ES2621379T3 - Compuestos para la unión a la glicoproteína IIb/IIIa específica de las plaquetas y su utilización para la formación de imágenes de trombos - Google Patents
Compuestos para la unión a la glicoproteína IIb/IIIa específica de las plaquetas y su utilización para la formación de imágenes de trombos Download PDFInfo
- Publication number
- ES2621379T3 ES2621379T3 ES12750331.6T ES12750331T ES2621379T3 ES 2621379 T3 ES2621379 T3 ES 2621379T3 ES 12750331 T ES12750331 T ES 12750331T ES 2621379 T3 ES2621379 T3 ES 2621379T3
- Authority
- ES
- Spain
- Prior art keywords
- piperidin
- oxopropyl
- ferc
- group
- pyridin
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K51/00—Preparations containing radioactive substances for use in therapy or testing in vivo
- A61K51/02—Preparations containing radioactive substances for use in therapy or testing in vivo characterised by the carrier, i.e. characterised by the agent or material covalently linked or complexing the radioactive nucleus
- A61K51/04—Organic compounds
- A61K51/08—Peptides, e.g. proteins, carriers being peptides, polyamino acids, proteins
- A61K51/088—Peptides, e.g. proteins, carriers being peptides, polyamino acids, proteins conjugates with carriers being peptides, polyamino acids or proteins
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D211/00—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings
- C07D211/04—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
- C07D211/06—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
- C07D211/36—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
- C07D211/60—Carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61J—CONTAINERS SPECIALLY ADAPTED FOR MEDICAL OR PHARMACEUTICAL PURPOSES; DEVICES OR METHODS SPECIALLY ADAPTED FOR BRINGING PHARMACEUTICAL PRODUCTS INTO PARTICULAR PHYSICAL OR ADMINISTERING FORMS; DEVICES FOR ADMINISTERING FOOD OR MEDICINES ORALLY; BABY COMFORTERS; DEVICES FOR RECEIVING SPITTLE
- A61J1/00—Containers specially adapted for medical or pharmaceutical purposes
- A61J1/05—Containers specially adapted for medical or pharmaceutical purposes for collecting, storing or administering blood, plasma or medical fluids ; Infusion or perfusion containers
- A61J1/06—Ampoules or carpules
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K49/00—Preparations for testing in vivo
- A61K49/04—X-ray contrast preparations
- A61K49/0433—X-ray contrast preparations containing an organic halogenated X-ray contrast-enhancing agent
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K51/00—Preparations containing radioactive substances for use in therapy or testing in vivo
- A61K51/02—Preparations containing radioactive substances for use in therapy or testing in vivo characterised by the carrier, i.e. characterised by the agent or material covalently linked or complexing the radioactive nucleus
- A61K51/04—Organic compounds
- A61K51/041—Heterocyclic compounds
- A61K51/044—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine, rifamycins
- A61K51/0455—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine, rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
- C07D401/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings
- C07D401/04—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings directly linked by a ring-member-to-ring-member bond
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
- C07D401/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings
- C07D401/06—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings linked by a carbon chain containing only aliphatic carbon atoms
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
- C07D401/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing three or more hetero rings
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
- C07K5/06—Dipeptides
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Optics & Photonics (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Hematology (AREA)
- Hydrogenated Pyridines (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Plural Heterocyclic Compounds (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
Abstract
Compuestos de Fórmula III:**Fórmula** en los que R3 se selecciona de entre el grupo que consiste en H, F, CF3, COR9, COOR10, SOR10, SO2R10, CN y NO2; R7 se selecciona de entre el grupo que consiste en Y, -O(CH2)n-Y, -(OCH2CH2)m-Y, Z, -OCH2-Z; -CH2-CH2- Z, -CH>=CH-Z y -CºC-Z; X se selecciona de entre CH o N; Y se selecciona de entre 18F o F; R9 es hidrógeno o alquilo (C1-C6); R10 es alquilo (C1-C6); Z es un grupo**Fórmula** en el que * indica el átomo de conexión de Z; R5 se selecciona de entre el grupo que consiste en H, CF3, COR9, COOR10, SOR10, SO2R10, CN y NO2; R8 se selecciona de entre el grupo que consiste en Y, -O(CH2)n-Y y -(OCH2CH2)m-Y; n es 1-3; y m es 2-3; con la condición de que si R7 presenta el significado de Y, R3 presente el significado de CF3, COR9, COOR10, SOR10, SO2R10, CN o NO2, y con la condición de que si R8 presenta el significado de Y, R5 presente el significado de CF3, COR9, COOR10, SOR10, SO2R10, CN o NO2; incluyendo isómeros E y Z y diastereómeros, mezclas de los mismos, y cualquier sal farmacéuticamente aceptable o complejo de los mismos.
Description
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
60
65
DESCRIPCION
Campo de la invencion
La presente invencion se refiere a nuevos compuestos que contienen fluor, compuestos marcados con 19F y los marcados con 18F correspondientes, procedimientos para su preparacion, los productos intermedios de la sfntesis, su utilizacion como agentes de diagnostico, especialmente para la formacion de imagenes de trombos. La presente invencion se refiere a los agentes de tomograffa de emision de positrones (PET) y reactivos precursores asociados, y a metodos para producir dichos agentes radiomarcados para la formacion de imagenes de trombos en un cuerpo de mamffero. Mas particularmente, la invencion se refiere a antagonistas de glicoproteina IIb/IIIa de union especffica de alta afinidad, no peptfdicos, pequenos, para la formacion de imagenes de trombos.
Antecedentes
1. Introduccion
El infarto del miocardio (MI), apoplejfa, ataques isquemicos transitorios (TIA) y embolia pulmonar (PE) son las principales causas de morbimortalidad a nivel mundial. Estos eventos clfnicos potencialmente mortales son provocados principalmente por trombos, que pueden ubicarse en diferentes vasos diseminados sobre todo el cuerpo y pueden ser de diferente tamano y composicion. El origen de la apoplejfa o TIA puede ser, por ejemplo, un trombo en la auricula izquierda (LA) del corazon o en una de las grandes arterias entre el corazon y el cerebro como la arteria carotida. En el caso de PE, la causa puede ser de una trombosis venosa, a menudo situada en la parte inferior de las piernas.
En un trombo en crecimiento, la etapa final habitual de la agregacion plaquetaria se caracteriza por la union de la glicoprotefna IIb/IIIa activada a fibrinogeno de la sangre, dando como resultado una reticulacion en el interior de las plaquetas. El diseno y desarrollo de inhibidores de la glicoprotefna IIb/IIIa (Scarborough R.M., Gretler D.D., J. Med. Chem. 2000, 43, 3453-3473) ha sido de considerable interes en la investigacion farmacologica con respecto a la actividad antiplaquetaria y antitrombotica.
Sin embargo, los profesionales sanitarios necesitan no solamente compuestos que previenen la trombosis en marco de cuidado agudo, sino tambien un metodo satisfactorio para formar imagenes de trombos hasta un tamano de 1 mm3. Mas particularmente, la formacion de imagenes de los trombos es importante debido a que las aplicaciones clfnicas tales como la intervencion trombolftica requieren que se identifique el sitio de formacion del trombo y permite la monitorizacion de los efectos de la terapia. De este modo, una formacion de imagenes de un trombo puede ayudar a evitar aplicaciones profilacticas innecesarias y con ello los tratamientos anticoagulantes que estan asociados a riesgos (por ejemplo, hemorragias graves debidas a una capacidad de coagulacion reducida).
La poblacion de pacientes que se puede beneficiar de tal procedimiento de diagnostico es enorme. Segun “Heart disease and Stroke Statistics - 2010 Update” de la American Heart Association, 17,6 millones de personas sufrieron cardiopatfa isquemica solamente en los Estados Unidos de America. Cada ano, alrededor de 785.000 americanos tendran un nuevo ataque coronario, y aproximadamente 470.000 tendran un ataque recurrente. Cada ano, alrededor de 795.000 pacientes experimentan una nueva apoplejfa o una apoplejfa recurrente. Alrededor de 610.000 de estos son ataques por primera vez. De todas las apoplejfas, el 87% son isquemicas, la mayorfa de ellas debidas a una causa tromboembolica (Lloyd-Jones, D. et al., Circulation, 2010, 121(7): p. e46-215). Se ha estimado que la incidencia de ataque isquemico transitorio (TIA) en los Estados Unidos de America es aproximadamente 200.000 a 500.000 por ano, con una prevalencia poblacional de 2,3%, que se traduce en alrededor de 5 millones de personas (Easton, J.D. et al., Stroke, 2009, 40(6): p. 2276-2293). Los individuos que tienen un TIA tienen un riesgo de apoplejfa durante 90 dfas de 3,0% a 17,3%, y un riesgo de apoplejfa durante 10 anos de 18,8%. El riesgo de apoplejfa durante 10 anos, de infarto de miocardio, o de muerte vascular combinado es incluso de 42,8% (Clark, T.G., M.F.G. Murphy, y P.M. Rothwell, Journal of Neurology, Neurosurgery & Psychiatry, 2003. 74(5): p. 577-580). La formacion de imagenes esta a la vanguardia en la identificacion del trombo. Actualmente, la formacion de imagenes de trombos se basa en diferentes modalidades, dependiendo del territorio vascular. El ultrasonido de la carotida se usa para la busqueda de trombo carotideo; la ecocardiograffa transesofagica (TEE) busca coagulo de la camara cardfaca; el ultrasonido busca trombosis venosa profunda, y CT se ha convertido en el patron oro para la deteccion de PE.
2. Descripcion de la tecnica anterior, problema a resolver y su solucion
A pesar del exito de estas tecnicas, continua existiendo una fuerte necesidad de una solucion de formacion de imagenes molecular para la deteccion y monitorizacion de un trombo: en primer lugar, hay ciertos territorios vasculares que estan desatendidos. Por ejemplo, a pesar de los mejores esfuerzos para la formacion de imagenes, aproximadamente 30% a 40% de las apoplejfas isquemicas son “criptogenicas”, esto es, de causa indefinida, o en
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
60
65
otras palabras, nunca se identifica la fuente de la tromboembolia (Guercini, F. et al., Journal of Thrombosis and Haemostasis, 2008. 6(4): p. 549-554). Las fuentes subyacentes de la apoplejfa criptogenica incluyen aterosclerosis en el arco aortico o en las arterias intracraneales. Se piensa que la ruptura de la placa en el arco u otros vasos principales, en particular, es una fuente importante de apoplejfas criptogenicas, y puede ser difmil de detectar con metodos habituales. Datos de ensayos clmicos recientes procedentes de estudios de ecocardiograffa transesofagica (TEE) mostraron que la presencia de una pared engrosada del vaso en el arco aortico no era predictiva de la apoplejfa isquemica, aunque las placas ulceradas del arco aortico estan asociadas con apoplejfa criptogenica. Un enfoque de formacion de imagenes molecular dirigido a los trombos podna identificar potencialmente el coagulo en presencia de placa aterosclerotica. Finalmente, existe la necesidad de un enfoque en el que se pudiese usar una unica modalidad para identificar un trombo a lo largo del cuerpo. Por ejemplo, en un seguimiento de TIA o de apoplejfa, actualmente se requieren multiples examenes para buscar la fuente del embolo (Ciesienski, K.L. y P. Caravan, Curr Cardiovasc Imaging Rep., 20l0. 4(1): p. 77-84).
Como se ha mencionado anteriormente, la aplicacion terapeutica de inhibidores de la glicoprotema Ilb/IIIa (Scarborough R.M., Gretler D.D., J. Med. Chem. 2000, 43, 3453-3473) ha sido de considerable interes en el pasado. Mientras tanto, existen comercialmente disponibles tres antagonistas de la glicoprotema IIb/IIIa: un anticuerpo recombinante (Abciximab), un heptapeptido cfclico (Eptifibatid), y un inhibidor sintetico no peptfdico (Tirofiban). Tirofiban (nombre comercial AGGRASTAT) pertenece a la clase de sulfonamidas, y es la unica molecula pequena sintetica entre las sustancias farmaceuticas mencionadas anteriormente. Duggan et. al., 1994, patente US n° 5.292.756, describieron un antagonista sulfonamndico del receptor de fibrinogeno como agente terapeutico para la prevencion y tratamiento de enfermedades causadas por formacion de trombos.
Un intento para satisfacer la necesidad de formacion de imagenes de trombos esta representado por el apticida trazador de SPECT (AcuTect®). El apticida es un peptido marcado con Tc-99m que se une espedficamente a un receptor de GPIIb/IIIa, y se usa para la formacion de imagenes de trombos en un cuerpo de marnffero. Dean et al., 1996, patente US n° 5.508.020, describieron peptidos radiomarcados, metodos y kits para obtener tales peptidos para formar imagenes de sitios en un cuerpo de marnffero marcados con tecnecio-99m via restos que se unen a Tc- 99m. Dean y Lister-James describen peptidos que se unen espedficamente a receptores de GPIIb/IIIa sobre la superficie de las plaquetas activadas (patente U.S. n° 5.645.815, patente US n° 5.830.856 y patente US n° 6.028.056). El apticida fue aprobado para la deteccion de trombosis venosa profunda. Se encontro que la resolucion alcanzada por el peptido marcado con tecnecio no es satisfactoria debido a la union no espedfica y a un fondo muy elevado.
En la tecnica anterior se han descrito nuevos antagonistas no peptfdicos y muy espedficos de glicoprotema IIb/IIIa (Damiano et. al., Thrombosis Research 2001 104, 113-126; Hoekstra, W.J., et al., J. Med. Chem., 1999, 42, 52545265). Se sabe que estos compuestos son antagonistas de GPIIb/IIIa, son eficaces como agentes terapeuticos con actividad antiplaquetaria y antitrombotica (veanse los documentos WO95/08536, WO96/29309, WO97/33869, WO9701/60813, patente US n° 6.515.130). Tambien se propone el uso potencial de antagonistas de glicoprotema IIb/IIIa como agentes de contraste (vease el documento Us 2007/0189970 A1). Sin embargo, no se ha demostrado la formacion de imagenes de trombos con estos compuestos.
Los compuestos radiomarcados con F-18, y sus precursores, descritos en esta invencion, muestran sorprendentemente una estabilidad metabolica elevada, una baja union a protemas y una eliminacion rapida. Se ha demostrado con exito una formacion de imagenes de PET no invasivo de trombos muy pequenos in vivo con un trazador marcado con 18F.
Las imagenes muestran senales fuertes en trombos arteriales y venosos. Contrariamente al apticida (patente U.S. n° 5.645.815, patente US n° 5.830.856 y patente US n° 6.028.056, no hay ningun fondo visible en todo el cuerpo excepto en organos secretores como el tugado y el rinon. Lo mas sorprendente, incluso pueden se detectar trombos muy pequenos (grosor < 1 mm) y muestran una senal brillante en la imagen. Hasta ahora no se ha descrito la deteccion de tales trombos pequenos. Los trombos mostrados con el apticida tienen un tamano de 89 mas/menos 26 mg [media mas/menos SEM] (Lister-James, J., et al., J Nucl Med, 1996. 37(5): p. 775-81).
La formacion de imagenes de trombos pequenos es particularmente importante con respecto a enfermedades tromboembolicas tales como infarto de miocardio, embolia pulmonar, apoplejfa y ataques isquemicos transitorios. Ademas, se puede usar un marcador de PET sensible para el trombo para la monitorizacion habitual de la salud de pacientes con riesgo cardiovascular, o el diagnostico de enfermedades potencialmente mortales tales como aneurisma aortico, hipertension pulmonar tromboembolica cronica (CETPH), fibrilacion auricular y trombosis coronaria.
La relacion de coagulo a sangre in vivo de los compuestos descritos se encuentra en un intervalo elevado, especialmente deseable, que es una propiedad que nunca se ha observado anteriormente. De hecho, es la propiedad decisiva de los nuevos compuestos que es responsable de la clara ventaja con respecto a los compuestos actuales del estado de la tecnica, y permite que se administre a un paciente potencial una dosis radiactiva mucho menor (solamente 15 MBq necesarios para monos, que es al menos 20 veces menor que la dosis usada en el documento US 2007/0189970 A1 de la tecnica anterior mas proxima).
5
10
15
20
25
30
35
Sumario
La presente invencion se refiere a compuestos que se unen a glicoproteina Ilb/IIIa y que se pueden usar como radiotrazadores para formacion de imagenes de diagnostico, en particular tomografia de emision positronica (PET), de trombos. Los compuestos descritos permiten la formacion de imagenes de trombos arteriales y venosos con una sensibilidad que nunca se ha observado anteriormente y que es suficiente para formar imagenes de los trombos mas pequenos en el intervalo del miligramo de un solo dfgito. En comparacion con la tecnica anterior, los compuestos descritos permiten obtener imagenes basicamente sin fondo en tejidos y organos relevantes y la administracion de dosis radioactivas en un intervalo mucho menor.
Descripcion
• La presente invencion proporciona nuevos compuestos de Formula I, Formula II y Formula III.
• La invencion proporciona ademas una composicion radiofarmaceutica de compuestos de Formula III o sales farmaceuticamente aceptables de un acido o base inorganicos u organicos de las mismos, hidratos, complejos y solvatos de los mismos, y opcionalmente un vehfculo, diluyente, adyuvante o excipiente farmaceuticamente aceptable.
• Los compuestos de Formula III pueden existir como iones bipolares. Se contempla que todas las formas de los compuestos, incluyendo acido libre, base libre e iones bipolares, estan dentro del alcance de la presente invencion. Es bien conocido en la tecnica que los compuestos que contienen tanto grupos amino como carboxilo existen a menudo en equilibrio con sus formas bipolares. De este modo, cualquiera de los compuestos descritos en la presente memoria que contengan, por ejemplo, tantos grupos amino como carboxilo, tambien incluye la referencia a sus iones bipolares correspondientes. •
• La presente invencion tambien proporciona procedimientos para elaborar compuestos de Formula III que contienen 18F:
Metodo directo:
- Radiomarcando con 18F compuestos de Formula I para obtener compuestos de Formula II, y
- Escindiendo grupos protectores de los compuestos de Formula II para obtener los compuestos de Formula III.
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
Metodo indirecto:
- Hacer reaccionar compuestos de Formula I con una unidad estructural (“building block”) radiomarcada con
18f, y
- Escindir grupos protectores para obtener compuestos de Formula III.
• La presente invencion tambien proporciona procedimientos para elaborar compuestos de Formula III que contienen 19F:
Metodo 1:
- Fluoracion con 19F de compuestos de Formula I para obtener compuestos de la Formula II,
- Escindir grupos protectores de los compuestos de Formula II para obtener compuestos de Formula III. Metodo 2:
- Hacer reaccionar el compuesto de Formula I con un reactivo de fluor 19F o una unidad estructural fluorada
con 19F,
- Escindir grupos protectores para obtener compuestos de Formula III.
Descripcion detallada
Antes de la descripcion detallada, se enfatizaron los compuestos principales de Formula III. El aspecto principal y el tercer aspecto de la presente invencion se refieren a compuestos de Formula III:
en la que
R3 es H, F, CF3, CN o NO2;
R7 es Y, -O(CH2)n-Y, -(OCH2CH2)m-Y, Z, -OCH2-Z; -CH2-CH2-Z, -CH=CH-Z o -C=C-Z; X es CH o N;
Y es 18F o F;
Z es un grupo
en el que * indica el atomo de conexion de Z;
R5 es H, CF3, CN o NO2;
R8 es Y, -O(CH2)n-Y o -(OCH2CH2)m-Y; n es 1-3; y m es 2-3,
incluyendo los isomeros E y Z y diastereomeros, mezclas de los mismos, y cualquier sal farmaceuticamente aceptable o complejo de los mismos.
El primer aspecto de la presente invencion se refiere a compuestos de Formula I:
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
en la que
R1 es hidrogeno o un grupo protector de amina;
R2 es hidrogeno o un grupo protector de carboxilo; en la que al menos uno de R1 y R2 no es H;
R3 se selecciona de entre el grupo que consiste en H, F, CF3, COR9, COOR10, SOR10, SO2R10, CN y NO2; preferentemente, R3 se selecciona de entre el grupo que consiste en H, F, CF3, CN, y NO2;
R4 se selecciona de entre el grupo que consiste en OH, Halogeno, -NO2, -N+(Me)3(W'), -I+R11(W'), -O(CH2)n-LG, - (OCH2CH2)m-LG, Q, -OCH2-Q; -CH2-CH2-Q, -CH=CH-Q y -C=C-Q; preferentemente, R4 se selecciona de entre el grupo que consiste en OH, Halogeno, -N+(MeHW'), -O(CH2)n-LG, -(OCH2CH2)m-LG, Q, -OCH2-Q; -CH2-CH2-Q, - CH=CH-Q y -CEC-Q;
X se selecciona de CH o N;
LG es un grupo saliente;
R9 es hidrogeno o alquilo (C1-C6); preferentemente hidrogeno o alquilo (C1-C4), mas preferentemente hidrogeno, metilo, etilo o ferc-butilo;
R10 es alquilo (C1-C6); preferentemente alquilo (C1-C4), mas preferentemente metilo, etilo o ferc-butilo;
R11 se selecciona de entre el grupo que consiste en fenilo, (4-metil)fenilo, (4-metoxi)fenilo, 2-furanilo y 2-tienilo; preferentemente, R11 se selecciona de entre el grupo que consiste en (4-metoxi)fenilo y 2-tienilo;
W- se selecciona de entre el grupo que comprende CF3(S(O)2O', anion yoduro, anion bromuro, y CF3C(O)O-; preferentemente, W se selecciona de entre el grupo CF3(S(O)2O', anion bromuro y CF3C(O)O-;
Q es un grupo
en el que * indica el atomo de connexion de Q;
R5 se selecciona de entre el grupo que consiste en H, CF3, COR9, COOR10, SOR10, SO2R10, CN y NO2; preferentemente, R5 se selecciona de entre el grupo que consiste en H, CF3, CN, y NO2
R6 se selecciona de entre el grupo que consiste en OH, Halogeno, -NO2, -N+(Me)3(W-), -I+R11(W-), -O(CH2)n- LG y -(OCH2CH2)m-LG; preferentemente, R6 se selecciona de entre el grupo que consiste en OH, Halogeno, - N+(Me)3(W-), -O(CH2)n-LG y -(OCH2CH2)m-LG;
n es 1-3; y m es 2-3;
con la condicion de que si R4 tiene el significado de Halogeno, -NO2, -N+(Me)3(W-) o -I+R11(W-), R3 tenga el significado de CF3, COR9, COOR10, SOR10, SO2R10, CN o NO2, y con la condicion de que si R6 tiene el significado de Halogeno, -NO2, -N+(MeHW') o -I+R11(W'), R5 tenga el significado de CF3, COR9, COOR10, SOR10, SO2R10, CN o NO2;
incluyendo isomeros E y Z y diastereomeros, mezclas de los mismos, y cualquier sal farmaceuticamente aceptable o complejo de los mismos.
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
Mas preferentemente, R1 es ferc-butiloxicarbonilo (BOC) o carbobenciloxi (Cbz).
Aun mas preferentemente, R1 es ferc-butiloxicarbonilo (BOC).
Preferentemente, R2 es un grupo protector de carboxilo seleccionado del grupo que comprende metilo, etilo, propilo, ferc-butilo, bencilo y p-metoxibencilo.
Mas preferentemente, R2 se selecciona de entre el grupo que comprende metilo y ferc-butilo.
Preferentemente, R1 es un grupo protector de nitrogeno y R2 es un grupo protector de carboxilo.
Mas preferentemente, R1 es ferc-butiloxicarbonilo (BOC) y R2 es metilo o ferc-butilo.
Preferentemente, X es N.
Preferentemente, R1 es ferc-butiloxicarbonilo (BOC), R2 es metilo o ferc-butilo, y X es N.
Preferentemente, LG es un grupo saliente seleccionado del grupo que comprende metilsulfoniloxi y (4- metilfenil)sulfoniloxi.
Mas preferentemente, LG es (4-metilfenil)sulfoniloxi.
En una forma de realizacion preferida, X es N y R3 es H y R4 es -O(CH2)n-LG.
En una forma de realizacion preferida, X es N y R3 es H y R4 es -O(CH2)n-LG y R1 es Boc y R2 es metilo o ferc-butilo y LG es metilsulfoniloxi o (4-metilfenil)sulfoniloxi.
Los compuestos de Formula I se definen por la formula general y/o la combinacion de las caracterfsticas preferidas como se definen anteriormente.
En una primera forma de realizacion, los compuestos de la Formula I se definen como diastereomeros individuales de Formula I-A; vease la estructura en la tabla A.
En una segunda forma de realizacion, los compuestos de la Formula I se definen como mezcla de los dos diastereomeros de Formula I-A y Formula I-B; vease la estructura en la tabla A.
Las caracterfsticas preferidas como se describen anteriormente se incorporan en la presente memoria para todas las formas de realizacion.
Tabla A: diastereomeros de Formula I
Los compuestos de Formula I-A y Formula I-B comprenden ademas sales farmaceuticamente aceptables de un acido o base inorganico u organico de los mismos, hidratos, complejos, y solvatos de los mismos, y opcionalmente un vehfculo, diluyente, adyuvante o excipientes farmaceuticamente aceptables.
Un compuesto preferido de Formula I es el Ejemplo 21
4-{3-[(3R)-3-({(7S)-3-metoxi-1-[3-(2-{[(4-metilfenil)sulfonil]oxi}etoxi)-fenil]-3-oxopropil}carbamoil)piperidin-1-il]-3- oxopropil}piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo
5
10
15
20
25
30
Otro compuesto preferido de Formula I es el Ejemplo 22
4-{3-[(3R)-3-({3-metoxi-1-[4-(2-{[(4-metilfenil)sulfonil]oxi}etoxi)fenil]-3-oxopropil}carbamoil)piperidin-1-il]-3- oxopropil}piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo
Otro compuesto preferido de Formula I es el Ejemplo 23
4-{3-[(3R)-3-({(7S)-3-ferc-butoxi-1-[4-(2-{[(4-metilfenil)sulfonil]oxi}etoxi)-fenil]-3-oxopropil}carbamoil)piperidin-1-il]-3- oxopropil}piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo
Otro compuesto preferido de Formula I es el Ejemplo 24
4-{3-[(3R)-3-({(7S)-3-metoxi-1-[5-(2-{[(4-metilfenil)sulfonil]oxi}etoxi)piridin-3-il]-3-oxopropil}carbamoil)piperidin-1-il]-3- oxopropil}piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo
Otro compuesto preferido de Formula I es el Ejemplo 25
4-{3-[(3R)-3-({(1S)-3-ferc-butoxi-1-[5-(2-{[(4-metilfenil)sulfonil]oxi}etoxi)-piridin-3-il]-3-oxopropil}carbamoil)piperidin-1- il]-3-oxopropil}piperidin-1 -carboxilato de ferc-butilo
Otro compuesto preferido de Formula I es el Ejemplo 26
5
10
15
20
25
30
4-{3-[(3R)-3-{[3-metoxi-1-{5-[4-(2-{[(4-metilfenil)sulfonil]oxi}etoxi)fenil]-piridin-3-il}-3-oxopropil]carbamoil}piperidin-1-il]- 3-oxopropil}piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo
Otro compuesto preferido de Formula I es el Ejemplo 27
4-{3-[(3R)-3-{[(7S)-3-ferc-butoxi-1-{5-[4-(2-{[(4-metilfenil)sulfonil]oxi}etoxi)-fenil]piridin-3-il}-3- oxopropil]carbamoil}piperidin-1-il]-3-oxopropil}piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo
Otro compuesto preferido de Formula I es el Ejemplo 28
4-{3-[(3R)-3-({1-[5-(4-cloro-3-cianofenil)piridin-3-il]-3-metoxi-3-oxopropil}-carbamoil)piperidin-1-il]-3- oxopropil}piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo
Otro compuesto preferido de Formula I es el Ejemplo 29
4-{3-[(3R)-3-{[(7S)-1-{5-[(3-bromo-4-cianobencil)oxi]piridin-3-il}-3-metoxi-3-oxopropil]carbamoil}piperidin-1-il]-3- oxopropil}piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo
Otro compuesto preferido de Formula I es el Ejemplo 30
4-{3-[(3R)-3-{[3-metoxi-1-{5-[3-(2-{[(4-metilfenil)sulfonil]oxi}etoxi)fenil]-piridin-3-il}-3-oxopropil]carbamoil}piperidin-1-il]- 3-oxopropil}piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo
5
10
15
20
25
Otro compuesto preferido de Formula I es el Ejemplo 31
4-{3-[(3R)-3-{[3-metoxi-1-{5-[2-(2-{[(4-metilfenil)sulfonil]oxi}etoxi)-fenil]piridin-3-il}-3-oxopropil]carbamoil}piperidin-1-il]- 3-oxopropil}piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo
Otro compuesto preferido de Formula I es el Ejemplo 32
4-{3-[(3R)-3-({1-[5-(4-cloro-3-nitrofenil)piridin-3-il]-3-metoxi-3-oxopropil}-carbamoil)piperidin-1-il]-3-oxopropil}piperidin- 1-carboxilato de ferc-butilo
Otro compuesto preferido de Formula I es el Ejemplo 33
4-{3-[(3R)-3-({1-[5-fluoro-4’-(2-{[(4-metilfenil)sulfonil]oxi}etoxi)bifenil-3-il]-3-metoxi-3-oxopropil}carbamoil)piperidin-1- il]-3-oxopropil}piperidin-1 -carboxilato de ferc-butilo
Otro compuesto preferido de Formula I es el Ejemplo 34
4-{3-[(3R)-3-{[(7S)-3-ferc-butoxi-1-(5-{[4-(2-{[(4-metilfenil)sulfonil]oxi}-etoxi)fenil]etinil}piridin-3-il)-3- oxopropil]carbamoil}piperidin-1-il]-3-oxopropil}-piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo
5
10
15
20
25
Otro compuesto preferido de Formula I es el Ejemplo 35
4-{3-[(3R)-3-{[(7S)-3-ferc-butoxi-1-(5-{[3-(2-{[(4-metilfenil)sulfonil]oxi}-etoxi)fenil]etinil}piridin-3-il)-3- oxopropil]carbamoil}piperidin-1-il]-3-oxopropil}-piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo
Otro compuesto preferido de Formula I es el Ejemplo 36
4-{3-[(3R)-3-{[(7S)-3-terc-butoxi-1-(5-{2-[4-(2-{[(4-metilfenil)sulfonil]oxi}-etoxi)fenil]etil}piridin-3-il)-3- oxopropil]carbamoil}piperidin-1-il]-3-oxopropil}-piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo
Otro compuesto preferido de Formula I es el Ejemplo 37
4-{3-[(3R)-3-{[(7S)-3-ferc-butoxi-1-(5-{2-[3-(2-{[(4-metilfenil)sulfonil]oxi}-etoxi)fenil]etil}piridin-3-il)-3- oxopropil]carbamoil}piperidin-1-il]-3-oxopropil}-piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo
Otro compuesto preferido de Formula I es el Ejemplo 2b
4-[3-((3R)-3-{[1-(4-hidroxifenil)-3-metoxi-3-oxopropil]carbamoil}piperidin-1-il)-3-oxopropil]piperidin-1-carboxilato
ferc-butilo
de
5
10
15
20
25
30
Otro compuesto preferido de Formula I es el Ejemplo 4e
4-{3-[(3R)-3-({(7S)-1-[3-hidroxifenil]-3-metoxi-3-oxopropil}carbamoil)-piperidin-1-il]-3-oxopropil}piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo
Otro compuesto preferido de Formula I es el Ejemplo 5e
4-{3-[(3R)-3-({(7S)-1-[5-(hidroxi)piridin-3-il]-3-metoxi-3-oxopropil}-carbamoil)piperidin-1-il]-3-oxopropil}piperidin-1- carboxilato de ferc-butilo
Otro compuesto preferido de Formula I es el Ejemplo 6a
4-{3-[(3R)-3-({1-[5-(3-hidroxifenil)piridin-3-il]-3-metoxi-3-oxopropil}-carbamoil)piperidin-1-il]-3-oxopropil}piperidin-1- carboxilato de ferc-butilo
Otro compuesto preferido de Formula I es el Ejemplo 7a
4-{3-[(3R)-3-({1-[5-(4-hidroxifenil)piridin-3-il]-3-metoxi-3-oxopropil}-carbamoil)piperidin-1-il]-3-oxopropil}piperidin-1- carboxilato de ferc-butilo
Otro compuesto preferido de Formula I es el Ejemplo 8d
5
10
15
20
25
30
4-{3-[(3R)-3-({1-[5-(2-hidroxifenil)piridin-3-il]-3-metoxi-3-oxopropil}-carbamoil)piperidin-1-il]-3-oxopropil}piperidin-1- carboxilato de ferc-butilo
Otro compuesto preferido de Formula I es el Ejemplo 17d
4-{3-[(3R)-3-{[(1-(5-fluoro-4’-hidroxibifenil-3-il)-3-metoxi-3-oxopropil]-carbamoil}piperidin-1-il]-3-oxopropil}piperidin-1- carboxilato de ferc-butilo
Otro compuesto preferido de Formula I es el Ejemplo 23b
4-{3-[(3R)-3-{[(1S)-3-ferc-butoxi-1-(4-hidroxifenil)-3-oxopropil]-carbamoil}piperidin-1-il]-3-oxopropil}piperidin-1- carboxilato de ferc-butilo
Otro compuesto preferido de Formula I es el Ejemplo 25e
4-{3-[(3R)-3-{[(1 S)-3-ferc-butoxi-1-(5-hidroxipiridin-3-il)-3-oxopropil]-carbamoil}piperidin-1 -il]-3-oxopropil}piperidin-1- carboxilato de ferc-butilo
Otro compuesto preferido de Formula I es el Ejemplo 27d
4-{3-[(3R)-3-({(7S)-3-ferc-butoxi-1-[5-(4-hidroxifenil)piridin-3-il]-3-oxopropil}carbamoil)piperidin-1-il]-3- oxopropil}piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo
5
10
15
20
25
30
Otro compuesto preferido de Formula I es el Ejemplo 34a
4-(3-{(3R)-3-[(3-ferc-butoxi-1-{5-[(4-hidroxifenil)etinil]piridin-3-il}-3-oxopropil)carbamoil]piperidin-1-il}-3- oxopropil)piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo
Otro compuesto preferido de Formula I es el Ejemplo 35a
4-{3-[(3R)-3-{[(7S)-3-terc-butoxi-1-{5-[(3-hidroxifenil)etinil]piridin-3-il}-3-oxopropil]carbamoil}piperidin-1-il]-3- oxopropil}piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo
Otro compuesto preferido de Formula I es el Ejemplo 36a
4-(3-{(3R)-3-[(3-ferc-butoxi-1-{5-[2-(4-hidroxifenil)etil]piridin-3-il}-3-oxopropil)carbamoil]piperidin-1-il}-3- oxopropil)piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo
Otro compuesto preferido de Formula I es el Ejemplo 37a
4-(3-{(3R)-3-[(3-terc-butoxi-1-{5-[2-(3-hidroxifenil)etil]piridin-3-il}-3-oxopropil)carbamoil]piperidin-1-il}-3- oxopropil)piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
El segundo aspecto de la presente invencion se refiere a compuestos de Formula II:
en la que
R1 es hidrogeno o un grupo protector de amina;
R2 es hidrogeno o un grupo protector de carboxilo; en la que al menos uno de R1 y R2 no es hidrogeno;
R3 se selecciona de entre el grupo que consiste en H, F, CF3, COR9, COOR10, SOR10, SO2R10, CN y NO2; preferentemente, R3 se selecciona de entre el grupo que consiste en H, F, CF3, CN, NO2;
R7 se selecciona de entre el grupo que consiste en Y, -O(CH2)n-Y, -(OCH2CH2)m-Y, Z, -OCH2-Z; -CH2-CH2-Z, - CH=CH-Z y -CEC-Z;
X se selecciona de CH o N;
Y se selecciona de 18F o F;
R9 es hidrogeno o alquilo (C1-C6); preferentemente hidrogeno o alquilo (C1-C4), mas preferentemente hidrogeno, metilo, etilo o ferc-butilo;
R10 es alquilo (C1-C6); preferentemente alquilo (C1-C4), mas preferentemente metilo, etilo o ferc-butilo; Z es un grupo
en el que * indica el atomo de conexion de
Z
R5 se selecciona de entre el grupo que consiste en H, CF3, COR9, COOR10, SOR10, SO2R10, CN y NO2; preferentemente, R5 se selecciona de entre el grupo que consiste en H, CF3, CN, NO2;
R8 se selecciona de entre el grupo que consiste en Y, -O(CH2)n-Y y -(OCH2CH2)m-Y;
n es 1-3;
y m es 2-3;
con la condicion de que si R7 tiene el significado de Y, R3 tenga el significado de CF3, COR9, COOR10, SOR10, SO2R10, CN o NO2 y
con la condicion de que si R8 tiene el significado de Y, R5 tenga el significado de CF3,COR9, COOR10, SOR10, SO2R10, CN o NO2;
incluyendo isomeros E y Z y diastereomeros, mezclas de los mismos, y cualquier sal farmaceuticamente aceptable o complejo de los mismos.
Preferentemente, R1 es un grupo protector de amina seleccionado del grupo que comprende ferc-butiloxicarbonilo (BOC), carbobenciloxi (Cbz) y 9-fluorenilmetiloxicarbonilo (FMOC).
Mas preferentemente, R1 es ferc-butiloxicarbonilo (BOC) o carbobenciloxi (Cbz).
Aun mas preferentemente, R1 es ferc-butiloxicarbonilo (BOC)
Preferentemente, R2 es un grupo protector de carboxilo seleccionado del grupo que comprende metilo, etilo, propilo, ferc-butilo, bencilo y p-metoxibencilo.
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
Mas preferentemente, R2 se selecciona de entre el grupo que comprende metilo y ferc-butilo.
Preferentemente, R1 es un grupo protector de nitrogeno y R2 es un grupo protector de carboxilo.
Mas preferentemente, R1 es ferc-butiloxicarbonilo (BOC) y R2 es metilo o ferc-butilo.
Preferentemente, X es N.
Preferentemente, R1 es ferc-butiloxicarbonilo (BOC), R2 es metilo o ferc-butilo, y X es N.
Preferentemente, Y es 18F.
Preferentemente, Y es F.
En una forma de realizacion preferida, X es N y R3 es H y R7 es -O(CH2)n-F.
En una forma de realizacion preferida, X es N y R3 es H y R7 es -O(CH2)n-18F.
En una forma de realizacion preferida, X es N y R3 es H y R7 es -O(CH2)n-F y R1 es BOC y R2 es metilo o ferc-butilo.
En una forma de realizacion preferida, X es N y R3 es H y R7 es -O(CH2)n-18F y R1 es BOC y R2 es metilo o ferc-
butilo.
Los compuestos de Formula II se definen por la formula general y/o la combinacion de las caracterfsticas pfreferidas como se definen anteriormente.
En una primera forma de realizacion, los compuestos de la Formula II se definen como diastereomeros individuales de Formula II-A; vease la estructura en la tabla B.
En una segunda forma de realizacion, los compuestos de Formula II se definen como mezcla de los dos diastereomeros de Formula II-A y Formula II-B; vease la estructura en la tabla B.
Las caracterfsticas preferidas como se describen anteriormente se incorporan en la presente memoria para todas las formas de realizacion.
Tabla B: diastereomeros de Formula II
Los compuestos de Formula II-A y Formula II-B engloban ademas sales farmaceuticamente aceptables de un acido o base inorganico u organico de los mismos, hidratos, complejos, y solvatos de los mismos, y opcionalmente un vehfculo, diluyente, adyuvante o excipientes farmaceuticamente aceptables.
Un compuesto preferido de Formula II es el Ejemplo 1d
4-{3-[(3R)-3-({(1-[3-(2-fluoroetoxi)fenil]-3-metoxi-3-oxopropil}carbamoil)-piperidin-1-il]-3-oxopropil}piperidin-1- carboxilato de ferc-butilo
Otro compuesto preferido de Formula II es el Ejemplo 1e
Acido 3-({[(3R)-1-{3-[1-(ferc-butoxicarbonil)piperidin-4-il]propanoil}piperidin-3-il]carbonil}amino)-3-[3-(2-
fluoroetoxi)fenil]propanoico
5
Otro compuesto preferido de Formula II es el Ejemplo 2c
4-{3-[(3R)-3-({1-[4-(2-fluoroetoxi)fenil]-3-metoxi-3-oxopropil}carbamoil)-piperidin-1-il]-3-oxopropil}piperidin-1- carboxilato de ferc-butilo
10
Otro compuesto preferido de Formula II es el Ejemplo 2d
15 Acido 3-({[(3R)-1-{3-[1-(ferc-butoxicarbonil)piperidin-4-il]propanoil}piperidin-3-il]carbonil}amino)-3-[4-(2-
fluoroetoxi)fenil]propanoico
20 Otro compuesto preferido de Formula II es el Ejemplo 3a
4-{3-[(3R)-3-({(1S)-3-terc-butoxi-1-[5-(2-fluoroetoxi)piridin-3-il]-3-oxopropil}-carbamoil)piperidin-1-il]-3- oxopropil}piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo
25
Otro compuesto preferido de Formula II es el Ejemplo 4f
4-{3-[(3R)-3-{[(7S)-1-(3-{2-[2-(2-fluoroetoxi)etoxi]etoxi}fenil)-3-metoxi-3-oxopropil]carbamoil}piperidin-1-il]-3- 30 oxopropil}piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo
5
10
15
20
25
Otro compuesto preferido de Formula II es el Ejemplo 5f
4-{3-[(3R)-3-{[(7S)-1-(5-{2-[2-(2-fluoroetoxi)etoxi]etoxi}piridin-3-il)-3-metoxi-3-oxopropil]carbamoil}piperidin-1-il]-3- oxopropil}piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo
Otro compuesto preferido de Formula II es el Ejemplo 6b
4-{3-[(3R)-3-{[1-{5-[3-(2-fluoroetoxi)fenil]piridin-3-il}-3-metoxi-3-oxopropil]-carbamoil}piperidin-1-il]-3- oxopropil}piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo
Otro compuesto preferido de Formula II es el Ejemplo 6c
Acido 3-({[(3R)-1-{3-[1-(ferc-butoxicarbonil)piperidin-4-il]propanoil}piperidin-3-il]carbonil}amino)-3-{5-[3-(2-
fluoroetoxi)fenil]piridin-3-il}propanoico
Otro compuesto preferido de Formula II es el Ejemplo 7b
4-(3-{(3R)-3-[(1-{5-[4-(2-fluoroetoxi)fenil]piridin-3-il}-3-metoxi-3-oxopropil)-carbamoil]piperidin-1-il}-3-
oxopropil)piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo
5 Otro compuesto preferido de Formula II es el Ejemplo 7c
Acido 3-({[(3R)-1-{3-[1-(terc-butoxicarbonil)piperidin-4-il]propanoil}piperidin-3-il]carbonil}amino)-3-{5-[4-(2-
fluoroetoxi)fenil]piridin-3-il}propanoico
10
Otro compuesto preferido de Formula II es el Ejemplo 8e
4-(3-{(3R)-3-[(1-{5-[2-(2-fluoroetoxi)fenil]piridin-3-il}-3-metoxi-3-oxopropil)carbamoil]piperidin-1-il}-3- 15 oxopropil)piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo
Otro compuesto preferido de Formula II es el Ejemplo 8f
20
Acido 3-({[(3R)-1-{3-[1-(ferc-butoxicarbonil)piperidin-4-il]propanoil}piperidin-3-il]carbonil}amino)-3-{5-[2-(2-
fluoroetoxi)fenil]piridin-3-il}propanoico
5
10
15
20
25
Otro compuesto preferido de Formula II es el Ejemplo 9a
4-{3-[(3R)-3-({1-[5-(3-ciano-4-fluorofenil)piridin-3-il]-3-metoxi-3-oxopropil}carbamoil)piperidin-1-il]-3- oxopropil}piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo
Otro compuesto preferido de Formula II es el Ejemplo 9b
Acido 3-({[(3R)-1-{3-[1-(ferc-butoxicarbonil)piperidin-4-il]propanoil}piperidin-3-il]carbonil}amino)-3-[5-(3-ciano-4-
fluorofenil)piridin-3-il]propanoico
Otro compuesto preferido de Formula II es el Ejemplo 10a
4-{3-[(3R)-3-({1-[5-(4-ciano-3-fluorofenil)piridin-3-il]-3-metoxi-3-oxopropil}carbamoil)piperidin-1-il]-3- oxopropil}piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo
Otro compuesto preferido de Formula II es el Ejemplo 10b
Acido 3-({[(3R)-1-{3-[1-(ferc-butoxicarbonil)piperidin-4-il]propanoil}piperidin-3-il]carbonil}amino)-3-[5-(4-ciano-3-
fluorofenil)piridin-3-il]propanoico
Otro compuesto preferido de Formula II es el Ejemplo 11a
5 4-{3-[(3R)-3-({1-[5-(4-fluoro-3-nitrofeml)piridm-3-il]-3-metoxi-3-oxopropil}carbamoil)piperidm-1-il]-3-oxopropil}piperidm-
1-carboxilato de ferc-butilo
10 Otro compuesto preferido de Formula II es el Ejemplo 11b
Acido 3-({[(3R)-1-{3-[1-(terc-butoxicarbonil)piperidm-4-il]propanoil}piperidm-3-il]carboml}amino)-3-[5-(4-fluoro-3-
nitrofenil)piridin-3-il]propanoico
15
Otro compuesto preferido de Formula II es el Ejemplo 12a
4-{3-[(3R)-3-{[(7S)-1-{5-[(3-ciano-4-fluorobencil)oxi]piridm-3-il}-3-metoxi-3-oxopropil]carbamoil}piperidin-1-il]-3- 20 oxopropil}piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo
5
10
15
20
25
Otro compuesto preferido de Formula II es el Ejemplo 13a
4-{3-[(3R)-3-{[(7S)-1-{5-[(4-ciano-3-fluorobencil)oxi]piridin-3-il}-3-metoxi-3-oxopropil]carbamoil}piperidin-1-il]-3- oxopropil}piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo
Otro compuesto preferido de Formula II es el Ejemplo 15a
4-{3-[(3R)-3-{[(1S)-3-ferc-butoxi-1-(5-{[4-(2-fluoroetoxi)fenil]etinil}piridin-3-il)-3-oxopropil]carbamoil}piperidin-1-il]-3- oxopropil}piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo
Otro compuesto preferido de Formula II es el Ejemplo 16a
4-{3-[(3R)-3-{[(1S)-3-ferc-butoxi-1-(5-{[3-(2-fluoroetoxi)fenil]etinil}piridin-3-il)3-oxopropil]carbamoil}piperidin-1-il]-3- oxopropil}piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo
Otro compuesto preferido de Formula II es el Ejemplo 17e
5
10
15
20
25
4-{3-[(3R)-3-({1-[5-fluoro-4’-(2-fluoroetoxi)bifenil-3-il]-3-metoxi-3-oxopropil}carbamoil)piperidin-1-il]-3- oxopropil}piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo
Otro compuesto preferido de Formula II es el Ejemplo 17f
Acido 3-({[(3R)-1-{3-[1-(ferc-butoxicarbonil)piperidin-4-il]propanoil}piperidin-3-il]carbonil}amino)-3-[5-fluoro-4’-(2-
fluoroetoxi)bifenil-3-il]propanoico
Otro compuesto preferido de Formula II es el Ejemplo 18a
4-{3-[(3R)-3-{[(1S)-3-ferc-butoxi-1-({[4-(2-fluoroetoxi)fenil]etil}piridin-3-il)3-oxopropil]carbamoil}piperidin-1-il]-3- oxopropil}piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo
Otro compuesto preferido de Formula II es el Ejemplo 19a
4-{3-[(3R)-3-{[(1S)-3-ferc-butoxi-1-({[3-(2-fluoroetoxi)fenil]etil}piridin-3-il)3-oxopropil]carbamoil}piperidin-1-il]-3- oxopropil}piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo
Otro compuesto preferido de Formula II es el Ejemplo 20
5
10
15
20
25
30
(E/Z) 4-{3-[(3R)-3-{[(7S)-3-terc-butoxi-1-({[3-(2-fluoroetoxi)fenil]etenil}piridin-3-il)3-oxopropil]carbamoil}piperidin-1-il]-
3-oxopropil}piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo
Otro compuesto preferido de Formula II es
4-{3-[(3R)-3-{[(1S)-1-{3-[2-[18F]fluoroetoxilfenil}-3-metoxi-3-oxopropil]carbamoil}piperidin-1-il]-3-oxopropil}piperidin-1- carboxilato de ferc-butilo
Otro compuesto preferido de Formula II es
Acido (3S)-3-({[(3R)-1-{3-[1-(ferc-butoxicarbonil)piperidin-4-il]propanoil}piperidin-3-il]carbonil}amino)-3-{3-[2-
[18F]fluoroetoxi]fenil)propanoico
Otro compuesto preferido de Formula II es
4-{3-[(3R)-3-({1-[4-(2-[18F]fluoroetoxi)fenil]-3-metoxi-3-oxopropil}carbamoil)-piperidin-1-il]-3-oxopropil}piperidin-1- carboxilato de ferc-butilo
Otro compuesto preferido de Formula II es
Acido 3-({[(3R)-1-{3-[1-(ferc-butoxicarbonil)piperidin-4-il]propanoil}piperidin-3-il]carbonil}amino)-3-{4-[2-
[18F]fluoroetoxi]fenil}propanoico
5
10
15
20
25
Otro compuesto preferido de Formula II es
4-{3-[(3R)-3-({(1S)-3-terc-butoxi-1-[5-(2-[18F]fluoroetoxi)piridin-3-il]-3-oxopropil}-carbamoil)piperidin-1-il]-3- oxopropil}piperidin-1-carboxilato de terc-butilo
Otro compuesto preferido de Formula II es
4-{3-[(3R)-3-({(1S)-1-[5-(2-[18F]fluoroetoxi)piridin-3-il]-3-metoxi-3-oxopropil}carbamoil)piperidin-1-il]-3- oxopropil}piperidin-1-carboxilato de terc-butilo
Otro compuesto preferido de Formula II es
Acido (3S)-3-({[(3R)-1-{3-[1-(terc-butoxicarbonil)piperidin-4-il]propanoil}piperidin-3-il]carbonil}amino)-3-{5-[2-
[18F]fluoroetoxi]piridin-3-il}propanoico
Otro compuesto preferido de Formula II es
4-(3-{(3R)-3-[(1-{5-[2-[18F]fluoroetoxi]piridin-3-il}-3-metoxi-3-oxopropil)carbamoil]piperidin-1-il}-3-oxopropil)piperidin-1- carboxilato de terc-butilo
5
10
15
20
25
Otro compuesto preferido de Formula II es
Acido 3-({[(3R)-1-{3-[1-(ferc-butoxicarbonil)piperidin-4-il]propanoil}piperidin-3-il]carbonil}amino)-3-{5-[2-
[18F]fluoroetoxilpiridin-3-illpropanoico
Otro compuesto preferido de Formula II es
4-{3-[(3R)-3-{[(1S)-1-(5-{4-[2-[18F]fluoroetoxi]fenil}piridin-3-il)-3-metoxi-3-oxopropil]carbamoil}piperidin-1-il]-3- oxopropil}piperidin-1-carboxilato de terc-butilo
Otro compuesto preferido de Formula II es
Acido (3S)-3-({[(3R)-1-{3-[1-(ferc-butoxicarbonil)piperidin-4-il]propanoil}piperidin-3-il]-carbonil}amino)-3-(5-{4-[2-
[18F]fluoroetoxi]fenil}piridin-3-il)propanoico
Otro compuesto preferido de Formula II es
4-{3-[(3R)-3-{[(1S)-3-ferc-butoxi-1-(5-{4-[2-[18F]fluoroetoxi]fenil}piridin-3-il)-3-oxopropil]carbamoil}piperidin-1-il]-3- oxopropil}piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo
Otro compuesto preferido de Formula II es
5 4-(3-{(3R)-3-[(1-{5-[3-ciano-4-[18F]fluorofenil]piridin-3-il}-3-metoxi-3-oxopropil)carbamoil]piperidin-1-il}-3-
oxopropil)piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo
10 Otro compuesto preferido de Formula II es
Acido 3-({[(3R)-1-{3-[1-(ferc-butoxicarbonil)piperidin-4-il]propanoil}piperidin-3-il]carbonil}amino)-3-[5-(3-ciano-4-
[18F]fluorofenil)piridin-3-il]propanoico
15
Otro compuesto preferido de Formula II es
4-(3-{(3R)-3-[(1-{5-[4-ciano-3-[18F]fluorofenil]piridin-3-il}-3-metoxi-3-oxopropil)carbamoil]piperidin-1-il}-3- 20 oxopropil)piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo
5
10
15
20
25
Otro compuesto preferido de Formula II es
Acido 3-({[(3R)-1-{3-[1-(ferc-butoxicarbonil)piperidin-4-il]propanoil}piperidin-3-il]carbonil}amino)-3-{5-[4-ciano-3-
[18F]fluorofenil]piridin-3-il}propanoico
Otro compuesto preferido de Formula II es
4-{3-[(3R)-3-{[(7S)-3-terc-butoxi-1-(5-{[4-(2-[18F]fluoroetoxi)fenil]etinil}-piridin-3-il)-3-oxopropil]carbamoil}piperidin-1-il]- 3-oxopropil}piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo
Otro compuesto preferido de Formula II es
4-{3-[(3R)-3-{[(7S)-3-ferc-butoxi-1-(5-{[3-(2-[18F]fluoroetoxi)fenil]etinil}piridin-3-il)-3-oxopropil]carbamoil}piperidin-1-il]- 3-oxopropil}piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo
Otro compuesto preferido de Formula II es
4-{3-[(3R)-3-{[(7S)-3-terc-butoxi-1-({[4-(2-[18F]fluoroetoxi)fenil]etil}piridin-3-il)3-oxopropil]carbamoil}piperidin-1-il]-3- oxopropil}piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo
5
10
15
20
25
Otro compuesto preferido de Formula II es
4-{3-[(3R)-3-{[(1S)-3-terc-butoxi-1-({[3-(2-[18F]fluoroetoxi}fenil]etil}piridin-3-il)3-oxopropil]carbamoil}piperidin-1-il]-3- oxopropil}piperidin-1-carboxilato de terc-butilo
Otro compuesto preferido de Formula II es
4-{3-[(3R)-3-({1-[3-(2-{2-[2-[18F]fluoroetoxi]etoxiletoxi)fenil]-3-metoxi-3-oxopropil}carbamoil)piperidin-1-il]-3- oxopropil}piperidin-1-carboxilato de terc-butilo
Otro compuesto preferido de Formula II es
Acido 3-({[(3R)-1-{3-[1-(terc-butoxicarbonil)piperidin-4-il]propanoil}piperidin-3-il]carbonil}amino)-3-[3-(2-{2-[2-
[18F]fluoroetoxi]etoxi}etoxi)fenil]propanoico
El tercer aspecto de la presente invencion se refiere a compuestos de Formula III:
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
en la que
R3 se selecciona de entre el grupo que consiste en H, F, CF3, COR9, COOR10, SOR10, SO2R10, CN y NO2; preferentemente, R3 se selecciona de entre el grupo que consiste en H, F, CF3, CN, NO2;
R7 se selecciona de entre el grupo que consiste en Y, -O(CH2)n-Y, -(OCH2CH2)m-Y, Z, -OCH2-Z; -CH2-CH2-Z, - CH=CH-Z y -CEC-Z;
X se selecciona de CH o N;
Y se selecciona de 18F o F;
R9 es hidrogeno o alquilo (C1-C6); preferentemente hidrogeno o alquilo (C1-C4), mas preferentemente hidrogeno, metilo, etilo o ferc-butilo;
R10 es alquilo (C1-C6); preferentemente alquilo (C1-C4), mas preferentemente metilo, etilo o ferc-butilo;
Z es un grupo
en el que * indica el atomo de conexion de Z;
R5 se selecciona de entre el grupo que consiste en H, CF3, COR9, COOR10, SOR10, SO2R10, CN y NO2; preferentemente, R3 se selecciona de entre el grupo que consiste en H, CF3, CN, NO2;
R8 se selecciona de entre el grupo que consiste en Y, -O(CH2)n-Y y -(OCH2CH2)m-Y;
n es 1-3; y m es 2-3;
con la condicion de que si R7 tiene el significado de Y, R3 tenga el significado de CF3, COR9, COOR10, SOR10, SO2R10, CN o NO2 y
con la condicion de que si R8 tiene el significado de Y, R5 tenga el significado de CF3, COR9, COOR10, SOR10, SO2R10, CN o NO2;
incluyendo isomeros E y Z y diastereomeros, mezclas de los mismos, y cualquier sal farmaceuticamente aceptable o complejo de los mismos.
Preferentemente, X es N.
Preferentemente, Y es 18F.
Preferentemente, Y es F.
En una forma de realizacion preferida, X es N y R3 es H y R7 es -O(CH2)n-F.
En una forma de realizacion preferida, X es N y R3 es H y R7 es -O(CH2)n-18F.
Los compuestos de Formula III se definen por la formula general y/o la combinacion de las caracterfsticas preferidas como se definen anteriormente.
5
10
15
20
25
30
35
40
En una primera forma de realizacion, los compuestos de la Formula III se definen como diastereomeros individuales de Formula III-A; vease la estructura en la tabla C.
En una segunda forma de realizacion, los compuestos de la Formula III se definen como mezcla de los dos diastereomeros de Formula III-A y Formula III-B; vease la estructura en la tabla C.
Las caracterfsticas preferidas como se describen anteriormente se incorporan en la presente memoria para todas las formas de realizacion.
Tabla C: diastereomeros de Formula III
Los compuestos de Formula III-A y Formula III-B engloban ademas sales farmaceuticamente aceptables de un acido o base inorganico u organico de los mismos, hidratos, complejos, y solvatos de los mismos, y opcionalmente un vehfculo, diluyente, adyuvante o excipientes farmaceuticamente aceptables.
Los compuestos de Formula III pueden existir como iones bipolares. Se contempla que todas las formas de los compuestos, incluyendo el acido libre, la base libre y los iones bipolares, estan dentro del alcance de la presente invencion. Es bien conocido en la tecnica que los compuestos que contienen tanto grupos amino como carboxilo existen a menudo en equilibrio con sus formas bipolares. De este modo, cualquiera de los compuestos descritos en la presente memoria a lo largo del texto que contiene, por ejemplo, tanto grupos amino como carboxilo, tambien incluye la referencia a sus iones bipolares correspondientes.
Un compuesto preferido de Formula III es el Ejemplo 1
Acido (3S)-3-[3-(2-fluoroetoxi)fenil]-3-[({(3R)-1-[3-(piperidin-4-il)propanoil]piperidin-3-il}-carbonil)amino]propanoico
Otro compuesto preferido de Formula III es el Ejemplo 2
Acido (3S)-3-[4-(2-fluoroetoxi)fenil]-3-[({(3R)-1-[3-(piperidin-4-il)propanoil]piperidin-3-il}carbonil)amino]propanoico
Otro compuesto preferido de Formula III es el Ejemplo 3
5
10
15
20
25
Otro compuesto preferido de Formula III es el Ejemplo 4
Acido (3S)-3-(3-{2-[2-(2-fluoroetoxi)etoxi]etoxi}fenil)-3-[({(3R)-1-[3-(piperidin-4-il)-propanoil]piperidin-3-
il}carbonil)amino]propanoico
Otro compuesto preferido de Formula III es el Ejemplo 5
Acido (3S)-3-(5-{2-[2-(2-fluoroetoxi)etoxi]etoxi}piridin-3-il)-3-[({(3R)-1-[3-(piperidin-4-il)-propanoil]piperidin-3-
il}carbonil)amino]propanoico
Otro compuesto preferido de Formula III es el Ejemplo 6
Acido (3S)-3-{5-[3-(2-fluoroetoxi)fenil]piridin-3-il}-3-[({(3R)-1-[3-(piperidin-4-il)propanoil]-piperidin-3-
il}carbonil)amino]propanoico
Otro compuesto preferido de Formula III es el Ejemplo 7
Acido (3S)-3-{5-[4-(2-fluoroetoxi)fenil]piridin-3-il}-3-[({(3R)-1-[3-(piperidin-4-il)propanoil]-piperidin-3-
il}carbonil)amino]propanoico
Otro compuesto preferido de Formula III es el Ejemplo 8
5 Acido (3S)-3-{5-[2-(2-fluoroetoxi)fenil]piridin-3-il}-3-[({(3R)-1-[3-(piperidin-4-il)propanoil]-piperidin-3-
il}carbonil)amino]propanoico
10 Otro compuesto preferido de Formula III es el Ejemplo 9
Acido (3S)-3-[5-(3-ciano-4-fluorofenil)piridin-3-il]-3-[({(3R)-1-[3-(piperidin-4-il)propanoil]-piperidin-3-
il}carbonil)amino]propanoico
15
Otro compuesto preferido de Formula III es el Ejemplo 10
Acido (3S)-3-[5-(4-ciano-3-fluorofenil)piridin-3-il]-3-[({(3R)-1-[3-(piperidin-4-il)propanoil]-piperidin-3-
20 il}carbonil)amino]propanoico
Otro compuesto preferido de Formula III es el Ejemplo 11
5
10
15
20
25
30
Acido (3S)-3-[5-(4-fluoro-3-nitrofenil)piridin-3-il]-3-[({(3R)-1-[3-(piperidin-4-il)propanoil]-piperidin-3-
il}carbonil)amino]propanoico
Otro compuesto preferido de Formula III es el Ejemplo 12
Acido (3R)-3-{5-[(3-ciano-4-fluorobencil)oxi]piridin-3-il}-3-[({(3S)-1-[3-(piperidin-4-il)propanoil]-piperidin-3-
il}carbonil)amino]propanoico
Otro compuesto preferido de Formula III es el Ejemplo 13
Acido (3S)-3-{5-[(4-ciano-3-fluorobencil)oxi]piridin-3-il}-3-[({(3R)-1-[3-(piperidin-4-il)propanoil]-piperidin-3-
il}carbonil)amino]propanoico
Otro compuesto preferido de Formula III es el Ejemplo 14
Acido (3S)-3-(4-ciano-3-fluorofenil)- 3-[({(3R)-1-[3-(piperidin-4-il)propanoil]piperidin-3-il}-carbonil)amino]propanoico
Otro compuesto preferido de Formula III es el Ejemplo 15
5
10
15
20
25
Otro compuesto preferido de Formula III es el Ejemplo 16
Acido (3S)-3-(5-{[3-(2-fluoroetoxi)fenil]etinil}piridin-3-il)-3-[({(3R)-1-[3-(piperidin-4-il)-propanoil]piperidin-3-
il}carbonil)amino]propanoico
Otro compuesto preferido de Formula III es el Ejemplo 17
Acido (3S)-3-[5-fluoro-4’-(2-fluoroetoxi)bifenil-3-il]-3-[({(3R)-1-[3-(piperidin-4-il)propanoil]-piperidin-3-
il}carbonil)amino]propanoico
Otro compuesto preferido de Formula III es el Ejemplo 18
Acido (3S)-3-(5-{2-[4-(2-fluoroetoxi)fenil]etil}piridin-3-il)-3-[({(3R)-1-[3-(piperidin-4-il)-propanoil]piperidin-3-
il}carbonil)amino]propanoico
Otro compuesto preferido de Formula III es el Ejemplo 19
5
10
15
20
25
Otro compuesto preferido de Formula III es el Ejemplo 20
acido (E/Z) (3S)-3-(5-{[3-(2-fluoroetoxi)fenil]etenil}piridin-3-il)-3-[({(3R)-1-[3-(piperidin-4-il)propanoil]piperidin-3-
il}carbonil)amino]propanoico
Otro compuesto preferido de Formula III es el Ejemplo 38
Acido (3S)-3-[3-(2-[18F]fluoroetoxi)fenil]-3-[({(3R)-1-[3-(piperidin-4-il)propanoil]piperidin-3-il}-
carbonil)amino]propanoico
Otro compuesto preferido de Formula III es el Ejemplo 39
Acido (3S)-3-[4-(2-[18F]fluoroetoxi)fenil]-3-[({(3R)-1-[3-(piperidin-4-il)propanoil]piperidin-3-il}carbonil)amino]propanoico
Otro compuesto preferido de Formula III es el Ejemplo 40
Acido (3S)-3-[5-(2-[18F]fluoroetoxi)piridin-3-il]-3-[({(3R)-1-[3-(piperidin-4-il)propanoil]piperidin-3-
il}carbonil)amino]propanoico
5
10
15
20
25
Otro compuesto preferido de Formula III es el Ejemplo 41
Acido (3S)-3-{5-[4-(2-[18F]fluoroetoxi)fenil]piridin-3-il}-3-[({(3R)-1-[3-(piperidin-4-il)propanoil]piperidin-3-
il}carbonil)amino]propanoico
Otro compuesto preferido de Formula III es el Ejemplo 42
Acido (3S)-3-[5-(3-ciano-4-[18F]fluorofenil)piridin-3-il]-3-[({(3R)-1-[3-(piperidin-4-il)propanoil]-piperidin-3-
il}carbonil)amino]propanoico
Otro compuesto preferido de Formula III es el Ejemplo 43
Acido (3S)-3-[5-(4-ciano-3-[18F]fluorofenil)piridin-3-il]-3-[({(3R)-1-[3-(piperidin-4-il)-propanoil]piperidin-3-
il}carbonil)amino]propanoico
Otro compuesto preferido de Formula III es el Ejemplo 44
Acido (3S)-3-(5-{[4-(2-[18F]fluoroetoxi)fenil]etinil}piridin-3-il)-3-[({(3R)-1-[3-(piperidin-4-il)-propanoil]piperidin-3-
il}carbonil)amino]propanoico
5
10
15
20
25
30
Otro compuesto preferido de Formula III es el Ejemplo 45
Acido (3S)-3-(5-{[3-(2-[18F]fluoroetoxi)fenil]etinil}piridin-3-il)-3-[({(3R)-1-[3-(piperidin-4-il)-propanoil]piperidin-3-
il}carbonil)amino]propanoico
Otro compuesto preferido de Formula III es el Ejemplo 46
Acido (3S)-3-(5-{2-[4-(2-[18F]fluoroetoxi)fenil]etil}piridin-3-il)-3-[({(3R)-1-[3-(piperidin-4-il)-propanoil]piperidin-3-
il}carbonil)amino]propanoico
Otro compuesto preferido de Formula III es el Ejemplo 47
Acido (3S)-3-(5-{2-[3-(2-[18F]fluoroetoxi)fenil]etil}piridin-3-il)-3-[({(3R)-1-[3-(piperidin-4-il)-propanoil]piperidin-3-
il}carbonil)amino]propanoico
Otro compuesto preferido de Formula III es el Ejemplo 48
Acido (3S)-3-(3-{2-[2-(2-[18F]fluoroetoxi)etoxi]etoxi}fenil)-3-[({(3R)-1-[3-(piperidin-4-il)-propanoil]piperidin-3-
il}carbonil)amino]propanoico
El cuarto aspecto de la presente invencion se refiere a metodos para la preparacion de compuestos de Formula III
5
10
15
20
25
30
35
40
45
en la que
R3 se selecciona de entre el grupo que consiste en H, F, CF3, COR9, COOR10, SOR10, SO2R10, CN y NO2; preferentemente, R3 se selecciona de entre el grupo que consiste en H, F, CF3, CN, NO2;
R7 se selecciona de entre el grupo que consiste en Y, -O(CH2)n-Y, -(OCH2CH2)m-Y, Z, -OCH2-Z; -CH2-CH2-Z, - CH=CH-Z y -CeC-Z;
X se selecciona de CH o N;
Y se selecciona de 18F o F;
R9 es hidrogeno o alquilo (C1-C6); preferentemente hidrogeno o alquilo (C1-C4), mas preferentemente hidrogeno, metilo, etilo o ferc-butilo;
R10 es alquilo (C1-C6); preferentemente alquilo (C1-C4), mas preferentemente metilo, etilo o ferc-butilo;
Z es un grupo
en el que * indica el atomo de conexion de Z;
R5 se selecciona de entre el grupo que consiste en H, CF3, COR9, COOR10, SOR10, SO2R10, CN y NO2; preferentemente, R3 se selecciona de entre el grupo que consiste en H, CF3, CN, NO2;
R8 se selecciona de entre el grupo que consiste en Y, -O(CH2)n-Y y -(OCH2CH2)m-Y;
n es 1-3; y m es 2-3;
con la condicion de que si R7 tiene el significado de Y, R3 tenga el significado de CF3, COR9, COOR10, SOR10, SO2R10, CN o NO2 y
con la condicion de que si R8 tiene el significado de Y, R5 tenga el significado de CF3, COR9, COOR10, SOR10, SO2R10, CN o NO2;
partiendo de compuestos de Formula I,
en la que
R1 es hidrogeno o un grupo protector de amina;
R2 es hidrogeno o un grupo protector de carboxilo; en la que al menos uno de R1 y R2 no es H;
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
R3 se selecciona de entre el grupo que consiste en H, F, CF3, COR9, COOR10, SOR10, SO2R10, CN y NO2; preferentemente, R3 se selecciona de entre el grupo que consiste en H, F, CF3, CN, y NO2;
R4 se selecciona de entre el grupo que consiste en OH, Halogeno, -NO2, -N+(Me)3(W'), -I+R11(W'), -O(CH2)n-LG, - (OCH2CH2)m-LG, Q, -OCH2-Q; -CH2-CH2-Q, -CH=CH-Q y -CeC-Q; preferentemente, R4 se selecciona de entre el grupo que consiste en OH, Halogeno, -N+(MeHW'), -O(CH2)n-LG, -(OCH2CH2)m-LG, Q, -OCH2-Q; -CH2-CH2-Q, - CH=CH-Q y -CeC-Q;
X se selecciona de CH o N;
LG es un grupo saliente;
R9 es hidrogeno o alquilo (C1-C6); preferentemente hidrogeno o alquilo (C1-C4), mas preferentemente hidrogeno, metilo, etilo o ferc-butilo;
R10 es alquilo (C1-C6); preferentemente alquilo (C1-C4), mas preferentemente metilo, etilo o ferc-butilo;
R11 se selecciona de entre el grupo que consiste en fenilo, (4-metil)fenilo, (4-metoxi)fenilo, 2-furanilo y 2-tienilo; preferentemente, R11 se selecciona de entre el grupo que consiste en (4-metoxi)fenilo y 2-tienilo;
W- se selecciona de entre el grupo que comprende CF3(S(O)2O-, anion yoduro, anion bromuro y CF3C(O)O-; preferentemente W- se selecciona de entre el grupo CF3(S(O^O', anion bromuro y CF3C(O)O-;
Q es un grupo
en el que * indica el atomo de conexion de Q;
R5 se selecciona de entre el grupo que consiste en H, CF3, COR9, COOR10, SOR10, SO2R10, CN y NO2; preferentemente, R5 se selecciona de entre el grupo que consiste en H, CF3, CN, y NO2
R6 se selecciona de entre el grupo que consiste en OH, Halogeno, -NO2, -N+(Me)3(W-), -I+R11(W-), -O(CH2)n- LG y -(OCH2CH2)m-LG; preferentemente, R6 se selecciona de entre el grupo que consiste en OH, Halogeno, - N+(Me)3(W-), -O(CH2)n-LG y -(OCH2CH2)m-LG;
n es 1-3; y m es 2-3;
con la condicion de que si R4 tiene el significado de Halogeno, -NO2, -N+(Me)3(W-) o -I+R11(W-), R3 tenga el significado de CF3, COR9, COOR10, SOR10, SO2R10, CN o NO2, y con la condicion de que si R6 tiene el significado de Halogeno, -NO2, -N+(MeHW') o -I+R11(W'), R5 tenga el significado de CF3, COR9, COOR10, SOR10, SO2R10, CN o NO2;
y una reaccion de fluoracion para obtener compuestos de Formula II,
en la que
R1 es hidrogeno o un grupo protector de amina;
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
R2 es hidrogeno o un grupo protector de carboxilo; en la que al menos uno de R1 y R2 no es hidrogeno;
R3 se selecciona de entre el grupo que consiste en H, F, CF3, COR9, COOR10, SOR10, SO2R10, CN y NO2; preferentemente, R3 se selecciona de entre el grupo que consiste en H, F, CF3, CN, NO2;
R7 se selecciona de entre el grupo que consiste en Y, -O(CH2)n-Y, -(OCH2CH2)m-Y, Z, -OCH2-Z; -CH2-CH2-Z, - CH=CH-Z y -CeC-Z;
X se selecciona de CH o N;
Y se selecciona de 18F o F;
R9 es hidrogeno o alquilo (C1-C6); preferentemente hidrogeno o alquilo (C1-C4), mas preferentemente hidrogeno, metilo, etilo o ferc-butilo;
R10 es alquilo (C1-C6); preferentemente alquilo (C1-C4), mas preferentemente metilo, etilo o ferc-butilo;
Z es un grupo
en el que * indica el atomo de conexion de Z;
R5 se selecciona de entre el grupo que consiste en H, CF3, COR9, COOR10, SOR10, SO2R10, CN y NO2; preferentemente, R5 se selecciona de entre el grupo que consiste en H, CF3, CN, NO2;
R8 se selecciona de entre el grupo que consiste en Y, -O(CH2)n-Y y -(OCH2CH2)m-Y;
n es 1-3; y m es 2-3;
con la condicion de que si R7 tiene el significado de Y, R3 tenga el significado de CF3, COR9, COOR10, SOR10, SO2R10, CN o NO2, y
con la condicion de que si R8 tiene el significado de Y, R5 tenga el significado de CF3, COR9, COOR10, SOR10, SO2R10, CN o NO2;
y escision del grupo o grupos protectores o
reaccion de compuestos de Formula I con un reactivo de 18F o F o una unidad estructural de 18F o F y escision de los grupos protectores para obtener compuestos de Formula III.
Ademas, el cuarto aspecto de la presente invencion se refiere a metodos para preparar compuestos de Formula III
en la que
R3 es H, F, CF3, CN o NO2;
5
10
15
20
25
30
35
40
45
R7 es Y, -O(CH2)n-Y, -(OCH2CH2)m-Y, Z, -OCH2-Z; -CH2-CH2-Z, -CH=CH-Z o -CeC-Z; X se selecciona de CH o N;
Y es 18F o F;
Z es un grupo
en el que * indica el atomo de conexion de Z; R5 es H, CF3, CN o NO2;
R8 es Y, -O(CH2)n-Y o -(OCH2CH2)m-Y; n es 1-3; y m es 2-3,
partiendo de compuestos de Formula I,
en la que
R1 es hidrogeno o un grupo protector de amina;
R2 es hidrogeno o un grupo protector de carboxilo; en la que al menos uno de R1 y R2 no es H;
R3 es H, F, CF3, CN y NO2;
R4 es OH, Halogeno, -N+(Me)3(W'), -O(CH2)n-LG, -(OCH2CH2)m-LG,Q, -OCH2-Q; -CH2-CH2-Q, -CH=CH-Q y - CeC-Q;
X se selecciona de CH o N;
LG es un grupo saliente;
W- es CF3(S(O)2O-, anion bromuro y CF3C(O)O-;
Q es un grupo
en el que * indica el atomo de conexion de Q;
R5 es H, CF3, CN y NO2;
R6 es OH, Halogeno, -N+(MeHW'), -O(CH2)n-LG y -(OCH2CH2)m-LG; n es 1-3; y m es 2-3;
con la condicion de que si R4 tiene el significado de Halogeno o -N+(Me)3(W-), R3 tenga el significado de CF3, CN o NO2 y
con la condicion de que si R6 tiene el significado de Halogeno o -N+(Me)3(W-), R5 tenga el significado de CF3, CN o NO2;
y una reaccion de fluoracion para obtener compuestos de Formula II,
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
en la que
R1 es hidrogeno o un grupo protector de amina;
R2 es hidrogeno o un grupo protector de carboxilo; en la que al menos uno de R1 y R2 no es hidrogeno;
R3 es H, F, CF3, CN y NO2;
R7 es Y, -O(CH2)n-Y, -(OCH2CH2)m-Y, Z, -OCH2-Z; -CH2-CH2-Z, -CH=CH-Z o -CeC-Z; X se selecciona de CH o N;
Y se selecciona de 18F o F;
Z es un grupo
en el que * indica el atomo de conexion de Z;
R5 es H, CF3, CN y NO2;
R8 es Y, -O(CH2)n-Y o -(OCH2CH2)m-Y; n es 1-3; y m es 2-3;
con la condicion de que si R7 tiene el significado de Y, R3 tenga el significado de CF3, CN o NO2, y con la condicion de que si R8 tenga el significado de Y, R5 tenga el significado de CF3, CN o NO2;
y escision del grupo o grupos protectors, o
reaccion de los compuestos de Formula I con un reactivo de 18F o F o una unidad estructural de 18F o F y escision de los grupos protectores para obtener compuestos de Formula III.
En una primera forma de realizacion, la invencion se refiere a un metodo para la preparacion de compuestos de Formula III que comprende las etapas de:
18 4 18
- radiofluorar con F un compuesto de Formula I, en la que R es diferente de OH, o radiofluorar con F un
compuesto de Formula I, en la que R6 es diferente de OH, para obtener un compuesto de Formula II, y subsiguientemente
- escindir grupos protectores de un compuesto de Formula II para obtener un compuesto de Formula III.
Opcionalmente, el metodo es seguido de la purificacion de un compuesto de Formula III mediante extraccion en fase solida o mediante HPLC semipreparativa. Las columnas de HPLC preferidas son columnas de fase inversa tales como ACE 5 m C18-HL (10 x 250 mm), Phenomenex Gemini 5 m C18 110A (10 x 250 mm) o Zorbax Bonus RP 5 p.m C18-HL (9,4 x 250 mm). Como fase movil, se pueden usar mezclas de disolucion amortiguadora, acidos, bases, agua, etc., con disolventes organicos tales como acetonitrilo, metanol, etanol, etc. El pico recogido de la purificacion mediante HPLC se puede atrapar opcionalmente en un cartucho de extraccion en fase solida, preferentemente via un cartucho de separacion C18. Para eluir del cartucho el producto purificado marcado con F-18, se pueden usar disolventes organicos puros tales como acetonitrilo, metanol, etanol, etc., o disoluciones amortiguadoras acuosas, acidos, bases, agua, etc., o mezclas de disolventes organicos y disoluciones acuosas citadas. preferentemente, el producto marcado con F-18 se eluye con etanol puro o mezclas con agua.
Se incorporan en la presente memoria las caracterfsticas y formas de realizacion preferidas descritas para los compuestos de formula general I, II y III.
Los metodos para la fluoracion con 18F son bien conocidos por el experto en la materia. Por ejemplo, el reactivo de 18F puede ser K18F, KH18F2, H18F, Rb18F, Cs18F, Na18F.
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
60
65
Opcionalmente, el reactivo de 18F comprende un agente quelante tal como un criptando (por ejemplo: 4,7,13,16,21,24-hexaoxa-1,10-diazabiciclo[8.8.8]-hexacosano - Kryptofix®) o un eter corona (por ejemplo: 18- corona-6).
18 18 18 El reactivo de F tambien puede ser una sal de tetraalquilamonio de F-, o una sal de tetraalquilfosfonio de F-,
conocidas por los expertos en la materia, por ejemplo: [18F]fluoruro de tetrabutilamonio, [18F]fluoruro de
tetrabutilfosfonio.
18 18 18 18 18
Preferentemente, el reactivo de F es Cs F, K F, KH F2, [ F]fluoruro de tetrabutilamonio, y contiene Kryptofix®.
Los reactivos, disolventes y condiciones que se pueden usar para esta fluoracion son habituales y bien conocidos por el experto en la materia. Veanse, por ejemplo, J. Fluorine Chem., 27 (1985):177-191; Coenen, Fluorine-18 Labeling Methods: Features and Possibilities of Basic Reactions, (2006), en: Schubiger P.A., Friebe M., Lehmann L., (eds), PET-Chemistry - The Driving Force in Molecular Imaging. Springer, Berlin Heidelberg, p. 15-50). preferentemente, los disolventes usados en el presente metodo son DMF, DMSO, acetonitrilo, DMA, o mezclas de los mismos, preferentemente el disolvente es acetonitrilo, DMSO.
Los precursores para alquil-18F compuestos de formula general I (en la que R4 o R6 no tienen el significado OH, - halogeno, -NO2, -N+(Me)3(W'), -I+R11(W')) son, por ejemplo, halogenuros o sulfonatos como metilsulfoniloxi, (4- metilfenil)sulfoniloxi, trifluormetilsulfoniloxi, nonafluorobutilsulfoniloxi, (4-bromofenil)sulfoniloxi, (4-nitrofenil)sulfoniloxi etc. (para la formula I, conteniendo R4 o R6 un grupo saliente (LG)), que se pueden sintetizar a partir de los hidroxicompuestos respectivos segun metodos conocidos en la tecnica (J. March, Advanced Organic Chemistry, 4a ed. 1992, John Wiley & Sons, p. 352ff).
Los precursores para alquil-18F compuestos de formula general I (en la que R4 o R6 tiene el significado de -OH) se pueden acoplar en condiciones basicas a grupos prosteticos que contienen tanto un grupo marcador con F-18 como un buen grupo saliente como un halogenuro o un sulfonato como metilsulfoniloxi, (4-metilfenil)sulfoniloxi, trifluormetilsulfoniloxi, nonafluorobutilsulfoniloxi, (4-bromofenil)sulfoniloxi, (4-nitrofenil)sulfoniloxi etc. Estos marcajes indirectos descritos en esta invencion se pueden realizar segun metodos conocidos en la tecnica (en: Schubiger P.A., Friebe M., Lehmann L., (eds), PET-Chemistry - The Driving Force in Molecular Imaging. Springer, Berlin Heidelberg, p. 15-50).
Los precursores para aril-18F compuestos de formula general I (en la que R4 o R6 tienen el significado de -halogeno, -NO2, -N+(Me)3(W-), -I+R11(W-)) son, por ejemplo, halogenuros de arilo, nitrocompuestos, compuestos de trimetilamonio, compuestos de arilyodonio, etc., que se pueden convertir en los 18F compuestos respectivos de esta invencion mediante metodos conocidos en la tenica (L. Cai, S. Lu, V. Pike, Eur. J. Org. Chem. 2008, 2853-2873). Los materiales de partida para estos precursores se pueden sintetizar mediante metodos conocidos en la tecnica (R.C. Larock, Comprehensive Organic Transformations, VCH Publishers 1989).
Opcionalmente, el metodo es seguido de la purificacion de un compuesto de Formula III mediante extraccion en fase solida o mediante HPLC semipreparativa. Las columnas de HPLC preferidas son columnas de fase inversa tales como ACE 5 m C18-HL (10 x 250 mm), Phenomenex Gemini 5 m C18 110A (10 x 250 mm) o Zorbax Bonus RP 5 mm C18-HL (9,4 x 250 mm). Como fase movil se pueden usar mezclas de disolucion amortiguadora, acidos, bases, agua, etc., con disolventes organicos tales como acetonitrilo, metanol, etanol, etc. El pico recogido de la purificacion mediante HPLC se puede atrapar opcionalmente en un cartucho de extraccion en fase solida, preferentemente via un cartucho de separacion C18. Para eluir del cartucho el producto purificado marcado con F-18, se pueden usar disolventes organicos puros tales como acetonitrilo, metanol, etanol, etc., o disoluciones amortiguadoras acuosas, acidos, bases, agua, etc., o mezclas de disolventes organicos y disoluciones acuosas citadas. preferentemente, el producto marcado con F-18 se eluye con etanol puro o mezclas con agua.
En una segunda forma de realizacion, la invencion se refiere a un metodo para preparar compuestos de Formula III, que comprende las etapas de:
- hacer reaccionar un compuesto de Formula I, en la que R4 es OH, o hacer reaccionar un compuesto de Formula I, en la que R6 es OH, con una unidad estructural marcada con 18F, y subsiguientemente
- escindir grupos protectores de un compuesto de Formula II para obtener un compuesto de Formula III.
Opcionalmente, el metodo es seguido de la purificacion de un compuesto de Formula III mediante extraccion en fase solida o mediante HPLC semipreparativa. Las columnas de HPLC preferidas son columnas de fase inversa tales como ACE 5 m C18-HL (10 x 250 mm), Phenomenex Gemini 5 m C18 110A (10 x 250 mm) o Zorbax Bonus RP 5 mm C18-HL (9,4 x 250 mm). Como fase movil se pueden usar mezclas de disolucion amortiguadora, acidos, bases, agua, etc., con disolventes organicos tales como acetonitrilo, metanol, etanol, etc. El pico recogido de la purificacion mediante HPLC se puede atrapar opcionalmente en un cartucho de extraccion en fase solida, preferentemente via un cartucho de separacion C18. Para eluir del cartucho el producto purificado marcado con F-18, se pueden usar
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
60
65
disolventes organicos puros tales como acetonitrilo, metanol, etanol, etc., o disoluciones amortiguadoras acuosas, acidos, bases, agua, etc., o mezclas de disolventes organicos y disoluciones acuosas citadas. preferentemente, el producto marcado con F-18 se eluye con etanol puro o mezclas con agua.
En una tercera forma de realizacion, la invencion se refiere a un metodo para preparar compuestos de Formula III, que comprende las etapas de:
- hacer reaccionar un compuesto de Formula I, en la que R4 es OH, o hacer reaccionar un compuesto de Formula I, en la que R6 es OH, con una unidad estructural que contiene un grupo saliente LG, y subsiguientemente
- radiofluorar con 18F el compuesto obtenido de Formula I, para obtener un compuesto de Formula II, y subsiguientemente
- escindir grupos protectores para obtener un compuesto de Formula III.
Opcionalmente, el metodo es seguido de la purificacion de un compuesto de Formula III mediante extraccion en fase solida o mediante HPLC semipreparativa. Las columnas de HPLC preferidas son columnas de fase inversa tales como ACE 5 m C18-HL (10 x 250 mm), Phenomenex Gemini 5 m C18 110A (10 x 250 mm) o Zorbax Bonus RP 5 mm C18-HL (9,4 x 250 mm). Como fase movil se pueden usar mezclas de disolucion amortiguadora, acidos, bases, agua, etc., con disolventes organicos tales como acetonitrilo, metanol, etanol, etc. El pico recogido de la purificacion mediante HPLC se puede atrapar opcionalmente en un cartucho de extraccion en fase solida, preferentemente via un cartucho de separacion C18. Para eluir del cartucho el producto purificado marcado con F-18, se pueden usar disolventes organicos puros tales como acetonitrilo, metanol, etanol, etc., o disoluciones amortiguadoras acuosas, acidos, bases, agua, etc., o mezclas de disolventes organicos y disoluciones acuosas citadas. preferentemente, el producto marcado con F-18 se eluye con etanol puro o mezclas con agua.
El quinto aspecto de la presente invencion se refiere a metodos para preparar compuestos de Formula III (estandar frfo).
En una primera forma de realizacion, la invencion se refiere a un metodo para preparar compuestos de Formula III, que comprende las etapas de:
- fluorar un compuesto de Formula I para obtener un compuesto de Formula II, y subsiguientemente
- escindir grupos protectores de un compuesto de Formula II para obtener un compuesto de Formula III.
Opcionalmente, el metodo es seguido de la purificacion de un compuesto de Formula III. Los metodos de purificacion adecuados son metodos cromatograficos (por ejemplo HPLC, cromatograffa ultrarrapida).
Se incorporan en la presente memoria las caracterfsticas y formas de realizacion preferidas descritas para compuestos de formula general I, II y III.
En una segunda forma de realizacion, la invencion se refiere a un metodo para preparar un compuesto de Formula III, que comprende las etapas de
- hacer reaccionar un compuesto de Formula I, en la que R4 es OH, o hacer reaccionar un compuesto de Formula I, en la que R6 es OH, con una unidad estructural que contiene un grupo saliente LG, y subsiguientemente
- escindir grupos protectores para obtener un compuesto de Formula III.
Opcionalmente, el metodo es seguido de la purificacion de un compuesto de Formula III. Los metodos de purificacion adecuados son metodos cromatograficos (por ejemplo HPLC, cromatograffa ultrarrapida).
Se incorporan en la presente memoria las caracterfsticas y formas de realizacion preferidas descritas para compuestos de formula general I y III.
En una tercera forma de realizacion, la invencion se refiere a un metodo para preparar compuestos de Formula III, que comprende las etapas de:
- hacer reaccionar un compuesto de Formula I, en la que R4 es OH, o hacer reaccionar un compuesto de Formula I, en la que R6 es OH, con una unidad estructural que contiene un grupo saliente LG, y a continuacion
- fluorar el compuesto obtenido de Formula I para obtener un compuesto de Formula II, y a continuacion
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
60
65
- escindir grupos protectores para obtener un compuesto de Formula III.
Opcionalmente, el metodo es seguido de la purificacion de un compuesto de Formula III. Los metodos de purificacion adecuados son metodos cromatograficos (por ejemplo HPLC, cromatograffa ultrarrapida).
La invencion tambien se refiere a la utilizacion del compuesto de Formula III para la elaboracion de medicamento o sustancia farmaceutica para tratamiento.
En un sexto aspecto de la invencion, la invencion se refiere a compuestos marcados con 18F segun la Formula III para la elaboracion de un trazador de formacion de imagenes o un agente radiofarmaceutico para formar imagenes de trombos. El agente formador de imagenes o el agente radiofarmaceutico es adecuado preferentemente como agente formador de imagenes para aplicaciones de PET.
En otras palabras, la invencion se refiere a compuestos marcados con 18F de formula general III como trazador para formacion de imagenes o como agente radiofarmaceutico.
La invencion se refiere a compuestos marcados con 18F de formula general III para la utilizacion en la formacion de imagenes de trombos.
Tambien se describe un metodo para formar imagenes o diagnosticar trombos, que comprende las etapas de:
- administrar a un mamffero una cantidad eficaz de un compuesto marcado con 18F de formula III,
- obtener imagenes del mamffero, y
- evaluar las imagenes.
Tambien se describe un metodo para formar imagenes, que comprende la etapa de introducir en un paciente una cantidad detectable de un compuesto marcado con 18F de Formula III, y formar la imagen de dicho paciente.
Tambien se describe la utilizacion de un compuesto de Formula III como se describe anteriormente y como se describe en la presente memoria, para diagnosticar trombos en un paciente, en particular en un mamffero, tal como un ser humano.
Preferentemente, la utilizacion de un compuesto de la invencion en el diagnostico se realiza usando tomograffa de emision positronica (PET).
Tambien se describe un metodo para formar imagenes de trombos. Tal metodo comprende a) administrar a un mamffero un compuesto como se describe anteriormente y en la presente memoria, que contiene un marcador detectable, y b) detectar la senal que proviene del compuesto que es captado especfficamente por los trombos.
Tambien se describe un metodo para diagnosticar un paciente con una enfermedad tromboembolica, tal como infarto de miocardio, embolia pulmonar, apoplejfa y ataques isquemicos transitorios. Este metodo comprende a) administrar a un ser humano que necesita tal diagnostico un compuesto de la invencion con un marcador detectable para detectar el compuesto en el ser humano como se describe anteriormente y en la presente memoria, y b) medir la senal del marcador detectable que surge de la administracion del compuesto al ser humano, preferentemente mediante tomograffa de emision positronica (PET).
Tambien se describe un metodo para diagnosticar un paciente con una enfermedad potencialmente mortal, tal como aneurisma aortico, hipertension pulmonar tromboembolica cronica (CETPH), fibrilacion arterial y trombosis coronaria. Este metodo comprende a) administrar a un ser humano que necesita tal diagnostico un compuesto de la invencion con un marcador detectable para detectar el compuesto en el ser humano como se describe anteriormente y en la presente memoria, y b) medir la senal del marcador detectable que surge de la administracion del compuesto al ser humano, preferentemente mediante tomograffa de emision positronica (PET).
Tambien se describe un metodo para diagnosticar y monitorizar la salud de pacientes con riesgo cardiovascular. Este metodo comprende a) administrar a un ser humano que necesita de tal diagnostico un compuesto de la invencion con un marcador detectable para detectar el compuesto en el ser humano como se describe anteriormente y en la presente memoria, y b) medir la senal del marcador detectable que surge de la administracion del compuesto al ser humano, mediante tomograffa de emision positronica (PET).
Los metodos de diagnostico y utilizacion para la formacion de imagenes de trombos mediante PET implican la administracion de uno de los compuestos preferidos enumerados a continuacion:
Acido (3S)-3-[3-(2-[18F]fluoroetoxi)fenil]-3-[({(3R)-1-[3-(piperidin-4-il)propanoil]piperidin-3-il}-
5
10
15
20
25
carbonil)amino]propanoico
Acido (3S)-3-[4-(2-[18F]fluoroetoxi)fenil]-3-[({(3R)-1-[3-(piperidin-4-il)propanoil]piperidin-3-il}carbonil)amino]propanoico
Acido
il}carbonil)amino]propanoico
Acido
il}carbonil)amino]propanoico
Acido
il}carbonil)amino]propanoico
Acido
il}carbonil)amino]propanoico
5
Acido
il}carbonil)amino]propanoico
10
15
Acido (3S)-3-(5-{[3-(2-[18F]fluoroetoxi)fenil]etinil}piridin-3-il)-3-[({(3R)-1-[3-(piperidin-4-il)-propanoil]piperidin-3-
il}carbonil)amino]propanoico
Acido
il}carbonil)amino]propanoico
Acido
il}carbonil)amino]propanoico
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
Acido (3S)-3-(3-{2-[2-(2-[18F]fluoroetoxi)etoxi]etoxi}fenil)-3-[({(3R)-1-[3-(piperidin-4-il)-propanoil]piperidin-3-
il}carbonil)amino]propanoico
incluyendo diastereomeros, mezclas de los mismos, y sales adecuadas de los mismos, y vehfculos o diluyentes farmaceuticamente aceptables como se describen anteriormente.
En un septimo aspecto, la invencion se refiere a un kit que comprende un vial o mas de un vial, que comprende una cantidad predeterminada de:
a) compuestos de Formula I, o
b) compuestos marcados con 19F de Formula III.
Ademas, segun este aspecto de la presente invencion, el kit comprende un compuesto que tiene una formula qufmica general como se describe anteriormente, junto con un vehfculo, diluyente, excipiente o adyuvante aceptable, o mezcla de los mismos.
Preferentemente, el kit comprende un vehfculo o portador fisiologicamente aceptable, y adyuvantes y conservantes opcionales, reactivos adecuados para realizar las reacciones descritas en la presente memoria y/o para generar los reactivos marcadores con 18F. Ademas, el kit puede contener instrucciones para su uso.
En un octavo aspecto, la invencion se refiere a la utilizacion de compuestos de formula general III para llevar a cabo ensayos biologicos y la identificacion cromatografica. Mas preferentemente, la utilizacion se refiere a compuestos marcados con 19F de formula general III.
Los compuestos marcados con 19F de formula general III son utiles como referencias y/o agentes de medida.
Los compuestos de formula general III se definen en la presente memoria como anteriormente, y engloban todas las formas de realizacion y caracterfsticas preferidas.
En un noveno aspecto, la invencion se refiere a una composicion que comprende compuestos de formula I, II o III como se definen en los aspectos anteriores y formas de realizacion incluidas.
En una primera forma de realizacion, la invencion se refiere a una composicion que comprende un compuesto marcado con 18F de formula III y adyuvantes farmaceuticamente adecuados. Estos adyuvantes incluyen, entre otros, vehfculos, disolventes, o estabilizantes.
El experto en la materia esta familiarizado con los adyuvantes que son adecuados para las formulaciones, preparaciones o composiciones farmaceuticas deseadas, debido a su conocimiento experto.
La administracion de los compuestos, composiciones farmaceuticas o combinaciones segun la invencion se realiza en cualquiera de los modos de administracion generalmente aceptados disponibles en la tecnica. Para evitar la etapa de bioabsorcion, se puede usar la administracion parenteral. Se prefieren los suministros intravenosos. preferentemente, las composiciones segun la invencion se administran de manera que la dosis del compuesto activo para la formacion de imagenes esta en el intervalo de 3,7 MBq (0,1 mCi) a 740 MBq (20 mCi) por paciente.
Mas preferentemente, se usara una dosis en el intervalo de 3,7 MBq a 400 MBq por paciente.
Preferentemente, la composicion comprende uno de los compuestos descritos a continuacion:
Acido (3S)-3-[3-(2-[18F]fluoroetoxi)fenil]-3-[({(3R)-1-[3-(piperidin-4-il)propanoil]piperidin-3-il}-
carbonil)amino]propanoico
Acido (3S)-3-[4-(2-[18F]fluoroetoxi)fenil]-3-[({(3R)-1-[3-(piperidin-4-il)propanoil]piperidin-3-il}carbonil)amino]propanoico
5
Acido
il}carbonil)amino]propanoico
10
Acido
il}carbonil)amino]propanoico
15
Acido
il}carbonil)amino]propanoico
Acido
il}carbonil)amino]propanoico
5
Acido
il}carbonil)amino]propanoico
10
15
Acido (3S)-3-(5-{[3-(2-[18F]fluoroetoxi)fenil]etinil}piridin-3-il)-3-[({(3R)-1-[3-(piperidin-4-il)-propanoil]piperidin-3-
il}carbonil)amino]propanoico
Acido
il}carbonil)amino]propanoico
Acido
il}carbonil)amino]propanoico
5
10
15
20
25
30
Acido
il}carbonil)amino]propanoico
incluyendo diastereomeros, mezclas de los mismos, y sales adecuadas de los mismos, y vehfculos o diluyentes farmaceuticamente aceptables como se describen anteriormente.
En una segunda forma de realizacion, la invencion se refiere a una composicion que comprende compuestos marcados con 19F de formula III. Tal composicion se puede usar para fines analfticos.
Preferentemente, la composicion comprende uno de los compuestos descritos a continuacion:
Acido (3S)-3-[3-(2-fluoroetoxi)fenil]-3-[({(3R)-1-[3-(piperidin-4-il)propanoil]piperidin-3-il}-carbonil)amino]propanoico
Acido (3S)-3-[4-(2-fluoroetoxi)fenil]-3-[({(3R)-1-[3-(piperidin-4-il)propanoil]piperidin-3-il}carbonil)amino]propanoico
Acido (3S)-3-[5-(2-fluoroetoxi)piridin-3-il]-3-[({(3R)-1-[3-(piperidin-4-il)propanoil]piperidin-3-il}-
carbonil)amino]propanoico
Acido (3S)-3-(3-{2-[2-(2-fluoroetoxi)etoxi]etoxi}fenil)-3-[({(3R)-1-[3-(piperidin-4-il)-propanoil]piperidin-3-
il}carbonil)amino]propanoico
5
10
15
Acido (3S)-3-(5-{2-[2-(2-fluoroetoxi)etoxi]etoxi}piridin-3-il)-3-[({(3R)-1-[3-(piperidin-4-il)-propanoil]piperidin-3-
il}carbonil)amino]propanoico
Acido (3S)-3-{5-[3-(2-fluoroetoxi)fenil]piridin-3-il}-3-[({(3R)-1-[3-(piperidin-4-il)propanoil]-piperidin-3-
il}carbonil)amino]propanoico
Acido (3S)-3-{5-[4-(2-fluoroetoxi)fenil]piridin-3-il}-3-[({(3R)-1-[3-(piperidin-4-il)propanoil]-piperidin-3-
il}carbonil)amino]propanoico
Acido (3S)-3-{5-[2-(2-fluoroetoxi)fenil]piridin-3-il}-3-[({(3R)-1-[3-(piperidin-4-il)propanoil]-piperidin-3-
il}carbonil)amino]propanoico
Acido (3S)-3-[5-(3-ciano-4-fluorofenil)piridin-3-il]-3-[({(3R)-1-[3-(piperidin-4-il)propanoil]-piperidin-3-
il}carbonil)amino]propanoico 5
Acido (3S)-3-[5-(4-ciano-3-fluorofenil)piridin-3-il]-3-[({(3R)-1-[3-(piperidin-4-il)propanoil]-piperidin-3-
il}carbonil)amino]propanoico
10
Acido (3S)-3-[5-(4-fluoro-3-nitrofenil)piridin-3-il]-3-[({(3R)-1-[3(piperidin-4-il)propanoil]-piperidin-3-
il}carbonil)amino]propanoico 15
Acido (3R)-3-{5-[(3-ciano-4-fluorobencil)oxi]piridin-3-il}-3-[({(3S)-1-[3-(piperidin-4-il)propanoil]-piperidin-3-
il}carbonil)amino]propanoico
Acido (3S)-3-{5-[(4-ciano-3-fluorobencil)oxi]piridin-3-il}-3-[({(3R)-1-[3-(piperidin-4-il)propanoil]-piperidin-3-
il}carbonil)amino]propanoico 5
Acido (3S)-3-(4-ciano-3-fluorofenil)-3-[({(3R)-1-[3-(piperidin-4-il)propanoil]piperidin-3-il}-carbonil)amino]propanoico
10
Acido (3S)-3-(5-{[4-(2-fluoroetoxi)fenil]etinil}piridin-3-il)-3-[({(3R)-1-[3-(piperidin-4-il)propanoil]piperidin-3-
il}carbonil)amino]propanoico
15
Acido (3S)-3-(5-{[3-(2-fluoroetoxi)fenil]etinil}piridin-3-il)-3-[({(3R)-1-[3-(piperidin-4-il)-propanoil]piperidin-3-
il}carbonil)amino]propanoico
Acido (3S)-3-[5-fluoro-4'-(2-fluoroetoxi)bifenil-3-il]-3-[({(3R)-1-[3-(piperidin-4-il)propanoil]-piperidin-3-
il}carbonil)amino]propanoico
5
10
15
20
25
Acido (3S)-3-(5-{2-[4-(2-fluoroetoxi)fenil]etil}piridin-3-il)-3-[({(3R)-1-[3-(piperidin-4-il)-propanoil]piperidin-3-
il}carbonil)amino]propanoico
Acido (3S)-3-(5-{2-[3-(2-fluoroetoxi)fenil]etil}piridin-3-il)-3-[({(3R)-1-[3-(piperidin-4-il)-propanoil]piperidin-3-
il}carbonil)amino]propanoico
Acido (E/Z) (3S)-3-(5-{[3-(2-fluoroetoxi)fenil]etenil}piridin-3-il)-3-[({(3R)-1-[3-(piperidin-4-il)propanoil]piperidin-3-
il}carbonil)amino]propanoico
incluyendo isomeros E y Z y diastereomeros, mezclas de los mismos, y sales adecuadas de los mismos.
En una tercera forma de realizacion, la invencion se refiere a una composicion que comprende compuesto of formula I. Tal composicion se puede usar para elaborar compuestos marcados con 18F de formula III (sustancia radiofarmaceutica) y compuestos marcados con 19F de formula III (patron frfo). preferentemente, la composicion comprende uno de los compuestos descritos a continuacion:
4-{3-[(3R)-3-({3-metoxi-1-[4-(2-{[(4-metilfenil)sulfonil]oxi}etoxi)fenil]-3-oxopropil}carbamoil)piperidin-1-il]-3- oxopropil}piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo 5
4-{3-[(3R)-3-({(7S)-3-ferc-butoxi-1-[4-(2-{[(4-metilfenil)sulfonil]oxi}etoxi)-fenil]-3-oxopropil}carbamoil)piperidin-1-il]-3- 10 oxopropil}piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo
4-{3-[(3R)-3-({(7S)-3-metoxi-1-[5-(2-{[(4-metilfenil)sulfonil]oxi}etoxi)piridin-3-il]-3-oxopropil}carbamoil)piperidin-1-il]-3- 15 oxopropil}piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo
4-{3-[(3R)-3-{[3-metoxi-1-{5-[4-(2-{[(4-metilfenil)sulfonil]oxi}etoxi)fenil]-piridin-3-il}-3-oxopropil]carbamoil}piperidin-1-il]- 3-oxopropil}piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo 5
4-{3-[(3R)-3-{[(7S)-3-ferc-butoxi-1-{5-[4-(2-{[(4-metilfenil)sulfonil]oxi}etoxi)-fenil]piridin-3-il}-3-oxopropil]carbamoil}- piperidin-1 -il]-3-oxopropil}piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo
10
4-{3-[(3R)-3-({1-[5-(4-cloro-3-cianofenil)piridin-3-il]-3-metoxi-3-oxopropil}-carbamoil)piperidin-1-il]-3- oxopropil}piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo 15
4-{3-[(3R)-3-{[(7S)-1-{5-[(3-bromo-4-cianobencil)oxi]piridin-3-il}-3-metoxi-3-oxopropil]carbamoil}piperidin-1-il]-3- oxopropil}piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo
20
4-{3-[(3R)-3-{[3-metoxi-1-{5-[3-(2-{[(4-metilfenil)sulfonil]oxi}etoxi)fenil]-piridin-3-il}-3-oxopropil]carbamoil}piperidin-1-il]- 3-oxopropil}piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo
5
4-{3-[(3R)-3-{[3-metoxi-1-{5-[2-(2-{[(4-metilfenil)sulfonil]oxi}etoxi)-fenil]piridin-3-il}-3-oxopropil]carbamoil}piperidin-1-il]- 3-oxopropil}piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo
10
4-{3-[(3R)-3-({1-[5-(4-cloro-3-nitrofenil)piridin-3-il]-3-metoxi-3-oxopropil}-carbamoil)piperidin-1-il]-3-oxopropil}piperidin- 1-carboxilato de ferc-butilo
15
4-{3-[(3R)-3-({1-[5-fluoro-4’-(2-{[(4-metilfenil)sulfonil]oxi}etoxi)bifenil-3-il]-3-metoxi-3-oxopropil}carbamoil)piperidin-1- il]-3-oxopropil}piperidin-1 -carboxilato de ferc-butilo
5
10
15
20
25
4-{3-[(3R)-3-{[(7S)-3-ferc-butoxi-1-(5-{[3-(2-{[(4-metilfenil)sulfonil]oxi}-etoxi)fenil]etinil}piridin-3-il)-3- oxopropil]carbamoil}piperidin-1-il]-3-oxopropil}-piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo
4-{3-[(3R)-3-{[(7S)-3-ferc-butoxi-1-(5-{2-[4-(2-{[(4-metilfenil)sulfonil]oxi}-etoxi)fenil]etil}piridin-3-il)-3- oxopropil]carbamoil}piperidin-1-il]-3-oxopropil}-piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo
4-{3-[(3R)-3-{[(7S)-3-ferc-butoxi-1-(5-{2-[3-(2-{[(4-metilfenil)sulfonil]oxi}-etoxi)fenil]etil}piridin-3-il)-3- oxopropil]carbamoil}piperidin-1-il]-3-oxopropil}-piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo
incluyendo diastereomeros, mezclas de los mismos, y sales adecuadas de los mismos.
Definiciones
Los siguientes terminos describen elementos estructurales genericos y especfficos del armazon qufmico de los compuestos de la presente invencion, asf como grupos funcionales y sustituyentes unidos a ellos. Se pueden combinar de una manera que de como resultado estructuras en lfnea con las reglas de Valencia qufmica y de estabilidad qufmica adecuada, esto es, compuestos que son suficientemente robustos para sobrevivir al aislamiento hasta un grado util de pureza a partir de una mezcla de reaccion, y para su uso pretendido, tal como la formulacion en una composicion farmaceutica.
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
60
65
Para los fines de la presente invencion, los terminos tienen los siguientes significados, excepto que se especifique de otro modo:
La expresion “grupo protector de amina”, como se emplea en la presente memoria por si misma o como parte de otro grupo, es conocida por u obvia para un experto en la materia, que se escoge de, pero no se limita a, una clase de grupos protectores, a saber, carbamatos, amidas, imidas, N-alquilaminas, N-arilaminas, iminas, enaminas, boranos, grupos protectores de N-P, N-sulfenilo, N-sulfonilo y N-sililo, y que se escogen de, pero no se limitan a, los descritos en el libro de texto de Greene y Wuts, Protecting groups in Organic Synthesis, tercera edicion, paginas 494-653, incluido en la presente memoria como referencia. El “grupo protector de amina” es preferentemente carbobenciloxi (Cbz), p-metoxibencilcarbonilo (Moz o MeOZ), ferc-butiloxicarbonilo (BOC), 9- fluorenilmetiloxicarbonilo (FMOC), bencilo (Bn), p-metoxibencilo (PMB), 3,4-dimetoxibencilo (DMPM), p- metoxifenilo (PMP), trifenilmetilo (tritilo), metoxifenildifenilmetilo (MMT), o el grupo amino protegido es un grupo 1,3-dioxo-1,3-dihidro-2H-isoindol-2-ilo (ftalimido) o un grupo azido.
La expresion “grupo protector de carboxilo”, como se emplea en la presente memoria por si misma o como parte de otro grupo, es conocida por u obvia para un experto en la materia, que se escoge de, pero no se limita a, una clase de grupos protectores, a saber, esteres, amidas e hidrazidas, y que se escoge de, pero no se limita a, los descritos en el libro de texto de Greene y Wuts, Protecting groups in Organic Synthesis, tercera edicion, paginas 369-453, incluido en la presente memoria como referencia. El “grupo protector de carboxilo” es preferentemente metilo, etilo, propilo, butilo, ferc-butilo, alilo, bencilo, 4-metoxibencilo o 4-metoxifenilo.
El termino “alquilo”, por si mismo o como parte de otro grupo, se refiere a un grupo alquilo de cadena lineal o de cadena ramificada con 1 a 6 atomos de carbono, tal como, por ejemplo, metilo, etilo, propilo, isopropilo, butilo, isobutilo, terc-butilo, pentilo, isopentilo, neopentilo, hexilo.
El termino “halogeno” representa fluor, cloro y bromo.
La expresion “grupo saliente”, como se emplea en la presente memoria por si misma o como parte de otro grupo, es conocida por u obvia para un experto en la materia, y significa que un atomo o grupo de atomos es separable de una sustancia qufmica mediante un agente nucleofilo. Los ejemplos se dan, por ejemplo, en P. Stang et al. Synthesis (1982), p. 85-125, tabla 2 (p. 86; (la ultima entrada de esta tabla 2 necesita ser corregida: “n-C4F9S(O)2-O- nonaplana” en lugar de “n-C4H9S(O)2-O- nonaplana”), Carey y Sundberg, Organische Synthese, (1995), paginas 279-281, tabla 5.8; o Netscher, Recent Res. Dev. Org. Chem., 2003, 7, 71-83, esquema 1, 2, 10 y 15; y otros). (Coenen, Fluorine-18 Labeling Methods: Features and Possibilities of Basic Reactions, (2006), en: Schubiger P.A., Friebe M., Lehmann L., (eds), PET-Chemistry - The Driving Force in Molecular Imaging. Springer, Berlin Heidelberg, p. 15-50, explfcitamente: esquema 4 p. 25, esquema 5 p. 28, tabla 4 p. 30, figura 7 p. 33),.
Preferentemente, el “grupo saliente” es fluoruro, cloruro, bromuro, yoduro, o un grupo saliente de sulfonato, incluyendo, pero sin limitarse a, metilsulfoniloxi, (4-metilfenil)sulfoniloxi, trifluorometilsulfoniloxi, nonafluorobutilsulfoniloxi, (4-bromofenil)sulfoniloxi, (4-nitrofenil)sulfoniloxi, (2-nitrofenil)sulfoniloxi, (4- isopropilfenil)sulfoniloxi, (2,4,6-triisopropil-fenil)sulfoniloxi, (2,4,6-trimetilfenil)sulfoniloxi, (4-tercbutilfenil)-sulfoniloxi, (4-metoxifenil)sulfoniloxi.
La expresion “unidad estructural de 18F”, como se emplea en la presente memoria por si misma o como parte de otro grupo, es conocida por u obvia para un experto en la materia, que se escoge de una clase de compuestos usados para un metodo indirecto de fluoracion con 18F via un grupo prostetico. Esto significa que un grupo primario marcado con 18F contiene un grupo funcional adicional adecuado para acoplar este grupo prostetico a una segunda molecula. Este grupo funcional puede ser un grupo saliente, incluyendo, pero sin limitarse a, un halogeno o un grupo saliente de sulfonato. Los ejemplos se dan, por ejemplo para la 18F-fluoroalquilacion, en Block et al. J. Label. Compd. Radiopharm. (1988), p. 201-216 y para la 18F-fluoroacilacion, en Block et al. J. Label. Compd. Radiopharm. (1988), p. 185-200. El grupo funcional tambien puede ser otro resto electrofilo como un aldehfdo, usado por ejemplo para un acoplamiento, via aminacion reductora, a la segunda molecula (Wilson et al. J. Label. Compd. Radiopharm. (1990), p. 1189-1199). Como alternativa, el grupo funcional tambien puede ser un resto nucleofilo, por ejemplo una amina, usada para la 18F-fluoroamidacion como en Shia et al. Biochem. (1989), p. 4801-4806. preferentemente, la “unidad estructural de 18F” se selecciona de entre grupo de grupos prosteticos usados para la 18F-fluoroalquilacion, como n- [18F]-fluoroalquil-1-arilsulfonatos, como n-[18F]-fluoroalcoxialquil-1-arilsulfonatos y n-[18F]-fluoroalquil-1-halogenuros. Mas preferentemente, la “unidad estructural de 18F” es bromo-[18F]fluorometano, 1-bromo-2-[18Flfluoroetano, 1- bromo-2-[18F]fluoropropano, metanosulfonato de 2-[18F]fluoroetilo, 4-metilbencenosulfonato de 2-[18F]fluoroetilo, 4- nitrobencenosulfonato de 2-[18F]fluoroetilo, metanosulfonato de 2-[18F]fluoropropilo, 4-metilbencenosulfonato de 2- [18F]fluoropropilo, 4-nitrobencenosulfonato de 2-[18F]fluoropropilo, metanosulfonato de 2-[2-(2-
[18F]fluoroetoxi)etoxi]etilo, 4-metilbencenosulfonato de 2-[2-(2-[18F]fluoroetoxi)etoxi]-etilo y 4-nitrobencenosulfonato de 2-[2-(2-[18F]fluoroetoxi)etoxi]etilo.
Si los centros quirales u otras formas de centros isomericos no se definen de otro modo en un compuesto segun la presente invencion, todas las formas de tales estereoisomeros, incluyendo los isomeros E y Z y los diastereomeros, estan destinadas a estar cubiertas en la presente memoria. Los compuestos que contienen centros quirales se
5
10
15
20
25
30
35
40
45
pueden usar como una mezcla diastereomerica o como una mezcla enriquecida diastereomericamente, o estas mezclas isomericas se pueden separar usando tecnicas bien conocidas, y se puede usar un estereoisomero individual solo. En los casos en los que los compuestos pueden existir en formas tautomericas, cada forma tautomerica se contempla como incluida en esta invencion, ya sea que exista en el equilibrio o que exista predominantemente en una forma.
Las sales adecuadas de los compuestos segun la invencion incluyen sales de acidos minerales, acidos carboxflicos y acidos sulfonicos, por ejemplo sales de acido clorhfdrico, acido bromhfdrico, acido sulfurico, acido fosforico, acido metanosulfonico, acido etanosulfonico, acido toluenosulfonico, acido bencenosulfonico, acido naftalenodisulfonico, acido acetico, acido trifluoroacetico, acido propionico, acido lactico, acido tartarico, acido malico, acido cftrico, acido fumarico, acido maleico y acido benzoico.
Las sales adecuadas de los compuestos segun la invencion tambien incluyen sales de bases habituales, tales como, a tftulo de ejemplo y a tftulo de preferencia, sales de metales alcalinos (por ejemplo sales de sodio y sales de potasio), sales de metales alcalino-terreos (por ejemplo, sales de calcio y sales de magnesio), y sales de amonio, derivadas de amonfaco o de aminas organicas que tienen 1 a 16 atomos de carbono, tales como, a tftulo de ejemplo y a tftulo de preferencia, etilamina, dietilamina, trietilamina, etildiisopropilamina, monoetanolamina, dietanolamina, trietanolamina, diciclohexilamina, dimetilaminoetanol, procafna, dibencilamina, N-metilmorfolina, arginina, lisina, etilendiamina y N-metilpiperidina.
El termino “trombo (trombos)” describe todos los tipos de coagulos sangufneos (trombos venosos y arteriales). El termino “trombo (trombos)” incluye tambien cualesquiera terminos de frases como “depositos tromboticos” y “sitios de formacion de trombo”. Los trombos surgen habitualmente como resultado de la etapa de coagulacion de la sangre en hemostasia, o patologicamente como resultado de diferentes causas, como trastornos tromboticos. En esta investigacion, se incluyen todos los trombos que contienen plaquetas, asf como trombos circulantes (embolos), que se quedan atascados en alguna parte en el arbol vascular.
El termino “purificacion” como se emplea en la presente memoria, tiene el objetivo de eliminar el exceso de producto secundario, tal como 18F-fluoruro, y concentrar y atrapar el producto de reaccion. La purificacion se lleva a cabo mediante cualquier metodo conocido por un experto en la materia, adecuado como radiotrazador, por ejemplo cromatograffa, HPLC, cartuchos de extraccion en fase solida, o columna.
Sfntesis general
En general, la sfntesis de estos compuestos esta documentada en la bibliograffa:
1) J. Med. Chem. 1999, 42, 5254-5265
2) Organic Progress Research & Development 2003, 7, 866-872
Las modificaciones y mejoras de estos metodos se describen con detalle en la parte experimental. La ruta principal a los compuestos de Formula I se ejemplifica en el Esquema 1:
Esquema 1
5
10
15
20
25
Los compuestos de Formula I obtenidos en la sfntesis resumida en el Esquema 1 son mezclas de dos diastereomeros. Estos se separaron al final de la sfntesis mediante HPLC preparativa. Fue posible (ejemplos 4, 5, 8, 25 y 27) llevar a cabo un enfoque estereoselectivo a los acidos 3-amino-3-arilpropanoicos protegidos (Esquema 2 a 4). En general, son aplicables metodos estereoselectivos para la sfntesis de b-aminoacidos (M. Liu, M.P. Sibi, Tetrahedron 2002 58, 7991-8035 o E. Juaristi, V. Soloshonok Eds. de Enantioselective Synthesis of Beta-Amino Acids, segunda edicion, Wiley-Interscience, ISBN 0-471-46738-3).
Esquema 2
El ester ferc-butflico del acido (£)-3-(5-bromo-piridin-3-il)acrflico se sintetizo como se describio en el documento WO 2010/038081, pagina 143. La preparacion del ester ferc-butflico del acido (S)-3-amino-3-(5-bromo-piridin-3-il)- propionico se logro como se describe en J. Chem. Soc., Perkin Trans. 1, 2002, 1858-1868, para el ester ferc-butflico del acido (S)-3-amino-3-(piridin-3-il)propionico 14. Para este compuesto, se especifica una rotacion optica [ajo - 17,6°, mientras que el bromoderivado obtenido dio [ajo -18,8°. El producto final de la sfntesis usando este intermedio enantiomerico puro dio el diastereomero activo con un exceso enantiomerico de 53% (esquema 2). En un segundo enfoque (esquema 3), el 3-piridilnitrilo se pudo transformar en la arilenamina, que se redujo estereoselectivamente (Yi Hsiao et. al. J. Am. Chem. Soc. 2004 126, 9918-9919) al ester terc-butflico del acido 3-amino-3-arilpropanoico enantiomericamente enriquecido. El ester se acoplo al fragmento de piperidina via un ester activado. Transformaciones estandar posteriores de grupos protectores, o transformaciones catalizadas por paladio como la reaccion de Suzuki o de Sonogashira, suministraron los compuestos ejemplificados.
estereose ectiva
base
ejemplos
transformaciones de
grupos protectores,
acoplamiento de Suzuki
o de Sonogashira
Esquema 3
En un tercer enfoque (esquema 4), el diester malonico mixto se acoplo en una reaccion de Mannich estereoselectiva con la BOC-imina generada in situ (J. Song et al., Org. Lett. 2007, 9, 603-606) derivada de la N-BOC-amidosulfona 5 correspondiente en presencia de un catalizador de tiourea quiral (Y. Yamaoka et al., Synthesis 2007, 16, 25712575). Transformaciones estandar posteriores de los grupos protectores, incluyendo la descarboxilacion del monoester malonico sustituido, suministraron los compuestos ejemplificados.
reaccion de Mannich
estereose ectiva
acido
base
ejemplos
transformaciones de grupos
protectores, descarboxilacion
Esquema 4
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
60
65
Los compuestos de formula II y III, que contienen un marcaje de F-18, se obtuvieron segun uno de los tres procedimientos de smtesis general esquematizados mas abajo.
Sintesis general de alquil-F-18 compuestos via marcaje directo
El [18F]fluoruro se produjo mediante bombardeo con protones en un ciclotron usando una diana de plata (1 ml) llena
18 18 18 18
de [ O]-agua para la reaccion de O (p,n) F. El [ F]fluoruro acuoso se hizo pasar a traves de un cartucho (por ejemplo, cartucho de resina QMA Waters, Sep Pak Light QMA n° de referencia: WAT023525). El [18F]fluoruro atrapado se eluyo entonces del cartucho usando una mezcla de Kryptofix® (Kryptofix® es 4,7,13,16,21,24-hexaoxa- 1,10-diazabiciclo[8.8.8]hexacosano) (5,27 mg en 1,5 ml de acetonitrilo) y carbonato potasico (1,0 mg en 0,5 ml de agua). Como alternativa, se uso carbonato de cesio (2,3 mg en 0,5 ml de agua) como base. Esta disolucion de [18F]- fluoruro (hasta 10 GBq) se seco azeotropicamente calentando bajo una corriente de nitrogeno a 110-120°C durante 20-30 minutos. Durante este tiempo, se anadieron 3 x 1 ml de acetonitrilo y se evaporaron. Tras secar, se anadio una disolucion del precursor (2-4 mg en 200-300 ml de acetonitrilo). La vasija de reaccion se calento a 100-110°C durante 10-20 min. para efectuar el marcaje. La mezcla de reaccion bruta se analizo mediante HPLC. El pico del producto se confirmo mediante coinyeccion de la mezcla de reaccion con los patrones fnos de F-19 de formula general II.
Dependiendo de los grupos de proteccion del F-18 intermedio de formula general II, se llevo a cabo una hidrolisis de una etapa o de dos etapas. En el caso de los compuestos de ester metilico de formula general II, a la mezcla de reaccion se anadio NaOH 0,5 M (100 ml), y, tras agitar durante 5-10 min. a 25°C, se anadio HCl 1 M (200 ml), y la agitacion se continuo durante 5-15 min. a 100-110°C. En el caso de compuestos de ester ferc-butilico de formula general II, a la mezcla de reaccion se anadio HCl 1 M (150-400 ml), y la agitacion se continuo durante 5-15 min. a 100-110°C. Tras la hidrolisis total, la mezcla de reaccion se neutralizo opcionalmente con NaOH 1 M, o se diluyo directamente con agua (4 ml) y se transfirio a una HPLC semipreparativa para la purificacion. El pico del producto recogido se diluyo con agua (15-40 ml) y se inmovilizo en un cartucho de separacion C18. El producto puro marcado con F-18 se eluyo del cartucho con etanol puro (1-2 ml). Tras la evaporacion total del etanol a 80-90°C, el F-18 producto final se recogio en agua (100-300 ml).
Sintesis general de aril-F-18 compuestos via marcaje directo
El [18F]fluoruro se produjo mediante bombardeo con protones en un ciclotron usando una diana de plata (1 ml) llena de [18O]-agua para la reaccion de 18O (p, n)18F. El [18F]fluoruro acuoso se hizo pasar a traves de un cartucho (por ejemplo, cartucho de resina QMA Waters, Sep Pak Light QMA n° de referencia: WAT023525). El [18F]fluoruro atrapado se eluyo entonces del cartucho usando una mezcla de Kryptofix® (10,4 mg en 1,5 ml de acetonitrilo) y bicarbonato potasico (2,8 mg en 0,5 ml de agua). Esta disolucion de [18F]-fluoruro (hasta 5 GBq) se seco azeotropicamente calentando bajo una corriente de nitrogeno a 110-120°C durante 20-30 minutos. Durante este tiempo, se anadieron 3 x 1 ml de acetonitrilo y se evaporaron. Tras secar, se anadio una disolucion del precursor (12 mg en 200-300 ml de DMSO). La vasija de reaccion se calento a 150-160°C durante 10-15 min. para efectuar el marcaje. La mezcla de reaccion bruta se analizo mediante HPLC. El pico del producto se confirmo mediante coinyeccion de la mezcla de reaccion con los patrones fnos de F-19 de formula general II. Este F-18 intermedio de formula general II se hidrolizo en un procedimiento de dos etapas. Se anadio NaOH 0,5 M (100 ml) a la mezcla de reaccion, y, tras agitar durante 5-10 min. a 25°C, se anadio HCl 1 M (200 ml), y la agitacion se continuo durante 5-10 min. a 70-80°C.
Tras la hidrolisis total, la mezcla de reaccion se neutralizo opcionalmente con NaOH 1 M, o se diluyo directamente con agua (4 ml) y se transfirio a una HPLC semipreparativa para la purificacion. El pico del producto recogido se diluyo con agua (15-40 ml) y se inmovilizo en un cartucho de separacion C18. El producto puro marcado con F-18 se eluyo del cartucho con etanol puro (1-2 ml). Tras la evaporacion total del etanol a 80-90°C, el F-18 producto final se recogio en agua (100-300 ml).
Sintesis general de alquil-F 18 compuestos via marcaje indirecto con un grupo prostetico de formula general 18F- O(CH2)n-LG, 18F-(OCH2CH2)m-LG, en la que LG representa un grupo saliente adecuado para acoplamiento
El [18F]fluoruro se produjo mediante bombardeo con protones en un ciclotron usando una diana de plata (1 ml) llena de [18O]-agua para la reaccion de 18O (p, n)18F. El [18F]fluoruro acuoso se hizo pasar a traves de un cartucho (por ejemplo, cartucho de resina QMA Waters, Sep Pak Light QMA n° de referencia: WAT023525). El [18F]fluoruro atrapado se eluyo entonces del cartucho usando una mezcla de Kryptofix® (5,27 mg en 1,5 ml de acetonitrilo) y carbonato potasico (1,0 mg en 0,5 ml de agua). Esta disolucion de [18F]-fluoruro (hasta 5 GBq) se seco azeotropicamente calentando bajo una corriente de nitrogeno a 110-120°C durante 20-30 minutos. Durante este tiempo, se anadieron 3 x 1 ml de acetonitrilo y se evaporaron. Tras secar, se anadio una disolucion del precursor del grupo prostetico (10 mg) en DMF u orto-diclorobenceno (500 ml). La vasija de reaccion se calento a 100-130°C durante 10-15 min. para efectuar el marcaje. El grupo prostetico resultante de la formula general 18F-O(CH2)n-LG o
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
60
65
18F-(OCH2CH2)m-LG se purifico via una destilacion (15-25 min. a 100-110°C) bajo una corriente lenta de nitrogeno (por ejemplo, para bromuro de 2-[18F]fluoroetilo) o via una HPLC semipreparativa tras dilucion con agua (4 ml) (por ejemplo, ester 2-[2-(2-[18F]fluoroetoxi)etoxi]etflico del acido tolueno-4-sulfonico). En el caso de la purificacion via HPLC semipreparativa, el pico recogido se diluyo con agua (15-20 ml) y se inmovilizo en un cartucho de separacion C18. El producto puro marcado con F-18 se eluyo del cartucho con acetonitrilo (1-2 ml). El acetonitrilo se evaporo a 90-100°C.
El precursor (2,5 mg) a acoplar al grupo prostetico se disolvio en DMF (100-300 ml), y se anadio NaOH 2 M (20 at) para desprotonacion. Esta mezcla se anade al vial que contiene el grupo prostetico 18F-O(CH2)n-LG o 18F- (OCH2CH2)m-LG. Tras calentar a 100-110°C durante 20-25 min., la mezcla de reaccion reenfriada se trato con NaOH 1-2 M (100 ml). La disolucion se agito durante 10-15 min. adicionales antes de que se anadiese HCl 2-4 M (200 ml). La mezcla se calento durante 10 min. a 100-110°C.
Tras la hidrolisis total, la mezcla de reaccion se neutralizo opcionalmente con NaOH 1 M, o se diluyo directamente con agua (4 ml) y se transfirio a una HPLC semipreparativa para purificacion. El pico del producto recogido se diluyo con agua (15-40 ml) y se inmovilizo en un cartucho de separacion C18. El producto puro marcado con F18 se eluyo del cartucho con etanol puro (1-2 ml). Tras la evaporacion total del etanol a 80-90°C, el F-18-producto final se recogio en agua (100-300 ml).
Descripcion de las figuras
figura 1:
Ensayo de afinidad: En la primera etapa, GPIIb/IIIa humana, purificada de plaquetas humanas, se inmovilizo en una placa solida de 96 pocillos. Despues de 48 horas, las placas se lavaron, y los sitios de union no especffica se bloquearon con Roti®-Block. 2. En la siguiente etapa, las placas se incubaron simultaneamente con un aglutinante de GPIIb/IIIa conocido marcado con tritio (3H) mezclado con concentraciones crecientes de los nuevos compuestos de pequena molecula (inhibidor, 19F). Cuanto mayor es la afinidad del inhibidor, menor fue la fraccion unida del aglutinante de GPIIb/IIIa conocido tritiado (3H). La fraccion de compuesto tritiado (3H), que no es desplazada por el inhibidor, se midio en un contador de centelleo de microplaca.
figura 2:
El diagrama muestra la relacion de sangre a coagulo frente a los valores de IC50 de los compuestos investigados. Cada punto esta marcado con el numero del ejemplo que se acompana. Las relaciones de sangre a coagulo disminuyen al aumentar la afinidad.
Ejemplo 3:
Biodistribucion del compuesto descrito en el ejemplo 41 en ratones. El compuesto se elimino rapidamente de la sangre y se excreto rapidamente por el rinon y el hfgado. No hubo casi fondo en todo el resto del cuerpo tras 15 minutos p.i.
figura 4:
Cinetica de la sangre del compuesto descrito en el ejemplo 40 en macaco. La formacion de imagenes mediante PET se realizo de forma continua desde poco tiempo antes hasta 60 minutos tras la inyeccion. Las muestras de sangre venosa se recogieron a 3, 10, 30 y 60 minutos p.i., y se midieron en un contador gamma (Automatic Gamma Counter Wizard23, Perkin Elmer) y se expresaron como cpm/mg de sangre. Adicionalmente, la concentracion en sangre del compuesto se midio a partir de la imagen de PET durante todo el perfodo de formacion de la imagen, y se expreso como % I D/g. Como ya se mostro en ratones, el compuesto se elimino rapidamente de la sangre.
figura 5:
Formacion de imagenes mediante PET de un trombo arterial en un macaco: La figura muestra un trombo arterial (flecha 2) que se habfa desarrollado en la superficie de un tubo de cateter de polietileno (PE50) rugoso. El trombo ya es visible dentro de la aorta descendente cerca del corazon (flecha 1) en los primeros 15 minutos (imagen izquierda). No hay perdida de senal hasta 60 minutos (imagen derecha). El compuesto se elimina rapidamente de la sangre, y no hay ningun fondo en el tejido y organos adyacentes despues de 15 minutos (imagen derecha).
figura 6:
Formacion de imagenes mediante PET de un trombo arterial en un macaco: La figura muestra dos trombos arteriales (flecha 2) que se habfan desarrollado sobre la superficie de un tubo de cateter de polietileno (PE50) que se habfa hecho rugoso en dos partes con un espacio entremedias. No hay ninguna senal visible entre los trombos, demostrando que el compuesto se une solamente al trombo y no al tubo polimerico solo. El trombo ya es visible
5
10
15
20
25
dentro de la aorta descendente cerca del corazon (flecha 1) en los primeros 15 minutos (imagen izquierda). No hay ninguna perdida de senal hasta 60 minutos (imagen derecha). El compuesto se elimina rapidamente de la sangre, y no hay ningun fondo en tejido u organos adyacentes despues de 15 minutos (imagen derecha).
figura 7:
Trombos arteriales eliminados del macaco 2: La imagen muestra el tubo de cateter de polietileno (PE50, diametro externo: 1 mm) que se habfa hecho rugoso en dos partes (1/3), con un espacio (2) entremedias. El trombo solo se desarrollo en las partes rugosas de la superficie del tubo, y fue extremadamente delgado (aproximadamente 1/10 de mm [flecha 1] o incluso menos [flecha 3]). Esto muestra que incluso los trombos mas pequenos se pueden detectar en cualquier parte en el cuerpo.
figura 8:
Formacion de imagenes mediante PET de trombos arteriales y venosos en un macaco con la dosis reducida de trazador de 15 MBq por animal: La figura muestra varios trombos arteriales (flecha 3) y venosos (flecha 4) que se habfan desarrollado sobre la superficie de tubos de cateter de polietileno (PE50) que se habfan hecho asperos en algunas partes, con espacios entremedias. Todos los trombos se pudieron observar ya en los primeros 15 minutos. Sin embargo, el contraste fue mucho mejor despues de 15 minutos debido al bajo fondo. Ademas de los cateteres trombogenicos, aparecio otro trombo arterial en la imagen, que se encontro en la arteria carotida derecha mas tarde y que se habfa desarrollado muy probablemente como resultado del dano al vaso durante la preparacion. El corazon (imagen izquierda, flecha 1) solamente es visible en los primeros 15 minutos, mientras que el hfgado (imagen derecha, flecha 5) todavfa se puede ver hasta 60 minutos.
Parte experimental
Abreviaturas
- ACN
- acetonitrilo
- Boc
- ferc-butoxicarbonilo
- br
- senal ancha (en datos de RMN)
- CAN
- nitrato cerico amonico
- CI
- ionizacion quimica
- d
- doblete
- DAD
- detector de matriz de diodos
- dd
- doblete de dobletes
- ddd
- doblete de doblete de dobletes
- dt
- doblete de tripletes
- DMF
- W,W-dimetilformamida
- DMSO
- dimetilsulfoxido
- EI
- ionizacion electronica
- ELSD
- detector de dispersion de luz tras la evaporacion
- ESI
- ionizacion por electropulverizacion
- EtOAc
- acetato de etilo
- EtOH
- etanol
- Fmoc
- fluorenilmetiloxicarbonilo
- Fu
- Fraccion no unida
- Hal
- halogenuro
- HATU
- hexafluorofosfato de W-[(dimetilamino)(3H-[1,2,3]triazolo[4,5-b]piridin-3-iloxi)-metiliden]- N-metilmetanaminio
- HPLC
- cromatograffa de lfquidos de altas prestaciones
- HT
- rendimiento elevado
- GBq
- Giga Bequerel
- K2.2.2
- 4,7,13,16,21,24-hexaoxa-1,10-diazabiciclo[8.8.8]hexacosano
- K2CO3
- carbonato potasico
- MBq
- Mega Bequerel
- LCMS
- cromatograffa de lfquidos-espectroscopfa de masas
- MWCO
- corte de peso molecular
- MeCN
- acetonitrilo
- MeOH
- metanol
- MS
- Espectrometrfa de masas
- MTB
- metil terc-butil eter
- m
- multiplete
- mc
- multiplete centrado
- NH4Cl
- cloruro de amonio
5
10
15
20
25
- RMN
- espectroscopfa de resonancia magnetica nuclear: los desplazamientos qufmicos (8) se dan en ppm
- q
- cuadruplete (cuartete)
- PMB
- para-metoxibencilo
- Rt
- tiempo de retencion
- RT
- temperatura ambiente
- s
- singlete
- t
- triplete
- TBAF
- fluoruro de tetrabutilamonio
- TEE
- ecocardiograffa transesofagica
- THF
- tetrahidrofurano
- THP
- tetrahidropirano
- TIA
- ataque isquemico transitorio
- UPLC
- cromatograffa de lfquidos de ultra prestaciones
Los ejemplos se analizaron y caracterizaron mediante los siguientes metodos analfticos para determinar el tiempo de retencion y el espectro de masas caracterfsticos:
- Sistema:
- Waters Acquity UPLC-MS: Manipulador de disolvente binario, manipulador/organizador de muestras, manipulador de columna, PDA, ELSD, SQD 3001
- Columna:
- Acquity UPLC BEH C18 1,7 50x2,1mm
- Disolvente:
- A1 = H2O + 0,1% de HCOOH
- A2 = H2O + 0,2% de NH3
- B1 = acetonitrilo
- Gradiente:
- 0-1,6 min. 1-99% de B, 1,6-2,0 min., 99% de B
- Caudal:
- 0,8 ml/min.
- Temperatura:
- 60°C
- Inyeccion:
- 2,0 ml
- Deteccion:
- intervalo de barrido de DAD 210-400 nm ® tabla de picos
- ELSD
- Metodo:
- MS con intercambio de ESI+, ESI- ® diversos intervalos de barrido posibles
Metodo 1: UPLC (ACN-HCOOH):
Instrumento: Waters Acquity UPLC-MS SQD 3001; columna: Acquity UPLC BEH C18 1,7 50 x 2,1 mm; eluyente A: agua + 0,1% de acido formico, eluyente B: acetonitrilo; gradiente: 0-1,6 min. 1-99% de B, 1,6-2,0 min. 99% de B; caudal 0,8 ml/min.; temperatura: 60°C; inyeccion: 2 ml; barrido de DAD: 210-400 nm; ELSD.
Metodo 2: UPLC (ACN-NH3):
Instrumento: Waters Acquity UPLC-MS SQD 3001; columna: Acquity UPLC BEH C18 1,7 50 x 2,1mm; eluyente A: agua + 0,2% de amonfaco, eluyente B: acetonitrilo; gradiente: 0-1,6 min. 1-99% de B, 1,6-2,0 min. 99% de B; caudal 0,8 ml/min.; temperatura: 60°C; inyeccion: 2 ml; barrido de DAD: 210-400 nm; ELSD.
Ejemplos
Ejemplo 1
Acido (3S)-3-[3-(2-fluoroetoxi)fenil]-3-[({(3R)-1-[3-(piperidin-4-il)propanoil]piperidin-3-il}carbonil)amino]propanoico
5
10
15
20
25
30
35
40
45
3-[(ferc-Butoxicarbonil)amino]-3-(3-hidroxifenil)propanoato de metilo
Se anadieron 3-amino-3-(3-hidroxifenil)propanoato de metilo (2,78 g, 14,2 mmoles) en THF (70 ml) y trietilamina (3 ml, 21,3 mmoles) a una disolucion de dicarbonato de diferc-butilo (4,66 g, 21,3 mmoles) en THF (70 ml), y la mezcla se agito durante 72 horas. Se anadio disolucion saturada de cloruro de amonio, y la mezcla se extrajo con diclorometano. La capa organica se lavo con salmuera, se seco sobre sulfato de sodio y se concentro a vacfo. El residuo se purifico mediante cromatograffa sobre gel de sflice (acetato de etilo en hexano 0 hasta 30%) para producir 3,24 g de 3-[(ferc-butoxicarbonil)amino]-3-(3-hidroxifenil)propanoato de metilo.
RMN 1H (400 MHz, DMSOd6): 8 = 1,35 (s, 9 H), 2,56 - 2,75 (m, 2 H), 3,55 (s, 3 H), 4,81 (m, 1 H), 6,60 (ddd, 1 H), 6,69 (m, 2 H), 7,08 (dd, 1 H), 7,42 (d, 1 H), 9,37 (s, 1 H) ppm.
Ejemplo 1b
3-[(ferc-Butoxicarbonil)amino]-3-[3-(2-fluoroetoxi)fenil)propanoato de metilo
A 3-[(terc-butoxicarbonil)amino]-3-(3-hidroxifenil)propanoato de metilo (4,46 g, 20 mmoles) en THF se anadio carbonato de cesio (9,84 g, 30 mmoles) y 1-fluoro-2-yodoetano (5 g, 30 mmoles), y la mezcla se agito durante 9 horas. Tras filtrar, el filtrado se concentro a vacfo para producir 5,0 g de 3-[(ferc-butoxicarbonil)amino]-3-[3-(2- fluoroetoxi)fenil)propanoato de metilo.
RMN 1H (400 MHz, CDCla): 8 = 1,43 (br. s, 9 H), 2,83 (m, 2 H), 3,63 (s, 3 H), 4,23 (ddd, 2 H), 4,76 (ddd, 2 H), 5,08 (br., 1 H), 5,48 (br., 1 H), 6,82 (dd, 1 H), 6,88 (s, 1 H), 6,91 (d, 1 H), 7,26 (t, 1 H) ppm.
Ejemplo 1c
3-Amino-3-[3-(2-fluoroetoxi)fenil]propanoato de metilo
A 3-[(ferc-butoxicarbonil)amino]-3-[3-(2-fluoroetoxi)fenil)propanoato de metilo (5,0 g, 20 mmoles) en diclorometano se anadio acido trifluoroacetico (5,64 ml, 73 mmoles). Tras agitar durante 24 horas a temperatura ambiente, se anadio acido trifluoroacetico adicional (1,13 ml), y la agitacion se continuo durante 20 horas. La mezcla se concentro a presion reducida, y el residuo se purifico mediante cromatograffa sobre gel de sflice (metanol en diclorometano 0% hasta 40%)) para producir 4,9 g de 3-amino-3-[3-(2-fluoroetoxi)fenil]propanoato de metilo.
RMN 1H (300 MHz, DMSOd6): 8 = 2,86 - 3,12 (m, 2 H), 4,13 - 4,24 (m, 1 H), 4,24 - 4,34 (m, 1 H), 4,52 - 4,75 (m, 2 H), 4,75 - 4,95 (m, 1 H), 7,00 (dd, 1 H), 7,06 (d, 1 H), 7,12 (d, 1 H), 7,28 - 7,42 (m, 1 H), 8,44 (br. s., 2H) ppm.
5
10
15
20
25
30
35
40
45
4-{3-[(3R)-3-({(1-[3-(2-Fluoroetoxi)fenil]-3-metoxi-3-oxopropil}carbamoil)piperidin-1-il]-3-oxopropil}piperidin-1- carboxilato de ferc-butilo
Se suspendio acido (3R)-1-{3-[1-(ferc-butoxicarbonil)piperidin-4-il]propanoil}piperidin-3-carboxflico (105 mg, 286 mmoles, Bioorg. Med. Chem. 13 (2005) 4343-4352, Compuesto 10) en 2 ml de W,W-dimetilformamida, y se enfrio hasta 0°C. Se anadieron HATU (117 mg, 308 mmoles), una disolucion de 3-amino-3-[3-(2-fluoroetoxi)fenil]propanoato de metilo (53 mg, 220 mmoles) en 3,4 ml de W,W-dimetilformamida y N-etil-diisopropilamina (0,11 ml, 660 mmoles). La mezcla se agito a 0°C durante 5 minutos y a temperatura ambiente durante 24 horas. Se anadio agua, y la mezcla se extrajo con diclorometano, se lavo con disolucion saturada de cloruro de sodio y se seco sobre sulfato de sodio. La disolucion se concentro a presion reducida, y el residuo se purifico mediante cromatograffa sobre una columna de fase amfnica (Separtis® Flash-NH2, acetato de etilo en diclorometano 0% hasta 100%) para producir 88 mg de 4-{3- [(3R)-3-({(1-[3-(2-fluoroetoxi)fenil]-3-metoxi-3-oxopropil}carbamoil)piperidin-1-il]-3-oxopropil}piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo.
UPLC (ACN-HCOOH): Rt. = 1,22/1,23 min.
MS (ES+): m/e = 592,44 (M + H+)
Ejemplo 1e
Acido 3-({[(3R)-1-{3-[1-(ferc-butoxicarbonil)piperidin-4-il]propanoil}piperidin-3-il]carbonil}amino)-3-[3-(2-
fluoroetoxi)fenil]propanoico
Se disolvio 4-{3-[(3R)-3-({(1-[3-(2-fluoroetoxi)fenil]-3-metoxi-3-oxopropil}carbamoil)piperidin-1-il]-3-oxopropil}piperidin-
1-carboxilato de ferc-butilo (67 mg, 102 mmoles) en metanol (12,4 ml), y se anadio hidroxido de bario octahidratado (2,2 g, 7,1 mmoles). La mezcla se agito a temperatura ambiente durante una hora y despues se diluyo con salmuera y con eter dietflico. La mezcla se acidifico con acido clorhfdrico 1 M, y las fases se separaron. La concentracion de la fase organica dio 70 mg de acido 3-({[(3R)-1-{3-[1-(ferc-butoxicarbonil)piperidin-4-il]propanoil}piperidin-3- il]carbonil}amino)-3-[3-(2-fluoroetoxi)fenil]propanoico.
UPLC (ACN-HCOOH): Rt. = 1,12/1,14 min.
MS (ES+): m/e = 578,3 (M + H+)
RMN 1H (500 MHz, DMSOd6, a 80°C): 8 = 0,82 - 1,05 (m, 2 H), 1,05 - 1,51 (m, 6 H), 1,40(s, 9 H), 1,56 - 1,70 (m, 4 H), 2,29 - 2,41 (m, 3 H), 2,58 - 2,80 (m, 5 H), 3,20 (br., 3H), 3,91 (d, 2 H), 4,25 (ddd, 2 H), 4,73 (ddd, 2 H), 5,19 (m, 1 H), 6,85 (m, 1 H), 6,94 (m, 2 H), 7,23 (td, 1 H), 8,15 (d, 1 H) ppm.
Ejemplo 1f
Acido (3S)-3-[3-(2-fluoroetoxi)fenil]-3-[({(3R)-1-[3-(piperidin-4-il)propanoil]piperidin-3-il}carbonil)amino]propanoico A acido 3-({[(3R)-1-{3-[1-(ferc-butoxicarbonil)piperidin-4-il]propanoil}piperidin-3-il]carbonil}amino)-3-[3-(2-
fluoroetoxi)fenil]propanoico (65 mg, 90 mmoles) en dioxano se anadio una disolucion 4 M de acido clorhfdrico en dioxano (0,23 ml, 900 mmoles), y se agito durante 3 horas a temperatura ambiente. La disolucion se concentro a presion reducida, y el residuo se purifico mediante HPLC preparativa para producir 8,7 mg de acido (3S)-3-[5-(2- fluoroetoxi)fenil]-3-[({(3R)-1-[3-(piperidin-4-il)propanoil]piperidin-3-il}carbonil)amino]propanoico.
5
- Columna:
- C18 YMC-ODS AQ 10 mm 170 x 25 mm
- Disolvente:
- A = H2O + 0,1% de HCOOH
- B = acetonitrilo
- Gradiente:
- 0 - 0,25 min. 10% de B, 0,25 -10 min. 10 - 50% de B
- Caudal:
- 60 ml/min.
- Temperatura:
- RT
- Deteccion:
- 261 nm
- Rt.:
- 4,84-5,73 min.
UPLC (ACN-HCOOH): Rt. = 0,76 min.
MS (ES+): m/e = 478,29 (M + H+)
10
RMN 1H (500 MHz, DMSOd6, 80°C): 8 = 1,20 - 1,70 (m, 8 H), 1,80 (m, 2 H), 2,17 (br. 1H), 2,25 - 2,50 (m, 4 H), 2,60 - 2,71 (m, 3 H), 3,05- 3,25 (m, 3 H), 3,72 (br., 3 H), 4,23 (ddd, 2 H), 4,73 (ddd, 2 H), 5,10 (m, 1 H), 6,80 (m, 1 H), 6,91 (m, 2 H), 7,21 (t, 1 H), 8,28 (br., 1 H) ppm.
15 Ejemplo 2
Acido (3S)-3-[4-(2-fluoroetoxi)fenil]-3-[({(3R)-1-[3-(piperidin-4-il)propanoil]piperidin-3-il}carbonil)amino]propanoico
20
Ejemplo 2a
Ester metflico del acido 3-amino-3-(4-hidroxifenil)propionico
25
Se suspendieron 5,298 g (29,24 mmoles) de acido 3-amino-3-(4-hidroxifenil)propionico comercial en 136 ml de metanol, la mezcla se enfrio hasta 0°C y se anadieron lentamente 3,20 ml (43,86 mmoles) de cloruro de tionilo. La mezcla se agito a temperatura ambiente durante 20 horas y se concentro. El residuo se trato con disolucion saturada 30 de hidrogenocarbonato de sodio y se extrajo con diclorometano y diclorometano/2-propanol 8:2. La parte organica se concentro para dar 5,09 g (80%) de ester metflico del acido 3-amino-3-(4-hidroxifenil)propionico.
UPLC (ACN-HCOOH): Rt. = 0,45 min.
35 MS (ES+): m/e = 179,07 (M + H+ - NH3)
5
10
15
20
25
30
35
40
4-[3-((3R)-3-{[1-(4-Hidroxifenil)-3-metoxi-3-oxopropil]carbamoil}piperidin-1-il)-3-oxopropil]piperidin-1-carboxilato de
ferc-butilo
Se suspendieron 490,75 mg (1,33 mmoles) de acido (3R)-1-{3-[1-(terc-butoxicarbonil)piperidin-4- il]propanoil}piperidin-3-carboxflico (Bioorg. Med. Chem. 13 (2005) 4343-4352, Compuesto 10) en 8 ml de N,N- dimetilformamida, y se enfriaron hasta 0°C. Se anadieron 0,545 g (1,43 mmoles) de HATU, una disolucion de 200,0 mg (1,0 mmoles) de ester metflico del acido 3-amino-3-(4-hidroxi-fenil)-propionico en 12 ml de N,N-dimetilformamida y 0,53 ml (3,07 mmoles) de N-etil-diisopropilamina. La mezcla se agito a 0°C durante 5 minutos y a temperatura ambiente durante 24 horas. Se anadieron 20 ml de agua, y la mezcla se extrajo con diclorometano, se lavo con disolucion saturada de cloruro de sodio, se seco sobre sulfato de sodio y se concentro a vacfo. La cromatograffa sobre 28 g de gel de sflice basica (diclorometano/etanol 100/0-95/5-90/10-80/20) dio 465 mg (83%) de 4-[3-((3R)-3- {[1-(4-hidroxifenil)-3-metoxi-3-oxopropil]carbamoil}piperidin-1-il)-3-oxopropil]piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo.
UPLC (ACN-HCOOH): Rt. = 1,11 min.
MS (ES+): m/e = 546,31 (M + H+)
MS (ES-): m/e = 590,23 (M + HCOO-)
Ejemplo 2c
4-{3-[(3R)-3-({1-[4-(2-Fluoroetoxi)fenil]-3-metoxi-3-oxopropil}carbamoil)piperidin-1-il]-3-oxopropil}piperidin-1- carboxilato de ferc-butilo
Se disolvieron 150 mg (0,28 mmoles) de ester terc-butflico del acido 4-(3-{(R)-3-[1-(4-hidroxi-fenil)-2-metoxicarbonil- etilcarbamoil]-piperidin-1-il}-3-oxo-propil)-piperidin-1-carboxflico en 3 ml de tetrahidrofurano. Se anadieron 179 mg (0,55 mmoles) de carbonato de cesio y 91 mg (0,52 mmoles) de 1-yodo-2-fluoroetano. La mezcla se agito a temperatura ambiente durante 60 horas y se filtro. El filtrado se concentro. La cromatograffa sobre 10 g de gel de sflice (diclorometano/etanol 100/0-90/10) dio 90 mg (50%) de 4-{3-[(3R)-3-({1-[4-(2-fluoroetoxi)fenil]-3-metoxi-3- oxopropil}carbamoil)piperidin-1-il]-3-oxopropil}piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo y 40 mg de material de partida.
UPLC (ACN-HCOOH): Rt. = 1,24 - 1,25 min.
MS (ES+): m/e = 592,31 (M + H+)
5
10
15
20
25
30
Acido 3-({[(3R)-1-{3-[1-(ferc-butoxicarbonil)piperidin-4-il]propanoil}piperidin-3-il]carbonil}amino)-3-[4-(2-
fluoroetoxi)fenil]propanoico
Se disolvieron 96 mg (0,16 mmoles) de 4-{3-[(3R)-3-({1-[4-(2-fluoroetoxi)fenil]-3-metoxi-3- oxopropil}carbamoil)piperidin-1-il]-3-oxopropil}piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo en 20 ml de metanol. Se anadieron 512 mg (1,62 mmoles) de hidroxido de bario octahidratado. La mezcla se agito a temperatura ambiente durante 70 horas, y despues se diluyo con 20 ml de agua. La mezcla se acidifico con acido clorhfdrico 1 N hasta pH 4 y se extrajo con 2 x 40 ml de diclorometano. La concentracion de la fase organica dio 93 mg (99%) de acido 3- ({[(3R)-1-{3-[1-(ferc-butoxicarbonil)piperidin-4-il]propanoil}piperidin-3-il]carbonil}amino)-3-[4-(2- fluoroetoxi)fenil]propanoico.
UPLC (ACN-HCOOH): Rt. = 1,14- 1,16 min.
MS (ES+): m/e = 578,30 (M + H+)
MS (ES-): m/e = 576,30 (M - H), 622,16 (M + HCOO')
Ejemplo 2e
Acido (3S)-3-[4-(2-fluoroetoxi)fenil]-3-[({(3R)-1-[3-(piperidin-4-il)propanoil]piperidin-3-il}carbonil)amino]propanoico
Se disolvieron 93 mg (0,16 mmoles) de ester del acido 3-({[(3R)-1-{3-[1-(7erc-butoxicarbonil)piperidin-4- il]propanoil}piperidin-3-il]carbonil}amino)-3-[4-(2-fluoroetoxi)fenil]propanoico en 3,3 ml de dioxano. Se anadieron 0,4 ml (1,6 mmoles) de acido clorhfdrico 4 N. La mezcla se agito a temperatura ambiente durante 48 horas, y despues se concentro para dar 131 mg, que se purificaron mediante HPLC:
- Sistema:
- Sistema de autopurificacion Waters: Bomba 254, Manipulador de muestras 2767, CFO, DAD 2996, ELSD 2424, SQD 3001
- Columna:
- XBrigde C18 5 mm 100 x 30 mm
- Disolvente:
- A = H2O + 0,2% de NH3
- B = Metanol
- Gradiente:
- 0-1 min. 10% de B, 1-8 min. 10-70% de B
- Caudal:
- 50 ml/min.
- Temperatura:
- RT
- Disolucion:
- 131 mg/2 ml de DMSO/MeOH 1:1
- Inyeccion:
- 2 x 1 ml
5
10
15
20
25
30
35
- Deteccion:
- Intervalo de barrido de DAD 210-400 nm
- MS ESI+, ESI-, intervalo de barrido 160-1000 m/z
- ELSD
- Fracciones:
- Rt. en min DAD TAC Cantidad
- -11
- 5,0-5,4 >99% 19 mg
- -12
- 5,7-6,0 90,2% 16 mg
- Las fracciones se concentraron, se mezclaron con ferc.-butanol, y se liofilizaron.
La fraccion 12 contenfa el isomero deseado. UPLC (ACN-HCOOH): Rt. = 0,65 min.
MS (ES+): m/e = 478,37 (M + H+) MS (ES-): m/e = 476,43 (M - H)
Ejemplo 3
Acido (3S)-3-[5-(2-fluoroetoxi)piridin-3-il]-3-[({(3R)-1-[3-(piperidin-4-il)propanoil]-piperidin-3-
il}carbonil)amino]propanoico
Ejemplo 3a
4-{3-[(3R)-3-({(1S)-3-terc-Butoxi-1-[5-(2-fluoroetoxi)piridin-3-il]-3-oxopropil}carbamoil)piperidin-1-il]-3- oxopropil}piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo
Se disolvio 4-{3-[(3R)-3-{[(1S)-3-terc-butoxi-1-(5-hidroxipiridin-3-il)-3-oxopropil]carbamoil}piperidin-1-il]-3-
oxopropil}piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo (ejemplo 25e, 800 mg, 1,36 mmoles) en W,W-dimetilformamida (52 ml). Se anadieron carbonato de cesio (1,1 g, 3,4 mmoles) y tosilato de 2-fluoroetilo (445 mg, 2,04 mmoles). La mezcla se agito a temperatura ambiente durante 3,5 horas, se anadieron carbonato de cesio (70 mg, 0,21 mmoles) y tosilato de
2-fluoroetilo (28 mg, 0,13 mmoles) adicionales, y la agitacion se continuo durante 2,5 horas a temperatura ambiente y 17 horas a 5°C. La mezcla se paralizo mediante adicion de disolucion acuosa saturada de cloruro de amonio y se extrajo con eter dietflico y acetato de etilo. Los extractos combinados se lavaron con salmuera y se secaron sobre sulfato de sodio. La disolucion se concentro a presion reducida, y el residuo se purifico mediante cromatograffa sobre gel de sflice (acetato de etilo en hexano 20 hasta 100%, seguido de dioxano en acetato de etilo 0 hasta 50%) para producir 670 mg de 4-{3-[(3R)-3-({(1S)-3-ferc-butoxi-1-[5-(2-fluoroetoxi)piridin-3-il]-3-
oxopropil}carbamoil)piperidin-1-il]-3-oxopropil}piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo.
UPLC (ACN-HCOOH): Rt. = 1,24 min.
MS (ES+): m/e = 633,5 (M + H+)
Acido (3S)-3-[5-(2-fluoroetoxi)piridin-3-il]-3-[({(3R)-1-[3-(piperidin-4-il)propanoil]-piperidin-3-
il}carbonil)amino]propanoico 5
Se calento durante 30 minutos a 60°C y 10 minutos a 100°C 4-{3-[(3R)-3-({(1S)-3-ferc-butoxi-1-[5-(2- fluoroetoxi)piridin-3-il]-3-oxopropil}carbamoil)piperidin-1-il]-3-oxopropil}piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo (660 mg, 1,06 mmoles) en acido formico (12 ml). La disolucion se concentro a presion reducida, y el residuo se purifico mediante HPLC preparativa para producir 311 mg de acido (3S)-3-[5-(2-fluoroetoxi)piridin-3-il]-3-[({(3R)-1-[3- 10 (piperidin-4-il)propanoil]piperidin-3-il}carbonil)amino]propanoico.
- Columna:
- C18 YMC-ODS AQ 10 pm 200 x 51 mm
- Disolvente:
- A = H2O + 0,1% de HCOOH
- B = acetonitrilo
- Gradiente:
- 0 - 1 min. 1% de B, 1-10 min. 1-25% de B,
- Caudal:
- 240 ml/min.
- Temperatura:
- RT
- Deteccion:
- 277 nm
- Rt.:
- 5,21 -7,05 min
UPLC (ACN-HCOOH): Rt. = 0,50 min.
15 MS (ES+): m/e = 479,4 (M + H+)
RMN 1H (400 MHz, DMSOd6): 8 = 1,13 - 1,29 (m, 2 H), 1,35 - 1,77 (m, 7 H), 1,88 (d, 1 H), 2,00 (m, 1 H), 2,21 - 2,43 (m, 4 H), 2,50 - 2,78 (m, 3 H), 2,96 - 3,11 (m, 1 H), 3,15 (d, 1 H), 3,28 (d, 1 H), 3,64 (br., 4 H), 4,30 (ddd, 2 H), 4,75 (ddd, 2 H), 5,09 (m, 1 H), 7,27 (s, 1 H), 8,10 (s, 1 H), 8,16 (s, 1 H), 8,53 (d, 1 H) ppm.
20
Ejemplo 4
Acido (3S)-3-(3-{2-[2-(2-fluoroetoxi)etoxi]etoxi}fenil)-3-[({(3R)-1-[3-(piperidin-4-il)propanoil]piperidin-3-
il}carbonil)amino]propanoico 25
Ejemplo 4a
30 {[3-(Benciloxi)fenil](fenilsulfonil)metil}carbamato de ferc-butilo
A 3-(benciloxi)benzaldehfdo (5 g, 23,6 mmoles) y sal sodica del acido bencenosulffnico (3,9 g, 23,6 mmoles) en THF 35 (23 ml) se anadio agua (51,5 ml), carbamato de ferc-butilo (2,76 g, 23,6 mmoles) y acido formico (2,66 ml, 70
mmoles). La mezcla se agito durante 4 dfas y se filtro. El precipitado se lavo con agua y se trituro en hexano que contiene 9% de diclorometano. Tras filtrar, los solidos se secaron a vacfo para producir 7,24 g de {[3- (benciloxi)fenil](fenilsulfonil)metil}carbamato de ferc-butilo.
40 RMN 1H (400 MHz, CDCla): 8 =1,27 (s, 9 H), 5,07 (s, 2 H), 5,73 (d, 1 H), 5,90 (d, 1 H), 6,94 - 7,14 (m, 3 H), 7,30 - 7,49 (m, 6 H), 7,55 (t, 2 H), 7,65 (t, 1 H), 7,92 (d, 2 H) ppm.
5
10
15
20
25
30
35
40
45
2-{(S)-[3-(Benciloxi)fenil][(ferc-butoxicarbonil)amino]metil}propanodioato de ferc-butilo y metilo
Se suspendio {[3-(benciloxi)fenil](fenilsulfonil)metil}carbamato de ferc-butilo (3,0 g, 5,93 mmoles) en una mezcla de tolueno (21,6 ml) y agua (16 ml). A 0°C, se anadieron malonato de ferc-butilo y metilo (1,2 ml, 7,1 mmoles), carbonato de cesio (1,94 g, 5,9 mmoles) y 1-[3,5-bis(trifluorometil)fenil]-3-[(1R,2R)-(-)-2-
(dimetilamino)ciclohexil]tiourea (246 mg, 0,59 mmoles), y la mezcla se agito durante 72 horas a 0°C. Tras almacenar a -20°C durante 72 horas, la mezcla se diluyo con agua y acetato de etilo, y tras filtrar, las fases se separaron, y la fase acuosa se extrajo con acetato de etilo. Los extractos combinados se secaron sobre sulfato de sodio y se concentraron. El residuo se purifico mediante cromatograffa sobre gel de sflice (acetato de etilo en hexano 0 hasta 35%) para producir 2,17 g de 2-{(S)-[3-(benciloxi)fenil][(ferc-butoxicarbonil)amino]metil}propanodioato de ferc-butilo y metilo enantiomericamente enriquecido. RMN 1H (400 MHz, CDCl3): 8 = 1,20 (s, 4,5 H), 1,36 (s, 9 H), 1,41 (s, 4,5 H), 3,04 (br., 3 H), 3,47 (s, 1,5 H), 3,66 (s, 1,5 H), 3,88 (m, 1 H), 5,09 (s, 2 H), 5,06 - 5,11 (m, 1 H), 6,85 - 6,93 (m, 2 H), 7,02 (m, 1 H), 7,21 (m, 1 H), 7,28 - 7,46 (m, 5 H) ppm.
Ejemplo 4c
2-[(S)-[3-(Benciloxi)fenil]({[(3R)-1-{3-[1-(ferc-butoxicarbonil)piperidin-4-il]propanoil}piperidin-3- il]carbonil}amino)metil]propanodioato de ferc-butilo y metilo
A 2-{(S)-[3-(benciloxi)fenil][(ferc-butoxicarbonil)amino]metil}propanodioato de ferc-butilo y metilo (600 mg, 1,24 mmoles) se anadio acido formico frfo 0°C (13,8 ml), y la disolucion se almaceno a 5°C durante 20 horas. Se anadio hielo, y el pH se ajusto a 8 mediante adicion de disolucion acuosa de hidrogenocarbonato de sodio. La fase acuosa se extrajo con acetato de etilo. Los extractos combinados se lavaron con disolucion acuosa de hidrogenocarbonato de sodio y salmuera, y se secaron sobre sulfato de sodio. La concentracion a presion reducida produjo 390 mg de 2- {(S)-amino[3-(benciloxi)fenil]metil}propanodioato de ferc-butilo y metilo bruto. Se suspendio acido (3R)-1-{3-[1-(ferc- butoxicarbonil)piperidin-4-il]propanoil}piperidin-3-carboxflico (447 mg, 1,21 mmoles) en W,W-dimetilformamida (14 ml), y se enfrio hasta 0°C. Se anadieron HATU (646 mg, 1,7 mmoles), una disolucion del 2-{(S)-amino[3- (benciloxi)fenil]metil}propanodioato de ferc-butilo y metilo bruto (780 mg, 1,21 mmoles) en W,W-dimetilformamida (14 ml) y N-etil-diisopropilamina (350 ml, 3,64 mmoles). La mezcla se agito a 0°C durante 2 horas. Se anadio agua con hielo y disolucion saturada de cloruro de amonio, la mezcla se extrajo con acetato de etilo, y se seco sobre sulfato de sodio. La disolucion se concentro a presion reducida, y el residuo se purifico mediante cromatograffa sobre una columna de fase amfnica (Separtis® Flash-NH2, acetato de etilo en hexano 0 hasta 100%) para producir 700 mg de [(S)-[3-(benciloxi)fenil]({[(3R)-1-{3-[1-(ferc-butoxicarbonil)piperidin-4-il]propanoil}piperidin-3- il]carbonil}amino)metil]propanodioato de ferc-butilo y metilo.
UPLC (ACN-HCOOH): Rt. = 1,53 min.
5
10
15
20
25
30
35
40
MS (ES-): m/e = 780,82 (M + HCOO-)
Ejemplo 4d
4-{3-[(3R)-3-({(1S)-1-[3-(Benciloxi)fenil]-3-metoxi-3-oxopropil}carbamoil)piperidin-1-il]-3-oxopropil}piperidin-1- carboxilato de ferc-butilo
Se disolvio 2-[(S)-[3-(benciloxi)fenil]({[(3R)-1-{3-[1-(ferc-butoxicarbonil)piperidin-4-il]propanoil}piperidin-3-
il]carbonil}amino)metil]propanodioato de ferc-butilo y metilo (700 mg, 0,95 mmoles) en acido formico (5,4 ml), y se almaceno durante 5 dfas a temperatura ambiente. La mezcla se concentro a presion reducida para producir 640 g de acido (3S)-3-[3-(benciloxi)fenil]-2-(metoxicarbonil)-3-[({(3R)-1-[3-(piperidin-4-il)propanoil]piperidin-3-
il}carbonil)amino]propanoico bruto. El ester metflico en THF (65 ml) y trietilamina (2,5 ml, 18 mmoles) se calentaron a 60°C durante 4 horas. Tras concentrar a presion reducida, el residuo se purifico mediante HPLC preparativa para producir 147 mg de (3S)-3-[3-(benciloxi)fenil]-3-[({(3R)-1-[3-(piperidin-4-il)propanoil]piperidin-3- il}carbonil)amino]propanoato de metilo.
- Columna:
- C18 Chromatorex 10 mm 30 x 125 mm
- Disolvente:
- A = H2O + 0,1% de HCOOH
- B = acetonitrilo
- Gradiente:
- 0 - 0,5 min. 1% de B, 0,5 - 10 min. 1 - 60% de B,
- Caudal:
- 65 ml/min.
- Temperatura:
- RT
- Deteccion:
- 277 nm
- Rt.:
- 7,09-7,40 min
A la piperidina libre en diclorometano (1,5 ml) y trietilamina (0,11 ml) se anadio dicarbonato de di-terc-butilo (90 ml, 0,38 mmoles), y la mezcla se agito durante 2 horas para producir, tras concentrar a vacfo, 159 mg de 4-{3-[(3R)-3- ({(1S)-1-[3-(benciloxi)fenil]-3-metoxi-3-oxopropil}carbamoil)piperidin-1-il]-3-oxopropil}piperidin-1-carboxilato de ferc- butilo.
UPLC (ACN-HCOOH): Rt. = 1,41 min.
MS (ES+): m/e = 636,59 (M + H+)
MS (ES-): m/e = 680,44 (M + HCOO')
Ejemplo 4e
4-{3-[(3R)-3-({(1S)-1-[3-hidroxifenil]-3-metoxi-3-oxopropil}carbomoil)piperidin-1-il]-3-oxopropil}piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo
Se disolvio 4-{3-[(3R)-3-({(1S)-1-[3-(benciloxi)fenil]-3-metoxi-3-oxopropil}carbamoil)piperidin-1-il]-3-
oxopropil}piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo (650 mg, 1,02 mmoles) en acetato de etilo (45 ml) y metanol (7,4 ml), y se anadio paladio sobre carbon (65 mg, 10%). La mezcla se agito bajo una atmosfera de hidrogeno durante 16
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
horas, se filtro a traves de celita, que se lavo con metanol. El filtrado se concentro y se purifico mediante cromatograffa sobre gel de sflice (metanol en acetato de etilo 0% hasta 25%) para producir 422 mg de 4-{3-[(3R)-3- {[(7S)-1-(3-hidroxifenil)-3-metoxi-3-oxopropil]carbamoil}piperidin-1-il]-3-oxopropil}piperidin-1-carboxilato de terc-
butilo.
RMN 1H (400 MHz, DMSOda, a 80°C): 8 = 1,01 (m, 2 H), 1,26 - 1,53 (m, 4 H), 1,41 (s, 9 H), 1,65 (m, 4 H), 1,83 (m, 1 H), 2,23 - 2,38 (m, 3 H), 2,65 - 2,76 (m, 5 H), 3,57 (s, 3 H), 3,92 (m, 3 H), 5,19 (q, 1 H), 6,64 (d, 1 H), 6,72 (m, 2 H), 7,09 (t, 1 H), 8,05 (d, 1 H), 9,04 (br., 1 H) ppm
UPLC (ACN-HCOOH): Rt. = 1,14 min.
MS (ES+): m/e = 546,53 (M + H+)
MS (ES-): m/e = 590,43 (M + HCOO-)
Ejemplo 4f
4-{3-[(3R)-3-{[(1S)-1-(3-{2-[2-(2-Fluoroetoxi)etoxi]etoxi}fenil)-3-metoxi-3-oxopropil]carbamoil}piperidin-1-il]-3- oxopropil}piperidin-1-carboxilato de terc-butilo
A 4-{3-[(3R)-3-{[(7S)-1-(3-hidroxifenil)-3-metoxi-3-oxopropil]carbamoil}piperidin-1-il]-3-oxopropil}piperidin-1-
carboxilato de terc-butilo (26 mg, 50 mmoles) en DMF (6,6 ml) se anadio carbonato de cesio (38,8 mg, 120 mmoles) y 4-metilbencenosulfonato de 2-[2-(2-fluoroetoxi)etoxi]etilo (22 mg, 70 mmoles) mientras se agita a temperatura ambiente. Despues de 5 horas, se anadio tolueno, y la mezcla se concentro a vacfo. El residuo libre de DMF se purifico mediante cromatograffa de capa fina preparativa sobre gel de sflice (diclorometano en acetato de etilo al 30%) para producir 21 mg de 4-{3-[(3R)-3-{[(7S)-1-(3-{2-[2-(2-fluoroetoxi)etoxi]etoxi}fenil)-3-metoxi-3-
oxopropil]carbamoil}piperidin-1-il]-3-oxopropil}piperidin-1-carboxilato de terc-butilo.
RMN 1H (400 MHz, DMSOd6, a 80°C): 8 = 1,02 (m, 2 H), 1,25 - 1,51 (m, 5 H), 1,41 (s, 9 H), 1,55 - 1,70 (m, 4 H), 1,82 (m, 1 H), 2,26 - 2,38 (m, 3 H), 2,73 - 2,81 (m, 4 H), 3,40 (m, 1 H), 3,56 - 3,65 (m, 5 H), 3,58 (s, 3 H), 3,69 - 3,74 (m, 1 H), 3,74 - 3,81 (m, 2 H), 3,91 (br., 2 H), 4,06 - 4,14 (m, 2 H) 4,50 (ddd, 2 H), 5,21 (q, 1 H), 6,82 (dd, 1 H), 6,85 - 6,96 (m, 2 H), 7,21
(t, 1 H), 8,08 (d, 1 H) ppm.
UPLC (ACN-HCOOH): Rt. = 1,26 min.
MS (ES+): m/e = 680,54 (M + H+)
MS (ES-): m/e = 724,50 (M + HCOO')
Ejemplo 4g
Acido (3S)-3-(3-{2-[2-(2-fluoroetoxi)etoxi]etoxi}fenil)-3-[({(3R)-1-[3-(piperidin-4-il)propanoil]piperidin-3-
il}carbonil)amino]propanoico
Se disolvio 4-{3-[(3R)-3-{[(7S)-1-(3-{2-[2-(2-fluoroetoxi)etoxi]etoxi}fenil)-3-metoxi-3-oxopropil]carbamoil}piperidin-1-il]-
3-oxopropil}piperidin-1-carboxilato de terc-butilo (20,3 mg, 27 mmoles) en terc.-butanol (0,77 ml) y metanol (0,76 ml), y se anadio hidroxido de bario octahidratado (42 mg, 0,13 mmoles). Tras agitar durante 60 minutos a temperatura ambiente, el disolvente se separo por destilacion a 0°C mediante alto vacfo. El residuo se disolvio en agua (1 ml) y se acidifico mediante acido formico (2 ml). Despues de 18 horas a 5°C, se anadio acido formico adicional (2 ml). Despues de 3 horas a temperatura ambiente, el disolvente se separo por destilacion a 0°C mediante alto vacfo, y el residuo se purifico mediante HPLC preparativa para producir 8,4 mg de acido (3S)-3-(3-{2-[2-(2- fluoroetoxi)etoxi]etoxi}fenil)-3-[({(3R)-1-[3-(piperidin-4-il)propanoil]piperidin-3-il}carbonil)amino]propanoico.
Columna:_____| C18 Chromatorex 10 mm 30 x 125 mm
- Disolvente:
- A = H2O + 0,1% de HCOOH
- B = acetonitrilo
- Gradiente:
- 0 -0,5 min. 15% de B, 0,5 - 10 min. 15 - 70% de B,
- Caudal:
- 65 ml/min.
- Temperatura:
- RT
- Deteccion:
- 285 nm
- Rt.:
- 3,48 -4,19 min
UPLC (ACN-HCOOH): Rt. = 0,69 min.
MS (ES+): m/e = 566,41 (M + H+)
5
MS (ES-): m/e = 564,37 (M - H)
Ejemplo 5
10 Acido (3S)-3-(5-{2-[2-(2-fluoroetoxi)etoxi]etoxi}piridin-3-il)-3-[({(3R)-1-[3-(piperidin-4-il)propanoil]piperidin-3-
il}carbonil)amino]propanoico
15 Ejemplo 5a
{[5-(Benciloxi)piridin-3-il](fenilsulfonil)metil}carbamato de ferc-butilo
20
A 5-(benciloxi)piridin-3-carbaldehfdo (3,61 g, 16,9 mmoles, Harrowven, D.C. et al. Tetrahedron, 2001 57 p. 4447 - 4454) y sal sodica del acido bencenosulffnico (2,7 g, 16,6 mmoles) en THF (16,3 ml) se anadio agua (36,3 ml), carbamato de ferc-butilo (1,94 g, 16,6 mmoles) y acido formico (1,9 ml, 49 mmoles). La mezcla se agito durante 4 dfas y se filtro. El filtrado se agito durante 2 dfas adicionales y se filtro nuevamente. Los precipitados formados se 25 lavaron con agua y se trituraron en hexano que contiene 9% de diclorometano. Tras filtrar, los solidos se secaron a vacfo para producir 3,17 g de {[5-(benciloxi)piridin-3-il](fenilsulfonil)metil}carbamato de terc-butilo.
RMN 1H (400 MHz, CDCla): 8 = 1,27 (s, 9 H), 5,13 (s, 2 H), 5,83 (d, 1 H), 5,97 (d, 1 H), 7,32 - 7,50 (m, 6 H), 7,53 - 7,63 (m, 2 H), 7,68 (t, 1 H), 7,93 (d, 2 H), 8,27 (s, 1 H), 8,44 (d, 1 H) ppm.
30
Ejemplo 5b
2-{(S)-[5-(Benciloxi)piridin-3-il][(ferc-butoxicarbonil)amino]metil}propanodioato de ferc-butilo y metilo
5
10
15
20
25
30
35
Se suspendio {[5-(benciloxi)piridin-3-il](fenilsulfonil)metil}carbamato de ferc-butilo (2,2 g, 4,84 mmoles) en una mezcla de tolueno (16,5 ml) y agua (13 ml). A 0°C, se anadio malonato de terc-butilo y metilo (1,0 ml, 5,8 mmoles), carbonato de cesio (1,58 g, 4,84 mmoles) y 1-[3,5-bis(trifluorometil)fenil]-3-[(1R,2R)-(-)-2-
(dimetilamino)ciclohexil]tiourea (200 mg, 0,48 mmoles), y la mezcla se agito durante 48 horas a 0°C. Tras almacenar a 5°C durante 72 horas, la mezcla se diluyo con agua y con acetato de etilo, las fases se separaron, y la fase acuosa se extrajo con acetato de etilo. Los extractos combinados se secaron sobre sulfato de sodio y se concentraron. El residuo se purifico mediante cromatograffa sobre gel de sflice (acetato de etilo en hexano 0% hasta 60%) para producir 1,54 g de 2-{(S)-[5-(benciloxi)piridin-3-il][(ferc-butoxicarbonil)amino]metil}propanodioato de ferc-butilo y metilo enantiomericamente enriquecido.
RMN 1H (300 MHz, CDCla): 8 = 1,36 (s, 4,5 H), 1,43 (s, 9 H), 1,48 (s, 4,5 H), 3,65 (s, 1,5 H), 3,76 - 3,87 (m, 1H), 3,77 (s, 1,5 H), 5,10 (s, 2 H), 5,48 (br., 1 H), 6,27 (br., 1 H), 7,26 (s, 1 H), 7,35 - 7,44 (m, 5 H), 8,21 (d, 1 H), 8,28 (s, 1 H) ppm.
Ejemplo 5c
4-{3-[(3R)-3-{[(2,5-Dioxopirrolidin-1-il)oxi]carbonil}piperidin-1-il]-3-oxopropil}piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo
A acido (3R)-1-{3-[1-(terc-butoxicarbonil)piperidin-4-il]propanoil}piperidin-3-carboxflico (1,91 g, 5,18 mmoles) en 1,2- dimetoxietano (13,5 ml) se anadio N-hidroxisuccinimida (0,60 g, 5,18 mmoles) y 1,3-diciclohexilcarbodiimida (1,18 g, 5,7 mmoles). La disolucion se agito durante 4 horas a temperatura ambiente mientras que se formo un precipitado. La mezcla se enfrio despues hasta 0°C, se filtro, y el solido se lavo con eter dietflico. El filtrado y el lavado con eter dietflico se combinaron y se concentraron para producir 2,61 g de 4-{3-[(3R)-3-{[(2,5-dioxopirrolidin-1 - il)oxi]carbonil}piperidin-1-il]-3-oxopropil}piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo bruto.
UPLC (ACN-HCOOH): Rt. = 1,13 min.
MS (ES+): m/e = 466,31 (M + H+)
Ejemplo 5d
4-{3-[(3R)-3-({(1S)-1-[5-(Benciloxi)piridin-3-il]-3-metoxi-3-oxopropil}carbamoil)piperidin-1-il]-3-oxopropil}piperidin-1- carboxilato de ferc-butilo
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
A 2-{(S)-[5-(benciloxi)piridin-3-il][(ferc-butoxicarbonil)amino]metil}propanodioato de ferc-butilo y metilo en dioxano (15 ml) se anadio una disolucion 4 M de acido clorhfdrico en dioxano (11,2 ml, 45 mmoles) y se agito durante 20 horas. La mezcla se diluyo con dioxano y tolueno, y se concentro a presion reducida. El procedimiento de dilucion y concentracion se repitieron con tolueno y diclorometano para producir 1,64 g de ester monometflico del acido 2-[(S)- amino-(5-benciloxi)piridin-3-il)metil]malonico bruto. El ester monometflico se enfrio hasta 0°C en DMF (18 ml) y una disolucion de 4-{3-[(3R)-3-([(2,5-dioxopirrolidin-1-il)oxi]carbonil}piperidin-1-il]-3-oxopropil}piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo (3,0 g, 5,15 mmoles) y trietilamina (1,94 ml, 13,9 mmoles) en diclorometano (18 ml). La mezcla se agito a 0°C durante 21 horas y despues se calento a 60°C durante una hora. Tras enfriar hasta la temperatura ambiente, se anadio disolucion acuosa saturada de cloruro de amonio. Las fases se separaron, y la fase acuosa se extrajo con eter dietflico y acetato de etilo. Los extractos combinados se secaron sobre sulfato de sodio y se concentraron a vacfo. El residuo se purifico mediante cromatograffa sobre gel de sflice (metanol en acetato de etilo 0% hasta 15%) para producir 1,4 g de 4-{3-[(3R)-3-({(1S)-1-[5-(benciloxi)piridin-3-il]-3-metoxi-3-oxopropil}carbamoil)piperidin-1-il]-3- oxopropil}piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo.
UPLC (ACN-HCOOH): Rt. = 1,25 min.
MS (ES+): m/e = 637,6 (M + H+)
MS (ES-): m/e = 681,5 (M + HCOO')
Ejemplo 5e
4-{3-[(3R)-3-({(1S)-1-[5-(Hidroxi)piridin-3-il]-3-metoxi-3-oxopropil}carbamoil)piperidin-1-il]-3-oxopropil}piperidin-1- carboxilato de ferc-butilo
Se disolvio 4-{3-[(3R)-3-({(1S)-1-[5-(benciloxi)piridin-3-il]-3-metoxi-3-oxopropil}carbamoil)piperidin-1-il]-3-
oxopropil}piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo (650 mg, 1,02 mmoles) en acetato de etilo (45 ml) y metanol (7,4 ml), y se anadio paladio sobre carbon (65 mg, 10%). La mezcla se agito bajo una atmosfera de hidrogeno durante 16 horas, se filtro a traves de celita, que se lavaron con metanol. El filtrado se concentro y se purifico mediante cromatograffa sobre gel de sflice (metanol en acetato de etilo 0% hasta 25%) para producir 422 mg de 4-{3-[(3R)-3- {[(1S)-1-(5-hidroxipiridin-3-il)-3-metoxi-3-oxopropil]carbamoil}piperidin-1-il]-3-oxopropil}piperidin-1-carboxilato de ferc- butilo.
RMN 1H (400 MHz, DMSOd6, a 80°C): 8 = 1,00 (m, 2 H), 1,26 - 1,55 (m, 4 H), 1,40 (s, 9 H), 1,65 (m, 4 H), 1,83 (m, 1 H), 2,17 - 2,40 (m, 3 H), 2,63 - 2,74 (m, 2 H), 2,75 - 2,90 (m, 3 H), 3,58 (s, 3 H), 3,90 (m, 3 H), 5,19 (m, 1 H), 7,08 (d, 1 H), 7,94 - 8,07 (m, 2 H), 8,16 (d, 1 H), 9,57 (br., 1 H) ppm.
UPLC (ACN-HCOOH): Rt. = 0,95 min.
MS (ES+): m/e = 547,4 (M + H+)
Ejemplo 5f
4-{3-[(3R)-3-{[(1S)-1-(5-{2-[2-(2-fluoroetoxi)etoxi]etoxi}piridin-3-il)-3-metoxi-3-oxopropil]carbamoil}piperidin-1-il]-3- oxopropil}piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo
5
10
15
20
25
30
35
40
45
A 4-{3-[(3R)-3-{[(1S)-1-(5-hidroxipiridin-3-il)-3-metoxi-3-oxopropil]carbamoil}piperidin-1-il]-3-oxopropil}piperidin-1- carboxilato de ferc-butilo (30 mg, 60 mmoles) en DMF (7,6 ml) se anadio carbonato de cesio (44,7 mg, 140 mmoles) y 4-metilbencenosulfonato de 2-[2-(2-fluoroetoxi)etoxi]etilo (25 mg, 80mmoles) mientras se agita a temperatura ambiente. Despues de 5 horas, se anadio tolueno, y la mezcla se concentro a vacfo. El residuo libre de DMF se purifico mediante cromatograffa de capa fina preparativa sobre gel de sflice (acetato de etilo) para producir 16,7 mg de 4-{3-[(3R)-3-{[(1S)-1-(5-{2-[2-(2-fluoroetoxi)etoxi]etoxi}piridin-3-il)-3-metoxi-3-oxopropil]carbamoil}piperidin-1-il]-3- oxopropil}piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo.
RMN 1H (400 MHz, MeOD): 8 = 1,00 - 1,19 (m, 2 H), 1,40 - 1,60 (m, 5 H), 1,45 (s, 9 H), 1,73 (m, 4 H), 1,94 (m, 1 H), 2,27 - 2,54 (m, 3 H), 2,73 (br.,2 H), 2,91 (m, 3 H), 3,66 (s, 3 H), 3,64 - 3,72 (m, 7 H), 3,87 (m, 2 H), 4,06 (br., 3 H), 4,23 (m, 2 H), 4,50 (ddd, 2 H), 5,36 (t, 1 H), 7,41 (dd, 1 H), 8,17 (d, 1 H), 8,13 (d, 1 H) ppm.
UPLC (ACN-HCOOH): Rt. = 1,10 min.
MS (ES+): m/e = 681,3 (M + H+)
MS (ES-): m/e = 725,5 (M + HCOO')
Ejemplo 5g
Acido (3S)-3-(5-{2-[2-(2-fluoroetoxi)etoxi]etoxi}piridin-3-il)-3-[({(3R)-1-[3-(piperidin-4-il)propanoil]piperidin-3-
il}carbonil)amino]propanoico
Se disolvio 4-{3-[(3R)-3-{[(1S)-1-(5-{2-[2-(2-fluoroetoxi)etoxi]etoxi}piridin-3-il)-3-metoxi-3-oxopropil]carbamoil}-
piperidin-1 -il]-3-oxopropil}piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo (16,5 mg, 22 mmoles) en terc.-butanol (0,62 ml) y metanol (0,6 ml), y se anadio hidroxido de bario octahidratado (34 mg, 315 mmoles). Tras agitar durante 45 minutos a temperatura ambiente, el disolvente se separo por destilacion a 0°C mediante alto vacfo. El residuo se disolvio en agua (0,3 ml) y se acidifico mediante acido formico (0,9 ml). Despues de 18 horas a 5°C, el disolvente se separo por destilacion a 0°C mediante alto vacfo, y el residuo se purifico mediante HPLC preparativa para producir 1,6 mg de acido (3R)-3-(5-{2-[2-(2-fluoroetoxi)etoxi]etoxi}piridin-3-il)-3-[({(3S)-1-[3-(piperidin-4-il)propanoil]piperidin-3-
il}carbonil)amino]propanoico.
- Columna:
- C18 Chromatorex 10 mm 30 x 125 mm
- Disolvente:
- A = H2O + 0,1% de HCOOH
- B = acetonitrilo
- Gradiente:
- 0-0,5 min. 5% de B, 0,5 - 6 min. 5-40% de B,
- Caudal:
- 150 ml/min.
- Temperatura:
- RT
- Deteccion:
- 285 nm
- Rt:
- 2,36 -2,45 min
UPLC (ACN-HCOOH): Rt. = 0,55 min.
MS (ES+): m/e = 567,4 (M + H+)
MS (ES-): m/e = 565,4 (M - H),
Ejemplo 6
Acido (3S)-3-{5-[3-(2-fluoroetoxi)fenil]piridin-3-il}-3-[({(3R)-1-[3-(piperidin-4-il)propanoil]piperidin-3-
il}carbonil)amino]propanoico
5
10
15
20
25
30
35
40
4-{3-[(3R)-3-({1-[5-(3-Hidroxifenil)piridin-3-il]-3-metoxi-3-oxopropil}carbamoil)piperidin-1-il]-3-oxopropil}piperidin-1- carboxilato de ferc-butilo
A 400,0 mg (0,66 mmoles) de 4-{3-[(3R)-3-{[1-(5-bromopiridin-3-il)-3-metoxi-3-oxopropil]carbamoil}piperidin-1-il]-3- oxopropil}piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo (ejemplo 8c) en 16 ml de tolueno se anadieron 15,17 mg (0,01 mmoles) de tetraquis(trifenilfosfina)paladio(0), 108,6 mg (0,79 mmoles) de acido (3-hidroxifenil)boronico en 4,0 ml de etanol, y 118,3 mg (2,04 mmoles) de fluoruro de potasio en 4,0 ml de agua. La mezcla se agito a 100°C durante 26 horas, se diluyo con agua, y se extrajo con acetato de etilo. La fase organica se seco sobre sulfato de sodio y se concentro a vacfo. La cromatograffa sobre 10 g de gel de sflice (diclorometano/etanol 100/0-95/5-90/10) dio 236 mg (58%) de 4-{3-[(3R)-3-({1-[5-(3-hidroxifenil)piridin-3-il]-3-metoxi-3-oxopropil}carbamoil)piperidin-1-il]-3-
oxopropil}piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo.
UPLC (ACN-HCOOH): Rt = 1,10 min.
MS (ES+): m/e = 624,70 (M + H+)
MS (ES-): m/e = 621,46 (M - H), 667,57 (M + HCOO')
Ejemplo 6b
4-{3-[(3R)-3-{[1-{5-[3-(2-Fluoroetoxi)fenil]piridin-3-il}-3-metoxi-3-oxopropil]carbamoil}piperidin-1-il]-3- oxopropil}piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo
Se disolvieron 128 mg (0,21 mmoles) de 4-{3-[(3R)-3-({1-[5-(3-hidroxifenil)piridin-3-il]-3-metoxi-3-
oxopropil}carbamoil)piperidin-1-il]-3-oxopropil}piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo en 2,25 ml de tetrahidrofurano. Se anadieron 134 mg (0,41 mmoles) de carbonato de cesio y 68 mg (0,39 mmoles) de 1-yodo-2-fluoroetano. La mezcla se agito a temperatura ambiente durante 70 horas. Se anadieron 68 mg (0,39 mmoles) de 1-yodo-2-fluoroetano, y la mezcla se agito a temperatura ambiente durante 48 horas. Se anadieron 68 mg (0,39 mmoles) de 1-yodo-2- fluoroetano, y la mezcla se agito a temperatura ambiente durante 70 horas. Se anadieron 68 mg (0,39 mmoles) de 1- yodo-2-fluoroetano, y la mezcla se agito a temperatura ambiente durante 24 horas. Se anadieron 68 mg (0,39 mmoles) de 1-yodo-2-fluoroetano, 2 ml de tetrahidrofurano y 134 mg (0,41 mmoles) de carbonato de cesio, y la mezcla se agito a temperatura ambiente durante 24 horas. Se anadieron 68 mg (0,39 mmoles) de 1-yodo-2- fluoroetano, y la mezcla se agito a temperatura ambiente durante 24 horas. Se anadieron 68 mg (0,39 mmoles) de 1- yodo-2-fluoroetano, y la mezcla se agito a temperatura ambiente durante 24 horas. Se anadieron 68 mg (0,39 mmoles) de 1-yodo-2-fluoroetano, y la mezcla se agito a temperatura ambiente durante 70 horas, se diluyo con agua, y se extrajo con acetato de etilo. La fase organica se seco sobre sulfato de sodio y se concentro a vacfo. La
5
10
15
20
25
30
35
40
cromatograffa sobre 10 g de gel de sflice (diclorometano/etanol 100/0-90/10) dio 100 mg (65%) de 4-{3-[(3R)-3-{[1- {5-[3-(2-fluoroetoxi)fenil]piridin-3-il}-3-metoxi-3-oxopropil]carbamoil}piperidin-1-il]-3-oxopropil}piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo.
UPLC (ACN-HCOOH): Rt. = 1,20 min.
MS (ES+): m/e = 669,3 (M + H+)
MS (ES-): m/e = 713,5 (M + HCOO-)
Ejemplo 6c
Acido 3-({[(3R)-1-{3-[1-(ferc-butoxicarbonil)piperidin-4-il]propanoil}piperidin-3-il]carbonil}amino)-3-{5-[3-(2-
fluoroetoxi)fenil]piridin-3-il}propanoico
Se disolvieron 95 mg (0,14 mmoles) de 4-{3-[(3R)-3-{[1-{5-[3-(2-fluoroetoxi)fenil]piridin-3-il}-3-metoxi-3- oxopropil]carbamoil}piperidin-1-il]-3-oxopropil}piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo en 17 ml de metanol. Se anadieron 448 mg (1,42 mmoles) de hidroxido de bario octahidratado. La mezcla se agito a temperatura ambiente durante 20 horas y despues se concentro para dar acido 3-({[(3R)-1-{3-[1-(ferc-butoxicarbonil)piperidin-4- il]propanoil}piperidin-3-il]carbonil}amino)-3-{5-[3-(2-fluoroetoxi)fenil]piridin-3-il}propanoico.
UPLC (ACN-HCOOH): Rt. = 1,12 min.
MS (ES+): m/e = 655,5 (M + H+)
MS (ES-): m/e = 653,6 (M - H)
Ejemplo 6d
Acido (3S)-3-{5-[3-(2-fluoroetoxi)fenil]piridin-3-il}-3-{[(3R)-1-(3-piperidin-4-il-propionil)piperidin-3-
carbonil]amino}propionico
La mezcla obtenida en el ejemplo 9c que contiene 93 mg (0,14 mmoles) de ester terc-butflico del acido 4-{3-[(R)-3- (2-carboxi-1-{5-[3-(2-fluoro-etoxi)-fenil]-piridin-3-il}-etilcarbamoil)-piperidin-1-il]-3-oxo-propil}-piperidin-1-carboxflico se disolvio en 8,7 ml de dioxano. Se anadieron 1,07 ml (4,26 mmoles) de acido clorhfdrico 4 N. La mezcla se agito a temperatura ambiente durante 20 horas. Se anadieron 0,178 ml (0,71 mmoles) de acido clorhfdrico 4 N. La mezcla se agito a temperatura ambiente durante 24 horas. Se anadieron 8,0 ml de dioxano y 0,178 ml (0,71 mmoles) de acido clorhfdrico 4 N. La mezcla se agito a temperatura ambiente durante 72 horas y despues se concentro. Al residuo se anadio una pequena cantidad de agua y de disolucion saturada de hidrogenocarbonato de sodio para
5
10
15
20
25
obtener un pH = 6. La mezcla se concentro y se extrajo con acetato de etilo/etanol 9:1 y con diclorometano/metanol 9:1. Las disoluciones organicas se filtraron, se combinaron y se concentraron para dar 55 mg, que se purificaron mediante HPLC:
- Sistema:
- Sistema de autopurificacion Waters: Bomba 254, Manipulador de muestras 2767, CFO, DAD 2996, ELSD 2424, SQD 3001
- Columna:
- XBrigde C18 5 mm 100 x 30 mm
- Disolvente:
- A = H2O + 0,1% de HCOOH
- B = Metanol
- Gradiente:
- 0-1 min. 15% de B, 1-8 min. 15-70% de B
- Caudal:
- 50 ml/min.
- Temperatura:
- RT
- Disolucion:
- 55 mg/2 ml de DMSO/MeOH 1:1
- Inyeccion:
- 2 x 1 ml
- Deteccion:
- intervalo de barrido de DAD 210-400 nm
- MS ESI+, ESI-, intervalo de barrido 160-1000 m/z
- ELSD
- Fracciones:
- Rt. en min DAD TAC Cantidad
- 11
- 7,2-7,8 78,7% 8 mg
- 12
- 7,8-7,2 74,2% 2 mg
- 13
- 8,2-9,0 97,3% 9mg
- Las fracciones se concentraron.
La fraccion 13 contenfa el isomero deseado.
UPLC (ACN-HCOOH): Rt. = 0,95 min.
MS (ES+): m/e = 555,12 (M + H+)
MS (ES-): m/e = 553,17 (M - H)
Ejemplo 7
Acido (3S)-3-{5-[4-(2-fluoroetoxi)fenil]piridin-3-il}-3-[({(3R)-1-[3-(piperidin-4-il)propanoil]piperidin-3-
il}carbonil)amino]propanoico
Ejemplo 7a
4-{3-[(3R)-3-({1-[5-(4-Hidroxifenil)piridin-3-il]-3-metoxi-3-oxopropil}carbamoil)piperidin-1-il]-3-oxopropil}piperidin-1- carboxilato de ferc-butilo
5
10
15
20
25
30
35
40
A 300,0 mg (0,49 mmoles) de 4-{3-[(3R)-3-{[1-(5-bromopiridin-3-il)-3-metoxi-3-oxopropil]carbamoil}piperidin-1-il]-3- oxopropil}piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo (ejemplo 8c) en 12 ml de tolueno se anadieron 11,4 mg (0,01 mmoles) de tetraquis(trifenilfosfina)paladio(0), 81,5 mg (0,59 mmoles) de acido (4-hidroxifenil)boronico en 3,0 ml de etanol y 88,7 mg (1,53 mmoles) de fluoruro de potasio en 3,0 ml de agua. La mezcla se agito a 100°C durante 4 horas, se diluyo con agua, y se extrajo con acetato de etilo. La fase organica se seco sobre sulfato de sodio y se concentro a vacfo. La cromatograffa sobre 10 g de gel de sflice (diclorometano/etanol 100/0-95/5-90/10) dio 218 mg (71%) de 4- {3-[(3R)-3-({1-[5-(4-hidroxifenil)piridin-3-il]-3-metoxi-3-oxopropil}carbamoil)piperidin-1-il]-3-oxopropil}piperidin-1- carboxilato de ferc-butilo.
UPLC (ACN-HCOOH): Rt. = 1,02 min.
MS (ES+): m/e = 624,8 (M + H+)
MS (ES-): m/e = 621,5 (M - H), 667,6 (M + HCOO-)
Ejemplo 7b
4-(3-{(3R)-3-[(1-{5-[4-(2-Fluoroetoxi)fenil]piridin-3-il}-3-metoxi-3-oxopropil)carbamoil]piperidin-1-il}-3- oxopropil)piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo
Se disolvieron 120 mg (0,19 mmoles) de 4-{3-[(3R)-3-({1-[5-(4-hidroxifenil)piridin-3-il]-3-metoxi-3-
oxopropil}carbamoil)piperidin-1-il]-3-oxopropil}piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo en 2,11 ml de tetrahidrofurano. Se anadieron 126 mg (0,39 mmoles) de carbonato de cesio y 64 mg (0,37 mmoles) de 1-yodo-2-fluoroetano. La mezcla se agito a temperatura ambiente durante 70 horas. Se anadieron 64 mg (0,37 mmoles) de 1-yodo-2-fluoroetano, y la mezcla se agito a temperatura ambiente durante 48 horas. Se anadieron 64 mg (0,37 mmoles) de 1-yodo-2- fluoroetano, y la mezcla se agito a temperatura ambiente durante 70 horas. Se anadieron 64 mg (0,37 mmoles) de 1- yodo-2-fluoroetano, y la mezcla se agito a temperatura ambiente durante 24 horas. Se anadieron 64 mg (0,37 mmoles) de 1-yodo-2-fluoroetano, 2 ml de tetrahidrofurano y 126 mg (0,39 mmoles) de carbonato de cesio, y la mezcla se agito a temperatura ambiente durante 24 horas. Se anadieron 64 mg (0,37 mmoles) de 1-yodo-2- fluoroetano, y la mezcla se agito a temperatura ambiente durante 24 horas, se diluyo con agua, y se extrajo con acetato de etilo. La fase organica se seco sobre sulfato de sodio y se concentro a vacfo. La cromatograffa sobre 10 g de gel de sflice (diclorometano/etanol 100/0-90/10) dio 84 mg (62%) de 4-(3-{(3R)-3-[(1-{5-[4-(2- fluoroetoxi)fenil]piridin-3-il}-3-metoxi-3-oxopropil)carbamoil]piperidin-1-il}-3-oxopropil)piperidin-1-carboxilato de ferc- butilo.
UPLC (ACN-HCOOH): Rt. = 1,16 min.
MS (ES+): m/e = 669,3 (M + H+)
MS (ES-): m/e = 713,5 (M + HCOO')
5
10
15
20
25
30
35
Acido 3-({[(3R)-1-{3-[1-(ferc-butoxicarbonil)piperidin-4-il]propanoil}piperidin-3-il]carbonil}amino)-3-{5-[4-(2-
fluoroetoxi)fenil]piridin-3-il}propanoico
Se disolvieron 76 mg (0,11 mmoles) de 4-(3-{(3R)-3-[(1-{5-[4-(2-fluoroetoxi)fenil]piridin-3-il}-3-metoxi-3- oxopropil)carbamoil]piperidin-1-il}-3-oxopropil)piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo en 14 ml de metanol. Se anadieron 358,5 mg (1,14 mmoles) de hidroxido de bario octahidratado. La mezcla se agito a temperatura ambiente durante 20 horas y despues se concentro para dar acido 3-({[(3R)-1-{3-[1-(ferc-butoxicarbonil)piperidin-4- il]propanoil}piperidin-3-il]carbonil}amino)-3-{5-[4-(2-fluoroetoxi)fenil]piridin-3-il}propanoico.
UPLC (ACN-HCOOH): Rt. = 1,08 min.
MS (ES'): m/e = 655,5 (M + H+)
MS (ES-): m/e = 653,5 (M - H)
Ejemplo 7d
Acido (3S)-3-{5-[4-(2-fluoroetoxi)fenil]piridin-3-il}-3-[({(3R)-1-[3-(piperidin-4-il)propanoil]piperidin-3-
il}carbonil)amino]propanoico
La mezcla obtenida en el ejemplo 7c, que contiene 74 mg (0,11 mmoles) de acido 3-({[(3R)-1-{3-[1-(ferc- butoxicarbonil)piperidin-4-il]propanoil}piperidin-3-il]carbonil}amino)-3-{5-[4-(2-fluoroetoxi)fenil]piridin-3-il}propanoico, se disolvio en 6,9 ml de dioxano. Se anadieron 0,85 ml (3,39 mmoles) de acido clorhfdrico 4 N. La mezcla se agito a temperatura ambiente durante 48 horas. Se anadieron 0,141 ml (0,56 mmoles) de acido clorhfdrico 4 N. La mezcla se agito a temperatura ambiente durante 24 horas y despues se concentro. Al residuo se anadio una pequena cantidad de agua y de disolucion saturada de hidrogenocarbonato de sodio para obtener un pH = 6. La mezcla se concentro y se extrajo con acetato de etilo/etanol 9:1. Las disoluciones organicas se filtraron y se concentraron para dar 49 mg, que se purificaron mediante HPLC:
- Sistema:
- Sistema de autopurificacion Waters: Bomba 254, Manipulador de muestras 2767, CFO, DAD 2996, ELSD 2424, SQD 3001
- Columna:
- XBrigde C18 5 mm 100 x 30 mm
- Disolvente:
- A = H2O + 0,1% de HCOOH
- B = Metanol
- Gradiente:
- 0-1 min. 10% de B, 1-8 min. 10-50% de B
- Caudal:
- 50 ml/min.
- Temperatura:
- RT
- Disolucion:
- 49 mg/2,1 ml de DMSO/MeOH 1:1
- Inyeccion:
- 3 x 0,7 ml
- Deteccion:
- Intervalo de barrido de DAD 210-400 nm
5
10
15
20
25
30
- MS ESI+, ESI-, intervalo de barrido 160-1000 m/z
- ELSD
- Fracciones:
- Rt. en min DAD TAC Cantidad
- 11
- 5,2-5,8 91,7% 11 mg
- 12
- 6,0-6,9 95,5% 12 mg
- 13
- 5,8-6,0 56,5% 15 mg
- 35,4%
- Las fracciones se concentraron.
La fraccion 12 contenfa el isomero deseado.
UPLC (ACN-HCOOH): Rt. = 0,89 min. MS (ES+): m/e = 555,11 (M + H+)
MS (ES-): m/e = 553,16 (M - H) Ejemplo 8
Acido (3S)-3-{5-[2-(2-fluoroetoxi)fenil]piridin-3-il}-3-[({(3R)-1-[3-(piperidin-4-il)propanoil]piperidin-3-
il}carbonil)amino]propanoico
Ejemplo 8a
Acido 3-amino-3-(5-bromopiridin-3-il)propionico
Se suspendieron 9,50 g (51,07 mmoles) de 5-bromopiridin-3-carbaldehfdo en 22 ml de etanol. Se anadieron 5,31 g (51,07 mmoles) de acido propanodioico y 8,27 g (107,25 mmoles) de acetato de amonio. La mezcla se puso a reflujo durante 4 horas y, tras enfriar hasta la temperatura ambiente, se filtro. El residuo se lavo con etanol frfo y se seco a vacfo a 45°C para dar 8,69 g (69%) de acido 3-amino-3-(5-bromo-piridin-3-il)propionico.
RMN 1H (300 MHz, DMSO-da): 8 = 3,03 (dd, 2H), 4,71 (br., 1H), 8,24 (t, 1H), 8,68 (d, 1 H), 8,75 (d, 1 H) ppm.
Ejemplo 8b
Ester metflico del acido 3-amino-3-(5-bromopiridin-3-il)propionico
5
10
15
20
25
30
35
40
45
Se suspendieron 9,54 g (38,93 mmoles) de acido 3-amino-3-(5-bromopiridin-3-il)propi6nico en 158 ml de metanol, y la mezcla se enfri6 hasta 0°C. Se anadieron lentamente 4,26 ml (58,39 mmoles) de cloruro de tionilo. La mezcla se agit6 a temperatura ambiente durante 20 horas y se concentr6. El residuo se trat6 con disoluci6n saturada de hidrogenocarbonato de sodio y se extrajo con diclorometano. La parte organica se sec6 con sulfato de sodio y se concentr6. La cromatograffa sobre gel de sflice (diclorometano/etanol 100/0-50/50) dio 5,84 g (52%) de ester metflico del acido 3-amino-3-(5-bromopiridin-3-il)-propi6nico.
UPLC (ACN-NH3): Rt. = 0,74 min.
MS (ES+): m/e = 261,2 (M + H+)
RMN 1H (300 MHz, CDCla): 8 = 2,68 (d, 2H), 3,71 (s, 3H), 4,48 (t, 1H), 7,91 - 7,95 (m, 1H), 8,53 (d, 1H), 8,59 (d, 1 H) ppm.
Ejemplo 8c
4-{3-[(3R)-3-{[1-(5-Bromopiridin-3-il)-3-metoxi-3-oxopropil]carbamoil}piperidin-1-il]-3-oxopropil}piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo
Se suspendieron 3,324 g (9,02 mmoles) de acido (3R)-1-{3-[1-(terc-butoxicarbonil)piperidin-4-il]propanoil}piperidin-3- carboxflico (Bioorg. Med. Chem. 13 (2005) 4343-4352, Compuesto 10) en 52 ml de W,W-dimetilformamida, y se enfri6 hasta 0°C. Se anadieron 3,694 g (9,71 mmoles) de HATU, una disoluci6n de 1,798 g (6,94 mmoles) de ester metflico del acido 3-amino-3-(5-bromo-piridin-3-il)-propi6nico en 78 ml de W,W-dimetilformamida y 3,56 ml (20,82 mmoles) de N-etil-diisopropilamina. La mezcla se agit6 a 0°C durante 5 minutos y a temperatura ambiente durante 24 horas. Se anadieron 160 ml de agua, y la mezcla se extrajo con 280 ml de diclorometano. La fase organica se lav6 con agua, se sec6 sobre sulfato de sodio, y se concentr6 a vacfo. La cromatograffa sobre 55 g de gel de sflice basica (diclorometano/etanol 100/0-97/3-94/6) dio 4395 mg (104%) de 4-{3-[(3R)-3-{[1-(5-bromopiridin-3-il)-3-metoxi-3- oxopropil]carbamoil}piperidin-1-il]-3-oxopropil}piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo.
UPLC (ACN-HCOOH): Rt. = 1,18 min.
MS (ES+): m/e = 511,3 (M + H+ - BOC)
MS (ES-): m/e = 609,5 (M - H)
Ejemplo 8d
4-{3-[(3R)-3-({1-[5-(2-Hidroxifenil)piridin-3-il]-3-metoxi-3-oxopropil}carbamoil)piperidin-1-il]-3-oxopropil}piperidin-1- carboxilato de ferc-butilo
A 400,0 mg (0,66 mmoles) de 4-{3-[(3R)-3-{[1-(5-bromopiridin-3-il)-3-metoxi-3-oxopropil]carbamoil}piperidin-1-il]-3- oxopropil}piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo en 16 ml de tolueno se anadieron 15,17 mg (0,01 mmoles) de
5
10
15
20
25
30
35
40
tetraquis(trifenilfosfina)paladio(0), 108,6 mg (0,79 mmoles) de acido (2-hidroxifenil)bor6nico en 4,0 ml de etanol, y 118,3 mg (2,04 mmoles) de fluoruro de potasio en 4,0 ml de agua. La mezcla se agit6 a 100°C durante 20 horas, se diluy6 con agua, y se extrajo con acetato de etilo. La fase organica se sec6 sobre sulfato de sodio y se concentr6 a vacfo. La cromatograffa sobre 10 g de gel de sflice (diclorometano/etanol 100/0-95/5-90/10) dio 240 mg (59%) de 4- {3-[(3R)-3-({1-[5-(2-hidroxifenil)piridin-3-il]-3-metoxi-3-oxopropil}carbamoil)piperidin-1-il]-3-oxopropil}piperidin-1- carboxilato de ferc-butilo.
UPLC (ACN-HCOOH): Rt. = 1,02 min.
MS (ES+): m/e = 624,58 (M + H+)
MS (ES-): m/e = 621,55 (M - H), 667,57 (M + HCOO-)
Ejemplo 8e
4-(3-{(3R)-3-[(1-{5-[2-(2-Fluoroetoxi)fenil]piridin-3-il}-3-metoxi-3-oxopropil)carbamoil]piperidin-1-il}-3- oxopropil)piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo
Se disolvieron 124 mg (0,20 mmoles) de 4-{3-[(3R)-3-({1-[5-(2-hidroxifenil)piridin-3-il]-3-metoxi-3-
oxopropil}carbamoil)piperidin-1-il]-3-oxopropil}piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo en 2,2 ml de tetrahidrofurano. Se anadieron 130 mg (0,40 mmoles) de carbonato de cesio y 66 mg (0,38 mmoles) de 1-yodo-2-fluoroetano. La mezcla se agit6 a temperatura ambiente durante 90 horas. Se anadieron 66 mg (0,38 mmoles) de 1-yodo-2-fluoroetano, y la mezcla se agit6 a temperatura ambiente durante 20 horas. Se anadieron 66 mg (0,38 mmoles) de 1-yodo-2- fluoroetano, y la mezcla se agit6 a temperatura ambiente durante 60 horas, se diluy6 con agua, y se extrajo con acetato de etilo. La fase organica se sec6 sobre sulfato de sodio y se concentr6 a vacfo. La cromatograffa sobre 10 g de gel de sflice (diclorometano/etanol 100/0-90/10) dio 80 mg (54%) de 4-(3-{(3R)-3-[(1-{5-[2-(2- fluoroetoxi)fenil]piridin-3-il}-3-metoxi-3-oxopropil)carbamoil]piperidin-1-il}-3-oxopropil)piperidin-1-carboxilato de ferc- butilo.
UPLC (ACN-HCOOH): Rt. = 1,18 min.
MS (ES+): m/e = 669,57 (M + H+)
MS (ES-): m/e = 667,57 (M - H), 713,62 (M + HCOO')
Ejemplo 8f
Acido 3-({[(3R)-1-{3-[1-(ferc-butoxicarbonil)piperidin-4-il]propanoil}piperidin-3-il]carbonil}amino)-3-{5-[2-(2-
fluoroetoxi)fenil]piridin-3-il}propanoico
5
10
15
20
25
30
35
Se disolvieron 73 mg (0,11 mmoles) de 4-(3-{(3R)-3-[(1-{5-[2-(2-fluoroetoxi)fenil]piridin-3-il}-3-metoxi-3- oxopropil)carbamoil]piperidin-1-il}-3-oxopropil)piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo en 13 ml de metanol. Se anadieron 344 mg (1,09 mmoles) de hidroxido de bario octahidratado. La mezcla se agito a temperatura ambiente durante 20 horas, y despues se concentro para dar acido 3-({[(3R)-1-{3-[1-(ferc-butoxicarbonil)piperidin-4- il]propanoil}piperidin-3-il]carbonil}amino)-3-{5-[2-(2-fluoroetoxi)fenil]piridin-3-il}propanoico.
UPLC (ACN-HCOOH): Rt. = 1,09 min.
MS (ES+): m/e = 655,5 (M + H+)
MS (ES-): m/e = 653,5 (M - H), 622,16 (M + HCOO')
Ejemplo 8g
Acido (3S)-3-{5-[2-(2-fluoroetoxi)fenil]piridin-3-il}-3-[({(3R)-1-[3-(piperidin-4-il)propanoil]piperidin-3-
il}carbonil)amino]propanoico
La mezcla obtenida en el ejemplo 8f, que contiene 71 mg (0,11 mmoles) de acido 3-({[(3R)-1-{3-[1-(ferc- butoxicarbonil)piperidin-4-il]propanoil}piperidin-3-il]carbonil}amino)-3-{5-[2-(2-fluoroetoxi)fenil]piridin-3-il}propanoico, se disolvio en 6,6 ml de dioxano. Se anadieron 0,81 ml (3,25 mmoles) de acido clorhfdrico 4 N. La mezcla se agito a temperatura ambiente durante 20 horas. Se anadieron 0,136 ml (0,54 mmoles) de acido clorhfdrico 4 N. La mezcla se agito a temperatura ambiente durante 24 horas. Se anadieron 6,0 ml de dioxano y 0,136 ml (0,54 mmoles) de acido clorhfdrico 4 N. La mezcla se agito a temperatura ambiente durante 24 horas, y despues se concentro. Al residuo se anadio una pequena cantidad de agua y de disolucion saturada de hidrogenocarbonato de sodio para obtener un pH = 6. La mezcla se concentro y se extrajo con acetato de etilo/etanol 9:1 y con diclorometano/metanol 9:1. Las disoluciones organicas se filtraron, se combinaron y se concentraron para dar 76 mg, que se purificaron mediante HPLC:
- Sistema:
- Sistema de autopurificacion Waters: Bomba 254, Manipulador de muestras 2767, CFO, DAD 2996, ELSD 2424, SQD 3001
- Columna:
- XBrigde C18 5 mm 100 x 30 mm
- Disolvente:
- A = H2O + 0,1% de HCOOH
- B = Metanol
- Gradiente:
- 0-1 min. 15% de B, 1-8 min. 15-60% de B
- Caudal:
- 50 ml/min.
- Temperatura:
- RT
- Disolucion:
- 76 mg/2,1 ml de DMSO/MeOH 1:1
- Inyeccion:
- 3 x 0,7 ml
- Deteccion:
- Intervalo de barrido de DAD 210-400 nm
- MS ESI+, ESI-, intervalo de barrido 160-1000 m/z
- ELSD
- Fracciones:
- Rt. en min DAD TAC Cantidad
- 11
- 6,0 - 6,6 83,0% 10 mg
- 12
- 6,6 - 7,0 61,5% 4 mg
- 13
- 7,0 - 7,8 98,2% 11 mg
- Las fracciones se concentraron.
La fraccion 13 contenfa el isomero deseado. UPLC (ACN-HCOOH): Rt. = 0,88 min.
MS (ES+): m/e = 555,08 (M + H+)
MS (ES-): m/e = 553,18 (M - H)
5
10
15
20
25
30
Acido (3S)-3-[5-(3-ciano-4-fluorofenil)piridin-3-il]-3-[({(3R)-1-[3-(piperidin-4-il)propanoil]piperidin-3-
il}carbonil)amino]propanoico
Ejemplo 9a
4-{3-[(3R)-3-({1-[5-(3-Ciano-4-fluorofenil)piridin-3-il]-3-metoxi-3-oxopropil}carbamoil)piperidin-1-il]-3- oxopropil}piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo
A 300,0 mg (0,49 mmoles) de 4-{3-[(3R)-3-{[1-(5-bromopiridin-3-il)-3-metoxi-3-oxopropil]carbamoil}piperidin-1-il]-3- oxopropil}piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo (ejemplo 8c) en 12 ml de tolueno se anadieron 11,4 mg (0,01 mmoles) de tetraquis(trifenilfosfina)paladio(0), 97,4 mg (0,59 mmoles) de acido (3-ciano-4-fluoro-fenil)boronico en 3,0 ml de etanol, y 88,7 mg (1,53 mmoles) de fluoruro de potasio en 3,0 ml de agua. La mezcla se agito a 100°C durante 3 horas, se diluyo con agua, y se extrajo con acetato de etilo. La fase organica se seco sobre sulfato de sodio y se concentro a vacfo. La cromatograffa sobre 10 g de gel de sflice (diclorometano/etanol 100/0-95/5-90/10) dio 206 mg (58%) de 4-{3-[(3R)-3-({1-[5-(3-ciano-4-fluorofenil)piridin-3-il]-3-metoxi-3-oxopropil}carbamoil)piperidin-1-il]-3- oxopropil}piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo.
UPLC (ACN-HCOOH): Rt. = 1,23 min.
MS (ES+): m/e = 652,3 (M + H+)
MS (ES-): m/e = 648,5 (M - H), 694,5 (M + HCOO')
5
10
15
20
25
30
Se disolvieron 100 mg (0,15 mmoles) de 4-{3-[(3R)-3-({1-[5-(3-ciano-4-fluorofenil)piridin-3-il]-3-metoxi-3- oxopropil}carbamoil)piperidin-1-il]-3-oxopropil}piperidin-1-carboxilato de terc-butilo en 5 ml de tetrahidrofurano, y se trataron con 2,5 ml de disolucion 0,1N de hidroxido de sodio. La mezcla se agito durante 15 minutos y se concentro para dar 97 mg (99%).
UPLC (ACN-HCOOH): Rt. = 1,13 min.
MS (ES+): m/e = 636,5 (M + H+)
MS (ES-): m/e = 634,5 (M - H)
Ejemplo 9c
Acido (3S)-3-[5-(3-ciano-4-fluorofenil)piridin-3-il]-3-[({(3R)-1-[3-(piperidin-4-il)propanoil]piperidin-3-
il}carbonil)amino]propanoico
La mezcla obtenida en el ejemplo 9b, que contiene 97 mg (0,15 mmoles) de acido 3-({[(3R)-1-{3-[1-(ferc- butoxicarbonil)piperidin-4-il]propanoil}piperidin-3-il]carbonil}amino)-3-[5-(3-ciano-4-fluorofenil)piridin-3-il]propanoico, se disolvio en 9,6 ml de dioxano. Se anadieron 0,39 ml (1,57 mmoles) de acido clorhfdrico 4 N. La mezcla se agito a temperatura ambiente durante 20 horas, y despues se concentro. Al residuo se anadio una pequena cantidad de agua y de disolucion saturada de hidrogenocarbonato de sodio para obtener un pH = 6. La mezcla se concentro y se extrajo con diclorometano/2-propanol 8:2. Las disoluciones organicas se filtraron y se concentraron para dar 44 mg, que se purificaron mediante HPLC:
- Sistema:
- Sistema de autopurificacion Waters: Bomba 254, Manipulador de muestras 2767, CFO, DAD 2996, ELSD 2424, SQD 3001
- Columna:
- XBrigde C18 5 mm 100 x 30 mm
- Disolvente:
- A = H2O + 0,2% de NH3
- B = Metanol
- Gradiente
- 0-1 min. 15% de B, 1-12 min. 15-55% de B
- Caudal:
- 50 ml/min.
- Temperatura:
- RT
- Disolucion:
- 41 mg/2,2 ml de DMF/MeOH 1:1
- Inyeccion:
- 2 x 1,1 ml
- Deteccion:
- Intervalo de barrido de DAD 210-400 nm
- MS ESI+, ESI-, intervalo de barrido 160-1000 m/z
- ELSD
- Fracciones:
- Rt. en min DAD TAC Cantidad
- 11
- 5,52-5,82 78% 7 mg
- 12
- 6,00-6,34 91% 7,5 mg
- Las fracciones se concentraron, se mezclaron con ferc.-butanol y se liofilizaron.
La fraccion 12 contenfa el isomero deseado.
UPLC (ACN-HCOOH): Rt. = 0,95 min.
5
MS (ES+): m/e = 536,11 (M + H+)
MS (ES-): m/e = 534,11 (M - H)
10 Ejemplo 10
Acido (3S)-3-[5-(4-ciano-3-fluorofenil)piridin-3-il]-3-[({(3R)-1-[3-(piperidin-4-il)propanoil]piperidin-3-
il}carbonil)amino]propanoico
15
Ejemplo 10a
4-{3-[(3R)-3-({1-[5-(4-Ciano-3-fluorofenil)piridin-3-il]-3-metoxi-3-oxopropil}carbamoil)piperidin-1-il]-3- 20 oxopropil}piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo
A 300,0 mg (0,49 mmoles) de 4-{3-[(3R)-3-{[1-(5-bromopiridin-3-il)-3-metoxi-3-oxopropil]carbamoil}piperidin-1-il]-3- 25 oxopropil}piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo (ejemplo 8c) en 12 ml de tolueno se anadieron 11,4 mg (0,01 mmoles) de tetraquis(trifenilfosfina)paladio(0), 97,4 mg (0,59 mmoles) de acido (4-ciano-3-fluoro-fenil)boronico en 3,0 ml de etanol, y 57,2 mg (0,98 mmoles) de fluoruro de potasio en 3,0 ml de agua. La mezcla se agito a 100°C durante 10 horas y a 60°C durante 20 horas, se diluyo con agua, y se extrajo con acetato de etilo y disolucion de hidrogenocarbonato de sodio. La fase organica se seco sobre sulfato de sodio y se concentro a vacfo. La 30 cromatograffa sobre 10 g de gel de sflice (diclorometano/etanol 100/0-95/5-90/10) dio 157 mg (44%) de 4-{3-[(3R)-3- ({1-[5-(4-ciano-3-fluorofenil)piridin-3-il]-3-metoxi-3-oxopropil}carbamoil)piperidin-1-il]-3-oxopropil}piperidin-1- carboxilato de ferc-butilo.
UPLC (ACN-HCOOH): Rt. = 1,23 min.
35
MS (ES+): m/e = 652,3 (M + H+)
MS (ES-): m/e = 648,5 (M - H), 694,6 (M + HCOO-)
5
10
15
20
25
30
Se disolvieron 220 mg (0,34 mmoles) de 4-{3-[(3R)-3-({1-[5-(4-ciano-3-fluorofenil)piridin-3-il]-3-metoxi-3- oxopropil}carbamoil)piperidin-1-il]-3-oxopropil}piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo en 11 ml de tetrahidrofurano y se trataron con 4,1 ml de disolucion 0,1N de hidroxido de sodio. La mezcla se agito durante 15 minutos y se concentro para dar 215 mg (100%).
UPLC (ACN-HCOOH): Rt. = 1,14 min.
MS (ES+): m/e = 638,2 (M + H+)
MS (ES-): m/e = 634,5 (M - H)
Ejemplo 10c
Acido (3S)-3-[5-(4-ciano-3-fluorofenil)piridin-3-il]-3-[({(3R)-1-[3-(piperidin-4-il)propanoil]piperidin-3-
il}carbonil)amino]propanoico
La mezcla obtenida en el ejemplo 10b, que contiene 215 mg (0,34 mmoles) de acido 3-({[(3R)-1-{3-[1-(ferc- butoxicarbonil)piperidin-4-il]propanoil}piperidin-3-il]carbonil}amino)-3-[5-(4-ciano-3-fluorofenil)piridin-3-il]propanoico, se disolvio en 20,6 ml de dioxano. Se anadieron 0,85 ml (3,4 mmoles) de acido clorhfdrico 4 N. La mezcla se agito a temperatura ambiente durante 20 horas y despues se concentro. Al residuo se anadio una pequena cantidad de agua y de disolucion saturada de hidrogenocarbonato de sodio para obtener un pH = 6. La mezcla se concentro y se extrajo con diclorometano/2-propanol 8:2. Las disoluciones organicas se filtraron y se concentraron para dar 205 mg, 203 mg de los cuales se purificaron mediante HPLC:
- Sistema:
- Dionex: Bomba P 580, Gilson: Manipulador de lfquidos 215, Knauer: Detector de UV K-2501
- Columna:
- Chiralcel OZ-H 5 mm 250 x 30 mm
- Disolvente:
- Etanol/Metanol 50:50
- Caudal:
- 30 ml/min.
- Temperatura:
- RT
- Disolucion:
- 203 mg/7,6 ml de EtOH/MeOH 1:1
- Inyeccion:
- 4 x 1,9 ml
- Deteccion:
- UV 254 nm
- Fracciones:
- Rt. en min DAD TAC Cantidad
- 11
- 5,4 - 7,1 > 99,9% 60 mg
- 12
- 10,4 - 12,2 98,9% 29 mg
- Las fracciones se concentraron y se secaron a alto vacfo.
La fraccion 12 contenfa el isomero deseado.
UPLC (ACN-HCOOH): Rt. = 0,79 min.
5
MS (ES+): m/e = 536,4 (M + H+)
MS (ES-): m/e = 534,4 (M - H), 680,4 (M + HCOO-)
10 Ejemplo 11
Acido (3S)-3-[5-(4-fluoro-3-nitrofenil)piridin-3-il]-3-[({(3R)-1-[3-(piperidin-4-il)propanoil]piperidin-3-
il}carbonil)amino]propanoico
15
Ejemplo 11a
4-{3-[(3R)-3-({1-[5-(4-fluoro-3-nitrofenil)piridin-3-il]-3-metoxi-3-oxopropil}carbamoil)piperidin-1-il]-3-oxopropil}piperidin- 20 1-carboxilato de ferc-butilo
A 300,0 mg (0,49 mmoles) de 4-{3-[(3R)-3-{[1-(5-bromopiridin-3-il)-3-metoxi-3-oxopropil]carbamoil}piperidin-1-il]-3- 25 oxopropil}piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo (ejemplo 8c) en 12 ml de tolueno se anadieron 11,4 mg (0,01 mmoles)
de tetraquis(trifenilfosfina)paladio(0), 109,2 mg (0,59 mmoles) de acido (4-fluoro-3-nitro-fenil)boronico en 3,0 ml de etanol, y 88,7 mg (1,53 mmoles) de fluoruro de potasio en 3,0 ml de agua. La mezcla se agito a 100°C durante 9 horas y a 60°C durante 20 horas, se diluyo con agua, y se extrajo con acetato de etilo. La fase organica se seco sobre sulfato de sodio y se concentro a vacfo. La cromatograffa sobre 10 g de gel de sflice (diclorometano/etanol 30 100/0-95/5-90/10) dio 147 mg (40%) de 4-{3-[(3R)-3-({1-[5-(4-fluoro-3-nitrofenil)piridin-3-il]-3-metoxi-3-
oxopropil}carbamoil)piperidin-1-il]-3-oxopropil}piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo.
UPLC (ACN-HCOOH): Rt. = 1,23 min.
35 MS (ES+): m/e = 670,3 (M + H+)
MS (ES-): m/e = 668,5 (M - H), 714,6 (M + HCOO')
5
10
15
20
25
30
Se disolvieron 225 mg (0,34 mmoles) de 4-{3-[(3R)-3-({1-[5-(4-fluoro-3-nitrofenil)piridin-3-il]-3-metoxi-3- oxopropil}carbamoil)piperidin-1-il]-3-oxopropil}piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo en 11 ml de tetrahidrofurano y se trataron con 4,0 ml de disolucion 0,1N de hidroxido de sodio. La mezcla se agito durante 15 minutos y se concentro para dar 220 mg (100%).
UPLC (ACN-HCOOH): Rt. = 1,15 min.
MS (ES+): m/e = 656,4 (M + H+)
MS (ES-): m/e = 654,5 (M - H)
Ejemplo 11c
Acido (3S)-3-[5-(4-fluoro-3-nitrofenil)piridin-3-il]-3-[({(3R)-1-[3-(piperidin-4-il)propanoil]piperidin-3-
il}carbonil)amino]propanoico
La mezcla obtenida en el ejemplo 11b, que contiene 220 mg (0,34 mmoles) de acido 3-({[(3R)-1-(3-[1-(ferc- butoxicarbonil)piperidin-4-il]propanoil}piperidin-3-il]carbonil}amino)-3-[5-(4-fluoro-3-nitrofenil)piridin-3-il]propanoico, se disolvio en 20,5 ml de dioxano. Se anadieron 0,84 ml (3,4 mmoles) de acido clorhfdrico 4N. La mezcla se agito a temperatura ambiente durante 20 horas y despues se concentro. Al residuo se anadio una pequena cantidad de agua y de disolucion saturada de hidrogenocarbonato de sodio para obtener un pH = 6. La mezcla se concentro y se extrajo con diclorometano/2-propanol 8:2. Las disoluciones organicas se filtraron y se concentraron para dar 213 mg, 211 mg de los cuales se purificaron mediante HPLC:
- Sistema:
- Dionex: Bomba P 580, Gilson: Manipulador de lfquidos 215, Knauer: Detector de UV K-2501
- Columna:
- Chiralcel OZ-H 5 mm 250 x 30 mm
- Disolvente:
- etanol/metanol 50:50
- Caudal:
- 30 ml/min.
- Temperatura:
- RT
- Disolucion:
- 211 mg/3 ml de EtOH/MeOH 1:1
- Inyeccion:
- 4 x 0,75 ml
- Deteccion:
- UV 254 nm
- Fracciones:
- Rt. en min DAD TAC Cantidad
- 11
- 5,4 - 7,1 83,6% 65 mg
5
10
15
20
25
30
35
40
45
- 12
- 10,4 - 12,2 | 90,8% | 35 mg |
- Las fracciones se concentraron y se secaron a alto vacfo.
La fraccion 12 contenfa el isomero deseado.
UPLC (ACN-HCOOH): Rt. = 0,78 min.
MS (ES+): m/e = 556,4 (M + H+)
MS (ES-): m/e = 554,4 (M - H)
Ejemplo 12
Acido (3R)-3-{5-[(3-ciano-4-fluorobencil)oxi]piridin-3-il}-3-[({(3S)-1-[3-(piperidin-4-il)propanoil]piperidin-3-
il}carbonil)amino]propanoico
Ejemplo 12a
4-(3-[(3R)-3-([(7S)-1-(5-[(3-ciano-4-fluorobencil)oxi]piridin-3-il)-3-metoxi-3-oxopropil]carbamoil}piperidin-1-il]-3- oxopropil}piperidin-1-carboxilato de terc-butilo
Se agitaron trifenilfosfina unida a polfmero (30 mg) y 4-{3-[(3R)-3-{[(1S)-1-(5-hidroxipiridin-3-il)-3-metoxi-3- oxopropil]carbamoil}piperidin-1-il]-3-oxopropil}piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo (ejemplo 5e, 30 mg, 60 mmoles) en diclorometano durante 30 minutos. Se anadio 2-fluoro-5-(hidroximetil)benzonitrilo (26 mg, 0,17 mmoles) en THF, y la mezcla se enfrio hasta 0°C. Se anadio diazeno-1,2-dicarboxilato de dipropan-2-ilo (20 ml, 0,11 mmoles), la mezcla se agito durante 3 horas a temperatura ambiente y despues se almaceno durante 16 horas a 5°C. Tras filtrar, el filtrado se concentro a presion reducida, y el residuo se purifico mediante cromatograffa de capa fina preparativa sobre gel de sflice (acetato de etilo al 100%) para producir 3,2 mg de 4-{3-[(3R)-3-([(lS)-1-(5-[(3-ciano-4- fluorobencil)oxi]piridin-3-il}-3-metoxi-3-oxopropil]carbamoil}piperidin-1-il]-3-oxopropil}piperidin-1-carboxilato de terc- butilo.
UPLC (ACN-HCOOH): Rt. = 1,24 min.
MS (ES+): m/e = 680,4 (M + H+)
MS (ES-): m/e = 724,5 (M + HCOO-).
Ejemplo 12b
Acido (3R)-3-{5-[(3-ciano-4-fluorobencil)oxi]piridin-3-il}-3-[({(3S)-1-[3-(piperidin-4-il)propanoil]piperidin-3-
il}carbonil)amino]propanoico
Se disolvio 4-{3-[(3R)-3-{[('7S)-1-{5-[(3-ciano-4-fluorobencil)oxi]piridin-3-il}-3-metoxi-3-oxopropil]carbamoil}piperidin-1-
il]-3-oxopropil}piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo (3,2 mg, 10 mmoles) en terc.-butanol (0,15 ml) y metanol (0,13 ml), y se anadio hidroxido de bario octahidratado (7,4 mg, 20 mmoles). Tras agitar durante 45 minutos a temperatura ambiente, el disolvente se separo por destilacion a 0°C mediante alto vacfo. El residuo se disolvio en agua (0,3 ml), y se acidifico mediante acido formico (0,9 ml). Despues de 3 horas a temperatura ambiente, el disolvente se separo 5 por destilacion a 0°C mediante alto vacfo, y el residuo se purifico mediante HPLC preparativa para producir 0,8 mg de acido (3R)-3-{5-[(3-ciano-4-fluorobencil)oxi]piridin-3-il}-3-[({(3S)-1-[3-(piperidin-4-il)propanoil]piperidin-3-
il}carbonil)amino]propanoico.
- Columna:
- C18 Chromatorex 10 mm 30 x 125 mm
- Disolvente:
- A = H2O + 0,1% de HCOOH
- B = acetonitrilo
- Gradiente
- 0-0,5 min. 5% de B, 0,5-6 min. 5-40% de B,
- Caudal:
- 150 ml/min.
- Temperatura:
- RT
- Deteccion:
- 284 nm
- Rt.:
- 368 -4,04 min
10 UPLC (ACN-HCOOH): Rt. = 0,70 min.
MS (ES+): m/e = 567,3 (M + H+)
MS (ES-): m/e = 565,3 (M - H).
15
Ejemplo 13
Acido (3S)-3-{5-[(4-ciano-3-fluorobencil)oxi]piridin-3-il}-3-[({(3R)-1-[3-(piperidin-4-il)propanoil]piperidin-3-
il}carbonil)amino]propanoico
20
Ejemplo 13a
25 4-{3-[(3R)-3-{[(1S)-1-{5-[(4-ciano-3-fluorobencil)oxi]piridin-3-il}-3-metoxi-3-oxopropil]carbamoil}piperidin-1-il]-3-
oxopropil}piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo
30 A 4-{3-[(3R)-3-{[(1S)-1-(5-hidroxipiridin-3-il)-3-metoxi-3-oxopropil]carbamoil}piperidin-1-il]-3-oxopropil}piperidin-1-
carboxilato de ferc-butilo (ejemplo 5e, 200 mg, 0,37 mmoles) en DMF (5 ml) se anadio hidruro de sodio (60%, 9,6 mg, 0,24 mmoles), y la mezcla se enfrio hasta 0°C. Se anadio 4-(bromometil)-2-fluorobenzonitrilo (70,5 mg, 0,33 mmoles) en DMF (3 ml) mientras se agita, y la mezcla se calento hasta la temperatura ambiente. Despues de una hora, se anadieron agua, salmuera y acetato de etilo. Las fases se separaron, y la fase acuosa se extrajo con 35 acetato de etilo. Los extractos combinados se secaron sobre sulfato de sodio y se concentraron a vacfo. El residuo se purifico mediante HPLC preparativa para producir 10 mg de 4-{3-[(3R)-3-{[(1S)-1-{5-[(4-ciano-3- fluorobencil)oxi]piridin-3-il}-3-metoxi-3-oxopropil]carbamoil}piperidin-1-il]-3-oxopropil}piperidin-1-carboxilato de ferc- butilo.
5
10
15
20
25
30
- Columna:
- C18 Chromatorex 10 mm 30 x 125 mm
- Disolvente:
- A = H2O + 0,1% de HCOOH
- B = acetonitrilo
- Gradiente:
- 0 - 0,5 min. 30% de B, 0,5 - 7 min. 30 - 70% de B,
- Caudal:
- 120 ml/min.
- Temperatura:
- RT
- Deteccion:
- 280 nm
- Rt.:
- 4,61 - 5,04 min
UPLC (ACN-HCOOH): Rt. = 1,22 min.
MS (ES+): m/e = 680,4 (M + H+)
MS (ES-): m/e = 678,6 (M - H), 724,5 (M + HCOO-).
Ejemplo 13b
Acido (3S)-3-{5-[(4-ciano-3-fluorobencil)oxi]piridin-3-il}-3-[({(3R)-1-[3-(piperidin-4-il)propanoil]piperidin-3-
il}carbonil)amino]propanoico
Se disolvio 4-{3-[(3R)-3-{[(1S)-1-(5-(4-ciano-3-fluorobenciloxi)piridin-3-il)-3-metoxi-3-oxopropil]carbamoil}piperidin-1- il]-3-oxopropil}piperidin-1 -carboxilato de ferc-butilo (10 mg, 15 mmoles) en terc.-butanol (0,6 ml) y metanol (0,6 ml), y se anadio hidroxido de bario octahidratado (23 mg, 74 mmoles). Tras agitar durante 45 minutos a temperatura ambiente, el disolvente se separo por destilacion a 0°C mediante alto vacfo. El residuo se acidifico con acido formico (1 ml). Despues de 18 horas a 5°C, el disolvente se separo por destilacion a 0°C mediante alto vacfo, y el residuo se purifico mediante HPLC preparativa para producir 4 mg de acido (3R)-3-{5-[(4-ciano-3-fluorobencil)oxi]piridin-3-il}-3- [({(3S)-1-[3-(piperidin-4-il)propanoil]piperidin-3-il}carbonil)amino]propanoico.
- Columna:
- C18 Chromatorex 10 mm 30 x 125 mm
- Disolvente:
- A = H2O + 0,1% de HCOOH
- B = acetonitrilo
- Gradiente:
- 0 - 0,5 min. 10% de B, 0,5 - 7 min. 10 - 50% de B,
- Caudal:
- 150 ml/min.
- Temperatura:
- RT
- Deteccion:
- 280 nm
- Rt.:
- 2,87 -3,15 min
UPLC (ACN-HCOOH): Rt. = 0,71 min.
MS (ES+): m/e = 566,4 (M + H+)
Ejemplo 14
Acido (3S)-3-(4-ciano-3-fluorofenil)-3-[({(3R)-1-[3-(piperidin-4-il)propanoil]piperidin-3-il}carbonil)amino]propanoico
5
10
15
20
25
30
35
Acido 3-amino-3-(4-ciano-3-fluorofenil)propi6nico
Se suspendieron 500 mg (3,35 mmoles) de 2-fluoro-4-formilbenzonitrilo en 2 ml de etanol. Se anadieron 349 mg (3,35 mmoles) de acido propanodioico y 0,54 g (7,04 mmoles) de acetato de amonio. La mezcla se puso a reflujo durante 6 horas, y, tras enfriar, se filtr6. El residuo se lav6 con etanol y se sec6 a vacfo para dar 360 mg (52%) de acido 3-amino-3-(4-ciano-3-fluorofenil)propi6nico.
Ejemplo 14b
Ester metflico del acido 3-amino-3-(4-ciano-3-fluorofenil)propi6nico
Se suspendieron 436 mg (2,09 mmoles) de acido 3-amino-3-(4-ciano-3-fluorofenil)propi6nico en 8,5 ml de metanol, y la mezcla se enfri6 hasta 0°C. Se anadieron lentamente 0,23 ml (3,14 mmoles) de cloruro de tionilo. La mezcla se agit6 a temperatura ambiente durante 20 horas y se concentr6. El residuo se trat6 con disoluci6n saturada de hidrogenocarbonato de sodio, y se extrajo con diclorometano. La parte organica se sec6 con sulfato de sodio y se concentr6. La cromatograffa sobre gel de sflice (diclorometano/etanol 100/0-97/3-94/6) dio 245 mg (47%) de ester metflico del acido 3-amino-3-(4-ciano-3-fluoro-fenil)-propi6nico.
UPLC (ACN-NH3): Rt. = 0,77 min.
MS (ES+): m/e = 222,74 (M + H+)
Ejemplo 14c
Acido (3S)-3-(4-ciano-3-fluorofenil)-3-[({(3R)-1-[3-(piperidin-4-il)propanoil]piperidin-3-il}carbonil)amino]propanoico
Se produjo de forma analoga a los ejemplos 2b - 2e partiendo del ejemplo 17b para dar 254 mg, que se purificaron mediante HPLC:
- Sistema:
- Sistema de autopurificaci6n Waters: Bomba 254, Manipulador de muestras 2767, CFO, DAD 2996, ELSD 2424, SQD 3001
- Columna:
- Kromasil C18 5 mm 150 x 30 mm
- Disolvente:
- A = H2O + 0,1% de HCOOH
- B = metanol
- Gradiente:
- 0-1 min. 10% de B, 1-12 min. 10-50% de B
- Caudal:
- 50 ml/min.
- Temperatura:
- RT
- Disolucion:
- 268 mg/3 ml de DMSO/MeOH 1:1
- Inyeccion:
- 4 x 0,75 ml
- Deteccion:
- Intervalo de barrido de DAD 210-400 nm
- MS ESI+, ESI-, intervalo de barrido 160-1000 m/z
- ELSD
- Fracciones:
- Rt. en min DAD TAC Cantidad
- -21
- 6,6-7,4 96,7% 38 mg
- -23
- 8,2-9,8 95,4% 43 mg
- Las fracciones se concentraron.
La fraccion 23 contenfa el isomero deseado.
UPLC (ACN-HCOOH): Rt. = 0,63 min.
5
MS (ES+): m/e = 459,1 (M + H+)
MS (ES-): m/e = 457,3 (M - H)
10 Ejemplo 15
Acido (3S)-3-(5-{[4-(2-fluoroetoxi)fenil]etinil}piridin-3-il)-3-[({(3R)-1-[3-(piperidin-4-il)propanoil]piperidin-3-
il}carbonil)amino]propanoico
15
Ejemplo 15a
4-{3-[(3R)-3-{[(1S)-3-Terc-butoxi-1-(5-{[4-(2-fluoroetoxi)fenil]etinil}piridin-3-il)-3-oxopropil]carbamoil}piperidin-1-il]-3- 20 oxopropil}piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo
A una disolucion desgasificada de 4-[3-((3R)-3-{[(1S)-1-(5-bromopiridin-3-il)-3-terc-butoxi-3-
25 oxopropil]carbamoil}piperidin-1-il)-3-oxopropil]piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo (ejemplo 27c, 100 mg, 150 mmoles), yoduro de cobre (3,5 mg, 20 mmoles), tetraquis(trifenilfosfina)paladio(0) (17,7 mg, 20 mmoles) y {[4-(2- fluoroetoxi)fenil]etinil}(trimetil)silano (73 mg, 310 mmoles) en 1,2-dimetoxietano (0,9 ml) y n-butilamina (0,23 ml) se anadio una disolucion 1 M de fluoruro de tetra-n-butilamonio en THF (200 ml) durante 15 minutos a 80°C. Despues de 20 minutos adicionales a 80°C, se anadio (36 mg, mmoles), la mezcla se diluyo con agua despues de 20 minutos, 30 y se extrajo con acetato de etilo. La fase organica se seco sobre sulfato de sodio y se concentro a vacfo. El residuo se purifico mediante HPLC preparativa para producir 43 mg de 4-{3-[(3R)-3-{[(1S)-3-terc-butoxi-1-({[4-(2- fluoroetoxi)fenil]etinil}piridin-3-il)3-oxopropil]carbamoil}piperidin-1-il]-3-oxopropil}piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo.
- Columna:
- C18 Chromatorex 10 mm 30 x 125 mm
- Disolvente:
- A = H2O + 0,1% de HCOOH
5
10
15
20
25
30
- B = acetonitrilo
- Gradiente:
- 0 - 0,5 min. 65% de B, 0,5 - 7 min. 65 - 85% de B,
- Caudal:
- 120 ml/min.
- Temperatura:
- RT
- Deteccion:
- 273 nm
- Rt.:
- 2,50 -2,98 min
UPLC (ACN-HCOOH): Rt. = 1,43 min.
MS (ES+): m/e = 735,5 (M + H+)
MS (ES-): m/e = 779,7 (M + HCOO-)
Ejemplo 15b
Acido (3S)-3-(5-([4-(2-fluoroetoxi)fenil]etinil)piridin-3-yi)-3-[({(3R)-1-[3-(piperidin-4-il)propanoil]piperidin-3-
il}carbonil)amino]propanoico
4-{3-[(3R)-3-{[(1S)-3-terc-butoxi-1-({[4-(2-fluoroetoxi)fenil]etinil}piridin-3-il)3-oxopropil]carbamoil}piperidin-1-il]-3- oxopropil)piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo (15,7 mg, 20 mmoles) se calento hasta 60°C en acido formico durante 40 minutos. Despues, la disolucion se concentro a vacfo, y el residuo se purifico mediante HPLC preparativa para producir 8,9 mg de acido (3S)-3-(5-{[4-(2-fluoroetoxi)fenil]etinil}piridin-3-il)-3-[({(3R)-1-[3-(piperidin-4-
il)propanoil]piperidin-3-il}carbonil)amino]propanoico.
- Columna:
- C18 Chromatorex 10 mm 30 x 125 mm
- Disolvente:
- A = H2O + 0,1% de HCOOH
- B = acetonitrilo
- Gradiente:
- 0 - 0,5 min. 20% de B, 0,5 - 7 min. 20 - 40% de B,
- Caudal:
- 95 ml/min.
- Temperatura:
- RT
- Deteccion:
- 271 nm
- Rt.:
- 2,78 - 4,62 min
UPLC (ACN-HCOOH): Rt. = 0,83 min.
MS (ES+): m/e =579,3 (M + H+)
Ejemplo 16
Acido (3S)-3-(5-{[3-(2-fluoroetoxi)fenil]etinil}piridin-3-il)-3-[({(3R)-1-[3-(piperidin-4-il)propanoil]piperidin-3-
il}carbonil)amino]propanoico
A una disolucion desgasificada de 4-[3-((3R)-3-{[(7S)-1-(5-bromopiridin-3-il)-3-terc-butoxi-3-
oxopropil]carbamoil}piperidin-1-il)-3-oxopropil]piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo (ejemplo 27c, 100 mg, 15 10 mmoles), yoduro de cobre (4,4 mg, 23 mmoles) y tetraquis(trifenilfosfina)paladio(0) (18 mg, 15 mmoles) en DMF (0,4 ml) y n-butilamina (0,23 ml) se anadio una disolucion de 1-etinil-3-(2-fluoroetoxi)benceno (50 mg, 0,31 mmoles) en DMF (0,6 ml) durante 60 minutos a 100°C. Despues de 20 minutos adicionales a 100°C, la mezcla se diluyo con DMSO y se purifico mediante HPLC preparativa para producir 90 mg de 4-{3-[(3R)-3-{[(1S)-3-terc-butoxi-1-(5-{[3-(2- fluoroetoxi)fenil]etinil}piridin-3-il)-3-oxopropil]carbamoil}piperidin-1 -il]-3-oxopropil}piperidin-1 -carboxilato de ferc-butilo. 15
- Columna:
- C18 Chromatorex 10 mm 30 x 125 mm
- Disolvente:
- A = H2O + 0,1% de HCOOH
- B = acetonitrilo
- Gradiente:
- 0 - 0,5 min. 65% de B, 0,5 -7 min. 65-90% de B,
- Caudal:
- 120 ml/min.
- Temperatura:
- RT
- Deteccion:
- 277 nm
- Rt.:
- 2,95-3,50 min
UPLC (ACN-HCOOH): Rt. = 1,45 min.
MS (ES+): m/e = 735,5 (M + H+)
20
MS (ES-): m/e = 779,5 (M + HCOO')
Ejemplo 16b
25 Acido (3S)-3-(5-{[3-(2-fluoroetoxi)fenil]etinil}piridin-3-il)-3-[({(3R)-1-[3-(piperidin-4-il)propanoil]piperidin-3-
il}carbonil)amino]propanoico
4-{3-[(3R)-3-{[( 1 S)-3-terc-butoxi-1 -(5-{[3-(2-fluoroetoxi)fenil]etinil}piridin-3-il)-3-oxopropil]carbamoil}piperidin-1-il]-3- oxopropil}piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo (15,7 mg, 20 mmoles) se calento hasta 60°C en acido formico (1,5 ml) 30 durante 40 minutos. Despues, la disolucion se concentro a vacfo, y el residuo se purifico mediante HPLC preparativa para producir 9,6 mg de acido (3S)-3-(5-{[3-(2-fluoroetoxi)fenil]etinil}piridin-3-il)-3-[({(3R)-1-[3-(piperidin-4-
il)propanoil]piperidin-3-il}carbonil)amino]propanoico.
- Columna:
- C18 Chromatorex 10 mm 30x125 mm
- Disolvente:
- A = H2O + 0,1% de HCOOH
- B = acetonitrilo
- Gradiente:
- 0 - 0,5 min. 10% de B, 0,5 - 7 min. 10 - 50% de B,
- Caudal:
- 120 ml/min.
- Temperatura:
- RT
- Deteccion:
- 271 nm
- Rt.:
- 4,09 - 4,38 min
35 UPLC (ACN-HCOOH): Rt. = 0,91 min. MS (ES+): m/e = 579,4 (M + H+)
5
10
15
20
25
30
35
40
Ejemplo 17a
Acido 3-amino-3-(3-bromo-5-fluorofenil)propionico
Se suspendieron 4,72 g (23,25 mmoles) de 3-bromo-5-fluorobenzaldehfdo en 10 ml de etanol. Se anadieron 2,42 g (23,25 mmoles) de acido propanodioico y 3,76 g (48,82 mmoles) de acetato de amonio. La mezcla se puso a reflujo durante 5 horas, y, tras enfriar hasta la temperatura ambiente, se filtro. El residuo se lavo con etanol frfo y se seco a vacfo a 30°C para dar 880 mg (13%) de acido 3-amino-3-(3-bromo-5-fluorofenil)propionico. El filtrado se concentro y se cristalizo en etanol para dar 706 mg (12%) adicionales de acido 3-amino-3-(3-bromo-5-fluorofenil)propionico.
UPLC (ACN-HCOOH): Rt. = 0,58 min. MS (ES+): m/e = 264,1 (M + H+)
MS (ES-): m/e = 262,1 (M - H)
RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6): 8 = 2,43 (d, 2H), 4,25 (t, 1 H), 7,31 (d, 1H), 7,43 (dt, 1 H), 7,50 (s, 1 H) ppm.
Ejemplo 17b
Ester metflico del acido 3-amino-3-(3-bromo-5-fluorofenil)propionico
Se suspendieron 1,59 g (6,05 mmoles) de acido 3-amino-3-(3-bromo-5-fluorofenil)propionico en 24,5 ml de metanol, y la mezcla se enfrio hasta 0°C. Se anadieron lentamente 0,66 ml (9,08 mmoles) de cloruro de tionilo. La mezcla se agito a temperatura ambiente durante 20 horas y se concentro. El residuo se trato con disolucion saturada de hidrogenocarbonato de sodio, y se extrajo con diclorometano. La parte organica se seco con sulfato de sodio y se concentro. La cromatograffa sobre 10 g de gel de sflice (diclorometano/etanol 100/0-95/5-90/10) dio 1,55 g (93%) de ester metflico del acido 3-amino-3-(3-bromo-5-fluorofenil)propionico.
5
10
15
20
25
30
35
40
45
RMN 1H (300 MHz, CLOROFORMO-d): 8 = 2,55 - 2,71 (m, 2H), 3,70 (s, 3H), 4,40 (dd, 1H), 7,06 (d, 1H), 7,15 (d, 1H), 7,33 (s, 1 H) ppm.
Ejemplo 17c
4-{3-[(3R)-3-{[1-(3-Bromo-5-fluorofenil)-3-metoxi-3-oxopropil]carbamoil}piperidin-1-il]-3-oxopropil}piperidin-1- carboxilato de ferc-butilo
Se disolvieron 587,2 mg (2,13 mmoles) de ester metflico del acido 3-amino-3-(3-bromo-5-fluoro-fenil)-propionico en 8,2 ml de W,W-dimetilformamida y se enfriaron hasta 0°C. A esta disolucion se anadio una disolucion de 1100 mg (2,36 mmoles) de 4-{3-[(3R)-3-{[(2,5-dioxopirrolidin-1-il)oxi]carbonil}piperidin-1-il]-3-oxopropil}piperidin-1-carboxilato de terc-butilo (ejemplo 5c) y 0,89 ml (6,38 mmoles) de trietilamina en 8,2 ml de diclorometano. La mezcla se mantuvo a 6°C durante 20 horas. Se anadio una disolucion saturada de cloruro de amonio, y la mezcla se extrajo con diclorometano. La capa organica se seco sobre sulfato de sodio y se concentro a vacfo para dar 1,66 g (125%) de 4-{3-[(3R)-3-{[1-(3-bromo-5-fluorofenil)-3-metoxi-3-oxopropil]carbamoil}piperidin-1-il]-3-oxopropil}piperidin-1- carboxilato de ferc-butilo con 80% de pureza.
UPLC (ACN-HCOOH): Rt. = 1,35 min.
MS (ES+): m/e = 628,5 (M + H+)
MS (ES-): m/e = 626,4 (M - H), 672,4 (M + HCOO-)
Ejemplo 17d
4-{3-[(3R)-3-{[(1-(5-Fluoro-4'-hidroxibifenil-3-il)-3-metoxi-3-oxopropil]carbamoil}piperidin-1-il]-3-oxopropil}piperidin-1- carboxilato de ferc-butilo
A 558,0 mg (0,71 mmoles) de 4-{3-[(3R)-3-{[1-(3-bromo-5-fluorofenil)-3-metoxi-3-oxopropil]carbamoil}piperidin-1-il]-3- oxopropil}piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo en 17,4 ml de tolueno se anadieron 16,5 mg (0,01 mmoles) de tetraquis(trifenilfosfina)paladio(0), 117,9 mg (0,85 mmoles) de acido (4-hidroxifenil)boronico en 4,3 ml de etanol, y 82,8 mg (1,43 mmoles) de fluoruro potasio en 4,4 ml de agua. La mezcla se agito a 100°C durante 4 horas, se diluyo con agua y se extrajo con acetato de etilo. La fase organica se seco sobre sulfato de sodio y se concentro a vacfo. La cromatograffa sobre 10 g de gel de sflice (diclorometano/etanol 100/0-95/5-90/10) dio 417 mg (92%) de 4-{3- [(3R)-3-([(1-(5-fluoro-4'-hidroxibifenil-3-il)-3-metoxi-3-oxopropil]carbamoil}piperidin-1-il]-3-oxopropil}piperidin-1- carboxilato de ferc-butilo.
UPLC (ACN-HCOOH): Rt. = 1,24 min.
5
10
15
20
25
30
35
40
45
Ejemplo 17e
4-{3-[(3R)-3-({1-[5-Fluoro-4’-(2-fluoroetoxi)bifenil-3-il]-3-metoxi-3-oxopropil}carbamoil)piperidin-1-il]-3- oxopropil}piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo
Se disolvieron 234 mg (0,37 mmoles) de 4-{3-[(3R)-3-{[(1-(5-fluoro-4’-hidroxibifenil-3-il)-3-metoxi-3- oxopropil]carbamoil}piperidin-1-il]-3-oxopropil}piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo en 4,0 ml de tetrahidrofurano. Se anadieron 238 mg (0,73 mmoles) de carbonato de cesio y 120,9 mg (0,70 mmoles) de 1-yodo-2-fluoroetano. La mezcla se agito a temperatura ambiente durante 20 horas. Se anadieron 120,9 mg (0,70 mmoles) de 1-yodo-2- fluoroetano, y la mezcla se agito a temperatura ambiente durante 70 horas, se diluyo con agua y se extrajo con acetato de etilo. La fase organica se seco sobre sulfato de sodio y se concentro a vacfo. La cromatograffa sobre 10 g de gel de sflice (diclorometano/etanol 100/0-90/10) dio 225 mg (90%) de 4-{3-[(3R)-3-({1-[5-fluoro-4’-(2- fluoroetoxi)bifenil-3-il]-3-metoxi-3-oxopropil}carbamoil)piperidin-1-il]-3-oxopropil}piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo.
UPLC (ACN-HCOOH): Rt. = 1,38 min.
MS (ES+): m/e = 686,2 (M + H+)
MS (ES-): m/e = 730,5 (M + HCOO')
Ejemplo 17f
Acido 3-({[(3R)-1-{3-[1-(ferc-butoxicarbonil)piperidin-4-il]propanoil}piperidin-3-il]carbonil}amino)-3-[5-fluoro-4’-(2-
fluoroetoxi)bifenil-3-il]propanoico
Se disolvieron 220 mg (0,32 mmoles) de 4-{3-[(3R)-3-({1-[5-fluoro-4’-(2-fluoroetoxi)bifenil-3-il]-3-metoxi-3- oxopropil)carbamoil)piperidin-1-il-3-oxopropilpiperidin-1-carboxilato de ferc-butilo en 10,4 ml de tetrahidrofurano. Se anadieron 3,85 ml (0,39 mmoles) de disolucion 0,1N de hidroxido de sodio. La mezcla se agito a temperatura ambiente durante 20 horas, se diluyo con agua y con una pequena cantidad de disolucion 1N de hidroxido de sodio, y se extrajo con acetato de etilo. La capa acuosa se llevo hasta pH = 4,5 con disolucion acuosa de acido cftrico al 10% y se extrajo con diclorometano y diclorometano/2-propanol 8/2. La capa organica se seco sobre sulfato de sodio y se concentro a vacfo para dar 150 mg (70%) de acido 3-({[(3R)-1-{3-[1-(ferc-butoxicarbonil)piperidin-4- il]propanoil}piperidin-3-il]carbonil}amino)-3-[5-fluoro-4’-(2-fluoroetoxi)bifenil-3-il]propanoico.
UPLC (ACN-HCOOH): Rt. = 1,32 min.
MS (ES+): m/e = 672,3 (M + H+)
Se suspendieron 148 mg (0,22 mmoles) de acido 3-({[(3R)-1-{3-[1-(terc-butoxicarbonil)piperidin-4-
il]propanoil}piperidin-3-il]carbonil}amino)-3-[5-fluoro-4'-(2-fluoroetoxi)bifenil-3-il]propanoico en 13,4 ml de dioxano. Se 10 anadieron 0,55 ml (2,20 mmoles) de acido clorhfdrico 4 N. La mezcla se agito a temperatura ambiente durante 20 horas y despues se concentro para dar 150 mg, que se purificaron mediante HPLC:
- Sistema:
- Sistema de autopurificacion Waters: Bomba 254, Manipulador de muestras 2767, CFO, DAD 2996, ELSD 2424, SQD 3001
- Columna:
- XBrigde C18 5 mm 100 x 30 mm
- Disolvente:
- A = H2O + 0,2% de NH3
- B = Metanol
- Gradiente:
- 0-1 min. 10% de B, 1-12 min. 10-80% de B
- Caudal:
- 50 ml/min.
- Temperatura:
- RT
- Disolucion:
- 150 mg/3 ml de DMSO/MeOH 1:1
- Inyeccion:
- 3 x 1 ml
- Deteccion:
- Intervalo de barrido de DAD 210-400 nm
- MS ESI+, ESI-, intervalo de barrido 160-1000 m/z
- ELSD
- Fracciones:
- Rt. en min DAD TAC Cantidad
- 11
- 8,4-8,8 >99% 41 mg
- 12
- 9,3-9,8 98,3% 18 mg
- Las fracciones se concentraron, se mezclaron con terc.-butanol y se liofilizaron.
La fraccion 12 contenfa el isomero deseado.
15
UPLC (ACN-HCOOH): Rt. = 1,12 min.
MS (ES+): m/e = 572,19 (M + H+)
20 MS (ES-): m/e = 570,16 (M - H)
Ejemplo 18
Acido (3S)-3-(5-{2-[4-(2-fluoroetoxi)fenil]etil}piridin-3-il)-3-[({(3R)-1-[3-(piperidin-4-il)propanoil]piperidin-3-
25 il}carbonil)amino]propanoico
Se agito 4-{3-[(3R)-3-{[(7S)-3-terc-butoxi-1-(5-{[4-(2-fluoroetoxi)fenil]etinil}piridin-3-il)-3-oxopropil]carbamoil}piperidin- 1 -il]-3-oxopropil}piperidin-1 -carboxilato de ferc-butilo (20 mg, 30 mmoles) en acetato de etilo (0,8 ml) y metanol (013 10 ml) durante 4,45 horas a temperatura ambiente bajo una atmosfera de hidrogeno en presencia de paladio sobre carbon (10%, 19 mg). La suspension se filtro a traves de celita, que se lavo concienzudamente con metanol. La disolucion se concentro a presion reducida y se purifico mediante HPLC preparativa para producir 13,9 mg de 4-{3- [(3R)-3-{[(1S)-3-terc-butoxi-1-(5-{2-[4-(2-fluoroetoxi)fenil]etil}piridin-3-il)3-oxopropil]carbamoil}piperidin-1-il]-3- oxopropil}piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo.
15
- Columna:
- C18 Chromatorex 10 mm 125 x 30 mm
- Disolvente:
- A = H2O + 0,1% de HCOOH
- B = acetonitrilo
- Gradiente:
- 0 - 0,5 min. 40% de B, 0,5 -7 min. 40-80% de B,
- Caudal:
- 120 ml/min.
- Temperatura:
- RT
- Deteccion:
- 271 nm
- Rt.:
- 3,48 - 4,35 min
UPLC (ACN-HCOOH): Rt. = 1,31 min.
MS (ES+): m/e = 739,5 (M + H+)
20
MS (ES-): m/e = 783,4 (M + HCOO')
Ejemplo 18b
25 Acido (3S)-3-(5-{2-[4-(2-fluoroetoxi)fenil]etil}piridin-3-il)-3-[({(3R)-1-[3-(piperidin-4-il)propanoil]piperidin-3-
il}carbonil)amino]propanoico
4-{3-[(3R)-3-{[(7S)-3-terc-butoxi-1-({[4-(2-fluoroetoxi)fenil]etil}piridin-3-il)-3-oxopropil]carbamoil}piperidin-1-il]-3- oxopropil}piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo (12,5 mg, 20 mmoles) se calento hasta 60°C en acido formico durante 30 30 minutos. Despues, la disolucion se concentro a vacfo, y el residuo se purifico mediante HPLC preparativa para
producir 9,2 mg de acido (3S)-3-(5-{2-[4-(2-fluoroetoxi)fenil]etil}piridin-3-il)-3-[({(3R)-1-[3-(piperidin-4-
il)propanoil]piperidin-3-il}carbonil)amino]propanoico.
- Columna:
- C18 Chromatorex 10 mm 30x125 mm
- Disolvente:
- A = H2O + 0,1% de HCOOH
- B = acetonitrilo
- Gradiente:
- 0 - 0,5 min. 10% de B, 0,5 - 7 min. 10 - 40% de B,
- Caudal:
- 120 ml/min.
- Temperatura:
- RT
- Deteccion:
- 269 nm
- Rt.:
- 2,31 - 3,41 min
35 UPLC (ACN-HCOOH): Rt. = 0,69 min. MS (ES”): m/e =583,5 (M + H+)
Acido (3S)-3-(5-{2-[3-(2-fluoroetoxi)fenil]etil}piridin-3-il)-3-[({(3R)-1-[3-(piperidin-4-il)propanoil]piperidin-3-
il}carbonil)amino]propanoico 5
Ejemplo 19a
10 4-{3-[(3R)-3-{[(1 S)-3-T erc-butoxi-1 -(5-{2-[3-(2-fluoroetoxi)fenil]etil}piridin-3-il)-3-oxopropil]carbamoil}piperidin-1 -il]-3-
oxopropil}piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo
15 Se agito 4-{3-[(3R)-3-{[(1S)-3-ferc-butoxi-1-(5-{[3-(2-fluoroetoxi)fenil]etinil}piridin-3-il)-3-oxopropil]carbamoil}piperidin- 1 -il]-3-oxopropil}piperidin-1 -carboxilato de ferc-butilo (30 mg, 40 mmoles) en acetato de etilo (1,2 ml) y metanol (0,2 ml) durante 2,5 horas a temperatura ambiente bajo una atmosfera de hidrogeno en presencia de paladio sobre carbon (10%, 3 mg). La suspension se filtro a traves de celita, que se lavo concienzudamente con metanol. La disolucion se concentro a presion reducida y se purifico mediante HPLC preparativa para producir 21,9 mg de 4-{3- 20 [(3R)-3-{[(1S)-3-ferc-butoxi-1-(5-{2-[3-(2-fluoroetoxi)fenil]etil}piridin-3-il)-3-oxopropil]carbamoil}piperidin-1-il]-3-
oxopropil}piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo.
- Columna:
- C18 Chromatorex 10 mm 125 x 30 mm
- Disolvente:
- A = H2O + 0,1% de HCOOH
- B = acetonitrilo
- Gradiente:
- 0 - 0,5 min. 40% de B, 0,5 -7 min. 40-80% de B,
- Caudal:
- 120 ml/min.
- Temperatura:
- RT
- Deteccion:
- 271 nm
- Rt.:
- 3,48-4,35 min
UPLC (ACN-HCOOH): Rt. = 1,31 min.
25
MS (ES+): m/e = 739,5 (M + H+)
y 2,4 mg de una mezcla E/Z de 4-{3-[(3R)-3-{[(7S)-3-ferc-butoxi-1-(5-{2-[3-(2-fluoroetoxi)fenil]etenil}piridin-3-il)-3- oxopropil]carbamoil}piperidin-1-il]-3-oxopropil}piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo.
30
UPLC (ACN-HCOOH): Rt. = 1,38 min.
MS (ES+): m/e = 737,5 (M + H+)
35 Ejemplo 19b
Acido (3S)-3-(5-{2-[3-(2-fluoroetoxi)fenil]etil}piridin-3-il)-3-[({(3R)-1-[3-(piperidin-4-il)propanoil]piperidin-3-
il}carbonil)amino]propanoico
40 4-{3-[(3R)-3-{[(1S)-3-ferc-butoxi-1-(5-{2-[3-(2-fluoroetoxi)fenil]etil}piridin-3-il)-3-oxopropil]carbamoil}piperidin-1-il]-3-
oxopropil}piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo (20 mg, 30 mmoles) se calento hasta 60°C en acido formico durante 50 minutos. Despues, la disolucion se concentro a vacfo, y el residuo se purifico mediante HPLC preparativa para producir 12 mg de acido (3S)-3-(5-{2-[3-(2-fluoroetoxi)fenil]etil}piridin-3-il)-3-[({(3R)-1-[3-(piperidin-4-
il)propanoil]piperidin-3-il}carbonil)amino]propanoico.
5
- Columna:
- C18 Chromatorex 10 mm 30x125 mm
- Disolvente:
- A = H2O + 0,1% de HCOOH
- B = acetonitrilo
- Gradiente:
- 0 - 0,5 min. 10% de B, 0,5 - 7 min. 10 - 40% de B,
- Caudal:
- 120 ml/min.
- Temperatura:
- RT
- Deteccion:
- 269 nm
- Rt.:
- 2,27 - 3,48 min
UPLC (ACN-HCOOH): Rt. = 0,69 min.
MS (ES+): m/e =583,3 (M + H+)
10
Ejemplo 20
Acido (E/Z)(3S)-3-(5-{2-[3-(2-fluoroetoxi)fenil]etenil}piridin-3-il)-3-[({(3R)-1-[3-(piperidin-4-il)propanoil]piperidin-3-
il}carbonil)amino]propanoico 15
4-{3-[(3R)-3-{[(1S)-3-terc-butoxi-1-({[3-(2-fluoroetoxi)fenil]etenil}piridin-3-il)-3-oxopropil]carbamoil}piperidin-1-il]-3- oxopropil}piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo (2,4 mg, 3,2 mmoles) se calento hasta 60°C en acido formico durante 20 40 minutos. Despues, la disolucion se concentro a vacfo para producir 1,6 mg de acido (E/Z)(3S)-3-(5-{2-[3-(2-
fluoroetoxi)fenil]etenil}piridin-3-il)-3-[({(3R)-1-[3-(piperidin-4-il)propanoil]piperidin-3-il}carbonil)amino]propanoico.
UPLC (ACN-HCOOH): Rt. = 0,75/0,77 min.
25 MS (ES+): m/e =581,5 (M + H+)
Ejemplo 21
4-{3-[(3R)-3-({(1S)-3-Metoxi-1-[3-(2-{[(4-metilfenil)sulfonil]oxi}etoxi)fenil]-3-oxopropil}carbamoil)piperidin-1-il]-3- 30 oxopropil}piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo
Se disolvio 4-{3-[(3R)-3-{[(7S)-1-(5-hidroxipiridin-3-il)-3-metoxi-3-oxopropil]carbamoil}piperidin-1-il]-3-
35 oxopropil}piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo (ejemplo 4e, 80 mg, 0,15 mmoles) en W,W-dimetilformamida (20 ml). Se anadieron carbonato de cesio (120 mg, 0,37 mmoles) y bis-p-toluenosulfonato de etilenglicol (81 mg, 0,22 mmoles). La mezcla se agito a temperatura ambiente durante 2 horas, se paralizo mediante adicion de disolucion acuosa saturada de cloruro de amonio, y se extrajo con acetato de etilo. Los extractos combinados se lavaron con salmuera y se secaron sobre sulfato de sodio. La disolucion se concentro a presion reducida, y el residuo se purifico
5
10
15
20
25
30
mediante cromatograffa de capa fina preparativa sobre gel de sflice (acetato de etilo en diclorometano al 60%) para producir 67 mg de 4-{3-[(3R)-3-({(7S)-3-metoxi-1-[3-(2-{[(4-metilfenil)sulfonil]oxi}etoxi)fenil]-3-
oxopropil}carbamoil)piperidin-1-il]-3-oxopropil}piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo.
UPLC (ACN-HCOOH): Rt. = 1,39 min.
MS (ES+): m/e = 744,60 (M + H+)
MS (ES-): m/e = 788,52 (M + HCOO-)
Ejemplo 22
4-{3-[(3R)-3-({3-Metoxi-1-[4-(2-{[(4-metilfenil)sulfonil]oxi}etoxi)fenil]-3-oxopropil}carbamoil)piperidin-1-il]-3- oxopropil}piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo
Se disolvieron 100 mg (0,18 mmoles) de 4-[3-((3R)-3-{[1-(4-hidroxifenil)-3-metoxi-3-oxopropil]carbamoil}piperidin-1- il)-3-oxopropil]piperidin-1 -carboxilato de ferc-butilo (ejemplo 2b) en 7 ml de W,W-dimetilformamida. Se anadieron 179 mg (0,55 mmoles) de carbonato de cesio y 102 mg (0,28 mmoles) de bis-p-toluenosulfonato de etilenglicol. La mezcla se agito a temperatura ambiente durante 48 horas y se concentro. El resto se recogio con disolucion saturada de cloruro de amonio y acetato de etilo. La fase acuosa se extrajo con 3 x 20 ml de acetato de etilo. Los extractos se secaron sobre sulfato de sodio, y se concentraron para producir 195 mg. La cromatograffa sobre 5 g de gel de sflice (diclorometano/etanol 100/0-95/5) dio 95 mg (63%) de 4-{3-[(3R)-3-({3-metoxi-1-[4-(2-{[(4- metilfenil)sulfonil]oxi}etoxi)fenil]-3-oxopropil}carbamoil)piperidin-1-il]-3-oxopropil}piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo.
UPLC (ACN-HCOOH): Rt. = 1,37 - 1,38 min.
MS (ES+): m/e = 744,37 (M + H+)
MS (ES-): m/e = 788,34 (M + HCOO-)
4-{3-[(3R)-3-({('/S)-3-Terc-butoxi-1-[4-(2-{[(4-metilfenil)sulfonil]oxi}etoxi)fenil]-3-oxopropil}carbamoil)piperidin-1-il]-3- oxopropil}piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo 5
Ejemplo 23a
10 Ester terc-butflico del acido (S)-3-amino-3-(4-hidroxifenil)propionico
Se suspendio 1,00 g (5,52 mmoles) de acido 3-amino-3-(4-hidroxi-fenil)-propionico comercial en 20 ml de acetato de 15 terc-butilo, y la mezcla se enfrio hasta 15°C. Se anadieron lentamente 0,90 ml (11,10 mmoles) de acido perclorico, y la mezcla se agito a 20°C durante 1,5 horas. La disolucion se extrajo con disolucion saturada de hidrogenocarbonato de sodio. La capa acuosa se llevo hasta pH = 8 con carbonato de sodio, y se extrajo con acetato de etilo. Las partes organicas se combinaron, se secaron sobre sulfato de sodio y se concentraron para producir 1,0 g (60%) de ester terc-butflico del acido 3-amino-3-(4-hidroxi-fenil)-propionico racemico. Este se separo en los enantiomeros mediante 20 HPLC:
- Sistema:
- 2x Labomatic Bombae HD-3000, Labomatic AS-3000, Knauer DAD 2600, Labomatic Labcol Vario 4000 Plus
- Columna:
- Chiralpak AD-H 5 mm 250 x 50 mm
- Disolvente:
- hexano/IPA 90:10+ 0,1% de dietilamina
- Caudal:
- 100 ml/min.
- Temperatura:
- RT
- Disolucion:
- 1000 mg /10 ml de EtOH
- Inyeccion:
- 4 x 2,5 ml
- Deteccion:
- UV 230 nm
- Fracciones:
- Rt. en min % Cantidad
- 11
- 8,98 98,7 232,6 mg
- 12
- 11,07 96,4 232,7 mg
- Las fracciones se concentraron.
La fraccion 12 contenfa el isomero deseado.
25 UPLC (ACN-NH3): Rt. = 0,81 min.
MS (ES+): m/e = 239,18 (M + H+)
MS (ES-): m/e = 236,18 (M - H), 282,18 (M + HCOO')
Rotacion optica (P2000 Polarimeter, CHCh): [a]o = -13,6° +/- 0,11°
5
10
15
20
25
30
35
40
Bibiiograffa: [ajo = -8,5° (Tetrahedron: Asymmetry 18 (2007) 1554-1566, 3.6.72 Compound (S)-46)
Ejemplo 23b
Ester terc-butfiico dei acido 4-(3-{(R)-3-[(S)-2-terc-butoxicarbonii-1-(4-hidroxi-fenii)-etiicarbamoii]-piperidin-1-ii}-3-oxo- propil)-piperidin-1-carboxflico
Se disoivieron 214,0 mg (0,90 mmoies) de ester terc-butfiico dei acido (S)-3-amino-3-(4-hidroxi-fenii)-propionico en 3,5 mi de W,W-dimetiiformamida y se enfriaron hasta 0°C. A esta disoiucion se anadio una disoiucion de 466,4 mg (1,00 mmoies) de 4-{3-[(3R)-3-{[(2,5-dioxopirroiidin-1-ii)oxi]carbonii}piperidin-1-ii]-3-oxopropii}piperidin-1-carboxiiato de ferc-butiio (ejempio 5c) y 0,38 mi (2,71 mmoies) de trietiiamina en 3,5 mi de diciorometano. La mezcia se mantuvo a 6°C durante 20 horas. Se anadio disoiucion saturada de cioruro de amonio, y ia mezcia se extrajo con diciorometano. La capa organica se seco sobre suifato de sodio y se concentro a vacfo para dar 820 mg. La cromatograffa sobre 5 g de gei de sfiice (diciorometano/etanoi 100/0-95/5-90/10) dio 539 mg (102%) de ester terc- butfiico dei acido 4-(3-{(R)-3-[(S)-2-terc-butoxicarbonii-1-(4-hidroxifenii)-etiicarbamoii]-piperidin-1-ii}-3-oxo-propii)- piperidin-1 -carboxfiico.
UPLC (ACN-HCOOH): Rt. = 1,24 min.
MS (ES+): m/e = 588,5 (M + H+)
MS (ES-): m/e = 586,6 (M - H), 632,6 (M + HCOO')
Ejemplo 23c
4-{3-[(3R)-3-({(7S)-3-Terc-butoxi-1-[4-(2-{[(4-metiifenii)suifonii]oxi}etoxi)fenii]-3-oxopropii}carbamoii)piperidin-1-ii]-3- oxopropii)piperidin-1-carboxiiato de ferc-butiio
Se disoivieron 270,0 mg (0,46 mmoies) de ester terc-butfiico dei acido 4-(3-{(R)-3-[(S)-2-terc-butoxicarbonii-1-(4- hidroxi-fenii)-etiicarbamoii]-piperidin-1 -ii}-3-oxo-propii)-piperidin-1 -carboxfiico en 17,7 mi de W,W-dimetiiformamida. Se anadieron 449 mg (1,38 mmoies) de carbonato de cesio y 255,3 mg (0,69 mmoies) de bis-p-toiuenosuifonato de etiiengiicoi. La mezcia se agito a temperatura ambiente durante 20 horas y se concentro. Ei resto se recogio con disoiucion saturada de cioruro de amonio y acetato de etiio. La fase acuosa se extrajo con 3 x 20 mi de acetato de etiio. Los extractos se secaron sobre suifato de sodio y se concentraron. La cromatograffa sobre 10 g de gei de sfiice (diciorometano/etanoi 100/0-90/10) dio 227 mg (63%) de 4-{3-[(3R)-3-({(7S)-3-terc-butoxi-1-[4-(2-{[(4- metiifenii)suifonii]oxi}etoxi)fenii]-3-oxopropii}carbamoii)piperidin-1-ii]-3-oxopropii}piperidin-1-carboxiiato de ferc-butiio,
5
10
15
20
25
30
que se purificaron mediante HPLC:
- Sistema:
- Sistema de autopurificacion Waters: Bomba 254, Manipulador de muestras 2767, CFO, DAD 2996, ELSD 2424, SQD 3001
- Columna:
- XBripde C18 5 mm 100 x 30 mm
- Disolvente:
- A = H2O + 0,1% de HCOOH
- B = acetonitrilo
- Gradiente:
- 0-1 min. 30% de B, 1-8 min. 30-100% de B
- Caudal:
- 50 ml/min.
- Temperatura:
- RT
- Disolucion:
- 227 mg/2 ml de DMSO/MeOH 1:1
- Inyeccion:
- 2 x 1 ml
- Deteccion:
- Intervalo de barrido de DAD 210-400 nm
- MS ESI+, ESI-, intervalo de barrido 160-1000 m/z
- ELSD
- Fracciones:
- Rt. en min % Cantidad
- 11
- 6,6-7,0 >99 125 mg
- Las fracciones se concentraron, se mezclaron con terc.-butanol y se liofilizaron.
UPLC (ACN-NH3): Rt. = 1,48 min.
MS (ES+): m/e = 787,8 (M + H+)
MS (ES-): m/e = 784,6 (M - H), 830,6 (M + HCOO")
Ejemplo 24
4-{3-[(3R)-3-({(7S)-3-Metoxi-1-[5-(2-{[(4-metilfenil)sulfonil]oxi}etoxi)piridin-3-il]-3-oxopropil}carbamoil)piperidin-1-il]-3- oxopropil}piperidin-1-carboxilato de terc-butilo
4-{3-[(3R)-3-({(7S)-1-[5-(benciloxi)piridin-3-il]-3-metoxi-3-oxopropil}carbamoil)piperidin-1-il]-3-oxopropil}piperidin-1- carboxilato de terc-butilo (ejemplo 5e, 200 mg, 0,37 mmoles) se disolvio en W,W-dimetilformamida (25,3 ml). Se anadieron carbonato de cesio (298 mg, 0,92 mmoles) y bis-p-toluenosulfonato de etilenglicol (203 mg, 0,55 mmoles). La mezcla se agito a temperatura ambiente durante 2 horas y se almaceno a 5°C durante 17 horas. La mezcla se paralizo mediante adicion de disolucion acuosa saturada de cloruro de amonio, y se extrajo con acetato de etilo. Los extractos combinados se lavaron con salmuera y se secaron sobre sulfato de sodio. La disolucion se concentro a presion reducida, y el residuo se purifico mediante cromatograffa de capa fina preparativa sobre gel de sflice (acetato de etilo al 100%) para producir 109 mg de 4-{3-[(3R)-3-({(7S)-3-metoxi-1-[5-(2-{[(4- metilfenil)sulfonil]oxi}etoxi)piridin-3-il]-3-oxopropil}carbamoil)piperidin-1 -il]-3-oxopropil}piperidin-1 -carboxilato de terc- butilo.
UPLC (ACN-NH3): Rt. = 1,26 min.
MS (ES+): m/e = 745,6 (M + H+)
MS (ES-): m/e = 789,5 (M + HCOO')
5
10
15
20
25
30
35
40
4-{3-[(3R)-3-({(1S)-3-7erc-butoxi-1-[5-(2-{[(4-metilfenil)sulfonil]oxi}etoxi)piridin-3-il]-3-oxopropil}carbamoil)piperidin-1- il]-3-oxopropil}piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo
Ejemplo 25a
5-(Benciloxi)piridin-3-carbonitrilo
Se agito 3-(benciloxi)-5-bromopiridina (5,38 g, 20,4 mmoles, Harrowven et al. Tetrahedron, 2001, 57, 4447-4454) en DMF (33 ml) con cianuro de cobre (2,9 g, 32,6 mmoles) a 160°C durante 7 horas. Se anadio disolucion acuosa saturada de hidrogenocarbonato de sodio y acetato de etilo, y la suspension formada se agito a 50°C durante 15 minutos. Tras filtrar, las fases lfquidas se separaron. El precipitado se trituro con DMF al 10% en acetato de etilo (500 ml) y con disolucion acuosa saturada de hidrogenocarbonato de sodio (100 ml) a 50°C, y se llevaron a cabo la filtracion y la separacion de fases. El tratamiento del precipitado con disolucion acuosa saturada de hidrogenocarbonato de sodio y DMF al 10% en acetato de etilo se repitio dos veces, y las fases organicas combinadas se lavaron con salmuera y se secaron sobre sulfato de sodio. La disolucion se concentro a presion reducida, y el residuo se purifico mediante cromatograffa sobre gel de sflice (acetato de etilo en hexano, 0 hasta 65%) para producir 3,13 g de 5-(benciloxi)piridin-3-carbonitrilo.
RMN 1H (300 MHz, CDCla): 8 = 5,16 (s, 2 H), 7,35 - 7,55 (m, 6 H), 8,50 (d, 1 H), 8,58 (d, 1 H) ppm.
Ejemplo 25 b
3-Amino-3-[5-(benciloxi)piridin-3-il]prop-2-enoato de ferc-butilo
Se anadio diisopropilamina (12,8 ml, 91 mmoles) a 0°C a una disolucion 3M de bromuro de etilmagnesio en eter dietflico (15 ml, 45 mmoles) y eter dietflico adicional (40 ml). Despues de una hora a 0°C, se anadio acetato de t- butilo, y la agitacion se continuo durante 30 minutos. Se anadio 5-(benciloxi)piridin-3-carbonitrilo (2,9 g, 13,8 mmoles) en eter dietflico (40 ml) a 0°C. Despues de 2,5 horas a 0°C, se anadio disolucion acuosa saturada de cloruro de amonio. Las fases se separaron, y la fase acuosa se extrajo con eter dietflico. Los extractos combinados se lavaron con salmuera y se secaron sobre sulfato de sodio. La disolucion se concentro a presion reducida, y el residuo se purifico mediante cromatograffa sobre gel de sflice (acetato de etilo en hexano, 0 hasta 45%) para producir 1,95 g de 3-amino-3-[5-(benciloxi)piridin-3-il]prop-2-enoato de ferc-butilo.
RMN 1H (300 MHz, CDCla): 6 = 1,53 (s, 9 H), 4,89 (s, 1 H), 5,14 (s, 2 H), 7,33 - 7,48 (m, 6 H), 8,42 (m, 2 H) ppm.
5
10
15
20
25
30
35
40
(3S)-3-Amino-3-[5-(benciloxi)piridin-3-il]propanoato de ferc-butilo
A dfmero de cloro(1,5-ciclooctadien)rodio(I) (29 mg, 60 mmoles) y (R)-(-)-1-[(S)-2-di-terc.-butil-fosfino)ferrocenil]etildi- (4-trifluormetilfenil)fosfina (81 mg, 120mmoles) en una atmosfera de argon se anadio 2,2,2-trifluoroetanol (4 ml), y la disolucion se agito durante 40 minutos. A 3-amino-3-[5-(benciloxi)piridin-3-il]prop-2-enoato de ferc-butilo (1,95 g 5,97 mmoles) en 2,2,2-trifluoroetanol desgasificado (10 ml) en una vasija de presion se anadio la disolucion de catalizador de rodio, y la disolucion se agito durante 22 horas a 50°C bajo una presion de hidrogeno de 10 bares. Se repitio la adicion de una disolucion de catalizador de rodio preparada identicamente en 2,2,2-trifluoroetanol (4 ml), y la agitacion se continuo durante 16 horas adicionales bajo una presion de hidrogeno de 10 bares a 50°C. La disolucion se concentro a presion reducida, y el residuo se purifico mediante cromatograffa sobre gel de sflice (acetato de etilo en hexano, 12 hasta 100%, seguido de metanol en acetato de etilo 0 hasta 15%) para producir 1,16 g de (3S)-3- amino-3-[5-(benciloxi)piridin-3-il]propanoato de ferc-butilo enantiomericamente enriquecido.
RMN 1H (400 MHz, CDCla): 8 = 1,43 (s, 9 H), 2,59 (d, 2 H), 4,42 (t, 1 H), 5,12 (s, 2 H), 7,32 - 7,50 (m, 6 H), 8,23 (s, 1 H), 8,29 (m, 1 H) ppm.
Rotacion optica (P2000 Polarimeter, CHCh): [a]D = -15,5° (c = 1,0 g/100 ml de CHCh)
Ejemplo 25d
4-{3-[(3R)-3-({(7S)-1-[5-(Benciloxi)piridin-3-il]-3-terc-butoxi-3-oxopropil}carbamoil)piperidin-1-il]-3-oxopropil}piperidin- 1-carboxilato de ferc-butilo
A (3S)-3-amino-3-[5-(benciloxi)piridin-3-il]propanoato de ferc-butilo (1,15 g, 3,5 mmoles) en DMF (13,4 ml) se anadio 4-{3-[(3R)-3-{[(2,5-dioxopirrolidin-1 -il)oxi]carbonillpiperidin-1-il]-3-oxopropil}piperidin-1 -carboxilato de ferc-butilo y trietilamina (1,46 ml, 10,5 mmoles) en diclorometano (13,5 ml) a 0°C. Despues de 3 horas, la mezcla se paralizo mediante adicion de disolucion acuosa saturada de cloruro de amonio, las fases se separaron, y la fase acuosa se extrajo con eter diefflico. Los extractos organicos combinados se secaron sobre sulfato de sodio, se concentraron a presion reducida, y el residuo se purifico mediante cromatograffa sobre gel de sflice (acetato de etilo en hexano 20 hasta 100%, seguido de metanol en acetato de etilo 0 hasta 20%) para producir 1,76 g de 4-{3-[(3R)-3-({(7S)-1-[5- (benciloxi)piridin-3-il]-3-terc-butoxi-3-oxopropil}carbamoil)piperidin-1-il]-3-oxopropil}piperidin-1-carboxilato de ferc- butilo, RMN 1H (300 MHz, DMSOd6): 8 = 0,79 - 1,08 (m, 3 H), 1,38 (s, 9 H), 1,35 (s, 9 H), 1,49-1,75 (m, 9 H), 2,29 (m, 3 H), 2,59 - 2,77 (m, 5 H), 2,89 - 3,13 (m, 1 H), 3,68 - 3,83 (m, 1 H), 3,83 - 3,97 (m, 2 H), 5,07 - 5,27 (m, 1 H), 5,17 (s, 2H), 7,28 - 7,51 (m, 6 H), 8,12 (br. s, 1 H), 8,24 (br. s, 1 H), 8,39 - 8,55 (m, 1 H)
5
10
15
20
25
30
35
40
45
4-{3-[(3R)-3-{[(7S)-3-Terc-butoxi-1-(5-hidroxipiridin-3-il)-3-oxopropil]carbamoil}piperidin-1-il]-3-oxopropil}piperidin-1- carboxilato de ferc-butilo
4-{3-[(3R)-3-({(1S)-1-[5-(benciloxi)piridin-3-il]-3-terc-butoxi-3-oxopropil}carbamoil)piperidin-1-il]-3-oxopropil}piperidin- 1-carboxilato de ferc-butilo (1,69 g, 2,49 mmoles) en acetato de etilo (73 ml) y metanol (12 ml) se agito durante 20 horas a temperatura ambiente bajo una atmosfera de hidrogeno en presencia de paladio sobre carbon (10%, 170 mg). La suspension se filtro a traves de celita, que se lavo concienzudamente con metanol. La disolucion se concentro a presion reducida, y el residuo se purifico mediante cromatograffa sobre gel de sflice (metanol en acetato de etilo 0 hasta 15%) para producir 1,37 g de 4-{3-[(3R)-3-{[(7S)-3-terc-butoxi-1-(5-hidroxipiridin-3-il)-3- oxopropil]carbamoil}piperidin-1-il]-3-oxopropil}piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo.
RMN 1H (400 MHz, DMSOd6, 80°C): 8 = 0,85 - 1,09 (m, 2 H), 1,36 (s, 9 H), 1,41 (s, 9 H), 1,30 - 1,47 (m, 5 H), 1,55 - 1,72 (m, 4 H), 1,77 - 1,89 (m, 1 H), 2,29 (m, 3 H), 2,59 - 2,77 (m, 5 H), 2,89 - 3,13 (m, 1 H), 3,83 - 3,97 (m, 3 H), 5,03 - 5,25 (m, 1 H), 7,09 (t, 1 H), 7,88 - 8,09 (m, 2 H), 8,14 (d, 1 H), 9,55 (br., 1 H) ppm.
Ejemplo 25f
4-{3-[(3R)-3-({(1S)-3-Terc-butoxi-1-[5-(2-{[(4-metilfenil)sulfonil]oxi}etoxi)piridin-3-il]-3-oxopropil}carbamoil)piperidin-1- il]-3-oxopropil}piperidin-1 -carboxilato de ferc-butilo
Se disolvio 4-{3-[(3R)-3-{[( 1 S)-3-terc-butoxi-1-(5-hidroxipiridin-3-il)-3-oxopropil]carbamoil}piperidin-1-il]-3- oxopropil}piperidin-1-carboxilato (200 mg, 0,34 mmoles) en W,W-dimetilformamida (39 ml). Se anadieron carbonato de cesio (277 mg, 0,85 mmoles) y bis-p-toluenosulfonato de etilenglicol (188 mg, 0,51 mmoles). La mezcla se agito a temperatura ambiente durante 4 horas, se repitio la adicion de carbonato de cesio (277 mg, 0,85 mmoles) y bis-p- toluenosulfonato de etilenglicol (188 mg, 0,51 mmoles), y la agitacion se continuo a 5°C durante 17 horas. La mezcla se paralizo mediante adicion de disolucion acuosa saturada de cloruro de amonio, y se extrajo con eter dietflico y acetato de etilo. Los extractos combinados se lavaron con salmuera y se secaron sobre sulfato de sodio. La disolucion se concentro a presion reducida, y el residuo se purifico mediante cromatograffa sobre gel de sflice (acetato de etilo en hexano 20% hasta 100%, seguido de dioxano en acetato de etilo 0 hasta 60%) para producir 207 mg de 4-{3-[(3R)-3-({(1S)-3-terc-butoxi-1-[5-(2-{[(4-metilfenil)sulfonil]oxi}etoxi)piridin-3-il]-3-
oxopropil}carbamoil)piperidin-1-il]-3-oxopropil}piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo.
UPLC (ACN-NH2): Rt. = 1,37 min.
MS (ES+): m/e = 787,5 (M + H+)
MS (ES-): m/e = 785,5 (M - H), 831,5 (M + HCOO')
Ejemplo 26
4-{3-[(3R)-3-{[3-Metoxi-1-{5-[4-(2-{[(4-metilfenil)sulfonil]oxi}etoxi)fenil]piridin-3-il}-3-oxopropil]carbamoil}piperidin-1-il]- 3-oxopropil}piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo
5
10
15
20
25
30
35
40
Se disolvieron 82,0 mg (0,13 mmoles) de 4-{3-[(3R)-3-({1-[5-(4-hidroxifenil)piridin-3-il]-3-metoxi-3-
oxopropil}carbamoil)piperidin-1-il]-3-oxopropil}piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo (ejemplo 7a) en 5,1 ml de N,N- dimetilformamida. Se anadieron 129 mg (0,40 mmoles) de carbonato de cesio y 73,2 mg (0,20 mmoles) de bis-p- toluenosulfonato de etilenglicol. La mezcla se agito a temperatura ambiente durante 20 horas y se concentro. El resto se recogio con disolucion saturada de cloruro de amonio y acetato de etilo. La fase acuosa se extrajo con 3 x 20 ml de acetato de etilo. Los extractos se secaron sobre sulfato de sodio y se concentraron. La cromatograffa sobre 10 g de gel de sflice (diclorometano/etanol 100/0-90/10) dio 64 mg (59%) de 4-{3-[(3R)-3-{[3-metoxi-1-{5-[4-(2-{[(4- metilfenil)sulfonil]oxi}etoxi)fenil]piridin-3-il}-3-oxopropil]carbamoil}piperidin-1-il]-3-oxopropil}piperidin-1 -carboxilato de ferc-butilo.
UPLC (ACN-HCOOH): Rt. = 1,30 min.
MS (ES+): m/e = 821,4 (M + H+)
MS (ES-): m/e = 819,6 (M - H), 865,5 (M + HCOO')
Ejemplo 27
4-{3-[(3R)-3-{[(1S)-3-Terc-butoxi-1-{5-[4-(2-{[(4-metilfenil)sulfonil]oxi}etoxi)fenil]piridin-3-il}-3- oxopropil]carbamoil}piperidin-1-il]-3-oxopropil}piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo
Ejemplo 27a
3-Amino-3-[5-bromopiridin-3-il]prop-2-enoato de ferc-butilo
Se anadio diisopropilamina (9,2 ml, 65 mmoles) a 0°C a una disolucion 3M de bromuro de etilmagnesio en eter dietflico (10,9 ml, 32,7 mmoles) y eter dietflico adicional (20 ml). Despues de una hora a 0°C, se anadio acetato de ferc-butilo (4,3 ml, 32,7 mmoles), y la agitacion se continuo durante 30 minutos. Se anadio 5-bromopiridin-3- carbonitrilo (2,0 g, 10,9 mmoles) en eter dietflico (42 ml) a 0°C. Despues de dos horas a 0°C, se anadio disolucion acuosa saturada de cloruro de amonio. Las fases se separaron, y la fase acuosa se extrajo con eter dietflico. Los extractos combinados se lavaron con salmuera y se secaron sobre sulfato de sodio. La disolucion se concentro a presion reducida, y el residuo se purifico mediante cromatograffa sobre gel de sflice (acetato de etilo en hexano, 0 hasta 60%) para producir 1,12 g de 3-amino-3-(5-bromopiridin-3-il)prop-2-enoato de ferc-butilo.
RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6): 8 = 1,44 (s, 9 H), 4,77 (s, 1 H), 7,15 (br., 2 H), 8,22 (t, 1 H), 8,75 (d, 1 H), 8,76 (d, 1 H) ppm.
5
10
15
20
25
30
35
40
(3S)-3-Amino-3-(5-bromopiridin-3-il)propanoato de ferc-butilo
A dfmero de cloro(1,5-ciclooctadien)rodio(I) (39 mg, 80 mmoles) y (R)-(-)-1-[(S)-2-di-ferc.-butil-fosfino)ferrocenil]etildi- (4-trifluormetilfenil)fosfina (108 mg, 160 mmoles) en una atmosfera de argon se anadio 2,2,2-trifluoroetanol (5,8 ml), y la disolucion se agito durante 40 minutos. A 3-amino-3-(5-bromopiridin-3-il)prop-2-enoato de ferc-butilo (1,59 g 5,32 mmoles) en 2,2,2-trifluoroetanol desgasificado (11,6 ml) en una vasija de presion se anadio la disolucion de catalizador de rodio, y la disolucion se agito durante 22 horas a 50°C bajo una presion de hidrogeno de 11 bares. La disolucion se concentro a presion reducida, y el residuo se purifico mediante cromatograffa sobre gel de sflice (acetato de etilo en hexano, 12 hasta 100%, seguido de metanol en acetato de etilo 0 hasta 15%) para producir 1,16 g de (3S)-3-amino-3-[5-(benciloxi)piridin-3-il]propanoato de ferc-butilo enantiomericamente enriquecido.
RMN 1H (300 MHz, CDCla): 8 = 1,43 (s, 9 H), 2,59 (d, 2 H), 4,42 (t, 1 H), 7,92 (t, 1 H), 8,58 (d, 1 H), 8,53 (d, 1 H) ppm.
a = -17,6° (c = 1,0g /100ml, CHCls)
Ejemplo 27c
4-{3-[(3R)-3-({(1S)-1-[5-Bromopiridin-3-il]-3-terc-butoxi-3-oxopropil}carbamoil)piperidin-1-il]-3-oxopropil}piperidin-1- carboxilato de ferc-butilo
A (3S)-3-amino-3-(5-bromopiridin-3-il)propanoato de ferc-butilo (1,33 g, 4,42 mmoles) en DMF (17 ml) se anadio 4- {3-[(3R)-3-{[(2,5-dioxopirrolidin-1-il)oxijcarbonil}piperidin-1-il]-3-oxopropil}piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo
(ejemplo 25c 2,54 g, 4,91 mmoles) y trietilamina (1,85 ml, 13,2 mmoles) en diclorometano (17 ml) a 0°C. Despues de 3 horas, la mezcla se paralizo mediante adicion de disolucion acuosa saturada de cloruro de amonio, las fases se separaron, y la fase acuosa se extrajo con eter dietflico. Los extractos organicos combinados se secaron sobre sulfato de sodio, se concentraron a presion reducida, y el residuo se purifico mediante cromatograffa sobre gel de sflice (acetato de etilo en hexano, 12 hasta 100%, seguido de metanol en acetato de etilo 0 hasta 15%) para producir 2,1 g de 4-[3-((3R)-3-{[(7S)-1-(5-bromopiridin-3-il)-3-terc-butoxi-3-oxopropil]carbamoil}piperidin-1-il)-3- oxopropil]piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo.
UPLC (ACN-HCOOH): Rt. = 1,35 min.
MS (ES+): m/e = 651,4/653,4 (M + H+)
5
10
15
20
25
30
35
40
45
4-{3-[(3R)-3-{[(7S)-3-Terc-butoxi-1-{5-[4-(2-{[4-hidroxifenil]piridin-3-il}-3-oxopropil]carbamoil}piperidin-1-il]-3- oxopropil}piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo
A 4-[3-((3R)-3-{[(7S)-1-(5-bromopiridin-3-il)-3-terc-butoxi-3-oxopropil]carbamoil}piperidin-1-il)-3-oxopropil]piperidin-1- carboxilato de ferc-butilo (200 mg, 307 mmoles) en tolueno (7,5 ml) se anadio tetraquis(trifenilfosfina)paladio(0) (14 mg, 0,01 mmoles), acido (4-hidroxifenil)boronico (55 mg, 399 mmoles) en etanol (1,87 ml), y fluoruro de potasio (55 mg, 0,61 mmoles) en agua (1,87 ml). La mezcla se agito a 100°C durante 4 horas, se diluyo con agua, y se extrajo con acetato de etilo. La fase organica se seco sobre sulfato de sodio y se concentro a vacfo. El residuo se purifico mediante cromatograffa sobre gel de sflice (acetato de etilo en hexano, 12 hasta 100%, seguido de metanol en acetato de etilo 0 hasta 15%) para producir 156 mg de 4-{3-[(3R)-3-{[(7S)-3-terc-butoxi-1-{5-[4-(2-{[4- hidroxifenil]piridin-3-il}-3-oxopropil]carbamoil}piperidin-1 -il]-3-oxopropil}piperidin-1 -carboxilato de ferc-butilo.
UPLC (ACN-HCOOH): Rt. = 1,17 min.
MS (ES+): m/e = 665,5 (M + H+)
MS (ES-): m/e = 663,5 (M - H), 709,5 (M + HCOO')
Ejemplo 27e
4-{3-[(3R)-3-{[(7S)-3-Terc-butoxi-1-{5-[4-(2-{[(4-metilfenil)sulfonil]oxi}etoxi)fenil]piridin-3-il}-3- oxopropil]carbamoil}piperidin-1-il]-3-oxopropil}piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo
Se disolvio 4-{3-[(3R)-3-{[(7S)-3-terc-butoxi-1-{5-[4-(2-{[4-hidroxifenil]piridin-3-il}-3-oxopropil]carbamoil}piperidin-1-il]- 3-oxopropil}piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo (100 mg, 0,15 mmoles) en W,W-dimetilformamida (17,4 ml). Se anadieron carbonato de cesio (122 mg, 0,38 mmoles) y bis-p-toluenosulfonato de etilenglicol (84 mg, 0,23 mmoles). La mezcla se agito a temperatura ambiente durante 4 horas, se repitio la adicion de carbonato de cesio (122 mg, 0,38 mmoles) y bis-p-toluenosulfonato de etilenglicol (84 mg, 0,23 mmoles), y la agitacion se continuo a 5°C durante 17 horas. La mezcla se paralizo mediante adicion de disolucion acuosa saturada de cloruro de amonio, y se extrajo con eter dietflico y acetato de etilo. Los extractos combinados se lavaron con salmuera y se secaron sobre sulfato de sodio. La disolucion se concentro a presion reducida, y el residuo se purifico mediante cromatograffa sobre gel de sflice (acetato de etilo en hexano 20 hasta 100%, seguido de dioxano en acetato de etilo 0 hasta 60%) para producir 85 mg de 4-{3-[(3R)-3-{[(7S)-3-terc-butoxi-1-{5-[4-(2-{[(4-metilfenil)sulfonil]oxi}etoxi)fenil]piridin-3-il}-3-
oxopropil]carbamoil}piperidin-1-il]-3-oxopropil}piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo.
UPLC (ACN-NH3): Rt. = 1,44 min.
MS (ES+): m/e = 863,6 (M + H+)
MS (ES-): m/e = 861,5 (M - H).
5
10
15
20
25
30
35
4-{3-[(3R)-3-({1-[5-(4-Cloro-3-cianofenil)piridin-3-il]-3-metoxi-3-oxopropil}carbamoil)piperidin-1-il]-3- oxopropil}piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo
A 100,0 mg (0,16 mmoles) de 4-{3-[(3R)-3-{[1-(5-bromopiridin-3-il)-3-metoxi-3-oxopropil]carbamoil}piperidin-1-il]-3- oxopropil}piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo (ejemplo 8c) en 4 ml de tolueno se anadieron 3,8 mg de tetraquis(trifenilfosfina)paladio(0), 35,7 mg (0,20 mmoles) de acido (4-cloro-3-ciano-fenil)boronico en 1,0 ml de etanol, y 29,6 mg (0,51 mmoles) de fluoruro de potasio en 1,0 ml de agua. La mezcla se agito a 100°C durante 6 horas, se diluyo con agua y con disolucion saturada de hidrogenocarbonato de sodio, y se extrajo con acetato de etilo. La fase organica se seco sobre sulfato de sodio y se concentro a vacfo. La cromatograffa sobre 10 g de gel de sflice (diclorometano/etanol 100/0-95/5-90/10) dio 44 mg (36%) de 4-{3-[(3R)-3-({1-[5-(4-cloro-3-cianofenil)piridin-3- il]-3-metoxi-3-oxopropil}carbamoil)piperidin-1-il]-3-oxopropil}piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo.
UPLC (ACN-HCOOH): Rt. = 1,27 min.
MS (ES+): m/e = 668,6 (M + H+)
MS (ES-): m/e = 664,5 (M - H), 710,5 (M + HCOO')
Ejemplo 29
4-{3-[(3R)-3-{[(7S)-1-{5-[(3-Bromo-4-cianobencil)oxi]piridin-3-il}-3-metoxi-3-oxopropil]carbamoil}piperidin-1-il]-3- oxopropil}piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo
A 4-{3-[(3R)-3-{[(7S)-1-(5-hidroxipiridin-3-il)-3-metoxi-3-oxopropil]carbamoil}piperidin-1-il]-3-oxopropil}piperidin-1-
carboxilato de ferc-butilo (100 mg, 0,18 mmoles) en DMF (3 ml) se anadio hidruro de sodio (8 mg, 60%, 0,2 mmoles). La disolucion se enfrio hasta 0°C y se anadio 2-bromo-4-(bromometil)benzonitrilo (55 mg, 0,2 mmoles) mientras se agita. La mezcla se calento hasta temperatura ambiente y, despues de 45 minutos, se paralizo mediante adicion de agua y acetato de etilo. Las fases se separaron, y la fase acuosa se extrajo con acetato de etilo. Los extractos organicos combinados se concentraron a vacfo, y el residuo se purifico mediante HPLC preparativa para producir 46 mg de 4-(3-[(3R)-3-{[(7S)-1-{5-[(3-bromo-4-cianobencil)oxi]piridin-3-il}-3-metoxi-3-oxopropil]carbamoil}piperidin-1-il]- 3-oxopropil}piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo.
- Columna:
- C18 Chromatorex 10 mm 30 x 125 mm
- Disolvente:
- A = H2O + 0,1% de HCOOH
- B = acetonitrilo
- Gradiente:
- 00,5 min. 30% de B, 0,5 -7 min. 30 - 70% de B
- Caudal:
- 120 ml/min.
- Temperatura:
- RT
- Deteccion:
- 276 nm
- Rt.:
- 5,31 - 5,70 min
5
10
15
20
25
30
35
40
45
MS (ES+): m/e = 740,3/742,3 (M + H+)
Ejemplo 30
4-{3-[(3R)-3-{[3-Metoxi-1-{5-[3-(2-{[(4-metilfenil)sulfonil]oxi}etoxi)fenil]piridin-3-il}-3-oxopropil]carbamoil}piperidin-1-il]- 3-oxopropil}piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo
Se disolvieron 98,0 mg (0,16 mmoles) de 4-{3-[(3R)-3-({1-[5-(3-hidroxifenil)piridin-3-il]-3-metoxi-3- oxopropil}carbamoil)piperidin-1-il]-3-oxopropil}piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo (ejemplo 6a) en 6,1 ml de N,N- dimetilformamida. Se anadieron 154 mg (0,47 mmoles) de carbonato de cesio y 87,4 mg (0,24 mmoles) de bis-p- toluenosulfonato de etilenglicol. La mezcla se agito a temperatura ambiente durante 68 horas y se concentro. El resto se recogio con disolucion saturada de cloruro de amonio y acetato de etilo. La fase acuosa se extrajo con 3 x 20 ml de acetato de etilo. Los extractos se secaron sobre sulfato de sodio y se concentraron. La cromatograffa sobre 10 g de gel de sflice (diclorometano/etanol 100/0-90/10) dio 70 mg (49%) de 4-{3-[(3R)-3-{[3-metoxi-1-{5-[3-(2-{[(4- metilfenil)sulfonil]oxi}etoxi)fenil]piridin-3-il}-3-oxopropil]carbamoil}piperidin-1-il]-3-oxopropil}piperidin-1 -carboxilato de ferc-butilo.
UPLC (ACN-HCOOH): Rt. = 1,33 min.
MS (ES+): m/e = 821,3 (M + H+)
MS (ES-): m/e = 865,5 (M + HCOO-)
Ejemplo 31
4-{3-[(3R)-3-{[3-Metoxi-1-{5-[2-(2-{[(4-metilfenil)sulfonil]oxi}etoxi)fenil]piridin-3-il}-3-oxopropil]carbamoil}piperidin-1-il]- 3-oxopropil}piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo
Se disolvieron 108,0 mg (0,17 mmoles) de 4-{3-[(3R)-3-({1-[5-(2-hidroxifenil)piridin-3-il]-3-metoxi-3- oxopropil}carbamoil)piperidin-1-il]-3-oxopropil}piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo (ejemplo 8d) en 6,7 ml de N,N- dimetilformamida. Se anadieron 170 mg (0,52 mmoles) de carbonato de cesio y 96,4 mg (0,26 mmoles) de bis-p- toluenosulfonato de etilenglicol. La mezcla se agito a temperatura ambiente durante 68 horas y se concentro. El resto se recogio con disolucion saturada de cloruro de amonio y acetato de etilo. La fase acuosa se extrajo con 3 x 20 ml de acetato de etilo. Los extractos se secaron sobre sulfato de sodio y se concentraron. La cromatograffa sobre 10 g de gel de sflice (diclorometano/etanol 100/0-90/10) dio 55 mg (37%) de 4-{3-[(3R)-3-{[3-metoxi-1-{5-[2-(2-{[(4- metilfenil)sulfonil]oxi}etoxi)fenil]piridin-3-il}-3-oxopropil]carbamoil}piperidin-1-il]-3-oxopropil}piperidin-1 -carboxilato de ferc-butilo.
UPLC (ACN-HCOOH): Rt. = 1,30 min.
5
10
15
20
25
30
35
40
MS (ES+): m/e = 821,3 (M + H+)
MS (ES-): m/e = 865,5 (M + HCOO-)
Ejemplo 32
4-{3-[(3R)-3-({1-[5-(4-Cloro-3-nitrofenil)piridin-3-il]-3-metoxi-3-oxopropil}carbamoil)piperidin-1-il]-3-oxopropil}piperidin- 1-carboxilato de ferc-butilo
A 171,5 mg (0,28 mmoles) de 4-{3-[(3R)-3-{[1-(5-bromopiridin-3-il)-3-metoxi-3-oxopropil]carbamoil}piperidin-1-il]-3- oxopropil}piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo (ejemplo 8c) en 7 ml de tolueno se anadieron 6,5 mg (0,01 mmoles) de tetraquis(trifenilfosfina)paladio(0), 68,0 mg (0,34 mmoles) de acido (4-cloro-3-nitro-fenil)boronico en 1,7 ml de etanol, y 50,7 mg (0,87 mmoles) de fluoruro en potasio 1,7 ml de agua. La mezcla se agito a 100°C durante 60 horas, se diluyo con agua y se extrajo con acetato de etilo. La fase organica se seco sobre sulfato de sodio y se concentro a vacfo. La cromatograffa sobre 10 g de gel de sflice (diclorometano/etanol 100/0-95/5-90/10) dio 100 mg (47%) de 4-{3-[(3R)-3-({1-[5-(4-cloro-3-nitrofenil)piridin-3-il]-3-metoxi-3-oxopropil}carbamoil)piperidin-1-il]-3- oxopropil}piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo.
UPLC (ACN-HCOOH): Rt. = 1,30 min.
MS (ES+): m/e = 686,2 (M + H+)
MS (ES-): m/e = 730,4 (M + HCOO')
Ejemplo 33
4-{3-[(3R)-3-({1-[5-Fluoro-4’-(2-{[(4-metilfenil)sulfonil]oxi}etoxi)bifenil-3-il]-3-metoxi-3-oxopropil}carbamoil)piperidin-1- il]-3-oxopropil}piperidin-1 -carboxilato de ferc-butilo
Se disolvieron 178,0 mg (0,28 mmoles) de ester terc-butflico del acido 4-(3-{(R)-3-[1-(5-fluoro-4’-hidroxi-bifenil-3-il)-2- metoxicarbonil-etilcarbamoil]-piperidin-1-il}-3-oxo-propil)-piperidin-1-carboxflico (ejemplo 17d) en 10,7 ml de N,N- dimetilformamida. Se anadieron 272 mg (0,84 mmoles) de carbonato de cesio y 154,6 mg (0,42 mmoles) de bis-p- toluenosulfonato de etilenglicol. La mezcla se agito a temperatura ambiente durante 70 horas y se concentro. El resto se recogio con disolucion saturada de cloruro de amonio y acetato de etilo. La fase acuosa se extrajo con 3 x 20 ml de acetato de etilo. Los extractos se secaron sobre sulfato de sodio y se concentraron. La cromatograffa sobre 10 g de gel de sflice (diclorometano/etanol 100/0-95/5) dio 167 mg, que se purificaron posteriormente mediante HPLC para producir 27 mg (11%) de 4-{3-[(3R)-3-({1-[5-fluoro-4’-(2-{[(4-metilfenil)sulfonil]oxi}etoxi)bifenil-3-il]-3- metoxi-3-oxopropil}carbamoil)piperidin-1-il]-3-oxopropil}piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo.
MS (ES+): m/e = 838,4 (M + H+)
5 MS (ES-): m/e = 882,4 (M + HCOO-)
Ejemplo 34
4-{3-[(3R)-3-{[(7S)-3-Terc-butoxi-1-(5-{[4-(2-{[(4-metilfenil)sulfonil]oxi}etoxi)fenil]etinil}piridin-3-il)-3- 10 oxopropil]carbamoil}piperidin-1-il]-3-oxopropil}piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo
Ejemplo 34a
15
4-{3-[(3R)-3-{[(7S)-3-Terc-butoxi-1-{5-[(4-hidroxifenil)etinil]piridin-3-il}-3-oxopropil]carbamoil}piperidin-1-il]-3- oxopropil}piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo
20
A una disolucion desgasificada de 4-[3-((3R)-3-{[(1S)-1-(5-bromopiridin-3-il)-3-terc-butoxi-3- oxopropil]carbamoil}piperidin-1-il)-3-oxopropil]piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo (400 mg, 0,61 moles), yoduro de cobre (14 mg, 70 mmoles), tetraquis(trifenilfosfina)paladio(0) (71 mg, 60 mmoles) y 4-[(trimetilsilil)etinil]fenol (234 mg, 1,23 mmoles) en 1,2-dimetoxietano (3,5 ml) y n-butilamina (0,91 ml) se anadio una disolucion 1 M de fluoruro de 25 tetra-n-butilamonio en THF (800 ml, 0,8 mmoles) durante 60 minutos a 80°C. Despues de 10 minutos adicionales a 80°C, la mezcla se diluyo con agua tras enfriar hasta la temperatura ambiente, y se extrajo con acetato de etilo. La fase organica se seco sobre sulfato de sodio y se concentro a vacfo. El residuo se purifico mediante HPLC preparativa para producir 338 mg de 4-{3-[(3R)-3-{[(7S)-3-terc-butoxi-1-{5-[(4-hidroxifenil)etinil]piridin-3-il}-3- oxopropil]carbamoil}piperidin-1-il]-3-oxopropil}piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo.
30
- Columna:
- C18 YMC-ODS AQ 10 mm 51 x 200 mm
- Disolvente:
- A = H2O + 0,1% de HCOOH
- B = acetonitrilo
- Gradiente:
- 0-1 min. 65% de B, 1-10 min. 65-85% de B,
- Caudal:
- 150 ml/min.
- Temperatura:
- RT
- Deteccion:
- 276 nm
- Rt.:
- 7,36-8,67 min.
UPLC (ACN-HCOOH): Rt. = 1,31 min.
MS (ES+): m/e = 689,5 (M + H+)
5
10
15
20
25
30
35
40
4-{3-[(3R)-3-{[(7S)-3-Terc-butoxi-1-(5-{[4-(2-{[(4-metilfenil)sulfonil]oxi}etoxi)fenil]etinil}piridin-3-il)-3- oxopropil]carbamoil}piperidin-1-il]-3-oxopropil}piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo
Se disolvio 4-{3-[(3R)-3-{[(7S)-3-terc-butoxi-1-{5-[(4-hidroxifenil)etinil]piridin-3-il}-3-oxopropil]carbamoil}piperidin-1-il]-
3- oxopropil}piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo (60 mg, 0,09 mmoles) en W,W-dimetilformamida (10 ml). Se anadieron carbonato de cesio (71 mg, 0,22 mmoles) y bis(4-metilbencenosulfonato de etano-1,2-diflo (48 mg, 0,13 mmoles). La mezcla se agito a temperatura ambiente durante 25 horas mientras se repitio la adicion de carbonato de cesio (71 mg, 0,22 mmoles) y bis(4-metilbencenosulfonato de etano-1,2-diflo (48 mg, 0,13 mmoles) despues de 4 y 6 horas. La mezcla se paralizo mediante adicion de disolucion acuosa saturada de cloruro de amonio, y se extrajo con eter dietflico y acetato de etilo. Los extractos combinados se lavaron con salmuera y se secaron sobre sulfato de sodio. La disolucion se concentro a presion reducida, y el residuo se purifico mediante cromatograffa sobre gel de sflice (acetato de etilo en hexano 20% hasta 100%, seguido de dioxano en acetato de etilo 0 hasta 50%) para producir 48 mg de 4-{3-[(3R)-3-{[(7S)-3-terc-butoxi-1-(5-{[4-(2-{[(4-metilfenil)sulfonil]oxi}etoxi)fenil]etinil}piridin-3-il)-3- oxopropil]carbamoil}piperidin-1-il]-3-oxopropil}piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo.
UPLC (ACN-HCOOH): Rt. = 1,51 min.
MS (ES+): m/e = 887,7 (M + H+)
Ejemplo 35
4- {3-[(3R)-3-{[(7S)-3-Terc-butoxi-1-(5-{[3-(2-{[(4-metilfenil)sulfonil]oxi}etoxi)fenil]etinil}piridin-3-il)-3- oxopropil]carbamoil}piperidin-1-il]-3-oxopropil}piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo
Ejemplo 35a
4-{3-[(3R)-3-{[(7S)-3-Terc-butoxi-1-{5-[(3-hidroxifenil)etinil]piridin-3-il}-3-oxopropil]carbamoil}piperidin-1-il]-3- oxopropil}piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo
A una disolucion desgasificada de 4-[3-((3R)-3-{[(7S)-1-(5-bromopiridin-3-il)-3-terc-butoxi-3-
oxopropil]carbamoil}piperidin-1-il)-3-oxopropil]piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo (ejemplo 27c, 300 mg, 0,46 mmoles), yoduro de cobre (13 mg, 70 mmoles) y tetraquis(trifenilfosfina) paladio(0) (53 mg, 50 mmoles) en DMF (1,5 ml) y n-butilamina (0,68 ml) se anadio una disolucion de 3-etinilfenol (103 mg, 0,88 mmoles) en DMF (1,0 ml) durante 35 minutos a 100°C. Despues de 5 minutos adicionales a 100°C, la mezcla se diluyo con DMSO y se purifico mediante HPLC preparativa para producir 289 mg de 4-{3-[(3R)-3-{[(7S)-3-terc-butoxi-1-{5-[(3-
hidroxifenil)etinil]piridin-3-il}-3-oxopropil]carbamoil}piperidin-1-il]-3-oxopropil}piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo.
5
10
15
20
25
30
- Columna:
- C18 YMC-ODS AQ 10 pm 51 x 200 mm
- Disolvente:
- A = H2O + 0,1% de HCOOH
- B = acetonitrilo
- Gradiente:
- 0 - 1 min. 65% de B, 1 -10 min. 65-85% de B,
- Caudal:
- 240 ml/min.
- Temperatura:
- RT
- Deteccion:
- 276 nm
- Rt.:
- 7,86 - 9,09 min.
UPLC (ACN-HCOOH): Rt. = 1,33 min.
MS (ES+): m/e = 689,6 (M + H+)
Ejemplo 35b
4-{3-[(3R)-3-{[(7S)-3-Terc-butoxi-1-(5-{[3-(2-{[(4-metilfenil)sulfonil]oxi}etoxi)fenil]etinil}piridin-3-il)-3- oxopropil]carbamoil}piperidin-1-il]-3-oxopropil}piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo
Se disolvio 4-{3-[(3R)-3-{[(7S)-3-terc-butoxi-1-{5-[(3-hidroxifenil)etinil]piridin-3-il}-3-oxopropil]carbamoil}piperidin-1-il]-
3- oxopropil}piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo (40 mg, 0,06 mmoles) en W,W-dimetilformamida (6,7 ml). Se anadieron carbonato de cesio (47 mg, 0,15 mmoles) y bis(4-metilbencenosulfonato de etano-1,2-diflo (32 mg, 0,09 mmoles). La mezcla se agito a temperatura ambiente durante 4 horas y se almaceno durante 72 horas a 5°C. Se repitio la adicion de carbonato de cesio (47 mg, 0,15 mmoles) y de bis(4-metilbencenosulfonato de etano-1,2-diflo (32 mg, 0,09 mmoles), y la mezcla se agito a temperatura ambiente durante 3 horas. La mezcla se paralizo mediante adicion de disolucion acuosa saturada de cloruro de amonio, y se extrajo con acetato de etilo. Los extractos combinados se lavaron con salmuera y se secaron sobre sulfato de sodio. La disolucion se concentro a presion reducida, y el residuo se purifico mediante cromatograffa sobre gel de sflice (acetato de etilo en hexano 20% hasta 100%, seguido de dioxano en acetato de etilo 0 hasta 50%) para producir 24 mg de 4-{3-[(3R)-3-{[(7S)-3-terc-butoxi- 1-(5-{[3-(2-{[(4-metilfenil)sulfonil]oxi}etoxi)fenil]etinil}piridin-3-il)-3-oxopropil]carbamoil}piperidin-1-il]-3- oxopropil}piperidin-1-carboxilato de terc-butilo.
UPLC (ACN-HCOOH): Rt. = 1,50 min.
MS (ES+): m/e = 887,5 (M + H+)
Ejemplo 36
4- {3-[(3R)-3-{[(7S)-3-Terc-butoxi-1-(5-{2-[4-(2-{[(4-metilfenil)sulfonil]oxi}etoxi)fenil]etil}piridin-3-il)-3- oxopropil]carbamoil}piperidin-1-il]-3-oxopropil}piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo
5
10
15
20
25
30
35
40
4-{3-[(3R)-3-{[(7S)-3-7erc-butoxi-1-{5-[2-(4-hidroxifenil)etil]piridin-3-il}-3-oxopropil]carbamoil}piperidin-1-il]-3- oxopropil}piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo
Se agito 4-{3-[(3R)-3-{[(7S)-3-terc-butoxi-1-{5-[(4-hidroxifenil)etinil]piridin-3-il}-3-oxopropil]carbamoil}piperidin-1-il]-3- oxopropil}piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo (190 mg, 0,28 mmoles) en acetato de etilo (8,1 ml) y metanol (1,34 ml) durante 4,45 horas a temperatura ambiente bajo una atmosfera de hidrogeno en presencia de paladio sobre carbon (10%, 19 mg). La suspension se filtro a traves de celita, que se lavo concienzudamente con metanol. La disolucion se concentro a presion reducida y se purifico mediante HPLC preparativa para producir 89 mg de 4-{3-[(3R)-3-{[(1S)- 3-terc-butoxi-1-{5-[2-(4-hidroxifenil)etil]piridin3-il}-3-oxopropil]carbamoil}piperidin-1-il]-3-oxopropil}piperidin-1- carboxilato de ferc-butilo.
- Columna:
- C18 YMC-ODS AQ 10 pm 51 x 200 mm
- Disolvente:
- A = H2O + 0,1% de HCOOH
- B = acetonitrilo
- Gradiente:
- 0 - 1 min. 40% de B, 1 -10 min. 40-80% de B,
- Caudal:
- 240 ml/min.
- Temperatura:
- RT
- Deteccion:
- 276 nm
- Rt.:
- 4,40 - 4,74 min.
UPLC (ACN-HCOOH): Rt. = 1,18 min.
MS (ES+): m/e = 693,6 (M + H+)
Ejemplo 36b
4-{3-[(3R)-3-{[(7S)-3-7erc-butoxi-1-(5-{2-[4-(2-{[(4-metilfenil)sulfonil]oxi}etoxi)fenil]etil}piridin-3-il)-3- oxopropil]carbamoil}piperidin-1-il]-3-oxopropil}piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo
Se disolvio 4-{3-[(3R)-3-{[(7S)-3-terc-butoxi-1-{5-[(4-hidroxifenil)etil]piridin-3-il}-3-oxopropil]carbamoil}piperidin-1-il]-3- oxopropil}piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo (67 mg, 0,10 mmoles) en W,W-dimetilformamida (9,7 ml). Se anadieron carbonato de cesio (79 mg, 0,24 mmoles) y bis(4-metilbencenosulfonato) de etano-1,2-diflo (54 mg, 0,15 mmoles). La mezcla se agito a temperatura ambiente durante 4 horas, se paralizo mediante adicion de disolucion acuosa saturada de cloruro de amonio, y se extrajo con acetato de etilo. Los extractos combinados se lavaron con salmuera y se secaron sobre sulfato de sodio. La disolucion se concentro a presion reducida, y el residuo se purifico mediante cromatograffa sobre gel de sflice (acetato de etilo en hexano 20% hasta 100%, seguido de dioxano en acetato de etilo 0 hasta 60%) para producir 64 mg de 4-{3-[(3R)-3-{[(7S)-3-ferc-butoxi-1-(5-{2-[4-(2-{[(4-
metilfenil)sulfonil]oxi}etoxi)fenil]etil}piridin-3-il)-3-oxopropil]carbamoil}piperidin-1-il]-3-oxopropil}piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo.
UPLC (ACN-NH3): Rt. = 1,48 min.
MS (ES+): m/e = 891,6 (M + H+)
4-{3-[(3R)-3-{[('/S)-3-Terc-butoxi-1-(5-{2-[3-(2-{[(4-metilfenil)sulfonil]oxi}etoxi)fenil]etil}piridin-3-il)-3- oxopropil]carbamoil}piperidin-1-il]-3-oxopropil}piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo 5
Ejemplo 37a
10 4-{3-[(3R)-3-{[(1S)-3-ferc-butoxi-1-{5-[(3-hidroxifenil)etil]piridin-3-il}-3-oxopropil]carbamoil}piperidin-1-il]-3-
oxopropil}piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo
15 Se agito 4-{3-[(3R)-3-{[(1S)-3-ferc-butoxi-1-{5-[(3-hidroxifenil)etinil]piridin-3-il}-3-oxopropil]carbamoil}piperidin-1-il]-3- oxopropil}piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo (200 mg, 0,29 mmoles) en acetato de etilo (8,5 ml) y metanol (1,4 ml) durante 7 horas a temperatura ambiente bajo una atmosfera de hidrogeno en presencia de paladio sobre carbon (10%, 20 mg), mientras que se repitio la adicion de paladio sobre carbon (10%, 20 mg) despues de 4 horas. La suspension se filtro a traves de celita, que se lavo concienzudamente con metanol. La disolucion se concentro a 20 presion reducida, y el residuo se purifico mediante HPLC preparativa para producir 125 mg de 4-{3-[(3R)-3-{[(1S)-3- ferc-butoxi-1-{5-[2-(3-hidroxifenil)etil]piridin-3-il}-3-oxopropil]carbamoil}piperidin-1-il]-3-oxopropil}piperidin-1- carboxilato de ferc-butilo.
- Columna:
- C18 Chromatorex 10 mm 125 x 30 mm
- Disolvente:
- A = H2O + 0,1% de HCOOH
- B = acetonitrilo
- Gradiente:
- 0 - 0,5 min. 45% de B, 0,5 - 6 min. 45 - 70% de B,
- Caudal:
- 150 ml/min.
- Temperatura:
- RT
- Deteccion:
- 228 nm
- Rt.:
- 1,52 - 2,49 min.
25 UPLC (ACN-HCOOH): Rt. = 1,19 min.
MS (ES+): m/e = 693,5 (M + H+)
Ejemplo 37b
30
4-{3-[(3R)-3-{[(1S)-3-Terc-butoxi-1-(5-{2-[3-(2-{[(4-metilfenil)sulfonil]oxi}etoxi)fenil]etil}piridin-3-il)-3- oxopropil]carbamoil}piperidin-1-il]-3-oxopropil}piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo
Se disolvio 4-{3-[(3R)-3-{[(1S)-3-terc-butoxi-1-{5-[(3-hidroxifenil)etil]piridin-3-il}-3-oxopropil]carbamoil}piperidin-1-il]-3- 35 oxopropil}piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo (67 mg, 0,10 mmoles) en W,W-dimetilformamida (9,7 ml). Se anadieron carbonato de cesio (79 mg, 0,24 mmoles) y bis(4-metilbencenosulfonato de etano-1,2-diflo (54 mg, 0,15 mmoles). La mezcla se agito a temperatura ambiente durante 4 horas, se paralizo mediante adicion de disolucion acuosa saturada de cloruro de amonio, y se extrajo con acetato de etilo. Los extractos combinados se lavaron con salmuera y se secaron sobre sulfato de sodio. La disolucion se concentro a presion reducida, y el residuo se purifico mediante
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
cromatograffa sobre gel de sflice (acetato de etilo en hexano 20% hasta 100%, seguido de dioxano en acetato de etilo 0 hasta 50%) para producir 49 mg de 4-{3-[(3R)-3-{[(1S)-3-terc-butoxi-1-(5-{2-[3-(2-{[(4-metilfenil) sulfonil]oxi}etoxi)fenil]etil}piridin-3-il)-3-oxopropil]carbamoil}piperidin-1-il]-3-oxopropil}piperidin-1 -carboxilato de terc- butilo.
UPLC (ACN-HCOOH): Rt. = 1,43 min.
MS (ES+): m/e = 891,5 (M + H+)
Ejemplo 38
Acido (3S)-3-[3-(2-[18F]fluoroetoxi)fenil]-3-[({(3R)-1-[3-(piperidin-4-il)propanoil]piperidin-3-il}carbonil)amino]propanoico
Radiosintesis via marcaje directo:
El [ F]fluoruro se produjo mediante una reaccion nuclear de O (p, n) F mediante bombardeo de una diana de agua enriquecida al 98% con 18O con un haz de protones de 11MeV en el ciclotron RDS111. La disolucion acuosa de [18F]fluoruro se atrapo en un pequeno cartucho de intercambio anionico Sep-Pak™ Plus QMA (Waters) preacondicionado con 5 ml de una disolucion de K2CO3 0,5 M y 10 ml de agua). La radioactividad se eluyo con una mezcla de disoluciones (1,0 mg de K2CO3 en 0,5 ml de agua, y 5,27 mg de K222 en 1,5 ml de MeCN) desde el cartucho de QMA a un vial Wheaton conico de 5 ml. El disolvente se evaporo bajo una corriente de nitrogeno a 110°C. El secado azeotropico se repitio tres veces con porciones de 1,0 ml de acetonitrilo. Despues, la mezcla diastereomerica de 4-{3-[(3R)-3-({3-metoxi-1-[3-(2-{[(4-metilfenil)sulfonil]oxi}etoxi)fenil]-3-
oxopropil}carbamoil)piperidin-1-il]-3-oxopropil}piperidin-1-carboxilato de terc-butilo (ejemplo 21, 2,0 mg, 2,69 mmoles) en MeCN seco (300 ml) se anadio al [18F]KF-K222 seco. Tras calentar a 100°C durante 10 min. en un vial cerrado hermeticamente, la vasija se enfrio, y se anadio NaOH 0,5 M (100 ml). La agitacion se continuo durante 10 min. a 25°C antes de que se anadiese HCl 1 M (200 ml). El vial, que se volvio a cerrar hermeticamente, se calento entonces nuevamente durante 10 min. a 100°C. Tras enfriar, la mezcla de reaccion se diluyo con 4 ml de agua y se aplico en una HPLC semipreparativa (Zorbax Bonus RP 5 mm C18-HL (9,4 x 250 mm), 17/83/0,1 - acetonitrilo/agua/acido trifluoroacetico (relacion volumen a volumen a volumen), 4 ml/min., tiempo de retencion de acido (3S)-3-[3-(2- [18F]fluoro-etoxi)fenil]-3-[({(3R)-1-[3-(piperidin-4-il)propanoil]piperidin-3-il}carbonil)amino]propanoico: 18,3-19,5 min.; tiempo de retencion de acido (3R)-3-[3-(2-[18F]fluoro-etoxi)fenil]-3-[({(3R)-1-[3-(piperidin-4-il)propanoil]piperidin-3-il}- carbonil)amino]propanoico: 12,8-14,0 min.). La fraccion recogida se diluyo con 20 ml de agua y se aplico en un cartucho preacondicionado Sep-Pak™ Light C18 (preacondicionado con 5 ml de EtOH y 10 ml de agua). El cartucho se lavo con 5 ml de agua, y despues la actividad se eluyo con 1,5 ml de EtOH. Tras la evaporacion total del EtOH bajo una corriente de nitrogeno a 90°C, el trazador final se recogio en agua (300 ml) para obtener acido (3S)-3-[3-(2- [18F]fluoro-etoxi)fenil]-3-[({(3R)-1-[3-(piperidin-4-il)propanoil]piperidin-3-il}-carbonil)amino]propanoico de 73 a 297 MBq (rendimiento radioqufmico: 14 ± 5,4% d.c.; tiempo de sfntesis: 116 ± 9,6 min.). La pureza radioqufmica fue >99%. El producto marcado con F-18 se confirmo mediante coinyeccion con el patron frfo de F-19 (ejemplo 1) en una HPLC analftica (columna: ACE, C18 RP, 50 x 4,6 mm, 3 m, 2 ml/min. (Agilent), disolvente A: H2O + 0,1% de TFA, disolvente B: MeCN + 0,1% de TFA, gradiente: 5% de B hasta 40% de B en 7 min.).
Radiosintesis via marcaje indirecto:
El [ F]fluoruro se produjo mediante una reaccion nuclear de O (p,n) F mediante bombardeo de una diana de agua enriquecida al a 98% con 18O con un haz de protones de 11MeV en el ciclotron RDS111. La disolucion acuosa de [18F]fluoruro se atrapo en un pequeno cartucho de intercambio anionico Sep-Pak™ Plus QMA (Waters) (preacondicionado con 5 ml de una disolucion de K2CO3 0,5 M y 10 ml de agua). La radioactividad se eluyo con una mezcla de disoluciones (1,0 mg de K2CO3 en 0,5 ml de agua y 5,27 mg de K222 en 1,5 ml de MeCN) desde el cartucho de QMA a un vial Wheaton conico de 5 ml. El disolvente se evaporo bajo una corriente de nitrogeno a 110°C. El secado azeotropico se repitio tres veces con porciones de 1,0 ml de acetionitrilo. Se anadieron 500 ml de o-diclorobenceno (o-DCB) al [18F]KF-K222 seco. Tras calentar a 100°C durante 2 min. en un vial cerrado hermeticamente, la vasija se enfrio, y despues se anadio ester 2-bromo-etflico del acido 4-nitro-bencenosulfonico (10 mg, 32,24 mmoles). El vial, que se volvio a cerrar hermeticamente, se calento nuevamente durante 10 min. a 130°C. Despues, la mezcla de reaccion se enfrio nuevamente y se pegaron dos agujas con tubos a traves del vial de reaccion sellado con una membrana de Teflon. Un tubo se conecta a un regulador de caudal de nitrogeno, y el otro tubo a un segundo vial equipado con 400 ml de DMF. Usando un caudal pequeno constante de gas nitrogeno a
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
traves de la mezcla de reaccion, esta mezcla se calento durante 20 min. adicionales a 100°C, mientras se conduce esta corriente de nitrogeno al segundo vial, en el que la corriente de nitrogeno burbujea constantemente a traves de los 400 ml de DMF. Con el calentamiento y la corriente de nitrogeno, el 2-[f8F]fluoro-1-bromo-etano formado en el vial 1 se lleva constantemente al vial 2. Despues de 20 min., la destilacion se detiene debido a que no se pudo detectar ningun incremento adicional de radioactividad en el vial 2.
En un vial separado, se disolvio 4-{3-[(3R)-3-{[1-(5-hidroxipiridin-3-il)-3-metoxi-3-oxopropil]carbamoil}piperidin-1-il]-3- oxopropil}piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo (ejemplo 4e, 2,50 mg, 4,58 mmoles) en 100 ml de DMF. Despues se anadio una disolucion 2 M de NaOH (20 ml, 40,0 mmoles), y, tras dejar reposar durante 1 min. a 25°C, esta mezcla se anadio al vial 2 que contiene el 2-[18F]fluoro-1-bromo-etano en 400 ml de DMSO. El vial 2 cerrado hermeticamente se calento durante 25 min. a 100°C. Tras enfriar, se anadieron 100 ml adicionales de NaOH 2 M a la mezcla de reaccion, y la agitacion se continuo durante 15 min. a 25°C. La disolucion se acidifico con 200 ml de HCl 4 M, y se calento durante 10 min. a 100°C en el vial cerrado hermeticamente. La mezcla de reaccion se neutralizo con NaOH 4 M, se diluyo con 3 ml de agua, y se aplico en una HPLC semiprep (Zorbax Bonus RP 5 mm C18-HL (9,4 x 250 mm), 17/83/0,1 - acetonitrilo/agua/acido trifluoroacetico (relacion volumen a volumen a volumen), 4 ml/min., tiempo de retencion del acido (3S)-3-[3-(2-[18F]fluoro-etoxi)fenil]-3-[({(3R)-1-[3-(piperidin-4-il)propanoil]piperidin-3-
il}carbonil)amino]propanoico: 13,4-14,7 min.; tiempo de retencion de acido (3R)-3-[3-(2-[18F]fluoro-etoxi)fenil]-3- [({(3R)-1-[3-(piperidin-4-il)propanoil]piperidin-3-il}carbonil)amino]propanoico: 8,6-9,7 min.). La fraccion recogida se diluyo con 20 ml de agua y se aplico en un cartucho preacondicionado Sep-Pak™ Light C18 (preacondicionado con 5 ml de EtOH y 10 ml). El cartucho se lavo con 5 ml de agua, y despues la actividad se eluyo con 1,5 ml de EtOH. Tras la evaporacion total del EtOH bajo una corriente de nitrogeno a 90°C, el trazador final se recogio en agua (100 ml) para obtener acido (3S)-3-[3-(2-[18F]fluoro-etoxi)-fenil]-3-[({(3R)-1-[3-(piperidin-4-il)propanoil]piperidin-3-
il}carbonil)amino]propanoico de 10 hasta 15 MBq (rendimiento radioqufmico: 3 ± 1,7% d.c.; tiempo de sfntesis: 195 ± 14,3 min.). La pureza radioqufmica fue >99%. El producto marcado con F-18 se confirmo mediante coinyeccion con el patron frfo de F-19 (ejemplo 1) en una HPLC analftica (columna: ACE, C18 RP, 50 x 4,6 mm, 3 m, 2 ml/min. (Agilent), disolvente A: h2o + 0,1% de TFA, disolvente B: MeCN + 0,1% de TFA, gradiente: 5% de B hasta 40% de B en 7 min.).
Ejemplo 39
Acido (3S)-3-[4-(2-[18F]fluoroetoxi)fenil]-3-[({(3R)-1-[3-(piperidin-4-il)propanoil]piperidin-3-il}carbonil)amino]propanoico
agua enriquecida al 98% con 18O con un haz de protones de 11MeV en el ciclotron RDS111. La disolucion acuosa de [18F]fluoruro se atrapo en un pequeno cartucho de intercambio anionico Sep-Pak™ Plus QMA (Waters) (preacondicionado con 5 ml de una disolucion de K2CO3 0,5 M y 10 ml de agua). La radioactividad se eluyo con una mezcla de disoluciones (1,0 mg de K2CO3 en 0,5 ml de agua y 5,27 mg de K222 en 1,5 ml de MeCN) desde el cartucho de QMA a un vial Wheaton conico de 5 ml. El disolvente se evaporo bajo una corriente de nitrogeno a 110°C. El secado azeotropico se repitio tres veces con porciones de 1,0 ml de acetonitrilo. Despues, la mezcla diastereomerica de 4-{3-[(3R)-3-({3-metoxi-1-[4-(2-{[(4-metilfenil)sulfonil]oxi}etoxi)fenil]-3-
oxopropil}carbamoil)piperidin-1-il]-3-oxopropil}piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo (ejemplo 22, 2,0 mg, 2,69 mmoles) en MeCN seco (300 ml) se anadio al [18F]KF-K222 seco. Tras calentar a 100°C durante 10 min. en un vial cerrado hermeticamente, la vasija se enfrio, y se anadio NaOH 0,5 M (100 ml). La agitacion se continuo durante 10 min. a 25°C antes de que se anadiese HCl 1 M (200 ml). El vial, que se volvio a cerrar hermeticamente, se calento entonces nuevamente durante 10 min. a 100°C. Tras enfriar, la mezcla de reaccion se diluyo con 4 ml de agua y se aplico en una HPLC semipreparativa (Zorbax Bonus RP 5 mm C18-HL (9,4 x 250 mm), 19/81/0,1 - acetonitrilo/agua/acido trifluoroacetico (relacion volumen a volumen a volumen), 4 ml/min., tiempo de retencion de acido (3S)-3-[4-(2- [18F]fluoroetoxi)fenil]-3-[({(3R)-1-[3-(piperidin-4-il)propanoil]piperidin-3-il}carbonil)amino]propanoico: 10,3-12,4 min.; tiempo de retencion de acido (3R)-3-[4-(2-[18F]fluoroetoxi)fenil]-3-[({(3R)-1-[3-(piperidin-4-il)propanoil]piperidin-3- il}carbonil)amino]propanoico: 8,3-10,3 min.). La fraccion recogida se diluyo con 20 ml de agua y se aplico en un cartucho preacondicionado Sep-Pak™ Light C18 (preacondicionado con 5 ml de EtOH y 10 ml). El cartucho se lavo con 5 ml de agua, y despues la actividad se eluyo con 1,5 ml de EtOH. Tras la evaporacion total del EtOH bajo una corriente de nitrogeno a 90°C, el trazador final se recogio en agua (300 ml) y se filtro de forma esteril para obtener
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
acido (3S)-3-[4-(2-[18F]fluoroetoxi)fenil]-3-[({(3R)-1-[3-(piperidin-4-il)propanoil]piperidin-3-il}carbonil)amino]propanoico de 115 hasta 151 MBq (rendimiento radioqmmico: 11 ± 4,0% d.c.; tiempo de smtesis: 108 ± 10,5min). La pureza radioqmmica fue >99%. El producto marcado con F-18 se confirmo mediante coinyeccion con el patron fno de F-19 (ejemplo 2) en una HPLC analttica (columna: ACE, C18 RP, 50 x 4,6 mm, 3 m, 2 ml/min. (Agilent), disolvente A: H2O + 0,1% de TFA, disolvente B: MeCN + 0,1% de TFA, gradiente: 5% de B hasta 50% de B en 7 min.).
Ejemplo 40
Acido (3S)-3-[5-(2-[18F]fluoroetoxi)piridin-3-il]-3-[({(3R)-1-[3-(piperidin-4-il)propanoil]piperidin-3-
il}carbonil)amino]propanoico
Marcaje de 4-{3-[(3R)-3-({3-metoxi-1-[5-(2-{[(4-metilfenil)sulfonil]oxi}etoxi)piridin-3-il]-3-oxopropil}carbamoil)piperidin- 1 -il]-3-oxopropil}piperidin-1 -carboxilato de ferc-butilo:
El [ F]fluoruro se produjo mediante una reaccion nuclear de O (p, n) F mediante bombardeo de una diana de agua enriquecida al 98% con 18O con un haz de protones de 11MeV en el ciclotron RDS111. La disolucion acuosa de [18F]fluoruro se atrapo en un pequeno cartucho de intercambio anionico Sep-Pak™ Plus QMA (Waters) (preacondicionado con 5 ml de una disolucion de K2CO3 0,5 M y 10 ml de agua). La radioactividad se eluyo con una mezcla de disoluciones (1,0 mg de K2CO3 en 0,5 ml de agua y 5,27 mg de K222 en 1,5 ml de MeCN) desde el cartucho de QMA a un vial Wheaton conico de 5 ml. El disolvente se evaporo bajo una corriente de nitrogeno a 110°C. El secado azeotropico se repitio tres veces con porciones de 1,0 ml de acetonitrilo. Despues, la mezcla diastereomerica de 4-{3-[(3R)-3-({3-metoxi-1-[5-(2-{[(4-metilfenil)sulfonil]oxi}etoxi)piridin-3-il]-3-
oxopropil}carbamoil)piperidin-1-il]-3-oxopropil}piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo (ejemplo 24, 2,0 mg, 2,68 mmoles) en MeCN seco (300 ml) se anadio al [18F]KF-K222 seco. Tras calentar a 100°C durante 10 min. en un vial cerrado hermeticamente, la vasija se enfrio, y se anadio NaOH 0,5 M (100 ml). La agitacion se continuo durante 10 min. a 25°C antes de que se anadiese HCl 1 M (200 ml). El vial, que se volvio a cerrar hermeticamente, se calento entonces nuevamente durante 10 min. a 100°C. Tras enfriar, la mezcla de reaccion se diluyo con 4 ml de agua y se aplico en una HPLC semipreparativa (Fenomenex Gemini 5 mm C18 110A (S/N: 337148-3; 10,0 x 250 mm), 10/90/0,1 - acetonitrilo/agua/acido trifluoroacetico (relacion volumen a volumen a volumen), 4 ml/min., tiempo de retencion de acido (3S)-3-[5-(2-[18F]fluoroetoxi)piridin-3-il]-3-[({(3R)-1-[3-(piperidin-4-il)propanoil]piperidin-3-il}carbonil)amino]-
propanoico: 15,1-17,0 min.; tiempo de retencion de acido (3R)-3-[5-(2-[18F]fluoroetoxi)piridin-3-il]-3-[({(3R)-1-[3- (piperidin-4-il)propanoil]piperidin-3-il}carbonil)amino]propanoico: 8,0-8,4 min.). La fraccion recogida se diluyo con 40 ml de agua y se aplico en un cartucho preacondicionado Sep-Pak™ Plus C18 (preacondicionado con 5 ml de EtOH y 10 ml). El cartucho se lavo con 5 ml de agua, y despues la actividad se eluyo con 1,5 ml de EtOH. Tras la evaporacion total del EtOH bajo una corriente de nitrogeno a 90°C, el trazador final se recogio en agua (300 ml) para obtener acido (3S)-3-[5-(2-[18F]fluoroetoxi)piridin-3-il]-3-[({(3R)-1-[3-(piperidin-4-il)propanoil]piperidin-3-
il}carbonil)amino]propanoico de 113 hasta 168 MBq (rendimiento radioqmmico: 8,7 ± 1,5% d.c.; tiempo de smtesis: 132 ± 15,4 min.). La pureza radioqmmica fue >99%. El producto marcado con F-18 se confirmo mediante coinyeccion con el patron fno de F-19 (ejemplo 3) en una HPLC analrtica (columna: Fenomenex Gemini, C18 RP, 50 x 4,6 mm, 3 m, 1,5 ml/min. (Agilent), disolvente A: H2O + 0,1% de TFA, disolvente B: MeCN + 0,1% de TFA, isocratico 12% de B durante 7 min.).
Marcaje de 4-{3-[(3R)-3-({(1S)-3-metoxi-1-[5-(2-{[(4-metilfenil)sulfonil]oxi}etoxi)piridin-3-il]-3-
oxopropil}carbamoil)piperidin-1-il]-3-oxopropil}piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo
El [ F]fluoruro se produjo mediante una reaccion nuclear de O (p, n) F mediante bombardeo de una diana de agua enriquecida al 98% con 18O con un haz de protones de 11MeV en el ciclotron RDS111. La disolucion acuosa de [18F]fluoruro se atrapo en un pequeno cartucho de intercambio anionico Sep-Pak™ Plus QMA (Waters) (preacondicionado con 5 ml de una disolucion de K2CO3 0,5 M y 10 ml de agua). La radioactividad se eluyo con una mezcla de disoluciones (1,0 mg de K2CO3 en 0,5 ml de agua y 5,27 mg de K222 en 1,5 ml de MeCN) desde el cartucho de QMA a un vial Wheaton conico de 5 ml. El disolvente se evaporo bajo una corriente de nitrogeno a 110°C. El secado azeotropico se repitio tres veces con porciones de 1,0 ml de acetonitrilo. Despues, se anadio 4-{3- [(3R)-3-({(1S)-3-metoxi-1-[5-(2-{[(4-metilfenil)sulfonil]oxi}etoxi)piridin-3-il]-3-oxopropil}carbamoil)piperidin-1-il]-3- oxopropil}piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo (ejemplo 24, 2,0 mg, 2,68 mmoles) en MeCN seco (300 ml) al [18F]KF- K222 seco. Tras calentar a 100°C durante 10 min. en un vial cerrado hermeticamente, la vasija se enfrio, y se anadio NaOH 0,5 M (100 ml). La agitacion se continuo durante 10 min. a 25°C antes de que se anadiese HCl 1 M (200 ml). El vial, que se volvio a cerrar hermeticamente, se calento entonces nuevamente durante 10 min. a 100°C. Tras enfriar,
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
la mezcla de reaccion se diluyo con 4 ml de agua y se aplico en una HPLC semipreparativa (Fenomenex Gemini 5 p,m C18 110A (S/N: 337148-3; 10,0 x 250 mm), 10/90/0,1 - acetonitrilo/agua/acido trifluoroacetico (relacion volumen a volumen a volumen), 4 ml/min., tiempo de retencion de acido (3S)-3-[5-(2-[18F]Fluoroetoxi)piridin-3-il]-3-[({(3R)-1-[3- (piperidin-4-il)propanoil]piperidin-3-il}carbonil)amino]propanoico: 15,4-18,4 min.). La fraccion recogida se diluyo con 40 ml de agua y se aplico en un cartucho preacondicionado Sep-Pak™ Plus C18 (preacondicionado con 5 ml de EtOH y 10 ml). El cartucho se lavo con 5 ml de agua, y despues la actividad se eluyo con 1,5 ml de EtOH. Tras la evaporacion total del EtOH bajo una corriente de nitrogeno a 90°C, el trazador final se recogio en agua (300 ml) para obtener acido (3S)-3-[5-(2-[18F]Fluoroetoxi)piridin-3-il]-3-[({(3R)-1-[3-(piperidin-4-il)propanoil]piperidin-3-
il}carbonil)amino]propanoico de 127 hasta 435 MBq (rendimiento radioqufmico: 19,5 ± 4,6% d.c.; tiempo de sfntesis: 117 ± 10 min.). La pureza radioqufmica fue >99%, y la actividad especffica estuvo entre 38 y 107 GBq/mmol. El producto marcado con F-18 se confirmo mediante coinyeccion con el patron frfo de F-19 (ejemplo 3) en una HPLC analftica (columna: Fenomenex Gemini, C18 RP, 50 x 4,6 mm, 3 m, 1,5 ml/min. (Agilent), disolvente A: H2O + 0,1% de TFA, disolvente B: MeCN + 0,1% de TFA, isocratico 12% de B durante 7 min.).
Marcaje de 4-{3-[(3R)-3-({(1S)-3-ferc-butoxi-1-[5-(2-{[(4-metilfenil)sulfonil]oxi}etoxi)piridin-3-il]-3-
oxopropil}carbamoil)piperidin-1-il]-3-oxopropil}piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo
El [ F]fluoruro se produjo mediante una reaccion nuclear de O (p,n) F mediante bombardeo de una diana de agua enriquecida al 98% con 18O con un haz de protones de 11MeV en el ciclotron RDS111. La disolucion acuosa de [18F]fluoruro se atrapo en un pequeno cartucho de intercambio anionico Sep-Pak™ Plus QMA (Waters) (preacondicionado con 5 ml de una disolucion de K2CO3 0,5 M y 10 ml de agua). La radioactividad se eluyo con una mezcla de disoluciones (2,28 mg de Cs2CO3 en 0,5 ml de agua y 5,27 mg de K222 en 1,5 ml de MeCN) desde el cartucho de QMA a un vial Wheaton conico de 5 ml. El disolvente se evaporo bajo una corriente de nitrogeno a 110°C. El secado azeotropico se repitio tres veces con porciones de 1,0 ml de acetonitrilo. Despues, se anadio 4-{3- [(3R)-3-({(1S)-3-ferc-butoxi-1-[5-(2-{[(4-metilfenil)sulfonil]oxi}etoxi)piridin-3-il]-3-oxopropil}carbamoil)piperidin-1-il]-3- oxopropil}piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo (ejemplo 25, 4,0 mg, 5,08 mmoles) en MeCN seco (400 ml) al [18F]CsF- K222 seco. Tras calentar a 100°C durante 20 min. en un vial cerrado hermeticamente, la vasija se enfrio, y se anadio HCl 1 M (400 ml). El vial, que se volvio a cerrar hermeticamente, se calento entonces nuevamente durante 12 min. a 100°C. Tras enfriar, la mezcla de reaccion se diluyo con 4 ml de agua y se aplico en una HPLC semipreparativa (Fenomenex Gemini 5 mm C18 110A (S/N: 337148-3; 10,0 x 250 mm), 9/91/0,1 - acetonitrilo/agua/acido trifluoroacetico (relacion volumen a volumen a volumen), 4 ml/min., tiempo de retencion de acido (3S)-3-[5-(2- [18F]Fluoroetoxi)piridin-3-il]-3-[({(3R)-1-[3-(piperidin-4-il)propanoil]piperidin-3-il}carbonil)amino]propanoico: 11,0 - 17,2 min.). La fraccion recogida se diluyo con 40 ml de agua y se aplico en un cartucho preacondicionado Sep-Pak™ Plus C18 (preacondicionado con 5 ml de EtOH y 10 ml). El cartucho se lavo con 5 ml de agua, y despues la actividad se eluyo con 1,0 ml de EtOH. Tras la evaporacion total del EtOH bajo una corriente de nitrogeno a 90°C, el trazador final se recogio en agua (300 ml) para obtener acido (3S)-3-[5-(2-[18F]Fluoroetoxi)piridin-3-il]-3-[({(3R)-1-[3-(piperidin- 4-il)propanoil]piperidin-3-il}carbonil)amino]propanoico de 154 hasta 1351 MBq (rendimiento radioqufmico: 21,3 ± 5,9% d.c.; tiempo de sfntesis: 126 ± 20 min.). La pureza radioqufmica fue >99%, y la actividad especffica estuvo entre 28,5 y 61,2 GBq/mmol. El producto marcado con F-18 se confirmo mediante coinyeccion con el patron frfo de F-19 (ejemplo 3) en una HPLC analftica (columna: Fenomenex Gemini, C18 RP, 50 x 4,6 mm, 3 m, 1,5 ml/min. (Agilent), disolvente A: H2O + 0,1% de tFa, disolvente B: MeCN + 0,1% de TFA, isocratico 12% de B durante 7 min.).
Ejemplo 41
Acido (3S)-3-{5-[4-(2-[18F]fluoroetoxi)fenil]piridin-3-il}-3-[({(3R)-1-[3-(piperidin-4-il)propanoil]piperidin-3-
il}carbonil)amino]propanoico
Marcaje de 4-{3-[(3R)-3-{[3-metoxi-1-{5-[4-(2-{[(4-metilfenil)sulfonil]oxi}etoxi)fenil]piridin-3-il}-3-
oxopropil]carbamoil}piperidin-1-il]-3-oxopropil}piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo
El [ F]fluoruro se produjo mediante una reaccion nuclear de O (p, n) F mediante bombardeo de una diana de agua enriquecida al 98% con 18O con un haz de protones de 11MeV en el ciclotron RDS111. La disolucion acuosa de [18F]fluoruro se atrapo en un pequeno cartucho de intercambio anionico Sep-Pak™ Plus QMA (Waters) (preacondicionado con 5 ml de una disolucion de K2CO3 0,5 M y 10 ml de agua). La radioactividad se eluyo con una
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
mezcla de disoluciones (1,0 mg de K2CO3 en 0,5 ml de agua y 5,27 mg de K222 en 1,5 ml de MeCN) desde el cartucho de QMA a un vial Wheaton conico de 5 ml. El disolvente se evaporo bajo una corriente de nitrogeno a 110°C. El secado azeotropico se repitio tres veces con porciones de 1,0 ml de acetonitrilo. Despues, la mezcla diastereomerica de 4-{3-[(3R)-3-{[3-metoxi-1-{5-[4-(2-{[(4-metilfenil)sulfonil]oxi}etoxi)fenil]piridin-3-il}-3-
oxopropil]carbamoil}piperidin-1-il]-3-oxopropil}piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo (ejemplo 26, 2,0 mg, 2,44 mmoles) en MeCN seco (300 ml) se anadio al [18]KF-K222 seco. Tras calentar a 100°C durante 10 min. en un vial cerrado hermeticamente, la vasija se enfrio, y se anadio NaOH 0,5 M (100 ml). La agitacion se continuo durante 10 min. a 25°C antes de que se anadiese HCl 1 M (200 ml). El vial, que se volvio a cerrar hermeticamente, se calento entonces nuevamente durante 10 min. a 100°C. Tras enfriar, la mezcla de reaccion se diluyo con 4 ml de agua y se aplico en una HPLC semipreparativa (ACE 5 mm C18 HL (10,0 x 250 mm), gradiente (20 min.): 20/80/0,1 - 35/65/0,1 acetonitrilo/agua/acido trifluoroacetico (relacion volumen a volumen a volumen), 4 ml/min., tiempo de retencion de acido (3S)-3-{5-[4-(2-[18F]fluoroetoxi)fenil]piridin-3-il}-3-[({(3R)-1-[3-(piperidin-4-il)propanoil]piperidin-3-
il}carbonil)amino]propanoico: 15,5-16,8 min.; tiempo de retencion de acido (3R)-3-{5-[4-(2-[18F]fluoroetoxi)fenil]piridin- 3-il}-3-[({(3R)-1-[3-(piperidin-4-il)propanoil]piperidin-3-il}carbonil)amino]propanoico: 13,2-15,4 min.). La fraccion recogida se diluyo con 40 ml de agua y se aplico en un cartucho preacondicionado Sep-Pak™ Plus C18 (preacondicionado con 5 ml de EtOH y 10 ml). El cartucho se lavo con 5 ml de agua, y despues la actividad se eluyo con 1,5 ml de EtOH. Tras la evaporacion total del EtOH bajo una corriente de nitrogeno a 90°C, el trazador final se recogio en agua (300 ml) para obtener acido (3S)-3-{5-[4-(2-[18F]fluoroetoxi)fenil]piridin-3-il}-3-[({(3R)-1-[3-(piperidin-4- il)propanoil]piperidin-3-il}carbonil)amino]propanoico de 65 hasta 163 MBq (rendimiento radioqufmico: 9,0 ± 1,0% d.c.; tiempo de sfntesis: 128 ± 10,0 min.). La pureza radioqufmica fue >99%. El producto marcado con F-18 se confirmo mediante coinyeccion con el patron frfo de F-19 (ejemplo 7) en una HPLC analftica (columna: ACE, C18 RP, 50 x 4,6 mm, 3 m, 2 ml/min. (Agilent), disolvente A: H2O + 0,1% de TFA, disolvente B: MeCN + 0,1% de TFA, isocratico 15% de B en 7 min.).
Marcaje de 4-{3-[(3R)-3-{[(1S)-3-ferc-butoxi-1-{5-[4-(2-{[(4-metilfenil)sulfonil]oxi}etoxi)fenil]piridin-3-il}-3-
oxopropil]carbamoil}piperidin-1-il]-3-oxopropil}piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo
El [ F]fluoruro se produjo mediante una reaccion nuclear de O (p,n) F mediante bombardeo de una diana de agua enriquecida al 98% con 18O con un haz de protones de 11 MeV en el ciclotron RDS111. La disolucion acuosa de [18F]fluoruro se atrapo en un pequeno cartucho de intercambio anionico Sep-Pak™ Plus QMA (Waters) (preacondicionado con una disolucion de 5 ml de K2CO3 0,5 M y 10 ml de agua). La radioactividad se eluyo con una mezcla de disoluciones (2,28 mg de Cs2CO3 en 0,5 ml de agua y 5,27 mg de K222 en 1,5 ml de MeCN) desde el cartucho de QMA a un vial Wheaton conico de 5 ml. El disolvente se evaporo bajo una corriente de nitrogeno a 110°C. El secado azeotropico se repitio tres veces con porciones de 1,0 ml de acetonitrilo. Despues, se anadio 4-{3- [(3R)-3-{[(1S)-3-ferc-butoxi-1-{5-[4-(2-{[(4-metilfenil)sulfonil]oxi}etoxi)fenil]piridin-3-il}-3-oxopropil]carbamoil}piperidin- 1 -il]-3-oxopropil}piperidin-1 -carboxilato de ferc-butilo (ejemplo 27, 2,0 mg, 2,31 mmoles) en MeCN seco (300 ml) al [18F]CsF-K222 seco. Tras calentar a 100°C durante 15 min. en un vial cerrado hermeticamente, la vasija se enfrio y se anadio HCl 1 M (150 ml). El vial, que se volvio a cerrar hermeticamente, se calento entonces nuevamente durante 10 min. a 100°C. Tras enfriar, la mezcla de reaccion se neutralizo con NaOH 1 M (150 ml) y se diluyo con 4 ml de agua y se aplico en una HPLC semipreparativa (ACE 5 mm C18 HL (10,0 x 250 mm), 21/79/0,1 - acetonitrilo/agua/acido trifluoroacetico (relacion volumen a volumen a volumen), 4 ml/min., tiempo de retencion de acido (3S)-3-{5-[4-(2- [18F]fluoroetoxi)fenil]piridin-3-il}-3-[({(3R)-1-[3-(piperidin-4-il)propanoil]piperidin-3-il}carbonil)amino]propanoico: 13,0
min.). La fraccion recogida se diluyo con 30 ml de agua y se aplico en un cartucho preacondicionado Sep-Pak™ Plus C18 (preacondicionado con 5 ml de EtOH y 10 ml). El cartucho se lavo con 5 ml de agua, y despues la actividad se eluyo con 1,0 ml de EtOH. Tras la evaporacion total del EtOH bajo una corriente de nitrogeno a 90°C, el trazador final se recogio en agua (300 ml) para obtener acido (3S)-3-{5-[4-(2-[18F]fluoroetoxi)fenil]piridin-3-il}-3-[({(3R)-1-[3- (piperidin-4-il)propanoil]piperidin-3-il}carbonil)amino]propanoico de 226 MBq (rendimiento radioqufmico: 11% d.c.; tiempo de sfntesis: 113 min.). La pureza radioqufmica fue >99%. El producto marcado con F-18 se confirmo mediante coinyeccion con el patron frfo de F-19 (ejemplo 7) en una HPLC analftica (columna: ACE, C18 RP, 50 x 4,6 mm, 3 m, 2 ml/min. (Agilent), disolvente A: H2O + 0,1% de TFA, disolvente B: MeCN + 0,1% de TFA, isocratico 15% de B en 7 min.).
5
10
15
20
25
30
35
40
45
agua enriquecida al 98% con 10O con un haz de protones de 11MeV en el ciclotron RDS111. La disolucion acuosa de [18F]fluoruro se atrapo en un pequeno cartucho de intercambio anionico Sep-Pak™ Plus QMA (Waters) (preacondicionado con 5 ml de una disolucion de K2CO3 0,5 M y 10 ml de agua). La radioactividad se eluyo con una mezcla de disoluciones (2,8 mg de KHCO3 en 100 ml de agua y 10,4 mg de K222 en 1,9 ml de MeCN) desde el cartucho de QMA a un vial Wheaton conico de 5 ml. El disolvente se evaporo bajo una corriente de nitrogeno a 110°C. El secado azeotropico se repitio tres veces con porciones de 1,0 ml de acetonitrilo. Despues, la mezcla diastereomerica de ester terc-butflico del acido 4-[3-((R)-3-{1-[5-(4-cloro-3-ciano-fenil)-piridin-3-il]-2-metoxicarbonil- etilcarbamoil}-piperidin-1-il)-3-oxo-propil]-piperidin-1-carboxflico (2,0 mg, 3,00 mmoles) en DMSO seco (300 ml) se anadio al [18F]KHF2-K222 seco. Tras calentar a 160°C durante 10 min. en un vial cerrado hermeticamente, la vasija se enfrio, y se anadio NaOH 0,5 M (100 ml). La agitacion se continuo durante 5 min. a 25°C antes de que se anadiese HCl 1 M (200 ml). El vial, que se volvio a cerrar hermeticamente, se calento entonces nuevamente durante 5 min. a 70°C. Tras enfriar, la mezcla de reaccion se diluyo con 4 ml de agua y se aplico en una HPLC semipreparativa (ACE 5 mm C18 HL (10,0 x 250 mm), gradiente (20 min.): 20/80/0,1-30/70/0,1 acetonitrilo/agua/acido trifluoroacetico (relacion volumen a volumen a volumen), 4 ml/min., tiempo de retencion de acido (3S)-3-[5-(3-ciano-4- [18F]fluorofenil)piridin-3-il]-3-[({(3R)-1-[3-(piperidin-4-il)propanoil]piperidin-3-il}carbonil)amino]propanoico: 12,0-11,8
min.; tiempo de retencion de acido (3R)-3-[5-(3-ciano-4-[18F]fluorofenil)piridin-3-il]-3-[({(3R)-1-[3-(piperidin-4- il)propanoil]piperidin-3-il}carbonil)amino]propanoico: 10,0-10,5 min.). La fraccion recogida se diluyo con 30 ml de agua y se aplico en un cartucho preacondicionado Sep-Pak™ Light C18 (preacondicionado con 5 ml de EtOH y 10 ml). El cartucho se lavo con 5 ml de agua, y despues la actividad se eluyo con 0,7 ml de EtOH. Tras la evaporacion total del EtOH bajo una corriente de nitrogeno a 90°C, el trazador final se recogio en agua (200 ml) para obtener acido (3S)-3-[5-(3-ciano-4-f8F]fluorofenil)piridin-3-il]-3-[({(3R)-1-[3-(piperidin-4-il)propanoil]piperidin-3-
il}carbonil)amino]propanoico de 12 hasta 111 MBq (rendimiento radioqufmico: 4,0 ± 1,0% d.c.; tiempo de sfntesis: 125 ± 19,8 min.). La pureza radioqufmica fue >99%. La pureza radioqufmica fue >99%. El producto marcado con F- 18 se confirmo mediante coinyeccion con el patron frfo de F-19 (ejemplo 9) en una HPLC analftica (columna: ACE, C18 RP, 50 x 4,6 mm, 3 m, 2 ml/min. (Agilent), disolvente A: H2O + 0,1% de TFA, disolvente B: MeCN + 0,1% de TFA, isocratico 15% de B en 7 min.).
Ejemplo 43
Acido (3S)-3-[5-(4-ciano-3-[18F]fluorofenil)piridin-3-il]-3-[({(3R)-1-[3-(piperidin-4-il)propanoil]piperidin-3-
il}carbonil)amino]propanoico
agua enriquecida al 98% con 18O con un haz de protones de 11MeV en el ciclotron RDS111. La disolucion acuosa de [18F]fluoruro se atrapo en un pequeno cartucho de intercambio anionico Sep-Pak™ Plus QMA (Waters) (preacondicionado con una disolucion de 5 ml de K2CO3 0,5 M y 10 ml de agua). La radioactividad se eluyo con una mezcla de disoluciones (2,8 mg de KHCO3 en 100 ml de agua y 10,4 mg de K222 en 1,9 ml de MeCN) desde el cartucho de QMA a un vial Wheaton conico de 5 ml. El disolvente se evaporo bajo una corriente de nitrogeno a
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
110°C. El secado azeotropico se repitio tres veces con porciones de 1,0 ml de acetonitrilo. Despues, la mezcla diastereomerica de 4-{3-[(3R)-3-({1-[5-(4-cloro-3-cianofenil)piridin-3-il]-3-metoxi-3-oxopropil}carbamoil)piperidin-1-il]- 3-oxopropil}piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo (ejemplo 28, 1,0 mg, 1,87 mmoles) en DMSO seco (300 ml) se anadio al [18F]KHF2-K222 seco. Tras calentar a 160°C durante 15 min. en un vial cerrado hermeticamente, la vasija se enfrio y se anadio NaOH 0,5 M (100 ml). La agitacion se continuo durante 10 min. a 25°C antes de que se anadiese HCl 1 M (200 ml). El vial, que se volvio a cerrar hermeticamente, se calento entonces nuevamente durante 10 min. a 70°C. Tras enfriar, la mezcla de reaccion se diluyo con 4 ml de agua y se aplico en una HPLC semipreparativa (ACE 5 mm C18 HL (10,0 x 250 mm), gradiente (20 min.): 20/80/0,1 - 30/70/0,1 acetonitrilo/agua/acido trifluoroacetico (relacion volumen a volumen a volumen), 4 ml/min., tiempo de retencion de acido (3S)-3-[5-(4-ciano-3- [18F]fluorofenil)piridin-3-il]-3-[({(3R)-1-[3-(piperidin-4-il)propanoil]piperidin-3-il}carbonil) amino]propanoico: 11,5-12,2 min.; tiempo de retencion de acido (3R)-3-[5-(4-ciano-3-[18F]fluorofenil)piridin-3-il]-3-[({(3R)-1-[3-(piperidin-4- il)propanoil]piperidin-3-il}carbonil) amino]propanoico: 9,9-10,8 min.). La fraccion recogida se diluyo con 15 ml de agua y se aplico en un cartucho preacondicionado Sep-Pak™ Light C18 (preacondicionado con 5 ml de EtOH y 10 ml). El cartucho se lavo con 5 ml de agua, y despues la actividad se eluyo con 1,0 ml de EtOH. Tras la evaporacion total del EtOH bajo una corriente de nitrogeno a 90°C, el trazador final se recogio en agua (100 ml) para obtener acido (3S)-3-[5-(4-ciano-3-f8F]fluorofenil)piridin-3-il]-3-[({(3R)-1-[3-(piperidin-4-il)propanoil]piperidin-3-
il}carbonil)amino]propanoico de 7 hasta 38 MBq (rendimiento radioqufmico: 2,4 ± 1,0% d.c.; tiempo de sfntesis: 111 ± 10,6 min.). La pureza radioqufmica fue >99%. El producto marcado con F-18 se confirmo mediante coinyeccion con el patron frfo de F-19 (ejemplo 10) en una HPLC analftica (columna: ACE, C18 RP, 50 x 4,6 mm, 3 m, 2 ml/min. (Agilent), disolvente A: h2o + 0,1% de TFA, disolvente B: MeCN + 0,1% de TFA, isocratico 15% de B en 7 min.).
Ejemplo 44
Acido (3S)-3-(5-{[4-(2-[18F]fluoroetoxi)fenil]etinil}piridin-3-il)-3-[({(3R)-1-[3-(piperidin-4-il)propanoil]piperidin-3-
il}carbonil)amino]propanoico
agua enriquecida al 98% con 18O con un haz de protones de 11MeV en el ciclotron RDS111. La disolucion acuosa de [18F]fluoruro se atrapo en un pequeno cartucho de intercambio anionico Sep-Pak™ Plus QMA (Waters) (preacondicionado con 5 ml de una disolucion de K2CO3 0,5 M y 10 ml de agua). La radioactividad se eluyo con una mezcla de disoluciones (2,28 mg de Cs2CO3 en 0,5 ml de agua y 5,25 mg de K222 en 1,5 ml de MeCN) desde el cartucho de QMA a un vial Wheaton conico de 5 ml. El disolvente se evaporo bajo una corriente de nitrogeno a 110°C. El secado azeotropico se repitio tres veces con porciones de 1,0 ml de acetonitrilo. Despues, se anadio 4-{3- [(3R)-3-{[(1S)-3-ferc-butoxi-1-(5-{[4-(2-{[(4-metilfenil)sulfonil]oxi}etoxi)fenil]etinil}piridin-3-il)-3-oxopropil]carbamoil)- piperidin-1 -il]-3-oxopropil}piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo (ejemplo 34, 2,0 mg, 2,25 mmoles) en MeCN seco (300 ml) al [18F]CsF-K222 seco. Tras calentar a 100°C durante 15 min. en un vial cerrado hermeticamente, la vasija se enfrio, y se anadio HCl 1 M (150 ml). El vial, que se volvio a cerrar hermeticamente, se calento entonces nuevamente durante 12 min. a 100°C. Tras enfriar, la mezcla de reaccion se diluyo con 4 ml de agua y se aplico en una HPLC semipreparativa (ACE 5 mm C18 (10,0 x 250 mm), 28/72/0,1 - acetonitrilo/agua/acido trifluoroacetico (relacion volumen a volumen a volumen), 4 ml/min., tiempo de retencion de acido (3S)-3-(5-{[4-(2- [18F]fluoroetoxi)fenil]etinil}piridin-3-il)-3-[({(3R)-1-[3-(piperidin-4-il)propanoil]piperidin-3-il}carbonil)amino]propanoico:
17,8 min.). La fraccion recogida se diluyo con 15 ml de agua y se aplico en un cartucho preacondicionado Sep-Pak™ Light C18 (preacondicionado con 5 ml de EtOH y 10 ml). El cartucho se lavo con 5 ml de agua, y despues la actividad se eluyo con 1,0 ml de EtOH. Tras la evaporacion total del EtOH bajo una corriente de nitrogeno a 90°C, el trazador final se recogio en agua (100 ml) para obtener acido (3S)-3-(5-{[4-(2-[18F]fluoroetoxi)fenil]etinil}piridin-3-il)-3- [({(3R)-1-[3-(piperidin-4-il)propanoil]piperidin-3-il}carbonil)amino]propanoico de 44 MBq (rendimiento radioqufmico: 5,0% d.c.; tiempo de sfntesis: 139 min.). La pureza radioqufmica fue >99%. El producto marcado con F-18 se confirmo mediante coinyeccion con el patron frfo de F-19 (ejemplo 15) en una HPLC analftica (columna: ACE, C18 RP, 50 x 4,6 mm, 3 m, 2 ml/min. (Agilent), disolvente A: H2O + 0,1% de TFA, disolvente B: MeCN + 0,1% de TFA, isocratico 20% de B en 7 min.).
5
10
15
20
25
30
35
40
45
agua enriquecida al 98% con 18O con un haz de protones de 11MeV en el ciclotron RDS111. La disolucion acuosa de [18F]fluoruro se atrapo en un pequeno cartucho de intercambio anionico Sep-Pak™ Plus QMA (Waters) (preacondicionado con una disolucion de K2CO3 0,5 M y 10 ml de agua). La radioactividad se eluyo con una mezcla de disoluciones (2,28 mg de Cs2CO3 en 500 ml de agua y 5,25 mg de K222 en 1,5 ml de MeCN) desde el cartucho de QMA a un vial Wheaton conico de 5 ml. El disolvente se evaporo bajo una corriente de nitrogeno a 110°C. El secado azeotropico se repitio tres veces con porciones de 1,0 ml de acetonitrilo. Despues, se anadio 4-{3-[(3R)-3-{[(1S)-3- ferc-butoxi-1-(5-{[3-(2-{[(4-metilfenil)sulfonil]oxi}etoxi)fenil]etinil}piridin-3-il)-3-oxopropil]carbamoil}piperidin-1-il]-3- oxopropil}piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo (ejemplo 35, 2,0 mg, 2,25 mmoles) en MeCN seco (300 ml) al [18F]CsF- K222 seco. Tras calentar a 100°C durante 15 min. en un vial cerrado hermeticamente, la vasija se enfrio, y se anadio HCl 1 M (150 ml). El vial, que se volvio a cerrar hermeticamente, se calento entonces nuevamente durante 10 min. a 100°C. Tras enfriar, la mezcla de reaccion se diluyo con 4 ml de agua y se aplico en una HPLC semipreparativa (ACE 5 mm C18 HL (10,0 x 250 mm), 31/69/0,1 - acetonitrilo/agua/acido trifluoroacetico (relacion volumen a volumen a volumen), 4 ml/min., tiempo de retencion de acido (3S)-3-(5-{[3-(2-[18F]Fluoroetoxi)fenil]etinil}piridin-3-il)-3-[({(3R)- 1-[3-(piperidin-4-il)propanoil]piperidin-3-il}carbonil)amino]propanoico: 14,9 min.). La fraccion recogida se diluyo con 15 ml de agua y se aplico en un cartucho preacondicionado Sep-Pak™ Light C18 (preacondicionado con 5 ml de EtOH y 10 ml). El cartucho se lavo con 5 ml de agua, y despues la actividad se eluyo con 0,5 ml de EtOH. Tras la evaporacion total del EtOH bajo una corriente de nitrogeno a 90°C, el trazador final se recogio en agua (100 ml) para obtener acido (3S)-3-(5-{[3-(2-[18F]fluoroetoxi)fenil]etinil}piridin-3-il)-3-[({(3R)-1-[3-(piperidin-4-il)propanoil]piperidin-3- il}carbonil)amino]propanoico de 63 MBq (rendimiento radioqufmico: 5,0% d.c.; tiempo de sfntesis: 115 min.). La pureza radioqufmica fue >99%. El producto marcado con F-18 se confirmo mediante coinyeccion con el patron frfo de F-19 (ejemplo 16) en una HPLC analftica (columna: ACE, C18 RP, 50 x 4,6 mm, 3 m, 2 ml/min. (Agilent), disolvente A: H2O + 0,1% de TFA, disolvente B: MeCN + 0,1% de TFA, isocratico 23% de B en 7 min.).
Ejemplo 46
Acido (3S)-3-(5-{2-[4-(2-[18F]fluoroetoxi)fenil]etil}piridin-3-il)-3-[({(3R)-1-[3-(piperidin-4-il)propanoil]piperidin-3-
il}carbonil)amino]propanoico
agua enriquecida al 98% con 18O con un haz de protones de 11MeV en el ciclotron RDS111. La disolucion acuosa de [18F]fluoruro se atrapo en un pequeno cartucho de intercambio anionico Sep-Pak™ Plus QMA (Waters) (preacondicionado con una disolucion de K2CO3 0,5 M y 10 ml de agua). La radioactividad se eluyo con una mezcla de disoluciones (1,0 mg de K2CO3 en 0,5 ml de agua y 5,27 mg de K222 en 1,5 ml de MeCN) desde el cartucho de QMA a un vial Wheaton conico de 5 ml. El disolvente se evaporo bajo una corriente de nitrogeno a 110°C. El secado azeotropico se repitio tres veces con porciones de 1,0 ml de acetonitrilo. Despues, se anadio 4-{3-[(3R)-3-{[(1S)-3- ferc-butoxi-1-(5-{2-[4-(2-{[(4-metilfenil)sulfonil]oxi}etoxi)fenil]etil}piridin-3-il)-3-oxopropil]carbamoil}piperidin-1-il]-3- oxopropil}piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo (ejemplo 36, 3,0 mg, 3,37 mmoles) en MeCN seco (300 ml) al [18F]KF-
5
10
15
20
25
30
35
40
45
K222 seco. Tras calentar a 100°C durante 15 min. en un vial cerrado hermeticamente, la vasija se enfrio, y se anadio HCl 1 M (150 ml). El vial, que se volvio a cerrar hermeticamente, se calento entonces nuevamente durante 10 min. a 100°C. Tras enfriar, la mezcla de reaccion se diluyo con 4 ml de agua y se aplico en una HPLC semipreparativa (Fenomenex Synergi Hidro-RP 4 mm (250 x 10 mm), 18/82/0,1 - acetonitrilo/agua/acido trifluoroacetico (relacion volumen a volumen a volumen), 4 ml/min., tiempo de retencion de acido (3S)-3-(5-{2-[4-(2- [18F]fluoroetoxi)fenil]etil}piridin-3-il)-3-[({(3R)-1-[3-(piperidin-4-il)propanoil]piperidin-3-il}carbonil)amino]propanoico:
17,8 min.). La fraccion recogida se diluyo con 15 ml de agua y se aplico en un cartucho preacondicionado Sep-Pak™ Light C18 (preacondicionado con 5 ml de EtOH y 10 ml). El cartucho se lavo con 5 ml de agua, y despues la actividad se eluyo con 1,0 ml de EtOH. Tras la evaporacion total del EtOH bajo una corriente de nitrogeno a 90°C, el trazador final se recogio en agua (100 ml) y se filtro de forma esteril para obtener acido (3S)-3-(5-{2-[4-(2- [18F]fluoroetoxi)fenil]etil}piridin-3-il)-3-[({(3R)-1-[3-(piperidin-4-il)propanoil]piperidin-3-il}carbonil)amino]propanoico de 52 MBq (rendimiento radioqufmico: 5,5% d.c.; tiempo de sfntesis: 145 min.). La pureza radioqufmica fue >99%. El producto marcado con F-18 se confirmo mediante coinyeccion con el patron frfo de F-19 en una HPLC analftica (columna: Fenomenex Synergi Hidro, C18 RP, 50 x 4,6 mm, 4 m, 2 ml/min. (Agilent), disolvente A: H2O + 0,1% de TfA, disolvente B: MeCN + 0,1% de TFA, isocratico 18% de B en 7 min.).
Ejemplo 47
Acido (3S)-3-(5-{2-[3-(2-[18F]fluoroetoxi)fenil]etil}piridin-3-il)-3-[({(3R)-1-[3-(piperidin-4-il)propanoil]piperidin-3-
il}carbonil)amino]propanoico
agua enriquecida al 98% con 18O con un haz de protones de 11MeV en el ciclotron RDS111. La disolucion acuosa de [18F]fluoruro se atrapo en un pequeno cartucho de intercambio anionico Sep-Pak™ Plus QMA (Waters) (preacondicionado con 5 ml de una disolucion de K2CO3 0,5 M y 10 ml de agua). La radioactividad se eluyo con una mezcla de disoluciones (2,28 mg de Cs2CO3 en 0,5 ml de agua y 5,27 mg de K222 en 1,5 ml de MeCN) desde el cartucho de QMA a un vial Wheaton conico de 5 ml. El disolvente se evaporo bajo una corriente de nitrogeno a 110°C. El secado azeotropico se repitio tres veces con porciones de 1,0 ml de acetonitrilo. Despues, se anadio 4-{3- [(3R)-3-{[(1S)-3-ferc-butoxi-1-(5-{2-[3-(2-{[(4-metilfenil)sulfonil]oxi}etoxi)fenil]etil}piridin-3-il)-3-
oxopropil]carbamoil}piperidin-1-il]-3-oxopropil}piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo (ejemplo 37, 2,5 mg, 2,81 mmoles) en MeCN seco (200 ml) al [18F]CsF-K222 seco. Tras calentar a 100°C durante 10 min. en un vial cerrado hermeticamente, la vasija se enfrio, y se anadio HCl 1 M (150 ml). El vial, que se volvio a cerrar hermeticamente, se calento entonces nuevamente durante 8 min. a 100°C. Tras enfriar, la mezcla de reaccion se diluyo con 4 ml de agua y se aplico en una HPLC semipreparativa (ACE 5 mm C18 HL (10,0 x 250 mm), 25/75/0,1 - acetonitrilo/agua/trifluoroacetico acido (relacion volumen a volumen a volumen), 4 ml/min., tiempo de retencion de acido (3S)-3-(5-{2-[3-(2-[18F]fluoroetoxi)fenil]etil}piridin-3-il)-3-[({(3R)-1-[3-(piperidin-4-il)propanoil]piperidin-3-
il}carbonil)amino]propanoico: 13,2 min.). La fraccion recogida se diluyo con 15 ml de agua y se aplico en un cartucho preacondicionado Sep-Pak™ Light C18 (preacondicionado con 5 ml de EtOH y 10 ml). El cartucho se lavo con 5 ml de agua, y despues la actividad se eluyo con 1,0 ml de EtOH. Tras la evaporacion total del EtOH bajo una corriente de nitrogeno a 90°C, el trazador final se recogio en agua (200 ml) para obtener acido (3S)-3-(5-{2-[3-(2- [18F]fluoroetoxi)fenil]etil}piridin-3-il)-3-[({(3R)-1-[3-(piperidin-4-il)propanoil]piperidin-3-il}carbonil)amino]propanoico de 290 MBq (rendimiento radioqufmico: 19,1% d.c.; tiempo de sfntesis: 88 min.). La pureza radioqufmica fue >99%. El producto marcado con F-18 se confirmo mediante coinyeccion con el patron frfo de F-19 (ejemplo 19) en una HPLC analftica (columna: ACE, C18 RP, 50 x 4,6 mm, 3 m, 2 ml/min. (Agilent), disolvente A: H2O + 0,1% de TFA, disolvente B: MeCN + 0,1% de TFA, gradiente: 5% de B hasta 50% de B en 7 min.).
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
agua enriquecida al 98% con 18O con un haz de protones de 11MeV en el ciclotron RDS111. La disolucion acuosa de [18F]fluoruro se atrapo en un pequeno cartucho de intercambio anionico Sep-Pak™ Plus QMA (Waters) (preacondicionado con 5 ml de una disolucion de K2CO3 0,5 M y 10 ml de agua). La radioactividad se eluyo con una mezcla de disoluciones (1,0 mg de K2CO3 en 0,5 ml de agua y 5,27 mg de K222 en 1,5 ml de MeCN) desde el cartucho de QMA a un vial Wheaton conico de 5 ml. El disolvente se evaporo bajo una corriente de nitrogeno a 110°C. El secado azeotropico se repitio tres veces con porciones de 1,0 ml de acetonitrilo. Despues, se anadio di-p- toluenosulfonato de tri(etilenglicol) (10 mg, 21,81 mmoles) en MeCN seco (500 ml) al [18F]KF-K222 seco. Tras calentar a 100°C durante 10 min. en un vial cerrado hermeticamente, la vasija se enfrio, se diluyo con 4 ml de agua y se aplico en una HPLC semipreparativa ACE 5 mm C18 HL (10,0 x 250 mm), 50/50/0,1-acetonitrilo/agua/acido trifluoroacetico (relacion volumen a volumen a volumen), 4 ml/min., tiempo de retencion de ester 2-[2-(2-[18F]- fluoroetoxi)etoxi]etflico del acido tolueno-4-sulfonico: 12,5 min.). La fraccion recogida se diluyo con 20 ml de agua y se aplico en un cartucho preacondicionado Sep-Pak™ Light C18 (preacondicionado con 5 ml de EtOH y 10 ml). El cartucho se lavo con 5 ml de agua, y despues la actividad se eluyo con 1,0 ml de MeCN. Despues el MeCN se evaporo completamente a 90°C bajo una corriente lenta de gas nitrogeno para obtener el grupo prostetico ester 2-[2- (2-[18F]fluoroetoxi)etoxi]etflico del acido tolueno-4-sulfonico puro (570 MBq).
En un vial separado, se disolvio 4-{3-[(3R)-3-{[1-(5-hidroxipiridin-3-il)-3-metoxi-3-oxopropil]carbamoil}piperidin-1-il]-3- oxopropil}piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo (ejemplo 4e, 2,50 mg, 4,58 mmoles) en 300 ml de DMF. Despues, se anadio una disolucion de NaOH 2 M (20 ml, 40,0 mmoles) y, tras dejar reposar durante 1 min. a 25°C, esta mezcla se anadio al vial 1 que contiene el ester 2-[2-(2-[18F]fluoroetoxi)etoxi]etflico del acido tolueno-4-sulfonico seco. El vial 2 cerrado hermeticamente se calento durante 20 min. a 100°C. Tras enfriar, se anadieron 100 ml adicionales de NaOH 1 M a la mezcla de reaccion, y la agitacion se continuo durante 10 min. a 25°C. La disolucion se acidifico con 200 ml de HCl 2 M, y se calento durante 10 min. a 100°C en el vial cerrado hermeticamente. La mezcla de reaccion se diluyo con 4 ml de una mezcla de agua/MeCN (1:1) y se aplico en una HPLC semipreparativa ACE 5 mm C18 HL (10,0 x 250 mm), gradiente (20 min.): 15/85/0,1 - 50/50/0,1 acetonitrilo/agua/acido trifluoroacetico (relacion volumen a volumen a volumen), 4 ml/min., tiempo de retencion de acido (3S)-3-(3-{2-[2-(2-[18F]fluoroetoxi)etoxi]etoxi}fenil)-3- [({(3R)-1-[3-(piperidin-4-il)propanoil]piperidin-3-il}carbonil)amino]propanoico: 28,3 min.; tiempo de retencion de acido (3R)-3-(3-{2-[2-(2-[18F]fluoroetoxi)etoxi]etoxi}fenil)-3-[({(3R)-1-[3-(piperidin-4-il)propanoil]piperidin-3- il}carbonil)amino]propanoico: 29,0 min.). La fraccion recogida se diluyo con 20 ml de agua y se aplico en un cartucho preacondicionado Sep-Pak™ Plus C18 (preacondicionado con 5 ml de EtOH y 10 ml). El cartucho se lavo con 5 ml de agua, y despues la actividad se eluyo con 2,0 ml de EtOH. Tras la evaporacion total del EtOH bajo una corriente de nitrogeno a 90°C, el trazador final se recogio en agua (100 ml) para obtener acido (3S)-3-(3-{2-[2-(2- [18F]fluoroetoxi)etoxi]etoxi}fenil)-3-[({(3R)-1-[3-(piperidin-4-il)propanoil]piperidin-3-il}carbonil)amino]propanoico de 34 MBq (rendimiento radioqufmico: 4,5% d.c.; tiempo de sfntesis: 172 min.). La pureza radioqufmica fue >99%. El producto marcado con F-18 se confirmo mediante coinyeccion con el patron frfo de F-19 (ejemplo 4) en una HPLC analftica (columna: ACE, C18 RP, 50 x 4,6 mm, 3 m, 2 ml/min. (Agilent), disolvente A: H2O + 0,1% de TFA, disolvente B: MeCN + 0,1% de TFA, isocratico 20% de B en 7 min.).
Compuesto de referenda
Acido (3S)-3-[({(3R)-1-[3-(piperidin-4-il)propanoil]piperidin-3-il}carbonil)amino]-3-{6-[sH]Piridin-3-il}propanoico
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
Se disolvio acido (3S)-3-(6-bromopiridin-3-il)-3-{[(3R)-1-(3-piperidin-4-il-propanoil)piperidin-3-
carbonil]amino}propanoico (1,85 mg, 3,73 mmoles) en una mezcla de DMF (500 ml) y Et3N (25 ml). A esta disolucion se anadio paladio sobre carbon (20%) (6,45 mg), y la mezcla se conecto a un colector de tritio, para tritiar toda la noche con tritio gaseoso. Despues, la mezcla de reaccion se evaporo criostaticamente 3 veces en el colector. El producto bruto obtenido se purifico en una HPLC semipreparativa (Kromasil 100 C8 5 mm (250 x 4,6 mm), eluyente: amonfaco 35 mM/metanol, caudal: 1 ml/min.). La fraccion recogida contenfa acido (S)-3-{5-3H-piridin-3-il}-3-{[(R)-1- (3-piperidin-4-il-propanoil)-piperidin-3-carbonil]-amino}-propanoico de 2061 MBq (rendimiento radioqufmico: 12,6%; pureza radioqufmica: 98%; actividad especffica: 7,81 Ci/mmoles).
Ejemplo 49
Afinidades de antagonistas de GPIIb/IIIa frente a receptores de GPIIb/IIIa humana
Todo el procedimiento del ensayo de GPIIb/IIIa usado se demuestra esquematicamente en la figura 1. La glicoprotefna IIb/IIIa humana purificada (Tris-HCl 20 mM, NaCl 0,1 M, 0,1% de Triton X-100, CaCh 1 mM, 0,05% de NaN3, 50% de glicerol, pH 7,4) se adquirio de Enzyme Research Laboratories Inc. (South Bend, IN). El receptor GPIIb/IIIa se diluyo en disolucion salina amortiguada con fosfato (disolucion salina amortiguada con fosfato de Dulbecco (D-PBS (+)) con calcio y magnesio, GIBCO®, Invitrogen) con 0,01% de seroalbumina bovina (albumina procedente de polvo liofilizado de suero bovino, >96 %, Sigma).
El receptor de GPIIb/IIIa se inmovilizo al menos 48 horas (100 ml por pocillo, 48 hasta un maximo de 96 horas) en una placa solida de 96 pocillos (Immuno Plate MaxiSorp™, Nunc, Roskilde, Dinamarca) a 277 K hasta 280 K y a una concentracion de 0,1 mg por pocillo hasta 1 mg por pocillo. Como control negativo, una fila de la placa (n = 8) se incubo solamente con 2% de seroalbumina bovina (200 ml por pocillo, albumina procedente de polvo liofilizado de suero bovino, >96%, Sigma, diluida en D-PBS (+)). Tras lavar tres veces con el amortiguador de lavado (230 ml por pocillo, disolucion salina amortiguada con fosfato de Dulbecco (D-PBS (-)) no contiene calcio o magnesio, GIBCO®, Invitrogen), el plastico expuesto residual y los sitios de union no especffica se bloquearon incubando la placa con una disolucion de bloqueo especial (200 ml por pocillo, Roti®-Block, Carl Roth GmbH Co KG, Karlsruhe) que contiene 2% de seroalbumina bovina (albumina procedente de polvo liofilizado de suero bovino, >96%, Sigma), 1 hora a temperatura ambiente.
Tras lavar tres veces con el amortiguador de lavado, se anadieron simultaneamente a cada pocillo 50 ml de compuesto de referencia tritiado (60 nM, compuesto marcado con 3H) y 50 ml de compuesto nuevo (inhibidor, 19F), y se incubo durante 1 hora a temperatura ambiente. Se investigaron varias concentraciones de cada nuevo inhibidor (0,1, 1, 2, 5, 10, 20 50, 100, 200, 500, 1000, 2000, 5000, 10000 y 20000 nM). A cada concentracion de inhibidor, se llevo a cabo una determinacion de cuatro veces. Los resultados para los inhibidores examinados se resumen en la tabla 1.
El valor maximo de compuesto de referencia tritiado se determino sin la adicion de inhibidor (n = 8). Para excluir la union no especffica del compuesto de referencia tritiado con 3H, se usaron pocillos sin receptores de glicoprotefna como controles negativos (n = 12, tratados identicamente justamente sin receptores de GPIIb/IIIa).
Despues de una hora, la placa se lavo tres veces con disolucion salina amortiguada con fosfato (200 ml por pocillo, disolucion salina amortiguada con fosfato de Dulbecco (D-PBS (+)), GIBCO®, Invitrogen). A continuacion, se anadieron a cada pocillo 140 ml de coctel de centelleo lfquido (MicroScint™ 40 aqueous, Perkin Elmer). Despues de 15 min. a temperatura ambiente, las placas se midieron en el contador de centelleo de microplaca (TopCount NXT v2.13, Perkin Elmer, Packard Instrument Company). La figura 1 muestra un diagrama esquematico del ensayo de GPIIb/IIIa. En la primera etapa, la glicoprotefna IIb/IIIa humana, que se purifica de plaquetas humanas, se inmovilizo en una placa solida de 96 pocillos. Despues de al menos 48 horas, las placas se lavaron, y los sitios de union no especffica se bloquearon con Roti®-Block. En la etapa siguiente, las placas se incubaron simultaneamente con un compuesto de referencia marcado con tritio y el nuevo compuesto de pequena molecula (inhibidor). Cuanto mayor es la afinidad del inhibidor, menor es la fraccion unida del compuesto de referencia. La fraccion de compuesto de referencia tritiado, que no es desplazado por el inhibidor, se midio en un contador de centelleo de microplaca.
Los resultados se resumen en la tabla 1.
5
10
15
20
25
30
35
40
Tabla 1: Afinidad de union de los compuestos frente al receptor de GPIIb/IIIa humana
- Ejemplo
- IC50 humana [nMl
- 1
- 101
- 2
- 29
- 3
- 20
- 4
- 84
- 5
- 16
- 6
- 16
- 7
- 11
- 8
- 14
- 9
- 21
- 10
- 15
- 11
- 14
- 12
- 8
- 13
- 7
- 14
- 15
- 15
- 5
- 16
- 6
- 17
- 35
- 18
- 3
- 19
- 3
- 20
- 7
Cuanto mayor es la afinidad del inhibidor, menor es la fraccion unida del compuesto de referencia marcado con tritio. Por medio de este ensayo se pudieron determinar los diastereomeros activos identificados y las afinidades (valores de IC50). Los estudios descritos anteriormente indican que los compuestos de formula I son utiles como agentes de contraste para la formacion de imagenes de trombos. En el Ejemplo 50 se describe la buena correlacion entre los valores de IC50 y la acumulacion real de trombo.
Ejemplo 50
Caracterizacion ex vivo
Union a trombos humanos
La union de los compuestos a los trombos se investigo adicionalmente en un modelo de flujo sangufneo ex vivo similar al descrito en “Wakhloo, A. K. et al. Thrombus and stroke 2008, in vitro models 57-66”, pero modificado con respecto al desarrollo del trombo. De forma breve, para la formacion del trombo se uso un conjunto de tubos hechos a mano abiertos que consiste en tubos tygon (Tygon R-1000, n° de referencia AAU00007: I.D. 3,2 mm, O.D. 6,4 mm, Saint Gobain Performance Plastics North America), tubos intermedios (conjunto de infusion Intrafix®, B.Braun, Melsungen, Alemania), un deposito abierto (Combitip de 10 ml, Eppendorf), y una camara hecha de una pieza de tubo de polietileno (tubo de polietileno INTRAMEDIC, Clay Adams, PE160, longitud: 6,5 cm) que contiene un bucle de hilo que se ha hecho rugoso (lfnea de pesca: Okuma UltraMax, diametro: 0,14 mm, longitud: 5 cm; papel de lija: designacion del grano segun CAMI: 600, CP918a, VSM). La conexion entre el tubo intermedio y la camara del trombo se realizo mediante puntas recortadas (epTIPS, 200 ml, Eppendorff, Hamburgo/Alemania). El deposito y la camara del trombo se fijaron mediante abrazaderas y soportes. Se uso una bomba peristaltica (Minipuls 3, Gilson, Middelton/USA) para bombear la sangre alrededor, ajustando de ese modo el caudal en el centro de la camara del trombo a 70-90 cm por segundo, que se monitorizo mediante medida de Doppler de ultrasonidos (Vevo 770 High- Resolution In Vivo Micro-Imaging System, VisualSonics, Toronto/Ontario, Canada; cabeza de barrido: RMV 704, 40 MHz). El volumen de todo el conjunto de tubos fue 7,5 o 15 ml.
Para cada experimento, se tomo sangre reciente de un voluntario usando tubos de citrato de 10 ml (Sarstedt S- Monovette 02.1067.001, 10 ml, citrato 3,13%), e inmediatamente se deposito sobre el dispositivo de volteo de una incubadora a una temperatura de 37°C (Heraeus miniTherm CTT con dispositivo de rotacion y volteo integrados, velocidad de volteo: 19 rotaciones por minuto, Heraeus Instruments GmbH, Hanau/Alemania). Segun se necesite, se sacaron dos tubos del dispositivo de volteo, y se transfirieron 15 ml a una jeringuilla de 20 ml (Omnifix®, B. Braun, Melsungen/Alemania), y se mezclaron suavemente con 0,75 ml de disolucion de CaCl2 antes de que se pusiera en marcha la bomba peristaltica, y todo el contenido de la jeringuilla se transfirio al deposito del conjunto de tubos via un filtro celular (filtro celular BD Falcon™, 40 mm, BD, Franklin Lakes, NJ USA). Despues de 7 minutos, se anadio 1 MBq o 0,5 MBq (15 ml o 7,5 ml) del compuesto al deposito por medio de una pipeta, mezclando suavemente de ese modo el contenido con la punta de la pipeta. La sangre se dejo circulando durante otros 3 minutos. Despues, la bomba se detuvo, se tomaron alfcuotas de la sangre, y el trombo junto con el hilo rugoso se retiro de la camara del trombo antes de que ambos se pesasen y se midiesen en un contador gamma (Automatic Gamma Counter Wizard2
5
10
15
20
25
30
35
40
3, Perkin Elmer). Despues, el trombo junto con el hilo se incubo en disolucion de plasmina (plasmina procedente de plasma humano, Sigma Aldrich, disolucion madre: 500 mg en 500 ml de amortiguador de Tris 150 mM (pH 7,8), 20 ml de disolucion madre a 230 ml de disolucion salina 0,9%) durante 48 horas para separar las plaquetas del hilo y para determinar el peso neto del trombo. Finalmente, se determino la actividad del compuesto en la sangre y del trombo, asf como tambien la relacion entre ambos (cpm/peso [mg]). Los resultados para los compuestos investigados se resumen en la tabla 2.
Tabla 2: Relaciones de coagulo a sangre in vitro y valores de ICrq correspondientes
- Ejemplo n° 18F-compuesto
- Relacion de coagulo a sangre in vitro* Ejemplo n° l9F-compuesto correspondiente IC50 humana [nM]
- 38
- 19 ± 1 (n=9) 1 101
- 39
- 34 ± 4 (n=4) 2 29
- 40
- 71 ± 4 (n=3) 3 20
- 41
- 83 ± 14 (n=6) 7 11
- 42
- 58 ± 10 (n=6) 9 21
- 46
- 191 ± 30 (n=4) 18 3
- 47
- 178 ± 48 (n=4) 19 3
- * Relacion de coagulo a sangre in vitro ± error estandar de la media (SEM) 3 minutos despues de la inyeccion del compuesto marcado con 18F en el modelo de trombo in vitro descrito.
Para verificar la especificidad del compuesto, se realizo un experimento de competicion en el que se anadio el compuesto frfo al deposito junto con el compuesto caliente. La concentracion plasmatica final del compuesto frfo fue
2,8 mM. Los resultados se resumen en la tabla 3.
Tabla 3: Experimentos de competicion
- Ejemplo n°
- Acumulacion en el trombo [103 cpm/mg]* Competicion por el trombo [103 cpm/mg]*
- 38
- 41 ± 3 (n=5) 10 ± 1 (n=5)
- 39
- 86 ± 9 (n=6) 12 ± 1 (n=6)
- 40
- 202 ± 11 (n=3) 8 ± 1 (n=3)
- 41
- 44 ± 7 (n=6) 5 ± 1 (n=5)
- 42
- 39 ± 5 (n=6) 5 ± 1 (n=6)
- 46
- 285 ± 76 (n=4) 17 ± 1 (n=4)
- 47
- 258 ± 59 (n=4) 14 ± 2 (n=3)
- * Valores ± error estandar de la media (SEM) 3 minutos despues de la inyeccion del compuesto marcado con '°F en el modelo de trombo in vitro descrito.
Los experimentos de competicion mostraron que la acumulacion del trazador se puede desplazar mediante adicion del compuesto frfo, y verifican que la union es especffica. La fuerte union especffica de los compuestos a los trombos mostrada en la tabla 2 y 3 (relacion de coagulo a sangre in vitro) se correlaciona bien con los valores de IC50 determinados antes (figura 2 y Ejemplo 49). La acumulacion de los compuestos en los trombos, o las relaciones de coagulo a sangre crecen al crecer la afinidad.
Ejemplo 51
Union a protefnas plasmaticas
La determinacion de la union de los compuestos a protefnas plasmaticas se realizo por medio de una dialisis en equilibrio en una placa HT de 96 pocillos. Se prepararon disoluciones de compuesto de ensayo (0,3 mM y 3 mM) en amortiguador (amortiguador de fosfato 50 mM) y 10% de plasma. Se monto una placa de dialisis HT de 96 pocillos (Teflon), de manera que cada pocillo se dividio en dos compartimentos mediante una membrana de celulosa semipermeable (celulosa regenerada, MWCO 12-14K). La disolucion de amortiguador de fosfato (150 ml) se anadio a un lado de la membrana, y la disolucion de plasma al otro lado (150 ml). Los compuestos se anadieron al lado de la disolucion de plasma, y se incubaron a 37 grados. La fraccion no unida del compuesto pudo pasar a traves de la membrana, y se pudo alcanzar el equilibrio entre los dos lados (6-8 h, 37°C). Ambas disoluciones se analizaron para cada compuesto (libre de plasma y que contiene plasma) mediante LC-MS. Ambas disoluciones para cada compuesto se diluyeron con amortiguador o con plasma para alcanzar la misma matriz (10% de plasma) para el analisis, y se precipitaron mediante adicion de metanol. La fraccion no unida (Fu) se calculo como el cociente de las concentraciones en el equilibrio del compuesto en disolucion libre de plasma y disolucion que contiene plasma.
Los resultados se resumen en la tabla 4. Se ha investigado el grado de union a protefnas plasmaticas en ser humano y mono. Los ejemplos no mostraron union significativa a protefnas plasmaticas, con una fraccion no unida
5
10
15
20
25
30
35
40
(Fu) mayor que 10% en todas las especies investigadas.
Tabla 4: Union a proteinas plasmaticas en plasma humano y de mono a una concentracion de 0,3 mM y 3 mM
- Ejemplo n°
- Especie Raza Concentracion (pM) Fu (Mari) %
- 1
- Humana Caucasico 3 90
- 1
- Humana Caucasico 0,3 91
- 1
- Mono Macaco 3 93
- 1
- Mono Macaco 0,3 99
- 3
- Humana Caucasico 3 100
- 3
- Humana Caucasico 0,3 96
- 3
- Mono Macaco 3 100
- 3
- Mono Macaco 0,3 100
- 7
- Humana Caucasico 3 54
- 7
- Humana Caucasico 0,3 50
- 7
- Mono Macaco 3 58
- 7
- Mono Macaco 0,3 54
Ejemplo 52
Estabilidad metabolica in vitro en microsomas hepaticos
Se usaron microsomas hepaticos humanos en suspension (contenido proteico 0,5 mg/ml) para estudios de estabilidad metabolica. La concentracion de incubacion fue 0,3 pMI. Todo el volumen de la incubacion fue 3,03 ml, en el que 2,4 ml de una suspension de microsomas en amortiguador de fosfato (pH 7,4) se activaron mediante adicion de 0,6 ml de un sistema de regeneracion de NADPH (mezcla de cofactores: 1,2 mg de NADP, 3 UI de glucosa-6- fosfato deshidrogenasa, 14,6 mg de glucosa-6-fosfato y 4,9 mg de MgCl2 en amortiguador de fosfato, pH 7,4). Tras la adicion de 30 ml de compuesto de ensayo, se inicio el ensayo. El compuesto se disolvio en un disolvente organico y se diluyo con el mismo medio de los microsomas hepaticos, a fin de mantener el contenido organico por debajo de la concentracion recomendada (dimetilsulfoxido (DMSo < 0,2% y metanol < 1%). La suspension se incubo a 37 grados durante 60 minutos con agitacion continua (Tec Control Shaker RS 485 a 300 UpM). En diferentes puntos de tiempo (2, 8, 16, 30, 45 y 60 min.) se tomaron alfcuotas de 250 ml y se mezclaron con metanol frfo. Las muestras se congelaron toda la noche a -20°C. Las disoluciones se centrifugaron durante 15 min. a 3000 g. El sobrenadante transparente (100 ml) se uso para determinar la concentracion. El analisis se llevo a cabo con un sistema de HPLC Agilent 1200, con un detector de LCMS/MS.
La susceptibilidad de los compuestos investigados a la degradacion mediante metabolismo oxidativo de fase I se investigo usando microsomas hepaticos procedentes de diferentes especies. El compuesto 1 y 3 revelaron estabilidad metabolica muy elevada en ser humano, mono y rata (CLsangre calculado = 0,0001 l/h/kg). La recuperacion fue casi 100% para todas las especies investigadas. La extrapolacion del aclaramiento in vitro a in vivo (Clint) sugiere un aclaramiento metabolico muy bajo en ser humano, raton, rata y mono.
Tabla 5: Estabilidad metabolica in vitro en microsomas humanos, de mono, de rata y de raton
- Ejemplo n°
- Especie Raza Sexo CLsanare(l/h/kg)
- 1
- Humana Caucasico Mixto 0,0001
- 1
- Mono Macaco Hembra 0,0001
- 1
- Rata Wistar Varon 0,0001
- 3
- Humana Caucasico Mixto 0,0001
- 3
- Mono Macaco Hembra 0,0001
- 3
- Rata Wistar Varon 0,0001
- 3
- Raton NMRI Hembra 0,0001
Ejemplo 53
Farmacocinetica en ratones
Se determino la biodistribucion del compuesto descrito en el Ejemplo 41 en ratones atfmicos. De forma breve, los ratones recibieron cada uno 185 KBq del compuesto. En diferentes puntos de tiempo (1, 3, 10, 30, 120 minutos p.i., 3 ratones por grupo), los animales se sacrificaron, y los organos de interes o sus alfcuotas se retiraron, se pesaron y finalmente se midieron en un contador gamma (Automatic Gamma Counter Wizard2 3, Perkin Elmer).
El compuesto se elimino rapidamente de la sangre, y no hubo aumento en la pared del vaso. El compuesto se excreto rapidamente por el rinon y el hfgado, y casi no hubo fondo en todo el resto del cuerpo despues de 15
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
60
65
minutos p.i. (figura 3).
Ejemplo 54
Aclaramiento sanguineo en un macaco
Se ha determinado el aclaramiento sanguineo del compuesto descrito en el ejemplo 40 en un macaco. Se anestesio un macaco hembra con una mezcla de xilazina (Rompun®, Bayer Healthcare, Leverkusen, Alemania), 0,12 ml/kg de peso corporal, y ketamina (Ketavet®, Pfizer), 0,12 ml/kg de peso corporal i.m. El mono se coloco dentro del escaner de PET (Inveon PET/CT, Siemens Medical, Erlangen), y se inyectaron i.v. 25 MBq del compuesto mientras que se llevo a cabo de forma continua la formacion de imagenes mediante PET desde poco tiempo antes hasta 60 minutos despues de la inyeccion. Se tomaron muestras de sangre venosa a 3, 10, 30 y 60 minutos p.i., y se midieron en un contador gamma (Automatic Gamma Counter Wizard2 3, Perkin Elmer). Adicionalmente, se midio la concentracion en sangre del compuesto a partir de la imagen de PET a lo largo de todo el periodo de la formacion de la imagen (figura 4).
Se encontro que el compuesto descrito en el ejemplo 40 se aclaro rapidamente de la sangre. Hubo solamente una senal marginal visible en cualquier otro tejido. El cerebro estaba completamente libre de contraste.
Este resultado se correlaciona bien con los resultados del estudio farmacocinetico en ratones, y subraya nuevamente el perfil farmacocinetico ventajoso del compuesto. Ademas, muestra que no hay tampoco ninguna reaccion cruzada con ninguna otra estructura (por ejemplo integrinas) en el endotelio sano.
Ejemplo 55
Formacion de imagenes de trombo en macacos
Se investigo la capacidad del compuesto descrito en el ejemplo 40 para la formacion de imagenes de trombos en un estudio mediante PET con macacos (hembras, 2,8-3,2 kg).
Mono 1:
El primer mono se anestesio con una mezcla de xilazina (Rompun®, Bayer HealthCare, Leverkusen, Alemania), 0,12 ml/kg, y ketamina (Ketavet®, Pfizer), 0,12 ml/kg de peso corporal (b.w.), i.m., y adicionalmente se le administro un analgesico mediante una inyeccion i.m. de 6 mg de buprenorfina por kg. Durante la investigacion, se han inyectado i.m. pequenas cantidades de ketamina si son necesarias. La arteria carotida comun izquierda se expuso quirurgicamente, y se inserto en el vaso un tubo de polietileno (tubo de polietileno (INTRAMEDIC, Clay Adams, PE50), que se habia hecho rugoso previamente mediante papel de lija (designacion de grano CAMI - 600), se hizo avanzar en la aorta descendente y se dejo alli durante 30 minutos para permitir el desarrollo de un trombo en la superficie rugosa del tubo. Mientras tanto, el mono se coloco dentro de un escaner de PET (Inveon PET/CT, Siemens Medical, Erlangen). Despues, el mono recibio 25 MBq del compuesto i.v., y se realizaron barridos de PET desde poco tiempo antes hasta 60 minutos despues de la inyeccion. La imagen revelo una senal brillante dentro de la aorta descendente junto a la parte del tubo que se habia hecho rugosa (figura 5), mientras que solamente habia una senal dispersa en cualquier tejido alrededor del tubo. Sorprendentemente, solamente hubo una capa visible muy delgada de trombo que cubre la parte rugosa del tubo tras la eliminacion del tubo que se habia hecho rugoso del animal. El grosor de esta capa estaba muy por debajo de 1 mm (vease tambien el trombo eliminado del Mono 2, figura 7) y con ello tambien muy por debajo de la resolucion de la imagen, que es aproximadamente 1 mm. Esto tambien significa que incluso los trombos mas pequenos, incluso si su tamano esta muy por debajo de la resolucion del dispositivo formador de imagenes, se pueden visualizar debido a la acumulacion masiva de compuesto en las plaquetas de los trombos. Al final del experimento, el tubo se retiro cuidadosamente del vaso antes de que se pesase y se midiese en un contador gamma (Automatic Gamma Counter Wizard2 3, Perkin Elmer). Despues, el trombo, junto con el tubo, se incubo en disolucion de plasmina (plasmina procedente de plasma humano, Sigma Aldrich, disolucion madre de plasmina: 500 mg de plasmina en 500 ml de amortiguador de Tris (150 mM, pH 7,8), 20 ml de disolucion madre de plasmina a 230 ml de disolucion salina 0,9%) durante 48 horas para separar las plaquetas del tubo y determinar el peso neto del trombo. Finalmente, se determino la actividad del compuesto en la sangre y en el trombo, asf como la relacion entre las dos (cpm/peso [mg]).
Mono 2:
Se repitio el experimento con el mismo compuesto en otro mono, con una preparacion ligeramente diferente del tubo trombogenico: este tubo se hizo rugoso en solamente dos secciones cortas, con un espacio entremedias. Aparte de eso, el diseno experimental, que incluye la determinacion de la relacion de coagulo a sangre in vivo, fue como se describio anteriormente para el mono 1. A diferencia del trombo del primer mono, ahora se encontraron dos senales fuertes separadas en la imagen de PET, con un espacio entremedias (figura 6). Tras retirar el tubo trombogenico del vaso, se pudieron encontrar dos trombos separados en las partes que se hicieron rugosas del tubo (figura 7), demostrando que las senales derivaron solamente del trombo, y no del tubo solo. Como ya se sabfa del mono 1,
5
10
15
20
25
30
35
40
45
estos dos trombos tambien fueron extremadamente delgados (figura 7). Mono 3, reduccion de la dosis y trombo venoso
Se repitio el experimento con el mismo compuesto en otro mono, pero con la dosis reducida de 15 MBq para todo el animal. Ademas del cateter arterial, este animal tambien recibio un cateter venoso, tambien hecho de tubo de cateter de PE50 y que se hizo rugoso en algunas partes con espacios entremedias como se describio anteriormente. Este cateter se inserto en la vena femoral izquierda y se hizo avanzar a la vena cava superior. Ambos cateteres se dejaron en los vasos durante 30 minutos antes de que se inyectase intravenosamente el compuesto. La formacion de imagenes mediante PET se llevo a cabo desde poco tiempo antes hasta 60 minutos despues de la inyeccion.
Al igual que en los otros monos, todos los trombos arteriales y venosos mostraron una senal brillante en la imagen (figura 8). Como antes, la mayorfa de la senal se desvanecio de la sangre y de otros tejidos alrededor de los trombos en algunos minutos.
Relacion de coagulo a sangre in vivo:
Se determino la relacion de coagulo a sangre in vivo de 5 trombos de los experimentos con monos descritos anteriormente. Como ya se menciono anteriormente, los trombos se eliminaron de los vasos tras la formacion de las imagenes, y se pesaron y midieron en un contador gamma (Automatic Gamma Counter Wizard2 3, Perkin Elmer) junto con muestras de sangre tomadas del animal. Tras incubar los trombos en plasmina (plasmina procedente de plasma humano, Sigma Aldrich, disolucion madre de plasmina: 500 mg de plasmina en 500 ml de amortiguador de Tris (150 mM, pH 7,8), 20 ml de disolucion madre de plasmina a 230 ml de disolucion salina 0,9%) y retirar los trombos de los tubos de los cateteres, se calculo el peso neto de los trombos, y se calculo la concentracion del compuesto en el trombo (coagulo) y en la sangre, asf como la relacion entre ellas. La relacion de coagulo a sangre in vivo fue sorprendentemente elevada (126 +/- 52, Tabla 6), y estaba significativamente por encima de la relacion descrita en la tecnica anterior mas parecida (documento US 2007/0189970 A1).
Tabla 6: Relaciones de coagulo a sangre in vivo (macacos)
- Coagulo [cpm/mgl
- Sangre [cpm/mgl Coagulo/Sangre
- 25578
- 130 196
- 7204
- 100 72
- 9545
- 100 96
- 9011
- 90 100
- 14801
- 90 164
- media sd 126 52
La Tabla 6 muestra la concentracion del compuesto en el trombo (coagulo) y en la sangre y la relacion de coagulo a sangre in vivo resultante determinada a partir de 5 trombos de los experimentos de formacion de imagenes con monos descritos anteriormente. Se encontro que era sorprendentemente elevada, y significativamente mayor que la mostrada en la tecnica anterior mas parecida (documento US 2007/0189970 A1).
Conclusion:
El compuesto descrito en el ejemplo 40 muestra una acumulacion sorprendentemente elevada en monos, incluso en los trombos venosos y arteriales mas pequenos. Casi no hubo fondo en ningun tejido u organo circundante en ninguno de los monos investigados. El compuesto permanece casi completamente en el trombo durante un perfodo prolongado (se mostraron 60 minutos). En contraste con la tecnica anterior mas parecida (documento US 2007/0189970 A1), la dosis dada en los experimentos descritos en la presente memoria fue casi 50 veces menor, y la relacion de coagulo a sangre in vivo fue al mismo tiempo significativamente mayor.
Claims (18)
- 510152025303540451. Compuestos de Formula III:
imagen1 en los queR3 se selecciona de entre el grupo que consiste en H, F, CF3, COR9, COOR10, SOR10, SO2R10, CN y NO2;R7 se selecciona de entre el grupo que consiste en Y, -O(CH2)n-Y, -(OCH2CH2)m-Y, Z, -OCH2-Z; -CH2-CH2- Z, -CH=CH-Z y -C°C-Z;X se selecciona de entre CH o N;Y se selecciona de entre 18F o F;R9 es hidrogeno o alquilo (C1-C6);R10 es alquilo (C1-C6);Z es un grupoimagen2 en el que * indica el atomo de conexion de Z;R5 se selecciona de entre el grupo que consiste en H, CF3, COR9, COOR10, SOR10, SO2R10, CN y NO2;R8 se selecciona de entre el grupo que consiste en Y, -O(CH2)n-Y y -(OCH2CH2)m-Y; n es 1-3; y m es 2-3;con la condicion de que si R7 presenta el significado de Y, R3 presente el significado de CF3, COR9, COOR10,SOR10, SO2R10, CN o NO2, ycon la condicion de que si R8 presenta el significado de Y, R5 presente el significado de CF3, COR9, COOR10,SOR10, SO2R10, CN o NO2;incluyendo isomeros E y Z y diastereomeros, mezclas de los mismos, y cualquier sal farmaceuticamente aceptable o complejo de los mismos. - 2. Compuestos segun la reivindicacion 1,en los queR3 es H, F, CF3, CN o NO2;R7 es Y, -O(CH2)n-Y, -(OCH2CH2)m-Y, Z, -OCH2-Z; -CH2-CH2-Z, -CH=CH-Z o -CeC-Z;X es CH o N;Y es 18F o F;Z es un grupo
imagen3 en el que * indica el atomo de conexion de Z; R5 es H, CF3, CN o NO2;R8 es Y, -O(CH2)n-Y o -(OCH2CH2)m-Y; n es 1-3;5101520253035404550556065y m es 2-3, - 3. Compuestos segun la reivindicacion 1 o 2, en los queR3 es H;R7 es -O(CH2)n-Y; X es N;Y es 18F o F; y n es 1-3;incluyendo isomeros E y Z y diastereomeros, mezclas de los mismos, y cualquier sal farmaceuticamente aceptable o complejo de los mismos.
- 4. Compuestos de Formula III segun la reivindicacion 1:acido (3S)-3-[3-(2-fluoroetoxi)fenil]-3-[({(3R)-1-[3-(piperidin-4-il)propanoil]piperidin-3-il}carbonil)amino]propanoico,acido (3S)-3-[4-(2-fluoroetoxi)fenil]-3-[({(3R)-1-[3-(piperidin-4-il)propanoil]piperidin-3-il}carbonil)amino]propanoico,acido (3S)-3-[5-(2-fluoroetoxi)piridin-3-il]-3-[({(3R)-1-[3-(piperidin-4-il)propanoil]-piperidin-3-il}carbonil)amino]propanoico,acido (3S)-3-{3-{2-[2-(2-fluoroetoxi)etoxi]etoxi}fenil)-3-[({(3R)-1-[3-(piperidin-4-il)propanoil]piperidin-3-il}carbonil)amino]propanoico,acido (3S)-3-(5-{2-[2-(2-fluoroetoxi)etoxi]etoxi}piridin-3-il)-3-[({(3R)-1-[3-(piperidin-4-il)propanoil]piperidin-3-il}carbonil)amino]propanoico,acido (3S)-3-{5-[3-(2-fluoroetoxi)fenil]piridin-3-il}-3-(({(3R)-1-[3-(piperidin-4-il)propanoil]piperidin-3-il}carbonil)amino]propanoico,acido (3S)-3-{5-[4-(2-fluoroetoxi)fenil]piridin-3-il}-3-[({(3R)-1-[3-(piperidin-4-il)propanoil]piperidin-3-il}carbonil)amino]propanoico,acido (3S)-3-{5-[2-(2-fluoroetoxi)fenil]piridin-3-il}-3-[({(3R)-1-[3-(piperidin-4-il)propanoil]piperidin-3-il}carbonil)amino]propanoico,acido (3S)-3-[5-(3-ciano-4-fluorofenil)piridin-3-il]-3-[({(3R)-1-[3-(piperidin-4-il)propanoil]piperidin-3-il}carbonil)amino]propanoico,acido (3S)-3-[5-(4-ciano-3-fluorofenil)piridin-3-il]-3-[({(3R)-1-[3-(piperidin-4-il)propanoil]piperidin-3-il}carbonil)amino]propanoico,acido (3S)-3-[5-(4-fluoro-3-nitrofenil)piridin-3-il]-3-[({(3R)-1-[3-(piperidin-4-il)propanoil]piperidin-3-il}carbonil)amino]propanoico,acido (3R)-3-{5-[(3-ciano-4-fluorobencil)oxi]piridin-3-il}-3-[({(3S)-1-[3-(piperidin-4-il)propanoil]piperidin-3-il}carbonil)amino]propanoico,acido (3S)-3-{5-[(4-ciano-3-fluorobencil)oxi]piridin-3-il}-3-[({(3R)-1-[3-(piperidin-4-il)propanoil]piperidin-3-il}carbonil)amino]propanoico,acido (3S)-3-(4-ciano-3-fluorofenil)-3-[({(3R)-1-[3-(piperidin-4-il)propanoil]piperidin-3-il}carbonil)amino]propanoico,acido (3S)-3-(5-{[4-(2-fluoroetoxi)fenil]etinil}piridin-3-il)-3-[({(3R)-1-[3-(piperidin-4-il)propanoil]piperidin-3-il}carbonil)amino]propanoico,acido (3S)-3-(5-{[3-(2-fluoroetoxi)fenil]etinil}piridin-3-il)-3-[({(3R)-1-[3-(piperidin-4-il)propanoil]piperidin-3-il}carbonil)amino]propanoico,acido (3S)-3-[5-fluoro-4'-(2-fluoroetoxi)bifenil-3-il]-3-[({(3R)-1-[3-(piperidin-4-il)propanoil]piperidin-3-il}carbonil)amino]propanoico,510152025303540455055acido (3S)-3-(5-{2-[4-(2-fluoroetoxi)fenil]etil}piridin-3-il)-3-[({(3R)-1-[3-(piperidin-4-il)propanoil]piperidin-3-il}carbonil)amino]propanoico,acido (3S)-3-(5-{2-[4-(2-fluoroetoxi)fenil]etil}piridin-3-il)-3-[({(3R)-1-[3-(piperidin-4-il)propanoil]piperidin-3-il}carbonil)amino]propanoico,acido (3S)-3-(5-{2-[3-(2-fluoroetoxi)fenil]etil}piridin-3-il)-3-[({(3R)-1-[3-(piperidin-4-il)propanoil]piperidin-3-il}carbonil)amino]propanoico,acido (E/Z) (3S)-3-(5-{2-[3-(2-fluoroetoxi)fenil]etenil}piridin-3-il)-3-[({(3R)-1-[3-(piperidin-4-il)propanoil]piperidin-3-il}carbonil)amino]propanoico,acido (3S)-3-[3-(2-[18F]fluoroetoxi)fenil]-3-[({(3R)-1-[3-(piperidin-4-il)propanoil]piperidin-3-il}-carbonil)amino]propanoico,acido (3S)-3-[4-(2-[18F]fluoroetoxi)fenil]-3-[({(3R)-1-[3-(piperidin-4-il)propanoil]piperidin-3-il}carbonil)amino]propanoico,acido (3S)-3-[5-(2-[18F]fluoroetoxi)piridin-3-il]-3-[({(3R)-1-[3-(piperidin-4-il)propanoil]piperidin-3-il}carbonil)amino]propanoico,acido (3S)-3-{5-[4-(2-[18F]fluoroetoxi)fenil]piridin-3-il}-3-[({(3R)-1-[3-(piperidin-4-il)propanoil]piperidin-3-il}carbonil)amino]propanoico,acido (3S)-3-[5-(3-ciano-4-[18F]fluorofenil)piridin-3-il]-3-[({(3R)-1-[3-(piperidin-4-il)propanoil]piperidin-3-il}carbonil)amino]propanoico,acido (3S)-3-[5-(4-ciano-3-[18F]fluorofenil)piridin-3-il]-3-[({(3R)-1-[3-(piperidin-4-il)propanoil]piperidin-3-il}carbonil)amino]propanoico,acido (3S)-3-(5-{[4-(2-[18F]fluoroetoxi)fenil]etinil}piridin-3-il)-3-[({(3R)-1-[3-(piperidin-4-il)propanoil]piperidin-3-il}carbonil)amino]propanoico,acido (3S)-3-(5-{[3-(2-[18F]fluoroetoxi)fenil]etinil}piridin-3-il)-3-[({(3R)-1-[3-(piperidin-4-il)propanoil]piperidin-3-il}carbonil)amino]propanoico,acido (3S)-3-(5-{2-[4-(2-[18F]fluoroetoxi)fenil]etil}piridin-3-il)-3-[({(3R)-1-[3-(piperidin-4-il)propanoil]piperidin-3-il}carbonil)amino]propanoico,acido (3S)-3-(5-{2-[3-(2-[18F]fluoroetoxi)fenil]etil}piridin-3-il)-3-[({(3R)-1-[3-(piperidin-4-il)propanoil]piperidin-3-il}carbonil)amino]propanoico,acido (3S)-3-(3-{2-[2-(2-[18F]fluoroetoxi)etoxi]etoxi}fenil)-3-[({(3R)-1-[3-(piperidin-4-il)propanoil]piperidin-3-il}carbonil)amino]propanoico.
- 5. Procedimiento para elaborar compuestos de Formula III
imagen4 en los queR3 se selecciona de entre el grupo que consiste en H, F, CF3, COR9, COOR10, SOR10, SO2R10, CN y NO2; preferentemente R3 se selecciona de entre el grupo que consiste en H, F, CF3, CN, NO2;R7 se selecciona de entre el grupo que consiste en Y, -O(CH2)n-Y, -(OCH2CH2)m-Y, Z, -OCH2-Z; -CH2-CH2-Z, -CH=CH-Z y -CEC-Z;X se selecciona de entre CH o N;Y se selecciona de entre 18F o F;51015202530354045R9 es hidrogeno o alquilo (Ci-Ca); preferentemente hidrogeno o alquilo (C1-C4), mas preferentemente hidrogeno, metilo, etilo o ferc-butilo;R10 es alquilo (Ci-Ca); preferentemente alquilo (C1-C4), mas preferentemente metilo, etilo o ferc-butilo;Z es un grupoimagen5 en el que * indica el atomo de conexion de Z;R5 se selecciona de entre el grupo que consiste en H, CF3, COR9, COOR10, SOR10, SO2R10, CN y NO2; preferentemente R3 se selecciona de entre el grupo que consiste en H, CF3, CN, NO2;R8 se selecciona de entre el grupo que consiste en Y, -O(CH2)n-Y y -(OCH2CH2)m-Y; n es 1-3; y m es 2-3;con la condicion de que si R7 presenta el significado de Y, R3 presente el significado de CF3, COR9, COOR10,SOR10, SO2R10, CN o NO2, ycon la condicion de que si R8 presenta el significado de Y, R5 presente el significado de CF3, COR9, COOR10,SOR10, SO2R10, CN o NO2;partiendo de compuestos de Formula I,imagen6 en los queR1 es hidrogeno o un grupo protector de amina;R2 es hidrogeno o un grupo protector de carboxilo; en los que por lo menos uno de R1 y R2 no es H;R3 se selecciona de entre el grupo que consiste en H, F, CF3, COR9, COOR10, SOR10, SO2R10, CN y NO2; preferentemente R3 se selecciona de entre el grupo que consiste en H, F, CF3, CN, y NO2;R4 se selecciona de entre el grupo que consiste en OH, halogeno, -NO2, -N+(Me)3(W'), -I+R11(W'), -O(CH2)n- LG, -(OCH2CH2)m-LG, Q, -OCH2-Q; -CH2-CH2-Q, -CH=CH-Q y - C=C-Q; preferentemente, R4 se selecciona de entre el grupo que consiste en OH, halogeno, -N+(Me)3(W-), -O(CH2)n-LG, -(OCH2CH2)m-LG, Q, -OCH2-Q; -CH2-CH2-Q, -CH=CH-Q y -CeC-Q;X se selecciona de entre CH o N;LG es un grupo saliente;R9 es hidrogeno o alquilo (C1-Ca); preferentemente hidrogeno o alquilo (C1-C4), mas preferentemente hidrogeno, metilo, etilo o ferc-butilo;R10 es alquilo (C1-Ca); preferentemente alquilo (C1-C4), mas preferentemente metilo, etilo o ferc-butilo;R11 se selecciona de entre el grupo que consiste en fenilo, (4-metil)fenilo, (4-metoxi)fenilo, 2-furanilo y 2- tienilo; preferentemente R11 se selecciona de entre el grupo que consiste en (4-metoxi)fenilo y 2-tienilo;W- se selecciona de entre el grupo que comprende CF3(S(O)2O-, anion yoduro, anion bromuro y CF3C(O)O-; preferentemente W- se selecciona de entre el grupo CF3(S(O)2O-, anion bromuro y CF3C(O)O-;Q es un grupoimagen7 en el que * indica el atomo de conexion de Q;5101520253035404550R5 se selecciona de entre el grupo que consiste en H, CF3, COR9, COOR10, SOR10, SO2R10, CN y NO2; preferentemente R5 se selecciona de entre el grupo que consiste en H, CF3, CN, y NO2 R6 se selecciona de entre el grupo que consiste en OH, Halogeno, -NO2, -N+(Me)3(W'), -I+R11(W'), -O(CH2)n-LG y -(OCH2CH2)m-LG; preferentemente R6 se selecciona de entre el grupo que consiste en OH, halogeno, -N+(Me)a(W'), -O(CH2)n-LG y -(OCH2CH2)m-LG; n es 1-3; y m es 2-3;con la condicion de que si R4 presenta el significado de halogeno, -NO2, -N+(Me)3(W-) o -I+R11(W-), R3 presente el significado de CF3, COR9, COOR10, SOR10, SO2R10, CN o NO2, y con la condicion de que si R6 presenta el significado de halogeno, -NO2, -N (Me)a(W') o -I R(W'), R5 presente el significado de CF3, COR9, COOR10,SOR10, SO2R10, CN o NO2;y una reaccion de fluoracion para obtener compuestos de Formula II,imagen8 en los queR1 es hidrogeno o un grupo protector de amina;R2 es hidrogeno o un grupo protector de carboxilo; en los que por lo menos uno de R1 y R2 no es hidrogeno;R3 se selecciona de entre el grupo que consiste en H, F, CF3, COR9, COOR10, SOR10, SO2R10, CN y NO2; preferentementeR3 se selecciona de entre el grupo que consiste en H, F, CF3, CN, NO2;R7 se selecciona de entre el grupo que consiste en Y, -O(CH2)n-Y, -(OCH2CH2)m-Y, Z, -OCH2-Z; -CH2-CH2-Z, -CH=CH-Z y -C°C-Z;X se selecciona de entre CH o N;Y se selecciona de entre 18F o F;R9 es hidrogeno o alquilo (C1-C6); preferentemente hidrogeno o alquilo (C1-C4), mas preferentemente hidrogeno, metilo, etilo o ferc-butilo;R10 es alquilo (C1-C6); preferentemente alquilo (C1-C4), mas preferentemente metilo, etilo o ferc-butilo;Z es un grupoimagen9 en el que * indica el atomo de conexion de Z;R5 se selecciona de entre el grupo que consiste en H, CF3, COR9, COOR10, SOR10, SO2R10, CN y NO2; preferentemente R5 se selecciona de entre el grupo que consiste en H, CF3, CN, NO2;R8 se selecciona de entre el grupo que consiste en Y, -O(CH2)n-Y y -(OCH2CH2)m-Y; n es 1-3; y m es 2-3;con la condicion de que si R7 presenta el significadoSOR10, SO2R10, CN o NO2, ycon la condicion de que si R8 presenta el significadoSOR10, SO2R10, CN o NO2;y la escision del(de los) grupo(s) protector(es) ola reaccion de los compuestos de Formula I con un reactivo de 18F o F o una unidad estructural de 18F o F y la escision de los grupos protectores para obtener los compuestos de Formula III.de Y, R3 presente el significado de CF3, COR9, COOR10, de Y, R5 presente el significado de CF3, COR9, COOR10,5101520253035 - 6. Procedimiento para elaborar compuestos de Formula III segun la reivindicacion 5,
imagen10 en los queR3 es H, F, CF3, CN o NO2;R7 es Y, -O(CH2)n-Y, -(OCH2CH2)m-Y, Z, -OCH2-Z; -CH2-CH2-Z, -CH=CH-Z o -CeC-Z; X es CH o N;Y es 18F o F;Z es un grupoimagen11 en el que * indica el atomo de conexion de Z; R5 es H, CF3, CN o NO2;R8 es Y, -O(CH2)n-Y o -(OCH2CH2)m-Y; n es 1-3; y m es 2-3,partiendo de compuestos de Formula Iimagen12 en los queR1 es hidrogeno o un grupo protector de amina;R2 es hidrogeno o un grupo protector de carboxilo; en los que por lo menos uno de R1 y R2 no es H;R3 es H, F, CF3, CN y NO2;R4 es OH, halogeno, -N+(MeHW'), -O(CH2)n-LG, -(OCH2CH2)m-LG, Q, -OCH2-Q; -CH2-CH2-Q, -CH=CH-Q y -CeC-Q;X es CH o N;LG es un grupo saliente;W- es CF3(S(O)2O-, anion bromuro y CF3C(O)O-;Q es un grupoimagen13 51015202530354045en el que * indica el atomo de conexion de Q;R5 es H, CF3, CN y NO2;R6 es OH, halogeno, -N+(Me)3(W'), -O(CH2)n-LG y -(OCH2CH2)m-LG; n es 1-3; y m es 2-3;con la condicion de que si R4 presenta el significado de halogeno o -N+(Me)3(W-), R3 presente el significado de CF3, CN o NO2 y con la condicion de que si R6 presenta el significado de halogeno o -N+(Me)3(W-), R5 presente el significado de CF3, CN o NO2;y una reaccion de fluoracion para obtener compuestos de Formula II,imagen14 en los queR1 es hidrogeno o un grupo protector de amina;R2 es hidrogeno o un grupo protector de carboxilo; en los que por lo menos uno de R1 y R2 no es hidrogeno;R3 es H, F, CF3, CN y NO2;R7 es Y, -O(CH2)n-Y, -(OCH2CH2)m-Y, Z, -OCH2-Z; -CH2-CH2-Z, -CH=CH-Z o -CeC-Z; X es CH o N;Y es 18F o F;Z es un grupoimagen15 en el que * indica el atomo de conexion de Z;R5 es H, CF3, CN y NO2;R8 es Y, -O(CH2)n-Y o -(OCH2CH2)m-Y; n es 1-3; y m es 2-3;con la condicion de que si R7 presenta el significado de Y, R3 presente el significado de CF3, CN o NO2, y con la condicion de que si R8 presenta el significado de Y, R5 presente el significado de CF3, CN o NO2; y la escision del(de los) grupo(s) protector(es) ola reaccion de los compuestos de Formula I con un reactivo de 18F o F o una unidad estructural de 18F o F y la escision de los grupos protectores para obtener los compuestos de Formula III. - 7. Compuestos de Formula I:5101520253035404550
imagen16 en los queR1 es hidrogeno o un grupo protector de amina; en los que la expresion “grupo protector de amina”, como se utiliza en la presente memoria por si misma o como parte de otro grupo es conocida por u obvia para un experto en la materia, que se selecciona de entre, pero no se limita a, una clase de grupos protectores, a saber, carbamatos, amidas, imidas, N-alquilaminas, N-arilaminas, iminas, enaminas, boranos, grupos protectores de N-P, N-sulfenilo, N-sulfonilo y N-sililo, y en los que el “grupo protector de amina” es preferentemente carbobenciloxi (Cbz), p-metoxibencilcarbonilo (Moz o MeOZ), ferc-butiloxicarbonilo (BOC), 9- fluorenilmetiloxicarbonilo (FMOC), bencilo (Bn), p-metoxibencilo (PMB), 3,4-dimetoxibencilo (DMPM), p- metoxifenilo (PMP), trifenilmetilo (tritilo), metoxifenildifenilmetilo (MMT), o el grupo amino protegido es un 1,3- dioxo-1,3-dihidro-2H-isoindol-2-ilo (ftalimido) o un grupo azido;R2 es hidrogeno o un grupo protector de carboxilo; en los que la expresion “grupo protector de carboxilo”, como se utiliza en la presente memoria por si misma o como parte de otro grupo es conocida por u obvia para un experto en la materia, que se selecciona de entre, pero no se limita a, una clase de grupos protectores, a saber, esteres, amidas e hidrazidas, en los que el “grupo protector de carboxilo” es preferentemente metilo, etilo, propilo, butilo, ferc-butilo, alilo, bencilo, 4-metoxibencilo o 4-metoxifenilo en los que por lo menos uno de R1 y R2 no es H;R3 se selecciona de entre el grupo que consiste en H, F, CF3, COR9, COOR10, SOR10, SO2R10, CN y NO2; preferentemente, R3 se selecciona de entre el grupo que consiste en H, F, CF3, CN, y NO2;R4 se selecciona de entre el grupo que consiste en OH, halogeno, -NO2, -N+(Me)3(W'), -I+R11(W'), -O(CH2)n- LG, -(OCH2CH2)m-LG, Q, -OCH2-Q; -CH2-CH2-Q, -CH=CH-Q y - CeC-Q; preferentemente R4 se selecciona de entre el grupo que consiste en OH, halogeno, -N+(Me)3(W'), -O(CH2)n-LG, -(OCH2CH2)m-LG, Q, -OCH2-Q; -CH2-CH2-Q, -CH=CH-Q y -CeC-Q;X se selecciona de entre CH o N;LG es un grupo saliente; en los que la expresion “grupo saliente”, como se utiliza en la presente memoria por si misma o como parte de otro grupo, es conocida por u obvia para un experto en la materia, y significa que un atomo o grupo de atomos es separable de una sustancia qufmica mediante un agente nucleofilo, en los que preferentemente el “grupo saliente” es fluoruro, cloruro, bromuro, yoduro, o un grupo saliente de sulfonato, que incluye pero de manera no limitativa metilsulfoniloxi, (4-metilfenil)sulfoniloxi, trifluormetilsulfoniloxi, nonafluorobutilsulfoniloxi, (4-bromofenil)sulfoniloxi, (4-nitrofenil)sulfoniloxi, (2- nitrofenil)sulfoniloxi, (4-isopropilfenil)sulfoniloxi, (2,4,6-tri-isopropil-fenil)-sulfoniloxi, (2,4,6-trimetilfenil)sulfoniloxi, (4-terctbutilfenil)sulfoniloxi, (4-metoxifenil)sulfoniloxi;R9 es hidrogeno o alquilo (C1-C6); preferentemente hidrogeno o alquilo (C1-C4), mas preferentemente hidrogeno, metilo, etilo o ferc-butilo;R10 es alquilo (C1-C6); preferentemente alquilo (C1-C4), mas preferentemente metilo, etilo o ferc-butilo; R11 se selecciona de entre el grupo que consiste en fenilo, (4-metil)fenilo, (4-metoxi)fenilo, 2-furanilo y 2-tienilo; preferentemente, R11 se selecciona de entre el grupo que consiste en (4-metoxi)fenilo y 2-tienilo;W- se selecciona de entre el grupo que comprende CF3(S(O)2O', anion yoduro, anion bromuro y CF3C(O)O-; preferentemente W- se selecciona de entre el grupo CF3(S(O)2O-, anion bromuro y CF3C(O)O-;Q es un grupo51015202530354045505560imagen17 en el que * indica el atomo de conexion de Q;R5 se selecciona de entre el grupo que consiste en H, CF3, COR9, COOR10, SOR10, SO2R10, CN y NO2; preferentemente R5 se selecciona de entre el grupo que consiste en H, CF3, CN, y NO2R6 se selecciona de entre el grupo que consiste en OH, halogeno, -NO2, -N+(Me)3(W'), -I+R11(W'), -O(CH2)n- LG y -(OCH2CH2)m-LG; preferentemente R6 se selecciona de entre el grupo que consiste en OH, halogeno, -N+(Me)3(W-), -O(CH2)n-LG y -(OCH2CH2)m-LG;n es 1-3;y m es 2-3;con la condicion de que si R4 presenta el significado de halogeno, -NO2, -N+(Me)3(W-) o -I+R11(W-), R3 presente el significado de CF3, COR9, COOR10, SOR10, SO2R10, CN o NO2, ycon la condicion de que si R6 presenta el significado de halogeno, -NO2, -N+(Me)3(W-) o -I+R11(W-), R5 presente el significado de CF3, COR9, COOR10, SOR10, SO2R10, CN o NO2;incluyendo isomeros E y Z y diastereomeros, mezclas de los mismos, y cualquier sal farmaceuticamente aceptable o complejo de los mismos. - 8. Compuestos segun la reivindicacion 7,en los queR1 es hidrogeno o un grupo protector de amina; en los que la expresion “grupo protector de amina”, como se utiliza en la presente memoria por si misma o como parte de otro grupo, es conocida por u obvia para un experto en la materia, que se selecciona de entre, pero no se limita a, una clase de grupos protectores, a saber, carbamatos, amidas, imidas, N-alquilaminas, N-arilaminas, iminas, enaminas, boranos, grupos protectores de N-P, N-sulfenilo, N-sulfonilo y N-sililo, en los que el “grupo protector de amina” es preferentemente carbobenciloxi (Cbz), p-metoxibencilcarbonilo (Moz o MeOZ), terc-butiloxicarbonilo (BOC), 9- fluorenilmetiloxicarbonilo (FMOC), bencilo (Bn), p-metoxibencilo (PMB), 3,4-dimetoxibencilo (DMPM), p- metoxifenilo (PMP), trifenilmetilo (tritilo), metoxifenildifenilmetilo (MMT), o el grupo amino protegido es un 1,3- dioxo-1,3-dihidro-2H-isoindol-2-ilo (ftalimido) o un grupo azido; R2 es hidrogeno o un grupo protector de carboxilo; en los que la expresion “grupo protector de carboxilo”, como se utiliza en la presente memoria por si misma o como parte de otro grupo es conocida por u obvia para un experto en la materia, que se selecciona de entre, pero no se limita a, una clase de grupos protectores, a saber, esteres, amidas e hidrazidas, en los que el “grupo protector de carboxilo” es preferentemente metilo, etilo, propilo, butilo, terc- butilo, alilo, bencilo, 4-metoxibencilo o 4-metoxifenilo.en los que por lo menos uno de R1 y R2 no es H;R3 es H, F, CF3, CN y NO2;R4 es OH, halogeno, -N+(Me)a(W'), -O(CH2)n-LG, -(OCH2CH2)m-LG, Q, -OCH2-Q; -CH2-CH2-Q, -CH=CH-Q y -CeC-Q;X es CH o N;LG es un grupo saliente; en los que la expresion “grupo saliente”, como se utiliza en la presente memoria por si misma o como parte de otro grupo es conocida por u obvia para un experto en la materia, y significa que un atomo o grupo de atomos es separable de una sustancia qufmica mediante un agente nucleofilo, en los que preferentemente el “grupo saliente” es fluoruro, cloruro, bromuro, yoduro, o un grupo saliente de sulfonato, incluyendo pero de manera no limitativa metilsulfoniloxi, (4-metilfenil)sulfoniloxi, trifluormetilsulfoniloxi, nonafluorobutilsulfoniloxi, (4-bromofenil)sulfoniloxi, (4-nitrofenil)sulfoniloxi, (2-nitrofenil)sulfoniloxi, (4- isopropilfenil)sulfoniloxi, (2,4,6-tri-isopropil-fenil)-sulfoniloxi, (2,4,6-trimetilfenil)sulfoniloxi, (4- tercbutilfenil)sulfoniloxi, (4-metoxifenil)sulfoniloxi;W- es CF3(S(O)2O-, anion bromuro y CF3C(O)O-;Q es un grupo510152025303540455055
imagen18 en el que * indica el atomo de conexion de Q;R5 es H, CF3, CN y NO2;R6 es OH, halogeno, -N+(Me)3(W'), -O(CH2)n-LG y -(OCH2CH2)m-LG; n es 1-3; y m es 2-3;con la condicion de que si R4 presenta el significado de halogeno o -N+(Me)3(W-), R3 presente el significado de CF3, CN o NO2, ycon la condicion de que si R6 presenta el significado de halogeno o -N+(Me)3(W-), R5 presente el significado de CF3, CN o NO2;incluyendo isomeros E y Z y diastereomeros y mezclas de los mismos. - 9. Compuestos segun la reivindicacion 7 u 8, en los queR1 es hidrogeno o un grupo protector de amina seleccionado de entre el grupo que comprende terc- butiloxicarbonilo (BOC), carbobenciloxi (Cbz) y 9-fluorenilmetiloxicarbonilo (FMOC);R2 es hidrogeno o un grupo protector de carboxilo seleccionado de entre el grupo que comprende metilo, etilo, propilo, terc-butilo, bencilo y o-metoxibencilo; en los que por lo menos uno de R1 y R2 no es H;R3 es H, F, CF3, CN y NO2;R4 es OH, halogeno, -N+(Me)a(W'), -O(CH2)n-LG, -(OCH2CH2)m-LG, Q, -OCH2-Q;-CH2-CH2-Q, -CH=CH-Q y -CeC-Q;X es CH o N;LG es un grupo saliente seleccionado de entre el grupo que comprende metilsulfoniloxi y (4- metilfenil)sulfoniloxi;W- es CF3(S(O)2O-, anion bromuro y CF3C(O)O-;Q es un grupo
imagen19 en el que * indica el atomo de conexion de Q;R5 es H, CF3, CN y NO2;R6 es OH, halogeno, -N+(MeHW'), -O(CH2)n-LG y -(OCH2CH2)m-LG; n es 1-3; y m es 2-3;con la condicion de que si R4 presenta el significado de halogeno o -N+(Me)3(W-), R3 presente el significado de CF3, CN o NO2, y con la condicion de que si R6 presenta el significado de halogeno o -N+(Me)3(W-), R5 presente el significado de CF3, CN o NO2;incluyendo isomeros E y Z y diastereomeros y mezclas de los mismos. - 10. Compuestos segun cualquiera de las reivindicaciones 7 a 9, en los queR1 es terc-butiloxicarbonilo (BOC);R2 es metilo o terc- butilo;en los que por lo menos uno de R1 y R2 no es H;R3 es H;R4 es -O(CH2)n-LG;5101520253035404550556065X es N;LG es metilsulfoniloxi y (4-metilfenil)sulfoniloxi; y n es 1-3;incluyendo isomeros E y Z y diastereomeros y mezclas de los mismos.
- 11. Compuestos de Formula I segun la reivindicacion 7:4-{3-[(3R)-3-({(7S)-3-metoxi-1-[3-(2-{[(4-metilfenil)sulfonil]oxi}etoxi)-fenil]-3-oxopropil}carbamoil)piperidin-1-il]-3- oxopropil}piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo,4-{3-[(3R)-3-({3-metoxi-1-[4-(2-{[(4-metilfenil)sulfonil]oxi}etoxi)fenil]-3-oxopropil}carbamoil)piperidin-1-il]-3- oxopropil}piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo,4-{3-[(3R)-3-({(7S)-3-ferc-butoxi-1-[4-(2-{[(4-metilfenil)sulfonil]oxi}etoxi)fenil]-3-oxopropil}carbamoil)piperidin-1-il]-3- oxopropil}piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo,4- {3-[(3R)-3-({(7S)-3-metoxi-1-[5-(2-{[(4-metilfenil)sulfonil]oxi}etoxi)piridin-3-il]-3-oxopropil}carbamoil)piperidin-1- il]-3-oxopropil}piperidin-1 -carboxilato de ferc-butilo,4-{3-[(3R)-3-({(1S)-3-ferc-butoxi-1-[5-(2-{[(4-metilfenil)sulfonil]oxi}etoxi)piridin-3-il]-3-oxopropil}carbamoil)piperidin- 1 -il]-3-oxopropil}piperidin-1 -carboxilato de ferc-butilo,4-{3-[(3R)-3-{[3-metoxi-1-{5-[4-(2-{[(4-metilfenil)sulfonil]oxi}etoxi)-fenil]piridin-3-il}-3-oxopropil]carbamoil}piperidin- 1 -il]-3-oxopropil}piperidin-1 -carboxilato de ferc-butilo,4-{3-[(3R)-3-{[(7S)-3-ferc-butoxi-1-{5-[4-(2-{[(4-metilfenil)sulfonil]oxi}-etoxi)fenil]piridin-3-il}-3- oxopropil]carbamoil}piperidin-1-il]-3-oxopropil} piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo,4-{3-[(3R)-3-({1-[5-(4-cloro-3-cianofenil)piridin-3-il]-3-metoxi-3-oxopropil}carbamoil)piperidin-1-il]-3- oxopropil}piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo,4-{3-[(3R)-3-{[(7S)-1-{5-[(3-bromo-4-cianobencil)oxi]piridin-3-il}-3-metoxi-3-oxopropil]carbamoil}piperidin-1-il]-3- oxopropil}piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo,4-{3-[(3R)-3-{[3-metoxi-1-{5-[3-(2-{[(4-metilfenil)sulfonil]oxi}etoxi)-fenil]piridin-3-il}-3-oxopropil]carbamoil}piperidin- 1 -il]-3-oxopropil}piperidin-1 -carboxilato de ferc-butilo,4-{3-[(3R)-3-{[3-metoxi-1-{5-[2-(2-{[(4-metilfenil)sulfonil]oxi}etoxi)-fenil]piridin-3-il}-3-oxopropil]carbamoil}piperidin- 1 -il]-3-oxopropil}piperidin-1 -carboxilato de ferc-butilo,4-{3-[(3R)-3-({1-[5-(4-cloro-3-nitrofenil)piridin-3-il]-3-metoxi-3-oxopropil}carbamoil)piperidin-1-il]-3- oxopropil}piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo,4-{3-[(3R)-3-({1-[5-fluoro-4'-(2-{[(4-metilfenil)sulfonil]oxi}etoxi)bifenil-3-il]-3-metoxi-3-oxopropil}carbamoil)piperidin- 1 -il]-3-oxopropil}piperidin-1 -carboxilato de ferc-butilo,4-{3-[(3R)-3-{[(7S)-3-ferc-butoxi-1-(5-{[4-(2-{[(4-metilfenil)sulfonil]oxi}-etoxi)fenil]etinil}piridin-3-il)-3- oxopropil]carbamoil}piperidin-1-il]-3-oxopropil}piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo,4-{3-[(3R)-3-{[(7S)-3-ferc-butoxi-1-(5-{[3-(2-{[(4-metilfenil)sulfonil]oxi}-etoxi)fenil]etinil}piridin-3-il)-3- oxopropil]carbamoil}piperidin-1-il]-3-oxopropil}piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo,4-{3-[(3R)-3-{[(7S)-3-ferc-butoxi-1-(5-{2-[4-(2-{[(4-metilfenil)sulfonil]oxi}etoxi)fenil]etil}piridin-3-il)-3- oxopropil]carbamoil}piperidin-1-il]-3-oxopropil}piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo,4-{3-[(3R)-3-{[(7S)-3-ferc-butoxi-1-(5-{2-[3-(2-{[(4-metilfenil)sulfonil]oxi}etoxi)fenil]etil}piridin-3-il)-3- oxopropil]carbamoil}piperidin-1-il]-3-oxopropil}piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo,4-[3-((3R)-3-{[1-(4-hidroxifenil)-3-metoxi-3-oxopropil]carbamoil}piperidin-1-il)-3-oxopropil]piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo,4-{3-[(3R)-3-({(7S)-1-[3-hidroxifenil]-3-metoxi-3-oxopropil}carbamoil)-piperidin-1-il]-3-oxopropil}piperidin-1- carboxilato de ferc-butilo,4-{3-[(3R)-3-({(7S)-1-[5-(hidroxi)piridin-3-il]-3-metoxi-3-oxopropil}carbamoil)piperidin-1-il]-3-oxopropil}piperidin-1-510152025303540455055carboxilato de ferc-butilo4-{3-[(3R)-3-({1-[5-(4-hidroxifenil)piridin-3-il]-3-metoxi-3-oxopropil}carbamoil)piperidin-1-il]-3-oxopropil}piperidin-1- carboxilato de ferc-butilo,4-{3-[(3R)-3-({1-[5-(2-hidroxifenil)piridin-3-il]-3-metoxi-3-oxopropil}carbamoil)piperidin-1-il]-3-oxopropil}piperidin-1- carboxilato de ferc-butilo,4-{3-[(3R)-3-{[(1-(5-fluoro-4’-hidroxibifenil-3-il)-3-metoxi-3-oxopropil]carbamoil}piperidin-1-il]-3-oxopropil}piperidin- 1-carboxilato de ferc-butilo,4-{3-[(3R)-3-{[(1S)-3-ferc-butoxi-1-(4-hidroxifenil)-3-oxopropil]carbamoil}piperidin-1-il]-3-oxopropil}piperidin-1- carboxilato de ferc-butilo,4-{3-[(3R)-3-{[(1S)-3-ferc-butoxi-1-(5-hidroxipiridin-3-il)-3-oxopropil]carbamoil}piperidin-1-il]-3-oxopropil}piperidin- 1-carboxilato de ferc-butilo,4-{3-[(3R)-3-({(1S)-3-ferc-butoxi-1-[5-(4-hidroxifenil)piridin-3-il]-3-oxopropil}carbamoil)piperidin-1-il]-3- oxopropil}piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo,4-(3-{(3R)-3-[(3-ferc-butoxi-1-{5-[(4-hidroxifenil)etinil]piridin-3-il}-3-oxopropil)carbamoil]piperidin-1-il}-3- oxopropil)piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo,4-{3-[(3R)-3-{[('/S)-3-ferc-butoxi-1-{5-[(3-hidroxifenil)etinil]piridin-3-il}-3-oxopropil]carbamoil}piperidin-1-il]-3- oxopropil}piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo,4-(3-{(3R)-3-[(3-ferc-butoxi-1-{5-[2-(4-hidroxifenil)etil]piridin-3-il}-3-oxopropil)carbamoil]piperidin-1-il}-3- oxopropil)piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo,4-(3-{(3R)-3-[(3-terc-butoxi-1-{5-[2-(3-hidroxifenil)etil]piridin-3-il}-3-oxopropil)carbamoil]piperidin-1-il}-3- oxopropil)piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo,
- 12. Compuestos de Formula II:
imagen20 en los queR1 es hidrogeno o un grupo protector de amina; en los que la expresion “grupo protector de amina”, como se utiliza en la presente memoria por si misma o como parte de otro grupo, es conocida por u obvia para un experto en la materia, que se selecciona de entre, pero no se limita a, una clase de grupos protectores, a saber, carbamatos, amidas, imidas, N-alquilaminas, N-arilaminas, iminas, enaminas, boranos, grupos protectores de N-P, N-sulfenilo, N-sulfonilo y N-sililo, en los que el “grupo protector de amina” es preferentemente carbobenciloxi (Cbz), p-metoxibencilcarbonilo (Moz o MeOZ), ferc-butiloxicarbonilo (BOC), 9- fluorenilmetiloxicarbonilo (FMOC), bencilo (Bn), p-metoxibencilo (PMB), 3,4-dimetoxibencilo (DMPM), p- metoxifenilo (PMP), trifenilmetilo (tritilo), metoxifenildifenilmetilo (MMT) o el grupo amino protegido es un 1,3- dioxo-1,3-dihidro-2H-isoindol-2-ilo (ftalimido) o un grupo azido;R2 es hidrogeno o un grupo protector de carboxilo; en los que la expresion “grupo protector de carboxilo”, como se utiliza en la presente memoria por si misma o como parte de otro grupo, es conocida por u obvia para un experto en la materia, que se selecciona de entre, pero no se limita a, una clase de grupos protectores, a saber, esteres, amidas e hidrazidas, en los que el “grupo protector de carboxilo” es preferentemente metilo, etilo, propilo, butilo, ferc-butilo, alilo, bencilo, 4-metoxibencilo o 4-metoxifenilo; en los510152025303540455055que por lo menos uno de R1 y R2 no es hidrogeno;R3 se selecciona de entre el grupo que consiste en H, F, CF3, COR9, COOR10, SOR10, SO2R10, CN y NO2; preferentemente R3 se selecciona de entre el grupo que consiste en H, F, CF3, CN, NO2;R7 se selecciona de entre el grupo que consiste en Y, -O(CH2)n-Y, -(OCH2CH2)m-Y, Z, -OCH2-Z; -CH2-CH2-Z, -CH=CH-Z y -C°C-Z;X se selecciona de entre CH o N;Y se selecciona de entre 18F o F;R9 es hidrogeno o alquilo (C1-C6); preferentemente hidrogeno o alquilo (C1-C4), mas preferentemente hidrogeno, metilo, etilo o ferc-butilo;R10 es alquilo (C1-C6); preferentemente alquilo (C1-C4), mas preferentemente metilo, etilo o ferc-butilo;Z es un grupoimagen21 en el que * indica el atomo de conexion de Z;R5 se selecciona de entre el grupo que consiste en H, CF3, COR9, COOR10, SOR10, SO2R10, CN y NO2; preferentemente R5 se selecciona de entre el grupo que consiste en H, CF3, CN, NO2;R8 se selecciona de entre el grupo que consiste en Y, -O(CH2)n-Y y -(OCH2CH2)m-Y; n es 1-3; y m es 2-3;con la condicion de que si R7 presenta el significado de Y, R3 presente el significado de CF3, COR9, COOR10,SOR10, SO2R10, CN o NO2, ycon la condicion de que si R8 presenta el significado de Y, R5 presente el significado de CF3, COR9, COOR10,SOR10, SO2R10, CN o NO2;incluyendo isomeros E y Z y diastereomeros, mezclas de los mismos, y cualquier sal farmaceuticamente aceptable o complejo de los mismos. - 13. Compuestos segun la reivindicacion 12,en los queR1 es hidrogeno o un grupo protector de amina; en los que la expresion “grupo protector de amina”, como se utiliza en la presente memoria por si misma o como parte de otro grupo, es conocida por u obvia para un experto en la materia, que se selecciona de entre, pero no se limita a, una clase de grupos protectores, a saber, carbamatos, amidas, imidas, N-alquilaminas, N-arilaminas, iminas, enaminas, boranos, grupos protectores de N-P, N-sulfenilo, N-sulfonilo y N-sililo, y en los que el “grupo protector de amina” es preferentemente carbobenciloxi (Cbz), p-metoxibencilcarbonilo (Moz o MeOZ), ferc-butiloxicarbonilo (BOC), 9- fluorenilmetiloxicarbonilo (FMOC), bencilo (Bn), p-metoxibencilo (PMB), 3,4-dimetoxibencilo (DMPM), p- metoxifenilo (PMP), trifenilmetilo (tritilo), metoxifenildifenilmetilo (MMT), o el grupo amino protegido es un 1,3- dioxo-1,3-dihidro-2H-isoindol-2-ilo (ftalimido) o un grupo azido;R2 es hidrogeno o un grupo protector de carboxilo; en los que la expresion “grupo protector de carboxilo”, como se utiliza en la presente memoria por si misma o como parte de otro grupo, es conocida por u obvia para un experto en la materia, que se selecciona de entre, pero no se limita a, una clase de grupos protectores, a saber, esteres, amidas e hidrazidas, en los que el “grupo protector de carboxilo” es preferentemente metilo, etilo, propilo, butilo, ferc-butilo, alilo, bencilo, 4-metoxibencilo o 4-metoxifenilo; en los que por lo menos uno de R1 y R2 no es hidrogeno;R3 es H, F, CF3, CN y NO2;R7 es Y, -O(CH2)n-Y, -(OCH2CH2)m-Y, Z, -OCH2-Z; -CH2-CH2-Z, -CH=CH-Z o -CeC-Z;X es CH o N;Y es 18F o F;Z es un grupo
imagen22 510152025303540455055en el que * indica el atomo de conexion de Z;R5 es H, CF3, CN y NO2;R8 es Y, -O(CH2)n-Y o -(OCH2CH2)m-Y; n es 1-3; y m es 2-3;con la condicion de que si R7 presenta el significado de Y, R3 presente el significado de CF3, CN o NO2, y con la condicion de que si R8 presenta el significado de Y, R5 presente el significado de CF3, CN o NO2; incluyendo isomeros E y Z y diastereomeros y mezclas de los mismos. - 14. Compuestos segun la reivindicacion 12 o 13,en los queR es hidrogeno o un grupo protector de amina seleccionado de entre el grupo que comprende terc- butiloxicarbonilo (BOC), carbobenciloxi (Cbz) y 9-fluorenilmetiloxicarbonilo (FMOC);R2 es hidrogeno o un grupo protector de carboxilo seleccionado de entre el grupo que comprende metilo, etilo, propilo, terc-butilo, bencilo y p-metoxibencilo; en los que por lo menos uno de R1 y R2 no es hidrogeno;R7 es Y, -O(CH2)n-Y, X es N;Y es 18F o F;Z es un grupo■(OCH2CH2)m-Y, Z, -OCH2-Z; -CH2-CH2-Z, -CH=CH-Z o -C°C-Z;R es H, F, CF3, CN y NO2;
imagen23 en el que * indica el atomo de conexion de Z; R5 es H, CF3, CN y NO2;R8 es Y, -O(CH2)n-Y o -(OCH2CH2)m-Y; n es 1-3; y m es 2-3;con la condicion de que si R7 presenta el significado de Y, R3 presente el significado de CF3, CN o NO2 y con la condicion de que si R8 presenta el significado de Y, R5 presente el significado de CF3, CN o NO2; incluyendo isomeros E y Z y diastereomeros y mezclas de los mismos. - 15. Compuestos segun cualquiera de las reivindicaciones 12 a 14, en los queR1 es terc-butiloxicarbonilo (BOC);R2 es metilo o terc- butilo;en los que por lo menos uno de R1 y R2 no es hidrogeno; R3 es H;R7 es -O(CH2)n-Y;X es N;Y es 18F o F;Z es un grupo
imagen24 en el que * indica el atomo de conexion de Z; R5 es H, CF3, CN y NO2;R8 es Y, -O(CH2)n-Y o -(OCH2CH2)m-Y; n es 1-3; y m es 2-3;5101520253035404550556065 - 16. Compuestos de Formula II segun la reivindicacion 12:acido 3-({[(3R)-1-{3-[1-(ferc-butoxicarbonil}piperidin-4-il]propanoil}piperidin-3-il]carbonil}-amino)-3-[3-(2-fluoroetoxi)fenil]propanoico,acido 3-({[(3R)-1-{3-[1-(ferc-butoxicarbonil)piperidin-4-il]propanoil}piperidin-3-il]carbonil}-amino)-3-[4-(2-fluoroetoxi)fenil]propanoico,4-{3-[(3R)-3-({(1S)-3-terc-butoxi-1-[5-(2-fluoroetoxi)piridin-3-il]-3-oxopropil}carbamoil)piperidin-1-il]-3- oxopropil}piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo,4-{3-[(3R)-3-{[(7S)-1-(3-{2-[2-(2-fluoroetoxi)etoxi]etoxi}fenil)-3-metoxi-3-oxopropil]carbamoil}piperidin-1-il]-3- oxopropil}piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo,4-{3-[(3R)-3-{[(7S)-1-(5-{2-[2-(2-fluoroetoxi)etoxi]etoxi}piridin-3-il)-3-metoxi-3-oxopropil]carbamoil}piperidin-1-il]-3- oxopropil}piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo,4-{3-[(3R)-3-{[1-{5-[3-(2-fluoroetoxi)fenil]piridin-3-il}-3-metoxi-3-oxopropil]carbamoil}piperidin-1-il]-3- oxopropil}piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo,acido 3-({[(3R)-1-{3-[1-(ferc-butoxicarbonil)piperidin-4-il]propanoil}piperidin-3-il]carbonil}-amino)-3-{5-[3-(2-fluoroetoxi)fenil]piridin-3-il}propanoico,4-(3-{(3R)-3-[(1-{5-[4-(2-fluoroetoxi)fenil]piridin-3-il}-3-metoxi-3-oxopropil)carbamoil]piperidin-1-il}-3- oxopropil)piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo,acido 3-({[(3R)-1-{3-[1-(ferc-butoxicarbonil)piperidin-4-il]propanoil}piperidin-3-il]carbonil}amino)-3-{5-[4-(2-fluoroetoxi)fenil]piridin-3-il}propanoico,4-(3-{(3R)-3-[(1-{5-[2-(2-fluoroetoxi)fenil]piridin-3-il}-3-metoxi-3-oxopropil)carbamoil]piperidin-1-il}-3- oxopropil)piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo,acido 3-({[(3R)-1-{3-[1-(ferc-butoxicarbonil)piperidin-4-il]propanoil}piperidin-3-il]-carbonil}amino)-3-{5-[2-(2-fluoroetoxi)fenil]piridin-3-il}propanoico,4-{3-[(3R)-3-({1-[5-(3-ciano-4-fluorofenil)piridin-3-il]-3-metoxi-3-oxopropil}carbamoil)piperidin-1-il]-3- oxopropil}piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo,acido 3-({[(3R)-1-{3-[1-(ferc-butoxicarbonil)piperidin-4-il]propanoil}piperidin-3-il]carbonil}amino)-3-[5-(3-ciano-4-fluorofenil)piridin-3-il]propanoico,4-{3-[(3R)-3-({1-[5-(4-ciano-3-fluorofenil)piridin-3-il]-3-metoxi-3-oxopropil}carbamoil)piperidin-1-il]-3- oxopropil}piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo,acido 3-({[(3R)-1-{3-[1-(ferc-butoxicarbonil)piperidin-4-il]propanoil}piperidin-3-il]carbonil}amino)-3-[5-(4-ciano-3-fluorofenil)piridin-3-il]propanoico,4-{3-[(3R)-3-({1-[5-(4-fluoro-3-nitrofenil)piridin-3-il]-3-metoxi-3-oxopropil}carbamoil)piperidin-1-il]-3- oxopropil}piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo,acido 3-({[(3R)-1-{3-[1-(ferc-butoxicarbonil)piperidin-4-il]propanoil}piperidin-3-il]carbonil}amino)-3-[5-(4-fluoro-3-nitrofenil)piridin-3-il]propanoico,4-{3-[(3R)-3-{[(7S)-1-{5-[(3-ciano-4-fluorobencil)oxi]piridin-3-il}-3-metoxi-3-oxopropil]carbamoil}piperidin-1-il]-3- oxopropil}piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo,4-{3-[(3R)-3-{[(7S)-1-{5-[(4-ciano-3-fluorobencil)oxi]piridin-3-il}-3-metoxi-3-oxopropil]carbamoil}piperidin-1-il]-3- oxopropil}piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo,4-{3-[(3R)-3-{[(7S)-3-ferc-butoxi-1-(5-{[4-(2-fluoroetoxi)fenil]etinil}-piridin-3-il)-3-oxopropil]carbamoil}piperidin-1-il]- 3-oxopropil}piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo,51015202530354045505560654-{3-[(3E)-3-({1-[5-fluoro-4’-(2-fluoroetoxi)bifenil-3-il]-3-metoxi-3-oxopropil}carbamoil)piperidin-1-il]-3- oxopropil}piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo,acido 3-({[(3E)-1-{3-[1-(ferc-butoxicarbonil)piperidin-4-il]propanoil}piperidin-3-il]carbonil}amino)-3-[5-fluoro-4’-(2-fluoroetoxi)bifenil-3-il]propanoico,4-{3-[(3R)-3-{[(1S)-3-ferc-butoxi-1-({[4-(2-fluoroetoxi)fenil]etil}piridin-3-il)-3-oxopropil]carbamoil}piperidin-1-il]-3- oxopropil}piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo,4-{3-[(3R)-3-{[(1S)-3-ferc-butoxi-1-({[3-(2-fluoroetoxi)fenil]etil}piridin-3-il)-3-oxopropil]carbamoil}piperidin-1-il]-3- oxopropil}piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo,(E/Z) 4-{3-[(3E)-3-{[(7S)-3-ferc-butoxi-1-({[3-(2-fluoroetoxi)fenil]etenil}-piridin-3-il)3-oxopropil]carbamoil}piperidin- 1 -il]-3-oxopropil}piperidin-1 -carboxilato de ferc-butilo,4-{3-[(3E)-3-{[(1S)-1-{3-[2-[18F]fluoroetoxi]fenil}-3-metoxi-3-oxopropil]carbamoil}piperidin-1-il]-3- oxopropil}piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo,acido (3S)-3-({[(3E)-1-{3-[1-(ferc-butoxicarbonil)piperidin-4-il]propanoil}piperidin-3-il]-carbonil}amino)-3-{3-[2-[18F]fluoroetoxi]fenil}propanoico,4-{3-[(3E)-3-({1-[4-(2-[18F]fluoroetoxi)fenil]-3-metoxi-3-oxopropil}-carbamoil)piperidin-1-il]-3-oxopropil}piperidin-1- carboxilato de ferc-butilo,acido 3-({[(3R)-1-{3-[1-(ferc-butoxicarbonil)piperidin-4-il]propanoil}piperidin-3-il]carbonil}amino)-3-{4-[2-[18F]fluoroetoxi]fenil}propanoico,4-{3-[(3E)-3-({(1S)-3-ferc-butoxi-1-[5-(2-[18F]fluoroetoxi}piridin-3-il]-3-oxopropil}carbamoil)piperidin-1-il]-3- oxopropil}piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo,4-{3-[(3E)-3-({(1S)-1-[5-(2-[18F]fluoroetoxi)piridin-3-il]-3-metoxi-3-oxopropil}carbamoil)piperidin-1-il]-3- oxopropil}piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo,acido (3S)-3-({[(3E)-1-{3-[1-(ferc-butoxicarbonil)piperidin-4-il]propanoil}piperidin-3-il]carbonil}amino)-3-{5-[2-[18F]fluoroetoxi]piridin-3-il}propanoico,4-(3-{(3E)-3-[(1-{5-[2-[18F]fluoroetoxi]piridin-3-il}-3-metoxi-3-oxopropil)carbamoil]piperidin-1-il}-3- oxopropil)piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo,acido 3-({[(3R)-1-{3-[1-(ferc-butoxicarbonil)piperidin-4-il]propanoil}piperidin-3-il]-carbonil}amino)-3-{5-[2-[18F]fluoroetoxi]piridin-3-il}propanoico,4-{3-[(3R)-3-{[(1S)-1-(5-{4-[2-[18F]fluoroetoxi]fenil}piridin-3-il)-3-metoxi-3-oxopropil]carbamoil}piperidin-1-il]-3- oxopropil}piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo,acido (3S)-3-({[(3R)-1-{3-[1-(ferc-butoxicarbonil)piperidin-4-il]propanoil}piperidin-3-il]-carbonil}amino)-3-(5-{4-[2-[18F]fluoroetoxi]fenil}piridin-3-il)propanoico,4-{3-[(3E)-3-{[(1S)-3-ferc-butoxi-1-(5-{4-[2-[18F]fluoroetoxi]fenil}piridin-3-il)-3-oxopropil]carbamoil}piperidin-1-il]-3- oxopropil}piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo,4-(3-{(3R)-3-[(1-{5-[3-ciano-4-[18F]fluorofenil]piridin-3-il}-3-metoxi-3-oxopropil)carbamoil]piperidin-1-il}-3- oxopropil)piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo,acido 3-({[(3R)-1-{3-[1-(ferc-butoxicarbonil)piperidin-4-il]propanoil}piperidin-3-il]carbonil}amino)-3-[5-(3-ciano-4-[18F]fluorofenil)piridin-3-il]propanoico,4-(3-{(3E)-3-[(1-{5-[4-ciano-3-[18F]fluorofenil]piridin-3-il}-3-metoxi-3-oxopropil)carbamoil]piperidin-1-il}-3- oxopropil)piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo,acido 3-({[(3R)-1-{3-[1-(ferc-butoxicarbonil)piperidin-4-il]propanoil}piperidin-3-il]carbonil}amino)-3-{5-[4-ciano-3-[18F]fluorofenil]piridin-3-il}propanoico,5101520254-{3-[(3R)-3-{[(7S)-3-ferc-butoxi-1-(5-{[3-(2-[18F]fluoroetoxi)fenil]etinil}piridin-3-il)-3-oxopropil]carbamoil}piperidin-1- il]-3-oxopropil}piperidin-1 -carboxilato de ferc-butilo,4-{3-[(3R)-3-{[(7S)-3-terc-butoxi-1-({[4-(2-[18F]fluoroetoxi)fenil]etil}piridin-3-il)-3-oxopropil]carbamoil}piperidin-1-il]-3- oxopropil}piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo,4- {3-[(3R)-3-{[(1S)-3-ferc-butoxi-1-({[3-(2-[18F]fluoroetoxi)fenil]etil}piridin-3-il)3-oxopropil]carbamoil}piperidin-1-il]-3- oxopropil}piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo,4-{3-[(3R)-3-({1-[3-(2-{2-[2-[18F]fluoroetoxi]etoxi}etoxi)fenil]-3-metoxi-3-oxopropil}carbamoil)piperidin-1-il]-3- oxopropil}piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo,acido 3-({[(3R)-1-{3-[1-(ferc-butoxicarbonil)piperidin-4-il]propanoil}piperidin-3-il]carbonil}-amino)-3-[3-(2-{2-[2-[18F]fluoroetoxi]etoxi}etoxi)fenil]propanoico,
- 17. Utilizacion de los compuestos de Formula III o las mezclas de los mismos para la elaboracion de agentes de diagnostico, especialmente para la formacion de imagenes de trombos.
- 18. Kit que comprende un vial sellado que contiene una cantidad predeterminada de un compuesto de Formula I segun cualquiera de las reivindicaciones 7 a 11, estereoisomeros del mismo y sus mezclas, y sales adecuadas de bases y acidos inorganicos u organicos del mismo, hidratos, complejos, esteres, amidas, y solvatos del mismo.
Applications Claiming Priority (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| EP11075195 | 2011-08-17 | ||
| EP11075195 | 2011-08-17 | ||
| PCT/EP2012/003583 WO2013023795A1 (en) | 2011-08-17 | 2012-08-17 | Compounds for binding to the platelet specific glycoprotein iib/iiia and their use for imaging of thrombi |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| ES2621379T3 true ES2621379T3 (es) | 2017-07-03 |
Family
ID=46724333
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| ES12750331.6T Active ES2621379T3 (es) | 2011-08-17 | 2012-08-17 | Compuestos para la unión a la glicoproteína IIb/IIIa específica de las plaquetas y su utilización para la formación de imágenes de trombos |
Country Status (22)
| Country | Link |
|---|---|
| US (2) | US9345793B2 (es) |
| EP (1) | EP2744802B1 (es) |
| JP (2) | JP6243335B2 (es) |
| KR (1) | KR101948362B1 (es) |
| CN (1) | CN103906743B (es) |
| AU (1) | AU2012297137B2 (es) |
| BR (1) | BR112014003366B1 (es) |
| CA (1) | CA2845477C (es) |
| DK (1) | DK2744802T3 (es) |
| ES (1) | ES2621379T3 (es) |
| HK (1) | HK1197064A1 (es) |
| HR (1) | HRP20170464T1 (es) |
| IL (1) | IL230854A (es) |
| MX (1) | MX352546B (es) |
| MY (1) | MY174617A (es) |
| NZ (1) | NZ620635A (es) |
| PL (1) | PL2744802T3 (es) |
| PT (1) | PT2744802T (es) |
| RU (1) | RU2597425C2 (es) |
| SG (1) | SG2014011225A (es) |
| SI (1) | SI2744802T1 (es) |
| WO (1) | WO2013023795A1 (es) |
Families Citing this family (13)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2013023795A1 (en) * | 2011-08-17 | 2013-02-21 | Piramal Imaging Sa | Compounds for binding to the platelet specific glycoprotein iib/iiia and their use for imaging of thrombi |
| KR101493571B1 (ko) * | 2012-12-24 | 2015-02-13 | (주)엘지하우시스 | 저방사 투명 적층체 및 이를 포함하는 건축 자재 |
| JP6099045B2 (ja) * | 2013-04-30 | 2017-03-22 | 国立大学法人京都大学 | トリアゾロピリミジン誘導体化合物 |
| JP5847140B2 (ja) * | 2013-08-29 | 2016-01-20 | 国立大学法人東北大学 | 慢性血栓塞栓性肺高血圧症の検査方法 |
| JP2017506633A (ja) * | 2014-02-11 | 2017-03-09 | バイエル・ファルマ・アクティエンゲゼルシャフト | 血小板特異的糖タンパク質ＩＩｂ／ＩＩＩａに結合するための金属キレート化合物 |
| JP2015193545A (ja) * | 2014-03-31 | 2015-11-05 | 国立大学法人京都大学 | ２−（３−ピリジニル）−１ｈ−ベンズイミダゾール誘導体化合物、これを含む放射性医薬 |
| CN105699563A (zh) * | 2016-04-25 | 2016-06-22 | 广西壮族自治区梧州食品药品检验所 | 双波长高效液相色谱检测血栓通的方法 |
| US20180206726A1 (en) | 2016-12-07 | 2018-07-26 | Progenity Inc. | Gastrointestinal tract detection methods, devices and systems |
| US20200253506A1 (en) | 2016-12-14 | 2020-08-13 | Progenity, Inc. | Treatment of a disease of the gastrointestinal tract with an integrin inhibitor |
| WO2019246455A1 (en) | 2018-06-20 | 2019-12-26 | Progenity, Inc. | Treatment of a disease of the gastrointestinal tract with an integrin inhibitor |
| WO2020106704A2 (en) | 2018-11-19 | 2020-05-28 | Progenity, Inc. | Ingestible device for delivery of therapeutic agent to the gastrointestinal tract |
| WO2021119482A1 (en) | 2019-12-13 | 2021-06-17 | Progenity, Inc. | Ingestible device for delivery of therapeutic agent to the gastrointestinal tract |
| KR102548998B1 (ko) * | 2020-03-31 | 2023-06-29 | 재단법인 아산사회복지재단 | 혈전영상을 위한 방사성의약품 및 조성물 |
Family Cites Families (16)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| NZ239846A (en) | 1990-09-27 | 1994-11-25 | Merck & Co Inc | Sulphonamide derivatives and pharmaceutical compositions thereof |
| US5645815A (en) | 1991-02-08 | 1997-07-08 | Diatide, Inc. | Radiolabled compounds for thrombus imaging |
| US5830856A (en) | 1991-02-08 | 1998-11-03 | Diatide, Inc. | Radiolabeled compounds for thrombus imaging |
| US5508020A (en) | 1992-06-05 | 1996-04-16 | Diatech, Inc. | Technetium-99M labeled peptides for imaging |
| US6380215B1 (en) | 1993-09-22 | 2002-04-30 | Fujisawa Pharmaceutical Co., Ltd | Beta-alanine derivative and a process for the preparation thereof |
| CA2215106A1 (en) | 1995-03-17 | 1996-09-26 | Fujisawa Pharmaceutical Co., Ltd. | N-acylpiperidinylcarbonylaminocarboxylic acids and their use as glycoprotein iib/iiia antagonists and fibrinogen-blood platelets binding inhibitors |
| DE19540700A1 (de) | 1995-11-02 | 1997-05-07 | Daniels & Korff Gmbh | Oberhemd mit Kragen |
| WO1997033869A1 (en) | 1996-03-13 | 1997-09-18 | Fujisawa Pharmaceutical Co., Ltd. | N-[(r)-1-{3-(4-piperidyl)propionyl-3-piperidylcarbonyl]-2(s)-acetylamino-beta-alanine as fibrinogen receptor antagonist |
| ATE421952T1 (de) | 1996-05-01 | 2009-02-15 | Ortho Mcneil Pharm Inc | Carboxamidderivate von pyrrolidin, piperidin und hexahydropiperizin für behandlung von thrombosen |
| US6066651A (en) | 1997-10-29 | 2000-05-23 | Ortho-Mcneil Pharmaceutical, Inc. | Orally-active nipecotamide glycolamide esters for the treatment of thrombosis disorders |
| US6028056A (en) | 1998-02-06 | 2000-02-22 | Diatide, Inc. | Pharmaceutical compositions for imaging and treating thrombi |
| UA67832C2 (uk) | 1999-03-22 | 2004-07-15 | Орто-Макнейл Фармацевтикал, Інк. | СПОСІБ ОТРИМАННЯ [S-(R<sup>*</sup>,S<sup>*</sup>)]-<font face="Symbol">b</font>-[[[1-[1-ОКСО-3-(4-ПІПЕРИДИНІЛ)ПРОПІЛ]-3-ПІПЕРИДИНІЛ]КАРБОНІЛ]АМІНО]-3-ПІРИДИНПРОПАНОВОЇ КИСЛОТИ ТА ЇЇ ПОХІДНИХ |
| WO2005079863A1 (ja) * | 2004-02-25 | 2005-09-01 | Astellas Pharma Inc. | 血栓造影剤 |
| EP2297070A2 (en) * | 2008-07-03 | 2011-03-23 | Bayer Schering Pharma Aktiengesellschaft | Compounds and processes for production of radiopharmaceuticals |
| TW201016676A (en) | 2008-10-03 | 2010-05-01 | Astrazeneca Ab | Heterocyclic derivatives and methods of use thereof |
| WO2013023795A1 (en) * | 2011-08-17 | 2013-02-21 | Piramal Imaging Sa | Compounds for binding to the platelet specific glycoprotein iib/iiia and their use for imaging of thrombi |
-
2012
- 2012-08-17 WO PCT/EP2012/003583 patent/WO2013023795A1/en active Application Filing
- 2012-08-17 SG SG2014011225A patent/SG2014011225A/en unknown
- 2012-08-17 DK DK12750331.6T patent/DK2744802T3/en active
- 2012-08-17 PL PL12750331T patent/PL2744802T3/pl unknown
- 2012-08-17 NZ NZ620635A patent/NZ620635A/en not_active IP Right Cessation
- 2012-08-17 RU RU2014109853/04A patent/RU2597425C2/ru active
- 2012-08-17 BR BR112014003366-8A patent/BR112014003366B1/pt active IP Right Grant
- 2012-08-17 AU AU2012297137A patent/AU2012297137B2/en active Active
- 2012-08-17 JP JP2014525352A patent/JP6243335B2/ja active Active
- 2012-08-17 KR KR1020147006644A patent/KR101948362B1/ko active IP Right Grant
- 2012-08-17 MY MYPI2014000391A patent/MY174617A/en unknown
- 2012-08-17 US US14/239,065 patent/US9345793B2/en active Active
- 2012-08-17 CA CA2845477A patent/CA2845477C/en active Active
- 2012-08-17 MX MX2014001784A patent/MX352546B/es active IP Right Grant
- 2012-08-17 PT PT127503316T patent/PT2744802T/pt unknown
- 2012-08-17 ES ES12750331.6T patent/ES2621379T3/es active Active
- 2012-08-17 SI SI201230874A patent/SI2744802T1/sl unknown
- 2012-08-17 EP EP12750331.6A patent/EP2744802B1/en active Active
- 2012-08-17 CN CN201280050196.4A patent/CN103906743B/zh active Active
-
2014
- 2014-02-06 IL IL230854A patent/IL230854A/en active IP Right Grant
- 2014-10-21 HK HK14110504A patent/HK1197064A1/xx unknown
-
2016
- 2016-01-21 US US15/003,368 patent/US9744252B2/en active Active
- 2016-11-21 JP JP2016225839A patent/JP2017075159A/ja active Pending
-
2017
- 2017-03-21 HR HRP20170464TT patent/HRP20170464T1/hr unknown
Also Published As
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| ES2621379T3 (es) | Compuestos para la unión a la glicoproteína IIb/IIIa específica de las plaquetas y su utilización para la formación de imágenes de trombos | |
| ES2312018T3 (es) | Peptidos radiofluorados. | |
| ES2332722T3 (es) | Agentes de formacion de imagenes peptidicos biciclicos. | |
| US9238631B2 (en) | Radiolabeled amino acids for diagnostic imaging | |
| KR20090096597A (ko) | [ｆ-１８]-표지된 ｌ-글루탐산, [ｆ-１８]-표지된 ｌ-글루타민, 이들의 유도체 및 이들의 용도 및 이들의 제조 방법 | |
| TW202241865A (zh) | 成纖維細胞活化蛋白抑制劑 | |
| TW201124161A (en) | Iodine-labeled homoglutamic acids and glutamic acids | |
| TW201136609A (en) | Compounds for imaging apoptotic cell death | |
| JP4910695B2 (ja) | 血栓造影剤 | |
| US20110250137A1 (en) | Radioisotope-labeled lysine and ornithine derivatives, their use and processes for their preparation | |
| KR102548998B1 (ko) | 혈전영상을 위한 방사성의약품 및 조성물 | |
| JP7458984B2 (ja) | テトラヒドロイソキノリン系誘導体、その製造方法及び用途 | |
| EP2520573A1 (en) | Compounds with matrix-metalloproteinase inhibitory activity | |
| WO2012025464A1 (en) | Fluorodeuteriomethyl tyrosine derivatives |