ES2460899T3 - Inmunoterapia basada en células cancerosas alógenas - Google Patents
Inmunoterapia basada en células cancerosas alógenas Download PDFInfo
- Publication number
- ES2460899T3 ES2460899T3 ES09720311.1T ES09720311T ES2460899T3 ES 2460899 T3 ES2460899 T3 ES 2460899T3 ES 09720311 T ES09720311 T ES 09720311T ES 2460899 T3 ES2460899 T3 ES 2460899T3
- Authority
- ES
- Spain
- Prior art keywords
- cells
- tumor
- subject
- mice
- lymphocytes
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 title claims abstract description 148
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 title claims abstract description 58
- 238000009169 immunotherapy Methods 0.000 title description 11
- 238000011282 treatment Methods 0.000 claims abstract description 14
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims abstract 2
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 17
- 239000013598 vector Substances 0.000 claims description 17
- 108700018351 Major Histocompatibility Complex Proteins 0.000 claims description 12
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 claims description 12
- 230000020382 suppression by virus of host antigen processing and presentation of peptide antigen via MHC class I Effects 0.000 claims description 12
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 claims description 10
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims description 7
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 claims description 5
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 claims description 5
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 claims description 5
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims description 4
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 claims description 2
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 124
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 49
- 210000003719 b-lymphocyte Anatomy 0.000 description 43
- 230000003053 immunization Effects 0.000 description 41
- 238000002649 immunization Methods 0.000 description 41
- 238000002255 vaccination Methods 0.000 description 34
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 32
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 32
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 32
- 102000002812 Heat-Shock Proteins Human genes 0.000 description 16
- 108010004889 Heat-Shock Proteins Proteins 0.000 description 16
- 108010088751 Albumins Proteins 0.000 description 15
- 102000009027 Albumins Human genes 0.000 description 15
- 230000002163 immunogen Effects 0.000 description 15
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 description 15
- 108010058846 Ovalbumin Proteins 0.000 description 13
- 238000007912 intraperitoneal administration Methods 0.000 description 12
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 12
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 10
- 230000004044 response Effects 0.000 description 10
- 230000001629 suppression Effects 0.000 description 10
- 230000004614 tumor growth Effects 0.000 description 10
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 9
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 9
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 9
- 210000003200 peritoneal cavity Anatomy 0.000 description 9
- 230000007115 recruitment Effects 0.000 description 9
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 8
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 8
- 210000001744 T-lymphocyte Anatomy 0.000 description 7
- 230000002950 deficient Effects 0.000 description 7
- 230000001506 immunosuppresive effect Effects 0.000 description 7
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 7
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 description 7
- 210000001165 lymph node Anatomy 0.000 description 6
- 208000002154 non-small cell lung carcinoma Diseases 0.000 description 6
- 208000029729 tumor suppressor gene on chromosome 11 Diseases 0.000 description 6
- 101000914484 Homo sapiens T-lymphocyte activation antigen CD80 Proteins 0.000 description 5
- 206010062016 Immunosuppression Diseases 0.000 description 5
- 206010058467 Lung neoplasm malignant Diseases 0.000 description 5
- 102100027222 T-lymphocyte activation antigen CD80 Human genes 0.000 description 5
- 230000005809 anti-tumor immunity Effects 0.000 description 5
- 230000036039 immunity Effects 0.000 description 5
- 201000005202 lung cancer Diseases 0.000 description 5
- 208000020816 lung neoplasm Diseases 0.000 description 5
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 5
- 230000009261 transgenic effect Effects 0.000 description 5
- 239000013603 viral vector Substances 0.000 description 5
- NLXLAEXVIDQMFP-UHFFFAOYSA-N Ammonia chloride Chemical compound [NH4+].[Cl-] NLXLAEXVIDQMFP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 108010035452 HLA-A1 Antigen Proteins 0.000 description 4
- 206010025323 Lymphomas Diseases 0.000 description 4
- 230000014102 antigen processing and presentation of exogenous peptide antigen via MHC class I Effects 0.000 description 4
- 230000009089 cytolysis Effects 0.000 description 4
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 4
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 description 4
- 238000000034 method Methods 0.000 description 4
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 4
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 4
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 4
- 102100024222 B-lymphocyte antigen CD19 Human genes 0.000 description 3
- 101000980825 Homo sapiens B-lymphocyte antigen CD19 Proteins 0.000 description 3
- 102000008070 Interferon-gamma Human genes 0.000 description 3
- 108010074328 Interferon-gamma Proteins 0.000 description 3
- 206010061309 Neoplasm progression Diseases 0.000 description 3
- 108010076504 Protein Sorting Signals Proteins 0.000 description 3
- 206010070834 Sensitisation Diseases 0.000 description 3
- 230000033289 adaptive immune response Effects 0.000 description 3
- 238000007792 addition Methods 0.000 description 3
- 208000009956 adenocarcinoma Diseases 0.000 description 3
- 230000000735 allogeneic effect Effects 0.000 description 3
- 230000000259 anti-tumor effect Effects 0.000 description 3
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 3
- 230000003111 delayed effect Effects 0.000 description 3
- 210000002472 endoplasmic reticulum Anatomy 0.000 description 3
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 3
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 3
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 3
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 description 3
- 210000000822 natural killer cell Anatomy 0.000 description 3
- 229960004641 rituximab Drugs 0.000 description 3
- 230000008313 sensitization Effects 0.000 description 3
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 3
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 3
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 3
- 238000001890 transfection Methods 0.000 description 3
- 238000002054 transplantation Methods 0.000 description 3
- 230000005751 tumor progression Effects 0.000 description 3
- 239000003981 vehicle Substances 0.000 description 3
- 201000009030 Carcinoma Diseases 0.000 description 2
- 206010057248 Cell death Diseases 0.000 description 2
- CMSMOCZEIVJLDB-UHFFFAOYSA-N Cyclophosphamide Chemical compound ClCCN(CCCl)P1(=O)NCCCO1 CMSMOCZEIVJLDB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010011968 Decreased immune responsiveness Diseases 0.000 description 2
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010074032 HLA-A2 Antigen Proteins 0.000 description 2
- 102000025850 HLA-A2 Antigen Human genes 0.000 description 2
- 102000006496 Immunoglobulin Heavy Chains Human genes 0.000 description 2
- 108010019476 Immunoglobulin Heavy Chains Proteins 0.000 description 2
- 208000006552 Lewis Lung Carcinoma Diseases 0.000 description 2
- 108091054437 MHC class I family Proteins 0.000 description 2
- 230000000172 allergic effect Effects 0.000 description 2
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 2
- 235000019270 ammonium chloride Nutrition 0.000 description 2
- 230000003321 amplification Effects 0.000 description 2
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 2
- 208000010668 atopic eczema Diseases 0.000 description 2
- 210000003230 b-1 b lymphocyte Anatomy 0.000 description 2
- 239000007975 buffered saline Substances 0.000 description 2
- 230000006041 cell recruitment Effects 0.000 description 2
- 229940030156 cell vaccine Drugs 0.000 description 2
- 238000011109 contamination Methods 0.000 description 2
- 229960004397 cyclophosphamide Drugs 0.000 description 2
- 230000007812 deficiency Effects 0.000 description 2
- 238000012217 deletion Methods 0.000 description 2
- 230000037430 deletion Effects 0.000 description 2
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 2
- 210000003743 erythrocyte Anatomy 0.000 description 2
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 2
- 239000013604 expression vector Substances 0.000 description 2
- 238000000684 flow cytometry Methods 0.000 description 2
- 230000006870 function Effects 0.000 description 2
- 108020001507 fusion proteins Proteins 0.000 description 2
- 102000037865 fusion proteins Human genes 0.000 description 2
- 229940044627 gamma-interferon Drugs 0.000 description 2
- 210000002865 immune cell Anatomy 0.000 description 2
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 2
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 2
- 230000015788 innate immune response Effects 0.000 description 2
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 2
- 206010061289 metastatic neoplasm Diseases 0.000 description 2
- 239000011325 microbead Substances 0.000 description 2
- 210000004479 myeloid suppressor cell Anatomy 0.000 description 2
- 238000003199 nucleic acid amplification method Methods 0.000 description 2
- 230000037361 pathway Effects 0.000 description 2
- OIGNJSKKLXVSLS-VWUMJDOOSA-N prednisolone Chemical compound O=C1C=C[C@]2(C)[C@H]3[C@@H](O)C[C@](C)([C@@](CC4)(O)C(=O)CO)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=C1 OIGNJSKKLXVSLS-VWUMJDOOSA-N 0.000 description 2
- 229960005205 prednisolone Drugs 0.000 description 2
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 2
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 2
- 210000003289 regulatory T cell Anatomy 0.000 description 2
- 230000003248 secreting effect Effects 0.000 description 2
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 2
- 230000007704 transition Effects 0.000 description 2
- 231100000588 tumorigenic Toxicity 0.000 description 2
- 230000000381 tumorigenic effect Effects 0.000 description 2
- 210000003462 vein Anatomy 0.000 description 2
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 description 2
- JVJGCCBAOOWGEO-RUTPOYCXSA-N (2s)-2-[[(2s)-2-[[(2s)-2-[[(2s)-2-[[(2s)-4-amino-2-[[(2s,3s)-2-[[(2s,3s)-2-[[(2s)-2-azaniumyl-3-hydroxypropanoyl]amino]-3-methylpentanoyl]amino]-3-methylpentanoyl]amino]-4-oxobutanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-4-carboxylatobutanoyl]amino]-6-azaniumy Chemical compound OC[C@H](N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 JVJGCCBAOOWGEO-RUTPOYCXSA-N 0.000 description 1
- UZOVYGYOLBIAJR-UHFFFAOYSA-N 4-isocyanato-4'-methyldiphenylmethane Chemical compound C1=CC(C)=CC=C1CC1=CC=C(N=C=O)C=C1 UZOVYGYOLBIAJR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FHVDTGUDJYJELY-UHFFFAOYSA-N 6-{[2-carboxy-4,5-dihydroxy-6-(phosphanyloxy)oxan-3-yl]oxy}-4,5-dihydroxy-3-phosphanyloxane-2-carboxylic acid Chemical compound O1C(C(O)=O)C(P)C(O)C(O)C1OC1C(C(O)=O)OC(OP)C(O)C1O FHVDTGUDJYJELY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108091023037 Aptamer Proteins 0.000 description 1
- 208000023275 Autoimmune disease Diseases 0.000 description 1
- 108091008875 B cell receptors Proteins 0.000 description 1
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- 241000701822 Bovine papillomavirus Species 0.000 description 1
- 102000019034 Chemokines Human genes 0.000 description 1
- 108010012236 Chemokines Proteins 0.000 description 1
- 208000035473 Communicable disease Diseases 0.000 description 1
- 101000609762 Gallus gallus Ovalbumin Proteins 0.000 description 1
- 229930182566 Gentamicin Natural products 0.000 description 1
- CEAZRRDELHUEMR-URQXQFDESA-N Gentamicin Chemical compound O1[C@H](C(C)NC)CC[C@@H](N)[C@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O[C@@H]2[C@@H]([C@@H](NC)[C@@](C)(O)CO2)O)[C@H](N)C[C@@H]1N CEAZRRDELHUEMR-URQXQFDESA-N 0.000 description 1
- 108010043121 Green Fluorescent Proteins Proteins 0.000 description 1
- 102000004144 Green Fluorescent Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010075704 HLA-A Antigens Proteins 0.000 description 1
- 102000011786 HLA-A Antigens Human genes 0.000 description 1
- 108010086377 HLA-A3 Antigen Proteins 0.000 description 1
- 102000008949 Histocompatibility Antigens Class I Human genes 0.000 description 1
- 101001043564 Homo sapiens Prolow-density lipoprotein receptor-related protein 1 Proteins 0.000 description 1
- 101000831567 Homo sapiens Toll-like receptor 2 Proteins 0.000 description 1
- 101000669447 Homo sapiens Toll-like receptor 4 Proteins 0.000 description 1
- 108091006905 Human Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- 102000008100 Human Serum Albumin Human genes 0.000 description 1
- ZQISRDCJNBUVMM-UHFFFAOYSA-N L-Histidinol Natural products OCC(N)CC1=CN=CN1 ZQISRDCJNBUVMM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZQISRDCJNBUVMM-YFKPBYRVSA-N L-histidinol Chemical compound OC[C@@H](N)CC1=CNC=N1 ZQISRDCJNBUVMM-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- 210000004322 M2 macrophage Anatomy 0.000 description 1
- 102000043129 MHC class I family Human genes 0.000 description 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 1
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 1
- 206010033128 Ovarian cancer Diseases 0.000 description 1
- 102100021923 Prolow-density lipoprotein receptor-related protein 1 Human genes 0.000 description 1
- 206010039491 Sarcoma Diseases 0.000 description 1
- 206010041067 Small cell lung cancer Diseases 0.000 description 1
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 230000005867 T cell response Effects 0.000 description 1
- 102100024333 Toll-like receptor 2 Human genes 0.000 description 1
- 102100039360 Toll-like receptor 4 Human genes 0.000 description 1
- 230000002159 abnormal effect Effects 0.000 description 1
- 229940072056 alginate Drugs 0.000 description 1
- 235000010443 alginic acid Nutrition 0.000 description 1
- 229920000615 alginic acid Polymers 0.000 description 1
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 1
- 230000006023 anti-tumor response Effects 0.000 description 1
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 1
- 210000000612 antigen-presenting cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000005975 antitumor immune response Effects 0.000 description 1
- 210000000436 anus Anatomy 0.000 description 1
- 238000002617 apheresis Methods 0.000 description 1
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 1
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 239000011324 bead Substances 0.000 description 1
- 230000033228 biological regulation Effects 0.000 description 1
- 230000000903 blocking effect Effects 0.000 description 1
- 210000001185 bone marrow Anatomy 0.000 description 1
- 208000002458 carcinoid tumor Diseases 0.000 description 1
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 1
- 210000003679 cervix uteri Anatomy 0.000 description 1
- 238000002512 chemotherapy Methods 0.000 description 1
- 210000001072 colon Anatomy 0.000 description 1
- 230000000139 costimulatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000002338 cryopreservative effect Effects 0.000 description 1
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 1
- 210000004443 dendritic cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000000779 depleting effect Effects 0.000 description 1
- 238000009795 derivation Methods 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 239000000539 dimer Substances 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 1
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 description 1
- 239000012636 effector Substances 0.000 description 1
- 230000008030 elimination Effects 0.000 description 1
- 238000003379 elimination reaction Methods 0.000 description 1
- 230000002121 endocytic effect Effects 0.000 description 1
- 239000012645 endogenous antigen Substances 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 210000003238 esophagus Anatomy 0.000 description 1
- 208000021045 exocrine pancreatic carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 239000012091 fetal bovine serum Substances 0.000 description 1
- 230000002496 gastric effect Effects 0.000 description 1
- 102000054766 genetic haplotypes Human genes 0.000 description 1
- 229960002518 gentamicin Drugs 0.000 description 1
- 239000005090 green fluorescent protein Substances 0.000 description 1
- 229910052736 halogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000002367 halogens Chemical class 0.000 description 1
- 230000036541 health Effects 0.000 description 1
- 230000006801 homologous recombination Effects 0.000 description 1
- 238000002744 homologous recombination Methods 0.000 description 1
- 210000003405 ileum Anatomy 0.000 description 1
- 230000005934 immune activation Effects 0.000 description 1
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 1
- 230000005847 immunogenicity Effects 0.000 description 1
- 239000003018 immunosuppressive agent Substances 0.000 description 1
- 229940124589 immunosuppressive drug Drugs 0.000 description 1
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 1
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 1
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 1
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 1
- 210000005007 innate immune system Anatomy 0.000 description 1
- 229960003130 interferon gamma Drugs 0.000 description 1
- 210000000936 intestine Anatomy 0.000 description 1
- 239000007928 intraperitoneal injection Substances 0.000 description 1
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 1
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 description 1
- 208000003849 large cell carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 208000032839 leukemia Diseases 0.000 description 1
- 239000003446 ligand Substances 0.000 description 1
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 1
- 230000005923 long-lasting effect Effects 0.000 description 1
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 1
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 1
- 210000004698 lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 238000002826 magnetic-activated cell sorting Methods 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 201000001441 melanoma Diseases 0.000 description 1
- 230000001394 metastastic effect Effects 0.000 description 1
- 108091005573 modified proteins Proteins 0.000 description 1
- 102000035118 modified proteins Human genes 0.000 description 1
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 1
- 230000003039 myelosuppressive effect Effects 0.000 description 1
- 230000003472 neutralizing effect Effects 0.000 description 1
- 238000011275 oncology therapy Methods 0.000 description 1
- 210000004789 organ system Anatomy 0.000 description 1
- 210000001672 ovary Anatomy 0.000 description 1
- 210000000496 pancreas Anatomy 0.000 description 1
- 208000008443 pancreatic carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 238000007911 parenteral administration Methods 0.000 description 1
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 1
- 244000052769 pathogen Species 0.000 description 1
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 description 1
- 210000005259 peripheral blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000011886 peripheral blood Substances 0.000 description 1
- 230000002093 peripheral effect Effects 0.000 description 1
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 1
- 229920001606 poly(lactic acid-co-glycolic acid) Polymers 0.000 description 1
- 230000008488 polyadenylation Effects 0.000 description 1
- 239000002243 precursor Substances 0.000 description 1
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 1
- 230000001737 promoting effect Effects 0.000 description 1
- 230000000069 prophylactic effect Effects 0.000 description 1
- 210000002307 prostate Anatomy 0.000 description 1
- 230000002685 pulmonary effect Effects 0.000 description 1
- 239000002510 pyrogen Substances 0.000 description 1
- 230000005855 radiation Effects 0.000 description 1
- 238000001959 radiotherapy Methods 0.000 description 1
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 1
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 1
- 210000000664 rectum Anatomy 0.000 description 1
- 230000000306 recurrent effect Effects 0.000 description 1
- 230000010076 replication Effects 0.000 description 1
- 230000001850 reproductive effect Effects 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 238000002271 resection Methods 0.000 description 1
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 1
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 1
- 230000035939 shock Effects 0.000 description 1
- 208000000587 small cell lung carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 210000000952 spleen Anatomy 0.000 description 1
- 210000004988 splenocyte Anatomy 0.000 description 1
- 206010041823 squamous cell carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 1
- 210000002784 stomach Anatomy 0.000 description 1
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 1
- 238000001356 surgical procedure Methods 0.000 description 1
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 1
- 230000009885 systemic effect Effects 0.000 description 1
- 238000012353 t test Methods 0.000 description 1
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 1
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 1
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 238000013518 transcription Methods 0.000 description 1
- 230000035897 transcription Effects 0.000 description 1
- 230000005760 tumorsuppression Effects 0.000 description 1
- 210000003932 urinary bladder Anatomy 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000008215 water for injection Substances 0.000 description 1
- 230000003442 weekly effect Effects 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
- A61K35/12—Materials from mammals; Compositions comprising non-specified tissues or cells; Compositions comprising non-embryonic stem cells; Genetically modified cells
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
- A61K35/12—Materials from mammals; Compositions comprising non-specified tissues or cells; Compositions comprising non-embryonic stem cells; Genetically modified cells
- A61K35/42—Respiratory system, e.g. lungs, bronchi or lung cells
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/0005—Vertebrate antigens
- A61K39/0011—Cancer antigens
- A61K39/001176—Heat shock proteins
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K40/00—Cellular immunotherapy
- A61K40/10—Cellular immunotherapy characterised by the cell type used
- A61K40/11—T-cells, e.g. tumour infiltrating lymphocytes [TIL] or regulatory T [Treg] cells; Lymphokine-activated killer [LAK] cells
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K40/00—Cellular immunotherapy
- A61K40/30—Cellular immunotherapy characterised by the recombinant expression of specific molecules in the cells of the immune system
- A61K40/32—T-cell receptors [TCR]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K40/00—Cellular immunotherapy
- A61K40/40—Cellular immunotherapy characterised by antigens that are targeted or presented by cells of the immune system
- A61K40/41—Vertebrate antigens
- A61K40/42—Cancer antigens
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
- A61P35/02—Antineoplastic agents specific for leukemia
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/02—Immunomodulators
- A61P37/04—Immunostimulants
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/51—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising whole cells, viruses or DNA/RNA
- A61K2039/515—Animal cells
- A61K2039/5152—Tumor cells
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K2239/00—Indexing codes associated with cellular immunotherapy of group A61K40/00
- A61K2239/31—Indexing codes associated with cellular immunotherapy of group A61K40/00 characterized by the route of administration
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K2239/00—Indexing codes associated with cellular immunotherapy of group A61K40/00
- A61K2239/38—Indexing codes associated with cellular immunotherapy of group A61K40/00 characterised by the dose, timing or administration schedule
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Public Health (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Immunology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Virology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Developmental Biology & Embryology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Oncology (AREA)
- Pulmonology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Mycology (AREA)
- Physiology (AREA)
- Hematology (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
Abstract
Una composición farmacéutica que comprende células que secretan gp96 para su uso en el tratamiento de cáncer en un sujeto, en la que las células son alógenas para el sujeto y se administran al sujeto en al menos nueve dosificaciones durante un periodo de seis semanas.
Description
Inmunoterapia basada en células cancerosas alógenas
El gobierno de EE.UU. tiene ciertos derechos en la presente invención conforme a lo dispuesto en el contrato de NIH CA039201 del Departamento de Salud y Servicios Sociales.
ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN
La presente invención se refiere a mejorar la inmunoterapia basada en células cancerosas (por ejemplo, inmunización o vacunación) que comprende la administración de células cancerosas alógenas que secretan una proteína de choque térmico modificada a un sujeto humano. Se mejora por la administración frecuente de células
15 cancerosas alógenas al sujeto, agotamiento de linfocitos B en el sujeto antes y/o durante la primera o al menos una administración de células cancerosas alógenas, o ambos.
El documento WO 99/42121 desveló una vacuna basada en células, en la que se secreta la proteína de choque térmico modificada codificada por una construcción de expresión transfectada. La vacuna puede ser eficaz para tratar o prevenir cáncer o enfermedad infecciosa. Se describieron una inyección de células cancerosas recombinantes y dos inyecciones de células cancerosas recombinantes separadas dos semanas. Se prefirieron células cancerosas autólogas. Por el contrario, la presente invención usa células cancerosas alógenas.
El documento WO 2005/030136 desveló inhibir un tumor administrando una célula de cáncer de pulmón
25 genéticamente modificada para expresar CD80 y HLA. La célula cancerosa no secreta una proteína de choque térmico modificada.
El cáncer se trata normalmente por resección quirúrgica del tumor, radiación o fármacos para destruir células cancerosas, o una combinación de los mismos. El sistema inmunitario puede inhibir la multiplicación y diseminación de células cancerosas. Sin embargo, pueden escapar de la supervisión inmunológica por ser no inmunogénicas (por ejemplo, cáncer de pulmón de células no pequeñas), que bloquea la sensibilización de la respuesta inmunitaria para generar una respuesta eficaz, o por ser inmunogénicas (por ejemplo, melanoma) pero bloqueando la fase efectora de la respuesta inmunitaria. Alternativamente, el bloqueo de la sensibilización podría ser debido al tumor que secreta mediadores inmunosupresores o que tolera quimiocinas y/o la estimulación de células reguladoras, células
35 presentadoras de antígeno tolerogénicas, o células mielosupresoras. La inmunoterapia activa administrando células cancerosas alógenas podría evitar el bloqueo, y sensibilizar la respuesta inmunitaria innata y/o adaptativa. La inducción y amplificación de una respuesta de linfocitos T CD8+ específica para tumor sería especialmente deseable como se evalúa por citólisis de células cancerosas o secreción de interferón gamma estimulado por células cancerosas.
Raez y col. (J. Clin. Oncol. 22:2800-2807, 2004) describieron un ensayo de fase I de una vacuna basada en células cancerosas alógenas para cáncer de pulmón de células no pequeñas en pacientes con enfermedad metastásica avanzada. La línea celular de adenocarcinoma AD100 se transfectó para expresar CD80 y HLA-A1 o A2. Los pacientes se inmunizaron intradérmicamente con 5 x 107 células una vez cada dos semanas. Tres inmunizaciones
45 representaron un ciclo de tratamiento. A menos que un paciente no tuviera respuesta a la inmunización inicial, se administraron hasta tres ciclos de tratamiento durante un total de nueve inmunizaciones. Los prometedores resultados obtenidos usando esta vacuna basada en células podrían mejorarse aumentando la frecuencia de inmunización y agotando los linfocitos B antes y/o durante al menos una inmunización.
Por tanto, es un objetivo de la presente invención proporcionar inmunoterapia mejorada (por ejemplo, inmunización o vacunación), que comprende administrar células cancerosas alógenas que secretan una proteína de choque térmico modificada a un sujeto humano, por administración frecuente, agotamiento de linfocitos B antes y/o durante la administración inicial o al menos una administración, o ambos. Otras ventajas y mejoras se describen más adelante
o serían evidentes de la divulgación en el presente documento.
55 RESUMEN DE LA INVENCIÓN
La invención proporciona una mejora en la inmunoterapia basada en células cancerosas alógenas para inmunización y vacunación. El “tratamiento” puede ser terapéutico, profiláctico, o simplemente paliativo.
Un sujeto humano se trata administrando células cancerosas alógenas que secretan una gp96 como se expone en la reivindicación 1. Aquí, “alógeno” significa que las células administradas y el sujeto tratados se diferencian por una
o más moléculas del complejo de histocompatibilidad mayor (MHC). La proteína de choque térmico puede
modificarse eliminando un dominio que contiene la señal de retención para retículo endoplásmico. Opcionalmente, el 65 dominio puede sustituirse con una o más regiones constantes de la cadena pesada de la inmunoglobulina IgG1 o IgG2 humana o de ratón (por ejemplo, dominio Fc). La proteína de choque térmico modificada se expresa a partir de un ácido nucleico dentro de la célula cancerosa que se transfectó por un vector de expresión o infectó por un vector viral. El vector puede basarse en una o más señales reguladoras (por ejemplo, inicio y parada de la transcripción, donante y aceptor de corte y empalme, poliadenilación, origen de replicación) del virus del papiloma bovino (VPB). El
5 vector preferentemente no contiene los genes E5, E6 y E7 de VPB. Así, las células cancerosas pueden considerarse “recombinantes” debido a la tecnología usada para producirlas.
El antígeno (por ejemplo, un epítope derivado de neoantígeno o antígeno de tumor de una célula cancerosa alógena
o singénica) puede inducir una respuesta inmunitaria innata o adaptativa en el sujeto. En particular, se desea la inducción y amplificación de una respuesta de linfocitos T CD8+. La célula CD8+ puede destruir células cancerosas o secretar interferón gamma específicamente.
Opcionalmente, una célula cancerosa puede hacerse alógena expresando al menos una molécula de MHC, que no es expresada por el sujeto, de un ácido nucleico dentro de la célula cancerosa que se transfectó por un vector de
15 expresión o infectó por un vector viral. La proteína de choque térmico modificada y la molécula de HLa pueden estar al menos parcialmente codificadas por el mismo vector o vectores diferentes.
Un sujeto humano puede inmunizarse varias veces con células cancerosas alógenas. El intervalo entre dos administraciones consecutivas de la composición inmunogénica basada en células es inferior a dos semanas. Otra mejora puede ser agotamiento de linfocitos B del sujeto antes y/o durante al menos una administración de la composición inmunogénica basada en células.
Otros aspectos de objetivos y ventajas de la invención serán evidentes para un experto en la materia a partir de la siguiente descripción de realizaciones específicas y las reivindicaciones, y generalizaciones a la misma.
A un sujeto puede administrársele una composición inmunogénica que comprende células cancerosas alógenas, que secretan una proteína de choque térmico modificada (por ejemplo, una proteína de choque térmico que carece de una secuencia de retención nativa para retículo endoplásmico) al menos parcialmente codificada por un vector de expresión transfectado o vector viral infectado en las células. Como cadena de polipéptidos naciente, la proteína de choque térmico modificada puede tener su propia secuencia señal de proteína u otra secuencia señal de proteína para elegir como diana la ruta secretora. Y opuesto a un extremo N la secuencia señal puede ser una marca de péptido que comprende una o más regiones constantes de la cadena pesada de inmunoglobulina humana (por
35 ejemplo, IgG1 o IgG2). Opcionalmente, las células cancerosas expresan una molécula del complejo de histocompatibilidad mayor (MHC) alógeno (por ejemplo, al menos parcialmente codificado por el mismo vector o vector diferente). Pueden o pueden no expresan CD80 (por ejemplo, al menos parcialmente codificado por el mismo vector o vector diferente). Más detalles de la expresión de la proteína de choque térmico modificada, HLA-A, y CD80 en diversas líneas de células cancerosas se proporcionan en los documentos WO 99/42121 y WO 2005/030136.
Un sujeto puede administrarse en un intervalo de 1 x 107 a 10 x 107células cancerosas alógenas por dosificación. Un número total de células de 1 a 10 x 108 puede administrarse al sujeto. Las células cancerosas alógenas pueden administrarse al menos dos veces al día, diariamente, cada dos días, dos veces a la semana, semanalmente, cada dos semanas, o mensualmente entre dos administraciones cualesquiera. Pueden administrarse al menos un total de
45 nueve, 18 ó 27 dosificaciones de células cancerosas alógenas. Las dosificaciones pueden administrarse a intervalos de una semana o menos, al menos dos veces a la semana, al menos cada dos días, al menos diariamente, o al menos dos veces al día. El tratamiento continúa durante seis semanas. Pueden inyectarse por al menos una vía intradérmica, intravenosa, intraperitoneal o subcutánea. Cada dosificación puede fraccionarse en alícuotas para las inyecciones separadas que comprenden una única administración. El tratamiento puede mejorarse por vacunación frecuente, agotamiento de linfocitos B, o ambos.
El antígeno (por ejemplo, un epítope derivado de neoantígeno o antígeno de tumor de una célula cancerosa alógena
o singénica) puede inducir una respuesta inmunitaria específica en el sujeto. Por ejemplo, el epítope unido en un complejo inmunogénico con la proteína de choque térmico secretada puede obtenerse de células cancerosas
55 alógenas que coexpresan tanto gp96 secretada como antígeno, o de células cancerosas singénicas del sujeto que expresan solo antígeno. Lo último requeriría supuestamente que la proteína de choque térmico modificada fuera captada por una célula cancerosa diferente a partir de la cual se sintetizó gp96, y el complejo formado en la célula cancerosa en el que el antígeno se sintetizó. La inmunización puede no requerir que tenga linfocitos T CD4+ funcionales o ganglios linfáticos. Por tanto, después de todas las modificaciones de gp96, que incluyen eliminación de la señal de retención de RE, la gp96 modificada todavía debe unirse a epítope en un complejo inmunogénico. Modificaciones opcionales incluyen adiciones o deleciones del extremo N, adiciones del extremo C, mutaciones puntuales de 1 a 3 aminoácidos contiguos, o adiciones o deleciones internas de 1 a 10 aminoácidos.
El sujeto puede ser un sujeto humano. Las células cancerosas pueden obtenerse de un sujeto humano. El 65 inmunogén o vacuna puede administrarse al mismo sujeto que donó las células cancerosas o un sujeto diferente.
Las células cancerosas alógenas pueden haberse obtenido de un sujeto que se diferencia en el (los) antígeno(s) de trasplante con respecto al sujeto que recibe las células. Opcionalmente, una molécula del complejo de histocompatibilidad mayor (por ejemplo, una o más moléculas de MHC clase I tales como HLA-A1, HLA-A2, HLA-A3, HLA-A27) pueden expresarse en las células cancerosas por transfección de un vector de expresión o infección de
5 un vector viral. El ácido nucleico del vector necesita codificar al menos parcialmente la proteína de choque térmico modificada o molécula de MHC alógena debido a que la modificación o tipo histo, respectivamente, puede introducirse en un gen endógeno de la célula cancerosa por recombinación homóloga.
Los linfocitos B pueden agotarse por técnicas conocidas en la técnica, tales como aféresis ex vivo o administración de anticuerpo específico para un receptor de linfocitos B (por ejemplo, anti-CD19, anti-CD20, anti-CD22, anti-BLyS), ligando dimerizado para reticular un receptor de linfocitos B (por ejemplo, dímero de aptámero), o puede usarse fármaco inmunosupresor (por ejemplo, ciclofosfamida o prednisolona). Pero a diferencia del uso de rituximab para tratar linfoma o enfermedad autoinmunitaria, el agotamiento de linfocitos B en asociación con inmunoterapia según la presente invención ahorraría a otras partes del sistema inmunitario efectuar inmunoterapia basada en células del
15 cáncer. Por ejemplo, rituximab a una dosificación de 100 mg/m2 a 500 mg/m2 (o de 200 mg/m2 a 300 mg/m2 o de 350 mg/m2 a 400 mg/m2) puede administrarse a un paciente a una tasa de 50 mg/hora a 400 mg/hora una o más veces (por ejemplo, una vez a la semana durante de dos semanas a dos meses). Rituximab puede complementarse con ciclofosfamida y prednisolona. Los linfocitos B pueden agotarse entonces seguido de inmunoterapia (por ejemplo, inmunización o vacunación). El nivel de linfocitos B puede monitorizarse durante la inmunoterapia y agotamiento repetido cuando se encuentra por encima del 1 %, 5 % o 10 % de niveles normales (es decir, no agotados).
Las células cancerosas de un sujeto que experimenta proliferación anormal pueden ser una neoplasia o tumor (por ejemplo, carcinoma, sarcoma, leucemia, linfoma), especialmente cáncer de pulmón. Los cánceres incluyen aquellos que se originan a partir de los sistemas de órganos gastrointestinales (por ejemplo, esófago, colon, intestino, íleon, 25 recto, ano, hígado, páncreas, estómago), genitourinarios (por ejemplo, vejiga, riñón, próstata), musculoesqueléticos, pulmonares (por ejemplo, pulmón) o reproductores (por ejemplo, cuello uterino, ovario, folículo). Por ejemplo, el cáncer de pulmón puede ser cáncer de pulmón de células no pequeñas (por ejemplo, adenocarcinoma, carcinoma de células escamosas o carcinoma de células grandes), cáncer de pulmón de células pequeñas y carcinoides. La célula cancerosa puede derivarse del sujeto que recibe el tratamiento o de otro individuo distinto del sujeto. Para el primer caso, la alogenicidad puede conferirse expresando una molécula de clase I no relacionada del complejo de histocompatibilidad mayor de un vector de expresión transfectado o un vector viral infectado. Las células cancerosas pueden ser no inmunogénicos o tener baja inmunogenicidad mientras que se manipulan para secretar la proteína de choque térmico modificada. Pueden ser de un carcinoma. Una célula de cáncer de pulmón a modo de ejemplo es el adenocarcinoma AD100, que es alógeno para todos los sujetos, excepto para el paciente del que se derivó la línea
35 celular y cualquier individuo raro que comparta ese haplotipo de MHC del paciente. Su derivación se describe en el documento WO 2005/030136. AD100 no expresa HLA-A1, HLA-A2 o CD80. El carcinoma pancreático puede tratarse con MIA PaCa-2 que secreta gp96-Ig de ATCC CRL1420; el carcinoma de ovario puede tratarse con OVCAR-3 que secreta gp96-Ig de ICLC HTL97004.
La eficacia del tratamiento puede evaluarse mediante la reducción en síntomas, progresión retardada o regresión de la enfermedad, o prolongación de la supervivencia. O el ensayo de citólisis de linfocitos T CD8+ de células cancerosas o interferón gamma estimulado por ellos puede medirse in vitro. Puede usarse mejora en la inmunoterapia activa para tratar cáncer en combinación con cirugía, radioterapia y/o quimioterapia. El refuerzo puede producirse administrando el complejo inmunogénico al menos mensualmente durante de uno a dos años.
45 Las composiciones inmunogénicas comprenden células cancerosas alógenas y un excipiente y/o vehículo farmacéuticamente aceptable. Por ejemplo, el vehículo puede ser alginato o perlas de PLGA o partículas virales, y el vehículo puede ser agua para inyección o solución salina tamponada. Antes de formular la composición, el excipiente o vehículo puede confirmarse libre de patógeno y pirógeno. Las células pueden irradiarse y suspenderse en solución salina tamponada que contiene 0,5 % de albúmina de suero humano. La composición es preferentemente adecuada para administración sistémica o local mediante inyección o depósito. Se prefiere que la composición se pruebe para la ausencia de contaminación bacteriana y viral antes de la administración. Para evitar posibles fuentes de contaminación, se preferiría cultivar las células cancerosas alógenas en medio definido sin suero. Las células pueden almacenarse en el mismo medio complementado con 20 % de sulfóxido de dimetilo como
55 crioconservante.
EJEMPLOS
La vacunación antitumoral es bastante eficaz cuando se administra a ratones sin tumor sin tratamiento previo produciendo protección del crecimiento tumoral tras la posterior exposición. La protección generalmente es de larga duración y específica de tumor que indica la participación de la respuesta inmunitaria adaptativa. Este cuadro cambia radicalmente cuando las vacunas se usan para el tratamiento terapéutico de tumor ya establecido. La misma dosis de vacuna que puede establecer eficazmente inmunidad protectora generalmente es incapaz de proporcionar beneficio terapéutico. Se cree que el motivo para esta falta de eficacia de la vacunación terapéutica procede de la 65 inducción de células supresoras inducidas por tumor, la generación de células reguladoras, la inducción de anergia o
tolerancia de linfocitos T, o una combinación de los mismos. Cualquiera que sean los mecanismos precisos de supresión tumoral inducida por tumor, el éxito de la terapia con vacuna para la terapia contra el cáncer dependerá de vencer o neutralizar estos efectos supresores inducidos por tumor.
5 Basándose en el trabajo pionero de los laboratorios de Srivastava y Rammensee que mostraron que los péptidos asociados a la proteína de choque térmico gp96 se presentan cruzados con células CD8+ por células dendríticas, los presentes inventores han desarrollado un sistema de vacunación adecuado para terapia antitumoral. El transfectar una proteína de fusión gp96-IgG1-Fc en células tumorales produce la secreción de gp96-Ig en el complejo con péptidos de tumor chaperonados. La administración parenteral de tumores que secretan gp96-Ig desencadena la robusta expansión de CTL CD8+ específica para antígeno con activación del sistema inmunitario innato. gp96 secretada por tumor produce el reclutamiento de células DC y NK al sitio de secreción de gp96 y media en la activación de DC mediante la unión a CD91 y TLR2 y TLR4. La captación endocítica de gp96 y sus péptidos chaperonados desencadena la presentación cruzada de péptidos mediante MHC clase I y activación de CD8 relacionada fuerte independiente de células CD4+. En este sistema modelo, la expansión de CTL CD8+ puede
15 cuantificarse con precisión en el plazo de 4 a 5 días desde la vacunación usando linfocitos T CD8+ marcados con gfp transgénicos de TCR adoptivamente transferidos. Usando este sistema de prueba los presentes inventores muestran ahora que en el sistema modelo la inmunosupresión inducida por tumor es no específica de antígeno y puede vencerse por inmunización frecuente o por la ausencia de linfocitos B.
Sujetos, líneas celulares y anticuerpos
Se compraron ratones C57BL/6J (B6) de The Jackson Laboratory o Charles River Laboratories. Ratones deficientes en la cadena μ de Ig que tienen un antecedente B6 (DCBM) se compraron de The Jackson Laboratory.
25 Ratones de gfp (proteína verde fluorescente) se obtuvieron de sus productores. Los ratones C57BL/6J OT-I transgénicos (obtenidos de Dr. M. Bevan) expresan un TCR (Va2V�5.1.2) específico para el péptido 257-264 derivado de albúmina de huevo de pollo limitado a H-2Kb (SIINFEKL). Los ratones de Gfp se cruzaron con ratones OT-I para generar ratones gfp-OT-I en el animalario en la Universidad de Miami según pautas institucionales. Los ratones de progenie se cribaron para la expresión del gen albúmina de huevo-TCR y por fluorescencia para gfp. Todos los ratones se usaron a 6-12 semanas de edad.
La línea celular EG7 (obtenida de M. Bevan) se transfectó con el vector pCMG-His que contenía gp96-Ig. Las células de control se transfectaron con vector solo. Se obtuvieron células de carcinoma de pulmón de Lewis (CPL) de la Colección Americana de Cultivos de Tejido y se transfectaron con albúmina de huevo en pAC-neo-albúmina de
35 huevo o con tanto el vector de albúmina de huevo como pCMG-His que contenía gp96-Ig. Todas las células se cultivaron en medio IMDM (GIBCO) con 10 % de suero bovino fetal (SBF) y gentamicina (GIBCO). Para mantener células transfectadas se añadieron antibióticos para la selección (G418 o L-histidinol, Sigma, St. Louis, MO) al cultivo.
Los siguientes anticuerpos se usaron para la tinción: anti-CD16/32 (2.4G2), CyCromo-anti-CD3£ (145-2C11), -anti-CD5 (UCHT2), -antiCD8a (53-6,7), PE-CD19 (4G7) PE o FITC-anti-NK1.1 (PK136), y PE o FITC-anti-CD11c (HL3) se compraron de BD PharMingen.
Purificación y transferencia adoptiva de células gfp-OT-I y linfocitos B CD19+
45 Suspensiones de una célula de esplenocitos y células de ganglio linfático (GL) se obtuvieron de ratones gfp-OT-I y se reunieron. Se agotaron en glóbulos rojos por lisis con cloruro de amonio. Las células Gfp-OT-I se clasificaron por selección en columna positiva usando microperlas magnéticas anti-CD8a y una columna MACS (Miltenyi Biotec) según las instrucciones del fabricante. La pureza de células OT-I aisladas fue superior al 95 % como se ha determinado por análisis de citometría de flujo. La expresión de Va2 yV15.1.2 sobre células purificadas se cuantificó por citometría de flujo. Para la purificación de linfocitos B, células CD19+ se purificaron con microperlas anti-CD19 (Miltenyi Biotec). Para reconstituir linfocitos B en ratones RDLB, 107 células purificadas se transfirieron adoptivamente a través de las venas de la cola dos días antes del trasplante de células tumorales.
55 Análisis de la expansión de CTL CD8+ in vivo
Para medir la expansión de CTL CD8+, ratones se transfirieron adoptivamente con 106 gfp-OT-I, se inmunizaron dos días después por inyección intraperitoneal (i.p.) de 1-4×106 células EG7-gp96-Ig no irradiadas. Tras la inmunización, las células se recogieron de la cavidad peritoneal, mesentérica, ganglios linfáticos para-aórticos (dLN) y sangre periférica en intervalos cronometrados. Los glóbulos rojos se eliminaron de las muestras por lisis con cloruro de amonio. Se incubaron un millón de células durante 10 min a 4 ºC con mAb anti-CD16/32 en PBS que contenía 0,5 % de BSA (PBA) para bloquear la unión de FcR. Entonces, las células se incubaron con los anticuerpos indicados durante 30 min. Las muestras se analizaron en un FACScan (Becton Dickinson) con el software CELL Quest (BD Bioscience). El número total de las células inmunitarias indicadas por cada tejido se calculó a partir del porcentaje de
65 células elegidas como diana y el número total de células en cada tejido.
Inoculación del tumor y protocolo de tratamiento
Células EG7, de CPL o de CPL-albúmina de huevo no irradiadas se inyectaron subcutáneamente (s.c.) en 200 μl de
5 PBS en los flancos de ratones. Cinco días después de la inoculación de las células de CPL-albúmina de huevo (día 5), 106 gfp-OT-I purificadas en un volumen de 0,3 ml de PBS se inyectaron a través de las venas de la cola. Dos días después, los ratones se inmunizaron por inyección i.p. de 106 células de CPL-albúmina de huevo-gp96-Ig o EG7gp96-Ig no irradiadas en un volumen de 0,5 ml de PBS según el programa indicado en las gráficas. Los ratones de control se trataron con PBS, EG7 o CPL-albúmina de huevo. El tamaño de tumores en el flanco se midió en dos
10 dimensiones dos veces por semana durante al menos 20 días.
Análisis estadístico
La significancia se evaluó por pruebas de la t. Un valor calculado de p < 0,05 se consideró que indicaba significancia 15 estadística.
Tumores establecidos suprimen la expansión de CTL CD8 mediada por gp96 independiente de la especificidad de TCR
20 La transfección de proteína de fusión de choque térmico gp96-Ig en células tumorales produce la secreción de gp96-Ig junto con péptidos chaperonados con gp96. Gp96-Ig es una proteína modificada generada por la sustitución de la señal de retención del retículo endoplásmico (KDEL) de gp96 con la porción Fc de IgG1. La inyección de ratones con células tumorales que secretan gp96-Ig produce la inducción de inmunidad específica de tumor y memoria y protección de la posterior exposición al mismo tumor, pero no transfectado. La inmunidad tumoral generada por
25 gp96-Ig secretada es específica para péptidos chaperonados con gp96 que incluyen péptidos derivados de antígenos endógenos de tumor, tales como antígenos específicos para EL4, y para antígenos sustitutos tales como albúmina de huevo transfectada en EL4 (EG7) o CPL (CPL-albúmina de huevo). El antígeno sustituto de albúmina de huevo ofrece un procedimiento para determinar con exactitud la expansión de CTL CD8+ in vivo mediante transferencia adoptiva de células CD8+ transgénicas de OT-I TCR específicas para albúmina de huevo.
30 Los tumores establecidos son conocidos por ser supresores de la expansión de CTL. Para medir respuestas de CTL en presencia y ausencia de tumores establecidos, los presentes inventores usaron el sistema de OT-I transgénico de TCR en el que CTL CD8+ transgénicos responden a tumores singénicos o alógenos transfectados con albúmina de huevo que secretan gp96-Ig-albúmina de huevo. Como modelos de tumor trasplantables los presentes inventores
35 usaron EG7, derivada de EL4 por transfección con albúmina de huevo, que se clasifica como inmunogénica y altamente tumorigénica. Además, los presentes inventores también usaron el carcinoma de pulmón de Lewis (CPL y CPL-albúmina de huevo) que se considera menos inmunogénico y altamente tumorigénico. La tasa de división de ambas líneas celulares es muy rápida con un tiempo de duplicación de 8-12 horas en cultivo.
40 Después de una única inmunización i.p. con un millón de células EG7-gp96-Ig, que secretan 60-80 ng de gp96-Ig por 106 células en 24 horas, OT-I se expanden de niveles preinmunes bajos en la puerta de CD8+ (�0,2 %) a altas frecuencias (15-40%) en ratones sin tumor. La administración de EG7 irradiadas que no secretan gp96-Ig no puede producir expansión de OT-I significativa. Pero tumores EG7 subcutáneamente establecidos presentes en un sitio distante en el flanco inhiben significativamente la expansión inducida por la vacuna de gp96 de OT-I en la cavidad
45 peritoneal y sistémicamente en bazo y ganglios linfáticos. Tumores EG7 secretan albúmina de huevo y expresan Kbalbúmina de huevo. Por tanto, es posible que OT-I adoptivamente transferidas tras la recirculación mediante el lecho tumoral o ganglios linfáticos de drenaje de tumor sean anérgicas debido a que reciben señales mediante sus TCR específicos de Kb-albúmina de huevo mientras que no reciben señal coestimulante. Para evaluar esta hipótesis, los tumores singénicos EL4 y CPL, ninguno de los cuales expresa albúmina de huevo, se establecieron
50 subcutáneamente en sitios distantes. Posteriormente, OT-I se transfirieron adoptivamente intravenosamente (i.v.) y los ratones se inmunizaron i.p. con EG7-gp96-Ig. EL4 y CPL establecidos fueron tan eficaces en suprimir la expansión de OT-I por gp96-albúmina de huevo secretada como EG7 establecidas que indica que la supresión no depende del antígeno de TCR apropiado, Kb-albúmina de huevo, en el tumor. Mientras que la expansión de OT-I en la cavidad peritoneal y sistémicamente se suprimió por la presencia de CPL y EL4 en sitios distantes, el
55 reclutamiento de células totales en la cavidad peritoneal tras la inmunización con EG7-gp96-Ig i.p. aumentó en realidad cuando se comparó con ratones sin tumor.
Como también se ha informado por otros, los datos indican que tumores establecidos pueden inducir supresión no específica de antígeno de expansión de CTL. Esta inducción de la supresión se correlaciona con elevado
60 reclutamiento celular al sitio de vacuna en la cavidad peritoneal. La transferencia de células peritoneales inducida por vacuna de ratones portadores de tumor a sin tumor suprimió la expansión de OT-I en ratones receptores que indica la presencia de células reguladoras o supresoras. Así, los linfocitos T CD8+ son no reactivos debido a una respuesta supresora celular en ratones portadores de tumor independiente de antígeno.
Para vencer la inmunosupresión no específica de antígeno, los presentes inventores evaluaron si la estimulación específica de antígeno frecuentemente repetida de CTL CD8+ por vacunación podría contrarrestar o no la actividad supresora encontrada en ratones portadores de tumor.
El rechazo de tumores establecidos requiere frecuentes inmunizaciones de gp96-Ig
5 Aunque muchas estrategias de vacunación, que incluyen gp96-Ig secretada, pueden establecer inmunidad protectora en ratones contra tumores y antígenos de tumor, es más difícil de rechazar tumores ya establecidos por vacunación terapéutica. Dada la observación de supresión no específica de antígeno de la expansión de CD8, los presentes inventores analizaron cómo afectaron programas de vacunación diferentes al rechazo de tumor y/o crecimiento tumoral.
Los presentes inventores analizaron inicialmente el efecto de la vacunación terapéutica empezando la vacunación el mismo día que el trasplante de tumor. Un millón de células tumorales EG7 se trasplantaron subcutáneamente en el flanco de ratones singénicos. En el mismo día (día 0), un millón de células de vacuna EG7 que secretan gp96-Ig
15 (EG7-gp96-Ig), que secretan gp96-Ig a una tasa de 60-80 ng/106 células x 24 h) se administraron i.p. como vacuna y la vacunación se repitió en el día 3, 7, 10 y 14. En comparación con ratones que no reciben terapia, el crecimiento tumoral se reduce por cuatro vacunaciones de EG7-gp96-Ig empezando en el mismo día que el trasplante de tumor. El efecto terapéutico es gp96 y dependiente de antígeno. EG7 irradiadas, que no secretan gp96-Ig, o CPL-gp96-Ig, que no expresan antígenos de EG7, pero que secretan gp96-Ig a la misma tasa que EG7-gp96-Ig, son incapaces de retardar el crecimiento tumoral cuando se administran i.p. como vacuna a la dosis indicada y programa como EG7gp96-Ig. Cuando la vacunación con EG7-gp96-Ig empieza dos días o después después de la inoculación de EG7, el efecto terapéutico usando el mismo programa de vacunación se reduce sustancialmente. Estos datos demuestran que incluso después de dos días los tumores establecidos son más difíciles de controlar por vacunación que los tumores que están recientemente trasplantados.
25 Los presentes inventores evaluaron a continuación si los tumores establecidos podrían o no controlarse por programas de vacunación más frecuentes. Se trasplantaron un millón de células tumorales EG7 subcutáneamente en el flanco y se dejaron establecerse durante tres a siete días, dejando al menos siete o más duplicados de células tumorales. Durante este periodo se produce la vascularización del nódulo tumoral que es detectable visualmente. Entonces, los ratones se vacunaron diariamente i.p. con un millón de células EG7-gp96-Ig o, en controles de especificidad, con el mismo programa y dosis de células CPL-gp96-Ig, o células EG7 irradiadas, o se dejaron sin vacunar. La vacunación diaria con EG7-gp96-Ig controló eficazmente el crecimiento de EG7 que se habían establecido durante tres días, mientras que la vacunación diaria con EG7 irradiadas o con CPL-gp96-Ig no tuvo efecto sobre crecimiento de EG7 establecidas. En otros estudios los presentes inventores dejaron que los tumores
35 EG7 trasplantados se establecieran durante 5 y 7 días antes de empezar la vacunación con EG7-gp96-Ig. Se requirieron dos vacunaciones cada día para retardar el crecimiento tumoral en esta etapa posterior del establecimiento tumoral. Los datos muestran que la inmunización frecuente puede comprobar el crecimiento tumoral durante un periodo de 24 días en ratones. Se necesitarán otros estudios para determinar si los programas de vacunación a largo plazo continuados pueden erradicar o no completamente los tumores.
Para validar datos obtenidos con el linfoma EG7 inmunogénico, los experimentos se repitieron con CPL establecido menos inmunogénico. Las inmunizaciones i.p. repetidas (día 3, 7, 10, 14) con CPL-gp96-Ig que empiezan el tercer día después del trasplante del tumor produjeron retardo de la progresión tumoral de CPL. Las inmunizaciones diarias para CPL no fueron más eficaces en el retardo tumoral. El efecto de la inmunización fue específico para tumor ya
45 que la vacunación de EG7-gp96-Ig fue incapaz de controlar el crecimiento tumoral de CPL. El control del crecimiento tumoral tampoco pudo lograrse por CPL irradiado, pero dependió de la secreción de gp96-Ig.
Estos datos sugieren que la frecuente activación de DC y NK combinada con la presentación cruzada de antígeno por gp96-Ig secretada y sus péptidos chaperonados puede vencer la inmunosupresión no específica de antígeno inducida por tumor establecido.
El reclutamiento de DC y NK y la expansión de CTL CD8 mediados por gp96 se potencia en ratones deficientes en linfocitos B
55 Se ha informado por varios grupos que las respuestas antitumorales Th1 se potencian en ratones deficientes en linfocitos B (RDLB) cuando se compara con ratones naturales. Por tanto, los presentes inventores estudiaron la función de linfocitos B en la expansión de CTL mediada por gp96 e inmunidad antitumoral. La cavidad peritoneal está poblada por linfocitos B CD5-CD19+ y por linfocitos B1-B CD5+CD19+, produciendo los últimos anticuerpo IgM y no experimentando conmutación de isotipo tras la activación. Tras la inmunización i.p. con EG7-gp96-Ig, la población CD5-CD19+ aumenta aproximadamente cinco veces en el día 4 después de la inmunización, mientras que los linfocitos B1-B CD5+ aumentan solo moderadamente. La expansión de OT-I mediada por gp96 es máxima en el día 4 y 5 después de la inmunización. Va precedida del reclutamiento y activación de células DC y NK en la cavidad peritoneal, el sitio de vacunación. En ratones deficientes en linfocitos B, el reclutamiento de células DC y especialmente NK aumentó en tres experimentos separados y las células reclutadas permanecieron más tiempo en
65 la cavidad peritoneal. La diferencia no alcanzó significancia, pero fue reproducible. La transferencia adoptiva de linfocitos B naturales a RDLB abolió el elevado reclutamiento de células DC y NK. El hallazgo sugiere que los linfocitos B influyen en el reclutamiento inducido por gp96 de células inmunitarias innatas y sugieren que los linfocitos B también pueden participar en la regulación o supresión de la expansión de CTL CD8+.
5 Por tanto, los presentes inventores evaluaron si la expansión de OT-I marcado con gfp aumentó o no en RDLB. La expansión de OT-I después de la inmunización con gp96 en RDLB fue aproximadamente dos veces tan fuerte como la observada en ratones naturales en el día 4. Y, lo que es más importante, OT-I persistió a frecuencias significativamente mayores en el día 7 y 12 después de la inmunización en la cavidad peritoneal y en ganglios linfáticos drenantes. La transferencia adoptiva de linfocitos B naturales a RDLB antes de la inmunización redujo la expansión de OT-I a niveles o por debajo de aquellos observados en ratones naturales. La supresión de la expansión de OT-I por la presencia de linfocitos B no está mediada por la producción de IL-10 ya que ratones deficientes en IL-10 presentan expansión de OT-I similar a ratones naturales en vez de expansión potenciada como se observa en RDLB.
15 El rechazo mediado por gp96 de tumores establecidos se potencia en ausencia de linfocitos B
Como se muestra anteriormente, el control del crecimiento de EG7 establecidas en ratones naturales requiere mínimamente inmunización de gp96 diaria. Similarmente, la progresión de CPL puede retardarse por inmunizaciones frecuentes. Las células EG7 y EL4 son rechazadas en RDLB y no establecen tumores; sin embargo, CPL y CPLalbúmina de huevo pueden establecerse en RDLB aunque crecen a una tasa más lenta que en ratones naturales. CPL-albúmina de huevo se estableció subcutáneamente en el flanco durante 7 días en RDLB y en ratones naturales. OT-I se transfirió adoptivamente i.v. y dos días después se administró CPL-albúmina de huevo-gp96-Ig como dosis única i.p. y se monitorizó el crecimiento tumoral. En RDLB, una única inmunización produjo rechazo completo de tumores de CPL-albúmina de huevo de siete días establecidos en tres ratones y encogimiento del tumor significativo
25 en dos. En ausencia de tratamiento, CPL-albúmina de huevo continuó creciendo progresivamente en RDLB, no obstante a una tasa más lenta que en ratones naturales. La reconstitución de linfocitos B de RDLB proveyó el efecto de vacunación similar al observado en ratones naturales, concretamente retardo de la progresión.
El control de tumores opcional de CPL establecido en RDLB por una única inmunización está soportado tanto por números suficientemente altos de precursores de CTL específicos de tumor (OT-I) como por inmunización específica de antígeno (CPL-albúmina de huevo-gp96-Ig). En RDLB, la presencia de un millón de OT-I adoptivamente transferidos sin inmunización con gp96 no produce rechazo de tumor en la mayoría de los ratones. Asimismo, la inmunización con gp96 sola sin transferencia de OT-1 es menos eficaz que la combinación.
35 Ensayo clínico de vacuna para cáncer alógeno en cáncer de pulmón de células no pequeñas (CPCNP) para referencia solo.
La línea de células de cáncer de pulmón alógenas AD100 se transfecta con gp96-Ig y HLA-A1. Al menos el 70 % de las células expresan más de 60 ng de gp96-Ig cada 24 horas a partir de un millón células. Las células cancerosas recombinantes se irradian y luego se inyectan intradérmicamente en pacientes que padecen CPCNP avanzado, recidivante o metastásico (estadio IIIB/IV). No se requiere coincidencia de HLA. Si no se producen cuestiones sobre la toxicidad, los pacientes se vacunarán con 5×107 células cancerosas alógenas una vez cada semana o cada dos semanas durante 17 semanas. Alternativamente, un total de 4,5×108 células cancerosas alógenas pueden administrarse por (a) nueve inyecciones durante 18 semanas, (b) 18 inyecciones durante 18 semanas, o (c) 36
45 inyecciones durante 18 semanas.
DISCUSIÓN
Es muy apreciado que los tumores establecidos supriman la inmunidad antitumoral. Los linfocitos T específicos de tumor se vuelven anérgicos en presencia de tumores establecidos. La anergia para el linfoma de linfocitos B usado en ese estudio fue específica de antígeno, limitada a MHC y dependiente de la presencia de células presentadoras de antígeno derivadas de la médula ósea coincidentes con MHC. En otros estudios, células supresoras de mieloide no específicas para antígeno y linfocitos T reguladores participan en la supresión de inmunidad antitumoral. Los estudios de los presentes inventores muestran que la supresión de respuestas de CTL in vivo puede lograrse por
55 tumores establecidos mediante rutas independientes de antígeno. La expansión de OT-I en respuesta a vacunación con gp96-albúmina de huevo se inhibe por tumores establecidos independiente de la expresión de albúmina de huevo por los tumores. Este tipo de supresión puede lograrse por linfocitos T reguladores o por otras células supresoras tales como células supresoras de mieloide o macrófagos M2. De acuerdo con esta hipótesis, la actividad supresora es transferible a ratones sin tumor por la transferencia de células peritoneales provocadas en ratones portadores de tumor por vacunación con gp96.
Mientras que la respuesta de OT-I a inmunización con gp96-albúmina de huevo se inhibió fuertemente en presencia de tumores establecidos, no se bloquea totalmente, sugiriendo que hay equilibrio entre inmunosupresión por el tumor establecido y activación de CD8-CTL mediante presentación cruzada de antígeno por DC activadas 65 estimuladas por gp96-albúmina de huevo secretada. Los presentes inventores han mostrado previamente que en
ratones sin tratamiento previo para el tumor gp96-albúmina de huevo produce el reclutamiento y activación de NK y DC seguido de expansión de OT-I. Los tumores establecidos, aunque en realidad potencian el reclutamiento de células en la cavidad peritoneal por vacunación con CPL-gp96-Ig, inhiben la expansión de OT-I y sugieren que en presencia de tumores establecidos es probable que muchas de las células reclutadas sean células supresoras. Esta
5 hipótesis predice que las frecuentes inmunizaciones con gp96-albúmina de huevo pueden vencer la actividad supresora desplazando el equilibrio de supresión a elevada activación inmune mediante estimulación de DC y NK mediada por gp96 repetida, elevada presentación cruzada de antígenos y sensibilización de CTL. De hecho, las frecuentes inmunizaciones tienen efectos significativos sobre el retardo de la progresión tumoral. En el caso de EG7 establecido, vacunaciones diarias o dos veces al día fueron más eficaces en detener la progresión tumoral. Para CPL, la inmunización cada dos o tres días fue suficiente y la inmunización diaria no fue más eficaz. Estas diferencias específicas de tumores pueden relacionarse con la tasa a la que las células supresoras se generan por la presencia del tumor periférico. Alternativamente, puede depender del mecanismo por el que los tumores median en la inducción de células supresoras o la naturaleza de las células supresoras que se han inducido. Estas cuestiones están actualmente en estudio.
15 Estudiando la respuesta de OT-I a inmunización i.p. con gp96-albúmina de huevo secretada de tumor los presentes inventores notaron que números grandes de linfocitos B son reclutados en la cavidad peritoneal. Se ha informado que los linfocitos B son inhibidores para inmunidad antitumoral promoviendo la cuestión en cuanto a su función en la expansión de OT-I mediada por gp96. Usando ratones deficientes en linfocitos B fue evidente inmediatamente que los linfocitos B inhiben tanto el reclutamiento de NK y DC como la expansión de OT-I tras la inmunización con gp96albúmina de huevo. Los RDLB reconstituidos en linfocitos B respondieron como ratones naturales a la expansión de OT-I mediada por gp96-albúmina de huevo, descartando la posibilidad de que la deficiencia de linfocitos B hubiera modificado la sensibilidad de RDLB a la inmunización con gp96-albúmina de huevo de un modo sin relacionar con la ausencia de linfocitos B. La deficiencia de linfocitos B produjo expansión de OT-I potenciada y rechazo de tumor
25 fuertemente potenciado de tumores de CPL-albúmina de huevo establecidos de siete días incluso después de solo una única inmunización con gp96-Ig. Los datos sugieren que la inducción mediada por tumor de células supresoras disminuye enormemente en ausencia de linfocitos B o que los propios linfocitos B actúan de células supresoras. Si los linfocitos B participan o no en la inducción de células supresoras o si los linfocitos B por sí mismos son inmunosupresores o no para respuestas de CTL necesita estudio adicional; sin embargo, la IL-10 no parece participar en la supresión mediada por linfocitos B de inmunidad tumoral. En estudios en curso los presentes inventores han encontrado que linfocitos B deficientes en OX40-L muestran capacidad reducida para suprimir respuestas inmunitarias antitumorales. Queda por determinar cómo OX40-L expresado en linfocitos B media en la supresión de inmunidad antitumoral y expansión de CTL por gp96.
35 Los estudios de los presentes inventores proporcionan un modelo por el que la inmunosupresión independiente de antígeno puede estudiarse y definirse adicionalmente. La función de linfocitos B en particular en este procedimiento será de gran interés. Además, los estudios de los presentes inventores indican hacia formas en las que pueden prepararse vacunas antitumorales más eficaces. El agotamiento de linfocitos B con anticuerpos y la posterior vacunación frecuente, por ejemplo, con vacunas de gp96 secretada por tumor, puede producir control más eficiente del crecimiento tumoral que el observado con procedimientos de vacunación convencionales.
En el establecimiento de un intervalo numérico debe entenderse que también se describen todos los valores dentro del intervalo (por ejemplo, uno a diez también incluye cada valor entero numérico entre uno y diez además de todos los intervalos intermedios tales como dos a diez, uno a cinco y tres a ocho). El término “aproximadamente” puede
45 referirse a la incertidumbre estadística asociada a una medida o la variabilidad en una cantidad numérica que un experto en la materia entendería que no afecta la operación de la invención o su patentabilidad.
Todas las modificaciones y sustituciones que están dentro del significado de las reivindicaciones y el intervalo de sus equivalentes legales deben englobarse dentro de su alcance. Una reivindicación que cita “que comprende” permite la inclusión de que otros elementos estén dentro del alcance de la reivindicación; la invención también se describe por tales reivindicaciones que citan las frases de transición “que consiste esencialmente en” (es decir, que permite la inclusión de que otros elementos estén dentro del alcance de la reivindicación si no afectan materialmente la operación de la invención) o “que consiste en” (es decir, que permite solo los elementos enumerados en la reivindicación distintos de impurezas o actividades intrascendentes que están generalmente asociados a la
55 invención) en lugar de citar el término “que comprende”. Cualquiera de estas tres transiciones puede usarse para reivindicar la invención.
Debe entenderse que un elemento descrito en esta memoria descriptiva no deben interpretarse como una limitación de la invención reivindicada a menos que se cite explícitamente en las reivindicaciones. Así, las reivindicaciones concedidas son la base para determinar el alcance de protección legal en lugar de una limitación de la memoria descriptiva que se lee en las reivindicaciones.
Las realizaciones descritas deben considerarse solo como ilustrativas, no restrictivas, debido a que el alcance de la protección legal proporcionada para la invención se indicará por las reivindicaciones adjuntas en vez de por esta
65 memoria descriptiva.
Claims (7)
- REIVINDICACIONES1.- Una composición farmacéutica que comprende células que secretan gp96 para su uso en el tratamiento de cáncer en un sujeto, en la que las células son alógenas para el sujeto y se administran al sujeto en al menos nueve 5 dosificaciones durante un periodo de seis semanas.
- 2.- La composición para su uso según la reivindicación 1, en la que cada una de las dosificaciones comprende entre diez millones y cien millones de las células.10 3.- La composición para su uso según las reivindicaciones 1 ó 2, en la que cada una de las dosificaciones se fracciona en una pluralidad de alícuotas que se administran al sujeto en diferentes sitios.
- 4.- La composición para su uso según cualquiera de las reivindicaciones 1-3, en la que las dosificaciones se administran al sujeto intradérmicamente.15 5.- La composición para su uso según cualquiera de las reivindicaciones 1-3, en la que las dosificaciones se administran al sujeto subcutáneamente.
- 6.- La composición para su uso según cualquiera de las reivindicaciones 1-3, en la que las dosificaciones se 20 administran al sujeto intraperitonealmente.
- 7.- La composición para su uso según cualquiera de las reivindicaciones 1-6, en la que al menos 18 dosificaciones se administran al sujeto.25 8.- La composición para su uso según cualquiera de las reivindicaciones 1-6, en la que al menos 27 dosificaciones se administran al sujeto.
- 9.- La composición para su uso según cualquiera de las reivindicaciones 1-8, en la que las células se han transfectado con al menos un primer vector que comprende un primer ácido nucleico que codifica una primera 30 proteína.
- 10.- La composición para su uso según la reivindicación 9, en la que la primera proteína es una forma secretada de un polipéptido gp96.35 11.- La composición para su uso según la reivindicación 9, en la que las células también se han transfectado con al menos un segundo vector que comprende un segundo ácido nucleico que codifica una molécula del complejo de histocompatibilidad mayor.
Applications Claiming Priority (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US3342508P | 2008-03-03 | 2008-03-03 | |
| US33425P | 2008-03-03 | ||
| PCT/US2009/001330 WO2009114085A2 (en) | 2008-03-03 | 2009-03-03 | Allogeneic cancer cell-based immunotherapy |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| ES2460899T3 true ES2460899T3 (es) | 2014-05-14 |
Family
ID=41065702
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| ES09720311.1T Active ES2460899T3 (es) | 2008-03-03 | 2009-03-03 | Inmunoterapia basada en células cancerosas alógenas |
Country Status (11)
| Country | Link |
|---|---|
| US (2) | US8475785B2 (es) |
| EP (2) | EP2257301B1 (es) |
| JP (2) | JP2011513399A (es) |
| KR (1) | KR20110009095A (es) |
| CN (1) | CN102014937A (es) |
| AU (1) | AU2009223838B2 (es) |
| CA (1) | CA2717854C (es) |
| DK (1) | DK2257301T3 (es) |
| ES (1) | ES2460899T3 (es) |
| IL (1) | IL207958A (es) |
| WO (1) | WO2009114085A2 (es) |
Families Citing this family (12)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| ES2439014T3 (es) * | 1998-02-20 | 2014-01-21 | The University Of Miami | Complejo de péptido antigénico-proteína de choque térmico modificada |
| US8475785B2 (en) | 2008-03-03 | 2013-07-02 | The University Of Miami | Allogeneic cancer cell-based immunotherapy |
| WO2009117116A2 (en) | 2008-03-20 | 2009-09-24 | University Of Miami | Heat shock protein gp96 vaccination and methods of using same |
| EP2358383A4 (en) * | 2008-11-21 | 2011-11-23 | Univ Miami | HIV / SIV VACCINES FOR THE MANUFACTURE OF SLEEPAGE AND SYSTEM IMMUNITY |
| CN102883746A (zh) * | 2010-05-21 | 2013-01-16 | 迈阿密大学 | 癌症治疗 |
| WO2013106895A1 (en) * | 2012-01-20 | 2013-07-25 | Fernando Thome Kreutz | Autologous cancer cell vaccine |
| WO2015131176A1 (en) * | 2014-02-28 | 2015-09-03 | Podack Eckhard R | Compositions, methods, and kits for treatment of cancer |
| KR20170109582A (ko) | 2015-02-06 | 2017-09-29 | 히트 바이오로직스, 인코퍼레이티드 | 벡터 공동 발현 백신 및 공동 자극 분자 |
| US11666649B2 (en) | 2016-10-11 | 2023-06-06 | University Of Miami | Vectors and vaccine cells for immunity against Zika virus |
| CA3058938A1 (en) | 2017-04-04 | 2018-10-11 | Heat Biologics, Inc. | Intratumoral vaccination |
| WO2018199318A1 (ja) * | 2017-04-28 | 2018-11-01 | 国立大学法人高知大学 | 抗ｇｐｃ－１抗体 |
| DE102021124078A1 (de) | 2021-09-17 | 2023-03-23 | Timm Golüke | Kosmetikzusammensetzung zur Anwendung auf der Haut |
Family Cites Families (159)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4215051A (en) | 1979-08-29 | 1980-07-29 | Standard Oil Company (Indiana) | Formation, purification and recovery of phthalic anhydride |
| US5168062A (en) | 1985-01-30 | 1992-12-01 | University Of Iowa Research Foundation | Transfer vectors and microorganisms containing human cytomegalovirus immediate-early promoter-regulatory DNA sequence |
| US4690915A (en) | 1985-08-08 | 1987-09-01 | The United States Of America As Represented By The Department Of Health And Human Services | Adoptive immunotherapy as a treatment modality in humans |
| US5217891A (en) | 1987-07-28 | 1993-06-08 | Chiron Corporation | DNA constructs containing a kluyveromyces α factor leader sequence for directing secretion of heterologous polypeptides |
| ATE127345T1 (de) | 1988-06-15 | 1995-09-15 | Whitehead Biomedical Inst | Stressproteine und verwendungen dafür. |
| US5137819A (en) | 1988-07-08 | 1992-08-11 | University Of British Columbia | Cellulose binding fusion proteins for immobilization and purification of polypeptides |
| WO1990002564A1 (en) | 1988-09-12 | 1990-03-22 | Codon | Vaccine diagnostic employing proteins homologous to heat shock proteins of trypanosoma cruzi |
| US5232833A (en) | 1988-09-14 | 1993-08-03 | Stressgen Biotechnologies Corporation | Accumulation of heat shock proteins for evaluating biological damage due to chronic exposure of an organism to sublethal levels of pollutants |
| US5703055A (en) | 1989-03-21 | 1997-12-30 | Wisconsin Alumni Research Foundation | Generation of antibodies through lipid mediated DNA delivery |
| US5108921A (en) | 1989-04-03 | 1992-04-28 | Purdue Research Foundation | Method for enhanced transmembrane transport of exogenous molecules |
| US5399346A (en) | 1989-06-14 | 1995-03-21 | The United States Of America As Represented By The Department Of Health And Human Services | Gene therapy |
| WO1991002077A1 (en) | 1989-07-28 | 1991-02-21 | The United States Of America, Represented By The Secretary, United States Department Of Commerce | Efficient directional genetic cloning system |
| GB9007194D0 (en) | 1990-03-30 | 1990-05-30 | Wellcome Found | Live vaccines |
| US5348945A (en) | 1990-04-06 | 1994-09-20 | Wake Forest University | Method of treatment with hsp70 |
| US5188964A (en) | 1990-04-12 | 1993-02-23 | Board Of Regents, The University Of Texas System | Method and kit for the prognostication of breast cancer patient via heat shock/stress protein determination |
| GB9016315D0 (en) | 1990-07-25 | 1990-09-12 | Burnie James P | Medicaments |
| AU660430B2 (en) | 1990-11-08 | 1995-06-29 | Stanford Rook Limited | Mycobacterium as adjuvant for antigens |
| GB9024320D0 (en) | 1990-11-08 | 1990-12-19 | Univ London | Treatment of uveitis |
| GB2251186A (en) | 1990-12-04 | 1992-07-01 | Randall Neal Gatz | Polypeptide for use in treatment of autoimmune disease |
| AU643141B2 (en) | 1991-03-15 | 1993-11-04 | Amgen, Inc. | Pulmonary administration of granulocyte colony stimulating factor |
| GB9200949D0 (en) | 1992-01-17 | 1992-03-11 | Medical Res Council | Diagnostic peptides |
| FR2688227A1 (fr) | 1992-03-04 | 1993-09-10 | Inst Nat Sante Rech Med | Proteines formant des complexes avec des chaperones et leurs ligands, leurs fragments, leur obtention et leurs applications biologiques. |
| IT1262896B (it) | 1992-03-06 | 1996-07-22 | Composti coniugati formati da proteine heat shock (hsp) e oligo-poli- saccaridi, loro uso per la produzione di vaccini. | |
| HUT70972A (en) | 1992-03-09 | 1995-11-28 | Ist Naz Stud Cura Dei Tumori | Protein compound capable of inhibiting tumoral growth |
| JPH07505719A (ja) | 1992-04-14 | 1995-06-22 | デューク・ユニバーシティー | ｐ５３及びＨＳＰ７０のコンプレックスを含む腫瘍の検出方法 |
| IL102687A (en) | 1992-07-30 | 1997-06-10 | Yeda Res & Dev | Conjugates of poorly immunogenic antigens and synthetic pepide carriers and vaccines comprising them |
| WO1994003599A1 (fr) | 1992-08-04 | 1994-02-17 | Sagami Chemical Research Center | ADNc HUMAIN ET PROTEINE POUR LAQUELLE CODE CET ADNc |
| GB2270076A (en) | 1992-08-18 | 1994-03-02 | Univ Manchester | Human HSP 90 Epitopes |
| GB9223816D0 (en) | 1992-11-13 | 1993-01-06 | Medical Res Council | Heat shock proteins and the treatment of tumours |
| AU6427994A (en) | 1993-03-19 | 1994-10-11 | Boehringer Ingelheim International Gmbh | Process for preparing cancer vaccines |
| US5496934A (en) | 1993-04-14 | 1996-03-05 | Yissum Research Development Company Of The Hebrew University Of Jerusalem | Nucleic acids encoding a cellulose binding domain |
| US5645829A (en) | 1993-06-18 | 1997-07-08 | Beth Israel Hospital Association | Mesothelial cell gene therapy |
| WO1995004824A1 (en) | 1993-08-05 | 1995-02-16 | Medvet Science Pty. Ltd. | Generation of dna libraries and retroviral vectors for same |
| US5705159A (en) | 1993-08-31 | 1998-01-06 | John Wayne Cancer Institute | Immunoreactive peptide sequence from a 43 KD human cancer antigen |
| US5444087A (en) | 1993-10-19 | 1995-08-22 | Bristol-Myers Squibb Company | Manumycin compounds |
| US5750119A (en) * | 1994-01-13 | 1998-05-12 | Mount Sinai School Of Medicine Of The City University Of New York | Immunotherapeutic stress protein-peptide complexes against cancer |
| US5997873A (en) | 1994-01-13 | 1999-12-07 | Mount Sinai School Of Medicine Of The City University Of New York | Method of preparation of heat shock protein 70-peptide complexes |
| EP0745134A1 (en) | 1994-02-22 | 1996-12-04 | Danafarber Cancer Institute | Nucleic acid delivery system, method of synthesis and uses thereof |
| US5961979A (en) | 1994-03-16 | 1999-10-05 | Mount Sinai School Of Medicine Of The City University Of New York | Stress protein-peptide complexes as prophylactic and therapeutic vaccines against intracellular pathogens |
| US5451569A (en) | 1994-04-19 | 1995-09-19 | Hong Kong University Of Science And Technology R & D Corporation Limited | Pulmonary drug delivery system |
| AU699405B2 (en) | 1994-07-08 | 1998-12-03 | Baxter International Inc. | Implanted device containing tumor cells for the treatment of cancer |
| US5772995A (en) | 1994-07-18 | 1998-06-30 | Sidney Kimmel Cancer Center | Compositions and methods for enhanced tumor cell immunity in vivo |
| ES2154738T3 (es) | 1994-10-03 | 2001-04-16 | Us Gov Health & Human Serv | Composicion que comprende un virus recombinante que expresa un antigeno y un virus recombinante que expresa una molecula inmunoestimuladora. |
| US5703057A (en) | 1995-04-07 | 1997-12-30 | Board Of Regents The University Of Texas System | Expression library immunization |
| US6761892B1 (en) | 1995-08-18 | 2004-07-13 | Sloan-Kettering Institute For Cancer Research | Heat shock protein-based vaccines and immunotherapies |
| US6331299B1 (en) | 1995-08-18 | 2001-12-18 | Sloan-Kettering Institute For Cancer Research | Method for treatment of cancer and infectious disease and compositions useful in same |
| US6719974B1 (en) | 1995-08-18 | 2004-04-13 | Sloan-Kettering Institute For Cancer Research | Heat shock protein-based vaccines and immunotherapies |
| WO1997006821A1 (en) | 1995-08-18 | 1997-02-27 | Sloan-Kettering Institute For Cancer Research | Heat shock protein-based vaccines and immunotherapies |
| AU727673B2 (en) | 1995-09-13 | 2000-12-21 | Fordham University | Therapeutic and prophylactic methods using heat shock proteins |
| US5985270A (en) | 1995-09-13 | 1999-11-16 | Fordham University | Adoptive immunotherapy using macrophages sensitized with heat shock protein-epitope complexes |
| US5935576A (en) | 1995-09-13 | 1999-08-10 | Fordham University | Compositions and methods for the treatment and prevention of neoplastic diseases using heat shock proteins complexed with exogenous antigens |
| US5837251A (en) | 1995-09-13 | 1998-11-17 | Fordham University | Compositions and methods using complexes of heat shock proteins and antigenic molecules for the treatment and prevention of neoplastic diseases |
| WO1997026910A2 (de) | 1996-01-27 | 1997-07-31 | Max-Delbrück-Centrum für Molekulare Medizin | Tumorimpfstoff für die immuntherapie von malignen tumoren |
| DE19602985A1 (de) | 1996-01-27 | 1997-07-31 | Max Delbrueck Centrum | Tumorzellimpfstoff für die Immuntheraphie von malignen Tumoren |
| US5951976A (en) | 1996-03-28 | 1999-09-14 | Whitenead Institute For Biomedical Research | Opsonin-enhanced cells, and methods of modulating an immune response to an antigen |
| US5747332A (en) | 1996-09-20 | 1998-05-05 | University Of New Mexico | Methods for purifying and synthesizing heat shock protein complexes |
| US6130087A (en) | 1996-10-07 | 2000-10-10 | Fordham University | Methods for generating cytotoxic T cells in vitro |
| AU736318B2 (en) | 1996-11-26 | 2001-07-26 | Nventa Biopharmaceuticals Corporation | Immune responses using compositions containing stress proteins |
| WO1998032856A1 (en) | 1997-01-28 | 1998-07-30 | Human Genome Sciences, Inc. | Death domain containing receptor 4 (dr4: death receptor 4), member of the tnf-receptor superfamily and binding to trail (ap02-l) |
| US7452538B2 (en) | 1997-01-28 | 2008-11-18 | Human Genome Sciences, Inc. | Death domain containing receptor 4 antibodies and methods |
| US8329179B2 (en) | 1997-01-28 | 2012-12-11 | Human Genome Sciences, Inc. | Death domain containing receptor 4 antibodies and methods |
| US6017540A (en) | 1997-02-07 | 2000-01-25 | Fordham University | Prevention and treatment of primary and metastatic neoplastic diseases and infectious diseases with heat shock/stress protein-peptide complexes |
| US5830464A (en) | 1997-02-07 | 1998-11-03 | Fordham University | Compositions and methods for the treatment and growth inhibition of cancer using heat shock/stress protein-peptide complexes in combination with adoptive immunotherapy |
| US20040136951A1 (en) | 1997-03-17 | 2004-07-15 | Human Genome Sciences, Inc. | Death domain containing receptor 5 |
| US20050233958A1 (en) | 1997-03-17 | 2005-10-20 | Human Genome Sciences, Inc. | Death domain containing receptor 5 |
| US20080248046A1 (en) | 1997-03-17 | 2008-10-09 | Human Genome Sciences, Inc. | Death domain containing receptor 5 |
| US6007821A (en) | 1997-10-16 | 1999-12-28 | Fordham University | Method and compositions for the treatment of autoimmune disease using heat shock proteins |
| US5948646A (en) | 1997-12-11 | 1999-09-07 | Fordham University | Methods for preparation of vaccines against cancer comprising heat shock protein-peptide complexes |
| US8101349B2 (en) | 1997-12-23 | 2012-01-24 | Novartis Vaccines And Diagnostics, Inc. | Gene products differentially expressed in cancerous cells and their methods of use II |
| ES2439014T3 (es) * | 1998-02-20 | 2014-01-21 | The University Of Miami | Complejo de péptido antigénico-proteína de choque térmico modificada |
| AU765529B2 (en) | 1998-05-26 | 2003-09-18 | Genitrix, Llc | Compositions and methods of modulating an immune response to an antigen |
| US6797480B1 (en) | 1998-10-05 | 2004-09-28 | University Of Connecticut Health Center | Purification of heat shock/stress protein cell surface receptors and their use as immunotherapeutic agents |
| US6451316B1 (en) | 1998-10-05 | 2002-09-17 | University Of Conneticut Health Center | Methods for generating antigen-reactive T cells in vitro |
| US6475490B1 (en) | 1998-10-19 | 2002-11-05 | Fordham University | Compositions and methods for promoting tissue repair using heat shock proteins |
| AU3316600A (en) | 1999-02-22 | 2000-09-21 | Torben F. Orntoft | Gene expression in bladder tumors |
| US6317435B1 (en) | 1999-03-08 | 2001-11-13 | Qualcomm Incorporated | Method and apparatus for maximizing the use of available capacity in a communication system |
| EP1194167B1 (en) | 1999-06-09 | 2009-08-19 | Immunomedics, Inc. | Immunotherapy of autoimmune disorders using antibodies which target b-cells |
| US6651655B1 (en) | 2000-01-18 | 2003-11-25 | Quadrant Technologies Limited | Inhaled vaccines |
| HUP0302681A3 (en) | 2000-04-17 | 2006-11-28 | Hoe Mee Irvington | Javelinization of protein antigens to heat shock proteins |
| US7030219B2 (en) | 2000-04-28 | 2006-04-18 | Johns Hopkins University | B7-DC, Dendritic cell co-stimulatory molecules |
| HRP20021015A2 (en) | 2000-06-26 | 2004-02-29 | Stressgen Biotechnologies Corp | Human papilloma virus treatment |
| EP1363938B1 (en) | 2000-08-03 | 2013-12-11 | Johns Hopkins University | Molecular vaccine linking an endoplasmic reticulum chaperone polypeptide to an antigen |
| US7132109B1 (en) | 2000-10-20 | 2006-11-07 | University Of Connecticut Health Center | Using heat shock proteins to increase immune response |
| US20070292411A1 (en) | 2000-11-08 | 2007-12-20 | Human Genome Sciences, Inc. | Antibodies That Immunospecifically Bind to TRAIL Receptors |
| US20060062786A1 (en) | 2000-11-08 | 2006-03-23 | Human Genome Sciences, Inc. | Antibodies that immunospecifically bind to TRAIL receptors |
| WO2004016753A2 (en) | 2002-08-15 | 2004-02-26 | Human Genome Sciences, Inc. | Antibodies that immunospecifically bind to trail receptors |
| US7348003B2 (en) | 2001-05-25 | 2008-03-25 | Human Genome Sciences, Inc. | Methods of treating cancer using antibodies that immunospecifically bind to TRAIL receptors |
| US20050214210A1 (en) | 2001-05-25 | 2005-09-29 | Human Genome Sciences, Inc. | Antibodies that immunospecifically bind to TRAIL receptors |
| US7361341B2 (en) | 2001-05-25 | 2008-04-22 | Human Genome Sciences, Inc. | Methods of treating cancer using antibodies that immunospecifically bind to trail receptors |
| US20050214209A1 (en) | 2001-05-25 | 2005-09-29 | Human Genome Sciences, Inc. | Antibodies that immunospecifically bind to TRAIL receptors |
| US20050129616A1 (en) | 2001-05-25 | 2005-06-16 | Human Genome Sciences, Inc. | Antibodies that immunospecifically bind to TRAIL receptors |
| US6905827B2 (en) | 2001-06-08 | 2005-06-14 | Expression Diagnostics, Inc. | Methods and compositions for diagnosing or monitoring auto immune and chronic inflammatory diseases |
| US7026121B1 (en) | 2001-06-08 | 2006-04-11 | Expression Diagnostics, Inc. | Methods and compositions for diagnosing and monitoring transplant rejection |
| US7235358B2 (en) | 2001-06-08 | 2007-06-26 | Expression Diagnostics, Inc. | Methods and compositions for diagnosing and monitoring transplant rejection |
| EP1411880B1 (en) | 2001-07-11 | 2018-04-25 | University of Miami | Recombinant vsv for the treatment of tumor cells |
| WO2003042661A2 (en) | 2001-11-13 | 2003-05-22 | Protein Design Labs, Inc. | Methods of diagnosis of cancer, compositions and methods of screening for modulators of cancer |
| AU2002365275A1 (en) | 2001-11-16 | 2003-07-09 | Aventis Pasteur | Novel chimeric rev, tat, and nef antigens |
| US7955845B2 (en) | 2001-11-20 | 2011-06-07 | Dana Farber Cancer Institute, Inc. | Modified antigen-presenting cells |
| US20050214205A1 (en) | 2001-12-20 | 2005-09-29 | Human Genome Sciences, Inc. | Antibodies that immunospecifically bind to TRAIL receptors |
| US20050214206A1 (en) | 2001-12-20 | 2005-09-29 | Human Genome Sciences, Inc. | Antibodies that immunospecifically bind to TRAIL receptors |
| US20050214208A1 (en) | 2001-12-20 | 2005-09-29 | Human Genome Sciences, Inc. | Antibodies that immunospecifically bind to TRAIL receptors |
| US20050214207A1 (en) | 2001-12-20 | 2005-09-29 | Human Genome Sciences, Inc. | Antibodies that immunospecifically bind toTRAIL receptors |
| US20030170756A1 (en) * | 2002-02-01 | 2003-09-11 | Thomas Jefferson University | Treatment of tumor cells for use in immunotherapy of cancer |
| EP1578773A3 (en) | 2002-02-28 | 2005-12-14 | Antigenics Inc. | Methods and products based on oligomerization of stress proteins |
| US6984389B2 (en) | 2002-04-25 | 2006-01-10 | University Of Connecticut Health Center | Using heat shock proteins to improve the therapeutic benefit of a non-vaccine treatment modality |
| WO2003090686A2 (en) | 2002-04-25 | 2003-11-06 | University Of Connecticut Health Center | Using heat shock proteins to improve the therapeutic benefit of a non-vaccine treatment modality |
| JP2005533015A (ja) | 2002-05-02 | 2005-11-04 | ユニバーシティー オブ コネティカット ヘルス センター | 抗体療法の有効性を増強するための熱ショックタンパク質の使用 |
| US20070298041A1 (en) | 2002-06-28 | 2007-12-27 | Tomlinson Ian M | Ligands That Enhance Endogenous Compounds |
| US20040091503A1 (en) | 2002-08-20 | 2004-05-13 | Genitrix, Llc | Lectin compositions and methods for modulating an immune response to an antigen |
| US7629440B2 (en) | 2002-08-20 | 2009-12-08 | Genitrix, Llc | Lectin compositions and methods for modulating an immune response to an antigen |
| BR0313650A (pt) | 2002-08-20 | 2007-08-14 | Genitrix Llc | composição, vetor de expressão, composição de vacina e uso |
| CA2501744C (en) | 2002-10-09 | 2012-01-03 | Central Iowa Health System | Antitumor vaccination using allogeneic tumor cells expressing alpha (1,3)-galactosyltransferase |
| US20060148064A1 (en) | 2002-10-25 | 2006-07-06 | Srivastava Pramod K | Apparatus and method for immunotherapy of a cancer through controlled cell lysis |
| EP1603391A4 (en) | 2003-02-20 | 2009-06-24 | Univ Connecticut Health Ct | METHODS OF USING ALPHA-2 STRESS OR MACROGLOBULIN PROTEIN-CONTAINING COMPOSITIONS IN THE TREATMENT OF CANCER AND INFECTIOUS DISEASE |
| DE602004030541D1 (de) | 2003-02-20 | 2011-01-27 | Univ Connecticut Health Ct | Verfahren zur herstellung von alpha (2) makroglobulin-antigen-molekül-komplexen |
| AU2003225661A1 (en) | 2003-02-27 | 2004-09-28 | University Of Connecticut Health Center | Methods and compositions for the treatment of cancer and infectious disease using alpha (2) macroglobulin-antigenic molecule complexes |
| CA2517396A1 (en) | 2003-02-28 | 2005-03-10 | Antigenics Inc. | Use of lectins to promote oligomerization of glycoproteins and antigenic molecules |
| US20040197312A1 (en) | 2003-04-02 | 2004-10-07 | Marina Moskalenko | Cytokine-expressing cellular vaccine combinations |
| CA2524737A1 (en) | 2003-05-06 | 2005-02-24 | Human Genome Sciences, Inc. | Antibodies that immunospecifically bind to trail receptors |
| KR100499278B1 (ko) * | 2003-07-05 | 2005-07-01 | 학교법인 포항공과대학교 | 로텍산 화합물이 공유결합된 고체 기판 및 이를 이용한바이오칩 |
| AU2004274430A1 (en) | 2003-09-12 | 2005-03-31 | Antigenics, Inc. | Vaccine for treatment and prevention of herpes simplex virus infection |
| JP2007506764A (ja) * | 2003-09-26 | 2007-03-22 | ユニバーシティ オブ マイアミ | 腫瘍ワクチン |
| ES2333724T3 (es) | 2003-09-26 | 2010-02-26 | Merck Serono Sa | Secuencias lideres para uso en la produccion de proteinas. |
| FR2867982B1 (fr) * | 2004-03-26 | 2007-07-20 | Jean Marie Andrieu | Procede pour amplifier l'activite de vaccins therapeutiques |
| AU2005244751A1 (en) | 2004-04-16 | 2005-12-01 | Genentech, Inc. | Method for augmenting B cell depletion |
| WO2005120558A2 (en) | 2004-05-25 | 2005-12-22 | University Of Connecticut Health Center | Methods for making compositions comprising heat shock proteins or alpha-2-macroglobulin for the treatment of cancer and infectious disease |
| US20080038316A1 (en) | 2004-10-01 | 2008-02-14 | Wong Vernon G | Conveniently implantable sustained release drug compositions |
| WO2006042237A2 (en) | 2004-10-06 | 2006-04-20 | Mayo Foundation For Medical Education And Research | B7-h1 and methods of diagnosis, prognosis, and treatment of cancer |
| CA2853335A1 (en) | 2005-02-24 | 2006-11-23 | Medical Research Council | Hivcon: an hiv immunogen and uses thereof |
| WO2007030531A2 (en) | 2005-09-06 | 2007-03-15 | Molecular Image Inc. | Reagents for testing and molecular imaging of liver cancer |
| CN101057975B (zh) | 2006-12-13 | 2012-10-10 | 中国科学院微生物研究所 | 一种抗免疫耐受性和免疫缺陷性病毒的鸡尾酒疫苗及其应用 |
| US7989173B2 (en) | 2006-12-27 | 2011-08-02 | The Johns Hopkins University | Detection and diagnosis of inflammatory disorders |
| CA2673752A1 (en) | 2006-12-27 | 2008-07-10 | The Johns Hopkins University | Compositions and methods for stimulating an immune response |
| WO2009018500A1 (en) | 2007-07-31 | 2009-02-05 | The Johns Hopkins University | Polypeptide-nucleic acid conjugate for immunoprophylaxis or immunotherapy for neoplastic or infectious disorders |
| US20100080773A1 (en) | 2008-09-26 | 2010-04-01 | Sdg, Inc. | Orally Bioavailable Lipid-Based Constructs |
| US8475785B2 (en) | 2008-03-03 | 2013-07-02 | The University Of Miami | Allogeneic cancer cell-based immunotherapy |
| WO2009117116A2 (en) | 2008-03-20 | 2009-09-24 | University Of Miami | Heat shock protein gp96 vaccination and methods of using same |
| IL190438A0 (en) | 2008-03-25 | 2008-12-29 | K M B Y Ltd | A method of setting a drill for drilling a hole in a bone coaxial to the hole in the nail and aiming device for realizing this method |
| ES2387941T7 (es) | 2008-03-26 | 2018-04-20 | Archroma Ip Gmbh | Composiciones mejoradas de abrillantamiento óptico |
| WO2009121483A1 (en) | 2008-04-02 | 2009-10-08 | Sanofi-Aventis | Highly bridged peptides from actinomadura namibiensis |
| US10722562B2 (en) | 2008-07-23 | 2020-07-28 | Immudex Aps | Combinatorial analysis and repair |
| WO2010037408A1 (en) | 2008-09-30 | 2010-04-08 | Curevac Gmbh | Composition comprising a complexed (m)rna and a naked mrna for providing or enhancing an immunostimulatory response in a mammal and uses thereof |
| EP2358383A4 (en) | 2008-11-21 | 2011-11-23 | Univ Miami | HIV / SIV VACCINES FOR THE MANUFACTURE OF SLEEPAGE AND SYSTEM IMMUNITY |
| HUE065752T2 (hu) | 2008-12-09 | 2024-06-28 | Hoffmann La Roche | Anti-PD-L1 antitestek és felhasználásuk T-sejt funkció elõsegítésére |
| AU2010205782A1 (en) | 2009-01-16 | 2011-09-08 | Agirx Limited | Vaccine compositions |
| WO2010088927A1 (en) | 2009-02-09 | 2010-08-12 | Curevac Gmbh | Use of pei for the improvement of endosomal release and expression of transfected nucleic acids, complexed with cationic or polycationic compounds |
| RU2011144575A (ru) | 2009-04-03 | 2013-05-10 | Эйдженус Инк. | Способы получения и применения мультишаперон-антигенных комплексов |
| US20110053829A1 (en) | 2009-09-03 | 2011-03-03 | Curevac Gmbh | Disulfide-linked polyethyleneglycol/peptide conjugates for the transfection of nucleic acids |
| US9459246B2 (en) | 2009-09-08 | 2016-10-04 | Nodality, Inc. | Induced intercellular communication |
| WO2011069529A1 (en) | 2009-12-09 | 2011-06-16 | Curevac Gmbh | Mannose-containing solution for lyophilization, transfection and/or injection of nucleic acids |
| WO2011069528A1 (en) | 2009-12-09 | 2011-06-16 | Curevac Gmbh | Lyophilization of nucleic acids in lactate-containing solutions |
| CA3253628A1 (en) | 2010-03-05 | 2025-11-29 | The Johns Hopkins University | Compositions and methods for targeted immunomodulatory antibodies and fusion proteins |
| US8828944B2 (en) | 2010-04-22 | 2014-09-09 | Institut Gustave Roussy | Compounds and uses thereof to induce an immunogenic cancer cell death in a subject |
| US8865653B2 (en) | 2010-04-22 | 2014-10-21 | Institut Gustave Roussy | Method of treatment for immunogenic treatment resistant cancer |
| CN102883746A (zh) | 2010-05-21 | 2013-01-16 | 迈阿密大学 | 癌症治疗 |
| JP2014508762A (ja) | 2011-02-23 | 2014-04-10 | ユニバーシティー オブ マイアミ | ＳＩＶ／ＨＩＶからの防御を目的とする、組合せ細胞ベースのｇｐ９６−Ｉｇ−ＳＩＶ／ＨＩＶ、組換えｇｐ１２０タンパク質のワクチン接種 |
| EP2714081A4 (en) | 2011-05-27 | 2015-09-09 | Cytocure Llc | METHODS, COMPOSITIONS AND KIT FOR CREAM TREATMENT |
| US10851148B2 (en) | 2013-03-15 | 2020-12-01 | Novelogics Biotechnology, Inc. | Antibodies to MICA and MICB proteins |
| US20160030659A1 (en) | 2013-03-15 | 2016-02-04 | Novelogics Biotechnology, Inc. | Methods and devices for removal of immunosuppressive ligands |
-
2009
- 2009-03-03 US US12/921,151 patent/US8475785B2/en not_active Expired - Fee Related
- 2009-03-03 CN CN200980115985XA patent/CN102014937A/zh active Pending
- 2009-03-03 WO PCT/US2009/001330 patent/WO2009114085A2/en not_active Ceased
- 2009-03-03 AU AU2009223838A patent/AU2009223838B2/en not_active Ceased
- 2009-03-03 CA CA2717854A patent/CA2717854C/en active Active
- 2009-03-03 KR KR1020107022069A patent/KR20110009095A/ko not_active Ceased
- 2009-03-03 DK DK09720311.1T patent/DK2257301T3/da active
- 2009-03-03 ES ES09720311.1T patent/ES2460899T3/es active Active
- 2009-03-03 EP EP09720311.1A patent/EP2257301B1/en not_active Not-in-force
- 2009-03-03 EP EP14152006.4A patent/EP2752193B1/en active Active
- 2009-03-03 JP JP2010549646A patent/JP2011513399A/ja active Pending
-
2010
- 2010-09-02 IL IL207958A patent/IL207958A/en active IP Right Grant
-
2013
- 2013-06-28 US US13/930,818 patent/US9238064B2/en active Active
-
2014
- 2014-07-04 JP JP2014138932A patent/JP2014208690A/ja active Pending
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| IL207958A0 (en) | 2010-12-30 |
| KR20110009095A (ko) | 2011-01-27 |
| US8475785B2 (en) | 2013-07-02 |
| WO2009114085A2 (en) | 2009-09-17 |
| US20110250229A1 (en) | 2011-10-13 |
| CN102014937A (zh) | 2011-04-13 |
| JP2014208690A (ja) | 2014-11-06 |
| US20130302376A1 (en) | 2013-11-14 |
| WO2009114085A3 (en) | 2009-12-03 |
| IL207958A (en) | 2015-09-24 |
| AU2009223838B2 (en) | 2012-07-26 |
| EP2257301B1 (en) | 2014-01-22 |
| EP2752193B1 (en) | 2017-01-11 |
| DK2257301T3 (da) | 2014-04-28 |
| EP2257301A2 (en) | 2010-12-08 |
| EP2257301A4 (en) | 2013-01-16 |
| EP2752193A1 (en) | 2014-07-09 |
| AU2009223838A1 (en) | 2009-09-17 |
| CA2717854A1 (en) | 2009-09-17 |
| CA2717854C (en) | 2019-02-19 |
| US9238064B2 (en) | 2016-01-19 |
| JP2011513399A (ja) | 2011-04-28 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| ES2460899T3 (es) | Inmunoterapia basada en células cancerosas alógenas | |
| ES2328025T3 (es) | Mejoramiento de las respuestas inmunitarias por anticuerpos agonistas 4-1 bb. | |
| JP6993240B2 (ja) | 結腸直腸癌を治療するための細胞透過性ペプチド、カーゴ、及びｔｌｒペプチドアゴニストを含む新規複合体 | |
| JP5239041B2 (ja) | 癌の治療剤 | |
| ES2686424T5 (es) | Inmunoterapia con células alogénicas redireccionadas | |
| JP2020114837A (ja) | 細胞免疫療法前の細胞毒性プレコンディショニングの代替 | |
| CN111148533A (zh) | 用于嵌合抗原受体t细胞疗法的组合物及其用途 | |
| Strbo et al. | Secreted heat shock protein gp96-Ig: next-generation vaccines for cancer and infectious diseases | |
| Su et al. | Anti-tumor efficacy of a hepatocellular carcinoma vaccine based on dendritic cells combined with tumor-derived autophagosomes in murine models | |
| JP2021500882A (ja) | スペーサーを含むポリペプチド組成物 | |
| AU2015233542B2 (en) | A medicament for use in a method of inducing or extending a cellular cytotoxic immune response | |
| Akutsu et al. | Combination of direct intratumoral administration of dendritic cells and irradiation induces strong systemic antitumor effect mediated by GRP94/gp96 against squamous cell carcinoma in mice | |
| RU2709015C2 (ru) | Лекарственное средство | |
| Zhang et al. | Neoantigen sequestrated autophagosomes as therapeutic cancer vaccines | |
| Cannon et al. | Cellular immunotherapy for ovarian cancer | |
| JP6077641B2 (ja) | 新規ｃｔｌエピトープ５連結ペプチド | |
| Smith et al. | Immunotherapy in cancer treatment | |
| CN109069599A (zh) | 针对癌症的基于ptp的疫苗 | |
| Himoudi et al. | Development of anti-PAX3 immune responses; a target for cancer immunotherapy | |
| Moseman | Delivery of plasmid DNA vaccines with checkpoint blockade or lipid nanoparticles to improve anti-tumor efficacy | |
| O'Neil et al. | Genetically modified T cell therapy optimisation of the chimeric T cell receptor for cancer therapy | |
| Jæhger | Preclinical Evaluation of Novel Drug Delivery Platforms for the Improvement of Adoptive T cell Therapy | |
| HK40026581A (en) | Compositions for chimeric antigen receptor t cell therapy and uses thereof | |
| Zhou et al. | Blocking Blood Supply to Breast Carcinoma With a DNA Vaccine Encoding VEGF Receptor-2 | |
| Bannister et al. | Role of CTLA4 in tumor immunity |