ES2801423T3 - Potenciador de inhibidores del homólogo Zeste 2 - Google Patents

Abstract

Un compuesto de acuerdo con la fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo: **(Ver fórmula)** en la que: R1 es alquilo (C1-C4) o alcoxi (C1-C4); R2 es alquilo (C1-C3); y R3 es alquilo (C1-C8), haloalquilo (C1-C8), hidroxialquilo (C1-C8), alcoxi (C1-C4)alquilo (C1-C8)-, cicloalquilo (C3-C5) o bicicloalquilo (C6-C10), en el que cada uno de dichos cicloalquilo (C3-C5) o bicicloalquilo (C6-C10) está opcionalmente sustituido con uno o dos grupos seleccionados independientemente entre halógeno, hidroxilo, alcoxi (C1-C4), alquilo (C1-C4) y haloalquilo (C1-C4).

Description

DESCRIPCIÓN

Potenciador de inhibidores del homólogo Zeste 2

Campo de la invención

La presente invención se refiere a compuestos que inhiben el potenciador del homólogo Zeste 2 (EZH2) y, por tanto, son útiles para inhibir la proliferación de y/o inducir apoptosis en células cancerosas.

Antecedentes de la invención

Las modificaciones epigenéticas desempeñan un importante papel en la regulación de muchos procesos celulares, incluyendo la proliferación celular, diferenciación y supervivencia celular. Las modificaciones epigenéticas globales son comunes en el cáncer e incluyen cambios globales en el ADN y/o metilación de histona, alteración de la regulación de ARN no codificante y remodelación del nucleosoma que conduce a una activación aberrante o inactivación de oncogenes, supresores de tumores y vías de señalización. Sin embargo, a diferencia de las mutaciones genéticas que surgen en el cáncer, estos cambios epigenéticos pueden revertirse mediante la inhibición selectiva de las enzimas implicadas. Se sabe que la regulación de varias metilasas implicadas en la metilación de histonas o ADN está alterada en el cáncer. Por lo tanto, los inhibidores selectivos de metilasas concretas serán útiles en el tratamiento de enfermedades proliferativas, tales como el cáncer.

EZH2 (human EZH2 gene: Cardoso, C y col.; European J of Human Genetics, Vol. 8, No. 3, páginas 174-180, 2000) es la subunidad catalítica del Complejo Represor Polycomb 2 (PRC2) que funciona para silenciar genes diana mediante la trimetilación de la lisina 27 de la histona h 3 (H3K27me3). La histona H3 es una de las cinco proteínas histonas principales implicadas en la estructura de la cromatina en las células eucariotas. Con un dominio globular principal y una larga cola N-terminal, las histonas están implicadas con la estructura de los nucleosomas, una estructura de "perlas en una cuerda". Las proteínas histonas están altamente modificadas postraduccionalmente, sin embargo, la histona H3 es la más ampliamente modificada de las cinco histonas. El término "Histona H3" solo es deliberadamente ambiguo porque no distingue entre variantes de secuencia o estado de modificación. La histona H3 es una proteína importante en el campo emergente de la epigenética, en el que se piensa que sus variantes de secuencia y estados de modificación variables desempeñan un papel en la regulación dinámica y a largo plazo de los genes.

Se ha observado una mayor expresión de EZH2 en numerosos tumores sólidos, incluidos los de próstata, mama, piel, vejiga, hígado, páncreas, cabeza y cuello y se correlaciona con la agresividad del cáncer, metástasis y mal resultado (Varambally y col., Nature 419:624-629, 2002; Kleer y col., Proc Natl Acad Sci USA 100:11606-11611,2003; Breuer y col., Neoplasia 6:736-743, 2004; Bachmann y col., Prostate 65:252-259, 2005; Weikert y col., Int. J. Mol. Med. 16:349-353, 2005; Sudo y col., British Journal of Cancer 92:1754-1758, 2005; Bachmann y col., Journal of Clinical Oncology 24:268-273, 2006). Por ejemplo, existe un mayor riesgo de recurrencia después de la prostatectomía en tumores que expresan altos niveles de EZH2, aumento de metástasis, supervivencia libre de enfermedad más corta y aumento de la muerte en pacientes con cáncer de mama con niveles altos de EZH2 (Varambally y col., Nature 419:624-629, 2002; Kleer y col., Proc Natl Acad Sci USA 100:11606-11611, 2003). Más recientemente, se han identificado mutaciones inactivantes en UTX (repeticiones de tetratricopéptido X transcritas de forma ubicua), una desmetilasa H3K27 que funciona en oposición a EZH2, en múltiples tipos de tumores sólidos y hematológicos (incluidos tumores renales, glioblastoma, esofágicos, mama, de colon, pulmonar no microcítico, pulmonar microcítico, de vejiga, mieloma múltiple y tumores de leucemia mieloide crónica), y los niveles bajos de UTX se correlacionan con una supervivencia deficiente en el cáncer de mama, lo que sugiere que la pérdida de la función UTX conduce a un aumento de H3K27me3 y la represión de los genes objetivo (Wang y col., Genes & Development 24:327-332, 2010). En conjunto, estos datos sugieren que el aumento de los niveles de H3K27me3 contribuye a la agresividad del cáncer en muchos tipos de tumores y que la inhibición de la actividad EZH2 puede proporcionar un beneficio terapéutico.

Numerosos estudios han informado de que la eliminación directa de EZH2 a través de ARNip o ARNsh o la pérdida indirecta de EZH2 a través del tratamiento con el inhibidor de SAH hidrolasa 3-deazaneplanocina A (DZNep) disminuye la proliferación de la línea celular de cáncer y la invasión in vitro y el crecimiento tumoral in vivo (Gonzalez y col., 2008, GBM 2009). Si bien no se conoce el mecanismo preciso por el cual la actividad aberrante de EZH2 conduce a la progresión del cáncer, muchos genes diana de EZH2 son supresores de tumores, lo que sugiere que la pérdida de la función supresora de tumores es un mecanismo clave. Además, la sobreexpresión de EZH2 en células epiteliales inmortalizadas o primarias promueve el crecimiento y la invasión independientes del anclaje y requiere actividad catalítica de EZh2 (Kleer y col., Proc Natl Acad Sci USA 100: 11606-11611, 2003; Cao y col., Oncogene 27:7274-7284, 2008).

Por lo tanto, existe evidencia sólida que sugiere que la inhibición de la actividad de EZH2 disminuye la proliferación e invasión celular. Por consiguiente, los compuestos que inhiben la actividad de EZH2 serían útiles para el tratamiento del cáncer.

Los provirus del virus de la inmunodeficiencia humana (VIH) latente se silencian como resultado de la desacetilación y la metilación de histonas ubicadas en la repetición terminal larga viral (LTR). Los experimentos de inmunoprecipitación de cromatina utilizando líneas de linfocitos T Jurkat infectadas de forma latente demostraron que EZH2 estaba presente en niveles altos en la LTR de los provirus del VIH silenciados y se desplazó rápidamente después de la reactivación proviral. La eliminación de EZH2 indujo hasta el 40 % de los provirus de VIH latentes. La eliminación de EZH2 también sensibilizó a los provirus latentes a estímulos externos, tales como la estimulación del receptor de linfocitos T y ralentizó la reversión de los provirus reactivados a la latencia. De manera similar, las poblaciones celulares que respondieron mal a los estímulos externos portaban provirus del VIH enriquecidos en H3K27me3 y relativamente empobrecidos en H3K9me3. Estos hallazgos sugieren que el silenciamiento mediado por PRC2 es una característica importante de la latencia del VIH y que los inhibidores de la metilación de histonas pueden desempeñar un papel útil en las estrategias de inducción diseñadas para erradicar las reservas latentes de VIH (Friedman y col., Virol. 85: 9078-9089, 2011). Estudios adicionales han demostrado que la desmetilación de H3K27 en el promotor proviral sensibiliza al VIH latente a los efectos de vorinostat en cultivos ex vivo de linfocitos T CD4+ en reposo (Tripathy y col., J. Virol. 89: 8392-8405, 2015).

Los documentos WO2014/177982, WO2014/097041, WO2017/002064, WO2017/035060 y WO2016/066697 desvelan derivados de N-[(2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]amida como inhibidores de EZH2 para tratar el cáncer.

Sumario de la invención

La presente invención se refiere a compuestos de acuerdo con la fórmula (I) o sales farmacéuticamente aceptables de los mismos:

en la que:

R1 es alquilo (C¹-C⁴) o alcoxi (C¹ -C⁴);

R2 es alquilo (C¹-C³ ) y

R3 es alquilo (CrCs), haloalquilo (Ci-Cs), hidroxialquilo (Ci-Cs), alcoxi (C¹ -C⁴)alquilo (CrCa)-, cicloalquilo (C³-C⁵ ) o bicicloalquilo (C⁶-C¹⁰), en la que cada uno de dichos cicloalquilo (C³-C⁵) o bicicloalquilo (C⁶-C¹⁰ ) está opcionalmente sustituido con uno o dos grupos seleccionados independientemente entre halógeno, hidroxilo, alcoxi (C¹ -C⁴), alquilo (C¹ -C⁴) y haloalquilo (C¹-C⁴).

Otro aspecto de la presente invención se refiere a un procedimiento para inducir la apoptosis en células cancerosas de tumores sólidos; en el tratamiento de cánceres de tumores sólidos.

Otro aspecto de la invención se refiere a preparaciones farmacéuticas que comprenden los compuestos de fórmula (I) y excipientes farmacéuticamente aceptables.

En otro aspecto, se proporciona el uso de un compuesto de fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable o solvato del mismo, en la fabricación de un medicamento para su uso en el tratamiento de un trastorno mediado por EZH2, tal como la inducción de apoptosis en las células cancerosas.

En otro aspecto, la presente invención proporciona el uso de un compuesto de fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo para el tratamiento de enfermedades mediadas por EZH2. La invención también proporciona el uso de un compuesto de fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo en forma de una sustancia terapéuticamente activa en el tratamiento de una enfermedad mediada por EZH2.

En otro aspecto, la invención proporciona un compuesto de fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo para su uso en terapia.

En otro aspecto, se proporciona un compuesto de fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo para su uso en el tratamiento de un trastorno mediado por EZH2.

En otro aspecto, se proporciona un compuesto de fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo para su uso en el tratamiento de enfermedades de proliferación celular.

En otro aspecto, se proporciona un compuesto de fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo para su uso en el tratamiento de cáncer, incluyendo el tratamiento de tumores sólidos, por ejemplo cáncer de cerebro (gliomas), glioblastomas, leucemias, linfomas, síndrome de Bannayan-Zonana, enfermedad de Cowden, enfermedad de Lhermitte-Duclos, cáncer de mama, cáncer de mama inflamatorio, tumor de Wilm, sarcoma de Ewing, rabdomiosarcoma, ependimoma, meduloblastoma, cáncer de colon, cáncer gástrico, cáncer de vejiga, cáncer de cabeza y cuello, cáncer de riñón, cáncer de pulmón, cáncer de hígado, melanoma, cáncer renal, cáncer de ovario, cáncer de páncreas, cáncer de próstata, cáncer de sarcoma, cáncer de osteosarcoma, tumor de células gigantes de hueso y cáncer de tiroides. En otro aspecto, se proporciona un compuesto de fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo para su uso en el tratamiento de un cáncer hematológico, por ejemplo leucemia mieloide aguda, leucemia mieloide crónica, leucemia linfoblástica aguda, leucemia linfocítica crónica, enfermedades mieloproliferativas, mieloma múltiple, síndrome mielodisplásico, enfermedad de Hodgkin y linfoma no de Hodgkin, en particular un linfoma no de Hodgkin, por ejemplo linfoma difuso de linfocitos B grandes (LDLBG) y linfoma folicular.

En otro aspecto se proporcionan procedimientos para la coadministración de los compuestos actualmente inventados de fórmula (I) con otros principios activos.

En otro aspecto se proporciona una combinación de un compuesto de fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo y al menos un agente antineoplásico para su uso en el tratamiento de un trastorno mediado por EZH2.

En otro aspecto se proporciona una combinación de un compuesto de fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo y al menos un agente antineoplásico para su uso en el tratamiento de enfermedades de proliferación celular.

En otro aspecto se proporciona una combinación de un compuesto de fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo y al menos un agente antineoplásico para su uso en el tratamiento de cáncer, incluyendo el tratamiento de tumores sólidos, por ejemplo cáncer de cerebro (gliomas), glioblastomas, leucemias, linfomas, síndrome de Bannayan-Zonana, enfermedad de Cowden, enfermedad de Lhermitte-Duclos, cáncer de mama, cáncer de mama inflamatorio, tumor de Wilm, sarcoma de Ewing, rabdomiosarcoma, ependimoma, meduloblastoma, cáncer de colon, cáncer gástrico, cáncer de vejiga, cáncer de cabeza y cuello, cáncer de riñón, cáncer de pulmón, cáncer de hígado, melanoma, cáncer renal, cáncer de ovario, cáncer de páncreas, cáncer de próstata, cáncer de sarcoma, cáncer de osteosarcoma, tumor de células gigantes de hueso y cáncer de tiroides. En otro aspecto, se proporciona una combinación de un compuesto de fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo y al menos un agente antineoplásico para su uso en el tratamiento de un cáncer hematológico, por ejemplo leucemia mieloide aguda, leucemia mieloide crónica, leucemia linfoblástica aguda, leucemia linfocítica crónica, enfermedades mieloproliferativas, mieloma múltiple, síndrome mielodisplásico, enfermedad de Hodgkin y linfoma no de Hodgkin, en particular un linfoma no de Hodgkin, por ejemplo linfoma difuso de linfocitos B grandes (LDLBG) y linfoma folicular.

Breve descripción de los dibujos

La Fig. 1 muestra un patrón de difracción de rayos X de la sal del ácido clorhídrico del compuesto del ejemplo 1 (Forma II).

La Fig. 2 muestra un espectro Raman de la sal del ácido clorhídrico del compuesto del ejemplo 1 (forma II). La Fig. 3 muestra una traza de calorimetría diferencial de barrido de la sal del ácido clorhídrico del compuesto del ejemplo 1 (Forma II).

La Fig. 4 muestra una traza de análisis termogravimétrico de la sal del ácido clorhídrico del compuesto del ejemplo 1 (Forma II).

La Fig. 5 muestra un patrón de difracción de rayos X en polvo de la sal del ácido clorhídrico del compuesto del ejemplo 10 (Forma I).

La Fig. 6 muestra un espectro Raman de la sal del ácido clorhídrico del compuesto del ejemplo 10 (Forma I). La Fig. 7 muestra una traza de calorimetría diferencial de barrido de la sal del ácido clorhídrico del compuesto del ejemplo 10 (Forma I).

La Fig. 8 muestra una traza de análisis termogravimétrico de la sal del ácido clorhídrico del compuesto del ejemplo 10 (Forma I).

Descripción detallada de la invención

La presente invención se refiere a compuestos de fórmula (I) tal como se han definido anteriormente o sales farmacéuticamente aceptables de los mismos.

En una realización, la presente invención se refiere a compuestos de fórmula (I) en la que R1 es alquilo (C¹ -C⁴) o alcoxi (C¹ -C⁴). En otra realización, la presente invención se refiere a compuestos de fórmula (I) en la que R1 es alquilo (C¹ C⁴). En otra realización, la presente invención se refiere a compuestos de fórmula (I) en la que R1 es metilo, etilo, npropilo o metoxi. En otra realización, la presente invención se refiere a compuestos de fórmula (I) en la que R1 es metilo o metoxi. En una realización específica, la presente invención se refiere a compuestos de fórmula (I) en la que R1 es metilo.

En una realización, la presente invención se refiere a compuestos de fórmula (I) en la que R2 es alquilo (C¹-C³ ). En otra realización, la presente invención se refiere a compuestos de fórmula (I) en la que R2 es metilo, etilo, n-propilo o isopropilo. En otra realización, la presente invención se refiere a compuestos de fórmula (I) en la que R2 es metilo o etilo. En una realización específica, la presente invención se refiere a compuestos de fórmula (I) en la que R2 es metilo.

En una realización, la presente invención se refiere a compuestos de fórmula (I) en la que R3 es alquilo (Ci-Cs), haloalquilo (Ci-Cs), hidroxialquilo (Ci-Cs), alcoxi (C¹ -C⁴)alquilo (C¹-C⁸)-, cicloalquilo (C³-C⁵) o bicicloalquilo (C⁶-C¹⁰), en la que cada uno de dichos cicloalquilo (C³-C⁵ ) o bicicloalquilo (C⁶-C¹⁰ ) está opcionalmente sustituido con uno o dos grupos seleccionados independientemente entre halógeno, hidroxilo, alcoxi (C¹-C⁴), alquilo (C¹ -C⁴) y haloalquilo (Ci-C⁴). En otra realización, la presente invención se refiere a compuestos de fórmula (I) en la que R3 es alquilo (C¹-C⁶), haloalquilo (C¹-C⁶), cicloalquilo (C³-C⁵) o bicicloalquilo (C⁶-C¹⁰ ), en la que cada uno de dichos cicloalquilo (C³-C⁵) o bicicloalquilo (C⁶-C¹⁰) está opcionalmente sustituido con uno o dos grupos seleccionados independientemente entre halógeno, hidroxilo, alcoxi (C¹ -C⁴), alquilo (C¹ -C⁴) y haloalquilo (C¹-C⁴). En otra realización, la presente invención se refiere a compuestos de fórmula (I) en la que R3 es alquilo (C¹ -C⁶), haloalquilo (C¹-C⁶), cicloalquilo (C³-C⁵ ) o bicicloalquilo (C⁶-C¹⁰), en la que cada uno de dichos cicloalquilo (C³-C⁵ ) o bicicloalquilo (C⁶-C¹⁰ ) está opcionalmente sustituido con uno o dos grupos seleccionados independientemente entre halógeno y alquilo (C¹ -C⁴). En otra realización, la presente invención se refiere a compuestos de fórmula (I) en la que R3 es alquilo (C¹-C⁶), haloalquilo (C¹ -C⁶), cicloalquilo (C³-C⁵ ) o bicicloalquilo (C⁶-C¹⁰), en la que cada uno de dichos cicloalquilo (C³-C⁵) o bicicloalquilo (C⁶-C¹⁰) está opcionalmente sustituido con fluoro o metilo. En otra realización, la presente invención se refiere a compuestos de fórmula (I) en la que R3 es alquilo (C¹-C⁶) o haloalquilo (C¹ -C⁶). En otra realización, la presente invención se refiere a compuestos de fórmula (I) en la que R3 es alquilo (C¹-C⁴). En otra realización, la presente invención se refiere a compuestos de fórmula (I) en la que R3 es ferc-butilo. En otra realización, la presente invención se refiere a compuestos de fórmula (I) en la que R3 es cicloalquilo (C³-C⁵) o bicicloalquilo (C⁶-C¹⁰ ), cada uno de los cuales está opcionalmente sustituido con uno o dos grupos seleccionados independientemente entre halógeno y alquilo (C¹ -C⁴). En otra realización, la presente invención se refiere a compuestos de fórmula (I) en la que R3 es cicloalquilo (C³-C⁵) o bicicloalquilo (C⁶-C¹⁰ ), cada uno de los cuales está opcionalmente sustituido con fluoro o metilo. En otra realización, la presente invención se refiere a compuestos de fórmula (I) en la que R3 es cicloalquilo (C³-C⁵) que está opcionalmente sustituido con fluoro o metilo. En otra realización, la presente invención se refiere a compuestos de fórmula (I) en la que R3 es cicloalquilo (C³-C⁵ ) que está opcionalmente sustituido con metilo. En otra realización, la presente invención se refiere a compuestos de fórmula (I) en la que R3 es ciclobutilo que está opcionalmente sustituido con metilo.

Los compuestos específicos de la presente invención incluyen:

(R)-5-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-3-metil-2-(1-(1-neopentilpiperidin-4-il)etil)-5,6,7,8-tetrahidro-4H-tieno[3,2-c]azepin-4-ona;

(R)-2-(1-(1-(ciclobutilmetil)piperidin-4-il)etil)-5-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-3-metil-5,6,7,8-tetrahidro-4H-tieno[3,2-c]azepin-4-ona;

(R)-5-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-2-(1-(1-isobutilpiperidin-4-il)etil)-3-metil-5,6,7,8-tetrahidro-4H-tieno[3,2-c]azepin-4-ona;

(R)-2-(1-(1-(ciclopentilmetil)piperidin-4-il)etil)-5-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-3-metil-5,6,7,8-tetrahidro-4H-tieno[3,2-c]azepin-4-ona;

(R)-5-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-2-(1-(1-(2,2-dimetilbutil)piperidin-4-il)etil)-3-metil-5,6,7,8-tetrahidro-4H-tieno[3,2-c]azepin-4-ona;

(R)-5-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-2-(1-(1-(2-fluoro-2-metilpropil)piperidin-4-il)etil)-3-metil-5.6.7.8- tetrahidro-4H-tieno[3,2-c]azepin-4-ona;

(R)-2-(1-(1-(ciclopropilmetil)piperidin-4-il)etil)-5-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-3-metil-5,6,7,8-tetrahidro-4H-tieno[3,2-c]azepin-4-ona;

(R)-5-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-3-metil-2-(1-(1-((1-metilciclopentil)metil)piperidin-4-il)etil)-5.6.7.8- tetrahidro-4H-tieno[3,2-c]azepin-4-ona;

(R)-2-(1-(1-(biciclo[2.2.2]octan-1-ilmetil)piperidin-4-il)etil)-5-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-3-metil-5.6.7.8- tetrahidro-4H-tieno[3,2-c]azepin-4-ona;

(R)-5-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-3-metil-2-(1-(1-((1-metilciclobutil)metil)piperidin-4-il)etil)-5.6.7.8- tetrahidro-4H-tieno[3,2-c]azepin-4-ona y

(R)-5-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-3-metil-2-(1-(1-((1-metilciclopropil)metil)piperidin-4-il)etil)-5.6.7.8- tetrahidro-4H-tieno[3,2-c]azepin-4-ona

o sales farmacéuticamente aceptables de los mismos.

Habitualmente, pero no de manera absoluta, las sales de la presente invención son sales farmacéuticamente aceptables. Se pueden preparar sales de los compuestos desvelados que contienen una amina básica otro grupo funcional básico por cualquier procedimiento adecuado conocido en la técnica, incluyendo el tratamiento de la base libre con un ácido inorgánico, tales como ácido clorhídrico, ácido bromhídrico, ácido sulfúrico, ácido nítrico, ácido fosfórico y similar o con un ácido orgánico, tal como ácido acético, ácido trifluoroacético, ácido maleico, ácido succínico, ácido mandélico, ácido fumárico, ácido malónico, ácido pirúvico, ácido oxálico, ácido glicólico, ácido salicílico, ácido de piranosidilo, tal como ácido glucurónico o ácido galacturónico, ácido alfa-hidroxi, tal como ácido cítrico o ácido tartárico, aminoácido, tal como ácido aspártico o ácido glutámico, ácido aromático, tal como ácido benzoico o ácido cinámico, ácido sulfónico, tal como ácido p-tolueno sulfónico, ácido metanosulfónico, ácido etanosulfónico o similar. Los ejemplos de sales farmacéuticamente aceptables incluyen sulfatos, pirosulfatos, bisulfatos, sulfitos, bisulfitos, fosfatos, cloruros, bromuros, yoduros, acetatos, propionatos, decanoatos, caprilatos, acrilatos, formiatos, isobutiratos, caproatos, heptanoatos, propiolatos, oxalatos, malonatos, succinatos, suberatos, sebacatos, fumaratos, maleatos, butin-1,4-dioatos, hexin-1,6-dioatos, benzoatos, clorobenzoatos, metilbenzoatos, dinitrobenzoatos, hidroxibenzoatos, metoxibenzoatos, ftalatos, fenilacetatos, fenilpropionatos, fenilbutiratos, citratos, lactatos, Y-hidroxibutiratos, glicolatos, tartratos, mandelatos y sulfonatos, tales como xilensulfonatos, metanosulfonatos, propanosulfonatos, naftalen-1-sulfonatos y naftalen-2-sulfonatos.

Se pueden preparar sales de los compuestos desvelados que contienen un ácido carboxílico u otro grupo funcional ácido haciéndolo reaccionar con una base adecuada. Dicha sal farmacéuticamente aceptable se puede fabricar con una base que proporciona un catión farmacéuticamente aceptable, lo que incluye sales de metales alcalinos (en especial sodio y potasio), sales de metales alcalinotérreos (en especial calcio y magnesio), sales de aluminio y sales de amonio, así como sales hechas a partir de bases orgánicas fisiológicamente aceptables tales como trimetilamina, trietilamina, morfolina, piridina, piperidina, picolina, diciclohexilamina, N,N'-dibenciletilendiamina, 2-hidroxietilamina, b/s-(2-hidroxietil)amina, tri-(2-hidroxietil)amina, procaína, dibencilpiperidina, deshidroabietilamina, N,N- b/sdeshidroabietilamina, glucamina, N-metilglucamina, colidina, quinina, quinolina y aminoácido básico tal como lisina y arginina.

Otras sales, que son farmacéuticamente no aceptables, pueden ser útiles en la preparación de compuestos de la presente invención y se debe considerar que estas forman un aspecto más de la invención. Estas sales, tales como oxálico o trifluoroacetato, aunque no por sí mismas farmacéuticamente aceptables, pueden ser útiles en la preparación de sales útiles como intermedios para obtener los compuestos de la invención y sus sales farmacéuticamente aceptables.

El compuesto de fórmula (I) puede existir en forma cristalina o no cristalina o en forma de una mezcla de las mismas. Los expertos en la técnica apreciarán que los solvatos farmacéuticamente aceptables pueden estar formados por compuestos cristalinos o no cristalinos. En los solvatos cristalinos, las moléculas de disolvente se incorporan a la red cristalina durante la cristalización. Los solvatos pueden incluir disolventes no acuosos tales como, pero no se limitan a, etanol, isopropanol, DMSO, ácido acético, etanolamina o acetato de etilo o pueden incluir agua como el disolvente que se incorpora a la red cristalina. Los solvatos en los que el agua es el disolvente incorporado a la red cristalina, habitualmente se denominan "hidratos". Los hidratos incluyen hidratos estequiométricos así como composiciones que contienen cantidades variables de agua. La invención incluye todos estos solvatos.

El experto en la técnica apreciará que los compuestos de la invención que existen en forma cristalina, incluyendo los diversos solvatos de los mismos, pueden exhibir polimorfismo (es decir la capacidad de existir con diferentes estructuras cristalinas). Estas diferentes formas cristalinas habitualmente se conocen como "polimorfos". La invención incluye todos estos polimorfos. Los polimorfos tienen la misma composición química pero difieren en el empaquetamiento, disposición geométrica y otras propiedades descriptivas del estado sólido cristalino. Los polimorfos, por tanto, pueden tener propiedades físicas distintas tales como las propiedades de forma, densidad, dureza, deformabilidad, estabilidad y disolución. Los polimorfos normalmente muestran distintos puntos de fusión, espectros de IR y patrones de difracción de rayos X en polvo, que se pueden usar para identificación. El experto en la técnica apreciará que se pueden producir distintos polimorfos, por ejemplo, cambiando o ajustando las condiciones de reacción o los reactivos usados en la fabricación del compuesto. Por ejemplo, cambios en la temperatura, presión o disolvente pueden dar como resultado polimorfos. Además, un polimorfo se puede convertir de manera espontánea en otro polimorfo bajo ciertas condiciones.

La presente invención se dirige además a formas cristalinas de la sal del ácido clorhídrico de (R)-5-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-3-metil-2-(1-(1-neopentilpiperidin-4-il)etil)-5,6,7,8-tetrahidro-4H-tieno[3,2-c]azepin-4-ona.

En algunas realizaciones, una forma cristalina de la sal del ácido clorhídrico de (R)-5-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-3-metil-2-(1-(1-neopentilpiperidin-4-il)etil)-5,6,7,8-tetrahidro-4H-tieno[3,2-c]azepin-4-ona se caracteriza por un patrón de difracción de rayos X en polvo (DRXP) que comprende al menos nueve ángulos de difracción, cuando se mide usando radiación Cu Ka, seleccionados entre un grupo que consiste en aproximadamente 4,5, 7,7, 8,9, 9,5, 10,7, 12,7, 13,4, 14,3, 14,8, 14,9, 15,3, 15,7, 16,3, 16,9, 17,4, 18,3, 18,6, 19,1,21,9, 22,4, 23,1,24,0, 24.4, 25,0, 25,6, 26,9, 27,7, 28,8 y 29,4 grados 20. En otra realización, la sal del ácido clorhídrico de (R)-5-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-3-metil-2-(1-(1-neopentilpiperidin-4-il)etil)-5,6,7,8-tetrahidro-4H-tieno[3,2-c]azepin-4-ona se caracteriza por un patrón de difracción de rayos X en polvo (DRXP) que comprende al menos ocho ángulos de difracción o al menos siete ángulos de difracción o al menos seis ángulos de difracción o al menos cinco ángulos de difracción o al menos cuatro ángulos de difracción, cuando se mide usando radiación Cu Ka, seleccionados entre un grupo que consiste en aproximadamente 4,5, 7,7, 8,9, 9,5, 10,7, 12,7, 13,4, 14,3, 14,8, 14,9, 15,3, 15,7, 16,3, 16,9, 17.4, 18,3, 18,6, 19,1, 21,9, 22,4, 23,1, 24,0, 24,4, 25,0, 25,6, 26,9, 27,7, 28,8 y 29,4 grados 20. En otra realización, la sal del ácido clorhídrico de (R)-5-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-3-metil-2-(1-(1-neopentilpiperidin-4-il)etil)-5,6,7,8-tetrahidro-4H-tieno[3,2-c]azepin-4-ona se caracteriza por un patrón de difracción de rayos X en polvo (DRXP) que comprende al menos tres ángulos de difracción, cuando se mide usando radiación Cu Ka, seleccionados entre un grupo que consiste en aproximadamente 4,5, 7,7, 8,9, 9,5, 10,7, 12,7, 13,4, 14,3, 14,8, 14,9, 15,3, 15,7, 16,3, 16,9, 17,4, 18,3, 18,6, 19,1,21,9, 22,4, 23,1,24,0, 24,4, 25,0, 25,6, 26,9, 27,7, 28,8 y 29,4 grados 20.

En otra realización más, la sal del ácido clorhídrico de (R)-5-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-3-metil-2-(1-(1-neopentilpiperidin-4-il)etil)-5,6,7,8-tetrahidro-4H-tieno[3,2-c]azepin-4-ona se caracteriza por un patrón de difracción de rayos X en polvo (DRXP) que comprende ángulos de difracción, cuando se mide usando radiación Cu Ka, de aproximadamente 8,9, 10,7, 14,3, 14,8, 16,9 y 24,0 grados 20. En otra realización más, la sal del ácido clorhídrico de (R)-5-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-3-metil-2-(1-(1-neopentilpiperidin-4-il)etil)-5,6,7,8-tetrahidro-4H-tieno[3,2-c]azepin-4-ona se caracteriza por un patrón de difracción de rayos X en polvo (DRXP) sustancialmente de acuerdo con la Fig. 1.

En otras realizaciones, la sal del ácido clorhídrico de (R)-5-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-3-metil-2-(1-(1-neopentilpiperidin-4-il)etil)-5,6,7,8-tetrahidro-4H-tieno[3,2-c]azepin-4-ona se caracteriza por un espectro Raman que comprende al menos doce picos en posiciones seleccionadas entre un grupo que consiste en picos a aproximadamente 455, 479, 505, 534, 542, 565, 612, 693, 758, 791, 854, 995, 1047, 1114, 1148, 1209, 1241, 1279, 1315, 1390, 1438, 1473, 1551, 1628, 1655, 2735, 2917 y 2953 cm-1. En otra realización, la sal del ácido clorhídrico de (R)-5-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-3-metil-2-(1-(1-neopentilpiperidin-4-il)etil)-5,6,7,8-tetrahidro-4H-tieno[3,2-c]azepin-4-ona se caracteriza por un espectro Raman que comprende al menos once picos o al menos diez picos o al menos nueve picos o al menos ocho picos o al menos siete picos en las posiciones seleccionadas entre un grupo que consiste en picos a aproximadamente 455, 479, 505, 534, 542, 565, 612, 693, 758, 791, 854, 995, 1047, 1114, 1148, 1209, 1241, 1279, 1315, 1390, 1438, 1473, 1551, 1628, 1655, 2735, 2917 y 2953 cm-1. En otra realización, la sal del ácido clorhídrico de (R)-5-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-3-metil-2-(1-(1 -neopentilpiperidin-4-il)etil)-5,6,7,8-tetrahidro-4H-tieno[3,2-c]azepin-4-ona se caracteriza por un espectro Raman que comprende al menos seis picos en posiciones seleccionadas entre un grupo que consiste en picos a aproximadamente 455, 479, 505, 534, 542, 565, 612, 693, 758, 791, 854, 995, 1047, 1114, 1148, 1209, 1241, 1279, 1315, 1390, 1438, 1473, 1551, 1628, 1655, 2735, 2917 y 2953 cm-1.

En otra realización más, la sal del ácido clorhídrico de (R)-5-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-3-metil-2-(1-(1-neopentilpiperidin-4-il)etil)-5,6,7,8-tetrahidro-4H-tieno[3,2-c]azepin-4-ona se caracteriza por un espectro Raman que comprende picos a aproximadamente 505, 534, 612, 1241, 1315, 1390, 1438, 1473, 1551, 1628, 2917 y 2953 cirr 1. En otra realización más, la sal del ácido clorhídrico de (R)-5-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-3-metil-2- (1-(1-neopentilpiperidin-4-il)etil)-5,6,7,8-tetrahidro-4H-tieno[3,2-c]azepin-4-ona se caracteriza por un espectro Raman sustancialmente de acuerdo con la Fig. 2.

En realizaciones adicionales, la sal del ácido clorhídrico de (R)-5-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-3-metil-2-(1-(1-neopentilpiperidin-4-il)etil)-5,6,7,8-tetrahidro-4H-tieno[3,2-c]azepin-4-ona se caracteriza por una traza de calorimetría diferencial de barrido sustancialmente de acuerdo con la Fig. 3 y/o una traza de análisis termogravimétrico sustancialmente de acuerdo con la Fig. 4.

En otras realizaciones más, tal como entenderá un experto habitual en la técnica, la sal del ácido clorhídrico de (R)-5-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-3-metil-2-(1-(1-neopentilpiperidin-4-il)etil)-5,6,7,8-tetrahidro-4H-tieno[3,2-c]azepin-4-ona se caracteriza por cualquier combinación de los datos analíticos que caracterizan las realizaciones mencionadas anteriormente. Por ejemplo, en una realización, la sal del ácido clorhídrico de (R)-5-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-3-metil-2-(1-(1-neopentilpiperidin-4-il)etil)-5,6,7,8-tetrahidro-4H-tieno[3,2-c]azepin-4-ona se caracteriza por un patrón de difracción de rayos X en polvo (DRXP) sustancialmente de acuerdo con la Fig. 1 y un espectro Raman sustancialmente de acuerdo con la Fig. 2 y una traza de calorimetría diferencial de barrido sustancialmente de acuerdo con la Fig. 3 y una traza de análisis termogravimétrico sustancialmente de acuerdo con la Fig. 4. En otra realización, la sal del ácido clorhídrico de (R)-5-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-3-metil-2-(1-(1-neopentilpiperidin-4-il)etil)-5,6,7,8-tetrahidro-4H-tieno[3,2-c]azepin-4-ona se caracteriza por un patrón de difracción de rayos X en polvo (DRXP) sustancialmente de acuerdo con la Fig. 1 y un espectro Raman sustancialmente de acuerdo con la Fig. 2. En otra realización, la sal del ácido clorhídrico de (R)-5-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3- il)metil)-3-metil-2-(1-(1-neopentilpiperidin-4-il)etil)-5,6,7,8-tetrahidro-4H-tieno[3,2-c]azepin-4-ona se caracteriza por un patrón de difracción de rayos X en polvo (DRXP) sustancialmente de acuerdo con la Fig. 1 y una traza de calorimetría diferencial de barrido sustancialmente de acuerdo con la Fig. 3. En otra realización, la sal del ácido clorhídrico de (R)-5-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-3-metil-2-(1-(1-neopentilpiperidin-4-il)etil)-5,6,7,8-tetrahidro-4H-tieno[3,2-c]azepin-4-ona se caracteriza por un patrón de difracción de rayos X en polvo (DRXP) sustancialmente de acuerdo con la Fig. 1 y una traza de análisis termogravimétrico sustancialmente de acuerdo con la Fig. 4. En otra realización, la sal del ácido clorhídrico de (R)-5-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-3-metil-2-(1-(1-neopentilpiperidin-4-il)etil)-5,6,7,8-tetrahidro-4H-tieno[3,2-c]azepin-4-ona se caracteriza por un patrón de difracción de rayos X en polvo (DRXP) que comprende ángulos de difracción, cuando se mide usando radiación Cu Ka, de aproximadamente 8,9, 10,7, 14,3, 14,8, 16,9 y 24,0 grados 20 y un espectro Raman que comprende picos a aproximadamente 505, 534, 612, 1241, 1315, 1390, 1438, 1473, 1551, 1628, 2917 y 2953 cm'1. En otra realización, la sal del ácido clorhídrico de (R)-5-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-3-metil-2-(1-(1-neopentilpiperidin-4-il)etil)-5,6,7,8-tetrahidro-4H-tieno[3,2-c]azepin-4-ona se caracteriza por un patrón de difracción de rayos X en polvo (DRXP) que comprende ángulos de difracción, cuando se mide usando radiación Cu Ka, de aproximadamente 8,9, 10,7, 14,3, 14,8, 16,9 y 24,0 grados 20 y una traza de calorimetría diferencial de barrido sustancialmente de acuerdo con la Fig. 3. En otra realización, la sal del ácido clorhídrico de (R)-5-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-3-metil-2-(1-(1-neopentilpiperidin-4-il)etil)-5,6,7,8-tetrahidro-4H-tieno[3,2-c]azepin-4-ona se caracteriza por un patrón de difracción de rayos X en polvo (DRXP) que comprende ángulos de difracción, cuando se mide usando radiación Cu Ka, de aproximadamente 8,9, 10,7, 14,3, 14,8, 16,9 y 24,0 grados 20 y una traza de análisis termogravimétrico sustancialmente de acuerdo con la Fig. 4.

La presente invención se dirige además a formas cristalinas de la sal del ácido clorhídrico de (R)-5-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-3-metil-2-(1-(1-((1-metilciclobutil)metil)piperidin-4-il)etil)-5,6,7,8-tetrahidro-4H-tieno[3,2-c]azepin-4-ona.

En algunas realizaciones, una forma cristalina de la sal del ácido clorhídrico de (R)-5-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-3-metil-2-(1-(1-((1-metilciclobutil)metil)piperidin-4-il)etil)-5,6,7,8-tetrahidro-4H-tieno[3,2-c]azepin-4-ona se caracteriza por un patrón de difracción de rayos X en polvo (DRXP) que comprende al menos nueve ángulos de difracción, cuando se mide usando radiación Cu Ka, seleccionados entre un grupo que consiste en aproximadamente 8,1, 10,2, 11,2, 12,4, 12,8, 13,8, 15,3, 15,5, 16,0, 17,2, 18,3, 18,8, 19,4, 19,8, 20,6, 22,4, 23,8, 24,4, 24,9, 25,6, 26,4 y 27,4 grados 20. En otra realización, la sal del ácido clorhídrico de (R)-5-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-3-metil-2-(1-(1-((1-metilciclobutil)metil)piperidin-4-il)etil)-5,6,7,8-tetrahidro-4H-tieno[3,2-c]azepin-4-ona se caracteriza por un patrón de difracción de rayos X en polvo (DRXP) que comprende al menos ocho ángulos de difracción o al menos siete ángulos de difracción o al menos seis ángulos de difracción o al menos cinco ángulos de difracción o al menos cuatro ángulos de difracción, cuando se mide usando radiación Cu Ka, seleccionados entre un grupo que consiste en aproximadamente 8,1, 10,2, 11,2, 12,4, 12,8, 13,8, 15,3, 15,5, 16,0, 17,2, 18,3, 18,8, 19,4, 19,8, 20,6, 22,4, 23,8, 24,4, 24,9, 25,6, 26,4 y 27,4 grados 20. En otra realización, la sal del ácido clorhídrico de (R)-5-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-3-metil-2-(1-(1-((1-metilciclobutil)metil)piperidin-4-il)etil)-5,6,7,8-tetrahidro-4H-tieno[3,2-c]azepin-4-ona se caracteriza por un patrón de difracción de rayos X en polvo (DRXP) que comprende al menos tres ángulos de difracción, cuando se mide usando radiación Cu Ka, seleccionados entre un grupo que consiste en aproximadamente 8,1, 10,2, 11,2, 12,4, 12,8, 13,8, 15,3, 15,5, 16,0, 17,2, 18,3, 18,8, 19,4, 19,8, 20,6, 22,4, 23,8, 24,4, 24,9, 25,6, 26,4 y 27,4 grados 20.

En otra realización más, la sal del ácido clorhídrico de (R)-5-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-3-metil-2-(1-(1-((1-metilciclobutil)metil)piperidin-4-il)etil)-5,6,7,8-tetrahidro-4H-tieno[3,2-c]azepin-4-ona se caracteriza por un patrón de difracción de rayos X en polvo (DRXP) que comprende ángulos de difracción, cuando se mide usando radiación Cu Ka, de aproximadamente 11,2, 13,8, 15,5, 18,8, 19,4 y 22,4 grados 20. En otra realización más, la sal del ácido clorhídrico de (R)-5-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-3-metil-2-(1-(1-((1-metilciclobutil)metil)piperidin-4-il)etil)-5,6,7,8-tetrahidro-4H-tieno[3,2-c]azepin-4-ona se caracteriza por un patrón de difracción de rayos X en polvo (DRXP) sustancialmente de acuerdo con la Fig. 5.

En otras realizaciones, la sal del ácido clorhídrico de (R)-5-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-3-metil-2-(1-(1-((1-metilciclobutil)metil)piperidin-4-il)etil)-5,6,7,8-tetrahidro-4H-tieno[3,2-c]azepin-4-ona se caracteriza por un espectro Raman que comprende al menos doce picos en las posiciones seleccionadas entre un grupo que consiste en picos a aproximadamente 436, 480, 511, 538, 550, 566, 611,683, 776, 814, 852, 887, 925, 986, 1050, 1140, 1169, 1227, 1252, 1277, 1313, 1338, 1373, 1391,1428, 1462, 1482, 1553, 1620, 2865, 2922, 2955 y 2973 cm-1. En otra realización, la sal del ácido clorhídrico de (R)-5-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-3-metil-2-(1-(1-((1-metilciclobutil)metil)piperidin-4-il)etil)-5,6,7,8-tetrahidro-4H-tieno[3,2-c]azepin-4-ona se caracteriza por un espectro Raman que comprende al menos once picos o al menos diez picos o al menos nueve picos o al menos ocho picos o al menos siete picos en posiciones seleccionados entre un grupo que consiste en picos a aproximadamente 436, 480, 511, 538, 550, 566, 611, 683, 776, 814, 852, 887, 925, 986, 1050, 1140, 1169, 1227, 1252, 1277, 1313, 1338, 1373, 1391, 1428, 1462, 1482, 1553, 1620, 2865, 2922, 2955 y 2973 cm-1. En otra realización, la sal del ácido clorhídrico de (R)-5-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-3-metil-2-(1-(1-((1-metilciclobutil)metil)piperidin-4-il)etil)-5,6,7,8-tetrahidro-4H-tieno[3,2-c]azepin-4-ona se caracteriza por un espectro Raman que comprende al menos seis picos en posiciones seleccionadas entre un grupo que consiste en picos a aproximadamente 436, 480, 511,538, 550, 566, 611, 683, 776, 814, 852, 887, 925, 986, 1050, 1140, 1169, 1227, 1252, 1277, 1313, 1338, 1373, 1391, 1428, 1462, 1482, 1553, 1620, 2865, 2922, 2955 y 2973 cm-1.

En otra realización más, la sal del ácido clorhídrico de (R)-5-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-3-metil-2-(1-(1-((1-metilciclobutil)metil)piperidin-4-il)etil)-5,6,7,8-tetrahidro-4H-tieno[3,2-c]azepin-4-ona se caracteriza por un espectro Raman que comprende picos a aproximadamente 611, 1169, 1227, 1277, 1313, 1482, 1553, 1620, 2922 y 2955 cm-1. En otra realización más, la sal del ácido clorhídrico de (R)-5-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-3-metil-2-(1-(1-((1-metilciclobutil)metil)piperidin-4-il)etil)-5,6,7,8-tetrahidro-4H-tieno[3,2-c]azepin-4-ona se caracteriza por un espectro Raman sustancialmente de acuerdo con la Fig. 6.

En realizaciones adicionales, la sal del ácido clorhídrico de (R)-5-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-3-metil-2-(1-(1-((1-metilciclobutil)metil)piperidin-4-il)etil)-5,6,7,8-tetrahidro-4H-tieno[3,2-c]azepin-4-ona se caracteriza por una traza de calorimetría diferencial de barrido sustancialmente de acuerdo con la Fig. 7 y/o una traza de análisis termogravimétrico sustancialmente de acuerdo con la Fig. 8.

En otras realizaciones más, tal como entenderá un experto habitual en la técnica, la sal del ácido clorhídrico de (R)-5-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-3-metil-2-(1-(1-((1-metilcidobutil)metil)piperidin-4-il)etil)-5,6,7,8-tetrahidro-4H-tieno[3,2-c]azepin-4-ona se caracteriza por cualquier combinación de los datos analíticos que caracterizan las realizaciones mencionadas anteriormente. Por ejemplo, en una realización, la sal del ácido clorhídrico de (R)-5-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-3-metil-2-(1-(1-((1-metilciclobutil)metil)piperidin-4-il)etil)-5,6,7,8-tetrahidro-4H-tieno[3,2-c]azepin-4-ona se caracteriza por un patrón de difracción de rayos X en polvo (DRXP) sustancialmente de acuerdo con la Fig. 5 y un espectro Raman sustancialmente de acuerdo con la Fig. 6 y una traza de calorimetría diferencial de barrido sustancialmente de acuerdo con la Fig. 7 y una traza de análisis termogravimétrico sustancialmente de acuerdo con la Fig. 8. En otra realización, la sal del ácido clorhídrico de (R)-5-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-3-metil-2-(1-(1-((1-metilciclobutil)metil)piperidin-4-il)etil)-5,6,7,8-tetrahidro-4H-tieno[3,2-c]azepin-4-ona se caracteriza por un patrón de difracción de rayos X en polvo (DRXP) sustancialmente de acuerdo con la Fig. 5 y un espectro Raman sustancialmente de acuerdo con la Fig. 6. En otra realización, la sal del ácido clorhídrico de (R)-5-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-3-metil-2-(1-(1-((1-metilciclobutil)metil)piperidin-4-il)etil)-5,6,7,8-tetrahidro-4H-tieno[3,2-c]azepin-4-ona se caracteriza por un patrón de difracción de rayos X en polvo (DRXP) sustancialmente de acuerdo con la Fig. 5 y una traza de calorimetría diferencial de barrido sustancialmente de acuerdo con la Fig. 7. En otra realización, la sal del ácido clorhídrico de (R)-5-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-3-metil-2-(1-(1-((1-metilciclobutil)metil)piperidin-4-il)etil)-5,6,7,8-tetrahidro-4H-tieno[3,2-c]azepin-4-ona se caracteriza por un patrón de difracción de rayos X en polvo (DRXP) sustancialmente de acuerdo con la Fig. 5 y una traza de análisis termogravimétrico sustancialmente de acuerdo con la Fig. 8. En otra realización, la sal del ácido clorhídrico de (R)-5-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-3-metil-2-(1-(1-((1-metilciclobutil)metil)piperidin-4-il)etil)-5,6,7,8-tetrahidro-4H-tieno[3,2-c]azepin-4-ona se caracteriza por un patrón de difracción de rayos X en polvo (DRXP) que comprende ángulos de difracción, cuando se mide usando radiación Cu Ka, de aproximadamente 11,2, 13,8, 15,5, 18,8, 19,4 y 22,4 grados 20 y un espectro Raman que comprende picos a aproximadamente 611, 1169, 1227, 1277, 1313, 1482, 1553, 1620, 2922 y 2955 cm-1. En otra realización, la sal del ácido clorhídrico de (R)-5-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-3-metil-2-(1-(1-((1-metilciclobutil)metil)piperidin-4-il)etil)-5,6,7,8-tetrahidro-4H-tieno[3,2-c]azepin-4-ona se caracteriza por un patrón de difracción de rayos X en polvo (DRXP) que comprende ángulos de difracción, cuando se mide usando radiación Cu Ka, de aproximadamente 11,2, 13,8, 15,5, 18,8, 19,4 y 22,4 grados 20 y una traza de calorimetría diferencial de barrido sustancialmente de acuerdo con la Fig. 7. En otra realización, la sal del ácido clorhídrico de (R)-5-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-3-metil-2-(1-(1-((1-metilciclobutil)metil)piperidin-4-il)etil)-5,6,7,8-tetrahidro-4H-tieno[3,2-c]azepin-4-ona se caracteriza por un patrón de difracción de rayos X en polvo (DRXP) que comprende ángulos de difracción, cuando se mide usando radiación Cu Ka, de aproximadamente 11,2, 13,8, 15,5, 18,8, 19,4 y 22,4 grados 20 y una traza de análisis termogravimétrico sustancialmente de acuerdo con la Fig. 8.

Se debe entender que un patrón de DRXP comprende un ángulo de difracción (expresado en grados 20) de "aproximadamente" un valor especificado en el presente documento cuando el patrón de DRXP comprende un ángulo de difracción con ± 0,3 grados 20 del valor especificado. Además, los expertos en la técnica saben bien y entienden que el aparato empleado, la humedad, la temperatura, la orientación de los cristales de polvo y otros parámetros implicados en la obtención del patrón de difracción de rayos X en polvo (DRXP) pueden causar alguna variabilidad en la apariencia, la intensidades y posiciones de las líneas en el patrón de difracción. Un patrón de difracción de rayos X en polvo que está "sustancialmente de acuerdo" con el de la figura 1 o 5 proporcionada en el presente documento, es un patrón de DRXP que un experto en la técnica podría considerar que representa un compuesto que posee la misma forma de cristal que el compuesto que proporciona el patrón de DRXP de la figura 1 o 5. Es decir, el patrón de DRXP puede ser idéntico al de la figura 1 o 5 o, más probablemente, puede ser algo diferente. Dicho patrón de DRXP puede no mostrar necesariamente cada una de las líneas de uno cualquiera de los patrones de difracción presentados en el presente documento y/o mostrar un ligero cambio en apariencia, intensidad o un cambio de posición de dichas líneas por las diferencias en las condiciones implicadas para obtener los datos. Un experto en la técnica es capaz de determinar si una muestra de un compuesto cristalino tiene la misma forma que, o una forma diferente a, una forma desvelada en el presente documento, mediante la comparación de sus patrones de DRXP. Por ejemplo, un experto en la técnica puede superponer un patrón de DRXP de una muestra de la sal del ácido clorhídrico de (R)-5-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-3-metil-2-(1-(1-neopentilpiperidin-4-il)etil)-5,6,7,8-tetrahidro-4H-tieno[3,2-c]azepin-4-ona, con la Fig. 1 y, usando la experiencia y el conocimiento de la técnica, determinar con facilidad si el patrón de DRXP de la muestra está sustancialmente de acuerdo con el patrón de DRXP de la sal del ácido clorhídrico de (R)-5-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-3-metil-2-(1-(1-neopentilpiperidin-4-il)etil)-5,6,7,8-tetrahidro-4H-tieno[3,2-c]azepin-4-ona (Forma II) desvelada en el presente documento. Si el patrón de DRXP está sustancialmente de acuerdo con la Fig. 1, la forma de la muestra se puede identificar de manera rápida y precisa como que tiene la misma forma que la sal del ácido clorhídrico de (R)-5-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-3-metil-2-(1-(1-neopentilpiperidin-4-il)etil)-5,6,7,8-tetrahidro-4H-tieno[3,2-c]azepin-4-ona (Forma II) desvelado en el presente documento. De manera similar, si un patrón de DRXP de una muestra de la sal del ácido clorhídrico de (R)-5-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-3-metil-2-(1-(1-((1-metilciclobutil)metil)piperidin-4-il)etil)-5,6,7,8-tetrahidro-4H-tieno[3,2-c]azepin-4-ona está sustancialmente de acuerdo con la Fig. 5, la forma de la muestra se puede identificar de manera rápida y precisa como que tiene la misma forma que la sal del ácido clorhídrico de (R)-5-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-3-metil-2-(1-(1-((1-metilciclobutil)metil)piperidin-4-il)etil)-5,6,7,8-tetrahidro-4H-tieno[3,2-c]azepin-4-ona (Forma I) desvelada en el presente documento.

Se entenderá que un espectro Raman comprende un pico (expresado en cm-1) de "aproximadamente" un valor especificado en el presente documento cuando el espectro Raman comprende un pico con ± 5,0 cm-1 del valor especificado. Además, los expertos en la técnica también saben bien y entienden que el aparato empleado, la humedad, la temperatura, la orientación de los cristales de polvo y otros parámetros implicados para obtener un espectro Raman pueden causar alguna variabilidad en la apariencia, intensidades y posiciones de los picos en el espectro. Un espectro Raman que está "sustancialmente de acuerdo" con el de la figura 2 o 6 proporcionado en el presente documento, es un espectro Raman que un experto en la técnica podría considerar que representa un compuesto que posee la misma forma de cristal que el compuesto que proporciona el espectro Raman de la figura 2 o 6. Es decir, el espectro Raman puede ser idéntico al de la figura 2 o 6 o, más probablemente puede ser algo diferente. Dicho espectro Raman puede no mostrar necesariamente cada uno de los picos de uno cualquiera de los espectros presentados en el presente documento y/o mostrar un ligero cambio en apariencia, intensidad o un cambio de posición de dichos picos por las diferencias en las condiciones implicadas para obtener los datos. Un experto en la técnica es capaz de determinar si una muestra de un compuesto cristalino tiene la misma forma que, o una forma diferente a, una forma desvelada en el presente documento, mediante la comparación de sus espectros Raman. Por ejemplo, un experto en la técnica puede superponer un espectro Raman de una muestra de la sal del ácido clorhídrico de (R)-5-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-3-metil-2-(1-(1-neopentilpiperidin-4-il)etil)-5,6,7,8-tetrahidro-4H-tieno[3,2-c]azepin-4-ona, con la Fig. 2 y, usando la experiencia y el conocimiento de la técnica, determinar con facilidad si el espectro Raman de la muestra está sustancialmente de acuerdo con el espectro Raman de la sal del ácido clorhídrico de (R)-5-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-3-metil-2-(1-(1-neopentilpiperidin-4-il)etil)-5,6,7,8-tetrahidro-4H-tieno[3,2-c]azepin-4-ona (Forma II) desvelada en el presente documento. De manera similar, si el espectro Raman está sustancialmente de acuerdo con la Fig. 6, la forma de la muestra se puede identificar de manera rápida y precisa como que tiene la misma forma que la sal del ácido clorhídrico de (R)-5-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-3-metil-2-(1-(1-((1-metilciclobutil)metil)piperidin-4-il)etil)-5,6,7,8-tetrahidro-4H-tieno[3,2-c]azepin-4-ona (Forma I) desvelada en el presente documento.

El compuesto de fórmula (I) o una sal del mismo puede existir en formas estereoisoméricas (por ejemplo, este contiene uno o más átomos de carbono asimétricos). Los estereoisómeros individuales (enantiómeros y diastereómeros) y mezclas de estos están incluidos dentro del ámbito de la presente invención. Asimismo, se entiende que un compuesto o una sal de fórmula (I) puede existir en formas tautoméricas distintas de las mostradas en la fórmula y estas están incluidas también dentro del ámbito de la presente invención. Debe entenderse que la presente invención incluye todas las combinaciones y subconjuntos de los grupos particulares definidos anteriormente en el presente documento. El ámbito de la presente invención incluye mezclas de estereoisómeros, así como enantiómeros purificados o mezclas enantiomérica/diastereoméricamente enriquecidas. Debe entenderse que la presente invención incluye todas las combinaciones y subconjuntos de los grupos particulares definidos anteriormente en el presente documento.

La presente invención también incluye compuestos marcados isotópicamente, que son idénticos a los enumerados en la fórmula (I) y siguientes, pero en los que uno o más átomos se reemplazan por un átomo que tiene una masa atómica o número másico diferente de la masa atómica o número másico que se encuentra normalmente en la naturaleza. Ejemplos de isótopos que pueden incorporarse en los compuestos de la invención y las sales farmacéuticamente aceptables de los mismos incluyen isótopos de hidrógeno, carbono, nitrógeno, oxígeno, fósforo, azufre, flúor, cloro y yodo, tales como 2H, 3H, 11C, 13C, 14C, 15N, 17O, 18O, 31P, 32P, 35S, 18F, 36Cl, 123I y 125I.

Los compuestos de la presente invención y las sales farmacéuticamente aceptables de dichos compuestos que contienen los isótopos anteriormente mencionados y/u otros isótopos de otros átomos, están incluidos dentro del ámbito de la presente invención. Los compuestos marcados con isótopos de la presente invención, por ejemplo aquellos en los que se incorporan isótopos radiactivos tales como 3H, 14C están incorporados, son útiles en los ensayos de distribución de fármacos y/o sustratos en tejidos. En particular se prefieren los isótopos tritiados, es decir, 3H y carbono-14, es decir, 14C, por su facilidad de preparación y detectabilidad. Los isótopos 11C y 18F son particularmente útiles en TEP (tomografía de emisión de positrones) y los isótopos 125I son particularmente útiles en TCEFU (tomografía computarizada de emisión de fotón único), todos útiles en la formación de imágenes del cerebro. Además, la sustitución con isótopos más pesados tales como deuterio, es decir, 2H, puede proporcionar ciertas ventajas terapéuticas resultantes de una mayor estabilidad metabólica, por ejemplo semivida in vivo aumentada o requerimientos de dosificación reducidos y, por tanto, pueden preferirse en algunas circunstancias. Los compuestos de fórmula (I) y siguientes de la presente invención marcados isotópicamente, generalmente se pueden preparar llevando a cabo los procedimientos desvelados en los esquemas y/o ejemplos siguientes, sustituyendo un reactivo marcado isotópicamente fácilmente disponible por un reactivo no marcado isotópicamente.

La invención también proporciona una composición farmacéutica (también denominada formulación farmacéutica) que comprende un compuesto de fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo y uno o más excipientes (también denominados vehículos y/o diluyentes en las técnicas farmacéuticas). Los excipientes son aceptables en el sentido de ser compatibles con los otros ingredientes de la formulación y no perjudiciales para el receptor de los mismos (es decir, el paciente).

Los excipientes farmacéuticamente aceptables variarán dependiendo de la forma de dosificación particular elegida. Además, los excipientes farmacéuticamente aceptables se pueden elegir para una función particular que pueden desempeñar en la composición. Por ejemplo, determinados excipientes farmacéuticamente aceptables se pueden elegir por su capacidad para facilitar la producción de formas de dosificación uniformes. Determinados excipientes farmacéuticamente aceptables se pueden seleccionar por su capacidad para facilitar la producción de formas de dosificación estables. Determinados excipientes farmacéuticamente aceptables se pueden seleccionar por su capacidad para llevar o transportar el compuesto o compuestos de la invención una vez administrados al paciente desde un órgano o una parte del cuerpo, hasta otro órgano o parte del cuerpo. Determinados excipientes farmacéuticamente aceptables se pueden seleccionar por su capacidad para mejorar el cumplimiento del paciente.

Los excipientes farmacéuticamente aceptables adecuados incluyen los siguientes tipos de excipientes: diluyentes, cargas, aglutinantes, disgregantes, lubricantes, agentes deslizantes, agentes de granulación, agentes de recubrimiento, agentes humectantes, disolventes, codisolventes, agentes de suspensión, emulsionantes, edulcorantes, agentes aromatizantes, agentes enmascaradores del sabor, agentes de coloración, agentes antiaglomerantes, hemectantes, agentes quelantes, plastificantes, agentes para el aumento de la viscosidad, antioxidantes, conservantes, estabilizantes, tensioactivos y agentes tamponantes. El experto en la técnica apreciará que ciertos excipientes farmacéuticamente aceptables pueden desempeñar más de una función y pueden desempeñar funciones alternativas, dependiendo de qué cantidad de excipiente está presente en la formulación y qué otros ingredientes están presentes en la formulación.

Los expertos en la técnica tienen el conocimiento y la habilidad en la técnica para ser capaces de seleccionar los excipientes farmacéuticamente aceptables, en las cantidades apropiadas para su uso en la presente invención. Además, existe una diversidad de recursos que están disponibles para el experto en la técnica, que describen excipientes farmacéuticamente aceptables y pueden ser útiles para seleccionar los excipientes farmacéuticamente aceptables adecuados. Los ejemplos incluyen Remington's Pharmaceutical Sciences (Mack Publishing Company), The Handbook of Pharmaceutical Additives (Gower Publishing Limited) y The Handbook of Pharmaceutical Excipients (la American Pharmaceutical Association y la Pharmaceutical Press).

Las composiciones farmacéuticas de la invención se prepararon usando técnicas y procedimientos conocidos por los expertos en la técnica. Algunos de los procedimientos usados normalmente en la técnica se describen en Remington's Pharmaceutical Sciences (Mack Publishing Company).

Las composiciones farmacéuticas pueden estar en forma de dosis unitaria que contiene una cantidad predeterminada de principio activo por dosis unitaria. Dicha unidad puede contener una dosis terapéuticamente eficaz del compuesto de fórmula (I) o una sal del mismo o una fracción de una dosis terapéuticamente eficaz tal que se deben administrar múltiples formas de dosificación unitarias en un tiempo dado para conseguir la dosis terapéuticamente eficaz deseada. Las formas de dosificación unitaria preferidas son aquellas que contienen una dosis o subdosis diaria, tal como se han mencionado anteriormente en el presente documento o una fracción apropiada de las mismas, de un principio activo. Además, dichas composiciones farmacéuticas se pueden preparar por cualquiera de los procedimientos bien conocidos en la técnica de la farmacia.

Las composiciones farmacéuticas se pueden adaptar para administración por cualquier vía apropiada, por ejemplo, por las vías oral (incluyendo bucal o sublingual), rectal, nasal, tópica (incluyendo bucal, sublingual o transdérmica), vaginal o parenteral (incluyendo subcutánea, intramuscular, intravenosa o intradérmica). Dichas composiciones se pueden preparar por cualquier procedimiento conocido en la técnica de la farmacia, por ejemplo, poniendo en asociación el principio activo con el o los excipientes.

Cuando se adaptan para administración oral, las composiciones farmacéuticas pueden estar en unidades discretas tales como comprimidos o cápsulas; polvos o gránulos; soluciones o suspensiones en líquidos acuosos o no acuosos; espumas o cremas comestibles; emulsiones de aceite en agua o emulsiones de agua en aceite. El compuesto o la sal del mismo de la invención o la composición farmacéutica de la invención también puede incorporarse en una golosina, una oblea y/o formulación de cinta de lengua para su administración en forma de un medicamento de "disolución rápida".

Por ejemplo, para administración oral en forma de un comprimido o cápsula, el componente activo del fármaco se puede combinar con un vehículo inerte farmacéuticamente aceptable, no tóxico, oral, tal como etanol, glicerol, agua y similares. Los polvos o gránulos se preparan triturando el compuesto hasta un tamaño fino adecuado y mezclándolo con un vehículo farmacéutico triturado de forma similar tal como un carbohidrato comestible, tal como, por ejemplo, almidón o manitol. También pueden estar presentes agentes aromatizantes, conservantes, dispersantes y colorantes.

Las cápsulas se fabrican preparando una mezcla en polvo, tal como se ha descrito anteriormente y rellenando vainas de gelatina o no gelatinosas formadas. Los agentes deslizantes y lubricantes tales como sílice coloidal, talco, estearato de magnesio, estearato de calcio, polietilenglicol sólido, se pueden añadir a la mezcla en polvo antes de la operación de relleno. También se puede añadir un agente disgregante o solubilizante tal como agar-agar, carbonato de calcio o carbonato sódico para mejorar la disponibilidad del medicamento cuando se ingiere la cápsula.

Además, cuando se desee o sea necesario, también se pueden añadir a la mezcla aglutinantes, lubricantes, agentes disgregantes y agentes colorantes adecuados. Los aglutinantes adecuados incluyen almidón, gelatina, azúcares naturales, tales como glucosa o beta-lactosa, edulcorantes de maíz, gomas naturales y sintéticas tales como acacia, tragacanto, alginato de sodio, carboximetilcelulosa, polietilenglicol, ceras y similares. Los lubricantes usados en estas formas de dosificación incluyen oleato de sodio, estearato de sodio, estearato de magnesio, benzoato sódico, acetato de sodio, cloruro sódico y similares. Los disgregantes incluyen, sin limitación, almidón, metilcelulosa, agar, bentonita, goma de xantano y similares.

Los comprimidos se formulan, por ejemplo, preparando una mezcla en polvo, granulando o por doble compresión, añadiendo un lubricante y un disgregante y prensando en comprimidos. Una mezcla en polvo se prepara mezclando el compuesto, adecuadamente triturado, con un diluyente o base tal como se ha descrito anteriormente y, opcionalmente, con un aglutinante tal como carboximetilcelulosa y alginato, gelatina o polivinilpirrolidona, una solución retardante tal como parafina, un acelerador de reabsorción tal como una sal cuaternaria y/o un agente de absorción tal como bentonita, caolín o fosfato dicálcico. La mezcla en polvo se puede granular humedeciéndola con un aglutinante tal como jarabe, pasta de almidón, mucílago de acadia o soluciones de materiales celulósicos o poliméricos y forzándolos a través de un tamiz. Como alternativa a la granulación, la mezcla en polvo se puede procesar con la máquina de comprimidos y el resultado son lingotes de forma imperfecta que se rompen en gránulos. Los gránulos se pueden lubricar para prevenir que se peguen a las matrices formadoras de comprimidos mediante la adición de ácido esteárico, una sal de estearato, talco o aceite mineral. La mezcla lubricada se comprime después en comprimidos. El compuesto o sal de la presente invención también se puede combinar con un vehículo inerte que fluye libremente y comprimir directamente en comprimidos, sin pasar por las etapas de granulado o doble compresión. Se puede proporcionar un revestimiento protector opaco transparente que consiste en una capa selladora de goma laca, un recubrimiento de azúcar o material polimérico y un recubrimiento pulido de cera. Se pueden añadir colorantes a estos revestimientos para distinguir las distintas dosificaciones.

Los fluidos orales tales como soluciones, jarabes y elixires se pueden preparar en forma unitaria de dosificación de modo que una cantidad dada contiene una cantidad predeterminada de principio activo. Los jarabes se pueden preparar disolviendo el compuesto o una sal del mismo de la invención en una solución acuosa con un sabor adecuado, mientras que los elixires se preparan usando un vehículo alcohólico no tóxico. Las suspensiones se pueden formular dispersando el compuesto o sal de la invención en un vehículo no tóxico. Los solubilizantes y emulsionantes, tales como alcoholes de isoestearilo etoxilados y éteres de polioxietilensorbitol, conservantes, aditivos aromatizantes tales como aceite de menta, edulcorantes naturales, sacarina u otros edulcorantes artificiales y similares, se pueden añadir también.

Cuando sea apropiado, las formulaciones de dosificación unitaria para administración oral pueden estar microencapsuladas. La formulación también se puede preparar para prolongar o mantener la liberación como, por ejemplo, recubriendo o embebiendo el material particulado en polímeros, cera o similares.

En la presente invención, se prefieren los comprimidos y cápsulas para la administración de la composición farmacéutica.

De acuerdo con otro aspecto de la invención, se proporciona un procedimiento para la preparación de una composición farmacéutica que comprende mezclar (o combinar) un compuesto de fórmula (I) o una de sus sales con al menos un excipiente.

La presente invención también proporciona un procedimiento para tratar a un mamífero, en especial un ser humano. Los compuestos y composiciones de la invención se usan para tratar enfermedades de proliferación celular. Las patologías que se pueden tratar por los procedimientos y composiciones proporcionados en el presente documento incluyen, pero no se limitan a, cáncer (analizado con más detalle a continuación), enfermedad autoinmunitaria, trastornos fúngicos, artritis, rechazo de injerto, enfermedad inflamatoria intestinal, proliferación inducida después de procedimientos médicos, que incluyen, pero no se limitan a, cirugía, angioplastia y similares. Se aprecia que en algunos casos las células pueden no estar en un estado de hiper o hipo proliferación (estado anormal) y aun así requieren tratamiento. Por ejemplo, durante la curación de heridas, las células pueden estar proliferando "normalmente", pero puede ser deseable un aumento de la proliferación. Por lo tanto, en una realización, la invención del presente documento incluye la aplicación a células o individuos afectados o a punto de verse afectados con cualquiera de estos trastornos o patologías.

Las composiciones y procedimientos proporcionados en el presente documento se consideran particularmente útiles para el tratamiento de cáncer, incluyendo tumores tales como el de próstata, de pecho, cerebro, piel, carcinomas del cuello uterino, carcinomas testiculares, etc. Son particularmente útiles en el tratamiento de tumores metastásicos o malignos. Más particularmente, los cánceres que se pueden tratar por las composiciones y procedimientos de la invención incluyen, pero no se limitan a, clases de tumores tales como astrocítico, de pecho, de cuello uterino, colorrectal, de endometrio, de esófago, gástrico, de cabeza y cuello, hepatocelular, laríngeo, pulmón, oral, de ovario, de próstata y carcinomas y sarcomas de tiroides. Más específicamente, estos compuestos se pueden usar para tratar: cardíacos: sarcoma (angiosarcoma, fibrosarcoma, rabdomiosarcoma, liposarcoma), mixoma, rabdomioma, fibroma, lipoma y teratoma; de pulmón: carcinoma broncogénico (de células escamosas, microcítico indiferenciado, de células grandes indiferenciado, adenocarcinoma), carcinoma alveolar (bronquiolar), adenoma bronquial, sarcoma, linfoma, hamartoma condromatoso, mesotelioma; gastrointestinales: de esófago (carcinoma de células escamosas, adenocarcinoma, leiomiosarcoma, linfoma), de estómago (carcinoma, linfoma, leiomiosarcoma), de páncreas (adenocarcinoma ductal, insulinoma, glucagonoma, gastrinoma, tumores carcinoides, vipoma), del intestino delgado (adenocarcinoma, linfoma, tumores carcinoides, sarcoma de Karposi, leiomioma, hemangioma, lipoma, neurofibroma, fibroma), del intestino grueso (adenocarcinoma, adenoma tubular, adenoma velloso, hamartoma, leiomioma); del tracto genitourinario: riñón (adenocarcinoma, tumor de Wilm (nefroblastoma), linfoma, leucemia), vejiga y uretra (carcinoma de células escamosas, carcinoma de células de transición, adenocarcinoma), de próstata (adenocarcinoma, sarcoma), de testículos (seminoma, teratoma, carcinoma embrionario, teratocarcinoma, coriocarcinoma, sarcoma, carcinoma de células intersticiales, fibroma, fibroadenoma, tumores adenomatoides, lipoma); de hígado: hepatoma (carcinoma hepatocelular), colangiocarcinoma, hepatoblastoma, angiosarcoma, adenoma hepatocelular, hemangioma; del tracto biliar: carcinoma de vesícula biliar, carcinoma ampular, colangiocarcinoma; de hueso: sarcoma osteogénico (osteosarcoma), fibrosarcoma, histiocitoma fibroso maligno, condrosarcoma, sarcoma de Ewing, linfoma maligno (sarcoma de células reticulares), mieloma múltiple, cordoma maligno de tumor de células gigantes, osteocronfroma (exostosis osteocartilaginosa), condroma benigno, condroblastoma, condromixofibroma, osteoma osteoide y tumores de células gigantes; del sistema nervioso: cráneo (osteoma, hemangioma, granuloma, xantoma, osteitis deformante), meninges (meningioma, meningiosarcoma, gliomatosis), cerebro (astrocitoma, meduloblastoma, glioma, ependimoma, germinoma (pinealoma), glioblastoma multiforme, oligodendroglioma, schwannoma, retinoblastoma, tumores congénitos), neurofibroma de la médula espinal, meningioma, glioma, sarcoma); ginecológicos: útero (carcinoma endometrial), cuello uterino (carcinoma del cuello uterino, displasia de cuello uterino pretumoral), ovarios (carcinoma de ovarios (cistadenocarcinoma seroso, cistadenocarcinoma mucinoso, carcinoma sin clasificar), tumores de células de la granulosa-teca, tumores de células de Sertoli-Leydig, disgerminoma, teratoma maligno), vulva (carcinoma de células escamosas, carcinoma intraepitelial, adenocarcinoma, fibrosarcoma, melanoma), vagina (carcinoma de células claras, carcinoma de células escamosas, sarcoma botrioide (rabdomiosarcoma embrionario), trompas de falopio (carcinoma); hematológico: sangre (leucemia mieloide (aguda y crónica), leucemia linfoblástica aguda, leucemia linfocítica crónica, enfermedades mieloproliferativas, mieloma múltiple, síndrome mielodisplásico), enfermedad de Hodgkin, linfoma no de Hodgkin (linfoma maligno, linfoma difuso de linfocitos B grandes (LDLBG), linfoma folicular); de piel: melanoma maligno, carcinoma de células basales, carcinoma de células escamosas, sarcoma de Karposi, lunares displásicos, lipoma, angioma, dermatofibroma, queloides, psoriasis y de glándulas adrenales: neuroblastoma. Por lo tanto, la expresión "célula cancerosa" tal como se proporciona en el presente documento, incluye una célula afectada por una cualquiera de las afecciones identificadas anteriormente o una relacionada.

Los compuestos y composiciones de la invención se pueden usar también para tratar o curar la infección por el virus de inmunodeficiencia humana (VIH). En una realización, se proporciona un procedimiento para tratar la infección por VIH que comprende administrar a un paciente con VIH una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto de fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo. En otra realización, se proporciona un procedimiento para curar la infección por VIH que comprende administrar a un paciente con VIH una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto de fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo. En otra realización, se proporciona el uso de un compuesto de fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable o solvato del mismo, en la fabricación de un medicamento para su uso en el tratamiento de infección por HIV. En otra realización, se proporciona el uso de un compuesto de fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable o solvato del mismo, en la fabricación de un medicamento para su uso en la cura de infección por HIV. En otra realización, se proporciona un compuesto de fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo para su uso en el tratamiento de infección por VIH. En otra realización, se proporciona un compuesto de fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo para su uso en la cura de infección por VIH.

Los compuestos instantáneos se pueden combinar con o coadministrar con otros agentes terapéuticos, en particular agentes que pueden potenciar la actividad o tiempo de disposición de los compuestos. Las terapias de combinación de acuerdo con la invención comprenden la administración de al menos un compuesto de la invención y el uso de al menos otro procedimiento de tratamiento. En una realización, las terapias de combinación de acuerdo con la invención comprenden la administración de al menos un compuesto de la invención y terapia quirúrgica. En una realización, las terapias de combinación de acuerdo con la invención comprenden la administración de al menos un compuesto de la invención y radioterapia. En una realización, las terapias de combinación de acuerdo con la invención comprenden la administración de al menos un compuesto de la invención y al menos un agente de tratamiento de apoyo (por ejemplo, al menos un agente antiemético). En una realización, las terapias de combinación de acuerdo con la presente invención comprenden la administración de al menos un compuesto de la invención y al menos otro agente quimioterapéutico. En una realización particular, la invención comprende la administración de al menos un compuesto de la invención y al menos un agente antineoplásico. En otra realización más, la invención comprende un régimen terapéutico en el que los inhibidores de EZH2 de la presente divulgación no son en sí mismos ni por sí mismos activos o significativamente activos, pero cuando se combinan con otra terapia, que puede o no ser activa como terapia independiente, la combinación proporciona un proporciona un resultado terapéutico útil.

Por la expresión "coadministración" y derivados de la misma, tal como se usa en el presente documento, se refiere tanto a la administración simultánea como a cualquier manera de administración secuencial separada de un compuesto inhibidor de EZH2, tal como se describe en el presente documento y otro u otros principios activos, que se sabe que son útiles en el tratamiento del cáncer, incluyendo quimioterapia y tratamiento de radioterapia. La expresión otro u otros principios activos, tal como se usa en el presente documento, incluye cualquier compuesto o agente terapéutico conocido por o que demuestra propiedades ventajosas cuando se administra a un paciente que necesita tratamiento contra el cáncer. Preferentemente, si la administración no es simultánea, los compuestos se administran con una proximidad temporal cercana entre sí. Además, no importa si los compuestos se administran en la misma forma de dosificación, por ejemplo, un compuesto se puede administrar por vía tópica y otro compuesto se puede administrar por vía oral.

Habitualmente, cualquier agente antineoplásico que tiene actividad frente a un tumor susceptible de ser tratado, se puede coadministrar en el tratamiento contra el cáncer en la presente invención. Se pueden encontrar ejemplos de dichos agentes en Cancer Principles and Practice of Oncology de V. T. Devita, T. S. Lawrence y S. A. Rosenberg (editores), 10a edición (5 de diciembre de 2014), Lippincott Williams & Wilkins Publishers. Un experto habitual en la técnica será capaz de discernir qué combinaciones de agentes serían útiles basándose en las características particulares de los fármacos y el cáncer implicado. Los agentes antineoplásicos habituales útiles en la presente invención incluyen, pero no se limitan a, agentes antimicrotúbulos o antimitóticos; complejos de coordinación de platino; agentes alquilantes; agentes antibióticos; inhibidores de la topoisomerasa I; inhibidores de la topoisomerasa II; antimetabolitos; hormonas y análogos hormonales; inhibidores de la ruta de transducción de señal; inhibidores de la angiogénesis de tirosina cinasa no receptora; agentes inmunoterapéuticos; agentes proapoptóticos; inhibidores de la señalización del ciclo celular; inhibidores de proteasoma; inhibidores de proteína de choque térmico; inhibidores del metabolismo del cáncer y agentes de terapia génica contra el cáncer.

Los agentes antineoplásicos son ejemplos de otro u otros principios activos para su uso en combinación o coadministración con los presentes compuestos inhibidores de EZH2. Los ejemplos de agentes antineoplásicos incluyen, pero no se limitan a, agentes quimioterapéuticos; agentes inmunomoduladores; inmunomoduladores y adyuvantes inmunoestimuladores.

Los agentes antimicrotúbulos o antimitóticos son agentes específicos de fase activos contra los microtúbulos de células tumorales durante la fase M o de mitosis del ciclo celular. Los ejemplos de agentes antimicrotúbulos incluyen, pero sin limitación, diterpenoides y alcaloides de la vinca.

Los complejos de coordinación de platino son agentes anticancerosos no específicos de fase, que son interactivos con el ADN. Los complejos de platino entran en las células tumorales, sufren acuación y forman enlaces cruzados intracatenarios e intercatenarios con el ADN que causan efectos biológicos adversos para el tumor. Los ejemplos de complejos de coordinación de platino incluyen, pero sin limitación, cisplatino y carboplatino.

Los agentes alquilantes son agentes anticancerosos no específicos de fase y electrófilos fuertes. Habitualmente, los agentes alquilantes forman enlaces covalentes, por alquilación, con el ADN a través de restos nucleofílicos de la molécula de ADN, tal como grupos fosfato, amino, sulfhidrilo, hidroxilo, carboxilo e imidazol. Tal alquilación interrumpe la función del ácido nucleico que conduce a la muerte celular. Entre los ejemplos de agentes alquilantes se incluyen, pero sin limitación, mostazas nitrogenadas, tales como ciclofosfamida, melfalán y clorambucilo; alquilsulfonatos, tales como busulfán; nitrosoureas, tales como carmustina; y triazenos, tales como dacarbazina.

Los antibióticos antineoplásicos son agentes no específicos de fase, que se unen o se intercalan con el ADN. Esta acción interrumpe la función ordinaria de los ácidos nucleicos, que conduce a la muerte celular. Los ejemplos de antibióticos antineoplásicos incluyen, pero sin limitación, actinomicinas, tales como dactinomicina; antrociclinas, tales como daunorrubicina y doxorrubicina; y bleomicinas.

Los inhibidores de la topoisomerasa I incluyen, pero sin limitación, camptotecinas. Se cree que la actividad citotóxica de las camptotecinas está relacionada con su actividad inhibidora de la topoisomerasa I.

Los inhibidores de la topoisomerasa II incluyen, pero sin limitación, epipodofilotoxinas. Las epipodofilotoxinas son agentes antineoplásicos específicos de fase derivados de la planta de mandrágora. Las epipodofilotoxinas típicamente afectan a las células en las fases S y G² del ciclo celular al formar un complejo ternario con topoisomerasa II y ADN que causa la rotura de la cadena de ADN. Las roturas de la cadena se acumulan, y a ello le sigue la muerte celular. Los ejemplos de epipodofilotoxinas incluyen, pero sin limitación, etopósido y tenipósido.

Los agentes neoplásicos antimetabolitos son agentes antineoplásicos específicos de fase que actúan en la fase S (síntesis de ADN) del ciclo celular al inhibir la síntesis de ADN o al inhibir la síntesis de bases de purina o pirimidina y, por lo tanto, limitar la síntesis de ADN. Por consiguiente, la fase S no continúa y sigue la muerte celular. Los ejemplos de agentes antineoplásicos antimetabolitos incluyen, pero sin limitación, fluorouracilo, metotrexato, citarabina, mercaptopurina, tioguanina y gemcitabina.

Las hormonas y los análogos hormonales son compuestos útiles para tratar cánceres en los que existe una relación entre la o las hormonas y el crecimiento y/o la falta de crecimiento del cáncer. Los ejemplos de hormonas y análogos hormonales útiles en el tratamiento del cáncer incluyen, pero sin limitación, adrenocorticosteroides, tales como dexametasona, prednisona y prednisolona; aminoglutetimida y otros inhibidores de la aromatasa, tales como anastrozol, letrazol, vorazol y exemestano; progestrinas, tales como acetato de megestrol; estrógenos, andrógenos y antiandrógenos, tales como flutamida, nilutamida, bicalutamida, acetato de ciproterona y 5a-reductasas, tales como finasterida y dutasterida; antiestrógenos, tales como tamoxifeno, toremifeno, raloxifeno, droloxifeno, yodoxifeno, así como moduladores selectivos del receptor de estrógenos (SERMS); y hormona liberadora de gonadotropina (GnRH) y análogos de la misma, que estimulan la liberación de la hormona luteinizante (LH) y/o la hormona folículo estimulante (FSH), Agonistas y antagonistas de LHRH, tales como acetato de goserelina y leuprolida.

Los inhibidores de la vía de transducción de señales son esos inhibidores, que bloquean o inhiben un proceso químico que provoca un cambio intracelular. Tal como se usa en el presente documento, este cambio es la proliferación o diferenciación celular. Los inhibidores de la transducción de señales útiles en la presente invención incluyen, pero sin limitación, inhibidores de las tirosina quinasas receptoras, tirosina quinasas no receptoras, bloqueadores del dominio SH2/SH3, serina/treonina quinasas, fosfatidil inositol-3 quinasas, señalización de mioinositol y oncogenes Ras.

Varias proteínas tirosina quinasas catalizan la fosforilación de residuos específicos de tirosilo en diversas proteínas implicadas en la regulación del crecimiento celular. Dichas proteínas tirosina quinasas pueden clasificarse ampliamente como quinasas receptoras o no receptoras.

Las tirosina quinasas receptoras son proteínas transmembrana que tienen un dominio de unión a ligando extracelular, un dominio transmembrana y un dominio de tirosina quinasa. Los receptores de tirosina quinasas están implicados en la regulación del crecimiento celular y generalmente se denominan receptores del factor de crecimiento. La activación inapropiada o incontrolada de muchas de estas quinasas, es decir, actividad aberrante del receptor del factor de crecimiento de quinasa, por ejemplo por sobreexpresión o mutación, se ha demostrado que produce un crecimiento celular incontrolado. Por consiguiente, la actividad aberrante de tales quinasas se ha relacionado con el crecimiento de tejido maligno. Por consiguiente, los inhibidores de tales quinasas podrían proporcionar procedimientos de tratamiento del cáncer. Los receptores del factor de crecimiento incluyen, por ejemplo, receptor de factor de crecimiento epidérmico (EGFR), receptor del factor de crecimiento derivado de plaquetas (PDGFr), erbB2, erbB4, receptor del factor de crecimiento endotelial vascular (VEGFR), tirosina quinasa con dominios de homología del factor de crecimiento epidérmico y de tipo inmunoglobulina (TIE-2), receptor del factor de crecimiento de insulina-I (IGFI), factor estimulante de colonias de macrófagos Cfms), BTK, ckit, cmet, receptores del factor de crecimiento de fibroblastos (FGF), receptores Trk (TrkA, TrkB y TrkC), receptores de efrina (eph) y el protooncogén RET. Varios inhibidores de los receptores de crecimiento están en desarrollo e incluyen antagonistas de ligandos, anticuerpos, inhibidores de tirosina quinasa y oligonucleótidos antisentido. Se describen los receptores del factor de crecimiento y agentes que inhiben la función del receptor del factor de crecimiento, por ejemplo, en Kath J.C., Exp. Opin. Ther. Patents, 10(6):803-818 (2000); Shawver L.K., y col., Drug Discov. Today, 2(2): 50-63 (1997); y Lofts, F. J. y Gullick W.J., "Growth factor receptors as targets" en New Molecular Targets for Cancer Chemotherapy, Kerr D.J. y Workman P. (editores), (June 27, 1994), CRC Press. Ejemplos no limitantes de inhibidores del receptor del factor de crecimiento incluyen pazopanib y sorafenib.

Las tirosina quinasas, que no son quinasas receptoras del factor de crecimiento, se denominan tirosina quinasas no receptoras. Las tirosina quinasas no receptoras útiles en la presente invención, que son objetivos u objetivos potenciales de los fármacos contra el cáncer, incluyen cSrc, Lck, Fyn, Yes, Jak, cAbl, FAK (quinasa de adhesión focal), tirosina quinasa de Bruton y Bcr-Abl. Tales quinasas no receptoras y agentes que inhiben la función de la tirosina quinasa no receptora se describen en Sinha S. y Corey S.J., J. Hematother. Stem Cell Res., 8(5): 465-480 (2004) y Bolen, J.B., Brugge, J.S., Annu. Rev. Immunol., 15: 371-404(1997).

Los bloqueadores del dominio SH2/SH3 son agentes que interrumpen la unión del dominio SH2 o SH3 en diversas enzimas o proteínas adaptadoras que incluyen, subunidad p85 PI3-K, familia quinasas Src, moléculas adaptadoras (Shc, Crk, Nck, Grb2) y Ras-GAP. Los dominios SH2/SH3 como objetivos para fármacos contra el cáncer se tratan en Smithgall T.E., J. Pharmacol. Toxicol. Methods, 34(3): 125-32 (1995).

Los inhibidores de serina/treonina quinasas incluyen, pero sin limitación, bloqueadores de cascada de MAP quinasa que incluyen bloqueadores de las Raf quinasas (rafk), quinasa regulada extracelular o por mitógenos (MEK) y quinasas reguladas extracelulares (ERK); bloqueadores de los miembros de la familia de la proteína quinasa C, incluidos los bloqueadores de las PKC (alfa, beta, gamma, épsilon, mu, lambda, iota, zeta); IkB quinasas (IKKa, IKKb); quinasas de la familia PKB; miembros de la familia AKT quinasa; quinasas receptoras de TGF beta; e inhibidores de la diana de rapamicina de mamífero (mTOR), incluyendo, pero sin limitaciones, rapamicina (FK506) y rapalogs, RAD001 o everolimus (AFINITOR®), CCI-779 o temsirolimus, AP23573, AZD8055, WYE-354, WYE-600, WYE-687 y Pp121. Los ejemplos de inhibidores de serina/treonina quinasas incluyen, pero sin limitación, trametinib, dabrafenib e inhibidores de Akt afuresertib y N-{(1S)-2-amino-1-[(3,4-difluorofenil)metil]etil}-5-cloro-4- (4-cloro-1-metil-1H- pirazol-5-il)-2-furancarboxamida.

Los inhibidores de los miembros de la familia de fosfatidil inositol 3-quinasa, incluidos los bloqueadores de PI3-quinasa, ATM, DNA-PK y Ku también son útiles en la presente invención. Tales quinasas se tratan en Abraham R.T., Curr. Opin. Immunol., 8(3): 412-418 (1996); Canman C.E. y Lim D.S., Oncogene, 17(25): 3301-3308 (1998); Jackson S.P., Int. J. Biochem. Cell Biol., 29(7): 935-938 (1997); y Zhong H., y col., Cancer Res., 60(6): 1541-1545 (2000).

También son útiles en la presente invención los inhibidores de señalización de mioinositol, tales como bloqueadores de la fosfolipasa C y análogos de mioinositol. Dichos inhibidores de señal se describen en Powis G. y Kozikowski A., "Inhibitors of Myo-Inositol Signaling" in New Molecular Targets for Cancer Chemotherapy, Kerr D.J. y Workman P. (editores), (June 27, 1994), CRC Press.

Otro grupo de inhibidores de la vía de transducción de señales son los inhibidores del oncogén Ras. Tales inhibidores incluyen inhibidores de farnesiltransferasa, geranil-geranil transferasa y proteasas CAAX, así como oligonucleótidos antisentido, ribozimas y otras inmunoterapias. Se ha demostrado que dichos inhibidores bloquean la activación de ras en células que contienen mutante ras de tipo salvaje, actuando así como agentes antiproliferación. La inhibición del oncogén Ras se analiza en Scharovsky O.G., y col., J. Biomed. Sci., 7(4): 292-298 (2000); Ashby M.N., Curr. Opin. Lipidol., 9(2): 99-102 (1998); y Bennett C.F. y Cowsert L.M., Biochim. Biophys. Acta., 1489(1): 19-30 (1999).

Los antagonistas de la unión del ligando receptor quinasa también pueden servir como inhibidores de la transducción de señal. Este grupo de inhibidores de la vía de transducción de señal incluye el uso de anticuerpos humanizados u otros antagonistas del dominio de unión al ligando extracelular de las tirosina quinasas receptoras. Los ejemplos de anticuerpos u otros antagonistas para la unión al ligando de la quinasa receptora incluyen, pero sin limitación, cetuximab (ERBITUX®), trastuzumab (HERCEPTIN®); trastuzumab emtansina (KADCYLA®); pertuzumab (PERJETA®); inhibidores de ErbB, incluidos lapatinib, erlotinib y gefitinib; y el anticuerpo específico de ² C³ VEGFR2 (véase Brekken R.A., y col., Cancer Res., 60(18): 5117-5124 (2000)).

Los inhibidores de la angiogénesis de la quinasa no receptora también pueden encontrar uso en la presente invención. Los inhibidores de VEGFR y TIE2 relacionados con la angiogénesis se han tratado anteriormente con respecto a los inhibidores de la transducción de señal (ambos receptores son tirosina quinasas receptoras). La angiogénesis en general está vinculada a la señalización de erbB2/EGFR ya que se ha demostrado que los inhibidores de erbB2 y EGFR inhiben la angiogénesis, principalmente la expresión de VEGF. Por consiguiente, los inhibidores de la tirosina quinasa no receptora pueden usarse en combinación con los inhibidores de EGFR/erbB2 de la presente invención. Por ejemplo, anticuerpos anti-VEGFR, que no reconocen el VEGFR (el receptor tirosina quinasa), pero se unen al ligando; inhibidores de molécula pequeña de la integrina (a lfa betas) que inhibirán la angiogénesis; la endostatina y la angiostatina (no RTK) también pueden resultar útiles en combinación con los compuestos desvelados. (Véase Bruns C.J., y col., Cancer Res., 60(11): 2926-2935 (2000); Schreiber A.B., y col., Science, 232(4755): 1250-1253 (1986); Yen L., y col., Oncogene, 19(31): 3460-3469 (2000)).

Los agentes utilizados en regímenes inmunoterapéuticos también pueden ser útiles en combinación con los compuestos de fórmula (I). Existen varias estrategias inmunológicas para generar una respuesta inmunitaria contra erbB2 o EGFR. Estas estrategias están generalmente en el ámbito de las vacunas tumorales. La eficacia de los enfoques inmunológicos puede mejorarse considerablemente mediante la inhibición combinada de las vías de señalización de erbB2/EGFR utilizando un inhibidor de molécula pequeña. La discusión del enfoque de la vacuna inmunológica/tumoral contra erbB2/EGFR se encuentra en Reilly R.T., y col., Cancer Res., 60(13): 3569-3576 (2000); y Chen Y., y col., Cancer Res., 58(9): 1965-1971 (1998).

Los agentes usados en los regímenes proapoptóticos (por ejemplo, oligonucleótidos antisentido Bcl-2) también se pueden usar en la combinación de la presente invención. Los miembros de la familia de proteínas Bcl-2 bloquean la apoptosis. Por lo tanto, la regulación por aumento de Bcl-2 se ha relacionado con la quimiorresistencia. Los estudios han demostrado que el factor de crecimiento epidérmico (EGF) estimula los miembros antiapoptóticos de la familia de Bcl-2 (es decir, Mcl-1). Por lo tanto, las estrategias diseñadas para regular por disminución la expresión de Bcl-2 en tumores han demostrado beneficio clínico. Dichas estrategias proapoptóticas que utilizan la estrategia de oligonucleótidos antisentido para Bcl-2 se analizan en Waters J.S., y col., J. Clin. Oncol., 18(9): 1812-1823 (2000); y Kitada S., y col., Antisense Res. Dev., 4(2): 71-79 (1994). Los ejemplos de inhibidores de molécula pequeña de Bcl-2 incluyen, pero sin limitaciones, venetoclax.

Los inhibidores de señalización del ciclo celular inhiben las moléculas implicadas en el control del ciclo celular. Una familia de proteínas quinasas llamadas quinasas dependientes de ciclina (CDK) y su interacción con una familia de proteínas denominadas ciclinas controla la progresión a través del ciclo celular eucariota. La activación e inactivación coordinada de diferentes complejos de ciclina/CDK es necesaria para la progresión normal a través del ciclo celular. Varios inhibidores de la señalización del ciclo celular están en desarrollo. Por ejemplo, los ejemplos de quinasas dependientes de ciclina, incluyendo CDK2, CDK4 y CDK6 e inhibidores para los mismos se describen en, por ejemplo, Rosania G.R. y Chang Y.T., Exp. Opin. Ther. Patents, 10(2): 215-230 (2000). Además, se ha descrito que p21WAF1/CIP1 es un inhibidor potente y universal de las quinasas dependientes de ciclina (Cdks) (Ball K.L., Prog. Cell Cycle Res., 3: 125-134 (1997)). Los compuestos que se sabe que inducen la expresión de p21WAF1/CIP1 se han implicado en la supresión de la proliferación celular y tienen actividad supresora de tumores (Richon V.M., y col., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 97(18): 10014-10019 (2000)) y se incluyen como inhibidores de señalización del ciclo celular. Los inhibidores de la histona desacetilasa (HDAC) están implicados en la activación transcripcional de p21WAF1/CIP1 (Vigushin D.M. y Coombes R.C., Anticancer Drugs, 13(1): 1-13 (2002)), y son inhibidores de señalización del ciclo celular adecuados para su uso en combinación en el presente documento. Los ejemplos de tales inhibidores de HDAC incluyen, pero sin limitación, vorinostat, romidepsina, panobinostat, ácido valproico y mocetinostat.

Los inhibidores del proteasoma son fármaco que bloquean la acción de los proteasomas, complejos celulares que descomponen las proteínas, como la proteína p53. Se comercializan varios inhibidores del proteasoma o se están estudiando para el tratamiento del cáncer. Los inhibidores del proteasoma adecuados para su uso en combinación en el presente documento incluyen, pero sin limitación, bortezomib, disulfiram, galato de epigalocatequina, salinosporamida A y carfilzomib.

Las proteínas del choque térmico de 70 kilodalton (Hsp70s) y las proteínas del choque térmico de 90 kilodalton (Hsp90s) son una familia de proteínas del choque térmico expresadas de forma ubicua. Hsp70s y Hsp90s se sobreexpresan en ciertos tipos de cáncer. Se están estudiando varios inhibidores de Hsp70 y Hsp90 en el tratamiento del cáncer. Los ejemplos de inhibidores de Hsp70 y Hsp90 para su uso en combinación en el presente documento incluyen, pero sin limitación, tanespimicina y radicicol.

Muchas células tumorales muestran un metabolismo notablemente diferente del de los tejidos normales. Por ejemplo, la tasa de glucólisis, el proceso metabólico que convierte la glucosa en piruvato, se incrementa, y el piruvato generado se reduce a lactato, en lugar de oxidarse aún más en las mitocondrias a través del ciclo del ácido tricarboxílico (TCA). Este efecto a menudo se ve incluso en condiciones aeróbicas y se conoce como el efecto Warburg.

La lactato deshidrogenasa A (LDH-A), una isoterma de lactato deshidrogenasa expresada en células musculares, desempeña un papel fundamental en el metabolismo de las células tumorales al realizar la reducción de piruvato a lactato, que luego se puede exportar fuera de la célula. Se ha demostrado que la enzima está regulada por incremento en muchos tipos de tumores. La alteración del metabolismo de la glucosa descrita en el efecto Warburg es crucial para el crecimiento y la proliferación de las células cancerosas y se ha demostrado que la eliminación de LDH-A usando ARN-i conduce a una reducción en la proliferación celular y el crecimiento tumoral en modelos de xenoinjerto (Tennant DA, y col., Nat. Rev. Cancer, 10(4): 267-277 (2010); Fantin V.R., y col., Cancer Cell, 9(6): 425-434 (2006)).

Se han observado niveles altos de ácido graso sintasa (FAS) en las lesiones precursoras del cáncer. La inhibición farmacológica de FAS afecta a la expresión de oncogenes clave implicados tanto en el desarrollo como en el mantenimiento del cáncer. Alli P.M., y col., Oncogene, 24(1): 39-46 (2005).

Los inhibidores del metabolismo del cáncer, incluidos los inhibidores de LDH-A y los inhibidores de la biosíntesis de ácidos grasos (o inhibidores de FAS), son adecuados para su uso en combinación en el presente documento. La terapia génica contra el cáncer implica la transferencia selectiva de ADN/ARN recombinante utilizando vectores de administración de genes virales o no virales para modificar las células cancerosas con fines terapéuticos. Los ejemplos de terapia génica para el cáncer incluyen, pero sin limitación, suicidio y las terapias génicas oncolíticas, así como terapias de linfocitos T adoptivos.

Tal como se usa en el presente documento, los "inmunomoduladores" se refieren a cualquier sustancia que incluye anticuerpos monoclonales que afectan el sistema inmunitario. Los inmunomoduladores pueden usarse como agentes antineoplásicos para el tratamiento del cáncer. Por ejemplo, los inmunomoduladores incluyen, pero sin limitación, anticuerpos u otros antagonistas de CTLA-4, tales como ipilimumab (YERVOY®) y PD-1, tal como nivolumab (OPDIVO®) y pembrolizumab (KEYTRUDA®). Otros inmunomoduladores incluyen, pero sin limitación, anticuerpos u otros antagonistas de PD-L1, OX-40, LAG3, TIM-3, 41BB y GITR.

Tal como se usa en el presente documento, "antagonista de PD-1" significa cualquier compuesto químico o molécula biológica que bloquea la unión de PD-L1 expresada en una célula cancerosa a PD-1 expresada en una célula inmunitaria (linfocito T, linfocito B o célula NKT) y, preferentemente, también bloquea la unión de PD-L2 expresado en una célula cancerosa a la PD-1 expresada en células inmunitarias. Los nombres o sinónimos alternativos para PD-1 y sus ligandos incluyen: PDCD1, PD1, CD279 y SLEB2 para PD-1; PDCD1L1, PDL1, B7H1, B7-4, CD274 y B7-H para PD-L1; y PDCD1L2, PDL2, B7-DC, Btdc y c D273 para PD-L2. Las secuencias de aminoácidos de PD-1 humana se pueden encontrar en el locus de NCBI n.°: NP_005009. Las secuencias de aminoácidos de PD-L1 y PD-L2 humanas se pueden encontrar en el locus de NCBI n.°: NP_054862 y NP_079515, respectivamente. Los antagonistas de PD-1 útiles en cualquiera de los aspectos de la presente invención incluyen un anticuerpo monoclonal (mAb), o un fragmento de unión a antígeno del mismo, que se une específicamente a PD-1 o PD-L1, y, preferentemente se une específicamente a PD-1 humana o PD-L1 humano. El mAb puede ser un anticuerpo humano, un anticuerpo humanizado o un anticuerpo quimérico, y puede incluir una región constante humana. En algunas realizaciones, la región constante humana se selecciona del grupo que consiste en las regiones constantes de IgG1, IgG2, IgG3 e IgG4, y, en realizaciones preferentes, la región constante humana es una región constante de IgG1 o IgG4. En algunas realizaciones, el fragmento de unión al antígeno se selecciona del grupo que consiste en Fab, Fab'-SH, F(ab')2, fragmentos scFv y Fv. Ejemplos de mAb que se unen a PD-1 humana y útiles en los diversos aspectos y realizaciones de la presente invención, se describen en la patente de Estados Unidos n.° 8,552,154; la patente de Estados Unidos n.° 8,354,509; la patente de Estados Unidos n.° 8,168,757; la patente de Estados Unidos n.° 8,008,449; la patente de Estados Unidos n.° 7,521,051; la patente de Estados Unidos n.° 7,488,802; los documentos WO2004072286; WO2004056875; y WO2004004771.

Otros antagonistas de PD-1 útiles en cualquiera de los aspectos y realizaciones de la presente invención incluyen una inmunoadhesina que se une específicamente a PD-1, y, preferentemente, se une específicamente a PD-1 humana, por ejemplo, una proteína de fusión que contiene la porción extracelular o de unión a PD-1 de PD-L1 o PD-L2 fusionada a una región constante, tal como una región Fc de una molécula de inmunoglobulina. Los ejemplos de moléculas de inmunoadhesina que se unen específicamente a PD-1 se describen en los documentos WO2010027827 y WO2011066342. Las proteínas de fusión específicas útiles como antagonista de PD-1 en el procedimiento de tratamiento, fármacos y usos de la presente invención incluyen AMP-224 (también conocido como B7-DCIg), que es una proteína de fusión PD-L2-FC y se une a la PD-1 humana.

Nivolumab es un anticuerpo monoclonal anti-PD-1 humanizado disponible comercialmente como OPDIVO®. El nivolumab está indicado para el tratamiento de algunos melanomas no resecables o metastásicos. El nivolumab se une y bloquea la activación de PD-1, una proteína transmembrana de la superfamilia de Ig, por sus ligandos PD-L1 y PD-L2, lo que da como resultado la activación de linfocitos T y respuestas inmunitarias mediadas por células contra células tumorales o patógenos. La PD-1 activada regula negativamente la activación de los linfocitos T y la función efectora mediante la supresión de la activación de la vía P13k/Akt. Otros nombres para nivolumab incluyen: BMS-936558, MDX-1106 y ONO-4538. La secuencia de aminoácidos para nivolumab y los procedimientos de uso y fabricación se desvelan en la patente de Estados Unidos N. US 8,008,449.

El pembrolizumab es un anticuerpo monoclonal anti-PD-1 humanizado disponible comercialmente como KEYTRUDA®. Pembrolizumab está indicado para el tratamiento de algunos melanomas no resecables o metastásicos. La secuencia de aminoácidos de pembrolizumab y los procedimientos de uso se desvelan en la patente de Estados Unidos n.° 8.168.757.

Los anticuerpos anti-PD-LI y los procedimientos para fabricarlos son conocidos en la técnica. Tales anticuerpos contra PD-L1 pueden ser policlonales o monoclonales, y/o recombinantes, y/o humanizados. Los anticuerpos PD-L1 están en desarrollo como agentes inmunomoduladores para el tratamiento del cáncer.

Los anticuerpos anti-PD-LI de ejemplo se desvelan en la patente de Estados Unidos n.° 9,212,224; la patente de Estados Unidos n.° 8,779,108; la patente de Estados Unidos n.° 8,552,154; la patente de Estados Unidos n.° 8,383,796; la patente de Estados Unidos n.° 8,217,149; la publicación de patente de Estados Unidos n.° 20110280877; el documento WO2013079174; y e documento WO2013019906. Los anticuerpos de ejemplo adicionales para PD-L1 (también denominados CD274 o B7-H1) y los procedimientos para su uso se desvelan en la patente de Estados Unidos N.° 8,168,179; la patente de Estados Unidos n.° 7,943,743; la patente de Estados Unidos n.° 7,595,048; el documento WO2014055897; el documento WO2013019906; y e documento WO2010077634. Los anticuerpos monoclonales anti-PD-L1 humano específicos útiles como antagonistas de PD-1 en el procedimiento de tratamiento, medicamentos y usos de la presente invención incluyen MPDL3280A, BMS-936559, MEDI4736, MSB0010718C.

Atezolizumab es un anticuerpo monoclonal anti-PD-Ll completamente humanizado disponible comercialmente como TECENTRIQ™. Atezolizumab está indicado para el tratamiento de algunos carcinomas uroteliales localmente avanzados o metastásicos. Atezolizumab bloquea la interacción de PD-L1 con PD-1 y CD80.

CD134, también conocido como OX40, es un miembro de la superfamilia de receptores TNFR que no se expresa constitutivamente en los linfocitos T intactos en reposo, a diferencia de CD28. OX40 es una molécula coestimuladora secundaria, que se expresa de 24 a 72 horas después de la activación; su ligando, OX40L, tampoco se expresa en las células presentadoras de antígeno en reposo, sino después de su activación. La expresión de OX40 depende de la activación completa del linfocito T; sin CD28, la expresión de OX40 es retardada y a niveles cuatro veces más bajos. Los anticuerpos OX-40, las proteínas de fusión OX-40 y los procedimientos para usarlos se desvelan en las patentes de Estados Unidos: US 7,504,101; US 7,758,852; US 7,858,765; US 7,550,140; US 7,960,515; el documento WO2012027328; WO2013028231.

Ejemplos adicionales de un principio o principios activos adicionales (agente antineoplásico) para su uso en combinación o coadministrado con los compuestos inhibidores de EZH2 de la presente invención son anticuerpos u otros antagonistas de CD20, retinoides u otros inhibidores de quinasas. Los ejemplos de tales anticuerpos o antagonistas incluyen, pero sin limitación, rituximab (RITUXAN® y MABTHERA®), ofatumumab (ARZERRA®) y bexaroteno (TARGRETIN®). Los anticuerpos o antagonistas de este tipo pueden combinarse adicionalmente con otros agentes activos, incluidos agentes alquilantes, agentes antineoplásicos antibióticos (tales como agentes intercalantes), otros agentes antineoplásicos (tales como alcaloides de la vinca) y adrenocorticosteroides. Por ejemplo, tal combinación puede incluir rituximab, ciclofosfamida, doxorrubicina, vincristina y prednisona (R-CHOP).

Ejemplos adicionales de un principio o principios activos adicionales (agente antineoplásico) para su uso en combinación o coadministrado con los compuestos inhibidores de EZH2 de la presente invención son los antagonistas del receptor 4 de tipo Toll (TLR4), incluidos, pero sin limitación, los fosfatos de aminoalquil glucosaminida (AGP).

Se sabe que los AGP son útiles como adyuvantes de vacunas y agentes inmunoestimuladores para estimular la producción de citocinas, activación de macrófagos, estimulación de la respuesta inmunitaria innata y aumento de la producción de anticuerpos en animales inmunizados. Los AGP son ligandos sintéticos de TLR4. Los AGP y sus efectos inmunomoduladores a través de TLR4 se desvelan en publicaciones de patentes, tales como los documentos WO 2006016997, WO 2001090129, y/o la patente de los Estados Unidos n.° 6,113,918 y se han notificado en la literatura. Otros derivados de AGP se desvelan en la patente de Estados Unidos N.° 7,129,219, la patente de Estados Unidos n.° 6,911,434 y la patente de Estados Unidos n.° 6,525,028. Ciertos AGP actúan como agonistas de TLR4, mientras que otros son reconocidos como antagonistas de TLR4.

Ejemplos no limitantes adicionales de un principio o principios activos adicionales (agente antineoplásico) para su uso en combinación o coadministrado con los compuestos inhibidores de EZH2 de la presente invención son los anticuerpos contra ICOS.

Las CDR para anticuerpos murinos contra ICOS humanos que tienen actividad agonista se muestran en la PCT/EP2012/055735 (w O 2012131004). Los anticuerpos frente a ICOS también se desvelan en los documentos WO 2008137915, WO 2010056804, EP 1374902, EP1374901 y EP1125585.

Ejemplos no limitantes adicionales de un principio o principios activos adicionales (agente antineoplásico) para su uso en combinación o coadministrado con los compuestos inhibidores de EZH2 de la presente invención son compuestos moduladores de STING, inhibidores de CD39 y antagonistas de adenosina A2a y A2a.

Determinados agentes antineoplásicos que pueden usarse en combinación con un compuesto de Fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, incluyen, pero sin limitación: abarelix, abemaciclib, abiraterona, afatinib, aflibercept, aldoxorrubicina, alectinib, alemtuzumab, trióxido de arsénico, asparaginasa, axitinib, AZD-9291, belinostat, bendamustina, bevacizumab, blinatumomab, bosutinib, brentuximab vedotina, cabazitaxel, cabozantinib, capecitabina, ceritinib, clofarabina, cobimetinib, crizotinib, daratumumab, dasatinib, degarelix, denosumab, dinutuximab, docetaxel, elotuzumab, entinostat, enzalutamida, epirrubicina, eribulina, filgrastim, flumatinib, fulvestrant, fruquintinib, gemtuzumab ozogamicina, ibritumomab, ibrutinib, idelalisib, imatinib, irinotecán, ixabepilona, ixazomib, lenalidomida, lenvatinib, leucovorina, mecloretamina, necitumumab, nelarabina, netupitant, nilotinib, obinutuzumab, olaparib, omacetaxina, osimertinib, oxaliplatino, paclitaxel, palbociclib, palonosetrón, panitumumab, pegfilgrastim, peginterferón alfa-2b, pemetrexed, plerixafor, pomalidomida, ponatinib, pralatrexato, quizartinib, radio-223, ramucirumab, regorafenib, rolapitant, rucaparib, sipuleucel-T, sonidegib, sunitinib, talimogene laherparepvec, tipiracilo, topotecán, trabectedina, trifluridina, triptorelina, uridina, vandetanib, velaparib, vemurafenib, venetoclax, vincristina, vismodegib y ácido zoledrónico.

Además, los compuestos de Fórmula (I) pueden usarse en combinación con uno o más agentes que pueden ser útiles en el tratamiento o cura del VIH.

Entre los ejemplos de dichos agentes se incluyen, pero sin limitación:

Inhibidores nucleotídicos de la transcriptasa inversa, tales como zidovudina, didanosina, lamivudina, zalcitabina, abacavir, estavudina, adefovir, adefovir dipivoxilo, fozivudina, todoxilo, emtricitabina, alovudina, amdoxovir, elvucitabina y agentes similares;

inhibidores no nucleotídicos de la transcriptasa inversa (incluido un agente que tiene actividad antioxidante, tal como inmunocal, oltipraz, etc.) tal como nevirapina, delavirdina, efavirenz, lovirida, inmunocal, oltipraz, capravirina, lersivirina, GSK2248761, TMC-278, TMC-125, etravirina y agentes similares;

inhibidores de la proteasa, tales como saquinavir, ritonavir, indinavir, nelfinavir, amprenavir, fosamprenavir, brecanavir, darunavir, atazanavir, tipranavir, palinavir, lasinavir y agentes similares;

inhibidores de la entrada, unión y fusión.tales como enfuvirtida (T-20), T-1249, PRO-542, PRO-140, TNX-355, BMS-806, BMS-663068 y BMS-626529, 5-Helix y agentes similares;

inhibidores de la integrasa, tales como raltegravir, elvitegravir, dolutegravir, cabotegravir y agentes similares; inhibidores de la maduración, tales como PA-344 y PA-457, y agentes similares; e

inhibidores de CXCR4 y/o CCR5, tales como vicriviroc (Sch-C), Sch-D, TAK779, maraviroc; (UK 427.857), TAK449, así como los desvelados en los documentos WO 02/74769,

WO2004/054974, WO2004/055012, WO2004/055010, WO2004/055016, WO2004/055011 y WO2004/054581, y agentes similares.

Otros ejemplos en los que los compuestos de la presente invención pueden usarse en combinación con uno o más agentes útiles en la prevención o el tratamiento del VIH se encuentran en la Tabla 1.

Tabla 1:

continuación

El ámbito de las combinaciones de los compuestos de la presente invención con agentes para el VIH no se limita a los mencionados anteriormente, sino que incluye en principio cualquier combinación con cualquier composición farmacéutica útil para la cura o el tratamiento del VIH. Como se indica, en dichas combinaciones los compuestos de la presente invención y otros agentes para el VIH se pueden administrar por separado o de manera conjunta. Además, un agente puede ser anterior a, concurrente con o posterior a la administración de otro u otros agentes.

Los compuestos de la presente invención se pueden usar junto con uno o más agentes útiles como potenciadores farmacológicos así como con o sin compuestos adicionales para la prevención o tratamiento del VIH. Los ejemplos de dichos potenciadores farmacológicos (o potenciadores farmacocinéticos) incluyen, pero no se limitan a, ritonavir, GS-9350 y SPI-452. Ritonavir es ácido 10-hidroxi-2-metil-5-(1-metiletil)-1-1[2-(1-metiletil)-4-tiazolil]-3,6-dioxo-8,11-bis(fenilmetil)-2,4,7,12-tetraazatridecan-13-oico, éster de 5-tiazolilmetilo, [5S-(5S*,8R*,10R*,11R*)] y está disponible en Abbott Laboratories de Abbott park, Illinois, como Norvir. Ritonavir es un inhibidor de la proteasa del VIH con otros agentes antirretrovirales para el tratamiento de la infección por HIV. Ritonavir también inhibe el metabolismo del fármaco mediado por P450 así como el sistema de transporte celular de la P-glicoproteína (Pgp), dando así como resultado mayores concentraciones de compuesto activo dentro del organismo. GS-9350 es un compuesto que está siendo desarrollado por Gilead Sciences of Foster City California como un potenciador farmacológico. SPI-452 es un compuesto que está siendo desarrollado por Sequoia Pharmaceuticals of Gaithersburg, Mariland, como un potenciador farmacológico.

En el presente documento se proporcionan procedimientos para el tratamiento o prevención de afecciones y enfermedades autoinmunes e inflamatorias que pueden mejorar inhibiendo EZH1 y/o EZH2 y por lo tanto, por ejemplo, modulan el nivel de expresión los genes diana activados por metilación y reprimidos por metilación o modulan la actividad de las proteínas de señalización. Un procedimiento puede comprender administrar a un ser humano, por ejemplo un ser humano que no necesita, una cantidad terapéuticamente eficaz de un agente descrito en el presente documento.

La inflamación representa un grupo de respuestas vasculares, celulares y neurológicas a un trauma. La inflamación se puede caracterizar como el movimiento de las células inflamatorias tales como monocitos, neutrófilos y granulocitos a los tejidos. Esto normalmente está asociado con función reducida de la barrera endotelial y edema dentro de los tejidos. La inflamación se puede clasificar en aguda o crónica. La inflamación aguda es la respuesta inicial del cuerpo a estímulos dañinos y se consigue mediante el aumento del movimiento del plasma y los leucocitos desde la sangre hasta los tejidos dañados. Una cascada de eventos bioquímicos se propaga y madura la respuesta inflamatoria, que implica al sistema vascular local, el sistema inmunológico y diversas células dentro del tejido lesionado. La inflamación prolongada, conocida como inflamación crónica, conduce a un cambio progresivo del tipo de células que están presentes en el lugar de la inflamación y que se caracteriza por la destrucción y curación simultáneas del tejido durante el proceso inflamatorio.

Cuando se produce como parte de una respuesta inmunitaria a una infección o como respuesta aguda a un traumatismo, la inflamación puede ser beneficiosa y normalmente es autolimitante. Sin embargo, la inflamación puede ser perjudicial en diversas condiciones. Estas incluyen la producción de inflamación excesiva en respuesta a los agentes infecciosos, lo que puede conducir a daño orgánico significativo y muerte (por ejemplo, en el caso de sepsis). Además, la inflamación crónica normalmente es perjudicial y está en la raíz de numerosas enfermedades crónicas, causando daños graves e irreversibles a los tejidos. En dichos casos, la respuesta inmunitaria a menudo se dirige contra los propios tejidos (autoinmunidad), aunque las respuestas crónicas a entidades extrañas también pueden conducir a daños inespecíficos a los tejidos propios.

El objetivo de la terapia antiinflamatoria es por lo tanto reducir esta inflamación, inhibir la autoinmunidad cuando se presente y permitir que el proceso fisiológico o la curación y la reparación del tejido progresen.

Los agentes se pueden usar para tratar la inflamación de cualquier tejido y órganos del cuerpo, incluyendo inflamación musculoesquelética, inflamación vascular, inflamación neurológica, inflamación del sistema digestivo, inflamación ocular, inflamación del sistema reproductor y otra inflamación, tal como se ejemplifica a continuación.

La inflamación musculoesquelética se refiere a cualquier afección inflamatoria del sistema musculoesquelético, en particular aquellas afecciones que afectan a las articulaciones del esqueleto, incluyendo las articulaciones de la mano, muñeca, codo, hombro, mandíbula, columna vertebral, cuello, cadera, rodilla, tobillo y pie y las afecciones que afectan a los tejidos que conectan los músculos a los huesos, tales como tendones. Los ejemplos de inflamación musculoesquelética que se pueden tratar con los compuestos de la invención incluyen artritis (incluyendo, por ejemplo, osteoartritis, artritis psoriásica, espondilitis anquilosante, artritis infecciosa aguda y crónica, artritis asociada con gota y pseudogota y artritis idiopática juvenil), tendinitis, sinovitis, tenosinovitis, bursitis, fibrositis (fibromialgia), epicondilitis, miositis y osteitis (incluyendo, por ejemplo, enfermedad de Paget, osteitis púbica y osteitis fibrosa quística).

La inflamación ocular se refiere a inflamación de cualquier estructura del ojo, incluyendo los párpados. Los ejemplos de inflamación ocular que se pueden tratar en la presente invención incluyen blefaritis, blefarochalasis, conjuntivitis, dacrioadenitis, queratitis, queratoconjuntivitis seca (xeroftalmia), escleritis, triquiasis y uveitis.

Los ejemplos de inflamación del sistema nervioso que se pueden tratar en la presente invención incluyen encefalitis, síndrome de Guillain-Barre, meningitis, neuromiotonía, narcolepsia, esclerosis múltiple, mielitis y esquizofrenia.

Los ejemplos de inflamación del sistema vascular o linfático que se pueden tratar en la presente invención incluyen artroesclerosis, artritis, flebitis, vasculitis y linfangitis.

Los ejemplos de afecciones inflamatorias del sistema digestivo que se pueden tratar en la presente invención incluyen colangitis, colecistitis, enteritis, enterocolitis, gastritis, gastroenteritis, ileítis y proctitis.

Los ejemplos de afecciones inflamatorias del sistema reproductor que se pueden tratar en la presente invención incluyen cervicitis, corioamnionitis, endometritis, epididimitis, onfalitis, ooforitis, orquitis, salpingitis, absceso tuboovárico, uretritis, vaginitis, vulvitis y vulvodinia.

Los agentes se pueden usar para tratar afecciones autoinmunes que tienen un componente inflamatorio. Dichas afecciones incluyen alopecia diseminada aguda universal, enfermedad de Behcet, enfermedad de Chagas, síndrome de fatiga crónica, disautonomía, encefalomielitis, espondilitis anquilosante, anemia aplásica, hidradenitis supurativa, hepatitis autoinmunitaria, ooforitis autoinmunitaria, enfermedad celíaca, enfermedad de Crohn, diabetes mellitus tipo 1, arteritis de células gigantes, síndrome de Goodpasture, enfermedad de Grave, síndrome de Guillain-Barre, enfermedad de Hashimoto, púrpura de Henoch-Schonlein, enfermedad de Kawasaki, lupus eritematoso, colitis microscópica, poliarteritis microscópica, enfermedad mixta del tejido conectivo, esclerosis múltiple, miastenia grave, síndrome opsoclono mioclono, neuritis óptica, tiroiditis de Ord, pénfigo, poliarteritis nodosa, polimialgia, síndrome de Reiter, síndrome de Sjogren, arteritis temporal, granulomatosis de Wegener, anemia hemolítica autoinmunitaria por anticuerpos calientes, cistitis intersticial, enfermedad de Lyme, morfea, sarcoidosis, esclerodermia, colitis ulcerosa y vitÍligo.

Los agentes se pueden usar para tratar enfermedades de hipersensibilidad mediadas por linfocitos T que tienen un componente inflamatorio. Dichas afecciones incluyen hipersensibilidad por contacto, dermatitis de contacto (incluyendo la debida a hiedra venenosa), urticaria, alergias cutáneas, alergias respiratorias (fiebre del heno, rinitis alérgica) y enteropatía sensible al gluten (enfermedad celíaca).

Otras afecciones inflamatorias que se pueden tratar en la presente invención incluyen, por ejemplo, apendicitis, dermatitis, dermatomiositis, endocarditis, fibrositis, gingivitis, glositis, hepatitis, hidradenitis supurativa, iritis, laringitis, mastitis, miocarditis, nefritis, otitis, pancreatitis, parotiditis, pericarditis, peritonitis, faringitis, pleuritis, neumonitis, prostatitis, pielonefritis y estomatitis, rechazo de trasplante (incluyendo órganos tales como riñón, hígado, corazón, pulmón, páncreas (por ejemplo, células de los islotes), médula ósea, córnea, intestino delgado, aloinjertos de piel, homoinjertos de piel y xenoinjertos de válvula cardíaca, enfermedad del suero y enfermedad de injerto contra hospedador), pancreatitis aguda, pancreatitis crónica, síndrome de distrés respiratorio agudo, síndrome de Sexary, hiperplasia adrenal congénita, tiroiditis no supurativa, hipercalcemia asociada con cáncer, pénfigo, dermatitis herpetiforme bullosa, eritema multiforme grave, dermatitis exfoliativa, dermatitis seborreica, rinitis alérgica estacional o perenne, asma bronquial, dermatitis de contacto, dermatitis atópica, reacciones de hipersensibilidad a fármaco, conjuntivitis alérgica, queratitis, herpes zóster oftálmico, iritis y oiridociclitis, coriorretinitis, neuritis óptica, sarcoidosis sintomática, quimioterapia para tuberculosis pulmonar fulminante o diseminada, púrpura trombocitopénica idiopática en adultos, trombocitopenia secundaria en adultos, anemia hemolítica adquirida (autoinmunitaria), leucemia y linfomas en adultos, leucemia aguda de la infancia, enteritis regional, vasculitis autoinmunitaria, esclerosis múltiple, enfermedad pulmonar obstructiva crónica, rechazo de trasplante de órgano sólido, sepsis.

Los tratamientos preferidos incluyen uno cualquiera de tratamientos de rechazo de trasplante, artritis psoriásica, esclerosis múltiple, diabetes tipo 1, asma, lupus eritematoso sistémico, enfermedad pulmonar crónica e inflamación que acompaña a afecciones infecciosas (por ejemplo, sepsis).

Las composiciones farmacéuticas se pueden presentar en formas de dosis unitaria que contienen una cantidad predeterminada de principio activo por dosis unitaria. Dicha unidad puede contener, por ejemplo, de 0,5 mg a 1 g, preferentemente de 1 mg a 700 mg, más preferentemente de 5 mg a 100 mg de un compuesto de fórmula (I), dependiendo de la afección a tratar, la vía de administración y la edad, el peso y el estado del paciente o las composiciones farmacéuticas se pueden presentar en formas de dosis unitarias que contienen una cantidad predeterminada del principio activo por dosis unitaria. Las composiciones de dosificación unitaria preferidas son aquellas que contienen una dosis diaria o subdosis, tal como se han mencionado anteriormente en el presente documento o una fracción apropiada de las mismas, de un principio activo. Además, dichas composiciones farmacéuticas se pueden preparar por cualquiera de los procedimientos bien conocidos en la técnica de la farmacia.

Las composiciones farmacéuticas se pueden adaptar para administración por cualquier vía apropiada, por ejemplo por la vía oral (incluyendo bucal o sublingual), rectal, nasal, tópica (incluyendo bucal, sublingual o transdérmica), vaginal o parenteral (incluyendo subcutánea, intramuscular, intravenosa o intradérmica). Dichas composiciones se pueden preparar por cualquier procedimiento conocido en la técnica de la farmacia, por ejemplo poniendo en asociación un compuesto de fórmula (I) con el o los vehículos o el o los excipientes.

Las composiciones farmacéuticas adaptadas para administración oral se pueden presentar en forma de unidades discretas tales como cápsulas o comprimidos; polvos o gránulos; soluciones o suspensiones en líquidos acuosos o no acuosos; espumas o cremas comestibles o emulsiones líquidas de aceite en agua o emulsiones líquidas de agua en aceite.

Las cápsulas se fabrican preparando una mezcla en polvo, tal como se ha descrito anteriormente y rellenando vainas de gelatina formadas. Los agentes deslizantes y lubricantes tales como sílice coloidal, talco, estearato de magnesio, estearato de calcio o polietilenglicol sólido se pueden añadir a la mezcla en polvo antes de la operación de relleno. También se puede añadir un agente disgregante o solubilizante tal como agar-agar, carbonato de calcio o carbonato sódico para mejorar la disponibilidad del medicamento cuando la cápsula se ingiere.

Además, cuando se desee o sea necesario, también se pueden incorporar a la mezcla aglutinantes, lubricantes, agentes disgregantes y agentes colorantes adecuados. Los aglutinantes adecuados incluyen almidón, gelatina, azúcares naturales tales como glucosa o beta-lactosa, edulcorantes de maíz, gomas naturales y sintéticas tales como acacia, tragacanto o alginato de sodio, carboximetilcelulosa, polietilenglicol, ceras y similares. Los lubricantes usados en estas formas de dosificación incluyen oleato de sodio, estearato de sodio, estearato de magnesio, benzoato sódico, acetato de sodio, cloruro sódico y similares. Los disgregantes incluyen, sin limitación, almidón, metilcelulosa, agar, bentonita, goma de xantano y similares. Los comprimidos se formulan, por ejemplo, preparando una mezcla en polvo, granulando o por doble compresión, añadiendo un lubricante y un disgregante y prensando en comprimidos. Una mezcla en polvo se prepara mezclando el compuesto, adecuadamente triturado, con un diluyente o base tal como se ha descrito anteriormente y, opcionalmente, con un aglutinante tal como carboximetilcelulosa, un alginato, gelatina o polivinilpirrolidona, una solución retardante tal como parafina, un acelerador de reabsorción tal como una sal cuaternaria y/o un agente de absorción tal como bentonita, caolín o fosfato dicálcico. La mezcla en polvo se puede granular mediante matrices formadoras de comprimidos mediante la adición de ácido esteárico, una sal de estearato, talco o aceite mineral. La mezcla lubricada se comprime después en comprimidos. Los compuestos de la presente invención también se pueden combinar con un vehículo inerte que fluye libremente y comprimir directamente en comprimidos, sin pasar por las etapas de granulado o doble compresión. Se puede proporcionar un revestimiento protector transparente u opaco que consiste en una capa selladora de goma laca, un revestimiento de azúcar o de material polimérico y un revestimiento pulido de cera. Se pueden añadir colorantes a estos revestimientos para distinguir las distintas dosis unitarias.

Los fluidos orales tales como soluciones, jarabes y elixires, se pueden preparar en forma de dosis unitarias de modo que una cantidad dada contiene una cantidad predeterminada de un compuesto de fórmula (I). Los jarabes se pueden preparar disolviendo el compuesto en una solución acuosa con un sabor adecuado, mientras que los elixires se preparan usando un vehículo alcohólico no tóxico. Las suspensiones se pueden formular dispersando el compuesto en un vehículo no tóxico. También se pueden añadir solubilizantes y emulsionantes tales como alcoholes de isoesterarilo etoxilados y éteres de polioxietilensorbitol, conservantes, aditivos aromatizantes tales como aceite de menta o edulcorantes naturales o sacarina u otros edulcorantes artificiales y similares.

Cuando sea apropiado, las composiciones farmacéuticas de dosificación unitaria para administración oral pueden estar microencapsuladas. La formulación también se puede preparar para prolongar o mantener la liberación como, por ejemplo, recubriendo o embebiendo el material particulado en polímeros, cera o similar.

Las composiciones farmacéuticas adaptadas para administración rectal se pueden presentar en forma de supositorios o en forma de enemas.

Las composiciones farmacéuticas adaptadas para administración vaginal se pueden administrar en forma de pesarios, tampones, cremas, geles, pastas, espumas o formulaciones en aerosol.

Las formulaciones farmacéuticas adaptadas para administración parenteral incluyen soluciones para inyección estériles acuosas y no acuosas que pueden contener antioxidantes, tampones, bacteriostatos y solutos que hacen que la formulación sea isotónica con la sangre del receptor pretendido y suspensiones estériles acuosas y no acuosas que pueden incluir agentes de suspensión y agentes espesantes. Las composiciones farmacéuticas se pueden presentar en envases de dosis unitarias o multidosis, por ejemplo ampollas y recipientes cerrados herméticamente, y se pueden almacenar en un estado de criodesecado (liofilizado) que requiere únicamente la adición del vehículo líquido estéril, por ejemplo agua para inyecciones, inmediatamente antes de su uso. Las soluciones y soluciones para inyección extemporánea se pueden preparar a partir de polvos, gránulos y comprimidos estériles.

Debe entenderse que además de los ingredientes mencionados de forma particular anteriormente, las composiciones farmacéuticas pueden incluir otros agentes convencionales en la técnica, teniendo en cuenta el tipo de formulación en cuestión, por ejemplo, aquellos adecuados para administración oral pueden incluir agentes aromatizantes.

Una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto de la presente invención dependerá de una diversidad de factores que incluyen, por ejemplo, la edad y peso del receptor pretendido, la afección precisa que requiere tratamiento y su gravedad, la naturaleza de la formulación y la vía de administración y finalmente estará de acuerdo con el criterio del médico que prescribe la medicación. Sin embargo, una cantidad eficaz de un compuesto de fórmula (I) para el tratamiento de anemia normalmente estará en el intervalo de 0,001 a 100 mg/kg de peso corporal del receptor al día, de manera adecuada en el intervalo de 0,01 a 10 mg/kg de peso corporal al día. Para un mamífero adulto de 70 kg, la cantidad diaria real sería de manera adecuada de 7 a 700 mg y esta cantidad se puede administrar en una única dosis al día o en un número (tal como dos, tres, cuatro, cinco o seis) de subdosis al día, tales que la dosis diaria sea la misma. Se puede determinar una cantidad eficaz de una sal o solvato, etc., como una proporción de la cantidad eficaz del compuesto de fórmula (I) per se. Se contempla que dosis similares serían apropiadas para el tratamiento de otras afecciones mencionadas anteriormente.

En determinadas realizaciones, la presente invención se refiere a una composición farmacéutica que comprende la sal del ácido clorhídrico de (R)-5-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-3-metil-2-(1-(1-neopentilpiperidin-4-il)etil)-5,6,7,8-tetrahidro-4H-tieno[3,2-c]azepin-4-ona. En otra realización, la presente invención se refiere a una composición farmacéutica que comprende la sal del ácido clorhídrico de (R)-5-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-3-metil-2-(1-(1-neopentilpiperidin-4-il)etil)-5,6,7,8-tetrahidro-4H-tieno[3,2-c]azepin-4-ona en la que al menos el 10% en peso de la sal del ácido clorhídrico de (R)-5-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-3-metil-2-(1-(1-neopentilpiperidin-4-il)etil)-5,6,7,8-tetrahidro-4H-tieno[3,2-c]azepin-4-ona está presente como la forma cristalina de la sal del ácido clorhídrico de (R)-5-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-3-metil-2-(1-(1-neopentilpiperidin-4-il)etil)-5,6,7,8-tetrahidro-4H-tieno[3,2-c]azepin-4-ona (Forma II) descrita en el presente documento. En otra realización, la presente invención se refiere a una composición farmacéutica que comprende la sal del ácido clorhídrico de (R)-5-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-3-metil-2-(1-(1-neopentilpiperidin-4-il)etil)-5,6,7,8-tetrahidro-4H-tieno[3,2-c]azepin-4-ona en la que al menos el 20 % en peso o al menos el 30 % en peso o al menos el 40 % en peso o al menos el 50 % en peso o al menos el 60 % en peso o al menos el 70 % en peso o al menos el 80 % en peso o al menos el 90 % en peso de la sal del ácido clorhídrico de (R)-5-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-3-metil-2-(1-(1-neopentilpiperidin-4-il)etil)-5,6,7,8-tetrahidro-4H-tieno[3,2-c]azepin-4-ona está presente como la forma cristalina de la sal del ácido clorhídrico de (R)-5-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-3-metil-2-(1-(1-neopentilpiperidin-4-il)etil)-5,6,7,8-tetrahidro-4H-tieno[3,2-c]azepin-4-ona (Forma II) descrita en el presente documento. En otra realización, la presente invención se refiere a una composición farmacéutica que comprende la sal del ácido clorhídrico de (R)-5-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-3-metil-2-(1-(1-neopentilpiperidin-4-il)etil)-5,6,7,8-tetrahidro-4H-tieno[3,2-c]azepin-4-ona en la que al menos el 95 % en peso o al menos el 96 % en peso o al menos el 97 % en peso o al menos el 98 % en peso o al menos el 99 % en peso o al menos el 99,5 % en peso o al menos el 99,8 % en peso o al menos el 99,9 % en peso de la sal del ácido clorhídrico de (R)-5-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-3-metil-2-(1-(1-neopentilpiperidin-4-il)etil)-5,6,7,8-tetrahidro-4H-tieno[3,2-c]azepin-4-ona está presente como la forma cristalina de la sal del ácido clorhídrico de (R)-5-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-3-metil-2-(1-(1-neopentilpiperidin-4-il)etil)-5,6,7,8-tetrahidro-4H-tieno[3,2-c]azepin-4-ona (Forma II) descrita en el presente documento.

En determinadas realizaciones, la presente invención se refiere a una composición farmacéutica que comprende la sal del ácido clorhídrico de (R)-5-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-3-metil-2-(1-(1-((1-metilciclobutil)metil)piperidin-4-il)etil)-5,6,7,8-tetrahidro-4H-tieno[3,2-c]azepin-4-ona. En otra realización, la presente invención se refiere a una composición farmacéutica que comprende la sal del ácido clorhídrico de (R)-5-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-3-metil-2-(1-(1-((1-metilciclobutil)metil)piperidin-4-il)etil)-5,6,7,8-tetrahidro-4H-tieno[3,2-c]azepin-4-ona en la que al menos el 10 % en peso de la sal del ácido clorhídrico de (R)-5-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-3-metil-2-(1-(1-((1-metilciclobutil)metil)piperidin-4-il)etil)-5,6,7,8-tetrahidro-4H-tieno[3,2-c]azepin-4-ona está presente como la forma cristalina de la sal del ácido clorhídrico de (R)-5-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-3-metil-2-(1-(1-((1-metilciclobutil)metil)piperidin-4-il)etil)-5,6,7,8-tetrahidro-4H-tieno[3,2-c]azepin-4-ona (Forma I) descrita en el presente documento. En otra realización, la presente invención se refiere a una composición farmacéutica que comprende la sal del ácido clorhídrico de (R)-5-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-3-metil-2-(1-(1-((1-metilciclobutil)metil)piperidin-4-il)etil)-5,6,7,8-tetrahidro-4H-tieno[3,2-c]azepin-4-ona en la que al menos el 20 % en peso o al menos el 30 % en peso o al menos el 40 % en peso o al menos el 50 % en peso o al menos el 60 % en peso o al menos el 70 % en peso o al menos el 80 % en peso o al menos el 90 % en peso de la sal del ácido clorhídrico de (R)-5-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-3-metil-2-(1-(1-((1-metilciclobutil)metil)piperidin-4-il)etil)-5,6,7,8-tetrahidro-4H-tieno[3,2-c]azepin-4-ona está presente como la forma cristalina de la sal del ácido clorhídrico de (R)-5-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-3-metil-2-(1-(1-((1-metilciclobutil)metil)piperidin-4-il)etil)-5,6,7,8-tetrahidro-4H-tieno[3,2-c]azepin-4-ona (Forma I) descrita en el presente documento. En otra realización, la presente invención se refiere a una composición farmacéutica que comprende la sal del ácido clorhídrico de (R)-5-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-3-metil-2-(1-(1-((1-metilciclobutil)metil)piperidin-4-il)etil)-5,6,7,8-tetrahidro-4H-tieno[3,2-c]azepin-4-ona en la que al menos el 95 % en peso o al menos el 96 % en peso o al menos el 97 % en peso o al menos el 98 % en peso o al menos el 99 % en peso o al menos el 99,5 % en peso o al menos el 99,8 % en peso o al menos el 99,9 % en peso de la sal del ácido clorhídrico de (R)-5-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-3-metil-2-(1-(1-((1-metilciclobutil)metil)piperidin-4-il)etil)-5.6.7.8- tetrahidro-4H-tieno[3,2-c]azepin-4-ona está presente como la forma cristalina de la sal del ácido clorhídrico de (R)-5-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-3-metil-2-(1-(1-((1-metilciclobutil)metil)piperidin-4-il)etil)-5,6,7,8-tetrahidro-4H-tieno[3,2-c]azepin-4-ona (Forma I) descrita en el presente documento.

En otra realización, la presente invención se refiere a una composición farmacéutica que comprende la sal del ácido clorhídrico de (R)-5-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-3-metil-2-(1-(1-neopentilpiperidin-4-il)etil)-5,6,7,8-tetrahidro-4H-tieno[3,2-c]azepin-4-ona, en la que no más del 90 % en peso de la sal es amorfo. En otra realización, la presente invención se refiere a una composición farmacéutica que comprende la sal del ácido clorhídrico de (R)-5-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-3-metil-2-(1-(1-neopentilpiperidin-4-il)etil)-5,6,7,8-tetrahidro-4H-tieno[3,2-c]azepin-4-ona, en la que no más del 80 % en peso o no más del 70 % en peso o no más del 60 % en peso o no más del 50 % en peso o no más del 40 % en peso o no más del 30 % en peso o no más del 20 % en peso o no más del 10 % en peso de la sal es amorfo. En otra realización, la presente invención se refiere a una composición farmacéutica que comprende la sal del ácido clorhídrico de (R)-5-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-3-metil-2-(1-(1-neopentilpiperidin-4-il)etil)-5,6,7,8-tetrahidro-4H-tieno[3,2-c]azepin-4-ona, en la que no más del 5% en peso o no más del 4 % en peso o no más del 3 % en peso o no más del 2 % en peso o no más del 1 % en peso o no más del 0,5 % en peso o no más del 0,2 % en peso o no más del 0,1 % en peso de la sal es amorfo.

En otra realización, la presente invención se refiere a una composición farmacéutica que comprende la sal del ácido clorhídrico de (R)-5-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-3-metil-2-(1-(1-((1-metilciclobutil)metil)piperidin-4-il)etil)-5,6,7,8-tetrahidro-4H-tieno[3,2-c]azepin-4-ona, en la que no más del 90 % en peso de la sal es amorfo. En otra realización, la presente invención se refiere a una composición farmacéutica que comprende la sal del ácido clorhídrico de (R)-5-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-3-metil-2-(1-(1-((1-metilciclobutil)metil)piperidin-4-il)etil)-5.6.7.8- tetrahidro-4H-tieno[3,2-c]azepin-4-ona, en la que no más del 80 % en peso o no más del 70 % en peso o no más del 60 % en peso o no más del 50 % en peso o no más del 40 % en peso o no más del 30 % en peso o no más del 20 % en peso o no más del 10 % en peso de la sal es amorfo. En otra realización, la presente invención se refiere a una composición farmacéutica que comprende la sal del ácido clorhídrico de (R)-5-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-3-metil-2-(1-(1-((1-metilciclobutil)metil)piperidin-4-il)etil)-5,6,7,8-tetrahidro-4H-tieno[3,2-c]azepin-4-ona, en la que no más del 5 % en peso o no más del 4 % en peso o no más del 3 % en peso o no más del 2 % en peso o no más del 1 % en peso o no más del 0,5 % en peso o no más del 0,2 % en peso o no más del 0,1 % en peso de la sal es amorfo.

En otra realización, la presente invención se refiere a una composición farmacéutica que comprende la sal del ácido clorhídrico de (R)-5-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-3-metil-2-(1-(1-neopentilpiperidin-4-il)etil)-5,6,7,8-tetrahidro-4H-tieno[3,2-c]azepin-4-ona en la que no más del 90 % en peso de la sal del ácido clorhídrico de (R)-5-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-3-metil-2-(1-(1-neopentilpiperidin-4-il)etil)-5,6,7,8-tetrahidro-4H-tieno[3,2-c]azepin-4-ona está presente en una forma distinta de la forma cristalina de la sal del ácido clorhídrico de (R)-5-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-3-metil-2-(1-(1-neopentilpiperidin-4-il)etil)-5,6,7,8-tetrahidro-4H-tieno[3,2-c]azepin-4-ona (Forma II) descrita en el presente documento. En otra realización, la presente invención se refiere a una composición farmacéutica que comprende la sal del ácido clorhídrico de (R)-5-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-3-metil-2-(1-(1-neopentilpiperidin-4-il)etil)-5,6,7,8-tetrahidro-4H-tieno[3,2-c]azepin-4-ona en la que no más del 80 % en peso o no más del 70 % en peso o no más del 60 % en peso o no más del 50 % en peso o no más del 40 % en peso o no más del 30 % en peso o no más del 20 % en peso o no más del 10 % en peso de la sal del ácido clorhídrico de (R)-5-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-3-metil-2-(1-(1-neopentilpiperidin-4-il)etil)-5.6.7.8- tetrahidro-4H-tieno[3,2-c]azepin-4-ona está presente en una forma distinta a la forma cristalina de la sal del ácido clorhídrico de (R)-5-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-3-metil-2-(1-(1-neopentilpiperidin-4-il)etil)-5.6.7.8- tetrahidro-4H-tieno[3,2-c]azepin-4-ona (Forma II) descrita en el presente documento. En otra realización, la presente invención se refiere a una composición farmacéutica que comprende la sal del ácido clorhídrico de (R)-5-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-3-metil-2-(1-(1-neopentilpiperidin-4-il)etil)-5,6,7,8-tetrahidro-4H-tieno[3,2-c]azepin-4-ona en la que no más del 5 % en peso o no más del 4 % en peso o no más del 3 % en peso o no más del 2 % en peso o no más del 1 % en peso o no más del 0,5 % en peso o no más del 0,2 % en peso o no más del 0,1 % en peso de la sal del ácido clorhídrico de (R)-5-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-3-metil-2-(1-(1-neopentilpiperidin-4-il)etil)-5,6,7,8-tetrahidro-4H-tieno[3,2-c]azepin-4-ona está presente en una forma distinta a la forma cristalina de la sal del ácido clorhídrico de (R)-5-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-3-metil-2-(1-(1-neopentilpiperidin-4-il)etil)-5,6,7,8-tetrahidro-4H-tieno[3,2-c]azepin-4-ona (Forma II) descrita en el presente documento.

En otra realización, la presente invención se refiere a una composición farmacéutica que comprende la sal del ácido clorhídrico de (R)-5-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-3-metil-2-(1-(1-((1-metilciclobutil)metil)piperidin-4-il)etil)-5,6,7,8-tetrahidro-4H-tieno[3,2-c]azepin-4-ona en la que no más del 90 % en peso de la sal del ácido clorhídrico de (R)-5-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-3-metil-2-(1-(1-((1-metilciclobutil)metil)piperidin-4-il)etil)-5.6.7.8- tetrahidro-4H-tieno[3,2-c]azepin-4-ona está presente en una forma distinta de la forma cristalina de la sal del ácido clorhídrico de (R)-5-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-3-metil-2-(1-(1-((1-metilciclobutil)metil)piperidin-4-il)etil)-5,6,7,8-tetrahidro-4H-tieno[3,2-c]azepin-4-ona (Forma I) descrita en el presente documento. En otra realización, la presente invención se refiere a una composición farmacéutica que comprende la sal del ácido clorhídrico de (R)-5-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-3-metil-2-(1-(1-((1-metilciclobutil)metil)piperidin-4-il)etil)-5,6,7,8-tetrahidro-4H-tieno[3,2-c]azepin-4-ona en la que no más del 80 % en peso o no más del 70 % en peso o no más del 60 % en peso o no más del 50 % en peso o no más del 40 % en peso o no más del 30 % en peso o no más del 20 % en peso o no más del 10 % en peso de la sal del ácido clorhídrico de (R)-5-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-3-metil-2-(1-(1-((1-metilciclobutil)metil)piperidin-4-il)etil)-5,6,7,8-tetrahidro-4H-tieno[3,2-c]azepin-4-ona está presente en una forma distinta a la forma cristalina de la sal del ácido clorhídrico de (R)-5-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-3-metil-2-(1-(1-((1-metilciclobutil)metil)piperidin-4-il)etil)-5,6,7,8-tetrahidro-4H-tieno[3,2-c]azepin-4-ona (Forma I) descrita en el presente documento. En otra realización, la presente invención se refiere a una composición farmacéutica que comprende la sal del ácido clorhídrico de (R)-5-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-3-metil-2-(1-(1-((1-metilciclobutil)metil)piperidin-4-il)etil)-5,6,7,8-tetrahidro-4H-tieno[3,2-c]azepin-4-ona en la que no más del 5 % en peso o no más del 4 % en peso o no más del 3 % en peso o no más del 2 % en peso o no más del 1 % en peso o no más del 0,5 % en peso o no más del 0,2 % en peso o no más del 0,1 % en peso de la sal del ácido clorhídrico de (R)-5-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-3-metil-2-(1-(1-((1-metilciclobutil)metil)piperidin-4-il)etil)-5,6,7,8-tetrahidro-4H-tieno[3,2-c]azepin-4-ona está presente en una forma distinta de la forma cristalina de la sal del ácido clorhídrico de (R)-5-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-3-metil-2-(1-(1-((1-metilciclobutil)metil)piperidin-4-il)etil)-5,6,7,8-tetrahidro-4H-tieno[3,2-c]azepin-4-ona (Forma I) descrita en el presente documento.

Definiciones

Los términos se usan con sus significados aceptados. Las definiciones siguientes están destinadas a clarificar, pero no limitar, los términos definidos.

Tal como se usa en el presente documento, el término "alquilo" representa un resto hidrocarburo lineal o ramificado, saturado, que tiene el número especificado de átomos de carbono. El término "alquilo (C¹ -C⁴)" se refiere a un resto alquilo que contiene de 1 a 4 átomos de carbono. Los alquilos ejemplares incluyen, pero no se limitan a, metilo, etilo, n-propilo, isopropilo, n-butilo, isobutilo, s-butilo, f-butilo, pentilo, hexilo, heptilo y octilo.

"Alcoxi" se refiere a un grupo que contiene un radical alquilo, definido anteriormente en el presente documento, unido a través de un átomo de enlace de oxígeno. El término "alcoxi (C¹ -C⁴)" se refiere a un radical hidrocarburo de cadena lineal o ramificada que tiene al menos 1 hasta 4 átomos de carbono unidos a través de un átomo de enlace de oxígeno. Los grupos "alcoxi (C¹-C⁴)" a modo de ejemplo útiles en la presente invención incluyen metoxi, etoxi, n-propoxi, isopropoxi, n-butoxi, s-butoxi, isobutoxi y f-butoxi.

Cuando el término "alquilo" se usa en combinación con otros grupos sustituyentes, tales como "haloalquilo (C¹ -C⁸)", "hidroxialquilo (C¹ -C⁸)" o "alcoxi (C¹-C⁴)alquil (C¹-C⁸)-", el término "alquilo" pretende incluir un radical hidrocarburo de cadena lineal o ramificada, divalente, en el que el punto de unión es a través del resto alquilo. El término "haloalquilo (C¹ -C⁴)" pretende indicar un radical que tiene uno o más átomos de halógeno, que pueden ser iguales o diferentes, en uno o más átomos de carbono de un resto alquilo que contiene de 1 a 4 átomos de carbono, que es un radical de carbono de cadena lineal o ramificada. Los ejemplos de grupos "haloalquilo (C¹-C⁴)" útiles en la presente invención incluyen, pero no se limitan a, -CF³ (trifluorometilo), -CCh (triclorometilo), 1,1-difluoroetilo, 2-fluoro-2-metilpropilo, 2,2-difluoropropilo, 2,2,2-trifluoroetilo y hexafluoroisopropilo. Los ejemplos de grupos "hidroxialquilo (C¹ -C⁸)" útiles en la presente invención incluyen, pero no se limitan a, hidroximetilo, hidroxietilo e hidroxiisopropilo. Los ejemplos de grupos "alcoxi (C¹-C⁴)alquil (C¹ -C⁸)-" útiles en la presente invención incluyen, pero no se limitan a, metoximetilo, metoxietilo, metoxiisopropilo, etoximetilo, etoxietilo, etoxiisopropilo, isopropoximetilo, isopropoxietilo, isopropoxiisopropilo, tbutoximetilo, t-butoxietilo y t-butoxiisopropilo.

Tal como se usa en el presente documento, el término "cicloalquilo" se refiere a un anillo hidrocarburo cíclico, saturado, no aromático, que contiene el número especificado de átomos de carbono. El término "cicloalquilo (C³-C⁵)" se refiere a un anillo hidrocarburo cíclico, no aromático, que tiene de tres a cinco átomos de carbono en el anillo. Los grupos "cicloalquilo (C³-C⁵)" a modo de ejemplo útiles en la presente invención incluyen ciclopropilo, ciclobutilo y ciclopentilo.

Tal como se usa en el presente documento, el término "bicicloalquilo" se refiere a un sistema de anillo hidrocarburo bicíclico, puenteado, condensado o espiro, saturado, que contiene el número especificado de átomos de carbono. Los grupos "bicicloalquilo (C⁶-C¹⁰)" a modo de ejemplo incluyen, pero no se limitan a, biciclo[2.1.1]hexilo, biciclo[2.1.1]heptilo, biciclo[3.2.1]octilo, biciclo[2.2.2]octilo, biciclo[3.2.2]nonilo, biciclo[3.3.1]nonilo, biciclo[3.3.2]decilo, biciclo[4.3.1]decilo, biciclo[2.2.0]hexilo, biciclo[3.1.0]hexilo, biciclo[3.2.0]heptilo, biciclo[4.1.0]heptilo, octahidropentalenilo, biciclo[4.2.0]octilo, decahidronaftalenilo, espiro[3.3]heptilo, espiro[2.4]heptilo, espiro[3.4]octilo, espiro[2.5]octilo, espiro[4.4]nonilo, espiro[3.5]nonilo y espiro[4.5]decilo.

Los términos "halógeno" y "halo" representan sustituyentes flúor, cloro, bromo o yodo. "Hidroxi" o "hidroxilo" pretende indicar el radical -OH.

Tal como se usa en el presente documento, el término "opcionalmente" significa que el o los eventos descritos posteriormente pueden ocurrir o no e incluye tanto el o los eventos que ocurren como el o los eventos que no ocurren.

Tal como se usa en el presente documento, el término "tratamiento" se refiere a aliviar la afección especificada, eliminar o reducir uno o más de los síntomas de la afección, ralentizar o eliminar la progresión de la afección y retrasar la recurrencia de la afección en un paciente o sujeto previamente afectado o diagnosticado.

"Curar" o "que cura" una enfermedad en un paciente se usa para indicar la erradicación, detención, interrupción o finalización del virus de la inmunodeficiencia humana o los síntomas o la progresión de los síntomas o el virus, durante un periodo definido. Como ejemplo, en una realización, "curar" o "que cura" se refiere a una administración terapéutica o una combinación de administraciones que solas o en combinación con uno o más de otros compuestos induce y mantiene un control viral sostenido (niveles indetectables de viremia plasmática mediante, por ejemplo, un ensayo de reacción en cadena de la polimerasa (RCP), un ensayo de ADNb (ADN de cadena ramificada) o un ensayo nAs BA (amplificación basada en secuencia de ácidos nucleicos) del virus de inmunodeficiencia humana después de un mínimo de dos años sin ninguna otra intervención terapéutica. Los ensayos anteriores de RCP, ADNb y NASBA se realizaron usando técnicas conocidas y familiares para un experto en la técnica. Como ejemplo, la erradicación, detención, interrupción o finalización del virus de la inmunodeficiencia humana o los síntomas o la progresión de los síntomas o el virus, se puede mantener durante un mínimo de dos años.

Tal como se usa en el presente documento, la expresión "cantidad eficaz" significa la cantidad de un fármaco o agente farmacéutico que provocará la respuesta biológica o médica de un tejido, sistema, animal o ser humano que está buscando, por ejemplo, un investigador o un médico.

La expresión "cantidad terapéuticamente eficaz" significa cualquier cantidad que, en comparación con un sujeto correspondiente que no recibe dicha cantidad, da como resultado un tratamiento mejorado, curación o mejora de una enfermedad, trastorno o efecto secundario o una disminución en la velocidad de avance de una enfermedad o trastorno. El término también incluye dentro de su ámbito cantidades eficaces para potenciar la función fisiológica normal. Para su uso en terapia, se pueden administrar cantidades terapéuticamente eficaces de un compuesto de fórmula (I), así como sales de los mismos, como el producto químico en bruto. Además, el principio activo puede estar presente en forma de una composición farmacéutica.

Preparación de los compuestos

Abreviaturas

AcOH ácido acético

Ar gas Ar

Boc terc-butiloxicarbonilo

BU⁴NC¹ cloruro de tetrabutilamonio

CH³CN acetonitrilo

CS²CO³ carbonato de cesio

DCE ¹ ,² -dicloroetano

DCM diclorometano

DMF W,W-dimetilformamida

DMSO dimetilsulfóxido

EDC 1-etil-3-(3-dimetilaminopropil)carbodiimida

EN electronebulización

Et²O éter dietílico

EtOAc acetato de etilo

EtOH etanol

h hora u horas

H² gas hidrógeno

HCl ácido clorhídrico

H²O agua

HOAt 1-hidroxi-7-azabenzotriazol

H2SO4 ácido sulfúrico

CLAR cromatografía líquida de alta resolución

CLEM cromatografía líquida espectrometría de masas

LÍAIH⁴ hidruro de litio y aluminio

MeOH metanol

MgSO4 sulfato de magnesio

min minuto o minutos

M molar

EM espectrometría de masas

N normal

N² gas nitrógeno

NaBH4 borohidruro de sodio

NaBH(OAc⁾³ triacetoxiborohidruro sódico

Na2CO3 carbonato sódico

NaHCO3 bicarbonato de sodio

NaHMDS bis(trimetilsilil)amida de sodio

NaOH hidróxido sódico

Na²SO⁴ sulfato sódico

NBS W-bromosuccinimida

NH⁴Cl cloruro de amonio

NH⁴OAc acetato amónico

NH⁴OH hidróxido de amonio

NMM W-metilmorfolina

Pd(OAc⁾² acetato de paladio (II)

Pd(PPh3)4 tetraquis(trifenilfosfina)paladio (⁰ )

MLP microscopía de luz polarizada

(R,R)- tetraquis(3,5-bis(trifluorometil)fenilborato de ((4R,5R)-(+)-0-[1-bencil-1-(5-metil-2-fenil-[COD]Ir[cy² PThrePHOX] 4,5-dihidrooxazol-4-il)-2-feniletil](diciclohexilfosfinita)(1,5-ciclooctadieno)iridio (I) t.a. temperatura ambiente

sat. saturado

TBME terc-butil metil éter

TFA ácido trifluoroacético

THF tetrahidrofurano

Esquemas de síntesis genéricos

Los compuestos de la presente invención se pueden fabricar por una diversidad de procedimientos, que incluyen procedimientos sintéticos convencionales bien conocidos. Los procedimientos sintéticos generales ilustrativos se indican a continuación y los compuestos específicos de la invención se preparan en los ejemplos de trabajo. Los expertos en la técnica apreciarán que si un sustituyente descrito en el presente documento no es compatible con los procedimientos sintéticos descritos en el presente documento, el sustituyente se puede proteger con un grupo protector adecuado que es estable en las condiciones de reacción. El grupo protector se puede eliminar en un punto adecuado en la secuencia de reacción para proporcionar un intermedio o un compuesto diana deseado. En todos los esquemas descritos a continuación, los grupos protectores para grupos sensibles o reactivos se emplean cuando es necesario de acuerdo con los principios generales de la química sintética. Los grupos protectores se manipulan de acuerdo con los procedimientos convencionales de la síntesis orgánica (T. W. Green y P. G. M. Wuts, (1991) Protecting Groups in Organic Synthesis, John Wiley & Sons). Estos grupos se eliminan en una etapa conveniente de la síntesis del compuesto usando procedimientos que son fácilmente evidentes para los expertos en la técnica. La selección de los procedimientos así como las condiciones de reacción y el orden de su ejecución deberán ser consistentes con la preparación de los compuestos de la presente invención. Los materiales de partida están disponibles en el mercado o se fabrican a partir de materiales de partida disponibles en el mercado usando procedimientos conocidos por los expertos en la técnica.

Ciertos compuestos de fórmula (I) se pueden preparar de acuerdo con el esquema 1 o procedimientos análogos. Una boración mediada por iridio, seguida de un acoplamiento de Suzuki con un triflato sustituido de manera apropiada da la olefina acoplada correspondiente. Una reducción asimétrica mediada por iridio de la olefina, seguida de bromación proporciona el bromotiofeno. Un acoplamiento de Heck mediado por paladio del bromotiofeno con alcohol alílico, seguido de una aminación reductora del aldehído resultante con una amina sustituida de manera apropiada proporciona la amina secundaria. La saponificación del éster y la formación de amida intramolecular proporciona la tiofenolactama elaborada. La eliminación de los grupos protectores de metilo y ferc-butilcarbonilo proporciona la piridona. La aminación reductora con un aldehído sustituido de manera apropiada proporciona los compuestos de fórmula (I).

Esquema 1: Síntesis de compuestos de fórmula (I).

SECCIÓN EXPERIMENTAL

Las directrices siguientes se aplican a todos los procedimientos experimentales descritos en el presente documento. Todas las reacciones se llevaron a cabo a presión positiva de nitrógeno usando instrumental de vidrio secado al horno, a menos que se indique otra cosa. Las temperaturas indicadas son externas (es decir temperaturas de baño) y son aproximadas. El aire y los líquidos sensibles a la humedad se transfirieron mediante una jeringa. Se usaron reactivos tal como se recibieron. Los disolventes utilizados fueron los enunciados como "anhidro" por los vendedores. Las molaridades enunciadas para los reactivos en las soluciones son aproximadas y se usaron sin titulación previa frente a un patrón correspondiente. Todas las reacciones se agitaron con una barra de agitación, a menos que se indique otra cosa. El calentamiento se llevó a cabo usando baños de calentamiento que contenían aceite de silicio, a menos que se indique otra cosa. Las reacciones llevadas a cabo mediante irradiación con microondas (0-400 W a 2,45 GHz) se realizaron usando un instrumento Biotage® Initiator 2.0 con viales EXP de microondas Biotage® (0,2-20 ml) y septos y tapones. Los niveles de irradiación utilizados (es decir alto, normal, bajo) basándose en el disolvente y la carga iónica se basaron en las especificaciones del vendedor. El enfriamiento a temperaturas por debajo de -70 °C se llevó a cabo usando hielo seco/acetona o hielo seco/2-propanol. El sulfato de magnesio y el sulfato de sodio usados como agentes de secado eran de calidad anhidra y se usaron de manera intercambiable. La eliminación de los disolventes que se describe "al vacío" o "a presión reducida" se realizó por evaporación rotatoria.

La cromatografía sobre gel de sílice en fase normal preparativa se realizó usando tanto un instrumento Teledyne ISCO® CombiFlash Companion con RediSep o cartuchos de gel de sílice ISCO® Gold (4 g-330 g) o un instrumento Analogix® IF280 con cartuchos de gel de sílice SF25 (4 g-3-00 g) o un instrumento Biotage® SP1 con cartuchos de gel de sílice HP® (10 g-100 g). La purificación por HPLC de fase inversa se llevó a cabo usando una columna YMC-pack (ODS-A 75x30 mm) como fase sólida, a menos que se indique otra cosa. Se usó una fase móvil de 25 ml/min de A (CH³CN-TFA al 0,1 %):B (agua-TFA al 0,1 %), 10-80 % de gradiente de A (10 min) con detección UV a 214 nM, a menos que se indique otra cosa.

Se operó un espectrómetro de masas de cuadrupolo individual PE Sciex® API 150 (PE Sciex, Thornhill, Ontario, Canadá) usando ionización por electronebulización en el modo de detección de ion positivo. El gas de nebulización se generó a partir de un generador de aire cero (Balston Inc., Haverhill, MA, Estados Unidos) y se suministró a 448,16 kPa y el gas cortina fue nitrógeno de alta pureza suministrado desde un recipiente de nitrógeno líquido Dewar a 344,74 kPa. El voltaje aplicado a la aguja de electronebulización fue de 4,8 kV. El orificio se ajustó a 25 V y el espectrómetro de masas realizó barridos a una velocidad de 0,5 barridos/s usando un paso de masa de 0,2 uma y recogiendo los datos de perfil.

Procedimiento A, CLEM. Las muestras se introdujeron en el espectrómetro de masas usando un automuestreador CTC® PAL (LEAP Technologies, Carrboro, NC) equipado con una jeringa de Hamilton® de 10 ul que realizó la inyección en una válvula de inyección de 10 puertos Valco. La bomba de CLAR fue una Shimadzu® LC-10ADvp (Shimadzu Scientific Instruments, Columbia, MD) operada a 0,3 ml/min y un gradiente lineal de 4,5 % de A a 90 % de B en 3,2 min. con una parada de 0,4 min. La fase móvil estaba compuesta por un 100 % (TFA al 0,02 % en H²O) en el recipiente A y un 100 % (TFA al 0,018 % en CH³CN) en el recipiente B. La fase estacionaria es Aquasil® (C18) y las dimensiones de la columna eran 1 mm x 40 mm. La detección fue por UV a 214 nm, de dispersión de luz evaporativa (ELSD) y EM.

Procedimiento B, CLEM. Como alternativa, se usó un sistema de CLAR analítica Agilent® 1100 con una CL/EM y se operó a 1 ml/min y un gradiente lineal de 5 % de A a 100 % de B en 2,2 min con una parada de 0,4 min. La fase móvil estaba compuesta por un 100 % (TFA al 0,02 % en H²O) en el recipiente A y un 100 % (TFA al 0,018 % en CH³CN) en el recipiente B. La fase estacionaria fue Zobax® (C8) con un tamaño de partícula de 3,5 um y las dimensiones de la columna eran 2,1 mm x 50 mm. La detección fue por UV a 214 nm, de dispersión de luz evaporativa (ELSD) y EM.

Procedimiento C, CLEM. Como alternativa, se usó un MDSSCIEX® API 2000 equipado con una columna capilar de (50 x 4,6 mm, 5 pm). La CLAR se realizó en un sistema de CLUR serie 1200 Agilent® equipado con una columna Zorbax® SB-C18 (50 x 4,6 mm, 1,8 pm) eluyendo con un tampón de CH³CN:NH⁴OAc.

Los espectros de la RMN 1H se registraron a 400 MHz usando un instrumento Bruker® AVANCE a 400 MHz, con un ACD Spect manager v. 10 usado para el reprocesamiento. Las multiplicidades indicadas son: s = singlete, d = doblete, t = triplete, c = cuadruplete, quint = quintuplete, sxt = sextete, m = multiplete, dd = doblete de dobletes, dt = doblete de tripletes, etc. y a indica una señal ancha. Todas las RMN en DMSO-d6 a menos que se indique otra cosa.

CLAR analítica: Los productos se analizaron mediante un sistema de cromatografía analítica Agilent® 1100, con una columna de 4,5 x 75 mm Zorbax® XDB-C18 (3,5 um) a 2 ml/min con un gradiente de 4 min de 5 % de CH³CN (ácido fórmico al 0,1 %) a 95 % de CH³CN (ácido fórmico al 0,1 %) en H²O (ácido fórmico al 0,1 %) y una parada de 1 min.

Intermedios

Intermedio 1

4-metiltiofen-3-carboxilato de metilo

A una solución en agitación de 3-bromo-4-metiltiofeno (20,0 g, 113 mmol) en THF (100 ml) en atmósfera de nitrógeno a TA se le añadió complejo de cloruro de isopropilmagnesio y cloruro de litio 1,3 N en THF (90 ml, 117 mmol) gota a gota. La reacción se agitó durante una noche. La reacción se enfrió a -78 °C y se trató con cloroformiato de metilo (12 ml, 155 mmol). La reacción se dejó calentar a TA y se agitó durante 1 h. La reacción se diluyó con EtOAc, se lavó con NaHCO³ saturado, se agitó durante 30 min, (se formó una suspensión de color blanco que permaneció en la fase acuosa), se lavó con salmuera, se secó (Na²SO⁴), se filtró y se concentró al vacío. El producto se destiló por recorrido corto al vacío (4 a 2 mm de Hg) a de 44 a 50 °C (baño de aceite a de 50 a 75 °C). Las fracciones principal y tardía se combinaron para dar el producto 4-metiltiofen-3-carboxilato de metilo (13,2 g, 85 mmol, 74,8 % de rendimiento) en forma de un líquido transparente. EM(EN) [M+H]+156,8.

Como alternativa, el intermedio 1 se preparó como sigue:

A una solución en agitación de 3-bromo-4-metiltiofeno (250 g, 1412 mmol) en THF (1200 ml) en atmósfera de nitrógeno a t.a. se le añadió una solución de complejo de cloruro de isopropilmagnesio y cloruro de litio (1,3 M en THF) (1086 ml, 1412 mmol) gota a gota durante 1 hora. La mezcla de reacción se agitó a t.a. durante una noche en atmósfera de nitrógeno. El día siguiente, la reacción se enfrió a -78 °C en un baño de hielo seco/acetona y se trató con cloroformiato de metilo (153 ml, 1977 mmol). La reacción se dejó calentar a t.a. y se agitó durante 3 h. Después, la mezcla de reacción se diluyó con Et²O (750 ml) y se agitó con NaHCO³ sat. (300 ml) durante 20 min. La capa acuosa se extrajo otra vez con Et²O (2 x 250 ml). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera (250 ml), se secaron (Na²SO⁴), se filtraron y se concentraron al vacío para proporcionar el compuesto en bruto (239 g) en forma de un líquido de color amarillo claro. El producto en bruto se purificó por destilación de recorrido corto al vacío (~3 mm de Hg). El producto se destiló a 50-55 °C usando una manta de térmica. Se recogieron el primer licor, la fracción principal y la fracción tardía. La fracción principal y la fracción tardía se combinaron posteriormente para proporcionar el producto que contenía una menor impureza polar. El residuo se cromatografió después sobre una columna de gel de sílice eluyendo con un gradiente de Et²O al 0-20 %/hexanos. Las fracciones que corresponden al producto según CCF se combinaron y se concentraron a presión reducida para proporcionar 4-metiltiofen-3-carboxilato de metilo (194 g, 1242 mmol, 88 % de rendimiento) al ~90 % de pureza en forma de un aceite de color amarillo claro. RMN 1H (400 MHz, CDCh) 88,08 (d, J = 3,5 Hz, 1H), 6,94-6,89 (m, 1H), 3,85 (s, 3H), 2,48 (d, J = 1,0 Hz, 3H). EM(EN) [M+H]+ 156,9.

Intermedio 2

(2-metoxi-4,6-dimetilpiridin-3-il)metanamina

A una solución enfriada (baño de agua enfriada con hielo) de 2-metoxi-4,6-dimetilnicotinonitrilo (10 g, 61,7 mmol) en Et²O (200 ml) se le añadió gota a gota LiAlH⁴ 1 M en Et²O (123 ml, 123 mmol). El baño de hielo se retiró y la mezcla de reacción se agitó a t.a. durante 16 h. La mezcla de reacción se enfrió en un baño de agua enfriada con hielo y se inactivó con una cantidad mínima de agua (hasta que no se generó más hidrógeno). La reacción se filtró y el material insoluble se lavó con 10:1 DCM/MeOH. Los filtrados orgánicos combinados se concentraron. El residuo se purificó por cromatografía en columna (MeOH al 0-30 %/DCM; columna de gel de sílice HP de 100 g) para dar (2-metoxi-4,6-dimetilpiridin-3-il)metanamina (8,9 g) en forma de un semisólido de color amarillento.

Como alternativa, el intermedio 2 se preparó como sigue:

A una suspensión enfriada (baño de agua enfriada con hielo) de 2-metoxi-4,6-dimetilnicotinonitrilo (50 g, 308 mmol) en Et²O (1000 ml) se le añadió gota a gota LiAlH⁴2 M en THF (308 ml, 617 mmol) durante 30 min. La reacción se agitó durante 60 min, momento en el que el baño de hielo se retiró. La mezcla de reacción se agitó a t.a. durante 20 h. La mezcla de reacción se volvió a enfriar (baño de agua enfriada con hielo) y se inactivó gota a gota con H²O (25 ml), seguido de NaOH 3 M (25 ml) y más H²O (75 ml). El baño de refrigeración se retiró y se añadió MgSO⁴ (10 cucharadas colmadas). La mezcla se agitó durante 1 h, momento en el cual se filtró a través de Celite®. Los sólidos se lavaron con Et²O y las aguas madre se concentraron. El residuo se secó al vacío (hivac) durante 2 h para dar (2-metoxi-4,6-dimetilpiridin-3-il)metanamina (50 g, 98 % de rendimiento) en forma de un aceite de color amarillo que solidificó después de congelación. EM(EN) [M+H]+167,0.

Ejemplos

Ejemplo 1

(R)-5-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-3-metil-2-(1-(1-neopentilpiperidin-4-il)etil)-5,6,7,8-tetrahidro-4H tieno[3,2-c]azepin-4-ona

a) 4-metil-5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)tiofen-3-carboxilato de metilo

A un matraz de fondo redondo de 500 ml en atmósfera de Ar se le añadió dímero de (1,5-cidooctadieno)(metoxi)iridio (I) (1,3 g, 1,961 mmol). Con agitación, se añadió 4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolano (32 ml, 222 mmol) mediante una jeringa, seguido de una solución de 4,4'-di-terc-butil-2,2'-dipiridilo (1,04 g, 3,87 mmol) en n-hexano (75 ml) (la reacción se mantuvo fría 5-10 °C en un baño de hielo). Después de agitar durante 1 minuto, se añadió 4-metiltiofen-3-carboxilato de metilo (20,0 g, 128 mmol) (se observó desprendimiento de gas). La reacción se agitó durante una noche a t.a. La reacción se evaporó a sequedad al vacío y se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (Isco® RediSep Rf Gold 330 g, EtOAc del 0 al 10 % en hexanos). Las fracciones puras se combinaron y se evaporaron a sequedad para dar 4-metil-5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)tiofen-3-carboxilato de metilo (33,1 g, 117 mmol, 92 % de rendimiento) en forma de un aceite incoloro, que solidificó a un sólido ceroso de color blanco al vacío. EM(EN) [M+H]+ 200,9 (ácido borónico), 283,1 (boronato).

b) 4-(1-(((trifluorometil)sulfonil)oxi)vinil)piperidin-1-carboxilato de terc-butilo

A una solución en agitación de 4-acetilpiperidin-1-carboxilato de terc-butilo (25 g, 110 mmol) en THF (250 ml) a -78 °C en atmósfera de nitrógeno se le añadió gota a gota NaHMDS 1 N en THF (130 ml, 130 mmol). La reacción se agitó a -78 °C durante 1 h. A continuación se añadió una solución de 1,1,1 -trifluoro-N-(piridin-2-il)-N-((trifluorometil)sulfonil)metanosulfonamida (45 g, 126 mmol) en THF (100 ml) gota a gota durante 15 min. La reacción se agitó durante 1 h a -78 °C, después a 0 °C durante 30 min. La reacción se interrumpió con agua fría (500 ml), se extrajo con EtOAc (2 x 250 ml), se lavó con salmuera, se secó (Na²SO⁴), se filtró y se concentró al vacío. El producto en bruto se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (Isco® RediSep Rf Gold 330 g, del 0 al 20 % de EtOAc en hexanos). (UV negativo, visualizado por carbonización con H²SO⁴ en EtOH.) Las fracciones que contenían el producto se combinaron y se evaporaron a sequedad para dar 4-(1 -(((trifluorometil)sulfonil)oxi)vinil)piperidin-1 -carboxilato de terc-butilo (29.1 g, 81 mmol, 73.6 % de rendimiento) en forma de un aceite incoloro. (La CLEM y la RMN 1H mostraron ~16 % de N-Boc-4-etinilpiperidina) EM(EN) [M+H]+ 304,0 (-isobutileno), 283,1 (-Boc).

c) 4-(1-(4-(metoxicarbonil)-3-metiltiofen-2-il)vinil)piperidin-1-carboxilato de terc-butilo

Una solución en agitación de 4-metil-5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)tiofen-3-carboxilato de metilo (50 g, 177 mmol), 4-(1-(((trifluorometil)sulfonil)oxi)vinil)piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo (76 g, 211 mmol) y Na²CO³ (45 g, 536 mmol) en 1,4-dioxano (450 ml) y agua (150 ml) se purgó con N² burbujeándolo durante 5 min. La reacción se cargó con Pd(PPh³⁾⁴ (8 g, 6,92 mmol) y se calentó a 70 °C en atmósfera de N² durante 1 h (desprendimiento de gas vigoroso). La reacción se diluyó con EtOAc (500 ml), se lavó con agua (500 ml) y salmuera, se secó (Na²SO⁴) y se concentró al vacío. El residuo se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (Isco® RediSep Rf Gold 330 g, del 0 al 20 % de EtOAc/hexanos) para dar 4-(1-(4-(metoxicarbonil)-3-metiltiofen-2-il)vinil)piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo (58,8 g, 161 mmol, 91 % de rendimiento) en forma de un aceite de color amarillo claro. EM(EN) [M+H]+ 266,1 (-Boc), [M+H]+ 278,0 (-isobutileno, -MeOH), [M+H]+ 310,1 (-isobutileno), [M+Na]+ 388,1.

d) 4-(1-(4-(metoxicarbonil)-3-metiltiofen-2-il)etil)piperidin-1-carboxilato de (R)-ferc-butilo

Una solución de 4-(1-(4-(metoxicarbonil)-3-metiltiofen-2-il)vinil)piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo (31,0 g, 85 mmol) en DCM (500 ml) se purgó con una corriente de N² durante 10 min. A la solución purgada se le añadió (R,R)-[COD]Ir[cy² PThrePHOX] (2,64 g, 1,527 mmol). La mezcla se cargó con H² (344,74 kPa) y se agitó (reactor Parr) durante 22 h, momento en el cual se filtró a través de Celite®, se lavó con DCM (50 ml) y se concentró. La purificación del residuo (columna de sílice Isco® de 330 gramos; gradiente B: 3-30 %; A = heptano; B = EtOAc) dio 4-(1-(4-(metoxicarbonil)-3-metiltiofen-2-il)etil)piperidin-1-carboxilato de (R)-ferc-butilo (30,9 g, 80 mmol, 94 % de rendimiento) en forma de un aceite espeso. EM(EN) [M+H]+ 390,2. Se determinó que la pureza óptica del producto era 97,6 % ee por CLAR quiral (Chiralpak AY-H, 5 micrómetros, 4,6 mm x 150 mm; 245, 250 nm UV; 90:10:0,1 nheptano:EtOH:isopropilamina, isocrática, 1,0 ml/min). La configuración absoluta se confirmó por cristalografía de rayos X de molécula pequeña de la sal del ácido L-(+)-tartárico de la amina desprotegida de Boc correspondiente.

e) 4-(1-(5-bromo-4-(metoxicarbonil)-3-metiltiofen-2-il)etil)piperidin-1-carboxilato de (R)-ferc-butilo

A una solución de 4-(1-(4-(metoxicarbonil)-3-metiltiofen-2-il)etil)piperidin-1-carboxilato de (R)-ferc-butilo (33,2 g, 90 mmol) en DMF (500 ml) se le añadió NBS (20,9 g, 117 mmol). La reacción se mantuvo durante aproximadamente 4 h, momento en el cual se diluyó con agua y se extrajo con Et²O (1,5 l). Los extractos orgánicos se lavaron con agua y salmuera, se secaron sobre MgSO⁴, se filtraron y se evaporaron. La purificación del residuo por cromatografía en columna (del 5 al 20% de EtOAc/hexanos) dio 4-(1-(5-bromo-4-(metoxicarbonil)-3-metiltiofen-2-il)etil)piperidin-1-carboxilato de (R)-fere-butilo (34 g, 72,4 mmol, 80 % de rendimiento). EM(EN) [M+H]+ 468,2, 470,2 (M+Na).

f) 4-(1-(4-(metoxicarbonil)-3-metil-5-(3-oxopropil)tiofen-2-il)etil)piperidin-1-carboxilato de (R)-fere-butilo

A una solución de 4-(1-(5-bromo-4-(metoxicarbonil)-3-metiltiofen-2-il)etil)piperidin-1-carboxilato de (R)-fere-butilo (50 g, 112 mmol) en DMF (1 l) se le añadió prop-2-en-1-ol (0,023 l, 560 mmol), Bu⁴NCl (37,4 g, 134 mmol) y NaHCO³ (37,6 g, 448 mmol). La mezcla de reacción se desgasificó con N² y se añadió Pd(OAc)² (3,77 g, 16,8 mmol). La mezcla de reacción se calentó a 65 °C durante 2 h, momento en el cual se dejó enfriar a ta. La mezcla se diluyó con agua (1,3 l) y se extrajo con Et²O (2x). Los extractos combinados se secaron (MgSO⁴ ) y se concentraron. El residuo se purificó por cromatografía en columna (gel de sílice, del 10 al 40 % de EtOAc/hexanos) para dar 4-(1-(4-(metoxicarbonil)-3-metil-5-(3-oxopropil)tiofen-2-il)etil)piperidin-1-carboxilato de (R)-fere-butilo (42 g, 94 mmol, 84 % de rendimiento) en forma de un aceite de color amarillo claro. EM(EN) [M+H]+ 446,2 (M+Na) ^{4 6 4 , 3} (M+MeCN).

g) 4-(1-(5-(3-(((2-metoxi-4,6-dimetilpiridin-3-il)metil)amino)propil)-4-(metoxicarbonil)-3-metiltiofen-2-il)etil)piperidin-1-carboxilato de (R)-fere-butilo

A una solución de 4-(1-(4-(metoxicarbonil)-3-metil-5-(3-oxopropil)tiofen-2-il)etil)piperidin-1-carboxilato de (Referebutilo (36,3 g, ⁸⁶ mmol) en MeOH (600 ml) se le añadió (2-metoxi-4,6-dimetilpiridin-3-il)metanamina (16,38 g, 99 mmol) en forma de un sólido congelado. La reacción se mantuvo a t.a. durante 1,5 h. Después, la reacción se enfrió en un baño de hielo durante 10 min, momento en el cual se añadió NaBH⁴ (8,11 g, 214 mmol) en forma de un sólido (algo de formación de espuma/desprendimiento de gas). La mezcla se agitó durante 15 min. El baño de hielo se retiró y la reacción se agitó a t.a. durante 2 h. La reacción se volvió a enfriar en un baño de hielo y se inactivó con NH⁴Cl acuoso sat. (200 ml). El baño de hielo se retiró y la reacción se concentró al vacío hasta ~1/4 de volumen. La mezcla se diluyó con NH⁴Cl acuoso sat. y se extrajo con EtOAc (2x). Los extractos orgánicos combinados se lavaron con NH⁴Cl acuoso sat., se secó sobre MgSO⁴ (con agitación durante 15 min), se filtró a través de Celite® y se concentró para dar 4-(1-(5-(3-(((2-metoxi-4,6-dimetilpiridin-3-il)metil)amino)propil)-4-(metoxicarbonil)-3-metiltiofen-2-il)etil)piperidin-1-carboxilato de (R)-fere-butilo (55,5 g, 87 mmol basándose en un 90 % de pureza según CLAR, 100 % de rendimiento) en forma de un aceite. El material se secó al vacío durante 30 min. EM(EN) [M+H]+ 574,5.

h) Ácido (R)-5-(1-(1-(fere-butoxicarbonil)piperidin-4-il)etil)-2-(3-(((2-metoxi-4,6-dimetilpiridin-3-il)metil)amino)propil)-4-metiltiofen-3-carboxílico

A una solución de 4-(1-(5-(3-(((2-metoxi-4,6-dimetilpiridin-3-il)metil)amino)propil)-4-(metoxicarbonil)-3-metiltiofen-2-il)etil)piperidin-1 -carboxilato de (R)-terc-butilo (55 g, 96 mmol) en MeOH (600 ml) y t Hf (130 ml) se le añadió NaOH 5 N (192 ml, 959 mmol). La reacción se calentó a 63 °C durante 22 h, momento en el cual se concentró al vacío. El residuo se diluyó con agua (400 ml) y DCM (400 ml) y se enfrió en un baño de hielo. A la mezcla se le añadió HCl ⁶ N (158 ml, 949 mmol) para ajustar el pH a 5-6 (papel). La mezcla se agitó bien y las capas se separaron. La capa acuosa se extrajo con DCM (200 ml) y los extractos orgánicos combinados se secaron sobre MgSO⁴ (en agitación durante 30 min), se filtraron a través de Celite® y se concentraron para dar ácido (R)-5-(1-(1-(terc-butoxicarbonil)piperidin-4-il)etil)-2-(3-(((2-metoxi-4,6-dimetilpiridin-3-il)metil)amino)propil)-4-metiltiofen-3-carboxílico (52,5 g, 87 mmol, 91 % de rendimiento). El residuo se secó al vacío durante 2 h. EM(EN) [M+H]+ 560,4.

i) 4-(1-(5-((2-metoxi-4,6-dimetilpiridin-3-il)metil)-3-metil-4-oxo-5,6,7,8-tetrahidro-4H-tieno[3,2-c]azepin-2-il)etil)piperidin-1 -carboxilato de (R)-terc-butilo

A una solución de ácido (R)-5-(1-(1-(terc-butoxicarbonil)piperidin-4-il)etil)-2-(3-(((2-metoxi-4,6-dimetilpiridin-3-il)metil)amino)propil)-4-metiltiofen-3-carboxílico (52,5 g, 94 mmol), EDC (21,58 g, 113 mmol) y HOAt (15,32 g, 113 mmol) en DMSO (400 ml) se le añadió NMM (25,8 ml, 234 mmol). La reacción se mantuvo durante 18 h, momento en el cual se vertió lentamente en agua enfriada con hielo (1500 ml). La mezcla se agitó vigorosamente (agitador superior) durante 40 min. La mezcla se filtró y los sólidos se lavaron con agua y se secaron al aire durante ~1 h. El sólido aún húmedo se disolvió en DCM y se lavó con NH⁴Cl acuoso sat., se secó (Mg²SO⁴), se filtró a través de Celite® y se concentró. La purificación del residuo por cromatografía en columna (columna de sílice Isco® de 330 g; gradiente B: 4-40 %; A = heptano. B = 3:1 EtOAc/EtOH) dio 4-(1-(5-((2-metoxi-4,6-dimetilpiridin-3-il)metil)-3-metil-4-oxo-5,6,7,8-tetrahidro-4H-tieno[3,2-c]azepin-2-il)etil)piperidin-1-carboxilato de (R)-terc-butilo (34,3 g, 60 mmol, 64 % de rendimiento) en forma de un sólido cristalino de color amarillo. EM(EN) [M+H]+ 542,4.

j) (R)-5-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-3-metil-2-(1-(piperidin-4-il)etil)-5,6,7,8-tetrahidro-4H-tieno[3,2-c]azepin-4-ona

A una solución de 4-(1-(5-((2-metoxi-4,6-dimetilpiridin-3-il)metil)-3-metil-4-oxo-5,6,7,8-tetrahidro-4H-tieno[3,2-c]azepin-2-il)etil)piperidin-1 -carboxilato de (R)-terc-butilo (34,3 g, 63,3 mmol) en MeOH (450 ml) se le añadió HCl 4 N en 1,4-dioxano (222 ml, ⁸⁸⁶ mmol). La reacción se mantuvo durante 15 min a t.a., después se calentó a 70 °C durante 24 h. La reacción se dejó enfriar a t.a. y se concentró. El residuo se diluyó con DCM (500 ml) y agua (300 ml) y el pH se ajustó a aproximadamente 11 con NH⁴OH concentrado. La mezcla se agitó durante 15 min, momento en el cual se separaron las capas. La capa acuosa se extrajo con DCM y los extractos orgánicos combinados se secaron (Mg²SO⁴), se filtraron y se concentraron. El residuo se secó al vacío durante 18 h para dar (R)-5-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-3-metil-2-(1-(piperidin-4-il)etil)-5,6,7,8-tetrahidro-4H-tieno[3,2-c]azepin-4-ona (29,3 g, 65,1 mmol, 100 % de rendimiento). EM(EN) [M+H]+ 428,3.

k) (R)-5-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-3-metil-2-(1-(1-neopentilpiperidin-4-il)etil)-5,6,7,8-tetrahidro-4H-tieno[3,2-c]azepin-4-ona

A una solución de (R)-5-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-3-metil-2-(1-(piperidin-4-il)etil)-5,6,7,8-tetrahidro-4H-tieno[3,2-c]azepin-4-ona (1,15 g, 2,69 mmol) en DCE (30 ml) se le añadió pivalaldehído (0,747 ml, 6,72 mmol). La reacción se agitó durante 5 min, momento en el cual se añadió AcOH (0,308 ml, 5,38 mmol). Después de 15 min, se añadió NaBH(OAc)³ (1,710 g, 8,07 mmol) en forma de un sólido y la reacción se agitó a t.a. durante 18 h. La reacción se diluyó con DCM (20 ml) y H²O. El pH se ajustó a 10 con una combinación de NaHCO³ sat. y Na²CO³ sat. La mezcla se agitó durante 30 min y se separaron las capas. La capa acuosa se extrajo con DCM y los extractos orgánicos combinados se secaron sobre Mg²SO⁴, se filtraron y se concentraron. El residuo se purificó por cromatografía en columna (columna de sílice Isco® de 40 g; gradiente B: 15-90 %; A = heptano; B = 3:1 EtOAc/EtOH NH⁴OH al 1 %). El residuo purificado se trató con DCM y se concentró. El residuo se trató después con TBME y se concentró (2x). El sólido se volvió a secar en un horno de vacío a 45 °C durante 4 h para dar (R)-5-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-3-metil-2-(1-(1-neopentilpiperidin-4-il)etil)-5,6,7,8-tetrahidro-4H-tieno[3,2-c]azepin-4-ona (912 mg, 1,777 mmol, 66,1 % de rendimiento). RMN 1H (DMSO-da) 811,58 (s, 1H), 5,91 (s, 1H), 4,61 (d, J = 13,7 Hz, 1H), 4,50 (d, J = 13,4 Hz, 1H), 3,16-3,28 (m, 2H), 2,75-2,90 (m, 2H), 2,62-2,73 (m, 3H), 1,93-2,20 (m, 13H), 1,74 (d, J = 8,9 Hz, 1H), 1,65 (quint., J = 6,7 Hz, 2H), 1,33 (d, J = 9,4 Hz, 1H), 1,11-1,28 (m, 7H), 0,81 (s, 9H). EM(EN) [M+H]+ 498,4.

Como alternativa, el compuesto del ejemplo 1 se preparó como sigue:

a') 4-metil-5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)tiofen-3-carboxilato de metilo

A una mezcla enfriada (baño de hielo) de dímero (1,5-ciclooctadieno)(metoxi)iridio (I) (1,6 g, 2,41 mmol) y 4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolano (25 ml, 173 mmol) se le añadió una solución de 4,4'-di-terc-butil-2,2'-dipiridilo (1,3 g, 4,84 mmol) en n-hexano (75 ml). Después de agitar durante 1 min, se añadió 4-metiltiofen-3-carboxilato de metilo (25 g, 160 mmol) (se observó desprendimiento de gas). La reacción se dejó calentar a t.a. y se agitó durante una noche. La reacción se concentró y el residuo se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (0-10% de EtOAc/hexanos) para dar 4-metil-5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)tiofen-3-carboxilato de metilo (29,2 g, 104 mmol, 65 % de rendimiento) en forma de un aceite incoloro que solidificó a un sólido ceroso de color blanco al vacío. EM(EN) [M+H]+ 200,9 (ácido borónico), 283,1 (boronato).

b') 4-(1-(((trifluorometil)sulfonil)oxi)vinil)piperidin-1-carboxilato de terc-butilo

A una solución enfriada (-78 °C) de 4-acetilpiperidin-1-carboxilato de terc-butilo (25 g, 110 mmol) en THF (250 ml) en atmósfera de nitrógeno se le añadió gota a gota bis(trimetilsilil)amida de sodio 1 N en THF (130 ml, 130 mmol). La reacción se mantuvo a -78 °C durante 1 h, momento en el cual se añadió una solución de 1,1,1 -trifluoro-N-(piridin-2 il)-N-((trifluorometil)sulfonil)metanosulfonamida (45 g, 126 mmol) en THF (100 ml) gota a gota durante 15min. La reacción se mantuvo durante 1 h a -78 °C, después a 0 °C durante 30 min. La reacción se interrumpió con agua fría (500 ml), se extrajo con EtOAc (2 x 250 ml), se lavó con salmuera, se secó (Na² SO⁴) y se concentró. El residuo se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (0-20 % de EtOAc/hexanos) para dar 4-(1-(((trifluorometil)sulfonil)oxi)vinil)piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo (28,8 g, 80 mmol, 73 % de rendimiento) en forma de un aceite incoloro. Em (EN) [M+H]+ -isobutileno 304,0, [M+H]+ -Boc 260,0.

c') 4-(1-(4-(metoxicarbonil)-3-metiltiofen-2-il)vinil)piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo

Una mezcla de 4-metil-5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)tiofen-3-carboxilato de metilo (33 g, 117 mmol), 4­ (1-(((trifluorometil)sulfonil)oxi)vinil)piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo (50 g, 139 mmol) y NaHCO³ (30 g, 357 mmol) en 1,4-dioxano (300 ml) y agua (100 ml) se purgó con nitrógeno. La reacción se cargó con tetraquis(trifenilfosfina)paladio (0) (6,8 g, 5,88 mmol) y se calentó a 70 °C en atmósfera de N² durante 2 h. La reacción se diluyó con EtOAc (300 ml), se lavó con agua (300 ml) y salmuera, se secó (Na²SO⁴) y se concentró. El residuo se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (0-20% de EtOAc/hexanos) para dar 4-(1-(4-(metoxicarbonil)-3-metiltiofen-2-il)vinil)piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo (34,5 g, 81 % de rendimiento) en forma de un aceite de color amarillo claro. EM(EN) [M+H]+-Boc 266,1, [M+H]+-isobutileno -MeOH 278,0, [M+H]+-isobutileno 310,1, [M+Na]+ 388,1. d') 4-(1-(4-(metoxicarbonil)-3 -metiltiofen-2-il)etil)piperidin-1 -carboxilato de (R)-ferc-butilo

Una solución de 4-(1-(4-(metoxicarbonil)-3-metiltiofen-2-il)vinil)piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo (42,7 g, 117 mmol) y (R,R)-[COD]Ir[cy² PThrePHOX] (2,83 g, 1,636 mmol) en DCM (250 ml) se hidrogenó a 413,68 kPa de presión de hidrógeno durante 15 h en un agitador Parr. La mezcla se concentró y el residuo se purificó por cromatografía en columna (0-25% de EtOAc/hexanos) para proporcionar 4-(1-(4-(metoxicarbonil)-3-metiltiofen-2-il)etil)piperidin-1-carboxilato de (R)-ferc-butilo (38,3 g, 89 % de rendimiento) en forma de un sólido de color amarillo suave. La CLAR quiral (Chiralpak® AY-H, 5 micrómetros (4,6 mm x 150 mm); 240, 250 nm UV; 1,0 ml/min; 90:10:0,1 nheptano:EtOH:isopropilamina (isocrática)) mostró que el material era 98,5 % ee. EM(EN) [M+H]+ 368,3.

e') 4-(1-(5-bromo-4-(metoxicarbonil)-3-metiltiofen-2-il)etil)piperidin-1-carboxilato de (R)-ferc-butilo

A una solución enfriada (0 °C) de 4-(1-(4-(metoxicarbonil)-3-metiltiofen-2-il)etil)piperidin-1-carboxilato de (R)-ferc-butilo (72,5 g, 200 mmol) en DMF (200 ml) se le añadió NBS (49,1 g, 276 mmol). El baño de hielo se retiró y la mezcla se agitó a t.a. durante 6 h. La mezcla se vertió en agua y se extrajo con Et²O (3 x 400 ml). Los extractos orgánicos combinados se concentraron hasta la mitad de volumen, se lavaron con solución acuosa de ditionita sódica y se concentraron a sequedad. La purificación del residuo por cromatografía en columna (0-30 % de EtOAc/hexanos) dio 4-(1-(5-bromo-4-(metoxicarbonil)-3-metiltiofen-2-il)etil)piperidin-1-carboxilato de (R)-fere-butilo (79,8 g, 91 % de rendimiento) en forma de un aceite de color amarillo claro. RMN 1H (400 MHz, CDCh) 84,24-3,99 (m, 2H), 3,92-3,85 (m, 3H), 2,89 (dd, J = 7,1, 8,4 Hz, 1H), 2,72-2,51 (m, 2H), 2,23 (s, 3H), 1,90-1,79 (m, 1H), 1,54-1,48 (m, 1H), 1,45 (s, 9H), 1,31-1,27 (m, 1H), 1,26-1,22 (m, 3H), 1,20-1,02 (m, 2H). EM(EN) [M+H]+ 468,2, 470,2 (M+Na).

f) 4-(1-(4-(metoxicarbonil)-3-metil-5-(3-oxopropil)tiofen-2-il)etil)piperidin-1-carboxilato de (R)-fere-butilo

A una solución de 4-(1-(5-bromo-4-(metoxicarbonil)-3-metiltiofen-2-il)etil)piperidin-1-carboxilato de (R)-fere-butilo (44 g) en MeOH (450 ml) se le añadió carbón activo Darco® (40 g). La mezcla se calentó a 45 °C durante 90 min, momento en el cual se filtró a través de Celite® y se lavó con MeOH templado (500 ml). El filtrado se concentró y el residuo se disolvió en EtOAc y heptano. La solución se concentró y se secó al vacío (hivac) durante 1 h para devolver 38 g del material de partida.

A una solución de 4-(1-(5-bromo-4-(metoxicarbonil)-3-metiltiofen-2-il)etil)piperidin-1-carboxilato de (R)-fere-butilo (38 g, 85 mmol) en DMF (400 ml) se le añadió prop-2-en-1-ol (20,3 ml, 300 mmol), Bu⁴NCl (23,7 g, 85 mmol) y Na²CO³ (22,6 g, 213 mmol). La mezcla de reacción se desgasificó con N² durante 10-15 min y se añadió Pd(OAc⁾² (2,9 g, 12,8 mmol). El recipiente de reacción se evacuó y se volvió a llenar con N² (3x) y se calentó a 65 °C durante 40 min. La reacción se dejó enfriar a t.a., se vertió en NH⁴Cl sat. (1200 ml) y se extrajo con Et²O (2x). Los extractos combinados se secaron (MgSO⁴), se filtraron a través de Celite® y se concentraron. El residuo se purificó por cromatografía en columna (3-25 % de EtOAc/heptanos) para dar 4-(1-(4-(metoxicarbonil)-3-metil-5-(3-oxopropil)tiofen-2-il)etil)piperidin-1-carboxilato de (R)-fere-butilo (26,2 g, 65 % de rendimiento). EM(EN) [M+H]+ 446,4 (M+Na).

g') 4-(1-(5-(3-(((2-metoxi-4,6-dimetilpiridin-3-il)metil)amino)propil)-4-(metoxicarbonil)-3-metiltiofen-2-il)etil)piperidin-1-carboxilato de (R)-fere-butilo

A una solución de 4-(1-(4-(metoxicarbonil)-3-metil-5-(3-oxopropil)tiofen-2-il)etil)piperidin-1-carboxilato de (Referebutilo (20 g, 47 mmol) en MeOH (300 ml) se le añadió (2-metoxi-4,6-dimetilpiridin-3-il)metanamina (9,4 g, 57 mmol) en forma de un sólido congelado. La reacción se mantuvo a t.a. durante 1,5 h. Después, la reacción se enfrió en un baño de hielo durante 10 min, momento en el que se añadió NaBH⁴ (4,5 g, 120 mmol) en forma de un sólido (formación de espuma/desprendimiento de gas vigorosos). La mezcla se agitó durante 15 min. El baño de hielo se retiró y la reacción se agitó a t.a. durante 1 h. La reacción se volvió a enfriar en un baño de hielo y se inactivó con NH⁴Cl acuoso sat. (120 ml). El baño de hielo se retiró y la reacción se concentró a ~1/4 de volumen. La mezcla se diluyó con NH⁴Cl acuoso sat. y se extrajo con EtOAc (2x). Los extractos orgánicos combinados se lavaron con salmuera, se secaron sobre MgSO⁴ (con agitación durante 15 min), se filtraron a través de Celite® y se concentraron para dar 4-(1-(5-(3-(((2-metoxi-4,6-dimetilpiridin-3-il)metil)amino)propil)-4-(metoxicarbonil)-3-metiltiofen-2-il)etil)piperidin-1-carboxilato de (R)-fere-butilo (27 g, 99 % de rendimiento) en forma de una espuma de color blanco. EM(EN) [M+H]+ 574,5.

h') Ácido (R)-5-(1-(1-(fere-butoxicarbonil)piperidin-4-il)etil)-2-(3-(((2-metoxi-4,6-dimetilpiridin-3-il)metil)amino)propil)-4metiltiofen-3-carboxílico

A una solución de 4-(1-(5-(3-(((2-metoxi-4,6-dimetilpiridin-3-il)metil)amino)propil)-4-(metoxicarbonil)-3-metiltiofen-2-il)etil)piperidin-1-carboxilato de (R)-terc-butilo (27 g, 47 mmol) en MeOH (400 ml) y t Hf (80 ml) se le añadió NaOH 5 N (93 ml, 470 mmol). La reacción se calentó a 63 °C durante 18 h, momento en el cual se concentró. El residuo se diluyó con agua (150 ml) y DCM (300 ml) y se enfrió en un baño de hielo. A la mezcla se le añadió HCl ⁶ N (77 ml, 460 mmol) para ajustar el pH a 5-6. La mezcla se agitó bien y las capas se separaron. La capa acuosa se extrajo con DCM (200 ml) y los extractos orgánicos combinados se secaron sobre MgSO⁴ (con agitación durante 30 min), se filtraron a través de Celite® y se concentraron para dar ácido (R)-5-(1-(1-(terc-butoxicarbonil)piperidin-4-il)etil)-2-(3-(((2-metoxi-4,6-dimetilpiridin-3-il)metil)amino)propil)-4-metiltiofen-3-carboxílico (25 g, 80 % de rendimiento). EM(EN) [M+H]+ 560,4.

i') 4-(1-(5-((2-metoxi-4,6-dimetilpiridin-3-il)metil)-3-metil-4-oxo-5,6,7,8-tetrahidro-4H-tieno[3,2-c]azepin-2-il)etil)piperidin-1-carboxilato de (R)-terc-butilo

A una solución de ácido (R)-5-(1-(1-(terc-butoxicarbonil)piperidin-4-il)etil)-2-(3-(((2-metoxi-4,6-dimetilpiridin-3-il)metil)amino)propil)-4-metiltiofen-3-carboxílico (25,2 g, 45 mmol), EDC (10,4 g, 54 mmol) y HOAt (6,74 g, 49,5 mmol) en DMSO (200 ml) se le añadió NMM (12,4 ml, 113 mmol). La reacción se mantuvo durante 18 h, momento en el cual se vertió lentamente en agua enfriada con hielo (1000 ml). La mezcla se agitó vigorosamente (agitador superior) durante 30 min. La mezcla se filtró y los sólidos se lavaron con agua y se secaron al aire durante 20 min. El sólido aún húmedo se disolvió en DCM y se lavó con NH⁴O acuoso sat., se secó (MgSO⁴), se filtró a través de Celite® y se concentró. La purificación del residuo por cromatografía en columna (8-40% de 3:1 EtOAc/EtOH en heptano) dio 4-(1-(5-((2-metoxi-4,6-dimetilpiridin-3-il)metil)-3-metil-4-oxo-5,6,7,8-tetrahidro-4H-tieno[3,2-c]azepin-2-il)etil)piperidin-1-carboxilato de (R)-terc-butilo (18,2 g, 72 % de rendimiento). EM(EN) [M+H]+ 542,3.

j') (R)-5-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-3-metil-2-(1-(piperidin-4-il)etil)-5,6,7,8-tetrahidro-4H-tieno[3,2-c]azepin-4-ona

A una solución de 4-(1-(5-((2-metoxi-4,6-dimetilpiridin-3-il)metil)-3-metil-4-oxo-5,6,7,8-tetrahidro-4H-tieno[3,2-c]azepin-2-il)etil)piperidin-1-carboxilato de (R)-ferc-butilo (18,2 g, 33,6 mmol) en MeOH (200 ml) se le añadió HCl 4 N en 1,4-dioxano (126 ml, 504 mmol). La reacción se mantuvo durante 15 min a t.a., después se calentó a 70 °C durante 30 h. La reacción se dejó enfriar a t.a. y se concentró. El residuo se diluyó con DCM (300 ml) y agua (150 ml) y el pH se ajustó a ~11 con NH⁴OH concentrado. La mezcla se agitó durante 15 min, momento en el cual se separaron las capas. La capa acuosa se extrajo con DCM (2x) y los extractos orgánicos combinados se secaron (MgSO⁴), se filtraron y se concentraron. El residuo se disolvió en TBME (200 ml) y se agitó en un baño de agua a 45 °C durante 30 min. Se formó un sólido de color blanco. La mezcla se concentró y se volvió a secar al vacío (hivac) durante 4 h para dar (R)-5-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-3-metil-2-(1-(piperidin-4-il)etil)-5,6,7,8-tetrahidro-4H-tieno[3,2-c]azepin-4-ona (15,6 g, 106 % de rendimiento) en forma de un sólido de color blanquecino que se usó sin más purificación. EM(EN) [M+H]+ 428,3.

k') (R)-5-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-3-metil-2-(1-(1-neopentilpiperidin-4-il)etil)-5,6,7,8-tetrahidro-4H-tieno[3,2-c]azepin-4-ona

A una solución de (R)-5-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-3-metil-2-(1-(piperidin-4-il)etil)-5,6,7,8-tetrahidro-4H-tieno[3,2-c]azepin-4-ona (28 g, ⁶⁶ mmol) en DCE (400 ml) se le añadió pivalaldehído (15 ml, 140 mmol). La reacción se agitó durante 3 min, momento en el cual se añadió AcOH (7,9 ml, 140 mmol). Después de 10 min, se añadió NaBH(OAc)³ (41,6 g, 196 mmol) en forma de un sólido y la reacción se agitó a t.a. durante 40 h. La reacción se vertió en hielo y DCM y se agitó bien. El pH se ajustó a ~10 con una combinación de NaHCO³ sat. y Na²CO³ sat. La mezcla se agitó durante 15 min y se separaron las capas. La capa acuosa se extrajo con DCM y los extractos orgánicos combinados se secaron sobre MgSO⁴, se filtraron a través de Celite® y se concentraron. El residuo se purificó por cromatografía en columna (10-80% de 3:1 EtOAc/EtOH NH⁴OH al 1 % en heptano). El residuo purificado se secó al vacío (hivac) durante 18 h para dar (R)-5-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-3-metil-2-(1-(1-neopentilpiperidin-4-il)etil)-5,6,7,8-tetrahidro-4H-tieno[3,2-c]azepin-4-ona (24,5 g, 74 % de rendimiento). RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6) ⁸ 0,81 (s, 9H) 1,07-1,29 (m, ⁶ H) 1,33 (d, J = 9,63 Hz, 1H) 1,65 (quint., J = 6,72 Hz, 2H) 1,74 (d, J = 10,14 Hz, 1H) 1,92-2,05 (m, 3H) 2,06-2,20 (m, 10H) 2,62-2,73 (m, 3H) 2,74-2,91 (m, 2H) 3,16-3,29 (m, 2H) 4,50 (d, J = 13,43 Hz, 1H) 4,61 (d, J = 13,69 Hz, 1H) 5,90 (s, 1H) 11,57 (s, 1H). EM(EN) [M+H]+ 498,4.

Preparación de la sal cristalina del ácido clorhídrico del compuesto del ejemplo 1

Se combinó (R)-5-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-3-metil-2-(1-(1-neopentilpiperidin-4-il)etil)-5,6,7,8-tetrahidro-4H-tieno[3,2-c]azepin-4-ona (20 mg) con acetona (0,2 ml). La mezcla se calentó a 40 °C con agitación. A la solución se le añadió HCl acuoso (3,0 M, 13 pl). La suspensión se sometió a ciclos de temperatura en bloques de 1 h a entre 40 °C y 5 °C durante una noche. Las suspensiones resultantes se agitaron a temperatura ambiente, la birrefringencia se comprobó por MLP y se aislaron por filtración para dar la sal cristalina de1HCl (Forma I), que se podría usar para sembrar una preparación a gran escala.

El experimento se repitió usando 50 mg de (R)-5-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-3-metil-2-(1-(1-neopentilpiperidin-4-il)etil)-5,6,7,8-tetrahidro-4H-tieno[3,2-c]azepin-4-ona y sembrando con los cristales de la Forma I anterior. Sin embargo, el experimento produjo una forma cristalina nueva de la sal de1HCl, denominada Forma II. La forma II de la sal del HCl parecía ser una forma más estable, debido a la conversión de la forma de las semillas de la Forma I a la Forma II y la mayor endotermia observada por CDB.

Se combinó (R)-5-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-3-metil-2-(1-(1-neopentilpiperidin-4-il)etil)-5,6,7,8-tetrahidro-4H-tieno[3,2-c]azepin-4-ona (462 mg; 0,928 mmol) con acetona (9,0 ml; 20 vol) a 40 °C con agitación. Se añadió HCl acuoso (3,0 M; 309 j l) a la solución, seguido de semillas de cristales (Forma II). La mezcla mostró precipitación a los pocos minutos. La suspensión se calentó a 40 °C durante 1 h, después se enfrió lentamente a 5 °C con una velocidad de refrigeración de 0,1 °C/min. El ciclo de frío-calor se repitió después 3 veces durante un periodo de 24 h. La suspensión se equilibró a TA durante 1 h. Los sólidos se filtraron y la torta húmeda se analizó por DRXP. Los sólidos restantes se secaron a 40 °C al vacío con una corriente de nitrógeno durante 4 horas. El rendimiento fue del 89,3 % (443 mg; 0,829 mmol) de la sal cristalina del HCl.

La sal cristalina del HCl se analizó por DRXP y era consistente con la Forma II como la torta húmeda antes y después del secado. Los datos térmicos mostraron una pérdida de peso del 0,8 % hasta 200 °C y una gran endotermia a 294 °C asociada con la descomposición. La imagen por MLP mostró partículas pequeñas, de forma irregular. El material era una sal estequiométrica 1:1, según se determinó mediante análisis por cromatografía iónica. Los datos del DVS mostraron una absorción total de humedad del 0,5 % durante el primer ciclo del 40-75 % de HR. El segundo ciclo, del 5-80 % de HR, mostró una sorción bastante lineal del 1,0% seguido de una disminución del 0,4 % entre el 80-90 % de HR. Los datos de la DRXP en la sal del HCl después del experimento del DVS no indicaron un cambio de forma o cambio en la cristalinidad.

El patrón de difracción de rayos X en polvo (DRXP) de este material (Forma II) se muestra en la Fig. 1 y en la Tabla I siguiente se proporciona un sumario de los ángulos de difracción y los espaciados d. El análisis por DRXP se realizó en un difractómetro PANanalytical X'Pert Pro en obleas de fondo cero de Si usando el detector X'celerator™ RTMS (Real Time Multi-Strip). Las condiciones de adquisición incluyen: radiación Cu Ka, tensión del generador: 45 kV, corriente del generador: 40 mA, tamaño de paso: 0,02° 20. Configuración en el lado del haz incidental: hendidura de divergencia fija (0,25°), hendiduras de Soller de 0,04 rad, hendidura antidispersión (0,25°) y máscara de haz de 10 mm. Configuración en el lado del haz difractado: hendidura de divergencia fija (0,25°) y hendidura de Soller de 0,04 rad.

TABLA I

continuación

El espectro Raman de este material (Forma II) se registró en un espectrómetro Nicolet NXR 9650 FT-Raman, a una resolución de 4 cm-1 con excitación a partir de un láser Nd:YVO4 l(A = 1064 nm). El espectro Raman de este material se muestra en la Fig. 2 con picos principales observados a 455,0, 478,7, 505,2, 533,5, 541,7, 565,1, 612,1, 693,5, 757,9, 791,3, 853,9, 995,1, 1046,7, 1113,8, 1148,2, 1208,9, 1240,9, 1279,4, 1315,4, 1390,2, 1437,7, 1473,5, 1550,7, 1628,2, 1654,8, 2735,5, 2917,4 y 2953,0 cm-1.

El termograma de la calorimetría diferencial de barrido (CDB) de este material (Forma II) se recogió en un calorímetro de barrido diferencial TA Instruments Q100 equipado con un automuestreador y un sistema de enfriamiento refrigerado con bajo una purga de 40 ml/min de N² y se muestra en la Fig. 3. Los experimentos se realizaron usando una velocidad de calentamiento de 15°C/min en una bandeja de aluminio ondulada. El termograma de la CDB de este material (Forma II) exhibió una sola gran endotermia con una temperatura de inicio de aproximadamente 250 °C, un pico de temperatura de aproximadamente 298 °C y entalpia de 195,4 J/g. Un experto en la técnica reconocerá que la temperatura de inicio, la temperatura pico y la entalpia de la endotermia pueden variar dependiendo de las condiciones experimentales.

El termograma del análisis termogravimétrico (TGA) de este material (Forma II) se registró en un analizador termogravimétrico TA Instruments Q500 y se muestra en la Fig. 4. Los experimentos se realizaron con una corriente de N² de 40 ml/min y una velocidad de calentamiento de 15 °C/min. El termograma del TGA de este material (Forma II) exhibió un solo evento de pérdida de peso observado antes de la descomposición térmica final. El evento de pérdida de peso tiene lugar en el intervalo de temperatura de 30 °C a 200 °C con una pérdida de peso de aproximadamente el 0,8 %.

Ejemplo 2

(R)-2-(1-(1-(ciclobutilmetil)piperidin-4-il)etil)-5-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-3-metil-5,6,7,8-tetrahidro-4H-tieno[3,2-c]azepin-4-ona

Siguiendo el procedimiento general del ejemplo 1, se preparó (R)-2-(1-(1-(ciclobutilmetil)piperidin-4-il)etil)-5-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-3-metil-5,6,7,8-tetrahidro-4H-tieno[3,2-c]azepin-4-ona. RMN 1H (DMSO-d6) 8 11,58 (s, 1H), 5,90 (s, 1H), 4,60 (d, J = 13,7 Hz, 1H), 4,50 (d, J = 13,7 Hz, 1H), 3,15-3,30 (m, 2H), 2,76-2,90 (m, 2H), 2,62-2,75 (m, 3H), 2,34-2,45 (m, 1H), 2,04-2,31 (m, 11H), 1,90-2,02 (m, 2H), 1,55-1,83 (m, 8H), 1,36 (d, J = 12,2 Hz, 1H), 1,05-1,31 (m, 7H). EM(EN) [M+H]+ 496,4.

Ejemplo 3

(R)-5-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-2-(1-(1-isobutilpiperidin-4-il)etil)-3-metil-5,6,7,8-tetrahidro-4H tieno[3,2-c]azepin-4-ona

Siguiendo el procedimiento general del ejemplo 1, se preparó (R)-5-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridm-3-il)metil)-2-(1-(1-isobutilpiperidin-4-il)etil)-3-metil-5,6,7,8-tetrahidro-4H-tieno[3,2-c]azepin-4-ona. RMN 1H (DMSO-d6) 8 11,58 (s, 1H), 5,91 (s, 1H), 4,60 (d, J = 13,4 Hz, 1H), 4,50 (d, J = 13,4 Hz, 1H), 3,16-3,29 (m, 2H), 2,79-2,93 (m, 2H), 2,74 (d, J = 11,2 Hz, 1H), 2,66 (t, J = 7,2 Hz, 2H), 2,09-2,20 (m, 9H), 1,95 (d, J = 7,4 Hz, 2H), 1,59-1,83 (m, 6H), 1,38 (d, J = 11,9 Hz, 1H), 1,07-1,29 (m, 6H), 0,81 (d, J = 6,3 Hz, 6H). EM(EN) [M+H]+ 484,4.

Ejemplo 4

(R)-2-(1-(1-(cidopentilmetil)piperidin-4-il)etil)-5-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-3-metil-5,6,7,8-tetrahidro-4H-tieno[3,2-c]azepin-4-ona

Siguiendo el procedimiento general del ejemplo 1, se preparó (R)-2-(1-(1-(cidopentilmetN)piperidin-4-il)etil)-5-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-3-metil-5,6,7,8-tetrahidro-4H-tieno[3,2-c]azepin-4-ona. RMN 1H (DMSO-d6) 8 11,51-11,64 (m, 1H), 5,91 (s, 1H), 4,56-4,68 (m, 1H), 4,45-4,54 (m, 1H), 3,24 (t, J = 5,45 Hz, 2H), 2,74-2,93 (m, J = 8,36 Hz, 3H), 2,67 (t, J = 7,22 Hz, 2H), 2,12-2,20 (m, 9H), 1,96-2,11 (m, 3H), 1,66 (d, J = 6,84 Hz, 8H), 1,33-1,57 (m, 5H), 1,12-1,22 (m, 7H). EM(EN) [M+H]+ 510,5.

Ejemplo 5

(R)-5-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-2-(1-(1-(2,2-dimetilbutil)piperidin-4-il)etil)-3-metil-5,6,7,8-tetrahidro-4H-tieno[3,2-c]azepin-4-ona

Siguiendo el procedimiento general del ejemplo 1, se preparó (R)-5-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-2-(1-(1-(2,2-dimetilbutil)piperidin-4-il)etil)-3-metil-5,6,7,8-tetrahidro-4H-tieno[3,2-c]azepin-4-ona. RMN 1H (DMSo-d6) 8 11,58 (s a, 1H), 5,91 (s, 1H), 4,56-4,66 (m, 1H), 4,46-4,54 (m, 1H), 3,23 (d, J = 13,18 Hz, 1H), 2,74-2,87 (m, J = 11,41 Hz, 2H), 2,65-2,70 (m, 3H), 2,16 (s, 3H), 2,13 (d, J = 1,52 Hz, 7H), 1,99 (s, 3H), 1,74 (d, J = 8,87 Hz, 1H), 1,60­ 1,69 (m, J = 6,84 Hz, 2H), 1,33 (d, J = 7,86 Hz, 1H), 1,10-1,26 (m, 9H), 0,73-0,79 (m, 9H). EM(EN) [M+H]+ 512,4.

Ejemplo 6

(R)-5-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-2-(1-(1-(2-fluoro-2-metilpropil)piperidin-4-il)etil)-3-metil-5,6,7,8-tetrahidro-4H-tieno[3,2-c]azepin-4-ona

a) (R)-5-((2-metoxi-4,6-dimetilpiridin-3-il)metil)-3-metil-2-(1-(piperidin-4-il)etil)-5,6,7,8-tetrahidro-4H-tieno[3,2-c]azepin-4-ona

Se trató 4-(1-(5-((2-metoxi-4,6-dimetil piridin-3-il)metil)-3-metil-4-oxo-5,6,7,8-tetrahidro-4H-tieno[3,2-c]azepin-2-il)etil)piperidin-1 -carboxilato de (R)-terc-butilo (3,0 g, 5,54 mmol) con una solución de TFA (5,12 ml, 66,5 mmol) en DCM (17 ml). La reacción se mantuvo durante 3,5 h. La CLEM mostró que quedaba ~8 % de material de partida. A la reacción se le añadió lentamente gota a gota más TFA (0,7 ml). Después de 30 min, la CLEM mostró que la reacción se había completado. La reacción se vertió lentamente en una mezcla de hielo, agua y NaHCO³ sat. con agitación. La mezcla se diluyó con DCM y se agitó durante 15 min (medido pH 8). Las capas se separaron y la acuosa se extrajo con DCM. Los extractos orgánicos se combinaron, se secaron (MgSO⁴) y se concentraron para dar (R)-5-((2-metoxi-4,6-dimetilpiridin-3-il)metil)-3-metil-2-(1-(piperidin-4-il)etil)-5,6,7,8-tetrahidro-4H-tieno[3,2-c]azepin-4-ona (2,7 g). EM(EN) [M+H]+ 442,2.

b) (R)-2-(1 -(1-(2-fluoro-2-metilpropM)piperidin-4-il)etM)-5-((2-metoxi-4,6-dimetilpiridin-3-il)metil)-3-metil-5,6,7,8-tetrahidro-4H-tieno[3,2-c]azepin-4-ona

A una solución de (R)-5-((2-metoxi-4,6-dimetilpiridin-3-il)metil)-3-metil-2-(1-(piperidin-4-il)etil)-5,6,7,8-tetrahidro-4H-tieno[3,2-c]azepin-4-ona (1,6 g, 3,62 mmol) en CH³CN (20 ml) se le añadió trifluorometanosulfonato de 2-fluoro-2-metilpropilo (1,624 g, 7,25 mmol) y Cs²CO³ (3,54 g, 10,87 mmol). La mezcla se calentó a 50 °C durante 6 h, momento en el cual se diluyó con DCM (30 ml) y se filtró. El filtrado se concentró y el residuo se purificó usando cromatografía en columna (0-60 % de EtOAc/hexanos) para dar (R)-2-(1-(1 -(2-fluoro-2-metilpropil)piperidin-4-il)etil)-5-((2-metoxi-4,6-dimetilpiridin-3-il)metil)-3-metil-5,6,7,8-tetrahidro-4H-tieno[3,2-c]azepin-4-ona (1,2 g) en forma de un sólido de color pardo claro. EM(EN) [M+H]+ 516,4.

c) (R)-5-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-2-(1-(1-(2-fluoro-2-metilpropil)piperidin-4-il)etil)-3-metil-5,6,7,8-tetrahidro-4H-tieno[3,2-c]azepin-4-ona

A una solución de (R)-2-(1-(1 -(2-fluoro-2-metilpropil)piperidin-4-il)etil)-5-((2-metoxi-4,6-dimetilpiridin-3-il)metil)-3-metil-5,6,7,8-tetrahidro-4H-tieno[3,2-c]azepin-4-ona (1,20 g, 2,327 mmol) en 1,4-dioxano (12 ml) se le añadió HCl 6 N (3,88 ml, 23,27 mmol). La mezcla se agitó a 70 °C durante 18 h. La mezcla se concentró y el residuo se disolvió en MeOH (10 ml). Se añadió NaHCO³ (0,586 g, 6,98 mmol) y la mezcla se agitó durante 15 min y se filtró. El filtrado se concentró y el residuo se purificó usando cromatografía en columna (10-80 % de 3:1 EtOAc/MeOH NH⁴OH al 1 % en heptano) para dar (R)-5-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-2-(1-(1 -(2-fluoro-2-metilpropil)piperidin-4-il)etil)-3-metil-5,6,7,8-tetrahidro-4H-tieno[3,2-c]azepin-4-ona (960 mg, 81% ) en forma de un sólido de color blanco. RMN 1H (400 MHz, metanol-d⁴) 8 1,23-1,51 (m, 12H), 1,76-1,92 (m, 3H), 1,95-2,13 (m, 2H), 2,22 (s, 3H), 2,28 (s, 3H), 2,30­ 2,35 (m, 3H), 2,38-2,43 (m, 1H), 2,44-2,49 (m, 1H), 2,78 (t, J = 7,35 Hz, 2H), 2,85-2,97 (m, 2H), 3,04 (d, J = 11,41 Hz, 1H), 3,35-3,43 (m, 2H), 4,68-4,85 (m, 2H), 6,15 (s, 1H). EM(EN) [M+H]+ 502,6.

Ejemplo 7

(R)-2-(1-(1-(ciclopropilmetil)piperidin-4-il)etil)-5-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-3-metil-5,6,7,8-tetrahidro-4H-tieno[3,2-c]azepin-4-ona

Siguiendo el procedimiento general del ejemplo 1, se preparó (R)-2-(1-(1-(ddopropNmetil)pipendin-4-il)etN)-5-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-3-metil-5,6,7,8-tetrahidro-4H-tieno[3,2-c]azepin-4-ona. RMN 1H (DMSO-da) 8 11,58 (s, 1H) 5,91 (s, 1H) 4,40-4,66 (m, 2H) 3,24 (t, J = 6,21 Hz, 2H) 2,98 (d, J = 11,15Hz, 1H) 2,84-2,92 (m, 2H) 2,67 (t, J = 7,22 Hz, 2H) 2,15 (d, J = 10,65 Hz, 9H) 2,10 (d, J = 6,59 Hz, 2H) 1,61-1,86 (m, 5H) 1,39 (d, J = 11,91 Hz, 1H) 1,10-1,26 (m, 6H) 0,72-0,83 (m, 1H) 0,38-0,45 (m, 2H) -0,01-0,06 (m, 2H). EM(EN) [M+H]+ 482,4.

Ejemplo 8

(R)-5-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-3-metil-2-(1-(1-((1-metilcidopentil)metil)piperidin-4-il)etil)-5,6,7,8-tetrahidro-4H-tieno[3,2-c]azepin-4-ona

Siguiendo el procedimiento general del ejemplo 1, se preparó (R)-5-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropindin-3-il)metil)-3-metil-2-(1-(1-((1-metilciclopentil)metil)piperidin-4-il)etil)-5,6,7,8-tetrahidro-4H-tieno[3,2-c]azepin-4-ona. RMN 1H (400 MHz, metanol-d⁴) 80,90 (m, 3H), 1,12-1,29 (m, 8H), 1,29-1,45 (m, 3H), 1,50-1,72 (m, 6H), 1,76 (d, J = 7,86 Hz, 1H), 1,96-2,11 (m, 2H), 2,11-2,24 (m, 11H), 2,60-2,72 (m, 2H), 2,77 (d, J = 11,66 Hz, 1H), 2,81-2,93 (m, 2H), 3,19-3,29 (m, 2H), 4,50 (d, J = 13,69 Hz, 1H), 4,61 (d, J = 13,69 Hz, 1H,), 5,91 (s, 1H), 8,17 (s, 1H). EM(EN) [M+H]+ 524,4.

Ejemplo 9

(R)-2-(1-(1 -(biciclo [2.2.2]octan-1-ilmetil)piperidin-4-il)etil)-5-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-3-metil-5,6,7,8-tetrahidro-4H-tieno[3,2-c]azepin-4-ona

Siguiendo el procedimiento general del ejemplo 1, se preparó (R)-2-(1-(1-(biciclo[2.2.2]octan-1-ilmetil)piperidin-4-il)etil)-5-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-3-metil-5,6,7,8-tetrahidro-4H-tieno[3,2-c]azepin-4-ona. RMN 1H (400 MHz, metanol-d⁴) ⁸ 1,32 (d, J = 6,84 Hz, 3H), 1,49-1,85 (m, 20H), 2,10 (a, 1H), 2,23 (s, 3H), 2,28 (s, 3H), 2,32 (s, 3H), 2,72-3,19 (m, 7H), 3,35-3,55 (m, 4H), 4,73 (d, J = 13,94 Hz, 1H), 4,82 (d, J = 13,94 Hz, 1H), 6,15 (s, 1H), 8,51 (s, 1H). EM(EN) [M+H]+ 550,4.

Ejemplo 10

(R)-5-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-3-metil-2-(1-(1-((1-metilcidobutil)metil)piperidin-4-il)etil)-5,6,7,8-tetrahidro-4H-tieno[3,2-c]azepin-4-ona

A una solución de (R)-5-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-3-metil-2-(1-(piperidin-4-il)etil)-5,6,7,8-tetrahidro-4H-tieno[3,2-c]azepin-4-ona (43 g, 91 mmol) en DCE (600 ml) se le añadió 1-metilciclobutan-1-carbaldehído (15,43 g, 149 mmol). La reacción se agitó durante 3 min, momento en el cual se añadió AcOH (10,88 ml, 190 mmol). Después de ⁸ min, se añadió NaBH(OAc⁾³ (57,5 g, 272 mmol) en forma de un sólido y la reacción se agitó a t.a. durante 18 h. La CLEM mostró que la reacción estaba completa al 80 %. A la mezcla de reacción se le añadió más NaBH(OAc)^{3 ( 5} g, 24 mmol). Después de 1 h, la CLEM no mostró cambios. A la mezcla se le añadió 1-metilciclobutan-1-carbaldehído (2 g, 20 mmol). La reacción se agitó durante 2 h, momento en el cual se vertió en hielo y DCM. El pH se ajustó a 10 con una combinación de NaHCO³ sat. y Na²CO³ sat. La mezcla se agitó durante 15 min y se separaron las capas. La capa acuosa se extrajo con DCM y los extractos orgánicos combinados se secaron sobre MgSO⁴, se filtraron a través de Celite® y se concentraron. El residuo se purificó por cromatografía en columna (columna de sílice Isco® de 330 g; gradiente B: 10-80%; A = heptano; B = 3:1 EtoAc/EtOH NH⁴OH al 1 %). Las fracciones que contenían el producto se concentraron al vacío hasta que precipitó un sólido de color blanco. Se añadió heptano y el sólido se filtró. El filtrado se concentró hasta que se formó un precipitado de color blanco. El sólido se filtró y se aclaró con heptano. El filtrado se concentró una tercera vez hasta que se formó un precipitado de color blanco, que se filtró y se aclaró con heptano. Los sólidos combinados se secaron en un horno de vacío a 40 °C durante 18 h para dar (R)-5-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-3-metil-2-(1-(1-((1-metilciclobutil)metil)piperidin-4-il)etil)-5,6,7,8-tetrahidro-4H-tieno[3,2-c]azepin-4-ona (37,15 g, 71,4 mmol, 79 % de rendimiento). RMN 1H (DMSO-d⁶) ⁸ 1,10 (s, 4H) 1,13-1,22 (m, 5H) 1,35 (d, J = 12,17 Hz, 1H) 1,51-1,60 (m, 2H) 1,61-1,88 (m, 9H) 2,04-2,21 (m, 11H) 2,58-2,77 (m, 4H) 2,84 (quint., J = 6,97 Hz, 1H) 3,14-3,29 (m, 2H) 4,51 (d, J = 13,69 Hz, 1H) 4,60 (d, J = 13,69 Hz, 1H) 5,90 (s, 1H) 11,59 (s, 1H). EM(EN) [M+H]+ 510,3.

Preparación de la sal cristalina del ácido clorhídrico del compuesto del ejemplo 10

Se combinó (R)-5-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-3-metil-2-(1-(1-((1-metilciclobutil)metil)piperidin-4 il)etil)-5,6,7,8-tetrahidro-4H-tieno[3,2-c]azepin-4-ona (20 mg) con CH³CN (0,2 ml). La mezcla se calentó a 40 °C con agitación. A la suspensión se le añadió HCl acuoso (3,0 M, 13 |jl). La suspensión se sometió a ciclos de temperatura entre 40 °C y 5 °C durante 3 días. La mezcla se enfrió a 4 °C y se mantuvo a 4 °C durante 3 días. La suspensión se dejó calentar a TA y se dejó que una porción del disolvente se evaporara lentamente. La suspensión se equilibró a TA durante 1 h, se aisló por filtración y se analizó por Raman para dar la sal cristalina de1HCl (Forma I), que se podría usar para sembrar una preparación a gran escala.

Se añadió CH³CN (6,0 ml, 20 vol) a (R)-5-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-3-metil-2-(1-(1-((1-metilciclobutil)metil)piperidin-4-il)etil)-5,6,7,8-tetrahidro-4H-tieno[3,2-c]azepin-4-ona (303,3 mg, 0,595 mmol). Se añadió un equivalente de ácido HCl acuoso (198 jl; solución 3 M), seguido de semillas de cristales (Forma I). La suspensión se sometió a ciclos de temperatura de 40 a 5 °C durante 3 días. La sal cristalina de1HCl se aisló mediante filtración al vacío, se secó al aire durante 30 min y se secó en un horno de vacío a 40 °C durante una noche. El rendimiento de la sal cristalina del HCl fue del 72 % (235 mg, 0,430 mmol).

Los datos de la CDB mostraron una endotermia intensa con un inicio a 296,6 °C (AH = 136,5 J/g). Los datos del TGA mostraron una pérdida de peso insignificante por debajo de 200 °C. Se observó una pérdida de peso del 1,6 % entre 200 °C y 270 °C. Se confirmó que la estequiometría de la sal del HCl era 1:1 (precursor: ácido HCl) mediante cromatografía iónica (CI). El diagrama de isotermas del DVS mostró ~0,5 % de absorción de humedad entre el 5-75 % de HR con una absorción total de 0,6 % de agua a partir del 5-95 % de HR indicando un bajo nivel de higroscopicidad. El patrón de la DRXP de la muestra después del DVS no mostró ningún cambio en la forma del cristal ni en la cristalinidad. El secado a 40 °C en un horno de vacío durante una noche tampoco cambió la forma del cristal.

El patrón de la difracción de rayos X en polvo (DRXP) de este material (Forma I) se muestra en la Fig. 5 y en la Tabla II siguiente se proporciona un sumario de los ángulos de difracción y los espaciados d. El análisis por DRXp se realizó en un difractómetro PANanalytical X'Pert Pro en obleas de fondo cero de Si usando el detector X'celerator™ RTMS (Real Time Multi-Strip). Las condiciones de adquisición incluyen: radiación Cu Ka, tensión del generador: 45 kV, corriente del generador: 40 mA, tamaño de paso: 0,02° 20. Configuración en el lado del haz incidental: hendidura de divergencia fija (0,25°), hendiduras de Soller de 0,04 rad, hendidura antidispersión (0,25°) y máscara de haz de 10 mm. Configuración en el lado del haz difractado: hendidura de divergencia fija (0,25°) y hendidura de Soller de 0,04 rad.

TABLA II

continuación

El espectro Raman de este material (Forma I) se registró en un espectrómetro Nicolet NXR 9650 FT-Raman, a una resolución de 4 cm-1 con excitación a partir de un láser Nd:YVO4 l(A = 1064 nm). El espectro Raman de este material se muestra en la Fig. 6 con picos principales observados a 421,6, 435,5, 468,3, 480,1,504,7, 511,4, 537,7, 549,9, 566,3, 611,1,658,8, 683,1, 693,2, 728,0, 737,7, 763,9, 776,0, 793,6, 806,5, 813,7, 851,8, 886,9, 924,8, 986,3, 1000,6, 1050.4, 1115,8, 1139,6, 1169,2, 1207,2, 1226,7, 1252,1, 1276,7, 1286,1, 1312,7, 1338,0, 1372,6, 1391,4, 1427,9, 1462.4, 1482,4, 1552,7, 1595,3, 1620,0, 1646,7, 2865,0, 2921,8, 2955,3, 2973,3 y 3062,7 cm-1.

El termograma de la calorimetría diferencial de barrido (CDB) de este material (Forma II) se recogió en un calorímetro de barrido diferencial TA Instruments Q100 equipado con un automuestreador y un sistema de enfriamiento refrigerado con bajo una purga de 40 ml/min de N² y se muestra en la Fig. 3. Los experimentos se realizaron usando una velocidad de calentamiento de 15°C/min en una bandeja de aluminio ondulada. El termograma de la CDB de este material (Forma II) exhibió una sola gran endotermia con una temperatura de inicio de aproximadamente 265 °C, un pico de temperatura de aproximadamente 300 °C y entalpia de 136,5 J/g. Un experto en la técnica reconocerá que la temperatura de inicio, la temperatura pico y la entalpia de la endotermia pueden variar dependiendo de las condiciones experimentales.

El termograma del análisis termogravimétrico (TGA) de este material (Forma II) se registró en un analizador termogravimétrico TA Instruments Q500 y se muestra en la Fig. 4. Los experimentos se realizaron con una corriente de N² de 40 ml/min y una velocidad de calentamiento de 15 °C/min. El termograma del TGA de este material (Forma II) exhibió un solo evento de pérdida de peso observado antes de la descomposición térmica final. El evento de pérdida de peso tiene lugar en el intervalo de temperatura de 30 °C a 260 °C con una pérdida de peso de aproximadamente el 1,6%.

Ejemplo 11

(R)-5-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-3-metil-2-(1-(1-((1-metilciclopropil)metil)piperidin-4-il)etil)-5,6,7,8-tetrahidro-4H-tieno[3,2-c]azepin-4-ona

Siguiendo el procedimiento general del ejemplo 1, se preparó (R)-5-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-3-metil-2-(1-(1-((1-metilciclopropil)metil)piperidin-4-il)etil)-5,6,7,8-tetrahidro-4H-tieno[3,2-c]azepin-4-ona. RMN 1H (DMSO-d6) 80,11-0,33 (m, 4H) 0,98 (s, 3H) 1,07-1,28 (m, 6H) 1,39 (d, J = 12,17 Hz, 1H) 1,59-1,82 (m, 5H) 1,97-2,07 (m, 2H) 2,08-2,29 (m, 9H) 2,66 (t, J = 7,22 Hz, 2H) 2,81-2,92 (m, 2H) 2,97 (d, J = 10,39 Hz, 1H) 3,14-3,31 (m, 2H) 4,51 (d, J = 13,43 Hz, 1H) 4,60 (d, J = 13,69 Hz, 1H) 5,91 (s, 1H) 11,58 (s, 1H). EM(EN) [M+H]+ 496,6.

Protocolo de ensayo

Los compuestos contenidos en el presente documento fueron evaluados por su capacidad para inhibir la actividad metiltransferasa de EZH2 dentro del complejo PRC2. El complejo PRC2 humano se preparó coexpresando cada una de las 5 proteínas miembro (FLAG-EZH2, EED, SUZ12, RbAp48, AEBP2) en células Sf9, seguido de co-purificación. La actividad enzimática se midió en un ensayo de centelleo por proximidad (SPA) en el que un grupo metilo tritiado se transfiere de 3H-SAM a un resto de lisina sobre un sustrato peptídico no metilado biotinilado derivado de la histona H3. Los péptidos se capturaron en perlas SPA recubiertas con estreptavidina y la señal resultante se leyó en un lector de placas ViewLux.

Parte A. Preparación del compuesto

1. Preparar una reserva de 10 mM de compuestos a partir de sólidos en DMSO al 100 %.

2. Preparar una dilución en serie de 11 puntos (dilución 1:4, concentración máxima 10 mM) en DMSO al 100 % para cada compuesto de prueba en una placa de 384 pocillos, dejando las columnas 6 y 18 para los controles de DMSO.

3. Dispensar 10 nl de compuesto de la placa de dilución en placas de reacción (Corning, poliestireno NBS de 384 pocillos, n.° cat. 3673).

Parte B. Preparación de reactivos

Preparar las siguientes soluciones:

1. 1x Tampón base, Tris-HCl 50 mM, pH 8, MgCh 2 mM: Por 1 l de tampón base, combinar Tris-HCl 1 M, pH 8 (50 ml), MgCl² 1 M (2 ml) y agua destilada (948 ml).

2. 1x tampón de ensayo: Por 10 ml de 1x tampón de ensayo, combinar 1x tampón base (9,96 ml), DTT 1 M (40 ul) y Tween-20 al 10 % (1 ul) para proporcionar una concentración final de Tris-HCl 50 mM, pH 8, MgCh 2 mM, DTT 4 mM, 0,001 % de Tween-20.

3. 2x solución enzimática: Por 10 ml de solución de enzima 2x, combinar 1x tampón de ensayo (9,99 ml) y 3,24 uM de complejo de EZH2 de 5 miembros (6,17 ul) para proporcionar una concentración final de enzima de 1 nM. 4. Solución de perlas de SPA: Por 1 ml de Solución de Perlas SPA, combinar las perlas de SPA recubiertas de estreptavidina (PerkinElmer, n.° de cat. RPNQ0261, 40 mg) y 1x tampón de ensayo (1 ml) para proporcionar una concentración de trabajo de 40 mg/ml.

5. 2x solución de sustrato: Por 10 ml de 2x solución de sustrato, combinar 40 mg/ml de Solución de Perlas SPA (375 ul), péptido de histona H3K27 biotinilado 1 mM (200 ul), 3H-SAM 12,5 uM (240 ul; 1 mCi/ml), SAM 1 mM frío (57 |jl) y 1x tampón de ensayo (9,13 ml) para proporcionar una concentración final de 0,75 mg/ml de solución de perlas SPA, péptido de histona H3K27 biotinilado 10 uM, 3H-SAM 0,15 uM (~ 12 uCi/ml de 3H-SAM), y SAM 2,85 uM frío.

6. 2,67x Solución de enfriamiento rápido: Por 10 ml de 2,67x Solución de enfriamiento rápido, combinar 1x tampón de ensayo (9,73 ml) y SAM 10 mM frío (267 ul) para proporcionar una concentración final 100 uM de SAM frío.

Parte C. Reacción del ensayo en placas Grenier Bio-One de 384 pocillos

Adición del compuesto

1. Sellar 10 nl/pocillo de Compuesto 1000x para probar los pocillos (como se ha indicado anteriormente).

2. Sellar 10 nl/pocillo de DMSO al 100 % en las columnas 6 y 18 (controles alto y bajo, respectivamente).

Ensayo

1. Dispensar 5 pl/pocillo de 1x tampón de ensayo a la columna 18 (reacciones de control bajo).

2. Dispensar 5 pl/pocillo de 2x de solución de sustrato a las columnas 1 a 24 (nota: la solución de sustrato se debe mezclar para garantizar una suspensión homogénea de las perlas antes de dispensar en el depósito de la matriz).

3. Dispensar 5 ul/pocillo de 2x Solución de enzima a las columnas 1 -17, 19 - 24.

4. Incubar la reacción durante 60 minutos a temperatura ambiente.

Inactivar

1. Dispensar 6 jl/pocillo de la solución de enfriamiento rápido 2,67x a las columnas 1 - 24.

2. Sellar las placas de ensayo y centrifugar durante ~ 1 min a 500 rpm.

3. Adaptar las placas a la oscuridad en el instrumento ViewLux durante 15 - 60 min.

Leer las placas

1. Lea las placas de ensayo en el lector de placas Viewlux utilizando el filtro de emisión de 613 nm o el filtro transparente (exposición de 300 s). La adición de reactivo se puede realizar manualmente o con un manipulador automático de líquidos.

Resultados

El porcentaje de inhibición se calculó en relación con el DMSO control para cada concentración de compuesto y los valores resultantes se ajustaron usando parámetros de ajuste CI⁵⁰ estándar dentro del paquete de software de ajuste de datos ABASE.

Los compuestos ejemplificados se analizaron generalmente según el ensayo anterior o un ensayo análogo y se descubrió que eran inhibidores de EZH2. Las actividades biológicas específicas probadas de acuerdo con dichos ensayos se enumeran en la siguiente tabla. Los valores de CI⁵⁰ de < 10 nM indican que la actividad del compuesto se estaba acercando al límite de detección en el ensayo. La repetición de la carrera o carreras del ensayo puede dar lugar a valores de CI⁵⁰ algo diferentes.

Claims (15)

REIVINDICACIONES

1. Un compuesto de acuerdo con la fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo:

en la que:

R1 es alquilo (C¹-C⁴) o alcoxi (C¹-C⁴);

R2 es alquilo (C¹-C³); y

R3 es alquilo (C¹-C⁸), haloalquilo (C¹-C⁸), hidroxialquilo (C ¹-C⁸), alcoxi (C¹ -C⁴)alquilo (C¹ -C⁸)-, cicloalquilo (C³-C⁵) o bicicloalquilo (C⁶-C ¹⁰), en el que cada uno de dichos cicloalquilo (C³-C⁵) o bicicloalquilo (C⁶-C ¹⁰) está opcionalmente sustituido con uno o dos grupos seleccionados independientemente entre halógeno, hidroxilo, alcoxi (C ¹-C⁴), alquilo (C¹-C⁴) y haloalquilo (C¹ -C⁴).

2. El compuesto o la sal farmacéuticamente aceptable del mismo de acuerdo con la reivindicación 1, en el que R1 es metilo, etilo, n-propilo o metoxi.

3. El compuesto o la sal farmacéuticamente aceptable del mismo de acuerdo con la reivindicación 1, en el que R1 es metilo.

4. El compuesto o la sal farmacéuticamente aceptable del mismo de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1-3, en el que R2 es metilo.

5. El compuesto o la sal farmacéuticamente aceptable del mismo de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1-4, en el que R3 es alquilo (C¹ -C⁶), haloalquilo (C¹ -C⁶), cicloalquilo (C³-C⁵) o bicicloalquilo (C⁶-C ¹⁰), en el que cada uno de dichos cicloalquilo (C³-C⁵) o bicicloalquilo (C⁶-C ¹⁰) está opcionalmente sustituido con uno o dos grupos seleccionados independientemente entre halógeno y alquilo (C¹ -C⁴).

6. El compuesto o la sal farmacéuticamente aceptable del mismo de acuerdo con la reivindicación 5, en el que R3 es alquilo (C1-C6) o haloalquilo (C1-C6).

7. El compuesto de acuerdo con la reivindicación 1 que es:

(R)-5-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-3-metil-2-(1-(1-neopentilpiperidin-4-il)etil)-5,6,7,8-tetrahidro-4R-tieno[3,2-c]azepin-4-ona;

(R)-2-(1-(1-(ciclobutilmetil)piperidin-4-il)etil)-5-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-3-metil-5,6,7,8-tetrahidro-4H-tieno[3,2-c]azepin-4-ona;

(R)-5-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-2-(1-(1-isobutilpiperidin-4-il)etil)-3-metil-5,6,7,8-tetrahidro-4R-tieno[3,2-c]azepin-4-ona;

(R)-2-(1-(1-(ciclopentilmetil)piperidin-4-il)etil)-5-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-3-metil-5,6,7,8-tetrahidro-4H-tieno[3,2-c]azepin-4-ona;

(R)-5-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-2-(1-(1-(2,2-dimetilbutil)piperidin-4-il)etil)-3-metil-5,6,7,8-tetrahidro-4H-tieno[3,2-c]azepin-4-ona;

(R)-5-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-2-(1-(1-(2-fluoro-2-metilpropil)piperidin-4-il)etil)-3-metil-5,6,7,8-tetrahidro-4H-tieno[3,2-c]azepin-4-ona;

(R)-2-(1-(1-(ciclopropilmetil)piperidin-4-il)etil)-5-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-3-metil-5,6,7,8-tetrahidro-4H-tieno[3,2-c]azepin-4-ona;

(R)-5-((4,6-d¡met¡l-2-oxo-1,2-d¡h¡drop¡r¡d¡n-3-¡l)met¡l)-3-met¡l-2-(1-(1-((1-met¡lc¡clopent¡l)met¡l)p¡per¡d¡n-4-¡l)et¡l)-5.6.7.8- tetrah¡dro-4H-t¡eno[3,2-c]azep¡n-4-ona;

(R)-2-(1-(1-(b¡c¡clo[2.2.2]octan-1-¡lmet¡l)p¡per¡d¡n-4-¡l)et¡l)-5-((4,6-d¡met¡l-2-oxo-1,2-d¡h¡drop¡r¡d¡n-3-¡l)met¡l)-3-met¡l-5.6.7.8- tetrah¡dro-4H-t¡eno[3,2-c]azep¡n-4-ona;

(R)-5-((4,6-d¡met¡l-2-oxo-1,2-d¡h¡drop¡r¡d¡n-3-¡l)met¡l)-3-met¡l-2-(1-(1-((1-met¡lc¡clobut¡l)met¡l)p¡per¡d¡n-4-¡l)et¡l)-5.6.7.8- tetrah¡dro-4H-t¡eno[3,2-c]azep¡n-4-ona o

(R)-5-((4,6-d¡met¡l-2-oxo-1,2-d¡h¡drop¡r¡d¡n-3-¡l)met¡l)-3-met¡l-2-(1-(1-((1-met¡lc¡cloprop¡l)met¡l)p¡per¡d¡n-4-¡l)et¡l)-5.6.7.8- tetrah¡dro-4H-t¡eno[3,2-c]azep¡n-4-ona

o una sal farmacéut¡camente aceptable del m¡smo.

8. El compuesto de acuerdo con la re¡v¡nd¡cac¡ón 1 que es:

o una sal farmacéut¡camente aceptable del m¡smo.

9. El compuesto o una sal farmacéut¡camente aceptable del mismo de acuerdo con la re¡v¡nd¡cac¡ón 8 que es una sal del ác¡do clorhídrico.

10. El compuesto de acuerdo con la re¡v¡nd¡cac¡ón 9, en el que el compuesto está en forma cr¡stal¡na que está caracterizado por un patrón de d¡fracc¡ón de rayos X en polvo (DRXP) que comprende ángulos de d¡fracc¡ón, cuando se m¡de usando rad¡ac¡ón Cu Ka, de aprox¡madamente 8,9, 10,7, 14,3, 14,8, 16,9 y 24,0 grados 20.

11. Una compos¡c¡ón farmacéut¡ca que comprende el compuesto o la sal farmacéut¡camente aceptable del mismo de acuerdo con una cualqu¡era de las re¡v¡nd¡cac¡ones 1-10 y un exc¡p¡ente farmacéut¡camente aceptable.

12. El compuesto o la sal farmacéut¡camente aceptable del mismo de acuerdo con una cualqu¡era de las re¡v¡nd¡cac¡ones 1-10 para su uso en terap¡a.

13. El compuesto o la sal farmacéut¡camente aceptable del mismo de acuerdo con una cualqu¡era de las re¡v¡nd¡cac¡ones 1-10 para su uso en el tratam¡ento de cáncer.

14. El compuesto o la sal farmacéut¡camente aceptable del mismo para su uso de acuerdo con la re¡v¡nd¡cac¡ón 13, en el que d¡cho cáncer se selecc¡ona entre el grupo que cons¡ste en: cáncer de cerebro, gl¡oblastomas, leucem¡as, linfomas, síndrome de Bannayan-Zonana, enfermedad de Cowden, enfermedad de Lhermitte-Duclos, cáncer de mama, cáncer de mama inflamatorio, tumor de Wilm, sarcoma de Ewing, rabdomiosarcoma, ependimoma, meduloblastoma, cáncer de colon, cáncer gástrico, cáncer de vejiga, cáncer de cabeza y cuello, cáncer de riñón, cáncer de pulmón, cáncer de hígado, melanoma, cáncer renal, cáncer de ovario, cáncer de páncreas, cáncer de próstata, cáncer de sarcoma, cáncer de osteosarcoma, tumor de células gigantes de hueso y cáncer de tiroides.

15. El compuesto o la sal farmacéuticamente aceptable del mismo para su uso de acuerdo con la reivindicación 13, en el que dicho cáncer se selecciona entre el grupo que consiste en: leucemia mieloide aguda, leucemia mieloide crónica, leucemia linfoblástica aguda, leucemia linfocítica crónica, enfermedades mieloproliferativas, mieloma múltiple, síndrome mielodisplásico, enfermedad de Hodgkin y linfoma no de Hodgkin.