ES2624644T3 - Inhibidores de proteasoma para el tratamiento de cáncer - Google Patents

Abstract

Bortezomib para su uso en un método para tratar cáncer en un paciente, que comprende la administración a dicho paciente de múltiples dosis de dicho bortezomib, en el que dichas dosis múltiples se administran al menos cuatro días a la semana durante al menos dos semanas.

Description

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INHIBIDORES DE PROTEASOMA PARA EL TRATAMIENTO DE CANCER Campo de la invencion

Se proporciona el bortezomib de inhibidor de proteasoma para el tratamiento de cancer en los pacientes que lo necesitan.

Descripcion de la tecnica relacionada

En celulas eucarioticas, la via de ubiquitina-proteasoma es la via central para la degradacion de protelnas intracelulares. Las protelnas se dirigen inicialmente para la proteolisis mediante el acoplamiento de una cadena de poliubiquitina, degradandose rapidamente a peptidos pequenos por el proteasoma y la ubiquitina se libera a continuacion y se recicla. Esta via proteolltica coordinada es dependiente en la actividad sinerglstica del sistema de conjugacion de ubiquitina y el proteasoma 26S. El proteasoma 26S es un complejo de multi-subunidad de aproximadamente 1.500 a 2.000 KDa presente en el nucleo y citoplasma de eucariontes. El nucleo catalltico de este complejo, al que se refiere como proteasoma 20S, es una estructura cillndrica que consiste en cuatro anillos heptamericos que contiene subunidades a y p. El proteasoma es una proteasa de treonina, la treonina N-terminal de la unidad p que proporciona el nucleofilo que ataca el grupo de carbonilo del enlace de peptido en protelnas diana. Al menos tres actividades proteollticas distintas se asocian con el proteasoma: quimotrlptico, trlptico y peptidilglutamilo. La capacidad para reconocer y vincular sustratos poliubiquinados se confiere por subunidades 19S (PA700), que se enlazan a cada extremo del proteasoma 20S. Estas subunidades accesorias despliegan sustratos y las ingresan en el complejo catalltico 20S, mientras que se elimina las moleculas ubiquitinas adjuntas. Tanto el conjunto del proteasoma 26S como la degradacion de los sustratos de protelna son dependientes de ATP (Almond, Leukemia, 16: 433, 2002).

La exposition de una variedad de llneas celulares derivadas de tumor a inhibidores de proteasoma activa apoptosis, resultando probablemente en efectos en varias vlas, incluyendo protelnas regulatorias de de ciclo celular, p53, y factor nuclear kappa B (NF-kB). Muchos de los estudios iniciales que documentan apoptosis mediada por inhibidor de proteasoma utilizando celulas de origen hematopoyetico, incluyendo monoblastos, celulas T y celulas de leucemia limfoclticas, celulas de limfoma y celulas de leucemia promieloclticas. La primera demostracion de una actividad de antitumor in vivo de un inhibidor de proteasoma utilizo un modelo de xenoinjerto de linfoma humano. Ademas, se informo de que los inhibidores de proteasoma para inducir apoptosis preferencial de linfoma derivados de pacientes y celulas de leucemia e inhibir preferencialmente proliferation de multiples celulas de mieloma con ahorro relativo de celulas de control no transformadas. Asl, los inhibidores de proteasoma son particularmente utiles como agentes terapeuticos en pacientes con neoplasias malignas hematologicas refractarias.

Un tal inhibidor del proteasoma es bortezomib, tambien conocido como PS-341 (Velcade® desarrollado por Millennium Pharmaceuticals, Inc, Cambridge, MA). Bortezomib es un derivado de acido boronico dipeptido y un inhibidor del proteasoma reversible, potente, altamente selectivo con una Ki de aproximadamente 0,6 nmol/L (Adams et al., Semin Oncol. 28: 613 619, 2001). Bortezomib se ha estudiado extensamente por su efecto sobre diversas funciones celulares que requieren la via ubiquitina-proteasoma tanto en sistemas in vitro como in vivo. WO2006/113470 describe la administration de inhibidor de telomerasa GRN163L en combination con bortezomib pero no se ocupa solo de la administracion de bortezomib.

Bortezomib esta aprobado actualmente en varias partes del mundo para el tratamiento de canceres hematologicos. Por ejemplo, bortezomib esta aprobado en los EE.UU. para el tratamiento de pacientes con mieloma multiple como una primera llnea de tratamiento o con linfoma de celulas del manto que han recibido al menos un tratamiento previo. El presente regimen para el tratamiento de pacientes dosifica bortezomib por via intravenosa cada dos semanas o semanalmente. Bajo la dosis actualmente aprobada, por lo menos 72 horas deben transcurrir entre las administraciones de bortezomib. Recientemente, los estudios precllnicos y cllnicos han indicado que dosificacion de bortezomib subcutaneo es una alternativa valida para la administracion intravenosa.

Los estudios biologicos han mostrado que las vlas de serialization aberrantes clave impactadas por la inhibition del proteasoma en canceres hematologicos tambien estan presentes en los tumores solidos, lo que sugiere que la inhibicion del proteasoma tambien puede ser util para el tratamiento de tumores solidos. Sin embargo, una de las toxicidades principales asociadas con la terapia bortezomib es la neuropatla periferica. La reduction de la dosis o frecuencia de administracion bortezomib esta indicada en los casos en que los slntomas de la neuropatla periferica estan presentes. Este efecto secundario es un obstaculo importante en la administracion de dosificacion mas frecuente, mas alta o alternativa de bortezomib, que puede ser necesaria para lograr un beneficio terapeutico para otros tipos de canceres, incluyendo tumores solidos.

Por lo tanto, es un objetivo de la presente solicitud proporcionar reglmenes de dosificacion alternativos para los inhibidores del proteasoma, incluyendo bortezomib, que resultan en una mejora de la terapia para los pacientes con cancer.

Resumen de la invencion

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La presente invencion proporciona el bortezomib inhibidor del proteasoma para su uso en un metodo para tratar cancer en un paciente, que comprende la administracion a dicho paciente de dosis multiples de dichos bortezomib, en donde dichas dosis multiples se administran al menos cuatro dlas a la semana durante al menos dos semanas. Tambien se describe en el presente documento un uso en un metodo para tratar un trastorno de proteasoma mediado o relacionado en un paciente, que comprende la administracion al paciente de un inhibidor del proteasoma con mas frecuencia que cada 72 horas, o al menos tres dlas a la semana, al menos cuatro dlas a la semana, al menos cinco dlas a la semana, al menos seis dlas a la semana o siete dias por semana. Tambien se describe aqul un uso de un inhibidor del proteasoma para el tratamiento de un proteasoma mediado o trastorno relacionado en un paciente en el que el inhibidor del proteasoma se administra al paciente mas frecuentemente que cada 72 horas, o al menos tres dlas a la semana, al menos cuatro dlas a la semana, al menos cinco dlas a la semana, al menos, seis dlas a la semana o siete dlas a la semana. El inhibidor del proteasoma se puede administrar por cualquier periodo de tiempo, incluyendo tres dlas, una semana, dos semanas, tres semanas, cuatro semanas, cinco semanas, seis semanas, siete semanas, ocho semanas, hasta varios meses y anos. El inhibidor del proteasoma tambien puede administrarse en ciclos de tratamiento que comprenden un periodo de tratamiento durante el cual se administra el inhibidor del proteasoma y un periodo de descanso durante el cual no se administra inhibidor de proteasoma.

El trastorno mediada o relacionado con proteasoma puede ser cancer. El inhibidor del proteasoma puede ser bortezomib.

El uso puede comprender ademas un tratamiento adicional. El tratamiento adicional puede ser un tratamiento adicional contra el cancer.

Otros objetos y caracteristicas de la presente invencion resultaran evidentes a partir de la siguiente descripcion detallada considerada en conjuncion con los dibujos adjuntos. Se ha de entender, sin embargo, que los dibujos estan disenados unicamente con fines de ilustracion y no como una definicion de los llmites de la invencion, para los cuales se debe hacer referencia a las reivindicaciones adjuntas. Debe ser entendido que los dibujos no estan dibujados necesariamente a escala y que, a menos que se indique lo contrario, estan destinados meramente a ilustrar conceptualmente las estructuras y procedimientos descritos en el presente documento.

Breve descripcion de los dibujos

En los dibujos:

Figs. 1A y 1B: Las concentraciones plasmaticas de bortezomib en monos cynomolgus despues de administracion subcutanea unica (dia 1) y repetida (dia 74, 0,075 y 0,1 mg/kg o dia 78, 0,166 mg/kg) de bortezomib a aproximadamente 0,075, 0,1 y 0,166 mg/kg en un regimen de dosificacion de cada dos semanas (0.075 y 0,1 mg/kg) o semanal (0,166 mg/kg) (T0X7345).

Fig 2A y 2B: Las concentraciones plasmaticas de bortezomib despues de administracion subcutanea unica (dia 1) y repetida (dia 54) de bortezomib a aproximadamente 0,0166, 0,0333 y 0,05 mg/kg en un regimen de dosificacion diario (5/7 dias) durante 8 semanas consecutivas en monos cynomolgus (T0X8394).

Figura 3: La inhibicion del proteasoma por el bortezomib despues de administracion subcutanea unica (dia 1, ciclo 1) y repetida (dia 74, aproximadamente 0,075 y 0,1 mg/kg, (ciclo 4) o el dia 78, aproximadamente 0,166 mg/kg) de bortezomib en aproximadamente 0,075, 0,1 y 0.166 mg/kg en un regimen de dos veces por semana (aproximadamente 0,075 y 0,1 mg/kg) o semanal (alrededor de 0,166 mg/kg) de dosificacion en monos cynomolgus (T0X7345).

Figura 4: La inhibicion del proteasoma en la sangre entera por bortezomib en el dia 3 y 54 de la administracion subcutanea de bortezomib a aproximadamente 0,0166, 0,0333 y 0,05 mg/kg en un regimen de dosificacion diario (5/7 dias) durante 8 semanas consecutivas en monos cynomolgus. El primer grafico muestra la actividad especifica antes de la dosificacion semanal, es decir, despues de un periodo de recuperacion de 2 dias (TOX8394).

Descripcion detallada de las realizaciones actualmente preferidas

Se describe aqul un uso en un metodo para tratar un trastorno mediado o relacionado con proteasoma en un paciente en necesidad del mismo que comprende la administracion de multiples dosis al paciente de una cantidad eficaz de un inhibidor del proteasoma, en el que dichas multiples dosis se administran con mas frecuencia que cada setenta y dos horas o al menos tres dlas a la semana.

Se encuentra en este documento que la administracion de bortezomib al menos tres dias por semana mantiene efectividad farmacodinamica similar y perfiles de seguridad como la administracion cada dos semanas. Incluso cuando la dosis administrada al menos tres dias por semana resulta en una dosis semanal acumulativa

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superior y la inhibition del proteasoma acumulativo mas alto que una dosis administrada cada dos semanas, el perfil de seguridad, incluyendo la neuropatia periferica y la tolerancia local es comparable entre los dos regimenes. Este resultado es sorprendente e inesperado porque se creia previamente que una dosificacion menos frecuente era necesaria para alcanzar un perfil de seguridad aceptable. La presente divulgation expande el uso de inhibidores del proteasoma para la terapia.

En ciertas realizaciones, el trastorno mediada o relacionado con proteasoma es la enfermedad injerto contra huesped (EICH). En otras realizaciones, el trastorno mediado o relacionado con proteasoma es una condition relacionada con el crecimiento celular aberrante. Condiciones relacionadas con el crecimiento celular aberrante incluyen metaplasias, displasias, hiperplasias y neoplasias. Neoplasias incluyen el cancer.

Ejemplos de cancer que se pueden tratar segun la presente invention incluyen tanto tumores solidos, tales como carcinomas, adenocarcinomas, sarcomas; como tumores no solidos, incluyendo canceres de origen hematologico. Los canceres de origen hematologico incluyen leucemias, tales como la leucemia mielogena aguda, leucemia mielogena cronica, leucemia linfocitica, y leucemia mieloide; linfomas tales como linfoma de celulas del manto, linfoma de celulas T cutaneo, linfoma de Hodgkin y linfoma de Hodgkin; y mielomas, tales como mieloma multiple. Los tumores solidos incluyen tumores de la piel (como el melanoma), pulmon, bronquios, prostata, mama, pancreas, glandula suprarrenal, intestino delgado, intestino grueso, colon, recto, tiroides, estomago, higado, conducto biliar, rinon, pelvis renal, vejiga urinaria, utero, cuello uterino, ovario, esofago, cerebro, cabeza y cuello, cavidad bucal, faringe y la laringe. Canceres especificos incluyen mixoide y carcinoma de celulas redondas, tumores localmente avanzados, carcinoma de tejido blando humano, metastasis cancerosas, carcinoma de celulas escamosas, carcinoma de celulas escamosas de esofago, cancer de la corteza suprarrenal, tumores que producen ACTH, canceres de celulas no pequenas, cancer de mama, canceres gastrointestinales, canceres urologicos, tumores malignos del tracto genital femenino, tumores malignos del tracto genital masculino, cancer de rinon, cancer de cerebro, cancer de hueso, cancer de la piel, cancer de tiroides, retinoblastoma, neuroblastoma, derrame peritoneal, derrame pleural maligno, mesotelioma, tumores de Wilms, cancer de vesicula biliar, neoplasias trofoblasticas, hemangiopericitoma, y sarcoma de Kaposi.

El tratamiento puede ser de primera linea, de segunda linea, de tercera linea, de cuarta linea o mas lineas. El cancer puede ser recurrente o refractario a uno o mas tratamientos contra el cancer. De este modo, el paciente puede ser de nuevo tratamiento, o puede haber recibido una o mas terapias contra el cancer anteriores que no curan por completo la enfermedad.

El termino "paciente" significa un animal, que es o ha sido objeto de tratamiento, observation o experimento y esta en riesgo de (o susceptible a) desarrollar una enfermedad o trastorno o que tiene una enfermedad o trastorno relacionado con la actividad del proteasoma no regulado. Los animales incluyen mamiferos, tales como seres humanos, simios, monos, vacas, caballos, conejos, ratas o ratones. En ciertas realizaciones, el paciente es un paciente humano.

Por "tratamiento" de un trastorno o enfermedad, se quiere decir que la administration resultara en la prevention, la inhibicion en la velocidad de avance, mejora o cura completa de uno o mas sintomas de la enfermedad o trastorno. El termino tambien indica la cantidad que podria mejorar la eficacia de la funcion fisiologica. Para el tratamiento del cancer, el tratamiento incluye la reduction en el numero de celulas cancerosas; reduction en el tamano del tumor; reduccion en el numero de tumores; inhibicion de (es decir, ralentizar en cierto grado y preferiblemente detener) la infiltration de celulas cancerosas en organos perifericos; inhibicion de (es decir, ralentizar en cierto grado y preferiblemente detener) la metastasis tumoral; inhibicion de crecimiento tumoral; y/o la reduccion de uno o mas de los sintomas asociados con el cancer. En la medida en que el ingrediente activo o agente puede prevenir el crecimiento y/o matar las celulas cancerosas existentes, puede ser citostatico y/o citotoxico. Para la terapia de cancer, la eficacia puede, por ejemplo, medirse mediante la evaluation del tiempo hasta la progresion de la enfermedad (TTP) y/o la determination de la tasa de respuesta (RR).

El termino "administrar", con respecto a los metodos de la presente invencion, se refiere a un medio para el tratamiento de una enfermedad como se describe en este documento con un compuesto descrito especificamente o un compuesto o profarmaco del mismo, que se incluye dentro del alcance de la invencion aunque no descrito especificamente para algunos de los compuestos instantaneos.

Los inhibidores del proteasoma utiles en la divulgacion incluyen aldehidos peptidicos y sulfonas de vinilo de peptidos, que se unen a e inhiben directamente los sitios activos dentro del nucleo 20S del proteasoma. Aldehidos peptidicos y sulfonas de peptido de vinilo se unen a la particula de nucleo 20S de una manera irreversible, por lo tanto, la actividad proteoliiica no puede ser restaurada en el momento de su elimination.

Boronatos peptidicos o compuestos de acido borico peptidico tambien son inhibidores del proteasoma, pero funcionan de manera diferente a partir de los analogos de peptido aldehido. Confieren inhibicion estable del proteasoma y se disocian lentamente del proteasoma. Ademas, los compuestos de acido borico peptidico son mas potentes que sus analogos de peptido aldehido, y actuan mas especificamente en la debil interaction entre el boro y azufre. Por lo tanto, boronatos de peptidos no inhiben proteasas de tiol (Richardson et al., Cancer Control. 10: 361,

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2003).

Compuestos de acido boronico de peptidos son peptidos que contienen un acido a-aminoboronico en el extremo acido o extremo C-terminal de la secuencia (Zembower et al., Int J. Pept Protein Res. 47: 405 413, 1996). Debido a la capacidad para formar un complejo de borato tetraedrico estable entre el grupo acido boronico y el resto de serina o histidina del sitio activo, acidos boronicos peptldicos son inhibidores de serina-proteasa potentes. Esta actividad es a menudo mayor e hecha altamente especlfica hacia una proteasa particular mediante la variacion de la secuencia de los acidos boronicos peptldicos y la introduccion de residuos de aminoacidos no naturales y otros sustituyentes. Compuestos de acido boronico de peptidos y su slntesis se han descrito anteriormente, incluyendo a numeros de patente US 4.499.082; 4.537.773; 5.780.454; 6.083.903; 6.297.217; 6.617.317; 6.713.446; y 6.958.319;

Compuestos de acido boronico de peptidos tienen generalmente la forma siguiente:

imagen1

en donde R1, R2 y R3 son restos independientemente seleccionados que pueden ser iguales o diferentes entre si, y n es de 1-8, preferiblemente 1-4.

Preferiblemente, R1, R2, y R3 se seleccionan independientemente de hidrogeno, alquilo, alcoxi, arilo, ariloxi, aralquilo, aralcoxi, cicloalquilo, o heterociclo, o cualquiera de R1, R2, y R3 pueden formar un anillo heteroclclico con un atomo de nitrogeno adyacente en la cadena principal del peptido. Alquilo, incluyendo el componente de alquilo de alcoxi, aralquilo y aralcoxi, es preferiblemente de 1 a 10 atomos de carbono, mas preferiblemente 1 a 6 atomos de carbono, y puede ser lineal o ramificado. Arilo, que incluye el componente arilo de ariloxi, aralquilo y aralcoxi, es preferiblemente mononuclear o binuclear (es decir, dos anillos fusionados), mas preferiblemente mononuclear, tal como bencilo, benciloxi, o fenilo. Arilo tambien incluye heteroarilo, es decir un anillo aromatico que tiene uno o mas atomos de nitrogeno, oxlgeno, o azufre en el anillo, tales como furilo, pirrol, piridina, pirazina, o indol. Cicloalquilo es preferiblemente de 3 a 6 atomos de carbono. Heterociclo se refiere a un anillo no aromatico que tiene uno o mas de nitrogeno, oxlgeno o atomos de azufre en el anillo, preferiblemente un anillo de 5 a 7 miembros haber que ha incluido 3 a 6 atomos de carbono. Tales heterociclos incluyen, por ejemplo, pirrolidina, piperidina, piperazina, y morfolina. Cualquiera de cicloalquilo o heterociclo se puede combinar con alquilo, por ejemplo ciclohexilmetilo.

Cualquiera de los grupos anteriores (excluyendo el hidrogeno) puede estar sustituido con uno o mas sustituyentes seleccionados de halogeno, preferiblemente fluoro o cloro, hidroxi, alquilo inferior, alcoxi inferior, tal como metoxi o etoxi, ceto, aldehldo, acido carboxllico, ester, amida, carbonato o carbamato, acido sulfonico o ester, ciano, amino primario, secundario, o terciario, nitro, amidino, y tio o alquiltio. Preferiblemente, el grupo incluye como maximo dos de tales sustituyentes. Los ejemplos especlficos de R1, R2, y R3 incluyen n-butilo, isobutilo, y neopentilo (alquilo), fenilo o pirazilo (arilo), 4-((t-butoxicarbonilo) amino)butilo-3-propilo (nitroamidino), y (1-ciclopentilo-9- ciano)nonilo (alquilo sustituido), naftilmetilo y bencilo (aralquilo), benciloxi (aralcoxi), y pirrolidina (R2 forma un anillo heteroclclico con un atomo de nitrogeno adyacente). Para R1, Los grupos preferidos son arilo sustituido y no sustituido y heteroarilo. Para R2 y R3, los grupos preferidos son cadenas de aminoacidos naturales laterales de acido (por ejemplo, alquilo, hidroxialquilo, aralquilo, heteroaralquilo, aminoalquilo, carboxialquilo, guanidinoalquilo) o variantes de los mismos.

En general, el compuesto de acido boronico de peptidos puede ser un monopeptido, di-peptido, tri-peptido, o un compuesto peptldico de orden superior. Otros compuestos de acido boronico peptldico se describen en Numeros de Patente US 6.083.903; 6.297.217; y 6.617.317. Los compuestos que tienen un acido aspartico o residuo de acido glutamico con un acido boronico como cadena lateral tambien se incluyen.

En la invencion, el inhibidor de proteasoma es bortezomib. Bortezomib, tambien llamado [(1R)-3-metilo-1- [[(2S)-1-oxo-3-fenilo-2-[pirazinilcarbonilo)-amino] propilojamino] butilo] acido boronico o N-pirazina carbonilo-L- fenilalanina-L-leucina, es un acido boronico de dipeptidilo modificado derivado de leucina y fenilalanina.

Otros inhibidores de proteasoma utiles en la presente divulgacion incluyen NPI-0052, carfilzomib, ritonavir, disulfiram, salinosporamida A, epigalocatequina-3-galato, genistelna y curcumina.

El inhibidor de proteasomea se administra mas frecuentemente que cada 72 horas, o al menos tres veces a la semana. El inhibidor de proteasoma se puede administrar cada 6-60 horas, incluyendo cada 48 horas, cada 24 horas, o cada 12 horas. El inhibidor del proteasoma se puede administrar tres, cuatro, cinco, seis o siete dlas a la semana, y se puede administrar una vez al dla o varias veces al dla. La administracion puede ser a intervalos regulares, o los intervalos entre la administracion puede variar. La administracion puede ser en dlas consecutivos, o dlas no consecutivos. Puede haber perlodos de descanso sin administracion de inhibidor de proteasoma. Por

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ejemplo, para la administracion tres veces por semana, la administration puede ser en el dla 1, dla 2, dla 3 con el reposo en dlas 4-7; o en el dla 1, dla 3, dla 4 con el reposo en dla 5-7; o en el dla 1, dla 3 y el dla 5, con el reposo en el dla 6-7, etc. En ciertas realizaciones, el inhibidor de proteasoma se administra en los dlas 1-5, sin inhibidor del proteasoma se administra en los dlas 6-7.

El tratamiento puede continuar durante tanto tiempo como sea necesario, y puede ser tan corto como una semana. En ciertas realizaciones, el tratamiento continuo durante al menos dos semanas, al menos tres semanas, al menos cuatro semanas, al menos cinco semanas, al menos seis semanas, al menos siete semanas, al menos ocho semanas o mas. El regimen de administracion y la dosificacion pueden ser la misma semana a semana o pueden variar semana a semana.

El inhibidor de proteasoma se puede administrar en ciclos de tratamiento, con un descanso entre ciclos. Por ejemplo, el inhibidor del proteasoma se puede administrar cinco dlas por semana en los dlas 1-5 y 8-12, con un descanso de una semana o dos semanas antes de repetir el ciclo.

El inhibidor de proteasoma es tlpicamente a una dosis de aproximadamente 0,001 mg a aproximadamente 300 mg/kg de peso corporal por dla; de aproximadamente 0,03 a aproximadamente 100 mg/kg de peso corporal por dla; o de aproximadamente 0,05 a aproximadamente 15 mg/kg de peso corporal por dla. Las dosificaciones optimas variaran dependiendo de factores asociados con el paciente particular a tratar (por ejemplo, edad, peso, dieta y tiempo de administracion), la gravedad de la afeccion a tratar, el compuesto empleado, el modo de administracion y la fuerza de la preparation. Cada dosis puede ser la misma, o la dosis puede variar de una administracion a otra, dla a dla, o semana a semana.

En ciertas realizaciones, el inhibidor de proteasorne se administra a dosis de aproximadamente 0,1, 0,2, 0,4, 0,5, 0,6, 0,7, 0,8, 0,9, 1,0, o 1,1 mg/m1 2. A tltulo de ejemplo, un tratamiento comprende la administracion de bortezomib una vez al dla a una dosis de aproximadamente 0,0166, 0,0333 o 0,05 mg por kg de peso corporal (por ejemplo, aproximadamente 0,2, 0,4 o 0,6 mg/m2). El regimen de dosificacion una vez al dla genera efecto farmacodinamico similar sin aumento de los efectos toxicologicos en comparacion con un regimen de dosificacion cada dos semanas de la administracion de bortezomib a aproximadamente 0,075 o 0,1 mg por kg de peso corporal (por ejemplo, aproximadamente 0,9 o aproximadamente 1,2 mg/m2) o un regimen de dosificacion semanal de la administracion del bortezomib a aproximadamente 0,166 mg/kg (por ejemplo, aproximadamente 2,0 mg/m2).

En ciertas realizaciones, el uso incluye la administracion de uno o mas tratamientos. El tratamiento adicional se puede administrar para aliviar un efecto secundario del inhibidor de proteasorne, para aliviar un slntoma o aspecto del proteasoma o enfermedad mediada relacionada, para aumentar la eficacia del inhibidor del proteasoma, o para tratar una enfermedad no relacionada o trastorno.

Los tratamientos adicionales utiles en la presente invention incluyen tratamientos anticancerosos, inmunosupresores, agentes antivirales, agentes antiinflamatorios, agentes anti-fungicos, antibioticos, agentes de hiperproliferacion antivasculares, agentes antidepresivos, agentes hipolipidemicos o agentes hipolipemiantes o agentes moduladores de llpidos, agentes antidiabeticos, agentes de antiobesidad, agentes antihipertensivos, inhibidores de la agregacion de plaquetas, y/o agentes de antiosteoporosis.

Tratamientos anticancerlgenos adicionales utiles en la presente invencion incluyen cirugla, quimioterapia, radioterapia, terapia hormonal, terapia genica, la terapia con anticuerpos, y la inmunoterapia. Tal tratamiento combinatorio se puede lograr mediante la administracion simultanea, secuencial o separada de los tratamientos divididos o combinados. A modo de ejemplo, la terapia de combination puede comprender la coadministracion de un compuesto de acido boronico peptldico o composition del mismo y un agente quimioterapeutico, la administracion secuencial de un compuesto de acido boronico peptldico o composicion del mismo y un agente quimioterapeutico, la administracion de una composicion que contiene un compuesto de acido borico peptldico y un agente quimioterapeutico, o la administracion simultanea de una composicion separada que contiene un compuesto de acido boronico peptldico y una composicion separada que contiene un agente quimioterapeutico.

Los agentes quimioterapeuticos utiles en la presente invencion incluyen agentes antiangiogenicos, agentes antitumorales, agentes citotoxicos, inhibidores de la proliferation celular, y similares, o mezclas de los mismos. Tal quimioterapia puede cubrir tres categorlas principales de agente terapeutico:

1. Agentes quimioterapeuticos de ciclo celular especlfico incluyen, pero no se limitan a, epipodofilotoxinas (por ejemplo, etoposido y teniposido); diterpenoides (por ejemplo, paclitaxel y docetaxel); alcaloides vinca (por ejemplo, vincristina, vindesina, vinblastina y vinorelbina); antimetabolitos (por ejemplo, cladrabina, citarabina, alopurinol, fludurabina, metotrexato, mercaptopurina, tioguanina, 5-fluorouracina y fluorodesoxiuridina) y camptotecinas (por ejemplo, 9-amino camptotecina, topotecan e irinotecan).

2. Agentes citotoxicos quimioterapeuticos que incluyen, pero no se limitan a agentes alquilantes (por ejemplo, hexametilmelamina, busulfan, melfalan, clorambucilo, ciclofosfamida, mecloretamina, carmustina, lomustina, dacarbazina, carboplatino, displatino y oxaliplatino); antibioticos antitumorales (por ejemplo, bleomicina, idarrubicina, mitomicina-c, doxorubicina, daunomicina, epirubicina, dactinomicina y mitramicina);

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3. Otros agentes contra el cancer, que incluyen, pero no se limitan a inhibidores de testosterona de 5a- hidroreductasa (por ejemplo, finasterida); antiestrogenos (por ejemplo tamoxifeno, toremifent, raloxifeno, droloxifeno y yodoxifeno); progestrogenos (por ejemplo acetato de megestrol); inhibidores de aromatasa (por ejemplo, anastrozol, letrazol, vorazol, y exemestano; antiandrogenos (por ejemplo flutamida, nilutamida, bicalutamida, y acetato de citorterona); agonistas y antagonistas de LHRH (por ejemplo acetato de goserelina y luprolida); inhibidores de metaloproteinasas (por ejemplo, marimastato); inhibidores de funcion del receptor activador de plasminogeno de uroquinasa; inhibidores de ciclooxigenasa de tipo 2 (por ejemplo, celecoxib), agentes inhibidores de la angiogenesis tales como inhibidores de VEGFR y TIE-2; inhibidores de la funcion del factor de crecimiento tales como inhibidores del factor de crecimiento de hepatocitos; erb-B2, erb-B4 receptor del factor de crecimiento epidermico (por ejemplo, Iressa y Tarceva), receptor del factor de crecimiento derivado de las plaquetas, receptor del factor de crecimiento endotelial vascular y TIE-2; y otros inhibidores de quinasa de tirosina distintos de los descritos en la presente invencion.

Agentes quimioterapeuticos mas comunmente usados incluyen taxanos (incluyendo paclitaxel y docetaxel), camptotecina, doxorubicina, bohemina, metotrexato, terapias a base de platino incluyendo cisplatino, oxaliplatino, carboplatino, inhibidores de la topoisomerasa (incluyendo etoposido y topotecan) y podofilotoxina.

En ciertas realizaciones, una o mas terapias adicionales contra el cancer son melfalan y/o prednisona; dexametasona, ciclofosfamida y/o lenalidomida; romidepsina; gemcitabina; irinotecan; docetaxel; o doxorrubicina.

El inhibidor de proteasoma o tratamientos adicionales se pueden administrar por cualquier via de administracion adecuada. Vlas de administracion adecuadas incluyen oral y parenteral, incluyendo intravenosa, subcutanea, intramuscular, intradermica, y transdermica. Los compuestos pueden administrarse mediante infusion continua o como un solo bolo. En ciertas realizaciones, el inhibidor de proteasoma se administra por via subcutanea.

El inhibidor de proteasoma o tratamientos adicionales pueden administrarse como parte de una formulacion farmaceutica. Las formulaciones farmaceuticas pueden prepararse por cualquiera de los metodos farmaceuticos convencionales y no convencionales bien conocidos en la tecnica farmaceutica y se pueden adaptar para la administracion por cualquier via apropiada.

Las formulaciones farmaceuticas adaptadas para la administracion subcutanea pueden incluir soluciones de inyeccion esteriles acuosas y no acuosas que pueden contener antioxidantes, tampones, bacteriostaticos y solutos que hacen la formulacion isotonica con la sangre del receptor previsto; y suspensiones esteriles acuosas y no acuosas que pueden incluir agentes de suspension y agentes espesantes. Las formulaciones para administracion transdermica pueden presentarse como parches discretos destinados a permanecer en contacto Intimo con la epidermis del receptor durante un perlodo prolongado de tiempo.

La invencion no esta limitada por las realizaciones descritas anteriormente que se presentan a tltulo de ejemplo, pero se pueden modificar de varias maneras dentro del alcance de proteccion definido por las reivindicaciones de patente adjuntas.

Ejemplo 1. ESTUDIOS PRECLINICOS, METODOS Y MATERIALES Diseno del estudio

Para el tratamiento de dosificacion cada dos semanas (TOX 7345), se les administraron a un grupo de 3 monos cynomolgus machos y 3 hembras una dosis de 4 ciclos. Cada ciclo consistio en la dosificacion con portador o con bortezomib a aproximadamente 0,075 o aproximadamente 0,1 mg/kg (por ejemplo, aproximadamente 0,9 o aproximadamente 1,2 mg/m2) en los dlas 1, 4, 8 y 11 seguido de 1 semana de descanso. Se administro a un segundo grupo de 3 monos cynomolgus machos y 3 hembras una dosis semanal de bortezomib a aproximadamente 0,166 mg/kg (por ejemplo, aproximadamente 2,0 mg/m2) durante 12 semanas consecutivas. Para el tratamiento de dosificacion diaria (TOX 8394), se dosificaron un grupo de 3 monos cynomolgus machos y 3 hembras con portador o bortezomib a aproximadamente 0,0166, 0,0333 o 0,05 mg/kg (por ejemplo, aproximadamente 0,2, 0,4 o 0,6 mg/m2) durante 5 dlas consecutivos seguidos de 2 dlas de descanso durante 8 semanas consecutivas.

La sustancia de ensayo y el portador estaban recien preparados en el dla de uso. Bortezomib se proporciono en viales previamente pesados que contienen cada uno aproximadamente 3,5 mg de bortezomib y aproximadamente 35 mg de manitol. La sustancia fue reconstituida mediante la adicion de alrededor de 0,9% p/v de cloruro de sodio para inyeccion USP y mediante el mezclado suave para proporcionar una solucion de bortezomib de aproximadamente 3,5 (TOX7345) o 1 (T0X83 94) mg/ml. El portador para los animales de control se preparo disolviendo una cantidad apropiada de manitol en un volumen apropiado de alrededor de 0,9% p/v de cloruro de sodio para inyeccion USP para proporcionar una solucion de dosificacion que contiene manitol a una concentracion igual a la contenida en la solucion de dosificacion de bortezomib de 3,5 mg/ml (TOX7345) o 1,0 mg/ml (TOX8394).

Se evaluo cada grupo de perfil toxicologico, la farmacocinetica y farmacodinamica como se describe a continuacion.

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EJEMPLO 2. ESTUDIOS DE CRIBADO PRECLINICOS

Para cada grupo de estudio, se realizo el siguiente cribado toxicologico: mortalidad, peso corporal, consumo de alimentos, observaciones cllnicas, oftalmologla, electrocardiografla, hematologla, bioqulmica serica, analisis de orina, evaluaciones de sitio de inyeccion (eritema y edema), examenes neurologicos, histologla, y neuropatla periferica. Los resultados de la evaluacion de cribado o de seguridad toxicologla se resumen en la Tabla 1 a continuacion.

Tabla 1. Resultados de cribado toxicologico para los reglmenes de dosificacion bisemanal los una vez al dla.

Parametro

TOX 7345 (dosificacion dos veces por semana) TOX 8394 (dosificacion una vez al dla)

Mortalidad

I F (dla 72), 1 M (dla 79), a 0,166 mg/kg (semanal) considerado tratamiento relacionado No hubo mortalidad en otros niveles de dosis No hubo mortalidad en cualquier nivel de dosis

Peso corporal

Perdida de peso corporal solo en 2/3 M (0,166 mg/kg) No hay perdida de peso corporal en otros niveles de dosis Perdida de peso corporal en 0,05 mg/kg (n = 2/3 M) Sin perdida de peso corporal en cualquier otro nivel de dosis

Observacio nes cllnicas

Heces anormales (blandos, llquidos, y/o mucoides) y emesis (0,166 (semanal) y 0,1 mg/kg) Disminucion del apetito y disminucion de actividad (0,166 (semanal) y 0,1 mg/kg) Heces anormales (blandos, llquidos, 0,0333 o 0,05 mg/kg)

Hematologl a

WBC (0,166 mg/kg) en mono muerto hembra Sin cambios hematologicos relacionados al bortezomib en otros niveles de dosis Numeros de plaquetas se disminuyeron y el volumen de plaquetas medio se aumentaron (en todos los grupos tratados de bortezomib de una manera dependiente de la dosis)

Bioqulmica de suero

La protelna total y globulina (0,166 (semanal) y 0,1 y 0,075 mg/kg) (puede ser un apetito secundario a reducido) No hay cambios en la qulmica del suero

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(continuacion)

Histologla

MEDULA OSEA: hipocelularidad MEDULA OSEA: no hay resultados

0,166 (semanal), 0,1, 0,075 mg/kg GANGLIOS LINFATICOS: no hay resultados

(dependiente de frecuencia y dosis) BAZO: no hay resultados

GANGLIOS LINFATICOS: atrofia RINON: Degeneracion tubular: 0,0333 y 0,05 mg/kg

de linfoides (0,166 (semanal), 0,1 mg/kg)

PANCREAS: disminucion de zimogeno,

BAZO: pulpa, atrofia linfoide

(0,166 (semanal); 0,1 mg/kg) granulos 0,0333 y 0,05 mg/kg

RINON: Degeneracion de tubulos PROSTATA: restos necroticos,

corticales renales/hipertrofia 0,0333

(0,166 (semanal), 0,1, 0,075 mg/kg) y 0,05 mg/kg

PANCREAS: no hay resultados

PROSTATA: no hay resultados

Sitio de la inyeccion

No hay signos significativos de cambios microscopicos Aumento dependiente de dosis en

relacionados con la irritacion o incidencia, frecuencia y gravedad

tratamiento de eritema y edema. De naturaleza transitoria

Aumento relacionado de dosis en el

numero de areas y secciones histologicas afectadas por infiltracion de neutrofilos de celulas

mononucleares (minima a templada)

Neuropatla periferica

0,075 mg/kg sin lesiones nerviosas perifericas 0,0166 mg/kg: lesiones

no neuronales

0.1/0.166 (semanal) mg/kg degeneracion minima 0,0333- 0,05 mg/kg:

de neurofibras axonales focales Medula espinal: degeneracion minima de funiculi dorsales

Medula espinal (ganglios de ralz dorsal) (cervicales y lumbares)

Periferico (nervios ciaticos, tibiales y

peroneales): degeneracion minima

Electrocardiografla

No se han encontrado No se han encontrado

anormalidades en cualquier anormalidades en cualquier dosis

nivel de dosis nivel

Oftalmologla

No hubo cambios relacionados No hubo cambios relacionados con

con el tratamiento el tratamiento

Analisis de orina

Sin resultados relacionados con el Sin resultados relacionados con el

tratamiento tratamiento

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Tal como se muestra en la Tabla 1, administration subcutanea de bortezomib que se repite, una vez al dla, cinco veces por semana fue bien tolerada por los monos cynomolgus durante ocho semanas. Todos los monos sobrevivieron al sacrificio previsto. No hubo cambios relacionados con bortezomib en ECG, oftalmologla, temperatura rectal o resultados de presion arterial. Ademas, no se observaron anomallas macroscopicas en los monos tratados con bortezomib en la necropsia. Cambios en parametros de qulmica del suero no resultaron del tratamiento.

Puntuaciones de draize de la zona de inyeccion mostraron un aumento dependiente de dosis con el tratamiento de bortezomib en la incidencia, la frecuencia y la gravedad del eritema y el edema que se correlaciona con el resultado histopatologico de fibroplasia en los sitios de inyeccion en monos macho y hembra administrados a aproximadamente 0,05 mg/kg/dosis. Hubo un aumento relacionado con dosis en el numero de zonas y secciones histologicas afectadas por infiltration de celula mononuclear/neutrofilo (minima a leve) en sitios de inyeccion.

Se observo inapetencia leve en un macho y una hembra administrada en aproximadamente 0,0333 mg/kg/dosis y una hembra administrada a aproximadamente 0,05 mg/kg/dosis. Sin embargo, nueve monos macho y hembra en estos grupos perdieron aproximadamente 3-12% del peso corporal. Todos menos dos monos macho administrados a aproximadamente 0,05 mg/kg/dosis de peso cuerpo recuperado durante el perlodo de dosificacion. Heces blandas tambien se observaron en varios dlas para un mono macho en cada grupo de administrado a aproximadamente 0,0166 mg/kg/dosis y 0,0333 mg/kg/dosis, y un mono hembra administrada a aproximadamente 0,05 mg/kg/dosis.

El numero de plaquetas se disminuyo, el volumen medio de plaquetas se aumento y concentraciones de fibrinogeno se aumentaron en todos los grupos tratados con bortezomib de una manera dependiente de la dosis. Los aumentos en los parametros de analisis de orina de creatinina, fosforo inorganico, cetonas, protelnas y sodio correlacionado con los resultados de patologla. peso de los rinones en todos los monos administrados a aproximadamente 0,05 mg/kg/dosis fueron mayores que los pesos de rinon de monos de control. Ademas, se observo degeneracion/regeneracion tubular en los rinones de monos macho administrados a aproximadamente 0,0333 mg/kg/dosis y en monos macho y hembra administrados a aproximadamente 0,05 mg/kg/dosis.

Otros resultados histopatologicos se redujeron, granulos de zimogeno en el pancreas en monos macho y hembra administrados a aproximadamente 0,0333 o 0,05 mg/kg/dosis y residuos necroticos en acinos de la prostata de monos macho administrados a aproximadamente 0,0333 y 0,05 mg/kg/dosis. La DMT era de alrededor de 0,1 mg/kg en el regimen de dosificacion cada dos semanas (TOX7345) y alrededor de 0,05 mg/kg en el regimen de dosificacion diaria (TOX8394).

En resumen, la administracion subcutanea de bortezomib a >= 0,0166 mg/kg/dosis dio lugar a cambios en varios parametros de analisis de orina, la disminucion de las plaquetas, y el aumento de volumen y la concentration serica de fibrinogeno plaquetario medio. La administracion subcutanea de bortezomib a >= 0,0333 mg/kg/dosis resulto en una disminucion del consumo de alimentos, y las lesiones en el rinon, pancreas y prostata, y la perdida inicial de peso corporal que en la mayorla de los casos fue seguida por el aumento de peso corporal durante el curso del tratamiento. En la alta dosis de aproximadamente 0,05 mg/kg/dosis, lesiones histopatologicas en el sitio de inyeccion y pesos de rinon fueron mayores que los controles. Ademas, dos varones con perdida de peso inicial no recuperaron peso durante el curso del tratamiento. Por lo tanto, bajo las condiciones del estudio y en base a los datos disponibles, el 'nivel de efecto adverso no observado (NOAEL) para administracion subcutanea repetida, cinco veces a la semana de bortezomib a monos cynomolgus durante 8 semanas no puede identificarse.

EJEMPLO 3. TOXICOCINETICA Y FARMACOCINETICA PRECLINICA

Para cada estudio, los valores del tiempo hasta la concentracion plasmatica maxima (Tmax), la concentracion plasmatica maxima (Cmax) se determinaron por inspection visual de los datos. La curva de tiempo de area bajo la concentracion de plasma (AUC) se calculo mediante la regla trapezoidal lineal. Las muestras de plasma se analizaron mediante un metodo LC/MS/MS validado con un menor llmite de cuantificacion de aproximadamente 0,5 ng/ml.

Las concentraciones plasmaticas de bortezomib en los reglmenes de dosificacion bisemanales y de una vez al dla se muestran en la Figs. 1A, 1B, 2A, 2B, respectivamente. No hubo diferencias en la exposition entre los monos machos y hembras. Por lo tanto, los parametros de medias se calcularon utilizando resultados obtenidos a parti r de ambos animales machos y hembras.

En cada experimento, bortezomib se absorbio rapidamente despues de la dosificacion. El valor de Tmax se produjo en promedio en 0,25 h despues de la dosificacion a mas tardar. Los valores de Cmax y AUC se aumentaron con niveles de dosis en aumento de bortezomib ya sea proporcionalmente o ligeramente mas de dosis proporcional para los reglmenes de dosificacion quincenales, asi como para diarios.

Ademas, en cada estudio, la exposicion (AUC) se aumento tras la administracion repetida. El aumento fue mas significativo de la primera a las administraciones de dosis de repetition temprana que entre las

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administraciones de dosis posteriores. Los datos indican que, desde el segundo ciclo regimen bisemanal de tratamiento (TOX7345) y de la tercera semana en la dosificacion una vez al dla (TOX8394), no ocurrio mas aumento de la exposicion. Cuando normalizado a un nivel de dosis similar, la exposicion (Cmax y AUC) era comparable entre los dos estudios.

Tabla 2: Parametros farmacocineticos de bortezomib en plasma calculadas despues de administracion subcutanea unica (dla 1) y repetida (dlas 32, 74 a 0,075 y 0,1 mg/kg o dlas 50 y 78 en 0,166 mg/kg) de bortezomib en 0,075, 0,1 y 0,166 mg/kg en un regimen de dosificacion cada dos semanas (0,075 y 0,1 mg/kg) o semanal (0,166 mg/kg) (TOX7345) en monos cynomolgus.

Dla

Dosis (mg/kg) T max (h) Cmax (ng/mL) AUC0-72H (h.ng/mL)

1

0,075 0,117 (0) 61,1-(10,3) 36,7 (8,4)

32

0,075 0,25 (0,20) 58,8 (29,7) 110 (5)

74

0,075 0,139 (0,06) 70,1-(11,6) 122 (11)

1

0,1 0,117 (0) 86,2 (20,5) 77,5 (42,2)

32

0,1 0,119 (0,01) 141 (19) 227 (107)

74

0.,1 0,161-(0,07) 113 (19) 211 (82)

1

0,166 0,117 (0,07) 144 (48) 160 (17)

50

0,166 0,117 (0) 168 (22) 205 (27)

78

0,166 0,23 (0,06) 158 (110) 229 (157)

Los valores medios se dan.

Las desviaciones estandar se dan entre parentesis.

T max = Tiempo de aparicion de Cmax.

Cmax = concentracion maxima en plasma.

AUC0-t = Area bajo la curva de tiempo de concentracion plasmatica entre 0 y t.

Tabla 3: Parametros farmacocineticos de bortezomib en plasma calculados despues de administracion subcutanea unica (dla 1) y repetida (dlas 3 y 54) de bortezomib en 0,0166, 0,0333 y 0,05 mg/kg en un regimen de dosificacion diario (5/7 dlas) para 8 semanas consecutivas (TOX8394) en monos cynomolgus.

Dla

Dosis (Mg/kg) T max (h) Cmax (ng/ml) AUC0-24h (h.ng/mL)

1

0,0166 0,148 (0,08) 10,7 (l,9) 4,78 (L,21)

3

0,0166 0,138 (0,05) 11,0 (3,2) 8,73 (5,04)

54

0,0166 0,161-(0,07) 14,1 -(2,7) 20,5 (10,3)

1

0,0333 0,116 (0,003) 23,7 (5,2) 14,4 (6,4)

3

0,0333 0,165 (0,07) 27,5 (3,5) 39,0 (6,0)

54

0,0333 0,184 (0,07) 45,5 (6,3) 85,0 (7,7)

1

0,05 0,200 (0,155) 34,2 (8,0) 30,7 (8,9)

3

0,05 0,203 (0,07) 48,1-(10,3) 64,5 (21,2)

54

0,05 0,185 (0,07) 68,3 (12,2) 101-(15)

Se exponen los valores medios. Las desviaciones estandar se dan entre parentesis. T max = Tiempo de aparicion de Cmax. Cmax, = concentracion maxima en plasma. AUCg-t = Area bajo la curva de tiempo de concentracion plasmatica entre 0 y t.

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Los resultados mostraron que el compuesto se absorbe rapidamente despues de la dosificacion al ser el promedio Tmax de entre aproximadamente 0,138 y 0,203 h despues de la dosificacion. La exposicion, representada por Cmax as! como AUC, se incremento con niveles de dosis crecientes de bortezomib. La inhibicion de proteasoma maxima se observo a aproximadamente 0,5 h despues de la dosificacion. La inhibicion del proteasoma tambien se aumento con dosis crecientes de bortezomib.

Toxicidad similar sistemica en GI, medula osea, sistema linfatico, rinon se observo tanto en la administracion quincenal (TOX7345) como diaria (TOX8394). Ademas, neuropatla similar se observo en ambos estudios. La tolerancia local era muy buena tanto en ambos estudios de toxicidad. La exposicion diaria (AUC) era menor en la dosificacion una vez al dla a aproximadamente 0,6 mg/m2 que la dosificacion cada dos semanas a aproximadamente 1,2 mg/m2. Sin embargo, la exposicion semanal acumulativa era mayor en el regimen de dosificacion una vez al dla que el regimen de dosificacion cada dos semanas.

La inhibicion maxima de proteasoma (Emax) era similar a aproximadamente 0,6 mg/m2 y 1,2 mg/m2 variando entre aproximadamente 65 y 73%. El AUE era menor para aproximadamente 0,6 mg/m2 (AUE0-24h: 900 %.h) en la dosificacion una vez al dla que para aproximadamente 1,2 mg/m2 (AUE0-72h: 1500 %.h) en la dosificacion bisemanal. El AUE semanal acumulado era superior para la programacion diaria: 4.500 frente a 3.000 %.h. En el programa de dosificacion diaria, un perlodo de descanso 2 dlas parecla ser adecuado para la recuperacion farmacodinamica, sin acumulacion de la inhibicion de proteasoma.

A pesar de esta exposicion farmacodinamica mas alta en el programa de dosificacion diaria, la toxicidad sistemica era similar para el programa de dosificacion una vez al dla a aproximadamente 0,6 mg/m2 que para los de la dosificacion cada dos semanas a aproximadamente 1,2 mg/m2.

EJEMPLO 4. FARMACODINAMICA PRECLINICA DE INHIBICION DEL PROTEASOMA

Para cada estudio, se determino la actividad de proteasoma 20S en la sangre entera, como se describio en Lightcap, Clin. Chem., 46:673 (2000). La actividad quimotrlptica se ensayo midiendo la velocidad a la que el proteasoma hidroliza un enlace amida en un sustrato polipeptido etiquetado por pequena fluorescencia. La actividad especlfica (Spa) se normalizo a la cantidad de protelna presente en el lisado.

Para cada ciclo de tratamiento, el Spa de cada punto de tiempo se calculo como un porcentaje del valor de llnea de base respectivo de cada animal individual. El tiempo a efecto inhibidor maximo (Tmax), el efecto inhibidor maximo (Emax) se determino por inspection visual de los datos. El area bajo la curva de efecto (AUE) se estimo por la regla trapezoidal lineal.

En ambos estudios de evaluation de seguridad, las muestras de plasma se analizaron mediante un metodo LC/MS/MS validado con un llmite de cuantificacion inferior de aproximadamente 0,5 ng/ml.

Los parametros farmacodinamicos de bortezomib en la dosificacion cada dos semanas y los reglmenes de dosificacion una vez al dla se resumen en las Tablas 4 y 5, respectivamente. Ademas, el porcentaje de la inhibicion del proteasoma en la sangre entera por bortezomib en la dosificacion cada dos semanas y los reglmenes de dosificacion una vez al dla se muestran en las Figuras 3 y 4, respectivamente.

Los resultados indican que no hubo diferencias de genero en la inhibicion del proteasoma mediado por bortezomib de la actividad del proteasoma 20S. Los resultados tambien indican que la inhibicion maxima se produjo en promedio aproximadamente a 0,5 h despues de la administracion subcutanea en ambos estudios.

En cada experimento, la inhibicion de inhibicion especlfica de proteasoma 20S estaba relacionada con la dosis. Para el regimen de dosificacion cada dos semanas se observo la inhibicion mas fuerte para el nivel de 0,1 mg/kg dosis (Emax = 74%). Para el programa de dosificacion diaria, se observo la mayor inhibicion a nivel de dosis de 0,05 mg/kg (Emax = 73%). Para el grupo de dosis semanal (0,166 mg/kg) se observo una inhibicion maxima del 78%.

En general, el curso de los perfiles de inhibicion como una funcion del tiempo despues de la dosificacion fue comparable entre los grupos dosificados por bortezomib en cada experimento y tambien entre los experimentos. Sin embargo, habla una tendencia para un retorno mas lento de la inhibicion del proteasoma de nuevo a la llnea de base para los niveles de dosis mas altos, en particular, el nivel de dosis 0,166 mg/kg. Para el regimen de dosificacion cada dos semanas (TOX7345), la inhibicion del proteasoma regreso a los valores de llnea base entre 24 y 48 h despues de la dosificacion para todos los grupos.

En el estudio de dosificacion diaria (TOX8394), la actividad de proteasoma 20S determinada en varios dlas antes de la dosificacion mostraron que no habla ninguna indication para la inhibicion del proteasoma 20S restante al final de vacaciones de medicamentos de 2 dlas.

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La inhibicion maxima del proteasoma (Emax) en la sangre era similar en 0,05 mg/kg (0,6 mg/m2) de dosificacion diaria y dosificacion cada dos semanas de 0,1 mg/kg (1,2 mg/m2) (entre la inhibicion 65 y 73%). Aunque el area bajo la curva de efecto (AUE) era menor para 0,05 mg/kg que para 0,1 mg/kg entre cada intervalo de dosificacion respectivo, la AUIE acumulativa (calculada sobre 1 semana) era aproximadamente 50% mas alta para el programa de tratamiento diario que para la administracion cada dos semanas.

Tabla 4: Parametros farmacodinamicos de bortezomib en sangre entera calculados despues de administracion subcutanea unica (dla 1) y repetida (dlas 32, 74 a 0,075 y 0,1 mg/kg o dlas 50 y 78 en 0,166 mg/kg) de bortezomib en 0,075, 0,1 y 0,166 mg/kg en un regimen de dosificacion cada dos semanas (0,075 y 0,1 mg/kg) o semanal (0,166 mg/kg) (TOX7345) en monos cynomolgus.

Dla

Dosis (mg/kg) T max (h) Emax (%) AUE 0-24h (% tiempo de inhibicion)

1

0,075 0,5 63 585 (87)

32

0,075 0,5 68 1086 (158)

74

0,075 0,5 67 1111 -(116)

1

0,1 0,5 74 926 (99)

32

0,1 0,5 71 1454 (201)

74

0,1 0,5 72 1584 (210)

1

0,166 1 78 931-(124)

50

0,166 0,5 78 2152 (222)

78

0,166 1 77 1468 (219)

Se exponen los valores medios. Desviaciones estandar se dan entre parentesis. T max = Tiempo de ocurrencia de Emax. Emax = Efecto maximo (= % de inhibicion del proteasoma). AUE0-t = Area bajo la curva de efecto entre 0 y t.

Tabla 5: los parametros farmacodinamicos de bortezomib en sangre entera en el dla 3 y el dla 54 de una administracion subcutanea de bortezomib en 0,0166, 0,0333 y 0,05 mg/kg en un regimen de dosificacion diario (5/7 dlas) durante 8 semanas consecutivas (TOX8394) en monos cynomolgus.

Dla

Dosis (mg/kg) T max (h) Emax (%) AUE 0-24h (% tiempo de inhibicion)

3

0,0166 0,5 48 603 (77)

54

0,0166 0,5 38 481-(103)

3

0,0333 0,5 58 685 (32)

54

0,0333 0,5 62 895 (125)

3

0,05 0,5 65 802 (67)

54

0,05 0,5 73 1039 (114)

Se exponen los valores medios.

Desviaciones estandar se dan entre parentesis.

T max = Tiempo de ocurrencia de Emax.

Emax = Efecto maximo (= % de inhibicion del proteasoma). AUEg-t = Area bajo la curva de efecto entre 0 y t.

5

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15

20

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30

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40

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50

55

60

65

A pesar de la mayor dosis acumulativa y la inhibicion del proteasoma acumulativa, el perfil de seguridad fue comparable entre y dosificacion cada dos semanas y el regimen de dosificacion una vez al dla. Los estudios tambien demostraron que la neuropatla periferica y la tolerancia local fueron similares en ambos reglmenes de dosificacion en los animales ensayados.

EJEMPLO 5. ESTUDIOS CLINICOS

Bortezomib se administra por via subcutanea una vez al dla en un horario de aplicacion durante 5 dlas y no aplicacion durante 2 dlas a pacientes con tumores solidos avanzados o metastasicos, ya sea solos o en combinacion con radioterapia. La dosificacion diaria comienza el Dla 1 de Curso 1, y cada curso es de 28 dlas consecutivos. La dosis administrada es de aproximadamente 0,1, 0,2, 0,3, 0,4, 0,5, 0,6, 0,7, 0,8, 0,9, 1,0, o 1,1 mg/m2.

La respuesta tumoral se determina para todos los sujetos con lesiones medibles utilizando los criterios de la OMS modificados para la respuesta tumoral. Las evaluaciones se realizan cada 2 meses o con mayor frecuencia si se indica.

Por lo tanto, aunque se han mostrado, descrito y senalado caracterlsticas novedosas fundamentales de la invencion aplicadas a una forma de realizacion preferida de la misma, se entendera que diversas omisiones y sustituciones y cambios en la forma y detalles de los dispositivos ilustrados, y en su funcionamiento, pueden realizarse por los expertos en la tecnica. Se pretende, por lo tanto, estar limitado solamente como se indica por el alcance de las reivindicaciones adjuntas.

Claims (12)

1. 5

   10

   15

   20

   25

   30

   35

   40

   45

   50

   55

   60

   65

   REIVINDICACIONES

   1. Bortezomib para su uso en un metodo para tratar cancer en un paciente, que comprende la administracion a dicho paciente de multiples dosis de dicho bortezomib, en el que dichas dosis multiples se administran al menos cuatro dlas a la semana durante al menos dos semanas.
2. 2. Bortezomib para uso en un metodo de la reivindicacion 1, donde dicho bortezomib se administra al menos cinco dlas a la semana, o en el que dicho bortezomib se administra al menos seis dlas a la semana, o donde dicho bortezomib se administra al menos una vez al dla.
3. 3. Bortezomib para uso en un metodo de la reivindicacion 1, en donde dichas dosis multiples se administran al menos una vez cada 48 horas.
4. 4. Bortezomib para uso en un metodo de la reivindicacion 3, en el que dichas dosis multiples se administran al menos una vez cada 24 horas.
5. 5. Bortezomib para uso en un metodo de una cualquiera de las reivindicaciones 14, donde dichas dosis multiples se administran durante al menos cuatro semanas.
6. 6. Bortezomib para uso en un metodo de una cualquiera de las reivindicaciones 15, donde dicho bortezomib se administra por via intravenosa, subcutanea, parenteral, intramuscular, intradermica o transdermica.
7. 7. Bortezomib para uso en un metodo de una cualquiera de las reivindicaciones 16, donde dicho cancer es un tumor solido.
8. 8. Bortezomib para uso en un metodo de la reivindicacion 7, donde el tumor solido se selecciona del grupo que consiste en tumores de la piel, pulmon, bronquios, prostata, mama, pancreas, glandula suprarrenal, intestino delgado, intestino grueso, colon, recto, tiroides, estomago, hlgado, conducto biliar, rinon, pelvis renal, vejiga urinaria, utero, cuello uterino, ovario, esofago, cerebro, cabeza y cuello, cavidad bucal, faringe y laringe.
9. 9. Bortezomib para uso en un metodo de una cualquiera de las reivindicaciones 18, que comprende ademas la administracion a dicho paciente de un segundo tratamiento contra el cancer.
10. 10. Bortezomib para uso en un metodo de la reivindicacion 9, donde dicho segundo tratamiento contra el cancer se selecciona del grupo que consiste en la terapia con anticuerpos, terapia hormonal, radiacion, cirugla de quimioterapia, terapia genica, inmunoterapia u otros tratamientos para la prevencion, tratamiento o mejora de cancer.
11. 11. Bortezomib para uso en un metodo de la reivindicacion 10, donde dicha quimioterapia se selecciona del grupo constituido por un agente antiangiogenico, un agente antitumoral, un agente citotoxico, y un inhibidor de la proliferacion celular.
12. 12. Bortezomib para uso en un metodo de una cualquiera de las reivindicaciones 111, donde dicho cancer es refractario o recurrente.