FI63948B - Foerfarande foer separering av beta-sitosterol fraon en sterolblandning utvunnen ur raosaopans neutralfraktion - Google Patents

Description

, 63948

Menetelmä 0-sitosterolin erottamiseksi raakasuovan neutraalija-‘ keesta eristetystä steroliseoksesta - Förfarande för separering av β-sitosterol frän en sterolblandning utvunnen ur räsäpans neutralfraktion

Jakamalla erotettu hakemuksesta 810216.

1 Keksinnön kohteena on menetelmä 0-sitosterolin eristämiseksi raakasuovan neutraalijakeesta eristetystä steroliseoksesta.

Tällöin saadaan 0-sitosterolia, joka sisältää korkeintaan A X, edullisesti alle 2 X, 0(-sitosterolia ja alle 7 X kam pester o-5 lia. Muiden epäpuhtauksien osuus on yhteensä alle 0,5 X.

Lääketeollisuudessa 0-sitosterolia voidaan käyttää sinänsä farmaseuttisiin tarkoituksiin, sekä lähtöaineena steroidivälituotteiden valmistamiseksi. Tärkeä edellytys on kuitenkin se, että p-sitosteroli täyttää tietyt laatuvaatimukset. On esim. välttä- 10-- mätöntä saada 13-sitosterolia, jonka (X -sitosterolipitoisuus on mahdollisimman alhainen, eli ainakin alle A %. Luonnolliset 3~sitosterolilähteet, kuten esim. sulfaattisellun raakasuovan neutraalijakeesta erotettu sitosteroliseos, voivat sisältää runsaasti 0(-sitosterolia, eli noin 20 % tai enemmän.

15 (X - ja (3-sitosterolin erottaminen toisistaan on siten käytän nössä tärkeä tehtävä. Tämän ongelman ratkaisemiseksi on ehdotettu mm. seuraavia menetelmiä: U.S.-patenttijulkaisussa n:o 2 573 265 kuvataan menetelmää 13-sitosterolia muistuttavien sitosterolien erottamiseksi muista 20 steroleista siten, että lähtöaine liuotetaan hiilivetyyn tai halogenoituun hiilivetyyn, jonka jälkeen β-sitosterolit ja sen tyyppiset sitosterolit kiteytetään HClO^sn tai HPF^in avulla.

6 3 9 4 8 1 Julkaisussa Sei.Res. (Dakka, Pak.) 1969, s. 162, kuvataan mm.

0(- ja |3-sitosterolin erottamista kromatograafisesti aluminium-oksidilla.

Suomalaisessa patenttijulkaisussa n:o 57956 kuvataan menetelmää 5 0^-sitosterolin eristämiseksi seoksista, jotka sisältävät mm.

. myös (X -sitosteroita. Tunnusomaista tälle menetelmälle on se, että lähtöaine käsitellään vahvalla, epäorgaanisella tai orgaanisella hapolla orgaanisessa liuottimessa. Happokäsittelyn jälkeen reaktiotuote, joka saadaan esim. jäähdyttämällä liuos 10 tai haihduttamalla liuotin pois, kiteytetään sopivasta orgaani sesta liuottimesta. Jos lähtöaineena käytetään raakasuovan neutraalijakeesta erotettua steroliseosta, saadaan tämän menetelmän mukaisesti lopputuote, joka sisältää noin 90 X β-sitoste-rolia, noin 6 % kampesterolia, -sitosterolin hajoamisesta joh-15 tuvia toisiintumistuotteita ja mahdollisesti vedenlohkeamistuot- teita. Varsinaista X -sitosterolia on lopputuotteessa hyvin vähän; alle 2 X, jos on valittu sopivat olosuhteet.

Suomalaisessa patenttijulkaisussa n:o 58333 kuvataan menetelmää ö(-sitosterolin poistamiseksi (3-sitosterolirikasteista, jolloin 20 {3-sitosterolirikaste käsitellään liuotinseoksella, joka sisältää aromaattisia ja/tai alifaattisia hiilivetyjä sekä estereitä, ja lisäksi mahdollisesti pieniä määriä ketoneja, alkoholeja, orgaa-' - nisiä happoja ja vettä. Epäkohtana tässä menetelmässä on mm.

se, että 3-sitosterolin saanto jää melko alhaiseksi, alle 55 X, 25 samoin kuin lopputuotteen O^-sitosterolipitoisuus jää yli 2 %:n.

Tämä keksinnön mukainen menetelmä 3-sitosterolin eristämiseksi raa'asta steroliseoksesta, joka sisältää 13-sitosterolin lisäksi 0(-eitosterolia ja kampesterolia, pyrkii yllä mainittujen epäkohtien poistamiseen. Keksinnönmukaisella menetelmällä voidaan 30 eristää (3-sitosterolia seoksesta yli 90 X:n saannolla. Puhdis tetussa |3-sitosterolissa on 0(-sitosterolipitoisuus 0-4,0 % ja kampesterolipitoisuus 6,0-7,0 %.

'3' 63948 1 Keksinnönmukaisessa menetelmässä käytetään asetonin veslseosta 0-sitosterolin kiteyttämlseksi raakasteroliseoksesta hydraatti-na. Kiteytynyt steroll sisältää 2-4 % kidevettä, joka poistuu tuotteesta vasta 80-100°C:n lämpötilassa.

5 Asetoni on halpa liuotin ja sitä voidaan käyttää uudelleen samaan tarkoitukseen tislauksen jälkeen. Keksinnönmukainen menetelmä on taloudellinen ja helppo suorittaa, koska menetelmässä ei käytetä monimutkaisia liuotinseoksia, jotka ovat tyypillisiä muille puhdistusmenetelmille. Ainoastaan yhden liuot-10 timen käyttö on merkittävä etu teknisessä mittakaavassa proses sia suoritettaessa. Käytetty liuotin, asetoni, on myöskin työturvallisuuden kannalta edullinen. Etuna voidaan pitää myös sitä, että lopputuote ei sisällä 0-sitosterolin lisäksi muita epäpuhtauksia kuin yllä mainitut kampesteroli ja ö^-sitostero-15 11. Näin ollen lopputuote soveltuu sellaisenaan farmaseuttisiin tarkoituksiin.

Tunnusomaista keksinnönmukaiselle menetelmälle on se, että 0-sitosterolia, kampesterolia ja -sitosterolia sisältävää raa-kasteroliseosta keitetään 1/2 - 1 h asetonin kanssa reaktorissa 20 pystyjäähdyttäen kunnes sakka on liuennut. Liuokseen lisätään vettä, jolloin 0-sitosteroli muodostaa hydraatin, joka kiteytyy jäähdytettäessä. Haitallisena epäpuhtautena oleva 0(-sitostero-li ja muut pieninä pitoisuuksina esiintyvät neutraallkomponentit jäävät selektiivisesti emäliuokseen. Kiteytynyt fraktio sisäl-25 tää yli 90 % 0-sitosterolia, 6-7 % kampesterolia ja korkeintaan 4 % ö(-sitosterolia. Emäliuoksesta saadaan liuotin helposti kiertoon tislaamalla se. Näin ollen puhdistusprosessissa ei ole ongelmia liuottimen kierrätyksen suhteen. Kampesterolin pitoisuudella ei ole vaikutusta prosessin onnistumiseen, koska myös-30 kin kampesteroli kiteytyy hydraattina lähes kvantitatiivisesti.

-4- 63948 1 Keksinnönmukainen menetelmä voidaan kuvata lähemmin seuraavln esimerkein. Esimerkeissä on käytetty lähtöaineena raakasteroll-seosta, joka on eristetty raakasuovan neutraalijakeeeta, ja jonka koostumus on seuraava:

5 0-sitosteroli 76,2 Z

q(-sitosteroll 17,7 Z

Kampesteroli 6,1 %

Esimerkki 1 10 g raakaa 13-sitosterolia, joka sisälsi 76,2 Z 0-sitosterolia, 17,7 Z ^-sitosterolia ja 6,1 Z kampesterolia liuotettiin 10 100 ml:aan kuumaa asetonia. 5 ml vettä lisättiin ja seos jääh dytettiin 10eC:een. Syntynyt sakka suodatettiin ja kuivattiin. Sakka, joka painoi 7,9 g, sisälsi 91,5 Z 0-sitosterolia, 2,0 Z -sitosterolia ja 6,5 Z kampesterolia.

Esimerkki 2 10 g raakaa 0-sitosterolia (sama kuin esim. 1) liuotettiin 15 100 ml:aan kuumaa asetonia. Liuokseen lisättiin 1 ml vettä ja seos jäähdytettiin l0°C:een. Syntynyt sakka suodatettiin ja kuivattiin. Sakka, joka painoi 8,2 g sisälsi 89,0 Z 0-sitoste-rolia, 4,0 Z ¢(-sitosterolia ja 7 Z kampesterolia.

Claims (1)

1. Menetelmä β-sitosterolin erottamiseksi sulfaattiselluloosa- prosessin raakasuovan neutraalijakeesta eristetystä steroli-seoksesta hydraattina hyvällä saannolla, edullisesti yli 90 %:n saannolla, jotta saataisiin puhdistettua 0-sitostero-5 lia, joka sisältää korkeintaan A % -sitosteroita ja 7 X kampesterolia ja multa epäpuhtauksia korkeintaan 0,5 %, käsittelemällä mainittua steroliseosta ainoastaan yhtä liuotinta ja vettä sisältävällä seoksella, tunnettu siitä, että 10 a) β-sitosterolipitoinen seos liuotetaan asetoniin siten, että kiintoaine-liuotin-suhde on edullisesti 1:8 - 1:13,' ja volyymisuhde vesi-asetoni on 1:20 - 1:100 b) kuumennetaan liuotin kiehumispisteeseen kunnes 0-sitoste-rolipitoinen seos liukenee 15 c) liuokseen lisätään vettä ennen liuoksen jäähdyttämistä 15°C:een tai sen alle, jolloin tuote kiteytyy jäädytettäessä hydraattina, ja d) erotetaan seostettu, runsaasti |3-sitosterolia sisältävä tuote, joka on olennaisesti vapaa CX-sitosterolista sisäl- 20 täen korkeintaan 20 X lähtSsteroliseoksen O^-sitosteroli- määrästä emäliuoksesta suodattamalla.