ES2326791T3 - 5,6-dihidro-4h-pirrolo(1,2-a)(1,4)benzodiazepinas antifungicas sustituidas en posicion 4. - Google Patents

Abstract

Uso de un compuesto de fórmula (I) para la fabricación de un medicamento para tratamiento de infecciones fúngicas, teniendo dicho compuesto la fórmula **(Ver fórmula)** una forma de N-óxido, una sal, una amina cuaternaria o formas estereoquímicamente isómera de la misma, en donde R 1 representa hidrógeno, alquilo C1-6, alquiltio C1-4, al-quiloxiC1-4 o halo; R 2 representa hidrógeno o alquilo C 1-6; R 3 representa fenilo sustituido con halo, ciano, alquil-oxiC1-4, alquiltio C1-4, alquilo C1-6, haloalquilo C1-6; 2-tienilo; o 3-tienilo; y R 4 es hidrógeno; o R 2 y R 4 forman un enlace adicional.

Description

5,6-dihidro-4H-pirrolo[1,2-a][1,4]benzodiazepinas antifúngicas sustituidas en posición 4.

La presente invención se refiere a una nueva clase de antifúngicos activos principalmente contra dermatofitos, y su preparación; la misma se refiere adicionalmente a composiciones que los comprenden, y a su uso como medicamento.

5,6-Dihidro-4H-pirrolo[1,2-a][1,4]benzodiazepinas han sido descritas en J. Chem. Soc.(C), 2732-2734 (1971); J. Heterocyclic Chem., 13, 711-716 (1976); y J. Heterocyclic Chem., 16, 241-244 (1979); no se registró actividad biológica alguna en ninguna de estas referencias. Farmaco, Edizione Scientifica, 39(8), 707-717 (1984) describe 6-H-pirrolo[1,2-a][1,4]benzodiazepinas que tienen actividad sobre el sistema nervioso central.

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La presente invención se refiere al uso de compuestos de fórmula (I) para la fabricación de un medicamento para tratamiento de infecciones fúngicas, teniendo dichos compuestos la fórmula

1

las formas de N-óxido, las sales, las aminas cuaternarias y formas estereoquímicamente isómeras de las mismas, en donde

R^{1}

representa hidrógeno, alquilo C_{1-6}, alquiltio C_{1-4}, alquiloxiC_{1-4} o halo;

R^{2}

representa hidrógeno o alquilo C_{1-6};

R^{3}

representa fenilo sustituido con halo, ciano, alquiloxiC_{1-4}, alquiltio C_{1-4}, alquilo C_{1-6}, haloalquilo C_{1-6}; 2-tienilo; o 3-tienilo; y

R^{4}

es hidrógeno; o

\quad

R^{2} y R^{4} forman un enlace adicional.

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Los átomos en el sistema tricíclico se numeran como se muestra en la fórmula siguiente (II).

2

Como se utiliza en las definiciones que anteceden y en lo sucesivo, halo define fluoro, cloro, bromo y yodo; alquilo C_{1-4} es un grupo o parte de un grupo que abarca los radicales hidrocarbonados saturados de cadena lineal y ramificada que tienen de 1 a 4 átomos de carbono tales como, por ejemplo, metilo, etilo, propilo, butilo y análogos; alquilo C_{1-6} como grupo o parte de un grupo abarca los radicales hidrocarbonados saturados de cadena lineal y ramificada como se definen en alquilo C_{1-4} así como los homólogos superiores de los mismos que contienen 5 ó 6 átomos de carbono tales como, por ejemplo, pentilo o hexilo; haloalquilo C_{1-6} define alquilo C_{1-6} en el cual al menos un átomo de hidrógeno está reemplazado por un átomo de halógeno, y pudiendo estar hasta la totalidad de los átomos de hidrógeno están reemplazados por átomos de halógeno, tales como por ejemplo, fluorometilo, difluorometilo, o trifluorometilo.

Para uso terapéutico, las sales de los compuestos de fórmula (I) son aquéllas en las cuales el ión de carga opuesta es farmacéuticamente aceptable. Sin embargo, sales de ácidos que no son farmacéuticamente aceptables pueden encontrar aplicación también, por ejemplo, en la preparación o purificación de un compuesto farmacéuticamente aceptable. Todas las sales, sean o no farmacéuticamente aceptables, están incluidas dentro del ámbito de la presente invención.

Debe entenderse que las sales de adición farmacéuticamente aceptables como se definen anteriormente en esta memoria comprenden las formas de sal de adición de ácido tera-péuticamente activas y no tóxicas que pueden formar los compuestos de fórmula (I). Las últimas pueden obtenerse convenientemente por el tratamiento de la forma de base con ácidos apropiados tales como ácidos inorgánicos, por ejemplo, hidrácidos halogenados, v.g. los ácidos clorhídrico, bromhídrico y análogos; ácido sulfúrico; ácido nítrico; ácido fosfórico y análogos; o ácidos orgánicos, por ejemplo, los ácidos acético, propanoico, hidroxiacético, 2-hidroxipropanoico, 2-oxopropanoico, oxálico, malónico, succínico, maleico, fumárico, málico, tartárico, 2-hidroxi-1,2,3-propanotricarboxílico, metanosulfónico, etanosulfónico, bencenosulfónico, 4-metilbencenosulfónico, ciclohexanosulfámico, 2-hidroxibenzoico, 4-amino-2-hidroxibenzoico y ácidos análogos. Inversamente, la forma de sal puede convertirse por tratamiento con álcali en la forma de base
libre.

El término sal de adición comprende también los hidratos y formas de adición de disolvente que pueden formar los compuestos de fórmula (I). Ejemplos de tales formas son v.g. hidratos, alcoholatos y análogos.

El término "amina cuaternaria" como se utiliza anteriormente en esta memoria define las sales de amonio cuaternario que pueden formar los compuestos de fórmula (I) por reacción entre un nitrógeno básico de un compuesto de fórmula (I) y un agente cuaternizante apropiado, tal como, por ejemplo, un haluro de alquilo opcionalmente sustituido, haluro de arilo o haluro de arilalquilo, v.g. yoduro de metilo o yoduro de bencilo. Pueden utilizarse también otras sustancias reaccionantes con grupos lábiles satisfactorios, tales como trifluorometanosulfonatos de alquilo, metanosulfonatos de alquilo, y p-toluenosulfonatos de alquilo. Una amina cuaternaria tiene un nitrógeno cargado positivamente. Iones de carga opuesta farmacéuticamente aceptables incluyen cloro, bromo, yodo, trifluoroacetato y acetato. El ión de carga opuesta de elección puede producirse utilizando columnas de resinas cambiadoras de iones.

El término "formas estereoquímicamente isómeras" como se utiliza anteriormente en esta memoria define la totalidad de las formas estereoisómeras posibles en las cuales existen los compuestos de fórmula (I), incluyendo también por tanto todos los enantiómeros, mezclas enantioméricas y mezclas de diastereoisómeros. A no ser que se mencione o indique otra cosa, la designación química de los compuestos denota la mezcla de todas las formas estereoisómeras posibles, conteniendo dichas mezclas todos los diastereómeros y enantiómeros de estructura molecular básica. Esto mismo es aplicable a los compuestos intermedios que se describen en esta memoria, utilizados para preparar los productos finales de fórmula (I).

Las formas estereoisómeras puras de los compuestos y compuestos intermedios como se mencionan en esta memoria se definen como isómeros sustancialmente exentos de otras formas enantiómeras o diastereómeras de la misma estructura molecular básica de dichos compuestos o compuestos intermedios. En particular, el término "estereoisómeramente puro", que es equivalente a "quiralmente puro" se refiere a compuestos o compuestos intermedios que tienen un exceso de estereoisómero de al menos 80% (es decir como mínimo 90% de un isómero y como máximo 10% de los otros isómeros posibles) hasta un exceso de estereoisómero de 100% (es decir 100% de un isómero y nada del otro), de modo más particular, compuestos o compuestos intermedios que tienen un exceso de estereoisómero de 90% hasta 100%, de modo aún más particular que tienen un exceso de estereoisómero de 94% hasta 100% y de modo muy particular que tienen un exceso de estereoisómero de 97% hasta 100%. Los términos "enantioméricamente puro" y "diastereoméricamente puro" deben entenderse de manera similar, pero refiriéndose entonces al exceso enantiomérico, o respectivamente al exceso diaste-reomérico de la mezcla en cuestión.

Los compuestos de fórmula (I), en donde R^{4} es hidrógeno, contienen todos ellos al menos un centro de simetría que puede tener la configuración R o S. Como se utilizan en esta memoria, los descriptores estereoquímicos que denotan la configuración estereoquímica del centro de asimetría están de acuerdo con la nomenclatura de Chemical Abstracts.

De algunos compuestos de fórmula (I) y de los compuestos intermedios utilizados en su preparación no se determinó experimentalmente la configuración estereoquímica absoluta. En tales casos, la forma estereoisómera que se aisló en primer lugar se designa como "A", y la segunda como "B", sin referencia adicional a la configuración estereoquímica real. Sin embargo, dichas formas estereoisómeras "A" y "B" pueden caracterizarse inequívocamente, por ejemplo por su rotación óptica en el caso en que "A" y "B" tengan una relación enantiomérica. Una persona experta en la técnica es capaz de determinar la configuración absoluta de tales compuestos utilizando métodos conocidos en la técnica tales como, por ejemplo, difracción de rayos X.

Debe entenderse que las formas de N-óxido de los presentes compuestos comprenden los compuestos de fórmula (I) en la cual uno o varios átomos de nitrógeno están oxidados al denominado N-óxido.

Siempre que se utiliza en lo sucesivo, debe entenderse que el término "compuestos de fórmula (I)" incluye formas de N-óxido, sales, aminas cuaternarias y formas estereoquímicamente isómeras. Son especialmente interesantes aquellos compuestos de fórmula (I) que son estereoquímicamente puros.

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Es también de interés el uso de compuestos de fórmula (I) en donde

R^{1}

representa hidrógeno, alquilo C_{1-6} o halo;

R^{2}

representa hidrógeno o alquilo C_{1-6};

R^{3}

representa fenilo sustituido con halo, ciano, alquiloxiC_{1-4}, alquilo C_{1-6}, haloalquilo C_{1-6}; 2-tienilo o 3-tienilo, y

R^{4}

representa hidrógeno; o R^{2} y R^{4} forman un enlace adicional.

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Es también interesante el uso de compuestos de fórmula (I) en donde

R^{1}

representa hidrógeno o halo;

R^{2}

representa hidrógeno o alquilo C_{1-6};

R^{3}

representa fenilo sustituido con alquilo C_{1-6};

R^{4}

representa hidrógeno; o R^{2} y R^{4} forman un enlace adicional.

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Es también interesante el uso de compuestos de fórmula (I) en donde

R^{1}

representa hidrógeno, 7-cloro, 7-fluoro o 9-cloro;

R^{2}

representa hidrógeno; y

R^{3}

representa fenilo sustituido con alquilo C_{1-6};

R^{4}

representa hidrógeno; o R^{2} y R^{4} forman un enlace adicional.

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Es sumamente interesante el uso de los compuestos (2), (21), (22), (23) y (24).

Los compuestos de la presente invención pueden prepararse de acuerdo con el esquema de reacción 1.

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(Esquema pasa a página siguiente)

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Esquema 1

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Los compuestos de fórmula (I) en donde R^{2} representa alquilo C_{1-6}, compuestos que se representan por la fórmula (I-a) en donde R^{2a} es alquilo C_{1-6}, se pueden preparar a partir de los compuestos representados por la fórmula (I-b), siguiendo reacciones de alquilación en N y aminación reductora conocidas en la técnica.

Las reacciones de alquilación en N se conducen haciendo reaccionar un compuesto de fórmula (I-b) con un agente de alquilación R^{2a}-W (III) en donde W es un grupo lábil tal como halo, v.g. cloro, bromo o yodo, o un grupo sulfonil-oxi, v.g. metanosulfoniloxi (mesilato) o 4-metilbencenosulfoniloxi (tosilato) en un disolvente apropiado tal como un alcanol, v.g. metanol, etanol, isopropanol; una cetona, v.g. acetona o metilisopropilcetona; un disolvente dipolar aprótico (v.g. N,N-dimetilformamida, N,N-dimetilacetamida; en presencia de una base tal como un hidróxido o carbonato de metal alcalino, v.g. hidróxido de sodio o de potasio, o carbonato de sodio o de potasio. La reacción de alquilación en N puede conducirse también por reacción de un compuesto de fórmula (I-b) con un sulfato de dialquilo, v.g. sulfato de dimetilo en agua o una mezcla de agua y un alcanol en presencia de una base tal como bicarbonato de sodio. La velocidad de reacción puede aumentarse por agitación y calentamiento de la mezcla de reacción y - en caso necesario - por catálisis de la reacción de alquilación en N con un catalizador apropiado tal como yoduro de potasio.

Reacciones de aminación reductora pueden conducirse por reacción de un compuesto de fórmula (I-a) con un aldehído o cetona de fórmula R^{2-b}=O (IV) en donde R^{2-b} representa un radical alcanodiílo C_{1-6} y =O representa un grupo oxo, en un disolvente apropiado tal como un alcanol, v.g. metanol, etanol, isopropanol; un disolvente dipolar aprótico, v.g. N,N-dimetilformamida, N,N-dimetilacetamida; en presencia de un agente reductor tal como borohidruro de sodio, o en presencia de hidrógeno y un catalizador tal como paladio. La velocidad de reacción puede aumentarse por agitación y calentamiento de la mezcla de reacción.

Los compuestos de fórmula (I) en donde R^{2} y R^{4} forman juntos un enlace adicional, compuestos que se representan por la fórmula (I-c), pueden prepararse a partir de los compuestos representados por la fórmula (I-b) siguiendo reacciones de oxidación de aminas a iminas conocidas en la técnica. Estas reacciones de oxidación pueden conducirse por reacción de un compuesto de fórmula (I-b) con un oxidante tal como, por ejemplo, tetraacetato de plomo o dióxido de manganeso, en un disolvente inerte en la reacción tal como un hidrocarburo halogenado, v.g. diclorometano o triclorometano. La velocidad de reacción puede aumentarse por agitación y opcionalmente calentamiento de la mezcla de reacción.

Los compuestos de fórmula (I-b) se pueden preparar a partir de un 1-(2-aminometilfenil)-pirrol(V) por conversión del mismo en una sal (VI) por reacción con un ácido H^{+}X^{-} (VII), y reacción de dicha sal (VI) con un aldehído de fórmula (VIII) en un disolvente apropiado tal como un alcanol, v.g. metanol, etanol, isopropanol, a una temperatura elevada, preferiblemente a la temperatura de reflujo.

Alternativamente, el compuesto intermedio de fórmula (V) puede hacerse reaccionar primeramente con el aldehído R^{3}-CHO (VIII) y la imina intermedia así formada puede ciclarse en presencia de un ácido H^{+}X^{-} (VII) para dar un compuesto de fórmula (I-b).

Otra alternativa adicional comprende alquilar en N el compuesto intermedio de fórmula (V) con un reactivo R^{2a}-W (III) o R^{2b}=O (IV) en las condiciones descritas anteriormente para producir una amina de fórmula (IX) que se convierte ulteriormente en una forma de sal (X) y se hace reaccionar con un aldehído (VIII) como se describe anteriormente en esta memoria.

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El compuesto intermedio de fórmula (V) se prepara por reducción de un 1-(2-cianofenil)pirrol (XI). Pueden utilizarse cuatro procedimientos diferentes para reducir la función nitrilo.

1.

LiAlH_{4}/THF [S. Raines, S.Y. Chai y F.P. Palopoli; J. Heterocyclic Chem., \underline{13}, 711-716 (1976)]

2. {}\hskip0.3cm i.

bis(2-metoxietoxi)aluminato de sodio (Red-Al®) 70% p/p tolueno, TA:

ii.

NaOH 10%, TA [G.W.H. Cheeseman y S.G. Greenberg; J. Heterocyclic Chem., 16, 241-244(1979)]

3. {}\hskip0.3cm i.

KBH_{4}/CF_{3}COOH, THF; ii. H_{2}O; iii. HCl [P. Trinka, P. Slégel y J. Reiter; J. Prakt. Chem., 338, 675-678 (1996)]

4.

RaNi/H_{2},

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A su vez, el compuesto intermedio de fórmula (XI) se prepara por tratamiento de un 2-aminobenzonitrilo (XII) con 2,5-dimetoxifurano en un disolvente inerte tal como dioxano o tetrahidrofurano en presencia de un ácido tal como hidrocloruro de 4-cloropiridina, o en un disolvente ácido tal como ácido acético glacial, a una temperatura elevada, preferiblemente a la temperatura de reflujo.

En todas estas preparaciones, los productos de reacción pueden aislarse del medio de reacción y, en caso necesario, purificarse ulteriormente de acuerdo con metodologías conocidas generalmente en la técnica tales como, por ejemplo, extracción, cristalización, trituración y cromatografía. En particular, los estereoisómeros pueden aislarse cromatográficamente utilizando una fase estacionaria quiral tal como, por ejemplo, Chiralpak AD (amilosa-3,5-dimetilfenil-carbamato) o Chiralpak AS, adquiridos ambos de Daicel Chemical Industries, Ltd., en Japón.

Los compuestos de fórmula (I) pueden convertirse también en las formas correspondientes de N-óxido siguiendo procedimientos conocidos en la técnica para convertir un nitrógeno trivalente en su forma de N-óxido. Dicha reacción de oxidación en N puede llevarse a cabo generalmente haciendo reaccionar el material de partida de fórmula (I) con un peróxido orgánico o inorgánico apropiado. Peróxidos inorgánicos apropiados comprenden, por ejemplo, peróxido de hidrógeno, peróxidos de metal alcalino o de metal alcalinotérreo, v.g. peróxido de sodio, peróxido de potasio; peróxidos orgánicos apropiados pueden comprender peroxiácidos tales como, por ejemplo, ácido bencenocarboperoxoico o ácido bencenocarboperoxoico sustituido con halógeno, v.g. ácido 3-clorobencenocarboperoxoico, ácidos peroxoalcanoicos, v.g. ácido peroxoacético, hidroperóxidos de alquilo, v.g. hidroperóxido de terc-butilo. Disolventes adecuados son, por ejemplo, agua, alcanoles inferiores, v.g. etanol y análogos, hidrocarburos, v.g. tolueno, cetonas, v.g. 2-butanona, hidrocarburos halogenados, v.g. diclorometano, y mezclas de tales disolventes.

Formas estereoisómeras puras de los compuestos y los compuestos intermedios de esta invención pueden obtenerse por la aplicación de procedimientos conocidos en la técnica. Los diastereómeros pueden separarse por métodos físicos de separación tales como técnicas selectivas de cristalización y cromatografía, v.g. cromatografía líquida utilizando fases estacionarias quirales. Los enantiómeros pueden separarse unos de otros por la cristalización selectiva de sus sales diastereómeras con ácidos ópticamente activos. Alternativamente, los enantiómeros se pueden separar por técnicas cromatográficas utilizando fases estacionarias quirales. Dichas formas estereoisómeras puras pueden derivarse también de las formas estereoisómeras puras correspondientes de los materiales de partida apropiados, con tal que la reacción transcurra de modo estereoselectivo o estereoespecífico. Preferiblemente, si se desea un estereoisómero específico, dicho compuesto se sintetizará por métodos de preparación estereoselectivos o estereoespecíficos. Estos métodos emplearán ventajosamente materiales de partida quiralmente puros. Las formas estereoisómeras de los compuestos de fórmula (I) deben considerarse, evidentemente, incluidas dentro del alcance de la invención.

Las fórmulas quiralmente puras de los compuestos de fórmula (I) forman un grupo preferido de compuestos. Por esta razón, las formas quiralmente puras de los compuestos intermedios de fórmula (II), (III) y (VI), sus formas de N-óxido, sus formas de sal y sus aminas cuaternarias son particularmente útiles en la preparación de los compuestos quiralmente puros de fórmula (I). Asimismo, las mezclas enantioméricas y mezclas diastereoméricas de los compuestos intermedios de fórmula (II), (III) y (VI) son útiles en la preparación de compuestos de fórmula (I) con la configuración correspondiente.

Los compuestos de fórmula (I), las sales, las aminas cuaternarias y las formas estereoquímicamente isómeras de los mismos son agentes útiles para combatir los hongos in vivo. Los presentes compuestos son activos contra una gran diversidad de hongos, tales como Candida spp., v.g. Candida albicans, Candida glabrata, Candida krusei, Candida parapsilosis, Candida kefyr, Candida tropicalis; Aspergillus spp., v.g. Aspergillus fumigatus, Aspergillus niger, Aspergillus flavus; Cryptococcus neoformans; Sporothrix schenckii; Epidermophyton floccosum; Microsporum canis; Trichophyton spp., v.g. Trichophyton mentagrophytes, Trichophyton rubrum, Trichophyton quinckeanum; y varios hifomicetos dematiáceos.

Experimentos in vitro, que incluyen la determinación de la susceptibilidad fúngica de los presentes compuestos como se describe en el ejemplo farmacológico más adelante en esta memoria, indican que los compuestos de fórmula (I) tienen una capacidad inhibidora intrínseca favorable sobre el crecimiento fúngico en, por ejemplo, Trichophyton rubrum. Otros experimentos in vitro tales como la determinación de los efectos de los presentes compuestos sobre la síntesis de esteroles en, por ejemplo, Trichophyton rubrum, demuestran también su potencia antifúngica. Asimismo, en experimentos in vivo en un modelo de ratón demuestran que los presentes compuestos son antifúngicos potentes cuando se administran por vía intraperitoneal.

Teniendo en cuenta la utilidad de los compuestos de fórmula (I), se proporciona un método de tratamiento de animales de sangre caliente, con inclusión de humanos, que padecen infecciones fúngicas. Dicho método comprende la administración sistémica o tópica de una cantidad eficaz de un compuesto de fórmula (I), una forma de N-óxido, una sal, una amina cuaternaria o una forma estereoisómera posible del mismo, a animales de sangre caliente, con inclusión de humanos. Por ello, los compuestos de fórmula (I) se proporcionan para uso como medicamento, proporcionándose en particular el uso de un compuesto de fórmula (I) en la fabricación de un medicamento útil en el tratamiento de infecciones fúngicas.

La presente invención proporciona también composiciones para el tratamiento o prevención de infecciones fúngicas que comprenden una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto de fórmula (I) y un vehículo o diluyente farmacéuticamente aceptable.

Teniendo en cuenta sus útiles propiedades farmacológicas, los presentes compuestos pueden formularse en diversas formas farmacéuticas para propósitos de administración.

Para preparar las composiciones farmacéuticas de esta invención, una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto particular, en forma de base o sal de adición, como ingrediente activo, se combina en mezcla íntima con un vehículo farmacéuticamente aceptable, vehículo que puede tomar una gran diversidad de formas dependiendo de la forma de preparación deseada para administración. Estas composiciones farmacéuticas se encuentran deseablemente en forma de dosis unitaria adecuada, preferiblemente, para administración por vías oral, rectal, tópica, percutánea, transungueal o por inyección parenteral. Por ejemplo, en la preparación de las composiciones en forma de dosificación oral, puede emplearse cualquiera de los medios farmacéuticos usuales, tales como, por ejemplo, agua, glicoles, aceites, alcoholes y análogos en el caso de preparaciones orales líquidas tales como suspensiones, jarabes, emulsiones, elixires y soluciones: o vehículos sólidos tales como almidones, azúcares, caolín, lubricantes, aglomerantes, agentes desintegradores y análogos en el caso de polvos, píldoras, cápsulas y tabletas. Debido a su facilidad de administración, tabletas y cápsulas representan la forma de dosificación unitaria oral más ventajosa, en cuyo caso se emplean obviamente vehículos farmacéuticos sólidos. Como composiciones apropiadas para aplicación tópica pueden citarse todas las composiciones empleadas usualmente para administrar fármacos por vía tópica, v.g., cremas, geles, apósitos, champúes, tinturas, pastas, ungüentos, pomadas, polvos y análogos. En las composiciones adecuadas para administración percutánea, el vehículo comprende opcionalmente un agente mejorador de la penetración y/o un agente humectante adecuado, combinados opcionalmente con aditivos adecuados de cualquier naturaleza en menores proporciones, aditivos que no causen un efecto deletéreo significativo a la piel. Dichos aditivos pueden facilitar la administración a la piel y/o pueden ser útiles para preparar las composiciones deseadas. Estas composiciones pueden administrarse de diversas maneras, v.g., como un parche transdérmico, como un toque o como un ungüento.

Las composiciones transungueales se encuentran en la forma de una solución y el vehículo comprende opcionalmente un agente mejorador de la penetración que favorece la penetración del antifúngico en y a través de la capa ungueal queratinizada de la uña. El medio disolvente comprende agua mezclada con un codisolvente tal como un alcohol que tenga de 2 a 6 átomos de carbono, v.g. etanol.

Para las composiciones parenterales, el vehículo comprenderá usualmente agua estéril, al menos en gran parte. Pueden prepararse, por ejemplo, soluciones inyectables, en las cuales el vehículo comprende solución salina, solución de glucosa o una mezcla de solución salina y solución de glucosa. Pueden prepararse también suspensiones inyectables, en cuyo caso se pueden emplear vehículos líquidos, agentes de suspensión y análogos apropiados. Para las composiciones parenterales, se pueden incluir también otros ingredientes, a fin de favorecer la solubilidad, por ejemplo, v.g. ciclodextrinas. Ciclodextrinas apropiadas son \alpha-, \beta-, \gamma-ciclodextrinas o éteres y éteres mixtos de las mismas en donde uno o más de los grupos hidroxi de las unidades anhidroglucosa de la ciclodextrina están sustituidos con alquilo C_{1-6}, particularmente metilo, etilo o isopropilo, v.g. \beta-CD metilada aleatoriamente; hidroxialquilo C_{1-6}, particularmente hidroxietilo, hidroxipropilo o hidroxibutilo; carboxialquilo C_{1-6}, particularmente carboximetilo o carboxietilo; alquilcarbonilo C_{1-6}, particularmente acetilo. Especialmente dignos de mención como complejantes y/o solubilizadores son \beta-CD, \beta-CD metilada aleatoriamente, 2,6-dimetil-\beta-CD, 2-hidroxietil-\beta-CD, 2-hidroxietil-\gamma-CD, 2-hidroxipropil-\gamma-CD y (2-carboximetoxi)propil-\beta-CD, y en particular 2-hidroxipropil-\beta-CD (2-HP-\beta-CD).

El término éter mixto denota derivados de ciclodextrina en los cuales al menos dos grupos hidroxi de la ciclodextrina están eterificados con grupos diferentes tales como, por ejemplo, hidroxipropilo e hidroxietilo.

La sustitución molar (M.S.) media se utiliza como medida del número medio de moles de unidades alcoxi por mol de anhidroglucosa. El grado de sustitución (D.S.) medio se refiere al número medio de hidroxilos sustituidos por unidad de anhidroglucosa. Los valores M.S. y D.S. pueden determinarse por diversas técnicas analíticas tales como resonancia magnética nuclear (NMR), espectrometría de masas (MS) y espectroscopia infrarroja (IR). Dependiendo de la técnica utilizada, pueden obtenerse valores ligeramente diferentes para un derivado de ciclodextrina dado. Preferiblemente, cuando se mide por espectrometría de masas, el M.S. varía desde 0,125 a 10 y el D.S. varía desde 0,125 a 3.

Otras composiciones adecuadas para administración oral o rectal comprenden partículas constituidas por una dispersión sólida que comprende un compuesto de fórmula (I) y uno o más polímeros apropiados farmacéuticamente aceptables solubles en agua.

El término "una dispersión sólida" utilizado en lo sucesivo, define un sistema en un estado sólido (en oposición a un estado líquido o gaseoso) que comprende al menos dos componentes, en su caso el compuesto de fórmula (I) y el polímero soluble en agua, en donde un componente está dispersado más o menos uniformemente en la totalidad del otro u otros componentes (en el caso en que se incluyen agentes de formulación adicionales farmacéuticamente aceptables conocidos generalmente en la técnica, tales como plastificantes, conservantes y análogos). Cuando dicha dispersión de los componentes es tal que el sistema es química y físicamente uniforme u homogéneo en todas sus partes o está constituido por una sola fase como se define en termodinámica, una dispersión sólida de este tipo se denominará "una solución sólida". Las soluciones sólidas son sistemas físicos preferidos debido a que los componentes contenidos en ellos están por regla general fácilmente biodisponibles para los organismos a los que se administran. Esta ventaja puede explicarse probablemente por la facilidad con la que dichas soluciones sólidas pueden formar soluciones líquidas cuando se ponen en contacto con un medio líquido tal como los jugos gastrointestinales. La facilidad de disolución puede atribuirse al menos en parte al hecho de que la energía requerida para disolución de los componentes de una solución sólida es menor que la requerida para la disolución de los componentes de una fase sólida cristalina o microcristalina.

El término "una dispersión sólida" comprende también dispersiones que son menos homogéneas en todas sus partes que las soluciones sólidas. Tales dispersiones no son química y físicamente uniformes en todas sus partes, o comprenden más de una fase. Por ejemplo, el término "una dispersión sólida" se refiere también a un sistema que tiene dominios o pequeñas regiones en las cuales el compuesto de fórmula (I) amorfo, microcristalino o cristalino, o polímero amorfo, microcristalino o cristalino soluble en agua, o ambos, están dispersados más o menos uniformemente en otra fase que comprende polímero soluble en agua, o compuesto de fórmula (I), o una solución sólida que comprende compuesto de fórmula (I) y polímero soluble en agua. Dichos dominios son regiones dentro de la dispersión sólida marcadas distintivamente por alguna característica física, de pequeño tamaño, y distribuidas uniforme y aleatoriamente por toda la dispersión sólida.

Existen diversas técnicas para preparar dispersiones sólidas, que incluyen fusión-extrusión, pulverización-secado y solución-evaporación.

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El proceso de solución-evaporación comprende los pasos siguientes:

a)

disolver el compuesto de fórmula (I) y el polímero soluble en agua en un disolvente apropiado, opcionalmente a temperaturas elevadas;

b)

calentar la solución resultante del punto a), opcionalmente a vacío, hasta que se evapora el disolvente. La solución puede verterse también sobre una gran superficie a fin de formar una película delgada, y evaporar el disolvente de la misma.

En la técnica de pulverización-secado, los dos componentes se disuelven también en un disolvente apropiado y la solución resultante se pulveriza luego a través de la tobera de un secador de pulverización seguido por evaporación de disolvente de las gotitas resultantes a temperaturas elevadas.

La técnica preferida para preparar dispersiones sólidas es el proceso de fusión-extrusión, que comprende los pasos siguientes:

a)

mezclar un compuesto de fórmula (I) y un polímero soluble en agua apropiado,

b)

opcionalmente, mezclar aditivos con la mezcla así obtenida,

c)

calentar y preparar una composición de la mezcla así obtenida hasta que se obtiene una masa fundida homogénea,

d)

forzar la masa fundida así obtenida a través de una o más toberas; y

e)

enfriar la masa fundida hasta que se solidifica.

Los términos "masa fundida" y "fusión" deben interpretarse en sentido amplio. Estos términos no sólo significan el cambio de un estado sólido a un estado líquido, sino que pueden referirse también a una transición a un estado vítreo o estado cauchutoso, y en el cual es posible que un componente de la mezcla llegue a estar embebido más o menos homogéneamente en el otro. En casos particulares, un componente fundirá y el o los otros componentes se disolverán en la masa fundida formando así una solución que, al enfriarse, puede formar una solución sólida que tiene propiedades de disolución ventajosas.

Después de la preparación de las dispersiones sólidas como se ha descrito anteriormente en esta memoria, los productos obtenidos pueden molerse y tamizarse opcionalmente.

El producto de la dispersión sólida puede molerse o triturarse para dar partículas que tienen un tamaño de partícula menor que 600 \mum, preferiblemente menor que 400 \mum y muy preferiblemente menor que 125 \mum.

Las partículas preparadas como se describe anteriormente en esta memoria pueden formularse luego por técnicas convencionales en formas de dosificación farmacéuticas tales como tabletas y cápsulas.

Se comprenderá que una persona experta en la técnica podrá optimizar los parámetros de las técnicas de preparación de dispersiones sólidas arriba descritos, tales como el disolvente más apropiado, la temperatura de trabajo, la clase de aparato a utilizar, la velocidad de la pulverización-secado, y el régimen de producción en el extrusor de la masa fundida.

Los polímeros solubles en agua contenidos en las partículas son polímeros que tienen una viscosidad aparente, cuando se disuelven a 20ºC en una solución acuosa al 2% (p/v) de 1 a 5.000 mPa.s, más preferiblemente de 1 a 700 mPa.s, y de modo muy preferido 1 a 100 mPa.s. Por ejemplo, polímeros solubles en agua adecuados incluyen alquilcelulosas, hidroxialquilcelulosas, hidroxialquil-alquilcelulosas, carboxialquilcelulosas, sales de metal alcalino de carboxialquilcelulosas, carboxialquilalquilcelulosas, ésteres de carboxialquilcelulosa, almidones, pectinas, derivados de quitina, di-, oligo- y polisacáridos tales como trehalosa, ácido algínico o sales de metal alcalino y de amonio del mismo, carragenanos, galactomananos, tragacanto, agar-agar, goma arábiga, goma guar y goma de xantano, ácidos poliacrílicos y las sales de los mismos, ácidos polimetacrílicos y las sales de los mismos, copolímeros de metacrilato, poli(alcohol vinílico), polivinilpirrolidona, copolímeros de polivinilpirrolidona con acetato de vinilo, combinaciones de poli(alcohol vinílico) y polivinilpirrolidona, poli(óxidos de alquileno) y copolímeros de óxido de etileno y óxido de propileno. Polímeros solubles en agua preferidos son hidroxipropil-metilcelulosas.

Asimismo pueden utilizarse una o más ciclodextrinas como polímero soluble en agua en la preparación de las partículas arriba mencionadas, como se describe en WO 97/18839. Dichas ciclodextrinas incluyen las ciclodextrinas farmacéuticamente aceptables insustituidas y sustituidas conocidas en la técnica, más particularmente \alpha, \beta o \gamma-ciclodextrinas, o los derivados farmacéuticamente aceptables de las mismas.

Ciclodextrinas sustituidas que pueden utilizarse incluyen los poliéteres descritos en la Patente de EE.UU. 3.459.731. Otras ciclodextrinas sustituidas son éteres en los cuales el hidrógeno de uno o más grupos hidroxi de la ciclodextrina está reemplazado por alquilo C_{1-6}, hidroxialquilo C_{1-6}, carboxialquilo C_{1-6} o alquiloxicarbonilC_{1-6}alquilo C_{1-6}, o éteres mixtos de los mismos. En particular, tales ciclodextrinas sustituidas son éteres en los cuales el hidrógeno de uno o más grupos hidroxi de la ciclodextrina está reemplazado por alquilo C_{1-3}, hidroxialquilo C_{2-4} o carboxialquilo C_{1-2} o de modo más particular por metilo, etilo, hidroxietilo, hidroxipropilo, hidroxibutilo, carboximetilo o carboxietilo. Como se utiliza anteriormente en esta memoria, alquilo C_{1-2} representa radicales hidrocarbonados saturados de cadena lineal o ramificada que tienen 1 ó 2 átomos de carbono tales como metilo o etilo; alquilo C_{1-3} abarca los radicales hidrocarbonados saturados de cadena lineal y ramificada definidos en alquilo C_{1-2} así como el homólogo superior de los mismos que contiene 3 átomos de carbono, tal como propilo; alquilo C_{2-4} representa radicales hidrocarbonados saturados de cadena lineal o ramificada que tienen de 2 a 4 átomos de carbono tales como etilo, propilo, butilo, 1-metil-propilo, y análogos.

De particular utilidad son los éteres de \beta-ciclodextrina, v.g. dimetil-\beta-ciclodextrina como se describe en Drugs of the Future, vol. 9, No. 8, p. 577-578 por M. Nogradi (1984) y poliéteres, siendo ejemplos v.g. hidroxipropil-\beta-ciclodextrina e hidroxietil-\beta-ciclodextrina,. Un alquiléter de este tipo puede ser un metil-éter con un grado de sustitución de aproximadamente 0,125 a 3, v.g. aproximadamente 0,3 a 2. Una hidroxipropil-ciclodextrina de este tipo puede formarse por ejemplo por la reacción entre \beta-ciclodextrina y óxido de propileno y puede tener un valor MS de aproximadamente 0,125 a 10, v.g. aproximadamente 0,3 a 3. Otro tipo adecuado de ciclodextrinas sustituidas es el de las sulfobutilciclodextrinas.

La relación de ingrediente activo a ciclodextrina puede variar ampliamente. Por ejemplo, pueden aplicarse relaciones de 1/100 a 100/1. Relaciones interesantes de ingrediente activo a ciclodextrina están comprendidas entre aproximadamente 1/10 y 10/1. Relaciones más interesantes de ingrediente activo a ciclodextrina varían desde aproximadamente 1/5 a 5/1.

Adicionalmente, puede ser conveniente formular los presentes antifúngicos de benzodiazepina en la forma de nanopartículas que tienen un modificador de la superficie adsorbido en la superficie de las mismas en una cantidad suficiente para mantener un tamaño de partícula medio eficaz menor que 1000 nm. Se cree que los modificadores de la superficie útiles incluyen aquéllos que se adhieren físicamente a la superficie del agente antifúngico pero no se unen químicamente al agente antifúngico.

Los modificadores de la superficie adecuados pueden seleccionarse preferiblemente de excipientes farmacéuticos orgánicos e inorgánicos conocidos. Tales excipientes incluyen diversos polímeros, oligómeros de peso molecular bajo, productos naturales y agentes tensioactivos. Modificadores de la superficie preferidos incluyen agentes tensioactivos no iónicos y aniónicos.

Otro modo adicional interesante de formulación de los presentes compuestos implica una composición farmacéutica en la cual los presentes antifúngicos se incorporan en polímeros hidrófilos y se aplica esta mezcla como una película de recubrimiento sobre muchas cuentas pequeñas, proporcionando así una composición que puede fabricarse convenientemente y que es adecuada para preparar formas de dosificación farmacéutica para administración
oral.

Dichas cuentas comprenden un núcleo central, redondeado o esférico, una película de recubrimiento de un polímero hidrófilo y un agente antifúngico, y una capa de recubrimiento de sellado.

Materiales adecuados para uso como núcleos en las cuentas son múltiples, con la condición de que dichos materiales sean farmacéuticamente aceptables y tengan dimensiones y consistencia apropiadas. Ejemplos de tales materiales son polímeros, sustancias inorgánicas, sustancias orgánicas, y sacáridos y derivados de los mismos.

Las composiciones farmacéuticas arriba mencionadas pueden contener también una cantidad eficaz como fungicida de otros compuestos antifúngicos tales como compuestos activos sobre la pared celular. El término "compuesto activo sobre la pared celular", como se utiliza en esta memoria, significa cualquier compuesto que interfiere con la pared celular de los hongos. Compuestos antifúngicos apropiados para uso en combinación con los presentes compuestos incluyen, pero sin carácter limitante, azoles conocidos tales como fluconazol, voriconazol, itraconazol, ketoconazol, miconazol, eberconazol, ER 30346, SCH 56592, ZD-0870, UK-292663; inhibidores de la escualeno-epoxidasa tales como terbinafina y butenafina; polienos tales como anfotericina B, nistatina o formas liposómicas y lipídicas de los mismos, tales como Abelcet, AmBisome y Amphocil; inhibidores nucleotídicos de purina o pirimidina, tales como flucitosina; polioxinas y nikkomicinas, en particular nikkomicina Z o nikkomicina K y otras que se describen en el documento US-5.006.513 u otros inhibidores de quitina; inhibidores de factores de elongación tales como sordarina y análogos de la misma; inhibidores de manano tales como predamicina; productos proteínicos bactericidas/inductores de permeabilidad (BPI) tales como XMP.97 o XMP.127; agentes antifúngicos de carbohidratos complejos tales como CAN-296; inhibidores de la (1,3)-\beta-glucano-sintasa con inclusión de papulacandinas, aculeacinas, equinocandinas, v.g. caspofungina y micafungina); o protegrinas tales como IB-367.

Es especialmente ventajoso formular las composiciones farmacéuticas arriba mencionadas en forma de unidades de dosificación para facilidad de administración y uniformidad de dosificación. La forma de dosificación unitaria como se utiliza en la memoria descriptiva y las reivindicaciones adjuntas hace referencia a unidades físicamente discretas adecuadas como dosis unitarias, conteniendo cada unidad una cantidad predeterminada de ingrediente activo calculada para producir el efecto terapéutico deseado en asociación con el vehículo farmacéutico requerido. Ejemplos de tales formas de dosificación unitaria son tabletas (con inclusión de tabletas granuladas o recubiertas), cápsulas, píldoras, supositorios, paquetes de polvos, pastillas, soluciones o suspensiones inyectables, cucharaditas de té, cucharadas de mesa y análogos, y múltiplos segregados de los mismos.

Las personas con experiencia en el tratamiento de animales de sangre caliente que padecen enfermedades causadas por hongos podrían determinar fácilmente la cantidad diaria terapéuticamente eficaz a partir de los resultados de los tests presentados en esta memoria. En general, se contempla que una cantidad diaria terapéuticamente eficaz sería desde 0,05 mg/kg a 20 mg/kg de peso corporal.

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Parte experimental A. Preparación de los compuestos intermedios

Ejemplo A.1

Procedimiento general para 1-(2-cianofenil)-pirrol

Una mezcla de 2-aminobenzonitrilo (0,01 mol), 2,5-dimetoxitetrahidrofurano (0,01 mol) y ácido acético glacial (10 ml) se calentó a reflujo durante 30 minutos (comprobación por TLC). El ácido acético y el acetato de etilo formado se evaporaron y el residuo se purificó utilizando cromatografía súbita sobre gel de sílice (eluyente: CH_{2}Cl_{2}). La fracción pura se recristalizó a partir del disolvente apropiado (principalmente etanol).

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Ejemplo A.2

Procedimiento general para 1-(2-aminometil-fenil)pirrol

Método A

Reducción con hidruro de litio y aluminio

A una suspensión bien agitada de (0,05 mol) de hidruro de litio y aluminio en 100 ml de tetrahidrofurano anhidro, se añadieron (0,043 moles) de 1-(2-cianofenil)pirrol en pequeñas porciones. Se mantuvo luego la mezcla con agitación a la temperatura ambiente durante 18 horas. La adición de etanol acuoso para destruir el exceso de hidruro de litio y aluminio, seguida por filtración, proporcionó una solución, que se evaporó luego a vacío. El residuo se extrajo con éter etílico, la capa orgánica se lavó con agua y se secó sobre sulfato de sodio anhidro. La eliminación del disolvente a presión reducida proporcionó un producto bruto, que se purificó por paso a través de una columna de alúmina eluyendo con cloroformo para dar 1-(2-aminofenil)pirrol.

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Método B

Reducción con Red-Al®

A una solución agitada de dihidrobis(2-metoxietoxi)aluminato de sodio (100 ml de solución al 70% p/p en tolueno) en tolueno seco (100 ml) se añadió gota a gota, a lo largo de 1 hora, una solución de 1-(2'-cianofenil)pirrol (16,8 g, 0,1 mol) en tolueno seco. Después de 1,5 horas, se añadió cuidadosamente hidróxido de sodio acuoso (10%, 100 ml). La capa acuosa se separó y se extrajo con tolueno. Las capas orgánicas reunidas se lavaron con solución saturada de cloruro de sodio, se secaron (sulfato de magnesio) y se evaporaron, y el residuo se destiló a vacío. El producto se convirtió en su hidrocloruro por tratamiento con solución de iPrOH/HCl.

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Método C

Reducción con KBH_{4}/CF_{3}COOH

A una mezcla de borohidruro de potasio (0,55 g, 0,01 mol) y THF (10 ml), se añadió gota a gota una solución de ácido trifluoroacético (1,1 g, 0,01 mol) en THF (1 ml) a una tasa tal que la temperatura se mantuvo entre 15 y 20ºC. A la mezcla de reducción así obtenida se añadió una solución de 1-(3-cloro-2-cianofenil)pirrol (0,6 g, 0,003 mol) en THF (15 ml) a un ritmo tal que se mantuvo la temperatura de reacción entre 25 y 30ºC. La mezcla de reacción así obtenida se agitó durante 6 horas más a la temperatura ambiente. Se añadió luego agua (100 ml) y la mezcla se extrajo con CH_{2}Cl_{2} (3X), se lavó la capa orgánica con H_{2}O (2x), NaCl (1x), se secó (MgSO_{4}), se filtró y se evaporó.

El residuo se convirtió en su hidrocloruro por tratamiento con solución de iPrOH/HCl (3 ml). La recristalización en iPrOH proporcionó cristales.

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Método D

Reducción con níquel Raney

Una mezcla de 1-(3-cloro-2-cianofenil)pirrol (16,3 g, 0,08 mol), RaNi (2 g,) y tiofeno (2 ml) en metanol saturado con amoniaco (250 ml) se enfrió hasta cerca de 14ºC y se hidrogenó a la presión atmosférica. Después de la absorción de dos equivalentes de hidrógeno, el catalizador se separó por filtración y se evaporó el disolvente. El residuo se convirtió en su hidrocloruro por tratamiento con solución de iPrOH/HCl (16 ml). Además del producto buscado, se formó también producto deshalogenado como producto secundario menor.

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Ejemplo A.3

Procedimiento específico para 1-(2'-aminometil)-3'-clorofenil)pirrol

Una solución de 2-amino-6-cloro-benzonitrilo (30 g), 2,5-dimetoxitetrahidrofurano (30 g) y 4-cloropiridinahidro-cloruro (17 g) en dioxano se calentó a 70ºC durante 2,5 horas. El disolvente se evaporó a vacío. Se añadió luego diclorometano al residuo, y el hidrocloruro de 4-cloropiridina agotado se separó por filtración. El diclorometano se evaporó a vacío para dar 1-(3'-cloro-2'-cianofenil)pirrol (35 g).

Se añadió gota a gota una solución de 1-(3'-cloro-2'-cianofenil)pirrol (10 g) en solución de dietil-éter a una solución de hidruro de litio y aluminio 1M en solución etérea (100 ml) bajo nitrógeno gaseoso. Una vez completada la adición, la mezcla de reacción se calentó a reflujo durante 2 h, y se dejó luego en agitación a la temperatura ambiente durante una noche (18 h). La mezcla se extinguió subsiguientemente con agua (4 ml), NaOH 2N (8 ml) y agua (16 ml). Se continuó la agitación durante 1 hora más después de la adición. Las sales cristalinas se filtraron y el filtrado se secó sobre sulfato de magnesio anhidro. Después de filtrar, el filtrado etéreo se evaporó a vacío para dar el compuesto del título (9,4 g) como un aceite incoloro.

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B. Preparación de los compuestos finales

Ejemplo B1

Procedimiento general

Una solución de (0,05 mol) de 1-(2-aminometilfenil)pirrol y un aldehído (0,05 mol) en etanol (100 ml) se calentó a reflujo durante 4 horas. La solución se evaporó y el residuo se disolvió en éter y se añadió cloruro de hidrógeno etéreo. Después de agitar durante 30 minutos, el precipitado se separó por filtración y se recristalizó en un alcohol apropiado.

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Ejemplo B.2

Procedimiento general para alquilación de 7-cloro-5,6-dihidro-4H-pirrolo[1,2-a][1,4]benzodiazepina

Una solución del haluro de alquilo apropiado (1 mmol) en CH_{3}CN (5 ml) se añade gota a gota a una solución de 7-cloro-5,6-dihidro-4H-pirrolo[1,2-a][1,4]benzodiazepina (1 mmol) y trietilamina (1 mmol) en CH_{3}CN (5 ml) a la temperatura ambiente. Después de agitar a la temperatura ambiente durante 1 a 48 horas, la mezcla se evapora a vacío y se somete a cromatografía en columna sobre gel de sílice.

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Ejemplo B.3

Procedimiento específico para 4-(4'-etilfenil)-5-metil-7-clorobenzo[1,2]-pirrolo-[1,2-a][1,4]-diazepina

Una solución de 1-(2'-aminometil)-3'-fluorofenil)-pirrol (1,5 g) y 4-etilbenzaldehído (1 g) en etanol se calentó a reflujo durante 2 horas. La solución se enfrió a 0ºC y se añadió gota a gota una solución de ácido bromhídrico concentrado (45%) (4 ml) en ácido acético glacial (9 ml). La solución se agitó a la temperatura ambiente durante 1 hora más, después de lo cual el compuesto (2) se separó por filtración (2,2 g). El compuesto (2) (0,5 g) se añadió a una solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio que contenía una pequeña cantidad de metanol. Se añadió un ligero exceso de sulfato de dimetilo y la mezcla de reacción se agitó a la temperatura ambiente durante 30 minutos. El sólido resultante se filtró, se secó y se purificó utilizando una columna de gel de sílice y empleando diclorometano como eluyente para dar el compuesto (10) (0,17 g) como un sólido blanco.

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Ejemplo B.4

Procedimiento para el compuesto 21

Una solución de compuesto (13) se agitó durante 3 días a la temperatura ambiente en diclorometano en presencia de un exceso de dióxido de manganeso. La suspensión se filtró y el filtrado se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice, proporcionando un aceite viscoso.

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Ejemplo B.5

Procedimiento para la resolución de (2) en los compuestos (24) y (29)

Una mezcla de hidrocloruro de 1-(2-aminometil-3-clorofenil)pirrol (preparado de acuerdo con A.2, método D) (0,024 mol) y 4-etilbenzaldehído (0,024 mol) en EtOH (50 ml) se agitó y se mantuvo a reflujo durante 2 horas. La mezcla se cristalizó durante la noche. Los cristales se separaron por filtración y se lavaron 3 veces con EtOH (10 ml) y se secaron luego (vacío, 60ºC). Rendimiento: 4,7 g. El residuo se purificó por cromatografía líquida de alta resolución sobre Chiralpak AD (eluyente: 100% EtOH). Las fracciones de producto se recogieron y se evaporó el disolvente. El rendimiento de fracción A (0,968 g) y de fracción B (0,92 g) se convirtió en la sal de ácido clorhídrico (1:1) con 2-propanol y HCl (6N), se separó por filtración y se secó. Rendimiento: 0,911 g de compuesto 29 (11,5%) y 0,861 g de compuesto 24 (11%).

Siguiendo los ejemplos anteriores, se han preparado los compuestos siguientes.

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(Tabla pasa a página siguiente)

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TABLA 1

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6

C. Ejemplos farmacológicos

Ejemplo C.1

Medida de la actividad antifúngica in vitro

Los compuestos de test se disolvieron a una concentración de 10^{-2} M en dimetilsulfóxido (DMSO) y se diluyeron en caldo CYG (Odds, F.C. Antimicrobial Agents and Chemotherapy 1992; 36: 1727-1737) para dar una concentración final de 10, 3,2, 1, 0,32, 0,1, 0,03, 0,01, 0,003 y 0,001 \muM. Para algunos compuestos, los tests se realizaron a concentraciones intermedias. Se inocularon cultivos con Candida kefyr hasta una concentración inicial de 10^{4}/ml y con las otras especies fúngicas hasta una concentración equivalente determinada por turbidimetría. Los cultivos se incubaron en los pocillos de placas de microdilución a 37ºC durante 48 h (C. kefyr) y a 30ºC durante 5-7 días (T. rubrum). El crecimiento en los pocillos que contenían los compuestos de test se estimó turbidimétricamente como porcentaje del crecimiento en los controles exentos de compuestos y la concentración mínima de compuesto que inhibía el crecimiento de un aislado por debajo de 35% del crecimiento del control se registró como la dosis activa mínima (LAD).

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Ejemplo C.2

Determinación de la susceptibilidad fúngica

Se utilizó un panel de aislados individuales de los dermatofitos Sporothrix schenckii; Microsporum canis; Trichophyton rubrum; Trichophyton mentagrophytes; Candida parapsilosis; Cryptococcus neoformans, y Aspergillus fumigatus para evaluar la actividad de los compuestos de test in vitro. Se prepararon inóculos como cultivos de caldo (levaduras) o como suspensiones de material fúngico producidas a partir de cultivos en pico de flauta en agar (mohos). Los compuestos de test se pipetearon en agua a partir de una solución stock en dimetilsulfóxido para proporcionar una serie de diluciones al décuplo. Los inóculos fúngicos se suspendieron en el medio de crecimiento CYG (F.C. Odds, Journal of Clinical Microbiology, 29, 2735-2740, 1991) a aproximadamente 50.000 unidades formadoras de colonias (CFU) por ml y se añadieron a los fármacos de test acuosos.

Los cultivos se dispusieron en los 96 pocillos de placas de microdilución de plástico y se incubaron en ellas durante 2 días a 37ºC (Candida spp.) o durante 5 días a 30ºC (otros hongos). El crecimiento en los microcultivos se medió por su densidad óptica (DO) medida a una longitud de onda de 405 nm. La DO para los cultivos con compuestos de test se calculó como un porcentaje de la DO para los cultivos de control, es decir, la DO para los cultivos sin compuestos de test. La inhibición del crecimiento hasta un 35% del control o menos se registró como inhibición significativa.

La concentración inhibidora mínima (MIC; en 10^{-6} M) de algunos de los compuestos de fórmula (I) para las especies testadas se da en la Tabla.

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TABLA 2a

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TABLA 2b

10

TABLA 2c

11

TABLA 2d

12

TABLA 2e

14

TABLA 2f

15

TABLA 2g

17

D. Ejemplo de composición

"Ingrediente activo" (I.A.), como se utiliza a lo largo de estos ejemplos se refiere a un compuesto de fórmula (I), un N-óxido, una sal, una amina cuaternaria o una forma estereoquímicamente isómera del mismo.

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Ejemplo D.1

Solución inyectable

Se disolvieron 1,8 gramos de 4-hidroxibenzoato de metilo y 0,2 gramos de hidróxido de sodio en aproximadamente 0,5 l de agua hirviente para inyección. Después de enfriar a aproximadamente 50ºC, se añadieron mientras se agitaba 0,05 gramos de propilenglicol y 4 gramos del ingrediente activo. La solución se enfrió a la temperatura ambiente y se suplementó con agua para inyección en cantidad suficiente hasta 1 litro, dando una solución que comprendía 4 mg/ml de ingrediente activo. La solución se esterilizó por filtración y se llenó en recipientes estériles.

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Ejemplo D2

Composición transungeal

Se añadieron 0,144 g de KH_{2}PO_{4}, 9 g de NaCl, 0,528 g de Na_{2}HPO_{4}.2H_{2}O a 800 ml de H_{2}O y se agitó la mezcla. El pH se ajustó a 7,4 con NaOH y se añadieron 500 mg de NaN_{3}. Se añadió etanol (42% v/v) y se ajustó el pH a 2,3 con HCl. Se añadieron 15 mg de ingrediente activo a 2,25 ml de PBS (solución salina tamponada con fosfato)/etanol (42%; pH 2,3) y la mezcla se agitó y se trató por ultrasonidos hasta que se hubo disuelto todo el ingrediente activo, proporcionando la composición transungeal deseada.

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Ejemplo D3

Gotas orales

Se disolvieron 500 gramos del I.A. en 0,5 l de una solución de hidróxido de sodio y 1,5 l de polietilen-glicol a 60\sim80ºC. Después de enfriar a 30\sim40ºC, se añadieron 35 l de polietilenglicol y la mezcla se agitó convenientemente. Se añadió luego una solución de 1750 gramos de sacarina sódica en 2,5 l de agua purificada y, mientras se agitaba, se añadieron 2,5 l de esencia de coco y polietilenglicol en cant. suf. hasta un volumen de 50 l, proporcionando una solución de gotas orales que comprendía 10 mg/ml de I.A.. La solución resultante se introdujo en envases adecuados.

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Ejemplo D.4

Cápsulas

20 gramos del I.A., 6 gramos de laurilsulfato de sodio, 56 gramos de almidón, 56 gramos de lactosa, 0,8 gramos de dióxido de silicio coloidal, y 1,2 gramos de estearato de magnesio se agitaron enérgicamente juntos. La mezcla resultante se introdujo subsiguientemente en 1000 cápsulas de gelatina endurecida adecuadas, cada una de las cuales comprendía 20 mg del ingrediente activo.

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Ejemplo D5

Tabletas recubiertas de película Preparación del núcleo de la tableta

Una mixtura de 100 gramos del I.A., 570 gramos de lactosa y 200 gramos de almidón se mezcló convenientemente y se humidificó después con una solución de 5 gramos de dodecilsulfato de sodio y 10 gramos de polivinilpirrolidona en aproximadamente 200 ml de agua. La mezcla de polvo húmeda se tamizó, se secó y se tamizó nuevamente. Se añadieron luego 100 gramos de celulosa microcristalina y 15 gramos de aceite vegetal hidrogenado. Se mezcló bien el todo y se comprimió en tabletas, obteniéndose 10.000 tabletas, cada una de las cuales contenía 10 mg del ingrediente activo.

Recubrimiento

A una solución de 10 gramos de metilcelulosa en 75 ml de etanol desnaturalizado se añadió una solución de 5 gramos de etilcelulosa en 150 ml de diclorometano. Se añadieron luego 75 ml de diclorometano y 2,5 ml de 1,2,3-propanotriol. Se fundieron 10 gramos de polietilenglicol y se disolvieron en 75 ml de diclorometano. La última solución se añadió a la primera y se añadieron luego 2,5 gramos de octadecanoato de magnesio, 5 gramos de polivinilpirrolidona y 30 ml de suspensión concentrada de colorante, y se homogeneizó el todo. Los núcleos de las tabletas se recubrieron con la mezcla así obtenida en un aparato de recubrimiento.

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Ejemplo D6

Crema al 2%

Se introducen alcohol estearílico (75 mg), alcohol cetílico (20 mg), monoestearato de sorbitán (20 mg) y miristato de isopropilo (10 mg) en un recipiente encamisado de paredes dobles y se calientan hasta que la mezcla se ha fundido completamente. Se añade esta mezcla a una mixtura preparada por separado de agua purificada, propilenglicol (200 mg) y polisorbato 60 (15 mg) que tiene una temperatura de 70 a 75ºC utilizando un homogeneizador para líquidos. La mezcla resultante se deja enfriar hasta por debajo de 25ºC mientras se agita continuamente. Se añade a continuación a la emulsión una solución de I.A. (20 mg), polisorbato 80 (1 mg) y agua purificada en cant. suf. hasta 1 g y una solución de sulfito de sodio anhidro (2 mg) en agua purificada, mientras se agita continuamente. La crema se homogeneíza y se introduce en tubos adecuados.

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Ejemplo D7

Crema al 2%

Una mezcla de I.A. (2 g), fosfatidil-colina (20 g), colesterol (5 g) y alcohol etílico (10 g) se agita y se calienta a 55-60ºC hasta disolución completa y se añade a una solución de metil-parabén (0,2 g), propil-parabén (0,02 g), edetato disódico (0,15 g) y cloruro de sodio (0,3 g) en agua purificada (hasta 100 g) mientras se homogeneíza. Se añade hidroxipropilmetilcelulosa (1,5 g) en agua purificada y se continúa la mezcladura hasta que se completa el hinchamiento.

Claims (6)

1. Uso de un compuesto de fórmula (I) para la fabricación de un medicamento para tratamiento de infecciones fúngicas, teniendo dicho compuesto la fórmula

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18

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una forma de N-óxido, una sal, una amina cuaternaria o formas estereoquímicamente isómera de la misma, en donde

R^{1}

representa hidrógeno, alquilo C_{1-6}, alquiltio C_{1-4}, al-quiloxiC_{1-4} o halo;

R^{2}

representa hidrógeno o alquilo C_{1-6};

R^{3}

representa fenilo sustituido con halo, ciano, alquil-oxiC_{1-4}, alquiltio C_{1-4}, alquilo C_{1-6}, haloalquilo C_{1-6}; 2-tienilo; o 3-tienilo; y

R^{4}

es hidrógeno; o

\quad

R^{2} y R^{4} forman un enlace adicional.

2. Uso de un compuesto de fórmula (I) de acuerdo con la reivindicación 1, en donde

R^{1}

representa hidrógeno, alquilo C_{1-6} o halo;

R^{2}

representa hidrógeno o alquilo C_{1-6};

R^{3}

representa fenilo sustituido con halo, ciano, alquiloxiC_{1-4}, alquilo C_{1-6}, haloalquilo C_{1-6}; 2-tienilo o 3-tienilo, y

R^{4}

representa hidrógeno; o R^{2} y R^{4} forman un enlace adicional.

3. Uso de un compuesto de fórmula (I) de acuerdo con la reivindicación 1 en donde

R^{1}

representa hidrógeno o halo;

R^{2}

representa hidrógeno o alquilo C_{1-6};

R^{3}

representa fenilo sustituido con alquilo C_{1-6}; y

R^{4}

representa hidrógeno; o R^{2} y R^{4} forman un enlace adicional.

4. Uso de un compuesto de fórmula (I) de acuerdo con la reivindicación 1 en donde

R^{2}

representa hidrógeno, 7-cloro- 7-fluoro o 9-cloro;

R^{2}

representa hidrógeno;

R^{3}

representa fenilo sustituido con alquilo C_{1-6}; y

R^{4}

representa hidrógeno; o R^{2} y R^{4} forman un enlace adicional.

5. Una composición farmacéutica que comprende un vehículo farmacéuticamente aceptable, y como ingrediente activo una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto como se define en una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4.

6. Un proceso para preparar una composición de acuerdo con la reivindicación 5, caracterizado porque un vehículo farmacéuticamente aceptable se mezcla íntimamente con una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto como se define en una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4.