FI72518B - Foerfarande foer framstaellning av terapeutiskt anvaendbara 1-oxokarbapenam- eller 1-oxokarbapen-2-em-3 -karboxylsyror och deras estrar. - Google Patents

Foerfarande foer framstaellning av terapeutiskt anvaendbara 1-oxokarbapenam- eller 1-oxokarbapen-2-em-3 -karboxylsyror och deras estrar. Download PDF

Info

Publication number
FI72518B
FI72518B FI811471A FI811471A FI72518B FI 72518 B FI72518 B FI 72518B FI 811471 A FI811471 A FI 811471A FI 811471 A FI811471 A FI 811471A FI 72518 B FI72518 B FI 72518B
Authority
FI
Finland
Prior art keywords
methyl
carboxylate
preparation
ethyl
pivaloyloxymethyl
Prior art date
Application number
FI811471A
Other languages
English (en)
Swedish (sv)
Other versions
FI72518C (fi
FI811471L (fi
Inventor
Robert Louis Rosati
Original Assignee
Pfizer
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Pfizer filed Critical Pfizer
Publication of FI811471L publication Critical patent/FI811471L/fi
Priority to FI844041A priority Critical patent/FI73685C/fi
Publication of FI72518B publication Critical patent/FI72518B/fi
Application granted granted Critical
Publication of FI72518C publication Critical patent/FI72518C/fi

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D487/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00
    • C07D487/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D487/04—Ortho-condensed systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D477/00—Heterocyclic compounds containing 1-azabicyclo [3.2.0] heptane ring systems, i.e. compounds containing a ring system of the formula:, e.g. carbapenicillins, thienamycins; Such ring systems being further condensed, e.g. 2,3-condensed with an oxygen-, nitrogen- or sulphur-containing hetero ring
    • C07D477/26—Heterocyclic compounds containing 1-azabicyclo [3.2.0] heptane ring systems, i.e. compounds containing a ring system of the formula:, e.g. carbapenicillins, thienamycins; Such ring systems being further condensed, e.g. 2,3-condensed with an oxygen-, nitrogen- or sulphur-containing hetero ring with hetero atoms or carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. an ester or nitrile radical, directly attached in position 4
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D499/00—Heterocyclic compounds containing 4-thia-1-azabicyclo [3.2.0] heptane ring systems, i.e. compounds containing a ring system of the formula:, e.g. penicillins, penems; Such ring systems being further condensed, e.g. 2,3-condensed with an oxygen-, nitrogen- or sulfur-containing hetero ring
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02P—CLIMATE CHANGE MITIGATION TECHNOLOGIES IN THE PRODUCTION OR PROCESSING OF GOODS
    • Y02P20/00—Technologies relating to chemical industry
    • Y02P20/50—Improvements relating to the production of bulk chemicals
    • Y02P20/55—Design of synthesis routes, e.g. reducing the use of auxiliary or protecting groups

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
  • Cephalosporin Compounds (AREA)
  • Heterocyclic Carbon Compounds Containing A Hetero Ring Having Nitrogen And Oxygen As The Only Ring Hetero Atoms (AREA)
  • Saccharide Compounds (AREA)

Description

1 72518
Menetelmä terapeuttisesti käyttökelpoisten 1-okso-karbapenaami- tai l-oksokarbapen--2--eemi-3-karboksyyli-happojen ja niiden esterien valmistamiseksi 5 Kirjallisuudessa on kuvattu joukko karbapenaameja ja karbapen-2-eemejä, joista joillakin on esitetty olevan käyttöä bakteerinvastaisina aineina. Viimemainittujen joukossa on joukko fermentoimalla johdettuja tuotteita, joista ensimmäinen oli tienamysiini: 10 OH _ NH2 S ' T.......f "li 15 ------ M-------v
O C02H
/Älbers-Schonberg et ai., J.Am.Chem.Soc. 100, 6491 (1978)/.
Muut yhdisteet tässä käymistuotteiden ryhmässä käsittävät 20 olivaani-happoja: /HC0CH3 SICOCH, OSO.H X—7 OSO^H / -5 I 3 S i 3 / 25 ·- "<--1 , n __________/ ^
L . N I
n'/ --------^ COOH n .·...... N
COOH
30 n = C tai 1.
/.Brown et ai., J. Chem. Soc . Chem. Commun . , 523 (177); Corbett et ai., sama. 953 (1977L7, sekä yhdisteen, joka on nimetty PS-5:ksi: 2 7251 8 _/NHCOCH3 s Ύ-τχ 5 >-Ν-\
(Τ Ν COOH
/Ofcamura et ai., J.Antibiotics 31, 480 (19 7 8Jj/'. Myöhem-^ min on esitetty joukko tienamysiinin johdannaisia, joilla on esitetty olevan hyödyllinen bakteerinvastainen vaikutus, kuten karbapen-2-eemi- ja karbapenaami-johdannaisilla: ORb ORb ^ΐΓ~ίί^1 d d
(r N COORC CY N XOORC
20 b (belgialainen patentti 867 227), joissa R :n määritellään laajasti olevan vety, asetyyli ja bentsyylioksikarbonyyli ja R :n määritellään laajasti käsittävän vedyn ja tavanomaisia karboksi-suojarynmiä, kuten bentshydryylin ja 2-naftyylimetyylin (selektiivisesti lohkaistu hydrogenolyy-sillä) , 2,2,2-trikloorietyylin (selektiivisesti lohkaistu lievällä sinkkipelkistyksellä) ja erilaisia 1-alkoksi-karbonyylioksialkyyli-ryhiniä (selektiivisesti hydrolysoitu fysiologisissa olosuhteissa).
3q Tienamysiiniä on valmistettu myös kokonaissyntee- sillä /Johnston et ai., J.Am.Chem.Soc. 100, 313 (1978 Γ7, samoin kuin esteri-prekursori /Kametani et ai., Heterocycles 12 (19), 1189 (1979)/ ja joukko muita karbapenaameja seka karbapen-2-eemejä, kuten itse karbapenaami /Wong et ai., J.Am.Chem.Soc. 99, 2823 (1977) j Busson ja Vanderhaeghe, J.Org.Chem. 43, 4438 (1978)/, p-nitrobentsyyli ja 2,3-di- 3 72518 hydro-3-oksoöentso/c/furan-l-yyli-6-karboksylaatteja /Öhoue et ai., Tetrahedron Letters (40), 3867 (1979)/, 3-metyylikarbapenaami /Aida et ai., Tetrahedron Letters (52), 4993 (1979)/, p-nitrobentsyyli-2-metyylikarbapen-2-eemi-3-5 karboksylaatti /Baxter et ai., J.Chem.Soc.Chem.Coimnun., 236 (1979)/, natriumkarbapen-2-eenii-3-karboksylaatti ja natrium-6- (1-hydroks ie tyyli) karbapen-2-eemi-3-karboksylaat-ti /Cama ja Christensen, J. Am.Chem.Soc. 100, 8006, (1978)/, bentsyyli-2-oksokarbapenaami-3-karboksylaatti ja 2-(4-metyy- 10 lifenyylisulfonyylioksi)karbapen-2-eemi-3-karboksylaatti /Ratcliffe et ai., Tetrahedron Letters (21), 31 (1980)/. Kirjallisuudessa on myös esitetty karbakef-3-eemejä, kuten 7-asyyliamino-2-alkyylikarbakef—3-eemi-4-karboni- ja 7-asyyliamino-2-asyylioksikarbakef-3-eemi-4-karbonihappoeste- 15 reitä, jotka on hydrolysoitu in vivo, ts. fysiologisissa olosuhteissa (belgialainen patentti 875 054). Missään tapauksessa näitä yhdisteitä ei ole johdettu ryhmittämällä uudelleen tavallisia beta-laktaami-johdannaisia, liioin ei mikään näistä yhdisteistä ole substituoitu 1-asemassa.
20 Aivan äskettäin on kuvattu yhdisteiden valmistus, joilla on rakennekaava: R°
_r-S
25 I
o' nco2h (Christensen et ai., UA-patentti 4 208 422). Näissä yhdis-c 30 teissä R on substituoitu tai substituoimaton alkyyli, aryyli tai aralkyyli. Näiden yhdisteiden monivaihe-syntee-sit alfa , beta-tyydyttämättömästä aldehydistä, nimittäin:
CHO
35 RC
4 72518 eivät salli tämän keksinnön yhdisteiden synteesiä.
Yksinkertaisuuden, selvyyden ja mukavuuden vuoksi tässä yleisesti käytetty nimistö ja renkaan numerointi-järjestelmä on kirjallisuuden standardi "pen/ceph"-nimistö, 5 esim.
^ S ^ / s 'X
|7 i6 1 2, fg [5 1 2 : >5 .3' ^3 _ ---N 4, . ----- ----- o χ- ty
Kef-3-eemi Penaami 10
|s S
Q J N O ’ N4 ^5 Karbapenaami Karbapen-2-eemi
Vaihtoehtoinen nimi, joka myös löytyy kirjallisuudesta, karbapenaamille, on l-atsabisyklo/3.2.07heptan-7-oni.
Tämän keksinnön kohteena on menetelmä terapeuttisesti käyttökelpoisten 1-okso-karbapenaami- tai 1-okso-karbapen-20 2-eemi-karboksyylihappojen tai niiden esterien valmistamiseksi, joilla on kaava 1 R2 0
R1 R A CH
X_X X / 3 25 ' (I) 0 ^COOR3 tai
2 O
r1 R i; 4
V__x χ R
30 I” I dU
i--- N---χ 3
O COOR
joissa R1 on vety, 2-fenoksiasetamido, 2-fenyyli-2-(4-etyyli- 2,3-dioksopiperatsiinikarboksiamido)asetamido, 5-metyyli-3-35 fenyyli-isoksatsolikarboksiamido, 1-(4-nitrobentsyylioksi- li 5 72518 2 karbonyylioksi)etyyli tai 1-(asetoksi)etyyli, R on vety 2 tai metoksi, sillä ehdolla, että kun R on metoksi, niin R^ on 2-fenoksiasetamido, R8 on vety tai tavanomainen karboksisuojaryhmä, kuten bentsyyli, bentshydryyli tai 5 2-naftyyli, jotka voidaan selektiivisesti poistaa hydro-genolyysillä, 2,2,2-trikloorietyyli, joka voidaan selektiivisesti poistaa lievällä sinkkipelkistyksellä, tai pivaloyylioksimetyyli tai asetoksimetyyli, jotka ovat selektiivisesti hydrolysoitavissa fysiologisissa olosuhteis-10 sa, ja R on metyyli, asetoksimetyyli tai metoksi, ja näiden farmaseuttisesti hyväksyttävien kationisuolojen valmistamiseksi, kun yhdisteessä on karboksyylihappofunk-tio, tai näiden näiden yhdisteiden farmaseuttisesti hyväksyttävien happoadditiosuolojen valmistamiseksi, kun 15 yhdisteessä on amino- tai amidinofunktio.
Keksinnön mukaisesti näitä yhdisteitä valmistetaan siten, että 2-diatso-l-oksokef-3-eemi-4-karboksylaatti, jolla on kaava 20 R2 0 1 R /k R I 1 S__/-s ^n2 T | (III) ---N 4
O γ R
25 COOR8 saatetaan toisiintumaan l-oksokarbapen-2-eemi-3-karboksy-laatiksi, jolla on kaava 30 R2 ? r1-^i ! ! i[ ,IV) ... '-·· * —\ 35 0 COOR8 6 72518 ί 2 4 joissa kaavoissa R , R ja R ovat samat kuin edellä g ja R on tavanomainen karboksisuojaryhmä, kuten bentsyy-li, bentshydryyli tai 2-naftyyli, jotka voidaan selektiivisesti poistaa hydrogenolyysillä, 2,2,2-trikloorietyy-5 li, joka voidaan selektiivisesti poistaa lievällä sink-kipelkistyksellä, tai pivaloyylioksimetyyli tai asetoksi-metyyli, jotka ovat selektiivisesti hydrolysoitavissa fysiologisissa olosuhteissa; valosäteilyä käyttäen reak-tioninertissä liuottimessa -100° - +35°C:ssa, ja sen jäl-10 keen haluttaessa suoritetaan yksi tai useampia seuraa-vista reaktioista: a) kaavan I mukaisten yhdisteiden valmistamiseksi kaavan IV mukainen yhdiste, jossa R^ on metyyli, mahdollisesti pelkistetään aktivoidulla sinkillä yhdisteeksi, 15 jolla on kaava R2 ? R1 ____ \ ] (VII) 20 --N----\ 3
COOR
b) saatu kaavan IV tai VII mukainen yhdiste, jossa 0 R on edellä määritelty tavanomainen, hydrogenolyy.sillä 25 poistettavissa oleva karboksisuojaryhmä, muutetaan karbok-syylihapoksi, c) saatu kaavan IV tai VII mukainen yhdiste, jossa 0 R on edellä määritelty, lievissä olosuhteissa suoritetussa sinkkipelkistyksessä poistettavissa oleva karboksi-30 suojaryhmä, muutetaan karboksyylihapoksi, d) saatu happo muutetaan fysiologisesti hyväksyttäväksi esteriksi, tai e) saatu yhdiste, jossa on karboksyyliryhmä, muutetaan farmaseuttisesti hyväksyttäväksi kationisuolaksi.
35 Tavanomaisilla karboksisuojaryhmillä tarkoitetaan li ^ 72518 ryhmiä, joita tavallisesti käytetään suojaamaan karboksi-ryhmää penisilliineissä ja kefalosporiineissa, ja niitä ovat erityisesti: 1) Ryhmät, jotka selektiivisesti hydrautuvat anta-5 maan vastaavan hapon. Esimerkkejä ovat bentsyyli, p-nitro- bentsyyli, bentshydryyli ja 2-naftyylimetyyli-esteri. Edullisia näistä ovat bentsyyli, bentshydryyli ja 2-naftyyli-metyyli, koska ne hydrautuvat helposti, mutta niillä, poiketen p-nitrobentsyylistä, ei ole pyrkimystä monimut-10 kaistaa tämän keksinnön sinkkipelkistyksiä.
2) Ryhmät, jotka selektiivisesti lohkeavat lievällä sinkkipelkistyksellä. Esimerkkinä on 2,2,2-trikloori-etyyliryhmä /vrt. Just ja Grozinger, Synthesis, 457 (1976)1/.
3) Ryhmät, jotka hydrolysoituvat selektiivisesti 15 fysiologisissa olosuhteissa. Esimerkkejä tällaisista ryhmistä ovat asetoksimetyyli ja pivaloyylioksimetyyli. Tällaiset esterit ovat esilääkeaineita ja ne ovat varsin sopivia vastaavan hapon (vapautuu fysiologisissa olosuhteissa) pysyvämmiksi muodoiksi, ja ne parantavat myös ab- 20 sorptiota suun kautta, kun tämän keksinnön yhdistettä käytetään systemaattisena bakteerinvastaisena aineena.
Tämä keksintö käsittää myös menetelmät, joilla valmistetaan ko. yhdisteiden farmaseuttisesti hyväksyttäviä suoloja, kun yhdisteet sisältävät vapaan karboksyylihapon 3 25 (esim. R on vety) tai vapaan amino- tai amidiini-ryhmän 2 (esim. R on 2-aminoetyyli tai 2-amidiinietyyli).
Tämän keksinnön mukaisesti valmistetuilla yhdisteillä on bakteerinvastainen vaikutus tai ne ovat välituotteita yhdisteille, joilla on tällainen vaikutus. Näiden yhdistei-30 den bakteerinvastainen aktiivisuus on helposti määritettävissä standardi-kiekko-levymäärityksellä, jota yksityiskohtaisemmin jäljempänä kuvataan. Tätä menetelmää käytetään totunnaisesti mikro-organismien, kuten niiden, jotka on vasta eristetty kliinisesti käytännössä, herkkyyden tarkistami-35 seen. Mitattu bakteerinvastainen aktiivisuus heijastelee ..._ - Γ .......
8 72518 käyttöä eläin- tai ihmisinfektioiden, jotka aiheutuvat herkistä bakteereista, systemaattisessa tai ulkonaisessa hoidossa, eläinrehuissa kasvua edistävinä aineina tai aineiden, jotka pilaantuvat biologisesti herkkien bakteerien vaikutuk-5 sesta, säilönnässä.
Avain näiden yhdisteiden valmistukseen keksinnön mukaisesti on 2-diatso-l-oksokef-3-eemi-4-karboksylaattien uudelleenryhmittäminen l-oksokarbapen-2-eemi-3-karboksylaa-teiksi. Tällä uudelleenryhmittämisellä on hyvin laaja-alai-nen käyttö uusien karbapen-2-eemien ja karbapenaamien synteeseissä. Tämän keksinnön mukaisia yhdisteitä on helppo valmistaa nyt keksityllä 2-diatso-l-oksokef-3-eemi-4-kar-boksylaatin fotolyyttisesti katalysoidulla uudelleenryh-mittämisellä l-oksokarbapen-2-eemi-3-karboksylaatiksi, eli 15 reaktiolla: 0
O
(---Γ S'^N2 __________ ,> — N ' ' ·/ O- ·/ *8 0 C00R ' 8
2 0 C00R
g jossa R on tavanomainen karboksi-suojaryhmä, kuten edellä määriteltiin.
Tämä fotolyyttinen uudelleenryhmittäminen toteute-25 taan mukavasti orgaanisessa liuotin-laimentimessa standardi-laboratorio (Pyrex)-laitteistossa laajalla lämpötila-alueella (esim, välillä -100 - 35°C), edellyttäen, että liuotin on neste käytetyssä lämpötilassa.
Esimerkkejä suuresta joukosta sopivia orgaanisia 3q liuottimia ovat klooratut hiilivedyt (esim. metyleeniklori-di), alemmat alkanolit (esim. metanoli) ja aromaattiset hiilivedyt (esim. tolueeni). Yksinkertainen kokeilu ratkaisee muiden liuottimien käyttökelpoisuuden (eetterit, keto-nit jne). Edullinen liuotin on metyleenikloridi, joka matalalla kiehuvana on helposti poistettavissa haihduttamalla 35 tyhjössä eristämisen aikana. Beta-laktamaasin mahdollisen hajoamisen vähentämiseksi on edullista suorittaa fotolyysi 9 72518 alemmissa lämpötiloissa (esim. välillä -45 - -85°C), edullisesti hiilihappojää/asetoni-kylvyssä (noin -78°C). Valolähteen valon aallonpituus on minkä tahansa standardi-aurinkolampun alueella, ts. ultravioletista näkyvään. Foto-5 lyysin kulkua voidaan helposti seurata infrapuna-spektro-skopialla (luonteenomaisen diatso-nauhan häviäminen) tai standardi-ohutlevykromatografialla, havaiten komponentit alkalisessa permanganaatti-suihkeella; eluentit valitaan niin, että lähtöaine voidaan erottaa tuotteesta; tässä ta-10 pauksessa metyleenikloridi tai kloroformi, vaihtelevin annoksin etyyliasetaattia, ovat usein sopivia. Käyttämällä standardi-valonsuodattimia voidaan helposti määrittää optimi aallonpituudet tätä fotolyysireaktiota varten. Reaktion sivutuotteet ovat typpikaasu ja rikki. Kun halutaan karba-15 pen-2-eemi-3-karboksylaattia (IV) suuremmalla puhtaudella, sekoitetaan reaktioseosta edullisesti Raney-nikkelin kanssa rikin poistamiseksi. Koska Raney-nikkeli pyrkii myös absorboimaan jonkinverran tuotetta ja siten pienentämään saaliita, tämä eristysvaihe jätetään edullisesti pois, kun 20 l-okso-karbapen-2-eemi-3-karboksylaattia käsitellään edelleen muulla prosessilla kuin hydrogenolyysillä. 1-oksokar-bapen-2-eemi-3-karboksylaatit ovat, verrattuna tämän keksinnön muihin yhdisteisiin, suhteellisen pysymättömiä yhdisteitä. Lämpötilat alennetaan sentähden tämän erityksen aikana 25 (esim. alle 25°C:n, edullisesti alle 5°C:n) ja ne valmistetaan tavallisesti juuri ennen käyttöä tai varastoidaan pakastinlämpötiloissa.
Karbapen-2-eemi-3-karboksylaattien, tyypillisesti niiden, joita käytetään tämän keksinnön mukaisesti muiden 30 yhdisteiden valmistamiseen, muut muuntamistavat on koottu kaavioihin I ja II.
10 7251 8
Kaavio I 5
Karpaben-2-eemi-karboksylaattien muuntaminen 10 O Op A Λ Λ v / ' """A \. „ lievä"-/ i? Zn'// 8 i 15 C00R h\ k ' C00R zn COOR8phy . /
COOH
akt. akt· akt·
Zn/H+ Zn/H+ Zn/H
O * ” Λ.......h__, Λ .·»«, Λ Ύ . '7-' ...../ COOR h poor 8 LOOH COOR phy 30 8
Rh = hydrogenolyysillä poistettavissa oleva suoja-ryhmä 0 R zn = lievästi sinkillä pelkistyvä karboksi-suoja-ryhmä 0 R phy = fysiologisesti hydrolysoituva karboksi-suoja-ryhmä 11 7251 8
Kaavion I hydrogenolyysireaktiot, joissa 8 hydrogenolysoituva karboksi-suojaryhmä (R h) poistetaan hydrogenolyysillä, saatetaan tapahtumaan alalla hyvin tunnetuin menetelmin, nimittäin hydraamalla sopivalla kata-5 lyytillä, kuten palladiumilla, platinalla tai rodiumilia, valinnaisesti kantimella kuten hiilellä, kalsiumkarbonaa-tilla tai aluminiumoksidilla, inertissä liuottimessa, sillä tavalla, että karbapenaamin tai karbapeneemin hajoaminen on pienin mahdollinen. Siten olosuhteet ovat edullisesti 10 lähes neutraalit ympäristön lämpötilassa tai sen alapuolella, ja sopivasti alhaisessa paineessa (esim. 1-7 ilmakehässä). "Inertillä liuottimena" tarkoitetaan liuotinta, joka äärellisestä liuentaa lähtöaineen reagoimatta merkitsevästi lähtöaineen (aineiden), tuotteen (tuotteiden) tai reagenssin 15 (reagenssien) (tässä tapauksessa vedyn ja katalyytin) kanssa. Edulliset liuottimet hydrogenolyysiä varten ovat myös liuottimia, jotka ovat haihtuvia ja joihin myös tuote liukenee, niin että tuote voidaan ottaa talteen yksinkertaisesti tyhjössä haihduttamalla (tai pakastekuivaamalla, miten on sopi-20 vaa) suodoksesta katalyytin talteenoton jälkeen. Edullisia katalyyttejä hydrogenolyysejä varten ovat palladium hiilellä tai palladium kalsiumkarbonaatilla. Tämän keksinnön yhdisteet, jotka sisältävät hydrautuvia ryhmiä liittyneenä C-2-tai C-6-sivuketju-aminoon, -hydroksiin tai -karboksiin 25 (esim. bentsyylioksikarbonyyli, p-nitrobentsyylioksikarbo-nyyli tai bentshydryyli), hydrautuvat samoin (ts. amino-, hydroksi- tai karboksi-ryhmiksi). Kun hydrogenolyysi on yksi monista tämän keksinnön piiriin kuuluvista vaiheista ja on käytettävissä valinnaisia teitä, on edullista saattaa hydroge-30 nolyysi tapahtumaan karbapenaamilla, vastakohtana karbapen-2-eemille, koska edelliset ovat pysyvämpiä ja helpompia käsitellä hydrogenolyysi-olosuhteissä. Vastaavalla tavalla l-asetoksikarbapen-2-eemin hydrogenolyysiä pidetään parempana kuin 1-okso- tai l-hydroksikarbapen-2-eemin hydrogeno-35 lyysiä, ja 1-asetoksi- tai 1-hydroksikarbapenaamien hydro- 12 7251 8 genolyysiä parempana kuin 1-oksokarbapenaamien hydrogeno-lyysiä. Optimi olosuhteet (esim. aika, katalyytti-määrä, katalyyttipanos) tämän keksinnön jonkun annetun yhdisteen hydrogenolyysiä varten voidaan helposti määrittää tarkkai-5 lemalla ohutlevykromatografiällä käyttäen edellä kuvattuja menettelytapoja.
Kaavion I lievät sinkkipelkistvkset, jois- g sa suojaryhmä (R zn) , kuten 2,2,2-trikloorietyyli, poistetaan, toteutetaan yleensä seuraten Just’in ja Grozinger'in 10 menetelmää /Synthesis (7), 457 (1976)/ nimittäin pelkistämällä kaupallisen sinkkijauheen lietteellä seoksessa, jossa on vesipitoista puskuria (pH 4,2-7,2) ja inerttiä, veden kanssa sekoittuvaa, orgaanista liuotinta, kuten tetrahydro-furaania, edullisesti ympäristön lämpötilassa tai alemmas-15 sa lämpötilassa. Kun lievä sinkkipelkistys on yksi monista vaiheista tämän keksinnön yhdisteeksi ja vaihtoehtoisia teitä on käytettävissä, on edullista suorittaa lievä sinkki-pelkistys karbapenaamilla eikä karbapeneemillä. Vastaavasti on edullista suorittaa lievä sinkkipelkistys 1-asetoksi-20 karbapen-2-eemillä mieluummin kuin 1-okso- tai 1-hydroksi-karbapen-2-eemillä. Lieviä sinkkipelkistyksiä tarkkaillaan myös mukavasti ohutlevykromatografiällä, kuten edellä esitettiin .
l-oksokarbapen-2-eemien pelkistäminen 1-oksokarba-
O
25 penaami-3-karboksylaateiksi (kun karboksi-suojarynmä on Rh
Q
tai R phy) tai l-oksokarbapenaami-3-karbonihapoiksi (kun g karboksi-suojaryhmä on R zn) sinkki/happo-parilla on koottu kaavioon I. Tämän pelkistyksen toteuttamiseksi puhtaasti miedoissa lämpötila- ja aikaolosuhteissa, on tärkeätä 30 käyttää erikoisesti aktivoitua sinkkiä. Erityisen sopivaa on erittäin aktiivinen sinkki, jota valmistetaan mustana jauheena Rieke'n ja Unm'in menetelmällä /Synthesis (7), 452 (1975)/, nimittäin pelkistämällä vedetöntä sinkkisuolaa kaliumilla palautuksen alaisessa tetrahydrofuraanissa iner-35 tissä atmosfäärissä. Edullinen happo näitä aktivoituja sink- li 13 7251 8 ki-pelkistyksiä varten on etikkahappo. Sen happovahvuus on riittävä auttamaan reaktiota ja silti se ei ole liian vahva aiheuttaakseen kohtuutonta haittaa beta-laktaa-mille. Etikkahappoa käytetään samanaikaisesti myös 5 liuottimena. Vaikka niinkin korkeita lämpötila kuin 35°C voidaan käyttää tätä reaktiota varten, ovat lämpötila väliltä -10 - 0°C edullisia. Koska etikkahappo jäätyy noin 17°C:ssa, on tarpeen lisätä inerttiä laimennin-ta toimimaan jäätymisen estoaineena. Tetrahydrofuraani 10 (30-%:nen) sopii hyvin tähän tarkoitukseen. Tämän kek sinnön aktivoituja sinkki-pelkistyksiä tarkkaillaan ja optimoidaan sopivasti käyttämällä ohutlevykromatografiaa edellä kuvattujen menetelmien mukaisesti. Mitä rakenne-kaavan IV l-oksokarbapen-2-eemien aktivoituun sinkkipel-15 kistykseen tulee, on tätä reaktiota käytetty hyödyksi 4 amostaan tapauksissa, joissa R on metyyli.
3-karboksyylihappojen muuttaminen vastaaviksi
O
suojatuiksi karboksyylihapoiksi (ts. R -estereiksi kuten edellä määriteltiin) suoritetaan myös standardimenetelmin. 20 Karboksyylihappo, karboksylaatti-suolana (ennalta muodostettuna tai muodostettuna in situ lisäämällä ainakin valiemästä), standardi-kaksimoolisena syrjäytyksenä, saatetaan reagoimaan sopivan halidin, mesylaatin jne.
g (R phyx), esim. kloorimetyylipivalaatin, bromimetyyliase-25 taatin, 1-etoksikarbonyylioksietyylikloridin, 1,3-dihydro-3-oksobentso/c.7furan-l-yyli-bromidin, bentsyylikloridin, bentsyylibromidin, bentsyylimesylaatin, 2-bromimetyyli-naftaleenin, bentshydryylikloridin jne. kanssa. Emäs voi olla tertiaarisen amiinin tai bikarbonaatin muodos-30 sa ja sitä voidaan käyttää ylimäärin karboksylaatti-io-nin pitoisuuden maksimoimiseksi ja siten nopeuden lisäämiseksi. Natriumjodidia voidaan myös lisätä katalyytiksi. Reaktio saatetaan tapahtumaan inertissä liuottimessa (kuten edellä määriteltiin), jolloin polaariset, app-35 roottiset liuottimet, kuten dimetyyliformamidi ovat „ 72518 14 edullisia, koska nopeita reaktionopeuksia saadaan ilman pyrkimystä vaikuttaa kummankaan substraatin beta-lak-taamiin tai tuotteeseen. Lämpötila-alue reaktiolle ei ole ratkaiseva (esim. 0-50°C), mutta edullisesti se pi-5 detään ympäristön lämpötilassa tai alempana beta-laktaa-min hajoamisen vähentämiseksi. Näitä esteröimisreaktioi-ta tarkkaillaan ja optimoidaan käyttäen ohutlevykromato-grafiaa kuten edellä kuvattiin. Tämän keksinnön beta-laktaamien hajoamisen vähentämiseksi näiden esteröimis-10 reaktioiden aikana ovat minimireaktioajät toivottavia. Tästä syystä jodidit ovat edullisempia kuin bromidit, jotka vuorostaan ovat edullisempia kuin kloridit reagens-seina käytettäviksi. Kun käytetään bromideja tai klorideja, jodidi-katalyysi on tavallisesti eduksi. Kun tä-15 män keksinnön jonkun erikoisyhdisteen synteesi vaatii tämäntyyppisen esterin muodostamista ja synteesisarja sallii valinnaisia teitä, on edullista tuoda esteri-ryhmä ennen uudelleenryhmittämisvaihetta.
Tämän keksinnön esterit valmistetaan myös sopi-20 van diatso-yhdisteen reaktiolla karbonihapon kanssa. Käytetään inerttiä, approottista liuotinta. Erityisen sopiva on metyleenikloridi, koska se on erittäin haihtuva ja tuotteet ovat helposti talteenotettavissa haihduttamalla tyhjössä. Lämpötila ei ole ratkaiseva (esim.
25 -25 - 35°C), jolloin myös ympäristön lämpötila tai si tä alempi lämpötila on edullinen. Esimerkki tämäntyyppisestä esterin muodostuksesta on difenyylidiatsometaanin reaktio tämän keksinnön karbonihapon kanssa metyleeni-kloridissa vastaavien bentshydryyli-esterien muodostami-30 seksi. Tätä reaktiota voidaan myös tarkkailla ja optimoida käyttäen ohutlevykromatografiaa ja infrapuna-spektroskopiaa. Aina kun sopiva diatsoyhdiste on käytettävissä, on tämä valmistus edullinen verrattuna edellisen kappaleen syrjäyttämisreaktioon, mikä johtuu yleensä 35 tarvittavista lievemmistä olosuhteista.
li 15 7251 8
Kolmas menettelytapa tämän keksinnön esterien synteesiä varten on sopivan alkoholin (2,2,2-trikloori-etanolin, bentshydrolin, bentsyylialkoholin, 2-hydrok-simetyylinaftolin tms.) vettäpoistava liittäminen noin 5 yhteen ekvivalenttiin tämän keksinnön karboksyylihap-poa. Vettäpoistava liittäminen suoritetaan jollakin suuresta joukosta eri aineita, joita tavallisesti käytetään peptidisynteesissä. Edustavia aineita ovat NtN-karbonyylidi-imidiatsoli, N,N1-karbonyylidi-s-tri-10 atsiini, etoksiasetyleeni, 1,1-diklooridietyylieet-teri, difenyyliketeeni-p-tolyyli-imiini, N-hydroksi-ftaali-imidi, N-hydroksisukkiini-imidi, N-hydroksipipe-ridiini, etyleenikloorifosfiitti, dietyylietyleenipyro-fosfiitti, N-etyyli-5-fenyylibisoksatsolium-3'-sulfo-15 naatti, fenyylifosforidi-(1-imidiatsolaatti) ja karbodi-imidit, kuten disykloheksyylikarbodi-imidi, 1-syklohek-syyli-3-(2-morfoliinimetyyli)karbodi-imidi, N-(3-dime-tyyliaminopropyyli)-N'-etyylikarbodi-imidi-hydrokloridi, l-etyyli-3-(3'-dimetyyliaminopropyyli)karbodi-imidi-20 hydrokloridi ja dietyylisyanamidi. Yleensä käytetään vettäpoistavaa ainetta 1-1,2 ekvivalenttia tert-amiini-katalyytin (esim. pyridiinin, trietyyliamiinin, tavallisesti 1-1,5 ekvivalenttia) läsnäollessa. Käytetään inerttiä, approottista liuotinta. Lämpötila ei ole rat-25 kaiseva (esim. -25 - 40°C), edullisesti ympäristön tai alempi lämpötila. Metyleenikloridi liuottimena ja huoneen lämpötila ovat sopivia olosuhteita. Hydratoitu rea-genssi poistetaan suodattamalla ja tuotteet otetaan talteen yksinkertaisesti haihduttamalla tyhjössä. Reaktioi-20 ta tarkkaillaan ohutlevykromatografiällä ja infrapuna- spektroskopialla. Kun sopivia alkoholeja on käytettävissä, tämä esteröimismenetelmä on edullisempi kuin edellä kuvattu halidi-syrjäytysmenetelmä, mikä johtuu lievemmästä olosuhteista.
c
On ilmeistä, että edellä kuvatuissa eri esteröi- ie 7251 8 misolosuhteissa pyrkivät myös sivuketju-karboksi-ryhmät esteröitymään. Jos halutaan vapaa karboksi-ryhmä sivu-ketjuun, se tukitaan edullisesti suojaryhmillä (bentsyy-lillä, bentshydryylillä, 2-naftyylimetyylillä, joka voi-5 daan poistaa selektiivisellä hydrogenolyysillä, jos halutaan pivaloyylioksimetyyli tai 2,2,2-trikloorietyylieste-ri C-3:een), välttäen monimutkaisten seosten kromatografinen erottaminen.
2-diatso-l-oksokef-3-eemi-4-karbboksylaatteja, joi-10 ta tarvitaan lähtöaineiksi näitä synteesejä varten, valmistetaan kirjallisuuden menetelmin tai valmistusmenetelmin, jotka jäljempänä yksityiskohtaisemmin esitetään. Lähtöaineen synteesin viimeisenä vaiheena on tavallisesti 2-di-atso-ryhmän väliinpano, 2-diatso-l-beta-oksokef-3-eemit 15 valmistetaan Ebbinghaus' in et ai. menetelmän mukaisesti /J. Org. Chem. 44 (25), 4967 (1979)J7> vaihtoehtoisesti, kaliumtert-butoksidin lisäksi läsnäollessa, kuten jäljempänä valmistusten yhteydessä yksityiskohtaisesti on esitetty. Jälkimmäinen menetelmä, mutta yleensä käyttäen jon-20 kinverran voimakkaampia aika- ja lämpötila-olosuhteita, sopii myös hyvin vastaavien 2-diatso-l-alfa-oksokef-3-ee-mien synteesiin. Tarvittavia l-oksokef-3-eemi-4-karboksy-laatteja on laajasti esitetty kirjallisuudessa (vrt. Bruyns ja Koning US-patentti 4 182 870). Tarvittavat oksidit val-25 mistetaan helposti perhapolla (sopivasti m-klooriperbentso-hapolla) tai 30-%:sella vetyperoksidi/muurahaishappo-hape-tuksella, viimeistä edellisenä vaiheena tai jossakin muussa sopivassa prekursori-vaiheessa. Joissakin tapauksissa saadaan erottuvia 1-alfa- ja 1-beta-oksidien seoksia; toi-30 sissa saadaan puhtaita 1-beta-oksideja. Kummassakin tapauksessa oksidi on sopiva tämän keksinnön jatkokäsittelyyn. Tarvittavat karboksi- ja amino-, ja jos halutaan, hydrok-si-suojaryhmät yhdistetään sopivassa vaiheessa lähtöaineen synteesiä käyttäen edellä yksityiskohtaisemmin esitettyjä 35 menetelmiä. Koska näiden prekursorien beta-laktaamit ovat 7251 8 yleensä pysyvämpiä kuin tämän keksinnön yhdisteiden beta-laktaamit, ei yleensä ole selvää etusijaa sillä, mikä nimenomainen menetelmä esteröintiä varten valitaan. Sopivien prekursorien asetyloinnit suoritetaan samalla tavalla kuin 5 tämän keksinnön yhdisteiden asetyloinnille kuvattiin. Sopivien prekursorien bentsyylioksikarbonylointi suoritetaan samalla menetelmällä kuin asetylointi, korvaamalla asety-loimisaine samanarvoisella karbobentsoksikloridilla. Amino-ryhmät voidaan asyloida selektiivisesti asyloimatta nydroksi-10 ryhmiä käyttäen yksinkertaista mooliekvivalenttia asyloimis-ainetta.
Tämän keksinnön niiden yhdisteiden, joissa on vapaa karboksyylihapDoryhmä, farmaseuttisesti hyväksyttäviä kationi-suoloja valmistetaan helposti standardimenetelmin. Esimer-15 kiksi ekvivalentti vastaavaa kationi-hydroksidia, -karbonaattia tai -bikarbonaattia yhdistetään karboksyylihappoon orgaanisessa tai vesiliuottimessa. Suola eristetään haihduttamalla ja/tai lisäämällä ei-liuotinta. Joissakin tapauksissa suola eristetään suoraan reaktioseoksesta eristämättä 20 vapaata happomuotoa. Farmaseuttisesti hyväksyttäviä katio-nisia suoloja ovat, mutta eivät rajoitu niihin, ne, jotka on muodostettu natriumin, kaliumin, kalsiumin, N,N'-dibents-yylietyleenidiamiinin, N-metyyliglukamiinin ja dietanoli-amiinin kanssa.
25 Tämän keksinnön niiden yhdisteiden, joissa on vapaa amino- tai amidiini-ryhmä, farmaseuttisesti hyväksyttävät happoadditiosuolat valmistetaan myös helposti standardi-menetelmin. Esimerkiksi, ekvivalentti happoa yhdistetään amiiniin tai amidiiniin orgaanisessa tai vesipitoisessa 30 orgaanisessa liuottimessa. Suola eristetään haihduttamalla ja/tai lisäämällä ei-liuotinta. Joissakin tapauksissa suola eristetään suoraan reaktioseoksesta eristämättä vapaata amiinia tai amidiinia. Farmaseuttisesti hyväksyttäviä happoadditiosuoloja ovat, mutta eivät rajoitu niihin.
18 7251 8 kloorivetyhapon, rikkihapon, typpihapon, fosforihapon, sitruunahapon, maleiininapon, sukkiinihapon ja metaani-sulfonihapon suolat.
Eri yhdisteiden käyttö välituotteina tämän keksinnön mukaisissa muissa menetelmissä on selvää edellä esitetyn perusteella. Näiden yhdisteiden bakteerinvastainen aktiivisuus, joka heijastelee niiden hyödyllisyyttä herkkien bakteeri-infektioiden torjunnassa ihmisellä ja eläimillä, lisäaineina eläinrehussa kasvun edistämistä varten tai säilöntäaineena 10 aineille, jotka pilaantuvat biologisesti herkkien mikro-organismien vaikutuksesta, mitataan parhaiten standardi-kiekko-levymenetelmällä, jota totunnaisesti käytetään kliinisissä laboratorioissa mikro-organismien herkkyyden määrittämiseksi mikrobinvastaisille aineilla. Herkkyyskiek-15 koja valmistetaan kastamalla standardi 6,25 mm:n paperikiek-ko testattavan yhdisteen liuokseen (väkevyys 1 mg/ml) haihtuvassa liuottimessa (esim. metyleenikloridissa) ja kiekko kuivataan, jolloin saadaan kiekkoja, jotka sisältävät noin 25 mikrogrammaa yhdistettä. Kiekot pannaan agar-kasvuväli-20 aineen pinnalle, joka aine on ympätty testi-mikro-organis-milla, jota on sitä ennen viljelty petrimaljoissa. Levyjä inkuboidaan yli yön 35-37°C:ssa. Testiyhdisteen aktiivisuus heijastuu bakteerikasvun estovyöhykkeeseen testikiekon ympärillä. Tämän vyöhykkeen läpimitta antaa kvantitatiivisen 25 mitan bakteerinvastaisen aineen aktiivisuudelle. Tämän keksinnön eri yhdisteiden aktiivisuudet on koottu taulukkoon I. Vertailua varten on tulokset, jotka on saatu 10 mikrogrammaan kiekoilla ampisilliinia ja penisilliiniä G, otettu mukaan positiivisina vertailuina. Vaihtoehtoinen 30 in vitro-seulontamenetelmä, joka käsittää mikro-organismien viljelyn putkissa, jotka sisältävät testiyhdisteen sarja-laimennusväkevyyksiä aivo/sydäninfuusioliemessä, ei anna tämän keksinnön yhdisteiden oikeata bakteerinvastaista aktiivisuutta, mikä johtuu näiden yhdisteiden pysymättömyy-35 destä testiväliaineessa. Esimerkiksi 25 mikrogramman kiekko 19 7251 8 pivaloyylioksimetyyli-2-metyyli-l-oksokarbapenaami-3-karbok-sylaattia testattuna Staphylococcus aureus'ta vastaan kiek-kolevymäärityksessä osoittaa, että tällä yhdisteellä on hyvä aktiivisuus tätä nimenomaista mikro-organismia vas-5 taan, siitä tosiasiasta huolimatta, että tämä sama yhdiste samaa mikro-organismia vastaan antoi minimiestoväkevyy-den >200 mikrog/ml sarjalaimennus-putkitestissä. Tämän keksinnön yhdisteiden testaustulokset sarjalaimennusputki-testistä on koottu taulukkoon II.
20 7 2 5 1 8
Taulukko I
Karbapenaamien ja karbapen-2-eemien bakteerinvastäinen aktiivisuus. Kiekko-levy-menetelmä.
5
Yhdiste 2 «IB 4 Estovyöhyke (mm)
&-N-‘'COOR3 S M
10 (I» K-s »
Hl οι Ό ΦΌ 2 3* _2 < tn rt a v-1
1R AB. h· w rl m S » O
Ril—204 2^.8 8 t S
F") T 3 o S |8 8 S g
15 ^COOR3 fo o £ c c ® M
(II) $ h· 8 “ 01 3 n» ' ' o m et q, c c 2- o £ 5 £ S 2
^ H2 K2 R4 A B I/XX g £ £2 2 E S
H H ROM ch3 -o- — -—:——: :8
20 H H POM CH3 H OH I - - 0 _ Q Q
H H H CH3 H OAC I - - 0 _ 12 0 H H POM CH3 -O- Il 14 0 18 26 37 22 H H POM CH3 H OH II - i0 13 1Q 15 15 H H POM CH3 H OAc II - - 0 0 14 13 25 H H H CH3 H OAc II 18 0 8 - 13 H H P0M Ohf ~°~ 11 * 12 - - 0 PMA H POM CH3 -O- I - 0 12 15 21 PMA H POM CH3 H OH I - 0 17 14 23 20
PMA H POM CH3 H OAc I - 0 0 0 16 H
PMA H H CH3 H OAc I - 0 0 0 0 0 PMA OMe POM CH3 -Ο- I 0 0 0 - 11 0 PMA OMe POM CH3 H OH I 0 0 0 - H 23 PMA OMe POM CH3 -O- II 0 0 0 - 33 8 35 MPI H P0M CH3 -O- I 0 0 11 - is . o 21 7251 8
Taulukko 1 (jatkoa) 5
Yhdiste
Estovyöhyke (mirO
-(Λ Ml 7 ^ W
^COOR » en £ ™ (I) ίϋ-ϊ 5.
2 < H g « £ !? o
R1 V *4 5 I ' 8 - H
--rV s S g8 8 £2 J—n—^ 3 ro o g 2 2 15 CK COOR « £ g- » m 3 » {11) o °* δ c c σ ^ ST n £ n £ £ g το-,* S O o o ro h- w R S R3 S4 a s i/ii H· F S S S' MPI H POM CH3 H OH I 13 Ö 14 I 16 15 MPI H POM CH3 -O- II 0 0 9 - 21 0 20 EPÄ H POM CH3 -O- I 21 12 12 - 21 12 EPÄ H POM CH3 H OH I 24 20 10 - 17 18 EPÄ H H CH3 H OH I 25 16 9 ~ 16 15 EPÄ H POM CH3 -O- II 20 0 0 0 0 0 25 HET H H CH3 H OH I - 23 - 39 29 29 HET H H CH3 H OAc I - 0 - 13 16 0 HET H H OCH3H OH I - 11 - 42 22 27 HET H POM CH3 H OH I - 14 - 31 24 27 AET H H CH3 H OH I 16 0 " 20 15 20 AET H H CH H OAc I 10 0 26 25 21 j w ^ r *s\
Positiiviset vertailut v :
Penisilliini 33 16 0 45 32 31
Penisilliini G
_32_0-0 45 33 32 22 7251 8 POM = pivaloyylioksimetyyli PMA = 2-fenoksiasetamido MPI = 5-metyyli-3-fenyyli-isoksatsolikarboksiamido EPA = D-2-(4-etyyli-2,3-dioksopiperatsiini-l-karboksi-5 amido)-2-fenyyliasetamido HET = 1-hydroksietyyli AET = 1-asetoksietyyli ^10 mikrogramman kiekkoja; kaikki muut 25 mikrogramman kiekkoja.
23 725 1 8
Staphylococcus aureus § § § § ° £ ° J* Λ Λ Ä 5( <0 b
Staphylococcus aureus ο σ o o ~o o (Resistantti antibiooteille) K /\ /^ X /( ^ /\
Escherichia cell g g g g g g g
p XX X XXX X
S S
M* t tl
Escherichia coli ooooooo w 5 (Resistantti antibiooteille) ® ° ° ° ° ® Ο „ Λ Λ Λ Λ Λ Λ Λ ? » P seud emonas aeruginosa ° § § § § § § 2 1 λ a a a ^ a a j£ Klebsiella pneumoniae ooooooo
•ti ~ ^ ^ CN <N (N (N
C > Λ A Λ A Λ A Λ c Serratia marcescens §§§§§§§ 2 πκπη f Enterobacter cloacae §§§§§§§
H -5 H * * Ä ft 5( A A
H S i Citrobacter diversus §§§§§§§ I S 2 " Π5(ΠΠ η Λ c Proteus morqani ooooooo b c o 5¾ a a ^ ^
bos A A Λ A Λ A A
E-· Ή *H
ε λ;
0 -P
<d b 1 a „
C-J I M
I t/J ^ b b 'vHhmhmmh
Ob H H
O, b b <u λ ε _ u o S-l -H . s < B <
b b (Dl I O O I ( o O
* γη m _ o o o b o § « <1 k k 1 1 a b o m 2 „ o b ο; M Tv p, Tv-1 -Γ1 •J"'"' 'b O o o o b co v . P 051 ® = = 2= s a a 0 \_/ \_/ u u u u u CJ u ε ray mxl S s s 2 Σ s: 1 <V2 «Λ-., 2 2 = 2 2 2 2 b z 2 Φ <D _ — o. -n <μ r~· h
b V) Tv__V M T . . m fVJ
s i -/Λ -7Λ -“'= = = = = = = *5 >H ^ Κ < < < H«i s e = = 2 2 2 24 7251 8 ΙΟ r· j. . 1 oooomomo
Staphylococcus aureus o o o o <n m . r-, Ä Ä ^ ~
5 M
Staphylococcus aureus oooooooo -ho
(Resistentti antibiooteille; ° ° ° ° ° ° · ° ^-i jQ
^(Nr-i(N(NtNrn--H >i p c λ;
·» (D I
, ^ m m 14-1 I—t
Escherichia coli S220<NocNo 11 ' 1 1 -- - 0000*0*0 ΓΟ-Η
(NlNiNi—IVOi-HlOfN IP
A Λ Λ Λ -H -H
Ή ·Η tn in >, tn >ι Escherichia coli οοοοοο<ν© -ptc £ (Resistentti antibiootein^ 3 ΑΛΛΑΑ/νΑη-πιο, I—I Ή LO ·Μ :!?nj OOOOOOOO -H-H Q.
> Pseudomonas aeruginosa oooooooo c c ιι i
O - I^ININMNNMO) ·η -η O
AÄAAAA h-hhoi n in ή γη cl x £ . 0000*000 ή o S o tii Klebsiella pneumoniae oooomoino -h tn -h ^ fN ,-t rH csj (N tn-U ·τ) d A A A AA'Hrfloi 5 di1*-! Ό cn e ooooinoooEtU H» o Έ Serratia marcescens oooorjomo <s λ; e <n o £--™ ™ <N <\| ,ΟΙ-Η Αλα λ A h rH 4J ·η ή U ^ in ·· ·· Q) Ή >Ί <0 — , , , _ O o o o · o m o ΉΉ tn >, >, :n Enterobacter cloacae oooonjmnjo m ^ u
-- - <N IN fN [N H pj . Hl Id -H -U (U
h A A A AdCtntD H
h m 3 b Ai i tn „ _. . , , . oooo.o -u-uo^ri; o Citrobacter diversus o o o o <n o ι i d -u c - o r$ ----- - N (N N H rt tN bföailll "3 AAA A 4JU IH N Ό •-H C/) C/) I I t>i
2 oooinrooino ™ Q -C
S Proteus morgani o o o cn · m cn o -t-1 i
0 - -Λ- IN (N N O nj II II -H
A A A VI A cc Φ tl) < < Il
tn tn s n MM Oi M H
3 b w 4-14-) · · e M 3 3 -h o
M M M -H XI
'v-MMMMWMHM
h Φ ό >i ε n
> > 4J (O -H
Q) -rH E
n CG E tn (ti EE E 35 E < CL) Φ ·Ή Λί 4->
ΠΜΟΟάΟΟΟΟ S S 3 ^ S
c'·' r*i ι I 3 3 O 14 (tj
55 02 | rCCC fr*! *t* 4J-P -H dj -H
R ^ O *!· mrommmcnrofO O O 1 « /U E O C| E S E E E E~ E~ SI -3-3 >i Ή >i \—/ \_/ υυυυυυαυ ^ h i § -A X <^100000 <TJrtJ>0(
**· \ <ί \ El diCUECUCUEEE ttJttJ-rHtntN
Φ — 2 y-2 JJ 4J Q* 4J i 1 \ I CC dj "—»
w — M 0) QJ dJOJIlwO
J ^ M(N Ihcnss _- ·* 'b rrj & r v\ -- E -η-λ — E|00EEE“ — *» — ^ S O -r-l 3 / \\ 7 \\ C jq O tn 6 $4 ' o ι-l / '0 — — en -H C '
r-t SSEQLiOiCUUtJ
Ε|α,α.2ωωωΕΕ 05 °* 25 7251 8 Tämän keksinnön niitä bakteerinvastäisiä yhdisteitä, jotka ovat käyttökelpoisia hoidettaessa systemaattisia infektioita eläimissä, ihminen mukaanluettuna, jotka ovat herkkien mikro-organismien aiheuttamia, annetaan 5 annosmäärissä väliltä 5-250 mg/kg päivässä, edullisesti 10-150 mg/kg/päivä, tavallisesti jaetuissa annoksissa. Muutoksia annokseen tehdään riippuen yksilöstä ja mikro-organismin herkkyydestä. Nämä yhdisteet ovat tehokkaimpia, kun ne annetaan ruoansulatuskanavan ulkopuolisesti, edulli-10 sesti lihaksensisäisesti pysyvämmän esilääkeaine-esteri-muodon suspensiona (määritelty edellä). Klinikoilla eristettyjen mikro-organismien herkkyys testataan totunnaisesti kliinisissä laboratorioissa kiekko-levy-menetelmällä kuten edellä kuvatt-in. Edullisia yhdisteitä ovat ne, jotka 15 antavat läpimitaltaan suurimman estovyöhykkeen bakteereita vastaan, jotka aiheuttavat hoidettavan infektion.
Parenteraalisesti tarvittavat annosmuodot edellä esitettyä systemaattista käyttöä varten valmistetaan edullisesti hienojakoiseen, kuivan jauheen muotoon, joka liuo-20 tetaan tai suspendoidaan välittömästi ennen käyttöä farmaseuttisesti hyväksyttävään kantimeen, kuten veteen, suolaliuokseen, seesamiöljyyn tms. Voidaan lisätä myös aineita, jotka parantavat suspendoituvuutta ja dispergoimisominai-suuksia. Optimaalisten annosmuotojen valmistus tapahtuu 25 farmasian alalla hyvin tunnetuin menetelmin.
Tämän keksinnön ne bakteerinvastaiset yhdisteet, jotka ovat käyttökelpoisia hoidettaessa paikallisia infektioita eläimissä, ihminen mukaanluettuna, jotka ovat aiheutuneet herkistä mikro-organismeista, valmistetaan liuoksiksi, 30 voiteiksi, vaahdoiksi, salvoiksi, geeleiksi tms. väkevyyksissä väliltä 500-200 mg/ml. Tämä annosmuoto levitetään infektio-kohtaan ad libitum (mielinmäärin), yleensä ainakin kerran päivässä. Mikroporganismit, jotka ovat infektioiden syynä, eristetään totunnaisesti kliinisissä laboratorioissa 35 ja näiden mikro-organismien herkkyys tämän keksinnön yhdis- 26 7251 8 teille määritetään totunnaisesti samoissa laboratorioissa kiekko-levy-menetelmällä, jota edellä kuvattiin. Edullisia yhdisteitä ovat ne, jotka antavat suurimman estovyöhykkeen bakteereille, jotka aiheuttavat hoidettavan infektion.
5 Edullisia ulkonaisia annosmuotoja ovat esilääke- aine-esterin hienojakoiset suspensiot inertissä, farmaseuttisesti hyväksyttävässä kantimessa. Optimaalisten annosmuo-tojen valmistus tapahtuu farmasian alalla hyvin tunnetuin menetelmin.
10 Kun tämän keksinnön mukaisesti valmistetut bakteerinvastaiset yhdisteet ovat käyttökelpoisia kasvua edistävinä aineina svöttökoti-eläimissä, niitä annetaan pienissä määrissä (esim. 10-100 g yhdistettä tonnia kohti rehua). Yhdisteen sekoittaminen rehuun tapahtuu yleensä kahdessa vaiheessa, joista ensimmäi-15 sessä valmistetaan esiseos (esim. 10-100 g yhdistettä sekoitetaan 10-20 lb:n kanssa jauhettua soijapapua tms), joka sitten sekoitetaan rehuun jauhamisen aikana. Koska kasvun edistäminen tapahtuu alhaisella aktiivisuustasolla ja samanaikaisesti yhdisteet altistetaan olosuhteille, jotka 20 ovat tiedemiehen säätelyn ulkopuolella, ovat tähän tarkoitukseen edullisia keksinnön yhdisteitä ne, joilla on parempi pysyvyys, nimittäin, edullisuusjärjestyksessä, 1-asetoksi-karbapenaami-3-karboksylaattiesterit, 1-hydroksikarbapenaa-mi-3-karboksylaattiesterit ja l-asetoksikarbapen-2-eemi-3-25 karboksvlaattiesterit.
Ne tämän keksinnön mukaisesti valmistetut bakteerinvastaiset yhdisteet, jotka ovat käyttökelpoisia säilöntäaineina biologisesti pilaantuville aineille, sekoitetaan yksinkertaisesti biologisesti pilaantuvan aineen kanssa väkevyydessä, joka on 30 ainakin riittävä estämään biologista pilaantumista aiheuttavien bakteerien kasvun. Totunnaista sarjalaimennusmene-telmää voidaan käyttää väkevyyksien määrittämiseen, jotka ovat tarpeen halutun tarkoituksen saavuttamiseksi.
Keksintöä valaistaan seuraavin esimerkein. On kui-35 tenkin ymmärrettävä, että keksintöä ei rajoiteta näiden esimerkkien spesifisiin yksityiskohtiin.
27 7251 8
Esimerkki 1
Pivaloyylioksimetyyli-2-metyyli-l-oksokarbapen- 2- eemi-3-karboksylaatti
Standardi Pyrex-pullossa liuotettiin pivaloyylioksi-5 metyyli-2-diatso-3-metyyli-l- /1)-oksokef-3-eemi-4-karboksy-laattia (124 mg, 0,35 mmoli) 124 ml:aan metyleenikloridia, liuos jäähdytettiin -78°C:een ja sitä säteilytettiin ultra-violettilampulla yhteensä 25 minuuttia tarkkaillen samalla reaktion kulkua IR-analyyseillä. Reaktioseos haihdutettiin 10 kuiviin tyhjössä antamaan raaka pivaloyylioksimetyyli-l-okso-2-metyylikarbapen-2-eemi-3-karboksylaatti /ir (CH2C12): 1815, 1750, 1720 cm"1/.
Reaktion päätyttyä voidaan puhtaamman tuotteen saamiseksi sekoittaa seosta Raney-nikkelin (1,24 g) kanssa 15 -78 C:ssa 30 minuuttia, suodatetaan ja haihdutetaan suodos tyhjössä.
Esimerkki 2
Pivalpyylioksimetyyli^-metyyli-l-oksokarbapenaami- 3- karboksylaatti
Pivaloyylioksimetyyli-2-metyyli-l-oksokarbapen-2-20 eemi-3-karboksylaattia, joka oli vastavalmistettu 50 mg:sta pivaloyylioksimetyyli-1.^-okso-2-diatso-3-metyylikef-3-eemi-4-karboksylaattia esimerkin 1 menetelmällä (käyttäen Raney-nikkeli-vaihetta), noin 0,25 mlrssa tetrahydrofuraania lisättiin lietteeseen,jossa oli 500 mg sinkkijauhetta, joka 25 oli aktivoitu Rieke'n ja Uhm'in menetelmällä /Synthesis, 452 (1975)/, 15 ml:ssa etikkahappo/30 % tetrahydrofuraania 0°C:ssa. 1 tunnin sekoittamisen jälkeen tässä lämpötilassa reaktioseos laimennettiin tolueenilla, haihdutettiin tyhjössä ja jäännöstä vaivattiin useita kertoja tolueenin kans-30 sa. Imusuodatettu jäännös sekoitettiin ylimäärään metyleenikloridia, sinkki poistettiin suodattamalla ja suodos haihdutettiin uudelleen tyhjössä antamaan homogeeninen pivaloyyli-oksimetyyli-2-metyyli-l-oksokarbapenaami-3-karboksylaatti /tie (ohutlevykromatografia): R^ 0,45, eluenttina kloroformi/ 35 etyyliasetaatti 18:1; ir 1780, 1760 cm ^/.
28 7251 8
Esimerkki 3
Bentshydryyli-2-metyyli-l-oksokarbapen-2-eemi-3- karboksylaatti
Esimerkin 1 menetelmällä (30-50 minuutin säteilytys-5 aika, lisäksi käsittely 500 mgrlla Raney-nikkeliä) muutettiin bentshydryyli-2-diatso-3-metyyli-l-/'! -oksokef-3-eemi- 4-karboksylaatti (50 mg) 50 ml:ssa metyleenikloridia bents-hydryyli-2-metyyli-l-oksokarbapen-2-eemi-3-karboksylaatiksi /Jir (CK^C^) 1810 cm \/.
10 Esimerkki 4
Bentshydryyli-2-metyyli-l-oksokarbapenaami-3- karboksylaatti
Esimerkin 3 vastavalmistettu bentshydryyli-2-metyyli- 1- oksokarbapen-2-eemi-3-karboksylaatti pelkistettiin esimer-15 kin 2 menetelmällä antamaan bentshydryyli-2-metyyli-l-okso- karbapenaami-3-karboksylaatti /T7 mg, 86 %; (18:1 kloro- formi/etyyliasetaatti); uudelleenkiteytys metyleenikloridi/ heksaanista antoi tuotteet, jonka sp. oli 132-133°C/.
Röntgen-kristallografinen analyysi osoitti tämän 20 yhdisteen rakenteen ja suhteellisen stereokemian olevan seuraava:
O
,_
CH
25 >-----N-·-- - H3 θ'' COOCH(C,H )n 6 5 2
Esimerkki 5 2.2.2- trikloorietyyli-2-metyyli-l-oksokarbapen-2- 30 eemi-3-karboksylaatti 2.2.2- trikloorietyyli-2-diatso-3-metyyli-l- '-okso-kef-3-eemi-4-karboksylaatti muutettiin 2,2,2-trikloorietyyli- 2- metyyli-l-oksokarbapen-2-eemi-3-karboksylaatiksi esimerkin 1 menetelmällä, jolloin reaktion kulkua seurattiin IR- 35 analyysillä. 10 mg:n mittakaavassa tarvittiin 15 minuuttia reaktion loppuunkulumiseen, kun taas 100 mg:n mittakaavassa
II
29 7251 8 tarvittiin 40 minuuttia. Tuote eristettiin haihduttamalla reaktioseos tyhjössä ilman Raney-nikkeli-käsittelyä.
Esimerkki 6
Pivaloyylioksimetyyli-2-asetoksimetyyli-l-oksokarba-5 pen-2-eemi-3-karboksylaatti
Pivaloyylioksimetyyli-2-diatso-l- b-oksokefalospo-ranaattia (25 mg) liuotettiin 25 ml:aan metyleenikloridia, liuos jäähdytettiin -78°C:seen ja säteilytettiin UV-lampulla. Reaktiota tarkkailtiin IR-analyysillä, seuraten diatso-nauhan 10 häviämistä. Reaktio oli käytänöllisesti katsoen täydellinen 1 tunnin kuluttua; saatiin pivaloyylioksimetyyli-2-asetoksi-metyyli-l-oksokarbapen-2-eemi-3-karboksylaatin /_ir (Ci^C^) 1810, 1740 cm ^7 metyleenikloridiliuos. Tuote eristettiin öljynä haihduttamalla tyhjössä. Alhaisen lämpötilan ylläpi-15 täminen estää liiallisen hajoamisen eristämisen aikana. Esimerkki 7
Pivaloyylioksimetyyli-2-metyyli-l-okso-6-(2-fenoksi-asetamido)karbapen-2-eemi-3-karboksylaatti Seuraten jompaakumpaa esimerkin 1 menetelmää muutet-20 tiin pivaloyylioksimetyyli-2-diatso-3-metyyli-l- /1>-okso-7-(2-fenoksiasetamido)kef-3-eemi-4-karboksylaatti (5 mg) 5 ml:ssa metyleenikloridia (käyttäen 30 minuutin säteilytys-aikaa) pivaloyylioksimetyyli-2-metyyli-l-okso-6-(2-fenoksiasetamido) karbapen-2-eemi-3-karboksylaatiksi /_ir (Ci^C^) 25 1805, 1740, 1715, 1680 cm"1/.
Esimerkki 8
Pivaloyylioksimetyyli-2-metyyli-l-okso-6-(2-fenoksiasetamido) karbapenaami-3-karboksylaatti Vastavalmistettu pivaloyylioksimetyyli-2-metyyli-1-30 okso-6-(2-fenoksiasetamido)karbapen-2-eemi-3-karboksylaatti (valmistettu 200 mg:sta pivaloyylioksimetyyli-2-diatso-3-metyyli-1-^-okso-7-(2-fenoksiasetamido)kef-3-eemi-4-karbok-sylaattia (käyttäen käsittelyä 2 g:11a Raney-nikkeliä eris-tysvaiheessa) 1 ml:ssa tetrahydrofuraania lisättiin sekoit-35 taen 0-5°C:ssa lietteeseen, jossa oli 2 g aktivoitua sinkki-jauhetta (esimerkki 2) 6 ml:ssa etikkahappoa, joka sisälsi 7251 8 30 30 % tetrahydrofuraania. Yhden tunnin sekoittamisen jälkeen tässä lämpötilassa reaktioseos laimennettiin tolueenilla ja haihdutettiin kuiviin tyhjössä antamaan pivaloyylioksimetyyli- 2-metyyli-l-okso-6-(2-fenoksiasetamido)karbapenaami-3-karbok-5 sylaatti /Rf 0,34 (9:1 kloroformi/etyyliasetaatti; ir (CH2C12) 1790, 1750, 1680 cm-1/·
Esimerkki 9
Bentshydryyli-2-metyyli-l-okso-6-(2-fenoksiasetamido) karbapen-2-eemi-3-karboksylaatti 10 Bentshydryyli-2-diatso-3-metyyli-l- -okso-7-(2- fenoksiasetamido)-kef-3-eemi-4-karboksylaattia (200 mg) 200 mlrssa metyleenikloridia -78°C:ssa Pyrex-pullossa säteilytettiin UV-lampulla 30 minuuttia. Reaktioseos haihdutettiin kuiviin antamaan bentshydryyli-2-metyyli-l-okso-15 6-(2-fenoksiasetamido)karbapen-2-eemi-3-karboksylaatti /lv CH2C12) 1810, 1720 , 1690 cm"1./.
Esimerkki 10
Bentshydryyli-2-metyyli-l-okso-6-(2-fenoksiaset-amido)karbapenaami-3-karboksylaatti 20 Bentshydryyli-2-metyyli-l-okso-6-(2-fenoksiasetamido)- karbapen-2-eemi-2-karboksylaatti (vastavalmistettu 200 mg:sta bentshydryyli-2-diatso-3-metyyli-l- ;>-okso-7- (2-fenoksiasetamido) kef-3-eemi-4-karboksylaattia esimerkin 9 menetelmällä) lisättiin mahdollisimman pienessä määrässä tetrahydrofuraania 25 -10°C:ssa seokseen, jossa oli 2 g aktivoitua sinkkijauhetta (esimerkki 2) lietettynä seokseen, jossa oli 4 ml etikka-happoa ja 2 ml tetrahydrofuraania. Reaktioseosta sekoitettiin 1 tunti -10°C:ssa, seos laimennettiin tolueenilla, haihdutettiin kuiviin tyhjössä, jäännökseen lisättiin tolueenia, sink-30 ki ja sinkkisuolat poistettiin suodattamalla ja suodos haihdutettiin; saatiin bentshydryyli-2-metyyli-l-okso-6-(2-fenoksiasetamido) karbapenaami-3-karboksylaatti Zl40 mg, ir (CH2C12) 1790, 1745, 1680 cm"1/.
31 7251 8
Esimerkki 11
Pivaloyylioksimetyyli-6-metoksi-2-metyyli-l-okso-6-(2-fenoksiasetamido)karbapen-2-eemi-3-karboksylaatti Menetelmä Λ 5 Seuraten esimerkkiä 1 pivaloyylioksimetyyli-2-diatso- 7-metoksi-3-metyyli-3 - ,'-okso-7-(2-fenoksiasetamido) kef-3-eemi-4-karboksylaattia (15 mg) 15 ml:ssa metyleenikloridia säteilytettiin UV-lampulla -78°C:ssa 10 minuuttia, minkä jälkeen ir-analyysi osoitti toisiintumisen olevan täydellinen. 10 Lisättiin Raney-nikkeliä (150 mg) ja sekoittamista jatkettiin 30 minuutia -78°C:ssa. Raney-nikkeli poistettiin suodattamalla ja suodos haihdutettiin tyhjössä antamaan pivaloyylioksi-metyyli-6-metoksi-2-metyyli-l-okso-6-(2-fenoksiasetamido)kar-bapen-2-eemi-3-karboksylaatti [lr (CH2C12) 1810, 1750, 1715, 15 1690 cm-1?-
Menetelmä B
Seuraten esimerkkiä 1 pivaloyylioksimetyyli-2-diatso- 7-metoksi-3-metyyli-l- /^-okso-7- (2-fenoksiasetamido) kef-3-eemi-4-karboksylaattia (50 mg) 50 ml:ssa metyleenikloridia 20 säteilytettiin UV-lampulla -78°C:ssa 15 minuuttia, minkä jälkeen ir-analyysi osoitti toisiintumisen olevan täydellinen. Reaktioseoksen haihduttaminen tyhjössä antoi pivaloyylioksi-metyyli-6-metoksi-2-metyyli-l-okso-6-(2-fenoksiasetamido)-karbapen-2-eemi-3-karboksylaatin, joka oli sopiva jatkokäsit-25 telyä varten.
Esimerkki 12
Pivaloyylioksimetyyli-6-metoksi-2-metyyli-l-okso-6-(2-fenoksiasetamido)karbapenaami-3-karboksylaatti Vastavalmistettua pivaloyylioksimetyyli-6-metoksi-3 0 2-metyyli-l-okso-6-(2-fenoksiasetamido)karbapen-2-eemi-3-karboksylaattia esimerkin 11 menetelmästä B liuotettiin mahdollisimman pieneen määrään tetrahydrofuraania ja lisättiin aktivoidun sinkkijauheen (esimerkki 2; 500 mg) lietteeseen (0°C) seoksessa, jossa oli 1 ml etikkahappoa ja 35 0,5 ml tetrahydrofuraania. 1 tunnin sekoittamisen jälkeen 0°C:ssa reaktioseos laimennettiin tolueenilla, haihdutettiin 32 72 5 1 8 tyhjössä kuiviin, sama uusittiin useita kertoja tolueenin kanssa. Jäännös liuotettiin uudelleen metyleenikloridiin, sinkki poistettiin suodattamalla ja suodos haihdutettiin kuiviin tyhjössä. Jäännös lisättiin eetteriin, liukenemat-5 tomat epäpuhtaudet poistettiin suodattamalla ja suodos haihdutettiin tyhjössä kuiviin antamaan pivaloyylioksime-tyyli-6-metoksi-2-metyvli-l-okso-6-(2-fenoksiasetamido)kar-bapenaami-3-karboksylaatti /20 mg; 0,70 (4:1 kloroformi /etyyliasetaatti / .
10 Esimerkki 13
Pivaloyylioksimetyyli-2-metyyli-1-okso-6-/2-fenyyli-2-(4-etyyli-2,3-dioksopiperatsiini-l-karboksamido)-asetamido/karbapen-2-eemi-3-karboksylaatti Seuraten esimerkkiä 1 liuotettiin pivaloyylioksime-15 tyyli-2-diatso-3-metyyli-l-;i-okso-7-/2-fenyyli-2-(4-etyyli- 2,3-diokso-piperatsiini-l-karboksiamido)asetamido/kef-3-eemi-4-karboksylaattia (10 mg) 10 ml:aan metyleenikloridia, liuos jäähdytettiin -78°C:seen, ja sitä säteilytettiin UV-lampulla 20 minuuttia. Reaktioseos haihdutettiin kuiviin 20 tyhjössä antamaan pivaloyylioksimetyyli-2-metyyli-l-okso- 6-/2-fenyyli-2-(4-etyyli-2,3-dioksopiperatsiniini-l-karboksi-amido;.asetamido/karbapen-2-eemi-3-karboksylaatti /ir (Ci^C^) 1815, 1750, 1700 cm"1/.
Esimerkki 14 25 Pivaloyylioksimetyyli-2-metyyli-l-okso-6-/2-fenyyli- 2-(4-etyyli-2,3-dioksopiperatsiini-l-karboksiamido)-asetamido/karbapenaami-3-karboksylaatti Pivaloyylioksimetyvii-2-metyyli-1-okso-6-/2-fenyyli-2- (4-etyyli-2,3-dioksopiperatsiini-l-karboksiamido)aset-30 amido/-karbapen-2-eemi-3-karboksylaatti /vastavalmistet-tu esimerkin 13 mukaisesti 127 mgrsta (0,19 mmol) kef-3-prekursoria? lisättiin minimimäärään tetrahydrofuraania ja lisättiin lietteeseen, jossa oli aktivoitua sinkkijauhetta (1,27 g) seoksessa, jossa oli 26 ml etikkahappoa ja 12 ml 35 tetrahydrofuraania, 0°C:ssa. Sekoittamista 0°C:ssa jatkettiin 1 tunti. Tuote eristettiin esimerkissä 2 yksityiskohtaisesti esitetyllä menetelmällä, jonka jälkeen tuotetta 33 725 1 8 hierrettiin eetterin kanssa; saatiin pivaloyylioksimetyyli-2-metyyli-l-okso-6-/2-fenyyli-2-(4-etyyli-2,3-dioksopiperat-siini-l-karboksiamido) asetamido/karbapenaami-3-karboksylaatti /30 mg; 0,91 (etyyliasetaatti)/. Lisäksi saatiin 13 mg 5 vähemmän puhdasta tuotetta haihduttamalla eetteri-trituraatti kuiviin.
Esimerkki 15 2-naftyylimetyyli-2-metyyli-4-okso-6-Z2-fenyyli-2-(4-etyyli-2,3-dioksopiperatsiini-l-karboksiami-10 do)asetamido/karbapen-2-eemi-3-karboksylaatti
Seuraten esimerkin 1 menettelyä (ilman Raney-nikkeli-käsittelyä) muutettiin 2-naftyylimetyyli-2-diatso-3-metyyli-1— /;3 -okso-7-/2-fenyyli-2- (4-etyyli-2,3-dioksopiperatsiini-1-karboksiamido) asetamido"7kef-3 -eemi-4-karboksy laatt i 15 (273 mg) 2-naftyylimetyyli-2-metyyli-l-okso-6-/_2-fenyyli-2- (4-etyyli-2,3-dioksopiperatsiini-l-karboksiamido)asetamido/-karbapen-2-eemi-3-karboksylaatiksi.
Esimerkki 16 2-naftyylimetyyli-2-metyyli-l-okso-6-/,2-fenyy li-2-20 (4-etyyli-2,3-dioksopiperatsiini-l-karboksiamido)- asetamido/karbapenaami-3-karboksylaatti 2-naftyylimetyyli-2-metyyli-l-okso-6-/_2-f enyyli-(4-etyyli-2,3-dioksopiperatsiini-l-karboksiamido)asetamido7-karbapen-2-eemi-3-karboksylaatti esimerkistä 15 minimimää-25 rässä tetrahydrofuraania lisättiin aktivoidun sinkin (2,37 g) lietteeseen 5 ml:ssa etikkahappotetrahydrofuraani-seosta 70:30 0°C:ssa. 1 tunnin kuluttua 0°C:ssa tuote eristettiin esimerkissä 2 esitetyllä tavalla. Saatu tuote sekoitettiin eetteriin, liukenemattomat osat poistettiin suodattamalla 30 ja suodos haihdutettiin kuiviin tyhjössä antamaan 2-naftyyli-metyyli-2-metyyli-l-okso-6-/2-fenyyli-2-(4-etyyli-2,3-diokso-piperatsiini-l-karboksiamido)asetamido/karbapenaami-3-kar-boksylaatti /36 mg, 16 %; R^ 0,48 (etyyliasetaatti)/.
34 7 2 5 1 8
Esimerkki 17
Pivaloyylioksimetyyli-2-metyyli-6-(5-metyyli-3-fenyyli-isoksatsoli-4-karboksiamido)-1-oksokarba-pen-2-eemi-3-karboksylaatti 5 Käyttäen esimerkissä 1 esitettyä menetelmää pivalo- yylioksimetyyli-2-diatso-3-metyyli-7-(5-metyyli-3-fenyyli-isoksatsoli-4-karboksiamido) -1- /i--oksokef-3-eemi-4-karboksy-laattia (222 mg) säteilytettiin, reaktiota seurattiin ja tuote eristettiin (ilman Raney-nikkeli-käsittelyä) antamaan 10 pivaloyylioksimetyyli-2-metyyli-6-(5-metyyli-3-fenyyli-isok- satsoli-5-karboksiamido)-l-oksokarbapen-2-eemi-3-karboksy-laatti /Ir (CH2C12) 1810, 1750, 1710, 1680 cm”1?.
Esimerkki 18
Pivaloyylioksimetyyli-2-metyyli-6-(5-metyyli-3-15 fenyyli-isoksatsoli-4-karboksiamido)-1-oksokarba- penaami-3-karboksylaatti
Pivaloyylioksimetyyli-2-metyyli-6-(5-metyyli-3-fenyyli-isoksatsoli-4-karboksiamido)-l-oksokarbapen-2-karboksylaatti esimerkistä 17 pelkistettiin sinkillä 20 (2,22 g) 5,3 ml:ssa etikkahappo-tetrahydrofuraani-seosta 70:30 esimerkissä 2 esitetyllä menetelmällä ja eristettiin esimerkeissä 2 ja 16 esitetyillä menetelmillä antamaan pivaloyylioksimetyyli-2-metyyli-6-(5-metyyli-3-fenyyli-isoksatsoli-4-karboksiamido)-l-oksokarbapenaami-3-karbok-25 sylaatti /100 mg, 50 % yhteensä; ir (CH2C12) 1790, 1750, 1670 cm"1/.
Esimerkki 19
Pivaloyylioksimetyyli-6-^ -/I-(p-nitrobentsyyli-oksikarbonyylioksi)etyyli7-2-metyyli-l-oksokarbapen-30 2-eemi-3-karboksylaatti
Esimerkin 1 menetelmällä pivaloyylioksimetyyli-7-.x -/1-(p-nitrobentsyylioksikarbonyylioksi/etyyli?-2-diatso-3-metyyli-1- 5-oksokef-3-eemi-4-karboksylaattia (120 mg) säteilytettiin 41 minuuttia 120 ml:ssa metyleenikloridia 35 -55°C:ssa. Kuiviin haihduttamalla saatiin pivaloyylioksi- metyyli-6-^ -IJl- (p-nitrobentsyylioksi) etyyli/-2-metyyli- 35 7251 8 l-oksokarbapen-2-eemi-3-karboksylaattia kvantitäviivise11a saannolla /.ir 1810 cm
Esimerkki 20
Bentsyyli-6- s-/1-(p-nitrobentsyylioksikarbonyyli-5 oksi)etyyli7-2-metyyli-l-oksokarbapen-2-eemi-3-karb- oksylaatti
Esimerkin 1 menetelmällä käyttäen 31 minuutin sätei-lytysaikaa ja ilman Raney-nikkeli-käsittelyä bentsyyli-7-v-/1-(p-nitrobentsyylioksikarbonyylioksi)etyyli/-2-diatso-3-10 metyyli-l-/'1’-oksokef-3-eemi-4-karboksylaatti (100 mg) muutettiin bentsyyli-6-vk. -/1-(p-nitrobentsyylioksikarbonyylioksi)-etyyli/-2-metyyli-l-oksokarbapen-2-eemi-3-karboksylaatiksi lähes kvantitatiivisella saannolla; ir (CH2C12) 1810 cm ". Esimerkki 21 15 Bentsyyli-6- 4-(l-asetoksietyyli)-2-metyyli-l-
oksokarbapen-2-eemi-3-karboksylaatti Menetelmä A
Esimerkin 1 menetelmällä bentsyyli-7-X-(1-asetoksi-etyyli)-2-diatso-3-metyyli-l- p -oksokef-3-eemi-4-karboksy-20 laattia (40 mg) säteilytettiin 34 minuuttia. Lisättiin Raney-nikkeliä (0,4 g) ja seosta sekoitettiin -78°C:ssa 30 minuuttia. Raney-nikkeli otettiin talteen suodattamalla. Emäliuoksen kuiviin haihduttaminen antoi bentsyyli-6- λ-(1-asetoksietyy-li)-2-metyyli-l-oksokarbapen-2-eemi-3-karboksylaatin, joka 25 käytettiin punnitsematta kokonaan seuraavassa vaiheessa £fr (CH2C12) 1805 cm-1?.
Menetelmä B
Menetelmä A toistettiin 90 mg :11a lähtöainetta jättäen Raney-nikkeli-käsittely pois. Saatiin sama tuote lähes 30 kvantitatiivisella saannolla /.ir (CH2C12) 1805 cm ^J.
Esimerkki 22
Bentsyyli-6-λ -/1-(p-nitrobentsyylioksikarbonyyli-oksi)etyyli/-2-metoksi-l-oksokarbapen-2-eemi-3-karb-oksylaatti 35 Esimerkin 1 menetelmällä bentsyyli-6-.^-/1-(o -nitro- bentsyylioksikarbonyylioksi)etyyli/-2-diatso-3-metoksi-l-/^-oksokef-3-eemiä (31 mg) 30 ml:ssa metyleenikloridia säteily- 3C 7251 8 tettiin -50°C:ssa 10 minuuttia. Haihduttaminen kuiviin tyhjössä antoi bentsyyli-6- < -/I- (p-nitrobentsyylioksikarbonyyli-oksi)etyyli/-2-metoksi-l-oksokarbapen-2-eemi-3-karboksylaatin kvantitatiivisella saannolla β.r (CH2C12 1810 cm ^./.
5 Valmistus 1
Pivaloyylioksimetyyli-3-metyylikef-3-eemi-4-karbok- sylaatti 3-metyylikef-3-eemi-karboksyylihappoa /12,9 g, 65 mmoolia; Kemp et ai., Tetrahedron Letters, 3785 (1979)// liuo-10 tettiin 100 ml:aan dimetyyliformamidia. Lisättiin trietyyli-amiinia (6,6 g, 65 mmoolia) lievä eksoterminen reaktio) ja seosta sekoitettiin 0,5 tuntia huoneen lämpötilassa. Lisättiin kaliumbikarbonaattia (13 g, 130 mmoolia) ja sekoittamista jatkettiin vielä tunnin ajan. Lopuksi lisättiin kloori-15 metyylipivalaattia (10,8 g, 70 mmoolia) ja reaktioseosta sekoitettiin noin 16 tuntia, minkä jälkeen tie (piihappogeeli; 4:1 kloroformi:etyyliasetaatti eluenttina; kehitys emäksisellä permanganaatti-suihkeella osoitti, että reaktio oli täydellinen. Reaktioseos kaadettiin 1,5 l:aan eetteriä, pestiin 20 usealla annoksella vettä, sitten IN kloorivetyhapolla, jälleen vedellä ja lopuksi suolaliuoksella, kuivattiin magnesiumsulfaatilla ja haihdutettiin tyhjössä kuiviin. Lisäämällä jäännökseen metyleenikloridia ja haihduttamalla saatiin pi-valoyvlioksimetyyli-3-metyylikef-3-eemi-4-karboksylaatti 25 /15,8 g, 79 %; ir (CH2C12) 1770, 1750 cm-1/.
Samalla menetelmällä, mutta käyttämällä ekvivalent-tista määrää bromimetyyliasetaattia, 1,3-dihydro-3-okso-bentso/c/furan-l-yyli-bromidia tai 1-etoksikarbonyylioksi-etyylikloridia, saatiin vastaavasti asetoksimetyyli-, 1,3-30 dihydro-3-oksobentso/c/furan-l-yyli- ja 1-etoksikarbonyyli-oksietyyli-3-metyylikef-3-eemi-4-karboksylaatti.
Valmistus 2
Pivaloyylioksimetyyli-3-metyyli-l-,’-oksokef-3-eemi-4-karboksylaatti 35 Pivaloyylioksimetyyli-3-metyyli-3-eemi-4-karboksy- laattia (815,4 g, 49 mmoolia) liuotettiin 1 Iraan metyleenikloridia ja jäähdytettiin 0°C:seen. Tämä lämpötila säilyttäen 37 7251 8 lisättiin 80 %:sta m-klooriperbentsoehappoa (10,6 g, 49 mmoolia) viitenä yhtä suurena annoksena 1 tunnin aikana.
Kun lisäys oli loppuun suoritettu, reaktion annettiin jatkua kunnes tie (valmistuksen 1 menetelmä ja eluentti) osoit-5 ti, että täydellinen muuttuminen vastaaviksi \ - ja -oksideiksi oli tapahtunut (noin 0,5 tuntia). Reaktioseosta pestiin useita kertoja vedellä, sitten kyllästetyllä bikarbo-naatilla, jälleen vedellä ja lopuksi suolaliuoksella, kuivattiin magnesiumsulfaatilla ja liuotin erotettiin tyhjössä.
10 Saatu tuote kromatografioitiin piihappogeeli1lä (20 paino-ossa), eluenttina etyyliasetaatti/10 % metanoli, antamaan pivaloyylioksimetyyli-3-metyyli-1- /5-oksokef-3-eemi-4-kar-boksylaatti (4,0 g; tie: 0,14, eluenttina 4:1 klorofor- mi/etyyliasetaatti).
15 Vastaava 1—s-oksidi, jolla oli alempi polaarisuus, saatiin myös kromatografoimalla vähemmän puhtaassa muodossa. Viimemainittu yhdiste puhdistetaan uudelleenkromatografoi-malla käyttäen suurempaa piihappogeelin painoa kiinteiden aineiden painoon nähden (esim. 50:1) ja jonkinverran vä-20 hemmän polaarista eluenttia (esim. etyyliasetaatti/4 % metanoli).
Samalla menetelmällä valmistuksen 1 muut esterit muutetaan vastaaviksi asetoksimetyyli-, 1,3-dihydro-3-okso-bentso/c7furan-l-yyli- ja l-etoksikarbonyylioksietyyli-3-25 metyyli-1- > -oksokef-3-eemi-4-karboksylaateiksi ja -3-me-tyyli-1-^ -oksokef-3-eemi-karboksylaateiksi.
Valmistus 3
Pivaloyylioksimetyyli-2-diatso-3-metyyli-l- - oksokef-3-eemi-4-karboksylaatti 30 Pivaloyylioksimetyyli-3-metyyli-l-, 5-oksokef-3-eemi· 4-karboksylaattia (674 mg, 2,05 mmoolia) liuotettiin 75 mlraan metyleenikloridia ja jäähdytettiin 0°C:seen. Lisättiin di-isopropyylietyyliamiinia (397 mg, 3,08 mmoolia) ja kalium-tert-butoksidia (345 mg, 3,08 mmoolia), ja muutaman minuutin 35 kuluttua lisättiin pikryyliatsidia /1,04 g, 4,1 moolia; E. Schrader- Ber. 50, 777 (1917)/. 30 minuutin sekoittamisen jälkeen IR-analyysissa todettiin voimakas diatso-nauha.
38 72 5 1 8
Lisättiin trifluorietikkahappoa (2 ekvivalenttia), seos suodatettiin ja suodos haihdutettiin kumiksi. Tämä kumi kromatografioitiin piihappogeelillä eluenttina 3:1 kloro-formi/etyyliasetaatti antamaan pivaloyylioksimetyyli-2-5 diatso-3-metyyli-l- /,1>-oksokef-3-eemi-4-karboksylaatti ZJ84 mg; ir (CH2C12) 2080, 1790, 1725 cm"1/.
Samalla menetelmällä valmistuksen 2 muut 1- /"’-oksidi-esterit muutetaan vastaaviksi asetoksimetyyli-, 1,3-di-hydro-3-oksobentso/c./furan-l-yyli- ja 1-etoksikarbonyyli-10 oksietyyli-2-diatso-3-metyyli-l-/3-oksokef-3-eemi-4-karbok-sylaateiksi.
Samalla menetelmällä, paitsi että käytetään valmistuksen 24 jonkinverran ankarampia lämpötila- ja aikaolosuh-teita, valmistuksen 2 l—x. -oksidi-esterit muutetaan vastaa-15 viksi pivaloyylioksimetyyli-, asetoksimetyyli-, 1,3-dihydro-3-oksobentso/c/furan-l-yyli- ja 1-etoksikarbonyylioksietyyli-2-diatso-3-metyyli-l-λ-oksokef-3-eemi-4-karboksylaateiksi.
Valmistus 4
Bentshydryyli-3-metyylikef-3-eemi-4-karboksylaatti 20 3-metyyli-3-eemi-4-karboksyylihappoa (7,56 g, 38 mmoolia) liuotettiin 100 mlraan metyleeniklrodia. Lisättiin pisaroittain difenyylidiatsometaania (noin 16,6 g, 85 mmoolia) kunnes tie (4:1 kloroformi/etyyliasetaatti) osoitti reaktion olevan täydellinen. Reaktioseos haihdutettiin kui-25 yiin, jäännökseen lisättiin 50-%:ista vesietyyliasetaatti-seosta, ja pH säädettiin 2,5:een. Etyyliasetaatti-kerros erotettiin, pestiin useita kertoja vedellä, sekoitettiin yhtä suureen tilavuusmäärän kanssa vettä ja säädettiin pH 7,8:aan. Etyyliasetaatti-kerros erotettiin jälleen, pestiin 30 useita kertoja vedellä ja sitten suolaliuoksella, kuivattiin vedettömällä magnesiumsulfaatilla, suodatettiin ja haihdutettiin antamaan bentshydryyli-3-metyylikef-2-eemi-4-kar- boksylaatti /11,4 g, 82 %; tie: R_ 0,75 eluenttina 4:1 r -1.
kloroformi/etyyliasetaatti: ir (CH2C12), 1775, 1725 cm J .
il 39 7 2 5 1 8
Valmistus 5
Bentshydryyli-3-metyyli-l-,^-oksokef-3-eemi-4- karboksylaatti
Bentshydryyli-3-metyylikef-3-eemi-4-karboksylaattia 5 (11,4 g, 31 mmoolia) hapetettiin 85 %:sella m-klooriper- bentsoehapolla (7,0 g, 34 ninoolia, jolloin käytettiin 10 %:n ylimäärää reaktion saattamiseksi täydelliseksi) ja χ- ja /*-oksidien seos eristettiin valmistuksen 2 menetelmien mukaisesti. Raakatuote kiteytettiin uudelleen etyyliasetaatis-10 ta antamaan bentshydryyli-3-metyyli-l-/^-oksokef-3-eemi- 4-karboksylaatti /2,63 g, 22 %; sp. 180-181°C (hajoaa); tie 0,05 (4:1 kloroformi/etyyliasetaatti eluenttina)/. Suodos haihdutettiin kuiviin ja kromatografoitiin piihappo-geelillä (sama eluentti) antamaan S-metyyli-l-·.^-oksokef-3-15 eemi-4-karboksylaatti [2,1 g, 22 %; sp. 163-165°C (hajoaa); tie: R^ 0,15 (sama eluentti)/ ja lisäksi 0,8 g (7 %) 1-/3-oksidia.
Valmistus 6
Bentshydryyli-2-diatso-3-metyyli-l- -oksokef-3-20 eemi-4-karboksylaatti
Bentshydryyli-3-metyyli-l-/ ’> -oksokef-3-eemi-4-kar-boksylaatti (1,5 g, 4 mmoolia) 160 ml:ssa metyleenikloridia, di-isopropyylietyyliamiini (568 mg, 4,4 mmoolia), kalium-tert-butoksidi (493 mg, 4,4 rrmoolia) ja pikryyliatsidi (2,03 g, 25 8 mmoolia) saatettiin reagoimaan noudattaen valmistuksen 3 menetelmää. Reaktion kulkua seurattiin tie :11a (18:1 kloroformi/etyyliasetaatti). 1 tunnin sekoittamisen jälkeen 0°C:ssa oli jäljellä ainoastaan jälkiä lähtöaineesta. Lisättiin tri-fluorietikkahappoa (2 ekvivalenttia), reaktioseos suodatet-30 tiin ja suodos haihdutettiin kumiksi. Jäännöstä hierrettiin useita kertoja eetterin kanssa ja jäännöstä kuivattiin suur-tyhjössä 10 minuuttia. Jäännös kiteytettiin 13:1 metyleeni-kloridi/etyyliasetaatista antamaan bentshydryyli-2-diatso-3-metyyli-l- P" -oksokef-3-eemi-4-karboksylaatti /1 g, 62 %; 35 R^ 0,4 (4:1 kloroformi/etyyliasetaatti); ir (Cf^C^) 2080, 1805, 1745, 1680 cm~}j.
__- ~ 40 7251 8
Eräässä toisessa valmistuksessa, jossa tuote ei kiteytynyt, raakatuote kromatografoitiin piihappogeelillä (3:1 metyleenikloridi/etyyliasetaatti eluenttina), jolloin tuotetta saatiin samalla saannolla. Tuote valmistetaan vaih-5 toehtoisesti Ebbinghaus'in et ai. samankaltaisella menetelmällä /J. Org. Chem. 44, 4697 (1979)/.
Valmistus 7 2.2.2- trikloorietyyli-3-metyylikef-3-eemi-4-karb- oksylaatti 10 3-metyylikef-3-eemi-4-karboksyylihappoa (4 g, 20 mmoolia) liuotettiin 200 mlraan metyleenikloridia, joka sisälsi pyridiiniä (2,05 g, 26 mmoolia). Lisättiin 2,2,2-tri-kloorietanolia (3 g, 20 mmoolia) ja sitten disykloheksyyli-karbodi-imidiä (4,5 g, 22 mmoolia). Reaktioseosta sekoitet-15 tiin noin 16 tuntia huoneen lämpötilassa. Saostuneet kiinteät aineet poistettiin suodattamalla ja suodos haihdutettiin kuiviin tyhjössä. Jäännökseen lisättiin etyyliasetaattia ja haihdutettiin uudelleen, jäännöstä hierrettiin hek-saanilla ja suodatettiin antamaan 2,2,2-trikloorietyyli-3- 20 metyylikef-3-eemi-4-karboksylaatti /ir (CH CL) 1775, 1730 -1 , 2 z cm /.
Valmistus 8 2.2.2- trikloorietyyli-3-metyyli-l-p-oksokef-3- eemi-4-karboksylaatti 25 2,2,2-trikloorietyyli-3-metyylikef-3-eemi-4-karbok- sylaattia (3,1 g, 9 mmoolia) 300 ml:ssa metyleenikloridia sekoitettiin 85-%:isen m-klooriperbentsoehapon (1,9 g, 9 mmoolia) kanssa ja - ja /’-oksidien seos eristettiin valmistuksessa 2 esitetyllä menetelmällä. Raakatuotteen uu-30 delleenkiteyttäminen antoi 2,2,2-trikloorietyyli-3-metyyli- 1-/L-oksokef-3-eemi-4-karboksylaatin (539 mg, sp. 166-170°C). Kuiviin haihdutettu ja piihappogeelillä kromatografoitu (9:1) etyyliasetaatti/metanoli) suodos antoi vielä 1-/* -oksidia /482 mg; sp. 169-170°C; R^ 0,10 (4:1 kloroformi/ 35 etyyliasetaatti)/.
41 7251 8
Valmistus 9 2.2.2- trikloorietyyli-2-diatso-3-metyyli-l-/T- oksokef-3-eemi-4-karboksylaatti 2.2.2- trikloorietyyli-3-metyyli-l- -oksokef-3- 5 eemi-4-karboksylaatti (1,04 g, 3 mmoolia) 75 ml:ssa mety-leenikloridia saatettiin reagoimaan di-isopropyylietyyli-amiinin, kalium-tert-butoksidin ja pikryyliatsidin kanssa valmistuksen 3 mukaisesti. Eristämällä ja puhdistamalla valmistuksen 3 mukaisesti saatiin 2,2,2-trikloorietyyli-10 2-diatso-3-metyyli-l- ,’5 -oksokef-3-eemi-4-karboksylaattia ,/659 mg, 58 %, Rf 0,4 (4:1 kloroformi/etyyliasetaatti; ir (CH2C12) 2080, 1790, 1730 cm"1/.
Valmistus 10 7-bromikefalosporaanihappo 15 7-aminokefalosporaanihappoa (54,4 g, 0,20 mmoolia) suspendoitiin seokseen, jossa oli 1 1 vettä ja 0,25 ml metanolia, ja jäähdytettiin 0-5°C:seen. Sekoittaen ja säilyttäen tämä lämpätila-alue, lisättiin bromivetyhappoa (48-%:ista, 338 ml, 0,20 mmoolia) tiputtaen, minkä jäl-20 keen lisättiin annoksittain natriumnitriittiä (20,7 g, 0,30 ml). Havaittiin runsasta kaasun kehitystä. Vielä 60 minuutin sekoittamisen jälkeen 0-5°C:ssa metanoli erotettiin reaktioseoksesta tyhjössä ja tuote uutettiin 8:11a 250 ml:n annoksella kloroformia. Kloroformi-uutteet yhdis-25 tettiin, pestiin suolaliuoksella, kuivattiin vedettömällä natriumsulfaatilla, suodatettiin ja suodos haihdutettiin tyhjössä antamaan 7-bromikefalosporaanihappoa /25,2 g; vaaleankeltainen vaahto; pnmr (CDCl^/TMS/6 ): käsittää 2,0 (s, 3H); 3,0-4,0 (m, 2H)7.
30 Valmistus 11
Kefalosporaanihappo
Hydrauskatalyyttiä (25,2 g 5-%:ista palladium/kal-siumkarbonaattia) esipelkistettiin 25 ml:ssa vettä Parr-ravistuslaitteessa. 7-bromikefalosporaanihappo seoksessa, 35 jossa oli 50 ml tetrahydrofuraania ja 50 ml vettä, lisät- 42 7251 8 tiin katalyytti-lietteeseen. pH säädettiin 4,5:een ja seosta hydrattiin kunnes vedyn vastaanotto loppui. Katalyytti otettiin talteen suodattamalla piimaalla ja tetra-hydrofuraani erotettiin suodoksesta tyhjössä. Vesipitoi-5 seen jäännökseen lisättiin yhtä suuri tilavuusmäärä etyyliasetaattia ja pH säädettiin 1,5 reen. Etyyliasetaatti-kerros erotettiin ja vesipitoista kerrosta uutettiin neljällä lisäannoksella etyyliasetaattia. Etyyliasetaatti-uutteet yhdistettiin, pestiin suolaliuoksella, kuivat-10 tiin vedettömällä natriumsulfaatilla, suodatettiin ja haihdutettiin kuiviin tyhjössä antamaan kefalosporaani-happo /13,2 g; vaahto; pnmr (CDCl^/TMS/l ): 2,0 (s, 3H); 2,5-4,2 (M 4H)7.
Valmistus 12 15 Pivaloyylioksimetyyli-kefalosporanaatti
Kefalosporaanihappo (5,0 g, 18,4 mmoolia) liuotettuna 50 ml:aan dimetyyliformamidia saatettiin reagoimaan trietyyliamiinin (1,96 g, 19,4 mmoolia), kaliumbi-karbonaatin (3,89 g, 38,9 mmoolia) ja kloorimetyylipiva-20 laatin (3,21 g, 3,07 ml, 21,7 mmoolia) kanssa valmistuksen 1 menetelmällä. Noin 16 tunnin sekoittamisen jälkeen huoneen lämpötilassa tie osoitti reaktion olevan epätäydellinen. Lisättiin vielä kaliumkarbonaattia (1,95 g) ja kloorimetyylipivalaattia (3,21 g) ja reaktion annet-25 tiin jatkua vielä 6 tuntia, minkä jälkeen ainoastaan pieni määrä lähtöainetta oli jäljellä. Eristämällä valmistuksen 1 mukaisesti saatiin pivaloyylioksimetyyli-kefalospo-ranaatti /5,31 g; öljy; ir (CH2CI2) 1775, 1750 cm "S Rf 0,7 (4:1 kloroformi/etyyliasetaatti)/.
Valmistus 13 3 0 Pivaloyylioksimetyy11-1-/^ -oksokefalosporanaatti
Pivaloyylioksimetyyli-kefalosporanaatti (5,31 g, 14,3 mmoolia) 50 mlrssa kloroformia saatettiin reagoimaan 85-%:isen m-klooriperbentsoehapon (2,46 g, 12,2 mmoolia) kanssa 0°:ssa 1 tunnin ajan. Reaktioseos suodatettiin, 43 7251 8 suodos pestiin peräkkäin kyllästetyllä natriumbikarbonaatilla, vedellä ja suolaliuoksella, kuivattiin vedettömällä natriumsulfaatilla, suodatettiin ja suodos haihdutettiin tyhjössä. Saatu öljy (4,97 g) kromato-5 grafoitiin 150 g:11a piihappogeeliä keräten 12 ml:n jakeita etyyliasetaatti-eluenttia. Jakeet 38-64 yhdistettiin ja haihdutettiin tyhjössä antamaan pivaloyyli-oksimetyyli-l-x -oksokefalosporanaatti (625 mg). Jakeet 110-183 yhdistettiin ja haihdutettiin tyhjössä antamaan 10 pivaloyylioksimetyyli-1-/^-oksokefalosporanaatti /”984 mg; ir (CH2C12) 1790, 1745 cm"1?.
Valmistus 14
Pivaloyylioksimetyyli-2-diatso-l--oksokefalosporanaatti 15 Seuraten pääasiallisesti Ebbinghaus'in et ai. mene telmää /J. Org. Chem. 44, 4697 (1979Γ7 pivaloyylioksime-tyyli-1--okso-2-diatsokefalosporanaattia (120 mg, 0,31 mmoolia) liuotettiin 12 ml:aan metyleenikloridia ja jäähdytettiin -10°C:seen. Lisättiin pikryyliatsidia (158 mg, 20 62 mmoolia) ja di-isopropyylietyyliamiinia (80 mg, 62 mmoolia) ja seosta sekoitettiin -10°C:ssa 90 minuuttia, minkä jälkeen tie (4:1 kloroformi/etvyliasetaatti) osoitti reaktion olevan täydellinen. Liuotin erotettiin reak-tioseoksesta tyhjössä ja seos kromatografoitiin piihappo-25 geelillä (3:1 metyleenikloridi/etyvliasetaatti eluentti-na) antamaan pivaloyylioksimetyyli-2-diatso-l-/^-oksokefalosporanaatti /89 mg, 61 %; Rf 0,2 (4:1 kloroformi/ etyyliasetaatti); ir (CH2C12) 1795, 1750 cm /.
Valmistus 15 50 Pivaloyylioksimetyyli-3-metyyli-7-(2-fenoksi- asetamido)kef-3-eemi-4-karboksylaatti 3-metyyli-7-(2-fenoksiasetamido)kef-3-eemi-4-karboksyylihappoa (69,6 g, 0,2 moolia) liuotettiin 300 ml:aan dimetyyliformamidia ja saatettiin peräkkäin rea-35 goimaan trietyyliamiinin (20,2 g, 0,2 moolia), kaliumbi- 44 7251 8 karbonaatin (40 g, 0,4 moolia) ja kloorimetyylipivalaa-tin (33,3 g, 0,22 moolia) kanssa valmistuksen 1 menetelmällä. Tuotteen eristämiseksi reaktioseos laimennettiin 3 1:11a eetteriä ja orgaaninen liuos pestiin, kui-5 vattiin ja haihdutettiin kuiviin, kuten valmistuksessa 1 esitettiin, antamaan pivaloyylioksimetyyli-3-metyyli- 7-(2-fenoksiasetamido)kef-3-eemi-4-karboksylaatti /75,5 g, 82 %; ir (CH2C12) 1776, 1750, 1685 cm_17. Valmistus 16 10 Pivaloyylioksimetyyli-3-metyyli-l-;λ-okso-7- (2-fenoksiasetamido)kef-3-eemi-4-karboksylaatti Pivaloyylioksimetyyli-3-metyyli-7-(2-fenoksiasetamido) kef-3-eemi-4-karboksylaattia (76,5 g, 0,16 moolia) 2 l:ssa metyleenikloridia (0-5°C) hapetettiin 15 85-%:isella m-klooriperbentsoehapolla (32,5 g, 0,16 moolia) , joka lisättiin kahtena annoksena noin 1 tunnin aikana. Reaktion kulkua seurattiin tie :11a (menetelmä ja eluentti kuten valmistuksessa 1). Kun reaktio oli täydellinen, tapahtui eristäminen valmistuksessa 2 esi-20 tetyllä tavalla, jolloin saatiin pivaloyylioksimetyyli-3-metvyli-l-/3-okso-7-(2-fenoksiasetamido)kef-3-eemi-4-karboksylaattia (41 g, 54 %; sp. 138-140°C), jonka puhtaus oli sellainen, että kromatografiapuhdistusta ei tarvittu.
25 Valmistus 17
Pivaloyylioksimetyyli^-diatso-l-metyyli-l·-/* -okso-7-(2-fenoksiasetamido)kef-3-eemi-4-karb-oksylaatti
Pivaloyylioksimetyyli-3-metyyli-1-/^-okso-7-(2-30 fenoksiasetamido)kef-3-eemi-4-karboksylaatti (4,78 g, 10 mmoolia) 400 ml:ssa metyleenikloridia saatettiin 0°C:ssa reagoimaan di-isopropyyliamiinin (1,9 g, 15 nmoo-lia), kalium-tert-butoksidin (1,6 g, 15 mmoolia) ja pik-ryyliatsidin (5,08 g, 20 mmoolia) kanssa valmistuksessa 35 3 esitetyllä tavalla. Reaktion kulkua seurattiin tie :11a <5 7251 8 (menetelmä ja eluentti kuten valmistuksessa 1). 13 minuuttia atsidin lisäämisen jälkeen tie osoitti kaiken lähtöaineen kuluneen. Raakatuote, joka oli eristetty valmistuksen 3 mukaisesti, kromatografoitiin piihappogee-5 Iillä (4:L metyleenikloridi/etyyliasetaatti eluenttina) antamaan pivaloyylioksimetyyli-2-diatso-3-metyyli-l- /3-okso-7-(2-fenoksiasetamido)kef-3-eemi-4-karboksylaatti /1,5 g, 29 %; 0,33 (4:1 kloroformi/etyyliasetaatti; ir (CH2C12) 2080, 1800, 1725, 1720, 1690 cm"1/.
10 Valmistus 18
Bentshydryyli-3-metyyli-7-(2-fenoksiasetamido)kef- 3-eemi-4-karboksylaatti 3-metyyli-7-(2-fenoksiasetamido)kef-3-eemi-4-karbok-syylihappoa (17,75 g, 51 mmoolia) liuotettiin 100 ml:aan me-15 tyleenikloridia. Tiputtaen ja sekoittaen lisättiin difenyyli-diatsometaania (noin 75 mmoolia) kunnes purppuranväri pysyi reaktioseoksessa. Vielä 30 minuutin sekoittamisen jälkeen huoneen lämpötilassa raetyleenikloridi haihdutettiin tyhjössä. Jäännökseen lisättiin 100 ml vettä, ja seosta käsiteltiin edelleen 2 0 valmistuksen 4 mukaisesti antamaan bentshydryyli-3^netyyli-7- (2-fenoksiasetamido) kef-3-eemi-4-karboksylaatti /15,03 g: pnmr (CDCl^/lMS/ ): käsittää 2,0 (s, 3H) , 3,2 (m, 2H) , 4,5 (s, 2H) , 6,9-7,6 (m,llH)./.
Valmistus 19
Bentshydryyli-3-metyyli-l-,^-okso-7-(2-fenoksi-25 asetamido)kef-3-eemi-4-karboksylaatti
Bentshydryyli-3-metyyli-7-(2-fenoksiasetamido)kef-3-eemi-4-karboksylaattia (18,0 g, 35 mmoolia) liuotettiin 100 ml:aan kloroformia, jäähdytettiin 0-5°C:seen ja liuokseen lisättiin annoksittain 85-%:ista m-klooriperbentsoehappoa 30 (7,1 g, 35 mmoolia). Seos lämmitettiin huoneen lämpötilaan ja sitä sekoitettiin 1 tunti, minkä jälkeen tie osoitti epätäydellistä reaktiota. Lisättiin vielä 85-%:ista m-klooriperbentsoehappoa (0,71 g, 3,5 mmoolia) ja sekoittamista jatkettiin 1,5 tuntia, minkä jälkeen tie osoitti, että lähtöainetta 35 ei enää ollut. Tuote eristettiin valmistuksen 3 mukaisesti 46 7251 8 eristäminen antoi bentshydryyli-3-metyyli-l-beta-okso-7-(2-fenoksiasetamido)kef-3-eemi-4-karboksylaatin /14,0 g; pnmr (CDCl^/TMS/delta): käsittää 2,0 (s, 3H), 3,3 (m, 2H), 6,1 (dd, 1H, J = 5, 12)7.
5 Valmistus 20
Bentshydryyli-2-diatso-3-metvvli-l-beta-okso-7-(2-fenoksiasetamido)kef-3-eemi-4-karboksylaatti
Bentshydryyli-3-metyyli-l-beta-okso-7-(2-fenoksi-asetamido)kef-3-eemi-4-karboksylaattia (5,3 g, 10 mmoolia) 10 250 ml:ssa metyleenikloridia saatettiin reagoimaan reagens- sien ja reagenssi-määrien kanssa kuten valmistuksessa 17, kuten yksityiskohtaisesti on esitetty valmistuksessa 3.
30 minuuttia atsidin lisäämisen jälkeen raaka tuote eristettiin valmistuksen 3 mukaisesti. Valmistuksen 17 mukainen 15 kromatografia antoi bentshydryyli-2-diatso-3-metyyli-l-beta-okso-7-(2-fenoksiasetamido)kef-3-eemi-4-karboksylaatin /1,1-1,7 g; ir (CH2C12) 2080, 1800, 1700 cm-1/.
Valmistus 21
Pivaloyylioksimetyyli-7-metoksi-3-metyyli-7-(2-fen-20 oksiasetamido)kef-3-eemi-4-karboksylaatti
Menetelmä A
Seuraten Koppel'in ja Koehler’in /J. Am. Chem. Soc. 95, 2403 (1973J7 menetelmän kanssa analogista menettelyä lisättiin fenyylilitium-liuosta (4,76 ml, 2, IM bentseeni-25 eetterissä, 10 mmoolia) 80 ml:aan kuivaa tetrahydrofuraania 0°C:ssa. Lisättiin metanolia (8,5 ml) ja liuosta sekoitettiin 2 minuuttia 0°C:ssa, jäähdytettiin sitten -46°C:een, missä vaiheessa lisättiin pivaloyylioksimetyyli-3-metyyli- 7-(2-fenoksiasetamido)kef-3-eemi-4-karboksylaattia (924 mg, 30 2 mmoolia), mitä seurasi 1 minuutin kuluttua tert-butyyli- hypokloriitti (0,286 ml, 2,4 mmoolia) ja vielä 2 minuutin kuluttua seos, jossa oli 8,5 ml etikkahappoa ja 8,5 ml tetrahydrofuraania. Reaktioseoksen annettiin lämmetä huoneen lämpötilaan, laimennettiin tolueenilla ja haihdutettiin 35 tyhjössä kuiviin. Jäännös koottiin tolueeniin, pestiin pe- 47 7 2 5 1 8 räkkäin 10-%:sella vesipitoisella natriumbisulfiitilla, vesipitoisella fosfaattipuskurilla (pH 8) ja suolaliuoksella, kuivattiin vedettömällä magnesiumsulfaatilla, suodatettiin ja haihdutettiin kuiviin tyhjössä. Saatu raaka 5 tuote kromatografoitiin piihappogeelillä käyttäen mety-leenikloridi-etyyliasetaatti-gradienttia (0,10 % etyyliasetaattia) antamaan pivaloyylioksimetyyli-7-metoksi-3-metyyli-7-(2-fenoksiasetamido)kef-3-eemi-4-karboksylaatti /316 mg; R^ 0,67 (etyyliasetaatti); ir (CHjC^) 1775, 1740, 10 169 0 cm.J'/'.
Menetelmä B
Menetelmä A toistettiin korvaten fenyylilitium n-butyy-lilitiumilla (0,65 g, 20 mmoolia). Pylvään antama saalis oli 416 mg (42 %).
15 Valmistus 22
Pivaloyylioksimetyyli-7-metoksi-3-metyyli-1-beta-okso-7-(2-fenoksiasetamido)-kef-3-eemi-4-karboksy-_ laatii
Valmistuksen 2 menetelmän mukaisesti pivaloyylioksi-20 metyyli-7-metoksi-3-metyyli-7-(2-fenoksiasetamido)kef-3- eemi-4-karboksylaattia (316 mg, 0,64 mmoolia) 9 mlrssa me-tyleenikloridia 0°C:ssa hapetettiin 80 %:sella m-klooriper-bentsoehapolla (130 mg, 0,64 mmoolia), lisättynä kymmenenä yhtä suurena annoksena 1 tunnin aikana. Valmistuksen 2 mu-25 kaisesti eristettiin alfa- ja beta-oksidien seos ja kromatografoitiin piihappogeelillä (3:1 metyleenikloridi/etyy-liasetaatti) antamaan pivaloyylioksimetyyli-7-metoksi-3-metyyli-l-beta-okso-7-(2-fenoksiasetamido)kef-3-eemi-4-karb-oksylaatti /52—64 mg, 16-20 %; 0,1 (4:1 kloroformi/etyy- 30 liasetaatti/7 ja pivaloyylioksimetyyli-7-metoksi-3-metyy- li-l-alfa-okso-7-(2-fenoksiasetamido)kef-3-eemi-4-karboksy-laatti /65-67 mg, 20-21 %; 0,2 (4:1 kloroformi/etyyli- asetaattjj /.
48 . 7251 8
Valmistus 23
Pivaloyylioksimetyyli-2-diatso-7-metoksi-3-metyyli-l-beta-okso-7-(2-fenoksiasetamido)kef-3-eemi-4-karboksylaatti 5 Valmistuksessa 3 yksityiskohtaisesti esitettyjen menetelmien mukaisesti pivaloyylioksimetyyli-7-metoksi-3-metyyli-l-beta-okso-(2-fenoksiasetamido)kef-3-eemi-4-karb-oksylaatti (136 mg, 0,27 mmoolia) 12 ml:ssa metyleeniklori-dia -10°C:ssa saatettiin reagoimaan di-isopropyylietyyli 10 amiinin (52 mg,0,4 mmoolia), kalium-tert-butoksidin (45 mg, 0,4 mmoolia) ja pikryyliatsidin (136 mg, 0,54 mmoolia) kanssa. Pitäen reaktio -10°C:ssa infrapuna-kirjoanalyysi osoitti epätäydellistä konversiota atsidille 0,5 tuntia atsidin lisäämisen jälkeen, mutta täydellistä konversiota 1 tunti 15 sen jälkeen. Raaka tuote eristettiin ja kromatografoitiin, myös valmistuksen 3 mukaisesti, antamaan 2-diatso-7-metok-si-3-metyyli-l-beta-okso-7-(2-fenoksiasetamido)kef-3-eemi- 4-karboksylaatti /65 mg, 45 %; ir (CH2C12) 2080, 1790, 1725, 1690 cm ^/.
20 Valmistus 24
Pivaloyylioksimetyyli-2-diatso-7-metoksi-3-metyyli-1—alfa-oksi-7-(2-fenoksiasetamido)kef-3-eemi-4-karb-oksylaatti
Seuraten valmistuksessa 23 yksityiskohtaisesti esi-25 tettyä menettelyä saatettiin pivaloyylioksimetyyli-7-metok-si-3-metyyli-l-alfa-okso-(2-fenoksiasetamido)kef-3-eemi- 4-karboksylaatti (178 mg, 0,35 mmoolia) 15 ml:ssa metyleeni-kloridia -10°C:ssa reagoimaan di-isopropyylietyyliamiinin (68 mg, 0,525 mmoolia), kalium-tert-butoksidin (59 mg, 30 0,525 mmoolia) ja pikryyliatsidin (178 mg, 0,7 mmoolia) kanssa. 1 tunnin kuluttua —10°C:ssa ir-kirjoanalyysi osoitti huomattavaa konversiota diatso-yhdisteeksi. Reaktioseos lämmitettiin huoneen lämpötilaan, jolloin ir ja tie (4:1 kloroformi/etyyliasetaatti) osoittivat täydellistä konver-35 siota. Eristäminen ja kromatografia valmistusten 3 ja 23 7251 8 49 mukaisesti antoi pivaloyylioksimetyyli-2-diatso-7-metok-si-3-metyyli-l-alfa-okso-7-(2-fenoksiasetamido)kef-3-eemi- 4-karboksylaatin /54 mg, 29 %; ir (Cl^C^) 2075, 1795, 1750, 1700, 1690 cm"*7· 5 Valmistus 25 3-metyyli-7-</g-fenyyli-2- (4-etyyli-2,3-dioksopipe-ratsiini-l-karboksiamido)asetamido/kef-3-eemi-4-karbonihappo
Kefaleksiinia (696 mg, 2 mmoolia) liuotettiin 10 ml: 10 aan vettä 5°C:ssa kaliumkarbonaatin (304 mg, 2,2 mmoolia) vaikutuksen avulla. Lisättiin etyyliasetaattia (5 ml) ja sitten lisättiin 4-etyyli-2,3~dioksopiperatsiini-l-karbo-nyylikloridia (450 mg, 2,2 moolia) 15 minuutin aikana 0-5°C: ssa. Kun lisäys oli loppuunsuoritettu reaktioseosta sekoi-15 tettiin vielä 30 minuuttia, minkä jälkeen etyyliasetaatti-kerros erotettiin ja vesipitoinen faasi pestiin lisäannok-sella etyyliasetaattia. Vesipitoinen faasi asetettiin 2,5: een ja tuote uutettiin useaan annokseen tuoretta etyyliasetaattia. Happamet etyyliasetaatti-uutteet yhdistettiin, pes-20 tiin vastavirtaan vedellä, pestiin suolaliuoksella, kuivattiin vedettömällä magnesiumsulfaatilla, haihdutettiin kuiviin tyhjössä ja jäännös kiteytettiin metyleenikloridista antamaan 3-metyyli-7-/2-fenyyli-2-(4-etyyli-2,3-dioksopipe-ratsiini-l-karboksiamido)asetamido/kef-3-eemi-4-karboni-25 happo (568 mg, sp. 199-200°C).
Valmistus 26 P i valoyylioksimetyyli-3-metyyli-1-/2-fenyyli-2-(4 etyyli-2,3-dioksopiperatsiini-l-karb ok s i amido)as e t-amido/kef-3-eemi-4-karboksylaatii 30 3-metyyli-7-/2-fenyyli-2-(4-etyyli-2,3-dioksopipe- ratsiini-l-karboksiamido7kef-3-eemi-4-karbonihappo (3,5 g, 6,8 mmoolia) 15 ml:ssa kuivaa dimetyyliformamidia, trietyyli-amiini (0,69 g, 6,8 mmoolia), kaliumbikarbonaatti (1,36 g, 13,6 mmoolia) ja kloorimetyylipivalaatti saatettiin reagoi-35 maan ja tuote eristettiin, molemmat valmistuksen 1 menetel- '50 7 2 5 1 8 mien mukaisesti, antamaan pivaloyylioksimetyyli-3-metyyli- 7-/2-fenyyli-2- (4-etyyli-2,3-dioksopiperatsiini-l-karboksi-amido)asetamido/kef-3-eemi-4-karboksylaatti /1,62 g; 0,48 (etyyliasetaatti)/.
5 Valmistus 27
Pivaloyylioksimetyyli-3-metyyli-l-beta-okso-7-/2~-fenyyli-2-(4-etyyli-2,3-dioksopiperatsiini-l-karbok-siamido)asetamido7kef-3-eemi-4-karboksylaatti P i va1oyy1i ok s ime tyy1i-3-me tyyli-7-/2-fenyyli-2-(4 -10 etyyli-2,3-dioksopiperatsiini-1-karboksiamido)asetamido/- kef-3-eemi-4-karboksylaattia liuotettiin 60 ml:aan metylee-nikloridia ja jäähdytettiin 0°C:seen. Lisättiin m-kloori-perbentsoehappoa (80 %:sta, 720 mg, 3,3 mmoolia) seitsemänä yhtä suurena annoksena 1 tunnin aikana pitäen lämpötila 0°C: 15 ssa. Viimeisen lisäyksen jälkeen tie etyyliasetaatti) osoitti hapettumisen olevan täydellinen. Eristäminen kuten valmistuksessa 2 on esitetty (kromatografiän ollessa tarpeeton) antoi pivaloyylioksimetyyli-3-metyyli-l-beta-okso-7-/2-fenyyli-2-(4-etyyli-2,3-dioksopiperatsiini-l-karboksi-20 amido)asetamido/kef-3-eemi-4-karboksylaatin /1,5 g, 70 %; 0,19 (etyyliasetaatti)/.
Valmistus 28
Pivaloyylioksimetyyli-2-diatso-3-metyyli-l-beta-okso-: 7-/2-fenyyli-2-(4-etyyli-2,3-dioksopiperatsiini-l-25 karboksiamido)asetamido/kef-3-eemi-4-karboksvlaatti aloyyli-3-metyyli-l-beta-okso-7-/2-fenyyli-2-(4-etyyli-2,3-dioksopiperatsiini-l-karboksiamido)asetamido/-kef-3-eemi-4-karboksylaatti (1,3 g, 2 mmoolia) 130 ml:ssa metyleenikloridia saatettiin reagoimaan di-isopropyylietyy-30 liamiinin (387 mg, 3 mmoolia), kalium-tert-butoksidin (336 mg, 3 mmoolia) ja pikryyliatsidin kanssa seuraten valmistuksessa 3 yksityiskohtaisesti esitettyjä menetelmiä. Raa1 an tuotteen eristäminen ja kromatografia piihappogeelillä (eluent-tina etyyliasetaatti) antoi pivaloyylioksimetyyli-2-diatso-35 3-metyyli-l-beta-okso-7-/2-fenyyli-2-(4-etyyli-2,3-diokso- 51 7251 8 piperatsiini-l-karboksiamido) asetamido/kef-3-eemi-4-karb-oksylaatin /750 mg; Rf 0,25 (etyyliasetaatti)/.
Valmistus 29 2- naftyylimetyyli-3-metyyli-7-/2-fenyyli-2-(4-etyy-_ 5 li-2,3-dioksopiperatsiini-l-karboksiamido)asetamido/- kef-3-eemi-4-karboksylaatti 3- metyyli-7-/2-fenyyli-2-(4-etyyli-2,3-dioksopipe-ratsiini-l-karboksiamido)asetamido/kef-3-eemi-4-karbonihap-poa (4,48 g, 8,7 mmoolia) liuotettiin 30 ml:aan dimetyyli- 10 formamidia. Lisättiin trietyyliamiinia (8,79 mg, 8,7 mmoolia) ja seosta sekoitettiin 30 minuuttia. Lisättiin kalium-bikarbonaattia (1,74 g, 17,4 mmoolia) ja sekoittamista jatkettiin 1 tunti. Lopuksi lisättiin natriumjodidia (1,3 g, 8,7 mmoolia) ja 2-(bromimetyyli)naftaleenia (2,11 g, 9,6 15 mmoolia) (havaittiin lievä eksotermisyys), ja seosta sekoitettiin 16 tuntia huoneen lämpötilassa. Koska reaktioseok-sen tie (9:1 asetoni/vesi)-tarkkailu 8 seuraavan tunnin aikana osoitti, että reaktio oli päättynyt ennen täydellistä konversiota esteriksi, lisättiin kymmenes-osamäärät ka-20 lium-bikarbonaattia, natriumjodidia ja 2-(bromimetyyli)nafta-leenia ja reaktion annettiin jatkua vielä 16 tuntia. Reak-tioseos laimennettiin 1:1 etyyliasetaatti/vedellä ja orgaaninen kerros erotettiin ja pestiin vastavirtaan useita kertoja vedellä. Orgaaninen faasi kerrostettiin tuoreella 25 vedellä, pH alennettiin 2,5 reen ja orgaaninen kerros erotettiin, pestiin useilla annoksilla vettä, pestiin suolaliuoksella, kuivattiin vedettömällä magnesiumsulfaatilla, suodatettiin ja haihdutettiin tyhjössä antamaan 2-naftyyli-metyyli-3-metyyli-7-/2-fenyyli-2-(4-etyyli-2,3-dioksopi-30 peratsiini-l-karboksiamido)asetamido/kef-3-eemi-4-karboksy-laatti /4,8 g, 84 %; 0,39 (etyyliasetaatti)/.
52 7 2 5 1 8
Valmistus 30 2-naftyylimetyyli-3-metyyli-l--okso-7-/2-fenyyli-2-(4-etyyli-2,3-diokso-piperatsiini- 1- karboksiamido) asetamidQ.7kef-3-eemi-4-kar- 5 boksylaatti 2- naf tyylimetyyli-3-metyyli-7-/_2-fenyyli-2- (4-etyyli-2,3-dioksopiperatsiini-l-karboksiamido)asetami-do/kef-3-eemi-4-karboksylaatti (4,8 g, 7,3 mmoolia) 480 ml:ssa metyleenikloridia saatettiin reagoimaan 10 0°C:sen m-klooriperbentsoehapon (1,6 g, 7,3 mmoolia) kanssa, joka lisättiin viitenä yhtä suurena annoksena 1 tunnin aikana. Tie (etyyliasetaatti) osoitti lähtöaineen kuluneen loppuun. Eristäminen valmistuksen 27 mukaisesti antoi 2-naftyylimetyyli-3-metyyli-l-/5 -okso-15 7-/2-fenyyli-(4-etyyli-2,3-dioksopiperatsiini-l-karboksi- amido)asetamido7kef-3-eemi-4-karboksylaatin /3,3 g, 67 %; 0,13 (etyyliasetaatti)/·
Valmistus 31 2-naftyylimetyyli-2-diatso-3-metyyli-l-/:{ -20 okso-7-Z2-fenyyli-2-(4-etyyli-2,3-dioksopiperat- siini-l-karboksiamido)asetamidQ/kef-3-eemi-4-karboksylaatti 2-naftyylimetyyli-3-metyyli-l- /c,'-okso-7-/2-fe-nyyli-2-(4-etyyli-2,3-dioksopiperatsiini-l-karboksi-25 amido)asetamid67kef-3-eemi-4-karboksylaatti (382 mg, 0,57 mmoolia) 38 ml:ssa metyleenikloridia -10°C:ssa saatettiin reagoimaan di-isopropyyliamiinin (110 mg, 0,86 mmoolia), kalium-tert-butoksidin (96 mg, 0,86 mmoolia) ja pikryyliatsidin (290 mg, 1,14 mmoolia) 30 kanssa valmistuksessa 3 yksityiskohtaisesti esitet- 53 7251 8 tyjen menetelmien mukaisesti. 0,5 tunnin kuluttua -10°C:ssa ir ja tie (etyyliasetaatti)-analyysit osoittivat konversion olevan täydellinen. Tuote eristettiin ja kromatografioitiin piihappogeelillä 5 (etyyliasetaatti eluenttina) valmistuksen 3 mukaisesti antamaan 2-naftyylimetyyli-2-diatso-3-metyyli-l-/^-okso-7-/2-fenyyli-2- (4-etyyli-2,3-dioksopipe-ratsiini-l-karboksiamido)asetamido7kef-3-eemi-4-karboksylaatti ,/237 mg, 60 %, ir (CH2C12) 2080 , 10 1800, 1760, 1740 cm 0,25 (etyyliasetaatti)/.
Valmistus 32 3- metyyli-7-(5-metyyli-3-fenyyli-isoksatsoli- 4- karboksiamido)kef-3-eemi-4-karbonihappo 7-aminodesasetoksikefalosporaanihappoa (7-ami- 15 no-3-metyylikef-3-eemi-4-karbonihappoa; 21,4 g, 0,1 mmoolia) liuotettiin 800 ml:aan vettä natriumbikarbonaatin (27,9 g, 0,33 mmoolia) vaikutuksen avulla. Liuos laimennettiin 800 ml :11a asetonia ja jäähdytettiin 0°C:seen. Lisättiin 5 metyyli-3-fenyyli-isok-20 satsoli-4-karbonyylikloridia (27,7 g, 0,33 mmoolia) ja reaktioseosta sekoitettiin 2 tuntia 0°C:ssa, ja pidettiin sitten jääkaappilämpötilassa noin 16 tuntia. Asetoni poistettiin haihduttamalla tyhjössä, vesipitoista jäännöstä uutettiin useita kertoja etyyliase-25 taatilla. Vesipitoisen faasin kerrostaminen etyyliasetaatilla ja asettaminen 2,Oraan saosti halutun tuotteen. Suodattaminen etyyliasetaatti-pesulla antoi 3-metyyli-7-(5-metyylifenyyli-isoksatsoli-4-karbok-siamido)kef-3-eemi-4-karbonihapon /27,5 , pnmr (TMS/DMSO-dg) delta; käsittää 2,0 (s, 3H); 2,4 30 (s, 3H; 3,4 (m, 2H), 7,2-7,8 (m, 5HJ7- 54 7251 8
Valmistus 33
Pivaloyylioksimetyyli-3-metyyli-7-(5-metyy li-3-. fenyyli-i soksatsoli-4-karboksiamido)kef-3-eemi-4-karboksylaatti 5 3-metyyli-7-(5-metyyli-3-fenyyli-isoksatsoli-4-karb- oksiamido)kef-3-eemi-4-karbonihappoa (25,9 g, 65 mmoolia) liuotettiin vedettömään dimetyyliformamidiin (150 ml).
Lisättiin trietyyliamiinia (19,7 g, 195 mmoolia), kalium-bikarbonaattia (19,5 g, 195 mmoolia), natriumjodidia (29,3 g, 10 195 mmoolia) ja kloorimetyylipivalaattia (29,3 g, 195 mmoo lia) . Havaittiin eksotermisyyttä ja lämpötila nousi noin 35°C:seen. 6 tunnin sekoittamisen jälkeen ympäristön lämpötilassa tarkkailu tie:11a (4:1 kloroformi/etyyliasetaatti) osoitti huomattavasti lähtöainetta olevan jäljellä. Lisät-15 tiin vielä kloorimetyylipivalaattia (8,4 g, 65 mmoolia) ja sekoittamista ympäristön lämpötilassa jatkettiin 16 tuntia. Valmistuksen 1 mukainen eristäminen antoi pivaloyylioksi-metyyli-3-metyyli-7-(5-metyyli-3-fenyyli-isoksatsoli-4-karboksiamido)kef-3-eemi-4-karboksylaatin /25,3 g, 76 %; 20 ϊ*£ 0,8 (4:1 kloroformi/etyyliasetaatti; ir (CH2C12) 1780, 1750, 1670 cm"1/.
Valmistus 34
Pivaloyylioksimetyyli-3-metyyli-7- (5-metyyli-3-fenyy-li-isoksatsoli-4-karboksiamido)-l-beta-oksokef-3-25 eemi-4-karboksylaatti
Pivaloyylioksimetyyli-3-metyyli-7-(5-metyyli-3-fenyy-li-isoksatsoli-4-karboksiamido)kef-3-eemi-4-karboksylaatti (24,6 g, 48 mmoolia) 1200 ml:ssa metyleenikloridia 0°C:ssa saatettiin reagoimaan 80 %:sen m-klooriperbentsoehapon (10,4 g, 30 48 mmoolia) kanssa. 1 tunnin kuluttua eristäminen valmis tuksen 2 mukaisesti (ilman kromatografiaa) antoi pivaloyy lioksime tyyli -3-metyy li li -7- (5-metyyli-3-fenyyli-isoksatsoli- 4-karboksiamido)-l-beta-oksokef-3-eemi-4-karboksylaatin.
Il 7251 8
Valmistus 35
Pivaloyylioksimetyyli-2-diatso-3-rnetyyli-7- (5-metyy-li-3-fenyyli-isoksatsoli-4-karboksiamido)-1-beta-oksokef-3-eemi-4-karboksylaatti 5 Valmistuksessa 3 yksityiskohtaisesti esitettyjen menetelmien mukaisesti pivaloyylioksimetyyli-3-metyyli-7-(5-metyyli-3*-fenyyli-isoksatsoli-4-karboksiamido) -1-beta-oksokef-3-eemi-4-karboksylaatti (2,1 g, 4 mmoolia) 200 ml: ssa metyleenikloridia -10°C:ssa saatettiin reagoimaan di-10 isopropyylietyyliamiinin (774 mg, 6 mmoolia), kalium-tert-butoksidin (672 mg, 6 mmoolia) ja pikryyliatsidin (2,0 g, 8 mmoolia) kanssa, reaktiota tarkkailtiin ja tuote erotettiin (paitsi että eluenttina käytettiin 3:1 metyleeniklori-di/etyyliasetaattia piihappogeeli-kromatografiassa) antamaan 15 pivaloyylioksimetyyli-2-diatso-3-metyyli-7-(5-metyyli-3-fenyyli-isoksatsoli-4-karboksi-amido)-l-beta-oksokef-3-eemi-4- karboksylaatti /1,09 g, 49 %; ir (Q^Clj) 2080, 1800, 1750, 1680 cm"_i;7.
Valmistus 36 2 0 7-D-(2-bentsyylioksikarbonyyliamino-2-fenyyliaset 7 amido)-3-metyylikef-3-eemi-4-karbonihappo Kefaleksiinia (3,47 g, 10 mmoolia) liuotetaan 250 ml: aan dimetyyliformamidia di-isopropyylietyyliamiinin (2,58 g, 20 mmoolia) vaikutuksen avulla. Liuos jäähdytetään 0°C:seen 25 ja lisätään 4-dimetyyliaminopyridiiniä (0,24 g, 2 mmoolia).
Pitäen lämpötila välillä 0-5°C lisätään tiputtaen karbobents-oksikloridia (1,78 g, 10,5 mmoolia). Reaktioseoksen annetaan lämmetä huoneen lämpötilaan ja sekoitetaan 30 minuuttia. Reaktioseos haihdutetaan tyhjössä kuiviin ja jäännös 30 kootaan 250 ml:aan metyleenikloridia. Metyleenikloridiliuos kerrostetaan yhtä suurella tilavuusmäärällä vettä ja pH asetetaan 2:een. Orgaaninen kerros pestään suolaliuoksella, kuivataan vedettömällä natriumsulfaatilla, suodatetaan ja haihdutetaan kuiviin tyhjössä antamaan 7-(2-bentsyylioksi-35 karbonyyliamino-2-fenyyliasetamido)-4-metyylikef-3-eemi- 4-karbcnihappo.
56 7 2 5 1 8
Valmistus 37
Pivaloyylioksimetyyli-6,6-dibromipenisillanaatti 6,6-dibromipensillaanihappo /Clayton, J. Chem. Soc.
C, 2123 (1969) ; 10 g, 30 mmoolia./' 200 ml:ssa dimetyyliform-5 amidia saatettiin reagoimaan trietyyliamiinin (4,17 ml, 30 mmoolia), kaliumbikarbonaatin (3,0 g, 30 mmoolia) ja kloorimetyylipivalaatin (4,3 ml, 30 mmoolia) kanssa. 5-tun-tisen sekoittamisen jälkeen huoneen lämpötilassa tie (18:1 asetoni/vesi) osoitti huomattavasti lähtöainetta. Lisäannok-10 siä kloorimetyylipivalaattia (4,3 ml, 30 mmoolia) ja kalium-bikarbonaattia (3,0 g, 30 mmoolia) lisättiin ja reaktion annettiin jatkua vielä 16 tuntia huoneen lämpötilassa. Reak-tioseos haihdutettiin kuiviin tyhjössä ja jäännös kromato-grafoitiin piihappogeelillä käyttäen eluenttina 30:1 mety-15 leeniklorid/etyyliasetaattia, tarkkailtiin tlc:llä ja ir-analyysillä. Saatiin pivaloyylioksimetyyli-6,6-dibromi-penisillanaatti /1,73 g; R,- 0,77 (18:1 asetoni/vesi); ir (CH2C12) 1790, 1750 cm~V-Valmistus 38 20 Pivaloyylioksimetyyli-6-alfa-bromi-6-beta-(1-hydrok- sietyyli)penisillaanihappo
Typpiatmosfäärissä ja liekillä kuivatussa 50 ml:n kolmikaulapullossa pivaloyylioksimetyyli-6,6-dibromipeni-sillaaninappoa (1,0 g, 2,33 mmoolia) liuotettiin kuivaan, 25 vastatislattuun tetrahydrofuraaniin ja jäähdytettiin -78°C: seen. Lisättiin tert-butyylimagnesiumkloridi-liuosta (1,03 ml, 2,7 M, 2,79 mmoolia) eetterissä ruiskun kautta ja reak-tioseosta sekoitettiin 1 tunti -78°C:ssa. Sitten lisättiin asetaldehydiä (0,29 ml, 5,23 mmoolia) ja reaktion annettiin 30 jatkua vielä yksi tunti -78°C:ssa. Reaktioseos tukahdutettiin lisäämällä etikkahappoa (0,22 ml, 3,9 mmoolia), annettiin lämmetä huoneen lämpötilaan ja haihdutettiin kuiviin tyhjössä. Jäännös jaettiin yhtä suurien tilavuusmää-rien kesken kloroformia ja vettä. Vesipitoista faasia uutet-35 tiin kahdella tuoreella annoksella kloroformia. Kloroformi- 57 7251 8 faasi ja pesunesteet yhdistettiin, pestiin vastavirtaan vedellä, pestiin suolaliuoksella, kuivattiin vedettömällä natriumsulfaatilla, suodatettiin ja haihdutettiin kuiviin antamaan pivaloyylioksimetyyli-6-alfa-bromi-6-beta-(1-5 hydroksietyyli) -penisillaanihappo Z_l,01 g; öljy; ir (CH2C12) 1775, 1750 cm-1/.
Valmistus 39
Pivaloyylioksimetyyli-6-alfa-(1-hydroksietyyli)-penisillanaatti 10 Hydrauskatalyyttiä (1,01 g, 10 %:sta palladium/hii1- tä) lietettiin 10 ml:aan vettä ja esihydrattiin 10 minuuttia (50 psig, huoneen lämpötila). Lisättiin pivaloyylioksi-metyyli-6-alfa-bromi-6-beta-l-nydroksietyyli)penisillanaat-tia (1,01 g) 10 ml:ssa tetrahydrofuraania ja hydrausta jat-^ kettiin 1,5 tuntia. Katalyytti otettiin talteen suodattamalla pesten vesipitoisella tetranyörofuraanilia. Tetrahydrof uraani haihdutettiin tyhjössä suodoksen ja pesunesteiden yhdistelmästä. Tuote uutettiin vesipitoisesta jäännöksestä neljään annokseen etyyliasetaattia ja etyyliase-20 taatti-uutteet yhdistettiin, pestiin suolaliuoksella, kuivattiin vedettömällä natriumsulfaatilla, suodatettiin ja haihdutettiin antamaan pivaloyylioksimetyyli-6-alfa-(1-hydr-oksietyyli) penisillan-atti (249 mg \. Katalyyttikakku sulpu-tettiin uudelleen noin 100 ml:aan tetrahydrofuraania, kata-25 lyytti otettiin talteen suodattamalla ja suodos haihdutettiin tyhjössä antamaan vielä 273 mg haluttua tuotetta /_ir (CH2C12) 1770, 1760 cm”1; Rf 0,48 (4:1 kloroformi/etyyli- asetaatti)/.
Valmistus 40 30 Pivaloyylioksimetyyli-6-aifa-(1-asetoksietyyli)- oenisillanaatti
Pivaloyylioksimetyyli-6-alfa-(1-hydroksietyyli)-penisillanaattia (468 mg, 1,49 mmoolia) ja di-isopropyyli-etyyliamiinia (0,30 ml) liuotettiin 50 ml:aan metyleeni-35 kloridia. Liuos jäähdytettiin 0°C:seen, lisättiin 4-dime-tyyliaminopyridiiniä (18,7 mg) ja etikkahapon anhydridiä 58 7251 8 (0,17 ml) ja reaktioseosta sekoitettiin 30 minuuttia huoneen lämpötilassa, minkä jälkeen tarkkailu tie :11a osoitti asetyloinnin olevan täydellinen. Reaktioseos uutettiin vesipitoisella puskurilla (pH 7,0), kuivattiin vedettömällä 5 natriumsulfaatilla, suodatettiin ja haihdutettiin antamaan haluttu tuote. Kromatografia (30:1 kloroformi/etyyliasetaat-ti) antoi puhdistetun pivaloyylioksimetyyli-6-alfa-(1-aset-oksietyyli) penisillanaatin /1120 mg; ir CH2C12) 1770, 1750 cm 0,35 (30:1 kloroformi/etyyliasetaatti); 0,80 10 (15:1 metyleenikloridi/etyyliasetaatti)/.
Valmistus 41
Pivaloyylioksimetyyli-6-alfa-(1-asetoksietyyli)-1-beta-oksopenisillanaatti
Pivaloyylioksimetyyli-6-alfa-(1-asetoksietyyli)-15 penisillanaattia (120 mg, 0,31 mmoolia) liuotettiin 10 ml:aan metyleenikloridia ja jäähdytettiin -78°C:seen. Lisättiin m-klooriperbentsoehappoa (85-%:ista, 62 mg, 0,31 mmoolia) kolmena annoksena 1 tunnin aikana. 2,5 tunnin sekoittamisen jälkeen -78°C:ssa tarkkailu tlc:lla (15:1 kloroformi/ 20 etyyliasetaatti) osoitti hapettumisen olevan täydellinen. Eristäminen valmistuksen 2 mukaisesti (kromatografiän ollessa tarpeeton) antoi pivaloyylioksimetyyli-6-alfa-(1-asetoksietyyli)-1-beta-oksopenisillanaatin /91 mg; ir (CH2C12) 1780, 1750 cm ; R^ 0,22 (15:1 metyleenikloridi/ 25 etyyliasetaatti)/.
Valmistus 42
Pivaloyy1ioksimetyyli-7-alfa-(1-asetoksietyyli)- 3-metyylikef-3-eemi-4-karboksylaatti
Seuraten Morris'in et ai. /J. Am. Chem. Soc. 85, 30 1886 (1973L? menetelmän kanssa analogista menettelyä pan tiin pivaloyylioksimetyyli-6-alfa-(1-asetoksietyyli)-1-beta-oksopenisillaanihappoa (90,5 mg), liuotettuna 20 ml:aan kuivaa dioksaania, Soxhlet-uuttolaitteen pulloon typpiat-mosfäärissä yhdessä 4A-molekyyliseulojen ja neutraalin alu-35 miniumoksidin 50/50 seoksen kanssa säiliössä. Lisättiin pyridiiniä (2 pisaraa) ja 80 %:ista fosforihappoa (1 pisara) 59 7 2 5 1 8 ja seosta kuumennettiin palautusjäähdyttäen 23 tuntia. Reaktioseos haihdutettiin tyhjössä öljyksi, joka koottiin metyleenikloridin ja veden 50/50-seokseen. pH:n havaittiin olevan noin 2,5. Metyleenikloridi-faasi erotettiin, 5 pestiin vastavirtaan vedellä, laimennettiin lisävedellä ja pH asetettiin välille 7-7,5. Metyleenikloridi-faasi erotettiin jälleen, pestiin tuoreella vedellä ja sitten suolaliuoksella, kuivattiin vedettömällä natriumsulfaatilla, suodatettiin ja haihdutettiin tyhjössä antamaan haluttu 10 tuote (61 mg). Valmistava ohutlevykromatografia (piihappo-geelin paksuus 250 mikronia), kehitettynä 30:1 metyleeni-kloridi/etyyliasetaatilla), jolloin päänauha uutettiin asetoniin ja haihdutettiin kuiviin, antoi pivaloyylioksimetyy-li-7-alfa-(1-asetoksietyyli)-3-metyylikef-3-eemi-4-karbok-15 sylaatin /15,6 mg; ir (CH2C12) 1770, 1745 cm .
Valmistus 43
Pivaloyylioksimetyyli-7-alfa-(l-asetoksietyyli-3- metyyli-l-beta-oksokef-3-eemi-4-karboksylaatti
Valmistuksen 41 menetelmällä pivaloyylioksimetyyli- 20 7-(1-asetoksimetyyli)-3-metyylikef-3-eemi-4-karboksylaattia (15,6 mg, 0,04 mmoolia) hapetettiin ja eristettiin antamaan pivaloyylioksimetyyli-7-alfa-(1-asetoksietyyli)-3-metyyli- l-beta-oksokef-3-eemi-4-karboksylaatin ja pivaloyylioksi- metyyli-7-alfa-(1-asetoksietyyli)-3-metyyli-l-alfa-oksokef- 25 3-eemi-4-karboksylaatin seos /16 mg; ir (CH9C19) 1780, 1745 -1 - £ i cm /. Nämä isomeerit erotetaan kromatografisesti käyttäen esimerkkien 40 ja 42 menetelmiä.
Valmistus 44
Pivaloyylioksimetyyli-7-(1-asetoksietyyli)-2-30 diatso-3-metyyli-l-beta-oksokef-3-eemi-4- karboksylaatti
Pivaloyylioksimetyyli-7-alfa-(l-asetoksietyyli-3-metyyli-l-beta-oksokef-3-eemi-4-karboksylaatin ja pivaloyy-lioksimetyyli-7-alfa-(1-asetoksietyyli)-3-metyyli-l-alfa-35 okso-kef-3-eemi-4-karboksylaatin seos (16 mg, 0,039 mmoolia) 60 72 5 1 8 valmistuksesta 43 liuotettiin 2 ml:aan metyleenikloridia ja jäähdytettiin -10°C:een. Lisättiin di-isopropyylietyy-liamiinia (13 mikrol, 0,073 mmoolia) ja sitten pikryyli-atsidia (19,9 mg, 0,078 mmoolia). Reaktioseosta sekoitet-5 tiin 5 tuntia pitäen lämpötila välillä 0- -10°C, minkä jälkeen infrapuna-analyysi osoitti laajaa diatso-muodos-tusta. Pitämisen jälkeen jääkaappilämpötilassa noin 16 tuntia reaktioseos haihdutettiin kuiviin antamaan pivalo-yylioksimetyyli-7-(1-asetoksietyyli)-2-diatso-3-metyyli-l-10 beta-oksokef-3-eemi-4-karboksylaatin /ir (Cl^C^) 2080, 1735, 1750 cm ja reagoimattoman pivaloyylioksimetyyli- 7-alfa-(1-asetoksietyyli)-3-metyyli-l-alfa-oksokef-3-eemi- 4-karboksylaatin seos. Nämä yhdisteet erotetaan kromato-grafisesti käyttäen esimerkkien 40 ja 42 menetelmiä.
15 Valmistus 45
Pivaloyylioksimetyyli-6-alfa-/l-(p-nitrobentsyyli-oksikarbonyyljoksi)etyyli7-penis illanaatti Pivaloyylioksimetyyli-6-alfa-(1-hydroksietyyli)pe-nisillanaattia (3,2 g) liuotettiin 100 ml:aan metyleeniklo-20 ridia ja jäähdytettiin 0°C:een. Lisättiin di-isopropyyli-amiinia (2,19 ml), 4-dimetyyliaminopyridiiniä (1,28 g) ja 2.5 g p-nitrobentsyylioksikarbonyylikloridia (p-nitrokar-bobentsoksikloridia, 2,72 g). Reaktioseosta sekoitettiin 16 tuntia huoneen lämpötilassa. Reaktioseos pestiin vedellä, 25 kuivattiin vedettömällä natriumsulfaatilla, suodatettiin ja haihdutettiin raa'aksi tuotteeksi. Raaka tuote kromatogra-foitiin piihappogeelillä eluenttina 15:1 kloroformi/etyy-liasetaatti antamaan puhdistettu pivaloyylioksimetyyli-6-alfa-^/J- (p-nitrobentsyylioksikarbonyylioksi) etyyli/'peni-30 sillanaatti /5 g; R^ 0,75 (4:1 kloroformi/etyyliasetaatti; R^ 0,7 (eetteri); pnmr/CDCl^/delta käsittää 1,0 (s, 9H), 1.5 (d, 3H, J = 7), 4,2 ppm (s, 1H)/.
61 7251 8
Valmistus 46
Pivaloyylioksimetvvli-6-alfa-Zl-(P~nitrobentsyyli-oksikarbonyylioksi)etyyllZ-l-beta-oksopenisilla-naatti 5 Valmistuksen 2 menetelmällä pivaloyylioksimetyyli-6- alfa-/l-(p-nitrobentsyyli)etyyli7penisillanaatti (5 g) saatettiin reagoimaan m-klooriperbentsoehapon (2,2 g) kanssa 200 ml:ssa metyleenikloridia käyttäen 16 tunnin reaktio-aikaa 0°C:ssa. Eluenttina kromatografiässä oli 4:1 kloro-10 formi/etyyliasetaatti. Pivaloyylioksimetyvli-6-alfa-71-(p-nitrobentsyylioksikarbonyylioksi) etyylJ.7-l“beta-okso-penisillanaatin saanto oli 2,55 g, 0,6 (4:1 klorofor- mi/etyyliasetaatti).
Valmistus 4 7 15 Pivaloyylioksimetyyli-7-alfa-/!- (p-nitrobentsyyli- oksikarbonyylioksi)etyyli/-3-metyylikef-3-eemi-4-karboksylaatti
Pivaloyylioksimetyyli-6-alf a-7.1- (p-nitrobentsyyli-oksikarbonyylioksi)etyyli'/'l'beta-oksopenisillanaatti (2,5 g) 20 400 ml:ssa dioksaania, 22 pisaraa 80 %:sta fosforinappoa ja 62 pisaraa pyridiiniä saatettiin reagoimaan valmistuksen 42 mukaisesti. Kromatografia piihappogeeli-pylväässä eluenttina 30:1 kloroformi/etyyliasetaatti ja tlc-tarkkailu antoivat 380 mg puhdasta tuotetta. Jakeet (558 mg), jotka 25 sisälsivät vähäisiä epäpuhtauksia, kromatografoitiin paksu-kerroslevyllä antamaan vielä 190 mg puhdistettua tuotetta. Pivaloyylioksimetyyli-7-aifa-/l-(p-nitrobentsyylioksikarbo-nyylioksi)etyyli/-3-metyylikef-3-eemi-4-karboksylaatin kokonaissaalis oli 570 mg, pnmr/CDCl^/delta käsittää 1,5 30 (d, 3H, J = 7), 2,0 (s, 3H), 4,8 ppm (d, 1H, J = 2).
Valmistus 48
Pivaloyylioksimetyyli-7-aifa-/l-(p-nitrobentsyyli-oksi)etyyli7-3-metyyli-l-beta-oksokef-3-eemi-4-karboksylaatii 35 Pivaloyylioksimetyyli-7-alf a-/.l-p-nitrobentsyy li- oksikarbonyylioksi)etyylI/kef-3-eemi-4-karboksylaattia *2 7251 8 (570 mg) liuotettiin 75 ml:aan metyleenikloridia. Lisättiin muurahaishappoa (0,30 ml) ja 30 %:sta vetyperoksidia (0,22 ml) ja seosta sekoitettiin 2 päivää huoneen lämpötilassa. Reaktioseos uutettiin vedellä, kuivattiin vedettö-5 mällä natriumsulfaatilla, suodatettiin ja haihdutettiin tyhjössä. Jäännös kromatografioitiin piihappogeelillä käyttäen eluenttina 1:3 kloroformi/etyvliasetaattia ja tlc-tarkkailua. Pivaloyylioksimetyyli-7-alfa-/J-(p-nitrobentsyy-lioksioksikarbonyylioksi)etyyli/-3-metyyli-l-beta-oksokef-10 3-eemi-4-karboksylaatin saanto oli 224 mg, Rf 0,1 (4:1 kloroformi/etyyliasetaatti) ; ir (CI^C^) 1775 cm Valmistus 49
Pivaloyy lioksimetyyli-7-alf a-/_l- (p-nitrobentsyyli-karbonyylioksi)etyyli7~2-diatso-3-metyyli-l-beta-15 oksokef-3-eemi-4-karboksylaatti
Valmistuksen 44 menetelmällä pivaloyylioksimetyyli- 7-alfa-/l-(p-nitrobentsyylioksikarbonyylioksi)etyyli7~3-metyyli-l-beta-oksokef-3-eemi-4-karboksylaatti (49,8 mg) saatettiin reagoimaan pikryyliatsidin (77,1 mg) kanssa di-20 isopropyylietyyliamiinin (28,8 mikrol) läsnäollessa 15 ml:ssa metyleenikloridia 16 tunniksi lämpötilassa väliltä -10 - 0°C. Lisä-reagensseja (atsidia, 35 mg ja amiinia.
10,8 mikrol) lisättiin seuraavan kahden päivän aikana.
2,3 päivän kokonaisreaktioajän jälkeen tuote eristettiin 25 saman esimerkin mukaisesti ja raaka tuote kromatografoi- tiin piihappogeelillä käyttäen eluenttina 10:1 kloroformi/ etyyliasetaattia antamaan puhdistettu pivaloyylioksimetyyli- 7-alfa-/I-(p-nitrobentsyylioksikarbonyylioksi)etyyli/-2-diatso-3-metyyli-l-beta-oksokef-3-eemi-4-karboksylaatti 30 /_T20 mg; ir (C^C^) 2080 cm ·
Valmistus 50
Bentsyyli-6,6-dibromipenisillanaatti Dibromipenisillaanihappoa (50 g, 0,30 moolia) liuotettiin 150 ml:aan dimetyyliformamidia. Liuos jäähdytettiin 35 välille 0-5°C, lisättiin trietyyliamiinia (21,3 ml, 0,30 moolia) ja sitten bentsyylibromidia (18,2 ml, 0,30 moolia) 63 7251 8 ja reaktioseosta sekoitettiin 16 tuntia huoneen lämpötilassa. Reaktioseos tukahdutettiin jäihin ja veteen ja uutettiin neljällä annoksella etyyliasetaattia. Yhdistetyt orgaaniset kerrokset pestiin peräkkäin 0,IN kloorivety-5 hapolla, vedellä ja suolaliuoksella, kuivattiin vedettömällä natriumsulfaatilla ja haihdutettiin kuiviin. Kiteyttäminen eetteristä antoi bentsyyli-6,6-dibromipenisilla-naatin (61 g).
Valmistus 51 10 Bentsyyli-6-alfa-bromi-6-beta-(1-hydroksietyyli)- penisillaanihappo
Valmistuksen 38 menetelmällä bentsyyli-6,6-dibromi- 4 penisillaanihappo (30 g) muutettiin bentsyyli-6-alfa-bromi- 6-beta-(1-hydroksietyyli)penisillaanihapoksi /31,4 g; öljy; 15 pnmr/CDCl^Jdelta käsittää 5,2 (s, 2H), 4,5 (s, 1H)/. Valmistus 52
Bentsyyli-6-alfa-(1-hydroksietyyli)penisillanaatti Valmistuksen 39 menetelmällä bentsyyli-6-alfa-bromi- 6-beta-(1-hydroksietyyli)penisillanaattia (31,4 g) hydrat-20 tiin 15,7 g:lla 5-%:ista Pd/CaCO^ 150 ml:ssa 2:1 tetrahydro-furaani/vettä, jolloin hydraus on huolellisesti lopetettava muutospisteessä, jossa pääasiallisesti yksi mooliekviva-lentti vetyä on kulunut. Raakatuote (19,6 g) eristetty öljynä, kromatografoitiin 400 mgtlla piihappogeeliä käyt-25 täen eluenttina 3:2 kloroformi/etyyliasetaattia. Ensimmäisten 500 ml:n jälkeen eluaattia koottiin 12 ml:n jakeita. Jakeet 41-70 yhdistettiin ja haihdutettiin antamaan puhdistettu bentsyyli-6-alfa-(1-hydroksietyyli)penisillanaatti /7,72 g; pnmr/CDCl^/delta 1,4 (s, 3H), 1,6 (s, 3H), 4,5 30 (s, 1H) , 5,1 (s, 1H) , 5,8 (s, 1H) , 7,3 ppm (s, 5H)//.
Valmistus 53
Bentsyyli-6-alfa-/l-(p-nitrobentsyylioksikarbonyyli-k^i)etyyli/penisillanaatti
Bentsyyli-6-alfa-(1-hydroksietyyli)penisillanaattia 35 (7,7 g, 0,023 moolia) liuotettiin 125 ml:aan metyleeniklo- ridia ja liuos jäähdytettiin 0°C: seen. Lisättiin peräkkäin 64 7 2 5 1 8 di-isopropyylietyyliamiinia (4,8 ml, 0,028 moolia), dime-tyyliaminopyridiiniä (2,8 g, 0,023 moolia) ja p-nitrobentsyy-liklooriformiaattia (6,0 g, 0,028 moolia) ja reaktioseosta sekoitettiin huoneen lämpötilassa 16 tuntia. Reaktioseosta 5 pestiin peräkkäin 100 ml :11a IN kloorivetyhappoa, 100 ml:11a vettä, 100 ml:11a kyllästettyä natriumbikarbonaattia, 100 ml :11a vettä ja 100 ml :11a suolaliuosta, kuivattiin vedettömällä natriumsulfaatilla, suodatettiin ja haihdutettiin tyhjössä antamaan raaka tuote. Kromatografia piihappogeelillä 10 käyttäen 15:1 kloroformi/etyyliasetaattia antoi puhdistetun bentsyyli-6-alfa-/l-(p-nitrobentsyylioksikarbonyylioksi)etyy-li7penisillanaatin /11,1 g? öljy; pnmr/CDCl^/delta käsittää 4,5 (s, 1H), 5,2 ppm (s, 2H)’.
Valmistus 54 15 Bentsyyli-6-alfa-/I-(p-nitrobentsyy!ioksikarbonyyIl oksi) etyyli/-1-beta-oksopenisillanaatti Bentsyyli-6-alfa-/I-(p-nitrobentsyy1ioksikarbonyyIloksi) etyyli/penisillanaatti (10,95 g, 0,022 moolia) saatettiin reagoimaan m-klooriperbentsoehapon kanssa 400 ml:ssa 20 metyleenikloridia valmistuksen 2 menetelmällä käyttäen alku-reaktiolämpötilaa -78°C, mitä seurasi 6 tuntia 0°C:ssa. Raakatuotteen saanto oli 11,6 g, kromatografia piihappogeelillä käyttäen eluenttina 10:1 kloroformi/etyyliasetaattia antoi puhdistetun bentsyyli-6-alfa-/l-(p-nitrobentsyyli-25 oksikarbonyylioksi) etyyli/-l-beta-oksopenisillanaatin /4,1 g, ir (CI^C^) 1770 cm ^_/.
Valmistus 55
Bentsyyli^-alfa-/!-(p-nitrobentsyylioksikarbonyyli-oksi) etyyli_7-3-metyylikef-3-eemi-4-karboksylaatti 30 Seuraten valmistuksen 42 menettelyä bentsyyli-6-alfa- ΖΪ-(p-nitrobentsyy1ioksikarbonyylioksi)etyyli/-l-beta-okso-penisillanaatti muutettiin bentsyyli-7-alfa-/l-(p-nitrobent-syylioksikarbonyylioksi)etyyli-3-metyylikef-3-eemi-4-karbok-sylaatiksi, joka puhdistettiin piihappogeeli-kromatografiällä 35 käyttäen eluenttina 30:1 kloroformi/etyyliasetaattia /1,4 g, pnmr/CDCl^delta käsittää 2,0 (s, 3H) ja 4,5 ppm (d, 1H, J = 2Hzf7.
65 7251 8
Valmistus 56
Bentsyyli-7-alfa-/I-(p-nitrobentsyylioks ik arbo-nyylioksi)etyyll/-3-metyyli-l-beta-oksokef-3-eemi-4-karboksylaatti 5 Bentsyyli-7-alfa-/l-(p-nitrobentsyylioksikarbonyyli- oksi)etyyli/-3-metyylikef-3~eemi-4-karboksylaattia (1,40 g, 2,32 mmoolia) liuotettiin 150 ml:aan metyleenikloridia. Lisättiin muurahaishappoa (0,42 ml) ja 30 %:sta vetyperoksidia (0,42 ml, 3,1 mmoolia) ja reaktioseosta sekoitettiin 10 2 päivää. Reaktioseos uutettiin vedellä, kuivattiin vedet tömällä natriumsulfaatilla, suodatettiin ja haihdutettiin antamaan alfa- ja beta-oksidien seos. Seos kromatografoi-tiin piihappogeelillä käyttäen eluenttina 1:3 kloroformi/-etyyliasetaattia. Vähemmän polaarinen alfa-oksiai eluoitui 15 ensin /R^ 0,5 (1:3 kloroformi/etyyliasetaatti)/, mitä seurasi polaarisempi beta-oksidi (R^ 0,3). Lisää beta-oksi-dia eristettiin keskijakeiden,jotka sisälsivät kumpaakin isomeeriä, paksulevy-kromatografiällä. Puhdistetun bents-yyli-7-alfa-/l-(p-nitrobentsyylioksikarbonyylioksijetyyli/-20 3-metyyli-l-beta-oksokef-3-eemi-4-karboksylaatin kokonaissaalis oli 509 mg Z_ir (CH2C12) 1780 cm-1/.
Valmistus 57
Bentsyyli-7-alfa-/l-(p-nitrobentsyylioksikarbonyyIloksi) etyyli7-2-diatso-3-metyyli-l-beta-oksokef-3-25 eemi-4-karboksylaatti
Valmistuksen 14 menetelmällä bentsyyli-7-alfa-/l-(p-nitrobentsyylioksikarbonyylioksi)etyyli/-3-metyyli-1-beta-oksokef-3-eemi-4-karboksylaatti (509 mg) muutettiin bentsyyli-6-alfa-/l-(p-nitrobentsyylioksikarbonyylioksi)-30 etyyli’7-2-diatso-3-metyyli-l-beta-oksokef-3-eemi-4-karbok-sylaatiksi ja puhdistettiin kromatografisesti piihappogeelillä käyttäen eluenttina 10:1 kloroformi/etyyliasetaattia. Saalis: 318 mg; R^. 0,4 (10:1 kloroformi/etyyliasetaatti) ; ir (CH2C12) 1780, 2060 cm-1.
7251 8 66
Valmistus 58
Bentsyyli-6-alfa-(1-asetoksietyyli)penisillanaatti
Valmistuksen 40 menetelmällä bentsyyli-6-alfa-(1-hydroksietyyli)penisillanaatti (4 g) asetyloitiin, käyttäen 5 7 tunnin reaktioaikaa, antamaan ilman kromatografiaa bentsyy- li-6-alfa-(1-asetoksimetyyli)penisillanaatti /J,72 g; pnmr/CDCl^/delta käsittää 5,2 (s, 2H) ja 7,4 ppm (s, 5H)V.
Valmistus 59
Bentsyyli-6-alfa-(1-asetoksietyyli)-1-beta-okso-10 penisillanaatti
Samalla menetelmällä kuin valmistuksessa 42 bentsyy-li-6-alfa-(1-asetoksietyyli)penisillanaatti (3,72 g) hapetettiin bentsyyli-6-alfa-(1-asetoksietyyli)-1-beta-oksope-sillanaatiksi /.3,7 g; pnmr/CDCl^7delta käsittää 2,0 ppm 15 (s, 3H)_7.
Valmistus 60
Bentsyyli-7-alfa-(1-asetoksietyyli)-3-metyylikef-3- eemi-4-karboksylaatti
Valmistuksen 42 menetelmällä bentsyyli-6-alfa-(1-20 asetoksietyyli)-1-beta-oksopenisillanaatti (3,7 g) saatettiin reagoimaan pyridiinin (2,5 ml) ja fosforihapon (42 pisaraa, 0,84 ml) kanssa 500 ml:ssa dioksaania ja raakatuote kromatografoitiin piihappogeelipylväässä käyttäen eluenttina 10:1 kloroformi/etyyliasetaattia antamaan puhdistettu bent-25 syyli-7-alfa-(1-asetoksietyyli)-3-metyylikef-3-eemi-4-karb-oksylaatti /992 mg; pnmr/CDCl^/delta käsittää 1,4 (s, 3H, J= 6), 1,9 (s, 3H), 4,5 ppm (d, 1H, J = 1)7.
Valmistus 61
Bentsyyli-7-alfa-(1-asetoksietyyli)-3-metyyli-l-3 0 beta-oksokef-3-eemi-4-karboksylaatti
Valmistuksen 41 menetelmällä bentsyyli-7-alfa-(1-asetoksietyyli)-3-metyylikef-3-eemi-4-karboksylaattia (922 mg) hapetettiin m-klooriperbentsoehapolla metyleenikloridissa 20 tuntia -78°C:ssa. Kromatografia piihappogeelillä antoi 35 bentsyyli-7-alfa-(1-asetoksietyyli)-3-metyyli-l-beta-oksokef-3-eemi-4-karboksylaatin /331 mg; pnmr/CDCl^/delta käsittää
II
67 7251 8 2,0 (br. s. 6H), 5,2 ppm (s, 2H7»ja erikseen, vastaavan alfa-oksidin (265 mg).
Valmistus 62
Bentsyyli-7-alfa-(1-asetoksietyyli)-2-diatso-3-5 metyyli-l-beta-oksokef-3-eemi-4-karboksylaatti
Valmistuksen 3 menetelmällä bentsyyli-7-alfa-1-asetoksietyyli)-3-metyyli-l-beta-oksokef-3-eemi-4-karbok-sylaatti (331 mg) muutettiin bentsyyli-7-alfa-(1-asetoksietyyli) -2-diatso-3-metyyli-l-beta-oksokef-3-eemi-4-karbok-10 sylaatiksi ja puhdistettiin piihappogeeli-kromatografiällä eluenttina 1:1 metyleenikloridi/etyyliasetaatti /130 mg; ir (CHCl^) 2080 cm-1/·
Valmistus 63
Bentsyyli-7-alfa-/l-(p-nitrobentsyylioksikarbonyyli-15 oksi7-3-metyleeni-l-beta-oksokefaarni-4-karboksy1aatti
Bentsyyli-6-alfa-/I-(p-nitrobentsyylioksikarbonyyIloksi) etyyli/-l-beta-oksopenisi llanaattia (1,0 g) yhdistettiin N-kloorisukkiini-imidin (286 mg) kanssa 200 mlrssa kloroformia ja kuumennettiin palautus jäähdyttäen 16 tuntia. 20 Reaktioseos jäähdytettiin 0°C:een ja lisättiin stanniklo-ridia (SnCl^; 0,24 ml). 3 tunnin kuluttua reaktioseos laimennettiin etyyliasetaatilla saostuneiden kiinteiden aineiden liuottamiseksi, pestiin peräkkäin kyllästetyllä natriumbikarbonaatilla, vedellä ja suolaliuoksella, kuivattiin 25 vedettömällä natriumsulfaatilla ja haihdutettiin tyhjössä. Jäännös kromatografoitiin piihappogeelillä käyttäen eluenttina 3:1 kloroformi/etyyliasetaattia ja tlc-tarkkailua. Puhtaat tuotejakeet yhdistettiin ja haihdutettiin antamaan puhdistettu bentsyyli-7-alfa-l-(p-nitrobentsyylioksikarbonyy-30 lioksi)-3-metyleeni-l-beta-oksokefaami-4-karboksylaacti ,/0,51 g; pnmry/CDCl^/delta käsittää 1,5 (d, 3H, J = 6) , 4,7 (br. s, 1H), 5,3 (s, 1H), 5,7 ppm (s, 1H17-
Valmistus 64
Bentsyyli-7-alfa-/i-(p-nitrobentsyy1ioksikarbonyyli-35 oksi)etyyli/-3-hydroksi-l-beta-oksokef-3-eemi-4-- karboksylaatti
Bentsyyli-7-alf a-/.f- (p-nitrobentsyy 1 ioksikarbonyy li - 68 7251 8 oksi)etyyli-3-metyleeni-l-beta-oksokefaami-4-karboksylaat-tia (491 mg) liuotettiin 50 ml:aan metyleenikloridia ja liuos jäähdytettiin -78°C:een. Otsonia pulputettiin liuokseen muutaman minuutin ajan kunnes sininen väri jäi pysy-5 väksi. Seosta huuhdottiin typellä 10 minuuttia ja sitten lisättiin dimetyylisulfidia (0,2 ml). Seos lämmitettiin noin 0°C:n yläpuolelle ja pestiin vedellä. Vesifaasi pestiin vastavirtaan metyleenikloridilla ja kaksi orgaanista kerrosta yhdistettiin, pestiin suolaliuoksella, kuivattiin lp vedettömällä natriumsulfaati11a, suodatettiin ja haihdutettiin antamaan bentsyyli-7-alfa-/l- (p-nitrobentsyylioksikarbonyy-lioksi)etyyli7-3-hydroksi-l-beta-oksokef-3-eemi-4-karbok-sylaatti.
Valmistus 65 15 Bentsyyli-7-alfa-/T-(p-nitrobentsyylioksikarbonyyIl oksi) etyyl_i/-3-metoksi-l-beta-oksokef-3-eemi-4-karboksylaatti
Bentsyyli-7-alfa-/l-(p-nitrobentsyylioksikarbonyyIloksi) etyyli7-3-hydroksi-l-beta-oksokef-3-eemi-4-karboksy-?0 laattia (300 mg) liuotettiin 25 ml:aan metyleenikloridia ja jäähdytettiin 0°C:een. Lisättiin tiputtaen diatsometaa-nia (5 ekvivalenttia) eetterissä (30 ml) ja seos pidettiin 0°C:ssa 1 tunti. Lisättiin riittävästi etikkahappoa hävittämään ylimääräinen diatsometaani ja seos pestiin ve-25 dellä, suolaliuoksella, kuivattiin vedettömällä natrium- sulfaatilla, suodatettiin ja haihdutettiin tyhjössä. Jäännös kromatografoitiin piihappogeelillä käyttäen eluenttina 10:1 kloroformi/etyyliasetaattia ja tlc-tarkkailua antamaan puhdistettu bentsyyli-7-alfa-/l-(p-nitrobentsyyli-30 oksikarbonyylioksi)etyyli7-3-metoksi-l-beta-oksokef-3-eemi- 4-karboksylaatti /133 mg; 0,2 (4:1 kloroformi/etyyli-asetaatti); pnmr/CDCl^/delta käsittää 1,4 (d, 3H, J = 6) , 3,4 (s, 3H), 4,4 ppm (d, 1H, J = 2)/.
69 7251 8
Valmistus 66
Bentsyyli-7-alfa-/!-(p-nitrobentsyylioksikarbonyyij, oksi)etyyli7-3-metoksi-l-beta-oksokef-3-eemi-4-karh~ oksylaatti 5 Valmistuksen 14 menetelmällä bentsyyli-7-alfa-/l-(p_ nitrobentsyylioksikarbonyylioksi)etyyli/-3-metoksi-l-beta-oksokef-3-eemi-4-karboksylaatti (134 mg, 0,24 mmoolia) muutettiin bentsyyli-7-alfa-/l-(p-nitrobentsyylioksikarbo-nyylioksi) etyy li/-2-cliatso-3-metoksi-l-beta-oksokef-3-eemi-10 4—karboksylaatiksi, puhdistettiin kromatografisesti pii- happogeelillä käyttäen eluenttina 30:1 kloroformi/etyyli-asetaatti i. Luiitant tuotejakeet yhdistettiin ia haihdutettiin tyhiössä antamaan 28 mg puhdistettua tuotetta /R^. 0,5 (etyyliasetaatti), ir (Cl^C^) 1800, 2090 cm X/. Jakeiden, 15 jotka olivat polaarisempien epäpuhtauksien saastuttamia (19 mg), toisto-kromatografia antoi vielä 30 mg puhdistettua tuotetta.
Valmistus 67
Bentsyyli-7-alfa-/I-(p-nitrobentsvvlioksikarbonvvli-2 0 oksi) etyyli7~3-iriesyylioksi-l-beta-ok5okef-3-eemi- 4-karboksylaatti
Bentsyyli-7-aifa-^T-(p-nitrobentsyylioksikarbonyyIloksi) etyy117-3-hydroksi-l-beta-oksokef-3-eemi-4-karboksy-laattia (439 mg) liuotettiin 60 ml:aan metyleenikloridia 25 ja liuos jäähdytettiin 0°C:een. Lisättiin di-isopropyyli-etyyliamiinia (0,25 ml) ja mesyylikloridia (0,15 ml) ja reaktioseosta sekoitettiin 0°C:ssa 8 tuntia, pestiin sitten kyllästetyllä natriumbikarbonaatilla, pestiin suolaliuoksella ja haihdutettiin kuiviin (0,56 g). Raaka tuote kro-30 matografoitiin piihappogeelillä käyttäen eluenttina 10:1 kloroformi/etyyliasetaattia antamaan puhdistettu bentsyyli- 7-alfa-/^.- (p-nitrobentsyylioksikarbonyylioksi) etyy 17/-3-mesyylioksi-l-beta-oksokef-3-33mi-4-karboksylaatti 70,27 g; 0,42 (1:1 kloroformi/etyyliasetaatti) ; pnmr/CDCl^/delta 35 käsittää 3,1 ppm (s, 3ΗΪ/.
70 7251 8
Valmistus 68
Bentsyyli-7-aifa-/l-(p-nitrobentsyylioksikarbonyyIloksi) etyyli/-3-/2-(p-nitrobentsyylioksikarbonyyli-amino)etyylitio/-l-beta-oksokef-3-eemi-4-karboksy-5 laatti 2-(p-nitrobentsyylioksikarbonyyliamino)etyylimerkap-taania (23,1 mg, 0,05 mmoolia) ja trietvylibentsyyliammonium-kloridia (11 mg, 0,04 moolia) yhdistettiin seoksen kanssa, jossa oli 0,IN natriumhydroksidia (0,5 ml), vettä (2 ml) 10 ja inetyleenikloridia (2,5 ml). Lisättiin bentsyyli-7-alfa-/1- (p-nitrobentsyylioksikarbonyylioksi) etyyli7~3-mesyyli-oksi-l-beta-oksokef-3-eemi-4-karboksylaattia (25 mg, 0,04 mmoolia) ja reaktioseosta sekoitettiin huoneen lämpötilassa 16 tuntia. Kerrokset erotettiin ja vesipitoinen kerros pesis tiin tuoreella metyleenikloridilla. Orgaaniset kerrokset yhdistettiin, pestiin vastavirtaan vedellä, kuivattiin vedettömällä natriumsulfaatilla, suodatettiin ja haihdutettiin antamaan tuote (41 mg). Kromatografia piinappogeelillä (10:1 kloroformi/etyyliasetaatti eluenttina) antoi pundis-20 tetun bentsyyli-7-alfa-/l-(p-nitrobentsyylioksikarbonyyIloksi ) etyyli/-3-/2-(p-nitrobentsyylioksikarbonyyliamino)etyy-litiQ/-l-oksokef-3-eemi-4-karboksylaatin /J.6 mg; pnmr/CDCl^/-delta käsittää 2,9 ppm (m, 2H)/.
Valmistus 69 75 Bentsyyli-7-alfa-/1-p-nitrobentsyylioksikarbonyyIl oksi) etyyli/-3-etyylitio-l-beta-oksokef-3-eemi- 4-karboksylaatti
Valmistuksen 67 mesyylioksi-oksidia (25 mg) lisättiin 0°C:ssa sekoituksenalaiseen seokseen, jossa oli 5,5 30 mikrolitraa etyylimerkaptaania 2-faasiseoksessa, jossa oli 3 ml metyleenikloridia, 1 ml 0,IN natriumhydroksidia ja 2,5 ml vettä, ja sekoitettiin 8 tuntia huoneen lämpötilassa. Lisättiin vielä 5,5 mikrolitraa etyylimerkaptaania ja seosta varastoitiin -78°C:ssa 16 tuntia. Sitten lisättiin 35 5,5 mikrolitraa etyylimerkaptaania, 0,5 ml natriumhyarok- sidia ja 11 mg bentsyylitrietyyliammoniumkloridia katalyytiksi. Reaktio oli täydellinen 1 tunnissa huoneen läm- 7251 8
Potilassa. Kerrokset erotettiin ja vesipitoinen kerros pestiin kolmella annoksella rnetyleenikloridia. Metyleeni-kloridi-kerrokset yhdistettiin ja pestiin vastavirtaan vedellä ja sitten suolaliuoksella, kuivattiin vedettömällä 5 natriumsulfaatilla, suodatettiin ja haihdutettiin kuiviin. Jäännös kromatografoitiin piihappogeelillä eluenttina 10:1 kloroformi/etyyliasetaatti ja tarkkailtiin tie:11a. Saalis 10,6 mg otsikkotuotetta, R^ 0,5 (etyyliasetaatti) . Valmistus 7Q
10 Bentsyyli-7-alfa-/l-(p-nitrobentsyylioksikarbonyyli- oksi)etyyli7-3-etyylitio-2-diatso-l-beta-oksokef-3-eemi-4-karboksylaatti
Valmistuksen 69 otsikko-etyylitio-yhdistettä (37,5 mg), sekoitettiin 10 mlrssa vettä ja 10 mlrssa metyleeni-15 kloridia ja jäähdytettiin 5°C:een. Lisättiin Macrocyclic ether 13 crown 6 (17,2 mg), bentsyylitrietyyliammoniumklo-ridia (15,2 mg), kaliumhydroksidia (3,7 mg) ja pikryyli-atsidia (33,7 mg). Reaktioseosta sekoitettiin 8 tuntia 5°C:ssa. Metyleenikloridi-kerros pestiin jäävedellä ja 20 sitten kylmällä suolaliuoksella, kuivattiin vedettömällä natriumsulfaatilla, suodatettiin ja haihdutettiin kuiviin. Jäännös kromatografoitiin piihappogeelillä eluenttina 4:1 kloroformi/etyyliasetaatti. Otsikkotuotteen, joka ir:lla antoi voimakkaan diatso-nauhan (2080 cm ^), saalis oli 10 mg. 25 Valmistus 71
Etyyliformamidaatti-hydrokloridi
Formamidin (4,5 g, 4,0 ml, 0,10 moolia) ja etanolin (4,6 g, 5,8 ml, 0,10 moolia) seos lisättiin tiputtaen liuokseen, jossa oli bentsoyylikloridia (14,1 g, 11,7 ml, 0,10 30 moolia) 70 ml:ssa eetteriä 10°C:ssa. Sekoitettaessa reak-tioseos muuttui lietteeksi. 30 minuutin sekoittamisen jälkeen tuote otettiin talteen suodattamalla ja kuivattiin P20,-:llä. Valkoisena kiinteänä aineena saadun etyyliform-amidi-hydrokloridin saalis oli 2,46 g.

Claims (9)

  1. 72 7251 8 Patenttivaatimus Menetelmä terapeuttisesti käyttökelpoisten 1-okso-kerbapenaami- tai l-oksokarbapen-2-eemi-3-karboksyylihappo-5 jen tai niiden esterien valmistamiseksi, joilla on kaava i r2 °\\ r 4____CH3 10 ' J---N----X 3
  2. 0 COOR R2 O R1 Jl R4 15 '· __________ f i| (ii> A-.......— N---V 3
  3. 0. COOR 20 joissa R^" on vety, 2-fenoksiasetamido, 2-fenyyli-2-(4-etyy- li-2,3-dioksopiperatsiinikarboksiamido)asetamido, 5-metyyli- 3-fenyyli-isoksatsolikarboksiamido, 1-(4-nitrobentsyyli- 2 oksikarbonyylioksi)etyyli tai 1-(asetoksi)etyyli, R on 2 vety tai metoksi, sillä ehdolla, että kun R on metoksi, 25 niin R^ on 2-fenoksiasetamido, R^ on vety tai tavanomainen karboksisuojaryhmä kuten bentsyyli, bentshydryyli tai 2-naf-tyyli, jotka voidaan selektiivisesti poistaa hydrogenolyy-sillä, 2,2,2-trikloorietyyli, joka voidaan selektiivisesti poistaa lievällä sinkkipelkistyksellä, tai pivaloyylioksi-30 metyyli tai asetoksimetyyli, jotka ovat selektiivisesti 4 hydrolysoitavissa fysiologisissa olosuhteissa; ja R on metyyli, asetoksimetyyli tai metoksi, ja näiden yhdisteiden farmaseuttisesti hyväksyttävien kationisuolojen valmistamiseksi, kun yhdisteessä on karboksyylihappofunktio, tai näi-35 den yhdisteiden farmaseuttisesti hyväksyttävien happoaddi-tiosuolojen valmistamiseksi, kun yhdisteessä on amino- tai amidinofunktio, tunnettu siitä, että 2-diatso-l- 73 7251 8 oksokef-3-eemi-4-karboksylaatti, jolla on kaava 1 r2 φ R ____^._n2 5 (III) ,,---------N 4 >' R ° I
  4. 1. COOR saatetaan toisiintumaan l-oksokarbapen-2-eemi-3-karboksy-10 laatiksi, jolla on kaava
  5. 1 R2 ί R XI X R4 L~ ~f V (IV,
  6. 15 J— i.....-IJx g O COOR 1 2 4 joissa kaavoissa R , R ja R ovat samoja kuin edellä ja Q R on tavanomainen karboksisuojaryhmä, kuten bentsyyli, 20 bentshydryyli tai 2-naftyyli, jotka voidaan selektiivisesti poistaa hydrogenolyysillä, 2,2,2-trikloorietyyli, joka voidaan selektiivisesti poistaa lievällä sinkkipelkistyk-sellä, tai pivaloyylioksimetyyli tai asetoksimetyyli, jotka ovat selektiivisesti hydrolysoitavissa fysiologisissa 25 olosuhteissa; valosäteilyä käyttäen reaktioinertissä liuot-timessa -100° - +35°C;ssa, ja sen jälkeen haluttaessa suoritetaan yksi tai useampia seuraavista reaktioista: (a) kaavan I mukaisten yhdisteiden valmistamiseksi 4 kaavan IV mukainen yhdiste, jossa R on metyyli, mahdolli-30 sesti pelkistetään aktivoidulla sinkillä yhdisteeksi, jolla on kaava R2 O Rl \/ A/CH3 -----f (VII) 0^-----N--\ 8 COOR 35 74 7251 8 (b) saatu kaavan IV tai VII mukainen yhdiste, jos-o sa R on edellä määritelty tavanomainen, hydrogenolyysillä poistettavissa oleva karboksisuojaryhmä, muutetaan karbok-syylihapoksi, 5 (c) saatu kaavan IV tai VII mukainen yhdiste, jossa O R on edellä määritelty, lievissä olosuhteissa suoritetussa sinkkipelkistyksessä poistettavissa oleva karboksisuojaryhmä, muutetaan karboksyylihapoksi, (d) saatu happo muutetaan fysiologisesti hyväksyttä-10 väksi esteriksi, tai (e) saatu yhdiste, jossa on karboksyyliryhmä, muutetaan farmaseuttisesti hyväksyttäväksi kationisuolaksi. 75 7251 8 Förfarande för framställning av terapeutiskt använd-bara 1-oxokarbapenam- eller l-oxokarbapen-2-em-3-karbcxyl-5 syror eller estrar därav med formeln 1 r2 f? R ' J____L. / ctI3 10 \ | (I) CK' ^ 3 u COOR
  7. 2 O R1 ? il 4
  8. 15 -V j_ / R I I M (II) A------N--------k 3 cA XOOR 20 väri R^ är väte, 2-fenoxiacetamido, 2-fenyl-2-(4-etyl-2,3- dioxopiperazinkarboxamido)acetamido, 5-metyl-3-fenylisoxazol-karboxamido, 1-(4-nitrobensyloxikarbonyloxi)etyl eller O 1- (acetoxi)etyl, R är väte eller metoxi, förutsatt, att da 2 1 3 R är metoxi, är R 2-fenoxiacetamido, R är väte eller en 25 konventionell karboxiskyddsgrupp säsom bensyl, benshydryl eller 2-naftyl som kan selektivt avlägsnas genom hydrogeno-lys, 2,2,2-trikloretyl som kan selektivt avlägsnas genom mild zinkreduktion, eller pivaloyloximetyl eller acetoxi-metyl, som kan selektivt hydrolyseras under fysiologiska 30 betingelser, och R^ är metyl, acetoximetyl eller metoxi, och farmaceutiskt godtagbara katjonsalter av dessa före-ningar, när föreningen innehäller en karboxylsyrafunktion, eller farmaceutiskt godtagbara syraadditionssalter av dessa föreningar, när föreningen innehäller en amino- eller ami- 35 dinofunktion, kännetecknat därav, att ett 2- diazo-l-oxokef-3-em-4-karboxylat med formeln 76 7251 8 2 0 E1 * T \-----j^S^N2 o-^---UII) ^ 4
  9. 5. R
FI811471A 1980-05-14 1981-05-13 Foerfarande foer framstaellning av terapeutiskt anvaendbara 1-oxokarbapenam- eller 1-oxokarbapen-2-em-3-karboxylsyror och deras estrar. FI72518C (fi)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
FI844041A FI73685C (fi) 1980-05-14 1984-10-15 Foerfarande foer framstaellning av terapeutiskt anvaendbara karbapenamer och karbapen-2-emer.

Applications Claiming Priority (4)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US14960480A 1980-05-14 1980-05-14
US14960480 1980-05-14
US23215681 1981-02-09
US06/232,156 US4348264A (en) 1980-05-14 1981-02-09 Photocatalyzed process for producing carbapenams and carbapen-2-ems

Publications (3)

Publication Number Publication Date
FI811471L FI811471L (fi) 1981-11-15
FI72518B true FI72518B (fi) 1987-02-27
FI72518C FI72518C (fi) 1987-06-08

Family

ID=26846880

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
FI811471A FI72518C (fi) 1980-05-14 1981-05-13 Foerfarande foer framstaellning av terapeutiskt anvaendbara 1-oxokarbapenam- eller 1-oxokarbapen-2-em-3-karboxylsyror och deras estrar.

Country Status (17)

Country Link
US (1) US4348264A (fi)
EP (1) EP0040494B1 (fi)
KR (1) KR840000722B1 (fi)
AR (1) AR227425A1 (fi)
AU (1) AU524882B2 (fi)
CA (1) CA1171415A (fi)
DE (1) DE3162245D1 (fi)
DK (1) DK169892B1 (fi)
ES (1) ES502204A0 (fi)
FI (1) FI72518C (fi)
IE (1) IE51268B1 (fi)
IL (1) IL62848A (fi)
NO (1) NO157143C (fi)
NZ (1) NZ197072A (fi)
PH (1) PH16363A (fi)
PT (1) PT73026B (fi)
YU (1) YU43031B (fi)

Families Citing this family (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4429128A (en) 1981-02-09 1984-01-31 Pfizer Inc. Carbapenams and carbapen-2-ems and process therefor
EP0160876A1 (en) * 1984-04-23 1985-11-13 Merck & Co. Inc. 1-Hetero-6-/1-Hydroxyethyl/-2-SR8-1-carbadethiapen-2-EM-3-carboxylic acids
DK270685A (da) * 1984-06-29 1985-12-30 Hoffmann La Roche Carbapenemderivater
US4675186A (en) 1985-04-18 1987-06-23 Pfizer Inc. 6-(1-acyl-1-hydroxymethyl)penicillanic acid derivatives
US5138050A (en) * 1988-06-30 1992-08-11 Merck & Co., Inc. 6-amido-1-methyl carbapenems
US5395931A (en) * 1988-06-30 1995-03-07 Merck & Co., Inc. 6-amido-1-methyl-2-(substituted-thio)carbapenems
US5055463A (en) * 1989-02-02 1991-10-08 Merck & Co., Inc. Spirocyclic 6-amido carbapenems
IL151502A0 (en) * 2000-02-28 2003-04-10 Newbiotics Inc Anti-infective ecta

Family Cites Families (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3592751A (en) * 1969-04-14 1971-07-13 Lilly Co Eli Penicillin sulfoxide conversion process
US4234596A (en) * 1976-11-19 1980-11-18 Merck & Co., Inc. 3-(2-Aminoethylthio)-6-(1-hydroxyethyl)-7-oxo-1-azabicyclo[3.2.0]hept-2-ene-2-carboxylic acid
BE867227A (fr) 1977-10-31 1978-11-20 Merck & Co Inc Preparation de l'acide 6-(alpha-hydroxyethyl)-7-oxo-1-azabicyclo (3,2,0) hept-2-ene-carboxylique et derives a activite antibiotique
US4208422A (en) * 1978-10-24 1980-06-17 Merck & Co., Inc. 1-Substituted-pen-2-em-3-carboxylic acids
US4262010A (en) * 1979-12-03 1981-04-14 Merck & Co., Inc. 6-(1-Hydroxyethyl)-2-(2-aminoethylthio)-1,1-disubstituted-1-carbadethiapen-2-em-3-carboxylic acids

Also Published As

Publication number Publication date
IE811070L (en) 1981-11-14
IE51268B1 (en) 1986-11-26
KR830006288A (ko) 1983-09-20
NO157143B (no) 1987-10-19
IL62848A0 (en) 1981-07-31
KR840000722B1 (ko) 1984-05-24
DK169892B1 (da) 1995-03-27
NZ197072A (en) 1983-12-16
AU524882B2 (en) 1982-10-07
DE3162245D1 (en) 1984-03-22
CA1171415A (en) 1984-07-24
AU7051381A (en) 1981-11-19
NO157143C (no) 1988-01-27
NO811628L (no) 1981-11-16
EP0040494B1 (en) 1984-02-15
DK211381A (da) 1981-11-15
YU43031B (en) 1989-02-28
EP0040494A1 (en) 1981-11-25
US4348264A (en) 1982-09-07
ES8203373A1 (es) 1982-04-01
PT73026B (en) 1983-02-08
AR227425A1 (es) 1982-10-29
YU122181A (en) 1983-06-30
PH16363A (en) 1983-09-08
PT73026A (en) 1981-06-01
FI72518C (fi) 1987-06-08
ES502204A0 (es) 1982-04-01
IL62848A (en) 1984-05-31
FI811471L (fi) 1981-11-15

Similar Documents

Publication Publication Date Title
AU638556B2 (en) 3-tetrazolylthiomethyl cephalosporin antibiotics
FI72518B (fi) Foerfarande foer framstaellning av terapeutiskt anvaendbara 1-oxokarbapenam- eller 1-oxokarbapen-2-em-3 -karboxylsyror och deras estrar.
US3883518A (en) 3-Methylene cephalosporins
JPS61122285A (ja) ３位置換カルバセフエム化合物
CA2021025A1 (en) 3-substituted vinyl cephalosporin derivatives
US4731362A (en) Alkylcarbamoyloxymethylcephem compounds
US4231928A (en) Antibacterial agents
Kamachi et al. Synthesis and biological activity of a new cephalosporin, BMY-28232 and its prodrug-type esters for oral use
US4393058A (en) Cephalosporin compounds
EP0773222B1 (en) Carbapenem derivative
US4645769A (en) 1-oxa-1-dethia-cephalosporin compounds and antibacterial agent comprising the same
JPS6118760A (ja) 抗細菌性７‐オキソ‐４‐チア‐１‐アザ　ビシクロ〔３，２，０〕ヘプタ‐２‐エン誘導体
US4629726A (en) Penem carboxylic acids
US6489316B2 (en) 6-(spirocyclopropyl) penicillanic acid 4, 4-dioxides
US4349551A (en) Penicillin derivatives and compositions containing them
EP0188781B1 (en) 1-oxa-1-dethia-cephalosporin compounds and antibacterial agent comprising the same
JPH0260679B2 (fi)
FI73685B (fi) Foerfarande foer framstaellning av terapeutiskt anvaendbara karbapenamer och karbapen-2-emer.
Okonogi et al. Synthesis and antibacterial activity of novel 2-methyl-1-oxacephalosporins
FI58332B (fi) Foerfarande foer framstaellning av estrar av klavulansyra
JPH0841063A (ja) カルバペネム誘導体
CA1175809A (en) 2.beta.-CHLOROMETHYL-2.alpha.-METHYLPENAM-3.alpha.-CARBOXYLIC ACID SULFONE AND SALTS AND ESTERS THEREOF
HU194252B (en) Process for producing new cepheme-carboxylic acid derivatives
JPS62212388A (ja) （１ｒ）−１−置換カルバペネム−３−カルボン酸誘導体
IE914307A1 (en) Heterocyclic carboxylic esters, methods for their¹preparation and their use for the preparation of¹gastro-intestinal medicines

Legal Events

Date Code Title Description
MM Patent lapsed

Owner name: PFIZER INC.