ES2328159T3 - Inmunoglobulinas anti-epcam. - Google Patents
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Abstract
Una inmunoglobulina humana que se une específicamente al antígeno humano EpCAM, caracterizada porque dicha inmunoglobulina humana exhibe una semivida sérica de al menos 15 días después de la administración a un paciente humano y comprende una cadena pesada de inmunoglobulina con una secuencia de aminoácidos expuesta en SEC ID NO: 1 y una cadena liviana de inmunoglobulina con un secuencia de aminoácidos expuesta en SEC ID NO:2
Description
Inmunoglobulinas anti-EpCAM.
La presente invención se refiere a
procedimientos para tratar enfermedades tumorales utilizando
moléculas de inmunoglobulina. En particular, la presente invención
se refiere a procedimientos para el tratamiento que involucran
moléculas de inmunoglobulina anti-EpCAM. La
invención además se refiere a los usos de dichas inmunoglobulinas
en la producción de medicamentos. La invención además se refiere a
moléculas de inmunoglobulina que pueden utilizarse en el
tratamiento de enfermedades tumorales así como a composiciones que
comprenden dichas moléculas de inmunoglobulina.
En el diseño de un régimen terapéutico que
involucra la administración de moléculas de inmunoglobulina, existen
varios factores que deben considerarse. Por una parte, la
inmunoglobulina terapéutica debe administrarse a un paciente en una
cantidad suficiente para provocar el efecto terapéutico deseado.
Este efecto debe producirse tras el tratamiento inicial y debe
seguir produciéndose en una medida tan grande como sea posible ya
que la inmunoglobulina se depura progresivamente del cuerpo del
paciente en el lapso entre dos administraciones consecutivas. Por
otra parte, la cantidad de inmunoglobulina administrada no debe ser
tan grande como para causar efectos adversos y/o efectos colaterales
tóxicos en el paciente.
Por ello surge un problema cuando la dosis
máxima de una inmunoglobulina que puede ser tolerada sin causar
efectos colaterales (dosis máxima tolerada, o "MTD") limita la
cantidad de inmunoglobulina a un nivel de dosis única que es
insuficiente pata mantener, en el tiempo, el nivel mínimo de
inmunoglobulina necesario para asegurar la eficacia continua. En
tal escenario, se torna imposible mantener el "nivel sérico
mínimo" necesario para asegurar un efecto terapéutico continuado
hasta la siguiente administración de inmunoglobulina. El "nivel
sérico mínimo" de un medicamento en general se refiere a la
concentración más baja que se permite que el medicamento alcance en
cualquier momento en la sangre de un paciente sin pérdida del efecto
terapéutico. Representa entonces la cantidad mínima del medicamento
que siempre debe estar presente en la sangre del paciente a fin de
que se produzca algún beneficio terapéutico.
Existen varios enfoques para mantener un nivel
sérico mínimo deseado de una inmunoglobulina terapéutica. Un
enfoque es incrementar la dosis inicial de la inmunoglobulina al
paciente. Sin embargo, este enfoque posee la desventaja de que es
posible que el nivel de inmunoglobulina terapéutica que es seguro
para el paciente se exceda y de ese modo es posible que el paciente
experimente efectos adversos y/o efectos colaterales tóxicos.
Otro enfoque es incrementar la frecuencia de la
administración de la inmunoglobulina terapéutica. Sin embargo, una
frecuencia incrementada de la administración podría quitar
gravemente calidad de vida del paciente, ya que se vuelven
necesarias múltiples y frecuentes visitas a la clínica. Este es
especialmente el caso cuando la enfermedad a ser tratada está aún
en los primeros estadíos, y el paciente de otra manera sería capaz
de llevar una vida normal.
Además una frecuencia de aplicación incrementada
implica una mayor cantidad total de inmunoglobulina terapéutica que
es necesaria para un régimen terapéutico total. Como tal, una
frecuencia de aplicación incrementada implica costos totales más
elevados asociados a un dado régimen de terapia en comparación con
un régimen de terapia en el que la inmunoglobulina terapéutica se
administra menos frecuentemente.
En el caso de que la inmunoglobulina terapéutica
a ser administrada sea específica para un antígeno que está
presente en el tejido saludable y enfermo, siendo el antígeno más
frecuente en el tejido enfermo que en el tejido saludable, se
vuelve más crucial desarrollar un régimen de tratamiento que
considere los puntos anteriores. Aquí, el peligro es especialmente
grande en el sentido de que dosificaciones demasiado grandes o
demasiado frecuentes conducirán a una interacción no deseada entre
la inmunoglobulina terapéutica y el antígeno al que la
inmunoglobulina terapéutica específicamente se une. Estas
interacciones inmunoglobulina-tejido saludable
podrían llevar a efectos adversos y/o efectos colaterales tóxicos
que pueden complicar un régimen de terapia que utiliza la
inmunoglobulina.
Uno de tales antígenos presente en el tejido
saludable y enfermo es la molécula de adhesión a células epiteliales
("EpCAM", también denominada antígeno 17-1A,
KSA, EGP40, GA733-2, ks 1-4 y esa).
EpCAM es una glicoproteína superficial expresada por células de
epitelios simples y células tumorales derivadas de los mismos.
Aunque la molécula EpCAM se despliega sobre la superficie de las
células del tejido saludable, su expresión está regulada por
aumento en el tejido maligno. EpCAM sirve para adherirse a células
epiteliales de manera orientada y altamente ordenada (Litvinov, J
Cell Biol. 1997, 139, 1337-1348). Los datos de los
experimentos con ratones y ratas transgénicas que expresan la EpCAM
humana en sus epitelios sugieren que EpCAM en el tejido normal
puede sin embargo no estar accesible a un anticuerpo administrado en
forma sistémica (McLaughlin, Cancer Immunol. Immunother., 1999, 48,
303-311). Tras la transformación maligna de las
células epiteliales las células tumorales en rápido crecimiento
están abandonando el alto orden celular de los epitelios. En
consecuencia, la distribución superficial de EpCAM se vuelve menos
restringida y la molécula se torna más expuesta sobre las células
tumorales. Debido a su origen celular epitelial, las células
tumorales de la mayoría de los carcinomas continúan expresando EpCAM
en su superficie.
En el pasado, se ha demostrado que EpCAM es un
blanco provechoso para el tratamiento del cáncer con
inmunoglobulina monoclonal, especialmente en pacientes con
enfermedad residual mínima que padecen células tumorales diseminadas
que pueden causar metástasis sólida tardía y de ese modo empeorar
el pronóstico del paciente. En pacientes con cáncer colorrectal
residual mínimo, una inmunoglobulina monoclonal murina específica
para la molécula EpCAM redujo la tasa de mortalidad de 5 años en un
30% en comparación con pacientes no tratados, cuando se aplicó por
vía sistémica en cinco dosis dentro de los cuatro meses posteriores
ala cirugía del tumor primario (Riethmüller, Lancet 343 (1994),
1177-83). Más recientemente, se ha informado la
fuerte sobre-expresión de EpCAM en aproximadamente
el 40% de los pacientes con cáncer de mama y se asocia con una
supervivencia global y libre de enfermedad pobres (Spizzo et
al., Int. J. Cancer 98 (2002), 883-8). Más
recientemente, se analizó la expresión de EpCAM en 3.722 pacientes.
Se descubrió que la expresión de EpCAM es muy común en tumores
epiteliales, donde dicha expresión se ha observado en más del 88%
de las muestras tumorales. Específicamente, se observó expresión de
EpCAM en el 94,1% de los cánceres ováricos, el 94% de los cánceres
de colon, el 92,3% de los cánceres de estómago, el 90,1% de los
cánceres de próstata y el 70,9% de los cánceres de pulmón.
Un ejemplo de un anticuerpo monoclonal (murino)
que reconoce EpCAM es Edrecolomab (Panorex) (Koprowski, Somatic
Cell Genet. 1979, 5, 957-971 y Herlyn, Cancer Res.,
1980, 40, 717-721). Sin embargo, la primera
administración de Panorex durante la inmunoterapia adyuvante de
cáncer de colon llevó al desarrollo y exacerbación de la
granulomatosis de Wegener, sugiriendo que Panorex debe aplicarse con
precaución en un paciente con enfermedad autoinmune (Franz,
Onkologie 2000, 23, 472-474). Las limitaciones de
Panorex son la rápida formación de anticuerpos humanos
anti-ratón (HAMA), la limitada capacidad de
interactuar mediante su receptor murino IgG2a Fcy con los
mecanismos efectores inmunes humanos y la corta semivida en
circulación (Frodin, Cáncer Res., 1990, 50,
4866-4871).
4866-4871).
Además, el anticuerpo murino causó reacciones
alérgicas de tipo inmediato y anafilaxis con la inyección repetida
en los pacientes (Riethmüller, Lancet 1994, 343,
1177-1183, Riethmüller, J Clin Oncol., 1998, 16,
1788-1794 y Mellstedt, Annals New York Academy of
Sciences 2000, 910, 254-261).
ING-1 es otra inmunoglobulina
anti-EpCAM conocida (Lewis, Curr. Op. Mol. Ther.
5,433-6, 2003). ING-1 es una
inmunoglobulina IgGI quimérica de ratón-humana-
actualmente en estudios clínicos de Fase I/II en pacientes con
tumores epiteliales avanzados. Aunque una dosis de 1 mg/kg de
inmunoglobulina trataba de proporcionar el mayor efecto en ratones
a los que se les había pre-inyectado células
tumorales humanas, esta dosis condujo a pancreatitis en 2 de 2
pacientes humanos con adenocarcinomas (elevación de amilasa y lipasa
con dolor abdominal), impidiendo el posterior escalamiento de la
dosis. Se descubrió que la MTD para ING-1 era de
sólo 0,3 mg/kg de peso corporal, aplicada en forma intravenosa cada
3 semanas. Considerando que la semivida de ING-1 a
esta dosis era de aproximadamente 31 horas y asumiendo que el
adulto promedio pesa 75 kg y posee aproximadamente 4,25 litros de
sangre, el nivel sérico de ING-1 después de 21 días
(es decir, después de 16,25 semividas) se habría reducido por
debajo de 7 x 10^{-5} \mug/ml de sangre, más de cuatro órdenes
de magnitud menos que el nivel sérico de 1 \mug/ml que se
descubrió es necesario para los máximos efectos citolíticos. Por
ello la MTD de ING-1 evita que se mantenga el nivel
plasmático mínimo necesario de inmunoglobulina
anti-EpCAM.
Por ello existe una necesidad de un régimen de
tratamiento que incluya anticuerpos anti-EpCAM que
puedan utilizarse para el tratamiento del cáncer. De la misma
manera, un objetivo de la presente invención es proporcionar un
régimen de tratamiento que incluya inmunoglobulinas
anti-EpCAM que superen los problemas detallados
más
arriba.
arriba.
La necesidad anterior se satisface por medio de
una inmunoglobulina humana que se une específicamente al antígeno
humano EpCAM, exhibiendo dicha inmunoglobulina una semivida sérica
de al menos 15 días, después de la administración a un paciente
humano. La cadena pesada comprende la secuencia de SEC ID No:1, la
cadena liviana la secuencia de SEC ID No:2.
Varios efectos ventajosos se producen utilizando
una inmunoglobulina anti-EpCAM con una semivida
sérica de al menos 15 días. Más importante aún, esta semivida
sérica relativamente larga implica que la inmunoglobulina
anti-EpCAM administrada como parte del procedimiento
inventivo no se depurará de la sangre tan rápidamente como otra
inmunoglobulina con una semivida más corta, digamos la de
NG-1 tratada más arriba. Suponiendo, entonces, que
se administran a un ser humano simultáneamente una inmunoglobulina
anti-EpCAM que cumple con los requerimientos de la
inmunoglobulina a ser utilizada en el procedimiento de la invención
y una inmunoglobulina anti-EpCAM que no cumple con
estos requerimientos y en cantidades absolutas idénticas, persistirá
más la primera inmunoglobulina en el suero después de un tiempo
dado que la segunda inmunoglobulina. En sentido inverso, la
persistencia incrementada en suero permite que en un momento se
administre menos de la inmunoglobulina anti-EpCAM
utilizada en el procedimiento inventivo que lo que sería posible
para otra anti-EpCAM de semivida sérica más corta,
manteniendo al mismo tiempo un cierto nivel sérico mínimo
predeterminado, es decir, mientras se asegura que la concentración
sérica total del agente terapéutico nunca caiga por debajo del nivel
mínimo que se determina que es necesario para la eficacia
continuada entre dos administraciones consecutivas. Eso posee el
efecto ventajoso de que se necesite aplicar menos de la
inmunoglobulina anti-EpCAM del procedimiento de la
invención en cualquier dosis dada, eliminado de este modo la
posibilidad de o al menos mitigando cualquier efecto adverso y/o
efecto colateral tóxico.
La semivida relativamente larga de la
inmunoglobulina anti-EpCAM utilizada en el
procedimiento de la invención también implica que no se necesite
que la administración se produzca demasiado frecuentemente,
incrementando de este modo la calidad de vida para el paciente y
reduciendo el costo total de la terapia.
El hecho de que la inmunoglobulina
anti-EpCAM utilizada en el procedimiento de la
invención sea una inmunoglobulina humana reduce o inclusive elimina
la posibilidad de una respuesta inmune no deseada montada por el
sistema inmune del paciente contra la inmunoglobulina administrada.
Como tales, problemas asociados a anticuerpos humanos
anti-ratón ("HAMAs") observados al utilizar
muchas moléculas quiméricas murinas o aun
murinas-humanas de inmunoglobulina en terapia no
plantean un problema conforme al procedimiento inventivo.
Sin quedar ligados a la teoría, los inventores
creen que una inmunoglobulina anti-EpCAM tal como se
utiliza en este aspecto de la invención provoca un efecto
terapéutico basado en al menos uno de dos diferentes mecanismos
in vivo. Un mecanismo se conoce como citotoxicidad celular
dependiente de anticuerpos ("ADCC"). En la ADCC, una célula
("célula blanco") que está revestida con inmunoglobulina es
destruida por una célula ("célula efectora") con receptores Fc
que reconocen la porción Fc de la inmunoglobulina que reviste la
célula blanco. En la mayoría de los casos, las células efectoras
que participan en la ADCC son células citolíticas naturales
("NK") que portan en su superficie el receptor
Fc-\gamma-RIII de Fc y/o la
molécula CD16. De este modo, solamente se matan las células
revestidas con inmunoglobulina, por lo que la especificidad de la
citólisis se correlaciona directamente con la especificidad de unión
- aquí, EpCAM - de la inmunoglobulina que reviste dichas
células.
Otro mecanismo por el que la inmunoglobulina tal
como se utiliza en este aspecto de la invención provoca un efecto
terapéutico se conoce como citotoxicidad dependiente del complemento
("CDC"). En la CDC, dos inmunoglobulinas idénticas se unen a
dos antígenos idénticos (por ejemplo, aquí EpCAM) sobre la
superficie de una célula blanco de manera tal que sus porciones Fc
respectivas entran en estrecha proximidad una con otra. Este
escenario atrae a las proteínas del complemento, entre ellas las
proteínas del complemento c1 q y c3 y c9, de las cuales la última
crea un poro en la célula blanco. La célula blanco es destruida por
esta perforación. Al mismo tiempo, la(s) célula(s)
blanco también se vuelve(n) decorada(s) en otras
ubicaciones en su(s) superficie(s) en un proceso
llamado opsonización. Esta decoración atrae a las células efectoras,
que después destruyen a la(s) célula(s) blanco de
manera análoga a la descrita más arriba en el contexto del mecanismo
de ADCC.
En virtud de la larga semivida de la
inmunoglobulina utilizada en el procedimiento conforme a este
aspecto de la invención, el beneficio de uno o ambos mecanismos
anteriores puede aprovecharse durante un tiempo más largo, y a
mayores niveles, que la posible utilización de una inmunoglobulina
anti-EpCAM con una semivida más corta.
Conforme a este aspecto de la invención, la
inmunoglobulina anti-EpCAM se administra a un
paciente con una frecuencia no mayor que una vez por semana,
preferiblemente no más frecuentemente que una vez cada dos semanas.
En este sentido, se aprovecha la semivida sérica favorablemente
larga de la inmunoglobulina anti-EpCAM. En el caso
de que la administración se realice una vez por semana, solamente se
necesitarán administrar pequeñas cantidades de inmunoglobulina en
cualquier administración, ya que más de la mitad de la
inmunoglobulina administrada previamente persistirá en la sangre
del paciente. Esto se debe a que una semana es menos que la semivida
de aproximadamente 15 días de la inmunoglobulina previamente
administrada.
En el caso de que la administración se realice
aproximadamente una vez cada dos semanas, la frecuencia de
dosificación conforme al procedimiento inventivo corresponde
aproximadamente a la semivida de la inmunoglobulina. Como tal, el
nivel sérico de esta inmunoglobulina en el intervalo entre dos
administraciones consecutivas nunca habrá disminuido en más que
aproximadamente un medio de la cantidad que sigue inmediatamente a
la respectiva administración anterior. Esto significa que la
dosificación de cualquier administración dada no necesita ser más
alta que la cantidad requerida para llevar, inmediatamente después
de la administración, hasta aproximadamente el doble el nivel sérico
mínimo predeterminado alcanzado en el momento de la siguiente
administración.
En general, se pueden definir dos fases de la
administración: una primera "fase de carga" en la que se
administran una o más dosis de carga para alcanzar un cierto nivel
estacionario en plasma de la inmunoglobulina, y una posterior
"fase de mantenimiento" en la que se administran múltiples
dosis de mantenimiento para mantener el nivel deseado en plasma de
la inmunoglobulina. La(s) dosis de carga típicamente se
administra(n) en cantidades más altas y/o en una sucesión
más frecuente que las dosis de mantenimiento posteriores,
manteniendo de ese modo la duración de la fase de carga en un
mínimo.
Conforme a los regímenes de dosificación
actuales no correspondientes con el presente aspecto de la
invención, el profesional médico se enfrenta a dos opciones: o bien
se administra la inmunoglobulina anti-EpCAM en una
cantidad inicial lo suficientemente alta para asegurar, después de
su rápida depuración del cuerpo, que el nivel sérico mínimo se
mantenga antes de la siguiente administración (en cuyo caso es
posible que la dosis inicial alta cause efectos adversos y/o
efectos colaterales tóxicos tales como pancreatitis) o la
inmunoglobulina anti-EpCAM se administra en una
cantidad inicial lo suficientemente baja para evitar los efectos
adversos y/o efectos colaterales tóxicos (en cuyo caso el nivel
sérico de inmunoglobulina anti-EpCAM cae por debajo
del nivel sérico mínimo antes de la siguiente administración,
llevando a una pérdida del efecto terapéutico). El compromiso es
incrementar la frecuencia de administración de la dosificación baja,
llevando a una pérdida importante de la calidad de vida para el
paciente.
\newpage
En contraste, el procedimiento conforme a este
aspecto de la invención encuentra el justo equilibrio en el que,
por una parte, las dosis individuales pueden administrarse en
cantidades que no lleven a efectos adversos y/o efectos colaterales
tóxicos y, por otra parte, la cantidad de inmunoglobulina
terapéutica en el suero no cae por debajo del nivel sérico mínimo
requerido para el efecto terapéutico continuado entre las
administraciones consecutivas. El ritmo de al menos aproximadamente
una semana entre dos administraciones consecutivas, preferiblemente
al menos aproximadamente dos semanas entre dos administraciones
consecutivas, permite este equilibrio al mismo tiempo que no
deteriora indebidamente la calidad de vida para el paciente.
Conforme a una realización de la invención, el
nivel sérico del anticuerpo anti-EpCAM aún presente
de una administración anterior se controla en la sangre del
paciente antes de efectuar una siguiente administración. De este
modo, el profesional médico puede evitar la
re-administración de la inmunoglobulina
anti-EpCAM demasiado temprano, como por ejemplo
sería el caso si aún existiera abundante inmunoglobulina
anti-EpCAM en la sangre del paciente de la
administración anterior. De ese modo se evita la sobredosificación
accidental, que puede llevar a efectos adversos y/o efectos
colaterales tóxicos, para un anticuerpo anti-EpCAM
para el que aún no se conoce la semivida exacta. Al mismo tiempo,
el profesional médico gana un valioso conocimiento con respecto a
la velocidad de depuración de la inmunoglobulina
anti-EpCAM utilizada a partir de dicha medición
intermedia, la que en cualquier caso se produce al menos dos
semanas después de la respectiva administración anterior. Este
conocimiento puede ser valioso en el ajuste fino del posterior
programa de administración. Dicho ajuste fino puede suponer
ventajosamente esperar bastante más que una semana, o
preferiblemente más que aproximadamente dos semanas, entre
administraciones consecutivas, incrementando de esta manera aún más
la calidad de vida del paciente.
En forma ventajosa, dicho control intermedio del
nivel sérico de la inmunoglobulina anti-EpCAM en la
sangre de los pacientes puede realizarse de la siguiente manera.
Primero, el profesional médico puede determinar, después de un
período de al menos una semana después de la última administración
respectiva de dicha inmunoglobulina pero antes de la siguiente
administración respectiva de dicha inmunoglobulina, el nivel sérico
de dicha inmunoglobulina aún presente en la sangre de dicho
paciente, obteniendo de ese modo un valor de nivel sérico intermedio
para dicha inmunoglobulina. Este valor de nivel sérico intermedio
para dicha inmunoglobulina después se compara con un valor de nivel
sérico mínimo predeterminado para dicha inmunoglobulina. Si se
descubre que el valor de nivel sérico intermedio para dicha
inmunoglobulina está muy por encima del nivel sérico mínimo
predeterminado para dicha inmunoglobulina, entonces el profesional
médico puede elegir ventajosamente esperar aún más para que el
nivel sérico de la inmunoglobulina anti-EpCAM se
reduzca más. En ese momento, pueden repetirse las etapas anteriores
a fin de obtener un nuevo nivel sérico intermedio de dicha
inmunoglobulina, que después se habrá reducido hasta un valor más
cercano al nivel sérico mínimo predeterminado. En cualquier caso, no
se debe esperar tanto como para que el nivel sérico intermedio
determinado para la inmunoglobulina caiga por debajo del nivel
sérico mínimo predeterminado para esa inmunoglobulina. Cuando el
profesional médico establece, posiblemente por ciclos de espera
repetidos, determinando el nivel sérico intermedio, y comparando
este nivel sérico intermedio con el nivel sérico mínimo
predeterminado para una inmunoglobulina anti-EpCAM
particular, que el nivel sérico intermedio de esta inmunoglobulina
se ha reducido dentro de un cierto porcentaje de dicho nivel
sérico mínimo, puede efectuarse la siguiente administración
respectiva de la inmunoglobulina anti-EpCAM para
subir nuevamente el nivel sérico de la inmunoglobulina
anti-EpCAM hasta un apropiado nivel para la
siguiente ronda de depuración. Ventajosamente, este cierto
porcentaje puede corresponder a un nivel sérico que esté dentro del
15%, preferiblemente dentro del 10%, más preferiblemente dentro del
5% del nivel sérico mínimo predeterminado para la inmunoglobulina
anti-EpCAM particular utilizada.
Ventajosamente, el nivel sérico intermedio de
inmunoglobulina puede medirse mediante cualquier procedimiento
conocido por aquel con experiencia común en la técnica, por ejemplo
mediante inmunoensayo. Por ejemplo, para este fin puede utilizarse
un ensayo de inmunofluorescencia, un radioinmunoensayo o un ensayo
de inmunosorción ligado a enzimas - ensayo ELISA, siendo este último
el preferido.
En una realización preferida de este aspecto de
la invención, la inmunoglobulina anti-EpCAM humana
se administra con una frecuencia no mayor que una vez cada dos
semanas. En una realización especialmente preferida, la
administración se realiza a intervalos de dos semanas, en la que
cada dosis posterior es equivalente en cantidad a la primer dosis
administrada, es decir que todas las dosis se realizan con la misma
cantidad. De este modo la administración es suficiente para
mantener un nivel sérico de inmunoglobulina que nunca cae por debajo
del nivel sérico mínimo predeterminado requerido para un efecto
terapéutico beneficioso de esta inmunoglobulina, mientras que al
mismo tiempo evita, o en gran parte evita, los efectos adversos y/o
efectos colaterales tóxicos.
Sin embargo, en otra realización también se
prevé que son posibles frecuencias de administración de más de, o
mucho más de dos semanas. En el caso de que la inmunoglobulina se
administre a intervalos de tiempo mayores que dos semanas, la
cantidad de anticuerpo administrado en cualquier momento
posteriormente a la dosis inicial debe ser mayor que una dosis
inicial realizada previendo una administración posterior en dos
semanas. La cantidad por la que dicha dosis posterior administrada
después de más de dos semanas puede ser mayor que una dosis
administrada después de dos semanas puede determinarse en cada caso,
por ejemplo mediante simulaciones farmacocinéticas (p. ej., con
WinNonlin 4.0.1 (Pharsight Corporation, USA; 2001), tales como las
descritas en los ejemplos anexados a la descripción anterior. Aquel
con experiencia común en la técnica entiende cómo construir y/o
aplicar dichas simulaciones. Dichas simulaciones se construyen
ventajosamente de manera tal que después de una administración
respectiva, no se permite que el nivel de inmunoglobulina
anti-EpCAM en el suero del paciente caiga por debajo
del nivel sérico mínimo que se determina que es necesario para tener
eficacia terapéutica.
La larga semivida sérica de la inmunoglobulina
anti-EpCAM humana asegura que durante este período
más largo entre las administraciones, digamos tres o aún cuatro
semanas o cualquier período intermedio de 2 a 5 semanas, se
mantiene el nivel sérico mínimo predeterminado requerido para tener
eficacia terapéutica. En otras palabras, la larga semivida sérica
de la inmunoglobulina anti-EpCAM humana (es decir,
aproximadamente 15 días) asegura que una cantidad importante de
esta inmunoglobulina aún estará presente en el suero a partir de una
respectiva administración anterior. Como resultado, se necesita
aplicar menos de la inmunoglobulina anti-EpCAM
humana con la semivida de aproximadamente 15 días que lo que sería
necesario para un anticuerpo sin semejante semivida sérica larga.
Esto reduce el riesgo de efectos adversos y/o efectos colaterales
tóxicos.
Debe observarse que dichos esquemas de
administración prolongada - y las múltiples ventajas asociadas a los
mismos (véase más arriba) - serían imposibles con una
inmunoglobulina anti-EpCAM con un semivida corta,
manteniendo entretanto el efecto terapéutico (por ejemplo con la
inmunoglobulina anti-EpCAM ING-1,
para la que se ha medido la semivida sérica en seres humanos que
varía de 17 a 31 horas). Para asegurar que al menos el nivel sérico
mínimo predeterminado de dicha inmunoglobulina
anti-EpCAM persista en el suero hasta la siguiente
administración, tendría que administrarse tanta inmunoglobulina
anti-EpCAM que muy posiblemente se encontrarían los
efectos adversos y/o efectos colaterales tóxicos. Por otra parte,
evitar dichos efectos adversos y/o efectos colaterales tóxicos
administrando menos de dicha inmunoglobulina
anti-EpCAM de corta vida llevaría a una pérdida del
efecto terapéutico en algún punto entre las dos administraciones
cuando la cantidad de inmunoglobulina que persiste en la sangre
cayera por debajo del nivel sérico mínimo.
Por supuesto, si se determina clínicamente
necesario o ventajoso, una inmunoglobulina
anti-EpCAM humana con una semivida sérica de
aproximadamente 15 días en otra realización puede administrarse a
intervalos de tiempo de menos de dos semanas, digamos a intervalos
de 1 semana o cualquier período intermedio de 1 semana a 2
semanas. Si bien dicho escenario no aprovecha completamente la
semivida sérica larga de aproximadamente 15 días, existen no
obstante situaciones clínicas en las que dicha administración puede
ser deseable. Con el fin de evitar acumulación no deseada de
inmunoglobulina anti-EpCAM humana en el paciente con
el tiempo, aquí es preferible reducir la cantidad de
anti-EpCAM humana administrada en estos intervalos
más cortos con relación a la cantidad que se necesitaría
administrar con un ritmo de administración bisemanal. La cantidad
por la que dicha dosis posterior administrada después de dos
semanas debe ser menor que una dosis administrada después de dos
semanas puede determinarse en cada caso, por ejemplo por medio de
simulaciones farmacocinéticas tales como las descritas en los
ejemplos anexados a la descripción anterior. Aquel con experiencia
común en la técnica entiende cómo construir y/o aplicar dichas
simulaciones. Dichas simulaciones se construyen ventajosamente de
manera tal que, después de una respectiva administración, no se
permite que el nivel de inmunoglobulina anti-EpCAM
en el suero del paciente caiga por debajo del nivel sérico mínimo
que se determina que es necesario para tener eficacia
terapéutica.
Conforme a una realización, las administraciones
pueden ser intravenosas, intraperitonales, subcutáneas,
intramusculares, tópicas o intradérmicas. Alternativamente, puede
utilizarse una combinación de estos procedimientos de administración
según sea apropiado. Además se prevén protocolos de
co-administración con otros compuestos, p. ej.
construcciones de anticuerpos biespecíficos, toxinas dirigidas a un
blanco u otros compuestos, que actúan a través de las células T u
otros compuestos tales como agentes antineoplásicos que actúan a
través de otros mecanismos. El régimen clínico para la
co-administración de la inmunoglobulina
anti-EpCAM puede incluir la
co-administración en el mismo momento, antes o
después de las administraciones del otro componente.
Ventajosamente, la enfermedad tumoral se elige
entre cáncer de mama, cáncer epitelial, carcinoma hepatocelular,
cáncer colangiocelular, cáncer de estómago, cáncer de colon, cáncer
de próstata, cáncer de cuello y cabeza, cáncer de piel (melanoma),
un cáncer del tracto urogenital, p. ej. cáncer ovárico, cáncer de
endometrio, cáncer de cuello de útero y cáncer de riñón; cáncer de
pulmón, cáncer gástrico, un cáncer del intestino delgado, cáncer de
hígado, cáncer de páncreas, cáncer de vesícula biliar, un cáncer del
conducto biliar, cáncer de esófago, un cáncer de las glándulas
salivales o un cáncer de la glándula tiroides.
En otra realización, la enfermedad también puede
ser una enfermedad residual mínima, preferiblemente tumor sólido
temprano, tumor sólido avanzado o tumor sólido metastásico, que se
caracteriza por la recurrencia local o no local del tumor causada
por la supervivencia de células solitarias.
En una realización especialmente preferida de
este aspecto de la invención, la enfermedad tumoral es cáncer de
próstata o cáncer de mama. La inmunoglobulina
anti-EpCAM humana administrada es una que comprende
una cadena pesada de inmunoglobulina con una secuencia de
aminoácidos expuesta en SEC ID NO: 1 y una cadena liviana de
inmunoglobulina con una secuencia de aminoácidos expuesta en SEC ID
NO: 2. Cuando dicha inmunoglobulina anti-EpCAM
humana se administra, es preferible que se administre en una
cantidad respectiva de dosificación de 1-7 mg/kg de
peso corporal, aún más preferiblemente 2-6 mg/kg de
peso corporal aproximadamente una vez cada dos semanas.
Otro aspecto de la invención proporciona un uso
de una inmunoglobulina humana que específicamente se une al
antígeno EpCAM humano, exhibiendo dicha inmunoglobulina una semivida
sérica de al menos 15 días y además se define según lo establecido
en la reivindicación 1, para la preparación de un medicamento para
tratar enfermedades tumorales. Alternativamente, puede utilizarse
una composición que comprende dicha inmunoglobulina para preparar
el medicamento anterior. El medicamento después puede administrarse
en forma favorable conforme al programa de dosificación descrito más
arriba para el procedimiento de tratamiento de una enfermedad
tumoral.
Conforme a una realización de este aspecto de la
invención, el medicamento preparado es apropiado para la
administración por vía intravenosa, intraperitonal, subcutánea,
intramuscular, tópica o intradérmica. Alternativamente, la
administración puede realizarse mediante una combinación de más de
una de estas vías según corresponda. Además se prevén protocolos de
co-administración con otros compuestos, p. ej.
construcciones de anticuerpos biespecíficos, toxinas dirigidas a un
blanco u otros compuestos, que actúan a través de las células T u
otros compuestos tales como agentes antineoplásicos que actúan a
través de otros mecanismos. El régimen clínico para la
co-administración de la inmunoglobulina
anti-EpCAM puede incluir la
co-administración al mismo tiempo, antes o después
de la administración del otro componente.
Ventajosamente, la enfermedad tumoral es cáncer
de mama, cáncer epitelial, carcinoma hepatocelular, cáncer
colangiocelular, cáncer de estómago, cáncer de colon, cáncer de
próstata, cáncer de cuello y cabeza, cáncer de piel (melanoma), un
cáncer del tracto urogenital, p. ej., cáncer ovárico, cáncer de
endometrio, cáncer de cuello de útero y cáncer de riñón; cáncer de
pulmón, cáncer gástrico, un cáncer del intestino delgado, cáncer de
hígado, cáncer de páncreas, cáncer de vesícula biliar, un cáncer del
conducto biliar, cáncer de esófago, un cáncer de las glándulas
salivales o un cáncer de la glándula tiroides.
En otra realización, la enfermedad también puede
ser una enfermedad residual mínima, preferiblemente tumor sólido
temprano, tumor sólido avanzado o tumor sólido metastásico, que se
caracteriza por la recurrencia local o no local del tumor causada
por la supervivencia de células solitarias.
En otro aspecto, la invención se refiere a una
inmunoglobulina humana que específicamente se une al antígeno EpCAM
humano, caracterizada porque dicha inmunoglobulina exhibe una
semivida sérica de al menos 15 días después de la administración a
un paciente humano. Las ventajas asociadas a dicha semivida sérica
larga se han elaborado más arriba, dentro del marco de dicho uso
del anticuerpo en un procedimiento de tratamiento para enfermedades
tumorales. Es preferible que la inmunoglobulina exhiba una semivida
sérica de 20 días, 19 días, 18 días, 17 días, 16 días o 15 días. Se
prefiere especialmente una semivida sérica de aproximadamente 15
días.
Conforme a la invención, la semivida de la
inmunoglobulina humana es de 15 días y la inmunoglobulina humana
comprende una cadena pesada de inmunoglobulina con una secuencia de
aminoácidos expuesta en SEC ID NO: 1 y una cadena liviana de
inmunoglobulina con una secuencia de aminoácidos expuesta en SEC ID
NO:2. Otro aspecto de la invención proporciona una composición que
comprende una inmunoglobulina anti-EpCAM humana
según se describe más arriba. Dicha composición puede administrarse
ventajosamente a un paciente humano como parte de un régimen de
terapia para tratar una enfermedad. En vista de la frecuencia de la
expresión de la molécula EpCAM en enfermedades tumorales, se
prefiere especialmente que dicha composición pueda administrarse
como parte de un régimen terapéutico dirigido a tratar dicha
enfermedad tumoral. Las enfermedades tumorales que pueden ser
tratadas en forma favorable mediante la administración de dicha
composición conforme a este aspecto de la invención incluyen cáncer
de mama, cáncer epitelial, carcinoma hepatocelular, cáncer
colangiocelular, cáncer de estómago, cáncer de colon, cáncer de
próstata, cáncer de cuello y cabeza, cáncer de piel (melanoma), un
cáncer del tracto urogenital, p. ej., cáncer ovárico, cáncer de
endometrio, cáncer de cuello de útero y cáncer de riñón; cáncer de
pulmón, cáncer gástrico, un cáncer del intestino delgado, cáncer de
hígado, cáncer de páncreas, cáncer de vesícula biliar, un cáncer
del conducto biliar, cáncer de esófago, un cáncer de las glándulas
salivales o un cáncer de la glándula tiroides.
En otra realización, la enfermedad también puede
ser una enfermedad residual mínima, preferiblemente tumor sólido
temprano, tumor sólido avanzado o tumor sólido metastásico, que se
caracteriza por la recurrencia local o no local del tumor causada
por la supervivencia de células solitarias.
Es dentro del aspecto de la invención que dichas
enfermedades tumorales pueden tratarse solas o en forma combinada,
habiendo surgido una combinación de dichas enfermedades, por
ejemplo, debido a la diseminación metastásica de la enfermedad
tumoral primaria para llevar a una o múltiples enfermedad(es)
tumorales secundarias.
Según se utilizan en la presente memoria, los
términos "anticuerpo", "molécula de anticuerpo",
"ing" y "molécula ing" se entenderán como equivalentes.
Según corresponda, cualquier uso de los plurales implica el
singular, y cualquier uso del singular implica el plural.
Los siguientes dibujos forman parte de la
presente memoria y se incluyen para demostrar además ciertos
aspectos de la presente invención. La invención se puede entender
mejor por referencia a uno o más de estos dibujos en combinación con
la descripción detallada de las realizaciones específicas
presentadas en la presente memoria.
Fig. 1 Esquemas de dosificación para las
cohortes de Fase I
Fig. 2 Concentración plasmática de
inmunoglobulina anti-EpCAM vs. tiempo, por
cohorte
Fig. 3 Parámetros farmacocinéticos de cohortes
de pacientes después de una dosis única de inmunoglobulina
anti-EpCAM
\newpage
Fig. 4 Parámetros farmacocinéticos de cohortes
de pacientes después de múltiples dosis de inmunoglobulina
anti-EpCAM
Fig. 5 Representación esquemática del modelo de
tres compartimentos
Fig. 6 Niveles plasmáticos máximo y mínimo de
inmunoglobulina anti-EpCAM con un nivel mínimo
buscado de 30 \mug/ml
Fig. 7 Niveles plasmáticos máximo y mínimo de
inmunoglobulina anti-EpCAM con un nivel mínimo
buscado blanco de 10 \mug/ml
Figs. 8A-F Tinción
inmunohistológica de los tejidos que expresan EpCAM
Fig. 9 Valores medios de los puntajes
histológicos semicuantitativos de EpCAM en pacientes con diversas
enfermedades hepáticas.
\vskip1.000000\baselineskip
Cohortes. Se investigó la farmacocinética de una
inmunoglobulina anti-EpCAM caracterizada por las SEC
ID NOs: 1 y 2 (de aquí en adelante
"Anti-EpCAM") en pacientes con cáncer de
próstata refractaria a las hormonas después de dos infusiones
únicas intravenosas en un intervalo de tiempo de 14 días. Las dosis
administradas fueron 10, 20, 40, 64, 102, 164 y 262 mg/m^{2} de
área de superficie corporal. Dos o tres pacientes de cada nivel de
dosis se trataron el día 1 y el día 15. Se tomaron muestras de
sangre en los puntos de tiempo de muestreo 29 - 31 desde el día 1
al día 70 (56 días después de la segunda administración). Se
midieron las concentraciones séricas de Anti-EpCAM
mediante un procedimiento específico ELISA. El ensayo ELISA se
dispuso como un típico ELISA tipo sándwich, en el que un
anticuerpo anti-Anti-EpCAM de rata
se utilizó como anticuerpo de captura y un anticuerpo
anti-Anti-EpCAM de pollo como
anticuerpo de detección (según se describe en Sambrook, Molecular
Cloning, Cold Spring Harbor Laboratory Press). Los esquemas de
dosificación utilizados para las cohortes de pacientes de Fase I se
muestran en la Fig. 1. El símbolo "-" en la columna 3 de la
Fig. 1 denota que los valores calculados para las dosis, que llevan
las unidades mg/kg, son el resultado de dosis promedio (tomando el
número de pacientes en la cohorte respectiva) dividido por el peso
corporal promedio (también tomando el número de pacientes en la
cohorte respectiva). Como tal, un valor de dosificación respectivo
representa el cociente de dos valores promedio.
Concentraciones séricas. Los niveles séricos de
Anti-EpCAM (valores medios \pm SD de
2-3 determinaciones) se midieron en los pacientes
individuales después de dos infusiones intravenosas únicas de
Anti-EpCAM. En la Fig. 2 se presenta una
comparación de los perfiles individuales dentro de las cohortes
únicas. Los perfiles medios concentración/tiempo (medias
aritméticas) obtenidos para todos los grupos de dosis de pacientes
con cáncer de próstata refractaria a las hormonas después de dos
infusiones intravenosas únicas en un intervalo de tiempo de 14 días
se muestran en la Fig. 2.
Esquema de Dosificación Simplificado. Los
pacientes recibieron una dosis personalizada, que se calculó en mg
de Anti-EpCAM/m^{2} de área de superficie
corporal. Debido a la consistencia de los perfiles séricos
observados para los diferentes pacientes dentro del grupo de una
dosis, se analizó si sería viable una simplificación del esquema de
dosificación. Con este fin, los perfiles de las cohortes 5, 6 y 7 se
normalizaron a una dosis total igual de 500 mg y los resultados se
compararon con respecto a la variabilidad de los niveles
séricos.
Para los 9 pacientes, la normalización de la
dosis a una dosis total de 500 mg llevó a niveles séricos que
variaban en un coeficiente promedio (% CV) de 26,6%. El coeficiente
de variación osciló entre el 14,8 y el 67,3%, la mayor variación se
observó en los niveles séricos más bajos. Sobre la base de estos
resultados, se consideró que era viable la simplificación del
régimen de dosis a una dosis total.
Farmacocinética: Evaluación no compartimental.
En la Fig. 3 se presenta un resumen de los parámetros
farmacocinéticos principales (medias aritméticas) calculados para
los pacientes de las siete cohortes con cáncer de próstata
refractaria a las hormonas después de la primera infusión
intravenosa (dosis única) de Anti-EpCAM. En la Fig.
4 se muestran los parámetros farmacocinéticos principales (medias
aritméticas) de Anti-EpCAM después de la
segunda administración intravenosa (dosis múltiple) en el día
14.
Las definiciones de los términos utilizados en
las Figs. 3 y 4 son las siguientes. C_{max} se refiere a la
concentración máxima (medida). AUC se refiere al área bajo la curva
concentración/tiempo (AUC) observada en un intervalo de dosis
(\tau = 14 días) calculada con la regla trapezoidal desde los días
14 a 28 (para dosis múltiple). AUC_{INF} se refiere a la AUC
calculada utilizando la regla trapezoidal desde las hora 0 hasta el
infinito conforme a la fórmula AUC_{\infty} = AUCz + Cz/ke. t½ se
refiere a la semivida media aparente terminal (1n2/\lambdaz), en
la que el término "media" se refiere al promedio de múltiples
valores determinados para la semivida sérica; el término
"aparente" se refiere a la extrapolación de una curva ajustada
a valores farmacocinéticos seleccionados hasta un punto de tiempo
infinito de manera que la cantidad de inmunoglobulina presente en
el suero de un paciente en el tiempo infinito cae asintóticamente a
cero; y el término "terminal" se refiere a este punto de
tiempo infinito. El parámetro \tau es un parámetro farmacocinético
estándar utilizado como factor constante de multiplicación, y el
parámetro z denota cualquier punto de tiempo z. Cl_{ss} se
refiere a la depuración corporal total, calculada conforme a la
fórmula Dosis/AUC. V_{ss} se refiere al volumen aparente de
distribución. Vz se refiere al volumen promedio de distribución. CL
se refiere al volumen medio de
depuración.
depuración.
La semivida media aparente terminal (t½) se
determinó que era 6,72 \pm 0,88 días después de la dosis única
(calculada desde los días 7-14) y 14,74 \pm 4,23
días después de la administración de múltiples dosis (calculada
desde los últimos tres puntos de muestreo, es decir los días 28 - 42
o los días 35 - 70). Los valores de semivida que difieren se deben
al período de observación claramente más largo después de la segunda
dosis, tornándose los valores de semivida medidos más exactos
cuando se miden los valores más largos debido al valor mejorado del
ajuste de la curva. Como tal, el valor para t½ de 14,74 \pm 4,23
días representa el valor más exacto para t½, ya que se midió durante
un período de tiempo largo.
Después de la primera administración se
determinó un Vz de 10,4 L y un volumen promedio de depuración de 1,1
L/día. Estos datos están bien de acuerdo con los resultados
calculados para la segunda dosis con un Vz promedio de 11,5 L y un
volumen de depuración promedio (CL) de 1,0 L/día. Además estos datos
son bien comparables entre todos los grupos de dosis (coeficiente
de variación de 8,2 a 14,8%). Como resultado, no se observó
dependencia de las dosis ni para el parámetro Vz ni para el
parámetro CL.
Linealidad de la dosis. Se determinó la relación
de las dosis con respecto a los parámetros C_{max},
AUC_{últ(0-14)}/
AUC_{\tau(14-28)} y AUC_{inf}. Para todos los parámetros (C_{max}, AUC_{últ.(0-14)}/AUC_{\tau(14-28} y AUC_{inf}) se puede asumir un incremento lineal de la dosis en el intervalo de dosis investigado.
AUC_{\tau(14-28)} y AUC_{inf}. Para todos los parámetros (C_{max}, AUC_{últ.(0-14)}/AUC_{\tau(14-28} y AUC_{inf}) se puede asumir un incremento lineal de la dosis en el intervalo de dosis investigado.
Farmacocinética: Evaluación Compartimental. El
análisis compartimental se basó en dos modelos diferentes que
requieren una infusión constante del fármaco. Para la evaluación del
mejor modelo compartimental se eligieron los datos obtenidos de la
cohorte 6 relacionados con la concentración media vs. tiempo. Para
ambas evaluaciones se aplicó el perfil después de la segunda dosis
debido al mayor tiempo de observación después de la administración.
A fin de investigar el mejor ajuste, se emplearon los siguientes
modelos compartimentales:
\bullet Evaluación de 2 Compartimentos
\bullet Evaluación de 3 Compartimentos
\vskip1.000000\baselineskip
Con ambos modelos, fue posible una evaluación;
sin embargo, se obtuvo un ajuste claramente mejor con el análisis de
3 compartimentos. La congruencia entre la Y observada y la Y
prevista fue marcadamente mejor después del análisis de 3
compartimentos. Por esta razón, se realizaron todas las evaluaciones
adicionales sobre la base de este modelo de 3 compartimentos.
Se investigó la farmacocinética de
Anti-EpCAM en pacientes después de la infusión
intravenosa de corto plazo de 10, 20, 40, 102, 164 y 262 mg/m^{2}
de área de superficie corporal. Se trataron dos o tres pacientes por
cohorte. Se tomaron muestras de sangre durante un período de tiempo
de 42 o 70 días. Las concentraciones séricas de
Anti-EpCAM se midieron mediante el procedimiento
ELISA. Se pudieron obtener los perfiles séricos completos hasta los
días 42 o 70 y se evaluaron para todos los pacientes.
El volumen de depuración y el volumen de
distribución no mostraron ninguna dependencia con las dosis ni
ninguna diferencia importante después de la primera y segunda
dosis. Sobre la base de los datos de 7 cohortes, se puede suponer
la linealidad de la dosis para los parámetros C_{max}, AUC_{\tau
1}, AUC_{últ.} y AUC_{inf} en el intervalo de dosificación
investigado.
El análisis compartimental mostró una
disminución de tercer orden de las concentraciones séricas
Anti-EpCAM con semividas de 0,565 días
(t_{1/2a}), 3,78 (t_{1/2\beta}) y 13,3 días (t_{1/2 \lambda
2}).
Según se esperaba de la semivida terminal
(aproximadamente dos semanas), las simulaciones de varios regímenes
de dosis produjeron los mejores resultados para un diseño bisemanal.
La simulación de una dosis semanal llevó a una acumulación mientras
que la administración cada 4 semanas dio como resultado una
reducción de los niveles séricos de Anti-EpCAM. Con
el fin de alcanzar los niveles mínimos buscados tan rápido como
fuera posible, se recomienda una dosis de carga con una cantidad
doble en comparación con la dosis de mantenimiento.
\newpage
El régimen de dosificación y la duración de
tratamiento seleccionados para este estudio se basan en el modelado
farmacocinético de los resultados del estudio clínico de fase I/II
con Anti-EpCAM en pacientes con cáncer de próstata.
El objetivo de las simulaciones era descubrir un esquema de
dosificación para Anti-EpCAM para lograr los niveles
séricos mínimos de 10 y 30 \mug/ml, respectivamente.
Sobre la base de los experimentos preclínicos,
se espera que los niveles séricos mínimos de 10 \mug/ml sean
efectivos para la actividad antitumoral de
Anti-EpCAM. Sin embargo, no se puede descartar que
dosis más altas puedan ser más efectivas. Por ello, en los ensayos
clínicos se va a evaluar una segunda dosis, calculada para lograr
el nivel sérico mínimo de 30 \mug/ml. No se espera toxicidad
adicional con esta concentración sérica mínima ya que los valores
C_{max} y AUC no exceden aquellos observados en los estudios
clínicos de fase I.
Debido al mejor ajuste, todas las simulaciones
se basaron en los datos de la evaluación de 3 compartimentos de las
cohortes 5 a 7.
El objetivo de las simulaciones era evaluar el
esquema óptimo de administración y la dosis requerida en
consideración de la frecuencia (semanalmente, bisemanalmente, cada
4 semanas), diferentes niveles mínimos (10 \mug/ml, 30 \mug/ml
de Anti-EpCAM) y para evaluar el beneficio de una
dosis de carga de Anti-EpCAM.
Según se esperaba del valor de semivida terminal
de aproximadamente dos semanas, el régimen de dosis bisemanal llevó
a los mejores resultados. Al aplicar una frecuencia de
administración de 7 días y 28 días, la simulación dio como
resultado una acumulación o una leve disminución de los niveles
séricos, respectivamente. La aplicación de una dosis de carga (LD)
llevó al logro inmediato de los niveles mínimos requeridos. Se
simularon las siguientes dosis y los correspondientes niveles
séricos mínimo y máximo para la administración intravenosa de
Anti-EpCAM.
Administración cada 14 días. Según se
esperaba de la semivida terminal de Anti-EpCAM, la
administración bisemanal dio como resultado perfiles simulados con
los valores C_{min} yC_{max} constantes y por ello puede
considerarse como el régimen de dosificación recomendado. Por ello,
se eligió el modelo bisemanal para el cálculo de las dosificaciones
requeridas que condujeran a niveles mínimos buscados de 10 y 30
\mug/ml de Anti-EpCAM.
Los parámetros iniciales de los cálculos se
adquirieron mediante una evaluación compartimental.
\bullet Datos del estudio: mediciones
farmacocinéticas obtenidas en el Estudio de Cáncer de Próstata de
Fase I/II.
\bullet Software: WinNonlin 4.0.1 (Pharsight
Corporation, EEUU; 2001)
\bullet Modelo: PK Modelo 19 (infusión IV de 3
compartimentos, constantes macro, ningún tiempo de retraso,
eliminación de 1er. orden, pesada uniforme).
\vskip1.000000\baselineskip
La Fig. 5 es una representación esquemática del
modelo de 3 compartimentos, en el que '1' representa el
compartimento central y '2' y '3' representan dos compartimentos
periféricos diferentes. El compartimento central está en equilibrio
inmediato con el plasma. El compartimento periférico requiere algo
de tiempo para alcanzar un equilibrio con el compartimento central
después de una administración de un fármaco. K13, K31, K12, K21, K10
son las constantes de velocidad respectivas, en las que el orden de
los numerales 13, 31, etc. denota la dirección del pasaje de
Anti-EpCAM.
Las simulaciones se extendieron hasta un período
de 120 días, aunque los datos del estudio original se limitaron a
un período de 70 días. Las simulaciones se basaron en una fase de
carga (es decir, administración del fármaco en los días 1, 8 y 15)
y una fase de mantenimiento (es decir, administración del fármaco en
los días 29 y cada 14 días a partir de allí):
\bullet Grupo A (dosis baja): fase de carga de
2 mg de Anti-EpCAM/kg de peso corporal semanalmente
(días 1, 8, 15), seguida de 23 dosis de mantenimiento de 2 mg de
Anti-EpCAM/kg de peso corporal cada dos semanas.
\bullet Grupo B (dosis alta): la fase de carga
de 6 mg de Anti-EpCAM/kg de peso corporal
semanalmente (días 1, 8, 15), seguida de 23 dosis de mantenimiento
de 6 mg de Anti-EpCAM/kg de peso corporal cada dos
semanas.
\vskip1.000000\baselineskip
Las dosis buscadas en este estudio llevan a
parámetros farmacocinéticos (es decir, C_{max} y AUC) que no
exceden los medidos con las dosis más altas administradas a
pacientes en el estudio de fase I. Las fases de carga y las fases
de mantenimiento se han calculado utilizando el modelo
farmacocinético para lograr las concentraciones séricas mínimas
buscadas dentro de un período corto de tiempo y para evitar
concentraciones plasmáticas máximas que excederían las evaluadas en
el estudio de fase I.
La Fig.6 muestra una simulación de una
administración bisemanal descrita más arriba de
Anti-EpCAM incluyendo una fase de carga con un
nivel sérico mínimo buscado de 30 \mug/ml. La Fig. 7 muestra una
simulación de una administración bisemanal de
Anti-EpCAM descrita más arriba que incluye una fase
de carga con un nivel sérico mínimo buscado de 10 \mug/ml.
Las Figs. 6 y 7 muestran las respectivas
administraciones del fármaco durante una escala de tiempo de 120
días. Pueden verse las concentraciones séricas máxima y mínima, los
niveles máximos están representados por las porciones superiores de
la curva y los niveles mínimos están representados por la parte más
baja de las curvas. Los gráficos representan las simulaciones para
alcanzar los diferentes niveles mínimos antes mencionados de 10 y
30 \mug/ml, respectivamente. Según puede verse en las figuras, las
concentraciones séricas máxima y mínima son diferentes en las dos
simulaciones.
\vskip1.000000\baselineskip
Lo siguiente describe los eventos adversos (AE)
observados para las diferentes cohortes de pacientes. A los fines
de lo siguiente, se define un AE como cualquier acontecimiento
médico perjudicial en un paciente o sujeto de investigación clínica
a quien se administra el producto farmacéutico y que no
necesariamente tiene una relación causal con este tratamiento. Por
ello el mismo podría ser cualquier signo (incluyendo hallazgos de
laboratorio anómalos), síntoma, o enfermedad desfavorable y no
intencional temporalmente asociado al uso del producto de
investigación, sea considerado o no relacionado con el producto de
investigación.
Las reacciones adversas al fármaco (es decir,
los AEs considerados al menos posiblemente relacionados con el
fármaco del estudio por el investigador) fueron clasificadas por el
investigador conforme a los Criterios de Toxicidad Habituales de
NCI (CTC, versión 2.0). Para las reacciones adversas al fármaco no
detalladas en las tablas de NCI CTC, se siguieron las definiciones
generales para la clasificación de la severidad de los eventos
adversos. En consecuencia, un AE "leve" describe un síntoma que
es apenas perceptible para el paciente. El mismo no interfiere con
las actividades o desempeño habitual del paciente y/o no tiene
ninguna consecuencia clínica. Un AE "moderado" interfiere con
las actividades habituales del individuo y es suficiente para hacer
que el sujeto se sienta incómodo. Tiene alguna consecuencia
clínica; puede requerirse el tratamiento de los síntomas. Un AE
"severo" es un evento que causa grave malestar y puede ser de
tal gravedad que el tratamiento del estudio deba discontinuarse. El
individuo es incapaz de trabajar normalmente o realizar las
actividades habituales y/o el AE tiene una consecuencia clínica
definida. Puede requerirse el tratamiento de los síntomas. Un
"evento adverso serio" (SAE) se define como cualquier
acontecimiento médico perjudicial que, en cualquier dosis: dio como
resultado la muerte, fue potencialmente fatal, requirió la
hospitalización del paciente o la prolongación de la
hospitalización existente, dio como resultado una
discapacidad/incapacidad persistente o importante, o fue una
anomalía congénita/defecto de
nacimiento.
nacimiento.
Se informó un total de 120 eventos adversos
(AEs) sin importar la relación con el fármaco del estudio en 19
(95%) pacientes durante el tratamiento y el período de seguimiento
de seguridad de 28 días después de la última infusión. Se informaron
más eventos adversos en pacientes de la cohorte 6 (38 eventos) y en
la cohorte 7 (35 eventos) en comparación con las cohortes de las
dosis más bajas (cohorte 1: 7; cohorte 2: 9; cohorte 3: 12; cohorte
4: 7; cohorte 5: 12). Las cohortes se exponen en la Fig.1, se
explican más arriba en el Ejemplo 1.
Los AEs clínicos más frecuentes emergentes del
tratamiento, sin importar la evaluación del investigador acerca de
la relación con el fármaco del estudio, fueron aumento de la
temperatura corporal (se informaron en el 30% de todos los
pacientes), náuseas (30%), pirexia (20%), diarrea (15%), fatiga
(15%), sensación de frío (15%) y vómitos (15%). Los cambios de
laboratorio más frecuentes emergentes del tratamiento informados
como eventos adversos, sin importar la evaluación del investigador
acerca de la relación con el fármaco del estudio, fueron fosfatasa
alcalina elevada (informada en el 30% de todos los pacientes),
linfopenia (30%), LDH elevado (25%), disminución de PTT (20%),
disminución de hemoglobina (20%), trastornos en leucocitos (15%),
glucosuria (15%) y transaminasas elevadas (15%).
La mayoría de los eventos adversos fueron leves
(70%) o moderados (25%). Se informaron seis eventos adversos
severos (grado 3) en cuatro pacientes de la siguiente manera:
fosfatasa alcalina elevada en un paciente con valor moderado (grado
2) antes del tratamiento; Glucosuria en un paciente con una diabetes
mellitus conocida; Un paciente con hemoglobina y glóbulos rojos
reducidos y pérdida de peso; un paciente con hernia de disco
intervertebral. Ninguno de los eventos se relacionó con el fármaco
del estudio según la evaluación del investigador. No se informó
ningún evento de grado 4.
Se informaron cuatro eventos adversos serios
(SAE) en 4 pacientes durante el período del estudio. Uno fue
considerado por el investigador posiblemente relacionado con la
medicación del estudio: una prolongación de la hospitalización
debido a fiebre de grado 1 después de la 2da. infusión de
Anti-EpCAM en un paciente de la Cohorte 3 (40
mg/m^{2} de área de superficie corporal).
\newpage
Los estudios clínicos con el anticuerpo
quimérico de ratón-humano anti-EpCAM
de alta afinidad (K_{D}: 2 x 10^{-9}) ING-1
dieron como resultado pancreatitis a la dosis de 1 mg/kg. Estos
eventos adversos fueron dependientes de la dosis con una clara MTD.
Es posible que la afinidad de la inmunoglobulina
ING-1 por el antígeno EpCAM, mayor en dos órdenes
de magnitud en comparación con Anti-EpCAM, esté
relacionada con el perfil de toxicidad observado para
ING-1. Como la MTD de ING-1 (1
mg/kg) y las dosis más elevadas buscadas en el protocolo
Anti-EpCAM (6 mg/kg) son similares, se espera que
Anti-EpCAM, la inmunoglobulina de los estudios
anteriores, posea un margen de seguridad significativamente más
alto, posiblemente debido a su afinidad mucho menor.
\vskip1.000000\baselineskip
A fin de evaluar el intervalo de aplicabilidad
del procedimiento del tratamiento descrito en la presente memoria,
se estudió la expresión del antígeno EpCAM humano en una cantidad de
enfermedades diferentes. Se espera que el procedimiento de la
invención pueda aplicarse eficazmente a cualquier enfermedad en la
que la expresión de EpCAM sea elevada en el estado de enfermedad
con respecto al estado saludable de un tejido dado: En particular,
se prestó especial atención a la síntesis del antígeno EpCAM en el
tejido hepático.
Pacientes y tejidos. Se caracterizaron en
total 254 especímenes diferentes de tejido hepático por
inmunohistología para determinar EpCAM y los parámetros
morfológicos relevantes detallados más abajo. Se analizaron
diferentes muestras tumorales, incluyendo 63 HCCs, 5
colangiocarcinomas de hígado y 30 nódulos displásicos (lesiones
precursoras hepatocelulares pre-malignas), así como
5 especímenes de hígado normal. Se tomaron 33 biopsias de pacientes
con hepatitis C crónica, 27 de pacientes con hepatitis B crónica, y
28 de aquellos con enfermedad hepática alcohólica crónica (ALD); 9
pacientes tenían hepatitis autoinmune (AIH). Se obtuvieron tejidos
hepáticos mediante biopsia utilizando una aguja de Menghini y en el
caso de HCCs mediante resección o explantación del hígado. Los
tejidos se fijaron inmediatamente en formaldehído tamponado neutro
al 4% y se procesaron conforme a protocolos estándar.
Evaluación morfológica. La evaluación
morfológica se realizó sobre la base de las secciones teñidas con
H&E (clasificación de carcinomas y hepatitis crónica). Se
realizó la clasificación de HCCs según se detalla en Nzeako et
al., Cancer 76, 1995, 579-88. Se evaluaron
morfológicamente las enfermedades hepáticas no neoplásicas de la
siguiente manera: se analizó la actividad necroinflamatoria de casos
de hepatitis crónica B y C utilizando el índice de actividad
hepático modificado según se describe en Ishak, Mod. Pathol. 7,
1994, 690-713.
Evaluación inmunohistológica. Se realizó
la inmunohistología según se describió previamente (Prange et
al., J. Pathol. 201, 2003, 250-9) utilizando el
denominado procedimiento ABC y diaminobencidina como cromógeno. Se
diluyó anticuerpo EpCAM monoclonal anti-humano de
ratón (clon VU-1D9; Novocastra, Newcastle, RU) 1/50
y se aplicó después del pretratamiento con tripsina de 30 minutos
(0,1%, pH 7,8). Consiguientemente se realizó la inmunohistología
para ciclina D1 (DCS-6; 1:100; DAKO, Hamburgo,
Alemania), p53 (FL-393; 1:50; Santa Cruz, Santa
Cruz, EEUU) y ubiquitina (70458; 1:200; DAKO). Se realizaron los
controles negativos, incluyendo la omisión del anticuerpo
primario.
Para la evaluación de la tinción de EpCAM en
HCCs solamente se graduó la intensidad
semi-cuantitativamente (0 = negativa, + (1) =
débilmente positiva, ++ (2) = moderadamente positiva, +++ (3) =
fuertemente positiva (al menos igual intensidad que la tinción del
conducto biliar)). La expresión hepatocelular de EpCAM en el
espécimen de biopsia no neoplásico se graduó de la siguiente manera:
0 = tinción no hepatocelular; (+) (0,5) = pocos hepatocitos
positivos dispersos, + (1) = pequeños grupos de hepatocitos a lo
largo o en la mayoría de los tractos septal o portal, ++ (2) =
grandes grupos de hepatocitos positivos alrededor de varios o de la
mayoría de los tractos portal o septal y que se extienden en la
región midacinar, +++ (3) = positividad hepatocelular extensiva,
que típicamente cubre al menos el 50% del ácino. Se realizó la
evaluación estadística utilizando las estadísticas descriptivas
(media, mediana, máximo, frecuencia) y el coeficiente de correlación
de Spearman. Se consideró significativo un nivel de p<0,05
Neo-expresión de EpCAM en
HCCs. El tejido hepático normal mostró una fuerte tinción de
todos los epitelios del conducto biliar, mientras que los
hepatocitos fueron completamente negativos (no se muestran datos).
La inmunohistología para EpCAM mostró una tinción de membrana
específica en 9 de 63 HCCs analizados (14,3 %; Figs.
8A-F) y en todos los colangiocarcinomas analizados
del hígado (n=5). En HCCs, la expresión varió de débil a fuerte y
pareció ser más frecuente en los HCCs moderadamente y pobremente
diferenciados, mientras que solamente un HCC bien diferenciado fue
positivo. También entre 30 nódulos displásicos, que representan
lesiones pre-malignas, solamente 3 mostraron
expresión leve de EpCAM. Se analizaron los mismos tejidos para
otros numerosos antígenos relacionados con tumores y los datos de
expresión se sometieron a análisis correlativo. Existió una
correlación positiva moderada pero significativa de la expresión de
EpCAM en HCCs con acumulación nuclear de p53 y ubiquitina
(p<0,05), pero no con la sospechada ciclina D1 reguladora
ascendente.
Neo-expresión hepatocelular
de EpCAM en la enfermedad necroinflamatoria hepática
crónica.
Se detectó positividad de membrana específica de
los hepatocitos en un porcentaje elevado de los tejidos hepáticos
no neoplásicos analizados (Figs. 8C-E). Se descubrió
una marcada positividad en los casos con hepatitis crónica y en
menor medida en aquellos con ALD. Además, se observó la positividad
de todas las proliferaciones ductulares y también de células
pequeñas únicas dispersas en el parénquima periportal (células
precursoras potenciales). La positividad hepatocelular mostró una
fuerte predominancia periportal/periseptal y alcanzó la intensidad
de tinción del conducto biliar en algunos de los casos. En ninguno
de los casos se presentó reactividad específica para EpCAM en las
células hepáticas no parenquimales.
Cuando se analizaron los valores medios y
medianos de la puntuación inmunohistológica semicuantitativa (véase
procedimientos), la expresión de EpCAM fue máxima en los tejidos con
infección HBV (puntuación media: 0,93; puntuación mediana: 0,5;
puntuación máxima: 3; frecuencia de tinción positiva de EpCAM
(+/++/+++): 55,6%;), ALD (puntuación media: 0,88; puntuación
mediana: 0,75; puntuación máxima: 2,5; frecuencia de tinción
positiva de EpCAM (+/++/+++): 78,6%;) e infección HCV (puntuación
media: 0,86; puntuación mediana: 0,5; puntuación máxima: 3;
frecuencia de tinción positiva de EpCAM (+/++/+++): 63,6%). Los
pacientes con AIH tenían una tinción de EpCAM intermedia
(puntuación media: 0,72; puntuación mediana: 0,5; puntuación máxima:
3; frecuencia de tinción positiva de EpCAM (+/++/+++): 55,6%;). La
expresión hepatocelular de EpCAM estuvo casi ausente en pacientes
con las enfermedades biliares crónicas PBC (puntuación media: 0,13;
puntuación mediana: 0; puntuación máxima: 0,5; frecuencia de
tinción positiva de EpCAM (+/++/ +++): 25,0%;) y PSC (puntuación
media: 0,04; puntuación mediana: 0; puntuación máxima: 0,5;
frecuencia de tinción positiva de EpCAM (+/++/+++): 7,7%;) (Fig. 9;
se muestra la descripción de las variables estadísticas en la figura
en el gráfico del recuadro derecho).
Conclusión. Se analizaron muestras de tejidos de
pacientes con enfermedad hepática crónica tal como infección
crónica por el virus de la hepatitis C (HCV) y virus de la hepatitis
B (HBV), hepatitis autoinmune crónica (AIH), enfermedad hepática
alcohólica crónica (ALD) y carcinoma hepatocelular (HCC), en forma
semicuantitativa para la expresión de EpCAM en correlación con el
estadío de la fibrosis hepática así como los parámetros histológicos
y bioquímicos de la actividad necroinflamatoria. Los hepatocitos,
que son EpCAM-negativos en el hígado adulto normal,
mostraron expresión de novo de EpCAM en muchos tejidos
hepáticos de pacientes con enfermedades crónicas del hígado. La
expresión hepatocelular de EpCAM fue más alta en pacientes con
enfermedades necroinflamatorias (hepatitis HCV y HBV, AIH, ALD). La
expresión hepatocelular de EpCAM se correlacionó significativamente
con los parámetros histológicos y bioquímicos de la actividad
inflamatoria y el grado de fibrosis, que fue particularmente
sorprendente en pacientes con infección por HBV. Además, el 14,3% de
los HCCs mostró la expresión de EpCAM en células tumorales.
Los resultados demuestran que la expresión de
novo de EpCAM aparece solamente en una fracción de carcinomas
hepatocelulares (HCCs), pero frecuentemente en los hepatocitos en
enfermedades hepáticas crónicas necroinflamatorias. Esta expresión
se correlaciona positivamente con la actividad de la enfermedad y la
fibrosis. Específicamente, se ha demostrado una correlación de la
neo-expresión hepatocelular de EpCAM en la
enfermedad hepática necroinflamatoria crónica y la fibrosis y la
actividad necroinflamatoria. Estos descubrimientos tienen
implicancias para las próximas opciones de tratamiento, tales como
anticuerpos monoclonales que se dirigen a EpCAM en tumores malignos,
y también puede aplicarse a algunos HCCs. Como consecuencia
específica, una fracción de HCCs puede representar un blanco válido
para la terapia de anticuerpos dirigidos a EpCAM.
\vskip1.000000\baselineskip
Se deseaba confirmar la exactitud de las
predicciones basadas en el modelo farmacocinético (estas mismas
basadas en los datos farmacocinéticos obtenidos del estudio de Fase
I de Anti-EpCAM, véanse los Ejemplos 1 y 2 más
arriba) utilizando datos reales de pacientes obtenidos de un estudio
posterior de Fase II en el que Anti-EpCAM se
administró conforme a la invención. Este estudio de fase II fue un
estudio de fase II internacional, abierto, multicéntrico,
aleatorizado, con dos grupos paralelos de tratamiento. Los pacientes
que participaron en el estudio de fase II de
Anti-EpCAM se aleatorizaron en dos grupos, el
primero de los cuales recibió una dosis baja de
Anti-EpCAM (2 mg/kg de peso corporal) administrada
según se explica más abajo, y el segundo de los cuales recibió una
dosis alta de Anti-EpCAM (6 mg/kg de peso corporal)
administrada según se explica más abajo. En el transcurso del
estudio de fase II de Anti-EpCAM, cada paciente
inicialmente recibió tres dosis de carga de
Anti-EpCAM (cada una de 2 mg/kg de peso corporal o 6
mg/kg de peso corporal, dependiendo del grupo de pacientes)
espaciadas entre sí una semana durante una fase de carga, seguida de
hasta 23 dosis de mantenimiento posteriores de
Anti-EpCAM (nuevamente, de 2 mg/kg de peso corporal
o 6 mg/kg de peso corporal, dependiendo del grupo de pacientes),
donde las dosis únicas de mantenimiento se administraron cada dos
semanas.
Conforme a las predicciones farmacocinéticas
basadas en los datos del estudio de fase I de
Anti-EpCAM, se esperaría que el nivel sérico mínimo
del primer grupo de pacientes que recibió la dosis baja de
Anti-EpCAM estuviera en el orden de 10 \mug/ml
(correlacionando con el nivel mínimo que se muestra en la Fig. 7),
mientras que se esperaría que el nivel sérico mínimo del segundo
grupo de pacientes que recibió la dosis alta de
Anti-EpCAM estuviera en el orden de 30 \mug/ml
(correlacionando con el nivel mínimo que se muestra en la Fig.
6).
El ensayo se realizó de la siguiente manera. Se
revistieron placas de 96 pocillos con HD4A4 (Anticuerpo
anti-idiotipo contra Anti-EpCAM; 5
\mug/ml en un volumen de 100 ml) seguido de una etapa de bloqueo y
lavado. Se añadieron los estándares de calibración, muestras de
control de calidad y muestras de Anti-EpCAM (100 ml
en una dilución apropiada) seguido de una etapa de lavado. El
Anti-EpCAM unido por HD4A4 se detectó con IgG
antihumano biotinilado, nuevamente seguido de una etapa de lavado.
Se añadió estreptavidina (0,5 mg/ml en un volumen de 100 \mul),
la placa de 96 pocillos se lavó nuevamente y en una etapa final se
añadieron 180 \mul de pNPP. El ensayo se interrumpió con 50
\mul de NaOH 3M y se midió en un Lector de ELISA a 405 y 490 nm.
La dilución de las muestras de dosis baja se realizó en una
relación de 1:100. La dilución de las muestras de dosis altas se
realizó en una relación de 1:300. Los resultados se muestran en la
Fig. 10.
La Fig. 10 representa como puntos los niveles
mínimos individuales medidos para un paciente del grupo de
dosificación baja (paciente número 401001; puntos de datos
indicados por cuadrados) y otro paciente del grupo de dosificación
alta (paciente número 101002; puntos de datos indicados por rombos).
El nivel vertical promedio de la línea horizontal que conecta los
puntos de datos del paciente respectivo representa el nivel sérico
mínimo observado para ese paciente. En consecuencia, se puede ver
que la línea horizontal para el paciente de dosis alta 101002
(puntos en rombos) indica una concentración de nivel mínimo de
Anti-EpCAM en conformidad con el valor previsto de
30 \mug/ml para esta dosis (comparar la línea horizontal que
conecta los mínimos previstos del gráfico en la Fig. 6). De la
misma manera, la línea horizontal para el paciente de dosis baja
401001 (puntos en cuadrados) indica una concentración de nivel
mínimo de Anti-EpCAM en conformidad con el valor
previsto de 10 \mug/ml para esta dosis (comparar la línea
horizontal que conecta los mínimos previstos del gráfico de la Fig.
7).
Estos datos corroboran la exactitud de las
predicciones del nivel mínimo mediante el modelo farmacocinético
basado en los datos obtenidos durante el estudio de fase I de
Anti-EpCAM con los datos reales de los pacientes
obtenidos durante el estudio de fase II de
Anti-EpCAM. Como tal, puede concluirse que las
suposiciones y resultados del modelo farmacocinético eran
correctos, y que el régimen de tratamiento conforme a la invención
tiene los efectos y ventajas elaborados en lo que antecede.
<110> Micromet AG
\vskip0.400000\baselineskip
<120> Inmunoglobulinas
anti-EpCAMs
\vskip0.400000\baselineskip
<130> MIC-022 PCT
\vskip0.400000\baselineskip
<140> no conocido
\vskip0.400000\baselineskip
<141>
2005-02-09
\vskip0.400000\baselineskip
<150> EE. UU. 10/778.915
\vskip0.400000\baselineskip
<151>
2004-02-13
\vskip0.400000\baselineskip
<160> 2
\vskip0.400000\baselineskip
<170> Patente en versión 3.1
\vskip0.400000\baselineskip
<210> 1
\vskip0.400000\baselineskip
<211> 457
\vskip0.400000\baselineskip
<212> PRT
\vskip0.400000\baselineskip
<213> secuencia artificial
\vskip0.400000\baselineskip
<220>
\vskip0.400000\baselineskip
<223> Cadena pesada de
Anti-EpCAM
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<400> 1
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<210> 2
\vskip0.400000\baselineskip
<211> 214
\vskip0.400000\baselineskip
<212> PRT
\vskip0.400000\baselineskip
<213> secuencia artificial
\vskip0.400000\baselineskip
<220>
\vskip0.400000\baselineskip
<223> Cadena liviana de
Anti-EpCAM
\newpage
\vskip0.400000\baselineskip
<400> 2
\vskip1.000000\baselineskip
Claims (15)
1. Una inmunoglobulina humana que se une
específicamente al antígeno humano EpCAM, caracterizada
porque dicha inmunoglobulina humana exhibe una semivida sérica de al
menos 15 días después de la administración a un paciente humano y
comprende una cadena pesada de inmunoglobulina con una secuencia de
aminoácidos expuesta en SEC ID NO: 1 y una cadena liviana de
inmunoglobulina con un secuencia de aminoácidos expuesta en SEC ID
NO: 2.
2. La inmunoglobulina humana de la
reivindicación 1, en la que la semivida sérica es de 20 días, 19
días, 18 días, 17 días, 16 días o 15 días.
3. La inmunoglobulina humana de la
reivindicación 1 o 2, en la que la semivida es de 15 días.
4. Una composición farmacéutica que comprende la
inmunoglobulina humana de cualquiera de las reivindicaciones
1-3.
5. Uso de la inmunoglobulina humana de la
reivindicación 1 para la preparación de un medicamento para tratar
una enfermedad tumoral, estando dicho medicamento formulado para la
administración a un paciente humano con una frecuencia no mayor de
una vez por semana.
6. El uso e la reivindicación 5, en el que dicho
medicamento está formulado para la administración con una frecuencia
no mayor de una vez cada dos semanas.
7. El uso de la reivindicación 5 o 6, en el que
dicho medicamento está formulado para la administración cada dos
semanas y permaneciendo la dosis administrada de dicha
inmunoglobulina humana sin cambios de una administración a la
siguiente.
8. El uso de cualquiera de las reivindicaciones
5-7, en el que dicho medicamento está formulado para
la administración con una frecuencia menor que una vez cada dos
semanas, fijándose la dosis administrada de dicha inmunoglobulina
humana administrada de manera tal que, al final del tiempo que media
entre dos respectivas administraciones, la cantidad de dicha
inmunoglobulina humana que persiste en el suero nunca cae por debajo
de un nivel sérico mínimo que se determina que es necesario para la
eficacia terapéutica.
9. El uso de cualquiera de las reivindicaciones
5-8, en el que el medicamento está formulado para la
administración intravenosa, intraperitonal, subcutánea,
intramuscular, tópica o intradérmica.
10. El uso de cualquiera de las reivindicaciones
5-9, en el que la enfermedad tumoral es cáncer de
mama, cáncer epitelial, carcinoma hepatocelular, cáncer
colangiocelular, cáncer de estómago, cáncer de colon, cáncer de
próstata, cáncer de cuello y cabeza, cáncer de piel (melanoma), un
cáncer del tracto urogenital, p. ej., cáncer ovárico, cáncer de
endometrio, cáncer de cuello de útero y cáncer de riñón; cáncer de
pulmón, cáncer gástrico, un cáncer del intestino delgado, cáncer de
hígado, cáncer de páncreas, cáncer de vesícula biliar, un cáncer del
conducto biliar, cáncer de esófago, un cáncer de las glándulas
salivales o un cáncer de la glándula tiroides.
11. Inmunoglobulina humana de la reivindicación
1 para su uso en el tratamiento de una enfermedad tumoral, en la que
el tratamiento se produce mediante la administración de dicha
inmunoglobulina humana a un paciente humano con una frecuencia no
mayor de una vez por semana.
12. Inmunoglobulina humana para el uso de la
reivindicación 11, en la que dicho tratamiento se produce mediante
la administración de dicha inmunoglobulina humana con una frecuencia
no mayor de una vez cada dos semanas.
13. Inmunoglobulina humana para el uso de la
reivindicación 11 o 12, en la que dicho tratamiento se produce
mediante la administración de dicha inmunoglobulina humana cada dos
semanas y permaneciendo la dosis administrada de dicha
inmunoglobulina humana sin cambios de una administración a la
siguiente.
14. Inmunoglobulina humana para el uso de
cualquiera de las reivindicaciones 11-13, en la que
dicho tratamiento se produce mediante la administración de dicha
inmunoglobulina humana con una frecuencia menor que una vez cada
dos semanas, fijándose la dosis administrada de dicha
inmunoglobulina humana administrada de manera que, al final del
tiempo que media entre las dos respectivas administraciones, la
cantidad de dicha inmunoglobulina humana que persiste en el suero
nunca cae por debajo del nivel sérico mínimo que se determina que es
necesario para la eficacia terapéutica.
15. Inmunoglobulina humana para el uso de
cualquiera de las reivindicaciones 11-14, en la que
dicho tratamiento se produce mediante administración intravenosa,
intraperitonal, subcutánea, intramuscular, tópica o
intradérmica.
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| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
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| JP2009526770A (ja) * | 2006-02-09 | 2009-07-23 | マイクロメット アクツィエン ゲゼルシャフト | 転移性乳癌の治療 |
| EP1865001A1 (en) * | 2006-06-08 | 2007-12-12 | Gsf-Forschungszentrum Für Umwelt Und Gesundheit, Gmbh | Specific protease inhibitors and their use in cancer therapy |
| DK2041181T3 (da) * | 2006-06-08 | 2011-08-29 | Helmholtz Zentrum Muenchen | Specifikke proteaseinhibitorer og deres anvendelse i cancerterapi |
| EP2142570B1 (en) * | 2007-04-04 | 2011-06-15 | SIGMA-TAU Industrie Farmaceutiche Riunite S.p.A. | Anti-epcam antibody and uses thereof |
| JP5840950B2 (ja) | 2008-12-22 | 2016-01-06 | ユニバーシティ・オブ・ユタ・リサーチ・ファウンデイション | 単色マルチプレックス定量ｐｃｒ |
| WO2011032296A1 (en) * | 2009-09-21 | 2011-03-24 | Mount Sinai Hospital | Methods and compositions for the diagnosis and treatment of thyroid cancer |
| TWI485161B (zh) * | 2012-03-02 | 2015-05-21 | Academia Sinica | 抗上皮細胞黏著分子（ＥｐＣＡＭ）抗體及其使用方法 |
| CN103387988B (zh) * | 2012-09-24 | 2016-01-06 | 厦门大学 | 上皮细胞粘附分子的核酸适体EpCAM Ccut及其制备方法 |
| AU2014268510A1 (en) | 2013-05-22 | 2015-11-26 | Telomere Diagnostics, Inc. | Measures of short telomere abundance |
| CN103275226B (zh) * | 2013-06-09 | 2017-08-29 | 中国科学技术大学 | 特异性抗人上皮细胞粘附分子（EpCAM）的单克隆抗体的制备、鉴定及应用 |
| CA2971169A1 (en) | 2014-12-30 | 2016-07-07 | Telomere Diagnostics, Inc. | Multiplex quantitative pcr |
| EP3377103B1 (en) * | 2015-11-19 | 2021-03-17 | Revitope Limited | Functional antibody fragment complementation for a two-components system for redirected killing of unwanted cells |
| AU2017301826A1 (en) | 2016-07-26 | 2019-03-14 | Tessa Therapeutics Ltd. | Chimeric antigen receptor |
| WO2020018964A1 (en) | 2018-07-20 | 2020-01-23 | Fred Hutchinson Cancer Research Center | Compositions and methods for controlled expression of antigen-specific receptors |
Family Cites Families (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5853697A (en) * | 1995-10-25 | 1998-12-29 | The United States Of America, As Represented By The Department Of Health & Human Services | Methods of treating established colitis using antibodies against IL-12 |
| WO1998046645A2 (en) * | 1997-04-14 | 1998-10-22 | Micromet Gesellschaft Für Biomedizinische Forschung Mbh | Method for the production of antihuman antigen receptors and uses thereof |
| US6855544B1 (en) * | 1999-04-15 | 2005-02-15 | Crucell Holland B.V. | Recombinant protein production in a human cell |
| US7605238B2 (en) * | 1999-08-24 | 2009-10-20 | Medarex, Inc. | Human CTLA-4 antibodies and their uses |
| DE60239454D1 (de) * | 2001-05-03 | 2011-04-28 | Merck Patent Gmbh | Rekombinanter, tumorspezifischer antikörper und dessen verwendung |
| US20030175268A1 (en) * | 2002-01-11 | 2003-09-18 | Saint-Remy Jean-Marie R. | Method and pharmaceutical composition for preventing and/or treating systemic inflammatory response syndrome |
| EP1575491A4 (en) * | 2002-05-20 | 2006-09-27 | Abgenix Inc | TREATMENT OF RENAL CARCINOMA USING ANTIBODIES AGAINST THE EPIDERMAL GROWTH FACTOR RECEPTOR |
-
2004
- 2004-02-13 US US10/778,915 patent/US20050180979A1/en not_active Abandoned
-
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