ES2574957T3 - Métodos de tratamiento de semillas - Google Patents

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Abstract

Método para aumentar el crecimiento de la planta, que comprende tratar la semilla al menos un mes antes de la siembra con una cantidad eficaz de una molécula de señal de planta, donde la molécula de señal de planta es un lipo-quitooligosacárido (LCO).

Description

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Metodos de tratamiento de semillas Antecedentes de la invencion
[0001] La simbiosis entre las bacterias de tierra gram-negativa, Rhizobiaceae y Bradyrhizobiaceae, y leguminosas tales como semilla de soja, esta bien documentada.
La base bioqufmica para estas relaciones incluye un intercambio de senalizacion molecular, donde los compuestos de senal planta-a-bacteria incluyen flavonas, isoflavonas y flavanonas, y los compuestos de senal bacteria-a-planta incluyen los productos de extremo de la expresion de genes Bradyrhizobial y Rizobial nod, conocidos como lipo- quitooligosacaridos (LCO).
La simbiosis entre estas bacterias y las leguminosas permite a la legumbre fijar nitrogeno atmosferico y asf crecen en suelo que tiene bajos niveles de nitrogeno asimilable, obviando asf una necesidad para fertilizantes de nitrogeno. Ya que fertilizantes de nitrogeno pueden significativamente aumentar el coste de plantas de cultivo y se asocian con un numero de efectos contaminantes, la industria agrfcola continua sus esfuerzos para explotar esta relacion biologica y desarrollar nuevos agentes y metodos para mejorar el rendimiento de plantas sin aumentar el uso de fertilizantes basados en nitrogeno.
[0002] W02005/087005 divulga el uso de una o varias senales isoflavonoides compuestas que pueden estar con un portador aceptable agrfcola, aplicado antes de la siembra.
[0003] W020099/049747 divulga una composicion biologica para aumentar el crecimiento de planta y el rendimiento de planta de cultivo, que comprende lipo-quitooligosacarido y compuesto flavonoide incluyendo flavonas, flavanoles, flavonoles, flavanonas o isoflavonas.
[0004] Patente US 6,979,664 ensena un metodo para aumentar la germinacion de semilla o emergencia de semilla de una planta de cultivo, que incluye las etapas de proporcionar una composicion que comprende una cantidad eficaz de al menos un lipo-quitooligosacarido y un portador adecuado agrfcola y aplicar la composicion en la proximidad inmediata de una semilla o planton en una cantidad eficaz para aumentar la germinacion de semilla de la emergencia de planton en comparacion con una semilla no tratada o planton.
[0005] Otro desarrollo en este concepto se ensena en WO 2005/062899, dirigido a combinaciones de al menos un inductor de planta, es decir un LCO, en combinacion con un fungicida, insecticida, o combinacion de los mismos, para mejorar una caracterfstica de planta tal como pie de planta, crecimiento, vigor y/o rendimiento.
Las composiciones y metodos se consideran aplicables a tanto leguminosas como no leguminosas, y se pueden usar para tratar una semilla (justo antes de siembra), planton, rafz o planta.
[0006] De forma similar, WO 2008/085958 ensena composiciones para el aumento del crecimiento de planta y rendimiento de planta de cultivo en tanto leguminosas como no leguminosas, y que contienen LCO en combinacion con otro agente activo tal como una quitina o quitosano, un compuesto flavonoide, o un herbicida, y que se pueden aplicar a semillas y/o plantas concomitantemente o consecutivamente.
Como en el caso de la publicacion '899, la publicacion '958 ensena tratamiento de semillas justo antes de siembra.
[0007] Un numero de otras publicaciones describen el beneficio de LCO en los procesos de tratamiento de semilla, tal como, Kidaj et al., "Nod factors stimulate seed germination and promote growt and nodulation of pea and vetch under competitive conditions," Microbiol Res 25426 (2011) y Maj et al, "Pretreatment of Clover Seeds wit Nod Factors Improves Growt and Nodulation of Trifolium pratense," J Chem Ecol (2009) 35:479-487.
[0008] Mas recientemente, Halford, Smoke Signals," in Chem. Eng. News (April 12, 2010), en paginas 37-38, informa que karrikinas o butenolidas que se contienen en el humo hacen de estimulantes de crecimiento y germinacion de semilla de espuela tras un fuego de bosque, y pueden tonificar semillas tales como mafz, tomates, lechuga y cebollas que han sido almacenadas.
Estas moleculas son el sujeto de la patente US 7,576,213.
Breve resumen de la invencion
[0009] La presente invencion proporciona metodos para aumentar el crecimiento de planta y produccion de planta de cultivo donde el efecto beneficioso de una molecula de senal de planta (agente de aumento de crecimiento de planta) se puede obtener sin la necesidad de aplicar la molecula de senal de planta (agente de aumento de crecimiento de planta) a la semilla contemporaneamente con la siembra.
La presente invencion esta basada, en parte, en el descubrimiento de que el tratamiento de semillas con una molecula de senal de planta que es un lCo, seguido de almacenamiento prolongado antes de la siembra, produce crecimiento de planta mejorada, incluyendo superior rendimiento de planta y/o area de superficie de hoja y/o numero de rafz, longitud y masa, en comparacion con planta cosechada de ambas semillas no tratadas.
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La presente invencion tambien proporciona metodos para aumentar el crecimiento de planta y produccion de planta de cultivo donde se pueden obtener mejoras adicionales sobre plantas de cultivo de plantas producidas de semillas tratadas justo antes o en una semana o menos de la siembra.
[0010] Un primer aspecto de la presente invencion se refiere a un metodo para aumento el crecimiento de planta, que comprende tratar la semilla al menos un mes (treinta dfas) antes de siembra con una cantidad eficaz de una molecula de senal de planta, donde la molecula de senal de planta es un lipoquitooligosacarido.
En formas de realizacion, la semilla se puede tratar conforme al presente metodo 2 meses antes de siembra, al menos 3 meses antes de siembra, al menos 4 meses antes de siembra, al menos 5 meses antes de siembra, al menos 6 meses antes de siembra, al menos 9 meses antes de siembra, al menos 1 ano antes de siembra, al menos 2 anos antes de siembra y en algunas formas de realizacion, al menos 3 anos antes de siembra.
[0011] El tratamiento se usa para producir una planta (planta de cultivo) que muestra al menos uno del rendimiento aumentado medido en cuanto a bushel/acre, numero de rafz aumentado, longitud de rafz aumentada, masa de rafz aumentada, volumen de rafz aumentada y area de hoja aumentada, en comparacion con planta cosechada de semilla no tratada.
En formas de realizacion particulares, el tratamiento se puede utilizar para producir una (planta de cultivo) planta que muestra al menos uno de rendimiento aumentado medido en cuanto a bushel/acre, numero de rafz aumentado, longitud de rafz aumentada, masa de rafz aumentada, volumen de rafz aumentada y area de hoja aumentada en comparacion con una planta (de cultivo) cosechada de semilla tratada con la molecula de senal justo antes o a una semana o menos de la siembra.
[0012] En la presente invencion, la molecula de senal de planta es un lipo-quitooligosacarido (LCO).
En algunas formas de realizacion, el LCO es recombinante.
En otras formas de realizacion, el LCO es sintetico.
En otras formas de realizacion, el LCO se obtienes de un microorganismo, por ejemplo, unas especies de Rhizobium seleccionada de Rhizobium sp., Bradyrhizobium sp., por ejemplo, Bradyrhizobium japonicum, Sinorhizobium sp. y Azorhizobium sp, o de un hongo micorrizal arbuscular.
[0013] En otras formas de realizacion, el tratamiento comprende ademas contacto de la semilla con al menos un otro agente agronomicamente beneficioso, por ejemplo, diazotrofo (inoculante rizobial), hongos micorrizales, un agente de solubilizacion de fosfato, herbicida, insecticida o una fungicida.
En algunas formas de realizacion, el tratamiento implica pulverizacion de una composicion que comprende la molecula de senal de planta sobre la semilla, y en algunas otras formas de realizacion, el tratamiento implica goteo de la composicion sobre las semillas.
[0014] El metodo de la presente invencion es aplicable tanto aleguminosas como a no leguminosas.
En algunas formas de realizacion, la semilla leguminosa es semilla de haba de soja.
En algunas otras formas de realizacion, la semilla que es tratada es semilla no leguminosa tal como una semilla de planta de cultivo de campo, por ejemplo, mafz, o una semilla de planta de cultivo vegetal.
[0015] La semilla se puede tratar conforme al presente metodo en cualquier sitio de un mes (treinta dfas) hasta 1 ano, 2 anos y en algunas formas de realizacion, incluso 3 anos antes de la siembra, dependiente de propiedades de semilla particular (viabilidad tras almacenamiento) o estandares de industria.
Por ejemplo, las semillas de haba de soja son generalmente plantadas la estacion siguiente, mientras que las semilla de mafz se pueden almacenar durante periodos mucho mas largos de tiempo incluyendo hasta 3 anos antes de la siembra.
[0016] Como demostrado en los ejemplos practicos, que incluyen experimentos comparativos llevados a cabo tanto en condiciones de invernadero como de campo, los beneficios de agentes de aumento de crecimiento de moleculas/planta de senal se pueden obtener aunque las moleculas de senal se aplican a una semilla significativamente antes del tiempo de la siembra y tras un periodo de almacenamiento prolongado.
[0017] Como demostrado ademas en los ejemplos practicos, que incluyen experimentos comparativos llevados a cabo tanto en condiciones de invernadero como de campo, formas de realizacion de la presente invencion que supusieron tratamiento de semilla de haba de soja con un LCO de Bradyrhizobium japonicum mostrando rendimiento de planta aumentado, area de superficie de hoja y longitud de rafz y volumen de rafz aumentados en comparacion tanto con semillas no tratadas como semillas tratadas con el LCO justo antes o a una semana de la siembra.
Breve descripcion de los dibujos
[0018]
Las figuras 1 y 2 muestran las estructuras qufmicas de compuestos de lipo-quitooligosacarido utiles (LCO) en la practica de la presente invencion.
La fig. 3 es un grafico de barras que muestra el area de superficie media de hojas trifoliadas de primer en planta de haba de soja de 19 dfas germinada de semilla tratada conforme a una forma de realizacion de la
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presente invencion (por ejemplo, 55 dfas antes de la siembra) en comparacion con controles (es decir, semilla no tratada y semilla tratada con la molecula de senal 7 dfas antes de la siembra).
Descripcion detallada
[0019] Para fines de la presente invencion, el termino "molecula de senal de planta", que se puede usar de forma intercambiable con "agente que aumenta el crecimiento de la planta", aproximadamente se refiere a cualquier agente, tanto de origen natural en plantas o microbios, como sintetico (y que puede ser de origen no natural) que directa o indirectamente activa una via bioqufmica de planta, dando como resultado crecimiento de planta aumentado, medible al menos en cuanto al menos uno de rendimiento aumentado medido en cuanto a bushel/acre, numero de rafz aumentada, longitud de rafz aumentada, masa de rafz aumentada, volumen de rafz aumentada y area de hoja aumentada.
Las moleculas de senal de planta que pueden ser utiles en la practica de la presente invencion son compuestos de lipo-quitooligosacarido (LCO's).
[0020] La molecula de senal de planta puede ser componente aislado y/o purificado.
El termino "aislado" significa que la molecula de senal es quitada de su estado natural y separada de otras moleculas naturalmente asociada a esta.
El termino "purificado" significa que la concentracion de la molecula de senal es aumentada (por un proceso de purificacion) con respecto a otros componentes, por ejemplo, componentes no deseados o inferiores.
[0021] LCO, tambien conocidos en la tecnica como senales simbioticas Nod o factores Nod, consisten en un esqueleto de oligosacarido de residuos de W-acetil-D-glucosamina p-1,4-enlazada ("GIcNAc") con una cadena de acilo graso N-enlazado condensada en el extremo no reductor.
LCO se diferencian en el numero de residuos GIcNAc en el esqueleto, en la longitud y grado de saturacion de la cadena de acilo graso, y en las sustituciones de residuos de azucar no reductor y reductor.
imagen1
donde:
G es una hexosamina que puede ser sustituida, por ejemplo, por un grupo acetflico en el nitrogeno, un grupo de sulfato, un grupo acetflico y/o un grupo de eter en un oxfgeno,
R1, R2, R3, R5, R6 y R7, que puede ser identico o diferente, representan H, CH3 CO--, Cx Hy CO-- donde x es un numero entero entre 0 y 17, e y es un numero entero entre 1 y 35, o cualquier otro grupo de acilo tal como por ejemplo un carbamilo,
R4 representa una cadena alifatica mono-, di-, o triinsaturada y tetrainsaturada que contiene al menos 12 atomos de carbono, y n es un numero entero entre 1 y 4.
[0022] LCO se pueden obtener (por ejemplo, aislado y/o purificado) de bacterias tales como Rhizobia, por ejemplo, Rhizobium sp., Bradyrhizobium sp., Sinorhizobium sp. y Azorhizobium sp.
Estructura LCO es caracterfstica para cada una de esas especies bacterianas, y cada cepa puede producir multiples LCO con estructuras diferentes.
Por ejemplo, LCO especfficos de S. meliloti han sido tambien descritos en patente US 5,549,718 con la formula II:
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imagen2
donde R representa H o CH3 CO-- y n es igual a 2 o 3.
[0023] LCO aun mas especfficos incluyen NodRM, NodRM-1; NodRM-3.
Cuando acetilado (el R=CH3 CO--), se vuelven AcNodRM-1, y AcNodRM-3, respectivamente (patente US 5,545,718).
[0024] LCO de Bradyrhizobium japonicum son descritos en patentes US 5,175,149 y 5,321,011.
Aproximadamente, son pentasacarido fitohormonas que comprenden metilfucosa.
Un numero de estos lCo derivados de B. japonicum son descritos: BjNod-V (C181); BjNod-V (Ac; C181), BjNod-V (C1a:1); y BjNod-V (Ac; C160), con "V" indicando la presencia de cinco N-acetilglucosaminas; "Ac" una acetilacion; el numero despues de "C" indicando el numero de carbonos en la cadena lateral de acido graso; y el numero despues de ":" el numero de enlaces doble.
[0025] LCO usados en formas de realizacion de la invencion se pueden recuperar de cepas bacterianas que producen LCO, tales como cepas de Azorhizobium, Bradyrhizobium (incluyendo B. japonicum), Mesorhizobium, Rhizobium (incluyendo R. leguminosarum), Sinorhizobium (incluyendo S. meliloti), y cepas bacterianas geneticamente modificadas para producir LCO.
[0026] LCO son los determinantes primarios de especificidad de huesped en la simbiosis de legumbre (Diaz, et al., Mol. Plant-Microbe Interactions 13:268-276 (2000)). Asf, en la familia de legumbre, generos y especies de rhizobia especfficos desarrollan una relacion de fijacion de nitrogeno simbiotica con un huesped de legumbre especffica.
Estas combinaciones de plant-host/bacteria son descritas en Hungria, et al., Soil Biol. Biochem. 29:819-830 (1997). Ejemplos de estas asociaciones simbioticas de bacterias/legumbre incluyen S. meliloti/alfalfa y trebol oloroso; R. leguminosarum biovar viciae/guisantes y lentejas; R. leguminosarum biovar phaseoli/habas; Bradyrhizobium japonicum/habas de soja; y R. leguminosarum biovar trifolii/ trebol rojo.
Hungria tambien enumera los inductores de gen flavonoide eficaz Nod de las especies rizobiales, y las estructuras LCO especfficas que se producen por las especies rizobiales diferentes.
Sin embargo, especificidad LCO solo se requiere para establecer nodulacion en leguminosas.
En la practica de la presente invencion, uso de un LCO dado no esta limitado al tratamiento de semilla de su legumbre simbiotica asociada, para conseguir rendimiento de planta aumentado medido en cuanto a bushel/acre, numero de rafz aumentada, longitud de rafz aumentada, masa de rafz aumentada, volumen de rafz aumentado y area de hoja aumentada, en comparacion con planta cosechado de semilla no tratada, o en comparacion con planta cosechado de semilla tratada con la molecula de senal justo antes o a una semana o menos de la siembra.
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Asf, por medio de ejemplo, un LCO obtenido de B. japonicum se puede utilizar para tratar semilla leguminosa ademas del haba de soja y semilla no leguminosa tal como mafz.
Como otro ejemplo, el guisante LCO obtenible de R. leguminosarum ilustrado en la Fig. 1 (designado V LCO (C18:1); SP104) puede utilizarse para tratar semilla leguminosa diferente del guisante y no leguminoso tambien.
[0027] Tambien incluido en la presente invencion es el uso de LCO obtenido (por ejemplo, aislado y/o purificado) de hongos micorrizales arbusculares, tales como hongos del grupo Glomerocycota, por ejemplo, Glomus intraradicus. Las estructuras de LCO representativos obtenidas de estos hongos son descritos en WO 2010/049751 y WO 2010/049751 (los LCO descritos en estos tambien referidos como "factores Myc" ).
[0028] Tambien incluido en la presente invencion es el uso de compuestos LCO sinteticos, tales como los descritos en WO2005/063784, y LCO recombinante producido mediante ingenierfa genetica.
La estructura basics de origen natural de LCO puede contener modificaciones o sustituciones encontradas en el LCO de origen natural, tales como los descritos en Spaink, Crit. Rev. Plant Sci. 54:257-288 (2000) y D'Haeze, et al., Glycobiology 12:79R-105R (2002). Moleculas de oligosacarido precursor (CO, que como se describe abajo, son tambien utiles como moleculas de senal de planta en la presente invencion) para la construccion de LCO tambien se puede sintetizar por organismos geneticamente modificados, por ejemplo, como en Samain, et al., Carb. Res. 302:35-42 (1997).
[0029] LCO se pueden utilizar en varias formas de pureza y se pueden usar solo o en forma de un cultivo de bacterias productoras de LCO u hongos.
Por ejemplo, OPTIMIZE® (disponible comercialmente de Novozymes BioAg Limited) contiene un cultivo de B. japonicum que produce un LCO (LCO-V(C18:1 MeFuc), MOR116) que se ilustra en la Fig. 2.
Metodos para proporcionar LCO sustancialmente puros incluyen sencillamente eliminar las celulas microbianas de una mezcla de LCO y el microbio, o continuar aislando y purificando las moleculas LCO a traves de separacion de fase de solvente LCO seguida de cromatograffa de HPLC como se describe, por ejemplo, en la Patente U.S. 5,549,718.
Purificacion se puede mejorar por HPLC repetida, y las moleculas LCO purificadas se pueden liofilizar para almacenamiento a largo plazo.
[0030] Las semillas se pueden tratar con la molecula de senal de planta en diferentes vfas pero preferiblemente via pulverizacion o goteo.
Tratamiento de pulverizacion y goteo se puede realizar por la formulacion de una cantidad eficaz de la molecula de senal de planta en un portador aceptable agrfcola, tfpicamente acuoso en la naturaleza, y pulverizacion o goteo de la composicion sobre semilla via un sistema de tratamiento continuo (que se calibra para aplicar tratamiento a un fndice predefinido al flujo continuo de semilla), tal como un tipo tambor de tratador.
Estos metodos ventajosamente emplean volumenes relativamente pequenos de portador para permitir secado relativamente rapido de la semilla tratada.
En esta forma, volumenes grandes de semilla pueden ser eficazmente tratados.
Sistemas de lote, donde un tamano de lote predeterminado de semilla y composiciones de molecula de senal se entregan en un mezclador, tambien pueden ser empleados.
Sistemas y aparatos para realizar estos procesos son disponibles comercialmente de proveedores numerosos, por ejemplo, Bayer CropScience (Gustafson).
[0031] En otra forma de realizacion, el tratamiento implica recubrir semillas.
Un tal proceso implica recubrir la pared interna de un contenedor redondo con la composicion, anadir semillas, luego rotar el contenedor para hacer que las semillas entren en contacto con la pared y la composicion, un proceso conocido en la tecnica como "revestimiento de contenedor".
Semillas se pueden recubrir por combinaciones de metodos de recubrimiento.
Remojo implica tfpicamente uso de una solucion acuosa que contiene el intensificador de crecimiento de planta.
Por ejemplo, semillas se pueden empapar de durante aproximadamente 1 minuto a aproximadamente 24 horas (por ejemplo, durante al menos 1 min, 5 min, 10 min, 20 min, 40 min, 80 min, 3 horas, 6 horas, 12 horas, 24 horas). Algunos tipos de semillas (por ejemplo, semillas de haba de soja) tienden a ser sensibles a la humedad.
Asf, remojar tales semillas durante un periodo de tiempo extendido no puede ser deseable, en cuyo caso el remojo es tfpicamente realizado de durante aproximadamente 1 minuto a aproximadamente 20 minutos.
[0032] Sin pretension a ser limitado por cualquier teorfa particular de operacion, los solicitantes creen que incluso en la medida en que el tratamiento no pueden causar que la molecula de senal de planta permanezca en contacto con la superficie de semilla despues del tratamiento y durante cualquier parte de almacenamiento, la molecula de senal puede conseguir los efectos esperados por un fenomeno conocido como memoria de semilla o percepcion de semilla.
Ver, Macchiavelli y Brelles-Marino, J. Exp. Rezno. 55(408):2635-40 (2004). Solicitantes tambien creen que tras el tratamiento la molecula de senal, el LCO difunde hacia la raicilla de desarrollo joven y activa genes simbioticos y desarrollables que producen un cambio en la arquitectura de rafz de la planta.
Sin embargo, las composiciones con la molecula de senal de planta pueden contener ademas una agente adherente o de recubrimiento para asistir en la adherencia de la molecula de senal a la semilla.
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Para uso estetico, las composiciones puede contener ademas un polfmero de recubrimiento y/o un colorante.
[0033] La cantidad eficaz de la molecula de senal de planta usada para tratar la semilla, expresada en unidades de concentracion, generalmente varfa de aproximadamente 10-5 a aproximadamente 10-14 M, y en algunas formas de realizacion, de aproximadamente 10-5 a aproximadamente 10-11 M, y en algunas otras formas de realizacion de aproximadamente 10-7 a aproximadamente 10-8 M.
Expresada en unidades de peso, la cantidad eficaz generalmente varfa de aproximadamente 1 a aproximadamente 400 pg/cien peso (ctw) semilla, y en algunas formas de realizacion de aproximadamente 2 a aproximadamente 70 pg/ctw, y en algunas otras formas de realizacion, de aproximadamente 2,5 a aproximadamente 3.0 pg/ctw semilla.
La cantidad eficaz de la molecula de senal de planta, sin embargo, puede ser obtenido por un ensayo de respuesta de dosificacion adecuada, preferiblemente, en un estudio de invernadero y/o campo.
[0034] El tratamiento tambien puede implicar poner en contacto la semilla, previamente, simultaneamente o consecutivamente al contacto con la molecula de senal de planta, con un agente agrfcolamente/agronomicamente beneficioso.
Como se utiliza en este caso y en la tecnica, el termino "agrfcolamente o agronomicamente beneficioso" se refiere a agentes que cuando aplicadod a semillas suponen aumento (que pueden ser estadfsticamente significativo) de caracterfsticas de planta talrd como pie de planta, crecimiento, vigor o rendimiento en comparacion con semillas no tratadas.
Ejemplos representativos de tales agentes que pueden ser utiles en la practica de la presente invencion incluyen, pero no es limitado a, diazotrofos, hongos micorrizales, herbicidas, fungicidas, insecticidas, y agentes de solubilizacion de fosfato.
[0035] Herbicidas adecuados incluyen bentazona, acifluorfen, chlorimuron, lactofen, clomazone, fluazifop, glufosinato, glifosato, setoxidim, imazetapir, imazamox, fomesafen, flumiclorac, imazaquin, y cletodim.
Productos comerciales que contienen cada uno de estos compuestos son facilmente disponibles.
Concentracion herbicida en la composicion generalmente corresponded al fndice de uso marcado para un herbicida particular.
[0036] Un "fungicida" como se utiliza en este caso y en la tecnica, es un agente que mata o inhibe crecimiento fungico.
Como se utiliza en este caso, una fungicida "muestra actividad contra" unas especies particulares de hongos si el tratamiento con el fungicida produce matanza o inhibicion de crecimiento de una poblacion fungica (por ejemplo, en la tierra) con respecto a una poblacion no tratada.
Fungicidas eficaces conforme a la invencion mostraran adecuadamente actividad contra una gama ancha de patogenos, incluyendo pero no limitado a Phytophthora, Rhizoctonia, Fusarium, Pythium, Phomopsis o Selerotinia y Phakopsora7 y combinaciones de los mismos.
[0037] Fungicidas comerciales pueden ser adecuados para su uso en la presente invencion.
Fungicidas disponibles comercialmente adecuados incluyen PROTEGE, RIVAL o ALLEGIANCE FL o LS (Gustafson, Piano, TX), WARDEN RTA (Agrilance, St. Paul, MN), APRON XL, APRON MAXX RTA or RFC, MAXIM 4FS o XL (Syngenta, Wilmington, DE), CAPTAN (Arvesta, Guelph, Ontario) y PROTREAT (Nitragin Argentina, Buenos Ares, Argentina).
Ingredientes activos en estos y otros fungicidas comerciales incluyen, pero de forma no limitativa, fludioxonil, mefenoxam, azoxistrobin y metalaxil.
Fungicidas comerciales son mas adecuadamente usados de acuerdo con las instrucciones del fabricante en las concentraciones recomendadas.
[0038] Como se utiliza en este caso, un insecticida "muestra actividad contra" unas especies particulares de insecto si el tratamiento con el insecticida produce matanza o inhibicion de una poblacion de insecto con respecto a una poblacion no tratada.
Insecticidas eficaces conforme a la invencion mostraran adecuadamente actividad contra una gama ancha de insectos incluyendo, pero no limitado a, gusanos alambre, gusano cortador, larvas, gusano de la rafz de mafz, larvas de mafz de semilla, escarabajos de pulga, bichos de chinche, pulgones, escarabajos de hoja, y chinches.
[0039] Insecticidas comerciales se pueden adecuar para usar en la presente invencion.
Insecticidas disponible comercialmente adecuados incluyen CRUISER (Syngenta, Wilmington, DE), GAUCHO y PONCHO (Gustafson, Piano, TX).
Ingredientes activos en estos y otros insecticidas comerciales incluyen tiametoxam, clotianidina, e imidacloprid. Insecticidas comerciales son mas adecuadamente usados de acuerdo con las instrucciones del fabricante en las concentraciones recomendadas.
[0040] Como se utiliza en este caso, agentes de solubilizacion de fosfato incluyen, pero de forma no limitativa, microorganismos de solubilizacion de fosfato.
Como se utiliza en este caso, "microorganismo de solubilizacion de fosfato" es un microorganismo que es capaz de aumentar la cantidad de fosforo disponible para una planta.
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Microorganismos de solubilizacion de fosfato incluyen cepas bacterianas y fungicas.
En la forma de realizacion, el microorganismo de solubilizacion de fosfato es un microorganismo que forma espora.
[0041] Ejemplos no limitativos de microorganismos de solubilizacion de fosfato incluyen especies de un genero seleccionado del grupo consistente en Acinetobacter, Arthrobacter, Arthrobotrys, Aspergillus, Azospirillum, Bacillus, Burkholderia, Candida Chryseomonas, Enterobacter, Eupenicillium, Exiguobacterium, Klebsiella, Kluyvera, Microbacterium, Mucor, Paecilomyces, Paenibacillus, Penicillium, Pseudomonas, Serratia, Stenotrophomonas, Streptomyces, Streptosporangium, Swaminathania, Thiobacillus, Torulospora, vibrio, Xanthobacter, y Xanthomonas.
[0042] Ejemplos no limitativos de microorganismos de solubilizacion de fosfato son seleccionados del grupo que consiste en Acinetobacter calcoaceticus, Acinetobacter sp, Arthrobacter sp., Arthrobotrys oligospora, Aspergillus niger, Aspergillus sp., Azospirillum halopraeferans, Bacillus amyloliquefaciens, Bacillus atrophaeus, Bacillus circulans,Bacillus licheniformis, Bacillus subtilis, Burkholderia cepacia, Burkholderia vietnamiensis, Candida krissii, Chryseomonas luteola, Enterobacter aerogenes, Enterobacter asburiae, Enterobacter sp., Enterobacter taylorae, Eupenicillium parvum, Exiguobacterium sp., Klebsiella sp., Kluyvera cryocrescens, Microbacterium sp., Mucor ramosissimus, Paecilomyces hepialid, Paecilomyces marquandii, Paenibacillus macerans, Paenibacillus mucilaginosus, Pantoea aglomerans, Penicillium expansum, Pseudomonas corrugate, Pseudomonas fluorescens, Pseudomonas lutea, Pseudomonas poae, Pseudomonas putida, Pseudomonas stutzeri, Pseudomonas trivialis, Serratia marcescens, Stenotrophomonas maltophilia, Streptomyces sp., Streptosporangium sp., Swaminathania salitolerans, Thiobacillus ferrooxidans, Torulospora globosa, vibrio proteolyticus, Xanthobacter agilis, y Xanthomonas campestris.
[0043] Preferiblemente, el microorganismo de solubilizacion de fosfato es una cepa del hongo Penicillium.
Cepas del hongo Penicillium que pueden ser utiles en la practica de la presente invencion incluyen P. bilaiae (fanteriormenre conocido como P. bilaii), P. albidum, P. aurantiogriseum, P. chrysogenum, P. citreonigrum, P. citrinum, P. digitatum, P. frequentas, P. fuscum, P. gaestrivorus, P. glabrum, P. griseoful vum, P. implicatum, P. janthinellum, P. lilacinum, P. minioluteum, P. montanense, P. nigricans, P. oxalicum, P. pinetorum, P. pinophilum, P. purpurogenum, P. radicans, P. radicum, P. raistrickii, P. rugulosum, P. simplicissimum, P. solitum, P. variable, P. velutinum, P. viridicatum, P. glaucum, P. fussiporus, y P. expansum.
[0044] Mas preferiblemente, la especie de microorganismo Penicillium de solubilizacion de fosfato es P. bilaiae, P. gaestrivorus, y/o una combinacion de los mismos.
De la forma mas preferible, las cepas P. bilaiae son seleccionadas del grupo consistente en ATCC 20851, NRRL 50169, ATCC 22348, ATCC 18309, NRRL 50162 (Wakelin, et al., 2004. Biol Fertil Soils 40:36-43) y la cepa P. gaestrivorus es NRRL 50170 (ver, Wakelin, supra.).
[0045] Segun la invencion, esta previsto que mas de un microorganismo de solubilizacion de fosfato pueda ser utilizado, tal como, al menos dos, al menos tres, al menos cuatro, al menos cinco, al menos seis, incluyendo cualquier combinacion de Acinetobacter, Arthrobacter, Arthrobotrys, Aspergillus, Azospirillum, Bacillus, Burkholderia, Candida Chryseomonas, Enterobacter, Eupenicillium, Exiguobacterium, Klebsiella, Kluyvera, Microbacterium, Mucor, Paecilomyces, Paenibacillus, Penicillium, Pseudomonas, Serratia, Stenotrophomonas, Streptomyces, Streptosporangium, Swaminathania, Thiobacillus, Torulospora, Vibrio, Xanthobacter, and Xanthomonas, including one species selected from the following group: Acinetobacter calcoaceticus, Acinetobacter sp, Arthrobacter sp., Arthrobotrys oligospora, Aspergillus niger, Aspergillus sp., Azospirillum halopraeferans, Bacillus amyloliquefaciens, Bacillus atrophaeus, Bacillus circulans,Bacillus licheniformis, Bacillus subtilis, Burkholderia cepacia, Burkholderia vietnamiensis, Candida krissii, Chryseomonas luteola, Enterobacter aerogenes, Enterobacter asburiae, Enterobacter sp., Enterobacter taylorae, Eupenicillium parvum, Exiguobacterium sp., Klebsiella sp., Kluyvera cryocrescens, Microbacterium sp., Mucor ramosissimus, Paecilomyces hepialid, Paecilomyces marquandii, Paenibacillus macerans, Paenibacillus mucilaginosus, Pantoea aglomerans, Penicillium expansum, Pseudomonas corrugate, Pseudomonas fluorescens, Pseudomonas lutea, Pseudomonas poae, Pseudomonas putida, Pseudomonas stutzeri, Pseudomonas trivialis, Serratia marcescens, Stenotrophomonas maltophilia, Streptomyces sp., Streptosporangium sp., Swaminathania salitolerans, Thiobacillus ferrooxidans, Torulospora globosa, vibrio proteolyticus, Xanthobacter agilis, y Xanthomonas campestris.
[0046] Diazotrofos son bacterias y arqueas que fijan gas nitrogeno atmosferico en una forma mas utilizable tal como amonfaco.
Ejemplos de diazotrofos incluyen bacterias de los generos Rhizobium spp. (por ejemplo, R. cellulosiliticum, R. daejeonense, R. etli, R. galegae, R. gallicum, R. giardinii, R. hainanense, R. huautlense, R. indigoferae, R. leguminosarum, R. loessense, R. lupini, R. lusitanum, R. meliloti, R. mongolense, R. miluonense, R. sullae, R. tropici,
R. undicola, y/o R. yanglingense), Bradyrhizobium spp. (por ejemplo, B. bete, B. canariense, B. elkanii, B. iriomotense, B. japonicum, B. jicamae, B. liaoningense, B. pachirhizi, y/o B. yuanmingense), Azorhizobium spp. (por ejemplo, A. caulinodans y/o A. doebereinerae), Sinorhizobium spp. (por ejemplo, S. abri, S. adhaerens, S. americanum, S. aboris, S. fredii, S. indiaense, S. kostiense, S. kummerowiae, S. medicae, S. meliloti, S. mexicanus,
S. morelense, S. saheli, S. terangae, y/o S. xinjiangense), Mesorhizobium spp., (M. albiziae, M. amorphae, M. chacoense, M. ciceri, M. huakuii, M. loti, M. mediterraneum, M. pluifarium, M. septentrionale, M. temperatum, y/o M. tianshanense), y combinaciones de los mismos.
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En una forma de realizacion particular, el diazotrofo es seleccionado del grupo consistente en B. japonicum, R leguminosarum, R meliloti, S. meliloti, y combinaciones de los mismos.
En otra forma de realizacion, el diazotrofo es B. japonicum.
En otra forma de realizacion, el diazotrofo es R leguminosarum.
En otra forma de realizacion, el diazotrofo es R meliloti.
En otra forma de realizacion, el diazotrofo es S. meliloti.
[0047] Hongos micorrizales forman asociaciones simbioticas con las rafces de una planta vascular, y proporcionan, por ejemplo, capacidad de absorcion para agua y nutrientes minerales debido al area de superficie comparativamente grande de micelio.
Hongos micorrizales incluyen hongos endomicorrizales (tambien llamado arbuscular vesicular micorrhizae, VAM, arbuscular micorrhizae, o Am), un hongo ectomicorrhizal, o una combinacion de los mismos.
En una forma de realizacion, el hongo micorrizal es un endomicorrhizae del filo Glomeromycota y generos Glomus y Gigaspora.
En todavfa otra forma de realizacion, el endomicorrhizae es una cepa de Glomus aggregatum, Glomus brasilianum, Glomus clarum, Glomus deserticola, Glomus etunicatum, Glomus fasciculatum, Glomus intraradices, Glomus monosporum, o Glomus mosseae, Gigaspora margarita, o una combinacion de los mismos.
[0048] Ejemplos de hongos micorrizales incluyen ectomicorrhizae del filo Basidiomycota, Ascomycota, y Zygomycota.
Otros ejemplos incluyen una cepa de Laccaria bicolor, Laccaria laccata, Pisolithus tinctorius, Rhizopogon amylopogon, Rhizopogon fulvigleba, Rhizopogon luteolus, Rhizopogon villosuli, Scleroderma cepa, Scleroderma citrinum, o una combinacion de los mismos.
[0049] Los hongos micorrizales incluyen ecroid micorrhizae, arbutoide micorrhizae, o monotropoide micorrhizae. Arbuscular y ectomicorrhizae forman micorriza ericoide con muchas plantas del orden Ericales, mientras algunas Ericales forman arbutoide y monotropoide micorrhizae.
En una forma de realizacion, la micorriza puede ser una micorriza ericoide, preferiblemente del filo Ascomycota, tal como Hymenoscyphous ericae u Oidiodendron sp.
En otra forma de realizacion, la micorriza tambien puede ser una micorriza arbutoide, preferiblemente del filo Basidiomycota.
En otra forma de realizacion, la micorriza puede ser una micorriza monotripoide, preferiblemente del filo Basidiomycota.
En todavfa otra forma de realizacion, la micorriza puede ser una micorriza de orqufdea, preferiblemente del genero Rhizoctonia.
[0050] Los metodos de la presente invencion son aplicables a semilla leguminosas, ejemplos representativos de las cuales incluyen haba de soja, alfalfa, cacahuete, guisante, lenteja, judfa y trebol.
Los metodos de la presente invencion son tambien aplicables a semillas no leguminosas, por ejemplo, Poaceae, Cucurbitaceae, Malvaceae. Asteraceae, Chenopodiaceae y Solonaceae.
Ejemplos representativos de semilla no leguminosa incluyen plantas de cultivo de campo tales como mafz, cereales tales como arroz, cebada y trigo, algodon y canola, y plantas de cultivo vegetales tales como patatas, tomates, pepinos, remolachas, lechuga y melon.
[0051] Tras el tratamiento, y para fines de almacenamiento, la semilla es luego empaquetada, por ejemplo, en bolsas de 50-lb o 100-lb, o bolsas en masa o contenedores, conforme a tecnicas estandar.
La semilla se almacena durante al menos 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, o 12 meses, e incluso mas tiempo, por ejemplo, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36 meses, o tiempo largo incluso, bajo condiciones de almacenamiento apropiadas que se conocen en la tecnica. Como se utilizan en este caso, el termino "mes" significara 30 dfas.
Como se utiliza en este caso, un ano significara 365 dfas.
Mientras que la semilla de haba de soja puede tener que ser plantada la estacion siguiente, la semilla de mafz se puede almacenar durante periodos mucho mas largos de tiempo incluyendo hasta 3 anos.
[0052] La molecula de senal de planta se puede aplicar de cualquier manera adecuada, tal como en forma de una composicion de tratamiento de semilla que comprende al menos una molecula de senal de planta y un portador aceptable agrfcola.
[0053] Cualquier portador aceptable agrfcola adecuado puede ser utilizado, por ejemplo, un soporte solido, portador semi-solido, un portador lfquido de base acuosa, un portador lfquido de base no acuosa, una suspension, una emulsion o un concentrado emulsionable.
Portadores agrfcolamente aceptables pueden incluir, por ejemplo, adyuvantes, componentes inertes, dispersantes, surfactantes, adherentes, ligantes, agentes estabilizantes, y/o polfmeros.
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[0054] La composicion de tratamiento de semilla puede incluir ademas uno o varios agentes beneficiosos agricolamente/agronomicamente (ademas de la molecula de senal), tales como, uno o varios diazotrofos, hongos micorrizales, herbicidas, fungicidas, insecticidas, y/o agentes de solubilizacion de fosfato.
[0055] La presente invencion sera ahora descrito mediante los siguientes ejemplos no limitativos.
Resumen de ejemplos practicos
[0056] Ejemplos 1 y 2 describen experimentos de campo comparativo que usan semilla de haba de soja que demuestran que la invencion reivindicada consigue rendimiento de planta aumentado.
Las semillas fueron tratadas conforme a la presente invencion 5 meses antes de siembra con el producto comercial Optimize® que es una combinacion de inoculante Bradyrhizobium japonicum y V LCO (C18:1, MeFuc) (ilustrado en la Fig. 2), y solo con el LCO puro, y 4,5 meses antes de siembra con (es decir, menos puro) grados no comerciales de Optimize® y solo LCO, y para fines de comparacion con estas mismas moleculas de senal de planta durante la siembra.
Semilla no tratada fue usada como otro control.
Los resultados, que se expresan en cuanto a la diferencia en el rendimiento granular, medido en unidades de bushel/acre, muestra que los metodos de la invencion reivindicada consiguio un aumento en el rendimiento de haba de soja, con respecto a metodos no inventivos (es decir, semilla tratada a tiempo de la siembra y semilla no tratada).
[0057] Ejemplos 3 y 4 describen experimentos comparativos llevados a cabo en el invernadero y que demuestran que la invencion reivindicada consigue aumentar otras caracterfsticas de crecimiento de planta.
Ejemplo 3 describe un experimento que implico tratamiento de semilla de haba de soja con puro V LCO (C18:1 MeFuc) un mes y un ano antes siembra.
Las plantas de haba de soja (incluyendo rafces) fueron cosechadas diez dfas despues de la siembra.
Resultados, que son descritos en terminos de diferencias en la longitud de rafz y volumen, muestran que los metodos de la presente invencion consiguen espectaculares aumentos en estas propiedades.
Finalmente, ejemplo 4 describe experimentos llevados a cabo con semilla de haba de soja tratada con Optimize® 55
dfas antes de siembra y para fines de comparacion, semilla de haba de soja tratada 7 dfas antes de siembra y
semilla no tratada.
Los resultados, expresados en unidades de area de superficie media de primeras hojas trifoliadas, muestran que la invencion reivindicada mejora crecimiento de planta en este aspecto tambien.
Ejemplo 1
[0058] Una prueba de campo fue llevada a cabo para evaluar formas de realizacion de la presente invencion en el rendimiento granular cuando aplicado en la semilla de haba de soja.
El sitio de prueba de campo fue situado cerca de Whitewater, WI y caracterizado por tierra arcillo-limosa Milford. Sondeo del terreno, conducido seis meses antes de siembra, mostro un pH de tierra de 6.8, un contenido de materia organica de 5,3%, y fosforo y contenido de potasio de 39 ppm y 139 ppm, respectivamente.
[0059] Las moleculas de senal de planta usadas en la prueba fueron Optimize®, un grado no comercial de
Optimize® (NI-50S-1), puro V LCO (C18:1 MeFuc)(NI-50GREN-1) y un grado no comercial de V LCO (C18:1,
MeFuc) (NI-50S-2CF).
La semilla de haba de soja usada en el estudio fue Stine S2118.
Las moleculas de senal de planta fueron pulverizadas sobre semillas con/sin dilucion a razon de 4,8 fl oz/cwt.
[0060] El estudio fue conducido en un diseno de bloque completo aleatorizado, con un tamano de grafico de 10 pies por 50 pies (0,011 acres), con espaciado de fila de 7,5 pulgadas.
Cuatro replicaciones fueron llevadas a cabo.
Las semilla fueron tratadas con las moleculas de senal de planta 4,5 o 5 meses antes de la siembra y justo antes de siembra, y fueron plantadas a un profundidad de 1 pulgada y a un fndice de semilla de 225,000 semillas por acre usando un taladro granular John Deere 750 NT.
Los pesticidas Extreme® y AMPS® fueron ambos aplicado 11 (pre-emergencia) dfas antes de la siembra a indices de 3,0 pt y 2,5 lb, respectivamente.
Assure II®, Roundup WeatherMax® y AMPS® fueron todos aplicados 46 dfas post-siembra (post-emergencia), a indices de 6,0 oz, 21 oz y 2,5 lb, respectivamente.
Las plantas fueron cosechadas 4 meses y 20 dfas despues de la siembra.
[0061] La semilla de control fue tratada con una cantidad (en peso) de agua, que corresponde con la cantidad (en peso) de la composicion de molecula de senal experimental (molecula de senal + portador).
La semilla de control fue almacenada bajo las mismas condiciones que la semilla experimental antes de siembra y plantado a la vez que la semilla experimental en la misma tierra.
[0062] Resultados del estudio se muestran en la tabla 1 por debajo.
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GRUPO DE TRATAMIENTO RENDIMIENTO DE GRANO @ 13%
1
Control - no inoculado 62,5
2
Optimize - en la siembra 64,2
3
Optimize - 5 mes 65,7
4
NI-50GREN-1 - en la siembra 62,2
5
NI-50GREN-1 - 5 mes 70,5
6
NI-50S-1 - 4,5 mes 67,2
7
NI-50S-2CF - 4,5 mes 69,6
[0063] Como reflejado por la comparacion entre grupo (no inventivo) comparativo 2 y grupo inventivo 3, tratamiento de la semilla de haba de soja con el Optimize® de grado comercial 5 meses antes de la siembra resulto en un aumento en el rendimiento de haba de soja de 1,5 bushel de haba de soja.
Como reflejado por la comparacion entre grupo 4 y grupo inventivo 5, tratamiento de semilla de haba de soja a 5 meses antes de la siembra con puro V LCO (C18:1 MeFuc) resulto solo en un aumento en el rendimiento de haba de soja de 8,3 bushel/acre.
Como reflejado por la comparacion entre grupo 2 y grupo inventivo 6, el tratamiento de semillas de haba de soja 4,5 meses antes de siembra con la calidad no comercial de Optimize® resulto en un aumento en el rendimiento de haba de soja de 3,0 bushel/acre.
Finalmente, como se muestra por la comparacion entre grupo 4 y grupo inventivo 7, tratamiento de semillas de haba de soja con grado no comercial de V LCO (C18:1 MeFuc) solo 4,5 meses antes de la siembra aumento rendimiento de haba de soja en 7,4 bushel/acre.
Mediciones de rendimiento granular se tomaron a un 13% de nivel de humedad de semilla.
Ejemplo 2
[0064] Una prueba de haba de soja fue conducida para evaluar formas de realizacion de la presente invencion en el rendimiento granular cuando aplicada en la semilla de haba de soja.
El sitio de prueba de campo fue situado cerca de Whitewater, WI y caracterizado por tierra arcillo-limosa Milford. Sondeo del terreno, realizado seis meses antes de siembra, mostro un pH de tierra de 6.6, un contenido de materia organica de 4.8%, y fosforo y contenido de potasio de 41 ppm y 131 ppm, respectivamente.
[0065] Las moleculas de senal de planta usadas en la prueba fueron las mismas que en el ejemplo 1.
La semilla de haba de soja usada en el estudio fue Stine S2118.
Las moleculas de senal de planta fueron pulverizadas sobre semillas con/sin dilucion a razon de 4.8 fl oz/cwt.
[0066] El estudio fue conducido en un diseno de bloque completo aleatorizado, con un tamano de grafico de 10 pies por 50 pies (0,011 acres), con 7,5 pulgadas de espaciado de fila.
Cuatro replicaciones fueron llevadas a cabo.
Las semilla fueron tratadas con las moleculas de senal de planta 4,5 o 5 meses antes de siembra y justo antes de siembra, y fueron plantadas a una profundidad de 1 pulgada y a un indice de semilla de 225.000 semillas por acre usando un taladro granular John Deere 750 NT.
Los pesticidas Extreme® y AMPS® fueron ambos aplicados 10 dfas antes (pre-emergencia) de siembra a indices de 3,0 pt y 2,5 lb, respectivamente.
Assure II®, Roundup WeatherMax® y AMPS® fueron todos aplicados 45 dfas post-siembra (post-emergencia), a indices de 6,0 oz, 21 oz y 2,5 lb, respectivamente.
Las planta fueron cosechadas 4 meses y 21 dfas despues de la siembra.
[0067] La semilla de control fue tratada con una cantidad (en peso) de agua, que corresponde con la cantidad (en peso) de la composicion de molecula de senal experimental (molecula de senal + portador).
La semilla de control fue almacenada bajo las mismas condiciones que la semilla experimental antes de siembra y plantada a la vez que la semilla experimental en la misma tierra.
[0068] Resultados del estudio se muestran en la tabla 2 por debajo.
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30
35
40
45
GRUPO DE TRATAMIENTO RENDIMIENTO DE GRANO @ 13%
1
Control - no inoculado 62,4
2
Optimize - en la siembra 64,1
3
Optimize - 5 mes 68,6
4
NI-50GREN-1 - en la siembra 65,8
5
NI-50GREN-1 - 5 mes 64,0
6
NI-50S-1 - 4,5 mes 69,4
7
NI-50S-2CF - 4,5 mes 66,6
[0069] Como reflejado por la comparacion entre grupo (no inventivo) comparativo 2 y grupo inventivo 3, el tratamiento de la semilla de haba de soja con el Optimize® de grado comercial 5 meses antes de la siembra resulto en un aumento en el rendimiento de haba de soja de 4,5 bushel de haba de soja.
Como reflejado por la comparacion entre grupo 2 y grupo inventivo 6, el tratamiento de las semillas de haba de soja 4,5 meses antes de siembra con la calidad no comercial de Optimize® resulto en un aumento en el rendimiento de haba de soja de 5,3 bushel/acre.
Como se muestra por la comparacion entre grupo 4 y grupo inventivo 7, el tratamiento de semillas de haba de soja con grado no comercial de V LCO (C18:1 MeFuc) solo 4,5 meses antes de la siembra aumento el rendimiento de haba de soja en 0,8 bushel/acre.
La respuesta solo negativa como reflejada por la comparacion entre grupo no inventivo 4 y grupo inventivo 5, mostro que tratamiento de semilla de haba de soja a 5 meses antes de la siembra con el LCO solo puro resulto en una reduccion en 1,8 bushel/acre, un resultado atribuible para variabilidad inexplicada asociada a ensayos de campo. Mediciones de rendimiento granular se tomaron a un nivel de 13% humedad de semilla.
Experimentos de invernadero
Ejemplo 3
[0070] Semillas de haba de soja tratadas con 10-7M puro V LCO (C18:1 MeFuc) y almacenadas a 15°C.
Semillas tratadas y semillas no tratadas (control) fueron plantadas 1 y 12 meses despues del tratamiento en las macetas de invernadero que contienen arena:perlita (1:1 mezcla).
Plantones fueron cultivados durante 10 dfas tras las plantaciones de semilla, luego los plantones fueron cosechados, sus rafces limpiadas y medidas en el escaner de Winrhizo®.
La semilla de control fue tratada con una cantidad (en peso) de agua, que corresponde con la cantidad (en peso) de la composicion de molecula de senal experimental (molecula de senal + portador).
La semilla de control fue almacenada bajo las mismas condiciones que la semilla experimental antes de siembra y plantada a medida que la semilla experimental en la misma tierra.
Los resultados se muestran en la tabla 3.
Tabla 3
Tratamiento
1 mes despues del tratamiento 1 ano despues del tratamiento
Longitud de rafz (cm) volumen de rafz (cm3) longitud de rafz (cm) volumen de rafz (cm3)
Control
128 0,455 115,5 0,403
LCO
135* 0,468 159,3* 0,540*
% aumento
5,46 2,86 37,92 34
[0071] Los resultados conseguidos por ambas formas de realizacion inventivas (semilla tratada con LCO a 1 mes y 12 meses antes de siembra), y particularmente los resultados obtenidos despues del pretratamiento de 1-ano, son espectaculares, considerando que se conoce en la tecnica que semilla de haba de soja son propensas a desmedrar durante esa longitud de tiempo.
Ejemplo 4
[0072] Semillas de haba de soja tratadas con Optimize® fueron mantenidas a 15°C en un frigorffico.
Semillas fueron plantadas 7 (7 dpp) y 55 (55dpp) dfas despues del tratamiento en las cajas de rafz con una mezcla turba:perlita.
Su area de superficie de hoja (cm2) se tomo desde el primer trifoliado despues de 19 dfas.
Como ilustrado en Fig. 3 y mostrado en la tabla 4, las hojas generadas de semilla tratada conforme a la presente invencion tienen un 50% aumento medio superior en el area de superficie de hoja en comparacion con la forma de realizacion no inventiva (42% contra 28%).
5 Tabla 4
Medio STDEV Respuesta Respuesta%
medio UTC
146,25 18,7539
medio 7dpp
187,05 29,8215 40,81 28%
medio 55dpp
207,18 20,5278 60,93 42%
[0073] Al ser conocido que la cuenta bacteriana (Bradyrhizobium japonicum) de semilla disminuye a lo largo del tiempo, el aumento en el area de superficie media mostrado en plantas generadas de semilla tratada 55 dfas antes de siembra puede ser atribuible al LCO rizobial.
10

Claims (17)

  1. 5
    10
    15
    20
    25
    30
    35
    40
    45
    REIVINDICACIONES
    1. Metodo para aumentar el crecimiento de la planta, que comprende tratar la semilla al menos un mes antes de la siembra con una cantidad eficaz de una molecula de senal de planta, donde la molecula de senal de planta es un lipo-quitooligosacarido (LCO).
  2. 2. Metodo segun la reivindicacion 1, donde el LCO se obtiene de una especie de Rhizobia seleccionada de Rhizobium sp., Bradyrhizobium sp., Sinorhizobium sp. y Azorhizobium sp.
  3. 3. Metodo segun la reivindicacion 1, donde el LCO se obtiene de Bradyrhizobium japonicum.
  4. 4. Metodo segun la reivindicacion 1, donde el LCO se obtiene de un hongo micorrizal arbuscular.
  5. 5. Metodo segun la reivindicacion 1, donde la molecula de senal de planta se aplica en forma de una composicion de tratamiento de semilla que comprende la molecula de senal y un portador agrfcola aceptable.
  6. 6. Metodo segun cualquiera de las reivindicaciones anteriores, donde la semilla es leguminosa.
  7. 7. Metodo segun la reivindicacion 6, donde la semilla leguminosa es haba de soja.
  8. 8. Metodo segun cualquiera de las reivindicaciones anteriores, donde la semilla no leguminosa es mafz.
  9. 9. Metodo segun cualquiera de las reivindicaciones anteriores, donde la semilla no leguminosa es una semilla de planta de cultivo vegetal.
  10. 10. Metodo segun cualquiera de las reivindicaciones anteriores, donde el tratamiento comprende la pulverizacion sobre la semilla de una composicion que comprende la molecula de senal de planta.
  11. 11. Metodo segun cualquiera de las reivindicaciones anteriores, donde el tratamiento comprende el riego por goteo de la semilla con una composicion que comprende la molecula de senal de planta.
  12. 12. Metodo segun cualquiera de las reivindicaciones anteriores, donde la semilla se trata con la molecula de senal de planta al menos 3 meses antes de la siembra.
  13. 13. Metodo segun cualquiera de las reivindicaciones anteriores, donde la semilla se trata con la molecula de senal de planta al menos 6 meses antes de la siembra.
  14. 14. Metodo segun cualquiera de las reivindicaciones anteriores, donde la semilla se trata con la molecula de senal de planta al menos 9 meses antes de la siembra.
  15. 15. Metodo segun cualquiera de las reivindicaciones anteriores, donde la semilla se trata con la molecula de senal de planta al menos 12 meses antes de la siembra.
  16. 16. Metodo segun cualquiera de las reivindicaciones anteriores, donde la semilla se trata con la molecula de senal de planta al menos 2 anos antes de la siembra.
  17. 17. Metodo segun cualquiera de las reivindicaciones anteriores, donde como resultado del tratamiento la molecula de senal de planta permanece como una cubierta sobre la semilla.
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