FI79116C - Foerfarande foer framstaellning av nya terapeutiskt anvaendbara aminosyraderivat och vid foerfarandet anvaendbara mellanprodukter. - Google Patents

Description

1 79116

Menetelmä uusien terapeuttisesti käyttökelpoisten aminohappo johdannaisten valmistamiseksi, sekä menetelmässä käyttökelpoisia välituotteita 5 Keksinnön kohteena on menetelmä kaavan I mukais

ten terapeuttisesti käyttökelpoisten trisyklisten aminohappojen ja niiden fysiologisesti hyväksyttävien suolojen valmistamiseksi H

10 O

^ N ^

co2r I

H

15 Y

C

0/\. . I

0 CH-NH-CH-(CH0) -C-X

. i n 1 2 R C02R z ·:· 20 jossa n = 0 tai 1, A = -CH=CH- tai -CH2-CH2-, R = vety, (C^-Cg)-alkyyli tai aralkyyli, jossa on 7 - 9 25 C-atomia, R1 = (C^-Cg)-alkyyli, joka voi olla mahdollisesti substi- tuoitu aminolla, (C^-C^)-asyyliaminolla, bentsoyyliami- nolla tai bentsyylioksikarbonyyliaminolla, tai (C^ C12) aryyli-(C^-C^)-alkyyli, joka on substituoitu (C^ tai C2>- 30 alkoksilla, 2 R = vety tai (C^-Cg)-alkyyli, Y ja Z merkitsevät kumpikin vetyä tai Y ja Z merkitsevät yhdessä happea, ja X = (Cg-C12)-aryyli, joka voi olla mono-, di- tai tri-35 substituoitu {C^-C^)-alkyylillä, (Ci-C4)-alkoksilla, .· : hdyroksilla, halogeenilla, nitrolla, aminolla, (C^-C^)- alkyyliaminolla, di-(C^-C^)-alkyyliaminolla ja/tai mety-leenidioksilla.

2 79116 FI-patenttihakemuksissa 813283 ja 810871 on kuvattu mm. oktahydroindoli-2-karboksyylihappojohdannaisia, jotka edustavat läheisintä tekniikan tasoa.

Suoloina tulevat kysymykseen erityisesti alkali-5 ja maa-alkalisuolat, fysiologisesti hyväksyttävien amiinien kanssa muodostettavat suolat ja epäorgaanisten tai orgaanisten happojen, kuten esim. hydrokloridin, hydrobromidin, rikkihapon, maleiinihapon ja fumaarihapon kanssa muodostettavat suolat.

10 Aryylillä tarkoitetaan edullisesti mahdollisesti substituoitua fenyyliä tai naftyyliä. Sama koskee aroyyli-ryhmiä. Alkyyli voi olla suoraketjuinen tai haarautunut.

Trisyklien C-2:ssa ja C-6:ssa olevien H-atomien konfiguraatio on cis-konfiguraatio. Edelleen tulevat kysee-15 seen kaksi mahdollista konfiguraatiota trisyklin C-2:ssa ja C-6:ssa oleville H-atomeille, nimittäin H-atomien ekso-asema bisykliseen JJ1,2, l7~rengasosaan nähden (kaavaryhmä Ia) ja vastaavasti endo-asema (kaavaryhmä Ib).

20 \ K

N-^X/CO^R H

25 r 2 (Ia) (Ib) C-atomissa 4 oleva karboksyyliryhmä voi olla orientoitunut sekä kaavaryhmässä Ia että kaavaryhmässä Ib trans-30 asemaan (kaavaryhmä Ie + If) tai cis-asemaan (kaavaryhmä Id + Ie) C-atomissa 2 olevaan vetyatomiin nähden. Kaikki edellä mainitut konfiguraatioisomeerit sekä kaavojen Ie -If mukaiset peilikuvaisomeerit kuuluvat tämän keksinnön piiriin.

3 79116

5 : \ H

3 H

(Ic) [\ ; \ ϊ \ 10

\ k \ C'°2R

-Ά*>Η A (Id) U i\ /N,>4 — r*co r yr

2\ L

(Ie) 'n^h co2r (If) 25

Kaavan I mukaisilla yhdisteillä on kiraaliset C-atomit asemissa C-l, C-2, C-4, C-6, C-7 sekä sivuketjun tähdellä merkityissä C-atomeissa. Sekä R- että S-konfigu-raatiot kaikissa keskuksissa kuuluvat keksinnön piiriin.

30 Kaavan I mukaiset yhdisteet voivat tämän johdosta esiintyä optisina isomeereinä, diastereomeereinä, rasemaatteina tai edellä mainittujen seoksina. Edullisina pidetään kuitenkin kaavan I mukaisia yhdisteitä, joissa trisyklisessä rengas-syteemissä olevalla C-atomilla 4 sekä sivuketjun tähdellä 35 merkityillä C-atomeilla on S-konfiguraatio, poikkeuksena (-CO-*CHR^-NH—) = Cys, jolloin R-konfiguraatiota pidetään edullisena.

4 79116

Erityisen edullisia kaavan I mukaisia yhdisteitä ovat sellaiset, joissa n = 1, A = -CH=CH- tai -CH2-CH2- 5 R = vety tai 1-4 C-atomia sisältävä alkyyli R1 = (C--C3=-alkyyli, 4-alkoksibentsyyli tai 4-aminobutyy- li 2 R = vety tai (C^-C^)-alkyyli ja X = fenyyli, joka voi olla mono- tai disubstituoitu (C^ 10 tai C2)-alkyylillä, (C^ tai C2)-alkoksilla, hydroksilla, fluorilla, kloorilla, bromilla, aminolla, (C3-C4)-alkyyli-aminolla, di-(C-^-C^)-alkyyliaminolla , nitrolla ja/tai me-tyleenidioksilla tai joka voi olla metoksin tapauksessa trisubstituoitu, 15 erityisesti sellaiset kaavan I mukaiset yhdisteet, joissa n = 1, A = -CH2-CH2-R = vety R.^ = metyyli 20 X = fenyyli 2 R = vety tai etyyli, C-":ssa ja C-6:ssa olevilla vetyatomeilla on cis-konfigu-raatio ja ekso- tai endo-konfiguraatio bisykliseen /2,2,1/-rakenteeseen nähden. C-4:ssä oleva karboksyyliryhmä on 25 orientoitunut cis- tai trans-asemaan C-2:ssa olevaan vety-atomiin nähden ja kiraalisilla C-atomeilla, jotka ovat tähdellä merkittyjä ja C-atomilla 4 on S-konfiguraatio.

Aivan erityisen edullisina pidettyjä yhdisteitä ovat ekso-endo: 30 N-(l-S-karboetoksi-3-fenyyli-propyyli)-S-alanyyli- lR,2R,4S,6S,7S-trisyklo£5,2,l,0^'^J-3-atsa-dekaani-4-karboksyylihappo N-(l-S-karboksi-3-fenyyli-propyyli)-S-alanyyli-lR,2R,4S,6S,7S-trisyklo/5,2,l,0^'^)-3-atsa-dekaani-4-35 karboksyylihappo 5 79116 n0G- (l-S-karbetoksi-3-fenyyli-propyyli)-S-lysyyli- IR, 2R, 4S, 6S, 7S-trisyklo^5,2,1,02, ^_)-3-atsa-dekaani-4-karb-oksyylihappo N^-d-S-karboksi-S-fenyyli-propyyli)-S-lysyyli-5 1R,2R,4S,6S, 7S-trisyklo^5,2,l,02,^)-3-atsa-dekaani-4-karb- oksyylihappo (endo-endo) N-(l-S-karbetoksi-3-fenyyli-propyyli)-S-alanyyli- IS, 2S,4S,6R,7R-trisyklo£5,2,1,02,^)-3-atsa-dekaani-4-karb-oksyylihappo 10 N-(l-S-karboksi-3-fenyyli-propyyli)-3-alanyyli- ^ 2 6 \ IS, 2S, 4S, 6R, 7R-trisyklo£5,2,1,0 '___/-3-atsa-dekaani-4-karb-oksyylihappo Ν<χ- (l-S-karbetoksi-3-fenyyli-propyyli)-S-lysyyli- ___ 2 \ lS,2S,4S,6R,7R-trisyklo£5,2,l,0 ' -3-atsa-dekaani-4-karb-15 oksyylihappo N/v - (l-S-karboksi-3-fenyyli-propyyli)-S-lysyyli- Λ /- 1S,2S,4S,6R,7R-trisyklo ,2,1,0 ' _)-3-atsa-dekaani-4-karb-oksyylihappo (ekso-endo) N-(l-S-karbetoksi-3-fenyyli-propyyli)-S-alanyyli-20 1R,2S,4S,6R,7S-trisyklo£5,2,1,02'^}-3-atsa-dekaani-4-karb- oksyylihappo N-(l-S-karboksi-3-fenyyli-propyyli)-S-alanyyli- o a 1R,2S,4S,6R,7S-trisyklo£5,2,1,0 '2-3-atsa-dekaani-4-karb-oksyylihappo 25 Not-(l-S-karbetoksi-3-fenyyli-propyyli)-S-lysyyli-

2 6V

lR,2S,4S,6R,7S-trisyklo£5,2,l,0 ' _/-3-atsa-dekaani-4-karb-oksyylihappo n06”(l-S-karboksi-3-fenyyli-propyyli)-S-lysyyli-1R,2S,4S,6R,7S-trisyklo£5,2,1,02,5/-3-atsa-dekaani-4-karb-30 oksyylihappo (ekso-ekso) N-(l-S-karbetoksi-3-fenyyli-propyyli)-S-alanyyli-lS,2R,4S,6S,7R-trisyklo£5,2,102,^)-3-atsa-dekaani-4-karb-oksyylihappo N-(l-S-karboksi-3-fenyyli-propyyli)-S-alanyyli-35 IS,2R,4S,6S,7R-trisyklo£5,2,1,02'^7-3-atsa-dekaani-4-karb-oksyylihappo 6 79116 N -(l-S-karbetoksi-3-fenyyli-propyyli)-S-lysyyli-lS,2R,4S,6S,7R-trisyklo£5,2,l,02,^/-3-atsa-dekaani-4-karb-oksyylihappo ja N0C“(1-S-- karboksi-3-fenyyli-propyyli)-S-lysyyli-5 lS,2R,4S,6S,7R-trisyklo^5,2,l,0^'^}'-3-atsa-dekaani-4-karb- oksyylihappo.

Keksinnön mukaiselle menetelmälle on tunnusomaista, että

a) yhdisteen, jolla on kaava II

10 Y

i

HO-C-CH-NH-CH-(CH_) -C-X II

2 I I 2 n , R1 C02r2 2 1 2

15 jossa n, R , R , X, Y ja Z merkitsevät samaa kuin kaavassa I, annetaan reagoida yhdisteen kanssa, jolla on kaava III

H

_

.20 A / III

\/\νΛ co2w

H

H

V jossa : : 25 W = vety tai happamesti tai emäksisesti tai hydrogeno- lyyttisesti lohkaistava ryhmä, edullisesti C^-Cg-alkyyli (esimerkiksi tert.-butyyli) tai C^-Cg-aralkyyli(esimerkiksi bentsyyli), ja lopuksi mahdollisesti W ja/tai R2 loh-: . kaistaan vapaiden karboksiryhmien muodostamiseksi, tai 30 b) kaavan I mukaisten yhdisteiden valmistamisek- , . si, joissa Y ja Z merkitsevät yhdessä happea,

: b^) yhdisteen, jolla on kaava IV

; /Tt-

| C02w IV

H CO-CH-NH- k 35 7 79116

jossa ja Λ merkitsevät samaa kuin kaavassa I ja W merkit-see samaa kuin kaavassa III, annetaan reagoida yhdisteen kanssa, jolla on kaava V

5 r2o2c-ch=ch-co-x V

2 .

jossa R ja X merkitsevät samaa kuin kaavassa I, ja lopullisesti mahdollisesti W ja/tai R2 lohkaistaan vapaiden karboksiryhmien muodostamiseksi, tai 10 ^ b2) kohdassa b^) mainitun kaavan IV mukai sen yhdisteen annetaan reagoida kaavan VI mukaisen yh- 2 disteen kanssa, jossa R merkitsee samaa kuin kaavassa I, ja kaavan VII mukaisen yhdisteen kanssa, 15 ohc-co2r2 x-co-xh3 (VI) (VII) jossa X merkitsee samaa kuin kaavassa I, ja lopuksi mah- 2 dollisesti W ja/tai R lohkaistaan vapaiden karboksiryh-20 mien muodostamiseksi, tai c) kaavan I mukaisten yhdisteiden valmistamiseksi, joissa Y ja Z merkitsevät kulloinkin vetyä, annetaan kohdassa b^) mainitun kaavan IV mukaisen yhdisteen reagoida yhdisteen kanssa, jolla on kaava VIII 25 CO_R2 X 2

0=C VIII

CH2-CH2-X

2 30 jossa R ja X merkitsevät samaa kuin kaavassa I, saadut

Schiff-emäkset pelkistetään ja lopuksi mahdollisesti 2 lohkaistaan W ja/tai R vapaiden karboksiryhmien muodostamiseksi , minkä jälkeen kohtien a) - c) mukaan saadut 35 kaavan I mukaiset yhdisteet, joissa R on vety, muutetaan mahdollisesti kaavan I mukaisiksi estereiksi, joissa R on (C1-C6) -alkyyli tai (C^^-Cg)-aralkyyli, ja kaavan I mukaiset yhdisteet muutetaan mahdollisesti niiden fysiologisesti hyväksyttäviksi suoloiksi.

3 79116

Menetelmävaihtoehto a) suoritetaan peptidikemiasta tunnettujen araidinmuodostamismenetelmien mukaisesti, ja mahdollisesti lopuksi ryhmä W lohkaistaan happo- tai emäs- käsittelyllä tai hydrogenolyysillä, ja mahdollisesti myös 2 5 ryhmä R lohkaistaan Iisaksi happo- tai emäskäsittelyllä, jolloin kulloinkin saadaan vapaita karboksyylihappoja.

Menetelmävaihtoehto b^) suoritetaan tunnetulla tavalla Michael-reaktiota käyttäen /Organikum, 6. Auflage (1967), s. 492^, ja mahdollisesti ryhmä W ja/tai ryhmä R2 lohkaisit) taan kuten edellä kuvattiin.

Menetelmävaihtoehto b2) suoritetaan tunnetulla tavalla Mannich-reaktion avulla ^Bull. Soc. Chim. France (1973), s. 625^, ja lopuksi lohkaistaan mahdollisesti ryhmä W ja/ 2 tai ryhmä R kuten edellä kuvattiin vapaiden karboksiryh-15 mien muodostuessa.

Menetelmävaihtoehdossa e) käytetään julkaisussa J. Amer. Chem. Soc. 93 (1971), s. 2897 kuvattua menetelmää, jolloin Schiff-emästen pelkistys voi tapahtua katalyyttisestä, elektrolyyttisesti tai pelkistimillä, kuten esim.

20 kompleksisilla boranaateilla, edullisesti natriumboorihyd-ridillä tai natriumsyanoboorihydridillä.

Kaavan I mukaiset yhdisteet, joissa R on vety, voidaan mahdollisesti muuttaa sinänsä tunnettujen menetelmien mukaisesti kaavan I mukaisiksi estereiksi, joissa R on 25 (C1-C6)-alkyyli tai (CC^)-aralkyyli.

Keksintö koskee myös kaavan III mukaisia yhdisteitä, joissa C-atomeissa 2 ja 6 olevat H-atomit ovat toisiinsa nähden cis-konfiguraatiossa, pyrrolidiinirengas on orientoitunut endo- tai ekso-asemaan bisykliseen rengassystee-30 miin nähden ja C-atomissa 4 oleva ryhmä -CC>2W on orientoitunut cis- tai trans-asemaan C-atomissa 2 olevaan vetyatomiin nähden, ja jossa W = vety, tert.-butyyli tai bentsyy-li, ja A on -CH=CH- tai -CH2-CH2~ryhmä.

Näitä yhdisteitä käytetään keksinnön mukaisesti 35 lähtöaineina kaavan I mukaisten yhdisteiden synteesissä, ja niitä voidaan valmistaa seuraavien menetelmien mukaisesti .

9 79116

Yhdessä synteesivaihtoehdossa lähdetään yhdisteestä, jolla on kaava IX tai X

0 (IXa) (IXb) 15

H 0 H

: ‘ 0 (Xa) (Xb) 25 jossa C-atomeissa 2 ja 6 olevat vetyatomit ovat toisiinsa nähden cis-konfiguraatiossa ja syklopentanoni-rengas on orientoitunut joko endo-asemaan (kaava IXa ja b) tai ekso-asemaan (kaava Xa ja b) bisykliseen rengassysteemiin nähden .

30 Kaavojen IXa ja Xa mukaiset yhdisteet tunnetaan julkaisusta R. R. Sauer, J. Org. Chem. 39 (1974), s. 1850, ja kaavojen IXb ja Xb mukaisia yhdisteitä on kuvattu julkaisussa J. Org. Chem. 32 (1967), s. 3120.

ίο 79116

Ketonit IX ja X muutetaan tunnettujen menetelmien mukaisesti oksiimeiksi tai oksiimijohdannaisiksi, joilla

on kaava XI

'Mr M or3 10 jossa C—atomeissa 2 ja 6 olevat H-atomit ovat toisiinsa nähden cis-konfiguraatiossa, syklopentaani-rengas on orientoitunut endo- tai ekso-asemaan bisvkliseen rengassysteemiin nähden, A on CII = CH tai CH„-CH0-ryhmä 3 2 2 15 ja R on vety, alkyyli, aryyli, aralkyyli, -SO^H, aryylisulfonyyli tai jokin muu ryhmä, joka soveltuu 3

Beckmann-uudelleenryhmittelyyn. Edullisesti R merkitsee vetyä, (C^-Cg)-alkyyliä, (Cg-C^)-aryyliä, (C^-C^)- aralkyyliä, SO^Hrta, bentseenisulfonyyliä ja p-tolueeni-20 sulfonyyliä. Kaavan XI mukaiset yhdisteet muutetaan Beckmann-uudelleenrvhmittelyn avulla (kts. Organic Reactions 11 (i960) 1-156] antamalla reagoida mineraa- ] lihapon,kuten esimerkiksi rikkihapon tai polyfosfori- 3 : hapon kanssa tai siinä tapauksessa, että R = H, bent-

25 seenisulfonyylikloridin tai p-tolueenisulfonyvliklori-din kanssa ja emäksen kuten, trietyyliamiinin kanssa tai orgaanisen hapon, kuten esim. muurahaishapon kanssa yhdisteeksi, jolla on kaava XII

30 /fN/'N

A ( 1 XII

k H |

;·. H

35 jossa C-atomeissa 2 ja 7 olevat H-atomit ovat toisiinsa nähden cis-konfiguraatiossa, laktaamirengas on orientoitunut endo- tai ekso-asemaan bisykliseen rengassysteemiin nähden ja A merkitsee samaa kuin edellä. Beckmann- 11 79116 uudelleenryhmittelyn jälkeen esiintyvät isomeerit voidaan helposti poistaa uudelleenkiteyttämällä tai pylväskromato-grafoimalla silikageelillä. Kaavan XII mukaiset yhdisteet halogenoidaan yhdisteeksi, jolla on kaava XIII 5 H Hai

A ( ^Hal XIII

10

H I

H

jossa A merkitsee samaa kuin edellä ja Hai on halogeeni-atomi, edullisesti kloori tai bromi. Halogenointiainei-na tulevat kyseeseen esimerkiksi epäorgaaniset happo-halogenidit,kuten PCl^, S02C12, POCl^, S0C12, PBr^ tai halogeenit, kuten bromi. Edullista on PCl^rn tai POCl^n käyttö yhdistelmänä S02Cl2:n kanssa. Välivaiheena muodostuu ensiksi imidihalogenidi, joka muutetaan ·; 20 mainittujen halogenointiaineiden avulla ja lopuksi hydro- lyysillä emäksisissä olosuhteissa, edullisesti vesipitoisella alkalikarbonaatilla edelleen kaavan XIII mukaiseksi yhdisteeksi.

Kaavan XIII mukaiset yhdisteet pelkistetään seu-

25 raavaksi katalvyttisesti polaarisessa proottisessa liuot-timessa, kuten esimerkiksi alkoholissa, edullisesti etanolissa, tai karboksyylihapossa, kuten esimerkiksi etikka-hapossa, lisäten happoakseptoria, kuten esimerkiksi natrium-asetaattia tai trietyyliamiinia, yhdisteeksi, jolla on kaa-va XIV

Hal

A ( XIV

35 H

- . H

jossa A ja Hai merkitsevät samaa kuin edellä. Katalysaattoreina tulevat kyseeseen esimerkiksi Raney-nikkeli tai palladium tai platina eläinhiilen pinnalla.

i2 791 1 6

Siinä tapauksessa, että A = CH = CH, on välttämätöntä suojata C-C-kaksoissidokset syklopentadienyyli-rautadi-karbonyyli-kompleksilla kaavan XV mukaisesti. Rautakomplek-si poistetaan hydrauksen jälkeen jälleen Na:lla asetonissa, 5 kuten on kuvattu julkaisussa J. Amer. Chem. Soc. 97 (1975), s. 3254; K. M. Nicholas.

CO H Hal · <#4ac|cb:“

0 C0 H I

BF4 H

Kaavan XIV mukaisia yhdisteitä voidaan myös valmistaa suoraan halogenoimalla kaavan XII mukaiset yhdisteet käyttämällä vähäisiä määriä edellä mainittuja haloge-nointiaineita.

Kaavan XIV mukaisten yhdisteiden annetaan reagoida tunnetun Favorskii-reaktion mukaisesti emäksen 20 läsnäollessa kaavan III mukaiseksi yhdisteeksi, jossa W = vetyt ja tämä mahdollisesti esteröidään. Edellä mainittu Favorskii-reaktio suoritetaan alkoholipitoisessa liuottimessa, kuten metanolissa, etanolissa tai tert.-butanolissa tai vedessä tai edellisten seoksissa lämpö-25 tila-alueen ollessa 20°C - 140°C, edullisesti 60°C - 100°C. Emäksinä käytetään tarkoituksenmukaisesti alkali-tai maa-alkalihydroksideja, kuten natrium-, kalium- tai bariumhydroksidia tai alkalialkoholaatteja, kuten esimerkiksi natriummetylaattia tai kalium-tert.-butanolaat- 30 tia*

Favorskii-reaktion jälkeen saadut kaavan III mukaiset yhdisteet, joissa W = vety, ovat rasemaatte-ja ja ne voivat esiintyä diastereomeeriseoksena. Niinpä saadaan lähtien kaavan IX mukaisista ketoneista kaavan 25 lila ja Illb mukaisia aminohappoja yhdessä peilikuva-isomeerien kanssa ja lähtien kaavan X mukaisesta keto-nista kaavan IIIc ja Illd mukaisia aminohappoja yhdessä niihin kuuluvien peilikuvaisomeerien kanssa, joissa W = vety, jolloin A merkitsee samaa kuin edellä.

13 791 1 6 \ τΐ N^(4 2\ \ / f^CO~W \ / H H 2 ',Α / ;Sh H co„w 10 (Ilia) * (Illb)

15 A 3^C02W A

l \ ® 2 : \ CO W

H H H H

. . (IIIc) (IHd) 20

Kaikissa neljässä kaavojen lila - Hid mukaisessa yhdisteessä ovat C-2:ssa ja C-6:ssa olevat vetyatomit toisiinsa nähden cis-konfiguraatiossa; kaavan lila ja Illb mukaisissa yhdisteissä on pyrrolidiinirengas orientoitunut 25 endo-asemaan ja kaavoissa IIIc ja IHd ekso-asemaan bisyk- liseen rengassysteemiin nähden. C-atomissa 4 olevat -0.0 ryhmät kaavan Ula ja IHd mukaisissa yhdisteissä ovat orientoituneet cis-asemaan C-2:ssa olevaan vetyatomiin nähden ja kaavan IHb ja IHd mukaisissa yhdisteissä vas-30 taavasti trans-asemaan. Seuraaviin reaktioihin voidaan käyttää vastaavia rasemaatteja tai diastereomeeriseoksia. Rasemaatit voidaan myös erottaa edeltä käsin peptidikemias-sa tunnettujen menetelmien mukaisesti optisiksi antipodeik-si, ja diastereomeeriseokset voidaan erottaa fraktiokiteyt-35 tämällä tai sopivan johdannaismuodostuksen jälkeen pylväs-kromatografoimalla silikageelillä diastereomeereiksi.

i4 791 1 6

Aminohapot voidaan mahdollisesti esteröidä. Kaavan III mukaisten aminohappojen (W = tert.-butyyli tai bentsyyli) edullisena pidettyjä tert.-butyyliestereitä ja bentsyyliestereitä saadaan peptidikemiasta tunnettu-5 jen tavanomaisten menetelmien mukaisesti, kuten esimerkiksi tert.-butyyliesterin tapauksessa antamalla happojen reagoida isobutyleenin kanssa inertissä orgaanisessa liuottimessa (esim. dioksaanissa) happojen (kuten esim. rikkihapon) läsnäollessa. Siinä tapauksessa, että 10 A = CH = CH, on seuraava menetelmä osoittautunut erittäin edulliseksi: Vastaava aminohappo asyloidaan emäksisestä lohkaistavalla ryhmällä, kuten esim. metyylisulfonyyli-etoksikarbonyyliryhmällä (= MSC), ^Tesser, Balvert-Geers, Int. J. Pept. Protein Res. 7, (1975), s. 295/.

15 Karboksyylihapon annetaan reagoida neutraalilla - heikosti emäksisellä pH-alueella tert.-butanolin kanssa orgaanisessa liuottimessa, kuten esim. pyridiinissä, propyylifosfonihappoanhydridin läsnäollessa vastaavaksi tert.-butyyliesteriksi. Lohkaisemalla MSC-ryhmä voimak-20 kaasti alkalisella pH-alueella emäksellä vesipitoisessa liuottimessa saadaan kaavan III mukainen tert.-butyyli-esteri (W = tert.-butyyli).

Kaavan III mukaisia bentsyyliestereitä (W = bentsyyli) saadaan tunnettujen menetelmien mukaisesti käyttä-25 mällä bentsyylialkoholia ja tionyylikloridia.

Lähtöaineina kaavan I mukaisten yhdisteiden valmistuksessa käytetyt kaavan II mukaiset yhdisteet, jois- 1 2 sa n = 1, Y, Z = vety, R = metyyli ja R = metyyli tai etyyli ja X = fenyyli, ovat tunnettuja (eurooppalainen 30 patenttihakemus no: 37 231). Kaavan II mukaisia yhdisteitä voidaan valmistaa eri menetelmätapoja käyttäen.

Eräs synteesivaihtoehto lähtee edellä mainitun kaavan VII mukaisesta ketonista, jonka annetaan reagoida tunnettujen menetelmätapojen mukaisesti Mannich-reaktiolla 35 edellä mainitun kaavan VI mukaisen yhdisteen kanssa yhdessä aminohappoestereiden kanssa, joilla on kaava XVI, 15 791 1 6

H-N-CH-CO-W W0~C-CH-NH-CH-CH„-C0-X

2 <1 2 2 Tl I 22

R R C02R

(XVI) (XVII) jossa R·*· merkitsee samaa kuin edellä ja W on hydroge-5 nolyyttisesti tai happamesti lohkaistava ryhmä, erityi

sesti bentsyyli- tai tert.-butyyli-rvhmä, kaavan XVII

1 2 mukaiseksi yhdisteeksi, jossa R , R , X ja W merkitsevät samaa kuin edellä, sillä rajoituksella, että jos W on hydrogenolyyttisesti lohkaistava ryhmä, erityi-10 sesti bentsyyli, niin silloin ei R :11a saa olla W :n merkitystä. Jos ryhmä W lohkaistaan hydrogenolyyttises-ti esimerkiksi palladiumin avulla, niin silloin saadaan otettaessa 3 mooliekvivalenttia vetyä, kaavan II mukaisia yhdisteitä, joissa Y, Z = vety. Jos vedyn otto py-15 säytetään 1 mooliekvivalentin kohdalla, niin saadaan kaavan II mukaisia yhdisteitä, joissa n = 1 ja Y ja Z merkitsevät yhdessä happea, joita yhdisteitä saadaan samoin, jos kaavan XVII mukainen ryhmä W lohkaistaan hapoilla, kuten esimerkiksi trifluorietikkahapolla tai 20 suolahapolla inertissä orgaanisessa liuottimessa, kuten esim. dioksaanissa.

Kaavan XVII mukaisia yhdisteitä voidaan myös saada tunnettujen menetelmätapojen mukaisesti edellä mainitun kaavan V mukaisen yhdisteen Michael-additiolla 25 edellämainitun kaavan XVI mukaisen yhdisteen kanssa.

Tämä menetelmä soveltuu edullisesti sellaisten kaavan XVII mukaisten yhdisteiden valmistukseen, joissa 1 2 R = metyyli, R = etyyli ja X = arvyli.

Kaavan XVII mukaiset yhdisteet muodostuvat 30 diastereomeeriseoksina. Edullisina pidettyjä kaavan XVII mukaisia diastereomeerejä ovat sellaiset, joissa tähdellä merkityillä kiraalisilla C-atomeilla on kulloinkin S-konfiguraatio. Nämä voidaan kulloinkin erottaa esimerkiksi kiteyttämällä tai kromatografoimalla esim.

35 silikageelillä. Seuraavassa ryhmän W lohkaisussa säi lyvät kiraalisten C-atomien konfiguraatiot.

16 791 1 6 Lähtöaineina kaavan I mukaisten yhdisteiden valmistuksessa käytettyjä edellä mainitun kaavan IV mukaisia yhdisteitä saadaan edellä mainitun kaavan III mukaisista yhdisteistä antamalla niiden reagoida tunnettujen menetel-5 mien mukaisesti N-suojatun 2-aminokarboksyylihapon kanssa,

jolla on kaava XVIII

V-NH-CH-CO.,H

J, " XVIII

R1 jossa V on suojaryhmä ja R merkitsee samaa kuin edel-10 lä. Suojaryhmänä V, joka jälleen lohkaistaan reaktion päätyttyä, tulee kyseeseen esimerkiksi tert.-butoksikar-bonyyli tai bentsyylioksikarbonyyli.

Kaavan II mukaisen yhdisteen reaktio kaavan III mukaisen yhdisteen kanssa kaavan I mukaisen yhdisteen 15 valmistamiseksi tapahtuu jonkin peptidikemiasta tunnetun kondensaatioreaktion mukaisesti, jolloin kondensaa-tioaineena lisätään esimerkiksi disykloheksyylikarbodi-imidiä ja 1-hydroksi-bentsotriatsolia. Sitä seuraavassa ryhmän W happamessa lohkaisussa käytetään happoina 20 edullisesti trifluorietikkahappoa tai kloorivetyä. Bent- syyliryhmän (W = bentsyyli) lohkaiseminen tapahtuu edullisesti hydrogenolyysillä käyttäen palladiumhiiltä alkoholissa.

Edellä kuvatuissa reaktioissa, joita käytetään kaa-25 vojen III, IV ja I mukaisten yhdisteiden valmistamiseksi säilyvät kulloinkin sillanpää-C-atomeissa 2 ja 6 olevien välituotteiden konfiguraatiot.

Edellä kuvatun menetelmätavan mukaan saadut kaavan III mukaiset yhdisteet muodostuvat seoksena ja ne 30 voidaan erottaa toisistaan esimerkiksi uudelleenkiteyttä- mällä tai kromatografoimalla.

Kaavan III mukaiset yhdisteet muodostuvat rasee-misina seoksina ja niitä voidaan käyttää sellaisenaan muihin edellä kuvattuihin svnteeseihin. Mutta niitä voi-35 daan myös käyttää puhtaina enantiomeereinä, sen jälkeen π 79116 kun rasemaatit on erotettu tavanomaisia menetelmiä käyttäen, esimerkiksi optisesti aktiivisten emästen tai happojen kanssa tapahtuneen suolanmuodostuksen kautta optisiksi antipodeiksi. Puhtaita enantiomeerejä voidaan myös saa-5 da.

Jos kaavan I mukaiset yhdisteet muodostavat rase-maatteja, ne voidaan myös erottaa tunnettujen menetelmien mukaisesti, kuten esim. optisesti aktiivisten emästen tai happojen kanssa tapahtuvan suolanmuodostuksen kautta nii-10 den enantiomeereiksi tai ne voidaan erottaa kromatografoi-malla.

Kaavan I mukaiset keksinnön mukaisesti valmistetut yhdisteet esiintyvät sisäisinä suoloina, jos R on vety. Amfoteerisinä yhdisteinä ne voivat muodostaa suoloja hap-15 pojen tai emästen kanssa. Näitä suoloja valmistetaan ta vanomaisella tavalla antamalla niiden reagoida ekvivalentin happoa tai emästä kanssa.

Kaavan I mukaisilla yhdisteillä tai niiden suoloilla on pitkäaikainen, intensiivinen verenpainetta 20 alentava vaikutus. Ne ovat angiotensiiniä tuottavan entsyymin voimakkaita estäjiä (ACE-estäjiä).

Angiotensiiniä muuttava entsyymi (ACE) on entsyymi, joka on ensisijaisesti vastuussa angiotensiini I:n hydrolysoimisesta vasopressori-oktapeptidi-antiotensiini 25 II:ksi. Sen aktiivisuus on määritettävissä käyttämällä hippuryyli-l-histidyyli-l-leusiinia tai hippuryyli-glysi-dyyli-glysiiniä substraatteina.

Keksinnön mukaisten yhdisteiden aktiviteetti angiotensiiniä muuttavan entsyymin inhiboinnissa määritet-30 tiin seuraavasti: 10 g kaniinin jauhettua keuhkoa uutettiin 100 ml:lla kaliumfosfaattipuskuria (50 mM; pH 8,3) 10 minuutin ajan ja sentrifugoitiin 40 minuuttia kierrosnopeu-della 40000 g. Supernatantti varastoitiin sen jälkeen 35 5°C:ssa. Entsyymianalyysiin käytettiin modifioitua menetel- mää julkaisussa D. W. Cushman ja H. S. Cheung; Biochem. Pharmacol. 20 (1971), ss. 1673 - 1648 kuvatusta menetelmästä.

ie 79116

Yhdisteiden ehkäisevä vaikutus testattiin lisäämällä 10 pl inhibiittoria (liuotettuna tislattuun veteen tai DMSO:iin) 40 pl:aan puskuria, joka sisälsi 750 mM NaCl:a ja 115 mM kaliumfosfaattia (pH 8,3) ja 40 pl HHL:a (500 5 pmoolia) 115 mM:ssa kaliumfosfaattipuskuria (pH 8,3). Ana lyysin DMSO-määrä pidettiin alle 1 %:n.

Reaktio käynnistettiin lisäämällä 20 F1 entsyymi-liuosta. 60 minuutin inkuboinnin jälkeen 37°C:ssa reaktio pysäytettiin 1 ml :11a 0,1-n HCl:a. (3-H)-hippurihappoa uu-10 tettiin 1 ml :11a etyyliasetaattia Vortex-sekoittamalla liuosta 4-5 sekunnin ajan. 10 minuuttia sentrifugoimisen jälkeen supernatanttia lisättiin 150 - 200 pl:n erinä 10 ml:aan skintillaatioseosta.

Radioaktiivisuus laskettiin Tricarb-tuikelaskurilla 15 (Packard Instruments), jolloin saatiin seuraavat tulokset:

Tutkittu yhdiste _IC50 ^ 1 6,6 x 10-8 2 5,4 x 10“8 20 _ o 3 4,5 x 10 ICcr. tarkoittaa inhibiitiokonsentraatiota, joka in-

DU

hiboi 50 % ACE:n aktiivisuudesta.

25 Tutkittujen yhdisteiden kaavat on esitetty seuraa- vassa.

i9 791 1 6 (S>\ Vertailuyhdiste ^ I’ VS) CO II (EP-A-1-50800 , \ / ^ esimerkki 66; ^(S) \ \ (S) J?~\ DE-A-1-3 118 191, CO-CH-NH-CH-CH2-CH2-// y esimerkki 11) CH3 C02C2H5 ”” yhdiste (1)

Keksinnön mukai- I / yt-\ nen yhdiste V^vco2H (esimerkki 3g,

Yr diastereomeeri B') HCl H I (S) (S) /F\ C0-CH-NH-CH-CH~-CHo—(' ') I I 2 2 W/

CH-, CO„C 0HC

3 2 2 D

yhdiste (2)

Keksinnön mukaile'' \ / \ nen yhdiste r^H\ \ (esimerkki lq) .HCl /N\ (S)

CO ^XC02H

\(s) (s) η λ CH-NH-CH-CH„-CH0-V/ \\ I I 2 2\=/

CH, C0oCoHc 3 2 2 D

yhdiste (3) 2o 7 9116

Edellä esitettyjen testitulosten vertailu osoittaa, että angiotensiiniä muuttavan entsyymin (ACE) ehkäisyak-tiviteetti on noin 20 % suurempi keksinnön mukaisen yhdisteen (2) kohdalla ja noin 50 % suurempi keksinnön mukaisen 5 yhdisteen (3) kohdalla verrattuna vertailuyhdisteen (1) aktiivisuuteen.

Keksinnön mukaisia yhdisteitä voidaan käyttää syntytavaltaan erintyyppisten verenpainetautien hoitoon.

Myös niiden yhdistelmiä muiden verenpainetta alentavien, 10 verisuonia laajentavien tai diureettisesti vaikuttavien yhdisteiden kanssa on mahdollista. Tämän vaikutusluokan tyypillisiä edustajia on kuvattu esimerkiksi julkaisussa Erhardt-Rusching; Arzneimittel, 2. Auflage, Weinheim 1972.

Yhdisteitä voidaan antaa suun kautta, tai ruiskeena 15 laskimoon tai ihonalaiseen sidekudokseen.

Oraalinen annostus on 1 - 100 mg, edullisesti 1-40 mg kutakin yksikköannosta kohden normaalipainoisella aikuis-potilaalla; tämä vastaa noin 0,013 - 1,3 mg/kg päivässä, edullisesti 0,013 - 0,53 mg/kg päivässä. Annos-20 ta voidaan myös kohottaa vaikeissa tapauksissa, koska toksisia ominaisuuksia ei ole vielä tähän mennessä havaittu. Myös annoksen pienentäminen on mahdollista, ja paikallaan ennen kaikkea silloin, kun samanaikaisesti annetaan d.i-ureetteja eli virtsan eritystä edistäviä aineita.

25 Keksinnön mukaisia yhdisteitä voidaan annostella :: oraalisesti tai parenteraalisesti vastaavassa farmaseut tisessa valmisteessa. Oraalista käyttömuotoa varten aktiivisiin yhdisteisiin sekoitetaan tarkoitukseen sopivia tavanomaisia lisäaineita, kuten kantaja-aineita, 30 stabiloimisaineita tai inerttejä laimennusaineita. Ne saatetaan tavanomaisia menetelmiä käyttäen sopiviksi annos telumuodoiksi, kuten tableteiksi, lääkerakeiksi, ·.’ piilokapseleiksi, vesipitoisiksi, alkoholipitoisiksi tai öljymäisiksi suspensioiksi tai vesipitoisiksi, alko-35 hoiipitoisiksi tai öljymäisiksi liuoksiksi. Inertteinä 2i 7911 6 kantaja-aineina voidaan käyttää esimerkiksi arabikumia, magnesiumkarbonaattia, kaliumfosfaattia, maitosokeria, glukoosia tai tärkkelystä, erityisesti maissitärkkelystä. Tällöin valmiste voi olla sekä kuiva- että kosteagranu-5 laattina. Öljvmäisinä kantaja-aineina tai liuottimina tulevat kyseeseen esim. kasvikunnasta tai eläinkunnasta peräisin olevat öljyt, kuten auringonkukkaöljy tai kalanmaksaöljy.

Subkutaanista tai intravenööristä annostelua 10 varten aktiiviset yhdisteet tai niiden fysiologisesti hyväksyttävät suolat saatetaan mahdollisesti tarkoitukseen soveltuvia tavanomaisia aineita, kuten liuotinväliai-neita, emulgaattoreita tai muita apuaineita käyttäen liuoksiksi, suspensioiksi tai emulsioiksi. Uusien aktii-15 visten yhdisteiden ja vastaavien fysiologisesti hyväksyttävien suolojen liuottimina tulevat esimerkiksi kyseeseen vesi, fysiologiset keittosuolaliuokset tai alkoholit, esim. etanoli, propaanidioli tai glyseriini, näiden ohella myös sokeri 1iuokset, kuten glukoosi- tai man-20 niittiliuokset, tai myös mainittujen eri liuottimien seos.

Seuraavat esimerkit selventävät keksintöä; rajoittamatta sitä kuitenkaan mainittuihin yhdisteisiin.

Esimerkeissä ilmoitetut iH-NMR-arvot saatiin, jollei toisin ole ilmoitettu, mittaamalla CDCl3:ssa, ja ne on 25 annettu c -arvoina (ppm).

Esimerkki 1 N-(l-S-karbetoksi-3-fenyyli-propyyli)-S-alanyy-1 i-lR, 2R_j_4S,_6S , 7S-trisyklo^5,2,1,O2' ^-3-atsa-dekaani-4-karboksyylihappo-hydrokloridi 7 *7 30 a) ( + ) Endo-trisyklo^6,2,1,0 ' ^-3-atsa-4-okso- undekaani 7,8 g ( + ) endo-trisyklo^5,2,1,02'^7-3-okso-de-kaania (Journ. Org. Chem. 32, 3120, 1967) liuotetaan 52 ml:aan 95-%:sta muurahaishappoa. Tähän tiputetaan 35 io minuutin sisällä 9,1 g hydroksyyliamiini-O-sulfoni-happoa, joka on liuotettu 26 ml:aan 95-%:sta muurahaishappoa. Tämän jälkeen keitetään 2 tunnin ajan paluujääh- 22 791 1 6 dyttäen. Jäähdyttämisen jälkeen lisätään jäätä ja neutraloidaan jäillä jäähdyttäen väkevällä NaOH:lla. Uutetaan metyleenikloridilla, uute pestään vedellä, kuivataan ja haihdutetaan rotaatiohaihduttimessa. Raakasaan-5 to: 7,4 g seosta. Seos, joka koostuu endo-trisyklo- ^5,2,1,0 ' //-3-atsa-4-okso-undekaanista ja endo-trisyklo-2 7 ^6,2,1,0 ' </-4-atsa-3-okso-undekaanista/, erotetaan sili-kageelillä käyttäen metyleenikloridi/metanolia 95:5. Saanto: 4,5 g, jp.: 170-172°C.

10 b) ( + ) endo-trisyklo^6,2,1,0^' ^-3-atsa-4-okso- 5,5-dikloori-undekaani 4,5 g esimerkin la laktaamia liuotetaan 70 ml:aan vedetöntä kloroformia ja sekoittaen ja huoneen lämpötilassa lisätään 5,6 g fosforipentakloridia. Tähän seokseen 15 tiputetaan 7,8 g sulfuryylikloridia 8 ml:ssa kloroformia 30 min. sisällä ja sitten keitetään paluujäähdyt-täen 3 tunnin ajan. Seos säädetään neutraaliksi jäähdyttäen kyllästetyllä kaiiumkarbonaattiliuoksella.

Sen jälkeen kun kloroformif-aasi on erotettu,vesipitoinen 20 faasi uutetaan metyleenikloridilla, orgaaniset faasit yhdistetään, pestään vedellä, kuivataan ja haihdutetaan vakuumissa. Raakatuote suodatetaan silikageelillä käyttäen metyleenikloridi/metanolia 95:5.

Saanto: 3,7 g, jp.: 199-200°C.

25 c) (+)-endo-trisyklo^6,2,1,0 ' J^-3-atsa-4-okso-5- undekaani 2,9 g dikloorilaktaamia esimerkistä Ib ja 1,7 ml trietyyliamiinia liuotetaan 170 ml:aan etanolia. Siihen lisätään noin 0,7 g Raney-nikkeliä ja hydrataan. Sen 30 jälkeen kun on otettu 1 ekvivalentti vetyä, tuote imusuodatetaan erilleen katalysaattorista ja etanoliliuos haihdutetaan vakuumissa. Jäännös liuotetaan etyyliasetaattiin, pestään vedellä, kuivataan ja haihdutetaan. Jäännös erotetaan silikageelillä käyttäen metyleenikloridi/ 35 metanolia 95:5. Saanto: 1,7 g, jp.: 179-181°C.

23 791 1 6 d) l:l-seos, joka koostuu 1R,2R,4S,6S,7S-tri-syklo-£5,2,1,0 ' 7-3-atsa-dekaani-4-karboksyylihaposta ja 1S,2S,4R,6R,7R-trisyklo£5,2,1,0^' ^J-3-atsa-dekaani- 4-karboksyylihaposta 5 1,3 g monokloorilaktaamia esimerkistä le lisätään kiehuvaan liuokseen, jossa on 2,2 g bariumhydroksidi-oktahydraattia 39 ml:ssa vettä. Keitetään 4 tunnin ajan paluujäähdyttäen, sitten pH säädetään konsentroidulla rikkihapolla arvoon 6,5 ja keitetään paluujäähdyttäen 10 1 tunnin ajan. Jäähdyttämisen jälkeen imusuodatetaan erilleen sakasta. Emäliuos haihdutetaan kuiviin ja jäännös kiteytetään etyyliasetaatista.

Saanto: 1,1 g, Rf:0,61 (Si02; CH2C12/CH30H/CH3C02H/H20 20:15:2:4).

15 Reaktiossa muodostuu ^H-NMR:n (270 MHz) mukaan pieni osa IS ,2S,4S,6R,7R-trisyklo/5,2,1,0^'^/-3-atsa- dekaani-4-karboksyylihappoa ja 1R,2R,4R,6S,7S-trisyklo-^ 2 6s £5,2,1,0 'J-3-atsa-dekaani-4-karboksyylihappoa, joka voidaan erottaa.

20 e) l:l-seos, joka koostuu 1R,2R,4S,6S,7S-trisyk- lo/5,2,1,0^'^7-3-atsa-dekaani-4-karboksyylihappo-bentsyyliesteri-hydrokloridistä ja 1S,2S,4R, 6R,7R-trisyklo£5,2,1,0^' ^J-3-atsa-dekaani-4-karb-oksyylihappo -bentsyyliesterihydrokloridistä 25 10 ml bentsyylialkoholia jäähdytetään -5°C:seen ja 1,7 g tionyylikloridia tiputetaan. Tähän liuokseen lisätään 1,1 g raseemista aminohappoa esimerkistä Id. Annetaan lämmetä Öiseen ja sekoitetaan 17 tunnin ajan 5°C:ssa. Bentsyylialkoholi tislataan vakuumissa ja jäännöstä hier-30 retään di-isopropyylieetterin kanssa. Saanto: 1,1 g 1H-NMR (DMS0-d6): 1,0-3,0 (m, 5H), 3,2-4,8 (m 8H) 5,2 (s, 2H), 7,4 (leveä s 5H), 9,2-10,5 (leveä, 2H).

24 79 1 1 6 f) N-(l-S-karbetoksi-3-fenyyli-propyyli)-S- alanyyli-lR,2R,4S,6S,7S-trisyklo^5,2,l,02,67-3- atsa-dekaani-4-karboksyylihappo-bentsyyliesteri - .. ..... I. . - I— I — , 10 mlraan vedetöntä dimetyyliformamidia lisätään 5 peräkkäin jäillä jäähdyttäen 0,96 g N-(1-S-karbetoksi- 3-fenyyli-propyyli)-S-alaniinia, 0,46 g hydroksibents-triatsolia, 1 g bentsyyliesteriä esimerkistä le, 0,7 g disykloheksyylikarbodi-imidiä ja 0,4 g N-etyylimorfolii-nia ja sekoitetaan 17 tunnin ajan huoneen lämpötilassa.

10 Sitten laimennetaan 12 ml:11a etyyliasetaattia ja muodostunut urea imusuodatetaan. Liuotin tislataan vakuumissa. Jäännös liuotetaan eetteriin, pestään kyllästetyllä natriumkarbonaattiliuoksella ja vedellä, kuivataan ja haihdutetaan. Jäännös, 1,7 g erotetaan silikageelillä 15 käyttäen sykloheksaani/etyyliasetaattia 8:2, yhtenäisiksi diastereomeereiksi.

Nopeasti valuva fraktio sisältää N-(1-S-karbetoksi- 3-fenyyli-propyyli) -S-alanyyli-l.S , 2S,4R,6R,7R-trisyklo-2 6 ^5,2,1,0 ' ^-3-atsa-dekaani-4-karboksyy1ihappobentsyy1ies-20 teriä 100 mg; m/e: 532 R^. = 0,52 (S1O2; sykloheks aani/ etyyliasetaatti (1:1).

Hitaasti valuva fraktio sisältää 400 mq n-H-s-karbetoksi-3-fenyyli-propyyli)-S-alanyyli-lR,2R,4S,6S,7S-trisyklo^B,2,1,0 ' y-3-atsa-dekaani-4-karboksyylihappobent-25 yyliesteriä in/e 532; R^ --· 0,45 (S i 0 ^ ? syk loheksaan i /et; kkacs * e-1:1) q) N-(l-S-karbetoksi-3-fenyyli-propyyli)-5-ala- 7 f, \-- nyyli-lR, 2R, 4S , 6S , 7S-trisyklo/Ί?, 2,1,0 ' J-3-atsa-dekaani-30 4-karboksyy1ihappo-hydrokloridi 350 mg N-(l-S-karbetoksi-3-fenyyli-propyyli)-S-ala-nyyli-lR,2R,4S,6S ,7S-trisyklo^5,2,1,02,67-3-atsa-dekaani-4-karboksyylihappobentsyyliesteriä esimerkistä lf liuotetaan 1.0 ml.:aan etanolia, lisätään 30 mg 10-%:sta palla-35 diumia hiilen pinnalla ja hydrataan huoneen lämpötilassa. Sen jälkeen kun on imusuodatettu erilleen katalysaattorista, haihdutetaan liuos vakuumissa, jäännös liuotetaan etyyliasetaattiin, liuos saatetaan happameksi 25 791 1 6 etanolipitoisella kloorivedyllä ja haihdutetaan rotaatio-haihduttimessa. Jäännöstä hierretään di-isopropyylieet-terin kanssa. Saanto: 270 mg, jp.: 162-165°C (hajoten).

= 0,42 (Si02; metyleenikloridi/metanoli 8:2).

5 Esimerkki 2 N- (l-S-karbetoksi-3-fenyyli-propyyli)-S-ala-nyyli-lS,2S,4S ,6R,7R-trisyklo/r5,2,1,02,67~3-atsa-dekaani- 4-karboksyylihappo-hydroklöridi

Vastaavasti kuten esimerkissä le - lg kuvatussa 10 menetelmässä saadaan käyttämällä lS,2S,4S,6R,7R-trisyklo- (5,2,1,O2'67“3-atsa-dekaani-4karboksyylihappoa lähtötuottee-na, N-(l-S-karbetoksi-3-fenyyli-propyyli)-S-alanyyli-lS,2S,4S,6R,7R-trisyklo^!5,2,02'^7-3-atsa-dekaani-4-karboksyylihappo-hydrokloridi.

15 Esimerkki 3 N-(l-S-karbetoksi-3-fenyyli-propyyli)-S-alanyyli-IS , 2R, 4S, 6S , 7R-trisyklo/,S , 2,1,0 ' ^-3-atsa-dekaani-4-karboksyylihappo a) (+) Ekso-trisyklo^S,2,1,O2'^7-3-atsa-4-okso-20 undekaani

Yhdistettä valmistetaan lähtien (+) ekso-trisyklo-^*5,2,1,0 ' ^-3-okso-dekaanista (Journ. Org. Chem. 32, 3120 (1967)) esimerkissä la kuvatun menetelmän mukaisesti. Laktaami-seos erotetaan silikageelillä käyttäen me-25 tyleenikloridi/metanolia 9:1.

Rf = 0,49 (Si02; CH2C12/CH30H 9:1) Jp.: 178-180°C.

b) ( + ) Ekso-trisyklo^*6,2,1,02'^)-3-atsa-4-okso- 5,5-dikloori-undekaani

Yhdistettä valmistetaan lähtien esimerkin 3a 30 laktaamista esimerkissä Ib kuvatun menetelmän mukaisesti.

Jp.: 240°C, Rf = 0,49 (Si02; CH2C12/CH OH 95:5).

e) (+) Ekso-trisyklo^fe,2,1,02, y-3-atsa-4-okso-5-klooriundekaani

Yhdistettä valmistetaan lähtien esimerkin 3b 35 dikloorilaktaamista käyttäen esimerkissä le kuvattua menetelmää.

Rf = 0,26 (Si 0 2; CH2C12/CH30H 95:5).

26 79 1 1 6 d) l:l-seos, joka koostuu IS ,2R,4S,6S,7R-trisyk1 o- f*» O ~~ /.5,2,1,0 ' j/-3-atsa-dekaani-4-karboksyylihaposta ja peili-kuvaisomeeristä ja 1R,2S,4S,6R,7S-trisyklo/5,2,l,Q2f^}-3-atsa-dekaani-4-karboksyylihaposta ja peilikuvaisomeeristä 5 yhdisteitä valmistetaan lähtien esimerkin 3c monokloorilaktaamista esimerkissä Id kuvatun menetelmän mukaisesti.

Rf = 0,54 (Si02; CH2C12/CH30H / CH30H / CH3C02H / H20 20:15:2:4) 10 NMR (D20): 0,9-1,6 (m, 8H); 2,1-2,5 (m 3H) 3,4-4,0 (m, 2H).

e) l:l-seos, joka koostuu 1S,2R,4S,6S,7R-trisykio- f5,2,1,O2'^-3-atsa-dekaani-4-karboksyylihappo-bentsyylies-teristä ja peilikuvaisomeeristä ja 1R,2S,4S,6R,7S-tri-15 syklo/^5,2,1,0 ^'®/-3-a tsa-dekaani-4-karboksyylihappo-ben ts-yyliesteristä ja peilikuvaisomeeristä.

Yhdisteitä valmistetaan lähtien esimerkin 3d ami-nohapposeoksesta esimerkissä le kuvatun menetelmän mukaisesti .

20 Rf = 0,31 diastereomeeri 1 (Si02; CII2C12/CH30H 95:5)

= 0,26 diastereomeeri II

Seos voidaan erottaa preparatiivisesti N-asyloin-nin jälkeen silikageelillä kromatografioiden molemmiksi raseemisiksi diastereomeereiksi.

25 f) Seos, joka koostuu N-(l-S-karbetoksi-3-fenyyli- propyyli)-S-alanyyli-lS,2R,4S,6S,7R-trisyklo^S,2,l,0^'^/- 3- atsa-dekaani-4-karboksyylihappobentsyyliesteristä, N-(1-S- karbetoksi-3-fenyyli-propyyli)-S-alanyyli-lR,2S,4R,6R,7S- 2 6 trisyklo^5,2,1,0 ' ^-3-atsadekaani-4-karboksyylihappobent-30 syyliesteristä, N-(l-S-karbetoksi-3-fenyyli-propyyli)-S- alanyyli-lR, 2S, 4 S, 6R, 7S-trisyklo/rS ,2,1,02, 6^-3-atsa-dekaani- 4- karboksyylihappobentsyyliesteristä ja N-(l-S-karb-etoksi-3-fenyyli-propyyli)-S-alanyyli-lS,2R,4R,6S,7R- 2 g trisyklo^*5,2,1,0 ' </-3-atsa-dekaani-4-karboksyylihappo- 35 bentsyyliesteristä.

27 791 1 6

Yhdisteitä valmistetaan lähtien esimerkin 3e bentsyyliesteriseoksesta esimerkissä lf kuvatun menetelmän mukaisesti. Diastereomeeri-seos erotetaan silika- geelillä käyttäen metyleenikloridi/etyyliasetaattia 99:1 _ g · 2

5 Diastereomeeri A

= 0,134 (Si02; metyleenikloridi/etyyliasetaatti 95:5) m/e = 532 Diastereomeeri B

= 0,126 (Si02; metyleenikloridi/etyyliasetaatti 95:5) 10 m/e = 532

Diastereomeeri C

Rf = 0,105 (Si02; metyleenikloridi/etyyliasetaatti 95:5) m/e = 532 Diastereomeeri D

15 Rj = 0,074 (Si02; metyleenikloridi/etyyliasetaatti 95:5) m/e = 532 ' g) N—(l-S-karbetoksi-3-fenyyli-propyyli)-S—ala- nyyli-lS,2R,4S,6S,7R-trisyklo^> ,2,1,02'^-3-atsa-dekaani- 4-karboksyylihappo-hydrokloridi 20 N- (1-S-karhet, oksi - 3 —renyyl i-propyy 1 u-S-alanyyli- IR, 2S , 4R, 6R, 7S-tr isyklo^"5 ,2,1,02,6</-3-atsa-dekaani-4-karboksyylihappo-hydrokloridi v· N-(l-S-karbetoksi-3-fenyylipropyvli)-S-alanyyli-lR,2S,4S,- O G.

6R,7S-trisvklo ζ5,2,1,0 ' ^-3-atsa-dekaani-4-karboksyylihap-25 po-hydrokloridi N-(l-S-karbetoksi-3-fenyyli-propyyli)-S-alanvyli- IS, 2R,4R,6S, 7R-trisyklo{5,2,1,O2'6>7-3-atsa-dekaani-4-karboksyylihappo-hydrokloridi muodostuvat, kun esimerkin 3g diastereomeerien A, B, C, D 30 annetaan kulloinkin reagoida esimerkissä lg kuvatun menetelmän mukaisesti.

28 791 1 6

Diastereomeeri A’_

Rj = 0,191 (Si 02 ; metyleenikloridi/metanoli 9:1) m/e : 514 trimetyylisilyylijohdannaisella Diastereomeeri B1 5 Rf = 0,231 (SiO^? metyleenikloridi/metanoli 9:1) m/e: 514 trimetyylisilyylijohdannaisena Diastereomeeri C1 R^ = 0,301 (Si02; metyleenikloridi/metanoli 9:1) m/e: 514 trimetyylisilyylijohdannaisena 10 Diastereomeeri D1 R^ = 0,358 (Si02; metyleenikloridi/metanoli 9:1) m/e : 514 trimetyylisilyylijohdannaisena.

Esimerkki 4 N-(l-S-karboksi-3-fenyyli-propyyli)-S-alanyyli-15 1R, 2R, 4S , 6S , 7S-trisyklo^*5,2,1,0^' ^/-3-atsa-dekaani-4- karboksyylihappo 1 g esimerkin lg esteriä liuotetaan 20 ml:aan di-metoksietaania. Lisätään 1 tippa laimennettua indikaat-toriliuosta, esim. bromitymolinsinistä ja sitten lisä-20 tään voimakkaasti sekoittaen 5 minuutin kuluessa ekvi-valenttinen määrä 4-n vesipitoista kaliumhydroksidi-liuosta siten, että indikaattori osoittaa reaktion päättyessä pH-arvoa 9-10. Tämän jälkeen pH säädetään suolahapolla arvoon 4, haihdutetaan vakuumissa kuiviin, liuote-25 taan etyyliasetaattiin ja suodatetaan. Sen jälkeen kun etyyliasetaatti on haihdutettu, saadaan 0,75 g kiinteätä jäännöstä. m/e:414 .

29 791 1 6

Esimerkki 5 N-{i-S-karbetoksi-3-fenyyli-propyyli)-S-alanyyli-1S,2R,4S,6S,7R-trisykio^5,2,1,02 ^7-3-atsa-dekaani-4-karboksyylihappo 5 N-(l-S-karboksi-3-fenyyli-propyyli)-S-alanyyli- 1R,2S,4R,6R,7S-trisyklo^5,2,1,02, ^-3-atsa-dekaani-4-karboksyylihappo N-(l-S-karboksi-3-fenyyli-propyyli)-S-alanyyli- IR, 2S,4S,6R,7S-trisyklo^5,2,1,O2'^7-3-atsa -dekaani-4-10 karboksyylihappo N-(l-S-karboksi-3-fenyyli-propyyli)-S-alanyyli- IS, 4R, 6S, 7R-tri sykloni) ,2,1,02, f’<7-3-atsa-dekaani-4-karboksyylihappo muodostuvat saippuoinnin jälkeen, kuten on kuvattu esi-15 merkissä 4, esimerkin 3g diastereomeereistä A', B', C ja D'.

Esimerkki 6 N-(l-S-karbetoksi-3-okso-3-fenyyli-propyyli)-S-alaniini-bentsyyliesteri 20 65,7 g 4-fenyyli-4-okso-buteeni-2-karboksyylihappo- etyyliesteriä (bentsoyyliakryylihappoetyvliesteriä) liuotetaan 225 ml saan etanolia ja siihen lisätään 1 ml trietyyliamiinia. Tähän liuokseen tiputetaan nopeasti huoneen lämpötilassa liuos, jossa on 70 g S-alaniini-25 bentsyyliesteriä 90 mlsssa etanolia. Sekoitetaan 2 tuntia huoneen lämpötilassa ja sitten liuos jäähdytetään.

S,S-isomeeri kiteytyy.

Saanto: 94,3 g; jp.: 73-74°C.

= + 17,8° (c = 1, CH30H) .

30 791 1 6

Esimerkki 7 N-(l-S-karbetoksi-3-okso-3-fenyyli-propyyli)-S-alaniini 0,5 g esimerkin 6 yhdistettä liuotetaan 40 ml:aan 5 etanolia ja lisätään 0,1 g Pd/C:tä 10-%:sena ja hydrataan huoneen lämpötilassa ja normaalipaineessa.

Saanto 300 mg; jp.; 210-220°C.

1H-NMR (DMSO-dg) : 1,0-1,4 (t, 6H); 3,2-5,0 (m, 8H) ; 7,2-8,2 (m, 5H).

10 Esimerkki 8 N-(l-S-karbetoksi-3-okso-3-fenyyli-propyyli)-S- IR, 2R,4S,6S,7S-trisyklo^S ,2,1,0 ' y-3-atsa-dekaani-4-karboksyylihappobentsyyliesteri

Yhdistettä valmistetaan esimerkin le bentsyyli-15 esteriseoksesta ja esimerkin 7 N-(l-S-karbetoksi-3- okso-3-fenyylipropyyli)-S-alaniinista esimerkissä lf kuvatun menetelmän mukaisesti. Diastereomeerit erotetaan silikageelillä.

Esimerkki 9 20 N-(l-S-karbetoksi-3-okso-3-fenyyli-propyyli)-S- alanyyli-lR,2R,4S,6S ,7S-trisyklo/S,2,1,02, ^/-3-atsa-dekaani-4-karboksyylihappo 1 g esimerkin 8 bentsyyliesteriä liuotetaan 30 ml: aan etanolia, hydrataan 100 mg:lla Pd/C:tä (10-%:sta) 25 huoneen lämpötilassa ja normaalipaineessa. Sen jälkeen kun on otettu yksi mooliekvivalentti vetyä,keskeytetään hydraus. Imusuodatetaan katalysaattorista erilleen ja liuos haihdutetaan.

Saanto: 750 mg öljyä.

30 Vastaavasti kuten esimerkeissä 8 ja 9 kuvatuis sa menetelmissä, lähtien esimerkin 3e aminohappobent-syyliestereistä valmistetaan yhdisteitä: N-(l-S-karbetoksi-3-okso-3-fenyyli-propyyli)-S-alanyyli- IS, 2R, 4S, 6S , 7R-trisyklo^S ,2,1,0^' ^-l-atsa-dekaani-i- 35 karboksyylihappo 31 79116 N-(l-S-karbetoksi-3-okso-3-fenyyli-propyyli)-S-alanyyli-lR,2S,4R,6R,7S-trisyklo^5,2,l,02, ^7-3-atsa-dekaani-4-karboksyylihappo N- (l-S-karbetoksi-3-okso-3-fenyyli-propyyli)-S-alanyyli-5 1R, 2S, 4S, 6R, 7S-trisyklo^r5,2,1,02,6</-3-atsa-dekaani-4- karboksyylihappo N-(l-S-karbetoksi-3-okso-3-fenyyli-propyyli)-S-alanyyli-IS,2R,4R,6S,7R-trisyklo^5,2,1,0 'y-3-atsa-dekaani-4-ka r bok s yy 1 ihappo 10 Esimerkki 10 N0CT d-S-karbetoksi-3-fenyyli-propyyli) -S-lysyyli-1R,2R,4S,6S,7S-trisyklo^5,2,1,02,^7~3-atsa-dekaani-4-karboksyylihappo-dihydrokloridi a) N^- (l-S-karbetoksi-3-okso-3-fenyyli-propyyli)- 15 N£-bentsyyli-oksikarbonyyli-S-lysiinibentsyylj- esteri 10 g 4-fenyyli-4-okso-buteeni-2-karboksyylihappoetyy-liesteriä liuotetaan 100 ml:aan etanolia. Tähän lisätään 19,1 g Ng-bentsyylioksikarbonyyli-S-lysiinibent-20 syyliesteriä ja 0,2 g trietyyliamiinia. Liuosta sekoite taan 3 tunnin ajan huoneen lämpötilassa; tämän jälkeen haihdutetaan vakuumissa. öljymäinen jäännös (31 g) liuotetaan isopropanoli/di-isopropyylieetteriin ja jäähdytetään. 13 g Ng-(l-S-karbetoksi-3-okso-3-fenyyli-propyy-25 li)-Ng-bentsyylioksikarbonyyli-S-lysiinibentsyylieste- riä kiteytyy./OoJ^®= 3,5° (c = 1, CH^OH) 1H-NMR (CDC13): 1,0 - 1,4 (tr, 3H)? 1,0-2,0 (m, 9H); 2,0-2,6 (leveä s, 1H); 2,9-3,9 (m, 6H); 3,9-4,4 (q, 2H); 4,6-4,9 30 (leveä s, 1H); 5,0-5,2 (kaksinkertai nen s, 4H) 7,1-8,1 (m, 15H).

b) Na- (l-S-karbetoksi-3-fenyyli-propyyli)-Ng-bentsyylioksikarbonyyli-S-lysiini 4,0 g esimerkissä 10a valmistettua lysiini-bent-35 syyliesteri johdannaista liuotetaan 50 ml .-aan jääetikkaa, 32 7 9 1 1 6 siihen lisätään 0,6 g Pd/C:tä (10-%:sta) ja 0,6 g konsentroitua rikkihappoa. Hydrataan 6 tuntia huoneen lämpötilassa ja normaalipaineessa. Tämän jälkeen imusuodatetaan erilleen katalysaattorista, etanolipitoista liuosta se-5 koitetaan 1,4 g:n kanssa kiinteätä natriumvetykarbonaat- tia. Liuos haihdutetaan rotaatiohaihduttimessa ja jäännös liuotetaan veteen. Vesipitoinen faasi uutetaan etyyliasetaatilla ja metyleenikloridi11a. Orgaaniset faasit heitetään pois ja vesipitoinen faasi haihdutetaan kuiviin 10 vakuumissa. Jäännöstä sekoitetaan metanolin kanssa. Me- tanolin haihduttamisen jälkeen jää jäljelle öljyinen jäännös, joka tulee kiinteäksi käsiteltäessä di-isopro-pyylieetterillä.

N ci- (l-S-karbetoksi-3-f enyyli-propyyli) - S-ly siini, 15 saanto = 2,0 g.

1H-NMR (D20): 1,0 - 1,4 (tr, 3H); 1,0-2,5 (m, 9H), 2.5- 4,4 (m, 9H); 3,9-4,4 (q, 2H) , 4.5- 5,0 (m, 1H); 7,1-7,6 (m, 5H) m/e : 336.

20 3,4 g NQf-(l-S-karbetoksi-3-fenvyli-propyyli)-S- lysiiniä liuotetaan 30 ml:aan metyleenikloridia ja jäähdytetään 0°C:seen. Tähän lisätään jäillä jäähdyttäen 2,1 g trietyyliamiinia ja lopuksi tiputetaan 1,9 g kloorimuu-rahaishappobentsyyliesteriä. Sekoitetaan 1 tunnin 25 ajan 0°C:ssa ja sitten annetaan lämmetä huoneen lämpö tilaan. Metyleenikloridiliuosta ravistellaan lopuksi, veden, natriumkarbonaattiliuoksen ja veden kanssa. Kuivaamisen jälkeen haihdutetaan ja öljyinen jäännös kroma-tografoidaan silikageelillä käyttäen metyleenikloridi/ 30 metanolia. Saadaan 2,0 g Να-(l-S-karbetoksi-3-fenyyli- propyyli) -N^-bentsyylioksikarbonyy1i-S-lysiiniä.

1H-NMR (D20): 1,0-1,4 (tr, 3H); 1,0-2,5 (m, 9H); 2.5- 4,4 (m, 9H) ; 3,9-4,4 (q, 2H) ; 4.5- 5,0 (m, 1H); 5,1 (s, 2H); 35 7,1-7,5 (m, 10H).

j η λ 79116 c) (l-S-karbetoksi-3-fenyyli-propyyli) -Νε,-bent- syylioksi-karbonyyli-S-lysyyli-lR,2R,4S,6S,7S-trisvklo-^ 26' ~ ~ /5,2,1,0__’ ^/-3-atsa-dekaani-4-karboksyylihappobentsyyliesteri 500 mg:n bentsyyliesterlhydrckloridia, valmistettu 5 esimerkissä le, annetaan reagoida 900 mg:n kanssa (l-S-karbetoksi-3-fenyyli-propyyli)-N£-bentsyylioksi-karbonyyli-S-lysiiniä, valmistettu esimerkin 10b mukaisesti, vastaavasti kuten esimerkissä lf. Edelleenkäsit-telyn jälkeen saadaan 1,5 g öljyä, joka on kahden diaste-10 reomeerisen yhdisteen seos.

Diastereomeeri-seos erotetaan pylväskromatografi-sesti silikageelillä käyttäen svkloheksaani/etyyliase-taattia 2:1 eluointiaineena yksittäisiksi komponenteiksi. Ensiksi eluoitu isomeeri on edellä oleva yhdis-15 te. Saadaan 0,6 g öljyä.

1H-NMR (CDC13 H/D-vaihdon jälkeen DjOrlla): 0,9-3,1 (m, 18H); 3,2-5,1 (m, 14H), 5,1-5,3 (ds, 4H) 7,1-7,6 (m, 15H).

d) Ν^χ,- (l-S-karbetoksi-3-fenyyli-propyyli) -S-ly- - .. I I·*· A f· " — - - 20 syyli-lR,2R,4S,6S,7S-trisyklo/^ ,2,1,0 ’ ^-3-atsa-dekaa- ni-karboksyylihappo-dihydrokloridi 500 mg Ncx-(l-S-karbetoksi-3-fenyyli-propyyli)-N£,- oksikarbonyyli-S-lysyyli-lR,2R,4S,6S,7S-trisyklo-2 6 /¾ ,2,1,0 ' <7-3-atsa-dekaani-4-karboksyylihappobentsyyli-25 esteriä esimerkistä 10 c liuotetaan 20 ml:aan etanolia ja lisäten 0,1 g 10-%:sta Pd/C:tä bentsyloidaan normaalipaineessa hydrogenolyyttisesti. Vedynoton päätyttyä suodatetaan erilleen katalysaattorista, etanolipi-toiseen liuokseen lisätään etanolipitoista kloorivety-30 liuosta kunnes pH on 1, etanoli haihdutetaan vakuumissa.

Jäännökseen lisätään di-isopropvylieetteriä, jolloin tuote tulee kiinteäksi. Saadaan 200 mg.

NMR (D20): 1,0-3,1 (m, 18H); 3,1-5,2 (m, 14H) 7,2 (s, 5H) .

34 791 1 6

Esimerkki 11

Vastaavasti kuten esimerkissä 10c kuvatussa menetelmässä saadaan antamalla esimerkin 3e aminohappo-bentsyyliesterin reagoida No,- (l-S-karbetoksi-3-f enyyli-5 propvyli)-Ng-bentsyylioksikarbonyyli-S-lysiinin kanssa, (kuvattu esimerkissä 10b) seuraavia yhdisteitä:

Noo- (l-karbetoksi-3-fenyyli-propyyli) -lNg-bentsyylioksi-karbonyyli-S-lysvyli-lS,2R,4S,6S,7R-tri syklo/1},2,1,02'^- 3-atsa-dekaani-4-karboksyylihappobentsyyliesteri (diaste-10 reomeeri E) N(X~ (l-S-karbetoksi-3-fenyyli-propyyli)-N^-bentsyyli- oksikarbonyyli-S-lysyyli-lR,2S,4R,6R,7S-trisyklo-2 6 /5,2,1,0 ' </-3-atsa-dekaani-4-karboksyylihappobentsyyli-esteri Idiastereomeeri F) 15 NcC" (l-S-karbetoksi-3-fenyyli-propyyli)-Ne-bentsyylioksi- O C\ karbonyyli-S-lysyyli-lR, 2S, 4S, 6R, 7S-trisyklo-/*5,2,1,0 ' )- 3-atsa-dekaani-4-karboksyylihappobentsyyliesteri (diastereomeeri G)

Not- (l-S-karbetoksi-3-fenyyli-propyyli)-N^-bentsyylioksi-20 karbonyyli-S-lysyyli-lS,2R,4R,6S,7R-trisyklo/5,2,1,0 ' )- 3-atsa-dekaani-4-karbo ksyylihappobentsyyliesteri (diastereomeeri H) .

Kun otetaan lS,2S,4S,6R,7R-trisyklo^,2,l,02'^- 3-atsa-dekaani-4-karbonihappobentsyvliesteri, niin saa- 25 daan vastaavasti Not-(l-S-karbetoksi-3-fenvyli-propyyli)-

Ng-bentsyylioksikarbonyyli-S-lysyyli-IS,2S,4S,6R,7R- 2 6 trisyklo/ΐ,2,1,0 ' <</-3-atsa-dekaani-4-karboksyylihappobent-syyliesteri (diastereomeeri K).

Esimerkki 12 30 Kun diastereomeerit E, F, G, H, K hydrataan esi

merkissä lOd kuvatun menetelmän mukaisesti, niin saadaan diastereomeeristä E

Nctr (l-S-karbetoksi-3-fenyyli-propyyli) -S-lysyyli-1S,2R,4S,6S, 7R-trisyklo^ ,2,1,02, *^/-3-a tsa-dekaani-4 - karb-35 oksyylihappo-dihydrokloridi (diastereomeeri E1) 1H-NMR (D20) : 0,9 - 3,0 (m, 18H) , 3,0-4,9 (m, 14H) , 7,2 (s, 5H) .

35 79 1 1 6

diastereomeeristä F

N<*- (l-S-karbetoksi-3-fenyyli-propyyli)-S-lysyyli-lR,2S,4R, 2 6 6R, 7S-trisyklo^3,2,1,0 ' ^-3-atsa-dekaani-4-karbo.ksyylihap-po-dihydrokloridi (Diastereomeeri F') 5 1H-NMR (D20) : 1,0-3,2 (m, 18H) ; 3,2-5,1 (m 14H) ;

7.1 (s, 5H), diastereomeeristä G

Net- (l-S-karbetoksi-3-fenyyli-propyyli) -S-lysyyli-1R,2S,4S,6R,7S-trisyklo^5,2,1,02, ^/-3-atsa-dekaani-4-karb-10 oksyylihappo-dihydrokloridi (Diastereomeeri G') 1H-NMR (D20): 1,0 - 3,3 (m, 20H); 3,4-5,0 (m, 12H);

7.2 (s,5H), diastereomeeristä H

Ν<χ- (l-S-karbetoksi-3-fenyyli-propyyli) -S-lysyyli-15 1S,2R,4R,6S,7R-trisyklo^5,2,1,02,^7~3-atsa-dekaani-4-karb- oksyylihappo-dihydrokloridi (Diastereomeeri H') 1H-NMR (D20): 0,9 - 3,0 (m, 18H); 3,0-4,9 (m, 14H);

7.2 (s, 5H) diastereomeeristä K

20 No,- (l-S-karbetoksi-3-fenyyli-propyyli) -S-lvsyyli- 1S , 2S, 4S, 6R, 7R-trisyklo^”5,2,1,02,6^-3-atsa-dekaani-4- karbok-syylihappo—dihydrokloridi (Diastereomeeri K') 1H-NMR (D20): 1,0-3,1 (m, 18H); 3,0 - 4,8 (m, 14H); 7.2 (s, 5H).

25 Esimerkki 13

Noo- (l-S-karboksi-3-fenyyli-propyyli)-S-lysvyli-1R,2R,4S,6S, 7S-trisyklo/S , 2,1, O2'6</-3-atsa-dekaani-4- karb-oksyylihappo-hydrokloridi 0,5 g esimerkin lOd etyyliesteridihydrokloridia 30 suspendoidaan 20 ml:aan dimetoksietaania. Lisätään vesi pitoista 4~n K0H:ta, kunnes pH-arvo on 9-10. Sekoitetaan puolen tunnin ajan. Tämän jälkeen pH säädetään suolahapolla arvoon 4, haihdutetaan kuiviin vakuumissa, jäännös liuotetaan etyyliasetaattiin ja suodatetaan. Etyyliase-55 taattiliues haihdutetaan; jäännöstä hierretään di-iso- propyylieetterin kanssa, jolloin se kiteytyy.

Saanto: 300 mg 36 7 9 1 1 6 1H-NMR (D20): 0,9 - 2,9 (m, 15H); 3,0 - 4,9 (m, 12H); 7.2 (s, 5H).

Esimerkki 14

Vastaavasti kuten esimerkissä 13 kuvatussa mene-5 telmässä, valmistetaan lähtien diastereomeereistä E', F', G', H' ja K', seuraavia dikarboksyylihappoja: NQt~ (l-S-karboksi-3-fenyyli-propyyli-S-lysyyli-1S,2R,4S,6S,7R-trisykio^5,2,1,02,^/-3-atsa-dekaani-4-karb-oksyylihappohydrokloridi 10 1H-NMR (D20); 1,0-3,0 (m, 15H), 3,0-5,0 (m, 12H); 7.2 (s, 5H) N<^- (l-S-karboksi-3-fenyyli-propyyli) -S-lysyyli- 1R,2S,4R,6R,7S-trisyklo^5,2,1,02, ^7-3-atsa-dekaani-4-karb- oksyylihappohydrokloridi 15 No(,- (l-S-karboksi-3-fenyyli-propyyli) -S-lysyyli- IR, 2S,4S,6R,7S-trisyklo,2,1,02,^/-3-atsa-dekaani-4-karb-oksyylihappohydrokloridi 1H-NMR (D20) : 1,0-3,3 (m, 16H) , 3,3-5,0 (m, UH) , 7.2 (s, 5H) 20 N07(l-S-karboksi-3-fenyyli-propyyli)-S-lysyyli- IS, 2R,4R,6S, 7R-trisyklo^"5,2,1,02, ^/-3-atsa-dekaani-4- karb-oksyylihappohydrokloridi Να· (l-S-karboksi-3-fenyyli-propyyli)-S-lysyyli-1S,2S,4S,6R,7R-trisyklo^>,2,1,02,^/~3-atsa-dekaani-4- karb-25 oksyylihappohydrokloridi 1H-NMR (D20): 1,0-3,1 (m, 15H); 3,1-4,9 (m, 12H); 7,2 (s, 5H).

Esimerkki 15 S-alanyyli-lR,2R,4S,6S,7S-trisyklo/S,2,l,02,67-30 3-atsa-dekaani-4-karboksyylihappo-tert.-butyyliesteri a) l:l-seos, joka koostuu 1R,2R,4S,6S,7S-trisyklo-^5,2,1,0 ' </-3-atsa-dekaani-4-karboksyylihappo-tert.-butyy-liesteristä ja vastaavasta peilikuvaisomeeristä 2,5 g:n aminohappoa esimerkistä Id annetaan 35 reagoida 30 ml:ssa dioksaania 30 ml:n isobutyleeniä 37 79116 ja 2,5 ml:n konsentroitua rikkihappoa kanssa. Sen jälkeen kun on annettu seistä 14 tunnin ajan huoneen lämpötilassa, seos saatetaan NaOH:lla alkaliseksi, haihdutetaan vakuumissa, lisätään 20 ml vettä ja esteriä ravis-5 teilaan metyleenikloridin kanssa. Metyleenikloridin haihduttamisen jälkeen saadaan 2,0 g väritöntä öljyä. 1H-NMR: 0,9-3,0 (m, 6H)? 1,4 (s, 9H); 3,1-4,9 (m, 7H) (H/D-vaihdon jälkeen) b) N-bentsyylioksikarbonyyli-S-alanyyli- 10 1R,2R,4S,6S,7S-trisykloni ,2,1,0^'^7~3-atsa-dekaani-4-karb- oksyylihappo-tert.-butyyliesteri

Liuokseen, jossa on 1 g Z-Ala-0H:ta 10 ml:ssa dimetyyliformamidia, lisätään 0,67 g 1-hydroksi-bents-triatsolia ja 1,47 g esimerkissä 15a valmistettua tert.- 15 butyyliesteriä. pH saatetaan N-etyylimorfoliinilla ar voon 8,0. Seos jäähdytetään jäähauteella ja siihen lisätään 1,05 g disykloheksyylikarbodi-imidiä. Sekoitetaan 15 tunnin ajan 20-25°C:ssa. Saostunut urea imusuoda-tetaan, suodos haihdutetaan vakuumissa ja liuotetaan etyy- 20 liasetaattiin. Orgaaninen faasi pestään peräkkäin kaliumvetvsulfaatti-, kaliumvetykarbonaatti- ja natrium-kloridi-liuoksella, kuivataan ja haihdutetaan. Jäännös kromatografoidaan silikageelillä käyttäen etyyliasetaatti/ sykloheksaania 1:1, diastereomeerien erottamiseksi.

25 Saanto: 0,7 g N-bentsyylioksikarbonyyli-S-alanyyli- o a 1R,2R,4S,6S,7S-trisyklo^5,7.1,0 ' y7-3-atsa-dekaani-4-karb-oksyylihappo-tert.-butyyliesteriä.

c) S-alanyyli-lR,2R,4S,6S,7S-trisyklo^,2,1,0^' 3-atsa-dekaani-4-karboksyylihappo-tert.-butyyliesteri 30 1,2 g tert.-butyyliesteriä esimerkistä 15b liuotetaan 20 ml:aan etanolia ja hydrataan huoneen lämpötilassa ja normaalipaineessa 100 mg:11a Pd/C:tä (10-%:sta). Imusuodatetaan katalysaattorista erilleen ja jäännös haihdutetaan vakuumissa.

35 Saanto: 0,8 g väritöntä öljyä.

33 791 1 6 ^H-NMR (H/D-vaihdon jälkeen): 0,9-3,1 (m, 6H) ; 1,2 (d, 3H) ; 1,4 (s, 9H) ; 3,1-5,0 (m, 8H) .

Esimerkki 16 N-(1—S,R-karbetoksi-3-okso-3-fenyyli-propyyli)-S-5 alanyyli-lR, 2R, 4S, 6S, 7S-trisyklo^ ,2,1, p2'6^-3-atsa-de- kaani-4-karboksyylihappo-tert.-butyyliesteri Tätä yhdistettä valmistetaan esimerkin 15b yhdisteestä käyttäen bentsoyyliakryylihappoetyyliesteriä vastaavasti kuten esimerkissä 10a kuvatussa menetelmässä.

10 Esimerkki 17 N-(l-S,R-karbetoksi-3-okso-3-fenyyli-propyyli)-S-alanyyli-lR,2R,4S,6S,7S-trisyklo^> ,2,1,02,^-3-atsa-dekaani-4-karboksyylihappo-trifluoriasetaatti 0,5 g esimerkissä 16 valmistettua tert.-butyyli-15 esteriä liuotetaan 5 mlraan trifluorietikkahappoa ja sekoitetaan 30 min. ajan huoneen lämpötilassa. Tämän jälkeen trifluorietikkahappo poistetaan tislaten vakuumissa ja jäännöstä hierretään di-isopropyylieetterin kanssa. Saanto: 0,25 g kiinteätä jäännöstä.

20 ^H-NMR (H/D-vaihdon jälkeen): 1,0-3,2 (m, 12H), 3,3-4,9 (m, 13H); 7,2-8,2 (m, 5H).

Esimerkki 18 N-(1-S,R-karbetoksi-3-okso-3-fenyyli-propyyli)- S-alanyyli-lR,2R,4S,6S,7S-trisyklo^5,2,1,02,6/-3-atsa-25 dekaani-4-karboksyylihappo-tert.-butyyliesteri 5 millimoolia asetofenonia, 5 millimoolia gly-oksyylihappoetyyliesteriä ja 5 millimoolia tert.-butyyliesteriä esimerkistä 14c kuumennetaan 15 ml:ssa jääetikkaa 36 tunnin ajan 45°C:ssa. Sen jälkeen kun on 30 haihdutettu vakuumissa, seos saatetaan natriumbikarbonaatti- liuoksella neutraaliksi ja uutetaan etyyliasetaatilla. Etyyliasetaattifaasi haihdutetaan ja kromatografoidaan silikageelillä käyttäen etyyliasetaatti/sykloheksaania (1:1) eluointiaineena.

39 791 1 6

Esimerkki 19 N-(l-S-karbetoksi-3-fenyyli-propyyli)-S-alanyyli-1R, 2R, 4S, 6S,7S-trisyklo^> ,2,1,0^' ^/-3-atsa-dekaani-4-^arb^ oksyylihappo-tert.-butyyliesteri 5 5 millimoolia esimerkin 15c tert.-butyyliesteriä liuotetaan 15 ml:aan vedetöntä etanolia. Liuoksen pH saatetaan etanolipitoisella kaliumhydroksidilla arvoon 7,0 ja lisätään 0,7 g jauhettua molekyyliseulaa (4A) ja lopuksi 5 millimoolia 2-keto-4-fenyylivoihappo-10 etyyliesteriä. Sitten tiputetaan hitaasti liuos, jossa on 0,6 g natriumsyanboorihvdridiä 6 ml:ssa vedetöntä etanolia. Sen jälkeen kun reaktio or kestänyt 20 tuntia 20 - 25°C:ssa, liuos suodatetaan ja liuotin tislataan. Jäännös liuotetaan etyyliasetaatti/veteen. Sen jälkeen kun 15 etyyliasetaattifaasi on haihdutettu, jäännös kromatografoi-daan silikageelillä käyttäen etyyliasetaatti/sykloheksaania (1:4) .

1H-NMR: 1,0-3,0 (m, 16H); 1,4 (s, 9H); 3,0-5,0 (m, llH); 7,2 (s, 5H) (H/D-vaihdon jälkeen).

20 Esimerkki 20 N-(l-S-karbetoksi-3-fenyyli-propyyli)-S-alanyyli--—-- 1R,2R,4S,6S,7S-trisyklo^5,2,1,0' /-3-atsa-dekaani-4-karb-oksyylihappo-hydrokloridi 0,4 g esimerkissä 19 valmistettua tert.-butyyli-25 esteriä liuotetaan 5 mlraan trifluorietikkahappoa ja sekoitetaan 30 min. ajan huoneen lämpötilassa. Tämän jälkeen trifluorietikkahappo poistetaan tislaten vakuumis-sa. Jäännös liuotetaan vesi/metanoliin, digeroidaan ase-taatilla täytetyllä ioninvaihtajalla, kunnen pH-arvo on 30 noin 5. Ioninvaihtaja suodatetaan ja liuoksen ph saate taan etanolipitoisella suolahapolla arvoon 1. Liuotin poistetaan vakuumissa ja jäännöstä hierretään eetterin kanssa. Saanto: 0,25 g

Rjr = 0,42 (S1O2: metvleenikloridi/metanoli 8:2).

40 79116

Esimerkki 21 O-etyyli-S-tyrosinyyli-lR,2R,4S,6S,7S-trisyklo-(%, 2,1,0 ' <7-3-atsa-dekaani-4-karboksyylihappo--tert.-bu-tyyliesteri 5 a) N-bentsyylioksikarbonyyli-O-etyyli-S-tyrosi- nyyli-lR,2R, 4S , 6S, 7S-trisyklo/'5,2,1,0 ' </~3~atsa-dekaa-ni-4-karboksyylihappo-tert.-butyyli

Yhdistettä valmistetaan O-etyyli-Z-tvrosiini-0H:sta ja tert.-butyyliesteristä, joka on kuvattu esi-10 merkissä 15a, vastaavasti kuten esimerkissä 15b kuvatussa menetelmässä. Diastereomeerit erotetaan silikagee-lillä käyttäen sykloheksaani/etyyliasetaattia.

1H-NMR (H/D-vaihdon jälkeen): 0,9 - 3,0 (m, UH) ; 1,4 (s, 9H); 3,0-4,9 (m, 12H); 6,6-7,0 (m, 4 H); 15 7,2 (s, 5H).

b) O-etyyli-S-tyrosinyyli-lR,2R,4S,6S,7S-tri-syklo/5,2,1,0^'^/-3-atsa-dekaani-4-karboksyylihappo-tert.-butyyliesteri (Diastereomeeri 1).

Yhdistettä valmistetaan hydraamalla esimerkin 20 21a tert.-butyyliesteri vastaavasti kuten esimerkis sä 15c.

1H-NMR (H/D-vaihdon jälkeen): 1,0-3,1 (m, 11H); 1,3 (s, 9H); 3,1-4,9 (m, 10H); 6,6-7,0 (m, 4H).

Vastaavasti kuten esimerkissä 21 kuvatussa mene-25 telmässä saadaan vastaavista lähtöaineista seuraavia yhdisteitä: 0-etyyli-S-tyrosinyyli-lS,2S,4S,6R,7R-trisyklo-2 6 > ^5,2,1,0 ' </-3-atsa-dekaani-4-karboksyylihappo-tert.-butyyliesteri (Diastereomeeri 2) 3 0 O-etyyli-S-tyrosinyyli-lR, 2S , 4S , 6R, 7S-trisyklo- ζ5,2,1,0^' ^?-3-atsa-dekaani-4-karboksyylihappo-tert.-butyyliesteri (Diastereomeeri 3) 0-etyyli-S-tyrosinyyli-lS,2R,4S,6S,7R-trisyklo- 2 g \ /5,2,1,0 ' 7-3-atsa-dekaani-4-karboksyylihappo-tert.-butyy-35 liesteri (Diastereomeeri 4).

4i 79116

Esimerkki 22 N-(l-S-karbetoksi-3-okso-3-fenyyli-propyyli)-/T)-etyyli-S-tyrosinyyli/-lR, 2R, 4S, 6S, 7S-trisyklo- -2-g»——--—- * > 2,1, QZ ' V~3 -atsa-dekaani-4-karbo ksyylihappo-tert. -butyy-5 liesteri (Diastereomeeri 1').

Tätä yhdistettä saadaan esimerkin 21b diastereo-meeristä 1 ja bentsoyyliakryylihappoetyyliesteristä vastaavasti kuten esimerkissä 10a kuvatussa menetelmässä .

10 Vastaavasti kuten tässä menetelmässä saadaan diastereomeereistä 2, 3 ja 4 seuraavat yhdisteet: N- (l-S-karbetoksi-3-okso-3-fenyvli-propyyli) -^"0-etyyli-s-tyrosinyyli^Z-lS, 2S, 4S, 6R, 7R-trisyklo^*5,2,1,0 ' J-3-atsa-dekaani-4-karb oksyylihappo-tert.-butyyliesteri 15 (Diastereomeeri 2').

N-(l-S-karbetoksi-3-okso-3-fenyvli-propyyli)-/0-etyyli- S-tyrosinyyli/-lR,2S,4S,6R,7S-trisyklo£5,2,1,0 ' )-3-atsa-dekaani-4-karbo ksyylihappo-tert.-butyyliesteri (Diastereomeeri 3’).

20 N- (l-S-karbetoksi-3-okso-3-fenyvli-propyvli)-^O-etyyli- S-tyrosinyyl i^-lS,2R,4S,6S,7R-trisyklo^, 2,1,02,67"3“ atsa-dekaani-4-karbo ksyylihappo-tert.-butyyliesteri (Diastereomeeri 41).

Esimerkki 23 25 N-(l-S-karbetoksi-3-okso-3-fenyyli-propyyli)- /O-etyyli-S-tyrosinvyli/-lR,2R,4S,6S,7S-trisyklo-2 6 /5, 2,1,0' 7~3~^tsa-dekaani-4-karb oksyylihappo-trifluori-asetaatti

Esimerkin 22 diastereomeerin 1' annetaan reagoida 30 esimerkissä 17 kuvatun menetelmän mukaisesti.

^H-NMR (H/D-vaihdon jälkeen): 1,0-3,1 (m, 16H) ; 3,1-4,9 (m, 13H); 6,6-7,0 (m, 4H) ; 7,2 (s, 5H) .

Tämän menetelmän mukaisesti saadaan diastereomeereistä 2', 3' ja 4' seuraavia yhdisteitä: 35 N-(l-S-karbetoksi-3-okso-3-fenyyli-propyyli)-A)-e tyyli-

^ O C

S-tyrosinyvli/-lS , 2S , 4S , 6R, 7R-tr isyklo^ ,2,1,0^' 42 791 1 6 atsa-dekaani-4-karboksyylihappo-trifluoriastetaatti N- (l-S-karbetoksi-3-okso-3-fenyyli-propyyli) -/”0-etyyli-S-tyrosinyyli7-lR,2S,4S,6R,7S-trisyklo/7>, 2,1,0 ' ,7-3-atsa-dekaani-4-karboksyylihappo-trifluoriasetaatti 5 N- (l-S-karbetoksi-3-okso-3-fenyyli-propyyli) -^fO-etvyli- S-tyrosinyyli/-lS , 2R, 4S , 6S , 7R-trisyklo^T>,2,1,0 ' J-3-atsa-dekaani-4-karboksyylihappo-trifluoriasetaatti

Esimerkki 24 N- (l-S-karbetoksi-3-fenyyli-propyyli) -/~0-etvvli-10 S-tyrosinyyli/-lR, 2R, 4S,6S,7S-trisyklo/5,2,1,0^^-3- atsa-dekaani-4-karboksyylihappo-tert.-butyyliesteri (Diastereomeeri 1).

Tätä yhdistettä saadaan esimerkin 21b yhdisteestä ja 2-keto-4-fenyyli-voihappoetyyliesteristä vastaavasti 15 kuten esimerkissä 19 kuvatussa menetelmässä.

^H-NMR (H/D-vaihdon jälkeen): 1,0-3,0 (m, 18H); 1,4 (s, 9H), 3,1-5,0 (m, 13H), 6,6-7,0 (m, 4H); 7,2 (s, 5H).

Vastaavasti kuten tässä menetelmässä saadaan esimerkin 21 diastereomeereistä 2, 3 ja 4 ja 2-keto-4-fe-20 nyyli-voihappo-etyyliesteristä seuraavia yhdisteitä: N-(l-S-karbetoksi-3-fenyyli-propyyli)-^Ö-etyyli-S-tyrosinyyliy-lS,2S,4 S,6R,7R-trisyklo^5,2,1,0^'^3-atsa-dekaani-4-karboksyylihappo-tert.-butyyliesteri (Diastereomeeri 2) 25 ^H-NMR (H/D-vaihdon jälkeen): 1,0-3,0 (m, 18H); 1,4 (s, 9H); 3,0-4,9 (m, 13H)? 6,6-7,0 (m, 4H); 7,2 (s, 5H) N-(l-S-karbetoksi-3-fenyyli-propyyli)-/0-etyyli-S-tyrosi-nyyli^-lR, 2S, 4S, 6R, 7S-trisyklo^75,2,1,02,6_/-3-atsa-de-kaani-4-karboksyylihappo-tert.-butyyliesteri 30 (Diastereomeeri 3) ^H-NMR (H/D-vaihdon jälkeen): 1,0-3,0 (m, 18H); 1,4 (s, 9H); 3,0-5,0 (m, 13H); 6,6-7,0 (m, 4H); 7,2 (s, 5H) N-(l-S-karbetoksi-3-fenyyli-propyyli)-^0-etyyli-S- n r (Diastereomeeri 4) tyrosinyyli^-lS,2R,4S,6S,7R-trisyklo£5,2,1,0 ' ,7-3-atsa- 35 dekaani-4-karboksyylihappo—tert.-butyyliesteri 43 79 1 1 6 ^H-NMR (H/D-vaihdon jälkeen): 0,9-3,1 (m, 18H); 1,4 (s, 9H); 3,2-4,9 (m, 13H); 6,6-7,0 (m, 4H); 7,2 (s, 5H).

Esimerkki 25 N-(l-S-karbetoksi-3-fenyyli-propyyli)-/Q-etyyli- 5 S-tyrosinyyli^-lR^R^S^S^S-trisyklo^S^,! ,0 ' 7-3- atsa-dekaani-4-karboksyylihappo-hydrokloridi

Antamalla esimerkin 24 tert.-butyyliesterin reagoida trifluorietikkahapon kanssa vastaavasti kuten esimerkissä 20 kuvatussa menetelmässä saadaan karboksyylihappo.

•j 10 H-NMR (H/D-vaihdon jälkeen): 1,0-3,1 (m, 18H); 3,1-5,0 (m, 13H); 6,6-7,0 (m, 4H); 7,2 (s, 5H).

Vastaavasti saadaan esimerkin 24 diastereomee-reistä 2, 3 ja 4 seuraavia yhdisteitä: N- (l-S-karbetoksi-3-fenyyli-oropyyli) -/’"Or-etyy li-S-tyro-15 sinyyli/-lS,2S,4 S ,6R,7R-tri syklo ^"5,2,l,0^,6/-3-atsa- dekaani-4-karboksyylihappo-hydrokloridi ^H-NMR (H/D-vaihdon jälkeen): 0,9-3,0 (m, 18H), 3,04-4,9 (m, 13H); 6,6-7,0 (m, 4H); 7,2 (s, 5H) N- (l-S-karbetoksi-3-fenyyli-propyyli)-/'Ö-etyyli-S-20 tyrosinyyli/-lR,2S,4S,6R,7S-trisyklo/5,a,l,02'67-3- atsa-dekaani-4-karbo.ksyylihappo-hydrokloridi ‘'‘H-NMR (H/D-vaihdon jälkeen): 1,0-2,9 (m, 18H) ; 3,0-4,9 (m, 13H); 6,6-7,0 (m, 4H); 7,2 (s, 5H) N- (l-S-karbetoksi-3-fenyyli-propyyli) -/tl-etyyli-S-25 tyrosinyyli/-lS, 2R,4S, 6S,7R-trisyklo</'5,2,1,02, V-3- atsa-dekaani-4-karboksyylihappo-hydrokloridi '"H-NMR (H/D-vaihdon jälkeen): 1,0-3,1 (m, 18H) ; 3,1-5,0 (m, 13H); 6,6-7,0 (m, 4H); 7,2 (s, 5H).

Claims (13)

44 791 1 6

1. Menetelmä kaavan I mukaisten terapeuttisesti käyttökelpoisten trisyklisten aminohappojen ja niiden 5 fysiologisesti hyväksyttävien suolojen valmistamiseksi, H —i 10 C02r I H 0/\. . Ϊ

15. CH-NH-CH-(CH0) -C-X I I I 1 2 R C02R Z jossa 20 n = 0 tai 1, A = -CH=CH- tai -CH2-CH2-, R = vety, (C^-Cg)-alkyyli tai aralkyyli, jossa on 7 - 9 C-atomia, R1 = (C^-Cg)-alkyyli, joka voi olla mahdollisesti substi- 25 tuoitu aminolla, (C^-C4)-asyyliaminolla, bentsoyyliami- nolla tai bentsyylioksikarbonyyliaminolla, tai (Cg-C^2)- aryyli-(C^-C^)-alkyyli, joka on substituoitu (C^ tai C2>- alkoksilla, 2 R = vety tai (C^-Cg)-alkyyli, 30. ja Z merkitsevät kumpikin vetyä tai Y ja Z merkitsevät yhdessä happea, ja X = (Cg-C^2)-aryyli, joka voi olla mono-, di- tai tri-substituoitu (C^-C4)-alkyylillä, (C^-C4)-alkoksilla, hydroksilla, halogeenilla, nitrolla, aminolla, (C^-C^)-35 alkyyliaminolla, di-(C^-C^)-alkyyliaminolla ja/tai mety- leenidioksilla, tunnettu siitä, että 45 791 1 6 a) yhdisteen, jolla on kaava II Y HO-C-CH-NH-CH-(CHn) -C-X II

2. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että valmistetaan kaavan I mukainen yhdiste, jossa sillanpää-C-atomeissa 2 ja 6 olevat vetyatomit ovat toisiinsa nähden cis-konfiguraatiossa,

2. I 2'n I R1 CO-R2 Z 5 1 2 jossa n, R , R , X, Y ja Z merkitsevät samaa kuin kaavassa I, annetaan reagoida yhdisteen kanssa, jolla on kaava III

10 H Cfck ^ C02w

15 H H jossa W = vetv tai happamesti tai emäksisesti tai hydrogeno-lyyttisesti lohkaistava ryhmä, edullisesti C^-Cg-alkyyli (esimerkiksi tert.-butyyli) tai C^-Cg-aralkyyli (esimerkik-— 20 si bentsyyli), ja lopuksi mahdollisesti W ja/tai R2 loh- : kaistaan vapaiden karboksiryhmien muodostamiseksi, tai b) kaavan I mukaisten yhdisteiden valmistamiseksi, joissa Y ja Z merkitsevät yhdessä happea, ; b^) yhdisteen, jolla on kaava IV : 25 " A \ 2 jU | CU2 IV H CO-CH-NH- 30 < 1 R jossa R^ ja A merkitsevät samaa kuin kaavassa I ja W merkitsee samaa kuin kaavassa III, annetaan reagoida yhdisteen kanssa, jolla on kaava V 35 R202C-CH=CH-C0-X V 2 jossa R ja X merkitsevät samaa kuin kaavassa I, ja 46 791 1 6 lopuksi mahdollisesti W ja/tai R lohkaistaan vapaiden karboksiryhmien muodostamiseksi, tai b2) kohdassa b^) mainitun kaavan IV mukaisen yhdisteen annetaan reagoida kaavan VI mukaisen yh- 2 5 disteen kanssa, jossa R merkitsee samaa kuin kaavas sa I , ja kaavan VII mukaisen yhdisteen kanssa, ohc-co2r2 x-co-xh3 10 (VI) (VII) jossa X merkitsee samaa kuin kaavassa I, ja lopuksi mah- 2 dollisesti W ja/tai R lohkaistaan vapaiden karboksiryhmien muodostamiseksi, tai c) kaavan I mukaisten yhdisteiden valmistamisek-15 si, joissa Y ja Z merkitsevät kulloinkin vetyä, annetaan kohdassa b^) mainitun kaavan IV mukaisen yhdisteen reagoida yhdisteen kanssa, jolla on kaava VIII CO„R2 20 0=C VIII ch2-ch2-x 2 jossa R ja X merkitsevät samaa kuin kaavassa I, saadut Schiff-emäkset pelkistetään ja lopuksi mahdollisesti 2 25 lohkaistaan W ja/tai R vapaiden karboksiryhmien muodostamiseksi , minkä jälkeen kohtien a) - c) mukaan saadut kaavan I mukaiset yhdisteet, joissa R on vety, muutetaan mahdollisesti kaavan I mukaisiksi estereiksi, joissa R 30 on (C^-Cg)-alkyyli tai (C^-Cg)-aralkyyli, ja kaavan I mukaiset yhdisteet muutetaan mahdollisesti niiden fysiologisesti hyväksyttäviksi suoloiksi. 47 791 1 6

3. Patenttivaatimuksen 1 tai 2 mukainen menetelmä, 10 tunnettu siitä, että valmistetaan kaavan I mukainen yhdiste, jossa kaavan I 4-asemassa olevalla C-atomil-la sekä sivuketjun tähdellä merkityillä C-atomeilla on kulloinkin S-konfiguraatio.

4. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, 15 tunnettu siitä, että valmistetaan N-(1-karbetoksi- 2 6 3-fenyyli-propyyli)-alanyyli-trisyklo (5,2,1,0 ' )-3-atsa-dekaani-4-karboksyylihappo-hydrokloridi.

5. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että valmistetaan N-(l^karboksi-3- 2 6 20 fenyyli-propyyli)-alanyyli-trisyklo (5,2,1,0 ' )-3-atsa-dekaani-4-karboksyylihappo.

5 C-atomeissa 2 ja 6 oleva pyrrolidiinirengas on orientoi tunut endo- tai ekso-asemaan bisykliin nähden ja C-atomis-sa 4 oleva ryhmä -CC^R on orientoitunut cis- tai trans-asemaan C-atomissa 2 olevaan H-atomiin nähden.

6. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että valmistetaan Ν<χ, - (1-karb- 2 6 etoksi-3-fenyyli-propyyli)-lysyyli-trisyklo (5,2,1,0 ' )-25 3-atsa-dekaani-4-karboksyylihappo-dihydrokloridi.

7. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että valmistetaan Nq£ - (1-karboksi- 2 6 3-fenyyli-propyyli)-lysyyli-trisyklo (5,2,1,0 ' )-3-atsa- dekaani-4-karboksyylihappo-hydrokloridi.

8. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että valmistetaan N-(1-karbetoksi- . . 3-fenyyli-propyyli)-(0-etyyli-tyrosinyyli)-trisyklo- 2 6 (5,2,1,0 ' )-3-atsa-dekaani-4-karboksyylihappo-hydroklori-di. 48 791 16

9. Yhdisteet, tunnetut siitä, että niillä on kaava III H 5 -"/H4—i A ( 2 JL m N c0^w H H 10 jossa C-atomeihin 2 ja 6 kiinnittyneet H-atomit ovat toisiinsa nähden cis-konfiguraatiossa ja C-atomiin 4 kiinnittynyt ryhmä -CC^W on orientoitunut cis- tai trans-asemaan C-atomissa 2 olevaan H-atomiin nähden ja pyrrolidiiniren-gas on orientoitunut ekso- tai endo-asemaan bisykliseen 15 rengassysteemiin nähden, ja jossa W on vety, tert.-butyyli tai bentsyyli, ja A on -CH=CH tai -Cl^-Cf^- .