ES2562010T3

ES2562010T3 - Derivado de purinilpiridinilamino-2,4-difluorofenilsulfonamida, sal farmacéuticamente aceptable del mismo, método de preparación del mismo y composición farmacéutica con actividad inhibidora contra cinasa Raf, que contiene el mismo como ingrediente activo

Info

Publication number: ES2562010T3
Application number: ES11844745.7T
Authority: ES
Inventors: Eun Kyong Shim; Nam Doo Kim; Tae Bo Shim; Seung Yong Kim
Original assignee: Medpacto Inc
Current assignee: Medpacto Inc
Priority date: 2010-12-02
Filing date: 2011-11-25
Publication date: 2016-03-02
Anticipated expiration: 2031-11-25
Also published as: WO2012074249A2; RU2013129993A; US20130317023A1; AU2011337461B2; EP2647637B1; JP5689182B2; AU2011337461A1; WO2012074249A3; RU2550038C2; US9216981B2; PL2647637T3; EP2647637A4; CA2820550A1; KR101364658B1; CN103339132B; JP2013545768A; EP2647637A2; CA2820550C; CN103339132A; KR20120060744A

Abstract

Un nuevo derivado de purinilpiridinilamino-2,4-difluorofenilsulfonamida representado por la Fórmula 1 posterior o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo:**Fórmula** (En la Fórmula 1 anterior, R es alquilo lineal o ramificado C1-C6; cicloalquilo C3-C6 no sustituible o sustituido con uno o más seleccionados del grupo que consiste en halógeno y alquilo lineal o ramificado C1-C6; arilo C5-C6 sustituido con uno o más seleccionados del grupo que consiste en halógeno, alquilo lineal o ramificado C1-C6, y alcoxi lineal o ramificado C1- C6 sustituido con alcoxi lineal o ramificado C1-C6 y halógeno; heteroarilo de anillo sencillo o doble C5-C12 no sustituible o sustituido con uno o más seleccionados del grupo que consiste en alquilo lineal o ramificado C1-C6 sustituido con halógeno, alquilo lineal o ramificado C1-C6, alquiloxicarbonilo lineal o ramificado C1-C6, y heterocicloalquilo C5-C6 que contiene uno o más oxígeno (O) en el anillo; heterocicloalquilo C5-C6 no sustituible o sustituido con uno o más seleccionados del grupo que consiste en halógeno y alquilo lineal o ramificado C1-C6; o aril(C5-C6)-alquilo(lineal o ramificado C1-C6) no sustituible o sustituido con halógeno, nitro y alquilo lineal o ramificado C1-C6; esta vez, el heteroarilo y el heterocicloalquilo contienen uno o más heteroátomos seleccionados del grupo que consiste en N, O y S en el anillo.)

Description

imagen1

imagen2

imagen3

imagen4

imagen5

N-(3-(3-(9H-purin-6-il)piridin-2-ilamino)-2,4-difluorofenil)-2-clorobencenosulfonamida;

(33) N-(3-(3-(9H-purin-6-il)piridin-2-ilamino)-2,4-difluorofenil)-3-clorobencenosulfonamida;

(34) 5 N-(3-(3-(9H-purin-6-il)piridin-2-ilamino)-2,4-difluorofenil)-2,3-clorobencenosulfonamida;

(36) N-(3-(3-(9H-purin-6-il)piridin-2-ilamino)-2,4-difluorofenil)-2,3-dihidrobenzofurano-7-sulfonamida;

(37) N-(3-(3-(9H-purin-6-il)piridin-2-ilamino)-2,4-difluorofenil)benzofurano-7-sulfonamida; 10 (38) N-(3-(3-(9H-purin-6-il)piridin-2-ilamino)-2,4-difluorofenil)cromano-8-sulfonamida;

(39) N-(3-(3-(9H-purin-6-il)piridin-2-ilamino)-2,4-difluorofenil)-2-metilbenzo[d]tiazol-6-sulfonamida;

(40) 15 N-(3-(3-(9H-purin-6-il)piridin-2-ilamino)-2,4-difluorofenil)-1-metil-1H-indol-5-sulfonamida;

(41) N-(3-(3-(9H-purin-6-il)piridin-2-ilamino)-2,4-difluorofenil)-1-metil-1H-indol-4-sulfonamida;

(42) N-(3-(3-(9H-purin-6-il)piridin-2-ilamino)-2,4-difluorofenil)-1-metil-1H-indol-7-sulfonamida; 20 (43) N-(3-(3-(9H-purin-6-il)piridin-2-ilamino)-2,4-difluorofenil)-1-metil-1H-pirazol-4-sulfonamida; y

(44) N-(3-(3-(9H-purin-6-il)piridin-2-ilamino)-2,4-difluorofenil)-5-clorotiofeno-4-sulfonamida.

[Tabla 1]

Fórmula: Estructura Fórmula Estructura

1: imagen6 2 imagen7

3: imagen8 4 imagen9

5: imagen10 6 imagen11

7: imagen12 8 imagen13

9: imagen14 10 imagen15

11: imagen16 12 imagen17

13: imagen18 14 imagen19

15: imagen20 16 imagen21

17: imagen22 18 imagen23

19: imagen24 20 imagen25

21: imagen26 22 imagen27

23: imagen28 24 imagen29

25: imagen30 26 imagen31

27: imagen32 28 imagen33

28: imagen34 30 imagen35

31: imagen36 32 imagen37

33: imagen38 34 imagen39

36: imagen40

37: imagen41 38 imagen42

39: imagen43 40 imagen44

41: imagen45 42 imagen46

43: imagen47 44 imagen48

Los derivados de purinilpiridinilamino-2,4-difluorofenilsulfonamida representados por la Fórmula 1 de la presente invención se pueden usar en una forma de sales farmacéuticamente aceptables, y las sales por adición de ácidos, que se forman mediante un ácido libre farmacéuticamente aceptable, pueden ser útiles para las sales. Sales 5 farmacéuticamente aceptables significa sales por adición orgánicas o inorgánicas del compuesto de base de Fórmula 1, cuya concentración es relativamente atóxica e inocua para un paciente y se activa eficazmente y cuyos efectos secundarios no debilitan la eficacia del compuesto de base de Fórmula 1. Se pueden usar ácidos inorgánicos y orgánicos como ácido libre para las sales. Como el ácido inorgánico, se pueden usar los siguientes ácidos – ácido clorhídrico, ácido brómico, ácido nítrico, ácido sulfúrico, ácido perclórico, ácido fosfórico, etc. Como el 10 ácido orgánico, se pueden usar los siguientes ácidos -ácido cítrico, ácido acético, ácido láctico, ácido maleico, ácido fumárico, ácido glucónico, ácido metanosulfónico, ácido glicólico, ácido succínico, ácido tartárico, ácido galacturónico, ácido embónico, ácido glutámico, ácido aspártico, ácido oxálico, ácido málico (D) o (L), ácido maleico, ácido metanosulfónico, ácido etanosulfónico, ácido 4-toluenosulfónico, ácido salicílico, ácido cítrico, ácido benzoico o ácido malónico. Además, las sales contienen sales de metales alcalinos (sales sódicas, sales potásicas, etc.) y sales 15 de metales alcalinotérreos (sales cálcicas, sales magnésicas, etc.). Por ejemplo, las siguientes se pueden incluir como las sales por adición de ácido: sal de acetato, aspartato, benzoato, besilato, bicarbonato/carbonato, bisulfato/sulfato, borato, camsilato, citrato, edisilato, esilato, formiato, fumarato, gluceptato, gluconato, glucuronato, hexafluorofosfato, hibenzato, hidrocloruro/cloruro, hidrobromuro/bromuro, hidroyoduro/yoduro, isetionato, lactato, malato, maleato, malonato, mesilato, metilsulfato, naftilato, 2-napsilato, nicotinato, nitrato, orotato, oxalato, palmitato,

pamoato, fosfato/hidrogenofosfato/dihidrogenofosfato, sacarato, estearato, succinato, tartrato, tosilato, trifluoroacetato, aluminio, arginina, benzatina, calcio, colina, dietilamina, diolamina, glicina, lisina, magnesio, meglumina, olamina, potasio, sodio, trometamina, cinc, etc. Entre las mencionadas anteriormente, es preferible el hidrocloruro o el trifluoroacetato.

5 Además, los derivados de purinilpiridinilamino-2,4-difluorofenilsulfonamida representados por la Fórmula 1 de la presente invención contienen todas las sales, isómeros, hidratos y solvatos que se pueden preparar mediante un método convencional, así como las sales farmacéuticamente aceptables.

Las sales por adición según la presente invención se pueden preparar mediante un método convencional. Por ejemplo, las sales se pueden preparar disolviendo el compuesto de Fórmula 1 en disolventes orgánicos miscibles

10 con agua tales como acetona, metanol, etanol o acetonitrilo, y aplicando una gran cantidad de ácido orgánico o aplicando solución ácida de ácido inorgánico, precipitando o cristalizando, y evaporando el disolvente de la mezcla anterior o la gran cantidad de ácido, y a continuación secando o absorbiendo y filtrando las sales precipitadas.

Como se muestra en la Fórmula de Reacción 1 posterior, la presente invención proporciona un método para preparar el derivado de purinilpiridinilamino-2,4-difluorofenilsulfonamida presentado en la reivindicación 1, que

15 incluye la etapa de hacer reaccionar el compuesto de Fórmula 2 con el compuesto de Fórmula 3 en una base y un disolvente para obtener el compuesto de Fórmula 1.

[Fórmula de Reacción 1]

imagen49

(En la Fórmula de Reacción 1 anterior, R es igual a como se define en la Fórmula 1.)

20 Para el método de preparación de la presente invención, la base es (bistrimetilsilil)amida de litio y se puede usar tetrahidrofurano como el disolvente.

Para especificar, el derivado de purinilpiridinilamino-2,4-difluorofenilsulfonamida de Fórmula 1 se puede preparar añadiendo y disolviendo el compuesto de Fórmula 2 y el compuesto de Fórmula 3 en tetrahidrofurano como el disolvente y aplicando (bistrimetilsilil)amida de litio como la base lentamente a 0ºC, y a continuación agitando a

25 temperatura ambiente durante 1 hora.

Como se muestra en la Fórmula de Reacción 2 posteriormente, la presente invención proporciona un método para preparar el derivado de purinilpiridinilamino-2,4-difluorofenilsulfonamida presentado en la reivindicación 1, que incluye la etapa de hacer reaccionar el compuesto de Fórmula 4 con el compuesto sulfonílico de Fórmula 5 en una base y disolvente para obtener el compuesto de Fórmula 1.

30 [Fórmula de Reacción 2]

imagen50

imagen51

imagen52

imagen53

imagen54

5

10

15

25

30

35

el reaccionante a temperatura ambiente durante 1 hora, completar la reacción, verter agua y extraer con acetato de etilo, la capa orgánica se lavó con sulfato magnésico y se concentró a vacío y a continuación se refinó por medio de cromatografía en columna, de modo que se obtuvieron 25 mg del compuesto buscado, N-(2,4-difluoro-3-(3-9(tetrahidro-2H-piran-2-il)-9H-purin-6-il)piridin-2-ilamino)fenil)propano-2-sulfonamida (rendimiento porcentual: 75%).

1H NMR (400 MHz, CDCl3): ∂ 11,63 (s a, 1H),9,67 (dd, J = 8,0, 2,0 Hz, 1H), 9,03 (s, 1H), 8,38 (s,1H), 8,26 (dd, J = 4,8, 2,0 Hz, 1H), 7,46 (m, 1H), 7,01 (m, 2H), 6,41 (s a, 1H), 5,91 (dd, J =10,8, 2,4 Hz, 1H), 4,24 (m, 1H), 3,85 (m, 1H), 3,32 (m, 1H), 2,24-1,71 (m, 6H),1,44 (d, J = 6,8 Hz, 6H).

Etapa 9: Preparación de N-(3-(3-(9H-purin-6-il)piridin-2-ilamino)-2,4-difluorofenil)propano-2-sulfonamida

Se añadió solución acuosa de ácido clorhídrico 1 M a la N-(2,4-difluoro-3-(3-9-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-9H-purin-6il)piridin-2-ilamino)fenil)propano-2-sulfonamida (20 mg, 0,038 mmol) preparada en la Etapa 8 y se agitaron durante 2 horas. Después de la reacción, el reaccionante se lavó con una solución acuosa de hidrogenocarbonato sódico y agua salada. Después de la extracción con acetato de etilo, la capa orgánica se lavó con sulfato magnésico y se concentró a vacío y a continuación se refinó por medio de cromatografía en columna, de modo que se obtuvieron 15 mg del compuesto buscado, N-(3-(3-(9H-purin-6-il)piridin-2-ilamino)-2,4-difluorofenil)propano-2-sulfonamida (rendimiento porcentual: 92%).

1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): ∂ 11,54 (s a, 1H), 9,03 (s, 1H), 8,55 (s, 1H), 8,16 (dd, J = 4,8, 1,6 Hz, 1H), 7,45 (td, J = 8,8, 5,6 Hz, 1H), 7,05 (m, 2H), 3,31 (m, 1H), 1,44 (d, J = 6,8 Hz, 6H).

<Ejemplo 2> Preparación de N-(3-(3-(9H-purin-6-il)piridin-2-ilamino)-2,4-difluorofenil)-3(trifluorometil)bencenosulfonamida

imagen55

Etapa 1 a Etapa 3: Preparación de 3-amino-2,6-difluorofenilcarbamato de terc-butilo

Se realizó el mismo método que se indica en las Etapas 1 a 3 del Ejemplo 1 y se obtuvo el compuesto buscado, 3amino-2,6-difluorofenilcarbamato de terc-butilo.

Etapa 4: Preparación de terc-butil(2,4-difluoro-1,3-fenilen)dicarbamato de bencilo

El 2,6-difluoro-3-nitrofenilcarbamato de terc-butilo (305 mg, 1,25 mmol) preparado en la Etapa 3, diisopropiletilamina (371 µl, 2,13 mmol) y cloroformiato de bencilo (194 µl, 1,38 mmol) se añadieron a diclorometano como disolvente y se agitaron a temperatura ambiente durante 5 horas. Después de la reacción, el reaccionante se lavó con agua y agua salada. Después de la extracción con acetato de etilo, la capa orgánica se lavó con sulfato magnésico y se concentró a través de filtración a vacío, y los residuos se refinaron por medio de cromatografía en columna, de modo que se obtuvieron 402 mg del compuesto buscado, terc-butil(2,4-difluoro-1,3-fenilen)dicarbamato de bencilo (rendimiento porcentual: 85%).

1H NMR (400 MHz, CDCl3): ∂ 7,94 (s a, 1H), 7,39 (m, SH), 6,93 (td, J = 9,2, 1,6 Hz, 1H), 6,82 (s a, 1H), 5,98 (s a, 1H), 5,23 (s, 2H), 1,52 (s, 9H).

Etapa 5: Preparación de 3-amino-2,4-difluorofenilcarbamato de bencilo

El terc-butil(2,4-difluoro-1,3-fenilen)dicarbamato de bencilo (400 mg, 1,06 mmol) preparado en la Etapa 4 se añadió a acetato de etilo como disolvente, se aplicó cloruro de hidrógeno (solución 4 M en 1,4-dioxano) y se agitaron a temperatura ambiente durante 5 horas. Después de la reacción, el disolvente se concentró y se filtró a vacío, y el sólido restante se lavó con éter dietílico y hexano y se secó, de modo que se obtuvieron 276 mg del compuesto buscado, 3-amino-2,4-difluorofenilcarbamato (rendimiento porcentual: 94%).

5

10

15

20

25

30

35

40

45

1H NMR (400 MHz, CDCl3): ∂ 7,40 (m, 6H), 6,80 (dd, J = 9,6, 2,0 Hz, 1H), 6,74 (s a, 1H), 5,23 (s, 2H), 3,76 (s a, 2H).

Etapa 6 y Etapa 7: Preparación de 6-(2-fluoropiridin-3-il)-9-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-9H-purina

Se realizó el mismo método que se indica en las Etapas 6 y 7 del Ejemplo 1 y se obtuvo el compuesto buscado, 6(2-fluoropiridin-3-il)-9-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-9H-purina.

Etapa 8: Preparación de 2,4-difluoro-3-(3-(9-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-9H-purin-6-il)piridin-2-ilamino)fenilcarbamato de bencilo

El 3-amino-2,4-difluorofenilcarbamato de bencilo (100 mg, 0,32 mmol) preparado en la Etapa 5 y la 6-(2-fluoropiridin3-il)-9-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-9H-purina (86 mg, 0,29 mmol) preparada en la Etapa 7 se añadieron y se disolvieron, y se aplicó lentamente a 0ºC (bistrimetilsilil)amida de litio (solución 1,0 M en THF). Después de agitar el reaccionante a temperatura ambiente durante 1 hora, completar la reacción, verter agua y extraer con acetato de etilo, la capa orgánica se lavó con sulfato magnésico y se concentró a vacío y a continuación se refinó por medio de cromatografía en columna, de modo que se obtuvieron 128 mg del compuesto buscado, 2,4-difluoro-3-(3-(9(tetrahidro-2H-piran-2-il)-9H-purin-6-il)piridin-2-ilamino)fenilcarbamato de bencilo (rendimiento porcentual: 80%).

1H NMR (400 MHz, CDCl3): ∂ 11,57 (s,1H), 9,66 (dd, J = 8,0,2,0 Hz,1H), 9,02 (s,1H), 8,39 (s,1H), 8,28 (dd, J = 4,4, 1,6 Hz, 1H), 7,92 (s a,1H), 7,40 (m, 5H), 6,98 (m, 3H), 5,89 (dd, J = 10,4, 2,4 Hz, 1H), 5,24 (s, 2H), 4,22 (m, 1H), 3,84 (m, 1H), 2,23-1,68 (m, 6H) .

Etapa. 9: Preparación de 2,6-difluoro-N1-(3-(9-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-9H-purin-6-il)piridin-2-il)benceno-1,3-diamina

Después de disolver el 2,4-difluoro-3-(3-(9-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-9H-purin-6-il)piridin-2-ilamino)fenilcarbamato de bencilo (100 mg, 0,18 mmol) preparado en la Etapa 2 en metanol como disolvente, se añadió paladio-carbono (100 mg, 0,18 mmol) y se agitaron bajo presión de hidrógeno durante 1 hora. Después de completar la reacción, filtrar a través de celita, concentrar a vacío y refinar por medio de cromatografía en columna, se obtuvieron 51 mg del compuesto buscado, 2,6-difluoro-N1-(3-(9-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-9H-purin-6-il)piridin-2-il)benceno-1,3-diamina (rendimiento porcentual: 67%).

1H NMR (400 MHz, CDCl3): ∂ 11,49 (s, 1H), 9,63 (dd, J = 7,6, 1,6 Hz, 1H), 9,01 (s, 1H), 8,37 (s, 1H), 8,30 (dd, J = 4,8, 1,6 Hz, 1H), 6,92 (m, 1H), 6,82 (td, J = 9,2, 2,0 Hz, 1H), 6,60 (td, J = 9,2, 5,2 Hz, 1H), 5,88 (dd, J = 10,4, 2,4 Hz, 1H), 4,23 (m, 1H), 3,83 (m, 1H), 3,49 (s a, 2H), 2,22-1,69 (m, 6H).

Etapa. 10 : Preparación de N-(2,4-difluoro-3-(3-(9-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-9H-purin-6-il)piridin-2-ilamino)fenil)-3(trifluorometil)bencenosulfonamida

La 2,6-difluoro-N1-(3-(9-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-9H-purin-6-il)piridin-2-il)benceno-1,3-diamina (20 mg, 0,047 mmol) preparada en la Etapa 9 se añadió y se disolvió en diclorometano como disolvente. Se añadieron cloruro de 3(trifluorometil)bencenosulfonilo (8 µl, 0,052 mmol) y piridina (8 µl, 0,094 mmol) a la solución de reacción y se agitaron a 50ºC durante 2 horas. Después de la reacción, el reaccionante se lavó con solución acuosa de ácido clorhídrico 1 N y agua salada. Después de la extracción con diclorometano, la capa orgánica se lavó con sulfato magnésico y se concentró a vacío y a continuación se refinó por medio de cromatografía en columna, de modo que se obtuvieron 16 mg del compuesto buscado, N-(2,4-difluoro-3-(3-(9-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-9H-purin-6-il)piridin-2-ilamino)fenil)-3(trifluorometil)bencenosulfonamida (rendimiento porcentual: 54%).

1H NMR (400 MHz, CDCl3): ∂ 11,53 (8, 1H), 9,63 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 8,98 (s, 1H), 8,39 (s, 1H), 8,16 (d, J = 4,8 Hz, 1H), 8,04 (s, 1H), 7,95 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,82 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,62 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,37 (m, 1H), 7,10 (s a, 1H), 7,01 (t, J = 9,2 Hz, 1H), 7,95 (dd, J = 6,8, 4,8 Hz, 1H), 5,89 (d, J = 10,4 Hz, 1H), 4,24 (d, J = 10,4 Hz, 1H), 3,85 (m, 1H), 2,23-1,71 (m, 6H).

Etapa 11: Preparación de N-(3-(3-(9H-purin-6-il)piridin-2-ilamino)-2,4-difluorofenil)-3(trifluorometil)bencenosulfonamida

Se añadió solución acuosa de ácido clorhídrico 1 M a la N-(2,4-difluoro-3-(3-(9-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-9H-purin-6il)piridin-2-ilamino)fenil)-3-(trifluorometil)bencenosulfonamida (26 mg, 0,040 mmol) preparada en la Etapa 10 y se agitaron durante 2 horas. Después de la reacción, el reaccionante se lavó con una solución acuosa de hidrogenocarbonato sódico y agua salada. Después de la extracción con acetato de etilo, la capa orgánica se lavó con sulfato magnésico y se concentró a vacío y a continuación se refinó por medio de cromatografía en columna, de modo que se obtuvieron 21 mg del compuesto buscado, N-(3-(3-(9H-purin-6-il)piridin-2-ilamino)-2,4-difluorofenil)-3(trifluorometil)bencenosulfonamida (rendimiento porcentual: 95%).

imagen56

imagen57

5

10

15

20

25

Etapa 1 a Etapa 9: Preparación de 2,6-difluoro-N1-(3-(9-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-9H-purin-6-il)piridin-2-il)benceno1,3-diamina

Se realizó el mismo método que se indica en las Etapas 1 a 9 del Ejemplo 2 y se obtuvo el compuesto buscado, 2,6difluoro-N1-(3-(9-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-9H-purin-6-il)piridin-2-il)benceno-1,3-diamina.

Etapa 10: Preparación de N-(2,4-difluoro-3-(3-(9-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-9H-purin-6-il)piridin-2ilamino)fenil)propano-1-sulfonamida

La 2,6-difluoro-N1-(3-(9-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-9H-purin-6-il)piridin-2-il)benceno-1,3-diamina (20 mg, 0,047 mmol) preparada en la Etapa 9 se añadió y se disolvió en diclorometano como disolvente. Se añadieron a la solución de reacción cloruro de 1-propanosulfonilo (6 µl, 0,052 mmol) y piridina (8 µl, 0,094 mmol) y se agitaron a 50°C durante 2 horas. Después de la reacción, el reaccionante se lavó con solución acuosa de ácido clorhídrico 1 N y agua salada. Después de la extracción con diclorometano, la capa orgánica se lavó con sulfato magnésico y se concentró a vacío, y a continuación se refinó por medio de cromatografía en columna, de modo que se obtuvieron 23 mg del compuesto buscado, N-(2,4-difluoro-3-(3-(9-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-9H-purin-6-il)piridin-2-ilamino)fenil)propano-1-sulfonamida (rendimiento porcentual: 94%).

1H NMR (400 MHz, CDCl3): ∂ 11,65 (s,1H), 9,67 (dd, J= 8,0, 1,6 Hz, 1H), 9,04 (s, 1H), 8,41 (s, 1H), 8,27 (dd, J = 4,8, 1,6 Hz, 1H), 7,43 (m,1H), 7,01 (m, 2H), 6,46 (s,1H), 5,91 (dd, J = 0,8, 2,0 Hz, 1H), 4,24 (m, 1H), 3,85 (m, 1H), 3,11 (m, 2H), 2,41-1,71 (m, 8H), 1,07 (t, J = 7,2 Hz, 3H) .

Etapa 11: Preparación de N-(3-(3-(9H-purin-6-il)piridin-2-ilamino)-2,4-difluorofenil)propano-1-sulfonamida

Se añadió solución acuosa de ácido clorhídrico 1 M a la N-(2,4-difluoro-3-(3-(9-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-9H-purin-6il)piridin-2-ilamino)fenil)propano-1-sulfonamida (20 mg, 0,038 mmol) preparada en la Etapa 10 y se agitaron durante 2 horas. Después de la reacción, el reaccionante se lavó con una solución acuosa de hidrogenocarbonato sódico y agua salada. Después de la extracción con acetato de etilo, la capa orgánica se lavó con sulfato magnésico y se concentró a vacío y a continuación se refinó por medio de cromatografía en columna, de modo que se obtuvieron 15 mg del compuesto buscado, N-(3-(3-(9H-purin-6-il)piridin-2-ilamino)-2,4-difluorofenil)propano-1-sulfonamida (rendimiento porcentual: 88%).

1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): ∂ 11,48 (s a, 1H), 9,67 (s a, 1H), 9,03 (s, 1H), 8,55 (s, 1H), 8,17 (dd, J = 4,8, 1,6 Hz, 1H), 7,42 (td, J = 8,8,5,6 Hz, 1H), 7,07 (m, 2H), 3,12 (m, 2H), 1,89 (m, 2H), 1,07 (t, J = 7,2 Hz, 3H).

<Ejemplo 6> Preparación de N-(3-(3-(9H-purin-6-il)piridin-2-ilamino)-2,4-difluorofenil)-3,4-diclorobencenosulfonamida

imagen58

1,3-diamina

Se realizó el mismo método que se indica en las Etapas 1 a 9 del Ejemplo 2 y se obtuvo el compuesto buscado, 2,6difluoro-N1-(3-(9-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-9H-purin-6-il)piridin-2-il)benceno-1,3-diamina. Etapa 10: Preparación de 3,4-dicloro-N-(2,4-difluoro-3-(3-(9-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-9H-purin-6-il)piridin-2

ilamino)fenil)bencenosulfonamida

La 2,6-difluoro-N1-(3-(9-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-9H-purin-6-il)piridin-2-il)benceno-1,3-diamina (20 mg, 0,047 mmol) preparada en la Etapa 9 se añadió y se disolvió en diclorometano como disolvente. Se añadieron cloruro de 3,4-diclorobencenosulfonilo (17 mg, 0,07 mmol) y piridina (8 µl, 0,094 mmol) a la solución de

imagen59

imagen60

imagen61

imagen62

<Ejemplo 11> Preparación de N-(3-(3-(9H-purin-6-il)piridin-2-ilamino)-2,4-difluorofenil)ciclohexanosulfonamida

imagen63

5 Se realizó el mismo método que se indica en las Etapas 1 a 9 del Ejemplo 2 y se obtuvo el compuesto buscado, 2,6difluoro-N1-(3-(9-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-9H-purin-6-il)piridin-2-il)benceno-1,3-diamina.

Etapa 10: Preparación de N-(2,4-difluoro-3-(3-(9-(tetrahidro-2H-piran-2-il)9H-purin-6-il)piridin-2ilamino)fenil)ciclohexanosulfonamida

La 2,6-difluoro-N1-(3-(9-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-9H-purin-6-il)piridin-2-il)benceno-1,3-diamina (20 mg, 0,047 mmol)

10 preparada en la Etapa 9 se añadió y se disolvió en diclorometano como disolvente. Se añadieron cloruro de ciclohexanosulfonilo (10 mg, 0,052 mmol) y piridina (8 µl, 0,094 mmol) a la solución de reacción y se agitaron a 50ºC durante 2 horas. Después de la reacción, el reaccionante se lavó con solución acuosa de ácido clorhídrico 1 N agua salada. Después de la extracción con diclorometano, la capa orgánica se lavó con sulfato magnésico y se concentró a vacío y a continuación se refinó por medio de cromatografía en columna, de modo que se obtuvieron 24 mg del

15 compuesto buscado, N-(2,4-difluoro-3-(3-(9-(tetrahidro-2H-piran-2-il)9H-purin-6-il)piridin-2ilamino)fenil)ciclohexanosulfonamida (rendimiento porcentual: 91%).

1H NMR (400 MHz, CDCl3): ∂ 11,63 (s, 1H), 9,67 (dd, J = 8,0,2,0 Hz, 1H), 9,04 (s, 1H), 8,40 (s, 1H), 8,26 (dd, J = 4,8, 2,0 Hz, 1H), 7,45 (m, 1H), 6,99 (m, 2H), 6,46 (s, 1H), 5,90 (dd, J = 10,4, 2,4 Hz, 1H), 4,24 (m, 1H), 3,85 (m, 1H), 3,02 (m, 1H), 2,23-1,23 (m, 16H).

20 Etapa 11: Preparación de N-(3-(3-(9H-purin-6-il)piridin-2-ilamino)-2,4-difluorofenil)ciclohexanosulfonamida

Se añadió solución acuosa de ácido clorhídrico 1 M a la N-(2,4-difluoro-3-(3-(9-(tetrahidro-2H-piran-2-il)9H-purin-6il)piridin-2-ilamino)fenil)ciclohexanosulfonamida (20 mg, 0,035 mmol) preparada en la Etapa 10 y se agitaron durante 2 horas. Después de la reacción, el reaccionante se lavó con una solución acuosa de hidrogenocarbonato sódico y agua salada. Después de la extracción con acetato de etilo, la capa orgánica se lavó con sulfato magnésico y se

25 concentró a vacío y a continuación se refinó por medio de cromatografía en columna, de modo que se obtuvieron 15 mg del compuesto buscado, N-(3-(3-(9H-purin-6-il)piridin-2-ilamino)-2,4-difluorofenil)ciclohexanosulfonamida (rendimiento porcentual 90%).

1H NMR (400 MHz, MeOD): ∂ 11,50 (s a, 1H), 9,60 (s, 1H), 9,03 (s, 1H), 8,55 (s, 1H), 8,18 (dd, J = 4,8,2,0 Hz, 1H), 7,43 (m, 1H), 7,05 (m, 2H), 3,05 (m, 1H), 2,23 (m, 2H), 1,89 (m, 2H), 1,77-1,18 (m, 6H).

30

5

10

15

20

25

30

imagen64

<Ejemplo 12> Preparación de N-(3-(3-(9H-purin-6-il)piridin-2-ilamino)-2,4-difluorofenil)-4(trifluorometoxi)bencenosulfonamida

Etapa 10: Preparación de N-(2,4-difluoro-3-(3-(9-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-9H-purin-6-il)piridin-2-ilamino)fenil)-4(trifluorometoxi)bencenosulfonamida

La 2,6-difluoro-N1-(3-(9-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-9H-purin-6-il)piridin-2-il)benceno-1,3-diamina (20 mg, 0,047 mmol) preparada en la Etapa 9 se añadió y se disolvió en diclorometano como disolvente.

Se añadieron cloruro de 4-(trifluorometoxi)bencenosulfonilo (18 mg, 0,07 mmol) y piridina (8 µl, 0,094 mmol) a la solución de reacción y se agitaron a 50ºC durante 2 horas. Después de la reacción, el reaccionante se lavó con solución acuosa de ácido clorhídrico 1 N y agua salada. Después de la extracción con diclorometano, la capa orgánica se lavó con sulfato magnésico y se concentró a vacío y a continuación se refinó por medio de cromatografía en columna, de modo que se obtuvieron 26 mg del compuesto buscado, N-(2,4-difluoro-3-(3-(9(tetrahidro-2H-piran-2-il)-9H-purin-6-il)piridin-2-ilamino)fenil)-4-(trifluorometoxi)bencenosulfonamida (rendimiento porcentual: 87%).

1H NMR (400 MHz,CDCl3): ∂ 11,51 (s,1H), 9,62 (dd, J 8,0, 1,6 Hz, 1H), 8,98 (s, 1H), 8,39 (s, 1H), 8,17 (dd, J = 4,8, 2,0 Hz, 1H), 7,84 (m, 2H), 7,40 (m, 1H), 7,29 (m, 2H), 6,97 (m,3H), 5,89 (dd, J = 10,4, 2,0 Hz, 1H), 4,23 (m, 1H), 3,85 (m,1H), 2,23-1,71 (m,6H) .

Etapa 11: Preparación de N-(3-(3-(9H-purin-6-il)piridin-2-ilamino)-2,4-difluorofenil)-4(trifluorometoxi)bencenosulfonamida

Se añadió solución acuosa de ácido clorhídrico 1 M a la N-(2,4-difluoro-3-(3-(9-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-9H-purin-6il)piridin-2-ilamino)fenil)-4-(trifluorometoxi)bencenosulfonamida (20 mg, 0,031 mmol) preparada en la Etapa 10 y se agitaron durante 2 horas. Después de la reacción, el reaccionante se lavó con una solución acuosa de hidrogenocarbonato sódico y agua salada. Después de la extracción con acetato de etilo, la capa orgánica se lavó con sulfato magnésico y se concentró a vacío y a continuación se refinó por medio de cromatografía en columna, de modo que se obtuvieron 16 mg del compuesto buscado, N-(3-(3-(9H-purin-6-il)piridin-2-ilamino)-2,4-difluorofenil)-4(trifluorometoxi)bencenosulfonamida (rendimiento porcentual: 89%).

1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): ∂ 11,43 (s a, 1H), 9,63 (m, 1H), 8,98 (s, 1H), 8,71 (s, 1H), 8,13 (dd, J = 4,8, 2,0 Hz, 1H), 7,85 (d, J = 8,4 Hz, 2H), 7,57 (d, J = 8,4 Hz, 2H), 7,13 (m, 2H), 7,02 (m, 1H).

imagen65

imagen66

imagen67

imagen68

imagen69

5

10

15

20

25

30

35

40

1,3-diamina

Etapa 10 : Preparación de N-(2,4-difluoro-3-(3-(9-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-9H-purin-6-il)piridin-2-ilamino)fenil)furano3-sulfonamida

La 2,6-difluoro-N1-(3-(9-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-9H-purin-6-il)piridin-2-il)benceno-1,3-diamina (20 mg, 0,047 mmol) preparada en la Etapa 9 se añadió y se disolvió en diclorometano como disolvente. Se añadieron cloruro de furano3-sulfonilo (12 mg, 0,07 mmol) y piridina (8 µl, 0,094 mmol) a la solución de reacción y se agitaron a 50ºC durante 2 horas. Después de la reacción, el reaccionante se lavó con solución acuosa de ácido clorhídrico 1 N y agua salada. Después de la extracción con diclorometano, la capa orgánica se lavó con sulfato magnésico y se concentró a vacío y a continuación se refinó por medio de cromatografía en columna, de modo que se obtuvieron 23 mg del compuesto buscado, N-(2,4-difluoro-3-(3-(9-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-9H-purin-6-il)piridin-2-ilamino)fenil)furano-3-sulfonamida (rendimiento porcentual: 89%).

1H NMR (400 MHz, CDCl3): ∂ 11,53 (s, 1H), 9,62 (dd, J = 8,0, 1,6 Hz, 1H), 8,99 (s,1H), 8,38 (s,1H), 8,22 (dd, J = 4,8, 2,0 Hz, 1H), 7,86 (s, 1H), 7,40 (m, 2H), 6,97 (m, 2H), 6,77 (s, 1H), 6,57 (s, 1H), 5,88 (dd, J = 10,4, 2,4 Hz, 1H), 4,21 (m,1H), 3,83 (m, 1H), 2,21-1,66 (m, 6H).

Etapa 11: Preparación de N-(3-(3-(9H-purin-6-il)piridin-2-ilamino)-2,4-difluorofenil)furano-3-sulfonamida

Se añadió solución acuosa de ácido clorhídrico 1 M a la N-(2,4-difluoro-3-(3-(9-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-9H-purin-6il)piridin-2-ilamino)fenil)furano-3-sulfonamida (20 mg, 0,036 mmol) preparada en la Etapa 10 y se agitaron durante 2 horas. Después de la reacción, el reaccionante se lavó con una solución acuosa de hidrogenocarbonato sódico y agua salada. Después de la extracción con acetato de etilo, la capa orgánica se lavó con sulfato magnésico y se concentró a vacío y a continuación se refinó por medio de cromatografía en columna, de modo que se obtuvieron 16 mg del compuesto buscado, N-(3-(3-(9H-purin-6-il)piridin-2-ilamino)-2,4-difluorofenil)furano-3-sulfonamida (rendimiento porcentual: 92%).

1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): ∂ 11,49 (s a, 1H), 9,61 (m, 1H), 8,98 (s, 1H), 8,66 (s, 1H), 8,17 (m, 2H), 7,79 (m, 1H), 7,08 (s, 4 H), 6,64 (s, 1H).

<Ejemplo 19> Preparación de N-(3-(3-(9H-purin-6-il)piridin-2-ilamino)-2,4-difluorofenil)ciclopropanosulfonamida

imagen70

Etapa 10: Preparación de N-(2,4-difluoro-3-(3-(9-(tetrahidro-2H-piran-2-il)9H-purin-6-il)piridin-2ilamino)fenil)ciclopropanosulfonamida

La 2,6-difluoro-N1-(3-(9-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-9H-purin-6-il)piridin-2-il)benceno-1,3-diamina (20 mg, 0,047 mmol) preparada en la Etapa 9 se añadió y se disolvió en diclorometano como disolvente. Se añadieron cloruro de ciclopropanosulfonilo (10 mg, 0,052 mmol) y piridina (8 µl, 0,094 mmol) a la solución de reacción y se agitaron a 50ºC durante 2 horas. Después de la reacción, el reaccionante se lavó con solución acuosa de ácido clorhídrico 1 N y agua salada. Después de la extracción con diclorometano, la capa orgánica se lavó con sulfato magnésico y se concentró a vacío y a continuación se refinó por medio de cromatografía en columna, de modo que se obtuvieron 24

imagen71

imagen72

imagen73

5

10

15

20

25

30

35

40

1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): ∂ 11,37 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 9,97 (s, 1H), 9,60 (s, 1H), 9,09 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 8,97 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 8,20 (s, 1H), 7,77 (dd, J = 21,2, 6,4 Hz, 2H), 7,21 (m, 1H), 7,06 (m, 2H), 5,88 (m, 1H), 4,15 (m, 1H), 3,91 (m, 1H), 3,67 (s, 1H), 2,35-1,12 (m, 6H).

Etapa 9 : Preparación de N-(3-(3-(9H-purin-6-il)piridin-2-ilamino)-2,4-difluorofenil)-1-metil-1H-imidazol-4-sulfonamida

Se añadió solución acuosa de ácido clorhídrico 1 M a la N-(2,4-difluoro-3-(3-(9-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-9H-purin-6il)piridin-2-ilamino)fenil)-1-metil-1H-imidazol-4-sulfonamida (15 mg, 0,026 mmol) preparada en la Etapa 8 y se agitaron durante 2 horas. Después de la reacción, el reaccionante se lavó con una solución acuosa de hidrogenocarbonato sódico y agua salada. Después de la extracción con acetato de etilo, la capa orgánica se lavó con sulfato magnésico y se concentró a vacío y a continuación se refinó por medio de cromatografía en columna, de modo que se obtuvieron 11 mg del compuesto buscado, N-(3-(3-(9H-purin-6-il)piridin-2-ilamino)-2,4-difluorofenil)-Imetil-1H-imidazol-4-sulfonamida (rendimiento porcentual: 88%).

1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): ∂ 11,52 (s a, 1H), 9,71 (s a, 1H), 9,03 (s, 1H), 8,72 (s, 1H), 8,18 (d, J = 4,0 Hz, 1H), 7,80 (s, 1H), 7,66 (s, 1H), 7,22 (m, 1H), 7,10 (m, 1H), 7,03 (m, 1H), 3,68 (s, 3H).

<Ejemplo 23> Preparación de N-(3-(3-(9H-purin-6-il)piridin-2-ilamino)-2,4-difluorofenil)-5-metilfurano-2-sulfonamida

imagen74

Etapa 10: Preparación de N-(2,4-difluoro-3-(3-(9-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-9H-purin-6-il)piridin-2-ilamino)fenil)-5metilfurano-2-sulfonamida

La 2,6-difluoro-N1-(3-(9-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-9H-purin-6-il)piridin-2-il)benceno-1,3-diamina (50 mg, 0,120 mmol) preparada en la Etapa 9 se añadió y se disolvió en diclorometano como disolvente. Se añadieron cloruro de 5metilfurano-2-sulfonilo (24 mg, 0,130 mmol) y piridina (11 µl, 0,130 mmol) a la solución de reacción y se agitaron a 50ºC durante 2 horas. Después de la reacción, el reaccionante se lavó con solución acuosa de ácido clorhídrico 1 N y agua salada. Después de la extracción con diclorometano, la capa orgánica se lavó con sulfato magnésico y se concentró a vacío y a continuación se refinó por medio de cromatografía en columna, de modo que se obtuvieron 58 mg del compuesto buscado, N-(2,4-difluoro-3-(3-(9-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-9H-purin-6-il)piridin-2-ilamino)fenil)-5metilfurano-2-sulfonamida (rendimiento porcentual: 85%).

1H NMR (400 MHz, CDCl3) ∂ 11,56 (s,1H), 9,65 (dd, J = 7,6, 1,6 Hz, 1H), 9,01 (s, 1H), 8,39 (s, 1H), 8,25 (dd, J = 4,8, 2,0 Hz, 1H), 7,38 (m, 1H), 7,13 (s, 1H), 7,00 (m, 3H), 6,47 (dd, J = 3,6, 2,0 Hz, 1H), 5,90 (dd, J = 10,4, 2,0 Hz, 1H), 4,23 (m,1H), 3,85 (m, 1H), 2,41 (s, 3H), 2,24-1,84 (m, 6H) .

Etapa 11: Preparación de N-(3-(3-(9H-purin-6-il)piridin-2-ilamino)-2,4-difluorofenil)-5-metilfurano-2-sulfonamida

Se añadió solución acuosa de ácido clorhídrico 1 M a la N-(2,4-difluoro-3-(3-(9-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-9H-purin-6il)piridin-2-ilamino)fenil)-5-metilfurano-2-sulfonamida (12 mg, 0,020 mmol) preparada en la Etapa 10 y se agitaron durante 2 horas. Después de la reacción, el reaccionante se lavó con una solución acuosa de hidrogenocarbonato sódico y agua salada. Después de la extracción con acetato de etilo, la capa orgánica se lavó con sulfato magnésico y se concentró a vacío y a continuación se refinó por medio de cromatografía en columna, de modo que se obtuvieron 8 mg del compuesto buscado, N-(3-(3-(9H-purin-6-il)piridin-2-ilamino)-2,4-difluorofenil)-5-metilfurano-2sulfonamida (rendimiento porcentual: 81%).

imagen75

imagen76

imagen77

imagen78

<Ejemplo 28> Preparación de N-(3-(3-(9H-purin-6-il)piridin-2-ilamino)-2,4-difluorofenil)-3-cloro-4fluorobencenosulfonamida

imagen79

Etapa 10: Preparación de 3-cloro-N-(2,4-difluoro-3-(3-(9-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-9H-purin-6-il)piridin-2-ilamino)fenil)4-fluorobencenosulfonamida

10 La 2,6-difluoro-N1-(3-(9-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-9H-purin-6-il)piridin-2-il)benceno-1,3-diamina (20 mg, 0,047 mmol) preparada en la Etapa 9 se añadió y se disolvió en diclorometano como disolvente. Se añadieron cloruro de 3-cloro4-fluorobenceno-1-sulfonilo (16 mg, 0,07 mmol) y piridina (8 µl, 0,094 mmol) a la solución de reacción y se agitaron a 50ºC durante 2 horas. Después de la reacción, el reaccionante se lavó con solución acuosa de ácido clorhídrico 1 N y agua salada. Después de la extracción con diclorometano, la capa orgánica se lavó con sulfato magnésico y se

15 concentró a vacío y a continuación se refinó por medio de cromatografía en columna, de modo que se obtuvo el compuesto buscado.

1H NMR (400 MHz, CDCl3): ∂ 11,55 (s, 1H), 9,62 (dd, J = 6,0, 1,6 Hz, 1H), 8,99 (s, 1H), 8,39 (s, 1H), 8,18 (dd, J = 2,8, 2,0 Hz, 1H), 7,88 (dd, J = 4,8, 2,0 Hz, 1H), 7,66 (m, 1H), 7,38 (m, 1H), 7,24 (m, 1H), 7,02 (m, 2H), 5,91 (d, J = 2,0 Hz, 1H), 4,24 (m, 1H), 3,86 (m, 1H), 2,20-1,65 (m, 6H).

20 Etapa 11: Preparación de N-(3-(3-(9H-purin-6-il)piridin-2-ilamino)-2,4-difluorofenil)-3-cloro-4fluorobencenosulfonamida

Se añadió solución acuosa de ácido clorhídrico 1 M a la 3-cloro-N-(2,4-difluoro-3-(3-(9-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-9Hpurin-6-il)piridin-2-ilamino)fenil)-4-fluorobencenosulfonamida (20 mg, 0,032 mmol) preparada en la Etapa 10 y se agitaron durante 2 horas. Después de la reacción, el reaccionante se lavó con una solución acuosa de

25 hidrogenocarbonato sódico y agua salada. Después de la extracción con acetato de etilo, la capa orgánica se lavó con sulfato magnésico y se concentró a vacío y a continuación se refinó por medio de cromatografía en columna, de modo que se obtuvo el compuesto buscado.

1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): ∂ 12,15 (s a, 1H), 11,42 (s, 1H), 10,28 (s, 1H), 9,77 (dd, J = 6,4, 1,6 Hz, 1H), 9,19 (s, 1H), 8,35 (s, 1H), 8,30 (dd, J = 2,8, 1,6 Hz, 1H), 8,16 (dd, J = 6,4, 1,6 Hz, 1H), 7,50 (m, 3H), 7,01 (m, 2H).

30

<Ejemplo 29> Preparación de N-(3-(3-(9H-purin-6-il)piridin-2-ilamino)-2,4-difluorofenil)-3-cloro-2fluorobencenosulfonamida

imagen80

Etapa 1 a Etapa 9: Preparación de 2,6-difluoro-N1-(3-(9-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-9H-purin-6-il)piridin-2-il)benceno5 1,3-diamina

Etapa 10: Preparación de 3-cloro-N-(2,4-difluoro-3-(3-(9-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-9H-purin-6-il)piridin-2-ilamino)fenil)2-fluorobencenosulfonamida

10 La 2,6-difluoro-N1-(3-(9-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-9H-purin-6-il)piridin-2-il)benceno-1,3-diamina (20 mg, 0,047 mmol) preparada en la Etapa 9 se añadió y se disolvió en diclorometano como disolvente. Se añadieron cloruro de 3-cloro2-fluorobenceno-1-sulfonilo (16 mg, 0,07 mmol) y piridina (8 µl, 0,094 mmol) a la solución de reacción y se agitaron a 50ºC durante 2 horas. Después de la reacción, el reaccionante se lavó con solución acuosa de ácido clorhídrico 1 N y agua salada. Después de la extracción con diclorometano, la capa orgánica se lavó con sulfato magnésico y se

1H NMR (400 MHz, CDCl3): ∂ 11,55 (s, 1H), 9,63 (m, 1H), 8,99 (d, J = 6,0 Hz, 1H), 8,39 (d, J = 6,0 Hz, 1H), 8,20 (s, 1H), 7,72 (m, 1H), 7,61 (m, 1H), 7,30 (m, 1H), 7,18 (m, 1H), 6,94 (m, 2H), 5,91 (m, 1H), 4,23 (d, J = 11,2 Hz, 1H), 3,85 (m, 1H), 2,19-1,72 (m, 6H).

Se añadió solución acuosa de ácido clorhídrico 1 M a la 3-cloro-N-(2,4-difluoro-3-(3-(9-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-9Hpurin-6-il)piridin-2-ilamino)fenil)-2-fluorobencenosulfonamida(20 mg, 0,032 mmol) preparada en la Etapa 10 y se agitaron durante 2 horas. Después de la reacción, el reaccionante se lavó con una solución acuosa de

1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): ∂ 11,47 (s an., 1H), 9,63 (s an., 1H), 9,00 (s, 1H), 8,73 (s, 1H), 8,15 (m, 1H), 7,72 (m, 1H), 7,65 (m, 1H), 7,35 (m, 1H), 7,08 (m, 1H), 6,92 (m, 2H).

30

<Ejemplo 30> Preparación de N-(3-(3-(9H-purin-6-il)piridin-2-ilamino)-2,4-difluorofenil)piridino-3-sulfonamida

Etapa 10: Preparación de N-(2,4-difluoro-3-(3-(9-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-9H-purin-6-il)piridin-2-ilamino)fenil)piridino3-sulfonamida

10 preparada en la Etapa 9 se añadió y se disolvió en diclorometano como disolvente. Se añadieron cloruro de piridin-3sulfonilo (12 mg, 0,07 mmol) y piridina (8 µl, 0,094 mmol) a la solución de reacción y se agitaron a 50°C durante 2 horas. Después de la reacción, el reaccionante se lavó con solución acuosa de ácido clorhídrico 1 N y agua salada. Después de la extracción con diclorometano, la capa orgánica se lavó con sulfato magnésico y se concentró a vacío y a continuación se refinó por medio de cromatografía en columna, de modo que se obtuvo el compuesto buscado.

15 1H NMR (400 MHz, CDCl3): ∂ 9,43 (s, 1H), 8,89 (m, 2H), 8,63 (s, 1H), 8,34 (m, 1H), 8,04 (s, 2H), 7,36 (m, 1H), 6,91 (m, 2H), 5,79 (m, 1H), 4,13 (m, 1H), 3,50 (m, 1H), 2,10-1,54 (m, 6H) .

Etapa 11: Preparación de N-(3-(3-(9H-purin-6-il)piridin-2-ilamino)-2,4-difluorofenil)piridino-3-sulfonamida

Se añadió solución acuosa de ácido clorhídrico 1 M a la N-(2,4-difluoro-3-(3-(9-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-9H-purin-6il) piridin-2-ilamino)fenil)piridino-3-sulfonamida (19 mg, 0,033 mmol) preparada en la Etapa 10 y se agitaron durante

20 2 horas. Después de la reacción, el reaccionante se lavó con una solución acuosa de hidrogenocarbonato sódico y agua salada. Después de la extracción con acetato de etilo, la capa orgánica se lavó con sulfato magnésico y se concentró a vacío y a continuación se refinó por medio de cromatografía en columna, de modo que se obtuvo el compuesto buscado.

1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): ∂ 11,41 (s, 1H), 9,44 (s, 1H), 9,09 (s, 1H), 8,91 (s, 1H), 8,57 (s, 1H), 8,42 (m, 2H), 25 8,03 (m, 1H), 7,65 (m, 2H), 7,36 (m, 2H), 6,91 (m, 1H).

<Ejemplo 31> Preparación de N-(3-(3-(9H-purin-6-il)piridin-2-ilamino)-2,4-difluorofenil)-2-metilbencenosulfonamida

imagen81

5

10

20

25

30

35

1H NMR (400 MHz, CDCl3): ∂ 11,51 (s, 1H), 9,62 (dd, J = 6,4, 1,6 Hz, 1H), 8,98 (s, 1H), 8,39 (s, 1H), 8,19 (dd, J = 3,2, 1,6 Hz, 1H), 8,04 (m, 1H), 7,52 (m, 2H), 7,38 (m, 3H), 6,94 (m, 2H), 5,89 (dd, J = 8,0, 2,4 Hz, 1H), 4,23 (m, 1H), 3,85 (m, 1H), 2,19-1,70 (m, 6H).

Etapa 11: Preparación de N-(3-(3-(9H-purin-6-il)piridin-2-ilamino)-2,4-difluorofenil)-2-clorobencenosulfonamida

Se añadió solución acuosa de ácido clorhídrico 1 M a la 2-cloro-N-(2,4-difluoro-3-(3-(9-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-9Hpurin-6-il)piridin-2-ilamino)fenil)bencenosulfonamida (20 mg, 0,033 mmol) preparada en la Etapa 10 y se agitaron durante 2 horas. Después de la reacción, el reaccionante se lavó con una solución acuosa de hidrogenocarbonato sódico y agua salada. Después de la extracción con acetato de etilo, la capa orgánica se lavó con sulfato magnésico y se concentró a vacío y a continuación se refinó por medio de cromatografía en columna, de modo que se obtuvo el compuesto buscado.

1H NMR (400 MHz, CDCl3): ∂ 12,10 (s, 1H), 11,42 (s, 1H), 10,28 (s, 1H), 9,77 (dd, J = 6,4, 2,0 Hz, 1H), 9,19 (s, 1H), 8,35 (s, 1H), 8,30 (dd, J = 2,8, 1,6 Hz, 1H), 8,16 (dd, J = 6,4, 1,6 Hz, 1H), 7,54 (m, 3H), 7,42 (m, 1H), 7,01 (m, 1H), 6,94 (m, 1H).

<Ejemplo 33> Preparación de N-(3-(3-(9H-purin-6-il)piridin-2-ilamino)-2,4-difluorofenil)-3-clorobencenosulfonamida

imagen82

Etapa 10: Preparación de 3-cloro-N-(2,4-difluoro-3-(3-(9-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-9H-purin-6-il)piridin-2ilamino)fenil)bencenosulfonamida

La 2,6-difluoro-N1-(3-(9-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-9H-purin-6-il)piridin-2-il)benceno-1,3-diamina (20 mg, 0,047 mmol) preparada en la Etapa 9 se añadió y se disolvió en diclorometano como disolvente. Se añadieron cloruro de 3clorobenceno-1-sulfonilo (15 mg, 0,07 mmol) y piridina (8 µl, 0,094 mmol) a la solución de reacción y se agitaron a 50ºC durante 2 horas. Después de la reacción, el reaccionante se lavó con solución acuosa de ácido clorhídrico 1 N y agua salada. Después de la extracción con diclorometano, la capa orgánica se lavó con sulfato magnésico y se concentró a vacío y a continuación se refinó por medio de cromatografía en columna, de modo que se obtuvo el compuesto buscado.

1H NMR (400 MHz, CDCl3): ∂ 11,54 (s, 1H), 9,64 (dd, J = 6,0, 2,0 Hz, 1H), 8,99 (s, 1H), 8,39 (s, 1H), 8,20 (dd, J = 3,2,1,6 Hz, 1H), 7,80 (t, J = 2,0 Hz, 1H), 7,65 (m, 1H), 7,55 (m, 1H), 7,53 (m, 3H), 7,40 (m, 2H), 7,01 (m, 3H), 5,90 (dd, J = 8,4, 2,0 Hz, 1H), 4,23 (m, 1H), 3,85 (m, 1H), 2,23-1,77 (m, 6H) .

Etapa 11: Preparación de N-(3-(3-(9H-purin-6-il)piridin-2-ilamino)-2,4-difluorofenil)-3-clorobencenosulfonamida

Se añadió solución acuosa de ácido clorhídrico 1 M a la 3-cloro-N-(2,4-difluoro-3-(3-(9-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-9Hpurin-6-il)piridin-2-ilamino)fenil)bencenosulfonamida (20 mg, 0,033 mmol) preparada en la Etapa 10 y se agitaron durante 2 horas. Después de la reacción, el reaccionante se lavó con una solución acuosa de hidrogenocarbonato sódico y agua salada. Después de la extracción con acetato de etilo, la capa orgánica se lavó con sulfato magnésico y se concentró a vacío y a continuación se refinó por medio de cromatografía en columna, de modo que se obtuvo el compuesto buscado.

1H NMR (400 MHz, CDCl3): ∂ 12,04 (s, 1H), 9,78 (dd, J = 6,0, 1,6 Hz, 1H), 9,16 (s, 1H), 8,37 (s, 1H), 8,33 (dd, J = 2,8, 2,0 Hz, 1H), 7,89 (t, J = 2,0 Hz, 1H), 7,76 (m, 1H), 7,52 (m, 2H), 7,40 (t, J = 8,0 Hz, 1H), 7,04 (m, 2H).

<Ejemplo 34> Preparación de N-(3-(3-(9H-purin-6-il)piridin-2-ilamino)-2,4-difluorofenil)-2,3-clorobencenosulfonamida

imagen83

Se realizó el mismo método que se indica en las Etapas 1 a 9 del Ejemplo 2 y se obtuvo el compuesto buscado, 2, 6difluoro-N1-(3-(9-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-9H-purin-6-il)piridin-2-il)benceno-1,3-diamina.

Etapa 10: Preparación de 2,3-cloro-N-(2,4-difluoro-3-(3-(9-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-9H-purin-6-il)piridin-210 ilamino)fenil)bencenosulfonamida

La 2,6-difluoro-N1-(3-(9-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-9H-purin-6-il)piridin-2-il)benceno-1,3-diamina (20 mg, 0,047 mmol) preparada en la Etapa 9 se añadió y se disolvió en diclorometano como disolvente. Se añadieron cloruro de 2,3clorobenceno-1-sulfonilo (17 mg, 0,07 mmol) y piridina (8 µl, 0,094 mmol) a la solución de reacción y se agitaron a 50L durante 2 horas. Después de la reacción, el reaccionante se lavó con solución acuosa de ácido clorhídrico 1 N y

15 agua salada. Después de la extracción con diclorometano, la capa orgánica se lavó con sulfato magnésico y se concentró a vacío y a continuación se refinó por medio de cromatografía en columna, de modo que se obtuvo el compuesto buscado.

1H NMR (400 MHz, CDCl3): ∂ 11,55 (s, 1H), 9,63 (t, J = 6,0 Hz, 1H), 8,99 (d, J = 6,0 Hz, 1H), 8,20 (s, 1H), 7,97 (t, J = 5,6 Hz, 1H), 7,68 (t, J = 6,0 Hz, 1H), 7,48 (m, 1H), 7,30 (m, 2H), 6,93 (m, 2H), 5,89 (m, 1H), 4,22 (m, 1H), 3,84 (m,

20 1H), 2,19-1,72 (m,6H).

Etapa 11: Preparación de N-(3-(3-(9H-purin-6-il)piridin-2-ilamino)-2,4-difluorofenil)-2,3-clorobencenosulfonamida

Se añadió solución acuosa de ácido clorhídrico 1 M a la 2,3-cloro-N-(2,4-difluoro-3-(3-(9-(tetrahidro-2H-piran-2-il)9H-purin-6-il)piridin-2-ilamino)fenil)bencenosulfonamida (21 mg, 0,033 mmol) preparada en la Etapa 10 y se agitaron durante 2 horas. Después de la reacción, el reaccionante se lavó con una solución acuosa de hidrogenocarbonato

25 sódico y agua salada. Después de la extracción con acetato de etilo, la capa orgánica se lavó con sulfato magnésico y se concentró a vacío y a continuación se refinó por medio de cromatografía en columna, de modo que se obtuvo el compuesto buscado.

1H NMR (400 MHz, CDCl3): ∂ 12,17 (s, 1H), 11,53 (s, 1H), 10,74 (s, 1H), 9,76 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 9,21 (s, 1H), 8,35 (s, 1H), 8,32 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 8,10 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,71 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,51 (d, J = 4,8 Hz, 1H), 7,37 (t, J

30 = 8,0 Hz, 1H), 7,00 (m, 2H).

<Ejemplo 35> Preparación de N-(3-(3-(9H-purin-6-il)piridin-2-ilamino)-2,4-difluorofenil)bencenosulfonamida (ejemplo comparativo)

imagen84

Etapa 10: Preparación de N-(2,4-difluoro-3-(3-(9-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-9H-purin-6-il)piridin-2ilamino)fenil)bencenosulfonamida

10 La 2,6-difluoro-N1-(3-(9-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-9H-purin-6-il)piridin-2-il)benceno-1,3-diamina (20 mg, 0,047 mmol) preparada en la Etapa 9 se añadió y se disolvió en diclorometano como disolvente. Se añadieron cloruro de bencenosulfonilo (12 mg, 0,07 mmol) y piridina (8 µl, 0,094 mmol) a la solución de reacción y se agitaron a 50°C durante 2 horas. Después de la reacción, el reaccionante se lavó con solución acuosa de ácido clorhídrico 1 N y agua salada. Después de la extracción con diclorometano, la capa orgánica se lavó con sulfato magnésico y se

15 concentró a vacío, y a continuación se refinó por medio de cromatografía en columna, de modo que se obtuvo el compuesto buscado.

1H NMR (400 MHz, CDCl3): ∂ 11,49 (s, 1H), 9,62 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 8,98 (s, 1H), 8,39 (s, 1H), 8,19 (m, 1H), 7,80 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 7,58 (m, 1H), 7,48 (m, 2H), 7,37 (m, 1H), 7,28 (m, 1H), 6,97 (m, 2H), 6,87 (s, 1H), 5,89 (d, J = 10,4 Hz, 1H), 4,23 (m, 1H), 3,85 (m, 1H), 2,23-1,7 3(m, 6H).

20 Etapa 11: Preparación de N-(3-(3-(9H-purin-6-il)piridin-2-ilamino)-2,4-difluorofenil)bencenosulfonamida

Se añadió solución acuosa de ácido clorhídrico 1 M a la N-(2,4-difluoro-3-(3-(9-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-9H-purin-6il) piridin-2-ilamino) fenil)bencenosulfonamida (19 mg, 0,033 mmol) preparada en la Etapa 10 y se agitaron durante 2 horas. Después de la reacción, el reaccionante se lavó con una solución acuosa de hidrogenocarbonato sódico y agua salada. Después de la extracción con acetato de etilo, la capa orgánica se lavó con sulfato magnésico y se

25 concentró a vacío y a continuación se refinó por medio de cromatografía en columna, de modo que se obtuvo el compuesto buscado.

1H NMR (400 MHz, CDCl3): ∂ 13,19 (s, 1H), 11,39 (s, 1H), 9,51 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 9,10 (s, 1H), 8,78 (s, 1H), 8,11(s, 1H), 7,98 (dd, J = 2,8, 1,6 Hz, 1H), 7,67(d, J = 8,0 Hz, 2H), 7,41 (m, 1H), 7,32 (m, 2H), 7,11 (m, 1H), 6,76 (m, 2H).

<Ejemplo 36> Preparación de N-(3-(3-(9H-purin-6-il)piridin-2-ilamino)-2,4-difluorofenil)-2,3-dihidrobenzofurano-7sulfonamida

imagen85

Etapa 10: Preparación de N-(2,4-difluoro-3-(3-(9-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-9H-purin-6-il)piridin-2-ilamino)fenil)-2,3dihidrobenzofurano-7-sulfonamida

10 La 2,6-difluoro-N1-(3-(9-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-9H-purin-6-il)piridin-2-il)benceno-1,3-diamina (20 mg, 0,047 mmol) preparada en la Etapa 9 se añadió y se disolvió en diclorometano como disolvente. Se añadieron cloruro de 2,3dihidrobenzofurano-7-sulfonilo (15 mg, 0,07 mmol) y piridina (8 µl, 0,094 mmol) a la solución de reacción y se agitaron a 50ºC durante 2 horas. Después de la reacción, el reaccionante se lavó con solución acuosa de ácido clorhídrico 1 N y agua salada. Después de la extracción con diclorometano, la capa orgánica se lavó con sulfato

15 magnésico y se concentró a vacío y a continuación se refinó por medio de cromatografía en columna, de modo que se obtuvo el compuesto buscado.

1H NMR (400 MHz, CDCl3): ∂ 11,47 (s, 1H), 9,62 (dd, J = 6,0, 2,0 Hz, 1H), 8,99 (s, 1H), 8,39 (s, 1H), 8,17 (dd, J = 2,8, 1,6 Hz, 1H), 7,55 (dd, J = 7,2, 0,8 Hz, 1H), 7,41 (m, 2H), 7,15 (d, J = 2,4 Hz, 1H), 6,39 (m, 2H), 5,90 (dd, J = 8,0, 2,4 Hz, 1H), 4,76 (t, J = 8,8 Hz, 2H), 4,23 (m, 1H), 3,85 (m, 1H), 3,24 (t, J = 8,8 Hz, 2H), 2,23-1,71 (m, 6H).

20 Etapa 11: Preparación de N-(3-(3-(9H-purin-6-il)piridin-2-ilamino)-2,4-difluorofenil)-2,3-dihidrobenzofurano-7sulfonamida

Se añadió solución acuosa de ácido clorhídrico 1 M a la N-(2,4-difluoro-3-(3-(9-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-9H-purin-6il)piridin-2-ilamino)fenil)-2,3-dihidrobenzofurano-7-sulfonamida (20 mg, 0,033 mmol) preparada en la Etapa 10 y se agitaron durante 2 horas. Después de la reacción, el reaccionante se lavó con una solución acuosa de

1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): ∂ 11,47 (s an., 1H), 9,63 (s an., 1H), 9,00 (s, 1H), 8,73 (s, 1H), 8,15 (dd, J = 2,8, 2,0 Hz, 1H), 7,48 (dd, J = 6,0, 1,2 Hz, 1H), 7,37 (d, J = 6,8 Hz, 1H), 7,08 (m, 2H), 7,02 (m, 1H), 6,91 (t, J = 7,6 Hz, 1H),

30 4,63 (t, J = 8,8 Hz, 2H), 3,22 (t, J = 8,8 Hz, 2H).

imagen86

imagen87

imagen88

<Ejemplo 40> Preparación de N-(3-(3-(9H-purin-6-il)piridin-2-ilamino)-2,4-difluorofenil)-1-metil-1H-indol-Ssulfonamida

imagen89

Etapa 10: Preparación de N-(2,4-difluoro-3-(3-(9-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-9H-purin-6-il)piridin-2-ilamino)fenil)-1-metil1H-indol-5-sulfonamida

10 La 2,6-difluoro-N1-(3-(9-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-9H-purin-6-il)piridin-2-il)benceno-1,3-diamina (20 mg, 0,047 mmol) preparada en la Etapa 9 se añadió y se disolvió en diclorometano como disolvente. Se añadieron cloruro de 1-metil1H-indol-5-sulfonilo (16 mg, 0,07 mmol) y piridina (8 µl, 0,094 mmol) a la solución de reacción y se agitaron a 50ºC durante 2 horas. Después de la reacción, el reaccionante se lavó con solución acuosa de ácido clorhídrico 1 N y agua salada. Después de la extracción con diclorometano, la capa orgánica se lavó con sulfato magnésico y se

1H NMR (400 MHz, CDCl3): ∂ 11,29 (s,1H), 9,99 (s, 1H), 9,57 (dd, J = 6,0, 1,6 Hz, 1H), 9,02 (s, 1H), 8,96 (s, 1H), 8,07 (dd, J = 2,8, 2,0 Hz, 1H), 8,00 (d, J = 1,6 Hz,1H), 7,61 (d, J = 8,8 Hz,1H), 7,55 (dd, J = 6,8, 1,6 Hz, 1H), 7,51 (d, J = 3,2 Hz, 1H), 7,08 (m, 2H), 6,99 (m, 1H), 6,62 (d, J = 2,4 Hz, 1H), 5,86 (dd, J = 8,8, 2,0 Hz, 1H), 4,05 (m, 1H), 3,83

20 (s, 3H), 3,75 (m, 1H), 2,41-1,65 (m, 6H).

Etapa 11: Preparación de N-(3-(3-(9H-purin-6-il)piridin-2-ilamino)-2,4-difluorofenil)-1-metil-1H-indol-5-sulfonamida

Se añadió solución acuosa de ácido clorhídrico 1 M a la N-(2,4-difluoro-3-(3-(9-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-9H-purin-6il)piridin-2-ilamino)fenil)-1-metil-1H-indol-5-sulfonamida (20 mg, 0,033 mmol) preparada en la Etapa 10 y se agitaron durante 2 horas. Después de la reacción, el reaccionante se lavó con una solución acuosa de hidrogenocarbonato

1H NMR (400 MHz, CDCl3): ∂ 12,04 (s, 1H), 11,59 (s an., 1H), 9,86 (s, 1H), 9,76 (dd, J = 6,0, 2,0 Hz, 1H), 9,16 (s, 1H), 8,35 (s, 1H), 8,26 (m, 2H), 7,72 (m, 1H), 7,53 (m, 1H), 7,33 (m, 1H), 7,14 (d, J = 3,2 Hz, 1H), 6,97 (m, 2H), 6,57

30 (dd, J = 2,4, 0,8 Hz, 1H), 3,77 (s, 3H).

<Ejemplo 41> Preparación de N-(3-(3-(9H-purin-6-il)piridin-2-ilamino)-2,4-difluorofenil)-1-metil-1H-indol-4sulfonamida

imagen90

Etapa 10: Preparación de N-(2,4-difluoro-3-(3-(9-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-9H-purin-6-il)piridin-2-ilamino)fenil)-1-metil1H-indol-4-sulfonamida

1H NMR (400 MHz, CDCl3): ∂ 11,27 (s, 1H), 10,18 (s, 1H), 9,57 (dd, J = 5,6, 2,0 Hz, 1H), 9,05 (s, 1H), 8,96 (s, 1H), 8,15 (dd, J = 2,8, 2,0 Hz, 1H), 7,76 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 7,51 (m, 1H), 7,25 (m, 1H), 7,01 (m, 3H), 6,82 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 5,87 (dd, J = 8,8, 2,0 Hz, 1H), 4,08 (m, 1H), 3,83 (s, 3H), 3,76 (m, 1H), 2,35-1,63 (m, 6H).

20 Etapa 11: Preparación de N-(3-(3-(9H-purin-6-il)piridin-2-ilamino)-2,4-difluorofenil)-1-metil-1H-indol-4-sulfonamida

Se añadió solución acuosa de ácido clorhídrico 1 M a la N-(2,4-difluoro-3-(3-(9-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-9H-purin-6il)piridin-2-ilamino)fenil)-1-metil-1H-indol-4-sulfonamida (20 mg, 0,033 mmol) preparada en la Etapa 10 y se agitaron durante 2 horas. Después de la reacción, el reaccionante se lavó con una solución acuosa de hidrogenocarbonato sódico y agua salada. Después de la extracción con acetato de etilo, la capa orgánica se lavó con sulfato magnésico

25 y se concentró a vacío y a continuación se refinó por medio de cromatografía en columna, de modo que se obtuvo el compuesto buscado.

1H NMR (400 MHz, CDCl3): ∂ 12,12 (s, 1H), 11,89 (s an., 1H), 10,50 (s, 1H), 9,77 (d, J = 6,8 Hz, 1H), 9,22 (s, 1H), 8,33 (s, 1H), 8,28 (dd, J = 2,8, 2,0 Hz, 1H), 7,80 (dd, J = 6,8, 0,8 Hz, 1H), 7,53 (m, 1H), 7,25 (m, 1H), 7,11 (d, J = 3,2 Hz, 1H), 6,97 (m, 2H), 6,88 (m, 1H), 3,73 (s, 3H).

30

imagen91

<Ejemplo 43> Preparación de N-(3-(3-(9H-purin-6-il)piridin-2-ilamino)-2,4-difluorofenil)-1-metil-1H-pirazol-4sulfonamida

imagen92

Etapa 10: Preparación de N-(2,4-difluoro-3-(3-(9-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-9H-purin-6-il)piridin-2-ilamino)fenil)-1-metil1H-pirazol-4-sulfonamida

10 La 2,6-difluoro-N1-(3-(9-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-9H-purin-6-il)piridin-2-il)benceno-1,3-diamina (20 mg, 0,047 mmol) preparada en la Etapa 9 se añadió y se disolvió en diclorometano como disolvente. Se añadieron cloruro de 1-metil1H-pirazol-4-sulfonilo (13 mg, 0,07 mmol) y piridina (8 µl, 0,094 mmol) a la solución de reacción y se agitaron a 50ºC durante 2 horas. Después de la reacción, el reaccionante se lavó con solución acuosa de ácido clorhídrico 1 N y agua salada. Después de la extracción con diclorometano, la capa orgánica se lavó con sulfato magnésico y se

1H NMR (400 MHz, CDCl3): ∂ 11,54 (s, 1H), 9,63 (dd, J = 6,0,2,0 Hz, 1H), 9,00 (s, 1H), 8,63 (m, 1H), 8,39 (s, 1H), 8,24 (dd, J = 2,8, 2,0 Hz, 1H), 7,69 (m, 2H), 7,40 (m, 1H), 7,30 (m, 1H), 7,20 (s an., 1H), 6,98 (m, 2H), 5,89 (dd, J = 8,0, 2,4 Hz, 1H), 4,22 (m, 1H), 3,87 (s, 3H), 3,83 (m, 1H), 2,22-1,72 (m, 6H).

20 Etapa 11: Preparación de N-(3-(3-(9H-purin-6-il)piridin-2-ilamino)-2,4-difluorofenil)-1-metil-1H-pirazol-4-sulfonamida

Se añadió solución acuosa de ácido clorhídrico 1 M a la N-(2,4-difluoro-3-(3-(9-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-9H-purin-6il)piridin-2-ilamino)fenil)-1-metil-1H-pirazol-4-sulfonamida (19 mg, 0,033 mmol) preparada en la Etapa 10 y se agitaron durante 2 horas. Después de la reacción, el reaccionante se lavó con una solución acuosa de hidrogenocarbonato sódico y agua salada. Después de la extracción con acetato de etilo, la capa orgánica se lavó

25 con sulfato magnésico y se concentró a vacío y a continuación se refinó por medio de cromatografía en columna, de modo que se obtuvo el compuesto buscado.

1H NMR (400 MHz, CDCl3): ∂ 9,60 (s, 1H), 8,97 (s, 1H), 8,28 (s, 1H), 8,20 (dd, J = 3,2, 1,6 Hz, 1H), 7,71 (d, J = 10,4 Hz, 2H), 7,41 (m, 1H), 6,98 (m, 2H), 3,86 (s, 3H).

5

10

15

20

25

30

35

<Ejemplo 44> Preparación de N-(3-(3-(9H-purin-6-il)piridin-2-ilamino)-2,4-difluorofenil)-S-clorotiofeno-4-sulfonamida

imagen93

Etapa 10: Preparación de 5-cloro-N-(2,4-difluoro-3-(3-(9-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-9H-purin-6-il)piridin-2ilamino)fenil)tiofeno-2-sulfonamida

La 2,6-difluoro-N1-(3-(9-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-9H-purin-6-il)piridin-2-il)benceno-1,3-diamina (20 mg, 0,047 mmol) preparada en la Etapa 9 se añadió y se disolvió en diclorometano como disolvente. Se añadieron cloruro de 5clorotiofeno-2-sulfonilo (15 mg, 0,07 mmol) y piridina (8 µl, 0,094 mmol) a la solución de reacción y se agitaron a 50ºC durante 2 horas. Después de la reacción, el reaccionante se lavó con solución acuosa de ácido clorhídrico 1 N y agua salada. Después de la extracción con diclorometano, la capa orgánica se lavó con sulfato magnésico y se concentró a vacío y a continuación se refinó por medio de cromatografía en columna, de modo que se obtuvo el compuesto buscado.

1H NMR (400 MHz, CDCl3): ∂ 11,58 (s, 1H), 9,64 (dd, J = 6,0, 2,0 Hz, 1H), 8,99 (s, 1H), 8,39 (m, 1H), 8,25 (dd, J = 2,8, 2,0 Hz, 1H), 7,70 (s, 1H), 7,36 (m, 1H), 7,27 (d, J = 4,0 Hz, 1H), 6,99 (m, 2H), 6,86 (d, J = 4,4 Hz, 1H), 5,89 (dd, J = 8,4,2,4 Hz, 1H), 4,24 (m, 1H), 3,84(s, 1H), 2,22-1,72 (m, 6H) .

Etapa 11: Preparación de N-(3-(3-(9H-purin-6-il)piridin-2-ilamino)-2,4-difluorofenil)-S-clorotiofeno-2-sulfonamida

Se añadió solución acuosa de ácido clorhídrico 1 M a la 5-cloro-N-(2,4-difluoro-3-(3-(9-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-9Hpurin-6-il)piridin-2-ilamino)fenil)tiofeno-2-sulfonamida (20 mg, 0,033 mmol) preparada en la Etapa 10 y se agitaron durante 2 horas. Después de la reacción, el reaccionante se lavó con una solución acuosa de hidrogenocarbonato sódico y agua salada. Después de la extracción con acetato de etilo, la capa orgánica se lavó con sulfato magnésico y se concentró a vacío y a continuación se refinó por medio de cromatografía en columna, de modo que se obtuvo el compuesto buscado.

1H NMR (400 MHz, CDCl3): ∂ 13,88 (s, 1H), 11,52 (s, 1H), 10,56 (s, 1H), 9,68 (d, J = 7,8 Hz, 1H), 9,02 (s, 1H), 8,73 (s, 1H), 8,19 (dd, J = 2,8, 1,6 Hz, 1H), 7,37 (d, J = 3,6 Hz, 1H), 7,24 (d, J = 3,6 Hz, 1H), 7,16 (d, J = 6,0 Hz, 1H), 7,03 (m, 1H).

<Ejemplo Experimental 1> Experimento de los efectos en la actividad de cinasa B-Raf

Para comprobar la actividad inhibidora de cinasa B-Raf de los compuestos de la presente invención, se efectuaron los siguientes experimentos.

(1) Señalización en serie

20 µl de disolvente de dilución (MOPS 20 mM, pH 7,2, fosfato de ß-glicerol 25 mM, EGTA 5 mM, ortovanadato sódico 1 mM, ditiotreitol 1 mM) y 10 µl de solución mixta de Mg/ATP (ATP 500 µM, cloruro magnésico 75 mM) se añadieron a un tubo de centrífuga, se añadió el compuesto derivado de Fórmula 1 o no se añadieron los compuestos de los Ejemplos como un grupo de control, y a continuación se añadió 1 µg de B-Raf activada, 0,4 ng de MEK1 desactivada y 1 µg de MAPK2 desactivada. Las soluciones del tubo se recogieron en el fondo a través de centrifugación y se hicieron reaccionar a 30ºC durante 30 minutos. Después de recoger 4 µl de la solución mixta, la prueba avanzó hasta la siguiente etapa.

(2) Fosforilación de proteína de matriz MBP mediante MAPK2

10 µl de disolvente de dilución, 20 µg de MBP usada como una matriz y 10 µl de [γ-32P]ATP diluido (1 µCi/µl) se añadieron a los 4 µl de la solución mixta obtenida de (1). Las soluciones del tubo se recogieron en el fondo a través de centrifugación y se hicieron reaccionar a 30ºC durante 30 minutos. Y 25 µl de la solución de reacción se pusieron 5 cuidadosamente en el centro de un papel de filtro (P81 de 2 cm x 2 cm) durante 30 segundos. Posteriormente, el papel de filtro se limpió con ácido fosfórico al 0,75% durante 10 minutos tres veces y con acetona durante 5 minutos una vez. El papel de filtro se movió a continuación a un vial de centelleo y se añadieron al mismo 5 ml de cóctel de centelleo. La velocidad de inhibición (IC50) sobre la actividad de B-Raf se midió leyendo la radiactividad a través de un contador de centelleo mientras se comparó con el grupo de control. Los resultados de la medida se proporcionan

10 en la Tabla 2 posteriormente.

Tabla 2

Compuesto en el Ejemplo: Actividad de la Enzima B-Raf; IC50 (µM)

Ejemplo 1: 0,017

Ejemplo 2: 0,0088

Ejemplo 3: 0,030

Ejemplo 4: 0,012

Ejemplo 5: 0,023

Ejemplo 6: 0,72

Ejemplo 7: 0,832

Ejemplo 8: 0,0337

Ejemplo 9: 1,5

Ejemplo 10: 1,2

Ejemplo 11: 0,206

Ejemplo 12: 0,610

Ejemplo 13: 0,42

Ejemplo 14: 0,002

Ejemplo 15: 0,001

Ejemplo 16: 1,5

Ejemplo 17: 0,007

Ejemplo 18: 0,001

Ejemplo 19: 0,05

Ejemplo 20: 0,16

Ejemplo 21: 1,3

Ejemplo 22: 1,8

Ejemplo 23: 0,015

Ejemplo 24: 0,22

Ejemplo 25: 0,015

Ejemplo 26: 0,03

Ejemplo 27: 0,08

Ejemplo 28: 0,3

Ejemplo 29: 0,08

Ejemplo 30: 0,004

Ejemplo 31: 0,05

Ejemplo 32: 0,03

Ejemplo 33: 0,08

Ejemplo 34: 0,04

Ejemplo 35: 0,02

Ejemplo 36: 1,02

Ejemplo 37: 0,09

Ejemplo 38: 0,9

Ejemplo 39: 0,4

Ejemplo 40: >10

Ejemplo 41: 0,55

Ejemplo 42: 0,8

Ejemplo 43: 0,12

Ejemplo 44: 0,02

Como se muestra en la Tabla 2 anteriormente, se confirmó que los compuestos según la presente invención tenían un efecto de inhibición de la actividad de B-Raf deseable, presentando la tasa de inhibición sobre la actividad de B-Raf a 0,001-1,8 µM. Se confirmó que la mayoría de los compuestos tenía una actividad inhibidora de B-Raf

5 deseable, con la tasa de inhibición a menos de 1 µM.

<Ejemplo Experimental 2> Experimento de inhibición de la actividad celular de B-Raf

Para comprobar la capacidad inhibidora de la actividad celular de B-Raf de los compuestos de la presente invención, se efectuaron los siguientes experimentos en la línea celular A375P (ATCC). La línea celular A375P (ATCC) se derivó de un paciente con melanoma humano, y tenía un mutante V600E del gen de B-Raf. Las células A375 se 10 mantuvieron en DMEM complementado con suero bovino fetal al 10%, glutamina (2 mM), penicilina (100 U/ml) y

estreptomicina (100 µg/ml). Las células se mantuvieron a 37ºC y en CO2 al 5% y 100% de humedad. Para efectuar la prueba de inhibición del crecimiento, las células se cultivaron usando una microplaca blanca de 384 pocillos, con

1.000 células cultivada por 1 pocillo. Después de 24 horas, se añadieron 5 µl de solución de reserva de fármaco x 5. Todos los fármacos se prepararon inicialmente con solución de reserva x 200 en DMSO, y la concentración final de 5 DMSO fue 0,5%. Las células se incubaron a 37ºC durante 72 horas. Para el ensayo con MTT, se usó el estuche 'CellTiter 96 (R) Non-Radioactive Proliferación celular Assay (G4100)' de Promega Corp. Se pusieron 15 µl de solución de colorante del estuche de Promega en cada pocillo y se cultivaron en la incubadora durante 4 horas. Y 100 µl de cada sustancia de solubilización/solución de parada del estuche se añadieron y se fijaron en la incubadora durante 24 horas de nuevo. Y a continuación se midió la absorbancia usando un lector de placas de 96 pocillos con

10 570 nm de absorbancia. Basándose en el control negativo, la absorbancia medida se convirtió en toxicidad relativa para las células por concentración y se calculó la EC50 (concentración eficaz semimáxima). Los resultados de la misma se proporcionan en la Tabla 3 posteriormente.

Tabla 3

Actividad inhibidora celular de B-Raf

Compuesto en el Ejemplo: Actividad celular (A375P), IC50 (µM)

Ejemplo 1: 0,12

Ejemplo 2: 0,23

Ejemplo 3: 5,2

Ejemplo 4: 0,03

Ejemplo 5: 0,31

Ejemplo 6: 2,8

Ejemplo 7: 4,3

Ejemplo 8: 0,7

Ejemplo 9: 11,2

Ejemplo 10: 10,2

Ejemplo 11: 0,34

Ejemplo 12: 0,6

Ejemplo 13: 0,15

Ejemplo 14: 0,006

Ejemplo 15: 11,0

Ejemplo 16: 9,6

Ejemplo 17: 0,04

Ejemplo 18: 0,002

Ejemplo 19: 0,25

Ejemplo 20: 0,7

Ejemplo 21: 0,36

Ejemplo 22: 1,0

Ejemplo 23: 0,06

Ejemplo 24: 0,8

Ejemplo 25: 0,1

Ejemplo 26: 0,33

Ejemplo 27: 0,76

Ejemplo 28: 1,93

Ejemplo 29: 0,72

Ejemplo 30: 0,07

Ejemplo 31: 0,67

Ejemplo 32: 0,44

Ejemplo 33: 0,77

Ejemplo 34: 0,5

Ejemplo 35: 0,16

Ejemplo 36: 8,37

Ejemplo 37: 0,81

Ejemplo 38: 7,19

Ejemplo 39: 2,93

Ejemplo 40: >15

Ejemplo 41: 4,20

Ejemplo 42: 5,87

Ejemplo 43: 1,37

Ejemplo 44: 0,2

Como se muestra en la Tabla 3 anteriormente, se confirmó que los compuestos según la presente invención tenían un efecto inhibidor de la actividad de células A375P, presentando una tasa de inhibición sobre la actividad de células A375P en 0,006-11,2 µM. Se confirmó que la mayoría de los compuestos tenían una actividad inhibidora anticancerosa deseable, con la tasa de inhibición en menos de 1µM.

Por lo tanto, los compuestos presentados en los Ejemplos de la presente invención se pueden usar útilmente como un medicamento para enfermedades asociadas con cánceres con actividad de B-Raf anormal, incluyendo melanoma, cáncer colorrectal, cáncer renal, cáncer de próstata, cáncer de tiroides, cáncer ovárico, en particular.

imagen94

imagen95

Extracto de ume (Prunus mume) 2 g

Taurina 1 g

Agua purificada hasta 900 ml

Según el método convencional para preparar bebidas naturales, los constituyentes anteriores se mezclaron y se agitaron/calentaron a 85ºC durante 1 hora. Y a continuación la mezcla se filtró y se cargó en recipientes de 2 l esterilizados, y a continuación se cerró herméticamente y se esterilizó de nuevo y se almacenó en un frigorífico

5 hasta que se usó como una composición para bebidas naturales. Los constituyentes anteriores se mezclaron en una relación deseable para bebidas favoritas, pero se pueden

mezclar en una relación ajustada y modificada según las preferencias regionales y nacionales, incluyendo clase de consumidor, país de consumo, uso, etc. <Ejemplo de fabricación 7> Preparación de otras bebidas naturales

10 7-1. Preparación de bebidas Miel 522 mg Amida de ácido tióctico 5 mg Amida de ácido nicotínico 10 mg Hidrocloruro de riboflavina sódica 3 mg Hidrocloruro de piridoxina 2 mg Inositol 30 mg Ácido orótico 50 mg Compuesto de Fórmula 1 0,48~1,28 mg Agua 200 ml

Se prepararon bebidas con la composición y los contenidos presentados anteriormente, mediante el método convencional para preparar bebidas. 7-2. Preparación de gomas de mascar Base de goma 20% Azúcar 76,36~76,76% Compuesto de Fórmula 1 0,24~0,64% Aroma de fruta 1% Agua 2%

15 Se prepararon gomas de mascar con la composición y los contenidos presentados anteriormente, mediante el método convencional para preparar gomas de mascar.

imagen96

Claims

imagen1

imagen2

imagen3

imagen4

imagen5