FI79329C - Nytt foerfarande foer framstaellning av pentapeptiden h-arg-x-asp-y-tyr-r och vid foerfarandet anvaenda mellanprodukter. - Google Patents
Nytt foerfarande foer framstaellning av pentapeptiden h-arg-x-asp-y-tyr-r och vid foerfarandet anvaenda mellanprodukter. Download PDFInfo
- Publication number
- FI79329C FI79329C FI811883A FI811883A FI79329C FI 79329 C FI79329 C FI 79329C FI 811883 A FI811883 A FI 811883A FI 811883 A FI811883 A FI 811883A FI 79329 C FI79329 C FI 79329C
- Authority
- FI
- Finland
- Prior art keywords
- group
- tyr
- asp
- carboxy
- fragment
- Prior art date
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 46
- 230000008569 process Effects 0.000 title claims description 11
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title description 17
- 239000000543 intermediate Substances 0.000 title description 4
- 125000006239 protecting group Chemical group 0.000 claims description 30
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 claims description 22
- -1 diisopropylmethyl Chemical group 0.000 claims description 17
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 claims description 17
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 claims description 16
- CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N L-aspartic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N 0.000 claims description 13
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 claims description 13
- 125000000449 nitro group Chemical group [O-][N+](*)=O 0.000 claims description 13
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 10
- 125000001797 benzyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(C([H])=C1[H])C([H])([H])* 0.000 claims description 9
- ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-N L-arginine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCCN=C(N)N ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-N 0.000 claims description 8
- 235000003704 aspartic acid Nutrition 0.000 claims description 8
- OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N beta-carboxyaspartic acid Natural products OC(=O)C(N)C(C(O)=O)C(O)=O OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- 229910052736 halogen Inorganic materials 0.000 claims description 8
- 150000002367 halogens Chemical group 0.000 claims description 8
- 125000003545 alkoxy group Chemical group 0.000 claims description 7
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 claims description 7
- 229930064664 L-arginine Natural products 0.000 claims description 6
- 235000014852 L-arginine Nutrition 0.000 claims description 6
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 claims description 6
- 150000001412 amines Chemical class 0.000 claims description 6
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 claims description 6
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 claims description 6
- 230000000269 nucleophilic effect Effects 0.000 claims description 6
- 125000001997 phenyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(*)C([H])=C1[H] 0.000 claims description 6
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 claims description 6
- UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N Hydrogen Chemical compound [H][H] UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 claims description 5
- 125000002795 guanidino group Chemical group C(N)(=N)N* 0.000 claims description 5
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 claims description 3
- 125000000999 tert-butyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(*)(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H] 0.000 claims description 3
- 125000002088 tosyl group Chemical group [H]C1=C([H])C(=C([H])C([H])=C1C([H])([H])[H])S(*)(=O)=O 0.000 claims description 3
- 125000003903 2-propenyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])=C([H])[H] 0.000 claims description 2
- 125000005073 adamantyl group Chemical group C12(CC3CC(CC(C1)C3)C2)* 0.000 claims description 2
- UOCJDOLVGGIYIQ-PBFPGSCMSA-N cefatrizine Chemical group S([C@@H]1[C@@H](C(N1C=1C(O)=O)=O)NC(=O)[C@H](N)C=2C=CC(O)=CC=2)CC=1CSC=1C=NNN=1 UOCJDOLVGGIYIQ-PBFPGSCMSA-N 0.000 claims description 2
- 125000000113 cyclohexyl group Chemical group [H]C1([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])(*)C([H])([H])C1([H])[H] 0.000 claims description 2
- 125000001511 cyclopentyl group Chemical group [H]C1([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])(*)C1([H])[H] 0.000 claims description 2
- 125000005982 diphenylmethyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(C([H])=C1[H])C([H])(*)C1=C([H])C([H])=C([H])C([H])=C1[H] 0.000 claims description 2
- 150000002431 hydrogen Chemical group 0.000 claims description 2
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 229910052717 sulfur Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 125000003944 tolyl group Chemical group 0.000 claims description 2
- 125000000391 vinyl group Chemical group [H]C([*])=C([H])[H] 0.000 claims description 2
- 229920002554 vinyl polymer Polymers 0.000 claims description 2
- 125000005023 xylyl group Chemical group 0.000 claims description 2
- 239000012634 fragment Substances 0.000 claims 13
- 125000005843 halogen group Chemical group 0.000 claims 3
- 239000000203 mixture Substances 0.000 abstract description 2
- FSYKKLYZXJSNPZ-UHFFFAOYSA-N sarcosine Chemical compound C[NH2+]CC([O-])=O FSYKKLYZXJSNPZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 49
- 108010077895 Sarcosine Proteins 0.000 description 24
- 229940043230 sarcosine Drugs 0.000 description 24
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 21
- ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N N,N-Dimethylformamide Chemical compound CN(C)C=O ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 19
- ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N Triethylamine Chemical compound CCN(CC)CC ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 18
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 15
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 14
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 13
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 12
- WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N Tetrahydrofuran Chemical compound C1CCOC1 WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N Trifluoroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(F)(F)F DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 10
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 9
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 9
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 9
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 9
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 9
- KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N L-lysine Chemical group NCCCC[C@H](N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 8
- KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N L-valine Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 8
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 8
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 8
- 238000004809 thin layer chromatography Methods 0.000 description 8
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- QOSSAOTZNIDXMA-UHFFFAOYSA-N Dicylcohexylcarbodiimide Chemical compound C1CCCCC1N=C=NC1CCCCC1 QOSSAOTZNIDXMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 7
- DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-M Trifluoroacetate Chemical compound [O-]C(=O)C(F)(F)F DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 7
- 229960005261 aspartic acid Drugs 0.000 description 7
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 6
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 6
- VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N n-Hexane Chemical compound CCCCCC VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 229940086542 triethylamine Drugs 0.000 description 6
- WSNDAYQNZRJGMJ-UHFFFAOYSA-N 2,2,2-trifluoroethanone Chemical compound FC(F)(F)[C]=O WSNDAYQNZRJGMJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- PQFMNVGMJJMLAE-QMMMGPOBSA-N L-tyrosinamide Chemical compound NC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 PQFMNVGMJJMLAE-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 5
- OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N L-tyrosine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 5
- NQTADLQHYWFPDB-UHFFFAOYSA-N N-Hydroxysuccinimide Chemical compound ON1C(=O)CCC1=O NQTADLQHYWFPDB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 description 5
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 description 5
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 description 5
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 5
- 238000001308 synthesis method Methods 0.000 description 5
- NGNBDVOYPDDBFK-UHFFFAOYSA-N 2-[2,4-di(pentan-2-yl)phenoxy]acetyl chloride Chemical compound CCCC(C)C1=CC=C(OCC(Cl)=O)C(C(C)CCC)=C1 NGNBDVOYPDDBFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- ZAMOUSCENKQFHK-UHFFFAOYSA-N Chlorine atom Chemical compound [Cl] ZAMOUSCENKQFHK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 150000008064 anhydrides Chemical class 0.000 description 4
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 4
- 229910052801 chlorine Inorganic materials 0.000 description 4
- 239000000460 chlorine Substances 0.000 description 4
- 238000005859 coupling reaction Methods 0.000 description 4
- 239000000047 product Substances 0.000 description 4
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 description 4
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 description 4
- 125000001424 substituent group Chemical group 0.000 description 4
- 229960004295 valine Drugs 0.000 description 4
- PJUPKRYGDFTMTM-UHFFFAOYSA-N 1-hydroxybenzotriazole;hydrate Chemical compound O.C1=CC=C2N(O)N=NC2=C1 PJUPKRYGDFTMTM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- UHOVQNZJYSORNB-UHFFFAOYSA-N Benzene Chemical compound C1=CC=CC=C1 UHOVQNZJYSORNB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- WKBOTKDWSSQWDR-UHFFFAOYSA-N Bromine atom Chemical compound [Br] WKBOTKDWSSQWDR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229910004373 HOAc Inorganic materials 0.000 description 3
- WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N L-glutamic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N 0.000 description 3
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 description 3
- LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N N-Butanol Chemical compound CCCCO LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- KDLHZDBZIXYQEI-UHFFFAOYSA-N Palladium Chemical compound [Pd] KDLHZDBZIXYQEI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N Phenol Chemical compound OC1=CC=CC=C1 ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N Toluene Chemical compound CC1=CC=CC=C1 YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N Valine Chemical group CC(C)C(N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 3
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 description 3
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 3
- GDTBXPJZTBHREO-UHFFFAOYSA-N bromine Substances BrBr GDTBXPJZTBHREO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229910052794 bromium Inorganic materials 0.000 description 3
- 239000003054 catalyst Substances 0.000 description 3
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N citric acid Chemical compound OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000008878 coupling Effects 0.000 description 3
- 239000007822 coupling agent Substances 0.000 description 3
- 238000010168 coupling process Methods 0.000 description 3
- 239000002274 desiccant Substances 0.000 description 3
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 3
- 125000000956 methoxy group Chemical group [H]C([H])([H])O* 0.000 description 3
- 239000012074 organic phase Substances 0.000 description 3
- 238000007430 reference method Methods 0.000 description 3
- 238000010532 solid phase synthesis reaction Methods 0.000 description 3
- PSWFFKRAVBDQEG-YGQNSOCVSA-N thymopentin Chemical compound NC(N)=NCCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 PSWFFKRAVBDQEG-YGQNSOCVSA-N 0.000 description 3
- ASOKPJOREAFHNY-UHFFFAOYSA-N 1-Hydroxybenzotriazole Chemical compound C1=CC=C2N(O)N=NC2=C1 ASOKPJOREAFHNY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- QCQCHGYLTSGIGX-GHXANHINSA-N 4-[[(3ar,5ar,5br,7ar,9s,11ar,11br,13as)-5a,5b,8,8,11a-pentamethyl-3a-[(5-methylpyridine-3-carbonyl)amino]-2-oxo-1-propan-2-yl-4,5,6,7,7a,9,10,11,11b,12,13,13a-dodecahydro-3h-cyclopenta[a]chrysen-9-yl]oxy]-2,2-dimethyl-4-oxobutanoic acid Chemical compound N([C@@]12CC[C@@]3(C)[C@]4(C)CC[C@H]5C(C)(C)[C@@H](OC(=O)CC(C)(C)C(O)=O)CC[C@]5(C)[C@H]4CC[C@@H]3C1=C(C(C2)=O)C(C)C)C(=O)C1=CN=CC(C)=C1 QCQCHGYLTSGIGX-GHXANHINSA-N 0.000 description 2
- USFZMSVCRYTOJT-UHFFFAOYSA-N Ammonium acetate Chemical compound N.CC(O)=O USFZMSVCRYTOJT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000005695 Ammonium acetate Substances 0.000 description 2
- OKKJLVBELUTLKV-MZCSYVLQSA-N Deuterated methanol Chemical compound [2H]OC([2H])([2H])[2H] OKKJLVBELUTLKV-MZCSYVLQSA-N 0.000 description 2
- PXGOKWXKJXAPGV-UHFFFAOYSA-N Fluorine Chemical compound FF PXGOKWXKJXAPGV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 235000019766 L-Lysine Nutrition 0.000 description 2
- JGFZNNIVVJXRND-UHFFFAOYSA-N N,N-Diisopropylethylamine (DIPEA) Chemical compound CCN(C(C)C)C(C)C JGFZNNIVVJXRND-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N Pyridine Chemical compound C1=CC=NC=C1 JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000010306 acid treatment Methods 0.000 description 2
- 229940043376 ammonium acetate Drugs 0.000 description 2
- 235000019257 ammonium acetate Nutrition 0.000 description 2
- 150000001540 azides Chemical class 0.000 description 2
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 2
- 239000003480 eluent Substances 0.000 description 2
- 229910052731 fluorine Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000011737 fluorine Substances 0.000 description 2
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 2
- 239000000463 material Substances 0.000 description 2
- 229910052763 palladium Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 2
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 2
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 2
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 2
- 238000010189 synthetic method Methods 0.000 description 2
- 150000003512 tertiary amines Chemical class 0.000 description 2
- 229960004441 tyrosine Drugs 0.000 description 2
- 239000003039 volatile agent Substances 0.000 description 2
- RKSKSWSMXZYPFW-VIFPVBQESA-N (2s)-2-(benzylamino)butanedioic acid Chemical compound OC(=O)C[C@@H](C(O)=O)NCC1=CC=CC=C1 RKSKSWSMXZYPFW-VIFPVBQESA-N 0.000 description 1
- PVHFNBNJJJYQIA-LBPRGKRZSA-N (2s)-2-[benzyl-[(2-methylpropan-2-yl)oxycarbonyl]amino]butanedioic acid Chemical compound CC(C)(C)OC(=O)N([C@@H](CC(O)=O)C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 PVHFNBNJJJYQIA-LBPRGKRZSA-N 0.000 description 1
- RYHBNJHYFVUHQT-UHFFFAOYSA-N 1,4-Dioxane Chemical compound C1COCCO1 RYHBNJHYFVUHQT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CBWFTZNMONHKNZ-UHFFFAOYSA-N 2-[methyl(phenylmethoxycarbonyl)amino]acetic acid Chemical compound OC(=O)CN(C)C(=O)OCC1=CC=CC=C1 CBWFTZNMONHKNZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- YRXIMPFOTQVOHG-UHFFFAOYSA-N 2-[methyl-[(2-methylpropan-2-yl)oxycarbonyl]amino]acetic acid Chemical compound OC(=O)CN(C)C(=O)OC(C)(C)C YRXIMPFOTQVOHG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CFMZSMGAMPBRBE-UHFFFAOYSA-N 2-hydroxyisoindole-1,3-dione Chemical compound C1=CC=C2C(=O)N(O)C(=O)C2=C1 CFMZSMGAMPBRBE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- IJBFORCSZCUUPG-UHFFFAOYSA-N 3-hydroxypyrrolidine-2,5-dione 2-[methyl-[(2-methylpropan-2-yl)oxycarbonyl]amino]acetic acid Chemical compound OC1CC(=O)NC1=O.OC(=O)CN(C)C(=O)OC(C)(C)C IJBFORCSZCUUPG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101100260051 Caenorhabditis elegans cct-1 gene Proteins 0.000 description 1
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CKLJMWTZIZZHCS-UHFFFAOYSA-N D-OH-Asp Natural products OC(=O)C(N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CKLJMWTZIZZHCS-UWTATZPHSA-N L-Aspartic acid Natural products OC(=O)[C@H](N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-UWTATZPHSA-N 0.000 description 1
- CTQNGGLPUBDAKN-UHFFFAOYSA-N O-Xylene Chemical compound CC1=CC=CC=C1C CTQNGGLPUBDAKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000001338 aliphatic hydrocarbons Chemical class 0.000 description 1
- 150000001408 amides Chemical class 0.000 description 1
- 239000000010 aprotic solvent Substances 0.000 description 1
- 125000003118 aryl group Chemical group 0.000 description 1
- 239000012298 atmosphere Substances 0.000 description 1
- VDEUYMSGMPQMIK-UHFFFAOYSA-N benzhydroxamic acid Chemical compound ONC(=O)C1=CC=CC=C1 VDEUYMSGMPQMIK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HSDAJNMJOMSNEV-UHFFFAOYSA-N benzyl chloroformate Chemical compound ClC(=O)OCC1=CC=CC=C1 HSDAJNMJOMSNEV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000006664 bond formation reaction Methods 0.000 description 1
- 239000006227 byproduct Substances 0.000 description 1
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000001805 chlorine compounds Chemical class 0.000 description 1
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 1
- 239000012043 crude product Substances 0.000 description 1
- 238000002425 crystallisation Methods 0.000 description 1
- 230000008025 crystallization Effects 0.000 description 1
- 125000004093 cyano group Chemical group *C#N 0.000 description 1
- 238000010511 deprotection reaction Methods 0.000 description 1
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 1
- 125000001495 ethyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 229960002989 glutamic acid Drugs 0.000 description 1
- 125000004435 hydrogen atom Chemical group [H]* 0.000 description 1
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 1
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 1
- PNDPGZBMCMUPRI-UHFFFAOYSA-N iodine Chemical compound II PNDPGZBMCMUPRI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000004255 ion exchange chromatography Methods 0.000 description 1
- 125000001449 isopropyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])(*)C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 125000001280 n-hexyl group Chemical group C(CCCCC)* 0.000 description 1
- 238000010647 peptide synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 1
- 239000003223 protective agent Substances 0.000 description 1
- UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N pyridine Natural products COC1=CC=CN=C1 UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 description 1
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 1
- WPLOVIFNBMNBPD-ATHMIXSHSA-N subtilin Chemical compound CC1SCC(NC2=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(=O)NC(C(=O)NC(CCCCN)C(=O)NC(C(C)CC)C(=O)NC(=C)C(=O)NC(CCCCN)C(O)=O)CSC(C)C2NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C1NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(NC(=O)C1NC(=O)C(=C/C)/NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(C)NC(=O)CNC(=O)C(NC(=O)C(NC(=O)C2NC(=O)CNC(=O)C3CCCN3C(=O)C(NC(=O)C3NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(=C)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(NC(=O)C(CCCCN)NC(=O)C(N)CC=4C5=CC=CC=C5NC=4)CSC3)C(C)SC2)C(C)C)C(C)SC1)CC1=CC=CC=C1 WPLOVIFNBMNBPD-ATHMIXSHSA-N 0.000 description 1
- 150000003458 sulfonic acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 125000005931 tert-butyloxycarbonyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(OC(*)=O)(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N tetrahydrofuran Natural products C=1C=COC=1 YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000001544 thienyl group Chemical group 0.000 description 1
- 229960004517 thymopentin Drugs 0.000 description 1
- 210000001685 thyroid gland Anatomy 0.000 description 1
- 125000004044 trifluoroacetyl group Chemical group FC(C(=O)*)(F)F 0.000 description 1
- OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N tyrosine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JOYRKODLDBILNP-UHFFFAOYSA-N urethane group Chemical group NC(=O)OCC JOYRKODLDBILNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000008096 xylene Substances 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
- C07K5/08—Tripeptides
- C07K5/0819—Tripeptides with the first amino acid being acidic
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/575—Hormones
- C07K14/66—Thymopoietins
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
- C07K5/06—Dipeptides
- C07K5/06008—Dipeptides with the first amino acid being neutral
- C07K5/06017—Dipeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic
- C07K5/06026—Dipeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic the side chain containing 0 or 1 carbon atom, i.e. Gly or Ala
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
- C07K5/06—Dipeptides
- C07K5/06086—Dipeptides with the first amino acid being basic
- C07K5/06095—Arg-amino acid
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K7/00—Peptides having 5 to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- C07K7/04—Linear peptides containing only normal peptide links
- C07K7/06—Linear peptides containing only normal peptide links having 5 to 11 amino acids
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
- Y02P—CLIMATE CHANGE MITIGATION TECHNOLOGIES IN THE PRODUCTION OR PROCESSING OF GOODS
- Y02P20/00—Technologies relating to chemical industry
- Y02P20/50—Improvements relating to the production of bulk chemicals
- Y02P20/55—Design of synthesis routes, e.g. reducing the use of auxiliary or protecting groups
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Biophysics (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Toxicology (AREA)
- Endocrinology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
- Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
- Polymers With Sulfur, Phosphorus Or Metals In The Main Chain (AREA)
- Macromolecular Compounds Obtained By Forming Nitrogen-Containing Linkages In General (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
- Low-Molecular Organic Synthesis Reactions Using Catalysts (AREA)
- Compounds Of Unknown Constitution (AREA)
Description
1 79329
Uusi menetelmä pentapeptidin H-ARG-X-ASP-Y-TYR-R valmistamiseksi ja menetelmässä käytettäviä välituotteita Tämä keksintö koskee uutta menetelmää hyödyllisten 5 pentapeptidien valmistamiseksi liuossynteesitekniikalla sekä menetelmässä käytettäviä välituotteita. Keksinnön mukaisella menetelmällä valmistetaan peptidejä, joilla on kaava H-ARG-X-ASP-Y-TYR-R, jossa X on LYS ja Y on VAL tai X ja Y ovat kumpikin SAR.
10 US-patentissa 4 190 646 ja US-patenttihakemuksessa
No 124 959, jätetty maaliskuun 13. päivänä 1980, kuvataan erilaisia peptidejä, jotka ovat käyttökelpoisia kateenkor-van toiminnan alueella ja immunologisilla alueilla. Mainitussa patentissa kuvataan "thymopoietin-pentapeptidi" 15 (TP5) ja sen substituoituja johdannaisia, kun taas patent tihakemuksessa kuvataan TP5:n peptidi-analogeja, joiden teho on parempi kuin TP5:n. Mainitussa patentissa ja patenttihakemuksessa kuvataan peptidien valmistus kiinteä-faasi-synteesimenetelmin, joista käytetään tavallisesti 20 nimitystä "Merrifield-synteesi", ja niissä esitetään myös, että eräiden näiden kaltaisten aineiden valmistamiseen voidaan käyttää klassisia menetelmiä (so. liuossynteesimene-telmiä), mutta mitään spesifistä klassista menetelmää tai synteettistä tapaa niissä ei ole paljastettu.
25 Merrifield'in kiinteäfaasi-synteesimenetelmän ol lessa tarkoituksenmukainen valmistettaessa pieniä määriä —: peptidejä laboratoriossa, se olisi epäkäytännöllinen ja ta- vallisesti epätaloudellinen menetelmä valmistettaessa suuria määriä (esim. suurempia kuin noin 100 gramman eriä) 30 peptidiä, johon tarkoitukseen liuos-synteesimenetelmät ovat sopivampia. Lisäksi liuos-synteesimenetelmät ovat yleensä paljon halvempia kuin kiinteäfaasi-menetelmät tiettyjen käytettävien reagenssien paljon pienempien yksikkökustannusten vuoksi. Polypeptiden valmistuksessa käyttökelpoisten 35 hyvin moninaisten liuossynteesimenetelmien joukosta paten- 2 79329 tinhakijat ovat keksineet erityisen synteettisen menetelmän, jolla haluttua pentapeptidiä saadaan valmistetuksi mukavasti ja taloudellisesti.
Keksintö koskee siten uutta menetelmää peptidin 5 H-ARG-X-ASP-Y-TYR-R valmistamiseksi, jossa kaavassa X on LYS ja Y on VAL tai X ja Y on kumpikin SAR ja R on NI^ tai OH, liuossynteesitekniikalla siten, että a) muodostetaan osa I, jolla on kaava H-Y-TYR-R' i) suojaamalla Y-aminohapon c<.-aminoryhmä antamalla sen 10 reagoida reagenssin kanssa, joka liittää suojaavan ryhmän T, ii) aktivoimalla vaiheessa i) muodostettu suojattu Y amiinin nukleofiilisen liittymisen suhteen karboksiryhmään, jolloin muodostuu karboksi-aktivoitu suojattu Y-aminohappo, iii) antamalla mainitun karboksi-aktivoidun suojatun Y:n 15 reagoida TYR-R':n kanssa ja iv) poistamalla suojaryhmä T, jolloin muodostuu osa I; b) muodostetaan osa IV, jolla on kaava c*;-T-6J-U-ASP-Y-TYR-R' i) suojaamalla asparagiinihapon 06-amino- ja («J-karboksi-20 ryhmät antamalla sen reagoida reagenssin kanssa, joka liittää siihen suojaryhmät T ja U, ii) aktivoimalla vaiheessa i) muodostettu suojattu as- * paragiinihappo amiinin nukleofiilisen liittymisen suhteen ; -karboksiryhmään, jolloin muodostuu karboksi-aktivoitu 25 suojattu asparagiinihappo, ja iii) antamalla mainitun karboksi-aktivoidun suojatun asparagiinihapon reagoida osan I kanssa, jolloin muodostuu osa IV; c) muodostetaan osa IVA, jolla on kaava 30 H-^-U-ASP-Y-TYR-R', poistamalla suojaryhmä T osasta IV? d) muodostetaan osa III, jolla on kaava °6—T-(£-T")-X-f-U-ASP-Y-TYR-R' i) suojaamalla X-aminohapon ^'-aminoryhmä (ja jos X on LYS, £-aminoryhmä) antamalla sen reagoida reagenssin (rea-35 genssien) kanssa, joka (jotka) liittää (liittävät) suoja-ryhmän (suojaryhmät) T (ja T"), 3 79329 ii) aktivoimalla vaiheessa i) muodostettu suojattu X, amiinin nukleofiilisen liittymisen suhteen karboksiryhmään, jolloin muodostuu karboksi-aktivoitu suojattu X-aminohappo, ja 5 iii) antamalla mainitun karboksi-aktivoidun suojatun X-aminohapon reagoida osan IVA kanssa, jolloin muodostuu osa III, e) poistetaan T-suojaryhmä osasta III, jolloin muodostuu osa IIIA, jolla on kaava H-(C-T")-Χ-ίΟ-U-ASP-Y-TYR-R'; 10 f) valmistetaan o<L-T-U-T1-ARG, jossa T on L-arginii- nin 'X-aminoryhmässä oleva suojaryhmä ja Τ' on L-arginiinin guanidinoryhmässä oleva suojaryhmä; g) osan IIIA annetaan reagoida '-ARG:n kans sa, jolloin muodostuu cC-T-C^-T '-ARG-(£-T" )-X-6J-U-ASP-Y-TYR- 15 R'; h) poistetaan ryhmät U, T, Τ' ja T", jolloin muodostuu peptidi H-ARG-X-ASP-Y-TYR-R; ja j) eristetään ja puhdistetaan saatu peptidi; jolloin edellä esitetyissä kaavoissa T ja T" on valittu ryh- 20 mästä, jonka muodostavat
O
n a) R^-OC-, jossa R^ on fenyyli; tolyyli; ksylyyli; adamantyyli; allyyli; /3-syanoetyyli; fluorenyylimetyyli; fenyylirenkaastaan mahdollisesti 1-3 halogeenilla, nitrol- 25 la, pienalkyylillä ja/tai pienalkoksilla substituoitu bent-syyli; di-isopropyylimetyyli; difenyylimetyyli; syklohek-syyli; syklopentyyli; vinyyli; t-butyyli; t-amyyli; dime-tyylitrifluorimetyylimetyyli; tai dimetyylibifenyylimetyyli;
O
fl 30 b) R2C-, jossa R2 on pienalkyyli, jossa on 2-4 hiil tä tai pienalkyyli, jossa on 1-4 hiiltä ja substituentteina 1-5 halogeenia,
V
* * Il c) R^O-P-, jossa V on S tai O ja ja R4 on kum- 35 Ör4 pikin bentsyyli tai pienalkyyli; 4 79329 " " Rc jossa Rc ja Rc erikseen on j C- kumpikin pienalkyyli tai R5 "^a R6 yhdessä vastaavat . C=0 ryhmää -CH»-C-CH„- x I 1 / \ * 5 " ' R6 R7 R8 jossa R7 ja Rg on kumpikin vety tai pienalkyyli; m ^N^N—NOo 10 . I I Δ jossa Rq on vety tai nitro; e) ia
Rl°\ ? rhr- f) I |J jossa R10 on vety, metyyli, halogeeni tai nitro, 0 20 edellyttäen, että T on monovalenttinen kun X on SAR; U on fenyyliryhmästään mahdollisesti 1-3 halogeenilla, nitrolla, C^_g-alkyylillä ja/tai Cj^-alkoksilla substituoitu bentsyyli; ja Τ' on
O
II
25 R^-OC-, jossa R^ on edellä määritelty, nitro, hydrokloridi, p-metoksibentsyylisulfonyyli tai tosyyli, ja R' on NI^ tai OU, jossa U on edellä määritelty.
oi.-amino-suojaryhmä T voi olla jokaisen edellä mainitun aminohapon osalta sama tai erilainen ja sen on säi- 30 lyttävä stabiilina vaiheissa, joita käytetään aminohappo-ryhmiä liitettäessä, sen ollessa silti helposti poistettavissa yhdistämisvaiheiden päätyttyä olosuhteissa, jotka eivät lohkaise mitään peptidin amidisidoksista. Eräiden ryhmien osalta (esim. BOC) tämä poisto suoritetaan vahval- 35 la hapolla (esim. trifluorietikkahapolla), minkä seurauk- 5 79329 sena saadaan suojaamatonta väliyhdistettä vastaavana hap-poadditiosuolana (esim. trifluoriasetaattina).
Guanidino-suojaryhmänä Τ' voi olla mikä tahansa edellä määritelty sopiva amino-suojaryhmä, tai nitroryhmä 5 samoin kuin happoadditiosuolat, kuten hydrokloridi. Amino-suojaryhmistä ovat ensisijaisia uretaani-suojaryhmät (kaava a) edellä) ja substituoidut sulfonihappojohdannaiset, kuten p-metoksibentseenisulfonyyli ja tosyyli. Ensisijaisin on hydrokloridi-suola. Tästä guanidino-suojaryhmästä käy-10 tetään tässä nimitystä cj-ryhmä osoittamaan, että se on ketjun päässä. Monien guanidino-suojaryhmien tarkka sijainti ketjussa ei ole täsmällisesti tiedossa.
Karboksi-suojaryhmän U on oltava helposti poistettavissa olosuhteissa, jotka eivät tuhoa saatua peptidiä, 15 stabiilisuuden säilyessä T-ryhmiä poistettaessa.
R'-ryhmä on joko NH2 (peptidien valmistamiseksi, joissa R on NH2) tai OU (peptidien valmistamiseksi, joissa R on OH).
Amino-suojaryhmää f), joka on bidentaatti, voidaan 20 käyttää ainoastaan L-arginiinin tai L-valiinin evl-amino-ryhmien tai L-lysiinin tiramino- ja £-aminoryhmien, mutta ei sarkosiinin οί-aminoryhmän yhteydessä. Sarkosiinin 06-; aminoryhmän suojaryhmän on oltava monodentaatti tässä ami- noryhmässä olevan metyylisubstituentin vuoksi. Muita ami-25 nosuojaryhmiä voidaan käyttää kaikkien aminohappojen yh-‘r teydessä.
Tässä käytettynä "halogeeni" tarkoittaa fluoria, : klooria, bromia ja jodia, kloorin ja bromin ollessa kuiten kin ensisijaisia. Termit "pienalkyyli" ja "pienalkoksi" 30 merkitsevät vastaavasti tyydytettyjä alifaattisia hiilivetyjä/ joissa on 1-6 hiiliatomia, kuten metyyliä, etyyliä, isopropyyliä, t-butyyliä, n-heksyyliä ja näiden kaltaisia ryhmiä ja vastaavia alkoksiryhmiä kuten metoksia, etoksia, isopropoksia, t-butoksia, n-heksoksia, ja näiden kaltaisia 35 ryhmiä. Ensisijainen pienalkyyli on metyyli ja ensisijainen pienalkoksi on metoksi.
6 79329
Reagensseja, joita käytetään näiden suojaryhmien liittämiseen (tavallisesti vastaavia happoklorideja, joskin muitakin johdannaisia voidaan käyttää) nimitetään tässä joskus "suojaryhmäreagensseiksi". Muita sopivia suojaryhmiä 5 on esitetty esimerkiksi julkaisussa "Protective Groups in Organic Chemistry", J.F.W. McOmie, ed., Plenum Press, N.Y., 1973.
Pidetään ensisijaisena, että kukin T ja T" on sama ja on bentsyylioksikarbonyyli(CBZ) tai trifluoriasetyyli 10 (TFA). Pidetään ensisijaisena, että Τ' on hydrokloridisuola.
Edellä selostettujen karboksi-aktivoitujen suojattujen aminohappotähteiden valmistamiseen voidaan käyttää hyvin moninaisia reagensseja.
Eräs karboksi-aktivoitu suojattu aminohappotähde-15 tyyppi on reaktiokykyinen esteri. Esimerkkejä aineista, joita käytetään sopivien aktiivisten esterien valmistamiseen ovat fenoli; fenoli, jonka fenolirenkaassa on substi-tuentteina 1-5 radikaalia, jotka on valittu ryhmästä halogeeni (esim. kloori tai fluori), nitro, syano ja metoksi; 20 tiofenyyli; N-hydroksiftaali-imidi; N-hydroksisukkiini-imidi; N-hydroksiglutaari-imidi; N-hydroksibentsamidi; 1-hydroksibentsotriatsoli; ja näiden kaltaiset substituentit.
; Muita sopivia aineita on esitetty esimerkiksi edellä mai nitussa julkaisussa "Protective Groups in Organic Chemis-25 try", J.F.W. McOmie, ed. Seuraavissa alla esitetyissä spesifisissä esimerkeissä käytetään yleensä N-hydroksisukkii-ni-imidiä tai 1-hydroksibentsotriatsolia.
Alalla tunnetaan hyvin muitakin aikaisempia menetelmiä, kuten seka-anhydridimenetelmä tai symmetristen anhyd-30 ridien menetelmä, happokloridimenetelmä ja atsidimenetelmä, joita on selostettu esim. artikkelissa Bodanszky ym., "Peptide Synthesis", 2 nd ed., 1976, s. 85-128. Nämä muutkin menetelmät voivat olla käyttökelpoisia.
Viitattaessa eri aminohappoihin käytetään mukavuus-35 syistä seuraavia lyhenteitä: 7 79329
Aminohappo Lyhenne
L-lysiini LYS
L-valiini VAL
L-tyrosiini TYR
5 L-asparagiinihappo ASP
L-glutamiinihappo GLU
Sarkosiini SAR
L-arginiini ARG
8 79329
Keksinnön mukaista menetelmää kuvataan kaavamaisesti seuraavassa kaaviossa 5
ARG X Z Y TYR
T-OH
10 T--OAH--R' T---R'
U
T —-—OA H---R' 15 u T ---R'
rji »» U
T — OA H —L---R'
T" U
20 T —^-i---R'
T* T" U
*. T — -—OA H —1---R'
*. Τ’ U
*. T —^1-L---R' 25 !
HJ-1---h R
9 79329
Edellä esitetyissä kaavioissa suojaavat ryhmät on esitetty edellä mainituin merkein U, Tf Tf ja T", kun taas aminohappotähteiden karboksiaktivointi on osoitettu kirjaimin "OA".
5 Edellä esitettyyn kaavioon viitaten osaa I voidaan valmistaa tavallisesti seuraavasti. Sarkosiinin aminoryh-män suojaamiseksi muodostetaan sarkosiinin vesiliukoinen emäksinen additiosuola ja tämä liuotetaan veteen. Mukavuussyistä tätä emäksistä additiosuolaa voidaan muodostaa 10 liuottamalla sarkosiini pieneen ylimäärään natriumhydroksidia. Tähän liuokseen lisätään sitten samanaikaisesti vähäisin ylimäärin reagenssi suojaavan ryhmän T liittämiseksi (esim. vastaavaa happokloridia, kuten bentsyylioksikarbo-nyylikloridia) ja emäksen (esim. natriumhydroksidin) liu-15 osta reagoimaan reaktion aikana muodostuneen hapon (esim. HCl:n) kanssa. Suojaavan ryhmän lisäävä reagenssi voi olla liuoksessa tai pelkkänä ja se on lähinnä happokloridia. Reaktion päätyttyä ylimääräinen suojaryhmän lisäävä reagenssi poistetaan (esim. uuttamalla dietyylieetterillä tai 20 millä tahansa muulla orgaanisella veden kanssa sekoittumat-; tomalla liuottimena) , minkä jälkeen suojattu sarkosiini eristetään reagoimattoman sarkosiinin joukosta käsittele-:.*V mällä hapon (esim. kloorivetyhapon) kanssa. Happokäsitte- ly muuttaa suojaamattoman sarkosiinin emäksisen additiosuo-:*·: 25 lan suojaamattoman sarkosiinin happoadditiosuolaksi, joka suola liukenee veteen. Happokäsittely muuttaa kuitenkin suojatun sarkosiinin emäksisen additiosuolan ainoastaan suojatuksi sarkosiiniksi, koska suojatusta aminoryhmästä johtuen happoadditiosuolaa ei voida valmistaa. Tämä suo-30 jattu sarkosiini, ollen veteen liukenematon, on helposti erotettavissa suojaamattoman sarkosiinin suolasta, esi-*· · merkiksi uuttamalla sekoittamattomalla orgaanisella liuot- timella, kuten edellä on selostettu. Tässä käytettynä ter-min "sekoittamaton orgaaninen liuotin" piiriin sisältyvät / ; 35 kaikki tavalliset orgaaniset laboratorioliuottimet, jotka 10 79329 eivät sekoitu veden kanssa, kuten esimerkiksi dietyyli-eetteri, etyyliasetaatti, bentseeni, tolueeni, ksyleeni ja näiden kaltaiset liuottimet. Ensisijainen suojattu sarkosiini, N-bentsyylioksikarbonyylisarkosiini, on tun-5 nettu yhdiste. Menetelmän sen valmistamiseksi ovat esittäneet R.S. Tipton ja B.A. Pawson, J.Org.Chem., 26, 4698 (1961), ja yhdistettä on saatavana kaupallisena tuotteena toimittajalta Bachein, Inc., Torrance, CA.
Valmistettaessa, tämän suojatun sarkosiinin konden-10 soimiseksi L-tyrosiiniamidimolekyylin kanssa osan I muodostamiseksi, amino-suojattu sarkosiini on tavallisesti aktivoitava jollakin tavalla sidoksen muodostumisen edistämiseksi. Vaikkakin ensisijaisena tapana tämän aktivoinnin suorittamiseksi on "aktiivisen esterin" muodostaminen, 15 harkinnan arvoista on huomioida, että käyttökelpoisia voivat olla muutkin alalla aikaisemmin tunnetut aktivointi-menetelmät kuten seka-anhydridi-, symmetrinen anhydridi-, atsidi- tai happokloridi-menetelmät.
Harkinnan arvoista on myös, että käyttökelpoinen 20 voi olla jokainen suojatun sarkosiinin esteri; eräs ensisijainen aktiivinen esteri on esteri, joka on muodostettu : hydroksisukkiini-imidiä käyttäen. Suojatun sarkosiinin aktiivista esteriä valmistetaan antamalla ekvivalenttimää-rien suojattua sarkosiinia ja aktiivista esterireagenssia 25 reagoida sopivan orgaanisen liuottimen,kuten esimerkiksi, tetrahydrofuraanin, dioksaanin, dimetyyliformamidin, pyri-diinin tai näiden kaltaisen liuottimen liuoksessa. Tähän liuokseen lisätään sitten ekvivalenttimäärin kytkentäainet-ta, tyypillisenä esimerkkinä disykloheksyylikarbodi-imidiä. 30 Vaikka muutkin kytkentäaineet ovat tehokkaita, disyklohek-: syylikarbodi-imidi on erityisen käyttökelpoinen koska kyt- kentäreaktiossa syntyvä sivutuote liukenee hyvin huonosti käytettäviin liuotinryhmän liuottimiin, ja sen vuoksi se on helposti poistettavissa suodattamalla, kytkentätuotteen 35 jäädessä liuokseen.
li 79329 L-tyrosiiniamidia on saatavissa kaupan olevana tuotteena (esim. yhtiöltä Sigma Chemical Company, St. Louis, MO) tai sitä voidaan valmistaa tunnetuin menetelmin.
Seuraavassa osan I valmistusvaiheessa mooliekviva-5 lenttimäärin käytettävän L-tyrosiiniamidin ja suojatun sarkosiinin aktiivisen esterin annetaan reagoida keskenään siten, että läsnä on yksi ekvivalentti suolan muodostavaa ainetta, kuten orgaanista tertiääristä amiinia. Vaikkakin voidaan käyttää mitä tahansa orgaanista tertiääristä amii-10 nia, trietyyliamiinin on todettu toimivan hyvin. Liuottimena on sopiva edellä esitetty orgaaninen liuotin. Reagoimattomat aminohapot poistetaan käsittelemällä reaktioseos-ta hapon kanssa (esim. etikkahapon kanssa) ja eristetään uuttamalla edellä selostetulla tavalla sekoittumattomalla 15 orgaanisella liuottimena.
Viimeisenä vaiheena on oC-amino-suojaryhmän poisto sarkosiinista, lähinnä trifluorietikkahapolla, jolloin saadaan osaa I.
Osaa IV valmistettaessa lähdetään L-asparagiiniha-20 poista, jonka /^-karboksi-ryhmä on suojattu. Tästä /S-kar-boksiryhmästä käytetään tavallisesti nimitystä <J-ryhmä hyväksytyn nimistön mukaisesti osoittamaan, että se on ketjun päässä.
Esimerkkejä sopivista karboksyyli-suojaryhmistä ovat 25 bentsyyli ja bentsyyli, jonka fenyyliryhmässä on 1-3 subs-tituenttia ryhmästä halogeeni (esim. kloori tai bromi), : nitro, C^C-^-alkoksi (esim. metoksi) ja C^-C^-alkyyli (esim. metyyli). Bentsyyli on ensisijainen ryhmä. Tätä ^-suojattua L-asparagiinihappoa on kaupallisena tuottee-30 na saatavissa toimittajalta Bachem, Inc. Torrance, California, tai sitä voidaan valmistaa tunnetuin menetelmin.
Osat I ja od-T-(*>-U-ASP yhdistetään, jolloin muodostuu suojattu tripeptidi cx>T-U)-U-ASP-Y-TYR-R' (osa IV) , antamalla ekvivalenttimäärien niitä reagoida sopivassa aprootti-35 sessa liuottimessa, kuten dimetyyliformamidissa vähäisen i2 79329 kytkentäaine-ylimäärän kuten disykloheksyylikarbodi-imidi-ylimäärän läsnäollessa. Sitten poistetaan ASP-ryhmässä oleva cxf-aminosuojaryhmä, lähinnä trifluorietikkahapolla, minkä jälkeen suojattu X-aminohappo lisätään osaan IV, esim.
5 aktiivisen esterin menetelmällä, jolloin saadaan valmistetuksi osaa III.
Osan III sarkosiinitähteessä oleva cK.-aminosuojaryh-mä poistetaan trifluorietikkahapolla, jolloin saadaan osaa IIIA.
10 Lopuksi o(-amino- ja guanidiini-suojattu L-arginiini- tähde yhdistetään osan IIIA amino-päätteeseen, ja saadusta yhdisteestä poistetaan kaikki suojaryhmät, jolloin saadaan haluttu pentapeptidiamidi.
Suojaryhmien poisto voidaan suorittaa esimerkiksi 15 käsittelemällä vetykaasulla hiilellä oleva palladium-katalyytin läsnäollessa pelkistykseen soveltuvassa edellä selostetussa liuottimessa (lähinnä vesipitoisessa etikkaha-possa). Vetykaasun paineen ei tarvitse olla suurempi kuin yksi ilmakehä, vaikkakin paineen käyttäminen on tarkoituk-20 senmukaista sen jouduttaessa pelkistymisnopeutta.
Saadun epäpuhtaan tuotteen eristäminen ja puhdistus voidaan suorittaa yhdistetyllä kiteytys- ja ioninvaihto-kromatografointi-menetelmällä (lähinnä käyttämällä eluent-tina ammoniumasetaatti-pH 5:ttä), käyttämällä ohutkerros-25 kromatografiaa kunkin fraktion aineiden identtisyyden seuraamiseen. Vaikkakin seuraavissa esimerkeissä on esitetty useita eristys- ja puhdistusmenetelmiä, ilmeisen selvää on, että muitakin menetelmiä voidaan harkita käytettäväksi.
Vaikkakin liuossynteesitekniikka sinänsä on pepti-30 dikemiassa tunnettu (esim. FI-patenttijulkaisuista 62823, 63018, 64139 ja 64349), niin keksinnön mukaisella uudella menetelmällä saavutetaan etuja, jotka ovat ennestään tunnetun tekniikan perusteella täysin odottamattomia. Keksinnön mukaisella menetelmällä valmistetaan pentapeptidiä edul-35 lisen tuotteen ollessa Arg-Lys-Asp-Val-Tyr (tunnettu sivulla 1 mainitusta US-patenttijulkaisusta 4 190 646 kuten välipäätöksessä on esitetty). Keksinnön mukaisen menetelmän edut käyvät selvästi ilmi hakijan suorittamista vertailu- i3 79329 kokeista, joissa yllä mainittu edullinen pentapeptidi on valmistettu sekä keksinnön mukaisella menetelmällä että tavanomaisella liuossynteesimenetelmällä, jota seuraavassa kutsutaan vertailumenetelmäksi. Seuraavassa esitetään yh-5 teenveto näistä synteeseistä ja saaduista tuloksista.
Jos valmistetun pentapeptidin rakenneyksiköistä lyhyyden vuoksi käytetään seuraavaa numerointia:
Arg-Lys-Asp-Val-Tyr 1 2 3 4 5 10 niin keksinnön mukainen menetelmä voidaan esittää seuraavasti : 4 + 5 ==* (4-5) 3 + (4-5) 3» (3-4-5) 2 + (3-4-5) -55» (2-3-4-5) 15 1 + (2-3-4-5) -==- (1-2-3-4-5)
Vertailumenetelmässä reaktiojärjestys oli seuraava: 3 + 4 =*. (3-4) 2 + (3-4) ==v (2-3-4) 1 + (2-3-4) -(1-2-3-4) 20 (1-2-3-4) + 5 _-s, (1-2-3-4-5)
Keksinnön mukaisen kahdeksanvaiheisen menetelmän kokonaissaanto oli 46,4 %. Tämä oli täysin yllättävä verrattuna vertailumenetelmään, joka käsitti seitsemän vaihetta, ja jonka kokonaissaanto oli 6,4 %. Huomattakoon lisäk-25 si, että keksinnön mukaisen menetelmän viimeisessä vaiheessa saanto on 88 %, kun taas vertailumenetelmän viimeisessä vaiheessa saanto on vain 23 %.
Tämän keksinnön piiriin sisällytettäviä ovat myös suojatut yhdisteet, jotka ovat käyttökelpoisia välituottei-30 na keksinnön mukaista menetelmää sovellettaessa.
Esimerkki I
Osan I valmistus: SAR-TYR-Itt^ A. BOC-sarkosiini-hydroksisukkiini-imidi-esteri (BOC-SAR-OSu): 35 BOC-sarkosiinia (24,78 g, 0,13 moolia) ja N-hydroksi- sukkiini-imidiä (15,5 g, 0,13 moolia) liuotettiin 30 ml:aan i4 79329 kuivaa THF:a ja jäähdytettiin -5°:seen. 15 minuutin kuluessa lisättiin liuos, jossa oli disykloheksyylikarbo-di-imidiä (26,98 g, 0,13 moolia) 100 ml:ssa kuivaa THF:a. Saätua reaktioseosta sekoitettiin yön ajan ja annettiin 5 lämmetä ympäristön lämpötilaan. Kiinteä aine poistettiin suodattamalla ja liuotin haihdutettiin pois vakuumissa, jolloin saatiin valkeata kiinteätä ainetta. Kiinteä aine kiteytettiin 250 ml:sta absoluuttista etanolia 4°:ssa, jolloin saatiin 32 g (86 %) valkeata kiinteätä ainetta, 10 sp. 121-123°.
Analyysi laskettu: C, 50,35, H, 6,34, N, 9,79 saatu: C, 50,23, H, 6,44, N, 9,97 TLC: Rf = 0,81, CHCl3/MeOH 9/1 15 (Silica Gel G, 250 mikronia) p.m.r, ( o , CDC13): 1,45, S, 9H, BOC; 2,83, S, 4H, -OSu; 2,93, S, 3H, N-CH3; 4,27, S, 2H, -CH2~.
M.S.: M+ 286 B. BOC-sarkosyyli-L-tyrosiiniamidi (BOC-SAR-TYR-HiU): 20 L-tyrosiiniamidia (2,17 g, 10 mmoolia) ja trietyyli- amiinia (1,01 g, 10 mmoolia) liuotettiin 25 ml:aan kuivaa metanolia. Lisättiin BOC-sarkosiini-hydroksisukkiini-imi-diä (2,86 g, 10 mmoolia) ja reaktioseosta sekoitettiin yön ajan ympäristön lämpötilassa. Haihtuvat osat poistettiin 25 vakuumissa ja jäännös jaettiin etyyliasetaattiin (50 ml) ja NaCl-liuokseen /50 ml (25 ml H20 + 25 ml kyllästettyä NaCl)/ liukeneviin osiin. Faasit erotettiin ja orgaaninen faasi pestiin vielä kaksi kertaa saman koostumuksen omaavalla NaCl-liuoksella ja sitten kuivattiin MgS04:lla. Kuivaus-30 aine poistettiin suodattamalla ja liuotin haihdutettiin vakuumissa. Jäännös kromatografoitiin 75 grammalla valmistetta Silicar CCT l":n pylväässä käyttämällä eluenttina etyyliasetaattia. Yhdistettä alkoi ilmaantua kohdalla 390 Seuraavat 475 ml koottiin talteen ja haihdutettiin kuiviin, is 79329 jolloin saatiin 1,55 g (44 %) valkeata kiinteätä ainetta. Analyysi laskettu: C, 58,11, H, 7,17, N, 11,96 saatu: C, 57,96, H, 9,96, N, 11,45 5 TLC: (Silica Gel GF) Rf = 0,46 CHCl3/MeOH 9/1
C. Sarkosyyli-L-tyrosiiniamidi, trifluoriasetaatti (TFA SAR-TYR-NHQ
BOC-sarkosyyli-L-tyrosiiniamidia (1,30 g, 3,7 mmoo-lia) liuotettiin 15 inl:aan trifluorietikkahappoa 0°:ssa.
10 Liuosta sekoitettiin tunnin ajan 0°:ssa ja liuotin poistettiin vakuumissa. Saatua öljyä trituroitiin 50 ml:n kanssa kuivaa eetteriä, jolloin saatiin 1,27 g (94 %) valkeata kiinteätä ainetta.
p.m.r. (<£, CD3OD): 2,3, S, 3H, N-CH3? 3,00, d, 2H, 15 -CH2-C-j 3,7, S, 2H, -N-CH2~C=0,· 6,9, q, 4H, aro maattinen .
Esimerkki II
BOC-SAR-^-bentsyyli-ASP
(BOC-sarkosyyli- /Q -bentsyyli-L-asparagiinihappo) 20 Trietyyliamiinia (2,02 g, 20 mmoolia) ja /Ö-bentsyy- li-L-asparagiinihappoa (2,23 g, 10 mmoolia) sekoitettiin 50 mlrssa kuivaa RHF:ssa kuivaa THF:a. Lisättiin BOC-sarko-siini-hydroksisukkiini-imidiesteriä (2,68 g, 10 mmoolia) ja liuosta sekoitettiin ympäristön lämpötilassa yön ajan.
25 Kiinteät aineet poistettiin suodattamalla ja liuotin poistettiin vakuumissa. Jäännös jaettiin etyyliasetaattiin (100 ml) ja 2-norm. HCl:oon (100 ml) liukeneviin osiin. Faasit erotettiin ja orgaaninen faasi pestiin vedellä (2 x 100 ml), kyllästetyllä NaCl-liuoksella (1 x 100 ml) 30 ja kuivattiin (MgSO^). Kuivausaine poistettiin suodattamalla ja liuotin poistettiin vakuumissa. Jäännöstä trituroitiin heksaanin kanssa. Heksaani dekantoitiin pois ja jäännös kuivattiin vakuumissa, jolloin saatiin 2,64 g (67 %) hygroskooppista kiinteätä ainetta.
ie 79 329 TLC: = 0/73 + jälkiä epäpuhtauksista kohdalla 0,48, CHCl3/MeOH/HOAc 85/10/5 (Silica Gel G, 250 mikronia) p.m.r. ( S, CH2OD): 1,45, S, 9H, BOC; 2,82, S, 3H, 5 N-CH3; 2,95, M, 2H, -CH2-C; 3,85, S, 2H, -N-CH2“C=0; 4,85, t, 1H, -CH-f 5,08, S, 2H, -CH2; 5,46, S, 2H, -NH + -CO„H; 7,3, S, 5H, -0 ,,170 ^ = +13,3° (C = 1,032, MeOH)
Esimerkki III
Osan III valmistus: BQC-sarkosyyli-/Ö-bentsyyli-L-10 aspartyyli-sarkosyyli-L-tyrosiiniamidi (BOC-SAR- i5 -
Bzl-ASP-SAR-TYR-NH-,) BOC-sarkosyyli-^-bentsyyli-L-asparagiinihappoa (0,52 g 1.3 mmoolia) ja 1-hydroksibentsotriatsoli-monohydraattia (0,18 g, 1,3 mmoolia) liuotettiin 10 ml:aan kuivaa DMFsa 15 ja liuos jäähdytettiin 0°:seen. Lisättiin disykloheksyyli-karbodi-imidiä (0,27 g, 1,3 mmoolia) 7,5 ml:ssa kuivaa DMF:a ja saatua liuosta sekoitettiin tunnin ajan 0°:ssa. Sarkosyyli-L-tyrosiiniamidia, trifluoriasetaattia (0,50 g, 1.3 mmoolia) ja di-isopropyylietyyliamiinia (0,17 g, 1,3 20 mmoolia) liuotettiin 5 ml:aan kuivaa DMF:a ja lisättiin heti ensimmäiseen liuokseen. Reaktioseosta sekoitettiin yön ajan ja annettiin lämmetä ympäristön lämpötilaan. Kiinteä aine poistettiin suodattamalla ja jäännös liuotettiin 25 ml:aan etyyliasetaattia. Orgaaninen faasi pestiin pe-25 räkkäin 10-prosenttisella sitruunahapolla (2 x 25 ml), vedellä (2 x 25 ml), 5-prosenttisella NaHC03:lla (2 x 25 ml), H20:lla (2 x 25 ml), kyllästetyllä NaCl-liuoksella (25 ml) ja kuivattiin vedettömällä MgSO^:lla. Kuivausaine poistettiin suodattamalla ja liuotin poistettiin vakuumissa, jol-30 loin saatiin 0,6 g (73,5 %) valkeata kiinteätä ainetta.
TLC: Rf = 0,31, CHCl3/MeOH 9/1, (Silica Gel G, 250 mikronia) p.m.r. (d, CDC13) : 1,45, S, 9H, BOC; 2,95, m, 10H, 2 x N-CH3, -CH2-CH (Asp), -ch2-CH (Tyr); 3,8, m, 4H, 17 79329 2x H-CH.-OO» 4,6, m, 2H, -CH-CHj-, Asp, -CH-CH,- (Tyr); 5,1, m, 2H, -CH2-0; 6,92, q, 4H, tyrosiini aromaattinen; 7,25, S, 5H, aromaattinen bentsyyli /C^/pl0= 12,4° (C = 0,1046, MeOH)
Analyysi yhdisteelle C3iH4]_N5°9 5 laskettu: C, 59,32; H, 6,58; N, 11,16 saatu: C, 58,73; H, 6,80; N, 10,76
Esimerkki IV
Osan ΙΣΙΑ valmistus: Sarkosyyli-/ff-bentsyyli-L-aspar-tyyli-sarkosyyli-L-tyrosiiniamidi, trifluoriasetaat-10 ti (TFA SAR-&-Bz1-ASP-SAR-TYR-NH^) BOC-sarkosyyli- β-bentsyyli-L-aspartyyli-sarkosyyli-L-tyrosiiniamidia (0,48 g, 0,76 mmoolia) liuotettiin 10 ml: aan TFA:a 0°:ssa ja sekoitettiin 0°:ssa tunnin ajan. Liuotin poistettiin vakuumissa ja jäännöstä trituroitiin yön 15 ajan 50 ml:n kanssa kuivaa eetteriä. Suspensio suodatettiin ja kiinteä aine pestiin hyvin eetterillä ja kuivattiin vakuumissa, jolloin saatiin 0,4 g (82 %) valkeata kiinteätä ainetta.
TLC: Rf = 0,56, n-BuOH/HOAc/H20 (Silica Gel GF).
20 Esimerkki V
Pentapeptidin valmistus A. o(-fenyylimetoksikarbonyyli-L-arginyyli(HCl)-sarko-syyli-β -bentsyyli-L-aspartyyli-sarkosyyli-L-tyro-siiniamidi 25 /CDZ-ARG (HCl) -SAR-/3 -Bz 1-ASP-SAR-TYR-NHu/ o^-fenyylimetoksikarbonyyli-L-arginiini-HCl:a (2,66 g, 7.8 mmoolia) ja 1-hydroksibentsotriatsoli-monohydraattia (1,06 g, 7,8 mmoolia) liuotettiin 20 ml:aan kuivaa dimetyy-liformamidia ja jäähdytettiin 0°:seen. Disykloheksyyli- 30 karbodi-imidiä (1,61 g, 7,8 mmoolia) liuotettiin 5 mlraan ja lisättiin ensimmäiseen liuokseen. Saatua reaktioseosta sekoitettiin tunnin ajan 0°:ssa. Sarkosyyli-/Ö-bentsyyli-L-aspartyyli-sarkosyyli-L-tyrosiiniamidin TFA-suolaa (5,0 g, 7.8 mmoolia) liuotettiin 15 ml:aan kuivaa DMF:a trietyyli- ie 79329 amiinin (0,79 g, 7,8 mmoolia) kanssa ja lisättiin ensimmäiseen liuokseen. Reaktioseosta sekoitettiin yön ajan ja annettiin lämmetä ympäristön lämpötilaan. Kiinteä aine poistettiin suodattamalla ja haihtuvat osat pois-5 tettiin vakuumissa. Jäännöstä trituroitiin veden kanssa, jolloin saatiin jäännöstä (3 g).
TLC: Rf = 0,60, n-Bu0H/H0Ac/H20 3/1/1 (Silica Gel GF).
B. L-arginyyli-sarkosyyli-L-aspartyyli*sarkosyyli-L- tyrosiiniamidi 10 (arg-sar-asp-sar-tyr-nh2) oC-fenyylimetoksikarbonyyli-L-arginyyli(HC1)-sarko-syyli -β -bentsyyli-L-aspartyyli-sarkosyyli-L-tyrosiiniami-dia (1,0 g) liuotettiin 100 ml:aan 75-prosenttista etikka-hapon vesiliuosta ja pelkistettiin 0,5 grammalla katalyyt-15 tiä 10 % Pd/C 50 psi:n paineessa 15 tuntia. Katalyytti poistettiin suodattamalla ja liuos kylmäkuivattiin, jolloin saatiin 0,8 g ainetta. Aine liuotettiin 7 ml:aan vettä, suodatettiin 3^u:n multipore-suodattimen läpi, pH säädettiin arvoon 5 NH^OHrlla (väk.) ja kromatografoitiin 20 SP-C-25-kolonnissa (2,5 x 100 cm) 0,20-mol. ammoniumase-taatilla, pH 5,0, 100 ml/t, 20 ml/putki. Putket 71-78 yhdistettiin ja kylmäkuivattiin, jolloin saatiin 0,35 g yhdistettä Arg-Sar-Asp-Sar-Tyr-NH2.
TLC: Rf = 0,23, n-Bu0H/H0Ac/H20 3/1/1, (Silica Gel GF) 25 = = 0,1-norm. HOAc)
Esimerkki VI
Noudattamalla esimerkkien I-V menetelmiä, mutta korvaamalla niissä käytetty suojattu sarkosiini ekvivalentti-määrällä sopivasti suojattua L-valiinia esimerkissä I ja 30 ekvivalenttimäärällä sopivasti suojattua L-lysiiniä esimerkissä II, valmistetaan yhdistettä H-ARG-LYS-ASP-VAL-TYR-NH2.
Esimerkki VII
Noudattamalla esimerkkien I-V menetelmiä, mutta 35 käyttämällä ekvivalenttimäärin sopivia lähtöaineita, valmistetaan yhdisteitä: 19 79329
h-val-tyr-nh2 H-VAL-TYR-bentsyyliesteri H-SAR-TYR-bentsyyliesteri H-ARG-LYS-ASP-VAL-TYR-OH 5 BOC-£-CBZ-LYS-/?-bentsyyli-ASP-OH
BOC-epsilon-CBZ-LYS-^-bentsyyli-ASP-VAL-TYR-OH-bentsyyli- esteri
Esimerkki VIII
Osan IVA valmistus: H-^-bentsyyli-ASP-VAL-TYR-bent-10 syyliesteri, trifluoriasetaatti (/^-bentsyyli-L-as- partyyli-L-valyyli-L-tyrosiini-bentsyyliesteri, tri-fluoriasetaatti) BOC-^bentsyyli-L-asparagiinihappoa ja mooliekviva-lenttimäärä 1-hydroksibentsotriatsoli-monohydraattia liuo-15 tetaan kuivaan DMF:iin ja liuos jäähdytetään 0°:seen. Sitten liuokseen lisätään mooliekvivalenttimäärä disyklohek-syylikarbodi-imidiä ja koko seosta sekoitetaan tunnin ajan 0°:ssa. Reaktioseokseen lisätään sitten liuos, jossa on DMF:ssa mooliekvivalenttimäärin trietyyliamiinia ja L-va-20 lyyli-L-tyrosiini-bentsyyliesteriä, trifluoriasetaattia (valmistettu noudattamalla esimerkin I menetelmää, mutta korvaamalla siinä käytetty sarkosiini ekvivalenttimäärällä L-valiinia) ja koko seosta sekoitetaan yön ajan ympäristön lämpötilassa. Tuote eristetään reaktioseoksesta reaktion 25 päätyttyä ja BOC-ryhmä poistetaan, jolloin saadaan haluttua ainetta.
Esimerkki IX
Osan III (vaihtoehtoinen) valmistus: BOC-epsilon-CBZ-LYS-^-bentsyyli-ASP-VAL-TYR-bentsyyliesteri 30 (BOC-epsilon-CBZ-L-lysyyli-ft-bentsyyli-L-aspartyy- li-L-valyyli-L-tyrosiini-bentsyyliesteri BOC-epsilon-CBZ-L-lysiini-hydroksisukkiini-imidiä lisätään liuokseen, jossa on mooliekvivalenttimäärin trietyyliamiinia ja /3-bentsyyli-L-aspartyyli-L-valyyli-L-tyro-35 siini-bentsyyliesteri-trifluoriasetaattia kuivassa THF:ssa ja koko seosta sekoitetaan yön ajan. Kiinteiden aineiden poistamisen jälkeen tuote eristetään liuoksesta.
Claims (8)
1. Menetelmä peptidin H-ARG-X-ASP-Y-TYR-R valmistamiseksi, jossa X on LYS ja Y on VAL tai X ja Y on kumpikin 5 SAR ja R on OH tai NH2, liuossynteesitekniikalla, tunnettu siitä, että a) muodostetaan osa I, jolla on kaava H-Y-TYR-R' i) suojaamalla Y-aminohapon oC-aminoryhmä antamalla sen reagoida reagenssin kanssa, joka liittää suojaavan ryhmän
10 T, ii) aktivoimalla vaiheessa i) muodostettu suojattu Y amiinin nukleofiilisen liittymisen suhteen karboksiryhmään, jolloin muodostuu karboksi-aktivoitu suojattu Y-aminohappo, iii) antamalla mainitun karboksi-aktivoidun suojatun Y:n 15 reagoida TYR-R':n kanssa ja iv) poistamalla suojaryhmä T, jolloin muodostuu osa I; b) muodostetaan osa IV, jolla on kaava Ci -Τ-ω-U-ASP-Y-TYR-R1 i) suojaamalla asparagiinihapon 06-amino- ja ϋ-karbok-20 siryhmät antamalla sen reagoida reagenssin kanssa, joka liittää siihen suojaryhmät T ja U, ii) aktivoimalla vaiheessa i) muodostettu suojattu aspa-ragiinihappo amiinin nukleofiilisen liittymisen suhteen oC-karboksiryhmään, jolloin muodostuu karboksi-aktivoitu 25 suojattu asparagiinihappo, ja iii) antamalla mainitun karboksi-aktivoidun suojatun asparagiinihapon reagoida osan I kanssa, jolloin muodostuu osa IV; c) muodostetaan osa IVA, jolla on kaava 30 Η-ϋ-ϋ-ASP-Y-TYR-R', poistamalla suojaryhmä T osasta IV; d) muodostetaan osa III, jolla on kaava OC-T-(£-T")-Χ-ω-U-ASP-Y-TYR-R' i) suojaamalla X-aminohapon ot-aminoryhmä (ja jos X on LYS, £-aminoryhmä) antamalla sen reagoida reagenssin (rea-35 genssien) kanssa, joka (jotka) liittää (liittävät) suoja-ryhmän (suojaryhmät) T (ja T"), 21 79329 ii) aktivoimalla vaiheessa i) muodostettu suojattu X, amiinin nukleofiilisen liittymisen suhteen karboksiryhmään, jolloin muodostuu karboksi-aktivoitu suojattu X-aminohap-po, ja 5 iii) antamalla mainitun karboksi-aktivoidun suojatun X-aminohapon reagoida osan IVA kanssa, jolloin muodostuu osa III; e) poistetaan T-suojaryhmä osasta III, jolloin muodostuu osa IIIA, jolla on kaava H-(£-T")-Χ-ω-U-ASP-Y-TYR-
10 R'; f) valmistetaan ot-T-(#&-T' -ARG, jossa T on L-arginii-nin ct-aminoryhmässä oleva suojaryhmä ja Τ' on L-arginiinin guanidinoryhmässä oleva suojaryhmä; g) osan IIIA annetaan reagoida cC-T-id-T'-ARG:n kans- 15 sa, jolloin muodostuu ct-T-O-T'-ARG- (£-T")-X-(i*-U-ASP-Y-TYR- R'; h) poistetaan ryhmät U, T, Τ’ ja T", jolloin muodostuu peptidi H-ARG-X-ASP-Y-TYR-R; ja j) eristetään ja puhdistetaan saatu peptidi; jolloin 20 edellä esitetyissä kaavoissa T ja T" on valittu ryhmästä, jonka muodostavat 0 N a) R^-OC-, jossa Rj^ on fenyyli; tolyyli; ksylyyli; adamantyyli; allyyli; /ö-syaanoetyyli; fluorenyylimetyyli; 25 fenyylirenkaastaan mahdollisesti 1-3 halogeenilla, nitrolla, pienalkyylillä ja/tai pienalkoksilla substituoitu bentsyy-li; di-isopropyylimetyyli; difenyylimetyyli; sykloheksyyli; syklopentyyli; vinyyli; t-butyyli; t-amyyli; dimetyylitri-fluoriraetyyliraetyyli, tai dimetyylibifenyylimetyyli;
30 O H b) R2c“f jossa R2 on pienalkyyli, jossa on 2-4 hiiltä tai pienalkyyli, jossa on 1-4 hiiltä ja substituenttei-na 1-5 halogeenia; V II 35 c) R^O-P-, jossa V on S tai O ja ja R^ on kumpi- 0R„ 4 ..... kin bentsyyli tai pienalkyyli; „ 79329 22 - ' Rg jossa R,- ja Rg erikseen on kumpi- j - kin pienalkyyli tai R,. ja Rg yh- d) dessä vastaavat ryhmää -CHj-C-CHj- 5 ^ ^0=0 R7 R8 x ^ jossa R7 ja Rg on kumpikin vety ® tai pienalkyyli; R9 e) 7i 2 jossa Rq on vety tai nitro; ja 10 ux xs \ R ° R10\ Il jossa R^q on vety, metyyli, halo-15 geeni tai nitro, <5 edellyttäen, että T on monovalenttinen kun X on SAR; U on fenyyliryhmästään mahdollisesti 1-3 halogeenilla, nitrolla, C^_2“alkyylillä ja/tai C^_ ^-^ko^silla substituoitu 20 bentsyyli; ja T" on 0 r^-OC-, jossa on edellä määritelty, nitro, hydroklori- di, p-metoksibentsyylisulfonyyli tai tosyyli, ja R’ on NH2 tai OU, jossa U on edellä määritelty.
2. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tun nettu siitä, että sekä X että Y on SAR.
3. Patenttivaatimuksen 2 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että R on N^.
4. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, t u n -30 n e t t u siitä, että X on LYS ja Y on VAL.
5. Patenttivaatimuksen 4 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että R on OH. 23 79329
6. Patenttivaatimuksen 1 mukaisessa menetelmässä välituotteena käyttökelpoinen suojattu tetrapeptidi, tunnettu siitä, että se on BOC-sarkosyyli-/5-bents-yyli-L-aspartyyli-sarkosyyli-L-tyrosiiniamidi.
7. Patenttivaatimuksen 1 mukaisessa menetelmässä välituotteena käyttökelpoinen suojattu tetrapeptidi, tunnettu siitä, että se on sarkosyyli-/3-bentsyyli-L-aspartyyli-sarkosyyli-L-tyrosiiniamidi.
8. Patenttivaatimuksen 1 mukaisessa menetelmässä 10 välituotteena käyttökelpoinen suojattu pentapeptidi, tunnettu siitä, että se on Ct-bentsyylioksikarbo-nyyli-L-arginyyli(HC1)-sarkosyyli-/^-bentsyyli-L-aspartyy-li-sarkosyyli-L-tyrosiiniamidi. 24 79329
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US06/160,241 US4298523A (en) | 1980-06-17 | 1980-06-17 | Methods and compositions for preparation of H-ARG-X-Z-Y-TYR-R |
| US16024180 | 1980-06-17 |
Publications (3)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| FI811883L FI811883L (fi) | 1981-12-18 |
| FI79329B FI79329B (fi) | 1989-08-31 |
| FI79329C true FI79329C (fi) | 1989-12-11 |
Family
ID=22576099
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| FI811883A FI79329C (fi) | 1980-06-17 | 1981-06-16 | Nytt foerfarande foer framstaellning av pentapeptiden h-arg-x-asp-y-tyr-r och vid foerfarandet anvaenda mellanprodukter. |
Country Status (19)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US4298523A (fi) |
| EP (3) | EP0042291B1 (fi) |
| JP (3) | JPS5728036A (fi) |
| AT (2) | ATE24183T1 (fi) |
| AU (3) | AU562807B2 (fi) |
| CA (6) | CA1188297A (fi) |
| DE (2) | DE3177306T2 (fi) |
| DK (3) | DK151968C (fi) |
| ES (3) | ES8207513A1 (fi) |
| FI (1) | FI79329C (fi) |
| GR (1) | GR74546B (fi) |
| IE (3) | IE940518L (fi) |
| IL (7) | IL72392A (fi) |
| NO (3) | NO161744C (fi) |
| NZ (1) | NZ197294A (fi) |
| PH (2) | PH16501A (fi) |
| PT (1) | PT73201B (fi) |
| YU (1) | YU45852B (fi) |
| ZA (1) | ZA814061B (fi) |
Families Citing this family (17)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4369137A (en) * | 1980-06-17 | 1983-01-18 | Ortho Pharmaceutical Corporation | N-Protected pentapeptides useful as intermediates in the preparation of thymopoietin pentapeptide |
| US4499079A (en) * | 1982-11-18 | 1985-02-12 | E. R. Squibb & Sons, Inc. | Carboxy and substituted carboxy alkanoyl and cycloalkanoyl peptides |
| DE3401545A1 (de) * | 1983-08-03 | 1985-02-14 | Hoechst Ag, 6230 Frankfurt | Neue peptide mit immunstimulierender wirkung, verfahren zu deren herstellung und deren verwendung |
| US4505853A (en) * | 1983-11-18 | 1985-03-19 | Ortho Pharmaceutical Corporation | Enzyme-resistant immunomodulatory peptides |
| AU602483B2 (en) * | 1985-01-18 | 1990-10-18 | Immunetech Pharmaceuticals | Immunoregulatory peptides |
| US4749690A (en) * | 1986-01-27 | 1988-06-07 | Ortho Pharmaceutical Corporation | Treatment of allergy with thymopentin |
| US4732970A (en) * | 1986-06-13 | 1988-03-22 | American Cyanamid Company | Antitumor amino acid and peptide derivatives of 1,4-bis(aminoalkyl and hydroxy-aminoalkyl)amino)-5,8-dihydroxyanthraquinones |
| US5200506A (en) * | 1987-03-19 | 1993-04-06 | Eniricerche S.P.A. | Process for preparing new thymopentin retro-inverso analogs and fragments thereof and the intermediates obtained therein |
| US5656601A (en) * | 1987-06-19 | 1997-08-12 | Berlin-Chemie Ag | Acylated splenopentins, methods for their synthesis and their use |
| HU199878B (en) * | 1987-06-19 | 1990-03-28 | Berlin Chemie Veb | Process for producing acylated splenopentynes and pharmaceutical compositions comprising such compounds as active ingredient |
| FR2622587B1 (fr) * | 1987-10-30 | 1990-12-21 | Inst Vaisseaux Sang | Peptide lysyl-arginyl-aspartyl-serine et ses applications en tant que medicament, notamment antithrombotique |
| NZ229004A (en) * | 1988-05-19 | 1993-09-27 | Immunobiology Res Inst Inc | Tetrapeptides having t cell helper acitivity |
| JPH01264767A (ja) * | 1988-11-17 | 1989-10-23 | G N Tool Kk | 砥石自動交換ｃｎｃ工具研削盤 |
| CN101168560B (zh) * | 2006-10-23 | 2012-09-05 | 江苏正大天晴药业股份有限公司 | N-取代肽酰胺，其药物组合物与用途 |
| JP5647146B2 (ja) | 2008-12-29 | 2014-12-24 | トレベナ・インコーポレイテッドＴｒｅｖｅｎａ， Ｉｎｃ． | β−アレスチンエフェクターおよび組成物およびその使用方法 |
| JP2017506235A (ja) | 2014-02-07 | 2017-03-02 | トレベナ・インコーポレイテッドＴｒｅｖｅｎａ， Ｉｎｃ． | ベータ−アレスチンエフェクターの結晶性および非晶質形態 |
| CA2948858A1 (en) | 2014-05-19 | 2015-11-26 | Trevena, Inc. | Synthesis of beta-arrestin effectors |
Family Cites Families (13)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US3317559A (en) * | 1963-08-23 | 1967-05-02 | American Cyanamid Co | alpha-amino acid esters of n-hydroxysuccinimide and preparation and use in peptide synthesis |
| DE1593830A1 (de) * | 1967-05-24 | 1971-03-11 | Akad Wissenschaften Ddr | Verfahren zur Herstellung von Peptiden |
| US3560503A (en) * | 1968-09-18 | 1971-02-02 | Council Scient Ind Res | Di-lower alkyl-substituted octahydropyrazinopyrimidinones |
| JPS4826010B1 (fi) * | 1969-11-11 | 1973-08-03 | ||
| CH611878A5 (fi) * | 1974-07-04 | 1979-06-29 | Takeda Chemical Industries Ltd | |
| DE2544348C3 (de) * | 1975-10-03 | 1979-12-13 | Max-Planck-Gesellschaft Zur Foerderung Der Wissenschaften E.V., 3400 Goettingen | L-Leucin-13-Motilin, Verfahren zu dessen Herstellung und dasselbe enthaltendes Mittel |
| US4190646A (en) * | 1975-11-11 | 1980-02-26 | Sloan-Kettering Institute For Cancer Research | Polypeptide compositions and methods |
| SE446867B (sv) * | 1977-11-15 | 1986-10-13 | Sloan Kettering Inst Cancer | Sett att framstella en polypeptid med formaga att inducera differentiering av t-lymfocyter men inte av komplementreceptor (cr?72+) b-lymfocyter |
| US4215112A (en) * | 1979-03-14 | 1980-07-29 | Ortho Pharmaceutical Corporation | Tripeptides and methods |
| US4215111A (en) * | 1979-03-14 | 1980-07-29 | Ortho Pharmaceutical Corporation | Peptides having ubiquitin-like activity |
| CA1156220A (en) * | 1979-04-26 | 1983-11-01 | George Heavner | Method and composition for preparation of h-sar-lys-sar-gln-nh.sub.2 |
| DE2938420A1 (de) * | 1979-09-22 | 1981-04-09 | Hoechst Ag, 6000 Frankfurt | Neue peptide und verfahren zu ihrer herstellung |
| US4309340A (en) * | 1980-03-31 | 1982-01-05 | American Home Products Corporation | Polypeptide compositions |
-
1980
- 1980-06-17 US US06/160,241 patent/US4298523A/en not_active Expired - Lifetime
-
1981
- 1981-06-03 NZ NZ197294A patent/NZ197294A/en unknown
- 1981-06-08 CA CA000379207A patent/CA1188297A/en not_active Expired
- 1981-06-12 GR GR65234A patent/GR74546B/el unknown
- 1981-06-12 ES ES503012A patent/ES8207513A1/es not_active Expired
- 1981-06-16 EP EP81302685A patent/EP0042291B1/en not_active Expired
- 1981-06-16 DK DK263781A patent/DK151968C/da not_active IP Right Cessation
- 1981-06-16 IL IL72392A patent/IL72392A/xx unknown
- 1981-06-16 ZA ZA814061A patent/ZA814061B/xx unknown
- 1981-06-16 FI FI811883A patent/FI79329C/fi not_active IP Right Cessation
- 1981-06-16 IE IE940518A patent/IE940518L/xx unknown
- 1981-06-16 IE IE133681A patent/IE62213B1/en not_active IP Right Cessation
- 1981-06-16 JP JP9163881A patent/JPS5728036A/ja active Granted
- 1981-06-16 NO NO812035A patent/NO161744C/no unknown
- 1981-06-16 EP EP93200564A patent/EP0565148A2/en not_active Withdrawn
- 1981-06-16 PT PT73201A patent/PT73201B/pt not_active IP Right Cessation
- 1981-06-16 IL IL63108A patent/IL63108A/xx not_active IP Right Cessation
- 1981-06-16 DE DE3177306T patent/DE3177306T2/de not_active Expired - Fee Related
- 1981-06-16 AT AT81302685T patent/ATE24183T1/de active
- 1981-06-16 DE DE8181302685T patent/DE3175701D1/de not_active Expired
- 1981-06-16 EP EP84201633A patent/EP0144103B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1981-06-16 IL IL72393A patent/IL72393A/xx unknown
- 1981-06-16 IL IL72394A patent/IL72394A/xx unknown
- 1981-06-17 YU YU152881A patent/YU45852B/sh unknown
- 1981-06-17 PH PH25768A patent/PH16501A/en unknown
-
1982
- 1982-05-31 ES ES512721A patent/ES8303298A1/es not_active Expired
- 1982-05-31 ES ES512722A patent/ES8304541A1/es not_active Expired
- 1982-12-03 PH PH28221A patent/PH21622A/en unknown
-
1984
- 1984-07-12 IL IL72394A patent/IL72394A0/xx unknown
- 1984-07-12 IL IL72392A patent/IL72392A0/xx unknown
- 1984-07-12 IL IL72393A patent/IL72393A0/xx unknown
- 1984-08-31 CA CA000462320A patent/CA1282550C/en not_active Expired - Lifetime
- 1984-08-31 CA CA000462321A patent/CA1285099C/en not_active Expired - Lifetime
- 1984-11-12 AT AT84201633T patent/ATE99327T1/de not_active IP Right Cessation
-
1985
- 1985-07-31 AU AU45666/85A patent/AU562807B2/en not_active Ceased
- 1985-07-31 AU AU45667/85A patent/AU562808B2/en not_active Ceased
- 1985-07-31 AU AU45668/85A patent/AU563303B2/en not_active Ceased
- 1985-09-12 DK DK415485A patent/DK154653C/da not_active IP Right Cessation
-
1987
- 1987-05-04 DK DK227787A patent/DK154437C/da not_active IP Right Cessation
-
1988
- 1988-06-08 IE IE172088A patent/IE62614B1/en not_active IP Right Cessation
- 1988-12-20 NO NO885646A patent/NO164245C/no unknown
-
1989
- 1989-04-17 JP JP1095437A patent/JPH01308297A/ja active Granted
- 1989-04-17 JP JP1095438A patent/JPH01308298A/ja active Granted
- 1989-07-12 CA CA000605518A patent/CA1315042C/en not_active Expired - Fee Related
- 1989-07-12 CA CA000605517A patent/CA1315041C/en not_active Expired - Fee Related
- 1989-07-12 CA CA000605516A patent/CA1315040C/en not_active Expired - Fee Related
-
1990
- 1990-01-22 NO NO900294A patent/NO166532C/no unknown
Also Published As
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| FI79329C (fi) | Nytt foerfarande foer framstaellning av pentapeptiden h-arg-x-asp-y-tyr-r och vid foerfarandet anvaenda mellanprodukter. | |
| EP1037904A2 (en) | Branched building units for synthesizing cyclic peptides | |
| US4369137A (en) | N-Protected pentapeptides useful as intermediates in the preparation of thymopoietin pentapeptide | |
| US4250086A (en) | Method and composition for preparation of H-SAR-LYS-SAR-GLN-NH2 | |
| JP3436559B2 (ja) | ペプチドの合成方法及び新規な合成中間体 | |
| CA2086416A1 (en) | Process for synthesizing peptides | |
| HU208838B (en) | Method for producing peptones containing aza aminoacides by means of solid-phase synthesis | |
| EP0018793B1 (en) | Peptides and process for their preparation | |
| Besser et al. | Synthesis of differentially protected N‐acylated reduced pseudodipeptides as building units for backbone cyclic peptides | |
| US5219988A (en) | Gem-diamino derivatives and their use in the synthesis of retro-inverso peptides | |
| NO177100B (no) | Peptider | |
| PL145979B1 (en) | Method of obtaining dipetides containing arginin as their c-terminal amino acid |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM | Patent lapsed | ||
| MM | Patent lapsed |
Owner name: ORTHO PHARMACEUTICAL CORPORATION |