FI78678C - Foerfarande foer framstaellning av terapeutiskt anvaendbara naftokinonderivat, och vid foerfarandet anvaendbara mellanprodukter. - Google Patents

Description

! 78678

Menetelmä terapeuttisesti käyttökelpoisten naftokinonijohdannaisten valmistamiseksi, ja menetelmässä käyttökelpoisia välituotteita 5 Jakamalla erotettu hakemuksesta nro 823531

Keksinnön kohteena on menetelmä terapeuttisesti käyttökelpoisten kaavan (I) mukaisten naftokinonijohdannaisten ja niiden farmaseuttisesti hyväksyttävien suolojen valmis-10 tamiseksi, 20 jossa R on suoraketjuinen C^_^-alkyyli. Kaavan (I) mukaiset naftokinonit ovat käyttökelpoisia alkueläimien aiheuttamien, ihmisten ja eläinten infektioiden kemoterapiassa.

2-substituoiduilla 3-hydroksi-l,4-naftokinoneilla on viime aikoina kuvattu olevan alkueläinten vastainen vaiku-. 25 tus, erityisesti malarian vastainen vaikutus ja, pienem- mässä määrin, itiöloisten vastainen vaikutus. Siten Fieser et ai. (J. Amer. Chem. Soc. 70 (1948) 3156) ovat kuvanneet muutamia satoja tällaisia yhdisteitä malarian vastaisesti vaikuttavina. Sellaisia näistä yhdisteistä, joissa syklo-30 alkyyliryhmä oli kiinnittynyt kinonirenkaaseen, pidettiin erityisen aktiivisina, ja niitä on kuvattu US-patenttijulkaisussa nro 2 553 648. Joitakin näistä yhdisteistä annet-- tiin ihmisille, mutta annetuilla yhdisteillä oli se heik kous, että tarvittiin suuria annoksia terapeuttisen vaiku-35 tuksen aikaan saamiseksi ihmisellä. Sen jälkeen huomio siirtyi yhdisteisiin, joissa oli w-sykloheksyylialkyylisi-vuketju, erityisesti menoktoniin, 2-(8-sykloheksyylioktyy- 2 78678 li)-3-hydroksi-l,4-naftokinoniin (esimerkiksi Fieser et ai., J. Med. Chem. 10 (1967) 513), mutta mielenkiinto sammui jälleen, koska vaikutus ihmisellä oli heikko.

US-patenttijulkaisussa nro 3 357 742 kuvataan 2— (4' — 5 sykloheksyylisykloheksyyli)-1,4-naftokinoni itiöloisten vastaisena aineena, mutta tätä yhdistettä ei ole milloinkaan valmistettu kaupallisesti.

GB-patenttijulkaisussa nro 1 553 424 kuvataan 2-hydr-oksi-3-sykloheksyylialkyyli- ja 2-hydroksi-3-sykloheksyyli-10 1,4-naftokinonijohdannaisia tehokkaina teilerioosin ehkäi syssä ja hoidossa. EP-hakemuksjulkaisu nro 78 101 426 sisältää mm. 3-hydroksi-l,4-naftokinoneja, joissa substi-tuenttina 2-asemassa on C3_^2~sy^l°al^yyliren9as» joka on mahdollisesti substituoitu C^^-alkyylillä, erityisesti me-15 tyylillä. Hakemuksessa ei kuitenkaan mainita mitään erityisiä substituoituja yhdisteitä, ei myöskään mainita, mihin kohtiin sykloalkyylirenkaan substituentit tulisi liittää.

Kaavan (I) mukaisilla yhdisteillä on varsin hyvä 20 Theileria-loisien vastainen aktiivisuus, ja niillä on huomattava vaikutus T. parvumiin ja T. annulataan; niiden ak--] tiivisuus on suurempi kuin aiemmin Theileria-lajien vastai- *. sinä pidettyjen naftokinonien.

: On huomattava, että substituoimattoman 1,4-naftoki- / 25 nonin 2- ja 3-asemat ovat identtiset, ja siten nimettäessä I yhdisteitä ilmoitetaan sopimuksen mukaan, onko syklohek- syylisubstituentti vai hydroksyyliryhmä 2-asemassa. Mukavuuden vuoksi tässä hakemuksessa jätetään tarkemmin määrittelemättä yhdisteet, joissa substituentti on 2-asemassa.

30 Kaavan (I) mukaisissa yhdisteissä symboli R on edul- - lisesti metyyli tai etyyli.

: On huomattava, että kaavan (I) mukaiset yhdisteet voivat esiintyä cis- ja trans-isomeereina, so. sykloheksyy-lirengas voi olla cis- tai trans-substituoitu naftokinoni-35 renkaalla ja 4-t-alkyylillä. Keksintö sisältää sekä öisettä trans-isomeerit sekä niiden seokset kaikissa suhteis- 3 78678 sa. Yleensä silloin, kun yhdiste on isomeeriseoksena, trans-isomeeria on noin 50 %, tai se on hallitseva, mutta myös seokset, joissa cis-isomeeri on hallitseva, kuuluvat keksinnön piiriin. Isomeerien tarkka suhde voi vaihdella tar-5 peen mukaan? tyypillisissä seoksissa cis/trans-isomeerisuh-de on noin 1:1, 40:60 tai 5:95.

Erityisiä kaavan (I) mukaisia yhdisteitä ovat: 2-(41-t-butyylisykloheksyylimetyyli)-3-hydroksi-l,4-nafto-kinoni ja 10 2-hydroksi-3-(4'-t-pentyylisykloheksyylimetyyli)-1,4-nafto-kinoni, niiden puhtaat cis- ja trans-isomeerit sekä isomeeriseok-set mukaan luettuina.

Kaavan (I) mukaiset yhdisteet voivat esiintyä tauto- 15 meerisessa muodossa, jossa hydroksyyliryhmä luovuttaa protonin jollekin oksoryhmistä, ja tällaiset tautomeeriset muodot sisältyvät keksintöön. Uskotaan kuitenkin, että kaavan (I) mukainen muoto on pysyvä.

Koska kaavan (I) mukaisten yhdisteiden hydroksyyli- 20 ryhmä voi muodostaa suoloja emästen kanssa, farmaseuttisesti hyväksyttäviin suoloihin kuuluvat alkalimetallikationin, kuten natriumin tai kaliumin, ja orgaanisten emästen, kuten etanoliamiinin, dietanoliamiinin ja N-metyyliglukamii-nin kanssa muodostetut suolat.

25 Kaavan (I) mukaisia yhdisteitä valmistetaan keksin- nön mukaisesti siten, että a) hydrolysoidaan yhdiste, jolla on kaava (II) ch3 30 0 r— v o$C°Hr ...

; 35 4 78678 jossa R merkitsee samaa kuin edellä ja X on halogeeni; tai b) hydrolysoidaan yhdiste, jolla on kaava (V), W CH, ,V> 10 3 jossa R merkitsee samaa kuin edellä.

Menetelmässä (a) muutetaan analogiset 3-halogeeni-, esimerkiksi 3-kloori- tai 3-bromiyhdisteet, joilla on kaa-15 va (II), jossa X on halogeeni, vastaavaksi 3-hydroksiyhdis-teeksi emäshydrolyysillä, esimerkiksi alkalimetallihydrok-sidilla sopivassa väliaineessa; esimerkiksi kaliumhydroksi-di vesipitoisessa metanolissa on todettu sopivaksi.

Kaavan (II) mukaisilla yhdisteillä on kaava 20 0 ch3 : . αχ-Ot· ...

jossa R merkitsee samaa kuin edellä ja X on halogeeni.

Kaavan (II) mukaiset yhdisteet ovat uusia yhdisteitä, 30 ja ne ovat siten keksinnön lisäkohteena. Kaavan (II) mukaiset yhdisteet voidaan valmistaa alalla tunnetuilla menetel-millä rakenteeltaan analogisten yhdisteiden valmistamiseksi, esimerkiksi L. Fieserin (J. Am. Chem. Soc. (1948) 3165) menetelmällä.

35 Vaihtoehtoisesti kaavan (I) mukainen yhdiste voidaan valmistaa hydrolysoimalla yhdiste, jonka kaava on (V), 5 78678 ch3 • θφτθ-lr - esimerkiksi laimealla hapon tai emäksen vesiliuoksella.

10 Alan asiantuntijoille on selvää, että yllä kuvatut valmistusmenetelmät voivat johtaa joko kaavan (I) mukaisten yhdisteiden isomeeriseoksiin (cis ja trans) tai, kun käytetään lähtöaineena puhdasta isomeeriä, puhtaisiin kaavan (I) mukaisiin cis- tai trans-yhdisteisiin.

15 Kaavan (II) mukaisia yhdisteitä voidaan valmistaa antamalla yhdisteen, jonka kaava on (VI), ,, 20 'θφ.

jossa Y on halogeeni (esimerkiksi kloori tai bromi), rea-25 goida sykloheksyyli- tai sykloheksyylimetyyliryhmän luovuttajan kanssa, joka sisältää ryhmän CH-,

--H

30 ch3 ja joka on sellaisessa muodossa, että se luovuttaa substi-tuoidun sykloheksyylimetyyliryhmän vapaana radikaalina, jossa elektroni on oikeassa asemassa vastapäätä alkyyli-substituenttia, joko spontaanisti tai hapettavissa olosuh-35 teissä.

6 78678

Soveltuva luovuttaja on vastaava sykloalkaanikarboksyy-lihappo, jolle voidaan tehdä hapettava dekarboksylaatio. Esimerkiksi persulfaatti katalysaattorin, kuten hopeaionien, kanssa on hyvä tähän tarkoitukseen (kts. Jacobson N. et ai.

5 Annalen (1972) 763, 135 ja Acta Chem. Scand. 27 (1973) 3211). Hapettavana aineena käytetään sopivasti ammoniumper-sulfaattia hopeanitraatilla katalysoiden.

Esimerkkinä luovuttajasta, jossa itsessään on perok-sidiryhmä, on menetelmä, jossa käytetään asianmukaisesti 10 substituoitua sykloalkanoyyliperoksidia (US-patenttijulkaisu nro 2 553 647).

Vapaan sykloalkyyliradikaalin aikaan saaminen spontaanilla irtoamisella luovuttajasta voidaan suorittaa esimerkiksi käyttämällä trisykloalkyyliboraania. Tällainen 15 reagenssi on helppo valmistaa antamalla sykloalkeenin reagoida boraanidimetyylisulfidin kanssa. Reaktio suoritetaan sopivasti liuottimessa, esimerkiksi tetrahydrofuraanissa.

Muita mahdollisia sykloheksyylimetyylin luovuttajia ovat t-alkyylisubstituoidut sykloheksyylimetyylikarboksyy-20 lihapot.

Alan asiantuntijoille on selvää, että yllä mainitut menetelmät johtavat cis- ja trans-isomeerien seokseen.

On havaittu, että ei-stereospesifisesti menetelmät johtavat yleensä cis- ja trans-isomeerien suhteeseen noin 25 1:1, trans-isomeerin määrää saatavassa tuotteessa voidaan lisätä säätämällä reaktio-olosuhtieta, erityisesti valitsemalla liuotinsysteemi, johon trans-isomeeri on heikommin liukeneva. Tällaiset liuotinsysteemit on helppo määrittää kokeilemalla, mutta erityisen tehokkaaksi havaittu liuotin-30 systeemi on veden ja asetonitriilin seos. Käyttämällä tällaisia systeemejä voidaan saada cis/trans-suhteeksi noin 2:3-1:4.

Kun halutaan saada puhdas cis- tai trans-isomeeri, käytetään stereospesifistä synteesiä, tai erotetaan iso-35 meerit fysikaalisin menetelmin. Tällaiset menetelmät ovat alalla hyvin tunnettuja, ja niihin kuuluvat esimerkiksi fraktioiva kiteytys tai kromatografinen erotus.

7 78678

On havaittu lisäksi, että kaavan (I) mukaisten yhdisteiden cis-isomeeri voidaan epimeroida trans-isomeeriksi.

Tämä voidaan saada aikaan erityisesti käsittelemällä tietyillä mineraalihapoilla, erityisesti väkevällä rikki-5 hapolla. Cis-isomeerin muuttumisaste trans-isomeeriksi tällaisissa epimeroinneissa voidaan säätää valitsemalla asianmukaiset reaktio-olosuhteet, erityisesti lämpötila ja reaktion kesto. Asianmukaisissa olosuhteissa voidaan valmistaa suurinpiirtein puhdasta trans-isomeeria. Soveltuva 10 lämpötila on 50-70°C tai korkeampi, ja soveltuvat reaktio-ajat ovat 6-24 h tai jopa 4-6 vrk tai pidempiä.

Yllä kuvattuja epimerointireaktioita voidaan tehdä puhtaille cis-isomeereille, mutta niitä käytetään mukavim-min isomeeriseoksille, jotka on valmistettu ei-stereospesi-15 fisillä synteesimenetelmillä. Reaktioita voidaan käyttää joko valmistettaessa kaavan (I) mukaisten yhdisteiden trans-isomeereja, jotka ovat suurinpiirtein vapaita cis-isomee-rista, tai valmistettaessa seoksia, joissa cis- ja trans-isomeerien suhde on toivottu, esimerkiksi 5:95, 3:97 tai 20 jokin muu haluttu suhde.

Keksintö kohdistuu lisäksi kaavan (VII) mukaisiin yhdisteisiin, n ch3 25 ^ JL / \ |T H ch (VII) 0 30 jossa Y1 on halogeeni. Nämä ovat uusia yhdisteitä ja käyttökelpoisia yllä kuvattujen synteesien välituotteina.

Kaavan (I) mukaisten yhdisteiden on havaittu olevan hyvin tehokkaita suvun Theileria loisia vastaan, ja ne ovat 35 siten käyttökelpoisia hoidettaessa ja/tai ehkäistäessä tei-lerioosia naudoissa ja lampaissa. Yhdisteiden on havaittu 8 78678 olevan erityisen tehokkaita T. annulatan aiheuttaman infektion hoidossa.

On huomattava, että se määrä kaavan (I) mukaista yhdistettä, joka tarvitaan Theileria-infektioiden hoitoon 5 tai ehkäisyyn, ei vaihtele vain aktiivisen yhdisteen mukaan, vaan myös antotavan ja infektion luonteen mukaan.

"Vaikuttava määrä, annos tai yksikköannos" tarkoittavat tässä käytettynä ennalta määrättyä yhdistemäärää, joka on kyllin tehokas Theileria-organismeja vastaan, esi-10 merkiksi naudoissa tai lampaissa annettuna in vivo. Ehkäisyn ja hoidon edistämiseksi tai saavuttamiseksi jotkut valmisteet voivat sisältää yhden eläimen tarvitseman annoksen monikertoja.

Tyypillinen 400 kg painavalle naudalle annettava al-15 kuannos voi olla 0,2-10 g, edullisesti 0,5-2,5 g, ja vasikoille tai lampaille 50 mg - 1,0 g, edullisesti noin 0,1 -0,5 g aktiivista yhdistettä, ja lisäannoksia voidaan antaa.

Vaikka on mahdollista antaa kaavan (I) mukaisia yhdisteitä sellaisenaan silloin, kun niitä käytetään alku-20 eläinten vastaisina aineina, on edullista antaa aktiivinen aineosa eläinlääkevalmisteena.

Eläinlääketieteessä käytettävät lääkevalmisteet ovat edullisesti joko jauheena tai nestemäisenä tiivisteenä. Tavanomaisen eläinlääkevalmistekäytännön mukaisesti jauhei-25 siin voidaan lisätä tavallisia vesiliukoisia lisäaineita, kuten laktoosia tai sakkaroosia, valmisteiden fysikaalisten ominaisuuksien parantamiseksi. Erityisen edulliset keksinnön mukaiset jauheet sisältävät 50-100 paino-%, edullisesti 60-80 paino-%, yhtä tai useampaa aktiivista aineosaa, ja 30 0-50 paino-%, edullisesti 20-40 paino-% tavanomaisia eläin ten lääkkeissä käytettäviä lisäaineita. Nämä jauheet voidaan joko lisätä eläinten ruokaan, esimerkiksi tekemällä välivaiheena esisekoitus, tai laimentaa eläinten juomaveteen .

35 Nestetiivisteet sisältävät sopivasti kaavan (I) mu kaista vesiliukoista yhdistettä tai sen suolaa, ja ne saat- 78678 9 tavat mahdollisesti sisältää eläinlääketieteessä hyväksyttävää veteen sekoittuvaa liuotinta, esimerkiksi polyety-leeniglykolia, propyleeniglykolia, glyserolia, glyseroli-formaldehydiä tai jotain tämänkaltaista liuotinta sekoitet-5 tuna etanoliin, jota on korkeintaan 30 tilavuus-%. Nestemäiset tiivisteet voidaan annostella eläinten, erityisesti siipikarjan juomaveteen.

Keksinnön mukaisia yhdisteitä voidaan käyttää myös yhdessä muiden terapeuttisten aineiden, esimerkiksi muiden 10 alkueläinten vastaisten aineiden kanssa. Keksinnön mukaisia yhdisteitä voidaan käyttää erityisesti yhdessä tunnettujen teilerioosin vastaisten aineiden kanssa.

Kun kaavan (I) mukaisia yhdisteitä käytetään yhdessä toisen saman loisen vastaisen terapeuttisen aineen kanssa, 15 kunkin yhdisteen annos on erilainen kuin käytettäessä yhdistettä yksinään. Alan asiantuntijoiden on helppo määrittää soveltuvat annokset.

Kaavan (I) mukaisten yhdisteiden biologinen vaikutus A. Vaikutus in vitro T. parvaa ja T. annulataa vas-20 taan

In vitro-tulokset, jotka osoittavat kaavan (I) mukaisen yhdisteen (R = CH^) tehoa T. parvaa ja T. annulataa vastaan, annetaan verrattuna tunnettuun teilerioosin vastaiseen 2-hydroksi-3-sykloheksyyli-l,4-naftokinoniin. Nau-25 dan varhaisimusoluviljelmiä, jotka oli infektoitu T. parvan makrojakautumisvaiheella, inkuboitiin 48 h erilaisten 2-£fcrans-(4-t-butyylisykloheksyyli)-metyyli7“3-hydroksinafto-kinoni- ja 2-hydroksi-3-sykloheksyyli-l,4-naftokinonipitoi-suuksien läsnäollessa. Vertailunäytteiksi inkuboitiin vil-30 jelmiä ilman lääkettä. Yhdisteiden nelinkertaisia laimennoksia käytettiin ED50-arvon määrittämiseksi; kullekin yhdisteelle tehtiin ainakin kaksi koetta. ED50 on lääkepitoisuus (mg/1), joka tarvitaan vähentämään skitsontti-infek-toitujen solujen lukumäärä viljelmässä 50 %:iin käsittele-35 mättömien vertailuviljelmien vastaavasta lukumäärästä 48 h:n inkuboinnin aikana. Tulokset ovat taulukossa 1.

10 78678

Taulukko 1 ED5q (mg/1) T. parva:a T. annulata:a

Yhdiste_vastaan_vastaan_ 5 Yhdiste (1) (R=CH3) 0,0002 0,005 2-hydroks i-3-sykloheksyyli- 1,4-naftokinoni 0,006 0,100 B. Vaikutus in vivo T. annulataa vastaan Jersey-naarasvasikat, paino 115-140 kg, infektoitiin 10 ruiskuttamalla 0,8 ml stabilaattia, joka oli valmistettu homogenoiduista punkeista (Hyalomma anatolicum anatolicum), jotka oli infektioitu T. annulataan Hissar-kannalla. 2-Ztrans-(4-t-butyylisykloheksyyli)metyyli7-3-hydroksi-l,4-naftokinonia (injektioformulana) annettiin kaulalihakseen 15 12 päivää infektoinnista. Eri ryhmien ja vertailuryhmän tulokset ovat taulukossa 2.

Taulukko 2 2-£trans-(4-t-butyylisyk- Vertailu loheksyyli)metyyli7~3- (käsittelemätön)

Parametri hydroksi-1,4-naftokinoni ^ _5 mq/kq 2,5 mq/kq 1,25 mq/kq_

Aika (vrk) kuu-metilan alkamiseen 10 11 12 11

Kuumetilan kesto (vrk) käsittelyn / 25 jälkeen (12 p:nä) 000 4 C. Vaikutus in vivo T. parvaa vastaan 2-Ztrans-(4-t-butyylisykloheksyyli)metyyli7_3-hydrok-si-1,4-naftokinonin tehoa in vivo T. parvaa vastaan tutkittiin ja verrattiin tunnettuun Theileria-lajien vastaiseen 30 aineeseen 2-hydroksi-3-sykloheksyyli-l,4-naftokinoniin.

Puhdasrotuiset nuoret friisiläishärät, jotka painoi-vat 180-250 kg, ja olivat serologisesti negatiivisiä T. parvan vasta-aineiden suhteen, infektoitiin ruiskuttamalla ihon alle 1,0 ml T. parva-stabilaattia 147. Kolmantena päi-35 vänä selvän kuumetilan alkamisesta annettiin lihakseen 2-ZJrans-(4-t-butyylisykloheksyyli)metyyli7-3-hydroksi-l,4- 11 78678 naftokinonia (injektioforraulana) ja 2-hydroksi-3-syklohek-syyli-1,4-naftokinonia (samanlaisena formulana) kahdelle friisiläishärkäryhmälle. Eri ryhmien tulokset vertailueläi-miin verrattuna ovat taulukossa 3.

5 Taulukko 3 Käsiteltävä 2-hydroksi-3- ryhmä sykloheksyyli- 1,4-naftokino- Yhdiste

Parametri_Vertailu liini_(I) R=Me 10 Annos: 20 mg/kg 5 mg/kg

Lukumäärä ryhmässä 55 5

Elossa olevien lukumäärä 28 p:nä 05 5 Käsittelystä) paranemi- 15 kuluneet ) seen 7,4+1,47 3,0+0,45 vrk:det ) kuolemaan 9,2+1,46

Teilerioosin

vakavuus 5 SF 4 MR 5 MR

1 IR

2g M = lievä, I = keskinkertainen, S = vakava, R = paraneminen, F = kuolema

Seuraavat esimerkit kuvaavat keksintöä:

Esimerkki 1 __ 2-£trans-(4-t-butyylisykloheksyyli)metyyli7~3-hydr-

Δ D

oksi-l,4-naftokinonin valmistus A. 1-trans-(4-t-butyylisykloheksyyli)-etikkahapon valmistus 4-t-butyylisykloheksaani-l-karboksyylihappoa (50 g, 2Q cis- ja trans-isomeerien seos), kaliumhydroksidia (150 g) ja etyleeniglykolia (500 ml) refluksoitiin yön yli. Sitten reaktioseos kaadettiin murksattuihin jäihin (2000 g), tehtiin happamaksi väkevöidyllä suolahapolla, ja syntynyt valkea sakka erotettiin suodattamalla. Märkä kiinteä ,, 78678 12 aine liuotettiin etyyliasetaattiin, vesikerros poistettiin, ja orgaaninen kerros kuivattiin magnesiumsulfaatilla. Poistettaessa liuotin alipaineessa saatiin valkea kiinteä aine, joka kiteytettiin uudelleen tolueenista, jol-5 loin saatiin 1-trans-(4-t-butyylisykloheksyyli)-karboksyy- lihappo (30,9 g, sp. 172-174°C).

1-trans-(4-t-butyylisykloheksyyli)-karboksyylihap-po (35 g) liuotettiin vedettömään eetteriin (250 ml), ja liuos lisättiin hitaasti vedettömään eetteriin (200 ml), 10 johon oli liuotettu 7,3 g litiumalumiinihydridiä, siten että seos kiehui hieman koko ajan. Kun lisäys oli saatu loppuun, seosta refluksoitiin sekoittasi vielä 1,5 h. Reak-tioseos jäähdytettiin jäähauteella, ja lisättiin 200 ml jääkylmää 2N suolahappoa. Vesikerros erotettiin, pestiin 15 eetterillä (100 ml), yhdistetyt orgaaniset uutteet pes tiin laimealla natriumhydroksidiliuoksella, sitten vedellä, kuivattiin (MgSO^), ja liuotin poistettiin alipaineessa, jolloin saatiin väritön öljy (28 g). Edellä valmistettu 1-trans-(4-t-butyylisykloheksyyli)-metanoli (28 g) 20 liuotettiin kuivaan asetonitriiliin (330 ml), lisättiin 28,7 g vedetöntä litiumbromidia ja 44,5 g klooritrimetyyli-silaania, ja seosta refluksoitiin 60 h. Sitten reaktio-seoksen annettiin jäähtyä, ja liuotin poistettiin alipaineessa. Jäännös liuotettiin eetteriin, pestiin vedellä 25 (100 ml), 10 % natriumbikarbonaattiliuoksella (100 ml), ve dellä (100 ml), kuivattiin (MgSO^), ja liuotin poistettiin alipaineessa. Puhdistettaessa raakatuote pylväskroma-tografisesti saatiin öljymäinen 1-trans-(4-t-butyylisykloheksyyli) -metaanibromidi (15,5 g).

30 Yllä mainittu bromidi (15 g) lisättiin heksametyy- lifosforihappotriamidiin liuotettuun natriumsyanidiin (4,83 g), ja seosta sekoitettiin ympäristön lämpötilassa yön yli. Epäpuhdas reaktioseos laimennettiin vedellä (250 ml), ja uutettiin eetterillä (2 x 200 ml). Yhdistetyt orgaani-35 set kerrokset pestiin vedellä (3 x 100 ml), kuivattiin (MgSO^), ja liuotin poistettiin alipaineessa, jolloin saatiin 1-trans-(4-t-butyylisykloheksyyli)-metaaninitrii-li värittömänä nesteenä (10,5 g).

78678 13 1-trans-(4-t-butyylisykloheksyyli)-metaaninitriiliä (10 g), kaliumhydroksidia (20 g), etanolia (200 ml) ja vettä (50 ml) refluksoitiin 65 h. Suurin osa liuottimesta poistettiin alipaineessa, ja jäännös liuotettiin veteen 5 (300 ml), ja uutettiin etyyliasetaatilla (100 ml). Vesi- kerros tehtiin happamaksi suolahapolla ja uutettiin etyyliasetaatilla (2 x 100 ml). Yhdistetyt orgaaniset kerrokset pestiin vedellä (200 ml), kuivattiin (MgSO^), ja ylimääräinen liuotin poistettiin alipaineessa, ja kiinteä 10 jäännös trituroitiin kylmällä vedellä, jolloin saatiin 1-trans-(4-t-butyylisykloheksyyli)-etikkahappo (9,5 g, sp. 93-95°C).

B. 2-^trans-(4-t-butyylisykloheksyyli)metyyli7- 3-hydroksi-l,4-naftokinonin valmistus 15 Seosta, joka sisälsi 960 mg 2-kloori-l,4-naftoki- nonia, 990 mg 1-trans-(4-t-butyylisykloheksyyli)-etikka-happoa (valmistettu julkaisun J. Amer. Chem. Soc. 92 (1970) 2800 mukaan) ja 250 mg hopeanitraattia asetonitrii-lissä (9 ml), refluksoitiin voimakkaasti sekoittaen, ja 20 lisättiin veteen (12 ml) liuotettu ammoniumpersulfaatti (3,0 g) samanaikaisesti pisaroittain 1 h:n aikana. Seosta refluksoitiin vielä 1 h, se jäähdytettiin jäähauteella, ja siten saatu keltainen kiinteä aine kerättiin ja pestiin vedellä. Kiinteä aine uutettiin kuumalla etyyliasetaatil-25 la, josta saatiin jäähdytettäessä 2-/trans-(4-t-butyyli sykloheksyyli) metyyli7-3-kloori-l,4-naftokinoni, sp. 154-156°C. NMR-spektroskopialla varmistettiin, että tuote oli 100 %:sesti trans-isomeeria.

Yllä kuvatulla tavalla valmistettua kloorikinonia 30 (6 g) refluksoitiin dimetoksietaanissa (60 ml) ja vedes sä (60 ml) lisäten samalla pisaroittain veteen (60 ml) liuotettu kaliumhydroksidi (6,0 g) 10 min:n aikana. Refluk-sointia jatkettiin vielä 15 min, seos jäähdytettiin nopeasti ympäristön lämpötilaan ja tehtiin happamaksi väke-35 vöidyllä suolahapolla. Siten saatu kirkkaan keltainen kiinteä aine kerättiin, pestiin vedellä ja kuivattiin, jolloin saatiin 2-,/trans-(4-t-butyylisykloheksyyli)-metyy-li7-3-hydroksi-l,4-naftokinonia, sp. 180-132°C.

1« 78678

Esimerkki 2 2-j£rans- (4'-t-pentyylisykloheksyyli)metyyli7-3-hydroksi-1,4-naftokinonin valmistus A. 1-trans-(4-t-pentyylisykloheksyyli)etikkahapon 5 valmistus

Trans-t-pentyylisykloheksaani-l-karboksyylihappoa (8,0 g), dikloorimetaania (34,7 ml) ja tionyylikloridia (17,77 g) sekoitettiin ympäristön lämpötilassa 22 h. Reak-tioseos haihdutettiin alipaineessa, jolloin saatiin ^ musta jäännös, joka tislattiin alipaineessa, jolloin saatiin 7,05 g trans-4-t-pentyylisykloheksaani-l-karbok- syylihappokloridia, kp. 107-110°C/0,5 mmHg.

Yllä mainittu happokloridi lisättiin sitten pisaroittaan 30 minin aikana diatsometaanin eetteriliuok-15 seen 0°C:ssa, ja seoksen annettiin seistä jääkaapissa yön yli. Haihduttamalla ylimääräinen liuotin alipaineessa saatiin vastaava diatsoketoni keltaisena öljynä (6,8 g).

Diatsoketoni (6,8 g) liuotettiin vedettömään meta-noliin (60 ml), ja lisättiin pisaroittain liuos, jossa 2o oli 0,45 g hopeabentsoaattia trietyyliamiinissa (7 ml), sekoittaen. Liuosta refluksoitiin 1 h, sen annettiin jäähtyä, suodatettiin hiilen läpi, ja suodos haihdutettiin : kuiviin alipaineessa. Tislaamalla saatu jäännös saatiin trans-t-pentyylisykloheksyylimetyyliasetaattia, kp. 96-25 100°C/0,2 mmHg. Trans-t-pentyylisykloheksyylimetyyliase- taatti (3,6 g) liuotettiin metanoliin (11 ml), lisättiin veteen (5 ml) liuotettu natriumhydroksidi (1,08 g), ja reaktioseosta sekoitettiin ympäristön lämpötilassa yön yli. Reaktioseos laimennettiin vedellä (50 ml), ja uutet-30 tiin eetterillä. Vesikerros tehtiin happamaksi väkevöi- dyllä suolahapolla, ja uutettiin eetterillä. Eetteriuut-teet kuivattiin (MgSO^) ja haihdutettiin alipaineessa, jolloin saatiin 2,0 g 1-trans-(4-t-pentyylisykloheksyyli)-etikkahappoa öljynä.

15 78678 B. 2-£jtrans- (4 ' -t-pentyylisykloheksyyli)metyyl4j-3- hydroksi-1,4-naftokinonin valmistus

Seosta, jossa oli 0,95 g 2-kloori-l,4-naftokinonia, 1,0 g 1-trans-(4-t-pentyylisykloheksyyli)-etikkahappoa ja 5 0,17 g hopeanitraattia asetonitriilissä (1,5 ml) refluksoi- tiin voimakkaasti sekoittaen lisäten samalla veteen (3 ml) liuotettu ammoniumpersulfaatti (1,7 g) pisaroittain 1 h:n aikana. Seosta refluksoitiin vielä 1 h, jäähdytettiin jäissä ja uutettiin eetteriin. Eetteriuute pestiin vedellä, 10 kuivattiin (MgS04) ja haihdutettiin, jolloin saatiin 700 mg 2-£trans-(4'-t-pentyylisykloheksyyli)metyyli7-3-kloori- 1.4- naftokinonia.

Yllä kuvatulla tavalla valmistettua kloorikinonia (700 mg) metanoliin (21 ml) liuotettuna refluksoitiin lisä-15 ten samalla 700 mg kaliumhydroksidia vedessä (7 ml) pisaroittain 10 min:n aikana. Refluksointia jatkettiin vielä 15 min, seos jäähdytettiin nopeasti ympäristön lämpötilaan ja tehtiin happamaksi väkevöidyllä suolahapolla. Seos uutettiin kloroformilla, ja pestiin huolellisesti uute 20 vedellä. Orgaaniset uutteet kuivattiin (MgS04) ja haihdutettiin alipaineessa öljyksi. Puhdistettiin kromatografi-sesti silikageelipylväällä tolueenilla eluoiden, minkä jälkeen tuote kiteytettiin uudelleen asetonitriilistä, jolloin saatiin 150 mg 2-£trans-(4'-t-pentyylisykloheksyyli)metyy-25 li7-3-hydroksi-l,4-naftokinonia, sp. 132-135°C.

Esimerkki 3 2-(cis-4'-t-butyylisykloheksyylimetyyli)-3-hydroksi- 1,4-naftokinoni

Esimerkkien 1 ja 2 mukaisesti, mutta korvaamalla 30 trans-karboksyylihappo cis-karboksyylihapolla, valmistettiin 2-(cis-41-t-butyylisykloheksyylimetyyli)-3-hydroksi- 1.4- naftokinoni (sp. 124-125°), jonka osoitettiin olevan puhdas isomeeri NMR-spektroskopian avulla. Välituotteena olevan 3-kloorijohdannaisen, 2-(cis-4'-t-butyylisykloheksyy- 35 limetyyli)-3-kloori-l,4-naftokinonin sp. oli 111-113°C.

is 78678

Esimerkki 4 2-(trans-4-t-butyylisykloheksyylimetyyli)-3-hydroksi- 1,4-naftokinoni 2-(trans-4-t-butyylisykloheksyylimetyyli)-1,4-nafto-5 kinoni-2,3-oksidia (2,0 g) liuotettiin teolliseen metyloi-tuun spriihin (100 ml), jota keitettiin palautusjäähdyttäen, ja lisättiin konsentroitua kloorivetyhappoa (5 ml). Liuoksen väri muuttui keltaiseksi, ja reaktion etenemistä seurattiin TLC-menetelmällä (silikageeli, tolueeni). Kolmen 10 tunnin kuluttua liuotin haihdutettiin ja oranssin ruskea kiinteä aine kromatografoitiin silikageelillä, jolloin saatiin otsikon mukainen yhdiste keltaisena kiinteänä aineena (0,9 g, 45 %) .

Claims (9)

17 78678

1. Menetelmä terapeuttisesti käyttökelpoisten kaavan (I) mukaisten naftokinonijohdannaisten ja niiden farmaseut-5 tisesti hyväksyttävien suolojen valmistamiseksi, ch3 " OÖC°t' - 15 jossa R on suoraketjuinen C^.^-alkyyli, tunnettu siitä, että a) hydrolysoidaan yhdiste, jolla on kaava (II)

20 CH3 1^ Il ch3 (II)

25 O jossa R merkitsee samaa kuin edellä ja X on halogeeni; tai b) hydrolysoidaan yhdiste, jolla on kaava (V), \-/ ia, (v) 35 3 jossa R merkitsee samaa kuin edellä. 18 78678

2. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että valmistetaan kaavan (I) mukainen yhdiste, jossa R on metyyli.

3. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, t u n -5 n e t t u siitä, että valmistetaan kaavan (I) mukainen yhdiste, jossa R on etyyli.

4. Jonkin patenttivaatimuksen 1-4 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että kaavan (I) mukainen yhdiste valmistetaan trans-isomeerina.

5. Kaavan (VII) mukainen yhdiste, ch3

15 N--* | |T |f \_y mi, VkA,l ^H3 20 jossa kaavassa R on suoraketjuinen Cj *-alkyyli ja Y* on halogeeni. i9 78678