FI78360C - Foerfarande foer framstaellning av testremsa. - Google Patents

Foerfarande foer framstaellning av testremsa. Download PDF

Info

Publication number
FI78360C
FI78360C FI823786A FI823786A FI78360C FI 78360 C FI78360 C FI 78360C FI 823786 A FI823786 A FI 823786A FI 823786 A FI823786 A FI 823786A FI 78360 C FI78360 C FI 78360C
Authority
FI
Finland
Prior art keywords
liquid
carrier
composition
reagent
maleic acid
Prior art date
Application number
FI823786A
Other languages
English (en)
Swedish (sv)
Other versions
FI823786L (fi
FI823786A0 (fi
FI78360B (fi
Inventor
Ronald G Sommer
Original Assignee
Miles Inc
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Miles Inc filed Critical Miles Inc
Publication of FI823786A0 publication Critical patent/FI823786A0/fi
Publication of FI823786L publication Critical patent/FI823786L/fi
Publication of FI78360B publication Critical patent/FI78360B/fi
Application granted granted Critical
Publication of FI78360C publication Critical patent/FI78360C/fi

Links

Classifications

    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/52—Use of compounds or compositions for colorimetric, spectrophotometric or fluorometric investigation, e.g. use of reagent paper and including single- and multilayer analytical elements
    • G01N33/525—Multi-layer analytical elements
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
    • G01N33/536—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor with immune complex formed in liquid phase
    • G01N33/542—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor with immune complex formed in liquid phase with steric inhibition or signal modification, e.g. fluorescent quenching
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
    • G01N33/543—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor with an insoluble carrier for immobilising immunochemicals
    • G01N33/54366—Apparatus specially adapted for solid-phase testing
    • G01N33/54386—Analytical elements
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
    • Y10S435/805—Test papers
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
    • Y10S435/97—Test strip or test slide
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S436/00—Chemistry: analytical and immunological testing
    • Y10S436/807—Apparatus included in process claim, e.g. physical support structures
    • Y10S436/81—Tube, bottle, or dipstick

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
  • Investigating Or Analyzing Non-Biological Materials By The Use Of Chemical Means (AREA)
  • Automatic Analysis And Handling Materials Therefor (AREA)
  • Analysing Materials By The Use Of Radiation (AREA)
  • Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)

Description

! 78360
Menetelmä testiliuskan valmistamiseksi Tämä keksintö koskee menetelmää sellaisen testi-liuskan valmistamiseksi, jossa reagenssin migraatio pois 5 näytteen sijoituskohdasta on minimoitu.
Testiliuskat ja samantapaiset kiinteät analyyttiset elementit ovat tulleet yleisiksi analysoitaessa erilaisia nestemäisiä näytteitä, erikoisesti biologisia nesteitä.
Ne ovat olleet edullisia esimerkiksi tautien diganostii-10 kassa. Ne ovat olleet tunnettuja ja niitä on käytetty useita vuosia eri alueilla, erikoisesti in vitro diagnostisissa laitteissa virtsan ja veren erilaisten aineosien kuten glukoosin, proteiinin, pelkästään kliinisesti ha-vaitsemattoman veren ja vastaavien ilmaisemiseen. Katso 15 esimerkiksi US-patentteja 3 012 976, 3 164 534 ja 3485587.
On valmistettu testivälineitä, joita voidaan käyttää määrättyjen sidosanalyysien suorittamiseen. Spesifiset sidosanalyysit ovat käyttökelpoisia määrättäessä diagnostisesta, lääketieteellisesti, ympäristöllisesti ja teol-20 lisesti tärkeitä erilaisia orgaanisia aineita, joita esiintyy nestemäisessä väliaineessa erittäin pieninä pitoisuuksina. Ne perustuvat määrättyyn vuorovaikutukseen tutkittavan sidottavan analyytin, jota myös kutsutaan ligandiksi ja sen sidoskumppanin välillä. Jos toinen analyytistä ja 25 sen sidoskumppanista on hapteeni tai antigeeni ja toinen on vastaava vasta-aine, tunnetaan analyysi immunoanalyysin nimellä, ks. esim. US-patentti 4 447 526, EP-patentti 51 213 ja US-patentti 4 442 204, joissa on kuvattu tällaisia spesifisiä sidosanalyysivälineitä.
30 Näitä koeliuskoja ja vastaavia laitteita käytettäes sä on esiintynyt puutteita niiden antamien tulosten luotettavuudessa, kun näytteen sijoittaminen on aiheuttanut reagenssien siirtymistä pois näytteen sijoituskohdasta laitteessa. Tästä aiheutuu epätasaisuutta reagenssin pi-35 toisuuksissa laitteen eri kohdissa ja edelleen ilmaista- 2 78360 van signaalin tai vastetason epätasaisuutta. Tästä syystä yksi laite, joka on saatettu kosketukseen yhden näytteen kanssa, voi antaa erittäin suuren määrän signaalitasoja riippuen siitä, mitä laitteen pinnan osaa käytetään luke-5 man ottoon.
Tähän mennessä käytetty tapa nimellä "kehänmuodos-tus" kutsutun ilmiön välttämiseen on ollut päällekkäin levitettyjen kerrosten käyttö. Katso esimerkiksi US-patentti 3 992 158 ja GB-hakemusjulkaisu 2 052 057. Tällöin olete-10 taan, että koska leviämistä tapahtuu levitetyssä kerroksessa ja levinnyt näyte on reagenssin sisältävässä kerroksessa ilman poikittaista hydrostaattista painetta, "kehä”-ilmiö vältetään. Nämä kerrokset lisäävät monimutkaisuutta ja kustannuksia testilaitteita valmistettaessa.
15 Esillä oleva keksintö liittyy reagenssin migraation aiheuttamaan ongelman ratkaisuun, jolloin samalla vältytään tarpeelta kerrosten levittämiseksi. Keksintö mahdollistaa reagenssin tasaisen pitoisuuden ylläpitämisen kauttaltaan laitteessa jopa nestemäisen näytteen sijoittamisen jäl-20 keen. Luotettavia, tasaisia ja tarkkoja signaalitasoja voidaan saada riippumatta siitä, mikä laitteen pinnan kohta luetaan käyttäen laitteita, jotka ovat oleellisesti yksinkertaisempia kun levitettyjen kerrosten käyttämisen vaatimat laitteet.
25 Keksintö koskee menetelmää testiliuskan valmistami seksi, jossa liuskassa reagenssin migraatio pois näytteen sijoituskohdasta on minimoitu. Menetelmälle on tunnusomais-ta, että a) kantaja yhdistetään nesteessä olevan koostumuk-30 sen kanssa, joka sisältää vähintään yhtä analyyttimääri-tysjärjestelmän reagenssia, olosuhteissa, jotka tehokkaasti ionisoivat reagenssimigraatiota estävän aineen, joka ei-ionisoidussa muodossa ei liukene mainittuun nesteeseen ja ionisoidussa muodossa liukenee mainittuun nesteeseen, 35 ja kantaja kuivataan, minkä jälkeen , 78360 3 b) kohdassa a) saatu kantaja yhdistetään toisen nesteessä olevan koostumuksen kanssa, jolloin neste on muu kuin kohdassa a) mainittu ja koostumus sisältää muut jäljellä olevat analyyttimääritysjärjestelmän reagenssit, 5 jotka reagoivat kohdassa a) mainitun reagenssin kanssa, sekä reagenssimigraatiota estävää ainetta, joka ei-ioni-soidussa muodossa liukenee mainittuun nesteeseen, ja jolloin neste tehokkaasti estää toisen koostumuksen reaktion kohdassa a) mainitun reagenssin kanssa ennen liuskan 10 saattamista kosketukseen näytteen kanssa ja estää migraatiota estävän aineen ionisoitumisen ennen kosketusta näytteen kanssa, ja kantaja kuivataan.
Edullisesti reagenssin migraation estoaine on ma-leiinihapon monoesteripolymeeri, kuten metyylivinyyli-15 eetterin ja maleiinihapon monometyyliesterin kopolymee-ri ja olosuhteet, jotka ionisoivat reagenssin migraation estoaineen ovat sellaiset, että kohdan (a) neste on vesipitoinen ja sen pH-arvo on vähintään noin 5 saavutettuna edullisesti puskuria lisäämällä. Neste (b) on edul-20 lisesti orgaaninen neste, kuten asetoni. Keksinnön avulla saavutettavat edut ovat erikoisen arvokkaita spesifisissä sidosanalyyseissä, esimerkiksi immunoanalyysiväli-neissä. Tässä suositellussa toteutuksessa, kun vesipitoi-nen näyte lisätään spesifiseen sidosanalyysiliuskaan, : * 25 joka on valmistettu keksinnön mukaisesti, myöhemmin yk- sityiskohtaisesti esitettävä konjugaatti kiinnittyy vä-' "· liaikaisesti veteen liukenemattomaan, ionisoitumattomaan happomuodossa olevaan reagenssin migraation estoainee-seen ja estää migraation näytteen levittyessä. Kuiten-30 kin välittömästi kun vaiheen (a) puskurilla on ollut riittävästi aikaa kohdistaa sen ionisoiva vaikutus, reagenssin migraation estoaine muuttuu ionisoituneeseen, liukoiseen muotoon ja konjugaatti voi vapaasti osallistua analyyttiin kohdistuvaan reaktioon.
’· .· 35 78360 4 Tämän keksinnön avulla saadaan testivälineitä, jotka omaavat kaikki tavanomaisten testiliuskojen ja muiden vastaavan rakenteen omaavien analyyttisten välineiden käyttömukavuuteen kohdistuvat piirteet. Analysoitava väli-5 aine voi olla luonnossa esiintyvä tai keinotekoisesti muodostettu neste, jonka oletetaan sisältävän analyyttiä ja tavallisesti se on biologinen neste tai sen laimennus. Biologisiin nesteisiin, joita voidaan analysoida kuuluvat seerumi, plasma, virtsa, sylkineste ja amnioottiset sekä 10 serebrospinaaliset nesteet.
Keksinnön mukaisiin analyysivälineisiin voidaan lisätä reagenssikoostumuksia, joita tässä kutsutaan analyytin ilmaisujärjestelmiksi, kuten niitä, jotka tunnetaan määrättäessä veren, plasman, seerumin ja virtsan aineosia 15 (analyyttejä). Ne sisältävät usein entsyymiä tai analyytin suhteen substraattispesifisiä ja muita tarvittavia reagens-seja, mukaanluettuina hapetus-pelkistys-indikaattorit ja fluorisoivat aineet, joissa tapahtuu ilmaistava muutos.
Ne voivat myös sisältää järjestelmiä analyytin (ligandin) 20 ilmaisemiseksi, jota varten niissä on spesifinen sidos-kumppani ja kääntäen järjestelmiä nestemäisen välineen kyvyn ilmaisemiseksi analyytin tai ligandin sitomiseksi (tavallisesti sen sidoskumppanin läsnäolon vaikutuksesta väliaineessa). Nestemäisen näytteen tutkimisen määrätyn 25 analyytin suhteen oletetaan käsittävän kaikki nämä analyysitavat. Analyytti on tavallisesti peptidi, polypep-tidi, proteiini, hiilihydraatti, glykoproteiini, steroidi tai jokin muu orgaaninen molekyyli, jonka spesifinen sidos-kumppani esiintyy biologisissa järjestelmissä tai joka 30 voidaan syntetisoida. Terapeuttinen lääkeaineen valvonta on eräs näiden spesifisten sidosanalyysivälineiden arvokas sovellutus.
Tämän keksinnön mukaisia analyyttisiä välineitä varten käytetty kantaja voi olla jokin useista eri muodois-35 ta ja niiden sisältö on tässä mielessä laaja. Se voi olla 5 78360 yhtä tai useampaa sopivaa materiaalia tai väliainetta, joiden absorptio- tai muut fysikaaliset ominaisuudet ovat samanlaisia tai erilaisia. Katso esimerkiksi US-patentteja nro 3 552 928; 4 046 514 ja 4 845 247. Edulli-5 sesti kantaja muodostuu imukykyisestä materiaalista kuten suodatinpaperista, joka on kyllästetty analyytin ilmaisen järjestelmän reagenssien liuoksella tai suspensiolla. Kaikkia näitä, samoinkuin muitakin, kantajakäsit-teitä voidaan käyttää tässä keksinnössä. Mikä materiaali 10 valitaankin kantajaa varten, mikä sen koostumus tai rakenne onkin, sen valinta määräytyy reagenssijärjestelmän ja laitteen aiotun käytön mukaan.
Näitä analyysijärjestelmiä sisältävät välineet muodostavat ilmaistavan vasteen, pääasiassa sähkömagneettisia 15 säteilysignaaleja kuten fluoresenssia, fosforenssia, ke-miluminenssia sekä muutoksia valon absorptiossa tai heijastuksessa näkyvän spektrialueen sisä- tai ulkopuolella riippuen analyytin (ligandin) läsnäolosta tai määrästä analysoitavassa nestenäytteessä. Ilmaistava vaste voidaan 20 havaita suoraan aistien avulla tai sopivaa ilmaisuvälinettä kuten spektrofotometriä, ultraviolettivaloa ilmaisevaa laitetta, fluorometriä tai muuta ilmaisuvälinettä käyttäen .
Perusteellisten tutkimusten aikana pyrittäessä pois-25 tamaan ne vaikeudet, jotka aiheutuvat reagenssin migraatiosta, tutkittiin useita yhdisteitä. Näihin yhdisteisiin kuuluivat Klucel LF ja Klucel G hydroksipropyylisellu-loosa (Hercules, Inc. Wilmington, De), Gafquat 734 , joka on kvaternisoidun dimetyyliaminoetyylimetakrylaatin ja 30 vinyylipyrrolidonin kopolymeeri (GAF Corp., New York, NY), £
Gantrez AN-139, joka on metyylivinyylieetterin ja maleii-nihapon anhydridin kopolymeeri (GAT Corp., edellä), sellu-loosa-asetaatti (Eastman Chemical Products, Inc., Kingsport, TN) ja Natrosol MR ja Natrosol LR hydroksietyyliselluloosa 35 (Hercules, Inc., edellä). Mikään näistä ei osoittautunut kyvykkääksi ratkaisemaan mainittua vaikeutta.
« 78360
Kuten tavanomaisten välineiden tapauksessa, tämä keksintö antaa kantajan, jonka tyyppi vaihtelee ja johon on lisätty kaikki reagenssit, jotka vaaditaan annetun analyysin suorittamiseksi, jolloin käyttäjän tehtävänä 5 onvain saattaa testiväline kosketukseen tutkittavan näytteen kanssa ja mitata saatu vaste. Näistä tavanomaisista välineistä poiketen saavutetaan tämän keksinnön avulla etuna reagenssin migraation esto, kuten yksityiskohtaisesti esitetään ja osoitetaan seuraavan esityksen ja 10 esimerkkien avulla.
Tällöin tämän keksinnön avulla saadaan testivälinei-tä, joissa ei oleellisesti katsoen esiinny lainkaan reagenssin migraatiota saatettaessa ne kosketukseen nestemäisen näytteen kanssa, millä migraatiolla on epäedulli-15 nen vaikutus tulosten luotettavuuteen. Nämä testivälineet valmistetaan menetelmän avulla, joka käsittää (a) nesteessä olevan koostumuksen lisäämisen kantajaan, mikä koostumus sisältää vähintään yhtä analyytin ilmaisujärjestelmän rea-genssia, olosuhteissa, jotka tehokkaasti ionisoivat rea-20 genssin migraation estoaineen, joka ei liukene mainittuun nesteeseen ionisoitumattomassa muodossaan ja liukenee mainittuun nesteeseen ionisoituneena sekä kantajan kuivaamisen ja sitten (b) kohdan (a) mukaiseen kantajaan lisätään toista koostumusta nesteessä, joka on eri kuin kohdassa 25 (a), mikä koostumus sisältää muut analyytin ilmaisujärjes telmän reagenssit, jotka reagoivat vähintään yhden kohdan (a) mukaisen reagenssin ja reagenssin migraation estoaineen kanssa, joka estoaine liukenee mainittuun nesteeseen ionisoitumattomassa muodossa, mikä neste estää tehokkaas-30 ti koostumuksen (b) reaktion vähintään yhden kohdan (a) mukaisen reagenssin kanssa ennen välineen saattamista kosketukseen näytteen kanssa ja estää migraation estoaineen ionisoitumisen ennen kosketuksen muodostamista näytteen kanssa sekä kantajan kuivaamisen.
35 Eräässä suositellussa toteutuksessa reagenssin esto- aine on karboksyylihappopolymeeri. Näitä karboksyylihappo- 7 78360 polymeerejä voivat esimerkiksi olla (1) metyylivinyyli-eetterin ja maleiinihapon monometyyliesterin kopolymeerit, (2) metyylivinyylieetterin ja maleiinihapon mono-etyyliesterin kopolymeerit, (3) metyylivinyylieetterin ja 5 maleiinihapon monopropyyliesterin kopolymeerit, (4) metyylivinyylieetterin ja maleiinihapon monobutyyliesterin kopolymeerit (5) vinyyliasetaatin ja maleiinihapon mono-metyyliesterin kopolymeerit, (7) etyleenin ja maleiinihapon monometyyliesterin kopolymeerit, (8) etyleenin ja 10 maleiinihapon monoetyyliesterin kopolymeerit, (9) oktade-syylivinyylieetterin ja maleiinihapon monometyyliesterin kopolymeerit ja (10) oktadesyylivinyylieetterin ja maleiinihapon monometyyliesterin kopolymeerit.
Olosuhteet, jotka tehokkaasti ionisoivat karboksyy-15 lihappopolymeerejä saavutetaan esimerkiksi käyttämällä vaiheessa (a) vesipitoista nestettä, jonka pH-arvo on vähintään noin 5. Tämä voidaan saavuttaa esimerkiksi käyttämällä sopivia puskureita, joihin kuuluvat natriumbisiini (bisiini on Ν,Ν-bis-(2-hydroksietyyli)glysiini), glysyyli-20 glysiini, AMP-puskuri (2-amino-2-metyyli-l-propanoli), TAPS (N-tris-(hydroksimetyyli)-metyylili-3-aminopropaani-sulfonihappo) ja TRIS (tris-(hydroksimetyyli)-aminometaani).
Toisessa toteutuksessa reagenssin migraation esto-aine on sulfonihappopolymeeri. Näitä sulfonihappopolymee-25 rejä voivat olla esimerkiksi polystyreenisulfonaatti, 2-akryyliamido-2-metyylipropaanisulfonihapon ja styreenin kopolymeeri ja polyvinyylisulfonihappo.
Olosuhteet, jotka tehokkaasti ionisoivat polysulfo-nihappoja, saavutetaan esimerkiksi käyttämällä vaiheessa 30 (a) vesipitoista nestettä, jonka pH-arvo pidetään alueella, joka vastaa käytetyn määrätyn polysulfonihapon pKa-arvoa siten, että sulfonihapporyhmät ionisoituvat.
Vielä seuraavassa toteutuksessa reagenssin migraation estoaine on polyamiini, joka ionisoituu yhdellä pH-arvon 35 alueella ja on ionisoitumaton eri pH-arvon alueella. Näitä 8 78360 polyamiineja voivat olla esimerkiksi polylysiini, polyargi-niini ja polyhistidiini.
Olosuhteet, jotka tehokkaasti ionisoivat polyamiineja, saavutetaan esimerkiksi käyttämällä vaiheessa (a) vesipi-5 toista nestettä, jonka pH-arvo pidetään alueella, joka suhtautuu käytetyn määrätyn polyamiinin pKa-arvoon siten, että amiiniryhmät ionisoituvat.
Vielä seuraavassa toteutuksessa reagenssin migraation estoaine on ionisoituva fenoli. Näitä ionisoituvia fenoleja 10 on esimerkiksi polytyrosiini.
Olosuhteet, jotka tehokkaasti ionisoivat ionisoituvaa fenolia, saavutetaan esimerkiksi käyttämällä vaiheessa (a) vesipitoista nestettä, jonka pH-arvo pidetään alueella, joka suhtautuu käytetyn määrätyn fenolin pKa-arvoon siten, 15 että fenoliryhmät ionisoituvat.
Tämän keksinnön yhteydessä migraation estoaineen liukoisuudelle ei vaadita täydellisen liukenemisen tapahtumista. Jopa muutamia prosentteja, kuten esimerkiksi 10 prosenttia oleva migraation estoaineen liukenevuus voi riittää halutun 20 tuloksen saavuttamiseen. Liukenevuusaste, joka sallii ana-lyytin ilmaisujärjestelmän aineosien välisen vuorovaikutuksen, on kaikki mikä vaaditaan.
Migraation estoaineen liukenemattomuuden ionisoitumat-tomana kohdan (a) nesteeseen täytyy olla sellaisen, että liu-25 koisuuden aste ja nopeus alenee voimakkaasti sen ionisoituun muotoon verrattuna.
Tämän keksinnön yhteydessä migraation estoaineen ioni-soitumiselle ei vaadita, että kaikki tai edes useimmat migraation estoaineen ionisoituvista ryhmistä ionisoituvat.
30 Täten sopivasti muodostamalla välineen komponentit migraation estoaineen ionisoituvien ryhmien jopa pienen prosenttiosuuden, kuten esimerkiksi 10 prosentin ionisoituminen voi riittää halutun reagenssipitoisuuden tasaisuuden ja signaali-tason saavuttamiseen kauttaaltaan välineessä.
35 Kohdan (a) reagenssi voi muodostua esimerkiksi (i) spe sifisestä sidoskumppanista analyyttiä varten tai (ii) spesifi- f 78360 sestä sidoskumppanista analyyttiä varten ja komponentista, joka pystyy reagoimaan merkkikonjugaatin kanssa, mikä muodostuu merkkikomponentista kytkettynä analyytin osaan tai sen spesifiseen sidosanalogiin merkkikomponentin lohkaise-5 miseksi.
Tämän eräs toteutus on menetelmä homogeenisen, spesifisen sidosanalyysivälineen valmistamiseksi analyytin määrittämiseksi nestemäisessä näytteessä, mikä menetelmä käsittää (a) kantajan kyllästämisen nestemäisessä väliainees-10 sa olevalla koostumuksella, mikä koostumus sisältää β-qa-laktosidaasia ja vasta-ainetta analyytille, olosuhteissa, jotka tehokkaasti ionisoivat monoesteri-maleiinihappopoly-meerin karboksyylihapporyhmän ja sitten (b) kohdan (a) mukainen kantaja kyllästetään koostumuksella orgaanisessa nes-15 teessä, mikä koostumus sisältää /3-galaktosyyli-umbellife-roni-analyyttiä tai analyytin analogista konjugaattia sekä monoesteri-maleiinihappopolymeeriä ja kantaja kuivataan.
Eräs määrätty esimerkki on menetelmä homogeenisen, spesifisen sidosanalyysivälineen valmistamiseksi gentami-20 siinin määrittämiseksi nestemäisestä näytteestä, mikä menetelmä käsittää (a) kantajan kyllästämisen vesipitoisessa nesteessä olevalla koostumuksella, mikä koostumus sisältää -galaktosidaasia ja vasta-ainetta gentamisiinille, olosuhteissa , jotka tehokkaasti ionisoivat monoesteri-maleiini-25 happopolymeerin karboksyylihapporyhmän ja kantajan kuivaamisen ja sitten (b) kohdan (a) mukaisen kantajan kyllästämisen koostumuksella asetonipitoisessa nesteessä, mikä koostumus sisältää -galaktosyyli-umbelliferoni-sisomisiini-konju-gaattia ja monoesterimaleiinihappopolymeeriä ja kantajan 30 kuivaamisen.
Toinen toteutus on menetelmä homogeenisen, spesifisen sidosanalyysivälineen valmistamiseksi analyytin määrittämistä varten nestemäisestä näytteestä, mikä menetelmä käsittää (a) kantajan kyllästämisen vesipitoisessa nesteessä 35 olevalla koostumuksella, mikä koostumus sisältää glukoosia.
10 78360 peroksidaasia, glukoosioksidaasia, apoentsyymiä ja ana-lyytin vasta-ainetta, olosuhteissa, jotka tehokkaasti ionisoivat monoesteri-maleiinihappopolymeerin karboksyyli-happoryhmän ja kantajan kuivaamisen ja sitten (b) kantajan 5 kyllästämisen asetonipitoisessa nesteessä olevalla koostumuksella, mikä koostumus sisältää flaviini-adeniini-di-nukleotidi-analyyttiä tai analyytin analogista konjugaat-tia tetra-alkyylibentsidiinissä kuten 3,3',5,5'-tetrame-tyylibentsidiinissä ja monoesterimaleiinihappopolymeeriä 10 ja kantajan kuivaamisen.
Seuraava toteutus on menetelmä, joka ennen vaiheita (a) ja (b) käsittää lisävaiheena indikaattorireagenssin lisäämisen kantajaan nesteessä, joka tehokkaasti estää indikaattorireagenssin reaktion kohdan (a) reagenssin kanssa 15 ennen välineen saattamista kosketukseen näytteen kanssa sekä kantajan kuivaamisen. Edullisesti tämä indikaattorirea-genssi sisältää tetra-alkyylibentsidiiniä kuten 3,3',5,5'-tetrametyylibentsidiiniä.
Tämän toteutuksen eräs määrätty esimerkki on mene-20 telmä homogeenisen, spesifisen sidosanalyysivälineen valmistamiseksi teofylliinin määrittämiseksi nestemäisestä näytteestä, mikä menetelmä käsittää (1) kantajan kyllästämisen asetonipitoisessa nesteessä olevalla koostumuksella, joka sisältää 3,5',5,5'-tetrametyylibentsidiiniä ja kan-25 tajan kuivaamisen; sitten (2) kantajan kyllästämisen vesipitoisessa nesteessä olevalla koostumuksella, mikä koostumus sisältää glukoosia, peroksidaasia, glukoosioksidaa-siapoentsyymiä ja teofylliinin vasta-ainetta, olosuhteissa, jotka tehokkaasti ionisoivat monoesterimaleiinihapon 30 karboksyylihapporyhmän ja kantajan kuivaamisen; ja sitten (3) kantajan kyllästämisen asetonipitoisessa nesteessä olevalla koostumuksella, mikä koostumus sisältää flaviiniade-niinidinykleotidi-teofylliini-konjugaattia ja monoesteri-maleiinihappopolymeeriä ja kantajan kuivaamisen.
35 Tutkittaessa lukuisia migraation estoaineen pitoisuuk sia on havaittu, että pitoisuusalue ei ole kriittinen paitsi, n 78360 että riittävä minimimäärä täytyy lisätä halutun tehon saavuttamiseksi. Tämä minimimäärä voidaan määrätä vastaamaan käytettävää, spesifistä analyytin ilmaisevaa järjes-telmää.
5 Väline voi olla itsetukeva ja se voidaan kiinnit tää alustaan. Alusta voi olla läpinäkymätön tai se voi läpäistä valoa tai muuta energiaa. Tukialustan valinta kulloistakin kantajaa varten voidaan sovittaa haluttua signaalin ilmaisutapaa vastaavasti. Tukialustoihin kuulo luvat läpinäkymättömät tukialustat ja läpinäkyvät tuki-alustamateriaalit, jotka pystyvät läpäisemään sähkömagneettista säteilyä aallonpituudella, joka on alueella 200 nanometrin (nm) ja 900 nanometrin (nm) välillä. Voi myös olla edullista käyttää tukialustaa, joka läpäisee 15 yhden tai useamman kapean aallonpituuskaistan ja on läpinäkymätön viereisten aallonpituuskaistojen suhteen. Tämä voidaan saavuttaa esimerkiksi kyllästämällä tai päällystämällä tukialusta yhdellä tai useammalla väriaineella, joiden absorptio-ominaisuudet ovat sopivat. Tyypil-20 lisiä tukialustoja valmistetaan polystyreenistä, kartongista tai lukuisista muista rakenteellisesti stabiileista materiaaleista.
Seuraavat esimerkit valaisevat keksintöä.
Esimerkeissä 1-6 fluoresenssi mitattiin kuituop-25 tillistä fluorometriä käyttäen, joka on erikoisesti suunniteltu (Ames Company, Division of Miles Laboratories, Inc., Elkhart, IN) fluoresoivan emission mittaamiseksi analyyttisistä välineistä, joita pidetään vaakasuorassa. Kojeessa käytettiin jatkuvasti emittoivaa elohopeavalo-30 lähdettä, kuituoptillista lukupäätä, valomonistinta fluoresenssin ilmaisemiseksi ja mekaanista pidintä luettavaa analyyttistä välinettä varten. Tämä mekaaninen välineen p pidin on samanlainen kuin mitä käytetään Seralyzer heijastusfotometrissä (Ames Company, supra). Välinettä 35 pidetään paikallaan vaakasuuntaisessa asennossa ja i2 78360 luettava, säteilytetty pinta on ylöspäin ja luetaan yläpuolelta. Fluorometrissä on aallonpituuden interferens-sisuodattimet viritysvalolähteen muodostamiseksi, jonka aallonpituus on 405 nanometriä (nm) ja joka kohdistuu 5 välineen pintaan 90° kulmassa. Fluoresoivan valon etupintani! ttaus , joka emittoituu aallonpituudella 450 nm, suoritetaan myös 90° kulmassa alustan suhteen.
Esimerkki 1 Väline valmistettuna polymeeriä käyttämättä 10 Tässä esimerkissä esitetään kokeita, jolloin vä line valmistettiin käyttämättä keksinnön mukaista rea-genssimigraation estoainetta.
Välineen valmistus Välinettä valmistettaessa on välttämätöntä lisätä 15 annettu määrä &-galaktoosi-umbelliferoni-fenobarbitaa-lin (yö-GUPB) fluoresoivaa konjugaattia jokaiseen välineeseen. Tässä esimerkissä käytetty ^-GUPB-konjugaatti valmistettiin US-patentissa nro 4 279 992 esimerkissä 9 esitetyllä tavalla. Fenobarbitaali on käyttökelpoinen 20 kouristuksia estävä, hypnoottinen ja rauhoittava aine.
Näissä kokeissa tutkittuja välineitä valmistettaessa käytetyt liuokset sisälsivät seuraavia aineosia:
Vesipitoinen liuos 25
Aineosa Määrä, ml 1) Normaalia kanin seerumia 8 2) Natriumbisiinin 1,2 molaarinen (M) ja magnesiumkloridin 0,1 mo- 30 laarinen liuos vedessä, -n pH-arvo 9,0 3) ^3-galaktosidaasi-varastoliuos-ta (165 Ames-yksikköä/ml 50 mmoo-lissa natriumbisiiniä vedessä, pH-arvo 8,5 1 35 4) Tislattua vettä 11
II
i3 78360
Yksi /^-galaktosidaasin Aines-yksikkö on se määrä entsyymiä, joka hydrolysoi 1,0 mikromoolia ortonitro-fenyyli-/6-D-galaktopyranosidiä (ONPG) ortonitrofenyylik-si yhdessä minuutissa vesipitoisessa puskurissa, 0,05 molaa-5 risessa natriumbisiinissä, pH-arvo 8,5, joka sisältää 0,003 moolia ONPG-materiaalia, 25°C lämpötilassa.
Orgaaninen liuos
Aineosa Määrä, ml
1) 4,8 mikromoolia (yUM) /&-GUPB:tä asetonissa 10 10 Kooltaan 7,5 cm x 15 cm oleva palanen Whatman 31ET
paperia (Whatman, Inc., Clifton, NJ) kyllästettiin täysin edellä valmistetulla vesipitoisella liuoksella ja kuivattiin kiertouunissa 50°C lämpötilassa 15 minuutin aikana. Paperi kyllästettiin sitten täysin orgaanisella liuoksella 15 samalla tavalla, jolloin paperi sisälsi vesipitoisen liuoksen kuivatun jäännöksen ja paperi kuivattiin uudestaan kiertouunissa 50°C lämpötilassa 15 minuutin aikana.
Tämä palanen kyllästettyä paperia sijoitettiin hopeoi-R
dun Mylar -polyesterikalvon (3M Company, St. Paul, MN) lii-20 mapinnalle, jolloin muodostui laminaatti, joka sijoitettiin sitten Y915 liimanauhalle (3M Company, supra), jonka toisella pinnalla oli erotuskalvo. Tämä lopullinen laminaatti leikattiin yhden sentimetrin levyisiksi liuskoiksi, jotka erotusalustan poistamisen jälkeen sijoitettiin 6 mm pää-25 hän 83,3 cm levyisen Trycite polyesterikalvonauhan (3M
Company, supra) sivureunasta. Trycite'lle sijoitettu laminaatti leikattiin poikkisuunnassa 5 millimetrin (mm) levyisiksi liuskoiksi, jolloin jokainen lopullinen liuska sisälsi siten 5 mm x 10 mm suuruisen palasen kyllästettyä pa-30 periä.
Analyyttinen menettely
Jokainen täten valmistettu väline testattiin saattamalla se kosketukseen 30 mikrolitran (^ul) suuruisen määrän kanssa tislattua vettä.
35 Välineen sijoittamisen jälkeen mittalaitteen liuskan- pitimeen pipetoitiin alimäärä testiliuosta välineen paljaalle i4 78360 pinnalle ja liuskanpidin sijoitettiin fluoresenssin ilmai-sulaitteeseen.
Fluoresoivien ainelajien migraatio kolmen (3) minuutin konjugaatin reaktioajan jälkeen /0-galaktosidaasin 5 kanssa mitattiin skannaamalla kyllästetyn paperin säteily-tetyn pinnan eri kohdista emittoituva fluoresenssi. Migraa-tioindeksi/ Rm, laskettiin reagenssialustan keskikohdan (näytteen sijoituskohta) fluoresenssisignaalin suhteena jokaisen välineen etu- ja takareunan fluoresenssisignaalien 10 keskiarvoon.
Tulokset
Koe nro Rm 1 0/80 2 0,79 15 3 0,90
Keskiarvo 0,83
Normaalipoikkeama 0,06
Johtopä ä tök s e t Tässä esimerkissä esitetyllä tavalla valmistetuissa 20 välineissä esiintyi huomattavaa vaihtelua kyllästetyn paperin säteilytetyn pinnan eri kohdista emittoituneen fluoresenssin suhteen, kuten migraatioindeksi osoittaa. Tämä ilmiö aiheuttaa luotettavuuden heikkenemisen, mikä ei ole hyväksyttävä.
25 Esimerkki 2
Polymeeriä pelkästään ensimmäisessä (vesipitoisessa) kyllästyksessä Tässä esimerkissä esitellään kokeita, joissa väline valmistettiin monoesterimaleiinihappopolymeeriä käyttäen, 30 jota lisättiin ensimmäisessä kyllästyksessä käytettyyn vesipitoiseen liuokseen, mutta ei lisätty toiseen, orgaani-seen liuokseen, jota käytettiin toisessa kyllästyksessä, - johon oli lisätty /^-GUS-konjugaattia.
Gantrez AN-139:n monometyyliesterin synteesi 35 Absoluuttista metanolia, 570 millilitraa (ml), sijoi tettiin yhden litran lasiastiaan ja lisättiin 50 grammaa (g) is 78360
Gantrez AN-139 tuotetta sekoittaen nopeasti magneettisella sekoituslevyllä. Lisättiin väkevöityä rikkihappoa, 10 mik-rolitraa (yUl) ja lietettä sekoitettiin huoneenlämpötilassa yksi tunti. Lämpötila nostettiin 55-60°C:seen kolmen 5 tunnin ajaksi pitäen astian kantta hieman avoimena. Tänä aikana liukeni suurin osa kiinteästä materiaalista ja saatiin hieman samea liuos. Tämä liuos jäähdytettiin huoneenlämpötilaan ja sitä sekoitettiin vielä 18 tuntia. Kiinteistä jäännöksistä ei liuennut mitään. Noin 10-prosentti-10 nen (paino/paino) Gantrez AN-139-monometyyliesterin liuos varastoitiin 4°C lämpötilassa ja sitä käytettiin tarvittaessa. Välineen valmistus Välinettä valmistettaessa on välttämätöntä lisätä annettu määrä fluoresoivaa konjugaattia, -galaktoosi-umbel-15 liferoni-sisomisiiniä ( -GUS) jokaiseen analyysivälineeseen. Tämä esimerkissä käytetty /0-GUS-konjugaatti valmistettiin US-patentin nro 4 279 992 esimerkissä 1 esitetyllä tavalla. Sisomisiini on gentamisiinin spesifinen sidos-analogi. Gentamisiini on vesiliukoinen, laajaspektrinen 20 aminoglykosidi-antibioottinen aine. Gentamisiinin antiseerumi valmistettiin julkaisussa Nature New Biol 239:214 (1972) esitetyllä tavalla.
Näissä kokeissa tutkittuja välineitä valmistettaessa käytetyt liuokset sisälsivät seuraavat aineosat.
25 Vesiliuos Määrä, ml 1) Gantrez AN-139-monometyyliesteriä (10-prosenttinen (paino/tilavuus) metanolissa) 10 2) Natriumbisiini-puskuria (50 mM, pH-arvo 8,5) 90 30 Orgaaninen liuos 1) Asetonia 100 2) /^-GUS-varastoliuosta (2250 ,uM dimetyy- :: lisulfoksidissa (DMSO)) ' 0,2
Edellä esitetty vesipitoista liuosta käyttäen kyl-3£. lästettiin täysin 10 cm levyinen rulla Whatman 31ET paperia (Whatman, Inc., Clifton, NJ) ja kuivattiin 7,5 minuu- 16 7 8 360 tin aikana Overly kiertoilmakuivaajassa (Overly Inc., Neenah, WI) 50°C lämpötilassa. Toisen kaston (orgaaninen liuos) avulla suoritettiin vastaava kyllästys. Välinettä käsiteltiin sitten esimerkissä 1 esitetyllä tavalla.
5 Analyyttinen menettely Tässä esimerkissä esitetyllä tavalla valmistettuja välineitä testattiin käyttäen esimerkissä 1 esitettyä menettelyä paitsi, että lisätty näyte oli 25 mikrolitran liuos β-galaktosidaasia (2 yksikköä/ml) 0,03 M natrium-10 bisiini-puskurissa, pH-arvo 8,5.
Tulokset
Koe nro Rm 1 0,66 2 0,78 15 3 0,77
Keskiarvo 0,74
Normaalipoikkeama 0,07 J ohtopäätökset Tässä esimerkissä esitetyllä tavalla valmistetuissa 20 analyysivälineissä esiintyi huomattavia vaihteluita kyllästetyn paperin säteilytetyn alueen eri kohdissa emittoituneessa fluoresenssissä, kuten migraatioindeksi osoittaa. Tämä ilmiö aiheuttaa luotettavuuden heikkenemistä, mitä ei voida hyväksyä.
25 Esimerkki 3
Polymeeriä käytetään molemmissa kyllästyksissä Tässä esimerkissä esitellään kokeita, jolloin fluoresoiva väline valmistettiin lisäten monoesterimaleiinihappo-polymeeriä sekä ensimmäisessä kyllästyksessä käytettyyn 30 vesipitoiseen liuokseen että toisessa kyllästyksessä käytettyyn toiseen, orgaaniseen liuokseen, johon lisättiin /^-GUPB-kon jugaattia.
Analyysivälineen valmistus Näissä kokeissa tutkittujen välineiden valmistuk-35 sessa käytetyt liuokset sisälsivät seuraavat aineosat.
Il 17 78360
Vesipitoinen liuos
Aineosa Määrä, ml 1) Normaalia kanin seerumia 5 2) 2 % (paino/tilavuus) Gantrez ES-225-materiaalia 1,2 M natriumbisiinissä ja 0,1 M MgC^issa vedessä, pH-arvo 9,0 50 3) β-galaktosidaasi-varastoliuosta (165 Ames-yksikköä/ml 0,05 M natriumbisii- niä vedessä, pH-arvo 8,5 3,4 4) Tislattua vettä 41,6 ^ Gantrez ES-225 on kaupallisesti saatava Gantrez AN-119-monoetyyliesteri.
Orgaaninen liuos
Aineosa Määrä, ml 1) Gantrez ES-335 6 2) Asetonia 94
3) A-GUPB-varastoliuosta (948 ,uM
DMSO:ssa) ' 0,50
Edellä esitettyjä liuoksia käyttäen välineet valmistettiin sitten esimerkissä 2 esitetyllä tavalla paitsi, että käytettiin 5 cm levyistä rullaa Whatman 31ET
20 paperia ja kokonaiskuivausaika oli viisi minuuttia. Analyyttinen menettely Tässä esimerkissä esitetyllä tavalla valmistetut välineet tutkittiin käyttäen analyyttistä menettelyä, joka oli sama kuin esimerkissä 1 esitetty.
25
Tulokset
Koe nro Rm 1 0,98 2 0,94 3 0,96 ^ Keskiarvo 0,96
Todennäköinen poikkeama 0,02 J oh topää töks e t Tämän esimerkin mukaan valmistetuissa välineissä esiintyi häviävän pieniä muutoksia kyllästetyn paperin säteilytetyn pinnan eri osien emittoimassa fluoresenssissa, 35 18 78360 kuten migraatioindeksi osoittaa. Tämä osoittaa, että keksinnön mukainen parannus poistaa luotettavuuden puutteen, mikä on ollut haittana alan aikaisemmissa välineissä, kuten esimerkeissä 1 ja 2 on osoitettu ja osoittaa myös, 5 että tätä parannusta ei haittaa migraation estoaineen lisääminen molempiin kyllästyksiin.
Esimerkki 4
Polymeeriä pelkästään jälkimmäisessä kyllästyksessä Tässä esimerkissä esitellään kokeita, joissa substraat-10 ti-merkitty, fluoresoiva immunoanalyysiväline valmistettiin käyttäen monoesterimaleiinihappopolymeeriä pelkästään toisessa, orgaanisessa liuoksessa, jota käytettiin /5-GUPB-konjugaatin kyllästämiseksi. Polymeeriä ei lisätty ensimmäisessä kyllästyksessä käytettyyn vesipitoiseen liuok-15 seen.
Analyysivälineen valmistus Näissä kokeissa tutkittuja välineitä valmistettaessa käytetyt liuokset sisälsivät seuraavia aineosia.
Vesipitoinen liuos 20 Aineosa Määrä, ml 1) Normaalia kanin seerumia 8 2) 1,2 M natriumbisiiniä, 0,1 M MgC^rta ja 0,1 % (paino/tilav.) natrium- atsidia vedessä, pH-arvo 9,0 20 3) /ö-galaktosidaasi-varastoliuosta 25 (165 Ames-yksikköä/ml 50 milli- moolissa natriumbisiini-puskuria, pH-arvo 8,5) 1 4) Tislattua vettä 11
Orgaaninen liuos
Aineosa Määrä, ml 30 1) 4,8 ,uM ^-GUPBstä 3-prosentti- sessa (paino/tilav.) Gantrez ES-225-liuoksessa asetonissa 10
Edellä esitettyjä liuoksia käyttäen valmistettiin analyysivälineet esimerkissä 1 esitettyä menettelyä käyttäen.
35 Analyyttinen menettely Tässä esimerkissä esitetyllä tavalla valmistettuja i9 78360 analyysivälineitä tutkittiin käyttäen testiliuoksia ja analyyttisiä menettelyjä, jotka olivat samat kuin esimerkissä 1 esitetyt.
Tulokset 5 Koe nro Rm 1 0,96 2 0,97 3 0,98
Keskiarvo 0,97 10 Todennäköinen poikkeama 0,01 J ohtopäätökset Tässä esimerkissä esitetyllä tavalla valmistetuissa analyyttisissä välineissä esiintyi vähäisiä vaihteluita kyllästetyn paperin säteilytetyn alueen eri osista emit-15 toituneessa fluoresenssissa, minkä migraatioindeksi osoittaa. Tämä osoittaa, että keksinnön mukaisella parannuksella voidaan poistaa luotettavuuden puute, mikä on ollut haittana alan aikaisemmissa välineissä, kuten esimerkit 1 ja 2 osoittavat sekä osoittaa, että migraation estoainetta 20 tarvitsee lisätä vain toiseen kyllästykseen.
Esimerkki 5
Muun polymeerin käyttö pelkästään toisessa kyllästyksessä
Substraattimerkitty fluoresoiva immunoanalyysiväline 25 fenobarbitalia varten Tässä esimerkissä esitetään kokeet, joissa substraatti-merkitty, fluoresoiva immunoanalyysiväline valmistettiin lisäämällä monoesterimaleiinihappopolymeeriä vain toiseen, kyllästyksessä käytettyyn >3-GUPB-konjugaatin 30 orgaaniseen liuokseen. Polymeeriä ei lisätty ensimmäisessä kyllästyksessä käytettyyn vesipitoiseen liuokseen.
Analyys i välineen vaImis tus Näissä kokeissa käytettyjä välineitä valmistettaessa käytetyt liuokset sisälsivät seuraavia aineosia.
35 Vesipitoinen liuos 20 78360
Aineosa Määrä, ml 1) 1,2 M natriumbisiiniä ja 0,1 M magnesiumkloridia vedessä, pH-arvo 9,0 7,5 2) Antiseerumia fenobarbitaalille 6 5 3) P -galaktosidaasi-varastoliuosta (176 Ames-yksikköä/ml 50 mM natriumbisiiniä vedessä, pH-arvo 8,5 0,5 4) Vettä
Orgaaninen liuos 10 Aineosa Määrä, ml 1) 1-prosenttista (paino/tilav.)
Gantrez ES-355-I:tä (Gantreaz AN-119-monoisopropyyliesteriä) asetonissa 15
2) /ö-GUPB-varastoliuosta (958 ,uM
15 DMSO:ssa) 7 0,188
Antiseerumi fenobarbitalille otettiin talteen kaneista, jotka oli immunisoitu fenobarbitaali-boviiniseerumi-albumiihi-immunogeeni-konjugaatilla. Edellä esitettyjä liuoksia käyttäen valmistettiin analyysiväline sitten 20 esimerkissä 2 esitettyä menettelyä käyttäen paitsi, että käytettiin 5 cm levyistä Whatman 31 ET paperirullaa. Analyyttinen menettely Tässä esimerkissä esitetyllä tavalla valmistetut välineet testattiin käyttäen analyyttistä menettelyä, 25 joka oli sama kuin esimerkissä 1 paitsi, että näytteet olivat 30 mikrolitran suuruisia vesiliuoksia, jotka sisälsivät 5 % (tilav./tilav.) normaalia ihmisen seerumia ja fenobarbitalia (3 g/ml).
Tulokset 30 Koe nro Rm 1 1,04 2 0,98 3 0,99
Keskiarvo 1,00 35 Todennäköinen poikkeama 0,03
Johtopäätökset Tässä esimerkissä esitetyllä tavalla valmistetuissa
II
21 78360 analyysivälineissä esiintyi vain vähäisiä vaihteluita kyllästetyn paperin säteilytetyn alueen eri kohdista emittoituneessa fluoresenssissa, kuten migraatioindeksi osoittaa. Tämä osoittaa, että keksinnön mukaisen paran-5 nuksen avulla voidaan poistaa luotettavuuden puute, mikä on haitannut alan aikaisempia välineitä, kuten esimerkeissä 1 ja 2 on osoitettu ja osoittaa myös toisen migraation estoaineen käyttömahdollisuus. Lisäksi tämän esimerkin kokeet osoittavat migraation estoaineen yhteensopivuuden 10 täydellisen, substraattimerkityn immunoanalyyttisen järjestelmän kanssa.
Esimerkki 6
Substraattimerkitty fluoresoiva immunoanalyysiväline gentamisiinin suhteen 15 Tässä esimerkissä esitellään kokeita, joissa substraat timerkitty fluoresoiva immunoanalyysiväline gentamisiiniä varten valmistettiin käyttäen monoesterimaleiinihappopoly-meeriä vain toisessa, orgaanisessa liuoksessa, jota käytettiin yö-GUS-konjugaatin kyllästämiseen. Polymeeriä ei 20 lisätty ensimmäisessä kyllästyksessä käytettyyn vesipitoiseen liuokseen.
Analyysivälineen' valmistus Näissä kokeissa testattujen välineiden valmistuksessa käytetyt liuokset sisälsivät seuraavia aineosia.
25 Vesipitoinen liuos
Aineosa Määrä, ml 1) 1,2 M natriumbisiiniä ja 0,1 M mag- nesiumkloridia vedessä, pH-arvo 9,0 7,5 2) Antiseerumia gentamisiinille 1,2 3) /ö-galaktosidaasi-varastoliuosta 30 (160 Amesyksikköä/ml 50 mM natriumbisiiniä vedessä, pH-arvo 8,5 0,5 4) Vettä 5,8
Orgaaninen liuos
Aineosa Määrä, ml 1) 2-prosenttista (paino/tilav.) Gantrez 35 ES-255-monoetyyliesteriä asetonissa 15 22 7 8 3 6 0 2) 2,8 mM /^-GUS-varastoliuosta (0,005 moolissa natriumformaattia, joka sisälsi 0,1 % (paino/tilav.) natriumatsi-dia, pH-arvo 3,5) 25,7 ml
Edellä esitettyjä liuoksia käyttäen valmistettiin 5 analyysivälineet esimerkissä 3 esitettyä menettelyä käyttäen.
Analyyttinen menettely Tässä esimerkissä esitetyllä tavalla valmistetut välineet testattiin käyttäen testiliuoksia ja analyyttisiä 1Q menettelyjä, jotka olivat samat kuin esimerkissä 1 esitetyt paitsi, että näytteinä käytettiin 30 mikrolitran suuruisia määriä liuosta, joka sisälsi 10 % normaalia ihmisen seerumia ja gentamisiinia (4 ^,ug/ml) .
Tulokset 15 Koe nro Rm 1 0,95 2 0,94 3 0,95
Keskiarvo 0,95 20 Todennäköinen hajonta 0,01
Johtopäätökset
Keksinnön avulla saatu parannus on osoitettu myös tässä esimerkissä, jossa täydellinen substraattimerkitty fluoresoiva immunoanälyysijärjestelmä on lisätty analyytti-25 seen välineeseen.
Kokeet, joissa on käytetty orgaanista väriainetta edellä esitetyissä esimerkeissä käytettyjen konjugaattien asemasta, ovat osoittaneet keksinnön mukaisen migraation eston käyttökelpoisuuden lukuisia reagenssijärjestelmiä 30 käytettäessä. Tämän osoittavat seuraavat esimerkit.
Esimerkki 7
Bromofenolisininen väriaine toisessa kastossa käyttämättä polymeeriä kummassakaan kastossa Tässä esimerkissä esitellään kokeita, joissa valmis-35 tettiin liuskoja, jotka sisälsivät puskuria ja bromifenoli-sinistä väriainetta, jolloin ensimmäinen, vesipitoinen liuos
II
23 78360 sisälsi puskuria ja toinen, orgaaninen liuos sisälsi bromifenolisinistä väriainetta, hyvin tunnettua pH-indi-kaattoria, mutta kumpikaan liuos ei sisältänyt keksinnön mukaista migraation estoainetta.
5 Analyysivälineen valmistus Näissä kokeissa tutkittuja välineitä valmistettaessa käytetyt liuokset sisälsivät seuraavia aineosia.
Vesipitoinen liuos
Aineosa Määrä, ml
10 1) 0,6 M natriumbisiiniä ja 0,05 M
magnesiumkloridia vedessä, pH-arvo 9,0 10
Orgaaninen liuos
Aineosa Määrä 1) Bromifenolisinistä 5,6 mg 2) Asetonia 20 ml 15
Edellä esitettyjä liuoksia käyttäen valmistettiin sitten analyysiväline esimerkissä 2 esitetyllä tavalla paitsi, että käytettiin 5 cm levyistä Whatman 54 paperirullaa.
20 Analyyttinen menettely
Kolme liuskaa sijoitettiin laboratoriopöydän pinnalle ja 20 ^ul vettä pipetoitiin kyllästetyn paperin keskiosaan huolehtien 'tarkoin liuskan värittymistä tasaisesti.
25 Tulokset
Kaikissa kolmessa liuskassa suurin osa bromifenoli-sinisestä väriaineesta peseytyi pois kyllästetyn paperin keskiosasta reunoja kohti, jolloin keskiosan värittyminen väheni.
30 Johtopäätökset
Pelkästään visuaalinen tarkastus oli riittävä havaitsemaan värin epätasaisuuden liuskoissa, jotka oli valmistettu tässä esimerkissä esitetyllä tavalla.
Esimerkki 8 35 Bromifenolisinistä väriainetta toisessa kastossa polymeerin kanssa toisessa kastossa pelkästään 24 7 8 3 6 0 Tässä esimerkissä esitellään kokeita, joissa valmistettiin liuskoja, jotka sisälsivät puskuria ja bromi-fenolisinistä väriä, jolloin ensimmäinen, vesipitoinen liuos sisälsi puskuria ja toinen, orgaaninen liuos sisälsi 5 bromifenolisinistä väriä ja monoesterimaleiinihappopoly-meeriä.
Analyysivälineen valmistus Näissä kokeissa tutkittuja välineitä valmistettaessa käytetyt liuokset sisälsivät seuraavia aineosia.
10 Vesipitoinen liuos
Aineosa Määrä 1) 0,6 M natriumbisiiniä ja 0,05 M magnesiurnkloridia vedessä, pH-arvo 9,0 10 ml
Orgaaninen liuos 15
Aineosat Maara 1) Bromifenolisinistä 5,6 mg 2) Gantrez ES-225 (50-prosenttinen (paino/tilav.) etanolissa) 1,2 ml 3) Asetonia 20 ml 20 Edellä olevia liuoksia käyttäen valmistettiin ana lyysivälineen esimerkissä 2 esitetyllä tavalla paitsi, että käytettiin 5 cm levyistä Whatman 54 paperirullaa. Analyyttinen menettely
Analyyttinen menettely oli sama kuin esimerkissä 7.
25 Tulokset
Jokaisessa kolmessa liuskassa vähän tai ei lainkaan bromifenolisiniväriä peseytyi pois keskustasta reunoja kohti antaen kyllästetyn liuskan, joka visuaalisesti havaittiin väriltään tasaiseksi kauttaaltaan.
30 Johtopäätökset Tämä esimerkki osoittaa keksinnön mukaan saatavan parannuksen huomattavasti eri tyyppisiä reagensseja käyttäen, so. bromifenolisinistä väriainetta kyllästetyssä liuskassa.
35 Vaikka erikoisesti ei ole esitetty, voidaan lukuisia muutoksia tehdä keksinnön yksityiskohtiin poikkeamatta keksinnön alueesta.

Claims (10)

25 78360
1. Menetelmä testiliuskan valmistamiseksi, jossa liuskassa reagenssin migraatio pois näytteen sijoituskoh-5 dasta on minimoitu, tunnettu siitä, että a) kantaja yhdistetään nesteessä olevan koostumuksen kanssa, joka sisältää vähintään yhtä analyyttimääri-tysjärjestelmän reagenssia, olosuhteissa, jotka tehokkaasti ionisoivat reagenssimigraatiota estävän aineen, 10 joka ei-ionisoidussa muodossa ei liukene mainittuun nesteeseen ja ionisoidussa muodossa liukenee mainittuun nesteeseen, ja kantaja kuivataan, minkä jälkeen b) kohdassa a) saatu kantaja yhdistetään toisen nesteessä olevan koostumuksen kanssa, jolloin neste on muu 15 kuin kohdassa a) mainittu ja koostumus sisältää muut jäljellä olevat analyyttimääritysjärjestelmän reagenssit, jotka reagoivat kohdassa a) mainitun reagenssin kanssa, sekä reagenssimigraatiota estävää ainetta, joka ei-ionisoidus-sa muodossa liukenee mainittuun nesteeseen, ja jolloin nes-20 te tehokkaasti estää toisen koostumuksen reaktion kohdassa a) mainitun reagenssin kanssa ennen liuskan saattamista kosketukseen näytteen kanssa ja estää migraatiota estävän aineen ionisoitumisen ennen kosketusta näytteen kanssa, ja kantaja kuivataan.
2. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tun nettu siitä, että reagenssimigraatiota estävä aine on karboksyylihappopolymeeri.
3. Patenttivaatimuksen 2 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että karboksyylihappolymeeri on (1) 30 metyylivinyylieetterin ja maleiinihapon monometyyliesterin, (2) metyylivinyylieetterin ja maleiinihapon monoetyylieste-rin, (3) metyylivinyylieetterin ja maleiinihapon monopropyy-liesterin, (4) metyylivinyylieetterin ja maleiinihapon mono-butyyliesterin, (5) vinyyliasetaatin ja maleiinihapon mono-35 metyyliesterin, (6) vinyyliasetaatin ja maleiinihapon mono-etyyliesterin, (7) etyleenin ja maleiinihapon monometyyli- 26 7 8 3 6 0 esterin, (8) etyleenin ja maleiinihapon monoetyyliesterin, (9) oktadekyylivinyylieetterin ja maleiinihapon monometyyli-esterin tai (10) oktadekyylivinyylieetterin ja maleiinihapon monoetyyliesterin kopolymeeri.
4. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tun nettu siitä, että reagenssimigraatiota estävä aine on sulfonihappopolymeeri.
5. Patenttivaatimuksen 4 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että sulfonihappopolymeeri on polystyree- 10 nisulfonaatti, 2-akryyliamido-2-metyylipropaanisulfonihapon ja styreenin kopolymeeri tai polyvinyylisulfonihappo.
6. Jonkin patenttivaatimuksen 1-5 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että ennen vaiheita a) ja b) kantaja yhdistetään nesteessä olevan indikaattorireagenssin kans- 15 sa, jolloin neste tehokkaasti estää indikaattorireagenssin reaktion kohdassa a) mainitun reagenssin kanssa ennen liuskan saattamista kosketukseen näytteen kanssa, ja kantaja kuivataan.
7. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä homogeeni- 20 sen, spesifisen sidosanalyysivälineen valmistamiseksi, jota välinettä käytetään nestemäisessä näytteessä olevan analyy-tin määrittämiseksi, tunnettu siitä, että a) kantaja kyllästetään vesipitoisessa nesteessä olevalla koostumuksella, joka sisältää ^-galaktosidaasia ja 25 analyytin vasta-ainetta olosuhteissa, jotka tehokkaasti : ionisoivat monoesterimaleiinihappopolymeerin karboksyyli- happoryhmän ja kantaja kuivataan, minkä jälkeen b) kohdassa a) saatu kantaja kyllästetään orgaanisessa nesteessä olevalla koostumuksella, joka sisältää /*-galakto- 30 syyli-umbelliferoni-analyyttia tai analyytin analogista kon-jugaattia ja monoesterimaleiinihappopolymeeriä, ja kantaja kuivataan.
8. Patenttivaatimusten 1 ja 7 mukainen menetelmä homogeenisen, spesifisen sidosanalyysivälineen valmistamiseksi, 35 jota välinettä käytetään nestemäisessä näytteessä olevan gentamisiinin määrittämiseksi, tunnettu siitä, että 27 78360 a) kantaja kyllästetään vesipitoisessa nesteessä olevalla koostumuksella, joka sisältää /J-galaktosidaasia ja gentamisiinin vasta-ainetta, olosuhteissa, jotka tehokkaasti ionisoivat monoesterimaleiinihappopolymeerin karboksyyli- 5 happoryhmän, ja kantaja kuivataan minkä jälkeen b) kohdassa a) saatu kantaja kyllästetään asetonipi-toisessa nesteessä olevalla koostumuksella, joka sisältää /*-galaktosyyli-umbelliferoni-sisomisiini-konjugaattia ja monoesterimaleiinihappopolymeeriä, ja kantaja kuivataan.
9. Patenttivaatimusten 1, 6 ja 7 mukainen menetelmä homogenisen, spesifisen sidosanalyysivälineen valmistamiseksi, jota välinettä käytetään nestemäisessä näytteessä olevan teofylliinin määrittämiseksi, tunnettu siitä, että 15 a) kantaja kyllästetään asetonipitoisessa nesteessä olevalla koostumuksella, joka sisältää 3,3',5,5'-tetrametyy-libentsidiiniä, ja kantaja kuivataan, minkä jälkeen b) kantaja kyllästetään vesipitoisessa nesteessä olevalla koostumuksella, joka sisältää glukoosia, peroksidaa-20 siä, glukoosioksidaasiapoentsyymiä ja teofylliinin vasta-ainetta, olosuhteissa, jotka tehokkaasti ionisoivat mono-esterimaleiinihappopolymeerin karboksyylihapporyhmän, ja kantaja kuivataan, minkä jälkeen ; c) kantaja kyllästetään asetonipitoisessa nesteessä 25 olevalla koostumuksella, joka sisältää flaviiniadeniini-di-nukleotidi-teofylliini-konjugaattia ja monoesterimaleiini-happopolymeeriä, ja kantaja kuivataan.
10. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä homogeenisen, spesifisen sidosanalyysivälineen valmistamiseksi, 30 jota välinettä käytetään nestemäisessä näytteessä olevan : analyytin määrittämiseksi, tunnettu siitä, että a) kantaja kyllästetään vesipitoisessa nesteessä olevalla koostumuksella, joka sisältää glukoosia, peroksidaa-sia, glukoosioksidaasiapoentsyymiä ja analyytin vasta-ai-35 netta, olosuhteissa, jotka tehokkaasti ionisoivat monoeste-rimaleiinihappopolymeerin karboksyylihapporyhmän, ja kantaja kuivataan, minkä jälkeen 28 7 8 3 6 0 b) kantaja kyllästetään asetonipitoisessa nesteessä olevalla koostumuksella, joka sisältää flaviiniadeniini-dinukleotidi-analyyttiä tai analyytin analogista konjugaat-tia, 3,3',5,51-tetrametyylibentsidiiniä ja monoesterimaleii-5 nihappopolymeeriä, ja kantaja kuivataan. 29 7 8 3 6 O
FI823786A 1981-11-06 1982-11-04 Foerfarande foer framstaellning av testremsa. FI78360C (fi)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US06/318,755 US4562148A (en) 1981-11-06 1981-11-06 Analytical element and method for preventing reagent migration
US31875581 1981-11-06

Publications (4)

Publication Number Publication Date
FI823786A0 FI823786A0 (fi) 1982-11-04
FI823786L FI823786L (fi) 1983-05-07
FI78360B FI78360B (fi) 1989-03-31
FI78360C true FI78360C (fi) 1989-07-10

Family

ID=23239468

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
FI823786A FI78360C (fi) 1981-11-06 1982-11-04 Foerfarande foer framstaellning av testremsa.

Country Status (14)

Country Link
US (1) US4562148A (fi)
EP (1) EP0078965B1 (fi)
JP (1) JPH0627732B2 (fi)
AT (1) ATE21174T1 (fi)
AU (1) AU551143B2 (fi)
CA (1) CA1179261A (fi)
DE (1) DE3272353D1 (fi)
DK (1) DK158245C (fi)
FI (1) FI78360C (fi)
GR (1) GR77058B (fi)
IE (1) IE54067B1 (fi)
IL (1) IL66289A0 (fi)
NO (1) NO161886C (fi)
ZA (1) ZA825300B (fi)

Families Citing this family (19)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPS59145965A (ja) * 1983-02-09 1984-08-21 Fuji Photo Film Co Ltd ビリルビン定量用分析要素
JPS6010171A (ja) * 1983-06-30 1985-01-19 Fuji Photo Film Co Ltd 多層分析要素
USRE34405E (en) * 1983-08-01 1993-10-12 Abbott Laboratories Determination of analytes in particle-containing medium
US4647430A (en) * 1985-06-20 1987-03-03 Miles Laboratories, Inc. Volume independent test device
CA1281283C (en) * 1985-08-29 1991-03-12 Elazar Rabbani Method for detecting an analyte moiety by means of signal localization
CA1289872C (en) * 1986-06-18 1991-10-01 David L. Woodrum Reversible immobilization of assay reagents in a multizone test device
US4935346A (en) 1986-08-13 1990-06-19 Lifescan, Inc. Minimum procedure system for the determination of analytes
US6168956B1 (en) 1991-05-29 2001-01-02 Beckman Coulter, Inc. Multiple component chromatographic assay device
US5998220A (en) 1991-05-29 1999-12-07 Beckman Coulter, Inc. Opposable-element assay devices, kits, and methods employing them
US5877028A (en) 1991-05-29 1999-03-02 Smithkline Diagnostics, Inc. Immunochromatographic assay device
US5547702A (en) * 1994-07-08 1996-08-20 Polymer Technology International Corporation Method for continuous manufacture of diagnostic test strips
US6458326B1 (en) 1999-11-24 2002-10-01 Home Diagnostics, Inc. Protective test strip platform
US6562625B2 (en) 2001-02-28 2003-05-13 Home Diagnostics, Inc. Distinguishing test types through spectral analysis
US6541266B2 (en) 2001-02-28 2003-04-01 Home Diagnostics, Inc. Method for determining concentration of an analyte in a test strip
US6525330B2 (en) 2001-02-28 2003-02-25 Home Diagnostics, Inc. Method of strip insertion detection
US10345281B2 (en) 2014-04-04 2019-07-09 Massachusetts Institute Of Technology Reagents for enhanced detection of low volatility analytes
US9588095B2 (en) 2012-07-24 2017-03-07 Massachusetts Institute Of Technology Reagents for oxidizer-based chemical detection
US10816530B2 (en) 2013-07-23 2020-10-27 Massachusetts Institute Of Technology Substrate containing latent vaporization reagents
JP5751365B1 (ja) * 2014-03-28 2015-07-22 栗田工業株式会社 塩素濃度測定用組成物

Family Cites Families (25)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4059405A (en) * 1972-04-11 1977-11-22 Damon Corporation Method and apparatus for analysis of constituent carried in fibrous medium
US3992158A (en) * 1973-08-16 1976-11-16 Eastman Kodak Company Integral analytical element
DE2460903C3 (de) * 1974-12-21 1981-12-24 Boehringer Mannheim Gmbh, 6800 Mannheim Neue 3,3',5,5'-Tetraalkylbenzidine
SE388694B (sv) * 1975-01-27 1976-10-11 Kabi Ab Sett att pavisa ett antigen exv i prov av kroppvetskor, med utnyttjande av till porost berarmaterial bundna eller adsorberande antikroppar
US4038485A (en) * 1976-03-18 1977-07-26 Miles Laboratories, Inc. Test composition, device, and method
CA1095819A (en) * 1977-01-14 1981-02-17 Eastman Kodak Company Element for analysis of liquids
US4166093A (en) * 1977-08-08 1979-08-28 Eastman Kodak Company Reduction of detectable species migration in elements for the analysis of liquids
US4283491A (en) * 1977-09-06 1981-08-11 Eastman Kodak Company Analytical elements with improved reagent stability
US4153668A (en) * 1978-01-03 1979-05-08 Eastman Kodak Company Multi-zone analytical element and method using same
US4279992A (en) * 1978-03-13 1981-07-21 Miles Laboratories, Inc. Specific binding assay employing an enzyme-cleavable substrate as label
US4233402A (en) * 1978-04-05 1980-11-11 Syva Company Reagents and method employing channeling
US4238565A (en) * 1978-06-22 1980-12-09 Miles Laboratories, Inc. Specific binding assay with a prosthetic group as a label component
US4211845A (en) * 1978-11-24 1980-07-08 Miles Laboratories, Inc. Glucose indicator and method
US4258001A (en) * 1978-12-27 1981-03-24 Eastman Kodak Company Element, structure and method for the analysis or transport of liquids
US4273868A (en) * 1979-02-23 1981-06-16 Miles Laboratories, Inc. Color stable glucose test
US4235601A (en) * 1979-01-12 1980-11-25 Thyroid Diagnostics, Inc. Test device and method for its use
US4247297A (en) * 1979-02-23 1981-01-27 Miles Laboratories, Inc. Test means and method for interference resistant determination of oxidizing substances
JPS55164356A (en) * 1979-06-08 1980-12-22 Fuji Photo Film Co Ltd Multi-layer analysis sheet for liquid sample analysis
US4376827A (en) * 1979-07-30 1983-03-15 Miles Laboratories, Inc. Composition, test device and method for determining the ionic strength or specific gravity of a liquid sample utilizing a strong polyelectrolyte
US4299916A (en) * 1979-12-26 1981-11-10 Syva Company Preferential signal production on a surface in immunoassays
US4303753A (en) * 1980-03-20 1981-12-01 Miles Laboratories, Inc. Method and device for the semiquantitative determination of glucose in aqueous fluids
US4336330A (en) * 1980-12-15 1982-06-22 Miles Laboratories, Inc. Device for detecting glucose concentration
JPS57174099A (en) * 1981-04-17 1982-10-26 Fuji Photo Film Co Ltd Color indicator composition for detecting hydrogen peroxide and quantitative analytical film having reagent layer containing the same
US4390343A (en) * 1981-07-06 1983-06-28 Miles Laboratories, Inc. Multilayer analytical element having an impermeable radiation diffusing and blocking layer
US4361648A (en) * 1981-08-13 1982-11-30 Miles Laboratories, Inc. Color fixed chromogenic analytical element

Also Published As

Publication number Publication date
US4562148A (en) 1985-12-31
ATE21174T1 (de) 1986-08-15
DK494582A (da) 1983-05-07
JPH0627732B2 (ja) 1994-04-13
IE822645L (en) 1983-05-06
CA1179261A (en) 1984-12-11
EP0078965B1 (en) 1986-07-30
FI823786L (fi) 1983-05-07
IE54067B1 (en) 1989-06-07
FI823786A0 (fi) 1982-11-04
FI78360B (fi) 1989-03-31
AU551143B2 (en) 1986-04-17
NO161886B (no) 1989-06-26
EP0078965A1 (en) 1983-05-18
IL66289A0 (en) 1982-11-30
DE3272353D1 (en) 1986-09-04
AU8624282A (en) 1983-05-12
GR77058B (fi) 1984-09-05
NO823518L (no) 1983-05-09
JPS5887461A (ja) 1983-05-25
NO161886C (no) 1989-10-04
ZA825300B (en) 1983-05-25
DK158245C (da) 1990-09-24
DK158245B (da) 1990-04-16

Similar Documents

Publication Publication Date Title
FI78360C (fi) Foerfarande foer framstaellning av testremsa.
FI71202B (fi) Diagnostiskt medel foer paovisande av bestaondsdelar i vaetskor
JP3214854B2 (ja) カード上での微量分析
US6121050A (en) Analyte detection systems
KR100496218B1 (ko) 시각적으로판독가능한시약시험스트립
AU722471B2 (en) Blood glucose strip having reduced sensitivity to hematocrit
US5300439A (en) Method, device, and composition for the assay of ions
EP1082614B1 (en) Method and device for detecting analytes in fluids
US7312028B2 (en) Highly cost-effective analytical device for performing immunoassays with ultra high sensitivity
FI80343C (fi) Testanordning.
JP3491863B2 (ja) 直読式試薬検査ストリツプのための化学タイマー
GB2026160A (en) Test strip for determiation of glucose
US6271044B1 (en) Method and kit for detecting an analyte
US20160245811A1 (en) Systems and methods for monitoring biological fluids
CA1121920A (en) Fluorimetric analysis method for bilirubin
US4594225A (en) Elements for analysis of calcium
EP0041175B1 (en) Ion specific analytical element
EP0233690B1 (en) Labeled hydantoin conjugate and its use in analytical element and immunoassays
CA3005214A1 (en) A diagnostic strip for determining the amount of sarcosine, creatinine and hydrogen peroxide in a biological or environmental sample
JPH01101453A (ja) 被分析物質の検出方法
US20020071784A1 (en) Dry analytical element and it's manufacturing method
JPH02232561A (ja) 新規な潜血検出用試験片。
JPH01107137A (ja) 液体分析方法

Legal Events

Date Code Title Description
MM Patent lapsed
MM Patent lapsed

Owner name: MILES INC