FI119473B - Menetelmä HIV-proteaasi-inhibiittoreiden valmistamiseksi - Google Patents

Description

χ 119473

Menetelmä HIV-proteaasi-inhibiittoreiden valmistamiseksi Keksinnön tausta

Esillä oleva keksintö koskee uutta välituotetta ja 5 menetelmää yhdisteiden syntetisoimiseksi, jotka inhiboivat humaani-immuunikatoviruksen (HIV) koodaamaa proteaasia, ja erityisesti L-735 524 tai sen farmaseuttisesti hyväksyttäviä suoloja. Nämä yhdisteet ovat arvokkaita HlV-infektion ehkäisemisessä, HIV-infektion hoidossa ja tästä infektios-10 ta johtuvan immuunikato-oireyhtymän (AIDS) hoidossa.

Tarkemmin esillä oleva menetelmä koskee amidista, kuten N-(2(R) -hydroksi-l(S) -indanyyli) -3 - f enyylipropaani -amidista, johdetun amidienolaatin reaktiota aktivoidun ei-raseemisen glysldolijohdannaisen kuten 2(S)-glysidyy-15 litosylaatin kanssa, jolloin saadaan epoksidivälituote, joka on käyttökelpoinen avainvälituote valmistettaessa HIV-proteaasi-inhibiittoriyhdisteitä, mukaan lukien L-735 524. Kuvataan myös parannettua menetelmää tiettyjen HIV-proteaasi-inhibiittoreiden valmistamisessa käytettyjen 20 dialkyyliamiinien syntetisoimiseksi»

Humaani-immuunikatovirukseksi (HIV:ksi) nimitetty .:. retrovirus aiheuttaa monimutkaisen sairauden, johon kuuluu ·♦·· etenevä immuunijärjestelmän tuhoutuminen (immuunikato-oi- • * · reyhtymä; AIDS) sekä keskushermoston ja ääreishermoston • * ...t 25 rappeutuminen. Tämä virus tunnettiin aikaisemmin LAV:nä, *'* HTLV-ITI:na tai ARV:nä. Retrovirusten replikaatiolle yh- • · · teisenä piirteenä on se, että viruksen koodaama proteaasi • · · *·* * muokkaa translaation jälkeen voimakkaasti prekursoripoly- proteiineja kypsän viruksen kokoonpanossa ja toiminnassa * V,·' 30 tarvittavien proteiinien muodostamiseksi. Kun tämä muok- hautuminen inhiboidaan, normaalia infektiokykyistä virusta ei muodostu. Esimerkiksi julkaisussa Kohl, N.E. et ai., Proc. Nat M Acad. Sei., 85, 4686 (1988) osoitettiin HIV:n • · *1* koodaaman proteaasin geneettisen inaktivoinnin johtavan ***** 35 kypsymättömien ja infektiokyvyttömien viruspartikkelien • · 2 119473 muodostumiseen. Nämä tulokset viittaavat siihen, että HIV-proteaasin inhibointi edustaa elinkykyistä menetelmää AIDS:n hoitamiseksi ja HIV-infektion ehkäisemiseksi ja hoitamiseksi.

5 HIV:n nukleotidisekvenssistä käy ilmi, että pol- geeni esiintyy yhdessä avoimessa lukukehyksessä [Ratner, L. et ai., Nature, 313, 277 (1985)]. Aminohapposekvenssien homologian perusteella on saatu todisteita siitä, että pol - sekvenssi koodaa käänteistranskriptaasia, endonukleaa-10 siä ja HIV-proteaasia [Toh, H. et ai., EMBO J., 4, 1267 (1985); Power, M.D. et ai.. Science 231, 1567 <1986);

Pearl, L.H. et ai*, Nature, 329, 351 (1987)]* Lopputuote-yhdisteet, mukaan lukien L-735 524, joka esitetään esimerkissä 4 jäljempänä, jotka voidaan valmistaa uusista väli-15 tuotteista ja tämän keksinnön mukaisella menetelmällä, ovat HlV-proteaasi-inhibilttoreita, ja niitä on kuvattu julkaisussa EPO 541 168, joka on julkaistu 12. toukokuuta 1993.

Aikaisemmin L-735 524 ja vastaavat yhdisteet synte-20 tisoitiin 12-vaiheisen menetelmän mukaan, jossa käytettiin hydroksisuojattua dihydrö-5 <S)-hydroks imetyyli-3(2h)fura-nonia, joka alkyloitiin, ja se käsitti furanonin lähtevän * · · · alkoholiryhmän korvaamisen piperldiiniryhmällä. Kytketty • « « tuote hydrolysoitiin sitten f ur anoni renkaan avaamisek- • · 25 si hydroksihapporyhmäksi, ja happo kytkettiin lopuksi *** 2(R) -hydroksi-1 (S)-aminoindaaniin. Tämä menetelmä kuvataan • · · *“** julkaisussa EPO 541 168. Tämän menetelmän äärimmäinen pi- • · · '·* * tuus (12 vaihetta) tekee tämän menetelmän aikaavieväksi ja työintehsiiviseksi, ja siinä tarvitaan monta kallista rea- • · V.: 30 genssia ja kallista lähtöainetta. Menetelmä, jossa tarvit- ίι<(.' täisiin vähemmän reaktovaiheita ja reagensseja, tarjoaisi ,···. toivottavia taloudellisia ja aikaa säästäviä etuja.

• · «

Modifioitu menetelmä L-735 524:n ja vastaavien yh-*!* disteiden valmistamiseksi esitettiin myös julkaisussa EPO

*·*" 35 541 168, ja se perustui N-(2(R)-hydröksi-l(S)-indan-N,0~ • ♦ 3 119473 isopropylidenyyli) -3~fenyylipropaaniamidista j ohdetun eno-laatin diastereoselektiiviseen alkylointiin, jolloin kolmen hiilen C3.5-yksikkö vietiin paikalleen allyyliryhmänä ja myöhemmin hapetettiin. Joitakin tähän menetelmään liit-5 tyviä ongelmia ovat: (a) neljä vaihetta on tarpeen kolmen hiilen glysldyyliosan viemiseksi paikalleen, (b) hyvin myrkyllistä 0s04 käytetään menetelmässä ja (e) dihydrok-sylaatiovaiheessa saavutetaan alhainen di astereoselekti i-visyys. Toivottava menetelmä veisi siten kolmen hiilen 10 osan suoraan paikalleen oikeassa kiraalisesti hapettuneessa muodossaan.

Lisäksi kiraalisen piperatsiinivälituotteen synteesi suoritettiin lähtien 2-pyratsiinikarboksyylihaposta kuuden vaiheen menetelmänä ja se vaati kalliiden reagens-15 slen kuten BOC-ON:n ja EDCrn käyttöä* Lyhyempi reitti pi-peratsiinivälituotteeseen, jossa ei myöskään käytettäisi kalliita reagensseja, olisi siten toivottava.

Kirjallisuudessa tunnetaan useita esimerkkejä stabiloitujen karbanionien kondensaatioista glysidolin ja sen 20 johdannaisten (aktivoitujen tai ei-aktivoitujen) kanssa; mikään tunnettu menetelmä ei kuitenkaan tuota uutta epok- ·{· sidia suoraan hyvällä saannolla. Kts. esim. Hanson, R. M., • · ·

Chem. Rev., 1991, 91, 437 - 475. Aktivoitujen glysidoli-johdannaisten ja hiilinukleofillien tapauksessa tämä joh- • · ...i 25 tuu ensisijaisesti nukleofiilin ja epoksidituotteen odote- « * tusta ja ei-toivotusta "kaksinkertaisesta" addltiosta, • · ·

Lisäksi missään tunnetussa esimerkissä ei ole ami- * · · *·' * diryhmää karbanionia stabiloivana ryhmänä (amidienolaatti- na) eikä lisäksi missään tunnetussa esimerkissä kytketä • · V,; 30 stabiloitua karbanionia, jossa on kiraalisuutta, kiraali- * · · !,t>: siin, ei-raseemisiin glysidolij ohdannaisiin (kaksinkertai- ,···. nen stereoselektiivisyys).

• ♦ ♦ !..t Stabiloitujen karbanionien kondensaatioita aktivoi- • ♦ 7 tujen ei-raseemisten glysidolij ohdannaiSten kanssa on ku- φ "· 35 vattu: malonaattianioni on kytketty sekä ei-raseemisen • · 119473 4 epikloorihydriinin että ei-raseemisen glysidyylltriflaatln ii kanssa, jolloin saadaan syklopropyy1ilaktoni iii. Kts. esim. Pirrung, M. C. et. ai., Helvetiva Chimica Acta 1989, 72, 1301 - 1310 ja Burgess, K. et. ai., J. Org. Chem. 5 1992, 57, 5931 - 5936. Siten tässä tapaukessa välituote·» epoksidi reagoi edelleen, jolloin syntyy syklopropyyliren-gassysteemi. Tapauksessa 1 alkuperäinen reaktio malonaat- tianlonin kanssa tapahtuu epoksidin päässä (C3), kun sen < sijaan tapauksessa ii alkuperäinen reaktio tapahtuu tri-10 f laa tin Cx-.päässä.

COOR

3 λ NaWH COOR

is 0 j " \f«xy ti'·,lo COOR {s: I ^ 3 1 ) qoor 20 tV^OTf -—-^ o fi ··· ··»·

Samantyyppinen esimerkki on v:stä johdetun sulfoni- * 1 stabiloidun karbanionin reaktio glysidyylitosylaatin iv .···, 25 kanssa, jolloin saadaan hydroksitosylaatti vi. Kts. esim.

*” Baldwin J. E. et. ai,, J, Chem. Soc. 1992, 1249 - 1251.

**; Tässä tapauksessa, vaikka karbanionin kaksinkertainen ad- • · · ditio ei ole pääongelma, lisävaihe on tarpeen välituote-hydroksitosylaatin vi muuttamiseksi halutuksi epoksidiksi \V 30 vii.

• · · • · • · ♦ ·· ·«· • · 1 • · · 1 1 • · • · • · · * • 1 t · 119473 5

TMS

3 1 ^\^S02Ph S^V^OTs fO^rvr- TMS^y T T U,s

OTS -—^- PhS02 OH

g iSt M

TMS

entäs —* PhS02 10 Λ

Samoin kirjallisuudessa on tuntematonta ja odottamatonta, että typpinukleofiilit voidaan selektiivisesti liittää aktivoituihin glystdoltjohdannaisiln hyvällä saan-15 nolla ilman ongelmallista kaksinkertaista additiota.

Alalla tunnetaan myös N~(2(R)-hydroksi-l{S)-indan-N, O-isopropylidenyyli) -3-fenyylipropaaniamidista 1 j ohdet-tujen amidienolaattien kondensaatlo suojattujen alfa-ami-noepoksidien viii kanssa, jolloin saadaan halutut hydrok-20 sietyleenidipeptidi-isosteerivälituotteet ix C2-(R)-stereo- keskuksen suurella stereokontrollilla. Kts. esim. Askin, D. et. ai., J. Org. Chem. 1992, 57, 2771 - 2773 ja US-pa- ·*·· tentti nro 5 169 952, Askin, D. et. ai. Hydrolyysin jäi- • · · keen saadaan suojaamattomat hydroksietyleenidipeptidi-iso-... 25 steeri-inhibiittorit.

• m • · • ·· . .·. o y :T: BocNH^^S ιρν^ΑΛρ

o:= sd x λ 1 (V

• * • · y—^ ··· \ n • · · \ / « * ·

.···. emäs b | V

*·..* -— BocNHsSA Ui kl/vn * ; —N y 35 yj o •ϊ··: J-γ

k U

119473 e 2-piperatsiinikarboksyylihapon resoluutio (+)-CSA:lla tunnetaan. Kts. esim. Felder, E. et. ai., Helvetica Chimica Acta I960, 43, 888. Kirjallisuudessa ei kuitenkaan tunneta esimerkkejä piperatsiinlamidien resoluutlos-5 ta.

Nyt esillä oleva keksintö koskee aikaisemmin tunnettua edullisempaa menetelmää HIV-proteaasi-inhibi±tto-reiden valmistamiseksi. Se sallii julkaisussa EPO 541 168 kuvattujen yhdisteiden, erityisesti L-735 524:n, paljon 10 lyhyemmän, paljon korkeammin diastereoselektiivisen, korkeamman saannon omaavan synteesin, Ilman myrkyllisten rea-genssien kuten osmiumtetroksidin tai ehkäisevästi kalliiden reagenssien kuten (S)-( + )-dihydro-5-(hydroksimetyyli)-3(2H)furanonin käytön.

15 Keksinnön yhteenveto

Esillä oleva keksintö koskee uusia synteettisiä menetelmiä epoksidivälituotteiden kuten 3:n valmistamiseksi, jotka ovat hyödyllisiä syntetisoitaessa Hiv-proteaasi-in-hibiittoreita. Keksintö koskee amidienolaatin, kuten 1: stä 20 johdetun enolaatin, reaktion aktivoidun ei-raseemisen glysidolijohdannaisen, kuten 2(S)-glysidyylitosylaatin 2 kanssa, jolloin saadaan epoksidituote 3 yhdessä vaihees-sa ja hyvällä saannolla. Tämän reaktion tulos on odottama- • · · ton, koska olisi odotettavissa, että epoksidi 3 reagoisi 25 edelleen kytkentäqlosuhteissa, jolloin saataisiin suuri • · *···’ määrä dimeeristä tuotetta 3-a, jolloin siten saataisiin 3 • · · *·«* alhaisella saannolla.

s·· « · · *0* * 5$ ” ^-ΑΧ> Φό·,. oj ry i j H 0 J.) -—- o j \ | (Γ emäs iv)

·:*·: 35 MJ

• « 119473 7 ex £>

5 O ψ [f [f S

Mo ^ 10

Keksintö koskee edelleen epoksidivälituoteyhdlsteitä ja epoks idivä 1 ituotteen kytkemisen jäljempänä määritellyn kaavan V mukaisen amiinin kanssa, jolloin saadaan HIV-proteaasivälituottelta ja lopputuotteita.

15 Jotkin tässä patenttihakemusjulkaisussa mahdolli sesti esiintyvistä lyhenteistä ovat seuraavat.

Lyhenteet Käytetty merkintä Suo1aava ryhmä BQC (Boc) t-butyylioksikarbonyyli 20 CBZ (Cbz) bentsyylioksikarbonyyli(kar- bobentsöksi) •i. TBS (TBDMS) t-butyyli-dimetyylisilyyli Käytetty merkintä Aktivoiva ryhmä M’M'. Ts tai tosyyli tai p-tolueenisulfonyyli ... 25 tosylaatti *" Ns tai nosyyli tai 3-nltrobentseenisul£onyyli • · · nosylaatti • · t * Tf tai triflyyli tai trifluprlmetaanlsulfonyyli triflaatti t · \V 30 Ms tai mesyyli tai metaanisulfonyyli ··· ί.,.ί mesylaatti Käytetty merkintä Kytkentäreaoenssi • · · l.,t BOP-reagenssi bentsotriatsol-l-yylioksi- 7 tris(dimetyyliamino)fosfo- 35 niumheksafluorlfosfaatti • · 8 119473 B0P-C1 bis(2-okso-3-oksatSolldi~ nyyli)fosfiinihappokloridi i-etyyli-3-{3-dinietyyliami-nopropyyli)karbodi-imldihyd-5 rokloridi

Muut BOC-ON 2-(tert-butyylikarbonyyliok- si ~ imina)-2-fenyyliasetonit-riili 10 (B0C)20, (B0C20) tai di-t-butyylidikarbonaatti (BoCjO) n-Bu4N1F" tetrabutyylianunoniurafluoridi nBuLi (n-Buli) n-butyylilitium (S)-CSA {lS)-( + )™lO"kainferisulfoni~ 15 happo

DlEA tai DIPEA di-isopropyylietyyliamiini DMAP dimetyyliaminopyridiini DME dimetoksietaani DMF dimetyyliformamidi 20 Et3N trietyyliamiini

EtOAc etyyliasetaatti ··· h tunti(a) ·1·1 XPA 2-propanoli • · ....: DBA litiumdi-isopropyyliamidi * · 25 L-PGA (L) -pyroglutaamihappo TFA trifluorietikkahappo THF tetrahydrof uraani • · · *·1 1 TLC ohutkeroskromatografia • · :.:.i 30 Keksinnön seikkaperäinen kuvaus • · a

Esillä oleva keksintö koskee uutta menetelmää kaa-.···. van 1 ja IV mukaisten välituotteiden valmistamiseksi, jot~ • · a |!..j ka ovat hyödyllisiä valmistettaessa HIV-proteaasi-inhi- • 7 biittoreita -ja erityisesti niitä yhdisteitä, joita on ku- • * · 119473 9 vattu julkaisussa E PO 541 168. Menetelmät kaavan 1 mukaisten välituotteiden valmistamiseksi R3 5 R2 lp1 OH ών’Γ/ *? O O yi 10 käsittää seuraavat vaiheet: (1) saatetaan joko a. kaavan IX mukainen glysidoli οχ n 15 & , tai b. epikloorihydriini, jonka kaava on

Cl, 20 reagoimaan kaavan III mukaisen amidin kanssa O \/ R3-(ch2),-— • · · Ti —"

• · #' V

***** ok jL / ΠΙ ... 25 • · 111 • · t 11 • a· 1 li • • it • · · ··· • · · V · vahvan emäksen läsnä ollessa alhaisessa lämpötilassa, jol loin syntyy sddukti IV :Vi 30 m3 ,

:*’*: _ (CH2)f X

"* I J o

:T: !V

!.**': O L·)

• V U

*:**: 35 3a • * • · 10 119473

(2) saatetaan IV reagoimaan kaavan v mukaisen amiinin karissa, jolloin syntyy I

R2 5 r‘nhyV v O R1 jossa: stereokeskus a on joko R-konfiguraatiossa, S-konfiguraa-10 tiossa tai se on raseeminen; X valitaan joukosta H, metaanisulfonyyli, tri fluoriraetaa-nisulfonyyli, p-tolueenisulfonyyli, bentseenisulfonyyli ja 3-nitrobentseenisulfonyyli; r on kokona isluku lähtien nollasta lukuun 5 käsittäen myös 15 tämän; R* jä R2 valitaan itsenäisesti kulloinkin seuraavaa-ta joukosta: 1) vety, 2) -C^-alkyyli, joka on substituoimaton tai subs- 20 tituoitu yhdellä tai useammalla ryhmistä, jotka ovat a) hydroksi, ·;· b) C,.,-aikoksi, «M* c) aryyli, joka on substituoimaton tai substituoitu • * yhdellä tai useammalla ryhmistä, jotka ovat Cw~alkyyli, ,···, 25 halogeeni, hydroksi tai aryyli, * * dj -W-aryyli tai -W-bentsyyli, jossa W on -0- tai

• · S

• ia n ··· “Ö“ f • · · *·' * e) 5 - 7-jäseninen sykloalkyyliryhmä, joka on subs tituoimaton tai substituoitu yhdellä tai useammalla ryh- • * ·.*.· 30 mistä, jotka ovat ··· *...* i ) hydroksi, ,···. li) Ct.g-alkoksi tai • · · ,···, lii) aryyli, • · T f) heterosykli, joka on substituoimaton tai substi- "**· 35 tuoitu yhdellä tai useammalla ryhmistä, jotka ovat hydrok- m • · 11 1 1 9473 si, C^-aikoksi, C^-alkyyli, joka oil substituoitu hydrok-silla tai Bocslla, g) ~NH~CÖÖCi_3-alkyyli, h) -NH-GO-Cj.3 -aikyy 1i, 5 1) -NH-SOjCj.j-alkyyli, j) -COOR tai k) -((CH2)B0)nR tai 3) aryyli, joka on substituoimaton tai substituoitu yhdellä tai useammalla ryhmistä, jotka Ovat 10 a) halogeeni, b) hydroksi, e) ~N02 tai -N(R)2, d) C-^-alkyyli, e) C^j-alkoksi, joka on substituoimaton tai substi-15 tuoitu yhdellä tai useammalla ryhmistä, jotka ovat -OH tai C^-alkoksi, f) -COOR, g) -CN(R)2, hj -CH2N(R)2, 20 i) -CHjNHCOR, j) -GN, k) ~CF*' .V. 1) -NHCOR, *·*·* m) aryyli-Ci.g-alkoksi, t.»t 25 n) aryyli, o) -NRSOzR, I · I * ' p> -op(oxorj2 tai *·* g) -R5, joka on määritelty jäljempänä; tai R1 ja R2 voivat olla liittyneet toisiinsa muodostaen \V 30 sen typen kanssa, johon R1 on kiinnittynyt ja sen hiilen ·*· _ !,.,ί kanssa, johon R on kiinnittynyt, 3 ~ 10-jäsenisen monosyk- lisen tai bi syklisen tyydyttyneen r enga s j är j e s te lmän, joka ,···, koostuu siitä typestä, johon R1 on kiinnittynyt, ja 2 - 9 • · hiiliatomista, kuten esimerkiksi • · • ·

H

12 119473

Uyv H Ja/.

5 ja on substituoimaton tai substltuoitu yhdellä tai useammalla ryhmistä, jotka ovat 1) hydroksl, 2) c^-alkyyli, joka on substituoimaton tai substi-10 tuoitu yhdellä tai useammalla ryhmistä, jotka ovat a) halogeeni, b) hydroksl, c) Cj-a-alkoksi, d) aryy11, 15 e) 5 - 7-jäseninen sykloalkyyliryhmä, joka on subs tituoimaton tai substltuoitu yhdellä tai useammalla ryhmistä, jotka ovat 1) hydroksl, ii) Cj^-alkoksi tai 20 lii) aryyli, tai f) heterosykli, 3) C^-alkoksi, !\\ 4) - NHCOOCj .g - a Ikyy 11, • t « 5) -NH-CO-C1_3-alkyyli, (... 25 6) -NH-S02Cj_3-alkyyll, “* 7) heterosykli, J * · lii 8) -w-aryyli tai • · · 9) -W-C0-aryyli, jossa W on edellä määritellyn mukainen? tai • · V.: 30 R1 ja R2 voivat olla liittyneet toisiinsa muodostaen »·· sen typen kanssa, johon R1 on kiinnittynyt ja sen hiilen kanssa, johon R2 on kiinnittynyt, 3 - 10-jäsenisen monosyk- ,···. lisen tai blsyklisen tyydyttyneen rengasjärjestelmän, joka • · *·* koostuu siitä typestä, johon R1 on kiinnittynyt, 1-8 hii- • · • * 13 119471 liatomista ja yhdestä tai useammasta substituoimattomasta tai substi tuo idusta heteroatornista, valittuina joukosta 1) -N(VR1)-, jossa V ei ole läsnä tai V on -CO-Q-tai — SOjj-Q -, R1 on edellä määritellyn mukainen sellaisen 5 R1 :n kyseessä ollessa, joka on R2:sta riippumaton eikä siihen liittyneenä, ja jossa Q ei ole läsnä tai Q on -O-, ~N(R)~ tai mahdollisesti -C1.4-alkyylillä substituoitu hete-rosykli, 2) -N(heterosykli)-, 10 3) -N(CI_4-alkenyyli), joka on substituoimaton tai substituoitu aryylillä, 4) -N( S02-Ca.4-alkenyyli), joka on substituoimaton tai substituoitu aryylillä, 5) —S(0)p—, jossa p on 0, 1 tai 2, tai 15 6) -0-, kuten esimerkiksi

20 ' , V

ί^ι Λ _ \ •'.0 ..... 25 O T * ' * * «A/l/1 ··· . .

. . tai !.!! kJiy ; ***** * :.V 30 R3 valitaan joukosta; 1) vety, •T; 2) C^-alkyyli, * ,···. 3) C5_10-sykloalkyyli, joka on mahdollisesti subs ti- *"4 tuoitu hydroksilla, • · * • · 14 119473 4) C6_10-aryyli, joka on substituoimaton tai substi-tuoitu yhdellä tai useammalla ryhmistä, jotka ovat: a) halogeeni, b) hydroksi, 5 G) -N02 tai -*1{R)2, d) C1_4-alkyyli, e) G^-alkoksi, joka on substituoimaton tai substi-tuoitu yhdellä tai useammalla ryhmistä, jotka ovat ~0H tai CjL.j-alkoksi, 10 f) -C00R, g) ~con(R)2, h) -ch2n<r)2, i) -ch2nhcor, j) -CN, 15 k) -CF3, l) -NHCOR, m) aryyli-Cj.a-alkoksi, n) aryyli, o) -NRS02R, 20 p) -OP(0)(ORx)2 tai g) -Rs, joka on määritelty jäljempänä, tai .:. 5) monosyklinen tai blsyklinen heterosykli, joka ···· sisältää 1 ~ 3 heteroatomia, valittuina joukosta N, o ja S, kuten esimerkiksi 2~pyridyyli, 3-pyridyyli tai 4-pyri- • · ... 25 dyyli, ja joka on substituoimaton tai substituoitu Rs:llä • · ja mahdollisesti yhdellä tai useammalla ryhmistä, jotka • φ · '•:·* ovat • · · • · · *·* * a) halogeeni, b) Clw4-alkyyli tai 30 G) C^g-alkoksi; : *: m on 2, 3, 4 tai 5; #·|·# n on 0, 1, 2 tai 3; • · · R on vety tai C^-alkyyli? *;** Rx on H tai aryyli ? ’·**· 35 R4 on sUoräketjuinen tai haaroittunut C^g-alkyyli; ja • · R5 on is 1 1 9473 1) -W- (CH3 )e-NR1R7,. jossa W on edellä määritellyn mukainen, ja R6 ja R7 valitaan itsenäisesti kulloinkin seuraavas-5 ta joukosta: a) vety, b) Ci.g-alkyyli, joka on substituoimaton tai substituoitu yhdellä tai useammalla ryhmistä, jotka ovat 1) C1.3-alkoksi, 10 li) -OH tai lii) -N(R)2, o) aromaattinen heterosykli, joka on substituoimaton tai substituoitu yhdellä tai useammalla ryhmistä, jotka ovat 15 i) C^-alkyyli tai U) -N)R)2, d) tai R6 ja R7 ovat liittyneet toisiinsa muodostaen sen typen kanssa, johon ne ovat kiinnittyneet, 5 - 7-jäsenisen heterosyklin, kuten morfolinon, sisältäen jopa kak-20 si lisäheteroätomia valittuina joukosta -N(Rj, -O-, -S-, —S(O)— tai -S(0)2, jolloin heterosykli mahdollisesti on ... substituoitu C^-alkyyIillä, • · · 2) -(CH2 )q-NR6R7, jossa q on kokonaisluku 1 - 5, ja R6 ja R7 on määritelty edellä, lukuunottamatta sitä, että ♦ 1 25 R6 tai R7 eivät ole H tai substituoimaton C1.6-alkyyli, tai * · 3) bentsofuryy1i, indolyyli, atsasykloalkyyll, at- • · · sabisyklo-C7_u-sykloalkyyli tai bentsopiperidinyyli, joka • · 1 on substituoimaton tai substituoitu Ct.4-alkyylillä.

Kaavio 1 jäljempänä kuvaa tätä menetelmää. Mitkään * · V,· 30 tietyt kaaviossa käytetyt substituentit eivät kuitenkaan • · · :,,,ί rajoita nyt esillää olevaa menetelmää, kaavion ollessa ai- noastaan kuvaava.

• · · ··· • 1 • · « · · • ·

Kaavio 1 16 119473

Q V s O

5 (X°S ° ^ g^jTy | Cj emös 3 10 Ci

BocN^

k^H Λ W

I BocN"^ OH 1 v, »-Bo’NH ° VN^kArNXp 4 t-Bu-NH^O ° 5 Ci 20

Kaavan iv mukaiset välituotteet syntetisoidaan

··· saattamalla glysidoli tai sen Johdannainen II ja amidi III

···· reagoimaan vahvan emäksen läsnä ollessa. Vahvan emäksen on • · ...

oltava metalllpitöinen emäs, ja se voi tai ei voi olla • · 25 inertissä vedettömässä orgaanisessa liuottimessa kuten t « esim. syklisissä tai asyklisissä hiilivedyissä mukaan lu~ kien heksaanissa, pentaanissa, sykloheksaanissa jne. Sopivia Vahvoja emäksiä ovat LiN[ (CH3 )3Si]2, KN[(CH3)3Si]2,

NaNt(CH3)3Si]2, n-butyylilitium (n-BuLi)s-BuLi, t-BuLi, • · :,V 30 kalium^-tert-butoksidi, litiumdi-isopropyyliaraidi (LDA), • · ϊ,##ϊ litiumisopropyylisykloheksyyliamidi t 1 i ti umpy r rol ididi , ,···, litiurntetrametyylipiperididi, fenyylilitium, isopropyyli- * * * magnesiumkloridi, isobutyylimagnesiumkloridi ja vastaaavat *;** alalla tunnetut vahvat emäkset. Edullisia vahvoja emäksiä *""* 35 ovat n-BuLi, s-BuLi, LiN[{CH3)3Si]z ja LDA, jolloin n-BuLi · 119473 17 ja LiN[ (CH3)3Si]2 ovat edullisimmat. Edullisesti käytetään 1 - 2 mooliekvivalenttia vahvaa emästä 1 mooliekvivalenttia liira kohtia jolloin suhde noin 1,15:1 mooliekviva-lenttia emästä:III on edullisin. II:n reaktio III:n kanssa 5 voidaan suorittaa yhdistämällä II ja III yhdessä astiassa ja lisäämällä sitten vahvaa emästä, tai se voidaan suorit-taa peräkkäin, s.o. käsittelemällä ensin amiini III emäksellä, minkä jälkeen lisätään II. Vahva emäs aikaansaa amidin HI metalloinnin asemassa alfa karbonyyliryhmän IÖ suhteen, jolloin saadaan reaktiivinen metalliamidienolaat-ti, joka siten aikaansaa epoksidin II renkaan avautumisen pääteasemassa, jolloin saadaan tuote IV. Uusi symmetria-keskus luodaan tuoteisosteerissä IV 2-asemassa.

Reaktio suoritetaan edullisesti alhaisessa lämpöti-15 Iässä, esimerkiksi välillä noin -82 “C ja 0 "C. Amidin III metalloinnnin aikaansaamiseksi lämpötila pidetään edullisemmin välillä -82 °C ja -40 °C, ja edullisimmin välillä -50 “C ja -45 °C. Metalloidun amidin ja II:n välisen reaktion aikaansaamiseksi, jolloin muodostuu IV, lämpötilaväli 20 pidetään edullisemmin välillä -50 °C ja -10 eC, ja edullisimmin välillä -30 1C ja -20 °C 4 - 5 tunnin aikana.

II:n reaktio Hirn kanssa suoritetaan edullisesti ···· .1,·, eetteriliuottimessa. Eetteriliuottimet ovat mitkä tähän- • » · ,[.]· sa liuottimet, jotka ovat soveliaita käytettäviksi tässä • e φ...# 25 reaktiovaiheessa kuten esim. tetrahydrofuraani, 1,2-dime- **! toksietaani, dietyylieetterl ja metyyli-t-butyylieetteri t · · tai niiden kombinaatiot, jolloin tetrahydrof uraani on : edullinen.

Kaavan I mukaiset yhdisteet valmistetaan saattamal- • · *.V 30 la kaavan IV mukainen yhdiste reagoimaan kavan V mukaisen amiinin kanssa. Edullisesti käytetään noin 1-3 mooliek-

,···, vivalenttia amiinia V 1 mooliekvivalenttia epoksidia IV

• · ·

kohti, jolloin suhde noin 1,05:1 mooliekvivalenttia V: IV

• · *1’ on edullisempi.

• « 119473

IB

Reaktio voidaan suorittaa missä tahansa sopivassa liuottimessa kuten esim. sellaisessa, joka on valittu hiilivedyistä, kuten tolueeni, eettereistä kuten dietyylieet-teri, alkoholeista kuten metanoli, etanoli tai isopropano-5 li, nitriileistä kuten asetonitriili ja estereistä kuten etyyliasetaatti, tai niiden kombinaatioissa, jolloin alkoholit ovat edullisia ja isopropanoli on edullisin. Reaktion lämpötila voidaan pitää välillä ympäristön lämpötila - käytetyn liuottimen refluksointilämpötila, mutta 10 reaktio suoritetaan edullisesti korotetussa lämpötilassa esim. välillä 80 "C - 90 °C, ja edullisimmin noin S3 °C -85 °C.

Aktivoituja kaavan II mukaisia glysidoleja voidaan valmistaa alalla tunnetuin menetelmin kuten on kuvattu 15 esim. julkaisussa J. Org. Chem. 1989, 54, 1295 - 1304 ja siinä mainituissa viitteissä.

Kaavan III mukaiset amidiyhdisteet voidaan valmistaa alan ammattimiehen tuntemin menetelmin kuten esim. on kuvattu esimerkissä 1, käyttäen sopivia lähtöaineita.

20 Suojaryhmiä kuten typplsuojaryhmlä voidaan käyttää, milloin näin sopii sovellettaessa tätä keksintöä. Esimer- .:. kiksi voidaan 2-t-butyylikarboksiamidlpiperatsiinin 4-ase- ···· man typpi suojata ryhmällä kuten B0C:lla, CBZ:11a, bent- • · · syylillä, 4-metoksibentsyylillä, 2,4-dimetoksibentsyylil- • · ... 25 lä, trifluoriasetamidilla, trialkyylisilyylillä tai muilla • · • · *" alalla tunnetuilla ryhmillä.

* · *

Lopputuotteet HIV-proteaasi-inhibiittorit valmiste - « · · *·* * taan kaavan I mukaisista yhdisteistä poistamalla mahdolli set jäljellä olevat suojaryhmät alan ammattimiehen hyvin • ♦ V.· 30 tuntemin suojaryhmän poistamismenetelmin. Esimerkiksi voi- :***: daan ketaalisuoj aryhmä poistaa käsittelemällä I hapolla .·», metanoiin läsnä ollessa, tai vesipitoisella hapolla tai • ·

1 n kloorivetyhapolla tetrahydrofuraanissa, jolloin syntyy "S lopulliset HIV-proteaas i-inhibi ittorituotteet. Kaavan I

• · • « 19 1 19473 mukaiset yhdisteet voidaan myös substituoida edelleen alalla tunnetuin menetelmin1

Eräässä tämän keksinnön mukaisessa suoritusmuodossa stereokeskuksella a on S-konfiguraatlo; X on p-tolueeni-5 sulfonyyli; r on 1; R1 ja R1 ovat liittyneet toisiinsa muodostaen syklisen rakenteen, joka valitaan joukosta:

Boc-N^ "Ί i^V^'N'^1 io y1 V Vv «Λλλαγ . “ ΛηΛΛΑΛ 15 Ον^ογΝ·^ oor 5Vv.

*λλαλ

H

29 (T|!l , (Xl < VV jb γγν ··· **·· .

R· valitaan joukosta fenyyli, • · 1 • · .···! 25 ιΓ^ν γ1^ ··:' Λ-^J J» ΚΧ ' • · ♦ ^ ^ • · · ··· • ·· V : ja R4 on tert-butyyli.

Tämän suoritusmuodon sisällä on edullinen kaavan II

• » 30 mukainen yhdiste, joka on kaavan IV-a mukainen välituote-yhdiste • i1 • · « • · · · · • 1 • 1 • · · * a • a • • 1 20 119473 s ‘^rvvf ο ΓΛ 10 Tämän suoritusmuodon sisällä ovat myös edulliset kaavan I mukaiset yhdisteet, Jotka ovat kaavan Ι-a Ja I-b mukaiset välituoteyhdlsteet

Boc-N '""''"'j OH

V' - ’ -'S ·// „ CONH-t-Bu O ΓΛ 20 •rt (fY^O OH fv !·!·: M ^nXL,^0 25 5 ΓΥί H- .···. -5 CONH-t-Bu O r\ * 1 / \ ··· i / ! ·1· (if

··· lv M

• · · Xv Jr • :V: 30 Yhdiste I-b voidaan valmistaa suoraan kytkemällä 2 (S) -t-butyylikarboksiamidi-4N“ (metyyli-3-pyrldyyli )pipe- ratslini IV~a:n kanssa. Lopputuote L-735 524 valmistetaan ·]/ edullisesti poistamalla suojaryhmä ja pikolyloimalla I-a, « · *·1·1 kuten on esitetty esimerkeissä 3-4.

• · · 9 119473 21 Tämän keksinnön mukaiset menetelmät ja välituotteet Ovat käyttökelpoisia valmistettaessa lopputuoteyMisteitä, jotka ovat käyttökelpoisia HIV-proteaasin inhibitiossa, humaani-immuunikatoviruksen (HIV) aikaansaaman infektion 5 ehkäisemisessä tai tämän hoidossa ja infektiosta johtuvien patologisten tilojen, kuten AIDS:n, hoidossa1 AIDS:n hoito tai HIV-infektion ehkäiseminen tai sen hoito määritellään siten, että siihen kuuluvat, mainittuihin kuitenkaan rajoittumatta, suuri joukko HlV-infektiotiloja, joita ovat 10 AIDS, ARC (AIDS:iin liittyvä kompleksi), jotka ovat sekä oireellisia että oireettomia, ja varsinainen tai mahdollinen altistuminen Hiv:lie. Lopputuoteyhdisteet, jotka voidaan Valmistaa käyttäen tämän keksinnön mukaisia menetelmiä ja välituotteita, ovat esimerkiksi käyttökelpoisia 15 HIV-infektion hoidossa, kun potilaan epäillään altistuneen aikaisemmin HIV:lie esimerkiksi verensiirron, elimensiirron, ruumiinnesteiden vaihdon, puremien, vahingossa tapahtuneen neulanpiston tai leikkauksessa tapahtuneen potilaan verelle altistumisen jälkeen.

20 Lopulliset HIV-proteaasi-inhibiittorituotteet ovat myös käyttökelpoisia antiviraalisten yhdisteiden valmista-*;· misessa ja antiviraalisten yhdisteiden seulontamääritysten • ••t ·1.1. suorittamisessa. Lopputuoteyhdisteet ovat esimerkiksi • · käyttökelpoisia sellaisten entsyymimutanttien eristämises- .···, 25 sä, jotka ovat erinomaisia seulontatyökaluja yhä voimak- "! kaamplen antiviraalisten yhdisteiden aikaansaamiseksi. Li- säksl tällaiset yhdisteet ovat käyttökelpoisia tutkittaes- # · · sa tai määritettäessä muiden antiviraalisten aineiden sitoutumiskohtia HIVrssä, esim. käyttämällä kompetitiivista 30 inhibitiota. Lopputuoteyhdisteet, jotka valmistetaan käyt- ··· ·...·' täen tämän keksinnön mukaisia menetelmiä ja välituotteita, ovat siten kaupallisia tuotteita, joita on tarkoitus pitää • 1 ,···, kaupan näihin tarkoituksiin.

• · HIV-pröteaasi-inhibiittoriyhdisteitä, joita voidaan 1 35 valmistaa käyttäen tämän keksinnön mukaisia menetelmiä ja « • · 119473 22 välituotteita, kuvataan julkaisussa EPO 541 168. HIV-pro-teaasi-inhibiittoriyhdisteitä voidaan antaa tällaista hoitoa tarvitseville potilaille farmaseuttisina koostumuksina, jotka käsittävät farmaseuttisesti hyväksyttävän kan-5 tajän ja terapeuttisesti tehokkaan määrän yhdistettä tai sen farmaseuttisesti hyväksyttävää suolaa. Julkaisussa EPO 541 168 kuvataan sopivia farmaseuttisia koostumuksia, antotapoja, suolamuotoja ja annostuksia yhdisteille.

Tämän keksinnön mukaisissa yhdisteissä voi olla 10 asymmetrisiä keskuksia ja ne voivat esiintyä rasemaattei-ha, raseemisina seoksina ja yksittäisinä diastereomeereinä tai enantiomeeereinä, ja kaikki isomeeriset muodot sisältyvät tähän keksintöön.

Kun jokin vaihtuva ryhmä (esimerkiksi, aryyli, he-15 terosykli, R, Rl, R2, n, X jne.) esiintyy useammin kuin kerran missä tahansa rakenneosassa tai kaavoissa I - V, niin sen määritelmä kullakin esiintymiskerrallaan on riippumaton sen määritelmästä kaikilla muilla esiintymisker-roilla. Myös substituenttien ja/tai vaihtuvien ryhmien yh-20 distelmät ovat sallittuja vain silloin, kun nämä yhdistelmät tuottavat pysyviä yhdisteitä.

Ellei toisin ole mainittu, sisältää "alkyyli” tässä ,v, keksinnössä sekä haara- että suoraketj ui set tyydyttyneet • · * J f*. alifaattiset hiilivety ryhmät, joissa on ilmoitettu määrä • · ... 25 hiiliatomeja (Me on metyyli, Et on etyyli, Pr on propyyli, *** Bu on butyyli, t-Bu on tert-butyyli ); "alkoksi" tarkoittaa • · · *“·* ilmoitetun hiiliatomimäärän sisältävää alkyyliryhmää, joka *.* ' on kiinnittynyt happisillan välityksellä; ja "sykloalkyy- liin" on tarkoitus sisältyä tyydyttyneet rengasryhmät, ku- • · V.: 30 ten syklopropyy1i, syklobutyyli, syklopentyyli, syklohek- ϊ#4|ϊ syyli (Cyh) ja sykloheptyyli. "Alkenyyliin*' on tarkoitus .*··, sisältyä hiilivetyryhmät, jotka ovat joko suoraketjuisessa • · · l..' tai haaraketjuisessa konfiguraatiossa ja joissa on yksi • · *!* tai useampia kahden hiilen välisiä kaksoissidoksia, jotka 35 voivat esiintyä missä tahansa pysyvässä kohdassa pitkin ·«·· ♦ · 119473 23 ketjua ja joita ovat etenyyli, propenyyli, butenyyli, pen-tenyyli ja vastaavat. "Alkynyyliin" on tarkoitus sisältyä hiilivetyryhmät, jotka ovat joko suoraketjäisessä tai haa-raketjuisesea konfiguraatiossa ja joissa on yksi tai 5 useampia kahden hiilen välisiä kolmoissidoksia, jotka voivat esiintyä missä tahansa pysyvässä kohdassa pitkin ketjua ja joita ovat etynyyli, propynyyli, butynyyli, penty-nyyli ja vastaavat. "Halogeeni" tarkoittaa tässä fluoria, klooria# bromia ja jodia. "Aryyli" tarkoittaa tässä käy-10 tettynä fenyyliä (Ph) tai naftyyliä.

Milloin ei toisin ole mainittu, tarkoittaa termi heterosykli tai heterosyklinen tässä pysyvää 5 - 7-jäsenistä mono- tai bisyklistä tai pysyvää 7 - 10-jäsenistä bisyklistä heterosyklistä rengassysteemiä, jonka mikä ta-15 hansa rengas voi olla tyydyttynyt tai tyydyttymätön, ja joka koostuu hiiliatomeista ja yhdestä kolmeen heteroato-mista valittuina joukosta N, 0 ja S, ja jossa typpi- ja rikkiheteroatornit voivat mahdollisesti olla hapettuneita ja typpiheteroatomi voi mahdollisesti olla kvaternisoitu, 20 ja joihin kuuluu mikä tahansa bisyklinen ryhmä, jossa mikä tahansa edellä kuvatuista heterosyklisistä renkaista on ··· fuusioitunut bentseenirenkaaseen. Heterosyk linen rengas «··· ·1·1. voi olla kiinnittyneenä mihin tahansa heteroatomiin tai • · hiiliatomiin siten, että tästä syntyy pysyvä rakenne. Esi-,···, 25 merkkejä tällaisista heterosyklisistä yksiköistä ovat pi- • 4 peridinyyli, piperatslnyyli, 2-oksopiperatsinyyli, 2-okso- • · · !!!( piperidinyy 1 i, 2-oksopyrrolodinyyli, 2-oksoatsepinyyli, ** 1 atsepinyyli, pyrrolyyli, 4-piperidonyyli, pyrrolidinyyli, pyratsolyyli, pyratsolidinyyli, imidatsolyyll, imidatsoli-30 nyyli, imidatsolidinyyli, pyridyyli, pyratsinyyl 1, pyrimi-dinyyli, pyridatsinyyli, oksatsolyyli, oksatsolidinlnyyli, * isoksatsolyyli, isoksatsolidinyyli, morfolinyyli, tiatso- * .···. lyyli, tiatsolidinyyli, isotiatsolyyli, kinuklidinyyli, • · "1 isotiatsolidinyyli, indolyyli, kinolinyyli, isokinolinyy- 1 35 li, bentsimidatsolyyli, tiadiatsoyyli, bentsopyranyyli, t · 119473 24 bentsotiatsolyyli, bentsoksatsolyyli, furyyli, tetrahydro-furyyli, tetrahydropyranyyli, tienyyli, bentsotienyyli, tiaroorfolinyylltiamorfolinyylisulfoksidi, tiaraorfolinyy-lisulfoni ja oksadiatsolyyli. Morfolino on sama kuin mor-5 folinyyli.

Jäljempänä kuvataan seikkaperäisesti edustavia kokeellisia vaiheita, joissa käytetään hyväksi uutta menetelmää . Nämä menetelmät toimivat ainoastaan esimerkkeinä, eikä niitä pidä tulkita tämän keksinnön mukaista uutta melo netelmää rajoittaviksi,

Esimerkki 1 Amidin 1 valmistus NHj, Ci ? ΓΥ\.··ΌΗ ^ EI3N ks r\ 9ch3 h. 1 fj 2) Ä ^ 20 ... Liuos, jossa oli (-)-cis-l-aminoindan-2-olia 7! (884 g, 5,93 mol) 17,8 l:ssa kuivaa THF:ää (KF « 55 mg/ml) ·**,* (KF tarkoittaa Karl Fisher vedentitrausta) ja trie tyyli- • · · · · 25 amiinia (B68 ml, 6,22 mol) 50 litran, pyöteäpohjäisessä • * *···’ pullossa, joka oli varustettu termoparimittauslaitteella, mekaanisella sekoittajalla ja typen sisäänjohtosuuttimella * * * V · ja kuplanmuodostajalla, jäähdytettiin 15 °C:seen. Sitten lisättiin 3-fenyylipropionyylikloridia (1 000 g, 5,93 mol) 30 75 minuutin aikana, jolloin sisälämpötila pidettiin välil- • · .·**. lä 14 - 24 “c j ää/vesi - j äähdy tyshauteen avulla. Lisäyksen jälkeen seosta kypsytettiin 30 minuuttia 18 - 20 0C:ssa ja tutkittiin HFLC-analyysillä (-)-cis-l-amlnoindan-2-olln häviämisen toteamiseksi.

* • · * • · 25 119473

Reaktion edistymistä monitoroitiin korkean erotuskyvyn nestekromatografia (HPLC) -analyysillä; 25 cm:n Dupont C8-RX-kolonna, 60:40 asetonitriili/10 mM (KH2P04/ KaHP04), 1,0 ml/min, injektiotilavuus = 20 ml, detektio = 5 200 nm, näytteen preparointi - 500 x laimennus. Likimää räiset retentioajat: retentioaika (min.) tunnistus 6,3 cis-aminoindanoli 10

Raektioseos käsiteltiin pyridinium-p-tolueenisulfo-naatilla (241 g, 0,96 mol, 0,16 ekv.) ja sitä sekoitettiin 10 minuuttia (seoksen pH laimentamisen jälkeen samanlaisella vesimäärällä on välillä 4,3 - 4,6). Sitten lisättiin 15 2-metoksipropeenia (1,27 1, 13,24 mol, 2,2 ekv.) ja reak-tioseosta kuumennettiin kaksi tuntia 38 - 40 °C:ssa. Reak-tioseos jäähdytettiin 20 “G:seen ja se jaettiin etyyliasetaatin (12 1) ja 5-%:isen natriumvetykarbonaatin vesiliuoksen (10 1) välillä. Seosta sekoitettiin ja kerrokset 20 erotettiin. Etyyliasetaattluute pestiin 5-%:isella natriumvetykarbonaatin vesiliuoksella (10 1) ja vedellä .:. (41). Etyyliasetaattiuute kuivattiin atmosfäärisellä tis- * * · lauksella ja liuotin vaihdettiin sykloheksaaniksi (koko- · · naistilavuus noin 30 1). Tislauksen ja konsentroinnin lo- • · ... 25 pussa (20 tilavuus-% etyyliasetaattiuutetilavuudesta), "f kuuma sykloheksaaniliuos sai hitaasti jäähtyä 25 °C:seen • · · tuotteen kiteyttämiseksi. Syntynyt liete jäähdytettiin • · · *·* * edelleen 10 °C:seen ja sitä kypsytettiin tunnin ajan.

Tuote eristettiin suodattamalla ja kostea kakku pestiin \V 30 kylmällä (10 °C) sykloheksaani 11a (2 x 800 ml). Pesty kak-ku kuivattiin vakuumissa (26”, 64 mm Hg) 40 °C:ssa, jol-loin saatiin 1,65 kg asetonidia 1 (86,4 %, 98 pinta-ala-% • · · !.. HPLC:n perusteella). 1H-NMR (300,13 MHz, CDC13, päärotamee- **:** ri) 6: 7,36 - 7,14 (m, 9H), 5,03 (d, J * 4,4, 1H), 4,66 '"*·· 35 (m, 1H), 3,15 (m, 2H), 3,06 (br s, 2H), 2,97 (m, 2H), 1,62 • · 26 119473 (s, 3H), 1,37 (s, 3H); 13C-NMR (75,5 MHz, CDC13, päärotamee-rl) 6C: 168,8, 140,9, 140,8, 140,6, 128,6, 128,5, 128,4, 127,1, 126,3, 125,8, 124,1, 96,5, 78,6, 65,9, 38,4, 36,2, 31,9, 26,5, 24,1.

5 Analyysi C^H^NO*: laskettu: C 78,47,· H 7,21; N 4,36; saatu: C 78,65; H 7,24; N 4,40.

Esimerkki 2 Epoksidin 3 valmistus 10 a. Tosylaattimenetelmä JY r£Kr. „ O.

__ tijCXo 1 ς yL· s emäs J. \—\ 1 ° Γ\

Liuoksesta, jossa oli asetonidla 1 (1 000 g, 3,11 20 mol) ja 2(S)-glysidyylitosylaattia 2 (853 g, 3,74 mol, 1,2 ekv.) 15,6 1:ssa THF:ää (KF « 22 mg/ml) 50 litran, pyöreä- m.m pohjaisessa nelikaulapullossa, joka oli varustettu termo- 7! parilla, mekaanisella sekoittajalla, lisäyssuppilolla ja • · · *·*·[ typen sisäänjohtosuuttimella, poistettiin kaasu kolme ker- * ; 25 taa vakuumi-typpi-huuhtelun avulla ja seos jäähdytettiin • · · -56 "C:seen. Sitten lisättiin kahden tunnin aikana litium-heksametyylidisilatsidia (LiN[(CH3)3SiJ2) (2,6 1, 1,38 M, :T: 1,15 ekv.) pitäen sisälämpötilan välillä -50 - -45 °C.

Reaktioseosta sekoitettiin -45 - -40 *C:ssa tunnin ajan ja 30 se sai sitten lämmetä -25 °C: seen tunnin aikana. Seosta • · .1. sekoitettiin välillä -25 - -22 ec neljä tuntia (tai kunnes ·· lähtöaineasetonidla on 3,0 pinta-ala-%).

• · · *·[ * Reaktion edistymistä monitoroitiin HPLC-analyysil- *··.* lä: 25 cm x 4,6 nm Zorbax silikakolonni, 20 % etyyliase- ·;··· 35 taattia heksaanissa, 2,0 rnl/min, injektiotilavuus « 20 ml, • · 119473 27 detektio = 254 nm, näytteen preparointi = 100 x laimennus. Likimääräiset retentioaj at: retentioaika (min.) tunnistus 5.5 amidi 1 5 6„5 glysidyylitosylaatti 2 13.5 epoksidi 3

Reaktioseokseen lisättiin deionisoitunutta vettä (6,7 1) -15 °C:ssa ja se jaettiin etyyliasetaattiin 10 (10 1). Seosta sekoitettiin ja kerrokset erotettiin. Etyy- liasetaattiuute pestiin 1~%:isella natriumvetykarbonaatin vesiliuoksella (5 1) ja kyllästetyllä natriumkloridlliuok-sella (0,5 1). Etyyliasetaattiuute (28,3 1) konsentroitiin vakuumltislaUksella (28", 71 mm Hg) ja lisää efcyyliase-15 taattia lisättiin, jotta liuottimen vaihto etyyliasetaattiin olisi täydellinen (lopullinen tilavuus = 11,7 1). Etyyliasetaattikonsentraatti vaihdettiin edelleen metano-liin tuotteen kiteyttämlseksi ja konsentroitiin lopulliseen tilavuuteen 3,2 1. Jäljellä oleva etyyliasetaatti-20 liuotin poistettiin lisäämällä 10 1 metanolia ja ottamalla talteen 10 1 tislettä. Syntynyttä lietettä sekoitettiin ··· 22 °C:ssa tunnin ajan, jäähdytettiin sitten 5 °C:seen ja

• IM

kypsytettiin 0,5 tuntia. Tuote eristettiin suodattamalla ♦ * ja kostea kakku pestiin kylmällä metanolilla (2 x 250 • · 25 ml). Pesty kakku kuivattiin vakuumissa (26”, 64 mm Hg) 25 °C:ssa, jolloin saatiin 727 g epoksidia 3 (61,2 %, 98,7 pinta-ala-% pääepoksidia HPLCtn perusteella). i3C-NMR (300 *·* * MHz, CDCI3, päärotameeri) 6: 171,1, 140,6, 140,5, 139,6, 129,6 128,8, 128,2, 127,2, 126,8, 125,6, 124,1, 96,8, • · V.; 30 79,2, 65,8, 50,0, 48,0, 44,8, 39,2, 37,4, 36,2, 26,6, O 24,1.

Φ • · · • · · • · 1 • · * · • m • ·

t I

28 1 1 9 4 7 3

Epoksidin 3 valmistus b. Epikloorihydriinimenetelmä ϊν ”Ι^~α Ο _ _ 1 cr Λ h f\/ Ρ emäs ^Ρ (^Υ 2} KOt- amyyli 0 Γ) 1 U 3 ΓΎ 10 L I)

Liuoksesta, jossa oli asetonidia 1 (3,00 g, 9,33 mmol) 47 ml:ssa molekyyliseuloilla kuivattua THF:ää, pois-15 tettiin kaasu typellä ja syntynyt liuos jäähdytettiin -78 °C:seen ja käsiteltiin litiumheksaraetyylidisilyyliat-sidiliuoksella (1,38 M tetrahydrofuraanissa). Syntynyttä liuosta kypsytettiin 15 minuuttia -78 *C:ssa, sitten lisättiin tipoittain 2(S)-epikloorihydriiniä (1,2 ml, 15,3 20 mmol) ja syntynyt seos sai lämmetä -25 *C:seen tunnin aikana ja sitä kypsytettiin tunnin ajan· Reaktioseos jäähdy- •|· tettiin sitten uudelleen -78 eC:seen ja käsiteltiin 3,0 *··· ml: 11a litiumheksametyylidisilyyliatsidiliuosta sekä 1,0 ml: 11a 2(S)-epikloorihydriiniä. Reaktioseos sai lämmetä • · .•••# 25 -25 eC:seen ja sitä kypsytettiin kaksi tuntia. Reaktio lo- petettiin lisäämällä 20 ml kyllästettyä natriumvetykarbo- ”·* naattiliuosta ja seos uutettiin 120 ml:11a etyyliasetaat- • · · *·* * ti a, ja uutettiin takaisin 60 ml :11a etyyliasetaattia. Yh distetyt orgaaniset faasit pestiin natriumkloridiliuoksel- • · :.V 30 la, kuivattiin (MgS04), suodatettiin ja väkevöitiin alenne- ··· tussa paineessa, jolloin saatiin 3,97 g öljyä, joka puh- .···. distettiin silikageelikromatografiällä (80 g SiOa, eluointi * · · 4:1 heksaani/etyyliasetaatti-seoksella), jolloin saatiin • · 2,9 g seosta, jossa oli haluttua epoksidia 3 ja välituote-35 kloorihydriinituotetta. Osa seoksesta (1,29 g) liuotettiin *"*: molekyyliseuloilla kuivattuun THFiään (20 ml) 25 °C:ssa ja 119473 29 käsiteltiin 1,73 g:11a 25 paino~%:ista kalium-t-araylaatti-liuosta ja seosta kypsytettiin 25 ec:ssa tunnin ajan. Reaktioseos jaettiin etyyliasetaatin ja kyllästetyn nat-riumvetykarbönaatin vesiliuoksen välillä ja kerrokset ero-5 tettiin. Orgaaninen faasi pestiin natriumkloridiliuoksel-la, kuivattiin (MgS04) ja väkevöitiin alennetussa paineessa öljyksi. Öljy puhdistettiin silikageelikromatografialla (80 g Sipj, eluointi 4:1 heksaani/etyyliasetaatti-seoksel-la), jolloin saatiin 1,1 g (70 % kokonaissaanto) epoksidia 10 3.

Esimerkki 3 viimeistä edellisen 6 valmistus l5 1) BpoN^i H -S***/ oä f y §

t-Bu-NH^O

o --~~ 20 3 ·!· Π

BocN^j OH ( \ , .**·, 25 : ^^]τ—Ν/Ν0 <-- * ; || fc t-Bu-NH^O 5 0 j \ ··· Jr' • t i O**'* 30 f \ OH f****' ··· | I || ·***· .,,, ou

*.* * : ' ' ]pNH 5 H

:V: t-Bu-NH^O β 0 ΓΛ : * 35 Γ li 119473 30

Lietettä, jossa oli 2(S)-t~butyylikarboksiamidi-4-N-Boc-piperatslinia 4 (1 950 g, 6,83 mol, > 99,5 % ee) (ee = enantiomeerinen ylimäärä) ja epoksidia 3 (2 456 g, 4S/R-epoksidien 97,5:2,5 seos, 6,51 mol) isopropanolissa 5 (2-propanoli, 18, 6 1) 72 litran, pyöreäpohjäisessä pullos sa, jossa oli neljä kaulaa, ja joka oli varustettu mekaanisella sekoittajalla, refluksointijäähdyttäjällä, höyry-hauteella, teflonpäällystetyllä termoparilla ja typen sisään johtosuuttimella, re fluksoltiin (sisälämpötila 84 -10 85 °C). 40 minuutin kuluttua saatiin homogeeninen liuos.

Seosta refluksoitiin 48 tuntia.

Sisälämpötila oli refluksoinnin aikana 84 - 85 "C.

Reaktion edistymistä monitoroitiin HPLC-analyysil-lä: 25 cm:n Dupont C8-RX-kolonna, 60:40 asetonitriili/10 15 mM (KH2P04/K2HP04), 1,0 ml/min, detektio « 220 nm, näytteen preparointi = 2 μΐ, reaktioseos laimennettiin l ial:ksi asetonitriilillä. Likimääräiset retentioajat: retentioaika (min.) tunnistus 4,8 piperatsiinx 4 20 8,9 epoksidi 3 1.5,2 kytketty tuote 5 ·· *··♦ :V: 28 tunnin kuluttua jäljellä olevaa epoksidia 3 ja • · ··») kytkettyä tuotetta 5 oli 1,5 pinta-ale-% ja 91 - 93 pinta- .···. 25 ala-% vastaavasti. Seos jäähdytettiin 0-5 *C: seen ja . .·. 20, 9 1 6 N kloorivetyhappoa lisättiin pitäen lämpötilan alle 15 °C:ssa. Kun lisäys oli mennyt loppuun, seos lämmi- * · · tettiin 22 °C:seen. Tällöin huomattiin kaasunkehitystä (isobutyleeniä). Seosta kypsytettiin kuusi tuntia 20 - *·*·' 30 22 eC:ssa.

• * · • · '·;·* Reaktion edistymistä monitoroitiin HPLC-analyysi 1 - :*♦*; lä: samat olosuhteet kuten edellä. Likimääräiset retentio- m ·“·. ajat: »»f • · *···« • · 119473 31 retentioaika (min.) tunnistus 7,0 cis-aminoindanoli 11,9 viimeistä edellinen 6 15,1 kytketty tuote 5 5

Seos jäähdytettiin 0 °C:seen ja 7,5 1 50-%:ista natriumhydroksidiliuosta lisättiin hitaasti, jotta seoksen pH säädettäisiin arvoon pH « 11,6, pitäen lämpötilan alle 25 °C:ssa lisäyksen aikana. Reaktioseos jaettiin etyyli-10 asetaatin (40 1) ja veden (3 1) välillä. Orgaaninen faasi (60 1) väkevöitiin alennetussa paineessa (28", 71 mm Hg) ja liuotin vaihdettiin dimetyyliformamidiksi ja konsentroitiin lopulliseen tilavuuteen 10,5 1 (KF = 1,8 mg/ml). HPLC-tutkimuksen perusteella 6:n saanto etyyliasetaatissa 15 oli 86,5 %. Viimeistä edellinen yhdiste 6 dimetyyliform-amidissa käytettiin suoraan seuraavassa vaiheessa ilman eri puhdistusta. Eristetylle 6: lie: 13ONMR (75,4 MHz, CDC13) 6: 175,2, 170,5, 140,8, 140,5, 139,9, 129,1 128,5, 127,9, 126,8, 126,5, 125,2, 124,2, 73,0, 66,0, 64,8, 62,2, 20 57,5, 49,5, 47,9, 46,4, 45,3, 39,6, 39,3, 38,2, 28,9,

Esimerkki 4 ··· I1-735 524-monohydraatin valmistus ···· • · * · * *·* * ^ *H \\

.···. 25 ^wCH2CI

:··: mCl f jp (J-Hc,

Λ„ . O ?—\ Et3N

t-Bu-NH^O 6 / \ :λ·* 30 lii ^ (Λ :S (YY^ T 1

**:·[ S* 9H

*"'· 35 o Y~\ I-Bu-NH' O l )

iT

L-735,524 119473 32

Liuokseen, jossa oli edellisestä vaiheesta saatu 6 diraetyyliformamidissa (10,5 1, KF - 10 mg/rol), laitettiin 8 1 roolekyyliseuloilla kuivattua dimetyy1iformaraidia (KF < 30 mg/ml) ja seosta kuumennettiin höyryhauteella 30":n (76 5 mm) Hgin vakuumissa, jotta pääasiallisesti vettä ja/tai mahdollisesti jäljellä olevaa isopropanoli- tai etyyliase-taattiliuQtinta tlslautuisi pois. Lopullinen konsentroitu tilavuus oli 13,5 1 (KF » 1,8 mg/ml) ja sitten lisättiin trietyyliamiinia (2,86 1, 20,51 mol) 25 "Criseen liuokseen 10 sekä 3-pikolyylikloridihydrokloridia (96 %, 1287 g, 7,84 mol). Syntynyt liete kuumennettiin 68 "Csaeen.

Reaktion edistymistä monitoroitiin HPLC-analyysillä käyttäen samoja olosuhteita kuten edellisessä vaiheessa. Likimääräiset retentioajat: 15 retentioaika (min.) tunnistus

2,7 DMF

4,2 3-pikolyylikloridi 4, 8 L-735 524 9,1 viimeistä edellinen 6 20

Seosta kypsytettiin 68 °C:ssa kunnes viimeistä ( r edellistä yhdistettä 6 oli < 0,3 pinta-ala-% HPLC-analyy- •V: sin perusteella.

•

Seosta sekoitettiin neljä tuntia 68 eC:ssa, jääh- ,···, 25 dytettiin sitten 25 °C:seen ja jaettiin etyyliasetaatin • * (80 1) ja seoksen välillä, jossa oli 24 1 kyllästettyä • · « natriumvetykarbonaatin vesiliuosta ja tislattua vettä • · · (14 1). Seosta sekoitettiin 55 "Cissa ja kerrokset erotettiin. Etyyliasetaattikerros pestiin kolme kertaa vedellä *.V 30 (20 1) 55 °C:ssa. Pesty etyyliasetaattikerros konsentroi- \..Σ ti in atmosfäärin paineessa lopulliseen astiatilavuuteen 30 1. Atmosfäärisen konsentroinnin lopussa vettä (560 ml) * ,···. lisättiin ja siemennettiin L-735 524-monohydraatllla. Seos • · jäähdytettiin 4 °C:seen ja suodatettiin tuotteen talteen- * * 35 ottamiseksi. Tuote pestiin kylmällä etyyliasetaatilla (2 x • * 119473 33 3 1) ja kuivattiin talon vakuumilla 25 °C:ssa, jolloin saatiin 2 905 g (70,7 %) L-735 524-monohydraattia valkoisena kiintoaineena.

Esimerkki 5 5 Pyratsiini-2-tert-butyylikarboksiaraidi 9

Λ _ ("X

Ν^ΌΟΟΗ N CONHt-Bu 8 9 10 2-pyratsiinikarboksyylihappoa (8) 3,35 kg (27 mol) oksalyylikloridia 3,46 kg (27,2 mol) tert-butyyliamiinia (KP = 460 pg/ml) 9,36 1 (89 mol)

EtOAc (KF * 56 pg/ml) 27 1 15 DMF 120 «il 1-propanolia 30 1

Karboksyylihappo 8 suspendoitiin 27 l:aan etyyliasetaattia ja 120 mitään dimetyyliformamidia 72 l:n kolmi-20 kaulapullossa, samalla mekaanisesti sekoittaen typen alla ja suspensio jäähdytettiin 2 ·G:seen. Oksalyylikloridi 11-sättiln pitäen lämpötilan välillä 5-8 °C.

***«

Lisäys oli mennyt loppuun viiden tunnin kuluttua. Eksotermisen lisäyksen aikana kehittyi hiilimonoksidia ja • · .·♦·. 25 hiilidioksidia. Muodostunut kloorivety pysyi suurimmaksi • · “! osaksi liuoksessa. Läsnä oleva saostuma on todennäköisesti • · · *··' pyratsiinihappokloridin HC1-suola. Happokloridimuodostuk- i · « *·* ' sen määritys suoritettiin lisäämällä reaktloseoksen näyt teeseen vedetöntä t-butyyliamiinia. Kun reaktio oli mennyt • · *.·.· 30 loppuun oli jäljellä < 0,7 % happoa 8.

• · ·

Happokloridimuodostuksen loppuunmenemiskoe on tär- ,···, keä, koska epätäydellinen reaktio johtaa bis-tert-butyyli- • · · ,·», oksiamidiepäpuhtauden muodostumiseen.

• ·

Reaktion edistymistä voidaan monitoroida HPLC:llä: ”**· 35 25 cm:n Dupont C8-RX-kolonna, valuma 1,0 ml/min ja detek- **··« • « 119473 34 tip 250 nm; lineaarinen gradientti lähtien seoksesta 98 % 0,1-%:inen vesipitoinen H3P04 ja 2 % CH3CN ja loppuen seokseen 50 % vesipitoinen H3P04 ja 50 % CH3CN 30 minuutin aikana. Retentioajat: happo 8 - 10,7 minuuttia, amidi 9 = 28,1 5 minuuttia.

Reaktioseosta kypsytettiin 5 °C:ssa tunnin ajan. Syntynyt liete jäähdytettiin 0 “Ctseen ja tert-butyy1i-amiinia lisättiin siten, että sisälämpötila pysyi alle 20 °C:ssa.

10 Lisäys kesti kuusi tuntia, koska reaktio oli hyvin eksoterminen. Pieni osa muodostuneesta tert-butyy1iammo-niumhydrokloridista kulkeutui ulos reaktiosta vaahtomaise-na, valkoisena kiintoaineena.

Seosta kypsytettiin 18 °C:ssa vielä 30 minuuttia.

15 Saostuneet ammoniumsuolat poistettiin suodattamalla. Suo-datinkakku pestiin 12 1:11a etyyliasetaattia. Yhdistetyt orgaaniset faasit pestiin 6 lilla 3-%:ista natriumvetykar-bonaattiliuosta ja 2 x 2 1:11a kyllästettyä natriumklori-din vesiliuosta. Orgaaninen faasi käsiteltiin 200 g: 11a 20 Darco G60 hiiltä ja suodatettiin Solka Flokin läpi ja kakku pestiin 4 1:11a etyyliasetaattia, r Hiilikäsittely poisti tehokkaasti tuotteessa jonkin verran ollutta purppuranväriä.

• · 9:n etyyliasetaattiliuos konsentroitiin 10 mbar:n .*··, 25 paineessa 25 %:iin alkuperäisestä tilavuudestaan. 30 1 1-propanolia lisättiin ja tislausta jatkettiin kunnes lo- • · · 1“ pullinen tilauus oli 20 1.

• * S

* Tällöin etyyliasetaatti oli alle detektioraj an lH-NMR:ssä {< 1 %). Sisälämpötila tässä liuotinvaihdossa *·*·* 30 oli < 30 °C. 3:n 1-propanoli/etyyliasetaatti-liuos kesti ·· refluksointia atmosfäärin paineessa.

:*j*: Määrätilavuuden haihdutus antoi kullanruskean kiin- .*··. toaineen, sp. 87 - 88 °C, 13C-NMR (75 MHz, CDC13, ppm): 161,8, 146,8, 145,0, 143,8, 142,1, 51,0, 28,5.

• * • a 119473 35

Esimerkki 6 ras-2-tert-butyy1ikarboksiamidipiperatsiini 10 5 f 1 —" Γ 1 ^N^XONHt-Bu CONHt-Bu 9 H 10

Aineet 10 Pyratsiini-2~tert-butyylikarboksiamidia 9, 2,4 kg (13,4 mol) 1-propanoliliuoksessa 12 1, 20-%;ista Pd(OH),/ C: tä, 16 % vettä, 144 g.

Pyratsi ini-2-tert-butyylikarboksi amid i 9/1-propano-lilluos laitettiin 9 gallonan (34,2 1) autoklaaviin1 Kata-15 lyytti lisättiin ja seos hydrogenoitiin 65 eC:ssa vetypai-neessa 40 psi (3 atm).

24 tunnin kuluttua reaktioseos oli kuluttanut teoreettisen vetymäärän ja GCrn perusteella läsnä oli < 1 % 9. Seos jäähdytettiin, huuhdeltiin typellä ja katalyytti 20 poistettiin suodattamalla Solka Flokin läpi. Katalyytti pestiin 2 1:11a lämmintä 1-propanolia.

M|j· Todettiin että käyttämällä lämmintä 1-propanolia :*·1· suodatinkakun pesussa suodatus parani ja tuotehävikit suo- * · ···.: datinkakussa vähenivät* .···. 25 Reaktio monitoroitiin GC:llä: 30 m: n Megabore-ko- . .·. lonna, 100 °C:sta - 160 °C:seen 10 "C/minuutti, pidä siinä • · · viisi minuuttia, sitten 10 eC/minuutti 250 "Ciseen, reten- • · ·

tioajat: 9 = 7,0 minuuttia, 10 = 9,4 minuuttia. Reaktio-,, ta voitiin myös monitoroida TLC:llä käyttäen EtOAc/MeOH

• J · ♦1·* 30 (50:50) liuottimena ja ninhydriiniä kehity sai neena.

• 1· ·*** Määrä tilavuuden haihdutus antoi 10 valkoisena kiin- :V: toaineena, sp. ISO - 151 "C; 13C-NMR (75 MHz, D,0, ppm): 1 173,5, 59,8, 52,0, 48,7, 45,0, 44,8, 28,7.

*·» * * · · 119473 36

Esimerkki 7 (S) -2-iert-butyylikarbaksiamidipiperat8iini-bIs-(S)-kamferisulfonihapposuola (S) 11

5 H H

>N 2 (+)-CSA · 2 (+)-CSA

' H^CONHt"BU jsj CONHt-Bu 11 10 10

Aineet ras-2-tert-butyyllkarboksl- 4,10 kg (22,12 mol) amldipiperatsiinia 10 25,5 kg:ssa 1-propanoliliuoksessa liuotinta 15 (S)-(+)-10-kamferisulfonihappoa 10,0 kg (43,2 mol) 1-propanolia 12 1

Asetonitri i1iä 39 1

Vettä 2,4 1 20 Amiinin 10 liuos 1-propanolissa laitettiin 100 l:n

astiaan, joka oli kytketty panoskonsentraattoriin. Liuos konsentroitiin paineessa 10 mbar ja lämpötilassa < 25 “C

• ·· · tilavuuteen noin 12 1.

· · ...I: Tällöin tuote oli saostunut liuoksesta, mutta • * ... 25 se liukeni uudelleen liuokseen kun sitä kuumennettiin * · 50 eG:seen.

• * *

Homogeenisen määrätilavuuden analyysin perusteella * · · '·* 10: n konsentraatio Oli 341 g/1. Konsentraatio määritettiin HPLC:llä: 25 cm:n Dupont Zorbax RXC8-kolonna, valuma 1,5 • \V 30 ml/min ja detektio 210 nm; isokraattinen (98/2) CH3CN/ 0,l-%:inen vesipitoinen H3P04. 10:n retentioaika * 2,5 mi- .···. nauttia.

• · · ..... Asetonitriiliä (39 1) ja vettä (2,4 1) lisättiin, • · *" jolloin saatiin kirkas, hiukan ruskea liuos.

* · • * 119473 37

Vesipitoisuuden määritys KF-titrauksella ja CH3CN/ 1 -propanol i - suhteen määritys %-NMR-integraatiolla osoitti, että CHjCN/1-propanoli/vesi-suhde oli 26/8/1,6. Liuoksen konsentraatio oli 72,2 g/1.

5 (S j-IQ-kanvferisulfonihappo lisättiin 30 minuutin aikana neljänä annoksena 20 eC:ssa. Lämpötila nousi 40 °C:seen sen jälkeen kun (S)-10-kamferisulfonihappo oli lisätty. Muutaman minuutin kuluttua muodostui paksu valkoinen saostuma. Valkoinen liete kuumennettiin 76 °C:seen 10 kaikkien kiintoaineiden liuottamiseksi, hiukan ruskea liuos sai sitten jäähtyä 21 1C:seen kahdeksan tunnin aikana.

Tuote saostui 21 °G:ssa suodatinkakku pestiin 5 1:11a asetonitriili/l-propanoli/vesi 26:8:1,6-liuotin-15 seosta. Se kuivattiin 35 DC:ssa vakuumiuunissa typpivir- rassa, jolloin saatiin 5,6 kg (39 %) 11 valkoisena kiteisenä kiintoaineena, sp. 288 - 290 “C (hajoaa). [a] “ = 18,9° (c = 0,37, HjO). 13C-NMR (75 MHz, D20, pprt): 222,0, 164,0, 59,3, 54,9, 53,3, 49,0, 48,1, 43,6, 43,5, 43,1, 20 40,6, 40,4, 28,5, 27,2, 25,4, 19,9, 19,8.

Materiaalin ee oli 95 % seuraavan kiraalisen HPLC- ··· kokeen mukaan: määrätilavuus 11 (33 mg) suspendoitiin 4 ···· ml:aan etanolia ja 1 ml:aan trietyyliamiinia. Boc20 (11 mg) lisättiin ja reaktioseosta kypsytettiin tunnin ajan. Liuo- • · ... 25 tin poistettiin täysin vakuumissa ja jäännös liuotettiin • · *** noin 1 ml:aan etyyliasetaattia ja suodatettiin Pasteur- • 1 · ;j;' pipetin läpi silikageelillä käyttäen etyyliasetaattia • · · eluenttina. Haihdutetut tuotefraktiot liuotettiin uudelleen heksaaninn konsentraationa noin 1 mg/ml. Enantiomee- • ♦ :Λ1 30 rit erotettiin Daicel Chiracell AS-kolonnalla käyttäen ··· heksaani/isopropanoli (97:3) liuotinsysteeraiä valumalla .·1·. 1 ml/minuuti ja detektiolla 228 nm. Retentioajat: S-anti- • · · _·.. podi = 7,4 minuuttia, R-antipodi = 9,7 minuuttia.

• 1 *·· ♦ * • · · 119473 38

Esimerkki 8 (S)-2-1ert-butyy1ikarboksi amidi-4-tert-butoksikar-bonyylipiperatsiini 4 suolasta 11 H Boc 5 fS 2 (Βοο)ζΟ ^K^CONHt-Bu N CONHt-Bu

H H

tl 4 10 Eineet (S)“2-tert-butyylikarboksi- 5,54 kg (8,53 mol) amidlpiperatsiini-bis-{s)-(-f·)-CSA-suolaa 11r 95 % ee

Di-tert-butyylidikarbonaattia 1,86 kg (8,53 möi) 15 Trietyyliamiinia 5,95 1 (42,6 mol)

Etanolia tarkalleen 100 %:ista 55 1

Etyyliasetaattia 2 1 (S)-CSA-suolaan 11 100 l:n kolmikaulapullpssa, jos- 20 sa oli lisäyssuppilo, lisättiin typen alla etanolia ja trietyyliamiinia 25 °C:ssa. Kiintoaine liukeni helposti •j. lisättäessä trietyyliamiinia. Dl-tert-butyylidikarbonaatti ·«·· liuotettiin etyyliasetaattiin ja laitettiin lisäyssuppi-loon. Di-tert-butyylidikarbonaatin etyyliasetaattiliuos • t ... 25 lisättiin siten, että lämpötila pysyi alle 25 °C:ssa. Li- • « *" säys kesti kolme tuntia. Kun di-tert-butyylidikarbonaatti-

• I I

;;;* liuos oli kokonaan lisätty, reaktioseosta kypsytettiin :·** ! tunnin ajan.

Reaktion edistymistä voidaan monitoroida HPLCillä: • · v‘.·' 30 25 cm: n Dupont Zorbax-RXC8~kolonna, valuina 1 ml/min ja de- tektio 228 nm; isokraattinen (50/50) CH3CN/0,1 M KH2P04 sää-.···. dettynä arvoon pH = 6,8 natriumhydroksidilla. 4:n reten- • · t #I..# tioaika = 7,2 minuutla. Kiraalisuuden määritys suoritet- • · 7 tiin käyttäen samaa systeemiä kuiri edellisessä vaiheessa.

• i · 119473 39

Reaktiota voitiin myös monitoroida TLC:llä käyttäen 100 % etyyliasetaattia liuottimena (Rf * 0,7).

Liuos konsentroitiin sitten noin 10 1:ksi sisäisen lämpötilan ollessa < 20 eC panoskonsentraattorissa 5 10 mbar:n vakuumissa. Liuottimen vaihto vietiin loppuun valuttamalla siihen hitaasti 20 1 etyyliasetaattia ja konsentroimalla uudelleen noin 10 1:ksi. Reaktioseos pestiin ekstraktoriin 60 1:11a etyyliasetaattia. Orgaaninen faasi pestiin 16 1:11a 5-%:ista natriumkarbonaatin vesiliuosta, 10 2 x 10 1:11a tislattua vettä ja 2 x 6 1:11a kyllästettyä natriumkloridin vesiliuosta. Yhdistetyt pesuvedet uutettiin takaisin 20 1:11a etyyliasetaattia ja orgaaninen faasi pestiin 2 x 3 1:11a vettä ja 2 x 4 1:11a kyllästettyä natriumkloridin vesiliuosta. Yhdistetyt etyyliasetaatti-15 uutteet konsentroitiin 10 mbar:n vakuumissa noin 8 l:ksi sisäisen lämpötilan ollessa < 20 "C 100 l;n panoskonsentraattorissa. Liuottimen vaihto sykloheksaaniksi suoritettiin valuttamalla siihen hitaasti noin 20 1 sykloheksaania ja konsentroimalla uudelleen noin 8 l:ksi. Lietteeseen 11-20 sättlin 5 1 sykloheksaania ja 280 ml etyyliasetaattia ja seosta refluksoitiin kun kaikki oli liuennut. Liuos jääh-^j* dytettiin ja siemenainetta (10 g) lisättiin 58 °C:ssa.

;*;** Liete jäähdytettiin 22 °C:ksi neljän tunnin aikana ja tuo- • · te eristettiin suodattamalla kun sitä oli kypsytetty tun-.···. 25 nin ajan 22 °C:ssa. Suodatinkakku pestiin 1,8 1:11a syklo- I · heksaania ja kuivattiin 35 eC:ssa vakuumiuunissa typpivir-rassa, jolloin saatiin 1,87 kg (77 %, > 99,9 pinta-ala-% • · · HPLC:n mukaan, R-isomeeri havaitsemisrajan alapuolella) 4 hiukan kullanruskeana jauheena. [a] j;5 = 22,0° (c = 0,20, \V 30 MeOH), sp. 107 eC. 13C-NMR (75 MHz, CDCl3, ppm): 170,1, O 154,5, 79,8, 58,7, 50,6, 46,6, 43,6, 43,4, 28,6, 28,3.

··· • · * • · · «·* m * · *·· • · • 40 1 1 9473

Esimerkki 9 ($ )-2-tert-butyylikarboksiaroidipiperats i ini-bis-(L)-pyroglutamiinihappo 12

5 S 2L-PGA W · 2 L-PGA

^ N ’"XONHt-Bu ^ ^ ^GONHt*Bu 10 12 10

Aineet ras~2~tert-butyylikarboksi- (0,1.1 mol) amidipiperatsiinia 10 155 ml, näyte = 1-pröpanoliliuoksessa 21,1 g 15 L-pyroglutamiinihappoa 28 g (0/21 mol)

Vettä 5 ml ras-2-tert-butyylifcarboksiainidlpiperatsiinin 10 liuos 1-propanolissa laitettiin 500 ml:n kolmikaulapul-20 loon, joka oli varustettu refluksointijäähdyttäjällä, mekaanisella sekoittajalla ja typen sisäänjohtosuuttiroella. ,j. Vettä lisättiin yhdessä L-pyroglutamiinihapon kanssa ja syntnyt liete kuumennettiin refluksointilämpötilaan. Homo- • i i #*f*. geeninen keltainen liuos jäähdytettiin 50 eC:seen ja sie- • · ... 25 mennettiin R-amiinin bis-(L)-L-pyroglutamiinihapposuolal- **··* la (50 mg). Kiintoainetta rupesi heti muodostumaan. Liuos • * · ’;j;‘ jäähdytettiin edelleen 25 eC:seen ja sitä kypsytettiin 16 • · · *·* * tuntia. Kiintoaineet suodatettiin 22 *C:ssa ja suodatin- kakku pestiin 35 ml:11a kylmää 1-propanolia/1 % vettä V,·' 30 -seoksella. Suodatinkakku kuivattiin 35 eC:ssa vakuumiuu- :***: nissa typpi virrassa, jolloin saatiin 23,74 g (48 %) (R)-2- tert-bUtyγlikarboksiamidipiρeratsl·ini“bis“ (1)-pyroglu- • · · tamiinihappoa. Materiaalin ee oli 98 % edellä kuvatun ki- · *1* raalisen HPLC-kokeen mukaan. Keltainen emäliuos sisälsi *·*’· 35 22,6 g (46 %) (S)-2-tert-butyylikarboksiamidipiperatsiini- t · 119473 41 bis~(L)-pyroglutamiinihapposuolaa 12 ja ee oli 95 % kiraa-lisen HPLC-kokeen mukaan. Emälluos haihdutettiin ja käytettiin suoraan suoj ausvaiheessa.

Esimerkki 10 5 (S)-2-tert-butyylikarboksiamidi-4~tert-butoksikar- bonyylipiperatsiini 4 (S)-2-tert-butyylikarboksiamidipipe-ratsiini-bis-(L)-pyroglutamiinihapposuolasta 12 H Boc

1D rV2L-pQA (Boc)ao X

N CONHt-Bu N^CONHt-Bu

H

12 4 ftineet 15 (S)-2-tert-butyylikarboksi- 22,6 g (50,1 mmol) amidipiperatslini-bis-(L)-pyroglutamiinihapposuolaa, 95 % ee

Dl-tert-hutyylidlkarbonaattia 11,1 g (50,1 nunol)

Trietyyliamiinia 35,5 ml (0,254 mol) 20 1-propanolia 226 ml

Etyyliasetaattia 24 ml « · · * ,»[.t (S) -2-tert-butyylikarboksiamidipiperatsiini-bis- I I · (L) -pyroglutatniinihapposuolaan 500 ml:n kolmikaulapullos- 1 sa, jossa oli lisäyssuppilo, lisättiin typen alla 1-propa- • · *··;* nolla. Keltainen kumimainen kiintoaine liukeni helposti • · · *·|·* lisättäessä trietyyliamiinia. Liuos, jossa oli di-tert- V * butyylldikarbonäattia etyyliasetaatissa lisättiin kahden tunnin aikana 22 “Crssa. Kun lisäys oli kokonaan tapahtu- * · ϊ,ί,ί 30 nut, reaktioseosta kypsytettiin tunnin ajan.

Reaktion edistymistä voitiin monitoroida HPLCrllä ja TLC:llä käyttäen samoja menetelmiä kuten muutettaessa *., 11 4:ksi.

φ · *·;·* Liuos konsentroitiin sitten ja se vaihdettiin etyy- ***** 35 liasetaattiin (200 ml). Reaktioseos pestiin 50 ml:11a • * 42 1 1 9 4 7 3 7-%:ista natriumkarbonaatin vesiliuosta/ 2 x 100 ml:11a vettä ja kuivattiin (Na2S04) ja suodatettiin. Etyyliasetaatti liuos konsentroitiin ja liuotin vaihdettiin syklo-heksaaniksi f60 ml). Etyyliasetaattia (1 ml) lisättiin ja 5 seosta refluksoitiin kaikkien kiintoaineiden liuottamiseksi. Seos jäähdytettiin ja siemennettiin (50 mg) 52 eC:ssa. Liete jäähdytettiin 22 °C:ksi kahden tunnin aikana ja tuote eristettiin suodattamalla kun sitä oli kypsytetty tunnin ajan 22 aC:ssa. Suodatinkakku pestiin 8 ml:11a syklo-10 heksaania ja kuivattiin 35 ®C:ssa vakuumiuunissa typpivir-rassa, jolloin saatiin 10,8 g (74 %, > 99,9 pinta-ala-% HPLC-analyysin mukaan, R-isomeeri havaitsemisrajan alapuolella) 4 valkeana jauheena.

Esimerkki 11 15 (S/R)-2-1 er t-butyy 1 ikarboksi ami di - 4 -tert-butoks i - karbonyylipiperatsiinin 13 kineettinen resoluutio 4:ksi Boc Boc ^N^CONHt-Bu ^N^CONHt-Bu

20 H H

13 4

Aineet 9

Raakaa (S/R)-2-tert-butyylikarboksi- 1,40 g amidi-4-tert-butoksikarbonyyli-25 piperatsiinla 13 * *···' (S )~2-tert-butyylikarboksiamidi- 4 x 0,14 g 4-tert-butoksikarbonyyli-V · piperatsiinla 4 (> 99,5 % ee)

Metyylisykloheksaania, jossa oli :V: 30 2 % (til/til) etyyliasetaattia 14 ml ««· • · « · ·«·

Raaka kumimainen 13 liuotettiin 14 ml: aan liuo- • · 9 tinseosta lämmittämällä 90 °C:seen. Liuos sai jäähtyä * 9 '·;·* ja 10 "Ctn välein liuosta siemennettiin 0,14 g:lla 4 ·:*·; 35 (> 99,5 % ee). 55 °C:ssa neljäs siemenannos ei enää liuen- 9 9 9 43 119473 nut ja liuoksen jäähtyessä hitaasti huoneenlämpötilaan muodostui valkoinen kiteinen massa. Reaktio-seos suodatettiin, pestiin 3 ml: 11a metyylisykloheksaanl/etyyliasetaat-ti-liuotinseosta ja kuivattiin vakuumiuunissa typpivirras-5 sa, jolloin saatiin 0,95 g valkoista kiintoainetta. Enan-tiomeerisen puhtauden määritys Chiracell AS-kolonnalla osoittaa 93 % ee.

Esimerkki 12 trans-3-(4-pyridyyli)akryylihapon valmistus 10

O

Liuokseen, jossa oli 4-pyridiinikarboksialdehydiä 15 (36,7 ml, 0,384 mol) ja malonihappoa (40 g, 0,384 mol) 31 mljssa pyridiiniä lisättin piperidiiniä (0,12 ml) ja seos lämmitettiin 100 "Ciseen, Varoitus: kehittyy suuret määrät hiilidioksidia. Puolen tunnin kuluttua reaktioseos jäähdytettiin huoneenlämpötilaan (RT) ja liuos muuttui kiinteäk-20 si. Tämä trituroitiin 240 ml:11a vettä ja suodatettiin ja pestiin 2 x 50 ml:n vesiannoksilla. Kiintoaine kuivattiin ··· yön yli 42 °C:saa vakuumissa (10 mm Mg), jolloin saatiin • M· 37,1 g valkoista kiintoainetta; sp. 295 - 297 "C.

• «

Esimerkki 13 * · t*..# 25 N- (2 (R) -hydroksi-1 (S) -indanyyli ) -trans-3- (4-pyri- • · *'* dyyli)akryyliamidin valmistus • · · * · · φ ·η h 9h o:» so o \=l S··' \_) »«· '' l,,f • · · • t ·

Suspensioon, jossa oli trans-3~(4-pyridyyli )akryy-“* lihappoa (10,0 g, 0,067 mol) 500 ml:ssa THFtää lisättiin 35 trietyyliamiinia (10,29 ml, 0,0738 mol) ja liuos jäähdy- • · 119473 44 tattiin O eC:seen. Trimetyyliasetyylikloridia (8,68 ml, 0,0704 mol) lisättiin ja reaktioseosta sekoitettiin 0,5 tuntia. 2(R)-hydroksi-1(S)-indaania (10,0 g, 0,067 mol) liuotettiin 260 ml:aan THF:ää Injektioneulan avulla. Kah-5 den tunnin kuluttua reaktioseos lämmitettiin huoneenlämpö-tilaan ja sitä sekoitettiin vielä 15 tuntia. Liuotin poistettiin vakuumissa ja syntynyt kiintoaine trituroitiin kylmällä etyyliasetaatilla (150 ml) ja suodatettiin. Tämä kuivattiin yön yli vakuumissa (0,5 mm Hg), jolloin saatiin 10 18,5 g valkoista kiintoainetta; sp. 205 - 207 “C,

Esimerkki 14 N-(l, 2-N, O-isopropylideeni-2(R) -hydroksidi (S )-in-danyyli)-trans-3- (4-pyridyyli)akryyliamidln valmistus

15 VQ

20 Suspensioon, jossa oli N-(2{R)-hydroksi-l(S)-inda- nyyli )-· trans-3-(4-pyridyyli )akryyliamidia (18,5 g, 0,066 mol) 700 mltssa metyleeniklorldia lisättiin dimetoksipro- ··*· paania (49,0 ml, 0,402 mol) ja (+/-)-kamferisulfonihappoa (46,8 g, 0,201 mol). 20 minuutin kuluttua reaktioseos • · ... 25 muuttui homogeeniseksi. Reaktioseosta sekoitettiin kolme • « ....

"* tuntia ja se pestiin kyllästetyllä natriumvetykarboneatti- • « « *·“* liuoksella (2 x 150 ml). Vesikerros uutettiin metyleeni- *.* * kloridilla (3 x 200 ml) ja yhdistetyt orgaaniset kerrokset kuivattiin magnesiumsulfaatilla, suodatettiin ja konsent-ϊ.ν 30 roitiin öljyksi. Puhdistamalla flashpylväskromatografial-ϊ#β*ί la (100 x 150 mm sllikageelikolonna; gradienttieluointi 1:30:69, 2:30:68, 3:30:67, 5:30:65 MeOH:CHCl3 kyllästetty • » · NH3;CH2C12:11a) tuotti 16,0 g valkoista vaahtoa. (Rf - 0,46, **:'* 5:30:65 Me0H:CHCl3 kyllästetty NH3: CH2Cl2:lla ).

φ φ Φ Φ 119473 45

Esimerkki 15 N- (1,2-N, O~isopropylideeni-2(R)-hydroksi-1(S)-in-danyyli)-3-(4-pyridyyli)propyy1iamidin valmistus 10 N-(1,2-N,O-isopropylideeni-2(R) -hydroksi-1 (S)-inda-nyyli)-trans-3-(4-pyridyyli)akryyliamidiin (16,0 g, 0,0499 mol), jpkä oli liuotettu etanoliin (200 ml) ja THF:ään (200 ml) lisättiin 14,0 g Pd(0H)2:ta hiilellä (20 pai- 15 no-%:ista)- Pulloon johdettiin vetyä ja seosta sekoitettiin yhdeksän tuntia. Liuos huuhdeltiin argonilla, suoda-tettiin celitekerroksen läpi pestiin etanolilla (100 ml). Liuotin poistettiin vakuumissa ja tuote puhdistettiin flashpylväskromatografialla (10Ö x 150 mm silikageeli- 20 kolonna; gradienttieluointi 1:30:69, 2:30:68, 3:30:67, 5:30:65 MeOH:CHCl3 kyllästetty NH3:CH2Cl2:lla), jolloin tJ) saatiin 13,8 g valkoista vaahtoa. (Rf =» 0,5, 5:30:65

MeOH:CHG13 kyllästetty NHa:GHaCl2:11a), *·'·* Esimerkki 16 25 N--.(..2- (R) -hydroksi-1 (S) -indanyyli) - trans-3 - (3-pyrl- • · *···' dyyli) akryyli amidin valmistus

!:l:! OH

CJUyVn 30 o >=(

V \J

• as * · · Käyttämällä oleellisesti samaa menetelmää kuten *·;·* N- (2(R)-hydroksi-l (S )-indanyyli )-trans-3-( 4-pyridyyli )ak- ·:·*: 35 ryyliamidin valmistuksessa, mutta käyttämällä vastaavat ····«

• S

46 1 1 9473 lähtöaineet valmistettiin otsikon mukainen yhdiste. Fysikaaliset tiedot: sp. 119 - 120 °C.

Analyysi Ci7H16N202.0,65 H20: laskettu: C 69,92? H 5,97; N 9,59? 5 saatu: C 69,94; H 5,74; N 9,84.

Esimerkki 17 N- (1,2-N,O - isopropyl ideeni-2 (R) -hydroksi -1 (S) - inda-nyyli)»trans-3-(3-pyridyyli)akryyliamidin valmistus 10 .N.

CjL/ N ^ Ö 15 Käyttämällä oleellisesti samaa menetelmää kuten N-(1,2-N,0-isopropylideeni-2(R)-hydroksi-1(S)-indanyyli)- trans-3-(4-pyridyyli)akryyliamidin valmistuksessa, mutta käyttämällä vastaavat lähtöaineet valmistettiin otsikon 20 mukainen yhdiste. Fysikaaliset tiedot: sp. 134 - 136 *C.

Analyysi ^20^20^2^2 * 0 f 25 H20 I

··· laskettu: C 73,94; H 6,36? N 8,62? ···· •V. saatu: C 73,95? H 6,18; N 8,70.

• a ·.·*; Esimerkki 18 • · ,···, 25 N- {1,2-N, O - i sopropylideeni ~ 2 (R) -hydroksi-1 (S) -inda- • · nyyli)-3-(3-pyridyyli)propyyliamidin valmistus • SS ··· ··· • · · / f Ni Vq \V 30 li \ / **· _ Λ__/ : : O /s==\ aa# / \ :: : a ··« • a

• I

aa · •„ Käyttämällä oleellisesti samaa menetelmää kuten | 35 N-(1,2-N,0-isopropylideeni-2(R)-hydroksi-1(S)-lndanyyli)- ··«·· • · A7 1 1 9473 47 trans-3-(4-pyridyyli)propyyliamidin valmistuksessa, mutta käyttämällä vastaavat lähtöaineet valmistettiin etsikon mukainen yhdiste.

Vaikkakin edellä olevassa Selityksessä opetetaan 5 tämän keksinnön periaatteita käyttäen sitä kuvaamaan tarkoitettuja esimerkkejä, on ymmärrettävä, että keksinnön käyttö kattaa kaikki tavalliset muunnelmat, sovellutukset ja modifikaatiot, jotka kuuluvat seuraavien patenttivaatimusten ja niitä vastaavien ekvivalenttien piiriin, e • M • ··♦· • · • * « • « ··*·· • · *·· V t • · ··· • · · • * · ♦ ·· «·· te· • · ♦ v · • · · • · · * · V·· • · ♦ · ♦ *· ··· • · ♦ v · · V·· : : »·· *·*·♦ • · •••«s

• I

Claims (21)

119473

1. Ci-4-alkyyli tai il) -N)R)2, d) tai R6 ja R7 ovat liittyneet toisiinsa muodostaen sen typen kanssa, johon ne ovat kiinnittyneet, 5 - 7-jäse-5 nisen heterosyklin, sisältäen jopa kaksi lisäheteroatomia valittuina joukosta -N(R), -0-, -S-, -3(0)- tai -S (0)2, jolloin heterosykli mahdollisesti on substituoitu Ci-4-al-kyylillä, 2) - (CH2) q-NRsR7, jossa q on kokonaisluku 1-5, ja 10 Rs ja R7 on määritelty edellä, lukuunottamatta sitä, että R6 tai R7 eivät ole H tai substituoimaton Ci-6-alkyyli, tai 3. bentsofuryyli, indolyyli, atsasykloalkyyli, at-sabisyklo-C7_n-sykloalkyyli tai bentsopiperidinyyli, joka on substituoimaton tai substituoitu Ci-4-alkyylillä.

1. Menetelmä kaavan I mukaisen yhdisteen valmistamiseksi R3 R2 R1 OH (CHz)r~ / 9 r4 NHT^N'vX®s^YN'','ö ° ° O 5 tunnettu siitä, että saatetaan kaavan IV mukainen yhdiste - °o reagoimaan kaavan V mukaisen amiinin kanssa * "'""Λ v O R1 • · 10 jossa: stereokeskus a on joko R-konf iguraatiossa, S-konf iguraa- ««· ! i: tiossa tai se on raseeminen; r on kokonaisluku lähtien nollasta lukuun 5 käsittäen myös •V. 15 tämän; ·*·* i ? .·*·. R ja R valitaan itsenäisesti kulloinkin seuraa- • · ♦ ·· vasta joukosta: *·* * 1) vety, ·...· 2) -Ci-4-alkyyli, joka on substituoimaton tai subs- e 20 tituoitu yhdellä tai useammalla ryhmistä, jotka ovat « • · 119473 a) hydroksi, b) Ci-3-alkoksi, c) aryyli, joka on substituoimaton tai substituoitu yhdellä tai useammalla ryhmistä, jotka ovat Ci-4-alkyyli, 5 halogeeni, hydroksi tai aryyli, d) -W-aryyli tai -W-bentsyyli, jossa W on -0- tai -s-, e) 5 - 7-jäseninen sykioalkyyliryhmä, joka on substituoimaton tai substituoitu yhdellä tai useammalla ryhmis- 10 tä, jotka ovat i) hydroksi, ii) Ci_3-alkoksi tai iii) aryyli, f) heterosykli, joka on substituoimaton tai substi-15 tuoitu yhdellä tai useammalla ryhmistä, jotka ovat hydroksi, Ci-4-alkoksi, Ci-4-alkyyli, joka on substituoitu hydrok-silla tai Boctlla, g) -NH-COOCi_3~alkyyli, h) -NH-CO-Ci-3-alkyyli, 20 i) -NH-S02Ci-3~alkyyli, . j) -COOR tai ··♦ "·; k) - ( (CH2) m0) nR tai • · · ·*·] 3) aryyli, joka on substituoimaton tai substituoitu * yhdellä tai useammalla ryhmistä, jotka ovat ·»* 25 a) halogeeni, Σ,ί.ί b) hydroksi, :#:*i c) -NO2 tai -n(R)2, d) Ci-4-alkyyli, e) Ci-3~alkoksi, joka on substituoimaton tai substi- • · ,··*, 30 tuoitu yhdellä tai useammalla ryhmistä, jotka ovat -OH tai ·’ Cx-3-alkoksi, ··· J.: J f) -COOR, g) -cn(R)2/ h) -CH2N(R)2, 35 i) -ch2nhcor, • · j) -CN, 119473 k) -CF3/ l) -NHCOR, m) aryyli-Ci-3-alkoksi, n) aryyli, 5 o) -NRSO2R, p) -OP (O) (ORx)2 tai q) -R5, joka on määritelty jäljempänä; tai R1 ja R2 voivat olla liittyneet toisiinsa muodostaen sen typen kanssa, johon R1 on kiinnittynyt ja sen hiilen 10 kanssa, johon R2 on kiinnittynyt, 3 - 10-jäsenisen monosyk-lisen tai bisyklisen tyydyttyneen rengasjärjestelmän, joka koostuu siitä typestä, johon R1 on kiinnittynyt, ja 2 - 9 hiiliatomista, ja on substituoimaton tai substituoitu yhdellä tai useammalla ryhmistä, jotka ovat 15 1) hydroksi,

2. Ci-4-alkyyli,

2. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tun nettu siitä, että reaktio suoritetaan liuottimessa, joka valitaan Ci-3-alkoholista, ja lämpötila on noin 80 °C - 90 °C.

2. Ci-4-alkyyli, joka on substituoimaton tai substituoitu yhdellä tai useammalla ryhmistä, jotka ovat a) halogeeni, b) hydroksi, 20 c) Ci.3-alkoksi, . d) aryyli, ··· e) 5 - 7-jäseninen sykloalkyyliryhmä, joka on sub- *.*.* stituoimaton tai substituoitu yhdellä tai useammalla ryh- ***** mistä, jotka ovat ϊ’^ϊ 25 i) hydroksi, : ·*; ii) Ci-3-alkoksi tai ··· **ϊ*. iii) aryyli, tai f) heterosykli, ,V. 3) Ci-3-alkoksi, M 30 4) -NHCOOCi-3-alkyyli, · *"** 5) -NH-CO-Ci-3-alkyyli, V*J 6) -NH-S02Ci_3-alkyyli, Ϊ**’: 7) heterosykli, • 8) -W-aryyli tai • · 35 9) -W-CO-aryyli, jossa W on edellä määritellyn mu kainen; tai 119473 R1 ja R2 voivat olla liittyneet toisiinsa muodostaen sen typen kanssa, johon R1 on kiinnittynyt ja sen hiilen kanssa, johon R2 on kiinnittynyt, 3 - 10-jäsenisen monosyk-lisen tai bisyklisen tyydyttyneen rengasjärjestelmän, joka 5 koostuu siitä typestä, johon R1 on kiinnittynyt, 1-8 hiiliatomista ja yhdestä tai useammasta substituoimattomasta tai substituoidusta heteroatomista, valittuina joukosta 1) -N (VR1)-, jossa V ei ole läsnä tai V on -CO-Q-tai -SO2-Q-, R1 on edellä määritellyn mukainen sellaisen

3. C5 -io-sykloalkyyli, joka on mahdollisesti substi tuoitu hydroksilla,

3. C5-io~sykloalkyyli, joka on mahdollisesti substi-tuoitu hydroksilla, 5 4) Ce-io-aryyli, joka on substituoimaton tai substi- tuoitu yhdellä tai useammalla ryhmistä, jotka ovat: a) halogeeni, b) hydroksi, c) -NO2 tai -N(R)2, 10 d) Ci-4-alkyyli, e) Ci-3-alkoksi, joka on substituoimaton tai substi-tuoitu yhdellä tai useammalla ryhmistä, jotka ovat -OH tai Cj-3-alkoksi, f) -COOR, 15 g) -CON(R)2, h) -CH2N(R)2, i) -ch2nhcor, j) -CN, k) -CF3, 20 1) -NHCOR, . m) aryyli-Ci-3-alkoksi, §·· **j n) aryyli, !.V o) -NRSO2R, P) -0P(0) (ORx)2 tai f·** - 25 q) -R , joka on määritelty jäljempänä, tai ί 5) monosyklmen tai bisyklinen heterosykli, joka ;*·*: sisältää 1-3 heteroatomia, valittuina joukosta N, O ja S, ja joka on substituoimaton tai substituoitu Rs:llä ja mah-dollisesti yhdellä tai useammalla ryhmistä, jotka ovat • · · 30 a) halogeeni, *" b) Ci-4-alkyyli tai :.· * c) Ci-3-alkoksi; ··· ϊ.,.ϊ R on vety tai Ci-4-alkyyli; Rx on H tai aryyli; ja * · mmtt. 35 R5 on • · 119473 1) -W— (CH2)m-NR6R7, jossa W on -0- tai -S-, m on 2, 3, 4 tai 5, ja R6 ja R7 valitaan itsenäisesti kulloinkin seuraa-vasta joukosta: 5 a) vety, b) Ci-6-alkyyli, joka on substituoimaton tai substi-tuoitu yhdellä tai useammalla ryhmistä, jotka ovat i) Ci-3-alkoksi, ii) -OH tai 10 iii) -N(R)2, c) aromaattinen heterosykli, joka on substituoimaton tai substituoitu yhdellä tai useammalla ryhmistä, jotka ovat i) Ci-4-alkyyli tai 15 ii) -N) R) 2, d) tai R6 ja R7 ovat liittyneet toisiinsa muodosta en sen typen kanssa, johon ne ovat kiinnittyneet, 5 - 7-jä-senisen heterosyklin, sisältäen jopa kaksi lisäheteroatomia valittuina joukosta -N(R), -O-, -S-, -S(O)- tai -S(0)2, 20 jolloin heterosykli mahdollisesti on substituoitu Ci-4-al- . kyylillä, ··♦ ’*** 2) - (CH2)q-NR6R7, jossa q on kokonaisluku 1-5, ja t · · *·1 2 3·| R6 ja R7 on määritelty edellä, lukuunottamatta sitä, että R6 • · 1 tai R7 eivät ole H tai substituoimaton Ci-6-alkyyli, tai 2 ··· 25 3) bentsofuryyli, indolyyli, atsasykloalkyyli, at- sabisyklo-C7-ii-sykloalkyyli tai bentsopiperidinyyli, joka 51t1j on substituoimaton tai substituoitu Ci-4-alkyylillä.

3. Patenttivaatimuksen 2 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että liuotin on isopropanoli, ja lämpötila 20 on noin 83 °C - 85 °C. , 4. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tun- • · · ·1·· nettu siitä, että se lisäksi käsittää vaiheen, jossa • ·1· *.1.1 valmistetaan kaavan IV mukainen yhdiste saattamalla joko ***** a. kaavan II mukainen yhdiste • · · • · n , tai • · 1 _ _ *.1 · 25 b. epikloorihydriini, jonka kaava on .¾ oV^OI. • · • 1 1 reagoimaan kaavan III mukaisen amidin kanssa * • •a • a • · aa« a • • · a 119473 R3-(ch2K_A/^o 8 vahvan emäksen läsnä ollessa alhaisessa lämpötilassa, jolloin X valitaan joukosta H, metaanisulfonyyli, trifluorime-taanisulfonyyli, p-tolueenisulfonyyli, bentseenisulfonyyli 5 ja 3-nitrobentseenisulfonyyli.

4. Ce-io-aryyli, joka on substituoimaton tai substi-tuoitu yhdellä tai useammalla ryhmistä, jotka ovat: 15 a) halogeeni, ··· b) hydroksi, ···· c) -N02 tai -N(R)2, • · d) Ci-4-alkyyli, • · e) Ci-3-alkoksi, joka on substituoimaton tai substi- » · *** 20 tuoitu yhdellä tai useammalla ryhmistä, jotka ovat -OH tai • « · ’"f Ci-3-alkoksi, *’·** *’ f) -COOR, g) -con(R)2, :!*V h) -CH2N(R)2, 25 i) -ch2nhcor, j) -CN, l..t k) -CF3, 1) -NHCOR, ***** m) aryyli-Ci-3-alkoksi, ***** 30 n) aryyli, o) -nrso2r, 119473 p) -OP (O) (ORx)2 tai q) -R5, joka on määritelty jäljempänä, tai 5. monosyklinen tai bisyklinen heterosykli, joka sisältää 1-3 heteroatomia, valittuina joukosta N, O ja S, 5 ja joka on substituoimaton tai substituoitu R5:llä ja mahdollisesti yhdellä tai useammalla ryhmistä, jotka ovat a) halogeeni, b) Ci-4-alkyyli tai c) Ci~3-alkoksi; 10. on vety tai Ci-4-alkyyli; Rx on H tai aryyli; ja R5 on 1) -W- (CH2)m~NRsR7, jossa W on -O- tai -S-, m on 2, 3, 4 tai 5, ja

5. Patenttivaatimuksen 4 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että X on p-tolueenisulfonyyli.

6. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että stereokeskus a on S-konfiguraatiossa; 10. on 1; R1 ja R? ovat liittyneet toisiinsa muodostaen syklisen rakenteen, joka valitaan joukosta: ΒοοΌ ΛΛΑΛΛ 5 a i/VUWW • · · mm • · I αχ. ··· z * • · · ; * * o:» O iHK c< VV MvV: • ·· ΐΛΛΓ je S • li νΛΑΛ ·*** R3 valitaan joukosta fenyyli, - JO - 'O 15 119473 ja R4 on tert-butyyli.

7. Patenttivaatimuksen 6 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että R3 on fenyyli, ja R1 ja R2 ovat yhdessä Vv

8. Menetelmä kaavan IV mukaisen yhdisteen valmista miseksi, f3 V / ö tunnettu siitä, että kaavan II mukainen yhdiste A/S O·"-^ ΟΧ n 10 saatetaan reagoimaan kaavan III mukaisen amidin kanssa r3-(ch2),\A,/'p • · · l'·/. s 9 δ • · · ^ ··· ··· ·.· · vahvan emäksen läsnä ollessa alhaisessa lämpötilassa, jos sa : :V; stereokeskus a on joko R-konfiguraatiossa, S-konfiguraati- • · ·*’*· 15 ossa tai se on raseeminen; • · · X valitaan joukosta H, metaanisulfonyyli, trifluorimetaani- * · · *;*/ sulfonyyli, p-tolueenisulfonyyli, bentseenisulfonyyli ja 3- *·“* nitrobentseenisulfonyyli; *:··· r on kokonaisluku lähtien nollasta lukuun 5 käsittäen myös 20 tämän; R3 valitaan joukosta: 1 19473 1. vety,

9. Patenttivaatimuksen 8 mukainen menetelmä, tun-·1.1. nettu siitä, että vahva emäs valitaan joukosta

30 LiN [ (CH3) 3S1] 2, KN [ (CH3) 3S1] 2, NaN [ (CH3) 3Si] 2, n-butyylili- *···1 #1t tium, s-butyylilitium, t-butyylilitium, kalium-tert-butok- · 1 '·’ 1 sidi, litiumdi-isopropyyliamidi, litiumisopropyylisyklohek- 3 *...· syyliamidi, litiumpyrrolididi, litiumtetrametyylipiperidi- di, fenyylilitium, isopropyylimagnesiumkloridi ja isobutyy-35 limagnesiumkloridi. 119473

10. Patenttivaatimuksen 9 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että lämpötila on noin -82 °C - 0 °C.

10 Rx:n kyseessä ollessa, joka on R2:sta riippumaton eikä siihen liittyneenä, ja jossa Q ei ole läsnä tai Q on -O-, -N(R)- tai mahdollisesti -Ci-4-alkyylillä substituoitu hete-rosykli, 2) -N (heterosykli)-, 15 3) -N (Ci-4-alkenyyli), joka on substituoimaton tai substituoitu aryylillä, 4) -N (S02-Ci_4-alkenyyli), joka on substituoimaton tai substituoitu aryylillä, 5) -S(0)p-, jossa p on 0, 1 tai 2, tai 20 6) -O-, R3 valitaan joukosta: • -1 • · · ···1 1) vety, • · *.·.· 2) Ci-4-alkyyli, * ***** 3) Cs-io-sykloalkyyli, joka on mahdollisesti substi- • · · ^ 25 tuoitu hydroksilla, : :1; 4) Ce-io-aryyli, joka on substituoimaton tai substi- • · · tuoitu yhdellä tai useammalla ryhmistä, jotka ovat: a) halogeeni, b) hydroksi, l,m, 30 c) -NO2 tai -N(R)2, * · 11 d) Ci-4-alkyyli, • · · * e) Ci-3-alkoksi, joka on substituoimaton tai substi- tuoitu yhdellä tai useammalla ryhmistä, jotka ovat -OH tai Ci-3-alkoksi, 35 f) -COOR, g) -CON(R)2, 119473 h) -CH2N(R)2, i) -CH2NHCOR, j) -CN, k) -CF3, 5 1) -NHCOR, m) aryyli-Ci-3-alkoksi, n) aryyli, o) -NRSO2R, P) -OP (O) (ORx)2 tai 10 q) -R5, joka on määritelty jäljempänä, tai 5. monosyklinen tai bisyklinen heterosykli, joka sisältää 1-3 heteroatomia, valittuina joukosta N, O ja S, ja joka on substituoimaton tai substituoitu R5:llä ja mahdollisesti yhdellä tai useammalla ryhmistä, jotka ovat 15 a) halogeeni, b) Ci-4-alkyyli tai c) Ci-3-alkoksi; m on 2, 3, 4 tai 5; n on 0, 1, 2 tai 3; 20. on vety tai Ci-4-alkyyli; Rx on H tai aryyli; ···· R on suoraketjuinen tai haaroittunut Ci-5-alkyyli; ja *.·.* Rb on l) -W-(CH2)m-NRbR7, jossa W on edellä määritellyn Ϊ : 25 mukainen, ja ··· ^ : R6 ja R7 valitaan itsenäisesti kulloinkin seuraa- • « * ·*ί*. vasta joukosta: • · · -* a) vety, b) Ci-6-alkyyli, joka on substituoimaton tai substi- • * · 30 tuoitu yhdellä tai useammalla ryhmistä, jotka ovat *** i) Ci-3-alkoksi, ii) -oh tai iii) -N(R)2, ·*· c) aromaattinen heterosykli, joka on substituoima- * · , 35 ton tai substituoitu yhdellä tai useammalla ryhmistä, jotka ovat 119473

11. Patenttivaatimuksen 10 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että reaktio suoritetaan liuottimessa, 5 joka valitaan joukosta tetrahydrofuraani, 1,2-dimetok- sietaani, dietyylieetteri ja metyyli-t-butyylieetteri tai niiden kombinaatiot.

12. Patenttivaatimuksen 11 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että vahva emäs valitaan joukosta n- 10 butyylilitium, s-butyylilitium, LiN [ (CH3) 3Si] 2 ja litiumdi-isopropyyliamidi.

13. Patenttivaatimuksen 12 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että lämpötila on välillä noin -82 °C --40 °C amidin III metalloinnnin aikaansaamiseksi, ja lämpö- 15 tila on välillä noin -50 °C ja -10 °C III :n metalloidun johdannaisen ja II:n välisen reaktion aikaansaamiseksi.

14. Patenttivaatimuksen 13 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että liuotin on tetrahydrof uraani.

15 R6 ja R7 valitaan itsenäisesti kulloinkin seuraa- vasta joukosta: a) vety, b) Ci-6-alkyyli, joka on substituoimaton tai substituoitu yhdellä tai useammalla ryhmistä, jotka ovat 20 i) Ci-3-alkoksi, . ii) -OH tai ··· *:*; iii) -N(R)2, • · · *·*·* c) aromaattinen heterosykli, joka on substituoima- * * ton tai substituoitu yhdellä tai useammalla ryhmistä, jotka ·...· 25 ovat ϊ#·,· i) Ci-4-alkyyli tai ii) -n)r)2, d) tai Rg ja R7 ovat liittyneet toisiinsa muodosta-en sen typen kanssa, johon ne ovat kiinnittyneet, 5 - 7-jä- • · · • * .*··, 30 senisen heterosyklm, sisältäen jopa kaksi lisäheteroatomia • · *1* valittuina joukosta -N (R) , -O-, -S-, -S (O)- tai -S(0)2, ·«· *.· · jolloin heterosykli mahdollisesti on substituoitu Ci-4-al- i...; kyylillä, ....· 2) - (CH2)q-NR6R7, jossa q on kokonaisluku 1-5, ja ··.: 35 R6 ja R7 on määritelty edellä, lukuunottamatta sitä, että Rr’ • ** 7 tai R eivät ole H tai substituoimaton Ci-e-alkyyli, tai 119473 3. bentsofuryyli, indolyyli, atsasykloalkyyli, at-sabisyklo-C7-n-sykloalkyyli tai bentsopiperidinyyli, joka on substituoimaton tai substituoitu Ci-4_alkyylillä.

15. Patenttivaatimuksen 14 mukainen menetelmä, 20 tunnettu siitä, että vahva emäs valitaan joukosta n-bu- . tyylilitium ja LiN [ (CH3) 3Si] 2 . • M

···· 16. Patenttivaatimuksen 15 mukainen menetelmä, • · · *·*·* tunnettu siitä, että lämpötila on välillä -50 °C ja * * -45 °C amidin III metalloinnnin aikaansaamiseksi, ja lämpö- *...· 25 tila on välillä noin -30 °C - -20 °C III:n metalloidun joh- ί **· dannaisen ja II: n välisen reaktion aikaansaamiseksi. ί*Γϊ

17. Patenttivaatimuksen 11 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että stereokeskus a on S-konfiguraa-tiossa; r on 1; ja R3 valitaan joukosta fenyyli, .¾ 30 Xj Ja Ό

· :***: 18. Patenttivaatimuksen 17 mukainen menetelmä, ··· *. tunnettu siitä, että R3 on fenyyli. • · • · 119473

19. Kaavan IV mukainen yhdiste o (ch2>, yc IV °σ « tunnettu siitä, että stereokeskus a on joko R-konfiguraatiossa, S-konfiguraati-5 ossa tai se on raseeminen; r on kokonaisluku lähtien nollasta lukuun 5 käsittäen myös tämän; R3 valitaan joukosta: 1. vety, 10 2) Ci-4-alkyyli,

20. Patenttivaatimuksen 19 mukainen yhdiste, tun-5 nettu siitä, että stereokeskus a on S-konfiguraatiossa; r on 1/ ja R3 valitaan joukosta fenyyli, JO la "Ö ·

21. Patenttivaatimuksen 20 mukainen yhdiste, tunnettu siitä, että yhdisteen kaava on j X y 10 «·· « ·«·· • 1 • · « • · · • · • · ·♦· • • · ·«» • · « • · « ··1 *»· • · · • · · « 1 • · « • · I • « ··· • 1 • « ··· »»· • · · • · · f · 1 • · * · • I· • · • · 119473