatimuksen 1 mukaisen yleisen kaavan (I) mukaista 178-hydroksi-118-(4-dimetyyliaminofenyyli)-17a-10 (1-propynyyli)-estra-4,9-dien-3-onia (6,7-3H).
8. Kaavan (I) mukaisen radioaktiivisen estradiee-nijohdannaisen valmistuksessa käyttökelpoiset välituotteet: 3.3- dimetoksi-17S-hydroksi-17a-(1-propynyyli)-estra- 15 5(10), 9( 11 )-dieeni (6,7-3H), 3.3- etyleenidioksi-17fi-hydroksi-17a-(1-propynyyli)-estra-5(10),9( 11 )-dieeni (6,7-3H), 3.3- etyleenidioksi-5a,10a-epoksi-17B-hydroksi-17a-(1-pro-pynyyli)-estra-9(11)-eeni (6,7-3H), 20 3,3-etyleenidioksi-5a,17B-dihydroksi-llB-(4-dimetyyliami nofenyyli ) -17a- ( 1-propynyyli ) -estra-9 ( 11 ) -eeni (6,7-3H). 18 83785
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| FR8309812 | 1983-06-14 | ||
| FR8309812A FR2549067B1 (fr) | 1983-06-14 | 1983-06-14 | Derives estradieniques radioactifs marques au tritium, leur procede de preparation et leur application pour l'etude et le dosage radio-immunologique de steroides dans les fluides biologiques |
Publications (4)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| FI842398A0 FI842398A0 (fi) | 1984-06-13 |
| FI842398A FI842398A (fi) | 1984-12-15 |
| FI83785B FI83785B (fi) | 1991-05-15 |
| FI83785C true FI83785C (fi) | 1991-08-26 |
Family
ID=9289759
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| FI842398A FI83785C (fi) | 1983-06-14 | 1984-06-13 | Med tritium staemplade radioaktivt estradienderivat och foerfarande foer framstaellning av detta och dess mellanprodukter samt dess tillaempning foer radioimmunolog bestaemning av steroider och undersoekning av biologiska vaetskor. |
Country Status (9)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US4661295A (fi) |
| EP (1) | EP0135400B1 (fi) |
| JP (2) | JPS6011499A (fi) |
| AT (1) | ATE34752T1 (fi) |
| CA (2) | CA1222744A (fi) |
| DE (1) | DE3471660D1 (fi) |
| FI (1) | FI83785C (fi) |
| FR (1) | FR2549067B1 (fi) |
| NO (1) | NO162194C (fi) |
Families Citing this family (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2785023B2 (ja) * | 1987-12-30 | 1998-08-13 | ルセル―ユクラフ | １７α位置を置換された１７β―ＯＨ―１９―ノルステロイドの新誘導体、その製造方法、その薬剤としての使用及びそれを含有する製薬組成物 |
| ATE172469T1 (de) * | 1989-08-04 | 1998-11-15 | Schering Ag | 11 beta-aryl-gona-4,9-dien-3-one |
| US5407928A (en) * | 1990-08-15 | 1995-04-18 | Schering Aktiengesellschaft | 11β-aryl-gona-4,9-dien-3-ones |
| DE69500542T2 (de) * | 1994-05-19 | 1998-01-02 | Akzo Nobel Nv | 11,21-Bisphenyl-19-nor-pregnan Derivate |
| EP3856756A4 (en) * | 2018-09-28 | 2022-06-29 | The Regents Of The University Of Michigan | Halogenated cholesterol analogues and methods of making and using same |
Family Cites Families (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| FR2414515A1 (fr) * | 1978-01-11 | 1979-08-10 | Roussel Uclaf | Steroides marques au tritium, leur procede de preparation et leur application dans la synthese de derives de l'estrane marques au tritium |
| FR2430953A1 (fr) * | 1978-07-13 | 1980-02-08 | Roussel Uclaf | Nouveaux derives 3,20-dioxo 4,9-diene 21-hydroxyle, leur procede de preparation et leur application comme medicaments |
| ZA8231B (en) * | 1981-01-09 | 1982-11-24 | Roussel Uclaf | New 11 -substituted steroid derivatives, their preparation, their use as medicaments, the compositions containing them and the new intermediates thus obtained |
-
1983
- 1983-06-14 FR FR8309812A patent/FR2549067B1/fr not_active Expired
-
1984
- 1984-05-04 NO NO841798A patent/NO162194C/no unknown
- 1984-06-12 JP JP59119240A patent/JPS6011499A/ja active Pending
- 1984-06-13 EP EP84401203A patent/EP0135400B1/fr not_active Expired
- 1984-06-13 AT AT84401203T patent/ATE34752T1/de not_active IP Right Cessation
- 1984-06-13 FI FI842398A patent/FI83785C/fi not_active IP Right Cessation
- 1984-06-13 DE DE8484401203T patent/DE3471660D1/de not_active Expired
- 1984-06-13 CA CA000456496A patent/CA1222744A/fr not_active Expired
- 1984-06-14 JP JP59120900A patent/JPS6034989A/ja active Pending
- 1984-06-14 US US06/620,454 patent/US4661295A/en not_active Expired - Fee Related
-
1987
- 1987-02-17 CA CA000529936A patent/CA1242695A/fr not_active Expired
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| NO841798L (no) | 1984-12-17 |
| CA1222744A (fr) | 1987-06-09 |
| JPS6034989A (ja) | 1985-02-22 |
| FI842398A (fi) | 1984-12-15 |
| EP0135400A3 (en) | 1985-08-14 |
| CA1242695A (fr) | 1988-10-04 |
| JPS6011499A (ja) | 1985-01-21 |
| EP0135400B1 (fr) | 1988-06-01 |
| FR2549067B1 (fr) | 1985-12-27 |
| FI842398A0 (fi) | 1984-06-13 |
| FI83785B (fi) | 1991-05-15 |
| EP0135400A2 (fr) | 1985-03-27 |
| NO162194B (no) | 1989-08-14 |
| FR2549067A1 (fr) | 1985-01-18 |
| DE3471660D1 (en) | 1988-07-07 |
| NO162194C (no) | 1989-11-22 |
| US4661295A (en) | 1987-04-28 |
| ATE34752T1 (de) | 1988-06-15 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Weinstein et al. | Antigenic complexes of steroid hormones formed by coupling to protein through position 7: Preparation from Δ4-3-oxosteroids and characterization of antibodies to testosterone and androstenedione | |
| FR2528434A1 (fr) | Nouveaux 19-nor steroides substitues en 11b et eventuellement en 2, leur procede de preparation et leur application comme medicament | |
| US4197286A (en) | Testosterone derivatives and assay method | |
| JP2004123757A (ja) | ステロイドスルファメート、その製造方法、及びその使用 | |
| Milewich et al. | Isolation and Characterization of 5α-Pregnane-3, 20-dione and Progesterone in Peripheral Blood of Pregnant Women: Measurement Throughout Pregnancy | |
| JPS60502100A (ja) | 黄体活性を示すステロイド | |
| FI83785C (fi) | Med tritium staemplade radioaktivt estradienderivat och foerfarande foer framstaellning av detta och dess mellanprodukter samt dess tillaempning foer radioimmunolog bestaemning av steroider och undersoekning av biologiska vaetskor. | |
| Stalla et al. | The development of a direct homologous radioimmunoassay for serum cortisol | |
| US4277460A (en) | Cortisol radioimmunoassay method and cortisol derivatives useful therefor | |
| Gower et al. | Studies on the biosynthesis of 16-dehydro steroids: The metabolism of [4-14C] pregnenolone by boar adrenal and testis tissue in vitro | |
| JPH0649717B2 (ja) | 二重結合又は三重結合を含む基で１０位置が置換された新規なステロイド、それらの製造法及び薬剤 | |
| US4740476A (en) | Immunoassay for estriol-3-sulfate | |
| US4379780A (en) | 17 α-Dihydroequilin hapten and assay method | |
| White et al. | Monoclonal antibodies to testosterone: the effect of immunogen structure on specificity | |
| US4221725A (en) | Steroid derivatives and their use in radioimmunoassays | |
| US4780420A (en) | Progesterone receptor ligands | |
| JPH0460479B2 (fi) | ||
| US4230621A (en) | Steroid derivatives and their use in radioimmunoassays | |
| Shimada et al. | Preparation of specific antisera to digoxin using hapten-[C-17]-and [C-12]-bovine serum albumin conjugates | |
| US4323511A (en) | Steroid derivatives and their use in radioimmunoassays | |
| Rosenfeld et al. | Preparation of some C19 steroid-protein conjugates | |
| Toshio et al. | Preparation of specific antisera to estrone-3-glucuronide and estriol-3-glucuronide | |
| US4379779A (en) | Equilin hapten and assay method | |
| US4345096A (en) | Steroid derivatives and their use in radioimmunoassays | |
| Tanaka et al. | Bridge-heterologous chemiluminescence enzyme-linked immunosorbent assay of estriol 3-sulfate in pregnancy plasma |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM | Patent lapsed | ||
| MM | Patent lapsed |
Owner name: ROUSSEL UCLAF SOCIETE ANONYME |