ES2607978T3 - Aparato para almacenar muestras biológicas - Google Patents

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Abstract

Un conjunto de contenedor para almacenar una muestra celular o biológica, comprendiendo dicho conjunto: un contenedor (152; 252) que tiene un lateral (158; 258), un extremo (162; 260) superior abierto, y una dimensión interna para contener un volumen de un reactivo suficiente para tratar una muestra biológica; una tapa (154; 254) para acoplarse a y para cerrar dicho extremo superior abierto de dicho contenedor; y un portamuestras (156; 256) que tiene un elemento (208; 282) de cierre y una cavidad interna con una dimensión apropiada para alojar a una muestra biológica, teniendo dicho portamuestras una pluralidad de aberturas para fluido que comunican con dicha cavidad para permitir flujo libre de dicho reactivo hacia el interior de dicha cavidad, teniendo dicho portamuestras una dimensión apropiada para que encaje en dicho contenedor por debajo de dicho cierre y para sumergir dicha cavidad en dicho reactivo, caracterizado por que dicho portamuestras (156; 256) es un componente independiente de dicha tapa (154; 254) y que comprende además un fondo y un lateral, un extremo superior abierto, y al menos un elemento (200; 298) estabilizante que se extiende desde dicho lateral (184) del citado portamuestras una distancia apropiada para interaccionar con dicho lateral de dicho contenedor para colocar a dicho portamuestras en una posición seleccionada dentro de dicho contenedor, y dicho elemento de cierre está fijado de forma abisagrada a dicho portamuestras.

Description

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Las Figuras 1-10 están dirigidas a un conjunto 10 de contenedor, una realización no de acuerdo con la invención. El conjunto 10 de contenedor incluye un contenedor 12, una tapa 14 de cierre y un soporte 16 para alojamiento de muestras.
En la realización ilustrada, el contenedor 12 tiene una forma substancialmente cilíndrica formada por una pared 18 lateral y una pared 20 inferior. La pared 18 lateral se extiende desde un extremo 22 superior abierto del contenedor 12 hasta un borde 24 inferior. En la pared 18 lateral, adyacentes al borde 24 inferior, están conformadas una pluralidad de áreas 26 rebajadas. Los rebajes 26 tienen una dimensión apropiada para ayudar al operador a agarrar el contenedor para ayudar al operador en la apertura y cierre del conjunto 10 de contenedor.
La pared 18 lateral incluye filetes de rosca 28 externos adyacentes al extremo 22 superior abierto para que engranen con filetes de rosca complementarios situados sobre la tapa 14. Un nervio 30 se extiende radialmente hacia el exterior desde la pared 18 lateral y está separado axialmente del extremo 22 superior abierto. Preferiblemente, el nervio 30 está separado del extremo 22 superior abierto una distancia que complementa las dimensiones de la tapa 14 de cierre y rodea al contenedor 12.
Haciendo referencia a la Figura 4, el contenedor 12 tiene una cavidad 32 interna con una dimensión suficiente para contener una cantidad efectiva de un agente estabilizante líquido suficiente para estabilizar una muestra biológica. En la realización ilustrada, la pared 20 inferior está separada del borde 24 inferior de la pared 18 lateral por una parte 33 cilíndrica para formar un rebaje 34 en el fondo del contenedor 12. En realizaciones alternativas, el fondo del contenedor 12 puede ser substancialmente plano.
La pared 18 lateral incluye un escalón 36 que se extiende en una dirección substancialmente radial con respecto a un eje central del contenedor 12. El escalón 36 tiene una anchura suficiente para soportar al portamuestras 16 como se explica más adelante con mayor detalle. En la realización ilustrada, el escalón 36 está situado en el extremo superior de la pared 18 lateral y está orientado substancialmente paralelo a un borde 38 superior del contenedor 12. Preferiblemente, el escalón 36 está conformado en la pared 18 lateral. En una realización alternativa, desde la cara interior de la pared 18 lateral se puede extender un nervio hacia adentro una cierta distancia para soportar al portamuestras 16.
La tapa 14 tiene una dimensión que complementa a la pared 18 lateral del contenedor 12 para engranar con el contenedor 12. Como se muestra en las Figuras 3 y 4, la tapa 14 incluye una pared 40 lateral que tiene una forma substancialmente cilíndrica con una superficie 42 exterior y una superficie 44 interior. Como se muestra en la Figura 3, la superficie 42 exterior incluye una pluralidad de depresiones 46 para ayudar al operador a manipular la tapa 14. La superficie 44 interior incluye filetes de rosca 48 para engranar con los filetes de rosca 28 del contenedor 12.
La tapa 14 incluye una pared 50 superior acoplada a la pared 40 lateral. Desde la pared 50 superior se extiende un nervio 52 anular en una dirección axial, generalmente descendente, con respecto a la tapa 14. El nervio 52 incluye una pared 54 lateral axial interior y una pared 56 lateral axial exterior conectadas por una pared 55 inferior. Como se explicará más adelante, la pared 55 inferior del nervio 52 está orientada de manera que haga contacto con el portamuestras 16 mientras se encuentra dentro del contenedor 12 para limitar el movimiento de dicho portamuestras
16. La pared 56 lateral axial exterior se extiende substancialmente paralela a la pared 40 lateral y está separada hacia adentro de la pared 40 lateral una cierta distancia para conformar un rebaje 58 para engranar con el borde 38 superior del contenedor 12.
La pared 50 superior de la tapa 14 incluye un cuerpo situado centralmente que define un émbolo 60 que tiene una pared 62 inferior con forma substancialmente troncocónica y una pared 64 lateral anular que se extiende entre la pared 50 superior y la pared 62 inferior. Como se explica más adelante, el émbolo 60 define un elemento de cierre para el portamuestras 16. Como se muestra en la Figura 4, la pared 64 lateral del émbolo 60 tiene una longitud axial ligeramente mayor que la longitud axial de la pared 40 lateral y del nervio 52 de manera que la pared 62 inferior del émbolo 60 está separada axialmente hacia afuera del borde inferior de la pared 40 lateral. La pared 64 lateral del émbolo 60 está separada de la cara 54 axial interior del nervio 52 para conformar un rebaje 66 con forma anular. En una realización preferida, la pared 64 lateral del émbolo 60 tiene una forma troncocónica ligeramente inclinada.
Como se muestra en la Figura 4, un labio 68 anular se extiende hacia arriba desde la pared 50 superior adyacente al borde exterior en una dirección axial. El labio 68 forma un escalón con la pared 50 superior y está dimensionado para complementar al borde 24 inferior de la pared 18 inferior del contenedor 12. De esta manera, varios conjuntos 10 de contenedor se pueden apilar verticalmente con el borde 24 inferior de la pared 18 alojado en el área definida por el labio 68.
El portamuestras 16 está dimensionado para alojarse dentro del contenedor 12 y para soportar a una muestra biológica. El portamuestras 16 en la realización de las Figuras 1-10 incluye una pared 70 superior que tiene un borde 72 exterior circular y un borde 74 interior. El borde 74 interior define una abertura 76 central que comunica con el interior de una cavidad 78 para alojar a una muestra biológica. El borde 72 exterior de la pared 70 superior tiene una dimensión que complementa a la dimensión interior del contenedor 12. Una cresta 80 anular se extiende axialmente hacia arriba desde una cara 81 superior de la pared 70 superior adyacente al borde 74 interior y rodea a la abertura 76 central. Como se muestra en las Figuras 1 y 2, en la pared 70 superior y adyacentes a la cresta 80 anular están
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El aparato es particularmente apropiado para ser utilizado en el transporte de una muestra biológica a otro lugar, por ejemplo a un laboratorio alejado, al mismo tiempo que se estabiliza y se preserva la muestra. Un método recoge una muestra biológica, tal como una muestra de tejido, y coloca inmediatamente la muestra dentro del conjunto de contenedor para sumergir la muestra en el reactivo contenido en el interior del conjunto de contenedor. El conjunto de contenedor es capaz de retener a la muestra biológica sumergida en el reactivo mientras es transportada y de proporcionar una cantidad del reactivo suficiente para tratar la muestra. En una realización, el reactivo es un reactivo estabilizante de los ácidos nucleicos que es capaz de preservar los ácidos nucleicos existentes en las células de la muestra durante largos periodos de tiempo. Preferiblemente, la muestra se recoge y se sumerge inmediatamente en el reactivo estabilizante para permitir un análisis cuantitativo y cualitativo de gran calidad de los ácidos nucleicos.
El reactivo es preferiblemente un medio acuoso o un alcohol que contiene uno o más componentes para tratar la muestra biológica. En una realización, el reactivo es para estabilizar células y muestras biológicas. En una realización preferida, el reactivo de preservación y estabilización es capaz de preservar ácidos nucleicos durante largos periodos de tiempo antes de su aislamiento de las células. El reactivo estabilizante incluido en el contenedor es una cantidad efectiva para penetrar en las células y en la muestra biológica para impedir o inhibir que las nucleasas descompongan los ácidos nucleicos.
En una realización, el reactivo es capaz de precipitar los ácidos nucleicos y la proteína celular de la muestra para inhibir o desactivar la acción de la nucleasa. En esta realización, el agente estabilizante es un medio acuoso que contiene una sal que es capaz de precipitar el ácido nucleico y las proteínas celulares. Ejemplos de sales apropiadas son los sulfatos, tales como el sulfato de amonio, el bisulfato de amonio, el sulfato de cesio, el sulfato de cadmio, el sulfato de cesio hierro (II), el sulfato de cromo (III), el sulfato de cobalto (II), el sulfato de cobre (II), el sulfato de litio, el sulfato de magnesio, el sulfato de manganeso, el sulfato de potasio, el sulfato de sodio y el sulfato de zinc. La concentración de sal puede oscilar desde aproximadamente 0,10 hasta 1,50 g/ml, y preferiblemente puede ser aproximadamente 0,7 g/ml. En otras realizaciones, el agente estabilizante puede incluir formalina o una sal caotrópica tal como compuestos de quanidium.
El reactivo también puede incluir cantidades de etanol, metanol, acetona, ácido tricloroacético, propanol, polietilén glicol, ácido acético y un agente quelante tal como EDTA. También se pueden añadir agentes amortiguadores tales como acetato de sodio. Por lo general, el agente estabilizante tiene un pH de aproximadamente 4-8.
Los reactivos son por lo general líquidos que pueden pasar a través de la malla porosa del portamuestras para entrar en contacto con la muestra biológica. En otras realizaciones, el reactivo puede ser un gel, un sólido o un semisólido en forma de perlas o partículas. La malla porosa del portamuestras puede ser permeable o impermeable al gel y a las perlas. Típicamente las perlas o partículas tienen un tamaño de partícula que es mayor que el tamaño de abertura de la malla en el portamuestras y no pueden pasar a través de la malla. En realizaciones en las que la malla del portamuestras es impermeable al gel o a las perlas, la cavidad del portamuestras puede contener una cantidad del gel, perlas o partículas para que entre en contacto con la muestra biológica. Las dimensiones de la cavidad se seleccionan para proporcionar el ratio necesario del volumen de la muestra biológica respecto al volumen del reactivo. La malla permeable del portamuestras puede ser permeable al gel para que éste pase a través de las paredes de la muestra para entrar en contacto con la muestra biológica y para sumergir a dicha muestra biológica en el reactivo. El reactivo sólido o semisólido, tal como por ejemplo perlas o partículas, se puede utilizar solo aunque típicamente estos reactivos se utilizan en combinación con un líquido o gel reactivo para complementar al reactivo sólido o semisólido de modo que la muestra biológica se mantiene sumergida en los reactivos. En esta realización, la cavidad del portamuestras puede contener el reactivo sólido o semisólido y el contenedor puede contener el líquido o gel reactivo al que es permeable la pared del contenedor para muestras. De esta manera la muestra biológica se coloca en el portamuestras en contacto con el reactivo sólido o semisólido. A continuación se coloca el portamuestras en el contenedor con el reactivo líquido o en gel para permitir que el reactivo fluya a través de las paredes del portamuestras para que rellene los espacios entre las perlas o partículas y para que rodee a la muestra biológica.
El conjunto 10 de contenedor está construido de manera que defina un área de contención interna en el interior del contenedor 12 para contener a la muestra 108 biológica en un área predeterminada del contenedor 12. Preferiblemente, un área 109 de contención está definida por la cavidad 78 del portamuestras 16. Haciendo referencia a las Figuras 11-13, el área 109 de contención de muestras se muestra de forma esquemática en el contenedor 12 mediante líneas fantasma. Como se muestra en la Figura 11, el área 109 de contención está orientada substancialmente en el centro del contenedor 12 entre los laterales del contenedor 12, la tapa 14, y la pared 20 inferior. Como se muestra, se rellena el reactivo 106 hasta un nivel en el que sumerja completamente al área 109 de contención. El área 109 de contención y el reactivo 108 se seleccionan y se controlan para mantener el área 109 de contención completamente sumergida en reactivo 109 con independencia de la orientación del contenedor 12 como se muestra en las Figuras 12 y 13. De esta manera, la muestra biológica permanecerá completamente sumergida en el reactivo durante la manipulación y el transporte del contenedor. Contener la muestra biológica en un área que está consistentemente por debajo del nivel del reactivo de tratamiento con independencia de la orientación del contenedor impide substancialmente que la muestra biológica entre en contacto con el aire existente dentro del contenedor. Retener a la muestra biológica completamente sumergida en el reactivo de tratamiento mejora el tratamiento completo de la muestra con el reactivo y minimiza las imprecisiones en los resultados de ensayo que se pueden producir cuando la muestra está expuesta al aire incluso durante cortos
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Realizaciones de las Figuras 32-37
En las Figuras 32-37 se muestra otra realización no perteneciente a la invención. Haciendo referencia a la Figura 32, el conjunto 386 de contenedor incluye un contenedor 388, una tapa 390 de cierre y un portamuestras 392. En la realización de las Figuras 32-36, el portamuestras 392 está acoplado de forma no permanente al contenedor 388 de manera que el portamuestras 392 permanece en una posición fija en el interior del contenedor 388. El portamuestras 392 de las Figuras 32-36 se puede separar del contenedor 388 para rellenarlo con una muestra biológica, después de lo cual se da la vuelta al portamuestras 392 y se acopla al contenedor 388. En la realización de la Figura 37, el portamuestras 392 está fijado de manera permanente al contenedor 388. Típicamente, el portamuestras 392 está moldeado integralmente con el contenedor 388 en la realización de la Figura 37.
El contenedor 388 tiene una pared 394 lateral cilíndrica que tiene un extremo 396 superior que define un extremo 398 superior abierto. Una pared 400 inferior está acoplada a un extremo inferior de la pared 394 lateral. La pared 394 lateral y la pared 400 inferior definen una cavidad 402 interna para alojar al portamuestras 392. El extremo 396 superior de la pared 394 lateral incluye filetes de rosca 402 situados sobre la cara exterior para engranar con la tapa
390.
La tapa 390 tiene una pared 404 superior y una pared 406 lateral dependiente. La pared 406 lateral incluye filetes de rosca situados sobre la cara interior como se muestra en la Figura 33. La pared 406 lateral tiene una dimensión apropiada para engranar con el extremo 396 superior del contenedor 388.
El portamuestras 392 está dimensionado para que encaje en el contenedor 398 y se extrae fácilmente de la cavidad
402. El portamuestras 392 tiene un cuerpo 408 que tiene una cavidad 410 interna y un extremo 412 superior abierto. El cuerpo 408 incluye una pared 414 lateral que se extiende desde el extremo 412 superior abierto hasta una base
416. Como se muestra en la Figura 33, la base 414 tiene una configuración substancialmente cilíndrica con un nervio 418 radial que se extiende hacia fuera. La pared 400 inferior del contenedor 388 incluye un rebaje 420 anular dimensionado para alojar a la base 416 del portamuestras 392 en una relación de acoplamiento. En la realización ilustrada, el rebaje 420 está definido por paredes 422 concéntricas. La pared 422 más exterior tiene un surco 424 abierto hacia el interior para alojar al nervio 418 de la base 414 para acoplar de forma segura el portamuestras 392 al contenedor 388. El portamuestras 392 está acoplado de forma no permanente al contenedor 398 mediante un ajuste a presión, tal como un ajuste por interferencia o un ajuste por rozamiento.
En una realización preferida, el portamuestras 392 está fijado de forma segura al contenedor 388 mediante un ajuste por encaje a presión entre el nervio 418 y el surco 424 para fijar la posición del portamuestras 392 en el interior del contenedor 388. El rebaje 420 conformado por las paredes 422 define un elemento de acoplamiento para acoplar de forma no permanente el portamuestras 392 al contenedor 388. El portamuestras 392 se puede separar del contenedor 388 tirando de él hacia arriba con fuerza suficiente para vencer la resistencia entre el nervio 418 y el surco 424. En la realización mostrada en la Figura 37, el portamuestras 392 está conformado integralmente con el contenedor 388 y no se puede separar. El contenedor 388 incluye una superficie sobre la que se puede escribir para identificación de la muestra biológica. El portamuestras 392 se puede separar del contenedor 388 tirando hacia arriba del portamuestras 392 con respecto al contenedor 388.
Haciendo referencia a las Figuras 33 y 34, un escalón 426 interno se extiende radialmente hacia adentro desde una superficie interior de la pared 414 lateral. Un material permeable tal como una malla 428 permeable está acoplado al escalón 426 para definir un fondo permeable a los líquidos de la cavidad 410. El escalón 426 y la malla 428 separan la cavidad 410 de una parte 430 hueca de la base 416 y separan la cavidad 402 del fondo del contenedor 388 cuando el portamuestras 392 está acoplado al contenedor 388 como se muestra en las Figuras 33 y 34.
La pared 414 lateral incluye una pluralidad de aberturas 432 espaciadas entre sí cubiertas por una malla 434 porosa para permitir que un reactivo fluya a través de la cavidad 402. La base 416 también incluye una pluralidad de aberturas 436 espaciadas entre sí para permitir el flujo de un reactivo líquido hacia el interior de la parte 430 hueca y a través de la malla 428 hacia el interior de la cavidad 402.
La pared 414 lateral del cuerpo 408 incluye una pestaña 438 que se extiende radialmente espaciada del extremo superior abierto para definir un casquillo 440 anular. El portamuestras 392 incluye un elemento 442 de cierre en forma de tapa para cerrar el extremo superior abierto de la cavidad 410. En la realización ilustrada, la pata 442 se puede separar del cuerpo 408 y está acoplada de forma no permanente al cuerpo 408 mediante un ajuste por encaje a presión.
La tapa 442 incluye una pared 444 lateral anular que tiene un extremo inferior con una pestaña 446 radial que se extiende hacia fuera. La pared 444 lateral tiene una dimensión interior que complementa la dimensión exterior del casquillo 440. En la realización ilustrada, la pared 444 lateral incluye un nervio 448 sobre una superficie interior para proporcionar un ajuste por interferencia de la tapa 442 con el casquillo 440 del cuerpo 408.
Haciendo referencia a la Figura 33, la pared 444 lateral de la tapa 442 incluye un extremo superior con una pestaña 450 radial que se extiende hacia adentro. La pestaña 450 forma aberturas 452, las cuales están cubiertas por una malla 454 permeable. Una lengüeta 456 que forma un mango se extiende hacia arriba desde la pestaña 450 en una dirección axial con respecto al portamuestras 392. La lengüeta 456 incluye un extremo superior que define una
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