ES2534558T3 - Método de tratamiento de la esofagitis eosinofílica - Google Patents

Método de tratamiento de la esofagitis eosinofílica Download PDF

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Abstract

El uso de un dispositivo de parche para la piel que comprende una composición que comprende un alérgeno que provoca una reacción inmunitaria cutánea, en la preparación de una composición para el tratamiento de la esofagitis eosinofílica en un sujeto mediante la aplicación de dicho dispositivo en la piel en condiciones que permiten el contacto entre dicha composición y la piel.

Description

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08-04-2015
Para la aplicación, los dispositivos de parche pueden aplicarse directamente a la piel, sin ningún pretratamiento, preferiblemente en una parte sin pelo del cuerpo. Alternativamente, la piel puede tratarse antes de la aplicación del dispositivo, para interrumpir el estrato córneo, para eliminar los pelos o simplemente para provocar la hidratación de la piel, en el sitio de contacto con el dispositivo de parche.
5 Como se describe en la sección experimental, el método de la invención da como resultado una disminución progresiva de eosinófilos en la mucosa intestinal del sujeto.
La presente invención también se refiere al uso de un dispositivo de parche para la piel como se describió anteriormente, en la producción de una composición para la prevención o el tratamiento de la EE en un sujeto.
Los ejemplos siguientes se ponen para ilustración y no a modo de limitación.
10 Ejemplos
Métodos
Diseño del estudio
La viabilidad y eficacia de EPIT para tratar la esofagitis eosinofílica (EE) se evaluó en un modelo de ratones sensibilizados al cacahuete. Después de un período de sensibilización, los animales se dividieron en 2 grupos: no
15 tratados (grupo NT) y tratados semanalmente por vía epicutánea usando el sistema de administración epicutánea (SAE) como se ha descrito posteriormente (EPIT), durante un total de 8 semanas. Un grupo de referencia (C) también se constituyó con animales no sensibilizados. Se tomaron muestras de sangre para análisis al principio y al final de los experimentos, junto con los análisis histológicos después de la prueba de provocación oral con alérgenos de cacahuete.
20 Animales y extractos de proteínas
Ratones BALB/c hembra (n = 30) de cuatro semanas adquiridos de Charles River Laboratories (Francia) se sensibilizaron a proteínas del cacahuetes. El uso de ratones BALB/c como modelo murino de sensibilización a proteínas de cacahuete se describió en Adel-Patient et al., 2005. Este modelo debería reproducir la especificidad fina de IgE y los síntomas que se observan en seres humanos alérgicos tras la prueba de provocación. Todos los
25 experimentos se realizaron de acuerdo con las normas de la Comunidad Europea de cuidado de los animales y con el permiso 92-305 de los Servicios Veterinarios franceses.
El extracto de proteína de cacahuete (EPC) utilizado se adquirió en los laboratorios de Greer (EE.UU).
Protocolo de sensibilización
Veinte ratones BALB/c recibieron 1 mg de EPC homogeneizado mezclado con 10 μg de toxina del cólera (TC) en los
30 días 1, 6, 12, 18, 24, 30 mediante sobrealimentación sondas intragástricas. Se extrajeron sueros del plexo venoso retroorbital el día 43, se centrifugaron y las muestras se almacenaron a -20°C hasta su análisis ulterior. Se extrajo sangre a los ratones no tratados previamente los mismos días (n = 10). Se controló la sensibilización por los parámetros biológicos como se definió anteriormente.
Protocolo de Tratamiento (EPIT)
35 El EPIT se llevó a cabo una vez a la semana durante 8 semanas de la siguiente manera:
Se anestesiaron los ratones por vía intraperitoneal con cetamina y xilacina y se rasuraron con una maquinilla eléctrica y crema de depilación. Al día siguiente, se colocaron en el lomo del ratón dispositivos de parche dérmico con un soporte que comprende un hidrogel formado con una solución que contiene 100 μg de EPC, estando adaptada la periferia de dicho soporte para crear con la piel del ratón una cámara herméticamente cerrada, y se
40 mantuvieron con un vendaje durante 48 horas.
Se tomaron muestras de sangre cada 2 semanas durante EPIT y al final del tratamiento (D98) con el fin de medir la respuesta serológica.
Prueba de provocación de alimento con alérgeno y muestreo del esófago
Al final del tratamiento, se alimentó a los los ratones exclusivamente con la semilla de cacahuete durante 3 días
45 consecutivos. A continuación, se reintrodujo alimento normal y los ratones recibieron 50 mg de polvo de cacahuete por administración intragástrica durante 3 días consecutivos. A continuación, se sacrificaron los ratones y se extrajeron los esófagos y se fijaron en formalina al 10% tamponada neutra, se hicieron inclusiones en parafina y se cortaron en secciones de 5 μm. Se prepararon extensiones y se colorearon con Hemalun Eosina Safran.
Análisis histológicos (eosinófilos en el esófago)
8
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