ES2882588T3

ES2882588T3 - Actividad antiviral de setas medicinales y sus constituyentes activos

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Publication number: ES2882588T3
Application number: ES16717212T
Authority: ES
Inventors: Paul Stamets
Original assignee: Turtle Bear Holdings LLC
Current assignee: Turtle Bear Holdings LLC
Priority date: 2015-03-31
Filing date: 2016-03-31
Publication date: 2021-12-02
Anticipated expiration: 2036-03-31
Also published as: CA2980173C; WO2016161138A1; EP3277271B1; EP3277271A1; AU2016242929A1; US20180200224A1; CA2980173A1

Abstract

Una composición para su uso en el tratamiento de una infección por virus patógeno en un paciente que lo necesita, que comprende uno o más de ácido siríngico, ácido trans-cinámico, ácido trans-ferúlico, sales de los mismos, ésteres de los mismos o combinaciones de los mismos, en la que el virus patógeno es el virus del papiloma humano (VPH).

Description

DESCRIPCIÓN

Actividad antiviral de setas medicinales y sus constituyentes activos

Campo técnico

La presente invención se refiere a composiciones antivirales como se define en la Reivindicación 1 basadas en constituyentes aislados de o contenidos dentro de micelios de setas medicinales, o las moléculas sintéticas correspondientes, que han demostrado ser útiles para reducir virus patógenos y tratar infecciones virales; en particular los virus que afligen a los animales, incluidos, entre otros, seres humanos, abejas, cerdos, murciélagos y aves, lo que da como resultado una reducción de los virus que causan enfermedades, su patogenicidad y/o infectividad tanto en el animal huésped como en el medio ambiente.

Antecedentes

Los setas medicinales se han utilizado durante miles de años para una amplia variedad de dolencias. Tradicionalmente se ha utilizado el cuerpo frutal de setas. Los científicos han estudiado extensamente extractos de cuerpos frutales durante las últimas décadas. Aunque se han publicado numerosos artículos que muestran que los extractos de setas en agua caliente y sus micelios pueden activar el sistema inmunológico y pueden ser antiinflamatorios, comparativamente pocos han dilucidado los beneficios de las fracciones alcohólicas. La presente invención describe contribuciones novedosas al campo de la investigación de setas medicinales, en particular descubrimientos relacionados con la actividad antiviral del micelio de setas extraído con alcohol y los componentes activos contenidos en ellos.

Los científicos están descubriendo ahora que la infección viral desafía y degrada el sistema inmunológico de múltiples formas, incluida la inflamación, que puede provocar daño celular por radicales libres, un cofactor en la carcinogénesis, y cánceres causados por oncovirus. En todo el mundo, la Agencia Internacional para la Investigación del Cáncer de la Organización Mundial de la Salud (OMS) estimó que en 2002 el 17,8% de los cánceres humanos fueron causados por infecciones, y el 11,9% fue causado por 1 de 7 virus diferentes. Los 7 virus que se sabe que causan cáncer incluyen tres oncovirus del herpes: Epstein-Barr, también conocido como virus del herpes humano 4 (HHV-4); virus del herpes humano 6 (HHV-6) y virus del herpes humano 8 (HHV-8). El HHV-6 está implicado en el desarrollo de linfomas, leucemia, cánceres de cuello uterino, sarcoma de Kaposi y tumores cerebrales. Otros oncovirus incluyen el virus del polioma que causa el carcinoma de células de Merkel (CCM), los virus del papiloma humano (VPH 16 y 18) que causan cáncer de cuello uterino, cáncer anal, cánceres orofaríngeos, cánceres vaginales, cánceres vulvares y cánceres de pene; hepatitis B y C, que provocan cáncer de hígado; y los virus linfotrópicos T humanos (HTLV), que causan leucemia de células T y linfoma de células T. Se conocen cuatro HTLV. HTLV-1 y HTLV-2 están involucrados en epidemias que infectan a entre 15 y 20 millones de personas en todo el mundo. En los Estados Unidos, la infección por hepatitis C se estima en 2,7 millones y se estima que entre 700.000 y 1,4 millones de personas están infectadas con hepatitis B. Los HTLV pueden ser más prevalentes en algunas regiones geográficas que en otras, infectando alrededor del 1% de la población de Japón. Las tasas entre los donantes de sangre voluntarios en los Estados Unidos promedian el 0,016%, pero en algunas partes de África se han registrado informes del 15%.1

A medida que avanza la ciencia, es probable que se descubran más oncovirus y rutas oncogénicas mediadas por virus. Dado que la inmunidad se basa en muchos factores complejos, los virus patógenos que no se sabe que causen cáncer específicamente pueden contribuir a la carcinogénesis al causar inflamación, radicales libres y reducir la cantidad de células inmunes que de otro modo mantendrían a raya el cáncer y las infecciones conjuntas. La naturaleza es un juego de números, y las infecciones ponen en peligro el equilibrio entre la salud y la enfermedad. Cuando se reduce la inmunidad, el cuerpo humano es menos capaz de erradicar las células cancerosas, que de otro modo se mantendrían bajo control, y las vías inflamatorias deletéreas desafían aún más la salud. Por lo tanto, las tasas de mortalidad aumentan con las infecciones agravadas. Por lo tanto, existe la necesidad de composiciones que reduzcan los oncovirus y también reduzcan los virus que provocan inflamación y desactivación inmunitaria, que contribuyen a la oncogénesis.

Las epidemias y pandemias virales representan amenazas crecientes para la salud global a medida que las enfermedades zoonóticas se propagan, saltan especies hospedadoras, se recombinan y potencialmente mutan en formas más virulentas. La necesidad de medicamentos adicionales contra la influenza es importante para mantener contramedidas activas contra las pandemias. Por ejemplo, cuando el virus de la gripe H1N1 arrasó el mundo en 2010, los dos antivirales más populares fueron Tamiflu® (Oseltamivir) y Relenza® (Zanamivir); que fueron útiles, en el mejor de los casos, para acortar el período de la enfermedad en aproximadamente un día. En menos de un año, el nuevo virus H1N1 evolucionó para resistir cada vez más las aplicaciones de Tamiflu®, y el medicamento se ha vuelto en gran medida ineficaz contra las poblaciones posteriores de los virus heredados de la gripe porcina H1N1. Aunque algunos medicamentos antivirales pueden ser eficaces en la actualidad, es vital que los investigadores investiguen diversos agentes terapéuticos para combatir los brotes virales de cepas de rápida evolución. Es especialmente preocupante la facilidad y velocidad con la que numerosas variedades de virus de la gripe mutan para volverse resistentes a los medicamentos.

En la primavera de 2015, las aves silvestres de Asia transportaron virus H5N8 a América del Norte, que se mezclaron con variantes de la gripe aviar y mutaron en un virus H5N2 altamente patógeno. Este virus provocó la muerte, tanto por el virus como por la eutanasia, de decenas de millones de aves y amenazó a la multimillonaria industria del pollo y el pavo. El virus H5N2 ha mutado en variantes H5N1, y dada la cantidad de huéspedes en aves silvestres y domesticadas, las mutaciones continuas podrían desarrollar una cepa de la gripe que podría afectar a los humanos, causando una pandemia y una devastación severa en nuestras economías globales, nuestra bioseguridad alimentaria y la salud humana. Dado que los virus de la gripe se pueden propagar a través del aire, contactos directos y secundarios (a través de vehículos, zapatos, ropa, toallas, billetes de dólares, moscas, ácaros, etc.) y que los virus de la gripe pueden sobrevivir en gotitas mucosas hasta por 17 días, la amenaza de que una pandemia de gripe se propague a los seres humanos preocupa en gran medida a los especialistas en virología, salud pública y defensa. Encontrar procedimientos y composiciones para reducir la carga útil de patógenos virales vectorizados por animales hospedadores y fómites será de gran utilidad para el interés público. Además, dado que la mayoría de las vacunas tienen una utilidad limitada (pero enfocada) contra solo unas pocas variantes de la gripe, es de suma importancia encontrar soluciones de base amplia para prevenir y reducir la amenaza de múltiples virus de la gripe en particular, y diversos virus en general.

Las setas medicinales se han ingerido como alimento y como terapia durante cientos y, en algunos casos, miles de años. Este es un fuerte apoyo para su ingestión segura, lo que las convierte en candidatas atractivas en la búsqueda de nuevos agentes antivirales. Además, los compuestos divulgados en el presente documento pueden ser ingredientes residentes en alimentos bien conocidos que, cuando se aíslan y concentran, pueden funcionar como fármacos. Entonces, la diferencia en el presente documento entre un alimento y un medicamento es que un medicamento es típicamente una molécula aislada que se presenta en una forma de alta pureza (es decir, 90%) y se usa en una dosis alta para tratar una enfermedad. Una de las primeras setas reconocidas por su actividad antiviral fue Fomes fomentarius, un cono leñoso con forma de pezuña que se encontró que inhibe el virus del mosaico del tabaco.2 Más recientemente, Piraino et al., encontraron derivados de la seta Gitana, Rozites caperata inhibe significativamente la replicación y propagación de Varicela zoster (el virus del 'herpes zóster'), influenza A y B, y herpes simple I y II. Sarkar et al., también han identificado actividad contra el herpes simple I en un extracto de setas Shiitake (Lentinula edodes).

34 Collins y Ng han identificado un polisacaropéptido que inhibe la infección por VIH tipo 1 de las setas Cola de Pavo (Coriolus versicolor = Trametes versicolor).5 Brandt, Piraino y Stamets también han publicado resúmenes de las propiedades antivirales de algunas especies de setas.67

La creencia inflexible que prevalece entre los expertos en la ciencia de la investigación de setas medicinales es que los únicos beneficios de los extractos de setas medicinales deben provenir de la extracción con agua caliente. Como han publicado tres destacados expertos, expertos en la técnica y autores de artículos científicos y libros sobre las propiedades medicinales de las setas: "Los extractos de agua caliente son la única forma de preparación de setas que se ha utilizado en la Medicina Tradicional China (MTC), y la única forma de suplemento de setas que se haya utilizado, probado o estudiado en la investigación científica y médica". (The Health Benefits of Medicinal Mushrooms, 2005, Dr. Mark Stengler).8

De acuerdo con John Seleen of Mushroom Science (actualmente en su sitio web Mushroom Science), "Pocas personas se dan cuenta de cuánta investigación se ha realizado sobre setas medicinales; se han publicado más de 2.000 estudios en solo los últimos 10 años, y todos estos estudios han utilizado extractos de agua caliente. De hecho, los extractos de agua caliente son el único tipo de preparación de setas medicinales que tiene una prueba real de eficacia para apoyar la salud inmunológica. No es frecuente que haya un consenso absoluto entre miles de años de práctica y todos los estudios científicos publicados sobre el mismo tema, pero ese es el caso de las setas medicinales. Todas las fuentes y tradiciones están de acuerdo, en que las setas medicinales deben extraerse con agua caliente cuando se usan para el apoyo inmunológico, y los extractos de agua caliente son el único tipo de suplemento de setas validado por la investigación" (10 de septiembre de 2015).

Además, un 'documento técnico' de 2015 de Jeffery S. Chilton, Redefining Medicinal Mushrooms: Redefining Medicinal Mushrooms: A new Scientific screening program for active compounds establece que, si el micelio se cultiva en arroz y no en madera, que "sin los precursores naturales, el micelio basidiomiceto en cultivo estéril produce pocos de los metabolitos secundarios importantes". Por lo tanto, estos tres expertos, expertos en la técnica y muy influyentes, son unánimes en desacreditar cualquier actividad significativa de los extractos de micelio en agua no caliente, especialmente cuando el micelio se cultiva en granos tales como el arroz. Por lo tanto, enseñan los detalles de esta invención.

Con el advenimiento del cultivo de tejidos de micelio a principios del siglo XX, esta nueva etapa de vida de las setas (el micelio en oposición a los cuerpos frutales de la seta) estuvo disponible para probar la bioactividad. Esta nueva forma fúngica disponible abrió nuevas fronteras para la investigación de productos naturales. Sin embargo, las compañías farmacéuticas que estudian productos naturales basados en setas, típicamente y de manera más económica, analizan los cuerpos frutales y, al hacerlo, pierden las actividades antivirales que este inventor ha descubierto que se expresan durante la etapa de vida del micelio.

Desde un punto de vista práctico, los investigadores farmacéuticos encuentran más fácil recolectar y analizar una seta que cultivarla laboriosamente y luego analizar el micelio. Este enfoque estándar tiene un fundamento razonable: muchas especies de hongos formadores de setas no crecen o son demasiado lentas para crecer en cultivo in vitro en comparación con otros hongos tales como los mohos. Además, los cuerpos fructíferos de las setas están hechos de micelio compactado, denso con tejido, y por lo tanto, aparentemente sería un mejor recurso para la bioprospección que el micelio más suelto en red. Esto explicaría por qué hay poca información técnica anterior sobre el micelio de especies de setas que sean antivirales activas. Normalmente, cuando una empresa farmacéutica analiza productos naturales a base de setas, analiza grandes conjuntos de especies. Si no encuentran actividad en la forma natural (el cuerpo frutal de la seta o carpóforo), pasan a otras especies sin explorar adicional de un resultado negativo, basado en la creencia errónea de que las actividades de las setas serían las mismas que las del micelio y que todas las cepas o variedades de cultivo de una especie poseerían la misma actividad antiviral. Esto es comprensible ya que la creencia predominante es que la seta está compuesta simplemente de micelio compactado y los dos compartirían, en común, los mismos componentes.

La investigación genómica reciente muestra que se activan más genes durante la etapa de desarrollo del micelio que en la estructura reproductiva de los cuerpos fructíferos de las setas. Como señalaron Li et al., 2013, "The proteincoding genes were expressed higher in mycelia or primordial stages compared with those in the fruiting bodies."9 Las prácticas del inventor inadvertidamente han reivindicado o apoyado esta afirmación sin conocimiento previo de que hay más genes sobrerregulados durante el crecimiento micelial que la formación de cuerpos frutales (setas). Esto no se sabía, ni era obvio, en el momento en que este solicitante de patente presentó su primera solicitud de patente antiviral provisional U.S. 60/534.776 el 6 de enero de 2004.

Sorprendentemente, e inesperadamente, el descubrimiento del autor de que los extractos solubles en alcohol de micelio de Ganoderma lucidum (Ganoderma lucidum var. Resinaceum) mostraron actividad antigripal es novedoso porque está en contradicción directa con los resultados anteriores de que los extractos en alcohol de cuerpos frutales no tenían actividad. Esto es único en el sentido de que es contrario a la intuición, ya que el pensamiento convencional llevaría a la mayoría de los científicos a creer que la actividad de ambas formas compartiría efectos comunes.

Seong-Kug Eo analizó fracciones solubles en agua y solubles en alcohol de los cuerpos frutales de Ganoderma lucidum.10 Los compuestos solubles en metanol se marcaron como "GLMe", para la "fracción en metanol de Ganoderma lucidum" y "GLhw" para la fracción en agua caliente de "G . lucidum." Sus conclusiones mostraron que las fracciones solubles en metanol (alcohol) no tenían actividad contra los virus de la gripe: "Los carpóforos de G. lucidum (500 g) se rompieron y se extrajeron con agua caliente durante 8 h. El extracto en agua se concentró a una décima parte del volumen original, y se agregaron tres volúmenes de EtOH helado para precipitar los componentes de alto peso molecular. Después de reposar durante la noche a 4 °C, se centrifugó y los precipitados se liofilizaron, y se obtuvo GLhw (3,30 g) como una sustancia pardusca. Se aislaron ocho sustancias solubles en metanol (GLMe) mediante disolventes orgánicos sobre la base de diferencias en la carga eléctrica neta. GLMe-1, GLMe-2, GLMe-4 y GLMe-7 aislados de la fracción en MeOH exhibieron efectos inhibidores, especialmente sobre los efectos citopáticos inducidos por cepas de VSV Indiana y New Jersey a concentraciones que no mostraron citotoxicidad contra las células Vero; sin embargo, no mostraron ningún efecto sobre los otros virus tales como e1HSV y el virus de la influenza A".

El autor señala que este artículo ha sido referenciado, a esta fecha, 18 de agosto de 2015, 2.090 veces de acuerdo con Google y 3.570 veces por los motores de búsqueda Bing, lo que demuestra que la afirmación de Seong-Kug Eo et al., (1999) de que las fracciones solubles en alcohol de Ganoderma lucidum eran inactivas contra los virus de la gripe y el herpes estaba bien establecida en la literatura científica.

Este descubrimiento de Seong-Kug Eo et al., (1999) se aleja de la patente de Stamets N° 8.765.138 (2014), la última de las cuales describe que los extractos alcohólicos del micelio de Ganoderma lucidum eran muy activos contra los virus de la gripe y el herpes. La sabiduría convencional ha sido que los cuerpos fructíferos (setas) de Ganoderma lucidum contienen los componentes bioactivos más diversos y que el micelio es menos activo. Además, dado que los cuerpos fructíferos están compuestos de micelio, los expertos actuales e históricamente en la preparación de setas habrían visto que habría diferencias entre los extractos elaborados a partir de setas frente a los micelios como una contradicción fáctica. Por lo tanto, los resultados del inventor eran novedosos y no obvios en el momento de las primeras solicitudes de patente antivirales de este inventor, en las que descubrió que los extractos en EtOH/H2O de cuerpos frutales de Agarikon (Fomitopsis officinalis) eran inactivos contra los virus de la viruela, la gripe y el herpes mientras que extractos en EtOH/H2O del micelio vivo de esta especie fueron activos contra los mismos virus.

El documento US2010/178364 describe procedimientos para prevenir o atenuar la microcompetencia entre un polinucleótido extraño y un polinucleótido celular o atenuar un efecto de tal microcompetencia.

El documento US2009/137661 describe composiciones para reducir la actividad de una célula de cáncer de cuello uterino. La composición incluye al menos uno de los siguientes compuestos: isopsoraleno, triptolida, baicaleína, ácido gálico, quercetina, ácido gosipol-acético, baicalina, clorhidrato de berberina y derivados de los mismos en una cantidad suficiente para reducir la actividad de la célula de cáncer de cuello uterino en la sujeto.

El documento WO02/19965 describe un procedimiento para inhibir la replicación de virus dependiente de proteínas de choque térmico en células y en animales. También se describe un procedimiento para identificar compuestos que inhiben la replicación de virus dependiente de proteínas de choque térmico.

Sumario

La presente invención proporciona una composición para su uso en el tratamiento de una infección por virus patógeno que comprende uno o más de ácido siríngico, ácido trans-cinámico, ácido trans-ferúlico, sales de los mismos, ésteres de los mismos o combinaciones de los mismos, en la que el virus patógeno es virus del papiloma humano (VPH). En un aspecto, el ácido siríngico, el ácido trans-cinámico y el ácido trans-ferúlico tienen un efecto antiviral, con un Índice de Selectividad 50 (SI⁵⁰) —10 contra el virus del papiloma humano (VPH), y el ácido trans-cinámico y el ácido transferúlico tienen un efecto antiviral con un Índice de selectividad 50 (SI⁵⁰) —100 contra el virus del papiloma humano (VPH). En otro aspecto, el efecto antiviral tiene un índice de selectividad (SI⁵⁰= CC⁵⁰/EC⁵⁰) contra el virus patógeno SI⁵⁰— 5. En otro aspecto, el efecto antiviral tiene un índice de selectividad (SI⁵⁰= CC⁵⁰/EC⁵⁰) contra al virus patógeno SI ⁵⁰—10. En otro aspecto, el efecto antiviral tiene un índice de selectividad (SI⁵⁰CC⁵⁰/EC⁵⁰) contra el virus patógeno SI ⁵⁰— 100. En otro aspecto, la composición tiene además un efecto antibacteriano. Como se describe en el presente documento, la composición puede comprender adicionalmente un extracto de micelio de un hongo. En otro aspecto descrito en el presente documento, el hongo comprende especies de Polyporales, Hymenochaetales o Agaricales. El hongo comprende especies de Antrodia, Fomitopsis, Ganoderma, Hypsizygus, Inonotus, Piptoporus, Pleurotus, Trametes o Polyporus. En otro aspecto descrito en el presente documento, el hongo comprende Antrodia camphoratus, Antrodia cinnamomea, Fomitopsis officinalis, Ganoderma annulare, Ganoderma applanatum, Ganoderma brownii, Ganoderma lucidum, Ganoderma lingzhi, Ganoderma resinaceum, Inonotus obliquus, Hypssulaus versicolor ostreatus.

La composición para su uso puede administrarse como una dosis diaria de una composición durante un período de tiempo de 10 a 60 días a un paciente que padece la infección por virus patógeno, en el que la dosis diaria comprende aproximadamente 0,001 a 2 gramos de la composición, en el que la composición es como se define en la Reivindicación 1. En un aspecto, la dosis diaria comprende aproximadamente 0,1 a 1,5 gramos de la composición. En otro aspecto, la dosis diaria comprende aproximadamente de 0,25 a 1,4 gramos de la composición. En otro aspecto, la dosis diaria comprende aproximadamente 1.000 miligramos de la composición.

También se describe en el presente documento un procedimiento para fabricar una forma de dosificación para tratar, mejorar, mitigar, aliviar, reducir y curar una infección por virus que comprende: formular una composición en una forma de dosificación que comprende aerosoles, cápsulas, comprimidos, elixires, emulsiones, pastillas, suspensiones, jarabes, píldoras, lociones, parches epidérmicos, supositorios, inhaladores o inyectables, en los que la composición comprende uno o más de 7-cloro-2-oxo-4-fenil-2H-cromen-3-carboxilato de etilo, ácido vanílico, crisina, hidrato de quercetina, hidrato de rutina, ácido siríngico, ácido trans-cinámico, ácido trans-ferúlico, sales de los mismos, ésteres de los mismos o combinaciones de los mismos, y en el que la composición tiene un efecto antiviral contra un virus patógeno que comprende uno o más del Virus del herpes de la Varicella zóster, virus de Epstein-Barr, virus del herpes simple I y II, virus del papiloma humano (VPH), poliovirus o norovirus.

También se describe en el presente documento una composición farmacéutica que comprende uno o más extractos de uno o más micelios de hongos. La composición comprende adicionalmente un compuesto activo. El compuesto activo comprende uno o más compuestos activos extraídos, aislados, sintéticos o fabricados. Los hongos comprenden una o más especies de Antrodia, Fomitopsis, Ganoderma, Hypsizygus, Inonotus, Piptoporus, Pleurotus, Trametes y Polyporus o el compuesto activo comprende una o más de 7-cloro-2-oxo-4-fenil-2H-chromen-3-carboxilato de etilo, ácido vanílico, crisina, hidrato de quercetina, hidrato de rutina, ácido siríngico, ácido trans-cinámico, ácido transferúlico, ácido deshidrosulfurénico, ácido eburicoico, sales de los mismos, ésteres de los mismos o combinaciones de los mismos. La composición farmacéutica descrita en este documento tiene actividad antiviral contra los virus del herpes, virus del herpes varicela zóster, virus de Epstein-Barr, virus del herpes simple I y II, virus del papiloma humano (VPH), virus de la influenza, virus de la hepatitis, poliovirus o norovirus.

Los pacientes a menudo albergan múltiples virus y, a medida que disminuye la inmunidad, pueden proliferar múltiples virus. La combinación de múltiples virus puede exacerbar condiciones preexistentes, hacer que se expresen nuevas enfermedades y confundir los protocolos médicos debido a la complejidad de los factores que se presentan. Como tal, tener una nueva combinación de moléculas antivirales activas es útil y único. La combinación de estas moléculas con extractos de micelio de setas medicinales agrega beneficios adicionales más allá de la simple actividad antiviral. Estos beneficios adicionales incluyen, entre otros, la reducción de la inflamación, la activación de las vías de regresión tumoral P21 y P53, la mejora de la preparación, la actividad, las poblaciones y la capacidad de las células asesinas naturales, macrófagos y células T citotóxicas y la capacidad de atacar las células enfermas, reforzando la preparación general de los pacientes para la defensa del huésped.

La presente invención también proporciona una forma de dosificación para tratar, mejorar, mitigar, aliviar, reducir y curar una infección por virus que comprende: formular una composición en una forma de dosificación que comprende aerosoles, cápsulas, comprimidos, elixires, emulsiones, pastillas, suspensiones, jarabes, píldoras, lociones, parches epidérmicos, supositorios, inhaladores o inyectables, en los que la composición es como se define en la Reivindicación 1. En otro aspecto, la composición comprende adicionalmente cualquier compuesto medicinal activo. En otro aspecto, el compuesto activo comprende uno o más compuestos activos extraídos, aislados, sintéticos o fabricados.

También se describe en el presente documento un procedimiento para preparar una composición farmacéutica que comprende uno o más extractos de uno o más micelios de hongos, comprendiendo los medios cultivar un micelio de setas puras sobre un sustrato sólido o sustrato líquido bajo luz apropiada y extraer el micelio con uno o más más disolventes, agua, agua fría, agua caliente, agua/etanol o un disolvente, y una o más etapas de combinar extractos de alcohol y extractos de agua en proporciones que van de 1:1 a 1:99, ajustando el contenido de alcohol de los extractos de agua/etanol a uno o más de etanol al 22-23% en volumen o etanol al 22-50% en volumen o etanol al 25-35% en volumen o etanol al 30-40% en volumen o etanol al 35-45% en volumen, filtrando, añadiendo parcialmente etanol para precipitar polisacáridos solubles en agua, precipitar sólidos o un precipitado, separar un sobrenadante de sólidos o un precipitado, concentrar un sobrenadante, eliminar parcial o totalmente un disolvente o líquido, secar, aislar o purificar un ingrediente activo, aislar o purificar una fracción, aislar o purificar un compuesto activo, o combinar con CBD (cannabidiol), proporcionar un procedimiento o medio físico o quími

extractos o ingredientes principales activos en lociones u otros procedimientos o medios de suministro a un paciente.

Otra realización es una composición farmacéutica producida por cualquiera de los medios descritos en este documento. En un aspecto, la composición comprende uno o más de ácido siríngico, ácido trans-cinámico, ácido transferúlico, sales de los mismos, ésteres de los mismos o combinaciones de los mismos.

También se describe en el presente documento un procedimiento para preparar una composición que comprende uno o más de 7-cloro-2-oxo-4-fenil-2H-cromen-3-carboxilato de etilo, ácido vanílico, crisina, hidrato de quercetina, hidrato de rutina, moléculas de ácido siríngico, ácido trans-cinámico, ácido trans-ferúlico, sales de los mismos o ésteres de las mismas moléculas, que comprenden aislar, purificar, sintetizar o fabricar las moléculas y combinarlas en diversas proporciones de 1:1 a 99:1 en porcentaje en peso, incluidos todos los números enteros dentro del intervalo de proporción especificado, o combinando cualquier ingrediente aprobado por la FDA.

También se describe en este documento un medio para preparar una composición que comprende uno o más de 7-cloro-2-oxo-4-fenil-2H-cromen-3-carboxilato de etilo, ácido vanílico, crisina, hidrato de quercetina, hidrato de rutina, ácido siríngico, ácido trans-cinámico, ácido trans-ferúlico, sales de los mismos, ésteres de los mismos o combinaciones de los mismos que comprenden aislar, purificar, sintetizar o fabricar las moléculas y combinarlas en diversas proporciones de 1:1 a 99:1 en porcentaje en peso, incluyendo todos los números enteros dentro del intervalo de proporción especificado, o combinando cualquier ingrediente aprobado por la FDA.

Otra realización es una composición farmacéutica producida por cualquiera de los medios descritos en este documento. En un aspecto, la composición es como se define en la Reivindicación 1.

Divulgación de la invención

"Extracto", como se usa en el presente documento, puede referirse a un extracto crudo de micelio, un extracto parcialmente purificado o un compuesto activo, ingrediente o molécula aislada de dicho extracto. Puede utilizarse cualquier medio de extracción conocido en la técnica.

En vista de la falta de uso de micelio de setas medicinales y sus componentes inherentes para proteger contra virus que afectan a animales, la presente invención proporciona nuevas composiciones y procedimientos para usar tales agentes o sus equivalentes sintéticos más baratos.

La presente invención ofrece un enfoque único para el control viral mediante la utilización de constituyentes moleculares, más específicamente ingredientes farmacológicos activos discretos, residentes en extractos de etanol acuoso del micelio vivo de Antrodia, Fomes, Fomitopsis, Ganoderma, Inonotus, Schizophyllum, Phellinus, Piptoporus, Trametes y otros taxones en Polyporaceae, y una gama de principios activos codificados por secuencias de genes del micelio de setas medicinales relacionados para combatir virus dañinos.

Esta patente se centra en extractos de EtOH/H2O (alcohol etílico/agua) de micelio vivo para descubrir nuevos medicamentos, en particular antivirales. Se puede usar metanol y otros disolventes conocidos en la técnica, pero el inventor se centró en el etanol porque el etanol puede consumirse, mientras que el metanol es altamente tóxico (causando ceguera) si se consume. Se describen nuevas moléculas antivirales que son componentes dentro de los extractos de micelio vivo.

Por lo tanto, esta invención no solo proporciona la primera evidencia de que los extractos y moléculas dentro de estos extractos reducen algunos oncovirus y también reducen los virus que causan inflamación y desactivación inmunitaria, que contribuyen a la oncogénesis. Estos extractos y componentes activos no solo reducen la patogenicidad de los virus, sino que también reducen, como consecuencia, el riesgo de cáncer. Por lo tanto, los agentes activos encontrados por este inventor pueden combinarse para obtener composiciones anticancerígenas, mejorando significativamente los beneficios de otros fármacos anticancerosos y programas de medicina integrativa para aumentar la calidad de vida de los pacientes con cáncer.

Esta invención ofrece un amplio escudo biológico de defensa contra virus patógenos para humanos, aves, abejas, cerdos y otros animales utilizando extractos de setas medicinales y sus ingredientes farmacéuticos activos, moléculas activas o compuestos activos. Estos extractos contienen muchos compuestos antivirales, cuyo uso es nuevo para la ciencia, imprevisto y no obvio.

El inventor examinó la literatura científica hasta 2001 y escribió una revisión de la literatura para la revista HerbalGram11 revisada por pares. Los antivirales de especies de setas, hasta esa fecha, se elaboraron a partir de extractos de cuerpos de frutas, excepto en el caso de Shiitake (LEM de Lentinula edodes) y Cola de Pavo (PSP y PSK de Trametes versicolor). LEM, PSP y PSK se aíslan utilizando agua caliente como el principal disolvente de extracción de "primer etapa". Es de destacar que LEM, PSK y PSP precipitan de la solución cuando los niveles de EtOH superan el 25-35%, un procedimiento que practica este inventor. Usando el sobrenadante clarificado, desprovisto de los compuestos LEM, PSK y PSP ricos en precipitantes, este inventor se opuso al pensamiento convencional. La eliminación de betaglucanos y proteínas insolubles en etanol ayudó, en opinión de este inventor, a desenmascarar un nuevo conjunto de agentes antivirales. Sin embargo, el inventor, en 2001, reflejando la sabiduría convencional actual de la ciencia declarada en el artículo 12 de la revista botánica revisada por pares del inventor, que los únicos antivirales conocidos provienen de la extracción con agua caliente y estos son antivirales basados en polisacáridos o polisacáridos ricos en proteínas (betaglucano) presentes tanto en el micelio como en los cuerpos frutales. Resulta que esto no era necesariamente cierto, como lo descubrió posteriormente este inventor, para su sorpresa, y contrariamente a la sabiduría convencional de los expertos en la técnica.

Descripción detallada de la invención

La presente invención proporciona una composición para su uso en el tratamiento de una infección por virus patógeno que comprende uno o más de ácido siríngico, ácido trans-cinámico, ácido trans-ferúlico, sales de los mismos, ésteres de los mismos o combinaciones de los mismos, en la que el virus patógeno es virus del papiloma humano (VPH). La invención incluye principios activos que se encuentran en la combinación de productos del micelio de múltiples especies de setas en una forma que tiene el efecto acumulado de restringir el crecimiento, propagación y supervivencia de virus en animales, especialmente humanos, aves y abejas. La presente invención también incluye la combinación de productos de múltiples especies de setas en una forma útil para prevenir, tratar, aliviar, mitigar, mejorar o reducir virus, incluidos oncovirus, en animales, incluidos seres humanos. Dichas formas pueden tener las ventajas adicionales de funcionar como antibacterianos, antiprotozoarios, inmunomoduladores, nutracéuticos y/o prebióticos, así como de mejorar los mecanismos de defensa de la inmunidad innata y la respuesta inmune del huésped, dando como resultado la curación.

Las setas que presentan propiedades medicinales son numerosas. Algunas especies y subespecies ("cepas") varían en sus proporcionalidades de constituyentes. Este inventor ha encontrado una sorprendente variedad de moléculas antivirales distribuidas entre diferentes familias de moléculas. Más particularmente, los polifenoles dentro de los poliporales (los denominadas setas 'poliporo') contienen muchas de las moléculas antivirales descubiertas por este inventor, muchas de las cuales se expresan como metabolitos extracelulares, primarios y secundarios. Estas moléculas son diversamente solubles en una amplia gama de disolventes, desde agua muy polar hasta hexano y aceites, que son menos polares. Los polifenoles, lípidos y ácidos grasos de mayor interés para la nueva actividad antiviral son en particular, pero no exclusivamente, los que son solubles en disolventes no polares.

Los extractos de alcohol acuoso de micelios de setas antivirales y antibacterianos, especialmente en las Polyporaceae, más específicamente Fomitopsis officinalis (= Laricifomes officinalis), Fomitopsis pinicola, Ganoderma annulare, Ganoderma lingzhi, Ganoderma lucidum, Ganoderma lucidum variedad resinaceum (=Ganoderma resinaceum), Ganoderma applanatum, Ganoderma brownii, Ganoderma atrum, Ganoderma oregonense, Ganoderma sinense, Ganoderma tsugae y otras especies de Ganoderma, Inonotus obliquus, Piptoporus betulinus, Schizophyllum commune y Trametes versicolor contienen moléculas altamente activas en la reduccion de virus patógenos. Especies adicionales que probablemente proporcionen un depósito de moléculas antivirales incluyen, pero no se limitan a, Polyporales e Hymenochaetales tales como, Antrodia cinnomonea, Fomitiporia robusta, Fomes fomentarius, Ganoderma curtisii, Ganoderma lingzhi, Grifola frondosa, Heterobasidion annosum, Inonotus hispidus, Inonotus andersonii, Inonotus dryadeus, Irpex lacteus, Laetiporus cincinnatus, Laetiporus sulphureus, Laetiporus conifericola, Lentinula edodes, Lenzites betulina, Phanerochaete chrysosporium, Phaeolus schweinitzii, Phellinus baumii, Phellinus igniarius, Phellinus linteus, Phellinus pini, Polyporus elegans, Phanerochaetes chrysosporium, Phaeolus schweitnitzii, Stereum complicatum, Stereum hirsutum, Stereum ostrea, Trametes elegans, Trametes gibbosa, Trametes hirsuta, Trametes villosa, Trametes cingulata, Trametes ochracea, Trametes pubescens, Trametes ectypa, Trametes aesculi, Wolfiporia cocos, and Agaricales such as Agaricus augustus, Agaricus blazei, Agaricus bonardii, Agaricus brasiliensis, Agaricus campestris, Agaricus lilaceps, Agaricus placomyces, Agaricus subrufescens, Agaricus sylvicola, Agrocybe pediades, Agrocybe aegerita, Agrocybe arvalis, Agrocybe praecox, Amanita muscaria, Amanita gemmata, Amanita pantherina, Amanita phalloides, Amanita virosa, Amanita pachycolea, Amanita vaginata, Clitocybe odora, Clitocybe dealbata, Clitocybe dilitata, Conocybe cyanopus, Conocybe lacteus, Conocybe rickenii, Conocybe smithii, Conocybe tenera, Coprinopsis atrementaria, Coprinopsis nivea, Coprinopsis lagopus, Coprinus comatus, Coprinus micaceus, Galerina autumnalis, Galerina marginata, Galerina venenata, Gymnopus hydrophilus, Gymnopilus peronatus, Hypholoma aurantica (Leratiomyces ceres), Hypholoma capnoides, Hypholoma fasciculare, Hypholoma sublateritium, Hypsizygus marmoreus, Hypsizygus tessulatus, Hypsizygus ulmarius, Lentinus ponderosus, Lepiota procera (Macrolepiota procera), Lepiota rachodes (Chlorophyllum rachodes), Lepista nuda, Mycena alcalina, Mycena pura, Mycena aurantiadisca, Panellus serotinus, Panaeolus foenisecii, Panaeolus subbalteatus, Pleurotus columbinus, Pleurotus ostreatus, Pleurotus cystidiosus, Pleurotus pulmonarius, Pleurotus sapidus, Pleurotus tuberregium, Panellus stipticus, Panellus serotinus, Pluteus cervinus, Psathyrella aquatica, Psathyrella condolleana, Psathyrella hydrophila, Psilocybe allenii, Psilocybe azurescens, Psilocybe baeocystis, Psilocybe caerulescens, Psilocybe coprophila, Psilocybe cubensis, Psilocybe cyanescens, Psilocybe ovoideocystidiata, Psilocybe semilanceata, Psilocybe stuntzii, Psilocybe subaeruginosa, Psilocybe weilii, Stropharia aeruginosa, Stropharia coronilla, Stropharia coronilla, Stropharia cyanea, Stropharia rugoso-annulata, Stropharia semiglobata, Stropharia semigloboides, Stropharia squamosa, Stropharia thrausta, Stropharia umbonotescens, Termitomyces robusta, Volvaria bombycina, Volvariella volvacea, y ascomycetes tales como Metarhizium anisopliae, Metarhizium acridum, Beauveria bassiana, Cordyceps capitata, Cordyceps militaris, Cordyceps sinensis en sentido amplio, Cordyceps subsessilis, Ophiocordyceps sinensis, y Ophiocordyceps unilateralis.

El efecto de los componentes antivirales y antibacterianos dentro de las especies de setas anteriormente mencionadas y sus parientes puede ser el factor decisivo que mejora la supervivencia de la infección en muchos animales, incluidos humanos, perros, gatos, caballos, vacas, cerdos, aves, peces, insectos (incluidas las abejas) y otros animales silvestres y domésticos. Además, estos extractos de setas, y las versiones sintéticas o extraídas de forma natural de los compuestos contenidos en dichos extractos, pueden mejorar y combinarse con una amplia gama de terapias convencionales contra el cáncer, incluidas las quimioterapias que utilizan herceptina, tamoxifeno, taxol, interferón alfa, así como vacunas, terapias génicas, incluida la incorporación de nanobots, radiológicas, inmunológicas, sónicas, fotónicas, eléctricas, de choque frío, electromagnéticas, microbiómicas y otras terapias contra el cáncer.

La reducción de los efectos cancerígenos de los virus y las bacterias es una consecuencia y se deriva de los efectos antivirales, antibacterianos y otros efectos medicinales de los micelios de setas poliporo en particular, y los micelios de otros setas medicinales en general, como se describe en la patente de los estados Unidos N° 8.765.138, expedida el 01/07/2014 por el inventor. Empleando extractos y los ingredientes activos derivados de estos hongos antivirales y antibacterianos, se puede lograr una mejora significativa en la capacidad de supervivencia de los pacientes, incluidos humanos y animales.

Procedimientos y medios de extracción

Este inventor ha descubierto que las extracciones con agua fría o temperatura ambiente (75 °F = 24 °C) EtOH/H2O (etanol/agua) como se describe en la patente de los Estados Unidos No. 8.765.138 (2014) y la solicitud de patente de los Estados Unidos No. 14/641.432 (2015), son efectivos para extraer moléculas antivirales de alta potencia y son de apoyo inmunológico, contrariamente a las opiniones predominantes de los expertos en la técnica que argumentan que solo los extractos con agua caliente son útiles para extraer compuestos de apoyo inmunológico a base de setas medicinales.

Por el contrario, el inventor descubrió que la extracción en frío producía activos antivirales contrarios al pensamiento convencional, que aboga por la extracción en caliente (véanse los párrafos 0009-0011 anteriores). "Frío" es una percepción empírica. El inventor define "frío" como < 98,6 °F (< 37 °C) la temperatura promedio de un ser humano y "caliente" como > 98,6 °F (> 37 °C). El inventor utilizó procedimientos de extracción en frío, más específicamente a temperatura ambiente (“ 72-75 °F; “ 22-24 °C), para hacer extractos de etanol/agua del micelio de Fomitopsis officinalis, que a su vez mostró una fuerte actividad contra la gripe. los virus del herpes y la viruela, mientras que los extractos con agua fría y agua caliente >180 °F (82 °C) del cuerpo frutal de la misma cepa no mostraron actividad contra estos mismos virus.

Además, el inventor se centra en el uso de micelio, no de cuerpos frutales, de macrohongos medicinales usados tradicionalmente en el descubrimiento de poderosas propiedades y estructuras antivirales. Este inventor ha identificado numerosas moléculas antivirales residentes dentro y expresadas extracelularmente por el micelio y extraíbles con agua fría/etanol, de granos (arroz), madera y sustratos lignocelulósicos, utilizando solventes distintos al agua caliente para crear nuevas composiciones útiles para reducir virus y su infectividad cruzada para ayudar a las células animales de la invasión y replicación viral.

La optimización de la dosificación depende de numerosas variables. La diferencia entre un medicamento y un veneno suele ser la dosis. La determinación de la dosis adecuada para los efectos antivirales solo requerirá experimentación de rutina porque las concentraciones de extractos se pueden diluir o concentrar simplemente ajustando el contenido de etanol y/o agua. En general, con respecto a mezclas de Ganoderma lucidum variedad resinaceum ("G.r."), las composiciones que consisten en 5-95% de G.r. se prefieren, el 10-75% es más preferido y el 20-50% es más preferido.

El término "cantidad eficaz" se refiere a una cantidad suficiente para tener actividad antiviral y/o potenciar un mecanismo de defensa del huésped como se describe con más detalle a continuación. Esta cantidad puede variar en cierto grado dependiendo del modo de administración, pero estará en el mismo intervalo general. La cantidad efectiva exacta necesaria podría variar de un sujeto a otro, dependiendo de la especie, el tratamiento preventivo o la condición que se esté tratando, el modo de administración, etc. La cantidad efectiva apropiada puede ser determinada por un experto en la técnica usando solo experimentación de rutina o conocimiento previo en la técnica en vista de la presente divulgación.

El adulto estadounidense promedio tiene una masa corporal aumentada en comparación con el pasado, por lo que un régimen de dosificación debe tener en cuenta los individuos más grandes de lo que se ha practicado históricamente. Por ejemplo, la mujer estadounidense promedio pesaba 142 (64,4 kg) libras en 1990; hoy, la mujer promedio pesa 160 libras (72,6 kg). De manera similar, el peso promedio de los hombres estadounidenses en 1990 era de 180 libras (81,6 kg) y hoy los hombres promedian alrededor de 195 libras (88,4 kg). A modo de ejemplo, podría calcularse un régimen de dosificación típico para adultos de masa corporal variable de la siguiente manera, lo que permite una flexibilidad considerable de dosificación dependiendo de las circunstancias conocidas por la ciencia de la dosificación farmacéutica.

Las cantidades terapéuticas típicas de micelio cultivado en arroz para un adulto de 180 libras (81,6 kg) (extractos de especies fúngicas individuales y/o combinaciones de especies) son preferiblemente de 0,1 a 20 g/día, más preferiblemente de 0,25 a 10 g/día, y lo más preferiblemente 0,5-5 g/día.

Las cantidades terapéuticas típicas de extractos (especies de hongos individuales y/o combinaciones de especies) suministran preferiblemente 0,1-20 mg de materiales extraídos por kg de peso corporal, más preferiblemente 0,25-10 mg/kg de peso corporal y lo más preferiblemente 0,5-5 mg/kg de peso corporal.

Cantidades terapéuticas de dosis diaria típica de moléculas activas, compuestos activos o principios activos principales, que incluyen 7-cloro-2-oxo-4-fenil-2H-cromen-3-carboxilato de etilo, ácido vanílico, hispolona hidrato de quercetina, rutina, hidrato, ácido siríngico, ácido trans-cinámico, ácido trans-ferúlico y sales conjugadas y iónicas, ésteres o congéneres de ácido vanílico, ácido siríngico, ácido trans-cinámico y ácido trans-ferúlico, para la prevención de la infección viral preferiblemente oscilan entre aproximadamente 100-200 mg al día (aproximadamente 1,2-2,4 mg/kg de peso corporal para un adulto de 180 libras o 81,6 kg), preferiblemente divididos en dos unidades de dosificación administradas dos veces al día. Una dosis terapéutica diaria preferida es de aproximadamente 200 mg. Los ingredientes activos 7-cloro-2-oxo-4-fenil-2H-cromen-3-carboxilato de etilo, ácido vanílico, hispolona hidrato de quercetina, hidrato de rutina, ácido siríngico, ácido trans-cinámico, ácido trans-ferúlico y conjugado y sales iónicas, ésteres o congéneres de ácido vanílico, ácido siríngico, ácido trans-cinámico y ácido trans-ferúlico pueden combinarse entre sí en cualquier proporción. En general, los compuestos con aprobación de la FDA se prefieren tanto individualmente como en mezclas en cualquier proporción, mientras que los compuestos que carecen de dicha aprobación (tal como 7-cloro-2-oxo-4-fenil-2H-cromen-3-carboxilato de etilo) son menos preferidos. Las cantidades terapéuticas típicas de moléculas activas, compuestos activos o ingredientes de principios activos para tratar, mejorar, mitigar, aliviar, reducir y curar una infección por virus patógeno varían preferiblemente de aproximadamente 0,001 a 2,0 g/día, más preferiblemente de aproximadamente 0,1 a 1,5 g/día y lo más preferiblemente en el intervalo de aproximadamente 0,25 a 1,4 g/día, preferiblemente dividido en dos unidades de dosificación administradas dos veces al día durante un período de tiempo que varía de 10 a 60 días. Una dosis terapéutica diaria preferida para tratar una infección viral patógena es de aproximadamente 1.000 mg sujeto a ajustes de peso como anteriormente. Cantidades terapéuticas típicas de ingredientes activos suministran preferiblemente alrededor de 0,012 mg a 24,5 mg de ingrediente activo por kg de peso corporal basado en un peso corporal promedio de 180 libras (81,6 kg), más preferiblemente alrededor de 1,2 mg a 18,4 mg/kg de peso corporal y lo más preferiblemente alrededor de 3,1 a 17,2 mg/kg de peso corporal. Una dosis terapéutica diaria preferida para el uso potencial de psilocina sería de aproximadamente 0,1 mg por kg de peso corporal.

Tabla 1. Peso cor oral dosis diaria número de cá sulas

Nótese que no se espera que los intervalos/dosis efectivos sean exactamente los mismos para todos los compuestos. Las dosis se pueden optimizar con cada compuesto cuando se estudia la farmacocinética para ver cómo se metaboliza cada compuesto en el tracto gastrointestinal y en el hígado a través de las vías del citocromo P450, lo que puede alterar los intervalos de dosis. Sin embargo, estos compuestos se compararon uno al lado del otro con medicamentos antivirales bien estudiados dentro de los mismos intervalos de dosis reconocidos por la ciencia farmacéutica, por lo que estos niveles de dosis son predictivos y lógicos.

Los sistemas de administración de estas composiciones que contienen una o una pluralidad de moléculas antivirales incluyen, pero no se limitan a: aerosoles, cápsulas, comprimidos, elixires, emulsiones, pastillas, suspensiones, jarabes, píldoras, lociones, parches epidérmicos, supositorios, inhaladores e inyectables, o por otros medios conocidos en la técnica de administración de fármacos. Para una dosificación medida a largo plazo y para lograr un efecto más consistente, se pueden emplear sistemas de liberación de liberación retardada conocidos por la industria farmacéutica. Además, estos compuestos se pueden combinar con otros fármacos o supresores de enzimas para permitir el paso a través del complejo citocromo P450 del hígado y vías relacionadas para producir una cantidad eficaz en el torrente sanguíneo.

Los extractos antivirales, componentes activos, micelio y/u otros derivados pueden incorporarse en alimentos para producir alimentos con propiedades antivirales, útiles para proteger animales incluyendo humanos, perros, gatos, caballos, vacas, cerdos, aves, peces, insectos, incluidas las abejas y otros animales silvestres y domésticos, contra la infección.

De acuerdo al conocimiento de este inventor, no tiene precedentes tener un extracto antiviral doblemente activo contra virus que infectan a seres humanos y virus que infectan a las abejas melíferas. Que los extractos de alcohol y agua de setas polypore (especies Fomes fomentarius, Ganoderma applanatum, Ganoderma resinaceum, Inonotus obliquus, Schizophyllum commune, Trametes versicolor y Fomitopsis) sean activos contra familias dispares de virus que afectan a humanos y abejas es un resultado extraño, inesperado y no obvio para los expertos en la técnica de las medicinas virales que combaten virus humanos o de abejas. Estos resultados novedosos son objeto de solicitudes de patente pendientes presentadas por el inventor, es decir, la solicitud de patente de los Estados Unidos No. 14/641,432: "Integrative fungal solutions for protecting bees", presentada el 8 de marzo de 2015, y la solicitud de patente de los estados Unidos No. 14/247,207: "Integrative fungal solutions for protecting bees and overcoming Colony Collapse Disorder (CCD): methods and compositions", presentado el 7 de abril de 2014.

Un agente antiviral activo contra un virus no significa, por supuesto, que habrá actividad antiviral contra otro. De hecho, los compuestos que tienen actividad antiviral contra todos los virus son típicamente venenos, ya que los virus tienen respuestas de especificidad debido a sus modos únicos de actividad, infección, composiciones de ARN y ADN, transcriptomas y campos de receptores en sus membranas. ¡El pensamiento actual es que hay más especies de virus en la tierra que todas las especies de hongos, plantas y procariotas combinadas!. Y es probable que un antiviral universal acabe con muchos virus beneficiosos, un subcampo incipiente de la virología. Por lo tanto, no es una teoría obvia ni médicamente justificable que un ataque contra un virus signifique que el mismo compuesto estará contra todas las especies del viroma.

A medida que los virus mutan y desarrollan tolerancias a los medicamentos antivirales, la búsqueda, el descubrimiento y la identificación de nuevas moléculas antivirales es una prioridad para mitigar las pandemias, ya sean naturales o provocadas por el hombre. Con este fin, el inventor y su equipo han descubierto que los extractos etanólicos acuosos del micelio de setas poliporo nativas de los bosques del noroeste del Pacífico demuestran una actividad notable en los ensayos estándar para evaluar medicamentos contra la gripe, el herpes y la viruela. Se observó una actividad particularmente fuerte contra los virus de la influenza A y B.

Siguiendo al Project BioShield Act de 2004, Fungi Perfecti, LLC presentó más de 200 extractos etanólicos acuosos de cuerpo frutal y agua caliente del micelio cultivado in vitro de especies y cepas de setas dentro del BioShield BioDefense Program administrado por el Instituto de Investigación Médica del Ejército de los Estados Unidos sobre Enfermedades Infecciosas (USAMRIID) y los Institutos Nacionales de Salud (NIH). Las muestras enviadas se analizaron para determinar la actividad antiviral coordinada a través del Instituto de Investigación del Sur (SRI). De las más de 200 muestras que el inventor proporcionó a BioShield, se realizaron 2.392 ensayos antivirales en nombre del inventor; 1.042 de los cuales fueron pruebas de influenza. De estas 1.042 pruebas, 13 muestras tenían Sl50 > 100, aproximadamente una tasa de éxito del 1,2% contra cualquier virus. Dentro de una especie como Agarikon (Fomitopsis officinalis), un extracto de una cepa de esta especie a menudo mostró una actividad antiviral significativa contra un virus de la gripe, por ejemplo, pero no contra otro. En esencia, la probabilidad de éxito resultó ser muy improbable y los resultados negativos desalentarían a otros investigadores que realicen bioprospección de grandes bibliotecas de organismos en busca de nuevos antivirales.

Los protocolos para determinar la actividad antiviral están completamente descritos por los Institutos Nacionales de Alergias y Enfermedades Infecciosas (NIAID) de Greenstone et al., NIAID resources for developing new therapies for severe viral infections, Antiviral Res., Volumen 78, publicación 1, abril de 2008, páginas 51-59. Antiviral Res., Volumen 78, edición 1, abril de 2008, páginas 51-59. Los bioensayos de influenza se realizaron de acuerdo con Sidwell, RW y Smee, DF, In vitro and in vivo assay systems for study of influenza virus inhibitors, Antiviral Res., octubre de 2000, 48 (1): 1-16., incorporado aquí por referencia en su totalidad.

Los avances en la determinación de medicamentos antivirales útiles se basan cada vez más en ensayos de pocillos de células humanas, ya que algunos virus infectan a los seres humanos de forma diferente que a los animales. Si bien muchos virus pasan de animales a humanos, su etiología suele ser diferente y los resultados de las pruebas con animales no son necesariamente traducibles, a menudo fallan cuando se ponen en contacto con células humanas. Por lo tanto, muchos modelos animales no son representativos de la utilidad potencial de los nuevos fármacos antivirales necesarios para el tratamiento de seres humanos. NIH Virology ha diseñado un conjunto de pruebas que confirman la actividad antiviral utilizando células humanas y, una vez que se observa la actividad, se utilizan modelos farmacocinéticos para predecir cómo se metabolizarán en los seres humanos. Como en el caso del ácido vanílico, cuya seguridad está bien establecida, la ruta más eficaz es pasar de los ensayos de pocillos de células humanas directamente a los estudios en humanos para el tratamiento del virus de la culebrilla (Herpes zoster). Además, la tendencia creciente, debido a las normas sociales, es alejarse lo más posible de los modelos de experimentación con animales.

Se detectó una fuerte actividad contra los virus de la viruela ortopédica, influenza A e influenza B en Fomitopsis officinalis, también conocida como Agarikon, Ganoderma resinaceum (= Ganoderma lucidum variedad Resinaceum), también conocida como Reishi Rojo, e Inonotus obliquus, también conocida como Chaga, especies de setas que contienen cantidades variables de muchos de los principios activos descritos en el presente documento y, además, de los específicamente citados en las Reivindicaciones.

Como se ilustra en la Tabla 2, un porcentaje de solución de extractos de Fomitopsis officinalis tan bajo como 1-2% inhibió el daño celular inducido por virus en un 50% (EC⁵⁰) en los ensayos estándar para cribado de antivirales. Cuando el extracto crudo (solución al 100%) se diluyó en un factor de 10⁶(solución al 0,0001%), se observó una reducción del 50% en el daño celular por cepas patológicamente relevantes de influenza (influenza A e influenza B) y herpes viral (HSV). Los números del índice de selectividad (SI) superiores a 5 son moderadamente activos, los superiores a 10 son muy activos y los superiores a 100 son extraordinariamente muy activos.

Afortunadamente, en 2014, la solicitud del inventor para enviar muestras para pruebas antivirales continuas fue aceptada por Virología del NIH. Sin embargo, Virología del NIH se negó a probar extractos de micelio debido a su complejidad pero, previa aprobación de la presentación aceptaría moléculas puras, es decir, "estructuras" para la prueba. Los compuestos puros solo se probarían si los especialistas en virología del NIH examinaran y aprobaran las nuevas estructuras como no probadas antes por el NIH, ni si tienen evidencia de actividad contra los virus seleccionados para su estudio en la literatura científica, con el fin de eliminar la redundancia. Dado que puede haber más de 200.000 compuestos residentes en micelios y setas, el inventor se enfrentó a una tarea aparentemente imposible: ¿qué compuestos de más de 200.000 moléculas serían activos contra virus?. Llevar a cabo el estándar de pruebas de fraccionamiento bioguiado en el descubrimiento farmacéutico de nuevos fármacos normalmente llevaría años, así como enormes recursos de laboratorio.

El inventor, conocedor de la descomposición de la madera por setas poliporo, y sabiendo que estos setas poliporo contenían polifenoles, se centró en más de 20 compuestos relacionados con polifenoles y relacionados con ácidos producidos en la deslignificación de la madera, más específicamente ácidos cumáricos y sus análogos y congéneres relacionados. El NIH aprobó la primera presentación de 10 de las 20 estructuras que el inventor propuso inicialmente para las pruebas. Contra todo pronóstico, las primeras pruebas dieron como resultado que 3 de 10 estructuras fueran más activas contra una variedad de virus que los controles de fármacos positivos uno al lado del otro utilizados por los laboratorios de pruebas de virología del NIH. Tras la segunda presentación, 5 de las 10 estructuras mostraron mayor actividad contra los virus que el cidofovir, el control positivo del fármaco, en las pruebas contra el virus del papiloma humano (VPH). En perspectiva, no hay buenos antivirales contra el VPH actualmente en el mercado, de acuerdo con la comunicación personal entre el inventor y Virología del NIH. Aunque se ha desarrollado una vacuna contra el VPH, muchos no la recibirán por una amplia variedad de factores médicos y sociales. Además, millones de personas ya están infectadas con el VPH y no se beneficiarán sustancialmente de la vacunación (la edad recomendada para la vacuna es de 11 a 12 años, y no se recomienda después de los 26). Tener un antiviral novedoso que sea activo contra el VPH sirve de manera significativa a la salud pública al reducir la carga útil de patógenos en la población infectada en el ambiente, reducir la transmisibilidad posterior de la enfermedad y, en efecto, reducir las muertes por cáncer de cuello uterino, anal, oral y otros.

Los laboratorios contratados por Virología del NIH examinaron los compuestos contra un panel de virus, lo que dio como resultado una actividad significativamente alta contra el virus del papiloma humano (VPH), el virus de la varicelazóster, el norovirus (Norwalk), el virus de Epstein-Barr y los poliovirus. Para medir la actividad antiviral, se comparó el SI⁵⁰con un fármaco de control para el mismo virus. El SI⁵⁰es simplemente el CC⁵⁰, también conocido como IC⁵⁰(concentración de compuesto que reduce la viabilidad celular en un 50%) dividido por la EC⁵⁰(concentración de compuesto que reduce la replicación viral en un 50%). Una muestra (hispolona) mostró una actividad modesta contra el Ébola, un virus de ARN monocatenario, con un SI⁵⁰>5,3, prometedor, ya que el SI⁵⁰del fármaco de control, favipiravir, solo tiene un SI⁵⁰>10. En un momento de extrema necesidad de antivirales contra el Ébola, los componentes relacionados con las hispolonas merecen un estudio más a fondo con la probabilidad de descubrir moléculas estrechamente relacionadas con las hispolonas que serán más activas antiviralmente que el SI⁵⁰>10 de favipiravir. El inventor continúa buscando compuestos contra el Ébola aislados de hongos.

Un SI⁹⁰en la escala del índice de selectividad (SI) es la relación de citotoxicidad del agente frente a la actividad antiviral selectiva (CC⁵⁰/EC⁹⁰) de manera que un SI⁹⁰>10 indica una actividad extraordinariamente fuerte por la que la concentración del compuesto reduce la replicación viral en un 90% y reduce la viabilidad celular en un 50%.

Es de destacar que muy pocos medicamentos antivirales tienen un SI⁹⁰significativo >10. El aciclovir contra Varicella zoster es un buen ejemplo para discutir. El SI⁹⁰del aciclovir, (SI⁹⁰= 6), es mucho menos activo como antiviral que el ácido vanílico, reivindicado por el inventor, que tiene un SI⁹⁰>195 contra el virus de Varicela zoster, un virus del herpes que causa el "herpes zóster". Lograr una reducción tan alta de virus (90%) subraya en gran medida que el ácido vanílico y sus análogos (por ejemplo, p-hidroxibenzaldehído y ácido p-hidroxibenzoico) tienen un alto potencial para convertirse en antivirales útiles, especialmente porque la vanilina tiene una larga historia de uso seguro y se consume de forma amplia y segura como un delicioso saborizante comestible. La vanilina se oxida, después del consumo, en ácido vanílico. El ácido vanílico o sus análogos relacionados se pueden administrar utilizando técnicas de nanoencapsulación, de manera que el revestimiento del ácido vanílico dentro de una cubierta de proteína biodegradable pase a través del hígado al torrente sanguíneo sin alteraciones. Además, el ácido vanílico puede encapsularse con otras moléculas para permitir su paso al torrente sanguíneo después del metabolismo hepático en una cantidad terapéuticamente eficaz. De manera similar, se puede utilizar cualquier procedimiento o medio físico o quími

La crisina >98%, el ácido trans-cinámico >98%, el ácido trans-ferúlico >98%, el hidrato de quercetina >95%, el hidrato de rutina >98%, el ácido siríngico >97% y el ácido vanílico >98% se obtuvieron de TCI Chemicals. Hispolon > 98% se obtuvo de Enzo Life Sciences. 7-cloro-2-oxo-4-fenil-2H-cromen-3-carboxilato de etilo, preparado de acuerdo con Hwang et al., J. Nat. Prod. 76: 1916-1922 Supporting Information S-28-29 (2013), se obtuvo del Departamento de Química Medicinal y Farmacognosia, Facultad de Farmacia, Universidad de Illinois en Chicago, Chicago, Illinois 60612, cortesía de los autores. Estos compuestos exhibieron actividad antiviral de moderada a alta de acuerdo con el protocolo del índice de selectividad del NIH en la Tabla 3:

Tabla 3: Moléculas del ingrediente activo principal (API) con actividad antiviral específica en comparación con los nr l f rm nivir l iiv l i n r r Vir l í l NIH nr i .

continuación

Katayama et al. (2013), divulga que una forma enzimáticamente convertida de ácido vanílico es antiviral.13 Esta técnica anterior de Katayama et al. (2013), no hace obvio el descubrimiento de este inventor de que el ácido vanílico es activo contra un virus del herpes (Varicella zoster) por las siguientes tres razones:

Los norovirus (probados por Katayama) no están relacionados con los virus del herpes (probados por el inventor). El norovirus (virus de Norwalk) está en Calciviridae y es un virus de ARN monocatenario y los virus del herpes (Varicella zoster, Epstein-Barr, etc.) están en Herpesviridae y son virus de ADN bicatenario. Estos son tan distantes como pueden ser los virus. Es muy poco probable que una molécula antiviral sea activa contra virus tan diferentes, y los expertos en la técnica del descubrimiento de antivirales no supondrán que la actividad contra los virus del herpes es una extensión lógica obvia de la actividad antiviral contra los norovirus.

El ácido vanílico en su forma pura no fue probado por Katayama, sino más bien nuevos análogos de ácido vanílico convertidos enzimáticamente sintetizados por rutinasas (rutinosilación).

Las pruebas del NIH de este inventor del ácido vanílico (Muestra 14-00086) contra el norovirus revelaron un SI50 = 1 y SI90 = 1, lo que significa que no hay actividad de inhibición del ácido vanílico contra el norovirus. Esto proporciona una fuerte evidencia para el argumento (1) anterior del inventor de que la actividad contra los virus del herpes no es esperada, anticipada o una extensión obvia de la actividad observada contra los norovirus.

El inventor ha asumido la tarea de toda la vida de evaluar exhaustivamente la actividad antiviral de Agarikon (Fomitopsis officinalis), Amadou (Fomes fomentarius), Narigón de Artistas (Ganoderma applanatum también conocido como Ganoderma annulare, Ganoderma brownii), Chaga (Inonotus obliquus), Reishi Rojo (Ganoderma lucidum en sentido amplio, Ganoderma resinaceum, Ganoderma sinense, Ganoderma tsugae, Ganoderma oregonense), el poliporo Split Gill (Schizophyllum commune), Cola de Pavo (Trametes versicolor) y otros poliporos en los mismos clados y setas no poliporo en los Agaricales. En la búsqueda de este objetivo, el inventor ha descubierto sorprendentemente que muchos de estos mismos extractos de Agarikon (Fomitopsis officinalis), Chaga (Inonotus obliquus) y Reishi Rojo (Ganoderma resinaceum, Ganoderma lucidum), que reducen los virus que afectan a las células humanas, también reducen significativamente los virus que afligen a otros animales, incluso a las abejas melíferas (vease la solicitud de patente de los Estados Unidos No 14/641,432: "Integrative fungal solutions for protecting bees", 2015). Como tal, este inventor cree que estos hongos son depósitos profundos de muchas moléculas antivirales novedosas, que ofrecen un amplio escudo biológico de defensa contra los virus patógenos que afectan a los animales. Derivado de este descubrimiento, el inventor predice que se descubrirán más moléculas antivirales, muchas de las cuales están relacionadas con las moléculas descritas en el presente documento enumeradas en esta solicitud de patente. El inventor predice que algunas de estas moléculas también pueden ser activas contra virus que afectan a las plantas y, por lo tanto, útiles para proteger la agricultura.

Estos componentes antivirales son producidos por muchos hongos poliporo (poliporales) tales como pero sin limitarse a Fomitopsis officinalis, Fomitopsis pinicola, Fomes fomentarius, Inonotus obliquus, Ganoderma applanatum, Ganoderma oregonense, Ganoderma resinaceum, Ganoderma sinensee, Ganoderma tsugae, Irpex lacteus, Schizophyllum commune, Trametes versicolor y hongos branquiales (Agaricales) tales como Pleurotus ostreatus, Pleurotus pulmonarius, Pleurotus populinus, Stropharia rugoso-annulata, Stropharia semigloboides, Stropharia ambigua, Psilocybe allenii, Psilocybe azurescens, Psilocybe coprophila, Psilocybe cubensis, Psilocybe cyanescens, Clitocybe odora, y Lactarius fragilis.

El inventor predice que se encontrarán más moléculas antivirales dentro de los metabolitos extracelulares e intracelulares relacionados no solo con polifenoles y ácidos grasos, sino también con moléculas, que en asociación entre sí, aumentan la actividad antiviral. Los ejemplos incluyen, pero no se limitan a: amilasa, amiloglucosidasa, ácido betulínico, ácido cafeico, ácido protocatechuico, ácido trans-cinámico, ácido ferúlico, ácido gálico, ácido elágico, lanosterol, inotodiol, ácidos trametenólicos, hispolonas (hispidinas), hispidina, hifolomina B, inoscavina A, davalialactona, feligridina D, ergosteroles, crisina, cordicepina, ácido trans-o-cumárico, ácido trans-p-cumárico, dihidrato de ácido elágico, ergosterol, ácidos linoleicos, ácido trans-ferúlico, hidrato de ácido gálico, hexanal, hispolona ácido 4-hidroxibenzoico, p-hidroxibenzaldehído, 4-hidroxibenzaldehído, ácido p-hidroxibenzoico, hidrato de quercetina, hidrato de rutina (incluidos los glucósidos flavonoides relacionados), ácido shikímico, ácido siríngico, ácido vanílico, vanilina, etil vanilina, isobutil vanilina precursores metabólicos de vanilina y ácido vanílico, productos metabólicos de vanilina y ácido vanílico, acetovanilona, guayacol, eugenol, ácido sulfurénico, ácido deshidrosulfurénico, ácido eburicoico, ácido trans-cinámico, ácido trans-ferúlico, 6-cloro-4-fenil-2H-cromen-2-ona, 6 cloro-2-oxo-4-fenil-2H-cromen-3-carboxilato de etilo, 7-cloro-4-fenil-2H-cromen-2-ona, 7-cloro-2-oxo-4-fenil-2H-cromen-3-carboxilato de etilo (y otras cumarinas), psilocibina, psilocina y sus sales farmacéuticas conjugadas y iónicas, ésteres, congéneres (sustancias químicas relacionadas entre sí por origen, estructura o función), isómeros, análogos estructurales y funcionales y análogos sustituidos significativamente similares que incluyen compuestos hidroxilados, acetilados, metoxilados, etoxilados y halogenados conocidos por los expertos en la técnica que pueden resultar útiles en la práctica de esta invención, incluida la actividad contra virus y oncovirus. Esto incluiría, a modo de ejemplo, pero no de limitación: virus de influenza (H1N1, H3N2, H5N1, H5N2, H5N3, H5N8, H5N9, H7N1, H7N2, H7N3, H7N4, H7N5, H7N6, H7N7, H7N8 y H7N9, H9N1, H9N2, H9N3, H9N4, H9N5, H9N6, H9N7, H9N8 y H9N9), virus del Herpesviridae, virus 1 del herpes simple, virus 2 del herpes simple, citomegalovirus humano, citomegalovirus murino, virus de varicela-zoster, virus de Epstein-Barr, virus 6 del herpes humano, virus 8 del herpes humano, virus respiratorio y otros virus, incluido el coronavirus del SARS, virus sincitial respiratorio, virus del Ébola, virus Nipah, virus del sarampión, virus adenovirus-5, norovirus, virus de la rabia, Arenaviridae, virus Tacaribe, virus Pichinde, poliovirus, virus Junin, virus de la fiebre de Lassa, Bunyaviridae, virus de la fiebre del Valle de Rift, virus Punta Toro, virus La Crosse, virus Maporal, Flaviviridae, virus del dengue, virus del Nilo Occidental, virus de la fiebre amarilla, virus de la encefalitis japonesa, virus Powassen, Togaviridae, Virus de la encefalitis equina venezolana, virus de la encefalitis equina del este, virus de la encefalitis equina del oeste, virus chikungunya, Picornaviridae, poliovirus, enterovirus-71, enterovirus-68, coxsackievirus B3, Papovaviridae, virus BK, virus JC, virus del papiloma, Poxviridae, virus vaccinia, virus de la viruela vacuna, virus de la viruela del simio, polioma y virus hepáticos, virus de la hepatitis A, virus de la hepatitis C y virus de la hepatitis B. También se prevé que los compuestos sean útiles con todos los animales, incluidos humanos, mamíferos, aves, murciélagos, cerdos y abejas, y con enfermedades virales transmitidas por garrapatas, pulgas, moscas, mosquitos y otros insectos y artrópodos.

Con cualquier fármaco nuevo, el gasto de producción y la disponibilidad son dos factores que determinan si el fármaco puede comercializarse o no. Los ingredientes del principio activo (API) descubiertos por el autor se pueden adquirir "listos para usar" en una variedad de empresas de suministro de productos químicos. Los siguientes precios son para pequeñas cantidades de prueba. Comprarlos en masa reduciría drásticamente los costos asociados con cada API. Dada una dosis objetivo de aproximadamente 100-200 mg por día, los costes de muchas de estas nuevas moléculas antivirales, con la excepción de hispolona son extraordinariamente económicos. Si se compra grandes cantidades de estos API para alimentar una cadena de suministro y satisfacer las demandas del mercado, dadas las economías de escala que van desde los 100 mg hasta mas de 1.000 kg por orden de compra, los costes de cada uno deben reducirse al menos 10 veces, y probablemente más. Los siguientes precios son precios minoristas disponibles para fines de investigación comprando 100 mg (1/10 de gramo) antes de la negociación de descuentos (los grados USP o farmacéuticos pueden ser más altos).

Crisina: TCI Chemicals, >98%, $ 0,39/100 mg

Ácido trans-cinámico: TCI Chemicals, >98%, $ 0,038/100 mg

Ácido trans-ferúlico: TCI Chemicals, >98%, $ 0,15/100 mg

Hispolona: Enzo Life Sciences, >98%, $ 1.280,00/100 mg

Hidrato de quercetina: TCI Chemicals, >95%, $ 0,15/100 mg

Hidrato de rutina: TCI Chemicals, >98%, $ 0,12/100 mg

Ácido siríngico: TCI Chemicals, >97%, $ 0,16/100 mg

Ácido vanílico: TCI Chemicals, >98%, $ 0,12/100 mg

El cidofovir, un antiviral inyectable con el que se compararon favorablemente muchas de estas moléculas (API) es muy costoso y la forma genérica se vende actualmente por $ 342 a $ 626 por 5 dosis por vial (5 ml) que contiene 75 mg/ml (genérico). El antiviral comparativo menos costoso es el aciclovir (ahora sin patente) y se vende por $ 7,59 por 200 mg. A manera de ejemplo, las API del inventor contra el virus del papiloma humano (VPH), mostraron una alta actividad antiviral utilizando moléculas muchas órdenes de magnitud menos costosas que el cidofovir.

Mientras se enfocaba en las vías de deslignificación y descomposición de celulosa y subproductos del micelio de setas de especies de Poliporales y Agaricales, y estudiaba cómo salvar a las abejas del trastorno de colapso de colonias, el inventor observó una alta atracción de las gotitas extracelulares que exudan del micelio de las setas, inicialmente de una seta con branquias en los Agaricales (Stropharia rugoso-annulata), cuando se plantó un parche de micelio de esta especie en su jardín. Cuando el micelio crece sobre madera o granos, descompone componentes lignina-celulósicos, hemicelulósicos o celulósicos y expresa compuestos similares a polifenoles. Centrándose en el ácido p-cumárico, el inventor examinó la literatura científica, que mostró que el ácido cumárico era esencial para activar las secuencias de genes para las vías de desintoxicación del citocromo p450 en las abejas. A continuación, el inventor exploró constelaciones de moléculas en busca de actividad antiviral y, sorprendentemente, muchos de estos ácidos mostraron una fuerte actividad antiviral, como se indica en esta solicitud de patente.

La consideración de las rutas metabólicas supuestamente no relacionadas con los antivirales proporcionó inspiración y guía en la selección de muchos de los compuestos descritos actualmente para la prueba. Por ejemplo, Terrón et al., Structural close-related aromatic compounds have different effects on laccase activity and on Icc gene expression in the ligninolytic fungus Trametes sp. I-62, Fungal Genet. Biol., 41:954-962 (2004) enseña: "Se probaron nueve compuestos fenólicos (ácido p-cumárico, ácido ferúlico, guayacol, siringol, p-metoxifenol, pirocatecol, floroglucinol, ácido 3,5-dihidroxibenzoico y siringaldazina) por su capacidad para aumentar la producción de lacasa en el basidiomiceto ligninolítico Trametes sp. I-62. Todos estos compuestos produjeron aumentos en la actividad de la lacasa, y los niveles más altos se detectaron en presencia de ácido p-cumárico (273 veces) y guayacol (73 veces)". El inventor, mientras investigaba qué compuestos activan las vías de desintoxicación del citocromo P450 en las abejas, y cómo el micelio de Trametes versicolor usa enzimas para deslignificar la lignina (en la madera) y la celulosa (en papel, granos, almidón), encontró las moléculas concurrentes, particularmente alrededor del ácido p-cumárico para ser interesante para probar la actividad antiviral. Aunque la curiosidad del inventor en su búsqueda de ayudar a las abejas a superar el trastorno de colapso de colonias lo llevó a mirar el ácido cumárico, y esto lo impulsó a enviar a Virología del NIH una variedad de moléculas relacionadas con el ácido cumárico, es interesante notar que, hasta la fecha, el ácido cumárico no ha demostrado ninguna actividad antiviral. El inventor seguirá considerando los ácidos cumáricos y sus congéneres como fuente de nuevos antivirales. Sin embargo, esto habla además de que el descubrimiento del inventor no es obvio y de hecho es extraño.

Con los principales ingredientes activos presentados por el inventor en este documento, se describen en primer lugar compuestos nuevos para la ciencia con estas propiedades multifacéticas. Todos los compuestos y mezclas que contienen estos compuestos pueden administrarse utilizando cualquier procedimiento conocido en la técnica de la administración de fármacos farmacéuticos, incluidas nuevas nanotecnologías y terapias de microbiomas que permitan la liberación controlada, la mejora y el direccionamiento de los medicamentos.

Estos principios activos (API) se pueden encontrar tanto en hongos como en plantas, y pueden combinarse entre sí, o con otros fármacos, o unirse a otras moléculas para aumentar su eficacia farmacocinética, especificidad y/o longevidad de efectos con el fin de conferir un beneficio médico. Además, los API se pueden incrustar dentro de moléculas portadoras de mayor complejidad, que tras la digestión, permiten que los API pasen al torrente sanguíneo en una cantidad eficaz para impartir un beneficio de apoyo antiviral e inmunológico.

Se espera que se descubran más moléculas antivirales nuevas, derivadas de esta invención, de Amadou (Fomes fomentarius), Agarikon (Fomitopsis officinalis), Poliporo de Cinturón Rojo (Fomitopsis pinícola), Narigón de Artista (Ganoderma applanatum), Reishi Rojo (Ganoderma lucidum o Ganoderma resinaceum), Ganoderma sinense, Chaga (Inonotus obliquus), Mesima (Phellinus linteus), Poliporo de Agalla Dividida (Schizophyllum commune), Cola de Pavo (Trametes versicolor) y sus especies estrechamente relacionadas dentro del mismo clado o clados taxonómicos de los que estas especies evolucionaron, utilizando los procedimientos conocidos en la técnica del descubrimiento de fármacos farmacéuticos. Los compuestos descubiertos por el inventor que existen en hongos no formadores de setas y en bacterias y plantas también pueden impartir actividad antiviral a otros virus aún no probados. Además, se espera que las combinaciones de estos principios activos y sus congéneres también reduzcan virus tales como la hepatitis, la gripe, el SARS (síndrome respiratorio agudo severo), el MERS (síndrome respiratorio del Medio Oriente) y otros virus, algunos aún no conocidos por la ciencia. Este descubrimiento ofrece un paraguas de protección, un arsenal, un amplio escudo biológico o "escudo contra micosis" de defensa contra uno o una pluralidad de virus que causan enfermedades.

Ejemplo de referencia 1

En las pruebas iniciadas y por causa del inventor, los virólogos contratados por el NIH informaron de la siguiente actividad antiviral. Estos resultados muestran una actividad antiviral de gran importancia y utilidad potencial para crear nuevos fármacos y nuevas composiciones de fármacos, tratamientos, profilácticos, adyuvantes, nutracéuticos, piensos y suplementos dietéticos. A modo de ejemplo y no de limitación, estas composiciones pueden incluir compuestos puros, aislados o fracciones casi puras, extractos de productos naturales que contienen las moléculas descritas y moléculas sintetizadas idénticas a las moléculas naturales, descritas en este documento y reivindicadas como nuevos agentes antivirales de importancia contra múltiples virus.

El inventor envió moléculas puras o casi puras a través de su empresa de propiedad exclusiva Fungi Perfecti, LLC, y su empleado, el Dr. Regan Nally, al Dr. Mark Prichard, Universidad de Alabama (UAB) Birmingham, Alabama 35233 para probar la actividad contra el virus del papiloma humano (VPH) a través de Virología del NIH, utilizando protocolos que cumplen con los estándares establecidos por los Institutos Nacionales de Salud/Virología. El equipo del Dr. Mark Prichard analizó las moléculas del inventor contra el VPH (virus del papiloma humano) utilizando procedimientos de prueba de última generación que utilizan protocolos cuantitativos de reacción en cadena de la polimerasa (ADN)/CellTiter-Glo (Toxicidad).

En general, se prefieren extractos de esas especies y cepas de setas, o moléculas purificadas que se encuentran dentro de ellas, o versiones sintéticas de tales moléculas, o análogos de tales moléculas, que son activas contra virus con un SI⁵⁰25, son preferidos SI⁵⁰210 son más preferidos y SI⁵⁰230 los más preferido. Cualquier compuesto que tenga un SI⁵⁰2100 se considera extremadamente activo y extraordinariamente selectivo.

El cribado primario del ácido vanílico contra el virus de Varicela zoster (el "herpes" o virus del herpes humano 3, HHV-3) resultó en una alta actividad con un SI⁵⁰2448 y SI⁹⁰^195 en comparación con el control positivo del fármaco aciclovir que, en la misma prueba lado a lado tuvo un SI⁵⁰226 y un SI⁹⁰21.

Este compuesto, ácido vanílico, se produce como subproducto en la deslignificación de la madera por Fomitopsis, Ganoderma, Inonotus y otros hongos, particularmente los que descomponen la madera. El ácido vanílico también se produce a través de la oxidación metabólica de la vanilina, el saborizante común, al ser ingerido. La vanilina se puede sintetizar u obtener de una amplia variedad de plantas, ¡incluso del estiércol!. La vanilina está fácilmente disponible en cantidad, lo que la convierte en un candidato principal excepcionalmente favorable y con sabor para pruebas adicionales y comercialización rápida, ya que es un ingrediente alimentario seguro y bien conocido. La cantidad de ácido vanílico, la forma oxidada de la vanilina y las dosis correlacionadas de un antiviral basadas en comparaciones lado a lado de ácido vanílico con aciclovir, se encuentran dentro de una cantidad segura para un ser humano de 70 kg, es decir, 700 mg de vanilina por día o para un hombre americano de 88 kg, 880 mg de vanilina por día. La concentración promedio de vanilina en el saborizante de vainilla disponible para los consumidores varía de 0,38 a 8,59 mg/ml. Por lo tanto, para que una persona obtenga un beneficio antiviral al beber extracto de vainilla, significaría ingerir volúmenes poco realistas de extracto de vainilla y a un costo muy alto.

La vanilina y el ácido vanílico son moléculas comunes en el mundo vegetal, notablemente Angelic sinensis o Dong Quai tiene algunas de las cantidades más altas de ácido vanílico que se encuentran en la naturaleza. "La mayoría de la vanilina producida industrialmente se ingiere en forma de alimentos y bebidas. Cantidades menores se aplican tópicamente como productos para el cuidado de la piel, perfumes, etc. El uso global de vanilina en alimentos y bebidas implica que casi todos los seres humanos en todo el mundo están expuestos a cantidades de vanilina por ingestión, aunque las dosis individuales y la exposición pueden variar según los hábitos y preferencias alimentarias. Se ha acordado una ingesta diaria aceptable (IDA) de 10 mg/kg entre la FAO/OMS y la UE. Para una persona de 70 kg, la IDA es 700 mg de vanilina que, por ejemplo, corresponde a un mínimo de 700 g de chocolate o 7.000 g de helado. Para la evaluación del riesgo se asume que incluso las personas con una alta ingesta de alimentos y bebidas que contienen vanilina no tienen una ingesta de vanilina por encima de la IDA".14

Sin embargo, 700-880 mg de vanilina están dentro de la ventana de dosificación terapéutica para impartir efectos antivirales a una persona de 70-88 kg. Para el hombre estadounidense promedio, comprar una dosis efectiva de 880 mg de vainilla de una tienda de comestibles es una cantidad poco práctica para que los consumidores la ingieran usando los saborizantes concentrados de vainilla que están comúnmente disponibles.

Se puede encontrar más información en el Handbook of Vanilla Science and Technology (2011), editado por Dahna Havkin-Frenkel y Faith Belanger.

Aunque se produce de forma natural, el uso de ácido vanílico y vanilina como antivirales es nuevo. Téngase en cuenta que la vanilina tiene muchos análogos y compuestos estrechamente relacionados, algunos de los cuales se describen en el presente documento como antivirales y se espera que la mayoría sean antivirales.

Existe una necesidad emergente de nuevos antivirales activos contra Varicella zoster y otros virus del herpes debido a la aparición de resistencia a los fármacos, ya que estas cepas mutan y son cofactores que causan inflamación y carcinogénesis. El ácido vanílico y sus ácidos estrechamente relacionados ofrecen nuevas fuentes de medicamentos antivirales que son económicos de fabricar. En un momento de crisis cuando pocos medicamentos antivirales nuevos y seguros están saliendo al mercado, el ácido vanílico se puede fabricar fácilmente, estandarizar su potencia y estudiar clínicamente con pocas expectativas de daño en comparación con la mayoría de los nuevos antivirales. Además, el ácido vanílico tiene una buena farmacocinética. El ácido vanílico de la ingestión oral permanece en el torrente sanguíneo después de la digestión durante más de 11 horas, una ventaja farmacocinética porque este compuesto tendrá un contacto prolongado entre la célula y el virus, lo que refuerza su potencial como fármaco antiviral ventajoso.

Dado que hasta el 95% de la vanilina se metaboliza dentro del cuerpo humano en ácido vanílico, también se prevé que la vanilina y sus análogos convertidos enzimáticamente sean agentes antivirales primarios contra virus, particularmente contra virus herpes relacionados con virus Varicela zoster. La varicela zóster es uno de los nueve virus del herpes conocidos actualmente que infectan a los seres humanos, de los cuales se cree que al menos tres son oncovirus: virus del herpes 4 (HHV-4 = Epstein-Barr); herpes 6 (HHV-6); y herpes 8 (HHV-8)). E1HHV-6 se ha detectado en linfomas, leucemia, cánceres de cuello uterino, sarcoma de Kaposi y tumores cerebrales. Los virus del herpes también son neurotóxicos y a menudo se asocian, con o sin causalidad, a la neurodegeneración y la inflamación neuropática a menudo asociadas con el complejo de la enfermedad de Alzheimer. Además, el ácido vanílico y los otros compuestos, composiciones y derivados descritos en este documento pueden sobrerregular las rutas enzimáticas del citocromo, específicamente en genes que codifican el citocromo p450, y las rutas p21 y p53 para la sobrerregulación y la producción de proteínas de necrosis tumoral. Por lo tanto, tener más de un beneficio de estos API antes mencionados puede dar como resultado de forma sinérgica beneficios combinados útiles para la medicina. Para que los medicamentos tengan propiedades antivirales, antibacterianas, potenciadoras del sistema inmunológico, antioxidantes y de ocultación de tumores con efectos de activación de los genes P21 y P53, después de la ingestión, representan un nuevo arsenal de agentes activos contra el cáncer. Cuantos más beneficios sinérgicos tengamos disponibles para que nuestras células combatan enfermedades, más probable será un resultado positivo. En lugar de encontrar un solo agente contra un solo virus, presentar a un animal un menú de beneficios proporciona un escudo de protección más amplio.

Se puede utilizar cualquier medio, procedimiento o etapa de proceso conocido en la técnica para fabricar los extractos o para extraer, aislar o purificar un ingrediente activo o para sintetizar y purificar los ingredientes activos de la presente invención. "Extractos", como se usa en este documento, incluye extractos crudos o purificados que contienen múltiples compuestos y múltiples compuestos activos o el sobrenadante o sólidos o precipitados aislados de un extracto crudo o una fracción, ingrediente, compuesto o molécula aislado o purificado de un extracto.

Ejemplo 2

El informe de virología del NIH sobre los compuestos del inventor probados contra el VPH señaló que cinco muestras son "altamente activas", y están designadas en letras rojas por virología del NIH para dar énfasis. La Tabla 3 (enumerada anteriormente) muestra que 5 de las 10 moléculas enviadas en un conjunto demostraron una actividad antiviral significativa del VPH, con índices de selectividad (SI) >10. Se espera que otras isoformas relacionadas con estos compuestos confieran una actividad antiviral aún mayor y beneficios complementarios, más allá de la actividad antiviral, haciéndolas más útiles en medicina para el tratamiento de enfermedades.

El cribado primario de moléculas antivirales potenciales contra el virus del papiloma humano (VPH) se comparó con cidofovir, el control de fármaco positivo, que mostró un SI⁵⁰>12; SI⁹⁰= 1. Los índices de selectividad para probar las moléculas seleccionadas por el inventor contra el VPH son los siguientes: hidrato de quercetina SI⁵⁰>60; hidrato de rutina SI⁵⁰S109; ácido siríngico SI⁵⁰>30, ácido trans-cinámico SI⁵⁰>125 y ácido trans-ferúlico SI⁵⁰>125.

En general, se prefieren aquellas especies y cepas de setas, o micelios de setas o extractos de micelios de setas, o moléculas purificadas que se encuentran dentro de ellos, o análogos de esas moléculas. Se prefieren aquellas especies, cepas, micelios, extractos o moléculas que son activas contra VHP que tienen un SI⁵⁰^5, siendo SI⁵⁰^10 más preferido y SI⁵⁰^30 el más preferido. Cualquier compuesto que tenga SI⁵⁰>100 se considera extremadamente activo y extraordinariamente selectivo contra el VPH, con baja toxicidad para las células humanas y, por lo tanto, tiene un alto potencial clínico para la prevención de la infección cruzada por VPH. Es de destacar que hay muy pocos medicamentos antivirales activos contra el VPH, y las vacunas son parcialmente efectivas, aunque controvertidas, con consecuencias a largo plazo aún por determinar. Todas las cinco moléculas mencionadas anteriormente seleccionadas y presentadas en nombre del inventor excedieron en gran medida la actividad anti-VPH de cidofovir.

Ejemplo de referencia 3

La hispolona (ARB # 14-000869) también mostró, de acuerdo con Virología del NIH, actividad antiviral "moderadamente activa" contra el oncovirus de Epstein-Barr con un SI⁵⁰= 5 en comparación con el control de fármaco positivo cidofovir que tiene un SI⁵⁰>10.

Ejemplo de referencia 4

Las infecciones por poliovirus continúan propagándose por todo el mundo. Aunque se cree que la viruela se ha erradicado con éxito, la poliomielitis aún sobrevive a pesar de las vacunaciones generalizadas. Se han descubierto pocos fármacos antivirales eficaces. Las pruebas de virología en el Instituto de Investigación Antiviral de la Universidad Estatal de Utah (USU) en Logan, Utah, bajo contrato con Virología del NIH, seleccionaron numerosos candidatos a antivirales presentados por el solicitante. Una molécula en particular, crisina, demostró niveles moderados a altos de actividad antiviral inhibiendo el virus de la polio con un SI⁵⁰>15 en comparación con el control positivo del fármaco, pirodavir, que tuvo un SI⁵⁰= 22. Por lo tanto, la crisina y sus derivados y análogos pueden resultar ser nuevos antivirales para ayudar a reducir el poliovirus.

Ejemplo de referencia 5

Muy pocos compuestos han mostrado una actividad dual contra virus y bacterias. El 7-cloro-2-oxo-4-fenil-2H-cromen-3-carboxilato de etilo (un análogo sintético de 6-cloro-4-fenil-2H-cromen-2-ona de origen natural y 6-cloro-2-oxo-4-fenil-2H-cromen-3-carboxilato de etilo) e hispolona son dos de estos compuestos, no solo activos contra el norovirus (7-cloro-2-oxo-4-fenil-2H-cromen-3-carboxilato de etilo SI⁵⁰= 25 e hispolona SI⁵⁰>13), sino también contra la bacteria Mycobacterium tuberculosis, véase "Chlorinated coumarins from the polypore mushroom Fomitopsis officinalis and their activity against Mycobacterium tuberculosis," Hwang et al., J. Nat. Prod. 76: 1916-1922 (2013) (en coautoría con el presente inventor).

Esta doble actividad antiviral y antibacteriana contra la bacteria que causa la tuberculosis, Mycobacterium tuberculosis, y el virus Norwalk (norovirus), un virus notoriamente problemático en los cruceros, hace que estos medicamentos únicos sean útiles para proteger a las personas que viajan en espacios reducidos de infecciones por virus y bacterias y útiles para proteger y beneficiar la salud pública y ambiental y reducir los impactos de las enfermedades en los animales, particularmente en los humanos.

La rápida propagación del norovirus y las tendencias de alta infectividad con tuberculosis resistente a múltiples fármacos son solo un ejemplo de un estado de enfermedad complejo en el que la salud de las personas está amenazada por más de un contagio. Como tal, el 7-cloro-2-oxo-4-fenil-2H-cromen-3-carboxilato de etilo y la hispolona y las composiciones que contienen estos compuestos, pueden proteger a los pasajeros, pacientes, viajeros o personas dondequiera que se reúnan de múltiples ataques de virus e infecciones bacterianas. Se espera que los congéneres y análogos de 7-cloro-2-oxo-4-fenil-2H-cromen-3-carboxilato de etilo e hispolona muestren una eficacia mejorada contra infecciones virales y bacterianas. Los sistemas de administración incluyen, entre otros, aerosoles, cápsulas, comprimidos, elixires, emulsiones, pastillas, suspensiones, jarabes, píldoras, lociones, parches epidérmicos, supositorios, inhaladores e inyectables, o por otros medios conocidos en la técnica de administración de fármacos. Para una dosificación medida a largo plazo y para lograr un efecto más consistente, se pueden emplear sistemas de administración de liberación retardada.

En medicina, el pensamiento convencional es que los fármacos no pueden ser doblemente antivirales y antibacterianos. Por lo tanto, es probable que estos compuestos y otros relacionados con ellos impartan un escudo de protección más amplio contra la infección causada por virus y bacterias patógenos e infecciosos. Estos compuestos pueden ser los primeros entre muchos que muestran una actividad dual contra estas dos categorías dispares de agentes infecciosos. Dado que la persona promedio no sabe si una infección es causada por un virus o una bacteria, y dado que las infecciones bacterianas son notoriamente comunes (y a menudo mortales) después de una infección viral, esta invención cumple una función importante en la protección general de la salud pública, antes de la infección, en el momento de la infección o después de la infección. Este descubrimiento puede conducir, derivativamente, a una clase completamente nueva de agentes, procedimientos, composiciones y tratamientos médicamente útiles.

Ejemplo de referencia 6

Numerosos análogos de hispolonas, incluida la hispidina, pueden ser útiles como medicamentos antivirales y antibacterianos. Hasta ahora se conocen al menos 26 análogos relacionados, y el inventor los ve como los principales candidatos para nuevos tratamientos contra virus, oncovirus y bacterias patógenas, y como antiinflamatorios. Como tal, las hispolonas ofrecen una sinergia única de beneficios para proteger la salud animal a través de múltiples vías. Algunos, pero no todos, se pueden encontrar en Balaji et al., Design, Synthesis and In Vitro Cell-based Evaluation of the Anti-Cancer Activities of Hispolon Analogs, Bioorganic & Medicinal Chemistry 23: 2148-2158 (2015).

Estos compuestos pueden influir directa o indirectamente positivamente en los resultados de la enfermedad, ya que funcionan a través de vías separadas y activan conjuntos de receptores, que mejoran la inmunidad de forma acumulativa y sinérgica, superan la toxicidad de las toxinas xenobióticas, tienen propiedades antivirales y antibacterianas y potencian los beneficios de otras terapias farmacológicas.

Ejemplo 7

Aunque en esta invención se ilustran extractos de etanol y agua, será obvio que se pueden utilizar los diversos disolventes y procedimientos de extracción conocidos en la técnica.

Los extractos se pueden preparar opcionalmente mediante procedimientos que incluyen extracción con agua, alcoholes, disolventes orgánicos y fluidos supercríticos y subcríticos tales como CO2, y a partir de extractos derivados de la fermentación con bacterias tales como, pero sin limitarse a, Bacillus subtilis. Los extractos también se pueden preparar mediante destilación al vapor de componentes volátiles, similar a la preparación de "aceites esenciales" de flores y hierbas. Los alcoholes adecuados incluyen aquellos que contienen de 1 a 10 átomos de carbono, tales como, por ejemplo, metanol, etanol, isopropanol, n-propanol, n-butanol, 2-butanol, 2-metil-1-propanol (t-butanol), etilenglicol, glicerol, etc. Los disolventes orgánicos adecuados incluyen disolventes orgánicos no sustituidos que contienen de 1 a 16 átomos de carbono tales como alcanos que contienen de 1 a 16 átomos de carbono, alquenos que contienen de 2 a 16 átomos de carbono, alquinos que contienen de 2 a 16 átomos de carbono y compuestos aromáticos que contienen de 5 a 14 átomos de carbono, por ejemplo, benceno, ciclohexano, ciclopentano, metilciclohexano, pentanos, hexanos, heptanos, 2,2,4-trimetilpentano, tolueno, xilenos, etc., cetonas que contienen de 3 a 13 átomos de carbono tales como, por ejemplo, acetona, 2-butanona, 3-pentanona, 4-metil-2-pentanona, etc., éteres que contienen de 2 a 15 átomos de carbono tales como t-butilmetiléter, 1,4-dioxano, dietiléter, tetrahidrofurano, etc., ésteres que contienen de 2 a 18 átomos de carbono tales como, por ejemplo, formiato de metilo, acetato de etilo, acetato de butilo, etc., nitrilos que contienen de 2 a 12 átomos de carbono tales como, por ejemplo, acetonitrilo, propionitrilo, benzonitrilo, etc., amidas que contienen de 1 a 15 átomos de carbono tales como, por ejemplo, formamida, N,N-dimetilformamida, N,N-dimetilacetamida, etc., aminas y heterociclos que contienen nitrógeno que contienen de 1 a 10 átomos de carbono tales como pirrolidina, 1 -metil-2-pirrolidinona, piridina, etc., disolventes orgánicos sustituidos con halógeno que contienen de 1 a 14 átomos de carbono tales como, por ejemplo, bromotriclorometano, tetracloruro de carbono, clorobenceno, cloroformo, 1,2-dicloroetano, diclorometano, 1-clorobutano, tricloroetileno, tetracloroetileno, 1,2-diclorobenceno, 1,2,4-triclorobenceno , 1,1,2-triclorotrifluoroetano, etc., disolventes orgánicos sustituidos con alcoxi, ariloxi, cicloalquilo, arilo, alcarilo y aralquilo que contienen de 3 a 13 átomos de carbono tales como, por ejemplo, 2-butoxietanol, 2-etoxietanol, éter dimetílico de etilenglicol, 2-metoxietanol, 2-metoxietiléter, 2-etoxietiléter, etc., ácidos que contienen de 1 a 10 átomos de carbono tales como ácido fórmico, ácido acético, ácido trifluoroacético, etc., disulfuro de carbono, dimetilsulfóxido (DMSO), nitrometano y combinaciones de los mismos. Los extractos también se pueden preparar mediante extracción secuencial con cualquier combinación de los disolventes o procedimientos anteriores mencionados en este documento. Se puede utilizar cualquier medio, procedimientos o etapas de procedimientos o cualquier disolvente conocido en la técnica para fabricar los extractos de la presente invención. Los extractos se pueden refinar adicionalmente por medios conocidos en la técnica a una forma antiviral más potente o un ingrediente farmacéutico activo.

Los procedimientos de secado preferidos incluyen secado por congelación, secado al aire, secado por infrarrojo, secado por aspersión, secado al vacío, secado por membrana, secado por ultrasonido, secado por vibración, secado en tambor, secado por luz y procedimientos de secado Refractance Window® y aparatos para secar micelio, metabolitos extracelulares , extractos y derivados de productos naturales como se describe en la patente de Estados Unidos N° 4.631.837 de Magoon (1986). Los extractos se extraen preferiblemente de micelio vivo o congelado y pueden estar libres de células (filtrados y/o centrifugados) o no.

Ejemplo 8

Se cultivan Fomes fomentarius, Fomitopsis officinalis, Fomitopsis pinícola, Ganoderma resinaceum, Inonotus obliquus, Piptoporus betulinus, Trametes versicolor, Schizophyllum commune y otras especies de setas descritas en este documento o conocidas en la técnica y el micelio se cultiva en arroz, cebada, linaza otros granos, desechos agrícolas o productos forestales tales como aserrín o astillas de madera (para obtener una lista de sustratos, vease Stamets, Growing Gourmet and Medicinal Mushrooms, 1993, Ten Speed Press, Berkeley, Ca. y Stamets & Chilton, The Mushroom Cultivator, Agarikon Press, Olympia, WA). Cuando el micelio alcanza una masa de crecimiento (preferiblemente después de 5 a 60 días de crecimiento en fermentación o en fermentación en estado sólido posterior a la inoculación, pero mucho antes de la formación del cuerpo frutal), la masa micelial se puede extraer a través de una solución acuosa simple, agua/etanol (ambos son preferidos) o lavado del sustrato con etanol, o por compresión del sustrato, todo lo cual dará como resultado un fluido líquido o un extracto capturable que incluye exudados extracelulares. Estos extractos se pueden utilizar tal cual, o se puede añadir alcohol (25-50% en volumen) a extractos acuosos como conservante y disolvente (que precipitará polisacáridos solubles en agua). El extracto hidroetanólico se puede evaporar o eliminar, o el alcohol y el agua se pueden evaporar y eliminar por separado. El extracto crudo se puede filtrar sin células usando un filtro de 0,12-0,20 pm. Este extracto se puede congelar o secar para uso futuro. Alternativamente, se pueden utilizar extractos de disolventes no acuosos o no etanólicos como los enumerados en el Ejemplo 1 u otros disolventes conocidos en la técnica, o extractos de fluidos subcríticos o supercríticos que utilizan, por ejemplo, dióxido de carbono o agua y codisolventes opcionales tales como como alcoholes, o se pueden utilizar extractos asistidos por microondas. Se puede utilizar cualquier medio, procedimiento o etapa de procedimiento conocido en la técnica para inocular o cultivar un cultivo micelial puro sobre un sustrato sólido o celulósico, extraer un cultivo micelial, filtrar un extracto o eliminar parcial o totalmente el disolvente.

En un ejemplo de realización para extraer un micelio de setas, se mezclan volúmenes iguales de alcohol etílico frío al 95% (190 grados) y micelio y la mezcla se deja en remojo durante un mínimo de 15 minutos, preferiblemente varias horas, lo que permite la extracción de ambos compuestos solubles en etanol y solubles en agua. Luego se agrega agua para ajustar el líquido con alcohol al 30-40% en volumen y el micelio se separa del disolvente agua/etanol. En general, los polisacáridos solubles en agua comienzan a precipitar del líquido o sobrenadante con alcohol al 22-23% en volumen, siendo preferido alcohol al 22-50% en el producto final, siendo lo más preferido 25-35%. Si se recoge el precipitado para su uso, se prefiere EtOH al 35-45% para precipitar los sólidos de forma más completa. Se prefiere el alcohol de grano para la preparación de extractos kosher.

Ejemplo 9

El micelio de setas medicinales se cultiva utilizando técnicas de cultivo líquido. Mientras que el cultivo de arroz puede tener un 30-40% de conversión de arroz en micelio, el cultivo en tina líquida puede tener una conversión esencialmente completa con mas de 3 veces de micelio por unidad de masa. Por lo tanto, el cultivo de micelio en depósito líquido y sus metabolitos extracelulares será más fácil de utilizar en el desarrollo de esta invención, ya que el proceso de uso del cultivo en depósito elimina la necesidad de eliminar los ingredientes del sustrato no metabolizados. Se puede utilizar cualquier medio, procedimiento o etapas de procedimiento conocido en la técnica para inocular o cultivar un cultivo micelial puro sobre un sustrato líquido, extraer un cultivo micelial, filtrar un extracto o eliminar parcial o totalmente un disolvente.

Ejemplo 10

Para hacer el extracto de micelio, se usan volúmenes iguales de micelio cultivado en grano (cebada, linaza, arroz, avena, mijo, trigo, centeno, maíz), semillas, incluidas nueces, aserrín o astillas de madera (abeto de Douglas, pinos, robles, abedules, álamos, olivos) y se sumergen en una solución 50:50 de agua y etanol. Se deja reposar a temperatura ambiente durante dos semanas y luego se presione para expulsar el extracto líquido. Durante varios días, caerá un precipitado de la solución hidroetanólica. El sobrenadante hidroetanólico se extrae por encima del precipitado pastoso. Después de varias semanas más, o utilizando una centrífuga, el precipitado se concentra más en un estado semisólido. Estos semisólidos húmedos se eliminan y se calientan a 50 °C durante 6-8 horas mientras se agita. El volumen húmedo de semisólidos se reduce a aproximadamente el 40% de los semisólidos húmedos originales. El secado de los semisólidos en la sustancia de caramelo "similar a la miel" produce aproximadamente el 16% de los sólidos húmedos originales en húmedo. Por lo tanto, el uso de 1.000 ml de sólidos húmedos (que era el 40% del extracto inicial) produce aproximadamente 170 ml de una sustancia espesa de tipo caramelo almibarado. El calentamiento y la agitación continuos concentran esta sustancia con propiedades notablemente más dulces. El extracto se puede cristalizar, pulverizar y utilizar como enmienda a otros tratamientos. Las formas líquida, semisólida y cristalizada tienen un sabor notablemente dulce y podrían considerarse una sustancia medicinal similar a un caramelo útil tanto para los animales como para las personas en un amplio número de aplicaciones. Se puede utilizar cualquier medio, procedimiento o etapas de procedimiento conocidos en la técnica para inocular o cultivar un cultivo micelial puro en granos, nueces o maderas, para extraer un cultivo micelial con un disolvente, para precipitar un precipitado o para concentrar un sobrenadante.

Ejemplo 11

Se prepara un extracto de micelio extrayendo cuerpos frutales o micelio de setas basidiomicetos que incluyen Ganoderma resinaceum en agua caliente (80-100 °C) durante varias horas y combinado con la extracción con agua a temperatura ambiente (10-30 °C) de micelio de Fomes fomentarius, Fomitopsis officinalis, Fomitopsis pinícola, Ganoderma resinaceum, Inonotus obliquus, Piptoporus betulinus, Trametes versicolor y/o Schizophyllum commune cultivado en grano o madera. A estos extractos en agua, se agrega etanol para hacer que la solución tenga más de 22% de EtOH (etanol), preferiblemente 35-45% de EtOH. Tras la adición de etanol, los polisacáridos precipitan de la solución y se depositan en el fondo del recipiente de extracción. Al extraer el sobrenadante, los polisacáridos precipitados, ricos en glucósidos, glucoproteínas y otros nutrientes "similares al néctar", se recogen y se calientan entre 50 y 70 °C durante varias horas, lo que da como resultado la creación de un residuo dulce y beneficioso. Alternativamente, el sobrenadante se puede almacenar durante varios días, lo que produce además útiles polisacáridos de precipitación. Estos precipitados contienen azúcares complejos, antivirales, antibacterianos, ácidos cumáricos y cumarinas que sobrerregulan el citocromo p450, y pueden combinarse con otros ingredientes. Se puede utilizar cualquier medio, procedimiento o etapas de procedimiento conocidos en la técnica para extraer un cultivo micelial con agua, para añadir alcohol, para precipitar sólidos o para separar un sobrenadante de sólidos o un precipitado.

Ejemplo 12

Un extracto de micelio elaborado a partir de la extracción de cuerpos frutales o micelio de hongos basidiomicetos que incluyen Ganoderma resinaceum se empapa primero en etanol al 100% (proporción 1:1 en masa) durante 1-7 días. Se puede utilizar opcionalmente alcohol de 95% o 190 grados. Al escurrir el etanol, el orujo de hongo o micelio se sumerge en agua caliente (80-100 °C) durante varias horas y se combina con la inmersión en agua a temperatura ambiente (10-30 °C) y la extracción de micelio de Fomes fomentarius, Fomitopsis officinalis, Fomitopsis pinicola, Ganoderma resinaceum, Inonotus obliquus, Piptoporus betulinus, Trametes versicolor y/o Schizophyllum commune cultivados en grano o madera. A estos extractos en agua, se añaden los extractos de etanol descritos anteriormente para hacer que la solución combinada total sea superior al 22% de EtOH, preferiblemente al 35-45% de EtOH. Tras la adición de la fracción de etanol, los polisacáridos precipitan de la solución y se depositan en el fondo del recipiente de extracción. El ácido p-cumárico, que es más soluble en etanol que en agua, es más rico en el sobrenadante etanólico extraído (el sobrenadante etanólico, con ácidos p-cumáricos concentrados, es un reservorio de compuestos beneficiosos que codifican p450). Este sobrenadante hidroetanólico se puede almacenar durante varios días, lo que produce una mezcla de polisacáridos pero que es proporcionalmente más alta en ácidos p-cumáricos que las fracciones de agua caliente solas. El precipitado también contiene ácidos p-cumáricos y, además, otros nutrientes, que pueden usarse como se describe en este documento. Estos precipitados enriquecidos con p-cumárico también contienen azúcares complejos, antivirales, antibacterianos y familias de cumarinas, y pueden combinarse con otros ingredientes en cualquier sistema de liberación deseado. Cualquier medio, procedimiento o etapas de procedimiento conocido en la técnica para extraer un cultivo micelial secuencialmente con alcohol y agua caliente, fría o a temperatura ambiente, para combinar extractos de alcohol y extractos de agua o para precipitar sólidos o para separar un sobrenadante de sólidos o un precipitado, puede ser utilizado.

Ejemplo de referencia 13

A finales de mayo de 2015, el inventor suministró 50 kg de micelio liofilizado de Agarikon (Fomitopsis officinalis) a una granja de pollos de corral de 20.000 pollos, en el centro de la pandemia de gripe aviar que asoló Iowa y Minnesota, (esta fue una prueba experimental proporcionada por el inventor sin cargo). La cepa de influenza aviar H5N8 contribuyó a las variantes de H5N2 para crear una nueva cepa de influenza aviar altamente transmisible y letal. Los pollos se alimentaron a razón de 0,25 gramos por día por pollo de micelio de Agarikon - liofilizado y esterilizado por calor sobre un sustrato de arroz, elaborado de acuerdo con las especificaciones enumeradas en esta y las solicitudes de patente mencionadas anteriormente por el inventor, y se aplicó con su alimentación normal a una tasa de 1,9 lbs/ton (0,86 kg/ton).

Los pollos no tratados, en el área circundante, dieron positivo para influenza aviar y tuvieron que ser sacrificados posteriormente. Los pollos alimentados con micelio de Agarikon sobrevivieron sin rastro de gripe aviar. Se observó una isla de inmunidad en medio de una pandemia con los pollos tratados con Agarikon. Los propietarios de la granja de pollos, que son los principales interesados en la industria avícola, quedaron lo suficientemente impresionados como para contratar al inventor para que suministre a los pollos micelio de Agarikon para tratarlos de manera profiláctica antes del próximo brote de gripe aviar. El micelio de Agarikon contiene muchos de los compuestos antivirales descritos en este documento. Al contener una complejidad de moléculas antivirales, el inventor ve que Agarikon y los otros hongos, especialmente los poliporos enumerados en este documento, ofrecen un amplio escudo biológico de protección contra virus patógenos al ofrecer un extracto o una forma seca especializada de micelio como complemento alimenticio. El mercado potencial para proteger la industria del pollo y el pavo es de cientos de millones de dólares. Dadas estas pruebas iniciales, aproximadamente 1.000 kg de micelio (una tonelada métrica) equivalen a 40.000.000 pollo-días de protección (después de tres semanas de no detección del virus de la gripe, los pollos se consideran 'libres de virus de aves' y se les permite venderse para consumo). El micelio de Agarikon se puede comercializar y vender como nutracéutico o como alimento farmacéutico estandarizado para marcadores identificables para la consistencia de un lote a otro. De manera similar, se pueden utilizar micelio, extractos de micelio crudo o purificado o fracciones o ingredientes activos aislados.

Ejemplo de referencia 14

A un hombre de 58 años se le diagnosticó un carcinoma de células de Merkel (CCM) inusual (positivo para citoqueratina 7). Después de varios procedimientos y la finalización de la radioterapia, una tomografía por emisión de positrones (PET) no mostró evidencia de enfermedad. Durante un seguimiento regular seis meses después de completar la radioterapia, una tomografía por emisión de positrones reveló una lesión hepática, confirmada por imágenes de resonancia magnética (IRM). Las características histológicas eran compatibles con su tumor primario de CCM. La cirugía y la radiación no fueron posibles dada la ubicación del tumor; el paciente rechazó la quimioterapia debido a los resultados relativamente pobres y los efectos secundarios significativos asociados con el tratamiento con quimioterapia del CCM. El paciente comenzó a tomar suplementos dietéticos, limpiador de hígado y colon y Stamets 7®, una mezcla de micelio de setas medicinales [Royal Sun Blazei (Agaricus brasiliensis f. Blazei), Cordyceps (Cordyceps sinensis sl), Reishi (Ganoderma lucidum sl), Maitake (Grifóla frondosa), Melena de León (Hericium erinaceus), Chaga (Inonotus obliquus) y Mesima (Phellinus linteus)] y alteró notablemente su dieta eliminando carne, huevos y lácteos y sustituyéndola por arroz integral orgánico, frijoles, verduras salteadas y jugos recién preparados de vegetales orgánicos. Cinco semanas después de comenzar con estos enfoques alternativos, una resonancia magnética reveló la remisión completa de su metástasis hepática y ha permanecido asintomático durante un total de 53 meses, y la exploración más reciente no muestra evidencia de enfermedad. Véase Vandeven et al., Complete Spontaneous Regress of Merkel Cell Carcinoma Metastatic to the Liver: Did Lifestyle Modifications and Dietary Supplements Play a Role?, Glob. Adv. Health Med., 1(5): 20-21 (2012). Los componentes antivirales dentro de la formulación de Stamets 7® pueden ser responsables de la reducción de CCM y pueden haber ayudado a este paciente a recuperarse del cáncer subsiguiente.

Ejemplo de referencia 15

Se ha atribuido una mezcla compleja de micelio de 17 especies de setas medicinales en un producto llamado MyCommunity® y una mezcla de 7 especies llamada Stamets 7® bajo la marca Host Defense® de Fungi Perfecti (PO b Ox 7634, Olympia, WA 98507) por varios clientes para aliviar los síntomas de la enfermedad de Lyme. Dentro de esta mezcla, las víctimas de la enfermedad de Lyme han reportado anecdóticamente que Melena de León, Hericium erinaceus y Cordyceps subsessilis resultan en el alivio de los síntomas. La enfermedad de Lyme es causada por especies de Borrelia, particularmente la bacteria Borrelia burgdorferi, y cohortes, que pueden coinfectar, causando inflamación y disminuyendo la inmunidad, haciendo que los pacientes sean más susceptibles a infecciones latentes u oportunistas y carcinogénesis. Las especies y compuestos mencionados en este documento, por lo tanto, son prometedores en nuevos procedimientos y composiciones para usos farmacológicos y nutracéuticos para tratar pacientes que padecen la enfermedad de Lyme y las patologías, sintomatologías y coinfecciones relacionadas observadas con personas con esta enfermedad crónica debilitante. Los componentes antibacterianos de las formulaciones de Stamets 7® y MyCommunity® pueden ser responsables de la reducción de la enfermedad de Lyme y pueden ayudar a aliviar los síntomas.

Ejemplo de referencia 16

Un médico informó que sus recuentos virales de la hepatitis C se volvieron indetectables después de tomar un régimen de dos meses de cápsulas de Agarikon Host Defense® que contenían micelio de Fomitopsis officinalis cultivado en arroz (500 mg por cápsula). Reimpreso, con permiso, es una copia exacta de su informe de caso.

"Estos son los hechos de mi caso.

Me diagnosticaron hepatitis C en 2000 o 2001. Un panel hepático anormal había alertado al médico para que buscara ese virus, ya que ese era el momento en que la medicina daba cuenta de su propagación.

Nunca me di cuenta de cómo contraje el virus, pero había trabajado en una unidad psiquiátrica para pacientes hospitalizados en SoCal en 1987/88. Después de eso, administré grandes clínicas de salud mental para pacientes ambulatorios allí donde un número significativo de nuestros pacientes tenían este virus. Otra posibilidad es que lo obtuve de una cirugía mayor que tuve en 1992. En cualquier caso, el médico en 2001 dijo que dado que mi carga viral era baja, debería esperar hasta que hubiera mejores tratamientos disponibles antes de buscar atención.

Como probablemente usted sepa, recientemente estuvieron disponibles excelentes tratamientos (aunque costosos). Mi internista acordó este enero volver a controlar mi carga viral y, aunque todavía era relativamente baja, accedió a derivarme a un gastroenterólogo de todos modos. Ese tipo hizo un panel de hígado y luego, a mi súplica, me refirió al farmacéutico para el curso de la medicación. Así es como lo hace Kaiser Permanente®: un farmacéutico especialmente capacitado administra un programa de tratamiento. Comienza con una verificación inicial de la carga viral, luego la medicación diaria. Tan pronto como la carga viral desciende a cero, se suspenden los medicamentos.

La semana antes de que asistiera a la clase, el farmacéutico ordenó otra prueba de laboratorio del VHC para establecer la línea base. El día de la clase, estaba literalmente en las instalaciones, caminando hacia el salón de clases cuando el farmacéutico llamó a mi teléfono celular. Ella dijo que los resultados de las pruebas de laboratorio acababan de llegar y de alguna manera, por alguna razón, no mostraban presencia del virus. Ella estaba perpleja por una explicación, pero dijo que no podía comenzar con la medicación porque no tenía carga viral que tratar de reducir.

Llamé nuevamente al gastroenterólogo al día siguiente y le dije que tal vez había habido un error de laboratorio o algo parecido. Había sido tan difícil conseguir la remisión que no quería perder esta oportunidad de deshacerme del virus. Estuvo de acuerdo en volver a hacer la prueba de inmediato, por si acaso. Una semana después, llamó para decir que, efectivamente, la primera prueba era correcta. No hubo carga viral, aparentemente estoy libre de virus. Parecía inseguro, pero dijo que había escuchado historias de pacientes cuyo sistema inmunológico fue capaz de eliminar el virus de alguna manera, pero nunca había oído hablar de nadie que hubiera tenido una carga viral durante más de 10 años y luego desapareciera así. Dijo que había revisado mis registros y que la carga viral había sido constante entre la primera identificación y la prueba más reciente en enero de 2015. Pero ya no estaba, siete meses después. Y la carga seguía siendo cero en la nueva prueba dos semanas después. Dijo que debería estar feliz.

Y de hecho es un alivio, como usted puede imaginar. Pensé mucho en busca de una explicación. Me di cuenta de que durante la primavera de este año, había tomado las cápsulas de Agarikon durante unos dos meses. Aparte de eso, estaba tomando curcumina y una vitamina, pero las había estado tomando durante años. El único cambio fue agregar la cápsula de setas.

Escuché una entrevista con usted en la radio. (No recuerdo qué programa, pero fue en medio de la noche cuando no podía dormir). No dijo nada sobre el VHC, pero mencionó el efecto antiviral de ciertas setas. Hice una búsqueda bibliográfica y encontré un artículo o una patente suya (no recuerdo cuál) en la que se menciona específicamente el VHC, por eso le pedí el Agarikon a su empresa.

Así que esa es mi historia. Obviamente no es un experimento controlado en laboratorio, pero he pensado mucho en otras posibles explicaciones y no tengo muchas. No había cambiado ningún otro estilo de vida o hábito dietético. Entonces, o esta remisión se debe a (a) meditación y oración, (b) buena fortuna al azar, (c) el Agarikon, o (d) alguna combinación de ellos.

Usé dos botellas de 60 cápsulas de Agarikon entre abril y junio. Siempre tomaba una cápsula por la mañana antes del desayuno y, a veces, una segunda cápsula por la noche antes de dormir, pero eso no era consistente. Estuvimos en SoCal en junio y julio y no estaba tomando las cápsulas allí, pero las pruebas de laboratorio que dieron negativo se realizaron en agosto (realizadas en las instalaciones de Káiser en Fontana, California). Entonces, cualquier efecto beneficioso debe haber sido en la primavera.

No dude en compartir mi historia según corresponda, pero, por supuesto, preferiría permanecer en el anonimato".

Ejemplo 17

Cualquiera de los micelios, extractos o moléculas antivirales o sus análogos descritos en esta invención se puede combinar con CBD (cannabidiol) por cualquier medio o procedimiento conocido en la técnica para proporcionar un beneficio sinérgico dual para reducir los oncovirus y aumentar la regulación de las vías del sistema inmunológico, lo que resulta en el beneficio acumulativo de reducir la carga viral y reducir la carcinogénesis. Además, los productos naturales tales como setas, micelio de hongos y extractos de micelio de hongos que contienen las moléculas antivirales descritas en el presente documento pueden combinarse con CBD en sus formas purificadas, o con otros cannabinoides, o con sus formas naturales, como con especies de Cannabis, o extractos de los mismos, para beneficio médico. Además, los alimentos pueden diseñarse con sustancias naturales que contienen estas composiciones y agentes farmacéuticos antivirales anteriormente mencionados, con y sin CBD, específicamente para atraer a los consumidores para mantener la salud y prevenir y curar enfermedades. Actualmente se conocen al menos 85 cannabinoides, cualquiera de los cuales o una combinación de ellos puede utilizarse para crear una composición de ingredientes para beneficio médico. Además, estos ingredientes se pueden combinar sin hacer afirmaciones médicas y de conformidad con la Ley de Educación y Salud de Suplementos Dietéticos (DSHEA) de 1994, tal como, pero sin limitarse a, declaraciones de apoyo tales como: en apoyo de la inmunidad, en apoyo de estados de salud innatos en individuos sanos, en apoyo de un microbioma sano y en apoyo de una expresión genética saludable. Las hispolonas, polifenoles, micoflavonoides y los ácidos antivirales que se muestran en el presente documento son los principales candidatos para combinarse con CBD para crear nuevas mezclas de componentes. La razón fundamental para combinar CBD y componentes antivirales y potenciadores de la inmunidad fúngica es que tanto los CBD como los polisacáridos fúngicos actúan para potenciar el sistema inmunológico. Sus mecanismos de acción son complementarios; los respectivos sitios receptores pueden generar reacciones en cascada que son similares y diferentes entre sí, lo que permite que la interacción de estos agonistas sintonice el sistema inmunológico de acuerdo con el estado de salud de cada uno.

El CBD de Cannabis complementa significativamente las capacidades inmunomoduladoras de los polisacáridos fúngicos. Los polisacáridos fúngicos (PS fúngicos) son agonistas de algunos receptores clave de reconocimiento de patrones, tales como los TLR 2, 4, 6 y Dectina1. Estos receptores se expresan en células inmunes que regulan la inmunidad mediada por células, tales como macrófagos, células NK y otros. La activación de estas células inicia el diálogo cruzado con el sistema del complemento y, según sugiere la investigación actual, las ramas humorales del sistema inmunológico. La actividad agonista en estos sitios receptores activa las vías MAPK y MyD88, activando NfkappaB. Los PS fúngicos también activan las células Th1, que coordinan la respuesta inmune mediada por células.

El CBD es un agonista débil (con baja afinidad) en el sitio del receptor CB2, que se expresa en todas las células y tejidos inmunes (es decir, amígdalas, bazo). La farmacología del CBD aún se está investigando. Por lo que se conoce actualmente, el CBD subregula TNF-alfa. Esto es de interés, ya que el TNF-alfa puede ser sobrerregulado por PS fúngico. El CBD también es un agonista débil en GPR55, también conocido en algunos círculos como el receptor CB3. Este receptor se expresa en una amplia gama de células del cuerpo y cada vez se investiga más su papel en la homeostasis endocannabinoide (apetito, memoria y estado de ánimo) y oncogénesis.

Quizás la interacción más intrigante entre CBD y PS fúngicos radica en los linfocitos T. Los PS fúngicos activan el brazo Th1 de la actividad de los linfocitos. El CBD suprime ciertos aspectos de la actividad de los linfocitos. El CBD induce principalmente la apoptosis activando la vía ROS mediada por ER en linfocitos primarios. Esto produce un efecto antiinflamatorio neto y se considera que es el mecanismo de los efectos antiartríticos del compuesto. El alcance completo de los efectos del CBD sobre la función inmunológica aún se está caracterizando y parece depender del contexto (específicamente, la densidad del receptor y la población de células diana).

El CBD tiene características farmacológicas adicionales, incluida la actividad en TRPV1 (implicado en la nocicepción) y 5-HT1A. Este último sugiere un emparejamiento natural con especies de setas neurológicamente activos y seratonérgicos tales como Hericium erinaceus o Ganoderma lucidum. El CBD ha sido investigado por sus actividades neuroprotectoras y es un conocido antipsicótico, ansiolítico y antidepresivo. El CBD también se ha estudiado para una amplia gama de acciones contra el cáncer, incluida la inducción de la apoptosis (mediante la activación de las caspasas 3, 8 y 9), la actividad antiproliferativa, la antiangiogénesis y la prevención de la migración e invasión tumorales. En dosis altas (1 g/día), el CBD ha demostrado efectos antineoplásicos in vitro.

El CBD parece redondear y complementar los efectos del ingrediente basado en setas sobre la función inmunológica.

Referencias/Lecturas clave

Cabral GA, Rogers TJ y Lichtman AH. Turning Over a New Leaf: Cannabinoid and Endocannabinoid Modulation of Immune Function. Journal of Neuroimmune Pharmacology, 10(2): 193-203 (2015).

Hassan S, Eldeeb K, Millns PJ, Bennett AJ, Alexander SPH y Kendall DA. Cannabidiol enhances microglial phagocytosis via transient receptor potential (TRP) channel activation. British Journal of Pharmacology, 171(9): 2426 2439 (2014).

Kaplan BLF, Springs AEB y Kaminski NE. The Profile of Immune Modulation by Cannabidiol (CBD) Involves Deregulation of Nuclear Factor of Activated T Cells (NFAT). Biochemical pharmacology, 76(6): 726-737 (2008).

Ejemplo 18

A las abejas melíferas cautivas (Apis melifera) se les presentó agua azucarada (típicamente 50% de azúcar (sacarosa o jarabe de maíz) y 50% de agua), a la que se añadió un porcentaje, basado en la masa, de extractos miceliales en concentraciones variables. El recuento neto total de partículas de patógenos virales de abejas que recibieron extractos de micelio en su agua azucarada al 0,1% y al 1%, mostró una reducción dependiente de la dosis en los virus de las abejas en general después de una semana de tratamiento. Los extractos de etanol-agua se prepararon usando los procedimientos descritos previamente en la patente de los Estados Unidos No 8.765.138 y en la solicitud de patente de los Estados Unidos No 14/641.432. Los recuentos virales se realizaron utilizando los ensayos descritos en la solicitud de patente de los Estados Unidos No 14/641.432: "Integrative fungal solutions for protecting bees" presentada el 8 de marzo de 2015. Los virus examinados incluyeron el virus de la parálisis crónica (CPV), el virus de la parálisis aguda de las abejas (ABPV), Virus de la parálisis aguda israelí (IAPV), virus de la abeja de Cachemira (KBV), virus de la célula reina negra (BQCV), virus del ala turbia (CWV), virus del saco de abeja (SBV), virus del ala deformada (DWV), virus de Kakugo, virus de tipo iridiscente de invertebrados tipo 6 (IIV-6), virus del lago Sinaí (LSV1 y LSV2) y virus de la mancha anular del tabaco (TRSV). Los extractos de etanol-agua de los micelios de las siguientes especies mostraron una disminución neta del virus del 9% para Trametes versicolor al 10% de concentración, 56% para Fomitopsis pinicola al 1% de concentración, 68% para Fomes fomentarius al 1% de concentración, 72 % para Inonotus obliquus al 1% de concentración y 87% para Ganoderma lucidum (= Ganoderma lucidum variedad resinaceum) al 0,1% de concentración mientras que el Extracto de Control de Arroz mostró un aumento del 63% en la carga viral al 1% de concentración en la misma semana. Los ensayos replicados se realizaron uno al lado del otro al mismo tiempo en la misma sala para realizar comparaciones precisas. El inventor sugiere que las moléculas antivirales descritas en esta patente pueden ser útiles para reducir los virus patógenos en las abejas y están dentro del alcance de estas invenciones. Además, dado que el virus de la mancha anular del tabaco es un virus vegetal que también daña a las abejas, los antivirales descritos en este documento pueden ser útiles para combatir virus que dañan las plantas.

Ejemplo 19

El micelio de Fomes fomentarius cultivado sobre aserrín de abedul y extraído en agua fría y etanol (EtOH al 35%), luego se evaporó frente a un filtro HEPA a 22 °C, durante 48 horas, reduciendo los volúmenes en un 90%. Se pueden utilizar de forma similar otros medios y procedimientos conocidos para evaporar, concentrar o eliminar un disolvente. Este concentrado evaporado se presentó a las abejas a través de su agua de alimentación. A una concentración de 0,01% en masa, el virus del ala deformada (DWV) se redujo, en aproximadamente, en 1.000: 1 con una muestra que demuestra una reducción de más de 1.000.000 a 1. (Los resultados de la investigación fueron subcontratados por los expertos en abejas Dr. Jay Evans, USDA, en colaboración con el Dr. Steve Sheppard, de la Universidad Estatal de Washington (WSU), quienes han comentado que nunca habían visto tal actividad antiviral en los muchos compuestos que conocen o han probado contra virus de abejas (Comunicaciones personales). Esta notable reducción en la infección viral de DWV sugiere que los extractos de micelio cultivado en madera a temperatura ambiente o en agua fría y etanol son un antiviral más potente que los extractos derivados del micelio cultivado en arroz. Sin embargo, que el micelio cultivado en arroz de varias especies de poliporos enumeradas en esta solicitud de patente también reduce significativamente los virus en las abejas es una fuerte evidencia de que la vía central para la expresión de compuestos antivirales no depende exclusivamente de la madera (alto contenido de lignina) sino que se ve reforzada por compuestos endógenos dentro de la madera.

Inesperadamente, los extractos del micelio cultivado en aserrín de abedul mostraron selectividad contra el virus del ala deformada (DWV) pero mucha menos actividad contra el virus del lago Sinaí (LSV), lo que subraya la importancia de los factores de especificidad de especies cruzadas para elaborar los extractos más útiles.

Además, se observó algo, pero significativamente menos actividad de los extractos de control de abedul contra los virus de las abejas, pero es explicable ya que, tras el análisis de ADN por PCR, dos especies de poliporos, ya descritas y predichas para tener actividad antiviral en patentes pendientes, es decir, Trametes versicolor y una especie de Stereum, Chondrostereum purpureum, se encontró que era residente natural en el control de aserrín de abedul usado para el control de alcohol-agua, pero curiosamente, aunque se usaron los cebadores de ADN para Fomes fomentarius, no se detectó ADN de Fomes fomentarius. El inventor señala que la variabilidad natural de las poblaciones de setas dentro del aserrín de madera de abedul hace que los extractos de aserrín natural no sean adecuados como control antiviral en comparación con el cultivo intencional de especies de poliporos seleccionados en madera esterilizada que luego pueden extraerse posteriormente del aserrín u otros materiales biodegradables, utilizando procedimientos para composiciones descritas dentro del alcance de esta patente.

Ejemplo 20

Las especies de Lactobacillus, Acidophilus y Bifidobacterias se pueden combinar con el micelio, los API o con extractos del micelio que contienen los API enumerados en este documento, para aumentar la eficacia de los componentes antivirales, aumentar la biodisponibilidad, facilitar la absorción y catalizar formas para aumentar la actividad y beneficios para los hospedadores desafiados con patógenos virales. Además, Trametes versicolor (Cola de Pavo) y Ganoderma lucidum (Reishi) son prebióticos que favorecen las bacterias beneficiosas del microbioma. Como tal, estas y otras bacterias beneficiosas pueden cultivarse con o sobre micelio de especies de Trametes versicolor y Ganoderma. Por lo tanto, estas combinaciones pueden usarse para ayudar a facilitar la activación bacteriana y la detección de quórum compleja que puede mejorar la eficacia de los API enumerados en este documento, mejorando los beneficios para el organismo huésped del virus. Además, las especies de poliporos y sus extractos miceliales mejoran el crecimiento de la levadura Pichia beneficiosa en el sistema gastrointestinal al tiempo que suprimen las levaduras patógenas tales como Candida albicans. Por lo tanto, los extractos de estas especies de poliporos seleccionadas, tales como, entre otros, los géneros Fomitopsis, Ganoderma, Inonotus, Trametes, pueden ser prebióticos tanto para bacterias beneficiosas como para levaduras beneficiosas, mejorando la salud de los microbiomas de los pacientes. Se puede utilizar adicionalmente cualquier otro medio o procedimiento para aumentar la eficacia o aumentar la biodisponibilidad o facilitar la absorción conocidos en la técnica.

Ejemplo 21

Cualquiera de los ingredientes o composiciones principales activos que contienen estos API antes mencionados que se verían disminuidos por oxidación se puede tomar con inhibidores de monoamina oxidasa (MAO) para ayudar a mantener la eficacia antiviral. El uso de inhibidores de oxidasa permitirá una mejor supervivencia de los API originales a través de las vías del citocromo P450, especialmente a través del hígado. Se pueden utilizar numerosas fuentes naturales de MAO en combinaciones con los API, con los extractos de micelio que contienen estos API o con otras composiciones que contienen estos API para aumentar la biodisponibilidad, el paso o la potencia. Las plantas que se pueden utilizar incluyen, entre otras, Glycyrrhiza glabra (raíz de regaliz), Acacia catechu (planta de catechu), hoja de Ginkgo biloba (ginkgo), Planta de Passiflora incarnata (pasiflora), Raíz y semilla de Peganum harmala (ruda siria), raíz de Curcuma longa (cúrcuma), Piper methysticum (raíz de kava), Hypericum perforatum (hierba de San Juan) y Banisteriopsis caapi (yagé).

Ejemplo 22

Se pueden utilizar varios procedimientos para aumentar la producción de antivirales a partir de micelio en crecimiento in vitro, dentro de laboratorios cerrados, reduciendo los costes de descubrimiento y comercialización de nuevos fármacos.

A medida que los hongos pudren la madera, descomponiendo la lignina, también exudan agua, rica en ácido pcumárico y otros compuestos nutracéuticos. Cuanto más ácido p-cumárico, se expresan más lacasas (enzimas que degradan la lignocelulosa) por el micelio, cuanto más se pudre la madera, se producen más polisacáridos fúngicos (azúcares) y, en última instancia, más de estos compuestos estarán en los exudados fúngicos. Una vez que la luz ultravioleta estimula el proceso de señalización del micelio en la formación de primordios, las lacasas disminuyen y el ácido p-cumárico se degrada en ácido p-hidroxibenzoico, que está estrechamente relacionado con el ácido vanílico y sus precursores y productos metabólicos.

Curiosamente, muchos de los granos preferidos para la producción de semillas miceliales para la industria de las setas (véase Growing Gourmet & Medicinal Mushrooms por el inventor, Paul Stamets, 1993, 2000, Ten Speed Press, Berkeley) también son fuentes ricas en ácido p-cumárico y pueden ser útiles en composiciones antivirales. Los ácidos fenólicos primarios en el grano de arroz se identificaron como ácido p-cumárico, ácido ferúlico y ácido sinapínico. Por lo tanto, el arroz es un buen sustrato de materia prima sobre el que cultivar micelio para producir los nuevos antivirales que ha descubierto el inventor.

El ácido p-cumárico no solo se encuentra en los granos preferidos para la producción de semillas de setas, sino que también se genera durante el ciclo de vida normal de las setas, especialmente antes de la formación de primordios. El ácido p-cumárico es un potente inhibidor de la tirosinasa, la enzima esencial para la melanización. La presencia y abundancia de ácido p-cumárico interfiere con la producción de pigmentos de color oscuro. La luz ultravioleta estimula la fotodescomposición del ácido p-cumárico, lo que permite la melanización y desencadena la formación de primordios. Una vez que la luz ultravioleta estimula el proceso de señalización del micelio en la formación de primordios, las lacasas disminuyen y el ácido p-cumárico se degrada en ácido p-hidroxibenzoico, que está estrechamente relacionado con el ácido vanílico, y otros compuestos antivirales descubiertos por el inventor, como la etil vanilina, ácido cafeico, ácido protocatechuico, ácido trans-cinámico, ácido ferúlico, ácido gálico, ácido elágico, lanosterol, inotodiol, ácidos trametenólicos, hispolonas (hispidinas), hispidina, hifolomina B, inoscavina A, davalialactona, feligridina D, ergosteroles, crisina, cordecepina, ácido trans-cumárico, dihidrato de ácido elágico, ácidos linoleicos, ácido transferúlico, hidrato de ácido gálico, hexanal, ácido 4-hidroxibenzoico, p-hidroxibenzaldehído, ácido p-hidroxibenzoico, hidrato de quercetina, hidrato de rutina (incluidos los glucósidos flavonoides relacionados), ácido shikímico, ácido siríngico, acetovanilona, guayacol, eugenol, ácido sulfurénico, ácido deshidrosulfurénico, ácido eburicoico, estigmasterol y beta-sitosterol, incluidos, entre otros, sus polifenoles y sus análogos que se describen en este documento. Cabe señalar que el micelio puede estar en un estado de transición antes, durante y después de la exposición a la luz, por lo que una combinación de estos ingredientes antivirales activos puede coexistir o controlarse mediante la exposición a la luz y las limitaciones de nutrientes.

La estimulación con luz también desencadena la producción de psilocibina y psilocina en el micelio de, por ejemplo, Psilocybe cyanescens, Psilocybe cubensis y Psilocybe cyanescens. La producción "intermitente" de psilocibina, psilocina, baeocistina, norbaeocistina y otros alcaloides asociados del micelio causada por la exposición a la luz (particularmente a los rayos UV) están interrelacionados con la producción de ácido p-cumárico y la expresión metabólica resultante de la codificación de la tirosinasa para la melanina, especialmente antes, durante y después del tiempo de formación de los primordios. Por lo tanto, este inventor sugiere que la psilocibina, psilocina, 4-acetoxidimetiltriptamina, baeocistina, nor-baeocistina y otros alcaloides asociados pueden tener propiedades medicinales clave para la producción o uso de nuevos antivirales no descubiertos todavía por la ciencia pero descubiertos o predichos por este inventor. Los animales como los seres humanos y las abejas podrían beneficiarse del uso del micelio de las setas productores de psilocibina como fuente de nuevos agentes medicinales. La transición del micelio tras la exposición controlada a la luz, especialmente luz azul en los intervalos de 300-420 nanómetros, permite el desarrollo de un conjunto personalizado de ingredientes activos, a partir de los cuales se crea un extracto o se combina con moléculas farmacológicas activas para un beneficio neto para el paciente (humano o animal) que consume esta combinación única.

Ejemplo de referencia 23

Dado que varios virus descritos dentro del alcance de esta invención causan neuropatía (Epstein Barr, Herpes (Varicella) zoster, virus del herpes, Hepatitis C, poliomielitis, Nilo Occidental, citomegalovirus, a modo de ejemplo y no de limitación) y que la psilocina y sus análogos relacionados causan neurogénesis, la combinación de las moléculas antivirales activas antes mencionadas descubiertas por el inventor se puede combinar de manera única con psilocibina, psilocina, 4-acetoxi dimetiltriptamina, baeocistina, nor-baeocistina para crear una combinación de fármacos única que podría reducir, prevenir, curar o remediar el daño neuropático de los virus, incluidas las neuropatías del sistema nervioso central y periférico. Este inventor sugiere que estas combinaciones no solo podrían reparar la neuropatía, sino también mejorar o mantener la inteligencia y la salud cognitiva a medida que los pacientes (humanos o animales) envejecen. Esta combinación única podría resultar útil para ayudar a los pacientes que padecen una amplia gama de enfermedades relacionadas con la neuropatía, tales como, a modo de ejemplo y no de limitación, el Alzheimer, la demencia, el síndrome bipolar, el Parkinson y enfermedades complejas englobadas por los "parkinsonismos". Las dosis sugeridas diarias a semanales para un hombre adulto de peso promedio, por ejemplo, estarían en el intervalo de:

1 gramo de ácido vanílico con 30 mg de psilocibina para una dosis alta.

1/4 de gramo de ácido vanílico con 7,5 mg de psilocibina en una dosis moderada.

1/8 gramo de ácido vanílico con 3,75 mg de psilocibina para una dosis baja o de mantenimiento.

Las proporciones facultativas de usar una combinación de ácido vanílico en combinación con psilocibina pueden ser de 1:1 a 100:1 de ácido vanílico con respecto a psilocibina.

En caso de que se utilicen setas que contengan 1% de psilocibina, el constituyente o constituyentes activos pueden extraerse eficazmente permitiendo que el hielo se derrita lentamente sobre las setas picadas, o usando agua a punto de congelación o cerca de la congelación en una suspensión de hielo y agua fría extraída durante 2 - 4 días a 1-2 grados Celsius utilizando una proporción de 100 ml de agua a 10-100 gramos de setas. El extracto resultante, bajo en diversos betaglucanos y otros polisacáridos, tiene un color azulado profundo translúcido. Dicho 'jugo azul' puede liofilizarse, evaporarse en un evaporador rotatorio o secarse por otros medios que no sean perjudiciales para la psilocibina o el contenido de psilocina o análogos. Dicho material seco se puede analizar para su estandarización para permitir la formulación del fármaco dentro de los parámetros prescritos necesarios para que la FDA u otras agencias farmacéuticas otorguen la aprobación para la formulación como un medicamento aprobado. En particular, este procedimiento de extracción de agua casi helada es diametralmente contrario al pensamiento y las prácticas convencionales defendidas por los expertos en la industria de las setas. Además, se puede emplear adicionalmente una amplia gama de disolventes polares y no polares para una mayor potenciación de los ingredientes con efectos anti-neuropáticos. Se pueden agregar conservantes y excipientes. El extracto se puede secar mediante secado sin escarcha, secado por congelación, evaporación rotatoria, secado en tambor, ultrasonido o por cualquier medio conocido en la industria farmacéutica.

Ejemplo 24

Como ejemplo, pero no limitativo, el micelio de Auricularia aurícula (A. auricularia-judae), cuando se desarrolla en cultivo, es blanquecino y carece de melanina, pero contiene ácido p-cumárico. Cuando el micelio de las setas se expone a la luz, el micelio se biotransforma para crear cuerpos frutales de color marrón oscuro, que son más ricos en melanina a medida que maduran, con el ácido p-cumárico, un inhibidor de la melanina, disminuyendo al mismo tiempo. Este es un ejemplo y es un argumento sólido a favor del beneficio de utilizar micelio de color claro a amarillento, premelanización y, a menudo, rico en micoflavonoides, como fuente de micelio para la elaboración de extractos antivirales debido a su contenido innato de ácido p-cumárico compuesto por el contenido nativo de ácido p-cumárico en los granos que se utilizan para la producción de semillas para el cultivo de micelio. Curiosamente, la interfaz ideal para capturar los mejores beneficios del micelio por su contenido de ácido p-cumárico y nutracéutico es una ventana corta, a menudo de unos pocos días de duración, antes y directamente después de la exposición a la luz, pero antes del desarrollo del cuerpo frutal de color oscuro más allá de la etapa primordial blanca.

La exposición del micelio cultivado en arroz a la luz azul (ultravioleta, UV) en las longitudes de onda de 280-420 nanómetros, durante un período corto de tiempo, que dura solo 1-5 días, puede ayudar a crear y potenciar los agentes antivirales descritos en este documento. La intensidad de la luz puede oscilar entre 50 y 1.000 lux. Al incubar el arroz esterilizado que está siendo colonizado activamente por el micelio en bolsas de plástico, que han crecido durante un mínimo de 1 semana y hasta 16 semanas, las luces que exponen la luz ultravioleta se pueden colocar directamente encima y debajo de las bolsas de forma horizontal para una máxima exposición a la luz. Las bolsas de plástico se pueden seleccionar para permitir que estas longitudes de onda de luz azul alcancen el micelio. El micelio puede sufrir un cambio de fase en respuesta a estímulos lumínicos para producir agentes antivirales derivados que se mencionan en esta invención (es de esperar que durante este período de transición, el micelio pueda contener diversas mezclas de compuestos antivirales activos). Este procedimiento y las mejoras derivadas que utilizan ciclos de oscuridad, luz y oscuridad/luz, según corresponda, pueden potenciar la producción de moléculas antivirales, algunas de las cuales son moléculas intermedias durante las vías de melanización activadas por la exposición a la luz a longitudes de onda específicas. Esto abre posibilidades para personalizar la salida de moléculas antivirales específicas utilizando longitudes de onda precisas, tiempos de exposición e intensidades de luz para fabricar y potenciar la producción antiviral a partir del micelio. Las luces se pueden pulsar y/o secuenciar con diferentes longitudes de onda para exponer el micelio. El micelio también se puede agitar posteriormente para provocar nuevos brotes de crecimiento, lo que provoca la diferenciación de hifas con múltiples núcleos por célula e hiperexpresión de metabolitos extracelulares que contienen estos antivirales. Además, los antivirales pueden emitirse de manera diferente a lo largo del tiempo, lo que permite ventanas de recolección lavando el micelio usando EtOH y H2O fríos u otros disolventes y procesos conocidos en la técnica de extracción de productos naturales. Puede utilizarse cualquier procedimiento o aparato para proporcionar la luz adecuada.

Ejemplo 25

La producción de principios activos contra virus a partir de micelio puede mejorarse adicionalmente mediante acciones vibratorias, que incluyen, entre otras, vibración sónica pulsada (ultrasonidos) en combinación con longitudes de onda UV estimulantes de API. Se pueden personalizar espectros y vibraciones UV específicos para mejorar los rendimientos antivirales. Además, se pueden utilizar combinaciones de hongos, bacterias y plantas (algas). Se pueden orquestar grupos de hongos, bacterias y plantas (algas, en particular) para crear un quórum que emita compuestos antivirales y antimicrobianos útiles en medicina. La interacción de estos organismos en conjunto provocará nuevos moduladores inmunitarios y compuestos antivirales útiles en medicina. A medida que evoluciona la ciencia genómica, los quórum de organismos pueden diseñarse específicamente para beneficiar mejor al individuo desde el punto de vista médico de estos antivirales y otros relacionados en función de la 'personalidad' genómica o la constitución de ese individuo. Puede utilizarse cualquier procedimiento o aparato para proporcionar acciones vibratorias o sónicas. La preparación de los productos finales se puede realizar utilizando cualquier procedimiento conocido por las industrias farmacéutica o de procesamiento de alimentos.

Ejemplo 26

Los compuestos o extractos de micelio podrían inducir la replicación viral de bacteriófagos en el microbioma que podrían ayudar a respaldar el descubrimiento de una acción selectiva pero indirecta contra bacterias y virus patógenos. Además de producir pequeñas moléculas de micelio que inhiben directamente la replicación viral, el micelio también puede producir compuestos que reúnan virus específicos contra bacterias patógenas; modular bacterias (e indirectamente virus) a través de la inducción o inhibición de detección del quórum; y seleccionar bacteriófagos que pueden resultar en efectos antibacterianos sin que esos componentes sean realmente positivos para la actividad antibacteriana en ausencia de bacteriófagos.

Ejemplo 27

Posteriormente al descubrimiento de este inventor, ahora se puede crear un conjunto de lociones, aerosoles, parches dérmicos, ingeribles o inyectables dermatológicos personalizados y muy necesarios usando combinaciones de varias de las moléculas activas y extractos novedosos de micelio. Ahora se pueden diseñar lociones dermatológicas, aerosoles y parches dérmicos que serán útiles para reparar el daño nervioso, reducir la inflamación y las poblaciones virales mientras ralentizan el crecimiento o erradican de tumores al ayudar a la inducción de la apoptosis de los tumores o al reforzar la respuesta inmune nativa. El VPH (virus del papiloma humano), CCM (carcinoma de células de Merkel), HHV-8 (virus del herpes humano 8 también conocido como virus del herpes asociado al sarcoma de Kaposi (KSHV)) y el VIH (virus de la inmunodeficiencia humana) pueden causar una variedad de cánceres de piel, incluidos los cánceres de piel de células basales y escamosas y el melanoma. Algunos cánceres pueden presentarse primero como verrugas genitales. Es probable que haya más asociaciones entre virus y cáncer de piel y, por lo tanto, estas fórmulas pueden hacer uso de estas combinaciones únicas de ingredientes. Alternativamente, estas fórmulas pueden ingerirse en forma de píldoras, usarse como atomizadores inyectables, nasales u orales, usarse dentro de supositorios, dentro de nano moléculas portadoras o mediante cualquier sistema de administración eficaz conocido en la técnica de la medicina.

Se pueden producir ejemplos de composiciones como se muestra a continuación. Las siguientes fórmulas propuestas (las proporciones son en masa) utilizan una combinación de elementos de los nuevos descubrimientos de este inventor. Los ejemplos de formulación pueden incluir proporciones de ingredientes activos con extractos de micelio en intervalos de 1:1:1:1 a 1:10:100:1.000, o 1:1:1:1:1 a 1:10:100:1.000:10.000.

Loción para el tratamiento del cáncer de piel tipo melanoma:

85% de aloe vera

5% de ácido vanílico

4% de glicerina

2% de extracto de Fomitopsis officinalis

2% de extracto de Inonotus obliquus

2% de extracto de Phellinus linteus

Loción para tratar el herpes (Herpes zoster):

85% de aloe vera

6% de ácido vanílico

5% extracto de Fomitopsis officinalis

4% de glicerina

Loción para el tratamiento de los cánceres de piel y las verrugas genitales asociados al VPH:

80% de aloe vera

4% de glicerina

4% de extracto de Fomitopsis officinalis

3% de hidrato de rutina

3% de ácido trans-cinámico

3% de ácido trans-ferúlico

3% de extracto de Inonotus obliquus.

Loción de alta potencia para el tratamiento de los cánceres de piel y las verrugas genitales asociados al VPH:

70% de aloe vera

4% de glicerina

4% de hidrato de rutina

4% de ácido trans-cinámico

4% de ácido trans-ferúlico

4% de hidrato de quercetina

4% de ácido siríngico

4% de extracto de Fomitopsis officinalis

2% de extracto de Inonotus obliquus

Antiviral ingerible o Inyectable o loción de alta potencia para reducir los virus del herpes y el VPH

40% de ácido vanílico

13% de hidrato de rutina

13% de ácido trans-cinámico

13% de ácido trans-ferúlico

11% extracto de Fomitopsis officinalis

5% hidrato de quercetina

5% de ácido siríngico

Ingredientes de amplio espectro de alta potencia para antivirales ingeribles o inyectables o loción para reducir los virus del herpes, el VPH, la gripe, Epstein-Barr y la hepatitis

30% de ácido vanílico

10% de hidrato de rutina

10% de ácido trans-cinámico

10% de ácido trans-ferúlico

10% de extracto de Fomitopsis officinalis

10% de extracto de Inonotus obliquus al.

10% de Ganoderma lucidum

5% de hidrato de quercetina

5% de ácido siríngico

Los ejemplos de realizaciones incluyen:

Uno o más extractos de hongos; y uno o más excipientes farmacéuticamente aceptables.

Uno o más extractos de hongos; y uno o más disolventes.

Uno o más extractos de hongos; y un emoliente.

Uno o más extractos de hongos; uno o más vehículos farmacéuticamente aceptables; y uno o más disolventes.

Los ejemplos de composiciones farmacéuticas comprenden uno o más extractos de hongos en un disolvente acuoso o etanol y uno o más sabores, colorantes, edulcorantes, espesantes o conservantes, en los que la composición es una tintura, elixir o cápsula de dosificación.

Los excipientes farmacéuticos adicionales útiles para las composiciones como se describen en este documento incluyen, por ejemplo, los siguientes: agentes acidificantes (ácido acético, ácido acético glacial, ácido cítrico, ácido fumárico, ácido clorhídrico, ácido clorhídrico diluido, ácido málico, ácido nítrico, ácido fosfórico, ácido fosfórico diluido, ácido sulfúrico, ácido tartárico); agentes alcalinizantes (solución amoniacal, carbonato de amonio, dietanolamina, diisopropanolamina, hidróxido de potasio, bicarbonato de sodio, borato de sodio, carbonato de sodio, hidróxido de sodio, trolamina); agentes antiespumantes (dimeticona, simeticona); conservantes antimicrobianos (cloruro de benzalconio, solución de cloruro de benzalconio, cloruro de bencetonio, ácido benzoico, alcohol bencílico, butilparabeno, cloruro de cetilpiridinio, clorobutanol, clorocresol, cresol, ácido deshidroacético, etilparabeno, metilparabeno, metilparabeno sódico, fenol, alcohol feniletílico, acetato de fenil mercúrico, nitrato fenilmercúrico, benzoato de potasio, sorbato de potasio, propilparabeno, propilparabeno sódico, benzoato de sodio, deshidroacetato de sodio, propionato de sodio, ácido sórbico, timerosal, timol); antioxidantes (ácido ascórbico, palmitato de ascorbilo, hidroxianisol butilado, hidroxitolueno butilado, ácido hipofosforoso, monotioglicerol, galato de propilo, sulfoxilato de formaldehído sódico, metabisulfito de sodio, tiosulfato de sodio, dióxido de azufre, tocoferol, excipiente de tocoferoles); agentes tamponadores (ácido acético, carbonato de amonio, fosfato de amonio, ácido bórico, ácido cítrico, ácido láctico, ácido fosfórico, citrato de potasio, metafosfato de potasio, fosfato de potasio monobásico, acetato de sodio, citrato de sodio, solución de lactato de sodio, fosfato de sodio dibásico, fosfato de sodio monobásico); agentes quelantes (edetato disódico, ácido etilendiaminotetraacético y sus sales, ácido edético); agentes de recubrimiento (carboximetilcelulosa de sodio, acetato de celulosa, ftalato de acetato de celulosa, etilcelulosa, gelatina, barniz farmacéutico, hidroxipropilcelulosa, hidroxipropilmetilcelulosa, ftalato de hidroxipropilmetilcelulosa, copolímero de ácido metacrílico, metilcelulosa, ftalato acetato de polivinilo, goma laca, sacarosa, dióxido de titanio, cera carnauba cera microcristalina, zeína); colorantes (caramelo, rojo, amarillo, negro o mezclas, óxido férrico); agentes complejantes (ácido etilendiaminotetraacético y sus sales (EDTA), ácido edético, ácido gentísico, etanolamida, sulfato de oxiquinolina); desecantes (cloruro de calcio, sulfato de calcio, dióxido de silicio); agentes emulsionantes y/o solubilizantes (goma arábiga, colesterol, dietanolamina (adyuvante), monoestearato de glicerilo, alcoholes de lanolina, mono y diglicéridos, monoetanolamina (adyuvante), lecitina, ácido oleico (adyuvante), alcohol oleico (estabilizador), poloxámero, estearato de polioxietileno 50, aceite de ricino polioxilo 35, aceite de ricino hidrogenado polioxilo 40, éter oleílico polioxilo 10, éter cetoestearílico polioxilo 20, estearato de polioxilo 40, polisorbato 20, polisorbato 40, polisorbato 60, polisorbato 80, diacetato, monoestearato laurilsulfato de sodio, estearato de sodio, monolaurato de sorbitán, monooleato de sorbitán, monopalmitato de sorbitán, monoestearato de sorbitán, ácido esteárico, trolamina, cera emulsionante); coadyuvantes de filtración (celulosa en polvo, tierra silícea purificada); sabores y perfumes (anetol, benzaldehído, etil vanilina, mentol, salicilato de metilo, glutamato monosódico, aceite de flor de naranja, menta, aceite de menta, alcohol de menta, aceite de rosa, agua de rosas más fuerte, timol, tintura de bálsamo de tolú, vainilla, tintura de vainilla, vanilina); humectantes (glicerol, hexilenglicol, sorbitol); plastificantes (por ejemplo, aceite de ricino, monoglicéridos diacetilados, ftalato de dietilo, glicerol, monoglicéridos mono y diacetilados, propilenglicol, triacetina, citrato de trietilo); polímeros (por ejemplo, acetato de celulosa, alquil celulosas, hidroxialquilo, polímeros y copolímeros acrílicos); disolventes (acetona, alcohol, alcohol diluido, hidrato de amileno, benzoato de bencilo, alcohol butílico, tetracloruro de carbono, cloroformo, aceite de maíz, aceite de semilla de algodón, acetato de etilo, glicerol, hexilenglicol, alcohol isopropílico, alcohol metílico, cloruro de metileno, metil isobutil cetona, aceite mineral, aceite de cacahuete, carbonato de propileno, aceite de sésamo, agua para inyección, agua esterilizada para inyección, agua esterilizada para riego, agua purificada); sorbentes (celulosa en polvo, carbón vegetal, tierra silícea purificada); sorbentes de dióxido de carbono (cal hidróxido de bario, cal sodada); agentes endurecedores (aceite de ricino hidrogenado, alcohol cetoestearílico, alcohol cetílico, cera de ésteres cetílicos, grasa dura, parafina, excipiente de polietileno, alcohol estearílico, cera emulsionante, cera blanca, cera amarilla); agentes de suspensión y/o que aumentan la viscosidad (goma arábiga, agar, ácido algínico, monoestearato de aluminio, bentonita, bentonita purificada, bentonita de magma, carbómero, carboximetilcelulosa de calcio, carboximetilcelulosa de sodio, carboximetilcelulosa de sodio 12, carragenina, celulosa microcristalina y carboximetilcelulosa de sodio, dextrina, gelatina, goma guar, hidroxietilcelulosa, hidroxipropilcelulosa, hidroxipropilmetilcelulosa, silicato de magnesio y aluminio, metilcelulosa, pectina, óxido de polietileno, alcohol polivinílico, povidona, alginato, dióxido de silicio, dióxido de silicio coloidal, alginato de sodio, tragacanto, goma de xantano); agentes edulcorantes (aspartamo, dextratos, dextrosa, dextrosa excipiente, fructosa, manitol, sacarina, sacarina de calcio, sacarina de sodio, sorbitol, solución de sorbitol, sacarosa, azúcar compresible, azúcar de repostería, jarabe); tensioactivos (simeticona); aglutinantes de comprimidos (goma arábiga, ácido algínico, carboximetilcelulosa de sodio, celulosa microcristalina, dextrina, etilcelulosa, gelatina, glucosa líquida, goma guar, hidroxipropilmetilcelulosa, metilcelulosa, óxido de polietileno, povidona, almidón pregelatinizado, jarabe); diluyentes para comprimidos y/o cápsulas (carbonato de calcio, fosfato de calcio dibásico, fosfato de calcio tribásico, sulfato de calcio, celulosa microcristalina, celulosa en polvo, dextratos, dextrina, excipiente de dextrosa, fructosa, caolín, lactosa, manitol, sorbitol, almidón, almidón pregelatinizado, sacarosa, azúcar comprimible, azúcar de repostería); desintegrantes de comprimidos (ácido algínico, celulosa microcristalina, croscarmelosa de sodio, crospovidona, polacrilina de potasio, glicolato sódico de almidón, almidón, almidón pregelatinizado); lubricantes para comprimidos y/o cápsulas (estearato de calcio, behenato de glicerilo, estearato de magnesio, aceite mineral ligero, estearilfumarato de sodio, ácido esteárico, ácido esteárico purificado, talco, aceite vegetal hidrogenado, estearato de zinc); agentes espesantes (gelatina que tiene una fuerza de Bloom de 50-100); agente de tonicidad (dextrosa, glicerol, manitol, cloruro de potasio, cloruro de sodio); vehículo: saborizado y/o endulzado (elixir aromático, elixir compuesto de benzaldehído, elixir iso-alcohólico, agua de menta, solución de sorbitol, jarabe, jarabe de bálsamo de tolú); vehículo: oleaginoso (aceite de almendras, aceite de maíz, aceite de semilla de algodón, oleato de etilo, miristato de isopropilo, palmitato de isopropilo, aceite mineral, aceite mineral ligero, alcohol miristílico, octil dodecanol, aceite de oliva, aceite de cacahuete, aceite pérsico, aceite de sésamo, aceite de soja, escualano); vehículo: portador sólido (esferas de azúcar); vehículo: estéril (agua bacteriostática para inyección, inyección bacteriostática de cloruro de sodio); incremento de la viscosidad (véase agente de suspensión); agente repelente al agua (ciclometicona, dimeticona, simeticona); y/o agente solubilizante (cloruro de benzalconio, cloruro de bencetonio, cloruro de cetilpiridinio, docusato de sodio, nonoxinol 9, nonoxinol 10, octoxinol 9, poloxámero, aceite de ricino polioxilo 35, polioxilo 40, aceite de ricino hidrogenado, estearato de polioxilo 50, oleil éter de polioxilo 10, polioxilo 20, cetoestearil éter, estearato de polioxilo 40, polisorbato 20, polisorbato 40, polisorbato 60, polisorbato 80, lauril sulfato de sodio, monolaurato de sorbitán, monooleato de sorbitán, monopalmitato de sorbitán, monoestearato de sorbitán, tiloxapol). Esta lista no pretende ser exclusiva, sino simplemente representativa de las clases de excipientes y los excipientes particulares que pueden usarse en formas de dosificación oral como se describe en este documento. Se puede utilizar cualquier procedimiento conocido en la técnica para formular extractos o ingredientes activos principales en lociones, jabones, etc.

1 Proietti FA y Cameiro-Proietti AB, Catalan-Soares BC y Murphy EL, Global epidemiology of HTLV-I infection and associated diseases, Oncogene, 24(39): 6058-68 (2005).

2 Aoki, M., T. Motomu, A. Fukushima, T. Hieda, S. Kubo, M. Takabayashi, K. Ono, y Y. Mikami, Antiviral substances with systemic effects produced by Basidiomycetes such as Fomes fomentarius, Bioscience, Biotechnology, and Biochemistry. 57(2): 278-293 (1993).

3 Piraino, F., & C.R. Brandt, Isolation and partial characterization of an antiviral RC-183, from the edible mushroom Rozites caperata, Antiviral Research 43: 67-78 (1999).

4 Sarkar, S., J. Koga, R.J. Whitley, & S. Chatterjee, Antiviral effect of the extract of culture medium of Lentinula edodes mycelia on the replication of herpes simplex virus 1, Antiviral Research, 20(4): 293-303 (1993).

5 Collins, R.A. y T.B. Ng, Polysaccharopeptide from Coriolus versicolor has potential for use against human immunodeficiency virus type 1 infection, Life Sciences, 60: 383-387 (1997).

6 Brandt, C.R. y F. Piraino, Mushroom antivirals, Recent Research Developments for Antimicrobial Agents and Chemotherapy, 4: 11-26 (2000).

7 Stamets, P., New antiviral compounds from mushrooms, HerbalGram. 51: 24-27 (2001).

8 Stengler, M., The Health Benefits of Medicinal Mushrooms, p.6, Basic Health Publications, 2005.

9 Li et al., Complete mitochondrial genome of the medicinal mushroom Ganoderma lucidum, PLoS ONE 8(8):e72038 (2013).

10 Seong-Kug Eo, Young-So Kim, Chong-Kil Lee y Seong-Sun Han, Antiviral activities of various water and methanol soluble substances isolated from Ganoderma lucidum, Journal of Ethnopharmacology 68 (1-3): 129-136 (1999).

11 Stamets, P., Novel antimicrobial from mushrooms, HerbalGram 54: 28-32 (2002).

12 Stamets, Supra note 7, en 24, 27.

13 Katayama S, Ohno F, Yamauchi Y, Kato M, Makabe H, Nakamura S, Enzymatic synthesis of novel phenol acid rutinosides using rutinase and their antiviral activity in vitro, J. Agric. Food Chem., 61(40): 9617-22 (Epub, 25 de septiembre de 2013).

14 Vanilin, OECD SIDS, UNEP Publications, p. 9 (1996).

Claims

REIVINDICACIONES

1. Una composición para su uso en el tratamiento de una infección por virus patógeno en un paciente que lo necesita, que comprende uno o más de ácido siríngico, ácido trans-cinámico, ácido trans-ferúlico, sales de los mismos, ésteres de los mismos o combinaciones de los mismos, en la que el virus patógeno es el virus del papiloma humano (VPH).

2. Una composición para su uso de acuerdo con la reivindicación 1, en la que la composición tiene un índice de selectividad del efecto antiviral (SI50 = CC50/EC50) contra el SI50 ^ 100 del virus patógeno.

3. Una composición para su uso de acuerdo con la reivindicación 1 o 2, en la que el ácido siríngico, el ácido trans cinámico y/o trans-ferúlico tiene un índice de selectividad 50 (SI50) ^ 10 de efecto antiviral contra el VPH.

4. Una composición para su uso de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en la que el ácido siríngico tiene un índice de selectividad 50 (SI50) ^ 30 de efecto antiviral contra el VPH.

5. Una composición para su uso de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en la que el ácido trans cinámico y/o el ácido trans-ferúlico tiene un índice de selectividad 50 (SI50) ^ 100 de efecto antiviral contra el VPH.

6. Una composición para su uso de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en la que la composición además tiene un efecto antibacteriano.

7. Una composición para su uso de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones anteriores para ser administrada durante un período de tiempo de 10 a 60 días a un paciente que padece la infección por virus patógeno a una dosis diaria de 0,001 a 2 gramos de la composición.

8. Una composición para su uso de acuerdo con la reivindicación 7, en la que la dosis diaria es de 0,1 a 1,5 gramos por día, tal como de 0,25 a 1,4 gramos por día, preferibl y aproximadamente 1.000 mg por día.

9. Una composición para su uso de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones anteriores, para tratar, mejorar, mitigar, aliviar, reducir o curar una infección por virus y formulada en una forma de dosificación seleccionada de aerosoles, cápsulas, comprimidos, elixires, emulsiones, pastillas, suspensiones, jarabes, píldoras, lociones, parches epidérmicos, supositorios, inhaladores e inyectables.

10. Una composición para su uso de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones anteriores que comprende adicionalmente CBD (cannabidiol).