ES2636469T3

ES2636469T3 - Nuevos derivados de pirido[3,4-c][1,9]fenantrolina y 11,12-dihidropirido[3,4-c][1,9]fenantrolina y su uso, particularmente para el tratamiento de cáncer

Info

Publication number: ES2636469T3
Application number: ES13717459.5T
Authority: ES
Inventors: Bernd Clement; Christopher Meier; Dieter Heber; Lars Stenzel
Original assignee: Christian Albrechts Universitaet Kiel
Current assignee: Christian Albrechts Universitaet Kiel
Priority date: 2012-04-05
Filing date: 2013-04-05
Publication date: 2017-10-05
Anticipated expiration: 2033-04-05
Also published as: AU2013244918A1; JP2015512437A; JP6129951B2; DE102012006903B4; AU2013244918B2; DE102012006903A9; EP2834240B1; US20150099774A1; CA2869426A1; CA2869426C; EP2834240A1; WO2013150140A1; DE102012006903A1; US9062054B2

Abstract

Compuesto de fórmula general I o II**Fórmula** en las que R1 es igual a un anillo de fenilo de fórmula**Fórmula** que porta al menos un sustituyente RX seleccionado del grupo de Cl, Br o I en posición meta, en la que RY, que puede ser igual o distinto, es igual a H, OH, OMe, OEt o halógeno; así como compuesto de fórmulas generales III y IV**Fórmula** en las que R1 es igual a un anillo de fenilo de fórmula**Fórmula** que porta al menos un sustituyente RY en posición meta, en la que RY, que puede ser igual o distinto, es igual a H, OH, OMe, OEt o halógeno o bien es igual a un heterociclo aromático de cinco miembros de fórmula**Fórmula** en la que W es igual a O, S o NH; y en la que Z es igual a H, F, Cl, Br, I, NHX, OX, SX, en la que X es igual a H, un grupo dimetilaminoalquilo, dietilaminoalquilo, ω-(1,3-diazol-1-il)alquilo, hidroxialquilo, alcoxialquilo, tioalquilo, alquiltioalquilo, en los que alquilo es igual a metilo, etilo o propilo y en la que A es igual a O o S, así como sus sales y solvatos farmacéuticamente aceptables.

Description

DESCRIPCION

Nuevos derivados de pirido[3,4-c][1,9]fenantrolina y 11,12-dihidropirido[3,4-c][1,9]fenantrolina y su uso, particularmente para el tratamiento de cancer 5

[0001] La presente invencion se refiere a nuevos heterociclos aromaticos, a un procedimiento para su preparacion as! como a medicamentos que contienen estos heterociclos.

[0002] Muchas enfermedades cancerosas no son tratables mediante principios activos de accion selectiva 10 hasta la fecha. Segun los datos de la Organizacion Mundial de la Salud (OMS), se diagnosticaron en todo el mundo

en el ano 2000 aprox. 10 millones de personas con cancer, aprox. 6 millones fallecieron (World Cancer Report 2003,
www.iarc.fr/IARCPress/pdfs/wcr/WorldCancerReport.pdf). Segun la valoracion de la OMS, el numero de fallecimientos causados por enfermedades cancerosas crecera hasta 2030 a aprox. 11,5 millones al ano (Worlds Health Statistics - 2007,
www.who.int/whosis/whostat2007_10-highlights.pdf). En vista del gran numero de personas 15 que enferman de cancer, el pronostico desfavorable para la curacion de determinadas clases de cancer a causa de la baja efectividad de los medicamentos actuales, los efectos secundarios y el desarrollo de resistencias contra los medicamentos utilizados, existe una necesidad imperiosa de nuevos medicamentos para el cancer.

[0003] Por el documento DE 195 38 088 A1 son conocidas 6-aminobenzo[c]fenantridinas que disponen 20 parcialmente de propiedades antitumorales, antimicrobianas, antifungicidas, antivlricas y antiinflamatorias. Los

citados compuestos presentan sin embargo tambien desventajas en el perfil farmacologico, particularmente la baja solubilidad en agua.

[0004] Es por tanto objetivo de la invencion poner a disposicion nuevos medicamentos. Ademas, es objetivo 25 de la invencion poner a disposicion nuevos medicamentos particularmente para terapia contra enfermedades

cancerosas. Es otro objetivo de la invencion poner a disposicion nuevos medicamentos con una solubilidad en agua farmaceuticamente aceptable as! como un procedimiento de preparacion como se describe a continuacion, mediante el que puedan obtenerse los compuestos segun la invencion.

30 [0005] El objetivo se consigue mediante las realizaciones caracterizadas en las reivindicaciones y la presente

descripcion. Las reivindicaciones secundarias y ejemplos indican configuraciones ventajosas de la invencion.

[0006] En un aspecto, la presente invencion se refiere a la provision de derivados de fenantrolina de formulas

generales I y II 35

imagen1

en las que R1 es igual a un anillo de fenilo de formula

imagen2

que porta al menos un sustituyente RX seleccionado del grupo de Cl, Br o I en posicion meta, en la que RY, que puede ser igual o distinto, es igual a H, OH, OMe, OEt o halogeno; asi como las formulas generales III y IV 5

imagen3

en las que R1 es igual a un anillo de fenilo de formula

10

imagen4

que porta al menos un sustituyente RY en posicion meta, en la que RY, que puede ser igual o distinto, es igual a H, OH, OMe, OEt o halogeno o bien es igual a un heterociclo aromatico de cinco miembros de formula

15

imagen5

en la que W es igual a O, S o NH; y

en la que Z es igual a H, F, Cl, Br, I, NHX, OX, SX,

en la que X es igual a H, un grupo dimetilaminoalquilo, dietilaminoalquilo, w-(1,3-diazol-1-il)alquilo, hidroxialquilo, 20 alcoxialquilo, tioalquilo, alquiltioalquilo,

en los que alquilo es igual a metilo, etilo o propilo y en la que A es igual a O o S,

asi como sus sales y solvatos farmaceuticamente aceptables.

25 [0007] En otro aspecto, la invencion se refiere a un procedimiento para la preparacion de un compuesto

segun la presente invencion como se describe a continuation, que comprende al menos las siguientes etapas:

(i) Reaccion de aidehldos sustituidos de formula general R1-CHO (V) con 4-metilpiridin-3-carbonitrilos

sustituidos de formula general

imagen6

5

en disolventes dipolares aproticos en presencia de bases hasta un compuesto de formula general

imagen7

10 (ii) Aislamiento de los productos y derivatizacion en posicion 6 por insercion de los restos R4 hasta

derivados con sustitucion A o Z en posicion 6, segun las formulas I a IV,

en la que R1 es un H, un resto hidrocarburo alifatico clclico o aclclico, ramificado o no ramificado, sustituido una o varias veces, un resto carboclclico aromatico o heteroclclico, sustituido una o varias veces y

R2 y R3 pueden ser iguales o distintos y son un H, resto alquiloxi, resto alquilenoxi, atomo de halogeno o un grupo 15 nitro, y

R4 es un H, un grupo monoamino, alquilamino, dialquilamino, (dialquil)aminoalquilamina, alquilo, alcoxi, (dialquil)aminoalquiloxi, hidroxi, hidroxialquilamino, hidroxialquiloxi, tiol, (dialquil)aminoalquiltio, tioalquilo, alquiltioalquilo o un atomo de halogeno.

20 La posterior derivatizacion en posicion 6 con insercion de los restos R4 hasta derivados con sustitucion A o Z en posicion 6 correspondiente a la etapa de procedimiento (ii) conduce a los compuestos segun la invencion como se representan en las formulas generales III o IV.

Por tanto, la presente invencion se refiere a un procedimiento para la preparation de un compuesto como se describe anteriormente, en el que entre ambas etapas (i) y (ii) puede insertarse opcionalmente la etapa de 25 procedimiento

(i.a.) deshidratacion y aislamiento de los productos as! resultantes de formula general

imagen8

[0008] Particularmente, la presente invencion se refiere a un procedimiento como se describe anteriormente, en el que el disolvente dipolar aprotico es preferiblemente una amida como dimetilformamida, dimetilacetamida, dietilacetamida, trisamida del acido hexametilfosforico o una urea como tetrametilurea, 1,3-dimetiltetrahidropirimidin-

5 2-ona y 1,3-dimetilimidazolidinona o es un dimetilsulfoxido, y en el que la base es un hidruro alcalino o alcalinoterreo como hidruro de sodio, amiduro alcalino como amiduro de sodio, metilacetamiduro de sodio, alcoholato alcalino, alcalinoterreo o de aluminio como ferc-butilato de potasio, metilato de sodio, etilato de sodio o etilato de aluminio.

[0009] Se ha mostrado en los experimentos llevados a cabo segun la invencion que sorprendentemente es 10 posible obtener los derivados de fenantrolina segun la invencion mediante reaccion sencilla de los correspondientes

aldehldos sustituidos con los correspondientes 4-metilpiridin-3-carbonitrilos sustituidos.

[0010] El curso de reaccion puede representarse como sigue:

15

imagen9

[0011] En particular, se procede a este respecto de modo que se realice una reaccion de un aldehldo de

formula

Ri-CHO V,

en la que R1 puede ser tanto hidrogeno, un resto hidrocarburo alifatico aclclico, ramificado o no ramificado que puede estar sustituido una o varias veces, as! como un resto carboclclico aromatico o heteroclclico que puede estar

sustituido una o varias veces, con 2 moles de un 4-metilpiridin-3-carbonitrilo de formula VI,

imagen10

5 en la que R2 y R3, que pueden ser iguales o distintos, significan un H, un resto alquiloxi, un resto alquilenoxi, un atomo de halogeno o un grupo nitro, en presencia de una base en un disolvente dipolar aprotico hasta una 6-amino- 11,12-dihidropirido[3,4-c][1,9]fenantrolina de formula VII.

[0012] Despues del aislamiento por precipitacion de la base libre, filtracion y posterior purificacion, por 10 ejemplo recristalizacion (Organikum, 21a edicion, 2001, Wiley-VCH), pueden hacerse reaccionar estos derivados de

formula VII con los procedimientos qufmicos correspondientes para los restos R4 respectivos en posicion 6 (diazotizacion, reaccion de derivados de acido carboxflico con cloruros de acido inorganicos, sustitucion nucleofila en productos aromaticos, sfntesis de tionas/tioles y reacciones de reduccion como, p.ej., desulfuraciones), que son conocidos por el especialista por ejemplo por Organikum, 21a edicion, 2001, Wiley-VCH u Organische Chemie, K. 15 Peter C. Vollhardt, 3a edicion, 2000, en una o varias etapas hasta los derivados de formula I o II, o puede realizarse segun procedimientos conocidos en general por el especialista (p.ej., por "Comprehensive Organic Transformations", Richard C. Larock, 1989) una deshidratacion con un agente de deshidratacion adecuado en ausencia o presencia de disolvente hasta las correspondientes 6-aminopirido[3,4-c][1,9]fenantrolinas de formula VIII, que a continuacion despues del aislamiento pueden hacerse reaccionar con procedimientos qufmicos correspondientes conocidos por el 20 especialista para los restos R4 respectivos en posicion 6 (Organikum, 21a edicion, 2001, Wiley-VCH; Organische Chemie, K. Peter C. Vollhardt, 3a edicion, 2000), en una o varias etapas hasta los derivados de formula III o IV, en los que el resto R4 puede ser un atomo de hidrogeno, un grupo monoamino, un grupo alquilamino, un grupo dialquilamino, un grupo (dialquil)aminoalquilo, un grupo alquilo, un grupo alcoxi, un grupo (dialquil)aminoalquiloxi, un grupo hidroxi, un grupo hidroxialquilamino, un grupo hidroxialquiloxi, un grupo tiol, un grupo (dialquil)aminoalquiltio, 25 un grupo tioalquilamino, un grupo tioalquiltio, asf como un atomo de halogeno. Se representa la seleccion de una cadena lateral de alquilendiamina N-sustituida en posicion 6, p.ej. en Genes (Genes et al., Eu. J. Med. Chem. (46), 2011, 2117-2131). La introduccion de nucleofilos de oxfgeno, azufre y carbono se describe, p.ej. por Cherng (Cherng, Tetrahedron 58, 2002, 4931-4935), ademas, son validos los procedimientos vigentes generales de sustitucion nucleofila en productos aromaticos, conocidos por el especialista por Organikum, 21a edicion, 2001, 30 Wiley-VCH u Organische Chemie, K. Peter C. Vollhardt, 3a edicion, 2000.

[0013] Son preferiblemente utilizables como disolventes dipolares aproticos para la reaccion segun la invencion para la preparacion de las correspondientes 6-amino-11,12-dihidropirido[3,4-c][1,9]fenantrolinas sustituidas de formula VII amidas como dimetilformamida, dimetilacetamida, dietilacetamida, trisamida del acido

35 hexametilfosforico o ureas como tetrametilurea, 1,3-dimetiltetrahidropirimidin-2-ona y 1,3-dimetilimidazolidinona o dimetilsulfoxido.

[0014] Pueden utilizarse como base por ejemplo:

40 [0015] Hidruros alcalinos o alcalinoterreos, como hidruro de sodio, amiduros alcalinos como amiduro de

sodio, metilacetamiduro de sodio, alcoholatos alcalinos, alcalinoterreos o de aluminio como ferc-butilato de potasio, metilato de sodio, etilato de sodio o etilato de aluminio.

[0016] La reaccion puede llevarse a cabo como sigue: se anade gota a gota lentamente a una solucion de la

45 base en un disolvente dipolar adecuado con gasificacion con gas inerte una solucion del compuesto V y VI en el mismo disolvente. Despues de varias horas de agitacion a 25-40 °C con gasificacion con gas inerte, se vierte la preparacion en agua con hielo y se separa por filtracion el residuo. Se agita la solucion filtrada con un disolvente organico adecuado. Se concentra la mayor parte de la fase organica y a continuacion se destila a vacfo. Los residuos reunidos pueden purificarse mediante recristalizacion en un disolvente adecuado. La 6-amino-11,12-

dihidropirido[3,4-c][1,9]-fenantrolina VII puede deshidratarse entonces segun procedimientos vigentes generales (Comprehensive Organic Transformations, Richard C. Larock, 1989) con un agente de deshidratacion adecuado en presencia o ausencia de un disolvente inerte hasta 6-aminopirido[3,4-c][1,9]fenantrolina VIII. El grupo amino en posicion 6 puede intercambiarse en una o varias etapas con procedimientos qulmicos vigentes generales (p.ej., 5 Organikum, 21a edicion, 2001, Wiley-VCH; Organische Chemie, K. Peter C. Vollhardt, 3a edicion, 2000) por los restos R4 citados anteriormente, de modo que se llegue a los derivados de formulas I o II, o para los derivados 11,12-deshidratados, a las formulas III o IV.

[0017] Es de especial relevancia en el procedimiento segun la invencion que pueden sintetizarse con el 10 derivados de fenantrolina que presentan en posicion 11 restos tanto alifaticos como aromaticos sustituidos o no

sustituidos. Es sorprendente que sea posible la slntesis mediante la reaccion sencilla descrita anteriormente, en la que a causa del aldehldo de sustancia de partida que se utiliza existe una gran amplitud de variacion con respecto a los productos a obtener. Tambien en la posicion 6 se obtiene una variabilidad considerable por la posibilidad de intercambio del grupo amino por los restos citados. Mediante la combinacion de ambas posiciones variables, surge 15 un gran espectro de compuestos y la posibilidad de construccion de una gran coleccion de sustancias eficaces potencialmente citostaticas.

[0018] Se divulgan tambien compuestos que son obtenibles mediante un procedimiento como se describe anteriormente.

20

[0019] En otro aspecto parcial, la invencion se refiere a los compuestos anteriores para uso como medicamento, particularmente para uso en la terapia de cancer.

[0020] Se prefiere un compuesto segun la invencion como se describe anteriormente para uso en el 25 tratamiento de una enfermedad seleccionada del grupo compuesto por enfermedades microbianas, fungicidas,

vlricas y/o inflamatorias.

[0021] Ademas, la invencion se refiere en un aspecto parcial a un compuesto segun la invencion como se describe anteriormente para uso en el tratamiento de cancer.

30

[0022] Se prefiere un cancer seleccionado del grupo compuesto por leucemias, melanoma o carcinoma de mama.

[0023] Ademas, la presente invencion se refiere a una composicion farmaceutica que comprende al menos 35 uno de los compuestos anteriormente descritos en combinacion con un excipiente adecuado.

[0024] Se ha mostrado en los experimentos llevados a cabo segun la invencion que los derivados de fenantrolina descritos anteriormente poseen propiedades antitumorales. A causa de su similitud estructural, ha de suponerse que, como las benzo[c]fenantridinas, poseen ademas propiedades antimicrobianas, antifungicidas,

40 antivlricas y antiinflamatorias. Para el analisis de las propiedades farmacologicas, se analizaron los compuestos de formulas generales I y II, as! como los compuestos de la clase de sustancias III, en un “cribado antitumoral in vitro" del National Cancer Institute (NCI), Bethesda, Maryland, EE.UU. Se ensayaron frente a 60 series de celulas tumorales patogenas humanas distintas que provenlan de 9 tipos de cancer (leucemia, carcinoma pulmonar no microcltico, cancer de intestino grueso, cancer de SNC, melanoma, cancer de ovario, cancer renal, cancer de 45 prostata, cancer de mama). Para investigar la efectividad, se expusieron las celulas tumorales a los compuestos durante dos dlas y despues se investigo indirectamente la inhibicion del crecimiento mediante la determinacion de la biomasa de protelna con sulforrodamina B (SRB). Los cultivos no tratados sirven como referencia.

imagen11

[0025] Formula estructural de los compuestos ensayados en el National Cancer Institute (NCI) de derivados

de fenantrolina segun la invencion de formulas I y II.

5 [0026] En los analisis segun la invencion, se ensayaron en primer lugar los derivados a una concentracion de

1 pM en 60 llneas celulares. Pudo comprobarse inhibition del crecimiento para varios derivados. Sorprendentemente, los compuestos segun la invencion presentaban actividades que se encuentran fuera de la categorla de los compuestos antitumorales analizados de modo similar, de modo que se consigue aqul un espectro de action totalmente nuevo.

10

[0027] La Tabla I muestra los resultados de estas pruebas, seleccionados para 7 derivados distintos de los

derivados de fenantrolina segun la invencion de formulas I y II con diferentes restos en position 11 as! como en position 6. Los restos respectivos se representan en las dos primeras filas. La columna izquierda muestra las llneas celulares usadas de 3 tipos tumorales seleccionados, leucemia, melanoma as! como cancer de mama. La tabla 15 establece conclusiones sobre las acciones inhibidoras del crecimiento de los correspondientes derivados con sus diferentes restos.

imagen12

Resto en posicion 11

OMe

Resto en posicion 6

Lineas celulares

Crecimiento celular en porcentaje

Leucemia

CCRF-CEM: 5,9 37,1 - - - 76,5 -

HL-60(TB): -11,6 -16,1 3,1 76 70,3 78,8 102,7

MOLT-4: 0,5 24,6 14,2 89,4 75,3 85,9 86,2

RPMI-8226: 6,3 52,6 - - 64,7 92,3 -

SR: 0,4 10,6 3 91,8 - 41,4 75,5

K-562: - - 14,9 99,7 84,9 - 87,6

Valor medio: 0,3 21,8 8,8 89,2 73,8 75 70,4

Melanoma

LOX IMVI: 38 44,6 44,2 89,7 95,7 86,3 107,3

MALME-3M: - 50 43,9 108,6 98,2 93,1 115,4

M14: 1,3 29,3 34,5 108,4 93,4 105,8 120,5

MDA-MB-435: -59,8 1,1 -39 117,6 107 17,2 99,3

SK-MEL-2: 29,9 46,4 -10,5 101,4 94,1 117,2 133,1

SK-MEL-28: 73,6 52,1 60,6 117 112,5 100,45 115,3

SK-MEL-5: 17,2 28 -52,2 101,1 86,2 85,05 95,8

UACC-257: 48,7 88,5 66 106 107,8 110,9 110

UACC-62: 50,3 26,4 41,4 96,8 81,7 95,5 104,1

Valor medio: 24,9 40,7 14,3 105,2 97,4 90,2 100,1

Cancer de mama

MCF7: 27,8 25,3 19,5 91,2 83,4 81,6 88,6

MDA-MB-231/ATCC: 68,2 52,7 63 106 80,6 91,5 106,9

HS-578T: 20,3 51,3 -0,7 82,3 111,1

BT-549: 29,7 53,5 44,7 103,5 67,8 91,6 144,3

T-47D: 75,5 60,3 57,4 98,9 84,6 104,9 111,8

MDA-MB-468: -4,5 21 -22,3 103,3 87,6 48,9 104,5

Valor medio: 36,2 44 30,3 100,6 80,8 83,5 111,2

Valor medio de las

60 lineas celulares: 34,1 33,4 46,1 102,1 90,5 109 106,5

Tabla I: Prueba de citotoxicidad del NCI en 60 lineas celulares tumorales (c= 1 gM) con derivados de formulas I y II.

5 [0028] Los tres primeros derivados muestran claras inhibiciones del crecimiento sobre las celulas de los tipos

tumorales seleccionados para el ejemplo, mientras que los 4 derivados restantes tienen efectos inhibidores del crecimiento de nulos a muy bajos sobre estas celulas. Por ello, se deduce que un resto 3-halogenofenilo en posiciOn 11 es esencial para la acciOn inhibidora del crecimiento de los derivados de fenantrolina de formulas I y II. Ni los derivados con atomos de halOgeno en posiciOn 2 o 4 (en el ejemplo 2-bromofenilo o 4-bromofenilo), ni los derivados 10 con otros grupos funcionales en posiciOn 3 del anillo de fenilo, ni el anillo de fenilo no sustituido muestran efectos inhibidores del crecimiento en esta medida. La Tabla II muestra los resultados de estas pruebas, seleccionados para 5 derivados distintos de derivados de fenantrolina segun la invenciOn de fOrmula III con diferentes restos en posiciOn 11. Los restos en posiciOn 11 se representan en la primera fila. La columna izquierda muestra las lineas celulares

usadas de 3 tipos tumorales seleccionados, leucemia, melanoma as! como cancer de mama. La tabla establece conclusiones sobre las acciones inhibidoras del crecimiento de los correspondientes derivados con sus diferentes restos.

5

imagen13

[0029] Formula estructural de los compuestos ensayados en

derivados de fenantrolina segun la invencion de formula III.

el National Cancer Institute (NCI) de los

imagen14

Resto en posicion 11

OMe

Lineas celulares

Crecimiento celular en porcentaje

Leucemia

CCRF-CEM

HL-60(TB)

MOLT-4

RPMI-8226

SR

K-562

Valor medio Melanom

21,7: 32,1; 74,9 7,2 12,4

18,9: 26,0 118,7 -0,9 13,9

2,3: 11,9 90,1 -8,9 -0,9

80,7: 76,2 96,8 33,5 62,7

11,1: 15,3 in ro CO 13,1 7,8

80,0: 68,9 88,8 29,9 51,6

35,8: 38,4 92,1 12,3 24,6

LOXIMVI: 41,0 37,9 89,3 -30,4 2,3

MALME-3M: 91,0 73,7 123,8 35,5 59,7

M14: 74,7 59,1 94,8 9,5 37,0

MDA-MB-435: - - - - -

SK-MEL-2: 141,3 103,9 117,3 65,3 91,8

SK-MEL-28: 102,1 69,4 119,5 41,5 42,4

SK-MEL-5: 64 51,2 86,3 2,2 20,0

UACC-257: 124,5 78,0 126,3 30,9 69,8

UACC-62: 79,3 45,2 99,1 - 41,0

Valor medio: 89,9 64,8 95,2 22,1 45,5

Brustkrebs

MCF7: 39,8 37,1 89,9 22,8 25,0

MDA-MB-231/ATCC: 112,0 77,1 90,8 - 74,9

HS-578T: 83,9 64,2 90,5 -2,5 -

BT-549: 59,4 61,4 95,0 8,31 16,2

T-47D: 97,0 77,7 97,4 36 48,4

MDA-MB-468: 98,2 53,7 81,5 -23,6 35,6

Valor medio: 81,7 61,9 90,9 8,2 40,0

Valor medio de las 60 lineas celulares: 69,9 55,6 98,0 16,8 39,1

Tabla II: Prueba de citotoxicidad del NCI en 60 lineas celulares tumorales (c= 1 pM) con derivados de formula III.

5 [0030] La Tabla II muestra los mejores resultados respecto a una accion inhibidora del crecimiento para el

derivado con el resto trimetoxifenilo en posicion 11. El derivado con solo un grupo metoxi en posicion meta consigue igualmente inhibiciones del crecimiento considerables. El derivado de 11-fenilo tiene solo una baja accion, mientras que una sustitucion en posicion orto, por ejemplo del derivado de 2,3-dimetoxifenilo, resulta ventajosa. Por ello se

deduce que al menos debe estar presente un sustituyente en la posicion meta del anillo de 11-fenilo. Por los resultados de la Tabla I, ha de esperarse que el reemplazo de metoxi por halogeno en posicion meta conduzca igualmente a buenos efectos inhibidores del crecimiento. Como representante de los compuestos heteroaromaticos de 5 miembros, el derivado de 11-furilo muestra aqul buenos efectos citotoxicos.

5

[0031] Ademas, ha de deducirse las Tablas I y II que los derivados de fenantrolina segun la invencion aqul

ensayados poseen selectividades por determinados tipos tumorales. La mas claramente pronunciada es la accion inhibidora del crecimiento sobre celulas tumorales de leucemia. Ademas, se reconoce una cierta selectividad por celulas tumorales de melanoma y carcinoma de mama (cancer de mama). Estos resultados son representativos de 10 las 60 llneas celulares. Se han determinado ademas para los compuestos mas efectivos las relaciones de dosis- respuesta para 5 concentraciones. La GI50 (inhibicion del crecimiento del 50 %) describe a este respecto la concentracion de sustancia de prueba que es necesaria para una inhibicion del crecimiento celular del 50 %. A partir de ello se investiga el denominado “punto medio del grafico” (MG_MID), que corresponde al valor medio de los valores de GI50 logarltmicos de un comportamiento de respuesta promedio de las 60 llneas celulares por la sustancia 15 de prueba investigada [Boyd y Paull, Drug. Develop. Res., 34, (1995) 91-109].

imagen15

[0032] Con esta magnitud, puede caracterizarse la actividad de un compuesto en el sistema de prueba usado

20 y compararse cuantitativamente con la actividad de otros compuestos (Tabla 3). La siguiente Tabla muestra 4 derivados de formulas I y III con sus codigos usados, los puntos medios del grafico investigados para las correspondientes sustancias y los valores de GI50 calculados a partir de ellos.

Leyendas de la Tabla 3:

Codigo: MG_MID IGI50/60 [pM]

P4: -5,09 8,13

P5: -5,57 2,69

P5-O: -5,07 8,51

P16: -5,42 3,80

P26: -5,22 6,02

Fagaronina: -5,00 9,48

25

[0033] P4= 6-amino-11,12-dihidropirido[3,4-c][1,9]fenantrolina, P5= 6-amino-11-(3-bromofenil)-11,12-

dihidropirido[3,4-c][1,9]fenantrolina, P5-O= 11-(3-bromofenil)-6-oxo-5,6,11,12-tetrahidropirido[3,4-c][1,9]fenantrolina, P16= 6-amino-11-(3-clorofenil)-11,12-dihidropirido-[3,4-c][1,9]fenantrolina, P26= 6-amino-11-(3,4-diclorofenil)-11,12- dihidropirido-[3,4-c]-[1,9]fenantrolina.

30

[0034] Adicionalmente a los compuestos segun la invencion, se ensayo fagaronina, un alcaloide de benzo[c]fenantridina vegetal valido como sustancia primaria para el desarrollo de derivados de benzo[c]fenantridina sinteticos (Pommier, Y. Nat. Rev. Cancer, 6, (2006), 789; Pommier, Y. Chem. Rev. 109, (2009), 2984). Ha de senalarse que todos los derivados de las fenantrolinas segun la invencion para los que se han determinado las

35 curvas de dosis-respuesta presentan una mejor accion inhibidora del crecimiento que la sustancia natural fagaronina.

[0035] Por ejemplo, para 6-amino-11-(3-bromofenil)-11,12-dihidropirido[3,4-c][1,9]fenantrolina, se reproducen las curvas de dosis-respuesta en las figuras 1 a 9. Las 9 figuras distintas incluyen las distintas formas de cancer. Se

40 aplica respectivamente el crecimiento porcentual dependiendo de la concentracion de compuesto (como log10 de las concentraciones molares). Las curvas individuales de cada tipo de cancer son distintas llneas celulares de esta forma de cancer, que aparecen como leyendas con sus abreviaturas habituales. Las llneas horizontales en las figuras significan crecimiento porcentual +100, +50, 0, -50, -100. Crecimiento de 100 % significa, p.ej., ninguna diferencia con el crecimiento despues de dos dlas sin adicion de sustancia. Se reconoce en las curvas individuales 45 que, al aumentar las concentraciones de sustancia, se reduce el crecimiento porcentual.

[0036] Es una ventaja especial de los derivados de fenantrolina segun la invencion su solubilidad en agua mejorada en comparacion con las 6-aminobenzo[c]fenantridinas. En este sentido, ha de citarse ante todo la solubilidad en medios acuosos acidos (2-20 mM en tampon fosfato a pH= 2 y todavla 0,01-0,05 mmol en tampon

fosfato a pH= 4), que es atribuible a 2 atomos de nitrogeno protonables adicionales. A pH 7,4, pudieron encontrarse para numerosos derivados solubilidades por debajo del intervalo micromolar (<1-15 pM), la solubilidad de las 6- aminobenzo[c]fenantridinas a este valor de pH se encuentra principalmente en el intervalo nanomolar. La figura 10 muestra 4 graficas individuales representantes de 4 sistemas tampon de fosfato con distintos valores de pH, en los 5 que respectivamente las solubilidades de las 6-amino-11,12-dihidropirido[3,4-c][1,9]fenantrolinas segun la invencion se aplican al eje y, mientras que se observan en el eje x los distintos derivados con restos diferentes en posicion 11 (3a: R= fenilo, 3b: R= 3-metoxifenilo, 3d: R= 2,3-dimetoxifenilo, 3e: R= 3,5-dimetoxifenilo, 3f: R= 3,4,5-trimetoxifenilo, 3g: R= 2,4,6-trimetoxifenilol, 3h: R= furilo, 3i: R= tienilo, 3j: R= 3-bromofenilo, 3k: R= 4-bromofenilo, 3l: R= 3- clorofenilo, 3m: R= 4-fluorofenilo, 3n: R= bifenilo, 3o: R= propilo).

10

[0037] A partir de los derivados de fenantrolina segun la invencion, se determinaron ademas los valores de logP como una medida de la lipofilia de la clase de sustancias. En este sentido, se compararon 6 6-amino-11,12- dihidropirido[3,4-c][1,9]fenantrolinas diferentes con restos diferentes en posicion 11 con las correspondientes benzo[c]fenantridinas. La figura 11 muestra los valores de logP en el eje y, aplicados frente a derivados que se

15 diferencian en los 6 restos citados en posicion 11, respectivamente para ambas clases de sustancias comparadas. Ademas, se aplica el valor medio (MW).

[0038] Es evidente a partir de la grafica que los valores de logP de las 6-amino-11,12-dihidropirido[3,4- c][1,9]fenantrolinas segun la invencion son aproximadamente un valor de 2 menores que en las correspondientes

20 benzo[c]fenantridinas.

[0039] Esto es de enorme importancia, considerando la aplicabilidad de la clase de sustancias como farmaco y ante todo su biodisponibilidad oral. Segun la “regla de cinco” de Lipinski (Lipinski, C. A.; Lombardo, F.; Dominy, B. W.; Feeney, P. J. Adv. Drug. Deliv. Rev. 46 (2001), 3-26), una regla emplrica reconocida generalmente para la

25 valoracion de la biodisponibilidad oral de un posible farmaco, una sustancia esta biodisponible oralmente cuando posee no mas de 5 donantes de enlaces de puente de hidrogeno (p.ej., grupos OH o NH), no mas de 10 aceptores de enlaces de puente de hidrogeno (p.ej., atomos de oxlgeno o nitrogeno), una masa molecular de no mas de 500 g/mol, as! como un coeficiente de reparto (logP) entre octanol y agua (coeficiente de reparto de octanol-agua) de como maximo 5. Los derivados segun la invencion investigados se encuentran todos dentro del intervalo llmite de la 30 “regla de cinco” y son adecuados despues como farmacos aplicables por via oral, p.ej. en forma de soluciones, comprimidos, capsulas, etc.

[0040] Las figuras muestran las curvas de dosis-respuesta de 9 tipos tumorales distintos del ensayo de 5 dosis (NCI) para 6-amino-11-(3-bromofenil)-11,12-dihidropirido[3,4-c][1,9]fenantrolina.

35

Breve descripcion de las figuras

[0041]

40 Fig. 1: Curvas de dosis-respuesta para tumores leucemicos del ensayo de 5 dosis (NCI) para 6-amino-11-(3- bromofenil)-11,12-dihidropirido[3,4-c][1,9]fenantrolina.

Fig. 2: Curvas de dosis-respuesta para carcinoma bronquial no microcltico del ensayo de 5 dosis (NCI) para 6- amino-11-(3-bromofenil)-11,12-dihidropirido[3,4-c] [1,9]fenantrolina.

Fig. 3: Curvas de dosis-respuesta para carcinoma de colon del ensayo de 5 dosis (NCI) para 6-amino-11-(3- 45 bromofenil)-11,12-dihidropirido[3,4-c][1,9]fenantrolina.

Fig. 4: Curvas de dosis-respuesta para cancer de SNC del ensayo de 5 dosis (NCI) para 6-amino-11-(3-bromofenil)-

11.12- dihidropirido[3,4-c][1,9]fenantrolina.

Fig. 5: Curvas de dosis-respuesta para melanoma del ensayo de 5 dosis (NCI) para 6-amino-11-(3-bromofenil)-

11.12- dihidropirido[3,4-c][1,9]fenantrolina.

50 Fig. 6: Curvas de dosis-respuesta para carcinoma de celulas renales del ensayo de 5 dosis (NCI) para 6-amino-11- (3-bromfenil)-11,12-dihidropirido[3,4-c][1,9]fenantrolina.

Fig. 7: Curvas de dosis-respuesta para carcinoma de ovario del ensayo de 5 dosis (NCI) para 6-amino-11-(3- bromofenil)-11,12-dihidropirido[3,4-c][1,9]fenantrolina.

Fig. 8: Curvas de dosis-respuesta para carcinoma de prostata del ensayo de 5 dosis (NCI) para 6-amino-11-(3- 55 bromofenil)-11,12-dihidropirido[3,4-c][1,9]fenantrolina.

Fig. 9: Curvas de dosis-respuesta para carcinoma de mama del ensayo de 5 dosis (NCI) para 6-amino-11-(3- bromofenil)-11,12-dihidropirido[3,4-c][1,9]fenantrolina.

Fig. 10: Solubilidades dependientes del pH de 6-amino-11,12-dihidropirido[3,4-c][1,9]fenantrolinas.

Fig. 11: Valores de logP dependientes de los restos en posicion 11.

Claims

REIVINDICACIONES

1. Compuesto de formula general I o II

imagen1

5

imagen2

10

que porta al menos un sustituyente RX seleccionado del grupo de Cl, Br o I en posicion meta, en la que RY, que puede ser igual o distinto, es igual a H, OH, OMe, OEt o halogeno; as! como compuesto de formulas generales III y IV

imagen3

en las que R1 es igual a un anillo de fenilo de formula

imagen4

que porta al menos un sustituyente RY en posicion meta, en la que RY, que puede ser igual o distinto, es igual a H, OH, OMe, OEt o halogeno o bien es igual a un heterociclo aromatico de cinco miembros de formula 5

imagen5

en la que W es igual a O, S o NH; y

en la que Z es igual a H, F, Cl, Br, I, NHX, OX, SX,

10 en la que X es igual a H, un grupo dimetilaminoalquilo, dietilaminoalquilo, w-(1,3-diazol-1-il)alquilo, hidroxialquilo, alcoxialquilo, tioalquilo, alquiltioalquilo, en los que alquilo es igual a metilo, etilo o propilo y en la que A es igual a O o S,

as! como sus sales y solvatos farmaceuticamente aceptables.

15
2. Procedimiento para la preparacion de un compuesto segun la reivindicacion 1, que comprende al

menos las siguientes etapas:

(i) Reaccion de aldehldos sustituidos de formula general R1-CHO (V) con 4-metilpiridin-3-carbonitrilos

20 sustituidos de formula general

imagen6

25

en disolventes dipolares aproticos en presencia de bases hasta un compuesto de formula general

imagen7

(ii) Aislamiento de los productos y derivatizacion en posicion 6 por insercion de los restos R4 hasta

derivados con sustitucion A o Z en posicion 6, segun las formulas I a IV,

en la que R1 es un H, un resto hidrocarburo alifatico clclico o aclclico, ramificado o no ramificado, sustituido una o 5 varias veces, un resto carboclclico aromatico o heteroclclico, sustituido una o varias veces y

R2 y R3 pueden ser iguales o distintos y son un H, resto alquiloxi, resto alquilenoxi, atomo de halogeno o un grupo nitro, y

R4 es un H, un grupo monoamino, alquilamino, dialquilamino, (dialquil)aminoalquilamina, alquilo, alcoxi, 10 (dialquil)aminoalquiloxi, hidroxi, hidroxialquilamino, hidroxialquiloxi, tiol, (dialquil)aminoalquiltio, tioalquilo, alquiltioalquilo o un atomo de halogeno.
3. Procedimiento segun la reivindicacion 2, en el que entre ambas etapas (i) y (ii) puede introducirse

opcionalmente la etapa de procedimiento

15 (i.a.) deshidratacion y aislamiento de los productos as! resultantes de formula general

imagen8
4. Procedimiento segun la reivindicacion 2 o 2, en el que el disolvente dipolar aprotico es preferiblemente 20 una amida como dimetilformamida, dimetilacetamida, dietilacetamida, trisamida del acido hexametilfosforico o una

urea como tetrametilurea, 1,3-dimetiltetrahidropirimidin-2-ona y 1,3-dimetilimidazolidonona o un dimetilsulfoxido, y en el que la base es un hidruro alcalino o alcalinoterreo como hidruro de sodio, amiduro alcalino como amiduro de sodio, metilacetamiduro de sodio, alcoholato alcalino, alcalinoterreo o de aluminio como ferc-butilato de potasio, metilato de sodio, etilato de sodio o etilato de aluminio.

25
5. Compuesto segun la reivindicacion 1 para uso como medicamento.
6. Compuesto segun la reivindicacion 1 para uso en el tratamiento de una enfermedad seleccionada del

grupo compuesto por enfermedades microbianas, fungicidas, vlricas y/o inflamatorias.

30
7. Compuesto segun la reivindicacion 1 para uso en el tratamiento de cancer.
8. Compuesto segun la reivindicacion 7, en el que el cancer se selecciona de un grupo compuesto por

leucemia, melanoma o carcinoma de mama.

35
9. Composicion farmaceutica que contiene al menos un compuesto segun una de las reivindicaciones 1 o 5 a 8 en combinacion con un excipiente adecuado.