JP2018024654A - プロポリスのミセル化抽出物を有効成分とする認知機能改善剤 - Google Patents
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Abstract
Description
一方、グルタミン酸は、脳内で働く興奮性の神経伝達物質である。そして、グルタミン酸の受容体の一つにNMDA(N−メチル−D−アスパルテート)受容体がある。
NMDA受容体は、記憶・学習機能に関わる生体分子であり、その拮抗薬が記憶・学習障害を引き起こすことが知られている(非特許文献1)。
統合失調症やアルツハイマー病では、記憶・学習機能障害といった認知機能の障害が発症するが、MK−801(ジゾシルピン Dizocilpine)などのNMDA拮抗薬が投与されたマウスは、認知機能障害の疾患モデル動物であることが知られている(特許文献1)。
医薬品ではなく天然物由来で永年利用している食品・飲料の中に、認知症など神経疾患や加齢から生じる認知機能の低下を予防するものが求められている。
プロポリスは、樹脂状固形物質であり、食品などにする場合、プロポリスをエタノールなどのアルコール、水、エチレングリコール、グリセリンなどのポリオールといった溶媒により抽出した抽出物が使用される。
水および/またはポリオールと乳化剤からなる混合物を溶媒として抽出したミセル化抽出物は、アルコール、水のそれぞれにより抽出される成分の両成分をより多く含有していることが特徴である。
水素結合し得る複数個のOH基含有媒体とは、例えば、グリセリン、エチレングリコール、ジエチレングリコール、プロピレングリコール、ジプロピレングリコール、グリセリンのアルキレンオキサイド付加物、エチレングリコールのアルキレンオキサイド付加物、プロピレングリコールのアルキレンオキサイド付加物、グルコノデルタラクトン、D−キシロース、D−ソルビツト液、グルコン酸液、シヨ糖水溶液、水などを挙げることができる。
経口剤は、必要に応じて結合剤、滑沢剤、崩壊剤、着色剤、矯味剤などを加え錠剤、散剤、顆粒剤、カプセル剤を常法により製造することができる。
また、必要に応じて防腐剤、抗酸化剤、安定化剤などを添加することができる。
プロポリスのミセル化抽出物を飲食品に使用するには、そのまま、または種々の栄養成分とともに加工肉、清涼飲料などの飲食品の原料に混ぜて飲食品を製造することができる。
また、付属成分として、麦芽糖、ブドウ糖、デキストリン、ゼラチンなどの増量剤、ソルビン酸、デヒドロ酢酸ナトリウム、各種ビタミン類などの保存安定剤を含有していてもよい。
また、プロポリスのミセル化抽出物を健康食品、栄養補助食品などとして使用する場合、例えば慣用の手段を用いて、錠剤、カプセル、散剤、顆粒、懸濁剤、シロップ剤などの形態に調製することができる。
上記の飲食品におけるプロポリスのミセル化抽出物の配合量は、添加形態及び投与形態によっても異なり広い範囲から選択できるが、通常、0.01〜10重量%配合するのが望ましい。
従って、プロポリスのミセル化抽出物は、NMDA受容体が関与する認知機能の低下を改善する医薬や飲食品または認知機能の低下を予防する医薬や飲食品として有用である。
プロポリスのミセル化抽出物は、以下の原材料から製造された日本プロポリス株式会社のミセル化抽出物を使用した。
原材料:プロポリス(ブラジル産)、グリセリン、グリセリンエステル
製造工程:原材料秤量混合⇒抽出⇒ろ過⇒殺菌⇒充填
プロポリス規格成分:200mg/mL
外観・性状:淡〜濃褐色の液体で、特有のプロポリス臭、甘味を有する。異物を認めない。
プロポリスの水抽出物は、上記の原材料の内、グリセリンおよびグリセリンエステルの代わりに水を使用して、上記の製造工程に準じて製造した物を使用した。
C57BL6Jマウス (日本SLC)を使用した。全てのマウスは、餌と水を自由に摂取させ、22±2℃、50±5%の湿度、午前7時から始まる12時間の明暗サイクルで制御された環境で飼育した。本実施例においては、C57BL6Jマウスを用いた実験動物の取り扱いは、National Institutes of Health のガイドラインに従い、富山大学動物実験委員会の許可を得た。なお、実験は富山大学動物実験委員会の指針に従って行った。
自発的交替行動を測定するY迷路試験(Y-maze test)は、空間認知・記憶の指標を得る試験であり、文献(Behavioural Brain Research 180 (2007) 139-145)に記載の方法に準じた。すなわち、マウスをY字型迷路アームの1つ(40×10×12 cm)の先端に置いた後、8分間マウスを自由に行動させ、マウスが進入したアームを順番に記録した。各アームへの進入回数(total arm entries)と連続して異なるアームを選択した回数(交替行動回数: number of alternations)を記録した。交替行動率(alternation behavior (%))を以下の式で算出した。
交替行動率(alternation behavior (%) =
[交替行動回数 (number of alternations) / 進入回数 (total arm entries)-2]×100
認知能力を測定する新奇物体認知試験(Novel object recognition test)は、文献(The Journal of Neuroscience, 2005 25(7)1826-1835)に記載の方法に準じた。すなわち、連続した3日間、マウスをアクリル製の四角い箱(30×30×35 cm)で1日30分間探索させた(habituation)。4日目に、箱内に2つの物体を置きマウスを入れ、それぞれの物体にマウスがアプローチした時間と回数を10分間測定した(training)。いったんマウスをホームケージに戻し、trainingから24時間後に、一方の物体を新奇物体に変えて同様にマウスを箱に入れ、アプローチした時間と回数を10分間測定した(trial)。
プロポリス (日本プロポリス、エスタプロント(商品名)、プロポリス 200mg/mL )を、一群6匹のマウス(8週齢、雄)にマウス一匹、1日当たり1mL/kgを7日間、毎日1回、経口投与(最終投与量200mg/kg/day)した。対照として溶媒(水、グリセリンおよびグリセリンエステルの混合物)を同様に経口投与した。プロポリスの投与を継続したまま、MK-801マレイン酸水素塩(MK-801 hydrogen maleate、Sigma-Aldrich)を生理食塩水に溶解させ、最終濃度0.03mg/mLとした、MK-801溶液をマウスに対して1日当たり10 mg/kgを14日間腹腔内投与(最終投与量0.3mg/kg/day)とした。対照として生理食塩水を同様に腹腔内投与した。次いで、7日間 MK-801を無投与でプロポリスの投与を継続した後、Y迷路試験を行った。結果を図1に示す。
一群6匹のマウス(8週齢、雄)を使用し、プロポリスとMK801を実施例1と同様の投与方法、投与期間で投与した後、新奇物体認知試験を行った。結果を図2に示す。
ミセル化抽出プロポリス (日本プロポリス, エスタプロント (商品名), プロポリス 200mg/mL) をその溶媒 (水、グリセリンおよびグリセリンエステルの混合物) で希釈したもの (50mg/mL) を、一群4匹のマウス (8週齢、雄) に対し、1匹あたり4mL/kgで7日間、毎日1回、経口投与して、最終投与量を200mg/kg/dayとした。対照として、同量の溶媒も経口投与した。
水抽出プロポリスはプロポリスに含まれる成分の1つである3,5-ジカフェオイルキナ酸がミセル化抽出プロポリスとほぼ同等になるように調整し、これを溶媒である蒸留水で4倍に希釈した。希釈された水抽出プロポリスおよび蒸留水をミセル化抽出プロポリと同様に経口投与をした。
ミセル化抽出および水抽出プロポリスとそれらの溶媒の1日1回の投与を継続したまま、新奇物体認識試験を行った。スコポラミン[(-)-Scopolamine hydrobromide trihydrate (Scopolamine;Sigma)] を生理食塩水に溶解させ、0.1mg/mLとし、マウスに10mL/kgで腹腔内投与することで、最終投与量を1.0 mg/kgとした。新奇物体認識試験のtrainingの際に、測定の20分前にスコポラミンの投与を行い、認知機能障害を誘発させた。対照として生理食塩水を同様に腹腔内投与した。
結果を図3に示す。
Claims (5)
- プロポリスのミセル化抽出物を有効成分とする認知機能の改善剤。
- ミセル化抽出物が、水素結合し得る複数個のOH基含有媒体に可溶のプロポリス成分である請求項1に記載の認知機能の改善剤。
- プロポリス成分が、プロポリス片またはプロポリス粉末を、ポリオール・脂肪酸エステル系界面活性剤が均一溶解もしくは安定分散された水素結合し得る複数個のOH基含有媒体中に存在させ、50〜100℃の温度条件で混合撹拌することで得られたものである請求項2記載の認知機能の改善剤。
- 認知機能が、NMDA受容体の機能低下によるのである請求項1〜3に記載の認知機能の改善剤。
- 請求項1〜4に記載の認知機能の改善剤を含有する飲食品。
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JP2005060242A (ja) * | 2003-08-12 | 2005-03-10 | Yamada Bee Farm | プロポリスを含む神経障害の予防または治療用組成物 |
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-
2017
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