ES2969988T3 - Inhibidores de Mnk sustituidos con piperidina y métodos relacionados con los mismos - Google Patents

Abstract

La presente invención se refiere a compuestos según la Fórmula (I): o un estereoisómero, tautómero o una sal farmacéuticamente aceptable de los mismos en la que X1, X2, R1, R2, R3 yn son como se definen en el presente documento. También se describen composiciones farmacéuticamente aceptables de compuestos de Fórmula (I), así como métodos para utilizar los compuestos de Fórmula (I) y las composiciones farmacéuticamente aceptables de compuestos de Fórmula (I) como inhibidores de Mnk, así como agentes terapéuticos para el tratamiento de enfermedades tales como como cáncer. (Traducción automática con Google Translate, sin valor legal)

Description

DESCRIPCIÓN

Inhibidores de Mnk sustituidos con piperidina y métodos relacionados con los mismos

Campo

La presente invención en general se refiere a compuestos que tienen actividad como inhibidores de la quinasa que interacciona con MAP quinasa (Mnk), así como a composiciones relacionadas y métodos que contienen o utilizan los mismos. Tales compuestos encuentran utilidad en cualquier número de aplicaciones terapéuticas incluyendo el tratamiento del cáncer.

Antecedentes

El factor de iniciación eucariota 4E (eIF4E) es un factor de traducción general, pero tiene el potencial para aumentar preferentemente la traducción de los ARN mensajeros (ARNm) que llevan a la producción de proteínas asociadas con neoplasia maligna. Esta selectividad se puede relacionar a un requisito aumentado para eIF4E y sus compañeros de unión para la traducción de ARNm que contienen estructura secundaria extensa en sus regiones 5'-no traducidas (5'-UTR). Estos ARNm incluyen los que codifican ciertas proteínas que controlan la progresión del ciclo celular y la tumorigénesis. En condiciones celulares normales la traducción de estos ARNm asociados a neoplasias malignas se suprime ya que la disponibilidad de eIF4E activo es limitada; sin embargo, sus niveles pueden aumentar cuando eIF4E está sobreexpresado o hiperactivado. Los niveles elevados de eIF4E se han encontrado en muchos tipos de tumores y líneas celulares cancerosas incluyendo cánceres del colon, mama, vejiga, pulmón, próstata, aparato digestivo, cabeza y cuello, linfomas de Hodgkin y neuroblastomas.

Se piensa que la iniciación de la traducción dependiente de la caperuza depende del ensamblaje de eIF4F, un complejo de factores de iniciación que incluye eIF4E, la proteína soporte eIF4G, y la ARN helicasa eIF4A. Puesto que eIF4E es la única de estas proteínas que se une directamente a la estructura de caperuza del ARNm, es el factor clave para el ensamblaje de eF4F en la caperuza 5'. La proteína soporte, eIF4G, también recluta la subunidad ribosómica 40S al ARNm a través de su interacción con eIF3 y se une a eIF4B, una proteína que ayuda la función ARN helicasa de eIF4A, facilitando de esta manera la traducción de los ARNm que contienen 5'-UTR estructurados. La disponibilidad de eIF4E como parte del complejo eIF4F es un factor limitante en controlar la velocidad de traducción, y por tanto eIF4E es un regulador importante de la traducción de ARNm.

La regulación de la actividad eIF4E forma un nodo de convergencia de las rutas de señalización PI3K/Akt/mTOR y Ras/Raf/MAPK. La ruta de PI3K (fosfoinosítido 3-quinasa)/PTEN (homólogo de fosfatasa y tensina delecionado en el cromosoma diez)/Akt/mTOR (diana de rapamicina de mamífero) con frecuencia está implicada en tumorigénesis y en sensibilidad y resistencia a terapia contra el cáncer. La señalización desregulada a través de la ruta PI3K/PTEN/Akt/mTOR con frecuencia es el resultado de alteraciones genéticas en componentes críticos de esta ruta y/o mutaciones en receptores de factores de crecimiento anteriores o componentes de señalización. PI3K inicia una cascada de sucesos cuando se activa, por ejemplo, por factores de crecimiento extracelulares, mitógenos, citoquinas y/o receptores, PDK1 activa Akt, que a su vez fosforila e inactiva el complejo supresor de tumores que comprende TSC1 y 2 (complejo de esclerosis tuberosa 1/2), produciendo la activación de mTORC1 (complejo 1 de la diana de rapamicina) por Rheb-GTP. La activación de PDK1 y Akt por PI3K está negativamente regulada por PTEN.

PTEN es un gen supresor tumoral crítico y con frecuencia está mutado o silenciado en cánceres humanos. Su pérdida produce la activación de Akt y aumenta la señalización de mTORC1 posterior. La implicación del complejo 1 de mTOR (mTORC1) en transformación neoplásica parece depender de su papel regulador hacia el complejo eIF4F; la sobreexpresión de eIF4E puede conferir resistencia a rapamicina. mTORC1 regula el ensamblaje del complejo eIF4F que es crítico para la traducción de los ARNm asociados con crecimiento celular, prevención de apoptosis y transformación. mTORC1 alcanza esto por fosforilación e inactivación de las 4E-BP y la posterior disociación de las 4E-BP de eIF4E. Esto después permite que eIF4E interaccione con la proteína soporte eIF4G, lo que permite el ensamblaje del complejo eF4F para la traducción de los ARNm estructurados. mTORC1 también fomenta la activación del activador de traducción, s 6k , que fosforila la proteína ribosómica S6 y otros sustratos, incluyendo eIF4B. La señalización de mTOR1 está inhibida por rapamicina y sus análogos (rapálogos), aunque estos compuestos actúan alostéricamente, más que inhibir directamente la actividad quinasa de mTOR.

Dada la importancia de la ruta PI3K/Akt/mTOR en la regulación de la traducción del ARNm de genes que codifican proteínas protoncogénicas y la señalización de mTROC1 activada en una alta proporción de cánceres, estas quinasas se han perseguido activamente como dianas de fármacos oncológicos. Se han identificado un número de inhibidores farmacológicos, algunos de los cuales han alcanzado fases clínicas avanzadas. Sin embargo, recientemente se ha hecho evidente que la ruta de mTOR participa en un bucle de retroalimentación complicado que puede deteriorar la activación de Akt. Se ha mostrado que el tratamiento prolongado de células o pacientes de cáncer con inhibidores de mTOR produce actividad PI3K elevada que produce la fosforilación de Akt y eIF4E, y fomenta la supervivencia de células cancerosas. eIF4E, que actúa después de Akt y mTOR, resume la acción de Akt en tumorigénesis y resistencia a fármacos, y la señalización de Akt a través de eIF4E es un mecanismo importante de oncogénesis y resistencia a fármacosin vivo.

Además de la ruta PI3K/Akt/mTOR, eIF4E también es la diana de la cascada de señalización Ras/Raf/MAP que se activa por factores de crecimiento y para la ruta de la p38 MAP quinasa activada por estrés. Erk1/2 y p38 fosforilan después la quinasa que interacciona con MAP quinasa 1 (Mnk1) y la quinasa que interacciona con MAP quinasa 2 (Mnk2). La ruta de Erk también está activada en muchos cánceres, reflejando, por ejemplo, mutaciones activadoras en Ras (encontradas en aproximadamente el 20% de los tumores) o la pérdida de función de la proteína activadora de la GTPasa de Ras NF1. Mnk1 y Mnk2 son proteínas treonina/serina quinasas y específicamente fosforilan la serina 209 (Ser209) de eIF4E en el complejo eIF4F, en virtud de la interacción entre eIF4E y las Mnk, que sirve para reclutar las Mnk para actuar sobre eIF4E. Ratones con eIF4E mutado, en el que la Ser209 está sustituida por alanina, no muestran fosforilación de eIF4E y crecimiento tumoral significativamente atenuado. Significativamente, mientras la actividad Mnk es necesaria para la transformación oncogénica mediada por eIF4E, es dispensable para el desarrollo normal. Inhibir farmacológicamente las Mnk, por tanto, presenta una estrategia terapéutica atractiva para el cáncer.

A pesar de la comprensión aumentada de la estructura y función de Mnk, se ha hecho poco progreso con respecto al descubrimiento de inhibidores de Mnk farmacológicos y se han descrito relativamente pocos inhibidores de Mnk: CGP052088 (Tschoppet al., Mol Cell Biol Res Commun.3(4):205-211,2000); CGP57380 (Rowlettet al., Am J Physiol Gastrointest Liver Physiol. 294(2):G452-459, 2008); y Cercosporamida (Koniceket al., Cáncer Res.71(5):1849-1857, 2011). Estos compuestos, sin embargo, se han usado principalmente para los fines de validación de diana de Mnk. Más recientemente, investigadores han propuesto compuestos adicionales para tratar enfermedades influidas por la inhibición de la actividad quinasa de Mnk1 y/o Mnk2, incluyendo, por ejemplo, los compuestos divulgados en la publicación de la solicitud de patente internacional WO 2014/044691 y los varios documentos de patente citados en la misma, las 4-(dihidropiridinon-3-il)amino-5-metiltieno[2,3,-d]pirimidinas divulgadas por Yuet al., European Journal of Med. Chem.,95: 116-126, 2015, y la 6-((6-aminopirimidin-4-il)amino)-8-metil-2'H-espiro[ciclohexano-1,3-imidazo[1,5-a]piridina]-1',5'-diona y los varios compuestos divulgados en la publicación de la solicitud de patente internacional WO 2015/200481.

El documento WO2016/172010A1 divulga inhibidores de moduladores del punto de control inmunitario para uso en tratar cáncer e infecciones.

El documento US2016/317536 A1 divulga inhibidores de MNK y métodos relacionados con los mismos.

Según esto, mientras se han hecho avances en este campo permanece una necesidad significativa en la técnica para compuestos que tienen solubilidad mejorada mientras retienen la potencia para inhibir específicamente Mnk y otra actividad de receptor. La presente invención cumple esta necesidad y proporciona ventajas relacionadas adicionales.

Compendio

La presente invención se dirige a compuestos que inhiben o modulan la actividad de Mnk, así como estereoisómeros, tautómeros y sales farmacéuticamente aceptables de tales compuestos como agentes terapéuticos candidatos. La presente invención también se dirige a composiciones que contienen tales compuestos y dichos compuestos para uso en tratar afecciones que se beneficiarían de la inhibición de Mnk, tal como cáncer. Cualquier referencia a métodos de tratamiento en los párrafos posteriores de esta descripción se deben interpretar como referencias a los compuestos, composiciones farmacéuticas y medicamentos de la presente invención para uso en un método de tratamiento del cuerpo humano (o aminal) por terapia (o diagnóstico).

La invención se dirige a un compuesto o un estereoisómero, tautómero o sal farmacéuticamente aceptable del mismo,

En otra forma de realización, se divulgan composiciones que comprenden un compuesto como se enumera anteriormente en combinación con un soporte, diluyente o excipiente farmacéuticamente aceptable.

En una forma de realización adicional, se proporcionan métodos para tratar una afección dependiente de Mnk en un mamífero en necesidad de ello. Tales métodos comprenden administrar una cantidad eficaz de un compuesto como se enumera anteriormente, o composiciones que comprenden el mismo, al mamífero. Tales afecciones incluyen, pero no están limitadas a, varias formas de cáncer como se discute en más detalle posteriormente.

Estos y otros aspectos de la invención serán aparentes tras referencia a la siguiente descripción detalla.

Descripción detallada

En la siguiente descripción, se exponen ciertos detalles específicos con el fin de proporcionar una comprensión exhaustiva de varias formas de realización de la invención. Sin embargo, un experto en la materia entenderá que la invención se puede practicar sin estos detalles. A menos que el contexto requiera otra cosa, a lo largo de la presente especificación y reivindicaciones, la palabra “comprender” y variaciones de la misma, tal como, “comprende” y “que comprende” se deben interpretar en un sentido abierto, incluso (es decir, como “incluyendo, pero no limitado a”). La referencia a lo largo de esta especificación a “una forma de realización” significa que un rasgo, estructura o característica particular descrito en relación con la forma de realización se incluye en al menos una forma de realización de la presente invención. Por tanto, las apariciones de la frase “en una forma de realización” en varios sitios a lo largo de esta especificación no se refieren todas necesariamente a la misma forma de realización. Además, los rasgos, estructuras o características particulares se pueden combinar de cualquier manera adecuada en una o más formas de realización.

Definiciones

Como se usan en el presente documento, y a menos que se indique lo contrario, los siguientes términos y frases tienen el significado indicado a continuación.

“Amino” se refiere al sustituyente -NH2.

“Carboxilo” se refiere al sustituyente -CO2H.

“Carbonilo” se refiere a un grupo -C(O)- o -C(=O)-. Ambas notaciones se usan de forma intercambiable en la especificación.

“Ciano” se refiere al sustituyente -C<e>N.

“Acetilo” se refiere al sustituyente -C(O)CH3.

“Hidroxi” o “hidroxilo” se refiere al sustituyente -OH.

“Oxo” se refiere a un oxígeno del sustituyente -O-.

La frase “quinasa que interacciona con MAP quinasa” o el término “Mnk” se refiere a todas las isoformas de la proteína quinasa que interacciona con MAP quinasa incluyendo Mnk-1 y Mnk-2.

“Alquilo” se refiere a un radical de cadena hidrocarbonada saturada, lineal o ramificada que consiste solamente en átomos de carbono e hidrógeno, que tiene de uno a doce átomos de carbono (alquilo de C1-C12), de uno a ocho átomos de carbono (alquilo de C1-C8) o de uno a seis átomos de carbono (alquilo de Ci-Ca), y que está unido al resto de la molécula por un enlace sencillo. Los grupos alquilo ejemplares incluyen metilo, etilo, n-propilo, 1 -metiletilo (isopropilo), n-butilo, n-pentilo, 1,1-dimetiletilo (t-butilo), 3-metilhexilo, 2-metilhexilo, y similares.

“Alquilo inferior” tiene el mismo significado que alquilo definido anteriormente, pero que tiene de uno a cuatro átomos de carbono (alquilo de C1-C4).

“Alquileno” o “cadena de alquileno” se refiere a una cadena hidrocarbonada (alquilo) divalente lineal o ramificada que une el resto de la molécula a un grupo radical, que consiste solamente en carbono e hidrógeno, respectivamente. Los alquilenos pueden tener de uno a doce átomos de carbono, por ejemplo, metileno, etileno, propileno, n-butileno, y similares. La cadena de alquileno está unida al resto de la molécula a través de un enlace sencillo o doble. Los puntos de unión de la cadena alquileno al resto pueden ser mediante un carbono o cualesquiera dos carbonos en la cadena. “Alquileno opcionalmente sustituido” se refiere a alquileno o alquileno sustituido.

“Alcoxi” se refiere a un radical de fórmula -ORa donde Ra es un alquilo que tiene el número indicado de átomos de carbono como se ha definido anteriormente. Los ejemplos de grupos alcoxi incluyen sin limitación, -O-metilo (metoxi), -O-etilo (etoxi), -O-propilo (propoxi), -O-isopropilo (isopropoxi) y similares.

“Acilo” se refiere a un radical de fórmula -C(O)Ra donde Ra es un alquilo que tiene el número indicado de átomos de carbono.

“Arilo” se refiere a un radical de sistema de anillos hidrocarbonados que comprende hidrógeno, de 6 a 18 átomos de carbono y al menos un anillo aromático. Los arilos ejemplares son un radical de sistema de anillos hidrocarbonados que comprenden hidrógeno y de 6 a 9 átomos de carbono y al menos un anillo aromático; un radical de sistema de anillos hidrocarbonados que comprenden hidrógeno y de 9 a 12 átomos de carbono y al menos un anillo aromático; un radical de sistema de anillos hidrocarbonados que comprenden hidrógeno y de 12 a 15 átomos de carbono y al menos un anillo aromático; o un radical de sistema de anillos hidrocarbonados que comprenden hidrógeno y de 15 a 18 átomos de carbono y al menos un anillo aromático. Para los fines de esta invención, el radical arilo puede ser un sistema de anillos monocíclico, bicíclico, tricíclico o tetracíclico, que puede incluir sistemas de anillo fusionados o en puente. Los radicales arilo incluyen, pero no están limitados a, radicales arilo derivados de aceantrileno, acenaftileno, acefenantrileno, antraceno, azuleno, benceno, criseno, fluoranteno, fluoreno, as-indaceno, s-indaceno, inadano, indeno, naftaleno, fenaleno, fenantreno, pleiadeno, pireno y trifenileno. “Arilo opcionalmente sustituido” se refiere a un grupo arilo o un grupo arilo sustituido.

“Cicloalquilo” se refiere a un radical hidrocarbonado monocíclico o policíclico no aromático estable que consiste solamente en átomos de carbono e hidrógeno, que puede incluir sistemas de anillos fusionados o en puente, que tiene de tres a quince átomos de carbono, preferiblemente tiene de tres a diez átomos de carbono, de tres a nueve átomos de carbono, de tres a ocho átomos de carbono, de tres a siete átomos de carbono, de tres a seis átomos de carbono, de tres a cinco átomos de carbono, un anillo con cuatro átomos de carbono, o un anillo con tres átomos de carbono. El anillo cicloalquilo puede estar saturado o insaturado y unido al resto de la molécula por un enlace sencillo. Los radicales monocíclicos incluyen, por ejemplo, ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo, ciclohexilo, cicloheptilo, y cilooctilo. Los radicales policíclicos incluyen, por ejemplo, adamantilo, norbornilo, decalinilo, 7,7-dimetil-biciclo[2.2.1]heptanilo, y similares.

“Fusionado” se refiere a cualquier estructura de anillo descrita en el presente documento que está fusionada a una estructura de anillo existente en los compuestos de la invención. Cuando el anillo fusionado es un anillo heterociclilo o un anillo heteroarilo, cualquier átomo de carbono en la estructura de anillo existente que se convierte en parte del anillo heterociclilo fusionado o anillo heteroarilo fusionado se puede sustituir con un átomo de nitrógeno.

“Halo” o “halógeno” se refiere a bromo (bromo), cloro (cloro), fluoro (flúor) o yodo (yodo).

“Haloalquilo” se refiere a un radical alquilo que tiene el número indicado de átomos de carbono, como se define en el presente documento, en donde uno o más átomos de hidrógeno del grupo alquilo están sustituidos con un halógeno (radicales halo) como se ha definido anteriormente. Los átomos de halógeno pueden ser iguales o diferentes. Los haloalquilos ejemplares son trifluorometilo, difluorometilo, triclorometilo, 2,2,2-trifluoroetilo, 1,2-difluoroetilo, 3-bromo-2-fluoropropilo, 1,2-dibromoetilo, y similares.

“Heterociclilo”, “heterociclo” o “anillo heterocíclico” se refiere a un radical saturado o insaturado de 3 a 18 miembros estable que consiste en de dos a doce átomos de carbono y de uno a seis heteroátomos, por ejemplo, de uno a cinco heteroátomos, de uno a cuatro heteroátomos, de uno a tres heteroátomos, o de uno a dos heteroátomos seleccionados del grupo que consiste en nitrógeno, oxígeno y azufre. Los heterociclos ejemplares incluyen sin limitación radicales saturados o insaturados de 3-15 miembros estables, radicales saturados o insaturados de 3-12 miembros estables, radicales saturados o insaturados de 3-9 miembros estables, radicales saturados o insaturados de 8 miembros estables, radicales saturados o insaturados de 7 miembros estables, radicales saturados o insaturados de 6 miembros estables, o radicales saturados o insaturados de 5 miembros estables.

A menos que se manifieste de otra manera en la especificación, el radical heterociclilo puede ser un sistema de anillos monocíclico, bicíclico, tricíclico o tetracíclico, que puede incluir sistemas de anillos fusionados o en puente; y los átomos de nitrógeno, carbono o azufre en el radical heterociclilo pueden estar opcionalmente oxidados; el átomo de nitrógeno puede estar opcionalmente cuaternizado; y el radical heterociclilo puede estar parcial o completamente saturado. Los ejemplos de radicales heterociclilos no aromáticos incluyen, pero no están limitados a, acetidinilo, dioxolanilo, tienil[1,3]ditianilo, decahidroisoquinolilo, imidazolinilo, imidazolidinilo, isotiazolidinilo, isoxazolidinilo, morfolinilo, octahidroindolilo, octahidroisoindolilo, 2-oxopiperacinilo, 2-oxopiperidinilo, 2-oxopirrolidinilo, oxazolidinilo, piperidinilo, piperacinilo, 4-piperidonilo, pirrolidinilo, pirazolidinilo, quinuclidinilo, tiazolidinilo, tetrahodrofurilo, tietanilo, tritianilo, tetrahidropiranilo, tiomorfolinilo, tiamorfolinilo, 1-oxo-tiomorfolinilo, y 1,1-dioxo-tiomorfolinilo.

“Heteroarilo” o “heteroarileno” se refiere a un radical de sistema de anillos de 5 a 14 miembros que comprende átomos de hidrógeno, de uno a trece átomos de carbono, de uno a seis heteroátomos seleccionados del grupo que consiste en nitrógeno, oxígeno y azufre, y al menos un anillo aromático. Para los fines de esta invención, el radical heteroarilo puede ser un anillo de 5-12 miembros estable, un anillo de 5-10 miembros estable, un anillo de 5-9 miembros estable, un anillo de 5-8 miembros estable, un anillo de 5-7 miembros estable, o un anillo de 6 miembros estable que comprende al menos 1 heteroátomo, al menos 2 heteroátomos, al menos 3 heteroátomos, al menos 4 heteroátomos, al menos 5 heteroátomos, o al menos 6 heteroátomos. Los heteroarilos pueden ser un sistema de anillos monocíclico, bicíclico, tricíclico o tetracíclico, que pueden incluir sistemas de anillo fusionados o en puente; y los átomos de nitrógeno, carbono o azufre en el radical heteroarilo pueden estar opcionalmente oxidados; el átomo de nitrógeno puede estar opcionalmente cuaternizado. El heteroátomo puede ser un miembro de un anillo aromático o no aromático, siempre que al menos un anillo en el heteroarilo sea aromático. Los ejemplos incluyen, pero no están limitados a, acepinilo, acridinilo, bencimidazolilo, benzotiazolilo, bencindolilo, benzodioxolilo, benzofuranilo, benzooxazolilo, benzotiazolilo, benzotiadiazolilo, benzo[b][1,4]dioxepinilo, 1,4-benzodioxanilo, benzonaftofuranilo, benzoxazolilo, benzodioxolilo, benzodioxinilo, benzopiranilo, benzopiranonilo, benzofuranilo, benzofuranonilo, benzotienilo (benzotiofenilo), benzotriazolilo, benzo[4,6]imidazo[1,2-a]piridinilo, carbazolilo, cinolinilo, dibenzofuranilo, dibenzotiofenilo, furanilo, furanonilo, isotiazolilo, imidazolilo, indazolilo, indolilo, indazolilo, isoindolilo, indolinilo, isoindolinilo, isoquinolilo, indolicinilo, isoxazolilo, napftiridinilo, oxadiazolilo, 2-oxoacepinilo, oxazolilo, oxiranilo, 1 -oxidopiridinilo, 1-oxidopirimidinilo, 1 -oxidopiracinilo, 1 -oxidopiridacinilo, 1-fenil-1H-pirrolilo, fenacinilo, fenotiacinilo, fenoxacinilo, ftalacinilo, pteridinilo, purinilo, pirrolilo, pirazolilo, piridinilo, piracinilo, pirimidinilo, piridacinilo, quinazolinilo, quinoxalinilo, quinolinilo, quinuclidinilo, isoquinolinilo, tetrahidroquinolinilo, tiazolilo, tiadiazolilo, triazolilo, tetrazolilo, triacinilo, y tiofenilo (es decir, tienilo).

El compuesto de la invención puede existir en varias formas isoméricas, así como en una o más formas tautoméricas, incluyendo tanto tautómeros individuales como mezclas de tautómeros. El término “ isómero” se pretende que abarque todas las formas isoméricas de un compuesto de esta invención, incluyendo formas tautoméricas del compuesto.

Algunos compuestos descritos aquí pueden tener centros asimétricos y por tanto existen en diferentes formas enantioméricas y diastereoméricas. Un compuesto de la invención puede estar en forma de un isómero óptico o un diastereómero. Según esto, la invención abarca compuestos de la invención y sus usos como se describe en el presente documento en la forma de sus isómeros ópticos, diastereoisómeros y mezclas de los mismos, incluyendo una mezcla racémica. Los isómeros ópticos de los compuestos de la invención se pueden obtener por técnicas conocidas tal como síntesis asimétrica, cromatografía quiral, o a través de separación química de estereoisómeros mediante el empleo de agentes de resolución ópticamente activos.

A menos que se indique de otra manera, “estereoisómero” significa un estereoisómero de un compuesto que está sustancialmente libre de otros estereoisómeros de ese compuesto. Por tanto, un compuesto estereoméricamente puro que tiene un centro quiral estará sustancialmente libre del enantiómero opuesto del compuesto. Un compuesto estereoméricamente puro que tiene dos centros quirales estará sustancialmente libre de otros diastereómeros del compuesto. Un compuesto estereoméricamente puro típico comprende más de aproximadamente el 80% en peso de un estereoisómero del compuesto y menos de aproximadamente el 20% en peso de otros estereoisómeros del compuesto, por ejemplo, más de aproximadamente el 90% en peso de un estereoisómero del compuesto y menos de aproximadamente el 10% en peso de otros estereoisómeros del compuesto, o más de aproximadamente el 95% en peso de un estereoisómero del compuesto y menos de aproximadamente el 5% en peso de otros estereoisómeros del compuesto, o más de aproximadamente el 97% en peso de un estereoisómero del compuesto y menos de aproximadamente el 3% en peso de otros estereoisómeros del compuesto.

Si hay discrepancia entre una estructura representada y un nombre dado a esa estructura, entonces la estructura representada controla. Además, si la estereoquímica de una estructura o una porción de una estructura no está indicada con, por ejemplo, líneas en negrita o discontinuas, se debe interpretar que la estructura o porción de la estructura abarca todos los estereoisómeros de ella. En algunos casos, sin embargo, donde existe más de un centro quiral, las estructuras y nombres se pueden representar como enantiómeros individuales para ayudar a describir la estereoquímica relativa. Los expertos en la materia de la síntesis orgánica sabrán si los compuestos están preparados como enantiómeros individuales de los métodos usados para prepararlos.

En esta descripción, una “sal farmacéuticamente aceptable” es una sal de ácido o base orgánica o inorgánica farmacéuticamente aceptable de un compuesto de la invención. Las sales farmacéuticamente aceptables representativas incluyen, por ejemplo, sales de metales alcalinos, sales de metales alcalinotérreos, sales de amonio, sales solubles en agua e insolubles en agua, tal como las sales acetato, amsonato (4,4-diaminoestilbeno-2,2-disulfonato), bencenesulfonato, benzoato, bicarbonato, bisulfato, bitartrato, borato, bromuro, butirato, calcio, edetato de calcio, camsilato, carbonato, cloruro, citrato, clavulariato, diclorhidrato, edetato, edisilato, estolato, esilato, fiunarato, gluceptato, gluconato, glutamato, glicolilarsanilato, hexafluorofosfato, hexilresorcinato, hidrabamina, bromhidrato, clorhidrato, hidroxinaftoato, yoduro, isotionato, lactato, lactobionato, laurato, malato, maleato, mandelato, mesilato, metilbromuro, metilnitrato, metilsulfato, mucato, napsilato, nitrato, sal de amonio de N-metilglucamina, 3-hidroxi-2-naftoato, oleato, oxalato, palmitato, pamoato (1,1-meteno-bis-2-hidroxi-3-naftoato, einbonato), pantotenato, fosfato/difosfato, picrato, poligalacturonato, propionato, p-toluenosulfonato, salicilato, estearato, subacetato, succinato, sulfato, sulfosaliculato, suramato, tanato, tartrato, teoclato, tosilato, trietioduro, y valerato. Una sal farmacéuticamente aceptable puede tener más de un átomo cargado en su estructura. En este caso la sal farmacéuticamente aceptable puede tener múltiples contraiones. Por tanto, una sal farmacéuticamente aceptable puede tener uno o más átomos cargados y/o uno o más contraiones.

Los términos “tratar”, “que trata” y “tratamiento” se refieren a la mejora o erradicación de una enfermedad o síntomas asicados con una enfermedad. En ciertas formas de realización, tales términos se refieren a minimizar la propagación o empeoramiento de la enfermedad resultante de la administración de uno o más agentes profilácticos o terapéuticos a un paciente con tal enfermedad.

El término “cantidad eficaz” se refiere a una cantidad de un compuesto de la invención u otro principio activo suficiente para proporcionar un beneficio terapéutico o profiláctico en el tratamiento o la prevención de una enfermedad o para retrasar o minimizar síntomas asociados con una enfermedad. Además, una cantidad terapéuticamente eficaz con respecto a un compuesto de la invención significa esa cantidad de agente terapéutico solo, o en combinación con otras terapias, que proporciona un beneficio terapéutico en el tratamiento o la prevención de una enfermedad. Usado en relación con un compuesto de la invención, el término puede abarcar una cantidad que mejora la terapia global, reduce o evita síntomas o causas de enfermedad, o aumenta la eficacia terapéutica o sinergias con otro agente terapéutico.

Los términos “modular”, “modulación” y similares se refieren a la capacidad de un compuesto para aumentar o disminuir la función, o actividad de, por ejemplo, una quinasa que interacciona con MAP quinasa (Mnk). “Modulación”, en sus varias formas, se pretende que abarque la inhibición, antagonismo, antagonismo parcial, activación, agonismo y/o agonismo parcial de la actividad asociada con Mnk. Los inhibidores de Mnk son compuestos que se unen a, bloquean parcial o totalmente la estimulación, disminuyen, previenen, retrasan la activación, inactivan, desensibilizan, o disminuyen la transducción de señales. La capacidad de un compuesto para modular la actividad Mnk se puede demostrar en un ensayo enzimático o en un ensayo celular.

Un “paciente” o “sujeto” incluye un animal, tal como un ser humano, vaca, caballo, oveja, cordero, cerdo, pollo, pavo, codorniz, gato, perro, ratón, rata, conejo o cobaya. El animal puede ser un mamífero tal como un no primate y un primate (por ejemplo, mono y ser humano). En una forma de realización, un paciente es un ser humano, tal como un lactante, niño, adolescente o adulto humano.

El término “profármaco” se refiere a un precursor de un fármaco que es un compuesto que tras la administración a un paciente debe experimentar conversión química por procesos metabólicos antes de convertirse en un agente farmacológico activo. Los profármacos ejemplares de los compuestos son ésteres, acetamidas y amidas.

Compuestos de la invención

La presente invención en general se dirige a compuestos abarcados por las reivindicaciones.

En una forma de realización un compuesto según la fórmula (I), o un estereoisómero, tautómero o sal farmacéuticamente aceptable del mismo se selecciona de los compuestos 3D, 3K, 3L, 3X, 3Y, rac-1F, 1Fa, 1Fb, rac-2F, 2Fa y 2Fb.

En el presente documento se divulga que los compuestos inventivos pueden estar isotópicamente marcados al tener uno o más átomos sustituidos por un átomo que tiene diferente masa atómica o número de masa. Los ejemplos de isótopos que se pueden incorporar en compuestos como se divulga en el presente documento incluyen isotopos de hidrógeno, carbono, nitrógeno, oxígeno, fósforo, flúor, cloro, o yodo. Ilustrativo de tales isótopos son 2H, 3H, 11C, 13C,

14C, 13N, 15N, 15O, 17O, 18O, 31P, 32P, 35S, 18F, 36Cl, 123I y 125I, respectivamente. Estos compuestos pueden usar para medir la biodistribución, concentración tisular y la cinética del transporte y excreción de tejidos biológicos incluyendo un sujeto al que se administra tal compuesto marcado. Los compuestos marcados también se usan para determinar la eficacia terapéutica, el sitio o modo de acción, y la afinidad de unión de un terapéutico candidato a una diana farmacológicamente importante. Ciertos compuestos marcados con radioactividad como se divulga en el presente documento, por tanto, son útiles en estudios de distribución de fármacos y/o tejidos. Los isotopos radioactivos tritio, es decir, 3H, y carbono-14, es decir, 14C, son particularmente útiles para este fin en vista de su facilidad de incorporación y medios de detección listos.

La sustitución con isótopos más pesados tal como deuterio, es decir, 2H, da ciertas ventajas terapéuticas resultantes de la mayor estabilidad metabólica, por ejemplo, semividain vivoaumentada de los compuestos que contienen deuterio. La sustitución de hidrógeno con deuterio puede reducir la dosis requerida para el efecto terapéutico, y por tanto puede ser preferido en un marco de descubrimiento o clínico.

La sustitución con isotopos emisores de positrones, tal como 11C, 18F, 15O y 13N, proporciona análogos marcados de los compuestos inventivos que son útiles en estudios detomografía de emisión de positrones (PET), por ejemplo, para examinar ocupación de receptores de sustratos. Los compuestos según la fórmula (I) isotópicamente marcados en general pueden prepararse por técnicas convencionales que conocen los expertos en la materia o por procesos análogos a los descritos en la sección de preparaciones y ejemplos como se expone posteriormente usando un reactivo de marcaje isotópico apropiado.

También se pretende que las variantes divulgadas en el presente documento abarquen los productos metabólicosin vivode compuestos divulgados en el presente documento. Tales productos pueden resultar de, por ejemplo, la oxidación, reducción, hidrólisis, amidación, esterificación, y procesos similares principalmente debido a actividad enzimática tras la administración de un compuesto de la invención. Según esto, la invención incluye compuestos que se producen como subproductos de actividad enzimática o no enzimática en un compuesto inventivo después de la administración de tal compuesto a un mamífero durante un periodo de tiempo suficiente para dar un producto metabólico. Los productos metabólicos, en particular los metabolitos farmacéuticamente activos típicamente se identifican administrando un compuesto de la invención radiomarcado en una dosis detectable a un sujeto, tal como rata, ratón, cobaya, mono o ser humano, durante un periodo de tiempo suficiente durante el que el metabolismo se produce, y aislar los productos metabólicos de orina, sangre u otras muestras biológicas que se obtienen del sujeto que recibe el compuesto radiomarcado.

La invención también proporciona formas salinas farmacéuticamente aceptables de los compuestos. Abarracados en el ámbito de la invención están las sales de adición tanto de ácido como de base que se forman al poner en contacto un ácido farmacéuticamente adecuado o una base farmacéuticamente adecuada con un compuesto de la invención.

Para este fin, una “sal de adición de ácido farmacéuticamente aceptable” se refiere a esas sales que retienen la eficacia biológica y las propiedades de las bases libres, que no son biológicamente o de otra manera indeseables, y que se forman con ácidos inorgánicos tal como, pero no limitados a, ácido clorhídrico, ácido bromhídrico, ácido sulfúrico, ácido nítrico, ácido fosfórico y similares, y ácidos orgánicos tal como, pero no limitados a, ácido acético, ácido 2,2-dicloroacético, ácido adípico, ácido algínico, ácido ascórbico, ácido aspártico, ácido bencenosulfónico, ácido benzoico, ácido 4-acetamidobenzoico, ácido canfórico, ácido canfor-10-sulfónico, ácido cáprico, ácido caproico, ácido caprílico, ácido carbónico, ácido cinámico, ácido cítrico, ácido dodecilsulfúrico, ácido etano-1,2-disulfónico, ácido etanosulfónico, ácido 2-hidroxietanosulfónico, ácido fórmico, ácido fumárico, ácido galactárico, ácido gentístico, ácido glucoheptónico,

ácido glucónico, ácido glucorónico, ácido glutámico, ácido glutárico, ácido 2-oxo-glutárico, ácido glicerofosfórico, ácido glicólico, ácido hipúrico, ácido isobutírico, ácido láctico, ácido lactobiónico, ácido láurico, ácido maleico, ácido málico, ácido malónico, ácido mandélico, ácido metanosulfónico, ácido múcico, ácido naftaleno-1,5-disulfónico, ácido naftaleno-2-sulfónico, ácido 1-hidroxi-2-naftopico, ácido nicotínico, ácido oleico, ácido orótico, ácido oxálico, ácido palmítico, ácido pamoico, ácido propiónico, ácido piroglutámico, ácido pirúvico, ácido salicílico, ácido 4-aminosalicílico, ácido sebácico, ácido esteárico, ácido succínico, ácido tartárico, ácido tiociánico, ácido p-toluenosulfónico, ácido trifluoroacético, ácido undecilénico, y similares.

Similarmente, una “sal de adición de base farmacéuticamente aceptable” se refiere a esas sales que retienen la eficacia biológica y las propiedades de los ácidos libres, que no son biológicamente o de otra manera indeseables. Estas sales se preparan por adición de una base inorgánica o una base orgánica al ácido libre. Las sales derivadas de bases inorgánicas incluyen, pero no están limitadas a, las sales de sodio, potasio, litio, amonio, calcio, magnesio, hierro, cinc, cobre, manganeso, aluminio y similares. Las sales inorgánicas preferidas son las sales de amonio, sodio, potasio, calcio y magnesio. Las sales derivadas de bases orgánicas incluyen, pero no están limitadas a, sales de aminas primarias, secundarias y terciarias, aminas sustituidas incluyendo aminas sustituidas naturales, aminas cíclicas y resinas de intercambio iónico básicas, tal como amoniaco, isopropilamina, trimetilamina, dietilamina, trietilamina, tripropilamina, dietanolamina, etanolamina, deanol, 2-dimetilaminoetanol, 2-dietilaminoetanol, diciclohexilamina, lisina, arginina, histidina, cafeína, procaína, hidrabamina, colina, betaína, benetamina, benzatina, etilendiamina, glucosamina, metilglucamina, teobromina, trietanolamina, trometamina, purinas, piperacina, piperidina, N-etilpiperidina, resinas poliaminas y similares. Las bases orgánicas particularmente preferidas son isopropilamina, dietilamina, etanolamina, trimetilamina, diciclohexilamina, colina y cafeína.

Con frecuencia las cristalizaciones producen un solvato del compuesto de la invención. Como se usa en el presente documento, el término “solvato” se refiere a un agregado que comprende una o más moléculas de un compuesto de la invención con una o más moléculas de solvente. El solvente puede ser agua, en cuyo caso el solvato puede ser un hidrato. Alternativamente, el solvente puede ser un solvente orgánico. Por tanto, los compuestos de la presente invención pueden existir como un hidrato, incluyendo un monohidrato, dihidrato, hemihidrato, sesquihidrato, trihidrato, tetrahidrato y similares, así como las formas solvatadas correspondientes. Los compuestos de la invención pueden ser solvatos verdaderos, mientras en otros casos los compuestos de la invención pueden solamente retener agua adventicia o ser una mezcla de agua más algún solvente adventicio.

Un “estereoisómero” se refiere a un compuesto hecho de los mismos átomos unidos por los mismos enlaces, pero que tienen diferentes estructuras tridimensionales, que no son intercambiables. La presente invención contempla varios estereoisómeros y mezclas de los mismos e incluye “enantiómeros”, que se refiere a dos estereoisómeros cuyas moléculas no son imágenes especulares superponibles.

Los compuestos de la invención, o sus sales farmacéuticamente aceptables pueden contener uno o más centros asimétricos y pueden por tanto dar lugar a enantiómeros, diastereómeros, y otras formas estereoisoméricas que se pueden definir, en términos de estereoquímica absoluta, como (R)- o (S)- o, como (D)- y (L)- para aminoácidos. Se pretende que la presente invención incluya todos de tales posibles isómeros, así como sus formas racémicas y ópticamente puras. Los isómeros ópticamente activos (+) y (-), (R)- y (S)-, o (D)- y (L)- se pueden preparar usando sintones quirales o reactivos quirales, o resolverse usando técnicas convencionales, por ejemplo, cromatografía y cristalización fraccional. Las técnicas convencionales para la preparación/aislamiento de enantiómeros individuales incluye síntesis quiral a partir de un precursor ópticamente puro adecuado o resolución del racemato (o el racemato de una sal o derivado) usando, por ejemplo, cromatografía líquida de alta presión quiral (HPLC). Cuando los compuestos descritos en el presente documento contienen dobles enlaces olefínicos u otros centros de asimetría geométrica, y a menos que se especifique otra cosa, se pretende que los compuestos incluyan los isómeros geométricos tanto E como Z. Asimismo, también se pretende que todas las formas tautoméricas estén incluidas.

El término “tautómero” se refiere a un cambio de protón de un átomo de una molécula a otro átomo de la misma molécula. Los ejemplos no limitantes de tautómeros incluyen formas enol/ceto, lactama/lactima, amida/imídico y amina/imina.

Existen tautómeros similares para los compuestos de fórmula (I). Los compuestos inventivos se sintetizan usando métodos sintéticos convencionales, y más específicamente usando los métodos generales indicados posteriormente. Se describen protocolos sintéticos específicos para varios compuestos según la presente invención en los ejemplos.

Formulaciones farmacéuticas

En una forma de realización, un compuesto de la presente invención se formula como composiciones farmacéuticamente aceptables que contienen un compuesto de la presente invención en una cantidad eficaz para tratar una enfermedad o afección particular de interés tras la administración de la composición farmacéutica a un mamífero. Las composiciones farmacéuticas según la presente invención pueden comprender un compuesto de la presente invención en combinación con un soporte, diluyente o excipiente farmacéuticamente aceptable.

A este respecto, un “soporte, diluyente o excipiente farmacéuticamente aceptable” incluye sin limitación cualquier adyuvante, soporte, excipiente, deslizante, agente edulcorante, diluyente, conservante pigmento/colorante, potenciador de sabor, tensioactivo, agente humectante, agente dispersante, agente de suspensión, estabilizante, agente isotónico, solvente o emulsionante que ha sido aprobado por la Agencia de Alimentos y Fármacos de los Estados Unidos como que es aceptable para uso en humanos o animales domésticos.

Además, un “mamífero” incluye seres humanos y tanto animales domésticos tal como animales de laboratorio y mascotas familiares (por ejemplo, gatos, perros, cerdo, ganado, ovejas, caballos, conejos), como animales no domésticos tal como vida salvaje y similares.

Las composiciones farmacéuticas de la invención se pueden preparar combinando un compuesto de la invención con un soporte, diluyente o excipiente farmacéuticamente aceptable apropiado, y se puede formular en preparaciones en formas sólidas, semisólidas, líquidas o gaseosas, tal como comprimidos, cápsulas, polvos, gránulos, pomadas, soluciones, supositorios, inyecciones, inhalantes, geles, microesferas, y aerosoles. Las rutas típicas de administrar tales composiciones farmacéuticas incluyen, sin limitación, oral, tópica, transdérmica, inhalación, parenteral, sublingual, yugal, rectal, vaginal e intranasal. El término parenteral como se usa en el presente documento incluye inyecciones subcutáneas, técnicas de inyección o infusión intravenosa, intramuscular, intraesternal. Las composiciones farmacéuticas de la invención se formulan de modo que permita que los principios activos contenidos en las mismas estén biodisponibles tras la administración de la composición a un paciente. Las composiciones que se administrarán a un sujeto o paciente toman la forma de una o más unidades posológicas, donde, por ejemplo, un comprimido puede ser una unidad posológica individual, y un envase de un compuesto de la invención en forma de aerosol puede contener una pluralidad de unidades posológicas. Los métodos reales de preparar tales formas posológicas los conocen, o serán aparentes para los expertos en la materia; por ejemplo, véase, Remington: The Science and Practice of Pharmacy, 20a Edición (Philadelphia College of Pharmacy and Science, 2000). La composición que se va a administrar contendrá, en cualquier caso, una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto de la invención, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, para el tratamiento de una enfermedad o afección de interés según las enseñanzas de esta invención.

Una composición farmacéutica de la invención puede estar en forma de un sólido o líquido. En un aspecto, el/los soporte(s) son particulados, de modo que las composiciones están, por ejemplo, en forma de comprimido o polvo. El/los soporte(s) puede(n) ser líquido(s), siendo las composiciones, por ejemplo, un jarabe oral, líquido inyectable o un aerosol, que es útil en, por ejemplo, administración inhaladora. Cuando se pretende para administración oral, la composición farmacéutica está preferiblemente en forma sólida o líquida, donde las formas semisólida, semilíquida, suspensión y gel están incluidas en las formas consideradas en el presente documento como sólidas o líquidas.

Como una composición sólida para la administración oral, la composición farmacéutica se puede formularen un polvo, gránulo, comprimido por compresión, píldora, cápsula, chicle, oblea o forma similar. Tal composición sólida típicamente contendrá uno o más diluyentes inertes o soportes comestibles. Además, puede estar presente uno o más de los siguientes: aglutinantes tal como carboximetilcelulosa, etilcelulosa, celulosa microcristalina, goma tragacanto o gelatina; excipientes tales como almidón, lactosa o dextrinas, agentes disgregantes tal como ácido algínico, alginato de sodio, Primogel, almidón de maíz y similares; lubricantes tal como estearato de magnesio o Sterotex; deslizantes tal como dióxido de silicio coloidal; agentes edulcorantes tal como sacarosa o sacarina; un agente saborizante tal como menta, salicilato de metilo o sabor de naranja; y un agente colorante.

Cuando la composición farmacéutica está en forma de una cápsula, por ejemplo, una cápsula de gelatina, puede contener, además de los materiales del tipo anterior, un soporte líquido tal como, polietilenglicol o aceite.

La composición farmacéutica puede estar en forma de un líquido, por ejemplo, un elixir, jarabe, solución, emulsión o suspensión. El líquido puede ser para administración oral o para administración por inyección, como dos ejemplos. Cuando se pretende para administración oral, la composición preferida contiene, además de los compuestos presentes, uno o más agentes edulcorantes, conservantes pigmento/colorante y potenciador de sabor. En una composición destinada a ser administrada por inyección, se pueden incluir uno o más de un tensioactivo, conservante, agente humectante, agente dispersante, agente de suspensión, tampón, estabilizante y agente isotónico.

Las composiciones farmacéuticas líquidas de la invención, ya sean soluciones, suspensiones u otra forma similar, pueden incluir uno o más de los siguientes adyuvantes: diluyentes estériles tal como agua para inyección, solución salina, preferiblemente solución salina fisiológica, solución de Ringer, cloruro de sodio isotónico, aceites no volátiles tal como mono y diglicéridos sintéticos que pueden servir como el solvente o medio de suspensión, polietilenglicoles, glicerina, propilenglicol u otros solventes; agentes antibacterianos tal como alcohol bencílico o metilparabeno; antioxidantes tal como ácido ascórbico o bisulfito de sodio; agentes quelantes tal como ácido etilendiaminotetraacético; tampones tal como acetatos, citratos o fosfatos y agentes para el ajuste de la tonicidad tal como cloruro de sodio o dextrosa. La preparación parenteral puede estar encerrada en ampollas, jeringas desechables o viales de dosis múltiples hechos de vidrio o plástico. La solución salina fisiológica es una adyuvante preferido. Una composición farmacéutica inyectable es preferiblemente estéril.

Una composición farmacéutica líquida de la invención destinada para administración parenteral u oral debe contener una cantidad de un compuesto de la invención de modo que se obtenga una dosis adecuada.

La composición farmacéutica de la invención puede estar destinada para administración tópica, en cuyo caso el soporte debe comprender adecuadamente una solución, emulsión, pomada o base de gel. La base, por ejemplo, puede comprender uno o más de los siguientes: vaselina, lanolina, polietilenglicoles, cera de abeja, aceite de vaselina, diluyentes tal como agua y alcohol, y emulsionantes y estabilizantes. Pueden estar presentes agentes espesantes en una composición farmacéutica para administración tópica. Si está destinada para la administración transdérmica, la composición puede incluir un parche transdérmico o dispositivo de iontoforesis.

La composición farmacéutica de la invención puede estar destinada para administración rectal, en la forma, por ejemplo, de un supositorio, que se fundirá en el recto y liberará el fármaco. La composición para la administración rectal puede contener una base oleaginosa como un excipiente no irritante adecuado. Tales bases incluyen, sin limitación, lanolina, manteca de cacao y polietilenglicol.

La composición farmacéutica de la invención puede incluir varios materiales, que modifican la forma física de una unidad posológica sólida o líquida. Por ejemplo, la composición puede incluir materiales que forman una vaina de recubrimiento alrededor de los principios activos. Los materiales que forman la vaina de recubrimiento típicamente son inertes, y se pueden seleccionar de, por ejemplo, azúcar, laca, y otros agentes de recubrimiento entéricos. Alternativamente, los principios activos pueden estar encerrados en una cápsula de gelatina.

La composición farmacéutica de la invención en forma sólida o líquida puede incluir un agente que se une al compuesto de la invención y mediante ello ayuda en la administración del compuesto. Los agentes adecuados que pueden actuar en esta capacidad incluyen un anticuerpo monoclonal o policlonal, una proteína o un liposoma.

La composición farmacéutica de la invención puede consistir en unidades posológicas que se pueden administrar como un aerosol. El término aerosol se usa para indicar una variedad de sistemas que varían desde los de naturaleza coloidal a sistemas que consisten en envases presurizados. La administración puede ser por un gas licuado o comprimido o por un sistema de bomba adecuado que dispensa los principios activos. Los aerosoles de los compuestos de la invención se pueden administrar en sistemas de una única fase, bifásicos, o trifásicos con el fin de administrar el/los principio(s) activo(s). La administración del aerosol incluye el envase necesario, activadores, válvulas, subenvases, y similares, que juntos pueden formar un kit. Un experto en la materia, sin experimentación excesiva puede determinar los aerosoles preferidos.

Las composiciones farmacéuticas de la invención se pueden preparar por cualquier metodología bien conocida en la técnica farmacéutica. Por ejemplo, una composición farmacéutica destinada a ser administrada por inyección se puede preparar combinando un compuesto de la invención con agua destilada estéril de modo que se forme una solución. Se puede añadir un tensioactivo para facilitar la formación de una solución o suspensión homogénea. Los tensioactivos son compuestos que interaccionan de forma no covalente con el compuesto de la invención de modo que facilitan la disolución o suspensión homogénea del compuesto en el sistema de administración acuoso.

En ciertas formas de realización, una composición farmacéutica que comprende un compuesto de la presente invención se administra a un mamífero en una cantidad suficiente para inhibir la actividad Mnk tras la administración, y preferiblemente con toxicidad aceptable al mismo. La actividad Mnk de los compuestos de la presente invención la puede determinar un experto en la materia, por ejemplo, como se describe en los ejemplos posteriormente. Las concentraciones y dosis apropiadas las puede determinar fácilmente un experto en la materia.

Uso terapéutico

Los compuestos de la invención, o sus sales farmacéuticamente aceptables, se administran en una cantidad terapéuticamente eficaz, que variará dependiendo de una variedad de factores que incluyen la actividad del compuesto específico empleado; la estabilidad metabólica y longitud de acción del compuesto; la edad, peso corporal, salud general, sexo, y dieta del paciente; el modo y tiempo de administración; la velocidad de excreción; la combinación de fármacos; la gravedad del trastorno o afección particular; y el sujeto que experimenta terapia.

“Cantidad eficaz” o “cantidad terapéuticamente eficaz” se refiere a esa cantidad de un compuesto de la invención que, cuando se administra a un mamífero, preferiblemente un ser humano, es suficiente para efectuar el tratamiento, como se define posteriormente, de una afección o enfermedad relacionada con Mnk en el mamífero, preferiblemente un ser humano. La cantidad de un compuesto de la invención que constituye una “cantidad terapéuticamente eficaz” variará dependiendo del compuesto, la afección y su gravedad, la manera de administración, y la edad del mamífero que se va a tratar, pero la puede determinar un experto en la materia en consideración a su propio conocimiento y a esta divulgación.

Los compuestos de la invención, o sales farmacéuticamente aceptables de los mismos, también se pueden administrar simultáneamente con, antes de, o después de la administración de uno o más otros agentes terapéuticos. Tal terapia de combinación incluye la administración de una única formulación posológica farmacéutica que contiene un compuesto de la invención y uno o más agentes activos adicionales, así como la administración del compuesto de la invención y cada agente activo en su propia formulación posológica farmacéutica separada. Por ejemplo, un compuesto de la invención y el otro agente activo se pueden administrar al paciente juntos en una única composición posológica oral tal como un comprimido o una cápsula, o administrar cada agente en formulaciones posológicas orales separadas. Donde se usan formulaciones posológicas separadas, los compuestos de la invención y uno o más agentes activos adicionales se pueden administrar en esencialmente el mismo momento, es decir, concurrentemente, o en momentos escalonados por separado, es decir, secuencialmente; se entiende que la terapia de combinación incluye todas estas pautas.

En ciertas formas de realización, los compuestos divulgados son útiles para inhibir la actividad de Mnk y/o pueden ser útiles en analizar la actividad de señalización de Mnk en sistemas modelo y/o para prevenir, tratar, o mejorar un síntoma asociado con una enfermedad, trastorno, o estado patológico que implica Mnk, preferiblemente uno que afecta a seres humanos. Un compuesto que inhibe la actividad de Mnk será útil en prevenir, tratar, mejorar o reducir los síntomas o la evolución de enfermedades de crecimiento, proliferación y/o supervivencia celular incontrolados, respuestas inmunitarias celulares inapropiadas, o respuestas inflamatorias celulares inapropiadas o enfermedades que están acompañadas con crecimiento, proliferación y/o supervivencia celular incontrolados, respuestas inmunitarias celulares inapropiadas, o respuestas inflamatorias celulares inapropiadas, en particular en la que el crecimiento, proliferación y/o supervivencia celular incontrolados, respuestas inmunitarias celulares inapropiadas, o respuestas inflamatorias celulares inapropiadas está mediada por Mnk, tal como, por ejemplo, tumores hematológicos, tumores sólidos, y/o metástasis de los mismos, incluyendo leucemias y síndrome mielodisplásico, linfomas malignos, por ejemplo, linfoma de células B, linfoma de células T, linfoma de células pilosas, linfoma de Hodgkin, linfoma no hodgkiniano y linfoma de Burkitt, tumores de cabeza y cuello incluyendo tumores cerebrales y metástasis cerebrales, tumores del tórax incluyendo tumores pulmonares no microcíticos y microcíticos, tumores gastrointestinales, tumores endocrinos, tumores mamarios y otros ginecológicos, tumores urológicos incluyendo tumores renales, de vejiga y próstata, tumores de piel, y sarcomas, y/o metástasis de los mismos.

Además, los compuestos inventivos y sus composiciones farmacéuticas son terapéuticos candidatos para la profilaxis y/o terapia de enfermedades relacionadas con citoquinas, tal como enfermedades inflamatorias, alergias u otras afecciones asociadas con citoquinas proinflamatorias. Las enfermedades inflamatorias ejemplares incluyen sin limitación, inflamación crónica o aguda, inflamación de las articulaciones tal como artritis inflamatoria crónica, artritis reumatoide, artritis psoriásica, artrosis, artritis reumatoide juvenil, síndrome de Reiter, artritis traumática reumatoide, artritis por rubeola, sinovitis aguda y artritis gotosa; enfermedades inflamatorias de la piel tal como quemadura del sol, psoriasis, psoriasis eritrodérmica, psoriasis pustular, eccema, dermatitis, formación de injerto aguda o crónica, dermatitis atópica, dermatitis de contacto, urticaria y esclerodermia; inflamación del aparato digestivo tal como enfermedad inflamatoria intestinal, enfermedad de Crohn y afecciones relacionadas, colitis ulcerosa, colitis, y diverticulitis; nefritis, uretritis, salpingitis, ovaritis, endomiometritis, espondilitis, lupus eritematoso sistémico y trastornos relacionados, esclerosis múltiple, asma, meningitis, mielitis, encefalomielitis, encefalitis, flebitis, tromboflebitis, enfermedades respiratorias tal como asma, bronquitis, enfermedad pulmonar obstructiva crónica (EPOC), enfermedad pulmonar inflamatoria y síndrome de dificultad respiratoria del adulto, y rinitis alérgica; endocarditis, osteomielitis, fiebre reumática, pericarditis reumática, endocarditis reumática, miocarditis reumática, enfermedad de la válvula mitral reumática, enfermedad de la válvula aórtica reumática, prostatitis, prostatocistitis, espondoartropatías espondilitis anquilosante, sinovitis, tenosinovitis, miositis, faringitis, polimialgia reumática, tendinitis del hombro o bursitis, gota, pseudogota, vasculitis, enfermedades inflamatorias del tiroides seleccionadas del grupo que consiste en tiroiditis granulomatosa, tiroiditis linfocítica, tiroiditis fibrosa invasiva, tiroiditis aguda; tiroiditis de Hashimoto, enfermedad de Kawasaki, fenómeno de Raynaud, síndrome de Sjogren, enfermedad neuroinflamatoria, septicemia, conjuntivitis, queratitis, iridociclitis, neuritis óptica, otitis, linfoadenitis, nasofaringitis, sinusitis, faringitis, amigdalitis, laringitis, epiglotitis, bronquitis, neumonitis, estomatitis, gingivitis, esofagitis, gastritis, peritonitis, hepatitis, colelitiasis, colecistitis, glomerulonefritis, enfermedad de goodpasture, glomerulonefritis semilunar, pancreatitis, endomiometritis, miometritis, metritis, cervicitis, endocervicitis, exocervicitis, parametritis, tuberculosis, vaginitis, vulvitis, silicosis, sarcoidosis, neumoconiosis, pirosis, poliartropatías inflamatorias, artropatías psoriásicas, fibrosis intestinal, bronquiectasia y artropatías enteropáticas.

Aunque la inflamación es el proceso patogénico unificador de estas enfermedades, las terapias actuales solo tratan los síntomas de la enfermedad y no la causa subyacente de la inflamación. Las composiciones de la presente invención son útiles para el tratamiento y/o la profilaxis de enfermedades inflamatorias y complicaciones y trastornos relacionados.

Según esto, ciertas formas de realización se dirigen a un método para tratar una afección dependiente de Mnk en un mamífero en necesidad de ello, el método comprende administrar una cantidad eficaz de una composición farmacéutica como se ha descrito anteriormente (es decir, una composición farmacéutica que comprende uno o más compuestos de la presente invención) a un mamífero.

“Tratar” o “tratamiento” como se usa en el presente documento cubre el tratamiento de la enfermedad o afección de interés en un mamífero, preferiblemente un ser humano, que tiene la enfermedad o afección de interés, e incluye: (i) prevenir que se produzca la enfermedad o afección en un mamífero, en particular, cuando tal mamífero está predispuesto a la afección, pero aún no ha sido diagnosticado que la tiene;

(ii) inhibir la enfermedad o afección, es decir, parar su desarrollo;

(iii) aliviar la enfermedad o afección, es decir, producir regresión de la enfermedad o afección; o

(iv) aliviar los síntomas resultantes de la enfermedad o afección, es decir, aliviar el dolor sin abordar la enfermedad o afección subyacente. Como se usa en el presente documento, los términos “enfermedad” y “afección” se pueden usar de forma intercambiable o pueden ser diferentes en que la dolencia o afección particular pueden no tener un agente causante conocido (de modo que la etiología aún no se ha encontrado) y por tanto aún no está reconocida como una enfermedad, sino solo como una afección o síndrome indeseable, en donde un conjunto más o menos específico de síntomas han sido identificados por clínicos.

Como se ha descrito anteriormente la desregulación de la síntesis de proteínas es un suceso común en cánceres humanos. Un regulador clave del control de la traducción es eIF4E cuya actividad es un determinante clave de la tumorigenicidad. Puesto que la activación de eIF4E implica la fosforilación de una serina clave (Ser209) específicamente por quinasas que interaccionan con MAP quinasa (Mnk), los inhibidores de Mnk son agentes terapéuticos candidatos adecuados para tratar trastornos proliferativos de células tal como cáncer. Una amplia variedad de cánceres incluyendo tumores sólidos, linfomas y leucemias, son susceptibles a las composiciones y métodos divulgados en el presente documento. Los tipos de cáncer que se pueden tratar incluyen, pero no están limitados a, adenocarcinoma de la mama, próstata, y colon; todas las formas de carcinoma broncogénico del pulmón; mieloide; melanoma; hepatoma; neuroblastoma; papiloma; apudoma; coristoma; branquioma; síndrome carcinoide maligno; enfermedad carcinoide del corazón; y carcinoma (por ejemplo, Walker, células basales, basoescamoso, Brown-Pearce, ductal, tumor de Ehrlich, Krebs 2, células de merkel, mucinoso, de pulmón no microcítico, de células pequeñas, papilar, escirroso, bronquiolar, broncogénico, de células escamosas, y de células transicionales). Los tipos adicionales de cánceres que se pueden tratar incluyen trastornos histiocíticos; leucemia; histiocitosis maligna; enfermedad de Hodgkin; pequeño inmunoproliferativo; linfoma no hodgkiniano; linfoma difuso de células B grandes, linfoma de células T, linfoma de células B, linfoma de células pilosas, linfoma de Burkitt, plasmacitoma; reticuloendoteliosis; melanoma; condroblastoma; condroma; condrosarcoma; fibroma; fibrosarcoma; tumores de células gigantes; histiocitoma; lipoma; liposarcoma; mesotelioma; mixoma; mixosarcoma; osteoma; osteosarcoma; cordoma; craniofaringioma; disgerminoma; hamartoma; mesenquimoma; mesonefroma; miosarcoma; ameloblastoma; cementoma; odontoma; teratoma; timoma; tumor trofoblástico.

Otros cánceres que se pueden tratar usando los compuestos inventivos incluyen sin limitación adenoma; colangioma; colesteatoma; ciclindroma; cistadenocarcinoma; cistadenoma; tumor de células granulosas; ginandroblastoma; hepatoma; hidradenoma; tumor de células de los islotes; tumor de células de Leydig; papiloma; tumor de células de sertoli; tumor de células tecales; leimioma; leiomiosarcoma; mioblastoma; mioma; miosarcoma; rabdomioma; rabdomiosarcoma; ependimoma; ganglioneuroma; glioma; meduloblastoma; meningioma; neurilemoma; neuroblastoma; neuroepitelioma; neurofibroma; neuroma; paraganglioma; paraganglioma no cromafínico.

En una forma de realización los compuestos inventivos son agentes terapéuticos candidatos para el tratamiento de cánceres tal como angioqueratoma; hiperplasia angiolinfoide con eosinofilia; angioma esclerosante; angiomatosis; glomangioma; hemangioendotelioma; hemangioma; hemangiopericitoma; hemangiosarcoma; linfangioma; linfangiomioma; linfangiosarcoma; pinealoma; carcinosarcoma; condrosarcoma; cistosarcoma filoides; fibrosarcoma; hemangiosarcoma; leiomiosarcoma; leucosarcoma; liposarcoma; linfangiosarcoma; miosarcoma; mixosarcoma; carcinoma ovárico; rabdomiosarcoma; sarcoma; neoplasias; nerofibromatosis; y displasia cervical.

En una forma de realización particular, la presente divulgación proporciona métodos para tratar un tumor sólido, cáncer de colon, cáncer rectal, cáncer colorrectal, cáncer de vejiga, cáncer gástrico, cáncer esofágico, cáncer de cabeza y cuello, síndrome mielodisplásico, cáncer de cerebro, cáncer del SNC, glioma maligno, glioblastoma, cánceres hepatocelulares, carcinoma hepatocelular, cáncer tiroideo, cáncer de pulmón, cáncer de pulmón no microcítico, un cáncer hematológico, leucemia, linfoma de células B, linfoma de células T, linfoma de células pilosas, linfoma difuso de células B grandes, linfoma de Hodgkin, linfoma no hodgkiniano, linfoma de Burkitt, cáncer pancreático, melanoma, mieloma, mieloma múltiple, carcinoma pancreático, carcinoma de células renales, cáncer renal, cáncer cervical, cáncer urotelial, cáncer de próstata, cáncer de próstata resistente a castración, cáncer ovárico, cáncer de mama o cáncer de mama triple negativo. Según tal método, una cantidad terapéuticamente eficaz de al menos un compuesto según la fórmula (I) o un estereoisómero, tautómero o sal farmacéuticamente aceptable del mismo se puede administrar a un sujeto que ha sido diagnosticado con una enfermedad proliferativa celular, tal como un cáncer. Alternativamente, una composición farmacéutica que comprende al menos un compuesto según la fórmula (I) o un estereoisómero, tautómero o sal farmacéuticamente aceptable del mismo se puede administrar a un sujeto que ha sido diagnosticado con cáncer.

En ciertas formas de realización, los compuestos según la invención se administran a un sujeto con cáncer junto con otras terapias contra el cáncer convencionales tal como tratamiento de radiación o cirugía. La terapia de radiación se conoce bien en la técnica e incluye terapia de rayos X, tal como radiación gamma, y terapias radiofarmacéuticas.

En ciertas formas de realización, los compuestos inhibidores de Mnk inventivos se usan con al menos un agente anticáncer. Los agentes anticáncer incluyen fármacos quimioterapéuticos. Un agente quimioterapéutico incluye, pero no está limitado a, un inhibidor de la función de cromatina, un inhibidor de topoisomerasa, un fármaco que inhibe microtúbulos, un agente de daña el ADN, un antimetabolito (tal como antagonistas de folato, análogos de pirimidina, análogos de purina, y análogos con azúcar modificado), un inhibidor de la síntesis de ADN, un agente interactivo con ADN (tal como un agente intercalante) y un inhibidor de la reparación de ADN.

Los agentes quimioterapéuticas ilustrativos incluyen, sin limitación, los siguientes grupos: antimetabolitos/agentes anticáncer, tal como análogos de pirimidina (5-fluorouracilo, floxuridina, capecitabina, gemcitabina y citarabina) y análogos de purina, antagonistas de folato e inhibidores relacionados (mercaptopurina, tioguanina, pentostatina y 2-clorodesoxiadenosina (cladribina)); agentes antiproliferativos/antimitóticos incluyendo productos naturales tal como alcaloides de la vinca (vinblastina, vincristina, y vinorelbina), alteradores de microtúbulos tal como taxano (paclitaxel, docetaxel), vincristina, vinblastina, nocodazol, epotilonas y navelbina, epidipodofilotoxinas (etopósido, tenipósido), agentes que dañan el ADN (actinomicina, amsacrina, antraciclinas, bleomicina, busulfán, camptotecina, carboplatino, clorambucilo, cisplatino, ciclofosfamida, Cytoxan, dactinomicina, daunorubicina, doxorubicina, epirubicina, hexametilmelaminaoxaliplatino, ifosfamida, melfalán, merclorehtamina, mitomicina, mitoxantrona, nitrosourea, plicamicina, procarbazina, taxol, taxotere, temozolamida, tenipósido, trietilenetiofosforamida y etopósido (VP 16)); antibióticos tal como dactinomicina (actinomicina D), daunorubicina, doxorubicina (adriamicina), idarubicina, antraciclinas, mitoxantrona, bleomicinas, plicamicina (mitramicina) y mitomicina; enzimas (L-asparraginasa que metaboliza sistémicamente L-asparragina y priva a las células que no tienen la capacidad de sintetizar su propia asparragina); agentes antiplaquetarios; agentes antiproliferativos/antimitóticos alquilantes tal como mostazas de nitrógeno (mecloretamina, ciclofosfamida y análogos, melfalán, clorambucilo), etileniminas y metilmelaminas (hexametilmelamina y tiotepa), sulfonatos de alquilo -busulfán, nitrosoureas (carmustina (BCNU) y análogos, estreptozocina), tracenos— dacarbacinina (DTIC); antimetabolitos antiproliferativos/antimitóticos tal como análogos de ácido fólico (metotrexato); complejos de coordinación de platino (cisplatino, carboplatino), procarbazina, hidroxiurea, mitotano, aminoglutetimida; hormonas, análogos de hormonas (estrógeno, tamoxifeno, goserelina, bicalutamida, nilutamida) e inhibidores de aromatasa (letrozol, anastrozol); anticoagulantes (heparina, sales de heparina sintéticas y otros inhibidores de trombina); agentes fibrinolíticos (tal como activador de plasminógeno tisular, estreptoquinasa y uroquinasa), aspirina, dipiridamol, ticlopidina, clopidogrel, abciximab; agentes antimigratorios; agentes antisecretores (breveldina); inmunosupresores (ciclosporina, tacrolimus (FK-506), sirolimus (rapamicina), azatioprina, micofenolato mofetil); compuestos anti-angiogénicos (TNP470, genisteina) e inhibidores de factores de crecimiento (inhibidores del factor de crecimiento endotelial vascular (VEGF), (inhibidores del factor de crecimiento de fibroblastos (FGF)); bloqueante del receptor de angiotensina; donantes de óxido nítrico; oligonucleótidos antisentido; anticuerpos (trastuzumab, rituximab); receptores de antígenos quiméricos; inhibidores del ciclo celular e inductores de diferenciación (tretinoina); inhibidores de mTOR, inhibidores de topoisomerasa (doxorubicina (adriamicina), amsacrina, camptotecina, daunorubicina, dactinomicina, enipósido, epirubicina, etopósido, idarubicina, irinotecano (CPT-11) y mitoxantrona, topotecano, irinotecano), corticosteroides (cortisona, dexametasona, hidrocortisona, metilpednisolona, prednisona, y prenisolona); inhibidores de quinasas de transducción de señales de factores de crecimiento; inductores de disfunción mitocondrial, toxinas tal como toxina del cólera, ricina, exotoxina de Pseudomonas, toxina adenilato ciclasa de Bordetella pertussis, o toxina de la difteria, y activadores de caspasas; y alteradores de cromatina.

En ciertas formas de realización, un inhibidor de Mnk según la presente invención se usa simultáneamente, en la misma formulación o en formulaciones separadas, o secuencialmente con un agente(s) adicional(es) como parte de una pauta de terapia de combinación.

Los inhibidores de Mnk según la presente invención incluyendo sus correspondientes sales y composiciones farmacéuticas de los compuestos de la presente invención también son eficaces como agentes terapéuticos para tratar o prevenir trastornos mediados por citoquinas, tal como inflamación en un paciente, preferiblemente en un ser humano. En una forma de realización, un compuesto o composición según la invención es particularmente útil para tratar o prevenir una enfermedad seleccionada del grupo que consiste en inflamación crónica o aguda, artritis inflamatoria crónica, artritis reumatoide, psoriasis, EPOC, enfermedad intestinal inflamatoria, choque séptico, enfermedad de Crohn, colitis ulcerosa, esclerosis múltiple y asma.

En un aspecto adicional de la invención, los compuestos inventivos o formulaciones farmacéuticamente aceptables de los compuestos inventivos se proporcionan como inhibidores de la actividad Mnk. Tal inhibición se logra poniendo en contacto una célula que expresa Mnk con un compuesto o una formulación farmacéuticamente aceptable, para disminuir o inhibir la actividad Mnk, para proporcionar eficacia terapéutica para una afección dependiente de Mnk en un mamífero en necesidad de ello.

Las dosis terapéuticamente eficaces de un compuesto de la presente invención o una composición de un compuesto de la presente invención en general variarán desde aproximadamente 1 a 2000 mg/día, desde aproximadamente 10 hasta aproximadamente 1000 mg/día, desde aproximadamente 10 hasta aproximadamente 500 mg/día, desde aproximadamente 10 hasta aproximadamente 250 mg/día, desde aproximadamente 10 hasta aproximadamente 100 mg/día, desde aproximadamente 10 hasta aproximadamente 50 mg/día. Las dosis terapéuticamente eficaces se pueden administrar en una o múltiples dosis. Sin embargo, se apreciará que las dosis específicas de los compuestos de la invención para cualquier paciente particular dependerán de una variedad de factores tal como la edad, sexo, peso corporal, estado de salud general, dieta, respuesta individual del paciente que se va a tratar, tiempo de administración, gravedad de la enfermedad que se va a tratar, la actividad del compuesto particular aplicado, forma posológica, modo de aplicación y medicación concomitante. La cantidad terapéuticamente eficaz para una situación determinada se determinará fácilmente por experimentación de rutina y está dentro de las capacidades y juicio del clínico o médico habitual. En cualquier caso, el compuesto o la composición se administrará a dosis y de una manera que permite que una cantidad terapéuticamente eficaz se administre basado en el estado único del paciente.

Métodos sintéticos generales

Método 1:

La formación del intermedioIV, donde X = halógeno u otro grupo saliente, tal como -OTf, -OTs u -OMs, se logró exponiendo el compuestoIIa una cetonaIII, o un equivalente de cetona tal comoIlla,IlIboIIIcen condiciones ácidas. Más específicamente, exponerIIdonde X es Cl o Br a una cetonaIIIen 1,4-dioxano y ácido sulfúrico concentrado con calentamiento da el intermedioIV.

Los compuestos de fórmulaIse sintetizaron a través de acoplamiento de Buchwald-Hartwig, acoplamiento de tipo Ullmann, o sustitución aromática nucleófila. Por tanto, poner en contacto el intermedioIVdonde X = halógeno u otro grupo saliente, tal como -OTf, -OTs u -OMs, con un compuesto de fórmulaVoVaen condiciones adecuadas para acoplamiento, o sustitución aromática nucleófila dio compuestos de fórmulaIoIa.Iase puede desproteger para darI.

En un método alternativo, el grupo saliente X del intermedioIV, donde X = halógeno u otro grupo saliente, tal como -OTf, -OTs u -OMs, se puede desplazar con un nucleófilo N apropiado en condiciones similares a las descritas anteriormente para la síntesis deIde modo que se produzca el intermedioVo el intermedio protegidoVa.Vase puede desproteger para darV.

Los compuestos de fórmulaIolase sintetizan fácilmente poniendo en contacto el intermedioVcon un compuesto de pirimidinaVIoVla, donde X = halógeno u otro grupo saliente, tal como -OTf, -OTs u -OMs, en las condiciones de acoplamiento de Buchwald-Hartwig, acoplamiento de tipo Ullmann, o sustitución aromática nucleófila.Iase puede desproteger para darI.

Se exponen métodos sintéticos más específicos para compuestos de fórmulaIa continuación. Se entiende que si se usan grupos protectores (“P”) durante la síntesis de intermedios, o si un compuesto de fórmulaIcontiene uno o más grupos protectores, entonces tales grupos protectores se eliminan por métodos conocidos en la técnica química.

También se entiende que el grupo R1, R2 o R3 de un compuesto de fórmulaIse puede proveer en una fase adecuada de la síntesis a través de métodos convencionales conocidos en la técnica química.

Ejemplos

Los siguientes ejemplos se proporcionan para fines de ilustración y no limitación.

Ejemplo 1: (R)-6-((6-am¡no-5-met¡lp¡r¡m¡d¡n-4-¡l)am¡no)-1'.8-d¡met¡l-2H-esp¡ro[¡m¡dazo[1.5-a1p¡r¡d¡na-3.3'-p¡perid¡na1-1,5-diona (Cpto No. 1Fa) y (S)-6-((6-am¡no-5-met¡lp¡r¡m¡d¡n-4-¡l)am¡no)-1'.8-d¡met¡l-2H-esp¡ro[¡m¡dazo[1.5-a1p¡r¡d¡na-3.3'-p¡per¡d¡na1-1.5-d¡ona (Cpto No. 1Fb)

Síntesis de N-(6-((1’,8-dimetil-1,5-dioxo-1,5-dihidro-2H-espiro[imidazo[1,5-a]piridina-3,3’-piperidin]-6-il)amino)-5-metilpirimidin-4-il)ddopropanocarboxamida (3):

Una suspensión de N-(6-amino-5-metilpirimidin-4-il)cidopropanocarboxamida (1, 0,82 g, 4,29 mmol), 6-bromo-1',8-dimetil-2H-espiro[imidazo[1,5-a]piridina-3,3'-piperidina]-1,5-diona (2, 1,40 g, 4,29 mmol), y carbonato de cesio (2,79 g, 8,58 mmol) en 1,4-dioxano (20 ml) se purgó con argón durante 15 min. A esta mezcla se añadió 9,9-dimetil-4,5-bis(difenilfosfino)xanteno (0,12 g, 0,21 mmol), 2-(diclohexilfosfino)-2’,4',6'-triisopropilbifenilo (0,10 g, 0,21 mmol), tris(dibencilidenoacetona)dipaladio (0,20 g, 0,21 mmol) y acetato de paladio (0,049 g, 0,21 mmol). La mezcla se purgó durante otros 5 min y el vial se selló. La reacción se agitó a 100 °C durante 16 h. Después de completar, la masa de reacción se diluyó con metanol al 5% en diclorometano (150 ml) y se pasó a través de un lecho de celite. El filtrado se concentró y el crudo se purificó por cromatografía en columna combiflash usando metanol al 3-5% en diclorometano para dar N-(6-((1',8-dimetil-1,5-dioxo-1,5-dihidro-2H-espiro[imidazo[1,5-a]piridina-3,3'-piperidin]-6-il)amino)-5-metilpirimidin-4-il)ciclopropanocarboxamida (3) como un sólido amarillo. Rendimiento: 0,96 g, 51%; MS (ESI)m/z438,1 [M+1]+.

(R)-6-((6-amino-5-metilpirimidin-4-il)amino)-1’,8-dimetil-2H-espiro[imidazo[1,5-a]piridina-3,3’-piperidina]-1,5-diona (Cpto No. 1Fa) y (S)-6-((6-amino-5-metilpirimidin-4-il)amino)-1’,8-dimetil-2H-espiro[imidazo[1,5-a]piridina-3,3’-piperidina]-1,5-diona (Cpto No. 1Fb)

A una solución de N-(6-((1',8-dimetil-1,5-dioxo-1,5-dihidro-2H-espiro[imidazo[1,5-a]piridina-3,3'-piperidin]-6-il)amino)-5-metilpirimidin-4-il)ciclopropanocarboxamida (3, 0,95 g, 2,17 mmol) en tetrahidrofurano, etanol y agua (1:1:1, 30 ml) se añadió hidróxido de potasio (1,22 g, 21,71 mmol). La reacción se agitó a 60 °C durante 18 h. Después de completar, la mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente y se extrajo con metanol al 10% en diclorometano (3 * 50 ml). La fase orgánica combinada se lavó con agua, salmuera, se secó sobre sulfato de sodio anhidro, se filtró y concentró a presión reducida. El compuesto crudo se purificó por cromatografía en columna combiflash usando metanol al 7-8% en diclorometano para dar 6-((6-amino-5-metilpirimidin-4-il)amino)-1',8-dimetil-2H-espiro[imidazo[1,5-a1piridina-3,3'-piperidina]-1,5-diona (rac-1F) como sólido blancuzco. Rendimiento: 555 mg, 69%; MS (ESI)m/z370,4 [M+1]+.

La purificación quiral del compuesto racémico 6-((6-amino-5-metilpirimidin-4-il)amino)-1',8-dimetil-2H-espiro[imidazo[1,5-a]piridina-3,3'-piperidina]-1,5-diona (Cpto. No. 1F) se llevó a cabo por HPLC quiral SFC usando una columna Chiralpak-IA (250 * 21 mm, 5 pm) usando una mezcla isocrática de metanol al 15%/dióxido de carbono. Pico-1: Rt= 17 min, ee = 98,16%; 1H RMN (400 MHZ, DMSO-d6) 89,82 (bs, 1H), 8,48 (s, 1H), 8,12 (s, 1H), 7,98 (s, 1H), 6,50 (s, 2H), 3,33-3,30 (m, 1H), 3,02-2,93 (m, 1H), 2,81-2,79 (m, 1H), 2,46-2,45 (m, 1H), 2,44 (s, 3H), 2,21 (s, 3H), 1,98 (s, 3H), 1,93-1,91 (m, 2H), 1,72-1,68 (m, 1H), 1,49-1,47 (m, 1H). Pico-2: Rt = 19,8 min, ee = 96,58%; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 89,87 (bs, 1H), 8,48 (s, 1H), 8,11 (s, 1H), 7,98 (s, 1H), 6,48 (s, 2H), 3,33-3,30 (m, 1H), 2,99-2,93 (m, 1H), 2,81-2,79 (m, 1H), 2,492,48 (m, 1H), 2,44 (s, 3H), 2,21 (s, 3H), 1,98 (s, 3H), 1,93-1,91 (m, 2H), 1,71-1,68 (m, 1H), 1,47 (d,J=12 Hz, 1H).

Ejemplo 2: (R)-4-am¡no-6-((1'.8-d¡met¡l-1.5-d¡oxo-1.5-d¡h¡dro-2H-esp¡ro[¡m¡dazo[1.5-a1p¡r¡d¡na-3,3'-p¡per¡d¡n1-6-¡l)am¡no)pir¡m¡d¡na-5-carbon¡tr¡lo (Cpto. No. 2Fa) y (S)-4-amino-6-((1',8-dimetil-1,5-dioxo-1,5-dihidro-2H-espironmidazo[1,5-a1piridina-3,3'-piperidin1-6-il)amino)pirimidina-5-carbonitrilo (Cpto. No. 2Fb)

Síntesis de clorhidrato de 6-bromo-8-metil-2H-espiro[imidazo[1,5-a]piridina-3,3’-piperidina]-1,5-diona (3)

Un tubo sellado se cargó con 5-bromo-3-metil-6-oxo-1,6-dihidropiridina-2-carboxamida (1, 10,0 g, 43,2 mmol), 3-oxopiperidina-1-carboxilato de tert-butilo (2, 10,31 g, 51,8 mmol) y cloruro de hidrógeno 4 M en 1,4-dioxano (100 ml) en 1,4-dioxano (100 ml). La mezcla de reacción se calentó a 110 °C durante 16 h. Después de completar, la mezcla de reacción se evaporó a presión reducida y el residuo sólido se lavó con éter para dar clorhidrato de 6-bromo-8-metil-2H-espiro[imidazo[1,5-a]piridina-3,3'-piperidina]-1,5-diona (3) como un sólido amarillo claro. Rendimiento: 20,0 g, 93%; MS (ESI)m/z312,27 [M+1]+.

Síntesis de 6-bromo-1’, 8-dimetil-2H-espiro[imidazo[1,5-a]piridina-3,3’-piperidina]-1,5-diona (4)

A una solución de clorhidrato de 6-bromo-8-metil-2H-espiro[imidazo[1,5-a]piridina-3,3'-piperidina]-1,5-diona (3, 10,0 g, 28,8 mmol) en N,N-dimetilformamida (75 ml) se añadieron N,N-diisopropiletilamina (9,29 g, 72,04 mmol) y yoduro de metilo (4,50 g, 31,7 mmol) a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 3 h. Después la mezcla de reacción de extinguió con agua y hielo y el precipitado sólido se aisló por filtración. El sólido se lavó con éter dietílico y se secó a presión reducida para dar 6-bromo-1',8-dimetil-2H-espiro[imidazo[1,5-a]piridina-3,3'-piperidina]-1,5-diona (4) como sólido marrón claro. Rendimiento: 5,3 g, 57%; MS (ESI)m/z326,2 [M+1]+.

Síntesis de (1’,8-dimetil-1,5-dioxo-1,5-dihidro-2H-espiro[imidazo[1,5-a]piridina-3,3’-piperidin]-6-il)carbamato de tertbutilo (5)

A una solución de 6-bromo-1',8-dimetil-2H-espiro[imidazo[1,5-a]piridina-3,3'-piperidina]-1,5-diona (4, 15,0 g, 46,1 mmol) en 1,4-dioxano (150 ml) en un tubo sellado se añadieron carbamato de tert-butilo (7,01 g, 59,0 mmol) y carbonato de cesio (30,0 g, 92,0 mmol) en una atmósfera de argón. La mezcla de reacción se purgó con argón durante 15 min seguido por la adición de 9,9-dimetil-4,5-bis(difenilfosfino)xanteno (2,66 g, 4,6 mmol) y tris(dibencilidenoacetona)dipaladio (4,1 g, 4,60 mmol). La mezcla se purgó con argón durante otros 5 min y la mezcla de reacción se calentó a 100 °C durante 16 h. Después de completar, la masa de reacción se concentró al vacío para dar el compuesto crudo que se purificó por cromatografía en columna de gel de sílice (metanol al 3-5% en diclorometano) para dar (1',8-dimetil-1,5-dioxo-1,5-dihidro-2H-espiro[imidazo[1,5-a]piridina-3,3'-piperidin]-6-il)carbamato de tert-butilo (5) como un sólido marrón oscuro, que se usó para la siguiente etapa son purificación adicional. Rendimiento: 9,0 g, 54%; MS (ESI)m/z363,14 [M+1]+.

Separación quiral de (R)-(1’,8-dimetil-1,5-dioxo-1,5-dihidro-2H-espiro[imidazo[1,5-a]piridina-3,3’-piperidin]-6-il)carbamato de tert-butilo (5A) y (S)-(1’,8-dimetil-1,5-dioxo-1,5-dihidro-2H-espiro[imidazo[1,5-a]piridina-3,3’-piperidin]-6-il)carbamato de tert-butilo (5B)

El compuesto racémico (1',8-dimetil-1,5-dioxo-1,5-dihidro-2H-espiro[imidazo[1,5-a]piridina-3,3'-piperidin]-6-il)carbamato de tert-butilo (5, 8,0 g) se purificó por SFC quiral usando columna Chiralpak-IG (250 * 21 mm, 5 pm) usando un gradiente isocrático de trietilamina al 0,2% en metanol/dióxido de carbono (40:60). Después de la purificación se aisló el pico 1 a Rt = 8,0 min (2,4 g, ee = 99,82%) y se aisló el pico 2 a Rt = 12,80 min (3,4 g, ee = 99,60%). La estereoquímica absoluta del pico 1 y el pico 2 no se asignó. Para facilidad de ilustración, el pico 1 se asignó aleatoriamente como (R)-(1',8-dimetil-1,5-dioxo-1,5-dihidro-2H-espiro[imidazo[1,5-a]piridina-3,3'-piperidin]-6-il)carbamato de tert-butilo (5A) y el pico 2 se asignó aleatoriamente como (S)-(1',8-dimetil-1,5-dioxo-1,5-dihidro-2H-espiro[imidazo[1,5-a]piridina-3,3'-piperidin]-6-il)carbamato de tert-butilo (5B).

Síntesis de (R)-6-amino-1’,8-dimetil-2H-espiro[imidazo[1,5-a]piridina-3,3’-piperidina]-1,5-diona (6A)

A una solución de (R)-(1',8-dimetil-1,5-dioxo-1,5-dihidro-2H-espiro[imidazo[1,5-a]piridina-3,3'-piperidin]-6-il)carbamato de tert-butilo (5A, 2,40 g, 6,6 mmol) en diclorometano (20 ml) se añadió cloruro de hidrógeno 4 M en 1,4-dioxano (20 ml). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 3 h. Después de completar, la masa de reacción se concentró al vacío y el compuesto crudo se suspendió en solución saturada de bicarbonato de sodio. La fase acuosa se extrajo con diclorometano; la fase orgánica se secó sobre sulfato de sodio, se filtró y concentró. El residuo se lavó con éter dietílico para dar el compuesto deseado (R)-6-amino-1',8-dimetil-2H-espiro[imidazo[1,5-a]piridina-3,3'-piperidina]-1,5-diona (6A) como un sólido marrón claro. Rendimiento: 1,7 g, 98%; MS (ESI)m/z263,3 [M+1]+.

Síntesis de (R)-4-amino-6-((1’,8-dimetil-1,5-dioxo-1,5-dihidro-2H-espiro[imidazo[1,5-a]piridina-3,3’-piperidin]-6-il)amino)pirimidina-5-carbonitrilo (Cpto. No. 2Fa)

A una solución de (R)-6-amino-1',8-dimetil-2H-espiro[imidazo[1,5-a]piridina-3,3'-piperidina]-1,5-diona (6A, 1,70 g, 6,4 mmol) en tert-butanol (25 ml) se añadieron 4-amino-6-cloropirimidina-5-carbonitrilo (7, 1,0 g, 6,4 mmol) y ácido ptoluenosulfónico (1,10 g, 6,4 mmol). La mezcla de reacción se calentó a 120 °C durante 15 h en un tubo sellado. Después la mezcla de reacción se concentró y el residuo se disolvió en isopropanol al 20%/cloroformo (100 ml). La fase orgánica se lavó con una solución de bicarbonato de sodio saturado, se secó sobre sulfato de sodio, se filtró y concentró. El residuo se purificó con cromatografía en columna de gel de sílice usando combiflash (metanol al 5-7% en diclorometano) para dar (R)-4-amino-6-((1',8-dimetil-1,5-dioxo-1,5-dihidro-2H-espiro[imidazo[1,5-a]piridina-3,3'-piperidin]-6-il)amino)pirimidina-5-carbonitrilo (Cpto. No. 2Fa) como un sólido blanco. Rendimiento: 0,61 g, 25%. MS (ESI)m/z381,13 [M+1]+; ee = 97,94%; Rt = 19,96 min, Chiralpak IC (4,6 * 250 mm, 5 pm) usando un gradiente isocrático de metanol/dióxido de carbono (40:60). 1H RMN (400 MHZ, DMSO-da) 5 10,02 (s, 1H), 8,58 (s, 1H), 8,49 (s, 1H), 8,34 (s, 1H), 7,79 (bs, 2H), 3,31-3,28 (m, 1H), 2,982,94 (m, 1H), 2,82-2,81 (m, 1H), 2,45 (s, 3H), 2,23 (s, 3H), 1,99-1,94 (m, 2H), 1,72-1,70 (m, 1H), 1,50 (d,J=12,76 Hz, 1H).

Síntesis de (S)-6-amino-1’,8-dimetil-2H-espiro[imidazo[1,5-a]piridina-3,3’-piperidina]-1,5-diona (6B)

A una solución de (S)-(1',8-dimetil-1,5-dioxo-1,5-dihidro-2H-espiro[imidazo[1,5-a]piridina-3,3'-piperidin]-6-il)carbamato de tert-butilo (5B, 3,40 g, 9,3 mmol) en diclorometano (30 ml) se añadió cloruro de hidrógeno 4 M en 1,4-dioxano (30 ml). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 3 h. Después de completar, la masa de reacción se concentró al vacío y el compuesto crudo se suspendió en solución saturada de bicarbonato de sodio. La fase acuosa se extrajo con diclorometano; la fase orgánica se secó sobre sulfato de sodio y se concentró. El residuo se lavó con éter dietílico para dar el compuesto deseado (S)-6-amino-1',8-dimetil-2H-espiro[imidazo[1,5-a]piridina-3,3'-piperidina]-1,5-diona (6<b>) como un sólido marrón claro. Rendimiento: 2,1 g, 85%; MS (ESI)m/z263,3 [M+1]+.

Síntesis de (S)-4-amino-6-((1’,8-dimetil-1,5-dioxo-1,5-dihidro-2H-espiro[imidazo[1,5-a]piridina-3,3’-piperidin]-6-il)amino)pirimidina-5-carbonitrilo (Cpto. No. 2Fb)

A una solución de (S)-6-amino-1',8-dimetil-2H-espiro[imidazo[1,5-a]piridina-3,3'-piperidina]-1,5-diona (6B, 2,0 g, 7,6 mmol) en tert-butanol (30 ml) se añadieron 4-amino-6-cloropirimidina-5-carbonitrilo (7, 1,17 g, 7,6 mmol) y ácido ptoluenosulfónico (1,30 g, 7,6 mmol). La mezcla de reacción se calentó a 120 °C durante 15 h en un tubo sellado. Después la mezcla de reacción se concentró y el residuo se disolvió en isopropanol al 20%/cloroformo (100 ml). La fase orgánica se lavó con una solución de bicarbonato de sodio saturado, se secó sobre sulfato de sodio, se filtró y concentró. El residuo se purificó con cromatografía en columna de gel de sílice usando combiflash (metanol al 5-7% en diclorometano) para dar (S)-4-amino-6-((1',8-dimetil-1,5-dioxo-1,5-dihidro-2H-espiro[imidazo[1,5-a]piridina-3,3'-piperidin]-6-il)amino)pirimidina-5-carbonitrilo (Cpto. No. 2Fb) como un sólido blanco. Rendimiento: 0,49 g, 18%. MS (ESI)m/z381,17 [M+1]+; ee = 95,58%; Rt = 8,89 min, Chiralpak IC (4,6 * 250 mm, 5 pm) usando un gradiente isocrático de metanol/dióxido de carbono (40:60). 1H RMN (400 MHZ, DMSO-d6) 510,02 (s, 1H), 8,58 (s, 1H), 8,49 (s, 1H), 8,34 (s, 1H), 7,79 (bs, 2H), 3,29-3,28 (m, 1H), 2,94-2,91 (m, 1H), 2,81-2,80 (m, 1H), 2,45 (s, 3H), 2,22 (s, 3H), 1,93-1,88 (m, 2H), 1,72-1,70 (m, 1H), 1,49 (d,J=12,76 Hz, 1H).

Ejemplo 3:

Utilizando los reactivos apropiados se pueden hacer los siguientes compuestos según los métodos generales 1 o 2.

Ejemplo 4: clorhidrato de 6'-((6-am¡no-5-clorop¡r¡d¡n-4-¡l)am¡no)-8'-met¡l-2'H-esp¡ro[c¡clohexano-1.3'-¡m¡dazo[1,5-a1p¡r¡d¡na-1',5'-d¡ona (Cpto. No. 4A)

El compuesto 4a se puede preparar según el proced¡m¡ento descr¡to en el ejemplo 223 de la patente en EE UU No.

9.382.248.

Estudios biológicos

Ensayo celular de señal¡zac¡ón de peIF4E

El eIF4E fosfor¡lado se ensaya usando el k¡t de ensayo C¡sB¡o peIF4E HTRF® (C¡sB¡o, No. de catálogo 64EF4PEG). Las células se s¡embran en placas de 96 poc¡llos de cult¡vo t¡sular tratadas en un med¡o de crec¡m¡ento aprop¡ado (90 pl). Los compuestos (10X) se d¡luyen usando d¡luc¡ones en ser¡e de 3 veces en med¡o de cult¡vo celular y se añaden a las células. Las placas se ¡ncuban durante 2 h a 37 °C. El sobrenadante celular se el¡m¡na cu¡dadosamente o b¡en asp¡rando el sobrenadante o mov¡endo la placa. Inmed¡atamente se añaden 50 pl de tampón de l¡s¡s suplementado (1X) y se ¡ncuba durante al menos 30 m¡nutos a temperatura amb¡ente con ag¡tac¡ón. Después de homogen¡zac¡ón p¡peteando arr¡ba y abajo. 16 pl de l¡sado celular se transfieren de la placa de cult¡vo celular de 96 pocilios a una placa blanca de pequeño volumen de 384 poc¡llos. Se preparan 4 pl de soluc¡ones de ant¡cuerpos premezcladas (vol/vol) en tampón de detecc¡ón y se añaden. La placa se cubre con un sellador de placa y se ¡ncuba durante la noche a temperatura amb¡ente. Las em¡s¡ones de fluorescenc¡a se leen a dos long¡tudes de onda d¡ferentes (665 nm y 620 nm) en un Wallace V¡ctor2. Los coc¡entes de em¡s¡ón se conv¡erten a porcentajes de ¡nh¡b¡c¡ón y se ¡importan al software GraphPad Pr¡sm. La concentrac¡ón de compuesto necesar¡o para alcanzar ¡nh¡b¡c¡ón de la act¡v¡dad enz¡mát¡ca al 50% (CI50) se calcula usando concentrac¡ones que varían desde 20 pM a 0.1 nM (curva de 12 puntos). Los valores de CI50 se determ¡nan usando un modelo de regres¡ón no l¡neal en GraphPad Pr¡sm 5.

Los resultados de estos ensayos se exponen en la tabla 1 a cont¡nuac¡ón. Para este f¡n, los valores de CI50 de menos de 0,001 pM se marcan como “+++”, desde 0,001 a 0,01 pM se marcan como “++”. y mayores de 0,01 pM se marcan como “+” (NA s¡gn¡f¡ca “no d¡spon¡ble”).

La ¡nh¡b¡c¡ón de MNK d¡sm¡nuye la expres¡ón de receptores y l¡gandos de puntos de control ¡nmun¡tar¡os

Tras la act¡vac¡ón de la señal¡zac¡ón del receptor de células T (TCR). las células T prol¡feran, producen c¡toqu¡nas (por ejemplo; IL-2) e ¡nducen la expres¡ón de receptores de puntos de control ¡nmun¡tar¡os. Muerte celular programada 1 (PD-1) es un receptor de punto de control ¡nh¡b¡dor expresado en la superf¡c¡e de células T act¡vadas, así como en células mieloides. El ligando para PD-1, ligando de muerte celular programada 1 (PD-L1, B7-H1/CD274) no es expresado por células T o células epiteliales normales, sino que es expresado por células presentadoras de antígeno y sobreexpresado en varios cánceres. La interacción de PD-1 con PD-L1 produce un efecto antiproliferativo sobre células T y con el tiempo agotamiento de células T y apoptosis. Para estudiar el papel de MNK en células T inactivadas y células tumorales, se examinó el efecto de un inhibidor de MNK sobre moléculas de control sobre el punto de control inmunitario.

Expresión de PD-1 (CD279)

Para examinar el efecto de los inhibidores de MNK sobre la expresión de PD-1, se usaron células Jurkat (clon E6.1, ATCC, células T transformadas), que expresan PD-1 cuando se activan a través de la señalización del receptor de células T (TCR). Brevemente, las células Jurkat se hicieron crecer en RPMI 1X con Pen/Estrep 1X, y SBF al 10%, después aproximadamente 3 x 106 células Jurkat se activaron en presencia de PHA (Sigma) 1 pg/ml y PMA (Sigma) 50 ng/ml. Se trataron células de prueba simultáneamente con varias concentraciones de un inhibidor de MNK (0, 0,01, 0,1 1, 3 y 10 pM). Después de 48 horas, los sobrenadantes de cultivo se recogieron y examinaron mediante ELISA sándwich para la presencia de IL-2 usando ELISA de IL-2 humana DuoSet (R&D Systems, Mineápolis, MN). El nivel de PD-1 en células Jurkat se examinó incubando con bloqueo de FcR humano, después se puso en contacto con anticuerpo anti-PD-1 conjugado con aloficocianina (APC) (5 pl por 100 pl de volumen de ensayo, Biolegend, San Diego, CA) durante 25 minutos a 4 °C, sin lavar las células, se añadió tinción de células muertas fijable (1:10.000; BD Biosciences, San José, CA) y se incubó durante 10 minutos adicionales a 4 °C. Las células se lavaron dos veces con tampón de flujo, y por último las células se fijaron con tampón de fijación durante 15 minutos a 4 °C. Después de la fijación, las células se lavaron dos veces con tampón de flujo y se resuspendieron en tampón de flujo y se evaluó la fluorescencia usando un citómetro de flujo BD Accuri C6 Los datos se analizaron usando el software de citómetro C6 (BD Biosciences, San José, CA) o citómetro Attune Nxt (Invitrogen, Carlsbad, CA).

La activación de células T Jurkat con PHA y PMA indujo la expresión de PD-1 en la superficie celular de aproximadamente el 25-30% de las células Jurkat estimuladas en comparación con células sin inducir (Sin estm.) e indujo un aumento de 1.000 veces en la producción de citoquina IL-2, respectivamente. El tratamiento de células T Jurkat activadas con PHA/PMA con el inhibidor de MNK produjo una disminución dependiente de la concentración en la expresión del receptor inhibidor inmunitario PD-1, reducción hasta el 50% a la mayor concentración en comparación con el control. Además, esta reducción de PD-1 no era debido a un bloqueo en la activación de células T Jurkat por sí, ya que la inhibición de MNK por un inhibidor de MNK no alteró la producción de citoquinas medida por los niveles de IL-2. Por último, la inhibición de MNK por varios inhibidores de MNK diferentes no tuvo efecto sobre la viabilidad celular. De hecho, varios inibidores de MNK diferentes en el ensayo de células T Jurkat mostró la capacidad de disminuir los inhibidores de puntos de control inmunitarios sin afectar la viabilidad celular. Los resultados de estos ensayos se exponen en la tabla 1 a continuación. Para este fin, el porcentaje de inhibición de células positivas para PD-1 (10 pM) de más del 50% se marcan como “+++”, desde el 10% al 50% se marcan como “++”, y menos del 10% se marcan como “+” (NA significa “no disponible”).

Solubilidad acuosa

La solubilidad, el fenómeno de disolución de un soluto en un solvente para dar un sistema homogéneo, es uno de los parámetros importantes para alcanzar una concentración deseada de un compuesto en la circulación sistémica para respuesta farmacológica deseada (anticipada). Los compuestos que tienen buena solubilidad acuosa son deseables porque producen buena biodisponibilidadin vivodebido a su alta velocidad de disolución después de la administración a un sujeto. Los compuestos que tienen buena solubilidad acuosa también contribuyen a la facilidad del desarrollo de formulación, fabricación de formulación y estabilidad de la formulación.

Procedimiento de solubilidad termodinámica de alto rendimiento

En una placa de 96 pocillos, se secaron soluciones madre en DMSO 10 mM (50-100 pl) de cada compuesto bajo flujo de nitrógeno calentado usando un secador de placa SPE-96 (velocidad de flujo superior = 50 l/min, temperatura = 60 °C, velocidad de flujo inferior = 20 l/min, temperatura = 80 °C). Después de haber eliminado el DMSO por completo, los materiales restantes se disolvieron en solventes de prueba incluyendo agua desionizada, fluido intestinal simulado en estado de ayuno (FaSSIF, pH 6,5) y fluido gástrico simulado en estado de ayuno (FaSSGF, pH 1,6). Los compuestos preparados como la base libre se evaluaron en condiciones con y sin un equivalente de TFA añadido. Las concentraciones máximas teóricas de las soluciones acuosas fueron 10 mM. Cada pocillo se tapó e incubó durante un periodo de 18 horas a temperatura ambiente o 37 °C. Se realizó mezclado de las soluciones durante el periodo de incubación o bien agitando la placa a 750 rpm o añadiendo StriStix (capilares de acero inoxidable) y agitando la mezcla usando un agitador de vueltas magnético giratorio. Después del periodo de incubación, se filtraron alícuotas de cada pocillo. La solubilidad de todas las muestras se cuantificó según comparación a estándares de concentración conocida por HPLC-UV.

Los resultados de la solubilidad acuosa se exponen en la tabla 1 a continuación.

Tabla 1: actividad de señalización de pEIF4E, actividad de inhibición de PD-1 y solubilidad acuosa.

Los inventores han encontrado inesperadamente que la velocidad de disolución de un compuesto inhibidor de Mnk se puede mejorar notablemente sobre el compuesto comparativo4a: (i) sustituyendo la imidazopiridina en el compuesto con 3- o 4-piperidina; y (ii) sustituyendo la pirimidina en el compuesto con alquilo inferior, halógeno o ciano. Tales sustituciones o características estructurales inducen quiralidad en las moléculas.

La mejora en la solubilidad acuosa de los compuestos de la invención es especialmente significativa en entornos de bajo pH, tal como en fluido gástrico o del estómago. Por ejemplo, como se muestra en la tabla 1, los compuestos 3D, 3K, 3L, 3X, 3Y, rac-1F, 1Fa, 1Fb, rac-2F, 2Fa y 2Fb mostraron excelente solubilidad en fluido gástrico simulado en estado de ayuno (FaSSGF), que tiene un valor de pH de 1,6.

De forma importante, además de la solubilidad acuosa mejorada, los compuestos sustituidos con 3- y 4-piperidina también han retenido su potencia anticáncer en forma de su capacidad para inhibir la señalización de pEF4E. En algunos casos, la potencia anticáncer se manifiesta además en la capacidad de estos compuestos sustituidos con 3-y 4-piperidina para inhibir PD-1, como se puede ver en la tabla 1.

Claims (9)

1. REIVINDICACIONES onado de
2. 2 El compuesto o un estereoisómero, tautómero o sal farmacéuticamente aceptable del mismo según la reivindicación 1 seleccionado de los compuestos
3. 3 El compuesto o un estereoisómero, tautómero o sal farmacéuticamente aceptable del mismo según la reivindicación 1 seleccionado de los compuestos
4. 4. El compuesto o un estereoisomero, tautomero o sal farmacéuticamente aceptable del mismo según la reivindicación 1 seleccionado de los compuestos
5. 5. El compuesto o un estereoisómero, tautómero o sal farmacéuticamente aceptable del mismo según la reivindicación 1 seleccionado de los compuestos
6. 6. El compuesto según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5, en donde la sal farmacéuticamente aceptable es una sal de ácido orgánico o inorgánico seleccionada del grupo que consiste en acetato, mesilato, sulfato, citrato, oxalato, clorhidrato, diclorhidrato, isotionato, lactato y laurato.
7. 7. Una composición farmacéutica que comprende (i) una cantidad terapéuticamente eficaz de al menos un compuesto o un estereoisómero, tautómero o sal farmacéuticamente aceptable del mismo según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 6; (ii) en combinación con un soporte, diluyente o excipiente farmacéuticamente aceptable.
8. 8. El compuesto según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 6, o un estereoisómero, tautómero o sal farmacéuticamente aceptable del mismo para uso en un método para tratar una afección dependiente de Mnk en un mamífero en necesidad de ello, que comprende administrar al mamífero una cantidad terapéuticamente eficaz de al menos un compuesto según la reivindicación 1, o un estereoisómero, tautómero o sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en donde la afección dependiente de Mnk es cáncer o inflamación.
9. 9. El compuesto según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 6, o un estereoisómero, tautómero o sal farmacéuticamente aceptable del mismo, para uso en un método para tratar un tumor sólido, cáncer colorrectal, cáncer de vejiga, cáncer gástrico, cáncer esofágico, cáncer de cabeza y cuello, cáncer del SNC, glioma maligno, glioblastoma, cánceres hepatocelulares, cáncer de tiroides, cáncer de pulmón, cáncer de pulmón no microcítico, cáncer de pulmón microcítico, melanoma, mieloma, cáncer pancreático, carcinoma pancreático, carcinoma de células renales, cáncer cervical, cáncer urotelial, cáncer de próstata, cáncer de próstata resistente a castración, cáncer ovárico, cáncer de mama, cáncer de mama triple negativo, leucemia, linfoma de Hodgkin, linfoma no hodgkiniano, linfoma de células B, linfoma de células T, linfoma de célula pilosas, linfoma difuso de células B grandes, linfoma de Burkitt, mieloma múltiple, y síndrome mielodisplásico en un mamífero en necesidad de ello, que comprende administrar al mamífero una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 6, o un estereoisómero, tautómero o sal farmacéuticamente aceptable del mismo.