ES2904263T3 - Composiciones que comprenden triterpenoides para el tratamiento de la enfermedad de Alzheimer y la enfermedad de Parkinson - Google Patents

Composiciones que comprenden triterpenoides para el tratamiento de la enfermedad de Alzheimer y la enfermedad de Parkinson Download PDF

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Abstract

Una composición farmacéutica que comprende una combinación de ácido masticadienónico (MDA), ácido isomasticadienónico (IMDA), (8R)-3-beta-8-dihidroxipolipoda-13E,17E,21-trieno (NF-1), (8R)-3-Oxo-8- hidroxipolipoda-13E,17E,21-trieno (NF-2) y un portador farmacéuticamente aceptable, para su uso en el tratamiento de una afección seleccionada de la enfermedad de Alzheimer (EA) y las enfermedades de Parkinson (EP).

Description

DESCRIPCIÓN
Composiciones que comprenden triterpenoides para el tratamiento de la enfermedad de Alzheimer y la enfermedad de Parkinson
CAMPO DE LA INVENCIÓN
La invención se refiere a composiciones que comprenden triterpenoides y usos de las mismas para tratar la enfermedad de Alzheimer (EA) y las Enfermedades de Parkinson (EP).
ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN
A lo largo de los años se han divulgado varias entidades farmacéuticas derivadas de plantas y productos vegetales, para varias aplicaciones terapéuticas.
Por ejemplo, Paraschos et al divulgan la preparación de un extracto de mástique total sin polímero (TMEWP) mediante extracción con solventes polares de mástique cruda, eliminación del polímero insoluble poli-pmirceno de la misma y separación de fracciones ácidas y neutras de TMEWP (Paraschos et al. al (2007) Antimicrob. Agents Chemother. 51(2):551-559).
La Publicación de Solicitud de Patente Internacional N° WO 2005/112967 se dirige a la actividad anticancerígena de la goma de mástique.
La Publicación de Solicitud de Patente Internacional N° WO 2010/100650 de algunos de los inventores de la presente invención, se dirige a usos terapéuticos de fracciones de goma de mástique.
La Publicación de Solicitud de Patente Internacional N° WO 2010/100651 de algunos de los inventores de la presente invención, se dirige a composiciones de mirceno polimérico.
La Publicación de Solicitud de Patente Internacional N° WO 2012/032523 de algunos de los inventores de la presente invención, se dirige a composiciones ácidas de goma de mástique.
La Publicación de Solicitud de Patente Internacional N° WO 2005/094837 se dirige al uso de ácido masticadienónico como inhibidor de la ADN polimerasa-beta, usado para el tratamiento de cánceres, tumores y enfermedades neurodegenerativas.
Marner et al (1991) divulgan la identificación de varios triterpenoides de mástique de goma de P. lentiscus (Marner et al (1991) Phytochemistry, 30, 3709-3712).
Giner-Larza et al (2002) divulgan triterpenos antiinflamatorios de agallas de pistacia terebinthus (Planta Med (2002), 68, 311-315).
Los trastornos neurodegenerativos, como la enfermedad de Alzheimer (EA), la enfermedad de Parkinson (EP) y la demencia vascular (VD) son enfermedades de aparición durante la edad adulta crónicas, progresivas e irreversibles que causan graves discapacidades.
La enfermedad de Alzheimer (EA) se caracteriza por un deterioro mental y cognitivo progresivo con la consiguiente formación de placas amiloides, ovillos neurofibrilares, gliosis y pérdida neuronal. La enfermedad se presenta tanto en formas genéticas como esporádicas, cuyo curso clínico y características patológicas son bastante similares.
La enfermedad de Parkinson (EP) es una enfermedad neurodegenerativa crónica y progresiva provocada por una degeneración selectiva de neuronas dopaminérgicas en la sustancia negra pars compacta del cerebro; el 80% de las neuronas mueren por una causa desconocida antes de que aparezcan los síntomas. Los síntomas incluyen temblor intermitente en las extremidades, falta de equilibrio y dificultad para iniciar el movimiento. La EP tiene un síndrome clínico característico de bradicinesia, temblor, rigidez e inestabilidad postural. Los trastornos parkinsonianos degenerativos pueden ser hereditarios o esporádicos, pero todos se caracterizan por la pérdida neuronal en poblaciones selectivas de neuronas vulnerables. El denominador común de todos los trastornos parkinsonianos degenerativos es la pérdida de neuronas dopaminérgicas de la sustancia negra que se proyectan al putamen (es decir, vía dopaminérgica nigroestriatal). Se han identificado cinco síndromes principales separados de Parkinson-plus: atrofia multisistémica (MSA), parálisis supranuclear progresiva (PSP), complejo parkinsonismodemencia-esclerosis lateral amiotrófica, degeneración ganglionar corticobasal (CBD) y demencia con cuerpos de Lewy (DLB). Otros síndromes de Parkinson-plus incluyen la enfermedad de Pick y la atrofia olivopontocerebelosa (OPCA).
Sigue habiendo una necesidad insatisfecha de compuestos y composiciones seguros, versátiles y eficaces, que puedan obtenerse de plantas mediante métodos reproducibles, altamente eficientes y rentables, para su uso en el tratamiento de la enfermedad de Alzheimer (EA), Enfermedades de Parkinson (EP).
SUMARIO DE LA INVENCIÓN
Las siguientes realizaciones y aspectos de las mismas se describen e ilustran junto con sistemas, herramientas y métodos que se pretende que sean ejemplares e ilustrativos, no limitativos en su alcance.
En algunas realizaciones, se proporcionan combinaciones de compuestos triterpenoides, composiciones que los comprenden y usos de los mismos para el tratamiento de varias afecciones relacionadas con la salud como la enfermedad de Alzheimer (EA) y las Enfermedades de Parkinson (EP).
Se proporciona una composición que comprende una combinación de ácidos triterpenoicos y triterpenoides neutros; y un portador farmacéuticamente aceptable.
Se proporciona una composición que comprende una combinación de ácidos triterpenoicos y un triterpenoide neutro; y un portador farmacéuticamente aceptable.
En algunas realizaciones, se proporciona una composición que comprende o consiste de por lo menos un ácido triterpenoico, por lo menos un triterpenoide neutro y un portador farmacéuticamente aceptable.
De acuerdo con la invención, se proporciona una composición farmacéutica que comprende una combinación de ácido masticadienónico (MDA), ácido isomasticadienónico (IMDA), (8R)-3-beta-8-dihidroxipolipoda-13E,17E,21-trieno(NF-1), (8R)-3-Oxo-8-hidroxipolipoda-13E,17E, 21-trieno (NF-2) y un portador farmacéuticamente aceptable para que sea útil en el tratamiento de una afección seleccionada de la enfermedad de Alzheimer (EA) y, Enfermedades de Parkinson (EP). En algunas realizaciones, pueden seleccionarse ácidos triterpenoicos adicionales de por lo menos uno de ácido masticadienólico (MLA), ácido isomasticadienólico (IMLA), ácido 3-O-acetil masticadienólico, ácido 3-O-acetil epimasticadienólico, ácido 3-O-acetil isomasticadienólico, ácido 3-O-acetil epiisomasticadienólico, ácido oleanónico (OA) y ácido morónico (MA), o cualquier combinación de los mismos. Cada posibilidad es una realización separada. En algunas realizaciones, la composición farmacéutica que comprende una combinación de ácidos triterpenoicos comprende ácido masticadienónico (MDA) y ácido isomasticadienónico (IMDA), y por lo menos uno de ácido masticadienólico (MLA), ácido isomasticadienólico (IMLA), ácido 3-O-acetil masticadienólico, ácido 3-O-acetil epimasticadienólico, ácido 3-O-acetil isomasticadienólico, ácido 3-O-acetil epiisomasticadienólico, ácido oleanónico (OA) y ácido morónico (MA), o cualquier combinación de los mismos.
En algunas realizaciones, la composición comprende por lo menos tres ácidos triterpenoicos. En algunas realizaciones, la composición comprende por lo menos cuatro ácidos triterpenoicos. En algunas realizaciones, la composición comprende por lo menos cinco ácidos triterpenoicos. En algunas realizaciones, la composición comprende por lo menos seis ácidos triterpenoicos. En algunas realizaciones, la composición comprende por lo menos siete ácidos triterpenoicos. En algunas realizaciones, la composición comprende por lo menos ocho ácidos triterpenoicos. En algunas realizaciones, la composición comprende por lo menos nueve ácidos triterpenoicos. En algunas realizaciones, la composición comprende por lo menos diez ácidos triterpenoicos. En algunas realizaciones, la composición comprende o consiste de no más de dos ácidos triterpenoicos. En algunas realizaciones, la composición comprende o consiste de no más de tres ácidos triterpenoicos. En algunas realizaciones, la composición comprende o consiste de no más de cuatro ácidos triterpenoicos. En algunas realizaciones, la composición comprende o consiste de no más de cinco ácidos triterpenoicos. En algunas realizaciones, la composición comprende o consiste de no más de seis ácidos triterpenoicos. En algunas realizaciones, la composición comprende o consiste de no más de siete ácidos triterpenoicos. En algunas realizaciones, la composición comprende o consiste de no más de ocho ácidos triterpenoicos. En algunas realizaciones, la composición comprende o consiste de no más de nueve ácidos triterpenoicos. En algunas realizaciones, la composición comprende o consiste de no más de diez ácidos triterpenoicos.
En algunas realizaciones, la combinación de ácido o ácidos triterpenoicos comprende MDA, IMDA y comprende o consiste de por lo menos uno de MLA, IMLA, ácido 3-O-acetil masticadienólico, ácido 3-O-acetil isomasticadienólico, OA y MA. En algunas realizaciones, la combinación de ácido o ácidos triterpenoicos comprende MDA, IMDA y comprende o consiste de por lo menos uno de MLA e IMLA. En algunas realizaciones, la combinación de ácido triterpenoico comprende o consiste de por lo menos MDA e IMDA.
En algunas realizaciones, el ácido triterpenoico adicional se selecciona de MLA, IMLA, ácido 3-O-acetil masticadienólico, ácido 3-O-acetil epimasticadienólico, ácido 3-O-acetil isomasticadienólico, ácido 3-O-acetil epiisomasticadienólico, OA y MA. Cada posibilidad es una realización separada. En algunas realizaciones, el ácido triterpenoico adicional se selecciona de MLA, IMLA, ácido 3-O-acetil masticadienólico, ácido 3-O-acetil isomasticadienólico, OA y MA. En algunas realizaciones, el ácido triterpenoico adicional se selecciona de MLA e IMLA.
En algunas realizaciones, el ácido triterpenoico adicional consiste de MLA, IMLA, ácido 3-O-acetil masticadienólico, ácido 3-O-acetil epimasticadienólico, ácido 3-O-acetil isomasticadienólico, ácido 3-O-acetil epiisomasticadienólico, OA y MA. Cada posibilidad es una realización separada. En algunas realizaciones, el ácido triterpenoico adicional consiste de MLA, IMLA, ácido 3-O-acetil masticadienólico, ácido 3-O-acetil isomasticadienólico, OA y MA. En algunas realizaciones, el ácido triterpenoico adicional consiste de MLA e IMLA.
En algunas realizaciones, el triterpenoide neutro adicional puede seleccionarse de por lo menos uno de aldehído oleanónico (NF-3), tirucallol (NF-4), 28-hidroxilup-20(29)-en-3-ona (NF-A), 28-hidroxi-beta-amirona (NF-B), 20-hidroxydammar-24-en-3-ona (NF-P), 3-beta-hidroxi-13-alfa-malabarica-14(26),17E,21-trieno, 20-hidroxi-lupan-3-ona, 28-Nor-17-hidroxilupen-3-ona, 28-oxo-lupen-3-ona, 28-nor-beta-amirona, aldehído isomasticadienónico, isomasticadienediol, masticadienediol, aldehído oleanólico (28-oxo-beta-amirina), 3-beta-20-dihidroxilupano, aldehído masticadienónico, 3-oxo-malabarica-14 (26), 17E,21-trieno, Beta-amirona, Beta-amirina, Germanicol, o cualquier combinación de los mismos. Cada posibilidad es una realización separada.
En algunas realizaciones, el triterpenoide neutro adicional puede seleccionarse de por lo menos uno de aldehído oleanónico (NF-3), tirucallol (NF-4), 28-hidroxilup-20(29)-en-3-ona (NF-A), 28-hidroxi-beta-amirona (NF-B), 3-beta-hidroxi-13-alfa-malabarica-14 (26), 17E,21-trieno, 20-hidroxi-lupan-3-ona, 28-Nor-17-hidroxilupen-3-ona, 28-oxo-lupen-3-ona, 28-nor-beta-amirona, aldehído isomasticadienónico, isomasticadienediol, masticadienediol, aldehído oleanólico (28-oxo-beta-amirina), 3-beta-20-dihidroxilupano, aldehído masticadienónico, 3-oxo-malabarica-14(26),17E,21-trieno, Beta-amirona, Beta-amirina, Germanicol o cualquier combinación de los mismos. Cada posibilidad es una realización separada.
En algunas realizaciones, la 20-hidroximadammar-24-en-3-ona (NF-P) no está presente en la composición farmacéutica.
En algunas realizaciones, el triterpenoide neutro adicional comprende o consiste de por lo menos uno de aldehído oleanónico (NF-3), tirucallol (NF-4), 28-hidroxilup-20(29)-en-3-ona (NF-A), 28-hidroxi-beta-amirona (NF-B), 20-hidroxidammar-24-en-3-ona (NF-P), 3-beta-hidroxi-13-alfa-malabarica-14 (26),17E,21-trieno, 20-hidroxi-lupan-3-ona, 28-Nor-17-hidroxilupen-3-ona, 28-oxo-lupen-3-ona, 28-nor-beta-amirona, aldehído isomasticadienónico, isomasticadienediol, masticadienediol, aldehído oleanólico (28-oxo-beta-amirina), 3-beta-20-dihidroxilupano, aldehído masticadienónico, 3-oxo-malabarica-14(26),17E, 21-trieno, beta-amirona, beta-amirina y germanicol. Cada posibilidad es una realización separada.
En algunas realizaciones, el triterpenoide neutro adicional comprende o consiste de por lo menos uno de aldehído oleanónico (NF-3), tirucallol (NF-4), 28-hidroxilup-20(29)-en-3-ona (NF-A), 28-hidroxi-beta-amirona (NF-B), 3-beta-hidroxi-13-alfa-malabarica-14(26),17E,21-trieno, 20-hidroxi-lupan-3-ona, 28-Nor-17-hidroxilupen-3-ona, 28-oxo-lupen-3-ona, 28-nor-beta-amirona, aldehído isomasticadienónico, isomasticadienediol, masticadienediol, aldehído oleanólico (28-oxo-beta-amirina), 3-beta-20-dihidroxilupano, aldehído masticadienónico, 3-oxo-malabarica-14(26),17E, 21-trieno, beta-amirona, beta-amirina y germanicol. Cada posibilidad es una realización separada.
En algunas realizaciones, el triterpenoide neutro no comprende 20-hidroximadammar-24-en-3-ona (NF-P). En algunas realizaciones, el triterpenoide neutro no consiste de 20-hidroximadammar-24-en-3-ona (NF-P). En algunas realizaciones, el triterpenoide neutro adicional comprende o consiste de por lo menos dos triterpenoides neutros. En algunas realizaciones, el triterpenoide neutro adicional comprende o consiste de por lo menos tres triterpenoides neutros. En algunas realizaciones, el triterpenoide neutro adicional comprende o consiste de por lo menos cuatro triterpenoides neutros. En algunas realizaciones, el triterpenoide neutro adicional comprende o consiste de por lo menos cinco triterpenoides neutros. En algunas realizaciones, el triterpenoide neutro adicional comprende o consiste de por lo menos seis triterpenoides neutros. En algunas realizaciones, el triterpenoide neutro adicional comprende o consiste de por lo menos siete triterpenoides neutros. En algunas realizaciones, el triterpenoide neutro comprende o consiste de no más de dos triterpenoides neutros. En algunas realizaciones, el triterpenoide neutro comprende o consiste de no más de tres triterpenoides neutros. En algunas realizaciones, el triterpenoide neutro comprende o consiste de no más de cuatro triterpenoides neutros. En algunas realizaciones, el triterpenoide neutro comprende o consiste de no más de cinco triterpenoides neutros. En algunas realizaciones, el triterpenoide neutro comprende o consiste de no más de seis triterpenoides neutros. En algunas realizaciones, el triterpenoide neutro comprende o consiste de no más de siete triterpenoides neutros.
En algunas realizaciones, el triterpenoide neutro adicional comprende por lo menos NF-3, NF-4, NF-A, NF-B, NF-P, 3-beta-hidroxi-13-alfa-malabarica-14(26),17E, 21-trieno, 20-hidroxi-lupan-3-ona, 28-Nor-17-hidroxilupen-3-ona, 28-oxo-lupen-3-ona, 28-nor-beta-amirona, aldehído isomasticadienónico, isomasticadienediol, masticadienediol, aldehído oleanólico (28-oxo-beta-amirina), 3-beta-20-dihidroxilupano, aldehído masticadienónico, 3-oxo-malabarica-14(26),17E, 21-trieno, beta-amirona, beta-amirina y germanicol. Cada posibilidad es una realización separada. En algunas realizaciones, el triterpenoide neutro adicional comprende por lo menos NF-3, NF-4, NF-A, NF-B y NF-P. En algunas realizaciones, el triterpenoide neutro adicional comprende por lo menos NF-3, NF-4, NF-A y NF-B. En algunas realizaciones, el triterpenoide neutro adicional comprende por lo menos NF-3 y NF-4. En algunas realizaciones, el triterpenoide neutro adicional comprende por lo menos NF-3. En algunas realizaciones, el triterpenoide neutro adicional comprende por lo menos NF-4. En algunas realizaciones, el triterpenoide neutro adicional comprende por lo menos NF-3 y NF-4. En algunas realizaciones, el triterpenoide neutro adicional comprende por lo menos NF-3 y NF-4. En algunas realizaciones, el triterpenoide neutro adicional comprende por lo menos NF-3. En algunas realizaciones, el triterpenoide neutro adicional comprende por lo menos NF-4. En algunas realizaciones, el triterpenoide neutro adicional comprende por lo menos NF-A. En algunas realizaciones, el triterpenoide neutro adicional comprende por lo menos NF-B.
En algunas realizaciones, el triterpenoide neutro adicional se selecciona de NF-3, NF-4, NF-A, NF-B, NF-P, 3-beta-hidroxi-13-alfa-malabarica-14 (26), 17E,21-trieno, 20-hidroxi-lupan-3-ona, 28-Nor-17-hidroxilupen-3-ona, 28-oxo-lupen-3-ona, 28-nor-beta-amirona, aldehído isomasticadienónico, isomasticadienediol, masticadienediol, aldehído oleanólico (28-oxo-beta-amirina), 3-beta-20-dihidroxilupano, aldehído masticadienónico, 3-oxo-malabarica-14(26),17E,21-trieno, beta-amirona, beta-amirina y germanicol. Cada posibilidad es una realización separada.
En algunas realizaciones, el triterpenoide neutro adicional comprende por lo menos NF-3, NF-4, NF-A, NF-B y NF-P. En algunas realizaciones, el triterpenoide neutro adicional comprende por lo menos NF-3, NF-4, NF-A y NF-B. En algunas realizaciones, el triterpenoide neutro adicional comprende por lo menos NF-3 y NF-4. En algunas realizaciones, el triterpenoide adicional neutro comprende por lo menos NF-3. En algunas realizaciones, el triterpenoide neutro adicional comprende por lo menos NF-4. En algunas realizaciones, el triterpenoide neutro adicional comprende por lo menos NF-3 y NF-4. En algunas realizaciones, el triterpenoide neutro adicional comprende por lo menos NF-3 y NF-4. En algunas realizaciones, el triterpenoide neutro adicional comprende por lo menos NF-3. En algunas realizaciones, el triterpenoide neutro adicional comprende por lo menos NF-4. En algunas realizaciones, el triterpenoide neutro adicional comprende por lo menos NF-A. En algunas realizaciones, el triterpenoide neutro adicional comprende por lo menos NF-B.
En algunas realizaciones, el triterpenoide neutro adicional se selecciona de NF-3, NF-4, NF-A, NF-B y NF-P. En algunas realizaciones, el triterpenoide neutro adicional se selecciona de NF-3, NF-4, NF-A y NF-B. En algunas realizaciones, el triterpenoide neutro adicional se selecciona de NF-3 y NF-4.
En algunas realizaciones, el triterpenoide neutro adicional consiste de NF-3, NF-4, NF-A, NF-B, NF-P, 3-beta-hidroxi-13-alfa-malabarica-14(26),17E,21 -trieno, 20-hidroxi-lupan-3-ona, 28-Nor-17-hidroxilupen-3-ona, 28-oxolupen-3-ona, 28-nor-beta-amirona, aldehído isomasticadienónico, isomasticadienediol, masticadienediol, aldehído oleanólico (28-oxo-beta-amirina), 3-beta-20-dihidroxilupano, aldehído masticadienónico, 3-oxo-malabarica-14(26),17E,21-trieno, beta-amirona, beta-amirina y germanicol. Cada posibilidad es una realización separada. En algunas realizaciones, el triterpenoide neutro adicional consiste de NF-3, NF-4, NF-A, NF-B y NF-P. En algunas realizaciones, el triterpenoide neutro adicional consiste de NF-3 y NF-4.
En algunas realizaciones, se proporciona una composición farmacéutica que comprende ingredientes farmacéuticamente activos que comprenden o consisten esencialmente de MA, OA, MDA, IMDA, ácido 3-O-acetil masticadienólico, ácido 3-O-acetil isomasticadienólico, MLA, IMLA, NF-1, NF-2, NF-3 y NF-4; y un portador farmacéuticamente aceptable.
En algunas realizaciones, se proporciona una composición farmacéutica que comprende ingredientes farmacéuticamente activos que comprenden o consisten esencialmente de MDA, IMDA, MLA, IMLA, NF-1, NF-2, NF-3, NF-4, NF-A y NF-B; y un portador farmacéuticamente aceptable.
En algunas realizaciones, se proporciona una composición farmacéutica que comprende ingredientes farmacéuticamente activos que comprenden o consisten esencialmente de MDA, IMDA, MLA, IMLA, NF-1, NF-2, NF-3, NF-4, NF-P, NF-A y NF-B; y un portador farmacéuticamente aceptable.
En algunas realizaciones, se proporciona una composición farmacéutica que comprende ingredientes farmacéuticamente activos que comprenden o consisten esencialmente de MDA, IMDA, NF-1, NF-2, NF-3 y NF-4; y un portador farmacéuticamente aceptable.
En algunas realizaciones, se proporciona una composición farmacéutica que comprende ingredientes farmacéuticamente activos que comprenden o consisten esencialmente de MDA, IMDA, NF-1 y NF-2; y un portador farmacéuticamente aceptable.
En algunas realizaciones, se proporciona una composición farmacéutica que comprende ingredientes farmacéuticamente activos que comprenden o consisten esencialmente de MDA, IMDA, NF-1, NF-2, NF-3 y NF-4; y un portador farmacéuticamente aceptable.
En algunas realizaciones, se proporciona una composición farmacéutica que comprende ingredientes farmacéuticamente activos que comprenden o consisten esencialmente de MA, OA, MDA, IMDA, ácido 3-O-acetil masticadienólico, ácido 3-O-acetil isomasticadienólico, MLA, IMLA, NF-1, NF-2, NF-3, NF-4, NF-P, NF-A y NF-B como los únicos ingredientes farmacéuticamente activos; y un portador farmacéuticamente aceptable.
En algunas realizaciones, se proporciona una composición farmacéutica que comprende ingredientes farmacéuticamente activos que comprenden o consisten esencialmente de MA, OA, MDA, IMDA, ácido 3-O-acetil masticadienólico, ácido 3-O-acetil isomasticadienólico, MLA, IMLA, NF-1, NF-2, NF-3, NF-4, NF-A y NF-B como los únicos ingredientes farmacéuticamente activos; y un portador farmacéuticamente aceptable.
En algunas realizaciones, se proporciona una composición farmacéutica que comprende ingredientes farmacéuticamente activos que comprenden o consisten esencialmente de MDA, IMDA, NF-1, NF-2, NF-3, NF-4, NF-P, NF-A y NF-B como los únicos ingredientes farmacéuticamente activos; y un portador farmacéuticamente aceptable.
En algunas realizaciones, se proporciona una composición farmacéutica que comprende ingredientes farmacéuticamente activos que comprenden o consisten esencialmente de MDA, IMDA, NF-1, NF-2, NF-3, NF-4, NF-A y NF-B como los únicos ingredientes activos; y un portador farmacéuticamente aceptable.
En algunas realizaciones, se proporciona una composición farmacéutica que comprende ingredientes farmacéuticamente activos que consisten esencialmente de MA, OA, MDA, IMDA, ácido 3-O-acetil masticadienólico, ácido 3-O-acetil isomasticadienólico, NF-1, NF-2, NF -3, NF-4, NF-A y NF-B; y un portador farmacéuticamente aceptable.
En algunas realizaciones, se proporciona una composición farmacéutica que comprende ingredientes farmacéuticamente activos que consisten esencialmente de MA, OA, MDA, IMDA, ácido 3-O-acetil masticadienólico, ácido 3-O-acetil isomasticadienólico, NF-1, NF-2, NF -3 y NF-4; y un portador farmacéuticamente aceptable.
En algunas realizaciones, se proporciona una composición farmacéutica que comprende ingredientes farmacéuticamente activos que consisten esencialmente de OA, MDA, IMDA, ácido 3-O-acetil masticadienólico, ácido 3-O-acetil isomasticadienólico, NF-1, NF-2, NF-3, NF-4, NF-A y NF-B; y un portador farmacéuticamente aceptable.
En algunas realizaciones, se proporciona una composición farmacéutica que comprende ingredientes farmacéuticamente activos que consisten esencialmente de OA, MDA, IMDA, ácido 3-O-acetil masticadienólico, ácido 3-O-acetil isomasticadienólico, NF-1, NF-2, NF-3 y NF-4; y un portador farmacéuticamente aceptable.
En algunas realizaciones, se proporciona una composición farmacéutica que comprende ingredientes farmacéuticamente activos que consisten esencialmente de MDA, IMDA, NF-1, NF-2; y un portador farmacéuticamente aceptable.
En algunas realizaciones, se proporciona una composición farmacéutica que comprende ingredientes farmacéuticamente activos que consisten esencialmente de MdA, IMDA, NF-1, NF-2, NF-3, NF-4, NF-A y NF-B como los únicos ingredientes farmacéuticamente activos; y un portador farmacéuticamente aceptable.
En algunas realizaciones, se proporciona una composición farmacéutica que comprende ingredientes farmacéuticamente activos que consisten esencialmente de MDA, IMDA, NF-1, NF-2, NF-3 y NF-4 como los únicos ingredientes farmacéuticamente activos; y un portador farmacéuticamente aceptable.
En algunas realizaciones, se proporciona una composición farmacéutica que comprende ingredientes farmacéuticamente activos que consisten esencialmente de MDA, IMDA, NF-1 y NF-2 como los únicos ingredientes farmacéuticamente activos; y un portador farmacéuticamente aceptable.
En algunas realizaciones, la composición comprende por lo menos dos triterpenoides neutros adicionales. En algunas realizaciones, el o los ácidos triterpenoicos pueden obtenerse de una fuente vegetal. En algunas realizaciones, cualquiera de los ácidos triterpenoicos puede obtenerse de una fuente vegetal. En algunas realizaciones, por lo menos un ácido triterpenoico puede obtenerse de una fuente vegetal. En algunas realizaciones, el o los triterpenoides neutros pueden obtenerse de una fuente vegetal. En algunas realizaciones, cualquiera de los triterpenoides neutros puede obtenerse de una fuente vegetal. En algunas realizaciones, por lo menos un triterpenoide neutro puede obtenerse de una fuente vegetal. En algunas realizaciones, la fuente vegetal puede incluir goma de mástique.
En algunas realizaciones, el o los ácidos triterpenoicos pueden obtenerse mediante una síntesis química. En algunas realizaciones, cualquiera de los ácidos triterpenoicos puede obtenerse mediante una síntesis química. En algunas realizaciones, por lo menos un ácido triterpenoico puede obtenerse mediante una síntesis química. En algunas realizaciones, el o los triterpenoides neutros pueden obtenerse mediante una síntesis química. En algunas realizaciones, cualquiera de los triterpenoides neutros puede obtenerse mediante una síntesis química. En algunas realizaciones, por lo menos un triterpenoide neutro puede obtenerse mediante una síntesis química.
En algunas realizaciones, las composiciones y/o combinaciones de compuestos, como se divulga en la presente, presentan inesperadamente una variedad de actividades biológicas beneficiosas, que se explotan para aplicaciones terapéuticas de una manera sorprendentemente eficaz. Más específicamente, se muestra que las composiciones y combinaciones divulgadas en la presente son activas y útiles en el tratamiento de afecciones como la enfermedad de Alzheimer (EA), las enfermedades de Parkinson (EP). En algunas realizaciones, el tratamiento de la enfermedad de Alzheimer (EA) y las enfermedades de Parkinson (EP) puede estar asociado con la reversión de la afección. En algunas realizaciones, el tratamiento de la enfermedad de Alzheimer (EA) y la enfermedad de Parkinson (EP) puede estar asociado con la reducción o eliminación de los efectos secundarios provocados por la afección.
En algunas realizaciones, se proporciona un método para tratar la enfermedad de Alzheimer (EA) y las enfermedades de Parkinson (EP), que comprende administrar a un sujeto una composición como se divulga en la presente. En algunas realizaciones, se proporciona un método para tratar la enfermedad de Alzheimer (EA) y las enfermedades de Parkinson (EP) en un sujeto con necesidad de ello, que comprende administrar a un sujeto una cantidad terapéuticamente eficaz de una composición como se divulga en la presente. En algunas realizaciones, el método es para tratar la enfermedad de Alzheimer (EA). En algunas realizaciones, el método es para tratar las enfermedades de Parkinson (EP).
En algunas realizaciones, los animales se seleccionan del grupo de humanos, mamíferos no humanos, aves y peces.
Se proporciona un kit que comprende una composición farmacéutica como se divulga en la presente.
En algunas realizaciones, la composición puede estar en una forma adecuada para la administración por una vía seleccionada del grupo que consiste de parenteral, transdérmica, oral y tópica. En algunas realizaciones, la composición puede estar en una forma adecuada para la administración mediante inyección. En algunas realizaciones, la composición es una formulación parenteral para administración por una vía seleccionada del grupo que consiste de subcutánea, intravenosa, intramuscular, intradérmica, intraperitoneal, intraarterial, intracerebral, intracerebroventricular, intraósea e intratecal.
En algunas realizaciones, el sujeto que se va a tratar con las composiciones divulgadas en la presente puede seleccionarse del grupo de humanos y mamíferos no humanos.
Además de los aspectos y realizaciones ejemplares descritos anteriormente, otros aspectos y realizaciones resultarán evidentes con referencia a las figuras y mediante el estudio de la siguiente descripción detallada.
BREVE DESCRIPCIÓN DE LOS DIBUJOS
Las realizaciones ejemplares se ilustran en las figuras referenciadas. Las dimensiones de los componentes y las características que se muestran en las figuras se eligen generalmente por conveniencia y claridad de presentación y no se muestran necesariamente a escala. Se pretende que las realizaciones y figuras divulgadas en la presente se consideren ilustrativas en lugar de restrictivas. A continuación se enumeran las figuras.
La Figura 1 muestra gráficos de barras que muestran la puntuación de colocación delta de la extremidad anterior en los Grupos A-F (N° de entradas respectivo 4 (grupo A); 27 (grupo B); 31 (Grupo C); 2 (Grupo E); 26 (Grupo F) de la Tabla 1A) de la prueba de colocación de las extremidades anteriores en un modelo de ataque cerebral tMCAO en ratas. El grupo D es el control con placebo.
La Figura 2 muestra gráficos de barras que muestran la puntuación neurológica en los Grupos A-F (N° de Entrada respectivo 4 (grupo A); 27 (grupo B); 31 (Grupo C); 2 (Grupo E); 26 (Grupo F) de la Tabla 1A) de la prueba de puntuación neurológica en un modelo de ataque cerebral tMCAO en ratas. El grupo D es el control con placebo.
Las Figuras 3A y 3B muestran gráficos que muestran el efecto de la "Combinación A" (Tabla 1A, Entrada N° 25) sobre la citólisis inducida por el tratamiento con glutamato, normalizada en el punto de datos de 72 horas. La Figura 3A- muestra curvas cinéticas de citólisis normalizadas en el punto de datos de 72 h (justo antes del tratamiento con glutamato. La Figura 3B muestra áreas bajo la curva (AUC) de la cinética de citólisis calculada desde el punto de tiempo de 72 h hasta el final de la cinética. *: p<0,05, **: p <0,01 en comparación con el grupo tratado con vehículo, ANOVA unidireccional seguido de la prueba post hoc de Dunnett.
Las Figuras 4A y 4B muestran gráficos que muestran el efecto de la "Combinación B" (Tabla 1A, Entrada N° 31) sobre la citólisis inducida por el tratamiento con glutamato, normalización en el punto de datos de 72 horas.
La Figura 4A- muestra curvas cinéticas de citólisis normalizadas en el punto de datos de 72 h (justo antes del tratamiento con glutamato. La Figura 4B muestra áreas bajo la curva (AUC) de la cinética de citólisis calculada desde el punto de tiempo de 72 h hasta el final de la cinética. *: p<0,05, **: p<0,01 en comparación con el grupo tratado con vehículo, ANOVA unidireccional seguido de la prueba post hoc de Dunnett.
La Figura 5A muestra un gráfico de líneas que muestra el efecto de la "Combinación A" (Tabla 1A, Entrada N° 25) sobre la hiperfosforilación de Tau inducida por ácido okadaico (OKA) después de un pretratamiento de 24 horas. *: p<0,05 en comparación con la condición de no tratado (NT). ANOVA unidireccional seguido de la prueba de comparación múltiple de Dunnett.
La Figura 5B muestra un gráfico de líneas que muestra el efecto de la "Combinación B" (Tabla 1A, Entrada N° 31) sobre la hiperfosforilación de Tau inducida por ácido okadaico (OKA) después de un pretratamiento de 24 horas o como un cotratamiento *: p<0,05 en comparación con la condición de no tratado (NT). ANOVA unidireccional seguido de la prueba de comparación múltiple de Dunnett.
La Figura 6 muestra el efecto de la "Combinación A" (Tabla 1A, Entrada N° 25) y la "Combinación B" (Tabla 1A, Entrada N° 31) sobre el tiempo de reacción de la elección. Los tiempos de reacción para cada presentación de dos palancas, expresados como el valor medio por animal por sesión. Tiempos de reacción para cada presentación de dos palancas, expresados como el valor medio por animal por sesión. (*): comparado con controles envejecidos (vehículo s.c.).
La Figura 7 muestra el efecto de la "Combinación A" (Tabla 1A, Entrada N° 25) y la "Combinación B" (Tabla 1A, Entrada N° 31) sobre la duración de la investigación social en el segundo contacto en comparación con la duración en el primer contacto para cada grupo. El efecto de la combinación A y B sobre la duración de la investigación social en el segundo contacto en comparación con la duración del primer contacto para cada grupo. (a): comparado con el primer contacto. (b): comparado con controles adultos (vehículo s.c.). (c): comparado con controles envejecidos (vehículo s.c.).
La Figura 8 muestra el efecto de "Combinación A" (Tabla 1A, Entrada N° 25) y la "Combinación B" (Tabla 1A, Entrada N° 31) en el índice de reconocimiento (= C2/C1). El efecto de la combinación A y B en el índice de reconocimiento (=C2/C1). (b): comparado con controles adultos (vehículo s.c.). (c): comparado con controles envejecidos (vehículo s.c.).
Las Figuras 9A y 9B muestran el efecto del tratamiento con "Combinación A" (Tabla 1A, Entrada N° 25) sobre la toxicidad inducida por 6-OH DA en cultivos primarios mesencefálicos y neuronas TH positivas.
Las Figuras 10A y 10B muestran el efecto del tratamiento con "Combinación B" (Tabla 1A, Entrada N° 31) sobre la toxicidad inducida por 6-OH DA en cultivos primarios mesencefálicos y neuronas TH positivas.
Las Figuras 11A y 11B muestran el efecto del tratamiento con "Combinación C" (Tabla 1A, Entrada N° 34) sobre la toxicidad inducida por 6-OH DA en cultivos primarios mesencefálicos y neuronas TH positivas.
Las Figuras 12A y 12B muestran la media de la "Combinación A" (Tabla 1A, Entrada N° 25) y la "Combinación C" (Tabla 1A, Entrada N° 34) sobre las diferencias de colocación de las patas (cambio desde el día 7).
Las Figuras 13A y 13B muestran respectivamente el área TH-positiva media en el cuerpo estriado para las "Combinaciones A, B y C" (Entradas respectivas 25, 31 y 34 en la Tabla 1A); y el área TH positiva media normalizada en el cuerpo estriado para las "Combinaciones A, B y C" (Entradas respectivas 25, 31 y 34 en la Tabla 1A).
DESCRIPCIÓN DETALLADA DE LA INVENCIÓN
Como se divulga en la presente, se ha descubierto sorprendentemente que las combinaciones de ácidos triterpenoicos y compuestos triterpenoides neutros muestran una alta actividad en el tratamiento de una afección seleccionada de la enfermedad de Alzheimer (EA) y las enfermedades de Parkinson (EP).
Las combinaciones específicas de ácidos triterpenoicos y compuestos terpenoides neutros muestran sorprendentemente una eficacia terapéutica mejorada.
Definiciones
Como se usa en la presente, el término "pluralidad" se refiere a más de uno, preferiblemente más de dos. Como se usa en la presente, el término "sinérgico" significa más que un aditivo.
Como se usa en la presente, el término "extracción ácido-base" se refiere a un procedimiento en el que una solución de solvente orgánico que contiene componentes orgánicos ácidos (típicamente, ácidos carboxílicos orgánicos) y orgánicos no ácidos se trata/extrae con una o más soluciones acuosas básicass. Como resultado, los componentes orgánicos ácidos se desprotonan y, por tanto, se convierten en sus correspondientes formas de sal iónicas desprotonadas (típicamente, carboxilatos aniónicos orgánicos) y como resultado se disolverán en dicha solución acuosa básica. Los componentes orgánicos no ácidos no se desprotonarán, por lo que permanecerán en la fase de solución orgánica original. Los ácidos desprotonados también pueden formar una capa intermedia oleosa y/o de emulsión, especialmente cuando se extraen cantidades de varios gramos. La solución acuosa básica que contiene las formas de sal desprotonadas de los componentes ácidos, junto con la capa oleosa y/o de emulsión (si la hay), se acidifica, dando como resultado la reformación de las formas ácidas protonadas de los componentes ácidos orgánicos. Estas formas ácidas protonadas (fracción ácida) pueden eliminarse de la solución acuosa acidificada de varias maneras dependiendo de las propiedades de los compuestos ácidos. Una opción para eliminar la fracción ácida de la solución acidificada es mediante la reextracción en un solvente orgánico adecuado. Los Ejemplos 1A y 1B a continuación describen un ejemplo no limitativo de una extracción ácido-base como se ha descrito anteriormente. Dependiendo de la solubilidad y la forma física de los compuestos ácidos (por ejemplo, si la fracción ácida comprende típicamente un sólido separado/precipitado) en la solución acuosa acidificada, la fracción ácida puede aislarse a través de filtración de la solución acuosa acidificada.
Como se ha indicado anteriormente, la fase de solución orgánica original que queda después de la extracción con solución o soluciones acuosas básicas contiene los componentes orgánicos no ácidos. En el caso de la goma de mástique, estos componentes no ácidos consisten en triterpenoides neutros y a la mezcla se hace referencia como fracción neutra. Los Ejemplos 1A y 1B a continuación describen un método particular (pero no limitativo) para el aislamiento de una cierta fracción ácida y una cierta fracción neutra de la goma de mástique.
A partir de la fracción ácida aislada y la fracción neutra, los ácidos triterpenoicos y los triterpenoides neutros individuales pueden aislarse usando métodos conocidos en la técnica como cromatografía en columna y HPLC. Varias referencias presentadas en la introducción de la solicitud actual contienen ejemplos de métodos de separación para ácidos triterpenoicos y triterpenoides neutros de la goma de mástique.
En lugar de usar una solución acuosa básica para la extracción ácido-base, también pueden usarse formas básicas de resinas de intercambio iónico. En estos casos, tras entrar en contacto con la resina de intercambio iónico, los componentes orgánicos ácidos (fracción ácida, típicamente, ácidos carboxílicos orgánicos) son capturados en su forma aniónica desprotonada (típicamente, carboxilatos aniónicos orgánicos) por la resina. Posteriormente, la resina se elimina de la solución inicial, dejando atrás los componentes no ácidos. Posteriormente se liberan los componentes ácidos (fracción ácida) de la resina mediante el tratamiento de la resina con una solución ácida adecuada. El uso de resinas de intercambio iónico para extracciones ácido-base es especialmente adecuado para procesos de aumento a escala y puede usarse para el desarrollo de procesos de extracción (semi)continuos.
Ejemplos de las extracciones ácido-base anteriores y otras variaciones pueden encontrarse en muchos libros de texto y otras publicaciones, y se consideran de conocimiento común para los expertos en la técnica. Un ejemplo de un libro de texto útil es " Vogel's Textbook of Practical Organic Chemistry", 5a edición, 1989, (p.162-163).
Como se usa en la presente, el término "grado de pureza" se refiere al contenido de un compuesto químico especificado en una preparación, expresado como un porcentaje en base a un peso por peso del compuesto químico especificado con respecto a otros compuestos químicos en la preparación.
Como se usa en la presente, "compuestos de terpeno" se refiere a hidrocarburos que contienen isopreno, que tienen unidades de isopreno (CH2C(CH3)CHCH2) en una orientación de cabeza a cola. Los hidrocarburos terpénicos en general, tienen la fórmula molecular (C5H8K e incluyen hemiterpenos, (C5), monoterpenos (C10), sesquiterpenos (C15), diterpenos (C20), triterpenos (C30) y tetraterpenos (C40) que tienen respectivamente 1, 2, 3, 4, 6 y 8 unidades de isopreno. Los terpenos pueden clasificarse además como acíclicos o cíclicos.
Como se usa en la presente, "terpenoides" y "compuestos terpenoides" se refieren indistintamente a compuestos relacionados con terpenos, que contienen por lo menos un átomo de oxígeno además de unidades de isopreno, y por tanto incluyen alcoholes, aldehídos, cetonas, éteres, como pero no limitado a, derivados de ácidos carboxílicos de los mismos, como ésteres. Los terpenoides se subdividen de acuerdo con el número de átomos de carbono de una manera similar al terpeno y, por tanto, incluyen hemiterpenoides, (C5), monoterpenoides (C10), sesquiterpenoides (C15), diterpenoides (C20), triterpenoides (C30) y tetraterpenoides (C40) que tienen respectivamente 1, 2, 3, 4, 6 y 8 unidades de isopreno. El esqueleto de los terpenoides puede diferir de la aditividad estricta de las unidades de isopreno por la pérdida o desplazamiento de un fragmento, comúnmente un grupo metilo. Los ejemplos de monoterpenoides incluyen alcanfor, eugenol, mentol y borneol. Los ejemplos de diterpenoides incluyen fitol, retinol y taxol. Los ejemplos de triterpenoides incluyen ácido betulínico y lanosterol. Los terpenoides pueden ser acíclicos o pueden contener una o más estructuras de anillo. Los triterpenoides pueden ser acíclicos o pueden contener una o más estructuras de anillo. Los anillos pueden contener solo átomos de carbono o, alternativamente, pueden contener uno o más átomos de oxígeno además de los átomos de carbono. Los tamaños de anillo comunes varían de anillos de tres miembros hasta anillos de diez miembros. Son posibles anillos de mayor tamaño de hasta por lo menos veinte miembros. Puede haber más de un anillo y más de un tamaño de anillo en un solo triterpenoide. En caso de que un triterpenoide contenga más de un anillo, los anillos pueden estar presentes y separados por uno o más enlaces acíclicos; alternativamente, los anillos pueden conectarse directamente a través de conexiones del tipo apareado, del tipo puente, el tipo espiro o combinaciones de cualquiera de estos tipos. Son posibles los sistemas de anillos de tipo apareado, fusionado, con puente o espiro múltiples. Son posibles combinaciones de anillos de tipo apareado, con puente, fusionado, espiro simples y múltiples. Son posibles combinaciones de anillos aislados y anillos conectados en el mismo triterpenoide.
Como se usa en la presente, "ácidos terpenoicos" se refiere a compuestos terpenoides que contienen por lo menos un grupo funcional de ácido carboxílico (COOH). Los ácidos terpenoicos pueden contener adicionalmente uno o más de otros grupos funcionales que contienen oxígeno, por ejemplo, pero no limitado a hidroxilo, ceto, aldehído, éter (cíclico y no cíclico), éster (cíclico y no cíclico). También pueden contener uno o más enlaces dobles C=C, cada enlace doble puede ser cis, trans, tipo E, tipo Z, así como estar monosustituido, disustituido, trisustituido o tetrasustituido (lo que significa sin sustituyente H vinílico), independientemente de otros enlaces C=C. El grupo de ácido carboxílico puede estar presente en forma protonada (COOH) o en forma aniónica desprotonada (COO-).
Como se usa en la presente, "ácidos triterpenoicos" se refiere a compuestos triterpenoides que contienen por lo menos un grupo de ácido carboxílico. Los ácidos triterpenoicos pueden contener adicionalmente uno o más de otros grupos funcionales que contienen oxígeno, por ejemplo, pero no limitado a, hidroxilo, ceto, aldehído, éter (cíclico y no cíclico) y éster (cíclico y no cíclico). También pueden contener uno o más enlaces dobles C=C, cada enlace doble puede ser de tipo cis, trans, E o Z, así como estar monosustituido, disustituido, trisustituido o tetrasustituido (lo que significa sin sustituyente H vinílico), independientemente de otros enlaces C=C. El grupo de ácido carboxílico puede estar presente en forma protonada (COOH) o en forma aniónica desprotonada (COO-).
Como se usa en la presente, "terpenoides neutros" se refiere a compuestos terpenoides que carecen de un grupo de ácido carboxílico. Los triterpenoides neutros pueden contener uno o más de otros grupos funcionales que contienen oxígeno, por ejemplo, pero sin limitación, hidroxilo, ceto, aldehído, éter (cíclico y no cíclico) y éster (cíclico y no cíclico). También pueden contener uno o más enlaces dobles C=C, cada enlace doble puede ser de tipo cis, trans, E o Z, así como estar monosustituido, disustituido, trisustituido o tetrasustituido (lo que significa sin sustituyente H vinílico), independientemente de otros enlaces C=C.
Como se usa en la presente, "triterpenoides neutros" se refiere a compuestos triterpenoides que carecen de un grupo de ácido carboxílico. Los triterpenoides neutros pueden contener uno o más de otros grupos funcionales que contienen oxígeno, por ejemplo, pero sin limitación, hidroxilo, ceto, aldehído, éter (cíclico y no cíclico) y éster (cíclico y no cíclico). También pueden contener uno o más enlaces dobles C=C, cada enlace doble puede ser de tipo cis, trans, E o Z, así como estar monosustituido, disustituido, trisustituido o tetrasustituido (lo que significa sin sustituyente H vinílico), independientemente de otros enlaces C=C.
Como se usa en la presente, "una forma oligomérica de un ácido terpenoico" se refiere a un ácido terpenoico oligomérico en el que las unidades monoméricas son o del mismo ácido terpenoico o de diferentes ácidos terpenoicos, y están unidas en cualquier disposición posible, y están conectadas entre sí a través de cualquier enlace o grupo funcional posible, como un enlace C-C, pero no limitado a, un grupo éster o un grupo éter.
Como se usa en la presente, "una forma oligomérica de un ácido triterpenoico" se refiere a un ácido triterpenoico oligomérico en el que las unidades monoméricas son o del mismo ácido triterpenoico o de diferentes ácidos triterpenoicos, y están unidas en cualquier disposición posible, y están conectadas entre sí a través de cualquier enlace o grupo funcional posible, como, pero no limitado a, un enlace -CC, un grupo éster o un grupo éter.
Como se usa en la presente, los términos "mástique", "resina de mástique", "mástique de goma" y "goma de mástique", se usan indistintamente para referirse a una resina de árbol (también conocida como oleorresina) obtenida como un exudado de cualquier árbol clasificado en la familia Anacardiaceae. Los árboles del género Pistacia, más notablemente Pistacia lentiscus L., y en particular el cultivar P. lentiscus L. cv. Chia (cultivada en la isla griega de Chios), es conocida por su alto rendimiento de mástique de goma. Otras variedades incluyen P. lentiscus L. var. emarginata Engl. y P. lentiscus L. var. latifolia Coss. Especies adicionales de Pistacia incluyen, por ejemplo, P. atlantica, P. palestina, P. saportae, P. terebinthus, P. vera y P. integerrima.
Como se usa en la presente, los términos "ácido masticadienoico", "ácido masticadienónico", "masticadienoico" y "masticadienónico" pueden usarse indistintamente.
Para proporcionar claridad con respecto a la estructura molecular de los compuestos frecuentemente mencionados y a los que se hace referencia en esta solicitud, a continuación se presenta una lista de estructuras con nombres y acrónimos usados en esta solicitud.
El ácido masticadienónico se refiere al ácido 24-Z-masticadienónico, el acrónimo MDA usado en la presente solicitud se refiere a este compuesto. La estructura química del ácido 24-Z-masticadienónico es la siguiente:
Figure imgf000011_0001
Como se usa en la presente, los términos "ácido ¡somasticadienoico", "ácido isomasticadienonico", "isomasticadienoico" e "isomasticadienonico" pueden usarse indistintamente.
El ácido isomasticadienonico se refiere al ácido 24-Z-isomasticadienónico, el acrónimo IMDA usado en la presente solicitud se refiere a este compuesto. La estructura química del ácido 24-Z-isomasticadienónico es la siguiente:
Figure imgf000011_0002
El ácido morónico (MO) tiene la siguiente estructura molecular:
Figure imgf000011_0003
El ácido 24-Z-masticadienólico (MLA) tiene la siguiente estructura, el grupo 3-hidroxilo tiene la configuración beta:
Figure imgf000012_0001
El ácido 24-Z-epimasticadienólico (epi-MLA) tiene la siguiente estructura, el grupo 3-hidroxilo tiene la configuración alfa:
Figure imgf000012_0002
El ácido 24-Z-isomasticadienólico (IMLA) tiene la siguiente estructura, el grupo 3-hidroxilo tiene la configuración beta:
Figure imgf000012_0003
El ácido 24-Z-epi-isomasticadienólico (epi-IMLA) tiene la siguiente estructura, el grupo 3-hidroxilo tiene la configuración beta:
Figure imgf000012_0004
El ácido 24-Z-3-O-acetil-masticadienólico (3-OAc-MLA) tiene la siguiente estructura molecular:
Figure imgf000012_0005
masticadienólico
El ácido 24-Z-3-O-acetil-epimasticadienólico (3-OAc-epi-MLA) tiene la siguiente estructura molecular:
Figure imgf000013_0001
El ácido 24-Z-3-O-acetil-isomasticadienólico (3-OAc-IMLA) tiene la siguiente estructura molecular:
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El ácido 24-Z-3-O-acetil-epiisomasticadienólico (3-OAc-epi-IMLA) tiene la siguiente estructura molecular:
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Debe entenderse que en el contexto de esta divulgación, en caso de que se omita "24-Z'' de cualquiera de los nombres de compuestos mencionados anteriormente, es este isómero 24-Z particular al que se hace referencia.
El término "NF-1" se refiere al compuesto triterpenoide neutro (8R)-3-beta,8-dihidroxipolipoda-13E,17E,21-trieno (también referido como Mirranol C), que tiene la estructura expuesta en el esquema I:
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El término "NF-2" se refiere al compuesto triterpenoide neutro ((8R)-3-Oxo-8-hidroxipol¡poda-13E,17E,21-trieno, que tiene la estructura expuesta en el esquema II:
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El término "NF-3" se refiere al compuesto triterpenoide neutro aldehido oleanónico, que tiene la estructura expuesta en el esquema III:
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El término "NF-4" se refiere al compuesto triterpenoide neutro Tirucallol (Epimero C-20 de Euphol), que tiene la estructura expuesta en el esquema IV:
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El término "NF-A" se refiere al compuesto triterpenoide neutro 28-hidroxilup-20(29)-en-3-ona (también referido como Betulon), que tiene la estructura expuesta en el esquema V:
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El término "NF-B" se refiere al compuesto triterpenoide neutro 28-hidroxi-beta-amirona (también referido como alcohol oleanónico), que tiene la estructura expuesta en el esquema VI:
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El término "NF-P" se refiere al compuesto triterpenoide neutro 20-hidroximadammar-24-en-3-ona (también referido como Dipterocarpol), que tiene la estructura expuesta en el esquema VII.
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NF-P, 20-hidroxidammar-24-en-3-ona (NF-P; Dipterocarpol)
Los triterpenoides neutros adicionales aislados de la fracción neutra de goma de mástique son los siguientes: Nombre: 3-beta-20-dihidroxilupano
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Nombre: 3-beta-hidroxi-13-alfa-malabarica-14(26),17E, 21-trieno
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Nombre: 3-oxo-malabarica-14 (26),17E, 21-trieno
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Nombre: Isomasticadienediol
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Nombre: Epi-isomasticadienediol
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Nombre: Masticadienediol
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Nombre: Epi-masticadienediol
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Nombre: aldehído isomasticadienónico
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Nombre: aldehído masticadienónico
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Nombre: Beta-amirina
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Nombre: Beta-amirona
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Nombre: Germánico!
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Nombre: 28-nor-beta-amirina
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Nombre: 28-nor-beta-amirona
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Nombre: 3-oxo-28-norlup-20(29)-eno (28-nor-betulona)
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Nombre: 3-oxo-28nor-17-hidroxi-20 (29)-eno (28-nor-17-hidroxibetulona)
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Como se usa en la presente, el término "aceite esencial" se refiere a un aceite volátil derivado de las hojas, tallo, flor o ramitas de plantas o compuestos elaborados sintéticamente que tienen los mismos atributos químicos. El aceite esencial habitualmente lleva el olor o el aroma de la planta. Cada aceite esencial vegetal o derivado del mismo puede extraerse de fuentes naturales o elaborarse sintéticamente. Los aceites químicamente esenciales contienen generalmente mezclas de mono- y sesquiterpenos o mezclas correspondientes de tales terpenoides como constituyentes principales, que tienen pesos moleculares más bajos en comparación con los triterpenos y titerpenoides. En particular, este grupo comprende monoterpenos o sesquiterpenos acíclicos saturados e insaturados que incluyen fracciones de alcohol o aldehído, compuestos aromáticos bencenoides que contienen por lo menos un sustituyente o cadena lateral oxigenado, o un terpeno monocarbocíclico que generalmente tiene un anillo de seis miembros que lleva uno o más sustituyentes oxigenados. La resina de mástique contiene aproximadamente un 2-4% de tales compuestos. Como se usa en la presente, "aceite esencial" incluye además derivados del mismo, incluyendo mezclas racémicas, enantiómeros, diastereómeros, hidratos, sales, solvatos, metabolitos, análogos y homólogos.
Como se usa en la presente, "sustancialmente desprovista" significa que una preparación o composición farmacéutica de acuerdo con la invención contiene generalmente menos de aproximadamente el 5% de la sustancia indicada. Por ejemplo, menos de aproximadamente el 3%, menos del 1%, menos del 0,5%, menos del 0,1%.
Como se usa en la presente, el término "que consiste esencialmente de" significa que el único ingrediente farmacéutico activo en la formulación o método que trata una afección específica es el ingrediente terapéutico enumerado específicamente en la realización o reivindicación particular. No se excluye la presencia de otros ingredientes, por ejemplo, excipientes y/o lubricantes, etc. Tampoco se excluye la presencia de otros agentes farmacéuticamente activos adicionales, siempre que estos últimos no tengan un efecto real sobre dicha afección.
Como se usa en la presente, "cantidad terapéuticamente eficaz" se refiere a la cantidad de un ingrediente farmacéutico que induce, promueve o produce sustancialmente un efecto terapéutico deseado.
Como se usa en la presente, "portador farmacéuticamente aceptable" se refiere a un diluyente o vehículo, que se usa para mejorar la administración y/o las propiedades farmacocinéticas de un ingrediente farmacéutico con el que se formula, pero que no tiene ningún efecto terapéutico propio, ni tampoco induce o provoca cualquier efecto indeseable o adverso o reacción adversa en el sujeto.
Como se usa en la presente, "portador hidrófobo farmacéuticamente aceptable" se refiere a un diluyente o vehículo no polar hidrófobo en el que se disuelve o suspende una composición.
Como se usa en la presente, las alfa-sinucleinopatías (sinucleinopatías) son enfermedades neurodegenerativas caracterizadas por la acumulación anormal de agregados de la proteína alfa-sinucleína en neuronas, fibras nerviosas o células gliales.
La enfermedad de Parkinson (EP) es un trastorno neurodegenerativo debilitante que se caracteriza por la pérdida progresiva de neuronas dopaminérgicas (DA) en la sustancia negra pars compacta (SNc), lo que lleva a una disminución marcada de dopamina (DA) en el cuerpo estriado, la región de proyección primaria, así como núcleos extraestriatales de los ganglios basales. La EP tiene un síndrome clínico característico de bradicinesia, temblor, rigidez e inestabilidad postural. Hay una gran cantidad de trastornos diferentes que pueden tener algunas o todas estas características clínicas, y el síndrome clínico se conoce como "parkinsonismo". Los trastornos en los que el parkinsonismo es una parte importante se denominan "trastornos parkinsonianos". La EP es uno de los muchos trastornos parkinsonianos. Los trastornos parkinsonianos degenerativos pueden ser hereditarios o esporádicos, pero todos se caracterizan por la pérdida neuronal en poblaciones selectivas de neuronas vulnerables. El denominador común de todos los trastornos parkinsonianos degenerativos es la pérdida de neuronas dopaminérgicas de la sustancia negra que se proyectan al putamen (es decir, vía dopaminérgica nigroestriatal). Los síndromes de Parkinson-plus incluyen afecciones como atrofia multisistémica (MSA), parálisis supranuclear progresiva (PSP), complejo de parkinsonismo-demencia-esclerosis lateral amiotrófica, degeneración ganglionar corticobasal (CBD) y demencia con cuerpos de Lewy (DLB).
Como se usa en la presente, el término "aproximadamente" en referencia a un valor numérico indicado en la presente debe entenderse como el valor indicado /- 10%.
Composiciones que comprenden ácidos triterpenoicos y triterpenoides neutros.
En algunas realizaciones, la presente invención proporciona composiciones que comprenden o consisten de ácidos triterpenoicos y triterpenoides neutros específicos, se muestra que estas composiciones tienen un efecto terapéutico sinérgico inesperado en el tratamiento de la enfermedad de Alzheimer (EA), enfermedades de Parkinson (EP).
Los compuestos de ácidos triterpenoicos y triterpenoides neutros pueden obtenerse de una fuente vegetal, como por ejemplo goma de mástique, o pueden ser el producto de reacciones de síntesis química. En algunas realizaciones, cualquiera de los ácidos triterpenoicos y triterpenoides neutros puede ser el producto de una reacción bioquímica o un producto producido por un organismo microbiano. En algunas realizaciones, cualquiera de los ácidos triterpenoicos y triterpenoides neutros puede ser el producto de un proceso de fermentación. En algunas realizaciones, cualquiera de los ácidos triterpenoicos y triterpenoides neutros puede producirse mediante una combinación de una síntesis química y una reacción bioquímica. En algunas realizaciones, cualquiera de los ácidos triterpenoicos y triterpenoides neutros puede producirse mediante una combinación de una síntesis química y un proceso de fermentación. En algunas realizaciones, cualquiera de los ácidos triterpenoicos y triterpenoides neutros puede producirse mediante una combinación de cualquiera de las opciones indicadas anteriormente. En el caso de una reacción bioquímica o un proceso microbiano, el agente bioquímico y el agente microbiano pueden ser un agente de origen natural o puede ser un agente modificado que no existe de manera natural. La modificación de estos agentes puede lograrse usando métodos bioquímicos modernos como, por ejemplo, ingeniería genética. Dichos agentes bioquímicos y agentes microbianos que no se encuentran de manera natural también pueden crearse usando métodos de biología sintética.
La presente invención se refiere a las propiedades biológicas y farmacéuticas inesperadas de las composiciones farmacéuticas divulgadas que comprenden ácido o ácidos triterpenoicos y triterpenoide p triterpenoides neutros. La combinación de ácido o ácidos triterpenoicos y triterpenoide o triterpenoides neutros da como resultado una actividad farmacéutica global que no puede obtenerse usando solo los ácidos triterpenoicos o solo los triterpenoides neutros.
En algunas realizaciones, las composiciones pueden corresponder a combinaciones de compuestos en los que algunos se sintetizan químicamente y otros se derivan de fuentes vegetales.
En algunas realizaciones, las composiciones pueden corresponder a combinaciones de compuestos en los que cada compuesto puede haberse derivado independientemente de una fuente vegetal, o puede ser el producto de una síntesis química, una reacción bioquímica o un proceso microbiano (por ejemplo, fermentación) como se ha indicado anteriormente.
El ácido triterpenoico es ácido masticadienónico (MDA) y ácido isomasticadienónico (IMDA), y puede seleccionarse adicionalmente de ácido masticadienólico (MLA), ácido isomasticadienólico (IMLA), ácido 3-O-acetil masticadienólico, ácido 3-O-acetil epimasticadienólico, ácido 3-O-acetil isomasticadienólico, ácido 3-O-acetil epiisomasticadienólico, ácido oleanónico (OA) y ácido morónico (MA), o cualquier combinación de los mismos. Cada posibilidad es una realización separada.
En algunas realizaciones, cuando el MDA es uno de los ácidos triterpenoicos, el MDA puede comprender aproximadamente el 2-80% del peso total de los ácidos triterpenoicos. En algunas realizaciones, el MDA puede comprender aproximadamente el 10-70% del peso total de los ácidos triterpenoicos. En algunas realizaciones, el MDA puede comprender aproximadamente del 15 al 60% del peso total de los ácidos triterpenoicos. En algunas realizaciones, el MDA puede comprender aproximadamente el 20-50% del peso total de los ácidos triterpenoicos. En algunas realizaciones, el MDA puede comprender aproximadamente el 20-40% del peso total de los ácidos triterpenoicos. En algunas realizaciones, el MDA puede comprender aproximadamente el 40-50% del peso total de los ácidos triterpenoicos. En algunas realizaciones, el MDA puede comprender aproximadamente el 50% del peso total de los ácidos triterpenoicos.
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En algunas realizaciones, cuando IMDA es uno de los ácidos triterpenoicos, IMDA puede comprender aproximadamente 2-80% del peso total de los ácidos triterpenoicos. En algunas realizaciones, IMDA puede comprender aproximadamente 10-70% del peso total de los ácidos triterpenoicos. En algunas realizaciones, IMDA puede comprender aproximadamente el 15-60% del peso total de los ácidos triterpenoicos. En algunas realizaciones, IMDA puede comprender aproximadamente 20-50% del peso total de los ácidos triterpenoicos. En algunas realizaciones, IMDA puede comprender aproximadamente 20-40% del peso total de los ácidos triterpenoicos. En algunas realizaciones, IMDA puede comprender aproximadamente 40-50% del peso total de los ácidos triterpenoicos. En algunas realizaciones, IMDA puede comprender aproximadamente el 50% del peso total de los ácidos triterpenoicos.
En algunas realizaciones, cuando el MLA es uno de los ácidos triterpenoicos, el MLA puede comprender aproximadamente el 0-80% del peso total de los ácidos triterpenoicos. En algunas realizaciones, el MLA puede comprender aproximadamente el 0-70% del peso total de los ácidos triterpenoicos. En algunas realizaciones, el MLA puede comprender aproximadamente el 0-25% del peso total de los ácidos triterpenoicos. En algunas realizaciones, el MLA puede comprender aproximadamente el 0-15% del peso total de los ácidos triterpenoicos. En algunas realizaciones, el MLA puede comprender aproximadamente el 8% del peso total de los ácidos triterpenoicos.
En algunas realizaciones, cuando el IMLA es uno de los ácidos triterpenoicos, el IMLA puede comprender aproximadamente el 0-80% del peso total de los ácidos triterpenoicos. En algunas realizaciones, el IMLA puede comprender aproximadamente el 0-70% del peso total de los ácidos triterpenoicos. En algunas realizaciones, el IMLA puede comprender aproximadamente el 0-25% del peso total de los ácidos triterpenoicos. En algunas realizaciones, el IMLA puede comprender aproximadamente el 0-15% del peso total de los ácidos triterpenoicos. En algunas realizaciones, el IMLA puede comprender aproximadamente el 8% del peso total de los ácidos triterpenoicos.
En algunas realizaciones, cuando el MA es uno de los ácidos triterpenoicos, el MA puede comprender aproximadamente el 0-80% del peso total de los ácidos triterpenoicos. En algunas realizaciones, el MA puede comprender aproximadamente el 0-70% del peso total de los ácidos triterpenoicos. En algunas realizaciones, el MA puede comprender aproximadamente el 0-40% del peso total de los ácidos triterpenoicos. En algunas realizaciones, el MA puede comprender aproximadamente el 0-30% del peso total de los ácidos triterpenoicos. En algunas realizaciones, el MA puede comprender aproximadamente el 5-20% del peso total de los ácidos triterpenoicos. En algunas realizaciones, el MA puede comprender aproximadamente el 12-15% del peso total de los ácidos triterpenoicos.
En algunas realizaciones, cuando el OA es uno de los ácidos triterpenoicos, el OA puede comprender aproximadamente el 0-80% del peso total de los ácidos triterpenoicos. En algunas realizaciones, el OA puede comprender aproximadamente el 0-70% del peso total de los ácidos triterpenoicos. En algunas realizaciones, el OA puede comprender aproximadamente el 0-50% del peso total de los ácidos triterpenoicos. En algunas realizaciones, el OA puede comprender aproximadamente el 5-35% del peso total de los ácidos triterpenoicos. En algunas realizaciones, el OA puede comprender aproximadamente el 10-25% del peso total de los ácidos triterpenoicos. En algunas realizaciones, el MA puede comprender aproximadamente el 18-20% del peso total de los ácidos triterpenoicos.
En algunas realizaciones, cuando el ácido 3-O-acetil masticadienólico es uno de los ácidos triterpenoicos, el ácido 3-O-acetil masticadienólico puede comprender aproximadamente el 0-80% del peso total de los ácidos triterpenoicos. En algunas realizaciones, el ácido 3-O-acetil masticadienólico puede comprender aproximadamente el 0-70% del peso total de los ácidos triterpenoicos. En algunas realizaciones, el ácido 3-O-acetil masticadienólico puede comprender aproximadamente el 0-25% del peso total de los ácidos triterpenoicos. En algunas realizaciones, el ácido 3-O-acetil masticadienólico puede comprender aproximadamente el 0-15% del peso total de los ácidos triterpenoicos. En algunas realizaciones, el ácido 3-O-acetil masticadienólico puede comprender aproximadamente el 4-7% del peso total de los ácidos triterpenoicos.
En algunas realizaciones, cuando el ácido 3-O-acetil isomasticadienólico es uno de los ácidos triterpenoicos, el ácido 3-O-acetil isomasticadienólico puede comprender aproximadamente el 0-80% del peso total de los ácidos triterpenoicos. En algunas realizaciones, el ácido 3-O-acetil isomasticadienólico puede comprender aproximadamente el 0-70% del peso total de los ácidos triterpenoicos. En algunas realizaciones, el ácido 3-O-acetil isomasticadienólico puede comprender aproximadamente el 0-25% del peso total de los ácidos triterpenoicos. En algunas realizaciones, el ácido 3-O-acetil isomasticadienólico puede comprender aproximadamente el 0-15% del peso total de los ácidos triterpenoicos. En algunas realizaciones, el ácido 3-O-acetil isomasticadienólico puede comprender aproximadamente el 4-7% del peso total de los ácidos triterpenoicos.
En algunas realizaciones, cuando el ácido 3-O-acetil-epimasticadienólico es uno de los ácidos triterpenoicos, el ácido 3-O-acetil-masticadienólico puede comprender aproximadamente el 0-80% del peso total de los ácidos triterpenoicos. En algunas realizaciones, el ácido 3-O-acetil epimasticadienólico puede comprender aproximadamente el 0-70% del peso total de los ácidos triterpenoicos. En algunas realizaciones, el ácido 3-O-acetil masticadienólico puede comprender aproximadamente el 0-25% del peso total de los ácidos triterpenoicos. En algunas realizaciones, el ácido 3-O-acetil epimasticadienólico puede comprender aproximadamente el 0-15% del peso total de los ácidos triterpenoicos. En algunas realizaciones, el ácido 3-O-acetil epimasticadienólico puede comprender aproximadamente el 4-7% del peso total de los ácidos triterpenoicos.
En algunas realizaciones, cuando el ácido 3-O-acetil epiisomasticadienólico es uno de los ácidos triterpenoicos, el ácido 3-O-acetil epiisomasticadienólico puede comprender aproximadamente el 0-80% del peso total de los ácidos triterpenoicos. En algunas realizaciones, el ácido 3-O-acetil epiisomasticadienólico puede comprender aproximadamente el 0-70% del peso total de los ácidos triterpenoicos. En algunas realizaciones, el ácido 3-O-acetil epiisomasticadienólico puede comprender aproximadamente el 0-25% del peso total de los ácidos triterpenoicos. En algunas realizaciones, el ácido 3-O-acetil epiisomasticadienólico puede comprender aproximadamente el 0-15% del peso total de los ácidos triterpenoicos. En algunas realizaciones, el ácido 3-O-acetil epimasticadienólico puede comprender aproximadamente el 4-7% del peso total de los ácidos triterpenoicos.
El triterpenoide neutro es (8R)-3-beta, 8-dihidroxipolipoda-13E,17E, 21-trieno (8-dihidroxipolipoda-13E,17E, 21-trieno; NF-1) y (8R)-3-Oxo-8-hidroxipolipoda-13E,17E,21-trieno (NF-2), y puede seleccionarse adicionalmente de aldehído oleanónico (Nf-3), tirucallol (NF-4), 28-hidroxilup-20(29)-en-3-ona (NF-A), 28-hidroxi-beta-amirona (NF-B), 20-hidroximadammar-24-en-3-ona (NF-P), 3-beta-hidroxi-13-alfa-malabarica-14(26),17E,21-trieno, 20-hidroxi-lupan-3-ona, 28-Nor-17-hidroxilupen-3-ona, 28-oxo-lupen-3-ona, 28-nor-beta-amirona, aldehído isomasticadienónico, isomasticadienediol, aldehído oleanólico (28-oxo-beta-amirina), 3-beta-20-dihidroxilupan, aldehído masticadienónico, 3-oxo-malabarica-14(26),17E,21-trieno, Beta-amirona, Beta-amirina, germanicol o cualquier combinación de los mismos. Cada posibilidad es una realización separada.
En algunas realizaciones, el triterpenoide neutro adicional puede seleccionarse de por lo menos uno de aldehído oleanónico (NF-3), tirucallol (NF-4), 28-hidroxilup-20(29)-en-3-ona (NF-A), 28-hidroxi-beta-amirona (NF-B), 20-hidroxidammar-24-en-3-ona (NF-P), 3-beta-hidroxi-13-alfa-malabarica-14(26),17E, 21-trieno, 20-hidroxi-lupan-3-ona, 28-Nor-17-hidroxilupen-3-ona, 28-oxo-lupen-3-ona, 28-nor-beta-amirona, aldehído isomasticadienónico, isomasticadienediol, masticadienediol, aldehído oleanólico (28-oxo-beta-amirina), 3-beta-20-dihidroxilupano, aldehído masticadienónico, 3-oxo-malabarica-14(26),17E,21-trieno, Beta-amirona, Beta-amirina, germanicol, o cualquier combinación de los mismos. Cada posibilidad es una realización separada.
En algunas realizaciones, el triterpenoide neutro adicional puede seleccionarse de por lo menos uno de aldehído oleanónico (NF-3), tirucallol (NF-4), 28-hidroxilup-20(29)-en-3-ona (NF-A), 28-hidroxi-beta-amirona (NF-B), 3-beta-hidroxi-13-alfa-malabarica-14(26),17E,21-trieno, 20-hidroxi-lupan-3-ona, 28-Nor-17-hidroxilupen-3-ona, 28-oxo-lupen-3-ona, 28-nor-beta-amirona, aldehído isomasticadienónico, isomasticadienediol, aldehído oleanólico (28-oxo-beta-amirina), 3-beta-20-dihidroxilupano, aldehído masticadienónico, 3-oxo-malabarica-14(26),17E,21-trieno, Beta-amirona, Beta-amirina, germanicol o cualquier combinación de los mismos. Cada posibilidad es una realización separada.
En algunas realizaciones, el triterpenoide neutro adicional puede seleccionarse de por lo menos uno de aldehído oleanónico (NF-3), tirucallol (NF-4), 28-hidroxilup-20(29)-en-3-ona (NF-A), 28-hidroxi-beta-amirona (NF-B), 3-beta-hidroxi-13-alfa-malabarica-14(26),17E,21-trieno, 20-hidroxi-lupan-3-ona, 28-Nor-17-hidroxilupen-3-ona, 28-oxo-lupen-3-ona, 28-nor-beta-amirona, aldehído isomasticadienónico, isomasticadienediol, masticadienediol, aldehído oleanólico (28-oxo-beta-amirina), 3-beta-20-dihidroxilupano, aldehído masticadienónico, 3-oxo-malabarica-14(26),17E,21-trieno, Beta-amirona, Beta-amirina, Germanicol o cualquier combinación de los mismos. Cada posibilidad es una realización separada.
En algunas realizaciones, cuando el NF-1 es uno de los triterpenoides neutros, la cantidad de NF-1 con respecto a la cantidad total de triterpenoides neutros puede estar en el intervalo de aproximadamente el 0% a aproximadamente el 80%. En algunas realizaciones, la cantidad de NF-1 con respecto a la cantidad total de triterpenoides neutros puede estar en el intervalo de aproximadamente el 0% a aproximadamente el 50%. En algunas realizaciones, la cantidad de NF-1 con respecto a la cantidad total de triterpenoides neutros puede estar en el intervalo de aproximadamente el 5% a aproximadamente el 25%. En algunas realizaciones, la cantidad de NF-1 con respecto a la cantidad total de triterpenoides neutros puede estar en el intervalo de aproximadamente el 9% a aproximadamente el 13%.
En algunas realizaciones, cuando el NF-2 es uno de los triterpenoides neutros, la cantidad de NF-2 con respecto a la cantidad total de triterpenoides neutros puede estar en el intervalo de aproximadamente el 0% a aproximadamente el 80%. En algunas realizaciones, la cantidad de NF-2 con respecto a la cantidad total de triterpenoides neutros puede estar en el intervalo de aproximadamente el 0% a aproximadamente el 50%. En algunas realizaciones, la cantidad de NF-2 con respecto a la cantidad total de triterpenoides neutros puede estar en el intervalo de aproximadamente el 5% a aproximadamente el 25%. En algunas realizaciones, la cantidad de NF-2 con respecto a la cantidad total de triterpenoides neutros puede estar en el intervalo de aproximadamente el 9% a aproximadamente el 13%.
En algunas realizaciones, cuando el NF-3 es uno de los triterpenoides neutros, la cantidad de NF-3 con respecto a la cantidad total de triterpenoides neutros puede estar en el intervalo de aproximadamente el 0% a aproximadamente el 80%. En algunas realizaciones, la cantidad de NF-3 con respecto a la cantidad total de triterpenoides neutros puede estar en el intervalo de aproximadamente el 0% a aproximadamente el 50%. En algunas realizaciones, la cantidad de NF-3 con respecto a la cantidad total de triterpenoides neutros puede estar en el intervalo de aproximadamente el 5% a aproximadamente el 25%. En algunas realizaciones, la cantidad de NF-3 con respecto a la cantidad total de triterpenoides neutros puede estar en el intervalo de aproximadamente el 9% a aproximadamente el 13%.
En algunas realizaciones, cuando el NF-4 es uno de los triterpenoides neutros, la cantidad de NF-4 con respecto a la cantidad total de triterpenoides neutros puede estar en el intervalo de aproximadamente el 0% a aproximadamente el 80%. En algunas realizaciones, la cantidad de NF-4 con respecto a la cantidad total de triterpenoides neutros puede estar en el intervalo de aproximadamente el 0% a aproximadamente el 50%. En algunas realizaciones, la cantidad de NF-4 con respecto a la cantidad total de triterpenoides neutros puede estar en el intervalo de aproximadamente el 5% a aproximadamente el 25%. En algunas realizaciones, la cantidad de NF-4 con respecto a la cantidad total de triterpenoides neutros puede estar en el intervalo de aproximadamente el 9% a aproximadamente el 13%.
En algunas realizaciones, cuando el NF-P es uno de los triterpenoides neutros, la cantidad de NF-P con respecto a la cantidad total de triterpenoides neutros puede estar en el intervalo de aproximadamente el 0% a aproximadamente el 50%. En algunas realizaciones, la cantidad de NF-P con respecto a la cantidad total de triterpenoides neutros puede estar en el intervalo de aproximadamente el 0% a aproximadamente el 25%. En algunas realizaciones, la cantidad de NF-P con respecto a la cantidad total de triterpenoides neutros puede estar en el intervalo de aproximadamente el 0% a aproximadamente el 7%. En algunas realizaciones, la cantidad de NF-P con respecto a la cantidad total de triterpenoides neutros puede estar en el intervalo de aproximadamente el 6% a aproximadamente el 7%.
En algunas realizaciones, cuando el NF-A es uno de los triterpenoides neutros, la cantidad de NF-A con respecto a la cantidad total de triterpenoides neutros puede estar en el intervalo de aproximadamente el 0% a aproximadamente el 25%. En algunas realizaciones, la cantidad de NF-A con respecto a la cantidad total de triterpenoides neutros puede estar en el intervalo de aproximadamente el 0% a aproximadamente el 15%. En algunas realizaciones, la cantidad de NF-A con respecto a la cantidad total de triterpenoides neutros puede estar en el intervalo de aproximadamente el 0% a aproximadamente el 6%. En algunas realizaciones, la cantidad de NF-A con respecto a la cantidad total de triterpenoides neutros puede estar en el intervalo de aproximadamente el 4% a aproximadamente el 6%.
En algunas realizaciones, cuando el NF-B es uno de los triterpenoides neutros, la cantidad de NF-B con respecto a la cantidad total de triterpenoides neutros puede estar en el intervalo de aproximadamente el 0% a aproximadamente el 25%. En algunas realizaciones, la cantidad de NF-B con respecto a la cantidad total de triterpenoides neutros puede estar en el intervalo de aproximadamente el 0% a aproximadamente el 15%. En algunas realizaciones, la cantidad de NF-B con respecto a la cantidad total de triterpenoides neutros puede estar en el intervalo de aproximadamente el 0% a aproximadamente el 6%. En algunas realizaciones, la cantidad de NF-B con respecto a la cantidad total de triterpenoides neutros puede estar en el intervalo de aproximadamente el 4% a aproximadamente el 6%.
En algunas realizaciones, los ácidos triterpenoicos pueden comprender de aproximadamente el 1% a aproximadamente el 80% de los ingredientes activos totales de la composición. En algunas realizaciones, los ácidos triterpenoicos pueden comprender de aproximadamente el 10% a aproximadamente el 80% de los ingredientes activos totales de la composición. En algunas realizaciones, los ácidos triterpenoicos pueden comprender de aproximadamente el 20% a aproximadamente el 80% de los ingredientes activos totales de la composición. En algunas realizaciones, los ácidos triterpenoicos pueden comprender de aproximadamente el 30% a aproximadamente el 70% de los ingredientes activos totales de la composición. En algunas realizaciones, los ácidos triterpenoicos pueden comprender de aproximadamente el 35% a aproximadamente el 65% de los ingredientes activos totales de la composición. En algunas realizaciones, los ácidos triterpenoicos pueden comprender de aproximadamente el 40% a aproximadamente el 60% de los ingredientes activos totales de la composición.
En algunas realizaciones, los ácidos triterpenoicos pueden comprender de aproximadamente el 0,01% a aproximadamente el 80% de la composición total. En algunas realizaciones, los ácidos triterpenoicos pueden comprender de aproximadamente el 0,01% a aproximadamente el 50% de la composición total. En algunas realizaciones, los ácidos triterpenoicos pueden comprender de aproximadamente el 0,01% a aproximadamente el 10% de la composición total. En algunas realizaciones, los ácidos triterpenoicos pueden comprender de aproximadamente el 0,1% a aproximadamente el 10% de la composición total. En algunas realizaciones, los ácidos triterpenoicos pueden comprender de aproximadamente el 0,5% a aproximadamente el 4% de la composición total. En algunas realizaciones, los ácidos triterpenoicos pueden comprender de aproximadamente el 1% a aproximadamente el 3,5% de la composición total. En algunas realizaciones, los ácidos triterpenoicos pueden comprender de aproximadamente el 1,5% a aproximadamente el 3% de la composición total. En algunas realizaciones, los ácidos triterpenoicos pueden comprender de aproximadamente el 1,75% a aproximadamente el 2,75% de la composición total. En algunas realizaciones, los ácidos triterpenoicos pueden comprender de aproximadamente el 2% a aproximadamente el 2,5% de la composición total.
En algunas realizaciones, los triterpenoides neutros pueden comprender de aproximadamente el 1% a aproximadamente el 80% de los ingredientes activos totales de la composición. En algunas realizaciones, los triterpenoides neutros pueden comprender de aproximadamente el 10% a aproximadamente el 80% de los ingredientes activos totales de la composición. En algunas realizaciones, los triterpenoides neutros pueden comprender de aproximadamente el 20% a aproximadamente el 80% de los ingredientes activos totales de la composición. En algunas realizaciones, los triterpenoides neutros pueden comprender de aproximadamente el 30% a aproximadamente el 70% de los ingredientes activos totales de la composición. En algunas realizaciones, los triterpenoides neutros pueden comprender de aproximadamente el 35% a aproximadamente el 65% de los ingredientes activos totales de la composición. En algunas realizaciones, los triterpenoides neutros pueden comprender de aproximadamente el 40% a aproximadamente el 60% de los ingredientes activos totales de la composición.
En algunas realizaciones, los triterpenoides neutros pueden comprender de aproximadamente el 0,01% a aproximadamente el 80% de la composición total. En algunas realizaciones, los triterpenoides neutros pueden comprender de aproximadamente el 0,01% a aproximadamente el 50% de la composición total. En algunas realizaciones, los triterpenoides neutros pueden comprender de aproximadamente el 0,01% a aproximadamente el 10% de la composición total. En algunas realizaciones, los triterpenoides neutros pueden comprender de aproximadamente el 0,1% a aproximadamente el 10% de la composición total. En algunas realizaciones, los triterpenoides neutros pueden comprender de aproximadamente el 0,5% a aproximadamente el 4% de la composición total. En algunas realizaciones, los triterpenoides neutros pueden comprender de aproximadamente el 1% a aproximadamente el 3,5% de la composición total. En algunas realizaciones, los triterpenoides neutros pueden comprender de aproximadamente el 1,5% a aproximadamente el 3% de la composición total. En algunas realizaciones, los triterpenoides neutros pueden comprender de aproximadamente el 1,75% a aproximadamente el 2,75% de la composición total. En algunas realizaciones, los triterpenoides neutros pueden comprender de aproximadamente el 2% a aproximadamente el 2,5% de la composición total.
Las combinaciones incluyen por lo menos MDA e IMDA como ácidos triterpenoicos y por lo menos NF-1 y NF-2 como triterpenoides neutros.
En algunas realizaciones, las combinaciones incluyen por lo menos MDA e IMDA como ácidos triterpenoicos y por lo menos NF-1, NF-2, NF-3 y NF-4 como triterpenoides neutros. En algunas realizaciones, las combinaciones incluyen por lo menos MDA e IMDA como ácidos triterpenoicos y por lo menos NF-1, NF-2, NF-3, NF-4, NF-A, NF-B, NF-P como triterpenoides neutros. En algunas realizaciones, las combinaciones incluyen por lo menos MdA e IMDA como ácidos triterpenoicos y por lo menos NF-1, NF-2, NF-3, NF-4, NF-A y NF-B como triterpenoides neutros. En algunas realizaciones, las combinaciones incluyen por lo menos MDA, MLA, IMDA e IMLA como ácidos triterpenoicos y por lo menos NF-1, NF-2, NF-3 y NF-4 como triterpenoides neutros. En algunas realizaciones, las combinaciones incluyen por lo menos MDA, MLA, IMDA e IMLA como ácidos triterpenoicos y por lo menos NF-1, NF-2, NF-3, NF-4, NF-A, NF-B y NF-P como triterpenoides neutros. En algunas realizaciones, las combinaciones incluyen por lo menos MDA, MLA, IMDA e IMLA como ácidos triterpenoicos y por lo menos NF-1, NF-2, NF-3, NF-4, NF-A y NF-B como triterpenoides neutros.. Tales composiciones presentan inesperadamente un efecto sinérgico, por lo que la combinación de compuestos muestra un efecto terapéutico notablemente mejorado en el tratamiento de afecciones, como la enfermedad de Alzheimer (EA) y las enfermedades de Parkinson (EP).
En algunas realizaciones, el triterpenoide neutro adicional comprende por lo menos un triterpenoide neutro adicional. En algunas realizaciones, el triterpenoide neutro adicional se selecciona del grupo que consiste de NF-3, NF-4, NF-A, NF-B y NF-P. En algunas realizaciones, el triterpenoide neutro adicional se selecciona del grupo que consiste de NF-3, NF-4, NF-A y NF-B. Cada posibilidad es una realización separada. En algunas realizaciones, el triterpenoide neutro adicional se selecciona del grupo que consiste de NF-3, NF-4, NF-A, NF-B y NF-P. En algunas realizaciones, el triterpenoide neutro adicional se selecciona del grupo que consiste de NF-3, NF-4, NF-A y NF-B. En algunas realizaciones, el triterpenoide neutro adicional se selecciona del grupo que consiste de NF-3, NF-4, NF-A, NF-B y NF-P. En algunas realizaciones, el triterpenoide neutro adicional se selecciona del grupo que consiste de NF-3, NF-4, NF-A y NF-B. En algunas realizaciones, el triterpenoide neutro adicional se selecciona del grupo que consiste de NF-3, NF-4, NF-A, NF-B y NF-P. En algunas realizaciones, el triterpenoide neutro adicional se selecciona del grupo que consiste de NF-3, NF-4, NF-A y NF-B. En algunas realizaciones, el triterpenoide neutro adicional se selecciona de NF-3 y Tirucallol NF-4. Varias combinaciones de algunos de estos compuestos muestran un efecto sinérgico inesperado en el tratamiento de la enfermedad de Alzheimer (EA), las enfermedades de Parkinson (EP).
En algunas realizaciones, se proporciona una composición que comprende NF-1 y NF-2, además de MDA e IMDA; y por lo menos uno de NF-3 y NF-4.
En algunas realizaciones, se proporciona una composición que comprende NF-1 y NF-2, además de MDA e IMDA y por lo menos uno de NF-3, NF-4, NF-A, NF-B y NF-P.
En algunas realizaciones, se proporciona una composición que comprende NF-1 y NF-2, además de MDA e IMDA y por lo menos uno de NF-3, NF-4, NF-A y NF-B.
En algunas realizaciones, se proporciona una composición que comprende NF-1 y NF-2, además de MDA e IMDA.
En algunas realizaciones, la composición puede incluir no más de 15 triterpenoides. En algunas realizaciones, la composición puede incluir no más de 14 triterpenoides. En algunas realizaciones, la composición puede incluir no más de 13 triterpenoides. En algunas realizaciones, la composición puede incluir no más de 12 triterpenoides. En algunas realizaciones, la composición puede incluir no más de 11 triterpenoides. En algunas realizaciones, la composición puede incluir no más de 10 triterpenoides. En algunas realizaciones, la composición puede incluir no más de 9 triterpenoides. En algunas realizaciones, la composición puede incluir no más de 8 triterpenoides. En algunas realizaciones, la composición puede incluir no más de 7 triterpenoides. En algunas realizaciones, la composición puede incluir no más de 6 triterpenoides.
En algunas realizaciones, la combinación puede incluir además un portador farmacéuticamente aceptable. En algunas realizaciones, la composición comprende además por lo menos un triterpenoide neutro seleccionado del grupo que consiste de: 3-beta-hidroxi-13-alfa-malabarica-14(26),17E,21-trieno, 20-hidroxi-lupan-3-ona, 28-Nor-17-hidroxilupen-3-ona, 28-oxo-lupen-3-ona, 28-nor-beta-amirona, aldehído isomasticadienónico, isomasticadienediol, aldehído oleanólico (28-oxo-beta-amirina), 3-beta-20-dihidroxilupano, aldehído masticadienónico, 3-oxo-malabarica-14(26),17E,21-trieno. Cada posibilidad es una realización separada de la invención.
En algunas realizaciones, la composición comprende además por lo menos un triterpenoide neutro seleccionado del grupo que consiste de: 3-beta-hidroxi-13-alfa-malabarica-14(26),17E,21-trieno, 20-hidroxi-lupan-3-ona, 28-Nor-17-hidroxilupen-3-ona, 28-oxo-lupen-3-ona, 28-nor-beta-amirona, aldehído isomasticadienónico, isomasticadienediol, masticadienediol, aldehído oleanólico (28-oxo-beta-amirina), 3-beta-20-dihidroxilupano, aldehído masticadienónico, 3-oxo-malabarica-14(26),17E,21-trieno. Cada posibilidad es una realización separada de la invención.
El IMDA y el MDA pueden estar presentes en una proporción de aproximadamente 1:1 p/p.
En algunas realizaciones, en una composición que comprende más de un ácido triterpenoico, y si está presente en dicha composición, el MDA, IMDA, MLA IMLA están presentes en una proporción de aproximadamente 1:1:0,2:0,2 (5:5:1:1) p/p respectivamente.
En algunas realizaciones, si están presentes en dicha composición, el IMDA, MDA, NF-1, NF-2, NF-3 y NF-4 están presentes en una proporción de aproximadamente 1:1:0,5:0,5:0,5:0,33 (6:6:3:3:3:2) p/p respectivamente.
En algunas realizaciones, si están presentes en dicha composición, el IMDA, MDA, NF-1, NF-2, NF-3, NF-4, NF-P, NF-A y NF-B están presentes en una proporción de aproximadamente 1:1:0,5:0,5:0,5:0,33:0,33:0,25:0,25 (12:12:6:6:6:4:4:3:3) p/p respectivamente.
En algunas realizaciones, si están presentes en dicha composición, el IMDA, MDA, NF-1, NF-2, NF-3, NF-4, NF-A y NF-B están presentes en una proporción de aproximadamente 1:1:0,5:0,5:0,5:0,33:0,25:0,25 (12:12:6:6:6:4:4:3:3) p/p respectivamente.
En algunas realizaciones, si están presentes en dicha composición, el IMDA, MDA, NF-1 y NF-2 están presentes en una proporción de aproximadamente 1:1:0,5:0,5 (2:2:1:1) p/p, respectivamente.
En algunas realizaciones, si están presente en dicha composición, el IMDA, MDA, OA, ácido 3-O-acetilmasticadienólico, ácido 3-O-acetil-isomasticadienólico, NF-1 y NF-2 están presentes en una proporción de aproximadamente 2:2:0,75:0,75:1,5:1:1:1:0,67 p/p respectivamente.
En algunas realizaciones, si están presentes en dicha composición, el NF-1, NF-2, NF-3 y NF-4 están presentes en una proporción de aproximadamente 1:1:1:0,67 (3:3:3:2) p/p respectivamente.
En algunas realizaciones, si están presentes en dicha composición, el NF-1, NF-2, NF-3, NF-4, NF-P, NF-A y NF-B están presentes en una proporción de aproximadamente 1:1:1:0,67:0,67:0,5:0,5 (6:6:6:4:4:3:3) respectivamente.
En algunas realizaciones, si están presentes en dicha composición, el NF-1, NF-2, NF-3, NF-4, NF-A y NF-B están presentes en una proporción de aproximadamente 1:1:1:0,67:0,5:0,5 (6:6:6:4:4:3:3) respectivamente.
En algunas realizaciones, la composición comprende además por lo menos un triterpenoide neutro adicional seleccionado del grupo que consiste de: Beta-amirona, Beta-amirina y Germanicol. Cada posibilidad es una realización separada de la invención.
En algunas realizaciones, la combinación puede comprender además por lo menos un ácido triterpenoico adicional seleccionado del grupo que consiste de: ácido oleanólico, ácido ursónico y ácido ursólico. Cada posibilidad es una realización separada de la invención.
En algunas realizaciones, el o los ácidos triterpenoicos pueden obtenerse de una fuente vegetal. En algunas realizaciones, cualquiera de los ácidos triterpenoicos puede obtenerse de una fuente vegetal. En algunas realizaciones, puede obtenerse por lo menos un ácido triterpenoico de una fuente vegetal. En algunas realizaciones, el o los triterpenoides neutros pueden obtenerse de una fuente vegetal. En algunas realizaciones, cualquiera de los triterpenoides neutros puede obtenerse de una fuente vegetal. En algunas realizaciones, puede obtenerse por lo menos un triterpenoide neutro de una fuente vegetal. En algunas realizaciones, la fuente vegetal puede incluir goma de mástique.
En algunas realizaciones, cualquiera de los ácidos triterpenoicos y/o el triterpenoide neutro puede aislarse de una fuente natural o puede ser el producto de una síntesis química. En algunas realizaciones, los ácidos triterpenoicos y/o los triterpenoides neutros pueden aislarse de una fuente natural o pueden ser el producto de una síntesis química.
En algunas realizaciones, cualquiera de los ácidos triterpenoicos y triterpenoides neutros puede ser el producto de una reacción bioquímica o un producto producido por un organismo microbiano. En algunas realizaciones, cualquiera de los ácidos triterpenoicos y triterpenoides neutros puede ser el producto de un proceso de fermentación. En algunas realizaciones, cualquiera de los ácidos triterpenoicos y triterpenoides neutros puede producirse mediante una combinación de una síntesis química y una reacción bioquímica. En algunas realizaciones, cualquiera de los ácidos triterpenoicos y triterpenoides neutros puede producirse mediante una combinación de una síntesis química y un proceso de fermentación. En algunas realizaciones, cualquiera de los ácidos triterpenoicos y triterpenoides neutros puede producirse mediante una combinación de cualquiera de las opciones indicadas anteriormente. En caso de reacción bioquímica o proceso microbiano, el agente bioquímico y el agente microbiano pueden ser agentes de origen natural o pueden ser agentes modificados que no se encuentran de manera natural. La modificación de estos agentes puede haberse logrado usando métodos bioquímicos modernos como, por ejemplo, ingeniería genética. Tales agentes bioquímicos y agentes microbianos que no se encuentran de manera natural también pueden haber sido creados usando métodos de biología sintética.
En algunas realizaciones, la obtención de una fuente natural puede incluir el aislamiento de una fuente natural. En algunas realizaciones, el aislamiento de la fuente natural puede incluir el aislamiento como compuesto o compuestos individuales o como grupo o grupos de compuestos. En algunas realizaciones, la fuente natural puede incluir un material vegetal seleccionado del grupo que consiste de una resina, una goma, hojas, ramitas, raíces, flores, semillas, brotes, cortezas, nueces y raíces. Cada posibilidad es una realización separada. En algunas realizaciones, la fuente natural puede incluir una resina extraída de por lo menos una planta. En algunas realizaciones, la fuente natural puede incluir goma de mástique.
En algunas realizaciones, la fuente natural puede incluir por lo menos una planta. En algunas realizaciones, la planta puede clasificarse en la familia Anacardiaceae. En algunas realizaciones, la planta puede comprender por lo menos una planta clasificada en el género/géneros Pistacia y/o Schinus. En algunas realizaciones, la Pistacia puede incluir especies seleccionadas del grupo que consiste de P. lentiscus, P. lentiscus Latifolia Coss, P. lentiscus var. Chia, P. atlantica, P. palestina, P. saportae, P. terebinthus, P. vera P. integerrima, P y. lentiscus L. Cada posibilidad es una realización separada. En algunas realizaciones, la Pistacia puede incluir la especie Pistacia lentiscus L. En algunas realizaciones, la Schinus puede incluir la especie S. molle. En algunas realizaciones, la Pistacia puede incluir la especie Pistacia Lentiscus var. Chia.
En algunas realizaciones, los triterpenoides pueden obtenerse mediante un proceso que comprende o consiste de una o más de los pasos de:
(a) tratar la goma de mástique con un solvente orgánico polar;
(b) aislar una fracción soluble en dicho solvente orgánico polar;
(c) eliminar opcionalmente dicho solvente orgánico polar;
(d) tratar la fracción soluble obtenida en el paso (b) o (c) con un solvente orgánico no polar;
(e) aislar una fracción soluble en dicho solvente orgánico no polar;
(f) eliminar opcionalmente dicho solvente orgánico no polar;
(g) disolver la fracción obtenida en el paso (f) en un primer solvente orgánico;
(h) tratar la solución obtenida en el paso (g) o (e) con una solución acuosa básica para obtener una fracción acuosa básica que contiene ácidos triterpenoicos en forma de sal desprotonada y una fase intermedia oleosa o en emulsión además de la primera solución orgánica que contiene triterpenoides neutros;
(i) separar dicha fracción acuosa básica y la fase intermedia oleosa/en emulsión de la primera solución orgánica (j) acidificar la fracción acuosa básica y la emulsión obtenidas en el paso (i) con un ácido;
(k) extraer la fracción acidificada obtenida en el paso (j) con un segundo solvente orgánico;
(l) opcionalmente poner en contacto la fracción orgánica obtenida en el paso (k) con un agente secante;
(m) eliminar el segundo solvente orgánico, el agente secante y/o el exceso de ácido de la fracción obtenida en cualquiera de los pasos (j), (k) o (l) proporcionando de este modo una fracción ácida aislada;
(n) tomar la primera solución orgánica del paso (i), poniéndola opcionalmente en contacto con un agente secante; y
(o) eliminar el primer solvente orgánico y el agente secante proporcionando de este modo una fracción neutra aislada.
Los ácidos triterpenoicos individuales pueden obtenerse mediante separación cromatográfica de la fracción ácida aislada obtenida en el paso (m). Los triterpenoides neutros individuales pueden obtenerse mediante separación cromatográfica de la fracción neutra aislada obtenida en el paso (o).
Los ácidos triterpenoicos y los triterpenoides neutros obtenidos individualmente pueden mezclarse luego según se requiera para obtener las composiciones farmacéuticas deseadas.
En algunas realizaciones, la composición comprende además por lo menos un ácido triterpenoico adicional. En algunas realizaciones, el ácido triterpenoico adicional se selecciona del grupo que consiste de MLA, IMLA, ácido 3-O-acetil masticadienólico, ácido 3-O-acetil epimasticadienólico, ácido 3-O-acetil isomasticadienólico, ácido 3-O-acetil epi-isomasticadienólico, OA, MA y combinaciones de los mismos.
En algunas realizaciones, la composición comprende por lo menos dos ácidos triterpenoicos adicionales. En algunas realizaciones, la composición comprende por lo menos tres ácidos triterpenoicos adicionales. En algunas realizaciones, la composición comprende por lo menos cuatro ácidos triterpenoicos adicionales.
En algunas realizaciones, la composición comprende además por lo menos un triterpenoide neutro adicional. En algunas realizaciones, el triterpenoide neutro adicional se selecciona del grupo que consiste de NF-3, NF-4, NF-A, NF-B, NF-P y combinaciones de los mismos.
En algunas realizaciones, la composición comprende por lo menos dos triterpenoides neutros adicionales. En algunas realizaciones, la composición comprende por lo menos tres triterpenoides neutros adicionales. En algunas realizaciones, la composición comprende por lo menos cuatro triterpenoides neutros adicionales.
En algunas realizaciones, la composición comprende además por lo menos un triterpenoide neutro adicional. En algunas realizaciones, el triterpenoide neutro adicional se selecciona del grupo que consiste de NF-3, NF-4, NF-A, NF-B y combinaciones de los mismos.
En algunas realizaciones, la composición comprende además NF-P. En algunas realizaciones, por lo menos uno de los triterpenoides neutros adicionales se selecciona de NF-3, NF-4 o ambos.
En algunas realizaciones, la presente invención proporciona una composición farmacéutica que consiste esencialmente de MDA, IMDA, NF-1, NF-2, NF-3 y NF-4 como ingredientes farmacéuticamente activos; y un portador farmacéuticamente aceptable. En algunas realizaciones, la presente invención proporciona una composición farmacéutica que consiste esencialmente de MDA, IMDA, MLA, IMLA, NF-1, NF-2, NF-3, NF-4, NF-A, NF-B y NF-P como los ingredientes farmacéuticamente activos; y un portador farmacéuticamente aceptable. En algunas realizaciones, la presente invención proporciona una composición farmacéutica que consiste esencialmente de MDA, IMDA, MLA, ImLa, NF-1, NF-2, NF-3, NF-4, NF-A y NF-B como ingredientes farmacéuticamente activos; y un portador farmacéuticamente aceptable. En algunas realizaciones, la presente invención proporciona una composición farmacéutica que consiste esencialmente de MDA, IMDA, NF-1, NF-2, NF-3, NF-4, NF-A, NF-B y NF-P como ingredientes farmacéuticamente activos; y un portador farmacéuticamente aceptable. En algunas realizaciones, la presente invención proporciona una composición farmacéutica que consiste esencialmente de MDA, IMDA, NF-1, nF-2, NF-3, NF-4, NF-A y NF-B como ingredientes farmacéuticamente activos; y un portador farmacéuticamente aceptable. En algunas realizaciones, la presente invención proporciona una composición farmacéutica que consiste esencialmente de MA, OA, MDA, IMDA ácido 3-O-acetil masticadienólico, ácido 3-O-acetil isomasticadienólico, MLA, IMLA, NF-1, NF-2, NF-3 y NF-4 como ingredientes farmacéuticamente activos; y un portador farmacéuticamente aceptable. En algunas realizaciones, la presente invención proporciona una composición farmacéutica que consiste esencialmente de MA, OA, MDA, IMDA, ácido 3-O-acetil masticadienólico, ácido 3-O-acetil isomasticadienólico, MLA, IMLA, NF-1, NF-2, NF-3, NF-4, NF-A, NF-B y NF-P como ingredientes farmacéuticamente activos; y un portador farmacéuticamente aceptable. En algunas realizaciones, la presente invención proporciona una composición farmacéutica que consiste esencialmente de MA, OA, MDA, IMDA, ácido 3-O-acetil masticadienólico, ácido 3-O-acetil isomasticadienólico, MLA, IMLA, NF-1, NF-2, NF-3, NF-4, NF-A y NF-B como ingredientes farmacéuticamente activos; y un portador farmacéuticamente aceptable. En algunas realizaciones, se proporciona una composición farmacéutica que comprende ingredientes farmacéuticamente activos que consisten esencialmente de MA, OA, MDA, IMDA, ácido 3-O-acetil masticadienólico, ácido 3-O-acetil isomasticadienólico, NF-1, NF-2, NF -3, NF-4, NF-A y NF-B; y un portador farmacéuticamente aceptable. En algunas realizaciones, se proporciona una composición farmacéutica que comprende ingredientes farmacéuticamente activos que consisten esencialmente de MA, OA, MDA, IMDA, ácido 3-O-acetil masticadienólico, ácido 3-O-acetil isomasticadienólico, NF-1, NF-2, NF-3 y NF -4; y un portador farmacéuticamente aceptable. En algunas realizaciones, se proporciona una composición farmacéutica que comprende ingredientes farmacéuticamente activos que consisten esencialmente de OA, MDA, IMDA, ácido 3-O-acetil masticadienólico, ácido 3-O-acetil isomasticadienólico, NF-1, NF-2, NF-3, NF-4, NF-A y NF-B; y un portador farmacéuticamente aceptable. En algunas realizaciones, se proporciona una composición farmacéutica que comprende ingredientes farmacéuticamente activos que consisten esencialmente de OA, MDA, IMDA, ácido 3-O-acetil masticadienólico, ácido 3-O-acetil isomasticadienólico, NF-1, NF-2, NF-3 y NF-4; y un portador farmacéuticamente aceptable. En algunas realizaciones, se proporciona una composición farmacéutica que comprende ingredientes farmacéuticamente activos que consisten esencialmente de MDA, IMDA, NF-1, NF-2; y un portador farmacéuticamente aceptable. En algunas realizaciones, se proporciona una composición farmacéutica que comprende ingredientes farmacéuticamente activos que consisten esencialmente de MDA, IMDA, NF-1, NF-2, NF-3, NF-4, NF-A y NF-B como los únicos ingredientes farmacéuticamente activos.; y un portador farmacéuticamente aceptable. En algunas realizaciones, se proporciona una composición farmacéutica que comprende ingredientes farmacéuticamente activos que consisten esencialmente de MDA, IMDA, NF-1, NF-2, NF-3 y NF-4 como los únicos ingredientes farmacéuticamente activos; y un portador farmacéuticamente aceptable. En algunas realizaciones, se proporciona una composición farmacéutica que comprende ingredientes farmacéuticamente activos que consisten esencialmente de MDA, IMDA, NF-1 y NF-2 como los únicos ingredientes farmacéuticamente activos; y un portador farmacéuticamente aceptable.
Cualquiera de los ácidos triterpenoicos, triterpenoides neutros, ácidos triterpenoicos adicionales y/o triterpenoides neutros adicionales puede aislarse de una fuente natural como goma de mástique, o puede ser el producto de una síntesis química.
En algunas realizaciones, cualquiera del MDA, IMDA, MLA, IMLA, ácido 3-O-acetil masticadienólico, ácido 3-O-acetil epimasticadienólico, ácido 3-O-acetil isomasticadienólico, ácido 3-O-acetil epi-isomasticadienólico, OA, MA, NF-1, NF-2, NF-3, NF-4, NF-A, NF-B) y NF-P puede ser el producto de una síntesis química. En algunas realizaciones, cualquiera del por lo menos un ácido triterpenoico y del por lo menos un triterpenoide neutro puede ser un producto de una síntesis química.
En algunas realizaciones, cualquiera del MDA, IMDA, MLA, IMLA, ácido 3-O-acetil masticadienólico, ácido 3-O-acetil epimasticadienólico, ácido 3-O-acetil isomasticadienólico, ácido 3-O-acetil epi-isomasticadienólico, OA, MA, NF-1, NF-2, NF-3, NF-4, NF-A y NF-B puede ser producto de una síntesis química. En algunas realizaciones, cualquiera del por lo menos un ácido triterpenoico y del por lo menos un triterpenoide neutro puede ser un producto de una síntesis química.
Las especies vegetales útiles para obtener las composiciones de la invención incluyen, sin limitación, las del género Pistacia. Las especies útiles de Pistacia incluyen, sin limitación, P. lentiscus, P. lentiscus latifolius Coss., P.lentiscus var. Chia, P. atlantica, P. palestina, P. saportae, P. terebinthus, P. vera y P. integerrima.
Los métodos analíticos para determinar la estructura química precisa de los ácidos triterpenoicos y los triterpenoides neutros incluyen resonancia magnética nuclear (por ejemplo, 1H-NMR y 13C-NMR), varios métodos de espectrometría de masas (por ejemplo, MALDI-TOF), HPLC, métodos de combinación como como cromatografía líquida-espectrometría de masas (LC-MS; LC-MS/MS, espectrometría UV-VIS, espectrometría IR y FT-IR y otros métodos conocidos en la técnica.
En algunas realizaciones, el ácido triterpenoico adicional puede incluir ácido masticadienólico (MLA), ácido isomasticadienólico (IMLA), ácido 3-O-acetil masticadienólico, ácido 3-O-acetil epimasticadienólico, ácido 3-O-acetil isomasticadienólico, ácido 3-O-acetil epi-isomasticadienólico, ácido oleanónico (OA), ácido morónico (MA) o cualquier combinación de los mismos. En algunas realizaciones, el triterpenoide neutro adicional puede incluir aldehído oleanónico (NF-3), tirucallol (NF-4), 28-hidroxilup-20(29)-en-3-ona (NF-A), 28-hidroxi-beta-amirona (NF-B), 20-hidroximadammar-24-en-3-ona (NF-P) o cualquier combinación de los mismos.
En algunas realizaciones, el por lo menos un ácido triterpenoico adicional puede incluir ácido masticadienólico (MLA), ácido isomasticadienólico (IMLA), ácido 3-O-acetil masticadienólico, ácido 3-O-acetil epimasticadienólico, ácido 3-O-acetil isomasticadienólico, ácido 3-O-acetil epi-isomasticadienólico, ácido oleanónico (OA), ácido morónico (MA) o cualquier combinación de los mismos. En algunas realizaciones, el triterpenoide neutro adicional puede incluir aldehído oleanónico (NF-3), tirucallol (NF-4), 28-hidroxilup-20(29)-en-3-ona (NF-A), 28-hidroxi-beta-amirona (NF-B) o cualquier combinación de los mismos.
En algunas realizaciones, el ácido triterpenoico incluye por lo menos ácido masticadienónico (MDA), ácido isomasticadienónico (IMDA), ácido masticadienólico (MLA) y ácido isomasticadienólico (IMLA).
En algunas realizaciones, el ácido triterpenoico puede incluir por lo menos ácido masticadienónico (MDA), ácido isomasticadienónico (IMDA), ácido masticadienólico (MLA) y ácido isomasticadienólico (IMLA). En algunas realizaciones, el ácido triterpenoico puede incluir por lo menos ácido masticadienónico (MDA), ácido isomasticadienónico (IMDA), ácido 3-O-acetil masticadienólico (3-OAc-MLA) y ácido 3-O-acetil isomasticadienólico (3-OAc-IMLA). En algunas realizaciones, el ácido triterpenoico puede incluir por lo menos ácido masticadienónico (MDA), ácido isomasticadienónico (IMDA), ácido 3-O-acetil epimasticadienólico (3-OAc-epi-MLA) y ácido 3-O-acetil epiisomasticadienólico (3- OAc-epi-IMLA). En algunas realizaciones, el ácido triterpenoico puede incluir por lo menos ácido masticadienónico (MDA), ácido isomasticadienónico (IMDA), ácido 3-O-acetil masticadienólico (3-OAc-MLA), ácido 3-O-acetil isomasticadienólico (3-OAc- IMLA), ácido 3-O-acetil epimasticadienólico (3-OAc-epi-MLA) y ácido 3-O-acetil epiisomasticadienólico (3-OAc-epi-IMLA). En algunas realizaciones, el triterpenoide neutro puede incluir por lo menos NF-1, NF-2, NF-3 y NF-4. En algunas realizaciones, el triterpenoide neutro puede incluir por lo menos NF-1, NF-2, NF-3, NF-4, NF-A y NF-B. En algunas realizaciones, el triterpenoide neutro puede incluir por lo menos NF-1, NF-2 y NF-4. En algunas realizaciones, el triterpenoide neutro puede incluir por lo menos NF-2, NF-3 y NF-4. En algunas realizaciones, el triterpenoide neutro puede incluir por lo menos NF-1, NF-2 y NF-3. En algunas realizaciones, el triterpenoide neutro puede incluir por lo menos NF-1, NF-2, NF-A y NF-B. En algunas realizaciones, el triterpenoide neutro puede incluir por lo menos NF-1, NF-2 y NF-A. En algunas realizaciones, el triterpenoide neutro puede incluir por lo menos NF-1, NF-2 y NF-B.
En algunas realizaciones, los triterpenoides neutros consisten esencialmente de no más de siete triterpenoides neutros. En algunas realizaciones, los triterpenoides neutros consisten esencialmente de no más de seis triterpenoides neutros. En algunas realizaciones, los triterpenoides neutros consisten esencialmente de no más de cinco triterpenoides neutros. En algunas realizaciones, los triterpenoides neutros consisten esencialmente de no más de cuatro triterpenoides neutros.
En algunas realizaciones, los triterpenoides neutros adicionales consisten esencialmente de no más de seis triterpenoides neutros. En algunas realizaciones, los triterpenoides neutros adicionales consisten esencialmente de no más de cinco triterpenoides neutros. En algunas realizaciones, los triterpenoides neutros adicionales consisten esencialmente de no más de cuatro triterpenoides neutros. En algunas realizaciones, los triterpenoides neutros adicionales consisten esencialmente de no más de tres triterpenoides neutros. En algunas realizaciones, los triterpenoides neutros adicionales consisten esencialmente de no más de dos triterpenoides neutros.
En algunas realizaciones, los ácidos triterpenoicos consisten esencialmente de no más de ocho ácidos triterpenoicos. En algunas realizaciones, los ácidos triterpenoicos consisten esencialmente de no más de siete ácidos triterpenoicos. En algunas realizaciones, los ácidos triterpenoicos consisten esencialmente de no más de seis ácidos triterpenoicos. En algunas realizaciones, los ácidos triterpenoicos consisten esencialmente de no más de cinco ácidos triterpenoicos. En algunas realizaciones, los ácidos triterpenoicos consisten esencialmente de no más de cuatro ácidos triterpenoicos. En algunas realizaciones, los ácidos triterpenoicos consisten esencialmente de no más de tres ácidos triterpenoicos. En algunas realizaciones, los ácidos triterpenoicos consisten esencialmente de no más de dos ácidos triterpenoicos.
En algunas realizaciones, la composición consiste esencialmente de no más de 15 triterpenoides. En algunas realizaciones, la composición consiste esencialmente de no más de 14 triterpenoides. En algunas realizaciones, la composición consiste esencialmente de no más de 13 triterpenoides. En algunas realizaciones, la composición consiste esencialmente de no más de 12 triterpenoides. En algunas realizaciones, la composición consiste esencialmente de no más de 11 triterpenoides. En algunas realizaciones, la composición consiste esencialmente de no más de 10 triterpenoides. En algunas realizaciones, la composición consiste esencialmente de no más de 9 triterpenoides. En algunas realizaciones, la composición consiste esencialmente de no más de 8 triterpenoides. En algunas realizaciones, la composición consiste esencialmente de no más de 7 triterpenoides. En algunas realizaciones, la composición consiste esencialmente de no más de 6 triterpenoides.
Las composiciones divulgadas en la presente muestran inesperadamente un efecto sinérgico, por lo que la combinación de compuestos muestra un efecto terapéutico notablemente mejorado en el tratamiento de la enfermedad de Alzheimer (EA), enfermedades de Parkinson (EP).
En algunas realizaciones, la composición comprende por lo menos cuatro ácidos triterpenoicos que son MDA e IMDA, y se seleccionan además de MLA, IMLA, OA, MA, ácido 3-O-acetil masticadienólico, ácido 3-O-acetil epimasticadienólico, ácido 3-O-acetil isomasticadienólico y ácido 3-O-acetil epi-isomasticadienólico. En algunas realizaciones, la composición comprende por lo menos cuatro ácidos triterpenoicos que son MDA e IMDA, y se seleccionan además de MLA, IMLA, OA, MA, ácido 3-O-acetil masticadienólico y ácido 3-O-acetil isomasticadienólico. En algunas realizaciones, la composición comprende por lo menos MDA, IMDA, MLA e IMLA.
En algunas realizaciones, la composición comprende por lo menos NF-1, NF-2 y NF-4.
En algunas realizaciones, la composición comprende por lo menos cuatro triterpenoides neutros que son NF-1 y NF-2, y se seleccionan además de NF-3, n F-4, NF-A, NF-B, NF-P, 3-beta -hidroxi-13-alfa-malabarica-14(26),17E,21-trieno, 20-hidroxi-lupan-3-ona, 28-Nor-17-hidroxilupen-3-ona, 28-oxo-lupen-3-ona, 28-nor-betaamirona, aldehído isomasticadienónico, isomasticadienediol, masticadienediol, aldehído oleanólico (28-oxo-betaamirina), 3-beta-20-dihidroxilupano, aldehído masticadienónico, 3-oxo-malabarica-14(26),17E,21-trieno, Betaamirona, Beta-amirina y Germanicol. Cada posibilidad es una realización separada. En algunas realizaciones, la composición comprende por lo menos cuatro triterpenoides neutros que son NF-1 y NF-2, y que se seleccionan además de NF-3, NF-4, NF-A, NF-B, 3-beta-hidroxi 13-alfa-malabarica-14(26),17E,21-trieno, 20-hidroxi-lupan-3-ona, 28-Nor-17-hidroxilupen-3-ona, 28-oxo-lupen-3-ona, 28-nor-beta-amirona, aldehído isomasticadienónico, isomasticadienediol, masticadienediol, aldehído oleanólico (28-oxo-beta-amirina), 3-beta-20-dihidroxilupano, aldehído masticadienónico, 3-oxo-malabarica-14(26),17E,21-trieno, beta-amirona, beta-amirina y germanicol. Cada posibilidad es una realización separada. En algunas realizaciones, la composición comprende por lo menos cuatro triterpenoides neutros que son NF-1 y NF-2, y se seleccionan además de NF-3, NF-4, NF-A y NF-B. En algunas realizaciones, la composición comprende por lo menos cuatro triterpenoides neutros que son NF-1 y NF-2, y se seleccionan además de NF-3, NF-4, NF-A, NF-B y NF-P. En algunas realizaciones, la composición comprende por lo menos NF-1, NF-2, NF-3 y n F-4.
En algunas realizaciones, las combinaciones de ácidos triterpenoicos y triterpenoides neutros pueden estar sustancialmente desprovistas de aceites esenciales.
En algunas realizaciones, los ácidos triterpenoicos pueden comprender de aproximadamente el 1% a aproximadamente el 80% de los ingredientes activos totales de la composición. En algunas realizaciones, los ácidos triterpenoicos pueden comprender de aproximadamente el 10% a aproximadamente el 80% de los ingredientes activos totales de la composición. En algunas realizaciones, los ácidos triterpenoicos pueden comprender de aproximadamente el 20% a aproximadamente el 80% de los ingredientes activos totales de la composición. En algunas realizaciones, los ácidos triterpenoicos pueden comprender de aproximadamente el 30% a aproximadamente el 70% de los ingredientes activos totales de la composición. En algunas realizaciones, los ácidos triterpenoicos pueden comprender de aproximadamente el 35% a aproximadamente el 65% de los ingredientes activos totales de la composición. En algunas realizaciones, los ácidos triterpenoicos pueden comprender de aproximadamente el 40% a aproximadamente el 60% de los ingredientes activos totales de la composición.
En algunas realizaciones, los ácidos triterpenoicos pueden comprender de aproximadamente el 0,01% a aproximadamente el 80% de la composición total. En algunas realizaciones, los ácidos triterpenoicos pueden comprender de aproximadamente el 0,01% a aproximadamente el 50% de la composición total. En algunas realizaciones, los ácidos triterpenoicos pueden comprender de aproximadamente el 0,01% a aproximadamente el 10% de la composición total. En algunas realizaciones, los ácidos triterpenoicos pueden comprender de aproximadamente el 0,1% a aproximadamente el 10% de la composición total. En algunas realizaciones, los ácidos triterpenoicos pueden comprender de aproximadamente el 0,5% a aproximadamente el 4% de la composición total. En algunas realizaciones, los ácidos triterpenoicos pueden comprender de aproximadamente el 0,1% a aproximadamente el 0,5% de la composición total. En algunas realizaciones, los ácidos triterpenoicos pueden comprender de aproximadamente el 0,1% a aproximadamente el 1,0% de la composición total. En algunas realizaciones, los ácidos triterpenoicos pueden comprender de aproximadamente el 0,1% a aproximadamente 2% de la composición total. En algunas realizaciones, los ácidos triterpenoicos pueden comprender de aproximadamente el 1% a aproximadamente el 3,5% de la composición total. En algunas realizaciones, los ácidos triterpenoicos pueden comprender de aproximadamente el 1,5% a aproximadamente el 3% de la composición total. En algunas realizaciones, los ácidos triterpenoicos pueden comprender de aproximadamente 1,75% a aproximadamente 2,75% de la composición total. En algunas realizaciones, los ácidos triterpenoicos pueden comprender de aproximadamente el 2% a aproximadamente el 2,5% de la composición total.
En algunas realizaciones, los triterpenoides neutros pueden comprender de aproximadamente el 1% a aproximadamente el 80% de los ingredientes activos totales de la composición. En algunas realizaciones, los triterpenoides neutros pueden comprender de aproximadamente el 10% a aproximadamente el 80% de los ingredientes activos totales de la composición. En algunas realizaciones, los triterpenoides neutros pueden comprender de aproximadamente el 20% a aproximadamente el 80% de los ingredientes activos totales de la composición. En algunas realizaciones, los triterpenoides neutros pueden comprender de aproximadamente el 30% a aproximadamente el 70% de los ingredientes activos totales de la composición. En algunas realizaciones, los triterpenoides neutros pueden comprender de aproximadamente el 35% a aproximadamente el 65% de los ingredientes activos totales de la composición. En algunas realizaciones, los triterpenoides neutros pueden comprender de aproximadamente el 40% a aproximadamente el 60% de los ingredientes activos totales de la composición.
En algunas realizaciones, los triterpenoides neutros pueden comprender de aproximadamente el 0,01% a aproximadamente el 80% de la composición total. En algunas realizaciones, los triterpenoides neutros pueden comprender de aproximadamente el 0,01% a aproximadamente el 50% de la composición total. En algunas realizaciones, los triterpenoides neutros pueden comprender de aproximadamente el 0,01% a aproximadamente el 10% de la composición total. En algunas realizaciones, los triterpenoides neutros pueden comprender de aproximadamente el 0,1% a aproximadamente el 10% de la composición total. En algunas realizaciones, los triterpenoides neutros pueden comprender de aproximadamente el 0,5% a aproximadamente el 4% de la composición total. En algunas realizaciones, el triterpenoide neutro puede comprender de aproximadamente el 0,1% a aproximadamente el 0,5% de la composición total. En algunas realizaciones, el triterpenoide neutro puede comprender de aproximadamente el 0,1% a aproximadamente el 1,0% de la composición total. En algunas realizaciones, el triterpenoide neutro puede comprender de aproximadamente el 0,1% a aproximadamente el 2% de la composición total. En algunas realizaciones, los triterpenoides neutros pueden comprender de aproximadamente el 1% a aproximadamente el 3,5% de la composición total. En algunas realizaciones, los triterpenoides neutros pueden comprender de aproximadamente el 1,5% a aproximadamente el 3% de la composición total. En algunas realizaciones, los triterpenoides neutros pueden comprender de aproximadamente el 1,75% a aproximadamente el 2,75% de la composición total. En algunas realizaciones, los triterpenoides neutros pueden comprender de aproximadamente el 2% a aproximadamente el 2,5% de la composición total.
En algunas realizaciones, la composición para su uso en la invención comprende una cantidad terapéuticamente eficaz de por lo menos un ácido triterpenoico y de por lo menos un triterpenoide neutro como se describe en la presente, y un portador farmacéuticamente aceptable. En algunas realizaciones, el portador es hidrófobo.
En algunas realizaciones, el portador farmacéuticamente aceptable puede incluir un portador hidrófobo. En algunas realizaciones, el portador hidrófobo puede incluir por lo menos un aceite. En algunas realizaciones, el aceite puede seleccionarse del grupo que consiste de un aceite mineral, un aceite vegetal y combinaciones de los mismos. En algunas realizaciones, el aceite vegetal puede seleccionarse del grupo que consiste de aceite de semilla de algodón, aceite de oliva, aceite de almendras, aceite de canola, aceite de coco, aceite de maíz, aceite de semilla de uva, aceite de cacahuete, aceite de azafrán, aceite de sésamo, aceite de soja y combinaciones de los mismos. En algunas realizaciones, el aceite vegetal es un producto disponible comercialmente que puede obtenerse como un producto de calidad "NF" (Formulario Nacional) o como un producto de calidad "USP" (Farmacopea de Estados Unidos). En algunas realizaciones, el aceite mineral puede ser un aceite mineral ligero. En algunas realizaciones, el portador hidrófobo puede incluir por lo menos una cera. En algunas realizaciones, el portador hidrófobo puede incluir una combinación de por lo menos un aceite y por lo menos una cera.
El término "aceite mineral" se refiere a un líquido transparente, incoloro, casi inodoro e insípido obtenido de la destilación del petróleo. También puede denominarse aceite blanco, aceite mineral blanco, vaselina líquida, parafina líquida o aceite de parafina blanca. En algunas realizaciones, el aceite mineral es aceite mineral ligero, un producto disponible comercialmente que puede obtenerse como un producto de grado "NF" (Formulario Nacional) o como un producto de grado "USP" (Farmacopea de Estados Unidos). Para su uso en la invención, el aceite mineral está preferiblemente libre de compuestos aromáticos y otros compuestos insaturados.
El portador farmacéuticamente aceptable puede comprender alternativamente o adicionalmente un sustituto de aceite. Los sustitutos de aceite incluyen alcanos que tienen por lo menos 10 átomos de carbono (por ejemplo, isohexadecano), ésteres de benzoato, ésteres alifáticos, ésteres no comodógenos, compuestos de silicona volátiles (por ejemplo, ciclometicona) y sustitutos de silicona volátiles. Ejemplos de ésteres de benzoato incluyen alquil C12-C15 benzoato, isoestearilo benzoato, 2-etil hexil benzoato, dipropilenglicol benzoato, octildodecil benzoato, estearil benzoato y behenil benzoato. Ejemplos de ésteres alifáticos incluyen alquil C12-C15 octonoato y maleato de dioctilo. Los ejemplos de ésteres no comodógenos incluyen isononanoato de isononilo, isononanoato de isodecilo, dilinoleato de dímero de diisoestearilo, propionato de araquidilo e isononanoato de isotridecilo.
La ciclometicona es una silicona evaporativa que puede incluirse en el portador para ayudar a que la composición sea susceptible de ser expulsada desde un dispensador de pulverización.
El portador hidrófobo puede comprender además por lo menos una cera. Las ceras incluyen, por ejemplo, cera de abejas; ceras vegetales, ceras de caña de azúcar, ceras minerales y ceras sintéticas. Las ceras vegetales incluyen, por ejemplo, cera de carnauba, candelilla, ouricury y jojoba. Las ceras minerales incluyen, por ejemplo, cera de parafina, cera de lignito, ceras microcristalinas y ozoqueritas. Las ceras sintéticas incluyen, por ejemplo, ceras de polietileno.
En la presente se divulgan varias formulaciones de las diferentes combinaciones de ácidos triterpenoicos y triterpenoides neutros y su preparación. Las composiciones farmacéuticas de la invención pueden administrarse por cualquier medio que logre su propósito pretendido. Por ejemplo, la administración puede ser, por ejemplo, por vías oral, parenteral, tópica, transdérmica como, por ejemplo, vías de administración subcutánea, intravenosa, intramuscular, intradérmica, intraperitoneal, intraarterial, intrauterina, intrauretral, intracardiaca, intracerebral, intracerebroventricular, intrarenal, intrahepática, intratendón, intraósea, intratecal, dérmica, vaginal, rectal, inhalación, intranasal, ocular, auricular y bucal.
La administración puede comprender además una técnica o medios como electroporación o sonicación para ayudar a su administración, por ejemplo, por vía transdérmica. Otras técnicas que pueden emplearse incluyen, por ejemplo, radiofrecuencia o aplicación de pulverización presurizada.
La dosificación administrada puede depender de la edad, la salud y el peso del sujeto, el uso del tratamiento concurrente, si lo hay, la frecuencia del tratamiento y la naturaleza del efecto deseado. La cantidad de triterpenoides de la presente invención en cualquier forma de dosificación unitaria comprende una cantidad terapéuticamente eficaz que puede variar dependiendo del sujeto receptor, la vía y la frecuencia de administración.
En algunas realizaciones, cuando el MA es uno de los ingredientes de la composición, la cantidad de MA de la composición total puede estar en el intervalo de aproximadamente el 0% a aproximadamente el 15%. En algunas realizaciones, la cantidad de MA de la composición total puede estar en el intervalo de aproximadamente el 0% a aproximadamente el 7,5%. En algunas realizaciones, la cantidad de MA de la composición total puede estar en el intervalo de aproximadamente el 0% a aproximadamente el 2,5%. En algunas realizaciones, la cantidad de MA de la composición total puede estar en el intervalo de aproximadamente el 0% a aproximadamente el 1%. En algunas realizaciones, la cantidad de MA de la composición total puede estar en el intervalo de aproximadamente el 0% a aproximadamente el 0,3%. En algunas realizaciones, la cantidad de MA de la composición total puede ser de aproximadamente el 0,3%. En algunas realizaciones, la cantidad de MA con respecto a la cantidad total de triterpenoides puede estar en el intervalo de aproximadamente el 0% a aproximadamente el 50%. En algunas realizaciones, la cantidad de MA con respecto a la cantidad total de triterpenoides puede estar en el intervalo de aproximadamente el 0% a aproximadamente el 25%. En algunas realizaciones, la cantidad de MA con respecto a la cantidad total de triterpenoides puede estar en el intervalo de aproximadamente el 0% a aproximadamente el 8%. En algunas realizaciones, la cantidad de MA con respecto a la cantidad total de triterpenoides puede estar en el intervalo de aproximadamente el 6% a aproximadamente el 8%.
En algunas realizaciones, cuando el OA es uno de los ingredientes de la composición, la cantidad de OA de la composición total puede estar en el intervalo de aproximadamente el 0% a aproximadamente el 25%. En algunas realizaciones, la cantidad de OA de la composición total puede estar en el intervalo de aproximadamente el 0% a aproximadamente el 10%. En algunas realizaciones, la cantidad de OA de la composición total puede estar en el intervalo de aproximadamente el 0% a aproximadamente el 5%. En algunas realizaciones, la cantidad de OA de la composición total puede estar en el intervalo de aproximadamente el 0% a aproximadamente el 1%. En algunas realizaciones, la cantidad de OA de la composición total puede estar en el intervalo de aproximadamente el 0% a aproximadamente el 0,5%. En algunas realizaciones, la cantidad de OA de la composición total puede ser de aproximadamente el 0,5%. En algunas realizaciones, la cantidad de OA con respecto a la cantidad total de triterpenoides puede estar en el intervalo de aproximadamente el 0% a aproximadamente el 50%. En algunas realizaciones, la cantidad de OA con respecto a la cantidad total de triterpenoides puede estar en el intervalo de aproximadamente el 0% a aproximadamente el 25%. En algunas realizaciones, la cantidad de OA con respecto a la cantidad total de triterpenoides puede estar en el intervalo de aproximadamente el 0% a aproximadamente el 11%. En algunas realizaciones, la cantidad de OA con respecto a la cantidad total de triterpenoides puede estar en el intervalo de aproximadamente el 9% a aproximadamente el 11%.
En algunas realizaciones, la cantidad de MDA de la composición total puede estar en el intervalo de aproximadamente el 0,5% a aproximadamente el 1%. En algunas realizaciones, la cantidad de MDA con respecto a la cantidad total de triterpenoides puede estar en el intervalo de aproximadamente el 5% a aproximadamente el 35%. En algunas realizaciones, la cantidad de MDA con respecto a la cantidad total de triterpenoides puede estar en el intervalo de aproximadamente el 10% a aproximadamente el 26%. En algunas realizaciones, la cantidad de MDA con respecto a la cantidad total de triterpenoides puede estar en el intervalo de aproximadamente el 20% a aproximadamente el 26%.
En algunas realizaciones, la cantidad de IMDA de la composición total puede estar en el intervalo de aproximadamente el 0,6% a aproximadamente el 1%. En algunas realizaciones, la cantidad de IMDA con respecto a la cantidad total de triterpenoides puede estar en el intervalo de aproximadamente el 5% a aproximadamente el 35%. En algunas realizaciones, la cantidad de IMDA con respecto a la cantidad total de triterpenoides puede estar en el intervalo de aproximadamente el 12% a aproximadamente el 26%. En algunas realizaciones, la cantidad de IMDA con respecto a la cantidad total de triterpenoides puede estar en el intervalo de aproximadamente el 20% a aproximadamente el 26%.
En algunas realizaciones, cuando el MLA es uno de los ingredientes de la composición, la cantidad de MLA de la composición total puede estar en el intervalo de aproximadamente el 0% a aproximadamente el 10%. En algunas realizaciones, la cantidad de MLA de la composición total puede estar en el intervalo de aproximadamente el 0% a aproximadamente el 3%. En algunas realizaciones, la cantidad de MLA de la composición total puede estar en el intervalo de aproximadamente el 0% a aproximadamente el 1%. En algunas realizaciones, la cantidad de MLA de la composición total puede estar en el intervalo de aproximadamente el 0% a aproximadamente el 0,5%. En algunas realizaciones, la cantidad de MLA de la composición total puede estar en el intervalo de aproximadamente el 0% a aproximadamente el 0,2%. En algunas realizaciones, la cantidad de MLA de la composición total puede ser de aproximadamente el 0,2%. En algunas realizaciones, la cantidad de MLA con respecto a la cantidad total de triterpenoides puede estar en el intervalo de aproximadamente el 0% a aproximadamente el 25%. En algunas realizaciones, la cantidad de MLA con respecto a la cantidad total de triterpenoides puede estar en el intervalo de aproximadamente el 0% a aproximadamente el 15%. En algunas realizaciones, la cantidad de MLA con respecto a la cantidad total de triterpenoides puede estar en el intervalo de aproximadamente el 0% a aproximadamente el 4%. En algunas realizaciones, la cantidad de MLA con respecto a la cantidad total de triterpenoides puede ser de aproximadamente el 4%.
En algunas realizaciones, cuando el IMLA es uno de los ingredientes de la composición, la cantidad de IMLA de la composición total puede estar en el intervalo de aproximadamente el 0% a aproximadamente el 10%. En algunas realizaciones, la cantidad de IMLA de la composición total puede estar en el intervalo de aproximadamente el 0% a aproximadamente el 3%. En algunas realizaciones, la cantidad de IMLA de la composición total puede estar en el intervalo de aproximadamente el 0% a aproximadamente el 1%. En algunas realizaciones, la cantidad de IMLA de la composición total puede estar en el intervalo de aproximadamente el 0% a aproximadamente el 0,5%. En algunas realizaciones, la cantidad de IMLA de la composición total puede estar en el intervalo de aproximadamente el 0% a aproximadamente el 0,2%. En algunas realizaciones, la cantidad de IMLA de la composición total puede ser de aproximadamente el 0,2%. En algunas realizaciones, la cantidad de IMLA con respecto a la cantidad total de triterpenoides puede estar en el intervalo de aproximadamente el 0% a aproximadamente el 25%. En algunas realizaciones, la cantidad de IMLA con respecto a la cantidad total de triterpenoides puede estar en el intervalo de aproximadamente el 0% a aproximadamente el 15%. En algunas realizaciones, la cantidad de IMLA con respecto a la cantidad total de triterpenoides puede estar en el intervalo de aproximadamente el 0% a aproximadamente el 4%. En algunas realizaciones, la cantidad de IMLA con respecto a la cantidad total de triterpenoides puede ser de aproximadamente el 4%.
En algunas realizaciones, cuando el 3-OAc-MLA es uno de los ingredientes de la composición, la cantidad de 3-OAc-MLA de la composición total puede estar en el intervalo de aproximadamente el 0% a aproximadamente el 15%. En algunas realizaciones, la cantidad de 3-OAc-MLA de la composición total puede estar en el intervalo de aproximadamente el 0% a aproximadamente el 5%. En algunas realizaciones, la cantidad de 3-OAc-MLA de la composición total puede estar en el intervalo de aproximadamente el 0% a aproximadamente el 3%. En algunas realizaciones, la cantidad de 3-OAc-MLA de la composición total puede estar en el intervalo de aproximadamente el 0% a aproximadamente el 1%. En algunas realizaciones, la cantidad de 3-OAc-MLA de la composición total puede estar en el intervalo de aproximadamente el 0% a aproximadamente el 0,2%. En algunas realizaciones, la cantidad de 3-OAc-MLA de la composición total puede ser de aproximadamente el 0,2%. En algunas realizaciones, la cantidad de 3-OAc-MLA con respecto a la cantidad total de triterpenoides puede estar en el intervalo de aproximadamente el 0% a aproximadamente el 25%. En algunas realizaciones, la cantidad de 3-OAc-MLA con respecto a la cantidad total de triterpenoides puede estar en el intervalo de aproximadamente el 0% a aproximadamente el 15%. En algunas realizaciones, la cantidad de 3-OAc-MLA con respecto a la cantidad total de triterpenoides puede estar en el intervalo de aproximadamente el 0% a aproximadamente el 10%. En algunas realizaciones, la cantidad de 3-OAc-MLA con respecto a la cantidad total de triterpenoides puede estar en el intervalo de aproximadamente el 0% a aproximadamente el 5%. En algunas realizaciones, la cantidad de 3-OAc-MLA con respecto a la cantidad total de triterpenoides puede ser de aproximadamente el 3%.
En algunas realizaciones, cuando el 3-OAc-IMLA es uno de los ingredientes de la composición, la cantidad de 3-OAc-IMLA de la composición total puede estar en el intervalo de aproximadamente el 0% a aproximadamente el 15%. En algunas realizaciones, la cantidad de 3-OAc-IMLA de la composición total puede estar en el intervalo de aproximadamente el 0% a aproximadamente el 5%. En algunas realizaciones, la cantidad de 3-OAc-IMLA de la composición total puede estar en el intervalo de aproximadamente el 0% a aproximadamente el 3%. En algunas realizaciones, la cantidad de 3-OAc-IMLA de la composición total puede estar en el intervalo de aproximadamente el 0% a aproximadamente el 1%. En algunas realizaciones, la cantidad de 3-OAc-IMLA de la composición total puede estar en el intervalo de aproximadamente el 0% a aproximadamente el 0,2%. En algunas realizaciones, la cantidad de 3-OAc-IMLA de la composición total puede ser de aproximadamente el 0,2%. En algunas realizaciones, la cantidad de 3-OAc-IMLA con respecto a la cantidad total de triterpenoides puede estar en el intervalo de aproximadamente el 0% a aproximadamente el 25%. En algunas realizaciones, la cantidad de 3-OAc-IMLA con respecto a la cantidad total de triterpenoides puede estar en el intervalo de aproximadamente el 0% a aproximadamente el 15%. En algunas realizaciones, la cantidad de 3-OAc-IMLA con respecto a la cantidad total de triterpenoides puede estar en el intervalo de aproximadamente el 0% a aproximadamente el 10%. En algunas realizaciones, la cantidad de 3-OAc-IMLA con respecto a la cantidad total de triterpenoides puede estar en el intervalo de aproximadamente el 0% a aproximadamente el 5%. En algunas realizaciones, la cantidad de 3-OAc-IMLA con respecto a la cantidad total de triterpenoides puede ser de aproximadamente el 3%.
En algunas realizaciones, cuando el 3-OAc-epi-MLA es uno de los ingredientes de la composición, la cantidad de 3-OAc-epi-MLA de la composición total puede estar en el intervalo de aproximadamente el 0% a aproximadamente el 15%. En algunas realizaciones, la cantidad de 3-OAc-epi-MLA A de la composición total puede estar en el intervalo de aproximadamente el 0% a aproximadamente el 5%. En algunas realizaciones, la cantidad de 3-OAc-epi-MLA de la composición total puede estar en el intervalo de aproximadamente el 0% a aproximadamente el 3%. En algunas realizaciones, la cantidad de 3-OAc-epi-MLA de la composición total puede estar en el intervalo de aproximadamente el 0% a aproximadamente el 1%. En algunas realizaciones, la cantidad de 3-OAc-epi-MLA de la composición total puede estar en el intervalo de aproximadamente el 0% a aproximadamente el 0,2%. En algunas realizaciones, la cantidad de 3-OAc-epi-MLA de la composición total puede ser de aproximadamente el 0,2%. En algunas realizaciones, la cantidad de 3-OAc-epi-MLA con respecto a la cantidad total de triterpenoides puede estar en el intervalo de aproximadamente el 0% a aproximadamente el 25%. En algunas realizaciones, la cantidad de 3-OAc-epi-MLA con respecto a la cantidad total de triterpenoides puede estar en el intervalo de aproximadamente el 0% a aproximadamente el 15%. En algunas realizaciones, la cantidad de 3-OAc-epi-MLA con respecto a la cantidad total de triterpenoides puede estar en el intervalo de aproximadamente el 0% a aproximadamente el 10%. En algunas realizaciones, la cantidad de 3-OAc-epi-MLA con respecto a la cantidad total de triterpenoides puede estar en el intervalo de aproximadamente el 0% a aproximadamente el 5%. En algunas realizaciones, la cantidad de 3-OAc-epi-MLA con respecto a la cantidad total de triterpenoides puede ser de aproximadamente el 3%.
En algunas realizaciones, cuando el 3-OAc-epi-IMLA es uno de los ingredientes de la composición, la cantidad de 3-OAc-epi-IMLA de la composición total puede estar en el intervalo de aproximadamente el 0% a aproximadamente el 15%. En algunas realizaciones, la cantidad de 3-OAc-epi-IMLA de la composición total puede estar en el intervalo de aproximadamente el 0% a aproximadamente el 5%. En algunas realizaciones, la cantidad de 3-OAc-epi-IMLA de la composición total puede estar en el intervalo de aproximadamente el 0% a aproximadamente el 3%. En algunas realizaciones, la cantidad de 3-OAc-epi-IMLA de la composición total puede estar en el intervalo de aproximadamente el 0% a aproximadamente el 1%. En algunas realizaciones, la cantidad de 3-OAc-epi-IMLA de la composición total puede estar en el intervalo de aproximadamente el 0% a aproximadamente el 0,2%. En algunas realizaciones, la cantidad de 3-OAc-epi-IMLA de la composición total puede ser de aproximadamente el 0,2%. En algunas realizaciones, la cantidad de 3-OAc-epi-IMLA con respecto a la cantidad total de triterpenoides puede estar en el intervalo de aproximadamente el 0% a aproximadamente el 25%. En algunas realizaciones, la cantidad de 3-OAc-epi-IMLA con respecto a la cantidad total de triterpenoides puede estar en el intervalo de aproximadamente el 0% a aproximadamente el 15%. En algunas realizaciones, la cantidad de 3-OAc-epi-IMLA con respecto a la cantidad total de triterpenoides puede estar en el intervalo de aproximadamente el 0% a aproximadamente el 10%. En algunas realizaciones, la cantidad de 3-OAc-epi-IMLA con respecto a la cantidad total de triterpenoides puede estar en el intervalo de aproximadamente el 0% a aproximadamente el 5%. En algunas realizaciones, la cantidad de 3-OAc-epi-IMLA con respecto a la cantidad total de triterpenoides puede ser de aproximadamente el 3%.
En algunas realizaciones, la cantidad de ácido masticadienónico (MDA) puede estar en el intervalo de aproximadamente el 0,05% a aproximadamente el 20%. En algunas realizaciones, la cantidad de ácido isomasticadienónico (IMDA) puede estar en el intervalo de aproximadamente el 0,05% a aproximadamente el 20%. En algunas realizaciones, la cantidad de ácido oleanónico (OA) puede estar en el intervalo de aproximadamente el 0,05% a aproximadamente el 20%. En algunas realizaciones, la cantidad de ácido masticadienónico (MDA) puede estar en el intervalo de aproximadamente el 0,1% a aproximadamente el 10%. En algunas realizaciones, la cantidad de ácido isomasticadienónico (IMDA) puede estar en el intervalo de aproximadamente el 0,1% a aproximadamente el 10%. En algunas realizaciones, la cantidad de ácido oleanónico (OA) puede estar en el intervalo de aproximadamente el 0,1% a aproximadamente el 10%. En algunas realizaciones, la cantidad de ácido masticadienónico (MDA) puede estar en el intervalo de aproximadamente el 0,5% a aproximadamente el 12%. En algunas realizaciones, la cantidad de ácido isomasticadienónico (IMDA) puede estar en el intervalo de aproximadamente el 0,5% a aproximadamente el 12%. En algunas realizaciones, la cantidad de ácido oleanónico (OA) puede estar en el intervalo de aproximadamente el 0,5% a aproximadamente el 12%. En algunas realizaciones, la cantidad de ácido masticadienónico (MDA) puede estar en el intervalo de aproximadamente el 0,5% a aproximadamente el 15%. En algunas realizaciones, la cantidad de ácido isomasticadienónico (IMDA) puede estar en el intervalo de aproximadamente el 0,5% a aproximadamente el 15%. En algunas realizaciones, la cantidad de ácido oleanónico (OA) puede estar en el intervalo de aproximadamente el 0,5% a aproximadamente el 15%.
En algunas realizaciones, la cantidad de NF-1 de la composición total puede ser de aproximadamente el 0,5%. En algunas realizaciones, la cantidad de NF-1 con respecto a la cantidad total de triterpenoides puede estar en el intervalo de aproximadamente el 5% a aproximadamente el 25%. En algunas realizaciones, la cantidad de NF-1 con respecto a la cantidad total de triterpenoides puede estar en el intervalo de aproximadamente el 9% a aproximadamente el 13%.
En algunas realizaciones, la cantidad de NF-2 de la composición total puede ser de aproximadamente el 0,5%. En algunas realizaciones, la cantidad de NF-2 con respecto a la cantidad total de triterpenoides puede estar en el intervalo de aproximadamente el 5% a aproximadamente el 25%. En algunas realizaciones, la cantidad de NF-2 con respecto a la cantidad total de triterpenoides puede estar en el intervalo de aproximadamente el 9% a aproximadamente el 13%.
En algunas realizaciones, cuando el NF-3 es uno de los ingredientes de la composición, la cantidad de NF-3 de la composición total puede estar en el intervalo de aproximadamente el 0% a aproximadamente el 25%. En algunas realizaciones, la cantidad de NF-3 de la composición total puede estar en el intervalo de aproximadamente el 0% a aproximadamente el 10%. En algunas realizaciones, la cantidad de NF-3 de la composición total puede estar en el intervalo de aproximadamente el 0% a aproximadamente el 5%. En algunas realizaciones, la cantidad de NF-3 de la composición total puede estar en el intervalo de aproximadamente el 0% a aproximadamente el 1%. En algunas realizaciones, la cantidad de NF-3 de la composición total puede ser de aproximadamente el 0,5%. En algunas realizaciones, la cantidad de NF-3 con respecto a la cantidad total de triterpenoides puede estar en el intervalo de aproximadamente el 0% a aproximadamente el 50%. En algunas realizaciones, la cantidad de NF-3 con respecto a la cantidad total de triterpenoides puede estar en el intervalo de aproximadamente el 5% a aproximadamente el 25%. En algunas realizaciones, la cantidad de NF-3 con respecto a la cantidad total de triterpenoides puede estar en el intervalo de aproximadamente el 9% a aproximadamente el 13%. En algunas realizaciones, la cantidad de NF-3 con respecto a la cantidad total de triterpenoides puede estar en el intervalo de aproximadamente el 10-12%.
En algunas realizaciones, cuando el NF-4 es uno de los ingredientes de la composición, la cantidad de NF-4 de la composición total puede estar en el intervalo de aproximadamente el 0% a aproximadamente el 25%. En algunas realizaciones, la cantidad de NF-4 de la composición total puede estar en el intervalo de aproximadamente el 0% a aproximadamente el 10%. En algunas realizaciones, la cantidad de NF-4 de la composición total puede estar en el intervalo de aproximadamente el 0% a aproximadamente el 5%. En algunas realizaciones, la cantidad de NF-4 de la composición total puede estar en el intervalo de aproximadamente el 0% a aproximadamente el 1%. En algunas realizaciones, la cantidad de NF-4 de la composición total puede ser de aproximadamente el 0,33%. En algunas realizaciones, la cantidad de NF-4 con respecto a la cantidad total de triterpenoides puede estar en el intervalo de aproximadamente el 0% a aproximadamente el 50%. En algunas realizaciones, la cantidad de NF-4 con respecto a la cantidad total de triterpenoides puede estar en el intervalo de aproximadamente el 2,5% a aproximadamente el 25%. En algunas realizaciones, la cantidad de NF-4 con respecto a la cantidad total de triterpenoides puede estar en el intervalo de aproximadamente el 6% a aproximadamente el 9%.
En algunas realizaciones, cuando el NF-P es uno de los ingredientes de la composición, la cantidad de NF-P de la composición total puede estar en el intervalo de aproximadamente el 0% a aproximadamente el 15%. En algunas realizaciones, la cantidad de NF-P de la composición total puede estar en el intervalo de aproximadamente el 0% a aproximadamente el 7,5%. En algunas realizaciones, la cantidad de NF-P de la composición total puede estar en el intervalo de aproximadamente el 0% a aproximadamente el 2,5%. En algunas realizaciones, la cantidad de NF-P de la composición total puede estar en el intervalo de aproximadamente el 0% a aproximadamente el 1%. En algunas realizaciones, la cantidad de NF-P de la composición total puede estar en el intervalo de aproximadamente el 0% a aproximadamente el 0,33%. En algunas realizaciones, la cantidad de NF-P de la composición total puede ser de aproximadamente el 0,33%. En algunas realizaciones, la cantidad de NF-P con respecto a la cantidad total de triterpenoides puede estar en el intervalo de aproximadamente el 0% a aproximadamente el 50%. En algunas realizaciones, la cantidad de NF-P con respecto a la cantidad total de triterpenoides puede estar en el intervalo de aproximadamente el 0% a aproximadamente el 25%. En algunas realizaciones, la cantidad de NF-P con respecto a la cantidad total de triterpenoides puede estar en el intervalo de aproximadamente el 0% a aproximadamente el 7%. En algunas realizaciones, la cantidad de NF-P con respecto a la cantidad total de triterpenoides puede estar en el intervalo de aproximadamente el 6% a aproximadamente el 7%.
En algunas realizaciones, cuando el NF-A es uno de los ingredientes de la composición, la cantidad de NF-A de la composición total puede estar en el intervalo de aproximadamente el 0% a aproximadamente el 10%. En algunas realizaciones, la cantidad de NF-A de la composición total puede estar en el intervalo de aproximadamente el 0% a aproximadamente el 3%. En algunas realizaciones, la cantidad de NF-A de la composición total puede estar en el intervalo de aproximadamente el 0% a aproximadamente el 1%. En algunas realizaciones, la cantidad de NF-A de la composición total puede estar en el intervalo de aproximadamente el 0% a aproximadamente el 0,5%. En algunas realizaciones, la cantidad de NF-A de la composición total puede estar en el intervalo de aproximadamente el 0% a aproximadamente el 0,25%. En algunas realizaciones, la cantidad de NF-A de la composición total puede ser de aproximadamente el 0,25%. En algunas realizaciones, la cantidad de NF-A con respecto a la cantidad total de triterpenoides puede estar en el intervalo de aproximadamente el 0% a aproximadamente el 25%. En algunas realizaciones, la cantidad de NF-A con respecto a la cantidad total de triterpenoides puede estar en el intervalo de aproximadamente el 0% a aproximadamente el 15%. En algunas realizaciones, la cantidad de NF-A con respecto a la cantidad total de triterpenoides puede estar en el intervalo de aproximadamente el 0% a aproximadamente el 6%. En algunas realizaciones, la cantidad de NF-A con respecto a la cantidad total de triterpenoides puede estar en el intervalo de aproximadamente el 4% a aproximadamente el 6%.
En algunas realizaciones, cuando el NF-B es uno de los ingredientes de la composición, la cantidad de NF-B de la composición total puede estar en el intervalo de aproximadamente el 0% a aproximadamente el 10%. En algunas realizaciones, la cantidad de NF-B de la composición total puede estar en el intervalo de aproximadamente el 0% a aproximadamente el 3%. En algunas realizaciones, la cantidad de NF-B de la composición total puede estar en el intervalo de aproximadamente el 0% a aproximadamente el 1%. En algunas realizaciones, la cantidad de NF-B de la composición total puede estar en el intervalo de aproximadamente el 0% a aproximadamente el 0,5%. En algunas realizaciones, la cantidad de NF-B de la composición total puede estar en el intervalo de aproximadamente el 0% a aproximadamente el 0,25%. En algunas realizaciones, la cantidad de NF-B de la composición total puede ser de aproximadamente el 0,25%. En algunas realizaciones, la cantidad de NF-B con respecto a la cantidad total de triterpenoides puede estar en el intervalo de aproximadamente el 0% a aproximadamente el 25%. En algunas realizaciones, la cantidad de NF-B con respecto a la cantidad total de triterpenoides puede estar en el intervalo de aproximadamente el 0% a aproximadamente el 15%. En algunas realizaciones, la cantidad de NF-B con respecto a la cantidad total de triterpenoides puede estar en el intervalo de aproximadamente el 0% a aproximadamente el 6%. En algunas realizaciones, la cantidad de NF-B con respecto a la cantidad total de triterpenoides puede estar en el intervalo de aproximadamente el 4% a aproximadamente el 6%.
En algunas realizaciones, el portador farmacéuticamente aceptable puede incluir un portador hidrófobo. En algunas realizaciones, el portador hidrófobo puede incluir por lo menos un aceite. En algunas realizaciones, el aceite puede seleccionarse del grupo que consiste de un aceite mineral, un aceite vegetal y combinaciones de los mismos. En algunas realizaciones, el aceite vegetal puede seleccionarse del grupo que consiste de aceite de semilla de algodón, aceite de oliva, aceite de almendras, aceite de canola, aceite de coco, aceite de maíz, aceite de semilla de uva, aceite de cacahuete, aceite de azafrán, aceite de sésamo, aceite de soja y combinaciones de los mismos. En algunas realizaciones, el aceite mineral puede ser un aceite mineral ligero. En algunas realizaciones, el portador hidrófobo puede incluir por lo menos una cera. En algunas realizaciones, el portador hidrófobo puede incluir una combinación de por lo menos un aceite y por lo menos una cera.
En algunas realizaciones, el portador farmacéuticamente aceptable puede ser un fosfolípido.
En algunas realizaciones, la composición es una composición farmacéutica. En algunas realizaciones, la composición puede estar en una forma adecuada para la administración por una vía seleccionada del grupo que consiste de parenteral, transdérmica, oral y tópica.
En algunas realizaciones, la composición puede estar en una forma adecuada para la administración tópica. En algunas realizaciones, la composición puede estar en una forma adecuada para la administración oral. En algunas realizaciones, la composición está en una forma adecuada para la administración parenteral. En algunas realizaciones, la composición puede estar en una forma adecuada para la administración mediante inyección. En algunas realizaciones, la composición es una formulación parenteral para administración por una vía seleccionada del grupo que consiste de subcutánea, intravenosa, intramuscular, intradérmica, intraperitoneal, intraarterial, intracerebral, intracerebroventricular, intraósea e intratecal.
En algunas realizaciones, la composición puede ser una formulación parenteral para administración por vía subcutánea.
En algunas realizaciones, la composición puede ser una formulación parenteral para administración por vía intramuscular.
En varias realizaciones, la composición puede formularse para su administración mediante una vía seleccionada del grupo que consiste de dérmica, vaginal, rectal, inhalatoria, intranasal, ocular, auricular y bucal.
En algunas realizaciones, la composición farmacéutica puede estar en una forma seleccionada del grupo que consiste de una cápsula, un comprimido, un liposoma, un supositorio, una suspensión, una pomada, una crema, una loción, una solución, una emulsión, una película, un cemento, un polvo, un pegamento, un aerosol y un spray. En algunas realizaciones, la cápsula puede seleccionarse del grupo que consiste de una cápsula de gelatina dura y una cápsula de gelatina blanda. En algunas realizaciones, la emulsión es una nanoemulsión o una microemulsión.
En algunas realizaciones, la formulación puede incluir por lo menos uno de un complejo de inclusión, una nanoemulsión, una microemulsión, un polvo, una balsa lipídica, una micropartícula lipídica, un dendrímero y un liposoma. En algunas realizaciones, el complejo de inclusión puede incluir por lo menos una ciclodextrina. En algunas realizaciones, la por lo menos una ciclodextrina puede incluir hidroxipropil-P-ciclodextrina. En algunas realizaciones, la nanoemulsión puede incluir gotitas que tienen un tamaño medio de partícula de menos de 800 nm. En algunas realizaciones, las gotitas pueden incluir gotitas que tienen un tamaño medio de partícula de menos de 500 nm. En algunas realizaciones, las gotitas pueden incluir gotitas que tienen un tamaño medio de partícula de menos de 200 nm. En algunas realizaciones, el polvo puede incluir un polvo secado por pulverización. En algunas realizaciones, el liposoma puede incluir una vesícula multilaminar. En algunas realizaciones, la microemulsión puede incluir un surfactante no iónico. En algunas realizaciones, el surfactante no iónico puede seleccionarse del grupo que consiste de un aceite de ricino polioxílico, un éster de ácido graso de polioxietilensorbitán (polisorbatos), un poloxámero, un derivado de vitamina E, un alquil éter de polioxietileno, un esterato de polioxietileno o glicérido poliglicolizado saturado o combinaciones de los mismos.
En algunas realizaciones, la composición puede disponerse sobre el artículo de fabricación en forma de un recubrimiento. En algunas realizaciones, el artículo de fabricación puede incluir un recipiente, en donde la composición puede disponerse dentro del recipiente. En algunas realizaciones, el artículo de fabricación puede seleccionarse del grupo que consiste de un artículo de tela, un pañal, un apósito para heridas, un dispositivo médico, una aguja o una pluralidad de agujas, una microaguja o una pluralidad de microagujas, un dispositivo de inyección y un dispensador de pulverización. En algunas realizaciones, el artículo de fabricación puede incluir una pluralidad de microagujas. En algunas realizaciones, el dispositivo médico se selecciona del grupo que consiste de una prótesis, un órgano artificial o un componente del mismo, una válvula, un catéter, un tubo, una endoprótesis, una membrana artificial, un marcapasos, un sensor, un endoscopio, un dispositivo de imagenología, una bomba, un alambre y un implante. En algunas realizaciones, el implante se selecciona del grupo que consiste de un implante cardíaco, un implante coclear, un implante corneal, un implante craneal, un implante dental, un implante maxilofacial, un implante de órgano, un implante ortopédico, un implante vascular, un implante intraarticular y un implante de mama.
En algunas realizaciones, la composición puede ser adecuada para la administración mediante un medio seleccionado del grupo que consiste de electroporación, sonicación, radiofrecuencia, pulverización presurizada y combinaciones de los mismos.
Las composiciones farmacéuticas de la invención pueden fabricarse de una manera que sea conocida por los expertos en la técnica, por ejemplo, mediante procesos de mezclado, granulación, preparación de grageas, encapsulación de gelatina blanda, disolución, extracción o liofilización convencionales. Las composiciones farmacéuticas para uso oral pueden obtenerse combinando los compuestos activos con excipientes sólidos y semisólidos y conservantes y/o antioxidantes adecuados. Opcionalmente, la mezcla resultante puede molerse y procesar. La mezcla resultante de gránulos puede usarse, después de añadir productos auxiliares adecuados, si es necesario, para obtener comprimidos, cápsulas blandas, cápsulas o núcleos de grageas.
Los excipientes adecuados son, en particular, cargas como sacáridos, por ejemplo, lactosa o sacarosa, manitol o sorbitol; preparaciones de celulosa y/o fosfatos de calcio, por ejemplo, fosfato tricálcico o hidrogenofosfato de calcio; así como aglutinantes, como pasta de almidón, usando, por ejemplo, almidón de maíz, almidón de trigo, almidón de arroz, almidón de patata, gelatina, tragacanto, metilcelulosa, hidroxipropilmetilcelulosa, carboximetilcelulosa sódica y/o polivinilpirrolidona. Si se desea, pueden añadirse agentes disgregantes como los almidones mencionados anteriormente y también carboximetil-almidón, polivinilpirrolidona reticulada, agar o ácido algínico o una sal del mismo, como alginato de sodio. Los agentes auxiliares son agentes reguladores del flujo y lubricantes, por ejemplo, sílice, talco, ácido esteárico o sales de los mismos, como estearato de magnesio o estearato de calcio, y/o polietilenglicol. Los núcleos de grageas se proporcionan con recubrimientos adecuados que, si se desea, son resistentes a los jugos gástricos. Para este propósito, pueden usarse soluciones de sacáridos concentrados, que opcionalmente pueden contener goma arábiga, talco, polivinilpirrolidona, polietilenglicol y/o dióxido de titanio, soluciones de laca y solventes orgánicos o mezclas de solventes adecuados. Para producir recubrimientos resistentes a los jugos gástricos, se usan soluciones de preparaciones de celulosa adecuadas, como ftalato de acetilcelulosa o ftalato de hidroxipropimetilcelulosa. Pueden añadirse tintes o pigmentos a los comprimidos o recubrimientos de grageas, por ejemplo, para la identificación o para caracterizar combinaciones de dosis de compuestos activos.
Otras composiciones farmacéuticas para uso oral incluyen cápsulas de ajuste rápido hechas de gelatina, así como cápsulas blandas selladas hechas de gelatina y un plastificante, como glicerol o sorbitol.
Las formulaciones para administración parenteral incluyen suspensiones y dispersiones de micropartículas de los compuestos activos según sea apropiado. En algunas realizaciones, pueden administrarse suspensiones inyectables oleosas. Los solventes o vehículos lipófilos adecuados incluyen aceites grasos, por ejemplo, aceite de sésamo, o ésteres de ácidos grasos sintéticos, por ejemplo, oleato de etilo, triglicéridos, polietilenglicol-400, cremofor o ciclodextrinas. Las suspensiones inyectables pueden contener sustancias que aumentan la viscosidad de la suspensión, por ejemplo, carboximetilcelulosa sódica, sorbitol y/o dextrano. Opcionalmente, la suspensión también puede contener estabilizantes.
Las composiciones farmacéuticas también pueden prepararse usando liposomas que comprenden el ingrediente activo. Como se conoce en la técnica, los liposomas se derivan generalmente de fosfolípidos u otras sustancias lipídicas. Los liposomas están formados por cristales líquidos hidratados mono- o multilamelares que se dispersan en un medio acuoso. Puede usarse cualquier lípido no tóxico, fisiológicamente aceptable y metabolizable capaz de formar liposomas. En general, los lípidos preferidos son los fosfolípidos y las fosfatidil colinas (lecitinas), tanto naturales como sintéticas. Los métodos para formar liposomas son conocidos en la técnica, como se divulga, por ejemplo, en Prescott, Ed., Methods in Cell Biology, Volumen XIV, Academic Press, Nueva York, N.Y. (1976) y en la Patente de Estados Unidos N° 7.048.943.
Las formulaciones para administración tópica incluyen pomadas. Los portadores adecuados incluyen aceites vegetales o minerales, vaselina blanca, grasas o aceites de cadena ramificada, grasas animales y ceras. Los portadores preferidos son aquellos en los que el ingrediente activo es soluble. También pueden incluirse estabilizadores, humectantes y antioxidantes, así como agentes que imparten color o fragancia, si se desea. Las pomadas pueden formularse, por ejemplo, mezclando una solución del ingrediente activo en un aceite vegetal como aceite de almendras con parafina blanda tibia y dejando que la mezcla se enfríe.
La composición farmacéutica puede comprender una emulsión o microemulsión de aceite en agua para facilitar su formulación para uso oral, parenteral o tópico. Tales emulsiones/microemulsiones incluyen generalmente lípidos, surfactantes, opcionalmente humectantes y agua. Los lípidos adecuados incluyen aquellos que generalmente se sabe que son útiles para crear emulsiones/microemulsiones de aceite en agua, por ejemplo, ésteres de glicéridos de ácidos grasos. Los surfactantes adecuados incluyen aquellos que generalmente se sabe que son útiles para crear emulsiones/microemulsiones de aceite en agua en las que se usan lípidos como componente de aceite en la emulsión. Pueden preferirse los surfactantes no iónicos como, por ejemplo, aceite de ricino etoxilado, fosfolípidos y copolímeros de bloque de óxido de etileno y óxido de propileno. Los humectantes adecuados, si se usan, incluyen, por ejemplo, propilenglicol o polietilenglicol.
La composición farmacéutica puede formularse en forma de gel, como un hidrogel formado a partir de un polímero formador de gel como carragenano, goma xantana, goma karaya, goma arábiga, goma de algarrobo, goma guar. Puede combinarse un hidrogel con una emulsión de aceite en agua que comprende el ingrediente activo.
La composición farmacéutica puede formularse en forma de cemento, como los que comprenden polimetilmetacrilato (PMMA) o fosfato cálcico. En algunas realizaciones, la composición farmacéutica puede formularse en forma de polvo.
En algunas realizaciones, la presente invención proporciona usos y métodos terapéuticos para tratar la enfermedad de Alzheimer (EA) en un sujeto con necesidad de ello, que comprende administrar a un sujeto una cantidad terapéuticamente eficaz de una composición que comprende una combinación de por lo menos un ácido triterpenoico y por lo menos un triterpenoide neutro. En algunas realizaciones, la presente invención proporciona usos y métodos terapéuticos para tratar las enfermedades de Parkinson (EP) en un sujeto con necesidad de ello, que comprende administrar a un sujeto una cantidad terapéuticamente eficaz de una composición que comprende una combinación de por lo menos un ácido triterpenoico y por lo menos una triterpenoide neutro. En algunas realizaciones, la presente invención proporciona usos y métodos terapéuticos para tratar el síndrome de Parkinsonplus en un sujeto con necesidad de ello, que comprende administrar a un sujeto una cantidad terapéuticamente eficaz de una composición que comprende una combinación de por lo menos un ácido triterpenoico y por lo menos un triterpenoide neutro. En algunas realizaciones, la presente invención proporciona usos y métodos terapéuticos para tratar el parkinsonismo en un sujeto con necesidad de ello, que comprende administrar a un sujeto una cantidad terapéuticamente eficaz de una composición que comprende una combinación de por lo menos un ácido triterpenoico y por lo menos un triterpenoide neutro.
El paso de administrar las composiciones puede comprender cualquier vía aceptable, incluyendo oral, tópica, parenteral y transdérmica como, por ejemplo, la administración parenteral incluye las vías de administración intravenosa, intramuscular, subcutánea, intradérmica, intraperitoneal, intraarterial, intrauterina, intrauretral, intracardiaca, intracerebral, intracerebroventricular, intrarrenal, intrahepática, intratendón, intraósea, intratecal, dérmica, vaginal, rectal, inhalatoria, intranasal, ocular, auricular y bucal.
En algunas realizaciones, el método puede llevarse a cabo antes o después de la implantación de un dispositivo médico en el sujeto. En algunas realizaciones, el método puede llevarse a cabo antes o después de la implantación de un dispositivo médico en el sujeto para tratar las implicaciones/consecuencias de la afección. Los dispositivos médicos incluyen, pero no se limitan a, una prótesis, un órgano artificial o un componente del mismo, una válvula, un catéter, un tubo, una endoprótesis, una membrana artificial, un marcapasos, un sensor, un endoscopio, un dispositivo de imagenología, una bomba, un alambre y un implante. Los implantes incluyen, pero no se limitan a, un implante cardíaco, un implante coclear, un implante corneal, un implante craneal, un implante dental, un implante maxilofacial, un implante de órgano, un implante ortopédico, un implante vascular, un implante intraarticular y un implante de mama.
En algunas realizaciones, el dispositivo médico es un implante de órgano, que en ciertos casos puede comprender células autólogas del sujeto.
En algunas realizaciones, el paso de poner en contacto comprende un medio seleccionado del grupo que consiste de electroporación, sonicación, radiofrecuencia, pulverización presurizada y combinaciones de los mismos.
En algunas realizaciones, el paso de poner en contacto comprende establecer contacto entre el fluido intersticial y la composición. El contacto entre el fluido intersticial y la composición puede lograrse perforando y/o pinchando la dermis con una aguja, una microaguja o un aparato que comprenda una pluralidad de agujas o microagujas. Preferiblemente, tales agujas o microagujas no son huecas y pueden formarse en una pluralidad, por ejemplo, en un aparato similar a un peine o a un cepillo.
El método de la invención es adecuado para su aplicación en humanos y mamíferos no humanos.
El método de la invención puede abarcar el uso de un artículo de fabricación que incorpora la composición que comprende las combinaciones descritas en la presente.
Los siguientes ejemplos se presentan para ilustrar más completamente ciertas realizaciones de la invención. Sin embargo, de ninguna manera deben interpretarse como limitativos del amplio alcance de la invención. Un experto en la técnica puede idear fácilmente muchas variaciones y modificaciones de los principios divulgados en la presente sin apartarse del alcance de la invención.
EJEMPLOS
Aislamiento de ácidos triterpenoicos y triterpenoides neutros de la goma de mástique:
Muchas de las composiciones divulgadas en esta solicitud se preparan mezclando entre sí ácido o ácidos triterpenoicos individuales y triterpeno o triterpenos neutros. Estos ácidos triterpenoicos y triterpenoides neutros individuales pueden o extraerse de una fuente natural como la goma de mástique o pueden ser el producto de una síntesis química. El origen real de estos compuestos individuales no influye en las propiedades de las composiciones farmacéuticas preparadas usando estos compuestos individuales. Por tanto, se entiende que los procedimientos proporcionados a continuación para el aislamiento y síntesis de varios ácidos triterpenoicos individuales y triterpenos neutros individuales son solo ejemplos prácticos limitados y que una persona experta en la técnica puede usar diferentes procedimientos de aislamiento y procedimientos de síntesis para obtener estos compuestos individuales.
La presente invención se refiere a las propiedades biológicas y farmacéuticas inesperadas de las composiciones farmacéuticas divulgadas que comprenden ácido o ácidos triterpenoicos y triterpenoide o triterpenoides neutros. La combinación de ácidos triterpenoicos y triterpenoides neutros da como resultado una actividad farmacéutica global que no puede obtenerse usando solo los ácidos triterpenoicos o solo los triterpenoides neutros.
Ejemplo 1A - Preparación de la fracción ácida aislada de goma de mástique
A una cantidad de 50 gramos de goma de mástique, se le añadió etanol absoluto (800 ml) y la mezcla se dejó reposar durante 24 horas. La mezcla se agitó durante 30 minutos a 150 rpm y se dejó reposar durante dos horas. La solución de etanol obtenida se decantó del material insoluble en un matraz de fondo redondo de 3 l. Al material insoluble se le añadieron 400 ml de etanol nuevo y la mezcla se agitó de nuevo durante 30 minutos a 150 rpm y se dejó reposar durante 30 minutos. La solución de etanol obtenida se decantó y se añadió a la primera solución de etanol. Este paso se repitió una vez más usando 200 ml de etanol absoluto. Esto proporcionó 1,4 l de solución de etanol. El etanol se evaporó usando un evaporador rotatorio y se añadió n-hexano (1,2 litros) al material restante y la mezcla se agitó a 150 rpm durante 4 horas. Luego se dejó reposar durante 4 horas y la solución de hexano se decantó del material insoluble en un Erlenmeyer de 3 l. Al material insoluble restante, se le añadieron 800 ml de hexano nuevo y la mezcla se agitó durante 6 horas a 150 rpm y se dejó reposar durante 12 horas. La solución de hexano se decantó en el matraz Erlenmeyer de 3 l que contenía los primeros 1,2 l de solución de hexano. El hexano se evaporó en un matraz limpio de fondo redondo de 3 l para dar aproximadamente 30 gramos de extracto. (Los rendimientos varían típicamente entre el 50 y el 70%, dependiendo de la edad y el tamaño de las partículas de la goma de mástique usada).
El material extraído obtenido se disolvió posteriormente en éter dietílico (500 ml) y se extrajo con una solución acuosa de carbonato de sodio al 5% (4 x 100 ml), la capa acuosa básica y una capa oleosa/en emulsión se separaron cuidadosamente de la capa de éter dietílico. Luego, la capa de éter dietílico se extrajo adicionalmente con hidróxido de sodio acuoso 0,4 N (3 x 100 ml) y la capa acuosa básica y una capa oleosa/en emulsión se separaron de nuevo cuidadosamente de la capa de éter dietílico. (Esta capa de éter dietílico restante se denomina capa de éter dietílico Nr.I, y se usará en la presente a continuación en el Ejemplo 1B). Los dos extractos acuosos básicos (incluidas las capas oleosa/en emulsión) se acidificaron por separado a pH 1-2 mediante la adición lenta de ácido clorhídrico acuoso al 10% y posteriormente se extrajeron con éter dietílico nuevo (3 x 200 ml). Las fracciones etéreas obtenidas de este modo se combinaron y se secaron sobre sulfato de sodio anhidro. Después de filtrar el sulfato de sodio, se eliminó el éter dietílico en un evaporador rotatorio. Este procedimiento dio alrededor de 15 gramos de fracción ácida aislada de goma de mástique como un sólido blanco, correspondiente a un rendimiento de aproximadamente el 50% en base al extracto intermedio obtenido después de la extracción con etanol/hexano. Esta fracción ácida aislada particular obtenida a partir de goma de mástique como se ha descrito anteriormente en la presente se denomina "Mezcla ácida 1".
En base a los 50 gramos iniciales de goma de mástique, el rendimiento de esta fracción ácida es de aproximadamente el 30%. Los rendimientos típicos de esta fracción ácida particular a partir de la goma de mástique varían entre aproximadamente el 25% y aproximadamente el 35%. Sin querer estar limitados por ninguna teoría o mecanismo, estas variaciones en el rendimiento pueden producirse debido a fluctuaciones naturales (por ejemplo, estacionales) en la composición de la goma de mástique y también pueden estar influenciadas por la edad y las condiciones de almacenamiento de la goma de mástique.
Ejemplo 1B: Aislamiento de la fracción neutra de goma de mástique.
La capa de éter dietílico Nr.I obtenida en el Ejemplo 1A se transfirió a un embudo de decantación limpio y se lavó con agua (200 ml) y salmuera (150 ml). Luego se secó sobre sulfato de sodio anhidro. El sulfato de sodio se eliminó por filtración y el éter dietílico se evaporó usando un evaporador rotatorio. Esto dio aproximadamente 15 gramos de fracción neutra aislada como un sólido pegajoso de color blanco a blanquecino (que se convertirá en un líquido muy viscoso por encima de 35-40° C). Este es un rendimiento de aproximadamente el 50% en base al extracto obtenido después de la extracción con etanol/hexano presentada en el Ejemplo 1A. Esta fracción neutra aislada particular obtenida de la goma de mástique como se describe en la presente se denomina "Mezcla Neutra 1". En base a los 50 gramos iniciales de goma de mástique, el rendimiento de esta fracción neutra ("Mezcla neutra 1") es de aproximadamente el 30%. Los rendimientos típicos de esta fracción neutra de goma de mástique varían de aproximadamente el 25 a aproximadamente el 35%.
El balance de masa de esta extracción ácido-base particular descrita aquí es típicamente de más del 90% y, a menudo, más del 95% en base al extracto intermedio obtenido después del procedimiento de extracción con etanol/hexano. La proporción de la fracción ácida aislada de este modo ("Mezcla ácida 1") con la fracción neutra aislada ("Mezcla neutra 1") se aproxima habitualmente a 1:1 (y casi siempre dentro del intervalo de 0,8:1,2 a 1,2:0,8).
El aislamiento de ácidos triterpenoicos y triterpenoides neutros individuales a partir de fracciones ácidas aisladas y fracciones neutras aisladas puede lograrse usando cromatografía en columna estándar y métodos de HPLC como los conocidos por un experto en la técnica.
Debe entenderse, y está claro para un experto en la técnica, que pueden usarse otros protocolos de extracción para obtener diferentes fracciones ácidas aisladas y fracciones neutras aisladas a partir de materiales vegetales adecuados que pueden usarse posteriormente para el aislamiento de ácidos triterpenoicos y/o triterpenoides neutros.
Ejemplo 2 - Síntesis de un ácido triterpenoico y algunos triterpenoides neutros
Síntesis A : Peparación de ácido oleanónico
El ácido oleanónico se obtuvo en tres pasos a partir del ácido oleanólico.
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El ácido oleanólico se convirtió primero en el éster metílico correspondiente mediante tratamiento con yoduro de metilo y carbonato de potasio en dimetilformamida (DMF). La oxidación del éster metílico del ácido oleanólico a éster metílico del ácido oleanónico se realizó usando reactivo de peryodinano de Dess-Martin en diclorometano (DCM). La hidrólisis del éster metílico del ácido oleanónico con hidróxido de litio en THF acuoso dio tras la acidificación el ácido oleanónico deseado.
Éster metílico del ácido oleanónico: Se disolvió ácido oleanólico (3,66 g, 1,0 eq) en DMF (20,0 vol.). Se añadió K2CO3 (3,3 g, 3,0 eq) y la mezcla se agitó durante 10 minutos, luego se añadió yoduro de metilo (0,75 ml, 1,5 eq). La mezcla de la reacción se llevó a cabo a temperatura ambiente durante la noche (conversión completa en TLC). Se filtró el K2CO3 de la mezcla de la reacción y la reacción se vertió en agua helada. Se filtró el sólido blanco, se lavó con agua y se secó a presión reducida para dar el producto deseado (3,62 g, 96,0%).
Hidrólisis del éster metílico: a éster metílico del ácido oleanónico (1,0 g) en DMF seco (30 ml) se le añadió LiCl seco (200 mg) y la mezcla se agitó bajo nitrógeno a 50° C durante 6 h. Después de enfriar a temperatura ambiente, la mezcla de la reacción se inactivó mediante la adición de una solución de Na2CO3 al 5% (20 ml) y se agitó durante la noche. Luego se añadió HCl acuoso al 3% hasta pH = 2 y la mezcla se extrajo con éter dietílico (3 x 50 ml). Las capas de éter combinadas se lavaron con HCl al 0,5% y se secaron sobre sulfato de sodio. La evaporación del éter dietílico dio ácido oleanónico como un sólido blanco (0,73 g).
Síntesis B: preparación de NF-A (betulona)
Se sintetizó la NF-A a partir de acetato de betulina-28 en dos pasos.
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Primero, se oxidó el grupo 3-hidroxilo a la correspondiente cetona con PCC en diclorometano. Esto fue seguido por la hidrólisis del grupo acetato C-28 para dar el NF-A deseado (Betulona).
Paso de oxidación: se disolvió 28-acetil betulina (3,2 g, 1,0 eq) en DCM (40,0 vol.). La mezcla se enfrió en un baño de hielo y luego se añadió PCC (2,13 g, 1,5 eq). La mezcla de la reacción se calentó a temperatura ambiente y se agitó durante la noche. La mezcla se concentró en gel de sílice y se purificó mediante cromatografía en columna ultrarrápida eluida con hexano:EtOAc (95:5->90:10->85:15) para dar el producto deseado como un polvo blanco (2,85-3,15 g, 80,0-99%)..
Hidrólisis del acetato: el material de partida (1,14 g, 1,0 eq) se disolvió en una mezcla de THF:H2O (2:1, 40,0 vol) luego se añadió LiOH monohidrato (0,57 g, 10,0 eq)). La reacción se llevó a cabo a temperatura ambiente durante 3 días. Se evaporó el THF. La mezcla se extrajo con EtOAc (3x), las capas orgánicas se combinaron, se secaron sobre MgSO4 y luego se concentraron a presión reducida. El producto bruto se purificó mediante cromatografía en columna eluida con hexano:EtOAc 9:1 para dar un polvo blanco (80%). El material de partida recuperado se hidrolizó una vez más, rendimiento total 1,04 g (91,0%).
Síntesis C: Preparación de NF-B (alcohol oleanónico; 28-hidroxi-beta-amirona)
El NF-B se sintetizó a partir del éster metílico del ácido oleanónico en tres pasos.
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Primero, el grupo 3-oxo de éster metílico del ácido oleanónico (ver la síntesis de A anterior) se convirtió con etilenglicol y p-TosOH (ácido p-toluenosulfónico) catalítico en el acetal correspondiente usando la configuración de Dean-Stark estándar con tolueno como el solvente. Luego, el grupo éster metílico se redujo al alcohol correspondiente con hidruro de litio y aluminio en THF. La hidrólisis del acetal con HCl acuoso diluido en acetona dio el NF-B (alcohol oleanónico) deseado.
Formación de acetal: Se disolvió éster metílico del ácido oleanónico (1,4 g, 1,0 eq) en tolueno (20,0 vol.) y luego se añadieron TsOH (0,006 g, 0,01 eq) y etilenglicol (0,46 g, 2,5 eq). La reacción se mantuvo a reflujo durante 3 horas en un condensador Dean-Stark. La TLC indicó la conversión completa del material de partida. La reacción se enfrió a TA y se inactivó con solución saturada de NaHCO3, luego se realizó la extracción a EtOAc (3x). Las capas orgánicas se lavaron con agua, se secaron sobre MgSO4 y se concentraron. El producto bruto se obtuvo como un sólido gris y se usó en el paso siguiente sin ninguna purificación adicional (1,42 g).
Reducción de éster: se suspendió LAH (0,86 g, 2,5 eq) en THF anh. (20,0 vol.) y se enfrió a 0° C. El material de partida (3,85 g, 1,0 eq) se disolvió en THF anh. (25,0 vol.) y se añadió gota a gota a la suspensión. Después de la adición, la mezcla se calentó a temperatura ambiente y se agitó durante 2 horas (conversión completa en TLC). La mezcla de la reacción se inactivó mediante el "método 1-2-3". La lechada resultante se filtró a través de Celite. El filtrado se concentró y se usó en el paso siguiente sin purificación adicional (3,5 g).
"Método 1-2-3":
1. Añadir H2O a la mezcla de la reacción. La misma cantidad (ml) de agua que la cantidad (g) de LAH
2. Añadir NaOH al 15% a la mezcla. Doble de la cantidad (ml) de NaOH al 15% que la cantidad (g) de LAH 3. Añadir H2O a la mezcla. Triple de la cantidad (ml) de agua que la cantidad (g) de LAH
Hidrólisis de acetal: Se suspendió el material de partida (3,5 g, 1,0 eq) en una mezcla de acetona (12,0 vol.) y HCl 1M (10,0 vol.). La mezcla de la reacción se calentó a reflujo durante 3 horas (conversión completa en TLC). La mezcla de la reacción se inactivó con solución saturada de NaHCO3 a pH 8, se extrajo con EtOAc (3x), se secó sobre MgSO4 y se concentró. El producto bruto se purificó mediante cromatografía en columna, se eluyó con hexano: EtOAc (98:2 ^ 95:5 ^ 93:7) y se trituró con MeOH (1 g de producto bruto/5 ml de MeOH). El precipitado se filtró y se secó al vacío para dar el producto deseado en forma de un sólido blanco (2,63 g).
Síntesis D y E: Preparación de alcohol oleanólico (también conocido como eritrodiol; 28-hidroxi-beta-amirina) y NF-3 (aldehído oleanónico)
Se descubrió que el alcohol oleanólico (también conocido como eritrodiol) se sintetizaba más fácilmente mediante la reducción del éster metílico del ácido oleanólico (ver síntesis A) con hidruro de litio y aluminio en THF. (Los intentos de preparar este compuesto mediante reducción directa de ácido oleanólico dieron rendimientos muy bajos incluso después de tiempos de reacción prolongados y usando un gran exceso de hidruro de litio y aluminio).
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El aldehído oleanónico (NF-3) se sintetizó posteriormente a partir de alcohol oleanólico mediante oxidación usando el reactivo peryodinano de Dess-Martin.
28-hidroxi-beta-amirina (Eritrodiol): se suspendió LAH (1,2 g, 3,0 eq) en THF anhidro (10,0 vol.) y se enfrió a 0° C. El material de partida (5,0 g, 1,0 eq) se disolvió en THF anhidro (15,0 vol.) y se añadió gota a gota a la suspensión. Después de la adición, se dejó que la mezcla alcanzara la temperatura ambiente y se agitó adicionalmente durante 2 horas (conversión completa en TLC). La reacción se inactivó mediante el "método 1-2-3" (ver la síntesis C). La lechada resultante se filtró a través de Celite. El filtrado se concentró y el producto bruto se usó en el paso siguiente sin purificación adicional (4,60 g).
Aldehído oleanónico (NF-3): se disolvió 28-hidroxi-beta-amirina (2,8 g, 1,0 eq) en DCM (20,0 vol.) y luego se añadió DMP (5,36 g, 2,0 eq). La reacción se llevó a cabo durante 1 hora. El producto bruto se concentró en gel de sílice y se purificó mediante cromatografía en columna eluida con hexano, luego con hexano:EtOAc (99:1 ^ 9:1) para dar aldehído oleanónico como un sólido blanco (0,60 g).
Síntesis F: Preparación de aldehído masticadienónico
El aldehído masticadienónico se preparó a partir de ácido masticadienónico en tres pasos. El éster metílico del ácido masticadienónico se preparó usando diazometano en éter dietílico o usando trimetilsilildiazometano en diclorometano (DCM)/metanol. La reducción del éster metílico con hidruro de litio y aluminio dio masticadienediol. Luego, el diol se convirtió en aldehído masticadienónico por oxidación con reactivo peryodinano de Dess-Martin.
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Éster metílico del ácido masticadienónico: se disolvió MDA (1 g, 1,0 eq) en una mezcla de DCM (10,0 ml) y MeOH (10,0 ml) y se añadió gota a gota una solución 2M de TMS-diazometano en DCM (4,4 ml, 4,0 eq) en el plazo de 30 minutos. El color de la solución se volvió amarillo claro, la mezcla de la reacción se agitó durante 30 minutos. El progreso de la reacción se monitorizó en TLC (hexano:EA 4:1, visualizado en solución de tinción pAA).
La reacción se inactivó mediante la adición de unas pocas gotas de AcOH hasta que desapareció el color amarillento. La mezcla se concentró, se disolvió en EA y se lavó con NaHCO3 saturado y salmuera saturada. La capa orgánica se secó y se concentró para dar el éster metílico de MDA deseado (1,02 g). El producto se usó en el paso posterior sin más purificación.
Masticadienediol: se suspendió LAH (0,21 g, 10,0 eq) en THF anh. (20,0 vol.) y se enfrió a 0° C. Se disolvió MDA (0,25 g, 1,0 eq) en THF anh. (25,0 vol.) y se añadió gota a gota a la suspensión en el plazo de 15 minutos. Después de la adición, la mezcla se calentó a temperatura ambiente y se agitó durante 2 horas (conversión completa en TLC). La mezcla de la reacción se inactivó mediante el "método 1-2-3". La lechada resultante se filtró a través de Celite. El filtrado se concentró y se purificó mediante cromatografía en columna eluida con la mezcla eluyente apropiada (DCM :MeOH) para dar masticadienediol (110 mg). La misma reacción en una escala de 2,5 g dio 1,7 g de producto. Se obtuvo una mezcla de isómeros, con el isómero 3-beta como producto principal (proporción de alfa/beta de aprox. 5:1). Los isómeros pueden separarse adicionalmente mediante HPLC preparativa.
Aldehido masticadienónico: se disolvió masticadienediol (0,45 g, 1,0 eq) en DCM (20,0 vol.) y luego se añadió DMP (0,95 g, 2,2 eq). La reacción se llevó a cabo durante 2 horas. El producto bruto se concentró en gel de sílice y se purificó mediante cromatografía en columna eluida con hexano, luego con hexano:EtOAc (99:1 ^ 9:1) para dar el producto deseado en forma de un sólido blanco (0,3 g).
Sintesis G: Preparación de aldehído isomasticadienónico
El aldehído isomasticadienónico se sintetizó a partir del ácido isomasticadienónico usando la misma secuencia de reacciones que se usó para el aldehído masticadienónico en la Síntesis E descrita anteriormente.
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Éster metílico del ácido isomasticadienónico: Se disolvió IMDA (1 g, 1,0 eq) en una mezcla de DCM (10,0 ml) y MeOH (10,0 ml) y se añadió gota a gota una solución 2M de diazometano TMS (4,4 ml, 4,0 eq) en el plazo de 30 minutos. El color de la solución se volvió amarillo claro, la mezcla de la reacción se agitó durante 30 minutos. El progreso de la reacción se monitorizó en TLC (hexano:EA 4:1, visualizado en solución de tinción pAA).
La reacción se inactivó mediante la adición de unas gotas de AcOH hasta que desapareció el color amarillento. La mezcla se concentró, se disolvió en EA y se lavó con NaHCO3 saturado y salmuera saturada. La capa orgánica se secó y se concentró para dar el éster metílico de IMDA deseado (1,02 g). El producto se usó en el paso posterior sin purificación adicional.
Isomasticadienediol: se suspendió LAH (0,21 g, 10,0 eq) en THF anh. (20,0 vol.) y se enfrió a 0° C. Se disolvió MDA (0,25 g, 1,0 eq) en THF anh. (25,0 vol.) y se añadió gota a gota a la suspensión en el plazo de 15 minutos. Después de la adición, la mezcla se calentó a temperatura ambiente y se agitó durante 2 horas (conversión completa en TLC). La mezcla de la reacción se inactivó mediante el "método 1-2-3". La lechada resultante se filtró a través de Celite. El filtrado se concentró y se purificó mediante cromatografía en columna eluyendo con la mezcla de eluyente apropiada (DCM:MeOH) para dar isomasticadienediol (0,16 g, 65,0%). La misma reacción en una escala de 2,5 g dio 1,55 g de producto (61%). Se obtuvo una mezcla de isómeros, con el isómero 3-beta como producto principal (proporción de alfa/beta de aprox. 5:1). Los isómeros pueden separarse adicionalmente mediante HPLC preparativa.
Aldehído isomasticadienónico: se disolvió isomasticadienediol (0,45 g, 1,0 eq) en DCM (20,0 vol.) y luego se añadió DMP (0,95 g, 2,2 eq). La reacción se llevó a cabo durante 2 horas. El producto bruto se concentró en gel de sílice y se purificó mediante cromatografía en columna eluida con hexano, luego con hexano:EtOAc (99:1 ^ 9:1) para dar el producto deseado en forma de un sólido blanco (0,4 g).
Síntesis H: Preparación de NF-2 ((8R)-3-Oxo-8-hidroxipolipoda-13E,17E,21-trieno)
Se preparó NF-2 a partir de NF-1 por oxidación del grupo hidroxilo secundario a la cetona usando reactivo de peryodinano de Dess-Martin.
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Se disolvió NF-2 ((8R)-3-Oxo-8-hidroxipolipoda-13E,17E,21-trieno): NF-1 (0,90 g, 1,0 eq) en DCM (20,0 vol.) y luego se añadió DMP (1,90 g, 2,2 eq). La reacción se llevó a cabo durante 2 horas. El producto bruto se concentró en gel de sílice y se purificó mediante cromatografía en columna eluida con hexano, luego con hexano:EtOAc (9:1 ^ 3:1) para dar el producto deseado en forma de un sólido blanco (0,72 g).
Otros métodos de oxidación adecuados para esta reacción son la oxidación de Swern, el clorocromato de piridinio en DCM y la oxidación de Oppenauer.
Síntesis I: preparación de beta-amirina
Se preparó beta-amirina en cinco pasos a partir de ácido oleanólico.
Figure imgf000044_0002
Primero, el grupo 3-hidroxilo se protegió como TES-éter usando TES-triflato (TES= trietilsililo). A esto le siguió la reducción del éster metílico al alcohol correspondiente usando hidruro de litio y aluminio, dando el diol monoprotegido. El grupo hidroxilo libre se oxidó al aldehído usando PCC (clorocromato de piridinio). El grupo aldehído se convirtió en beta-amirina en una secuencia de tres pasos en un solo recipiente. El primer paso fue la formación de tosilhidrazida. Después de cambiar el sistema de solvente, la hidrazida se redujo sometiéndola a reflujo con borohidruro de sodio que simultáneamente eliminó el grupo protector de TES dando como resultado la formación directa de la beta-amirina deseada.
Éster metílico del ácido oleanólico:
Se disolvió ácido oleanólico (5,0 g, 1,0 eq) en DMF (20,0 vol.). Se añadió K2CO3 (4,54 g, 3,0 eq) y la mezcla se agitó durante 5-10 min, luego se añadió CH3I (2,0 eq). La mezcla de la reacción se llevó a cabo a temperatura ambiente durante la noche (conversión completa en TLC). Se filtró el K2CO3 de la mezcla de la reacción y la reacción se vertió en agua con hielo. Se filtró el sólido blanco, se lavó con agua y se secó a presión reducida. El producto bruto se usó en el paso siguiente sin ninguna purificación (5,1 g).
Protección TES del grupo 3-hidroxilo:
Se disolvió éster metílico del ácido oleanólico (5,1 g, 1,0 eq) en DCM (20,0 vol.) que contenía TEA (9,9 ml, 6,6 eq). La mezcla se agitó durante 15 minutos y se añadió gota a gota TESOTf (8,0 ml, 3,3 eq). La mezcla de la reacción se agitó durante la noche a TA hasta que se hubo completado. (TLC hexano:EA; 4:1). La mezcla se diluyó con HCl 1M y se extrajo con DCM (2x). Las capas orgánicas combinadas se secaron y concentraron. La mezcla bruta se purificó mediante cromatografía en columna (hexano:EA 98:2) para dar el producto deseado en forma de un sólido blanco. (6,6 g).
Reducción de éster:
Se suspendió LAH (1,29 g, 2,5 eq) en THF anh. (20,0 vol.) y se enfrió a 0° C. El material de partida (6,61 g, 1,0 eq) se disolvió en THF anh. (25,0 vol.) y se añadió gota a gota a la suspensión. Después de la adición, la mezcla se calentó a temperatura ambiente y se agitó durante 2 horas (conversión completa en TLC). La reacción se inactivó mediante el "método 1-2-3" (ver Síntesis C). La suspensión resultante se filtró a través de Celite. El filtrado se concentró y se usó en el paso siguiente sin purificación adicional (4,55 g).
Oxidación de alcohol:
Se disolvió diol mono-protegido (1,0 g, 1,0 eq) en DCM (20,0 vol.) y se enfrió a 0° C. A eso se le añadió PCC (0,58 g, 1,5 eq) y la mezcla se agitó durante 2 h a TA. El progreso de la reacción se monitorizó en TLC (hexano:EA 9:1). La reacción se concentró en S1O2 y se purificó por cromatografía en columna eluida con hexano:EA para dar el producto puro (0,76 g).
Conversión en un solo recipiente de producto intermedio TES-aldehído en beta-amirina (formación de hidrazida; reducción; escisión de TES):
El material de partida (0,62 g, 1,0 eq) se suspendió en EtOH (26,0 vol.), se añadió p-toluenosulfonil hidrazida (0,25 g, 1,2 eq) y la mezcla se calentó a reflujo durante la noche. El progreso de la reacción se monitorizó en TLC (hexano:EA 7:3). Se concentró EtOH y se disolvió el residuo en THF (33,0 vol.) y agua (5,0 vol.) y NaBH4 (0,42 g, 10,0 eq). La reacción continuó a TA durante la noche y luego 2 horas a reflujo. La reacción se enfrió y se dividió entre agua y EA, se separaron las capas y la capa de agua se extrajo 2 veces con EA. Las capas orgánicas combinadas se secaron y concentraron para dar un residuo bruto. La mezcla de la reacción bruta purificada mediante cromatografía en columna se eluyó con hexano:EA para dar beta-amirina como un sólido blanco (100 mg).
Síntesis J : preparación de beta-amirona
La beta-amirona se preparó a partir de beta-amirina por oxidación del grupo hidroxilo a la cetona correspondiente usando clorocromato de piridinio (PCC). Otros métodos adecuados son el reactivo de Dess-Martin o la oxidación de Swern.
Figure imgf000045_0001
Via PCC-oxidación: Se disolvió beta-amirina (100 mg, 1,0 eq) en DCM (20,0 vol.) y se enfrió a 0° C. A eso se le añadió PCC (76 mg, 1,5 eq) y la mezcla se agitó durante 1 hora a TA. El progreso de la reacción se monitorizó en TLC (hexano:EA 6:1). La reacción se concentró en S1O2 y se purificó mediante cromatografía en columna eluyendo con hexano:EA (60:1 ^ 20:1) para dar el producto puro (63 mg).
Vía reactivo Dess-Martin: Se disolvió el material de partida (100 mg, 1,0 eq) en DCM (20,0 vol.) y luego se añadió DMP (0,95 g, 2,2 eq). La reacción se llevó a cabo durante 2 horas. El producto bruto se concentró en gel de sílice y se purificó mediante cromatografía en columna eluida con hexano:EA (60:1 ^ 20:1) para dar el producto puro para dar el producto deseado como un sólido blanco (0,67 g).
Síntesis K : Preparación de 28-oxo-lupen-3-ona
Se sintetizó 28-oxo-lupen-3-ona a partir de NF-A (betulona, ver Síntesis B), por oxidación del grupo 28-hidroxilo al aldehído correspondiente con peryodinano de Dess-Martin.
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El material de partida (1,0 g, 1,0 eq) se disolvió en DCM (20,0 vol.) y luego se añadió DMP (2,20 g, 2,2 eq). La reacción se llevó a cabo durante 2 horas. El producto bruto se concentró en gel de sílice y se purificó mediante cromatografía en columna eluida con hexano, luego con hexano:EtOAc (99:1 ^ 9:1) para dar el producto deseado en forma de un sólido blanco (0,74 g).
Otros métodos de oxidación adecuados para esta reacción fueron la oxidación de Swern, clorocromato de piridinio en DCM.
Síntesis L: Preparación de aldehído oleanólico
El aldehído oleanólico se preparó en dos pasos a partir del producto intermedio diol mono-protegido de la síntesis I de beta-amirina.
Figure imgf000046_0002
El grupo hidroxilo libre se oxidó al aldehído correspondiente usando PCC o peryodinano de Dess-Martin. A esto le siguió la eliminación del grupo TES con TBAF en THF acuoso para dar el aldehído oleanólico deseado.
Via PCC-oxidación: El diol mono-protegido (1,0 g, 1,0 eq) se disolvió en DCM (20,0 vol.) y se enfrió a 0° C. a eso se le añadió PCC (0,58 g, 1,5 eq) y la mezcla se agitó durante 2 horas a TA. El progreso de la reacción se monitorizó en TLC (hexano:EA 9:1). La reacción se concentró en SiO2 y se purificó por cromatografía en columna se eluyó con hexano:EA para dar el producto puro (0,76 g).
Vía oxidación de Dess-Martin: El diol monoprotegido (1,0 g, 1,0 eq) se disolvió en DCM (20,0 vol.) y luego se añadió DMP (2,20 g, 2,2 eq). La reacción se llevó a cabo durante 2 horas. El progreso de la reacción se monitorizó en TLC (hexano:EA 9:1). La mezcla de la reacción se concentró en SiO2 y se purificó por cromatografía en columna eluida con hexano:EA para dar el producto puro (0,69 g).
Eliminación de grupo TES: (150 mg, 1,0 eq) se disolvió en THF (15,0 vol.) y se enfrió a 0° C. A esto se añadió TBAF (113 mg, 2,0 eq) y la mezcla se agitó durante la noche a TA. El progreso de la reacción se monitorizó en TLC (hexano:EA 4:1). La reacción se concentró en SiO2 y se purificó mediante cromatografía en columna eluyendo con hexano:EA (9:1 ^ 6:1) para dar el producto puro (86 mg).
Algunas referencias adecuadas para la síntesis de varios triterpenoides que se encuentran en la presente solicitud son:
D. Barton et al. J.Chem.Soc. 1956, 4150,
V. Domingo et al. J.Org.Chem. 74, 6151,2009.
V. Domingo et al. Org.Biomol.Chem. 11,559, 2013.
J. Justicia et al. Eur.J.Org.Chem. 10, 1778, 2004.
Ejemplo 3 - Preparación de composiciones y formulaciones farmacéuticas
Las composiciones farmacéuticas que se muestran en la Tabla 1 se prepararon mezclando y disolviendo las cantidades requeridas de ácido o ácidos triterpenoicos y triterpenoide o triterpenoides neutros en un solvente adecuado (por ejemplo, éter dietílico) seguido de la adición de la cantidad requerida de portador farmacéuticamente aceptable. Luego, la mezcla se sacudió o agitó hasta que se obtuvo una solución transparente homogénea y el solvente adecuado (por ejemplo, éter dietílico) se eliminó usando vacío (por ejemplo, un evaporador rotatorio). Esto dio la composición farmacéutica deseada.
La Tabla 1A muestra las composiciones farmacéuticas que se prepararon usando éter dietílico como solvente y aceite de semilla de algodón de grado farmacéutico (grado NF) (estabilizado con aproximadamente 900 ppm de BHT) como portador farmacéuticamente aceptable.
T l 1A
Figure imgf000047_0001
En la Tabla 1B se indican formulaciones adicionales que contienen 3-OAc-MLA, 3-OAc-IMLA, 3-Ac-epi-MLA y 3-OAc-epi-IMLA que se han preparado como se indicó anteriormente.
T l 1B
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Ejemplo 4 - Efecto sinérgico de combinaciones de triterpenoides neutros y ácidos triterpenoicos en el modelo de ataque cerebral tMCAO de rata.
El modelo de oclusión de la arteria cerebral media (MCAO) es un modelo fiable para el ataque cerebral en ratas e imita la afección humana. Generalmente, la isquemia focal da como resultado un infarto cerebral localizado y es inducida por la oclusión de la arteria cerebral media (MCAO) en ratas. La oclusión de la MCA lleva a un daño en la corteza sensoriomotora debido a la pérdida neuronal, mientras que el nivel de este daño puede evaluarse mediante la evaluación histológica del tamaño del infarto y diversas pruebas de comportamiento.
La oclusión transitoria de la arteria cerebral media (tMCAO) se realizó de acuerdo con el método descrito por R. Schmid-Elsaesser et al. Stroke. 1998 ;29(10):2162-2170. Para los experimentos descritos en la presente, los animales se anestesian usando una solución de ketamina/xilazina. Luego se afeita el cuello del animal y se hace una incisión en la línea media en la piel del cuello, y el tejido que se encuentra debajo se disecciona directamente. La arteria carótida común derecha (ACC) se expuso a través de una incisión en la línea media del cuello y se diseccionó cuidadosamente para liberarla de los nervios y la fascia circundantes, desde su bifurcación hasta la base del cráneo. Luego, se aislaron las ramas de la arteria occipital de la ECA (arteria carótida externa), y estas ramas se diseccionaron y coagularon. La ECA se diseccionó más distalmente y se coaguló junto con las ramas terminales de la arteria lingual y maxilar, que luego se dividió. La ICA (arteria carótida interna) se aisló y se separó cuidadosamente del nervio vago adyacente, y la arteria pterigopalatina se ligó cerca de su origen con una sutura de nailon 5-0. Luego, se ató una sutura de seda 4-0 sin apretar alrededor del muñón de ECA movilizado, y una sutura de nailon monofilamento 4-0 de 4 cm de longitud (la punta de la sutura se desafiló usando una llama y la sutura se recubrió con polilisina, antes de la inserción) se insertó a través de la ECA proximal en la ICA y de allí en el círculo de Willis, ocluyendo efectivamente la MCA. Se cerró la herida quirúrgica y los animales se devolvieron a sus jaulas para recuperarse de la anestesia. Dos horas después de la oclusión, se volvió a anestesiar a las ratas, se retiró el monofilamento para permitir la reperfusión, se cerró la herida quirúrgica y las ratas se devolvieron a sus jaulas.
Dos horas después de la oclusión justo antes de la reperfusión, los animales se sometieron a evaluación neurológica usando el "Neuroscore para criterios de exclusión" (Chen J. et al. Stroke. 2001; 32(4):1005-1011.). Solo se incluyeron en el estudio animales con una puntuación global >10.
Inmediatamente después de la reperfusión, tres horas después de la inducción del ataque cerebral, las ratas se trataron con las composiciones A, B, C, D, E y F mediante inyección subcutánea. El experimento se llevó a cabo con un total de 68 ratas como se especifica a continuación.
Pruebas de colocación de extremidades anteriores y posteriores
Para la prueba de colocación de la extremidad anterior, el examinador sostiene a la rata cerca de una mesa y evalúa la capacidad de la rata para colocar la extremidad anterior sobre la mesa en respuesta a la estimulación de bigotes, visual, táctil o propioceptiva. De manera similar, para la prueba de colocación de las extremidades posteriores, el examinador evalúa la capacidad de la rata para colocar las extremidades posteriores sobre la mesa en respuesta a la estimulación táctil y propioceptiva. Se obtienen subpuntuaciones separadas para cada modo de entrada sensorial y se suman para obtener puntuaciones totales (para la prueba de colocación de las extremidades anteriores: 0 = normal, 12 = máximamente deteriorada; para la prueba de colocación de las extremidades posteriores: 0 = normal; 6 = máximamente deteriorada). Las puntuaciones se dan en incrementos de medio punto (ver más abajo). Por lo general, hay una recuperación lenta y constante del comportamiento de colocación de las extremidades durante el primer mes después del ataque cerebral.
Prueba de colocación de las extremidades anteriores (0-12):
Colocación de bigotes (0-2);
Colocación visual (hacia adelante (0-2), hacia los lados (0-2))
Colocación táctil (dorsal (0-2), lateral (0-2))
Colocación propioceptiva (0-2).
La evaluación se llevó a cabo (a) antes de la operación, (b) el día 15 después de la inducción del ataque cerebral y (c) el día 58 después de la inducción del ataque cerebral. Las diferencias en las pruebas de colocación de las extremidades anteriores entre los días 58 y 15 (p<0,01) se presentan en la Figura 1. Los valores con altas diferencias en los grupos A, B, C, E y F. indicaron una curación significativa y una función neurológica recuperada después del ataque cerebral en los grupos tratados con triterpenoides en comparación con el grupo de placebo D. Puntuación neurológica (Neuroscore):
La Escala de Calificación Neurológica Modificada (mNRS), o Neuroscore, se llevó a cabo (a) antes de la operación, (b) el día 15 después de la inducción del ataque cerebral y (c) el día 58 después del ataque cerebral. Las diferencias en las neuropuntuaciones entre los días 58 y 15 (p<0,01) se presentan en la Figura 2. Los valores con altas diferencias en los grupos A, B, C, E y F. indicaron una curación significativa y una función neurológica recuperada después del ataque cerebral en los grupos tratados con triterpenoides en comparación con el grupo de placebo D.
Composiciones como se usan en el modelo de ataque cerebral tMCAO
"Mezcla ácida 1" significa la fracción ácida aislada de goma de mástique preparada de acuerdo con el Ejemplo 1A. La "Mezcla ácida 1" contiene como compuestos principales los siguientes:
- MA: ácido morónico (12-15%)
- OA: ácido oleanónico (18-20%)
- MDA: ácido 24-Z-masticadienónico (20-22%)
- IMDA: ácido 24-Z-isomasticadienónico (22-26%)
- Ácido 3-beta-OAc-24-Z-masticadienólico (4-7%)
- Ácido 3-beta-OAc-24-Z-isomasticadienólico (4-7%)
Además, contiene una serie de otros ácidos triterpenoicos en pequeñas cantidades, típicamente de menos del 5%. Los posibles ácidos triterpenoicos que puede contener son:
- MLA: ácido 3-beta-masticadienólico
- IMLA: ácido 3-beta-isomasticadienólico
- Ácido dihidromasticadienónico
- Ácido dihidroisomasticadienónico
La "Mezcla ácida 2" contiene los siguientes compuestos en % (p/p):
MA: ácido morónico (15%)
- OA: ácido oleanónico (15%)
- MDA: ácido 24-Z-masticadienónico (25%)
- IMDA: ácido 24-Z-isomasticadienónico (30%)
- Ácido 3-beta-OAc-24-Z-masticadienólico (8%)
- Ácido 3-beta-OAc-24-Z-isomasticadienólico (7%)
En la Tabla 2, "Mezcla ácida 1 (2,5%)" significa una formulación al 2,5% (p/p) de la fracción ácida como se aísla en el Ejemplo 1A en aceite de semilla de algodón. De igual manera, "Mezcla ácida 2 (2,5%)" significa una formulación al 2,5% (p/p) de "Mezcla ácida 2" como se ha definido anteriormente,
"Mezcla neutra 1" es la fracción neutra preparada de acuerdo con el Ejemplo 1A, B;
La "Mezcla neutra 2" contiene los siguientes triterpenoides neutros:
NF-1: (8R)-3-beta,8-dihidroxipolipoda-13E,17E,21 -trieno
NF-2: (8R)-3-Oxo-8-hidroxipolipoda-13E,17E,21 -trieno
NF-3: aldehído oleanónico
NF-4: tirucallol
NF-P: Dipterocarpol (20-hydroxidammar-24-en-3-ona)
NF-A: (Betulon), 28-hidroxilup-20 (29) -en-3-ona
NF-B: alcohol oleanónico; (28-hidroxi-beta-amirona)
3-beta-hidroxi-13-alfa-malabarica-14(26),17E,21 -trieno
20-hidroxi-lupan-3-ona
28-Nor-17-hidroxilupen-3-ona
28-oxo-lupen-3-ona
28-nor-beta-amirona
Aldehído isomasticadienónico
Isomasticadienediol
Masticadienediol
Aldehído oleanólico (28-oxo-beta-amirina),
3-beta-20-dihidroxilupano
Aldehído masticadienónico
3-oxo-malabarica-14(26),17E,21 -trieno
Beta-amirona
Beta-amirina
Germanicol,
Las concentraciones (en aceite de semilla de algodón) de cada compuesto/fracción en las diferentes composiciones usadas para el modelo de tMCAO se presentan en la Tabla 2. La Tabla 3 presenta el número de animales por grupo y dosificación.
T l 2
Figure imgf000050_0001
continuación
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Tabla 3
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A las ratas de los diferentes grupos se les inyectaron dos veces por semana por vía subcutánea 25 microlitros del elemento de prueba designado. La primera inyección se administró tres horas después de la inducción del ataque cerebral. Como se usa en la presente, el término "Formulación X" se refiere a la formulación administrada a las ratas incluidas en el Grupo X, como se describe en la presente y en la Tabla 2, en donde X es A, B, C, D, E o F.
Resultados y conclusión
Las ratas incluidas en los grupos A-F se trataron con las Composiciones A, B, C, E y F, que incluyen una combinación de por lo menos un ácido triterpenoico y por lo menos un triterpenoide neutro, o con la Composición D de placebo durante 58 días mediante inyecciones subcutáneas dos veces a la semana comenzando inmediatamente después de la reperfusión. Durante el estudio, las funciones neurológicas y somatosensoriales se controlaron en una batería de pruebas de comportamiento.
Se observó cierta recuperación del ataque cerebral espontánea de las funciones neurológicas durante el seguimiento de 58 días después de la inducción del ataque cerebral. Todas las composiciones probadas, incluyendo combinaciones de por lo menos un ácido triterpenoico y por lo menos un triterpenoide neutro, mostraron una recuperación mejorada de la función neurológica en comparación con el grupo de placebo (Grupo D). Al comparar el efecto de las composiciones que incluyen combinaciones de compuestos terpenoides, las Composiciones A y C mostraron efectos más fuertes en comparación con las composiciones B, E y F (Figura 1).
Las funciones sensoriales motoras también se mejoraron tras el tratamiento con cada una de las composiciones que comprenden por lo menos un ácido triterpenoico y por lo menos un triterpenoide neutro. El tratamiento con la Composición A mostró la mayor diferencia en comparación con el placebo (Grupo D) (Figura 2). También se observó una mejora mejorada de la función motora sensorial en comparación con el Grupo D tratado con placebo para las Composiciones B, C, E y F, mientras que la mejora fue más pronunciada para las Composiciones F y C. Inesperadamente, los efectos terapéuticos observados debido a la administración de la diferentes composiciones que comprenden por lo menos un ácido triterpenoico y por lo menos un triterpenoide neutro, aumentaron con el tiempo y fueron más pronunciadas hacia el día 58 después de la operación.
La salud general de las ratas fue idéntica en todos los grupos, ya que todas aumentaron de peso al mismo ritmo sin diferencias significativas entre ellas.
En vista de estos descubrimientos, puede concluirse que las composiciones de varias combinaciones de moléculas, como se divulga en la presente invención, son eficaces para el tratamiento del ataque cerebral y tienen el potencial de restaurar la función motora dañada y mejorar los déficits somatosensoriales de los sujetos que sufrieron un ataque cerebral.
Ejemplo 5 - Modelo de neurotoxicidad inducida por glutamato
El ataque cerebral isquémico o hemorrágico, la lesión cerebral traumática (TBI) y otras lesiones cerebrales se encuentran entre los eventos más devastadores que pueden padecer los pacientes. A pesar de tener diferentes etiologías, parecen fusionarse en torno a la misma fisiopatología compleja que incluye: supresión inmunitaria, toxicidad mediada por radicales libres, daño cerebral/neuronal, infección, citotoxicidad mediada por citoquinas, inflamación y activación de células gliales. Todos estos resultan en déficits cognitivos y/o físicos.
La excitoneurotoxicidad después de diferentes daños cerebrales se debe principalmente a la liberación excesiva de glutamato con la consiguiente entrada excesiva de Ca2+, principalmente mediada por los receptores de glutamato de N-metil D-aspartato (NMDA). La liberación de glutamato induce excitotoxicidad y contribuye a la fisiopatología de numerosas enfermedades neurológicas incluyendo isquemia, inflamación, epilepsia y enfermedades neurodegenerativas.
La excitotoxicidad del glutamato es un mecanismo importante de muerte neuronal en una amplia gama de trastornos neurológicos. Se usó un modelo bien establecido para implementar la excitotoxicidad inducida por glutamato en cultivos primarios de neuronas corticales con el propósito de evaluar el efecto neuroprotector potencial de las composiciones de la presente invención.
Procedimiento experimental
Composiciones usadas:
Tabla 1A, Entrada N° 25, denominada en la presente "Combinación A".
Tabla 1A, Entrada N° 31, denominada en la presente "Combinación B:
Extracto de la Tabla 1A:
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Cultivo de células
Se recogieron cortezas de embriones de rata E19 Sprague-Dawley. Los tejidos se disociaron enzimática y mecánicamente para obtener una suspensión celular homogénea, y las células se sembraron a 20000 por pocillo de cuatro placas de 96 pocillos en 200 gl de medio neuronal.
Neurotoxicidad inducida por glutamato:
Seis (6) días después de la siembra en placas (DIV6) de neuronas corticales primarias en 200 gl de medio de crecimiento, los compuestos de prueba se aplicaron a las neuronas, reemplazando la mitad del medio de crecimiento con 90 gl de medio que contenía una sonda de citólisis que es impermeable a las células y colorante de tinción de ácidos nucleicos de alta afinidad que no es fluorescente en ausencia de ácidos nucleicos y muestra una fuerte fluorescencia al unirse al ADN. Luego, se añadieron a las células 10 gl de compuestos concentrados 20X en aceite. La adquisición de imágenes de lapso de tiempo se inició 20 horas después del primer tratamiento después de un problema de la red informática que no permitió el inicio de adquisiciones desde el momento del tratamiento. Desde ese momento hasta el final de los experimentos, se tomaron imágenes de lapso de tiempo (1 imagen cada 4 horas) del cultivo neuronal en contraste de fase y en fluorescencia para monitorización de citólisis. Esto se realizó en 4 placas diferentes en paralelo, cada una conteniendo los compuestos de prueba y controles.
Nueve (9) días después de la siembra en placas (DIV9), la mitad del medio de crecimiento se renovó con 90 gl de medio que contenía la sonda de citólisis y se añadieron a las células 10 gl de los mismos compuestos concentrados 20X preparados el día 6. En DIV10, la mitad de las placas pretratadas (2 placas) se trataron con glutamato 100 gM/glicina 10 gM para inducir excitotoxicidad, mediante la adición de 10 gl de solución de glutamato concentrada 21X. Una placa tratada con glutamato y una placa no tratada con glutamato recibieron además tratamientos con compuestos de prueba en DIV 11 y en DIV 14 siguiendo el mismo programa (renovación de la mitad del medio con adición de 10 gl de compuestos concentrados en las células). Las células se siguieron hasta DIV 15, 24 horas después del último tratamiento. Al final de los experimentos, todos los cultivos se permeabilizaron de modo que la sonda de citólisis marcó todas las células permitiendo el recuento de células totales. La citólisis a lo largo del tiempo se racionalizó al número total de células para proporcionar un porcentaje de células citolizadas a lo largo del tiempo. Todos los experimentos se realizaron por triplicado en la misma sesión experimental.
Protocolo de tratamiento:
Los compuestos de prueba se probaron con 2 programas de tratamiento:
- 2 pretratamientos a -96 y -24 horas antes de los tratamientos con glutamato
- 2 pretratamientos a -96 y -24 horas antes de los tratamientos con glutamato de otras placas pero sin tratamiento con glutamato.
Criterios de valoración/análisis del ensayo
Porcentaje de neuronas citolizadas a lo largo del tiempo (cinética) de DIV 6 a DIV 15. Como el período de monitorización fue muy largo, en algunos casos, la citólisis máxima durante este período superó el 100% que se midió al final después de la permeabilización celular, porque los tratamientos tóxicos pueden inducir desprendimientos de células muertas de la superficie del cultivo. En estos casos, el valor máximo que se alcanzó durante la monitorización (superior al valor final de citólisis del 100%) se consideró como el 100%. En cultivos primarios, hay una pérdida neuronal espontánea a lo largo del tiempo. El primer punto de datos se consideró al 0% de citólisis, por lo que solo se consideró la homogeneidad de la muerte celular que aparecía durante el período de monitorización.
Para evaluaciones específicas de los efectos del glutamato, algunas representaciones usan el punto de datos antes de la aplicación de glutamato como la nueva citólisis al 0% para evaluar específicamente los efectos del glutamato sin interferencia de eventos de citólisis anteriores. Los gráficos de puntos de tiempo fijo también se extrajeron de los análisis cinéticos, las áreas bajo la curva (AUC) de las curvas cinéticas de citólisis se calcularon desde el punto temporal de 72 h hasta el final de la cinética.
Resultados:
Como se muestra en las Figuras 3A-3B, la Combinación A redujo eficazmente el efecto excitotóxico del glutamato de una manera dependiente de la dosis, del 0,025 al 0,5% (Figuras 3A-B).
Como se muestra en las Figuras 4A-B, la Combinación B también mostró una disminución dependiente de la dosis en los efectos excitotóxicos del glutamato del 0,05 al 0,5%.
Conclusiones:
Las lesiones excitotóxicas provocadas por glutamato 100 pM podrían revertirse parcial y significativamente mediante la administración de la combinación A o la combinación B entre concentraciones del 0,025% (para la combinación A) y del 0,05% (para la combinación B) a una concentración del 0,5% para ambas combinaciones. Ejemplo 6 - Ensayo de hiperfosforilación de Tau - modelo in vitro para la enfermedad de Alzheimer
La demencia se caracteriza por el deterioro progresivo del funcionamiento cognitivo, lo que significa la pérdida de la capacidad de pensar, recordar o razonar, así como de las habilidades conductuales. Varios trastornos y factores contribuyen al desarrollo de la demencia. Los trastornos neurodegenerativos como la enfermedad de Alzheimer (EA), los trastornos frontotemporales y la demencia con cuerpos de Lewy dan como resultado una pérdida progresiva e irreversible de neuronas y funciones cerebrales. En algunas demencias, se demostró que una proteína llamada tau está hiperfosforilada y se agrega dentro de las células nerviosas del cerebro, provocando la muerte celular. Los trastornos que se asocian con una acumulación de tau se denominan tauopatías y se usa generalmente ácido okadaico (OKA) para desencadenar tauopatías en modelos animales ya que se demostró que aumenta la fosforilación de tau en células cultivadas. El uso de OKA en combinación con inhibidores de quinasas es un modelo farmacológico in vitro establecido para identificar compuestos responsables de la fosforilación de residuos específicos. Para determinar el efecto terapéutico de las varias combinaciones y formulaciones, en demencias relacionadas con tau, como la enfermedad de Alzheimer, se usó un modelo de hiperfosforilación de Tau inducida por ácido okadaico (OKA) en neuronas corticales de rata maduras.
Procedimiento experimental y programa de tratamiento
Composiciones usadas:
Tabla 1A, Entrada N° 25, denominada en la presente "Combinación A".
Tabla 1A, Entrada N° 31, denominada en la presente "Combinación B:
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Cultivo celular - se recogieron cortezas de embriones de rata E19 Sprague-Dawley. Los tejidos se disociaron enzimática y mecánicamente para obtener una suspensión celular homogénea y las células se sembraron en placas de 96 pocillos.
Procedimiento experimental - Después de 9 días in vitro, para los pocillos de tratamiento de 24 horas, se añadieron a las neuronas 10 pl de compuestos concentrados 20X o vehículo. Se añadió LiCl a 3 mM como control positivo. Después de 24 horas, se añadió OA 10 nM a los pocillos como una solución concentrada 11X (20 pl en 200 pl de medio). En los pocillos que no se habían tratado previamente durante 24 horas, se añadieron los compuestos de prueba o el vehículo justo antes de la adición de OKA (10 pl de las respuestas a la dosis concentradas 20x preparadas). Después de 3 horas de tratamiento con OKA en la incubadora de células, se descartó la mitad del medio y se añadieron 100 pl de paraformaldehído al 2% a los pocillos para la fijación. Luego, las células se procesaron para el marcado inmunofluorescente doble de neuronas (marcado MAP2) y Fosfo-Tau (Anticuerpo Phospho-PHF-tau pSer202+Thr205 (AT8)). Los núcleos se marcaron usando Hoechst 3334210 pM en PBS.
Criterios de valoración /análisis del ensayo: porcentaje de neuronas con alta intensidad de fosfo-Tau para cada condición experimental. Este porcentaje se calcula con un umbral por encima del cual se considera una hiperfosforilación de Tau significativa en las neuronas. Este umbral se establece comparando condiciones no tratadas y tratadas con ácido okadaico, entre las poblaciones neuronales negativas y positivas en un diagrama de dispersión célula por célula (análisis citométrico) en el software CytoSurfer de Fluofarma.
Resultados: como se demuestra en la Figura 5A, se muestra que la formulación probada (Combinación A) disminuye de manera dependiente de la dosis la hiperfosforilación de Tau con efectos significativos de las concentraciones del 0,25 y 0,5% aplicadas como pretratamiento de 24 horas antes del tratamiento con Ácido Okadaico. Como se demostró en la Figura 5B, la dosis de la formulación probada (Combinación B) disminuyó de manera dependiente de la dosis la hiperfosforilación de Tau con efectos significativos de las concentraciones del 0,25 y el 0,5% aplicadas como pretratamiento de 24 horas antes del tratamiento con Ácido Okadaico.
Ejemplo 7 - Modelos in vivo para la enfermedad de Alzheimer
La demencia se caracteriza por el deterioro progresivo del funcionamiento cognitivo, lo que significa la pérdida de la capacidad de pensar, recordar o razonar, así como de las habilidades conductuales. La enfermedad de Alzheimer (EA) es la principal causa de demencia, mientras que la demencia vascular, la demencia con cuerpos de Lewy, la demencia fronto-temporal, etc. también llevan a déficits de memoria. Se ha establecido un modelo animal fiable de pérdida de memoria con ciertas características de múltiples formas exponiendo a los animales a una lesión cerebral predeterminada o una infusión intracraneal de ciertas neurotoxinas. Un modelo de rata envejecida para la enfermedad de Alzheimer con déficit de memoria demuestra características patológicas y comportamientos complejos comunes a la EA, proporciona un modelo natural de envejecimiento y deterioro cognitivo y es una opción útil para probar terapias en investigación dirigidas a mecanismos de neuroprotección, aprendizaje y memoria.
Se han desarrollado muchas tareas conductuales de roedores que son muy sensibles a los síntomas cognitivos conductuales que se observan en la EA, y estas pruebas se usan ampliamente como herramientas de diagnóstico clínico.
Entre las numerosas tareas diseñadas para evaluar distintos procesos de la memoria, la tarea de reconocimiento social en la rata ofrece la oportunidad de evaluar una forma de memoria de trabajo a corto plazo en el dominio de la cognición social, y su modificación por agentes farmacológicos o estados fisiopatológicos, como el envejecimiento 5. La cognición social en los seres humanos es obviamente de gran importancia y sus déficits, por ejemplo, durante el envejecimiento y la demencia de Alzheimer, a menudo tienen consecuencias dramáticas para el paciente y su entorno. Los deterioros en la función ejecutiva también son un deterioro cognitivo comúnmente observado en los trastornos neuropsiquiátricos como la esquizofrenia, la EA y la enfermedad de Parkinson. El deterioro cognitivo y la EA están estrechamente relacionados con el envejecimiento de la población humana. Las ratas y los ratones envejecidos con déficit de memoria muestran características patológicas y comportamientos complejos comunes a la EA, lo que proporciona una alternativa perspicaz a los modelos tradicionales. El envejecimiento se caracteriza por un deterioro progresivo del rendimiento cognitivo, que se ha atribuido en parte a alteraciones estructurales y funcionales del hipocampo. El deterioro cognitivo y la EA están estrechamente relacionados con el envejecimiento de la población humana. Un modelo de rata envejecida para la EA con déficit de memoria demuestra características patológicas y comportamientos complejos comunes a la EA, por lo tanto, proporciona un modelo natural de envejecimiento y deterioro cognitivo y es una opción útil para probar terapias en investigación dirigidas a mecanismos de neuroprotección, aprendizaje y memoria. En este estudio, las formulaciones se probaron para determinar la actividad potencial de mejora de la cognición usando las Pruebas de Reconocimiento Social y Alternación Retrasada en rata envejecida.
Procedimiento experimental
Prueba de alternancia retardada en la rata envejecida (adquisición) - el protocolo experimental es similar al descrito en Porsolt et al. (Drug Dev. Res., 35, 214-229, 1995).
Programa de alimentación: 5 días antes de comenzar el experimento de alternancia retardada, los animales se sometieron a acceso restringido a la comida (15 g por día) para habituarlos al programa de privación de alimentos usado durante el experimento. Este programa de privación de alimentos continuó durante todo el experimento. Los animales recibieron la ración de alimento de 15 g en sus jaulas domésticas después de la prueba del último animal. Antes del comienzo de la presión de la palanca, también se les dio varios gránulos de comida de 45 mg (los usados en la Alternancia Retardada) para habituarlos a este nuevo alimento.
Experimento de alternancia retardada - Este experimento incluye 2 fases consecutivas: Adquisición de presión de palanca (palanca única); y Adquisición de alternancia retardada (dos palancas).
Adquisición de presión de palanca-El objetivo de esta fase es entrenar a los animales a presionar la palanca para recibir una recompensa de gránulos de comida. Los animales se someten a aproximadamente 10 sesiones de adquisición de presión de palanca durante 2 semanas (5 días a la semana) en las cámaras experimentales de acuerdo con un programa de refuerzo de proporción fija (FR1). El refuerzo consiste de un gránulo de alimento (45 mg) que se entrega después de cada presión de palanca. Los animales se someten primero a sesiones de adquisición de presión de palanca donde una respuesta en la palanca derecha o izquierda dio como resultado la entrega de un gránulo de comida. Las palancas se insertan en la cámara al comienzo de la sesión y se retiran al final de la sesión. Posteriormente, se someten a varias sesiones en las que la palanca izquierda o derecha se presenta pseudoaleatoriamente cada 5 segundos. Una respuesta en la palanca da como resultado la retracción de la palanca y la entrega de un gránulo de comida. Si los animales no apretaban la palanca en 30 segundos, la palanca se retraía sin refuerzo y 5 segundos más tarde seguía una nueva presentación de palanca. La luz de la casa se enciende al comienzo de la sesión y se apaga al final de la sesión. La sesión termina después de 30 minutos o después de que el animal dé 50 respuestas a la palanca. Al final de esta fase, entre el 80 y el 100% de los animales adquieren la respuesta de presión de palanca (es decir, han realizado por lo menos 20 respuestas durante la sesión final). Los animales que no aprenden se descartan del experimento. Si algunos animales están cerca de establecer un comportamiento constante de presionar la palanca, se les dará un entrenamiento adicional con el objetivo de tener por lo menos 12 animales por grupo.
Adquisición de alternancia retardada (prueba de fármacos) -Posteriormente a la adquisición de presión de palanca, los animales se sometieron a 10 sesiones de alternancia retardada durante 2 semanas consecutivas (5 días a la semana). Cada sesión consiste de 36 ensayos separados por 10 segundos. Cada ensayo consiste de presentar al animal primero con una palanca (izquierda o derecha). Cuando el animal presiona la palanca, se le da un gránulo de comida, la palanca se retrae y 2,5 segundos después se presentan ambas palancas. El animal tiene que aprender a presionar la palanca opuesta a la presentada anteriormente para obtener una recompensa de comida (no coincide con la muestra). Si el animal no responde a una presentación de una o dos palancas en 20 segundos, la o las palancas se retirarán sin refuerzo alimenticio y el siguiente ensayo comenzará 10 segundos después. La luz de la casa se enciende al comienzo de la sesión y se apaga al final de la sesión. Las sesiones terminan después de que el animal haya completado 36 ensayos, o después de que hayan transcurrido 30 minutos.
El parámetro de comportamiento analizado fue el tiempo de reacción de elección. El tiempo de reacción de elección es el tiempo de reacción para cada presentación de las dos palancas, expresados como el valor medio por animal por sesión.
Análisis estadístico - los datos obtenidos durante la adquisición de alternancia retardada se analizarán comparando el control de edad avanzada con los controles jóvenes usando pruebas t de Student no emparejadas en cada sesión. Los datos obtenidos durante la adquisición de alternancia retardada se analizarán comparando los grupos tratados con la sustancia de prueba con los controles de edad usando un análisis de varianza de dos vías (con grupo y sesión como factor) con medidas repetidas en cada sesión. El análisis será seguido por un análisis de varianza unidireccional en cada sesión en caso de un efecto de grupo o interacción significativo y se completará con las pruebas t de Dunnett cuando el efecto de grupo sea significativo.
Test de reconocimiento social en la rata envejecida
El método, que detecta los efectos facilitadores de los fármacos sobre los déficits de memoria relacionados con la edad, sigue el descrito por Lemaire et al (Psychopharmacology, 115, 435-440, 1994). El experimento se realizó usando una jaula de prueba abierta desconocida (46,5 x 26,5 x 18,5 cm) que contenía aserrín, una jaula de prueba por rata adulta experimental. Se dejó que la rata adulta se habituara a la jaula de prueba durante por lo menos 5 minutos. Luego, se colocó una rata joven no familiar en la jaula de prueba con la rata adulta durante 5 minutos. Después de este primer contacto (C1), se retiró la juvenil y las ratas adultas regresaron a su jaula de alojamiento 30 minutos después de que el adulto regresara a la misma jaula de prueba y la misma juvenil (familiar) se colocó luego en la jaula de prueba una vez más para una sesión de prueba de 5 minutos. Se registró el tiempo que la rata pasa investigando (olfateando, acicalando, lamiendo, siguiendo de cerca) a la juvenil en cada contacto. También se calculó un índice de reconocimiento (= C2/C1). En tales condiciones, una rata adulta madura normalmente reconoce a la juvenil como familiar, como lo indica una reducción en la duración del comportamiento de investigación social en C2. Las ratas envejecidas normalmente muestran amnesia en esta tarea, como lo indica la ausencia de una disminución en la duración de la conducta de investigación social en C2. Los datos se analizaron comparando la duración de la investigación social en el segundo contacto con el primer contacto para cada grupo usando pruebas t de Student emparejadas. Los datos se analizaron comparando controles envejecidos con controles adultos usando pruebas t de Student no emparejadas. Los datos se analizaron comparando grupos tratados con sustancias de prueba con controles envejecidos usando ANOVA unidireccional seguido de pruebas t de Dunnett en caso de efectos significativos.
Procedimiento de prueba de fármacos
Se incluyen 15 ratas por grupo al comienzo de los experimentos. Las Combinaciones A, B y C se evaluaron en 1 dosis, administradas s.c. dos veces por semana durante 10 semanas antes del experimento de alternancia retardada y luego hasta el final de la prueba de reconocimiento social (es decir, 13 semanas en total). Durante las pruebas de comportamiento (reconocimiento social, etapa de presión de la palanca y adquisición de alternancia retardada), la administración se da después de la prueba. El experimento incluye un grupo de controlenvejecido y un grupo de control de adultos/jóvenes, que reciben administraciones de vehículo.
Resultados
Prueba de alternancia retardada:
La combinación A, administrada subcutáneamente dos veces a la semana durante 10 semanas, generalmente redujo significativamente los tiempos de reacción de elección para la sesión 6 (p<0,05), (Figura 6). La combinación B, administrada subcutáneamente dos veces a la semana durante 10 semanas, también mostró una tendencia pronunciada a reducir los tiempos de reacción de elección, sin embargo, sin alcanzar significancia estadística.
Experimento de reconocimiento social
La combinación A administrada s.c. dos veces a la semana durante 12 semanas, disminuyó significativamente la duración de la investigación del juvenil familiar en el segundo contacto, en comparación con el primer contacto (-39%, p<0,05). La Combinación B mostró una tendencia a disminuir la duración de la investigación del familiar juvenil en el segundo contacto, en comparación con el primer contacto (-21%, p = 0,0675), (Figura 7). Tanto la combinación A como la B muestran una tendencia general a disminuir el índice de reconocimiento que no se modificó significativamente en comparación con los controles de edad (A: 0,64 frente a 0,95, NS; B: 0,69 frente a 0,95, NS), (Figura 8).
Conclusiones
Los resultados muestran que la administración s.c. repetida de las combinaciones A y B en ratas envejecidas tiene efectos beneficiosos sobre los déficits de velocidad de procesamiento relacionados con la edad en la prueba de alternancia retardada. Además, los resultados sugieren la presencia de efectos beneficiosos para la Combinación A y la Combinación B administradas s.c. dos veces a la semana durante 12 semanas sobre los déficits relacionados con la edad en la prueba de reconocimiento social en ratas. Por lo tanto, tomados en conjunto, los resultados indicaron los efectos beneficiosos de las composiciones probadas en el modelo de Alzheimer.
Ejemplo 8 - Efecto de las formulaciones probadas sobre la toxicidad inducida por 6-OHDA en cultivos primarios mesencefálicos y neuronas TH positivas.
La enfermedad de Parkinson (EP) es un trastorno neurodegenerativo debilitante que se caracteriza por la pérdida progresiva de neuronas dopaminérgicas (DA) en la sustancia negra pars compacta (SNc), lo que lleva a una disminución marcada de dopamina (DA) en el cuerpo estriado, la región de proyección primaria, así como los núcleos extraestriatales de los ganglios basales. Como la tirosina hidroxilasa (TH) cataliza la formación de L-dihidroxifenilalanina (L-DOPA), el paso limitante de la velocidad en la biosíntesis de DA, la enfermedad puede considerarse como un síndrome de deficiencia de TH del cuerpo estriado. Los problemas relacionados con la EP suelen acumularse cuando el almacenamiento vesicular de DA se ve alterado por la presencia de protofibrillas de asinucleína o estrés oxidativo.
Los modelos de EP inducida por neurotoxinas son ampliamente usados para comprender los mecanismos de la degeneración neuronal en la EP. La 6-hidroxidopamina (6-OHDA) es una neurotoxina catecolaminérgica selectiva y se usa ampliamente en estudios in vivo e in vitro para generar modelos de EP.
El estudio fue diseñado para examinar los efectos de las formulaciones probadas en dos modelos diferentes. En la primera parte del estudio, se usó la exposición de cultivos primarios mesencefálicos con 6-OHDA como sistema modelo para examinar la viabilidad celular y la expresión de TH neuronal. En la segunda parte del estudio, se indujo un modelo de rata de la enfermedad de Parkinson mediante inyección intraestriada unilateral de la neurotoxina 6-OHDA. Esta inyección produce una pérdida de neuronas DA en el lado inyectado, mientras que evita las neuronas DA contralaterales.
Este modelo se usó para evaluar el efecto de varias formulaciones sobre la función motora y la expresión de TH en el cerebro de rata.
Se han desarrollado o adaptado varias pruebas de comportamiento a partir de otros modelos de deterioro neurológico para dilucidar los déficits sensoriomotores de las extremidades asociados con la disminución de dopamina estriatal unilateral inducida por 6-OHDA, y se correlacionan con el grado de degeneración dopaminérgica. Las funciones de la extremidad afectada pueden compararse con las de la extremidad intacta, aumentando de este modo la sensibilidad y la repetibilidad de la evaluación a lo largo de los días.
Procedimiento experimental:
Composiciones usadas:
Tabla 1A, Entrada N° 25, denominada en la presente "Combinación A".
Tabla 1A, Entrada N° 31, denominada en la presente "Combinación B".
Tabla 1A, Entrada N° 34, denominada en la presente "Combinación C".
Extracto de la Tabla 1A:
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Cultivo celular - cultivo primario de neuronas mesencefálicas de rata de embriones de rata E14, tratados con 6-hidroxi dopamina. Se recogió mesencéfalo de embriones de rata E14 Sprague-Dawley. Los tejidos se disociaron enzimática y mecánicamente para obtener una suspensión celular homogénea, y las células se sembraron en placas a 100000 por pocillo de una placa de 96 pocillos en 100 pl de medio neuronal que contenía suero.
Neurotoxicidad inducida por 6-OH DA - Después de sembrar en placas las neuronas mesencefálicas en 150 pl de medio, y después de 3 horas, las neuronas se trataron con compuestos de prueba mediante la adición de 10 pl de compuestos concentrados 20X en aceite y con 6-OH DA 10 pM en medio de crecimiento (5x concentrado en 40 pl de medio de cultivo). Después de 72 horas, se retiró el medio y se añadió medio que contenía un marcador de citólisis fluorescente para medir la citólisis general en el cultivo. Luego, las células se fijaron y se marcaron inmunológicamente con un anticuerpo específico de tirosina hidroxilasa (TH) para el recuento de neuronas dopaminérgicas y la evaluación de la longitud de neuritas de las neuronas dopaminérgicas. Las imágenes se adquirieron con un objetivo 10X, uniendo 9 imágenes por pocillo, usando una plataforma Pathway 855 y se analizaron usando el módulo Neurite Outgrowth del software Metamorph. Todos los experimentos se realizaron por triplicado en la misma sesión experimental.
Formulaciones probadas (combinaciones) - se prepararon respuestas de dosis de combinaciones de prueba en vehículo (aceite de semilla de algodón) a 20 veces (20X) las concentraciones probadas finales mediante diluciones en serie el día del primer tratamiento. Para los tratamientos, se aplicaron 10 pl de cada solución concentrada o vehículo sobre 190 pl de medio de crecimiento neuronal. Las formulaciones de prueba se añadieron justo antes de la adición de 6-OH DA, a partir de respuestas a dosis recién preparadas en aceite de semilla de algodón.
Concentraciones finales:
Combinación A: 0,025%, 0,005%, 0,025%, 0,05%, 0,25%, 0,5%, 1%
Combinación B: 0,025%, 0,005%, 0,025%, 0,05%, 0,25%, 0,5%, 1%
Combinación C: 0,025%, 0,005%, 0,025%, 0,05%, 0,25%, 0,5%, 1%
Criterios de valoración:
Número de células citolizadas por pocillo en el criterio de valoración y número de neuronas TH positivas. Los resultados se muestran como medias /- desviación estándar (DE). Los análisis estadísticos se realizaron usando pruebas t de Student para comparar dos medias o ANOVA unidireccional seguido de la prueba de comparación múltiple de Dunnett para comparar medias múltiples con el grupo tratado con vehículo.
Resultados
Combinación A -Como se muestra en la Figura 9A - La combinación A al 0,005, 0,025, 0,05 y 0,25% disminuyó significativamente el número de células citolizadas después de 72 horas de tratamiento con 6-OH DA.
Como se muestra en la Figura 9B, el número de neuronas TH positivas se incrementó en un 0,25, 0,5 y 1% en comparación con los pocillos tratados con 6-OH DA.
Combinación B
Como se muestra en la Figura 10A, la combinación B al 0,0025, 0,005 y 0,025% disminuyó significativamente el número de células citolizadas después de 72 horas de tratamiento con 6-OH DA.
Como se muestra en la Figura 10B, el número de neuronas TH positivas aumentó en un 0,005 y 1% en comparación con los pocillos tratados con 6-OH DA.
Combinación C
Como se muestra en la Figura 11A, la combinación C al 0.025% disminuyó significativamente el número de células citolizadas después de 72 horas de tratamiento con 6-OH DA.
Como se muestra en la Figura 11B, el número de neuronas TH positivas se incrementó en un 0,025, 0,05, 0,25, 0,5 y 1% en comparación con los pocillos tratados con 6-OH DA.
Conclusiones
Se usó un modelo in vitro de neurodegeneración inducida por 6-OHDA para evaluar los posibles efectos protectores de la Combinación A, la Combinación B y la Combinación C. Se demostró que la Combinación A, la Combinación B y la Combinación C reducen la muerte celular en las neuronas mesencefálicas y aumentan el número de neuronas dopaminérgicas después de 72 horas de tratamientos, por lo que sirven como protectores. Ejemplo 9 - Efecto terapéutico de las combinaciones probadas en el modelo de enfermedad de Parkinson (EP) inducida por 6-Oh Da de rata.
El modelo de rata de la enfermedad de Parkinson se indujo mediante inyección unilateral intraestriada de la neurotoxina 6-hidroxidopamina (6-OHDA). Esta inyección produce una pérdida de neuronas dopaminérgicas (DA) en el lado inyectado, mientras que evita las neuronas DA contralaterales.
Procedimientos de prueba:
Composiciones usadas:
Tabla 1A, Entrada N° 25, denominada en la presente "Combinación A".
Tabla 1A, Entrada N° 34, denominada en la presente "Combinación C".
Extracto de la Tabla 1A:
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Inducción de enfermedades:
Los animales se anestesian con ketamina (10%; 0,1 ml/kg de peso corporal) y xilacina (2%; 0,01 ml/kg). A continuación, los animales se les inyectan estereotácticamente en el cuerpo estriado derecho 2 |ul de 6-OHDA a una concentración de 20 mg/ml en ácido ascórbico al 0,02%. Las coordinaciones de las lesiones se establecen de acuerdo con el bregma y la duramadre en mm: L-3,5 mm; AP-1 mm; DV-5,5 mm. Después de la inyección (velocidad de inyección: 2 gl/5 min), se deja la aguja de inyección durante 1 minuto más para evitar el reflujo y luego se retrae lentamente.
Prueba de colocación de la pata (prueba del cilindro) -Esta prueba evalúa el uso independiente de las extremidades anteriores de una rata para apoyar el cuerpo contra las paredes de un recinto cilíndrico. La prueba aprovecha el impulso innato de los animales para explorar un entorno nuevo al ponerse de pie sobre las extremidades posteriores e inclinarse hacia las paredes circundantes. Para realizar esta prueba, las ratas se colocan individualmente en un cilindro de vidrio (21 cm de diámetro, 34 cm de altura) y se registra la exploración de la pared durante 3 minutos. No se permite la habituación al cilindro antes de los registros. La exploración de la pared se expresa en términos de la proporción entre las patas intactas (R) y dañadas (L) y se calcula como la proporción de la pata intacta (R) / de ambas extremidades anteriores (/B ) con respectoa al valor de la pata intacta (R) el valor de la pata dañada (L) el valor de ambas patas (B). La prueba de colocación de la pata se llevó a cabo el día -1 para obtener los datos de referencia. La prueba se realizó de nuevo 7 días después de la inyección de 6-OHDA, y se incluyeron en el estudio animales con una proporción >0,6. En los días de estudio 17, 24, 30, 43, 57 y 70, los animales se volvieron a probar para determinar su rendimiento en la prueba de colocación de las patas.
Análisis histológico -Tirosina hidroxilasa (TH) -Al final del estudio, todos los animales se perfunden con solución salina/heparina a través del ventrículo izquierdo del corazón y luego se perfunden con formalina al 4%. Los órganos se recogen en viales que contienen formalina al 4% durante 24-48 horas. Luego, los tejidos se incrustaron en parafina y se cortaron secciones de 4 pm de la región estriada y la región de Substantia Nigra (SNpc) para la tinción IHC usando anticuerpo anti-tirosina hidroxilasa (TH) y tinción IHF usando anti-alfa-sinucleína y proteína ácida de fibrilación anti-Glial (GFAP).
Resultados:
Prueba de colocación de la pata: en cada día de examen se calculó la diferencia media en la proporción entre ese día y el día 7 (día X-día 7). Los animales tratados con un vehículo mostraron un aumento en la diferencia a lo largo del estudio. Se descubrió que el aumento en la proporción de diferencias fue significativamente mayor desde el día 30 hasta el final del estudio el día 70 y es un indicador de la progresión de la enfermedad dependiente del tiempo. El tratamiento con la Combinación A y C mostró generalmente una media más baja de las diferencias desde el día 7 en todos los puntos temporales, en comparación con el grupo de vehículo. La diferencia alcanzó significancia estadística en el día 43 y 57 para la combinación A. Las diferencias para la combinación C fueron significativamente menores que las del vehículo del día 24 al 70 (Figuras 12A y 12B, respectivamente). Esto implica que las Combinaciones A y C pueden disminuir significativamente la progresión de la enfermedad.
Análisis histológico -Tirosina hidroxilasa (TH):
El análisis de células TH positivas en SNpc de animales tratados con 6-OHDA mostró una reducción estadísticamente significativa en el número de células TH-IR (inmuno-sensibles) en el hemisferio derecho frente al hemisferio izquierdo, lo que indica el efecto pronunciado del 6- OHDA en el. Además, se descubrió una reducción estadísticamente significativa en las células TH-IR en el hemisferio derecho del grupo de Vehículo en comparación con el hemisferio derecho de los animales no tratados (Figura 13A). Se descubrió un aumento estadísticamente significativo en el número de células TH positivas en el hemisferio derecho del grupo tratado con la Combinación C en comparación con el grupo de vehículo (17,05 ± 8,16 frente a 0,48 ± 0,48, p <0,05; PRUEBA T). Se descubrió una tendencia de aumento en el número de células TH-IR en SNpc del hemisferio derecho en animales tratados con la Combinación A en comparación con el grupo con vehículo (17,1 ± 9,1 frente a 0,48 ± 0,48, para el grupo A frente a vehículo, respectivamente; p = 0.055; prueba T), (Figura 13B).
Conclusiones:
El tratamiento con las combinaciones A y C, que comenzó 7 días después de la administración de 6-OHDA, mejoró la movilidad de la extremidad anterior deteriorada, medido mediante la prueba de colocación de la pata. Curiosamente, la proporción media de animales tratados con las combinaciones A y C apenas se modificó a lo largo del estudio, con respecto al día 7, en comparación con los cambios graduales en el grupo de vehículo, lo que indica progresión de la enfermedad. El análisis histológico de cerebros usando anticuerpo anti-TH mostró la validez del modelo presentado por la reducción en el número de células TH-IR en el SNpc del hemisferio derecho inyectado con 6-OHDA frente al hemisferio izquierdo intacto. Además, el estriado teñido positivamente con TH del hemisferio izquierdo en comparación con el estriado en su mayoría sin teñir del hemisferio derecho, también destaca la extensión del daño de 6-OHDA en el sitio de inyección. La Combinación C mostró un aumento estadísticamente significativo en la tinción de TH en el hemisferio derecho, en comparación con el grupo de vehículo. La Combinación A mostró una clara tendencia de actividad en el aumento del número de células TH-IR en SNpc y el área positiva para TH en el estriado del hemisferio derecho inyectado con 6-OHDA.
Ejemplo 10 - Demencia vascular - Efecto de varias composiciones para revertir los efectos neurodegenerativos de la hipoperfusión cerebral crónica (demencia vascular) en un modelo de rata. (no de acuerdo con la invención)
Las lesiones cerebrales pueden inducirse experimentalmente en cerebros de ratas mediante la oclusión permanente de ambas arterias carótidas comunes, lo que puede afectar a la función cognitiva. Este modelo es similar a la demencia vascular y la técnica experimental disminuye el flujo sanguíneo en la corteza cerebral y el hipocampo hasta en un 40-80% durante varios meses, induciendo ciertos trastornos del aprendizaje. Por tanto, este modelo se usa para estudiar la eficacia de las composiciones de la presente invención para revertir las deficiencias provocadas por las lesiones de demencia vascular.
Se aleatoriza un total de 40 animales en 4 grupos: un grupo de control simulado sin tratar, un grupo de control de vehículo y 2 grupos con diferentes composiciones de la presente invención (10-15 animales por grupo). Se aleatorizan en 4 grupos, un grupo de control simulado sin tratar, un control de vehículo y 2 grupos tratados. Se administran subcutáneamente diez microlitros de cada composición (en aceite de semilla de algodón) o vehículo dos veces a la semana a intervalos equivalentes, y la primera dosis se administra 14 días después de la inducción de la demencia vascular.
La prueba del laberinto de agua de Morris (MWM) es sensible a la función del hipocampo. La tarea del laberinto de agua se realiza para evaluar dos déficits de aprendizaje relacionados con CCA usando el método descrito anteriormente (Watanabe et al., Cilostazol Stroke. 2006; 37 (6):1539-1545). En una piscina circular de 160 cm de diámetro llena de agua con 20 cm de profundidad, se prepara una plataforma circular de acrílico transparente, cuya superficie superior está a 3 cm por debajo del agua. Las ratas se sueltan de cara a la pared y el tiempo que tardan en escapar a la plataforma se registra como latencia de escape. Las pruebas se realizan el día 3 antes de la oclusión de CCA y los días 14, 35, 56, 84 y 112 después de la oclusión de CCA. En el entrenamiento, se realizan seis pruebas de entrenamiento al día con un intervalo entre pruebas de 2 minutos. Los animales se colocan en la piscina en una de las seis posiciones de partida. En cada prueba de entrenamiento, se registra el tiempo y la longitud del camino necesarios para escapar a la plataforma oculta. Se promedian los resultados de seis pruebas de entrenamiento para obtener un único valor representativo, y las medias se usan para análisis estadísticos finales. Los animales que encontraron la plataforma pueden permanecer en la plataforma durante 30 segundos. Los animales que no encuentran la plataforma en el plazo de 90 segundos son guiados suavemente a la plataforma durante 30 segundos al final de la prueba.
El rendimiento de los varios grupos de animales, tratados con las composiciones de la invención, los animales tratados con vehículo y los animales de control simulado se prueban para determinar la frecuencia en la localización de la plataforma; el tiempo pasado en el área de la plataforma; la latencia para encontrar la plataforma; la frecuencia en la localización de la zona 1; el tiempo pasado en la parte de luz; la latencia para encontrar la plataforma; y la velocidad.
Ejemplos de composiciones probadas en el modelo VD
La "Mezcla ácida 1" significa la fracción ácida aislada de goma de mástique preparada de acuerdo con el Ejemplo 1A. La "Mezcla ácida 1" contiene como compuestos principales los siguientes:
- MA: ácido morónico (12-15%)
- OA: ácido oleanónico (18-20%)
- MDA: ácido 24-Z-masticadienónico (20-22%)
- IMDA: ácido 24-Z-isomasticadienónico (22-26%)
- Ácido 3-beta-OAc-24-Z-masticadienólico (4-7%)
- Ácido 3-beta-OAc-24-Z-isomasticadienólico (4-7%)
Además, contiene varios otros ácidos triterpenoicos en pequeñas cantidades, típicamente de menos del 5%. Los posibles ácidos triterpenoicos que puede contener son:
- MLA: ácido 3-beta-masticadienólico
- IMLA: ácido 3-beta-isomasticadienólico
- Ácido dihidromasticadienónico
- Ácido dihidroisomasticadienónico
La "Mezcla ácida 2" contiene los siguientes compuestos en %(p/p):
MA: ácido morónico (15%)
- OA: ácido oleanónico (15%)
- MDA: ácido 24-Z-masticadienónico (25%)
- IMDA: ácido 24-Z-isomasticadienónico (30%)
- Ácido 3-beta-OAc-24-Z-masticadienólico (8%)
- Ácido 3-beta-OAc-24-Z-isomasticadienólico (7%)
En la Tabla 4, "Mezcla ácida 1 (2,5%)" significa una formulación al 2,5% (p/p) de la fracción ácida aislada en el Ejemplo 1A en aceite de semilla de algodón. De igual manera, "Mezcla ácida 2 (2,5%)" significa una formulación al 2,5% (p/p) de "Mezcla ácida 2" como se ha definido anteriormente,
"Mezcla neutra 1" es la fracción neutra preparada de acuerdo con el Ejemplo 1A,B;
La "Mezcla neutra 2" contiene los siguientes triterpenoides neutrales:
NF-1: (8R)-3-beta, 8-dihidroxipolipoda-13E,17E, 21-trieno
NF-2: (8R)-3-Oxo-8-hidroxipolipoda-13E,17E,21 -trieno
NF-3: aldehído oleanónico
NF-4: tirucallol
NF-P: Dipterocarpol (20-hydroxidammar-24-en-3-ona)
NF-A: (Betulon), 28-hidroxilup-20(29)-en-3-ona
NF-B: alcohol oleanónico; (28-hidroxi-beta-amirona)
3-beta-hidroxi-13-alfa-malabarica-14(26),17E,21 -trieno
20-hidroxi-lupan-3 -ona
28-Nor-17-hidroxilupen-3-ona
28-oxo-lupen-3-ona
28-nor-beta-amirona
Aldehído isomasticadienónico
Isomasticadienediol
Masticadienediol
Aldehído oleanólico (28-oxo-beta-amirina),
3-beta-20-dihidroxilupano
Aldehído masticadienónico
3-oxo-malabarica-14(26),17E,21 -trieno
Beta-amirona
Beta-amirina
Germanicol,
Las concentraciones (en aceite de semilla de algodón) de cada compuesto/fracción en las diferentes composiciones se presentan en la Tabla 4.
TABLA 4
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continuación
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Ejemplo 11 - Encefalomielitis autoinmune experimental (EAE), un modelo de esclerosis múltiple (EM) humana (no de acuerdo con la invención)
La encefalomielitis autoinmune experimental (EAE) es un buen modelo para la investigación de la esclerosis múltiple (EM) humana. La EAE es inducida por inmunización de ratas Lewis hembra con MBP de cobaya. Este es un modelo agudo de EAE. Se inmunizan ratas Lewis con proteína básica de mielina (MBP) en adyuvante de Freund mediante inyección subcutánea en la región subplantar de la pata trasera. Los síntomas clínicos comienzan a desarrollarse alrededor del día 10 con pérdida del tono de la cola ("cola flácida") y parálisis de las patas traseras el día 14. El período pico es típicamente alrededor del día 14/15, después del cual los animales comienzan a recuperarse.
Diseño experimental: las ratas se tratan con la composición de prueba comenzando el día de la inmunización como "tratamiento preventivo" para probar el efecto de la composición de prueba sobre el desarrollo de la parálisis de las patas traseras. El tratamiento también puede iniciarse en la aparición del primer signo clínico de la EAE para probar el efecto del artículo de prueba sobre la recuperación de la parálisis.
A las ratas se les dosifica dos veces a la semana a través de vía de administración SC. Se asignan ocho ratas a cada uno de los grupos (vehículo, grupos de tratamiento, como en la Tabla 4 anterior) para un total de 48 animales. Los animales se observan diariamente para detectar la pérdida de peso corporal y los síntomas clínicos. Se toman muestras de sangre para la preparación del suero y la investigación adicional. El estudio lleva aproximadamente 21 días en completarse.
Reactivos:
Mycobacterium tuberculosis H37Ra (MT), Difco, código 231141
Adyuvante incompleto de Freund (IFA), Difco.
Homogeneizado de médula espinal de cobaya liofilizado (MBP), Sigma (M2295)
Preparación de emulsión encefalitogénica.
IFA está enriquecido con MT hasta 4 mg/ml.
El polvo de MT se triturará con mano y mortero.
La MBP liofilizada se pesará y se suspenderá en PBS para proporcionar 0,5 mg/ml.
El homogeneizado de 0,5 mg/ml de MBP se mezclará con una cantidad igual de CFA (4 mg/ml de MT).
Inducción de EAE:
IFA está enriquecido con MT hasta 4 mg/ml. El polvo de MT se tritura con mano y mortero. La MBP liofilizada se pesa y se suspende en PBS para proporcionar 0,5 mg/ml. El homogeneizado de 0,5 mg/ml de MBP se mezcla con una cantidad igual de CFA (4 mg/ml de MT) y se emulsiona en dos jeringuillas conectadas con cierre Leur.
Las ratas se anestesian y se inyecta una emulsión SC en el BT, cada rata q un volumen de 0,2 ml. Las ratas se puntuaron según los signos clínicos de EAE y se pesaron entre sí hasta 21 días después de la inmunización (p.i.). Los signos se puntuaron como se describe a continuación.
La emulsión se inyecta SC en el BT, cada rata a un volumen de 0,2 ml de ROA y dosis del elemento de prueba:
Las ratas se tratan con la composición indicada comenzando el día de la inmunización como "tratamiento preventivo" para probar el efecto de la composición probada sobre el desarrollo de la parálisis de las patas traseras. Evaluación de los signos clínicos de EAE (Tabla 5):
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Pesos corporales: los pesos corporales se registran dos veces a la semana durante todo el estudio, en los días de administración.
Signos clínicos: los signos clínicos se registran dos veces a la semana durante todo el estudio.
Muestras de sangre: Al finalizar el estudio se realiza el sangrado final, se toman muestras de sangre bajo anestesia total del seno orbitario (tanto como sea posible) y opcionalmente también del corazón. La sangre se mantiene a temperatura ambiente durante por lo menos una hora para que se coagule. Después, la sangre se centrifuga a temperatura ambiente durante 10 minutos a 1790 g (4000 RpM para la centrífuga N° 060). El suero (sobrenadante) se separa de las células sanguíneas usando una pipeta adecuada y se transfiere a ependorf marcado de acuerdo con el Protocolo del estudio. El suero se conserva en nevera (-70° C) antes de enviarlo al patrocinador.
Recogida de tejido: después del sacrificio, los animales se diseccionan. Se recogen el cerebro y el nervio ciático de cada animal y se colocan inmediatamente en PFA al 4% para una evaluación histopatológica adicional.

Claims (13)

REIVINDICACIONES
1. Una composición farmacéutica que comprende una combinación de ácido masticadienónico (MDA), ácido isomasticadienónico (IMDA), (8R)-3-beta-8-dihidroxipolipoda-13E,17E,21-trieno (NF-1), (8R)-3-Oxo-8-hidroxipolipoda-13E,17E,21-trieno (NF-2) y un portador farmacéuticamente aceptable, para su uso en el tratamiento de una afección seleccionada de la enfermedad de Alzheimer (EA) y las enfermedades de Parkinson (EP).
2. La composición farmacéutica para el uso de la reivindicación 1, que comprende además por lo menos un ácido triterpenoico adicional seleccionado del grupo que consiste de ácido masticadienólico (MLA), ácido isomasticadienólico (IMLA), ácido 3-O-acetil masticadienólico, ácido 3-O-acetil epimasticadienólico, ácido 3-O-acetil isomasticadienólico, ácido 3-O-acetil epi-isomasticadienólico, ácido oleanónico (OA), ácido morónico (MA) y combinaciones de los mismos.
3. La composición farmacéutica para el uso de la reivindicación 1, que comprende además por lo menos un triterpenoide neutro adicional seleccionado del grupo que consiste de aldehído oleanónico (NF-3), tirucallol (NF-4), 28-hidroxilup-20 (29)-en-3-ona (NF-A), 28-hidroxi-beta-amirona (NF-B).
4. La composición farmacéutica para el uso de la reivindicación 3, en donde por lo menos uno de dichos triterpenoides neutros se selecciona de NF-3 y NF-4.
5. La composición farmacéutica para el uso de la reivindicación 2, que comprende por lo menos dos ácidos triterpenoicos adicionales.
6. La composición farmacéutica para el uso de la reivindicación 3, que comprende por lo menos dos triterpenoides neutros adicionales.
7. La composición farmacéutica para el uso de la reivindicación 1, en donde por lo menos uno del MDA e IMDA se obtiene de una fuente vegetal; o en donde se obtiene por lo menos un triterpenoide neutro mediante síntesis química.
8. La composición farmacéutica para su uso de la reivindicación 7, en donde dicha fuente vegetal comprende goma de mástique.
9. La composición farmacéutica para el uso de la reivindicación 1,
sustancialmente desprovista de aceites esenciales; o
en donde por lo menos uno del MDA e IMDA se obtiene mediante síntesis química; o en donde por lo menos un triterpenoide neutro se obtiene de una fuente vegetal; o en donde dicho portador farmacéuticamente aceptable comprende por lo menos un aceite; o en una forma adecuada para la administración mediante una vía seleccionada del grupo que consiste de parenteral, transdérmica, oral y tópica.
10. La composición farmacéutica para el uso de las reivindicaciones 1 -3,
que comprende ingredientes farmacéuticamente activos que consisten esencialmente de: MA, OA, MDA, IMDA, ácido 3-O-acetil masticadienólico, ácido 3-O-acetil isomasticadienólico, NF-1, NF-2, NF-3, NF-4, NF- A y NF-B; y el portador farmacéuticamente aceptable; o
que comprende ingredientes farmacéuticamente activos que consisten esencialmente de: MA, OA, MDA, IMDA, ácido 3-O-acetil masticadienólico, ácido 3-O-acetil isomasticadienólico, NF-1, NF-2, NF-3 y NF-4; y el portador farmacéuticamente aceptable; o
que comprende ingredientes farmacéuticamente activos que consisten esencialmente de: OA, MDA, IMDA, ácido 3-O-acetil masticadienólico, ácido 3-O-acetil isomasticadienólico, NF-1, NF-2, NF-3, NF-4, NF-A y NF-B; y el portador farmacéuticamente aceptable; o
que comprende ingredientes farmacéuticamente activos que consisten esencialmente de: OA, MDA, IMDA, ácido 3-O-acetil masticadienólico, ácido 3-O-acetil isomasticadienólico, NF-1, NF-2, NF-3 y NF-4; y el portador farmacéuticamente aceptable; o
que comprende ingredientes farmacéuticamente activos que consisten esencialmente de: MDA, IMDA, NF-1, NF-2, NF-3 y NF-4; y el portador farmacéuticamente aceptable.
11. La composición farmacéutica para el uso de las reivindicaciones 1-4, que comprende ingredientes farmacéuticamente activos que consisten esencialmente de: MDA, IMDA, MLA, Im La , NF-1, NF-2, NF-3, NF-4, NF-P, NF-A y NF-B; y el portador farmacéuticamente aceptable.
12. La composición farmacéutica para el uso de la reivindicación 1, que comprende ingredientes farmacéuticamente activos que consisten esencialmente de: MDA, IMDA, NF-1, NF-2; y el portador farmacéuticamente aceptable.
13. Un kit que comprende una composición farmacéutica para el uso de cualquiera de las reivindicaciones 1-12 para tratar la enfermedad de Alzheimer (EA) y/o las enfermedades de Parkinson (EP).
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Families Citing this family (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
SG11202005482SA (en) * 2017-12-28 2020-07-29 Suntory Holdings Ltd Composition for inhibiting reactive oxygen species production
KR102583195B1 (ko) * 2020-12-10 2023-09-26 경상국립대학교산학협력단 퀴노바산을 포함하는 퇴행성 뇌질환 예방 또는 치료용 조성물
CN115501261B (zh) * 2022-10-14 2023-09-22 山西大学 一种藜麦糠水溶性萜类提取物及其制备方法和应用

Family Cites Families (13)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CA2437578A1 (en) 2001-02-13 2002-08-22 Rivka Cohen Carotenoid-loaded liposomes
DE60329098D1 (de) 2002-05-01 2009-10-15 Lavipharm Sa Verwendung von mastix und dessen ätherischen ölen zur verhinderung oder bekämpfung von mikrobieller infektionen
FR2867980B1 (fr) * 2004-03-23 2006-07-14 Pierre Fabre Medicament Sa Utilisation de l'acide masticadienonique en tant qu'inhibiteur de l'adn polymerase beta
WO2005112967A2 (en) 2004-05-19 2005-12-01 Balfour Marketing Corp. Anticancer activity of chios mastic gum
GB2474813B (en) 2008-09-19 2014-05-28 Biotechnology Res Corp Ltd Triterpenoid compounds and methods of use thereof
EP3578191A1 (en) * 2009-03-04 2019-12-11 Regenera Pharma Ltd. Compositions of polymeric myrcene
CN106619700A (zh) * 2009-03-04 2017-05-10 瑞吉纳拉制药公司 乳香部分的治疗应用
JP6446624B2 (ja) 2010-07-08 2019-01-09 アルコン、ダニエル・エル． 脳卒中の治療法におけるｐｋｃ活性化因子および抗凝血剤
EP2613777B1 (en) 2010-09-07 2019-05-01 Regenera Pharma Ltd. Compositions comprising acidic extracts of mastic gum
EP2791189B1 (en) * 2011-12-14 2018-05-02 Ineos Europe AG Novel polymers
CN103360456B (zh) * 2012-04-04 2015-07-29 浙江大学 三萜类化合物及制备和应用
US9114130B2 (en) * 2013-05-06 2015-08-25 University Of South Florida Compounds and related methods for treatment of neurodegenerative diseases
CN104910238B (zh) * 2014-03-14 2017-08-11 中国科学院上海药物研究所 一类五环三萜类化合物及其在制备治疗阿尔兹海默病的药物中的用途

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