ES2577606T3 - Sistema de análisis de diagnóstico inmediato (POC) y procedimiento para aplicar una muestra - Google Patents

Sistema de análisis de diagnóstico inmediato (POC) y procedimiento para aplicar una muestra Download PDF

Info

Publication number
ES2577606T3
ES2577606T3 ES10727004.3T ES10727004T ES2577606T3 ES 2577606 T3 ES2577606 T3 ES 2577606T3 ES 10727004 T ES10727004 T ES 10727004T ES 2577606 T3 ES2577606 T3 ES 2577606T3
Authority
ES
Spain
Prior art keywords
sample
analysis
discharge
conduit
drop
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Active
Application number
ES10727004.3T
Other languages
English (en)
Inventor
Lars Von Olleschik-Elbheim
Mark HÜNKEN
Marc Dangers
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
DST Diagnostische Systeme und Technologien GmbH
Original Assignee
DST Diagnostische Systeme und Technologien GmbH
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by DST Diagnostische Systeme und Technologien GmbH filed Critical DST Diagnostische Systeme und Technologien GmbH
Application granted granted Critical
Publication of ES2577606T3 publication Critical patent/ES2577606T3/es
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N21/00—Investigating or analysing materials by the use of optical means, i.e. using sub-millimetre waves, infrared, visible or ultraviolet light
    • G01N21/75—Systems in which material is subjected to a chemical reaction, the progress or the result of the reaction being investigated
    • G01N21/77—Systems in which material is subjected to a chemical reaction, the progress or the result of the reaction being investigated by observing the effect on a chemical indicator
    • G01N21/78—Systems in which material is subjected to a chemical reaction, the progress or the result of the reaction being investigated by observing the effect on a chemical indicator producing a change of colour
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01L—CHEMICAL OR PHYSICAL LABORATORY APPARATUS FOR GENERAL USE
    • B01L3/00—Containers or dishes for laboratory use, e.g. laboratory glassware; Droppers
    • B01L3/50—Containers for the purpose of retaining a material to be analysed, e.g. test tubes
    • B01L3/502—Containers for the purpose of retaining a material to be analysed, e.g. test tubes with fluid transport, e.g. in multi-compartment structures
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01L—CHEMICAL OR PHYSICAL LABORATORY APPARATUS FOR GENERAL USE
    • B01L3/00—Containers or dishes for laboratory use, e.g. laboratory glassware; Droppers
    • B01L3/50—Containers for the purpose of retaining a material to be analysed, e.g. test tubes
    • B01L3/502—Containers for the purpose of retaining a material to be analysed, e.g. test tubes with fluid transport, e.g. in multi-compartment structures
    • B01L3/5027—Containers for the purpose of retaining a material to be analysed, e.g. test tubes with fluid transport, e.g. in multi-compartment structures by integrated microfluidic structures, i.e. dimensions of channels and chambers are such that surface tension forces are important, e.g. lab-on-a-chip
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01L—CHEMICAL OR PHYSICAL LABORATORY APPARATUS FOR GENERAL USE
    • B01L3/00—Containers or dishes for laboratory use, e.g. laboratory glassware; Droppers
    • B01L3/50—Containers for the purpose of retaining a material to be analysed, e.g. test tubes
    • B01L3/502—Containers for the purpose of retaining a material to be analysed, e.g. test tubes with fluid transport, e.g. in multi-compartment structures
    • B01L3/5027—Containers for the purpose of retaining a material to be analysed, e.g. test tubes with fluid transport, e.g. in multi-compartment structures by integrated microfluidic structures, i.e. dimensions of channels and chambers are such that surface tension forces are important, e.g. lab-on-a-chip
    • B01L3/50273—Containers for the purpose of retaining a material to be analysed, e.g. test tubes with fluid transport, e.g. in multi-compartment structures by integrated microfluidic structures, i.e. dimensions of channels and chambers are such that surface tension forces are important, e.g. lab-on-a-chip characterised by the means or forces applied to move the fluids
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01L—CHEMICAL OR PHYSICAL LABORATORY APPARATUS FOR GENERAL USE
    • B01L3/00—Containers or dishes for laboratory use, e.g. laboratory glassware; Droppers
    • B01L3/50—Containers for the purpose of retaining a material to be analysed, e.g. test tubes
    • B01L3/502—Containers for the purpose of retaining a material to be analysed, e.g. test tubes with fluid transport, e.g. in multi-compartment structures
    • B01L3/5027—Containers for the purpose of retaining a material to be analysed, e.g. test tubes with fluid transport, e.g. in multi-compartment structures by integrated microfluidic structures, i.e. dimensions of channels and chambers are such that surface tension forces are important, e.g. lab-on-a-chip
    • B01L3/502738—Containers for the purpose of retaining a material to be analysed, e.g. test tubes with fluid transport, e.g. in multi-compartment structures by integrated microfluidic structures, i.e. dimensions of channels and chambers are such that surface tension forces are important, e.g. lab-on-a-chip characterised by integrated valves
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
    • C12Q1/001—Enzyme electrodes
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
    • G01N33/543—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor with an insoluble carrier for immobilising immunochemicals
    • G01N33/54366—Apparatus specially adapted for solid-phase testing
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
    • G01N33/543—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor with an insoluble carrier for immobilising immunochemicals
    • G01N33/54366—Apparatus specially adapted for solid-phase testing
    • G01N33/54373—Apparatus specially adapted for solid-phase testing involving physiochemical end-point determination, e.g. wave-guides, FETS, gratings
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
    • G01N33/543—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor with an insoluble carrier for immobilising immunochemicals
    • G01N33/54366—Apparatus specially adapted for solid-phase testing
    • G01N33/54386—Analytical elements
    • G01N33/54387—Immunochromatographic test strips
    • G01N33/54388—Immunochromatographic test strips based on lateral flow
    • G01N33/54389—Immunochromatographic test strips based on lateral flow with bidirectional or multidirectional lateral flow, e.g. wherein the sample flows from a single, common sample application point into multiple strips, lanes or zones
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01L—CHEMICAL OR PHYSICAL LABORATORY APPARATUS FOR GENERAL USE
    • B01L2300/00—Additional constructional details
    • B01L2300/06—Auxiliary integrated devices, integrated components
    • B01L2300/0681—Filter
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01L—CHEMICAL OR PHYSICAL LABORATORY APPARATUS FOR GENERAL USE
    • B01L2300/00—Additional constructional details
    • B01L2300/08—Geometry, shape and general structure
    • B01L2300/0809—Geometry, shape and general structure rectangular shaped
    • B01L2300/0825—Test strips
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01L—CHEMICAL OR PHYSICAL LABORATORY APPARATUS FOR GENERAL USE
    • B01L2300/00—Additional constructional details
    • B01L2300/08—Geometry, shape and general structure
    • B01L2300/0861—Configuration of multiple channels and/or chambers in a single devices
    • B01L2300/0864—Configuration of multiple channels and/or chambers in a single devices comprising only one inlet and multiple receiving wells, e.g. for separation, splitting
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01L—CHEMICAL OR PHYSICAL LABORATORY APPARATUS FOR GENERAL USE
    • B01L2300/00—Additional constructional details
    • B01L2300/08—Geometry, shape and general structure
    • B01L2300/0887—Laminated structure
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01L—CHEMICAL OR PHYSICAL LABORATORY APPARATUS FOR GENERAL USE
    • B01L2400/00—Moving or stopping fluids
    • B01L2400/02—Drop detachment mechanisms of single droplets from nozzles or pins
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01L—CHEMICAL OR PHYSICAL LABORATORY APPARATUS FOR GENERAL USE
    • B01L2400/00—Moving or stopping fluids
    • B01L2400/04—Moving fluids with specific forces or mechanical means
    • B01L2400/0403—Moving fluids with specific forces or mechanical means specific forces
    • B01L2400/0406—Moving fluids with specific forces or mechanical means specific forces capillary forces

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Clinical Laboratory Science (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Dispersion Chemistry (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Plasma & Fusion (AREA)
  • Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
  • Apparatus Associated With Microorganisms And Enzymes (AREA)

Abstract

Procedimiento de análisis en un sistema de análisis conforme a la reivindicación 17, en el que: a) Al menos un reactivo de prueba o análisis se fija a una primera superficie, y en el dorso de la misma se configura una segunda superficie, b) Al menos un líquido de muestra se hace pasar por un conducto de muestra (8, figura 1a), donde el conducto de muestra (8, figura 1a) conduce a una zona de descarga (9, figura 1a) que se encuentra frente a la segunda superficie, en el que la segunda superficie puede humedecerse al menos en una región que está frente al área de descarga, c) Y el fluido de muestra sale por el conducto de muestra (8, figura 1a) a través de su abertura de descarga como resultado de la presión aplicada, y dicho fluido forma una gota que se adhiere a la abertura de la zona de descarga (9, figura 1a), d) Donde el contacto se produce entre la gota y un punto húmedo en la segunda superficie, de manera que como resultado de la presión aplicada al conducto de muestra, la gota se hace más grande y entra en contacto con el punto humedecido, e) El líquido de muestra, como un resultado directo del contacto establecido con el punto humedecido o bien como resultado de la acción capilar de la primera superficie y/o de la presión aplicada al conducto de muestra, penetra desde la segunda superficie hacia la primera superficie o bien viaja hasta la primera superficie y reacciona con el reactivo de análisis, Se caracteriza por que f) El conducto de muestra (8, figura 1a) se ha configurado de manera que se hace más grande hacia el extremo que mira la zona de descarga (9, figura 1a) y una gota humedece al menos parcialmente la zona ensanchada (3, figura 1a).

Description

5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
60
DESCRIPCION
SISTEMA DE ANALISIS DE DIAGNOSTICO INMEDIATO (POC) Y PROCEDIMIENTO PARA APLICAR UNA MUESTRA
La presente invencion se refiere a un sistema de analisis o sistema analttico (sistema de deteccion) y a un procedimiento o metodo de analisis, que utiliza preferiblemente un diagnostico inmediato (PoC).
En la investigacion, el diagnostico o en otros multiples campos de aplicacion los ensayos de laboratorio analfticos que sirven para la determinacion cualitativa y/o cuantitativa de moleculas, analitos o bien para determinar su actividad o composicion, representan la base de enunciados trascendentales hasta para el desarrollo de nuevos procedimientos o dispositivos. La base son los metodos en general conocidos de la analftica del DNA/RNA o bien de la analftica protemica. Otro ejemplo son la multitud de procedimientos y metodos analfticos que se emplean para las reacciones de anticuerpos, las conocidas reacciones inmunologicas, que se emplean para la determinacion de biomarcadores y muchas otras sustancias /analitos.
Se conocen los procedimientos de ensayos rapidos, como el Lateral-Flow-test(LFT), Flow-Through-Test (FTT), Aglutinations-Test (AT) p Soldi-Phase-Test(SPT). Todos estos procedimientos sirven para la deteccion rapida de analitos sin la utilizacion de aparatos y son adecuados para la evaluacion visual.
Se conoce un principio analftico serio descrito en la tecnologfa actual como el analisis inmunologico (IA) para el diagnostico in vitro, conocido tambien como EIA o “binding assay”(“sandwich”) (ver por ejemplo, EP0171150B1, EP 0063810B1). Ademas se conoce, por ejemplo, la deteccion fluorimetrica de la IgE en el campo de los analisis de fijacion de la EP0119613 B1. Ademas se hace referencia al escrito de Roger P. Ekins (por ejemplo, WO 8401031 u.v.a.).
Tambien desde finales de los anos 80 se conoce un analisis de fijacion o union, soportado por una membrana, en particular de la IgE de la sangre en alergenos. Por ejemplo en el CHEMICAL ABSTRACTS, vol. 101, nr. 25, del 17 de diciembre de 1984, pagina 578, abstract nr. 228190b, Columbus, Ohio, US; B.J. WALSH y cols.: “Allergen discs prepared from nitrocellulose: detection of IgE binding to soluble and insoluble allergens”, & J. IMMUNOL. METHODS 1984, 72(1) 139-45.
Para un analisis de diagnostico inmediato se ha descrito, por ejemplo, el Fast-Check-PoC (ver EP1718970) que se basa en un analisis de fijacion soportado por una membrana y sirve para detectar alergias en la sangre entera.
Sin embargo, existe una gran necesidad de mejorar el sistema de analisis de diagnostico inmediato (PoC).
Un problema en particular es la humectacion simultanea de las muestras de cada uno de los lugares de deteccion. Esto es preciso para reproducir y obtener un resultado de elevado valor cualitativo.
Un problema significativo similar es la humectacion de las zonas de deteccion con la misma cantidad de lfquido de muestra.
En la tecnologfa actual se conocen sistemas de tubos para los inmunoanalisis, por ejemplo de la WO2002072264, que permiten una adicion de muestras controlada y definida sobre una membrana.
En general es un inconveniente que los sistemas de tubos o de conductos conocidos no garanticen una aportacion uniforme o bien homogenea de cada una de las muestras procedente de una muestra global.
Por lo tanto el cometido de la presente invencion es disponer de una adicion de muestras mejorada para un sistema de analisis PoC, que de lugar a un mejor resultado.
Sorprendentemente este cometido se resuelve mediante la reivindicacion 1. De acuerdo con la invencion se ha previsto un metodo de analisis en el que
a) Al menos un reactivo de prueba o analisis se fija a una primera superficie, y en el dorso de la misma se configura una segunda superficie,
b) Al menos un lfquido de muestra se hace pasar por un conducto de muestra, donde el conducto de muestra conduce a una zona de descarga que se encuentra frente a la segunda superficie, en el que la segunda superficie puede humedecerse al menos en una region que esta frente al area de descarga,
c) Y el fluido de muestra sale por el conducto de muestra a traves de su abertura de descarga como resultado de la presion aplicada, y dicho fluido forma una gota que se adhiere a la abertura de la zona de descarga,
d) Donde el contacto se produce entre la gota y un punto humedo en la segunda superficie, de manera que como resultado de la presion aplicada al conducto de muestra, la gota se hace mas grande y entra en contacto con el punto humedecido,
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
60
65
e) El Ifquido de muestra, como un resultado directo del contacto establecido con el punto humedecido o bien como resultado de la accion capilar de la primera superficie y/o de la presion aplicada al conducto de muestra, penetra desde la segunda superficie hacia la primera superficie o bien viaja hasta la primera superficie y reacciona con el reactivo de analisis,
f) El conducto de muestra tiene una forma tal que se ensancha hacia el extremo que mira la zona de descarga y una gota humedece parcialmente la zona ensanchada.
Los tipos de realizacion preferidos y las configuraciones se deducen de las subreivindicaciones.
Un reactivo de analisis puede contener, por ejemplo, sustancias como peptidos, protemas, enzimas o bien sus sustratos, ligandos o receptores, anticuerpos o antfgenos, ADN, ARN, asf como moleculas de origen no bioqmmico, como el yodo. Los reactivos de analisis pueden contener combinaciones de estos tipos de moleculas o bien de sus fragmentos, conjugados, formas modificadas, algo glucosiladas o bien fosforiladas. Los lfpidos y azucares estan asimismo comprendidos conforme a la invencion. Ademas las sustancias naturales y los extractos naturales pueden presentarse en los reactivos de analisis como ocurre con frecuencia en las pruebas de alergia o de intolerancia a alimentos.
La zona de descarga y/o la primera y/o segunda superficie de un soporte de deteccion pueden ser de vidrio, plastico, en particular plastico transparente. Se prefieren los policarbonatos como por ejemplo Makrolon, las olefinas polidclicas, como Topaz, polipropileno, PMMA o poliimidas. La superficie puede revestirse, por ejemplo con protemas, en particular anticuerpos, azucares como por ejemplo los dextranos, o bien con metales, vidrio o plasticos o derivados de carbono como por ejemplo, nanotubos de carbono.
Uno o varios reactivos de analisis se fijan a la primera superficie. De acuerdo con la invencion los reactivos de analisis se pueden fijar en una capa por debajo de la primera superficie. Los reactivos de analisis se pueden secar por ejemplo en la superficie, solos o bien en una matriz estabilizante o bien aplicarse como liofilizado y disolverse humedeciendo la superficie. La fijacion puede realizarse utilizando interacciones no covalentes, como por ejemplo las que existen entre anticuerpos y protema A, entre la biotina y la estreptavidina, entre la hexa-histidina y mquel-NTA o bien en pares de bases de ADN. Ademas un elemento de los reactivos de analisis puede formar un enlace covalente en la primera superficie. En una configuracion preferida el reactivo de analisis se mantiene fijado por humectacion basicamente a la primera superficie, en particular en una proporcion mayor al 50%.
Un lfquido de muestra puede ser una sustancia cualquiera o una mezcla de sustancias, si es preciso junto con un disolvente de cualquier origen, proceder en particular de una planta o de un animal, en especial de un animal mairnfero, especialmente de un ser humano. El lfquido de muestra puede contener por ejemplo sangre completa, plasma, suero, saliva, lfquido lagrimal, orina, lfquido cerebral, secreciones o bien formas procesadas de dichos ifquidos, como la sangre estabilizada con EDTA.
El conducto de muestra puede disponer de un medio de presurizacion. En una configuracion preferida puede tratarse de una abertura de llenado o de un tapon de llenado en el que se ha insertado una jeringa con la que el usuario puede ejercer una presion manual. Otras configuraciones disponen de camaras de bombeo o blfsteres o bien conexiones a bombas externas. Ademas se puede prever tambien un dispositivo de calentamiento con el que se dilata el lfquido o se aplica para la evaporacion, creandose una presion.
La superficie de descarga puede hacerse humectable en la zona de descarga del conducto de muestra, de manera que la gota formada durante la presurizacion se adhiera y no se pierda de forma incontrolada. Esta propiedad la cumplen no solo los policarbonatos como el Makrolon y las poliolefinas como el Topaz en forma no tratada, o bien posteriormente tratada, siempre que el tratamiento ulterior como el tratamiento del plasma no reduzca o anule esa humectabilidad. Esta zona humedecida puede estar rodeada por una zona hidrofoba con la que se delimita el tamano de las gotas.
La segunda superficie se crea humectable en una zona del punto de humectacion, que se encuentra frente a la zona de descarga, de manera que la gota entra en contacto con la segunda superficie. En particular esta zona se compone de nitrocelulosa.
Se prefiere especialmente el procedimiento en el que la segunda superficie presenta en la zona de descarga del conducto de prueba una distancia a la superficie de descarga de 0,001 mm hasta 15 mm, en particular de 0,01 mm hasta 2 mm, especialmente de 0,04 hasta 0,4 mm.
El punto de humectacion se situa en la segunda superficie y es el primer punto de esta superficie que contacta con la gota en su crecimiento por la segunda superficie. Se prefieren especialmente las configuraciones en las cuales el punto de humectacion es totalmente reproducible, como puede producirse por un ensanchamiento alrededor del orificio extremo del conducto de prueba y/o por la mencionada hidrofobizacion en la superficie de descarga y/o por la hidrofobizacion alrededor del punto de reticulacion en la segunda superficie.
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
60
65
En una configuracion especialmente preferida del procedimiento el conducto de prueba se ha configurado de tal forma que se ensancha en los extremos hacia la segunda superficie, de manera que la gota humedece parcial o totalmente la superficie del ensanchamiento. El ensanchamiento abarca de acuerdo con la invencion desde la zona de descarga del conducto de prueba hasta el borde de descarga del ensanchamiento.
De acuerdo con la invencion el ensanchamiento se humedece en la zona del borde de la descarga. Preferiblemente puede ocurrir que la zona del borde de la descarga del ensanchamiento sea algo hidrofoba.
El ensanchamiento actua preferiblemente de manera que el angulo de contacto y la superficie de la gota son optimos desde el punto de vista energetico cuando la gota se perfila en el ensanchamiento. Al dilatarse mas alla de los lfmites del ensanchamiento se debe aplicar todavfa mas energfa. El ensanchamiento actua de tal manera que la gota adquiere una posicion y forma reproducible y estable. El punto de reticulacion en la segunda superficie y el punto de paso del lfquido de muestra por la primera superficie se fijan preferiblemente de ese modo en la primera superficie.
Se prefiere especialmente el procedimiento en el que la superficie de la zona de descarga en la posicion en el borde de la descarga del ensanchamiento presenta una distancia a la segunda superficie de 0,001 mm hasta 15 mm, en particular de 0,01 mm hasta 2 mm, especialmente de 0,04 hasta 0,4 mm.
En otra configuracion la segunda superficie puede cerrar un ensanchamiento en al menos un borde de la zona de descarga o apoyarse al menos parcialmente o bien crear un espacio intermedio desde la segunda superficie hasta el borde de descarga del ensanchamiento. El espacio creado equivale a una cavidad que se puede delimitar espacialmente (por ejemplo, por medio de una carcasa, paredes laterales, etc...)
Ademas cada uno de los bordes de la zona de descarga del ensanchamiento se ha configurado en una unica zona de descarga que se situa frente a la primera y segunda superficie y/o descansa total o parcialmente sobre la segunda superficie.
Un espacio intermedio puede ocupar columnas de distinto volumen desde la segunda superficie o de la primera superficie a cualquier borde de descarga de un ensanchamiento. Por ejemplo, la segunda superficie puede presentar un plano inclinado respecto a la superficie de descarga de la totalidad de conductos de prueba/ensanchamientos. En particular la segunda superficie puede descansar parcialmente sobre los planos de los bordes de la zona de descarga de los ensanchamientos, tanto en los bordes de descarga de los ensanchamientos como junto a los ensanchamientos.
Se prefiere especialmente el procedimiento en el que el ensanchamiento lateral de la zona de descarga tiene forma conica o concava en al menos uno de los conductos de muestra, especialmente semiesferica, en forma de una placa o segmento esferico. El ensanchamiento puede adquirir cualquier forma aproximadamente oval o basicamente concava. El ensanchamiento puede tambien presentar una forma cilmdrica, con cantos y curvas. Es preferible que el ensanchamiento tenga forma de trompeta.
En una configuracion especialmente preferida el ensanchamiento en el borde de descarga tiene un diametro entre 0,015 y 15 mm, en particular entre 0,1 y 6 mm, especialmente entre 1 y 4 mm.
En una configuracion preferida, el ensanchamiento tiene una profundidad, es decir una distancia desde la zona de descarga del conducto de prueba hasta el borde de descarga del ensanchamiento de 0,001 mm hasta 2 mm, en particular entre 0,01 y 1 mm.
Ademas el conducto de prueba puede presentar adicionalmente un codo en la boca de descarga siempre que este no limite la humectacion del ensanchamiento.
El ensanchamiento puede oscilar entre una forma simetrica radial, por ejemplo elfptica, o bien un perfil irregular.
Es preferible tambien que exista una distancia practicamente similar de la segunda superficie a los bordes de la zona de descarga sobre una gran parte de la primera superficie y sobre varios puntos de humectacion. Ademas es preferible que la primera y/o la segunda superficie discurran en paralelo y/o planas a los niveles de los bordes de la zona de descarga o de la superficie de descarga en la totalidad de los conductos de descarga/ensanchamientos.
Desde un punto de vista tecnico de fabricacion puede ocurrir que esta distancia entre la superficie de la zona de descarga y la segunda superficie no se pueda mantener con exactitud o no sea estable, por ejemplo, si se emplea una membrana como primera superficie y segunda superficie. El metodo conforme a la invencion tiene la especial ventaja de que incluso en estas condiciones la humectacion de los puntos de humectacion se realiza casi del mismo modo y al mismo tiempo.
Se prefiere en particular una configuracion en la que se acceda al analisis a traves de al menos otro conducto, al menos un reactivo (de analisis, de prueba), en particular una solucion de lavado y/o una solucion de parada.
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
60
65
Uno o varios conductos pueden llegar desde distintas direcciones al lugar en el que se fija un reactivo de analisis, y/o al punto de humectacion. Es preferible que otro conducto se disponga en perpendicular a la lmea del conducto de pruebas-punto de humectacion (segunda superficie) - si es preciso un punto de paso (primera superficie). En particular este otro conducto puede abastecer varios lugares de medicion, en serie o en paralelo con un reactivo. El reactivo puede ser un reactivo de paro, que detenga una reaccion enzimatica, por ejemplo en un ELISA (enzimoinmunoanalisis de adsorcion). El reactivo puede contener un sustrato que conduzca la emision de la luz en un metodo de luminiscencia (Firefly).Se prefiere una configuracion en la que se anada un anticuerpo secundario marcado. Ademas es preferible anadir una solucion de lavado, por ejemplo para arrastrar los anticuerpos no unidos al lugar de medicion. Puede ser preferible anadir varios reactivos de analisis al mismo conducto uno tras otro.
Se prefiere una configuracion en la que la superficie de la zona de descarga y la segunda superficie estan unidas ngidamente una con otra, en la que en particular el volumen entre la zona de descarga del conducto de prueba mas el ensanchamiento y la segunda superficie si se diera el caso mas el espacio intermedio este totalmente cerrado frente al entorno exterior y se forme una primera cavidad, y en la cual el aire que se encuentre en este volumen pueda escaparse por otro conducto o por al menos otro orificio. La primera cavidad puede adquirir distintas formas, siempre que se garantice que la gota puede entrar en contacto con el punto de humectacion de la primera superficie. Se prefiere especialmente una configuracion en la que la cavidad en al menos una zona de descarga de un conducto de prueba presenta una distancia desde la zona de descarga hasta la segunda superficie de 0,001 mm hasta 15 mm, especialmente de 0,01 mm hasta 2 mm, en particular de 0,04 hasta 0,4 mm.
Este cavidad puede comprender ademas un espacio intermedio situado en la parte superior.
Se prefiere especialmente una configuracion en la que la primera y la segunda superficie se compongan de una membrana tipo gel, porosa, tipo filtro, permeable o semipermeable, o bien una membrana de dialisis, en particular una membrana de nitrocelulosa revestida o no revestida.
De acuerdo con la invencion la primera y/o la segunda superficie pueden estar unidas total o parcialmente al material sustrato de la cavidad. Puede tambien aplicarse como revestimiento y se puede fabricar in situ mediante un procedimiento microtecnico conocido, por ejemplo, el metodo Sol-Gel o mediante presion o vaporizacion, y puede ser disuelta por el sustrato disolviendo una primera capa previamente aplicada. La primera y/o segunda superficie puede estar estructurada mediante un metodo conocido, por ejemplo aplicando una mascara protectora a las zonas espedficas y un ataque o posterior tratamiento del plasma. La primera y/o segunda superficie puede estar compuesta por varias capas que se manipularan in situ. Por ejemplo, se podnan haber perforado agujeros con un laser en la primera y/o segunda capa, o al menos una de sus capas podna activarse a traves de un tratamiento con plasma o con biomoleculas.
Puede ser preferible que la distancia entre la primera y la segunda superficie se encuentre en la zona de 0,001 hasta 1 mm. En una configuracion preferida sera monomolecular.
En una configuracion preferida se fabrica una membrana, al menos parcialmente por fuera y se aplica despues de estas etapas de fabricacion a una superficie o se coloca en ella. La membrana puede adherirse a al menos una parte de su superficie, fijarse por carga estatica o bien engancharse de forma mecanica, en particular entre la primera y la segunda superficie, o bien fijarse mediante combinaciones de metodos distintos.
De acuerdo con la invencion antes de colocar la membrana esta se reviste por fuera de al menos un reactivo de analisis. Los reactivos de analisis se pueden aplicar a la membrana mediante una unidad de dispensado, usando un procedimiento de fijacion fotoqmmica o mediante un pulverizador. Tambien se puede anclar moleculas de ligante a la membrana, que se uniran al reactivo de analisis sin que la union de los analitos del lfquido de muestra influya basicamente en el proceso.
En otra configuracion se aplica in situ al menos una parte de los reactivos de analisis. Aqrn se pueden emplear los metodos mencionados.
En una configuracion especialmente preferida la membrana puede empaparse de agua, de manera que el lfquido de muestra tras la humectacion del punto de humectacion con la gota pueda dispersarse por la membrana. Esta propagacion se puede llevar a cabo por la fuerza capilar o bien por presurizacion continuada del lfquido de muestra. En particular la membrana puede estar compuesta de un material no tejido y especialmente de nitrocelulosa.
Puede ser preferible que la membrana disponga de algun otro material como algodon o guata que incrementa la capacidad de capilaridad, es decir la potencia de absorcion.
Se prefiere especialmente que la membrana este dispuesta en forma de al menos una tira en la cavidad, en una disposicion en paralelo.
En una configuracion especialmente preferida, a las membranas o las tiras se les aplican los reactivos de analisis.
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
60
65
En una configuracion especialmente preferida los reactivos de analisis se aplican en forma de tiras, cuadrados o rectangulos, drculos, numeros o letras o sfmbolos. Se prefieren especialmente otros sfmbolos de colores, grises o en blanco y negro sin aplicar el reactivo de analisis, de manera que por ejemplo se identifiquen mediante un signo “-“ o
En una configuracion especialmente preferida el reactivo de analisis se aplica como una tira sobre la membrana que va de un canto de la membrana hasta el otro. Se prefiere en particular la membrana en forma de tiras y las tiras de reactivo de analisis van de un canto longitudinal de la tira de la membrana hasta el canto longitudinal opuesto.
En una configuracion preferida se dispone en la primera superficie una segunda cavidad que es independiente de la cavidad formada en la segunda superficie, a la cual al menos puede ir a parar un conducto microflmdico, que se une a esta segunda cavidad con un recipiente o con un espacio exterior.
La segunda cavidad se puede configurar de forma diferente sin que el metodo conforme a la invencion se vea perjudicado. En particular puede ser preferible que los conductos microflmdicos puedan desembocar en la segunda cavidad, que esta unida a un recipiente o al entorno exterior.
En una configuracion especialmente preferida no existe ningun reactivo de analisis en un punto de paso de la primera superficie. De acuerdo con la invencion dicho punto de paso se encuentra sobre la primera superficie frente al punto de humectacion de la segunda superficie. Tan pronto como la gota entra en contacto con el punto de humectacion de la segunda superficie, se propaga el lfquido de prueba por la fuerza capilar y/o la presion por la membrana, y alcanza al menos un lugar de deteccion con reactivo de analisis, que puede encontrarse sobre una zona cubierta de la membrana. En esta configuracion la membrana soporta en la primera superficie no solo el reactivo de analisis, sino que tambien impide que componentes de partfculas mas grandes del lfquido de prueba entren en contacto con el reactivo de analisis.
Esta configuracion permite preferiblemente que los componentes mas grandes en un lfquido de prueba, como por ejemplo los eritrocitos de una muestra de sangre completa, no puedan interaccionar con los campos de analisis.
Por ello la invencion hace referencia tambien a aquellas configuraciones en las cuales en la primera superficie el punto de paso esta libre de reactivos de analisis.
En otra configuracion se han colocado al menos dos, en particular al menos diez lugares de deteccion en puntos separados en la primera superficie. Una parte de dichos lugares se ha previsto para determinaciones de control. Es preferible que se realicen las detecciones de distintos alergenos o sustancias de intolerancia alimenticia en diferentes lugares.
En una configuracion preferida al menos dos conductos de muestra con un ensanchamiento cada uno de ellos en la superficie de la zona de descarga y al menos dos de estos conductos de muestra estan conectados por medio de al menos una ramificacion a al menos un recipiente o un orificio de llenado comun.
En una configuracion especialmente preferida un conducto de muestra presenta al menos en sus extremos antes del ensanchamiento un estrechamiento o estrangulamiento, que eleva la resistencia al flujo que se puede conseguir segun Hagen-Poiseuille por estrechamiento y/o modificacion de la forma del area de la seccion transversal del conducto de muestra. Es preferible un estrechamiento del area de la seccion transversal superior al 1%, en particular mayor del 10%, especialmente mayor del 30%. Se prefiere especialmente una modificacion de una seccion transversal angular de 0,5-1 mm frente a un diametro circular de 0,5 mm. La seccion transversal del estrangulamiento puede presentar secciones irregulares, redondas, cuadradas, distintas de la del conducto de muestra. Preferiblemente la seccion transversal puede variar a lo largo del estrangulamiento tanto en forma como en dimensiones. En otra configuracion el estrangulamiento no discurre en forma recta sino que en su recorrido forma curvas y meandros.
En otra configuracion preferida el estrechamiento del conducto de prueba correspondiente tiene una longitud de 1 cm hasta 0,5 mm.
En una configuracion preferida el estrechamiento tiene lugar en forma de un escalon.
Puede ser preferible que el conducto de muestras se desvfe del primer conducto formando un angulo de 40 hasta 120 grados respecto al eje longitudinal del primer conducto de muestras.
En una configuracion preferida uno o varios conductos de muestras proceden de un primer conducto de muestra, de manera que el paso del primer conducto a como mmimo un conducto de muestras siguiente presenta una reduccion de la seccion transversal que equivale pues a una funcion de estrangulamiento.
En una configuracion especialmente preferida uno o varios, en particular cuatro conductos de muestra proceden en forma cruzada de un primer conducto de muestras.
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
60
65
En una configuracion preferida al menos dos, en particular todas las bocas de descarga de los conductos de muestra proceden de un tubo de llenado comun.
En una configuracion preferida las secciones transversales de los conductos de muestras se disponen de forma distinta y de manera que se compensan las distintas resistencias de los conductos de muestras. Por lo tanto se consigue que las distintas muestras fluyan por el ensanchamiento en cantidades similares y al mismo tiempo, incluso cuando las longitudes de los conductos o el numero de codos o flexiones por conducto vanan. Como consecuencia de ello el tamano de las gotas que se forman en los distintos ensanchamientos practicamente no vana.
En otra configuracion el estrechamiento conforme a la invencion puede efectuarse en forma de una estructura tipo tamiz, que basicamente esta colocada perpendicularmente al eje longitudinal del conducto de muestras. Los diametros de cada uno de los orificios pueden variar y presentar una disposicion irregular. Se prefiere especialmente una disposicion cuadrada o hexagonal de los orificios. En otra configuracion preferida los orificios son mas grandes hacia el borde para que el perfil de circulacion laminar por el conducto de muestras se vaya aplanando.
Ademas se prefiere que dos o mas conductos de muestras vanen de tal modo los estrechamientos que distintos conductos de muestras independientemente de su longitud presenten una misma resistencia a la circulacion.
Este estrechamiento o reduccion del diametro a lo largo del conducto de muestras correspondiente permite una distribucion homogenea optima de cada una de las muestras de una muestra comun, puesto que se consigue un estrangulamiento a lo largo del gradiente de flujo y de ese modo una formacion de gotas simultanea a la salida del conducto de muestras conduce a una humectacion optima en la membrana. Si los conductos de muestra se llenan del lfquido de muestra a traves de un orificio de llenado comun estos se van llenando del lfquido de muestra hasta que se llega a un estrechamiento donde el lfquido de muestra se detiene y se llenan los otros conductos de muestra hasta que se alcanza el estrechamiento en todos ellos. Solamente entonces el lfquido de muestra penetra en los lugares estrechos en los ensanchamientos y forma una gota.
La humectacion es especialmente adecuada si se realiza por medio de un plato radialmente abierto por arriba, puesto que dicho plato apoya la formacion de una gota. La gota sirve para salvar la distancia entre el conducto de muestras y la membrana y depende del diametro de la boca de descarga de salida del conducto. Es decir, la forma del plato conduce a un incremento reforzado de la forma del plato y con ello a que la muestra entre en contacto con el material de la membrana en el lugar de humectacion. Seguidamente la membrana asume un papel absorbente, es decir tras la toma de contacto con la muestra la membrana absorbe la muestra de forma pasiva hasta la saturacion.
En otra configuracion un conducto de muestra cualquiera puede estar estrangulado independientemente de otro. Dicha estrangulacion se puede efectuar mediante una valvula o sencillamente por medio de un elemento que inte- rrumpa el flujo de manera que un primer conducto de muestra tenga un angulo de 40-120°.
En otra configuracion preferida se han dispuesto al menos dos reactivos de analisis de manera que forman una estrella con distancias o angulos iguales o distintos alrededor de un punto de humectacion sobre la primera superfi- cie o membrana, de manera que en una lmea de union recta no se encuentra ningun reactivo de analisis fijado entre un reactivo de analisis fijado y el punto de humectacion. Esta disposicion evita que el lfquido de muestra discurra por distintos lugares de deteccion y los datos de estos lugares de deteccion se vean influidos por anticuerpos de cruce reactivos de las muestras.
En una configuracion preferida se disponen varias membranas, en particular membranas en forma de tiras dispues- tas en paralelo, y la segunda cavidad consta de una o varias cavidades parciales. Una segunda cavidad puede tener unas dimensiones tales que lleguen preferiblemente a todos los lugares de deteccion de una tira de membrana. Ademas es preferible que la segunda cavidad se extienda del mismo modo por una tira de membrana. Ademas se prefiere que la tira de membrana separe totalmente la primera y la segunda cavidad y ningun lfquido de muestra pase de la primera a la segunda cavidad sin pasar por la membrana.
En una configuracion especialmente preferida la segunda cavidad esta unida a un tubo de llenado, a traves del cual pueden pasar los reactivos de analisis o las soluciones de lavado que se inyectan por medio de una jeringa, columna de agua, bomba o bien otros dispositivos para crear presion en la segunda cavidad. En una configuracion especialmente preferida esta cavidad esta unida a un orificio de salida o a un recipiente de descarga, de manera que el aire y el lfquido sobrenadante pueden salir de esta segunda cavidad. Preferiblemente a esta segunda cavidad se unen otras cavidades o cavidades parciales con tubos de llenado comunes o recipientes de descarga.
En otra configuracion preferida ademas de al menos un reactivo de analisis fijo se dispone al menos una lente, de manera que el ojo humano puede reconocer bien los lugares de deteccion mas pequenos.
En una configuracion preferida el reactivo de analisis es liofilizado y/o se une a la primera superficie o membrana por medio de un enlace covalente o no covalente.
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
60
65
En una configuracion preferida el tamano del poro de la primera superficie o membrana tiene unas dimensiones tales que las protemas pueden pasar por los poros pero los eritrocitos o los globulos blancos no pueden. En particular, se prefiere un tamano de poro inferior a 0,8 pm, muy especialmente menor de 0,2pm.
En una configuracion preferida el metodo de analisis contiene un analisis de fijacion. Por lo que se puede emplear para la fijacion entre peptidos y/o protemasO o bien la hibridacion de ADN, ARN o ANF, la fijacion de anticuerpo- antigeno, la interaccion de anticuerpo primario-secundario, la fijacion aptamero-target, interaccion ligando-receptor o combinacion de los mismos. Se prefiere especialmente un analisis de fijacion, en el cual un antigeno se fija a la primera superficie, que contiene IgE espedfica del antigeno en el lfquido de prueba, y se anade un anticuerpo anti- IgE, que tiene una marca enzimatica, fluorescente, luminiscente o de color.
La invencion hace referencia ademas a un sistema de analisis que consta de una primera superficie y de una se- gunda superficie donde
a) al menos un reactivo de prueba o analisis se fija a una primera superficie, y en el dorso de la misma se configura una segunda superficie,
b) al menos un lfquido de muestra se hace pasar por un conducto de muestra, donde el conducto de muestra conduce a una zona de descarga que se encuentra frente a la segunda superficie, en el que la segunda superficie puede humedecerse al menos en una region que esta frente al area de descarga,
c) el conducto de muestra se ensancha por su extremo hacia una segunda superficie y una gota humedece parcialmente al menos el ensanchamiento, de forma que el borde de la zona de descarga del ensanchamiento esta a una distancia de la segunda superficie de 0,001 mm hasta 15 mm, en particular de 0,04 hasta 0,4 mm y la primera y la segunda superficie forman independientemente una de otra una cavidad.
El sistema de analisis se puede configurar de acuerdo con las caractensticas mencionadas, incluso cuando dichas caractensticas se refieren al metodo conforme a la invencion. En las reivindicaciones y en las figuras se representan otras configuraciones.
Estos ejemplos sirven exclusivamente para aclarar la invencion
A) Extraccion de 100ml de sangre periferica, o de suero o de sangre completa heparinizada
B) Mezcla de la muestra con la solucion de deteccion
C) Introduccion de la solucion en la carcasa de analisis, y se humedecen de forma homogenea los campos de deteccion de la primera superficie
D) incubacion durante 5 minutos
E) Se hace pasar 3 veces una solucion de lavado de 1 ml por el reverso de la primera superficie en la que se realiza la deteccion, dejando 1 minuto de tiempo de incubacion entre las etapas de lavado.
F) Introduccion del sustrato por el reverso de la membrana, tiempo de incubacion 5 minutos
G) Parada de la reaccion mediante la adicion de la solucion de parada por el reverso de la membrana
H) Lectura visual de los campos de deteccion
Descripcion de las figuras:
La figura 1(a) muestra , una posible disposicion que consta de una segunda cavidad(1), membrana(2), ensancha- miento(3), superficie del ensanchamiento(4),estrechamiento o estrangulacion (5), sustrato(6), lugar de deteccion con reactivo de analisis(7) y conducto de muestras(8) y superficie de la zona de descarga(9)
La figura 1(b) muestra que en la membrana no adyacente a la superficie de la zona de descarga (9) o inclinada se garantiza una humectacion casi homogenea (posicion inclinada de la membrana en el dibujo algo exagerada para una mayor aclaracion).
La figura 2 muestra el proceso de humectacion conforme a la invencion. Las flechas en el borde inferior de la figura indican la direccion del ensanchamiento de la presion en el lfquido. (izquierda) El lfquido de muestra sale de la estrangulacion y forma una gota en el ensanchamiento (centro). La gota crece y toca la membrana en un punto de humectacion (1)(derecha). El lfquido de muestra se propaga por la membrana en la direccion (2) de los lugares de deteccion.
La figura 3 muestra en un perfil longitudinal distintas formas del estrechamiento o estrangulacion. Los ensancha- mientos se han representado respectivamente como trapecios. Totalmente a la derecha un ensanchamiento en forma de trompeta.
La figura 4(a) muestra la distribucion del lfquido de muestra en los conductos de muestra, que es conducida desde un tubo de llenado (2) comun en forma de cruz hacia el estrangulamiento (1) y el ensanchamiento adyacente.
La figura 4(b) muestra esquematicamente el plano de adicion de la solucion de lavado a traves del tubo de llenado comun (1); con las segundas cavidades (2), en las que se encuentran las membranas; los ensanchamientos signifi- cativos (3) en el lado inferior de la membrana (segunda superficie) junto con los lugares de deteccion (4) de un reci- piente de descarga (5).

Claims (23)

  1. 5
    10
    15
    20
    25
    30
    35
    40
    45
    50
    55
    60
    65
    REIVINDICACIONES
    1. Procedimiento de analisis en un sistema de analisis conforme a la reivindicacion 17, en el que:
    a) Al menos un reactivo de prueba o analisis se fija a una primera superficie, y en el dorso de la misma se configura una segunda superficie,
    b) Al menos un lfquido de muestra se hace pasar por un conducto de muestra (8, figura 1a), donde el conducto de muestra (8, figura 1a) conduce a una zona de descarga (9, figura 1a) que se encuentra frente a la segunda superficie, en el que la segunda superficie puede humedecerse al menos en una region que esta frente al area de descarga,
    c) Y el fluido de muestra sale por el conducto de muestra (8, figura 1a) a traves de su abertura de descarga como resultado de la presion aplicada, y dicho fluido forma una gota que se adhiere a la abertura de la zona de descarga (9, figura 1a),
    d) Donde el contacto se produce entre la gota y un punto humedo en la segunda superficie, de manera que como resultado de la presion aplicada al conducto de muestra, la gota se hace mas grande y entra en contacto con el punto humedecido,
    e) El lfquido de muestra, como un resultado directo del contacto establecido con el punto humedecido o bien como resultado de la accion capilar de la primera superficie y/o de la presion aplicada al conducto de muestra, penetra desde la segunda superficie hacia la primera superficie o bien viaja hasta la primera superficie y reacciona con el reactivo de analisis,
    Se caracteriza por que
    f) El conducto de muestra (8, figura 1a) se ha configurado de manera que se hace mas grande hacia el extremo que mira la zona de descarga (9, figura 1a) y una gota humedece al menos parcialmente la zona ensanchada (3, figura 1a).
  2. 2. Procedimiento conforme a la reivindicacion 1, que se caracteriza por que la zona de descarga (9, figura 1a) al menos en la posicion del borde de abertura de la descarga de la zona ensanchada (3, figura 1a) se distancia de la segunda superficie entre 0,001 mm y 15mm, especialmente entre 0,01 mm y 2 mm, mas especialmente entre 0,04 y 0,4 mm.
  3. 3. Procedimiento conforme a cualquiera de las reivindicaciones anteriores, que se caracteriza por que la segunda superficie termina en al menos un borde de abertura de descarga de la zona ensanchada (3, figura 1a) o bien puede encontrarse al menos parcialmente en la zona ensanchada (3, figura 1a) o al lado de la zona ensanchada (3, figura 1a), y/o se forma un espacio intermedio desde la segunda superficie hasta el canto de abertura de la zona ensanchada (3, figura 1a).
  4. 4. Procedimiento conforme a la reivindicacion 3, que se caracteriza por que se forma una cavidad (1, figura 1a).
  5. 5. Procedimiento conforme a cualquiera de las reivindicaciones anteriores, que se caracteriza por que la zona ensanchada (3, figura 1a) por el lado de la abertura de descarga de al menos uno de los conductos de muestra (8, figura 1a) es conica o concava, especialmente semiesferica, en forma de una placa o segmento esferico.
  6. 6. Procedimiento conforme a cualquiera de las reivindicaciones anteriores, que se caracteriza por que al menos un reactivo adicional, en particular una solucion de lavado o una solucion de parada se anade si fuera preciso a al menos otro conducto.
  7. 7. Procedimiento conforme a cualquiera de las reivindicaciones anteriores, que se caracteriza por que la primera y/o la segunda superficie se compone de una membrana tipo gel, porosa, tipo malla o filtro, permeable o semipermeable, o membrana de dialisis, en particular una membrana de nitrocelulosa revestida o no revestida.
  8. 8. Procedimiento conforme a cualquiera de las reivindicaciones anteriores, que se caracteriza por que el punto de paso a la primera superficie esta libre de reactivo de analisis.
  9. 9. Procedimiento conforme a cualquiera de las reivindicaciones anteriores, que se caracteriza por que la primera y segunda superficies respectivamente se han configurado a base de una cavidad independiente una de otra (1, figura 1a).
  10. 10. Procedimiento conforme a cualquiera de las reivindicaciones anteriores, que se caracteriza por que al menos un conducto de muestra presenta un estrechamiento o paso calibrado en los extremos antes del ensanchamiento (3, figura 1a).
  11. 11. Procedimiento conforme a la reivindicacion 10, donde al menos un estrechamiento presenta una reduccion de la superficie perfilada mayor al 1%, en particular mayor al 10%, especialmente mayor al 30%.
    5
    10
    15
    20
    25
    30
    35
    40
    45
    50
    55
  12. 12. Procedimiento conforme a la reivindicacion 10 o 11, que se caracteriza por que uno o varios conductos de muestra proceden de un primer conducto de muestra (8, figura 1a), donde el primer conducto de muestra presenta un estrangulamiento (5, figura 1a).
  13. 13. Procedimiento conforme a una de las reivindicaciones 10 hasta 12, que se caracteriza por que dos o varios conductos de muestra tienen un diametro del estrechamiento distinto, de manera que distintos conductos de muestra presentan la misma resistencia a la corriente independientemente de su distinta longitud.
  14. 14. Procedimiento conforme a una de las reivindicaciones anteriores, que se caracteriza por que uno o varios conductos de muestra en forma cruzada (1, figura 4a) proceden de un primer conducto de muestra (2, figura 4a).
  15. 15. Procedimiento conforme a una de las reivindicaciones anteriores, que se caracteriza por que al menos dos reactivos de analisis se disponen de manera que estan colocados en forma de estrella con distancias o angulos iguales o diferentes alrededor de una zona de descarga de al menos un conducto de prueba (8, figura 1a) sobre la primera superficie o membrana, de manera que no existe ningun otro reactivo de analisis adicional en una lmea de union recta entre un reactivo de analisis fijado y la abertura de descarga.
  16. 16. Procedimiento conforme a una de las reivindicaciones anteriores, que se caracteriza por que el procedimiento de analisis comprende un analisis de fijacion.
  17. 17. Sistema de analisis compuesto por una primera superficie y una segunda superficie, que se caracteriza por que
    a. Al menos un reactivo de analisis se fija a una primera superficie, y se configura en el reverso una segunda superficie,
    b. El conducto de muestra (8, figura 1a) desemboca en una zona de descarga (9, figura 1a), que se encuentra frente a la segunda superficie, donde la segunda superficie esta humedecida al menos en una zona opuesta a la zona de descarga, que se caracteriza por que
    c. El conducto de muestra (8, figura 1a) se ensanche por su extremo y al menos una gota humedece al menos parcialmente dicho ensanchamiento (3, figura 1a)
    de manera que el borde de descarga del ensanchamiento (3, figura 1a) se encuentra a una distancia de la segunda superficie de 0,001 mm hasta 15mm y la primera y la segunda superficie forman respectivamente una cavidad independiente una de otra (1, figura a).
  18. 18. Sistema de analisis conforme a la reivindicacion 17, que se caracteriza por que al menos un conducto de muestra (8, figura 1a) presenta un estrechamiento o paso calibrado (5, figura 1a) cerca de su extremo antes del ensanchamiento (3, figura 1a).
  19. 19. Sistema de analisis conforme a la reivindicacion 17 o 18, que se caracteriza por que la zona ensanchada (3, figura 1a) por el lado de la abertura de descarga de al menos uno de los conductos de muestra (8, figura 1a) es conica o concava, especialmente semiesferica, en forma de una placa o segmento esferico.
  20. 20. Sistema de analisis conforme a una de las reivindicaciones anteriores, que se caracteriza por que la zona ensanchada (3, figura 1a) por el lado de la abertura de descarga presenta un diametro entre 0,015 mm y 15 mm, en particular entre 0,1 mm y 6 mm, especialmente entre 1 y 4 mm.
  21. 21. Sistema de analisis conforme a una de las reivindicaciones anteriores, que se caracteriza por que la zona ensanchada (3, figura 1a) tiene una profundidad de 0,001 mm hasta 2 mm, en particular entre 0,01 mm y 1 mm.
  22. 22. Sistema de analisis conforme a una de las reivindicaciones anteriores, que se caracteriza por que el punto de paso en la primera superficie esta libre de reactivo de analisis.
  23. 23. Sistema de analisis conforme a una de las reivindicaciones anteriores, que se caracteriza por que el sistema de analisis es un analisis de fijacion especialmente adecuado para muestras sangumeas.
ES10727004.3T 2009-07-02 2010-07-02 Sistema de análisis de diagnóstico inmediato (POC) y procedimiento para aplicar una muestra Active ES2577606T3 (es)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
DE102009033008 2009-07-02
DE102009033008A DE102009033008A1 (de) 2009-07-02 2009-07-02 Neues PoC-Testsystem und Verfahren
PCT/EP2010/059508 WO2011000959A1 (de) 2009-07-02 2010-07-02 Point of care testsystem und verfahren zum aufbringen einer probe

Publications (1)

Publication Number Publication Date
ES2577606T3 true ES2577606T3 (es) 2016-07-15

Family

ID=42752386

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
ES10727004.3T Active ES2577606T3 (es) 2009-07-02 2010-07-02 Sistema de análisis de diagnóstico inmediato (POC) y procedimiento para aplicar una muestra

Country Status (8)

Country Link
US (2) US9399786B2 (es)
EP (1) EP2448677B1 (es)
CN (1) CN102497932B (es)
DE (1) DE102009033008A1 (es)
ES (1) ES2577606T3 (es)
HK (1) HK1166749A1 (es)
PL (1) PL2448677T3 (es)
WO (1) WO2011000959A1 (es)

Families Citing this family (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP2560004A1 (de) 2011-08-19 2013-02-20 DST Diagnostische Systeme & Technologien GmbH Neues PoC-Testsystem und Verfahren
EP2767831A1 (de) 2013-02-19 2014-08-20 DST Diagnostische Systeme & Technologien GmbH Neues PoC-Testsystem und Verfahren

Family Cites Families (14)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4248904A (en) * 1979-05-21 1981-02-03 Fenimore David C Method for preparing samples for application to a thin layer chromatographic sheet
US4323536A (en) * 1980-02-06 1982-04-06 Eastman Kodak Company Multi-analyte test device
AR231590A1 (es) 1981-04-29 1984-12-28 Ciba Geigy Ag Dispositivo de analisis inmunologico y procedimiento para obtenerlo
EP0134215B1 (en) 1982-08-27 1989-10-25 EKINS, Roger Philip Measurement of analyte concentration
DE3485839T2 (de) 1983-03-17 1993-03-04 Biowhittaker Inc Fluorometrische pruefung des gesamten ige niveaus und reagens dafuer.
IL75464A (en) 1984-06-12 1990-08-31 Orgenics Ltd Method and apparatus for multi-analyte assay
EP0388782A1 (en) * 1989-03-20 1990-09-26 Quantai Biotronics Inc. Method for determination of analytes
HU9301278D0 (en) * 1990-10-30 1993-09-28 Hypoguard Ltd Collecting and signalling device
US6299838B1 (en) * 1995-10-06 2001-10-09 Kyoto Daiichi Kagaku Co., Ltd. Test apparatus for assaying a component in a liquid sample
US6656697B1 (en) * 1998-09-28 2003-12-02 Lifescan, Inc. Diagnostics based on tetrazolium compounds
US6696240B1 (en) * 1999-10-26 2004-02-24 Micronix, Inc. Capillary test strip to separate particulates
CA2450676C (en) 2001-03-09 2010-03-30 Biomicro Systems, Inc. Method and system for microfluidic interfacing to arrays
EP1564556A1 (de) 2004-02-17 2005-08-17 DST Diagnostic Science & Technology GmbH Verfahren und Vorrichtung zur Bestimmung mehrerer Analyten mit simultaner interner Kontrolle
US20080257071A1 (en) * 2005-11-25 2008-10-23 Koninklijke Philips Electronics, N.V. Microfluidic Device with Porous Membrane and an Unbranched Channel

Also Published As

Publication number Publication date
WO2011000959A1 (de) 2011-01-06
US9399786B2 (en) 2016-07-26
EP2448677B1 (de) 2016-04-13
PL2448677T3 (pl) 2016-10-31
EP2448677A1 (de) 2012-05-09
CN102497932B (zh) 2015-09-30
DE102009033008A1 (de) 2011-01-05
US20160305888A1 (en) 2016-10-20
US20120208205A1 (en) 2012-08-16
HK1166749A1 (en) 2012-11-09
US10393664B2 (en) 2019-08-27
CN102497932A (zh) 2012-06-13

Similar Documents

Publication Publication Date Title
ES2562406T3 (es) Dispositivo capilar de flujo lateral de reacción multietapa
ES2828278T3 (es) Sistema de integración de recolección de lágrimas microfluídicas y análisis de flujo lateral de analitos de interés
ES2229797T3 (es) Tiras reactivas bidireccionales de flujo lateral y procedimiento correspondiente.
ES2271330T3 (es) Dispositivo y procedimiento de ensayo quimico microfluidico.
ES2687620T3 (es) Dispositivo y método para análisis en sistemas microfluídicos
ES2439225T3 (es) Sistema y método para el suministro de fluidos
ES2741001T3 (es) Mezcla de fluidos en sistemas fluídicos
ES2649559T3 (es) Método y aparato para realizar ensayos
ES2294389T3 (es) Articulo microfluidico.
ES2949146T3 (es) Dispositivo de ensayo lateral
ES2776523T3 (es) Microportadores codificados mejorados, sistema de ensayo que los comprende y método para realizar un ensayo
ES2241911T3 (es) Dispositivo y procedimiento de ensayo para lipoproteinas de alta densidad.
JP2005230816A (ja) 液体を処理するためのマイクロ構造化されたプラットフォーム及び該プラットフォームの使用法
Zhao et al. On-chip porous microgel generation for microfluidic enhanced VEGF detection
US20190001332A1 (en) Disposable independent 3-d structure depened sequential capillary lateral flow device for analyte determination
CN109564236A (zh) 分析组件、分析设备、分析装置以及分析系统
TWI498166B (zh) 以表面電漿共振定量分析之自動操作檢測程序的多孔性薄膜微流體裝置
ES2672268T3 (es) Portaobjetos para pruebas de inmunoanálisis
ES2577606T3 (es) Sistema de análisis de diagnóstico inmediato (POC) y procedimiento para aplicar una muestra
JP5430569B2 (ja) マイクロデバイス及びマイクロチップ装置並びにこれらを用いた分析方法
CN106153891B (zh) 三维生物标志物检测装置、制备方法及检测生物标志物的方法
JP7494204B2 (ja) アッセイデバイスにおける試薬の配備
ES2207539T3 (es) Dispositivo de analisis con un biochip.
PT2282206E (pt) Método e aparelho para testar vários analitos simultaneamente com um controlo interno
EP3336556A1 (en) Flow path structure, measurement unit, method for measuring liquid to be measured, and device for measuring liquid to be measured