ES2890435T3 - Derivados carbonucleósidos sustituidos útiles como agentes anticancerígenos - Google Patents

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Abstract

Un compuesto de fórmula (IV): **(Ver fórmula)** o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en la que: cada R1 se selecciona independientemente del grupo que consiste en alquilo (C1-C8), haloalquilo (C1-C8), hidroxi, alcoxi (C1-C8), arilo (C5-C12), heteroarilo de 5-12 miembros, cicloalquilo (C3-C10), heterociclilo de 3-12 miembros, OR4, SR4 y N(R4)2; R2 es hidrógeno, halógeno, alquilo (C1-C8), hidroxi, alcoxi (C1-C8) o N(R5)2, donde cada R5 es independientemente hidrógeno o alquilo (C1-C8), o dos R5 se unen para formar un anillo heterocíclico de 4-6 miembros que contiene 1- 3 heteroátomos seleccionados entre N, O y S; cada R3 es independientemente hidrógeno, hidroxi o NH2; o cuando D es C(R3)2, R3 se selecciona adicionalmente entre flúor; cada R9 es independientemente hidrógeno o flúor; D es C(R3)2, O, o S(O)1-2; B es N o C; E es NR1, CH2, C(R1)2, O o -S(O)2; cada R8 está ausente o se selecciona independientemente del grupo que consiste en alquilo (C1-C8), haloalquilo (C1-C8), hidroxi, alcoxi (C1-C8), arilo (C5-C12), heteroarilo de 5-12 miembros, cicloalquilo (C3-C10), heterociclilo de 3-12 miembros, OR4, SR4, N(R4)2, CN, halógeno y CON(R4)2, donde dos R8 se unen opcionalmente para formar un anillo de espirocicloalquilo de 4-6 miembros, un anillo fusionado de cicloalquilo o un puente de alquileno, y donde dos R8 se unen opcionalmente para formar carbonilo; cada R4 es independientemente A-R14, donde A está ausente, (C1-C3)alquilo, -C(O)- o -SO2-, y R14 es hidrógeno, alquilo (C1-C8), arilo (C5-C12), heteroarilo de 5-12 miembros, cicloalquilo (C3-C10) o heterociclilo de 3-12 miembros, o dos R4 se unen para formar un anillo heterocíclico de 4-6 miembros que contiene 1-3 heteroátomos seleccionados entre N, O y S; Q está ausente o es una fracción divalente seleccionada entre O, S, NH y (C1-C8)alquileno; V es N o C, donde si V forma un doble enlace V es carbono; W es N o C, donde si W forma un doble enlace W es carbono; X es N o C, donde si X forma un doble enlace X es carbono; Y es CR10, N, NR10, O o S, donde cada R10 se selecciona independientemente entre hidrógeno, alquilo (C1-C8), hidroxi, alcoxi (C1-C8), halógeno, SH, S-alquilo (C1-C8) y N(R11)2 si Y es CR10, donde Y forma un doble enlace con un miembro del anillo adyacente cuando Y es CR10 o N, y donde cada R11 es independientemente hidrógeno, alquilo (C1-C8), arilo (C5-C12) o heteroarilo de 5-12 miembros o dos R11 se unen para formar un anillo heterocíclico de 4-6 miembros que contiene 1-3 heteroátomos seleccionados entre N, O y S, o Y es C(R10) 2 y los dos R10 y el carbono al que están asociados forman un carbonilo o un tiocarbonilo; Z es CR12, N, NR12, O o S, donde cada R12 se selecciona independientemente entre hidrógeno, alquilo (C1-C8), hidroxi, alcoxi (C1-C8), fluoro, cloro, bromo, SH, S-alquilo (C1-C8) y N(R13)2, donde Z forma un doble enlace con un miembro del anillo adyacente si es CR12 o N, donde cada R13 es independientemente hidrógeno, alquilo (C1-C8), arilo (C5-C12) o heteroarilo de 5-12 miembros, o dos R13 se unen para formar un anillo heterocíclico de 4-6 miembros que contiene 1-3 heteroátomos seleccionados entre N, O y S, y donde Z no es NR12 si X es N, V es C, W es C e Y es CR10, o Z es C(R12) 2 y los dos R12 y el carbono al que están asociados forman un carbonilo o un tiocarbonilo; y cada ----- es un enlace opcional, en el que no puede haber más de dos, no adyacentes -----.

Description

DESCRIPCIÓN
Derivados carbonucleósidos sustituidos útiles como agentes anticancerígenos
Campo de la invención
Esta invención se refiere a novedosos derivados de carbonucleósidos útiles en el tratamiento del crecimiento celular anormal, tal como el cáncer, en mamíferos. Esta invención también se refiere a tales compuestos para su uso en el tratamiento del crecimiento celular anormal en mamíferos, especialmente en humanos, y a las composiciones farmacéuticas como agentes anticancerígenos.
Antecedentes de la invención
La modificación postraduccional de los residuos de arginina por metilación es importante para muchos procesos celulares críticos, como la remodelación de la cromatina, la transcripción de genes, la traducción de proteínas, la transducción de señales, el empalme de ARN y la proliferación celular. La metilación de la arginina es catalizada por las enzimas arginina metiltransferasa de proteínas (PRMT). Hay nueve miembros de la PRMT en total, y ocho han informado de su actividad enzimática en sustratos objetivo.
La familia de enzimas de la proteína arginina metiltransferasa (PRMT) utiliza la S-adenosilmetionina (SAM) para transferir grupos metilo a los residuos de arginina en las proteínas diana. Las PRMT de tipo I catalizan la formación de mono-metil-arginina y di-metil-argininas asimétricas, mientras que las PRMT de tipo II catalizan mono-metil-arginina y di-metil-argininas simétricas. La PRMT5 es una enzima de tipo II, que transfiere dos veces un grupo metilo de la SAM a los dos átomos de nitrógeno w-guanidino de la arginina, dando lugar a la metilación u>-NG, N'G di-simétrica de los sustratos proteicos.
La proteína PRMT5 se encuentra tanto en el núcleo como en el citoplasma, y tiene múltiples sustratos proteicos como las histonas, los factores de transcripción y las proteínas del espliceosoma. PRMT5 tiene un socio de unión, Mep50 (proteína 50 del metilosoma) y funciona en múltiples complejos proteicos. PRMT5 se asocia con complejos de remodelación de la cromatina (SWI/SNF, NuRD) y controla epigenéticamente los genes implicados en el desarrollo, la proliferación celular y la diferenciación, incluidos los supresores de tumores, a través de la metilación de las histonas (Karkhanis, V. et al., Versatility of PRMT5 Induced Methylation in Growth Control and Development,Trends Biochem Sci 36(12) 633-641 (2011)). PRMT5 también controla la expresión de los genes mediante la asociación con complejos proteicos que reclutan a PRMT5 para metilar varios factores de transcripción p53 (Jansson, M. et al., Arginine Methylation Regulates the p53 Response, Nat. Cell Biol. 10, 1431-1439 (2008)); E2 F1 (Zheng, S. et al., Arginine Methylation-Dependent Reader-Writer Interplays Governs Growth Control by E2F-1, Mol Cell 52(1), 37-51 (2013)); HOXA9 (Bandyopadhyay, S. et al., HOXa 9 Methylation by PRMT5 is Essential for Endothelial Cell Expression of Leukocyte Adhesion Molecules, Mol. Celular. Biol. 32(7):1202-1213 (2012)); y NFkB (Wei, H. et al., PRMT5 dimethylates R30 of the p65 Subunit to Activate NFkB, PNAS 110(33), 13516-13521 (2013)). En el citoplasma, PRMT5 tiene un conjunto diverso de sustratos que participan en otras funciones celulares, incluyendo el empalme de ARN (proteínas Sm), el ensamblaje de golgi (gm130), la biogénesis de los ribosomas (RPS10), el silenciamiento de genes mediado por piRNA (proteínas Piwi) y la señalización del EGFR (Karkhanis, 2011).
Otros documentos relacionados con la PRMT5 son: Aggarwal, P. et al., (2010) Nuclear Cyclin D1/CDK4 Kinase Regulates CUL4B Expression and Triggers Neoplastic Growth via Activation of the PRMT5 Methyltransferase, Cancer Cell 18: 329-340 Bao, X. et al., Overexpression of PRMT5 Promotes Tumor Cell Growth and is Associated with Poor Disease Prognosis in Epithelial Ovarian Cancer, J Histochem Cytochem 61: 206-217 (2013) Cho E. et al., Arginine Methylation Controls Growth Regulation by E2F1, EMBO J. 31(7) 1785-1797 (2012) Gu, Z. et al., Protein Arginine Methyltransferase 5 Functions in Opposite Ways in the Cytoplasm and Nucleus of Prostate Cancer Cells, PLoS One 7(8) e44033 (2012) Gu, Z. et al., Protein Arginine Methyltransferase 5 is Essential for Growth of Lung Cancer Cells, Biochem J. 446: 235-241 (2012); Kim, J. et al., Identification of Gastric Cancer Related Genes Using a cDNA Microarray Containing Novel Expressed Sequence Tags Expressed in Gastric Cancer Cells, Clin Cancer Res. 11(2) 473-482 (2005) Nicholas, C. et al., PRMT5 is Upregulated in Malignant and Metastatic Melanoma and Regulates Expression of MITF and p27(Kip1), PLoS One 8(9) e74710 (2012) Powers, M. et al., Protein Arginine Methyltransferase 5 Accelerates Tumor Growth by Arginine Methylation of the Tumor Suppressor Programmed Cell Death 4, Cancer Res. 71(16) 5579­ 5587 (2011) Wang, L. et al., Protein Arginine Methyltransferase 5 Suppresses the Transcription of the RB Family of Tumor Suppressors in Leukemia and Lymphoma Cells, Mol. Cell Biol. 28(20), 6262-6277 (2008).
PRMT5 se sobreexpresa en muchos tipos de cáncer y se ha observado en muestras de pacientes y líneas celulares que incluyen linfoma y leucemia de células B (Wang, 2008) y los siguientes tumores sólidos: gástrico (Kim 2005) esofágico (Aggarwal, 2010), de mama (Powers, 2011), de pulmón (Gu, 2012), de próstata (Gu, 2012), de melanoma (Nicholas 2012), de colon (Cho, 2012) y de ovario (Bao, 2013). En muchos de estos cánceres, la sobreexpresión de PRMT5 se correlaciona con un mal pronóstico. La metilación aberrante de arginina de los sustratos de la PRMT5 se ha relacionado con otras indicaciones además del cáncer, como los trastornos metabólicos, las enfermedades inflamatorias y autoinmunes y las hemaglobinopatías.
Sumario de la invención
Dado su papel en la regulación de varios procesos biológicos, la PRMT5 es una diana atractiva para la modulación con inhibidores de moléculas pequeñas. Hasta la fecha, se han desarrollado pocos inhibidores eficaces de la PRMT5, y ningún inhibidor de la PRMT5 ha entrado en la clínica.
Cada una de las realizaciones de los compuestos de la presente invención descrita a continuación puede combinarse con cualquier otra realización de los compuestos de la presente invención descrita en el presente documento que no sea incompatible con la realización con la que se combina. Además, cada una de las realizaciones que se describen a continuación de la invención contempla dentro de su ámbito sales farmacéuticamente aceptables de los compuestos de la invención. Por lo tanto, la expresión "o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo" está implícita en la descripción de todos los compuestos descritos en el presente documento.
La invención incluye compuestos de fórmula (III):
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o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en la que:
cada R1 se selecciona independientemente del grupo que consiste en alquilo (Ci-C8), haloalquilo (Ci-C8), hidroxi, alcoxi (C1-C8), arilo (C5-C12), heteroarilo de 5-12 miembros, cicloalquilo (C3-C10), heterociclilo de 3-12 miembros, OR4, SR4 y N(R4)2;
R2 es hidrógeno, halógeno, alquilo (C1-C8), hidroxi, alcoxi (C1-C8) o N(R5)2 , donde cada R5 es independientemente hidrógeno o alquilo (C1-C8), o dos R5 se unen para formar un anillo heterocíclico de 4-6 miembros que contiene 1-3 heteroátomos seleccionados entre N, O y S;
cada R3 es independientemente hidrógeno, hidroxi o NH2 ; o cuando D es C(R3)2, R3 se selecciona adicionalmente entre flúor;
cada R9 es independientemente hidrógeno o flúor;
D es C(R3)2 , O, o S(O)1-2;
E es NR1, CH2, C (R ^ , O o -S(O)2 ;
cada R8 está ausente o se selecciona de forma independiente del grupo que consiste en alquilo (C1-C8), (C1-C8)haloalquilo, hidroxi, alcoxi (C1-C8), arilo (C5-C12), heteroarilo de 5-12 miembros, cicloalquilo (C3-C10), heterociclilo de 3-12 miembros, OR4, SR4, N(R4)2 , CN, halógeno y CON(R4)2, donde dos R8 se unen opcionalmente para formar un anillo de espirocicloalquilo de 4-6 miembros, un anillo fusionado de cicloalquilo o un puente de alquileno, y donde dos R8 se unen opcionalmente para formar carbonilo;
cada R4 es independientemente A-R14, donde A está ausente, (C1-C3)alquilo, -C(O)- o -SO2-, y R14 es hidrógeno, alquilo (C1-C8), arilo (C5-C12), heteroarilo de 5-12 miembros, cicloalquilo (C3-C10) o heterociclilo de 3-12 miembros, o dos R4 se unen para formar un anillo heterocíclico de 4-6 miembros que contiene 1-3 heteroátomos seleccionados entre N, O y S;
Q está ausente o es una fracción divalente seleccionada entre O, S, NH y (Ci-C8)alquileno;
V es N o C, donde si V forma un doble enlace V es carbono;
W es N o C, donde si W forma un doble enlace W es carbono;
X es N o C, donde si X forma un doble enlace X es carbono;
Y es CR10, N, NR10, O o S, donde cada R10 se selecciona independientemente entre hidrógeno, alquilo (C1-C8), hidroxi, alcoxi (C1-C8), halógeno, SH, S-alquilo (C1-C8) y N(R11)2 si Y es CR10, donde Y forma un doble enlace con un miembro del anillo adyacente cuando Y es CR10 o N, y donde cada R11 es independientemente hidrógeno, alquilo (C1-C8), arilo (C5-C12) o heteroarilo de 5-12 miembros o dos R11 se unen para formar un anillo heterocíclico de 4-6 miembros que contiene 1-3 heteroátomos seleccionados entre N, O y S, o Y es C(R10) 2 y los dos R10 y el carbono al que están asociados forman un carbonilo o un tiocarbonilo;
Z es CR12, N, NR12, O o S, donde cada R12 se selecciona independientemente entre hidrógeno, alquilo (C1-C8), hidroxi, alcoxi (C1-C8), fluoro, cloro, bromo, SH, S-alquilo (C1-C8) y N(R13)2, donde Z forma un doble enlace con un miembro del anillo adyacente si es CR12 o N, donde cada R13 es independientemente hidrógeno, alquilo (C1-C8), arilo (C5-C12) o heteroarilo de 5-12 miembros, o dos R13 se unen para formar un anillo heterocíclico de 4-6 miembros que contiene 1-3 heteroátomos seleccionados entre N, O y S, y donde Z no es NR12 si X es N, V es C, W es C e Y es CR10, o Z es C(R12) 2 y los dos R12 y el carbono al que están asociados forman un carbonilo o un tiocarbonilo; y
cada — es un enlace opcional, en el que no puede haber más de dos, no adyacentes — .
La presente invención también incluye compuestos de fórmula (IV):
Figure imgf000004_0001
o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en la que:
cada R1 se selecciona independientemente del grupo que consiste en alquilo (C1-C8), haloalquilo (C1-C8), hidroxi, alcoxi (C1-C8), arilo (C5-C12), heteroarilo de 5-12 miembros, cicloalquilo (C3-C10), heterociclilo de 3-12 miembros, OR4, SR4 y N(R4)2 ;
R2 es hidrógeno, halógeno, alquilo (C1-C8), hidroxi, alcoxi (C1-C8) o N(R5)2, donde cada R5 es independientemente hidrógeno o alquilo (C1-C8), o dos R5 se unen para formar un anillo heterocíclico de 4-6 miembros que contiene 1-3 heteroátomos seleccionados entre N, O y S;
cada R3 es independientemente hidrógeno, hidroxi o NH2; o cuando D es C(R3)2, R3 se selecciona adicionalmente entre flúor;
cada R9 es independientemente hidrógeno o flúor;
D es C(R3)2 , O, o S(O)2;
B es N o C;
E es NR1, CH2, C(R1)2 , O o -S(O)2 ;
cada R8 está ausente o se selecciona independientemente del grupo que consiste en alquilo (Ci-Cs), haloalquilo (Ci-Cs), hidroxi, alcoxi (Ci-Cs), arilo (C5-C12), heteroarilo de 5-12 miembros, cicloalquilo (C3-C10), heterociclilo de 3-12 miembros, Or 4, Sr4, N(R4)2, Cn , halógeno y CON(R4)2, donde dos R8 se unen opcionalmente para formar un anillo de espirocicloalquilo de 4-6 miembros, un anillo fusionado de cicloalquilo o un puente de alquileno, y donde dos R8 se unen opcionalmente para formar carbonilo;
cada R4 es independientemente A-R14, donde A está ausente, (C1-C3)alquilo, -C(O)- o -SO2-, y R14 es hidrógeno, alquilo (C1-Cs), arilo (C5-C12), heteroarilo de 5-12 miembros, cicloalquilo (C3-C10) o heterociclilo de 3-12 miembros, o dos R4 se unen para formar un anillo heterocíclico de 4-6 miembros que contiene 1-3 heteroátomos seleccionados entre N, O y S;
Q está ausente o es una fracción divalente seleccionada entre O, S, NH y (C1-Cs)alquileno;
V es N o C, donde si V forma un doble enlace V es carbono;
W es N o C, donde si W forma un doble enlace W es carbono;
X es N o C, donde si X forma un doble enlace X es carbono;
Y es CR10, N, NR10, O o S, donde cada R10 se selecciona independientemente entre hidrógeno, alquilo (C1-Cs), hidroxi, alcoxi (C1-Cs), halógeno, SH, S-alquilo (C1-Cs) y N(R11)2 si Y es CR10, donde Y forma un doble enlace con un miembro del anillo adyacente cuando Y es CR10 o N, y donde cada R11 es independientemente hidrógeno, alquilo (C1-Cs), arilo (C5-C12) o heteroarilo de 5-12 miembros o dos R11 se unen para formar un anillo heterocíclico de 4-6 miembros que contiene 1-3 heteroátomos seleccionados entre N, O y S, o Y es C(R10)2 y los dos R10 y el carbono al que están asociados forman un carbonilo o un tiocarbonilo; Z es CR12, N, NR12, O o S, donde cada R12 se selecciona independientemente entre hidrógeno, alquilo (C1-C8), hidroxi, alcoxi (C1-C8), fluoro, cloro, bromo, SH, S-alquilo (C1-C8) y N(R13)2, donde Z forma un doble enlace con un miembro del anillo adyacente si es CR12 o N, donde cada R13 es independientemente hidrógeno, alquilo (C1-C8), arilo (C5-C12) o heteroarilo de 5-12 miembros, o dos R13 se unen para formar un anillo heterocíclico de 4-6 miembros que contiene 1-3 heteroátomos seleccionados entre N, O y S, y donde Z no es NR12 si X es N, V es C, W es C e Y es CR10, o Z es C(R12) 2 y los dos R12 y el carbono al que están asociados forman un carbonilo o un tiocarbonilo; y
cada — es un enlace opcional, en el que no puede haber más de dos, no adyacentes — .
Otras realizaciones de la presente invención incluyen compuestos como los descritos en el presente documento en los que
Figure imgf000005_0001
se selecciona de
Figure imgf000006_0001
En ciertas realizaciones:
Figure imgf000006_0002
se selecciona entre
Figure imgf000006_0003
Otras realizaciones de la presente invención incluyen compuestos como los descritos en el presente documento en los que
Figure imgf000007_0001
se selecciona de
Ċ
Figure imgf000007_0002
Figure imgf000008_0001
Ċ
Figure imgf000009_0001
En ciertas realizaciones
Figure imgf000009_0002
Otras realizaciones de la presente invención incluyen compuestos seleccionados entre
Figure imgf000010_0001
Figure imgf000011_0001
Figure imgf000012_0001
Figure imgf000013_0001
Figure imgf000014_0001
Figure imgf000015_0001
Figure imgf000016_0001
Figure imgf000017_0001
Figure imgf000018_0001
o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.
En ciertas realizaciones de la presente invención el compuesto se selecciona de
Figure imgf000019_0001
o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.
Otras realizaciones de la presente invención incluyen compuestos seleccionados entre
Figure imgf000020_0001
Figure imgf000021_0001
Figure imgf000022_0001
Figure imgf000023_0001
Figure imgf000024_0001
Figure imgf000025_0001
Figure imgf000026_0001
Figure imgf000027_0001
o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.
También se proporcionan en la presente invención composiciones farmacéuticas que comprenden un compuesto como el descrito en el presente documento y un portador farmacéuticamente aceptable.
Además, la presente invención proporciona un compuesto como el descrito en el presente documento para su uso en el tratamiento del crecimiento celular anormal en un mamífero. El crecimiento celular anormal es el cáncer. El cáncer al que se hace referencia en el presente documento puede ser cáncer de pulmón, cáncer de hueso, cáncer de páncreas, cáncer de piel, cáncer de cabeza o cuello, melanoma cutáneo o intraocular, cáncer de útero, cáncer de ovario, cáncer de recto, cáncer de la región anal, cáncer de estómago cáncer de colon, cáncer de mama, cáncer de útero, carcinoma de las trompas de Falopio, carcinoma del endometrio, carcinoma del cuello uterino, carcinoma de la vagina, carcinoma de la vulva, enfermedad de Hodgkin, cáncer del esófago, cáncer del intestino delgado, cáncer del sistema endocrino, cáncer de la glándula tiroidea, cáncer de la glándula paratiroidea, cáncer de la glándula suprarrenal, sarcoma de tejidos blandos, cáncer de la uretra, cáncer del pene, cáncer de próstata, leucemia crónica o aguda, linfomas linfocíticos, cáncer de vejiga, cáncer de riñón o uréter, carcinoma de células renales, carcinoma de pelvis renal, neoplasias del sistema nervioso central (SNC), linfoma primario del SNC, tumores del eje espinal, glioma del tronco cerebral o adenoma hipofisario.
Definiciones
A menos que se indique lo contrario, los siguientes términos utilizados en la memoria descriptiva y las reivindicaciones tienen los significados que se comentan a continuación.
"Alquenilo" se refiere a un grupo alquilo, como se define en el presente documento, que consta de al menos dos átomos de carbono y al menos un doble enlace carbono-carbono. Los Ejemplos representativos incluyen, pero no se limitan a, etenilo, 1propenilo, 2propenilo, 1,2 o 3-butenilo, y similares. "Alquenileno" se refiere a una forma di-valente de alquenilo.
"Alcoxi" se refiere a -O-alquilo donde el alquilo es preferentemente alquilo C1-C8, C1-C7 , C1-C6 , C1-C5, C1-C4, C1-C3 , C1-C2 o C1.
"Alquilo" se refiere a un radical hidrocarburo alifático saturado que incluye grupos de cadena recta y cadena ramificada de 1 a 20 átomos de carbono ("alquilo (C1-C20)"), preferentemente de 1 a 12 átomos de carbono ("(C1-C12)alquilo"), más preferentemente de 1 a 8 átomos de carbono ("alquilo (C1-C8)"), o de 1 a 6 átomos de carbono ("(C1-C6)alquilo"), o de 1 a 4 átomos de carbono ("(C1-C4)alquilo"). Los Ejemplos de grupos alquilo incluyen el metilo, el etilo, el propilo, el 2-propilo, el n-butilo, el isobutilo, el tert-butilo, el pentilo, el neopentilo y similares. "Haloalquilo", por ejemplo haloalquilo (C1-C8), se refiere a un alquilo que tiene uno o más sustituyentes halógenos. "Alquileno" se refiere a una forma di-valente de alquilo.
"Alquinilo" se refiere a un grupo alquilo, como se define en el presente documento, que consta de al menos dos átomos de carbono y al menos un triple enlace carbono-carbono. Los Ejemplos representativos incluyen, pero no se limitan a, etilo, 1 -propinilo, 2-propinilo, 1-, 2-, o 3-butinilo, y similares. "Alquinileno" se refiere a una forma di-valente de alquinilo.
"Amino" se refiere a un grupo -NRxRy, en el que Rx y Ry son ambos hidrógeno.
"Arilo (C6-C12)" se refiere a un grupo monocíclico o policíclico de anillos fusionados de 6 a 12 átomos de carbono que tiene un sistema de electrones pi completamente conjugado. Del mismo modo, "arilo (C5-C12)" se refiere a un grupo monocíclico o policíclico de anillos fusionados de 5 a 12 átomos de carbono que tiene un sistema de electrones pi completamente conjugado. Ejemplos, sin limitación, de grupos arilo son el fenilo, el naftalenilo y el antracenilo.
"Ciano" se refiere a un grupo -C=N. El ciano puede expresarse como CN.
"cicloalquilo (C3-C10)" se refiere a un anillo monocíclico de 3 a 10 miembros, a un anillo bicíclico de 3 a 10 miembros, a un anillo bicíclico fusionado de 5 o 6 miembros, un anillo multicíclico fusionado (un sistema de anillos "fusionados" significa que cada anillo del sistema comparte un par adyacente de átomos de carbono con cada uno de los otros anillos del sistema) grupo en el que uno o más de los anillos puede contener uno o más dobles enlaces, pero ninguno de los anillos tiene un sistema de electrones pi completamente conjugado, y un sistema de anillos todo carbono con puente. Ejemplos, sin limitación, de grupos cicloalquilos son el ciclopropano, el ciclobutano, el ciclopentano, el ciclopenteno, el ciclohexano, el ciclohexadieno, el adamantano, el cicloheptano, el cicloheptatrieno y similares.
El término "halógeno" o el prefijo "halo" se refiere al fluoruro, al cloro, al bromo y al yodo. Preferentemente, el halógeno se refiere al flúor o al cloro.
"Heteroalquilo" se refiere a un grupo alquilo de cadena recta o cadena ramificada de 1 a 20 átomos de carbono, preferiblemente de 1 a 12 átomos de carbono, más preferiblemente de 1 a 8 átomos de carbono, o de 1 a 6 átomos de carbono, o de 1 a 4 átomos de carbono, en el que uno, dos o tres de los átomos de carbono están sustituidos por un heteroátomo seleccionado de entre NRx, N, O, y S(O)n (donde n es 0, 1 o 2). Normalmente los heteroátomos, si hay más de uno, no son adyacentes entre sí. Los heteroalquilos ejemplares incluyen éteres de alquilo, aminas de alquilo secundarias y terciarias, amidas, sulfuros de alquilo y similares. El grupo puede ser un grupo terminal o un grupo puente. Tal y como se utiliza en el presente documento, la referencia a la cadena normal cuando se utiliza en el contexto de un grupo puente se refiere a la cadena directa de átomos que une las dos posiciones terminales del grupo puente. "Heteroalquenilo" se refiere a un heteroalquilo que posee uno o más dobles enlaces carbono-carbono. "Heteroalquileno" se refiere a una forma divalente de heteroalquilo. "Heteroalquenileno" se refiere a una forma divalente de heteroalquenilo.
"Heteroarilo" se refiere a un grupo anular monocíclico o fusionado de 5 a 12 átomos de carbono en el anillo que contiene uno, dos, tres o cuatro heteroátomos en el anillo seleccionados de entre NRx, N, O y S(O)n (donde n es 0, 1 o 2) y que, además, tiene un sistema de electrones pi completamente conjugado. Los grupos heteroarilo preferidos incluyen heteroarilo (C2-C7) de acuerdo con la definición anterior. Ejemplos, sin limitación, de grupos heteroarilo no sustituidos son el pirrol, el furano, el tiofeno, el imidazol, el oxazol, el tiazol, el pirazol, la piridina, la pirimidina, la quinoleína, la isoquinolina, la purina, el tetrazol, la triazina y el carbazol. Un heteroarilo farmacéuticamente aceptable es ac.uel que es suficientemente estable para ser unido a un compuesto de la invención, formulado en una composición farmacéutica y posteriormente administrado a un paciente que lo necesite. Ejemplos de grupos heteroarilo monocíclicos típicos incluyen, pero no se limitan a
Figure imgf000029_0001
1-oxa-3,4-diazol 1-tia-2,3-d¡azol 1-tia-2,4-d¡azol 1 -tia-2,5-diazol (1-oxa-3,4-d¡azolilo) (1-tia-2,3-diazolilo) (1-tia-2,4-d¡azolilo) (1-tia-2,5-diazolilo)
Figure imgf000029_0002
1 -tia-3,4-diazol tetrazol piridina piridazina pirimidina (1-tia-3,4-diazolilo) (tetrazolilo) (piridinilo) (piridazinilo) (pirimidinilo)
Figure imgf000029_0003
pirazina
(pirazinilo)
Ejemplos de grupos heteroarilo de anillo fusionado adecuados incluyen, pero no se limitan a
Figure imgf000030_0001
benzofuran benzotiofeno indo bencimidazol indazo (benzofuramlo) (benzotiopemlo) (indolilo) (bencimidazohlo) (indazolilo)
Figure imgf000030_0002
benzotriazo pirrólo 2,3-b piridina pirrolo[2,3-c]piridina pirrólo 3,2-c piridina (benzotriazolilo) (pirrolo[2,3-b]piridim lo) (pirrólo 2,3-c piridimlo) (pirrolo[3,2-c]piridim lo)
Figure imgf000030_0003
pirrolo[3,2-b]piridina imidazo[4,5-b]piridina imidazo[4,5-c]piridina pirazolo 4,3-d piridina (p¡rrolo[3,2-b]piridinilo) (im idazo[4,5-b]piridinilo) (im idazo[4,5-c]piridinilo) (pirazolo[4,3-d]piridim lo)
Figure imgf000030_0004
pirazolo[4,3-c]piridina pirazolo[3,4-c]piridina pirazolo 3,4-b piridina isoindol (pirazolo[4,3-c]piridinilo) (p¡razolo[3,4-c]p¡r¡dinilo) (pirazolo[3,4-b]piridinilo) (isoindolilo)
Figure imgf000031_0001
indazo purina indo hzina imidazo[1,2-a]piridina imidazo[1,5-a]piridina (indazolilo) (purimlo) (indolininilo) (imidazo[1,2-ajpiridinilo) (imidazo[1,5-aJpiridimlo)
Figure imgf000031_0002
pirazolo[1,5-a]piridina pirrolo[1,2-blpiridizina imidazo 1,2-clpirimidina (p¡razolo[1,5-a]piridinilo) (p¡rrolo[1,2-b]piridazinilo) (imidazo[1,2-c]pirimidinilo)
Figure imgf000031_0003
5H-pirrolo[3,2-b]pirazina 1H-pirazolo[4,3-b]pirazina 1H-pirazolo[3,4-d]]pirimidina 17H-pirrolo[2,3-d]pirimidina
Figure imgf000031_0004
quinolma isoquinolina cinohna quinazolina íquinolimla) (isoquinolinilo) (cinolmilo) (azaquinazohna)
Figure imgf000031_0005
quinoxalma ftalazina 1,6-naftiridina 1,7-naftiridina (quinoxalimlo (ftalazimlo) (1,6-naftiridimlo) (1,7-naftiridimlo)
Figure imgf000031_0006
1,8-naftiridina 1,5-naftiridina 2,6-naftiridina 2,7-naftiridina (1,8-nafti ridmilo) (1,5-naftiridinilo) (2,6-naftiridinilo) (2,7-naftiridinilo)
Figure imgf000031_0007
pirido[3,2-d]pirimidina pindo[4,3-d]pirimidina pirido[3,4-d pirimidina (pirido 3,2-dlpirimidimlo (pirido[4,3-d]pirimidinilo (pirido[3,4-d]pirimidinilo
Figure imgf000032_0001
pirido[2,3-d]pir¡midina pirido[2,3-b]piraz¡na pirido[3,4-b]pirazina (pir¡do[2,3-d]pirimidinilo) (plrldo[2,3-b]p¡razinilo) (pirido[3,4-b]pirazinilo)
Figure imgf000032_0002
pir¡mido[5,4-d]pirimidina pirazino[2,3-b]pirazina pir¡mido[4,5-d]pirimid¡na (pir¡mido[5,4-d]pirimidinilo) i (pirazino[2,3-b]pirazinilo) (pirim ido[4,5-d]pirimidini lo)
El término "heteroddilo" se refiere a un sistema de anillos monocíclicos o fusionados que tienen de 3 a 12 átomos de anillo que contienen uno, dos, tres o cuatro heteroátomos de anillo seleccionados entre N, O y S(O)n (donde n es 0, 1 o 2), y 1-9 átomos de carbono Los anillos también pueden tener uno o más dobles enlaces. Sin embargo, los anillos no tienen un sistema de electrones pi completamente conjugado. Los heterociclos preferidos incluyen los heterociclos (C2-C6) de acuerdo con la definición anterior. Los Ejemplos de grupos heteroalicíclicos saturados adecuados incluyen, pero no se limitan a
Figure imgf000032_0003
ox rano tiarano aziridina oxetano tiatano azetidina tetrahidrofurano (oxiramlo) (tiaranilo) (aziridimlo) (oxetanilo) (tiatanilo) (azetadinno) (tetrahldrofuranilo)
Figure imgf000032_0004
tetrahidrotiofeno pirrolidina tetrahidropirano tetrahidrotiopirano (tetrahidrotiofemlo) (pirrolidimlo) (tetrahidropiranilo) (tetrahidrotiopiramlo)
Figure imgf000032_0005
piperidina 1,4-dioxano 1,4-oxatiano morro hna 1,4-ditiano (piperidin ilo) (1,4-dioxamlo) (1,4-oxatiamlo) (morfolimlo) 1,4-ditiamlo)
Figure imgf000032_0006
piperazina 1,4-azatiano oxepano tiepano azepano (piperazimlo) 1,4-azatiamlo (oxepamlo) (tiepamlo) (azepamlo)
Figure imgf000033_0001
3,4-dihidro-2H-piran 5,6-dihidro-2H-piran 2H-piran
(3,4-dihidro-2H-piranilo) (5,6-dihidro-2H-p¡ran¡lo) (2H-piranilo)
Figure imgf000033_0002
1,2,3,4-tetrahidropiridina 1,2,5,6-tetrahidropiridina
(1,2,3,4-tetrahidropiridinilo) (1,2,5,6-tetrahidropiridinilo)
Además, el heterociclo puede contener puentes, incluyendo puentes entre carbonos no adyacentes en el heterociclo, con el puente conteniendo 1-2 carbonos y 0-1 heteroátomos seleccionados de entre NRx, O, y S(O)n (donde n es 0, 1 o 2).
"Hidroxi" o "hidroxilo" se refiere a un grupo -OH.
"In vitro" se refiere a los procedimientos realizados en un entorno artificial como, por ejemplo, sin limitación, en un tubo de ensayo o medio de cultivo.
"In vivo" se refiere a los procedimientos realizados dentro de un organismo vivo como, sin limitación, un ratón, una rata o un conejo.
"Opcional" u "opcionalmente" significa que el evento o la circunstancia descritos posteriormente pueden ocurrir pero no necesariamente, y que la descripción incluye casos en los que el evento o la circunstancia ocurren y casos en los que no. Por Ejemplo, "grupo heterociclo opcionalmente sustituido con un grupo alquilo" significa que el alquilo puede estar presente pero no es necesario, y la descripción incluye situaciones en las que el grupo heterociclo está sustituido con un grupo alquilo y situaciones en las que el grupo heterociclo no está sustituido con el grupo alquilo.
"Organismo" se refiere a cualquier entidad viva compuesta por al menos una célula. Un organismo vivo puede ser tan simple como, por ejemplo, una sola célula eucariota o tan complejo como un mamífero, incluido el ser humano.
Un "excipiente farmacéuticamente aceptable" se refiere a una sustancia inerte añadida a una composición farmacéutica para facilitar la administración de un compuesto. Ejemplos, sin limitación, de excipientes incluyen carbonato de calcio, fosfato de calcio, varios azúcares y tipos de almidón, derivados de la celulosa, gelatina, aceites vegetales y polietilenglicoles.
Tal como se utiliza en el presente documento, el término "sal farmacéuticamente aceptable" se refiere a ac.uellas sales que conservan la eficacia y las propiedades biológicas del compuesto original. Dichas sales incluyen:
(i) las sales de adición de ácido, que pueden obtenerse por reacción de la base libre del compuesto parental con ácidos inorgánicos como el ácido clorhídrico, el ácido bromhídrico, el ácido nítrico, el ácido fosfórico, el ácido sulfúrico y el ácido perclórico y similares o con ácidos orgánicos como el ácido acético, el ácido oxálico, el ácido málico (D) o (L), el ácido maleico, el ácido metanosulfónico, el ácido etanosulfónico, el ácido p-toluenosulfónico, el ácido salicílico, el ácido tartárico, el ácido cítrico, el ácido succínico o el ácido malónico y similares; o
(ii) sales formadas cuando un protón ácido presente en el compuesto original es sustituido por un ion metálico, por ejemplo, un ion de metal alcalino, un ion alcalinotérreo o un ion de aluminio, o se coordina con una base orgánica como la etanolamina, dietanolamina, trietanolamina, trometamina, N-metilglucamina y similares.
Una "composición farmacéutica" se refiere a una mezcla de uno o más de los compuestos descritos en el presente documento, o de sales, solvatos, hidratos o profármacos fisiológicamente o farmacéuticamente aceptables de los mismos, con otros componentes químicos, como portadores y excipientes fisiológicamente o farmacéuticamente aceptables. La finalidad de una composición farmacéutica es facilitar la administración de un compuesto a un organismo.
Tal como se utiliza en el presente documento, un "portador fisiológicamente/farmacéuticamente aceptable" se refiere a un portador o diluyente que no causa una irritación significativa a un organismo y que no anula la actividad biológica y las propiedades del compuesto administrado.
La "cantidad terapéuticamente eficaz" se refiere a la cantidad del compuesto que se administra que aliviará en cierta medida uno o más de los síntomas del trastorno que se está tratando. En referencia al tratamiento del cáncer, una cantidad terapéuticamente efectiva se refiere a ac.uella cantidad que tiene al menos uno de los siguientes efectos:
reducir el tamaño del tumor;
inhibir (es decir, ralentizar hasta cierto punto, preferiblemente detener) la metástasis tumoral;
inhibir hasta cierto punto (es decir, ralentizar hasta cierto punto, preferiblemente detener) el crecimiento del tumor, y aliviar hasta cierto punto (o, preferiblemente, eliminar) uno o más síntomas asociados al cáncer.
"Trato", "tratar" y "tratamiento" se refieren a un procedimiento para aliviar o abrogar un trastorno celular mediado por la metiltransferasa y/o sus síntomas concomitantes. En lo que respecta al cáncer en particular, estos términos significan simplemente que la esperanza de vida de un individuo afectado por un cáncer aumentará o que uno o varios de los síntomas de la enfermedad se reducirán.
Descripción detallada
Los Esquemas generales para sintetizar los compuestos de la invención se pueden encontrar en la sección Ejemplos del presente documento.
A menos que se indique lo contrario, todas las referencias en el presente documento a los compuestos inventivos incluyen referencias a sales, solvatos, hidratos y complejos de los mismos, y a solvatos, hidratos y complejos de sales de los mismos, incluyendo polimorfos, estereoisómeros y versiones isotópicamente marcadas de los mismos.
Las sales farmacéuticamente aceptables incluyen sales de adición de ácidos y de bases (incluyendo disaltos). Las sales de adición de ácido adecuadas se forman a partir de ácidos que forman sales no tóxicas. Los Ejemplos incluyen el acetato, aspartato, benzoato, besilato, bicarbonato/carbonato, bisulfato/sulfato, borato, camsilato, citrato, edisilato, esilato, formato, fumarato, glucepato, gluconato, glucuronato, hexafluorofosfato, hibenzato, hidrocloruro/cloruro, hidrobromuro/bromuro, hidroyoduro/yoduro, isetionato, lactato, malato, maleato, malonato, mesilato, metilsulfato, naftilato, 2-napsilato, nicotinato, nitrato, orotato, oxalato, palmitato, pamoato, fosfato/fosfato de hidrógeno/fosfato de dihidrógeno, sacarato, estearato, succinato, tartrato, tosilato y sales de trifluoroacetato.
Las sales de base adecuadas se forman a partir de bases que forman sales no tóxicas. Algunos Ejemplos son las sales de aluminio, arginina, benzatina, calcio, colina, dietilamina, diolamina, glicina, lisina, magnesio, meglumina, olamina, potasio, sodio, trometamina y zinc. Para obtener una revisión sobre las sales adecuadas, véase "Handbook of Pharmaceutical Salts: Properties, Selection, and Use" de Stahl y Wermuth (Wiley-VCH, Weinheim, Alemania, 2002).
Son interesantes las sales de tosilato, clorhidrato y mesilato.
Una sal farmacéuticamente aceptable de los compuestos inventivos puede prepararse fácilmente mezclando soluciones del compuesto y el ácido o la base deseados, según corresponda. La sal puede precipitar de la solución y recogerse por filtración o puede recuperarse por evaporación del disolvente. El grado de ionización de la sal puede variar desde completamente ionizado hasta casi no ionizado.
Los compuestos de la invención pueden existir tanto en forma no disuelta como disuelta. El término "solvato" se utiliza en el presente documento para describir un complejo molecular que comprende el compuesto de la invención y una o más moléculas de disolvente farmacéuticamente aceptables, por ejemplo, el etanol. El término "hidrato" se emplea cuando el disolvente es el agua. Los solvatos farmacéuticamente aceptables de acuerdo con la invención incluyen hidratos y solvatos en los que el solvente de cristalización puede estar isotópicamente sustituido, por ejemplo, D2O, d6-acetona, d6-DMSO.
También se incluyen en el ámbito de la invención los complejos como los clatratos, los complejos de inclusión fármacohuésped en los que, a diferencia de los solvatos mencionados, el fármaco y el huésped están presentes en cantidades estequiométricas o no estequiométricas. También se incluyen los complejos del fármaco que contienen dos o más componentes orgánicos y/o inorgánicos que pueden estar en cantidades estequiométricas o no estequiométricas. Los complejos resultantes pueden ser ionizados, parcialmente ionizados o no ionizados. Para una revisión de tales complejos, véase J Pharm Sci, 64 (8), 1269-1288 de Haleblian (agosto de 1975). También se incluyen en el ámbito de la invención los polimorfos e isómeros (incluidos los isómeros ópticos, geométricos y tautoméricos) de los compuestos inventivos derivados de los compuestos de la invención que pueden tener poca o ninguna actividad farmacológica por sí mismos, pero que, cuando se administran a un paciente, pueden convertirse en los compuestos inventivos, por ejemplo, por escisión hidrolítica. Estos derivados se denominan "profármacos". Se puede encontrar más información sobre el uso de profármacos en Pro-drugs as Novel Delivery Systems, Vol. 14, ACS Symposium Series (T Higuchi y W Stella) y Bioreversible Carriers in Drug Design', Pergamon Press, 1987 (ed. E B Roche, American Pharmaceutical Association).
Los profármacos pueden producirse, por ejemplo, sustituyendo las funcionalidades apropiadas presentes en los compuestos inventivos por ciertas moléculas conocidas por los expertos en la técnica como "pro-fracciones", como se describe, por ejemplo, en "Design of Prodrugs" de H Bundgaard (Elsevier, 1985).
Algunos Ejemplos de profármacos incluyen:
(i) cuando el compuesto contenga una funcionalidad de ácido carboxílico -(COOH), un éster del mismo, por ejemplo, sustituyendo el hidrógeno por alquilo (C-i-Ce);
(ii) cuando el compuesto contenga una funcionalidad de alcohol (-OH), un éter del mismo, por ejemplo, la sustitución del hidrógeno por alcanohiloximetilo (C1-C6); y
(iii) cuando el compuesto contenga una funcionalidad amino primaria o secundaria (-NH2 o -NHR donde R t H), una amida de la misma, por ejemplo, sustitución de uno o ambos hidrógenos por (C rC 1o)alcanoilo.
Otros Ejemplos de grupos de sustitución de acuerdo con los Ejemplos anteriores y Ejemplos de otros tipos de profármacos pueden encontrarse en las referencias mencionadas.
Por último, algunos compuestos inventivos pueden actuar como profármacos de otros de los compuestos inventivos.
Los compuestos de la invención que contienen uno o más átomos de carbono asimétricos pueden existir como dos o más estereoisómeros. Cuando los compuestos según esta invención tienen al menos un centro quiral, pueden existir, por tanto, como enantiómeros. Cuando los compuestos poseen dos o más centros quirales, pueden existir además como diastereómeros. Del mismo modo, cuando un compuesto de la invención contiene un grupo ciclopropilo u otro grupo cíclico donde existe quiralidad, y un grupo alquenilo o alquenileno, son posibles los isómeros geométricos cis/trans(o Z/E). Cuando el compuesto contiene, por ejemplo, un grupo ceto u oxima o una fracción aromática, puede producirse isomerismo tautomérico ("tautomerismo"). Un mismo compuesto puede presentar más de un tipo de isomería.
Se incluyen dentro del alcance de la invención todos los estereoisómeros, isómeros geométricos y formas tautoméricas de los compuestos inventivos, incluidos los compuestos que presentan más de un tipo de isomerismo, y las mezclas de uno o más de ellos. También se incluyen las sales de adición de ácido o de base en las que el contraión es ópticamente activo, por ejemplo, D-lactato o L-lisina, o racémico, por ejemplo, DL-tartrato o DL-arginina.
Los isómeros cis/trans pueden separarse mediante técnicas convencionales bien conocidas por los expertos en la técnica, por ejemplo, la cromatografía y la cristalización fraccionada.
Las técnicas convencionales para la preparación/aislamiento de enantiómeros individuales incluyen la síntesis quiral a partir de un precursor ópticamente puro adecuado o la resolución del racemato (o el racemato de una sal o derivado) utilizando, por ejemplo, cromatografía líquida de alta presión (HPLC) quiral o cromatografía de fluidos supercríticos (SFC).
Alternativamente, el racemato (o un precursor racémico) puede hacerse reaccionar con un compuesto ópticamente activo adecuado, por ejemplo, un alcohol, o, en el caso de que el compuesto contenga una fracción ácida o básica, un ácido o una base como el ácido tartárico o la 1-feniletilamina. La mezcla diastereomérica resultante puede separarse por cromatografía y/o cristalización fraccionada y uno o ambos diastereoisómeros se convierten en el(los) correspondiente(s) enantiómero(s) puro(s) por medios bien conocidos por un experto en la técnica.
Los conglomerados estereoisoméricos pueden separarse mediante técnicas convencionales conocidas por los expertos en la técnica; véase, por ejemplo, "Stereochemistry of Organic Compounds" de E L Eliel (Wiley, Nueva York, 1994).
La invención también incluye compuestos de la invención marcados isotópicamente, en los que uno o más átomos se sustituyen por un átomo que tiene el mismo número atómico, pero una masa atómica o número de masa diferente de la masa atómica o número de masa que se encuentra habitualmente en la naturaleza. Los Ejemplos de isótopos adecuados para su inclusión en los compuestos de la invención incluyen isótopos de hidrógeno, como 2H y 3H, de carbono, como 11C, 13C y 14C, de cloro, como 36Cl, de flúor, como 18F, de yodo, como 123I y 1251, de nitrógeno, como 13N y 15N, de oxígeno, como 15°, 17° y 18°, de fósforo, como 32P, y de azufre, como 35S Ciertos compuestos de la invención marcados isotópicamente, por ejemplo, los que incorporan un isótopo radiactivo, son útiles en los estudios de distribución tisular de fármacos y/o sustratos. Los isótopos radiactivos tritio, 3H, y carbono-14,14C, son particularmente útiles para este propósito en vista de su facilidad de incorporación y medios de detección. La sustitución por isótopos más pesados, como el deuterio, 2H, puede ofrecer ciertas ventajas terapéuticas derivadas de una mayor estabilidad metabólica, por ejemplo, una mayor vida media in vivo o una reducción de las necesidades de dosificación, por lo que puede ser preferible en algunas circunstancias. La sustitución con isótopos emisores de positrones, como e l11C, e l18F, el 15Oy e l13N, puede ser útil en los estudios de topografía por emisión de positrones (PET) para examinar la ocupación de los receptores del sustrato.
Los compuestos de la invención marcados isotópicamente pueden prepararse generalmente mediante técnicas convencionales conocidas por los expertos en la técnica o mediante procesos análogos a los descritos en el presente documento, utilizando un reactivo apropiado marcado isotópicamente en lugar del reactivo no marcado empleado de otro modo.
Los disolventes farmacéuticamente aceptables de acuerdo con la invención incluyen ac.uellos en los que el disolvente de cristalización puede estar isotópicamente sustituido, por ejemplo, D2O, d6-acetona, d6-DMSO.
Los compuestos de la invención destinados a uso farmacéutico pueden administrarse como productos cristalinos o amorfos, o mezclas de los mismos. Pueden obtenerse, por ejemplo, como tapones sólidos, polvos o películas por procedimientos como la precipitación, la cristalización, la liofilización, el secado por aspersión o el secado por evaporación. Para ello se puede utilizar el secado por microondas o por radiofrecuencia.
Los compuestos pueden administrarse solos o en combinación con uno o más compuestos de la invención. Generalmente, se administrarán como una formulación en asociación con uno o más excipientes farmacéuticamente aceptables. El término "excipiente" se utiliza en el presente documento para describir cualquier ingrediente que no sea el o los compuestos de la invención. La elección del excipiente dependerá en gran medida de factores como el modo particular de administración, el efecto del excipiente sobre la solubilidad y la estabilidad, y la naturaleza de la forma farmacéutica.
Las composiciones farmacéuticas adecuadas para la administración de los compuestos de la invención y los procedimientos para su preparación serán fácilmente evidentes para los expertos en la técnica. Tales composiciones y procedimientos para su preparación pueden encontrarse, por ejemplo, en Remington's Pharmaceutical Sciences", 19a edición (Mack Publishing Company, 1995). Administración oral: Los compuestos de la invención pueden administrarse por vía oral. La administración oral puede implicar la deglución, de modo que el compuesto entra en el tracto gastrointestinal, o puede emplearse la administración bucal o sublingual, por la que el compuesto entra en el torrente sanguíneo directamente desde la boca.
Las formulaciones adecuadas para la administración oral incluyen formulaciones sólidas como comprimidos, cápsulas que contienen partículas, líquidos o polvos, pastillas (incluyendo las llenas de líquido), masticables, multi y nanopartículas, geles, soluciones sólidas, liposomas, películas (incluyendo las muco-adhesivas), óvulos, aerosoles y formulaciones líquidas.
Las formulaciones líquidas incluyen suspensiones, soluciones, jarabes y elixires. Dichas formulaciones pueden utilizarse como relleno en cápsulas blandas o duras y suelen incluir un portador, por ejemplo, agua, etanol, polietilenglicol, propilenglicol, metilcelulosa o un aceite adecuado, y uno o más agentes emulsionantes y/o agentes de suspensión. Las formulaciones líquidas también pueden prepararse mediante la reconstitución de un sólido, por ejemplo, a partir de una bolsita.
Los compuestos de la invención también pueden utilizarse en formas farmacéuticas de disolución y desintegración rápidas, como las descritas en Expert Opinion in Therapeutic Patents, 11 (6), 981-986 de Liang y Chen (2001).
Para las formas de dosificación en comprimidos, dependiendo de la dosis, el fármaco puede constituir desde el 1 % en peso hasta el 80 % en peso de la forma de dosificación, más típicamente desde el 5 % en peso hasta el 60 % en peso de la forma de dosificación. Además del fármaco, los comprimidos suelen contener un desintegrante. Entre los Ejemplos de desintegrantes se encuentran el almidón glicolato de sodio, la carboximetilcelulosa de sodio, la carboximetilcelulosa de calcio, la croscarmelosa de sodio, la crospovidona, la polivinilpirrolidona, la metilcelulosa, la celulosa microcristalina, la hidroxipropilcelulosa sustituida por un alquilo inferior, el almidón, el almidón pregelatinizado y el alginato de sodio. Generalmente, el desintegrante comprenderá del 1 al 25 % en peso, preferiblemente del 5 al 20 % en peso de la forma farmacéutica.
Los aglutinantes se utilizan generalmente para impartir cualidades cohesivas a una formulación de comprimidos. Entre los aglutinantes adecuados se encuentran la celulosa microcristalina, la gelatina, los azúcares, el polietilenglicol, las gomas naturales y sintéticas, la polivinilpirrolidona, el almidón pregelatinizado, la hidroxipropilcelulosa y la hidroxipropilmetilcelulosa. Los comprimidos también pueden contener diluyentes, como la lactosa (monohidrato, monohidrato secado por aspersión y similares), manitol, xilitol, dextrosa, sacarosa, sorbitol, celulosa microcristalina, almidón y fosfato cálcico dibásico dihidratado.
Los comprimidos también pueden incluir opcionalmente agentes tensioactivos, como el lauril sulfato de sodio y el polisorbato 80, y deslizantes como el dióxido de silicio y el talco. Cuando están presentes, los agentes tensioactivos suelen estar en cantidades de entre el 0,2 y el 5 % en peso del comprimido, y los deslizantes suelen estar entre el 0,2 y el 1 % en peso del comprimido.
Los comprimidos también suelen contener lubricantes como el estearato de magnesio, el estearato de calcio, el estearato de zinc, el estearil fumarato de sodio y las mezclas de estearato de magnesio con lauril sulfato de sodio. Los lubricantes generalmente están presentes en cantidades de 0,25 % en peso a 10 % en peso, preferentemente de 0,5 % en peso a 3 % en peso del comprimido.
Otros ingredientes convencionales incluyen antioxidantes, colorantes, agentes saborizantes, conservantes y agentes enmascaradores del sabor.
Los comprimidos ejemplares contienen hasta un 80 % en peso de fármaco, desde un 10 % en peso hasta un 90 % en peso de aglutinante, desde un 0 % en peso hasta un 85 % en peso de diluyente, desde un 2 % en peso hasta un 10 % en peso de desintegrante y desde un 0,25 % en peso hasta un 10 % en peso de lubricante.
Las mezclas de comprimidos pueden comprimirse directamente o mediante un rodillo para formar comprimidos. Las mezclas de comprimidos o las porciones de las mezclas pueden ser granuladas en húmedo, en seco o en fundido, o extrudidas antes de su presentación en comprimidos. La formulación final puede incluir una o más capas y puede estar recubierta o sin recubrir; o encapsulada.
La formulación de los comprimidos se discute en detalle en "Pharmaceutical Dosage Forms: Tablets, Vol. 1", por H. Lieberman and L. Lachman, Marcel Dekker, N.Y., 1980 (ISBN 0-8247-6918-X).
Las formulaciones sólidas para la administración oral pueden ser formuladas para ser de liberación inmediata y/o modificada. Las formulaciones de liberación modificada incluyen la liberación retardada, sostenida, pulsada, controlada, dirigida y programada.
Las formulaciones de liberación modificada adecuadas se describen en la Patente U.S. No. 6.106.864. Los detalles de otras tecnologías de liberación adecuadas, como las dispersiones de alta energía y las partículas osmóticas y recubiertas, pueden encontrarse en Verma et al, Pharmaceutical Technology On-line, 25(2), 1-14 (2001). El uso de la goma de mascar para lograr la liberación controlada se describe en WO 00/35298.
Administración parenteral
Los compuestos de la invención también pueden administrarse directamente en el torrente sanguíneo, en el músculo o en un órgano interno. Los medios adecuados para la administración parenteral incluyen la intravenosa, la intraarterial, la intraperitoneal, la intratecal, la intraventricular, la intrauretral, la intraesternal, la intracraneal, la intramuscular y la subcutánea. Los dispositivos adecuados para la administración parenteral incluyen inyectores con aguja (incluyendo microagujas), inyectores sin aguja y técnicas de infusión.
Las formulaciones parenterales son típicamente soluciones acuosas que pueden contener excipientes tales como sales, carbohidratos y agentes amortiguadores (preferentemente a un pH de 3 a 9), pero, para algunas aplicaciones, pueden ser formuladas más adecuadamente como una solución estéril no acuosa o como una forma seca para ser usada en conjunto con un vehículo adecuado tal como agua estéril y libre de pirógenos.
La preparación de formulaciones parenterales en condiciones estériles, por ejemplo, mediante liofilización, puede realizarse fácilmente utilizando técnicas farmacéuticas estándar bien conocidas por los expertos en la técnica.
La solubilidad de los compuestos de la invención utilizados en la preparación de soluciones parenterales puede aumentarse mediante el uso de técnicas de formulación apropiadas, como la incorporación de agentes potenciadores de la solubilidad. Las formulaciones para la administración parenteral pueden ser de liberación inmediata y/o modificada. Las formulaciones de liberación modificada incluyen la liberación retardada, sostenida, pulsada, controlada, dirigida y programada. Así, los compuestos de la invención pueden formularse como un sólido, un semisólido o un líquido tixotrópico para su administración como depósito implantado que proporciona una liberación modificada del compuesto activo. Algunos Ejemplos de estas formulaciones son los stents recubiertos de fármacos y las microesferas de PGLA.
Administración tópica
Los compuestos de la invención también pueden administrarse por vía tópica sobre la piel o las mucosas, es decir, por vía dérmica o transdérmica. Las formulaciones típicas para este fin incluyen geles, hidrogeles, lociones, soluciones, cremas, ungüentos, polvos, apósitos, espumas, películas, parches cutáneos, obleas, implantes, esponjas, fibras, vendajes y microemulsiones. También se pueden utilizar liposomas. Los portadores típicos incluyen alcohol, agua, aceite mineral, petrolato líquido, petrolato blanco, glicerina, polietilenglicol y propilenglicol. Pueden incorporarse potenciadores de la penetración; véase, por ejemplo J Pharm Sci, 88 (10), 955-958 de Finnin y Morgan (octubre de 1999). Otros medios de administración tópica son la electroporación, la iontoforesis, la fonoforesis, la sonoforesis y la inyección con microagujas o sin ellas (por ejemplo , Powderject™, Bioject™, etc.).
Las formulaciones para la administración tópica pueden ser formuladas para ser de liberación inmediata y/o modificada. Las formulaciones de liberación modificada incluyen la liberación retardada, sostenida, pulsada, controlada, dirigida y programada.
Administración Inhalada/Intranasal
Los compuestos de la invención también pueden administrarse por vía intranasal o por inhalación, típicamente en forma de polvo seco (ya sea solo, como una mezcla, por ejemplo, en una mezcla seca con lactosa, o como una partícula de componente mixto, por ejemplo, mezclada con fosfolípidos como la fosfatidilcolina) desde un inhalador de polvo seco o como un aerosol desde un contenedor presurizado, bomba, pulverizador, atomizador (preferentemente un atomizador que utilice la electrohidrodinámica para producir una niebla fina) o nebulizador, con o sin el uso de un propulsor adecuado, como el 1,1,1,2-tetrafluoroetano o el 1,1,1,2,3,3,3-heptafluoropropano. Para uso intranasal, el polvo puede incluir un agente bioadhesivo, por ejemplo, quitosano o ciclodextrina.
El recipiente presurizado, la bomba, el pulverizador, el atomizador o el nebulizador contienen una solución o suspensión del compuesto o compuestos de la invención que comprende, por ejemplo, etanol, etanol acuoso o un agente alternativo adecuado para dispersar, solubilizar o prolongar la liberación del activo, un propulsor como disolvente y un tensioactivo opcional, como trioleato de sorbitán, ácido oleico o un ácido oligoláctico.
Antes de su uso en una formulación de polvo seco o de suspensión, el producto farmacéutico se microniza hasta un tamaño adecuado para su administración por inhalación (normalmente menos de 5 micrones). Esto puede lograrse mediante cualquier procedimiento de trituración apropiado, como la molienda por chorro en espiral, la molienda por chorro en lecho fluido, el procesamiento de fluidos supercríticos para formar nanopartículas, la homogeneización a alta presión o el secado por aspersión.
Las cápsulas (hechas, por ejemplo, de gelatina o HPMC), los blísteres y los cartuchos para su uso en un inhalador o insuflador pueden formularse para contener una mezcla de polvo del compuesto de la invención, una base de polvo adecuada como la lactosa o el almidón y un modificador del rendimiento como la I-leucina, el manitol o el estearato de magnesio. La lactosa puede ser anhidra o en forma de monohidrato, preferentemente esta última. Otros excipientes adecuados son el dextrano, la glucosa, la maltosa, el sorbitol, el xilitol, la fructosa, la sacarosa y la trehalosa.
Una formulación de solución adecuada para su uso en un atomizador que utiliza la electrohidrodinámica para producir una niebla fina puede contener de 1|jg a 20 mg del compuesto de la invención por actuación y el volumen de actuación puede variar de 1 j l a 100 jl. Una formulación típica incluye un compuesto de la invención, propilenglicol, agua estéril, etanol y cloruro de sodio. Los disolventes alternativos que pueden utilizarse en lugar del propilenglicol son el glicerol y el polietilenglicol.
A las formulaciones de la invención destinadas a la administración inhalada/intranasal pueden añadirse sabores adecuados, como el mentol y el levomentol, o edulcorantes, como la sacarina o la sacarina sódica.
Las formulaciones para la administración inhalada/intranasal pueden formularse para que sean de liberación inmediata y/o modificada utilizando, por ejemplo, ácido poli(DL-láctico-coglicólico (PGLA). Las formulaciones de liberación modificada incluyen la liberación retardada, sostenida, pulsada, controlada, dirigida y programada.
En el caso de los inhaladores de polvo seco y los aerosoles, la unidad de dosificación se determina mediante una válvula que suministra una cantidad medida. Las unidades de acuerdo con la invención están típicamente dispuestas para administrar una dosis medida o "soplo" que contiene una cantidad deseada del compuesto de la invención. La dosis diaria total puede administrarse en una sola dosis o, más habitualmente, en dosis divididas a lo largo del día.
Administración rectal/intravaginal: Los compuestos de la invención pueden administrarse por vía rectal o vaginal, por ejemplo, en forma de supositorio, pesario o enema. La manteca de cacao es la base tradicional de los supositorios, pero se pueden utilizar varias alternativas según convenga. Las formulaciones para la administración rectal/vaginal pueden ser de liberación inmediata y/o modificada. Las formulaciones de liberación modificada incluyen la liberación retardada, sostenida, pulsada, controlada, dirigida y programada.
Administración ocular: Los compuestos de la invención también pueden administrarse directamente en el ojo o en el oído, normalmente en forma de gotas de una suspensión o solución micronizada en solución salina estéril isotónica con pH ajustado. Otras formulaciones adecuadas para la administración ocular y auditiva incluyen pomadas, implantes biodegradables (por ejemplo, esponjas de gel absorbibles, colágeno) y no biodegradables (por ejemplo , silicona), obleas, lentes y sistemas en partículas o vesiculares, como niosomas o liposomas. Un polímero como el ácido poliacrílico reticulado, el polivinilalcohol, el ácido hialurónico, un polímero celulósico, por ejemplo, la hidroxipropilmetilcelulosa, la hidroxietilcelulosa o la metilcelulosa, o un polímero heteropolisacárido, por ejemplo, la goma gelana, puede incorporarse junto con un conservante, como el cloruro de benzalconio. Dichas formulaciones también pueden administrarse por iontoforesis.
Las formulaciones para la administración ocular/aural pueden ser formuladas para ser de liberación inmediata y/o modificada. Las formulaciones de liberación modificada incluyen la liberación retardada, sostenida, pulsada, controlada, dirigida o programada.
Otras tecnologías
Los compuestos de la invención pueden combinarse con entidades macromoleculares solubles, como la ciclodextrina y sus derivados adecuados o polímeros que contienen polietilenglicol, para mejorar su solubilidad, velocidad de disolución, enmascaramiento del sabor, biodisponibilidad y/o estabilidad para su uso en cualquiera de los modos de administración antes mencionados.
Los complejos fármaco-ciclodextrina, por ejemplo, resultan generalmente útiles para la mayoría de las formas de dosificación y vías de administración. Pueden utilizarse tanto complejos de inclusión como de no inclusión. Como alternativa a la complejación directa con el fármaco, la ciclodextrina puede utilizarse como aditivo auxiliar, es decir, como portador, diluyente o solubilizante. Las más utilizadas para estos fines son las ciclodextrinas alfa, beta y gamma, cuyos Ejemplos pueden encontrarse en la Publicación PCT n° WO 91/11172, WO 94/02518 y WO 98/55148.
Dosificación: La cantidad del compuesto activo que se administre dependerá del sujeto que se trate, de la gravedad del trastorno o la afección, de la tasa de administración, de la disposición del compuesto y del criterio del médico que lo prescriba. Sin embargo, una dosificación efectiva se encuentra típicamente en el rango de alrededor de 0,001 a alrededor de 100 mg por kg de peso corporal por día, preferiblemente alrededor de 0,01 a alrededor de 35 mg/kg/día, en dosis únicas o divididas. Para un ser humano de 70 kg, esto supondría entre 0,07 y 7000 mg/día, preferiblemente entre 0,7 y 2500 mg/día. En algunos casos, los niveles de dosificación por debajo del límite inferior de la gama mencionada pueden ser más que adecuados, mientras que en otros casos se pueden utilizar dosis aún mayores sin causar ningún efecto secundario perjudicial, con tales dosis más grandes típicamente divididas en varias dosis más pequeñas para la administración a lo largo del día.
Kit de piezas: Dado que puede ser deseable administrar una combinación de compuestos activos, por ejemplo, con el fin de tratar una enfermedad o condición particular, está dentro del alcance de la presente invención que dos o más composiciones farmacéuticas, al menos una de las cuales contiene un compuesto de acuerdo con la invención, pueden combinarse convenientemente en forma de un kit adecuado para la coadministración de las composiciones. Así, el kit de la invención incluye dos o más composiciones farmacéuticas separadas, al menos una de las cuales contiene un compuesto de la invención, y medios para retener por separado dichas composiciones, tales como un contenedor, un frasco dividido o un pac.uete de lámina dividido. Un Ejemplo de este tipo de kit es el conocido blíster utilizado para el envasado de comprimidos, cápsulas y similares.
El kit de la invención es particularmente adecuado para administrar diferentes formas de dosificación, por ejemplo, oral y parenteral, para administrar las composiciones separadas en diferentes intervalos de dosificación, o para valorar las composiciones separadas entre sí. Para facilitar el cumplimiento, el kit suele incluir instrucciones de administración y puede estar provisto de una ayuda para la memoria.
EJEMPLOS
Para algunas de las etapas descritas puede ser necesario proteger las funciones reactivas potenciales que no se desea que reaccionen, y escindir en consecuencia dichos grupos protectores. En este caso, se puede utilizar cualquier radical protector compatible. En particular, pueden utilizarse procedimientos de protección y desprotección como los descritos por T.W. Greene (Protective Groups in Organic Synthesis, A. Wiley-Interscience Publication, 1981) o por P. J. Kocienski (Protecting groups, Georg Thieme Verlag, 1994).
Todas las reacciones en el presente documento y las preparaciones de materiales de partida novedosos utilizados en el presente documento son reactivos convencionales y apropiados y las condiciones de reacción para su realización o preparación así como los procedimientos para aislar los productos deseados serán bien conocidos por los expertos en la técnica con referencia a los precedentes de la literatura y los Ejemplos y preparaciones ac.uí presentes.
En el presente documento pueden utilizarse las siguientes abreviaturas:
Ac (acetilo); AcCl (cloruro de acetilo); AcOH o HOAc (ácido acético); AC2O (anhídrido acético); ac. (acuoso); Boc o boc(tert-butoxicarbonilo); ca. (aproximadamente); CDCh (cloroformo deuterado); CH2Ch y/o DCM (diclorometano); Da St (trifluoruro de dietilaminosulfuro); DCE (dicloroetano); DEA (dietilamina); DIBAL o DIBa L-H (hidruro de diisobutilaluminio); DIC (diisopropilcarbodiimida); DIPEA o base de Hunig (N,N-diisopropiletilamina); DMA (dimetilacetamida); DMF (dimetilformamida); DME (etilenglicol); DMP (Peryodinano de Dess-Martin); d Ma P (4-dimetilaminopiridina); Dm So (dimetilsulfóxido); DMSO-d6 (dimetilsulfóxido deuterado); EDC o EDCI (1 -etil-3-(3-dimetilaminopropil)-carbodiimida); Et (etilo); Et3N o TEA (trietilamina); EtOH (etanol); EtOAc (acetato de etilo); Et2O (éter dietílico); g o gm (gramo o gramos); HATU (2-(7-aza-1H-benzotriazol-1-il)-1,1,3,3-tetrametiluro hexafluorofosfato); HBTU (o-(benzotriazol-1-il)-1,1,3,3-tetrametiluro hexafluorofosfato); HMPT (Tris(dimetilamino)fosfina); HPLC (cromatografía líquida de alto rendimiento); HOBT (1-hidroxi-benzotriazol); h o hr (hora u horas, según corresponda); iBu (isobutilo); IPA (alcohol isopropílico); iPr (isopropilo); iPrOAc (acetato de isopropilo); KHMDS (bis(trimetilsilil)amida de potasio); KOAc (acetato de potasio); LCMS (cromatografía líquidaespectrometría de masas); LiHMDS (bis(trimetilsilil)amida de litio); Me (metilo); MeOH (metanol); MeOD (metanol deuterado); MeCN (acetonitrilo); m o min (minuto o minutos, según corresponda); mg (miligramo o miligramos); Ms (metilsulfonilo); MsCl (cloruro de metanosulfonilo); N (normal); NBS (N-Bromosuccinimida); NFSI(N-Fluorodibenesulfonimida); RMN (resonancia magnética nuclear); nBu (n-butil); nBuLi (n-butil-litio); nPr (n-propil); Pd/C (paladio sobre carbono); Pd2(dba)3 (tris(dibencilideneacetona)dipaladio(0)); Pd(dppf)Cl2 ([1,1'-bis(difenilfosfino)ferroceno]dicloropaladio (II)); Ph (fenilo); PTSA o pTSA (ácido p-Tolueno sulfónico); Rt (tiempo de retención); rt (temperatura ambiente); RuCI(p-cimeno)[(R,R)-Ts-DPEN] ([N-[(1R,2R)-2-(Amino-KN)-1,2-difeniletil]-4-metilbencenosulfonam¡dato-KN]cloro[(1,2,3,4,5,6-r|)-1-met¡l-4-(1-met¡let¡l)benceno]-ruten¡o); s o seg (segundo o segundos, según corresponda); Selectfluor (N-Clorometil-N'-fluorotrietilendiamonio bis(tetrafluoroborato)); SEM (2-Trimetilsililoximetoxi); SFC (cromatografía de fluidos supercríticos); Si-Thiol (sílice 1-propanotiol); T3P (anhídrido propilfosfónico); TBAF (fluoruro de amonio tetrabutílico); TBDMSCI (cloruro de t-butil-dimetilsililo); TBME o MTBE (tertbutil metil éter); t-BuOH (2-metil-2-propanol, tert-butanol o alcohol tert-butílico); TDA-1 (Tris[2-(2-metoxietoxi)etil]amina o Tris(3,6-dioxaheptil)amina); TEA, NEt3 o Et3N (trietilamina); TFA (ácido trifluoroacético); THF (tetrahidrofurano); THP (tetrahidropirano); TLC (cromatografía en capa fina); TMS (trimetilsililo); TMSCI (cloruro de trimetilsililo); TMSCF3 (trimetil(trifluorometil)silano); Tos o tosilo (4-toluenosulfonilo); TOSMIC (p-Toluenosulfonilmetilisocianuro); UV (ultravioleta).
Esquema sintético general de los compuestos carbonucleósidos
Esquema 1
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reducción
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desprotección
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Como se ejemplifica en el Esquema 1, un compuesto como 1a puede comprarse o sintetizarse (Chem. Rev., 2012, 112 (8), pp 4642-4686). Típicamente, el (1S,2R,3S,4R)-4-amino-2,3-dihidroxiciclopentano-1-carboxilato de metilo puede reaccionar con una pirimidina adecuadamente funcionalizada u otro heterociclo para dar compuestos como el 1b. Esta reacción puede llevarse a cabo mediante una sustitución aromática nucleofílica estándar utilizando condiciones como la diisopropiletilamina o la trimetilamina en DMSO, DMA o DMF o condiciones utilizando fluoruro de cesio en DMSO. Las condiciones de reacción alternativas pueden incluir reacciones de acoplamiento de metales, como los acoplamientos de paladio. La ciclización de compuestos como 1b a compuestos como 1c puede ocurrir bajo una variedad de condiciones incluyendo condensaciones o acoplamientos metálicos dependiendo del tipo de átomo de A. La protección del diol para producir 1d puede hacerse usando acetona o 2,2-dimetoxipropano en ácido suave. Los ésteres como el 1d se convierten en cetonas de alquilo y arilo como el 1e utilizando reactivos metálicos de alquilo y arilo como los Grignardos de alquilo y arilo (M= Mg), reactivos de litio de alquilo y arilo, cupratos de alquilo y arilo, zincatos de alquilo y arilo, así como otros reactivos organometálicos. Normalmente, estas reacciones se llevan a cabo en disolventes etéreos como THF, MeTHF, dioxano o disolventes similares a temperaturas que oscilan entre -78 °C y 60 °C. Las cetonas alquílicas y arílicas como la 1e pueden convertirse en alcoholes secundarios como la 1f utilizando reactivos reductores como NaBH4, LiBH4, LiAIH4, DIBAL y otros. Normalmente, estas reacciones pueden llevarse a cabo en diversos disolventes, como DCM, THF, MeOH, EtOH u otros, a distintas temperaturas. Las cetonas alquílicas y arílicas como la 1e pueden convertirse preferentemente en alcoholes secundarios enriquecidos diastereoméricamente como la 1f utilizando condiciones reductoras quirales como RuCI(p-cimeno)[(R,R)-Ts-DPEN] y formiato sódico (J. Org. Chem, 2014, 79, 3238-3243). Normalmente, estas reacciones se realizan en disolvente EtOAc y se ejecutan a temperatura ambiente. Finalmente, los compuestos como 1f pueden desprotegerse para revelar los compuestos de triol como 1g por tratamiento con ácido como TFA o HCl diluido. Normalmente, estas reacciones se realizan en presencia de agua a 0 oC o rt. Los compuestos en cada paso pueden purificarse mediante técnicas estándar como la cromatografía en columna, la cristalización, la HPLC en fase inversa o la SFC. Si es necesario, la separación de los diastereómeros de 1f o 1g puede llevarse a cabo con procedimientos estándar conocidos en la técnica, como la SFC quiral o la HPLC, para obtener diastereómeros únicos
Esquema 2
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Como se ejemplifica en el Esquema 2, los compuestos como el 1d pueden ser hidrolizados con base para dar el ácido 2a. Normalmente, estas reacciones se llevan a cabo utilizando alguna fuente de hidróxido, como el hidróxido de litio, el hidróxido de sodio u otros. Los compuestos similares al ácido carboxílico 2a se convierten en compuestos como la amida de Weinreb 2b mediante el tratamiento con Hcl de N,O-dimetilhidroxilamina y reactivos estándar de acoplamiento de amidas como HOBT y EDCI, T3P o HATU con una base como DIPEA o TEA. Normalmente, estas reacciones se llevan a cabo en disolventes como DMF o THF y se ejecutan a temperaturas que oscilan entre 0 oC y 60 oC. Las amidas de Weinreb, como la 2b , se convierten en cetonas de alquilo y arilo, como la 1e , utilizando reactivos metálicos de alquilo y arilo, como los Grignardos de alquilo y arilo (M= Mg), los reactivos de litio de alquilo y arilo, los cupratos de alquilo y arilo, los zincatos de alquilo y arilo, así como otros reactivos organometálicos. Normalmente, estas reacciones se llevan a cabo en disolventes etéreos como THF, MeTHF, dioxano o un disolvente similar a temperaturas que oscilan entre -78 °C y 60 °C
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Como se ejemplifica en el Esquema 3, un compuesto como 3a [(3aS,4R,7S,7aR)-2,2-dimetiltetrahidro-4,7-metano[1,3]dioxolo[4,5-c]piridin-6(3aH)-ona] puede adquirirse o sintetizarse (Chem. Rev., 2012, 112 (8), 4642-4686) y puede protegerse como el carbamato utilizando reactivos como el anhídrido de Boc o el cloruro de benzoilo dando lugar a lactamas como la 3b. Estas lactamas activadas (3b) se convierten en cetonas de alquilo y arilo como la 3c utilizando reactivos metálicos de alquilo y arilo como los Grignardos de alquilo y arilo (M= Mg), reactivos de alquilo y arilo de litio, cupratos de alquilo y arilo, zincatos de alquilo y arilo, así como otros reactivos organometálicos. Normalmente, estas reacciones se llevan a cabo en disolventes etéreos como THF, MeTHF, dioxano o disolventes similares a temperaturas que oscilan entre -78 °C y 60 °C. Las cetonas alquílicas y arílicas como la 3c pueden convertirse en alcoholes secundarios como la 3d utilizando reactivos reductores como NaBH4, LiBH4, LiAIH4, DIBAL y otros. Normalmente, estas reacciones pueden llevarse a cabo en diversos disolventes, como DCM, THF, MeOH, EtOH u otros, a distintas temperaturas. Las cetonas alquílicas y arílicas como la 3c pueden convertirse preferentemente en alcoholes secundarios enriquecidos diastereoméricamente como la 3d utilizando condiciones de reducción quirales como RuCI(p-cimeno)[(S,S)-Ts-DPEN] y formiato sódico (J. Org. Chem, 2014, 79, 3238-3243). Normalmente, estas reacciones se realizan en disolvente EtOAc y se ejecutan a temperatura ambiente. El alcohol secundario resultante, como el 3d , puede protegerse con una variedad de reactivos que proporcionan estrategias de desprotección ortogonales al carbamato instalado anteriormente en la ruta. Estos reactivos incluyen TMSCI, TESCI, TBDMSCI, TIPSCI, así como otros. Compuestos como el 3e pueden ser desprotegidos para dar compuestos como el 3f a través de una variedad de procedimientos dependiendo del carbamato instalado. Los Ejemplos incluyen el uso de una solución diluida de ácido trifluoroacético en el caso del carbamato de Boc o la hidrogenólisis con un catalizador de Pd y gas hidrógeno en el caso del carbamato de benzoilo. Compuestos como el 3f pueden reaccionar con heterociclos adecuadamente sustituidos en una sustitución aromática nucleofílica para dar lugar a compuestos como el 3g. Dichas reacciones suelen llevarse a cabo utilizando bases orgánicas como la diisopropiletilamina o la trimetilamina en DMSO, DMA o DMF o en condiciones que utilizan fluoruro de cesio en DMSO. Las condiciones de reacción alternativas pueden incluir reacciones de acoplamiento de metales, como los acoplamientos de paladio. La ciclización de compuestos como el 3g a compuestos como el 3h puede ocurrir bajo una variedad de condiciones incluyendo condensaciones o acoplamientos metálicos dependiendo del tipo de átomo de A. Finalmente, los compuestos como el 3h pueden ser desprotegidos para revelar los compuestos de triol como el 3i por tratamiento con ácido como TFA o HCl diluido. Normalmente, estas reacciones se realizan en presencia de agua a 0 °C o rt. Los compuestos en cada paso pueden purificarse mediante técnicas estándar como la cromatografía en columna, la cristalización, la HPLC en fase inversa o la SFC. Si es necesario, la separación de los diastereómeros de 3d o de cualquier compuesto posterior puede llevarse a cabo mediante procedimientos estándar conocidos en la técnica, como la SFC quiral o la HPLC, para obtener diastereómeros únicos
Esquema 4:
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Como se ejemplifica en el Esquema 4, un compuesto como 4a [(3aR,4S,6R,6aS)-6-amino-2,2-dimetiltetrahidro-4H-ciclopenta[d][1,3]dioxol-4-ol] puede adquirirse o sintetizarse [J. Perkin Trans. I, 1985, 1437 Tetrahedron Letters, 2000, (41) 9537-9530]. Los compuestos como 4a pueden sufrir una sustitución aromática nucleofílica con el heterociclo adecuadamente sustituido para dar lugar a compuestos como 4b. La ciclización de compuestos como el 4b a compuestos como el 4c puede ocurrir bajo una variedad de condiciones incluyendo condensaciones o acoplamientos metálicos dependiendo del tipo de átomo de A. Los compuestos como el 4c pueden sufrir una sustitución aromática nucleofílica con el fluorobenceno apropiadamente sustituido para producir éteres de fenol como el 4d. Finalmente, los compuestos como el 4d pueden desprotegerse para revelar los compuestos de diol como el 4e por tratamiento con ácido como TFA o HCl diluido. Normalmente, estas reacciones se realizan en presencia de agua a 0 °C o rt. Los compuestos en cada paso pueden purificarse mediante técnicas estándar como la cromatografía en columna, la cristalización, la HPLC en fase inversa o la SFC. Si es necesario, la separación de los diastereómeros de 4a o de cualquier compuesto posterior puede llevarse a cabo mediante procedimientos estándar conocidos en la técnica, como la SFC quiral o la HPLC, para obtener diastereómeros únicos
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Como se ejemplifica en el Esquema 5, los compuestos como el 5a pueden comprarse o sintetizarse (Chemical Science, 2010, 1, p427 Journal of the American Chemical Society, 2000, 122, p5947 Organic Letters, 2012, 14(9), p2254). Los compuestos como 5a pueden someterse a una alquilación asimétrica con heterociclos adecuadamente sustituidos utilizando una variedad de catalizadores de paladio y ligandos quirales para formar compuestos como 5b.
Los compuestos como el 5b pueden someterse a una alquilación alílica con fenoles o hidroxiheterociclos apropiadamente sustituidos utilizando una variedad de catalizadores y ligandos de paladio para formar compuestos como el 5c. Los compuestos como el 5c pueden ser dihidroxilados para formar dioles como el 5d utilizando reactivos como eltertróxido de osmio o el permanganato de potasio. Los compuestos en cada paso pueden purificarse mediante técnicas estándar como la cromatografía en columna, la cristalización, la HPLC en fase inversa o la SFC. Si es necesario, la separación de los diastereómeros de 5d puede llevarse a cabo mediante procedimientos estándar conocidos en la técnica, como la SFC quiral o la HPLC, para obtener diastereómeros únicos
Esquema 6:
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Como se ejemplifica en el Esquema 6, los compuestos como 5a pueden someterse a una alquilación asimétrica con fenoles o hidroxiheterociclos apropiadamente sustituidos utilizando una variedad de catalizadores de paladio y ligandos quirales para formar compuestos como 6a. Los compuestos como 6a pueden someterse a una alquilación con heterociclos apropiadamente sustituidos utilizando una variedad de catalizadores y ligandos de paladio para formar compuestos como 5c. Los compuestos como el 5c pueden ser dihidroxilados para formar dioles como el 5d utilizando reactivos como el tertróxido de osmio o el permanganato de potasio
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Como se ejemplifica en el Esquema 7, los compuestos como 5b pueden ser hidrolizados a compuestos como 7a utilizando alguna fuente de hidróxido como hidróxido de litio, hidróxido de sodio u otro. Los compuestos como 7a pueden sufrir una sustitución aromática nucleofílica con el heterociclo adecuadamente sustituido para dar lugar a compuestos como 7b. Los compuestos como el 7b pueden ser dihidroxilados para formar dioles como el 7c utilizando reactivos como el tertróxido de osmio o el permanganato de potasio. Los compuestos en cada paso pueden purificarse mediante técnicas estándar como la cromatografía en columna, la cristalización, la HPLC en fase inversa o la SFC. Si es necesario, la separación de los diastereómeros de 7c puede llevarse a cabo mediante procedimientos estándar conocidos en la técnica, como la SFC quiral o la HPLC, para obtener diastereómeros únicos
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Como se ejemplifica en el Esquema 8; los compuestos como 6a pueden ser hidrolizados a compuestos como 8a utilizando alguna fuente de hidróxido como hidróxido de litio, hidróxido de sodio u otro. Los compuestos como el 8a pueden sufrir una sustitución aromática nucleofílica con el heterociclo adecuadamente sustituido para dar lugar a compuestos como el 8b. Los compuestos como el 8b pueden ser dihidroxilados para formar dioles como el 8c utilizando reactivos como el tertróxido de osmio o el permanganato de potasio. Los compuestos en cada paso pueden purificarse mediante técnicas estándar como la cromatografía en columna, la cristalización, la HPLC en fase inversa o la SFC. Si es necesario, la separación de los diastereómeros de 8c puede llevarse a cabo mediante procedimientos estándar conocidos en la técnica, como la SFC quiral o la HPLC, para obtener diastereómeros únicos.
Ejemplo 1 (Esquema A): Síntesis de (1S,2R,3R,5R)-3-((R)-1-hidroxietil)-5-(4-metil-7H-pirrolo[2,3-d]pmmidm-7-il)ciclopentano-1,2-diol (A-12) (referencia)
Ejemplo 2 (Esquema A): Síntesis de (1S,2R,3R,5R)-3-((S)-1-hidroxietil)-5-(4-metil-7H-pirrolo[2,3-d]pmmidm-7-il)ciclopentano-1,2-diol (A-13) (referencia)
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A una mezcla bifásica de color amarillo claro de (1R,4S)-2-azabiciclo[2.2.1]hept-5-en-3-ona A-1 (Chemical Reviews, 2012, 112(8), pp 4642-4686) (100 g, 916 mmol) y NMO (118 g, 1,01 mol) en isoamil alcohol (500 ml) y agua (500 ml) se añadió 2,5 % de OsO4 en t-BuOH (1,5 g, 5,9 mmol, 76 ml) a rt (15 °C). La mezcla se calentó a 70 °C durante 2 horas. La mezcla se enfrió hasta rt (15 °C). Se añadió NaHSO3 (12 g) y se agitó a rt (15 °C) durante 45 min. La mezcla se concentró al vacío para obtener el producto crudo (150 g) como un sólido oscuro que se purificó por cromatografía en gel de sílice eluyendo con MeOH en DCM = 10% para obtener A-2 (90 g, 69 %) como un sólido de color rosa claro.
1HRMN (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 7,54 (s. br., 1H), 5,00 (dd, J=21,3, 22,6 Hz, 2H), 3,81 - 3,64 (m, 2H), 3,43 (s, 1H), 2,25 (s, 1H), 1,93- 1,67 (m,2H)
Paso 2: Síntesis de (1S,2R,3S,4R)-4-amino-2,3-dihidroxiciclopentano-1-carboxilato-HCI de metilo (A-3)
El compuesto A-2 (33 g, 231 mmol) se añadió a HCl 4N en MeOH (500 ml) a rt (15 °C). La suspensión se agitó a rt (15 °C) durante 20 horas. La mezcla se concentró al vacío y el residuo se suspendió en DCM y se filtró. El sólido se lavó con DCM y se secó al vacío para obtener A-3 (45 g, 92 %) como sólido blanco. LCMS [M+1] 176; 1HRMN (400 MHz, D2O) 8 ppm 4,27 (t, J=5,1 Hz, 1H), 4,04 (t, J=6,4 Hz, 1H), 3,72 (s, 3H), 3,55 (q, J=8,4 Hz, 1H), 2,97 (dt, J=5,0, 8,8 Hz, 1H), 2,49 (td, J=8,5, 13,8 Hz, 1H), 1,83 (td, J=9,2, 13,7 Hz, 1H)
Paso 3: Síntesis de (1S,2R,3S,4R)-4-(4-doro-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidm-7-M)-2,3-dihidroxicidopentano-1-carboxilato de metilo (A-4)
A una suspensión blanca del compuesto A-3 (42 g, 200 mmol) y 2-(4,6-dicloropirimidin-5-il)acetaldehído (40 g, 209 mmol) en EtOH (400 ml) se añadió Et3N (40,4 g, 400 mmol). La solución amarilla resultante se agitó a reflujo durante 2 horas. La mezcla se concentró al vacío hasta unos 100 ml. El residuo se vertió en NH4Cl ac. (500 ml) y se extrajo con EtOAc (200 ml x 3). El extracto se lavó con salmuera (200 ml), se secó sobre Na2SO4 y se concentró al vacío para obtener A-4 crudo (60 g, >99 %) como una goma roja que se utilizó en el siguiente paso directamente. LCMS [M+1] 312
Paso 4: Síntesis de (3aR,4S,6R,6aS)-6-(4-cloro-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-M)-2,2-dimetMtetrahidro-4H-ciclopenta[d][1,3]dioxol-4-carboxilato de metilo (A-5)
A una solución del compuesto A-4 crudo (60 g, 192 mmol) en 2,2-dimetoxipropano (300 ml) y acetona (300 ml) se añadió TsOH.H2O (40 g, 212 mmol). La mezcla se agitó a rt (15 °C) durante 1 hora. La mezcla se vertió en NaHCO3 ac. (1000 ml) y se extrajo con EtOAc (500 ml). El extracto se lavó con salmuera y se concentró al vacío para obtener el material crudo, que se purificó mediante cromatografía en gel de sílice con elusión de EtOAc en éter de petróleo de 0 a 100 % para obtener A-5 (42 g, 62 %) como una goma de color amarillo que se solidificó al reposar. LCMS [M+1] 352; 1HRMN (400 MHz, CDCh) 8 ppm 8,63 (s, 1H), 7,29 (d, J=3,5 Hz, 1H), 6,64 (d, J=3,8 Hz, 1H), 5,15-5,04 (m, 2H), 5 ,03-4,98 (m, 1H), 3,76 (s, 3H), 3,12 (ddd, J=5,3, 7,6, 10,7 Hz, 1H), 2 ,75-2,59 (m, 2H), 1,59 (s, 3H), 1,33 (s, 3H)
Paso 5: Síntesis de (3aR,4S,6R,6aS)-2,2-dimetN-6-(4-metN-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidm-7-N)tetrahidro-4H-ciclopenta[d][1,3]dioxol-4-carboxilato de metilo (A-6)
A una solución de A-5 (15 g, 42,6 mmol) en THF seco (125 ml) se añadió Pd(PPh3)4 (1,97 g, 1,71 mmol). A la solución amarilla resultante se añadió una solución 1M de Zn(Me)2 (171 ml, 171 mmol). La mezcla se desgasificó con N2 cuatro veces. La solución amarilla se calentó a reflujo durante 3 horas y se convirtió en una solución oscura. La mezcla se vertió en NH4Cl ac. (200 ml) enfriado con cuidado y se extrajo con EtOAc (200 ml x 3). El extracto se lavó con salmuera (200 ml), se secó sobre Na2SO4 y se concentró al vacío para obtener el producto crudo (18 g) como una goma de color amarillo. El material crudo se purificó por cromatografía en gel de sílice eluyendo con EtOAc en éter de petróleo de 0 a 100 % para obtener A-6 (13,5 g, 96 %) como una goma de color amarillo. [a]20D-21,57° (c= 8,4 mg/ml, metanol). LCMS [M+1] 332; 1HRMN (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 8,65 (s, 1H), 7,74 (d, J=3,5 Hz, 1H), 6,74 (d, J=3,8 Hz, 1H), 5,18 - 5,06 (m, 1H), 5,01 - 4,90 (m, 2H), 3,65 (s, 3H), 3,15 - 3,03 (m, 1H), 2,64 (s, 3H), 2,46 - 2,40 (m, 1H), 1,49 (s, 3H), 1,23 (s, 3H)
Paso 6: Síntesis del ácido (3aR,4S,6R,6aS)-2,2-dimetil-6-(4-metil-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)tetrahidro-4H-ciclopenta[d][1,3]dioxol-4-carboxílico (A-7)
Una mezcla de A-6 (13 g, 33 mmol) y LiOH (2,8 g, 66,7 mmol) en THF (100 ml)/H2O (100 ml) se agitó a rt (15 °C) durante 4 horas. La TLC (DCM/MeOH=10/1) mostró que la mayor parte del SM se había consumido. La mezcla se diluyó con agua (50 ml) y se lavó con EtOAc (100 ml x 2). A la capa acuosa se añadió H3PO4 (3,6 g, 37 mmol) y se extrajo con EtOAc/THF (50 ml/50 ml x 5). El extracto se secó sobre Na2SO4 y se concentró al vacío para obtener A-7 (8,9 g, 84 %) como un sólido de color amarillo. LCMS [M+1] 318; 1HRMN (400 MHz, CDCh) 8 ppm 8,77 (s, 1H), 7,26 (s. br., 1H), 6,59 (d, J=3,8 Hz, 1H), 5,25 (t, J=5,3 Hz, 1H), 5,14-4,98 (m, 2H), 3,18 (ddd, J=4,8, 7,8, 10,0 Hz, 1H), 2,77 - 2,60 (m, 5H), 1,60 (s, 3H), 1,35 (s, 3H)
Paso 7: Síntesis de (3aR,4S,6R,6aS)-N-metoxi-N,2,2-trimetN-6-(4-metN-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidm-7-N)tetrahidro-4H-ciclopenta[d][1,3]dioxol-4-carboxamida (A-8)
A una suspensión de A-7 crudo (7 g, 22,1 mmol) y N,O-dimetilhidroxilamina-HCl (4,30 g, 44,1 mmol) en THF (140 ml) se añadió DIPEA(11,4 g, 88,2 mmol) y T3P al 50 % (28,1 g, 25,8 ml, 44,1 mmol) a rt (15 °C). La solución roja resultante se agitó a rt (15 °C) durante 20 horas. La LCMS mostró que el pico principal era el compuesto deseado. La mezcla se diluyó con EtOAc y se lavó con NH4Cl ac., NaHCO3 ac., salmuera, se secó sobre Na2SO4 y se concentró al vacío para obtener A-8 (7,3 g, 91,8 %) como una goma de color amarillo. [a]20D+27,30° (c= 2,82 mg/ml, metanol); LCMS [M+1] 361; 1HRMN (400 MHz, CDCh) 8 ppm 8,77 (s, 1H), 7,31 (d, J=3,5 Hz, 1H), 6,60 (d, J=3,5 Hz, 1H), 5,36-5,27 (m, 1H), 5,11 - 5,03 (m, 1H), 4,91 (dd, J=5,6, 7,2 Hz, 1H), 3,77 (s, 3H), 3,61 - 3,51 (m, 1H), 3,24 (s, 3H), 2,72 (s, 3H), 2,65 -2,56 (m, 1H), 2,54 - 2,42 (m, 1H), 1,60 (s, 3H), 1,30 (s, 3H)
Paso 8: Síntesis de 1-((3aR,4S,6R,6aS)-2,2-dimetil-6-(4-metil-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)tetrahidro-4H-ciclopenta[d][1,3]dioxol-4-il)etan-1-ona (A-9)
A una solución amarilla clara de A-8 (130 mg, 0,361 mmol) en THF (5,39 ml) se añadió MeMgBr (solución 3,0 M en éter dietílico, 0,144 ml, 0,433 mmol) a 0 °C. Tras la adición, la mezcla se agitó a 0 °C durante 40 min. La mezcla se inactivó con NH4Cl acuoso (40 ml) en un baño de hielo y se extrajo con EtOAc (30 ml x 2). El extracto se lavó con salmuera (20 ml), se secó sobre Na2SO4 y se concentró al vacío para obtener el compuesto A-9 crudo (110 mg, 97 %) como aceite de color amarillo y se utilizó tal cual en el siguiente paso.
Paso 9: Síntesis de (R)-1-((3aR,4R,6R,6aS)-2,2-dimetil-6-(4-metil-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)tetrahidro-4H-ciclopenta[d][1,3]dioxol-4-il)etan-1-ol (A-10) y (S)-1-((3aR,4R,6R,6aS)-2,2-dimetil-6-(4-metil-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)tetrahidro-4H-ciclopenta[d][1,3]dioxol-4-il)etan-1-ol (A-11)
A una solución amarilla de A-9 (110 mg, 0,349 mmol) en MeOH seco (6 ml) se añadió NaBH4 (26 mg, 0,698 mmol) a 0 °C. Tras la adición, la mezcla se agitó a 0 °C durante 60 min. A continuación, la mezcla de reacción se concentró al vacío para dar un sólido blanco (150 mg) que se separó porSFC quiral para dar A-10 (62 mg, 56 %) y A-11 (61 mg, 55 %) y se utilizó tal cual.
Paso 10: Síntesis de (1S,2R,3R,5R)-3-((R)-1-hidroxietN)-5-(4-metil-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-N)ciclopentano-1,2-diol (A-12) y (1S,2R,3R,5R)-3-((S)-1-hidroxietil)-5-(4-metN-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidm-7-N)ciclopentano-1,2-diol (A-13)
A una suspensión amarilla de A-10 (74 mg, 0,02 mmol) en H2O (1 ml) se añadió TFA (1 ml) a 0 °C. La mezcla se agitó a temperatura ambiente (15 °C) durante 2 horas. Se añadió K2c O3 acuoso saturado (10 ml) a la mezcla (0 °C) lentamente hasta el pH 7-8. Se purificó por HPLC preparativa para dar el compuesto A-12 (34 mg, 53 %). LCMS [M+1] 278; 1HRMN (400 MHz, MeOD-d4) 5 ppm 8,60 (s, 1H), 7,60 (d, J=3,8 Hz, 1H), 6,73 (d, J=3,5 Hz, 1H), 5,12 - 5,00 (m, 1H), 4,37 (dd, J=5,8, 9,3 Hz, 1H), 4,17 (dd, J=2,9, 5,6 Hz, 1H), 3,81 (quin, J=6,2 Hz, 1H), 2,71 (s, 3H), 2,31 (td, J=8,3, 12,7 Hz, 1H), 2,07 (ddt, J=2,8, 5,9, 9,0 Hz, 1H), 1,84 (ddd, J=9,3, 10,9, 12,7 Hz, 1H), 1,26 (d, J=6,3 Hz, 3H) A una suspensión amarilla de A-11 (74 mg, 0,23 mmol) en H2O (1,5 ml) se añadió TFA (1,5 ml) gota a gota a 0 °C. A continuación, la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente (20 °C) durante 2 horas, y luego se ajustó a pH=7 con K2CO3 al 20 %. La fase acuosa se purificó por HPLC preparativa para dar A-13 (45 mg, 70 %). LCMS [M+1] 278; 1HRMN (400 MHz, MeOD-d4) 5 ppm 8,59 (s, 1 H), 7,61 (d, J=3,53 Hz, 1 H), 6,72 (d, J=3,53 Hz, 1 H), 5,03 - 5,12 (m, 1 H), 3,92 - 4,30 (dd, J=8,60, 5,95 Hz, 1 H), 3,92 - 4,03 (m, 2 H), 2,70 (s, 3 H), 2,28 (dt, J=12,57, 8,27 Hz, 1 H), 2,06 (tt, J=8,71,4,30 Hz, 1 H), 1,88 - 1,99 (m, 1 H), 1,22 (d, J=6,62 Hz, 3 H)
Los Ejemplos 3-16 (referencias) se prepararon utilizando una química similar en el Esquema A, utilizando el reactivo de Grignard apropiado para el paso 8.
Figure imgf000048_0001
continuación
Figure imgf000049_0001
continuación
Figure imgf000050_0002
Síntesis de bromuro de (3,4,5-trifluorofenil)magnesio (para referencia Ejemplo 13 y 14)
Figure imgf000050_0001
A una mezcla de magnesio (264 mg, 11,0 mmol) y THF (5 ml) se añadió yodo (5,0 mg) y una solución de 5-bromo-1,2,3-trifluorobenceno (211 mg, 1 mmol) en THF (0,5 ml). La mezcla se calentó a 60 °C, y se añadió gota a gota una solución de 5-bromo-1,2,3-trifluorobenceno (1,9 g, 9 mmol) en THF (4,5 ml). La reacción se calentó durante dos horas, la solución se enfrió a temperatura ambiente y se utilizó directamente en el siguiente paso.
Los Ejemplos 15 y 16 (Esquema B) se prepararon utilizando una química similar a la del Esquema A, empleando 2,6-dimetilpiridina y nBuLi en el paso 8 en lugar de bromuro de metilmagnesio.
Figure imgf000051_0001
A una solución de 2,6-dimetilpiridina (168 mg, 1,56 mmol) en THF seco ( 8 ml) a -75 °C se añadió n-BuLi (125 mg, 1,96 mmol, 1,22 ml, 1,6 M) gota a gota, manteniéndose la temperatura a aproximadamente -70 °C. La suspensión resultante se agitó a -75 °C durante 1 hora. Se añadió una solución de A-8 ( 28 2 mg, 0,782 mmol) en THF seco (4 ml) a - 75 °C gota a gota. La suspensión resultante se agitó a -75 °C y se dejó calentar a t.r. y se agitó durante la noche. Se evaporó el THF, se añadió H2O al producto crudo y se extrajo con EtOAc, se concentró y se purificó por cromatografía en columna con MeOH/EtOAcal 5 % para dar 169 mg de B-1 (53 % de rendimiento) como aceite de color amarillo. LCMS [M+1] 407,15.
Figure imgf000051_0002
Ejemplo 17 (Esquema C): (1S,2R,3S,5R)-3-(1-hidroxiciclopropil)-5-(4-metil-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)ciclopentano-1,2-diol (C-2) (referencia)
Figure imgf000052_0001
Paso 1: Síntesis de 1-((3aR,4S,6R,6aS)-2,2-dimetN-6-(4-metN-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidm-7-N)tetrahidro-4H-cidopenta[d][1,3]dioxol-4-il)cidopropan-1-ol (C-1)
A una solución amarilla clara de A-6 (140 mg, 0,422 mmol) en THF seco (6,32 ml) se añadió Ti(OiPr)4 (168 mg, 0,591 mmol) y EtMgBr (solución 3,0 M en éter dietílico, 0,845 ml, 2,53 mmol) a r.t (13 °C). Tras la adición, la mezcla se agitó a 13 °C durante 10 min. La mezcla se inactivó con H2O (50 ml) en un baño de hielo y se extrajo con EtOAc (30 ml x 2). El extracto se lavó con salmuera (30 ml), se secó sobre Na2SO4 y se concentró al vacío para obtener un residuo crudo que se purificó por cromatografía instantánea eluyendo con EtOAc/DCM 0-100 % para dar C-1 (90 mg, 65 %) como un sólido de color amarillo. LCMS [M+1] 330; 1HRMN (400 MHz, CDCh) 8 ppm 8,72 (s, 1H), 7,22 (d, J=3,5 Hz, 1H), 6,55 (d, J=3,8 Hz, 1H), 5,06-4,99 (m, 1H), 4,94 (dd, J=3,3, 6,3 Hz, 1H), 4,86 (d, J=5,8 Hz, 1H), 2,74 (s, 3H), 2,68 - 2,57 (m, 2H), 2,11 (d, J=3,0 Hz, 1H), 1,59 (s, 3H), 1,34 (s, 3H), 1,25 (d, J=3,8 Hz, 1H), 0,93 (d, 1H), 0,88- 0,78 (m, 1H), 0,77 - 0,67 (m, 1H), 0,60 - 0,51 (m, 1H)
Paso 2: Síntesis de (1S,2R,3S,5R)-3-(1-hidroxicidopropM)-5-(4-metN-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidm-7-il)ciclopentano-1,2-diol (C-2)
A una suspensión de C-1 (65 mg, 0,20 mmol) en H2O (3 ml) se añadió TFA (3 ml) a 0 °C. La mezcla se agitó a rt (13 °C) durante 1,5 horas. La mezcla se vertió en K2CO3 al 20 % (50 ml) y se extrajo con EtOAc (30 ml x 3). El extracto se lavó con salmuera (50 ml x 2), se secó sobre Na2SO4 y se concentró al vacío para obtener C-2 (50 mg, 88 %) como sólido. LCMS [M+1] 290; 1HRMN (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 8,60 (s, 1H), 7,66 (d, J=3,8 Hz, 1H), 6,70 (d, J=3,5 Hz, 1H), 5,32 (s, 1H), 5,03-4,93 (m, 1H), 4,77 (d, J=6 , 8 Hz, 1H), 4,61 (d, J=4,3 Hz, 1H), 4,19 (td, J=6,3, 8,9 Hz, 1H), 4,04 - 3,97 (m, 1H), 2,63 (s, 3H), 2,19 (td, J=8,5, 12,8 Hz, 1H), 1,93 - 1,82 (m, 1H), 1,63 (dt, J=3,0, 8 , 8 Hz, 1H), 0,67 - 0,60 (m, 1H), 0,57 - 0,48 (m, 2H), 0,46 - 0,39 (m, 1H)
Ejemplo 18 (Esquema D): (1S,2R,3S,5R)-3-(2-hidroxipropano-2-il)-5-(4-metil-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)ciclopentano-1,2-diol (D-2) (referencia)
Figure imgf000052_0002
Paso 1: Síntesis de 2-((3aR,4S,6R,6aS)-2,2-dimetil-6-(4-metil-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)tetrahidro-4H-ciclopenta[d][1,3]dioxol-4-il)propan-2-ol (D-1)
A una solución amarilla clara de A-6 (150 mg, 0,453 mmol) en THF seco (6,77 ml) se añadió MeMgBr (solución 3,0 M en éter dietílico, 0,905 ml, 2,72 mmol) a r.t (13 °C). Tras la adición, la mezcla se agitó a 13 °C durante 10 min. La mezcla se inactivó con H2O (50 ml) en un baño de hielo y se extrajo con EtOAc (30 ml x 2). El extracto se lavó con salmuera (30 ml), se secó sobre Na2SO4 y se concentró al vacío para obtener el compuesto crudo (160 mg) como aceite de color amarillo que se purificó por cromatografía instantánea eluyendo con EtOAc/DCM 0-100 % para dar D-1 (120 mg, 80 %) como sólido blanco. LCMS [M+1] 332; 1HRMN (400 MHz, CDCla) 8 ppm 8,76 (s, 1H), 7,26 (d, J=3,8 Hz, 1H), 6,57 (d, J=3,5 Hz, 1H), 5,03 (ddd, J=6,0, 8,3, 10,8 Hz, 1H), 4,96-4,88 (m, 1H), 4,84 (dd, J=5,3, 7,3 Hz, 1H), 2,73 (s, 3H), 2,47 - 2,37 (m, 2H), 2,31 - 2,21 (m, 1H), 1,97 (s, 1H), 1,59 (s, 3H), 1,40 (s, 3H), 1,32 (s, 3H), 1,27 (s, 3H)
Paso 2: Síntesis de (1S,2R,3S,5R)-3-(2-hidroxipropano-2-il)-5-(4-metil-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)ciclopentano-1,2-diol (D-2)
A una suspensión de D-1 (100 mg, 0,302 mmol) en H2O (5 ml) se añadió TFA (5 ml) a 0 °C. La mezcla se agitó a rt (13 °C) durante 1,5 horas. La mezcla se vertió en K2CO3 al 20 % (50 ml) y se extrajo con EtOAc (30 ml x 3). El extracto se lavó con salmuera (50 ml x 2), se secó sobre Na2SO4 y se concentró al vacío para obtener D-2 (70mg, 80 %) como un sólido de color amarillo. LCMS [M+1] 292; 1HRMN (400 MHz, DMSO-da) 8 ppm 8,60 (s, 1H), 7,65 (d, J=3,5 Hz, 1H), 6,69 (d, J=3,5 Hz, 1H), 4,92 (dt, J=7,3, 10,4 Hz, 1H), 4,73 (d, J=7,0 Hz, 1H), 4,53 (d, J=4,3 Hz, 1H), 4,32 (s, 1H), 4,08 (td, J=6,7, 9,7 Hz, 1H), 3,92 (t, J=6,3 Hz, 1H), 2,63 (s, 3H), 2,03 (td, J=7,8, 11,5 Hz, 1H), 1,88 (dt, J=2,3, 9,0 Hz, 1H), 1,84- 1,73 (m, 1H), 1,19 (s, 3H), 1,08 (s, 3H)
Ejemplo 19 (Esquema E): (1S,2R,3S,5R)-3-[(1S)-1-(4-fluorofenM)-1-hidroxietM]-5-(4-metil-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)ciclopentano-1,2-diol (E-3) (referencia)
Ejemplo 20 (Esquema E): (1S,2R,3S,5R)-3-[(1R)-1-(4-fluorofenil)-1-hidroxietil]-5-(4-metil-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)ciclopentano-1,2-diol (E-4) (referencia)
Figure imgf000053_0001
Paso 1: Síntesis de ((3aR,4S,6R,6aS)-2,2-dimetN-6-(4-metN-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidm-7-N)tetrahidro-4H-ciclopenta[d][1,3]dioxol-4-il)(4-fluorofenil)metanona (E-1)
Siguiendo un procedimiento similar al del Paso 8 del Esquema A utilizando bromuro de (4-fluorofenil) magnesio se obtuvo E-1 (240 mg, 95 %). LCMS [M+1] 395,80. 1HRMN (400 MHz, CLOROFORMO-d) 8 ppm 8,75 (s, 1 H) 8,12 (dd, J=8 ,8 6 , 5,44 Hz, 2 H) 7,34 (dd, J=8,56, 5,50 Hz, 1 H) 7,15 - 7,22 (m, 2 H) 6,61 (d, J=3,67 Hz, 1 H) 5,28 - 5,37 (m, 1 H) 4,98 - 5,08 (m, 2 H) 3,71 (s. br, 1 H) 2,70 - 2,76 (m, 4 H) 2,60 - 2,70 (m, 1 H) 1,68 (s, 3 H) 1,33 (s, 3 H)
Paso 2: Síntesis de 1-((3aR,4S,6R,6aS)-2,2-dimetN-6-(4-metN-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidm-7-N)tetrahidro-4H-ciclopenta[d][1,3]dioxol-4-il)-1-(4-fluorophenil)etan-1-ol (E-2)
A una solución de E-1 ( 66 mg, 0,17 mmol) en THF seco (6,0 ml, c=0,106 M) a 50 °C se añadió bromuro de metilmagnesio (99,5 mg, 0,835 mmol, 0,278 ml, 3,0 M), la solución resultante se agitó a 50 °C durante 0,5 h. La mezcla se añadió a std. NH4Cl (20 ml) lentamente, la mezcla se extrajo con EtOAc (25 mlx3). El extracto se lavó con salmuera (25 ml), se secó sobre Na2SO4 y se concentró al vacío para dar 70 mg de E-2 como aceite incoloro. LCMS [M+1] 411,80.
Paso 3: Síntesis de (1S,2R,3S,5R)-3-[(1S)-1-(4-fluorofenM)-1-hidroxietM]-5-(4-metN-7H-pirrol[2,3-d]pirimidm-7-il)ciclopentano-1,2-diol (E-3) y (1S,2R,3S,5R)-3-[(1R)-1-(4-fluorofenM)-1-hidroxietM]-5-(4-metil-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)ciclopentano-1,2-diol (E-4)
Siguiendo un procedimiento similar al del Paso 10 del Esquema A y la posterior separación por SFC quiral se obtuvo E-3 (19 mg, 31 %). LCMS [M+1] 371,90. 1HRMN (700 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 8,61 (s, 1 H) 7,61 (d, J=3,74 Hz, 1 H) 7,54 (dd, J=8,58, 5,72 Hz, 2 H) 7,13 (t, J=8,80 Hz, 2 H) 6,72 (d, J=3,52 Hz, 1 H) 5,26 (s, 1 H) 4,97 - 5,06 (m, 1 H) 4,70 (d, J=5,94 Hz, 1 H) 4,17 (d, J=3,30 Hz, 1 H) 4,04 - 4,12 (m, 1 H) 3,54 (s. br, 1 H) 2,64 (s, 3 H) 2,39 (t, J=8,91 Hz, 1 H) 2,19 (dt, J=12,54, 8,58 Hz, 1 H) 1,95 (td, J=11,83, 8,91 Hz, 1 H) 1,35 (s, 3 H)y E-4 (12 mg, 19%). LCMS [M+1] 371,90.
1HRMN (700 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 8,51 - 8,59 (m, 1 H) 7,52 - 7,59 (m, 1 H) 7,40 - 7,47 (m, 2 H) 7,02 - 7,10 (m, 2 H) 6,65 (dd, J=3,52, 1,54 Hz, 1 H) 5,24 (s, 1 H) 4,78 - 4,88 (m, 2 H) 4,67 - 4,74 (m, 1 H) 4,10 - 4,19 (m, 2 H) 2,57 - 2,65 (m, 3 H) 2,35 (t, J=9,35 Hz, 1 H) 1,54 (s, 3 H) 1,39 - 1,51 (m, 2 H)
Ejemplo 21 (Esquema F): (1S,2R,3S,5R)-3-[fluoro(4-fluorofenil)metil]-5-(4-metil-7H-pirrolo[2,3-d] pirimidin-7-il)ciclopentano-1,2-diol (F-3 Isómero A)
Ejemplo 22 (Esquema F): (1S,2R,3S,5R)-3-[fluoro(4-fluorofenil)metil]-5-(4-metil-7H-pirrolo[2,3-d] pirimidin-7-il)ciclopentano-1,2-diol (F-4 Isómero B) (referencia)
Esquema F
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qura F-3 somero F-4 Isómero B
Paso 1: Síntesis de ((3aR,4R,6R,6aS)-2,2-dimetN-6-(4-metN-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidm-7-N)tetrahidro-4H-ciclopenta[d][1,3]dioxol-4-il)(4-fluorofenil)metanol (F-1)
Siguiendo un procedimiento similar al del Paso 8 del Esquema A se obtuvo F-1 (110 mg, 99 %). LCMS [M+1] 398,15.
Paso 2: Síntesis de 7-((3aS,4R,6S,6aR)-6-(fluoro(4-fluorofenil)metil)-2,2-dimetiltetrahidro-4H-cidopenta[d][1,3]dioxol-4-M)-4-metM-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidina (F-2)
A una solución de F-1 (110 mg, 0,277 mmol) en 5 ml de DCM se añadió DAST (223 mg, 1,38 mmol), y se agitó a r.t. durante 30 min. La reacción se inactivó con NaHCO3 saturado , se separaron las fases y se extrajo la fase acuosa con 3 porciones de DCM. Las fases orgánicas se combinaron, se lavaron con salmuera y se concentraron para dar F-2 crudo, que se utilizó directamente para el siguiente paso. LCMS [M+1] 400,10.
Paso 3: Síntesis de (1S,2R,3S,5R)-3-[fluoro(4-fluorofenil)metil]-5-(4-metil-7H-pirrolo[2,3-d] pirimidin-7-il)ciclopentano-1,2-diol
Siguiendo un procedimiento similar al del Paso 10 del Esquema A y la posterior separación por SFC quiral se obtuvo F-3 Isómero A (7,7 mg, 7,8 % dos pasos)
LCMS [M+1] 360,10. 1HRMN (700 MHz, DMSO-da) ó ppm 1,40- 1,49 (m, 1 H) 1,91 (dt, J=12,87, 8,64 Hz, 1 H) 2,55 (dd, J=17,39, 8,58 Hz, 1 H) 2,62 (s, 3 H) 4,07 (s. br, 1 H) 4,36 - 4,48 (m, 1 H) 4,91 -5,02 (m, 3 H) 5,59 (dd, J=1,00 Hz, 1 H) 6,67 (d, J=3,30 Hz, 1 H) 7,22 (t, J=8,58 Hz, 2 H) 7,45 - 7,56 (m, 2 H) 7,65 (d, J=3,30 Hz, 1 H) 8,60 (s, 1 H) y F-4 Isómero B (1,3 mg, 1,3 % dos pasos) LCMS [M+1] 360,15. 1HRMN (400 MHz, DMSO-d6) ó ppm 1,84- 1,94 (m, 1 H) 2,09 - 2,16 (m, 1 H) 2,64 (s, 3 H) 3,83 (q, J=4,40 Hz, 1 H) 4,24 - 4,35 (m, 1 H) 4,80 (d, J=4,52 Hz, 1 H) 4,89 - 5,04 (m, 2 H) 5,72 - 5,83 (m, 1 H) 6,71 (d, J=3,55 Hz, 1 H) 7,20 - 7,30 (m, 2 H) 7,47 (dd, J=8,13, 5,81 Hz, 2 H) 7,66 (d, J=3,55 Hz, 1 H) 8,61 (s, 1 H)
Ejemplo 23 (Esquema G): (1R,2S,3R,5R)-3-(4-ammo-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidm-7-M)-5-((S)-(4-doro-3-fluorofenil)(hidroxi)metil)ciclopentano-1,2-diol (G-7) (referencia)
Ejemplo 24 (Esquema G): (1R,2S,3R,5R)-3-(4-amino-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)-5-((R)-(4-cloro-3-fluorofenil)(hidroxi)metil)ciclopentano-1,2-diol (G-9) (referencia)
Figure imgf000055_0001
Paso 1: Síntesis del ácido (3aR,4S,6R,6aS)-6-(4-cloro-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidm-7-M)-2,2-dimetMtetrahidro-4H-ciclopenta[d][1,3]dioxol-4-carboxílico (G-1)
Una mezcla de A-5 (200 mg, 0,48 mmol) y LiOH (40,6 mg, 0,966 mmol) en THF (2 ml)/H2O (2 ml) se agitó a rt (25 °C) durante 2 horas. La mezcla se diluyó con agua (5 ml) y se ajustó con HCl 1N a pH=2 y se extrajo con EtOAc (10 ml x 2). El extracto se secó sobre Na2SO4 y se concentró al vacío para obtener G-1 crudo (200 mg) como goma de color amarillo, que se utilizó directamente en el siguiente paso. LCMS [M+1] 338; 1HRMN (400MHz, DMSO-d6) 8 ppm 8,65 (s, 1H), 7,97 (d, J=3,8 Hz, 1H), 6,72 (d, J=3,5 Hz, 1H), 5,17 - 5,07 (m, 1H), 5,01 - 4,90 (m, 2H), 3,03 - 2,93 (m, 1H), 2,60 - 2,53 (m, 2H), 1,49 (s, 3H), 1,23 (s, 3H)
Paso 2: Síntesis de (3aR,4S,6R,6aS)-6-(4-cloro-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidm-7-M)-N-metoxi-N,2,2-trimetiltetrahidro-4H-ciclopenta[d][1,3]dioxol-4-carboxamida (G-2)
A una suspensión de G-1 crudo (200 mg, 461 mmol) y N,O-dimetilhidroxilamina-HCl (70 mg, 0,72 mmol) en THF (4 ml) se añadió DIPEA (186 mg, 1,44 mmol) y T3P al 50 % (458 mg, 0,42 ml, 1,5 mmol) a rt (15 °C). La solución roja resultante se agitó a rt (15 °C) durante 20 horas. Se formaron algunos sólidos en la mezcla de reacción. La mezcla se vertió en NaHCO3 ac. (15 ml) y se extrajo con EtOAc (10 ml x 3). El extracto se lavó con salmuera (10 ml x 2), se secó sobre Na2SO4 y se concentró al vacío para obtener G-2 (150 mg, 82 % en dos pasos) como una goma de color amarillo. LCMS [M+1] 381; 1HRMN (400 MHz, CDCla) 8 ppm 8,66 (s, 1H), 7,42 (d, J=3,5 Hz, 1H), 6,67 (d, J=3,8 Hz, 1H), 5,27 (dd, J=5,1, 7,2 Hz, 1H), 5,06 (dd, J=5,0, 7,0 Hz, 1H), 4,92 (dd, J=5,5, 7,0 Hz, 1H), 3,78 (s, 3H), 3,64 - 3,51 (m, 1H), 3,25 (s, 3H), 2,70 - 2,42 (m, 2H), 1,61 (s, 3H), 1,32 (s, 3H)
Paso 3: Síntesis de (4-cloro-3-fluorofenil)((3aR,4S,6R,6aS)-6-(4-cloro-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)-2,2-dimetiltetrahidro-4H-ciclopenta[d][1,3]dioxol-4-il)metanona (G-3)
A una solución de G-2 (150 mg, 0,394 mmol) en THF seco (3 ml) se añadió bromuro de (4-cloro-3-fluorofenil)magnesio (3,1 ml, 1,54 mmol) a 0 °C. La mezcla se agitó a 0 °C durante 3 h. La mezcla se inactivó con NH4Cl ac. (20 ml) y se diluyó con EtOAc (10 ml x 2). La capa orgánica se lavó con salmuera (10 ml), se secó sobre Na2SO4 y se concentró al vacío para obtener el G-3 crudo (250 mg, >99 %) como un aceite de color amarillo que se utilizó directamente en el siguiente paso. LCMS [M+1] 450
Paso 4: Síntesis de (S)-(4-cloro-3-fluorofeml)(3aR,4R,6R,6aS)-6-(4-cloro-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidm-7-il)-2,2-dimetiltetrahidro-4H-ciclopenta[d][1,3]dioxol-4-il)metanol (G-4) y (R)-(4-cloro-3-fluorofenil)(3aR,4R,6R,6aS)-6-(4-cloro-7H-pirromidin-7-il)-2,2-dimetiltetrahidro-4H-ciclopenta[d][1,3]dioxol-4-il)metanol (G-5)
A una solución de G-3 crudo (150 mg, 0,4 mmol) en MeOH (5 ml) se añadió NaBH4 (45 mg, 1,18 mmol) a 0 °C. La mezcla se agitó a 0 ° C durante 1 hora. La mezcla se inactivó con NH4Cl ac. (10 ml) y se diluyó con EtOAc (10 ml x 3). La capa orgánica se lavó con salmuera (10 ml), se secó sobre Na2SO4 y se concentró al vacío, luego se purificó por cromatografía en gel de sílice eluyendo con EtOAc en éter de petróleo de 0 a 60 % para obtener G-4 (30 mg, 17 %) y G-5 (50 mg, 28 %) como un sólido de color amarillo claro.
G-4: LCMS [M+1] 452
G-5: LCMS [M+1] 452
Paso 5: Síntesis de (S)-((3aR,4R,6R,6aS)-6-(4-amino-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)-2,2-dimetiltetrahidro-4H-ciclopenta[d][1,3]dioxol-4-il)(4-cloro-3-fluorofenil)metanol (G-6)
Una mezcla de G-4 (30 mg, 0,0663 mmol) en dioxano/NH3.H2O (1 ml/1 ml) se calentó a 120 °C bajo microondas durante 2 h. La LCMS mostró que la mayor parte del SM se consumió y se formó un buen punto. La mezcla se concentró al vacío para obtener G-6 crudo (50 mg, > 1 0 0 %) como sólido de color amarillo, que se utilizó directamente en el siguiente paso. LCMS [M+1] 433
Paso 6: Síntesis de (1R,2S,3R,5R)-3-(4-ammo-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidm-7-il)-5-((S)-(4-cloro-3-fluorofenil)(hidroxi)metil)ciclopentano-1,2-diol (G-7)
Una mezcla de G-6 (30 mg, 0,0663mmol) en TFA/H2O (1 ml/ 1 ml) se agitó a rt (25 °C) durante 1 hora. La LCMS mostró que la mayor parte del SM se consumió y el pico principal fue el compuesto deseado. La mezcla se vertió en K2CO3 ac. al 2 0 % ( 10 ml) y se extrajo con EtOAc ( 10 ml x 2 ). El extracto se lavó con salmuera ( 1 0 ml x 2 ), se secó sobre Na2SO4 y se concentró al vacío para obtener el material crudo que se purificó por HPLC prep. para obtener G-7 (10 mg, 37 %) como un sólido blanco. LCMS [M+1] 393; 1HRMN (400 MHz, DMSO-da) 8 ppm 8,01 (s, 1H), 7,52 (t, J=8,0 Hz, 1H), 7,35 (dd, J=1,6, 10,4 Hz, 1H), 7,27 - 7,18 (m, 2H), 6,92 (s, 2H), 6,55 (d, J=3,5 Hz, 1H), 5,74 (d, J=5,3 Hz, 1H), 4,85 (d, J=6,5 Hz, 1H), 4,84-4,73 (m, 2H), 4,62 (d, J=4,8 Hz, 1H), 4,24-4,10 (m, 1H), 3,91 (q, J=4,9 Hz, 1H), 2,21 (td, J=4,3, 8,5 Hz, 1H), 1,90 - 1,64 (m, 2H)
El compuesto G-9 se preparó a partir de G-5 (10 mg, 37 %) como un sólido blanco con un procedimiento similar al de la preparación de G-7 a partir de G-4.
G-9: LCMS [M+1] 393; 1HRMN (40 0MHz, DMSO-d6) 8 ppm 8,02 (s, 1H), 7,54 (t, J=8,0 Hz, 1H), 7,40 (dd, J=1,6, 10,7 Hz, 1H), 7,30 - 7,24 (m, 1H), 7,21 (d, J=3,5 Hz, 1H), 6,92 (s, 2H), 6,54 (d, J=3,5 Hz, 1H), 5,76 (d, J=4,5 Hz, 1H), 4,87 - 4,76 (m, 2H), 4,61 (t, J=5,5 Hz, 1H), 4,51 (d, J=3,8 Hz, 1H), 4,28 - 4,19 (m, 1H), 3,93 - 3,88 (m, 1H), 2,23 (d, J=8,5 Hz, 1H), 2,06- 1,94 (m, 1H), 1,66- 1,52 (m, 1H)
Ejemplo 25 (Esquema H): (1R,2S,3R,5R)-3-(4-ammo-5-fluoro-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidm-7-il)-5-[(S)-(4-fluorofenil)(hidroxi)metil]ciclopentano-1,2-diol (H-5) (referencia)
Ejemplo 26 (Esquema H): (1R,2S,3R,5R)-3-(4-amino-5-fluoro-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)-5-[(R)-(4-fluorofenil)(hidroxi)metil]ciclopentano-1,2-diol (H-6) (referencia)
Figure imgf000057_0001
Paso 1: Síntesis de (3aR,4S,6R,6aS)-6-(4-doro-5-fluoro-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidm-7-M)-N-metoxi-N,2,2-trimetiltetrahidro-4H-ciclopenta[d][1,3]dioxol-4-carboxamida (H-1)
A una solución de G-2 (Esquema G) (400 mg, 1,05 mmol) en 20 ml de CH3CN anhidro se añadió selectfluor (558 mg, 1.58 mmol) y AcOH (10 ml). La mezcla se calentó a 70 °C durante 6 horas en una atmósfera de N2. La mezcla de reacción se concentró, se añadieron H2O y EtOAc, y la capa acuosa se extrajo 3 veces con EtOAc. La capa orgánica se lavó con salmuera, se secó sobre Na2SO4 y se concentró para dar un aceite marrón.
Al aceite marrón anterior se le añadió 2,2-dimetoxipropano (109 mg, 1,05 mmol, 3,50 ml, 0,3 M) y ácido toluenosulfónico monohidratado (599 mg, 3,15 mmol), la suspensión de color marrón amarilla se agitó vigorosamente a r.t. durante 15 min. La mezcla de reacción se diluyó con 50 ml de H2O, se neutralizó con NaHCO3 sólido, los volátiles se eliminaron cuidadosamente al vacío y la solución acuosa marrón resultante se extrajo con EtOAc 3 x 20 ml, la capa orgánica se combinó y concentró, se purificó por cromatografía en columna con EtOAc/heptano al 60 % para dar 100 mg de H-1 (24 % de rendimiento) como una goma incolora.
LCMS [M+1] 398,80. 1HRMN (400 MHz, CLOROFORMO-d) 8 ppm 8,63 (s, 1 H) 7,22 (d, J=2,57 Hz, 1 H) 5,25 - 5,36 (m, 1 H) 5,01 (dd, J=7,03, 4,95 Hz, 1 H) 4,83 (dd, J=6,97, 5,50 Hz, 1 H) 3,77 (s, 3 H) 3,58 (d, J=7,34 Hz, 1 H) 3,25 (s, 3 H) 2,58-2,68 (m, 1 H) 2,38-2,52 (m, 1 H) 1,61 (s, 3 H) 1,31 (s, 3 H)
Paso 2: Síntesis de ((3aR,4S,6R,6aS)-6-(4-doro-5-fluoro-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidm-7-M)-2,2-dimetNtetrahidro-4H-ciclopenta[d][1,3]dioxol-4-il)(4-fluorofenil)metanona (H-2)
Siguiendo un procedimiento similar al del paso 8 del Esquema A, utilizando bromuro de 4-fluorofenilmagnesio y H-1 para dar H-2 (100 mg, 92 %).
LCMS [M+1] 433,70. 1HRMN (400 MHz, CLOROFORMO-d) 8 ppm 8,62 (s, 1 H) 8,07 - 8,16 (m, 2 H) 7,14 - 7,23 (m, 3 H) 5,25 - 5,37 (m, 1 H) 4,98 (dd, J=6,91, 4,58 Hz, 1 H) 4,86 - 4,93 (m, 1 H) 4,03 (ddd, J=10,30, 7,79, 4,52 Hz, 1 H) 2.58 - 2,76 (m, 2 H) 1,67 (s, 3 H) 1,32 (s, 3 H)
Paso 3: Síntesis de ((3aR,4R,6R,6aS)-6-(4-doro-5-fluoro-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidm-7-M)-2,2-dimetNtetrahidro-4H-ciclopenta[d][1,3]dioxol-4-il)(4-fluorofenil)metanol (H-3)
Siguiendo un procedimiento similar al del paso 4 del Esquema G, H-2 se redujo a H-3 (88 mg, 88 %).
LCMS [M+1] 435,70.
Paso 4: Síntesis de ((3aR,4R,6R,6aS)-6-(4-ammo-5-fluoro-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidm-7-M)-2,2-dimetNtetrahidro-4H-ciclopenta[d][1,3]dioxol-4-il)(4-fluorofenil)metanol (H-4)
Siguiendo un procedimiento similar al del paso 5 del Esquema G, H-3 se transformó en H-4 como crudo para el siguiente paso.
LCMS [M+1] 417,80.
Paso 5: Síntesis de (1R,2S,3R,5R)-3-(4-ammo-5-fluoro-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidm-7-M)-5-[(S)-(4-fluorofenil)(hidroxi)metil]cidopentano-1,2-diol (h -5) y (1R,2S,3R,5R)-3-(4-amino-5-fluoro-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidm-7-M)-5-[(R)-(4-fluorofeml)(hidroxi)metM]ddopentano-1,2-diol (H-6)
Siguiendo un procedimiento similar al del paso 6 del Esquema G y la posterior purificación por SFC quiral, se desprotegió H-4 y se separaron los isómeros en H-5 y H-6 (26,5 mg, 35 %).
H-5: LCMS [M+1] 376,90. 1HRMN (700 MHz, DMSO-da) 8 ppm 8,01 (s, 1 H) 7,40 (dd, J=8,36, 5,72 Hz, 1 H) 7,19 (s, 1 H) 7,13 (t, J=8,80 Hz, 1 H) 6,85 (s. br, 1 H) 5,52 (d, J=4,62 Hz, 1 H) 4,87 (q, J=9,68 Hz, 1 H) 4,77 (d, J=6,82 Hz, 1 H) 4,53 (dd, J=7,04, 4,62 Hz, 1 H) 4,51 (d, J=3,52 Hz, 1 H) 4,16 (dt, J=9,63, 5,97 Hz, 1 H) 3,93 (s. br, 1 H) 2,16 - 2,22 (m, 1 H) 1,86 (dt, J=13,04, 8,78 Hz, 1 H) 1,42 (ddd, J=12,98, 10,56, 8,14 Hz, 1 H)
H-6: LCMS [M+1] 376,90. 1HRMN (700 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 8,01 (s, 1 H) 7,37 (dd, J=8,47, 5,61 Hz, 1 H) 7,23 (d, J=1,76 Hz, 1 H) 7,12 (t, J=8,80 Hz, 1 H) 6,87 (s. br, 1 H) 5,51 (d, J=4,84 Hz, 1 H) 4,82 - 4,88 (m, 1 H) 4,79 - 4,82 (m, 1 H) 4,76 (t, J=4,84 Hz, 1 H) 4,58 (d, J=4,62 Hz, 1 H) 4,10 (dt, J=836, 6,05 Hz, 1 H) 3,80 - 3,86 (m, 1 H) 2,17 (tt, J=8,64, 4,46 Hz, 1 H) 1,79 (dt, J=13,09, 8,53 Hz, 1 H) 1,68 (dt, J=12,93, 9,60 Hz, 1 H)
Ejemplo 27 (Esquema I) - (1S,2R,3R,5R)-3-[(S)-(3,4-difluorofeml)(hidroxi)metM]-5-(7H-pirrolo[2,3-d]pirimidm-4-ilamino)ciclopentano-1,2-diol (I-12) (referencia)
Ejemplo 28 (Esquema I) -(1S,2R,3R,5R)-3-[(R)-(3,4-difluorofenil)(hidroxi) metil]-5-(7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-ilamino)ciclopentano-1,2-diol (I-13) (referencia)
Esquema l
Paso 1: Síntesis de (3aS,4R,7S,7aR)-2,2-dimetil-6-oxotetrahidro-4,7-metano[1,3] dioxolo[4,5-c]piridin-5(4H)-carboxilato de tert-butilo (I-2)
A una solución de (3aS,4R,7S,7aR)-2,2-dimetiltetrahidro-4,7-metano[1,3]dioxolo[4,5-c]piridin-6(3aH)-ona I-1 ("Chemical Reviews, 2012, 112 (8), pp 4642-4686) (5000 mg, 27,29 mmol) y anhídrido de Boc (7,15 g, 32,7 mmol) en THF (54,6 ml, c=0,5 M) se añadió trietilamina (3,31 g, 32,7 mmol, 4,56 ml) y DMAP (333 mg, 2,73 mmol). La reacción se agitó a r.t. durante 3 horas. La mezcla se concentró hasta obtener un sólido de color bronce que se purificó por cromatografía en columna con EtOAc/Heptano al 30 % para dar 7,9 g de I-2 (rendimiento del 100 %) como sólido blanco.
LCMS [M+1-tBu] 228.1HRMN (400MHz, CLOROFORMO-d) 8 ppm 4,60 (d, J=5,4 Hz, 1H), 4,49 (d, J=5,4 Hz, 1H), 4,44 (s, 1H), 2,90 (s, 1H), 2 ,16-2,07 (m, 1H), 2,05- 1,96 (m, 1H), 1,53 (s, 9H), 1,50 (s, 3H), 1,37 (s, 3H).
Paso 2: Síntesis de ((3aS,4R,6S,6aR)-6-(3,4-difluorobenzoil)-2,2-dimetiltetrahidro-4H-ciclopenta[d][1,3]dioxol-4-il) (I-3)carbamato de tert-butilo
A una solución de I-2 (1,42 g, 5,00 mmol) en THF (10,0 ml, c=0,5 M) enfriada en un baño de agua helada se añadió bromuro de 4-fluorofenilmagnesio (997 mg, 5 mmol, 5,00 ml, 1 M). La mezcla de reacción se agitó en baño de hielo durante 10 min, se inactivó añadiendo 50 ml de MeOH y 50 ml de NH4Cl saturado mientras se enfría en un baño de hielo. La capa acuosa se extrajo con EtOAc, la capa orgánica se concentró y se purificó por cromatografía en columna con EtOAc/heptano al 30 % para dar 4,15 g de I-3 (93 % de rendimiento) como sólido blanco.
LCMS [M+1-Boc] 298. 1HRMN (400 MHz, CLOROFORMO-d) 8 ppm 7,84 - 7,95 (m, 2 H) 7,29 - 7,35 (m, 1 H) 5,43 (s. br., 1 H) 4,77 (d, J=5,50 Hz, 1 H) 4,51 (d, J=5,62 Hz, 1 H) 4,18 (s. br, 1 H) 3,87 (d, J=8,68 Hz, 1 H) 2,53 (d, J=6,85 Hz, 1 H) 2,04 (d, J=13,94 Hz, 1 H) 1,55 (s, 3 H) 1,45 (s, 9 H) 1,31 (s, 3 H)
Paso 3: Síntesis del ((3aS,4R,6R,6aR)-6-((3,4-difluorofeml)(hidroxi)metil)-2,2-dimetiltetrahidro-4H-ciclopenta[d][1,3]dioxol-4-il)carbamato de tert-butilo (I-4)
A una solución de I-3 (4531 mg, 11,40 mmol) en EtOH (57,0 ml, c=0,2 M) se añadió NaBH4 (2160 mg, 57,0 mmol), y se agitó a r.t. durante 30 min. La reacción se inactivó añadiendo NH4Cl saturado, se extrajo con EtOAc, las capas orgánicas se concentraron, se purificaron por cromatografía en columna eluyendo con EtOAc/heptano al 50 % para dar 4120 mg de I-4 (90 % de rendimiento) como sólido blanco. LCMS [M+1-Boc] 300.
Paso 4: Síntesis del ((3aS,4R,6S,6aR)-6-(((tert-butildimetilsilil)oxi)(3,4-difluorofeml)metil)-2,2-dimetiltetrahidro-4H-ciclopenta[d][1,3]dioxol-4-il)carbamato de tert-butilo (I-5)
A una solución de I-4 (4300 mg, 10,77 mmol) e imidazol (2200 mg, 32,3 mmol) en DMF (53,8 ml, c=0,2 M) se añadió cloruro de t-butildimetilsililo (4870 mg, 32,3 mmol). La mezcla se agitó a r.t. durante la noche. Se añadió TBSCI (1620 mg, 10,8 mmol) y se agitó a r.t. durante la noche. La mezcla de reacción se inactivó con H2O y se extrajo con EtOAc (x3). La capa orgánica se secó sobre Na2SO4 , se concentró y se purificó por cromatografía en columna con 15-20 % de EtOAc/heptano para dar 5,27 g de I-5 (87 % de rendimiento) como un aceite incoloro que se solidificó al vacío. LCMS [M+1-Boc] 414.
Paso 5: Síntesis de la mezcla de (3aS,4R,6S,6aR)-6-(((tert-butildimetilsilil)oxi)(3,4-difluorofenil)metil)-2,2-dimetiltetrahidro-4H-ciclopenta[d][1,3]dioxol-4-amina (I-6) y (1R,2S,3R,5S)-3-amino-5-(((tertbutildimetilsilil)oxi)(3,4-difluorofenil)metil)ciclopentano-1,2-diol (I-7)
I-5 (1250 mg, 2,433 mmol) en TFA (5,0 ml, c=0,5 M) se agitó a r.t. durante 10-15 min. La mezcla de reacción se añadió EtOAc y se neutralizó con NaHCO3 saturado hasta un pH de aproximadamente 7, la capa acuosa se extrajo con EtOAc, la capa orgánica se combinó y se secó sobre Na2SO4, se concentró para dar 1 g (99 % de rendimiento) como un aceite de color amarillo claro como una mezcla de los dos compuestos I-6 y I-7.
Paso 6: Síntesis de la mezcla de N-((3aS,4R,6S,6aR)-6-(((tert-butildimetilsilil)oxi)(3,4-difluorofeml)metil)-2,2-dimetiltetrahidro-4H-ciclopenta[d][1,3]dioxol-4-il)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidm-4-amma (I-8) y (1R,2S,3R,5S)-3-((7H-pirrolo[2,3-d]pirimidm-4-il)ammo)-5-(((tert-butildimetilsilil)oxi)(3,4-difluorofeml)metil)ciclopentano-1,2-diol (I-9)
A los compuestos anteriores I-6 e I-7 (154 mg, 0,372 mmol) en 4 ml de solución de nBuOH se añadió 4-cloro-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidina (85,8 mg, 0,559 mmol) y DIPEA (96,3 mg, 0,745 mmol, 0,123 ml), y se calentó a 100 °C durante 2 días. La mezcla de reacción se enfrió a r.t., se añadió EtOAc. La capa orgánica se lavó con H2O tres veces y luego con salmuera, se secó sobre Na2SO4 , se concentró, se purificó por cromatografía en columna eluyendo de EtOAc/heptano al 80 % a EtOAc/MeOH al 10 % para dar 35,3 mg (19 % de rendimiento) de una mezcla de dos compuestos I-8 e I-9 como un aceite marrón.
Paso 7: Síntesis de la mezcla de ((3aR,4R,6R,6aS)-6-((7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il)ammo)-2,2-dimetiltetrahidro-4H-ciclopenta[d][1,3]dioxol-4-il)(3,4-difluorofenil)metanol (I-10) y (1R,2S,3R,5R)-3-((7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il)amino)-5-((3,4-difluorofenil)(hidroxi)metil) ciclopentano-1,2-diol (I-11)
A una mezcla de los compuestos anteriores I-8 e I-9 (49 mg, 0,10 mmol) en 1 ml de THF se añadió gota a gota TBAF (39,2 mg, 0,150 mmol, 0,15 ml, 1,0 M), se agitó a r.t. durante 0,5 h, se concentró y se utilizó el producto crudo para el siguiente paso.
Paso 8: Síntesis del (1S,2R,3R,5R)-3-[(SH3,4-difluorofenil)(hidroxi)metil]-5-(7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-ilamino)ciclopentano-1,2-diol (I-12) y (1s,2R,3R,5R)-3-[(R)-(3,4-difluorofenil) (hidroxi)metil]-5-(7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-ilamino)cidopentano-1,2-diol (I-13)
Se disolvió una mezcla de los compuestos anteriores I-10 y I-11 (42 mg, 0,10 mmol) en TFA/H2O (1 ml/1 ml) y se agitó a rt durante 2h. Una vez completada, la mezcla se concentró para dar aceite crudo, que se disolvió en H2O y se lavó con EtOAc (1 ml x 2). La capa de agua se liofilizó y la mezcla se separó mediante cromatografía de fluido de C02 supercrítico para dar (1S,2R,3R,5R)-3-[(S)-(3,4-difluorofenil)(hidroxi)metil]-5-(7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-ilamino)ciclopentano-1,2-diol I-12 (5,88 mg, 15 %) y (1S,2R,3R,5R)-3-[(R)-(3,4-difluorofenil)(hidroxi)metil]-5-(7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-ilamino)ciclopentano-1,2-diol I-13 (5,72 mg, 15 %).
I-12: LCMS [M+1] 376,90. 1HRMN (700 MHz, DMS0-d6) 5 ppm 1,06 - 1,12 (m, 1 H) 1,88 - 1,96 (m, 1 H) 2,15 - 2,21 (m, 1 H) 2,88 (q, J=6,83 Hz, 1 H) 3,77 (t, J=6,15 Hz, 1 H) 3,88 (s. br, 1 H) 4,24 - 4,32 (m, 1 H) 4,47 (d, J=5,98 Hz, 1 6,53 (s. br., 1 H) 7,06 (s. br., 1 H) 7,15 (s. br., 1 H) 7,25 - 7,36 (m, 3 H) 7,99 (s. br., 1 H)
I-13: LCMS [M+1] 376,90. 1HRMN (700 MHz, DMS0-d6) 5 ppm 1,32 - 1,40 (m, 1 H) 1,81 (dt, J=12,55, 8,07 Hz, 1 H) 2,10 - 2,20 (m, 1 H) 2,88 (q, J=6,83 Hz, 1 H) 3,75 - 3,81 (m, 1 H) 3,83 (s. br, 1 H) 4,18 - 4,31 (m, 1 H) 4,73 (s. br., 1 H) 6,55 (s. br., 1 H) 7,07 (s. br., 1 H) 7,14 (s. br., 1 H) 7,24 - 7,41 (m, 3 H) 8,00 (s. br., 1 H)
Los Ejemplos 29 y 30 se prepararon utilizando una química similar a la del Esquema I, empleando 4-cloroquinazolina-8-carbonitrilo en el paso 6 en lugar de 4-cloro-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidina.
Figure imgf000060_0001
Ejemplo 31 (Esquema J) - (1S,2R,3R,5R)-3-[(S)-(3,4-difluorofenil)(hidroxi)metil]-5-[metil(pirimidin-4-il) amino]ciclopentano-1,2-diol (J-5) (referencia)
Ejemplo 32 (Esquema J) - (1S,2R,3R,5R)-3-[(R)-(3;4-difluorofenil)(hidroxi)metil]-5-[metil(pirimidin-4-il)amino]ciclopentano-1,2-diol (J-5) (referencia)
Figure imgf000061_0001
Paso 1: Síntesis del ((3aS,4R,6S,6aR)-6-(((tert-butMdimetMsiMl)oxi)(3,4-difluorofenN)metM)-2,2-dimetMtetrahidro-4H-ciclopenta[d][1,3]dioxol-4-il)(metil)carbamato de tert-butilo (J-1)
Se añadió hidruro de sodio (304 mg, 7,59 mmol) en porciones a una solución de I-5 (1300 mg, 2,531 mmol) en DMF (15 ml, 0,1 M) bajo una atmósfera de nitrógeno, después de 5 min, se añadió yodometano (1080 mg, 7,59 mmol), y se agitó a r.t. durante 30 min. A la mezcla de reacción se le añadió H2O, se extrajo con EtOAc, se concentró y se purificó por cromatografía en columna con 20 % de EtOAc/heptano para dar 1290 mg de J-1 (96 % de rendimiento) como un aceite incoloro, LCMS [M+1-Boc] 428,1.
Paso 2: Síntesis de (3aS,4R,6S,6aR)-6-(((tert-butMdimetMsiMl)oxi)(3,4-difluorofenN)metM)-N,2,2-trimetiltetrahidro-4H-ciclopenta[d][1,3]dioxol-4-amina (J-2)
J-1 (967 mg, 1,83 mmol) en TFA (5,0 ml, c=0,1 M) se agitó a r.t. durante 10-15 min. A la mezcla de reacción se le añadió EtOAc y . NaHCO3 saturado para neutralizar hasta un pH de aproximadamente 7, se extrajo con EtOAc, la capa orgánica se secó sobre Na2SO4, se concentró para dar un aceite incoloro.
El aceite anterior se disolvió en acetona dimetil acetal (10 ml, c=0,1 M), se añadió ácido tolueno-4-sulfónico (349 mg, 1,83 mmol), se agitó a r.t. durante 15 min. A la mezcla de reacción se le añadió NaHCO3 std, se extrajo con EtOAc, la capa orgánica se lavó con salmuera, se secó sobre Na2SO4, se concentró para dar 0,78 g de J-2 (99 % de rendimiento) como un aceite de color amarillo claro. LCMS [M+1] 428,15.
Paso 3: Síntesis de N-((3aS,4R,6S,6aR)-6-(((tert-butildimetilsilil)oxi)(3,4-difluorofenil) metil)-2,2-dimetiltetrahidro-4H-ciclopenta[d][1,3]dioxol-4-il)-N-metilpirimidin-4-amina (J-3)
La mezcla de J-2 (200 mg, 0,468 mmol), 4-cloropirimidina (64,3 mg, 0,561 mmol) y DIPEA (121 mg, 0,935 mmol , 0,155 ml) en n-butanol (2,0 ml, c=0,2 M) se calentó a 120 °C durante la noche. La mezcla de reacción se enfrió a r.t. y se eliminó el disolvente. Al residuo se le añadió EtOAc, se lavó con H2O 3 veces y luego con salmuera, se secó sobre Na2SO4 y se concentró, purificándose por cromatografía en columna con EtOAc/heptano al 70 % para dar 64 mg de J-3 (27 % de rendimiento) como un aceite marrón. LCMS [M+1] 506,20.
Paso 4: Síntesis del (3,4-difluorofenil)(3aR,4R,6R,6aS)-2,2-dimetil-6-(metil(pirimidin-4-il) amino)tetrahidro-4H-ciclopenta[d][1,3]dioxol-4-il)metanol (J-4)
Siguiendo un procedimiento similar al del paso 7 del Esquema I, se desprotegió J-3 para dar J-4 como crudo para el siguiente paso. LCMS [M+1] 392,15.
Paso 5: Síntesis de (1S,2R,3R,5R)-3-[(S)-(3,4-difluorofenM)(hidroxi)metM]-5-[metM(pirimidm-4-il)amino]ciclopentano-1,2-diol (J-5) y (1S,2R,3R,5R)-3-[(R)-(3;4-difluorofenil) (hidroxi)metil]-5-[metil(pirimidin-4-il)amino]ciclopentano-1,2-diol (J-6)
Siguiendo un procedimiento similar al del paso 8 del Esquema I, se desprotegió J-4 (50 mg, 0,13 mmol) para dar J-5 (19,73 mg, 44 %) y J-6 (3,14 mg, 7%).
J-5: LCMS [M+1] 351,90. 1HRMN (700 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 1,18-1,31 (m, 1 H) 1,63 (d, J=9,68 Hz, 1 H) 2,08-2,19 (m, 1 H) 2,90 (s. br., 3 H) 3,73 - 3,82 (m, 1 H) 3,90 (dd, J=9,35, 5,17 Hz, 1 H) 4,38 (s. br, 1 H) 4,49 (d, J=5,94 Hz, 1 H) 4,63 (s. br., 1 H) 5,60 (s. br., 1 H) 6,57 - 6,69 (m, 1 H) 7,21 (s. br., 1 H) 7,31 - 7,42 (m, 2 H) 8,02 - 8,14 (m, 1 H) 8,41 (s. br., 1 H)
J-6: LCMS [M+1] 351,90. 1HRMN(700 MHz, DMSO-d6) 5 ppm 1,42 (s. br., 2 H)2,10(s. br., 1 H) 2,90 (s. br., 3 H) 3,76 (s. br., 1 H) 3,86 - 3,97 (m, 1 H) 4,54 (s. br, 1 H) 4,65 (br. s., 1 H) 4,70 - 4,78 (m, 1 H) 5,58 (br. s., 1 H) 6,63 (br. s., 1 H) 7,17 (br. s., 1 H) 7,28 - 7,40 (m, 2 H) 8,09 (br. s., 1 H) 8,41 (br. s., 1 H)
Los Ejemplos 33-36 (referencias) se prepararon siguiendo una química similar en el Esquema J utilizando la cloropirimidina indicada en el paso 3.
Figure imgf000062_0001
Ejemplo 37 (Esquema K) - (1R,2S,3R,5R)-3-[(4-amino-1,3,5-triazin-2-il)(metil)amino]-5-[(S)-(3,4-difluorofenil) (hidroxi)metil]ciclopentano-1,2-diol (K-4) (referencia)
Ejemplo 38 (Esquema K) - (1R,2S,3R,5R)-3-[(4-amino-1,3,5-triazin-2-il)(metil) amino]-5-[(R)-(3,4-difluorofenM)(hidroxi)metil]ciclopentano-1,2-diol (K-5) (referencia)
Figure imgf000063_0001
Paso 1: Síntesis de N-((3aS,4R,6S,6aR)-6-(((tert-butildimetilsilil)oxi)(3,4-difluorofenil) metil)-2,2-dimetiltetrahidro-4H-ciclopenta[d][1,3]dioxol-4-M)-4-cloro-N-metiM,3,5-triazin-2-amina (K-1)
Siguiendo un procedimiento similar al del paso 3 del Esquema J utilizando 2,4-dicloro-[1,3,5]triazina con J-2 se generó
K-1 (267 mg, 58 %).
Paso 2: Síntesis de N2-((3aS,4R,6S,6aR)-6-(((tert-butildimetilsilil)oxi)(3,4-difluorofenil) metil)-2,2-dimetiltetrahidro-4H-ciclopenta[d][1,3]dioxol-4-il)-N2-metil-1,3,5-triazina-2,4-diamina (K-2)
Siguiendo un procedimiento similar al del paso 5 del Esquema G, K-1 se convirtió en K-2 (86 mg, 81 %). LCMS [M+1] 522.
Paso 3: Síntesis de ((3aR,4R,6R,6aS)-6-((4-amino-1,3,5-triazin-2-il)(metil)amino)-2,2-dimetil tetrahidro-4H-ciclopenta[d][1,3]dioxol-4-il)(3,4-difluorofenil)metanol (K-3)
Siguiendo un procedimiento similar al del paso 4 del Esquema J, K-2 se desprotegió con TBAF para dar K-3 como crudo para el siguiente paso.
Paso 4: Síntesis de (1R,2S,3R,5R)-3-[(4-amino-1,3,5-triazin-2-il)(metM)amino]-5-[(S)-(3,4-difluorofenil)(hidroxi)metil]ciclopentano-1,2-diol (K-4) y (1R,2S,3R,5R)-3-[(4-amino-1,3,5-triazin-2-il)(metil)amino]-5-[(3R)-(3,4-difluorofenil)(hidroxi)metil]ciclopentano-1,2-diol (K-5)
Siguiendo un procedimiento similar al del paso 5 del Esquema J con la posterior separación con SFC quiral, K-3 se convirtió en K-4 (12 mg, 20 %) y K-5 (48 mg, 80 %).
K-4: LCMS [M+1] 367,90. 1HRMN (400 MHz, DMSO-da) 8 ppm 1,12 -1,23 (m, 1 H) 1,52 - 1,64 (m, 1 H) 2,08 (s. br., 1 H) 2,96 (d, J=9,78 Hz, 3 H) 3,78 (s. br., 1 H) 3,87 (s. br, 1 H) 4,48 (d, J=5,38 Hz, 1 H) 4,94 (s. br., 1 H) 5,55 (s. br., 1 H) 6,95 (s, 1 H) 7,08 (s. br., 2 H) 7,21 (s. br., 1 H) 7,30 - 7,45 (m, 2 H) 8,07 (s. br., 1 H)
K-5: LCMS [M+1] 367,90. 1HRMN (700 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 1,31 -1,45 (m, 2 H)2,05(s. br., 1 H) 2,93 (m, 3 H) 3,72 (s. br., 1 H) 3,90 (s. br, 1 H) 4,65 - 4,72 (m, 1 H) 4,86 (d, J=15,03 Hz, 1 H) 7,14 (s. br., 1 H) 7,25 - 7,35 (m, 2 H) 7,98 (s. br., 1 H) 8,30 (s. br., 2 H)
Los Ejemplos 39-42 (referencias) se prepararon siguiendo una química similar en el Esquema K utilizando 2,4-dicloropirimidina (Ejemplos 39 y 40) o 2,4-dicloro-6-metil-1,3,5-triazina (Ejemplos 41 y 42) indicados en el paso 1.
Figure imgf000064_0001
Ejemplo 43 (Esquema L) - (1R,2S,3R,5R)-3-[(6-aminopirimidin-4-il)(metil)amino]-5-[(S)-(3,4-difluorofenil) (hidroxi)metil]ciclopentano-1,2-diol (L-4) (referencia)
Ejemplo 44 (Esquema L) - (1R,2S,3R,5R)-3-[(6-aminopirimidin-4-N)(metM)amino]-5-[(R)-(3,4-difluorofenil)(hidroxi)metil]ciclopentano-1,2-diol (L-5) (referencia)
Figure imgf000065_0001
Paso 1: Síntesis de N-((3aS,4R,6S,6aR)-6-(((tert-butNdimetNsilM)oxi)(3,4-difluorofenN)metM)-2,2-dimetiltetrahidro-4H-ciclopenta[d][1,3]dioxol-4-il)-6-cloro-N-metilpirimidin-4-amina (L-1)
Siguiendo un procedimiento similar al del paso 1 del Esquema K, J-2 se trató con 4,6-dicloropirimidina en n-butanol y DIPEA para dar L-1 (188 mg, 60 %). LCMS [M+1] 540,20.
Paso 2: Síntesis de N4-((3aS,4R,6S,6aR)-6-(((tert-butildimetilsilil)oxi)(3,4-difluorofenil) metil)-2,2-dimetiltetrahidro-4H-ciclopenta[d][1,3]dioxol-4-il)-N4-metilpirimidin-4,6-diamina (L-2)
A una solución de L-1 (188 mg, 0,348 mmol) en THF (10 ml, c=0,035 M) se añadió tris(dibencilideneacetona)dipaladio (41,4 mg, 0,045 mmol) y diciclohexil(2-fenilfenil)fosfano (33,7 mg, 0,092 mmol), se tapó y se purgó con nitrógeno, después se añadió LHMDS (153 mg, 0,905 m m ol, 0,90 ml, 1,0 M), se calentó a 75 °C durante 18 h. La reacción se enfrió a r.t., se diluyó con agua y EtOAc, y se separaron las capas. La fase orgánica se secó sobre Na2SO4, se filtró y se concentró. El producto se purificó por cromatografía en columna con 80 %-100 % de EtOAc/heptano para dar 180 mg de L-2 (99 % de rendimiento) como un aceite de color amarillo claro. LCMS [M+1] 521,30.
Paso 3: Síntesis de ((3aR,4R,6R,6aS)-6-((6-aminopirimidin-4-il)(metil)amino)-2,2-dimetil tetrahidro-4H-ciclopenta[d][1,3]dioxol-4-il)(3,4-difluorofenil)metanol (L-3)
Siguiendo un procedimiento similar al del paso 3 del Esquema K, L-2 se trató con TBAF para dar L-3 como crudo para el siguiente paso. LCMS [M+1] 407,20.
Paso 4: Síntesis de (1R,2S,3R,5R)-3-[(6-aminopirimidin-4-il)(metil)amino]-5-[(S)-(3,4-difluoro fenil)(hidroxi)metil]ciclopentano-1,2-diol (L-4) y (1R,2S,3R,5R)-3-[(6-aminopirimidin-4-il)(methil) amino]-5-[(R)-(3,4-difluorofenil)(hidroxi)metil]ciclopentano-1,2-diol (L-5)
Siguiendo un procedimiento similar al del paso 4 del Esquema K, L-3 se trató con TFA en agua. Se aislaronL-4 (31 mg, 25 %) y L-5 (11 mg, 9 %) tras su elaboración y purificación por SFC quiral.
L-4: LCMS [M+1] 366,90. 1HRMN (700 MHz, DMSO-da) 8 ppm 1,13 - 1,26 (m, 1 H) 1,55 (dt, J=12,60, 8,56 Hz, 1 H) 2,04 - 2,13 (m, 1 H) 2,77 (s, 2 H) 3,71 - 3,79 (m, 1 H) 3,81 - 3,88 (m, 1 H) 4,27 - 4,35 (m, 1 H) 4,47 (t, J=5,28 Hz, 1 H) 4,55 (d, J=5,72 Hz, 1 H) 5,47 (s, 1 H) 5,58 (d, J=4,62 Hz, 1 H) 6,03 (s. br, 2 H) 7,15 - 7,23 (m, 1 H) 7,30 - 7,40 (m, 2 H) 7,86 (s, 1 H)
L-5: LCMS [M+1] 366,90. 1HRMN (700 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 1,29- 1,42 (m, 2 H) 1,99 -2,09 (m, 1 H) 2,78 (s. br., 3 H) 3,74 (s. br., 1 H) 3,86 (d, J=7,04 Hz, 1 H) 4,41 - 4,49 (m, 1 H) 4,52 - 4,60 (m, 1 H) 4,72 (s. br, 1 H) 5,47 (s, 1 H) 5,56 (d, J=3,96 Hz, 1 H) 6,03 (s. br., 1 H) 7,15 (s. br., 1 H) 7,28 - 7,38 (m, 2 H) 7,86 (s, 1 H)
Ejemplo 46 (Esquema M) -(1S,2R,3R,5R)-3-[(S)-(3,4-difluorofenN)(hidroxi)metM]-5-[metN(4-metiM,3,5-triazin-2-il)amino]ciclopentano-1,2-diol (M-4)(referencia)
Ejemplo 47 (Esquema M) -(1S,2R,3R,5R)-3-[(R)-(3,4-difluorofeml)(hidroxi)metil]-5-[metil(4-metil-1,3,5-triazm-2-il)amino]ciclopentano-1,2-diol (M-5) (referencia)
Figure imgf000066_0001
Paso 1: Síntesis de N-((3aS,4R,6S,6aR)-6-(((tert-butildimetilsilil)oxi)(3,4-difluorofenil) metil)-2,2-dimetiltetrahidro-4H-ciclopenta[d][1,3]dioxol-4-il)-4-cloro-N-metil-1,3,5-triazin-2-amina (M-1)
La mezcla de reacción de J-2 (360 mg, 0,842 mmol), 2,4-dicloro-[1,3,5] triazina (152 mg, 1,01 mmol) y DIPEA (218 mg, 1,68 mmol, 0,279 ml) en DMA (5 ml, 0,16 M) se agitó a r.t. durante 5 horas. A la mezcla rxn se le añadió EtOAc, se lavó con H2O 3 veces y luego con salmuera. La capa orgánica se secó sobre Na2SO4 y se concentró, purificándose por cromatografía en columna con EtOAc/heptano al 20 % para dar 267 mg de M-1 (58,6 % de rendimiento) como aceite incoloro. LCMS [M+1] 541.
Paso 2: Síntesis de N-((3aS,4R,6S,6aR)-6-(((tert-butildimetilsilil)oxi)(3,4-difluorofenil) metil)-2,2-dimetiltetrahidro-4H-ciclopenta[d][1,3]dioxol-4-il)-N,4-dimetil-1,3,5-triazin-2-amina (M-2)
M-2 (176 mg, 99 %) se hizo a partir de M-1 siguiendo un procedimiento similar al del paso 5 del Esquema A. LCMS [M+1] 521.
Paso 3: Síntesis de (3,4-difluorofenil)(3aR,4R,6R,6aS)-2,2-dimetil-6-(metil(4-metil-1,3,5-triazin-2-il)amino)tetrahidro-4H-ciclopenta[d][1,3]dioxol-4-il)metanol (M-3)
Siguiendo un procedimiento similar al del paso 3 del Esquema K, M-2 se trató con TBAF para dar M-3 como crudo para el siguiente paso. LCMS [M+1] 407.
Paso 4: Síntesis de (1S,2R,3R,5R)-3-((S)-(3,4-difluorofeml)(hidroxi)metil)-5-(metil(4-metil-1,3,5-triazm-2-il)amino)ciclopentano-1,2-diol (M-4) y (1S,2R,3R,5R)-3-((R)-(3,4-difluorofenil) (hidroxi)metil)-5-(metil(4-metil-1,3,5-triazin-2-il)amino)ciclopentano-1,2-diol (M-5)
Siguiendo un procedimiento similar al del paso 4 del Esquema K, M-3 se trató con TFA en agua. Se aislaronM-4 (78,97 mg, 64 %) y M-5 (24,48 mg, 20 %) tras su posterior elaboración y purificación por SFC quiral.
M-4: LCMS [M+1] 366,90. 1HRMN (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 1,26- 1,34 (m, 1 H) 1,56- 1,69 (m, 1 H) 2,13 (s. br., 1 H) 2,24 - 2,32 (m, 3 H) 3,00 (s, 3 H) 3,78 (s. br., 1 H) 3,91 (s. br, 1 H) 4,33 (d, J=15,89 Hz, 1 H) 4,48 (s. br., 1 H) 4,60 (s. br., 1 H) 4,92 - 5,04 (m, 1 H) 5,56 (d, J=4,40 Hz, 1 H) 7,22 (d, J=4,52 Hz, 1 H) 7,30 - 7,43 (m, 2 H) 8,39 (d, J=14,67 Hz, 1 H)
M-5: LCMS [M+1] 366,90. 1HRMN (700 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 1,36- 1,48 (m, 2 H) 2,09 (s. br., 1 H) 2,27 (d, J=23,74 Hz, 3 H) 2,98 (d, J=4,10 Hz, 3 H) 3,73 (s. br, 1 H) 3,90 (m, 1 H) 4,70 (s. br., 1 H) 4,93 (t, J=9,99 Hz, 1 H) 7,15 (s. br., 1 H) 7,31 (d, J=9,39 Hz, 2 H) 8,34 (d, J=33,65 Hz, 1 H)
Ejemplo 48 (Esquema N) - (1R,2S,3R,5R)-3-(2-amino-4-metil-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)-5-[(S)-(3,4-difluorofenil)(hidroxi)metil]ciclopentano-1,2-diol (N-5) (referencia)
Ejemplo 49 (Esquema N) - (1R,2S,3R,5R)-3-(2-amino-4-metil-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)-5-[(R)-(3,4-difluorofenil)(hidroxi)metil]ciclopentano-1,2-diol (N-6) (referencia)
Figure imgf000067_0001
Paso 1: Síntesis de ((3aR,4R,6R,6aS)-6-amino-2,2-dimetiltetrahidro-4H-ciclopenta[d][1,3] dioxol-4-il)(3,4-difluorofenil)metanol (N-1)
I-5 (616 mg, 1,54 mmol) en TFA (3 ml, c=0,5 M) se agitó a r.t. durante 10-15 min. La mezcla de reacción se añadió EtOAc y se neutralizó con std. NaHCO3 hasta un pH de aproximadamente 7, la capa acuosa se extrajo con EtOAc 3 veces, la capa orgánica se secó sobre Na2SO4, se concentró para dar 460 mg de N-1 (100 % de rendimiento) como sólido blanco, utilizado para el siguiente paso. LCMS [M+1] 300,15.
Paso 2: Síntesis de ((3aR,4R,6R,6aS)-6-((2-ammo-6-doro-5-(2,2-dietoxietM)pirimidm-4-M) amino)-2,2-dimetiltetrahidro-4H-ciclopenta[d][1,3]dioxol-4-il)(3,4-difluorofenil)metanol (N-2)
La mezcla de N-1 (214 mg, 0,714 mmol), 4,6-dicloro-5-(2,2-dietoxietil)pirimidin-2-amina (200 mg, 0,714 mmol) y trietilamina (289 mg, 2,86 mmol) en 10 ml de nBuOH se calentó a 135 °C en un tubo sellado durante 40 horas. La mezcla de reacción se enfrió a r.t., se concentró, se añadió H2O, se extrajo con EtOAc, el producto se purificó por cromatografía en columna con 50-60 % de EtOAc/heptano para dar 200 mg de N-2 (51 % de rendimiento) como un sólido de color amarillo. LCMS [M+1] 543,20.
Paso 3: Síntesis de ((3aR,4R,6R,6aS)-6-(2-ammo-4-doro-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidm-7-M)-2,2-dimetNtetrahidro-4H-ciclopenta[d][1,3]dioxol-4-il)(3,4-difluorofenil)metanol (N-3)
Se añadióN-2 (200 mg, 0,368 mmol) al ácido acético (15 ml, c=0,025 M), la solución se calentó a 100 °C durante 1 h. Los volátiles se eliminaron al vacío, el residuo se añadió EtOAc, se neutralizó con NaHCO3 saturado, las capas se separaron y la capa acuosa se extrajo con EtOAc 3 veces. La capa orgánica se concentró y se purificó por cromatografía en columna con EtOAc/heptano al 50 % para dar 100 mg de N-3 (rendimiento del 60 %) como un sólido balncuzco. LCMS [M+1] 451,10.
Paso 4: Síntesis de ((3aR,4R,6R,6aS)-6-(2-amino-4-metil-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)-2,2-dimetiltetrahidro-4H-ciclopenta[d][1,3]dioxol-4-il)(3,4-difluorofenil)metanol (N-4)
Siguiendo un procedimiento similar al del paso 5 del Esquema A, el N-3 se convirtió en N-4 (69 mg, 85 %). LCMS [M+1] 431,15.
Paso 5: Síntesis de (1R,2S,3R,5R)-3-(2-amino-4-metil-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)-5-[(S)-(3,4-difluorofenil)(hidroxi)metil]ciclopentano-1,2-diol (N-5) y (1R,2S,3R,5R)-3-(2-amino-4-metil-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)-5-[(R)-(3,4-difluorofenil)(hidroxi)metil]ciclopentano-1,2-diol (N-6)
Siguiendo un procedimiento similar al del paso 4 del Esquema K, N-4 se trató con TFA en agua. Se aislaronN-5 (14,6 mg, 23 %) y N-6 (6 , 6 mg, 11 %) tras su posterior elaboración y purificación por SFC quiral.
N-5: LCMS [M+1] 390,85. 1HRMN (700 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 7,35 - 7,40 (m, 1 H) 7,29 - 7,35 (m, 1 H) 7,21 (s. br, 1 H) 7,07 (d, J=3,74 Hz, 1 H) 6,38 (d, J=3,52 Hz, 1 H) 5,90 (s, 2 H) 5,74 (d, J=4,40 Hz, 1 H) 4,83 (d, J=6,60 Hz, 1 H) 4,71 - 4,79 (m, 1 H)4,51 -4,58(m , 2 H) 4,15-4,21 (m, 1 H) 3,90 (s. br, 1 H)2,38(s, 3 H)2,18(d, J=7,92 Hz, 1 H) 1,83 - 1,93 (m, 1 H) 1,44 (d, J=10,34 Hz, 1 H)
N-6: LCMS [M+1] 390,90. 1HRMN (700 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 7,29 - 7,36 (m, 2 H) 7,16 (s. br., 1 H) 7,12 (d, J=3,52 Hz, 1 H) 6,40 (d, J=3,30 Hz, 1 H) 5,89 (s, 2 H) 5,76 (s. br, 1 H) 4,86 (d, J=5,94 Hz, 1 H) 4,76 (t, J=4,62 Hz, 1 H) 4,73 (q, J=8 , 88 Hz, 1 H) 4,68 (s. br, 1 H) 4,08 - 4,12 (m, 1 H) 3,83 - 3,86 (m, 1 H) 2,39 (s, 3 H) 2,16 (dt, J=8,53, 4,21 Hz, 1 H) 1,76 (dt, J=12,98, 8,47 Hz, 1 H) 1,57 - 1,64 (m, 1 H)
Ejemplo 50 (Esquema O) - (1S,2R,3S,5R)-3-[2-ammo-1-fluoro-1-(4-fluorofeml)etM]-5-(4-metN-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)ciclopentano-1,2-diol (O-5) (referencia)
Ejemplo 51 (Esquema O) - (1S,2R,3R,5R)-3-[(1S)-2-ammo-1-(4-fluorofeml)etM]-5-(4-metN-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)ciclopentano-1,2-diol (O-6) (referencia)
Ejemplo 52 (Esquema O) - (1S,2R,3R,5R)-3-[(1R)-2-amino-1-(4-fluorofenil)etil]-5-(4-metil-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)ciclopentano-1,2-diol (O-7) (referencia)
Figure imgf000068_0001
Paso 1: Síntesis de 2-((3aR,4S,6R,6aS)-2,2-dimetN-6-(4-metN-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidm-7-N)tetrahidro-4H-ciclopenta[d][1,3]dioxol-4-il)-2-fluoro-2-(4-fluorofenil)acetonitrilo (O-1)
A una mezcla de E-1 (175 mg, 0,443 mmol) y yoduro dezinc(N) (2,12 mg, 0,00664 mmol) en un tubo sellable se añadió CH2Cl2 anhidro de 2 ml, seguido de cianuro de trimetilsililo (0,25 ml) bajo nitrógeno. La reacción se selló y se calentó a 50 °C durante 2 días. La mezcla resultante se enfrió en un baño de hielo, se añadió gota a gota DAST (78,5 mg, 0,487 mmol) y se agitó a r.t. durante 15 min. La mezcla de reacción se lavó con H2O, HCl 0,5 N, NaHCO3 , saturado salmuera y se concentró. El producto se purificó por cromatografía en columna con EtOAc/heptano al 50 % para dar 80 mg de O-1 (43 % de rendimiento) como aceite de color amarillo. LCMS [M+1] 425,10.
Paso 2: Síntesis de 2-((3aR,4S,6R,6aS)-2,2-dimetN-6-(4-metN-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidm-7-N)tetrahidro-4H-ciclopenta[d][1,3]dioxol-4-il)-2-fluoro-2-(4-fluorofenil)etan-1-amina (O-2) y 2-((3aR,4R,6R,6aS)-2,2-dimetil-6-(4-metil-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)tetrahidro-4H-ciclopenta[d][1,3]dioxol-4-il)-2-(4-fluorofenil)etan-1-amina (O-3)
El O-1 (70 mg, 0,16 mmol) se disolvió en 0,5 ml de MeOH. Se añadió hexahidratado de cloruro de cobalto (II) (118 mg, 0,495 mmol) y la mezcla se enfrió en un baño de hielo. Se añadió NaBH4 (32,8 mg, 0,825 mmol) y la reacción se agitó a 0 °C durante 0,5 h. La mezcla de reacción se inactivó con . NH4Cl saturado, se extrajo con EtOAc, la capa orgánica se lavó con salmuera, se concentró, se purificó por placa de pre TLC con MeOH/CH2Ch al 5 % para dar 20 mg de O-2 (28 % de rendimiento) como aceite de color amarillo, (LCMS [M+1] 429,10) y 22 mg de O-3 (32 % de rendimiento) como aceite de color amarillo. (LCMS [M+1] 411,20)
Paso 3: Síntesis de (1S,2R,3S,5R)-3-[2-amino-1-fluoro-1-(4-fluorofenil)etil]-5-(4-metil-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)ciclopentano-1,2-diol (O-4)
Siguiendo un procedimiento similar al del paso 4 del Esquema K, el O-2 se trató con TFA en agua. O-4 (1,2 mg, 6 , 6 %) se aisló tras su posterior elaboración y purificación por SFC.
LCMS [M+1] 388,90. 1HRMN (400 MHz, METANOL-d4) 8 ppm 1,62 - 1,73 (m, 1 H) 1,81 (s, 3 H) 2,54 - 2,73 (m, 4 H) 4,17 (s. br, 1 H) 4,76 - 4,94 (m, 2 H) 6,59 (d, J=3,42 Hz, 1 H) 7,04 (t, J=8 , 6 8 Hz, 2 H) 7,29 - 7,42 (m, 3 H) 8,46 (s, 1 H) Paso 4: Síntesis de (1S,2R,3R,5R)-3-[(1S)-2-ammo-1-(4-fluorofenM)etM]-5-(4-metN-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidm-7-il)ciclopentano-1,2-diol (O-5) y (1S,2R,3R,5R)-3-[(1R)-2-ammo-1-(4-fluorofeml)etM]-5-(4-metN-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)ciclopentano-1,2-diol (O-6)
Siguiendo un procedimiento similar al del paso 4 del Esquema K, el O-3 se trató con TFA en agua. El O-5 (5,4 mg, 27 %) y el O-6 (3,7 mg, 19 %) se aislaron tras su posterior elaboración y purificación por SFC quiral.
O-5: LCMS [M+1] 370,90. 1HRMN (400 MHz, METANOL-d4) 8 ppm 1,42 - 1,57 (m, 1 H) 1,65 - 1,79 (m, 1 H) 2,24 (s. br., 1 H) 2,49 - 2,68 (m, 3 H) 2,83 (s. br, 1 H) 2,96 - 3,10 (m, 1 H) 3,31 (d, J=13,20 Hz, 1 H) 4,02 (t, J=5,81 Hz, 1 H) 4,27 (t, J=6,79 Hz, 1 H) 4,75 (s. br, 1 H) 6,56 (d, J=3,18 Hz, 1 H) 6,98 (t, J=8,38 Hz, 2 H) 7,13 - 7,28 (m, 2 H) 7,31 (d, J=2,93 Hz, 1 H) 8,45 (s, 1 H)
O-6: LCMS [M+1] 370,90. 1HRMN (400 MHz, METANOL-d4) 8 ppm 1,78 (d, J=9,29 Hz, 1 H) 2,26 - 2,40 (m, 2 H) 2,53 - 2,67 (m, 4 H) 2,91 - 3,00 (m, 1 H) 3,24 - 3,25 (m, 1 H) 3,67 - 3,78 (m, 1 H) 4,19 - 4,32 (m, 1 H) 4,82 - 4,89 (m, 1 H) 6,60 (d, J=3,67 Hz, 1 H) 7,08 (t, J=8 , 68 Hz, 2 H) 7,27 - 7,40 (m, 3 H) 8,44 - 8,52 (m, 1 H)
Ejemplo 53 (Esquema P) - (1S,2R,3R,5R)-3-((S)-(2-(ammometN)-4-dorofemlo)(hidroxi)metMo)-5-(4-metN-7H-pirrol[2,3-d]pirimidin-7-il)ciclopentano-1,2-diol (P-8) (referencia)
Ejemplo 54 (Esquema P) - (1S,2R,3R,5R)-3-((R)-(2-(ammometN)-4-dorofeml)(hidroxi)metM)-5-(4-metM-7H-pirrol[2,3-d]pirimidin-7-il)ciclopentano-1,2-diol (P-9) (referencia)
Figure imgf000069_0001
Paso 1: Síntesis de (1R,2S,3R,5R)-3-((6-cloro-5-(2,2-dietoxietil)pirimidin-4-il)amino)-5-(hidroximetil)ciclopentano-1,2-diol (P-1)
(1R,2S,3R,5R)-3-amino-5-(hidroximetil)ciclopentano-1,2-diol (4160 mg, 22,6 mmol) y 4,6-dicloro-5-(2,2-dietoxietil)pirimidina (J. Med. Chem. 10, 665, 1967) (5000 mg, 18,86 mmol) en 40 ml de etanol absoluto en un matraz sellado se trató con Et3N (7630 mg, 75,4 mmol), se calentó a 80 °C durante 18 horas. La mezcla de reacción se enfrió en un baño de hielo, el sólido se filtró y el licor madre se concentró para dar P-1 como una suspensión de color marrón que se utilizó directamente para el siguiente paso. LCMS [M+1] 375,80.
Paso 2: Síntesis de (1R,2S,3R,5R)-3-(4-cloro-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)-5-(hidroximetil) ciclopentano-1,2-diol (P-2)
La suspensión de P-1 (7088 mg, 18,86 mmol) en 30 ml de dioxano se trató con 10 ml de HCl 1 N y se calentó a 80 °C durante 30 min. La mezcla de reacción se neutralizó con NH4OH a pH 7 y los volátiles se eliminaron al vacío para obtener P-2 como una suspensión de color marrón que se utilizó directamente para el siguiente paso. LCMS [M+1] 283,85.
Paso 3: Síntesis de ((3aR,4R,6R,6aS)-6-(4-cloro-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-M)-2,2-dimetMtetrahidro-4H-ciclopenta[d][1,3]dioxol-4-il)metanol (P-3)
El P-2 (5350 mg, 18,86 mmol) y el 2,2-dimetoxipropano (50 ml, c=0,38 M) se trató con monohidrato de ácido ptoluenosulfónico(7170 mg, 37,7 mmol) y la suspensión de color marrón amarillento se ajustó a pH 4-5, se agitó vigorosamente a r.t. durante 15 min. La mezcla de reacción se diluyó con 100 ml de H2O y se neutralizó con NaHCO3 sólido. Los volátiles se eliminaron cuidadosamente in vacuo y la solución acuosa marrón resultante se extrajo con isopropanol/DCM al 20 %, la capa orgánica se combinó, se concentró y se purificó por cromatografía en columna con EtOAc/DCM al 50 % hasta EtOAc al 100 % para dar 4,4 g de P-3 como una goma de color amarillo (rendimiento global del 72 %).
LCMS [M+1] 324,10. 1HRMN (400 MHz, CLOROFORMO-d) 8 ppm 8,63 (s, 1 H) 7,33 (d, J=3,55 Hz, 1 H) 6,63 (d, J=3,67 Hz, 1 H) 4,94 - 5,06 (m, 2 H) 4,72 (dd, J=6 ,6 6 , 4,46 Hz, 1 H) 3,85 - 3,92 (m, 1 H) 3,78 - 3,85 (m, 1 H) 2,43 -2,56 (m, 2 H) 2,28 - 2,42 (m, 1 H) 2,09 (s. br, 1 H) 1,55 - 1,64 (m, 3 H) 1,33 (s, 3 H)
Paso 4: Síntesis de ((3aR,4R,6R,6aS)-2,2-dimetN-6-(4-metN-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidm-7-N)tetrahidro-4H-ciclopenta[d][1,3]dioxol-4-il)metanol (P-4)
Siguiendo un procedimiento similar al del paso 5 del Esquema A, P-3 se convirtió en P-4 (930 mg, 88 %).
LCMS [M+1] 304,15. 1HRMN (400 MHz, CLOROFORMO-d) 8 ppm 1,25 (s, 3 H) 1,53 (s, 3 H) 2,21 -2,34(m , 2 H) 2,38 - 2,47 (m, 2 H) 2,75 (s, 3 H) 3,75 (s. br, 1 H) 3,80 (s. br., 1 H) 4,65 (dd, J=6 ,6 6 , 4,10 Hz, 1 H) 4,86 - 5,00 (m, 2 H) 6,57 (s. br., 1 H) 7,25 (s. br., 1 H) 8,71 (s, 1 H)
Paso 5: Síntesis de (3aR,4S,6R,6aS)-2,2-dimetN-6-(4-metN-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidm-7-N)tetrahidro-4H-ciclopenta[d][1,3]dioxol-4-carbaldehído (P-5)
Se añadió EDC-HCl (3110 mg, 16,2 mmol) a una solución de P-4 (1230 mg, 4,055 mmol) en dimetilsulfóxido anhidro (22,5 ml, c=0,18 M). Se añadió piridina (641 mg, 8,11 mmol) seguida de TFA (462 mg, 4,05 mmol), y se agitó a r.t. durante 1,5 h. La mezcla de reacción se diluyó con H2O, se extrajo con EtOAc dos veces, la capa orgánica combinado se lavó con H2O 3 veces, salmuera, se secó sobre Na2SO4, se filtró y se concentró para dar P-5 (950 mg) como aceite marrón (78 % de rendimiento).
LCMS [M+1] 302,15. 1HRMN (400 MHz, CLOROFORMO-d) 8 ppm 1,28 (s, 3 H) 1,53 (s, 3 H) 2,47 - 2,57 (m, 1 H) 2,58 - 2,69 (m, 1 H) 2,85 (s, 3 H) 3,13 (td, J=8 ,6 8 , 4,28 Hz, 1 H) 4,94 (dd, J=6,60, 4,16 Hz, 1 H) 5,04 (td, J=8,04, 4,34 Hz, 1 H) 5,14 (dd, J=6,42, 4,22 Hz, 1 H) 6 , 6 6 (d, J=3,42 Hz, 1 H) 7,26 (s. br, 1 H) 8,73 (s, 1 H) 9,80 (s, 1 H)
Paso 6: Síntesis del 5-cloro-2-((3aR,4R,6R,6aS)-2,2-dimetN-6-(4-metN-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidm-7-N)tetrahidro-4H-ciclopenta[d][1,3]dioxol-4-il)(hidroxi)metilo)benzonitrilo (P-6)
A una solución de 5-cloro-2-yodobenzonitrilo (1570 mg, 5,97 mmol) en THF seco (29,9 ml, c=0,2 M) a -78 °C se añadió cloruro de isopropilmagnesio (1080 mg, 7,47 mmol, 5,74 ml, 1,3 M). La solución resultante se agitó a -78 °C durante 15 min. Se añadió gota a gota P-5 (900 mg, 2,99 mmol) en THF (5,0 ml). La mezcla de reacción se transfirió a un baño de hielo, se dejó calentar hasta el t.r. y se agitó durante la noche. A continuación, la reacción se inactivó con std. NH4Cl, se extrajo con EtOAc 3 veces; las capas orgánicas se combinaron, se lavaron con salmuera, se secaron sobre Na2SO4, se concentraron y se purificaron por cromatografía en columna con MeOH/DCM al 5 % para dar P-6 (700 mg) como un aceite de color amarillo. LCMS [M+1] 439,10.
Paso 7: Síntesis de (2-(aminometil)-4-clorofenil)(3aR,4R,6R,6aS)-2,2-dimetil-6-(4-metil-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)tetrahidro-4H-ciclopenta[d][1,3]dioxol-4-il)metanol (P-7)
A una solución de P-6 (200 mg, 0,456 mmol) en MeOH (5 ml, c=0,09 M) se añadió cloruro de cobalto(II) hexahidratado (545 mg, 2,28 mmol), y NaBH4 (181 mg, 4,56 mmol). La mezcla de reacción se agitó a r.t. durante 0,5 h, y luego se inactivó con NH4Cl saturado. La capa acuosa se saturó con NaCl sólido y se extrajo con alcohol isopropílico al 20 %/DCM varias veces. Las capas orgánicas se concentraron y se purificaron por HPLC preparativa para dar 50 mg de P-7 como aceite incoloro (13 % en dos pasos). LCMS [M+1] 443,10.
Paso 8: Síntesis del (1S,2R,3R,5R)-3-((S)-(2-(aminometil)-4-clorofenil)(hidroxi)metil)-5-(4-metil-7H-pirrol[2,3-d]pirimidin-7-il)ciclopentano-1,2-diol (P-8) y (1S,2R,3R,5R)-3-((R)-(2-(aminometil)-4-clorofenil)(hidroxi)metil)-5-(4-metil-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)ciclopentano-1,2-diol (P-9)
Siguiendo un procedimiento similar al del paso 4 del Esquema K, P-7 se trató con TFA en agua. Se aislaronP-8 (5,5 mg, 12 % de rendimiento) y P-9 (0,2 mg, 0,4 % de rendimiento) tras su posterior elaboración y purificación por SFC quiral. LCMS [M+1] 403,00.
Ejemplo 55 (Esquema Q) - (1S,2R,3S,5R)-3-(2-(ammometil)-4-clorobencil)-5-(4-metil-7H-pirromidm-7-il)ciclopentano-1,2-diol (Q-4) (referencia)
Figure imgf000071_0001
Paso 1: Síntesis de 7-((3aS,4R,6S,6aR)-6-(yodometil)-2,2-dimetiltetrahidro-4H-ciclopenta[d] [1,3]dioxol-4-il)-4-metil-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidina (Q-1)
La solución de trifenilfosfina (529 mg, 1,98 mmol) e imidazol (135 mg, 1,98 mmol) en cloruro de metileno (8,24 ml, c=0,2 M) se añadió l2 (502 mg, 1,98 mmol) seguido de la adición gota a gota de P-4 (500 mg, 1,65 mmol) en 2 ml de cloruro de metileno. La mezcla de reacción resultante se agitó a r.t. durante una noche, y luego se diluyó con agua (20 ml), se extrajo con cloruro de metileno (3 x 20 ml). Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre Na2SO4, se concentraron y se purificaron por cromatografía en columna con EtOAc/heptano al 60 % para dar 280 mg de Q-1 como aceite de color amarillo (rendimiento del 25 %).
LCMS [M+1] 414,00. 1HRMN (400 MHz, CLOROFORMO-d) 8 ppm 1,33 (s, 3 H) 1,60 (s, 3 H) 2,26 - 2,37 (m, 1 H) 2,40 (dd, J=11,55, 5,93 Hz, 1 H) 2,59 (dt, J=12,29, 6,08 Hz, 1 H) 2,80 (s, 3 H) 3,41 (dd, J=10,03, 6,72 Hz, 1 H) 3,50 (dd, J=10,09, 4,83 Hz, 1 H) 4,56 (t, J=6,11 Hz, 1 H) 5,02-5,13 (m, 2 H) 6,64 (d, J=3,55 Hz, 1 H) 7,28 (d, J=3,55 Hz, 1 H) 8,79 (s, 1 H)
Paso 2: Síntesis del 5-cloro-2-((3aR,4S,6R,6aS)-2,2-dimetil-6-(4-metil-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)tetrahidro-4H-ciclopenta[d][1,3]dioxol-4-il)metilo)benzonitrilo (Q-2)
A una suspensión de zinc (318 mg, 4,87 mmol) en DMF seca degradada (8,11 ml, c=0,1 M) se añadió 1,2-dibromoetano (33 mg, 0,17 m m ol, 15 uL) bajo nitrógeno. La mezcla se calentó con una pistola de calor durante unos 30 segundos hasta que el gas empezó a liberarse de la solución indicando la activación del zinc. La mezcla se dejó enfriar a temperatura ambiente. Se añadió TMSCI (19 mg, 0,18 mmol , 23 uL) y la reacción se agitó a r.t. durante 15 min, seguida de la adición de una solución de Q-1 (335 mg, 0,811 mmol) en DMF seca desgasificada (1 ml). La mezcla resultante se calentó a 60 °C durante 5 min, y luego se agitó a r.t. durante 30 min. Después de dejar que los sólidos de zinc se asentaran, la mezcla de reacción se filtró a través de un filtro de jeringa en una mezcla de 5-cloro-2-yodobenzonitrilo (214 mg, 0,812 mmol), Pd2(dba)3 (37,2 mg, 0,0406 mmol) y tri-o-toluilfosfina (49,4 mg, 0,162 mmol) en 1 ml de DMF seca desgasificada. La mezcla de reacción se enjuagó con nitrógeno y se agitó a 80 °C durante 2 h. Después de enfriar a r.t., la mezcla de reacción se sometió a partición entre H2O (30 ml) y EtOAc (30 ml). La fase orgánica se separó, se lavó con H2O (3 x 30ml) y salmuera (1 x 30ml), se secó sobre Na2SO4, se concentró y se purificó por cromatografía en columna con EtOAc/heptano al 70 % para dar 25 mg de Q-2 (rendimiento del 7,3 %).
LCMS [M+1] 423,10. 1HRMN (400 MHz, CLOROFORMO-d) 8 ppm 1,29 (s, 3 H) 1,56 (s, 3 H) 2,21 -2,38(m , 2 H) 2,48 - 2,60 (m, 1 H) 2,78 (s, 3 H) 2,95 - 3,04 (m, 1 H) 3,24 (dd, J=14,18, 6,72 Hz, 1 H) 4,62 (t, J=6,72 Hz, 1 H)92 - 5,01 (m, 1 H) 5,04 (dd, J=7,09, 5,38 Hz, 1 H) 6,61 (d, J=3,67 Hz, 1 H) 7,25 (d, J=3,67 Hz, 1 H) 7,36 (d, J=8,31 Hz, 1 H) 7,52 (dd, J=8,44, 2,20 Hz, 1 H) 7,60 (d, J=2,20 Hz, 1 H) 8,76 (s, 1 H)
Paso 3: Síntesis de (5-cloro-2-((3aR,4S,6R,6aS)-2,2-dimetil-6-(4-metil-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)tetrahidro-4H-ciclopenta[d][1,3]dioxol-4-il)metil)fenil)metanamina (Q-3)
Siguiendo un procedimiento similar al del paso 7 del Esquema P, Q-2 se redujo a Q-3 como crudo para el siguiente paso. LCMS [M+1] 427,10.
Paso 4: Síntesis de (1S,2R,3S,5R)-3-(2-(aminometil)-4-clorobencil)-5-(4-metil-7H-pirrolo[2,3-d] pirimidin-7-il)ciclopentano-1,2-diol (Q-4)
Siguiendo un procedimiento similar al del paso 4 del Esquema K, Q-3 se trató con TFA en agua. Se aislóQ-4 (9,5 mg, 35 %) tras su posterior elaboración y purificación por SFC quiral.
Q-4: LCMS [M+1] 386,85. 1HRMN (700 MHz, DMSO-da) 8 ppm 1,48- 1,56 (m, 1 H) 1,97-2,04 (m, 1 H) 2,11 (s. br, 1 H) 2,53 - 2,60 (m, 5 H) 2,91 (dd, J=14,09, 5,72 Hz, 1 H) 3,68 - 3,78 (m, 2 H) 4,29 (t, J=6,23 Hz, 1 H) 4,84 (q, J=8,37 Hz, 1 H) 6,63 (d, J=3,42 Hz, 1 H) 7,09 - 7,17 (m, 2 H) 7,41 (s. br, 1 H) 7,62 (d, J=2,22 Hz, 1 H) 8,53 (s, 1 H)
Ejemplo 56 (Esquema R) - (1S,2R,3R,5R)-3-((S)-hidroxi(1,2,3,4-tetrahidroisoqumoMn-8-N)metM)-5-(4-metN-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)ciclopentano-1,2-diol (R-7)
Ejemplo 57 (Esquema R) - (1S,2R,3R,5R)-3-((R)-hidroxi(1,2,3,4-tetrahidroisoqumoMn-8-N)metM)-5-(4-metN-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)ciclopentano-1,2-diol (R-8)
Figure imgf000072_0001
Una mezcla de 8-bromo-3,4-dihidroisoquinolin-2(1H)-carboxilato de tert-butilo (R-1) (1100 mg, 3,52 mmol), Nal (4,76 g, 31,8 mmol), Cul (402 mg, 2 , 1 2 mmol) y trans-N,N-dimetilciclohexano (602 mg, 4,22 mmol) en dioxano ( 20 ml) se purgó con N2 durante 10 min. La suspensión amarilla resultante se agitó a 110 °C en un tubo sellado durante 48 horas. La reacción se diluyó con éter de petróleo (50 ml) y se filtró. El filtrado se concentró in vacuo y el residuo se purificó mediante cromatografía en gel de sílice eluyendo con EtOAC en éter de petróleo de 0 a 20 % para obtener R-2 (1200 mg, 94,8 %) como una goma de color amarillo clara. LCMS [M+1-tBu] 304; 1HRMN (400 MHz, CDCh) 8 ppm 7,70 (d, J=7,8 Hz, 1H), 7,45 - 7,39 (m, 1H), 7,12 (d, J=7,5 Hz, 1H), 6 , 8 8 (s, 1H), 4,44 (s. br, 2H), 3,62 (t, J=5,5 Hz, 2H), 2,81 (d, J=4,8 Hz, 2H), 1,50 (s, 9H)
Paso 2: Síntesis del ácido (2-(tert-butoxicarbonilo)-1,2,3,4-tetrahidroisoquinolin-8-il)borónico (R-3)
A una solución de R-2 (250 mg, 0,696 mmol) y borato de triisopropilo (262 mg, 0,321 mmol) en THF seco ( 8 ml) se añadió n-BuLi 2,5 M (0,418 ml, 1,04 mmol) a -60 °C.La mezcla se agitó a -600 °C durante 30 min. La mezcla se vertió en NH4Cl ac. (15 ml) y se extrajo con EtOAc (10 ml x 3). El extracto se secó sobre Na2SO4 y se concentró al vacío para obtener el producto crudo. El producto crudo se purificó por cromatografía en gel de sílice eluyendo con MeOH en DCM de 0 a 10 % para obtener R-3 (180 mg, 93 %) como una goma de color amarillo clara que se utilizó en el siguiente paso directamente.
Paso 3: Síntesis de S-(p-toluil) (3aR,4S,6R,6aS)-2,2-dimetil-6-(4-metil-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)tetrahidro-4H-ciclopenta[d][1,3]dioxol-4-carbotioato (R-4)
Al compuesto A-7 (270 mg, 0,851 mmol) en THF se añadió 4-metilbencetol (211 mg, 1,7 mmol), DIPEA (440 mg, 3,4 mmol) y T3P (1,08 g, 1,7 mmol) a rt (15 °C). La mezcla se agitó a rt 5-10 °C durante 2 días. La mezcla se vertió en NaHCOa ac. (20 ml) y se extrajo con EtOAc (10 ml x 2). El extracto se lavó con salmuera (15 ml) y se concentró al vacío, luego se purificó por cromatografía en gel de sílice eluyendo con EtOAc en éter de petróleo de 0 a 100 % para obtener R-4 (320 mg, 89 %) como un sólido blanco. LCMS [M+1] 424
Paso 4: Síntesis del 8-((3aR,4S,6R,6aS)-2,2-dimetN-6-(4-metN-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidm-7-N)tetrahidro-4H-cidopenta[d][1,3]dioxol-4-carbomlo)-3,4-dihidroisoqumolm-2(1H)-carboxMato de tert-butilo (R-5)
Una mezcla de R-4 (125 mg, 0,3 mmol) y R-3 (180 mg, 0,32 mmol), CuTC (90 mg, 0,47 mmol), Pd2(dba)3.CHCl3 (31 mg, 0,03 mmol) y TFP (20,6 mg, 0,0886 mmol) en THF seco (5 ml) se desgasificó con N2 cuatro veces. La mezcla se agitó a 50 °C en un tubo sellado durante 16 horas. La mezcla se diluyó con EtOAc (10 ml) y se filtró. El filtrado se concentró al vacío hasta sequedad. El residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice eluyendo con EtOAc en éter de petróleo de 0 a 100 % para obtener R-5 (70 mg, 40 %) como un sólido blanco. LCMS [M+1] 533
Paso 5: Síntesis del 8-((3aR,4R,6R,6aS)-2,2-dimetN-6-(4-metN-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidm-7-N)tetrahidro-4H-ciclopenta[d][1,3]dioxol-4-il)(hidroxi)metil)-3,4-dihidroisoquinolin-2(1H)-carboxilato de tert-butilo (R-6)
A una solución de R-5 (70 mg, 0,131 mmol) en MeOH (2 ml) se añadió NaBH4 (86,9 mg, 2,30 mmol) a rt 15 °C. La mezcla se agitó a rt 15 °C durante 30 min. La mezcla se diluyó con agua (10 ml) y se extrajo con EtOAc (10 ml x 3). El extracto se lavó con salmuera (10 ml), se secó sobre Na2SO4 y se concentró al vacío para obtener R-6 crudo (60 mg, 85 %) como un sólido de color amarillo claro.
Paso 6: Síntesis de (1S,2R,3R,5R)-3-((S)-hidroxi(1,2,3,4-tetrahidroisoquinolin-8-il)metil)-5-(4-metil-7H-pirrol[2,3-d]pirimidin-7-il)ciclopentano-1,2-diol (R-7) y (1S,2R,3R,5R)-3-((R)-hidroxi(1,2,3,4-tetrahidroisoquinolin-8-il)metil)-5-(4-metil-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)ciclopentano-1,2-diol (R-8)
Al compuesto R-6 (60 mg, 0,1 mmol) se le añadió TFA/H2O (1 m l/1 ml, enfriado previamente a 0 °C). La mezcla se agitó a rt (15 °C) durante 3 horas. La mezcla se concentró al vacío para obtener un crudo que se purificó por SFC. Tras la SFC, los productos se purificaron de nuevo por TLC previa para obtener R-7 (4,5 mg, 13 %) y R-8 (3,5 mg, 9 %) como sólidos blancos.
R-7: LCMS [M+1] 395; 1HRMN (400 MHz, MeOD-d4) 8 ppm 8,63 (s, 1H), 7,59 (d, J=3,8 Hz, 1H), 7,42 (d, J=7,5 Hz, 1H), 7,21 (t, J=7,5 Hz, 1H), 7,06 (d, J=7,3 Hz, 1H), 6,73 (d, J=3,8 Hz, 1H), 5,09 - 5,01 (m, 1H), 4,81 (d, J=7,0 Hz, 1H), 4,64 (dd, J=5,3, 9,5 Hz, 1H), 4,31 (dd, J=2,0, 5,5 Hz, 1H), 4,29 - 4,16 (m, 2H), 3,21 - 3,06 (m, 2H), 2,92 (d, J=4,0 Hz, 2H), 2,72 (s, 3H), 2 ,56-2,47 (m, 1H), 2,22 (td, J=8 ,8 , 13,1 Hz, 1H), 1,83 (ddd, J=8,3, 10,7, 13,1 Hz, 1H)
R-8: LCMS [M+1] 395; 1HRMN (400 MHz, MeOD-d4) 8 ppm 8,63 (s, 1H), 7,72 (d, J=3,8 Hz, 1H), 7,42 (d, J=8,0 Hz, 1H), 7,23 - 7,17 (m, 1H), 7,07 (d, J=7,5 Hz, 1H), 6,77 (d, J=3,8 Hz, 1H), 5,12 - 5,04 (m, 2H), 4,48 - 4,42 (m, 1H), 4,30 - 4,15 (m, 2H), 4,14-4,10 (m, 1H), 3,24-3,18 (m, 2H), 3,00-2,94 (m, 2H), 2,74 (s, 3H), 2,45-2,36 (m, 1H), 2,20-2,14 (m, 1H) 2,09- 1,99 (m, 1H)
Ejemplo 58 (Esquema S) - (1S,2R,3S,5R)-3-(4-fluorobencil)-5-(4-metil-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)cidopentano-1,2-diol (S-1) (referencia)
Figure imgf000073_0001
Una mezcla de (1S,2R,3R,5R)-3-((R)-(4-fluorofenil)(hidroxi)metil)-5-(4-metil-7H-pirrol[2,3-d]pirimidin-7-il)ciclopentano-1.2- diol(Ejemplo 10) (30 mg, 0 , 08 4 mmol), ácido trifluoroacético (302 ul) y trietilsilano (268 ul, 1,68 mmol) se calentó a 50 °C durante 2 horas. La mezcla de reacción se concentró hasta formar un aceite y luego se añadió monohidrato de hidróxido de litio (20 mg, 0,48 mmol) y metanol (1 ml) y se agitó a r.t. durante 45 min. La mezcla de reacción se concentró para eliminar el metanol y luego se sometió a partición entre agua y EtOAc. La capa de EtOAc se lavó con salmuera, se secó con Na2SO4 , se filtró y se concentró para dar S-1 como aceite en un rendimiento del 52 %.
LCMS-APCI(+): MH+=342, 1HRMN (700MHz, DMSO-d6) 8 ppm 8,58 (s, 1H), 7,64 (d, J=3,5 Hz, 1H), 7,25 (dd, J=5,9, 8,1 Hz, 2H), 7,08 (t, J=8 , 8 Hz, 2H), 6 , 6 8 (d, J=3,5 Hz, 1H), 4 ,98-4,84 (m, 2H), 4,77 (d, J=4,4 Hz, 1H), 4,44-4,23 (m, 1H), 3,82 - 3,75 (m, 1H), 2,92 (dd, J=6 ,6 , 13,6 Hz, 1H), 2,68 - 2,57 (m, 4H), 2,26 - 2,12 (m, 1H), 2,06 (td, J=8,3, 13,0 Hz, 1H), 1,60-1,41 (m, 1H)
Ejemplo 59 (Esquema T) - (+/-)-(1S,2S,3S,5R)-3-metoxi-5-(4-metil-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)ciclopentano-1.2- diol (T-5) (referencia)
Ejemplo 60 (Esquema T) - (1S,2S,3S,5R)-3-metoxi-5-(4-metil-7H-pirrolo[2,3-d]pmmidm-7-il)ciclopentano-1,2-diol (T-6) (referencia)
Ejemplo 61 (Esquema T) - (1R,2R,3R,5S)-3-metoxi-5-(4-metil-7H-pirrolo[2,3-d]pmmidm-7-il)ciclopentano-1,2-diol (T-7) (referencia)
Figure imgf000074_0001
Paso 1: (+/-)-(3aR,4S,6R,6aS)-6-((5-bromo-6-metilpirimidin-4-il)amino)-2,2-dimetiltetrahidro-4H-ciclopenta[d][1,3]dioxol-4-ol. (T-2)
Una mezcla de (+/-)-(3aR,4S,6R,6aS)-6-amino-2,2-dimetiltetrahidro-4H-cidopenta[d][1,3]dioxol-4-ol (T-1) (786 mg, 4,54 mmol), 5-bromo-4-doro-6-metilpirimidina (1,04 g, 4,99 mmol) y trimetilamina (0,822 ml, 5,9 mmol) en etanol (9,0 ml, 0,5 M) se calentó a 80 °C durante 20 horas. La mezcla de reacción cruda se concentró hasta obtener un sólido y luego se purificó por cromatografía en gel de sílice con un gradiente de 0 % a 100 % de EtOAc en heptano para dar T-2 como sólido blanco, 1,35 g (87 % de rendimiento).
LCMS-ESI(+): MH+=344/346, 1HRMN (400MHz, METANOL-d4) 8 ppm 8,29 (s, 1H), 4,60 (d, J=6,4 Hz, 1H), 4,56-4,52 (m, 1H), 4,51 - 4,47 (m, 1H), 4,22 (d, J=3,9 Hz, 1H), 2,33 - 2,23 (m, 1H), 1,76 (d, J=14,2 Hz, 1H), 1,41 (s, 3H), 1,27 (s, 3H).
Paso 2: Síntesis de (+/-)-(3aR,4S,6R,6aS)-6-((5-((E)-2-etoxivinil)-6-metilpirimidin-4-il)amino)-2,2-dimetiltetrahidro-4H-ciclopenta[d][1,3]dioxol-4-ol. (T-3)
A una solución de T-2 (2,06 g, 5,98 mmol) y (E)-2-(2-etoxivinilo)-4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolano (1,19 g, 5,98 mmol) en dioxano (19,9 ml, 0,3 M) se enjuagó al vacío con nitrógeno y luego se añadió carbonato sódico 2N (ac.) (8,98 ml) seguido del precatalizador S-Phos (136 mg, 0,180 mmol). La mezcla resultante se calentó a 80 °C durante 23 horas. La mezcla de reacción se enfrió a r.t. y se diluyó con EtOAc y agua. La capa orgánica se lavó con salmuera, se secó con Na2SO4, se filtró y se concentró hasta obtener un aceite que se purificó por cromatografía en gel de sílice eluyendo con un gradiente de 0 % a 100 % de EtOAc en heptano para dar T-3 como un sólido blanco, 1,21 g (rendimiento del 60 %).
LCMS-ESI(+): MH+=336, 1HRMN (400MHz, DMSO-d6) 8 ppm 8,23 (s, 1H), 6 , 6 6 (d, J=13,2 Hz, 1H), 6,38 (d, J=8,6 Hz, 1H), 5,63 (d, J=2,4 Hz, 1H), 5,32 (d, J=13,2 Hz, 1H), 4,50 - 4,33 (m, 3H), 4,07 (s. br, 1H), 3,87 (q, J=6,9 Hz, 2H), 2,24 (s, 3H), 2,12 (td, J=5,2, 13,6 Hz, 1H), 1,62 (d, J=13,9 Hz, 1H), 1,34 (s, 3H), 1,25 (t, J=7,0 Hz, 3H), 1,18 (s, 3H)
Paso 3: Síntesis de (+/-)-7-((3aS,4R,6S,6aR)-6-metoxi-2,2-dimetiltetrahidro-4H-ciclopenta[d][1,3]dioxol-4-il)-4-metil-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidina. (T-4)
Una mezcla de (+/-)-(3aR,4S,6R,6aS)-6-((5-((E)-2-etoxivinil)-6-metilpirimidin-4-il)amino)-2,2-dimetiltetrahidro-4H-ciclopenta[d][1,3]dioxol-4-ol (111 mg, 0,331 mmol) y ácido trifluoroacético (127 ul, 1,65 mmol) en acetona (3,31 ml, 0,1 M) se calentó a 60 °C durante 43 horas. La mezcla de reacción se concentró hasta obtener un aceite y luego se sometió a azeotropía con tolueno. El aceite crudo se disolvió en acetona (3,31 ml) y luego se añadió DMP (81 ul, 0,662 mmol) y PTSA (3,1 mg, 0,016 mmol). La mezcla se agitó a r.t. durante 48 horas. La mezcla de reacción se concentró hasta obtener un aceite y se volvió a disolver en EtOAc. La capa de EtOAc se lavó con NaHCO3(ac.) saturado, salmuera, se secó con Na2SO4, se filtró y se concentró hasta obtener un aceite. La mezcla cruda se purificó mediante cromatografía en gel de sílice eluyendo un gradiente de 0 % a 100 % de EtOAc en heptano para dar(3aR,4S,6R,6aS) 2,2-dimetil-6-(4-metil-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)tetrahidro-4H-cidopenta[d][1,3]dioxol-4-ol como sólido blanco, 76 mg (79 % de rendimiento, 80 % de pureza).
A una suspensión de (3aR,4S,6R,6aS)-2,2-dimetil-6-(4-metil-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)tetrahidro-4H-ciclopenta[d][1,3]dioxol-4-ol (76 mg, 80 % de pureza) en 2-metil-tetrahidrofurano (1ml) a r.t. se añadió hidruro de sodio al 60 % (26 mg). Después de 15 minutos se añadió yoduro de metilo (200 ul). Después de 1 hora se añadió más yoduro de metilo (200 ul) y la mezcla se agitó a r.t. durante 3 horas más. La mezcla de reacción se inactivó con cloruro de amonio saturado (ac.) y se extrajo con EtOAc. La capa de EtOAc se lavó con salmuera, se secó con Na2SO4, se filtró y se concentró hasta obtener un aceite. El aceite crudo se purificó mediante cromatografía en gel de sílice eluyendo con un gradiente de 0 % a 100 % de EtOAc en heptano para dar (+/-)-7-((3aS,4R,6S,6aR)-6-metoxi-2,2-dimetiltetrahidro-4H-ciclopenta[d][1,3]dioxol-4-il)-4-metil-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidina como un aceite incoloro, 39 mg (39 % de rendimiento).
LCMS-ESI(+): MH+=304, 1HRMN (400MHz, CLOROFORMO-d) 8 ppm 8,77 (s, 1H), 7,43 (d, J=3,7 Hz, 1H), 6,53 (d, J=3,7 Hz, 1H), 5,30 (ddd, J=2,6, 5,3, 7,8 Hz, 1H), 4,84 (dd, J=2,1, 6,2 Hz, 1H), 4,71 (d, J=6,4 Hz, 1H), 3,94 (t, J=4,2 Hz, 1H), 3,41 (s, 3H), 2,80-2,65 (m, 4H), 2,24 (td, J=4,6, 14,5 Hz, 1H), 1,54 (s, 3H), 1,30 (s, 3H).
Paso 4: Síntesis de (+/-)-(1S,2S,3S,5R)-3-metoxi-5-(4-metil-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)ciclopentano-1,2-diol (T-5), (1S,2S,3S,5R)-3-metoxi-5-(4-metil-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)ciclopentano-1,2-diol (T-6) y (lR,2R,3R,5S)-3-metoxi-5-(4-metil-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)ciclopentano-1,2-diol (T-7).
Una mezcla de T-4 (39 mg, 0,13 mmol) y TFA acuoso al 50 % (800 ul) se calentó a 60 °C durante 2 horas. La mezcla de reacción se concentró hasta obtener un aceite y luego se purificó por SFC (columna 3HOP) para dar (+/-)-(1S,2S,3S,5R)-3-metoxi-5-(4-metil-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)ciclopentano-1,2-diol (T-5) como un sólido blanco, 25 mg (rendimiento del 75 %).
T-5: LCMS-APCI(+): MH+=264, 1HRMN (400MHz, CLOROFORMO-d) 8 ppm 8,61 (s, 1H), 7,31 (d, J=3,7 Hz, 1H), 6,59 (d, J=3,4 Hz, 1H), 4,95 (q, J=8 , 6 Hz, 1H), 4,54 - 4,39 (m, 1H), 4,23 (d, J=4,9 Hz, 1H), 3,87 (t, J=5,4 Hz, 1H), 3,47 (s, 3H), 2,98-2,81 (m, 1H), 2,71 (s, 3H), 2,09 (ddd, J=5,1, 9,0, 13,8 Hz, 1H).
T-5 se resolvió mediante SFC quiral (columna Lux Cellulose-4 4,6 x 100 mm 3u, 30 % MeOH/DEA @ 120 bar, 4 ml/min) para dar (1S,2S,3S,5R)-3-metoxi-5-(4-metil-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)ciclopentano-1,2-diol (T-6) como sólido blanco, 6 mg (19 % de rendimiento).
T-6: LCMS-APCI(+): MH+=264,1HRMN (700MHz, DMSO-d6) 8 ppm 8,61 (s, 1H), 7,60 (d, J=3,5 Hz, 1H), 6,70 (d, J=3,5 Hz, 1H), 5,11 - 4,83 (m, 3H), 4,40-4,26 (m, 1H), 3,91 (s. br, 1H), 3,61 (t, J=4,8 Hz, 1H), 3,31 (s, 3H), 2,63 (s, 3H), 2,56 (td, J=8,0, 14,0 Hz, 1H), 1,77 (ddd, J=4,8, 9,1, 13,8 Hz, 1H) y (1R,2R,3R,5S)-3-metoxi-5-(4-metil-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)ciclopentano-1,2-diol (T-7) como sólido blanco, 6 mg (19 % de rendimiento).
T-7: LCMS-APCI(+): MH+=264, 1H RMN (700MHz, DMSO-d6) 8 ppm 8,61 (s, 1H), 7,60 (d, J=3,5 Hz, 1H), 6,70 (d, J=3,5 Hz, 1H), 5,07 - 4,92 (m, 3H), 4,38 - 4,25 (m, 1H), 3,91 (s. br, 1H), 3,66 - 3,52 (m, 1H), 3,31 (s, 3H), 2,63 (s, 3H), 2,56 (td, J=8,1, 13,8 Hz, 1H), 1,76 (ddd, J=4,6, 8,9, 13,8 Hz, 1H)
Ejemplo 62: (Esquema U) - (1S,2S,3S,5R)-3-(2-(ammometil)fenoxi)-5-(4-metil-7H-pirrolo[2,3-d]pinmidm-7-il)ciclopentano-1,2-diol (U-6) (referencia)
Ejemplo 63: (Esquema U) - (1R,2R,3R,5S)-3-(2-(aminometil)fenoxi)-5-(4-metil-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)ciclopentano-1,2-diol (U-7) (referencia)
Figure imgf000076_0001
Paso 1: Síntesis de 2-(((3aR,4S,6R,6aS)-6-((5-((E)-2-etoxivmM)-6-metMpinmidm-4-N)ammo)-2,2-dimetiltetrahidro-4H-cidopenta[d][1,3]dioxol-4-M)oxi)benzomtrMo. (U-1)
A una mezcla de T-3 (181 mg, 0,54 mmol) y 2-fluorobenzonitrilo (57,4 ul, 65,4 mg, 0,54 mmol) en THF (1,8 ml, 0,3 M) a r.t. se añadió hidruro de sodio al 60 % (45,3 mg, 1,13 mmol). Tras agitar durante 5 minutos, la mezcla de reacción se calentó a 70 °C durante 6 horas. La mezcla de reacción se enfrió a r.t. y se inactivó con NH4Cl(ac.) saturado, se diluyó con agua y se extrajo con EtOAc. La capa de EtOAc se lavó con salmuera, se secó con MgSO4 , se filtró y se concentró hasta obtener un aceite. El aceite crudo se purificó por cromatografía en gel de sílice eluyendo con 0-100 % de EtOAc-Heptano para dar U-1 como un aceite ámbar, 210 mg (89 % de rendimiento).
LCMS-ESI(+): MH+=437, 1HRMN (400MHz, CLOROFORMO-d) 8 ppm 8,48 (s, 1H), 7,68 - 7,49 (m, 2H), 7,19 - 6,98 (m, 2H), 6,47 (d, J=13,2 Hz, 1H), 5,45 (d, J=7,6 Hz, 1H), 5,41 (d, J=13,2 Hz, 1H), 4,82 - 4,69 (m, 4H), 3,86 (q, J=6 , 8 Hz, 2H), 2,70 (td, J=6,1, 15,0 Hz, 1H), 2,35 (s, 3H), 2,13 (d, J=15,2 Hz, 1H), 1,51 (s, 3H), 1,32 (s, 3H), 1,26 (t, J=7,0 Hz, 4H).
Paso 2: 2-(((3aR,4S,6R,6aS)-2,2-dimetN-6-(4-metN-7H-pirrolo[2,3-d]pmmidm-7-N)tetrahidro-4H-ciclopenta[d][1,3]dioxol-4-il)oxi)benzonitrilo. (U-2)
Una solución de U-1 (210 mg, 0,481 mmol en ácido acético (4,81 ml, 0,1 M) se calentó a 110 °C durante 19 horas. La mezcla de reacción se concentró hasta obtener un aceite y luego se purificó por cromatografía en gel de sílice eluyendo con 0-100 % de EtOAc-Heptano para dar U-2 como un cristal ámbar oscuro, 166 mg ( 88 % de rendimiento).
LCMS-ESI(+): MH+=391, 1HRMN (400MHz, CLOROFORMO-d) 8 ppm 8,79 (s, 1H), 7,69 (d, J=3,4 Hz, 1H), 7,65-7,51 (m, 2H), 7,13 (d, J=8 , 6 Hz, 1H), 7,07 (t, J=7,6 Hz, 1H), 6 , 6 6 (d, J=3,7 Hz, 1H), 5,48 (dd, J=3,2, 6 , 8 Hz, 1H), 5,01 (d, J=4,6 Hz, 1H), 4,95 (dd, J=2,7, 6,1 Hz, 1H), 4,86 (d, J=5,9 Hz, 1H), 3,06 (td, J=7,6, 14,7 Hz, 1H), 2,74 (s, 3H), 2,57 (d, J=14,9 Hz, 1H), 1,62 (s, 4H), 1,34 (s, 4H).
Paso 3: Síntesis de (2-(((3aR,4S,6R,6aS)-2,2-dimetil-6-(4-metil-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)tetrahidro-4H-ciclopenta[d][1,3]dioxol-4-il)oxi)fenil)metanamina (U-3)
A una mezcla de U-2 (139 mg, 0,356 mmol) en etanol (7,12 ml, 0,05 M) se le añadió NH4OH al 28 % (3 ml) y níquel Raney (70 mg, 1,2 mmol). La mezcla se hidrogenó a 0,344738 Mpa en una bomba de acero inoxidable durante 24 horas. La mezcla de reacción se filtró a través de Celite y luego el filtrado se concentró hasta obtener un aceite y se purificó por cromatografía en gel de sílice eluyendo con MeOH al 0-100 % en EtOAc para dar U-3 como un aceite incoloro, 81 mg (58 % de rendimiento).
LCMS-APCI(+): MH+=395, 1HRMN (400MHz, METANOL-d4) 8 ppm 8,64 (s, 1H), 7,62 (d, J=3,7 Hz, 1H), 7,34 - 7,23 (m, 2H), 7,12 (d, J=8 , 6 Hz, 1H), 6,96 (t, J=7,5 Hz, 1H), 675 (d, J=3,7 Hz, 1H), 5,28 (dt, J=3,5, 7,0 Hz, 1H), 5,19 (dd, J=3,4, 6,4 Hz, 1H), 4,94 (d, J=6,4 Hz, 1H), 4,87 (t, J=5,9 Hz, 1H), 3,72 (s. br, 2H), 2,95 (td, J=7,0, 14,1 Hz, 1H), 2,73 (s, 3H), 2,65 - 2,54 (m, 1H), 1,60 (s, 3H), 1,35 (s, 3H).
Paso 4: Síntesis de (2-(((1S,2S,3S,4R)-2,3-dihidroxi-4-(4-metil-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidm-7-il)ciclopentil)oxi)bencil)carbamato de tert-butilo (U-4) y (2-(((1R,2R,3R,4S)-2,3-dihidroxi-4-(4-metil-7H-pirimidm-7-il)ciclopentil)oxi)carbamato de bencilo (U-5)
Una solución del U-3 (81 mg, 0,21 mmol) en TFA (ac.) al 50 % (600 ul) se agitó a r.t. durante 16 horas. A continuación, la mezcla de reacción se concentró hasta obtener un aceite. Una mezcla del aceite crudo y Boc2O (30,8 mg, 1,41 mmol) en DCM 30,8 mg, 0,141 mmol) se agitó a r.t. durante 6 horas. La mezcla de reacción se concentró y luego se purificó por cromatografía en gel de sílice eluyendo con 40 a 100 % de EtOAc en heptano y luego 0-20 % de MeOH en EtOAc para dar una mezcla racémica de U-4 y U-5 como un aceite incoloro, 73 mg. Los enantiómeros se separaron por SFC quiral (columna Chiralpak IC-34,6 x 100 mm 3u, 30 % MeOH @ 120 bar, 4 ml/min) para dar U-4 (25,4 mg, 40 % de rendimiento) y U-5 (24,4 mg, 38 % de rendimiento) como sólidos blancos.
U-4 : LCMS-ESI(+): MH+=455, 1HRMN (400MHz, METANOL-d4) 6 ppm 8,52 (s, 1H), 7,51 (s. br, 1H), 7,23 - 7,09 (m, 2H), 6,92 (d, J=8,1 Hz, 1H), 6,84 (t, J=7,5 Hz, 1H), 6,64 (d, J=3,7 Hz, 1H), 5,15 (q, J=8 , 6 Hz, 1H), 4 ,67-4,58 (m, 2H), 4,34 - 4,15 (m, 2H), 4,11 (d, J=4,4 Hz, 1H), 2,90 (ddd, J=7,3, 9,4, 14,5 Hz, 1H), 2,61 (s, 3H), 2 ,24-2 ,08(m , 1H), 1,33 (s, 9H). [a]D22= 61,3° (c=0,1, MeOH).
U-5: LCMS-ESI(+): MH+=455, 1HRMN (400MHz, METANOL-d4) 6 ppm 8,62 (s, 1H), 7,61 (s. br, 1H), 7,33 - 7,17 (m, 2H), 7,02 (d, J=8,1 Hz, 1H), 6,94 (t, J=7,3 Hz, 1H), 6,74 (d, J=3,7 Hz, 1H), 5,25 (q, J=9,0 Hz, 1H), 4,74 (d, J=7,1 Hz, 2H), 4,43 - 4,25 (m, 2H), 4,21 (d, J=4,4 Hz, 1H), 3,00 (ddd, J=7,3, 9,5, 14,7 Hz, 1H), 2,71 (s, 3H), 2,38 - 2,12 (m, 1H), 1,43 (s, 9H). [a]D22= - 86,1° (c=0,1, MeOH)
Paso 5: Síntesis de (1S,2S,3S,5R)-3-(2-(ammometil)fenoxi)-5-(4-metil-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidm-7-il)ciclopentano-1,2-diol (U-6)
Una mezcla de U-4 (24 mg, 0,053 mmol) y ácido trifluoroacético (120 mg, 1,06 mmol) en DCM (0,176 ml, 0,3 M) se agitó a t.r. durante 3 horas y luego se concentró hasta obtener un aceite y se purificó por SFC (columna ZymorSpher Pyridine Diol 150 x 21,2 mm con 20-40 % MeOH @ 5 %/min, 100 bar, 60 ml/min.) para dar U-6 como un sólido blanco, 6,54 mg (35 % de rendimiento).
LCMS-APCI(+): MH+=355, 1H RMN (700MHz, DMSO-d6) 6 ppm 8,62 (s, 1H), 7,66 (d, J=2,2 Hz, 1H), 7,37 (d, J=7,0 Hz, 1H), 7,28 (t, J=7,5 Hz, 1H), 7,07 (d, J=7,9 Hz, 1H), 6,96 (t, J=7,0 Hz, 1H), 6,72 (d, J=2,6 Hz, 1H), 5,12 (q, J=8 , 8 Hz, 1H), 4,61 (d, J=3,1 Hz, 1H), 4,06 (s. br, 1H), 2,94 - 2,75 (m, 1H), 2,64 (s, 3H), 2,03 (t, J=9,7 Hz, 1H)
Paso 6: Síntesis de (1R,2R,3R,5S)-3-(2-(ammometil)fenoxi)-5-(4-metil-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidm-7-il)ciclopentano-1,2-diol (U-7)
U-7 se preparó de manera similar a U-6 partiendo de U-5 para dar un sólido blanco, 9 mg (rendimiento del 50 %).
LCMS-APCI(+): MH+=355, 1H RMN (700MHz, DMSO-d6) 6 ppm 8,63 (s, 1H), 7,66 (d, J=3,5 Hz, 1H), 7,39 (d, J=7,5 Hz, 1H), 7,36 (t, J=7,7 Hz, 1H), 7,13 (d, J=8,4 Hz, 1H), 7,00 (t, J=7,5 Hz, 1H), 6,72 (d, J=3,5 Hz, 1H), 5,19 - 5,04 (m, 2H), 4,63 (d, J=4,4 Hz, 2H), 4,08 (d, J=4,4 Hz, 1H), 4,06 (s, 2H), 2,87 (td, J=8,3, 14,2 Hz, 1H), 2,64 (s, 3H), 2,06 (ddd, J=4,0, 9,5, 13,9 Hz, 1H)
Ejemplo 64 (Esquema V) - 2-(((1S,2S,3S,4R)-2,3-dihidroxi-4-(4-metil-7H-pirromidm-7-il)ciclopentil)oxi)benzomtrilo (V-1) (referencia)
Ejemplo 65 (Esquema V) - 2-(((1R,2R,3R,4S)-2,3-dihidroxi-4-(4-metil-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)ciclopentil)oxi)benzonitrilo (V-2) (referencia)
Figure imgf000077_0001
Paso 1: Síntesis de 2-(((1S,2S,3S,4R)-2,3-dihidroxi-4-(4-metil-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)ciclopentil)oxi)benzonitrilo (V-1) y 2-(((1R,2R,3R,4S)-2,3-dihidroxi-4-(4-metil-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)ciclopentil)oxi)benzonitrilo (V-2)
V-1 (9,5 mg, 47 % de rendimiento) y V-2 (9,4 mg, 47 % de rendimiento) se prepararon a partir de U-2 de forma similar al paso 5 del Esquema U
. V-1: LCMS-ESI(+): MH+=351, 1HRMN (400MHz, METANOL-d4) 5 ppm 8 , 68 (s. br, 1H), 7,75 (d, J=3,7 Hz, 1H), 7,71 - 7,60 (m, 2H), 7,30 (d, J=8 , 6 Hz, 1H), 7,12 (t, J=7,6 Hz, 1H), 6,82 (d, J=3,7 Hz, 1H), 5,36 (q, J=8,5 Hz, 1H), 4,89 (d, J=6,1 Hz, 1H), 4,71 (dd, J=4,6, 8,3 Hz, 1H), 4,23 (d, J=4,2 Hz, 1H), 3,16 - 3,01 (m, 1H), 2,75 (s, 3H), 2,18 (ddd, J=2,4, 7,6, 14,7 Hz, 1H).
V-2: LCMS-ESI(+): MH+=351, 1HRMN (400MHz, METANOL-d4) 5 ppm 8,73 (s. br, 1H), 7,79 (d, J=3,7 Hz, 1H), 7,72 -7,61 (m, 1H), 7,31 (d, J=8 , 6 Hz, 1H), 7,12 (t, J=7,6 Hz, 1H), 6,87 (d, J=3,7 Hz, 1H), 5,43 - 5,31 (m, 1H), 4,90 (d, J=5,9 Hz, 1H), 4,72 (dd, J=4,6, 8 , 6 Hz, 1H), 4,23 (d, J=4,4 Hz, 1H), 3,16 - 3,01 (m, 1H), 2,77 (s, 2H), 2,19 (ddd, J=2,3, 7,6, 14,8 Hz, 1H)
Ejemplo 66 (Esquema W) -(1S,2S,3S,5R)-3-(2-(ammometN)-4-fluorofenoxi)-5-(4-metN-7H-pirrol[2,3-d]pirimidm-7-il)ciclopentano-1,2-diol (W-5) (referencia)
Ejemplo 67 (Esquema W) -(1R,2R,3R,5S)-3-(2-(ammometN)-4-fluorofenoxi)-5-(4-metN-7H-pirrol[2,3-d]pirimidm-7-il)ciclopentano-1,2-diol. (W-6) (referencia)
Figure imgf000078_0001
Paso 1: Síntesis de (3aR,4S,6R,6aS)-2,2-dimetN-6-(4-metN-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidm-7-N)tetrahidro-4H-ciclopenta[d][1,3]dioxol-4-ol (W-1)
Una mezcla de T-3 (111 mg, 0,331 mmol) y ácido trifluoroacético (127 ul, 1,65 mmol) en acetona (3,31 ml, 0,1 M) se calentó a 60 °C durante 43 horas. La mezcla de reacción se concentró hasta obtener un aceite y luego se disolvió en EtOAc. La capa de EtOAc se lavó con NaHCO3(ac.) saturado, salmuera, se secó con Na2SO4 , se filtró y se concentró hasta obtener un aceite. La mezcla cruda se purificó por cromatografía en gel de sílice eluyendo un gradiente de 0 % a 100 % de EtOAc en heptano para dar W-1 como un sólido blanco, 76 mg (79 % de rendimiento, 80 % de pureza).
Paso 1: Síntesis de 2-(((3aR,4S,6R,6aS)-2,2-dimetN-6-(4-metN-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidm-7-N)tetrahidro-4H-ciclopenta[d][1,3]dioxol-4-il)oxi)-5-fluorobenzonitrilo (W-2)
A una mezcla de W-1 (67,1 mg, 0,2 mmol) y 2,5-difluorobenzonitrilo (55,0 mg, 0,395 mmol, 55,0 uL) en THF (1,01 ml, c=0,3 M) a r.t. se añadió hidruro de sodio al 60 % (24,3 mg, 0,608 mmol). Después de agitar durante 3 minutos, la mezcla de reacción se calentó a 70 °C durante 6 horas y se inactivó con NH4Cl(ac.) saturado y se diluyó con EtOAc y agua. La capa de EtOAc se lavó con salmuera, se secó con Na2SO4 filtrado y se concentró hasta obtener un aceite. El aceite se purificó por cromatografía en gel de sílice eluyendo con 0-100 % de EtOAc en heptano para dar W-2 como una espuma blanca, 101 mg (81 % de rendimiento).
LCMS-ESI(+): MH+=409, 1H RMN (400 MHz, CLOROFORMO-d) 5 ppm 1,34 (s, 3 H) 1,61 (s, 3 H) 2,59 (d, J=15,41 Hz, 1 H) 2,78 (s, 3 H) 3,05 (dt, J=15,16, 7,34 Hz, 1 H) 4,84 (d, J=6,36 Hz, 1 H) 4,86 - 4,92 (m, 1 H) 5,04 (d, J=4,40 Hz, 1 H) 5,35- 5,53 (m, 1 H) 6 , 6 8 (d, J=3,18 Hz, 1 H) 7,11 (dd, J=9,78, 3,67 Hz, 1 H) 7,32 (d, J=7,58 Hz, 2 H) 7,66 (s. br, 1 H) 8,80 (s, 1 H).
Paso 2: Síntesis de (2-(((1S,2S,3S,4R)-2,3-dihidroxi-4-(4-metM-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidm-7-N)cidopentM)oxi)-5-fluorobencil)carbamato de tert-butilo (W-3) y (2-(((1R,2R,3R,4S)-2,3-dihidroxi-4-(4-metil-7H-pirimidin-7-il)ciclopentil)oxi)-5-fluorobencil)carbamato (W-4)
A una mezcla de W-2 (101 mg, 0,247 mmol) en etanol (7,0 ml) se le añadió hidróxido de amonio al 28 % (3,0 ml) y níquel Raney (70 mg, 1,2 mmol).La mezcla se hidrogenó a 0,344738 Mpa en una bomba de acero inoxidable durante 24 horas. La mezcla de reacción se filtró a través de Celite y luego se concentró hasta formar espuma.
A esta amina cruda se añadió anhídrido de boc (54 mg, 0,247 mmol) en DCM (3 ml, 0,3 M) y se agitó a r.t. durante 2 horas. Se concentró hasta formar espuma y se purificó por cromatografía en gel de sílice para dar una mezcla racémica de W-3 y W-4 como aceite incoloro, 104 mg de rendimiento del 982 %). Los enantiómeros se separaron por SFC quiral (columna Chiralpak AS-34,6 x 100 mm 3u, 8 % MeOH 10mM NH3 @ 120 bar, 4 ml/min) para dar W-3 (34,2 mg, 27 % de rendimiento) y W-4 (35,9 mg, 28 % de rendimiento) como sólidos blancos.
W-3: LCMS-ESI(+): MH+=513, 1HRMN (400MHz, CLOROFORMO-d) 5 ppm 8 , 86 - 8,76 (m, 1H), 7,45 (s. br., 1H), 7,02 (d, J=8 , 6 Hz, 1H), 6,95 (d, J=5,1 Hz, 2H), 6,67 (d, J=3,2 Hz, 1H), 5,35 (s. br, 1H), 5,07 (d, J=3,7 Hz, 1H), 4,89 - 4,71 (m, 3H), 4,21 (s. br, 1H), 2,98 (td, J=7,2, 14,7 Hz, 1H), 2,81 (s, 3H), 2,54 (d, J=15,2 Hz, 1H), 1,61 (s, 3H), 1,50 - 1,38 (m, 10H), 1,34 (s, 3H), [a]D22= 28,2° (c=0,1, MeOH)
W-4: LCMS-ESI(+): MH+=513 -80 % de pureza.
Paso 3: Síntesis de (1S,2S,3S,5R)-3-(2-(ammometil)-4-fluorofenoxi)-5-(4-metil-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidm-7-il)ciclopentano-1,2-diol. (W-5)
Una mezcla de W-3 (34 mg, 0,066 mmol) en una mezcla de TFA(ac.) al 50 % (0,4 ml) se agitó a r.t. durante 3 horas, luego se concentró y se purificó por SFC (columna ZymorSpher Pyridine Diol 150 x 21,2mm con 20-40 % MeOH @ 5 %/min, 100 bar, 60 ml/min.) para dar W-5 como un sólido blanco, 16,5 mg (67 % de rendimiento).
LCMS-ESI(+): MH+=373, 1HRMN (400MHz, DMSO-d6) 5 ppm 8,63 (s, 1H), 7,65 (d, J=3,7 Hz, 1H), 7,28 (dd, J=2,6, 9,2 Hz, 1H), 7,21 - 7,03 (m, 2H), 6,72 (d, J=3,4 Hz, 1H), 5,19 - 4,98 (m, 2H), 4,69 - 4,48 (m, 2H), 4,06 (d, J=4,6 Hz, 1H), 4.00 (s, 2H), 2 ,95-2,76 (m, 1H), 2,64 (s, 3H), 2,04 (ddd, J=4,0, 9,5, 13,8 Hz, 1H)
Paso 4: Síntesis de (1R,2R,3R,5S)-3-(2-(ammometil)-4-fluorofenoxi)-5-(4-metil-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidm-7-il)ciclopentano-1,2-diol. (W-6)
W-6 se preparó a partir de W-4 de forma similar al paso 3 del Esquema W para dar un sólido blanco, 17,2 mg (rendimiento del 70 %).
LCMS-ESI(+): MH+=373, 1HRMN (400MHz, DMSO-d6) 5 ppm 8,63 (s, 1H), 7,65 (d, J=3,7 Hz, 1H), 7,28 (dd, J=2,6, 9,2 Hz, 1H), 7,21 - 7,07 (m, 2H), 6,72 (d, J=3,4 Hz, 1H), 518 - 5,02 (m, 2H), 4,69 - 4,54 (m, 2H), 4,06 (d, J=4,6 Hz, 1H), 4.01 (s, 2H), 2 ,94-2,74 (m, 1H), 2,64 (s, 3H), 2,04 (ddd, J=4,2, 9,5, 13,7 Hz, 1H).
Ejemplo 68 (Esquema X) - 2-(((1S,2S,3S,4R)-2,3-dihidroxi-4-(4-metil-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)ciclopentil)oxi)-5-fluorobenzomtrilo (X-2) (referencia)
Ejemplo 69 (Esquema X) - 2-(((1R,2R,3R,4S)-2,3-dihidroxi-4-(4-metil-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)ciclopentil)oxi)-5-fluorobenzonitrilo (X-3) (referencia)
Esquemax
Figure imgf000079_0001
Paso 1: Síntesis de 2-(((3aR,4S,6R,6aS)-6-((5-((Z)-2-etoxiviml)-6-metilpirimidm-4-il)ammo)-2,2-dimetiltetrahidro-4H-ciclopenta[d][1,3]dioxol-4-il)oxi)-5-fluorobenzonitrilo. (X-1)
Una mezcla de T-3 (67,1 mg, 0,2 mmol) y O-fluorobenzonitrilo (25,5 ul, 0,240 mmol) en THF (0,67 ml, 0,3 M) a r.t. se añadió hidruro de sodio al 60 % (16,8 mg, 0,42 mmol). A continuación, la mezcla se calentó a 70 °C en un reactor de microondas durante 30 minutos. La mezcla de reacción se inactivó con NH4Cl(ac.) saturado, se diluyó con agua y se extrajo con EtOAc. El EtOAc se lavó con salmuera, se secó con Na2SO4 , se filtró y se concentró hasta obtener un aceite que se purificó por cromatografía en gel de sílice eluyendo con 0-100 % de EtOAc/Heptano para dar X-1 como un aceite ámbar, 58 mg (64 % de rendimiento).
LCMS-ESI(+): MH+=455, 1HRMN (400MHz, CLOROFORMO-d) 5 ppm 8,47 (s, 1H), 7,35 - 7,28 (m, 2H), 7,16 - 7,06 (m, 1H), 6,47 (d, J=13,2 Hz, 1H), 5,43 (d, J=7,3 Hz, 1H), 5,39 (d, J=13,2 Hz, 1H), 4,81 - 4,65 (m, 4H), 3,87 (q, J=7,0 Hz, 2H), 2,69 (td, J=6,1, 14,9 Hz, 1H), 2,34 (s, 3H), 2,11 (d, J=14,9 Hz, 1H), 1,50 (s, 3H), 1,31 (s, 2H), 1,27 (t, J=7,0 Hz, 3H).
Paso 2: Síntesis de 2-(((1S,2S,3S,4R)-2,3-dihidroxi-4-(4-metil-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidm-7-il)ciclopentil)oxi)-5-fluorobenzonitrilo (X-2) y 2-(((1R,2R,3R,4S)-2,3-dihidroxi-4-(4-metil-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)ciclopentil)oxi)-5-fluorobenzonitrilo (X-3)
Una mezcla de X-1 (58 mg, 0,13 mmol) y HCl(ac.) 1N (255 ul, 0,255 mmol) en 1,4-dioxano (0,382 ml, 0,15 M) se agitó a r.t. durante 24 horas. Se añadió ácido trifluoroacético (200 ul) y la mezcla se agitó a r.t. durante 48 horas y luego se calentó a 60 °C durante 6 horas. La mezcla de reacción se concentró hasta obtener un aceite y luego se sometió a partición entre EtOAc y y agua. Se añadió NaHCO3(ac.) saturado y la capa de EtOAc se lavó con salmuera, se secó con Na2SO4 , se filtró y se concentró hasta obtener un sólido blanco, 44 mg. Los enantiómeros se separaron por SFC quiral (columna Lux Cellulose- 2 4,6 x 10 0 mm 3u, 30 % MeOH @ 120 bar, 4 ml/min) para dar X-2 (17 mg, 36 % de rendimiento) y X-3 (16,2 mg, 35 % de rendimiento) como sólidos blancos.
X-2: LCMS-ESI(+): MH+=369, 1HRMN (400MHz, DMSO-da) 8 ppm 8,64 (s, 1H), 7,79 (dd, J=3,1, 8,2 Hz, 1H), 7,70 (d, J=3,4 Hz, 1H), 7,65-7,51 (m, 2H), 7,40 (dd, J=4,2, 9,3 Hz, 1H), 6,76 (d, J=3,4 Hz, 1H), 5,41 (s. br, 1H), 5,15 (q, J=8,9 Hz, 1H), 4,77 (s. br., 1H), 4,53 (s. br., 1H), 4,05 (s. br., 1H), 2,97 - 2,75 (m, 1H), 2,65 (s, 3H), 2,11 - 1,93 (m, 1H), [a]D22= 47,3° (c=0,1, MeOH).
X-3: LCMS-ESI(+): MH+=369, 1HRMN (400MHz, METANOL-d4) 8 ppm 7,72 (d, J=3,4 Hz, 1H), 7,51 (dd, J=2,9, 7,6 Hz, 1H), 7,47 - 7,38 (m, 1H), 7,32 (dd, J=4,0, 9,2 Hz, 1H), 6,80 (d, J=3,4 Hz, 1H), 5,33 (q, J=8 , 6 Hz, 1H), 4,85 (s. br, 1H), 4,71 (dd, J=4,8, 8,2 Hz, 1H), 4,22 (d, J=3,9 Hz, 1H), 3,12-2,97 (m, 1H), 2,74 (s. br., 3H), 2 ,26-2,12 (m, 1H), [a]D22= -53,5° (c=0,1, MeOH).
Ejemplo 70 (Esquema Y) - 2-(((1S,2S,3S,4R)-2,3-dihidroxi-4-(4-metil-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidm-7-il)ciclopentil)oxi)-5-fluorobenzamida (Y-3) (referencia)
Figure imgf000080_0001
Paso 1 - Síntesis de 2-((3aR,4S,6R,6aS)-2,2-dimetil-6-(4-metil-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidm-7-il)tetrahidro-4H-ciclopenta[d][1,3]dioxol-4-il)oxi)-5-fluorobenzonitrilo (Y-1)
A una suspensión de X-2 (4 g, 9,8 mmol) en dimetoxipropano (60 ml)/DMF (20 ml) se añadió TsOH.H2O (2990 mg, 15,75 mmol) a rt (20 °C). La solución resultante se agitó a rt (20 °C) durante 24 horas. La mezcla se purificó directamente por cromatografía en gel de sílice eluyendo con EtOAc en éter de petróleo de 0 a 100 % para obtener Y-1 (2,2 g, 55 %) como un sólido blanco. LCMS 409 [M+1]; 1HRMN (400 MHz, CDCla) 8 ppm 8,77 (s, 1H), 7,60 (d, J=3,8 Hz, 1H), 7,33 - 7,25 (m, 2H), 7,15 - 7,06 (m, 1H), 6,63 (d, J=3,5 Hz, 1H), 5,44 (ddd, J=2,5, 5,0, 7,8 Hz, 1H), 5,02 (dd, J=2,3, 6,0 Hz, 1H), 4,90 - 4,85 (m, 1H), 4,82 (d, J=6,3 Hz, 1H), 3,04 (ddd, J=6 ,8 , 8,0, 15,1 Hz, 1H), 2,72 (s, 3H), 2,63 - 2,53 (m, 1H), 1,60 (s, 3H), 1,33 (s, 3H)
Paso 2 - Síntesis de 2-((3aR,4S,6R,6aS)-2,2-dimetil-6-(4-metil-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)tetrahidro-4H-ciclopenta[d][1,3]dioxol-4-il)oxi)-5-fluorobenzamida (Y-2)
A una solución de Y-1 (50 mg, 0,12 mmol) en DMSO (0,25 ml) se añadió K2CO3 (20 mg, 0,15 mmol), seguido de H2O2 (0,25 ml) gota a gota en agua helada, luego la reacción se puede calentar a temperatura ambiente durante 2h, en la que se observó gas. A la mezcla de reacción se le añadió agua y se extrajo con EtOAc dos veces. La capa orgánica se secó sobre sulfato sódico, se filtró y el residuo se purificó por pre-TLC para dar Y-2 (36 mg, 69 %) y se utilizó tal cual en el siguiente paso.
Paso 3 - Síntesis de 2-(((1S,2S,3S,4R)-2,3-dihidroxi-4-(4-metil-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)ciclopentil)oxi)-5-fluorobenzamida (Y-3)
A una suspensión de Y-2 (42 mg, 0,1 mmol) en H2O (0,3 ml) se añadió TFA (0,3 ml) gota a gota a 0 °C. A continuación, la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente (20 °C) durante 16h. A continuación, se ajustó la reacción a pH 7 con K2CO3 al 20 %, en lal que se formó un sólido, se filtró y se lavó con agua y MTBE. El sólido se secó para dar Y-3 (32 mg, 84 %). LCMS 387 [M+1]; 1HRMN (400 MHz, MeOD-d4) 8 ppm 8,63 (s, 1H), 7,62-7,65 (m, 1H), 7,60 (d, J=3,8 Hz, 1H), 7,24-7,30 (m, 2H), 6,75 (d, J=3,5 Hz, 1H), 5,16 (q, J=8 , 8 Hz, 1H), 4,82-4,87 (m, 2H), 4,27 (d, J=4,8 Hz, 1H), 3,02 (ddd, J=14,6, 9,6, 7,4 Hz, 1H), 2,73 (s, 3H), 2,42 ppm (ddd, J=13,7, 9,2, 4,3 Hz, 1H)
Ejemplo 71 (Esquema Z) - (1S,2S,3S,5R)-3-(2-((dimetilammo)metil)-4-fluorofenoxi)-5-(4-metil-7H-pirrol[2,3-d]pirimidin-7-il)ciclopentano-1,2-diol (8) (referencia)
Figure imgf000081_0001
Paso 1 - Síntesis de (2-(((3aR,4S,6R,6aS)-2,2-dimetN-6-(4-metN-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidm-7-N)tetrahidro-4H-cidopenta[d][1,3]dioxol-4-M)oxi)-5-fluorofeml)metanamma (Z-1)
Una mezcla de Y-1 (500 mg, 1,22 mmol) y Ra-Ni (100 mg) en EtOH (30 ml)/NH3.H2O (3 ml) se desgasificó con H2 cuatro veces. La mezcla se agitó a rt (20 °C) bajo globo de H2 durante 20 horas y luego se dejó reposar a rt durante 20 horas. La mezcla se filtró y se concentró al vacío para obtener Z-1 (510 mg, >99 %) como una goma de color amarillo clara. LCMS [M+1] 413; 1HRMN (400 MHz, CDCh) 8 ppm 8,79 (s, 1H), 7,37 (d, J=3,5 Hz, 1H), 7,05 (dd, J=2,4, 8,7 Hz, 1H), 6,99 - 6 , 8 8 (m, 2H), 6,58 (d, J=3,8 Hz, 1H), 5,33 (ddd, J=2,6, 5,5, 8,0 Hz, 1H), 5,05 (dd, J=2,9, 6,1 Hz, 1H), 4,88 - 4,80 (m, 1H), 4,80 - 4,75 (m, 1H), 3,76 (s. br, 2H), 3,06 - 2,89 (m, 1H), 2,73 (s, 3H), 2,62 - 2,47 (m, 1H), 1,61 (s, 3H), 1,34 (s, 3H)
Paso 2 - Síntesis de 1-(2-((3aR,4S,6R,6aS)-2,2-dimetN-6-(4-metN-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidm-7-N)tetrahidro-4H-ciclopenta[d][1,3]dioxol-4-il)oxi)-5-fluorofenil)-N,N-dimetilmetanamina (Z-2)
Una mezcla de Z-1 (100 mg, 0,24 mmol), 37 % CH2O (59 mg, 0,73 mmol) y NaBHOAc3 (206 mg, 0,970 mmol) en THF (2 ml) se agitó a rt durante 2 h. La mezcla se vertió en NaHCO3 ac. (10 ml) y se extrajo con EtOAc (10 ml x 3). El extracto se lavó con salmuera (10 ml), se secó sobre Na2SO4 y se concentró al vacío para obtener Z-2 (100 mg, 94 %) como una goma incolora. LCMS 441 [M+1]; 1HRMN (400 MHz, CDCh) 8 ppm 8,79 (s, 1H), 7,49 (d, J=3,8 Hz, 1H), 7 ,14-7,08 (m, 1H), 7,01 - 6 , 8 6 (m, 2H), 6,55 (d, J=3,5 Hz, 1H), 5,37 (t, J=2,8 Hz, 1H), 5,02 (d, J=4,0 Hz, 1H), 4,83 (d, J=6,3 Hz, 1H), 4,77 (dd, J=3,3, 5,8 Hz, 1H), 3,33 (s, 2H), 2,97 (d, J=8,0 Hz, 1H), 2,73 (s, 3H), 2,54 (d, J=13,8 Hz, 1H), 2,23 (s, 6 H), 1,60 (s, 3H), 1,33 (s, 3H)
Paso 3 - Síntesis de (1S,2S,3S,5R)-3-(2-((dimetilamino)metil)-4-fluorofenoxi)-5-(4-metil-7H-pirrol[2,3-d]pirimidin-7-il)ciclopentano-1,2-diol (Z-3)
A TFA/H2O (1 ml/2 ml) se añadió Z-2 (100 mg, 0,23 mmol) a temperatura ambiente. La mezcla se agitó a rt durante 1 hora. La mezcla se vertió en K2CO3 al 20 % (10 ml). La mezcla se lavó saturada de NaCl y se extrajo con EtOAc/THF (20 ml/ 20 ml) dos veces. El extracto se lavó con concentrado al vacío. El residuo se disolvió en CH3CN/H2O (10 ml/ 50 ml) y se liofilizó para obtener Z-3 (70 mg, 77 %) como un sólido blanco. LCMS 404 [M+1]; 1HRMN (400 MHz, Dm SO-d6) 8 ppm 8,61 (s, 1H), 7,69 (d, J=3,8 Hz, 1H), 7,13 (d, J=8,5 Hz, 1H), 7,05 (d, J=5,5 Hz, 2H), 6,72 (d, J=3,5 Hz, 1H), 5,36 (s. br, 1H), 5,16-5,09 (m, 2H), 4,60-4,49 (m, 2H), 4,01 (d, J=3,3 Hz, 1H), 3,57- 3,48 (m, 1H), 3,44 (s. br., 1H), 2,90 - 2,78 (m, 1H), 2,63 (s, 3H), 2,23 (s, 6 H), 1,96 - 1,86 (m, 1H)
Ejemplo 72 (Esquema AA) - (1S,2S,3S,5R)-3-(4-fluoro-2-((metilamino)metil)fenoxi)-5-(4-metil-7H-pirrol[2,3-d]pirimidin-7-il)ciclopentano-1,2-diol (11) (referencia)
Figure imgf000081_0002
Paso 1 - Síntesis del (2-((3aR,4S,6R,6aS)-2,2-dimetil-6-(4-metil-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)tetrahidro-4H-ciclopenta[d][1,3]dioxol-4-il)oxi)-5-fluorobencil)carbamato de tert-butilo (AA-1)
A una solución de Z-1 (140 mg, 0,34 mmol) y Et3N (34 mg, 0,34 mmol) en DCM (5 ml) se añadió B0 C2O (74 mg, 0,34 mmol) a rt (20 °C). La mezcla se agitó a rt (20 °C) durante 1 hora. La mezcla se purificó por cromatografía en gel de sílice eluyendo con EtOAC en éter de petróleo de 0 a 100 % para obtener AA-1 (140 mg, 81 %) como un aceite incoloro. LCMS 513 [M+1]; 1HRMN (400 MHz, CDCh) 8 ppm 8,78 (s, 1H), 7,33 (s, 1H), 7,00 (d, J=8 , 8 Hz, 1H), 6,93 (d, J=5,2Hz, 2H), 6,58 (d, J=3,6Hz, 1H), 5,30-5,28 (m, 1H), 5,06-5,05 (m, 1H), 4,81 (d, J=6 Hz, 2H), 4,76-4,75 (m, 1H), 4,18 (d, J=3,2Hz, 1H), 2,98-2,90 (m, 1H), 2,71 (s, 3H), 2,54-2,50 (m, 1H), 1,55 (s, 3H), 1,44 (s, 9H), 1,24 (s, 3H)
Paso 2 - Síntesis de (2-((3aR,4S,6R,6aS)-2,2-dimetN-6-(4-metN-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidm-7-il)tetrahidro-4H-ciclopenta[d][1,3]dioxol-4-il)oxi)-5-fluorobencil)(metil)carbamato de tert-butilo (AA-2)
A una solución de AA-1 (140 mg, 0,27 mmol) en DMF seca (3 ml) se añadió NaH al 60 % (16,4 mg, 0,41 mmol) a rt (0 °C). La mezcla se agitó a rt (20 °C) durante 1 hora. CH3 l (56 mg, 0,4 mmol) se añadió a la mezcla y se agitó a rt (20 °C) durante 20 horas. La mezcla se vertió en NH4Cl ac. (10 ml) y se extrajo con EtOAc (5 ml x 3). El extracto se lavó con salmuera (5 ml), se secó sobre Na2SO4 y se concentró al vacío para obtener el material crudo (200 mg) como un aceite marrón que se purificó por cromatografía en gel de sílice eluyendo con EtOAc en éter de petróleo de 0 a 100 % para obtener a A-2 (100 mg, 70 %) como una goma incolora. LCm S 527 [M+1 ]
Paso 3 - Síntesis de (1S,2S,3S,5R)-3-(4-fluoro-2-((metNammo)metM)fenoxi)-5-(4-metil-7H-pirrol[2,3-d]pirimidm-7-il)ciclopentano-1,2-diol (AA-3)
A TFA/H2O (1 ml/2 ml) se añadió AA-2 (89 mg, 0,169 mmol) a temperatura ambiente. La mezcla se agitó a rt durante 2 horas y luego se vertió en K2CO3 ac. al 20 % (5 ml). La mezcla se extrajo con EtOAc (10 ml x 3). El extracto se lavó con salmuera (10 ml x 2), se secó sobre Na2SO4, se filtró y se concentró al vacío. El residuo se disolvió en CH3CN/H2O (4 ml/10 ml) y se liofilizó para obtener AA-3 (55 mg, 84 %) como un sólido blanco. LCMS 387 [M+1]; 1HRMN (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 8,62 (s, 1H), 7,67 (d, J=3,8 Hz, 1H), 7,23-7,14 (m, 1H), 7,08-6,98 (m, 2H), 6,73 (d, J=3,8 Hz, 1H), 5,12 (q, J=9,1 Hz, 2H), 4,57 (s. br, 2H), 4,02 (d, J=4,8 Hz, 1H), 3,71 (s, 2H), 2,92-2,77 (m, 1H), 2,65 (s, 3H), 2,34 (s, 3H), 2,03- 1,93 (m, 1H)
Ejemplo 73 (Esquema BB) - (1S,2S,3S,5R)-3-(4-fluorofenoxi)-5-(4-metN-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidm-7-il)ciclopentano-1,2-diol (BB-4) (referencia)
Figure imgf000082_0001
Paso 1: Síntesis de ferf-buf/7-((1S,4R)-4-(4-metN-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidm-7-N)ciclopent-2-en-1-N)-carbonato (BB-2)
Vial A: A un vial de reacción secado en horno, equipado con una barra de agitación magnética y enfriado bajo una corriente de argón, se añadió el aducto de Tris(bencilidenoacetona)dipaladio(0)cloroformo (78,7 mg, 0,0760 mmol) y el ligando ('S,Sj-DACH-naftilo Trost (MFCD02684552) (180 mg, 0,228 mmol). El vial se purgó con argón bajo vacío dinámico y DCE (7,5 ml), que había sido rociado con argón durante 30 minutos. La solución se agitó durante 30 minutos a rt, momento en el que se obtuvo una solución naranja brillante de catalizador ligado. En esta fase se preparó el vial B .
Vial B: A un vial de reacción secado en horno, equipado con una barra de agitación magnética y enfriado bajo una corriente de argón, se añadió 4-metil-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidina (HG-1) (506 mg, 3,8 mmol), di-tert-butil-((1R,3S)-ciclopent-4-ene-1,3-diil)-bis(carbonato) (BB-1) (preparado como se informa en J. Am. Chem. Soc. 2006, 128, 6054­ 6055) (1,37 g, 4,56 mmol), y carbonato de cesio (1,36 g, 4,18 mmol). El vial se purgó con argón bajo vacío dinámico y se añadió DCE (7,5 ml), que había sido rociado con argón durante 30 minutos, seguido de la adición del contenido del vial A mediante una jeringa hermética. La reacción se agitó bajo argón a rt durante 48 horas. La reacción se transfirió a un embudo separador con DCM. La solución se lavó con 2 porciones de agua y 1 porción de salmuera. Se utilizó una pequeña cantidad de HCl 1M para disipar la emulsión en el último lavado. La fase orgánica se secó (MgSO4), se filtró y se concentró al vacío. El residuo crudo se purificó mediante cromatografía en columna instantánea (40 g de SiO2 , Isco, 100 % de Hept. a 100 % de EtOAc, 20 ml de fracciones) para obtener el compuesto BB-2 (814 mg, 6 8 %, >99 % ee) como una goma marrón que se solidificó al reposar. LCMS [M+H] = 316 observado; LCMS quiral (columna Chiralcel OJ-34,6x100 mm 3|j, 4 % MeOH+10nM NH3 @ 120 bar, 4 ml/min) pico 1 @ 0,63 min., pico 2 @ 0,77 min, pico principal observado @ 0,65 min, 99,8:0,2 % por área MS; 1HRMN (400MHz, CLOROFORM0-d) 8 ppm 8,78 (s, 1H), 7,32 - 7,22 (m, 1H), 6,60 (d, J=3,7 Hz, 1H), 6,35 - 6,23 (m, 1H), 6,10 (d, J=5,4 Hz, 1H), 6,00 (s. br, 1H), 5,66 -5,57 (m, 1H), 3,21 - 3,07 (m, 1H), 2,75 (s, 3H), 1,89 (d, J=14,9 Hz, 1H), 1,57 - 1,46 (m, 9H).
Paso 2: Síntesis de 7-((1R,4S)-4-(4-fluorofenoxi)ciclopent-2-en-1-il)-4-metil-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidina (BB-3) En un vial de centelleo, equipado con una barra de agitación magnética, se añadió BB-2 (56,8 mg, 0,180 mmol), 4-fluorofenol (22,2 mg, 0,198 mmol), difenilfosfinopropano (dppp) (4,5 mg, 0,0108 mmol), aducto de tris(dibencilideneacetona)dipaladio(0)cloroformo (4,7 mg, 0,0045 mmol) y carbonato de cesio (64,6 mg, 0,198 mmol). El vial se purgó con argón bajo vacío dinámico, seguido de la adición de DCE (0,9 ml) que había sido rociado con argón durante 30 minutos. La reacción se agitó a rt bajo argón durante 2,5 horas. La reacción se tomó con DCM y se cargó directamente en una columna de sílice preempacada. El residuo crudo se purificó mediante cromatografía en columna instantánea (12g SiO2, Isco, 100 % Hept. a 100 % EtOAc, 9 ml de fracciones) para obtener el compuesto BB-3 (38,8 mg, 70 % de rendimiento) como una goma incolora. LCMS [M+H] = 310 observado; 1HRMN (400 MHz, CLOROFORMO-d) 5 ppm 8,77 (s, 1H), 7,34 (d, J=3,55 Hz, 1H), 6,92-7,04 (m, 2H), 6,80-6,92 (m, 2H), 6,57 (d, J=3,55 Hz, 1H), 6,37 (d, J=5,38 Hz, 1H), 6,14 (d, J=4,03 Hz, 1H), 5,97-6,09 (m, 1H), 5,17-5,34 (m, 1H), 3,02-3,18 (m, 1H), 2,56-2,91 (m, 3H), 1,97 (td, J=3,35, 14,70 Hz, 1H).
Paso 3: Síntesis de (1S,2S,3S,5R)-3-(4-fluorofenoxi)-5-(4-metN-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidm-7-N)ciclopentano-1,2-diol (BB-4)
A un vial de centelleo, equipado con una barra de agitación magnética y que contenía BB-3 (38,8 mg, 0,125 mmol), se añadió DCM (0,73 ml) y agua (0,03 ml). A la solución se le añadió óxido de 4-metilmorfolina (NMO) (44,1 mg, 0,376 mmol), seguido de la adición gota a gota de tetraóxido de osmio (32 pl, 0,005 mmol) como solución al 4 % en peso en agua. La reacción se agitó a rt durante 8 horas. La reacción se inactivó con NaHSO3 ac.. 1M, se agitó durante 30 minutos y se transfirió a un embudo separador con DCM. La solución se diluyó de nuevo con agua y el producto se extrajo con 4 porciones de una mezcla 3:1 de CHCh/i-PrOH. Los extractos orgánicos combinados se secaron (MgSO4), se filtraron y se concentraron al vacío para obtener el producto crudo como un sólido blanco. El residuo crudo se purificó mediante HPLC preparativa (columna LuxCellulose-1 4,6x100 mm 3p, 15 % MeOH @ 120 bar, 4 ml/min) para obtener el compuesto b B-4 (30,4 mg, 71 %, >99 % de) como un sólido blanco. LCMS [M+H] = 344 observado; [a] 22 D = -36,0° (c=0,1, MeOH); 1HRMN (400 MHz, METANOL-d4) 5 ppm 8,61 (s, 1H), 7,58 (d, J=3,67 Hz, 1H), 6,94-7,09 (m, 4H), 6,75 (d, J=3,67 Hz, 1H), 527 (q, J=8,64 Hz, 1H), 4,58-4,68 (m, J=3,67 Hz, 2H), 4,17 (d, J=4,89 Hz, 1H), 2,96 (ddd, J=7,15, 9,32, 14,46 Hz, 1H), 2,71 (s, 3H), 2,09 (ddd, J=3,85, 8,53, 14,03 Hz, 1H). 19F RMN (377 MHz, METANOL-d4) 5 ppm = -125,65 (s, 1F).
Los Ejemplos 74-77 se prepararon utilizando la química descrita en el Esquema BB y empleando el reactivo comercial de fenol apropiado para el paso 2.
Figure imgf000083_0001
(continuación)
Figure imgf000084_0002
Ejemplo 78 (Esquema CC) -(1S,2S,3S,5R)-3-((6-cloro-5-fluoro-1,2,3,4-tetrahidroisoqumolm-8-N)oxi)-5-(4-metN-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidm-7-M)cidopentano-1,2-diol (CC-3)
Figure imgf000084_0001
Paso 1 - Síntesis del 8-((1S,4R)-4-(4-metN-7H-pirrolo[2,3-d]pmmidm-7-N)cidopent-2-en-1-N)oxi)-3,4-dihidroisoquinolin-2(1H)-carboxilato de tert-butilo (CC-1)
A una mezcla de BB-2 (600 mg, 1,9 mmol) y 8-hidroxi-3,4-dihidroisoquinolin-2(1H)-carboxilato de tert-butilo (474 mg, 1,9 mmol), Cs2COs( 682 mg, 2,09 mmol) y DPPP (47,1 mg, 0,11 mmol) en d Ce (15 ml) se roció con N2 durante 40 min. A la mezcla se añadió Pd2(dba)3.CHCh (49 mg, 0,048 mmol) bajo N2. La reacción se roció con N2 durante 5 min y luego se agitó a rt (20 °C) bajo N2 durante 40 min. La mezcla se purificó inmediatamente (la solución se purificó directamente) mediante cromatografía en gel de sílice eluyendo con éter de petróleo/EtOAc=8/1 a 1/1 y luego DCM/MeOH=12/1 para obtener CC-1 (735 mg, 87 %) como una goma de color amarillo. LCMS [M+1] 447; 1HRMN (400 MHz, CDCI3) 5 ppm 8,77 (s, 1H), 7,33 (d, J=3,5 Hz, 1H), 7,13 (t, J=7,9 Hz, 1H), 6 ,79-6 ,72 (m, 2H), 6,62-6,52 (m, 1H), 6,44 - 6,33 (m, 1H), 6,21 - 6,11 (m, 1H), 6,09 - 6,01 (m, 1H), 5,41 - 5,33 (m, 1H), 4,71 - 4,40 (m, 2H), 3,71 -3,48 (m, 2H), 3,22-3,12 (m, 1H), 2,82 (s. br, 2H), 2,73 (s, 3H), 1,98 (d, J=15,1 Hz, 1H), 1,51 (s, 9H)
Paso 2 - Síntesis del 8-((1S,2S,3S,4R)-2,3-dihidroxi-4-(4-metil-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)ciclopentil)oxi)-3,4-dihidroisoquinolin-2(lH)-carboxilato de tert-butilo (CC-2)
A una mezcla de CC-1 (730 mg, 1,63 mmol) en DCM (15 ml)/H2O (0,5 ml) se añadió NMO (575 mg, 4,9 mmol) y OsO4 ( 4 % en t-BuOH, 832 mg, 0,12 mmol). La mezcla se agitó a rt (25 °C) durante 3 h. Se añadió Na2SO3 (500 mg) y agua (20 ml). La mezcla se agitó a rt durante 1 hora y luego se filtró. El filtrado se diluyó con agua (50 ml) y se extrajo con EtOAc (50 mlx2). El extracto se lavó con salmuera (50 ml), se secó sobre Na2SO4 y se concentró in vacuo y se purificó con cromatografía en gel de sílice eluyendo con MeOH en DCM de 0 a 10 % para obtener CC-2 (560 mg, 71 %) como un sólido blanco. LCMS [M+1] 481; 1HRMN (400 MHz, CDCls) 5 ppm 8,67 (s, 1H), 7,24 (d, J=3,8 Hz, 1H), 7,18 (t, J=7,9 Hz, 1H), 6,90 (d, J=8,0 Hz, 1H), 6,80 (d, J=7,8 Hz, 1H), 6,60 (d, J=3,3 Hz, 1H), 5,08 - 4,94 (m, 1H), 4,87 - 4,76 (m, 1H), 4,61 - 4,39 (m, 3H), 4,37 - 4,28 (m, 1H), 3,76 - 3,55 (m, 2H), 3,46 - 3,31 (m, 1H), 3,20 - 3,04 (m, 1H), 2,86 - 2,79 (m, 2H), 2,73 (s, 3H), 2,48 - 2,30 (m, 1H), 1,48 (s, 9H)
Paso 3 - Síntesis de (1S,2S,3R,5S)-3-(4-metil-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)-5-((1,2,3,4-tetrahidroisoqumolm-8-il)oxi)ciclopentano-1,2-diol (CC-3)
A una solución de CC-2 (560 mg, 1,17 mmol) en DCM (15 ml) se añadió TFA (4,5 ml) a 0 °C. La mezcla de reacción se agitó a 0 °C durante 1 hora. La mezcla de reacción se evaporó y se disolvió en agua (30 ml) y se añadió K2CO3 (1 g). La mezcla se diluyó con salmuera (30 ml) y se extrajo con EtOAc/THF (1/1, 30 mlx3). El extracto se lavó con salmuera (30 mlx2), se secó sobre Na2SO4, se filtró y se concentró al vacío para obtener CC-3 (400 mg, 90 %) como un sólido blanco. LCMS [M+1] 381; 1HRMN (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm 8,64 (s, 1H), 7,62 (d, J=3,8 Hz, 1H), 7,11 -7,02 (m, 1H), 6,81 (d, J=8,3 Hz, 1H), 6,73 (d, J=3,5 Hz, 1H), 6 , 6 8 (d, J=7,5 Hz, 1H), 5,33 (s. br, 1H), 5,19 - 5,08 (m, 2H), 4,56 (s. br., 2H), 3,99 (s. br., 1H), 3,85 (s, 2H), 2,93 (t, J=5,8 Hz, 2H), 2,90 - 2,81 (m, 1H), 2,70 - 2,66 (m, 2H), 2,65 (s, 3H), 1,98- 1,86 (m, 1H)
Los Ejemplos 79 y 80 se prepararon utilizando la química descrita en el Esquema CC y empleando el reactivo comercial apropiado de fenol protegido por NBoc para el paso 1.
Figure imgf000085_0001
Ejemplo 81 (Esquema DD) - (1S,2S,3R,5S)-3-(4-metil-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)-5-[(2-metil-1,2,3,4-tetrahidroisoquinolin-5-il)oxi]ciclopentano-1,2-diol (DD-1) (referencia)
Figure imgf000086_0001
Paso 1: Síntesis de (1S,2S,3R,5S)-3-(4-metil-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidm-7-N)-5-[(2-metiM,2,3,4-tetrahidroisoquinolm-5-N)oxi]ciclopentano-1,2-diol (DD-1)
Una mezcla del compuesto del Ejemplo 80 (42 mg, 0,11 mmol), 37 % CH2O (26,9 mg, 0,331 mmol) y NaBHOAc3 (93,6 mg, 0,442 mmol) en THF (1,2 ml) se agitó a rt durante 2 h. La mezcla se vertió en NaHCO3 ac. (10 ml) y se extrajo con EtOAc (20 ml x 4). El extracto se secó sobre Na2SO4 y se concentró al vacío para obtener el residuo (50 mg) como un sólido blanco que se purificó por pre-TLC (DCM:MeOH=10:1 con NH3.H2O) para dar DD-1 (35 mg, 80 %) como un sólido blanco. LCMS 395 [M+1]; 1HRMN (400 MHz, DMSO-da) 5 ppm 8,63 (s, 1H), 7,63 (d, J=3,5 Hz, 1H), 7,16 (t, J=8,0 Hz, 1H), 6,92 (d, J=8,5 Hz, 1H), 6 ,75-6 ,69 (m, 2H), 5,36 (d, J=3,8 Hz, 1H), 5 ,18-5,09 (m, 2H), 4 ,64 ­ 4,54 (m, 2H), 4,02 (s. br, 1H), 3,83 (s. br., 2H), 2,99 (s. br., 2H), 2,92 - 2,82 (m, 3H), 2,65 (s, 3H), 2,58 (s. br., 3H), 1,95 (ddd, J=3,8, 9,5, 13,8 Hz, 1H)
Los Ejemplos 82 y 83 se elaboraron de forma similar a los Ejemplos 79 y 78 respectivamente
Figure imgf000086_0002
Síntesis del 6-fluoro-8-hidroxi-3,4-dihidroisoquinolin-2(1H)-carboxilato de tert-butilo (TP-1)
Figure imgf000087_0001
Paso 1 - Síntesis de la 5-fluoro-7-metoxi-2,3-dihidro-1 H-inden-1-ona (EE-2)
A una solución de 5-fluoro-7-hidroxi-2,3-dihidro-1H-inden-1-ona (preparada de forma similar a Bio. Med. Chem Letters, 20, 1004-1007, 2010) (1 g, 6,02 mmol) y K2CO3 (2,5 g, 18 mmol) en DMF seca (10 ml) se añadió Mel (1710 mg, 12,0 mmol) a 0 °C. Tras la adición, la reacción se agitó a 25 °C durante 4 horas. La mezcla de reacción se sometió a partición entre EtOAc y H2O. La capa acuosa se extrajo con EtOAc. Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera, se secaron sobre Na2SO4 y se concentraron para obtener EE-2 (1 g, 92 %) como un sólido de color amarillo. LCMS 181 [M+1]; 1HRMN (400 MHz, CDCh) 8 ppm 6,73 - 6,69 (m, 1H), 6,51 (dd, J=2,0, 11,3 Hz, 1H), 3,94 (s, 3H), 3,13 - 3,03 (m, 2H), 2,73 - 2,65 (m, 2H)
Paso 2 - Síntesis de 6-fluoro-8-metoxi-3,4-dihidroisoquinolin-1(2H)-ona (EE-3)
A una solución de EE-2 (950 mg, 5,27 mmol) en 1 ,2 -DCE/MeSO3H (38 ml/29 ml) a 0 °C se añadió porciones de NaN3 (1,4 mg, 21,1 mmol). Tras la adición, la mezcla se agitó a 70 °C durante 16 horas. La mezcla se enfrió a 0 °C, se ajustó a pH 7-8 con la adición de NaHCO3 acuoso (sat). La mezcla se extrajo con DCM (15 ml x 2), se secó sobre Na2SO4 , se filtró y se concentró para dar EE-3 (1,15 g, 74 %) como un sólido marrón. LCMS 196 [M+1]; 1HRMN (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 7,70 (s. br., 1H), 6,85 (dd, J=2,4, 11,9 Hz, 1H), 6,73 (dd, J=2,4, 8,9 Hz, 1H), 3,76 (s, 3H), 3,21 (dt, J=3,5, 6,3 Hz, 2H), 2,80 (t, J=6,3 Hz, 2H)
Paso 3 - Síntesis de 6-fluoro-8-metoxi-1,2,3,4-tetrahidroisoquinolina (EE-4)
El compuesto EE-4 se preparó a partir de EE-3 con un procedimiento similar al del paso 5 del Esquema FF para dar EE-4 crudo (455 mg, >99 %) como aceite de color amarillo y se utilizó directamente en el siguiente paso. LCMS 182 [M+1]; 1HRMN (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 6,63 (dd, J=2,3, 11,3 Hz, 1H), 6,48 (dd, J=2,3, 9,5 Hz, 1H), 3,75 (s, 3H), 3,67 - 3,61 (m, 2H), 2,85 (t, J=5,8 Hz, 2H), 2,61 (t, J=5,6 Hz, 2H)
Paso 4 - Síntesis de 6-fluoro-1,2,3,4-tetrahidroisoquinolin-8-ol (EE-5)
El compuesto EE-5 se preparó a partir de EE-4 con un procedimiento similar al del paso 6 del Esquema FF para dar EE-5 crudo (228 mg, 54 %) como un sólido de color amarillo. LCMS 168 [M+1]; 1HRMN (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 6,39 - 6,28 (m, 2H), 3,63 (s, 2H), 2,85 (t, J=5,8 Hz, 2H), 2,63 - 2,57 (m, 2H)
Paso 5 - Síntesis del 6-fluoro-8-hidroxi-3,4-dihidroisoquinolin-2(1H)-carboxilato de tert-butilo (TP-1)
El compuesto TP-1 se preparó a partir de EE-5 con un procedimiento similar al del paso 7 del Esquema FF para dar TP-1 (182 mg, 50 %) como un sólido de color amarillo. MS 212 [M-56+1]; 1HRMN (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 10,11 (s, 1H), 6,45 (d, J=10,5 Hz, 2H), 4,29 (s, 2H), 3,51 (m, J=5,8 Hz, 2H), 2,69 (m, J=5,6 Hz, 2H), 1,43 (s, 9H)
Síntesis del 5-fluoro-8-hidroxi-3,4-dihidroisoquinolin-2(1H)-carboxilato de tert-butilo (TP-2)
Scheme GG
Figure imgf000088_0001
Paso 1 - Síntesis del (pivoiloxi)carbamato de tert-butilo (FF-2)
A una solución del compuesto FF-1 (20 g, 150 mmol) en CHCI3 (200 ml) se añadió lentamente anhídrido piválico (34 g, 180 mmol) en un baño de hielo y luego se agitó a 70 °C durante 16 h. La solución de reacción se diluyó con DCM (200 ml) y se lavó con NaHCO3 saturado (200 ml x 2) hasta que el pH~7. La capa orgánica se secó sobre Na2SO4, se filtró y se concentró a presión reducida para obtener un aceite de color amarillo claro. El producto crudo se cristalizó con éter de petróleo (20 ml) para obtener FF-2 (18 g, 55 %) como un sólido blanco. 1HRMN (400 MHz, CDCh) 8 ppm 7,8 (s. br., 1H), 1,5 (s, 9H), 1,3 (s, 9H)
Paso 2 - Síntesis de la O-paloilhidroxilamina (FF-3)
A una solución de FF-2 (16 g, 70 mmol) en TBME (32 ml) se añadió CF3 SO3H (10,6 g, 70,7 mmol) a 0 °C. La solución de reacción se agitó a 15 °C durante 2 h. La mezcla de reacción se evaporó para dar el producto crudo FF-3 (20 g, >99 %) como sólido blanco y se utilizó en la siguiente reacción. La solución de reacción se agitó a 15 °C durante 2 h. La mezcla de reacción se evaporó para dar el producto crudo FF-3 (20 g, >99 %) como un sólido blanco y se utilizó directamente en la siguiente reacción.
Paso 3 - Síntesis de la 5-fluoro-2-metoxi-N-(pivoiloxi)benzamida (FF-4)
A una solución de ácido 5-fluoro-2-metoxibenzoico (4,50 g, 26,4 mmol) en THF (90,0 ml) se añadió T3P (19 g, 29,1 mmol) a 0 °C. Tras la adición, la mezcla de reacción se agitó durante 30 min a 25 °C. A la mezcla de reacción se añadió DIPEA (13,8 ml, 8,82 mmol) seguido de FF-3 (7,28 g, 29,1 mmol). Tras la adición, la mezcla de reacción se agitó a 25 °C durante 16 horas. La mezcla de reacción se filtró y el filtrado se sometió a partición entre EtOAc y H2O. La capa orgánica se separó, se secó sobre Na2SO4 y se concentró para obtener el producto crudo que se purificó mediante cromatografía en columna instantánea (EtOAc: éter de petróleo = 1 ~ 100 %, luego MeOH: DCM = 1 %~10 %) para obtener FF-4 (9 g, >99 %) como un sólido blanco y utilizarlo directamente en la siguiente reacción.
Paso 4 - Síntesis de la 5-fluoro-8-metoxi-3,4-dihidroisoquinolin-1(2H)-ona (FF-5)
Una suspensión de FF-4 (8,00 g, 28,0 mmol), KOAc (6,06 g, 61,7 mmol) y [Cp*RhCl2] 2 (867 mg, 1,40 mmol) en MeCN (100 ml) en un recipiente se purgó con N2 durante 5 min y luego se enfrió a -40 °C con hielo seco/acetona. Se purgó el etileno en el recipiente durante 30 minutos y luego se selló y se agitó a 25 °C durante 16 h. La suspensión de color rojo oscuro se filtró y la torta filtrada se lavó con CH3CN. El filtrado combinado se concentró para obtener el producto crudo que se purificó mediante cromatografía en columna instantánea (EtOAc:Éter de petróleo = 1 %~100 %, luego MeOH:DCM =1-8 %) para obtener FF-5 (4,62 g, 84 %) como un sólido de color amarillo. 1HRMN (400 MHz, Dm SO-d6) 5 ppm 7,85 (s. br., 1H), 7,32 (t, J=9,0 Hz, 1H), 6,99 (dd, J=4,3, 9,3 Hz, 1H), 3,76 (s, 3H), 3,31 - 3,22 (m, 2H), 2,79 (t, J=6,3 Hz, 2H)
Paso 5 - Síntesis de la 5-fluoro-8-metoxi-1,2,3,4-tetrahidroisoquinolina (FF-6)
A una solución de FF-5 (4,66 g, 23,9 mmol) en THF seco (240 ml) se añadió LiAIH4 (3,62 g, 95,5 mmol) en porciones. Tras la adición, la mezcla de reacción se calentó a 65 °C (reflujo) durante 2 horas. La mezcla de reacción se inactivó con 4 ml de H2O. La mezcla se destiló en EtOAc y se filtró. La torta filtrada se lavó con EtOAc. El filtrado se secó sobre Na2SO4 y se concentró para obtener el producto crudo, que se purificó mediante cromatografía en columna instantánea (MeOH: DCM = 1-8 %) para obtener fF-6 (2,9 g, 6 6 %) como una goma de color amarillo. 1HRMN (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm 6,92 (t, J=9,2 Hz, 1H), 6,73 (dd, J=4,4, 8,9 Hz, 1H), 3,73 (s, 3H), 3,69 (s, 2H), 2,88 (t, J=5,8 Hz, 2H), 2,55 (t, J=5,8 Hz, 2H)
Paso 6 - Síntesis de 5-fluoro-1,2,3,4-tetrahidroisoquinolin-8-ol (FF-7)
A una solución de FF-6 (2,86 g, 15,8 mmol) en DCM (28,6 ml) se añadió BBr3 (2,86 ml, 30,3 mmol) a -10 °C gota a gota. Tras la adición, la mezcla de reacción se agitó a 0 °C durante 2 horas. La mezcla de reacción se enfrió a -10 °C y se inactivó con MeOH. La mezcla resultante se diluyó en H2O, se basificó con K2CO3 sat. a pH 9-10 y luego se extrajo con EtOAc (50 ml x 3). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera, se secaron sobre Na2SO4 y se concentraron para obtener el producto crudo, que se purificó mediante cromatografía en columna instantánea (MeOH: DCM = 1:10) para obtener Ff -7 (1,0 g, 38 %) como un sólido de color amarillo. 1HRMN (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm 9,24 (s. br., 1H), 6,76 (t, J=9,0 Hz, 1H), 6,55 (dd, J=4,6, 8,7 Hz, 1H), 3,69 (s, 2H), 2,90 (t, J=5,9 Hz, 2H), 2,54 (t, J=6,4 Hz, 2H)
Paso 7 - Síntesis del 5-fluoro-8-hidroxi-3,4-dihidroisoquinolin-2(1H)-carboxilato de tert-butilo (TP-2)
A una solución de FF-7 (1,0 g, 6 mmol) en DCM (25,00 ml) y MeOH (5 ml) se añadió Boc2O (1,4 g, 6 , 6 mmol) seguido de Et3N (2,08 ml, 15,0 mmol) a 0 °C. Tras la adición, la mezcla de reacción se agitó a 25 °C durante 16 horas. La mezcla de reacción se acidificó con ácido cítrico acuoso hasta alcanzar un pH de 3-4 y la mezcla resultante se sometió a partición entre DCM y H2O. La capa orgánica se separó y la capa acuosa se extrajo con DCM. Las capas orgánicas combinadas se lavaron con sat. NaHCO3, salmuera, se secó sobre Na2SO4 y se concentró para obtener el producto crudo que se purificó mediante cromatografía en columna instantánea (MeOH:DCM = 1:10) para obtener el TP-2 (744 mg, 47 %) como un sólido blanco. MS 212 [M-55+1]; 1HRMN (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm 9,55 (s, 1H), 6,83 (t, J=9,0 Hz, 1H), 6,62 (dd, J=4,6, 8,9 Hz, 1H), 4,32 (s, 2H), 3,52 (t, J=5,9 Hz, 2H), 2,63 (t, J=5,6 Hz, 2H), 1,41 (s, 9H) Los procedimientos anteriores del Esquema FF se utilizaron para sintetizar los intermedios de hidroxitetrahidroisoquinolina TP-3 a TP-7.
Figure imgf000089_0001
(continuación)
Figure imgf000090_0002
Síntesis del 8-hidroxi-6-(2-hidroxipropano-2-il)-3,4-dihidroisoquinolin-2(1H)-carboxilato de tert-butilo (TP-9)
Esquema GG
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Paso 1: Síntesis del 2-(benciloxi)-4-bromobenzoato de bencilo (GG-2)
A una solución del ácido salicídico GG-1 (50 g, 230 mmol) en THF (1000 ml) se añadió carbonato de potasio (95,5 g, 691 mmol), bromuro de tetrabutil amonio (14,9 g, 46,1 mmol) y bromuro de bencilo (95,8 g, 576 mmol). La reacción se agitó a 20 °C durante 16 horas. La solución se filtró y se concentró al vacío para obtener el producto deseado GG-2 como un sólido marrón crudo (150 g). Este material se utilizó en el siguiente paso sin purificación adicional. TLC (PE./EA=10:1, Rf-0,5)
Paso 2: Síntesis del ácido 2-(benzoxi)-4-bromobenzoico (GG-3)
A una solución de GG-2 (140 g, 352 mmol, crudo, -53 % de pureza) en MeOH/agua/DCM (500 ml/500 ml/500 ml) se añadió hidróxido de litio (44,4 g, 1060 mmol) a 10 °C. La reacción se agitó a 70 °C durante 16 horas. La solución se concentró al vacío y se precipitó un sólido de color amarillo de la solución. Los sólidos se filtraron y la torta del filtro se lavó con agua (50 ml X 2). El sólido de color amarillo se acidificó con HCl 1N hasta alcanzar un pH=2. El sólido de color amarillo se filtró y se secó en un horno de infrarrojos para dar el compuesto GG-3 (43,3 g, 40 %) como sólido de color amarillo. 1RMN (400MHz, DMSO-da) 8 ppm 12,76 (bs, 1H), 7,61 (d, J=8,3 Hz, 1H), 7,52 - 7,47 (m, 2H), 7,44 (d, J=1,8 Hz, 1H), 7,43-7,38 (m, 2H), 7,37-7,31 (m, 1H), 7,23 (dd, J=1,8, 8,3 Hz, 1H), 5,25 (s, 2H).
Paso 3: Síntesis de 2-(benzoxi)-4-bromo-N-(pivoiloxi)-benzamida (GG-4)
A una solución de GG-3 (31,2 g, 101,58 mmol) en THF (630 ml) se añadió T3P (71,1 g, 112 mmol) a 0 °C. Tras la adición, la mezcla de reacción se agitó durante 30 minutos a 25 °C. A la solución anterior se añadió DIPEA (78,8 g, 609 mmol) seguido de O-pivaloilhidroxilamina (28 g, 112 mmol). Tras la adición, la mezcla de reacción se agitó a 25 °C durante 2 horas. La solución se transfirió a un embudo separador con EtOAc (500 ml) y se lavó con 1 porción de agua (300 ml), 1 porción de ácido cítrico ac.. (300 ml), 1 porción de NaHCO3 sat., y 1 porción de salmuera (300 ml). La capa orgánica se secó sobre Na2SO4 , se filtró y se concentró al vacío. El residuo crudo se purificó mediante cromatografía en columna instantánea (gel de sílice, éter de petróleo:EtOAc=7:1) para obtener el compuesto GG-4 (30,4 g, 74%) como un sólido de color amarillo. 1HRMN (400MHz, DMSO-d6) 8 ppm 10,74 (s, 1H), 8,06 (d, J=8,5 Hz, 1H), 7,52 - 7,35 (m, 5H), 7,28 (d, J=1,5 Hz, 1H), 7,26 (d, J=1,8 Hz, 1H), 7,23 (d, J=1,5 Hz, 1H), 5,27 (s, 2H), 1,34 (s, 9H)
Paso 4: Síntesis del pivalato de 8-(benciloxi)-6-bromo-1-oxo-3,4-dihidroisoquinolin-2(1H)-il (GG-5)
Una suspensión de GG-4 (40,7 g, 100,18 mmol), KOAc (10,8 g, 110 mmol) y Cp2RhCh (3,1 g, 5,01 mmol) en MeCN (1300 ml) se enfrió a 0 °C y la solución se roció con gas etileno durante 45 minutos. El recipiente se selló y se agitó a 10 °C durante 16 horas. La suspensión de la reacción se filtró y la torta se lavó con 2 porciones de una mezcla 5:1 de DCM/MeOH (100 ml). El filtrado se concentró a presión reducida para dar el producto crudo (50 g) como un sólido de color amarillo. El residuo crudo se purificó mediante cromatografía en columna instantánea (gel de sílice, DCM:MeOH=40:1) para obtener el compuesto GG-5 (28 g, 84 %) como un sólido de color amarillo. LCMS [M+H+Na] 356 observado; 1HRMN (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 7,79 (t, J=3,1 Hz, 1H) 7,53 - 7,59 (m, 2H) 7,35 - 7,42 (m, 2H) 7,30 - 7,34 (m, 1H) 7,26 (d, J=2,0 Hz, 1H) 7,15 (d, J=2,0 Hz, 1H) 5,20 (s, 2H) 3,25 (td, J=6,1, 3,6 Hz, 2H) 2,83 (t, J=6,3 Hz, 2H)
Paso 5: Síntesis de 8-(benciloxi)-6-bromo-3,4-dihidroisoquinolin-1(2H)-ona (GG-6)
A una mezcla de GG-5 (36,5 g, 110 mmol) en THF anhidro (700 ml) se añadió BH3.Me2S (10M, 33 ml, 330 mmol) a 0 °C gota a gota bajo N2. Tras la adición, la reacción se agitó a 5 °C durante 12 horas. En esta etapa, la mezcla de reacción se calentó a 78 °C (reflujo) durante 3 horas para impulsar la finalización. La reacción se dejó enfriar gradualmente hasta rt y se inactivó cuidadosamente con 70 ml de MeOH a 0 °C. La solución se concentró y luego se tomó en THF (2 ml) y MeOH (10 ml) y se transfirió a un vial de microondas. La solución se calentó a 120 °C en un reactor de microondas durante 1 hora. La solución se concentró para obtener un sólido negro. El residuo crudo se purificó mediante cromatografía en columna instantánea (120 g de gel de sílice x 3, MeOH/DCM=10 %~20 %) para obtener el compuesto GG-6 (8,28 g, 24 %) como un sólido marrón. LCMS [M+H] 319 observado; 1HRMN (400 Mh z , DMSO-d6) 8 ppm 8,99 (s. br., 1H) 7,37- 7,50 (m, 5H) 7,23 (d, J=1,3 Hz, 1H) 7,11 (d, J=1,3 Hz, 1H) 5,21 (s, 2H) 4,11 (s, 2H) 2,97 (t, J=5,9 Hz, 2H).
Paso 6: Síntesis del 8-(benciloxi)-6-bromo-3,4-dihidroisoquinolin-2(1H)-carboxilato de tert-butilo (GG-7)
A una mezcla de GG-6 (10,99 g, 34,537 mmol) en DCM (110 ml) y THF (22 ml) se añadió Et3N (10,5 g, 104 mmol) y (Boc)2O (11 , 3 g, 51,8 mmol) a 10 °C. La reacción se agitó a 10 °C durante 16 horas. La mezcla se concentró al vacío para dar el producto crudo como goma negra. El residuo crudo se purificó mediante cromatografía en columna instantánea (120 g de gel de sílice, EtOAc/éter de petróleo del 4 % al 7 %) para obtener el compuesto GG-7 (9,9 g, 68,5 %) como goma de color amarillo. LCMS [M+H-Boc] 319 observado; 1HRMN (400MHz, CLOROFORMO-d) 8 ppm 7,48 - 7,30 (m, 5H), 6,98 - 6 , 8 8 (m, 2H), 5,15 - 4,96 (m, 2H), 4,60 - 4,44 (m, 2H), 3,71 - 3,54 (m, 2H), 2,88 - 2,71 (m, 2H), 1,50 (s, 9H).
Paso 7: Síntesis del 2-(tert-butil) 6-metil 8-(benzoxi)-3,4-dihidroisoquinolin-2,6(1H)-dicarboxilato (GG-8)
Una mezcla de GG-7 (600 mg, 1,43 mmol), DPPP (296 mg, 0,717 mmol), TEA (435 mg, 4,30 mmol) y Pd(OAc)2 (161 mg, 0,717 mmol) en MeOH (20 ml) y DMF (20 ml) se calentó a 120 °C bajo 22 bares de monóxido de carbono durante 24 horas. La mezcla se concentró al vacío y se transfirió a un embudo de separación con EtOAc. La solución se lavó con 5 porciones de salmuera, se secó sobre sulfato sódico, se filtró y se concentró al vacío. El residuo crudo se purificó mediante cromatografía en columna instantánea (12 g, gel de sílice, 20 % EtOAc/éter de petróleo) para obtener el compuesto GG-8 (440 mg, 77 % de rendimiento) como un sólido blanco. 1HRMN (400MHz, CLOROFORMO-d) 8 ppm 7,54 - 7,28 (m, 7H), 5,22 - 5,08 (m, 2H), 4,67 - 4,54 (m, 2H), 3,91 (s, 3H), 3,70 - 3,57 (m, 2H), 2,93 - 2,77 (m, 2H), 1,50 (s, 9H).
Paso 8: Síntesis del 8-(benciloxi)-6-(2-hidroxipropano-2-il)-3,4-dihidroisoquinolin-2(1H)-carboxilato de tertbutilo (GG-9)
A una solución incolora de GG-8 (327 mg, 0,823 mmol) en THF seco (15 ml) se añadió MeMgBr (solución 3,0 M en éter dietílico, 1,65 ml, 4,94 mmol) gota a gota a 0 °C. La mezcla se agitó a 17 °C durante 1,5 horas. La solución se enfrió a 0 °C y se inactivó con agua (10 ml). La solución se transfirió aun embudo separador con EtOAc y se separaron las fases. La fase acuosa se extrajo con 2 porciones de EtOAc (20 ml). Los extractos orgánicos combinados se lavaron con 1 porción de salmuera (30 ml), se secaron sobre sulfato sódico, se filtraron y se concentraron al vacío. El residuo crudo se purificó mediante cromatografía en columna instantánea (gel de sílice, 12 g, éter de petróleo:EA=3:1) para obtener el compuesto GG-9 (320 mg, 98 %) como goma incolora. 1HRMN (400 MHz, CLOROFORMO-d) 5 ppm 7,29 - 7,49 (m, 5H) 6,97 (s, 1H) 6,84 (s, 1H) 5,12 (s. br., 2H) 4,58 (s, 2H) 3,65 (s. br., 2H) 2,82 (s. br., 2H) 1,57 (s, 6 H) 1,49 (s, 9H).
Paso 9: Síntesis del 8-hidroxi-6-(2-hidroxipropano-2-il)-3,4-dihidroisoquinolin-2(1H)-carboxilato de tert-butilo (TP-9)
Una mezcla de GG-9 (290 mg, 0,73 mmol) y Pd/C (105 mg) en MeOH (10 ml) se agitó a 15 °C durante 5 horas bajo un globo de hidrógeno. La mezcla se filtró a través de una almohadilla de Celite y el filtrado se concentró al vacío. El residuo crudo se purificó mediante cromatografía en columna instantánea (4 g, gel de sílice, 60 % EtOAc/éter de petróleo) para obtener el compuesto TP-9 (144 mg, 64 %) como sólido blanco. 1H RMN (400MHz, CLOROFORMO-d) 5 ppm 6,91 (s. br., 1H), 6,76 (s, 1H), 4,53 (s. br., 2H), 3,63 (s. br., 2H), 2,80 (s. br., 2H), 1,55 (s, 6 H), 1,50 (s, 9H).
Se utilizó una secuencia consistente en los pasos 1-6 y 9 del Esquema GG para sintetizar los intermedios hidroxitetrahidroisoquinolina TP-8 (Esquema III), TP-10 -12 a partir del ácido salicílico apropiado.
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Síntesis del 6-etil-8-hidroxi-3,4-dihidroisoquinolin-2(1H)-carboxilato de tert-butilo (TP-13)
Figure imgf000093_0001
Paso 1 - Síntesis del 8-(benciloxi)-6-vinil-3,4-dihidroisoquinolin-2(1H)-carboxilato de tert-butilo (HH-1)
Una mezcla de GG-7 (530 mg, 1,27 mmol) y 4,4,5,5-tetrametil-2-vinil-1,3,2-dioxaborolano (410 mg, 2,67 mmol), K3PO4.3 H2O (675 mg, 2,53 mmol), PdCh(dppf) (93 mg, 0,013 mmol) en dioxano (20 ml) y H2O (5 ml) se desgasificó con N2 calentado a 100 °C durante 2 horas. La mezcla se purificó por pre-TLC (Éter de Petróleo/EtOAc=8/1) para obtener HH-1 (370 mg, 80 %) como una goma incolora. LCMS 266 [M-Boc+1]; 1HRMN (400 MHz, CDCh) 8 ppm 7,51 - 7,28 (m, 5H), 6,83 (d, J=12,0 Hz, 2H), 6,65 (dd, J=10,9, 17,4 Hz, 1H), 5,69 (d, J=17,6 Hz, 1H), 5,22 (d, J=10,8 Hz, 1H), 5,12 (s. br, 2H), 4,58 (s. br., 2H), 3,73 - 3,56 (m, 2H), 2,90 -2,73 (m, 2H), 1,50 (s, 9H)
Paso 2 - Síntesis del 6-etil-8-hidroxi-3,4-dihidroisoquinolin-2(1H)-carboxilato de tert-butilo (TP-13)
Una mezcla de HH-1 (370 mg, 1,01 mmol) y Pd/C (370 mg) en MeOH (20 ml) se desgasificó con H2 y se agitó a 50 °C bajo H2 (0,344738 Mpa) durante 24 horas. La mezcla se filtró y el filtrado se concentró in vacuo para obtener material crudo que se purificó por cromatografía en gel de sílice eluyendo con EtOAc en éter de petróleo de 0 a 20 % para obtener TP-12 (210 mg, 75 %) como un sólido blanco. LCMS 222 [M-55+1]; 1HRMN (400 MHz, CDCh) 8 ppm 6,57 (s. br., 1H), 6,48 (s, 1H), 4,51 (s. br, 2H), 3,63 (s. br., 2H), 2,78 (s. br., 2H), 2,62 - 2,45 (q, J=7,5 Hz, 2H), 1,50 (s, 9H), 1,20 (t, J=7,5 Hz, 3H)
Síntesis del 6-(difluorometil)-8-hidroxi-3,4-dihidroisoquinolin-2(1H)-carboxilato de tert-butilo (TP-14)
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GG-7 (1000 mg, 2,390 mmol) se disolvió en tetrahidrofurano (22,0 ml, c=0,109 M) en un matraz de dos bocas secado al horno y equipado con un termómetro, se enfrió a -78 °C, se añadió lentamente tert-butil-litio (459 mg, 7,17 m m ol, 4,22 ml, 1,7 M) se añadió lentamente bajo N2 mientras se mantenía la temperatura interna alrededor de -70 °C, se agitó a -78 °C durante 30 min, se añadió gota a gota N,N-dimetilformamida (262 mg, 3,59 mmol) y se agitó a -78 °C durante 1,5 h. La reacción se inactivó con NH4Cl saturado a -78 °C, extraído con EtOAc 3 veces. Las capas orgánicas se combinaron, se lavaron con salmuera, se secaron sobre Na2SO4, se concentraron y se purificaron por cromatografía en columna con EtOAc/heptano al 15 % para dar II-1 (300 mg, 34 % de rendimiento) como un aceite incoloro.
LCMS [M+1-Boc] 268,10. 1HRMN (400 MHz, CLOROFORMO-d) 8 ppm 1,51 (s, 9 H) 2,91 (t, J=5,38 Hz, 2 H) 3,68 (t, J=5,69 Hz, 2 H) 4,65 (s, 2 H) 5,17 (s. br, 2 H) 7,29 (d, J=9,05 Hz, 2 H) 7,31 - 7,37 (m, 1 H) 7,40 (t, J=7,27 Hz, 2 H) 7,43 - 7,48 (m, 2 H) 9,92 (s, 1 H)
Paso 2: Síntesis del 8-(benciloxi)-6-(difluorometil)-3,4-dihidroisoquinolin-2(1H)-carboxilato de tert-butilo (II-2) A una solución de II-1 (300 mg, 0,816 mmol) en DCM (16,3 ml, c=0,05 M) a 0 °C se añadió trifluoruro de (dietilamino)azufre (1320 mg, 8,16 mmol, 1070 uL). La reacción se sacó del baño de hielo y se agitó a r.t. durante la noche. La reacción se diluyó con DCM y se inactivó con NaHCO3 saturado, agitado a r.t. hasta que cesó la evolución del co2 . Las capas se separaron y la capa acuosa se extrajo con DCM. La capa orgánica se secó sobre Na2SO4 y se concentró, purificándose por cromatografía en columna con EtOAc/heptano al 15 % para dar II-2 (240 mg, 75 % de rendimiento) como un aceite claro.
LCMS [M+1-Boc] 290,10. 1HRMN (400 MHz, CLOROFORMO-d) 8 ppm 1,51 (s, 9 H) 2,86 (t, J=5,26 Hz, 2 H) 3,66 (t, J=5,62 Hz, 2 H) 4,61 (s, 2 H) 5,13 (s. br., 2 H) 6,58 (t, J=57,22 Hz, 1 H) 6,92 (d, J=8,31 Hz, 2 H) 7,31 - 7,48 (m, 5 H)
Paso 3: Síntesis del 6-(difluorometil)-8-hidroxi-3,4-dihidroisoquinolin-2(1H)-carboxilato de tert-butilo (TP-14)
A una solución de II-2 (240 mg, 0616 mmol) en metanol (10 ml) se añadió paladio sobre carbono ( 66 mg, 0,616 mmol). La solución de reacción se desgasificó y se volvió a llenar con gas hidrógeno. La mezcla se ajustó con un globo de hidrógeno y se agitó a rt durante la noche. La reacción se filtró, los disolventes se eliminaron al vacío y el material se purificó mediante cromatografía en columna con EtOAc/heptano al 20 % para dar TP-14 (175 mg, 95 % de rendimiento) como un sólido blanco.
LCMS [M+1-tBu] 242. 1HRMN (400 MHz, CLOROFORMO-d) 8 ppm 1,52 (s, 9 H) 2,84 (s. br., 2 H) 3,66 (t, J=5,81 Hz, 2 H) 4,56 (s. br., 2 H) 6,53 (t, J=57,22 Hz, 1 H) 6,76 (s, 1 H) 6,84 (s. br., 1 H)
Síntesis del 6-(1,1-difluoroetil)-8-hidroxi-3,4-dihidroisoquinolin-2(1H)-carboxilato de tert-butilo (TP-15)
Figure imgf000094_0001
La mezcla de GG-2 (8544 mg, 21,51 mmol), tributilo(1 -etoxivinilo)estaño (8160 mg, 22,6 mmol), Pd2(dba)3 (394 mg, 0,430 mmol) y 2,2'-bis(difenilfosfino)-1,1'-binaftilo (536 mg, 0,860 mmol) en tolueno (108 ml, c=0,2 M) se desgasificó y se calentó a 90 °C durante 18 h. Se eliminó el tolueno y el producto crudo se llevó al siguiente paso.
El producto crudo se disolvió en THF (108 ml, c=0,20 M), se añadió ácido clorhídrico (6670 mg, 183 m m ol, 45,7 ml, 4,0 M), se agitó a t.r. durante 2 h. Se eliminó el disolvente orgánico; se añadió H2O, se extrajo con EtOAc 3 veces. Las capas orgánicas se combinaron, se lavaron con salmuera, se secaron sobre Na2SO4 , se filtraron y se concentraron, se purificaron con cromatografía en gel de sílice eluyendo con EtOAc/heptano al 15 % para dar 7180 mg de aceite de color amarillo.
LCMS [M+1] 361,10. 1HRMN (400 MHz, CLOROFORMO-d) 8 ppm 2,60 (s, 3 H) 5,23 (s, 2 H) 5,37 (s, 2 H) 7,29 - 7,42 (m, 8 H) 7,45 (d, J=6,85 Hz, 2 H) 7,54 (dd, J=8,01, 1,28 Hz, 1 H) 7,62 - 7,65 (m, 1 H) 7,90 (d, J=7,95 Hz, 1 H)
Paso 2: Síntesis de 2-(benciloxi)-4-(1,1-difluoroetil)benzoato de bencilo (JJ-2)
A JJ-1 (7,380 g, 20,48 mmol) se le añadió deoxofluor (22,7 g, 102 mmol). La mezcla de reacción se calentó a 80 °C durante 4,5 horas, se enfrió a r.t., se vertió en NaHCO3 saturado, y después de que cesara la evolución delCO2 , la capa acuosa se extrajo con EtOAc 3 veces. La capa orgánica se concentró al vacío y se purificó por cromatografía en columna con 10 % de EtOAc/heptano para dar JJ-2 (5,94 g, 76 % de rendimiento) como un aceite incoloro que se solidificó al vacío.
1HRMN (400 MHz, CLOROFORMO-d) 5 ppm 1,89 (t, J=18,16 Hz, 3 H) 5,19 (s, 2 H) 5,36 (s, 2 H) 7,12 (d, J=8,07 Hz, 1 H) 7,17 (s, 1 H) 7,29 - 7,42 (m, 8 H) 7,45 (d, J=6,72 Hz, 2 H) 7,89 (d, J=8,07 Hz, 1 H)
Paso 3: Síntesis del ácido 2-(benzoxi)-4-(1,1-difluoroetil)benzoico (JJ-3)
Siguiendo un procedimiento similar al del paso 2 del Esquema GG, JJ-2 se hidrolizó a JJ-3 (4,49 g, 99 %) como sólido blanco.
1HRMN (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm 1,97 (t, J=18,89 Hz, 3 H) 5,26 (s, 2 H) 7,19 (d, J=7,95 Hz, 1 H) 7,29 - 7,36 (m, 2 H) 7,40 (t, J=7,34 Hz, 2 H) 7,51 (d, J=7,21 Hz, 2 H) 7,71 (d, J=7,95 Hz, 1 H) 12,89 (s. br, 1 H)
Paso 4-8: Síntesis del 6-(1,1-difluoroetil)-8-hidroxi-3,4-dihidroisoquinolin-2(1H)-carboxilato de tert-butilo (TP-15)
Siguiendo procedimientos similares al paso 3 del Esquema GG (1,30 g, 70 %), el paso 4 del Esquema GG (684 mg, 65 %), los pasos 5 del Esquema FF y el paso 6 del Esquema GG (575 mg, 77 %), el paso 9 del Esquema GG (400 mg, 90 %), JJ-3 se convirtió en TP-15.
LCMS [M+1-Boc] 214,10. 1HRMN (400 MHz, CLOROFORMO-d) 5 ppm 1,52 (s, 9 H) 1,87 (t, J=18,10 Hz, 3 H) 2,83 (s. br., 2 H) 3,65 (t, J=5,69 Hz, 2 H) 4,56 (s. br., 2 H) 6,76 (s, 1 H) 6,83 (s. br., 1 H)
Síntesis del 8-hidroxi-3,4-dihidro-2,6-naftiridina-2(1H)-carboxilato de tert-butilo (TP-16)
Figure imgf000095_0001
Siguiendo procedimientos similares al paso 3 del Esquema GG (939 mg, 57 %), el paso 4 del Esquema GG utilizando pivolato de cesio y dicloroetano en lugar de acetato de potasio y acetonitrilo (290 mg, 70 %), y el paso 5 del Esquema FF (136 mg, 50 %), el KK-1 se convirtió en KK-4.
LCMS [M+1] 165,10. 1HRMN (400 MHz, CLOROFORMO-d) 5 ppm 2,77 (t, J=5,81 Hz, 2 H) 3,11 (t, J=5,81 Hz, 2 H) 3,90 (s, 3 H) 3,94 (s, 2 H) 8,03 (d, J=2,93 Hz, 2 H)
Paso 4: Síntesis de 5,6,7,8-tetrahidro-2,6-naftiridina-4-ol (KK-5)
El KK-4 (136,0 mg, 0,828 mmol) en 5 ml de HBr al 48 % y 3 ml de ácido acético glacial se selló y se sometió a reflujo a 120 °C durante 4 días. La reacción se enfrió a TA, se concentró para eliminar el ácido acético por azeotropía de heptanos 3 veces, se neutralizó por adición cuidadosa de NaOH 5 N hasta un pH de alrededor de 9. Se rotavaporizó para eliminar la mayor parte del H2O, se añadió MeOH y se secó con gel de sílice. El producto se purificó por cromatografía en columna con MeOH/DCM al 10 % con 0,5 %NH4OH para dar KK-5 (124 mg, 100 %). LCMS [M+1] 151,10.
Paso 5: Síntesis del 8-hidroxi-3,4-dihidro-2,6-naftiridina-2(1H)-carboxilato de tert-butilo (TP-16) Siguiendo procedimientos similares al paso 6 del Esquema GG, KK-5 se convirtió en TP-16 (106 mg, 51 %).
LCMS [M-55+1] 228. 1HRMN (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm 10,13 (s, 1H), 6 , 68 (s, 2H), 4,29 (s, 2H), 3,53-3,45 (t, J=5,6 Hz, 2H), 2,74 - 2,64 (t, J=5,5 Hz, 2H), 1,42 (s, 9H)
Síntesis del 8-hidroxi-5-metil-3,4-dihidro-2,6-naftiridina-2(1H)-carboxilato de tert-butilo (TP-17)
Figure imgf000096_0001
5-hidroxi-2-metilisonicotinato de etilo (LL-1) (síntesis descrita en WO10100475) (2190 mg, 17,22 mmol) y bromuro de N-bencilo (3540 mg, 20,7 mmol), K2CO3 (4810 mg, 34,4 mmol) en 20 ml de DMF se calentó a 80 °C durante la noche. Después de que la mezcla de reacción se enfriara a r.t., se añadió EtOAc, y se lavó con H2O 3 veces. La capa orgánica se concentró y se purificó por cromatografía en columna con 30 % de EtOAc/heptano para dar LL-2 (16 g, 48 % de rendimiento) como un sólido marrón.
LCMS [M+1] 272,10. 1HRMN (400 MHz, CLOROFORMO-d) 8 ppm 1,37 (t, J=7,15 Hz, 3 H) 2,54 (s, 3 H) 4,39 (q, J=7,13 Hz, 2 H) 5,23 (s, 2 H) 7,34 (d, J=7,09 Hz, 1 H) 7,36 - 7,43 (m, 2 H) 7,44 - 7,51 (m, 3 H) 8,35 (s, 1 H)
Paso 2: Síntesis del (5-(benzoxi)-2-metilpiridin-4-il)metanodiol (LL-3)
A una solución de LL-2 (2160 mg, 7,961 mmol) en 20 ml de MeOH se añadió hidróxido de sodio (1590 mg, 39,8 mmol, 7,96 ml, 5,0 M), y la reacción se calentó a 50 °C durante 4 horas. La mezcla se enfrió a r.t., se evaporó el MeOH, se añadió H2O, se neutralizó con HCl 1 N hasta un pH aproximado de 4, y se estrelló el sólido de color amarillo que se filtró y se enjuagó con H2O para dar LL-3 (1,66 g, rendimiento del 86 %).
LCMS [M+1] 244,10. 1HRMN (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 2,42 (s, 3 H) 5,27 (s, 2 H) 7,33 (d, J=7,21 Hz, 1 H) 7,35 -7,43 (m, 3 H) 7,44 - 7,52 (m, 2 H) 8,41 (s, 1 H)
Paso 3-7: - Síntesis del 8-hidroxi-5-metil-3,4-dihidro-2,6-naftiridina-2(1H)-carboxilato de tert-butilo (TP-17)
Siguiendo procedimientos similares al paso 3 del Esquema GG (1,60 g, 6 8 %), el paso 4 del Esquema GG utilizando pivolato de cesio y dicloroetano en lugar de acetato de potasio y acetonitrilo (620 mg, 49 %), el paso 5 del Esquema FF (366 mg, 64 %), el paso 6 del Esquema GG (483 mg, 96 %) y el paso 9 del Esquema GG ( 3 86 mg, 100 %), LL-3 se convirtió en TP-17.
1HRMN (400 MHz, CLOROFORMO-d) 8 ppm 1,51 (s, 9 H) 2,41 (s, 3 H) 2,71 (t, J=5,38 Hz, 2 H) 3,69 (t, J=5,75 Hz, 2 H) 4,59 (s, 2 H) 7,95 (s, 1 H)
Síntesis del 6-ciano-8-hidroxi-3,4-dihidroisoquinolin-2(1H)-carboxilato de tert-butilo (TP-18)
Figure imgf000096_0002
Paso 1: Síntesis del 8-(benciloxi)-6-ciano-3,4-dihidroisoquinolin-2(1H)-carboxilato de tert-butilo (MM-1) El compuesto GG-7 (700 mg, 1,67 mmol) se disolvió en DMF (5,00 ml). A la solución anterior se añadió Zn(CN)2 (236 mg, 2,01 mmol). La solución de reacción se desgasificó durante 2 min. Se añadió Pd(PPh3)4 (580 mg, 0,502 mmol) a la mezcla anterior. La mezcla de reacción se desgasificó con N2 durante 3 min. A continuación, la mezcla de reacción se calentó por microondas a 150 °C durante 30 min. La solución de reacción pasó de ser amarilla a negra. La solución de reacción se enfrió y se diluyó con EtOAc/H2O (8 ml/ 8ml), luego se filtró la mezcla y se extrajo el filtrado. La capa orgánica se separó, se secó y se evaporó para dar el producto crudo, que se purificó por cromatografía instantánea con éter de petróleo/EtOAc al 0-25 % para dar MM-1 (350 mg, 57 %) como sólido blanco. LCMS 265 [M-Boc]+; 1HRMN (400MHz, DMSO-da) 5 ppm 7,52 - 7,32 (m, 6H), 7,29 (s, 1H), 5,22 (s. br., 2H), 4,53 - 4,40 (m, 2H), 3,54 (t, J=5,6 Hz, 2H), 2,79 (t, J=5,5 Hz, 2H), 1,41 (s, 9H)
Paso 2: Síntesis del 6-ciano-8-hidroxi-3,4-dihidroisoquina-2(1H)-carboxilato de tert-butilo (TP-18)
El compuesto MM-1 (320 mg, 0,878 mmol) se disolvió en MeOH (3 ml). Se añadió Pd/C (93 mg, 0,44 mmol) a la solución de reacción y se desgasificó con globo de H2 tres veces, y se agitó bajo globo de h2 a 20 °C durante 1 hora. Se añadió DCM (5 ml) a la mezcla anterior, la mezcla de reacción se filtró y se concentró para dar el producto crudo, que se purificó por cromatografía instantánea con éter de petróleo/EtOAc de 0-50 % para dar TP-18 como un sólido blanco (125 mg, 51,9%). LCMS [219-tBu]+; 1HRMN (400 MHz, CDCls) 5 ppm 7,45 - 7,28 (m, 1H), 7,10-6,95 (m, 1H), 6,87 (s. br., 1H), 4,57 (s. br., 2H), 3,66 (t, J=5,9 Hz, 2H), 2,82 (s. br., 2H), 1,53 (s, 9H)
Los Ejemplos 84-98 se hicieron de forma similar al Ejemplo 78 del Esquema CC, utilizando la tetrahidroisoquinolina protegida con NBoc apropiada en el paso 1.
Figure imgf000097_0001
(continuación)
Figure imgf000098_0001
(continuación)
Figure imgf000099_0001
(continuación)
Figure imgf000100_0002
Ejemplo 99 (Esquema NN) - (1S,2S,3R,5S)-3-(4-ammo-5-fluoro-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidm-7-M)-5-((1,2,3,4-tetrahidroisoqumolm-8-il)oxi)ciclopentano-1,2-diol (NN-5)
Figure imgf000100_0001
Paso 1 - Síntesis del ((1S,4R)-4-(4-cloro-5-fluoro-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)ciclopent-2-en-1-il)carbonato de tert-butilo (NN-1)
Vial A: A un matraz de fondo redondo seco (purgado con N2) se añadió el ligando (S,S)-DACH-naftilo Trost (1,13 g, 1,43 mmol) y Pd2(dba)3.CHCl3 (493 mg, 0,48 mmol). Se purgó el vial con N2 cuatro veces y se añadió DCE (50 ml, rociado con N2 durante 30 min). La solución negra se agitó durante 30 minutos a 12 °C, momento en el que se obtuvo una solución de color rojo-marrón.
Vial B: A un matraz de fondo redondo seco (purgado con N2) se añadieron BB-1 (7155 mg, 23,82 mmol), 4-cloro-5-fluoro-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidina (4,5 g, 26,23 mmol) y Cs2CO3 (8,54 g, 26,2 mmol). Se purgó el vial con N2 cinco veces y se añadió DCE (50 ml), seguido de la adición del contenido del vial A mediante jeringa. La reacción se agitó a 12 °C bajo N2 durante 24 horas.
La mezcla de reacción se filtró y se concentró hasta obtener una goma marrón. El residuo crudo se purificó por biotage flash (120 g, gel de sílice, EtOAc/éter de petróleo = 15 %) para dar NN-1 (6,4 g, 76 %) como un sólido blanquecino.
LCMS [M+1] 354; 1HRMN (400 MHz, CDCla) 5 ppm 8,62 (s, 1H), 7,08 (d, J=2,5 Hz, 1H), 6,35 - 6,29 (m, 1H), 6,10 -6,00 (m, 2H), 5,63-5,55 (m, 1H), 3,11 (td, J=7,8, 15,4 Hz, 1H), 1,87 (td, J=3,8, 15,0 Hz, 1H), 1,52 (s, 9H) Paso 2 - Síntesis del 8-((1S,4R)-4-(4-cloro-5-fluoro-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)ciclopent-2-en-1-il)oxi)-3,4-dihidroisoquinolin-2(1H)-carboxilato de tert-butilo (NN-2)
En un vial de microondas seco (purgado con N2) se añadió NN-1 (200 mg, 0,57 mmol), 8-hidroxi-3,4-dihidroisoquinolin-2 (1 H)-carboxilato de tert-butilo (141 mg, 0,57 mmol), Cs2CO3 (203 mg, 0,622 mmol), Pd2(dba)3.CHCl3 (15 mg, 0,014 mmol) y DPPP (14 mg, 0,03 mmol). A continuación, se purgó el vial con N2 tres veces y se añadió DCE (2,6 ml, rociado con N2 durante 30 minutos). La mezcla negra se agitó a 20 °C durante 1 hora. A continuación, la mezcla de reacción se purificó directamente por pre-TLC (éter de petróleo:EtOAc=4:1) para dar NN-2 (260 mg, 95 %) como espuma blanca.
LCMS [M+23] 507; 1HRMN (400 MHz, CDCl3) 5 ppm 8,63 (s, 1H), 7,16 (d, J=2,0 Hz, 1H), 7,14 - 7,09 (m, 1H), 6,79 (d, J=7,3 Hz, 1H), 6,74 (d, J=7,5 Hz, 1H), 6,46 - 6,40 (m, 1H), 6,15 - 6,06 (m, 2H), 5,37 - 5,31 (m, 1H), 4,74 - 4,42 (m, 2H), 3 ,75-3,54 (m, 2H), 3,19-3,10 (m, 1H), 2,87-2,79 (m, 2H), 1,97 (d, J=14,6 Hz, 1H), 1,51 (s, 9H)
Paso 2 - Síntesis del 8-((1S,2S,3S,4R)-4-(4-cloro-5-fluoro-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)-2,3-dihidroxiciclopentil)oxi)-3,4-dihidroisoquinolin-2(1H)-carboxilato de tert-butilo (NN-3)
A una mezcla de NN-2 (260 mg, 0,536 mmol) en DCM (9 ml)/H2O (0,3 ml) se añadió NMO (188 mg, 1,61 mmol) y OsO4 (4 % en t-BuOH, 204 mg, 0,0322 mmol) a 20 °C. La mezcla negra se agitó a 20 °C durante 2 horas. La mezcla se diluyó con DCM (10 ml) y se inactivó con DCM sat. Na2SO3 (5 ml) y se separó. La capa acuosa se extrajo con DCM (10 ml). La capa orgánica combinada se lavó con salmuera (10 ml), se secó sobre Na2SO4, se filtró y se concentró y se purificó por OICV (12 g, gel de sílice, EtOAc:éter de petróleo=1:1) para obtener NN-3 (230 mg, 8 3 %) como una goma incolora.
LCMS [M+23] 541; 1HRMN (400 MHz, CDCl3) 5 ppm 8,62 (s, 1H), 7,17 (t, J=8,0 Hz, 1H), 7,13 (d, J=2,5 Hz, 1H), 6 , 8 6 - 6,79 (m, 2H), 5,21 - 5,05 (m, 1H), 5,02 - 4,75 (m, 2H), 4,67 - 4,56 (m, 1H), 4,53 - 4,42 (m, 2H), 4,37 - 4,29 (m, 1H), 3,72 - 3,57 (m, 2H), 3,32 - 2,99 (m, 2H), 2,87 - 2,78 (m, 2H), 2,33 - 2,22 (m, 1H), 1,50 - 1,44 (m, 9H)
Paso 3 - Síntesis del 8-((1S,2S,3S,4R)-4-(4-amino-5-fluoro-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)-2,3-dihidroxiciclopentil)oxi)-3,4-dihidroisoquinolin-2(1H)-carboxilato de tert-butilo (NN-4)
Una solución de NN-3 (105 mg, 0,202 mmol) en NH3.H2O y dioxano (2,8 ml /2,8 ml) se selló en un tubo de acero a 90 °C durante 15 horas. La reacción se concentró para dar n N-4 ( 101 mg, >99 %) como una goma de color amarillo y se utilizó directamente en el siguiente paso. LCMS [M+23] 522
Paso 4 - Síntesis de (1S,2S,3R,5S)-3-(4-amino-5-fluoro-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)-5-((1,2,3,4-tetrahidroisoquinolin-8-il)oxi)ciclopentano-1,2-diol (NN-5)
A una solución amarilla clara de NN-4 (101 mg, 0,202 mmol) en DCM (5 ml) se añadió TFA (1 ml) gota a gota a 0 °C. La mezcla de la solución amarilla se agitó a 20 °C durante 2 horas. La mezcla se concentró Se añadió MeOH (4 ml) al residuo y se basificó con K2CO3 sólido hasta alcanzar un pH de 7-8. La mezcla se filtró y se concentró purificándose por HPLC prep. para dar NN-5 (35 mg, 39 %) como un sólido de color amarillo claro.
LCMS [M+1] 400; 1HRMN (400 MHz, MeOD) 5 ppm 8,09 (s, 1H), 7,35- 7,23 (m, 1H), 7 ,15-7,06 (m, 1H), 7 ,03-6,96 (m, 1H), 6,94 - 6,83 (m, 1H), 5,16 - 5,07 (m, 1H), 4,75 - 4,68 (m, 1H), 4,63 - 4,55 (m, 1H), 4,37 (s, 2H), 4,22 - 4,16 (m, 1H), 3,54-3,44 (m, 2H), 3,17-3,08 (m, 2H), 3,04-2,92 (m, 1H), 2,16-2,02 (m, 1H)
Los Ejemplos 100-111 se hicieron de forma similar al Ejemplo 99 del Esquema NN utilizando la tetrahidroisoquinolina protegida con NBoc apropiada en el paso 2.
Figure imgf000101_0001
(continuación)
Figure imgf000102_0001
(continuación)
Figure imgf000103_0001
(continuación)
Figure imgf000104_0001
(continuación)
Figure imgf000105_0002
Ejemplo 114 (Esquema OO) - (1S,2S,3R,5S)-3-(4-ammo-5-fluoro-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidm-7-N)-5-((2-metN-1,2,3,4-tetrahidroisoquinolin-8-il)oxi)ciclopentano-1,2-diol (OO-1) (referencia)
Figure imgf000105_0001
Paso 1 - Síntesis de (1S,2S,3R,5S)-3-(4-ammo-5-fluoro-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidm-7-il)-5-((2-metiM,2,3,4-tetrahidroisoquinolin-8-il)oxi)ciclopentano-1,2-diol (OO-1)
Una mezcla de NN-5 (100 mg, 0,25 mmol), 37 % de CH2O (31 mg, 0,38 mmol) y NaBH(OAc)3 (212 mg, 1,0 mmol) en THF (6 ml) se agitó a 20 °C durante 2 horas. La mezcla se filtró y se envió a Hp Lc prep. para dar OO-1 (65 mg, 53 %) como un sólido de color amarillo claro. LCMS 414 [M+1]; 1HRMN (400 MHz, MeOD-d4) 5 ppm 8,10 (s, 1H), 7,34 - 7,27 (m, 1H), 7,16 - 7,10 (m, 1H), 7,03 - 6,97 (m, 1H), 6,94 - 6,88 (m, 1H), 5,18 - 5,09 (m, 1H), 4,75 - 4,68 (m, 1H), 4,59 -4,53 (m, 1H), 4,42 - 4,34 (m, 2H), 4,21 - 4,16 (m, 1H), 3,55 - 3,46 (m, 2H), 3,23 - 3,16 (m, 2H), 3,08 (s, 3H), 3,04 - 2,92 (m, 1H), 2 ,16-2,03 (m, 1H)
Los Ejemplos 115 y 116 se hicieron utilizando procedimientos similares al Esquema OO de los Ejemplos 110 y 111 respectivamente.
Figure imgf000105_0003
(continuación)
Figure imgf000106_0003
Síntesis de la 5-fluoro-2-metil-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidina (HG-3)
Figure imgf000106_0001
A una solución de 2-cloro-7H-pirrolo[2,3-d] pirimidina(PP-1) (8,5 g, 55 mmol) y selectfluor(29,4 g, 83,0 mmol) en CH3CN (500 ml) se añadió AcOH (100 ml) bajo N2. La mezcla se agitó a 70 °C durante 16 horas. El color de la reacción pasó de amarillo a naranja. La reacción se concentró y se sometió a a azeotropía con tolueno (30 ml x 3). A continuación, el sólido se diluyó con CH2Ch/EtOAc (1/1, 200 ml) y se agitó a temperatura ambiente (25oC) durante 16 horas y se filtró. El filtrado se concentró y se lavó con DCM para obtener el material crudo como un sólido marrón. Se añadió MBTE, se agitó durante la noche y se filtró para obtener PP-2 (1,5 g, 15 %) como un sólido de color amarillo. LCMS 172 [M+1]; 1HRMN (400 MHz, MeOD-d4) 5 ppm 8,89 (d, J=0,8 Hz, 1H), 7,31 (d, J=2,5 Hz, 1H)
Paso 2 - Síntesis de la 5-fluoro-2-metil-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidina (HG-3)
Se añadió Pd(PPh3)4 (835 mg, 0,723 mmol) a una solución de PP-2 (2,48 g , 14,46 mmol) en THF seco (36 ml) a 10 oC. La suspensión se desgasificó con N2. A la mezcla anterior se añadió lentamente una solución de Me3Al (2M, 14,5 ml, 28,9 mmol) a -10 °C. Tras la adición, la mezcla se calentó a 70 °C durante 16 horas. La mezcla de reacción se añadió al agua helada con cuidado. La mezcla se diluyó con EtOAc y se filtró a través de Celite. El filtrado se sometió a partición entre EtOAc y H2O. La capa orgánica se separó y se lavó con salmuera, se secó sobre Na2SO4 y se concentró para obtener el producto crudo y se purificó mediante columna instantánea (MeOH: DCM = 1 %~7,5 %) para obtener el producto HG-3 (1,2 g, 55 %) como un sólido de color amarillo. LCMS 152 [M+1]; 1HRMN (400 MHz, MeOD-d4) 5 ppm 11,76 (s. br., 1H), 8,96 (s, 1H), 7,44 (t, J=2,5 Hz, 1H), 2,63 (s, 3H)
Síntesis de la 5-fluoro-4-metil-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidina (HG-4)
Figure imgf000106_0002
A Pd(PPh3)4 (2 g, 1,75 mmol) se añadió una solución de HG-2 (7,5 g, 43,7 mmol) en THF seco (75 ml). La suspensión se desgasificó con N2. A la mezcla anterior se añadió una solución de AlMe3 (43,7 ml, 87,5 mmol, 2M) en agua helada. Tras la adición, la solución amarilla se calentó a 80 °C durante 16h. La mezcla de reacción se inactivó con hielo y sal acuosa de Rochelle. La mezcla se sometió a partición entre EtOAc y H2O. La mezcla se filtró y la torta filtrada se lavó con EtOAc (100 ml x 3). La capa orgánica se separó y se secó sobre Na2SO4 y se concentró, luego se purificó mediante columna instantánea (MeOH:DCM = 1 %~4 %) para obtener el producto. El producto se trituró en DCM y se filtró. La torta filtrada se lavó con TBME y se recogió para obtener el producto HG-4 (2,00 g, 30 %) como un sólido de color amarillo. El filtrado se concentró y se purificó mediante una columna instantánea (MeOH: DCM = 1 %~5 %) para obtener el producto. LCMS 152 [M+1]; 1HRMN (400 MHz, MeOD-d4) 5 ppm 11,89 (s. br., 1H), 8,62 (s, 1H), 7,48 (t, J=2,5 Hz, 1H), 2,70 (s, 3H)
Síntesis de la 4-cloro-5-fluoro-2-metil-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidina (HG-5)
Figure imgf000107_0001
Paso 1 - Síntesis de la 4-cloro-2-metil-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidina (RR-2)
Una mezcla de 2-metil-3,7-dihidro-4H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-ona(RR-1) (2,7 g, 18,1 mmol) en POCh (35 ml) se calentó a reflujo durante 4 horas. La mezcla se enfrió a 20 °C y se concentró. Al residuo se le añadió agua helada (20 ml) y se basificó con Na2CO3 sólido hasta pH~8. La mezcla se extrajo con EtOAc (60 ml X 2). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera ( 1 00 ml), se secaron sobre Na2S o4, se filtraron y se concentraron para obtener RR-2 (2,4 g, 78 %) como un sólido blanquecino. LCMS 168 [M+1]; 1HRMN (400 MHz, CDCls) 5 ppm 10,70 - 10,41 (m, 1H), 7,36 - 7,29 (m, 1H), 6,67 - 6,56 (m, 1H), 2,81 (s, 3H)
Paso 2 - Síntesis de la 4-cloro-5-fluoro-2-metil-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidina (HG-5)
Una mezcla de RR-2 (2,35 g, 14 mmol) y Selectfluor (7,45 g, 21 mmol) en CH3CN (110 ml) y AcOH (22 ml) se agitó a 70 °C bajo N2 durante 16 horas en las que la reacción pasó de ser marrón a rosa. La mezcla se concentró y se sometió a azeotropía con tolueno (50 ml x 2). El filtrado se concentró y se purificó por HPLC prep. para dar HG-5 (600 mg, 23 %) como un sólido de color amarillo. LCMS 186 [M+1]; 1HRMN (400 MHz, MeOD-d4) 5 ppm 12,27 - 12,18 (m, 1H), 7 ,62-7,56 (m, 1H), 2,61 (s, 3H)
Los Ejemplos 117-119 se hicieron de forma similar al CC-3 (Ejemplo 78) utilizando la pirrolopirimidina apropiada en el paso 1 del Esquema BB y la tetrahidroisoquinolina protegida con N-Boc apropiada en el paso 1 del Esquema Cc .
Figure imgf000107_0002
(continuación)
Figure imgf000108_0001
El Ejemplo 120 se hizo de forma similar al NN-5 (Ejemplo 99) utilizando la pirrolopirimidina apropiada en el paso 1 del Esquema BB y la tetrahidroisoquinolina protegida N-Boc apropiada en el paso 1 del Esquema NN.
Figure imgf000109_0002
Ejemplo 121 (Esquema SS) - (1S,2S,3R,5S)-3-(4-ammo-5-metil-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidm-7-N)-5-((5-fluoro-1,2,3,4-tetrahidroisoquinolin-8-il)oxi)cidopentano-1,2-diol (SS-5)
Figure imgf000109_0001
Paso 1: Síntesis del 8-(((1S,4R)-4-((tert-butoxicarboml)oxi)ciclopent-2-en-1-il)oxi)-5-fluoro-3,4-dihidroisoquinolin-2(1H)-carboxilato de tert-butilo (SS-1)
Vial A: A un vial de reacción secado en horno, equipado con una barra de agitación magnética y enfriado bajo una corriente de argón, se añadió el aducto de Tris(bencílidenoacetona)dipaladio(0)doroformo (62 mg, 0,060 mmol) y el ligando MFCD02684551 (R,R)-DACH-naftilo Trost (142 mg, 0,180 mmol). El vial se purgó con argón bajo vacío dinámico y se añadió DCE (5,0 ml), que había sido rociado con argón durante 30 minutos. La solución se agitó durante 30 minutos a rt, momento en el que se obtuvo una solución naranja brillante de catalizador ligado. En esta fase se preparó el vial B .
Vial B: A un vial de reacción secado en horno, equipado con una barra de agitación magnética y enfriado bajo una corriente de argón, se añadió TP-2 (800 mg, 2,99 mmol), y di-tert-butil-((1R,3S)-ciclopent-4-ene-1,3-diil)-bis(carbonato)(BB-1) (preparado como se informa en J. Am. Chem. Soc. 2006, 128, 6054-6055) (1,08 g, 3,59 mmol). El vial se purgó con argón bajo vacío dinámico y se añadió DCE (5,0 ml), que había sido rociado con argón durante 30 minutos, seguido de la adición del contenido del vial A mediante una jeringa hermética. La reacción se agitó bajo argón a rt durante 12 horas. La reacción se concentró al vacío y se purificó mediante cromatografía en columna instantánea (24 g de SiO2, Isco, 100 % de Hept. a 100 % de EtOAc, 20 ml de fracciones) para obtener SS-1 (1,33 g, >95 %) como un sólido de color amarillo pálido. LCMS [M+H-Boc-isobutileno] = 294 observado; 1H RMN (400MHz, CLOROFORMO-d) 5 ppm 6,84 (t, J=8,8 Hz, 1H), 6,65 (dd, J=4,3, 8,9 Hz, 1H), 6,20 (td, J=1,5, 5,7 Hz, 1H), 6,17 - 6,11 (m, 1H), 5,46 (t, J=5,9 Hz, 1H), 5,09 (t, J=5,6 Hz, 1H), 4,57 - 4,40 (m, 2H), 3,72 - 3,54 (m, 2H), 3,02 (td, J=7,4, 14,5 Hz, 1H), 2,77 (t, J=5,7 Hz, 2H), 1,94 (td, J=4,5, 14,4 Hz, 1H), 1,50 (d, J=1,6 Hz, 18H).
Paso 2: Síntesis del 8-((1S,4R)-4-(4-doro-5-metil-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)ddopent-2-en-1-il)oxi)-5-fluoro-3,4-dihidroisoquinolin-2(1H)-carboxilato de tert-butilo (SS-2)
En un vial de centelleo, equipado con una barra de agitación magnética, se añadió HG-6 (113 mg, 0,674 mmol), SS-1 (303 mg, 0,674 mmol), difenilfosfinopropano (dppp) (139 mg, 0,034 mmol), aducto de tris(dibencílideneacetona)dipaladio(0)doroformo (14 mg, 0,014 mmol) y carbonato de cesio (242 mg, 0,741 mmol). El vial se purgó con argón bajo vacío dinámico, seguido de la adición de DCE (2,25 ml) que había sido rociado con argón durante 30 minutos. La reacción se agitó a rt bajo argón durante 1,5 horas. La reacción se transfirió a un embudo separador con DCM y se diluyó con agua. Las fases se separaron y la fase acuosa se extrajo con 2 porciones de DCM. Las fases orgánicas combinadas se secaron (MgSO4), se filtraron y se concentraron al vacío. El residuo crudo se purificó mediante cromatografía en columna instantánea (12 g de SiO2, Isco, 100 % de Hept. a 100 % de EtOAc, 9 ml de fracciones) para obtener SS-2 (287,6 mg, 86 %) como una goma incolora. LCMS [M+H] = 499 observado; 1H RMN (400MHz, CLOROFORMO-d) 8 ppm 8,57 (s, 1H), 7,14 (s, 1H), 6,86 (t, J=8,8 Hz, 1H), 6,68 (dd, J=3,7, 8,4 Hz, 1H), 6,37 (d, J=5,4 Hz, 1H), 6,11 (d, J=4,4 Hz, 1H), 6 ,06-5,96 (m, 1H), 5,33 -5,25 (m, 1H), 4,69-4,41 (m, 2H), 3,75 - 3,55 (m, 2H), 3,22 - 3,03 (m, 1H), 2,79 (t, J=5,4 Hz, 2H), 2,49 (s, 3H), 1,95 (td, J=3,6, 14,8 Hz, 1H), 1,51 (s, 9H).
Paso 3: Síntesis del 8-((1S,2S,3S,4R)-4-(4-doro-5-metil-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)-2,3-dihidroxiciclopentil)oxi)-5-fluoro-3,4-dihidroisoquinolin-2(1H)-carboxilato de tert-butilo (SS-3)
A un vial de centelleo, equipado con una barra de agitación magnética y que contenía SS-2 (278 mg, 0,557 mmol), se añadió DCM (2,79 ml). A la solución se añadió óxido de 4-metilmorfolina (NMO) (0,13 ml, 0,613 mmol) como solución al 50 % en agua, seguida de la adición gota a gota detetraóxido de osmio (100 pl, 0,022 mmol) como solución al 4 % en agua. La reacción se agitó a rt durante 4 horas. La reacción se transfirió a un embudo separador con DCM, se diluyó con agua y se volvió a diluir con NaHSO31M. Las fases se separaron y la fase acuosa se extrajo con 3 porciones de DCM. Los extractos orgánicos combinados se secaron (MgSO4), se filtraron y se concentraron al vacío. El residuo crudo se purificó mediante cromatografía en columna instantánea (12g de SiO2 , Isco, 100 % de Hept. a 100 % de EtOAc, 9 ml de fracciones) para obtener SS-3 (169 mg, 57 %) como sólido blanco. LCMS [M+H] = 533 observado; 1H RMN (400MHz, CLOROFORMO-d) 8 ppm 8,49 (s, 1H), 7,09 (s. br, 1H), 6,89 (t, J=8,8 Hz, 1H), 6,81 (dd, J=4,2, 8,8 Hz, 1H), 5,03 (q, J=8,9 Hz, 1H), 4,73 (t, J=5,2 Hz, 1H), 4,55 (dd, J=5,2, 8,1 Hz, 1H), 4,53-4,40 (m, 2H), 4,30 (d, J=4,5 Hz, 1H), 3,73 - 3,54 (m, 2H), 3,13 - 2,97 (m, 1H), 2,79 (t, J=5,7 Hz, 2H), 2,49 (s, 3H), 2,31 (ddd, J=4,6, 9,4, 14,1 Hz, 1H), 1,48 (s. br, 9H).
Paso 4: Síntesis del 8-((1S,2S,3S,4R)-4-(4-amino-5-metil-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)-2,3-dihidroxicidopentil)oxi)-5-fluoro-3,4-dihidroisoquinolin-2(1H)-carboxilato de tert-butilo (SS-4)
A un vial de reacción, equipado con una barra de agitación magnética, se añadió SS-3 (159 mg, 0,298 mmol) como solución en dioxano (0,8 ml) e hidróxido de amonio (0,8 ml, 5,00 mmol). La reacción se colocó en un reactor de microondas y se calentó a 120 °C durante 6 horas. La solución se transfirió a un embudo separador con DCM y se diluyó con agua. Las fases se separaron y la fase acuosa se extrajo con 3 porciones de una mezcla 3:1 de DCM:IPA. Los extractos orgánicos combinados se secaron (MgSO4), se filtraron y se concentraron al vacío. El residuo crudo se purificó mediante cromatografía en columna instantánea (12 g de SiO2, Isco, 100 % de Hept. a 10 % de MeOH/EtOAc, fracciones de 9 ml) para obtener SS-4 (98,4 mg, 64 %) como un sólido blanco. LCMS [M+H] = 514 observado; [a]22D= -70,0° (C=0,1, MeOH); 1H RMN (400MHz, CLOROFORMO-d) 8 ppm 8,13 (s, 1H), 6,98-6,81 (m, 2H), 6,76 (s. br, 1H), 5,32 (s. br., 2H), 4,93-4,80 (m, 1H), 4,73 (t, J=5,3 Hz, 1H), 4,54 (s. br, 1H), 4,44 (d, J=16,8 Hz, 2H), 4,25 (s. br., 1H), 3,75-3,51 (m, 2H), 3,11 -2,92 (m, 1H), 2,79 (t, J=5,5 Hz, 2H), 2,43 (s, 3H), 2 ,38-2,25 (m, 1H), 1,48 (s. br., 9H).
Paso 5: Síntesis de (1S,2S,3R,5S)-3-(4-amino-5-metil-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)-5-((5-fluoro-1,2,3,4-tetrahidroisoquinolin-8-il)oxi)ciclopentano-1,2-diol (SS-5)
A un vial de centelleo, equipado con una barra de agitación magnética y que contenía SS-4 (79,4 mg, 0,155 mmol), se añadió dioxano (0,4 ml). A la solución se añadió ácido clorhídrico (0,4 ml) como solución 4M en dioxano y la reacción se agitó a rt durante 17 horas. La reacción se inactivó con NaHCO3 acuoso medio saturado y se transfirió aun embudo separador con DCM. Las fases se separaron y la fase acuosa se extrajo con 3 porciones de mezcla 3:1 de DCM/IPA. Los extractos orgánicos combinados se secaron (MgSO4), se filtraron y se concentraron al vacío. El material aislado se disolvió en una cantidad mínima de metanol y se diluyó con agua. La muestra se congeló y se liofilizó durante la noche para obtener SS-5 (51,3 mg, 80 %) como un sólido blanco. LCMS [M+H] 414 observado; 1H RMN (400MHz, METANOL-d4) 8 ppm 8,03 (s, 1H), 6,98 (d, J=1,0 Hz, 1H), 6,93 - 6,81 (m, 2H), 5,07 (q, J=8,7 Hz, 1H), 4,62 (ddd, J=1,8, 4,0, 7,0 Hz, 1H), 4,51 (dd, J=5,0, 8,5 Hz, 1H), 4,17-4,11 (m, 1H), 3,98 (s, 2H), 3,10 (t, J=6,0 Hz, 2H), 2,93 (ddd, J=7,3, 9,3, 14,5 Hz, 1H), 2,77 (t, J=5,9 Hz, 2H), 2,43 (d, J=1,1 Hz, 3H), 1,99 (ddd, J=4,0, 8,4, 13,8 Hz, 1H); 19F RMN (376MHz, METANOL-d4) d = -131,36 (s, 1F).
Los Ejemplos 122-129 se hicieron de forma similar al SS-5 (Ejemplo 121) utilizando la tetrahidroisoquinolina protegida con N-Boc apropiada en el paso 1 S y la pirrolopirimidina apropiada en el paso 2 del Esquema SS.
Figure imgf000111_0001
(continuación)
Figure imgf000112_0001
(continuación)
Figure imgf000113_0001
Los Ejemplos 130 - 132 se prepararon utilizando la química descrita en el Esquema SS empleando la tetrahidroisoquinolina apropiada para el paso 1 y la pirrolopirimidina para el paso 2. En una modificación del paso 5, se utilizó ácido trifluoroacético (TFA) para la desprotección.
Ejemplo 130 (Esquema TT) - (1S,2S,3R,5S)-3-(4-amino-5-cloro-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)-5-((6-cloro-1,2,3,4-tetrahidroisoquinolin-8-il)oxi)ciclopentano-1,2-diol (TT-2)
Figure imgf000114_0001
A una solución enfriada de TT-1 (50,0 mg, 0,091 mmol) en DCM (2,0 ml) se añadió TFA (0,50 ml). La solución amarilla se agitó a 15 °C durante 1 hora. La reacción se concentró al vacío para dar el producto crudo y el pH de la solución se ajustó a 7-8 utilizando NaHCO3 ac.. saturado. (A continuación, FA (1 %) ac.. (2 ml) a la solución de reacción. La mezcla se purificó por HPLC prep. y las fracciones deseadas se combinaron y liofilizaron para obtener TT-2 (35,0 mg, 86 %) como sólido blanco.
Figure imgf000114_0002
(continuación)
Figure imgf000115_0002
Los Ejemplos 133 y 134 se prepararon utilizando la química descrita en el Esquema SS, empleando la tetrahidroisoquinolina apropiada para el paso 1 y la pirrolopirimidina para el paso 2. En una modificación del procedimiento general para el paso 4, se empleó HOBt como catalizador, tal como se describe en el Esquema UU.
Síntesis del 8-((1S,2S,3S,4R)-4-(4-amino-5-cloro-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)-2,3-dihidroxiciclopentil)oxi)-5-fluoro-3,4-dihidroisoquinolin-2(1H)-carboxilato de tert-butilo (UU-2)
Figure imgf000115_0001
A un vial de reacción, equipado con una barra de agitación magnética, se añadió UU-1 (147 mg, 0,266) como solución en DMA (2,5 ml) seguido de la adición de HOBt.hidrato (8,13 mg, 0,053 mmol). A la solución se añadió hidróxido de amonio (1,0 ml, 7,96 mmol). El vial se cerró con un tapón de teflón y se colocó en un bloque de calentamiento. La reacción se calentó a 100 °C durante 19 horas. La solución se transfirió a un embudo separador con DCM y se diluyó con agua. Las fases se separaron y la fase acuosa se extrajo con 3 porciones de d Cm . Los extractos orgánicos combinados se secaron (MgSO4), se filtraron y se concentraron al vacío. El residuo crudo se purificó mediante cromatografía en columna instantánea (4g SiO2, Isco, 100 % Hept. a 10 % MeOH/EtOAc, fracciones de 9 ml). Las fracciones que contenían el producto se recogieron y se concentraron al vacío. El material se liofilizó para obtener el producto, con impurezas menores, como un sólido blanquecino (140,7 mg, 99 %). El material se utilizó en el paso 5, empleando TFA/DCM para la desprotección, como se indica en el Esquema TT, sin purificación adicional.
Figure imgf000116_0002
Ejemplo 135 (Esquema VV) - (1S,2S,3S,5R)-3-(4-fluoro-2-(hidroximetil)fenoxi)-5-(4-metil-7H-pirrol[2,3-d]pirimidm-7-M)ciclopentano-1,2-diol (2) (referencia)
Figure imgf000116_0001
El compuesto VV-1 se preparó utilizando los procedimientos de los pasos 2 y 3 del Esquema BB partiendo de BB-2 y utilizando el 5-fluoro-2-hidroxibenzoato de metilo disponible en el mercado. A una solución de VV-1 (90 mg, 0,22 mmol) en THF seco (5 ml) se añadió LiAlH4 (30 mg, 0,79 mmol) a 0 °C durante 2 horas. Se añadió H2O (30 ml) a la mezcla de reacción y la mezcla se extrajo con EtOAc (30 mlx4). La capa orgánica se lavó con salmuera, se secó sobre Na2SO4 y se concentró al vacío hasta obtener un residuo que se purificó por pre-TLC dando VV-2 (60 mg, 72 %) como un sólido blanco. LCMS 374 [M+1]; 1HRMN (400 MHz, DMSO-da) 8 ppm 8,62 (s, 1H), 7,65 (d, J=3,8 Hz, 1H), 7,18 (d, J=9,0 Hz, 1H), 7,04 - 6,99 (m, 2H), 6,72 (d, J=3,5 Hz, 1H), 5,32 (d, J=3,8 Hz, 1H), 5,23 (t, J=5,6 Hz, 1H), 5,16 - 5,07 (m, 2H), 4,58 (d, J=5,8 Hz, 2H), 4,56 - 4,50 (m, 2H), 3,99 (s. br, 1H), 2,88 - 2,78 (m, 1H), 2,64 (s, 3H), 1,97 - 1,87 (m, 1H)
Ejemplo 136 (Esquema WW) -(1S,2S,3S,5R)-3-(4-fluoro-2-hidroxifenoxi)-5-(4-metil-7H-pirrolo[2,3-d]pinmidm-7-il)ciclopentano-1,2-diol (WW-6) (referencia)
Figure imgf000117_0001
Paso 1 - Síntesis de 1-(2-((3aR,4S,6R,6aS)-2,2-dimetil-6-(4-metil-7H-pirrolo[2,3-d]pmmidm-7-il)tetrahidro-4H-ciclopenta[d][1,3]dioxol-4-il)oxi)-5-fluorofenil)etan-1-ona (Ww -2)
El compuesto WW-1 se preparó utilizando los procedimientos de los pasos 2 y 3 del Esquema BB partiendo de BB-2 y utilizando 1-(5-fluoro-2-hidroxifenil)etan-1-ona disponible en el mercado. A una solución de suspensión blanca agitada de WW-1 (1,06 g, 2,75 mmol) en acetona (6 ml) se añadió 2,2-dimetoxipropano (16 ml) y ácido ptoluenosulfónico (523 mg, 2,75 mmol) a r.t (25 °C). La reacción se agitó a 25 °C durante 15 horas. Se añadió NaHCO3 acuoso a la mezcla de reacción hasta que el pH alcanzó 8,0. Luego la mezcla se extrajo con EtOAc (15 ml x 5). Las capas orgánicas se separaron, se secaron y se evaporaron para dar el producto crudo, que se purificó por cromatografía, eluyendo con MeOH/DCM 0-5 % para dar WW-2 (1,06 g, 91 %) como sólido blanco. El material se utilizó directamente en el siguiente paso.
Paso 2 - Síntesis de 7-((3aS,4R,6S,6aR)-6-(2-acetil-4-fluorofenoxi)-2,2-dimetiltetrahidro-4H-ciclopenta[d][1,3]dioxol-4-il)-4-metil-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidina 3-óxido (WW-3)
El compuesto WW-2 (1,03 g, 2,42 mmol) se disolvió en DCM (15 ml). A continuación, se añadió m-CPBA(1,97 g, 9,68 mmol) a la mezcla anterior. La mezcla de reacción se calentó a 40 °C durante 16 horas. La mezcla se enfrió a 25 °C. A continuación, la mezcla se diluyó con DCM (15 ml) y se añadió tiosulfato sódico saturado (15 ml) y se separó la capa orgánica. La capa orgánica se lavó con NaHCO3 saturado (20 ml), se secó sobre Na2SO4 , se filtró y se purificó por cromatografía instantánea eluyendo con 0-10 % de MeOH/DCM para dar WW-3 (600 mg, 56 %) como un aceite de color amarillo y se utilizó directamente en el siguiente paso.
Paso 3 - Síntesis de 3-óxido de 7-((1R,2S,3S,4S)-4-(2-acetoxi-4-fluorofenoxi)-2,3-dihidroxiciclopentilo)-4-metil-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidina (WW-4)
El anhídrido trifluoroacético (3,56 g, 16,9 mmol) se enfrió a -10 °C durante unos 10-20 min y se añadió gota a gota H2O2 al 30 % (457 mg, 3,13 ml) y se agitó durante 10 min (manteniendo la temperatura entre 0 y -10 °C). A esta mezcla se añadió el compuesto WW-3 (570 mg, 1,29 mmol) en DCM (5 ml) gota a gota y se agitó a 25 °C durante 10-30 min. Se añadió a la mezcla anterior Na2S2O3/NaHCO3 ac. (15 ml) saturado y se agitó a 25 °C durante 10 min. La solución de reacción se extrajo con DCM (10 ml x 2), se secó y se evaporó para dar el WW-4 crudo (540 mg, >99 %) como un aceite de color amarillo. LCMS 418 [M+1]
Paso 4 - Síntesis de 2-(((1S,2S,3S,4R)-2,3-dihidroxi-4-(4-metil-7H-pirrolo[2,3-d]pmmidm-7-il)ciclopentil)oxi)-5-fluorofenil acetato (WW-5)
El compuesto WW-4 (540 mg, 1,22 mmol) se disolvió en DMF (1 ml). A continuación, se añadió ácido hipodibórico (658 mg, 7,34 mmol) a la mezcla anterior y se agitó a 25 °C durante 30 min. La solución de reacción de WW-5 se utilizó directamente para el siguiente paso sin purificación adicional. LCMS 402 [M+1]
Paso 5 - Síntesis de (1S,2S,3S,5R)-3-(4-fluoro-2-hidroxifenoxi)-5-(4-metil-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)ciclopentano-1,2-diol (WW-6)
Una solución del compuesto WW-5 (490 mg, 1,11 mmol) en DMF se añadió MeOH (2 ml). A la mezcla anterior se añadió K2CO3 (2,30 g, 16,6 mmol). La mezcla de reacción se agitó a 25 °C durante 2 horas. El disolvente se evaporó y el producto crudo se purificó por HPLC prep. para dar WW-6 (62 mg, 16 %) como un sólido blanco. LCMS 360 [M+1]; 1HRMN (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 9,53 (s, 1H), 8,63 (s, 1H), 7,75 (d, J=3,5 Hz, 1H), 7,01 (dd, J=5,9, 8,9 Hz, 1H), 6,75 (d, J=3,8 Hz, 1H), 6 , 6 8 (d, J=3,0 Hz, 1H), 6 , 6 6 (d, J=3,0 Hz, 1H), 6,56 (dt, J=3,0, 8,7 Hz, 1H), 5,26 (d, J=3,0 Hz, 1H), 5,16 (q, J=8,9 Hz, 1H), 5,07 (d, J=6 , 8 Hz, 1H), 4,54 (s. br, 2H), 4,00 (s. br., 1H), 2 ,83-2,74 (m, 1H), 2,65 (s, 3H), 1,97- 1,90 (m, 1H)
Ejemplo 137 (Esquema XX) - (1S,2S,3S,5R)-3-(2-((R)-1-aminoetil)-4-fluorofenoxi)-5-(4-metil-7H-pirrol[2,3-d]pirimidin-7-il)ciclopentano-1,2-diol (XX-3) (referencia)
Ejemplo 138 (Esquema XX) - (1S,2S,3S,5R)-3-(2-((S)-1-aminoetil)-4-fluorofenoxi)-5-(4-metil-7H-pirrol[2,3-d]pirimidin-7-il)ciclopentano-1,2-diol (XX-4) (referencia)
Figure imgf000118_0001
Paso 1 - Síntesis de 1-(2-((3aR,4S,6R,6aS)-2,2-dimetil-6-(4-metil-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)tetrahidro-4H-ciclopenta[d][1,3]dioxol-4-il)oxi)-5-fluorofenil)etan-1-amina (XX-1)
El compuesto WW-2 (100 mg, 0,235 mmol) se disolvió en MeOH (1 ml). A continuación, se añadió NH4OAc (181 mg, 2,35 mmol) a la mezcla anterior y se agitó a 25 °C durante 1 hora. A continuación se añadió NaBHaCN (89 mg, 1,41 mmol) y se calentó a 80 °C durante 16 horas. La mezcla se enfrió a 25 °C, después se añadió 1 ml de NaHCO3 saturado y se agitó a 25 °C durante 10 min. La mezcla de reacción se extrajo con DCM (5 ml x 3), se separó, se secó y se evaporó para dar el material crudo que se purificó por pre-TLC (MeOH/DCM 0-10 %) para obtener XX-1 (35 mg, 35 %) como un aceite incoloro y se utilizó directamente en el siguiente paso.
Paso 2 - Síntesis de (1S,2S,3S,5R)-3-(2-(1-aminoetil)-4-fluorofenoxi)-5-(4-metil-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)ciclopentano-1,2-diol (XX-2)
Al compuesto XX-1 (100 mg, 0,234 mmol) en H2O (0,5 ml) se añadió TFA (0,5 ml) a 0 °C. La mezcla se agitó a 0 °C durante 60 min. El pH de la solución de reacción se ajustó a pH=9 mediante la adición de K2CO3 ac.. saturado. La solución final se separó por HPLC prep., para dar 90 mg del x X-2 (90 mg, 99 %) como un sólido blanco.
Paso 3 - Separación de (1S,2S,3S,5R)-3-(2-((R)-1-aminoetil)-4-fluorofenoxi)-5-(4-metil-7H-pirrol[2,3-d]pirimidin-7-il)ciclopentano-1,2-diol (XX-3) y (1S,2S,3S,5R)-3-(2-((S)-1-aminoethil)-4-fluorofenoxi)-5-(4-metil-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)ciclopentano-1,2-diol (XX-4)
Separación del compuesto XX-2 por SFC quiral XX-3: LCMS 370 [M-NH2]; 1HRMN (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 8,61 (s, 1H), 7,61 (d, J=3,7 Hz, 1H), 7,29 (dd, J=3,0, 10,0 Hz, 1H), 7,03 - 6,90 (m, 2H), 6,72 (d, J=3,7 Hz, 1H), 5,34 (s. br, 1H), 5,18-5,01 (m, 2H), 4,61 -4,49 (m, 2H), 4,33 (q, J=6,4 Hz, 1H), 4,01 (d, J=4,5 Hz, 1H), 2,94-2,79 (m, 1H), 2,64 (s, 3H), 2,00 (ddd, J=4,0, 9,4, 13,8 Hz, 2H), 1,25 (d, J=6,5 Hz, 3H) XX-4: LCMS 370 [M-NH2]; 1HRMN (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 8,62 (s, 1H), 7,60 (d, J=3,7 Hz, 1H), 7,29 (dd, J=3,0, 10,0 Hz, 1H), 7,04-6,87 (m, 2H), 6,71 (d, J=3,5 Hz, 1H), 5,35 (s. br, 1H), 5,20 - 5,03 (m, 2H), 4,63 - 4,46 (m, 2H), 4,33 (q, J=6 , 6 Hz, 1H), 4,02 (d, J=4,3 Hz, 1H), 2,91 - 2,78 (m, 1H), 2,64 (s, 3H), 2,04 -1,91 (m, 2H), 1,26 (d, J=6 , 6 Hz, 3H)
Los Ejemplos 139-142 se hicieron de forma similar a los XX-3 y XX-4 partiendo de BB-2 y la cetona fenólica apropiada. La secuencia comienza con los pasos 2 (alquilación alílica) y 3 (dihidroxilación) del Esquema BB, seguidos por el paso 1 (formación de acetónidos) del Esquema WW y luego los pasos 1 (aminación reductora), 2 (desprotección) y 3 (separación quiral) del Esquema XX.
Figure imgf000119_0001
Ejemplo 143 (Esquema YY) - (1S,2S,3S,5R)-3-(2-(ammometN)-4-cloro-3-fluorofenoxi)-5-(4-metM-7H-pirrol[2,3-d]pirimidm-7-il)cidopentano-1,2-diol (YY-6) (referencia)
Figure imgf000120_0001
Paso 1 - Síntesis del 3-cloro-2-fluoro-6-metoxibenzaldehído (YY-2)
A una solución de 4-cloro-3-fluoroanisol (YY-1) (250 mg, 1,56 mmol) en THF anhidro se añadió LDA(0,86 ml, 2M, 1,71 mmol) gota a gota bajo N2, a -78 °C. y se agitó a -78oC durante 30 min bajo N2. A la solución anterior se añadió DMF (125 mg, 1,71 mmol) a -78 °C bajo N2 y la mezcla resultante se agitó a -78 °C durante 20 min. La reacción se inactivó con agua satelital. NH4Cl a -78 °C. La mezcla resultante se calentó hasta 25 °C. La mezcla se sometió a partición entre EtOAc y H2O. La capa orgánica se separó y la capa acuosa se extrajo con EtOAc. Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera, se secaron sobre Na2SO4 y se concentraron para obtener el producto crudo. El producto crudo se purificó mediante columna instantánea (EtOAc:éter de petróleo = 1 %-12 %) para obtener YY-2 (178 mg, 61 %) como sólido blanco. 1HRMN (400 MHz, CDCla) 8 ppm 10,41 (d, J=1,3 Hz, 1H), 7,54 (dd, J=8,0, 9,0 Hz, 1H), 6.76 (dd, J=1,5, 9,0 Hz, 1H), 3,95 (s, 3H)
Paso 2 - Síntesis de (3-cloro-2-fluoro-6-metoxifenil)metanamina (YY-3)
A una solución de YY-2 (400 mg, 2,12 mmol) en MeOH anhidro (20,0 ml) se añadió NH4OAc (1,63 g, 21,2 mmol). La mezcla se agitó a 25 °C durante 1 hora. A la solución anterior se añadió NaCNBH3 (533 mg, 8,48 mmol) a 25 °C. La mezcla resultante se agitó durante 16 horas a 25 °C. La mezcla de reacción se sometió a partición entre EtOAc y H2O. La capa orgánica se separó, se lavó con salmuera, se secó sobre Na2SO4 y se concentró para obtener el producto crudo que se purificó mediante columna instantánea (MeOH: DCM = 1 %-15 %) para obtener YY-3 (270 mg, 67 %) como una goma de color amarillo. 1HRMN (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 7,35 (t, J=8,8 Hz, 1H), 6,78 (d, J=9,0 Hz, 1H), 3.77 (s, 3H), 3,70 (s, 2H)
Paso 3 - Síntesis de 2-(aminometil)-4-cloro-3-fluorofenol (YY-4)
A una solución de YY-3 (180 mg, 0,949 mmol) en H2O (15,0 ml) se añadió HBr acuoso (1,50 ml) gota a gota a 0 °C bajo N2. Tras la adición, la reacción se calentó a reflujo (110 °C) y se agitó durante 6 horas. La mezcla de reacción se enfrió a 0 °C, se diluyó en H2O, y se neutralizó con NaOH sat. La capa acuosa se extrajo con EtOAc. La capa orgánica se lavó con salmuera, se secó sobre Na2SO4 y se concentró para obtener el producto crudo, que se purificó mediante pre-TLC (MeOH: DCM = 1:10) para obtener YY-4 (50 mg, 30 %) como sólido blanco. 1HRMN (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 7,18 (t, J=8,9 Hz, 1H), 6,52 (dd, J=1,5, 8,8 Hz, 1H), 3,92 (d, J=1,3 Hz, 2H)
Paso 4 - Síntesis del (3-cloro-2-fluoro-6-hidroxibencil)carbamato de tert-butilo (YY-5)
A una solución de YY-4 (50,0 mg, 0,285 mmol) en DCM (5,00 ml) y MeOH (1,0 ml) se añadió Boc2O (68,4 mg, 0,313 mmol) seguido de EtaN (72 mg, 0,71 mmol) a 0 °C. Tras la adición, la mezcla de reacción se agitó a 25 °C durante 16 horas. La mezcla de reacción se acidificó con ácido cítrico sat. hasta alcanzar un pH de 5-6. La mezcla se sometió a partición entre DCM y H2O. La capa orgánica se separó y la capa acuosa se extrajo con DCM. La capa orgánica combinada se lavó con NaHCO3 sat. y salmuera, se secó sobre Na2SO4 y se concentró para obtener el producto crudo que se purificó mediante pre-TLC (EtOAc: Éter de petróleo = 1:2) para obtener YY-5 (45 mg, 57 %) como un sólido blanco. 1HRMN (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 10,22 (s, 1H), 7,27 (t, J=8,4Hz), 7,02 (s. br., 1H), 6,67 (d, J=9,2 Hz), 4,14 (s, 2H), 1,37 (s, 9H)
Paso 5 - Síntesis de (1S,2S,3S,5R)-3-(2-(ammometN)-4-cloro-3-fluorofenoxi)-5-(4-metM-7H-pirrol[2,3-d]pirimidin-7-il)ciclopentano-1,2-diol (YY-6)
El compuesto YY-6 se sintetizó utilizando YY-5 y BB-2 siguiendo los procedimientos de los pasos 2 y 3 del Esquema BB.
LCMS 407 [M+1]; 1HRMN (400 MHz, DMSO-d6+D2O) 5 ppm 8,57 (s, 1H), 7,61 (d, J=3,5 Hz, 1H), 7,56 (t, J=8,7 Hz, 1H), 7,00 (d, J=9,0 Hz, 1H), 6,72 (s. br, 1H), 5,14 - 4,99 (m, 1H), 4,64 (s. br., 1H), 4,59 (dd, J=4,6, 9,4 Hz, 1H), 4,08 (s, 3H), 2,90 - 2,78 (m, 1H), 2,62 (s, 3H), 2,06 (t, J=10,4 Hz, 1H)
Los Ejemplos 144 -146 se hicieron de forma similar al YY-6, comenzando con el reactivo de anisol apropiado y siguiendo los pasos 3 y 4 del Esquema YY.
Figure imgf000121_0001
Ejemplo 147 (Esquema ZZ) - (1S,2S,3S,5R)-3-(2-(aminometil)-4,5-diclorofenoxi)-5-(4-metil-7H-pirrol[2,3-d]pirimidin-7-il)ciclopentano-1,2-diol (ZZ-7) (referencia)
Figure imgf000122_0001
A una solución de ácido metoxibencnico(ZZ-l) (500 mg, 2,26 mmol) en THF anhidro (23 ml) se añadió BH3.THF (6,79 ml, 6,79 mmol) a 0 °C bajo N2. Tras la adición, la mezcla de reacción se agitó a 30 °C bajo N2 durante 3 horas. La mezcla de reacción se enfrió a -20 ooy se inactivó con NH4Cl sat. La mezcla de reacción se sometió a partición entre EtOAc y H2O. La capa orgánica se separó y la capa acuosa se extrajo con EtOAc. Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera, se secaron sobre Na2SO4 y se concentraron para obtener el producto crudo, que se purificó mediante cromatografía en columna instantánea (EtOAc: Éter de petróleo = 1 %-35 %) para obtener la ZZ-2 (383 mg, 81,8 %) como un sólido blanco. 1HRMN (400 MHz, DMSO-da) 8 ppm 7,49 (s, 1H), 7,22 (s, 1H), 5,28 (t, J=5,6 Hz), 4,44 (d, J=6 Hz), 3,31 (s, 3H)
Paso 2 - Síntesis de la 2-(4,5-didoro-2-metoxibencN)iso-mdoNn-1,3-diona (ZZ-3)
A una solución de ZZ-2 (230 mg, 1,11 mmol) y ftalimida (163 mg, 1,11 mmol) en THF anhidro (12 ml) se añadió PPh3 (291 mg, 2,30 mmol). La mezcla de reacción se agitó a -20 °C bajo N2 durante 30 min. A la solución anterior se añadió DEAD (193 mg, 1,11 mmol) a -10 °C—20 °C. Tras la adición, la mezcla de reacción se convirtió en una solución amarilla, que se calentó a 25 °C y se agitó durante 2 horas. La mezcla de reacción se concentró y el residuo se purificó mediante columna instantánea (12,0 g de gel, EtOAc: éter de petróleo = 10 %-35 %) para obtener el producto crudo y se purificó además mediante prep-TLC (EtOAc: petróleo = 1 %~15 %) para obtener el producto ZZ-3 (30 mg, 8 %) como un sólido blanco que se utilizó tal cual en el siguiente paso.
Paso 3 - Síntesis de la 2-(4,5-dicloro-2-hidroxibencil)iso-indolin-1,3-diona (ZZ-4)
A una solución de ZZ-3 (50 mg, 0,15 mmol) en DCM (2,00 ml) se añadió BBr3 (0,20 ml) gota a gota a 0 °C. Tras la adición, la reacción se agitó a 0 °C durante 2 horas. La mezcla de reacción se inactivó con MeOH cuidadosamente. La mezcla resultante se particionó entre DCM y sat. NaHCO3. La capa orgánica se lavó con salmuera, se secó sobre Na2SO4 y se concentró para obtener el producto crudo que se purificó mediante pre-TLC (EtOAc: éter de petróleo = 1:1) para obtener ZZ-4 (43 mg, 90%) como un sólido blanco. 1HRMN (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 10,50 (s, 1H), 7,94 - 7,76 (m, 4H), 7,32 (s, 1H), 7,00 (s, 1H), 4,68 (s, 2H)
Paso 4 - Síntesis de 2-(4,5-didoro-2-((1S,4R)-4-(4-metM-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidm-7-N)cidopent-2-en-1-il)oxi)iso-indolin-1,3-diona (ZZ-5)
A una solución agitada de ZZ-4 (43 mg, 0,13 mmol) y carbonato de tert-butilo ((1S,4R)-4-(4-metil-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)ciclopent-2-en-1-il) (42 mg, 0,13 mmol) en DCE (1,50 ml) se añadió Cs2CO3 (52 mg, 0,16 mmol), Pd2(dba)3.CHCl3, (3,5 mg, 0,003 mmol) y dppp (3,3 mg, 0,008 mmol). La mezcla de reacción se desgasificó y se purgó con N2 durante 3 veces. La solución resultante se agitó durante 1,5 h a 25 °C. La mezcla de reacción se concentró y se purificó mediante pre-TLC (EtOAc: éter de petróleo = 1:1) para obtener el producto ZZ-5 (62 mg, 89 %) como una goma de color amarillo y se utilizó en el siguiente paso directamente.
Paso 5 - Síntesis de 2-(4,5-didoro-2-((1S,2S,3S,4R)-2,3-dihidroxi-4-(4-metN-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidm-7-il)ciclopentil)oxi)iso-indolin-1,3-diona (ZZ-6)
A una solución de ZZ-5 (62 mg, 0,12 mmol) en THF (2,50 ml) y H2O (0,50 ml) se añadió NMO (29,4 mg, 0,251 mmol) seguido de OsO4 (136 mg, 0,02 mmol, 4 % p/p en t-BuOH). Tras la adición, la mezcla de reacción se agitó a 28 °C durante 4 horas. La mezcla de reacción se diluyó en H2O y se inactivó con NaHSO3 sat. La solución oscura se extrajo con EtOAc, se secó sobre Na2SO4 y se concentró para obtener el producto crudo que se purificó mediante pre-TLC (MeOH: DCM = 1:10, UV) para obtener ZZ-6 (30 mg, 45 %) como un sólido de color amarillo. 1HRMN (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm 8,61 (s, 1H), 7,95 - 7,77 (m, 4H), 7,60 (d, J=3,5 Hz, 1H), 7,56 (s, 1H), 7,36 (s, 1H), 6,73 (d, J=3,5 Hz, 1H), 5,43 (d, J=4,0 Hz, 1H), 5 ,18-5,05 (m, 2H), 4,81 (s, 2H), 4,70-4,61 (m, J=6,0 Hz, 1H), 4,52-4,41 (m, 1H), 3,99 - 3,94 (m, 1H), 2,91 - 2,78 (m, 1H), 2,65 (s, 3H), 1,98 - 1,86 (m, 1H)
Paso 6 - Síntesis de (1S,2S,3S,5R)-3-(2-(ammometil)-4,5-diclorofenoxi)-5-(4-metN-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidm-7-il)ciclopentano-1,2-diol (ZZ-7)
A una solución de ZZ-6 (30 mg, 0,05 mmol) en THF (2,5 ml) se añadió NH2NH2 (31 mg, 0,81 mmol) gota a gota. Tras la adición, la solución de reacción se agitó a 28 °C durante 16 horas. La mezcla de reacción se filtró y el filtrado se concentró. El residuo se purificó mediante HPLC prep. para obtener ZZ-7 (11 mg, 46 %) como un sólido blanco. LCMS 423 [M+1]; 1HRMN (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm 8,62 (s, 1H), 7,66 (d, J=3,8 Hz, 1H), 7,60 (s, 1H), 7,31 (s, 1H), 6,72 (d, J=3,3 Hz, 1H), 5,14
- 5,05 (m, 2H), 4,63 (m, 1H), 4,00 (m, 1H), 3,74 (s, 2H), 2,89 - 2,81 (m, 1H), 2,64 (s, 3H), 2,02 (m, 1H)
Ejemplo 148 Se preparó (1S,2S,3S,5R)-3-(2-(ammometil)-4,5-difluorofenoxi)-5-(4-metN-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)ciclopentano-1,2-diol de forma similar a ZZ-7 empezando con (4,5-difluoro-2-metoxifenil)metanol y siguiendo los pasos 2 a 6 del Esquema ZZ.
Figure imgf000123_0001
Ejemplo 149 (Esquema AAA) -(1S,2S,3S,5R)-3-(2-(2-amino-1 -hidroxietil)-4-clorofenoxi)-5-(4-metN-7H-pirrol[2,3-d]pirimidin-7-il)ciclopentano-1,2-diol (AAA-9) (referencia)
Paso 1 - Síntesis de la 2-bromo-1-(5-cloro-2-hidroxifenil)etan-1-ona (AAA-2)
A una solución amarilla de 1-(5-cloro-2-hidroxifenil)etan-1-ona (AAA-1) (2 g, 11,72 mmol) y en THF (60 ml) se añadió PhMe3NBr3 (4,85 g, 12,9 mmol) a rt (25 °C). La solución roja resultante se agitó a rt durante 12 horas en las que se formó un sólido, luego se filtró la mezcla. El filtrado se concentró in vacuo y el residuo se purificó mediante cromatografía en gel de sílice eluyendo con EtOAc en éter de petróleo de 0 a 10 % para obtener a AA-2 (2,4 g) como aceite de color amarillo que se utilizó en el siguiente paso directamente.
Paso 2 - Síntesis de 2-((3r,5r,7r)-1/4,3,5,7-tetraazaadamantan-1-il)-1-(5-cloro-2-hidroxifenil)etan-1-ona, sal de bromuro (AAA-3)
A una solución de 1,3,5,7-tetraazaadamantano (4,67 g, 33,3 mmol) en CHCb (40 ml) se añadió AAA-2 (2,6 g, 10 mmol) a rt (25 °C). La mezcla se agitó a rt durante 12 horas en las que se formó un sólido. El sólido se recogió por filtración, se enjuagó con DCM y se secó al vacío para obtener el a AA-3 crudo (3 g, 74 %) como sólido blanco, que se utilizó directamente en el siguiente paso.
Paso 3 - Síntesis de 2-amino-1-(5-cloro-2-hidroxifenil)etan-1-ona (AAA-4)
A una suspensión de SM1 (3 g, 8 mmol) en EtOH (15 ml) se añadió HCl conc. (3 ml) a rt (25 oC). La suspensión se agitó a rt durante 2 horas. La reacción se evaporó para dar AAA-4 (1,5 g, >100 %) como aceite de color amarillo que se utilizó directamente sin purificación adicional. LCMS 186 [M+1]
Paso 4 - Síntesis del (2-(5-cloro-2-hidroxifenilo)-2-oxoetilo)carbamato de tert-butilo (AAA-5)
A una solución de (Boc)2O (2,29 g, 10,5 mmol) en dioxano (15 ml) se añadió la solución de AAA-4 (200 mg, solución, neutralizada por NaHCO3 ac..) a 0 °C. La solución de reacción se agitó a 25 °C. La solución de reacción se extrajo con EtOAc (6 ml x 3). Las capas orgánicas se separaron, se secaron y se evaporaron para dar el producto crudo, que se purificó por cromatografía instantánea con 0-25 % de EtOAc/éter de petróleo, para dar AAA-5 (600 mg, 22 %) como sólido blanco y se utilizó tal cual en el siguiente paso.
Paso 5 - Síntesis de (2-(5-cloro-2-((1S,4R)-4-(4-metil-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidm-7-il)ciclopent-2-en-1-il)oxi)fenil)-2-oxoetil)carbamato de tert-butilo (AAA-6)
Utilizando BB-2 y siguiendo procedimientos similares al paso 2 del Esquema BB, se obtuvo AAA-6 (288 mg, 31 %) como una goma de color amarillo y se utilizó en el siguiente paso directamente.
Paso 6 - Síntesis de (2-(5-cloro-2-((1S,2S,3S,4R)-2,3-dihidroxi-4-(4-metil-7H-pirromidin-7-il)ciclopentilo)feml)-2-oxoetil)carbamato de tert-butilo (AAA-7)
Partiendo de AAA-6 y siguiendo procedimientos similares al paso 3 del Esquema BB, se obtuvo AAA-7 (70 mg, 33 %) como un sólido blanco. LCMS 517 [M+1]
Paso 7 - Síntesis de (2-(5-cloro-2-((1S,2S,3S,4R)-2,3-dihidroxi-4-(4-metil-7H-pirromidin-7-il)ciclopentilo)feml)-2-hidroxietil)carbamato de tert-butilo (AAA-8)
A una mezcla de AAA-7 (70 mg, 0,14 mmol) en MeOH (1 ml) se añadió NaBH4 (15,4 mg, 0,406 mmol). La mezcla se inactivó con HCl 1N ac.. (La mezcla se evaporó para dar el producto crudo AAA-8 (70 mg, >99 %) como un sólido blanco.
Paso 8 - Síntesis de (1S,2S,3S,5R)-3-(2-(2-amino-1-hidroxietil)-4-clorofenoxi)-5-(4-metil-7H-pirrol[2,3-d]pirimidin-7-il)ciclopentano-1,2-diol (AAA-9)
El compuesto AAA-8 (62 mg, 0,12 mmol) se disolvió en DCM (0,6 ml). La mezcla se enfrió a 0 °C en un baño de hielo. Se añadió TFA (0,2 ml) a la mezcla anterior gota a gota. La mezcla de reacción se agitó a 25 °C durante 2 horas. La solución de reacción se neutralizó con NaHCO3 ac.. saturado. (1 ml), se filtró y el filtrado se purificó por HPLC prep. directamente para dar AAA-9 (21 mg, 42 %) como un sólido blanco. LCMS 441 [M+23]; 1HRMN (400 MHz, MeOD-d4) 8 ppm 8,62 (d, J=2,8 Hz, 1H), 7,58 (dd, J=3,3, 11,3 Hz, 1H), 7,48 (s, 1H), 7 ,26-7,22 (m, 1H), 7,03 (dd, J=2,1, 8,7 Hz, 1H), 6,75 (t, J=3,8 Hz, 1H), 5,20 (d, J=3,8 Hz, 1H), 5,10 (s. br, 1H), 4,70 (s. br., 2H), 4,22 (d, J=9,5 Hz, 1H), 3,04-2,94 (m, 2H), 2,77 (s. br., 1H), 2,71 (s, 3H), 2,26 (s. br., 1H)
Ejemplo 150 (Esquema BBB) - (1S,2S,3S,5R)-3-(2-(aminometil)-3,4-diclorofenoxi)-5-(4-metil-7H-pirrol[2,3-d]pirimidin-7-il)ciclopentano-1,2-diol (BBB-8) (referencia)
Figure imgf000125_0001
Paso 1 - Síntesis del 2,3-dicloro-6-fluorobenzaldehído (BBB-2)
A una solución de 1,2-dicloro-4-fluorobenceno (BBB-1) (2 g, 12,12 mmol) en THF anhidro (30 ml) se añadió LDA (6,67 ml, 2M, 13,3 mmol) gota a gota bajo N2, a -65 °C. Tras la adición, la mezcla de reacción se agitó a -65 °C durante 30 min bajo N2. A la solución roja resultante se añadió DMF (1,77 g, 24,2 mmol) a -65 °C bajo N2 y la mezcla resultante se agitó a -65 °C durante 20 min. La reacción se inactivó con agua (50 ml) y se extrajo con EtOAc (30 ml x 2). El extracto se lavó con HCl 1 N (30 ml), salmuera (30 ml), se secó sobre Na2SO4 y se concentró para dar el material crudo que se extrajo con éter de petróleo (30 ml x 3). El extracto se concentró al vacío para obtener BBB-2 (2,2 g, 94 %) como un sólido de color amarillo. 1HRMN (400 MHz, CDCk) 8 ppm 10,44 (s, 1H), 7,66 (dd, J=5,3, 9,0 Hz, 1H), 7,10 (t, J=9,2 Hz, 1H)
Paso 2 - Síntesis del 2,3-dicloro-6-hidroxibenzaldehído (BBB-3)
A una solución amarilla de BBB-2 crudo (2,2 g, 11,4 mmol) en DMSO (10 ml) se añadió KOH (1280 mg, 22,8 mmol) lentamente a 0 °C. Tras la adición, la mezcla se convirtió en una mezcla roja y se agitó a temperatura ambiente (20 °C) durante 16 horas. La mezcla se diluyó con MTBE (100 ml). El líquido se decantó y el residuo se lavó con MTBE (100 ml). El residuo se diluyó con agua (30 ml) y se ajustó con HCl 1 N a pH 2 y se extrajo con EtOAc (20 ml x 2). El extracto se lavó con salmuera (20 ml), se secó sobre Na2SO4 y se concentró al vacío para obtener el BBB-3 crudo (390 mg, 18 %) como sólido de color amarillo. 1HRMN (400 MHz, CDCla) 8 ppm 11,98 (s, 1H), 10,44 (s, 1H), 7,56 (d, J=9,0 Hz, 1H), 6,90 (d, J=9,3 Hz, 1H)
Paso 3 - Síntesis de (R,E)-N-(2,3-dicloro-6-hidroxibencilideno)-2-metilpropano-2-sulfinamida (4)
Una mezcla de BBB-3 crudo (150 mg, 0,79 mmol), (R)-2-metilpropano-2-sulfinamida (143 mg, 1,2 mmol) y CuSO4 (376 mg, 2,36 mmol) en CHCk (3 ml) se agitó a rt (30 °C) durante 5 días. La mezcla se filtró y se purificó por cromatografía en gel de sílice eluyendo con EtOAc en éter de petróleo de 0 a 30 % para obtener BBB-4 (70 mg, 30 %) como un sólido de color amarillo claro. 1HRMN (400 MHz,
CDCla) 8 ppm 11,98 (s, 1H), 9,28 (s, 1H), 7,49 (d, J=8,8 Hz, 1H), 6,92 (d, J=9,3 Hz, 1H), 1,29 (s, 9H)
Paso 4 - Síntesis de (R)-N-(2,3-dicloro-6-hidroxibencil)-2-metilpropano-2-sulfinamida (BBB-5)
A una solución de BBB-4 (70 mg, 0,238 mmol) en MeOH (3 ml) se añadió NaBH4 (27 mg, 0,714 mol) a rt (30 °C). La mezcla se agitó a rt durante 1 h. La mezcla se concentró al vacío y se disolvió en agua (5 ml). A la mezcla se le añadió NH4Cl ac. (2 ml) en el que se formó algún sólido. La mezcla se extrajo con EtOAc (5 ml x 3). El extracto se lavó con salmuera (5 ml), se secó sobre Na2SO4 y se concentró al vacío para obtener BBB-5 (55 mg, 78 %) como un sólido de color amarillo. 1HRMN (400 MHz, CDCk) 8 ppm 9,31 (s. br., 1H), 7,17 (d, J=8,8 Hz, 1H), 6,69 (d, J=9,0 Hz, 1H), 4,58 - 4,40 (m, 2H), 4,09 - 3,97 (m, 1H), 1,27 (s, 9H)
Paso 5 - Síntesis de (R)-N-(2,3-didoro-6-((1S,4R)-4-(4-metM-7H-pirrolo[2,3-d]pmmidm-7-N)cidopent-2-en-1-il)oxi)bencilo)-2-metilpropano-2-sulfinamida (BBB-6)
El compuesto BBB-6 (130 mg, 98 %, con 1 eq de DCM) se preparó como una goma de color amarillo a partir de BBB-5 y BB-2 utilizando procedimientos similares al paso 2 del Esquema BB. LCMS 493 [M+1]; 1HRMN (400 MHz, CDCk) 8 ppm 8,77 (s, 1H), 7,39 - 7,31 (m, 2H), 6,84 (d, J=9,0 Hz, 1H), 6,60 (d, J=3,5 Hz, 1H), 6,41 (d, J=5,5 Hz, 1H), 6,22 (d, J=4,8 Hz, 1H), 6,13-6,01 (m, 1H), 5,41 -5,35 (m, 1H), 4,63-4,39 (m, 2H), 3,65 (t, J=6,7 Hz, 1H), 3,29-3,09 (m, 1H), 2,73 (s, 3H), 1,98 (td, J=3,8, 14,7 Hz, 1H), 1,18 (s, 9H)
Paso 6 - Síntesis de la N-(2,3-dicloro-6-((1S,2S,3S,4R)-2,3-dihidroxi-4-(4-metil-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)ciclopentil)oxi)bencilo)-2-metilpropano-2-sulfonamida (BBB-7)
El compuesto BBB-6 se trató de forma similar a los procedimientos del paso 3 del Esquema BB para obtener BBB-7 (70 mg, 58 %). LCMS 543 [M+16+1]; 1HRMN (400 MHz, CDCla) 8 ppm 8,62 (s, 1H), 7,56 (s. br, 1H), 7,19 (d, J=8,8 Hz, 1H), 6,77 (d, J=9,0 Hz, 1H), 6,54 (d, J=3,8 Hz, 1H), 5,64 (t, J=5,5 Hz, 1H), 5,14 (s, 1H), 5,13-5,04 (m, 1H), 4,56-4,50 (m, 1H), 4,47 (dd, J=4,8, 8,5 Hz, 1H), 4,44 - 4,34 (m, 2H), 4,04 (d, J=4,8 Hz, 1H), 2,83 - 2,75 (m, 1H), 2,62 (s, 3H), 2,14-2,04 (m, 1H), 1,20 (s, 9H)
Paso 7 - Síntesis de (1S,2S,3S,5R)-3-(2-(ammometN)-3,4-diclorofenoxi)-5-(4-metN-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidm-7-il)ciclopentano-1,2-diol (BBB-8)
A una solución de BBB-7 (35 mg, 0,064 mmol) en DCM seco (5 ml) se añadió anisol (170 mg, 1,56 mmol) y AlCl3 (86 mg, 0,64 mmol) a rt (25 °C). La suspensión blanca se agitó a rt durante 3 h. La mezcla se inactivó con NaHCO3 ac. (3 ml), seguido de tartrato sódico potásico ac. (5 ml). La mezcla se extrajo con EtOAc (5 ml x 3). El extracto se concentró al vacío y se purificó por TLC (DCM/MeOH=10/1) para obtener BBB-8 (8 mg, 29 %) como sólido blanco. LCMS 423 [M+1]; 1HRMN (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 8,61 (s, 1H), 7,69 (d, J=3,5 Hz, 1H), 7,49 (d, J=8,8 Hz, 1H), 7,11 (d, J=9,0 Hz, 1H), 6,72 (d, J=3,8 Hz, 1H), 5,44 (s. br, 1H), 5,10 (q, J=9,0 Hz, 2H), 4,64 (d, J=5,3 Hz, 2H), 4,06 (d, J=4,8 Hz, 1H), 3,92 (s, 2H), 2,92-2,81 (m, 1H), 2,64 (s, 3H), 2,05 (ddd, J=4,1, 9,2, 13,8 Hz, 1H)
Ejemplo 151 (Esquema CCC) - (1S,2S,3S,5R)-3-(2-(2-aminoetoxi)-4,5-diclorofenoxi)-5-(4-metN-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)ciclopentano-1,2-diol (CCC-4) (referencia)
Figure imgf000126_0001
Paso 1 - Síntesis del 4,5-dicloro-2-((1S,4R)-4-(4-metN-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidm-7-N)ciclopent-2-en-1-N)fenol (CCC-1)
El compuesto CCC-1 se preparó utilizando procedimientos similares al paso 2 del Esquema BB con 4,5-diclorobenceno-1,2-diol y BB-2disponibles comercialmente .
Paso 2 - Síntesis del (2-(4,5-dicloro-2-((1S,4R)-4-(4-metM-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidm-7-N)ciclopent-2-en-1-il)oxi)fenoxi)etil)carbamato de tert-butilo (CCC-2)
A una solución amarilla agitada de CCC-1 (78 mg, 0,21 mmol) en DMF seca (5 ml) se añadió K2CO3 (86 mg, 0,62 mmol) y (2-bromoetil)carbamato de tert-butilo (923 mg, 0,42 mmol) a 25 °C y se agitó durante 20 horas. Se añadió agua (10 ml) a la mezcla de reacción y se extrajo con EtOAc (2 x 20 ml). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera (5 x 20 ml), se secaron sobre Na2SO4 , se filtraron y se concentraron al vacío para dar el residuo que se purificó por cromatografía en columna (gel de sílice, eluyendo con EtOAc) para dar CCC-2 (108 mg, >99 %) como una goma incolora. LCMS [M+1] 519; 1HRMN (400 MHz, CDCla) 8 ppm 8,77 (s, 1H), 7,42 (d, J=3,5 Hz, 1H), 7,04 (s, 1H), 6,98 (s, 1H), 6,60 (d, J=3,5 Hz, 1H), 6,39 (td, J=1,9, 5,5 Hz, 1H), 6,19 (dd, J=2,3, 5,3 Hz, 1H), 6,06 (dd, J=2,0, 4,8 Hz, 1H), 5,29 (d, J=7,0 Hz, 1H), 5,02 (s. br, 1H), 4,03 (t, J=5,0 Hz, 2H), 3,59 - 3,47 (m, 2H), 3,10 (td, J=7,7, 15,2 Hz, 1H), 2,73 (s, 3H), 2,07 (t, J=2,9 Hz, 1H), 1,42 (s, 9H)
Paso 3 - Síntesis de (2-(4,5-dicloro-2-((1S,2S,3S,4R)-2,3-dihidroxi-4-(4-metil-7H-pirromidin-7-il)ciclopentil)oxi)fenoxi)etilo)carbamato de tert-butilo (CCC-3)
El compuesto CCC-2 se sometió a procedimientos similares a los del paso 3 del Esquema BB para obtener CCC-3 (55 mg, 48 %) como goma marrón. Lc MS [M+23] 575
Paso 4 - Síntesis de (1S,2S,3S,5R)-3-(2-(2-aminoetoxi)-4,5-diclorofenoxi)-5-(4-metil-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)ciclopentano-1,2-diol (CCC-4)
El compuesto CCC-3 se sometió a procedimientos estándar de desprotección con TFA/agua similares al paso 8 del Esquema AAA, seguido de HPLC prep. para obtener CCC-4 (35 mg, 75 %). LCMS [M+23] 475; 1HRMN (400 MHz, MeOD-d4) 5 ppm 8,64 (s, 1H), 7,66 (d, J=3,8 Hz, 1H), 7,37 (s, 1H), 7,29 (s, 1H), 6,79 (d, J=3,5 Hz, 1H), 5,20 (q, J=8,9 Hz, 1H), 4,76 - 4,68 (m, 1H), 4,66 (dd, J=5,3, 8,0 Hz, 1H), 4,33 - 4,23 (m, 3H), 3,40 - 3,36 (m, 2H), 3,01 - 2,90 (m, 1H), 2,74 (s, 3H), 2,29 (ddd, J=5,0, 8,8, 14,3 Hz, 1H)
Ejemplo 152 (1S,2S,3S,5R)-3-(2-(2-aminoetoxi)-4,5-difluorofenoxi)-5-(4-metN-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidm-7-il)ciclopentano-1,2-diol se preparó de forma similar a CCC-4 empezando con 4,5-difluorobenceno-1,2-diol y siguiendo los pasos 1 a 4 del Esquema CCC.
Figure imgf000127_0002
Ejemplo 153 (Esquema DDD) - (1S,2S,3S,5R)-3-(2-(2-aminoetoxi)-4-clorofenoxi)-5-(4-metil-7H-pirrol[2,3-d]pirímidin-7-il)ciclopentano-1,2-diol (Dd D-6) (referencia)
Figure imgf000127_0001
Paso 1 - Síntesis de 1-(5-cloro-2-((1S,2S,3S,4R)-2,3-dihidroxi-4-(4-metN-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)ciclopentilo)fenil)etan-1 -ona (DDD-1)
El compuesto DDD-1 se preparó utilizando procedimientos similares a los pasos 2 y 3 del Esquema BB con 1-(5-cloro-2-hidroxifenil)etan-1-ona y BB-2disponibles comercialmente .
Paso 2 - Síntesis del acetato de 5-cloro-2-((1S,2S,3S,4R)-2,3-dihidroxi-4-(4-metN-7H-pirrimo[2,3-d]pirimidin-7-il)ciclopentilo)fenilo (DDD-2)
Se añadió gota a gota anhídrido trifluoroacético (1,46 g, 6,95 mmol) enfriado a -10 °C y H2O2 al 30 % (185 mg, 1,63 mmol) y se agitó la solución durante 10 min. A esta mezcla se añadió DDD-1 (210 mg, 0,523 mmol) en DCM (3,5 ml) gota a gota a 0 °C y se agitó a 25 °C durante 15 min. A continuación se añadió tiosulfato sódico saturado (2 ml) a la solución de reacción. La solución de reacción se basificó con NaHCO3 saturado hasta alcanzar un pH=7~8, se extrajo con DCM (30 ml x 2). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera (40 ml), se secaron sobre Na2SO4, se filtraron y se evaporaron para dar el material crudo, que se purificó por ISCO (gel de sílice, 12 g, MeOH/OCM=10 %~14 %) para dar el producto deseado DDD-2 (160 mg, 73 %) como sólido blanco. LCMS [M+1] 418; 1HRMN (400 MHz, CDCls) 5 ppm 8,67 (s, 1H), 7,25 (m, 1H), 7,21 (dd, J=2,5, 8,8 Hz, 1H), 7,12 - 7,06 (m, 2H), 6,60 (d, J=3,8 Hz, 1H), 4,97 (q, J=8,5 Hz, 1H), 4,78 (t, J=6,0 Hz, 1H), 4,50 (dd, J=5,3, 8,3 Hz, 1H), 4,29 (d, J=5,5 Hz, 1H), 3,12 - 3,01 (m, 1H), 2,72 (s, 3H), 2,36 - 2,27 (m, 1H), 2,24 (s, 3H)
Paso 2 - Síntesis de acetato de 5-cloro-2-((3aR,4S,6R,6aS)-2,2-dimetN-6-(4-metN-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidm-7-il)tetrahidro-4H-ciclopenta[d][1,3]dioxol-4-M)oxi)fenMo (DDD-3)
A una solución incolora agitada de DDD-2 (160 mg, 0,38 mmol) en acetona (0,64 ml) se añadió 2,2-dimetoxipropano (6,4 ml) y ácido p-toluenosulfónico (73 mg, 0,38 mmol) a 25 °C. La reacción se agitó a 25 °C durante 1 hora. A continuación, se añadió a la mezcla de reacción NaHCO3 acuoso (3 ml) hasta alcanzar un pH de 8,0. Luego la mezcla se extrajo con EtOAc (15 ml x 2). Las capas orgánicas se separaron, se lavaron con salmuera (20 ml), se secaron sobre Na2SO4 y se filtraron. La capa orgánica se evaporó para dar el producto crudo como una goma incolora, que se purificó por cromatografía en columna (éter:EtOAc=1:1, Rf~0,55) para dar el DDD-3 (126 mg, 72 %) como un sólido blanco. LCMS [M+1] 458; 1HRMN (400 MHz, CDCh) 8 ppm 8,79 (s, 1H), 7,43 (d, J=3,8 Hz, 1H), 7,25 - 7,20 (m, 1H), 7,14-7,07 (m, 2H), 6,58 (d, J=3,5 Hz, 1H), 5,46-5,38 (m, 1H), 4,93 (d, J=5,8 Hz, 1H), 4,83-4,74 (m, 2H), 3,06-2,89 (m, 1H), 2,74 (s, 3H), 2,52 - 2,37 (m, 1H), 2,21 (s, 3H), 1,60 (s. br, 3H), 1,32 (s, 3H)
Paso 3 - Síntesis de 5-cloro-2-((3aR,4S,6R,6aS)-2,2-dimetil-6-(4-metil-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)tetrahidro-4H-ciclopenta[d][1,3]dioxol-4-il)oxi)fenol (DDD-4)
El compuesto DDD-3 (142 mg, 0,31 mmol) se disolvió en MeOH (3 ml) y H2O (1 ml). A la mezcla anterior se añadió K2CO3 (85,7 g, 0,62 mmol). La mezcla de reacción se agitó a 25 °C durante 1 hora. La mezcla se neutralizó con ácido cítrico al 10 % hasta alcanzar un pH de 6-7. La mezcla se diluyó con H2O (10 ml), se extrajo con EtOAc (10 ml x 2). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera (10 ml), se secaron sobre Na2SO4, se filtraron y se evaporaron para dar DDD-4 (140 mg, >99 %) como una goma incolora. LCMS [M+1] 416; 1HRMN (400 MHz, cD ch) 8 ppm 8,79 (s, 1H), 7,22 (d, J=3,5 Hz, 1H), 6,96 - 6,90 (m, 2H), 6,87 - 6,81 (m, 1H), 6,61 (d, J=3,5 Hz, 1H), 5,95 - 5,74 (m, 1H), 5,27 - 5,19 (m, 2H), 4,87 - 4,78 (m, 2H), 2,99 - 2,87 (m, 1H), 2,74 (s, 3H), 2,61 - 2,50 (m, 1H), 1,59 (s, 3H), 1,34 (s, 3H)
Paso 4 - Síntesis de (2-(5-cloro-2-((3aR,4S,6R,6aS)-2,2-dimetil-6-(4-metil-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)tetrahidro-4H-ciclopenta[d][1,3]dioxol-4-il)oxi)fenoxi)carbamato de tert-butilo (DDD-5)
A una solución agitada de DDD-4 (140 mg, 0,34 mmol) en DMF seca (5 ml) se añadió K2CO3 (140 mg, 1,0 mmol) y (2­ bromoetil)carbamato de tert-butilo (151 mg, 0,67 mmol) a 25 °C. La reacción se agitó a 25 °C durante 15 horas. Se añadió agua (10 ml) a la mezcla de reacción y la mezcla se extrajo con EtOAc (20 ml x 2). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera (20 ml x 5), se secaron sobre Na2SO4, se filtraron y se concentraron para dar el material crudo, que se purificó por ISCO (EtOAc/éter de petróleo=60 %) para dar DDD-5 (170 mg, 90 %) como una goma incolora. LCMS [M+23] 581; 1HRMN (400 MHz, CDCh) 8 ppm 8,80 (s, 1H), 7,77 (d, J=3,8 Hz, 1H), 6,96 - 6,84 (m, 3H), 6,59 (d, J=3,8 Hz, 1H), 5,50 (d, J=8,0 Hz, 1H), 5,18 (s. br, 1H), 4,92 - 4,86 (m, 1H), 4,85 - 4,81 (m, 2H), 4,08 - 3,98 (m, 2H), 3,65 - 3,54 (m, 2H), 3,08 - 2,98 (m, 1H), 2,74 (s, 3H), 2,47 (d, J=14,6 Hz, 1H), 1,59 (s, 3H), 1,42 (s, 9H), 1,31 (s, 3H)
Paso 5 - Síntesis de (1S,2S,3S,5R)-3-(2-(2-ammoetoxi)-4-clorofenoxi)-5-(4-metN-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidm-7-il)ciclopentano-1,2-diol (DDD-6)
El compuesto DDD-5 se sometió a procedimientos estándar de desprotección con TFA/agua seguidos de HPLC prep. para obtener DDD-6 (40 mg, 31 %). LCMS [M+23] 441; 1HRMN (400 MHz, MeOD-d4) 8 ppm 8,64 (s, 1H), 7,78 (d, J=3,8 Hz, 1H), 7,14-7,05 (m, 2H), 6,96 (d, J=8,3 Hz, 1H), 6,82 (d, J=3,8 Hz, 1H), 5,41 - 5,27 (m, 1H), 4,74-4,70 (m, J=5,5 Hz, 1H), 4,67 (dd, J=4,6, 7,9 Hz, 1H), 4,21 (d, J=4,5 Hz, 1H), 4,15-4,07 (m, 2H), 3,18-3,08 (m, 2H), 3,06-2,94 (m, 1H), 2,74 (s, 3H), 2,14 (dd, J=6,8, 14,1 Hz, 1H)
(Esquema EEE) - Síntesis del 5-cloro-8-hidroxi-3,4-dihidroisoquinolin-2(1H)-carboxilato de tert-butilo (TP-19)
Figure imgf000128_0001
Paso 1 - Síntesis del (2-cloro-5-metoxifenil)metanol (EEE-2)
A una solución de 2-cloro-5-metoxibenzoato de metilo EEE-1 (4,55 g, 22,7 mmol) en THF anhidro (200 ml) se añadió LÍAIH4 (1,72 g, 45,4 mmol) a -10 °C—5 °C en porciones. La temperatura se elevó a 0 °C. Tras la adición, la reacción se agitó a 0 °C durante 2 horas. La mezcla de reacción se inactivó con NaOH al 5 %. La mezcla de reacción se filtró a través de una almohadilla de Celite. A la torta de Celite se le añadió THF (100 ml) y EtOAc (100 ml) y se agitó a 25 °C durante 0,5 horas. La mezcla se filtró y las capas orgánicas combinadas se secaron sobre Na2SO4 y se concentraron para obtener el EEE-2 crudo (4,5 g) como un aceite incoloro que se utilizó directamente en el siguiente paso. 1HRMN (400 MHz, CDCh) 8 ppm 7,25 (d, J=9,5 Hz, 1H), 7,05 (d, J=2,8 Hz, 1H), 6,78 (dd, J=2,9, 8,7 Hz, 1H), 4.75 (d, J=3,8 Hz, 2H), 3,81 (s, 3H), 2,04 - 1,94 (m, 1H)
Paso 2 - Síntesis del 2-cloro-5-metoxibenzaldehído (EEE-3)
A una solución de EEE-2 (3,63 g, 16,16 mmol) en CH3CN (120 ml) se añadió IBX (17,7 g, 63,1 mmol) a 25 °C. La mezcla resultante se calentó a 80 °C durante 2 horas. La mezcla de reacción se enfrió a 25 °C, se filtró y se lavó con DCM (50 ml). El filtrado combinado se concentró para obtener el material crudo, que se purificó por CIUO (gel de sílice, 80 g, EtOAc/éter de petróleo=17 %) para obtener EEE-3 (1,76 g, 49 %) como sólido blanco. 1h Rm N (400 MHz, CDCh) 8 ppm 10,45 (s, 1H), 7,42 (d, J=3,0 Hz, 1H), 7,36 (d, J=8 , 8 Hz, 1H), 7,11 (dd, J=3,3, 8 , 8 Hz, 1H), 3,86 (s, 3H)
Paso 3 - Síntesis de (E)-1-cloro-4-metoxi-2-(2-nitrovinilo)benceno (EEE-4)
A una solución de EEE-3 (1,76 g, 10,3 mmol) en AcOH (17,0 ml) se añadió NH4OAc (0,795 g, 10,3 mmol) seguido de MeNO2 (3,15 g, 51,6 mmol). Después de la adición, la mezcla de reacción se calentó a 85 °C durante 10 horas y luego se enfrió a 28 °C. La reacción se diluyó en DCM y se concentró para eliminar el AcOH para obtener el producto crudo que se purificó mediante columna instantánea (12 g de gel, EtOAc: Éter de petróleo = 1 %-10 %) para obtener EEE-4 (1,78 g, 81 %) como un sólido de color amarillo. 1HRMN (400 MHz, CDCla) 8 ppm 8,36 (d, J=13,8 Hz, 1H), 7,58 (d, J=13,8 Hz, 1H), 7,39 (d, J=9,0 Hz, 1H), 7,05 (d, J=3,0 Hz, 1H), 6,99 (dd, J=3,0, 9,0 Hz, 1H), 3,85 (s, 3H)
Paso 4 - Síntesis de 2-(2-cloro-5-metoxifenil)etan-1-amina (EEE-5)
A una solución de EEE-4 (862 mg, 4,04 mmol) en THF anhidro (40 ml) se añadió LiAlH4 (613 mg, 16,1 mmol) a -20 °C bajo N2. Tras la adición, la mezcla de reacción se agitó a 25 °C durante 1 hora. A continuación, la mezcla de reacción se calentó a 50 °C y se agitó durante 2 horas. La mezcla de reacción se inactivó con gotas de agua. La mezcla de reacción se diluyó con EtOAx, se filtró y se concentró para obtener el producto crudo, que se purificó mediante cromatografía en columna instantánea (40 g de gel, MeoH: DCM = 1 %~8,0 %) para obtener EEE-5 (290 mg, 38,7 %) como un aceite de color amarillo. 1HRMN (400 MHz, CDCh) 8 ppm 7,27 - 7,24 (m, 1H), 6,79 (d, J=2,8 Hz, 1H), 6,72 (dd, J=3,0, 8 , 8 Hz, 1H), 3,79 (s, 3H), 3,02 - 2,95 (m, 2H), 2,90 - 2,80 (m, 2H)
Paso 5 - Síntesis de la 5-cloro-8-metoxi-1,2,3,4-tetrahidroisoquinolina (EEE-6 )
A una solución de EEE-5 (195,0 mg, 0,679 mmol) en DCM (7,00 ml) se añadió TFA (0,70 ml), seguido de HCHO acuoso (37 %, 110 mg, 1,36 mmol). Tras la adición, la mezcla de reacción se agitó a 25 °C durante 3 horas. La mezcla de reacción se diluyó en H2O y se neutralizó por medio de . Na2CO3 sat. La mezcla se sometió a partición con EtOAc y H2O. La capa orgánica se secó sobre Na2SO4 y se concentró para obtener el producto crudo, que se purificó por pre-TLC (EtOAc:éter de petróleo =1:1) para obtener el intermedio (170 mg) que se suspendió en ac.. HCl (24 %, 2 ml) y se calentó a 110 °C durante 3 horas. La mezcla de reacción se neutralizó con Na2CO3 sat. y luego se smoetió a partición entre EtOAc y H2O. La capa orgánica se evaporó para obtener el producto crudo, que se purificó mediante cromatografía en capa fina prep-TLC (EtOAc:éter de petróleo = 1:0) para obtener el producto EEE-6 (50,0 mg, 37 %) como una goma de color amarillo. 1HRMN (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 7,22 (d, J=8 , 8 Hz, 1H), 6,81 (d, J=8 , 8 Hz, 1H), 3.76 (s, 3H), 3,70 (s, 2H), 2,91 (t, J=6,0 Hz, 2H), 2,57 (t, J=5,8 Hz, 2H)
Paso 6 - Síntesis del 5-cloro-1,2,3,4-tetrahidroisoquinolin-8-ol (EEE-7)
A una solución de EEE-6 (50,0 mg, 0,253 mmol) en DCM (4,00 ml) se añadió BBr3 (0,40 ml, 4,20 mmol) a 0 °C. Tras la adición, la mezcla de reacción se agitó a 25 °C durante 1 hora. La mezcla de reacción se inactivó con MeOH y se basificó por medio de K2CO3 sat. a pH 11-12. La mezcla se extrajo con EtOAc. La capa orgánica se secó sobre Na2SO4 y se concentró para obtener el producto crudo, que se purificó por pre-TLC (MeOH: DCM = 1:10) para obtener EEE-7 (50 mg, >99 %) como una goma de color amarillo y se utilizó directamente en el siguiente paso. 1HRMN (400 MHz, CDCh) 8 ppm 7,05 (d, J=8,5 Hz, 1H), 6,51 (d, J=9,3 Hz, 1H), 4,00 (s, 2H), 3,16 (t, J=6,0 Hz, 2H), 2,79 (t, J=6,1 Hz, 2H)
Paso 7 - Síntesis del 5-cloro-8-hidroxi-3,4-dihidroisoquinolin-2(1H)-carboxilato de tert-butilo (TP-19)
A una solución de EEE-7 (50 mg, 0,272 mmol) en DCM (5,00 ml) y MeOH (1,00 ml) se añadió Boc2O (65 mg, 0,300 mmol) seguido de Et3N (68,9 mg, 0,681 mmol). Tras la adición, la mezcla de reacción se agitó a 25 °C durante 2,5 horas. La mezcla de reacción se neutralizó con . HCl ac. (0,1 M) a pH 4-5 a 0 °C. La mezcla resultante se sometió a partición entre DCM y H2O. La capa orgánica se separó, se lavó con salmuera, se secó sobre Na2SO4 y se concentró para obtener el producto crudo que se purificó por pre-TLC (MeOH: DCM = 1:10) para obtener TP-19 (50 mg, 65 %) como un sólido blanco.
Los Ejemplos 154 y 155 se hicieron de forma similar al Ejemplo 78 del Esquema CC utilizando la tetrahidroisoquinolina protegida con NBoc apropiada en el paso 1.
Figure imgf000130_0002
Ejemplo 156 (Esquema FFF) - (1S,2S,3R,5S)-3-(4-metil-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidm-7-il)-5-((5,6,7,8-tetrahidropirido[4,3-d]pirimidin-4-il)oxi)ciclopentano-1,2-diol (FFF-4)
Figure imgf000130_0001
A una solución de BB-2 (650 mg, 2,06 mmol) en dioxano (0,3 ml) y H2O (0,3 ml) se añadió hidróxido de litio (494 mg, 20,6 mmol). La reacción se calentó a 90 °C durante la noche. La mezcla de reacción se enfrió a r.t., se diluyó con H2O, se extrajo con alcohol isopropílico al 20 %/DCM, las capas orgánicas se combinaron y se purificaron por ISCO 4 g con EtOAc al 100 % a MeOH/EtOAc al 10 % para dar 424 mg de FFF-1 (96 % de rendimiento) como un aceite incoloro que solidificó en reposo.
LCMS [M+1] 216,15. 1HRMN (400 MHz, CLOROFORMO-d) 5 ppm 2,22 (dt, J=15,16, 2,14 Hz, 1 H) 2,73 (s, 3 H) 3,00 (ddd, J=15,25, 9,20, 7,70 Hz, 1 H) 4,89 (s. br, 1 H) 5,37 (dq, J=9,23, 2,22 Hz, 1 H) 5,58 (s. br., 1 H) 5,85 (dd, J=5,50, 2,45 Hz, 1 H) 6,25 - 6,33 (m, 1 H) 6,54 (d, J=3,55 Hz, 1 H) 7,23 (d, J=3,55 Hz, 1 H) 8,69 (s, 1 H)
Paso 2: Síntesis del 4-((1S,4R)-4-(4-metil-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidm-7-il)ciclopent-2-en-1-il)oxi)-7,8-dihidropirido[4,3-d]pirimidin-6(5H)-carboxilato de tert-butilo (FFF-2)
A una solución de FFF-1 (100 mg, 0,465 mmol) en THF (3 ml, c=0,2 M) se añadió hidruro de sodio (27,9 mg, 0,697 mmol) en pequeños lotes. Tras agitar a r.t. durante 10 min, se añadió 4-cloro-7,8-dihidropirido[4,3-d]pirimidin-6(5H)-carboxilato de tert-butilo(TP-20) (125 mg, 0,465 mmol). La mezcla de reacción resultante se agitó a r.t. durante 3,5 h, y luego se inactivó con H2O, partiendo entre EtOAc (20 ml) y H2O (20 ml). La fase orgánica se separó, se lavó con salmuera, se secó sobre Na2SO4 , se concentró y se purificó por cromatografía en columna con 5-10 % de MeOH/EtOAc para obtener 150 mg de FFF-2 (72 % de rendimiento) como un sólido espumoso de color amarillo claro.
LCMS [M+1] 449,15. 1HRMN (400 MHz, CLOROFORMO-d) 8 ppm 1,44 (s, 9 H) 1,87 (d, J=15,04 Hz, 1 H) 2,66 (s, 3 H) 2,80 (t, J=4,77 Hz, 2 H) 3,15 (dt, J=15,31, 7,81 Hz, 1 H) 3,57 - 3,65 (m, 1 H) 3,65 - 3,75 (m, 1 H) 4,33 (d, J=17,61 Hz, 1 H) 4,44 (d, J=17,12 Hz, 1 H) 5,98 (dt, J=4,31, 1,94 Hz, 1 H) 6,01 -6,07(m , 1 H) 6,07 - 6,14 (m, 1 H) 6,33 (s. br, 1 H) 6,52 (d, J=3,18 Hz, 1 H) 7,20 (d, J=3,67 Hz, 1 H) 8,51 (s, 1 H) 8,70 (s, 1 H)
Paso 3: Síntesis del 4-((1S,2S,3S,4R)-2,3-dihidroxi-4-(4-metN-7H-pirromidm-7-N)ciclopentM)oxi)-7,8-dihidropirido[4,3-d]pirim idin-6(5H)-carboxilato de tert-butilo (FFF-3)
El compuesto FFF-2 se trató con un procedimiento similar al del paso 3 del Esquema BB para dar FFF-3 (50 mg, 33 %).
LCMS [M+1] 483,20. 1HRMN (400 MHz, CLOROFORMO-d) 8 ppm 1,49 (s, 9 H) 2,36-2,50 (m, 1 H) 2,76 (s, 3 H) 2,91 (t, J=5,81 Hz, 2 H) 3,06 - 3,22 (m, 1 H) 3,62 - 3,84 (m, 2 H) 4,13 (s, 1 H) 4,36 - 4,50 (m, 2 H) 4,53 (d, J=6,24 Hz, 1 H) 4,93 - 5,05 (m, 1 H) 5,45 (td, J=7,12, 3,12 Hz, 1 H) 5,64 (s. br, 1 H) 6,61 (d, J=3,67 Hz, 1 H) 7,23 (d, J=3,67 Hz, 1 H) 8,64 (s, 1 H) 8,76 (s, 1 H)
Paso 4: Síntesis de (1S,2S,3R,5S)-3-(4-metN-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidm-7-M)-5-((5,6,7,8-tetrahidropirido[4,3-d]pirim idin-4-il)oxi)ciclopentano-1,2-diol (FFF-4)
El compuesto FFF-3 se trató en condiciones de desprotección estándar similares al paso 3 del Esquema CC para producir FFF-4 (24 mg, 100 %).
LCMS [M+1] 383,10. 1HRMN (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 2,00 - 2,11 (m, 1 H) 2,92 (s, 3 H) 2,94 - 3,02 (m, 1 H) 3,06 (s. br., 2 H) 3,48 (s. br., 2 H) 4,11 (d, J=3,42 Hz, 1 H) 4,25 (s. br, 2 H) 4,66 (dd, J=8 ,8 6 , 4,58 Hz, 1 H) 5,22 (q, J=8,93 Hz, 1 H) 5,28 - 5,37 (m, 1 H) 7,20 (s. br., 1 H) 8,09 (s. br., 1 H) 8,69 (s, 1 H) 9,18 (s. br., 1 H) 9,71 (s. br., 1 H) 9,87 (s. br., 1 H)
Ejemplo 157 (Esquema GGG) - (1S,2S,3R,5S)-3-(4-metN-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidm-7-M)-5-((5,6,7,8-tetrahidro-2,7-naftiridin-1-il)oxi)ciclopentano-1,2-diol (GGG-5)
Figure imgf000131_0001
A una solución de 8-hidroxi-3,4-dihidro-2,7-naftiridina-2(1H)-carboxilato de tert-butilo (GGG-1) (250 mg, 0,999 mmol) en CH3CN (2,5 ml) se añadió lentamente POCh (2,5 ml) y se calentó a 90 °C durante la noche. La mezcla de reacción se neutralizó con std. NaHCO3, el disolvente se eliminó por rotavapor. Al residuo se le añadió MeOH 10 ml, a la suspensión se le añadió (BOC)2 (337 mg, 1,50 m m ol, 0,355 ml) y DIPEA (258 mg, 2,00 m m ol, 0,331 ml), se agitó a r.t. durante 30 min. El disolvente orgánico se rotavaporizó, se añadió EtOAc y H2O, se extrajo con EtOAc, se concentró la capa orgánica, se purificó por cromatografía en columna con 30 % de EtOAc/heptano para dar 240 mg de GGG-2 (89 % de rendimiento) como un aceite incoloro.
LCMS [M+1] 269,10. 1HRMN (400 MHz, CLOROFORMO-d) 8 ppm 1,51 (s, 9 H) 2,84 (t, J=5,69 Hz, 2 H) 3,66 (t, J=5,81 Hz, 2 H) 4,56 (s, 2 H) 7,03 (d, J=5,01 Hz, 1 H) 8,17 (d, J=5,01 Hz, 1 H)
Paso 2: Síntesis del 8-((1S,4R)-4-(4-metil-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)ciclopent-2-en-1-il)oxi)-3,4-dihidro-2,7-naftiridina-2(1H)-carboxilato de tert-butilo (g Gg -3)
A una solución de FFF-1 (92 mg, 0,43 mmol) y GGG-2 (115 mg, 0,427 mmol) en DMSO (4,27 ml, c=0,1 M) se trató con butóxido de potasio (61,8 mg, 0,534 mmol, 0,534 ml, 1,0 M). La reacción se calentó a 120 °C durante 15 min. La reacción se enfrió a r.t., se diluyó con H2O y EtOAc (10 ml cada uno). La fase acuosa se extrajo con EtOAc (10 ml). Las fases orgánicas combinadas se lavaron con H2O (2 x 15 ml), salmuera (15 ml) y se secaron sobre Na2SO4. La muestra se concentró y se purificó por HPLC preparativa para dar 40 mg de GGG-3 como sólido marrón (21 % de rendimiento).
LCMS [M+1] 448,20. 1HRMN (400 MHz, CLOROFORMO-d) 8 ppm 1,45- 1,56 (m, 9 H) 1,94 (d, J=14,92 Hz, 1 H) 2,63 (s, 3 H) 2,68 - 2,81 (m, 2 H) 3,20 (dt, J=15,13, 7,78 Hz, 1 H) 3,55 - 3,69 (m, 2 H) 4,33 - 4,45 (m, 1 H) 4,49 (s. br, 1 H) 6,06 (s. br., 2 H) 6,11 (d, J=4,03 Hz, 1 H) 6,45 (s. br., 1 H) 6,62 (s. br., 1 H) 6 , 6 8 (d, J=5,01 Hz, 1 H) 7,39 (s. br., 1 H) 7,92 (d, J=5,14 Hz, 1 H) 8,84 (s. br., 1 H)
Paso 3: Síntesis del 8-(((1S,2S,3S,4R)-2,3-dihidroxi-4-(4-metil-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidm-7-il)ciclopentil)oxi)-3,4-dihidro-2,7-naftiridma-2(1H)-carboxilato de tert-butilo (GGG-4)
El compuesto GGG-3 se trató con un procedimiento similar al del paso 3 del Esquema BB para dar GGG-4 (7,3 mg, 17 %).
LCMS [M+1] 481,90. 1HRMN (400 MHz, CLOROFORMO-d) 8 ppm 1,49 (s, 10 H) 2,43 - 2,54 (m, 1 H) 2,75 (s, 3 H) 2,81 (t, J=5,75 Hz, 2 H) 3,03 (s. br., 1 H) 3,63 - 3,71 (m, 2 H) 4,38 (s. br., 1 H) 4,47 (s. br, 3 H) 4,66 (s. br., 1 H) 5,03 -5,12 (m, 1 H) 5,25 - 5,32 (m, 1 H) 5,48 (s, 1 H) 6,60 (d, J=3,55 Hz, 1 H) 6,77 (d, J=5,26 Hz, 1 H) 7,29 (d, J=3,79 Hz, 1 H) 7,93 (d, J=5,14 Hz, 1 H) 8,77 (s, 1 H)
Paso 4: Síntesis de (1S,2S,3R,5S)-3-(4-metil-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidm-7-il)-5-((5,6,7,8-tetrahidro-2,7-naftidm-1-il)oxi)ciclopentano-1,2-diol (GGG-5)
El compuesto GGG-4 se trató en condiciones de desprotección estándar similares al paso 3 del Esquema CC para producir GGG-5 ( 6 mg, 90 %).
LCMS [M+1] 382,201HRMN (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 1,93-2,02 (m, 1 H) 2,86 - 2,92 (m, 3 H) 2,92 - 2,98 (m, 1 H) 3,01 (t, J=5,99 Hz, 2 H) 3,57 (s, 2 H) 4,08 (d, J=4,03 Hz, 1 H) 4,20 (s. br, 2 H) 4,66 (dd, J=8,93, 4,52 Hz, 1 H) 5,15 -5,23 (m, 1 H) 5,23 - 5,29 (m, 1 H) 6,91 (d, J=5,26 Hz, 1 H) 7,16 (d, J=3,30 Hz, 1 H) 7,99 - 8,06 (m, 2 H) 9,13 (s, 1 H) 9,52 (s. br., 1 H) 9,64 (s. br., 1 H)
Ejemplo 158 (Esquema HHH) - (1S,2R,3R,5S)-3-((2-metilpirimidm-4-il)oxi)-5-((1,2,3,4-tetrahidroisoqumolm-8-il)oxi)ciclopentano-1,2-diol (HHH-6 ) (referencia)
Esquema HHH
Figure imgf000132_0001
Paso 1: Síntesis del 8-(((1S,4R)-4-((tert-butoxicarbonil)oxi)ciclopent-2-en-1-il)oxi)-3,4-dihidroisoquinolin-2(1 H)-carboxilato de tert-butilo (HHH-1)
Vial A: A un vial de reacción secado en horno, equipado con una barra de agitación magnética y enfriado bajo una corriente de argón, se añadió el aducto de Tris(bencílidenoacetona)dipaladio(0)doroformo (44,7 mg, 0,043 mmol) y el ligando MFCD02684551 (R,R)-DACH-naftilo Trost (102 mg, 0,129 mmol). El vial se purgó con argón bajo vacío dinámico y se añadió DCE (3,6 ml), que había sido rociado con argón durante 30 minutos. La solución se agitó durante 30 minutos a rt, momento en el que se obtuvo una solución naranja brillante de catalizador ligado. En esta fase se preparó el vial B .
Vial B: A un vial de reacción secado en horno, equipado con una barra de agitación magnética y enfriado bajo una corriente de argón, se añadió 8-hidroxi-3,4-dihidroisoquinolin-2(1H)-carboxilato de tert-butilo (538 mg, 2,16 mmol), y di-tert-butil-((1R, 3S)-ciclopent-4-eno-1,3-diil)-bis(carbonato)(BB-1) (preparado como se indica en J. Am. Chem. Soc.
2006, 128, 6054-6055) (778 mg, 2,59 mmol). El vial se purgó con argón bajo vacío dinámico y se añadió DCE (3,6 ml), que había sido rociado con argón durante 30 minutos, seguido de la adición del contenido del vial A mediante una jeringa hermética. La reacción se agitó bajo argón a rt durante 14 horas. La reacción se concentró al vacío y se purificó mediante cromatografía en columna instantánea (24 g de SiO2, Isco, 100 % de Hept. a 100 % de EtOAc, 20 ml de fracciones) para obtener HHH-1 (973 mg, >95 %) como una espuma amarilla. LCMs [M+H-Boc-isobutileno] = 276 observado; 1H RMN (400MHz, CLOROFORMO-d) 8 ppm 7,12 (t, J=7,9 Hz, 1H), 6,75 (d, J=7,7 Hz, 1H), 6,72 (d, J=8,2 Hz, 1H), 6,22 (td, J=1,4, 5,7 Hz, 1H), 6,18-6,09 (m, 1H), 5,47 (t, J=5,8 Hz, 1H), 5,15 (t, J=5,7 Hz, 1H), 4 ,59-4,40 (m, J=8,2 Hz, 2H), 3,74 - 3,54 (m, 2H), 3,05 (td, J=7,4, 14,5 Hz, 1H), 2,81 (t, J=5,7 Hz, 2H), 1,96 (td, J=4,5, 14,5 Hz, 1H), 1,52- 1,47 (m, 18H).
Paso 2: Síntesis del 8-((1S,2S,3R,4R)-4-((tert-butoxicarbomlo)oxi)-2,3-dihidroxiciclopentil)oxi)-3,4-dihidroisoquinolin-2 (1H)-carboxilato de tert-butilo (HHH-2 )
A un vial de centelleo, equipado con una barra de agitación magnética y que contenía HHH-1 (225 mg, 0,521 mmol), se añadió DCM (2,6 ml). A la solución se añadió óxido de 4-metilmorfolina (NMO) (0,32 ml, 1,50 mmol) como solución al 50 % en agua, seguida de la adición gota a gota de tetraóxido de osmio (130 pl, 0,02 mmol) como solución al 4 % en agua. La reacción se agitó a rt durante 23 horas. La reacción se transfirió a un embudo separador con DCM, se diluyó con agua y se volvió a diluir con NaHSO31M. Las fases se separaron y la fase acuosa se extrajo con 3 porciones de DCM. Los extractos orgánicos combinados se secaron (MgSO4), se filtraron y se concentraron al vacío. El residuo crudo se purificó mediante cromatografía en columna instantánea (12 g de SO 2, Isco, 100 % de Hept. a 100 % de EtOAc, 9 ml de fracciones) para obtener HHH-2 (211 mg, 87 %) como sólido blanco. LCMS [M+H-Boc-isobutileno] = 310 observado; 1H RMN (400MHz, CLOROFORMO-d) 8 ppm 7,12 (t, J=7,9 Hz, 1H), 6,76 (d, J=7,7 Hz, 1H), 6,71 (d, J=8,2 Hz, 1H), 4,90 (td, J=5,8, 9,0 Hz, 1H), 4,69 - 4,59 (m, 1H), 4,45 (s, 2H), 4,34 (s, 1H), 4,26 (s. br, 1H), 3,63 (d, J=5,7 Hz, 2H), 2,81 (t, J=5,7 Hz, 3H), 2,03-1,91 (m, J=5,7, 9,3 Hz, 1H), 1,53- 1,48 (m, 18H).
Paso 3: Síntesis del 8-((3aR,4S,6R,6aS)-6-((tert-butoxicarbomlo)oxi)-2,2-dimetiltetrahidro-4H-ciclopenta[d][1,3]dioxol-4-il)oxi)-3,4-dihidroisoquinolin-2(1H)-carboxilato de tert-butilo (HHH-3)
A un vial de reacción, equipado con una barra de agitación magnética y que contenía HHH-2 (211 mg, 0,453 mmol), se añadió acetona (0,29 ml), ácido 4-toluenosulfónico monohidratado (172 mg, 0,906 mmol) y 2,2-dimetoxipropano (0,56 ml, 4,53 mmol). La reacción se agitó a rt durante 1 hora. La reacción se transfirió a un embudo separador con EtOAc y agua. La mezcla bifásica se diluyó con NaHCO3 sat. y se separaron las fases. La fase orgánica se lavó con 1 porción de NaHCO3 medio sat. y los lavados acuosos combinados se volvieron a extraer con 1 porción de EtOAc. Las fases orgánicas combinadas se secaron (MgSO4), se filtraron y se concentraron al vacío. El residuo crudo se purificó mediante cromatografía en columna instantánea (12g de SO 2, Isco, 100 % de Hept a 100 % de EtOAc, 9 ml de fracciones) para obtener HHH-3 (140,5 mg, 61 %) como sólido blanco. LCMS [M+H-Boc-isobutileno] = 350 observado; 1H RMN (400MHz, CLOROFORMO-d) 8 ppm 7,12 (s, 1H), 6,73 (t, J=8,1 Hz, 2H), 4,94 (d, J=4,6 Hz, 1H), 4,80 - 4,66 (m, 3H), 4,61 - 4,43 (m, 2H), 3,63 (s, 2H), 2,80 (t, J=5,6 Hz, 2H), 2,47 (td, J=5,4, 15,4 Hz, 1H), 2,25 (td, J=1,5, 15,4 Hz, 1H), 1,49 (s, 12H), 1,45 (s, 9H), 1,31 (s, 3H).
Paso 4: Síntesis del 8-((3aR,4S,6R,6aS)-6-hidroxi-2,2-dimetiltetrahidro-4H-ciclopenta[d][1,3]dioxol-4-il)oxi)-3,4-dihidroisoquinolin-2(1H)-carboxilato de tert-butilo (HHH-4)
A un vial de microondas, equipado con una barra de agitación magnética y que contenía HHH-3 (134,5 mg, 0,266 mmol) se añadió dioxano (1,3 ml) y agua (1,3 ml). A la solución se añadió hidróxido de litio (63,7 mg, 2,66 mmol) y el vial se cerró con un tapón de teflón. El vial se colocó en un bloque de calentamiento y se agitó a 100 °C durante 19 horas. El vial se retiró del bloque de calentamiento y se dejó enfriar a temperatura ambiente. La solución se transfirió a un embudo separador con EtOAc y se diluyó con agua. Las fases se separaron y la fase acuosa se extrajo con 3 porciones de EtOAc. Los extractos orgánicos combinados se secaron (MgSO4), se filtraron y se concentraron al vacío. El residuo crudo se purificó mediante cromatografía en columna instantánea (4g SiO2, Isco, 100 % Hept. a 100 % EtOAc, 9 ml de fracciones) para obtener HHH-4 (97,3 mg, 90 %) como espuma blanca. LCMS [M+H-Boc] = 306 observado; 1H RMN (400MHz, CLOROFORMO-d) 8 ppm 7,17 (t, J=7,9 Hz, 1H), 6,84 (d, J=8,3 Hz, 1H), 6,81 (d, J=7,7 Hz, 1H), 4,75 (dd, J=5,4, 7,8 Hz, 2H), 4,67 (dd, J=1,3, 5,6 Hz, 1H), 4,55 - 4,33 (m, 2H), 4,27 (d, J=4,6 Hz, 1H), 3,78 -3,49 (m, 2H), 2,82 (t, J=5,7 Hz, 2H), 2,42 (td, J=5,0, 15,0 Hz, 1H), 2,10 (d, J=15,0 Hz, 1H), 1,49 (s, 9H), 1,46 (s, 3H), 1,31 (s, 3H).
Paso 5: Síntesis del 8-((3aR,4S,6R,6aS)-2,2-dimetil-6-((2-metMpirimidm-4-il)oxi)tetrahidro-4H-ciclopenta[d][1,3]dioxol-4-N)oxi)-3,4-dihidroisoqumolm-2(1H)-carboxNato de tert-butilo (HHH-5)
A un vial de reacción secado en horno, equipado con una barra de agitación magnética y que contenía HHH-4 (43 mg, 0,110 mmol), se añadió DMF (0,53 ml) e hidruro de sodio (8,5 mg, 0,210 mmol) como una dispersión del 60 % en peso en aceite mineral. La solución se agitó a rt durante 1 hora para producir una solución de color marrón oscuro del alcóxido de sodio. A la solución se añadió 4-cloro-2-metilpirimidina (16,4 mg, 0,127 mmol) y el vial se colocó en un bloque de calentamiento y se calentó a 115 °C durante 16 horas. La reacción se inactivó cuidadosamente mediante la adición gota a gota de agua. La solución se diluyó de nuevo con agua y se transfirió a un embudo de separación con EtOAc. Las fases se separaron y la fase acuosa se extrajo con 4 porciones de una mezcla 3:1 de DCM/IPA. Los extractos orgánicos combinados se lavaron con 1 porción de salmuera, se secaron (MgSO4), se filtraron y se concentraron al vacío. El HHH-5 crudo se utilizó en el siguiente paso sin purificación adicional. LCMS [M+H-Boc] = 398 observado
Paso 6 : Síntesis de (1S,2R,3R,5S)-3-((2-metMpirimidm-4-N)oxi)-5-((1,2,3,4-tetrahidroisoqumolm-8-il)oxi)ciclopentano-1,2-diol (HHH-6 )
A un matraz de fondo redondo, equipado con una barra de agitación magnética y que contenía HHH-5 (53 mg, 0,11 mmol, crudo del paso 5) se añadió agua (1,0 ml) y TFA (0,5 ml). La solución se agitó a rt durante 1 hora. La reacción se transfirió a un embudo separador con DCM y se ajustó al pH básico con NaHCO3 sat. ac.. Las fases se separaron y la fase acuosa se extrajo con 4 porciones de una mezcla 3:1 de DCM/IPA. Los extractos orgánicos combinados se lavaron con 1 porción de agua sat. NaHCO3 ac.., se secó (MgSO4), se filtró y se concentró al vacío. El residuo crudo se purificó por HPLC prep. (columna de celulosa Lux-14,6 x 100 mm 3|j, 20 % MeOH/DEA @ 120 bar, 4 ml/min) para obtener HHH-6 (7,06 mg, 19 % en 2 pasos) como sólido blanco. LCMS [M+H] = 358 observado; [a] 22 D= 3,7° (c=0,1, MeOH); 1H RMN (400MHz, METANOL-d4) 8 ppm 8,05 (d, J=6,4 Hz, 1H), 7,15 (t, J=7,9 Hz, 1H), 6,84 (d, J=8,1 Hz, 1H), 6,79 (d, J=7,6 Hz, 1H), 6,67 (d, J=6,5 Hz, 1H), 4,68 (s. br., 2H), 4,61 (td, J=4,2, 8,1 Hz, 1H), 4,26 (t, J=4,3 Hz, 1H), 4,12 (td, J=4,9, 7,4 Hz, 1H), 4,02-3,90 (m, 3H), 2,90 (t, J=5,7 Hz, 2H), 2,74 (td, J=7,7, 15,0 Hz, 1H), 2,47 (s, 3H), 1,62 (td, J=4,7, 14,6 Hz, 1H).
Síntesis del ácido 2-(benzoxi)-5-fluoro-4-metilbenzoico (III-4)
Figure imgf000134_0001
A una solución de 4-bromo-5-fluoro-2-hidroxibenzoato de metilo III-1 (1,62 g, 6,505 mmol) en DMF (20 ml) se añadió K2CO3 (2,7 g, 19,5 mmol) y BnBr (2,23 g, 13 mmol). La mezcla se agitó a 16 °C durante 3 horas. La mezcla se diluyó con agua (100 ml). Luego la mezcla se extrajo con EtOAc (50 ml x 2). Las capas orgánicas se recogieron, se secaron y se evaporaron para dar el producto crudo, que se purificó por cromatografía instantánea, eluyendo con éter de petróleo/EtOAc al 0-10 % para dar el III-2 (1,8 g, 82 %) como sólido blanco y se utilizó directamente en el siguiente paso.
Paso 2 - Síntesis del 2-(benzoxi)-5-fluoro-4-metilbenzoato de metilo (III-3)
Una mezcla de III-2 (2 g, 5,87 mmol), Pd(Ph3 P)4 (339 mg, 0,293 mmol) en THF (20ml) se desgasificó con N2 cuatro veces, luego se añadió AlMe3 (7,87 ml, 15,7 mmol, 2M) a 0 ° y luego se agitó la reacción a 80 °C durante 24 horas. A continuación, la reacción se inactivó con tartrato sódico acuoso tetrahidratado, se extrajo con EtOAc tres veces, las capas orgánicas combinadas se secaron sobre Na2SO4, se eliminó el disolvente al vacío y el residuo se purificó mediante biotage flash (éter de petróleo/EtOAc=0-5 %) para dar III-3 (660 mg, 41 %) como un aceite de color amarillo.
1HRMN (400 MHz, CDCh) 8 ppm 7,57-7,47 (m, 3H), 7,43-7,37 (m, 2H), 7,36- 7,30 (m, 1H), 6,84 (d, J=6,0 Hz, 1H), 5,14 (s, 2H), 3,90 (s, 3H), 2,29 (d, J=2,0 Hz, 3H)
Paso 3 - Síntesis del ácido 2-(benzoxi)-5-fluoro-4-metilbenzoico (III-4)
A una solución de III-3 (0,71 g, 2,59 mmol) en MeOH (4 ml) se añadió una solución de LOH.H2O (326 gm, 7,77 mmol) en H2O (4 ml). La mezcla de reacción se agitó a 20 °C durante 2 horas. La solución de reacción se evaporó para eliminar la mayor parte del metanol, y luego el residuo se ajustó al pH~2 con HCl 1N. Se formaron sólidos blancos y se extrajo con EtOAc (20 ml x 2). Las capas orgánicas se secaron y evaporaron para dar 111-4 (670 mg, 99,5 %) como un sólido blanco. 1HRMN (400 MHz, CDCh) 8 ppm 10,76 (s. br., 1H), 7,83 (d, J=9,5 Hz, 1H), 7,52 - 7,37 (m, 5H), 6,96 (d, J=6,0 Hz, 1H), 5,26 (s, 2H), 2,35 (s, 3H)
Ejemplo 159 (Esquema JJJ) - (1S,2S,3S,5R)-3-(2-(aminometN)-4-clorofenoxi)-5-(4-metil-7H-pirrol[2,3-d]pirimidin-7-il)ciclopentano-1,2-diol (JJJ-3) (referencia)
Figure imgf000135_0001
Paso 1 - Síntesis del 5-cloro-2-((1S,4R)-4-(4-metM-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)ciclopent-2-en-1-il)oxi)benzonitrilo (JJJ-1)
En un vial de microondas seco (purgado con N2) se añadió BB-2 (100 mg, 0,317 mmol), 5-cloro-2-hidroxibenzonitrilo (56 mg, 0,37 mmol), Cs2CO3 (114 mg, 0,35 mmol), Pd2(dba)3 (8,2 mg, 0,008 mmol) y DpPP (7,85 mg, 0,019 mmol). A continuación, se purgó el vial con N2 tres veces y se añadió DCE (1,5 ml, rociado con N2 durante 30 minutos). La mezcla negra se agitó a 20 °C durante 1 hora. A continuación, la mezcla de reacción se purificó directamente por pre-TLC (éter de petróleo:EtOAc=1/4) para dar JJJ-1 (83 mg, 75 %, como una goma de color amarillo. LCMS [M+1] 351; 1HRMN (400 MHz, CDCh) 8 ppm 8,77 (s, 1H), 7,56 (d, J=2,8 Hz, 1H), 7,50 (dd, J=2,6, 8,9 Hz, 1H), 7,41 (d, J=3,8 Hz, 1H), 7,00 (d, J=9,0 Hz, 1H), 6,63 (d, J=3,5 Hz, 1H), 6,40 (td, J=1,9, 5,5 Hz, 1H), 6,26 (dd, J=2,4, 5,6 Hz, 1H), 6,14 -6,08 (m, 1H), 5,44 (d, J=7,0 Hz, 1H), 3,21 -3,11 (m, 1H), 2,73 (s, 3H), 2,04 (td, J=3,2, 14,9 Hz, 1H)
Paso 2 - Síntesis del 5-cloro-2-((1S,2S,3S,4R)-2,3-dihidroxi-4-(4-metil-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)ciclopentil)oxi)benzonitrilo (JJJ-2)
A una mezcla de JJJ-1 (83 mg, 0,237 mmol) en DCM ( 6 ml)/H2O (0,2 ml) se añadió NMO (96 mg, 0,71 mmol) y OSO4 (4 % en t-BuOH, 80 mg, 0,013 mmol) a 20 °C. La mezcla marrón se agitó a 20 °C durante 6 horas. La mezcla se diluyó con DCM (5 ml) y se inactivó con Na2SO3 sat. (2 ml) y se separó. La capa orgánica se lavó con salmuera (5 ml). Los acuosos combinados se extrajeron con DCM (5 ml X2). Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre Na2SO4 , se filtraron y se concentraron para obtener el producto crudo ( 1 0 0 mg) como un sólido de color amarillo claro, que se purificó por pre-TLC (EtOAc:MeOH=10:1) para obtener JJJ-2 (40 mg, 44 %) como un sólido blanco. LCMS [M+1] 385; 1HRMN (400 MHz, MeOD) 8 ppm 8,60 (s, 1H), 7,73 (d, J=2,5 Hz, 1H), 7,66 (d, J=3,5 Hz, 1H), 7,63 (dd, J=2,6, 9,2 Hz, 1H), 7,30 (d, J=9,0 Hz, 1H), 6,76 (d, J=3,5 Hz, 1H), 5,35 - 5,26 (m, 1H), 4,69 (dd, J=4,9, 8,4 Hz, 1H), 4,21 (d, J=4,5 Hz, 1H), 3,04 (ddd, J=6 ,8 , 9,8, 14,8 Hz, 1H), 2,71 (s, 3H), 2,17 (ddd, J=3,0, 7,7, 14,7 Hz, 1H)
Paso 3 - Síntesis de (1S,2S,3S,5R)-3-(2-(ammometM)-4-clorofenoxi)-5-(4-metil-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)ciclopentano-1,2-diol (JJJ-3)
Una mezcla de JJJ-2 (40 mg, 0,104 mmol) y Raney-Ni ( 8 mg) en EtOH (7 ml)/NH3.H2O (0,5 ml) se desgasificó con H2 cuatro veces. La mezcla se agitó a 20 °C bajo globo de H2 durante 20 horas. La mezcla se filtró y el filtrado se concentró in vacuo para obtener un sólido blanco, que se purificó por pre-TLC (DCM:MeOH:NH3.H2O=1 0 :1 :0 ,1 ) para obtener el producto (-20 mg) como goma de color amarillo y se liofilizó. El material se purificó de nuevo por HPLC prep. para dar JJJ-3 (9 mg, 22 %). LCMS [M+1] 389; 1HRMN (400 MHz, MeOD) 8 ppm 8,60 (s, 1H), 7,56 (d, J=3,8 Hz, 1H), 7,42 (d, J=2,5 Hz, 2H), 7,21 (d, J=8 , 8 Hz, 1H), 6,74 (d, J=3,5 Hz, 1H), 5,11 (q, J=9,1 Hz, 1H), 4,82-4,76 (m, 2H), 4,29 (dd, J=2,1, 5,1 Hz, 1H), 4,26-4,15 (m, 2H), 3,06-2,92 (m, 1H), 2,72 (s, 3H), 2,37 (ddd, J=5,0, 9,7, 14,4 Hz, 1H)
Los Ejemplos 160 y 161 se prepararon utilizando una química similar a la del Esquema A, empleando bromuro de magnesio (4-cloro-3-fluorofenilo) para el paso 8.
Figure imgf000136_0002
El Ejemplo 162 se hizo de forma similar al Ejemplo 99 del Esquema NN utilizando isoquinolin-8-ol en el paso 2.
Figure imgf000136_0003
Síntesis de 6-hidroxi-3,4-dihidrobenzo[f][1,4]oxazepin-5(2H)-ona (TP-21) y 6-hidroxi-2,3-dihidrobenzo[f][1,4]oxazepin-4(5H)-carboxilato de tert-butilo (TP-22) (Esquema KKK)
Figure imgf000136_0001
Una solución de 2,6-dihidroxibenzoato de metilo (1,2 g, 7,14 mmol), (2-bromoetil)carbamato de tert-butilo (2,33 g, 7,14 mmol) y K2CO3 (2,5 g, 17,8 mmol) en DMF(10 ml) se agitó a 15 °C durante 32 h. Se añadió agua a la mezcla de reacción y se extrajo con EtOAc tres veces. Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre sulfato sódico, se concentraron in vacuo y el residuo se purificó por cromatografía instantánea (éter de petróleo/EtOAc=10-20 %) para dar el compuesto KKK-2 (900 mg, 41 %) como sólido blanco y se utilizó en el siguiente paso directamente.
Paso 2 - Síntesis del 2-(2-((tert-butoxicarbonil)amino)etoxi)-6-hidroxibenzoato de metilo (KKK-3)
A una solución del compuesto KKK-2 (900 mg, 2,89 mmol) en DCM (10 ml) se añadió TFA (2 ml) a 0-5 °C, luego la mezcla de reacción se agitó a 15 °C durante 2 h. El disolvente se eliminó y el residuo (700 mg, >99 %) se utilizó para el siguiente paso directamente.
Paso 3 - Síntesis de 6-hidroxi-3,4-dihidrobenzo[f][1,4]oxazepin-5(2H)-ona (TP-21)
A una solución del compuesto KKK-3 (700 mg, 3,31 mmol) en i-PrOH ( 6 ml) se añadió TEA (3,35 g, 33,1 mmol) a 15 °C , y a continuación la mezcla de reacción se agitó a 95 °C durante 6 h. Se eliminó el disolvente, y el residuo se purificó por cromatografía instantánea (20 g, éter de petróleo/EtOAc=10-50 %) para dar el compuesto TP-21 (480 mg, 81 %) como un sólido blanco. 1HRMN (400 MHz, CDCh) 8 ppm 12,61 (s, 1H), 7,33 - 7,29 (m, 1H), 6,70 (d, J=8,3 Hz, 1H), 6,57 (s. br., 1H), 6,53 (d, J=8,0 Hz, 1H), 4,41 - 4,35 (m, 2H), 3,57 (q, J=4,8 Hz, 2H)
Paso 4 - Síntesis de 2,3,4,5-tetrahidrobenzo[f][1,4]oxazepin-6-ol (KKK-4)
A una solución del compuesto TP-21 (100 mg, 0,56 mmol) en THF anhidro (2 ml) se añadió BH3-Me2S (127 mg, 1,67 mmol) a 0 °C gota a gota bajo N2. Tras la adición, la mezcla se calentó a 70 °C (reflujo) durante 3 horas. A continuación, la mezcla de reacción se inactivó con 1 ml de MeOH cuidadosamente a -10~20 °C, después se añadió otro HCl 6 N 10 m l, luego se sometió a reflujo durante 3h, se eliminó la mayor parte del disolvente al vacío, después el residuo se ajustó el pH 8-9 con K2CO3 , se extrajo con EtOAc tres veces. Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre Na2SO4, se filtraron y se concentraron para dar el compuesto crudo KKK-4 (0,5 g, >99 %). LCMS [M+1] 166
Paso 5 - Síntesis del 6-hidroxi-2,3-dihidrobenzo[f][1,4]oxazepin-4(5H)-carboxilato de tert-butilo (TP-22)
El compuesto crudo KKK-4 (500 mg, 0,61 mmol) se disolvió en DCM (5 ml) y MeOH (5 ml). (Boc)2O (132 mg, 0,605 mmol) y Et3N (184 mg, 1,82 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a 15 °C durante 16 horas. Se añadió DCM (10 ml) y se lavó con ácido acético (5 ml) y NaCl saturado (5 ml). La capa orgánica se separó, se secó y se evaporó para dar el residuo. A continuación se añadieron 10 ml de MeOH para disolver el residuo, y luego se añadió K2CO3 (200 mg) a la mezcla. La mezcla de reacción se agitó a 15 °C durante 2 horas. Se añadió d Cm (25 ml x 2) a la solución, se lavó la solución con ácido acético (5 ml,pH <7) y NaCl saturado (5 ml). Las capas orgánicas se combinaron, se secaron y se evaporaron para dar el producto crudo que se purificó por pre-TLC para dar el compuesto TP-22 (13 mg, 8 %) como un sólido de color amarillo. 1HRMN (400 MHz, CDCla) 8 ppm 7,62 (brs, 1H), 7,07 (t, J=8,2 Hz, 1H), 6,73 (d, J=7,5 Hz, 1H), 6,64 (d, J=7,8 Hz, 1H), 4,37 (s, 2H), 4,01 - 3,92 (m, 2H), 3,79 - 3,70 (m, 2H), 1,40 (s, 9H) LCMS [M-Boc+1] 210.
Síntesis del 6-(1-(tert-butoxicarbonil)-1 H-pirazol-4-il)-8-hidroxi-3,4-dihidroisoquinolin-2(1H)-carboxilato de tert-butilo (TP-23) (Esquema LLL)
Figure imgf000137_0001
Bajo una atmósfera de N2, se añadieron a un vial TP-12 (50 mg, 0,15 mmol), 4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-1H-pirazol-1-carboxilato (67 mg, 0,23 mmol), K3PO4 (97 mg, 0,46 mmol) y XPhos-Paladaciclo (13 mg, 0,015 mmol). Se añadió DMF (1,60 ml) y la solución de reacción se calentó a 50 °C en el microondas durante 16 horas. Se añadió EtOAc y H2O para diluir la solución de reacción. La capa acuosa se extrajo con EtOAc (3 ml x 2). Las capas orgánicas se separaron, se secaron y se evaporaron para dar el producto crudo, que se purificó por pre-TLC (éter de petróleo/EtOAc=1/1) para dar el compuesto deseado TP-23 (33 mg, 90 %) como un aceite incoloro. LCMS [M-Boc+1] 316.
Síntesis del 6-(1-(tert-butoxicarbonil)-1H-pirazol-4-il)-5-fluoro-8-hidroxi-3,4-dihidroisoquinolin-2(1H)-carboxilato de tert-butilo (TP-24) (Esquema MMM)
Figure imgf000138_0001
El TP-24 se sintetizó de forma similar al TP-23 (Esquema LLL) a partir del TP-11. LCMS [M-Boc+1] 334.
Síntesis del 8-hidroxi-6-(1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-3,4-dihidroisoquinolin-2(1H)-carboxilato de tert-butilo (TP-25) (Esquema NNN)
Figure imgf000138_0002
Paso 1 - Síntesis del 8-(benciloxi)-6-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-3,4-dihidroisoqumolm-2(1H)-carboxilato de tert-butilo (NNN-1)
Una mezcla de GG-7 (3,00 g, 7,17 mmol), bis(pinacolato)diboro (2,73 g, 10,8 mmol), KOAc (1,4 g, 14,3 mmol) y PdCl2(dppf).CH2Cl2 (262 mg, 0,36 mmol) en dioxano (30,0 ml) se calentó a 80 °C durante 16 horas. Se añadió agua (30 ml) para diluir la solución de reacción y luego se extrajo con EtOAc (30 ml x 2). Las capas orgánicas se combinaron, se secaron y se evaporaron para dar el producto crudo, que se purificó por cromatografía instantánea ( 1 20 g de gel de sílice), eluyendo con éter de petróleo/EtOAc 0-20 %, para dar NNN-1 (3 g, 90 %) como sólido blanco. LCMS [M-Boc+1] 366; 1HRMN (400 MHz, DMSO-da) 8 ppm 7,50-7,45 (m, 2H), 7,43-7,39 (m, 2H), 7,37-7,30 (m, 1H), 7,13 (d, J=2,5 Hz, 2H), 5,15 (s. br, 2H), 4,54 - 4,38 (m, 2H), 3,59 - 3,50 (m, 2H), 2,77 (t, J=5,5 Hz, 2H), 1,42 (s, 9H), 1,29 (s, 12H)
Paso 2 - Síntesis del 8-(benciloxi)-6-(1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-3,4-dihidroisoquinolin-2(1H)-carboxilato de tert-butilo (NNN-2)
Un vial bajo argón que contenía NNN-1 (800 mg, 1,72 mmol), 5-yodo-1-metil-1H-1,2,3-triazol (467 mg, 2,23 mmol), PdCh(dppf)-DCM (126 mg, 0,172 mmol), K2CO3 (475 mg, 3,44 mmol), DME (10,0 ml) y agua (1,00 ml) se tapó y se calentó a 80 °C durante 16 horas. Se añadió agua (10,0 ml) a la reacción y se extrajo con EtOAc (10 ml x 2). Las capas orgánicas se separaron, se secaron y se evaporaron para dar el producto crudo, que se purificó por cromatografía instantánea (80 g), eluyendo con éter de petróleo/EtOAc (1:1) para dar NNN-2 (640 mg, 89 %) como un aceite incoloro. LCMS [M+1] 421.
Paso 3 - Síntesis del 8-hidroxi-6-(1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-3,4-dihidroisoquinolin-2(1H)-carboxilato de tertbutilo (TP-25)
El compuesto NNN-2 (640 mg, 1,52 mmol) se disolvió en EtOAc (3 ml). Se añadió Pd/C (162 mg, 1,52 mmol) a la mezcla anterior, la mezcla de reacción se agitó a 25 °C durante 48 horas. La solución se diluyó con EtOAc (10 ml) y se filtró. El filtrado se evaporó para dar el producto crudo, que se purificó por cromatografía instantánea, eluyendo con éter de petróleo/EtOAc al 0-30 %, para dar el producto deseado TP-25 (320 mg, 64 %) como sólido blanco. LCMS [M+1] 331; 1HRMN (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 10,04 (s, 1H), 7,82 (s, 1H), 6,91 - 6,77 (m, 2H), 4,40 (s, 2H), 4,04 (s, 3H), 3,56 (m, 2H), 2,78 (m, 2H), 1,45 (s, 9H)
Síntesis del 8-hidroxi-6-(tiazol-4-il)-3,4-dihidroisoquinolin-2(1H)-carboxilato de tert-butilo (TP-26) (Esquema OOO)
Figure imgf000139_0001
Paso 1 - Síntesis del 8-(benciloxi)-6-(tiazol-4-il)-3,4-dihidroisoquinolin-2(1H)-carboxilato de tert-butilo (OOO-1)
Se tapó un vial bajo argón que contenía el compuesto NNN-1 (800 mg, 1,72 mmol), 4-bromotiazol (367 mg, 2,23 mmol), Pd(PPh3)4 (278 mg, 0,241 mmol), K2CO3 (523 mg, 3,78 mmol), dioxano (10 ml) y agua (1 ml) y se calentó a 80 °C durante 16 horas. Se añadió agua (10 ml) a la reacción y se extrajo con EtOAc (10 ml x 2). Las capas orgánicas se separaron, se secaron y se evaporaron para dar el producto crudo, que se purificó por cromatografía instantánea, eluyendo con éter de petróleo/EtOAc de 0-20 %) para dar OOO-1 (370 mg, 51 %) como un aceite incoloro. LCMS [M+23] 445
Paso 2 - Síntesis de 6-(tiazol-4-il)-1,2,3,4-tetrahidroisoquinolin-8-ol (OOO-2)
El compuesto OOO-1 (320 mg, 0,76 mmol) se disolvió en DCM (10 ml) y se enfrió a 0 °C en un baño de hielo. Se añadió BBr3 (1,14 g, 4,54 mmol) a la solución de reacción y se agitó a 25 °C durante 16 horas. La solución de reacción se enfrió a 0 °C. Se añadió metanol (3,00 ml) a la solución de reacción gota a gota, seguido de agua (20 ml). La solución de reacción se lavó con DCM (10 ml x 2). Se separó la capa acuosa. Se utilizó Na2CO3 sólido para ajustar el pH a 9. La solución final del compuesto OOO-2 se utilizó directamente para el siguiente paso. LCMS [M+1] 233.
Paso 3 - Síntesis del 8-hidroxi-6-(tiazol-4-il)-3,4-dihidroisoquinolin-2(1H)-carboxilato de tert-butilo (TP-26)
Se añadieron MeOH (5,00 ml) y dioxano (5,00 ml) a la solución del compuesto OOO-2 (180 mg, solución de reacción acuosa, 40,0 ml), luego se añadió (Boc)2O ( 3 3 5 mg, 1,55 mmol) a la reacción y se agitó a 25 °C durante 16 horas. Se añadió DCM (20 ml) a la solución diluida. El pH se ajustó a un pH~3 mediante la adición de HCl 1N ac.. La solución se separó y la capa acuosa se extrajo con DCM (10 ml). Las capas orgánicas se combinaron y se lavaron con NaCl saturado (20,0 ml). Las capas orgánicas se separaron, se secaron y se evaporaron para dar el producto crudo, que se purificó por cromatografía instantánea, eluyendo con éter de petróleo/EtOAc 0-50 % para dar el TP-26 (180 mg, 70 %) como un sólido de color amarillo. LCMS [M+1] 333; 1HRMN (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 9,78 (s, 1H), 9,16 (d, J=2,0 Hz, 1H), 7,99 (d, J=2,0 Hz, 1H), 7,33 (d, J=1,3 Hz, 1H), 7,24 (s, 1H), 4,38 (s, 2H), 3,56 (m, 2H), 2,77 (m, 2H), 1,44 (s, 9H)
Síntesis del 8-hidroxi-3-metil-3,4-dihidroisoquinolin-2(1H)-carboxilato de tert-butilo (TP-28) (Esquema PPP)
Figure imgf000139_0002
Paso 1: Síntesis del 3-metil-1,2,3,4-tetrahidroisoquinolin-8-ol (PPP-1)
Una solución de 3-metilisoquinolin-8-ol(TP-27) [preparada a partir de Tetrahedron Letters 49 (2008) 3725-3728] (100 mg, 0,628 mmol) en EtOH/AcOH (6ml/0,2ml) se añadió PtO2 (80 mg, 0,35 mmol), hidrogenado bajo 45 psi H2 a rt durante 16h. La mezcla de reacción se filtró y se lavó con EtOH, el disolvente se evaporó para dar PPP-1 crudo (103 mg, 100 %) que se utilizó para el siguiente paso sin purificación adicional. LCMS [M+1] 163,9.
Paso 2: Síntesis del 8-hidroxi-3-metil-3,4-dihidroisoquinolin-2(1H)-carboxilato de tert-butilo (TP-28)
A una solución de PPP-1 (103 mg, 0,628 mmol) en THF ( 6 ml, 0,1 M) se añadió Boc2O (225 mg, 1,03 mmol) y K2CO3 (356 mg, 2,57 mmol) a 15 °C, se agitó a rt durante 15 h. Se eliminó el disolvente, el residuo se disolvió en MeOH, se añadieron 0,1 g de K2CO3 y se agitó durante 2 h. El sólido se filtró y se lavó con EtOAc, el filtrado se concentró y se purificó mediante TLC preparativa para dar TP-28 (70 mg, 42 %) como sólido de color amarillo.
LCMS [M+1-tBu] 207,9. 1HRMN (400MHz, CLOROFORMO-d) 5 ppm 7,09-7,01 (m, 1H), 6,71 (d, J=7,8 Hz, 1H), 6,63 (d, J=8,0 Hz, 1H), 4,81 (br d, J=17,6 Hz, 1H), 4,63 (br s, 1H), 4,18 (d, J=17,6 Hz, 1H), 3,08 (dd br, J=5,5, 16,1 Hz, 1H), 2,55 (ddd br, J=1,8, 14,6, 16,3 Hz, 1H), 1,54 - 1,43 (s, 9H), 1,09 (d, J=6 , 8 Hz, 3H)
Síntesis del 8-hidroxi-6-(oxazol-5-il)-3,4-dihidroisoquinolin-2(1H)-carboxilato de tert-butilo (TP-29) (Esquema QQQ)
Figure imgf000140_0001
Paso 1: Síntesis del 8-(benciloxi)-6-(oxazol-5-il)-3,4-dihidroisoquinolin-2(1H)-carboxilato de tert-butilo (QQQ-1) A la solución de II-1 (265 mg, 0,721 mmol) y p-toluenesulfonilmetilisocianuro (465 mg, 2,38 mmol) en metanol (14,4 ml, c=0,05 M) se añadió K2CO3 (199 mg, 1,44 mmol), la suspensión resultante se sometió a reflujo durante la noche. La mezcla de reacción se concentró, se añadió EtOAc y H2O. Las capas se separaron; la acuosa se extrajo con EtOAc. Las capas orgánicas se concentraron y se purificaron por cromatografía en columna con EtOAc/heptano al 35 % para dar q Qq -1 (100 mg, 34 %) como aceite incoloro.
LCMS [M+1-Boc] 307,15. 1HRMN (400 MHz, CLOROFORMO-d) 5 ppm 1,51 (s, 9 H) 2,86 (t, J=5,01 Hz, 2 H) 3,67 (t, J=5,62 Hz, 2 H) 4,62 (s, 2 H) 5,16 (s. br, 2 H) 7,06 (s, 1 H) 7,08 (s, 1 H) 7,31 (s, 1 H) 7,35 (d, J=7,21 Hz, 1 H) 7,41 (t, J=7,34 Hz, 2 H) 7,44 - 7,50 (m, 2 H) 7,90 (s, 1 H)
Paso 2: Síntesis del 8-hidroxi-6-(oxazol-5-il)-3,4-dihidroisoquinolin-2(1H)-carboxilato de tert-butilo (TP-29) El compuesto TP-29 se preparó a partir de QQQ-1 con un procedimiento similar al del paso 9 del Esquema GG (79 mg, 100 %).
LCMS [M+1-Boc] 217,10. 1HRMN (400 MHz, CLOROFORMO-d) 5 ppm 1,54 (s, 9 H) 2,83 (s. br., 2 H) 3,67 (t, J=5,69 Hz, 2 H) 4,60 (s. br., 2 H) 6,95 (s. br., 2 H) 7,27 (s, 1 H) 7,90 (s, 1 H)
Síntesis del 8-hidroxi-6-(1H-pirazol-3-il)-3,4-dihidroisoquinolin-2(1H)-carboxilato de tert-butilo (TP-30) (Esquema RRR)
Figure imgf000140_0002
Paso 1: Síntesis del 6-acetil-8-(benzoxi)-3,4-dihidroisoquinolin-2(1H)-carboxilato de tert-butilo (RRR-1) El compuesto RRR-1 se preparó a partir de GG-7 con un procedimiento similar al del paso 1 del Esquema JJ (360,0 mg, 80,2 %).
Paso 2: Síntesis del (E)-8-(benciloxi)-6-(3-(dimetilamino)acriloil)-3,4-dihidroisoquinolin-2(1H)-carboxilato de tert-butilo (RRR-2)
RRR-1 (65 mg, 0,17 mmol) y N,N-dimetilformamida dimetilcetal (0,5 ml) se calentaron a 100 °C durante la noche. La mezcla rxn se concentró, se purificó por cromatografía en columna con EtOAc/heptano al 70 % para dar RRR-270 mg (94 % de rendimiento) como aceite de color amarillo.
LCMS [M+1] 437,20. 1HRMN (400 MHz, CLOROFORMO-d) 5 ppm 1,50 (s, 9 H) 2,77 - 2,92 (m, 2 H) 2,92 - 3,22 (m, 6 H) 3,66 (t, J=5,01 Hz, 2 H) 4,62 (s, 2 H) 5,17 (s. br, 2 H) 5,66 (d, J=12,35 Hz, 1 H) 7,28 (s. br., 1 H) 7,32 (d, J=7,21 Hz, 1 H) 7,38 (t, J=7,27 Hz, 3 H) 7,43 - 7,49 (m, 2 H) 7,80 (d, J=12,35 Hz, 1 H)
Paso 3: Síntesis del 8-(benciloxi)-6-(1H-pirazol-3-il)-3,4-dihidroisoquinolin-2(1H)-carboxilato de tert-butilo (RRR-3)
El RRR-2 (70 mg, 0,16 mmol) y el monohidrato de hidracina (183 mg, 1,28 mmol, 0,178 ml) en 2 ml de EtOH se agitó a rt durante la noche. A la mezcla de reacción se le añadió EtOAcy H2O, se separaron las capas, se extrajo la capa acuosa con EtOAc. La capa orgánica se combinó y se lavó con salmuera, se secó sobre Na2sO 4 y se concentró para dar RRR-358,8 mg (90 % de rendimiento) como sólido.
LCMS [M+1-tBu] 350,10. 1HRMN (400 MHz, CLOROFORMO-d) 5 ppm 1,51 (s, 9 H) 2,76-2,93 (m, 2 H) 3,67 (t, J=5,50 Hz, 2 H) 4,62 (s, 2 H) 5,16 (s. br, 2 H) 6,59 (d, J=2,32 Hz, 1 H) 7,15 (s, 1 H) 7,23 (s, 1 H) 7,30 - 7,36 (m, 1 H) 7,39 (t, J=7,27 Hz, 2 H) 7,44 - 7,49 (m, 2 H) 7,62 (d, J=2,20 Hz, 1 H)
Paso 4: Síntesis del 8-hidroxi-6-(1H-pirazol-3-yi)-3,4-dihidroisoquinolin-2(1H)-carboxilato de tert-butilo (TP-30) El compuesto TP-30 se preparó a partir de RRR-3 con un procedimiento similar al del paso 9 del Esquema GG (32 mg, 70 %).
LCMS [M+1-Boc] 216,10. 1HRMN (400 MHz, CLOROFORMO-d) 5 ppm 1,51 (s, 9 H) 2,77 (t, J=5,26 Hz, 2 H) 3,62 (t, J=5,50 Hz, 2 H) 4,58 (s. br., 2 H) 6,46 (s. br., 1 H) 6,97 (s, 1 H) 7,12 (s. br., 1 H) 7,50 - 7,63 (m, 1 H)
Los Ejemplos 163-171 se hicieron de forma similar al Ejemplo 78 del Esquema CC utilizando la tetrahidroisoquinolina protegida con NBoc apropiada en el paso 1.
Figure imgf000141_0001
(continuación)
Figure imgf000142_0001
(continuación)
Figure imgf000143_0001
Ejemplo 172 (Esquema SSS) - Síntesis de (1S,2S,3S,5R)-3-(isoqumolm-8-Noxi)-5-(4-metil-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)ciclopentano-1,2-diol (SSS-6 ) (referencia)
Figure imgf000144_0001
Paso 1: Síntesis de carbonato de tert-butilo ((1S,2S,3S,4R)-2,3-dihidroxi-4-(4-metN-7H-pirrol[2,3-d]pirimidin-7-il)cidopentilo) (SSS-1)
El compuesto SSS-1 se preparó a partir de BB-2 con un procedimiento similar al del paso 2 del Esquema CC para dar 274 mg (82 % de rendimiento) como un aceite incoloro.
LCMS [M+1] 350,10. 1HRMN (400 MHz, CLOROFORMO-d) 8 ppm 1,51 (s, 9 H) 2,18 (ddd, J=14,21, 9,14, 5,26 Hz, 1 H) 2,71 (s, 3 H) 3,02 (dt, J=14,18, 8,07 Hz, 1 H) 3,95 - 4,02 (m, 1 H) 4,30 (dd, J=5,38, 2,08 Hz, 1 H) 4,51 (dd, J=7,82, 5,50 Hz, 1 H) 4,96 - 5,08 (m, 2 H) 6,61 (d, J=3,67 Hz, 1 H) 7,29 (d, J=3,67 Hz, 1 H) 8 , 6 6 (s, 1 H)
Paso 2: Síntesis de carbonato de tert-butilo ((3aR,4S,6R,6aS)-2,2-dimetN-6-(4-metN-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)tetrahidro-4H-ciclopenta[d][1,3]dioxol-4-il) (SSS-2)
El compuesto SSS-2 se preparó a partir de SSS-1 con un procedimiento similar al del paso 3 del Esquema P para dar 181 mg (59 % de rendimiento) como un aceite incoloro.
LCMS [M+1] 390,15. 1HRMN (400 MHz, CLOROFORMO-d) 8 ppm 1,32 (s, 3 H) 1,50 (s, 9 H) 1,58 (s, 3 H) 2,38-2,48 (m, 1 H) 2,73 (s, 3 H) 2,84-2,95 (m, 1 H) 4,82 (d, J=6 ,11 Hz, 1 H) 4,99 (dd, J=6,54, 3,12 Hz, 1 H) 5,06-5,13 (m, 1 H) 5,21 - 5,29 (m, 1 H) 6,57 (d, J=3,67 Hz, 1 H) 7,31 (d, J=3,67 Hz, 1 H) 8,78 (s, 1 H)
Paso 3: Síntesis de (3aR,4S,6R,6aS)-2,2-dimetil-6-(4-metil-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)tetrahidro-4H-ciclopenta[d][1,3]dioxol-4-ol (SSS-3)
El compuesto SSS-3 se preparó a partir de SSS-2 con un procedimiento similar al del paso 1 del Esquema FFF para dar 127 mg (94 % de rendimiento) como sólido blanco.
LCMS [M+1] 290,15. 1HRMN (400 MHz, CLOROFORMO-d) 8 ppm 1,33 (s, 3 H) 1,55 (s, 3 H) 2,20 (dd, J=15,65, 1,34 Hz, 1 H) 2,75 (s, 3 H) 2,95 - 3,08 (m, 1 H) 4,44 - 4,50 (m, 1 H) 4,80 (d, J=5,38 Hz, 1 H) 4,84 (dt, J=10,58, 2,48 Hz, 1 H) 4,98 (d, J=5,01 Hz, 1 H) 6,15 (d, J=9,41 Hz, 1 H) 6,55 (d, J=3,67 Hz, 1 H) 8,73 (s, 1 H)
Paso 4: Síntesis del 8-((3aR,4S,6R,6aS)-2,2-dimetil-6-(4-metil-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)tetrahidro-4H-ciclopenta[d][1,3]dioxol-4-il)oxi)-3,4-dihidro-2,7-naftiridina-2(1H)-carboxilato (SSS-4) y 1-(((3aR,4S,6R,6aS)-2,2-dimetil-6-(4-metil-7H-pirimidin-7-il)tetrahidro-4H-ciclopenta[d][1,3]dioxol-4-il)oxi)-2,7-naftiridina (SSS-5) A una solución de SSS-3 (80,7 mg, 0,279 mmol) en DMF (5,58 ml, c=0,05 M) se añadió NaH (16,7 mg, 0,419 mmol, 60 %). Tras agitar durante 10 minutos, se añadió GGG-2 (75,0 mg, 0,279 mmol). La mezcla de reacción resultante se calentó a 100 °C durante 1,5 h. La reacción se inactivó con NaHCO3 diluido y luego se sometió a partición entre acetato de etilo (20 ml) y agua (20 ml). La fase orgánica se separó, se lavó con salmuera, se secó sobre sulfato sódico, se concentró y se purificó con cromatografía en columna con EtOAc/heptano al 60 % para dar SSS-4 (15 mg, 10 %) LCMS [M+1] 522,20. 1HRMN (400 MHz, CLOROFORMO-d) 8 ppm 1,34 (s, 3 H) 1,50 (s, 9 H) 1,60 (s, 3 H) 2,45 (d, J=14,18 Hz, 1 H) 2,72 (s, 3 H) 2,76 (t, J=5,38 Hz, 2 H) 3,05 (dt, J=14,61, 7,12 Hz, 1 H) 3,60 (s. br, 1 H) 3,65 (s. br., 1 H) 4,39 (s. br, 2 H) 4,94 (d, J=6,24 Hz, 1 H) 5,05 (dd, J=6,17, 1,90 Hz, 1 H) 5,34 (ddd, J=7,70, 4,95, 2,38 Hz, 1 H) 5,60 (s. br., 1 H) 6,61 (s. br., 1 H) 6,69 (d, J=5,14 Hz, 1 H) 7,38 (d, J=3,67 Hz, 1 H) 7,95 (d, J=5,14 Hz, 1 H) 8,79 (m, 1 H) y se eluyó con MeOH/EtOAc al 5 % para dar SSS-5 (35 mg, 30 %) LCMS [M+1] 418,15. 1HRMN (400 MHz, CLOROFORMO-d) 5 ppm 1,38 (s, 3 H) 1,63 (s, 3 H) 2,56 (dt, J=14,98, 3,82 Hz, 1 H) 2,72 (s, 3 H) 3,04 - 3,19 (m, 1 H) 5,11 (d, J=6,11 Hz, 1 H) 5,21 (d, J=6,11 Hz, 1 H) 5,35 - 5,46 (m, 1 H) 5,83 (dt, J=3,97, 2,05 Hz, 1 H) 6,61 (d, J=3,67 Hz, 1 H) 7,20 (d, J=5,87 Hz, 1 H) 7,39 (d, J=3,67 Hz, 1 H) 7,55 (d, J=5,62 Hz, 1 H) 8,22 (d, J=5,87 Hz, 1 H) 8,70 (s. br, 1 H) 8,77 (s, 1 H) 9,38 (s. br., 1 H)
Paso 5: Síntesis de (1S,2S,3S,5R)-3-(isoquinoMn-8-Moxi)-5-(4-metM-7H-pirrol[2,3-d]pirimidin-7-M)ciclopentano-1,2-diol (SSS-6)
El compuesto SSS-6 se preparó a partir de SSS-5 con un procedimiento similar al del paso 10 del Esquema A para dar 11,6 mg (36 % de rendimiento) como un sólido blanco.
LCMS [M+1] 378,10. 1HRMN (700 MHz, DMSO-d6) 5 ppm 2,05 - 2,15 (m, 1 H) 2,64 - 2,72 (m, 3 H) 2,98 (ddd, J=14,75, 9,24, 7,48 Hz, 1 H) 4,25 (d, J=3,08 Hz, 1 H) 4,72 (dd, J=8,69, 4,73 Hz, 1 H) 5,21 (q, J=8 , 8 8 Hz, 1 H) 5,48 (dd, J=5,94, 3,30 Hz, 1 H) 6,80 (d, J=3,52 Hz, 1 H) 7,43 (d, J=5,94 Hz, 1 H) 7,78 - 7,89 (m, 2 H) 8,24 (d, J=5,72 Hz, 1 H) 8,64 (s, 1 H) 8,80 (s. br, 1 H) 9,72 (s. br., 1 H)
El Ejemplo 173 se realizó de forma similar al CC-3 (Ejemplo 78) utilizando la pirrolopirimidina adecuada en el paso 1 del Esquema BB y la tetrahidroisoquinolina protegida con N-Boc adecuada en el paso 1 del Esquema CC.
Figure imgf000145_0001
El Ejemplo 174 se hizo de forma similar al NN-5 (Ejemplo 99) utilizando la pirrolopirimidina apropiada en el paso 1 del Esquema BB y la tetrahidroisoquinolina protegida con N-Boc apropiada en el paso 1 del Esquema NN.
Figure imgf000145_0002
Los Ejemplos 175 -179 se hicieron de forma similar al SS-5 (Ejemplo 121) utilizando la tetrahidroisoquinolina protegida por N-Boc apropiada en el paso 1 y la pirrolopirimidina apropiada en el paso 2 del Esquema SS. El paso 4 del Esquema SS no fue necesario para estos Ejemplos.
Figure imgf000146_0001
(continuación)
Figure imgf000147_0002
Ejemplo 180 (Esquema TTT) - (1S,2S,3R,5S)-3-(4-amino-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)-5-((5-fluoro-1,2,3,4-tetrahidroisoquinolin-8-il)oxi)ciclopentano-1,2-diol (TTT-5)
Esquema TTT
Figure imgf000147_0001
Paso 1: Síntesis del 8-((3aR,4S,6R,6aS)-6-(5-bromo-4-cloro-7H-pirrolo[2,3-d]pmmidm-7-N)-2,2-dimetiltetrahidro-4H-ciclopenta[d][1,3]dioxol-4-il)oxi)-5-fluoro-3,4-dihidroisoquinolin-2(1H)-carboxilato de tert-but//o(TTT-2)
El intermedio TTT-1 se preparó siguiendo los procedimientos generales de los pasos 1-3 del Esquema SS , empleando TP-2 y 5-bromo-4-doro-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidina como materiales de partida adecuados.
A un vial de centelleo, equipado con una barra de agitación magnética y que contenía TTT-2 intermedio (281 mg, 0,470 mmol), se añadió Dc M (5,0 ml), 2,2-dimetoxipropano (0,58 ml, 4,70 mmol) y PPTS (11,8 mg, 0,047 mmol). La reacción se agitó a rt durante 23 horas. La solución se transfirió a un embudo separador con DCM y se lavó con 2 porciones de salmuera medio saturada. La fase orgánica se secó (MgSO4), se filtró y se concentró al vacío para obtener el compuesto del título TTT-2 (266 mg, 89 %) como un sólido blanco. LCMS [M+H] = 637 observado. 1h Rm N (400MHz, CLOROFORMO-d) 8 ppm 8 , 6 8 (s, 1H), 7,49 (s. br., 1H), 6,97 - 6 , 8 6 (m, 1H), 6,84 - 6,71 (m, 1H), 5,35 (s. br., 1H), 4,95 (dd, J=2,1, 6,1 Hz, 1H), 4,81 (d, J=6,1 Hz, 2H), 4,48 (s. br, 2H), 3,65 (s. br., 2H), 3,07 - 2,89 (m, 1H), 2,80 (s. br., 2H), 2,50 (d, J=15,3 Hz, 1H), 1,60 (s, 3H), 1,47 (s. br., 9H), 1,34 (s, 3H).
Paso 2: Síntesis del 8-((3aR,4S,6R,6aS)-6-(4-ammo-5-bromo-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidm-7-M)-2,2-dimetMtetrahidro-4H-ddopenta[d][1,3]dioxol-4-M)oxi)-5-fluoro-3,4-dihidroisoqumolm-2(1H)-carboxMato de tertbutilo(TTT-3)
A un vial de microondas, equipado con una barra de agitación magnética, se añadió TTT-2 (152 mg, 0,238 mmol) como solución en dioxano (0,60 ml). A la solución se añadió hidróxido de amonio (0,6 ml, 5,00 mmol) y el vial se cerró con un tapón de teflón. El vial se colocó en un reactor de microondas y se calentó a 120C durante 6 horas, luego se dejó enfriar a rt durante la noche. La solución se transfirió a un embudo separador con DCM y se diluyó con agua. Las fases se separaron y la fase acuosa se extrajo con 3 porciones de DCM. Los extractos orgánicos combinados se secaron (MgSO4), se filtraron y se concentraron al vacío. El residuo crudo se purificó mediante cromatografía en columna instantánea (12 g de SiO2, Isco, 100 % de Hept. a 100 % de EtOAc, 9 ml de fracciones) para obtener el compuesto del título Tt T-3 (81 mg, 55 %) como sólido blanco. LCMS [M+H] = 618 observado. 1Hr MN (400MHz, CLOROFORMO-d) 8 ppm 8,31 (s, 1H), 7,16 (s, 1H), 6,98 - 6,85 (m, 1H), 6,84 - 6,73 (m, 1H), 5,61 (s. br, 2H), 5,36 -5,18 (m, 1H), 4,94 (dd, J=2,5, 6,1 Hz, 1H), 4,82-4,73 (m, 2H), 4 ,56-4,45 (m, 2H), 3,90-3,42 (m, 2H), 3,02-2,87 (m, 1H), 2,80 (t, J=4,9 Hz, 2H), 2,46 (td, J=4,4, 14,8 Hz, 1H), 1,59 (s, 3H), 1,53- 1,42 (m, 9H), 1,33 (s, 3H).
Paso 3: Síntesis del 8-((3aR,4S,6R,6aS)-6-(4-amino-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)-2,2-dimetiltetrahidro-4H-ddopenta[d][1,3]dioxol-4-M)oxi)-5-fluoro-3,4-dihidroisoqumolm-2(1H)-carboxMato de tert-butilo(TTT-4)
En un vial de reacción, equipado con una barra magnética, se añadió TTT-3 (81,0 mg, 0,131 mmol), carbonato de potasio (54,3 mg, 0,393 mmol) y Pd(PPh3)4 (15,1 mg, 0,013 mmol). El vial se cerró con un tapón de teflón y se purgó con argón bajo vacío dinámico. Al vial se le añadió dioxano (0,58 ml) y agua (0,07 ml). El vial se transfirió a un bloque de calentamiento y se calentó a 100 °C durante 3,5 días. El vial se retiró del bloque de calentamiento y se dejó enfriar a temperatura ambiente. La reacción se diluyó con agua y se transfirió a un embudo de separación con DCM. Las fases se separaron y la fase acuosa se extrajo con 3 porciones de DCM. Los extractos orgánicos combinados se secaron (MgSO4), se filtraron y se concentraron al vacío. El residuo crudo se purificó mediante cromatografía líquida preparativa de alta resolución (columna Lux 5u Cellulose-2 30x250mm, 33 % MeOH con 0,05 % DEA enoO2 , 100 bar, 80 ml/min) para obtener el compuesto del título TTT-4 (17,1 mg, 24 %) como un sólido blanco. LCMS [M+H] = 540 observado. [a]D22 = 2,2° (C=0,1, MeOH). 1HRMN (400MHz, CLOROFORMO-d) 8 ppm 8,35 (s, 1H), 7,19 (d, J=3,7 Hz, 1H), 6,94-6,85 (m, 1H), 6,84-6,75 (m, 1H), 6,44 (s. br., 1H), 5,34-5,26 (m, 1H), 5,19 (s. br, 2H), 5,01 (dd, J=2,6, 6,2 Hz, 1H), 4,79 (d, J=6,4 Hz, 1H), 4,75 (t, J=5,3 Hz, 1H), 4,44 (s. br., 2H), 3,65 (s. br, 2H), 3,07 - 2,86 (m, 1H), 2,78 (t, J=5,1 Hz, 2H), 2 ,59-2,42 (m, 1H), 1,60 (s, 3H), 1,49 (s. br., 9H), 1,33 (s, 3H).
Paso 4: Síntesis de (1S,2S,3R,5S)-3-(4-ammo-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidm-7-M)-5-((5-fluoro-1,2,3,4-tetrahidroisoquinolin-8-il)oxi)ciclopentano-1,2-diol (TTT-5)
A un vial de centelleo, equipado con una barra de agitación magnética y que contenía TTT-4 (17,1 mg, 0,032 mmol), se añadió agua (0,08 ml). A la solución se añadió ácido clorhídrico (0,4 ml, 4,0 M en dioxano, 2 mmol) y la reacción se agitó a rt durante 15 horas. La solución se transfirió a un embudo separador con DCM, se diluyó con agua y se neutralizó con NaHCO3 sat. Las fases se separaron y la fase acuosa se extrajo con 3 porciones de una mezcla 3:1 de DCM:IPA. Los extractos orgánicos combinados se secaron (MgSO4), se filtraron y se concentraron al vacío. El material así obtenido se liofilizó para obtener el compuesto del título TTT-5 (12,5 mg, >95 %) como un sólido blanco. LCMS [M+H] = 400 observado. 1HRMN (400MHz, METANOL-d4) 8 ppm 8,08 (s, 1H), 7,22 (d, J=3,7 Hz, 1H), 6,95 - 6,79 (m, 2H), 6,63 (d, J=3,7 Hz, 1H), 5,12 (q, J=8 , 6 Hz, 1H), 4,69 - 4,61 (m, 1H), 4,57 (dd, J=4,8, 8,4 Hz, 1H), 4,16 (d, J=4,3 Hz, 1H), 3,96 (s. br, 2H), 3,08 (t, J=5,1 Hz, 2H), 2,97 (ddd, J=7,3, 9,3, 14,6 Hz, 1H), 2,76 (t, J=5,9 Hz, 2H), 2,04 (ddd, J=3,9, 8,4, 14,1 Hz, 1H).
Example 181 - (1S,2S,3S,5R)-3-((3-metil-5,6,7,8-tetrahidro-2,7-naphthyridin-1-il)oxi)-5-(4-metil-7H-pirrolo[2,3-d]pirim idin-7-il)ciclopentano-1,2-diol
Figure imgf000149_0001
Paso 1 - Síntesis del bromuro de 2-bencil-6-metil-8-oxo-7,8-dihidro-2,7-naftiridina-2-io (UUU-2)
A una mezcla de 3-metil-2,7-naftiridina-1(2H)-ona UUU-1 (preparada por un procedimiento similar en la patente WO2002068393) (3,9 g, 21,85 mmol) en CH3CN (50 ml) se añadió BnBr (6,25 g, 36,5 mmol) a rt (25 °C). A continuación, la mezcla se calentó a reflujo (85 °C) durante 16 horas. El precipitado se recogió por filtración, se lavó con etanol (30 ml) y se secó al vacío para obtener UUU-2 (4,8 g, 60 %) como un sólido de color amarillo. LCMS [M-Br] 251; 1HRMN (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm = 12,57 (br s, 1H), 9,77 (s, 1H), 8 , 88 (d, J=6 , 8 Hz, 1H), 8,08 (d, J=6 , 8 Hz, 1H), 7,55 (br d, J=6 , 8 Hz, 2H), 7,44 (brd, J=7,3 Hz, 3H), 6,70 (s, 1H), 5,86 (s, 2H), 2,40 (s, 3H)
Paso 2 - Síntesis de 7-bencil-3-metil-5,6,7,8-tetrahidro-2,7-naftiridina-1(2H)-ona (UUU-3)
A una solución del compuesto UUU-2 (4,8 g, 14,49 mmol) en MeOH (50 ml) se añadió NaBH4 (7,68 g, 203 mmol) en porciones durante 10 minutos a 0 °C y luego se agitó a rt (25 °C) durante 4 horas. La mezcla se concentró al vacío para eliminar el disolvente. Se añadió DCM (40 ml) y se filtró. El filtrado se concentró al vacío para obtener el producto crudo, que se purificó mediante cromatografía en gel de sílice (MeOH/OCM=0~10 %) para obtener UUU-3 (2,65 g,72 %) como un sólido de color amarillo. LCMS [M+1] 255; 1HRMN (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm = 11,33 (brs, 1H), 7 ,42­ 7,32 (m, 4H), 7,30 - 7,24 (m, 1H), 5,78 (s, 1H), 3,63 (s, 2H), 3,11 (s, 2H), 2,59 (brd, J=4,5 Hz, 2H), 2,56 (br d, J=3,5 Hz, 2H), 2,10 (s, 3H)
Paso 3 - 2-bencil-8-bromo-6-metil-1,2,3,4-tetrahidro-2,7-naftiridina (UUU-4)
A una solución de UUU-3 (2,15 g, 8,45 mmol) en CH3CN (20 ml) y Ph2O (40ml) a rt (25 °C). A continuación, se añadió POBr3 (12,1 g, 42,3 mmol) en porciones y se calentó a reflujo (85 °C) bajo N2 durante 4 horas en las que se empezó a formar un sólido de color naranja después de 20 min. El precipitado se recogió por filtración, se disolvió en agua (20 ml) y se neutralizó con una solución de NaHCO3 hasta alcanzar un pH de 8. Luego, la mezcla se extrajo con TBME (50ml x 2). La capa orgánica se lavó con salmuera (25 mlx2), se secó sobre Na2SO4 , se filtró y se concentró al vacío para obtener el producto crudo, que se purificó por cromatografía (gel de sílice EtOAc/Eter de petróleo=0~40 %) para obtener UUU-4 (1,55 g, 58 %) como un sólido de color naranja. LCMS [M+1] 317; 1HRMN (400 MHz, CDCh) 8 ppm = 7,40 - 7,32 (m, 4H), 7,32 - 7,28 (m, 1H), 6,87 (s, 1H), 3,75 (s, 2H), 3,59 (s, 2H), 2,84 - 2,78 (m, 2H), 2,69 - 2,64 (m, 2H), 2,47 (s, 3H)
Paso 4 - Síntesis de 8-bromo-6-metil-3,4-dihidro-2,7-naftiridina-2(1H)-carboxilato de tert-butilo (UUU-5) y 8 -cloro-6-metil-3,4-dihidro-2,7-naftiridina-2(1H)-carboxilato de tert-butilo (UUU-6 )
A una solución del compuesto UUU-4 (1,30 g, 4,1 mmol) en DCM (15 ml) se añadió gota a gota cloroformato de 1-cloroetilo (0,62 ml, 5,74 mmol) a rt (0 °C) durante 1 min. A continuación, la mezcla se calentó hasta rt (20 °C) y se agitó durante 10 minutos y se calentó a reflujo (40 °C) durante 2 horas. La mezcla se concentró al vacío para eliminar el disolvente. A continuación, el sólido se disolvió en MeOH (15 ml) y se calentó a reflujo (63 °C) durante 1,5 horas. A continuación se añadió (Boc)2O (1,07 g 4,92 mmol) y Et3N (1,71 ml,12,3 mmol). La mezcla se calentó a (63 °C) durante 16 horas. La mezcla se concentró al vacío para obtener el producto crudo, que se purificó por cromatografía (gel de sílice MeOH/DCM=0~10 % ) para obtener el producto una mezcla del compuesto UUU-5 y UUU-6 en un -proporción 1:1 (872 mg) como un sólido blanco y se utilizó directamente en el siguiente paso. LCMS [M+1] 327 y 283.
Los pasos 5-7 se realizaron de forma similar a los pasos 2-4 del Esquema GGG utilizando FFF-1.
Figure imgf000150_0002
Síntesis de tert-buti7-5-fluoro-8-h/drox/-4-meti7-3,4-dihidroisoqumolm-2(1H)-carboxNato (TP-31)
Figure imgf000150_0001
A un matraz de fondo redondo, equipado con una barra de agitación magnética, se añadió 5-fluoro-2-hidroxibenzoato de metilo VVV-1 (3,68 g, 21,6 mmol), carbonato de potasio (10,5 g, 75,7 mmol) y acetona (108 ml). A la solución se añadió bromuro de bencilo (2,70 ml, 22,7 mmol) y el matraz se equipó con un Findenser™. El matraz se colocó en una manta calefactora y se calentó a 65 °C durante 13 horas. El matraz se retiró del bloque de calentamiento y se dejó enfriar a rt. Los sólidos se filtraron sobre un lecho de Celite y se lavaron con varias porciones de acetona. El filtrado se concentró al vacío y se transfirió a un embudo de separación con EtOAc (-100 ml). La solución se lavó con 2 porciones de salmuera semi-saturada, se secó (MgSO4), se filtró y se concentró al vacío para obtener el compuesto del título VVV-2 (5,64 g, >95 % de rendimiento) como un sólido cristalino blanco. Este material se utilizó en el siguiente paso sin purificación adicional. 1HRMN (400MHz, CLOROFORMO-d) 5 ppm 7,54 (dd, J=3,3, 8,7 Hz, 1H), 7,51 - 7,45 (m, 2H), 7,44-7,36 (m, 2H), 7,36 - 7,29 (m, 1H), 7,14 (ddd, J=3,2, 7,5, 9,1 Hz, 1H), 6,97 (dd, J=4,3, 9,0 Hz, 1H), 5,16 (s, 2H), 3,92 (s, 3H). 19FRMN (376MHz, CLOROFORMO-d) 5 ppm -122,59 (s, 1F).
Paso 2: Síntesis de 2-(benciloxi)-5-fluoro-N-hidroxibenzamida (VVV-3)
A un matraz de fondo redondo, equipado con una barra de agitación magnética y que contenía VVV-2 (5,64 g, 21,7 mmol), se añadió clorhidrato de amina de hidroxilo (4,52 g, 65,0 mmol), hidróxido de potasio (7,29 g, 130 mmol) y metanol (108 ml). El matraz se equipó con un Findenser™ y se colocó en una manta calefactora. La reacción se calentó a 75 °C durante 3,5 horas. La reacción se retiró de la manta calefactora y se dejó enfriar gradualmente hasta rt. La solución se neutralizó con ácido acético y se concentró al vacío. El residuo se transfirió a un embudo separador con EtOAc y se diluyó con agua. Las fases se separaron y la fase acuosa se extrajo con 3 porciones de 100 ml de EtOAc. Los extractos orgánicos se secaron (MgSO4), se filtraron y se concentraron al vacío para obtener el compuesto del título VVV-3 (5,62 g, >95 % de rendimiento) como un sólido blanco. El material se utilizó en el siguiente paso sin purificación adicional. LCMS [M+H] =262 observado. 1HRMN (400MHz, DMSO-d6) 5 ppm 10,71 (s, 1H), 9,18 (d, J=1,5 Hz, 1H), 7,47 (d, J=7,3 Hz, 2H), 7,39 (t, J=7,4 Hz, 2H), 7,35 - 7,27 (m, 2H), 7,25 (dd, J=3,2, 8,3 Hz, 1H), 7,19 - 7,13 (m, 1H), 5,20 (s, 2H). 19FRMN (376MHz, DMSO-d6) 5 ppm -123,18 (s, 1F).
Paso 3: Síntesis de 2-(benzoxi)-5-fluoro-N-(pivoiloxi)benzamida (VVV-4)
A un matraz de fondo redondo, equipado con una barra de agitación magnética y que contenía VVV-3 (3,0 g, 11,5 mmol), se añadió THF (35 ml) y trietil amina (1,60 ml, 11,5 mmol), seguido de la adición gota a gota de cloruro de pivaloilo (1,55 ml, 12,6 mmol). La reacción se agitó a rt durante 30 minutos. La reacción se transfirió a un embudo separador con EtOAc. La solución se lavó con 2 porciones de HCl 1 M acuoso, 1 porción de NaHCO3 medio saturado y 2 porciones de salmuera. La solución orgánica se secó (MgSO4), se filtró y se concentró al vacío. El residuo crudo se purificó mediante cromatografía en columna instantánea (40 g de SiO2 , Isco, 100 % de Hept. a 100 % de EtOAc, 20 ml de fracciones) para obtener el compuesto del título (3,83 g, >95 %) como un aceite incoloro solvatado con EtOAc. El aceite se recogió en DCM y se diluyó con Heptano, tras lo cual se concentró al vacío. El material obtenido se secó a alto vacío durante una noche para obtener el compuesto del título VVV-4 (3,59 g, 90 %) como un sólido blanco. LCMS [M+H] = 346 observado. 1HRMN (400MHz, CLOROFORMO-d) 8 ppm 10,95 (s, 1H), 7,89 (dd, J=3,2, 9,1 Hz, 1H), 7,53 - 7,33 (m, 5H), 7,16 (ddd, J=3,3, 7,2, 9,0 Hz, 1H), 7,00 (dd, J=4,1, 9,1 Hz, 1H), 5,27 (s, 2H), 1,35 (s, 9H).
Paso 4: Síntesis de 8-(benciloxi)-5-fluoro-4-metil-3,4-dihidroisoquinolin-1(2H)-ona (VVV-5)
En un vial de centelleo, equipado con una barra de agitación magnética, se añadió VVV-4 (500 mg, 1,45 mmol), pivalato de cesio (678 mg, 2,90 mmol) y [CptRhCh]2 (25,4 mg, 0,036 mmol). El contenido del vial se transfirió a un reactor de alta presión y se añadió TFE (7,0 ml). El reactor se purgó con nitrógeno 3 veces, seguido de 3 ciclos de purga con gas propileno. La reacción se calentó a 45 °C bajo 4 bares de presión de gas propileno durante 20 horas. La solución se transfirió a un matraz de fondo redondo y se concentró al vacío. El residuo crudo se purificó mediante cromatografía en columna instantánea (24 g de SiO2, Isco, 100 % de Hept. a 100 % de EtOAc, 9 ml de fracciones) para obtener el compuesto del título VVV-5 (270 mg, 65 %, 93:7 r.a.) como un sólido de color rosa claro. Los análisis HSCQC y HOESY son consistentes con el regioisómero asignado. LCMS [M+H] = 286 observado. 1HRMN (400MHz, CLOROFORMO-d) 8 ppm 7,55 (d, J=7,5 Hz, 2H), 7,43 - 7,34 (m, 2H), 7,30 (d, J=7,3 Hz, 1H), 7,10 (t, J=8 , 8 Hz, 1H), 6,87 (dd, J=4,3, 9,0 Hz, 1H), 5,98 (d, J=3,7 Hz, 1H), 5,29 - 5,21 (m, 1H), 5,18 - 5,11 (m, 1H), 3,70 (ddd, J=0,7, 4,0, 12,6 Hz, 1H), 3,38 - 3,28 (m, 1H), 3,23 (ddd, J=1,5, 6,0, 12,6 Hz, 1H), 1,35 (d, J=7,0 Hz, 3H). 19FRMN (376MHz, CLOROFORMO-d) 8 ppm -129,24 (s, 1F).
Paso 5: Síntesis de tert-but/7-8-(benzoxi)-5-fluoro-4-metiM-oxo-3,4-dihidroisoqumoMn-2(1H)-carboxNato (VVV-6 )
A un matraz de fondo redondo, equipado con una barra de agitación magnética, se añadió VVV-5 (100 mg, 0,350 mmol) como solución en DMF (4,0 ml). La solución se enfrió a 10 °C y se añadió (Boc)2O (84,1 mg, 0,386 mmol), DIPEA (92 |jl, 0,526 mmol) y DMAP (2,1 mg, 0,017 mmol). La reacción se dejó agitar a rt durante 16 horas proporcionando una baja conversión al producto deseado. A continuación, la reacción se calentó a 50 °C durante 24 horas y luego se aumentó a 75 °C durante otras 24 horas para lograr el consumo completo del material de partida. La reacción se diluyó con agua y se transfirió a un embudo de separación con EtOAc. Las fases se separaron y la fase orgánica se lavó con 1 porción de salmuera, se secó (Ns2SO4), se filtró y se concentró al vacío. El residuo crudo se purificó mediante cromatografía en columna instantánea (SiO2 , 1 % EtOAc/éter de Pet. a 40 % EtOAc/éter de pet) para obtener el compuesto del título VVV- 6 (100 mg, 74 %) como una goma incolora. LCMS [M+H-Boc] = 286 observado.
Paso 6 : Síntesis del tert-but/7-8-(benzoxi)-5-fluoro-4-metN-3,4-dihidroisoqumoMn-2(1H)-carboxNato (VVV-7)
A un matraz de fondo redondo, equipado con una barra de agitación magnética, se añadió VVV- 6 (100 mg, 0,259 mmol) como solución en THF. La solución se enfrió a 0 °C y a continuación se añadió gota a gota el BH3-THF. Una vez completada la adición, la reacción se retiró del baño de hielo y se calentó a 60 °C bajo nitrógeno durante 6 horas. En esta etapa, la reacción se enfrió a -10 °C y se inactivó mediante la adición cuidadosa, gota a gota, de MeOH. La reacción se dejó agitar a -10 °C durante 16 horas y luego se concentró al vacío. El residuo crudo se purificó mediante cromatografía preparativa en capa fina (SiO2 , 20 % EtOAc/Éter. de pet) para obtener el compuesto del título VVV-7 (35,0 mg, 36 %) como una goma incolora. LCMS [M+H-Isobutileno] = 316 observado.
Paso 7: Síntesis de tert-but/7-5-/7uoro-8-h/drox/-4-met/7-3,4-dihidroisoqumoMn-2(1H)-carboxNato (TP-31)
A un matraz de fondo redondo, equipado con una barra de agitación magnética, se añadió VVV-7 (70 mg, 0,190 mmol) como solución en MeOH (4,5 ml). A la solución se añadió Pd/C (10,0 mg, 0,094 mmol) y se purgó el cabezal del matraz con hidrógeno 5 veces. La reacción se dejó agitar a rt bajo 1 atm de gas hidrógeno durante 2,5 horas. La reacción se filtró y los sólidos se lavaron con DCM. El filtrado se concentró al vacío y el residuo crudo se purificó mediante cromatografía en capa fina preparatoria (SiO2, 20 % EtOAc/Éter de Pet.) para obtener el compuesto del título TP-31 (45 mg, 85 %) como una goma incolora. LCMS [M+H-Isobutileno] = 226 observado. 1HRMN (400MHz, CLOROFORMO-d) 8 ppm 6,76 (brt, J=8 , 8 Hz, 1H), 6,55 (dd, J=4,4, 8,7 Hz, 1H), 5,14 - 4,78 (m, 2H), 4,22 - 3,95 (m, 2H), 3,23 - 2,94 (m, 2H), 1,54 - 1,46 (s, 9H), 1,23 (d, J=7,3 Hz, 3H).
Síntesis del (8-hidroxi-1,2,3,4-tetrahidronaftaleno-1-il)carbamato de tert-butilo (TP-32)
Figure imgf000152_0001
Paso 1 - Síntesis de 8-metoxi-1,2,3,4-tetrahidronaftaleno-1-amina (WWW-2)
A una suspensión amarilla agitada de 8-metoxi-3,4-dihidroftaleno-1(2H)-ona WWW-1 (600 mg, 3,4 mmol) en MeOH (30 ml) se añadió CH3COONH4 (5,25 g, 6 8 mmol) a 15 °C. La mezcla se agitó a 15 °C durante 15 min y después se añadió NaBH3CN (1,5 g, 24 mmol) a 15 °C. La mezcla se irradió en un reactor de microondas a 60 °C durante 45 min. La mezcla se inactivó con NaHCO3 sat. (15 ml) y H2O (15 ml) y se agitó a 15 °C durante 5 min. La mezcla se concentró para eliminar el MeOH. El residuo se extrajo con DCM (20 ml X 2). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera (10 ml), se secaron sobre Na2SO4 , se filtraron y se concentraron para dar el WWW-2 crudo (580 mg, 96 %) como una goma ligeramente rosada y se utilizó tal cual en el siguiente paso.
Paso 2 - Síntesis de 8-amino-5,6,7,8-tetrahidronaphthalen-1-ol (WWW-3)
El compuesto WWW-2 (550 mg, 3,10 mmol) se disolvió en HCl/dioxano (5,00 ml), la solución se agitó a 15 °C durante 10 min. Luego la solución se evaporó para dar un residuo. El residuo se disolvió en DCM y se enfrió a 0 °C en un baño de hielo. A continuación, se añadió BBr3 (7,77 mg, 31,0 mmol) a la solución de reacción gota a gota. La solución de reacción se agitó a 20 °C durante 5 horas. La solución de reacción se inactivó con MeOH (8,00 ml), y a continuación se ajustó el pH de la solución a pH=7 mediante la adición de NaHCO3 acuoso saturado. La solución final de WWW-3 se utilizó para el siguiente paso directamente ( 1 0 0 ml).
Paso 3 - Síntesis del (8-hidroxi-1,2,3,4-tetrahidronaftaleno-1-il)carbamato de tert-butilo (TP-32)
A una solución de (Boc)2O (730 mg, 3,34 mmol) en dioxano (5,00 ml) se añadió la solución del compuesto WWW-3 (solución en NaHCO3 sat. ac., 15 ml -3,3 mmol) a 0 °C en una porción. La solución de reacción se agitó a 20 °C durante 50 horas. La reacción se extrajo con DCM (2x) y las fases orgánicas se combinaron y se lavaron con ácido cítrico sat. (2 x 15 ml), Na2CO3 sat. ac. (2 x 15 ml), y salmuera (2 x 15 ml). Las fases orgánicas se secaron y evaporaron para dar un residuo que se purificó por pre-TLC (Éter de Petróleo/EtOAc=4/1) para dar TP-32 (410 mg, 50 %) como un sólido blanco. LCMS [M-tBu+1] 207; 1HRMN (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 9,20 (s, 1H), 6,96 (t, J=7,8 Hz, 1H), 6,78 (br d, J=7,5 Hz, 1H), 6,57 (d, J=7,7 Hz, 1H), 6,51 (d, J=7,4 Hz, 1H), 4,80 - 4,71 (m, 1H), 2,72 - 2,63 (m, 1H), 2,61 - 2,53 (m, 1H), 1,89 - 1,74 (m, 2H), 1,67 - 1,46 (m, 2H), 1,39 (s, 9H)
Síntesis del (5-hidroxicroman-3-il)carbamato de tert-butilo (TP-33)
Figure imgf000152_0002
Paso 1 - Síntesis de la 5-(benciloxi)croman-3-amina (XXX-2)
El compuesto XXX-1 (700 mg, 2,73 mmol, preparado siguiendo los procedimientos exactos de la literatura J. Org. Chem, 2013, 78, 7859-7884) se introdujo en procedimientos similares de Mitsunobu y Staudinger en la misma referencia para dar el producto XXX-2 (520 mg, 75 %) como una goma incolora, utilizada en el siguiente paso directamente. LCMS [M+1] 266; 1HRMN (400 MHz, CDCh) 8 ppm 7,48 - 7,36 (m, 4H), 7,36 - 7,30 (m, 1H), 7,07 (t, J=8,3 Hz, 1H), 6,52 (dd, J=2,5, 8,3 Hz, 2H), 5,07 (s, 2H), 4,18-4,07 (m, 1H), 3,80 (ddd, J=1,0, 7,3, 10,5 Hz, 1H), 3,43 - 3,29 (m, 1H), 3,07 (dd, J=5,0, 16,6 Hz, 1H), 2,50 (dd, J=7,3, 16,8 Hz, 1H)
Paso 2 - Síntesis del (5-(benzoxi)croman-3-il)carbamato de tert-butilo (XXX-3)
A una solución de XXX-2 (520 mg, 2,04 mmol) en MeOH seco (20 ml) se añadió B0 C2O (889 mg, 4,07 mmol) a rt y se agitó durante 30 min (se añadieron 20 ml de EtOAc para la solubilidad). La mezcla se concentró al vacío para obtener el material crudo, que se purificó mediante cromatografía en gel de sílice eluyendo con EtOAc en éter de petróleo de 0 a 50 % y luego EtOAc en DCM de 0 a 50 % para obtener XXX-3 (620 mg, 76 %) como sólido blanco. LCMS [M-tBu+1] 300; 1HRMN (400 MHz, CDCh) 8 ppm 7,45 - 7,36 (m, 4H), 7,34 (br d, J=6 , 8 Hz, 1H), 7,12 - 7,05 (m, 1H), 6,53 (d, J=8,3 Hz, 2H), 5,06 (s, 2H), 4,91 -4,79(m , 1H), 4,26-4,15 (m, 1H), 4,08 (br s, 2H), 3,01 -2,92 (m, 1H), 2,81 -2,69 (m, 1H), 1,44 (s, 9H)
Paso 3 - Síntesis del (5-hidroxicroman-3-il)carbamato de tert-butilo (TP-33)
Una mezcla de XXX-3 (620 mg, 2,43 mmol) y Pd/C (300 mg) en MeOH/EtOAc (10 ml/10 ml) se desgasificó con H2 cuatro veces. La mezcla se agitó a rt bajo un globo de H2 durante 16 h. La mezcla se filtró y se concentró. (El exceso de Boc2O del paso anterior también protegió el fenol con Boc, por lo que se añadió MeOH (20 ml) y K2CO3 (2 g) y se agitó durante 2 h, filtrándose a continuación). La mezcla se filtró y se concentró. El material crudo se diluyó con EtOAc y se lavó con salmuera (15 ml), se secó sobre Na2SO4 y se concentró al vacío, luego se liofilizó para obtener TP-33 (420 mg, 91 %) como un sólido blanco. LCMS [M-tBu+1] 210; 1HRMN (400 MHz, CDCla) 8 ppm 6,99 (t, J=8,2 Hz, 1H), 6,48 (d, J=8,3 Hz, 1H), 6,40 (d, J=8,0 Hz, 1H), 5,19 (br s, 1H), 4 ,96-4,89 (m, 1H), 4,22 (br s, 1H), 4 ,15-4,03 (m, 2H), 2,91 (dd, J=5,5, 16,8 Hz, 1H), 2,71 (brd, J=17,3 Hz, 1H), 1,45 (s, 9H)
Ejemplo 182 y Ejemplo 183 (Esquema YYY) - Clorhidrato de (1S,2S,3S,5R)-3-((-5-fluoro-4-metil-1,2,3,4-tetrahidroisoqumolm-8-M)oxi)-5-(4-metM-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidm-7-M)cidopentano-1,2-diol (YYY-3-isómero 1 y YYY-3-isómero 2)
EsquemaYYY
Figure imgf000153_0001
Paso 1: Síntesis de tert-but/7-5-fluoro-4-met/7-8-((1S,4R)-4-(4-metN-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidm-7-N)ddopent-2-en-1-il)oxi)-3,4-dihidroisoquinolin-2(1H)-carboxilato (YYY-1)
En un vial de microondas, equipado con una barra de agitación magnética, se añadió TP-31 (45 mg, 0,160 mmol), BB-2 (50,4 mg, 0,160 mmol), Pd2(dba)3-CHCl3 (4,14 mg, 0,004 mmol), DPPP (3,96 mg, 0,010 mmol) y carbonato de cesio (57,3 mg, 0,176 mmol). El vial se purgó con nitrógeno bajo vacío dinámico y se añadió DCE recién desgasificado (1,0 ml). La solución se agitó a rt bajo nitrógeno durante 1 hora. La solución se concentró al vacío y el residuo crudo se purificó mediante cromatografía en capa fina preparatoria (SiO2, 33 % EtOAc/Éter de Pet-) para obtener el compuesto del título YYY-1 (60 mg, 86 %) como una goma. LCMS [M+H] = 579 observado. 1H RMN (400MHz, CLOROFORMO-d) 8 ppm 8,76 (s, 1H), 7,35 - 7,28 (m, 1H), 6,84 (br t, J=8,7 Hz, 1H), 6,73 - 6,51 (m, 2H), 6,37 (br s, 1H), 6,19 - 5,99 (m, 2H), 5,28 (sónica, 1H), 4,24 - 3,95 (m, 2H), 3,22 - 3,05 (m, 3H), 2,73 (d, J=2,5 Hz, 3H), 1,96 (d, J=14,6 Hz, 1H), 1,69 - 1,63 (m, 1H), 1,50 (s, 9H), 1,23 (t, J=7,0 Hz, 3H)
Paso 2: Síntesis de tert-but/7-8-((1S,2S,3S,4R)-2,3-dihidroxi-4-(4-metil-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)ciclopentil)oxi)-5-fluoro-4-metil-3,4-dihidroisoquinolin-2(1H)-carboxilato (YYY-2)
A un vial de reacción, equipado con una barra de agitación magnética, se añadió YYY-1 (60,0 mg, 0,130 mmol) como solución en DCM (6,0 ml). A la solución se añadió agua (0,2 ml), NMO (44,1 mg, 0,376 mmol) y OsO4 (112 mg, 0,0176 mmol). La reacción se dejó agitar a rt durante 5 horas. La reacción se inactivó con Na2SO3 sat. (5 ml) y se transfiere a un embudo de separación con DCM. Las fases se separaron y la fase acuosa se extrajo con 1 porción de DCM. Los extractos orgánicos combinados se secaron (Na2SO4), se filtraron y se concentraron al vacío. El residuo crudo se purificó mediante cromatografía de capa fina preparativa para obtener el compuesto del título YYY-2 (35 mg, 54 %) como una goma incolora. LCMS [M+H] = 513 observado.
Paso 3: Síntesis de ferí-buf/7-8-((1S,2S,3S,4R)-2,3-dihidroxi-4-(4-metil-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)cidopentil)oxi)-5-fluoro-4-metil-3,4-dihidroisoquinolin-2(1H)-carboxilato (YYY-2-isómero 1 y YYY-2-isómero 2 )
El YYY-2 (30 mg, 0,058 mmol) se purificó aún más mediante cromatografía preparativa de fluidos supercríticos (OD 250mmx30mmx5^m, 0,1 % NH4OH/IPA a 30 % NH4OH/IPA, 60 ml/min) para obtener los diastereómeros separados YYY-2-isómero 1 (15 mg, 50 %) y YYY-2-isómero 2 (15 mg, 50 %) como sólidos blancos. LCMS [M+H] = 513 observado.
Paso 4: empleo del isómero 1 YYY-2: Síntesis del clorhidrato de (1S,2S,3S,5R)-3-((-5-fluoro-4-metil-1,2,3,4-tetrahidroisoquinolin-8-il)-5-(4-metil-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)ciclopentano-1,2-diol (YYY-3-isómero 1)
A un vial de reacción, equipado con una barra de agitación magnética, se añadió el isómero 1 de YYY-2 (15 mg, 0,029 mmol) como solución en EtOAc (1,0 ml). La solución se enfrió a 0 °C y a continuación se añadió HCl (4M EtOAc, 59 ^l). La reacción se sacó del baño de hielo y se agitó a rt durante 16 horas. La solución se concentró al vacío y se secó al aire libre para obtener el compuesto del título YYY-3-isómero 1 (8,26 mg, 63 %) como un sólido blanco. LCMS [M+H] = 413 observado. 1HRMN (400MHz, METANOL-d4) 5 ppm 9,05 (d, J=3,3 Hz, 1H), 8,08 (d, J=2,4 Hz, 1H), 7,24 (d, J=3,7 Hz, 1H), 7,15 - 6,99 (m, 2H), 5,41 (q, J=9,3 Hz, 1H), 4,76 (br d, J=4,8 Hz, 2H), 4,52 - 4,41 (m, 1H), 4,36 - 4,27 (m, 1H), 4,23 (d, J=4,8 Hz, 1H), 3,57- 3,40 (m, 3H), 3 ,12-2 ,99 (m, 4H), 2,27 (dt, J=5,1, 9,5 Hz, 1H), 1,47 (d, J=6,7 Hz, 3H).
Paso 4: empleo del isómero 2 de YYY-2: Síntesis del clorhidrato de (1S,2S,3S,5R)-3-((-5-fluoro-4-metil-1,2,3,4-tetrahidroisoquinolin-8-il)-5-(4-metil-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)ciclopentano-1,2-diol (YYY-3-isómero 2)
A un vial de reacción, equipado con una barra de agitación magnética, se añadió el isómero 2 de YYY-2 (15 mg, 0,029 mmol) como solución en EtOAc (1,0 ml). La solución se enfrió a 0 °C y a continuación se añadió HCl (4M EtOAc, 59 ^l). La reacción se sacó del baño de hielo y se agitó a rt durante 16 horas. La solución se concentró al vacío y se secó al aire libre para obtener el compuesto del título YYY-2-isómero 2 (8,48 mg, 70 %) como un sólido blanco. LCMS [M+H] = 413 observado. 1HRMN (400MHz, METANOL-d4) 5 ppm 9,04 (d, J=3,0 Hz, 1H), 8,06 (d, J=3,2 Hz, 1H), 7,24 (d, J=3,7 Hz, 1H), 7,16 - 7,01 (m, 2H), 5,42 (q, J=9,4 Hz, 1H), 4,77 - 4,70 (m, 2H), 4,48 - 4,39 (m, 1H), 4,36 - 4,27 (m, 1H), 4,21 (d, J=4,7 Hz, 1H), 3,55 - 3,40 (m, 3H), 3,17 - 2,96 (m, 4H), 2,33 - 2,18 (m, 1H), 1,46 (d, J=6,7 Hz, 3H).
Los Ejemplos 184 -189 se hicieron de forma similar a los Ejemplos 182 y 183 (Esquema YYY) empezando con la tetrahidroisoquinolina racémica apropiada en el paso 1 y separando los diastereómeros antes de la desprotección final.
Figure imgf000154_0001
(continuación)
Figure imgf000155_0001
Ejemplo 190 (Esquema ZZZ) -(1S,2S,3S,5R)-3-((6-(difluorometil)-5-fluoro-1,2,3,4-tetrahidroisoquinolin-8-il)oxi)-5-(4-metil-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidm-7-il)cidopentano-1,2-diol (ZzZ-16)
EsquemaZZZ
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Paso 1 - Síntesis del 4-bromo-5-fluoro-2-metoxibenzoato de metilo (ZZZ-2)
Una solución de ácido 4-bromo-2,5-difluorobenzoico ZZZ-1 (95 g, 400,85 mmol) en HCl/MeOH 4M (1500 ml) se calentó a 65 °C durante 3 horas. La mezcla se concentró al vacío para obtener ZZZ-2 (100 g, >99 %) como un sólido de color amarillo claro. 1HRMN (400 MHz, DMSO-da) 8 ppm 7,93 (dd, J=5,5, 9,8 Hz, 1H), 7,81 (dd, J=6,0, 8,5 Hz, 1H), 3,92 -3,85 (m, 3H)
Paso 2 - Síntesis del ácido 4-bromo-5-fluoro-2-metoxibenzoico (ZZZ-3)
A una solución de ZZZ-2 (80 g, 7,97 mmol) en DMF seca (1200 ml) se añadió una solución de MeONa (-17,2 g, 319 mmol, 8 g de Na disuelto en 80 ml de MeOH obtenido) a 0 °C. La mezcla se agitó a 0 °C durante 10 minutos, luego se calentó hasta rt (25 °C) y se agitó durante 1h. A la mezcla se le añadió TBME (1 L) y luego se vertió en agua helada (800 ml). La mezcla se extrajo con TBME (500 ml x 4). La capa orgánica se lavó con salmuera (300 ml x 2), se secó sobre Na2SO4 , se filtró y se concentró para obtener el producto éter metílico, éster metílico (12 , 1 g) como goma de color amarillo clara. La capa acuosa contenía el ácido carboxílico y se neutralizó con HCl (1M) a pH=5 y luego se extrajo con EtOAc (800 ml x 3). La capa orgánica se lavó con salmuera (400ml x 2), se secó sobre Na2SO4, se filtró y se concentró para obtener ZZZ-3 (100g, >99 % crudo) como un aceite de color amarillo y se utilizó directamente en el siguiente paso. RMN con DMF. 1HRMN (400 MHz, DMSO-da) 8 ppm 7,59 (d, J=8 , 8 Hz, 1H), 7,46 (d, J=5,8 Hz, 1H), 3,83 (s, 3H)
Paso 3 - Síntesis del ácido 4-bromo-5-fluoro-2-hidroxibenzoico (ZZZ-4)
A una solución de ZZZ-3 (~60g de crudo, 240,93 mmol) en DCM seco (600 ml) se añadió BBr3 (68,3 ml disueltos en DCM 600 ml, 723 mmol) a rt (20 °C). La mezcla se agitó a rt (20 °C) durante 2 h. Se vertió agua (500 ml) y se extrajo con DCM (800 ml x 3). La capa orgánica se lavó con salmuera (300 ml x 2) se secó sobre Na2SO4 se filtró y se concentró para obtener ZZZ-4 (35 g, 62 %) como una goma de color amarillo. 1HRMN (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 7,62 (d, J=9,0 Hz, 1H), 7,33 (d, J=5,8 Hz, 1H)
Paso 4 - Síntesis del 2-(benciloxi)-4-bromo-5-fluorobenzoato de bencilo (ZZZ-5)
A una solución de ZZZ-4 (35 g, 148,93 mmol) en DMF seca (300 ml) se añadió K2CO3 (41,2 g, 298 mmol) y BnBr (38,2 g, 223 mmol). La mezcla se agitó a 25 °C durante 16 horas. La mezcla se diluyó con agua (200 ml) y se extrajo con EtOAc (300 ml x 3). Las capas orgánicas se recogieron, se secaron y se concentraron para dar un aceite de color amarillo claro crudo que se purificó mediante combi-flash (gel de sílice EtOAc/éter de petróleo = 0-8 %) para obtener ZZZ-5 (22 g, 36 %) como un sólido de color amarillo claro. 1HRMN (400 MHz, CDCI3) 5 ppm 7,67 (d, J=8 , 6 Hz, 1H), 7,48 - 7,32 (m, 10H), 7,25 (d, J=5,5 Hz, 1H), 5,36 (s, 2H), 5,14 (s, 2H)
Paso 5 - Síntesis del ácido 2-(benzoxi)-4-bromo-5-fluorobenzoico (ZZZ-6 )
A una solución de ZZZ-5 (22 g, 52,98 mmol) en MeOH (200 ml) se añadió una solución de LÍOH.H2O (6,67 g, 159 mmol) en H2O (200 ml). La mezcla de reacción se extrajo con EtOAc (150 ml x 2). La capa acuosa se neutralizó con HCL ac. 1 M a 0 °C hasta alcanzar un pH de 4-5, luego se extrajo con EtOAc (200 ml x 2). La capa orgánica se lavó con salmuera (50ml x 2), se secó sobre Na2SO4, se filtró y se concentró para obtener ZZZ-6 (12,5 g, 73 %) como un sólido blanco. LCMS [M+1] 324,96; 1HRMN (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm 13,16 (br s, 1H), 7,66 - 7,56 (m, 2H), 7,53 -7,46 (m, 2H), 7,45 - 7,37 (m, 1H), 7,45 - 7,37 (m, 1H), 7,37 - 7,30 (m, 1H), 5,22 (s, 2H)
Paso 6 - Síntesis de 2-(benzoxi)-4-bromo-5-fluoro-N-(pivoiloxi)benzamida (ZZZ-7)
A una solución de ZZZ-6 (23 g, 70,74 mmol) en THF (300 ml) se añadió O-pivaloIlhidroxilamina (35,4 g, 141 mmol), DIPEA (54,9 g, 424 mmol) a rt (25 °C). A continuación se añadió T3P (113 g, 177mmol) a 0 °C. Tras la adición, la mezcla se agitó a 0 °C durante 10 minutos y, a continuación, se calentó hasta rt (20 °C) y se agitó durante 16 horas. La mezcla se concentró para eliminar la mayor parte del disolvente. La mezcla restante se diluyó con EtOAc (80 ml), se lavó con NaHCO3 sat. ac.. (50 ml) y se extrajo con EtOAc (100 ml x 2). La capa orgánica se lavó con salmuera (50 ml x 2), se secó sobre Na2SO4, se filtró y se concentró para dar el producto crudo (42 g) como una goma de color amarillo que se purificó por cromatografía (gel de sílice, EtOAc/Eter de petróleo = 0-25 %) para obtener ZZZ-7 (26 g, 87 %) como un sólido de color amarillo claro. LCMS [M+1] 424; 1HRMN (400 MHz, CDCh) 5 ppm 10,80 (br s, 1H), 7,93 (d, J=8 , 8 Hz, 1H), 7,51 - 7,34 (m, 5H), 7,27 - 7,23 (m, 1H), 5,24 (s, 2H), 1,33 (s, 9H)
Paso 7 - Síntesis de 8-(benciloxi)-6-bromo-5-fluoro-3,4-dihidroisoquinolin-1(2H)-ona (ZZZ-8 )
A una suspensión de ZZZ-7 (26 g, 64 mmol) en MeCN (600 ml) se añadió KOAc (6,91 g, 70,4 mmol) y [Cp*Rh2 Ch]2 (2,37 g, 3,84 mmol) en el recipiente se enfrió a 0 °C en el que se purgó etileno en el recipiente durante 30 minutos y se selló. La reacción se agitó a rt (20 °C) durante 16 horas. La mezcla se concentró para dar el producto crudo (26 g) como un sólido de color amarillo que se purificó por cromatografía (éter de petróleo en gel de sílice: EtOAc = 0-100 %) para obtener ZZZ-8 (12 g, 59 %) como un sólido de color amarillo. LCMS [M+1] 351; 1HRMN (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm 7,92 (br s, 1H), 7,56 (d, J=7,0 Hz, 2H), 7,44-7,35 (m, 3H), 7,34-7,28 (m, 1H), 5,19 (s, 2H), 3,30 (dt, J=3,6, 6,2 Hz, 2H), 2,86 (t, J=6,1 Hz, 2H)
Paso 8 - Síntesis del 8-(benciloxi)-6-bromo-5-fluoro-1-oxo-3,4-dihidroisoquinolin-2(1H)-carboxilato de tertbutilo (ZZZ-9)
A una solución de ZZZ-8 (11 g, 33,113 mmol) en THF (40 ml) y DCM (120ml) se añadió Boc2O (11,6 g, 53 mmol), DIPEA (15 g, 116 mmol) y DMAP (607 mg, 4,97 mmol). Tras la adición, la mezcla se agitó a rt (22 °C) durante 16 horas. La reacción se concentró para obtener el material crudo (17,2 g,) como una goma de color amarillo que se purificó por combi-flash (EtOAc/éter de petróleo = 0-20 %) para obtener ZZZ-9 (14,52 g, 97 %) como un sólido de color amarillo claro. LCMS [M+23] 472; 1HRMN (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm 7,63 - 7,22 (m, 6 H), 5,32 - 5,14 (m, 2H), 3,86 (t, J=6,0 Hz, 2H), 2,97 (t, J=5,9 Hz, 2H), 1,50 (s, 9H)
Paso 9 - Síntesis del 8-(benciloxi)-6-bromo-5-fluoro-3,4-dihidroisoquinolin-2(1H)-carboxilato de tert-butilo (ZZZ-10)
A una solución de ZZZ-9 (14,81 g, 32,9 mmol) en THF (150 ml) se añadió BH3Me2S (19,7 ml, 197 mmol) a rt (25 °C). La mezcla se calentó a 70 °C durante 1 hora. La reacción se inactivó con MeOH (40 ml) lentamente. La mezcla se sometió a reflujo (65 °C) durante 16 horas. La mezcla se concentró para dar el producto crudo (26 g) como una goma de color amarillo en la que se añadió agua (60 ml) el producto se extrajo con EtOAc (100ml x 2) .La capa orgánica se lavó con salmuera (50 ml x 2) se secó sobre Na2SO4 se filtró y se concentró para obtener el material crudo (17 g) que se purificó por cromatografía (gel de sílice, EtOAc/éter de petróleo = 0-25 %) para obtener ZZZ-10 (13,2 g) como una goma de color amarillo clara que se liofilizó para obtener ZZZ-10 (13,06 g, 91 %) se obtuvo como un sólido blanco. LCMS [M-Boc+1] 337; 1HRMN (400 MHz, CDCh) 5 ppm 7,44 - 7,31 (m, 5H), 6,92 (d, J=5,5 Hz, 1H), 5,04 (br s, 2H), 4,51 (s, 2H), 3,63 (br t, J=5,8 Hz, 2H), 2,88 - 2,72(m, 2H), 1,50 (s, 9H)
Paso 10 - Síntesis del 8-(benciloxi)-5-fluoro-6-formil-3,4-dihidroisoquinolin-2(1H)-carboxilato de tert-butilo (ZZZ-11)
En un matraz de fondo redondo secado al horno se añadió ZZZ-10 (285 mg, 0,653 mmol) y THF seco (4,35 ml, 0,15 M). Se añadió una solución de DMF (0,98 ml, 0,98 mmol, 1M en THF) y la mezcla se enfrió a -78 °C con hielo seco/acetona. Se añadió nBuLi (0,92 ml, 1,47 mmol, 1,6M en hexanos) gota a gota y se agitó a -78 °C durante 30 min en los que la reacción pasó de clara a amarilla. La LCMS seguía mostrando -50 % de ZZZ-10 y, por tanto, se añadieron otros 0,5 eq de DMF (0,49 ml, 0,49 mmol, 1M en THF) y nBuLi (0,46 ml, 0,735 mmol, 1M en hexanos) y se agitó durante 25 min. La reacción se inactivó con agua y se extrajo con EtOAc. La capa acuosa se extrajo con EtOAc 3 veces. Las fases orgánicas combinadas se lavaron con agua y se secaron sobre Na2SO4, se filtraron y se concentraron hasta obtener un aceite de color amarillo crudo (404 mg) que se purificó mediante ISCO 25g 0-20 % EtOAc/Heptanos para obtener ZZZ-11 como un aceite claro (215 mg, 60 %). LCMS [M+1]286; 1HRMN (400 MHz, CDCI3) 5 ppm 10,35 (s, 1H), 7,49 - 7,32 (m, 5H), 7,23 (d, J=5,3 Hz, 1H), 5,13 (s. br., 2H), 4,64 (s, 2H), 3,69 (t, J=5,7 Hz, 2H), 2,86 (t, J=5,1 Hz, 2H), 1,52 (s, 9H)
Paso 11 - Síntesis del 8-(benciloxi)-6-(difluorometil)-5-fluoro-3,4-dihidroisoquinolin-2(1H)-carboxilato de tertbutilo (ZZZ-12)
A una solución de ZZZ-11 (418 mg, 1,08 mmol) se añadió DCM (10,8 ml, 0,1M). La solución se enfrió a 0 °C y luego se añadió gota a gota DAST (0,36 ml, 2,71 mmol) y se agitó durante 4 h a r.t. La LCMS muestra -25 % de producto. La reacción se enfrió a 0 °C y se volvió a añadir gota a gota DAST (0,36 ml, 2,71 mmol) y se agitó a r.t. durante 2 horas. La reacción no se completó y se añadieron 2 eq adicionales y se agitó durante 2h. A continuación, la reacción se neutralizó con NaHCO3 sat. ac. Las capas se separaron y la capa acuosa se extrajo con DCM 2x, se secó sobre Na2SO4, se filtró y se concentró, y luego se purificó por ISCO 12g 0-15 % EtOAc/Heptanos para obtener ZZZ-12 como un sólido blanco (322 mg, 73 %). LCMS [M-Boc+1] 308; 1HRMN (400 MHz, CDCh) 5 ppm 7,47 - 7,32 (m, 5H), 7,03 -6,75 (m, 2H), 5,10 (s. br., 2H), 4,59 (s. br., 2H), 3,66 (t, J=5,6 Hz, 2H), 2 ,84-2,75 (m, 2H), 1,50 (s, 9H)
Paso 12 - Síntesis del 6-(difluorometil)-5-fluoro-8-hidroxi-3,4-dihidroisoquinolin-2(1H)-carboxilato de tert-butilo (ZZZ-13)
En un matraz de fondo redondo se añadió ZZZ-12 (322 mg, 0,79 mmol) y MeOH (15,8 ml, 0,05 M). Se añadió un 10 % de Pd/C (30 mg) y se añadió un globo de hidrógeno. La reacción se agitó a r.t. durante la noche. La reacción se filtró con una jeringa y una punta de filtro. El material blanco crudo (252 mg) se disolvió en DCM:MeOH (-2:1) para obtener una solubilidad completa y se añadió a una OICV 12g y se purificó con EtOAc/heptanos al 0-25 % para dar ZZZ-13 como sólido blanco (239 mg, 95 %). LCMS [M-Boc+1] 218; 1HRMN (400 MHz, CDCh) 5 ppm 6,99 - 6,62 (m, 2H), 4,55 (s. br., 2H), 3,66 (t, J=5,9 Hz, 2H), 2,79 (s. br., 2H), 1,52 (s, 9H)
Paso 13 - Síntesis del 6-(difluorometM)-5-fluoro-8-((1S,4R)-4-(4-metN-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidm-7-il)ciclopent-2-en-1-il)oxi)-3,4-dihidroisoquinolin-2(1H)-carboxilato de tert-butilo (ZZZ-14)
A un vial de microondas (que se secó con pistola de calor, y luego se enfrió bajo una corriente de N2) se añadió el compuesto BB-2 (238 mg, 0,753 mmol), ZZZ-13 (239 mg, 0,753 mmol), Cs2CO3 (270 mg, 0,829 mmol), DPPP (18,7 mg, 0,0452 mmol) y Pd2(dba)3-CHCh (19,5 mg, 0,02 mmol), se purgó el vial con N2 durante cinco y se añadió DCE (3 ml, rociado con N2 durante 30 minutos). El vial se purgó con N2 tres veces más. La solución se agitó a 18 °C bajo N2 durante 55 min. La mezcla de reacción se purificó por pre-TLC (EtOAc/éter de petróleo=1,5:1) para dar el producto ZZZ-14 (330 mg, 85 %) como una goma incolora. LCMS [M+1] 515; 1HRMN (400 MHz, CDCh) 5 ppm 8,78 (s, 1H), 7,29 (br d, J=3,4 Hz, 1H), 7,04 - 6,72 (m, 2H), 6,59 (br d, J=3,0 Hz, 1H), 6,39 (br d, J=5,3 Hz, 1H), 6,19 (br d, J=4,6 Hz, 1H), 6,08 (dd br, J=2,2, 4,3 Hz, 1H), 5,40 - 5,32 (m, 1H), 4,50 (s br, 2H), 3,73 - 3,57 (m, 2H), 3,26 - 3,16 (m, 1H), 2,80 (t br, J=5,4 Hz, 2H), 2,74 (s, 3H), 1,52 (s, 9H)
Paso 14 - Síntesis del 6-(difluorometil)-8-((1S,2S,3S,4R)-2,3-dihidroxi-4-(4-metil-7H-pirromidin-7-il)ciclopentil)oxi)-5-fluoro-3,4-dihidroisoquinolin-2(1H)-carboxilato de tert-butilo (ZZZ-15)
A una mezcla de ZZZ-14 (330 mg, 0,641 mmol) en DCM (10 ml)/H2O (0,4 ml) se añadió NMO (225 mg, 1,92 mmol) y OsO4 (4 % en t-BuOH, 285 mg, 0,045 mmol) a 15 °C. La solución negra se agitó a 18 °C durante 3 horas. La mezcla se inactivó con Na2SO3 sat. ac. (5 ml) y se diluyó con DCM (10 ml) y se separó. La capa acuosa se extrajo con DCM (5 ml). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera (10 ml), se secaron sobre Na2SO4, se filtraron y se concentraron para obtener el producto crudo (450 mg) como sólido marrón, que se purificó mediante pre-TLC (primero, EtOAc/MeOH=20:1, segundo, EtOAc) para obtener ZZZ-15 (210 mg, 60 %) como sólido de color amarillo claro. LCMS [M+1] 549; 1HRMN (400 MHz, CDCh) 5 ppm 8,69 (s, 1H), 7,22 (d, J=3,8 Hz, 1H), 7,10 (br d, J=5,3 Hz, 1H), 7,04-6,73 (m, 1H), 6,61 (d, J=3,8 Hz, 1H), 5,03- 4,88 (m, 1H), 4,80 (br s, 1H), 4,60 - 4,39 (m, 3H), 4,36 - 4,24 (m, 1H), 3,65 (br d, J=5,8 Hz, 2H), 3,46 - 3,29 (m, 1H), 3,20 - 3,02 (m, 1H), 2,80 (br t, J=5,4 Hz, 2H), 2,74 (s, 3H), 2,62 (s, 1H), 2,39 (s, 1H), 1,56- 1,34 (m, 9H)
Paso 15 - Síntesis de (1S,2S,3S,5R)-3-((6-(difluorometil)-5-fluoro-1,2,3,4-tetrahidroisoquinolin-8-il)oxi)-5-(4-metil-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)ciclopentano-1,2-diol (ZZZ-16)
A una solución de ZZZ-15 (210 mg, 0,383 mmol) en DCM (2 ml) se añadió HCl (g) /dioxano (4 N, 0,766 ml, 3,06 mmol) a 0 °C. La mezcla se agitó a 23 °C durante 2 horas. El sólido se precipitó. El disolvente se decantó y el sólido se secó y liofilizó para dar ZZZ-16 como sal de 2HCl 2 H2O (165 mg, 83 %) como un sólido de color amarillo claro. LCMS [M+1] 449; 1HRMN (400 MHz, D2O) 5 ppm 8,93 (s, 1H), 7,91 (d, J=3,8 Hz, 1H), 7,24-6,88 (m, 3H), 5,41 (q, J=9,0 Hz, 1H), 4,87 (br dd, J=2,4, 4,4 Hz, 1H), 4,75 (dd, J=5,0, 8 , 8 Hz, 1H), 4,45 (s, 2H), 4,39 (br d, J=5,0 Hz, 1H), 3,58 (t, J=6,3 Hz, 2H), 3,19-3,07 (m, 3H), 2,99 (s, 3H), 2 ,35-2,24 (m, 1H).
Ejemplo 191 (Esquema AAAA) - Síntesis de (1S,2S,3S,5R)-3-((4-fluoro-3-metoxi-5,6,7,8-tetrahidro-2,7-naftiridina-1-il)oxi)-5-(4-metil-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)ciclopentano-1,2-diol (AAAA-6 )
Figure imgf000159_0001
El compuesto AAAA-1 se preparó con un procedimiento similar al del paso 4 del Esquema FF utilizando ácido 2,6-dicloro-5-fluoronicotmico para dar 5,85 g (80 % de rendimiento) como sólido blanco. 1HRMN (400 MHz, CLOROFORMO-d) a ppm 9,91 (s. br., 1 H) 8,02 (d, J=5,14 Hz, 1 H) 1,37 (s, 9 H)
Paso 2: Síntesis de la 6,8-dicloro-5-fluoro-3,4-dihidro-2,7-naftiridina-1(2H)-ona (AAAA-2)
El compuesto AAAA-2 se preparó a partir de AAAA-1 con un procedimiento similar al del paso 4 del Esquema GG utilizando pivalato de cesio para dar 1,47 g (33 % de rendimiento) como sólido de color amarillo. LCMS [M+1-2Cl] 167,0. 1HRMN (400 MHz, CLOROFORMO-d) a ppm 6,13 (s. br., 1 H) 3,59 (td, J=6,45, 3,48 Hz, 2 H) 3,09 (t, J=6,42 Hz, 2 H)
Paso 3: Síntesis de 8-cloro-5-fluoro-6-metoxi-3,4-dihidro-2,7-naftiridina-1(2H)-ona (AAAA-3)
A una solución de AAAA-2 (200 mg, 0,85 mmol) en 20 ml de MeOH se añadió metóxido de sodio (161 mg, 2,98 mmol , 5,96 ml, 0,5 M), la solución se calentó a 60C durante 1 h. La reacción se concentró, se redisolvió en DCM, se lavó con H2O dos veces, se rotavaporizó el DCM, el producto crudo se purificó por cromatografía en columna con EtOAc al 100 % para dar 100 mg de AAAA-3 (51 % de rendimiento) como un sólido blanco. LCMS [M+1] 231,0. 1HRMN (400 MHz, CLOROFORMO-d) a ppm 5,96 (s. br., 1 H) 4,09 (s, 3 H) 3,52 (td, J=6,39, 3,48 Hz, 2 H) 3,03 (t, J=6,24 Hz, 2 H)
Paso 4: Síntesis del 8-cloro-5-fluoro-6-metoxi-3,4-dihidro-2,7-naftiridina-2(1H)-carboxilato de tert-butilo (AAAA-4)
El compuesto AAAA-4 se preparó a partir de AAAA-3 con un procedimiento similar al del paso 5 del Esquema GG para dar 105 mg (76 % de rendimiento) como un aceite incoloro. LCMS [M+1-Boc] 217,0. 1HRMN (400 MHz, CLOROFORMO-d) a ppm 4,48 (s, 2 H) 4,00 (s, 3 H) 3,63 (t, J=5,93 Hz, 2 H) 2,82 (t, J=5,69 Hz, 2 H) 1,50 (s, 9 H)
Paso 5: Síntesis del 8-((3aR,4S,6R,6aS)-2,2-dimetil-6-(4-metil-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)tetrahidro-4H-ciclopenta[d][1,3]dioxol-4-il)oxi)-5-fluoro-6-metoxi-3,4-dihidro-2,7-naftiridina-2(1H)-carboxilato de tert-butilo (AAAA-5)
La mezcla de (3aR,4S,6R,6aS)-2,2-dimetil-6-(4-metil-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)tetrahidro-4H-ciclopenta[d][1,3]dioxol-4-ol (SSS-3) (98,0 mg, 0,34 mmol), AAAA-4 (107 mg, 0,339 mmol), carbonato de cesio (221 mg, 0,677 mmol), tris(dibencilideneacetona)dipaladio (31,0 mg, 0,0339 mmol) y BINAP (42,2 mg, 0,0677 mmol) en tolueno (6,77 ml, c=0,05 M) se desgasificó y se purgó con N2 tres veces. La mezcla de reacción se calentó a 100 °C durante la noche, la LCMS indicó que la reacción no se completó. Se añadió carbonato de cesio (221 mg, 0,677 mmol), tris(dibencilideneacetona)dipaladio (31,0 mg, 0,0339 mmol) y BINAP (42,2 mg, 0,0677 mmol), se desgasificó y se continuó calentando a 100 °C durante 2 días. La mezcla de reacción se enfrió hasta rt, se añadió H2O, se extrajo con EtOAc, el producto crudo se concentró y se purificó por cromatografía en columna con EtOAc/heptano al 85 % para dar 60 mg (31 % de rendimiento) de aceite de color amarillo. LCMS [M+1] 570,1. 1HRMN (400 MHz, CLOROFORMO-d) a ppm 8,79 (s, 1 H) 7,37 (d, J=3,67 Hz, 1 H) 6,61 (s. br., 1 H) 5,47 (s. br, 1 H) 5,35 (ddd, J=7,95, 5,26, 2,69 Hz, 1 H) 4,98 - 5,05 (m, 1 H) 4,89 (d, J=6,24 Hz, 1 H) 4,36 (s. br, 2 H) 3,99 (s, 3 H) 3,56 - 3,64 (m, 2 H) 3,01 (dt, J=14,55, 7,27 Hz, 1 H) 2,78 (t, J=5,26 Hz, 2 H) 2,73 (s, 3 H) 2,41 - 2,52 (m, 1 H) 1,60 (s, 3 H) 1,50 (s, 9 H) 1,33 (s, 3 H)
Paso 6 : Síntesis de (1S,2S,3S,5R)-3-((4-fluoro-3-metoxi-5,6,7,8-tetrahidro-2,7-naftiridina-1-il)oxi)-5-(4-metil-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)ciclopentano-1,2-diol (AAAA-6 )
El compuesto AAAA-6 se preparó a partir de AAAA-5 con un procedimiento similar al del paso 10 del Esquema A para dar 19,7 mg (33 % de rendimiento). LCMS [M+1] 430,0. 1HRMN (400 MHz, DMSO-d6) a ppm 9,68 (s. br., 1 H) 9,56 (s. br., 1 H) 9,07 (s, 1 H) 7,99 (s. br., 1 H) 7,10 (s. br., 1 H) 5,11 - 5,26 (m, 2 H) 4,64 (dd, J=9,05, 4,65 Hz, 1 H) 4,15 (s. br, 2 H) 4,10 (d, J=4,03 Hz, 1 H) 3,94 (s, 3 H) 3,38 (s. br., 2 H) 2,91 - 3,03 (m, 3 H) 2,87 (s, 3 H) 1,95-2,05 (m, 1 H)
Los Ejemplos192 y 193 se prepararon de manera similar al Ejemplo 191 , excepto que se utilizó etoxido de sodio en etanol en el paso 3 del Esquema AAAA para el Ejemplo 192 y se utilizó isopropóxido de sodio en isopropanol en el paso 3 del Esquema AAAA para el Ejemplo 193.
Figure imgf000160_0002
Esquema BBBB - Síntesis del ácido 2-cloro-6-(difluorometil)nicotínico (BBBB-4)
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Paso 1: Síntesis de (E)-4-butoxi-1,1-difluorobut-3-en-2-ona (BBBB-1)
El compuesto BBBB-1 se preparó según WO20080269059. 1HRMN (400 MHz, CLOROFORMO-d) a ppm 7,86 (d, J=12,47 Hz, 1 H) 5,90 (d, 1 H) 5,77 (t, J=56 Hz, 1 H) 4,01 (t, J=6,48 Hz, 2 H) 1,68 - 1,80 (m, 2 H) 1,41 - 1,48 (m, 2 H) 0,97 (t, J=7,40 Hz, 3 H)
Paso 2: Síntesis del 6-(difluorometil)-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-carboxilato de metilo (BBBB-2)
El compuesto BBBB-2 se preparó según WO20080269059. 1HRMN (400 MHz, DMSO-d6) a ppm 12,18 (s. br., 1 H) 8,20 (d, J=5,87 Hz, 1 H) 7,05 (s. br., 1 H) 6 , 8 6 (t, J = 52 Hz, 1 H) 3,81 (s, 3 H)
Paso 3: Síntesis del 2-cloro-6-(difluorometil)nicotinato de metilo (BBBB-3)
Una mezcla de BBBB-2 (3340 mg, 16,44 mmol) y oxicloruro de fósforo (10 ml) se calentó a 110 °C durante 24 horas, se enfrió a rt, se añadió agua helada y se neutralizó con KOH sólido. La mezcla de reacción se extrajo con EtOActres veces, las capas orgánicas se combinaron y se concentraron, purificándose por cromatografía en columna con EtOAc/heptano al 18 % para dar 3,27 g (90 % de rendimiento) de BBBB-3 como sólido blanco. 1HRMN (400 MHz, CLOROFORMO-d) a ppm 8,31 (d, J=7,83 Hz, 1 H) 7,67 (d, J=7,83 Hz, 1 H) 6,61 (t, J = 56 Hz, 1 H) 4,00 (s, 3 H); 19F RMN (376 MHz, CLOROFORMO-d) a ppm -116,82 (s, 1 F)
Paso 4: Síntesis del ácido 2-cloro-6-(difluorometil)nicotínico (BBBB-4)
A una solución de BBBB-3 (1160 mg, 5,235 mmol) en 20 ml de MeOH se añadió hidróxido de sodio (1050 mg, 26,2 m m ol, 5,23 ml, 5 M), y se calentó a 65 °C durante 4 horas. La mezcla de reacción se neutralizó con HCl 1 N hasta pH 4, se eliminó el disolvente, el sólido se secó al vacío y se utilizó para el siguiente paso.
El Ejemplo 194 se realizó de forma similar al Ejemplo 191 (Esquema A A A A ), excepto que se omite el paso 3
Figure imgf000161_0002
Los Ejemplos195 y 196 se hicieron de manera similar al Ejemplo 99 en el Esquema NN usando la tetrahidroisoquinolina apropiada protegida con NBoc en el paso 2.
Figure imgf000161_0001
Esquema CCCC - Síntesis del 8-hidroxi-6-(isoxazol-4-il)-3,4-dihidroisoquinolin-2(1H)-carboxilato de tert-butilo (TP-34)
Figure imgf000162_0001
Paso 1 - Síntesis del 8-(benciloxi)-6-(isoxazol-4-il)-3,4-dihidroisoquinolin-2(1H)-carboxilato de tert-butilo (CCCC-1)
Una solución de NNN-1 (600 mg, 1,29 mmol), 4-bromoisoxazol (286 mg, 1,93 mmol), K2CO3 (535 mg, 3,87 mmol) y PdCl2(dppf)-DCM (94 mg, 0,129 mmol) en tolueno (2,5 ml) y agua (1,5 ml) se agitó bajo atmósfera de N2 a 75 °C durante 16 h. A continuación, la mezcla de reacción se enfrió a r.t. Se añadió agua y la mezcla se extrajo con EtOAc ( 3 x 5 ml). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera (5 ml), se secaron sobre Na2SO4, se filtraron y se concentraron. El producto crudo se purificó por cromatografía en columna con EtOAc/éter de petróleo al 15-85 % para dar un aceite incoloro CCCC-1 (160 mg, 31 %). LCMS [M-tBu+1] 350,9
Paso 2 - Síntesis de 6-(isoxazol-4-il)-1,2,3,4-tetrahidroisoquinolin-8-ol (CCCC-2)
El compuesto CCCC-1 (140 mg, 0,344 mmol) se disolvió en DCM (10 ml). La solución de la reacción se enfrió a 0 °C en un baño de hielo. Se añadió BBr3 (518 mg, 2,07 mol). La reacción pasó de ser una suspensión a una solución amarilla clara. La mezcla de reacción se agitó a 25 °C durante 16 horas. La reacción se enfrió a 0 °C y se añadió MeOH (2 ml) a la reacción gota a gota seguido de agua (20 ml). La solución de reacción se lavó con DCM (10 ml x 2). La capa acuosa se separó y el pH se ajustó a pH 9, utilizando NaHCO3 sólido. La solución final de CCCC-2 se utilizó para el siguiente paso directamente sin purificación adicional (23 ml, soln ac. crudo, >99 %).
Síntesis del 8-hidroxi-6-(isoxazol-4-il)-3,4-dihidroisoquinolin-2(1H)-carboxilato de tert-butilo (TP-34)
Se añadieron MeOH (5 ml) y dioxano (5 ml) a la solución de CCCC-2 (23 ml ac.), luego se añadió Boc2O (83 mg, 0,38 mmol) a la solución de reacción, la solución se agitó a 25 °C durante 16 horas. El pH de la solución de reacción se ajustó a pH~3 mediante la adición de HCl 1N ac.. La solución se separó y la capa acuosa se extrajo con DCM (10 ml). Las capas orgánicas se combinaron y se lavaron con NaCl saturado (20,0 ml). La capa orgánica se separó, se secó y se evaporó para dar el producto crudo, que se purificó por cromatografía instantánea, eluyendo con éter de petróleo/EtOAc al 0-50 %, para dar el producto deseado como sólido blanco de TP-34 (84 mg, 77 % de rendimiento en 2 pasos). MS [M-Boc+1] 217,1; 1HRMN (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm 9,83 (s, 1H), 9,32 (s, 1H), 9,02 (s, 1H), 6,97 (s, 1H), 6,89 (s, 1H), 4,36 (s, 2H), 3,55 (m, 2H), 2,75 (m, 2H), 1,44 (s, 9H)
El Ejemplo 197 se preparó utilizando la química descrita en el Esquema CC y empleando el compuesto TP-34.
Figure imgf000162_0002
Esquema DDDD - Síntesis del 5-fluoro-8-hidroxi-6-metoxi-3,4-dihidroisoquinolin-2(1H)-carboxilato de tertbutilo (TP-35)
Figure imgf000163_0001
Paso 1 - Síntesis del 8-(benciloxi)-5-fluoro-6-metoxi-3,4-dihidroisoquinolin-2(1H)-carboxilato de tert-butilo (DDDD-1)
El vial A se cargó con t-BuBrettPhos (49 mg, 0,10 mmol), NaOtBu (67,8 mg, 0,706 mmol) y ZZZ-10 (220 mg, 0,504 mmol) en dioxano (3 ml). El vial se desgasificó con N2 tres veces. A continuación, se añadió MeOH (81 mg, 2,52 mmol) al vial A. El vial B se cargó con RockPhosPd3G (85 mg, 0,10 mmol) y se desgasificó con N2 tres veces, seguido de la adición de dioxano (2 ml) y se agitó durante 1 min. El precatalizador del vial B se transfirió al vial A y la solución de reacción se agitó a 25 °C durante 16 horas. Se añadió EtOAc ( 10 ml) para diluir la solución y se lavó con agua (5 ml x 2). Las capas orgánicas se separaron, se secaron y se evaporaron para dar el producto crudo, que se purificó por cromatografía instantánea, eluyendo con EtOAc/éterde petróleo al 0-15 % para dar el producto deseado como aceite incoloro DDDD-1 (110 mg, 56 %). LCMS [M-Boc+1] 287,9; 1HRMN (400 MHz, DMSO-da) 5 ppm 7,54 - 7,27 (m, 5H), 6,83 (d, J=7,5 Hz, 1H), 5,15 (s, 2H), 4,43 - 4,26 (m, 2H), 3,82 (s, 3H), 3,53 (t, J=5,8 Hz, 2H), 2,71 - 2,66 (m, 2H), 1,42 (s, 9H)
Paso 2 - Síntesis del 5-fluoro-8-hidroxi-6-metoxi-3,4-dihidroisoquinolin-2(1H)-carboxilato de tert-butilo (TP-35)
El compuesto DDDD-1 (110 mg, 0,28 mmol) se disolvió en MeOH (3 ml) y EtOAc (1 ml) seguido de la adición de Pd/C (15 mg, 0,142 mmol). La solución se desgasificó con H2 cuatro veces y se agita a 25 °C durante 16 horas bajo un globo de H2. La reacción se diluyó con DCM (5 ml), se filtró y se concentró para dar TP-35 como un sólido blanco (70 mg, 83 %). LCMS [M-tBu+1] 242,1; 1HRMN (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm 9,58 (s, 1H), 6,46 (d, J=7,3 Hz, 1H), 4,28 (s, 2H), 3,74 (s, 3H), 3,55 - 3,50 (m, 2H), 2,65 (m, 2H), 1,43 (s, 9H)
El compuesto TP-36 se preparó utilizando una química sim ilar a la del Esquema DDDD utilizando EtOH en el paso 1
Figure imgf000163_0003
Los Ejemplos 198 y 199 se prepararon utilizando una química similar a la descrita en el Esquema CC y empleando los compuestos TP-35 y TP-36 respectivamente.
Figure imgf000163_0002
(continuación)
Figure imgf000164_0002
Esquema EEEE - Síntesis del 6-(difluorometoxi)-5-fluoro-8-hidroxi-3,4-dihidroisoquinolin-2(1H)-carboxilato de tert-butilo (TP-37)
Figure imgf000164_0001
Paso 1 - Síntesis del 8-(benciloxi)-5-fluoro-6-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-3,4-dihidroisoqumolm-2(1H)-carboxilato de tert-butilo (EEEE-1)
A una solución de ZZZ-10 (500 mg, 1,15 mmol) en dioxano (29 ml) se añadió bis(pinacolato)diboro (1,46 g, 5,73 mmol). La solución se desgasificó con N2 durante 10 minutos y se añadieron cataCXium® A-Pd-G2 (76,6 mg, 0,12 mmol) y KOAc (337 mg, 1,79 mmol) a la solución de reacción bajo atmósfera de N2. La reacción se calentó a 80 °C durante 16 horas. Se añadió agua (10 ml) y la reacción se extrajo con EtOAc (10 ml x 2). Las capas orgánicas se separaron, se secaron y se evaporaron para dar el producto crudo, que se purificó por cromatografía instantánea, eluyendo con éter de petróleo/EtOAc 0-20 % para dar EEEE-1 (78 %, 443 mg) como un sólido gris. LCMS [M-Boc+1] 384,0; 1HRMN (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm 7,52 - 7,32 (m, 5H), 7,05 (d, J=4,3 Hz, 1H), 5,13 (s, 2H), 4,47 (br s, 2H), 3,57 (brt, J=5,8 Hz, 2H), 2,72 - 2,66 (m, 2H), 1,43 (s, 9H), 1,30 (s, 12H)
Paso 2 - Síntesis del 8-(benciloxi)-5-fluoro-6-hidroxi-3,4-dihidroisoquinolin-2(1H)-carboxilato de tert-butilo (EEEE-2)
A una solución de EEEE-1 (430 mg, 0,89 mmol) en THF (4 ml) y agua (4 ml) se añadió perborato de sodio (306 mg, 3,74 mmol) en una porción a RT bajo N2. La solución de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 8 horas. La mezcla se diluyó con EtOAc (10 ml) y agua (5 ml). La capa orgánica se separó, se secó y se evaporó para dar el producto crudo, que se purificó por cromatografía instantánea, eluyendo con éter de petróleo/EtOAc 0-20 % para dar EEEE-2 (150 mg, 45 %) como un sólido blanco. LCMS [M+Na] 396.
Paso 3 - Síntesis del 8-(benciloxi)-6-(difluorometoxi)-5-fluoro-3,4-dihidroisoquinolin-2(1H)-carboxilato de tertbutilo (EEEE-3)
Se suspendió KOH (165 mg, 2,95 mol) en una mezcla de acetonitrilo (1 ml) y agua (1 ml) y se enfrió a -20 °C. El compuesto EEEE-2 (110 mg, 0,295 mmol) se añadió en porciones, seguido de (bromo-difluorometil)fosfonato de dietilo (157 mg, 0,59 mmol) durante 15 min. La mezcla se calentó a 25 °C durante 2 días. Se añadió agua a la solución de reacción y se extrajo con EtOAc (10 ml x 3). Las capas orgánicas se separaron, se secaron y se concentraron para dar el producto crudo, que se purificó por cromatografía instantánea, eluyendo con éter de petróleo/EtOAc 0-10 % , para dar EEEE-3 (100 mg, 80 %) como un sólido blanco. LCMS [M-Boc+1] 324.
Paso 4 - Síntesis del 6-(difluorometoxi)-5-fluoro-8-hidroxi-3,4-dihidroisoquinolin-2(1H)-carboxilato de tertbutilo (TP-37)
A una solución de EEEE-3 (100 mg, 0,23 mmol) en MeOH (5 ml) se añadió Pd/C (25 mg, 0,024 mmol). La mezcla se desgasificó y se purgó con H2 tres veces. La mezcla resultante se agitó a r.t. (28 °C) durante 16 horas. La reacción se diluyó con DCM (20 ml) y se filtró y concentró para dar TP-37 como un sólido blanco (75 mg, 95 %). LCMS [M tBu+1] 278,0; 1HRMN (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm 9,99 (bs, 1H), 7,31 (t, J=74 Hz, 1H), 6,62 (d, J= 8 Hz, 1H), 4,33 (s, 2H), 3,55 (t, J= 8 Hz, 2H), 2,69 (t, J= 8 Hz, 2H), 1,43 (s, 9H)
El Ejemplo 200 se preparó utilizando una química similar a la descrita en el Esquema CC y empleando el compuesto TP-37.
Figure imgf000165_0002
Esquema FFFF - Síntesis del 5-fluoro-8-hidroxi-6-isopropoxi-3,4-dihidroisoquinolin-2(1H)-carboxilato de tertbutilo (TP-38)
Figure imgf000165_0001
Paso 1 - Síntesis del 8-(benciloxi)-5-fluoro-6-isopropoxi-3,4-dihidroisoquinolin-2(1H)-carboxilato de tert-butilo (FFFF-1)
A una solución de EEEE-2 (170 mg, 0,455 mmol) en THF (3 ml) se enfrió con un baño de hielo y se añadió PPh3 (478 mg, 1,82 mmol) bajo N2. Se añadió gota a gota DIAD (368 mg, 1,82 mmol) y se agitó la reacción a 25 °C durante 30 min, que se convirtió en una suspensión blanca. A continuación, se añadió iPrOH (82,1 mg, 1,37 mmol) a la solución de reacción en una porción y se agitó a 15 °C durante 16 horas. La mezcla se diluyó con EtOAc (50 ml) y H2O (100 ml). La mezcla se separó y la capa acuosa se extrajo con EtOAc (50 ml). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera (50 ml), se secaron sobre Na2SO4, se filtraron y se concentraron. El producto crudo se purificó por cromatografía instantánea, eluyendo con éter de petróleo/EtoAc 0-20 % para dar FFFF-1 (160 mg, 85 %) como un aceite incoloro. LCMS [M-tBu+1] 270,1; 1HRMN (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm 7,50 - 7,29 (m, 5H), 6,78 (d, J=7,0 Hz, 1H), 5,15 (s, 2H), 4 ,65- 4,53 (m, 1H), 4,38 (br d, J=2,8 Hz, 2H), 3,54 (t, J=5,9 Hz, 2H), 2 ,74- 2,62 (m, 2H), 1,43 (s, 9H), 1,23 (d, J=6,0 Hz, 6 H)
Paso 2 - Síntesis del 5-fluoro-8-hidroxi-6-isopropoxi-3,4-dihidroisoquinolin-2(1H)-carboxilato de tert-butilo (TP-38)
A una solución de FFFF-1 (160 mg, 0,385 mmol) en MeOH (5 ml) se añadió Pd/C (41 mg, 0,039 mmol). La mezcla se desgasificó y se purgó con H2 tres veces utilizando un globo de H2 y luego se agitó a temperatura ambiente (28 °C) durante 16 horas bajo un globo de H2. La reacción se diluyó con DCM (20,0 ml), se filtró y se concentró para dar TP-38 como un sólido de color amarillo (118 mg, 94 %). 1HRMN (400 MHz, DMsO-d6) 5 ppm 9,50 (br d, J=2,5 Hz, 1H), 6,45 (d, J=7,3 Hz, 1H), 4,41 (td, J=6,0, 12,0 Hz, 1H), 4,28 (s, 2H), 3,52 (t, J=5,6 Hz, 2H), 2,64 (brt, J=5,8 Hz, 2H), 1,42 (s, 9H), 1,26 (d, J=6,0 Hz, 6 H)
El Ejemplo 201 se preparó utilizando una química similar a la descrita en el Esquema CC y empleando el compuesto TP-38.
Figure imgf000166_0002
Esquema GGGG - Síntesis del 8-ciano-6-hidroxi-2,3-dihidrobenzo[f][1,4]oxazepin-4(5H)-carboxilato de tertbutilo (TP-39)
Figure imgf000166_0001
Paso 1 - Síntesis de 8-bromo-6-fluoro-3,4-dihidrobenzo[f][1,4]oxazepin-5(2H)-ona (GGGG-2)
A una suspensión de GGGG-1 (13,8 g, 43,87 mmol, preparada con la patente de referencia US2015/64196) en THF seco (400 ml) se añadió DIPEA (28,3 g, 219 mmol) y T3P (50 % en EtOAc, 41,9 g, 65,8 mmol) a 0 °C. La mezcla se agitó a 0 °C durante 10 h y luego a rt 25 °C durante 6 h. La mezcla se vertió en agua (400 ml) y se extrajo con EtOAc (400 ml x 2). El extracto se lavó con salmuera (300 ml), se secó sobre Na2SO4 y se concentró para dar g Gg G-2 (9500 mg, 83 %) como un sólido de color amarillo claro. LCMS [M+1] 261,6; 1HRMN (400 MHz, DMSo-d6) 5 ppm 8,57 (brs, 1H), 7,44 (dd, J=1,8, 9,5 Hz, 1H), 7,22 (s, 1H), 4,22 (t, J=5,5 Hz, 2H), 3,27 (q, J=5,6 Hz, 2H)
Paso 2 - Síntesis de 6-(benciloxi)-8-bromo-3,4-dihidrobenzo[f][1,4]oxazepin-5(2H)-ona (GGGG-3)
A una suspensión al 60 % de NaH ( 6 g, 150 mmol) en DMF seca (140 ml) se añadió una solución de GGGG-2 (6,5 g, 25 mmol) y BnOH (5,41 g, 50 mmol) en DMF seca (70 ml) a rt 25 °C bajo N2 , después se agitó a rt 25 °C bajo N2 durante 16 h. La mezcla se vertió en agua helada (400 ml) en la que se formó un sólido. La mezcla se filtró. El sólido se lavó con agua y se secó al vacío para obtener GGGG-3 (9500 mg, >99 %) como sólido blanco. LCMS [M+1] 347,7; 1HRMN (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm 8,27 (brt, J=5,7 Hz, 1H), 7,47 (d, J=6 , 6 Hz, 2H), 7,42 - 7,36 (m, 2H), 7,35 - 7,29 (m, 1H), 7,26 - 7,15 (m, 1H), 6,93 (d, J=1,4 Hz, 1H), 5,19 (s, 2H), 4,12 (t, J=5,5 Hz, 2H), 3,18 (q, J=5,6 Hz, 2H). Paso 3 - Síntesis del 6-(benciloxi)-8-bromo-5-oxo-2,3-dihidrobenzo[f][1,4]oxazepin-4(5H)-carboxilato de tertbutilo (GGGG-4)
A una solución de GGGG-3 (7,3 g, 21 mmol) en DMF (150 ml) se añadió Boc2O (6 , 8 6 g, 31,43 mmol), DIPEA (8,13 g, 62,9 mmol) y DMAP (256 mg, 2,1 mmol) a rt 25 °C durante 2h. La mezcla se vertió en agua. El sólido se recogió por filtración y se lavó con agua. El sólido se disolvió en EtOAc/THF (50 ml/ 50 ml) y se secó sobre Na2SO4 y se concentró al vacío para obtener GGGG-4 crudo (10 g, >99 %) como una goma de color amarillo y se utilizó directamente en el siguiente paso sin purificación adicional.
Paso 4 - Síntesis del 6-(benciloxi)-8-bromo-2,3-dihidrobenzo[f][1,4]oxazepin-4(5H)-carboxilato de tert-butilo (GGGG-5)
A una solución de GGGG-4 (10 g, 21 mmol) en THF (150 ml) se añadió BH3.Me2S (8,39 ml, 83,9 mmol) a rt 25 °C. La mezcla se agitó a 60 °C bajo N2 durante 16 h y luego se mantuvo a rt durante 2 días. La reacción se inactivó con MeOH (70 ml) lentamente. A continuación, la mezcla se sometió a reflujo durante 16 h y se concentró. El producto crudo se purificó mediante cromatografía en columna (columna de sílice de 120 g, EtOAc en éter de petróleo de 0 % a 50 %) para obtener GGGG-5 (3130 mg, 34 %) como sólido blanco. LCMS [M+23] 456; 1HRMN (400 MHz, CDCls) 5 ppm 7,52 - 7,31 (m, 5H), 6,84 (bs, 1H), 6,82 (bs, 1H), 5,06 (br s, 2H), 4,64 (br s, 2H), 4 ,15-4 ,10 (m, 2H), 3,80 (br s, 2H), 1,29 (brs, 9H)
Paso 5 - Síntesis del 6-(benciloxi)-8-ciano-2,3-dihidrobenzo[f][1,4]oxazepin-4(5H)-carboxilato de tert-butilo (GGGG-6 )
El compuesto GGGG-5 (680 mg, 1,57 mmol), Zn(CN)2 (368 mg, 3,13 mmol) y Pd(PPh3)4 (181 mg, 0,157 mmol) en DMF (10 ml) se roció con N2 durante 10 min. La mezcla se agitó a 120 °C durante 3 h. La mezcla se enfrió, se filtró y se concentró. El residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice eluyendo con EtOAc en éter de petróleo de 0 a 50 % para obtener GGGG- 6 (520 mg, 87 %) como un sólido blanco. LCMS [M-Boc+1] 280,9.
Paso 6 - Síntesis del 6-(benciloxi)-8-carbamoil-2,3-dihidrobenzo[f][1,4]oxazepin-4(5H)-carboxilato de tert-butilo (GGGG-7)
A una solución de GGGG- 6 (520 mg, 1,37 mmol) y K2CO3 (189 mg, 1,37 mmol) en DMSO (5 ml) se añadió H2O2 al 30 % (465 mg, 4,1 mmol) a rt 25 °C lentamente. Nota: gas evolucionado y exotérmico. La mezcla se agitó a rt 25 °C durante 1 h. La mezcla se vertió en agua (10 ml) y se filtró. El sólido se lavó con agua. El sólido se suspendió en MeOH (30 ml) y se concentró al vacío para obtener g Gg G-7 (520 mg, 96 %) como un sólido blanco. LCMS [M+Na] 421.
Paso 7 - Síntesis del 8-carbamoil-6-hidroxi-2,3-dihidrobenzo[f][1,4]oxazepin-4(5H)-carboxilato de tert-butilo (GGGG-8 )
Una mezcla de GGGG-7 (520 mg, 1,31 mmol) y Pd/C (125 mg) en MeOH/THF (15 ml/15 ml) se desgasificó con H2 cuatro veces. La mezcla se agitó a 25 °C bajo un globo de H2 durante 16 h. La mezcla se filtró y se concentró al vacío para obtener GGGG- 8 (400 mg, 99 %) como un sólido blanco. 1HRMN (400 MHz, DMSO-d6, rotámetros) 8 ppm 9,85 (br. s., 1H), 7,80 (br. s., 1H), 7,22 (br. s., 1H), 7,11 - 6,97 (m, 1H), 6,92 (br. s., 1H), 4,57 (br. s., 2H), 4,20 - 4,03 (m, 2H), 3,68 (br. s., 2H), 1,42-1,13 (m, 9H)
Paso 8 - Síntesis del 8-ciano-6-hidroxi-2,3-dihidrobenzo[f][1,4]oxazepin-4(5H)-carboxilato de tert-butilo (TP-39)
A una suspensión de GGGG- 8 (100 mg, 0,324 mol) y piridina (128 mg, 1,62 mol) en DCM anhidro (2 ml) se añadió Tf2O (275 mg, 0,973 mol) a 0 °C y se agitó durante 0,5 h. La mezcla de reacción se calentó a 25 °C y se agitó durante 16 h. La mezcla se concentró al vacío hasta sequedad. El residuo se disolvió en MeOH (3 ml), seguido de K2CO3 (300 mg). La mezcla se agitó a rt 25 °C durante 16 h. La reacción se filtró y se purificó por pre-TLC (éter de petróleo/EtOAc 1:1) para obtener TP-39 (55 mg, 58%) como un sólido blanco. LCMS [M-Boc+1] 190,8; 1HRMN (400 MHz, DMSO-d6, rotámeros) 8 ppm 10,47 (brs, 1H), 6,83 (brs, 2H), 4,70-4,51 (m, 2H), 4,22-4,18 (m, 2H), 3,69 (brs, 2H), 1,46 -1,21 (m, 9H)
Esquema HHHH - Síntesis del 8-fluoro-6-hidroxi-2,3-dihidrobenzo[f][1,4]oxazepin-4(5H)-carboxilato de tertbutilo (TP -40)
Figure imgf000167_0001
A una solución de HHHH-1 (preparada con un procedimiento similar al de los pasos 1-4 del Esquema GGGG utilizando ácido 2-(2-aminoetoxi)-4,6-difluorobenzoico, 1980 mg, 5,302 mmol) en MeOH (74 ml) se añadió Pd/C húmedo al 10 % (590 mg) a 25 °C. La mezcla se agitó a 25 °C bajo un globo de H2 durante 1,2 horas. La reacción se filtró y se concentró para producir TP-40 (1420 mg, 95 %) como un sólido blanco. LCMS [M-Boc+1] 184,81HRMN (400 MHz, DMSO-d6 ,rotámeros) 8 ppm 10,60 - 9,69 (bs, 1H), 6,34-6,30 (m, 1H), 6,26 - 6,12 (m, 1H), 4,63 - 4,39 (m, 2H), 4,23 - 4,01 (m, 2H), 3,75 - 3,58 (m, 2H), 1,46 -1,20 (m, 9H); 1HRMN (400 MHz, DMSO-d6 , temperatura variable 80 °C) 8 ppm 6,33 (d. br, J=10,3 Hz, 1H), 6,19 (dd, J=2,3, 10,3 Hz, 1H), 4,53 (s, 2H), 4,19 - 4,06 (m, 2H), 3,69 (t. br, J=4,4 Hz, 2H), 1,36 (s, 9H)
Esquema INI - Síntesis del 8-cloro-6-hidroxi-2,3-dihidrobenzo[f][1,4]oxazepin-4(5H)-carboxilato de tert-butilo (TP-41)
Figure imgf000168_0001
Paso 1 - Síntesis del 8-cloro-2,3,4,5-tetrahidrobenzo[f][1,4]oxazepin-6-ol (1111-2)
A una solución de MII-1 (preparada con un procedimiento similar al de los pasos 1-3 del Esquema GGGG utilizando ácido 2-(2-aminoetoxi)-4-doro-6-fluorobenzoico, 1000 mg, 3,292 mmol) en THF seco (11 ml) se añadió BH3.Me2S (2,63 ml, 26,3 mmol) a rt 25 °C bajo N2. Tras la adición, la mezcla se calentó a 70 °C durante 16 horas. La mezcla se enfrió a rt (25 °C) y se inactivó con MeOH (3 ml). La mezcla se concentró como un sólido blanco. El producto crudo se disolvió en HCl conc (13,7 ml) y se calentó a 110 °C durante 16 horas. La mezcla se concentró para obtener IIII-2 (860 mg, >99%) como un sólido de color amarillo claro que se utilizó directamente en el siguiente paso. LCMS [M+1] 199,7 Paso 2 - Síntesis del 8-cloro-6-hidroxi-2,3-dihidrobenzo[f][1,4]oxazepin-4(5H)-carboxilato de tert-butilo (TP-41) A una solución de IIII-2 (1171 mg, 3,3 mmol) en MeOH (21 ml) se añadió TEA (3,58 ml, 25,6 mmol) y Boc2O (1,32 g, 6,02 mmol) y se agitó a r.t. durante 2 horas. La mezcla se concentró al vacío para obtener el producto crudo (1032 mg) como sólido blanco. El producto crudo se purificó mediante combi-flash (EtOAc/ éter de petróleo=0~50 %) para obtener TP-41 (520 mg, 30 %) como un sólido blanco. LCMS [M-tBu+1] 243,6; 1HRMN (400 MHz, DMSO-d6 , rotámetros) 5 ppm 10,13 (s, 1H), 6,61 -6,57 (m, 1H), 6,45 (bs, 1H), 4,61 -4,46 (m, 2H), 4 ,25-4 ,05 (m, 2H), 3,66 (br s,2H), 1,42- 1,27 (m,9H)
Los Ejemplos 202-204 se prepararon utilizando una química similar a la descrita en el Esquema CC y empleando los compuestos TP-39, TP-40 y TP-41 respectivamente
Figure imgf000168_0002
(continuación)
Figure imgf000169_0002
Esquema JJJJ - Síntesis del 8-(difluorometil)-6-hidroxi-2,3-dihidrobenzo[f][1,4]oxazepin-4(5H)-carboxilato de tert-butilo (TP-42)
Figure imgf000169_0001
Paso 1 - Síntesis del 6-(benciloxi)-8-formil-2,3-dihidrobenzo[f][1,4]oxazepin-4(5H)-carboxilato de tert-butilo (JJJJ-1)
Ref. Manabe, K. et al. Org. Lett., 2013, 5370-5373. En un vial de reacción se añadió una solución de GGGG-5 (1,64 g, 3,62 mmol) en DMF anhidra (18 ml) y N-formilsacarina (1200 mg, 5,66 mmol), G3 Xantphos (107 mg, 0,113 mmol) y DIPEA (634 mg, 4,91 mmol). La mezcla se roció con N2 durante 4 min. A la solución anterior se añadió Et3SiH (571 mg, 4,91 mmol) a 0oC. Después de la adición, la mezcla resultante se roció con N2 durante 5 minutos y luego se calentó a 75 °C durante 16 horas. La mezcla de reacción se sometió a partición entre EtOAcy agua. La capa orgánica se separó y la capa acuosa se extrajo con EtOAc (30 ml x 3). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera, se secaron sobre Na2SO4 y se concentraron para obtener el producto crudo que se purificó mediante columna instantánea (20 g, gel, EtOAc: éter de petróleo 1 %-14 %) para obtener JJJ-1 (730 mg, 53 %) como un sólido blanco. 1HRMN (400 MHz, CDCls, rotámeros) 5 ppm 9,87 (brs, 1H), 7,59- 7,30 (m, 5H), 7,21 (bs, 1H), 7,14 (bs, 1H), 5,16 (brs, 2H), 4,75 (brs, 2H), 4,24-4,17, (m, 2H), 3,85 (brs, 2H), 1,54-1,13 (m, 9H)
Paso 2 - Síntesis del 6-(benciloxi)-8-(difluorometil)-2,3-dihidrobenzo[f][1,4]oxazepin-4(5H)-carboxilato de tertbutilo (JJJ-2)
A una solución de JJJJ-1 (930 mg, 2,43 mmol) en DCM anhidro (49 ml) se añadió DAST (3,91 g, 24,3 mmol) a 0 °C bajo N2. Tras la adición, la mezcla de reacción se calentó a temperatura ambiente (32 °C) y se agitó a esta temperatura durante 16 horas. La solución de la reacción se diluyó en DCM (50 ml) y NaHCO3 ac.. sat. y se agitó hasta que cesó la evolución del Co2 . La mezcla de reacción se sometió a partición entre DCM y H2O. La capa orgánica se separó, se lavó con salmuera, se secó sobre Na2SO4 y se concentró para obtener el producto crudo que se purificó mediante columna instantánea (EtOAc: éter de petróleo 1 %-15 %) para obtener JJJ-2 (530 mg, 54 %) como un sólido blanco.
1HRMN (400 MHz, CDCls, rotámetros) 5 ppm 7,58 - 7,29 (m, 5H), 6,82 (bs, 1H), 6,79 (bs, 1H), 6,54 (t, J = 54 Hz, 1H), 5,12 (brs, 2H), 4,72 (brs, 2H), 4,21 -4,07 (m, 2H), 3,83 (brs, 2H), 1,54-1,13 (m, 9H)
Paso 3 - Síntesis del 8-(difluorometil)-6-hidroxi-2,3-dihidrobenzo[f][1,4]oxazepin-4(5H)-carboxilato de tertbutilo (TP-42)
A una solución de JJJJ-2 (530 mg, 1,31 mmol) en MeOH (13 ml) se añadió Pd/C (139 mg, 0,0163 mmol). La mezcla se desgasificó y se purgó con H2 tres veces, después se agitó a rt (35 °C) durante 16 horas. La reacción se filtró a través de Celite y se concentró. El residuo se liofilizó para eliminar el disolvente residual para dar TP-42 (360 mg, 87 %) como un sólido blanco. LCMS [M-tBu+1] 259,7; 1HRMN (400 MHz, DMSO-d6, rotámetros) 5 ppm 10,21 - 9,89 (m, 1H), 7,02 - 6,47 (m, 3H), 4,65 - 4,49 (m, 2H), 4,22 - 4,04 (m, 2H), 3,74 - 3,62 (m, 2H), 1,46 - 1,11 (m, 9H)
El Ejemplo 205 se preparó utilizando una química similar a la descrita en el Esquema CC y empleando el compuesto TP-42.
Figure imgf000170_0002
Esquema KKKK - Síntesis del 6-hidroxi-8-metil-2,3-dihidrobenzo[f][1,4]oxazepin-4(5H)-carboxilato de tertbutilo (TP-43)
Figure imgf000170_0001
Paso 1 - Síntesis del 6-(benciloxi)-8-metil-2,3-dihidrobenzo[f][1,4]oxazepin-4(5H)-carboxilato de tert-butilo (KKK-1)
Una solución de GGGG-5 (200 mg, 0,46 mmol) en dioxano (9,21 ml) se desgasificó con N2 durante 5 min. Después se añadió bis(tri-tert-butilfosfina)Pd(0) (23,5 mg, 0,05 mmol) y (Me)2Zn(0,921 ml, 0,92 mmol) a la solución de reacción y se calentó a 90 °C durante 16 horas. La solución de reacción se vertió en EtOAcy HCl 1 N (20 ml:20 ml). La mezcla se separó y la capa acuosa se lavó con EtOAc (20 ml x 2). Las capas orgánicas se separaron, se secaron y se evaporaron para dar el producto crudo, que se purificó por cromatografía instantánea, eluyendo con éter de petróleo/EtOAc al 0-25 %, para obtener KKKK-1 (160 mg, 94 %) como un sólido de color amarillo. LCMS [M+Na] 392,1; 1HRMN (400 MHz, DMSO-d6 , rotámetros) 5 ppm 7,57- 7,30 (m, 5H), 6,62 (bs, 1H), 6,39 (s, 1H), 5,09 (bs, 2H), 4,65-4,60 (m, 2H), 4,17-4,04 (m, 2H), 3,68 (br s, 2H), 2,22 (s, 3H), 1,42-1,15 (m, 9H)
Paso 2 - Síntesis del 6-hidroxi-8-metil-2,3-dihidrobenzo[f][1,4]oxazepin-4(5H)-carboxilato de tert-butilo (TP-43) El compuesto KKKK-1 (160 mg, 0,433 mmol) se disolvió en MeOH (8,00 ml). A continuación se añadió Pd/C a la solución de reacción, se desgasificó con H2 cuatro veces y se agitó a 30 °C bajo H2 (globo) durante 16 horas. Se añadió DCM (20 ml) para diluir la solución de reacción, luego se filtró y se concentró para dar el producto crudo, que se purificó por cromatografía instantánea, eluyendo con éter de petróleo/EtOAc de 0-25 %, para dar TP-43 (100 mg, 83 %) como un sólido blanco. LCMS [M-Boc+1] 179,9; 1HRMN (400 MHz, DMSO-d6, rotámetros) 5 ppm 9,41 (s, 1H), 6,37-6,35 (m, 1H), 6,22-6,20 (m, 1H), 4,58-4,42 (m, 2H), 4,13-3,95 (m, 2H), 3,70- 3,59 (m, 2H), 2,13 (s, 3H), 1,41 -1,27 (m, 9H)
El Ejemplo 206 se preparó utilizando una química similar a la descrita en el Esquema CC y empleando el compuesto TP-43
Figure imgf000171_0002
Esquema LLLL - Síntesis de (S)-6-hidroxi-3-metil-2,3-dihidrobenzo[f][1,4]oxazepin-4(5H)-carboxilato de tertbutilo (TP-44)
Esquema LLLL
Figure imgf000171_0001
Paso 1 - Síntesis del (S)-2-(benzoxi)-6-(2-((tert-butoxicarbonilo)amino)propoxi)benzoato de metilo (LLLL-1) A una solución de 2-(benzoxi)-6-hidroxibenzoato de metilo (2,80 mg, 10,8 mmol) en THF (40,0 ml) se añadió PPh3 (7,11 g, 27,1 mmol) en un baño de hielo bajo N2. Se añadió DIAD (5,48 g, 27,1 mmol) a la mezcla anterior gota a gota y se agitó a 25 °C durante 40 min. A continuación se añadió (S)-(1-hidroxipropano-2-il)carbamato de tert-butilo (5,70 g, 32,5 mmol) en THF seco (20,0 ml) y la reacción se agitó a 28 °C durante 16 horas. La mezcla se diluyó con EtOAc (50 ml) y H2O (100 ml). La mezcla se separó y la capa acuosa se extrajo con EtOAc (50 ml). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera (50 ml), se secaron sobre Na2SO4, se filtraron y se concentraron para obtener el producto crudo, que se purificó mediante ISCO (120 g de gel de sílice, éter de petróleo:EtOAc=4:1) para obtener LLLL-1 (3,50 g, 78 %) como una goma incolora. 1HRMN (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm 7,42 - 7,35 (m, 4H), 7,34 - 7,29 (m, 2H), 6,83 - 6,75 (m, 2H), 6,71 (d, J=8,5 Hz, 1H), 5,16 (s, 2H), 3,95-3,92 (m, 1H), 3,80 - 3,70 (m, 5H), 1,43 - 1,34 (m, 9H), 1,08 (d, J=6,5 Hz, 3H)
Paso 2 - Síntesis de (S)-2-(2-aminopropoxi)-6-(benzoxi)benzoato de metilo (LLLL-2)
A una solución de LLLL-1 (4,30 g, 10,3 mmol) en DCM (10 ml) se añadió HCl(g)/dioxano (~4N, 20 ml) a 0 °C. La mezcla se agitó a 25 °C durante 2 horas. La mezcla se concentró para producir LLLL-2 como sa1HCl (4,00 g, >99 %) como sólido de color amarillo, que se utilizó en el siguiente paso directamente.
Paso 3 - Síntesis del ácido (S)-2-(2-aminopropoxi)-6-(benzoxi)benzoico (LLLL-3)
A una suspensión de LLLL-2 (4,0 g, 3,17 mmol) en MeOH (60 ml) y agua (12 ml) se añadió LiOH.H2O (3,46 g, 82,4 mmol) a 25 °C. La mezcla se agitó a 75 °C durante 15 horas. El pH de la solución se ajustó a un pH~3 con 1N. La solución se evaporó para dar el producto crudo LLLL-3 (3,10 g, >99 %) como un sólido blanco que se utilizó para el siguiente paso directamente sin purificación adicional.
Paso 4 - Síntesis de (S)-6-(benciloxi)-3-metil-3,4-dihidrobenzo[f][1,4]oxazepin-5(2H)-ona (LLLL-4)
A una suspensión de LLLL-3 (4,00 g, 5,77 mmol) en THF seco (60 ml) se añadió DIPEA (3,73 g, 28,9 mmol) y T3P (50 % en EtOAc, 7,35 g, 11,5 mmol) a 0 °C. La mezcla se agitó a 25 °C durante 15 horas. La reacción no se completó y se agitó durante otras 16 horas con DIPEA (3,73 g, 28,9 mmol) y T3P (50 % en EtOAc, 7,35 g, 11,5 mmol). Se añadió EtOAc (40,0 ml) para diluir la solución. La solución se lavó con HCl 1 N (30 ml), NaHCO3 acuoso saturado (30 ml) y salmuera (30 ml). Las capas orgánicas se separaron, se secaron y se evaporaron para dar el producto crudo, que se purificó por cromatografía instantánea, eluyendo con éter de petróleo/EtOAc al 0-50 % para dar el producto deseado LLLL-4 (900 mg, 55 %) como sólido blanco. LCMS [M+1] 283,9; 1HRMN (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm 8,09 (d, J=6,3 Hz, 1H), 7,51 - 7,44 (m, 2H), 7,41 - 7,25 (m, 4H), 6,99 - 6,91 (m, 1H), 6 , 6 8 (dd, J=0,9, 8,2 Hz, 1H), 5,15 (s, 2H), 3,97 (dd, J=4,3, 10,3 Hz, 1H), 3,86 - 3,77 (m, 1H), 3,46-3,44 (m, 1H), 1,05 (d, J=6,5 Hz, 3H)
Paso 5 - Síntesis de (S)-6-(benzoxi)-3-metil-5-oxo-2,3-dihidrobenzo[f][1,4]oxazepin-4(5H)-carboxilato de tertbutilo (LLLL-5)
A una solución de LLLL-4 (900 mg, 3,18 mmol) en DMF (20,0 ml) se añadió DIPEA (1,23 g, 9,53 mmol) y DMAP (38,8 mg, 0,318 mmol) a 25 °C. Boc2O (1,04 mg, 4,76 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a 25 °C durante 16 horas. La mezcla se diluyó con agua helada (20 ml) y se extrajo con EtOAc (20 ml X 2). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera (30 ml X 5), se secaron sobre Na2SO4 y se filtraron, concentrándose al vacío para obtener el producto crudo, que se purificó mediante ISCO (4 g de gel de sílice, EtOAc:éterde petróleo=18 %-20 %) para obtener LLLL-5 (720 mg, 59 %) como sólido blanco y se utilizó directamente en el siguiente paso. LCMS [M-Boc+1] 238,9
Paso 6 - Síntesis de (S)-6-(benzoxi)-3-metil-2,3-dihidrobenzo[f][1,4]oxazepin-4(5H)-carboxilato de tert-butilo (LLLL-6 )
A una solución de LLLL-5 (720 mg, 1,88 mmol) en THF (20 ml) se añadió BH3.Me2S (10 M, 0,751 ml, 7,51 mmol) a 0 °C. La mezcla se agitó a 74 °C bajo N2 durante 2 horas. La reacción se inactivó con MeOH (5 ml) lentamente y se calentó a reflujo durante 16 horas. La mezcla se concentró para dar el producto crudo, que se purificó porcombi flash (columna de sílice de 40 g, EtOAc en éter de petróleo del 9-10 % para obtener LLLL - 6 (530 mg, 76,4 %) como una goma incolora. LCMS [M-Boc+1] 270,0; 1HRMN (400 MHz, DMSO-d6, rotámetros) 5 ppm 7,54 - 7,32 (m, 5h ), 7,06 (t, J=8,2 Hz, 1H), 6,70 (d, J=8,3 Hz, 1H), 6,46 (dd, J=0,8, 8,3 Hz, 1H), 5,35 - 4,97 (m, 3H), 4,54 - 4,30 (m, 1H), 4,24 - 4,02 (m, 3H), 1,39-1,22 (m, 9H), 1,06 (m, 3H)
Paso 7 - Síntesis de (S)-6-hidroxi-3-metil-2,3-dihidrobenzo[f][1,4]oxazepin-4(5H)-carboxilato de tert-butilo (TP-44)
A una solución de LLLL - 6 (530 mg, 1,43 mmol) en MeOH (10,0 ml) se añadió Pd/C húmedo al 10 % (100 mg). La solución de reacción se agitó a 30 °C bajo un globo de H2 durante 16 h. A continuación, la mezcla se filtró a través de Celite, se lavó con MeOH y se concentró para dar TP-44 (360 mg, 90 %) como un sólido blanco. 1HRMN (400 MHz, DMSO-d6, rotámetros) 5 ppm 9,61 - 9,49 (m, 1H), 6,87 (t, J=8,2 Hz, 1H), 6,44 (d, J=7,8 Hz, 1H), 6,26 (dd, J=1,0, 8,0 Hz, 1H), 5,23-4,94 (m, 1H), 4,54-4,28 (m, 1H), 4,15-4,00 (m, 3H), 1,39-1,25 (m, 9H), 1,06 (d, J=6 , 8 Hz, 3H)
El compuesto TP-45 se preparó utilizando condiciones similares a las del Esquema LLLL , utilizando (R)-(1-hidroxipropano-2 -il)carbamato de tert-butilo en el paso 1
Figure imgf000172_0001
Los Ejemplos 207 y 208 se prepararon utilizando una química similar a la descrita en el Esquema CC y empleando los compuestos TP-44 y TP-45, respectivamente
Figure imgf000172_0002
(continuación)
Figure imgf000173_0002
Esquema MMMM - Síntesis de (R)-6-hidroxi-2-metil-2,3-dihidrobenzo[f][1,4]oxazepin-4(5H)-carboxilato de tertbutilo (TP-46)
Figure imgf000173_0001
Paso 1 - Síntesis del (R)-6-(benciloxi)-2-metil-2,3-dihidrobenzo[f][1,4]oxazepin-4(5H)-carboxilato de tert-butilo (MMMM-1)
A un compuesto MMMM-1 (preparado por un procedimiento similar al de los pasos 1-5 del Esquema LLLL utilizando (R)-(2-hidroxipropil)carbamato de tert-butilo), 500 mg, (1,5 mmol) en THF seco (10,0 ml) se añadió LAH (233 mg, 6,14 mmol) a 25 oC. La mezcla se agitó a 75 °C durante 2 h. La reacción se enfrió a r.t., en la que se añadió agua (2 , 0 ml) a la reacción seguida de Boc2O (670 mg, 3,07 mmol). La mezcla se agitó durante 2,5 h a r.t., después se añadió agua y la reacción se extrajo con EtOAc ( 10 ml x3), se secó con Na2SO4 y se concentró para dar el producto crudo, que se purificó por ISCO (20 g, gel de sílice, EtOAc/éter de petróleo=15 %) para dar m Mm M-2 (520 mg, 92 %) como una goma incolora. Lc Ms [M-Boc+1 ] 269,9
Paso 2 - Síntesis de (R)-6-hidroxi-2-metil-2,3-dihidrobenzo[f][1,4]oxazepin-4(5H)-carboxilato de tert-butilo (TP-46)
El compuesto MMMM-2 (520 mg, 1,3 mmol) disuelto en MeOH (10 ml) se añadió Pd/C (100 mg, 0,940 mmol). La solución de reacción se agitó a 25 °C bajo H2 durante 2 h. A continuación, la mezcla se filtró a través de Celite, se lavó con MeOH y se concentró. El residuo se purificó por ISCO (20 g, gel de sílice, EtOAc/éter de petróleo=25 %) para obtener TP-46 (234 mg, 67 %) como un sólido blanco. LCMS [M-Boc+1] 179,7; 1HRMN (400 MHz, CDCls) 5 ppm 7,55 (s, 1H), 7,06 (t, J=8,1 Hz, 1H), 6,73 (d, J=8,1 Hz, 1H), 6,67 - 6,55 (m, 1H), 4,64 (d, J=14,7 Hz, 1H), 4,15 - 4,07 (m, 1H), 3,90 (brd, J=14,4 Hz, 1H), 3,84 - 3,76 (m, 1H), 3,29 (dd, J=8,9, 14,5 Hz, 1H), 1,41 (s, 9H), 1,29 (d, J=6,5 Hz, 3H) El compuesto TP-47 se preparó con un procedimiento similar al del Esquema MMMM utilizando (S)-(2-hidroxipropil)carbamato de tert-butilo
Figure imgf000173_0003
Los Ejemplos 209 y 210 se prepararon utilizando una química similar a la descrita en el Esquema CC y empleando los compuestos TP-46 y TP-47, respectivamente.
Figure imgf000174_0002
Esquema NNNN - Síntesis del fert-fouf/7-6-(difluorometil)-5-fluoro-8-hidroxi-4-metil-3,4-dihidroisoqumolm-2(1H)-carboxilato (TP-48)
Figure imgf000174_0001
Paso 1: Síntesis del ácido 2-(benzoxi)-4-bromo-5-fluorobenzoico (ZZZ-6 )
A un matraz de fondo redondo, equipado con una barra de agitación magnética, se añadió tert-butóxido de litio (3,81 g, 47,6 mmol) y DMSO (119 ml, 0,2M). El matraz se equipó con un fendensery se añadió alcohol bencílico (4,95 ml, 47,6 mmol). El matraz se colocó en una manta calefactora y se calentó a 80 °C durante 5 minutos. Se retiró el matraz y se añadió ZZZ-1 (5,64 g, 23,8 mmol). El matraz se devolvió a la manta calefactora y se calentó a 80 °C durante 17 horas. La reacción se retiró de la manta calefactora y se dejó enfriar hasta rt. La solución se vertió en 1,2 L de agua y se acidificó con 48 ml de HCl 1M ac.. dando lugar a un precipitado de color bronce. Los sólidos se filtraron y se lavaron con agua. Los sólidos se recogieron y se secaron en una estufa de vacío durante 3,5 horas a 80 °C para obtener el compuesto del título ZZZ- 6 (7,21 g, 93 %) como un sólido de color marrón claro. 1HRMN (400MHz, DMSO da) 8 ppm 13,10 (s. br., 1H), 7,61 (d, J=8 , 8 Hz, 1H), 7,57 (d, J=5,6 Hz, 1H), 7,48 (d, J=7,1 Hz, 2H), 7,44-7,36 (m, 2H), 7 ,35-7,28 (m, 1H), 5,22 (s, 2H).
Paso 2: Síntesis de 2-(benzoxi)-4-bromo-5-fluoro-N-(pivoiloxi)benzamida (ZZZ-7)
A un matraz de fondo redondo, equipado con una barra de agitación magnética, se añadió ZZZ- 6 (5,73 g, 17,6 mmol) y THF (176 ml, 0,1M). La solución se enfrió a 0 °C y se añadió T3P (24,7 g, 38,8 mmol) como solución al 50 % en peso en EtOAc. Tras la adición, la mezcla de reacción se agitó durante 30 min a 25 °C. A la solución anterior se añadió DIPEA (18,4 ml, 106 mmol) seguido de FF-3 (5,18 g, 19,4 mmol). Tras la adición, la mezcla de reacción se agitó a 25 °C durante 1 hora. La reacción se inactivó con agua, se diluyó con EtOAc y se transfirió a un embudo de separación. Las fases se separaron y la fase orgánica se lavó con 1 porción de ácido cítrico al 10 %, 1 porción de ácido sat. NaHCO3 , y 1 porción de salmuera. El extracto orgánico se secó (MgSO4), se filtró y se concentró al vacío. El residuo crudo se purificó mediante cromatografía en columna instantánea (12 g de SiO2, Isco, 100 % de Hept. a 100 % de EtOAc, 9 ml de fracciones) para obtener el compuesto del título ZZZ-7 (6,24 g, 83 %) como sólido blanco. 1HRMN (400MHz, CLOROFORMO-d) 8 ppm 10,79 (s, 1H), 7,94 (d, J=8,9 Hz, 1H), 7,52 - 7,35 (m, 5H), 7,27 - 7,23 (m, 1H), 5,26 (s, 2H), 1,34 (s, 9H).
Paso 3: Síntesis de 8-(bencMoxi)-6-bromo-5-fluoro-4-metN-3,4-dihidroisoqumoMn-1(2W)-ona (NNNN-1)
Aun reactor de acero de 80 ml se añadió ZZZ-7 (4,00 g, 9,43 mmol), pivalato de cesio (4,41 g, 18,9 mmol), [CptRhCh]2 (166 mg, 0,236 mmol) y trifluoroetanol (47 ml, 0,2M). El reactor se purgó con nitrógeno 3 veces, seguido de 3 ciclos de purga con gas propileno. La reacción se calentó a 40 °C bajo 4 bares de gas propileno durante 3 días. La solución se inactivó con NaHCO3 ac.. y se transfirió a un embudo separador con DCM. Las fases se separaron y la fase acuosa se extrajo con 2 porciones de DCM. Los extractos orgánicos combinados se secaron (MgSO4), se filtraron y se concentraron al vacío. El residuo crudo se purificó mediante cromatografía en columna instantánea (40 g de SiO2 , Isco, 100 % de Hept. a 10 % de MeOH/EtOAc, 25 ml de fracciones) para obtener el compuesto del título NNNN-1 (2,27 g, 6 6 %, 9:1 r.a.) como un sólido marrón. LCMS [M+H] = 364 observado. 1HRMN (400MHz, CLOROFORMO-d) 8 ppm 7,55 (d, J=7,5 Hz, 2H), 7,47 - 7,36 (m, 2H), 7,35 - 7,28 (m, 1H), 7,13 (d, J=5,5 Hz, 1H), 5,92 (d, J=3,8 Hz, 1H), 5,27 -5,19 (m, 1H), 5,16 - 5,10 (m, 1H), 3,69 (dd, J=4,0, 12,7 Hz, 1H), 3,40 - 3,30 (m, 1H), 3,23 (ddd, J=1,3, 6,0, 12,6 Hz, 1H), 1,36 (d, J=7,1 Hz, 3H).
Paso 4: Síntesis del ferf-buf/7-8-(benzoxi)-6-bromo-5-fluoro-4-metiM-oxo-3,4-dihidroisoqumoMn-2(1H)-carboxilato (NNNN-2)
A un matraz de fondo redondo, equipado con una barra de agitación magnética y que contenía NNNN-1 (1,20 g, 3,29 mmol) se añadió DCM (11,0 ml, 0,3M), DIPEA (0,86 ml, 4,94 mmol), (Boc)2O (1,08 g, 4,94 mmol) y DmA p (60,4 mg, 0,494 mmol). El matraz se equipó con un findenser y se colocó en un bloque de calentamiento. La reacción se calentó a 40 °C durante 16 horas. El matraz se retiró del bloque de calentamiento y se dejó enfriar a rt. La reacción se inactivó con agua y se transfirió a un embudo de separación con DCM. Las fases se separaron y la fase acuosa se extrajo con 2 porciones de DCM. Los extractos orgánicos combinados se secaron (MgSO4), se filtraron y se concentraron al vacío. El residuo crudo se purificó mediante cromatografía en columna instantánea (40 g de SiO2, Isco, 100 % de Hept a 100 % de EtOAc, 9 ml de fracciones) para obtener el compuesto del título NNNN-2 (1,41 g, 92 %) como espuma blanca. LCMS [M+H-Boc] = 364 observado. 1HRMN (400MHz, CLOROFORMO-d) 8 ppm 7,55 (d, J=7,5 Hz, 2H), 7,44 - 7,35 (m, 2H), 7,32 (d, J=7,3 Hz, 1H), 7,11 (d, J=5,6 Hz, 1H), 5,28- 5,20 (m, 1H), 5,18-5,09 (m, 1H), 4,21 (dd, J=2,2, 13,2 Hz, 1H), 3,61 (dd, J=3,2, 13,1 Hz, 1H), 3,39 - 3,27 (m, 1H), 1,59 (s, 9H), 1,33 (d, J=7,1 Hz, 3H).
Paso 5: Síntesis del ferf-buf/7-8-(benzoxi)-6-bromo-5-fluoro-4-metM-3,4-dihidroisoqumoMn-2(1H)-carboxNato (NNNN-3)
A un matraz de fondo redondo, equipado con una barra de agitación magnética y que contenía NNNN-2 (1,41 g, 3,04 mmol), se añadió THF (15 ml, 0,2M) y complejo de dimetilsulfuro de borano (1,44 ml, 15,2 mmol).
El matraz se equipó con un buscador y se transfirió a un bloque de calentamiento. La reacción se calentó a 70 °C durante 30 minutos. El matraz se retiró del bloque de calentamiento y se dejó enfriar gradualmente hasta rt. La reacción se inactivó mediante la adición gota a gota de metanol hasta que la evolución del gas fue completa, seguida de la dilución con heptano. La solución se concentró al vacío. El residuo crudo se purificó mediante cromatografía en columna instantánea (40 g de SiO2 , Isco, 100 % de Hept. a 10 % de EtOAc/Hept. a 100 % de EtOAc, fracciones de 9 ml) para obtener el compuesto del título NNNN-3 (1,13 g, 82 %) como espuma blanca. LCMS [M+H-Boc] = 350 observado. 1HRMN (400MHz, CLOROFORMO-d) 8 ppm 7,47 - 7,30 (m, 5H), 6,93 (d, J=5,5 Hz, 1H), 5,18 - 4,79 (m, 3H), 4,26 - 3,96 (m, 2H), 3,28 - 2,95 (m, 2H), 1,51 (s, 9H), 1,25 (d, J=6 , 8 Hz, 3H).
Paso 6 : Síntesis del ferf-buí/7-8-(benzoxi)-5-fluoro-6-formil-4-metil-3,4-dihidroisoquinolin-2(1H)-carboxilato (NNNN-4)
Nota: el nBuLi se tituló, el THF se secó sobre tamices moleculares 4A activados, y las agujas de jeringa se secaron en horno a 85C bajo vacío antes de su uso.
Un matraz de fondo redondo que contenía NNNN-3 (1,00 g, 2,22 mmol) se secó bajo alto vacío durante la noche, se equipó con una barra de agitación magnética y se purgó con argón bajo vacío dinámico. Al matraz se añadió THF (11,0 ml, 0,2M) y la solución se enfrió a -78 °C con un baño de AcMe/hielo seco. A la solución enfriada se añadió nbutil-litio (1,7 ml, 2,30 mmol) gota a gota para inducir el intercambio metal-halógeno. La reacción se agitó a -78 °C bajo argón durante 30 minutos.
Nota: La reacción se vuelve de color naranja brillante al añadir gota a gota nBuLi.
A la solución se añadió DMF (0,26 ml, 3,4 mmol) gota a gota a -78 °C. En esta etapa, se retiró el baño de hielo y se dejó que la reacción se calentara gradualmente hasta la temperatura ambiente.
Nota: La reacción se vuelve de color amarillo pálido cuando se calienta a temperatura ambiente.
La reacción se inactivó de forma inversa mediante la adición de la solución de reacción a la temperatura ambiente. NH4Cl ac.. (10 ml). La fase acuosa se extrajo con 4 porciones de DCM. Los extractos orgánicos combinados se secaron (MgSO4), se filtraron y se concentraron al vacío. El residuo crudo se purificó mediante cromatografía en columna instantánea (24 g de SiO2, Isco, 100 % de Hept. a 100 % de EtOAc, 20 ml de fracciones) para obtener el compuesto del título NNNN-4 (885 mg, >95 %) como un sólido ceroso blanco. LCMS [M+H-Boc] = 300 observado. 1HRMN (400MHz, CLOROFORMO-d) 8 ppm 10,34 (s, 1H), 7,48 - 7,31 (m, 5H), 7,21 (d, J=5,3 Hz, 1H), 5,29 - 4,87 (m, 3H), 4,32-4,03 (m, 2H), 3 ,35-3,18 (m, 1H), 3,17-3,00 (m, 1H), 1,52 (s, 9H), 1,29 (d, J=6 , 8 Hz, 3H).
Paso 7: Síntesis del tert-but/7-8-(benzoxi)-6-(difluorometM)-5-fluoro-4-metN-3,4-dihidroisoqumoMn-2(1H)-carboxilato (NNNN-5)
Un vial de centelleo, equipado con una barra de agitación magnética y que contenía NNNN-4 (1,77 g, 4,43 mmol), se purgó con argón bajo vacío dinámico. El vial se cargó con DCM (44 ml, 0,1M) y la solución se enfrió a 0 °C, seguida de la adición gota a gota de DAST (1,46 ml, 11,1 mmol). Se retiró el baño de hielo y se dejó que la solución se calentara gradualmente hasta llegar a rt. La reacción se agitó bajo argón durante 24 horas. Durante el curso de la reacción, se añadieron 2 alícuotas adicionales de DAST (1,46 ml, 11,1 mmol) a las 12 y 17 horas respectivamente para impulsar la conversión (7,5 equivalentes de DAST en total). La reacción se inactivó mediante la adición gota a gota de NaHCO3 sat. ac.. ATENCIÓN: Durante el enfriamiento se produce una rápida evolución del gas co2 . El contenido del vial se transfirió a un embudo de separación con DCM y se diluyó con agua. Las fases se separaron y la fase acuosa se extrajo con 3 porciones de DCM. Los extractos orgánicos combinados se secaron (MgSO4), se filtraron y se concentraron al vacío. El residuo crudo se purificó mediante cromatografía en columna instantánea (40 g de SiO2 , Isco, 100 % de Hept. a 100 % de EtOAc, 20 ml de fracciones) para obtener el compuesto del título n Nn N-5 (1,59 g, 85 %) como una goma de color amarillo pálida. LCMS [M+H-Boc] = 322 observado. 1HRMN (400MHz, CLOROFORMO-d) 8 ppm 7,49 - 7,29 (m, 5H), 6,95 (d, J=5,3 Hz, 1H), 6,89 (t, J=55,1 Hz, 1H), 5,22 - 4,90 (m, 3H), 4,27 - 4,02 (m, 2H), 3,28 - 2,96 (m, 2H), 1,51 (s, 9H), 1,26 (d, J=7,0 Hz, 3H).
Paso 8 : Síntesis del tert-but/7-6-(difluorometM)-5-fluoro-8-hidroxi-4-metN-3,4-dihidroisoqumoMn-2(1H)-carboxilato (TP-48)
A un matraz de fondo redondo de 500 ml, equipado con una barra de agitación magnética y que contenía NNNN-5 (1,65 g, 3,91 mmol), se añadió metanol (78 ml, 0,05M). A la solución se le añadió Pd/C al 10 % en peso (417 mg, 0,391 mmol) y la solución se purgó con gas hidrógeno bajo vacío dinámico. La reacción se agitó vigorosamente bajo 1 atm de hidrógeno durante 1,5 horas. La reacción se filtró sobre Celite, los sólidos se lavaron con DCM y el filtrado se concentró al vacío. El residuo crudo se purificó mediante cromatografía en columna instantánea (24 g de SiO2 , Isco, 100 % de Hept. a 100 % de EtOAc, 20 ml de fracciones) para obtener el compuesto del título TP-48 (1,15 g, 88 %) como una espuma blanca. LCMS [M+H-Boc] = 232 observado. 1HRMN (400MHz, CLOROFORMO-d) 8 ppm 7,00 -6,65 (m, 2H), 5,22 - 4,79 (m, 1H), 4,29 - 3,94 (m, 2H), 3,28 - 2,95 (m, 2H), 1,58 -1,51 (m, 9H), 1,23 (d, J=7,0 Hz, 3H).
Esquema OOOO - Síntesis de tert-but/7-5-/7uoro-8-h/drox/-1-met/7-3,4-dihidroisoqumoMn-2(1H)-carboxNato (TP-49)
Esquema 0 00 0
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Paso 1: Síntesis de 7-(benciloxi)-10-fluoro-1,4a,5,10b-tetrahidro-1,4-metofenantridina-6(4H)-ona (OOOO-1)
A un matraz de fondo redondo, equipado con una barra de agitación magnética, se añadió VVV-4 (2,29 g, 6,63 mmol), pivalato de cesio (3,10 g, 13,3 mmol), [Cp*RhCh]2 (20,5 mg, 0,0332 mmol) y trifluoroetanol (33 ml, 0,2M). El matraz se tapó con un tabique de goma y se añadió norbornadieno (0,74 ml, 7,29 mmol). El matraz se colocó en una manta calefactora y la reacción se calentó a 45 °C durante 40 minutos. El matraz se retiró del bloque de calentamiento y se dejó enfriar a rt. La solución se diluyó con agua seguida de DCM y se separaron las fases. La fase orgánica se lavó con 1 porción de agua, se secó (MgSO4), se filtró y se concentró al vacío. El residuo crudo se secó a alto vacío para obtener el compuesto del título OOOO-1 como un sólido de color naranja que se utilizó en el siguiente paso sin purificación adicional. LCMS [M+H] = 336 observado.
Paso 2: Síntesis de 8-(benciloxi)-5-fluoroisoquinolin-1(2H)-ona (OOOO-2)
A un vial de microondas, equipado con una barra de agitación magnética, se añadió OOOO-1 (-6,63 mmol) como solución en tolueno (15 ml, 0,44m ). El vial se cerró con un tapón de teflón y se colocó en el reactor de microondas. La reacción se calentó a 130 °C durante 1 hora. La solución se transfirió a un matraz de fondo redondo con DCM y se concentró al vacío. El residuo crudo se secó a alto vacío para obtener el compuesto del título OOOO-2 (1,79 g, >95 %) como un sólido marrón que se utilizó en el siguiente paso sin purificación adicional. LCMS [M+H] = 270 observado.
1HRMN (400MHz, DMSO-d6) 8 ppm 11,07 (s. br, 1H), 7,62 (d, J=7,2 Hz, 2H), 7,46 (t, J=9,3 Hz, 1H), 7,39 (t, J=7,5 Hz, 2H), 7,33 - 7,27 (m, 1H), 7,24 - 7,19 (m, 1H), 7,00 (dd, J=4,2, 9,0 Hz, 1H), 6,45 (d, J=7,1 Hz, 1H), 5,20 (s, 2H).
Paso 3: Síntesis de 8-(benciloxi)-1-cloro-5-fluoroisoquinolina (OOOO-3)
A un vial de reacción, equipado con una barra de agitación magnética, se añadió cloruro de benciltrietilamonio (846 mg, 3,71 mmol) y OOOO-2 (500 mg, 1,86 mmol) como solución en acetonitrilo (19 ml, 0,1M). El vial se cerró con un tapón de teflón y se añadió dimetilanilina (0,35 ml, 2,79 mmol) seguida de la adición gota a gota de oxicloruro de fósforo (1,04 ml, 11,1 mmol). El vial se colocó en un bloque térmico y se calentó a 80 °C durante 10 minutos. La solución se concentró y el residuo crudo se transfirió a un embudo separador con DCM y se diluyó con agua. Las fases se separaron y la fase acuosa se extrajo con 2 porciones de DCM. Los extractos orgánicos combinados se secaron (MgSO4), se filtraron y se concentraron al vacío. El residuo crudo se purificó mediante cromatografía en columna instantánea (24 g de SiO2, Isco, 100 % de Hept. a 100 % de EtOAc, 9 ml de fracciones) para obtener el compuesto del título OOOO-3 (465 mg, 87 %) como un sólido de color naranja claro. LCMS [M+H] = 288 observado. 1HRMN (400MHz, CLOROFORMO-d) 8 ppm 8,32 (d, J=5,6 Hz, 1H), 7,78 (d, J=5,6 Hz, 1H), 7,56 (d, J=7,2 Hz, 2H), 7,48 - 7,28 (m, 4H), 6,97 (dd, J=4,3, 8,7 Hz, 1H), 5,27 (s, 2H).
Paso 4: Síntesis de 8-(benciloxi)-5-fluoro-1-metilisoquinolina (OOOO-4)
A un vial de reacción secado en horno, equipado con una barra de agitación magnética y enfriado bajo una corriente de argón, se añadió OOOO-3 (422 mg, 1,47 mmol) y Pd(PPh3)4 (84,7 mg, 0,0733 mmol). El vial se tapó con un septo de goma y se purgó con argón bajo vacío dinámico. Al vial se añadió THF (7,33 ml, 0,2M) seguido de la adición gota a gota de dimetilcinc (2,20 ml, 4,40 mmol). El vial se cerró con un tapón de teflón y se colocó en un bloque de calentamiento. La reacción se sometió a reflujo a 75 °C durante 1 hora. El vial se retiró del bloque de calentamiento y se dejó enfriar a temperatura ambiente. La reacción se inactivó cuidadosamente mediante la adición gota a gota de agua NH4Cl sat. ac.. La solución se transfirió a un embudo separador con DCM. Las fases se separaron y la fase acuosa se extrajo con 3 porciones de DCM. Los extractos orgánicos combinados se lavaron con 1 porción de salmuera, se secaron (MgSO4), se filtraron y se concentraron al vacío. El residuo crudo se purificó mediante cromatografía en columna instantánea (12g SiO2 , Isco, 100 % Hept. a 100 % EtOAc, 9 ml de fracciones) para obtener (356 mg) un sólido de color naranja claro. El material aislado se volvió a someter a cromatografía en columna instantánea (12 g de SiO2, Isco, 100 % de Hept. a 10 % de MeOH/EtOAc, fracciones de 9 ml) para obtener el compuesto del título OOOO-4 (310 mg, 79 %) como un sólido blanco. El sólido aislado se utilizó en el siguiente paso con una pureza del -80 % según el análisis de RMN de 1H. LCMS [M+H] = 268 observado. 1HRMN (400MHz, CLOROFORMO-d) d = 8,43 (d, J=5,7 Hz, 1H), 7,68 (d, J=5,9 Hz, 1H), 7,50 (d, J=7,1 Hz, 2H), 7,47 - 7,39 (m, 3H), 7,22 (t, J=8,9 Hz, 1H), 6 , 8 6 (dd, J=4,3, 8 , 6 Hz, 1H), 5,22 (s, 2H), 3,10 (s, 3H).
Paso 5: Síntesis de 5-fluoro-1-metil-1,2,3,4-tetrahidroisoquinolin-8-ol (OOOO-5)
A un reactor de acero se añadió OOOO-4 (250 mg, 0,935 mmol), PtO2 (42,5 mg, 0,187 mmol), etanol (15 ml) y ácido acético (0,5 ml). La solución se hidrogenó bajo 0,310264 Mpa de gas hidrógeno a rt durante 20 horas. La solución se filtró a través de Celite y los sólidos se lavaron con etanol. El filtrado se concentró al vacío para dar el compuesto del título OOOO-5 (178 mg, >95 %) como un ligero sólido de color amarillo que se utilizó en el siguiente paso sin purificación adicional. 1HRMN (400MHz, METANOL-d4) 5 ppm 6,92 - 6,85 (m, 1H), 6,71 - 6,65 (m, 1H), 4,69 (q, J=6,7 Hz, 1H), 3,51 - 3,37 (m, 2H), 3,06 - 2,84 (m, 2H), 1,62 (d, J=6 , 8 Hz, 3H)
Paso 6 : Síntesis del 5-fluoro-8-hidroxi-1-metil-3,4-dihidroisoquinolin-2(1H)-carboxilato de tert-butilo (TP-49)
A un matraz de fondo redondo, equipado con una barra de agitación magnética y que contenía OOOO-5 (130 mg, 0,717 mmol), se añadió metanol (10 ml, 0,07M), (Boc)2O (157 mg, 0,717 mmol) y trimetilamina (145 mg, 1,43 mmol). La reacción se agitó a 25 °C durante 2,5 horas. La solución se concentró al vacío. El residuo crudo se purificó mediante cromatografía en columna instantánea (20g SiO2 , Isco, 25 % EtOAc/pet ether) para obtener el compuesto del título TP-49 (158 mg, 78 %) como sólido blanco. 1HRMN (400MHz, CLOROFORMO-d) 5 ppm 6,81 -6,69 (m, 1H), 6,55 (dd, J=4,4, 8,7 Hz, 1H), 5,54 - 5,20 (m, 1H), 4,32 - 4,03 (m, 1H), 3,36-3,07 (m, 1H), 2,86 - 2,66 (m, 2H), 1,51 (s, 9H), 1,43 (d, J=6,6 Hz, 3H).
Los Ejemplos 211 - 214 se hicieron de forma sim ilar a los Ejemplos 182 y 183 (Esquema YYY) empezando con la tetrahidroisoquinolina racémica apropiada en el paso 1 y separando los diastereómeros antes de la desprotección final.
Figure imgf000178_0001
Los Ejemplos 215 y 216 se hicieron de forma sim ilar a los Ejemplos 182 y 183 (Esquema YYY) empezando con la tetrahidroisoquinolina racémica apropiada en el paso 1, realizando la am inólisis de forma sim ilar al paso 4 (Esquema NN), y separando los diastereómeros antes de la desprotección final.
Figure imgf000179_0001
Ejemplos biológicos
Procedimientos de ensayo bioquímico
Los compuestos se solubilizaron en DMSO y se diluyeron en serie, utilizando diluciones triples, en 100 % DMSO a una concentración 50 veces mayor que la concentración deseada para el ensayo. Tras la dilución, se añadió 1 ul a una placa de microtitulación de 96 pocillos vacía. El complejo proteico PRMT5/MEP50 se combinó con el péptido H4(1-21) (SGRGKGKGLGKGAKRHRKV) en el tampón de ensayo PRMT5 (50 mM Tris pH 8,5, 50 mM NaCl, 5 mM MgCh, 1 mM EDTA, 1 mM TCEP) y se añadieron 44 ul a la placa de microtitulación que contenía el compuesto. La S-adenosil-L-metionina (SAM) se preparó combinando SAM marcada con 3H con SAM no marcada en el tampón de ensayo PRMT5, de forma que la concentración final de SAM era de 10 uM y la actividad específica era de 0,2 uCi/ul. La reacción se inició añadiendo 5 ul de stock de SAM a la placa de microtitulación. Las condiciones finales de reacción fueron 10 nM de complejo PRMT5/MEP50, 200 nM de péptido y 1 uM de SAM. Tras una incubación de 25 minutos a temperatura ambiente, la reacción se detuvo con la adición de 100 uL de TCA al 20 %. El producto del péptido 3H se capturó utilizando una placa de filtro de 96 pocillos (MSIPN4B, Millipore) y se lavó 5 veces con tampón PBS. Se añadió líquido de centelleo (100 ul) a la placa de filtro seca y se contó en un contador de centelleo líquido. Los valores de IC50 se determinaron ajustando los datos a la ecuación estándar de respuesta a la dosis de 4 parámetros utilizando el software propiedad de Pfizer.
Los resultados del ensayo bioquímico de los Ejemplos se resumen en la Tabla 1, mostrados como valores IC50 en ^M.
Tabla 1
Figure imgf000179_0002
(continuación)
Figure imgf000180_0001
(continuación)
Figure imgf000181_0001
(continuación)
Figure imgf000182_0001
Ensayo de proliferación A549
Las células de adenocarcinoma de pulmón A549 (American Type Culture Collection) se mantuvieron en medio de crecimiento DMEM (Life Technologies) suplementado con 10 % v/v de suero fetal bovino inactivado por calor (Sigma) y se cultivaron a 37 °C, 5 % deCO2. Las células A549 de crecimiento exponencial se sembraron en placas de 96 pocillos tratadas con cultivo de tejidos negros (Corning) a una densidad de 2500 células/ml en un volumen de 100 pl de medio de cultivo y se dejaron adherir durante la noche a 37 °C, 5 % de co2. Al día siguiente, se prepararon placas de compuestos haciendo diluciones de nueve puntos 3,3 veces en DMSO con una concentración máxima de l0 mM. Los compuestos se diluyeron de nuevo en el medio de cultivo y se añadieron 11 pl a las células (la concentración final del ensayo superior fue de 10 pM y el DMSO del 0,2 %). Las células se incubaron con el compuesto a 37 °C, 5 % de CO2 durante 7 días con sustitución de medios y compuesto el día 4. La viabilidad de las células se analizó el día 7 añadiendo 100 pl del reactivo Cell Titer Glo (Promega) a la placa para medir la cantidad de ATP presente en las células. La luminiscencia se leyó utilizando el Envision 2104 Multilabel Reader (Perkin Elmer). La concentración inhibitoria del 50 % (IC50) se determinó utilizando un modelo de ajuste de 4 parámetros normalizado al control de DMSO en respuesta a la dosis.
Los resultados para el ensayo de proliferación de A549 de los Ejemplos se resumen en la Tabla 2, mostrados como valores IC50 en pM.
Tabla 2
Figure imgf000183_0001
(continuación)
Figure imgf000184_0001
Biología Molecular
El gen que codifica el marco de lectura abierta (ORF) de PRMT5 en toda su extensión se fusionó directamente en Ala2 con la secuencia MDYKDDDDKGRAT que codifica la etiqueta Flag (SEQ ID: 1) y el MEP50 de longitud completa sin etiquetar (SEQ ID: 2) fueron optimizados para la expresión en mamíferos y sintetizados por GenScript, Piscataway, NJ. Los genes sintetizados se clonaron en el vector de expresión de células de insecto pFASTBac Dual (Life Technologies) utilizando procedimientos estándar de clonación basados en enzimas de restricción. En el constructo final, el ORF de PRMT5 estaba bajo el control del promotor de la polihedrina (polH), mientras que el ORF de MEP50 estaba bajo el control del promotor p10. Además, MEP50 (SEQ ID: 2) se subclonó en el vector pFASTBac mediante procedimientos de clonación estándar basados en enzimas de restricción.
Expresión de proteínas
Los virus se generaron utilizando los protocolos estándar de generación viral Bac-to-Bac (Life Technologies) y se amplificaron hasta obtener reservas de paso dos (P2) de alta titulación. La sobreexpresión de la proteína se llevó a cabo en células Sf21 de crecimiento exponencial infectadas a 2x106 con reserva viral P2 a MOI = 1 de virus de constructo dual PRMT5-Mep50 y de virus de constructo Mep50 en proporción 1:1. El protocolo de coexpresión se utilizó para complementar el Mep50 adicional para la formación del heterodímero FlagPRMT5-Mep50. Las células fueron recolectadas a las 72h post-infección por centrifugación y la pella congelada se almacenó a -800C.
Purificación de proteínas
El complejo FlagPRMT5-Mep50 se purificó a partir del lisado celular mediante cromatrografía de afinidad con Flag. Las células se lisaron en 50mM de Tris 7,5, 200mM de NaCl, 10 % de glicerol, 0,25mM de TCEP complementado con un cóctel de inhibidores de proteasas sin EDTA (Roche). 1.Se añadieron 5 ml de tampón de lisis por cada 1 g de pella congelada. El lisado clarificado se obtuvo por centrifugación del lisado celular a 10,000 g durante 1 h a 4 C. Se añadieron al lisado clarificado 5 ml de agarosa Anti-FLAG M2 (Sigma) durante 3 h para aislar FlagPRMT5-Mep50. Después de la unión por lotes durante 3 h a 4 C, la resina Flag se unió a FlagPRMT5-Mep50 lavada con 20 volúmenes de columna (CV) de 50mM Tris 7,5, 200mM NaCl, 10 % glicerol, 0,25mM TCEP seguido de la elución del complejo FlagPRMT5-Mep50 utilizando 3 CV de 50mM Tris 7,5, 200mM NaCl, 10 % glicerol, 0,25mM TCEP complementado con 200 ug/ml de péptido FLAG (DYKDDDDK). FlagPRMT5-Mep50 se purificó aún más utilizando la columna S300 26/600 (GE Healthcare) preequilibrada con 2 CV de tampón Tris 25mM pH7,5, NaCl 150mM, glicerol 5 %, TCEP 0,5mM. Las fracciones de pico que contenían el complejo FlagPRMT5-Mep50 se concentraron a 1,6 mg/ml, se congelaron en pequeñas alícuotas con nitrógeno líquido y se almacenaron a -80 0C.

Claims (1)

  1. REIVINDICACIONES
    1. Un compuesto de fórmula (IV):
    Figure imgf000186_0001
    o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en la que:
    cada R1 se selecciona independientemente del grupo que consiste en alquilo (C1-Cs), haloalquilo (C1-Cs), hidroxi, alcoxi (C1-Cs), arilo (C5-C12), heteroarilo de 5-12 miembros, cicloalquilo (C3-C10), heterociclilo de 3-12 miembros, OR4, SR4y N(R4)2;
    R2 es hidrógeno, halógeno, alquilo (C1-Cs), hidroxi, alcoxi (C1-Cs) o N(R5)2 , donde cada R5 es independientemente hidrógeno o alquilo (C1-Cs), o dos R5 se unen para formar un anillo heterocíclico de 4-6 miembros que contiene 1 ­ 3 heteroátomos seleccionados entre N, O y S;
    cada R3 es independientemente hidrógeno, hidroxi o NH2; o cuando D es C(R3)2, R3 se selecciona adicionalmente entre flúor;
    cada R9 es independientemente hidrógeno o flúor;
    D es C(R3)2 , O, o S(O)1-2;
    B es N o C;
    E es NR1, CH2, C (R ^ , O o -S(O)2 ;
    cada Rs está ausente o se selecciona independientemente del grupo que consiste en alquilo (C1-Cs), haloalquilo (C1-Cs), hidroxi, alcoxi (C1-Cs), arilo (C5-C12), heteroarilo de 5-12 miembros, cicloalquilo (C3-C10), heterociclilo de 3-12 miembros, OR4, SR4, N(R4)2, CN, halógeno y CON(R4)2, donde dos Rs se unen opcionalmente para formar un anillo de espirocicloalquilo de 4-6 miembros, un anillo fusionado de cicloalquilo o un puente de alquileno, y donde dos Rs se unen opcionalmente para formar carbonilo;
    cada R4 es independientemente A-R14, donde A está ausente, (C1-C3)alquilo, -C(O)- o -SO2-, y R14 es hidrógeno, alquilo (C1-Cs), arilo (C5-C12), heteroarilo de 5-12 miembros, cicloalquilo (C3-C10) o heterociclilo de 3-12 miembros, o dos R4 se unen para formar un anillo heterocíclico de 4-6 miembros que contiene 1-3 heteroátomos seleccionados entre N, O y S;
    Q está ausente o es una fracción divalente seleccionada entre O, S, NH y (C1-Cs)alquileno;
    V es N o C, donde si V forma un doble enlace V es carbono;
    W es N o C, donde si W forma un doble enlace W es carbono;
    X es N o C, donde si X forma un doble enlace X es carbono;
    Y es CR10, N, NR10, O o S, donde cada R10 se selecciona independientemente entre hidrógeno, alquilo (C1-Cs), hidroxi, alcoxi (C1-Cs), halógeno, SH, S-alquilo (C1-Cs) y N(R11)2 si Y es CR10, donde Y forma un doble enlace con un miembro del anillo adyacente cuando Y es CR10 o N, y donde cada R11 es independientemente hidrógeno, alquilo (C1-Cs), arilo (C5-C12) o heteroarilo de 5-12 miembros o dos R11 se unen para formar un anillo heterocíclico de 4-6 miembros que contiene 1-3 heteroátomos seleccionados entre N, O y S, o Y es C(R10) 2 y los dos R10 y el carbono al que están asociados forman un carbonilo o un tiocarbonilo;
    Z es CR12, N, NR12, O o S, donde cada R12 se selecciona independientemente entre hidrógeno, alquilo (C1-Cs), hidroxi, alcoxi (C1-Cs), fluoro, cloro, bromo, SH, S-alquilo (C1-Cs) y N(R13)2, donde Z forma un doble enlace con un miembro del anillo adyacente si es CR12 o N, donde cada R13 es independientemente hidrógeno, alquilo (C1-Cs), arilo (C5-C12) o heteroarilo de 5-12 miembros, o dos R13 se unen para formar un anillo heterocíclico de 4-6 miembros que contiene 1-3 heteroátomos seleccionados entre N, O y S, y donde Z no es NR12 si X es N, V es C, W es C e Y
    ^ 6
    es CR10, o Z es C(R12) 2 y los dos R12 y el carbono al que están asociados forman un carbonilo o un tiocarbonilo; y
    cada — es un enlace opcional, en el que no puede haber más de dos, no adyacentes — .
    2. Un compuesto según la reivindicación 1 que es de fórmula (III):
    Figure imgf000187_0001
    o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.
    3. El compuesto o la sal farmacéuticamente aceptable del mismo de una cualquiera de las reivindicaciones 1-2, en el que
    Figure imgf000187_0002
    se selecciona de
    Figure imgf000187_0003
    Figure imgf000188_0001
    4. El compuesto o la sal farmacéuticamente aceptable del mismo de la reivindicación 3, en el que
    Figure imgf000188_0002
    se selecciona de
    Figure imgf000188_0003
    5. El compuesto o la sal farmacéuticamente aceptable del mismo de la reivindicación 4, en el que
    Figure imgf000188_0004
    Figure imgf000189_0001
    6. El compuesto o sal farmacéuticamente aceptable del mismo de la reivindicación 2, en el que:
    Figure imgf000189_0002
    se selecciona entre
    Figure imgf000190_0001
    Figure imgf000191_0001
    7. El compuesto o sal farmacéuticamente aceptable del mismo de la reivindicación 6 , en el que:
    Figure imgf000191_0002
    es
    Figure imgf000192_0001
    8. El compuesto o sal farmacéuticamente aceptable del mismo de la reivindicación 7, en el que:
    Figure imgf000192_0002
    es
    Figure imgf000192_0003
    9. Un compuesto según la reivindicación 1 que se selecciona entre
    Figure imgf000193_0001
    Figure imgf000194_0001
    Figure imgf000195_0001
    Figure imgf000196_0001
    Figure imgf000197_0001
    Figure imgf000198_0001
    Figure imgf000199_0001
    Figure imgf000200_0001
    o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.
    10. Un compuesto según la reivindicación 1 seleccionado entre
    Figure imgf000201_0001
    o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.
    11. Un compuesto según la reivindicación 1 seleccionado entre
    Figure imgf000202_0001
    Figure imgf000203_0001
    Figure imgf000204_0001
    Figure imgf000205_0001
    Figure imgf000206_0001
    Figure imgf000207_0001
    Figure imgf000208_0001
    Figure imgf000209_0001
    o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.
    12. Un compuesto de la reivindicación 1 que es (1S,2S,3S,5R)-3-((6-(difluorometil)-5-fluoro-1,2,3,4-tetrahidroisoquinolin-8-il)oxi)-5-(4-metil-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)cidopentano-1,2-diol o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.
    13. Un compuesto de la reivindicación 1 que tiene la estructura
    Figure imgf000210_0001
    14. Un compuesto o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo de una cualquiera de las reivindicaciones 1-13, en el que dicha sal se selecciona entre sales de acetato, aspartato, benzoato, besilato, bicarbonato/carbonato, bisulfato/sulfato, borato camsilato, citrato, edisilato, esilato, formiato, fumarato, glucepato, gluconato, glucuronato, hexafluorofosfato, hibenzato, clorhidrato/cloruro, hidrobromuro/bromuro, hidroyoduro/yoduro, isetionato, lactato, malato, maleato, malonato, mesilato, metilsulfato, naftilato, 2-napsilato, nicotinato, nitrato, orotato, oxalato, palmitato, pamoato, fosfato/fosfato de hidrógeno/fosfato de dihidrógeno, sacarato, estearato, succinato, tartrato, tosilato, trifluoroacetato, aluminio, arginina, benzatina, calcio, colina, dietilamina, diolamina, glicina, lisina, magnesio, meglumina, olamina, potasio, sodio, trometamina y de zinc.
    15. Un compuesto o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo de la reivindicación 14, en el que dicha sal se selecciona entre las sales de clorhidrato, tosilato y mesilato.
    16. Una composición farmacéutica que comprende un compuesto o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 15, y un portador farmacéuticamente aceptable.
    17. Un compuesto o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 15 para su uso en el tratamiento del crecimiento celular anormal en un mamífero.
    18. El compuesto o la sal farmacéuticamente aceptable del mismo para el uso de la reivindicación 17, en el que el crecimiento celular anormal es cáncer.
    19. El compuesto o la sal farmacéuticamente aceptable del mismo para el uso de la reivindicación 18, en el que el cáncer es cáncer de pulmón, cáncer de hueso, cáncer de páncreas, cáncer de piel, cáncer de cabeza o cuello, melanoma cutáneo o intraocular, cáncer de útero, cáncer de ovario, cáncer de recto, cáncer de la región anal, cáncer de estómago, cáncer de colon, cáncer de mama, cáncer uterino, carcinoma de las trompas de Falopio, carcinoma del endometrio, carcinoma del cuello uterino, carcinoma de la vagina, carcinoma de la vulva, enfermedad de Hodgkin, cáncer del esófago, cáncer del intestino delgado, cáncer del sistema endocrino, cáncer de la glándula tiroidea, cáncer de la glándula paratiroidea, cáncer de la glándula adrenal, sarcoma de tejidos blandos, cáncer de la uretra, cáncer del pene, cáncer de próstata, leucemia crónica o aguda, linfomas linfocíticos, cáncer de vejiga, cáncer de riñón o uréter, carcinoma de células renales, carcinoma de pelvis renal, neoplasias del sistema nervioso central (SNC), linfoma primario del SNC, tumores del eje espinal, glioma del tronco cerebral o adenoma pituitario.
    20. El compuesto o la sal farmacéuticamente aceptable del mismo para su uso según la reivindicación 19, en el que el cáncer es cáncer de pulmón, cáncer de cabeza o cuello, cáncer de mama, carcinoma de endometrio, carcinoma de cuello uterino, cáncer de esófago o cáncer de vejiga.
    21. El compuesto o la sal farmacéuticamente aceptable del mismo para su uso según la reivindicación 20, en el que el cáncer es cáncer de pulmón.
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