ES2853981T3

ES2853981T3 - Un derivado de bencimidazol sustituido como un modulador de la actividad de TNF

Info

Publication number: ES2853981T3
Application number: ES17811318T
Authority: ES
Inventors: Jag Paul Heer
Original assignee: UCB Biopharma SRL
Current assignee: UCB Biopharma SRL
Priority date: 2016-12-09
Filing date: 2017-12-08
Publication date: 2021-09-20
Anticipated expiration: 2037-12-08
Also published as: EA201991294A1; HRP20210405T1; CO2019007115A2; GB201620948D0; PT3551624T; SG11201903655VA; HUE054184T2; DK3551624T3; EA037199B1; IL266874A; EP3551624A1; AU2017371443B2; AU2017371443A1; WO2018104534A1; EP3551624B1; CY1124158T1; IL266874B; KR20190091328A; CA3041081A1; JP6983238B2

Abstract

2-(5-{1-[2-(Difluorometoxi)-6-fluorobencil]-2-metil-1H-bencimidazol-6-il}pirimidin-2-il)propan-2-ol o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

Description

DESCRIPCIÓN

Un derivado de bencimidazol sustituido como un modulador de la actividad de TNF

La presente invención se refiere a un derivado de imidazol condensado sustituido y a su uso en terapia. Más particularmente, esta invención se refiere a un derivado de 1H-benzimidazol sustituido farmacológicamente activo. Este compuesto actúa como un modulador de la señalización de TNFa y en consecuencia es beneficioso como agente farmacéutico, especialmente en el tratamiento de trastornos inflamatorios y autoinmunitarios, trastornos neurológicos y neurodegenerativos, dolor y trastornos nociceptivos, trastornos cardiovasculares, trastornos metabólicos, trastornos oculares y trastornos oncológicos adversos.

El TNFa es el miembro prototípico de la superfamilia de proteínas del factor de necrosis tumoral (TNF) que comparten la función principal de regular la supervivencia celular y la muerte celular. Una característica estructural común a todos los miembros conocidos de la superfamilia de TNF es la formación de complejos triméricos que se unen a y activan, receptores específicos de la superfamilia de TNF. A modo de ejemplo, el TNFa existe en formas y señales solubles y transmembrana a través de dos receptores, conocidos como TNFR1 y TNFR2, con distintos puntos finales funcionales.

Ya están disponibles en el mercado diversos productos capaces de modular la actividad de TNFa. Todos están aprobados para el tratamiento de trastornos inflamatorios y autoinmunitarios tales como artritis reumatoide y enfermedad de Crohn. Todos los productos aprobados actualmente son macromoleculares y actúan inhibiendo la unión del TNFa humano a su receptor. Los inhibidores de TNFa macromoleculares típicos incluyen anticuerpos anti-TNFa; y proteínas de fusión del receptor de TNFa soluble. Algunos ejemplos de anticuerpos anti-TNFa disponibles en el mercado incluyen anticuerpos completamente humanos tales como adalimumab (Humira®) y golimumab (Simponi®), anticuerpos quiméricos tales como infliximab (Remicade®) y fragmentos Fab' pegilados tales como certolizumab pegol (Cimzia®). Un ejemplo de una proteína de fusión del receptor de TNFa soluble disponible en el mercado es etanercept (Enbrel®).

Los miembros de la superfamilia TNF, incluido el propio TNFa, están implicados en una diversidad de funciones fisiológicas y patológicas que se cree que juegan un papel en un abanico de condiciones de importancia médica significativa (véase, por ejemplo, M.G. Tansey & D.E. Szymkowski, Drug Discovery Today, 2009, 14, 1082-1088; y F.S. Carneiro et al., J. Sexual Medicine, 2010, 7, 3823-3834).

Los compuestos de acuerdo con la presente invención, siendo potentes moduladores de la actividad del TNFa humano, son por lo tanto beneficiosos en el tratamiento y/o la prevención de diversas dolencias humanas. Estas incluyen trastornos autoinmunitarios e inflamatorios; trastornos neurológicos y neurodegenerativos; dolor y trastornos nociceptivos; trastornos cardiovasculares; trastornos metabólicos; trastornos oculares; y trastornos oncológicos.

Además, los compuestos de acuerdo con la presente invención pueden ser beneficiosos como patrones farmacológicos para su uso en el desarrollo de nuevas pruebas biológicas y en la búsqueda de nuevos agentes farmacológicos. Por lo tanto, en una realización, los compuestos de esta invención pueden ser útiles como radioligandos en ensayos para detectar compuestos farmacológicamente activos. En una realización alternativa, los compuestos de esta invención pueden ser útiles para acoplarse a un fluoróforo para proporcionar conjugados fluorescentes que pueden utilizarse en ensayos (por ejemplo, un ensayo de polarización de fluorescencia) para detectar compuestos farmacológicamente activos.

El documento WO 2013/186229 describe una clase de derivados de bencimidazol que se afirma que son moduladores de la señalización del TNFa beneficiosos en el tratamiento de trastornos inflamatorios y autoinmunitarios, trastornos neurológicos y neurodegenerativos, dolor y trastornos nociceptivos, trastornos cardiovasculares, trastornos metabólicos, trastornos oculares y trastornos oncológicos.

La presente invención proporciona 2-(5-{1-[2-(difluorometoxi)-6-fluorobencil]-2-metil-1H-bencimidazol-6-il} pirimidin-2-il)propan-2-ol de fórmula (I):

o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

Los compuestos de acuerdo con la presente invención están englobados dentro del alcance genérico del documento WO 2013/186229. No hay, sin embargo, no hay descripción específica en el mismo del compuesto de fórmula (I) como se describe anteriormente, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

La presente invención también proporciona el compuesto de fórmula (I) como se describe anteriormente, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, para su uso en terapia.

La presente divulgación también proporciona el compuesto de fórmula (I) como se describe anteriormente, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, para su uso en el tratamiento y/o la prevención de trastornos para los cuales se indica la administración de un modulador de la función del TNFa.

En otro aspecto, la presente invención proporciona el compuesto de fórmula (I) como se describe anteriormente, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, para su uso en el tratamiento y/o prevención de un trastorno inflamatorio o autoinmunitario, un trastorno neurológico o neurodegenerativo, dolor o un trastorno nociceptivo, un trastorno cardiovascular, un trastorno metabólico, un trastorno ocular o un trastorno oncológico.

La presente divulgación también proporciona el uso del compuesto de fórmula (I) como se describe anteriormente, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, para la fabricación de un medicamento para el tratamiento y/o la prevención de trastornos para los cuales se indica la administración de un modulador de la función del TNFa.

En otro aspecto, la presente divulgación proporciona el uso del compuesto de fórmula (I) como se describe anteriormente, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, para la fabricación de un medicamento para el tratamiento y/o la prevención de un trastorno inflamatorio o autoinmunitario, un trastorno neurológico o neurodegenerativo, dolor o un trastorno nociceptivo, un trastorno cardiovascular, un trastorno metabólico, un trastorno ocular o un trastorno oncológico.

La presente divulgación también proporciona un método para el tratamiento y/o la prevención de trastornos para los cuales se indica la administración de un modulador de la función de TNFa que comprende administrar a un paciente que necesita dicho tratamiento una cantidad eficaz del compuesto de fórmula (I) como se ha representado anteriormente o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

En otro aspecto, la presente divulgación proporciona un método para el tratamiento y/o la prevención de un trastorno inflamatorio o autoinmunitario, un trastorno neurológico o neurodegenerativo, dolor o un trastorno nociceptivo, un trastorno cardiovascular, un trastorno metabólico, un trastorno ocular o un trastorno oncológico, que comprende administrar a un paciente que necesite dicho tratamiento una cantidad eficaz del compuesto de fórmula (I) como se describe anteriormente, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

Para uso en medicina, las sales del compuesto de fórmula (I) serán sales farmacéuticamente aceptables. Otras sales pueden, sin embargo, ser útiles en la preparación del compuesto de fórmula (I) o de sus sales farmacéuticamente aceptables. Se describen los principios habituales que subyacen a la selección y preparación de sales farmacéuticamente aceptables, por ejemplo, en Handbook of Pharmaceutical Salts: Properties, Selection and Use, ed. P.H. Stahl & C.G. Wermuth, Wiley-VCH, 2002. Las sales farmacéuticamente aceptables adecuadas del compuesto de fórmula (I) incluyen sales de adición de ácido que pueden, por ejemplo, formarse mezclando una solución del compuesto de fórmula (I) con una solución de un ácido farmacéuticamente aceptable.

Ha de entenderse que cada átomo individual presente en la fórmula (I) o en las fórmulas que se representan en lo sucesivo en el presente documento, pueden, de hecho, estar presentes en forma de cualquiera de sus isótopos de origen natural, prefiriéndose el isótopo o isótopos más abundantes. Por lo tanto, a modo de ejemplo, cada átomo de hidrógeno individual presente en la fórmula (I) o en las fórmulas que se representan en lo sucesivo en el presente documento, puede estar presente como un átomo de 1H, 2H (deuterio) o 3H (tritio), preferentemente 1H. De forma similar, a modo de ejemplo, cada átomo de carbono individual presente en la fórmula (I) o en las fórmulas que se representan en lo sucesivo en el presente documento, puede estar presente como un átomo de 12C, 13C o 14C, preferentemente 12C.

Los compuestos de acuerdo con la presente invención son beneficiosos en el tratamiento y/o la prevención de diversas dolencias humanas. Estas incluyen trastornos autoinmunitarios e inflamatorios; trastornos neurológicos y neurodegenerativos; dolor y trastornos nociceptivos; trastornos cardiovasculares; trastornos metabólicos; trastornos oculares; y trastornos oncológicos.

Los trastornos inflamatorios y autoinmunitarios incluyen trastornos autoinmunitarios sistémicos, trastornos endocrinos autoinmunitarios y trastornos autoinmunitarios específicos de órganos. Los trastornos autoinmunitarios sistémicos incluyen lupus eritematoso sistémico (SLE), psoriasis, artropatía psoriásica, vasculitis, miopatía inflamatoria (incluyendo polimiositis, dermatomiositis y miositis por cuerpos de inclusión), esclerodermia, esclerosis múltiple, esclerosis sistémica, espondilitis anquilosante, artritis reumatoide, artritis inflamatoria inespecífica, artritis inflamatoria juvenil, artritis idiopática juvenil (incluyendo las formas oligoarticular y poliarticular de la misma), anemia de enfermedad crónica (ACD), enfermedad de Still (inicio juvenil y/o en adulto), enfermedad de Behget y síndrome de Sjogren. Los trastornos endocrinos autoinmunitarios incluyen tiroiditis. Los trastornos autoinmunitarios específicos de órgano incluyen enfermedad de Addison, anemia hemolítica o perniciosa, lesión renal aguda (AKI; incluyendo AKI inducida por cisplatino), nefropatía diabética (DN), uropatía obstructiva (incluyendo uropatía obstructiva inducida por cisplatino), glomerulonefritis (incluyendo síndrome de Goodpasture, glomerulonefritis mediada por inmunocomplejos y glomerulonefritis asociada a anticuerpos anticitoplasma de neutrófilos (ANCA)), nefritis lúpica (LN), nefropatía de cambios mínimos, enfermedad de Graves, púrpura trombocitopénica idiopática, enfermedad inflamatoria intestinal (incluyendo enfermedad de Crohn, colitis ulcerosa, colitis indeterminada y reservoritis), pénfigo, dermatitis atópica, hepatitis autoinmunitaria, cirrosis biliar primaria, neumonitis autoinmunitaria, carditis autoinmunitaria, miastenia grave, infertilidad espontánea, osteoporosis, osteopenia, enfermedad ósea erosiva, condritis, degeneración y/o destrucción del cartílago, trastornos fibrosantes (incluyendo diversas formas de fibrosis hepática y pulmonar), asma, rinitis, enfermedad pulmonar obstructiva crónica (EPOC), síndrome de dificultad respiratoria, síndrome séptico, fiebre, distrofia muscular (incluyendo distrofia muscular de Duchenne), rechazo de trasplante de órgano (incluyendo rechazo de aloinjerto de riñón), escleritis (incluyendo escleritis por arteritis de células gigantes), arteritis de Takayasu, hidradenitis supurativa, pioderma gangrenoso, sarcoidosis, polimialgia reumática y espondiloartritis axial.

Los trastornos neurológicos y neurodegenerativos incluyen enfermedad de Alzheimer, enfermedad de Parkinson, enfermedad de Huntington, isquemia, accidente cerebrovascular, esclerosis lateral amiotrófica, lesión de la médula espinal, traumatismo craneal, convulsiones y epilepsia.

Los trastornos cardiovasculares incluyen trombosis, hipertrofia cardíaca, hipertensión, contractilidad irregular del corazón (por ejemplo, durante la insuficiencia cardíaca) y trastornos sexuales (incluyendo disfunción eréctil y disfunción sexual femenina). Los moduladores de la función del TNFa también pueden ser útiles en el tratamiento y/o prevención del infarto de miocardio (véase J.J. Wu et al., JAMA, 2013, 309, 2043-2044).

Los trastornos metabólicos incluyen diabetes (incluyendo diabetes mellitus insulinodependiente y diabetes juvenil), dislipidemia y síndrome metabólico.

Los trastornos oculares incluyen retinopatía (incluyendo retinopatía diabética, retinopatía proliferativa, retinopatía no proliferativa y retinopatía del prematuro), edema macular (incluyendo edema macular diabético), degeneración macular relacionada con la edad (ARMD), vascularización (incluyendo vascularización corneal y neovascularización), oclusión de la vena retiniana y diversas formas de uveítis (incluyendo iritis) y queratitis.

Los trastornos oncológicos, que pueden ser agudos o crónicos, incluyen trastornos proliferativos, especialmente cáncer y complicaciones asociadas al cáncer (incluyendo complicaciones esqueléticas, caquexia y anemia). Las categorías particulares de cáncer incluyen neoplasia maligna hematológica (incluyendo leucemia y linfoma) y neoplasia maligna no hematológica (incluyendo cáncer de tumor sólido, sarcoma, meningioma, glioblastoma multiforme, neuroblastoma, melanoma, carcinoma gástrico y carcinoma de células renales). La leucemia crónica puede ser mieloide o linfoide. Las variedades de leucemia incluyen leucemia linfoblástica de células T, leucemia mielógena crónica (CML), leucemia linfocítica/linfoide crónica (CLL), tricoleucemia, leucemia linfoblástica aguda (ALL), leucemia mielógena aguda (AML), síndrome mielodisplásico, leucemia neutrofílica crónica, leucemia aguda de células T linfoblásticas, plasmocitoma, leucemia inmunoblástica de células grandes, leucemia de células del manto, mieloma múltiple, leucemia megacarioblástica aguda, leucemia megacariocítica aguda, leucemia promielocítica y eritroleucemia. Las variedades de linfoma incluyen linfoma maligno, linfoma de Hodgkin, linfoma no Hodgkiniano, linfoma linfoblástico de células T, linfoma de Burkitt, linfoma folicular, linfoma MALT1 y linfoma de zona marginal. Las variedades de neoplasia maligna no hematológica incluyen cáncer de próstata, pulmón, mama, recto, colon, ganglio linfático, vejiga, riñón, páncreas, hígado, ovario, útero, cuello del útero, cerebro, piel, hueso, estómago y músculo. También pueden usarse moduladores de la función del TNFa para aumentar la seguridad del potente efecto anticanceroso del TNF (véase F.V. Hauwermeiren et al., J. Clin. Invest., 2013, 123, 2590-2603).

La presente invención también proporciona una composición farmacéutica que comprende el compuesto de fórmula (I) como se describe anteriormente, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en asociación con uno o más vehículos farmacéuticamente aceptables.

Las composiciones farmacéuticas de acuerdo con la invención pueden tomar una forma adecuada para administración oral, bucal, parenteral, nasal, tópica, oftálmica o rectal, o una forma adecuada para la administración por inhalación o insuflación.

Para administración oral, las composiciones farmacéuticas pueden tomar la forma de, por ejemplo, comprimidos, pastillas o cápsulas preparadas por medios convencionales con excipientes farmacéuticamente aceptables tales como agentes aglutinantes (por ejemplo, almidón de maíz pregelatinizado, polivinilpirrolidona o hidroxipropilmetilcelulosa); cargas (por ejemplo, lactosa, celulosa microcristalina o hidrogenofosfato cálcico); lubricantes (por ejemplo, estearato magnésico, talco o sílice); disgregantes (por ejemplo, almidón de patata o glicolato sódico); o agentes humectantes (por ejemplo, lauril sulfato sódico). Los comprimidos pueden recubrirse mediante métodos bien conocidos en la técnica. Las preparaciones líquidas para administración oral pueden tomar la forma de, por ejemplo, soluciones, jarabes o suspensiones, o pueden presentarse como un producto seco para su constitución con agua u otro vehículo adecuado antes de su uso. Dichas preparaciones líquidas pueden prepararse por medios convencionales con aditivos farmacéuticamente aceptables tales como agentes de suspensión, agentes emulsionantes, vehículos no acuosos o conservantes. Las preparaciones también pueden contener sales tamponantes, agentes aromatizantes, agentes colorantes o edulcorantes, según sea apropiado.

Las preparaciones para administración oral pueden formularse de manera adecuada para proporcionar una liberación controlada del compuesto activo.

Para administración bucal, las composiciones pueden tomar la forma de comprimidos o pastillas formuladas de manera convencional.

El compuesto de fórmula (I) puede formularse para administración parenteral por inyección, por ejemplo, mediante inyección en bolo o infusión. Las formulaciones para inyección pueden presentarse en forma de dosificación unitaria, por ejemplo, en ampollas de vidrio o recipientes multidosis, por ejemplo, viales de vidrio. Las composiciones para inyección pueden tomar formas tales como suspensiones, soluciones o emulsiones en vehículos oleaginosos o acuosos y pueden comprender agentes de formulación tales como agentes de suspensión, estabilizantes, conservantes y/o dispersantes. Alternativamente, el principio activo puede estar en forma de polvo para constitución con un vehículo adecuado, por ejemplo, agua estéril sin pirógenos, antes de su uso.

Además de las formulaciones descritas anteriormente, el compuesto de fórmula (I) también puede formularse como una preparación de depósito. Estas formulaciones de acción prolongada pueden administrarse mediante implantación o mediante inyección intramuscular.

Para administración nasal o administración por inhalación, los compuestos de acuerdo con la presente invención pueden administrarse convenientemente en forma de una presentación de pulverización en aerosol para envases presurizados o un nebulizador, con el uso de un propulsor adecuado, por ejemplo, diclorodifluorometano, fluorotriclorometano, diclorotetrafluoroetano, dióxido de carbono u otro gas o mezcla de gases adecuados.

Las composiciones pueden, si se desea, presentarse en un envase o dispositivo dispensador que puede contener una o más formas de dosificación unitarias que contienen el principio activo. El envase o dispositivo dispensador puede ir acompañado de instrucciones para la administración.

Para la administración tópica los compuestos de uso en la presente invención pueden formularse convenientemente en una pomada adecuada que contenga el componente activo suspendido o disuelto en uno o más vehículos farmacéuticamente aceptables. Los vehículos particulares incluyen, por ejemplo, aceite mineral, petróleo líquido, propilen glicol, polioxietileno, polioxipropileno, cera emulsionante y agua. Alternativamente, los compuestos de uso en la presente invención pueden formularse en una loción adecuada que contenga el componente activo suspendido o disuelto en uno o más vehículos farmacéuticamente aceptables. Los vehículos particulares incluyen, por ejemplo, ^{aceite mineral, monoestearato de sorbitán, polisorbato}60^{, cera de ésteres cetílicos, alcohol cetearílico, alcohol}bencílico, 2-octildodecanol y agua.

Para administración oftálmica, los compuestos de uso en la presente invención pueden formularse convenientemente como suspensiones micronizadas en solución salina estéril isotónica con pH ajustado, ya sea con o sin un conservante tal como un agente bactericida o fungicida, por ejemplo nitrato fenilmercúrico, cloruro de bencilalconio o acetato de clorhexidina. Alternativamente, para administración oftálmica, los compuestos pueden formularse en un ungüento tal como vaselina.

Para la administración rectal los compuestos de uso en la presente invención pueden formularse convenientemente como supositorios. Estos pueden prepararse mezclando el componente activo con un excipiente no irritante adecuado que sea sólido a temperatura ambiente pero líquido a temperatura rectal y, por lo tanto, se fundirá en el recto para liberar el componente activo. Dichos materiales incluyen, por ejemplo, manteca de cacao, cera de abejas y polietilenglicoles.

La cantidad de un compuesto de uso en la invención requerida para la profilaxis o el tratamiento de una afección particular variará dependiendo del compuesto elegido y la condición del paciente a tratar. En general, sin embargo, las dosificaciones diarias pueden variar de aproximadamente 10 ng/kg a 1000 mg/kg, típicamente de 100 ng/kg a 100 mg/kg, por ejemplo, de aproximadamente 0,01 mg/kg a 40 mg/kg de peso corporal, para administración oral o bucal, de aproximadamente 10 ng/kg a 50 mg/kg de peso corporal para administración parenteral y de aproximadamente 0,05 mg a aproximadamente 1000 mg, por ejemplo, de aproximadamente 0,5 mg a aproximadamente 1000 mg, para administración nasal o administración por inhalación o insuflación.

Si se desea, un compuesto de acuerdo con la presente invención puede coadministrarse con otro agente farmacéuticamente activo, por ejemplo, una molécula antiinflamatoria.

El compuesto de fórmula (I) anterior puede prepararse mediante un proceso que comprende hacer reaccionar un compuesto de fórmula (III) con un compuesto de fórmula (IV):

en donde L¹representa un grupo saliente adecuado y M¹representa un resto de ácido borónico -B(OH)²o un éster cíclico del mismo formado con un diol orgánico, por ejemplo, pinacol, 1,3-propanodiol o neopentilglicol; en presencia de un catalizador de metal de transición.

El grupo saliente L¹es normalmente un átomo de halógeno, por ejemplo, bromo.

El catalizador de metal de transición de uso en la reacción entre el compuesto (III) y (IV) es adecuadamente [1,1'-bis (difenilfosfino)ferroceno]dicloropaladio(II), dicloro[1,1'-bis(di-terc-butilfosfino)ferroceno]paladio(II), tetraquis(trifenilfosfina)paladio(0) o complejo de bis[3-(difenilfosfanil)ciclopenta-2,4-dien-1-il]hierro-dicloropaladiodiclorometano. La reacción se realiza de forma adecuada en presencia de una base, por ejemplo, una base inorgánica tal como carbonato sódico o carbonato potásico, o fosfato potásico. La reacción se lleva a cabo convenientemente a una temperatura elevada en un disolvente adecuado, por ejemplo, un éter cíclico tal como 1,4-dioxano.

Los intermedios de fórmula (IV) anterior pueden prepararse mediante un proceso de dos etapas que comprende: (i) reducir el grupo nitro en un compuesto de fórmula (V):

en donde L1 es como se ha definido anteriormente; y (ii) hacer reaccionar el derivado de amina obtenido de esta manera con ácido acético.

La etapa (i) del procedimiento anterior puede efectuarse convenientemente mediante hidrogenación catalítica del compuesto (V), que normalmente comprende tratar el compuesto (V) con hidrógeno gaseoso en presencia de un catalizador de hidrogenación tal como paladio sobre carbono.

Alternativamente, la reducción del compuesto (V) puede efectuarse por tratamiento con hierro o cinc elemental, normalmente a una temperatura elevada en presencia de ácido acético.

Alternativamente, la reducción del compuesto (V) puede efectuarse por tratamiento con cloruro de estaño(II), normalmente a una temperatura elevada en presencia de un ácido mineral tal como ácido clorhídrico.

La etapa (ii) del procedimiento anterior se efectúa convenientemente calentando el derivado de amina resultante en ácido acético.

Los compuestos intermedios de fórmula (V) anteriormente pueden prepararse haciendo reaccionar un compuesto de fórmula (VI) con un compuesto de fórmula (VII):

en donde L¹es como se define anteriormente y L²representa un grupo desplazable.

El grupo desplazable L²es normalmente un átomo de halógeno, por ejemplo, fluoro.

La reacción se realiza de forma adecuada en presencia de una base, por ejemplo, una base inorgánica tal como carbonato potásico. La reacción se lleva a cabo convenientemente a una temperatura elevada en un disolvente adecuado, por ejemplo, una amina cíclica tal como 1-metil-2-pirrolidinona.

Cuando no estén disponibles en el mercado, los materiales de partida de fórmula (III), (VI) y (VII) pueden prepararse mediante métodos análogos a aquellos descritos en los Ejemplos adjuntos, o mediante métodos convencionales bien conocidos en la técnica.

Cuando se obtiene una mezcla de productos a partir de cualquiera de los procesos descritos anteriormente para la preparación de compuestos de acuerdo con la invención, el producto deseado puede separarse de los mismos en una etapa apropiada mediante métodos convencionales tales como HPLC preparativa; o cromatografía en columna utilizando, por ejemplo, sílice y/o alúmina junto con un sistema disolvente apropiado.

Durante cualquiera de las secuencias sintéticas anteriores puede ser necesario y/o deseable proteger los grupos sensibles o reactivos en cualquiera de las moléculas en cuestión. Esto puede lograrse mediante grupos protectores convencionales, tales como aquellos descritos en Protective Groups in Organic Chemistry, ed. J.F.W. McOmie, Plenum Press, 1973; y T.W. Greene y P.G.M. Wuts, Protective Groups in Organic Synthesis, John Wiley & Sons, 3a edición, 1999. Los grupos protectores pueden retirarse en cualquier fase posterior conveniente utilizando métodos conocidos en la técnica.

Los compuestos de acuerdo con la presente invención neutralizan potentemente la actividad del TNFa en una línea celular indicadora derivada de HEK-293 disponible en el mercado conocida como HEK-Blue™ CD40L. Esta es una línea celular transfectada en HEK-293 estable que expresa SEAP (fosfatasa alcalina embrionaria secretada) bajo el control del promotor mínimo de IFNp fusionado a cinco sitios de unión de NF-kB. La secreción de SEAP por estas células se estimula de una manera dependiente de la concentración por TNFa. Cuando se prueba en el bioensayo HEK-293, también denominado en el presente documento el ensayo de gen indicador, los compuestos de la presente invención exhiben un valor de CI⁵⁰mejor que 50 nM.

Los compuestos de acuerdo con la presente invención inhiben potentemente la unión de un conjugado de fluorescencia a TNFa cuando se prueban en el ensayo de polarización de fluorescencia descrito en el presente documento. De hecho, cuando se prueban en ese ensayo, los compuestos de la presente invención exhiben un valor de CI⁵⁰mejor que 20 nM.

Ensayo de polarización de fluorescencia

Preparación del compuesto (A)

Puede prepararse 1-(2,5-d¡met¡lbenc¡l)-6-[4-(p¡peraz¡n-1-¡lmet¡l)fen¡l]-2-(p¡r¡d¡n-4-¡l-met¡l)-1H-benc¡m¡dazol - en lo sucesivo en el presente documento denom¡nado "Compuesto (A)" - por el proced¡m¡ento deserto en el Ejemplo 499 del documento WO 2013/186229; o por un procedimiento análogo al mismo.

Preparación de conjugado de fluorescencia

El Compuesto (A) (27,02 mg, 0,0538 mmol) se disolvió en DMSO (2 ml). El éster de succinimilo de 5(-6)carbox¡-fluoresceína (24,16 mg, 0,0510 mmol) (número de catálogo de Invitrogen: C1311) se disolvió en DMSO (1 ml) para dar una solución amarillo brillante. Las dos soluciones se mezclaron a temperatura ambiente, la mezcla se volvió de color rojo. La mezcla se agitó a temperatura ambiente. Poco después de mezclar se retiró una alícuota de 20 pl y se diluyó en una mezcla 80:20 de AcOH:H²O para análisis por Cl-EM en el sistema de CL-EM 1200RR-6140. El cromatograma mostró dos picos de elución cercanos en tiempos de retención de 1,42 y 1,50 minutos, ambos con una masa (M+H)⁺= 860,8 uma, correspondiente a los dos productos formados con el grupo carboxifluoresceína 5 y 6 sustituido. Un pico adicional en el tiempo de retención de 2,21 minutos tuvo una masa de (M+H)⁺= 502,8 uma, correspondiente al Compuesto (A). No se observó ningún pico para el éster de succinimilo de 5(-6)carboxifluoresceína sin reaccionar. Las áreas de los picos fueron el 22,0 %, el 39,6 % y el 31,4 % para las tres señales, indicando una conversión del 61,6 % en los dos isómeros del conjugado de fluorescencia deseado en ese punto temporal. Se extrajeron alícuotas de 20 pl adicionales después de varias horas y luego, después de agitar durante la noche, se diluyeron como antes y se sometieron a análisis por CL-EM. El porcentaje de conversión se determinó como el 79,8 % y el 88,6 % respectivamente en estos puntos temporales. La mezcla se purificó en un sistema de HPLC preparativa dirigida por UV. Las fracciones purificadas reunidas se secaron por congelación para retirar el exceso de disolvente. Después del secado por congelación, se recuperó un sólido naranja (23,3 mg), equivalente a 0,027 mmol de conjugado de fluorescencia, correspondiente a un rendimiento global del 53 % para la reacción y la purificación por HPLC preparativa.

Inhibición de la unión de conjugados de fluorescencia a TNFa

Los compuestos se probaron a 10 concentraciones empezando a partir de 25 pM en una concentración de ensayo final de DMSO al 5 %, por preincubación con TNFa durante 60 minutos a temperatura ambiente en Tris 20 mM, NaCl 150 mM, Tween 20 al 0,05 %, antes de la adición del conjugado de fluorescencia y una incubación adicional durante 20 horas a temperatura ambiente. Las concentraciones finales de TNFa y el conjugado de fluorescencia fueron 10 nM y 10 nM, respectivamente, en un volumen de ensayo total de 25 pl. Las placas se leyeron en un lector de placas capaz de detectar polarización de fluorescencia (por ejemplo, un lector de placas Analyst HT; o un lector de placas Envision). Se calculó un valor de CI⁵⁰utilizando XLfit™ (modelo logístico de 4 parámetros) en ActivityBase.

Cuando se probó en el ensayo de polarización de fluorescencia, se descubrió que el compuesto del Ejemplo adjunto exhibía un valor de CI⁵⁰mejor que 20 nM.

Por lo tanto, cuando se probó en el ensayo de polarización de fluorescencia, se descubrió que el compuesto del Ejemplo adjunto exhibía un valor de CI⁵⁰entre 0,1 nM y 20 nM.

Ensayo de gen indicador

Inhibición de la activación de NF-kB inducida por TNFa

La estimulación de células HEK-293 por TNFa conduce a la activación de la ruta de NF-kB. La línea celular indicadora usada para determinar la actividad de TNFa se adquirió de InvivoGen. HEK-Blue™ CD40L es una línea celular transfectada en HEK-293 estable que expresa SEAP (fosfatasa alcalina embrionaria secretada) bajo el control del promotor mínimo de IFNp fusionado a cinco sitios de unión de NF-kB. La secreción de SEAP por estas células se estimula de una manera dependiente de la dosis por TNFa, con una CE50 de 0,5 ng/ml para TNFa humano. Los compuestos se diluyeron a partir de soluciones madre de DMSO 10 mM (concentración de ensayo final del 0,3 %) para generar una curva de dilución en serie con factor de dilución 3 de 10 puntos (por ejemplo, concentración final de 30.000 nM a 2 nM). El compuesto diluido se preincubó con TNFa durante 60 minutos antes de la adición a una placa de microtitulación de 384 pocillos y se incubó durante 18 h. La concentración final de TNFa en la placa de ensayo fue de 0,5 ng/ml. La actividad de SEAP se determinó en el sobrenadante usando un sustrato colorimétrico, por ejemplo, medios de detección QUANTI-Blue™ o HEK-Blue™ (InvivoGen). Se calculó el porcentaje de inhibiciones para diluciones del compuesto entre un control de DMSO e inhibición máxima (por exceso de compuesto de control) y un valor de CI⁵⁰calculado usando XLfit™ (modelo logístico de 4 parámetros) en ActivityBase.

Cuando se probó en el ensayo de gen indicador, se descubrió que el compuesto del Ejemplo adjunto exhibía un valor de CI⁵⁰mejor que 50 nM.

Por lo tanto, cuando se probó en el ensayo de gen indicador, se descubrió que el compuesto del Ejemplo adjunto exhibía un valor de CI⁵⁰entre 0,5 nM y 50 nM.

El siguiente ejemplo ilustra la preparación del compuesto de acuerdo con la invención.

Ejemplos

______________________ Abreviaturas__________________

DCM: diclorometano EtOAc: acetato de etilo

DMSO: dimetilsulfóxido h: hora

CLEM: Espectrometría de masas por cromatografía líquida

CGEM: Espectrometría de masas por cromatografía de gases

M: masa TR: tiempo de retención

Nomenclatura

Los compuestos se nombraron con la ayuda de ACD/Name Batch (Network) versión 12.0 y/o Accelrys Draw Condiciones analíticas

CLEM

Método 1

Waters Acquity-SQD, Waters Acquity UPLC BEH C18, 2,1 x 50 mm, columna de 1,7 pm

Fase móvil A: Formiato de amonio 10 mM 0,1 % de amoníaco

^{Fase móvil B: 95 % de acetonitrilo 5 % de H}2^{O 0,1 % de amoníaco}

Caudal: 1,0 ml/min

Temperatura de la columna: 40 °C

Programa de gradiente Tiempo % de A % de B

0,00 95 5

0,50 95 5

1,75 5 95

2,00 5 95

2,25 95 5

CLEM ACIDO SC

Columna: Válvula Waters XSelect (C18, 30 x 2,1 mm, 3,5 pm): 1 Caudal: 1 ml/minuto Temperatura de la columna: 35 °C

Eluyente A: ácido fórmico al 0,1 % en acetonitrilo

Eluyente B: Acido fórmico al 0,1 % en agua

Lin. Gradiente: t=0 min A al 5 %, t=1,6 min A al 98 %, t=3 min A al 98 %

Detección: DAD (220-320 nm)

Detección: Intervalo de masa DSM (IEN pos/neg): 100-800

Detección: ELSD (PL-ELS 2100): flujo de gas 1,2 ml/min, temperatura del gas: 70 °C, neb: 50 °C

CLEM ACIDO AN

Columna: Válvula Waters XSelect (C18, 50 x 2,1 mm, 3,5 pm): 2 Caudal: 0,8 ml/minuto Temperatura de la columna: 35 °C

Eluyente A: ácido fórmico al 0,1 % en acetonitrilo

Eluyente B: Acido fórmico al 0,1 % en agua

Lin. Gradiente: t=0 min A al 5 %, t=3,5 min A al 98 %, t=6 min A al 98 %

Detección: DAD (220-320 nm)

Detección: Intervalo de masa DSM (IEN pos/neg): 100-800

CGEM

Método S

Instrumento: Agilent 6890N

Columna: RXÍ-5MS 20m, ID 180 |jm, df0.18 |jm

Velocidad promedio: 50 cm/s Gas vehículo: He

Temp inicial: 60 °C Tiempo inicial: 1,0 min Retardo del disolvente: 1,3 min Velocidad: 50 °C/min Temp final: 250 °C Tiempo final: 3,5 min

Relación de división: 20:1 Temp del inyector: 250 °C Vol. de inyección: 1 j l Detección: DSM (lE-positivo) Temp. del detector: 280 °C Intervalo de masa: 50-550 Detección: FID Temp. del detector: 300 °C

INTERMEDIO 1

2-(Difluorometoxi)-6-fluorobenzonitrilo

A una solución de 2-fluoro-6-hidroxibenzonitrilo (14,78 g, 108 mmol) en 1,4-dioxano (120 ml) se le añadió hidróxido sódico (25,9 g, 647 mmol) en agua (120 ml). La mezcla se calentó a 65 °C y se pasó clorodifluorometano (13,98 g, 162 mmol) a través de la solución mediante una vela de filtro. Se dejó enfriar la mezcla de reacción a temperatura ambiente y se filtraron los precipitantes formados. Las capas del filtrado se separaron y la fase orgánica se combinó con la capa orgánica de una repetición del mismo experimento, partiendo de 2-fluoro-6-hidroxibenzonitrilo (20,0 g, 146 mmol). La capa orgánica combinada se lavó con salmuera (2 x 100 ml), se secó sobre Na2SO4, se filtró y se concentró al vacío. La suspensión resultante se diluyó con éter dietílico (80 ml) y se lavó con agua (3 x 40 ml) y salmuera (2 x 40 ml), después se secó (Na2SO4), se filtró y se concentró al vacío, para dar el compuesto del título (34,2 g, 68 %) como un aceite amarillo, que se usó sin purificación adicional. 8h (300 MHz, DMSO-d6) 7,88 (td, J 8,6, 6,8 Hz, 1H), 7,50 (t, J 72,0 Hz, 1H), 7,43 (t, J 8,8 Hz, 1H), 7,34 (d, J 8,6 Hz, 1H). CGEM (Método S) [M]⁺187, TR 3,40 minutos (95,5 %).

INTERMEDIO 2

[2-(Difluorometoxi)-6-fluorofenil]metanamina

En un autoclave de acero en una atmósfera de argón, se añadió níquel Raney (~8 g, 50 % en peso de suspensión en agua) a una solución de Intermedio 1 (44,5 g, 214 mmol, 90 % puro) en amoníaco metanólico (7 M, 400 ml). La mezcla de reacción se agitó vigorosamente en una atmósfera de hidrógeno a 1000 kPa (10 bar) hasta que no se observó ningún consumo adicional de hidrógeno. La mezcla de reacción se filtró sobre una capa de kieselguhr, después el filtrado se concentró parcialmente [>22,5 kPa (>225 mbar), 40 °C] para dar el compuesto del título (146,1 g) como un líquido verde, que se usó sin purificación adicional. CGEM (Método S) [M-H]+ 190, TR 3,35 minutos (87 % de pureza).

INTERMEDIO 3

5-Bromo-N-[2-(difluorometoxi)-6-fluorobencil]-2-nitroanilina

Se añadió carbonato potásico (22,11 g, 160 mmol) a una solución de 4-bromo-2-fluoro-1-nitrobenceno (32 g, 145 mmol) e Intermedio 2 (30,6 g, 160 mmol) en 1-metil-2-pirrolidinona (320 ml). La mezcla resultante se agitó a 80 °C durante 5 h. Después de enfriar a temperatura ambiente, la mezcla se diluyó con acetato de etilo (~750 ml) y agua (~750 ml). Las fases se separaron y la fase acuosa se extrajo con acetato de etilo (500 ml). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con agua (7 x 200 ml) y salmuera (2 x 250 ml), después se secaron (Na2SO4), se filtraron, se concentraron al vacío y se co-evaporaron a partir de éter dietílico, para dar el compuesto del título (68,6 g) como un sólido amarillo/naranja oscuro, que se usó sin purificación adicional. Sh (300 MHz, CDCb) 8,35 (s a, 1H), 8,02 (d, J 9,1 Hz, 1H), 7,44-7,23 (m, 2H), 7,02 (t, J 8,8 Hz, 2H), 6,78 (dd, J9,1, 1,9 Hz, 1H), 6,63 (t, J 72,8 Hz, 1H), 4,58 (d, J 5,8 Hz, 2H). CLEM (ÁCIDO_SC) [M+H]+ 391/393 (patrón Br), TR 2,31 minutos (85 % de pureza).

INTERMEDIO 4

6-Bromo-1-[2-(difluorometoxi)-6-fluorobencil]-2-metil-1H-bencimidazol

Se añadió polvo de zinc (34,4 g, 527 mmol) a una solución de Intermedio 3 (68,68 g, 176 mmol) en ácido acético (350 ml). La mezcla resultante se agitó a reflujo durante 1 h, después de lo cual se añadió cuidadosamente zinc adicional (34,4 g, 527 mmol). La mezcla de reacción se calentó a reflujo durante 18 h adicionales, después se enfrió a temperatura ambiente sin agitación. La suspensión espesa se filtró sobre un filtro de vidrio y se lavó con acetato de etilo. El filtrado se concentró al vacío y el residuo oleaginoso se agitó en etanol (500 ml) durante 2 h. El sólido blanco que cristalizó se recogió por filtración y se suspendió en DCM (600 ml). Las capas orgánicas se lavaron con agua (3 x 200 ml), se secaron (Na2SO4), se filtraron y se concentraron al vacío, para obtener el compuesto del título (31,1 g, 45 %) como un sólido blanco. 8h (300 MHz, DMSO-d6) 7,57 (d, J 1,8 Hz, 1H), 7,55-7,43 (m, 2H), 7,35 (t, J 72,7 Hz, 1H), 7,25 (dd, J 8,5, 1,8 Hz, 1H), 7,23-7,15 (m, 1H), 7,15-7,09 (m, 1H), 5,46 (s, 2H), 2,53 (s, 3H). CLEM (ÁCIDOAN) [M+H]+ 385/387 (patrón Br), TR 1,79 minutos (98 % de pureza).

EJEMPLO 1

2-(5-{1-[2-(D¡fluorometox¡)-6-fluorobenc¡l1-2-met¡l-1H-benc¡m¡dazol-6-¡l>-pir¡m¡d¡n-2-¡l)propan-2-ol

Una soluc¡ón de Intermedio 4 (12,88 g, 33,4 mmol), 2-[5-(4,4,5,5-tetramet¡l-1,3,2-d¡oxaborolan-2-¡l)p¡r¡m¡d¡n-2-¡l]propan-2-ol (9,72 g, 36,8 mmol) y carbonato sód¡co (10,63 g, 100 mmol) en una mezcla de 1,4-d¡oxano (250 ml) y agua (25 ml) se lavó abundantemente con argón. Se añad¡ó [1,1'-b¡s(d¡fen¡lfosf¡no)ferroceno]d¡cloropalad¡o(N) (0,819 g, 1,003 mmol) y la mezcla resultante se ag¡tó a reflujo durante 1 h. Después de enfr¡ar a temperatura amb¡ente, la mezcla de reacc¡ón se comb¡nó con la mezcla de reacc¡ón de una repet¡c¡ón del m¡smo exper¡mento, part¡endo del Intermedio 4 (18,26 g, 47,4 mmol) y 2-[5-(4,4,5,5-tetramet¡l-1,3,2-d¡oxaborolan-2-¡l)p¡r¡m¡d¡n-2-¡l]propan-2-ol (13,77 g, 52,1 mmol), después se ag¡tó durante la noche. Los sól¡dos (sales), ¡ncluyendo la mayoría del conten¡do de agua, se ret¡raron por decantac¡ón y se lavaron con éter d¡etíl¡co. Las capas orgán¡cas comb¡nadas se d¡luyeron con éter d¡etíl¡co hasta un volumen de -1000 ml, después se secaron (Na²SO⁴), se f¡ltraron y se concentraron al vacío. El res¡duo se pur¡f¡có por f¡ltrac¡ón sobre un tapón de síl¡ce (EtOAc al 50-100 % en heptano) y las fracc¡ones que contenían el producto se concentraron al vacío a un volumen de -100-200 ml, tras lo cual el producto comenzó a cr¡stal¡zar. Los sól¡dos se f¡ltraron, se lavaron con acetato de et¡lo y se secaron, para dar el compuesto del título (24,8 g, 69 %) como un sól¡do blanco cremoso. Los f¡ltrados comb¡nados se concentraron al vacío y se tr¡turaron en éter d¡etíl¡co durante la noche. El prec¡p¡tado se f¡ltró y se secó, para dar una segunda cosecha del compuesto del título (5,82 g, 16 %) como un sól¡do be¡ge. 6^h(300 MHz, DMSO-d⁶) 9,03 (s, 2H), 7,78 (s a, 1H), 7,65 (d, J 8,3 Hz, 1H), 7,56 (dd, J 8,4, 1,7 Hz, 1H), 7,54-7,45 (m, 1H), 7,37 (t, J 73,1 Hz, 1H), 7,24-7,11 (m, 2H), 5,55 (s, 2H), 5,11 (s, 1H), 2,58 (s, 3H), 1,55 (s, 6H). CLEM (ÁCIDOAN) [M+H]⁺443, TR 2,26 m¡nutos (99 % de pureza).

Claims

REIVINDICACIONES

1. 2-(5-{1-[2-(D¡fluorometox¡)-6-fluorobenc¡l]-2-met¡MH-benc¡m¡dazol-6-¡l}p¡r¡m¡d¡n-2-¡l)propan-2-ol o una sal farmacéuticamente aceptable del m¡smo.

2. 2-(5-{1-[2-(D¡fluorometox¡)-6-fluorobenc¡l]-2-met¡MH-benc¡m¡dazol-6-¡l}p¡r¡m¡d¡n-2-¡l)propan-2-ol o una sal farmacéut¡camente aceptable del m¡smo, para su uso en terap¡a.

3. 2-(5-{1-[2-(D¡fluorometox¡)-6-fluorobenc¡l]-2-met¡MH-benc¡m¡dazol-6-¡l}p¡r¡m¡d¡n-2-¡l)propan-2-ol o una sal farmacéut¡camente aceptable del m¡smo, para su uso en el tratam¡ento y/o prevenc¡ón de un trastorno ¡nflamator¡o o auto¡nmun¡tar¡o, un trastorno neurológ¡co o neurodegenerat¡vo, dolor o un trastorno noc¡cept¡vo, un trastorno card¡ovascular, un trastorno metaból¡co, un trastorno ocular o un trastorno oncológ¡co.

4. Una compos¡c¡ón farmacéut¡ca que comprende 2-(5-{1-[2-(d¡fluorometox¡)-6-fluorobenc¡l]-2-met¡l-1H-benc¡m¡dazol-6-¡l}p¡r¡m¡d¡n-2-¡l)propan-2-ol o una sal farmacéut¡camente aceptable del m¡smo, en asoc¡ac¡ón con un vehículo farmacéut¡camente aceptable.

5. Una compos¡c¡ón farmacéut¡ca como se re¡v¡nd¡ca en la re¡v¡nd¡cac¡ón 4 que comprende además un ¡ngred¡ente farmacéut¡camente act¡vo ad¡c¡onal.