FI64578C - Foerfarande foer framstaellning av nya farmakologiskt aktiva prostaglandin-analoger - Google Patents

Description

-'-Ί Γ η, KUULUTUSJULKAISU

[Β] ί11) UTLÄGGNINCSSKRIFT 64 5 78 C Fr.t:;:;ttl nycnnetty 1Z 1C 1933 *-ÄjVj? (45) Patent cedds lut ^ ^ ^ (51) K*.ik.^nt.a.3 C 07 C 177/00 SUOMI —FINLAND (21) P««nttlh»k*mui — PaMntanrtknlng 760002 (22) Hftkcmiipthrt — Araöknlngidij 05.01.76 ^ ^ ^ (23) AlkupUvft—GUtlghetsdag 05.01.76 (41) Tullut Julkiseksi — Btivlt crffsntllg 2^ 07 76

Patentti- ja rekisterihallitus (44) Nthtivtksiptnon ji kuuLJulkaisun pvm. —

Patent· och registerstyrelsen Ansöksn utlsgd oeh ucl.skrtftM publicersd 31.08.S3 (32)(33)(31) P/ydstty etuoikeus —Begird priority 2U .01.75

Englanti-England(GB) 321+8/75 (71) Gruppo Lepetit S.p.A.* via Durando 38, 20158 Milano, Italia-Italien(IT) (72) Umberto Guzzi, Milano, Romeo Ciabatti, Milano, Italia-Italien(IT) (7I+) Munsterhielm Ky KTb (5I+) Menetelmä uusien farmakologisesti aktiivisten prostaglandiini-analo-gien valmistamiseksi - Förfarande för framställning av nya farmako-logiskt aktiva prostaglandin-analoger Tämä keksintö koskee menetelmää uusien prostaglandiini-tyyppis-ten yhdisteiden valmistamiseksi. Uusilla prostaglandiini-analogeilla on seuraava yleinen kaava:

/ V'·' 2 ^ A ^ CO0R

X L X -R2 (I) 5 l R3 jossa rengas P tarkoittaa jotakin seuraavista ryhmistä: f 9 / Cff" / CH / X. OH \ .CH CH '

ψ' V f' XCH/CX

OH 0H

a b c ί 2 ; 64578 symboli A tarkoittaa ryhmää tai cis-CH=CH-, symboli B tarkoittaa ryhmää -CH2-CH2- tai trans-CH=CH-, R on vety, 1-6 hiiliatomia sisältävä alkyyli tai kationi, on 1-6 hiiliatomia sisältävä alkyyli tai fenyyli, R2 on suoraketjuinen metyyli-, etyyli-, propyyli-, butyyli-, pentyy-li- tai heksyyliradikaali, R3 on vety tai metyyli, R4 on vety tai metyyli, R,. on hydroksi, tai R4 ja R^ muodostavat yhdessä oksoryhmän.

Kaavassa I edellä katkoviivat tarkoittavat sidoksia, jotka ulottuvat paperin tason alapuolelle (o<-konfiguraatio) ja paksut viivat tarkoittavat sidoksia, jotka ulottuvat paperi tason yläpuolelle (/?--konfiguraatio).

Sanonta ”1-6 hiiliatomia sisältävä alkyyli” tarkoittaa, ellei toisin ole määritelty, suora- tai haaraketjuista alkyyliradikaalia, kuten esimerkiksi metyyli, etyyliä, propyyliä, isopropyyliä, butyyliä, isobutyyliä, tert.-butyyliä, pentyyliä tai heksyyliä.

Sanonta "kationi” tarkoittaa farmaseuttisesti hyväksyttävää, myrkytöntä kationia, kuten esimerkiksi Na+ , Ca+ , NH^+ ja orgaanisia ammoniumkationeja.

Uusilla yhdisteillä on prostaglandiini-tyyppinen aktiviteetti, ts. niillä on luteolyyttinen, antihypertensiivinen, keuhkoputkea laajentava ja antisekretorinen vaikutus; joissakin tapauksissa niillä on myös estävä vaikutus luonnollisten prostaglandiinien katabolismiin.

Keksinnön mukaiset yhdisteet valmistetaan seuraavien yleisten menetelmien avulla, joita yleisesti käytetään prostaglandiinikemiassa.

Tämän keksinnön mukaisten uusien tuotteiden valmistamiseksi käytetyt lähtöyhdisteet ovat syklopentaanialdehydejä, joiden kaava on 0RC

. b ^ch2\ /-ch2\

\ > ^C00R

. CHO (11 * f / 3 / 64578 jossa A ja R tarkoittavat samaa kuin edellä, r6 J'a ^7 toisistaan riippumatta tarkoittavat vetyä tai hydroksifunktion suojaryhmää, kuten esimerkiksi 1-6 hiiliatomia sisältävää alempialkyy-liä, alempialkoksi-alempialkyyliä, jossa alempialkoksi- ja alempia 1-kyyliosat sisältävät 1-6 hiiliatomia, trityyliä, tetrahydropyran-2--yyliä, (^--alempialkoksi i-tetrahydropyran-^-yyliä, fenyylikarbamyyliä, bifenylyylikarbamyyliä, terfenylyylikarbamyyliä, tai asyyliradikaalia, j oka on 1) 2-8 hiiliatomia sisältävä alkanoyyli (esim. asetyyli, propionyyli, butyryyli, isobutyryyli, pentanoyyli, pivaloyyli, heksanoyyli, hep-tanoyyli, oktanoyyli), 2) bentsoyyli tai monosubstituoitu bentsoyyli, jossa substituenttina on kloori, bromi, fluori, nitro, karbo(alempialkoksi), alempialkyyli, alempialkoksi, fenyyli-alempialkyyli (jossa"alempialkoksi" ja "alempialkyyli" sisältävät 1-*+ hiiliatomia), fenyyli tai sykloheksyyli, 3) alempialkoksi-karbonyyli, jossa "alempialkoksi" sisältää 1-*+ hiili-atomia ja tarkoittaa myös halogenoituja alempialkoksi-radikaaleja, esim. 2,2,2-trikloorietoksia ja 2,2,2-tribromietoksia, *f) fenoksikarbonyyli, 5) bentsyylioksikarbonyyli ja 6) bifenylyylioksikarbonyyli.

Edellä mainitut lähtöyhdisteet voidaan valmistaa kirjallisuudessa kuvattujen menetelmien mukaisesti. Esimerkiksi DE-hakemusjul-kaisussa 2 217 930 ja BE-patentissa 807 161 on selitetty käyttökelpoisia menetelmiä näiden välituotteiden valmistamiseksi.

Menetelmä uusien prostaglandiini-analogien valmistamiseksi käsittää sen että kaavan II mukainen aldehydi kondensoidaan fosfonaat-ti- tai fosforianylideenireagenssin kanssa jolla on seuraava kaava OR, I 1 Z-C-R0 jossa Z tarkoittaa R3 0 3 &

Il I

ryhmää (R' O^P-CI^^O- tai (C^H^)^P=CH-C- jossa R-^ , R2 , ja R^ ja R^ tarkoittavat samaa kuin edellä ja R' on alempialkyyliryhmä jossa on 1-5 hiiliatomia.

Aldehydi II voidaan valmistaa välittömästi ennen sen saatta-mistä kosketukseen fosforireagenssin kanssa lohkaisemalla vastaava if 64578 asetaali tai vastaava johdannainen jossa karbonyylifunktio on suojattu.

Kaavan II mukaisen aldehydin ja fosfonaatti- tai fosforianyli-deenijohdannaisen välisessä kondensaatiossa saadaan kaavan I mukainen prostaglandiini-tyyppinen yhdiste jossa B on ryhmä -CH=CH- . Käyttämällä edellä mainittuja fosfonaatteja tai stabiloituja fosforianylidee-nijohdannaisia (R^ + = okso) saadaan erittäin spesifisesti vinylee- niryhmä jolla on trans(E)konformaatio kun taas käyttämällä ei-stabi-loituja fosforianylideenijohdannaisia voidaan saada cis(Z)- ja trans(E)-tuotteiden seos. Viimemainitussa tapauksessa voi olla välttämätöntä erottaa cis- ja trans-isomeerien seos kromatografoimalla. Tästä syystä pidetään edullisempana menetelmää jossa käytetään fosfonaatteja. Kun lähtöaine-aldehydissä toinen tai molemmat hydroksisubstituentit asemissa 9 ja 11 ovat suojatut ja suojaryhmä (t) on (ovat) edelleen läsnä lopullisissa kondensaatiotuotteissa, ne voidaan poistaa lohkaisemalla hydrolyyttisesti. Voidaan käyttää happo- tai emäskatalysoitua hydro-lyysiä riippuen suojaryhmien kemiallisesta luonteesta. Eetteri- ja asetaaliryhmät lohkaistaan edullisesti happamasti kun taas esteriryh-mät lohkaistaan mieluimmin hydrolysoimalla laimennetuilla emäksillä tai transesteröimällä.

Kaavan I mukainen yhdiste, jossa B tarkoittaa ryhmää -CH=CH-, voidaan helposti muuttaa vastaavaksi johdannaiseksi, jossa B on ryhmä -CHg-CHg-) hydraamalla vinyleeniryhmä hydrauskatalysaattorin, kuten jalometallin läsnäollessa. Tässä vaiheessa hydrautuu samanaikaisesti vinyleeniryhmä yläketjussa jos A tarkoittaa cis-CH-CH- .

Tuote I, joka saadaan aldehydin II ja forforireagenssin kondensaatiossa ja jossa on oksoryhmä prostaglandiinirungon asemassa 15 (R^ + = okso) voidaan pelkistää vastaavaksi hydroksijohdannaiseksi boorihydridi-tyyppisellä reagenssilla, esim. NaBH:lla, Zn(BH^Ha tai difenyyli-tina-dihydridillä tai litium-trialkyyli-boorihydridillä. Vaihtoehtoisesti voidaan oksoryhmä asemassa 15 muuttaa hydroksiryhmäksi liittämällä samanaikaisesti metyyliryhmä samaan niilikeskukseen Grignard-reagenssin, kuten esimerkiksi magnesiummetyylibromidin avulla.

Kondensaatio aldehydin ja fosforireagenssin välillä suoritetaan pääasiassa samoissa olosuhteissa jotka on laajalti selitetty kemiallisessa kirjallisuudessa koskien prostaglandiinien synteesiä syklopentaanialdehydilähtöaineista ja fosforireagensseista.

Kondensaatioreaktio suoritetaan vedettömän inertin liuottimen, kuten tetrahydrofuraanin, dimetoksietaanln, bentseenin, dioksaanin läsnäollessa 0 - 80° C:sen lämpötilassa.

5 1 64578 ( Ί i Käytettäessä fosfonaattijohdannaista reaktiokomponenttina se muutetaan ensin vastaavaksi anioniksi lisäämällä noin ekvimolaarinen määrä alkalimetallihydridiä. Fosforianylideenireagenssit saadaan puolestaan in situ dehydrohalogenoimalla vastaavat fosfoniumhalogenidit lisäämällä noin ekvimolaarinen määrä litium-alempialkaania tai -al-keenia, kuten butyylilitiumia tai vinyylilitiumia. Kun fosfoniumhalo-genidin alifaattinen ketjuosa sisältää yhden tai kaksi hydroksiryhmää (esimerkiksi = H ja/tai = OH) tarvitaan vastaavasti kaksi tai kolme ekvimolaarista määrää dehydrohalogenointiemästä.

Kaavan I mukaisten tuotteiden alemmassa sivuketjussa voi olla yksi tai kaksi asymmetristä hiiliatomia. Erityisesti kun symboli R^ tarkoittaa hydroksiryhmää, tämän substituentin sisältävä hiiliatomi ja ryhmän OR·^ sisältävä viereinen hiiliatomi ovat asymmetriakeskuksia. Näin ollen voidaan saada neljä isomeeristä kaavan I mukaista yhdistettä jolla kullakin, prostaglandiinirungon vastaavasti substituoiduissa hiiliatomeissa (C·^ ja C-^), on jokin seuraavista absoluuttisten kon-figuraatioiden yhdistelmistä: (R,R), (P,S), (S,R) ja (S,S).

Kun kaavan I mukaisissa yhdisteissä symbolit R^ ja R^ yhdessä tarkoittavat oksoryhmää asemassa 15 mahdollisia isomeerejä on kaksi johtuen atomissa C-^ olevasta asymmetriakeskuksesta.

Eri isomeerit voidaan valmistaa suoraan käyttämällä reagensseja joilla on sopiva konfiguraatio asymmetriakeskuksissa tai käyttämällä stereospesifisiä reaktioita, tai vaihtoehtoisesti kun reaktiokulun aitona stereokemiaa ei voida kontrolloida, isomeerit voidaan erottaa tavallisilla, asiantuntijoille hyvin tunnetuilla menetelmillä, kuten esimerkiksi kromatografoimalla.

Edellä selitetyn menetelmän mukaisesti saadaan F-sarjaan kuuluvia prostaglandiini-tyyppisiä johdannaisia (ts. renkaan P rakenne on a)) suoraan aldehydin II ja fosforireagenssien kondensaatioreaktios-sa. Kaavan I mukaisia A- ja E-sarjoihin kuuluvia prostaglandiini-tyyppisiä johdannaisia (ts. joiden renkaat P vastaavat rakenteeltaan b ja c)) valmistetaan yksinkertaisesti muuttamalla F-sarjan johdannaiset prostaglandiinialalla hyvin tunnettujen kemiallisten menetelmien mukaisesti .

Lähtöaineina käytettävät fosforaanireagenssit valmistetaan kon-densoimalla metyylifosfonihappo-alempialkyyliestereitä o(-substituoi-tujen karboksyylihappo-alempialkyyliestereiden (tai vastaavien happo-kloridien) kanssa seuraavan reaktiokaavion mukaisesti: 64578 ί6 Ο OR. ρ OR, II I 1 II I 1

(R’0)2PCH3 + xoc-c-r2 (r»o)2-p-ch2-co-c-r2 + XH

i3 R3 X = OR" ; Cl jossa R]_ ? R2 > R^ ja R' tarkoittavat samaa kuin edellä ja R" tarkoittaa 1-5 hiiliatomia sisältävää alifaattista radikaalia. Tämä menetelmä käsittää sen että metyylifosfonaatit ensin muutetaan vastaavaksi anio-niksi lisäämällä butyylilitiumia -78°C:sessa tetrahydrofuraanissa, ja saatetaan sen jälkeen kosketukseen karboksyylihappoesterin (tai vastaavan happokloridin) kanssa noin yhden tunnin ajan samassa lämpötilassa.

Fosforaanilähtöaineet valmistetaan vastaavista fosfoniumhalo-genideista jotka puolestaan saadaan saattamalla trifenyylifosfiini reagoimaan sopivan halogenidin kanssa, jonka kaava on

Rlf°Rl halo-CH0-C-C-R0 li R5R3 jossa halo tarkoittaa jodia, klooria tai bromia ja symbolit R^ , R2 , R^ , ja tarkoittavat samaa kuin edellä.

Kun ja R^ yhdessä tarkoittavat oksoryhmää, valmistetaan vastaavat fosforaanireagenssit yksinkertaiseemin asyloimalla metylee-nitrifenyylifosforaania hapon, jonka kaava on OR, HOOC-C-R- R3 alempialkyyliesterillä tai kloridilla, jossa kaavassa R-^ , R2 ja R^ tarkoittavat samaa kuin edellä.

Nämä alifaattiset hapot ja vastaavat esterit ja kloridit valmistetaan kirjallisuudessa tunnettujen menetelmien mukaan, vrt. esimerkiksi E.J. Salmi, Ann. Acad. Sei. Fennicae, A }+8, 17, 1937 (vrt. C.A.

33* 817^) ja V.F. Kucherov, Zhur. Obshchei Khim. 20, 1885, 1950 (C.*. iti, 2928).

Keksintöä havainnollistetaan seuraavilla ei-rajoittavilla esimerkeillä.

7 64578

Esimerkki 1 (esimerkin 2 lähtöaine) 9c^-asetoksi-ll'^-hydroksi-l6-metoksi-l5-okso-prosta-5(Z),13 (E)--dieeni-l-happo-metyyliesteri (16R- ja l6S-isomeerit) A) 1,3 g GOmmoolia) natriumhydridin 55 $:sta mineraaliöljysus-pensiota pestään typpiatmosfäärissä heksaanilla ja sen jälkeen siihen lisätään 20 ml vedetöntä dimetoksietaania. Tähän suspensioon lisätään noin 0°C:sen lämpötilassa 8 g (32 mmoolia) (3-metoksi-2-okso-heptyyli)--fosfonihapon dimetyyliesteriä liuotettuna 50 mitään vedetöntä dimetoksietaania. Annetaan seistä 15 minuuttia huoneen lämpötilassa, minkä jälkeen seos jäähdytetään 0°C:seen ja lisätään 6,2*+ g 7- (5t>(-asetoksi--2^/? -f ormyyli-3o< -hydroksi sykiopent-lc^-yyli) -5 (Z) -hepteeni-l-hapon metyyliesteriä (20 mmoolia) liuotettuna 100 mitään vedetöntä dimetoksietaania. Lämpötilan annetaan sitten nousta noin 20°Ctseen ja seosta hämmennetään neljä tuntia. Reaktioseos kaadetaan sitten Nal^PO^rllä kyllästettyyn vesiliuokseen ja uutetaan sitten etyyliasetaatilla. Orgaaninen uute haihdutetaan, jolloin saadaan lU-, 1 g raakaa tuotetta, joka sisältää kaksi komponenttia. Molemmat tuotteet, jotka ovat R-ja S-isomeereja aseman 16 suhteen erotetaan preparatiivisella ohutker-roskromatografiällä aluoimalla ensin etyylieetteri/heksaanilla 7:3 ja sitten etyylieetteri/heksaanilla 85:15· Tällä tavalla saadaan 1,38 g vähemmän polaarista isomeeriä ja 1,^-10 g polaarisempaa isomeeriä.

Vähemmän polaarinen isomeeri on öljymäinen tuote, jolla on seuraavat fysikaaliset tunnusmerkit: = + 85Λ (c = 0,985 % CHCl^:ssa UV-absorptiospektri metanolissa: Λ maks (mji) 238 , E^m = 267 IR-absorptiospektri sekoittamaton: tärkeimmät absorptiojuovat seuraa-villa taajuuksilla (cm-1) : 3*f00, 2910, 2860, 17*K>, 1700 (terävä), 1625, lMfO, 1370, 12*+0, 1100.

NMR-spektri: tärkeimmät absorptiopiikit CDCl^tssa seuraavilla taajuuksilla <5-yksikköinä: 0,88; 1,08-2,88; 2,03; 3,30; 3,6*f; 3,67; 3,83-^,32; Μ8-5Λ5; 6,50; 6,90.

Mikroanalyyttiset arvot vastaavat kaavaa ¢21+^38^7 .

Polaarisempi isomeeri on öljymäinen tuote, jolla on seuraavat fysikaaliset tunnusmerkit: >—,20 W = +19,8 (c = 1,05 CHCl.rssa)

D J

8 64578 UV-absorptiospektri metanolissa: maks (ταμ) 238 , Eicm = IR-absorptiospektri(sekoittamaton): tärkeimmät absorptiojuovat seuraa-villa taajuuksilla (cm-1): 3>+50 , 2920 , 2860, 1730, 1700 (terävä), 1620, l>+35, 1370, 1320, 12^+0, 1100, 10^+0, 985.

NMR-spetri: tärkeimmät absorptiopiikit CDCl^issa seuraavilla taajuuksilla s -yksikköinä: 0,88; 1,07-2,81+; 2,05; 3,30; 3,63; 3,67; 3,8^,28; *+,98-5Λ5$ 6,50; 6,90.

Mikroanalyyttiset arvot vastaavat kaavaa ^2^38^7' B) Lähtöaineena käytetty 7~(5<=^-asetoksi-2^!?-formyyli-3o^--hydroksi-syklopent-lo(-yyli)-5(Z)-hepteeni-l-hapon raaka metyyliesteri valmistetaan BE-patentissa 807 l6l läheiselle analogille, 7-^5^-0+--fenyyli-bentsoyylioksi )-2β-formyyli-3^-hydroksi-syklopent-lo(-yylj] --5(Z)-hepteeni-l-happo-metyyliesterille, selitetyn menetelmän mukaisesti, ainoa ero on että syklopentaanirenkaan 5 o(.-hydr oksi ryhmän asy-lointi tapahtuu asetyylikloridilla eikä ^-fenyylibentsoyylikloridilla.

Vastaava lähtöaine josta edellä mainittu lähtöaine saadaan hydrolysoimalla 60 %i sella etikkahapolla on 7~ ^5c^-asetoksi-2^/3-dimetoksi-metyyli-3o(- (tetrahydropyran-2-yylioksi J-syklopent-l^-yylQ^ (Z)--hepteeni-l-hapon metyyliesteri, joka· on öljy, jolla on seuraavat fysikaaliset tunnusmerkit: r _ 20 = + 26,5 Cc = 1,02 % CHCly ssa) IR-absorptiospektri (sekoittamaton): tärkeimmät absorptiojuovat seuraavilla taajuuksilla (cm ^): 2900, 2850, 1730, 1^35, 13 6 5, 12*+0, 1120, 1080-10^+0, 1020, 870.

NMR-spektri: tärkeimmät absorptiopiikit CDCl^ssa seuraavilla taajuuksilla S -yksikköinä: 1,2b-2,1+8; 2,02 ja 2,03; 3,22-1+,¥+5 3,l+o ja 3,*+2; ^,5^,75; >+,90-5,20; 5,22-5,51.

Mikroanalyyttiset arvot vastaavat kaavaa CggH-^gOg*

Esimerkki 2 9^,11 r^,l5-trihydroksi-l6-metoksi-prosta-5 (Z) ,13 (E)-dieeni-l--hapot jj.someerit: (15S,l6S), (l5S,l6R), (15R,16S) ja (15R,16R) 9 64578 A) Liuokseen, jossa on 1,3 g esimerkin 1 mukaan saatua polea-risempaa C-^-isomeeria (ts. yhdistettä jonka Jj-y] ^ = + 19,8) 150 ml:ssa metanolia, lisätään tipoittain -10°C:sessa 300 mg NaBH^iää 15 mlrssa jäävettä. Reaktioseosta hämmennetään -10°C:sessa kunnes reaktio on tapahtunut täydellisesti (reaktion kulkua seurataan ohutkerroskromato-graafisesti) ja kaadetaan sitten kyllästettyyn Nai^PO^-liuokseen. Uuttamalla etyyliasetaatilla ja haihduttamalla orgaaninen uute saadaan 1,15 g isomeeristen 9o^-asetoksi-llo<,l5-dihydroksi-l6-metoksi-prosta--5(Z),13(E)-dieeni-l-happojen metyyliestereiden seosta, joilla yhdisteillä on sama absoluuttinen konfiguraatio asemassa 16 ja päinvastainen absoluuttinen konfiguraatio asemassa 15· NMR-spektri ja mikroana-lyyttiset arvot vastaavat tätä rakennetta.

Saatu tuote liuotetaan ^6 ml:aan metanolia yhdessä 30 ml:n kanssa vettä. Sen jälkeen siihen lisätään liuos, jossa on 2,1 g KOHrta 30 ml:ssa 50 $:sta metanolia ja seosta hämmennetään yksi tunti huoneen lämpötilassa minkä ajan jälkeen reaktio on yleensä päättynyt.

Reaktioseokseen lisätään kyllästettyä NaH^O^-liuosta ja uutetaan etyyliasetaatilla. Orgaaninen faasi haihdutetaan tyhjössä jolloin saadaan 1 g tuotetta joka koostuu vastaavien prostaanihappojen isomeeriseoksesta, joka kromatografoidaan happopestyn piihappogeeli-pylvään läpi. Eluoimalla etyylieetteri/heksaanilla saadaan molempia isomeerituotteita käytännöllisesti katsoen puhtaassa muodossa.

Ensin eluoitu tuote (530 mg) on öljy jolla on seuraavat fysikaaliset tunnusmerkit: r ti 20 - + 7,6 (c = 0,92# CHClyssa) IR-absorptiospektri (CHCl-,:ssa): tärkeimmät absorptiojuovat seuraa- -l 3 villa taajuuksilla (cm ): 3580, 3500, 2960, 2935, 2870, 2830, 22»+0 (kompleksinen CDCl^-tuote), 1710 (leveä), 1600, l>+52, l*+05, 12^0 (leveä), 1090, 10^0, 970* NMR-spektri: tärkeimmät absorptiopiikit CDCl^ssa seuraavilla taajuuksilla § -yksikköinä: 0,88; 1,12-2,57? 2,8*f-3,29; 3,^0; 3,80-1+,32; · 5,21-5,70.

Toisena eluoitu tuote (200 mg) on öljy, jolla on seuraavat fysikaaliset tunnusmerkit: = + 31,2 (c= 1,05 % CHCl3:ssa) 10 64578 NMR-spektri: tärkeimmät absorptiopiikit CDClyssa seuraavilla taajuuksilla 3-yksikköinä: 0,88; 1,13-2,62; 3,01+-3,37; 3,*+0; 3,72->+,35; i+,8i+; 5,21-5,70.

B) Työskentelemällä samalla tavalla kuin edellä l,35g esimerkin 1 mukaan saatua vähemmän polaarista C^^-isomeeria (ts. tuotetta jonka r -|20 \_°ö = + ^5,*+) pelkistetään NaBH^_:llä ja hydrolysoidaan sitten K0H:lla 50 $:sessa metanolissa, jolloin saadaan 920 mg molempien vastaavien isomeeristen prostaanihappojen seosta, joilla on päinvastainen konfiguraatio ^-atomissa.

Ensin eluoitu tuote (300 mg) on öljy, jolla on seuraavat fysikaaliset tunnusmerkit: 1¾ = + 16,2 (c = 1,85 % CHCl^:ssa) NMR-rspektri: tärkeimmät absorptiopiikit CDClyssa seuraavilla taajuuksilla S -yksikköinä: 0,88; 1,11-2,63; 3,0^-3,375 3Λ0; 3,72-^+,35; ^86; 5,21-5,70.

Toinen eluoitu tuote (200 mg) on öljy, jolla on seuraavat fysikaaliset tunnusmerkit: \οΠ = +31,7 (c = 1,26 % CHCl,:ssa) u -iD o NMR-spektri: tärkeimmät absorptiopiikit CDCl^:ssa seuraavilla taajuuksilla S-yksikköinä: 0,88; 1,11-2,63; 3,0^-3,375 3Λ0; 3,72-»+,35; »+,86; 5,21-5,70.

Kaikkien neljän isomeerin mikroanalyyttiset arvot vastaavat teoreettista kaavaa: ^21^36^6 *

Esimerkki 3 (esimerkin ·+ lähtöaine) 9olk-asetoksi-llr^-hydroksi-l6-metoksi-l5-okso-prost-13 (E)-eeni--1-happo-metyyliesteri (16R- ja l6S-isomeerit) A) 2 g 7"\^°<‘_asetoksi-2^?-formyyli-3 o(- (hydroksi)-syklopent--lo(-yylij-hepteeni-l-hapon metyyliesteriä saatetaan reagoimaan (3--metoksi-2-okso-heptyyli)-fosfonihapon dimetyyliesterin anionin kanssa käyttämällä esimerkin 1 kohdasssa A selitettyä menetelmää.

Molemmat isomeerit asemassa 16 erotetaan preparatiivisella ohutkerroskromatografialla piihappogeelilevyillä käyttämällä samaa eluointisysteemiä kuin esimerkissä 1. Otsikoidun tuotteen vähemmän polaarinen C^-isomeeri on öljymäinen tuote, jolla on seuraavat tun- 11 64578 nusmerkit: Γ ~Ί 20 = + 69 (c = l,Ob% CHCIt : ssa)

L I d J

IR-absorptiospektri (pelkkä): tärkeimmät absorptiojuovat seuraavilla taajuuksilla (cm-·'"): 3Mt0 (leveä), 2920 , 2850 , 2820, 17>+0, 1695, 1625, Mo, lkkO, 1375, 12^-0 (leveä), 1170, 1120, 1100, 1030, 980.

NMR-spektri: tärkeimmät absorptiopiikit CDCl^ssa seuraavilla taajuuksilla S -yksikköinä: 0,9; 2,10; 3Λ8; 3,70; 3,7**; 3,90-^-,36; 5,12-5Λ5; 6,6; 7,0if.

Polaarisempi C-^-isomeeri on öljymäinen tuote, jolla on seu-raavat tunnusmerkit: j— —(20 = + 8,3 (c = 1,07 % CHCl^ssa) IR- ja NMR-spektreissä ei ole mitään huomattavia eroja verrattuna vähemmän polaarisen C^-isomeerin spektreihin.

B) 7- [5^-asetoksi-2^3 -dimetoksimetyyli-3°( - (tetrahydropyran--2-yylioksi)-syklopent-lo(-yylT| -5(Z)-hepteeni-l-hapon metyyliesteri valmistetaan BE-patentissa 807 161,vastaavalle 5°^-0·*—fenyylibentsyy-lioksi)-homologille selitetyn menetelmän mukaan käyttämällä asetyyli-kloridia ^--fenyylibentsoyylikloridin asemasta, vrt. esimerkin 1 kohtaa B.

32 g edellä mainittua tuotetta hydrataan *+ litrassa etyyliasetaattia atmosfääripaineessa ja huoneen lämpötilassa käyttämällä mukana 10 g 5 #:sta Pd-hiiltä katalysaattorina. Liuottimen pois-haihduttamisen jälkeen saadaan 32 g 7-[5o(-asetoksi-2/3-dimetoksimetyy-li-3°(-(tetrahydropyran-2-yylioksi)-syklopent-l o^-yylij-heptaani-l--hapon metyyliesteriä: Tämä tuote, jonka = + 3*+,3 (c = 1, 95 % CHClyssa) muutetaan kuumentamalla höyryhauteella 30 minuuttia 60 %isen etikkahapon kanssa 7-jj>o(-asetoksi-2^-formyyli-3(hydroksi)-syklo-penti-lc^-yylij-heptaani-l-hapoksi, jota käytetään kondensaatiovai-heessa ilman enempää puhdistamista.

Esimerkki *f 9 o(,llo(,l5-trihydroksi-l6-metoksi-prost-13 (E)-eeni-l-happo--metyyliesteri jisomeerit (15S,16S); (15S,16R); (15R,16S) ja (15R,16R) A) Esimerkin 3 kohdan A) mukaisesti saatu polaarisempi C,

*· .—« pA

-isomeeri (ts. tuote jonka ^ = + 8,3) pelkistetään NaBH^llä 12 64578 esimerkin 2 kohdan A) selitetyn menetelmän mukaisesti. Saatu 9c?<-ese-taattijohdannainen hydrolysoidaan osittain K^CO-^-metanolilla otsikossa mainittujen isomeeristen estereiden seoksen muodostamiseksi joilla isomeereillä on sama absoluuttinen konfiguraatio C-^.ssa ja päinvastainen absoluuttinen konfiguraatio Olissa.

Molemmat ^-isomeerit erotetaan preparatiivisella ohutkerros-kromatografiällä työskentelemällä vastaavalla tavalla kuin esimerkin 2 kohdassa A, ja niillä on seuraavat tunnusmerkit: a) vähemmän polaarinen tuote (öljy): j— —r 20 L U = + 6,1 (C = 1Λ7 % CHCl^ssa) IR-absorptiospektri (pelkkä): tärkeimmät absorptiojuovat seuraavilla taajuuksilla (cm-'1'): 3500 (leveä), 2920, 2855, 1755, 1670, 1560, 1550, 1260 (leveä), 1200, 1175, 1095 (leveä), 1030, 970.

NMR-spektri: tärkeimmät absorptiopiikit CDCl^:ssa seuraavilla taajuuksilla δ-yksikköinä: 0,91-1,12; 2,81+; 2,90; 3,35-3,56; 3,68-3,80; 5,50; 5,52-5,78. ' b) polaarisempi tuote (öljy): r 20 = + 19,3 (c = l,8l % CHCl··^: ssä) IR-absorptiospektri (pelkkä): tärkeimmät absorptiojuovat seuraavilla taajuuksilla (cm-1): 3380 (leveä), 2920, 2850, 1750, 1670, 1560, 1550, 1260, 1190, 1170, 1090, 1025, 970, 800.

MR-spektri: tärkeimmät absorptiopiikit CDCl^ssa seuraavilla taajuuksilla S-yksikköinä: 0,91-1,12; 2,90; 2,95; 3,35-3,57; 3,68-3,85; 5,38; 5,53-5,75.

B) Esimerkissä 3, kohdassa A saatu vähemmän polaarinen C^-r —! 20 -isomeeri ( = + 69) pelkistetään NaBH^llä ja hydrolysoidaan sitten osittain I^CO^lla metanolissa sellaisten isomeeristen prostaa-niestereiden seoksen muodostamiseksi, joilla on sama absoluuttinen konfiguraatio C^-atomissa ja päinvastainen absoluuttinen konfiguraatio Cf^-atomissa.

Molemmat isomeerit erotetaan preparatiivisella ohutkerroskro-matografiällä ja niillä on seuraavat tunnusmerkit: c) vähemmän polaarinen tuote (öljy): 13 64578 Γ Ti20 =+ 13,5 (c = 0,96 % CHCIt:ssa) K · d ·* d) polaarisempi tuote (öljy): Γ -1 20

o/ = + 19,7 (c = 0,66 % CHCl-j: ssa) u D J

Näillä kahdella isomeerillä on samat IR- ja NMR-spektrit kuin kahdella kohdassa A selitetyllä isomeerillä.

Esimerkki 5 (esimerkin 6 lähtöaine) 9°^-asetoksi-llr^-hydroksi-l6-fenoksi-l5~okso-prosta-5 (Z),13 (E)- -dieeni-l-happo-metyyliesteri (16R- ja l6S-isomeerit)

Esimerkissä 1 kuvatun menetelmän mukaisesti mutta käyttämällä (3-fenoksi-2-okso-heptyyli)-fosfonihapon dimetyyliesteriä (3-metoksi- -2-okso-heptyyli)-fosfonihapon dimetyyliesterin asemesta, saadaan 9^- -asetoksi-llo( -hydroksi-16-fenoksi-l5-okso-prosta-5(Z),13(E)-dieeni-l- -hapon metyyliesteriä (16r- ja l6S-isomeerit) 65 %:n saantona.Tässä tapauksessa ei molempia isomeerejä eroteta.

Isomeeriseoksella on seuraavat tunnusmerkit: NMR-spektri: tärkeimmät ahsorptiopiikit CDCl^rssa seuraavilla taajuuksilla & -yksikköinä: 0,9; 2,05; 3,70; 3,8-^,3; ^,6^+; 5,1-5,5; 6,66; 6,8-7,6.

Mikroanalyyttiset arvot vastaavat kaavaa 02^11^0^ .

Esimerkki 6 9 oi,Ilot ,l5-trihydroksi-l6-fenoksi-prosta-5 (Z) ,13 (E)-dieeni--1-happojen metyyliesterit jjLsomeerit: (15S, 16S ja 16R) ja.

(15R, 16S ja 16r3J

Esimerkissä 2 kuvatulla tavalla pelkistetään esimerkissä 5 saatu 9 ^-a set oksi-11 a^-hydroksi-l6-fenoksi-l5-okso-prosta-5 (Z) ,13 (E) - -dieeni-l-happo-metyyliesteri (C-^-isomeerien seos, 10 g) NaBH^.'lla -78°C:sessa. Neljän isomeerisen 9c^-asetoksi-llo(,l5-dihydroksi-l6--fenoksi-prosta-5(Z),13(E)-dieeni-l-happometyyli-esterin seoksesta koostuva tuote kromatografoidaan piihappogeelipylvään läpi. Eluoimal-la etyylieetteri/heksaanilla saadaan kaksi isomeeristen tuotteiden seosta. Kumpikin näistä kahdesta seoksesta koostuu kahdesta tuotteesta, joilla on samat absoluuttiset konfiguraatiot C-^ssa ja päinvastaiset absoluuttiset konfiguraatiot C-^ssa.

Ensimmäisenä eluoitu seos (*f,3 g) on öljy, jolla on seuraavat tunnusmerkit: NMR-spektri: tärkeimmät ahsorptiopiikit CDCl^ssa seuraavilla taajuuksilla rS -yksikköinä: lif 64578 2,0Μ·; 3,67; 3,7-*+Λ; 5,0-5,8, 6,8-7,5-

Toisena eluoitu seos (2,5 g) on öljy, jolla on seuraavat tunnusmerkit: NMR-spektri: tärkeimmät absorptiopiikit CDCl^ssa seuraavilla taajuuksilla A -yksikköinä: 2,0i+; 3,67; 3,7-*+Λ; 5,0-5,8; 6,8-7,5- Nämä molemmat seokset hydrataan erikseen molemmiksi otsikossa mainituiksi yhdisteiksi liuottamalla ne 160, vastaavasti 80 ml:aan meta-nolia ja lisäämällä 3,2, vastaavasti 1,6 g KgOO-^ia ja antamalla seoksen seistä noin 20 tuntia huoneen lämpötilassa. Neutraloidaan reaktio-seos NaHgPO^n kyllästetyillä vesiliuoksilla ja uutetaan etyyliasetaatilla, jolloin saadaan otsikossa mainittuja yhdisteitä haihduttamalla.

Vähemmän polaarinen seos (3,7 g) on öljy, jolla on seuraavat tunnusmerkit: NMR-spektri: tärkeimmät absorptiopiikit CDCl^tssa seuraavilla taajuuksilla A -yksikköinä: 3,68; 3,8-*+,>+; 5,3-5,8; 6,8-7,5-

Polaarisempi seos (1,9 g) on öljy, jolla on seuraavat tunnusmerkit: NMR-spektri: tärkeimmät absorptiopiikit CDCl^:ssa seuraavilla taajuuksilla A -yksikköinä: 3,65? 3,7-^,- 5,2-5,8; 6,8-7,5-Esimerkki 7 (esimerkin 8 lähtöaine) 9o(-asetoksi-llo(>-hydroksi-l6-metoksi-l6-metyyli-l5-okso-prosta--5(2),13(S)-dieeni-l-happometyyliesterit (16R- ja l6S-isomeerit) Molemmat otsikossa mainitut tuotteet saadaan esimerkissä 1 kuvatulla tavalla käyttämällä 1,2 g NaH:ta (55 $:nen suspensio mineraaliöljyssä) 60 ml:ssa dimetoksietaania, 8,65 g (3-metyyli-3~metoksi--2-okso-heptyyli)-fosfonihapon dimetyyliesteriä 60 ml:ssa dimetoksietaania ja 5 g 7-(5ol-asetoksi-2/3-formyyli-3°(-hydroksi-syklopent--lo(-yyli )-5 (z)-hepteeni-l-happo-metyyliesteriä U-5 ml:ssa dimetoksietaania.

Molemmat tuotteet ovat R- ja S-isomeereja atomissa C-^ ja ne erotetaan esimerkissä 1 kuvatulla tavalla.

Vähemmän polaarinen isomeeri (2,5 g) on öljy, jolla on seuraavat tunnusmerkit: r —t 20 \y\ = + 58,7 (C = 0,98 l CHCl.:ssa) D -3 1 !5 / 64578 NMR-spektri: tärkeimmät absorptiopiikit CDCl^tssa seuraavilla taajuuksilla ^ -yksikköinä: 1,28; 2,06; 3,20; 3,67; 3,8-»+,3; 5,0-5,5; 6,7-7,0.

Polaarisempi tuote on öljy, jolla on seuraavat tunnusmerkit: Γ 71 20 \ rt = + 26,8 (C = 0,86% CHOI·,: ssa) L. - D -5 NMR-spektri: tärkeimmät absorptiopiikit CDCl^:ssa seuraavilla taajuuksilla ^ -yksikköinä: 1,28; 2,06; 3,18; 3,66; 3,8-*f,3? 5,0-5,5; 6,6-6,70.

Esimerkki 8 ,ll°i ,l5-trihydroksi-l6-metoksi-l6-metyyli-prosta-5 (Z) ,13 (E)--dieeni-l-happo-metyyliesterit ^isomeerit: (15S,16S), (15R,16S), (15R,16R), (15S,16R) A) 2,31 g esimerkin 7 mukaisesti saatua polaarisempaa tuotetta 7 "'"l (jo{| = + 26,8) pelkistetään NaBH^llä ja otsikossa mainittujen yhdis- teidefi molempien 9o(-asetaatti-välituotteiden kromatograafisen erottamisen jälkeen hydrolysoidaan osittain esimerkissä 6 kuvatulla tavalla.

Molemmat saadut tuotteet ovat diastereoisomeerisia 9^,11^,15--trihydroksi-l6-metoksi-l6-metyyli-prosta-5(Z),13(E)-dieeni-l-happo--metyyliestereitä, joilla on samat absoluuttiset konfiguraatiot C-^ssa ja päinvastaiset absoluuttiset konfiguraatiot C^:ssa. Molemmat tuotteet puhdistetaan kromatografoimalla happopestyn piihappogeelipylvään läpi eluoimalla etyylieetteri/heksaanilla.

Vähemmän polaarinen tuote (310 mg) on öljy, jolla on seuraavat tunnusmerkit: NMR-spektri: tärkeimmät absorptiopiikit CDCl^:ssa seuraavilla taajuuksilla £-yksikköinä: 1,07; 3,23; 3,67; 3,8-*f,3; 5,2-5,7- r” ~i 20

\^l\ = + 6,h (C = 2,67 % CHCIO

L D °

Polaarisempi tuote (220 mg) on öljy, jolla on seuraavat tunnusmerkit: X —r 20 lofj = + 50 (0,8 % CHC1 ) U ' d o NMR-spektri: tärkeimmät absorptiopiikit CDCl^:ssa seuraavilla taajuuksilla £ -yksikköinä: 1,07; 3,23; 3,68; 3,8-*+,3; 5,2-5,65- 16 64578 B) Työskentelemällä edellä kohdassa A) vastaavasti, mutta käyttämällä lähtöaineena 1,5 g esimerkin 7 mukaisesti saatua vähemmän po- -I 20 laarista tuotetta ( = + 58,7) saadaan seuraavat kaksi diastereo-

' D

isomeeristä yhdistettä joilla on sama absoluuttinen konfiguraatio ^I6'ssa *^a Päinvastainen absoluuttinen konfiguraatio C-^:ssa.

Vähemmän polaarinen tuote on öljy, jolla on seuraavat tunnusmerkit: NMR-spektri: tärkeimmät absorptiopiikit CDCl-^rssa seuraa villa taajuuksilla S -yksikköinä: 1,12; 3,25; 3,67; 3,8-^,3; 5,3-5,8.

r —t 20 L°y = 9,9 (c = 2,2% CHClO D -3

Polaarisempi tuote on öljy, jolla on seuraavat tunnusmerkit: NMR-spektri: tärkeimmät absorptiopiikit CDClySsa seuraavilla taajuuksilla -yksikköinä: 1,1; 3,25; 3,68; 3,8-^,3; 5,3-5,8.

Lei] = + 23,3 (C = 1,33 % CHCl.) D 0

Esimerkki 9 llo( ,l5-dihydroksi-l6-metoksi-9-okso-prosta-5(Z),13(E)-dieeni--1-hapot ja metyyliesterit ^isomeerit: (15S,16S), (15R,16S), (15S,16R), (15R,16rT| A) 11,10 g isomeeristen 90(-asetoksi-l·lcsί,,l5-dihydroksi-16--metoksi-prosta-5(Z) ,13 (E)-dieeni-l-happo-metyyliestereiden seosta (saatu esimerkin 1 kohtaa A vastaavasti) liuotettuna 600 ml:aan bent-seeniä ja kuivattu atseotrooppisesti tislaamalla käsitellään 7.2 mltlla 3,^-dihydro-2H-pyraania ja 102 mg:lla vedetöntä p-tolueenisulfonihap-poa. 35 minuutin kuluttua reaktioseos neutraloidaan NaHCO^tn liuoksella ja uutetaan etyylieetterillä. Orgaaninen uute haihdutetaan jolloin saadaan 1*+ g vastaavaa 1115-bis-tetrahydropyranyylieetteriä. 8,^+6 g:aan tätä viimemainittua yhdistettä liuotettuna 150 ml:aan metanolia ja 100 ml:aan vettä lisätään liuos, jossa on 21 g K0H:ta 100 ml:ssa 80 $:sta metanolia ja seosta hämmennetään kaksi tuntia huoneen lämpötilassa. Reaktioseokseen lisätään kyllästetty Ν3Η2Ρ0^-1ΐηθ3 joka sen jälkeen uutetaan etyyliasetaatilla. Orgaaninen faasi haihdutetaan tyhjössä, jolloin saadaan 6,5 g llol,l5-bis- |ctetrahydro-2H-pyran-2--yyli)-oks7j -9-hydroksi-l6-metoksi-prosta-5(Z),13(E)-dieeni-l-happon.

( 17 f 64578 f /

Yhdiste on öljy, jolla en seuraavat tunnusmerkit: NMR-spektri: tärkeimmät absorptropiikit CDCl^:ssa seuraavilla taajuuksilla S -yksikköinä: !,*+-!,9; 3,1-*+, 5; *+,7-5,0; 5,3-5,8; 3,*+0-3,*+l; 3,*+*+-3,*+8.

22 g:aan Collins-reagenssia (Py2Cr02) liuotettuna *+00 ml:aan vedetöntä metyleenikloridia lisätään 20 g celite'ä ja edellä selitetyn yhdisteen liuos (6,5 g liuotettuna 100 ml:aan vedetöntä metyleenikloridia).

Reaktioseosta hämmennetään huoneen lämpötilassa 30 minuuttia minkä ajan jälkeen reaktio on yleensä päättynyt. Reaktioseos kaadetaan litraan etyylieetteriä ja suodatetaan ja pestään vedellä.

Orgaaninen faasi väkevöidään kuiviin tyhjössä. Öljymäinen jäännös kromatografoidaan piihappogeelipylVäässä eluoimalla etyylieetteri/ heksaanilla käyttäen suurenevia määriä etyylieetteriä jolloin saadaan 3,*+ g 11^ ,15-Ms- jjtetrahydro-2H-pyran-2-yyli )-oksi]-9-oksa-l6-metok-si-prosta-5 (Z),13(E)-dieeni-l-happoa.

1,650 g tätä viimemainittua yhdistettä liuotetaan 250 ml:aan etikkahappo/vesi/tetrahydrofuraanin liuokseen (19:11:3)· Reaktioseosta kuumennetaan l+0°C:sessa 2*+ tuntia minkä ajan jälkeen reaktio on yleensä päättynyt. Reaktioseos kyllästetään lisäämällä NaCl:ää ja uutetaan etyyliasetaatilla. Orgaaninen faasi pestään vedellä, kuivataan ja väkevöidään sitten tyhjössä, jolloin saadaan 1,*+ g 15-asemaan nähden diastereoisomeeristen yhdisteiden seosta.

Näin saatu vastaavien diastereoisomeeristen prostaanihappojen seos kromatografoidaan happopestyn piihappogeelipylvään läpi eluoimalla etyylieetteri/heksaanilla käyttäen yhä suurempia määriä etyylieetteriä, jolloin saadaan kaksi neljästä otsikossa mainitusta isomeerisestä haposta käytännöllisesti katsoen puhtaassa muodossa. Näillä hapoilla on sama absoluuttinen konfiguraatio asemassa C-^ ja päinvastainen absoluuttinen konfiguraatio asemassa C-^.

Ensimmäisenä eluoitu tuote (630 mg) on öljy, jolla on seuraa-vat fysikaaliset tunnusmerkit: r—(20 joi = 77,9 (C = 0,77 % CHCIt:ssa) I--o -5 NMR-spektri: tärkeimmät absorptiopiikit CHCl^:ssa seuraavilla taajuuksilla -yksikköinä: 3,*+3; 3,9-*+,*+; 5,3-5,5; 5,6-5,8; 5,2-5,6 18 64578 IR-absorptiospektri (liuos CDCl^rssa): tärkeimmät absorptiojuovat seu-raavilla taajuuksilla (cm ^): 3^00 , 3005 , 2955, 2930, 2870, 2660, 22*tO, 17UO, 1710, 1600, l*+55, l*+05, 121+0, II50, 1090, 970.

Toisena eluoitu tuote (300 mg) on öljy, jolla on seuraavat tunnusmerkit: 71 20 ^1 = - lf6 (c = 0,93# CHCl7:ssa)

D J

NMR-spektri: tärkeimmät absorptiopiikit CDCl^:ssa seuraavilla taajuuksilla ^ -yksikköinä: 3Λ7; 3,8-ΐ+Λ; 5,3-5,5; 5,6-5,8,- 5,2-5,6 IR-absorptiospektri (liuos CDCl^ssa): tärkeimmät absorptiojuovat seu- -1 2 raavilla taajuuksilla (cm ): 3380, 3010, 2955, 2930, 2870 , 2660 , 221+0, 17Ϊ+7, 1715, 1610, 1510, 11+55, 11+10, 1265, 121+0, 1155, 1090, 970.

B) 1,35 g isomeeristen 9o(.-asetoksi-llo(,l5-dihydroksi-l6--metoksi-prosta-5(Z),13 (E)-dieeni-l-happo-metyyliestereiden seosta, joka on saatu pelkistämällä NaBH^rllä esimerkin 1 vähemmän polaarinen C^-isomeeri (vrt. myös esimerkin 2 vaihetta B), muutetaan vastaavaksi Hoi, 15-bis-tetrahydropyranyylieetteriksi käyttämällä edellä kohdassa A selitettyä menetelmää.

1,30 g llo<,i5-bis-tetrahydropyranyylieetteriä liuotetaan 50 ml:aan vedetöntä metanolla ja sen jälkeen lisätään 800 mg vedetöntä K^CO^ta. Reaktioseosta hämmennetään huoneen lämpötilassa 2l+ tuntia minkä ajan jälkeen reaktio on yleensä päättynyt. Reaktioseos neutraloidaan lisäämällä vahvasti hapanta hartsia joka poistetaan yksinkertaisesti suodattamalla. Suodos väkevöidään tyhjössä kuiviin, jolloin saadaan 1,18 g molempien diastereoisomeeristen 9°^-hydroksi-lloi, ,15--bis- j(tetrahydro-2H-pyran-2-yyli)-oksiJ -9-oksa-l6-metoksi-prosta--5(Z),13(E)-dieeni-l-happo-metyyliestereiden seosta. Kohdassa A selitettyä menetelmää vastaavasti saatu seos muutetaan molempien diastereoisomeeristen llo(,15-dihydroksi-l6-metoksi-9-oksa-prosta-5(Z),13(E)--dieeni-l-happo-metyyliestereiden seokseksi. Näillä estereillä on sama absoluuttinen konfiguraatio asemassa C-^ (joka on päinvastainen verrattuna molempiin kohdassa A saatuihin happoihin) ja päinvastainen absoluuttinen konfiguraatio asemassa C-^ . Diastereoisomeeristen es-tereiden seos kromatografoidaan (kuten kohdassa A on selitetty molemmille C-^-isomeerisille hapoille) jolloin saadaan molempia tuotteita käytännöllisesti katsoen puhtaassa muodossa.

ίο / 64578

Ensimmäisenä eluoitu österi on öljy, jolla on seuraavat tunnusmerkit: r20 = - 85 (C = 0,82$ CHC13) NMR-spektri: tärkeimmät absorptiopiikit CDCl^rssa seuraavilla taajuuksilla -yksikköinä: 3Λ7; 3,72; 3,8-*+,5; 5,3-5,6; 5,7-5,9.

IR-absorptiospektri (CDdU liuos): tärkeimmät absorptiojuovat seuraa-villa taajuuksilla (cm ): 3^70, 3005, 2950 , 2925, 2870, 221+0, i7*+0, 1600, 1^55, 1^38, 1^05, 12if5, 1220, 1155, 1090, 970.

Toisena eluoitu esteri on öljy, jolla on seuraavat tunnusmerkit: R = - 77,7 (C = 0,67 % CHOI·,) D 0 NMR-spektri: tärkeimmät absorptiopiikit CDClyssa seuraavilla taajuuksilla £ -yksikköinä: 3,*+3,· 3,68; 3,9-^Λ; 5,2-5,5; 5,6-5,8.

IR-absorptiospektri (pelkkä): tärkeimmät absorptiojuovat seuraavilla taajuuksilla (cm-1): 3V00, 3005, 2950, 2930, 2870, 221+0, 17^0, 11+55, 1^0, i»+05, 1250, 1220, 1155, 1090, 970.

Esimerkki 10 11 o(,i5-dihydroksi-l6-metyyli-l6-metoksi-9-okso-prosta-5 (Z),-13 (E)-dieeni-l-happo-metyyliesterit jjLSomeerit: (15S,16S), (15R,16S), (15S,16R), (15R,i6r3 A) 310 mg esimerkin 8 kohdan A polaarisemman tuotteen T n20 (|o(j = + 50) 9W-asetaattilähtöainetta liuotetaan 30 ml:aan bentsee- niä ?a kuivataan atseotrooppisesti tislaamalla. Kuivattuun tuotteeseen lisätään 1 ml 3,lt-dihydro-2H-pyraania ja 3° mg p-tolueenisulfonihappoa. 15 minuutin kuluttua on reaktio yleensä päättynyt. Reaktioseos neutraloidaan ravistelemalla se NaHCO^n liuoksella ja pesemällä vedellä. Orgaaninen faasi väkevöidään kuiviin tyhjössä, jolloin jäännöksenä saadaan *+00 mg llo(,l5-bis-tetrahydropyranyylieetteri-johdannaista.

Tähän tuotteeseen, liuotettuna 100 ml:aan vedetöntä metanolia, lisätään *+00 mg vedetöntä ^CO^a. ^+ tunnin kuluttua reaktioseos neutraloidaan lisäämällä hapanta hartsia ja suodatetaan. Suodos väkevöidään kuiviin tyhjössä jolloin saadaan 360 mg 9^-hydroksi-ll'^( ,15-bis-- j(tetrahydropyran-2-yyli )-oksi"j -16-raetyyli-l6-metoksi-prosta-5 (Z), - 20· 64578 13(E)-dieenihappo-metyyliesteriä. 50 ml:aan vedetöntä metyleeniklori-dia lisätään samalla mekaanisesti hämmentäen 2,5 g Collins-reagenssia (Py^CrO^), 2 g celite'ä ja 360 mg edellä saatua yhdistettä.

2 tunnin kuluttua reaktioseos kaadetaan 200 ml:aan etyylieet-teriä, suodatetaan ja pestään NaHCO^-liuoksella ja vedellä. Eetterifaa-si väkevöidään tyhjössä jäännökseksi joka on 350 mg llo(,l5-bis-jj/tet-rahydro-2H-pyran-2-yyli)-oksoJ-l6-metyyli-16-metoksi-9-okso-prosta--5(Z),13(E)-dieeni-l-happo-metyyliestereitä. 150 mg tätä tuotetta liuotetaan 2 ml:aan ΟΗ-,ΟΟΟΗ: HpO : THF-seosta (19:11:3) ja kuumennetaan Λ •+0 C:sessa 2 tuntia. Tämän ajan jälkeen reaktioseos neutraloidaan kiinteällä NaHC0^:lla ja uutetaan etyylieetterillä. Orgaaninen faasi väkevöidään tyhjössä kuiviin jäännökseksi, joka kromatografoidaan happopestyssä piihappogeelipylväässä. Saatu yhdiste on yksi otsikon neljästä isomeerisestä esteristä ja sillä on seuraavat tunnusmerkit: 20 = -1+5 (C = 0,1+6 % CHClyssa) B) Käyttämällä kohdassa A kuvattua menetelmää saadaan 630 mg:sta esimerkin 8 kohdan A tuotteen = + 6,0) vähemmän polaa rista 9e(-asetaatti-edeltäjää 1+00 mg yhtä otsikon neljästä isomeerisestä tuotteesta. Tällä tuotteella on t~ —| 20 = - 60,6 (C = 1,15 % CHCl^: ssa) C) Käyttämällä kohdassa A kuvattua menetelmää saadaan 600 mg:sta esimerkin 8, kohdan B tuotteen (\^J = + 9,9) vähemmän polaa rista 90^-asetaatti-edeltäjää 1+00 mg yhtä otsikon ndjästä isomeerises-tä tuotteesta. Tällä yhdisteellä on -''x V *1 20 M = - 62 (C = 2,52$ CHClo:ssa) D 3 D) Käyttämällä kohdassa A kuvattua menetelmää saadaan 700 mg: s ta esimerkin 8, kohdan B tuotteen = - 23,3) polaarisempaa 9o^-asetaatti-edeltäjää 1+20 mg yhtä otsikon neljästä isomeerisestä tuotteesta. Tällä tuotteella on

Idi]20 =-1+8 (C = 1,02 % CHOU:ssa)

D J

Esimerkki 11

Ho(,l5-dihydroksi-l6-metoksi'-9-oksa-prosta-13 (E)-eeni-l-hapot jj.someerit: (15S,16S), (15R,16S), (15S,16R), (15R,16rT| 21 64578 O 1,7 g esimerkin ^f, kohdan B vähemmän polaarisen tuotteen w - + 13?5) 9^-asetaatti-edeltäjää muutetaan esimerkin lo, kohdan A menetelmää vastaavasti vastaavaksi llo<,l5-dihydroksi-l6-metoksi-9--oksa-prost-1'3 (E)-eeni-l-happo-metyyliesteriksi. Saanto 1,02 g. Tällä yhdisteellä on seuraavat tunnusmerkit: V Ί 20 dJ = - 67,6 (C = 1,08 % CHCUissa)

^ D J

NMR-spektri: tärkeimmät absorptiopiikit CDCl^:ssa seuraavilla taajuuksilla S -yksikköinä: 0,93; 3,^7; 3,69; 3,8-^,5; 5,6-5,9.

B) Työskentelemällä edellä kohdassa A kuvatulla tavalla, lähtemällä esimerkin *+, kohdan B polaarisemman tuotteen (Hjf = * 19,7) 9 o( —a s e taa 11 i — e del tä j ä s tä, saadaan vastaavaa 11d,15—dihydroksi—16— -metoksi-9-oksa-prost-13(E)-eeni-l-happo-metyyliesteri-isomeeriä, jolla on seuraavat tunnusmerkit:

IcJ] = - 63,6 (C = 1,07 % CHCl.issa) D -5 NMR-spektri: tärkeimmät absorptiopiikit CDCl^issa seuraavilla taajuuksilla § -yksikköinä: 0,93; 3Λ8; 3,70; 3,8-^,3; 5,6-5,9.

Edellä selitettyä menetelmää vastaavasti ja käyttämällä lähtöaineina esimerkin *+, kohdan A mukaan saatua kahta diastereoisomeeriä, saadaan vastaavat diastereoisomeeriset Ilo(,l5-dihydroksi-l6-metoksi--9-oksa-prost-13(E)-eeni-l-happo-metyyliesterit.

Esimerkki 12 l5-hydroksi-l6-metyyli-l6-metoksi-9-oksa-prosta-5(Z), 10,13 (E)-,- ' -trieeni-l-happo-metyyliesterit [isomeerit: (15S,16S), (15^','” 16S), (15S,16R), (15R,16R)| Γ A) 300 mg esimerkin 10, kohdassa A saatua 11 <d,l5dDis- \(tetra- s v— hydro-2H-pyran-2-yyli)-oksi] -l6-metyyli-l6-metoksi-9-okso-prosta-5(Z), -13(E)-dieeni-l-happo-metyyliesteriä liuotetaan seokseen jossa on 2 ml 2N oksaalihappoa ja 2 ml THF:ää ja kuumennetaan sitten 50°C:sessa ^8 tuntia. Reaktioseos neutraloidaan kiinteällä NaHC0^:lla ja uutetaan etyylieetterillä. Orgaaninen faasi väkevöidään tyhjössä; jäännös kromatografoidaan happopestyssä piihappogeelipylVäässä eluoimalla etyylieetteri/heksaanilla, jolloin saadaan käytännöllisesti katsoen puhdasta tuotetta (150 mg), jolla on T —f 20 |_o(| = + >f8,2 (C = 1,68# CHCl3:ssa) ! \ 22 64578 B) Saman menetelmäni mukaisesti mutta käyttämällä lähtöaineena esimerkin 10, kohdan B mukaisesti saatua 11^ ,15-bis- ^(tetrahydro-2H--pyran-2-yyli)-oksiJ-l6-metyyli-l6-metoksi-9-okso-prosta-5(Z),13(E)--dieeni-l-happo-metyyliesteriä, saadaan vastaavaa l5-hydroksi-l6-metyy-li-l6-metoksi-9-oksa-prosta-5(Z),10,13(E)-trieeni-l-happo-metyyliesteri -isomeeriä. Tällä yhdisteellä on Y~ —I 20 = + 7^,1 (C = 1,3 % CHCl.rssa) D -3

Molemmat muut diastereoisomeerit valmistetaan saman menetelmän mukaisesti käyttämällä lähtöaineina molempia muita esimerkin 10 kohdissa C ja D saatuja isomeerisiä llc^,l5-bis-jl/tetrahydro-2H-pyran-2-yyli)--oksi^j-l6-metyyli-l6-metoksi-9-okso-prosta-5(Z) ,13 (E)-dieeni-l-happo--metyyliestereitä.

Esimerkki 13 l5-hydroksi-l6-metoksi-9~oksa-prosta-5(Z),1Q,13(E)-trieeni-l- -hapot ja metyyliesterit j~Lsomeerit: (15S,16S), (17H,16S),

(15S,16R), (15R,16R)J

A) Esimerkin 12 menetelmän mukaisesti ja käyttämällä lähtöaineina esimerkin 9, kohdan A mukaan saatujen isomeeristen llo(,l5-bis-- j(tetrahydro-2H-pyran-2-yyli )-oksij-l6-metoksi-9-oksa-prosta-5(Z),-13(E)-dieeni-l-happojen seosta saadaan diastereoisomeeristen 15-hyd-roksi-l6-metoksi-9-oksa-prosta-5(Z),10,13(E)-trieeni-l-happoj en vastaava seos.

Seoksella on seuraavat tunnusmerkit: NMR-spektri: tärkeimmät absorptiopiikit CDCl^:ssa seuraavilla taajuuksilla % -yksikköinä: 3Λ7; 3,68; 3,8-M; 5-5,5; 6,16; 7Λ5.

B) Esimerkin 12 menetelmän mukaisesti ja käyttämällä lähtöaineena esimerkin 9, kohdan B mukaan saatujen 11 ,15-bis-^(tetrahydro- -2H-pyran-2-yyli)-oksi| -l6-metoksi-9-oksa-prosta-5(Z),13(E)-dieeni--1-happo-metyyliestereiden seosta, saadaan vastaava, diastereoisomeeristen l5-hydroksi-l6-metoksi-9-oksa-prosta-5(Z),10,13(E)-trieeni--1-happo-metyyliestereiden seos. Molemmat diastereoisomeerit erotetaan preparatiivisella ohutkerroskromatografialla (eluoimisaine heksaani: etyyliesteri) ja niillä on seuraavat tunnusmerkit: H 20 = + *+1,2 (C = 1,02 % CHCl^:ssa)

D J

1 —t 20 b) polaarisempi tuote: \ ^1 = + 170,8 (C = 0,35 % CHClo:ssa) u D -5 23 64578

Edustavissa biologisissa kokeissa on osoittautunut että esimerkin 2 kohdassa B selitetyllä viimeisellä isomeerillä (1=¾ if = +31i7) on 100 %inen keskenmenon aiheuttava vaikutus raskaan? olevissa naaras-hamstereissa annettuna subkutaanisesti raskauden *f:nä - 6:na päivänä annoksen ollessa 0,5 mg/kg.

Esimerkin 9 kohdassa A selitetyllä viimeisellä isomeerillä " *+6) ja sen kohdassa B selitetyllä viimeisellä isomeerillä (|j^]i)0= ~ 71,1) on pitkäaikainen verenpainetta alentava vaikutus annettuina nukutetuille koirille j? kissoille suoneen annosten ollessa 3-10 jig/kg.

Esimerkin 2 kohtien A ja B mukaan saatujen prostaanihappojen kahden isomeeriseoksen estävä vaikutus mahaeritykseen on, ennen niiden kromatograafista erottamista, kokeiltu nukutetuissa koirissa Bertaccini et al.'in julkaisuissa Jour. Pharmacol. 28, 360, 197^ ja British J. Pharmacol. j[2, 219, 197^ selitetyn tekniikan mukaan. On todettu molempien seosten olevan tehokkaita annoksissa b - 10 pg/kg.

Esimerkin 2 kohdan A mukaan saadulla seoksella, ennen isomeerien kromatograafista erottamista, on osoittautunut olevan hyvä rauhoittava vaikutus ilmatorveen in vitro ilman suolta stimuloivaa vaikutusta konsentraatiossa 5 ]ig/ml.

Claims (3)

24 64578

1. Menetelmä farmakologisesti aktiivisen, kaavan CI) mukaisen yhdisteen valmistamiseksi A -^CH^ CH2^CH^oor Cf-"· R3 jossa rengas P tarkoittaa jotakin seuraavista ryhmistä: 9H 0 /“>··" /'Y' /’v- CH2 CHK ΓΗ CH 1 VCU f* \ \»"c\ ! OH OH a b c symboli A tarkoittaa ryhmää -CH^-CHj- tai cis-CHsCH-, symboli B tarkoittaa ryhmää -C^-CHj- tai trans-CH=CH-, R on vety, 1-6 hiiliatomia sisältävä alkyyli tai kationi, R^ on 1-6 hiiliatomia sisältävä alkyyli tai fenyyli, R2 on suoraketjuinen metyyli-, etyyli-, propyyli-, butyyli-, pentyyli-, tai heksyyliradikaali, Rj on vety tai metyyli, R^ on vety tai metyyli, R on hydroksi, O tai R^ ja Rfi muodostavat yhdessä oksoryhmän, tunnettu siitä, että syklopentaanialdehydi, jonka kaava on 25 64578 0R6 1 ph / CH« -v. ,-"CH2\a^CH^ch2^ 2^coor VJ\ (ID ' ^ CHO » l 0R? jossa Rg ja R7 toisistaan riippumatta tarkoittavat vetyä tai hydrok-syylifunktion suojaryhmää, kondensoidaan reagenssin kanssa, jonka kaava on ?R1 z - c - R2 R3 jossa Z tarkoittaa jompaakumpaa seuraavista ryhmistä:

0 Ru Il I ** (R'0)2P-CH2-C0- tai (C6Hg>3=CH-C- K y jossa R^, R2, Rg, R^ ja Rg tarkoittavat samaa kuin edellä ja R' on 1-5 hiiliatomia sisältävä alempi alkyyliryhmä, vedettömässä inertissä liuottimessa 0-80°C:sen lämpötilassa, ja mahdollisesti saadussa kaavan (I) mukaisessa prostaglandiini-analogissa, jonka 15-asemassa on okso-ryhmä, tämä haluttaessa pelkistetään hydroksiryhmäksi NaBH^rllä, Zn(BH^)2:11a, difenyyli-tina-dihydridillä tai litium-trialkyyli-boori-hydrideillä, tai mahdollisesti saadusta stereoisomeeristen yhdisteiden seoksesta haluttaessa erotetaan yksittäiset komponentit.

2. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä kaavan (I) mukaisen yhdisteen valmistamiseksi, jossa rengas P tarkoittaa jotakin seuraavista ryhmistä: °H 0 0 i L » / >" / V" CH I c\ ^ CH I %„/C\ f»xC\ \h/c\ I i OH OH abc 26 } \ 64578 symboli A tarkoittaa ryhmää -CHj-CH^ tai cis-CH=CH-, symboli B tarkoittaa ryhmää -CHj-CHj-; tai trans-CH=CH-, R on vety , metyyli, etyyli, propyyli, isopropyyli, butyyli, isobu-tyyli, tert.butyyli, pentyyli tai heksyyli, tai farmaseuttisesti hyväksyttävä myrkytön kationi, on metyyli, etyyli, propyyli, isopropyyli, butyyli, isobutyyli, tert.butyyli, pentyyli tai heksyyli tai fenyyli, R2 on metyyli, etyyli, propyyli, butyyli, pentyyli tai heksyyli, R3 on vety tai metyyli, R,^ on vety tai metyyli, Rg on hydroksi, tai R^ ja Rg muodostavat yhdessä oksoryhmän.

3. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä kaavan (I) mukaisen yhdisteen valmistamiseksi, jossa kaavassa rengas P tarkoittaa jotakin seuraavista ryhmistä: OH 0 ! Il o ch \ /c%- /V c< f'" CH* “ / Τ'" vc\ Y \ OH 0H ab c symboli A tarkoittaa ryhmää -CHj-CHj- tai cis-CH=CH-, symboli B tarkoittaa ryhmää trans-CH=CH-, R on vety tai metyyli, R1 on metyyli tai fenyyli, Rj on butyyli, Rj on vety tai metyyli, R^ on vety, Rj. on hydroksi, tai R^ ja Rg muodostavat yhdessä oksoryhmän. ( 64578 27