ES2598284T3 - Método de purificación - Google Patents

Abstract

Un procedimiento de purificación que comprende las siguientes etapas: (a) hacer pasar una mezcla de reacción de producto en bruto diluido que comprende flutemetamol a través de un cartucho de SPE de fase inversa; (b) lavar dicho primer cartucho de SPE de fase inversa con una mezcla de agua/acetonitrilo, tetrahidrofurano(THF)/agua, metanol(MeOH)/agua o isopropanol/agua; (c) lavar dicho primer cartucho de SPE de fase inversa con agua una vez que se ha completado la etapa (b); (d) eluir dicho primer cartucho de SPE de fase inversa con acetonitrilo o tetrahidrofurano; (e) hacer pasar directamente la mezcla de dicha etapa (d) de elución a través de un cartucho de SPE de fase normal para dar una disolución de acetonitrilo o tetrahidrofurano que comprende flutemetamol purificado; (f) diluir dicha disolución de acetonitrilo o tetrahidrofurano que comprende flutematamol purificado con agua para formar una disolución diluida de agua/acetonitrilo o agua/tetrahidrofurano que comprende flutemetamol purificado, en el que dicha disolución de agua/acetonitrilo o de agua/tetrahidrofurano contiene alrededor de 40-70% (v/v) de agua; (g) hacer pasar la disolución diluida de agua/acetonitrilo o dicha disolución diluida de agua/tetrahidrofurano que comprende flutemetamol purificado de la etapa (f) a través de un segundo cartucho de SPE de fase inversa y atrapar el flutemetamol en dicho cartucho, segundo cartucho de SPE de fase inversa; (h) lavar dicho segundo cartucho de SPE de fase inversa con agua; y (i) eluir el flutemetamol purificado atrapado del segundo cartucho de SPE de fase inversa con un disolvente orgánico inyectable.

Description

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

DESCRIPCION

Metodo de purificacion Campo de la invencion

La presente invencion se refiere a un agente de obtencion de imagenes de diagnostico util para la obtencion de imagenes de tomograffa por emision de positrones (PET) asf como a herramientas mejoradas para producir tales agentes de obtencion de imagenes. Mas espedficamente, la presente invencion se refiere a un metodo de purificacion de [18F]flutemetamol en bruto que a su vez se puede formular a continuacion en forma de inyeccion de Flutemetamol [f8F] para la obtencion de imagenes de placas de p-amiloide en el cerebro y a metodos y dispositivos para preparar el mismo. Mas espedficamente, la presente invencion se refiere a la smtesis automatizada y purificacion de [18F]flutemetamol por medio de extraccion en fase solida (SPE).

Antecedentes de la invencion

La inyeccion de [18F]flutemetamol es un agente diagnostico de tomograffa por emision de positrones (PET) para la obtencion de imagenes de placas de p-amiloide en el cerebro. La smtesis del agente se puede realizar usando plataformas de smtesis automatizada con o sin usar casetes especialmente adaptados. Por ejemplo, la smtesis se puede realizar usando la plataforma TRACERlab FX F-N o la plataforma FASTlab™, comercialmente disponible de GE Healthcare una division de General Electric Company junto con equipo de cromatograffa de ffquidos de alto rendimiento preparativa auxiliar. Despues de la smtesis, el agente en bruto se transfiere al equipo de cromatograffa de ffquidos de alto rendimiento (HPLC) para separar los quimicoffsicamente similares compuestos de [18F]flutemetamol de su precursor desprotegido, AH111832 (6-hidroxi-2-(4'-(N-metil)amino-3'-nitro)fenilbenzotiazol) y por consiguiente obtener [18F]flutemetamol purificado.

El documento WO2009/027452 describe un metodo de smtesis de 18F-flutemetamol, en el que una mezcla de reaccion en bruto se diluye con 1 ml de etanol:agua y se inyecta en una columna de HPLC de C30, seguido de extraccion en fase solida del producto purificado en dos cartuchos de extraccion en fase solida de C30. Los cartuchos se lavan a continuacion con agua y el producto final se eluye con etanol Sin embargo existe aun una necesidad en la tecnica de metodos de purificacion alternativos para la preparacion de [18F]flutemetamol. La invencion como se describe a continuacion da respuesta a dicha necesidad. Espedficamente, los solicitantes han encontrado ahora un procedimiento que elimina el uso del equipo de HPLC preparativa.

Sumario de la invencion

Como el [18F]flutemetamol y su precursor desprotegido, AH111832 (6-hidroxi-2-(4'-(N-metil)amino-3'- nitro)fenilbenzotiazol) son quimicoffsicamente muy similares, se requiere HPLC preparativa para separarlos. Sin embargo, los solicitantes han encontrado ahora que es posible reemplazar el equipo de HPLC preparativa en los procedimientos de purificacion previa por cartuchos de extraccion en fase solida (SPE) de un solo uso, de bajo coste para la purificacion de [18F]flutemetamol.

Por consiguiente, la presente invencion proporciona un procedimiento de purificacion que comprende las siguientes etapas:

(a) hacer pasar una mezcla de reaccion de producto en bruto diluido que comprende flutemetamol a traves de un cartucho de SPE de fase inversa;

(b) lavar dicho primer cartucho de SPE de fase inversa con una mezcla de agua/acetonitrilo, tetrahidrofurano(THF)/agua, metanol(MeOH)/agua o isopropanol/agua; preferentemente una mezcla de agua/acetonitrilo;

(c ) lavar dicho primer cartucho de SPE de fase inversa con agua una vez que se ha completado la etapa (b);

(d) eluir dicho primer cartucho de SPE de fase inversa con acetonitrilo o tetrahidrofurano; preferentemente, acetonitrilo;

(e) hacer pasar directamente la mezcla de dicha etapa (d) de elucion a traves de un cartucho de SPE de fase normal para dar una disolucion de acetonitrilo o tetrahidrofurano; preferentemente una disolucion de acetonitrilo que comprende flutemetamol purificado;

(f) diluir dicha disolucion de acetonitrilo o tetrahidrofurano; preferentemente una disolucion de acetonitrilo, que comprende flutematamol purificado, con agua para formar una disolucion diluida de agua/acetonitrilo o de agua/tetrahidrofurano; preferentemente una disolucion diluida de agua/acetonitrilo, que comprende flutemetamol purificado, en la que dicha disolucion de agua/acetonitrilo contiene alrededor de 40-70% (v/v) de agua; preferentemente por lo menos alrededor de 40% (v/v) de agua; mas preferentemente por lo menos alrededor de 50% (v/v) de agua;

5

10

15

20

25

30

35

(g) hacer pasar la disolucion diluida de agua/acetonitrilo o de agua/tetrahidrofurano; preferentemente, la disolucion diluida de agua/acetonitrilo, que comprende flutemetamol purificado de la etapa (f) a traves de un segundo cartucho de SPE de fase inversa y atrapar el flutemetamol en dicho cartucho, segundo cartucho de SPE de fase inversa;

(h) lavar dicho segundo cartucho de SPE de fase inversa con agua; y

(i) eluir el flutemetamol purificado atrapado del segundo cartucho de SPE de fase inversa con un disolvente organico inyectable; preferentemente etanol o DMSO; preferentemente con etanol.

Segun la invention, el flutemetamol purificado se puede recoger despues de la etapa (i).

La presente invencion proporciona tambien un procedimiento de purification de la presente invencion, en el que el procedimiento esta automatizado.

Breve descripcion de las figuras

La Figura 1 representa derivados de precursor hidrofilo.

La Figura 2 representa el efecto de la temperatura ambiente y la concentration de acetonitrilo sobre el rendimiento.

La Figura 3 representa el efecto de la temperatura ambiente y la concentracion de acetonitrilo sobre el nivel de impurezas qulmicas.

La Figura 4 representa un diagrama de flujo que describe la production y formulation de Inyeccion de flutemetamol (18F) en un casete de la presente invencion.

La Figura 5 es un dibujo de un casete totalmente ensamblado de la presente invencion para produccion de Inyeccion de flutemetamol (18F), que muestra todas las tuberlas y viales de reactivos prellenados y el cartucho de SPE.

La Figura 6 muestra la numeration de cada position del distribuidor del casete de la presente invencion.

Las Figuras 7 y 8 listan las materias prima requeridas y la localization de cada uno de los principales componentes en el casete de la presente invencion.

La Figura 9 representa un cartucho de SPE de la presente invencion.

La Figura 10 representa el precursor desprotegido AH111832 (6-hidroxi-2-(4'-(N-metil)amino-3'- nitro)fenilbenzotiazol).

La Figura 11 es una vista alternativa del casete de la presente invencion.

Descripcion detallada

Se puede preparar [18F]Flutemetamol por substitution nucleofila de un grupo nitro en el precursor AH111907 (6- etoximetoxi-2-(4'-(N-formil-N-metil)amino-3'-nitro)fenilbenzotiazol) por [18F]fluoruro seguido de desproteccion como se ilustra en el Esquema 1:

imagen1

All! 11907

imagen2

[18F]Flutemetamol

Esquema 1

Los estudios iniciales llevados a cabo en AH111907 (6-etoximetoxi-2-(4'-(N-formil-N-metil)amino-3'- nitro)fenilbenzotiazol) y en flutemetamol (no radiactivo) demostraron que el ultimo reaccionaba con bases fuertes para producir especies menos lipofilas (por ejemplo, los derivados de precursor hidrofilo de la Figura 1) dejando al ultimo inalterado. Se puede usar cualquier base apropiada. En una reaction, se pueden usar alcoxido, hidroxidos de metal alcalino o bases de tiooxido. En una realization adicional, la base se selecciona del grupo que consiste en hidroxido de sodio, hidroxido de potasio, hidruro de sodio, tiometoxido de sodio, etoxido de sodio, y metoxido de sodio. En una realizacion adicional, la base es etoxido de sodio o metoxido de sodio. En una realizacion adicional, la base es metoxido de sodio.

5

10

15

20

25

30

35

40

45

En una realizacion de la invencion, “la mezcla de reaccion de producto en bruto que comprende flutemetamol” de la etapa (a) es la mezcla de reaccion de substitucion de [18F]fluoruro en bruto que comprende (i) flutemetamol, (ii) el flutemetamol hidroxil- y amino-protegido que tiene la siguiente estructura:

imagen3

e (iii) AH111907 (6-etoximetoxi-2-(4'-(N-formil-N-metil)amino-3'-nitro)fenilbenzotiazol), cada uno como se describe aqrn, y se trata con base a una temperatura de alrededor de >100°C seguido de tratamiento con acido. En una realizacion de la invencion, el tratamiento con base de la “mezcla de reaccion de producto en bruto que comprende flutemetamol”; preferentemente, la mezcla de reaccion de substitucion con [18F]fluoruro en bruto se realiza a una temperatura que vana entre alrededor de 120-140°C; mas preferentemente a alrededor de 130°C. Segun la invencion, para el tratamiento acido subsecuente, se puede usar cualquier acido mineral. Los ejemplos de acidos apropiados incluyen, pero no estan limitados a, acido sulfurico, acido nftrico, acido clortudrico, acido fosforico, acido bromtudrico (HBr); preferentemente el acido usado es acido clortudrico. Las especies menos lipofilas resultantes son separables a continuacion de [18F]flutemetamol usando un cartucho de extraccion en fase solida (SPE).

Segun la presente invencion, el flutemetamol como se usa aqrn puede ser flutemetamol radiomarcado o sin marcar. En una realizacion preferida, el flutemetamol sera [18F]flutemetamol. El [18F]flutemetamol se puede preparar por cualquier medio conocido en la tecnica que incluye, pero no esta limitado a, la smtesis expuesta en el Esquema 1 como se describe aqrn, para dar la “mezcla de reaccion de producto en bruto que comprende flutemetamol” de la etapa (a).

La fuente apropiada de ion fluoruro-[18F] (18F‘) se puede obtener en forma de una disolucion acuosa de la reaccion nuclear 18O(p,n)18F y se hace reactivo por la adiccion de un contraion cationico y la subsecuente retirada de agua. Los contraiones cationicos apropiados deben poseer suficiente solubilidad dentro del disolvente de reaccion anhidro para mantener la solubilidad de 18F\ Por lo tanto, los contraiones que se han usado incluyen iones metalicos grandes pero blandos tales como rubidio o cesio, potasio complejados con un criptando tal como Kryptofix™, o cualquier sal de tetraalquilamonio conocida en la tecnica. Un contraion preferido es sal de tetrabutilamonio. Una discusion mas detallada de tecnicas de marcado con 18F bien conocidas se puede encontrar en el Capttulo 6 del “Handbook of Radiopharmaceuticals” (2003; John Wiley and Sons: M.J. Welch and C.S. Redvanly, Eds). Segun la presente invencion, la etapa (b) de lavado retira compuestos hidrofilos que incluyen los derivados de precursor hidrofilo producidos durante la reaccion de metoxido de sodio (vease la Figura 1) desde el cartucho al residuo tal que el flutemetamol y las especies de similar hidrofobicidad se retienen en el primer cartucho de SPE de fase inversa. Como se entendena por uno de experiencia en la tecnica, la composicion espedfica de la mezcla disolvente dependera del cartucho de SPE usado.

Segun la presente invencion, el cartucho de SPE de fase normal de la etapa (e) de un procedimiento de la invencion, cada uno como se describe aqrn, sirve para retener muchas de las impurezas hidrofilas restantes. El flutemetamol y otros compuestos hidrofobos pasan a traves del cartucho de SPE de fase normal con retencion minima.

Segun la presente invencion, la etapa (h) de lavado se realiza hasta que el acetonitrilo residual esta presente a niveles aceptables para inyeccion.

Segun la invencion, la etapa (i) de elucion eluye flutemetamol y compuestos de similar hidrofobicidad tal como cantidades residuales de su precursor desprotegido AH111832 (6-hidroxi-2-(4'-(N-metil)amino-3'- nitro)fenilbenzotiazol). El flutematamol purificado de la etapa (i) es apropiado para formulacion.

Segun la invencion, el flutematamol purificado se puede recoger en cualquier vial de recogida apropiado tal como se entendena por un experto en la tecnica. Un procedimiento de la presente invencion opcionalmente comprende adicionalmente la etapa de lavado adicional de dicho segundo cartucho de SPE de fase inversa con agua para retirar completamente cualquier flutemetamol y etanol en el segundo cartucho de SPE de fase inversa para transferir a un vial de recogida, cada uno como se describe aqrn.

Segun la invencion, el cartucho de SPE de fase inversa puede ser cualquier cartucho de SPE de fase inversa conocido en la tecnica que tiene una longitud de cadena mayor de C8; preferentemente mayor de C18; lo mas preferentemente, un cartucho de SPE de C30. La Figura 9 representa un ejemplo de cartucho de SPE de fase inversa para uso en un procedimiento de la presente invencion. El cartucho de SPE de fase inversa incluye un sorbente comercialmente disponible envasado entre dos capas de medio poroso dentro de un cuerpo de cartucho

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

55

alargado. El cuerpo de cartucho incluye adaptadores luer para conexion simplificada. Los cartuchos de SPE de fase inversa apropiadamente ensamblados para uso en la presente invencion pueden ser cualquier cartucho de SPE de fase inversa conocido en la tecnica que incluyen, pero no estan limitados a, aquellos comercialmente disponibles de Macherey-Nagel GmbH & Co. KG, Neumann-Neander-Strasse 6-8, D-52355 Dueren, Alemania. Los sorbentes apropiados para uso en un cartucho de SPE de fase inversa pueden ser cualquier sorbente conocido en la tecnica que incluyen, pero no estan limitados a aquellos disponibles comercialmente de Princeton Chromatography Inc., Cranbury, NJ 08512 USA. Un ejemplo de sorbente apropiado es un sorbente de C30. Segun la invencion, es preferido un cartucho de C30 dado que proporciona mas alta capacidad de retencion comparado con cartuchos de fase inversa de cadena mas corta (C8, C18) y se puede usar para la separacion de flutemetamol de sus derivados de precursor hidrofilo.

Purificacion primaria - SPE de fase inversa

En una realizacion de la invencion, el primer cartucho de SPE de fase inversa puede ser un cartucho de SPE de fase inversa como se describe aqrn. En una realizacion preferida de la invencion el primer cartucho de SPE de fase inversa es un cartucho de C30.

En una realizacion de la invencion, el primer cartucho de SPE de fase inversa se puede acondicionar opcionalmente con acetonitrilo seguido de agua antes de la etapa (a) como se describe anteriormente.

En una realizacion de la invencion, despues de la etapa (b), el primer cartucho de SPE de fase inversa se puede limpiar opcionalmente con nitrogeno y/o vado.

En una realizacion de la invencion, en la etapa (b) el sorbente del primer cartucho de SPE de fase inversa se lava con 40% de acetonitrilo:60% de agua (v/v) y a continuacion el primer cartucho de SPE de fase inversa se limpia con nitrogeno y/o vado.

En una realizacion de la invencion, en la etapa (b) el sorbente del primer cartucho de SPE de fase inversa se lava con agua y a continuacion el primer cartucho de SPE de fase inversa se limpia con nitrogeno y/o vado.

En una realizacion de la invencion, en la etapa (d) se eluye flutemetamol del primer cartucho de SPE de fase inversa con 35-45% de acetonitrilo:agua (v/v).

En una realizacion de la invencion, se obtiene un rendimiento y pureza aceptables realizando estas etapas en el primer cartucho de SPE de fase inversa a una temperatura entre alrededor de 19°C y alrededor de 34°C; preferentemente entre alrededor de 20°C-30°C (es decir, la temperatura ambiente de la celda caliente en la que se encuentra el primer cartucho de SPE de fase inversa) y usando una mezcla de acetonitrilo/agua, en la que la concentracion de agua es de alrededor de 35 a 45% del total (v/v) (por ejemplo, 40% de agua + 60% de acetonitrilo); preferentemente, de alrededor de 39,5-40,5% del total (v/v). (Vease las Figuras. 2 y 3). A temperaturas mas bajas y concentraciones mas bajas de acetonitrilo, los compuestos relacionados con flutemetamol estan unidos mas firmemente a la fase solida y por lo tanto son menos susceptibles a ser perdidos hacia el residuo durante el lavado de acetonitrilo/agua. El resultado es un alto rendimiento de flutemetamol pero con un mayor nivel de impurezas. El efecto opuesto se ve a temperaturas mas altas y concentraciones mas altas de acetonitrilo. Esta combinacion da una mayor pureza, pero mucho menor rendimiento.

Purificacion secundaria - SPE de fase normal

Segun la invencion, el cartucho de SPE de fase normal puede ser cualquier cartucho de SPE de fase normal conocido en la tecnica. Los ejemplos de cartuchos SPE de fase normal apropiados incluyen, pero no estan limitados a, cartucho de SPE de fase normal de amino, ciano, diol, alumina, y sflice.

En una realizacion de la invencion, un cartucho de SPE de fase normal contendra materiales de fase normal tal como fase estacionaria amino basada en sflice para atrapar selectivamente impurezas hidrofilas de una disolucion de acetonitrilo sin retener tambien flutemetamol. Se puede usar cualquier fase estacionaria amino basada de sflice (es decir, sorbente amino) conocida en la tecnica. Los ejemplos de "fase estacionaria amino basada de sflice" apropiados incluyen, pero no estan limitados a, los disponibles comercialmente de Waters (Milford, Mass., USA). En una realizacion de la invencion, durante el procedimiento de FASTlab™, como se describe aqrn, se pueden usar en FASTlab™ cartuchos de amino, o cartuchos de SPE de fase normal, (por ejemplo, cartucho de NH2 Varian Bond Elut Jr).

En una realizacion de la invencion, el sorbente amino del cartucho de SPE de fase normal de la etapa (e) se acondiciona primero haciendo pasar acetonitrilo a traves del cartucho de SPE de fase normal y a continuacion secando el cartucho bajo un flujo de nitrogeno, antes de que se haga pasar a traves de el la fraccion de flutemetamol/acetonitrilo del primer cartucho de SPE de fase inversa. Segun la presente invencion, el cartucho de SPE de fase normal de la etapa (e) opcionalmente se puede lavar adicionalmente con acetonitrilo para maximizar la recuperacion de flutemetamol antes de la etapa (f).

En una realizacion de la invencion, el sorbente amino se acondiciona primero haciendo pasar acetonitrilo a traves

5

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

del cartucho SPE de fase normal y a continuacion secando bajo un flujo de nitrogeno. La fraccion de flutemetamol/acetonitrilo del primer cartucho de SPE de fase inversa se hace pasar a traves del cartucho de amino y a una jeringa de FASTlab™. El cartucho de amino se lava a continuacion con acetonitrilo adicional para maximizar la recuperacion de flutemetamol.

Intercambio de disolvente - segunda SPE de fase inversa

Despues de la purificacion secundaria por medio del cartucho de SPE de fase normal, el acetonitrilo (y cualquier metanol residual) se puede retirar antes de que la substancia farmacologica purificada (es decir flutemetamol) se transfiera al vial de recogida de producto. Esto se puede lograr realizando el intercambio de disolvente en un segundo cartucho de SPE de fase inversa. Segun la presente invencion, el segundo cartucho de SPE de fase inversa puede ser un cartucho SPE de fase inversa como se describe aqrn. En una realizacion preferida de la invencion, el segundo cartucho de SPE de fase inversa es un cartucho de C30.

En una realizacion de la invencion, el segundo cartucho de SPE de fase inversa se puede opcionalmente pre- acondicionar con acetonitrilo y agua.

En una realizacion de la invencion, antes de pasar a traves del segundo cartucho de SPE de fase inversa, la disolucion de producto de acetonitrilo/flutemetamol del cartucho de amino/SPE de fase normal se diluye con agua de tal modo que la disolucion de carga esta por debajo de alrededor de 50% de acetonitrilo para atrapar flutemetamol en el sorbente del segundo cartucho de sPe de fase inversa.

En una realizacion de la invencion, el segundo cartucho de SPE de fase inversa se lava subsecuentemente con agua para retirar disolventes residuales, antes de que se eluya el flutemetamol desde el cartucho a un vial de recogida de producto usando primero etanol y a continuacion agua.

Un procedimiento de purificacion de la invencion se puede realizar manualmente. Un procedimiento de purificacion de la invencion puede estar automatizado. En una realizacion preferida, se realiza un procedimiento de purificacion de la invencion en un sistema/plataforma automatizado.

En una realizacion preferida, se automatiza un procedimiento de la presente invencion. El [18F]flutemetamol se puede preparar convenientemente de forma automatizada por medio de un aparato de radiosmtesis automatizado. Hay varios ejemplos disponibles comercialmente de tales aparatos, que incluyen TRACERlab™ y FASTlab™ (ambos disponibles comercialmente de GE Healthcare una division de General Electric Company). En una realizacion preferida de la invencion, el aparato de radiosmtesis automatizada es FASTlab™. El aparato de radiosmtesis automatizada comprende comunmente un "casete", a menudo desechable, en el que se realiza la radioqmmica, del que esta provisto el aparato para realizar una radiosmtesis. El casete incluye normalmente vfas de fluido, un recipiente de reaccion, y puertos para recibir viales de reactivo asf como cualquier cartucho de extraccion de fase solida usado en etapas de limpieza post-radiosmtesis.

La presente invencion proporciona por lo tanto, en otro aspecto de la presente invencion, un casete para la smtesis automatizada y purificacion de [18F]flutemetamol cada una como se define aqrn que comprende:

(i) un recipiente que contiene mezcla de reaccion de producto en bruto que comprende flutemetamol;

(ii) un primer cartucho de SPE de fase inversa;

(iii) medios para lavar y eluir el primer cartucho de SPE de fase inversa;

(iv) un cartucho de SPE de fase normal;

(v) un segundo cartucho de SPE de fase inversa; y

(vi) medios para lavar y eluir el segundo cartucho de SPE de fase inversa; en la que cada componente es como se describe aqrn.

Las ventajas de tal procedimiento basado en cartucho de SPE en casete incluyen la reduccion del tiempo de smtesis total y del coste asf como reproducibilidad mejorada del procedimiento.

Se hace referencia ahora a las Figuras 5-9 y 11, que representan un casete 110 de smtesis desechable y sus componentes que son utiles para realizar el metodo de la presente invencion. La Figura 6 representa la numeracion de cada posicion 1-25 del distribuidor del casete de la presente invencion, haciendo referencia tambien cada posicion a la valvula de distribuidor del distribuidor 112. La Figura 7 lista las materias primas requeridas para el casete de la presente invencion. La Figura 8 lista la localizacion de cada uno de los componentes principales del casete de la presente invencion.

El casete 110 incluye, un distribuidor 112 que incluye veinticinco llaves de paso 1-25 de 3 vfas/3 posiciones, respectivamente. Las valvulas del distribuidor 1-25 tambien se conocen como sus posiciones de distribuidor 1-25

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

55

60

respectivamente. Las valvulas del distribuidor 1, 4-5, 7-10, 17-23, y 25 tienen conectores luer hembra que sobresalen hacia arriba. Las valvulas 2, 6, y 12-16 tienen un alojamiento de vial abierto alargado que sobresale verticalmente y soportan una canula vertical en el mismo para perforar un vial de reactivo insertado en el respectivo alojamiento del vial. El movimiento del vial de reactivo a ser perforado por la canula respectiva se realiza bajo el accionamiento por el dispositivo sintetizador. Las valvulas 3, 11 y 24 soportan un cilindro de jeringa abierto alargado vertical. Las valvulas 1-25 incluyen tres puertos abiertos que se abren a las valvulas del distribuidor adyacentes y a sus respectivos conectores luer, canulas y cilindros de jeringa. Cada valvula incluye una llave de paso giratoria que pone dos cualesquiera de los tres puertos asociados en comunicacion de fluido entre sf, aislando flmdicamente el tercer puerto. El distribuidor 112 incluye adicionalmente, en sus extremos opuestos, un primer y segundo conector de enchufe 121 y 123, que definen cada uno los puertos 121a y 123a, respectivamente. El distribuidor 112 y las llaves de paso de las valvulas 1-25 estan formadas deseablemente de un material polimerico, por ejemplo, PP, PE, polisulfona, Ultem o Peek.

El casete 110 es una variante de un cartucho pre-ensamblado disenado para ser adaptable para sintetizar lotes clmicos de diferentes radiofarmacos con minima instalacion y conexiones por parte del cliente. El casete 110 incluye recipiente de reaccion, viales de reactivo, cartuchos, filtros, jeringas, tubenas, y conectores para sintetizar un radiomarcador segun la presente invencion. Las conexiones deseablemente se realizan de manera automatica con los viales de reactivo llevando sus septos sobre puntas penetrantes para permitir al sintetizador acceso al uso de los reactivos.

El casete 110 es conectable a un dispositivo de smtesis, tal como FASTlab, que se acopla cooperativamente al casete para ser capaz de accionar cada una de las llaves de paso y jeringas para conducir un fluido fuente con un radioisotopo a traves del casete para la realizacion de un procedimiento de smtesis qmmica. Adicionalmente, el dispositivo de smtesis puede proporcionar calor al recipiente de reaccion del casete 110 segun se requiera para las reacciones qmmicas. El sintetizador esta programado para hacer funcionar bombas, jeringas, valvulas, elemento de calentamiento, y controla el suministro de nitrogeno y la aplicacion de vacm al casete para dirigir el fluido fuente a mezclarse con los reactivos, realizar las reacciones qmmicas, a traves de los cartuchos de purificacion apropiados, y bombear selectivamente el marcador de salida y los fluidos residuales a receptaculos de vial apropiados fuera del casete. El fluido recogido en el vial de salida se introduce tfpicamente en otro sistema, para purificacion y/o dispensacion. Despues de la dispensacion del producto, los componentes internos de casete 110 se limpian tfpicamente para retirar la radiactividad latente del casete, aunque quedara alguna actividad. El casete 110 de este modo se puede hacer funcionar para llevar a cabo un procedimiento de radiosmtesis de dos etapas. Mediante la incorporacion de cartuchos de SPE en el distribuidor, el casete 110 es capaz adicionalmente de proporcionar purificacion sencilla para obviar la necesidad de HPLC.

Las Figs. 5 y 11 representan un casete 110 totalmente ensamblado de la presente invencion para la produccion de inyeccion de flutemetamol (18F), que muestran todas las tubenas y viales de reactivo prellenados. El casete 110 incluye una carcasa 111 polimerica que tiene una superficie 113 frontal plana principal y que define una cavidad 115 de alojamiento en la que esta soportado el distribuidor 112. Un primer cartucho 114 de SPE de fase inversa se coloca en la posicion 18 del distribuidor mientras que un segundo cartucho 116 de SPE de fase inversa se coloca en la posicion 22 del distribuidor. Un cartucho 120 de SPE de fase normal (o amino) esta localizado en la posicion 21 del distribuidor. En primer cartucho 114 de SPE se usa para la purificacion primaria. El cartucho 120 de amino se usa para la purificacion secundaria. El segundo cartucho 116 de SPE se usa para el intercambio de disolvente. Una tubena 118 Tygon de 50 cm a alrededor de 2 m de longitud se conecta entre la posicion 19 del casete y un vial 129 de recogida de producto en el que se produce la formulacion de la substancia farmacologica. La tubena 118 se muestra con lmea de transparencia parcial para indicar donde esta pasando por detras de la superficie 113 frontal en el lado posterior del distribuidor 112 en la vista. Aunque algunas de las tubenas del casete son, o seran, identificadas como hechas de un material espedfico, la presente invencion contempla que las tubenas empleadas en el casete 110 se pueden formar de cualquier polfmero apropiado y pueden ser de cualquier longitud segun sea necesario. La superficie 113 de la carcasa 111 define una abertura 119 a traves de la que pasa la tubena 118 entre la valvula 19 y el vial 139 de recogida de producto. La Figura 11 representa el mismo distribuidor ensamblado del casete y muestra las conexiones a un vial que contiene una mezcla de 40% de MeCN y 60% de agua en la posicion 9 del distribuidor, un vial de 100% de MeCN en la posicion 10 del distribuidor, un vial de agua conectado a la punta de la posicion 14 del distribuidor, y un vial de recogida de producto conectado en la posicion 19 del distribuidor. La Figura 11 representa el distribuidor 112 desde la cara opuesta, tal que las llaves de paso giratorias y los puertos 121a y 123a estan escondidos de la vista.

Unos 14 cm de longitud de una tubena 122 se extienden entre el extremo libre del cartucho 114 y el conector luer de la valvula 17 del distribuidor. Unos 8 cm de longitud de tubena 124 se extienden entre el extremo libre del cartucho 116 y el conector luer de la valvula 23 del distribuidor. Unos 14 cm de longitud de tubena 126 se extienden entre el extremo libre del cartucho 120 y el conector luer de la valvula 20 del distribuidor. Adicionalmente, la tubena 128 se extiende desde el conector luer de la valvula 1 del distribuidor hasta un recipiente 129 de recuperacion objetivo (mostrado en la Figura 11) que recupera el agua enriquecido en residuos despues de que el fluoruro ha sido retirado del cartucho QMA. El extremo libre de la tubena 128 soporta un conector 131, tal como un adaptador luer o una aguja alargada y la tubena asociada, para conectar la cavidad al recipiente 129 de recuperacion objetivo. En el metodo de la presente invencion, el radioisotopo es [18F]fluoruro proporcionado en disolucion con agua objetivo

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

55

60

H2[18O] y se introduce en la valvula 6 del distribuidor.

Un vial 130 de eluyente de bicarbonato de tretabutilamonio se coloca dentro del alojamiento del vial en la valvula 2 de distribucion y se va a ensartar en la punta allf dentro. Una bomba 132 de jeringa de 1 ml alargada se coloca en la valvula 3 del distribuidor. La bomba 132 de jeringa incluye una varilla 134 de piston alargado que es movible alternativamente por el dispositivo de smtesis para sacar y bombear fluido a traves del distribuidor 112 y los componentes adjuntos. El cartucho 136 QMA esta soportado sobre el conector luer de la valvula 4 del distribuidor y esta conectado via una tubena 138 de silicona de 14 cm de longitud al conector luer de la posicion 5 del distribuidor. El cartucho 136 es deseablemente un cartucho QMA de carbonato ligero vendido por Waters, una division de Millipore. El bicarbonato de tetrabutilamonio en una disolucion de 80% de acetonitrilo; 20% de agua (v/v) proporciona elucion de [18F]fluoruro del QMA y catalizador de transferencia de fase. Un deposito 140 de entrada de fluoruro esta soportado en la valvula 6 del distribuidor.

La valvula 7 del distribuidor soporta una tubena 142 en su conector luer que se extiende hasta un primer puerto 144 de un recipiente 146 de reaccion. El conector luer de la valvula 8 del distribuidor esta conectado via una tubena 148 de 14 cm de longitud a un segundo puerto 150 del recipiente 146 de reaccion. El conector luer de la valvula 9 del distribuidor esta conectado via una tubena 152 de 42 cm de longitud a un vial 154 que contiene una mezcla de 40% de MeCN y 60% de agua (v/v). La mezcla de acetonitrilo y agua se usa para permitir la purificacion primaria de flutemetamol en el primer cartucho 114 de SPE. El conector luer de la valvula 10 del distribuidor esta conectado via una tubena 156 de 42 cm de longitud a un vial 158 que contiene 100% de MeCN usado para el acondicionamiento de los cartuchos y la elucion de flutemetamol del primer cartucho 114 de SPE. La valvula 11 del distribuidor soporta una pared de cilindro para una bomba 160 de jeringa de 5 ml. La bomba 160 de jeringa incluye una varilla 162 de piston alargada, que es alternativamente movible por el dispositivo de smtesis para sacar y bombear fluido a traves del distribuidor 112. El alojamiento de vial en la valvula 12 del distribuidor recibe el vial 164 que contiene 6- etoximetoxi-2-(4'-(N-formil-N-metil)amino-3'-nitro)fenilbenzotiazol). El alojamiento del vial en la valvula 13 del distribuidor recibe un vial 166 que contiene acido clorhndrico 4M. El acido clorhndrico proporciona desproteccion del intermedio radiomarcado. El alojamiento de vial en la valvula 14 del distribuidor recibe un vial 168 de una disolucion en metanol de metoxido de sodio. El alojamiento de vial en la valvula 15 del distribuidor recibe una extension 170 de punta hueca alargada que se coloca sobre la canula en la valvula 15 del distribuidor y proporciona una punta 170a de bolsa de agua alargada en su extremo libre. La punta 170 perfora un casquillo 172 de una botella 174 de agua que contiene agua tanto para diluir como lavar los caminos de fluido del casete 110. El alojamiento de vial en la valvula 16 del distribuidor recibe un vial 176 que contiene etanol. El etanol se usa para la elucion de la substancia farmacologica desde el segundo cartucho 116 de SPE. El conector luer de la valvula 17 del distribuidor esta conectado a una tubena 122 de silicona de 14 cm de longitud al cartucho 114 de SPE en la posicion 18. La valvula 24 del distribuidor soporta el cilindro alargado de una bomba 180 de jeringa de 5 ml. La bomba 180 de jeringa incluye una varilla 182 de jeringa alargada, que es movible alternativamente por el dispositivo de smtesis para sacar y bombear fluido a traves del distribuidor 112 y los componentes conectados. El conector luer de la valvula 25 del distribuidor esta conectado a una tubena 184 de 42 cm de longitud a un tercer puerto 186 de recipiente 146 reactor.

El casete 110 esta acoplado a un sintetizador automatizado que tiene brazos giratorios que se acoplan a cada una de las llaves de paso de las valvulas 1-25 y se pueden colocar cada uno en una orientacion deseada durante el funcionamiento del casete. El sintetizador tambien incluye un par de espitas, cada una de las cuales se inserta en los puertos 121a y 123a de los conectores 121 y 123 en conexion estanca de fluidos. Las dos espitas proporcionan, respectivamente, una fuente de nitrogeno y un vacrn al distribuidor 112 para ayudar a la transferencia de fluido a su traves y a hacer funcionar el casete 110 segun la presente invencion. Los extremos libres de los embolos de la jeringa se acoplan por medio de miembros cooperantes del sintetizador, que a continuacion le aplicaran el movimiento alternativo dentro de las jeringas. Una botella que contiene agua se monta en el sintetizador a continuacion se presiona sobre la punta 170 para proporcionar acceso a un fluido para la conduccion de los compuestos en funcionamiento de las diversas jeringas incluidas. El recipiente de reaccion se colocara dentro del pocillo de reaccion del sintetizador y se conectan el vial de recogida de producto y el vial de los residuos. El sintetizador incluye un conducto de suministro de radioisotopo que se extiende desde una fuente del radioisotopo, tipicamente un vial o la lmea de salida de un ciclotron, a un embolo de suministro. El embolo de suministro es movible por el sintetizador desde una primera posicion elevada que permite unir el casete al sintetizador, a una segunda posicion mas baja en la que se inserta el embolo en el alojamiento en la valvula 6 del distribuidor. El embolo proporciona un acoplamiento sellado con el alojamiento en la valvula 6 del distribuidor de modo que el vacrn aplicado por el sintetizador al distribuidor 112 sacara el radioisotopo a traves del conducto de suministro de radioisotopo y dentro del distribuidor 112 para su procesamiento. Adicionalmente, antes de comenzar el procedimiento de smtesis, los brazos del sintetizador presionaran los viales de reactivo sobre las canulas del distribuidor 112. El procedimiento de smtesis puede comenzar a continuacion.

La Fig. 9 representa un cartucho 210 de SPE de la presente invencion. El relleno 212 de sorbente de los cartuchos de SPE de fase inversa diferira del relleno del cartucho de SPE de fase normal. El cartucho 210 incluye un cuerpo 214 tubular alargado que define una cavidad 216 cilmdrica. Un primer extremo 214a de un cuerpo 214 incluye una pared 218 anular transversal que define una abertura 220 de salida en comunicacion de fluido con la cavidad 216. La pared 218 anular tambien soporta una pared 222 tubular abierta alargada que forma una punta 224 de luer. El segundo extremo 214b opuesto del cuerpo 214 soporta una tapa 226 final que tiene un cuerpo 228 de tapa que

5

10

15

20

25

30

35

40

45

define una abertura 230 de entrada en comunicacion de fluido con la cavidad 216. El cuerpo 228 de tapa incluye un borde 232 anular exterior que se acopla a la superficie 234 exterior del cuerpo 214 tubular en el segundo extremo 214b y una pared 236 anular interior que se acopla a la superficie 238 interior del cuerpo 214 tubular en el segundo extremo 214b. El cartucho 210 tambien incluye los elementos 240 y 242 circulares en forma de disco de filtro poroso que flanquean la cavidad 216 con relleno 212 de sorbente entre los mismos. A modo de ilustracion y no de limitacion, el cartucho 210 es generalmente de alrededor de 48,6 mm de longitud, alrededor de 15,2 mm de diametro en el segundo extremo 214b, alrededor de 12,0 mm de diametro en el primer extremo 214a y la cavidad 216 es de alrededor de 34,6 mm de longitud, aunque el tamano y la forma del cartucho 210 se pueden seleccionar como sea apropiado para su proposito previsto.

Ejemplos

Ejemplo 1 - Smtesis por FASTlab™ de Inyeccion de [18F]flutemetamol usando purificacion de SPE

Con referencia a las figuras. 4, 7 y 8, se describe la produccion y la formulacion de inyeccion de flutemetamol (18F) en un casete de la presente invencion. Para este procedimiento, se construyo el casete de las figuras 5 y 11 para el funcionamiento de la maquina FASTlab™. En primer lugar, se transfiere disolucion de [18F]fluoruro por vacm a la FASTlab™ y se atrapa en un cartucho QMA (comercialmente disponible de Waters (Milford, Mass. EE.UU.)) que habfa sido acondicionado previamente. El agua enriquecida en [18O] se recupera y no participa mas en la smtesis. El [18F]fluoruro se eluye a continuacion directamente desde el cartucho QMA al recipiente de reaccion con una disolucion de bicarbonato de tetrabutilamonio (350 pl, 0,15 M en 80:20 de acetonitrilo:agua).

El recipiente de reaccion se calienta por la unidad de smtesis bajo un flujo de nitrogeno y un vacm para secar el [18F]fluoruro y retirar los disolventes del eluyente de QMA. Para la reaccion de radiomarcado se anade al recipiente de reaccion el intermedio final, AH111907 (6-etoximetoxi-2-(4'-(N-formil-N-metil)amino-3'-nitro)fenilbenzotiazol) en dimetilsulfoxido (DMSO) anhidro. El recipiente se sella posteriormente, colocando valvulas de distribuidor 7, 8, y 25 para sellar el recipiente, y se calienta. Se anade al recipiente de reaccion metoxido de sodio en metanol, que se calienta a continuacion. Para efectuar la desproteccion, se anade acido clortndrico al recipiente de reaccion, que se calienta a continuacion. La mezcla de reaccion desprotegida en bruto que contiene [18F]flutemetamol se diluye con agua purificada esteril (aproximadamente 2 ml) antes de ser pasada a traves del primer cartucho 114 de SPE de fase inversa.

Para la purificacion por SPE primaria, el primer cartucho 114 de SPE de fase inversa se lava con 12 ml de 40% de acetonitrilo:60% de agua (v/v), seguido de 5 ml de agua para retirar la mayor parte de las impurezas (incluyendo los derivados de precursor hidrofilo). El flutemetamol parcialmente purificado se eluye del primer cartucho 114 de SPE de fase inversa en 2 ml de acetonitrilo.

Para la purificacion por SPE secundaria, la fase normal, los 2 ml de disolucion de acetonitrilo del primer cartucho de SPE de fase inversa se hacen pasar hacia atras y adelante a traves del cartucho 120 de amino (o cartucho de SPE de fase normal) para atrapar muchas de las impurezas hidrofilas restantes. El cartucho de amino se lava a continuacion con un 1 ml adicional de acetonitrilo para maximizar la recuperacion de flutemetamol.

Para realizar a continuacion el intercambio de disolvente y la formulacion, la disolucion de acetonitrilo (alrededor de 3 ml) del cartucho 120 de amino se diluye con agua (aproximadamente 5,5 ml) y se hace pasar a traves del segundo cartucho 116 de C30. El cartucho 116 de C30 se lava a continuacion tres veces con agua (hasta alrededor de 20 ml en total) para reducir los niveles de acetonitrilo y metanol. La substancia farmacologica [18F] flutemetamol se retiene en el cartucho 116 y se eluye con etanol (alrededor de 3,5 ml) al vial de recogida de producto previamente llenado con polisorbato 80, tampon de fosfato y cloruro de sodio para dar Inyeccion de flutemetamol[18F]. El cartucho 116 de C30 se eluye adicionalmente con agua (aproximadamente 9,3 ml) para limpiar cualquier etanol restante y este pasa directamente al vial de recogida de producto. Una de las jeringas de FASTlab™ a continuacion mueve arriba y abajo el contenido del vial de recogida de producto para homogeneizar el producto farmacologico.

Claims (12)

1. 5

   10

   15

   20

   25

   30

   35

   40

   45

   REIVINDICACIONES

   1. Un procedimiento de purificacion que comprende las siguientes etapas:

   (a) hacer pasar una mezcla de reaccion de producto en bruto diluido que comprende flutemetamol a traves de un cartucho de SPE de fase inversa;

   (b) lavar dicho primer cartucho de SPE de fase inversa con una mezcla de agua/acetonitrilo, tetrahidrofurano(THF)/agua, metanol(MeOH)/agua o isopropanol/agua;

   (c) lavar dicho primer cartucho de SPE de fase inversa con agua una vez que se ha completado la etapa (b);

   (d) eluir dicho primer cartucho de SPE de fase inversa con acetonitrilo o tetrahidrofurano;

   (e) hacer pasar directamente la mezcla de dicha etapa (d) de elucion a traves de un cartucho de SPE de fase normal para dar una disolucion de acetonitrilo o tetrahidrofurano que comprende flutemetamol purificado;

   (f) diluir dicha disolucion de acetonitrilo o tetrahidrofurano que comprende flutematamol purificado con agua para formar una disolucion diluida de agua/acetonitrilo o agua/tetrahidrofurano que comprende flutemetamol purificado, en el que dicha disolucion de agua/acetonitrilo o de agua/tetrahidrofurano contiene alrededor de 40-70% (v/v) de agua;

   (g) hacer pasar la disolucion diluida de agua/acetonitrilo o dicha disolucion diluida de agua/tetrahidrofurano que comprende flutemetamol purificado de la etapa (f) a traves de un segundo cartucho de SPE de fase inversa y atrapar el flutemetamol en dicho cartucho, segundo cartucho de SPE de fase inversa;

   (h) lavar dicho segundo cartucho de SPE de fase inversa con agua; y

   (i) eluir el flutemetamol purificado atrapado del segundo cartucho de SPE de fase inversa con un disolvente organico inyectable.
2. 2. El procedimiento de purificacion segun la reivindicacion 1, en el que dicho primer cartucho de SPE de fase inversa de la etapa (b) se lava con una mezcla de agua/acetonitrilo.
3. 3. El procedimiento de purificacion segun la reivindicacion 1, en el que dicha mezcla de agua/acetonitrilo de la etapa (f) contiene por lo menos 50% (v/v) de agua.
4. 4. El procedimiento de purificacion segun la reivindicacion 1, en el que dicho flutemetamol purificado atrapado de la etapa (i) se eluye con etanol.
5. 5. El procedimiento de purificacion de la reivindicacion 1, en el que:

   (i) dicho cartucho de SPE de fase inversa de la etapa (b) se lava con una mezcla de agua/acetonitrilo;

   (ii) dicha mezcla de agua/acetonitrilo de la etapa (f) contiene por lo menos 50% (v/v) de agua;

   (iii) dicho flutemetamol purificado atrapado de la etapa (i) se eluye con etanol.
6. 6. El procedimiento de purificacion segun la reivindicacion 5, en el que dicho procedimiento esta

   automatizado.
7. 7. El procedimiento de purificacion segun la reivindicacion 1, en el que dicho primer cartucho de SPE de fase inversa y dicho segundo cartucho de SPE de fase inversa son cada uno un cartucho de SPE de C30.
8. 8. El procedimiento de purificacion segun la reivindicacion 7, en el que:

   (i) dicho primer cartucho de SPE de fase inversa de la etapa (b) se lava con una mezcla de agua/acetonitrilo;

   (ii) dicha mezcla de agua/acetonitrilo de la etapa (f) contiene por lo menos 50% (v/v) de agua;

   (iii) dicho flutemetamol purificado atrapado de la etapa (i) se eluye con etanol.
9. 9. El procedimiento de purificacion segun la reivindicacion 8, en el que dicho procedimiento esta

   automatizado.
10. 10. El procedimiento de purificacion segun la reivindicacion 1, en el que dicho primer cartucho de SPE de fase inversa y dicho segundo cartucho de SPE de fase inversa se pre-acondicionan cada uno con acetonitrilo y agua.
11. 11. El procedimiento de purificacion segun la reivindicacion 1, en el que dicha etapa (f) de dilucion se realiza hasta que dicha mezcla diluida de agua/acetonitrilo que comprende flutemetamol purificado contiene menos de 50%

    5 de acetonitrilo.
12. 12. El procedimiento de purificacion segun la reivindicacion 1, en el que dicho procedimiento esta automatizado.