ES2324871T3 - 1h-pirrolo(3,2-b, 3,2-c, y 2,3-c)piridina-2-carboxamidas sustituidas y analogos relacionados como inhibidores de caseina quinasa i epsilon. - Google Patents

Abstract

Un compuesto de fórmula (I)** ver fórmula** en la que: R1 es H o alquilo C1-6; R2 es NR5R6; R3 es un arilo que es un anillo de carbonos monocíclico, bicíclico o tricíclico de hasta 7 miembros en cada anillo, y en el que al menos un anillo es aromático, estando dicho arilo opcionalmente sustituido con 1 a 3 sustituyentes seleccionados del grupo que consiste en metilendioxi, hidroxi, alcoxi C 1-6, halógeno, alquilo C 1-6, alquenilo C 2-6, alquinilo C 2-6, trifluorometilo, trifluorometoxi, -NO 2, -NH 2, -NH(alquilo C 1-6), -N(alquilo C 1-6) 2, -NH-acilo y -N(alquil C 1-6) acilo, siendo dicho grupo acilo un grupo hidrocarburo alifático saturado que tiene de 1 a 6 átomos de carbono, unido a un resto carbonilo; un heterociclo monocíclico C5-7 o un heterociclo bicíclico C8-11, teniendo dicho heterociclo de 1 a 3 heteroátomos seleccionados del grupo que consiste en N, O y S, y estando dicho heterociclo opcionalmente sustituido con 1 a 3 sustituyentes seleccionados del grupo que consiste en alcoxi C 1-6, hidroxi, halógeno, alquilo C 1-6, alquenilo C 2-6, alquinilo C 2-6, trifluorometilo, trifluorometoxi, -NO 2, -NH 2, -NH(alquilo C 1-6), -N(alquilo C 1-6) 2, -NH-acilo, y -N(alquil C1-6)acilo, siendo dicho grupo acilo un grupo hidrocarburo alifático saturado que tiene de 1 a 6 átomos de carbono unido a un resto carbonilo; R 4 es H, alquilo C 1-6, alquenilo C 2-6, alquinilo C 2-6, alcoxi C 1-6, CF 3, halógeno, SH, S-alquilo C 1-6, NO 2, NH 2 o NR5R6; R5 es H o alquilo C1-6; R 6 es H o alquilo C 1-6; X es S o S(O)n; uno de K, L o M es N y los otros dos miembros de K, L o M son cada uno C en los que R 4 está unido solo a un átomo K, L, M u otro átomo del anillo que sea C; m es 1, 2 ó 3; y n es 1 ó 2; o una de sus sales o estereoisómeros farmacéuticamente aceptable.

Description

1H-pirrolo[3,2-b, 3,2-c, y 2,3-c]piridina-2-carboxamidas sustituidas y análogos relacionados como inhibidores de caseína quinasa I\varepsilon.

Antecedentes de la invención 1. Campo de la invención

La presente invención se refiere a una serie de 1H-pirrolo[3,2-b]piridina-2-carboxamidas, 1H-pirrolo[3,2-c]piridina-2-carboxamidas y 1H-pirrolo[2,3-c]piridina-2-carboxamidas sustituidas. Más específicamente, la invención se refiere a 1H-pirrolo[3,2-b]piridina-2-carboxamidas, 1H-pirrolo[3,2-c]piridina-2-carboxamidas y 1H-pirrolo[2,3-c]piridina-2-carboxamidas sustituidas con 3-ariltio y 3-heterociclotio, y análogos relacionados. La invención también se refiere a métodos para preparar estos compuestos. Los compuestos de la invención son inhibidores de la actividad de fosforilación por la caseína quinasa humana I\varepsilon, y por lo tanto, son útiles como agentes farmacéuticos, especialmente en el tratamiento y/o prevención de enfermedades y trastornos asociados con el sistema nervioso central.

2. Descripción de la técnica

Muchos organismos, que varían desde células sencillas hasta el ser humano, presentan variaciones rítmicas en el comportamiento. Cuando el ritmo persiste en condiciones constantes y tiene un periodo de aproximadamente un día, dependiendo un poco de la temperatura, el ritmo se denomina "circadiano" (Konopka, R.J. y Benzer, S. (1971) Proc. Nat. Acad. Sci. USA 68, 2112-2116).

Los ritmos circadianos son generados por marcapasos biológicos endógenos (relojes circadianos) y están presentes en la mayoría de los organismos vivos, incluyendo seres humanos, hongos, insectos y bacterias (Dunlap, J.C. (1999) Cell 96, 271-290; Hastings, J.W. et al. Circadian Rhythms, The Physiology of Biological Timing. En: Prosser, C.L. ed. Neural and Integrative Animal Physiology, New York: Wiley-Liss (1991) 435-546; Allada, R. et al. (1998) Cell 93, 791-804; Kondo et al. (1994) Science 266, 1233-1236; Crosthwaite, S.K. et al. (1997) Science 276, 763-769; Shearman, L.P. et al. (1997) Neuron, 19, 1261-1269). Los ritmos circadianos se automantienen y son constantes incluso en condiciones de oscuridad total, pero pueden sincronizarse (entrar) en un nuevo régimen día/noche por señales ambientales tales como ciclos de luz y temperatura (Pittendrigh, C.S. (1993) Annu. Rev. Physiol., 55, 16-54; Takahashi, J. S. (1995) Annu. Rev. Neurosci. 18, 531-553; Albrecht, U. et al. (1997) Cell, 91, 1055-1064). Los relojes circadianos son esenciales para mantener los ritmos biológicos y regular una variedad de comportamientos circadianos, tales como las fluctuaciones diarias en el comportamiento, ingestión de alimentos y ciclos de sueño/vigilia, así como cambios fisiológicos, tales como la secreción de hormonas y fluctuaciones en la temperatura corporal (Hastings, M. (1997) Trends Neurosci. 20,459-464; Reppert, S.M. y Weaver, D.R. (1997) Cell 89, 487-490).

Estudios genéticos y moleculares de la mosca de la fruta Drosophila melanogaster condujeron al esclarecimiento de algunos de los genes implicados en los ritmos circadianos. Estos estudios condujeron al reconocimiento de una ruta que está muy auto-regulada y compuesta por un bucle de retroalimentación negativa basada en la transcripción/traducción (Dunlap, J.C. (1999) Cell, 96, 271-290; Dunlap, J.C. (1996) Annu. Rev. Genet. 30,579-601; Hall, J.C. (1996) Neuron, 17, 799-802). Los elementos nucleares del oscilador circadiano en Drosophila consisten en dos proteínas estimuladoras dCLOCK/dBMAL (CYCLE) y dos proteínas inhibidoras dPERIOD (dPER) y dTIMELESS (dTIM). dCLOCK y dBMAL heterodimerizan formando el factor de transcripción dCLOCK/dBMAL que promueve la expresión de dos genes que se denominan Drosophila Period (dper) y Drosophila Timeless (dtim). Finalmente, se transcriben los ARNm de estos genes para producir las proteínas dPER y dTIM, respectivamente. Durante varias horas, los productos proteicos dPER y dTIM se sintetizan y fosforilan en el citoplasma, alcanzan un nivel crítico y forman heterodímeros que se translocan al núcleo. Una vez en el núcleo, dPER y dTIM funcionan como reguladores negativos de su propia transcripción, disminuye la acumulación de dPER y dTIM y comienza de nuevo la activación de dper y dtim por dCLOCK/dBMAL (Zylka, M.J. et al. (1998) Neuron 20, 1103-1110; Lowrey, P.L. et al. (2000) 288, 483-491). Se ha demostrado que el gen dper es un elemento necesario para controlar los ritmos circadianos en el comportamiento de eclosión de adultos (la aparición de la mosca adulta desde la pupa) y la actividad locomotora (Konopka, R.J., & Benzer, S. (1971) Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 68, 2112-2116). Algunas mutaciones de sentido alterado del gen per pueden acortar (per^{S}) o alargar (per^{L}) el periodo de ritmos circadianos, mientras que algunas mutaciones interruptoras (perº) producen una arritmicidad en sus comportamientos (Hall, J.C. (1995) Trends Neurosci. 18, 230-240).

En mamíferos, los núcleos supraquiasmáticos (SCN) del hipotálamo anterior son el sitio de un reloj biológico principal (como revisión, véase Panda et al., (2002) Nature 417, 329 - 335; Reppert, S. M. y Weaver, D. R. (1997) Cell 89, 487-490). El reloj de los SCN se embarca en el día de 24 horas por el ciclo diario de luz-oscuridad, actuando la luz a través de rutas de retina a SCN tanto directas como indirectas (Klein, D.C. et al. (1991) Suprachiasmatic Nuclei: The Mind's Clock, Oxford Univeristy Press, New York). En los SCN de roedores, se han identificado y clonado tres genes Per, y se denominan Per1 de ratón (mPer1), mPer2 y mPer3. Las proteínas producto de estos genes de mamífero (mPER1, mPER2, mPER3) comparten varias regiones de homología entre ellas y cada gen Per de mamífero codifica una proteína con un dominio de dimerización de proteínas denominado PAS (PAS es un acrónimo de las tres primeras proteínas, PER, ARNT y SIM, encontradas que comparten este dominio de dimerización importante desde el punto de vista funcional) que es muy homólogo con el dominio PAS del PER de insectos. Todos los niveles de proteína y de ARN mensajero (ARNm) de Per oscilan durante el día circadiano y están implicados íntimamente en la regulación tanto positiva como negativa del reloj biológico, pero sólo mPER1 y mPER2 oscilan en respuesta a la luz (Zylka, M.J. et al. (1998) Neuron 20, 1103-1110; Albrecht, U. et al., (1997) Cell 91, 1055-1064; Shearman, L.P. et al. (1997) Neuron 19, 1261-1269). Se ha clonado el homólogo en mamíferos del gen Drosophila tim y se ha denominado mTim. Sin embargo, no había pruebas de interacciones mPER-mTIM análogas a las observadas en Drosophila, y se sugirió que las interacciones PER-PER pueden haber reemplazado la función de dímeros PER-TIM en las tareas moleculares del reloj circadiano de mamíferos (Zylka, M.J. et al., (1998) Neuron 21, 1115-1122). Otra posibilidad es que los ritmos en PER1 y PER2 forman bucles de retroalimentación negativa que regulan la actividad transcripcional de la proteína Clock (a través de sus dominios PAS) que, a su vez, dirige la expresión de uno o los dos genes Per (Shearman, L.P. et al. (1997) Neuron 19, 1261-1269).

La comprensión de las funciones de los tres genes mPer en el reloj de los mamíferos ha sido el objeto de muchas investigaciones. La homología estructural de las proteínas mPER con dPER condujo a la expectativa de que las proteínas mPER funcionaran como elementos negativos en el bucle de retroalimentación de mamíferos. Se cree que PER1 está implicada en la regulación negativa de su propia transcripción en el ciclo de retroalimentación, pero pruebas recientes indican que está implicada en la ruta de entrada (Hastings, M.H. et al. (1999) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 26, 15211-15216). PER2 es la proteína mejor caracterizada, y los ratones mutantes en mPER2 (mPer2^{Brdm1}), que carecen de 87 restos en la parte carboxilo del dominio de dimerización PAS, tienen un ritmo circadiano acortado en situaciones normales de luz-oscuridad, pero muestran arritmicidad en la oscuridad completa. La mutación también disminuye la expresión oscilante tanto de mPer1 como de mPer2 en los SCN, indicando que mPer2 puede regular mPer1 en vivo (Zheng, B. et al. (1999) Nature 400, 169-173). Se ha demostrado que PER2 tiene una función doble en la regulación de los "engranajes" del reloj central (Shearman, L.P. et al. (2000) Science 288, 1013-1018). En ese estudio, se demostró que PER2 se unía a proteínas del criptocromo (CRY) y se translocaba al núcleo, donde CRY regulaba negativamente la transcripción dirigida por los complejos transcripcionales positivos CLOCK y BMAL1. Tras la entrada en el núcleo, PER2 iniciaba el brazo positivo del reloj regulando positivamente la transcripción de BMAL1 por un mecanismo aún no identificado. La función de la PER3 se comprende mal; sin embargo, en ratones en los que se ha inactivado mPer3, se observa un ligero efecto sobre la actividad circadiana y, por lo tanto, se ha sugerido que PER3 está implicada en las rutas de salida de control circadiano (Shearman, L.P. et al. (2000) Mol. Cell. Biol. 17, 6269-6275). Se ha descrito que las proteínas mPER interaccionan entre sí y que mPER3 puede servir como transportador de mPER1 y mPER2 para llevar estas proteínas al núcleo, lo cual es crítico para la generación de señales circadianas en el SNC (Kume, K. et al. (1999) Cell 98, 193-205; Takano, A. et al. (2000), FEBS Letters, 477, 106-112).

Se ha postulado que la fosforilación de los componentes del reloj circadiano regula la duración del ciclo. La primera prueba genética de que una proteína quinasa específica regula el ritmo circadiano de la Drosophila fue el descubrimiento del nuevo gen doubletime (dbt), que codifica un proteína serina/treonina quinasa (Price J. L. et al. (1998) Cell 94, 83-95; Kloss B. et al. (1998) Cell 94, 97-107). Algunas mutaciones de sentido alterado en el dbt producen una alteración del ritmo circadiano. Los alelos nulos de dbt ocasionan la hipofosforilación de dPER y arritmia.

Las quinasas de mamífero más relacionadas con DBT son la caseína quinasa I\varepsilon (CKI\varepsilon) y la caseína quinasa I\delta (CKI\delta). Se ha demostrado que ambas quinasas se unen a mPER1, y varios estudios han demostrado que la CKI\varepsilon fosforila tanto la PER1 de ratón como la humana (Price J. L. et al. (1998) Cell 94, 83-95; Kloss B. et al. (1998) Cell 94, 97-107). En un estudio con células 293T de riñón embrionario humano co-transfectadas con hCKI\varepsilon de tipo salvaje, hPER1 mostró un aumento significativo de fosforilación (puesto de manifiesto por un cambio en la masa molecular). En este estudio, la hPER1 fosforilada tenía una vida media de aproximadamente doce horas, mientras que la hPER1 no fosforilada permanecía estable en la célula durante más de 24 horas, lo que sugería que la fosforilación de hPER1 conduce a una reducción de la estabilidad de la proteína (Kessler, G.A. et al. (2000) NeuroReport, 11, 951-955). Otro estudio también demostró que las consecuencias de la fosforilación de PER1 por hCKI\varepsilon incluyen tanto la retención citoplásmica, translocación nuclear como la inestabilidad de la proteína (Vielhaber, E. et al. (2000) Mol. Cell. Biol. 13, 4888-4899, Takano, A. et al. (2000) FEBS Letters 477, 106-112).

No había ninguna razón bioquímica para elegir entre CKI\varepsilon o CKI\delta como posible regulador en mamíferos hasta que Lowery et al. [(2000) Science 288, 483-491] descubrieron que en el hámster dorado sirio, mutaciones semidominantes en CKI\varepsilon (mutación tau, Ralph, M.R. y Menaker, M. (1988) Science 241, 1225-1227) producían un acortamiento del día circadiano tanto en animales heterocigotos (22 h) como homocigotos (20 h). En este caso, los niveles reducidos de actividad CKI\varepsilon dieron como resultado menor fosforilación de PER con niveles presumiblemente mayores de proteína PER citoplásmica que conducían a una mayor entrada nuclear y una alteración de los ciclos circadianos. Más recientemente, se ha sugerido que CKI\delta también puede estar implicada en la regulación de la ritmicidad circadiana por medio de la modificación postraduccional de las proteínas del reloj de los mamíferos hPER1 y hPER2 [Camacho, F. et al., (2001) FEBS Letters 489(2,3), 159-165]. Por lo tanto, moléculas pequeñas inhibidoras de CKI\varepsilon y/o CKI\delta proporcionan un medio nuevo para alterar el ritmo circadiano. Como se describe más adelante, la alteración del ritmo circadiano puede encontrar utilidad para el tratamiento de trastornos del sueño o del estado de ánimo.

La patente de Estados Unidos 6.555.328 B1 describe métodos de selección en las células para identificar compuestos que alteran los ritmos circadianos basados en un compuesto de ensayo que altera la capacidad de la caseína quinasa 1\varepsilon humana y/o la caseína quinasa 1\delta humana para fosforilar las proteínas del reloj humano hPER1, hPER2 y hPER3, Por ejemplo, se cotransfectan células HEK293T con hCKI\varepsilon y Per1 o Per2. Para evaluar la relevancia de la inhibición de CKI\varepsilon y de los inhibidores de CKI\varepsilon en la biología circadiana, se desarrolló un ensayo celular de alta producción (33rd Annual Meeting, Soc. for Neurosci., 8-12 de noviembre de 2003, Abstract números 284.1, 284.2, y 284.3) en el que podía controlarse el ritmo circadiano de una manera rutinaria. El ensayo consiste en fibroblastos Rat-1 que expresan de manera estable una construcción Mper1-luc, con lo que se permite la determinación de la activación rítmica del promotor de Mper1 en células vivas por medio de la estimación repetida de la actividad de luciferasa a través del control de la producción de luz durante varios días. El formato de medición repetida del ensayo permite una evaluación precisa y reproducible de los efectos dependientes de la concentración de inhibidores de CKI\varepsilon sobre el ritmo circadiano y proporciona el nexo para relacionar la inhibición de CKI\varepsilon con la alteración del ritmo circadiano.

Los trastornos del sueño se han clasificado en cuatro categorías principales que incluyen trastornos del sueño primarios (disomnias y parasomnias), trastornos del sueño asociados con trastornos médicos/psiquiátricos y una categoría propuesta de trastornos del sueño que no pueden clasificarse debido a que no se dispone de suficientes datos. Se cree que los trastornos del sueño primarios se producen por anormalidades en los sistemas intrínsecos responsables de la generación de sueño-vigilia (sistema homeostático) o la temporización (sistema circadiano). Las disomnias son trastornos en el inicio o mantenimiento del sueño e incluyen insomnio primario, hipersomnia (somnolencia excesiva), narcolepsia, trastorno del sueño relacionado con la respiración, trastorno del sueño del ritmo circadiano y disomnias no especificadas de otra manera. El insomnio primario se caracteriza por la persistencia (>1 mes) en la dificultad de iniciar y mantener el sueño o de mantener un sueño reconstituyente. Las dificultades en el sueño asociadas con el insomnio primario ocasionan desasosiego o molestias significativas, incluyendo irritabilidad durante el día, pérdida de atención y concentración, fatiga y malestar, y deterioro del estado de ánimo y la motivación. Los trastornos del sueño del ritmo circadiano incluyen síndrome de desfase horario, trastorno del sueño por cambio de turno, síndrome de la fase del sueño avanzada y síndrome de fase del sueño retardada (J. Wagner, M.L. Wagner y W.A. Hening, Annals of Pharmacotherapy (1998) 32, 680-691). Los individuos en un paradigma de sueño forzado demuestran un gran desvelo, como un porcentaje del tiempo de sueño, en ciertos periodos del día circadiano (Dijk y Lockley, J. Appl. Physiol. (2002) 92, 852-862). Generalmente se ha aceptado que con la edad hay un avance en nuestro ritmo circadiano de sueño y a menudo esto tiene como resultado un sueño de menor calidad (Am. J. Physiol. Endocrinol. Metab. (2002) 282, E297-E303). De esta manera, el sueño que sucede fuera de la fase circadiana puede sufrir en términos cualitativos y cuantitativos, como se ilustra adicionalmente por alteraciones del sueño por cambio de turno y de desfase horario. La alteración del reloj circadiano humano puede causar trastornos del sueño y los agentes que modulan la ritmicidad circadiana, tales como un inhibidor de CKI\varepsilon y/o CKI\delta, pueden ser útiles para el tratamiento de trastornos del sueño y particularmente de trastornos del sueño del ritmo circadiano.

Los trastornos de los estados de ánimo se dividen en trastornos depresivos ("depresión unipolar"), trastornos bipolares, y dos trastornos basados en la etiología que incluyen el trastorno del estado de ánimo debido a un estado médico general y el trastorno del estado de ánimo inducido por sustancias. Los trastornos depresivos se subclasifican como trastorno depresivo mayor, trastorno distímico y trastorno depresivo no especificado de otra manera. Los trastornos bipolares se subclasifican como trastorno bipolar I y trastorno bipolar II. Se ha observado que el "modelo estacional" de especificación puede aplicarse a trastornos depresivos mayores que son recurrentes y al modelo de episodios depresivos mayores en el trastorno bipolar I y el trastorno bipolar II. Anergia importante, hipersomnia, comer con exceso, ganancia de peso y un deseo vehemente de hidratos de carbono a menudo caracterizan los episodios depresivos mayores que se producen con un patrón estacional. No está claro si un patrón estacional es más probable en un trastorno depresivo mayor que es recurrente o en trastornos bipolares. Sin embargo, entre los trastornos bipolares parece que un patrón estacional es más probable en trastornos bipolares II que en trastornos bipolares I. En algunos individuos, el inicio de episodios maníacos o hipomaníacos también parece estar asociado a una estación particular. El modelo estacional de tipo invernal parece variar con la latitud, la edad y el sexo. La prevalencia aumenta con latitudes mayores, las personas más jóvenes tienen mayor riesgo de padecer episodios depresivos invernales y las mujeres constituyen de 60% a 90% de las personas con el modelo estacional. El trastorno afectivo estacional (TAE), un término utilizado generalmente en la bibliografía, es un subtipo de trastorno del estado de ánimo que en el Manual Diagnóstico y Estadístico de los Trastornos Mentales IV (DSM-IV) (American Psychiatric Association: Diagnostic y Statistical Manual of Mental Disorders, Cuarta Edición, Revisión de Texto. Washington, DC, American Psychiatric Association, 2000) se denota por la expresión "con modelo estacional"cuando describe un modelo estacional de episodios depresivos mayores en el trastorno bipolar I, trastorno bipolar II o trastorno depresivo mayor recurrente (E. M. Tam et al., Can. J. Psychiatry (1995) 40, 457-466). Las características y diagnosis de los trastornos depresivos, episodios depresivos mayores, trastorno bipolar I, trastorno bipolar II y sus efectos estacionales se describen en el DSM-IV.

Los pacientes que sufren trastornos depresivos mayores, incluyendo TAE que se caracteriza por episodios depresivos recurrentes típicamente en invierno, han mostrado que responden positivamente a terapia con luz (Kripke, Journal of Affective Disorders (1998) 49(2), 109-117). El éxito del tratamiento con luz brillante en pacientes con TAE y depresión mayor produjo la propuesta de varias hipótesis para explicar el mecanismo subyacente de acción del efecto terapéutico de la luz. Estas hipótesis incluían la "hipótesis del ritmo circadiano" que sugiere que el efecto antidepresivo de la luz brillante podría asociarse con un cambio de fase del marcapasos circadiano con respecto al sueño (E. M. Tam et al., Can. J. Psychiatry (1995) 40, 457-466). Confirmando la asociación entre la terapia luminosa y el ritmo circadiano, la terapia luminosa clínicamente eficaz en los trastornos depresivos mayores produce un cambio concomitante en la fase circadiana y la eficacia clínica de la terapia luminosa parece depender de la capacidad de cambio de fase de la terapia luminosa (Czeisler et al., The Journal of Physiology (2000) 526 (Parte 3), 683-694; Terman et al., Arch. Gen. Psychiatry (2001) 58, 69-75). Además, se ha demostrado que la terapia luminosa acelera y aumenta la eficacia del tratamiento farmacológico de trastornos depresivos mayores (Benedetti et al., J. Clin. Psychiatry (2003) 64, 648-653). De esta manera, sería de esperar que la inhibición de la caseína quinasa I\varepsilon y/o la caseína quinasa I\delta produjera un cambio de fase circadiano y tal inhibición representa una monoterapia o terapia combinada potencial clínicamente eficaz para trastornos del estado de ánimo.

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Se debe señalar que la alteración del sueño es un síntoma de criterio para muchos trastornos psiquiátricos (W. V. McCall, J. Clin. Psychiatry (2001) 62 (supl. 10), 27-32). Las alteraciones del sueño son una característica común de los trastornos depresivos y el insomnio es una alteración del sueño descrita con frecuencia en la depresión, que se produce en más de 90% de los pacientes deprimidos (M.E. Thase, J. Clin. Psychiatry (1999) 60 (supl. 17), 28-31). La evidencia acumulada sostiene una patogénesis común para el insomnio primario y el trastorno depresivo mayor. Se ha propuesto la hipótesis de que la hiperactividad del factor de liberación de corticotropina (CRF) (debido a una predisposición genética o posiblemente estrés prematuro) y el estrés inducen un proceso que conduce a alteraciones del sueño exageradas y prolongadas, y finalmente a un insomnio primario. El ritmo circadiano en la secreción de CRF en condiciones no estresantes puede intervenir en la expresión normal de sueño-vigilia (G.S. Richardson y T. Roth, J. Clin. Psychiatry (2001) 62 (supl. 10), 39-45). De esta manera, los agentes que modulan la ritmicidad circadiana, por ejemplo, por inhibición de la caseína quinasa I\varepsilon y/o la caseína quinasa I\delta, pueden ser útiles para el tratamiento de trastornos depresivos debido a los efectos sobre la secreción del CRF. El documento EP-A-0 186 367 describe compuestos indólicos y su uso como agentes antialérgicos. La patente de EE.UU. 5.527.819 describe compuestos indólicos inhibidores de la transcriptasa inversa del VIH. El documento WO 03/080608 describe compuestos de quinolina y aza-indólicos que tienen afinidad por el receptor 5-HT_{6}. El documento WO 03/078435 describe derivados de pirazolo[1,5-a]piridina útiles como antagonistas del receptor CRF_{1}.

Por lo tanto, un objetivo de esta invención es proporcionar una serie de 1H-pirrolo[3,2-b]piridina-2-carboxamidas, 1H-pirrolo[3,2-c]piridina-2-carboxamidas y 1H-pirrolo[2,3-c]piridina-2-carboxamidas sustituidas que son inhibidores de la caseína quinasa I\varepsilon. Este objetivo y otros objetivos de esta invención se hacen evidentes a partir de la discusión detallada de la invención siguiente.

Compendio de la invención

La presente invención proporciona 1H-pirrolo[3,2-b]piridina-2-carboxamidas, 1H-pirrolo[3,2-c]piridina-2-carboxamidas, 1H-pirrolo[2,3-c]piridina-2-carboxamidas sustituidas y análogos relacionados, y sus sales o estereoisómeros farmacéuticamente aceptables, de fórmula (I), como inhibidores de la actividad de fosforilación de la caseína quinasa Ie humana, y el uso de estos compuestos para preparar un medicamento útil en el tratamiento de enfermedades y trastornos del sistema nervioso central, tal como por ejemplo, trastornos del estado de ánimo, incluyendo trastorno de depresión mayor, trastorno bipolar I y trastorno bipolar II, y trastornos del sueño que incluyen trastornos del sueño del ritmo circadiano, tales como por ejemplo, trastornos de sueño por el trabajo por turnos, síndrome de desfase horario, síndrome de la fase del sueño avanzada y síndrome de la fase del sueño retardada.

Por consiguiente, un modo de realización amplio de la invención se refiere a un compuesto de fórmula (I)

1

en la que:

R_{1} es H o alquilo C_{1-6};

R_{2} es NR_{5}R_{6};

R_{3} es arilo o heterociclo;

R_{4} es H, alquilo C_{1-6}, alquenilo C_{2-6}, alquinilo C_{2-6}, alcoxi C_{1-6}, CF_{3}, halógeno, SH, S-alquilo C_{1-6}, NO_{2}, NH_{2} o NR_{5}R_{6};

R_{5} es H o alquilo C_{1-6};

R_{6} es H o alquilo C_{1-6};

X es S o S(O)n;

uno de K, L o M es N y los otros dos miembros de K, L o M son cada uno C en los que R_{4} está unido solo a un átomo K, L, M u otro átomo del anillo que sea C;

m es 1, 2 ó 3; y

n es 1 ó 2;

o una de sus sales o estereoisómeros farmacéuticamente aceptable.

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Una realización de la presente invención se refiere a una composición farmacéutica que comprende un vehículo farmacéutico y una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto de fórmula (I), o una de sus sales o estereoisómeros farmacéuticamente aceptable.

Otra realización de la presente invención se refiere a un procedimiento para preparar un compuesto de fórmula (I).

Una realización adicional de la presente invención se refiere a un compuesto de fórmula (I) preparado por un procedimiento de esta invención como se describe en el presente documento.

Descripción detallada de la invención

Como se usa en esta memoria, el término "estereoisómero" es un término general usado para todos los isómeros de las moléculas individuales que se diferencian sólo en la orientación de sus átomos en el espacio. El término estereoisómero incluye isómeros de imagen especular (enantiómeros), mezclas de isómeros de imagen especular (racematos, mezclas racémicas), isómeros geométricos (cis/trans o E/Z) e isómeros de compuestos con más de un centro quiral que no son imágenes especulares entre sí (diastereoisómeros).

Como se usa en esta memoria, "R" y "S" se usan como se usan generalmente en química orgánica para indicar la configuración específica de un centro quiral. El término "R" (rectus) se refiere a la configuración de un centro quiral con una relación de prioridades de grupos en la dirección de las agujas del reloj (de mayor al segundo menor) cuando se mira a lo largo del enlace hacia el grupo de menor prioridad. El término "S" (sinister) se refiere a la configuración de un centro quiral con una relación de prioridades de grupos en dirección contraria de las agujas del reloj (de mayor al segundo menor) cuando se mira a lo largo del enlace hacia el grupo de menor prioridad. La prioridad de los grupos se basa en reglas de secuencia en las que la prioridad se basa en primer lugar en el número atómico (en orden de número atómico decreciente). Una lista y un análisis de las propiedades se incluye en Stereochemistry of Organic Compounds, Ernest L. Eliel, Samuel H. Wilen y Lewes

\hbox{N. Mander, editores,
Wiley-Interscience, John Wiley & Sons, Inc.,
Nueva York, 1994.}

Además del sistema (R)-(S), también puede utilizarse en este texto el antiguo sistema D-L para indicar la configuración absoluta, especialmente con referencia a los aminoácidos. En este sistema, una fórmula en proyección Fischer se orienta para que el carbono número 1 de la cadena principal esté arriba. El prefijo "D" se utiliza para representar la configuración absoluta del isómero en la que el grupo funcional (determinante) se encuentra en el lado derecho del carbono en el centro quiral, y "L", es el isómero en el que se encuentra en el lado izquierdo.

Como se usa en esta memoria, el término "tautómero" o "tautomería" se refiere a la coexistencia de dos (o más) compuestos que difieren únicamente uno de otro en la posición de uno (o más) átomos móviles y en la distribución de los electrones, por ejemplo, tautómeros o tautomería ceto-enólica.

Como se usa en esta memoria, "alquilo" significa un grupo hidrocarburo alifático, saturado, de cadena lineal o ramificada, que tiene de 1 a 6 átomos de carbono, e incluye metilo, etilo, propilo, isopropilo, butilo, sec-butilo, ter-butilo.

Como se usa en esta memoria, "alquenilo" significa una cadena alifática, insaturada, monovalente, lineal o ramificada que tiene de 2 a 6 átomos de carbono e incluye etenilo (también conocido como vinilo), 1-metiletenilo, 1-metil-1-propenilo, 1-butenilo, 1-hexenilo, 2-metil-2-propenilo, 2,4-hexadienilo, 1-propenilo, 2-propenilo, 2-butenilo, 2-pentenilo.

Como se usa en esta memoria, "alquinilo" significa una cadena alifática, insaturada, monovalente, lineal o ramificada, que tiene de 2 a 6 átomos de carbono con al menos un triple enlace e incluye etinilo, 1-propinilo, 1-butinilo, 1-hexinilo, 2-propinilo, 2-butinilo, 2-pentinilo.

Como se usa en esta memoria, el término "alcoxi" significa un sustituyente monovalente que consiste en una cadena de alquilo lineal o ramificada que tiene de 1 a 6 átomos de carbono unida a través de un átomo de oxígeno de éter y que tiene su valencia libre unida desde el oxígeno del éter, e incluye metoxi, etoxi, propoxi, isopropoxi, butoxi, sec-butoxi, terc-butoxi.

Como se usa en esta memoria, la expresión "cicloalquilo C_{3}-C_{8}" significa una estructura de anillo hidrocarburo saturado que contiene de 3 a 8 átomos de carbono e incluye ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo, ciclohexilo, cicloheptilo.

Como se usa en esta memoria, "arilo" o "Ar" significa cualquier anillo de carbonos monocíclico, bicíclico o tricíclico, de hasta 7 miembros en cada anillo, en el que al menos un anillo es aromático y no sustituido o sustituido con 1 a 3 sustituyentes seleccionados del grupo que consiste en metilendioxi, hidroxi, alcoxi C_{1-6}, halógeno, alquilo C_{1-6}, alquenilo C_{2-6}, alquinilo C_{2-6}, trifluorometilo, trifluorometoxi, -NO_{2}, -NH_{2}, -NH(alquilo C_{1-6}), -N(alquilo C_{1-6})_{2}, -NH-acilo y-N(alquil C_{1-6})acilo. Los ejemplos de "arilo" o "Ar" incluyen fenilo, 2-clorofenilo, 3-clorofenilo, 4-clorofenilo, 2-fluorofenilo, 3-fluorofenilo, 4-fluorofenilo, 2-bromofenilo, 3-bromofenilo, 4-bromofenilo, 2-trifluorometilfenilo, 3-trifluorometilfenilo, 4-trifluorometilfenilo, 2-metoxifenilo, 3-metoxifenilo, 4-metoxifenilo, 2-aminofenilo, 3-aminofenilo, 4-aminofenilo, 2-metilfenilo, 3-metilfenilo, 4-metilfenilo, 2-nitrofenilo, 3-nitrofenilo, 4-nitrofenilo, 2,4-diclorofenilo, 2,3-diclorofenilo, 3,5-dimetilfenilo, 2-trifluorometoxifenilo, 3-trifluorometoxifenilo, 4-trifluorometoxifenilo, naftilo, tetrahidronaftilo y bifenilo. La expresión "aril-(alquilo C_{1}-C_{6})" incluye 2-metilfenilo, 3-metilfenilo, 4-metilfenilo, fenilmetilo (bencilo), feniletilo, p-metoxibencilo, p-fluorobencilo y p-clorobencilo.

Como se usa en esta memoria, el término "acilo" significa grupos hidrocarburo alifáticos saturados tanto de cadena lineal como ramificada, que tienen de 1 a 6 átomo de carbono, unidos a un resto carbonilo, e incluyen acetilo, propionilo, butirilo, isobutirilo.

Como se usa en este documento, el término "heterociclo" o "heterocíclico" se refiere a un anillo heterocíclico monocíclico estable de 5 a 7 miembros o bicíclico estable de 8 a 11 miembros que está saturado o insaturado, y que consiste en átomos de carbono y de uno a tres heteroátomos seleccionados entre el grupo que consiste en N, O y S, y en el que los heteroátomos nitrógeno y azufre pueden estar opcionalmente oxidados, y el heteroátomo nitrógeno puede estar opcionalmente cuaternizado, y que incluyen cualquier grupo bicíclico en el que cualquiera de los anillos heterocíclicos definidos anteriormente está condensado con un anillo de benceno. El anillo heterocíclico puede estar unido en cualquier heteroátomo o átomo de carbono que de como resultado la creación de una estructura estable. El anillo heterocíclico puede no estar sustituido o estar sustituido con 1 a 3 sustituyentes seleccionados del grupo que consiste en alcoxi C_{1-6}, hidroxi, halógeno, alquilo C_{1-6}, alquenilo C_{2-6}, alquinilo C_{2-6}, trifluorometilo, trifluorometoxi, -NO_{2}, -NH_{2}, -NH(alquilo C_{1-6}), -N(alquilo C_{1-6})_{2}, -NH-acilo, y -N(alquil C_{1-6})acilo. Los ejemplos de dichos elementos heterocíclicos incluyen piperidinilo, piperazinilo, 2-oxopiperazinilo, 2-oxopiperidinilo, 2-oxopirrolidinilo, 2-oxoazepinilo, azepinilo, pirrolilo, pirrolidinilo, pirazolilo, pirazolidinilo, imidazolilo, imidazolinilo, imidazolidinilo, piridilo, pirazinilo, pirimidinilo, piridazinilo, oxazolilo, oxazolidinilo, isoxazolilo, isoxazolidinilo, morfolinilo, tiazolilo, tiazolidinilo, isotiazolilo, quinuclidinilo, isotiazolidinilo, indolilo, quinolinilo, isoquinolinilo, bencimidazolilo, tiadiazolilo, benzopiranilo, benzotiazolilo, benzoxazolilo, furilo, tetrahidrofurilo, benzofuranilo, tetrahidropiranilo, tienilo, benzotienilo, tiamorfolinilo y oxadiazolilo.

Como se usa en esta memoria, "halógeno", "hal" o "halo" significan a un miembro de la familia flúor, cloro, bromo o yodo.

Cuando cualquier variable (por ejemplo, arilo, heterociclo, R_{1}, R_{2}, R_{3}, R_{4}, etc.) aparece más de una vez en cualquier constituyente o en un compuesto de fórmula (I) de esta invención, su definición en cada caso es independiente de su definición en cualquier otro caso. Además, las combinaciones de los sustituyentes y/o variables se permiten únicamente si las tales combinaciones dan como resultado compuestos estables.

Como se usa en este documento, "tratar", "que trata" o "tratamiento" significan:

(i) prevenir una enfermedad, trastorno o afección para que no se produzca en un paciente que pueda estar predispuesto a la enfermedad, trastorno y/o afección, pero que aún no se ha diagnosticado que lo padezca;

(ii) inhibir una enfermedad, trastorno o afección, es decir, detener su desarrollo; y

(iii) aliviar la enfermedad, trastorno o afección, es decir, provocar la regresión de la enfermedad, trastorno y/o estado.

Como se usa en esta memoria, el término "paciente" significa un animal de sangre caliente tal como un mamífero que padece una enfermedad, trastorno o afección particular. Se entiende explícitamente que las cobayas, perros, gatos, ratas, ratones, caballos, vacas, ganado, ovejas y seres humanos son ejemplos de animales dentro del alcance del significado del término.

Como se usa en esta memoria, el término "enfermedad" significa una dolencia, malestar o a una interrupción, suspensión o trastorno de funciones, sistemas u órganos corporales.

Como se usa en esta memoria, el término "trastorno" significa una alteración de la función, de la estructura o de las dos que se produce como resultado de un fallo genético o embriológico en el desarrollo, o de factores exógenos tales como intoxicación, lesión o enfermedad.

Como se usa en esta memoria, "afección" se refiere a un estado de salud o estado físico.

Como se usa en esta memoria, "profilaxis" significa la prevención de la enfermedad.

Como se usa en esta memoria, las expresiones "trastorno del sueño", "trastornos del sueño" o "alteraciones del sueño" significan insomnio.

Como se usa en esta memoria, el término "insomnio" significa la incapacidad de dormir en ausencia de impedimentos externos, tales como ruido, luz brillante, etc., durante el periodo en el que se produce normalmente el sueño y la incapacidad de dormir puede variar en grado desde agitación o sueño aletrado, a una restricción de la duración normal del sueño o al desvelo absoluto. El término "insomnio" incluye insomnio primario, insomnio relacionado con un trastorno mental, insomnio inducido por sustancias e insomnio del ritmo circadiano que es el insomnio debido a un cambio en el programa normal de sueño-vigilia (cambios, trastorno del sueño por cambio de turno, desfase horario o síndrome de desfase horario, etc.).

Como se usa en esta memoria, la expresión "insomnio primario" significa la dificultad para iniciar el sueño, para mantener el sueño o para tener un sueño reparador que no está causada por un trastorno mental o debido a efectos fisiológicos de tomar o dejar de tomar ciertas sustancias (insomnio inducido por una sustancia).

Como se usa en este documento, la expresión "trastornos del sueño del ritmo circadiano" incluye el desfase horario o el síndrome de desfase horario, el trastorno del sueño por cambio de turno, el síndrome de fase del sueño avanzada y el síndrome de fase del sueño retardada.

Como se usa en esta memoria, la expresión "cantidad eficaz de un compuesto inhibidora" o "cantidad eficaz de un compuesto inhibidora de la caseína quinasa I\varepsilon" significa una cantidad suficiente de un compuesto que se vuelve biodisponible por medio de la vía de administración apropiada para tratar a un paciente que padece una enfermedad, trastorno o estado susceptible de dicho tratamiento.

Como se usa en esta memoria, la expresión "una cantidad terapéuticamente eficaz" significa una cantidad de un compuesto que es eficaz para tratar la enfermedad, trastorno o afección mencionados.

Como se usa en esta memoria, el término "sal farmacéuticamente aceptable" se pretende aplicar a cualquier sal, sea previamente conocida o descubierta en el futuro, que usa un experto en la técnica que es una sal de adición orgánica o inorgánica no tóxica, que es adecuada para su uso como un producto farmacéutico. Las bases ilustrativas que forman sales adecuadas incluyen hidróxidos de metales alcalinos o alcalinotérreos tales como hidróxidos de sodio, potasio, calcio o magnesio; amoniaco y aminas alifáticas, cíclicas o aromáticas, tales como metilamina, dimetilamina, trietilamina, dietilamina, isopropildietilamina, piridina y picolina. Los ácidos ilustrativos que forman sales adecuadas incluyen ácidos inorgánicos, tales como, por ejemplo, los ácidos clorhídrico, bromhídrico, sulfúrico, fosfórico, y similares, y ácidos carboxílicos orgánicos, tales como, por ejemplo, los ácidos acético, propiónico, glicólico, láctico, pirúvico, malónico, succínico, fumárico, málico, tartárico, cítrico, ascórbico, maleico, hidroximaleico y dihidroximaleico, benzoico, fenilacético, 4-aminobenzoico, 4-hidroxibenzoico, antranílico, cinámico, salicílico, 4-aminosalicílico, 2-fenoxibenzoico, 2-acetoxibenzoico, mandélico y ácidos sulfónicos orgánicos, tales como los ácidos metanosulfónico y p-toluenosulfónico.

Como se usa en esta memoria, "vehículo farmacéutico" se refiere a excipientes farmacéuticos conocidos útiles en la formulación de compuestos farmacéuticamente activos para la administración, y que son sustancialmente no tóxicos y no sensibilizadores en las condiciones de uso. La proporción exacta de estos excipientes se determina por la solubilidad y propiedades químicas del compuesto activo, la vía de administración elegida, así como por la práctica farmacéutica convencional. En la práctica de los métodos de esta invención, el principio activo preferiblemente se incorpora en una composición que contiene un vehículo farmacéutico, aunque los compuestos son eficaces y pueden administrarse en y por sí mismos. Es decir, la proporción de principio activo puede variar de aproximadamente 1% a aproximadamente 90% en peso.

Las abreviaturas adicionales que pueden aparecer en esta solicitud tendrán los siguientes significados:

Me (metilo), Et (etilo), Ph (fenilo), Et_{3}N (trietilamina), p-TsOH (ácido para-toluenosulfónico), TsCl (cloruro de para-toluenosulfonilo), hept (heptano), DMF (dimetilformamida), NMP (1-metil-2-pirrolidinona o N-metil-2-pirrolidinona), IPA (isopropanol o alcohol isopropílico), TFA (ácido trifluoroacético), DBU (1,8-diazabiciclo[5.4.0]undec-7-eno), DBN (1,5-diazabiciclo[4.3.0]non-5-eno), ta o t.a. (temperatura ambiente), min (minutos), h (hora u horas), UV (ultravioleta), LCMS (cromatografía líquida-espectrometría de masas), t-Boc o Boc (terc-butoxicarbonilo), Bn (bencilo), t-Bu (butilo terciario), i-Pr (isopropilo), HOAc (ácido acético), EtOAc (acetato de etilo), Et_{2}O (éter dietílico), EtOH (etanol), g (gramos), mg (miligramos), \mug (microgramos), ng (nanogramos), ml (mililitros), \mul (microlitros), l (litros), HPLC (cromatografía líquida de alto rendimiento), TLC, tlc o Tlc (cromatografía en capa fina), g/l (gramos por litro), SiO_{2} (gel de sílice), l/min (litros por minuto), ml/min (mililitros por minuto), mmol (milimol), M (molar), mM (milimolar), \muM (micromolar), nM (nanomolar), \muCi (microCurie), CPM (cuentas por minuto), rpm (revoluciones por minuto), mm (milímetros), \mum (micrómetros), \mu (micrón), nm (nanómetro), ppm (partes por millón), kg/cm^{2} (kilogramos por centímetro cuadrado), eq. o

\hbox{equiv (equivalentes), R _{T}  (tiempo de retención), ºC
(grados Celsius), y K  (Kelvin).}

Por consiguiente, una realización amplia de la invención se refiere a un compuesto de fórmula (I)

2

en la que R_{1} es H o alquilo C_{1-6}; R_{2} es NR_{5}R_{6}; R_{3} es arilo o heterociclo; R_{4} es H, alquilo C_{1-6}, alquenilo C_{2-6}, alquinilo C_{2-6}, alcoxi C_{1-6}, CF_{3}, halógeno, SH, S-alquilo C_{1-6}, NO_{2}, NH_{2} o NR_{5}R_{6}; R_{5} es H o alquilo C_{1-6}; R_{6} es H o alquilo C_{1-6}; X es S o S(O)_{n}; uno de K, L o M es N y los otros dos miembros de K, L o M son cada uno C, en la que R_{4} está unido solo a un átomo K, L, M u otro átomo del anillo que sea C; m es 1, 2 ó 3; y n es 1 ó 2;

Una realización de esta invención se refiere a compuestos en los que L es N, y K y M son cada uno C.

Una realización adicional de esta invención se refiere a compuestos en los que L es N, K y M son cada uno C, R_{1}, R_{4}, R_{5} y R_{6} son cada uno H, y R_{3} es arilo. Los siguientes compuestos son ejemplos representativos dentro del alcance de esta realización:

amida del ácido 3-fenilsulfanil-1H-pirrolo[3,2-c]piridina-2-carboxílico,

amida del ácido 3-(3-fluoro-fenilsulfanil-1H-pirrolo[3,2-c]piridina-2-carboxílico y

amida del ácido 3-(4-cloro-fenilsulfanil-1H-pirrolo[3,2-c]piridina-2-carboxílico.

Otra realización de esta invención se refiere a compuestos en los que M es N, y K y L son cada uno C.

Una realización adicional de esta invención se refiere a compuestos en los que M es N, K y L son cada uno C, R_{1}, R_{4}, R_{5} y R_{6} son cada uno H, y R_{3} es arilo o heterociclo. Los siguientes compuestos son ejemplos representativos dentro del alcance de esta realización:

amida del ácido 3-fenilsulfanil-1H-pirrolo[2,3-c]piridina-2-carboxílico,

amida del ácido 3-(3-fluoro-fenilsulfanil)-1H-pirrolo[2,3-c]piridina-2-carboxílico,

amida del ácido 3-(3-metoxi-fenilsulfanil)-1H-pirrolo[2,3-c]piridina-2-carboxílico,

amida del ácido 3-(3-cloro-fenilsulfanil)-1H-pirrolo[2,3-c]piridina-2-carboxílico,

amida del ácido 3-(2-trifluorometil-fenilsulfanil)-1H-pirrolo[2,3-c]piridina-2-carboxílico,

amida del ácido 3-(2-trifluorometoxi-fenilsulfanil)-1H-pirrolo[2,3-c]piridina-2-carboxílico,

amida del ácido 3-(2-metoxi-fenilsulfanil)-1H-pirrolo[2,3-c]piridina-2-carboxílico, y

amida del ácido 3-(piridin-2-sulfanil)-1H-pirrolo[2,3-c]piridina-2-carboxílico.

Otra realización de esta invención se refiere a compuestos en los que K es N, y L y M son cada uno C.

Una realización adicional de esta invención se refiere a compuestos en los que K es N, L y M son cada uno C, R_{1} es alquilo C_{1-6}, R_{5} es H, R_{6} es H o alquilo C_{1-6}, y R_{3} es arilo. Los siguientes compuestos son ejemplos representativos dentro del alcance de esta realización:

metilamida del ácido 1-metil-3-fenilsulfanil-1H-pirrolo[3,2-b]piridina-2-carboxílico,

amida del ácido 1-metil-3-fenilsulfanil-1H-pirrolo[3,2-b]piridina-2-carboxílico, y

amida del ácido 3-fenilsulfanil-1-propil-1H-pirrolo[3,2-b]piridina-2-carboxílico.

Una realización adicional de esta invención se refiere a compuestos en los que K es N, L y M son cada uno C, R_{1}, R_{4} y R_{5} son cada uno H, R_{3} es arilo y R_{6} es alquilo C_{1-6}. Los siguientes compuestos son ejemplos representativos dentro del alcance de esta realización:

metilamida del ácido 3-(3-trifluorometoxifenilsulfanil)-1H-pirrolo[3,2-b]piridina-2-carboxílico,

metilamida del ácido 3-(3-clorofenilsulfanil)-1H-pirrolo[3,2-b]piridina-2-carboxílico,

metilamida del ácido 3-(3-fluorofenilsulfanil)-1H-pirrolo[3,2-b]piridina-2-carboxílico, y

metilamida del ácido 3-fenilsulfanil-1H-pirrolo[3,2-b]piridina-2-carboxílico.

Una realización adicional de esta invención se refiere a compuestos en los que K es N, L y M son cada uno C, R_{1}, R_{4}, R_{5} y R_{6} son cada uno H y R_{3} es heterociclo. Los siguientes compuestos son ejemplos representativos dentro del alcance de esta realización:

amida del ácido 3-(quinolin-8-ilsulfanil)-1H-pirrolo[3,2-b]piridina-2-carboxílico,

amida del ácido 3-(piridin-2-sulfanil)-1H-pirrolo[3,2-b]piridina-2-carboxílico,

amida del ácido 3-(piridin-4-sulfanil)-1H-pirrolo[3,2-b]piridina-2-carboxílico, y

amida del ácido 3-(tiofen-2-ilsulfanil)-1H-pirrolo[3,2-b]piridina-2-carboxílico.

Una realización adicional de esta invención se refiere a compuestos en los que K es N, L y M son cada uno C, R_{1}, R_{5} y R_{6} son cada uno H, y R_{3} es arilo. Los siguientes compuestos son ejemplos representativos dentro del alcance de esta realización:

amida del ácido 3-fenilsulfanil-1H-pirrolo[3,2-b]piridina-2-carboxílico,

amida del ácido 3-(3-fluorofenilsulfanil)-1H-pirrolo[3,2-b]piridina-2-carboxílico,

amida del ácido 3-(3-clorofenilsulfanil)-1H-pirrolo[3,2-b]piridina-2-carboxílico,

amida del ácido 3-(3-bromofenilsulfanil)-1H-pirrolo[3,2-b]piridina-2-carboxílico,

amida del ácido 3-(2-clorofenilsulfanil)-1H-pirrolo[3,2-b]piridina-2-carboxílico,

amida del ácido 3-(4-clorofenilsulfanil)-1H-pirrolo[3,2-b]piridina-2-carboxílico,

amida del ácido 3-(2,4-diclorofenilsulfanil)-1H-pirrolo[3,2-b]piridina-2-carboxílico,

amida del ácido 3-(2-fluorofenilsulfanil)-1H-pirrolo[3,2-b]piridina-2-carboxílico,

amida del ácido 3-(2,3-diclorofenilsulfanil)-1H-pirrolo[3,2-b]piridina-2-carboxílico,

amida del ácido 3-(2-trifluormetilfenilsulfanil)-1H-pirrolo[3,2-b]piridina-2-carboxílico,

amida del ácido 3-(3-trifluorometil-fenilsulfanil)-1H-pirrolo[3,2-b]piridina-2-carboxílico,

amida del ácido 3-(2-aminofenilsulfanil)-1H-pirrolo[3,2-b]piridina-2-carboxílico,

amida del ácido 3-(2,5-dicloro-fenilsulfanil)-1H-pirrolo[3,2-b]piridina-2-carboxílico,

amida del ácido 3-(2-metoxi-fenilsulfanil)-1H-pirrolo[3,2-b]piridina-2-carboxílico,

amida del ácido 3-(3-metoxi-fenilsulfanil)-1H-pirrolo[3,2-b]piridina-2-carboxílico,

amida del ácido 3-(3-amino-fenilsulfanil)-1H-pirrolo[3,3-b]piridina-2-carboxílico,

amida del ácido 3-(4-nitro-fenilsulfanil)-1H-pirrolo[3,2-b]piridina-2-carboxílico,

amida del ácido 3-(3-nitro-fenilsulfanil)-1H-pirrolo[3,2-b]piridina-2-carboxílico,

amida del ácido 3-o-tolilsulfanil-1H-pirrolo[3,2-b]piridina-2-carboxílico,

amida del ácido 3-p-tolilsulfanil-1H-pirrolo[3,2-b]piridina-2-carboxílico,

amida del ácido 3-(3,5-dimetil-fenilsulfanil)-1H-pirrolo[3,2-b]piridina-2-carboxílico,

amida del ácido 3-m-tolilsulfanil-1H-pirrolo[3,2-b]piridina-2-carboxílico,

amida del ácido 3-(2-etil-fenilsulfanil)-1H-pirrolo[3,2-b]piridina-2-carboxílico,

amida del ácido 3-(3-trifluorometoxi-fenilsulfanil)-1H-pirrolo[3,2-b]piridina-2-carboxílico,

amida del ácido 3-(3-fluoro-fenilsulfanil)-5-metoxi-1H-pirrolo[3,2-b]piridina-2-carboxílico, y

amida del ácido 3-(3-metoxi-fenilsulfanil)-5-metoxi-1H-pirrolo[3,2-b]piridina-2-carboxílico.

Los compuestos de la presente invención se pueden preparar mediante procedimientos análogos a los conocidos en la técnica. Los esquemas de reacción 1, 2 y 3, y el texto descriptivo correspondiente, describen la preparación de los diferentes compuestos de la invención. Los métodos y ejemplos descritos se proporcionan para fines de ilustración y no limitan el alcance de la presente invención. Reactivos y condiciones de reacción alternativos y otras combinaciones y permutaciones de las etapas descritas en esta memoria para llegar a los compuestos individuales son fácilmente evidentes para los expertos en la técnica. Las tablas 1, 2 y 3 proporcionan resúmenes de los compuestos de ejemplo y en la tabla 4 se resumen los datos biológicos para los compuestos de ejemplo de la invención.

Síntesis química

Esquema 1

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3

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El esquema 1 describe una síntesis para los compuestos de esta invención, a partir de 2-cloro-3-nitropiridina (1a-1 en la que K es N y L y M son cada uno C), 3-cloro-4-nitropiridina (1b-1 en la que L es N y K y M son cada uno C) o 4-cloro-3-nitropiridina (1c-1 en la que M es N y K y L son cada uno C), o una cloro-nitropiridina opcionalmente sustituida 1, disponibles en el comercio. El primer dígito de un número de compuesto se refiere al compuesto o número de estructura correspondiente mostrado en cualquiera de los esquemas 1-3, por ejemplo, el primer dígito 1 en 1a-1 se refiere al compuesto o estructura 1 en la esquema 1. La posterior designación de letra "a", "b" o "c" identifica un compuesto como un precursor para, o un miembro de la serie de las 1H-pirrolo[3,2-b]piridina-2-carboxamidas ("a", también conocida como la serie de 4-azaindoles), la serie de las 1H-pirrolo[3,2-c]piridina-2-carboxamidas ("b", también conocida como la serie de 5-azaindoles) y la serie de las 1H-pirrolo[2,3-c]piridina-2-carboxamidas ("c", también conocida como la serie de 6-azaindoles), respectivamente. El dígito o dígitos finales después del guión en un número de compuesto, identifican el compuesto específico en esa serie estructural. Cuando un compuesto se identifica sólo por un número, el número se refiere al correspondiente compuesto o estructura como se muestra en cualquiera de los esquemas 1-3, y se entiende que la discusión incluye de forma genérica las tres series estructurales identificadas como "a", "b" y "c" como se ha descrito anteriormente.

En el esquema 1, etapa a, se añade la cloro-nitropiridina 1 en porciones a una sal de metal alcalino de un diéster del ácido malónico, con el diéster malónico en exceso, tal como por ejemplo, la sal de sodio, potasio o litio del diéster del ácido malónico, con el diéster del ácido malónico en exceso, tal como por ejemplo malonato de dietilo o malonato de dimetilo, a una temperatura de aproximadamente 50ºC a aproximadamente 70ºC. La sal de metal alcalino del diéster del ácido malónico se puede preparar, por ejemplo, por adición de un metal alcalino, tal como por ejemplo sodio metálico, a un exceso del diéster del ácido malónico, como conoce el experto en la técnica. Después de aproximadamente 3 horas de aproximadamente 50ºC a aproximadamente 70ºC, la mezcla se deja en reposo a temperatura ambiente durante aproximadamente 12 a aproximadamente 24 horas. Si la reacción no se ha completado, la mezcla se calienta a aproximadamente 80ºC durante de aproximadamente 2 horas a aproximadamente 4 horas, después se concentra para separar el exceso de diéster del ácido malónico, y después se trata con un ácido mineral concentrado, tal como por ejemplo ácido clorhídrico o ácido sulfúrico, y agua. La mezcla se calienta de aproximadamente 100ºC a aproximadamente 110ºC durante aproximadamente 5 horas a aproximadamente 9 horas para efectuar la descarboxilación. Después de dejar en reposo de aproximadamente 12 a aproximadamente 24 horas a temperatura ambiente, la mezcla se lava con un disolvente adecuado, tal como por ejemplo, éter dietílico y acetato de etilo, se hace básica de aproximadamente pH 8 a aproximadamente pH 9 con un hidróxido de metal alcalino, tal como por ejemplo hidróxido de sodio o hidróxido de potasio, y se extrae con un disolvente orgánico adecuado, tal como por ejemplo acetato de etilo. El extracto orgánico se filtra y se concentra a presión reducida para dar la metil-nitropiridina 2 deseada. La preparación del compuesto 2 por este procedimiento de la "etapa a" se denomina "síntesis de dos etapas en un solo matraz".

Alternativamente, en el esquema 1, etapa a, la metil-nitropiridina 2 se puede preparar por acoplamiento de Suzuki del compuesto 1 con ácido metilborónico. Así pues, una mezcla de cloro-nitropiridina 1, ácido metilborónico, carbonato de potasio y tetrakis(trifenilfosfina)paladio(0) [Pd(PPh_{3})_{4}] en un disolvente aprótico adecuado, tal como por ejemplo dioxano, se calienta de aproximadamente 110ºC a aproximadamente 120ºC durante de aproximadamente 12 horas a aproximadamente 16 horas. La mezcla de reacción se enfría a temperatura ambiente, se concentra y se purifica por cromatografía para dar la metil-nitropiridina 2.

Ventajosamente, ahora se ha encontrado que el compuesto 2 también se puede preparar en un procedimiento que implica dos etapas en un solo matraz, de acuerdo con el esquema 1, etapa a. Por consiguiente, se añade a un disolvente polar, tal como por ejemplo dimetilformamida o N-metil-2-pirrolidinona, de aproximadamente 2 a aproximadamente 2,5 equivalentes de una base, tal como por ejemplo t-butóxido de potasio, etóxido de sodio, hidruro de sodio, t-butóxido de sodio, o hexametildisilazida de sodio, a una temperatura de aproximadamente 16ºC y con agitación durante aproximadamente 30 minutos. Después, la mezcla se trata con de aproximadamente 1 a aproximadamente 4 equivalentes de un diéster de ácido malónico, tal como por ejemplo malonato de dietilo, a una temperatura de aproximadamente 20ºC a aproximadamente 35ºC. Después de aproximadamente 20 minutos, la mezcla se trata de aproximadamente 29ºC a aproximadamente 44ºC con una disolución de aproximadamente 1 equivalente del compuesto 1 y un disolvente polar tal como por ejemplo dimetilformamida o N-metilpirrolidona. La mezcla se calienta a aproximadamente 50ºC hasta que la reacción se ha completado, indicado por el análisis por HPLC u otro análisis cromatográfico, como conocen bien los expertos en la técnica. Lo más ventajosamente, el compuesto 1 se condensa con aproximadamente 2,0 equivalentes de malonato de dietilo donde la N-metil-2-pirrolidinona es el disolvente preferido, donde la base preferida es de aproximadamente 2,2 a aproximadamente 2,5 equivalentes de t-butóxido de sodio, y donde se usa el orden de las adiciones, las temperaturas y tiempos de reacción descritos antes, para esta parte de la síntesis más ventajosa "de dos etapas en un solo matraz" (etapa a) del compuesto 2. Cuando la reacción se ha completado, la mezcla se trata con un ácido mineral y agua, preferiblemente aproximadamente 4,2 equivalentes de ácido sulfúrico 6 M, a aproximadamente 100ºC durante aproximadamente 12 horas para efectuar la descarboxilación. La reacción se inactiva con agua helada y se extrae con un disolvente adecuado, tal como tolueno, para dar el compuesto 2. La síntesis del compuesto 2a-1 (2-metil-3-nitro-piridina) por este procedimiento de la "etapa a" ventajoso, dio como resultado una reducción sorprendentemente significativa del tiempo de reacción (aproximadamente 2 horas frente a aproximadamente 3 días) para la condensación del compuesto 1a-1 con malonato de dietilo, y proporcionó el compuesto 2a-1 con un rendimiento global significativamente mejor (aproximadamente 80% frente a 30-68%) y mejoró significativamente la pureza aislada (>96%) sin necesidad de purificación cromatográfica. El método se puede reproducir ventajosamente con respecto al rendimiento y la pureza aislada. Este procedimiento también evita ventajosamente el uso de sodio metálico y reactivos relativamente caros, tales como por ejemplo tetrakis(trifenil-fosfina)paladio(0) que serían necesarios para la preparación del compuesto 2 por otros métodos descritos en lo que antecede.

Como se muestra en el esquema 1, etapa b, el éster de etilo del ácido 2-hidroxi-3-(nitro-piridinil)-acrílico 3 se puede preparar tratando la metil-nitropiridina 2 con una base adecuada, tal como por ejemplo etóxido de sodio, etóxido de litio, t-butóxido de litio, t-butóxido de sodio, t-butóxido de potasio o hexametildisilazida de sodio, en un disolvente adecuado, tal como por ejemplo etanol o t-butanol, y tratando la mezcla de reacción con un diéster de oxalato, tal como por ejemplo oxalato de dimetilo u oxalato de dietilo a temperatura ambiente, y dejando la mezcla de reacción que repose durante de aproximadamente 12 horas a aproximadamente 48 horas a temperatura ambiente. Después, la mezcla de reacción se trata con un ácido mineral, tal como por ejemplo ácido clorhídrico o ácido sulfúrico, a aproximadamente pH 1. El precipitado se recoge por filtración, se lava secuencialmente con un disolvente adecuado, tal como por ejemplo etanol y éter di-isopropílico, respectivamente, para dar el éster de etilo del ácido 2-hidroxi-3-(nitro-piridinil)-acrílico 3 o su ceto-éster tautómero.

Se ha encontrado ventajosamente que el compuesto 3 también se puede sintetizar por otro método de acuerdo con el esquema 1, etapa b, mediante la adición lenta del compuesto 2 a una disolución previamente mezclada de oxalato de dietilo y una base adecuada, en un disolvente adecuado, de aproximadamente 2ºC a aproximadamente temperatura ambiente. Por consiguiente, se añade una base adecuada tal como por ejemplo etóxido de sodio, etóxido de litio, t-butóxido de litio, t-butóxido de sodio, t-butóxido de potasio o hexametildisilazida de litio, a un disolvente adecuado tal como por ejemplo tetrahidrofurano, a aproximadamente 2ºC. La mezcla se agita durante aproximadamente 20 minutos y después se añaden aproximadamente 3 equivalentes de oxalato de dietilo de aproximadamente -0,3ºC a aproximadamente 4ºC. Después de aproximadamente 10 minutos, se añade una disolución de aproximadamente 1 equivalente del compuesto 2 y un disolvente adecuado, tal como por ejemplo tetrahidrofurano, de aproximadamente 4ºC a aproximadamente 9ºC. La mezcla se deja calentar a temperatura ambiente. Cuando la reacción se ha completado, indicado por el análisis de HPLC u otro análisis cromatográfico como conoce bien el experto en la técnica, la mezcla de reacción se enfría a aproximadamente 1ºC y se trata con disolución saturada de cloruro amónico de aproximadamente 1ºC a aproximadamente 9ºC. El compuesto 3 se aísla por dilución adicional con agua y/o un codisolvente, tal como por ejemplo isopropanol. Lo más ventajosamente, el compuesto 2 se condensa con oxalato de dietilo, donde el etóxido sódico es la base preferida y el tetrahidrofurano es el disolvente preferido, siguiendo el orden de adiciones y los tiempos y condiciones de reacción descritos antes. La síntesis del compuesto 3a-1 (éster de etilo del ácido 2-hidroxi-3-(3-nitro-piridin-2-il)-acrílico) por este procedimiento de la "etapa b" más ventajoso, daba como resultado una reducción significativa del tiempo de reacción (aproximadamente 2 horas frente a aproximadamente 2 a 3 días) y proporcionaba el compuesto 3a-1 con un rendimiento significativamente mejor (aproximadamente 88% frente a 32-68%).

Como se muestra en el esquema 1, etapa c, el éster del ácido 1H-pirrolo[3,2-b]piridina-2-carboxílico, éster del ácido 1H-pirrolo[3,2-c]piridina-2-carboxílico o éster del ácido 1H-pirrolo[2,3-c]piridina-2-carboxílico intermedios 4 deseados, se pueden preparar por reducción catalítica o química del grupo nitro de un éster del ácido 2-hidroxi-3-(nitro-piridinil)-acrílico adecuadamente sustituido 3, o su ceto-éster tautómero con formación simultánea del anillo de pirrol para dar el compuesto 4. Por lo tanto, una mezcla del compuesto 3 y un catalizador adecuado, tal como por ejemplo paladio sobre carbón, en un disolvente adecuado, tal como por ejemplo etanol o metanol, se hidrogena de una forma bien conocida para el experto en la técnica, durante de aproximadamente 1 a aproximadamente 3 horas a una presión de aproximadamente 3,15 kg/cm^{2} a aproximadamente 84 kg/cm^{2} para proporcionar, después de purificación, el compuesto intermedio 4. Ventajosamente, el compuesto 4 se preparar por este procedimiento en el que el etanol absoluto es el disolvente preferido y el paladio sobre carbón es el catalizador preferido. En estas condiciones, se logra una carga de catalizador ventajosamente baja de 10 por ciento en peso.

Alternativamente, el éster de etilo del ácido 2-hidroxi-3-(nitro-piridinil)-acrílico 3, o su ceto-éster tautómero, se pueden reducir químicamente para proporcionar el compuesto intermedio 4. Por ejemplo, una mezcla del compuesto 3, SnCl_{2} y TiCl_{4} en un disolvente adecuado, tal como por ejemplo etanol, se calienta a reflujo durante aproximadamente 4 horas para proporcionar, después de purificación por los métodos bien conocidos por un experto en la técnica, el compuesto intermedio 4.

Cuando se usa oxalato de dietilo para preparar el compuesto 3, la posterior reducción del compuesto 3 da el compuesto intermedio 4 en forma del éster de etilo. El éster de etilo intermedio 4 se puede convertir opcionalmente en otros ésteres adecuados por procedimientos de transesterificación como conocen bien los expertos en la técnica. Como se muestra en el esquema 1, etapa d, el éster de metilo 5 se puede preparar por tratamiento de una disolución en metanol del éster de etilo 4 en presencia de una base, tal como por ejemplo carbonato de potasio o carbonato de sodio, calentando la mezcla de aproximadamente 50ºC a aproximadamente 80ºC durante aproximadamente 1 hora, o hasta que la reacción se complete, determinado por cromatografía en capa fina u otro análisis cromatográfico adecuado, como conocen bien los expertos en la técnica. La dilución de la reacción con agua y el aislamiento del éster de metilo 5 por filtración o métodos de extracción, como conocen bien los expertos en la técnica, proporcionan el éster de metilo 5.

Como se muestra en el esquema 1, etapa e, los ésteres intermedios 4 ó 5, se pueden convertir en la amida 6 por métodos bien conocidos para el experto en la técnica. Por lo tanto, el tratamiento de una disolución del éster 4 ó 5 en un disolvente polar adecuado, tal como por ejemplo metanol o etanol, con disolución de hidróxido de amonio de aproximadamente 5 N a aproximadamente 7 N durante de aproximadamente 1 día a aproximadamente 3 días a temperatura ambiente, o calentando la disolución a aproximadamente 55ºC durante aproximadamente 10 horas, proporciona la amida primaria 6 después de aislamiento por métodos bien conocidos para el experto en la técnica. Alternativamente, el éster 4 ó 5 se puede suspender en una mezcla de disolución de hidróxido de amonio concentrado y cloruro de litio a temperatura ambiente durante aproximadamente 3 a aproximadamente 5 días hasta que el análisis por cromatografía en capa fina, u otro análisis cromatográfico adecuado, como es bien conocido para los expertos en la técnica, indique que la reacción se ha completado sustancialmente. La amida 6 se aísla de la mezcla de reacción por métodos bien conocidos para el experto en la técnica. Las amidas sustituidas con N-alquilo-C_{1-6} 6 se preparan tratando el éster de azaindol intermedio 4 ó 5 con una alquil(C_{1-6})-amina por métodos bien conocidos para el experto en la técnica. Por ejemplo, el éster de azaindol intermedio 4 ó 5 se puede tratar con una alquil(C_{1-6})-amina, tal como por ejemplo metilamina en forma de una disolución acuosa concentrada o sola con un exceso de la alquil(C_{1-6})-amina, y hacer el seguimiento de la reacción para que se complete por cromatografía en capa fina u otros métodos cromatográficos como conoce bien el experto en la técnica. La N-alquil(C_{1-6})amida 6 deseada se recoge después de dilución de la reacción con agua o por métodos de extracción como conoce bien el experto en la técnica. El tratamiento similar del éster de azaindol intermedio 4 ó 5 con una dialquil(C_{1-6})amina proporciona la correspondiente N-dialquil(C_{1-6})amida 6.

Ventajosamente, la amida primaria 6 se prepara de acuerdo con el esquema 1, etapa e, por adición del éster de etilo del azaindol 4 a una disolución de amoniaco en metanol y calentamiento con presión hasta completarse la reacción. El uso de metanol como disolvente proporciona una solubilidad significativamente mayor del material de partida y un tiempo de reacción significativamente más rápido. El éster de etilo del azaindol 4 también se transesterifica en estas condiciones al éster de metilo de azaindol 5 correspondiente, pero ambos ésteres 4 y 5 se convierten en la amida primaria 6 deseada en las condiciones de reacción. La reacción se lleva a cabo preferiblemente usando amoniaco 7 N en metanol, una temperatura de reacción de aproximadamente 50ºC y una presión inicial de aproximadamente 2,45 kg/cm^{2} durante aproximadamente 49 horas. Durante este tiempo, la presión en el recipiente de reacción disminuye a aproximadamente 1,12 kg/cm^{2}. El final de la reacción se determina por análisis de cromatografía de HPLC u otros análisis cromatográficos bien conocidos por los expertos en la técnica.

Como se muestra en el esquema 1, etapa f, la amida intermedia 6 se tioarila en la posición 3 del anillo de pirrol por métodos bien conocidos para el experto en la técnica. Por ejemplo, una suspensión de la amida intermedia 6 en un disolvente adecuado, tal como por ejemplo dimetilformamida o NMP, se trata con una base adecuada, tal como por ejemplo hidruro sódico o hidruro de litio, a temperatura ambiente, seguido de tratamiento con un disulfuro de diarilo adecuado, y después calentamiento de la mezcla de aproximadamente 90ºC a aproximadamente 100ºC durante de aproximadamente 12 horas a aproximadamente 20 horas. El transcurso de la reacción se sigue por análisis cromatográfico de capa fina u otros métodos cromatográficos bien conocidos para un experto en la técnica. Después, la reacción se concentra, se diluye con agua y se aísla el compuesto deseado de fórmula (I) y se purifica por cromatografía por métodos bien conocidos para el experto en la técnica.

Alternativamente, una mezcla de la amida intermedia 6 y aproximadamente 1,5 equivalentes de carbonato de cesio en un disolvente adecuado, tal como por ejemplo dimetilformamida o NMP, se trata con un disulfuro de diarilo adecuado (aproximadamente 1,1 equivalentes) y después la mezcla se calienta de aproximadamente 90ºC a aproximadamente 100ºC durante de aproximadamente 12 horas a aproximadamente 20 horas. La reacción se sigue por cromatografía de capa fina u otros métodos cromatográficos bien conocidos para un experto en la técnica. El compuesto de fórmula (I) se aísla y se purifica por cromatografía por métodos bien conocidos para el experto en la técnica. Los compuestos de fórmula (I) en la que R_{3}-X es heterociclo-S se preparan de una forma similar usando disulfuros de diheterociclo adecuadamente sustituidos.

Ventajosamente, un compuesto de fórmula (I) se sintetiza de acuerdo con el esquema 1, etapa f, por adición a NMP como disolvente preferido, como una sola porción, de aproximadamente 1,5 equivalentes del disulfuro de diarilo, aproximadamente 2 equivalentes de carbonato de cesio y aproximadamente 1 equivalente de la amida 6. La mezcla se calienta a aproximadamente 120ºC durante aproximadamente 21 horas y la reacción se sigue por HPLC u otros métodos cromatográficos que son bien conocidos para el experto en la técnica. Si es necesario llevar la reacción hasta que se complete, se añaden opcionalmente aproximadamente 0,5 equivalentes de carbonato de cesio, y se continua calentando durante aproximadamente 4 horas. Cuando la reacción se ha completado, determinado por análisis cromatográfico, se enfría, se inactiva vertiéndola en agua, y el compuesto de fórmula (I) deseado se aísla y se purifica por métodos bien conocidos para el experto en la técnica. Cuando se prepara de esta forma un compuesto de fórmula (I), el tiempo de reacción se acorta sorprendentemente de forma significativa, y el compuesto de fórmula (I) se obtiene ventajosamente con un rendimiento mayor (85% frente a 59%) y con suficiente pureza de modo que no es necesaria la purificación cromatográfica adicional del producto.

Como se muestra en el esquema 1, etapa g, el nitrógeno del anillo de pirrol de un compuesto de fórmula (I) se puede N-alquilar por tratamiento de una disolución de un compuesto de fórmula (I) en la que R_{1} es H y un disolvente adecuado, tal como por ejemplo 1,3-dimetil-3,4,5,6-tetrahidro-2(1H)-pirimidinona con un sulfato de dialquilo(C_{1-6}) y una base adecuada, tal como por ejemplo carbonato de cesio, a temperatura ambiente durante de aproximadamente 12 horas a aproximadamente 20 horas. El final de la reacción se determina por análisis de cromatografía en capa fina u otros métodos cromatográficos que son bien conocido para los expertos en la técnica. Cuando ha finalizado, la mezcla de reacción se diluye con agua y el compuesto de fórmula (I) en la que R_{1} es alquilo de C_{1-6} se aísla y se purifica por métodos bien conocidos para los expertos en la técnica. El nitrógeno del anillo pirrol de un compuesto de fórmula (I) también se puede alquilar tratando una disolución en piridina de un compuesto de fórmula (I) en la que R_{1} es H, con un haluro de alquilo C_{1}-C_{6} en presencia de una base adecuada, tal como por ejemplo carbonato de cesio con calentamiento durante de aproximadamente 0,25 horas a aproximadamente 3 horas. La mezcla de reacción se enfría, se diluye con agua o se concentra a sequedad, y se extrae con acetato de etilo. La concentración y purificación por métodos cromatográficos que son bien conocidos para el experto en la técnica, proporcionan el compuesto de fórmula (I) en la que R_{1} es alquilo C_{1}-C_{6}. Se pueden usar otros métodos para la N-alquilación del nitrógeno del anillo pirrol de un compuesto de fórmula (I) en la que R_{1} es H que son bien conocidos para el experto en la técnica, por ejemplo por tratamiento de un compuesto de fórmula (I) en la que R_{1} es H en un disolvente polar adecuado, tal como por ejemplo dimetilformamida o NMP, con una base adecuada, tal como por ejemplo hidruro de sodio o t-butóxido de potasio, y después adición de un haluro de alquilo de C_{1-6}, tal como por ejemplo yoduro de propilo. El final de la reacción se determina por análisis de cromatografía en capa fina u otros métodos cromatográficos bien conocidos para los expertos en la técnica. Cuando ha finalizado, la mezcla de reacción se diluye con agua y el compuesto de fórmula (I) en la que R_{1} es alquilo de C_{1-6} se aísla y se purifica por métodos bien conocidos para los expertos en la
técnica.

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Esquema 2

4

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Como se muestra en el esquema 2, los disulfuros de diarilo se preparan tratando una disolución del sulfuro de arilo adecuado en un disolvente orgánico adecuado, tal como por ejemplo metanol, con una disolución acuosa de perborato de sodio y permitiendo que la mezcla repose durante aproximadamente 12 horas a aproximadamente 24 horas a temperatura ambiente. El diarildisulfuro se puede aislar y purificar por métodos bien conocidos para los expertos en la técnica. Los disulfuros de diheterociclo, tales como por ejemplo el disulfuro de bis(2-tienilo) se preparan de forma similar.

Esquema 3

5

El esquema 3 describe una síntesis del éster de metilo del ácido 1H-pirrolo[3,2-c]piridina-2-carboxílico 5b-1. En el esquema 3, etapa h, una mezcla del éster de 1,1-dimetiletilo del ácido (3-yodo-piridin-4-il)carbámico (7b-1), 3,3-dietoxi-1-propino, una base tal como por ejemplo trietilamina o base de Hunig (N,N-diisopropiletilamina), diclorobis(trifenilfosfina)paladio(II) y yoduro de cobre, se calienta en un disolvente adecuado, tal como por ejemplo DMF seca, en atmósfera inerte a aproximadamente 90ºC durante aproximadamente 3 horas. La mezcla de reacción se enfría a aproximadamente 70ºC y se trata con una base adecuada tal como por ejemplo 1,8-diazabiciclo[5.4.0]undec-7-eno (DBU) o 1,5-diazabiciclo[4.3.0]non-5-eno (DBN), seguido de agitación durante aproximadamente 3 horas a aproximadamente 70ºC y después agitación a temperatura ambiente durante aproximadamente 12 horas. La mezcla de reacción se vierte en acetato de etilo, se lava con agua y salmuera y la fase orgánica se seca, se filtra y se concentra para proporcionar el éster de 1,1-dimetiletilo del ácido 2-(dietoximetil)-1H-pirrolo[3,2-c]piridina-1-carboxílico (8b-1) que se purifica por cromatografía u otros métodos bien conocidos para el experto en la técnica. Como se muestra en el esquema 3, etapa i, la hidrólisis del compuesto 8b-1 se realiza en condiciones ácidas para dar el 1H-pirrolo[3,2-c]piridina-2-carboxaldehído. El tratamiento de 8b-1 con un ácido mineral tal como por ejemplo ácido clorhídrico durante un periodo de tiempo adecuado tal como aproximadamente 20 horas a temperatura ambiente, proporciona una mezcla de 1H-pirrolo[3,2-c]piridina-2-carboxaldehído (9b-1) y éster de 1,1-dimetiletilo del ácido 2-formil-1H-pirrolo[3,2-c]piridina-1-carboxílico, después de aislar y separar por cromatografía la mezcla de productos por métodos bien conocidos para el experto en la técnica. La hidrólisis ácida del éster de 1,1-dimetiletilo del ácido 2-formil-1H-pirrolo[3,2-c]piridina-1-carboxílico calentando a reflujo con un ácido adecuado tal como por ejemplo ácido trifluoroacético y un disolvente adecuado tal como por ejemplo diclorometano, da el 1H-pirrolo[3,2-c]piridina-2-carboxaldehído, 9b-1. Como se muestra en el esquema 3, etapa j, el tratamiento del 1H-pirrolo[3,2-c]piridina-2-carboxaldehído (9b-1) en un disolvente adecuado tal como metanol con cianuro sódico y dióxido de manganeso con enfriamiento a aproximadamente 0ºC y agitación durante aproximadamente 5 horas, proporciona el éster de metilo del ácido 1H-pirrolo[3,2-c]piridina-2-carboxílico 5b-1 después de filtrar, lavar con agua y aislar por métodos bien conocidos para el experto en la técnica.

Todas las diversas realizaciones de los compuestos usados en los métodos de esta invención, según se describen en esta memoria, pueden usarse en el método de tratamiento de diferentes enfermedades y trastornos, como se describe en esta memoria. Como se expone en esta memoria, los compuestos de esta invención son capaces de inhibir los efectos de la caseína quinasa I\varepsilon. Una realización de esta invención proporciona el uso de estos compuestos para preparar un medicamento útil para tratar un trastorno del estado de ánimo o un trastorno del sueño. En otra realización de la presente invención, el trastorno del estado de ánimo puede ser un trastorno de depresión mayor o un trastorno bipolar. Una realización adicional de la presente invención se refiere al tratamiento de un trastorno depresivo en el que el trastorno depresivo es un trastorno depresivo mayor. Otra realización de la presente invención se refiere al tratamiento del trastorno bipolar en el que el trastorno bipolar es el trastorno bipolar I o trastorno bipolar II. Otra realización de la presente invención se refiere al tratamiento de un trastorno del sueño. Una realización adicional de la presente invención se refiere al tratamiento de un trastorno del sueño en el que el trastorno del sueño es un trastorno del ritmo circadiano del sueño. Otra realización de la presente invención se refiere al tratamiento de un trastorno del ritmo circadiano del sueño en el que el trastorno del ritmo circadiano del sueño es un trastorno del sueño por cambio de turno, síndrome de desfase horario, síndrome de fase del sueño avanzada y síndrome de fase del sueño retardada. Un especialista en la técnica apreciará fácilmente que las enfermedades y trastornos indicados expresamente en este documento no pretenden ser limitantes, sino más bien ilustrar la eficacia de los compuestos de la presente invención. De esta manera, debe entenderse que los compuestos de la invención pueden usarse para tratar cualquier enfermedad o trastorno que mejore por la inhibición de la caseína quinasa I\varepsilon.

En otra realización de la presente invención, las composiciones farmacéuticas de los compuestos de fórmula (I) de la invención, se preparan de una forma bien conocida para el experto en la técnica farmacéutica. El vehículo o los excipientes pueden ser un material sólido, semisólido o líquido que puede servir como vehículo o medio para el principio activo. Los vehículos o excipientes adecuados son bien conocidos en la técnica. La composición farmacéutica puede adaptarse para uso oral, por inhalación, parenteral o tópico, y puede administrarse al paciente en forma de comprimidos, cápsulas, suspensiones, jarabes, aerosoles, inhaladores, supositorios, pomadas, polvos, soluciones y similares. Como se usa en esta memoria, la expresión "vehículo farmacéutico" significa uno o más excipientes. Como se describe en este documento, las composiciones farmacéuticas de la invención proporcionan la inhibición de la caseína quinasa I\varepsilon y, de esta manera, son útiles para el tratamiento de enfermedades o trastornos que mejoran por medio de la inhibición de la caseína quinasa I\varepsilon

Para preparar formulaciones de los compuestos de la presente invención, debe tenerse cuidado de asegurar la biodisponibilidad de una cantidad terapéutica eficaz del compuesto o compuestos activos por medio de la vía de administración seleccionada, incluyendo las vías oral, parenteral y subcutánea. Por ejemplo, las vías de administración eficaces pueden incluir las vías subcutánea, intravenosa, intradérmica, intranasal, rectal, vaginal y similares, incluyendo la liberación desde implantes, así como inyección del principio activo y/o la composición directamente en el tejido.

Para administración oral, los compuestos pueden formularse en preparaciones sólidas o líquidas, con o sin diluyentes inertes o vehículos comestibles, tales como cápsulas, píldoras, comprimidos, trociscos, polvos, soluciones, suspensiones o emulsiones. Las cápsulas, píldoras, comprimidos, trociscos y similares también pueden contener uno o más de los siguientes adyuvantes: aglutinantes tales como celulosa microcristalina o goma de tragacanto; excipientes tales como almidón o lactosa, agentes disgregantes tales como ácido algínico, almidón de maíz y similares; lubricantes, tales como ácido esteárico, estearato de magnesio, o Sterotex®, (Stokely-Van Camp Inc., Indinapolis, Indiana); deslizantes, tales como dióxido de silicio coloidal; agentes edulcorantes, tales como sacarosa o sacarina; y agentes saporíferos, tales como menta, salicilato de metilo o saporíferos de fruta. Cuando la unidad de dosificación es una cápsula, también puede contener un vehículo líquido, tal como polietilenglicol o un aceite graso. Los materiales utilizados deben ser farmacéuticamente puros y no tóxicos en las cantidades utilizadas. Alternativamente, las composiciones farmacéuticas pueden prepararse en una forma adecuada para extender la liberación para proporcionar una cantidad terapéutica de un compuesto de fórmula (I) de la invención en una forma adecuada para dosis única diaria, dosis única semanal o dosis única mensual utilizando métodos que son bien conocidos por los expertos en la técnica. Por ejemplo, puede idearse un polímero erosionable que contiene el principio activo.

Para la administración parenteral, el compuesto de la presente invención se puede administrar en forma de dosificaciones inyectables de una disolución o suspensión del compuesto en un diluyente fisiológicamente aceptable con un vehículo farmacéutico que puede ser un líquido estéril tal como agua en aceite o sin la adición de un tensioactivo y otros excipientes farmacéuticamente aceptables. Son aceites ilustrativos que pueden emplearse en las preparaciones los procedentes del petróleo, o de origen animal, vegetal o sintético tales como, por ejemplo, aceite de cacahuete, aceite de soja y aceite mineral. En general, se prefieren vehículos líquidos como agua, disolución salina, disoluciones acuosas de dextrosa u otros azúcares relacionados, etanol y glicoles, tales como propilenglicol, particularmente para las disoluciones inyectables. La preparación parenteral se puede introducir en ampollas, jeringas desechables, o viales de dosis múltiples de plástico inerte o de vidrio.

Las disoluciones o suspensiones descritas anteriormente también pueden incluir uno o más de los siguientes adyuvantes: diluyentes estériles, tales agua para inyección, disolución salina, aceites fijos, polietilenglicoles, glicerina, propilenglicoles u otros disolventes sintéticos; agentes antibacterianos, tales como ácido ascórbico o bisulfito de sodio; agentes quelantes, tales como ácido etilendiaminatetraacético; tampones tales como acetatos, citratos o fosfatos y agentes para ajustar la tonicidad tales como cloruro sódico o dextrosa.

Los compuestos se pueden administrar en forma de un parche cutáneo, una inyección de depósito o una preparación de implante que pueda formularse de tal manera que permita la liberación sostenida del principio activo. El principio activo puede comprimirse en gránulos o pequeños cilindros e implantarse por vía subcutánea o por vía intramuscular como inyecciones de depósito o implantes. Los implantes pueden emplear materiales inertes, tales como polímeros biodegradables y siliconas sintéticas. Se encuentran vehículos farmacéuticos adecuados y técnicas de formulación en textos tales como Remington: The Science and Practice of Pharmacy, 19ª edición, Volúmenes 1 y 2, 1995, Mack Publishing Co., Easton, Pennsylvania, Estados Unidos, que se incorpora en este documento por referencia.

En el tratamiento de diversas estados patológicos como los descritos en este documento, un nivel de dosificación adecuado es de aproximadamente 0,01 mg/kg por día a aproximadamente 250 mg/kg por día, preferiblemente, de aproximadamente 0,05 mg/kg por día a aproximadamente 100 mg/kg por día, y especialmente de aproximadamente 0,05 mg/kg por día a aproximadamente 40 mg/kg por día. Los compuestos de la presente invención se pueden administrar en un régimen de 1 a 4 veces por día y viene dado por la naturaleza de la enfermedad o trastorno que se va a tratar.

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Ejemplos

Los siguientes ejemplos se pretende que sirvan para ilustrar la invención con mayor detalle. Las tablas 1, 2 y 3 proporcionan resúmenes de los compuestos de ejemplo que se preparan en esta memoria. Los compuestos nitro descritos en esta memoria se manejaron con precaución debido a la potencial posibilidad de detonación percibida de dichos compuestos.

A menos que se indique de otra manera, todos los materiales iniciales, reactivos y disolventes se obtienen de proveedores comerciales y se utilizan sin posterior purificación. Todas las reacciones se realizaron en atmósfera inerte con reactivos y disolventes secos. La cromatografía ultrarrápida se llevó a cabo usando gel de sílice EM Science 60 (40 - 63 mm) de acuerdo con la bibliografía, usando los sistemas de disolventes que se describen (Still, W. C.; Kahn, M.; Mitra, A. Rapid Chromatographic Technique for Preparative Separations with Moderate Resolution. J. Org. Chem., 1978, 43, 2923-2925). La cromatografía en capa fina se llevó a cabo usando placas con recubrimiento de gel de sílice de 0,25 mm 60F-254 (EM) y se visualizaron usando vapor de yodo, luz UV o un reactivo de tinción tal como disolución de KMnO_{4} (otras disoluciones de tinción, cuando se mencionan, se prepararon como se describe en: "Thin-Layer Chromatography, A Laboratory Handbook", Egon Stahl, Ed.; Springer-Verlag Berlin-Heidelberg-New York, 1969).

Los espectros de infrarrojos (IR) se registraron en un espectrómetro Nexus 670 FTIR (Nicolet) con muestras preparadas como se indica, y se proporcionan en números de onda (cm^{-1}). Los espectros de ^{1}H RMN se registraron en un espectrómetro Unidad Varian Gemini y/o mercury 300, Unity 400, o Unity plus y/o Inova 500 MHz, dándose los datos de los desplazamientos químicos (\delta) en ppm con respecto a tetrametilsilano (0,0 ppm) o cloroformo (CDCl_{3}, 7,26 ppm) como referencia. Los espectros de RMN ^{13}C se registraron en un instrumento Varian Unity (100,57 MHz, frecuencia 13C), dándose los datos de los desplazamientos químicos (\delta) en ppm en relación a CDCl_{3} (77,0 ppm), a menos que se indique otra cosa. Los espectros de masas (EM) se obtuvieron en un Sistema Espectrómetro de Masas Finnigan MAT Model TSQ 700 por ionización química a 120 eV usando metano (CI, 120 eV). La Cromatografía Líquida-Espectrometría de Masas (LCMS) se realizó en un Micromass LCT conectado con un manipulador de líquidos Gilson 215. El análisis espectrométrico de masas de alta resolución (espectro de masas exacto) se realizó en el modo ESI con una resolución de masa de 10.000 usando un espectrómetro de masas Micromass QTOF. Se determinaron los valores de masa exactos para los iones moleculares protonados (M + 1), donde M se refiere al ion molecular.

Preparación de pirrolo[3,2-b]piridinas (4-Azaindoles) 2-Metil-3-nitro-piridina, 2a-1 (Esquema 1, etapa a)

Se añade sodio metal (3,5 g) en porciones a lo largo de 1 hora a un matraz de 3 bocas que contiene 79 ml de malonato de dietilo calentado a 90ºC en atmósfera de nitrógeno. Se baja la temperatura a 60ºC y se añade 2-cloro-3-nitropiridina (1a-1, 25,0 g) en porciones a lo largo de 15 min. El color de la reacción se vuelve rojo oscuro. La disolución se mantiene durante 3 h a 60ºC y después se deja en reposo a t.a. a lo largo de una noche. La Tlc indica que queda material de partida. La disolución se calienta a 80ºC durante 3 h adicionales (hasta completarse la reacción). Se separa el malonato de dietilo a presión reducida y se recoge el residuo marrón oscuro en una mezcla de H_{2}SO_{4} conc. (18 ml) y H_{2}O (32 ml). La mezcla se calienta durante 7 h a 105ºC (descarboxilación) y después se deja en reposo a t.a. a lo largo de una noche. La mezcla se lava con 3x150 ml de Et_{2}O y 2x200 ml de EtOAc, y se descartan los lavados. La fase acuosa se basifica a pH 8-9 con NaOH y se extrae con 3x200 ml de EtOAc. Los extractos orgánicos combinados se filtran sobre Celite® (tierra de diatomeas) (Celite Corporation, 137 West Central Avenue, Lompor, California 93436) y el disolvente se separa a presión reducida. El residuo cristaliza para dar el compuesto 2a-1 (15,0 g, 68%), p.f. 29-31ºC.

2-Metil-3-nitro-piridina, 2a-1 (Esquema 1, etapa a)

Se calienta una mezcla de 2-cloro-3-nitro-piridina (1a-1, 7,9 g, 49,8 mmol), ácido metilborónico (1,10 equiv 54,8 mmol, 3,30 g), K_{2}CO_{3} (3,0 equiv, 150 mmol, 20,7 g) y Pd(PPh_{3})_{4} (1,2 g, 1,2 mmol) a 110ºC en dioxano (250 ml) durante 16 h. Se deja enfriar la reacción a t.a., se concentra hasta un aceite oscuro y se trata por cromatografía ultrarrápida en SiO_{2} (heptano/Et_{2}O 3:1, el aceite se diluye con cantidades limitadas de CH_{2}Cl_{2} para aplicar a la columna) para dar el compuesto 2a-1 (Niu, C.; Li, J.; Doyle, T. W.; Chen, S-H. Tetrahedron, 1998, 6311-6318).

2-Metil-3-nitropiridina, 2a-1 (Esquema 1, etapa a)

Se añade NMP (2,0 litros) a un matraz de 3 bocas de 12 litros, provisto de un agitador, una sonda de temperatura y un refrigerante de reflujo provisto de un adaptador de gas para N_{2} y se enfría a 16ºC. Se añade terc-butóxido sódico (0,675 kg, 6,81 mol, 2,2 equiv, corregido para pureza del 97%) en una porción, después de lo cual se observa una reacción exotérmica inmediata a 29ºC. La mezcla se agita durante 30 min para disolver parcialmente el NaOt-Bu y después se añade malonato de dietilo (0,943 litros, 6,19 mol, 2,0 equiv) de 20ºC a 35ºC a lo largo de 70 min con enfriamiento continuo, después de lo cual se forma una disolución homogénea. Se agita durante 20 min y se añade una disolución de 2-cloro-3-nitropiridina (1a-1, 0,491 kg, 3,09 mol, 1,0 equiv) y NMP (1,0 litro) a la mezcla de reacción de 29ºC a 44ºC a lo largo de 70 min. La mezcla de reacción se calienta a 50ºC. El avance de la reacción se sigue por HPLC (Agilent series 1100; columna Waters Symmetry C8 (5 \mu) (3,9 x 150 mm), caudal de 1,0 ml/min. Isocrático: CH_{3}CN/TFA ac. al 0,1%, 50/50; \lambda = 220 nm. R_{T}: malonato de dietilo = 2,6 min, 2-cloro-3-nitropiridina = 2,7 min, éster de dietilo del ácido 2-(3-nitro-piridin-2-il)-malónico = 3,9 min). Normalmente, se produce >99% de conversión en 1-2 h. Se interrumpe el calentamiento y se añade H_{2}SO_{4} 6 M (2,17 litros) de 50ºC a 59ºC a lo largo de 45 min. Durante la adición se forma un precipitado sólido espeso. La mezcla se calienta a 100ºC. Se produce evolución de gas. El progreso de la reacción se sigue por HPLC como se ha descrito previamente (R_{T}: 2-metil-3-nitropiridina 2a-1 = 2,0 min, éster de dietilo del ácido 2-(3-nitro-piridin-2-il)-malónico = 3,9 min). Normalmente se observa una conversión de >99% en 12 h. La mezcla se deja enfriar a 40ºC y se vierte sobre agua helada (20 kg, pH 1,5). Se añade NaOH ac. al 25% (2,65 litros) de -11ºC a -6ºC a lo largo de 20 min a pH 11. Se añade tolueno (4,0 litros) y se agita la mezcla durante 10 min. La mezcla se filtra a través de Celite® para separar los sólidos inorgánicos y la torta de filtración se lava con tolueno (6,0 litros). Se separan las fases y la fase acuosa se extrae dos veces con tolueno (6,0 litros y 4,0 litros). Las fases de tolueno combinadas se filtran a través de Celite® y la torta de filtración se lava con tolueno (1,0 litro). Los filtrados de tolueno se combinan y se lavan con agua (2 x 3,0 litros). La fase de tolueno se seca (MgSO_{4}), se filtra y se concentra para dar la 2-metil-3-nitropiridina 2a-1 (0,34 kg, 80% de rendimiento, corregido para el NMP y tolueno residuales) en forma de un aceite. El análisis por HPLC muestra que el material es 96% puro. RMN ^{1}H (CDCl_{3}) \delta 2,87 (s, 3H), 7,35 (dd, 1H, J = 4,8, 8,1 Hz), 8,27 (dd, 1H, J =1,4, 8,1 Hz), \delta 8,72 (dd, 1H, J =1,4, 4,8 Hz).

Éster de etilo del ácido 2-hidroxi-3-(3-nitro-piridin-2-il)-acrílico, 3a-1 (Esquema 1, etapa b)

En un matraz de 3 bocas que contiene 500 ml de etanol absoluto en atmósfera de N_{2}, se añaden 2,2 g (0,0956 átomo-gramos) de sodio. Tras reaccionar todo el sodio, se añade oxalato de dietilo (98 ml) gota a gota, y después se añade el compuesto 2a-1 (1 equivalente). El color vira de amarillo claro a marrón tras la adición. La disolución resultante se deja en reposo durante 2 días a t.a. La mezcla naranja se trata con HCl 5 N (pH =1), el precipitado se recoge por filtración y la torta de filtración se lava con 100 ml de EtOH y 200 ml de éter di-isopropílico para dar 3a-1 como el éster de etilo del ácido 2-hidroxi-3-(3-nitro-piridin-2-il)-acrílico (R_{4}=H, 20 g, 86%) o su ceto-éster tautómero o como una mezcla de tautómeros ceto-enol. RMN ^{1}H (DMSO-d_{6}) \delta 8,83 (dd, 1H, J =1,1,5,0 Hz), 8,65 (dd, 1H, J =1,5, 8,4 Hz), 7,56 (dd, 1H, J = 5,0, 8,4 Hz), 7,11 (s, 1H), 3,47 (s ancho, 1H), 4,28 (q, 2H, J = 7,1 Hz), 1,30 (t, 3H, J = 7,0 Hz).

Éster de etilo del ácido 2-hidroxi-3-(3-nitro-piridin-2-il)-acrílico, 3a-1 (Esquema 1, etapa b)

Se añade tetrahidrofurano (2,7 litros) a un matraz de 3 bocas de 22 litros, provisto de un agitador, una sonda de temperatura y un embudo de adición provisto de un adaptador de entrada de gas para el N_{2} y se enfría a aproximadamente 2ºC. Se añade etóxido sódico (0,409 kg, 6,02 mol, 2,0 equiv) en una porción. Se observa una ligera reacción exotérmica a 2,7ºC. La mezcla se agita durante 20 min, se añade oxalato de dietilo (1,22 litros, 9,03 mol, 3,0 equiv) a -0,3-4ºC a lo largo de 50 min (ligera reacción exotérmica) y después se agita la mezcla durante 10 min. Se añade una disolución de 2-metil-3-nitropiridina (2a-1, 0,415 kg, 3,01 mol, 1,0 equiv) y THF (0,625 litros) a 4-9ºC a lo largo de 22 min sin enfriamiento. La mezcla se deja calentar a t.a. a lo largo de 1 h. El progreso de la reacción se sigue por HPLC (Agilent series 1100 usando las siguientes condiciones: columna Waters Symmetry C8 (5 \mu) (3,9 x 150 mm), caudal de 1,0 ml/min; CH_{3}CN/TFA ac. al 0,1%, 55/45; \lambda = 210 nm; R_{T}: 2-metil-3-nitropiridina 2a-1 = 1,8 min, 3a-1 = 2,7 min). Normalmente se observa una conversión de >99% al producto en 2-3 h. Durante la reacción se forma un precipitado rojo espeso. La mezcla de reacción se enfría a aproximadamente 1ºC y se añade disolución saturada de NH_{4}Cl (2,0 litros) de 1ºC a 9ºC. Se añade agua (5,9 litros) (pH 7,4) y después se añade IPA (3,5 litros). La mezcla se agita durante 1 h y el sólido de color rojo se recoge por filtración. La torta de filtración se lava con IPA/H_{2}O (1:4, 8,0 litros), H_{2}O (15 litros) y se seca al aire. La torta de filtración se seca (40ºC/0,1 mm de Hg) para dar el compuesto 3a-1 (0,635 kg, 89%). RMN ^{1}H (CDCl_{3}) \delta 1,40 (t, 3H, J = 7 Hz), 4,38 (q, 2H, J = 7 Hz), 7,36 (m, 2H), 8,42 (dd, 1H J = 1,5, 8,4 Hz), 8,66 (dd, 1H, J =1,5, 4,8 Hz), 14,52 (2, 1H, OH).

Éster de etilo del ácido 1H-pirrolo[3,2-b]piridina-2-carboxílico, 4a-1 (Esquema 1, etapa c)

Se hidrogena el compuesto 3a-1 (20 g) con paladio sobre carbón al 10% (5,5 g) en EtOH (350 ml) a t.a. durante 3 horas a 84 kg/cm^{2}. La mezcla de reacción se filtra a través de Celite® y el filtrado se concentra para dar el éster 4a-1 (R_{4}=H) con 39% de rendimiento.

Alternativamente, el compuesto 3a-1 se reduce con SnCl_{2} (5,0 equiv), TiCl_{4} (2,5 equiv) en EtOH a reflujo durante 4 h, se enfría a temperatura ambiente, se concentra y se purifica por cromatografía en gel de sílice para proporcionar el éster 4a-1 (R_{4}=H) con 81% de rendimiento. RMN ^{1}H (DMSO-d_{6}) \delta 13,48 (s ancho, 1H), 8,80 (dd, 1H, J =0,7, 5,4 Hz), 8,56 (dd, 1H, J =0,7, 8,4 Hz), 7,80 (dd, 1H, J = 5,5, 8,4 Hz), 7,37 (s, 1H), 4,40 (q, 2H, J = 7,0 Hz), 1,38 (t, 3H, J = 7,0 Hz).

Éster de etilo del ácido 1H-pirrolo[3,2-b]piridina-2-carboxílico, 4a-1 (Esquema 1, etapa c)

En un reactor Parr de 2 litros de paredes gruesas, se añaden el compuesto 3a-1 (56,8 g, 0,24 mol), etanol (200 proof, 850 ml, 15 partes) y Pd/C al 10% (5,7 g, 10% en peso). El recipiente de reacción se conecta a un hidrogenador Parr, se lava por barrido con hidrógeno y se presuriza hasta una suspensión naranja a 3,15 kg/cm^{2}. Se agita a t.a. durante 1 h, y durante este tiempo la temperatura sube a 57ºC. Cuando la temperatura de la mezcla de reacción se estabiliza a 35ºC, se calienta lentamente la reacción a 40ºC durante 3 h. Cuando la reacción se ha completado, determinado por TLC (gel de sílice, MeOH al 1% en CH_{2}Cl_{2}), la mezcla de reacción se enfría a t.a., la suspensión se filtra a través de Celite®, y la torta de filtración se lava con EtOH (4 x 200 ml). El filtrado amarillo se concentra para dar un sólido (41,6 g), se añade acetato de etilo (302 ml) y se calienta en un baño de vapor de agua. La mezcla se enfría a t.a. y se añade heptano (600 ml) para precipitar el producto. La mezcla se agita en un baño de hielo durante 1 h, se filtra y la torta de filtración se lava con heptano (100 ml). La torta de filtración se seca (50ºC/0,1 mm de Hg) durante 24 h para dar el compuesto 4a-1 en forma de un sólido gris claro (36,6 g, 81% de rendimiento). RMN ^{1}H (DMSO-d_{6}) 1,36 (t, 3H, J = 7,0 Hz), 4,36 (q, 2H, J = 7,0 Hz), 7,19 (s, 1H), 7,25 (dd, 1H, J = 4,5, 8,1 Hz), 7,82 (d, 1H, J = 8,1 Hz), 8,44 (d, 1H, J = 4,5 Hz), \delta 12,11 (s, 1H).

Amida del ácido 1H-pirrolo[3,2-b]piridina-2-carboxílico, 6a-1 (Esquema 1, etapa e)

El éster 4a-1 se disuelve en disolución de amoniaco 5 N en MeOH y se calienta a 55ºC durante 10 h para dar, después de tratamiento, la amida 6a-1 (R_{2}=NH_{2}, R_{4}=H) con 44% de rendimiento, p.f. 332ºC (desc.). RMN ^{1}H (DMSO-d_{6}) \delta 11,72 (s ancho, 1H), 8,36 (dd, 1H, J =1,5, 4,5 Hz), 8,10 (s ancho, 1H), 7,76 (dd, 1H, J = 2,2, 8,2 Hz), 7,52 (s ancho, 1H), 7,24 (s, 1H), 7,17 (dd, 1H, J = 4,5, 8,2 Hz).

Amida del ácido 1H-pirrolo[3,2-b]piridina-2-carboxílico, 6a-1 (Esquema 1, etapa e)

El éster 4a-1 se disuelve en disolución de amoniaco 7 N en MeOH y se agita a t.a. durante varios días, haciendo el seguimiento por tlc (MeOH/CH_{2}Cl_{2} al 10%). Cuando se ha completado, la reacción se concentra hasta el volumen mínimo, se diluye con exceso de H_{2}O, el precipitado se recoge por filtración, y se seca para dar la amida 6a-1 (R_{2}=NH_{2}, R_{4}=H) con rendimiento aproximadamente cuantitativo.

Amida del ácido 1H-pirrolo[3,2-b]piridina-2-carboxílico, 6a-1 (Esquema 1, etapa e)

El éster 4a-1 se suspende en NH_{4}OH concentrado y se agita a t.a. durante varios días haciendo el seguimiento por tlc (MeOH/CH_{2}Cl_{2} al 10%). Cuando se ha completado, la reacción se concentra hasta el volumen mínimo, se diluye con exceso de H_{2}O, el precipitado se recoge por filtración, y se seca para dar la amida 6a-1 (R_{2}=NH_{2}, R_{4}=H) con rendimiento aproximadamente cuantitativo.

Amida del ácido 1H-pirrolo[3,2-b]piridina-2-carboxílico, 6a-1 (Esquema 1, etapa e)

Se añade una disolución de NH_{3} 7 N en MeOH (1,5 litros, 10,5 mol, 20 equiv) en un reactor de presión de 3 litros a t.a. y después se añade el éster del azaindol 4a-1 (100 g, 0,53 mol) en forma de un sólido. La suspensión se calienta lentamente a 50ºC para dar una disolución transparente. Se observa que la presión inicial de 2,45 kg/cm^{2} disminuye a 1,12 kg/cm^{2} a lo largo de 4 h. La reacción se mantiene a 50ºC durante 49 h. Se observa una presión final de 0,7 kg/cm^{2.}El seguimiento del progreso de la reacción se hace por HPLC (Agilent series 1100 usando las siguientes condiciones: columna Waters Symmetry C8 (5 \mu) (3,9 x 150 mm), caudal de 1,0 ml/min, condiciones del gradiente de elución: tiempo (minutos), relación agua:acetonitrilo-metanol (acetonitrilo-metanol usado como una disolución 1:1) 0 min, 70:30; 10 min, 20:80; 15 min, 70:30; 20 min, 70:30; \lambda_{1}= 210 nm, \lambda_{2} = 220 nm, caudal 1,0 ml/min, R_{T}: éster de etilo 4a-1 = 5,6 min, éster de metilo 5a-1 = 4,2 min, amida 6a-1 = 2,2 min). Se observa que se forma el correspondiente éster de metilo 5a-1 en la reacción, y 5a-1 sirve también como producto intermedio en la reacción. La reacción se enfría a 4ºC y el precipitado resultante se aísla por filtración a vacío. La torta de filtración se lava con metil-terc-butil-éter (2 x 100 ml) y se seca (40ºC/0,1 mm de Hg) durante 20 h para dar el compuesto 6a-1 en forma de un sólido gris (78,6 g, 93%). RMN ^{1}H (DMSO-d_{6}) \delta 7,17 (dd, 1H, J = 4,5, 8,4 Hz), 7,53, 8,11 (2s, 2H, NH_{2}), 7,76 (d, 1H, J = 8,1 Hz), 8,37 (d, 1H, J = 1,5 Hz), 11,72 (s, 1H, NH).

Metilamida del ácido 1H-pirrolo[3,2-b]piridina-2-carboxílico, 6a-2

Se agita el éster de 4-azaindol 4a-1 (R=Et, R_{4}=H) solo en metilamina (disolución al 40% en peso en H_{2}O) a t.a. durante 16 h haciendo el seguimiento por tlc (MeOH/CH_{2}Cl_{2} al_{ }10%). Cuando se ha completado, la reacción se diluye con exceso de H_{2}O, el precipitado se recoge por filtración y se seca para proporcionar el compuesto 6a-2 (R_{2}=NHCH_{3}, R_{4}=H) en forma de un sólido de color marfil (véase el procedimiento sintético general VI). EM obs. 176,07 (M + 1).

Preparación general de los materiales de partida disulfuro de diarilo y disulfuro de diheterociclo (Esquema 2)

Se añade a una disolución del feniltiol no sustituido o sustituido adecuadamente (17,2 milimoles, 1,0 equivalentes) y MeOH (30 ml), una disolución de perborato de sodio (22 milimoles) y agua (20 ml) con agitación y luego se deja reposar la reacción a t.a. durante la noche. Se recoge el sólido por filtración y se lava con metanol para dar el disulfuro de diarilo deseado. Otros disulfuros, incluyendo los disulfuros de diheterociclo (por ejemplo, disulfuro de bis(2-tienilo)) se pueden preparar de forma similar a la descrita para la preparación de los disulfuros de diarilo deseados.

Procedimiento sintético general I (transesterificación, Esquema 1, etapa d)

Se añade el 4-azaindol-2-carboxilato de etilo 4a (42,3 mmol) en MeOH (50 ml), K_{2}CO_{3} (1,20 equiv, 50,7 mmol) y la suspensión se agita con calentamiento a 55ºC durante 1 h. La reacción se sigue por tlc (Et_{2}O/hept). Cuando se ha completado, la reacción se concentra a vacío, se diluye con H_{2}O y se agita durante 15 min. El sólido se recoge por filtración y se seca en un horno a vacío a 65ºC durante 3 h para dar de aproximadamente 90% a aproximadamente 100% del 4-azaindol-2-carboxilato de metilo 5a deseado.

Procedimiento sintético general II (amidación usando NK_{4}OH, Esquema 1, etapa e)

El éster 4-azaindol-carboxilato 4a o 5a (40,0 mmol) se agita en forma de una suspensión en NH_{4}OH concentrado (100 ml) y LiCl (1,0 equiv) a t.a. durante 16 h. El sólido de color marfil se recoge por filtración, se lava con H_{2}O y se seca al aire para dar la amida primaria 6a (60-75%).

Procedimiento sintético general III (amidación usando NH_{3}/MeOH, Esquema 1, etapa e)

Se agita el 4-aza-2-indol-carboxilato de etilo 4a (4,67 mmol) en NH_{3}/MeOH 7 N (20 ml) y se añade LiCl (1,0 equiv, 4,67 mmol). La reacción se agita a t.a. durante 5 días haciendo el seguimiento por tlc (MeOH/CH_{2}Cl_{2} al 10%) y durante este tiempo se forma un precipitado. La mezcla se concentra hasta obtener un volumen mínimo, se diluye con H_{2}O y el sólido se recoge por filtración. La torta de filtración se lava con H_{2}O y se seca a vacío a 60ºC para dar la amida primaria 6a (>90%).

Procedimiento sintético general IVa (3-tioarilación usando NaH como base, Esquema 1, etapa f)

A una suspensión agitada de NaH (dispersión en aceite al 60%, 1,2 equiv, 9,8 mmol) en DMF (75 ml) en atmósfera de N_{2} a t.a., se añade la 4-aza-indol-2-carboxamida 6a (8,18 mmol) en forma de una disolución en DMF (5 ml). Después de 5 min se añade el disulfuro de diarilo (1,0 equiv, 8,18 mmol) en una porción y después la reacción se calienta con agitación a 95ºC durante 16 h. La reacción se sigue por distribución de una parte alícuota de la mezcla de reacción entre EtOAc/H_{2}O y haciendo el seguimiento por tlc (MeOH/CH_{2}Cl_{2} al 10%). Cuando se ha completado, la mezcla de reacción se concentra a vacío, se diluye con H_{2}O, se agita durante 30 min, se filtra y la torta de filtración se seca al aire. El sólido bruto se cromatografía en SiO_{2} eluyendo con CH_{2}Cl_{2}/MeOH 9:1 para proporcionar el 3-ariltioéter Ia (R_{1} = H).

Procedimiento sintético general IVb (3-tioarilación usando Cs_{2}CO_{3}, Esquema 1, etapa f)

A la 4-aza-indol-2-carboxamida 6a (0,42 mmol) disuelta en DMF seca (10 ml) se añade Cs_{2}CO_{3} (100 mg, 0,31 mmol) y después se añade disulfuro de diarilo (1,1 equiv, 0,46 mmol). La reacción se calienta en atmósfera de N_{2} a 95ºC durante 16 h (seguir la finalización por tlc/LCMS)La reacción se deja enfriar a t.a. y después se vierte con agitación en H_{2}O enfriada con hielo. El precipitado se recoge por filtración y se seca en un horno a vacío a 40ºC para proporcionar el producto bruto en forma de un sólido cristalino marrón. La purificación por cromatografía en SiO_{2} proporciona el 3-ariltioéter Ia (R_{1} = H).

Procedimiento sintético general V (N-metilación del anillo de pirrol, Esquema 1, etapa g)

A la amida del ácido 3-sustituido-4-azaindol-2-carboxílico Ia (R_{1}=H, 0,24 mmol) y la 1,3-dimetil-3,4,5,6-tetrahidro-2(1H)-pirimidinona (5,0 ml), se añade con agitación sulfato de dimetilo (1,5 equiv, 0,36 mmol) y Cs_{2}CO_{3} (2,0 equiv, 0,48 mmol). La reacción se agita a t.a. durante 16 h haciendo el seguimiento por tlc (MeOH/CH_{2}Cl_{2} al 10%). Cuando se ha completado, la mezcla de reacción se concentra a un volumen mínimo, se diluye con H_{2}O y el precipitado se recoge por filtración. La torta de filtración se lava con H_{2}O adicional y se seca a vacío a 40ºC para dar la amida del ácido 1-metil-3-sustituido-4-azaindol-2-carboxílico Ia (R_{1}=CH_{3}, 65%).

Se pueden usar otros métodos para la N-alquilación del nitrógeno del anillo de pirrol de un compuesto de fórmula (I) que son bien conocidas para el experto en la técnica. Por ejemplo, por tratamiento de un compuesto de fórmula (I) en la que R_{1} es H en un disolvente polar adecuado, tal como por ejemplo dimetilformamida o NMP, con una base adecuada, tal como por ejemplo hidruro sódico o t-butóxido potásico, y después adición de un haluro de alquilo, tal como por ejemplo yoduro de propilo, que proporciona el compuesto de fórmula (I) en la que R_{1} es propilo.

Procedimiento sintético general VI Preparación general del indol-2-metilamida y otras amidas secundarias (Esquema 1, etapa e)

El éster de 4-azaindol 4 ó 5 se agita con alquil(C_{1-6})amina (p. ej. disolución de metilamina al 40% en peso en H_{2}O o sola) a t.a. durante 16 h, haciendo el seguimiento por tlc (MeOH/CH_{2}Cl_{2} al 10%). Cuando se ha completado, la reacción se diluye con exceso de H_{2}O, el sólido precipitado se recoge por filtración y se seca para dar la amida secundaria 6 (R_{2}=NH-alquiloC_{1-6}) con rendimiento aproximadamente cuantitativo.

Amida del ácido 3-fenilsulfanil-1H-pirrolo[3,2-b]piridina-2-carboxílico, Ia-1

A la amida del ácido 1H-pirrolo[3,2-b]piridina-2-carboxílico (6a-1, R_{4}=H; 1,0 equiv) en DMF (100 mL), se añade disulfuro de dimetilo (1,0 equiv) como se describe en el procedimiento sintético general IVb para proporcionar el compuesto Ia-1 en forma de un sólido cristalino marrón (81%), p.f. 251ºC, tlc R_{f} = 0,49. RMN ^{1}H (DMSO-d_{6}) \delta 12,48 (s ancho, 1H), 8,45 (dd,1H, J =1,5, 4,4 Hz), 8,11 (s ancho, 1H), 7,89 (dd, 1H, J =1,5, 4,0 Hz se superpone con un s ancho, 1H), 7,31 (dd, 1H, J = 1,4, 4,5 Hz), 7,28 (dd, J = 1,5, 4,5 Hz, 1H) 7,21 (m, 2H), 7,13-7,05 (m, 3H); m/z = 270,06 (M + H). Análisis calculado para C_{14}H_{11}N_{3}SO: C, 62,44; H, 4,12; N, 15,6. Encontrado: C, 62,31; H, 4,08; N, 15,39.

Amida del ácido 3-fenilsulfanil-1H-pirrolo[3,2-b]piridina-2-carboxílico, Ia-1 usando exceso de Cs_{2}CO_{3}

Se añade NMP (1,20 litros) a un matraz de 3 bocas, de 3 litros, provisto con un agitador mecánico, una sonda de temperatura y un refrigerante de reflujo en atmósfera de nitrógeno. Se añade en una porción disulfuro de difenilo (177,8 g, 1,5 equiv), Cs_{2}CO_{3} (351,9 g, 2:0 equiv) y la amida 6a-1 (87,5 g, 0,54 mol). La mezcla de reacción se calienta a 120ºC durante 21 h. El seguimiento del progreso de la reacción se hace por HPLC (Agilent series 1100 usando las siguientes condiciones: columna Waters Symmetry C8 (5 \mu) (3,9 x 150 mm), caudal de 1,0 ml/min, condiciones del gradiente de elución: tiempo (minutos), relación agua:acetonitrilo-metanol (acetonitrilo-metanol usado como una disolución 1:1) 0 min, 70:30; 10 min, 30:70; 15 min, 30:70; 20 min, 70:30; 25 min, 70:30; \lambda_{1}= 210 nm, \lambda_{2} = 300 nm, caudal: 1,0 ml/min. (R_{T}: amida 6a-1 = 2,1 min, producto Ia-1 = 5,7 min, PhSSPh = 14,0 min, NMP = 1,9 min). Si la reacción no se ha completado, se añade Cs_{2}CO_{3} adicional (87,97 g, 0,5 equiv) y la reacción se mantiene a 120ºC durante otras 4 h. La mezcla de reacción se enfría a t.a., se vierte en agua helada y se agita durante 1 h. El sólido de color marrón se recoge por filtración, la torta de filtración se lava dos veces con agua y se seca al aire durante 6 h. El sólido se suspende dos veces con EtOAc/heptano al 20% a t.a. para separar el PhSSPh. El producto bruto se decolora en THF con carbón a reflujo durante 1 h, se filtra y se trata para dar el compuesto Ia-1 en forma de un sólido marrón claro. El compuesto Ia-1 se suspende en etanol (12 partes), se calienta a reflujo durante 1 hora, y se enfría en un baño de hielo con agitación. El sólido se recoge por filtración, se lava con EtOH frío y se seca (40ºC/0,1 mm de Hg) para dar el compuesto Ia-1. RMN ^{1}H (DMSO-d_{6}) \delta 7,05-7,32 (m, 6H), 7,91 (m, 2H), 8,12 (s, 1H, NH_{2}), 8,45 (dd, 1H, J = 4,5, 0,9 Hz), 12,50 (s, 1H, NH). Análisis: Calculado para C_{12}H_{11}N_{3}OS: 62,44% C, 4,12% H, 15,60% N; Encontrado: 62,31% C, 4,08% H, 15,39% N.

Amida del ácido 3-(3-fluorofenilsulfanil)-1H-pirrolo[3,2-b]piridina-2-carboxílico, Ia-2

La amida del ácido 1H-pirrolo[3,2-b]piridina-2-carboxílico 6a-1 (1,20 g, 74,4 mmol) en DMF (100 ml) se trata con disulfuro de bis-(3-fluorofenilo) (1,90 g, 1,0 equiv) como se describe en el procedimiento sintético general IV para proporcionar el compuesto Ia-2 en forma de un sólido de color marfil (1,73 g, 80,8%), p.f. 235-237 ºC, tlc R_{f} =0,49. RMN ^{1}H (DMSO-d_{6}) \delta 12,52 (s ancho, 1H), 8,45 (dd, 1H, J =1,2, 4,5 Hz), 8,10 (s ancho, 1H), 7,90 (dd, 1H, J =1,2, 8,2 Hz), 7,83 (s ancho, 1H), 7,27 (dd, 1H, J = 4,5, 8,2 Hz y dd, J = 7,8, 14,0 Hz, 1H que se superponen), 6,97-6,82 (m, 3H); EM Obs. 288 (M + 1); LC/MS: a = 100%. Análisis: Calculado para C_{14}H_{10}FN_{3}SO: C, 58,53; H, 3,51; N, 14,62. Encontrado: C, 57,95; H, 3,54; N, 14,25.

Amida del ácido 3-(3-clorofenilsulfanil)-1H-pirrolo[3,2-b]piridina-2-carboxílico, Ia-3

La amida del ácido 1H-pirrolo[3,2-b]piridina-2-carboxílico 6a-1 (1,20 g, 74,4 mmol) en DMF (100 ml) se trata con disulfuro de bis-(3-clorofenilo) (2,13 g, 1,0 equiv) como se describe en el procedimiento sintético general IVb para proporcionar el compuesto Ia-3 en forma de un sólido de color marfil (1,95 g, 86,3%), p.f. 246,5-248ºC, tlc R_{f} = 0,49. RMN ^{1}H (DMSO-d_{6}) \delta 12,54 (s ancho, 1H), 8,45 (dd, 1H, J =1,2,4,5 Hz), 8,11 (s ancho, 1H), 7,90 (dd, 1H, J =1,3, 8,3 Hz) que se superpone con 7,84 (s ancho, 1H), 7,31 (dd, 1H, J = 4,5, 8,2 Hz) 7,22 (m, 2H), 7,06-6,99 (m, 2H). Análisis: Calculado para C_{14}H_{10}ClN_{3}SO: C, 55,36; H, 3,32; N, 13,83. Encontrado: C, 54,94; H, 3,26; N, 13,62.

Amida del ácido 3-(3-bromofenilsulfanil)-1H-pirrolo[3,2-b]piridina-2-carboxílico, Ia-4

La amida del ácido 1H-pirrolo[3,2-b]piridina-2-carboxílico 6a-1 (1,0 equiv) en DMF se trata con disulfuro de bis-(3-bromofenilo) (1,1 equiv) como se describe en el procedimiento sintético general IVb para proporcionar el compuesto Ia-4 en forma de un sólido de color marfil. RMN ^{1}H (DMSO-d_{6}) \delta 12,55 (s ancho, 1H), 8,46 (dd, 1H, J =1,2,4,5 Hz), 8,10 (s ancho, 1H), 7,91 (dd, 1H, J =1,2, 8,2 Hz) que se superpone con 7,85 (s ancho, 1H), 7,33 (dd, 1H, J = 4,7, 8,5 Hz), 7,20 (m, 2H), 7,05-7,00 (m, 2H). EM obs. 348,1 (M + 1).

Amida del ácido 3-(2-clorofenilsulfanil)-1H-pirrolo[3,2-b]piridina-2-carboxílico Ia-5

La amida del ácido 1H-pirrolo[3,2-b]piridina-2-carboxílico 6a-1 (1,0 equiv) en DMF se trata con disulfuro de bis-(2-clorofenilo) (1,1 equiv) como se describe en el procedimiento sintético general IVb para proporcionar el compuesto Ia-5 en forma de un sólido de color marfil. RMN ^{1}H (DMSO-d_{6}) \delta 12,61 (s ancho, 1H), 8,46 (dd, 1H, J =1,0, 4,5 Hz), 8,09 (s ancho, 1H), 7,95 (d, 1H, J =8,0 Hz), 7,76 (s ancho, 1H), 7,49 (dd, 1H, J = 1,5, 7,5 Hz), 7,34 (dd, 1H, J = 4,5, 8,0 Hz), 7,14 (dt, 1H, J =1,5, 7,5 Hz), 7,08 (dt, 1H, J = 1,5,7,5 Hz), 6,49 (dd, 1H, J =1,5, 7,5 Hz). EM obs. 304,7 (M + 1).

Amida del ácido 3-(4-clorofenilsulfanil)-1H-pirrolo[3,2-b]piridina-2-carboxílico, Ia-6

La amida del ácido 1H-pirrolo[3,2-b]piridina-2-carboxílico 6a-1 (1,0 equiv) en DMF se trata con disulfuro de bis-(4-clorofenilo) (1,1 equiv) como se describe en el procedimiento sintético general IVb para proporcionar el compuesto Ia-6 en forma de un sólido de color marfil, p.f.= 266ºC, EM Obs 304,7 (M + 1).

Amida del ácido 3-(2,4-diclorofenilsulfanil)-1H-pirrolo[3,2-b]piridina-2-carboxílico, Ia-7

La amida del ácido 1H-pirrolo[3,2-b]piridina-2-carboxílico 6a-1 (1,0 equiv) en DMF se trata con disulfuro de bis-(2,4-diclorofenilo) (1,1 equiv) como se describe en el procedimiento sintético general IVb para proporcionar el compuesto Ia-7 en forma de un sólido de color marfil, p.f.= 266ºC, EM Obs 339,2 (M + 1).

Amida del ácido 3-(2-fluorofenilsulfanil)-1H-pirrolo[3,2-b]piridina-2-carboxílico, Ia-8

La amida del ácido 1H-pirrolo[3,2-b]piridina-2-carboxílico 6a-1 (1,0 equiv) en DMF se trata con disulfuro de bis-(2-fluorofenilo) (1,1 equiv) como se describe en el procedimiento sintético general IVb para proporcionar el compuesto Ia-8 en forma de un sólido de color marfil. RMN ^{1}H (DMSO-d_{b}) \delta 12,57 (s ancho, 1H), 8,45 (dd, 1H, J =1,2,4,2 Hz), 8,15 (s ancho, 1H), 7,90 (dd, 1H, J =1,2, 8,1 Hz) que se superpone con 7,84 (s ancho, 1H), 7,31 (dd, 1H, J = 4,5, 8,2 Hz), 7,20 (m, 2H), 6,98 (m, 1H), 6,69 (m, 1H). EM obs. 288,2 (M + 1).

Amida del ácido 3-(2,3-diclorofenilsulfanil)-1H-pirrolo[3,2-b]piridina-2-carboxílico, Ia-9

La amida del ácido 1H-pirrolo[3,2-b]piridina-2-carboxílico 6a-1 (1,0 equiv) en DMF se trata con disulfuro de bis-(2,3-diclorofenilo) (1,1 equiv) como se describe en el procedimiento sintético general IVb para proporcionar el compuesto Ia-9 en forma de un sólido de color marfil. RMN ^{1}H (DMSO-d_{6}) \delta 12,62 (s ancho, 1H), 8,44 (dd, 1H, J =1,2, 4,5 Hz), 8,10 (s ancho, 1H), 7,93 (dd, 1H, J =1,2,8,3 Hz), 7,75 (s ancho, 1H), 7,35 (m, 2H), 7,07 (t, 1H, J = 8,1 Hz), 6,40 (dd, 1H, J =1,4, 8,1 Hz). EM obs. 338,1 (M + 1).

Amida del ácido 3-(2-trifluormetilfenilsulfanil)-1H-pirrolo[3,2-b]piridina-2-carboxílico, Ia-10

La amida del ácido 1H-pirrolo[3,2-b]piridina-2-carboxílico 6a-1 (1,0 equiv) en DMF se trata con disulfuro de bis-(2-trifluorometilfenilo) (1,1 equiv) como se describe en el procedimiento sintético general IVb para proporcionar el compuesto Ia-10 en forma de un sólido de color marfil. RMN ^{1}H (DMSO-d_{6}) \delta 12,65 (s ancho, 1H), 8,47 (dd, 1H, J =1,5, 4,5 Hz), 8,15 (s ancho, 1H), 7,92 (dd, 1H, J =1,2, 8,2 Hz), 7,75 (s ancho, dd que se superpone, 2H), 7,34 (m, 3H), 6,75 (d, 1H, J = 7,8 Hz); EM obs. 338,2 (M + 1).

Amida del ácido 3-(3-trifluorometil-fenilsulfanil)-1H-pirrolo[3,2-b]piridina-2-carboxílico Ia-11

La amida del ácido 1H-pirrolo[3,2-b]piridina-2-carboxílico 6a-1 (1,0 equiv) en DMF se trata con disulfuro de bis-(3-trifluorometilfenilo) (1,1 equiv) como se describe en el procedimiento sintético general IVb para proporcionar el compuesto Ia-11 en forma de un sólido de color marfil. EM obs. 338,06 (M + 1).

Amida del ácido 3-(2-aminofenilsulfanil)-1H-pirrolo[3,2-b]piridina-2-carboxílico, Ia-12

La amida del ácido 1H-pirrolo[3,2-b]piridina-2-carboxílico (1,0 equiv) 6a-1 en DMF se trata con disulfuro de bis-(2-aminofenilo) (1,1 equiv) como se describe en el procedimiento sintético general IVb para proporcionar el compuesto Ia-12 en forma de un sólido de color marfil. RMN ^{1}H (DMSO-d_{6}) \delta 12,29 (s ancho, 1H), 8,49 (dd, 1H, J =1,3, 4,5 Hz), 8,18 y 8,15 (s ancho que se superpone, 2H), 7,83 (dd, 1H, J =1,4, 8,2 Hz), 7,28 (dd, 1H, J = 4,5, 8,3 Hz), 7,15 (dd, 1H, J =1,4, 7,8 Hz), 6,93 (m, 1H), 6,62 (d, 1H, J = 6,9 Hz), 6,39 (m, 1H), 5,74 (s ancho que se superpone, 2H); EM obs. 288,2 (M + 1).

Amida del ácido 3-(2,5-dicloro-fenilsulfanil)-1H-pirrolo[3,2-b]piridina-2-carboxílico, Ia-13

La amida del ácido 1H-pirrolo[3,2-b]piridina-2-carboxílico 6a-1 (1,0 equiv) en DMF se trata con disulfuro de bis-(2,5-diclorofenilo) (1,1 equiv) como se describe en el procedimiento sintético general IVb para proporcionar el compuesto Ia-13 en forma de un sólido de color marfil. RMN ^{1}H (DMSO-d_{6}) \delta 12,68 (s ancho, 1H), 8,46 (dd, 1H, J =1,3, 4,5 Hz), 8,10 (s ancho, 1H), 7,94 (dd, 1H, J =1,2, 8,2 Hz), 7,77 (s ancho, 1H), 7,52 (d aparente, 1H, J = 8,5 Hz), 7,35 (dd, 1H, J = 4,5, 8,4 Hz), 7,20 (dd, 1H, J = 2,5, 8,5 Hz), 6,37 (d aparente, 1H, J = 2,5 Hz); EM obs. 338,1 (M + 1).

Amida del ácido 3-(2-metoxi-fenilsulfanil)-1H-pirrolo[3,2-b]piridina-2-carboxílico, Ia-14

La amida del ácido 1H-pirrolo[3,2-b]piridina-2-carboxílico 6a-1 (1,0 equiv) en DMF se trata con disulfuro de bis-(2-metoxifenilo) (1,1 equiv) como se describe en el procedimiento sintético general IVb para proporcionar el compuesto Ia-14 en forma de un sólido de color marfil. RMN ^{1}H (DMSO-d_{6}) \delta 12,48 (s ancho, 1H), 8,44 (dd, 1H, J =1,5,4,5 Hz), 8,10 (s ancho, 1H), 7,90 (dd, 1H, J =1,2, 8,0 Hz), 7,60 (s ancho, 1H), 7,30 (m, 3H), 6,71 (t aparente, 1H), 6,50 (d aparente, 1H), 3,91 (s, 3H); EM obs. 300,3 (M + 1).

Amida del ácido 3-(3-metoxi-fenilsulfanil)-1H-pirrolo[3,2-b]piridina-2-carboxílico, Ia-15

La amida del ácido 1H-pirrolo[3,2-b]piridina-2-carboxílico 6a-1 (1,0 equiv) en DMF se trata con disulfuro de bis-(3-metoxifenilo) (1,1 equiv) como se describe en el procedimiento sintético general IVb para proporcionar el compuesto Ia-15 en forma de un sólido de color marfil. RMN ^{1}H (DMSO-d_{6}) \delta 12,51 (s ancho, 1H), 8,46 (dd, 1H, J =1,5, 4,5 Hz), 8,10 (s ancho, 1H), 7,89 (dd, 1H, J =1,5, 8,3 Hz se superpone con s ancho, 1H), 7,32 (dd,1H, J = 4,5, 8,2 Hz), 7,13 (t aparente, 1H, J = 8,0 Hz) 6,62 (m, 3H), 3,64 (s, 3H); EM Obs 300,3 (M+1).

Amida del ácido 3-(3-amino-fenilsulfanil)-1H-pirrolo[3,2-b]piridina-2-carboxílico, Ia-16

La amida del ácido 1H-pirrolo[3,2-b]piridina-2-carboxílico 6a-1 (1,0 equiv) en DMF se trata con disulfuro de bis-(3-aminofenilo) (1,1 equiv) como se describe en el procedimiento sintético general IVb para proporcionar el compuesto Ia-16 en forma de un sólido de color marfil. RMN ^{1}H (DMSO-d_{6}) \delta 12,40 (s ancho, 1H), 8,44 (dd, 1H, J =1,5, 4,5 Hz), 8,10 (s ancho, 1H), 7,86 (dd, 1H, J = 1,5, 8,3 Hz que se superpone con s ancho, 1H), 7,28 (dd,1H, J = 4,5, 8,2 Hz), 7,13 (t aparente, 1H, J = 7,8 Hz) 6,28 (m, 3H), 5,08 (s ancho, 2H); EM Obs 288,08 (M+1).

Amida del ácido 3-(4-Nitro-fenilsulfanil)-1H-pirrolo[3,2-b]piridina-2-carboxílico, Ia-17

La amida del ácido 1H-pirrolo[3,2-b]piridina-2-carboxílico 6a-1 (1,0 equiv) en DMF se trata con disulfuro de bis-(4-nitrofenilo) (1,1 equiv) como se describe en el procedimiento sintético general IVb para proporcionar el compuesto Ia-17 en forma de un sólido de color marfil. RMN ^{1}H (DMSO-d_{6}) \delta 12,63 (s ancho, 1H), 8,43 (dd, 1H, J =1,5, 4,5 Hz), 8,05 (m, 3H), 7,91 (m, 1H), 7,50 (s ancho, 1H), 7,32 (dd, 1H, J = 4,5, 8,1 Hz), 7,18 (d aparente, 2H, J = 9,0 Hz); EM Obs 315,05 (M+1).

Amida del ácido 3-(3-nitro-fenilsulfanil)-1H-pirrolo[3,2-b]piridina-2-carboxílico, Ia-18

La amida del ácido 1H-pirrolo[3,2-b]piridina-2-carboxílico 6a-1 (1,0 equiv) en DMF se trata con disulfuro de bis-(3-nitrofenilo) (1,1 equiv) como se describe en el procedimiento sintético general IVb para proporcionar el compuesto Ia-18 en forma de un sólido de color marfil. RMN ^{1}H (DMSO-d_{6}) \delta 12,59 (s ancho, 1H), 8,45 (dd, 1H, J =1,5, 4,6 Hz), 8,11 (s ancho, 1H), 7,96-7,81 (m, 4H), 7,50 (m, 2H), 7,33 (dd, 1H, J = 4,5, 8,4 Hz); Obs 315,1 (M+1).

Amida del ácido 3-o-tolilsulfanil-1H-pirrolo[3,2-b]piridina-2-carboxílico, Ia-19

La amida del ácido 1H-pirrolo[3,2-b]piridina-2-carboxílico 6a-1 (1,0 equiv) en DMF se trata con disulfuro de bis(o-tolilo) (1,1 equiv) como se describe en el procedimiento sintético general IVb para proporcionar el compuesto Ia-19 en forma de un sólido de color marfil. RMN ^{1}H (DMSO-d_{6}) \delta 12,5 (s ancho, 1H), 8,41 (dd, 1H, J =1,5, 4,5 Hz), 8,05 (s ancho, 1H), 7,90 (dd, 1H, J = 1,5, 8,3 Hz) que se superpone con 7,87 (s ancho, 1H), 7,31 (m, 1H), 7,29 (m, 1H), 7,00 (m, 2H), 6,4 (m, 1H), 3,3 (s, 3H). EM obs. 284,3 (M + 1).

Amida del ácido 3-p-tolilsulfanil-1H-pirrolo[3,2-b]piridina-2-carboxílico, Ia-20

La amida del ácido 1H-pirrolo[3,2-b]piridina-2-carboxílico 6a-1 (1,0 equiv) en DMF se trata con disulfuro de bis(p-tolilo) (1,1 equiv) como se describe en el procedimiento sintético general IVb para proporcionar el compuesto Ia-20 en forma de un sólido de color marfil. RMN ^{1}H (DMSO-d_{6}) \delta 12,42 (s ancho, 1H), 8,44 (dd, 1H, J =1,5, 4,5 Hz), 8,10 (s ancho, 1H), 7,91 (s ancho, 1H) que se superpone con 7,86 (dd, 1H, J =1,5, 7,9 Hz), 7,28 (dd, 1H, J = 3,7, 8,3 Hz), 7,00 (ds que se superpone, 4H, J = 12,5 Hz), 3,31 (s, 3H); EM obs. 284 (M + 1).

Amida del ácido 3-(3,5-dimetil-fenilsulfanil)-1H-pirrolo[3,2]piridina-2-carboxílico, Ia-21

La amida del ácido 1H-pirrolo[3,2-b]piridina-2-carboxílico 6a-1 (1,0 equiv) en DMF se trata con disulfuro de bis-(3,5-dimetilfenilo) (1,1 equiv) como se describe en el procedimiento sintético general IVb para proporcionar el compuesto Ia-21 en forma de un sólido de color marfil. RMN ^{1}H (DMSO-d_{6}) \delta 12,45 (s ancho, 1H), 8,45 (dd, 1H, J =1,2, 4,5 Hz), 8,12 (s ancho, 1H), 7,90 (dd, 1H, J =1,2, 8,0 Hz) que se superpone con (s ancho, 1H), 7,3 (dd, 1H, J = 4,5, 8,2 Hz), 6,76 (s, 1H), 6,7 (s, 2H), 2,05 (s, 6H). EM Obs 298,3 (M+1).

Amida del ácido 3-m-tolilsulfanil-1H-pirrolo[3,2-b]piridina-2-carboxílico, Ia-22

La amida del ácido 1H-pirrolo[3,2-b]piridina-2-carboxílico 6a-1 (1,0 equiv) en DMF se trata con disulfuro de bis(m-tolilo) (1,1 equiv) como se describe en el procedimiento sintético general IVb para proporcionar el compuesto Ia-22 en forma de un sólido de color marfil. RMN ^{1}H (DMSO-d_{6}) \delta 10,2 (s ancho, 1H), 8,62 (dd, 1H, J =1,0, 4,4 Hz), 8,19 (s ancho, 1H), 7,85 (dd, 1H, J =1,3, 8,4 Hz), 7,28 (dd que se superpone, 1H, J = 4,5, 8,3 Hz y 7,24 (s, 1H), 7,1-6,9 (m, 4H), 2,22 (s, 3H). EM Obs 284 (M+1).

Amida del ácido 3-(2-etil-fenilsulfanil)-1H-pirrolo[3,2-b]piridina-2-carboxílico, Ia-23

La amida del ácido 1H-pirrolo[3,2-b]piridina-2-carboxílico 6a-1 (1,0 equiv) en DMF se trata con disulfuro de bis-(2-etilfenilo) (1,1 equiv) como se describe en el procedimiento sintético general IVb para proporcionar el compuesto Ia-23 en forma de un sólido de color marfil. RMN ^{1}H (DMSO-d_{6}) \delta 12,5 (s ancho, 1H), 8,42 (dd, 1H, J =1,5, 4,4 Hz), 8,1 (s ancho, 1H), 7,91 (dd, 1H, J = 1,5, 8,1 Hz), 7,82 (s ancho, 1H), 7,30 (m, 1H), 7,2 (m, 1H), 7,05 (m, 1H), 6,95 (m, 1H), 6,5 (m, 1H), 2,9 (q, 2H), 1,3 (t, 3H). EM obs. 298,3 (M + 1).

Amida del ácido 3-(3-trifluorometoxi-fenilsulfanil)-1H-pirrolo[3,2-b]piridin3-2-carboxílico, Ia-24

La amida del ácido 1H-pirrolo[3,2-b]piridina-2-carboxílico 6a-1 (1,0 equiv) en DMF se trata con disulfuro de bis-(3-trifluorometoxifenilo) (1,1 equiv) como se describe en el procedimiento sintético general IVb para proporcionar el compuesto Ia-24 en forma de un sólido de color marfil. RMN ^{1}H (DMSO-d_{6}) \delta 12,56 (s ancho, 1H), 8,45 (dd, 1H, J =1,5, 4,5 Hz), 8,12 (s ancho, 1H), 7,92 (dd, 1H, J =1,5, 8,3 Hz), 7,85 (s ancho, 1H), 7,33 (dd, 1H, J = 4,4, 8,3 Hz) que se superpone con 7,32 (m, 1H), 7,1 (m, 1H) que se superpone con 7,03 (m, 2H). EM obs. 354,1 (M + 1).

Amida del ácido 3-(quinolin-8-ilsulfanil)-1H-pirrolo[3,2-b]piridin-2-carboxílico, Ia-25

La amida del ácido 1H-pirrolo[3,2-b]piridina-2-carboxílico 6a-1 (1,0 equiv) en DMF se trata con disulfuro de bis-(8-quinolilo) (1,1 equiv) como se describe en el procedimiento sintético general IVb para proporcionar el compuesto Ia-25 en forma de un sólido de color marfil, EM Obs 321,1 (M + 1).

Amida del ácido 3-(piridin-2-sulfanil)-1H-pirrolo[3,2-b]piridin-2-carboxílico, Ia-26

La amida del ácido 1H-pirrolo[3,2-b]piridina-2-carboxílico 6a-1 (1,0 equiv) en DMF se trata con disulfuro de 2,2'-dipiridilo (1,1 equiv) como se describe en el procedimiento sintético general IVb para proporcionar el compuesto Ia-26 en forma de un sólido de color marfil. RMN ^{1}H (DMSO-d_{6}) \delta 12,51 (s ancho, 1H), 8,42 (dd, 1H, J =1,4, 4,5 Hz), 8,34 (dd, 1H, J =1, 4 Hz) 8,06 (s ancho, 1H), 7,89 (dd, 1H, J =1,4, 8,3 Hz) que se superpone con 7,82 (s ancho, 1H), 7,53 (dd, 1H, J = 1,8, 7,5 Hz), 7,30 (dd, 1H, J = 4,3, 8,2 Hz), 7,10 (dd, 1H, J = 4,9, 7,4 Hz), 6,74 (d, 1H, J = 8,1 Hz). EM obs. 271,1 (M + 1).

Amida del ácido 3-(piridin-4-sulfanil)-1H-pirrolo[3,2-b]piridin-2-carboxílico, Ia-27

La amida del ácido 1H-pirrolo[3,2-b]piridina-2-carboxílico 6a-1 (1,0 equiv) en DMF se trata con disulfuro de 4,4'-dipiridilo (aldritiol 4) (1,1 equiv) como se describe en el procedimiento sintético general IVb para proporcionar el compuesto Ia-27 en forma de un sólido de color marfil. RMN ^{1}H (DMSO-d_{6}) \delta 12,5 (s ancho, 1H), 8,44 (dd, 1H, J =1,5, 4,5 Hz), 8,27 (dd, 2H, J =1,5, 4,5 Hz), 8,07 (s ancho, 1H), 7,93 (dd, 1H, J =1,4, 8,3 Hz), 7,73 (s ancho, 1H), 7,33 (dd, 1H, J = 4,5, 8,2 Hz), 6,94 (dd, 2H, J = 1,5, 4,5 Hz). EM obs. 271,07 (M + 1).

Amida del ácido 3-(tiofen-2-ilsulfanil)-1H-pirrolo[3,2-b]piridina-2-carboxílico, Ia-28

La amida del ácido 1H-pirrolo[3,2-b]piridina-2-carboxílico 6a-1 (1,0 equiv) en DMF se trata con disulfuro de bis-(tienilo) (1,1 equiv) como se describe en el procedimiento sintético general IVb para proporcionar el compuesto Ia-28 en forma de un sólido de color marfil. RMN ^{1}H (DMSO-d_{6}) \delta 12,34 (s ancho, 1H), 8,50 (d, 1H, J = 4,4 Hz), 8,21 (s ancho, 1H), 8,00 (s ancho, 1H), 7,83 (d, 1H, J = 8,3 Hz), 7,42 (d, 1H, J = 5,3 Hz), 7,26 (dd, 2H, J = 4,5, 8,2 Hz), 6,92 (dd, 1H, J = 3,6, 5,2 Hz). EM obs. 276,01 (M + 1).

Metilamida del ácido 1-metil-3-fenilsulfanil-1H-pirrolo[3,2-b]piridina-2-carboxílico, Ia-29

La metilamida del ácido 3-fenilsulfanil-1H-pirrolo[3,2-b]piridina-2-carboxílico Ia-33 (1,0 equiv) en DMF se trata con sulfato de dimetilo (1,5 equiv) como se describe en el procedimiento sintético general V para proporcionar el compuesto Ia-29 en forma de un sólido de color marfil, EM Obs 298,09 (M + 1).

Metilamida del ácido 1-metil-3-fenilsulfanil-1H-pirrolo[3,2-b]piridina-2-carboxílico, Ia-29

Se añade yoduro de metilo (20 mg, 0,164 mmol) a t.a. a una mezcla de la metilamida del ácido 3-fenilsulfanil-1H-pirrolo[3,2-b]piridina-2-carboxílico (Ia-33, 47 mg, 0,166 mmol), Cs_{2}CO_{3} (65 mg, 0,2 mmol) y piridina (1,5 ml). La reacción se calienta a 60ºC en un recipiente cerrado durante 3 h. Se añade yoduro de metilo adicional (20 mg) y el progreso de la reacción se sigue por cromatografía. Cuando se ha completado, la reacción se enfría, se concentra hasta sequedad y se extrae de la salmuera en acetato de etilo. La fase orgánica se separa y se concentra. El residuo se purifica por cromatografía ultrarrápida 2 veces (SiO_{2}, 3 g, se eluye con MeOH al 0-4% en DCM; y SiO_{2}, 1 g, se eluye con heptano:DCM, 1:1) para proporcionar el compuesto del título (10 mg) en forma de un sólido blanco, la RMN ^{1}H (CDCl_{3}) y la LC-MS (m/e = 297) estaban de acuerdo con la estructura del compuesto del título.

Metilamida del ácido 3-(3-trifluorometoxifenil)sulfanil-1H-pirrolo[3,2-b]piridina-2-carboxílico, Ia-30

La metilamida del ácido 1H-pirrolo[3,2-b]piridina-2-carboxílico 6a-2 (1,0 equiv) en DMF se trata con disulfuro de bis-(3-trifluorometoxifenil) (1,1 equiv) como se describe en el procedimiento sintético general IVb para proporcionar el compuesto Ia-30 en forma de un sólido de color marfil, EM Obs 368,03 (M + 1).

Metilamida del ácido 3-(3-clorofenilsulfanil-1H-pirrolo[3,2-b]piridina-2-carboxílico, Ia-31

La metilamida del ácido 1H-pirrolo[3,2-b]piridina-2-carboxílico 6a-2 (1,0 equiv) en DMF se trata con disulfuro de bis-(3-clorofenilo) (1,1 equiv) como se describe en el procedimiento sintético general IVb para proporcionar el compuesto Ia-31 en forma de un sólido de color marfil, EM Obs 318,03 (M + 1).

Metilamida del ácido 3-(3-fluorofenil)sulfanil-1H-pirrolo[3,2-b]piridina-2-carboxílico, Ia-32

La metilamida del ácido 1H-pirrolo[3,2-b]piridina-2-carboxílico 6a-2 (1,0 equiv) en DMF se trata con disulfuro de bis-(3-fluorofenilo) (1,1 equiv) como se describe en el procedimiento sintético general IVb para proporcionar el compuesto Ia-32 en forma de un sólido de color marfil, EM Obs 305,05 (M + 1).

Metilamida del ácido 3-fenilsulfanil-1H-pirrolo[3,2-b]piridina-2-carboxílico, Ia-33

La metilamida del ácido 1H-pirrolo[3,2-b]piridina-2-carboxílico 6a-2 (1,0 equiv) en DMF se trata con disulfuro de bis-(fenilo) (1,1 equiv) como se describe en el procedimiento sintético general IVb para proporcionar el compuesto Ia-33 en forma de un sólido de color marfil. RMN ^{1}H (DMSO-d_{6}) \delta 12,48 (s ancho, 1H), 8,45 (dd, 1H, J =1,5, 4,4 Hz), 8,11 (s ancho, 1H), 7,89 (dd, 1H, J =1,5, 4,0 Hz que se superpone con un s ancho, 1H), 7,31 (dd, 1H, J =1,4, 4,5 Hz), 7,28 (dd, J =1,5, 4,5 Hz, 1H) 7,21 (m, 2H), 7,13-7,05 (m, 3H), 2,9 (d, 3H, J = 4,2 Hz); EM obs. 284,06 (M + 1).

Amida del ácido 1-metil-3-fenilsulfanil-1H-pirrolo[3,2-b]piridina-2-carboxílico, Ia-34

La amida del ácido 3-fenilsulfanil-1H-pirrolo[3,2-b]piridina-2-carboxílico Ia-1 (1,0 equiv) en DMF se trata con sulfato de dimetilo (1,5 equiv) como se describe en el procedimiento sintético general V para proporcionar el compuesto Ia-34 en forma de un sólido de color marfil, EM Obs 284,06 (M + 1).

Amida del ácido 1-metil-3-fenilsulfanil-1H-pirrolo[3,2-b]piridina-2-carboxílico, Ia-34 (Esquema I, etapa g)

Se añade yoduro de metilo (20 mg, 0,14 mmol) a t.a. a una mezcla de la amida del ácido 3-fenilsulfanil-1H-pirrolo[3,2-b]piridina-2-carboxílico (Ia-1, 27 mg, 0,1 mmol), Cs_{2}CO_{3} (43 mg, 0,13 mmol) en piridina (0,5 ml). La reacción se calienta a 80ºC en un recipiente cerrado durante 15 minutos. La mezcla se enfría, y se extrae del agua en acetato de etilo. Se separa la disolución orgánica y se evapora. El residuo se purifica (33 mg) por cromatografía ultrarrápida (gel de sílice, 3 g, se eluye con MeOH al 0-4% en diclorometano) para proporcionar el compuesto del título (11 mg) en forma de un sólido blanco, la RMN ^{1}H (CDCl_{3}) y la LC-MS (m/e = 283) están de acuerdo con la estructura del compuesto del título.

Amida del ácido 3-(3-fluoro-fenilsulfanil)-5-metoxi-1H-pirrolo[3,2-b]piridina-2-carboxílico, Ia-35

La amida del ácido 5-metoxi-1H-pirrolo[3,2-b]piridina-2-carboxílico (1,0 equiv, preparada a partir del correspondiente éster de etilo, Frydman, B.; Reilo, S. J.; Boned, J.; Rapoport, H., J. Org. Chem. 1968, 33, 3762-6) en DMF se trata con disulfuro de bis-(3-fluorofenilo) (1,1 equiv) como se describe en el procedimiento sintético general IVb para proporcionar el compuesto Ia-35 en forma de un sólido de color marfil, EM Obs 318,03 (M + 1).

Amida del ácido 3-(3-metoxi-fenilsulfanil)-5-metoxi-1H-pirrolo[3,2-b]piridina-2-carboxílico Ia-36

La amida del ácido 5-metoxi-1H-pirrolo[3,2-b]piridina-2-carboxílico (1,0 equiv, preparada a partir del correspondiente éster de etilo, Frydman, B.; Reilo, S. J.; Boned, J.; Rapoport, H., J. Org. Chem. 1968, 33, 3762-6) en DMF se trata con disulfuro de bis-(3-metoxifenilo) (1,1 equiv) como se describe en el procedimiento sintético general IVb para proporcionar el compuesto Ia-36 en forma de un sólido de color marfil, EM Obs 330,01 (M + 1).

Amida del ácido 3-fenilsulfanil-1-propil-1H-pirrolo[3,2-b]piridina-2-carboxílico, Ia-37

La amida del ácido 3-fenilsulfanil-1H-pirrolo[3,2-b]piridina-2-carboxílico Ia-1 (1,0 equiv) en DMF se trata con yoduro de propilo (1,5 equiv) en presencia de Cs_{2}CO_{3} (1,5 equiv) de acuerdo con el procedimiento general V para proporcionar el compuesto Ia-37 en

\hbox{forma de un sólido de
color marfil, después de cromatografía,  EM Obs 312,06 (M +
1).}

Amida del ácido 3-fenilsulfanil-1-pronyl-1H-pirrolo[3,2-b]piridina-2-carboxílico, Ia-37 (Esquema I, etapa g)

Se añade 1-bromopropano (19 mg, 0,154 mmol) a t.a. a una mezcla de la amida del ácido 3-fenilsulfanil-1H-pirrolo[3,2-b]piridina-2-carboxílico (Ia-1, 31,5 mg, 0,12 mmol), Cs_{2}CO_{3} (60 mg, 0,185 mmol) en piridina (0,5 ml). La reacción se calienta a 80ºC en un recipiente cerrado durante 1 h. La mezcla se enfría y se extrae del agua en acetato de etilo. Se separa la fase orgánica y se evapora. El residuo se purifica (33 mg) por cromatografía ultrarrápida (SiO_{2}, 2 g, se eluye con heptano:DCM y después con MeOH al 0-4% en DCM) para proporcionar el compuesto del título (11,5 mg) en forma de un sólido blanco, la RMN ^{1}H (CDCl_{3}) y la LC-MS (m/e = 311) están de acuerdo con la estructura del compuesto del título.

Preparación de pirrolo[3,2-c]piridinas (5-Azaindoles) Éster de 1,1-dimetiletilo del ácido 2-(dietoximetil)-1H-pirrolo[3,2-c]piridina-1-carboxílico, 8b-1 (Esquema 3, etapa h)

Se calienta una disolución de éster de 1,1-dimetiletilo del ácido (3-yodo-piridin-4-il)carbámico (13,3 g, 41,56 mmol, Darnbrough, Shelley; Mervic, Miljenko; Condon, Stephen M:; Burns, Christopher, J. Synthetic Communications (2001) 31(21), 3273-3280), 3,3-dietoxi-1-propino (5,96 ml, 41,56 mmol), trietilamina (23 ml, 166 mmol), diclorobis(trifenil-fosfina)paladio(II) (1,46 g, 2,08 mmol) y yoduro de cobre (237 mg, 1,25 mmol) en DMF seca en atmósfera de argón a 90ºC durante 3 h. La mezcla de reacción se deja enfriar a 70ºC y se añade DBU (12,5 ml, 83,12 mmol). La reacción se mezcla a 70ºC durante 3 h y después se agita a temperatura ambiente durante una noche. La mezcla de reacción se vierte en EtOAc, se lava con agua (2X) y salmuera, se seca sobre MgSO_{4}, se filtra y se concentra para dar el compuesto del título en forma de un aceite. El aceite se purifica por cromatografía ultrarrápida (sílice, se eluye con EtOAc/n-heptano al 10-20%) para proporcionar 9,8 g del compuesto del título en forma de un aceite transparente, tlc (sílice, EtOAc/heptano al 30%, R_{f}= 0,30).

1H-pirrolo[3,2-c]piridina-2-carboxaldehído, 9b-1 (Esquema 3, etapa i)

A una disolución del éster de 1,1-dimetiletilo del ácido 2-(dietoximetil)-1H-pirrolo[3,2-c]piridina-1-carboxílico (8b-1, 9,8 g, 30,6 mmol) en 100 ml THF, se añaden 6 ml de HCl concentrado. La mezcla de reacción se agita a temperatura ambiente durante 20 h, se hace básica con disolución saturada de bicarbonato de sodio, se vierte en EtOAc, se lava con disolución saturada de bicarbonato de sodio y salmuera, la fase orgánica se seca sobre MgSO_{4}, se filtra y se concentra para dar una mezcla del éster de 1,1-dimetiletilo del ácido 2-formil-1H-pirrolo[3,2-c]piridina-1-carboxílico y el 1H-pirrolo[3,2-c]piridina-2-carboxaldehído 9b-1 en forma de un sólido. La mezcla se separa por cromatografía ultrarrápida (sílice, MeOH/CH_{2}Cl_{2} al 1-3%) para dar el éster de 1,1-dimetiletilo del ácido 2-formil-1H-pirrolo[3,2-c]piridina-1-carboxílico (5,0 g) en forma de un aceite y 1H-pirrolo[3,2-c]piridina-2-carboxaldehído 9b-1 (1,0 g) en forma de un sólido marrón. Se añade gota a gota TFA (5,0 ml) a una disolución del éster de 1,1-dimetiletilo del ácido 2-formil-1H-pirrolo[3,2-c]piridina-1-carboxílico (5,0 g, 20,3 mmol) en 250 ml de diclorometano. La mezcla de reacción se calienta a reflujo durante 3 horas, se concentra, el residuo se diluye con 300 ml de EtOAc, se lava con disolución saturada de bicarbonato de sodio (3x) y salmuera, se seca la fase orgánica (MgSO_{4}), se filtra y se concentra para dar el 1H-pirrolo[3,2-c]piridina-2-carboxaldehído 9b-1 (2,24 g) en forma de un sólido puro.

Éster de metilo del ácido 1H-pirrolo[3,2-c]piridina-2-carboxílico, 5b-1 (Esquema 3, etapa i)

A una disolución a 0ºC de 1H-pirrolo[3,2-c]piridina-2-carboxaldehído (9b-1, 3,24 g, 22,19 mmol) en metanol en atmósfera de argón, se añade cianuro sódico (5,44 g, 111 mmol) y dióxido de manganeso (9,65 g, 111 mmol). La mezcla de reacción se agita durante 5 h, se filtra a través de Celite® y se diluye con 500 ml de EtOAc. La capa orgánica se lava con agua (2x) y salmuera, se seca sobre carbonato de sodio, se filtra y se concentra para proporcionar el compuesto del título (3,27 g) en forma de un sólido marrón puro. Se prepara la amida del ácido 1H-pirrolo[3,2-c]piridina-2-carboxílico 6b-1 a partir de 5b-1 por cualquiera de los procedimientos descritos para la síntesis del compuesto 6a-1 a partir del éster de etilo 4a-1.

Amida del ácido 1H-pirrolo[3,2-c]piridina-2-carboxílico, 6b-1 (R_{4} =H, Esquema 1, etapas a-c, e)

La 3-metil-4-nitro-piridina (2b-1) se prepra a partir de la 3-cloro-4-nitro-piridina 1b-1 como se ha descrito antes para la síntesis del análogo isomérico 2-metil-3-nitro-piridina 2a-1 a partir del compuesto 1a-1. El éster del ácido 2-hidroxi-3-(4-nitro-piridin-3-il)-acrílico (3b-1) se prepara a partir del compuesto 2b-1 por cualquiera de los procedimientos descritos antes para preparar el compuesto 3a-1 a partir del compuesto 2a-1. El éster de etilo del ácido 1H-pirrolo[3,2-c]piridina-2-carboxílico, 4b-1, se prepara a partir del compuesto 3b-1 por cualquiera de los procedimientos descritos antes para preparar el compuesto 4a-1 a partir del compuesto 3a-1. La amida del ácido 1H-pirrolo[3,2-c]piridina-2-carboxílico 6b-1 se prepara a partir del compuesto 4b-1 por cualquiera de los procedimientos descritos antes para la síntesis del compuesto 6a-1 a partir del compuesto 4a-1.

Amida del ácido 3-fenilsulfanil-1H-pirrolo[3,2-c]piridina-2-carboxílico, Ib-1

La amida del ácido 1H-pirrolo[3,2-c]piridina-2-carboxílico 6b-1 (1,0 equiv) en DMF (100 ml) se trata con disulfuro de difenilo (1,1 equiv) como se ha descrito antes en el procedimiento general IVb para proporcionar el compuesto Ib-1 en forma de un sólido de color marfil. RMN ^{1}H (DMSO-d_{6}) \delta 12,48 (s ancho, 1H), 8,70 (s, 1H), 8,29 (d, J = 5,8 Hz, 1H), 8,04 (s ancho, 1H), 7,76 (s ancho, 1H), 7,44 (dd, J = 1,1, 5,7 Hz, 1H), 7,26 (m, 2H), 7,14 (m, 3H); m/z = 270,1 (M + H).

Amida del ácido 3-(3-fluoro-fenilsulfanil)-1H-pirrolo[3,2-c]piridina-2-carboxílico, Ib-2

La amida del ácido 1H-pirrolo[3,2-c]piridina-2-carboxílico 6b-1 (1,0 equiv) en DMF (100 ml) se trata con disulfuro de bis-(3-fluorofenilo) (1,1 equiv) como se ha descrito antes en el procedimiento general IVb para proporcionar el compuesto Ib-2 en forma de un sólido de color marfil. RMN ^{1}H (DMSO-d_{6}) \delta 12,63 (s ancho, 1H), 8,71 (s, 1H), 8,31 (d, J= 5,8 Hz, 1H), 8,06 (s ancho, 1H), 7,74 (s ancho, 1H), 7,46 (d, J = 5,8 Hz, 1H), 7,3 (m, 1H), 6,99-6,89 (m que se superpone, 3H); m/z = 288,06 (M + 1).

Amida del ácido 3-(4-cloro-fenilsulfanil)-1H-pirrolo[3,2-c]piridina-2-carboxílico, Ib-3

La amida del ácido 1H-pirrolo[3,2-c]piridina-2-carboxílico 6b-I(1,0 equiv) en DMF (100 ml) se trata con disulfuro de bis-(4-clorofenilo) (1,1 equiv) como se ha descrito antes en el procedimiento general IVb para proporcionar el compuesto Ib-3 en forma de un sólido de color marfil. RMN ^{1}H (DMSO-d_{6}) \delta 12,61 (s ancho, 1H), 8,71 (s ancho, 1H), 8,30 (d, 1H, J = 4,5 Hz), 8,07 (s ancho, 1H), 7,76 (s ancho, 1H), 7,45 (d, 1H, J= 5,7 Hz), 7,32 (d, 2H, J= 8,7 Hz), 7,12 (d, 2H, J = 8,5 Hz), m/z = 304 (M + 1).

Preparación de pirrolo[2,3-c]piridinas (6-Azaindoles) Amida del ácido 1H-pirrolo[2,3-c]piridina-2-carboxílico, 6c-1 (R_{4} =H, Esquema 1, etapas a-c, c)

La 4-metil-3-nitro-piridina (2c-1) se prepara a partir de la 4-cloro-3-nitro-piridina 1c-1 como se ha descrito antes para la síntesis del análogo isomérico 2-metil-3-nitro-piridina 2a-1 a partir del compuesto 1a-1. El éster del ácido 2-hidroxi-3-(3-nitro-piridin-4-il)-acrílico (3c-1) se prepara a partir del compuesto 2c-1 por cualquiera de los procedimientos descritos antes para preparar el compuesto 3a-1 a partir del compuesto 2a-1. El éster de etilo del ácido 1H-pirrolo[2,3-c]piridina-2-carboxílico (4c-1), se prepara a partir del compuesto 3c-1 por cualquiera de los procedimientos descritos antes para preparar el compuesto 4a-1 a partir del compuesto 3a-1. La amida del ácido 1H-pirrolo[2,3-c]piridina-2-carboxílico 6c-1 se prepara a partir del compuesto 4c-1 por cualquiera de los procedimientos descritos antes para la síntesis del compuesto 6a-1 a partir del compuesto 4a-1.

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Amida del ácido 3-fenilsulfanil-1H-pirrolo[2,3-c]piridina-2-carboxílico, Ic-1

A la amida del ácido 1H-pirrolo[2,3-c]piridina-2-carboxílico 6c-1 (1,0 equiv) en DMF (100 ml) se añade disulfuro de difenilo (1,0 equiv) como se ha descrito antes en el procedimiento general IVb para proporcionar el compuesto Ic-1 en forma de un sólido cristalino marrón. RMN ^{1}H (DMSO-d_{6}) \delta 12,4 (s ancho, 1H), 8,86 (s, 1H), 8,18 (m, 2H), 7,84 (s ancho, 1H), 7,42 (d, J= 5,5 Hz, 1H), 7,24 (m, 2H), 7,14 (m, 1H), 7,03 (d, 8,3 Hz, 2H); m/z = 270,1 (M + H).

Amida del ácido 3-bencenosulfonil-1H-pirrolo[2,3-c]piridina-2-carboxílico, Ic-2

La amida del ácido 3-fenilsulfanil-1H-pirrolo[2,3-c]piridina-2-carboxílico 6c-1 (1,0 mmol) se trata con H_{2}O_{2} (al 30% en p/v, 131 \mul, 2,5 mmol) y Na_{2}CO_{3} (212 mg, 2,0 mmol). Se agita a t.a. durante 16 h, la reacción se inactiva con H_{2}O, y se extrae con EtOAc. El extracto se lava con salmuera, la fase orgánica se seca (MgSO_{4}) y se concentra para dar el compuesto Ic-2 en forma de un sólido de color marfil; EM obs. 303 (M + 1).

Amida del ácido 3-(3-fluoro-fenilsulfanil)-1H-pirrolo[2,3-c]piridina-2-carboxílico, Ic-3

La amida del ácido 1H-pirrolo[2,3-c]piridina-2-carboxílico 6c-1 (1,0 equiv) en DMF (100 ml) se trata con disulfuro de bis-(3-fluorofenilo) (1,0 equiv) como se ha descrito antes en el procedimiento general IVb para dar el compuesto Ic-3 en forma de un sólido de color marrón. RMN ^{1}H (DMSO-d_{6}) \delta 12,77 (s ancho, 1H), 8,87 (s, 1H), 8,2 (d, J = 5,2 Hz, 1H) que se superpone parcialmente con 8,13 (s ancho, 1H), 7,81 (s ancho, 1H), 7,42 (d, J = 5,5 Hz, 1H), 7,26 (m, 1H), 6,96 (m, 1H), 6,84 (m, 2H); m/z = 288,04 (M + H).

Amida del ácido 3-(3-metoxi-fenilsulfanil)-1H-pirrolo[2,3-c]piridina-2-carboxílico, Ic-4

La amida del ácido 1H-pirrolo[2,3-c]piridina-2-carboxílico 6c-1 (1,0 equiv) en DMF (100 ml) se trata con disulfuro de bis-(3-metoxifenilo) (1,0 equiv) como se ha descrito antes en el procedimiento general IVb para dar el compuesto Ic-4 en forma de un sólido marrón. RMN ^{1}H (DMSO-d_{6}) \delta 12,8 (s ancho, 1H), 8,89 (s, 1H), 8,2 (d, J = 5,3 Hz, 1H) que se superpone con 8,19 (s ancho, 1H), 7,81 (s ancho, 1H), 7,41 (d, J = 5,4 Hz, 1H), 7,19 (m, 1H), 6,61 (s, 1H), parcialmente superpuesto con 6,56 (m, 2H), 3,65 (s, 3H); m/z = 300,1 (M + H).

Amida del ácido 3-(3-cloro-fenilsulfanil)-1H-pirrolo[2,3-c]piridina-2-carboxílico, Ic-5

La amida del ácido 1H-pirrolo[2,3-c]piridina-2-carboxílico 6c-1 (1,0 equiv) en DMF (100 ml) se trata con disulfuro de bis-(3-clorofenilo) (1,0 equiv) como se ha descrito antes en el procedimiento general IVb para dar el compuesto Ic-5 en forma de un sólido de color marfil. RMN ^{1}H (DMSO-d_{6}) \delta 12,8 (s ancho, 1H), 8,87 (s, 1H), 8,2 (d, J = 5,3 Hz, 1H) que se superpone con 8,17 (s ancho, 1H), 7,82 (s ancho, 1H), 7,41 (d, J = 5,4 Hz, 1H), 7,2 (m, 2H), 7,05 (s, 1H), 6,95 (d, J = 7,3 Hz, 1H); m/z = 304 (M + H).

Amida del ácido 3-(2-trifluorometil-fenilsulfanil)-1H-pirrolo[2,3-c]piridina-2-carboxílico, Ic-6

La amida del ácido 1H-pirrolo[2,3-c]piridina-2-carboxílico 6c-1 (1,0 equiv) en DMF (100 ml) se trata con disulfuro de bis-(2-trifluorometildifenilo) (1,0 equiv) como se ha descrito antes en el procedimiento general IVb para proporcionar el compuesto Ic-6 en forma de un sólido de color marfil. RMN ^{1}H (DMSO-d_{6}) \delta 12,9 (s ancho, 1H), 8,9 (s ancho, 1H), 8,19 (m, 2H), 7,79 (m, 1H), 7,33 (m, 2H), 7,46 (d, J = 5,5 Hz, 1H), 7,14 (m, 1H), 6,75 (dd, J = 1,3, 7,5 Hz, 1H); m/z = 338 (M + H).

Amida del ácido 3-(2-trifluorometoxi-fenilsulfanil)-1H-pirrolo[2,3-c]piridina-2-carboxílico, Ic-7

La amida del ácido 1H-pirrolo[2,3-c]piridina-2-carboxílico 6c-1 (1,0 equiv) en DMF (100 ml) se trata con disulfuro de bis-(2-trifluorometoxifenilo) (1,0 equiv) como se ha descrito antes en el procedimiento general IVb para dar el compuesto Ic-7 en forma de un sólido de color marrón. RMN ^{1}H (DMSO-d_{6}) \delta 12,8 (s ancho, 1H), 8,89 (s, 1H), 8,2 (d, J = 5,3 Hz, 1H) que se superpone con 8,14 (s ancho, 1H), 7,8 (s ancho, 1H), 7,36 (m, 2H), 7,1 (dd, J = 1,0, 8,3 Hz, 1H), 6,98 (m, 2H); m/z = 354 (M + H).

Amida del ácido 3-(2-metoxi-fenilsulfanil)-1H-pirrolo[2,3-c]piridina-2-carboxílico, Ic-8

La amida del ácido 1H-pirrolo[2,3-c]piridina-2-carboxílico 6c-1 (1,0 equiv) en DMF (100 ml) se trata con disulfuro de bis-(2-metoxidifenilo) (1,0 equiv) como se ha descrito antes en el procedimiento general IVb para proporcionar el compuesto Ic-8 en forma de un sólido de color marfil. RMN ^{1}H (DMSO-d_{6}) \delta 12,40 (s ancho, 1H), 8,89 (s ancho, 1H), 8,3-8,16 (m, 1H), 7,86 (s, 1H) que se superpone con 7,77 (m, 1H), 7,46 (d, J = 5,5 Hz, 1H), 7,14 (m, 1H), 7,03 (dd, J = 1,0, 8,3 Hz, 1H), 6,75 (dd, J = 1,3, 7,5 Hz, 1H), 6,50 (dd, J = 1,5, 7,8 Hz, 1H), 3,89 (s, 3H); m/z = 300,1 (M + H).

Amida del ácido 3-(piridin-2-sulfanil)-1H-pirrolo[2,3-c]piridina-2-carboxílico, Ic-9

A la amida del ácido 1H-pirrolo[2,3-c]piridina-2-carboxílico (1,0 equiv) en DMF (100 ml) se añade disulfuro de 2,2'-dipiridilo (aldritiol 2, 1,1 equiv) como se ha descrito antes en el procedimiento general IVb para proporcionar el compuesto Ic-9 en forma de un sólido de color marfil. RMN ^{1}H (DMSO-d_{6}) \delta 12,75 (s ancho, 1H), 8,86 (s, 1H), 8,35 (dd, 1H, J =14, 4,5 Hz), 8,19 (dd, 1H, J =1, 4 Hz), 8,1 (s ancho, 1H), 7,85 (s ancho, 1H), 7,54 (dd, 1H, J = 1,8, 7,5 Hz), 7,42 (d, J = 5,5 Hz, 1H), 7,10 (dd, 1H, J = 4,9, 7,4 Hz), 6,74 (d, 1H, J = 8,1 Hz), m/z = 271,1 (M + H).

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TABLA 1

6

7

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TABLA 2

8

TABLA 3

9

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Ejemplos biológicos Ensayo en placa de filtro de ^{33}P-ATP de caseína quinasa épsilon con respecto a la selección de inhibidores CK1\varepsilon

Propósito: Este ensayo mide el efecto de los compuestos para inhibir la fosforilación del sustrato caseína por la enzima caseína quinasa 1\varepsilon usando un ensayo de filtración de ^{33}P-ATP in vitro. Los compuestos se ensayan con cinco concentraciones por duplicado con el fin de obtener los valores de CI_{50} o del porcentaje de inhibición a una concentración 10 micromolar que se resumen en la tabla 4.

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Materiales Equipo

Robot de Manipulación de Líquidos Beckman Biomek 2000

Pipeteador de 96 Canales Automático Beckman Multimek 96

Kit Básico de Colector de Vacío nº MAVM0960R Millipore

Distribuidor de Líquidos Titertek Multidrop

Contador de Centelleo de Líquidos Packard TopCount NXT

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Placas

Placa nº 9018 Costar EIA/RIA

Placa de Poliestireno de fondo en U de 96 pocillos Falcon nº 353910

Placas de Filtración de 96 pocillos Millipore Multiscreen nº MAPHNOB50

Placas Adaptadoras Millipore Multiscreen TopCount nº SE3M203V6

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Productos químicos

EGTA de SIGMA nº E-3889

Caseína (desfosforilada) de SIGMA nº C-4032

ATP de SIGMA nº A-7699

DTT de Fisher Biotech nº BP1725

Ácido tricloroacético de SIGMA nº T-6399

\gamma-^{33}P-ATP 1 mCi/37 MBq de Perkin Elmer Life Sciences nº NEG-602H

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Enzima

Concentración final de la caseína quinasa 1\varepsilon 0,58 mg/ml obtenida de los procedimientos de fermentación y purificación realizados por Aventis Pharmaceuticals Inc., Francia. Se almacena en forma de partes alícuotas de 100 \mul a menos 80ºC.

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Compuestos

Los compuestos para el ensayo se suministran en forma de disolución madre del compuesto 10 mM congelada disuelto en DMSO al 100%.

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Condiciones de Ensayo

El volumen de ensayo total final por pocillo es igual a 50 \mul obtenidos como se indica a continuación:

5 \mul de disolución madre del compuesto diluida (10, 1, 0,1, 0,01 ó 0,001 \muM),

5 \mul de caseína desfosforilada de concentración final 0,2 \mug/\mul,

20 \mul de CK1\varepsilon de concentración final 3 ng/\mul, y

20 \mul de \gamma-^{33}P-ATP de concentración final 0,02 \muCi/\mul mezclado con ATP frío (final 10 \muM).

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Metodología

1. Se preparan 500 ml de tampón de ensayo nuevo: Tris 50 mM pH 7,5, MgCl_{2} 10 mM, DTT 2 mM y EGTA 1 mM.

2. Los compuestos que se va a evaluar se obtienen como 10 \mul de disolución madre 10 mM disuelta en DMSO al 100%. Usando un robot de manipulación de líquidos Biomek 2000, se realizan diluciones seriadas para producir diluciones finales del compuesto de 10, 1, 0,1, 0,01 y 0,001 \muM y se añaden como adiciones de 5 \mul a placas Falcon de fondo en U. Típicamente se ensayan 8 compuestos por placa de 96 pocillos, sirviendo las columnas 1 y 12 como pocillos de control. Un ensayo de selección de rutina constará de 32 compuestos, es decir 4 placas de
ensayo.

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3. Los mapas de las placas de ensayo se establecen de acuerdo con el siguiente patrón CKIePlateMap.xls

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10

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4. Una vez que se han añadido 5 \mul del compuesto como se ha indicado, se añaden 5 \mul de caseína desfosforilada (disuelta en H_{2}O_{ }destilada)(0,2 \mug/\mul) y 20 \mul de CK1\varepsilon (3 ng/\mul) a los pocillos adecuados.

5. Finalmente se añaden 20 \mul de \gamma-^{33}P-ATP (0,02 \muCi/\mul)/ATP 10 \muM frío (igual aproximadamente a 2x10^{6} CPM por pocillo).

6. La placa de ensayo Falcon de fondo en U que contiene el volumen de reacción anterior de 50 \mul se agita vorticialmente y después se incuba a temperatura ambiente durante 2 horas.

7. Después de las 2 horas, la reacción se interrumpe mediante la adición de 65 \mul de ATP 2 mM enfriado con hielo (preparado en tampón de ensayo) a las placas de ensayo usando un Beckman Multimek.

8. Al mismo tiempo, se añaden 25 \mul de TCA enfriado con hielo al 100% preparado en H_{2}O destilada a un número correspondiente de placas de filtro Millipore MAPH.

9. Usando un pipeteador portátil de 8 canales, se transfieren 100 \mul de la mezcla de reacción desde la placa Falcon de fondo en U a las placas de filtro Millipore MAPH previamente sumergidas en TCA.

10. Las placas de filtro Millipore MAPH se mezclan suavemente y se dejan a temperatura ambiente durante al menos 30 minutos para precipitar las proteínas.

11. Después de 30 minutos, las placas de filtro se ponen en un colector de vacío Millipore y se filtran a no más de 8 mm de Hg, ya que los filtros MAPH tienden a "retener aire" a altas potencias de vacío.

12. Las placas de filtro se lavan secuencialmente y se filtran con 2x150 \mul de TCA al 20%, 2x150 \mul de TCA al 10% y 2x150 \mul de TCA al 5% (total de 6 lavados por placa/900 \mul por pocillo).

13. Las placas se dejan secar durante una noche a temperatura ambiente. Al día siguiente, se añaden 40 \mul de líquido de centelleo Packard Microscint-20 por pocillo usando un distribuidor Titertek Multidrop; las placas se cierran herméticamente y se cuentan durante 2 minutos/pocillo en un contador de centelleo Packard Topcount NXT (se capturan los valores de CPM/pocillo).

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Cálculos

1. Se capturan los datos de cuentas por minuto (CPM) y se importan en una base de datos de cálculo y archivo de datos patentada (Activity Base de IDBS versión 5.0).

2. La columna 1 para cada placa refleja una actividad de fosforilación total de la enzima en ausencia de cualquier compuesto inhibidor y, de esta manera, representa 100%. La columna 12 refleja cualquier actividad de fosforilación no específica/radiactividad retenida en ausencia de compuesto inhibidor y enzima. Típicamente, se observa aproximadamente 1% de las CPM totales que son "no específicas".

3. Después de haber determinado las CPM "totales" y "no específicas" para cada placa, se puede determinar el porcentaje de inhibición de la capacidad de la enzima para fosforilar el sustrato para cada concentración de compuesto de ensayo. Estos datos de porcentaje de inhibición se usan para calcular un valor de CI50 (concentración a la que un compuesto puede inhibir la actividad enzimática en 50%) para un compuesto usando un programa de ajuste de curva no lineal contenido con el protocolo de cálculo Activitybase (DG0027-CK1-D-BL) (Estudio: RESR0290).

4. Los estudios cinéticos han determinado un valor de K_{m} para ATP de 21 \muM en este sistema de ensayo.

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Ensayo en placa con membrana de afinidad de estreptavidina de la caseína quinasa 1\delta con respecto a inhibidores de CKI\delta

Propósito: Evaluar la actividad de CKI\delta de los compuestos de ensayo en placas de captura de biotina con membrana de afinidad de estreptavidina (Promega V7542).

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Suministros y reactivos

HEPES Sigma nº H3375 PM = 238,3; fosfato de \beta-glicerol Sigma nº G-9891 MW = 216,0; EDTA 0,5 M, pH 8,0 GibcoBRL; Ortovanadato sódico ACROS nº 205330500 PM = 183,9; DTT (DL-ditiotreitol) Sigma nº D-5545 PM = 154,2; cloruro de magnesio ACROS nº 41341-5000 PM = 203,3; ATP Sigma nº A-7699 PM = 551,1; \gamma^{33}P ATP NEN nº NEG602H; caseína quinasa 1\delta Sigma nº C4455; sustrato de caseína quinasa 1 New England Peptide Biotin-RRKDLHDDEEDEAMSITA PM = 2470.

La disolución tampón de quinasa (KB, 100 ml) se prepara como sigue:

HEPES 50 mM, pH 8,0

5 ml de disolución madre 1 M

MgCl 10 mM

1 ml de disolución madre 1 M

\beta-glicerofosfato 10 mM

1 ml de disolución madre 1 M

EDTA 2,5 mM

500 \mul de disolución madre 500 mM

ortovanadato de sodio 1 mM

100 \mul de disolución madre 1 M

DTT 1 mM

100 \mul de disolución madre 1 M

Agua

92,3 ml

La mezcla principal de ATP se prepara como sigue:

Se prepara 1 ml de la disolución de ATP 1M en agua (solución madre de ATP 1 M).

Para 12 ml de KB:

Se añaden 12 \mul de disolución de ATP 1 M, después

Se añaden 12 \mul de ^{33}P-ATP (10 \muCi/\mul), NEG602H, Perkin Elmer.

Se prepara la placa de reacción y se realiza el ensayo como sigue:

1.

Se añaden 10 \mul de KB por pocillo con o sin el compuesto de ensayo inhibidor a los pocillos de la placa de reacción.

2.

Se añaden 60 \mul de KB por pocillo.

3.

Se añaden 10 \mul de sustrato peptídico 500 \muM por pocillo

4.

Se lleva la placa hasta 37ºC

5.

Se añaden 10 \mul de dilución 1:10 de CK1\delta por pocillo = 0,42 \mug o 0,68 unidades

6.

La reacción se inicia con 10 \mul de mezcla principal de ATP por pocillo

7.

La placa de reacción se pone en un incubador a 37ºC durante 10 minutos.

8.

La reacción se para con 10 \mul de ATP 1 M. Se transfieren 20 \mul a la placa SAM y se deja en reposo durante 10 minutos a temperatura ambiente.

9.

Se lava tres veces con 100 \mul de disolución de NaCl 2 M, después 3 veces con 100 \mul de disoluciones de NaCl 2 M y H_{3}PO_{4} al 1% y después 3 veces con 100 \mul de agua en una válvula distribuidora de vacío.

10.

Se seca la placa de filtro bajo una lámpara durante 30 minutos.

11.

Se sella el fondo de la placa y se añaden 20 \mul de MicroScint 20.

12.

Se mide en un TOPCOUNT.

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Procedimientos experimentales de ensayo circadiano celular

Cultivo celular: Se dividieron cultivos de fibroblastos Mper1-luc Rat-1 (P2C4) cada 3-4 días (\sim10-20% de confluencia) en matraces de cultivo de tejidos de poliestireno ventilados de 150 cm^{2} (Falcon nº 35-5001) y se mantuvieron en medio de crecimiento [EMEM (Cellgro nº 10-010-CV); suero bovino fetal al 10% (FBS; Gibco nº 16000-044); y 50 U.I./ml de penicilina-estreptomicina (Cellgro nº 30-001-C1)] a 37ºC y con CO_{2} al 5%.

Transfección estable: Se cotransfectaron cultivos de fibroblastos Rat-1 a una confluencia de 30-50% con vectores que contenían el marcador seleccionable de resistencia a la zeocina para la transfección estable y un gen indicador de luciferasa dirigido por el promotor de mPer-1. Después de 24-48 horas, los cultivos se repartieron en placas de 96 pocillos y se mantuvieron en medio de crecimiento complementado con 50-100 \mug/ml de zeocina (Invitrogen nº 45-0430) durante 10-14 días. En los transfectantes estables resistentes a la zeocina se evaluó la expresión del indicador complementando el medio de crecimiento con luciferina 100 \muM (Promega nº E1603) y ensayando la actividad de luciferasa en un contador de centelleo TopCount (Packard Modelo nº C384V00). Los clones de Rat-1 que expresaban tanto resistencia a la zeocina como actividad de luciferasa dirigida por mPer1 se sincronizaron por choque con suero de caballo al 50% [HS (Gibco nº 16050-122)] y se evaluaron con respecto a la actividad indicadora circadiana. Para ensayar el compuesto se seleccionó el clon P2C4 de fibroblastos Mper1-luc
Rat-1.

Protocolo de sincronización: Se cultivaron fibroblastos Mper1-luc Rat-1 (P2C4) (al 40-50% de confluencia) en placas de cultivo de tejidos opacas de 96 pocillos (PerkinElmer nº 6005680) y se mantuvieron en medio de crecimiento complementado con 100 \mug/ml de zeocina (Invitrogen nº 45-0430) hasta que los cultivos alcanzaron una confluencia de 100% (48-72 h). Los cultivos se sincronizaron con 100 \mul de medio de sincronización [EMEM (Cellgro nº 10-010-CV); 100 U.I./ml de penicilina-estreptomicina (Cellgro nº 30-001-C1); HS al 50% (Gibco nº 16050-122)] durante 2 horas a 37ºC y con CO_{2} al 5%. Después de la sincronización, los cultivos se aclararon con 100 \mul de EMEM (Cellgro nº 10-010-CV) durante 10 minutos a temperatura ambiente. Después del aclarado, el medio se reemplazó con 300 \mul de medio independiente de CO_{2} [CO_{2}I (Gibco nº 18045-088); L-glutamina 2 mM (Cellgro nº 25-005-C1); 100 U.I./ml de penicilina-estreptomicina (Cellgro nº 30-001-C1); luciferina 100 \muM (Promega nº E1603)]. Los compuestos ensayados con respecto al ritmo circadiano se añadieron a medio independiente de CO_{2} en DMSO al 0,3% (concentración final). Los cultivos se sellaron inmediatamente con película TopSeal-A (Packard nº 6005185) y se transfirieron para medir la actividad luciferasa.

Medición automática del indicador circadiano: Después de la sincronización, las placas de ensayo se mantuvieron a 37ºC en un incubador de cultivo de tejidos (Forma Scientific Modelo nº 3914). La actividad luciferasa in vivo se estimó midiendo la producción de luz relativa en un contador de centelleo TopCount (Packard Model #C384V00). Las placas se transfirieron desde el incubador al lector usando un brazo robótico ORCA (Beckman Instruments) y el software de programación automática SAMI-NT (Versión 3.3; SAGIAN/Beckman Instruments).

Análisis de los Datos: Se usaron Microsoft Excel y XLfit (Versión 2.0.9; IDBS) para importar, manipular y representar los datos. El análisis del periodo se realizó determinando el intervalo entre el mínimo de producción de luz relativo durante varios días o por la Transformada de Fourier. Los dos métodos produjeron estimaciones del periodo casi idénticas en una serie de periodos circadianos. La potencia se describe como EC_{\Delta t+1h}, que se presenta como la concentración micromolar eficaz que indujo un alargamiento del periodo de 1 hora. Los datos se analizaron por ajuste de una curva hiperbólica a los datos expresados como cambio de periodo (eje y) frente a la concentración de compuesto de ensayo (eje x) en XLfit y a partir de esta curva se interpoló EC_{\Delta t+1h}.

TABLA 4

11

12

Claims (43)

1. Un compuesto de fórmula (I)

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13

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en la que:

R_{1} es H o alquilo C_{1-6};

R_{2} es NR_{5}R_{6};

R_{3} es un arilo que es un anillo de carbonos monocíclico, bicíclico o tricíclico de hasta 7 miembros en cada anillo, y en el que al menos un anillo es aromático, estando dicho arilo opcionalmente sustituido con 1 a 3 sustituyentes seleccionados del grupo que consiste en metilendioxi, hidroxi, alcoxi C_{1-6}, halógeno, alquilo C_{1-6}, alquenilo C_{2-6}, alquinilo C_{2-6}, trifluorometilo, trifluorometoxi, -NO_{2}, -NH_{2}, -NH(alquilo C_{1-6}), -N(alquilo C_{1-6})_{2}, -NH-acilo y -N(alquil C_{1-6})acilo, siendo dicho grupo acilo un grupo hidrocarburo alifático saturado que tiene de 1 a 6 átomos de carbono, unido a un resto carbonilo; un heterociclo monocíclico C_{5-7} o un heterociclo bicíclico C_{8-11}, teniendo dicho heterociclo de 1 a 3 heteroátomos seleccionados del grupo que consiste en N, O y S, y estando dicho heterociclo opcionalmente sustituido con 1 a 3 sustituyentes seleccionados del grupo que consiste en alcoxi C_{1-6}, hidroxi, halógeno, alquilo C_{1-6}, alquenilo C_{2-6}, alquinilo C_{2-6}, trifluorometilo, trifluorometoxi, -NO_{2}, -NH_{2}, -NH(alquilo C_{1-6}), -N(alquilo C_{1-6})_{2}, -NH-acilo, y -N(alquil C_{1-6})acilo, siendo dicho grupo acilo un grupo hidrocarburo alifático saturado que tiene de 1 a 6 átomos de carbono unido a un resto carbonilo;

R_{4} es H, alquilo C_{1-6}, alquenilo C_{2-6}, alquinilo C_{2-6}, alcoxi C_{1-6}, CF_{3}, halógeno, SH, S-alquilo C_{1-6}, NO_{2}, NH_{2} o NR_{5}R_{6};

R_{5} es H o alquilo C_{1-6};

R_{6} es H o alquilo C_{1-6};

X es S o S(O)n;

uno de K, L o M es N y los otros dos miembros de K, L o M son cada uno C en los que R_{4} está unido solo a un átomo K, L, M u otro átomo del anillo que sea C;

m es 1, 2 ó 3; y

n es 1 ó 2; o

una de sus sales o estereoisómeros farmacéuticamente aceptable.

2. El compuesto según la reivindicación 1, en el que L es N, y K y M son cada uno C.

3. El compuesto según la reivindicación 2, en el que R_{1}, R_{4}, R_{5} y R_{6} son cada uno H y R_{3} es arilo que es un anillo de carbonos monocíclico, bicíclico o tricíclico de hasta 7 miembros en cada anillo, y en el que al menos un anillo es aromático, estando dicho arilo opcionalmente sustituido con 1 a 3 sustituyentes seleccionados del grupo que consiste en metilendioxi, hidroxi, alcoxi C_{1-6}, halógeno, alquilo C_{1-6}, alquenilo C_{2-6}, alquinilo C_{2-6}, trifluorometilo, trifluorometoxi, -NO_{2}, -NH_{2}, -NH(alquilo C_{1-6}), -N(alquilo C_{1-6})_{2}, -NH-acilo y -N(alquil C_{1-6})acilo, siendo dicho grupo acilo un grupo hidrocarburo alifático saturado que tiene de 1 a 6 átomos de carbono unido a un resto carbonilo.

4. El compuesto según la reivindicación 3, seleccionado del grupo que consiste en: amida del ácido 3-fenilsulfanil-1H-pirrolo[3,2-c]piridina-2-carboxílico, amida del ácido 3-(3-fluoro-fenilsulfanil)-1H-pirrolo[3,2-c]piridina-2-carboxílico y amida del ácido 3-(4-cloro-fenilsulfanil)-1H-pirrolo[3,2-c]piridina-2-carboxílico.

5. El compuesto según la reivindicación 1, en el que M es N, y K y L son cada uno C.

6. El compuesto según la reivindicación 5, en el que R_{1}, R_{4}, R_{5} y R_{6} son cada uno H y R_{3} es un arilo que es un anillo de carbonos monocíclico, bicíclico o tricíclico de hasta 7 miembros en cada anillo, y en el que al menos un anillo es aromático, estando dicho arilo opcionalmente sustituido con 1 a 3 sustituyentes seleccionados del grupo que consiste en metilendioxi, hidroxi, alcoxi C_{1-6}, halógeno, alquilo C_{1-6}, alquenilo C_{2-6}, alquinilo C_{2-6}, trifluorometilo, trifluorometoxi, -NO_{2}, -NH_{2}, -NH(alquilo C_{1-6}), -N(alquilo C_{1-6})_{2}, -NH-acilo y -N(alquil C_{1-6})acilo, siendo dicho grupo acilo un grupo hidrocarburo alifático saturado que tiene de 1 a 6 átomos de carbono unido a un resto carbonilo; heterociclo monocíclico C_{5-7} o un heterociclo bicíclico C_{8-11}, estando dicho heterociclo opcionalmente sustituido con 1 a 3 sustituyentes seleccionados del grupo que consiste en alcoxi C_{1-6}, hidroxi, halógeno, alquilo C_{1-6}, alquenilo C_{2-6}, alquinilo C_{2-6}, trifluorometilo, trifluorometoxi, -NO_{2}, -NH_{2}, -NH(alquilo C_{1-6}), -N(alquilo C_{1-6})_{2}, -NH-acilo, y -N(alquil C_{1-6})acilo, siendo dicho grupo acilo un grupo hidrocarburo alifático saturado que tiene de 1 a 6 átomos de carbono unido a un resto carbonilo.

7. El compuesto según la reivindicación 6, seleccionado del grupo que consiste en: amida del ácido 3-fenilsulfanil-1H-pirrolo[2,3-c]piridina-2-carboxílico, amida del ácido 3-(3-fluoro-fenilsulfanil)-1H-pirrolo[2,3-c]piridina-2-carboxílico; amida del ácido 3-(3-metoxi-fenilsulfanil)-1H-pirrolo[2,3-c]piridina-2-carboxílico, amida del ácido 3-(3-cloro-fenilsulfanil)-1H-pirrolo[2,3-c]piridina-2-carboxílico, amida del ácido 3-(2-trifluorometil-fenilsulfanil)-1H-pirrolo[2,3-c]piridina-2-carboxílico, amida del ácido 3-(2-trifluorometoxi-fenilsulfanil)-1H-pirrolo[2,3-c]piridina-2-carboxílico, amida del ácido 3-(2-metoxi-fenilsulfanil)-1H-pirrolo[2,3-c]piridina-2-carboxílico y amida del ácido 3-(piridin-2-sulfanil)-1H-pirrolo[2,3-c]piridina-2-carboxílico.

8. El compuesto según la reivindicación 1, en el que K es N, y L y M son cada uno C.

9. El compuesto según la reivindicación 8, en el que R_{1} es alquilo C_{1-6}, R_{5} es H, R_{6} es H o alquilo C_{1-6}, y R_{3} es arilo que es un anillo de carbonos monocíclico, bicíclico o tricíclico de hasta 7 miembros en cada anillo, y en el que al menos un anillo es aromático, estando dicho arilo opcionalmente sustituido con 1 a 3 sustituyentes seleccionados del grupo que consiste en metilendioxi, hidroxi, alcoxi C_{1-6}, halógeno, alquilo C_{1-6}, alquenilo C_{2-6}, alquinilo C_{2-6}, trifluorometilo, trifluorometoxi, -NO_{2}, -NH_{2}, -NH(alquilo C_{1-6}), -N(alquilo C_{1-6})_{2}, -NH-acilo y -N(alquil C_{1-6})acilo, siendo dicho grupo acilo un grupo hidrocarburo alifático saturado que tiene de 1 a 6 átomos de carbono unido a un resto carbonilo.

10. El compuesto según la reivindicación 9, seleccionado del grupo que consiste en: metilamida del ácido 1-metil-3-fenilsulfanil-1H-pirrolo[3,2-b]piridina-2-carboxílico, amida del ácido 1-metil-3-fenilsulfanil-1H-pirrolo[3,2-b]piridina-2-carboxílico y amida del ácido 3-fenilsulfanil-1-propil-1H-pirrolo[3,2-b]piridina-2-carboxílico.

11. El compuesto según la reivindicación 8, en el que R_{1}, R_{4} y R_{5} son cada uno H, R_{3} es arilo que es un anillo de carbonos monocíclico, bicíclico o tricíclico de hasta 7 miembros en cada anillo, y en el que al menos un anillo es aromático, estando dicho arilo opcionalmente sustituido con 1 a 3 sustituyentes seleccionados del grupo que consiste en metilendioxi, hidroxi, alcoxi C_{1-6}, halógeno, alquilo C_{1-6}, alquenilo C_{2-6}, alquinilo C_{2-6}, trifluorometilo, trifluorometoxi, -NO_{2}, -NH_{2}, -NH(alquilo C_{1-6}), -N(alquilo C_{1})_{2}, -NH-acilo y -N(alquil C_{1-6})acilo, siendo dicho grupo acilo un grupo hidrocarburo alifático saturado que tiene de 1 a 6 átomos de carbono unido a un resto carbonilo y R_{6} es alquilo C_{1-6}.

12. El compuesto según la reivindicación 11, seleccionado del grupo que consiste en: metilamida del ácido 3-(3-trifluorometoxifenilsulfanil)-1H-pirrolo[3,2-b]piridina-2-carboxílico,

metilamida del ácido 3-(3-clorofenilsulfanil)-1H-pirrolo[3,2-b]piridina-2-carboxílico,

metilamida del ácido 3-(3-fluorofenilsulfanil)-1H-pirrolo[3,2-b]pirdina-2-carboxílico y

metilamida del ácido 3-fenilsulfanil-1H-pirrolo[3,2-b]piridina-2-carboxílico.

13. El compuesto según la reivindicación 8, en el que R_{1}, R_{4}, R_{5} y R_{6} son cada uno H y R_{3} es heterociclo monocíclico C_{5-7} o heterociclo bicíclico C_{8-11}, y dicho heterociclo está opcionalmente sustituido con 1 a 3 sustituyentes seleccionados del grupo que consiste en alcoxi C_{1-6}, hidroxi, halógeno, alquilo C_{1-6}, alquenilo C_{2-6}, alquinilo C_{2-6}, trifluorometilo, trifluorometoxi, -NO_{2}, -NH_{2}, -NH(alquilo C_{1-6}), -N(alquilo C_{1-6})_{2}, -NH-acilo, y -N(alquil C_{1-6})acilo, siendo dicho grupo acilo un grupo hidrocarburo alifático saturado que tiene de 1 a 6 átomos de carbono unido a un resto carbonilo.

14. El compuesto según la reivindicación 13, se selecciona del grupo que consiste en:

amida del ácido 3-(quinolin-8-ilsulfanil)-1H-pirrolo[3,2-b]piridina-2-carboxílico,

amida del ácido 3-(piridin-2-sulfanil)-1H-pirrolo[3,2-b]piridina-2-carboxílico,

amida del ácido 3-(piridin-4-sulfanil)-1H-pirrolo[3,2-b]piridina-2-carboxílico, y

amida del ácido 3-(tiofen-2-ilsulfanil)-1H-pirrolo[3,2-b]piridina-2-carboxílico.

15. El compuesto según la reivindicación 8, en el que R_{1}, R_{5} y R_{6} son cada uno H, y R_{3} es un arilo que es un anillo de carbonos monocíclico, bicíclico o tricíclico de hasta 7 miembros en cada anillo, y en el que al menos un anillo es aromático, estando dicho arilo opcionalmente sustituido con 1 a 3 sustituyentes seleccionados del grupo que consiste en metilendioxi, hidroxi, alcoxi C_{1-6}, halógeno, alquilo C_{1-6}, alquenilo C_{2-6}, alquinilo C_{2-6}, trifluorometilo, trifluorometoxi, -NO_{2}, -NH_{2}, -NH(alquilo C_{1-6}), -N(alquilo C_{1-6})_{2}, -NH-acilo y -N(alquil C_{1-6})acilo, siendo dicho grupo acilo un grupo hidrocarburo alifático saturado que tiene de 1 a 6 átomos de carbono unido a un resto
carbonilo.

16. El compuesto según la reivindicación 15, seleccionado del grupo que consiste en:

amida del ácido 3-fenilsulfanil-1H-pirrolo[3,2-b]piridina-2-carboxílico,

amida del ácido 3-(3-fluorofenilsulfanil)-1H-pirrolo[3,2-b]piridina-2-carboxílico,

amida del ácido 3-(3-clorofenilsulfanil)-1H-pirrolo[3,2-b]piridina-2-carboxílico,

amida del ácido 3-(3-bromofenilsulfanil)-1H-pirrolo[3,2-b]piridina-2-carboxílico,

amida del ácido 3-(2-clorofenilsulfanil)-1H-pirrolo[3,2-b]piridina-2-carboxílico,

amida del ácido 3-(4-clorofenilsulfanil)-1H-pirrolo[3,2-b]piridina-2-carboxílico,

amida del ácido 3-(2,4-diclorofenilsulfanil)-1H-pirrolo[3,2-b]piridina-2-carboxílico,

amida del ácido 3-(2-fluorofenilsulfanil)-1H-pirrolo[3,2-b]piridina-2-carboxílico,

amida del ácido 3-(2,3-diclorofenilsulfanil)-1H-pirrolo[3,2-b]piridina-2-carboxílico,

amida del ácido 3-(2-trifluormetilfenilsulfanil)-1H-pirrolo[3,2-b]piridina-2-carboxílico,

amida del ácido 3-(3-trifluorometil-fenilsulfanil)-1H-pirrolo[3,2-b]piridina-2-carboxílico,

amida del ácido 3-(2-aminofenilsulfanil)-1H-pirrolo[3,2-b]piridina-2-carboxílico,

amida del ácido 3-(2,5-dicloro-fenilsulfanil)-1H-pirrolo[3,2-b]piridina-2-carboxílico,

amida del ácido 3-(2-metoxi-fenilsulfanil)-1H-pirrolo[3,2-b]piridina-2-carboxílico,

amida del ácido 3-(3-metoxi-fenilsulfanil)-1H-pirrolo[3,2-b]piridina-2-carboxílico,

amida del ácido 3-(3-amino-fenilsulfanil)-1H-pirrolo[3,2-b]piridina-2-carboxílico,

amida del ácido 3-(4-nitro-fenilsulfanil)-1H-pirrolo[3,2-b]piridina-2-carboxílico,

amida del ácido 3-(3-nitro-fenilsulfanil)-1H-pirrolo[3,2-b]piridina-2-carboxílico,

amida del ácido 3-o-tolilsulfanil-1H-pirrolo[3,2-b]piridina-2-carboxílico,

amida del ácido 3-p-tolilsulfanil-1H-pirrolo[3,2-b]piridina-2-carboxílico,

amida del ácido 3-(3,5-dimetil-fenilsulfanil)-1H-pirrolo[3,2-b]piridina-2-carboxílico,

amida del ácido 3-m-tolilsulfanil-1H-pirrolo[3,2-b]piridina-2-carboxílico,

amida del ácido 3-(2-etil-fenilsulfanil)-1H-pirrolo[3,2-b]piridina-2-carboxílico,

amida del ácido 3-(3-trifluorometoxi-fenilsulfanil)-1H-pirrolo[3,2-b]piridina-2-carboxílico,

amida del ácido 3-(3-fluoro-fenilsulfanil)-5-metoxi-1H-pirrolo[3,2-b]piridina-2-carboxílico, y

amida del ácido 3-(3-metoxi-fenilsulfanil)-5-metoxi-1H-pirrolo[3,2-b]piridina-2-carboxílico.

17. Una composición farmacéutica que comprende un vehículo farmacéutico y una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto según la reivindicación 1, o una de sus sales o estereoisómeros farmacéuticamente aceptable.

18. Uso de un compuesto según la reivindicación 1, para preparar un medicamento útil para el tratamiento de trastornos debidos a la inhibición de la actividad de la caseína quinasa I\varepsilon.

19. Uso de un compuesto según la reivindicación 1, para preparar un medicamento útil para el tratamiento de trastornos o enfermedades que mejoran por la inhibición de la caseína quinasa I\varepsilon.

20. Uso de un compuesto según la reivindicación 19, en el que la enfermedad o trastorno es un trastorno del estado de ánimo o un trastorno del sueño.

21. Uso de un compuesto según la reivindicación 20, en el que el trastorno es un trastorno del estado de ánimo.

22. Uso de un compuesto según la reivindicación 21, en el que el trastorno del estado de ánimo se selecciona de un trastorno depresivo o un trastorno bipolar.

23. Uso de un compuesto según la reivindicación 22, en el que el trastorno depresivo es un trastorno de depresión mayor.

24. Uso de un compuesto según la reivindicación 22, en el que el trastorno bipolar se selecciona del grupo que consiste en el trastorno bipolar I y el trastorno bipolar II.

25. Uso de un compuesto según la reivindicación 20, en el que el trastorno es un trastorno del sueño.

26. Uso de un compuesto según la reivindicación 25, en el que el trastorno del sueño es un trastorno del ritmo circadiano del sueño.

27. Uso de un compuesto según la reivindicación 26, en el que el trastorno del ritmo circadiano del sueño se selecciona del grupo que consiste en trastorno del sueño por cambio de turno, síndrome de desfase horario, síndrome de fase del sueño avanzada y síndrome de fase del sueño retardada.

28. Un procedimiento para preparar un compuesto de fórmula (I)

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en la que:

R_{1} es H;

R_{2} es NH_{2};

X es S;

R_{3}, R_{4}, R_{5}, R_{6} K, L M, N y m se definen como en la reivindicación 1;

que comprende la etapa de tratar un diéster malónico con una base adecuada en un disolvente adecuado, añadir una 2-cloro-3-nitropiridina, 3-cloro-4-nitropiridina o 4-cloro-3-nitropiridina sustituidas o no sustituidas, calentar la mezcla de reacción hasta que la reacción se ha completado, tratar la mezcla de reacción con un ácido mineral y calentar la mezcla de reacción hasta completarse la descarboxilación para proporcionar una 2-metil-3-nitropiridina, 3-metil-4-nitropiridina o 4-metil-3-nitropiridina sustituidas o no sustituidas.

29. El procedimiento de la reivindicación 28, en el que el diéster malónico es malonato de dietilo, la base es t-butóxido sódico, el disolvente es N-metil-2-pirrolidinona y el ácido mineral es ácido sulfúrico.

30. El procedimiento de la reivindicación 29, en el que se prepara la 2-metil-3-nitropiridina.

31. El procedimiento de la reivindicación 28, que además comprende la etapa de añadir una 2-metil-3-nitropiridina, 3-metil-4-nitropiridina o 4-metil-3-nitropiridina sustituidas o no sustituidas, a una mezcla de un disolvente adecuado, una base adecuada y un diéster de oxalato adecuado, para proporcionar el éster del ácido 2-hidroxi-3-(3-nitro-piridin-2-il)-acrílico, éster del ácido 2-hidroxi-3-(4-nitro-piridin-3-il)-acrílico o éster del ácido 2-hidroxi-3-(3-nitro-piridin-4-il)-acrílico, sustituidos o no sustituidos, o sus correspondientes cetonas tautómeras.

32. El procedimiento de la reivindicación 31, en el que el diéster de oxalato es oxalato de dietilo, el disolvente es tetrahidrofurano y la base es etóxido sódico.

33. El procedimiento de la reivindicación 32, en el que se prepara el éster de etilo del ácido 2-hidroxi-3-(3-nitro-piridin-2-il)-acrílico.

34. El procedimiento de la reivindicación 28, que además comprende la etapa de reducir un éster del ácido 2-hidroxi-3-(3-nitro-piridin-2-il)-acrílico, éster del ácido 2-hidroxi-3-(4-nitro-piridin-3-il)-acrílico o éster del ácido 2-hidroxi-3-(3-nitro-piridin-4-il)-acrílico, sustituidos o no sustituidos, en un disolvente adecuado con un catalizador adecuado para proporcionar un éster del ácido 1H-pirrolo[3,2-b]piridina-2-carboxílico, éster del ácido 1H-pirrolo[3,2-c]piridina-2-carboxílico o éster del ácido 1H-pirrolo[2,3-c]piridina-2-carboxílico, sustituidos o no sustituidos.

35. El procedimiento de la reivindicación 34, en el que el disolvente es etanol absoluto y el catalizador es paladio sobre carbón.

36. El procedimiento de la reivindicación 35, en el que se prepara el éster de etilo del ácido 1H-pirrolo[3,2-b]piridina-2-carboxílico.

37. El procedimiento de la reivindicación 28, que además comprende la etapa de añadir un éster del ácido 1H-pirrolo[3,2-b]piridina-2-carboxílico, éster del ácido 1H-pirrolo[3,2-c]piridina-2-carboxílico o éster del ácido 1H-pirrolo[2,3-c]piridina-2-carboxílico sustituidos o no sustituidos, a amoniaco en un disolvente adecuado para proporcionar una amida del ácido 1H-pirrolo[3,2-b]piridina-2-carboxílico, amida del ácido 1H-pirrolo[3,2-c]piridina-2-carboxílico o amida del ácido 1H-pirrolo[2,3-c]piridina-2-carboxílico sustituidas o no sustituidas.

38. El procedimiento de la reivindicación 37, en el que el disolvente es metanol.

39. El procedimiento de la reivindicación 38, en el que se prepara la amida del ácido 1H-pirrolo[3,2-b]piridina-2-carboxílico.

40. El procedimiento de la reivindicación 28, que además comprende la etapa de añadir una amida del ácido 1H-pirrolo[3,2-b]piridina-2-carboxílico, amida del ácido 1H-pirrolo[3,2-c]piridina-2-carboxílico o amida del ácido 1H-pirrolo[2,3-c]piridina-2-carboxílico sustituidas o no sustituidas, una cantidad en exceso de una base adecuada y un disulfuro de diarilo o un disulfuro de diheterociclo a un disolvente adecuado y calentar para proporcionar un compuesto de fórmula (I) en el que R_{1} es hidrógeno.

41. El procedimiento según la reivindicación 40, en el que la cantidad en exceso de base es de aproximadamente 2,0 a aproximadamente 2,5 equivalentes, la base es carbonato de cesio y el disulfuro de diarilo es disulfuro de difenilo o disulfuro de bis-(3-fluorofenilo).

42. El procedimiento según la reivindicación 41, en el que se prepara la amida del ácido 3-fenilsulfanil-1H-pirrolo[3,2-b]piridina-2-carboxílico.

43. El procedimiento según la reivindicación 41, en el que se prepara la amida del ácido 3-(3-fluorofenilsulfanil)-1H-pirrolo[3,2-b]piridina-2-carboxílico.