FI77225C - Foerfarande foer framstaellning av farmakologiskt aktiva 3-fenoxi-1-azetidinkarboxamider. - Google Patents

Description

77225

Menetelmä farmakologisesti aktiivisten 3-fenoksi-l-atsetidii-nikarboksiamidien valmistamiseksi

Esillä oleva keksintö koskee menetelmää uusien 3-fenoksi-l-atsetidiinikarboksiamidien valmistamiseksi, joilla on kouristusta estävä aktiivisuus imettäväisissä ja jotka ovat tehokkaita käsiteltäessä epilepsiaa ihmisissä. Näillä yhdisteillä on kaava: O r - \ -C Fq US-patenttijulkaisusta 4 226 Θ61 tunnetaan N-alkyyli-3-fenok-si-l-atsetidiinikarboksiamideja, joilla on kouristusta estävä aktiivisuus ja jotka ovat käyttökelpoisia epilepsiaa käsiteltäessä .

Kaavan I mukaisten yhdisteiden on todettu olevan metaboliit-teja sellaisten eläinten verenkierrosssa, joita on käsitelty edellä mainituilla N-alempialkyyli-analogeilla, ja niillä on todettu olevan pitempiaikainen vaikutus verenkierrossa ja niiden kouristusta estävän vaikutuksen kestoaika on pidempi kuin vastaavilla N-alempialkyyli-analogeilla.

Kaavan I mukaiset yhdisteet ovat edelleen vapaita lihaksia rentouttavista sivuvaikutuksista tehokkaina depressiota estävinä annoksina verrattuna N-alempialkyyli-analogeihin, joilla on lihaksia rentouttava vaikutus tehokkaina kouristusta estävinä annoksina.

Kaavan I mukaiset yhdisteet ovat käyttökelpoisia johtuen niiden farmakologisesta vaikutuksesta keskushermostoon.

Kaavan I mukaieia yhdisteitä voidaan valmistaa siten, että yhdiste, jolla on kaava 2 77225 saatetaan reagoimaan nitrourean kanssa.

Menetelmä, jolla tutkitaan näiden yhdisteiden kouristusta estävää aktiivisuutta ja niitä vertaillaan tunnettuihin yhdisteisiin, perustuu tutkimustekniikkaan, jonka on julkaissut Swinyard E.A. aikakausjulkaisussa EPILEPSIA jLO.: 107-19 (1969) js aikakausjulkaisuss J. PHARMC. EXPTL. THERAP. 106: 319-30 (1952), kuten jäljempänä yksityiskohtaisemmin esitetään. Näiden yhdisteiden lihaksia rentouttava vaikutus tutkittiin kokeen alussa ennen kouristuksen aiheuttavan aineen antamista.

Reaktiosarja valmistettaessa kaavan I mukaieia yhdisteitä on esitetty kaaviossa I.

Kaavio 1 3 77225 Λ/^—0„. CF3 r1-»0-:v5YCF3 —' I 11 h2

Pd/c H-H(y-0-^OyCF3

x ' II

o h2Nc'NHN02 φ cf3 2 1 R = α-metyylibenteyyii tai di fenyylimetyy1i

Sellaisia kaavan III mukaisia yhdisteitä, joissa R on o-me-tyylibentsyyli tai difenyylimetyyli, valmistetaan saattamalla kaavan IV ja V mukaiset yhdisteet reagoimaan lämpötiloissa aina noin 80-100 C 2-5 tunnin ajan dimetyyliformamidissa. Kaavan II mukaisia yhdisteitä valmistetaan hajottamalla vedyn avulla kaavan III mukaisia yhdisteitä tavallisesti alempi-alkanoliliuottimen läsnäollessa, joista etanoli on edullisin. Vedyllä hajottamisen nopeus riippuu jossain määrin ajasta ja lämpötilasta jolloin korkeampi lämpötila yleensä vähentää sitä aikaa, joka tarvitaan täydellisen vedyllä hajottamisen aikaansaamiseksi. Tyypilliset ajat vaihteleat noin 3 tunnista o aina noin 24 tuntiin lämpötiloissa 50-90 C.

4 77225

Lopullisessa vaiheessa saatetaan kaavan II mukaiset yhdisteet reagoimaan nitrourean kanssa liuoksessa, jolloin saadaan tuotteita <I) sopivasti esimerkiksi seoksessa, jossa on etanolia ja metyleenikloridia tai asetonia, huoneen lämpötilassa tavallisesti siihen saakka, kunnes analyysi osoittaa, että reaktio on tapahtunut riittävässä määrin. Tuotteet erotetaan haihduttamalla reaktioliuotin, jakamalla tuote veden ja orgaanisen liuottimen välillä ja haihduttamalla orgaaninen liuotinkerros ja kiteyttämällä uudelleen.

Kun kaavojen II tai III mukaiset yhdisteet erotetaan happoad-ditiosuolana synteesikäsittelyssä ja halutaan saada vapaata emästä, jaetaan nämä suolat laimean emäksisen vesiliuoksen ja sopivan orgaanisen liuottimen välille, joka liuottaa vapaan emäksen, ja tämän jälkeen tämä vapaa emäs erotetaan kuivaamalla ja haihduttamalla orgaaninen liuotin.

Valmistusmenetelmät 1-6 kuvaavat kaavan II mukaisten yhdisteiden ja niiden esituot teiden valmistusta ja esimerkit 1 ja 2 kuvaavat lopullista muuttamista kaavan I mukaiseksi yhdisteeksi .

Valmistusmenetelmä l 1-C Q-metyy 1 ibentsyy 1 i )-3-< 4-trif luor imetyy 1 if enoksi )atseti- äi.ini________ l-< ormetyylibentsyy1i)-3-hydroksiatsetidiinin maleaattisuola <78,6 g; 0,20 moolia jaettiin bentseenin ja laimean natrium-hydroksidin kesken, bentseenikerros kuivattiin, suodatettiin ja väkevöitiin alipaineessa. Jäännös liuotettiin 100 mitään kuivaa dimetyyliformamidia ja lisättiin tiputtamalla nopeasti sekoitettuun suspensioon, jossa oli 10,1 g <0,22 moolia) nat-riumhydridiä <50 * mineraaliöljyssä) 150 ml:saa kuivaa dimetyylif ormamidia lämpötilassa 90 C. Liuosta kuumennettin lämpötilassa 90 C 1 tunti ja sitä käsiteltiin sitten lisäämällä tipoittain 32,0 g <0,20 moolia) 4-trifluorimetyylifluoribent- 5 77225 seeniä. Liuosta kuumennettiin palautusjäähdyttäen 3 tuntia. Jäähdytetty liuos jaettiin veden ja isopropyylieetterin kesken ja eetterikerros uutettiin laimealla kloorivetyhapolla. Vesipitoinen happokerros tehtiin emäksiseksi väkevän natriumhydr-oksidin ja jään avulla ja uutettiin isoopropyylieetterillä.

Eetterikerros väkevöitiin ja jäännös tislattiin lämpötilassa o 150-16° C/0,2 mm, jolloin saatiin 25,6 g tuotetta.

Analyysi: laskettu yhdisteelle CieHl8F3N0: C 67,28; H 5,65; N 4,36 todettu : C 67,27; H 5,84; N 4,34

Valmistusmenetelmät 2 ja 3 toteutettiin siten kuin valmistusmenetelmässä 1 on esitetty saattamalla l-<a-metyylibenteyy-li>-2-atsetidinoli reagoimaan sopivasti substituoidun fluori-bentseenin kanssa. Fysikaaliset arvot on esitetty taulukossa 1 .

Taulukko I

c6h5<ch3)ch-n o

Valmistusmenetelmä R Sp. C Suola 2 3-CF3 150-3 <COOH>2 3 2-CF3 162-3 <COOH>2

Valmistusmenetelmissä 2 ja 3 saadut analyyttiset arvot on esitetty taulukossa II.

Taukukko II

6 77225

Valmistusmenetelmissä 2 ja 3 saatujen tuotteiden analyyttiset arvot.

Valmistus- Empiirinen _Laskettu___Todettu_

menetelmä kaava C H N C H N

2 c20H20F3NO5 58,39 4,90 3,41 57,99 4,97 3,39 3 C20H20F3NO5 58,39 4,90 3,41 58,15 4,89 3,37

Valmistusmenetelmä 4 3-/4-<trifluorimetvvli)fenokajTatBetidiini-oksalaatti 24,0 g:aan <0,075 moolia) 3-ΖΓ4-< tr i f luor imetyyl i ) f enoksi/-1-< ofr-metyylibenteyyli)atsetidiinia 150 ml:ssa etanolia lisättiin 0,5 g 20 X hiilellä olevaa Pd(OH)o ja seosta hydrattiin o £ 2 5 tuntia lämpötilassa 60 C paineessa 3,2 kp/cm . Seos jäähdytettiin ja suodatettiin ja suodos haihdutettiin alipaineessa. Jäännös liuotettiin etanoliin ja sitä käsiteltiin oksaalihapolla ja oksalaattisuola kiteytettiin kolmasti uudelleen eta- o nolissa. Saanto oli 3, 0 g <13 X) ja suolan sp. 176-189 C. Analyysi: laskettu yhdisteelle C12H12F3N03: C 46«91; H 3,94; N 4,56 todettu : C 47,07; H 3,96; N 4,59

Valmistusmenetelmistä 5 ja 6 saadut yhdisteet valmistettiin samalla tavoin kuin valmistusmenetelmässä 4 hajottamalla vedyn avulla α-metyylibentsyyiiradikaali, joka oli kiinnittynyt atsetidiinityppeen. Fysikaaliset arvot on esitetty taulukossa 1 .

Taulukko 1 77225 η·0"°Ό^ o

Valmistusmenetelmä R Sp. C Suola

5 3-CF3 123-25 C6H11NHS03H

6 2-CF3 154-56 HC1 N-sykloheksyylisulfamaatti.

Valmistusmnetelmistä 5 ja 6 saatujen yhdisteiden analyyttiset arvot on esitetty taulukossa 2.

Taulukko 2

Valmistusmenetelmissä 5 ja 6 saatujen tuotteiden analyyttiset arvot.

Valmistus- Empiirinen _Laskettu_Todettu_

menetelmä kaava C H N C H N

5 C16H23F3N2°4S 4Θ»4Θ 5,85 7,07 48,08 5,94 6,97 6 C10H11C1F3NO 47,35 4,37 5,52 47,12 4,32 5,45

Esimerkki 1 3-£3-<trifluorimetvvli)fenoksi7-l-atsetidiinikarbokeiaroidi Liuokseen, jossa oli 2,2 g <0,01 moolia) 3-£2|-< tr if luorime-tyyli)fenoksi7atsetidiiniä 45 ml:ssa metyleenikloridia ja 45 ml.-sea absoluuttista etyylialkoholia, lisättiin 7 g (0,066 moolia) nitroureaa ja seosta sekoitettiin huoneen lämpötilassa 48 h. Seos suodatettiin. Suodos haihdutettiin kuiviin ja jäännös jaettiin 75 ml:n metyleenikloridia ja 75 ml:n vettä 77225 θ kesken. Vesikerros uutettiin kolmasti 50 ml :11a metyieeniklo-ridia. Metyleenikloridiuutteet yhdistettiin ja haihdutettiin kuiviin. Jäännöstä käsiteltiin (pestiin) seoksella, jossa oli 1 ml metyleenikloridia ja 20 ml tolueenia ja suodatettiin Sakka kiteytettiin uudelleen etanoli-vedestä, jolloin saatiin vaaleankeltaisia kiteitä. Nämä kiteet sekoitettiin 2 ml:n kanssa metyleenikloridia ja 20 ml:n kanssa tolueenia ja seosta kuumennettiin höyryhauteella 2 h. Seosta varastoitiin jääkaapissa noin 72 h ja se suodatettiin, jolloin saatiin 1,2 g o tuotetta valkoisina, kiteisinä neulasina, sp. 151-152 C. Analyysi: laskettu yhdisteelle C11H11N202F3: C 50,77; H 4,26; N 10,77 todettu : C 50,72; H 4,25; N 10,74 SäimärKJsi-2 3-/3-( tr if luorimetwlDfenoksyT-l-atsetidiinikarboksiamidi Seosta, jossa oli 30,6 g (0,141 moolia) 3-/3-(trifluorime-tyyli)fenoksi/atsetidiiniä ja 42 g (0,321 moolia) nitroureaa (80-%:sta) 500 ml:ssa asetonia, sekoitettiin 5 vrk (5 vrk ei vaadittu aika, mutta sopiva aika) huoneen lämpötilassa. Seos suodatettiin ja suodos väkevöitiin tyhjössä. Jäännös jaettiin 150 ml:n vettä ja 100 ml:n etyyliasetaattia kesken ja kerrokset erotettiin. Vesipitoinen kerros pestiin 100 ml:11a etyyliasetaattia. Etyyliasetaattikerrokset pestiin 75 ml:lla 5-%:sta natriumhydroksidin vesiliuosta ja tämän jälkeen 75 ml:lla vettä, kuivattiin natriumsulfaatilia ja väkevöitiin tyhjössä. Jäännösöljy kiteytettiin etyyiialkoholi-etyyliase-taatista, jolloin saatiin 22 g (60 X) pääasiallisesti otsikossa mainittua yhdistettä. Kiteytettäessä kahdesti uudelleen etyylialkoholista saatiin 9,9 g valkoieta, kiteistä kiinteätä ainetta, sp. 151-152,5 C.

Analyysi: laskettu yhdisteelle Cj1H11N202F3: C 50,77; H 4,26; N 10,76 todettu : C 50,90; H 4,29; N 10,71 77225 9

Farmakologia

Vertailu suoritettiin esimerkin 1 mukaisen yhdisteen kouristusta estävän aktiivisuuden ja aikaisemmin tunnetun metyyli-analogin (US-patentti 4 226 861, esimerkki 4> välillä käyttäen kouristusta aiheuttavana aineena metratsolia ja menetelmää, jonka on esittänyt Swinyard (katso aikaisempaa viitettä). Lihasten rentoutumisominaisuuksien tarkastelu suoritettiin myös siten kuin Irwin, S. on kuvannut: (1962) Science 136: 123 (suoristumisen estyminen) yhdisteiden annostelemisen jälkeen, mutta ennen metratsolin annostelemista.

Yhdeksänkymmentäkuusi täysikasvuista, naaraspuolista hiirtä, joiden paino oli 24-32 g, jaettiin mielivaltaisesti kokeilu-ryhmiksi käyttäen menetelmää, jonka ovat esittäneet Steel, R.G.D. ja Torrie, J.H. (1960) "Principles and Procedures of Statistics", McGraw-Hill Book Company Inc., s. 99-100, s. 428-31. Jokainen hiiri identifioitiin häntään sovitetulla värikoodi1la. Koeyhdisteet annosteltiin suspensiona 0,5-%:sesea metyyliselluloosan vesiliuoksessa 10 ml/kg hiiren ruumiinpainoa 15 min kuluessa suspension valmistamisen jälkeen Metratsoli (pentyleenitetratsoli) valmistettiin liuoksena fysiologisessa suolaliuoksessa, Hiirien ei annettu paastota ennen koetta. Kahdeksan hiirtä kokeiltiin käyttäen kutakin annostusmäärää.

Kullekin hiirelle annettiin yksi annos kokeiltavaa lääkeainetta 0,5-X:sessa metyyliselluloosan vesiliuoksessa tai ver-tailuliuosta (pelkästään 0,5-%:sta metyyliselluloosan vesiliuosta) intraperitoneaalisesti. Suoristumisen estymisen tarkastelu suoritettiin 1/2 tuntia koelääkkeen annostelun jälkeen. Katso taulukkoa A. Metratsolia (80 mg/kg S.C.) annettiin sitten ihon löysään osaan eläinten niekan takaosassa, so. 1/2 tuntia sen jälkeen, kun koeyhdiatettä tai vertailuainetta oli annettu. Injektiot annettiin käyttäen 1 ml:n lasista tuberkuliiniruiskua ja vastaavan kokoista hypodermistä neulaa (27 viivaa liuoksia varten, 23 viivaa suspensiota varten).

10 77225

Kaikki injektiot annettiin käyttäen 10 ml/kg suuruista määrää hiiren ruumiinpainosta laskettuna. Kutakin hiirtä tarkkailtiin 30 min metratsolin injektion jälkeen. Kynnyareaktion puuttuminen katsottiin suojaukseksi (vähintään 5 sekunnin pituinen yk-eiklooninen kouristus jakso). Kouristusta estävät arvot laskettiin suojaprosenttina so. suojattujen hiirien määrä x 100.

kokeiltujen hiirien määrä EDgg-arvo ja potenssisuhde <95 %:n varmuusra jät) määrättiin tietokoneperusteisen analyysin avulla, jonka on kuvannut Finney D.J. (1964) "Statistical Method in Biological Assay.", 2. painos, New York, Hafner Publishing Co. Tulokset on esitetty taulukossa B. Esitettyjen arvojen statistinen analyysi ei osoittanut huomattavaa eroavaisuutta kouristukseneetovaiku-tuksessa näiden kahden yhdisteen välillä. Keksinnön mukainen esimerkistä 1 saatu yhdiste ei aiheuttanut suoristumisen menettämistä minään annoksena aina arvoon 225 mg/kg i.p. saakka (vaikkakin raajojen heikkous voitiin todeta tätä annosta käytettäessä) ja tämän johdosta sillä ei ollut huomattavaa lihaksia rentouttavaa vaikutusta tehokkaana kouristusta estävänä annoksena <EDgg= 99,2). Tämä on toisin kuin aikaisempaa yhdistettä käytettäessä, joka aikaansai huomattavan suoristu-misen estymisen (lihasten rentoutuminen) tehokasta kouristusta estävää vaikutusta käytettäessä.

77225 11

Taulukko A

Lihaksia rentouttava aktiivisuus hiirissä Koeyhdiste (a) (metyy1ise1luloosa- Suor is tumisen suspensiossa} Annos i.p. estymismäärä

Nimitys mg/kg Kokeiltu määrä (b)

Vertailu - pelkästään metyy1ise1lulooeaa - 0/24 3-£3-(trif luorimetyyli)-fenoksiZ7-l-atsetidiini- karbokeiamidi 45 0/Θ (esimerkki 1) 67 0/Θ 100 0/8 150 0/8 225 0/8 - (vähän raajan heikkoutta)

Aikaisemmin tunnettu yhdiste - N-metyy1i-3-(3-trifluori- metyy1i fenoksi-l-atsetidiini- karboksiamidi) 45 0/8 (US-patentin 4 226 861 67 0/8 esimerkki 4) 100 3/8 150 5/8

Huom: a) Kaikki hiiret injektoitiin käyttäen 10 ml/kg 0,5-%:sta vesipitoista metyyliselluloosaa intraperitoneaalisesti, johon koeyhdiste oli suspendoitu, mikäli sitä käytettiin.

b) 30 minuutin kuluttua.

12 77225 I c

3 X

P X I

(0 3 I -4-1 CO

-n 6 — -H X G -H

4-1 00 X 0) X GJ

CO Π3 m >, 4-> X .G

3 > (Ν' O >i >ι X >i 3 σι X O X :3 X 0 y C - I ' 0)ϋ ΦΟ

A ·· -P 0<N X E G A

O <*> (0 vo :G C

SP ·η ' G X G 3 flj m 3 o X x x

E-iChi-i — 3 3 G X

X O C OX Ό 3

— -Pi—I -C -P

-P X :3 0 3 — — DjA a; cn 3 -r-ι tn σ\ x -h \ •π 3 ' ' 3 E G x Ρ Cn f-· r- Ο Ο O Dl a; (NN· ro > - G 3

ΙΠ α\ I ' X ' X 3 X G

Q 3 Cn σι I οι 3-P33

WES σι-- σ r·' X x ftA

P - - cn o C 3

—- 3 <D X ·· TO X -P

XJ ί> U3 W G X

— — O E G

m L· 3 3

:3 - 3 3 A

cn o 3 P cn 3 :3 :3 3 x

•P P P Cn G C

P :3 :3 A -P O

-p :3 :3 \ X PC

*P E E O 'P 3 X E -p 3

3 3 Ί* Ο X -P

3 XX (NOOOOOOOOOO 00 CO 00 00 OX X

3 -P r-l \ W\W W w rP 3 3 0

3 3 x OiPCNp’inoo I—i γμ o oo x x A

CQ CO -n 0 GO 3

-P O A 0) X O G

O > 3 0 :3 >i 3 :3 A -P W A X Φ P :3 A -P X O P 3 3 X >i A 3 >i X A :3 P :0

3 3 A G O X

3 0 3

|p :3 G X cn C

> x 0 3

:3 10 tT> 3 -x 3 X

X o · A xinr^oocn ini-'-oo G c/)3

3 G 0j\ o p· vo o m cn 'ί ιο o in 3 - 3 G

U) CJ · CT1 '—I t“H CN (—I c—I *H ·· p S c x —ix 3 x 3 Ex X x 0) 3 3Λ II X 3 Ο Φ 3 3 ίΡ I x x 1—13

X 3 CD >1X OX X

33 X X p X33G

XO 3 30)3 A3 X 3

Px 3 xEA 30X3

3 3 O I Ό X X -x G O X

O C O—l X PC CO 3 3 C

A φ xxx >1 O X X x X X A O

Oj 3 x G 3 X <0 x 3XO

3 X >1X 3X3300 XPP3A

3 x jp x Xxx OOXcnx

3 0X33 X X X co POjO:G

3 33 OX OPOCN XGEO-x

3 >, X E ·Ρ G-P3CN X P X

0 x X X O Gl-P .G X CnX C

— 0 -p >1 P 3 3 n G ^ G A X 3

3 X ΕίΡ O X X — X'— I X X \ P X

' 3 x-P 3 3 3 X |X C — A Cn x O

X 20 XIX GXIXN* A 3 E X -P

OX ECXXE'H -PI— X X 3 £3 X O I :3 X I 3 A g X x x G X 3 3 0 0

3 3 3 :3 Pl\ XA E X 3 Ό O A A 0 00 0 C

XX X X X XI3 P O >1A X -P A O x C

^ x X 3 3 A 0 3 ΪΡ 0 E 3 P X X 3

.G tP 3 :3 I A O E X X G 3 α O ·· 3 X

>1 ip X A in 0 Λ X 300-PIE E X AG

0-0 p X \| G P 3 AExwcnx O X XO

0Ä 001030 -PI-PAW3 3—0—30 AS- > CU ro X A w CZXO-'O Κ33ΛΑΧ is 77225

Rwrmalcolcinat iikka

Suoritettiin vertailukokeita tarkoituksena verrata keksinnön mukaisen yhdisteen eliminoitumisen puoliintumisaikaa eläimen verenkierrossa US-patenttijulkaisusta 4 226 Θ61 tunnetun yhdisteen vastaavaan puoliintumisaikään. Koe-eläiminä käytettiin sekarotuisia koiria ja koeyhdisteitä annettiin yhtenä annoksena oraalisesti tai intravenööttisesti 10 mg/kg koiran ruumiinpainoa.

Saadut tulokset, jotka edustavat oraalisista ja intravenööt-tisistä kokeista saatuja keskiarvoja, on esitetty taulukossa C.

Taulukko C

Koeyhdiate Eliminoitumisen puoliintumisaika, h 3-Z3-< t r i f luor imetyy 1 i ) f enoks x7- 2,4 +. 0,4 1-atsetidi inikarboksiamidi (esimerkki 1> H-metyyiΪ-3-/3-(trifluorimetyyli)- 1,3 ± 0,4 f enoks i_/-l-atsetidiinikar boksi-amidi <us-4 226 861, esimerkki 4)

Claims (2)

14 77225

1. Pörfarande för främställning av en farmakologiskt ak-tiv 3-fenoxi-l-azetidinkarboxamid med formeln h2n-c-h^>_o-(^> I kännetecknat av att en förening med formeln •θ’" O’*’ omsättes med nitrourea.

1. Menetelmä farmakologisesti aktiivisen 3-fenoksi-l-atsetidiinikarboksiamidin valmistamiseksi, jolla on kaava Η2Ν-ϋ-κζ>— tunnettu siitä, että yhdiste, jolla on kaava -O-0·3 saatetaan reagoimaan nitrourean kanssa.

2. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että valmistetaan 3-/3-(trifluorimetyyli>fenoksiV- l-atsetidiinikarboksiamidi.

2. Förfarande enligt patentkravet 1, kännetecknat av att man framställer 3-/5-<trifluormetyl)fenoxi7"l-aze*·idin-karboxamid.