FI69641C - Foerfarande och reagens foer bestaemning av kreatinkinas - Google Patents
Foerfarande och reagens foer bestaemning av kreatinkinas Download PDFInfo
- Publication number
- FI69641C FI69641C FI800578A FI800578A FI69641C FI 69641 C FI69641 C FI 69641C FI 800578 A FI800578 A FI 800578A FI 800578 A FI800578 A FI 800578A FI 69641 C FI69641 C FI 69641C
- Authority
- FI
- Finland
- Prior art keywords
- mmol
- compound
- luciferase
- μmol
- reaction
- Prior art date
Links
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 title claims description 11
- 238000010276 construction Methods 0.000 title 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 claims abstract description 28
- UDMBCSSLTHHNCD-KQYNXXCUSA-N adenosine 5'-monophosphate Chemical compound C1=NC=2C(N)=NC=NC=2N1[C@@H]1O[C@H](COP(O)(O)=O)[C@@H](O)[C@H]1O UDMBCSSLTHHNCD-KQYNXXCUSA-N 0.000 claims abstract description 21
- DRBBFCLWYRJSJZ-UHFFFAOYSA-N N-phosphocreatine Chemical compound OC(=O)CN(C)C(=N)NP(O)(O)=O DRBBFCLWYRJSJZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 20
- ZKHQWZAMYRWXGA-UHFFFAOYSA-N Adenosine triphosphate Natural products C1=NC=2C(N)=NC=NC=2N1C1OC(COP(O)(=O)OP(O)(=O)OP(O)(O)=O)C(O)C1O ZKHQWZAMYRWXGA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 19
- 108060001084 Luciferase Proteins 0.000 claims abstract description 18
- 239000005089 Luciferase Substances 0.000 claims abstract description 18
- XTWYTFMLZFPYCI-KQYNXXCUSA-N 5'-adenylphosphoric acid Chemical compound C1=NC=2C(N)=NC=NC=2N1[C@@H]1O[C@H](COP(O)(=O)OP(O)(O)=O)[C@@H](O)[C@H]1O XTWYTFMLZFPYCI-KQYNXXCUSA-N 0.000 claims abstract description 16
- UDMBCSSLTHHNCD-UHFFFAOYSA-N Coenzym Q(11) Natural products C1=NC=2C(N)=NC=NC=2N1C1OC(COP(O)(O)=O)C(O)C1O UDMBCSSLTHHNCD-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 16
- IGXWBGJHJZYPQS-SSDOTTSWSA-N D-Luciferin Chemical compound OC(=O)[C@H]1CSC(C=2SC3=CC=C(O)C=C3N=2)=N1 IGXWBGJHJZYPQS-SSDOTTSWSA-N 0.000 claims abstract description 12
- QTPILKSJIOLICA-UHFFFAOYSA-N bis[hydroxy(phosphonooxy)phosphoryl] hydrogen phosphate Chemical compound OP(O)(=O)OP(O)(=O)OP(O)(=O)OP(O)(=O)OP(O)(O)=O QTPILKSJIOLICA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 11
- CYCGRDQQIOGCKX-UHFFFAOYSA-N Dehydro-luciferin Natural products OC(=O)C1=CSC(C=2SC3=CC(O)=CC=C3N=2)=N1 CYCGRDQQIOGCKX-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 9
- BJGNCJDXODQBOB-UHFFFAOYSA-N Fivefly Luciferin Natural products OC(=O)C1CSC(C=2SC3=CC(O)=CC=C3N=2)=N1 BJGNCJDXODQBOB-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 9
- DDWFXDSYGUXRAY-UHFFFAOYSA-N Luciferin Natural products CCc1c(C)c(CC2NC(=O)C(=C2C=C)C)[nH]c1Cc3[nH]c4C(=C5/NC(CC(=O)O)C(C)C5CC(=O)O)CC(=O)c4c3C DDWFXDSYGUXRAY-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 9
- 239000003352 sequestering agent Substances 0.000 claims abstract description 7
- 102000004420 Creatine Kinase Human genes 0.000 claims abstract description 6
- 108010042126 Creatine kinase Proteins 0.000 claims abstract description 6
- 239000000758 substrate Substances 0.000 claims abstract description 5
- ZKHQWZAMYRWXGA-KQYNXXCUSA-J ATP(4-) Chemical compound C1=NC=2C(N)=NC=NC=2N1[C@@H]1O[C@H](COP([O-])(=O)OP([O-])(=O)OP([O-])([O-])=O)[C@@H](O)[C@H]1O ZKHQWZAMYRWXGA-KQYNXXCUSA-J 0.000 claims abstract description 3
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 3
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 claims abstract description 3
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 claims abstract description 3
- XTWYTFMLZFPYCI-UHFFFAOYSA-N Adenosine diphosphate Natural products C1=NC=2C(N)=NC=NC=2N1C1OC(COP(O)(=O)OP(O)(O)=O)C(O)C1O XTWYTFMLZFPYCI-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract 7
- LNQVTSROQXJCDD-UHFFFAOYSA-N adenosine monophosphate Natural products C1=NC=2C(N)=NC=NC=2N1C1OC(CO)C(OP(O)(O)=O)C1O LNQVTSROQXJCDD-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract 2
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 13
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims description 9
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- PWKSKIMOESPYIA-BYPYZUCNSA-N L-N-acetyl-Cysteine Chemical compound CC(=O)N[C@@H](CS)C(O)=O PWKSKIMOESPYIA-BYPYZUCNSA-N 0.000 claims description 7
- -1 sulfhydryl compound Chemical class 0.000 claims description 7
- 229960004308 acetylcysteine Drugs 0.000 claims description 6
- 239000000872 buffer Substances 0.000 claims description 5
- 239000012085 test solution Substances 0.000 claims description 4
- JLVVSXFLKOJNIY-UHFFFAOYSA-N Magnesium ion Chemical compound [Mg+2] JLVVSXFLKOJNIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 229910001425 magnesium ion Inorganic materials 0.000 claims description 3
- 108010071390 Serum Albumin Proteins 0.000 claims description 2
- 102000007562 Serum Albumin Human genes 0.000 claims description 2
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 claims 1
- 229940098773 bovine serum albumin Drugs 0.000 claims 1
- LIYGYAHYXQDGEP-UHFFFAOYSA-N firefly oxyluciferin Natural products Oc1csc(n1)-c1nc2ccc(O)cc2s1 LIYGYAHYXQDGEP-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 3
- 238000005259 measurement Methods 0.000 abstract description 3
- JJVOROULKOMTKG-UHFFFAOYSA-N oxidized Photinus luciferin Chemical compound S1C2=CC(O)=CC=C2N=C1C1=NC(=O)CS1 JJVOROULKOMTKG-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 3
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 abstract 2
- PUZPDOWCWNUUKD-UHFFFAOYSA-M sodium fluoride Chemical compound [F-].[Na+] PUZPDOWCWNUUKD-UHFFFAOYSA-M 0.000 abstract 2
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 abstract 1
- 235000013024 sodium fluoride Nutrition 0.000 abstract 1
- 239000011775 sodium fluoride Substances 0.000 abstract 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 19
- 229950006790 adenosine phosphate Drugs 0.000 description 14
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 13
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 9
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 9
- OFGDSGVGRWPQJQ-UHFFFAOYSA-N 1h-imidazol-1-ium;acetate Chemical compound CC(O)=O.C1=CNC=N1 OFGDSGVGRWPQJQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 102000002281 Adenylate kinase Human genes 0.000 description 6
- 108020000543 Adenylate kinase Proteins 0.000 description 6
- 102000009027 Albumins Human genes 0.000 description 6
- 108010088751 Albumins Proteins 0.000 description 6
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 6
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 6
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 6
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 6
- RAXXELZNTBOGNW-UHFFFAOYSA-N imidazole Natural products C1=CNC=N1 RAXXELZNTBOGNW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 5
- 230000029918 bioluminescence Effects 0.000 description 5
- 238000005415 bioluminescence Methods 0.000 description 5
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 4
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 230000002407 ATP formation Effects 0.000 description 3
- 239000008351 acetate buffer Substances 0.000 description 3
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 3
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 3
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 3
- PIEPQKCYPFFYMG-UHFFFAOYSA-N tris acetate Chemical compound CC(O)=O.OCC(N)(CO)CO PIEPQKCYPFFYMG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 241000254173 Coleoptera Species 0.000 description 2
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- OAICVXFJPJFONN-UHFFFAOYSA-N Phosphorus Chemical compound [P] OAICVXFJPJFONN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108091000080 Phosphotransferase Proteins 0.000 description 2
- XJLXINKUBYWONI-DQQFMEOOSA-N [[(2r,3r,4r,5r)-5-(6-aminopurin-9-yl)-3-hydroxy-4-phosphonooxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl] [(2s,3r,4s,5s)-5-(3-carbamoylpyridin-1-ium-1-yl)-3,4-dihydroxyoxolan-2-yl]methyl phosphate Chemical compound NC(=O)C1=CC=C[N+]([C@@H]2[C@H]([C@@H](O)[C@H](COP([O-])(=O)OP(O)(=O)OC[C@@H]3[C@H]([C@@H](OP(O)(O)=O)[C@@H](O3)N3C4=NC=NC(N)=C4N=C3)O)O2)O)=C1 XJLXINKUBYWONI-DQQFMEOOSA-N 0.000 description 2
- CVSVTCORWBXHQV-UHFFFAOYSA-N creatine Chemical compound NC(=[NH2+])N(C)CC([O-])=O CVSVTCORWBXHQV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- BHEPBYXIRTUNPN-UHFFFAOYSA-N hydridophosphorus(.) (triplet) Chemical compound [PH] BHEPBYXIRTUNPN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 2
- 239000011777 magnesium Substances 0.000 description 2
- UEGPKNKPLBYCNK-UHFFFAOYSA-L magnesium acetate Chemical compound [Mg+2].CC([O-])=O.CC([O-])=O UEGPKNKPLBYCNK-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 208000010125 myocardial infarction Diseases 0.000 description 2
- 102000020233 phosphotransferase Human genes 0.000 description 2
- QOCMGIRPKVJJKN-UHFFFAOYSA-M sodium;2-[4-(2-acetyloxyethyl)piperazin-1-yl]ethanesulfonate Chemical compound [Na+].CC(=O)OCCN1CCN(CCS([O-])(=O)=O)CC1 QOCMGIRPKVJJKN-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 125000003396 thiol group Chemical group [H]S* 0.000 description 2
- BIRSGZKFKXLSJQ-SQOUGZDYSA-K 6-phosphonatooxy-D-gluconate Chemical compound [O-]P(=O)([O-])OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)C([O-])=O BIRSGZKFKXLSJQ-SQOUGZDYSA-K 0.000 description 1
- 229940093764 Adenylate kinase inhibitor Drugs 0.000 description 1
- DJHGAFSJWGLOIV-UHFFFAOYSA-K Arsenate3- Chemical compound [O-][As]([O-])([O-])=O DJHGAFSJWGLOIV-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M Chloride anion Chemical compound [Cl-] VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- NBSCHQHZLSJFNQ-GASJEMHNSA-N D-Glucose 6-phosphate Chemical compound OC1O[C@H](COP(O)(O)=O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O NBSCHQHZLSJFNQ-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- VFRROHXSMXFLSN-UHFFFAOYSA-N Glc6P Natural products OP(=O)(O)OCC(O)C(O)C(O)C(O)C=O VFRROHXSMXFLSN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- 108010024636 Glutathione Proteins 0.000 description 1
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 1
- 108010044467 Isoenzymes Proteins 0.000 description 1
- 241000254158 Lampyridae Species 0.000 description 1
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 1
- 229940000489 arsenate Drugs 0.000 description 1
- 230000001174 ascending effect Effects 0.000 description 1
- 239000006172 buffering agent Substances 0.000 description 1
- 239000002738 chelating agent Substances 0.000 description 1
- 239000008139 complexing agent Substances 0.000 description 1
- 229960003624 creatine Drugs 0.000 description 1
- 239000006046 creatine Substances 0.000 description 1
- 230000001627 detrimental effect Effects 0.000 description 1
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 1
- VHJLVAABSRFDPM-ZXZARUISSA-N dithioerythritol Chemical compound SC[C@H](O)[C@H](O)CS VHJLVAABSRFDPM-ZXZARUISSA-N 0.000 description 1
- VHJLVAABSRFDPM-QWWZWVQMSA-N dithiothreitol Chemical compound SC[C@@H](O)[C@H](O)CS VHJLVAABSRFDPM-QWWZWVQMSA-N 0.000 description 1
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 1
- 210000003743 erythrocyte Anatomy 0.000 description 1
- RWSXRVCMGQZWBV-WDSKDSINSA-N glutathione Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(=O)N[C@@H](CS)C(=O)NCC(O)=O RWSXRVCMGQZWBV-WDSKDSINSA-N 0.000 description 1
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 1
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 1
- 230000002045 lasting effect Effects 0.000 description 1
- 229910000664 lithium aluminum titanium phosphates (LATP) Inorganic materials 0.000 description 1
- 210000005229 liver cell Anatomy 0.000 description 1
- 229940069446 magnesium acetate Drugs 0.000 description 1
- 235000011285 magnesium acetate Nutrition 0.000 description 1
- 239000011654 magnesium acetate Substances 0.000 description 1
- 210000003205 muscle Anatomy 0.000 description 1
- 210000000663 muscle cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000004165 myocardium Anatomy 0.000 description 1
- 229930027945 nicotinamide-adenine dinucleotide Natural products 0.000 description 1
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 description 1
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 1
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 1
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 241000894007 species Species 0.000 description 1
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
- C12Q1/66—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving luciferase
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
- C12Q1/48—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving transferase
- C12Q1/50—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving transferase involving creatine phosphokinase
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
- Y10S435/81—Packaged device or kit
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Zoology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
Description
γβί kuulutusjulkaisu 69641
«tSll Β 11 UTLÄGGNINGSSKRIFT O 7 O H
c (45) r - 1 i : y' -Lty (51) Kv.lk.4/lnt.CI.4 C 12 Q, 1/50 SUOMI —FINLAND (21) Patenttihakemus — Patentansdknlng 800578 (22) Hakemispäivä — Ansöknlngsdag 27.02,80 (23) Alkupäivä — Giltlghetsdag 27.02.80 (41) Tullut julkiseksi — Blivit offentllg gg gg gg
Patentti- ja rekisterihallitus Nähtäväksip.non ja kuul.julkalsun pvm. -
Patent- och registerstyrelsen ' 1 Ansökan utlagd och utl.skrlften publlcerad · 1 1 ·0^ (32)(33)(31) Pyydetty etuoikeus—Begärd prioritet 02.03.79
Saksan Li i ttotasavalta-Förbundsrepubliken Tyskland(DE) P 290805**.*+ (71) Boehringer Mannheim GmbH., Sandhofer Strasse 112-132, 6800 Mannheim--Waldhof, Saksan Liittotasava1ta-Förbundsrepubliken Tyskland(DE) (72) Karl Wulff, Weilheim, Fritz Stähler, Tutzing,
Wolfgang Gruber, Tutzing-Unterzeismering,
Saksan Liittotasavalta-Förbundsrepubliken Tyskland(DE) (7**) Berggren Oy Ab (5*+) Menetelmä ja reagenssi kreat i in i k i naas in määrittämiseksi -Förfarande och reagens för bestämning av kreatinkinas Keksinnön kohteina ovat menetelmä ja reagenssi kreätiinifosfo- kinaasin (E.C. 2.7.3.2), josta seuraavassa käytetään lyhennettä CK, aktiivisuuden määrittämiseksi fotometrisesti loistekuo-riaisista peräisin olevan bioluminesenssisysteemin avulla.
CK katalysoi seuraavan reaktion: 1) ADP + kreatiinifosfaatti - ^ A ATP + kreatiini
Ihmiskehossa esiintyy kaksi erilaista lajia tämän entsyymin alayksiköitä, nimittäin alayksiköt M ja B. Koska aktiivinen entsyymi on kulloinkin koostunut kahdesta alayksiköstä ja koska mainitut alayksiköt voivat yhdistyä toisiinsa vapaasti, on kolme entsyymityyppiä mahdollista, lihastyyppi (CK-MM), aivotyyppi (CK-BB) ja hybridityyppi (CK-MB), joka itse asiassa esiintyy vain sydänlihaksessa siirtyen sydäninfarktin yhteydessä veriheraan ja on siitä mitattavissa kohonneena pitoisuutena. Tämän isoentsyymin aktiivisuus veriherassa on entsyymin CK kokonaisaktiivisuuden ohella sydäninfarktin diagnoosille hyvin tärkeä.
2 69641 CK-aktiivisuus määritetään tavallisesti absorptiofotometri-sellä menetelmällä ATP-muodostuksen (vertaa yhtälöä 1) mittauksen kautta seuraavasti: 2) ATP + D-glukoosi - hf^sokinaasi^ ^DP + D_g2U]coosi_g_fosfaa^._ ti 3) D-glukoosi-6-fosfaatti+ NADP+ - — -6~£PH;> D-glukonaatti-6-fosfaatti + NADPH + H+ Tätä CK-aktiivisuuden määritystä ATP-muodostuksen välityksellä häiritsevät veriheran (maksasta, lihaksesta tai punasoluista lähtöisin olevat) adenylaattikinaasit (E.C. 2.7.4.3 "myokinaa-sit"), jotka katalysoivat seuraavan reaktion: 4) 2 ADP ^Kinaasi. ATp + ^ Näiden aktiivisuutta voidaan tehokkaimmin hillitä lisäämällä 5-10 mmol/1 adenosiini-5'-monofosfaattia (AMP) ja 10 yumoi/1 diadeno- siinipentafosfaattia (Ap5A), jolloin absorptiofotometrisen kokeen häirintä tulee ehkäistyksi. Häirinnän ehkäisy on myös mahdollista lisäämällä 1-10 mmol/1 yhdistettä NaF yhdisteen Ap5A sijasta.
Näiden menetelmien eräänä olennaisena haittana on viivefaasi, joka ei vähene 90 sekunnin aikana. Absorptiofotometrisen menetelmän toinen olennainen epäkohta on sen pieni herkkyys, joka sallii vain suurempien aktiivisuuksien kuin 10 U/l mittauksen ja siten tekee itse asiassa mahdottomaksi erikoisesti CK-MB-aktiivisuuden mittauksen alemmalla patologisella alueella sekä myös normaalialueella.
Sen vuoksi on suoritettu erinäisiä kokeita, joissa on tutkittu CK-entsyymin ATP-muodostuksen seuraamista loistekuoriaisen (firefly) lusiferaasibioluminesenssin avulla. Tämän menetelmän etuina ovat suurempi herkkyys ja viivefaasin puuttuminen.
Loistekuoriaisista (Photinus pyralis ym.) peräisin oleva lusife-raasi katalysoi seuraavan reaktion: 69641 5) ATP + lusiferiini + 0 lusiferaasi > 0);siiusiferiini + C02 + AMP + PP^ + valo Tässä reaktiossa syntyvän valon emissio on lähes 1 einstein/ mol ATP. Valon aallonpituuden maksimiarvo on 562 nm. Reaktio on erittäin herkkä ja mahdollistaa ATP-pitoisuuksien määrityk- -13 sen jopa niin pieneen arvoon kuin 10 mol/1 saakka.
Kuitenkin on tunnettua, että AMP ehkäisee reaktion 5) tapahtumista niin voimakkaasti /Arch. Biochem. Biophys. 141, 49 (1970j_/, että tämän reaktion käyttö CK-aktiivisuuksien mittaamiseen veriherassa yhtälön 1) mukaan on hyvin epävarmaa, koska se estää yhdisteen AMP käyttämisen adenylaattikinaasin inhibiit-tinä reaktiossa 4) /Proc. Nat. Acad. Sei. 7JL, 1384-1387 (1974]_/. Edelleen on tunnettua välttää adenylaattikinaasin eston tarve osittain siten, että reaktio 1) suoritetaan suboptimaalisessa ADP-pitoisuudessa, ts. ilman substraattikyllästystä ja siten toimitaan substraattipitoisuudella, jossa johtuen adenylaattikinaasin jyrkästä aktiivisuus-substraattipitoisuus-käyrästä adenylaattikinaasin aktiivisuus CK-entsyymin aktiivisuuteen verrattuna on merkityksettömän pieni. Tällä tavalla on tosin mahdollista mitata CK veriherassa bioluminesenssimenetelmällä adenylaattikinaasin läsnäollessa /Clin. Chim. Acta 8j7, 199-209 (1978)_/, mutta tällöin on kuitenkin tunnetusti otettava huomioon seuraavat huomattavat haitat: 1. CK-reaktio ei tapahdu enää pseudo-.iollannen kertaluvun mukaan.
2. Takaisinsaatu CK-aktiivisuus, yhdisteellä ATP suoritetun sisäisen kalibroinnin suhteen, on vain noin 11 % absorptiototo-metrisessä kokeessa mitatuista arvoista.
3. Pienetkin ADP-pitoisuudessa esiintyvät epätarkkuudet vaikuttavat hyvin voimakkaasti tulokseen.
Niinpä tämän keksinnön tarkoituksena on aikaansaada CK-aktiivi-suuden määrittämiseksi bioluminesenssikoemenetelmä, jossa ei esiinny yllämainittuja epäkohtia ja jossa erikoisesti 1. adenylaattikinaasien vaikutus on täysin estettävissä, 69641 2. bioluminesenssin avulla mitattu aktiivisuus, ilmaistuna yksiköissä I.U. (substraatinmuutos ^umol/minuutti), on sama kuin absorptiofotometrisessä määrityksessä mitattu aktiivisuus, ja 3. voidaan työskennellä CK-entsyymin substraattikyllästyksen olosuhteissa.
Keksinnön mukaiselle menetelmälle kreatiinikinaasin määrittämiseksi saattamalla kreatiinifosfaatti reagoimaan adenosiinidi-fosfaatin kanssa adenosiinitrifosfaattia muodostaen, antamalla saadun yhdisteen reagoida lusiferiinin ja hapen kanssa lusife-raasin ja diadenosiinipentafosfaatin läsnäollessa oksilusiferii-nia ja adenosiinimonofosfaattia muodostaen ja mittaamalla tällöin emittoitu valo, on tunnusomaista, että jälkimmäinen reaktio suoritetaan adenosiinidifosfaattisubstraatin kylläs-tyspitoisuudessa AMP-määrän 1-10 mmol/1 läsnäollessa, pH-arvon ollessa välillä 5,8-7,5 ja lusiferaasimäärän vähintään 50 U koetta kohti.
Yllättäen yllämainittujen ehtojen mukaisissa olosuhteissa ei vain adenylaattikinaasien vaikutus tule täysin ehkäistyksi, vaan myös lusiferaasireaktio tapahtuu pseudo-ensimmäisen kertaluvun mukaan, ilman että yhdisteen AMP aiheuttamaa estovaikutusta esiintyy haitallisessa määrässä.
Keksinnön mukaisen menetelmän reaktiot suoritetaan sopivimmin pH-arvon ollessa välillä 6,3-7,2,erikoisen edullisesti välillä 6,5-6,9. Kussakin kokeessa on ADP-pitoisuus sopivimmin välillä 0,1-10 mmol/1 ja diadenosiinipentafosfaatin (Ap5A) pitoisuus välillä 1-100 ^umol/l.
Mainitulla edullisella pH-arvoalueella saadaan parhaat tulokset, kun läsnä on 0,5-2 mmol/1 ADP, 5-50 ^,umol/l Ap5A ja 5-10 mmol/1 AMP.
Paitsi edellä mainittuja reagensseja on keksinnön mukaisessa menetelmässä edullista käyttää lisäksi orgaanista sulfhydryyli-yhdistettä. Sopivia sulfhydryyliyhdisteitä ovat esimerkiksi N-asetyylikysteiini, ditiotreiitti, ditioerytriitti ja pelkistetty glutationi. Sopivimmin käytetään N-asetyylikysteiiniä.
5 69641
Edelleen on tarkoituksenmukaista lisätä sekvestrausainetta, kuten etyleenidiamiinitetraetikkahappoa (EDTA) , tri Ionia, kompleksonia, kompleksinmuodostajaa ja sentapaisia. %ös on tarkoituksenmukaista lisätä stabilointiaineita, kuten seerumialbumii-nia, määrissä, jotka asiantuntija tietää tarvittavan entsymaat-tisten reagenssien stabiloimiseen.
Loistekuoriais-reaktiossa on emittoidun valon intensiteetti suoraan verrannollinen ATP-pitoisuuteen. Mittasuureella on reaktionopeuden dimensio. Pseudo-ensimmäisen kertaluvun reaktion (C,.m_.<^K ) suhteen on voimassa: ATP m T = d(h·v) _ Vmax
dt K LATP
m
Jos tämän reaktion eteen kytketään yhdistettä ATP tuottava reaktio, kuten esim. CK-reaktio, niin on voimassa: dCATP , dl -at---at- ts. että seurauksena on valointensiteetin lineaarinen nousu, jonka kaltevuus on likimain verrannollinen käytetyn CK-määrän aktiivisuuteen.
Nämä entsyymikineettiset tarkastelut edellyttävät, ettei lusife-raasin aktiivisuus muutu havaintojen teon aikana. Näin ei ole kuitenkaan normaalisti laita, koska loistekuoriais-reaktio on oksilusiferiinin kautta tapahtuvan tuotoneston alaisena, mikä mitattaessa tiettyä ATP-pitoisuutta aikaansaa nopeasti tapahtuvan signaalin heikkenemisen ja siten hyvin lyhyen signaalin kestoajan, signaalin pysyessä vakiona enintään muutamia sekunteja.
yllättäen on nyt todettu, että keksinnön mukaisesti adenylaat-tikinaasien vaikutuksen ehkäisemiseksi lisätty AMP mainituissa olosuhteissa muuttaa loistekuoriais-lusiferaasin ominaisuudet sellaisiksi, että oksilusiferiini poistaa reaktion kuluessa tavallisesti esiintyvän tuotoneston. Tämä aiheuttaa sen, että mitattaessa tiettyä ATP-pitoisuutta edellä mainitun hyvin lyhyen signaalinkeston sijasta saadaan enemmän kuin 15 minuuttia kestävä muuttumaton signaali.
6 69641
Oheisessa piirustuksessa kuvio 1 esittää keksinnön mukaisesti saatua vakiosignaalia. Se aikaansaatiin seuraavalla koeseok-sella:
Komponentti D-lusiferiini 35 ^umol/1
Lusiferaasi 400 yksikköä (yksikköä/koe)
Tris-asetaattipuskuri pH 7,75, 100 mmol/1 EDTA 2 mmol/1
Mg++ 10 mmol/1 ATP 10-8 mol/1
Naudanverihera-albumiini 0,1 % AMP 5 mniol/1
Keksinnön toisena kohteena on reagenssi kreatiinikinaasin määritystä varten. Tälle on tunnusomaista, että se sisältää 10-500 ^,umol lusiferiinia, vähintään 50 U lusiferaasia, 5-250 mmol puskuria, jonka pH on 5,8-7,5, 1-10 mmol AMP, 0,1-10 mmol ADP, 1-100 ^umol diadenosiinipentafosfaattia, 5-50 mmol kreatiini-fosfaattia, 1-100 mmol orgaanista sulfhydryyliyhdistettä, 0,1-5 mmol sekvestrausainetta, 0,05-1 painoprosenttia naudanverihera-albumiinia ja 1-100 mmol magnesiumioneja koeliuoksen 1 litraa kohti. Reagenssi voi olla joko kiinteässä tai liuotetussa muodossa .
Eräässä edullisessa sovellutusmuodossa keksinnön mukainen reagenssi sisältää koeliuoksen 1 litraa kohti 15-50 ,umol lusife- 4 '
riinia, 100-5 x 10 U lusiferaasia, 60-120 mmol puskuria, pH
6,3-7,3, 5-10 mmol AMP, 0,5-2 mmol ADP, 5-50 ^,umol diadenosiinipentafosf aattia, 20-40 mmol kreatiinifosfaattia, 2-50 mmol orgaanista sulfhydryyliyhdistettä, 0,5-3 mmol sekvestrausainetta, 0,05-0,2 painoprosenttia naudanverihera-albumiinia ja 5-20 mmol magnesiumioneja.
Sekvestrausaineena keksinnön mukainen reagenssi sisältää sopi-vimmin yhdistettä EDTA ja sulfhydryyliyhdisteenä N-asetyyli-kysteiiniä.
li 69641
Esimerkkejä sopivista puskuriaineista ovat tris-asetaatti, imidatsoliasetaatti, hepesasetaatti, tris-, imidatsoli-, TRA-, hepessulfaatti tai -kloridi, arsenaatti- tai fosfaattipuskuri. Myös glysiinipuskuri on sopiva mainitulla alueella. Ensisijassa käytetään imidatsoliasetaattia ja hepesasetaattia.
Seuraavat esimerkit selittävät keksintöä edelleen. Pitoisuus-arvot tarkoittavat kokeessa käytetyn valmiin reagenssiliuoksen arvoja ja määrät koeliuoslitran valmistukseen tarvittavia määriä. Esimerkeissä käytettiin artikkelissa FEBS-Lett. 10_, 167-170 (1970) esitetyn menetelmän mukaan eristettyä loistekuoriais-lusiferaasia. Lusiferiinina käytettiin kaupallisesti saatavissa olevia tuotteita, joilla kussakin tapauksessa oli mahdollisimman suuri puhtausaste, esimerkiksi eriä Sigma 580-0,349 ja 98C-3942 tai erää Calbiochem 540022. Samoin myös muilla lusife-riini-valmisteilla oli vastaava puhtausaste.
Seuraavassa ilmoitetut lusiferaasi-yksiköt määritettiin seuraavasti :
Koeseos Lopullinen pitoisuus kokeessa D-lusiferiini 35 ^umol/1
Tris-asetaatti, pH 7,75 100 ^,umol/l EDTA 2 mmol/1
Naudanverihera-albumiini 0,1 %
Mg 10 mmol/1
Lusiferaasi vaihteleva ATP (alkuaan) 2,5 x 10 7 mol/1
Mittaus suoritettiin kaupallisella ATP-fotometrillä (valmistaja SAI, San Diego, Calif. USA).
Entsyymiyksikkönä pidettiin määrää, joka yllämainituilla edellytyksillä antoi signaalin 37 impulssia/10 s. Tällöin mittauslaitteen potentiometriherkkyys oli asetettu arvoon 6,7.
69641
Esimerkki 1
Liuokset Pitoisuus liuoksessa Pitoisuus kokeessa
Liuos 1 EDTA 4 mmol/1 2 nmol/1
Mg-asetaatti 20 nmol/1 10 nmol/1 D-lusiferiini 70 yUmol/1 35 ^umol/1
Lusi f erääsi 400 yksikköä/ml 400 yksikköä/koe
Naudanverihera-albumiini 4 g/1 0,2 %
Imidatsoliasetaatti, pH 6,7 110 nmol/1 100 nmol/1
Liuos 2 AMP 33 nmol/1 10 nmol/1 N-asetyylisysteiini (NAC) 33 nmol/1 10 mmol/1
Ap5A 33 yUmol/1 10 ^unol/1 ADP 3,3 nmol/l 1 nmol/1
Imidatsoliasetaatti, pH 6,7 110 nmol/1 100 mmol/1
Liuos 3
Kreatiinifosfaatti 300 nmol/1 30 irmol/1
Imidatsoliasetaatti 110 mmol/1 100 nmol/1
Liuos 4 ATP 5xlO~4 mol/1 5xl0-6 mol/1
Koe
Yhdistetään keskenään: 1000 yul liuosta 1 600 ^ul liuosta 2 200 ^,ul veriheranäytettä
Seosta esihaudotaan 5 minuuttia lämpötilassa 25°C, minkä jälkeen koeputki asetetaan mittauslaitteeseen (SAI-fotometriin) ja reaktio saatetaan alkuun lisäämällä 200 yUl liuosta 3, jota myös oli esihaudottu lämpötilassa 25°C. Käyrän kulku rekisteröidään piirturilla, ja noin 2 minuutin kuluttua suoritetaan sisäinen kalibrointi 20 ^ul:lla liuosta 4 yksiköissä ^umol substraatinmuu-tosta/minuutti. Piirturi rekisteröi automaattisesti tulokset. Käyrää piirretään edelleen 2-3 minuutin ajan graafisesti hyvin tulkittavan kuvauksen aikaansaamiseksi, kuvauksen ollessa esitettynä oheisen piirustuksen kuviossa 2.
9 69641
Lineaarisesti nouseva käyrä ilmaisee nousun mielivaltaisina as-teikonosina/minuutti, ja kalibrointivaihe mahdollistaa astei-konosien (lisäyksenä AmVj muuntamisen arvoksi ^umol ATP. Muuntamalla saatu käyrä on esitetty piirustuksen kuviossa 3.
Esimerkki 2
Tarvikkeet 100 koetta varten
Pullo 1 sisältää 0,4 mmol yhdistettä EDTA 2 mmol magnesiumasetaattia 7 ,umol lusiferiinia ' 4 4 x 10 yksikköä lusiferaasia 400 mg naudanverihera-albumiinia 11 mmol imidatsolipuskuria, pH 6,7 lyöfilisaattina.
Pullo 2 sisältää 2 mmol adenosiini-5'-monofosfaattia 2 mmol N-asetyylikysteiiniä 2 ^umol diadenosiinipentafosfaattia 0,2 mmol adenosiini-5'-difosfaattia 6,5 mmol imidatsoliasetaattipuskuria, pH 6,7 lyofilisaattina.
Pullo 3 sisältää 6 mmol kreatiinifosfaattia 2,2 mmol imidatsoliasetaattipuskuria, pH 6,7 lyofilisaattina.
Pullo 4 sisältää
10 ^ mol yhdistettä ATP
lyofilisaattina.
Pullon 1 sisältö viedään 100 mitään vettä, pullon 2 sisältö 60 mitään vettä, pullon 3 sisältö 20 mitään vettä ja pullon 4 sisältö 2 mitään vettä käyttövalmiitten liuosten valmistamiseksi.
Itse kokeitten suoritus tapahtuu samoin kuin esimerkissä 1 käyttämällä esimerkissä 1 mainittuja eri liuosten määriä.
Claims (9)
1. Menetelmä kreatiinikinaasin määrittämiseksi saattamalla kreatiinifosfaatti reagoimaan adenosiinidifosfaatin kanssa adenosiinitrifosfaattia muodostaen, antamalla saadun yhdisteen reagoida lusiferiinin ja hapen kanssa lusiferaasin ja diadenosiinipentafosfaatin läsnäollessa oksilusiferiinia ja adenosiinimonofosfaattia muodostaen sekä mittaamalla tällöin emittoitu valo, tunnettu siitä, että jälkimmäinen reaktio suoritetaan adenosiinidifosfaattisubstraatin kyllästys-pitoisuudessa AMP-määrän 1-10 mmol/1 läsnäollessa, pH-arvojen ollessa välillä 5,8-7,5 ja lusiferaasimäärän vähintään 50 U koetta kohti.
2. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä,että lisätään 0,1-10 mmol/1 yhdistettä ADP ja 1-100 ^umol/1 diadenosiinipentafosfaattia.
3. Patenttivaatimuksen 2 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että toimitaan pH-alueella 6,2-7,2 seuraavien yhdiste-määrien läsnäollessa: 0,5-2 mmol/1 ADP, 5-50 ^,umol/l diadenosiinipentafosf aattia ja 5-10 mmol/1 AMP.
4. Jonkin patenttivaatimuksista 1-3 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että määritys suoritetaan sekvestrausaineen, kuten etyleenidiamiinitetraetikkahapon, orgaanisen sulfhydryy-liyhdisteen, kuten N-asetyylikysteiinin, ja verihera-albumii-nin läsnäollessa.
5. Reagenssi kreatiinikinaasin määrittämiseksi, tunnettu siitä,että se sisältää koeliuoksen 1 litraa kohti 10-500 ^,umol lusiferiinia, vähintään 50 U lusiferaasia, 5-250 mmol puskuria, pH 5,8-7,5, 1-10 mmol yhdistettä AMP, 0,1-10 mmol yhdistettä ADP, 1-100 ^umol diadenosiinipentafosfaattia, 5-50 mmol kreatiinifosfaattia, 1-100 mmol orgaanista sulfhydryyliyhdistettä, 0,1-5 mmol sekvestrausainetta, 0,05-1 painoprosenttia naudanverihera-albumiinia ja 1-100 mmol magnesiumioneja. li 69641
6. Patenttivaatimuksen 5 mukainen reagenssi, tunnettu siitä, että se sisältää koeliuoksen 1 litraa kohti 15-50 ,umol lusiferiinia, ' 4 100-5 x 10 U lusiferaasia, 60-120 mmol puskuriainetta, pH 6,3-7,2, 5-10 mmol yhdistettä AMP, 0,5-2 mmol yhdistettä ADP, 5-50 ^umol diadenosiinipentafosfaattia, 20-40 mmol kreatiinifosfaattia, 2-50 mmol orgaanista sulfhydryyliyhdistettä, 0,5-3 mmol sekvestrausainetta, 0,05-0,4 painoprosenttia naudanverihera-albumiinia ja 5-20 mmol magnesiumioneja.
7. Patenttivaatimuksen 5 tai 6 mukainen reagenssi, tunnettu siitä,että se sisältää sekvestrausaineena etyleeni-diamiinitetraetikkahappoa.
8. Jonkin patenttivaatimuksista 5-7 mukainen reagenssi, tunnettu siitä, että se sisältää sulfhydryyliyhdis-teenä N-asetyylikysteiiniä.
9. Jonkin patenttivaatimuksista 5-8 mukainen reagenssi, tunnettu siitä, että se puskuriaineena sisältää imi-datsoliasetaattia tai hepesasetaattia. 1 2 69641
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| DE19792908054 DE2908054A1 (de) | 1979-03-02 | 1979-03-02 | Verfahren und reagenz zur bestimmung der creatinkinase |
| DE2908054 | 1979-03-02 |
Publications (3)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| FI800578A7 FI800578A7 (fi) | 1980-09-03 |
| FI69641B FI69641B (fi) | 1985-11-29 |
| FI69641C true FI69641C (fi) | 1986-03-10 |
Family
ID=6064230
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| FI800578A FI69641C (fi) | 1979-03-02 | 1980-02-27 | Foerfarande och reagens foer bestaemning av kreatinkinas |
Country Status (6)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US4286057A (fi) |
| EP (1) | EP0015437B1 (fi) |
| JP (2) | JPS585678B2 (fi) |
| AT (1) | ATE435T1 (fi) |
| DE (2) | DE2908054A1 (fi) |
| FI (1) | FI69641C (fi) |
Families Citing this family (18)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4357420A (en) * | 1981-04-28 | 1982-11-02 | The United States Of America As Represented By The United States Department Of Energy | Bioluminescence methods for enzymatic determinations |
| CA1175737A (en) * | 1981-07-17 | 1984-10-09 | James A. Sanderson | Determination of creatine phosphokinase in body fluids |
| US4547461A (en) * | 1983-01-18 | 1985-10-15 | Eastman Kodak Company | Composition, analytical element and method for the quantification of creatine kinase |
| US4704355A (en) * | 1985-03-27 | 1987-11-03 | New Horizons Diagnostics Corporation | Assay utilizing ATP encapsulated within liposome particles |
| CA1251395A (en) * | 1985-05-01 | 1989-03-21 | John B. Findlay | Immunochemical method and analytical compositions and element for determination of creatine kinase-mb |
| US4767699A (en) * | 1985-05-02 | 1988-08-30 | Allied Corporation | Diagnostic reagent, kit and method employing polynucleotide displacement, separation, enzymatic cleavage and adenosine phosphate detection |
| JP2564295B2 (ja) * | 1987-03-23 | 1996-12-18 | エーザイ株式会社 | ビタミンｅ欠乏症の検査のためのピルビン酸キナーゼ活性の測定方法 |
| US4981708A (en) * | 1989-10-02 | 1991-01-01 | Enzytech, Inc. | Method of preventing browning in foods utilizing protease free latex extracts particularly from figs |
| US5283180A (en) * | 1990-07-19 | 1994-02-01 | Charm Sciences, Inc. | Bioluminescence method for the determination of pesticides |
| US5374534A (en) * | 1990-07-19 | 1994-12-20 | Charm Sciences, Inc. | Method of preparing D-luciferin derivatives |
| AT401526B (de) * | 1993-02-10 | 1996-09-25 | Scheirer Winfried | Reagenzlösung zur stabilisierung der lumineszenz bei der luciferasemessung |
| US5734546A (en) * | 1994-09-21 | 1998-03-31 | Rohm Co. Ltd. | Capacitor element for solid electrolytic capacitor and process for making the same |
| US5817467A (en) | 1995-11-16 | 1998-10-06 | Kyowa Medex Co., Ltd. | Method for quantitatively determining creatinine kinase and a reagent therefor |
| US6171809B1 (en) | 1998-01-29 | 2001-01-09 | Packard Instrument Company | Method and compositions for detecting luciferase biological samples |
| CA2328684A1 (en) * | 2000-12-15 | 2002-06-15 | Yahia Gawad | Photon-triggered luminescent assay |
| GB0030727D0 (en) | 2000-12-15 | 2001-01-31 | Lumitech Uk Ltd | Methods and kits for detecting kinase activity |
| CN1764751B (zh) | 2003-02-26 | 2012-05-30 | 株式会社岛精机制作所 | 横机的导纱器 |
| TW200808974A (en) * | 2006-08-02 | 2008-02-16 | Ind Tech Res Inst | Luminescence-based recipe |
Family Cites Families (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US3423290A (en) * | 1966-08-03 | 1969-01-21 | Nasa | Lyophilized reaction mixtures |
| US3575811A (en) * | 1968-10-23 | 1971-04-20 | Hazleton Lab Inc | Method for the detection of cancer |
| DE2302721C2 (de) * | 1973-01-19 | 1975-01-23 | Boehringer Mannheim Gmbh, 6800 Mannheim | Verfahren zur Bestimmung der Creatinkinase |
| US4080265A (en) * | 1974-08-02 | 1978-03-21 | Antonik Alan S | Method for the determination of creative phosphokinase enzyme |
| US4001088A (en) * | 1974-08-02 | 1977-01-04 | Antonik Alan S | Method for the determination of creatine phosphokinase enzyme |
| DE2828658C3 (de) * | 1978-06-29 | 1981-10-22 | Lkb-Produkter Ab, Stockholm | Verfahren zur photometrischen Bestimmung der Untereinheit B der Creatinkinase und Reagens hierfür |
-
1979
- 1979-03-02 DE DE19792908054 patent/DE2908054A1/de not_active Withdrawn
-
1980
- 1980-02-19 DE DE8080100825T patent/DE3060087D1/de not_active Expired
- 1980-02-19 AT AT80100825T patent/ATE435T1/de not_active IP Right Cessation
- 1980-02-19 EP EP80100825A patent/EP0015437B1/de not_active Expired
- 1980-02-27 FI FI800578A patent/FI69641C/fi not_active IP Right Cessation
- 1980-02-28 US US06/125,381 patent/US4286057A/en not_active Expired - Lifetime
- 1980-02-29 JP JP55024218A patent/JPS585678B2/ja not_active Expired
-
1981
- 1981-11-04 JP JP56175851A patent/JPS57105199A/ja active Granted
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPS55120796A (en) | 1980-09-17 |
| ATE435T1 (de) | 1981-12-15 |
| DE2908054A1 (de) | 1980-09-11 |
| FI800578A7 (fi) | 1980-09-03 |
| EP0015437A1 (de) | 1980-09-17 |
| JPS585678B2 (ja) | 1983-02-01 |
| JPS615720B2 (fi) | 1986-02-20 |
| DE3060087D1 (en) | 1982-01-28 |
| FI69641B (fi) | 1985-11-29 |
| US4286057A (en) | 1981-08-25 |
| JPS57105199A (en) | 1982-06-30 |
| EP0015437B1 (de) | 1981-11-25 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| FI69641C (fi) | Foerfarande och reagens foer bestaemning av kreatinkinas | |
| JP3409962B2 (ja) | 生物発光試薬及びその試薬を用いたアデノシンリン酸エステルの定量法並びにその試薬を用いたａｔｐ変換反応系に関与する物質の定量法 | |
| RU2054674C1 (ru) | Способ определения концентрации ионов калия в биологическом материале | |
| US4246340A (en) | Method and reagent for bioluminiscence | |
| US4235961A (en) | Method for photometric determination of the subunit B of creatine kinase and a reagent for carrying out the method | |
| EP0034213B1 (en) | A stabilized aqueous coenzyme solution for use in a clinical assay, a method of stabilizing a labile coenzyme in an aqueous clinical assay solution and a kit for use in said clinical assay | |
| GB1512328A (en) | Method and reagent for determining the activity of creatinekinase-mb | |
| US5962248A (en) | Quantitative determination method for chloride ions | |
| Hess et al. | Pyruvate kinase from yeast | |
| US6413733B1 (en) | Stabilized reagent and method for determining creatine kinase | |
| US10472665B2 (en) | Measuring method and composition using kinase | |
| US4247633A (en) | Reagent for colorimetric determination of creative phosphokinase | |
| FR2540137A1 (fr) | Procede tres sensible d'analyse quantitative enzymatique | |
| US5817467A (en) | Method for quantitatively determining creatinine kinase and a reagent therefor | |
| Gruber et al. | Analytical Differentiation of Purine and Pyrimidine Nucleotides Determination of ADP, ATP, and Sum of GTP+ ITP in Biological Material | |
| EP0721986A2 (en) | Creatine kinase reagent | |
| Eu et al. | Homogeneous bioluminescence assay for galactosuria: Interference and kinetic analysis | |
| SU1041568A1 (ru) | Реагент дл определени аденозин-5-трифосфата | |
| CA1175737A (en) | Determination of creatine phosphokinase in body fluids | |
| Chiku et al. | A dithio-coupled kinase and ATPase assay | |
| JPH11196899A (ja) | クレアチンキナーゼ測定のための方法及び試薬 | |
| Munch-Petersen et al. | [118] UDPG pyrophosphorylase from yeast | |
| Min et al. | ADP is produced by firefly luciferase but its synthesis is independent of the light emitting properties | |
| JP3586737B2 (ja) | 生体物質の測定方法 | |
| JP3868214B2 (ja) | 液状カタラーゼの安定化法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM | Patent lapsed | ||
| MM | Patent lapsed |
Owner name: BOEHRINGER MANNHEIM GMBH |