ES2663335T3

ES2663335T3 - Composición para administración transnasal y método para prepararla

Info

Publication number: ES2663335T3
Application number: ES11756447.6T
Authority: ES
Inventors: Masaru Matsumoto; Shuji Takeda; Kyohei Nobori
Original assignee: Daiichi Sankyo Co Ltd
Current assignee: Daiichi Sankyo Co Ltd
Priority date: 2010-03-19
Filing date: 2011-03-18
Publication date: 2018-04-12
Anticipated expiration: 2031-03-18
Also published as: EP2548566B1; KR20130010462A; US20130012439A1; BR112012023681A2; CA2792749A1; JPWO2011115264A1; JP5670430B2; EP2548566A1; CA2792749C; US8802622B2; WO2011115264A1; EP2548566A4; CN102905717A; CN102905717B

Abstract

Una composición en polvo para administración nasal que comprende un péptido fisiológicamente activo y acetato de celulosa como base, en donde la composición se obtiene 1) mezclando el péptido fisiológicamente activo, el acetato de celulosa y al menos un 20% en peso de agua en relación con el acetato de celulosa, y 2) secando la mezcla, y en donde el grado de acetilación del acetato de celulosa es de 32-40% y el péptido fisiológicamente activo es un péptido con un peso molecular no mayor que 20.000.

Description

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directamente en un aspirador cuando sea necesario, y aspirarse para permitir que la composición alcance la cavidad nasal.

La composición de la invención está limitada a la administración nasal usando dispositivos de suministro ordinarios adecuados para el método de administración.

Ejemplos

(Método experimental 1)

Prueba de absorción con composición para administración nasal usando monos cynomolgus.

1-1. Preparación de la composición para administración nasal

Los polipéptidos fisiológicamente activos utilizados fueron el péptido similar al glucagón (GLP-1), la hormona paratiroidea humana 1-34 (hPTH (1-34)) y un derivado de motilina. Se prepararon composiciones para la absorción nasal que contienen cada péptido por los métodos descritos en los Ejemplos 1 a 10 y Ejemplos Comparativos 1 a 9. Cada péptido se introdujo en una cápsula de gelatina nº 2 en una cantidad de aproximadamente 500 μg. Se prepararon GLP-1 y hPTH (1-34) mediante técnicas de recombinación genética conocidas públicamente, y se usaron para el ensayo. La motilina es un péptido que consiste en 22 aminoácidos, y el derivado de motilina para la invención fue un péptido con la siguiente secuencia, producida mediante técnicas de recombinación génica conocidas. Phe-Val-Pro-Ile-Phe-Thr-Tyr-Gly-Glu-Leu-Gln-Arg-Leu-GIn-Glu-Lys-Glu-Arg-Asn-Lys-Pro-Gln (I) (SEQ ID NO: 1).

1-2. Método de atomización

Se usaron monos Cynomolgus con pesos corporales de aproximadamente 6 kg (Hamri Co., Ltd.). Los monos se mantuvieron en ayunas desde el día anterior a la prueba, y se sujetaron en una silla para monos el día del ensayo. Se usó un atomizador intranasal (Hitachi Automotive Systems, Ltd.) para la administración. Se colocó una cápsula en un dispositivo de formulación nasal y se administró por vía intranasal a los monos cynomolgus bombeando 5 veces en sincronización con la toma. Se tomaron muestras de sangre de la vena cutánea radial a los 5, 10, 15, 20, 30, 60, 120 y 180 minutos después de la administración.

1-3. Método de tratamiento de la sangre

1-3-1. Tratamiento de la sangre después de la administración de la composición de GLP-1 para administración nasal

Se montó una aguja de inyección desechable en una jeringuilla de vidrio humedecida con heparina sódica para tomar muestras de sangre. Inmediatamente después del muestreo de sangre, se añadió un volumen de 1/100 de EDTA al 10%·2Na·2H20 con solución salina fisiológica y 1/100 de volumen de inhibidor de DPP IV, y después la mezcla se enfrió en hielo y se centrifugó (4ºC) para obtener el plasma sanguíneo.

1-3-2. Tratamiento de la sangre después de la administración de la composición de hPTH (1-34) para administración nasal

Se montó una aguja de inyección desechable en una jeringuilla de vidrio humedecida con heparina sódica para tomar muestras de sangre. Inmediatamente después de la toma de muestra de sangre, se añadió un volumen 1/100 de EDTA al 10%·2Na·2H20, se enfrió en hielo y se centrifugó (4ºC) para obtener el plasma sanguíneo. Se añadió una solución de aprotinina a 1/10 del volumen del plasma obtenido, y se agitó la mezcla.

1-3-3. Tratamiento de la sangre después de la administración de la composición de derivado de motilina para administración nasal

Se montó una aguja de inyección desechable en una jeringuilla de vidrio humedecida con heparina sódica para tomar muestras de sangre. Inmediatamente después de la toma de muestra de sangre, se añadió un volumen 1/100 de EDTA al 10%·2Na·2H20, se enfrió en hielo y se centrifugó (4ºC) para obtener el plasma sanguíneo. Se añadió una solución de aprotinina a 1/10 del volumen del plasma obtenido, y la mezcla se agitó.

1-4. Medida de niveles de fármaco en el plasma

Se midieron los niveles de fármaco en el plasma sanguíneo muestreado, de la siguiente manera.

1-4-1. Medida del nivel de GLP-1 en el plasma

Se utilizó un kit de GLP-1 ELISA (Linco) para medir el nivel de GLP-1 en el plasma sanguíneo mediante un método de inmunoensayo ligado a enzimas (ELISA). El tratamiento se realizó de acuerdo con el protocolo del kit, y se midió la absorbancia a 355 nm/460 nm. La BA se calculó comparando el área bajo la curva (AUC) del nivel en plasma

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frente al tiempo después de la administración nasal, con el AUC después de la administración intravenosa de GLP-1 disuelto en una solución de manitol al 5%.

1-4-2. Medida del nivel de hPTH (1-34) en el plasma sanguíneo

Se usó un método de radioinmunoensayo (RIA) para medir el nivel de hPTH (1-34) en el plasma sanguíneo. Después de añadir anticuerpo anti-PTH a la muestra de plasma sanguíneo, se añadió [125I-Tyr34] hPTH (1-34) y se llevó a cabo la reacción de competición. Después se añadió un anticuerpo secundario, se precipitó el anticuerpo anti-PTH que se une a la hPTH (1-34), y se midió la radiactividad con un contador γ (Packard) en la fracción precipitada, después de la separación del sobrenadante. La BA se calculó comparando el área bajo la curva (AUC) de nivel plasmático/tiempo después de la administración nasal, con el AUC después de la administración intravenosa de PTH disuelta en una solución de manitol al 5%.

1-4-3. Medida del nivel del derivado de motilina en el plasma

Se midió el nivel del derivado de motilina en el plasma sanguíneo mediante un método de radioinmunoensayo (RIA) usando anticuerpo anti-motilina humana. Específicamente, se añadió anticuerpo anti-motilina humana a la muestra de plasma sanguíneo, y luego se añadió 125I-motilina humana para la reacción de competición. Luego se añadió un anticuerpo secundario, se precipitó la motilina humana que se une al anticuerpo anti-motilina humana, y se midió con un contador γ (Perkin-Elmer) la radioactividad en la fracción precipitada después de la separación del sobrenadante. La BA se calculó comparando el área bajo la curva (AUC) de nivel plasmático/tiempo después de la administración nasal, con el AUC después de la administración intravenosa del derivado de motilina disuelto en una solución de manitol al 5%.

Se trituró acetato de celulosa (CA398 de Eastman Chemical Company, contenido de grupos acetilo: 39,8%) usando un molino de martillos (ACM-15H de Hosokawa Micron Group). El acetato de celulosa molido se tamizó usando una máquina de tamizado por aspiración a presión reducida (200LS-N de Hosokawa Micron Group), y se obtuvo la fracción de 40-100 μm. El acetato de celulosa de esta fracción se usó como base para el ensayo, a menos que se especifique otra cosa.

La celulosa cristalina (CEOLUS PH-101 de Asahi Kasei Chemicals Corp.) fue también tamizada de la misma forma con una máquina de tamizado por aspiración a presión reducida, y se obtuvo la fracción de 40-100 μm. Se usó celulosa cristalina de esta fracción como base para el ensayo, a menos que se especifique otra cosa.

(Ejemplo 1)

Se disolvió una porción de 100 mg de GLP-1 en 4 mL de agua purificada. Después de amasar 4 g de acetato de celulosa con la solución en un vaso de precipitados usando una espátula, la mezcla se secó para obtener una composición (composición de mezcla de solución de GLP-1).

(Ejemplo Comparativo 1)

Se añadieron a un mortero 100 mg de GLP-1 y 4 g de acetato de celulosa. Se repitió 3 veces un ciclo de mezclado con una mano de mortero durante 30 segundos, seguido de enfriamiento pasivo durante 30 segundos para obtener una composición (composición de mezcla sólida de GLP-1).

(Ejemplo Comparativo 2)

Se disolvió una porción de 100 mg de GLP-1 en 4 mL de agua purificada. Esta solución se amasó con 4 g de celulosa cristalina en un vaso de precipitados usando una espátula, y la mezcla se secó para obtener una composición (composición de celulosa cristalina GLP-1).

La absorción nasal en monos se evaluó de acuerdo con el Método Experimental 1, para las composiciones obtenidas en el Ejemplo 1, Ejemplo Comparativo 1 y Ejemplo Comparativo 2. Los resultados se muestran en la Fig.

1. Los valores de BA para las composiciones del Ejemplo 1, Ejemplo Comparativo 1 y Ejemplo Comparativo 2 fueron 57,9%, 48,4% y 38,2%, respectivamente. La composición de la mezcla de solución de GLP-1 (Ejemplo 1) mostró una absorción satisfactoria en comparación con la composición de mezcla sólida de GLP-1 (Ejemplo Comparativo 1)

o la composición de celulosa cristalina de GLP-1 (Ejemplo Comparativo 2).

(Ejemplo 2)

Se disolvió una porción de 100 mg de hPTH (1-34) en 4 mL de agua purificada. Después de amasar 4 g de acetato de celulosa con la solución en un vaso de precipitados con una espátula, la mezcla se secó para obtener una composición (composición de la mezcla de la solución hPTH).

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(Ejemplo Comparativo 3)

A un mortero se añadieron 100 mg de hPTH (1-34) y 4 g de acetato de celulosa. Se repitió 3 veces un ciclo de mezclado con una mano de mortero durante 30 segundos, seguido de enfriamiento pasivo durante 30 segundos, para obtener una composición (composición de mezcla sólida de hPTH).

(Ejemplo Comparativo 4)

Se disolvió una porción de 100 mg de hPTH (1-34) en 4 mL de agua purificada. Esta solución se amasó con 4 g de celulosa cristalina en un vaso de precipitados usando una espátula, y la mezcla se secó para obtener una composición (composición de celulosa cristalina hPTH).

La absorción nasal en monos se evaluó de acuerdo con el Método Experimental 1, para las composiciones obtenidas en el Ejemplo 2, Ejemplo Comparativo 3 y Ejemplo Comparativo 4. Los resultados se muestran en la Fig.

2. Los valores de BA para las composiciones del Ejemplo 2, Ejemplo Comparativo 3 y el Ejemplo Comparativo 4 fueron 3,8%, 2,8% y 2,3%, respectivamente. La composición de la mezcla de solución de hPTH (Ejemplo 2) mostró una absorción satisfactoria en comparación con la composición de mezcla sólida de hPTH (Ejemplo Comparativo 3)

o la composición de celulosa cristalina hPTH (Ejemplo Comparativo 4).

(Ejemplo 3)

Se disolvieron 100 mg de derivado de motilina en 4 mL de agua purificada. Después de amasar 4 g de celulosa cristalina con la solución en un vaso de precipitados utilizando una espátula, la mezcla se secó para obtener una composición (composición de mezcla de solución de derivado de motilina).

(Ejemplo Comparativo 5)

A un mortero se añadieron 100 mg de derivado de motilina y 4 g de celulosa cristalina. Se repitió 3 veces un ciclo de mezcla con una mano de mortero durante 30 segundos, seguido de enfriamiento pasivo durante 30 segundos, para obtener una composición (composición de mezcla sólida de derivado de motilina).

(Ejemplo Comparativo 6)

Se disolvieron 100 mg de derivado de motilina en 4 mL de agua purificada. Esta solución se amasó con 4 g de celulosa cristalina en un vaso de precipitados usando una espátula, y la mezcla se secó para obtener una composición (composición de celulosa cristalina de derivado de motilina).

La absorción nasal en monos se evaluó de acuerdo con el Método Experimental 1, para las composiciones obtenidas en el Ejemplo 3, Ejemplo Comparativo 5 y Ejemplo Comparativo 6. Los resultados se muestran en la Fig.

3. Los valores de BA para las composiciones del Ejemplo 3, Ejemplo Comparativo 5 y Ejemplo Comparativo 6 fueron 4,6%, 4,0% y 3,3%, respectivamente. La composición de la mezcla de solución de derivado de motilina (Ejemplo 3) exhibió una absorción más satisfactoria que la composición de mezcla sólida de derivado de motilina (Ejemplo Comparativo 5) o la composición de celulosa cristalina de derivado de motilina (Ejemplo Comparativo 6).

(Ejemplo 4)

Después de mezclar 300 mg de derivado de motilina y 12 g de acetato de celulosa con un granulador de agitación a alta velocidad (PalmXer de Higuchi, Inc.), se añadieron gota a gota 2,4 mL de agua purificada, mientras se agitaba para el amasado. La mezcla se secó luego para obtener una composición.

(Ejemplo 5)

Se disolvieron 300 mg de derivado de motilina en 12 mL de agua purificada. Usando un agitador planetario (PRIM1X, HIVIS MIX), la solución se fue añadiendo gradualmente a 12 g de acetato de celulosa, y la mezcla se amasó y se secó para obtener una composición.

(Ejemplo 6)

Se disolvieron 25 mg de derivado de motilina en 2,5 mL de agua purificada. Después de amasar 1 g de acetato de celulosa con la solución en un vaso de precipitados usando una espátula, la mezcla se secó para obtener una composición.

(Ejemplo 7)

Se disolvieron 12,5 mg de derivado de motilina en 2,5 mL de agua purificada. Después de amasar 0,5 g de acetato de celulosa con la solución en un vaso de precipitados usando una espátula, la mezcla se secó para obtener una composición.

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