ES2683000T3

ES2683000T3 - Método de purificación de coenzima-Q reducida

Info

Publication number: ES2683000T3
Application number: ES04701106.9T
Authority: ES
Inventors: Takahiro Ueda; Tadao Ohno; Shiro Kitamura; Yasuyoshi Ueda
Original assignee: Kaneka Corp
Current assignee: Kaneka Corp
Priority date: 2003-01-10
Filing date: 2004-01-09
Publication date: 2018-09-24
Anticipated expiration: 2024-01-09
Also published as: JP4579835B2; EP1583729A1; WO2004063131A1; CN100344595C; EP1583729A4; CN1723181A; EP1583729B1; KR20050101170A; TW200509884A; US20060246565A1; JP2006513274A

Abstract

Método de purificación de coenzima Q10 reducida que puede obtenerse por reducción de coenzima Q10 oxidada, en el que se eliminan impurezas solubles en agua de la coenzima Q10 reducida, en el que el lavado de los cristales y/o el aceite de la coenzima Q10 reducida comprende poner en contacto cristales y/o aceite de la coenzima Q10 reducida con un disolvente orgánico soluble en agua o un disolvente mixto compuesto de un disolvente orgánico soluble en agua y agua en un recipiente y en el que el lavado de los cristales y/o el aceite de la coenzima Q10 reducida se lleva a cabo en un estado de dispersión de los cristales y/o el aceite de la coenzima Q10 reducida en el disolvente orgánico soluble en agua o el disolvente mixto compuesto del disolvente orgánico soluble en agua y agua y en el que los cristales y/o el aceite de la coenzima Q10 reducida se selecciona(n) del grupo que consiste en: cristales obtenibles mediante cristalización de o concentración hasta sequedad de una disolución que contiene coenzima Q10 reducida; un sólido que resulta de la solidificación de aceite de coenzima Q10 reducida; un aceite que resulta de la fusión de cristales de coenzima Q10 reducida; y un aceite obtenible concentrando una disolución que contiene coenzima Q10 reducida a una temperatura no inferior a la temperatura de fusión.

Description

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DESCRIPCION

Metodo de purificacion de coenzima-Q reducida Campo tecnico

La presente invencion se refiere a un metodo de purificacion de coenzima Q10 reducida. La coenzima Q10 reducida muestra un nivel mas alto de capacidad de absorcion oral en comparacion con la coenzima Q10 oxidada y es un compuesto util como ingrediente en alimentos buenos, alimentos nutritivos funcionales, alimentos saludables espedficos, suplementos nutricionales, nutrientes, farmacos para animales, bebidas, piensos, cosmeticos, medicamentos, remedios, farmacos preventivos, etc.

Tecnica anterior

Se sabe que la coenzima Q10 reducida puede prepararse produciendo coenzima Q10 de la manera convencional, por ejemplo mediante smtesis, fermentacion o extraccion a partir de productos naturales, y concentrando una fraccion de eluato que contiene la coenzima Q10 reducida que resulta de la cromatograffa (vease el documento JP-A-10- 109933). Se describe tambien en la publicacion citada anteriormente que, en este caso, la concentracion cromatografica puede llevarse a cabo despues de la reduccion de coenzima Q10 oxidada, que se produce como una impureza en la coenzima Q10 reducida, con un agente reductor tal como borohidruro de sodio o ditionito de sodio (hiposulfito de sodio), o puede prepararse coenzima Q10 reducida haciendo reaccionar el agente reductor mencionado anteriormente con una calidad altamente pura existente de coenzima Q10. Tambien se conocen el metodo que comprende usar cinc como agente reductor (Journal of Labelled Compounds, vol. 6, 1970, 66-75), el metodo que usa borohidruro de sodio (documento GB947643) y el metodo que comprende usar especies de vitamina C (es decir, acido ascorbico o compuestos relacionados tales como acido ascorbico, palmitato de acido ascorbico y estearato de acido ascorbico) como agentes reductores (documento WO 01/52822 A1).

Sin embargo, la coenzima Q10 reducida producida de tal manera no siempre puede recuperarse en un estado altamente puro. Por ejemplo, se obtiene a menudo en forma de cristales de pureza baja, semisolidos o aceite que contiene coenzima Q10 oxidada y otras impurezas. Cuando los cristales de coenzima Q10 reducida se recuperan de una disolucion de disolvente organico que contiene la coenzima Q10 reducida, en particular, es diffcil eliminar impurezas solubles en agua, particularmente el agente reductor usado para convertir coenzima Q10 oxidada en coenzima Q10 reducida y/o impurezas derivadas de tal agente reductor y, por tanto, los cristales obtenidos contienen muy frecuentemente tales impurezas solubles en agua y son de pureza baja.

Metodos para producir un cristal de coenzima Q10 reducida cristalizando la coenzima Q10 reducida en una disolucion acuosa (documento WO 03/6411 A1) o una disolucion de un alcohol y/o una cetona (documento WO 03/6409 A1) son el estado de la tecnica segun el Art. 54(3) EPC. En estos metodos los cristales se afslan mediante centrifugacion, filtracion a presion o filtracion a vacfo, si es necesario seguido por lavado de la torta.

Divulgacion de la invencion

En consideracion de lo anterior, la presente invencion tiene como objeto proporcionar un metodo de purificacion para eliminar impurezas, en particular impurezas solubles en agua, contenidas en coenzima Q10 reducida, y de ese modo producir coenzima Q10 reducida de alta calidad de una manera conveniente y eficaz en una produccion a escala industrial.

Como resultado de investigaciones intensivas, los presentes inventores encontraron que cuando se hizo un intento de eliminar las impurezas solubles en agua que quedaban en la coenzima Q10 reducida usando agua sola, particularmente para eliminar el agente reductor y/o las impurezas derivadas del agente reductor, no siempre fue facil disminuir el contenido de dichas impurezas hasta al menos niveles traza. Se ha encontrado tambien que la coenzima Q10 reducida mostro caractensticas de humectabilidad muy mala frente al agua y por tanto era muy diffcil obtener una suspension de la misma que tuviese buenas propiedades. Sin embargo, se encontro, que las impurezas solubles en agua, en particular el agente reductor y/o impurezas derivadas del mismo, que quedan en la coenzima Q10 reducida podfan eliminarse eficazmente con buena capacidad operativa lavando la coenzima Q10 reducida (cristales o aceite) con un disolvente organico soluble en agua o un disolvente mixto compuesto de un disolvente organico soluble en agua y agua. Basandose en estos hallazgos, la presente invencion se ha completado ahora.

Por tanto, la presente invencion proporciona un metodo de purificacion de coenzima Q10 en el que se eliminan impurezas solubles en agua de la coenzima Q10 reducida,

en el que el lavado de los cristales y/o el aceite de la coenzima Q10 reducida comprende poner en contacto cristales y/o aceite de la coenzima Q10 reducida con un disolvente organico soluble en agua o un disolvente mixto compuesto de un disolvente organico soluble en agua y agua en un recipiente y en el que el lavado de los cristales y/o el aceite de la coenzima Q10 reducida se lleva a cabo en un estado de dispersion de los cristales y/o el aceite de la coenzima Q10 reducida en el disolvente organico soluble en agua o el disolvente mixto compuesto del disolvente organico

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soluble en agua y agua y

en el que los cristales y/o el aceite de la coenzima Q10 reducida se selecciona(n) del grupo que consiste en: cristales obtenibles mediante cristalizacion de o concentracion hasta sequedad de una disolucion que contiene coenzima Q10 reducida; un solido que resulta de la solidificacion de aceite de coenzima Q10 reducida; un aceite que resulta de la fusion de cristales de coenzima Q10 reducida; y un aceite obtenible concentrando una disolucion que contiene coenzima Q10 reducida a una temperature no inferior a la temperature de fusion.

Segun el metodo de la presente invencion, las impurezas solubles en agua contenidas en la coenzima Q10 reducida pueden eliminarse de manera conveniente y eficaz al menos hasta un nivel traza y puede obtenerse coenzima Q10 reducida de muy alta calidad como una forma cristalina o aceitosa.

En la purificacion de aceite de coenzima Q10 reducida, tambien es posible cristalizarla mediante enfriamiento junto con el disolvente usado para lavar para recuperar los cristales formados, o solidificar la coenzima Q10 reducida poniendo en contacto cristales semilla con una forma aceitosa de coenzima Q10 reducida a una temperatura menor que el punto de fusion de la misma, para recuperar los cristales formados.

Divulgacion detallada de la invencion

A continuacion, se describe en mas detalle la presente invencion.

El metodo de purificacion de coenzima Q10 reducida segun la presente invencion es un metodo que comprende lavar una forma cristalina y/o una forma aceitosa de coenzima Q10 reducida con un disolvente organico soluble en agua o un disolvente mixto compuesto de un disolvente organico soluble en agua y agua para eliminar de este modo una impureza soluble en agua de los cristales y/o el aceite de la coenzima Q10 reducida.

Concretamente, segun la invencion, el lavado se lleva a cabo con un disolvente organico soluble en agua o un disolvente mixto compuesto de un disolvente organico soluble en agua y agua para eliminar de manera conveniente y eficaz impurezas solubles en agua que quedan en los cristales y/o el aceite de coenzima Q10 reducida, en particular el agente reductor y/o impurezas derivadas de un agente reductor, que se mencionaran mas adelante en el presente documento.

El disolvente organico soluble en agua usado en la practica de la presente invencion no esta particularmente restringido siempre que sea altamente miscible con agua, pero incluye alcoholes, eteres, cetonas, nitrilos, amidas, compuestos que contienen azufre, acidos grasos, y similares.

Los alcoholes que pueden usarse para la presente invencion no estan particularmente restringidos sino que pueden ser dclicos o adclicos, o saturados o insaturados. Se prefieren los saturados, sin embargo. Generalmente, puede usarse de manera favorable uno que contenga de 1 a 20 atomos de carbono, preferiblemente de 1 a 12 atomos de carbono, mas preferiblemente de 1 a 6 atomos de carbono, aun mas preferiblemente de 1 a 3 atomos de carbono y de manera particularmente preferible 2 o 3 atomos de carbono.

Como ejemplos espedficos de los alcoholes, pueden mencionarse metanol, etanol, 1-propanol, 2-propanol, 1- butanol, 2-butanol, alcohol isobutflico, alcohol terc-butflico, 1-pentanol, 2-pentanol, 3-pentanol, 2-metil-1-butanol, alcohol isopentflico, alcohol terc-pentflico, 3-metil-2-butanol, alcohol neopentflico, 1-hexanol, 2-metil-1-pentanol, 4- metil-2-pentanol, 2-etil-1-butanol, 1-heptanol, 2-heptanol, 3-heptanol, 1-octanol, 2-octanol, 2-etil-1-hexanol, 1- nonanol, 3,5,5-trimetil-1-hexanol, 1-decanol, 1-undecanol, 1-dodecanol, alcohol alflico, alcohol propargflico, alcohol bendlico, ciclohexanol, 1-metilciclohexanol, 2-metilciclohexanol, 3-metilciclohexanol, 4-metilciclohexanol, 2- metoxietanol, 2-etoxietanol, 2-(metoximetoxi)etanol, 2-isopropoxietanol, 2-butoxietanol, 2-(isopentiloxi)etanol, 2- (hexiloxi)etanol, alcohol furfunlico, 1-metoxi-2-propanol, 1-etoxi-2-propanol, 1,2-etanodiol, 1,2-propanodiol, 1,3- propanodiol, 1,2-butanodiol, 1,3-butanodiol, 1,4-butanodiol, 2,3-butanodiol, 1,5-pentanodiol, 2-butano-1,4-diol, 2- metil-2,4-pentanodiol, 2-etil-1,3-hexanodiol, dietilenglicol, trietilenglicol, tetraetilenglicol, polietilenglicol, dipropilenglicol, polipropilenglicol, glicerol, etc.

Como alcoholes monohidroxilados, los preferidos que pueden mencionarse son metanol, etanol, 1-propanol, 2- propanol, 1-butanol, 2-butanol, alcohol isobutflico, alcohol terc-butflico, 1-pentanol, 2-pentanol, 3-pentanol, 2-metil-1- butanol, alcohol isopentflico, alcohol terc-pentflico, 3-metil-2-butanol, alcohol neopentflico, 1-hexanol, 2-metil-1- pentanol, 4-metil-2-pentanol, 2-etil-1-butanol, 1-heptanol, 2-heptanol, 3-heptanol, 1-octanol, 2-octanol, 2-etil-1- hexanol, 1-nonanol, 1-decanol, 1-undecanol, 1-dodecanol, alcohol bendlico, ciclohexanol, 1-metilciclohexanol, 2- metilciclohexanol, 3-metilciclohexanol, 4-metilciclohexanol, 2-metoxietanol, 2-etoxietanol, 2-(metoximetoxi)etanol, etc. Se prefieren mas metanol, etanol, 1-propanol, 2-propanol, 1-butanol, 2-butanol, alcohol isobutflico, alcohol terc- butflico, 1-pentanol, 2-pentanol, 3-pentanol, 2-metil-1-butanol, alcohol isopentflico, alcohol terc-pentflico, 3-metil-2- butanol, alcohol neopentflico, 1-hexanol, 2-metil-1-pentanol, 4-metil-2-pentanol, 2-etil-1-butanol, ciclohexanol, etc. Aun se prefieren mas metanol, etanol, 1-propanol, 2-propanol, 1-butanol, 2-butanol, alcohol isobutflico, alcohol terc- butflico, 1-pentanol, 2-pentanol, 3-pentanol, 2-metil-1-butanol, alcohol isopentflico, alcohol terc-pentflico, 3-metil-2- butanol, alcohol neopentflico, etc. Se prefieren particularmente metanol, etanol, 1-propanol, 2-propanol, 1-butanol, 2-

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butanol, alcohol isobutilico, 2-metiM-butanol, alcohol isopentilico, etc. Se prefieren adicionalmente metanol, etanol, 1-propanol, 2-propanol, etc., y el mas preferido es etanol.

Como alcohol dihidroxilado, los preferidos que pueden mencionarse son 1,2-etanodiol, 1,2-propanodiol, 1,3- propanodiol, 2-butano-1,4-diol, 2-metil-2,4-pentanodiol, 2-etil-1,3-hexanodiol, dietilenglicol, trietilenglicol, tetraetilenglicol, polietilenglicol, dipropilenglicol, polipropilenglicol, etc., y los mas preferidos son 1,2-propanodiol y polietilenglicol.

Como alcohol trihidroxilado, puede usarse preferiblemente glicerol.

Los eteres no estan particularmente restringidos, y pueden ser dclicos o adclicos, o saturados o insaturados. Pero en general, se usan preferiblemente los saturados. Generalmente, se usan los que contienen de 3 a 20 atomos de carbono, y preferiblemente de 4 a 12 atomos de carbono y mas preferiblemente de 4 a 8 atomos de carbono.

Como ejemplos espedficos, pueden mencionarse, por ejemplo, dietil eter, metil terc-butil eter, dipropil eter, diisopropil eter, dibutil eter, dihexil eter, etil vinil eter, butil vinil eter, anisol, fenetol, butil fenil eter, metoxitolueno, dioxano, furano, 2-metilfurano, tetrahidrofurano, tetrahidropirano, dimetil eter de etilenglicol, dietil eter de etilenglicol, dibutil eter de etilenglicol, monometileter de etilenglicol, monoetil eter de etilenglicol, monobutil eter de etilenglicol, monometil eter de dietilenglicol, monoetil eter de dietilenglicol, monobutil eter de dietilenglicol, monometil eter de trietilenglicol, monometil eter de dipropilenglicol, monometil eter de dipropilenglicol, monometil eter de tripropilenglicol, etc.

Se prefieren dietil eter, metil terc-butil eter, dipropil eter, diisopropil eter, dibutil eter, dihexil eter, anisol, fenetol, butil fenil eter, metoxitolueno, dioxano, 2-metilfurano, tetrahidrofurano, tetrahidropirano, dimetil eter de etilenglicol, dietil eter de etilenglicol, dibutil eter de etilenglicol, monometil eter de etilenglicol, monoetil eter de etilenglicol, etc. Se prefieren mas dietil eter, metil terc-butil eter, anisol, dioxano, tetrahidrofurano, monometil eter de etilenglicol, monoetil eter de etilenglicol, etc. Se prefieren mas aun dietil eter, metil terc-butil eter, anisol, dioxano, tetrahidrofurano, etc., y se prefieren particularmente dioxano y tetrahidrofurano.

Las cetonas no estan particularmente restringidas, y se usan preferiblemente las que tienen de 3 a 6 atomos de carbono. Como ejemplos espedficos, pueden mencionarse por ejemplo, acetona, metil etil cetona, metil butil cetona, metil isobutil cetona, etc. Se prefieren acetona y metil etil cetona, y la mas preferida es acetona.

Los nitrilos no estan particularmente restringidos, y pueden ser dclicos o alidclicos, o saturados o insaturados. Sin embargo, se usan preferiblemente los saturados. Generalmente, se usan los que contienen de 2 a 20 atomos de carbono, preferiblemente de 2 a 12 atomos de carbono y mas preferiblemente de 2 a 8 atomos de carbono.

Como ejemplos espedficos, pueden mencionarse, por ejemplo, acetonitrilo, propiononitrilo, malononitrilo, butironitrilo, isobutironitrilo, succinonitrilo, valeronitrilo, glutaronitrilo, hexanonitrilo, heptilcianuro, octilcianuro, undecanonitrilo, dodecanonitrilo, tridecanonitrilo, pentadecanonitrilo, estearonitrilo, cloroacetonitrilo, bromoacetonitrilo, cloropropiononitrilo, bromopropiononitrilo, metoxiacetonitrilo, cianoacetato de metilo, cianoacetato de etilo, tolunitrilo, benzonitrilo, clorobenzonitrilo, bromobenzonitrilo, acido cianobenzoico, nitrobenzonitrilo, anisonitrilo, ftalonitrilo, bromotolunitrilo, cianobenzoato de metilo, metoxibenzonitrilo, acetilbenzonitrilo, naftonitrilo, bifenilcarbonitrilo, fenilpropiononitrilo, fenilbutironitrilo, metilfenilacetonitrilo, difenilacetonitrilo, naftilacetonitrilo, nitrofenilacetonitrilo, clorobencilcianuro, ciclopropanocarbonitrilo, ciclohexanocarbonitrilo, cicloheptanocarbonitrilo, fenilciclohexanocarbonitrilo, tolilciclohexanocarbonitrilo, etc.

Se prefieren acetonitrilo, propiononitrilo, butironitrilo, isobutironitrilo, succinonitrilo, valeronitrilo, cianoacetato de metilo, cianoacetato de etilo, benzonitrilo, tolunitrilo y cloropropiononitrilo. Se prefieren mas acetonitrilo, propiononitrilo, butironitrilo e isobutironitrilo, y el mas preferido es acetonitrilo.

Como amidas, pueden mencionarse, por ejemplo, formamida, N-metilformamida, N,N-dimetilformamida, N,N- dimetilacetoamida, N-metilpirrolidona, etc.

Como compuestos que contienen azufre, pueden mencionarse, por ejemplo, dimetilsulfoxido, sulfolano, etc.

Como acidos grasos, pueden mencionarse, por ejemplo, acido formico, acido acetico, acido propionico, etc. Se prefieren acido formico y acido acetico, y se prefiere particularmente acido acetico.

Entre los disolventes solubles en agua anteriores, se prefieren alcoholes, eteres, cetonas, nitrilos, se prefieren mas alcoholes y cetonas, se prefieren aun mas alcoholes monohidroxilados que contienen de 1 a 3 atomos de carbono y acetona, y el etanol es el mas preferido.

Los disolventes organicos solubles en agua mencionados anteriormente pueden usarse individualmente o en forma de un disolvente mixto compuesto de dos o mas especies. Ademas, pueden usarse de manera favorable en forma de disolventes mixtos en combinacion con agua. Desde el punto de vista de las caractensticas del lfquido y/o los

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efectos de lavado, se prefiere el uso de un disolvente mixto compuesto de un disolvente organico soluble en agua y agua.

Cuando se usa un disolvente mixto compuesto de un disolvente organico soluble en agua y agua, la concentracion del disolvente organico soluble en agua contenido en el disolvente mixto no esta particularmente restringida pero, desde el punto de vista de obtener caractensticas de lfquidos y efectos de lavado favorables, es preferiblemente no menor de aproximadamente el 5 % p/p, mas preferiblemente no menos de aproximadamente el 7 % p/p, aun mas preferiblemente no menos de aproximadamente el 10% p/p, de manera particularmente preferible no menos de aproximadamente el 20 % p/p y lo mas preferiblemente no menos de aproximadamente el 30 % p/p.

En casos en los que el producto se usa para alimentos o farmacos, por ejemplo, son adecuados etanol, 1,2- propanodiol, polietilenglicol (preferiblemente polietilenglicol que tiene un peso molecular de 300 a 1000), glicerol y similares, y es particularmente adecuado etanol. Obviamente, estos disolventes pueden usarse de manera favorable como disolvente mixto de dos o mas de ellos o como disolvente mixto en combinacion con agua.

En la practica de la invencion, puede usarse un disolvente organico insoluble en agua en combinacion con cualquiera de los disolventes solubles en agua mencionados anteriormente dentro del intervalo que no provocara un efecto adverso sustancial. Tal disolvente organico insoluble en agua incluye hidrocarburos, esteres de acidos grasos y similares, que se mencionaran mas adelante en el presente documento.

La coenzima Q10 reducida que va a usarse en la practica de la invencion es una obtenible por reduccion de coenzima Q10 oxidada. Se prefiere mas una obtenible utilizando la reaccion de reduccion segun la invencion, que va a mencionarse mas adelante en el presente documento.

El metodo de purificacion de la invencion puede aplicarse a coenzima Q10 reducida que contiene una cantidad relativamente grande de coenzima Q10 oxidada, pero es especialmente eficaz en la purificacion de coenzima Q10 reducida de pureza alta preparada por el metodo de reduccion mencionado mas adelante en el presente documento, o un metodo similar. La coenzima Q10 reducida que va a purificarse puede estar en forma o bien de cristales o bien de aceite tal como se define en las reivindicaciones adjuntas. El termino “cristal(es)” de coenzima Q10 reducida tal como se usa en el presente documento tambien incluye, dentro del significado del mismo, un solido obtenible concentrando una disolucion que contiene coenzima Q10 reducida hasta sequedad eliminando por destilacion el disolvente, un solido que resulta de la solidificacion de aceite de coenzima Q10 reducida.

La impureza soluble en agua que va a eliminarse segun la presente invencion no esta particularmente limitada pero incluye, entre otros, los agentes reductores usados en la etapa de reduccion de coenzima Q10 oxidada, que se mencionaran mas adelante en el presente documento, y/o impurezas derivadas de agentes reductores. Como agentes reductores y/o impurezas derivadas de agentes reductores, pueden mencionarse por ejemplo, acido hiposulfuroso o sales del mismo, e hidrogenosulfitos como subproductos derivados de dicho acido hiposulfuroso o sales del mismo; acido ascorbico o compuestos relacionados con el mismo, y acido deshidroascorbico, acido 2,3- dicetogulonico y acido oxalico como subproductos derivados de dicho acido ascorbico o compuestos relacionados con el mismo; sales generadas como subproductos de hierro o cinc; y similares.

El metodo de lavado no esta particularmente restringido pero comprende generalmente poner en contacto los cristales y/o el aceite de coenzima Q10 reducida con el disolvente organico soluble en agua mencionado anteriormente o el disolvente mixto compuesto del disolvente organico soluble en agua y agua en un recipiente ya que la cantidad del disolvente para lavar puede disminuirse. Este contacto se establece dispersando los cristales y/o el aceite de coenzima Q10 reducida en el disolvente organico soluble en agua o el disolvente mixto compuesto del disolvente organico soluble en agua y agua, y de manera particularmente preferible suspendiendo y/o emulsionando los cristales y/o el aceite de la coenzima Q10 reducida en el disolvente organico soluble en agua o el disolvente mixto compuesto del disolvente organico soluble en agua y agua en un grado suficiente.

Preferiblemente, el lavado se lleva a cabo con flujo forzado. Desde el punto de vista de la mejora de la calidad, el flujo se efectua preferiblemente por una potencia requerida para la agitacion por unidad de volumen de generalmente no menos de aproximadamente 0,01 kW/m3, preferiblemente no menos de aproximadamente 0,1 kW/m3 y mas preferiblemente no menos de aproximadamente 0,3 kW/m3. El flujo forzado anterior se proporciona generalmente mediante rotacion de paleta(s) de agitacion. Sin embargo, si el flujo anterior se consigue, no siempre es necesario usar paleta(s) de agitacion. Por ejemplo, pueden utilizarse la circulacion del lfquido o procedimiento similar.

La concentracion de la coenzima Q10 reducida durante el lavado de cristales y/o de aceite de la coenzima Q10 reducida no esta particularmente restringida pero, desde el punto de vista de conseguir caractensticas de lfquido favorables, el peso de la coenzima Q10 reducida en relacion con el peso del disolvente de lavado en el momento de la finalizacion del lavado es preferiblemente de aproximadamente no mas de aproximadamente el 30 % p/p, mas preferiblemente no mas de aproximadamente el 20 % p/p, aun mas preferiblemente no mas de aproximadamente el 15 % p/p, de manera particularmente preferible no mas de aproximadamente el 13 % p/p y lo mas preferiblemente no mas de aproximadamente el 10 % p/p. Manteniendo la concentracion anterior, se hace posible realizar un lavado

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mas favorable con suficiente capacidad operativa para una produccion a escala industrial. Desde el punto de vista de la productividad, el Kmite inferior para esa concentracion es preferiblemente de aproximadamente el 1 % p/p, y mas preferiblemente de aproximadamente el 2 % p/p.

El tiempo de lavado puede variar dependiendo de la especie del disolvente organico soluble en agua o disolvente mixto compuesto de un disolvente organico soluble en agua y agua, la proporcion de los mismos, la cantidad del disolvente de lavado, etc., por tanto no puede especificarse de manera absoluta. Generalmente, sin embargo, el lavado puede completarse en el plazo de un tiempo no mas largo de 10 horas, preferiblemente no mas largo de 5 horas, mas preferiblemente no mas largo de 2 horas, aun mas preferiblemente no mas largo de 1 hora, de manera particularmente preferible no mas largo de 30 minutos y lo mas preferiblemente no mas largo de 10 minutos.

La temperatura de lavado puede variar dependiendo de la cantidad, composicion y/o proporcion de la composicion del disolvente para lavar (disolvente organico soluble en agua o disolvente mixto compuesto de un disolvente organico soluble en agua y agua), la calidad o pureza de la coenzima Q10 reducida que va a purificarse y asf sucesivamente, por tanto no puede especificarse de manera absoluta. Pero cuando se usan cristales de la coenzima Q10 reducida, el lfmite superior es generalmente no mayor de aproximadamente 50 °C, preferiblemente no mayor de aproximadamente 45 °C, mas preferiblemente no mayor de aproximadamente 40 °C y aun mas preferiblemente no mayor de aproximadamente 35 °C, y el lfmite inferior no es menor de aproximadamente -10 °C, preferiblemente no menor de aproximadamente -5 °C, aun mas preferiblemente no menor de aproximadamente 0 °C. Generalmente, el lavado puede llevarse a cabo de manera favorable dentro del intervalo de aproximadamente 0 °C a 40 °C. Por otro lado, cuando se usa aceite de coenzima Q10 reducida, el lfmite inferior no es menor de la temperatura de fusion de la coenzima Q10 reducida, preferiblemente no menor de aproximadamente 40 °C, mas preferiblemente no menor de aproximadamente 45 °C, aun mas preferiblemente no menor de aproximadamente 50 °C y de manera particularmente preferible no menor de aproximadamente 60 °C, y el lfmite superior no es mayor de aproximadamente 100 °C, preferiblemente no mayor de aproximadamente 90 °C, mas preferiblemente no mayor de aproximadamente 80 °C y aun mas preferiblemente no mayor de aproximadamente 70 °C.

Lavando los cristales y/o el aceite de coenzima Q10 reducida segun el metodo mencionado anteriormente, pueden transferirse las impurezas solubles en agua contenidas en los cristales y/o el aceite de coenzima Q10 reducida a un disolvente organico soluble en agua o un disolvente mixto compuesto de un disolvente organico soluble en agua y agua, y de ese modo las impurezas solubles en agua pueden eliminarse de dichos cristales y/o aceite de coenzima Q10 reducida.

En casos en los que se purifican cristales de coenzima Q10 reducida, la coenzima Q10 reducida de la que se eliminaron impurezas solubles en agua puede recuperarse como un producto humedo, por ejemplo, mediante centrifugacion, filtracion a presion, filtracion a vacfo y/o un procedimiento similar para eliminar el disolvente mencionado anteriormente usado en el lavado, si es necesario seguido por lavado de la torta. Ademas, pueden recuperarse tambien como producto seco cargando adicionalmente el producto humedo en una secadora a presion reducida (secadora a vacfo) purgada internamente con un gas inerte y secando el mismo a presion reducida. Se prefiere la recuperacion como un producto seco.

Ademas, en casos en los que se purifica aceite de coenzima Q10 reducida mediante este metodo, es posible recuperar coenzima Q10 reducida como una forma aceitosa separando un disolvente usado para lavar de la mezcla de lavado (aceite de coenzima Q10 reducida + disolvente(s) usado(s) para lavar). Por otro lado, tambien es posible recuperar la coenzima Q10 reducida como una forma cristalina enfriando la mezcla de lavado tal como esta. La temperatura de enfriamiento en el caso en el que se recupera coenzima Q10 reducida como una forma cristalina no esta particularmente restringida pero es generalmente menor de aproximadamente 50 °C, preferiblemente menor de aproximadamente 48 °C, mas preferiblemente menor de aproximadamente 45 °C y aun mas preferiblemente menor de aproximadamente 40 °C. El lfmite inferior es la temperatura de solidificacion del sistema y generalmente no es menor de aproximadamente 0 °C. En este caso, la coenzima Q10 reducida de la que se eliminan impurezas solubles en agua puede recuperarse a pesar de la presencia de impurezas solubles en agua en una mezcla de lavado.

En casos en los que se recupero coenzima Q10 reducida como una forma aceitosa, tambien es posible solidificar de manera favorable el aceite de coenzima Q10 reducida poniendo en contacto cristales semilla (los propios cristales de coenzima Q10 reducida) con el aceite de coenzima Q10 reducida, particularmente poniendo en contacto cristales semilla (los propios cristales de coenzima Q10 reducida) con el aceite de coenzima Q10 reducida a una temperatura menor que la temperatura de fusion. En este caso, puede obtenerse un solido formando el producto aceitoso anterior en una forma deseada despues de disminuir la temperatura del producto aceitoso hasta por debajo de la temperatura de fusion del mismo y poner en contacto con los cristales semilla. El contacto con los cristales puede realizarse o bien antes o bien despues de dicha formacion a partir del producto aceitoso. La temperatura de solidificacion no esta particularmente restringida siempre que sea menor que la temperatura de fusion. Deseablemente, sin embargo, no es menor de 0 °C.

Al recuperar cristales (incluyendo solido) de coenzima Q10 reducida a partir de aceite de coenzima Q10 reducida de la manera anterior, las perdidas de reactivo y de tiempo pueden evitarse y pueden obtenerse de manera favorable cristales de coenzima Q10 reducida (incluyendo solido) con un alto rendimiento.

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El contenido en peso de impurezas solubles en agua en coenzima Q10 reducida, cuando se purifica de la manera anterior, puede disminuirse generalmente hasta el 0,15% o menos, preferiblemente el 0,10% o menos, mas preferiblemente al 0,08 % o menos. Por tanto, puede obtenerse coenzima Q10 reducida con muy alta calidad.

Es particularmente preferible llevar a cabo el procedimiento de purificacion anterior en una atmosfera desoxigenada. Haciendolo as^ se hace posible minimizar la formacion de coenzima Q10 oxidada como subproducto y por tanto realizar el lavado mas eficazmente.

La atmosfera desoxigenada puede conseguirse mediante sustitucion en gas inerte, reduccion de presion, ebullicion o una combinacion de estas. Es apropiado llevar a cabo al menos sustitucion en gas inerte, concretamente usar una atmosfera de gas inerte. Como gas inerte, pueden mencionarse, por ejemplo, gas nitrogeno, gas helio, gas argon, gas hidrogeno, gas dioxido de carbono o similares. Se prefiere gas nitrogeno, sin embargo.

A continuacion, se describe un metodo de smtesis de coenzima Q10 reducida, que es adecuado para su uso en la practica de la invencion, concretamente un metodo de reduccion de coenzima Q10 oxidada para dar la coenzima Q10 reducida.

La coenzima Q10 reducida que puede usarse en la practica de la invencion puede obtenerse tal como ya se menciono anteriormente en el presente documento. Pueden obtenerse reduciendo la coenzima Q10 oxidada, tal como una coenzima Q10 existente altamente pura, o una mezcla de coenzima Q10 oxidada y coenzima Q10 reducida con un agente reductor comun. En primer lugar, se describe el metodo de reduccion de coenzima Q10 oxidada.

Dado que la coenzima Q10 reducida es apta para oxidarse mediante oxfgeno molecular para dar coenzima Q10 oxidada como subproducto, se usa preferiblemente un disolvente con efecto protector alto frente a la oxidacion como disolvente en la etapa de reduccion. Preferiblemente, al menos una especie seleccionada de entre hidrocarburos, esteres de acidos grasos, eteres y nitrilos se usa como tal disolvente. Los hidrocarburos son los mas preferidos entre ellos.

Los hidrocarburos no estan particularmente restringidos, pero pueden mencionarse, por ejemplo, hidrocarburos alifaticos, hidrocarburos aromaticos, hidrocarburos halogenados, etc. Se prefieren hidrocarburos alifaticos e hidrocarburos aromaticos, y se prefieren mas hidrocarburos alifaticos.

Los hidrocarburos alifaticos no estan particularmente limitados, y pueden ser dclicos o adclicos, o saturados o insaturados. Sin embargo, generalmente contienen de 3 a 20 atomos de carbono, y preferiblemente de 5 a 12 atomos de carbono.

Como ejemplos espedficos, pueden mencionarse, por ejemplo, propano, butano, isobutano, pentano, 2-metilbutano, ciclopentano, 2-penteno, hexano, 2-metilpentano, 2,2-dimetilbutano, 2,3-dimetilbutano, metilciclopentano, ciclohexano, 1-hexeno, ciclohexeno, heptano, 2-metilhexano, 3-metilhexano, 2,3-dimetilpentano, 2,4-dimetilpentano, metilciclohexano, 1-hepteno, octano, 2,2,3-trimetilpentano, isooctano, etilciclohexano, 1-octeno, nonano, 2,2,5- trimetilhexano, 1-noneno, decano, 1-deceno, p-mentano, undecano, dodecano, etc.

Entre ellos, se prefieren los hidrocarburos alifaticos saturados que tienen de 5 a 8 atomos de carbono, y se usan preferiblemente pentano, 2-metilbutano y ciclopentano, que tienen 5 atomos de carbono (denominados “pentanos”); hexano, 2-metilpentano, 2,2-dimetilbutano, 2,3-dimetilbutano, metilciclopentano, ciclohexano, que tienen 6 atomos de carbono (denominados “hexanos”); heptano, 2-metilhexano, 3-metilhexano, 2,3-dimetilpentano, 2,4- dimetilpentano, metilciclohexano, que tienen 7 atomos de carbono (denominados “heptanos”); octano, 2,2,3- trimetilpentano, isooctano, etilciclohexano, que tienen 8 atomos de carbono (denominados octanos); y una mezcla de estos. En particular, se prefieren aun mas los heptanos anteriores ya que tienen una tendencia a mostrar un efecto protector muy alto frente a la oxidacion, y el mas preferido es heptano.

Los hidrocarburos aromaticos no estan particularmente restringidos, pero generalmente contienen de 6 a 20 atomos de carbono, preferiblemente de 6 a 12 atomos de carbono y mas preferiblemente de 7 a 10 atomos de carbono. Como ejemplos espedficos, pueden mencionarse, por ejemplo, benceno, tolueno, xileno, o-xileno, m-xileno, p- xileno, etilbenceno, cumeno, mesitileno, tetralina, butilbenceno, p-cimeno, ciclohexilbenceno, dietilbenceno, pentilbenceno, dipentilbenceno, dodecilbenceno, estireno, etc. Se prefieren tolueno, xileno, o-xileno, m-xileno, p- xileno, etilbenceno, cumeno, mesitileno, tetralina, butilbenceno, p-cimeno, ciclohexilbenceno, dietilbenceno y pentilbenceno. Se prefieren mas tolueno, xileno, o-xileno, m-xileno, p-xileno, cumeno y tetralina, y el mas preferido es cumeno.

Los hidrocarburos halogenados no estan particularmente restringidos, y pueden ser dclicos o alidclicos, o saturados o insaturados. Sin embargo, se usan preferiblemente hidrocarburos halogenados adclicos. Se prefieren mas hidrocarburos clorados e hidrocarburos fluorados, y se prefieren en particular hidrocarburos clorados. Adicionalmente, se usan de manera favorable los que contienen de 1 a 6 atomos de carbono, preferiblemente de 1 a 4 atomos de carbono y mas preferiblemente de 1 a 2 atomos de carbono.

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Como ejemplos espedficos, pueden mencionarse, por ejemplo, diclorometano, cloroformo, tetracloruro de carbono, 1,1-dicloroetano, 1,2-dicloroetano, 1,1,1-tricloroetano, 1,1,2-tricloroetano, 1,1,1,2-tetracloroetano, 1,1,2,2-

tetracloroetano, pentacloroetano, hexacloroetano, 1,1 -dicloroetileno, 1,2-dicloroetileno, tricloroetileno,

tetracloroetileno, 1,2-dicloropropano, 1,2,3-tricloropropano, clorobenceno, 1,1,1,2-tetrafluoroetano, etc.

Se prefieren diclorometano, cloroformo, tetracloruro de carbono, 1,1-dicloroetano, 1,2-dicloroetano, 1,1,1- tricloroetano, 1,1,2-tricloroetano, 1,1 -dicloroetileno, 1,2-dicloroetileno, tricloroetileno, clorobenceno y 1,1,1,2- tetrafluoroetano. Se prefieren mas diclorometano, cloroformo, 1,2-dicloroetileno, tricloroetileno, clorobenceno y 1,1,1,2-tetrafluoroetano.

Los esteres de acidos grasos no estan particularmente restringidos, pero pueden mencionarse, por ejemplo, propionatos, acetatos, formiatos, etc. Se prefieren acetatos y formiatos, y se prefieren mas acetatos. Los grupos funcionales ester de los mismos no estan particularmente restringidos, pero incluyen esteres alqmlicos que tienen de

1 a 8 atomos de carbono, esteres aralqmlicos que tienen de 7 a 12 atomos de carbono. Se prefieren esteres alqmlicos que tienen de 1 a 6 atomos de carbono y se prefieren mas esteres alqmlicos que tienen de 1 a 4 atomos de carbono y se usan.

Como propionatos, pueden mencionarse, por ejemplo, propionato de metilo, propionato de etilo, propionato de butilo, propionato de isopentilo, etc. Se prefiere propionato de etilo.

Como acetatos, pueden mencionarse, por ejemplo, acetato de metilo, acetato de etilo, acetato de propilo, acetato de isopropilo, acetato de butilo, acetato de isobutilo, acetato de sec-butilo, acetato de pentilo, acetato de isopentilo, acetato de sec-hexilo, acetato de ciclohexilo, acetato de bencilo, etc. Se prefieren acetato de metilo, acetato de etilo, acetato de propilo, acetato de isopropilo, acetato de butilo, acetato de isobutilo, acetato de sec-butilo, acetato de pentilo, acetato de isopentilo, acetato de sec-hexilo y acetato de ciclohexilo. Se prefiere mas acetato de metilo, acetato de etilo, acetato de propilo, acetato de isopropilo, acetato de butilo y acetato de isobutilo. El mas preferido es acetato de etilo.

Como formiatos, pueden mencionarse, por ejemplo, formiato de metilo, formiato de etilo, formiato de propilo, formiato de isopropilo, formiato de butilo, formiato de isobutilo, formiato de sec-butilo, formiato de pentilo, etc. Se prefieren formiato de metilo, formiato de etilo, formiato de propilo, formiato de butilo, formiato de isobutilo y formiato de pentilo, y el mas preferido es formiato de etilo.

Como eteres y nitrilos, pueden mencionarse eteres y nitrilos tales como los descritos anteriormente en el presente documento.

En la seleccion del disolvente que va a usarse de entre los mencionados anteriormente, se tienen en consideracion preferiblemente los siguientes factores: propiedades tales como punto de ebullicion y viscosidad (por ejemplo punto de ebullicion (de aproximadamente 30 a 150 °C a 1 atm) que permiten el calentamiento apropiado para aumentar la solubilidad y facilitar la eliminacion del disolvente mediante secado a partir de cristales humedos y/o la recuperacion del disolvente a partir del filtrado despues de la cristalizacion, etc.), un punto de fusion adecuado (no mayor de aproximadamente 20 °C, preferiblemente no mayor de aproximadamente 10 °C y mas preferiblemente no mayor de aproximadamente 0 °C) casi no permite la solidificacion durante la manipulacion a temperatura ambiente y tras enfriar hasta un nivel por debajo de la temperatura ambiente, y un nivel bajo de viscosidad (aproximadamente 10 cp o por debajo a 20 °C). Desde el punto de vista de la operacion industrial, se prefieren los que casi no son volatiles a temperatura habitual. Se prefieren generalmente los que tienen un punto de ebullicion de, por ejemplo, aproximadamente 80 °C o mayor, y mas preferiblemente aproximadamente 90 °C o mayor.

Entre los disolventes anteriormente mencionados, los disolventes que tienen una baja miscibilidad con agua se usan de manera particularmente preferible como disolvente para llevar a cabo la reaccion de reduccion. Promueven la extraccion/eliminacion del agente reductor (que va a mencionarse mas adelante) e impurezas derivadas del agente reductor en la fase acuosa y la purificacion/recuperacion de la coenzima Q10 reducida.

La coenzima Q10 reducida tiende a volverse mas resistente a la oxidacion a medida que aumenta la concentracion en disolucion de la misma. La coenzima Q10 reducida es altamente soluble en los disolventes mencionados anteriormente y, desde este punto de vista tambien, los disolventes anteriores son adecuados para proteccion frente a la oxidacion. La concentracion de la coenzima Q10 reducida que se prefiere para la proteccion frente a la oxidacion puede variar dependiendo de las especies de disolvente, no pudiendo por tanto especificarse de manera absoluta. Generalmente, sin embargo, la concentracion de la coenzima Q10 reducida en los disolventes anteriormente mencionados no es menor de aproximadamente el 1 % p/p, preferiblemente no menor de aproximadamente el

2 % p/p. El lfmite superior no esta particularmente restringido pero, desde el punto de vista de la capacidad operativa practica, es aproximadamente el 400 % p/p, preferiblemente de aproximadamente el 200 % p/p, mas preferiblemente de aproximadamente el 100 % p/p y aun mas preferiblemente de aproximadamente el 50 % p/p.

Por tanto, cuando se usan los disolventes anteriores, las reacciones secundarias no deseadas que implican al

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ox^geno se minimizan a traves de la etapa de reduccion.

La reaccion de reduccion puede llevarse a cabo en uno de los disolventes anteriores usando, como agente reductor, un compuesto de hidruro de metal, hierro (hierro metalico o un hierro en forma de sal), cinc (cinc metalico), acido hiposulfuroso o una sal del mismo, acido ascorbico o compuestos relacionados con el mismo, o similares.

El compuesto de hidruro de metal no esta particularmente restringido pero incluye borohidruro de sodio, hidruro de aluminio y litio, etc. La cantidad del compuesto de hidruro de metal que va a usarse puede variar dependiendo de la especie del compuesto de hidruro de metal, no pudiendo por tanto especificarse de manera absoluta. Generalmente, sin embargo, una cantidad de 1 a 3 veces el equivalente de hidrogeno teorico es adecuada para llevar a cabo la reaccion de reduccion.

La reduccion usando hierro o cinc se lleva a cabo generalmente usando un acido. El acido no esta particularmente restringido pero incluye acidos grasos tales como acido acetico, acidos sulfonicos tales como acido metanosulfonico y acidos inorganicos tales como acido clorlddrico y acido sulfurico, y similares. Se prefieren acidos inorganicos, y se prefiere mas acido sulfurico.

La cantidad de hierro que va a usarse no esta particularmente restringida pero una cantidad de aproximadamente 1/5 en peso o mas en relacion al peso de la coenzima Q10 reducida cargada es apropiada para llevar a cabo la reaccion. El lfmite superior no esta particularmente restringido pero, desde el punto de vista economico, entre otros, es aproximadamente 2 veces en peso o menos. El hierro puede usarse no solo en una forma metalica sino tambien en forma de una sal tal como sulfato de hierro (II).

La cantidad de cinc que va a usarse no esta particularmente restringida pero una cantidad de aproximadamente 1/10 en peso o mas en relacion con el peso de la coenzima Q10 reducida cargada es apropiada para llevar a cabo la reaccion. El lfmite superior no esta particularmente restringido pero, desde el punto de vista economico, entre otros, es no mas de aproximadamente 2 veces en peso.

El acido hiposulfuroso o la sal del mismo no estan particularmente restringidos pero generalmente se usa en forma de una sal de metal alcalino (sal de litio, sal de sodio, sal de potasio, y similares), sal de metal alcalinoterreo (sal de magnesio, sal de calcio, y similares), o sal de amonio, de acido hiposulfuroso, por ejemplo. Se prefieren sales de metales alcalinos, tales como sal de litio, sal de sodio y sal de potasio, y la sal de sodio se prefiere mas.

La cantidad del acido hiposulfuroso o la sal del mismo que va a usarse no esta particularmente restringida pero, generalmente, no es menos de aproximadamente 1/5 en peso, preferiblemente no menos de aproximadamente 2/5 en peso y mas preferiblemente 3/5 en peso aproximadamente, en relacion con el peso de la coenzima Q10 reducida cargada. Una cantidad mayor no provocara ningun problema pero es economicamente desfavorable. Por tanto, se emplea una cantidad que no excede aproximadamente 2 veces en peso, preferiblemente que no excede el mismo peso. La reaccion de reduccion puede llevarse a cabo apropiadamente en una cantidad dentro del intervalo de aproximadamente 2/5 en peso a aproximadamente el mismo peso.

El acido ascorbico y compuestos relacionados del mismo no estan particularmente restringidos, e incluyen, por ejemplo, no solo acido ascorbico, sino tambien acido ramno-ascorbico, acido arabo-ascorbico, acido gluco- ascorbico, acido fuco-ascorbico, acido glucohepto-ascorbico, acido xilo-ascorbico, acido galacto-ascorbico, acido gulo-ascorbico, acido alo-ascorbico, acido eritro-ascorbico, acido 6-desoxiascorbico, y los compuestos relacionados similares, y pueden ser formas ester o sales de estas. Ademas, estas pueden ser forma L, forma D o forma racemica. Mas espedficamente, pueden mencionarse, por ejemplo, acido L-ascorbico, palmitato de L-ascorbilo, estearato de L-ascorbilo, acido D-arabo-ascorbico, etc.

En la produccion de la coenzima Q10 reducida, cualquiera del acido ascorbico mencionado anteriormente y compuestos relacionados del mismo puede usarse de manera favorable. Sin embargo, los solubles en agua se usan de manera favorable en particular entre el acido ascorbico anteriormente mencionado o compuestos relacionados del mismo teniendo en cuenta la facilidad de separacion de la coenzima Q10 reducida generada, etc. Y los mas preferidos son una forma libre de acido L-ascorbico, acido D-arabo-ascorbico y similares en teniendo en cuenta la facil obtencion, precio, etc.

La cantidad del acido ascorbico o un compuesto relacionado del mismo a usar no esta particularmente restringida pero debe estar a un nivel tal que sea eficaz para convertir coenzima Q10 oxidada en coenzima Q10 reducida. Generalmente, se usa en una cantidad de no menos de 1 mol, preferiblemente no menos de 1,2 moles, por mol de coenzima Q10 reducida. El lfmite superior no esta particularmente restringido pero, teniendo en consideracion el punto de vista economico, es generalmente 10 moles, preferiblemente 5 moles y mas preferiblemente 3 moles, sobre la misma base.

Los agentes reductores mencionados anteriormente y/o compuestos derivables de los mismos son mayoritariamente solubles en agua. Cuando se usa acido hiposulfuroso o una sal del mismo, por ejemplo, se forma un hidrogenosulfito como subproducto. Cuando se usa acido ascorbico o un compuesto relacionado del mismo, se forma acido

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deshidroascorbico como subproducto, y se forman adicionalmente acido 2,3-dicetogulonico y acido oxalico como subproductos a partir de acido deshidroascorbico. Ademas, cuando se usan hierro o cinc, se forman sales (por

ejemplo cloruro de hierro o cloruro de cinc, que pueden generarse como subproducto cuando se usa acido

clorlddrico) como subproductos despues de la reduccion. Tal como se menciono anteriormente en el presente documento, todos estos agentes reductores y/o compuestos derivados de los mismos pueden eliminarse eficazmente usando el metodo de purificacion de la presente invencion, mediante lo cual puede obtenerse coenzima Q10 reducida de alta calidad.

Entre los agentes reductores anteriormente mencionados, se prefieren mas cinc, acido hiposulfuroso o una sal del

mismo, y acido ascorbico o un compuesto relacionado del mismo, y acido hiposulfuroso o una sal del mismo

(espedficamente, una sal de acido hiposulfuroso) y se prefieren especialmente acido ascorbico o un compuesto relacionado del mismo, desde el punto de vista de capacidad de reduccion, rendimiento, calidad.

En la reaccion de reduccion, un alcohol de este tipo tal como se menciono anteriormente y/o agua pueden usarse apropiadamente en combinacion. El uso combinado de agua es especialmente adecuado cuando se usa hierro, cinc o acido hiposulfuroso o una sal del mismo como agente reductor. Cuando se usa un compuesto de hidruro de metal o acido ascorbico o un compuesto relacionado del mismo como agente reductor, puede usarse un alcohol preferiblemente en combinacion. El uso combinado de agua y/o un alcohol hace posible mostrar las caractensticas de estos y contribuye a mejoras en la velocidad de reaccion, rendimiento y similares.

A continuacion, se describen en detalle modos preferidos del metodo de reduccion.

La reduccion que usa el acido hiposulfuroso anteriormente mencionado o una sal del mismo se lleva a cabo preferiblemente en un sistema de disolvente mixto compuesto de agua conjuntamente con al menos un disolvente organico seleccionado de entre los hidrocarburos, esteres de acidos grasos, eteres y nitrilos anteriormente mencionados (preferiblemente hidrocarburos, mas preferiblemente hidrocarburos alifaticos, aun mas preferiblemente heptanos y de manera particularmente preferible heptano).

En esa ocasion, la reaccion se lleva a cabo generalmente a un pH no mayor de 7, preferiblemente a pH de 3 a 7, y mas preferiblemente a pH de 3 a 6, desde el punto de vista del rendimiento y/u otro. El pH puede ajustarse usando un acido, por ejemplo un acido mineral tal como acido clorlddrico o acido sulfurico, o una base, por ejemplo un hidroxido de metal alcalino tal como hidroxido de sodio.

En la reduccion usando acido hiposulfuroso o una sal del mismo, la cantidad de agua a usar no esta particularmente limitada pero debe ser tal que una cantidad apropiada de acido hiposulfuroso o una sal del mismo, concretamente el agente reductor, pueda disolverse. Generalmente, es aconsejable ajustar el peso del acido hiposulfuroso o la sal en relacion con el agua a un nivel de no mas de aproximadamente el 30 % p/p, por ejemplo, y preferiblemente no mas de aproximadamente el 20 % p/p. Desde el punto de vista de la productividad, entre otros, la cantidad de agua generalmente no es de menos de aproximadamente el 1 % p/p, preferiblemente no menos de aproximadamente el 5 % p/p y mas preferiblemente no menos de aproximadamente el 10 % p/p.

La reduccion usando el acido ascorbico anteriormente mencionado o un compuesto relacionado del mismo tambien puede llevarse a cabo usando un disolvente altamente miscible con agua seleccionado de entre los hidrocarburos, esteres de acidos grasos, eteres y nitrilos anteriormente mencionados, en particular un eter o nitrilo altamente miscible en agua, mas espedficamente tetrahidrofurano, dioxano, acetonitrilo, o similares. El uso de un alcohol y/o una cetona de este tipo tal como se menciono anteriormente (preferiblemente un alcohol y/o cetona altamente miscible en agua (espedficamente, un alcohol monohidroxilado o dihidroxilado (preferiblemente monohidroxilado) que contiene de 1 a 5 atomos de carbono, preferiblemente de 1 a 4 atomos de carbono, mas preferiblemente de 1 a 3 atomos de carbono y/o una acetona de este tipo como acetona o metiletilcetona)) se prefiere de manera particular. Concretamente, en la reaccion de reduccion usando acido ascorbico o un compuesto relacionado, se prefiere el uso de disolvente organico altamente miscible.

La reduccion usando acido ascorbico o un compuesto relacionado del mismo puede llevarse a cabo en presencia de un promotor de reaccion tal como una sustancia basica o una sal de hidrogenosulfito con el objetivo de disminuir la temperatura de reaccion, acortar el tiempo de reaccion y similares.

La sustancia basica mencionada anteriormente no esta particularmente restringida sino que puede ser o bien un compuesto inorganico o bien un compuesto organico. El compuesto inorganico no esta particularmente limitado pero incluye hidroxidos, carbonatos e hidrogenocarbonatos de metales (preferiblemente metales alcalinos, metales alcalinoterreos, etc.), amoniaco, y similares. Como ejemplos tfpicos de los mismos, pueden mencionarse hidroxidos de metales alcalinos tales como hidroxido de sodio, carbonatos de metales alcalinos tales como carbonato de sodio, hidrogenocarbonatos de metales alcalinos tales como hidrogenocarbonato de sodio, carbonatos de metales alcalinoterreos tales como carbonato de magnesio, y similares. El compuesto organico no esta particularmente limitado pero incluye aminas tales como trietilamina, y similares.

Entre las sustancias basicas espedficamente mencionadas anteriormente, se usan preferiblemente sustancias

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debilmente basicas (base debil o alcali debil), por ejemplo compuestos inorganicos tales como carbonatos e hidrogenocarbonatos de metal (preferiblemente metal alcalino, metal alcalinoterreo o similares), y amoniaco, y compuestos organicos tales como trietilamina y aminas similares. Se prefieren mas los compuestos inorganicos debilmente basicos mencionados anteriormente.

Como especies preferidas de la sal de hidrogenosulfito, pueden mencionarse, por ejemplo, hidrogenosulfitos de metales alcalinos tales como hidrogenosulfito de sodio y similares.

La cantidad del promotor de reaccion anteriormente mencionado no esta particularmente limitada pero debe ser tal que el efecto promotor de la reaccion del promotor de la reaccion pueda producirse en un grado esperado (concretamente, una cantidad eficaz). Teniendo en consideracion el punto de vista economico tambien, es generalmente no mas de aproximadamente 20 moles, preferiblemente no mas de aproximadamente 10 moles, mas preferiblemente no mas de aproximadamente 5 moles, y aun mas preferiblemente no mas de aproximadamente 2 moles, por mol del acido ascorbico o un compuesto relacionado del mismo. El lfmite inferior no esta particularmente restringido pero generalmente es de aproximadamente 0,01 moles o mayor, preferiblemente de aproximadamente 0,05 moles o mayor, mas preferiblemente de aproximadamente 0,1 moles o mayor, y aun mas preferiblemente de aproximadamente 0,2 moles o mayor, sobre la misma base.

La reaccion de reduccion se lleva a cabo preferiblemente con flujo forzado. El flujo se efectua preferiblemente mediante una potencia requerida para agitacion por unidad de volumen de generalmente no menos de aproximadamente 0,01 kW/m3, preferiblemente no menos de aproximadamente 0,1 kW/m3 y mas preferiblemente no menos de aproximadamente 0,3 kW/m3. El flujo forzado anterior se proporciona generalmente mediante rotacion de paleta(s) de agitacion. Si el flujo anterior se consigue, sin embargo, no siempre es necesario usar paleta(s) de agitacion. Por ejemplo, pueden utilizarse la circulacion del lfquido o procedimiento similar.

La temperatura de reaccion de reduccion puede variar dependiendo de la especie del agente reductor y/o la cantidad del mismo, no pudiendo por tanto especificarse de manera absoluta. En el caso de reduccion usando acido hiposulfuroso o una sal del mismo, por ejemplo, la reaccion puede llevarse a cabo generalmente a aproximadamente 100 °C o menos, preferiblemente a aproximadamente 80 °C o menos y mas preferiblemente a aproximadamente 60 °C o menos. El lfmite inferior es la temperatura de solidificacion del sistema. La reaccion puede llevarse a cabo sin problemas a de aproximadamente 0 a aproximadamente 100 °C, preferiblemente a de aproximadamente 0 a aproximadamente 80 °C y mas preferiblemente a de aproximadamente 0 a aproximadamente 60 °C. La reduccion usando el acido ascorbico o un compuesto relacionado del mismo se lleva a cabo generalmente a aproximadamente 30 °C o mas, preferiblemente a aproximadamente 40 °C o mas y mas preferiblemente a aproximadamente 50 °C o mas. El lfmite superior es el punto de ebullicion del sistema. Generalmente, la reaccion puede llevarse a cabo a de aproximadamente 30 a aproximadamente 150 °C, preferiblemente a de aproximadamente 40 a aproximadamente 120 °C y mas preferiblemente a de aproximadamente 50 a aproximadamente 100 °C.

La concentracion de la reaccion no esta particularmente restringida pero el peso de coenzima Q10 oxidada en relacion con el peso del disolvente generalmente no es de menos de aproximadamente el 1 % p/p, preferiblemente no menos de aproximadamente el 2 % p/p, mas preferiblemente no menos de aproximadamente 3 % p/p, aun mas preferiblemente no menos de aproximadamente el 5 % p/p, de manera particularmente preferible no menos de aproximadamente el 10% p/p y lo mas preferiblemente no menos de aproximadamente el 15% p/p. El lfmite superior no esta particularmente restringido pero generalmente es de aproximadamente el 60 % p/p, preferiblemente de aproximadamente el 50 % p/p, mas preferiblemente de aproximadamente el 40 % p/p y aun mas preferiblemente de aproximadamente el 30 % p/p. Generalmente, la reaccion puede llevarse a cabo de manera favorable a de aproximadamente el 2 a aproximadamente el 30 % p/p, preferiblemente a de aproximadamente el 5 a aproximadamente el 30 % p/p y mas preferiblemente a de aproximadamente el 10 a aproximadamente el 30 % p/p.

La reaccion de reduccion puede realizarse hasta su finalizacion generalmente en el plazo de 48 horas, preferiblemente en el plazo de 24 horas, mas preferiblemente en el plazo de 10 horas y aun mas preferiblemente en el plazo de 5 horas.

El aceite de la coenzima Q10 reducida puede obtenerse tambien eliminando la fase acuosa despues de la reduccion, en agua, de aceite de coenzima Q10 oxidada usando el agente reductor anteriormente mencionado.

En este caso, la reduccion se lleva a cabo generalmente a una temperatura de aproximadamente 45 °C o mas, preferiblemente a aproximadamente 48 °C o mas, y mas preferiblemente a aproximadamente 50 °C o mas, aunque la temperatura depende de la pureza de la coenzima Q10 reducida y otros factores. El lfmite superior es el punto de ebullicion del sistema y generalmente es de aproximadamente 100 °C o menos, preferiblemente de aproximadamente 80 °C o menos y mas preferiblemente de aproximadamente 60 °C o menos.

Este metodo para reducir aceite de coenzima Q10 oxidada en agua hace posible sintetizar la coenzima Q10 reducida al tiempo que se evita la perdida de tiempo, el uso de un aparato de produccion caro y el aumento en el volumen debido a la separacion y concentracion del disolvente organico.

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La reaccion de reduccion anterior y el tratamiento posterior (separacion de la fase organica) se llevan a cabo de manera muy favorable en una atmosfera desoxigenada, y se encontro tambien que la operacion bajo tal atmosfera contribuyo enormemente a la mejora en el rendimiento de la reaccion de reduccion y a la disminucion de la cantidad del agente reductor especialmente en la reaccion de reduccion usando acido hiposulfuroso o una sal del mismo. La atmosfera desoxigenada puede conseguirse mediante sustitucion de gas inerte, reduccion de presion, ebullicion, o una combinacion de estas. Es apropiado llevar a cabo al menos sustitucion de gas inerte, concretamente usar una atmosfera de gas inerte. El gas inerte puede ser, por ejemplo, gas nitrogeno, gas helio, gas argon, gas hidrogeno, gas dioxido de carbono, o similar. Se prefiere gas nitrogeno, sin embargo.

Ahora, se describen los cristales de coenzima Q10 reducida que van a usarse en el metodo de purificacion de la presente invencion. Para la practica de la invencion, los cristales que pueden estar disponibles son los cristales obtenibles mediante cristalizacion de o concentracion hasta sequedad de una disolucion que contiene coenzima Q10 reducida, los cristales ya existentes de la coenzima Q10 reducida, y similares. Puede usarse tambien el solido que resulta de la solidificacion de aceite de coenzima Q10 reducida. Se prefieren los cristales de la coenzima Q10 reducida obtenibles mediante cristalizacion o concentracion hasta sequedad. Se prefieren mas los cristales de coenzima Q10 reducida obtenibles mediante cristalizacion o concentracion hasta sequedad tras la reduccion de coenzima Q10 oxidada. Se prefieren particularmente los cristales de coenzima Q10 reducida obtenibles mediante cristalizacion tras la reduccion de coenzima Q10 oxidada.

El disolvente que va a usarse en la obtencion de tales cristales no esta particularmente restringido pero incluye hidrocarburos, esteres de acidos grasos, eteres, alcoholes, acidos grasos, cetonas, compuestos que contienen nitrogeno (incluyendo nitrilos y amidas), compuestos que contienen azufre, agua y similares.

Como hidrocarburos, esteres de acidos grasos, eteres, alcoholes, acidos grasos, cetonas, nitrilos, amidas y compuestos que contienen azufre, pueden mencionarse disolventes tales como los mencionados anteriormente en el presente documento.

Como compuestos que contienen nitrogeno distintos de nitrilos o amidas, pueden mencionarse, por ejemplo, nitrometano, trietilamina, piridina, y similares.

Para obtener cristales de alta calidad de la coenzima Q10 reducida al tiempo que se suprime la reaccion secundaria que implica oxfgeno no deseada, prefiere usarse un disolvente con efecto protector elevado frente a tal oxidacion, concretamente al menos una especie seleccionada de entre los hidrocarburos, esteres de acidos grasos, eteres y nitrilos anteriormente mencionados. Entre ellos, se prefieren mas los hidrocarburos y esteres de acidos grasos como tal disolvente, los hidrocarburos se prefieren aun mas y los heptanos se prefieren particularmente.

El uso de un alcohol y/o cetona de este tipo tal como se menciono anteriormente en el presente documento se prefiere tambien debido a que pueden obtenerse cristales de coenzima Q10 reducida que tienen buenas caractensticas de suspension y cristal cuando se utiliza la cristalizacion, que se mencionara a continuacion como metodo para recuperar cristales, y un disolvente de este tipo se usa en la etapa de cristalizacion.

La cristalizacion de la coenzima Q10 reducida puede llevarse a cabo mediante el procedimiento de cristalizacion general, por ejemplo enfriamiento, concentracion, sustitucion de disolvente y uso de un mal disolvente, segun se usan individualmente o en combinacion apropiada de los mismos. En particular, la operacion de enfriamiento (cristalizacion por enfriamiento) se lleva a cabo preferiblemente individualmente o en combinacion con algunas otras operaciones.

Para la cristalizacion de coenzima Q10 reducida, es muy eficaz purificar y cristalizar la coenzima Q10 reducida con retirada simultanea de impurezas contenidas en la mezcla de reaccion o extracto obtenible de manera convencional o producido mediante el metodo de reduccion anteriormente mencionado o similares. Esto hace posible eliminar las impurezas coexistentes, en particular compuestos analogos que tienen una estructura similar y generalmente no siempre faciles de eliminar (espedficamente, coenzima Qg reducida, coenzima Q8 reducida, coenzima Q7 reducida, etc.). Los alcoholes y/o cetonas son disolventes particularmente eficaces para eliminar los compuestos que tienen estructuras similares tal como se menciono anteriormente.

Ademas, cuando se usa(n) un alcohol y/o una cetona y se permite que coexista una pequena cantidad de agua, la solubilidad de la coenzima Q10 reducida puede reducirse apropiadamente para dar un rendimiento aumentado. Ademas, las caractensticas de suspension pueden mejorarse y, en particular, la capacidad de separacion solido- lfquido (capacidad de filtracion) puede mejorarse de manera marcada, lo que es digno de mencion.

La proporcion de mezclado entre agua y la disolucion de alcohol y/o cetona puede variar dependiendo de la especie de disolvente, no pudiendo por tanto especificarse de manera absoluta. Cualquier disolvente que comprende sustancialmente el alcohol y/o la cetona anteriormente mencionados como componente(s) principal(es) puede usarse sin restriccion particular alguna. Concretamente, la proporcion entre el alcohol y/o la cetona anteriores en disolvente mixto que contiene agua tiene el lfmite inferior de generalmente el 90 % p/p aproximadamente, preferiblemente el 91 % p/p aproximadamente, mas preferiblemente el 92 % p/p aproximadamente y aun mas

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preferiblemente el 93 % p/p, y el Ifmite superior de aproximadamente el 99,5 % p/p, preferiblemente el 99 % p/p aproximadamente, mas preferiblemente el 98 % p/p aproximadamente y aun mas preferiblemente el 97 % p/p aproximadamente. En general, la cristalizacion puede llevarse a cabo de manera favorable a de aproximadamente el 90 al aproximadamente el 99,5 % p/p, y lo mas preferiblemente a de aproximadamente el 93 a aproximadamente el 97 % p/p.

La temperatura de cristalizacion de la coenzima Q10 reducida puede variar dependiendo de la especie de disolvente de cristalizacion y/o del metodo de cristalizacion, entre otros, no pudiendo por tanto especificarse de manera absoluta. Generalmente, sin embargo, no es mayor de aproximadamente 25 °C, preferiblemente no mayor de aproximadamente 20 °C, mas preferiblemente no mayor de aproximadamente 15 °C y aun mas preferiblemente no mayor de aproximadamente 10 °C. El lfmite inferior es la temperatura de solidificacion del sistema. Generalmente, la cristalizacion se lleva a cabo a de aproximadamente 0 a aproximadamente 25 °C.

Para minimizar la mezcla de diversas impurezas en la coenzima Q10 reducida obtenida o para obtener una suspension que tenga buenas propiedades, la cantidad de precipitacion de cristales por tiempo unitario puede controlarse en la etapa de cristalizacion. Una velocidad preferida de cristalizacion por tiempo unitario es, por ejemplo, no mayor que la velocidad a la que aproximadamente el 50 % de la cantidad total de cristales cristaliza por tiempo unitario (cantidad del 50 %/hora), y preferiblemente no mayor que la velocidad a la que aproximadamente el 25 % de la cantidad total de cristales cristaliza (cantidad del 25 %/hora). La velocidad de enfriamiento en cristalizacion por enfriamiento no es generalmente mayor de aproximadamente 40 °C/hora, y preferiblemente no mayor de aproximadamente 20 °C/hora.

La cristalizacion de la coenzima Q10 reducida se lleva a cabo preferiblemente en flujo forzado. Para inhibir la aparicion de supersaturacion y efectuar la nucleacion y el crecimiento de cristales de manera suave, o desde el punto de vista de mejora de la calidad, el flujo se provoca preferiblemente mediante una potencia requerida para agitacion por volumen unitario de generalmente no menos de aproximadamente 0,01 kW/m3, preferiblemente no menos de aproximadamente 0,1 kW/m3 y mas preferiblemente no menos de aproximadamente 0,3 kW/m3. El flujo forzado anterior se proporciona generalmente mediante rotacion de paleta(s) de agitacion. Si el flujo anterior se consigue, sin embargo, no siempre es necesario usar paleta(s) de agitacion. Por ejemplo, pueden utilizarse la circulacion del lfquido o procedimiento similar.

Para inhibir la aparicion de supersaturacion y efectuar la nucleacion y crecimiento cristalino de manera suave en la etapa de cristalizacion, se prefiere la adicion de cristales semilla.

La concentracion de cristalizacion puede variar dependiendo de la especie de disolvente de cristalizacion y el metodo de cristalizacion, no pudiendo por tanto especificarse de manera absoluta. Por ejemplo, el peso de la coenzima Q10 reducida en relacion con el peso del disolvente de cristalizacion en el momento de finalizacion de la cristalizacion no es mayor de aproximadamente el 15 % p/p, preferiblemente mayor de aproximadamente el 13 % p/p y mas preferiblemente no mayor de aproximadamente el 10 % p/p. Desde el punto de vista de la productividad, el lfmite inferior es generalmente no menor de aproximadamente el 1 % p/p, preferiblemente no menor de aproximadamente el 2 % p/p y mas preferiblemente no menor de aproximadamente el 5 % p/p. La cristalizacion puede llevarse a cabo de manera favorable generalmente a de aproximadamente el 5 a aproximadamente el 10 %

p/p.

Los cristales de la coenzima Q10 reducida asf obtenidos pueden recuperarse como un producto humedo, por ejemplo, mediante una tecnica de separacion solido-lfquido tal como centrifugacion, filtracion a presion o filtracion a vacfo, si es necesario seguida por lavado de la torta. Ademas, pueden recuperarse tambien como un producto seco cargando adicionalmente el producto humedo en una secadora a presion reducida (secadora a vado) purgada internamente con un gas inerte y secando el mismo a presion reducida. Se prefiere la recuperacion en una forma seca.

El aceite de coenzima Q10 reducida que va a usarse en el metodo de purificacion de la presente invencion es aceite que resulta de fundir cristales de coenzima Q10 reducida, o aceite obtenible concentrando una disolucion que contiene coenzima Q10 reducida a una temperatura no menor que la temperatura de fusion. Obviamente, tambien esta disponible el aceite obtenible concentrando una disolucion que contiene coenzima Q10 reducida, que viene dado por el procedimiento de reduccion mencionado anteriormente, a una temperatura no menor que la temperatura de fusion.

La fase organica que contiene coenzima Q10 reducida que va a usarse para obtener aceite de coenzima Q10 reducida no esta particularmente restringida pero, para inhibir la reaccion secundaria que implica oxfgeno no deseada para obtener de ese modo un aceite de alta calidad de coenzima Q10 reducida, es preferiblemente una disolucion en un disolvente con efecto protector alto frente a tal oxidacion, concretamente en al menos un disolvente seleccionado de entre hidrocarburos, esteres de acidos grasos, eteres y nitrilos. Entre ellos, se prefieren mas como disolvente hidrocarburos y esteres de acidos grasos. Los hidrocarburos se prefieren aun mas, y los mas preferidos son los heptanos. La fase organica que contiene coenzima Q10 reducida puede ser la disolucion anteriormente mencionada o un concentrado obtenible concentrando la disolucion de la manera general.

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Para concentrar la fase organica que contiene coenzima Q10 reducida, la concentracion de dicha fase organica se lleva a cabo a una temperatura igual a o mayor que la temperature de fusion del concentrado que comprende coenzima Q10 reducida como componente principal de manera que el disolvente coexistente puede eliminarse por destilacion completamente o casi completamente. Como resultado, puede obtenerse un producto aceitoso de coenzima Q10 reducida, del que los disolventes se eliminan completamente o casi completamente. Cuando la temperatura de fusion es amplia, la temperatura es aplicable siempre que no sea menor que la temperatura al inicio de la fusion.

En la practica de la invencion, la temperatura de concentracion anterior para obtener aceite de coenzima Q10 reducida puede variar dependiendo de la cantidad del disolvente organico coexistente, no pudiendo por tanto especificarse de manera absoluta. Es, sin embargo, por ejemplo, preferiblemente no menor de aproximadamente 40 °C, mas preferiblemente no menor de aproximadamente 45 °C, aun mas preferiblemente no menor de aproximadamente 48 °C, de manera particularmente preferible no menor de aproximadamente 50 °C y lo mas preferiblemente de aproximadamente 60 °C. La concentracion puede llevarse a cabo de manera favorable generalmente dentro del intervalo de aproximadamente 40 a aproximadamente 140 °C, preferiblemente de aproximadamente 40 a aproximadamente 100 °C y mas preferiblemente de aproximadamente 50 a aproximadamente 80 °C, aunque la temperatura depende de la especie del disolvente y la cantidad del mismo. La concentracion se lleva a cabo a presion habitual o a presion reducida.

El metodo anteriormente mencionado hace posible obtener de manera favorable coenzima Q10 reducida como un producto aceitoso eliminando completamente por destilacion el disolvente organico sin ningun problema de agitacion incluso cuando la pureza de la coenzima Q10 reducida en la fase organica es, por ejemplo, no menor de aproximadamente el 80 % en peso, preferiblemente no menor de aproximadamente el 90 % en peso y mas preferiblemente no menor del 95 % en peso.

Cuando el aceite de la coenzima Q10 reducida se obtiene eliminando por destilacion el disolvente, el contenido del disolvente en el aceite de la coenzima Q10 reducida es generalmente no mayor de aproximadamente el 10% en peso, preferiblemente no mayor de aproximadamente el 5 % en peso y mas preferiblemente no mayor de aproximadamente el 2 % en peso, del peso total del aceite.

Tal como se describio anteriormente, las impurezas solubles en agua que quedan en la coenzima Q10 reducida, en particular un agente reductor y/o impurezas derivadas del agente reductor, pueden eliminarse eficazmente mediante el metodo de la presente invencion que tiene una capacidad operativa excelente.

La coenzima Q10 reducida producto obtenible mediante el metodo de purificacion de la invencion tiene una calidad muy alta, y el peso de impurezas solubles en agua contenidas en la coenzima Q10 reducida se espera que sea del 0,15 % o mas bajo, preferiblemente el 0,10 % o mas bajo o mas preferiblemente el 0,08 % o mas bajo.

Mejor modo de llevar a cabo la invencion

Los siguientes ejemplos ilustran la presente invencion adicionalmente en detalle.

En los ejemplos, se determino el contenido de acido L-ascorbico mediante HPLC, y el contenido de hiposulfito de sodio y de impurezas derivadas de hiposulfito de sodio se determino mediante cromatograffa ionica para la determinacion del contenido de sodio, que se convirtio despues en el contenido de hiposulfito de sodio. Ha de entenderse, sin embargo, que los contenidos del agente reductor y/o impurezas derivadas del agente reductor mostradas no indicaran nunca el lfmite de purificacion de la coenzima Q10 reducida mediante el metodo de la invencion.

(Ejemplo de produccion 1)

Se anadieron coenzima Q10 oxidada (100 g) y 60 g de acido L-ascorbico a 1000 g de etanol, y se llevo a cabo la reaccion de reduccion con agitacion a 78 °C. Despues de 30 horas, se enfrio la mezcla hasta 50 °C y se anadieron 400 g de etanol y 100 g de agua manteniendo mientras la misma temperatura. Esta disolucion de etanol (que conterna 100 g de la coenzima Q10 reducida) se enfrio hasta 2 °C a una velocidad de enfriamiento de 10 °C/hora con agitacion (potencia para la agitacion: 0,3 kW/m3), y de ese modo se obtuvo suspension blanca. Se filtro la suspension obtenida a presion reducida, y se secaron los cristales humedos a presion reducida (de 20 a 40 °C, de 0,13 a 4 kPa (de 1 a 30 mm de Hg)) para dar 101 g de cristales blancos secos (que conternan el 3,2 % de acido L- ascorbico y el 0,36% de acido oxalico). Todas las operaciones distintas del secado a presion reducida se llevaron a cabo en una atmosfera de nitrogeno.

(Ejemplo 1 y ejemplo comparativo 1)

Se anadieron porciones de diez gramos de los cristales de coenzima Q10 reducida (que conternan el 3,2 % de acido L-ascorbico y el 0,36 % de acido oxalico) tal como se obtuvieron en el ejemplo de produccion 1 respectivamente a

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190 g de cada una de las disoluciones de etanol acuosas que difenan en el contenido de etanol para dar suspensiones. Cada suspension se agito a 25 °C durante 10 minutos. Esta suspension se filtro a presion reducida, y se secaron los cristales humedos a presion reducida (de 20 a 40 °C, de 0,13 a 4 kPa (de 1 a 30 mm de Hg)) para dar cristales blancos secos. Los contenidos de acido L-ascorbico y acido oxalico que quedan en los cristales asf obtenidos y el porcentaje de recuperacion de coenzima Q10 reducida se muestran en la tabla 1. Todas las operaciones distintas del secado a presion reducida se llevaron a cabo en una atmosfera de nitrogeno.

Como ejemplo comparativo 1, se muestra tambien el resultado obtenido cuando se anaden 190 g de agua en lugar de 190 g de etanol en el ejemplo 1 anterior. En el ejemplo comparativo 1, las propiedades del ffquido fueron muy malas, por ejemplo se adhirieron cristales a la superficie de la pared, y la operacion de descarga fue muy diffcil de llevar a cabo.

Tabla 1

: Contenido de etanol (%) Contenido de acido L-ascorbico (%) Contenido de acido oxalico (%) Porcentaje de recuperacion de coenzima Q10 reducida (%)

Ejemplo 1: 10 0,07 0,05 99

30: 0,06 0,03 99

50: 0,06 0,02 99

90: 0,05 0,04 97

Ejemplo comp. 1: 0 0,18 0,15 97

(Ejemplo 2)

Se anadio una porcion de 10 gramos de los cristales de coenzima Q10 reducida (que conteman el 3,2 % de acido L- ascorbico y el 0,36 % de acido oxalico) tal como se obtuvieron en el ejemplo de produccion 1 a 190 g de etanol para dar una suspension, que se agito a 2 °C durante 10 minutos. Se filtro esta suspension a presion reducida, y se secaron los cristales humedos a presion reducida (de 20 a 40 °C, de 0,13 a 4 kPa (de 1 a 30 mm de Hg)) para dar cristales blancos secos. Todas las operaciones distintas del secado a presion reducida se llevaron a cabo en una atmosfera de nitrogeno. En este caso, el contenido de acido L-ascorbico que quedaba en los cristales fue del 0,06 % y el de acido oxalico fue del 0,07 %, y el porcentaje de recuperacion de coenzima Q10 reducida fue del 96 %.

(Ejemplo 3 y ejemplo comparativo 2)

Una porcion de 10 gramos de los cristales de coenzima Q10 reducida (que contema el 3,2 % de acido L-ascorbico y el 0,36 % de acido oxalico) tal como se obtuvieron en el ejemplo de produccion 1 se convirtio en una forma aceitosa a 60 °C. Se anadieron a ello 190 g de una disolucion de etanol acuosa al 30 % (en peso), y se agito la mezcla a la misma temperatura durante 10 minutos. Despues de eso, se enfrio la mezcla hasta 25 °C para convertir el aceite en cristales. Se filtro la suspension resultante a presion reducida, y se secaron los cristales humedos a presion reducida (de 20 a 40 °C, de 0,13 a 4 kPa (de 1 a 30 mm de Hg)) para dar cristales blancos secos. Los contenidos de acido L- ascorbico y acido oxalico que quedan en los cristales asf obtenidos y el porcentaje de recuperacion de coenzima Q10 reducida se muestran en la tabla 2. Todas las operaciones distintas del secado a presion reducida se llevaron a cabo en una atmosfera de nitrogeno.

Como el ejemplo comparativo 2, se muestra tambien el resultado obtenido cuando se anaden 190 g de agua en lugar de 190 g de etanol en el ejemplo 3 anterior. En el ejemplo comparativo 2, las propiedades del ffquido fueron muy malas, por ejemplo el aceite de coenzima Q10 reducida no se dispersaba uniformemente e, incluso despues de enfriar, se adhirieron cristales a la paleta de agitacion, y la operacion de descarga fue muy diffcil de llevar a cabo.

Tabla 2

Ejemplo 3: 30 0,02 0,03 99

Ejemplo comp. 2: 0 0,43 0,19 97

(Ejemplo 4)

Se anadio una porcion de 10 gramos de los cristales de coenzima Q10 reducida (que conteman el 3,2 % de acido L- ascorbico y el 0,36% de acido oxalico) tal como se obtuvieron en el ejemplo de produccion 1 a 190 g de una disolucion de acetona al 30 % (en peso) en agua para dar una suspension, que se agito a 25 °C durante 10 minutos.

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Se filtro esta suspension a presion reducida, y se secaron los cristales humedos a presion reducida (de 20 a 40 °C, de 0,13 a 4 kPa (de 1 a 30 mm de Hg)) para dar cristales blancos secos. Todas las operaciones distintas del secado a presion reducida se llevaron a cabo en una atmosfera de nitrogeno. En este caso, el contenido de acido L- ascorbico que quedaba en los cristales fue del 0,09 % y el de acido oxalico fue del 0,04 %, y el porcentaje de recuperacion de la coenzima Q10 reducida fue del 99 %.

(Ejemplo de produccion 2)

Se disolvio coenzima Q10 oxidada (100 g) en 1000 g de heptano a 25 °C. Se anadio gradualmente a ello una disolucion acuosa, preparada como agente reductor anadiendo 1000 ml de agua a 100 g de hiposulfito de sodio (pureza del 75 % al menos), para disolucion con agitacion (potencia para la agitacion: 0,3 kW/m3), y se llevo a cabo la reaccion de reduccion a 25 °C y a pH de 4 a 6. Despues de 2 horas de la reaccion, se enfrio la mezcla hasta 2 °C a una velocidad de enfriamiento 10 °C/hora con agitacion continua (potencia para la agitacion: 0,3 kW/m3), y de ese modo se obtuvo una suspension blanca. Se llevaron a cabo todas las operaciones anteriores en una atmosfera de nitrogeno. Se filtro la suspension obtenida a presion reducida, y se secaron los cristales humedos a presion reducida (de 20 a 40 °C, de 0,13 a 4 kPa (de 1 a 30 mm de Hg)) para dar 95 g de cristales blancos secos (que conteman el 1,0 % de hiposulfito de sodio e impurezas derivadas de hiposulfito de sodio tal como se expresan en su totalidad en terminos de hiposulfito de sodio). Todas las operaciones distintas del secado a presion reducida se llevaron a cabo en una atmosfera de nitrogeno.

(Ejemplo 5 y ejemplo comparativo 3)

Una porcion de 10 gramos de los cristales de coenzima Q10 reducida (que conteman el 1,0 % de hiposulfito de sodio e impurezas derivadas de hiposulfito de sodio tal como se expresan en su totalidad en terminos de hiposulfito de sodio) tal como se obtuvieron en el ejemplo de produccion 2 se purifico mediante 1 hora de agitacion de la misma manera que en el ejemplo 1. La cantidad total de hiposulfito de sodio e impurezas derivadas de hiposulfito de sodio que quedaba en el cristal asf obtenido y el porcentaje de recuperacion de coenzima Q10 reducida se muestran en la tabla 3.

Como ejemplo comparativo 3, se muestra tambien el resultado obtenido cuando se anaden 190 g de agua en lugar de 190 g de etanol en el ejemplo 5 anterior. En el ejemplo comparativo 3, las propiedades del lfquido fueron muy malas, por ejemplo se adhirieron cristales a la superficie de la pared, y la operacion de descarga fue muy diffcil de llevar a cabo.

Tabla 3

: Contenido de etanol (%) La cantidad total de hiposulfito de sodio e impurezas derivadas de hiposulfito de sodio que quedan en la coenzima Q10 reducida (%) Porcentaje de recuperacion de coenzima Q10 reducida (%)

Ejemplo 5: 30 0,08 99

Ejemplo comp. 3: 0 0,18 97

(Ejemplo 6 y ejemplo comparativo 4)

Una porcion de 10 gramos de los cristales de coenzima Q10 reducida (que conteman el 1,0 % de hiposulfito de sodio e impurezas derivadas de hiposulfito de sodio tal como se expresan en su totalidad en terminos de hiposulfito de sodio) tal como se obtuvieron en el ejemplo de produccion 2 se agitaron en una disolucion de etanol acuosa al 30 % (en peso) a 60 °C durante 1 hora. Despues de eso, se elimino la fase acuosa a la misma temperatura para dar aceite de coenzima Q10 reducida. Este aceite se hizo gotear sobre una placa (40 °C) con los propios cristales de coenzima Q10 reducida dispersos sobre la misma para dar un solido semiesferico. La cantidad total de hiposulfito de sodio e impurezas derivadas de hiposulfito de sodio que quedaban en el solido asf obtenido y el porcentaje de recuperacion de coenzima Q10 reducida se muestran en la tabla 4.

Como ejemplo comparativo 4, se muestra tambien el resultado obtenido cuando se anaden 190 g de agua en lugar de 190 g de etanol en el ejemplo 5 anterior. En el ejemplo comparativo 4, el aceite de coenzima Q10 reducida no se dispersaba uniformemente, y las propiedades del lfquido fueron por tanto muy malas.

Tabla 4

Ejemplo 6: 30 0,15 99

| Ejemplo comp. 4 |_________0________|_____________0,35_____________|________97________|

(Ejemplo de referencia 1)

Se disolvieron porciones de un gramo de coenzima Q10 reducida (razon en peso de coenzima Q10 5 reducida/coenzima Q10 oxidada 99,6/0,4) respectivamente en 20 g de cada uno de los diversos disolventes especificados en la tabla 5 a 25 °C. Despues de 24 horas de agitacion al aire a 25 °C, se determino la razon en peso de coenzima Q10 reducida/coenzima Q10 oxidada en cada disolucion. Los resultados asf obtenidos se muestran en la tabla 5.

10 Tabla 5

: R

Heptano: 99,1/0,9

Hexano: 98,7/1,3

Tolueno: 98,8/1,2

Cloroformo: 98,9/1,1

Acetato de etilo: 98,9/1,1

Metil terc-butil eter: 98,6/1,4

Tetrahidrofurano: 98,5/1,5

R: razon en peso de coenzima Q10 reducida/coenzima Q10 oxidada 15 (Ejemplo de referencia 2)

Se disolvieron porciones de un gramo de coenzima Q10 reducida (razon en peso de coenzima Q10 reducida/coenzima Q10 oxidada 99,6/0,4) respectivamente en 100 g de cada uno de los diversos disolventes especificados en la tabla 5 a 35 °C. Despues de 24 horas de agitacion al aire a 35 °C, se determino la razon en peso 20 de coenzima Q10 reducida/coenzima Q10 oxidada en cada disolucion. Los resultados asf obtenidos se muestran en la tabla 6.

Tabla 6

Disolvente: R

Heptano: 96,7/3,3

Acetato de etilo: 96,4/3,6

Acetonitrilo: 96,0/4,0

25

R: razon en peso de coenzima Q10 reducida/coenzima Q10 oxidada Aplicabilidad industrial

30 La invencion, que tiene la constitucion descrita anteriormente en el presente documento, hace posible purificar de manera conveniente y eficaz coenzima Q10 reducida mediante un metodo con buena capacidad operativa. El metodo de la presente invencion es adecuado para una produccion a escala industrial, y de ese modo puede obtenerse coenzima Q10 reducida de alta calidad.

Claims

5

10

15

20
2.

25
3.

30
4.

35 5.
6.

40
7.

45
8.

50
9.

55

60 10.
11.

REIVINDICACIONES

Metodo de purificacion de coenzima Q10 reducida que puede obtenerse por reduccion de coenzima Q10 oxidada,

en el que se eliminan impurezas solubles en agua de la coenzima Q10 reducida,

en el que el lavado de los cristales y/o el aceite de la coenzima Q10 reducida comprende poner en contacto cristales y/o aceite de la coenzima Q10 reducida con un disolvente organico soluble en agua o un disolvente mixto compuesto de un disolvente organico soluble en agua y agua en un recipiente y en el que el lavado de los cristales y/o el aceite de la coenzima Q10 reducida se lleva a cabo en un estado de dispersion de los cristales y/o el aceite de la coenzima Q10 reducida en el disolvente organico soluble en agua o el disolvente mixto compuesto del disolvente organico soluble en agua y agua y

en el que los cristales y/o el aceite de la coenzima Q10 reducida se selecciona(n) del grupo que consiste en: cristales obtenibles mediante cristalizacion de o concentracion hasta sequedad de una disolucion que contiene coenzima Q10 reducida; un solido que resulta de la solidificacion de aceite de coenzima Q10 reducida; un aceite que resulta de la fusion de cristales de coenzima Q10 reducida; y un aceite obtenible concentrando una disolucion que contiene coenzima Q10 reducida a una temperatura no inferior a la temperatura de fusion.

Metodo de purificacion de coenzima Q10 reducida segun la reivindicacion 1, en el que la dispersion se provoca en un estado de flujo forzado.

Metodo de purificacion de coenzima Q10 reducida segun cualquiera de las reivindicaciones 1 o 2,

en el que el disolvente organico soluble en agua comprende al menos una especie seleccionada de entre alcoholes, cetonas, eteres y nitrilos.

Metodo de purificacion de coenzima Q10 reducida segun la reivindicacion 3, en el que el disolvente organico soluble en agua es etanol.

Metodo de purificacion de coenzima Q10 reducida segun cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4,

en el que el lavado se lleva a cabo con un disolvente mixto compuesto de un disolvente organico y agua.

Metodo de purificacion de coenzima Q10 reducida segun la reivindicacion 5,

en el que el lavado se lleva a cabo con un disolvente mixto que tiene un contenido de disolvente organico soluble en agua de no menos del 5 % p/p.

Metodo de purificacion de coenzima Q10 reducida segun cualquiera de las reivindicaciones 1 a 6,

en el que la impureza soluble en agua es un agente reductor usado para convertir coenzima Q10 oxidada en coenzima Q10 reducida y/o una impureza derivada de un agente reductor.

Metodo de purificacion de coenzima Q10 reducida segun la reivindicacion 7,

en el que el agente reductor y/o la impureza derivada de un agente reductor son/es acido hiposulfuroso o una sal del mismo y/o una impureza derivada de acido hiposulfuroso o una sal del mismo.

Metodo de purificacion de coenzima Q10 reducida segun la reivindicacion 7,

en el que el agente reductor y/o la impureza derivada de un agente reductor son/es acido ascorbico o un compuesto relacionado del mismo y/o una impureza derivada de acido ascorbico o un compuesto relacionado del mismo.

Metodo de purificacion de coenzima Q10 reducida segun la reivindicacion 9,

en el que la impureza derivada de acido ascorbico o un compuesto relacionado del mismo es acido oxalico.

Metodo de purificacion de coenzima Q10 reducida segun cualquiera de las reivindicaciones 1 a 10,

en el que la concentracion de la coenzima Q10 reducida durante el lavado no es mayor del 30 % p/p tal

5
13.

10
14. 15
15.

20
16.

25
17.

30
18.

como se expresa en terminos de peso de coenzima Q10 reducida en relacion con el peso del disolvente en el momento de la finalizacion del lavado.

Metodo de purificacion de coenzima Q10 reducida segun cualquiera de las reivindicaciones 1 a 11, en el que se produce coenzima Q10 reducida como una forma de cristales.

Metodo de purificacion de coenzima Q10 reducida segun la reivindicacion 12, en el que la temperatura de lavado no es mayor de 50 °C.

Metodo de purificacion de coenzima Q10 reducida segun cualquiera de las reivindicaciones 1 a 13,

en el que se produce coenzima Q10 reducida como una forma de aceite y la temperatura de lavado no es menor que la temperatura de fusion de la coenzima Q10 reducida.

Metodo de purificacion de coenzima Q10 reducida segun la reivindicacion 14,

en el que la temperatura de lavado es menor de 40 °C.

Metodo de purificacion de coenzima Q10 reducida segun la reivindicacion 14 6 15,

en el que se recuperan cristales de coenzima Q10 reducida enfriando la disolucion obtenible despues de la eliminacion de impurezas del aceite de coenzima Q10 reducida.

Metodo de purificacion de coenzima Q10 reducida segun la reivindicacion 14 o 15,

en el que se recuperan cristales de coenzima Q10 reducida poniendo en contacto cristales semilla con el aceite de coenzima Q10 reducida obtenible despues de la eliminacion de impurezas de dicho aceite.

Metodo de purificacion de coenzima Q10 reducida segun cualquiera de las reivindicaciones 1 a 17

en el que se purifica coenzima Q10 reducida en una atmosfera desoxigenada.