KR20060113754A - 카제인 키나제 Ｉε저해제로서 치환된 1Ｈ-피롤로［3,2-ｂ,3,2-ｃ, 및 2,3-ｃ］피리딘-2-카복사미드 및 관련 유사체 - Google Patents

Abstract

본 발명은 사람 카제인 키나제 Iε저해제로서 치환된 1H-피롤로[3,2-b]피리딘-2-카복사미드, 1H-피롤로[3,2-c]피리딘-2-카복사미드 및 1H-피롤로[2,3-c]피리딘-2-카복사미드(화학식 I의 화합물)를 설명하고, 이를 청구하며, 정서 장애, 수면 장애를 포함하는 다양한 중추 신경계 질환 및 장애 치료에 화학식 I의 화합물을 이용하는 방법을 설명하고 특허 청구한다. 화학식 I의 화합물로 구성된 약제학적 조성물 및 화학식 I의 화합물을 제조하는 방법 또한 설명하고 특허 청구한다.

카제인 키나제 Ｉε저해제, 서캐디안 리듬, 정서 장애, 수면 장애, 양극성 장애, 2-메틸-3-니트로피리딘

Description

카제인 키나제 Ｉε저해제로서 치환된 1Ｈ-피롤로［3,2-ｂ, 3,2-ｃ, 및 2,3-ｃ］피리딘-2-카복사미드 및 관련 유사체{Substituted 1Ｈ-pyrrolo[3,2-b, 3,2-c, and 2,3-c]pyridine-2-carboxamides and related analogs as inhibitors of casein kinase Ｉε}

본 발명은 치환된 1H-피롤로[3,2-b]피리딘-2-카복사미드, 1H-피롤로[3,2-c]피리딘-2-카복사미드 및 1H-피롤로[2,3-c]피리딘-2-카복사미드의 시리즈에 관한 것이다. 좀더 구체적으로, 본 발명은 3-아릴티오-치환된 및 3-헤테로시클로티오-치환된 1H-피롤로[3,2-b]피리딘-2-카복사미드, 1H-피롤로[3,2-c]피리딘-2-카복사미드 및 1H-피롤로[2,3-c]피리딘-2-카복사미드, 및 이의 관련 유사체에 관한 것이다. 본 발명은 또한 이들 화합물을 제조하는 방법에 관한 것이다. 본 발명의 화합물은 사람의 카제인 키나제 Ｉε인산화 활성 저해제이며, 따라서 중추 신경계와 연관된 장애 또는 질환의 치료 및/또는 예방에 특히 유용한 약제로서 유용하다.

단세포에서부터 사람에 이르는 많은 유기체의 거동에서 리듬의 변화가 나타난다. 온도와는 거의 관계없이, 리듬이 일정한 조건하에 지속되고, 대략 주기가 하루이면, 이와 같은 리듬을 "서캐디안(circadian)" [참조: Konopka, R.J. and Benzer, S. (1971) Proc. Nat. Acad. Sci. USA 68, 2112-2116]이라 한다.

서캐디안 리듬은 내인성 생물학적 페이스메이커(pacemakers)(서캐디안 시계)에 의해 발성되는데, 사람, 곰팡이, 곤충, 세균을 포함하는 대부분의 살아있는 유기체에 존재한다[참조: Dunlap, J.C.(1999) Cell 96, 271-290; Hastings, J.W. et al. Circadian, Rhythms, The Physiology of Biological Timing. In: Prosser, C.L. ed. Neural and Integrative Animal Physiology, New York: Wiley-Liss (1991)435-546; Allada, R. et al. (1998) Cell 93, 791-804; Kondo et al. (1994) Science 266, 1233-1236; Crosthwaite, S.K. et al. (1997) Science 276, 763-769; Shearman, L.P. et al. (1997) Neuron, 19, 1261-1269]. 서캐디안 리듬은 완전히 어두운 조건에서도 자체-지속적이고 일정하지만, 빛과 온도 주기와 같은 환경 시그날에 의해 새로운 낮과 밤 상황에 동조(싸이클 변화)될 수 있다[참조: Pittendrigh, C.S.(1993) Annu. Rev. Physiol., 55, 16-54; Takahashi, J.S. (1995) Annu. Rev. Neurosci. 18, 531-553; Albrecht, U. et al.(1997) Cell, 91, 1055-1064]. 서캐디안 시계는 생물학적 리듬을 유지하는데 기본적이며, 음식물 섭취 및 취침/기상 주기와 같은 거동에서 일상적 변동 등의 다양한 서캐디안 거동을 조절할 뿐만 아니라 호르몬 방출 및 체온 변동과 같은 생리학적 변화도 조절한다[참조: Hastings, M. (1997) Trends Neurosci. 20, 459-464; Reppert, S.M. and Weaver, D.R. (1997) Cell 89, 487-490].

초파리 ( Drosophila melanogaster )의 유전자 및 분자 연구를 통하여 서캐디 안 리듬성에 연관된 유전자 일부를 밝혀내었다. 이와 같은 연구들에 의해 자가-조절에 매우 근접하고 전사/해독에 근거한 네가티브 피이드-백 루프(transcription/translation-based negative feed back loop)로 구성된 경로를 인지하게 되었다[참조: Dunlap, J.C. (1999) Cell, 96, 271-290; Dunlap, J.C. (1996) Annu. Rev. Genet. 30, 579-601; Hall, J.C. (1996) Neuron, 17, 799-802].

초파리에서 서캐디안 진동자의 핵심 원소들은 두 가지 자극 단백질 dCLOCK/dBMAL(CYCLE)과 두 가지 저해 단백질 dPERIOD(dPER) 및 dTIMELESS (dTIM)으로 구성된다. dCLOCK 및 dBMAL는 이형이량체를 형성하여 전사인자 dCLOCK/dBMAL를 만드는데, 이는 Drosophila Period(dper) 및 Drosophila Timeless(dtim)으로 명명된 두 가지 유전자 발현을 촉진시킨다. 궁극적으로 이들 유전자로부터 mRNAs가 전사되어 각각 단백질 dPER 및 dTIM을 제공한다. 몇 시간 동안 단백질 생성물인 dPER 및 dTIM이 합성되어, 세포질에서 인산화되고, 임계수준에 도달하면 핵으로 전좌되는 이형이량체를 만든다. 일단 핵에서, dPER 및 dTIM는 이들 자체가 전사의 네가티브 조절 물질로써 기능을 하여, dPER 및 dTIM의 축적이 감소되고, dCLOCK/dBMAL에 의한 dper 및 dtim의 활성화가 재개된다[참조: Zylka, M.J. et al. (1998) Neuron 20, 1103-1110; Lowrey, P.L. et al. (2000) 288, 483-491]. dper 유전자는 성충 부화 거동 및 운동 활성(번데기에서 성충으로 출현)에서 서캐디안 리듬 조절에 필수적인 것으로 확인되었다[참조: Konopka, R.J., & Benzer, S. (1971) Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 68, 2112-2116]. per 유전자의 미스센스 돌연변이는 서캐디안 리듬을 단축시키거나(per ^S ) 또는 연장시킬 수 있으며(per ^L ), 넌센스 돌연변이들(per ^o )은 거동에 불규칙성을 제공하게 된다[참조: Hall, J.C. (1995) Trends Neurosci. 18, 230-240].

포유류에서, 전방 시상하부의 시신경 교차상핵(SCN)이 어미 생체 시계 부위가된다[참조: Panda et al, (2002) Nature 417, 329 - 335; Reppert, S.M. and Weaver, D.R. (1997) Cell, 89, 487-490]. SCN 시계는 빛이 망막-SCN 경로에 직간접적으로 작용함으로써 매일 낮과 밤의 주기가 24 시간으로 설정된다[참조: Klein, D.C. et al. (1991) Suprachiasmatic Nuclei: The Mind's Clock, Oxford Univercity Press, New York]. 설치류의 SCN에서, 세 가지 Per 유전자가 확인되었고, 클론되었으며, 이들을 각각 마우스 Per1(mPer1), mPer2 , mPer3로 명명하였다. 이들 포유류 유전자들의 단백질 생성물들 (mPER1, mPER2, mPER3)은 서로 상동성 부분을 공유하며, 각 포유류 Per 유전자는 곤충의 PER의 PAS 도메인과 상당히 유사한 단백질의 이량체형성 도메인 즉, PAS (PAS는 기능적으로 중요한 이량체형성 도메인을 공유하는 것으로 밝혀진 세가지 단백질 PER, ARNT, SIM의 첫자를 취한 약어이다)를 가진 단백질을 인코드한다. 모든 Per 메신져 RNAs (mRNAs) 및 단백질수준은 서캐디안 동안에 변동하여 궁극에는 생물학적 시계의 포지티브 및 네가티브 조절에 모두 관련되지만, mPER1 및 mPER2는 빛에 반응하여 변동한다[참조: Zylka, M.J. et al. (1998) Neuron 20, 1103-1110.; Albrecht, U. et al., (1997) Cell 91, 1055-1064; Shearman, L.P. et al. (1997) Neuron 19, 1261-1269]. Drosophila tim 유전자의 포유류 상동체를 클론하여 mTim으로 명명하였다. 그러나, 초파리 에서 관찰된 것과 유사한 mPER-mTIM 상호작용에 대한 증거는 없었으며, 포유류 서캐디안 시계의 분자 작업에서 PER-PER 상호작용이 PER-TIM 이량체의 기능을 대신할 것이라고 제안된 바 있다[참조: Zylka, M.J. et al., (1998) Neuron 21, 1115-1122]. 또 다른 가능성은 PER1 및 PER2에서 리듬이 네가티브 피드백 루프를 형성하여 시계 단백질의 전자 활성을 조절하고(이들의 PAS 도메인을 경유하여), 다시 Per 유전자 한 개 또는 두 개 유전자의 발현을 구동한다는 것이다[참조: Shearman, L.P. et al. (1997) Neuron 19, 1261-1269].

포유류 시계 작업에서 세 가지 mPer 유전자의 역할을 이해하는 것이 대부분의 연구의 주제가 되어 왔다. dPER에 대해 mPER 단백질의 구조적 유사성으로 mPER 단백질이 포유류 피드백 루프에서 네가티브 요소로써 기능을 할 것이라는 예측을 이끌었다. PER1은 피드백 루프에서 자체 전사의 네가티브 조절에 연관되는 것으로 보이나 최근 증거에서는 인풋 경로에 관계되는 것으로 보인다[참조: Hastings, M.H. et al. (1999) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 26, 15211-15216]. PER2은 가장 잘 특징이 알려진 단백질이며, PAS 이량체형성 도메인의 카복실 부분에 87개 잔기가 부족한 mPER2 돌연변이 마우스(mPer2 ^Brdm1 )는 정상적인 낮과 밤 세팅에서 단축된 서캐디안 사이클을 가지지만, 완전한 어둠에서는 불규칙성(arrhythmicity)를 보인다. 돌연변이 또한 SCN에서 mPer1 및 mPer2 모두의 변동 발현을 감소시키고, 이는 mPer2 가 생체에서 mPer1 를 조절할 수 있다는 것을 시사한다[참조: Zheng, B. et al. (1999) Nature 400, 169-173]. PER2은 중추 시계의 "기어(gear)" 조절에서 이중 기능을 하는 것으로 알려져 있다[참조: Shearman, L.P. et al. (2000) Science 288, 1013-1018]. 당해 연구에서, PER2는 크립토크롬(CRY) 단백질에 결합하여 핵 으로 전좌되고, 여기서 CRY는 CLOCK 및 BMAL1 포지티브 전사 복합체에 의해 구동되는 전사를 네가티브하게 조절하였다. 핵으로 진입시에, PER2는 아직 미확인된 기전에 의해 BMAL1 전사를 포지티브하게 조절함으로써 시계의 포지티브 부분을 개시하였다. PER3의 기능에 대해서는 아직 알려지지 않았지만, mPer3 녹다운 마우스에서, 서캐디안 활성에 미묘한 효과가 관찰되었고, 따라서, PER3는 서캐디안 제어된 출력 경로와 연관이 있는 것으로 보고 있다[참고: Shearman, L.P. et al (2000) Mol. Cell. Biol. 17, 6269-6275]. mPER 단백질들이 서로 상호작용하고, mPER3가 mPER1 및 mPER2의 담체로 작용하여 이들을 핵으로 가져오고, 이는 SCN에서 서캐디안 시그날의 생성에 중요하다[참고: Kume, K. et al. (1999) Cell 98, 193-205; Takano, A. et al. (2000), FEBS Letters, 477, 106-112].

서캐디안 시계의 성분들의 인산화반응이 사이클의 지속을 조절하는 것으로 주장되고 있다. 특정 단백질 키나제가 초파리 서캐디안 리듬을 조절한다는 첫 번째 유전적 증거는 단백질 세린/트레오닌 키나제를 인코드하는 신규한 유전자 이중시간(dbt)의 발견이었다[참조: Price J.L. et al. (1998) Cell 94, 83-95; Kloss B. et al. (1998) Cell 94, 97-107]. dbt에 미스센스 돌연변이가 생기면 변형된 서캐디안 리듬이 된다. dbt의 비활성 대립인자로 dPER의 하이포인산화 반응 및 부정맥(arrhythmia)이 생성된다.

DBT와 가장 밀접하게 연관된 포유류 키나제들은 카제인 키나제 Iε(CKIε) 및 카제인 키나제 Iδ(CKIδ)이다. 두 가지 키나제 모두가 mPER1에 결합하고, 몇 가지 연구에서는 CKIε가 마우스 및 사람의 PER1를 인산화시키는 것으로 나타났다 [참조: Price J.L. et al. (1998) Cell 94, 83-95; Kloss B. et al. (1998) Cell 94, 97-107]. 사람 신장 배아 293T 세포와 야생형 hCKIε가 공동-형질감염된 연구에서, hPER1는 인산화 반응에서 상당한 증가를 나타내었다(분자량의 변동으로 확인됨). 이와 같은 연구에서, 인산화된 hPER1는 약 12시간의 반감기를 가지는 반면에 비인산화된 hPER1는 24시간 이상 세포에서 안정하게 유지되어, hPER1의 인산화반응으로 인하여 단백질의 안정성이 감소되는 것으로 제안되었다[참조: Kessler, G.A. et al. (2000) NeuroReport, 11, 951-955. 또 다른 연구에서 hCKIε에 의한 PER1 인산화반응 결과에는 세포질 정체, 핵 전위 및 단백질 불안정화 등이 포함된다[참조: Vielhaber, E. et al. (2000) Mol. Cell. Biol. 13, 4888-4899; Takano, A. et al. (2000) FEBS Letters 477, 106-112].

Lowery 등[(2000) Science 288, 483-491]에 의해 시리아 골드 햄스트에서 CKIε(tau 돌연변이, Ralph, M.R. and Menaker, M. (1988) Science 241, 1225-1227]의 반우성 돌연변이에 의해 이형접합 및 동형접합 동물 모두에서 서캐디안 일이 단축되었음(각각 22시간 및 20시간)을 발견하기 전까지는 포유류에서 잠재적인 조절물질로써 CKIε또는 CKIδ를 선택하는 생화학적 이유는 없었다. 이와 같은 경우에, CKIε활성의 감소된 수준으로 PER 인산화반응이 적어지고, 세포질 PER 단백질의 수준이 아마도 높아져서, 핵 진입이 강화되고, 서캐디안 사이클이 변형될 것이다. 좀더 최근에는 포유류 시계 단백질인 hPER1 및 hPER2의 전사 후 변형에 의해 서캐디안 리듬 제어에 CKIδ가 관련될 수 있다고 제안된 바 있다[참조: Camacho, F. et al., (2001) FEBS Letters 489(2,3), 159-165]. 따라서, CKIε및/ 또는 CKIδ소분자 저해제는 서캐디안 리듬을 변경시키는 새로운 수단을 제공한다. 하기에서 논의되는 바와 같이, 서캐디안의 변경이 수면 또는 우울증 질환 치료에 유용할 수도 있을 것이다.

U.S. 특허 6,555,328 B1에서는 사람 시계 단백질인 hPER1, hPER2, hPER3을 인산화시키기 위해 사람의 카제인 키나제 1ε및/또는 사람 카제인 키나제 1δ능력을 변형시키는 테스트 화합물에 근거하여 서캐디안 리듬을 변경시키는 화합물을 세포에서 확인하는 스크리닝 방법을 개시하고 있다. 예를 들면, HEK293T 세포에 hCKIε및 Per1 또는 Per2를 공동 형질감염시킨다. 서캐디안 생물학에서 CKIε저해 및 CKIδ저해제의 유관성을 평가하기 위한 목적으로, 고출력 세포 검사(33^rd Annual Meeting, Soc. for Neurosci., November 8-12, 2003, Abstract numbers 284.1, 284.2, and 284.3)를 개발하였는데, 이로써 서캐디안 리듬을 통상적인 방식으로 모니터할 수 있다. 검사는 Mper1 -luc 구조체를 안정되게 발현시키는 Rat-1 섬유아세포로 구성되어, 수일간 광 출력을 모니터하여 반복적으로 루시페라제 활성을 평가함으로써 살아있는 세포에서 Mper1 프로모터의 리듬 활성을 결정할 수 있다. 검사의 반복적인 측정 포맷으로 서캐디안 리듬 상에 CKIε저해제의 농도-의존성 효과를 정확하고 반복적으로 평가할 수 있고, 서캐디안 기간 변경에 대해 CKIε관련 저해 연계를 제공한다.

수면 장애는 4가지 주요 범주로 분류되어 왔는데, 원발성 수면 장애(이상수면(dyssomnias) 및 사건수면(parasomnias)), 의료/정신 질환과 연관된 수면 장애, 자료의 불충분으로 인하여 분류시킬 수 없는 수면 장애 범주 등이 포함된다. 원발 성 수면 장애는 수면-취침 발생(항상성계) 또는 타이밍(서캐디안 시스템)을 맡고 있는 고유 시스템에 비정상으로 발생되는 것으로 보고 있다. 이상수면은 수면을 개시하거나 유지시키는데 있어서 이상이 있는 것으로써, 원발성 불면증(primary insomnia), 과다수면, 발작적 수면(narcolepsy), 호흡-관련 수면 장애, 서캐디안 리듬 수면 장애, 및 명시되지 않은 이상수면등이 포함된다. 원발성 불면증은 수면을 시작하고 유지하는데 어려움이 지속(1달 이상)되거나 비회복성 수면(non-restorative sleep)을 특징으로 한다. 원발성 불면증과 연관하여 취침의 어려움이 상당한 스트레스 또는 손상을 야기시키는데, 여기에는 낮 시간에 화를 자주 내거나 집중력이 상실되거나, 피로, 불안감, 기분이 악화되거나 동기 상실 등이 포함된다. 서캐디안 리듬 수면 장애에는 시차 증후군(jet lag syndrome), 교대제 근무 수면 장애, 전진성 수면주기 증후군(advanced sleep phase syndrome) 및 지연성 수면주기 증후군[참조: J. Wagner, M.L. Wagner and W.A. Hening, Annals of Pharmacotherapy (1998) 32, 680-691]등이 포함된다. 강제적 수면 전형의 개인에서는 서캐디안의 특정 기간에서 수면 시간의 비율로 더 큰 불면을 호소한다[참조: Dijk and Lockley, J. Appl. Physiol. (2002) 92, 852-862]. 나이가 들면 우리의 수면은 수면에 대한 서캐디안 리듬이 진전되어 종종 수면의 질이 떨어진다는 것이 일반적인 견해이다[참조: Am J Physiol Endocrinol Metab. (2002) 282, E297-E303). 따라서, 서캐디안 상을 벗어난 수면은 질과 양의 측면에서 고통이 될 수 있으며 이는 교대제 근무자 및 시차시의 수면 변형으로 예시된다. 사람의 서캐디안 시계 교란은 수면 장애의 원인이 되며, 서캐디안 리듬을 조절하는 물질, 가령 CKIε및/또는 CKIδ저해제가 수면 장애 특히, 서캐디안 리듬 수면 장애를 치료하는데 유용할 수 있을 것이다.

정서 장애는 우울증("unipolar depression"), 양극성 장애로 나눌 수 있는데, 두 가지 질환은 일반적인 의학적 상태 및 물질에 의해 유도된 정서 장애를 포함하는 원인에 근거한다. 우울증은 주 우울증, 기분부전장애(dysthymic disorder), 및 별도로 특별한 언급이 없는 우울증으로 세분된다. 양극성 장애는 양극성 I 장애 및 양극성 II 장애로 세분된다. 분류기 "계절적 패턴"은 양극성 I 장애 및 양극성 II 장애에서 재발성 주 우울증 및 주요 우울증 에피소드 패턴에 적용시킬 수 있을 것으로 관찰되었다. 현저한 무력증, 과수면, 과식, 체중 증가, 탄수화물에 대한 탐욕 등이 계절적 패턴에서 발생되는 주 우울증의 특징이 되기도 한다. 계절적 패턴이 재발되는 주 우울증 또는 양극성 장애에 더 있을 것인지는 아직 분명하지 않다. 그러나, 양극성 질환 중 양극성 I 장애보다는 양극성 II 장애에서 계절적 패턴이 더 잘 나타나는 것으로 보인다. 일부 개인에서 조증 또는 경조증 개시가 특정 계절과 연관이 있을 수도 있다. 겨울형 계절 패턴은 위도, 연령, 성별에 따라 다양하게 나타난다. 위도가 높을수록 증가되며, 어린 사람들이 겨울 동안 우울증 발생에 더 위험하며, 겨울 우울증 패턴을 가진 사람 중 60% 내지 90%가 여성이다. 문헌에서 흔히 사용되는 용어인 계절적 정동 장애(Seasonal affective disorder(SAD))는 정서 장애의 한 아류인데, 정신질환 IV의 진단적, 통계적 진단 지침[참조: American Psychiatric Association: "Diagnostic and Statistical Manual of Mental Disorders" Fourth Edition, Text Revision. Washington, DC, American Psychiatric Association, 2000]은 양극성 I 장애, 양극성 II 장애 또는 재발성 주 우울증에서 주 우울증의 계절적 패턴을 설명할 때 "계절적 패턴"으로 나타내고 있다[참조: E. M. Tam et al., Can. J. Psychiatry (1995) 40, 457-466]. 우울증, 주 우울증, 주 우울증 에피소드, 양극성 I 장애, 양극성 II 장애의 특징 및 진단 및 계절적 영향을 DSM-IV에서 설명하고 있다.

겨울에 일반적으로 재발성 우울증 에피소드를 가지는 것을 특징으로 하는 SAD를 포함하는 주 우울증을 앓고 있는 환자는 광 치료에 양성 반응을 보였다[참조: Kripke, Journal of Affective Disorders (1998) 49(2), 109-117]. SAD 환자 및 주 우울증 환자를 밝은 빛으로 치료하여 성공한 것으로 빛의 치료 효과에 대해 내재된 작용 기전을 설명하는 몇 가지 가설이 제안되었다. 이와 같은 가설에는 "서캐디안 리듬 가설"이 포함되는데, 이는 밝은 빛의 항-우울 효과가 수면과 연관된 서캐디안 페이스메이커의 상-전이와 유관할 수 있다는 것이다[참조: E. M. Tam et al., Can. J. Psychiatry (1995) 40, 457-466]. 빛 치료와 서캐디안 리듬 사이에 연관성을 뒷받침함에 있어서, 주 우울증에서 임상적으로 효과적인 빛 치료는 서캐디안 상에 동시 이동의 원인이 되며, 빛 치료의 임상적 효과는 빛 치료의 상-이동 능력에 따라 달라진다[참조: Czeisler et al., The Journal of Physiology (2000) 526 (Part 3), 683-694; Terman et al., Arch. Gen. Psychiatry (2001) 58, 69-75]. 또한, 빛-치료는 주 우울증의 약물 치료의 효과를 가속시키고 증대시키는 것으로 나타났다[참조: Benedetti et al., J. Clin. Psychiatry(2003) 64, 648-653]. 따라서, 서캐디안 상 이동의 원인이 되는 카제인 키나제 Iε및/또는 카제인 키나제 Iδ의 저해를 기대할 수 있으며, 이와 같은 저해는 정서 장애의 잠재적 임상적 효과를 가지는 단일 또는 복합 치료가 될 수 있다.

수면 장애는 많은 정신 질환의 판단 증상이 될 수 있음에 주의해야 한다[참조: W.V. McCall, J. Clin. Psychiatry (2001) 62 (suppl 10), 27-32]. 수면 장애는 우울증의 공통적인 특징이며, 불면증은 우울증에서 흔히 보고되는 수면 장애로써, 우울증 환자의 90% 이상에서 발생된다[참조: M.E. Thase, J. Clin. Psychiatry (1999) 60 (suppl 17), 28-31]. 누적된 자료에서 원발성 불면증 및 주 우울증의 공통적인 병인을 제공한다. 부신피질자극호르몬 분비인자(corticotrophin releasing factor (CRF)) 과다 활성(유전적 경향 또는 초기 스트레스로 인하여) 및 스트레스는 과장되고 장기간의 수면 장애를 이끄는 과정을 유도하여 궁극적으로 원발성 불면증이 된다. 스트레스를 받지 않은 상황에서 CRF 분비에 서캐디안 리듬성이 정상적인 취침-기상 상태에 중요한 역할을 할 것이다[참조: G.S. Richardson and T. Roth, J. Clin Psychiatry (2001) 62 (suppl 10), 39-45]. 따라서, 서캐디안 리듬을 조절하는 물질, 가령 카제인 키나제 Iε 및/또는 카제인 키나제 Iδ저해제는 CRF 분비에 영향으로 인하여 우울증 치료에 유용할 수 있을 것이다.

상기에서 언급된 모든 참고문헌을 전문으로 인용한다.

따라서, 본 발명의 목적은 카제인 키나제 Iε의 저해제인 치환된 1H-피롤로[3,2-b]피리딘-2-카복사미드, 1H-피롤로[3,2-c]피리딘-2-카복사미드 및 1H-피롤로[2,3-c]피리딘-2-카복사미드을 제공하는 것이다. 이와 같은 목적 및 다른 목적 은 다음의 본 발명의 상세한 설명에서 명백하게 제공된다.

발명의 요약

본 발명은 사람의 카제인 키나제 Iε인산화반응 활성의 저해제로서 화학식 I의 치환된 1H-피롤로[3,2-b]피리딘-2-카복사미드, 1H-피롤로[3,2-c]피리딘-2-카복사미드, 1H-피롤로[2,3-c]피리딘-2-카복사미드 및 연관된 유사체, 및 이의 약제학적으로 허용되는 염 또는 입체이성질체를 제공하고, 주 우울증, 양극성 I 장애, 양극성 II 장애를 포함하는 정서 장애, 및 교대제 근무 수면 장애, 시차 증후군(jet leg syndrome), 전진성 수면 주기 증후군 및 지연성 수면 주기 증후군 등의 서캐디안 리듬 수면 장애를 포함하는 수면 장애질환과 같은 중추 신경계의 질환 및 장애 치료를 위해 화학식 I의 화합물을 이용하는 방법에 관한 것이다.

따라서, 본 발명의 많은 구체예는 화학식 I의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염 또는 이의 이성체에 관한 것이다;

상기 식에서,

R₁는 H 또는 C_{1 - 6}알킬이고;

R₂는 NR₅R₆이고;

R₃는 아릴 또는 헤테로사이클이며;

R₄는 H, C_{1 - 6}알킬, C₂-₆-알케닐, C₂-₆-알키닐, C_{1 - 6}알콕시, CF₃, 할로겐, SH, S-C_1-6알킬, NO₂, NH₂ 또는 NR₅R₆이고;

R₅은 H 또는 C_{1 - 6}알킬이며;

R₆은 H 또는 C_{1 - 6}알킬이며;

X는 S 또는 S(O)_n이고;

K, L, M 중 하나는 N이며, K, L, M의 나머지 두 개는 각각 C이며, 여기서 R₄는 K, L, M에만 결합되거나 C인 다른 고리 원자에만 결합되고;

m 은 1, 2 또는 3이며;

n 은 1 또는 2이다.

본 발명의 한 구체예에서 화학식 I의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염 또는 이의 이성체의 치료요법 유효량과 약제학적 담체로 구성된 약제학적 조성물에 관한 것이다.

본 발명의 또 다른 구체예에서는 화학식 I의 화합물의 치료요법적 유효량을 환자에 투여하여 카제인 키나제 Iε 저해하는 방법에 관한 것이다.

본 발명의 또 다른 구체예는 카제인 키나제 Iε의 저해에 의해 개선되는 질환 또는 장애를 앓고 있는 환자 치료시에 화학식 I의 화합물의 치료요법적 유효량 을 환자에 투여하는 방법에 관한 것이다.

본 발명의 또 다른 구체예에서 화학식 I의 화합물을 제조하는 공정에 관한 것이다.

본 발명의 또 다른 구체예는 여기에서 설명하는 본 발명의 공정에 의해 제조된 화학식 I의 화합물에 관한 것이다.

발명의 상세한 설명

여기에서 사용된 바와 같이, '입체이성체'는 공간에서 원자의 방향만 상이한 개별 분자의 모든 이성체를 칭하는 일반적 용어이다. 입체이성체 용어에는 거울상 이성질체, 거울상 이성체 혼합물(라세미체, 라세미체 혼합물), 기하학 이성체 (시스/트랜스 또는 E/Z)이성체, 및 서로 거울상이 아니지만 한 개 이상의 키랄 중심을 가지는 화합물의 이성체(부분입체이성질체)가 포함된다.

여기에서 사용된 바와 같이, 'R' 및 'S'는 키랄 중심의 특정 모양을 표시하는 것으로써 유기화학에서 통상적으로 사용된다. 'R' (rectus)는 가장 낮은 위치의 우선기(priority group)를 향하여 결합을 따라 바라보았을 때 우선기가 시계방향(최고위치에서 제2 최저점 쪽으로)을 가지는 키랄 중심의 형태를 말한다. 'S' (sinister)는 가장 낮은 위치의 우선기(priority group) 를 향하여 결합을 따라 바라보았을 때 우선기가 반시계방향(최고위치에서 제2 최저점쪽으로)을 가지는 키랄 중심의 형태를 말한다 그룹의 우선순위는 순서 규칙(sequence rules)에 근거하는데, 우선 순위는 원자 수에 우선 기초한다(원자수가 감소하는 순서). 우선순위 목 록 및 관련 문제는 문헌[참조: Stereochemistry of Organic compounds, Ernest L. Eliel, Samuel H. Wilen and Lewis N. Mander, editors, Wiley-Interscience, John Wiley & Sons, Inc., New York, 1994.]에 명시되어 있다.

(R)-(S) 시스템에 추가하여, 예전의 D-L 시스템이 여기에서도 이용될 수 있는데, 이는 절대적 배열, 특히 아미노산을 참고한 절대적 배열을 표시한 것이다. 이와 같은 시스템에서, 펴셔 투영법(Fischer projection formula)은 주쇄(main chain)의 제 1 탄소가 위쪽을 향하도록 하고 있다. 'D'는 이성체의 절대 배열을 나타내는데, 기능(결정)기는 키랄 중심에서 탄소의 우측에 있고, 'L'은 좌측에 있는 이성체를 말한다.

여기에서 사용된 바와 같이, "호변체[tautomer 또는 tautomerism]"는 한 개 이상의 이동 원소의 위치만 서로 상이한 두 개 또는 그 이상의 화합물이 공존하는 것을 말하는데, 전자 분포에서 예를 들면, 케토-에놀 호변체가 된다.

여기에서 사용된 바와 같이, "알킬"은 1개 내지 6개 탄소 원자를 가지는 포화된 직쇄 또는 분지쇄 지방족 탄화수소를 말하고, 여기에는 메틸, 에틸, 프로필, 이소프로필, 부틸, sec-부틸, tert-부틸 및 이와 유사한 것들이 포함된다.

여기에서 사용된 바와 같이, "알케닐"은 2개 내지 6개 탄소 원자를 가지는 선형 또는 분지형 1가(monovalent) 불포화 지방족 쇄를 말하고, 에테닐(또는 비닐로 공지됨) , 1-메틸에테닐, 1-메틸-1-프로페닐, 1-부테닐, 1-헥세닐, 2-메틸-2-프로페닐, 2,4-헥사디에닐, 1-프로페닐, 2-프로페닐, 2-부테닐, 2-펜테닐, 및 이와 유사한 것들이 포함된다.

여기에서 사용된 바와 같이, "알키닐"은 적어도 1개의 삼중 결합을 포함하며 2개 내지 6개 탄소 원자를 가지는 선형 또는 분지형 1가 불포화 지방족 쇄를 말하고, 에티닐, 1-프로피닐, 1-부티닐, 1-헥시닐, 2-프로피닐, 2-부티닐, 2-펜티닐 및 이와 유사한 것들이 포함된다.

여기에서 사용된 바와 같이, "알콕시"는 에테르 산소 원자를 통하여 연결된 1개 내지 6개 탄소 원자를 가지고, 에테르 산소에서 자유기(free valence) 결합을 가지는 직쇄 또는 분지쇄 알킬 쇄로 구성된 1가 치환체를 말하는데, 메톡시, 에톡시, 프로폭시, 이소프로폭시, 부톡시, 2급-부톡시, 3급-부톡시 및 이와 유사한 것들이 포함된다.

여기에서 사용된 바와 같이, C₃-C₈ 사이클로알킬은 3개 내지 8개 탄소 원자를 포함하는 포화 탄화수소 고리를 말하는 것으로, 사이클로프로필, 사이클로부틸, 사이클로펜틸, 사이클로헥실, 사이클로헵틸 및 이와 유사한 것들이 포함된다.

여기에서 사용된 바와 같이, "아릴" 또는 "아르"는 임의 안정한 모노사이클, 바이사이클, 트리사이클 고리로 각 고리에는 최대 7개 원소를 가지며, 여기서 적어도 한 개 고리는 방향족이며, 메틸렌디옥시, 하이드록시, C₁-₆-알콕시, 할로겐, C₁-₆-알킬, C₂-₆-알케닐, C₂-₆-알키닐, 트리플로오르메틸, 트리플로오르메톡시, -NO₂, -NH₂, -NH(C₁-₆-알킬), -N(C₁-₆-알킬)₂, -NH-아실, -N(C₁-₆-알킬)아실에서 선택된 1개 내지 3개 치환체로 치환되거나 또는 치환되지 않을 수도 있다. "아릴" 또는 "아르"의 예로는 페닐, 2-클로로페닐, 3-클로로페닐, 4-클로로페닐, 2-플루오로페닐, 3-플루오로페닐, 4-플루오로페닐, 2-브로모페닐, 3-브로모페닐, 4-브로모페닐, 2-트리플루오로메틸페닐, 3-트리플루오로메틸페닐, 4-트리플루오로메틸페닐, 2-메톡시페닐, 3-메톡시페닐, 4-메톡시페닐, 2-아미노페닐, 3-아미노페닐, 4-아미노페닐, 2-메틸페닐, 3-메틸페닐, 4-메틸페닐, 2-니트로페닐, 3-니트로페닐, 4-니트로페닐, 2,4-디클로로페닐, 2,3-디클로로페닐, 3,5-디메틸페닐, 2-트리플루오로메톡시페닐, 3-트리플루오로메톡시페닐, 4-트리플루오로메톡시페닐, 나프틸, 테트라하이드로나프틸 및 바이페닐 등이 포함된다. 용어 "아릴-(C₁-C₆-알킬)"은 2-메틸페닐, 3-메틸페닐, 4-메틸페닐, 페닐메틸(벤질), 페닐에틸, p-메톡시벤질, p-플루오로벤질 및 p-클로로벤질 등이 포함된다.

여기에서 사용된 바와 같이, "아실"은 카르보닐 잔기에 결합된 1개 내지 6개 탄소원자를 가지는 분지쇄 및 직쇄 포화 지방족 탄화수소기를 의미하고, 아세틸, 프로피오닐, 부티릴, 이소부티릴, 및 이와 유사한 것들이 포함된다.

여기에서 사용된 바와 같이, "헤테로사이클" 또는 "헤테로사이클릭"이란 포화 또는 불포화된 안정적인 5-내지 7-개 원소의 모노 사이클 또는 안정적인 8-내지 11개 원소의 바이사이클 헤테로사이클 고리를 말하는 것으로써, 탄소원자와 N, O, S로 구성된 군에서 선택된 1개 내지 3개의 이형원소로 구성되며, 질소 및 황 이형원소는 선택적으로 산화될 수 있으며, 질소 이형원소는 선택적으로 4원자화(quaternized)될 수 있으며, 상기 정의한 이형사이클 고리가 벤젠 고리에 융합되는 임의 바이사이클 그룹도 포함된다. 헤테로사이클 고리는 임의 이형원소 또는 탄소원자에 결합되어 안정적 구조를 만들어 낼 수도 있다. 헤테로사이클 고리는 C₁-₆-알콕시, 하이드록시, 할로겐, C₁-₆-알킬, C₂-₆-알케닐, C₂-₆-알키닐, 트리플루오로메틸, 트리플루오로메톡시, -NO₂, -NH₂, -NH(C₁-₆-알킬), -N(C₁-₆-알킬)₂, -NH-아실, 및 -N(C₁-₆-알킬)아실로 구성된 군에서 선택된 한 개 내지 세 개 치환체로 치환되거나 또는 치환되지 않을 수도 있다. 이와 같은 헤테로사이클 원소들의 예로는 피페리디닐, 피페라지닐, 2-옥소피페라지닐, 2-옥소피페리디닐, 2-옥소피롤리디닐, 2-옥소아제피닐, 아제피닐, 피롤일, 피롤리디닐, 피라졸일, 피라졸리디닐, 이미다졸일, 이미다졸리닐, 이미다졸리디닐, 피리딜, 피라지닐, 피리미디닐, 피리다지닐, 옥사졸일, 옥사졸리디닐, 이소사졸일, 이소사졸리디닐, 모르폴리닐, 티아졸일, 티아졸리디닐, 이소티아졸일, 퀴누클리디닐, 이소티아졸리디닐, 인돌일, 퀴노리닐, 이소퀴노리닐, 벤지이미다졸일, 티아디아졸일, 벤조피라닐, 벤조티아졸일, 벤조옥사졸일, 퓨릴, 테트라하이드로퓨릴, 벤조퓨라닐, 테트라하이드로피라닐, 티에닐, 벤조티에닐, 티아모르포리닐, 옥사디아졸일등이 포함된다.

여기에서 사용된 바와 같이, '할로겐', '할' 또는 '할로'는 불소, 염소, 브롬 또는 요오드 중 하나를 의미한다.

본 발명의 화학식 I의 화합물 또는 임의 구성체에서 변수(예를 들면, 아릴, 헤테로사이클, R₁, R₂, R₃, R₄, 등)가 1회 이상 발생되는 경우에 각 발생 경우에서 정의는 다른 발생 경우와는 독립적이다. 또한, 치환체 복합 또는 변수들의 복합도 이와 같은 복합으로 인하여 화합물이 안정적인 경우에 한하여 허용된다.

여기에서 사용된 바와 같이, '치료하다', '치료하는' 또는 "치료"는

(i) 질환, 장애, 그 상태에 걸리기 쉬운 환자에서 아직 이와 같은 장애, 질환 또는 그 상태가 있는 것으로 진단되지는 않았지만 이와 같은 질환, 장애 또는 이상이 발생되는 것을 예방하고;

(ii) 질환, 장애 또는 그 상태를 저해시키고, 예를 들면 병의 진행을 억제하고;

(iii) 질환, 장애 또는 그 상태를 완화시키고, 예를 들면 질환, 장애 또는 이상을 퇴치시키는 것을 의미한다.

여기에서 사용된 바와 같이, "환자"는 특정 질환, 장애 또는 이상에 걸릴 수 있는 포유류와 같은 온혈 동물을 의미한다. 기니아 피그, 개, 고양이, 쥐, 마우스, 말, 소, 양, 사람 등이 본 발명의 범주에 속한다는 것을 명백히 이해할 것이다.

여기에서 사용된 바와 같이, '질환'은 질병, 병, 신체 기능, 시스템 또는 기관의 중단, 종료 또는 질환을 말한다.

여기에서 사용된 바와 같이, '장애'는 발생시에 유전적 또는 배아 기능부전으로 인하여 또는 독소, 손상 또는 질환과 같은 외인적인 요인에 의해 기능 또는 구조 또는 기능과 구조 모두에서 장애가 있는 것을 말한다.

여기에서 사용된 바와 같이, "컨디션"은 건강한 또는 신체적인 건강 상태를 말한다.

여기에서 사용된 바와 같이, "예방"은 질병의 발생을 막는다는 것을 말한다.

여기에서 사용된 바와 같이, "수면 장애", 또는 "수면 이상"은 불면증을 말 한다.

여기에서 사용된 바와 같이, "불면증"이란 수면이 정상적으로 일어나야 하는 시기에 소음, 밝은 빛과 같은 외부요소가 없음에도 잠이 들지 않는 경우를 말하는 것이며, 잠이 들지 않는 것은 불안 또는 선잠에서부터 정상 수면시간의 단축 또는 전혀 잠을 들지 못하고 깨어있는 등의 그 정도가 다양할 수 있다. "불면증"에는 원발성 불면증, 정신 질환과 연관된 불면증, 물질에 의해 야기되는 불면증 및 정상적인 취침-기상 일정의 변화(교대시간 변경, 교대제 근무 수면 장애, 시차, 또는 시차 증후군 등)로 인하여 불면증이 되는 서캐디안 리듬 불면증 등이 포함된다.

여기에서 사용된 바와 같이, "원발성 불면증"은 수면 개시, 수면 상태 유지 또는 정신 질환 원인이 아닌 복원성 수면 질환을 가지는데 어려움 또는 특정 물질의 복용 또는 중단으로 인한 생리학적 영향(물질에 의해 야기되는 불면증)이 있는 것을 말한다.

여기에서 사용된 바와 같이, "서캐디안 리듬 수면 장애" 시차 또는 시차 증후군, 교대제 근무 수면 장애, 전진성 수면 주기 증후군 또는 지연성 수면 주기 증후군 등이 포함된다.

여기에서 사용된 바와 같이, "화합물의 효과적인 저해량" 또는 "화합물의 카제인 키나제 Iε저해 유효량"은 질병 또는 장애 또는 치료를 요하는 상태에 있는 환자를 치료하기 위해 적절한 투여 경로를 통하여 이용할 수 있는 화합물의 충분한 양을 말한다.

여기에서 사용된 바와 같이, "치료요법의 유효량"은 지적된 질환, 장애 또는 상태를 치료하는데 효과적인 화합물의 양을 말한다.

여기에서 사용된 바와 같이, '약제학적으로 허용되는 염'이란 이미 공지되었거나 또는 앞으로 발견될 수 있는 임의 염을 말하는 것으로, 약물 제조시 사용에 적합한 비-독성의 유기 또는 무기 염으로 당업자가 이용하는 것을 말한다. 적절한 염을 만드는데 이용할 수 예시적인 염기에는 알칼리 금속 또는 알칼리-토금속 수산화물 예를 들면 수산화나트륨, 수산화칼륨, 수산화칼슘, 또는 수산화마그네슘; 암모니아 또는 지방족, 사이클 또는 방향족 아민 예를 들면, 메틸아민, 디메틸아민, 트리에틸아민, 디에틸아민, 이소프로필디에틸아민, 피리딘 및 피콜린 등이 포함된다. 적절한 염을 형성하는 예시적인 산으로는 염산, 브롬산, 황산, 인산 등의 무기산과 아세트산, 프로피온산, 글리콜산, 락트산, 피루브산, 말론산, 푸마르산, 말산, 타르타르산, 구연산, 아스크로브산, 말레산, 하이드록시말레산 및 디하이드록시말레산, 벤조산, 페닐아세트산, 4-아미노벤조산, 4-하이드록시벤조산, 안트라닐산, 시나민산, 살리실산, 4-아미노살리실산, 2-페녹시벤조산, 2-아세톡시벤조산, 만델린산 및 이와 유사한 유기 카복실산, 및 메탄설폰산 및 p-톨루렌설폰산과 같은 유기 설폰산 등이 포함된다.

여기에서 사용된 바와 같이, '약제학적 담체'는 투여를 위해 약학 활성 화합물을 조제하는데 유용한 공지의 약학 부형제를 말하는 것으로 실질적으로 비독성이며 사용되는 조건하에서 자극이 없는 것이다. 이들 부형제의 정확한 비율은 활성 화합물의 용해도 및 화학적 성질, 선택된 투여 경로뿐만 아니라 표준 약학 관행에 따라 결정될 수 있다. 본 발명을 실행함에 있어서 화합물이 효과가 있어 단독으로 투여될 수도 있지만, 활성 성분을 약학 담체를 포함하는 조성물에 결합시키는 것이 바람직하다. 활성 성분의 비율은 중량의 약 1% 내지 약 90% 까지 다양하게 조절할 수 있다.

본 출원서에 기재된 다음의 약어는 다음과 같이 정의된다:

Me (메틸), Et (에틸), Ph (페닐), Et₃N (트리에틸아민), p-TsOH (파라-톨루엔 설폰산), TsCl (파라-톨루엔설포닐 클로라이드), hept (헵탄), DMF (디메틸포름아미드), NMP (1-메틸-2-피롤리돈 또는 N-메틸-2-피롤리돈), IPA (이소프로판올 또는 이소프로필 알코올), TFA (트리플루오로아세트산), DBU (1,8-디아자바이사이클로[5.4.0]운데스-7-엔), DBN (1,5-디아자바이사이클로[4.3.0]논-5-엔), rt 또는 r.t. (실온 또는 주변온도), min 또는 min. (분), h (시간), UV (자외선), LCMS (액체 크로마토그래피 질량 분광계), t-Boc 또는 Boc (3급-부톡시카보닐), Bn (벤질), t-Bu (3차 부틸), i-Pr (이소프로필), HOAc (아세트산), EtOAc (에틸 아세테이트), Et₂O (디에틸에테르), EtOH (에탄올), g (그램), mg (밀리그램), mg (마이크로그램), ng (나노그램), mL (밀리리터), mL (마이크로리터), L (리터), HPLC (고성능 액체 크로마토그래피), TLC, tlc 또는 Tlc (박층 크로마토그래피), g/L (리터당 그램), SiO₂ (실리카겔), L/분 (분당 리터), mL/분 (분당 밀리리터), mmol (밀리몰), M (몰), mM (밀리몰), mM (마이크로몰), μM (나노몰), mCi (마이크로큐리), CPM (분당 카운트), rpm (분당 회전), mm (밀리미터), mm (마이크로미터), m (미크론), nm (나노미터), ppm (밀리온당 양), psi (제곱인치당 파운드), eq. 또는 당 량. (당량), R_T (보유 시간), ^oC (섭씨), K (켈빈 온도).

따라서, 본 발명은 넓은 양태에서 화학식 I의 화합물에 관한 것이다.

[화학식 I]

상기 식에서, R₁는 H 또는 C_{1 - 6}알킬이며; R₂는 NR₅R₆이며; R₃은 아릴 또는 헤테로사이클이며; R₄는 H, C_{1 - 6}알킬, C₂-₆-알케닐, C₂-₆-알키닐, C_{1 - 6}알콕시, CF₃, 할로겐, SH, S-C_{1 - 6}알킬, NO₂, NH₂ 또는 NR₅R₆이며; R₅는 H 또는 C_{1 - 6}알킬이며; R₆는 H 또는 C_{1 - 6}알킬이며, X는 S 또는 S(O)_n이며; K, L 또는 M 중 하나는 N이고, K, L 또는 M의 다른 두 개는 각각 C이며, 여기서 R₄는 K, L, M 또는 C 인 다른 고리 원자에만 연결되며, m은 1, 2 또는 3이며; n은 1 또는 2이다.

본 발명의 한 구체예에서 L은 N이며, K 및 M이 각 C가 되는 화합물에 관한 것이다.

본 발명의 다른 구체예는 L은 N이며, K 및 M이 각 C이고, R₁, R₄, R₅ 및 R₆는 각각 H가 되며, R₃는 아릴이 되는 화합물에 관한 것이다. 다음의 화합물은 본 발명의 구체예 범위에 있는 대표적인 예시 화합물이 된다;

3-페닐설파닐-1H-피롤로[3,2-c]피리딘-2-카복실산 아미드,

3-(3-플루오로-페닐설파닐-1H-피롤로[3,2-c]피리딘-2-카복실산 아미드, 및

3-(4-클로로-페닐설파닐-1H-피롤로[3,2-c]피리딘-2-카복실산 아미드.

본 발명의 또 다른 구체예는 M 은 N이고, K 및 L이 각각 C인 화합물에 관한 것이다.

본 발명의 다른 구체예는 M 은 N이며, K 및 L이 각 C이고, R₁, R₄, R₅ 및 R₆ 는 각각 H이며, R₃는 아릴 또는 헤테로사이클인 화합물에 관한 것이다. 다음의 화합물은 본 발명의 구체예 범위에 있는 대표적인 예시 화합물이 된다;

3-페닐설파닐-1H-피롤로[2,3-c]피리딘-2-카복실산 아미드,

3-(3-플루오로-페닐설파닐)-1H-피롤로[2,3-c]피리딘-2-카복실산 아미드,

3-(3-메톡시-페닐설파닐)-1H-피롤로[2,3-c]피리딘-2-카복실산 아미드,

3-(3-클로로-페닐설파닐)-1H-피롤로[2,3-c]피리딘-2-카복실산 아미드,

3-(2-트리플루오로메틸-페닐설파닐)-1H-피롤로[2,3-c]피리딘-2-카복실산 아미드,

3-(2-트리플루오로메톡시-페닐설파닐)-1H-피롤로[2,3-c]피리딘-2-카복실산 아미드,

3-(2-메톡시-페닐설파닐)-1H-피롤로[2,3-c]피리딘-2-카복실산 아미드, 및

3-(피리딘-2-설파닐)-1H-피롤로[2,3-c]피리딘-2-카복실산 아미드.

본 발명의 또 다른 구체예는 K는 N이며, L 및 M이 각 C인 화합물에 관한 것 이다.

본 발명의 다른 구체예는 K는 N이며, L 및 M이 각 C가 되고, R₁은 C_{1 - 6}알킬, R₅는 H이고, R₆은 H 또는 C_{1 - 6}알킬이며, R₃는 아릴인 화합물에 관한 것이다. 다음의 화합물은 본 발명의 구체예 범위에 있는 대표적인 예시 화합물이 된다;

1-메틸-3-페닐설파닐-1H-피롤로[3,2-b]피리딘-2-카복실산 메틸아미드,

1-메틸-3-페닐설파닐-1H-피롤로[3,2-b]피리딘-2-카복실산 아미드, 및

3-페닐설파닐-1-프로필-1H-피롤로[3,2-b]피리딘-2-카복실산 아미드.

본 발명의 다른 구체예는 K는 N이며, L 및 M이 각 C이고, R₁, R₄ 및 R₅는 각각 H이고, R₃는 아릴이고, R₆은 C_{1 - 6}알킬이 되는 화합물에 관한 것이다. 다음의 화합물은 본 발명의 구체예 범위에 있는 대표적인 예시 화합물이 된다.

3-(3-트리플루오로메트옥시페닐설파닐-1H-피롤로[3,2-b]피리딘-2-카복실산 메틸아미드,

3-(3-클로로페닐설파닐-1H-피롤로[3,2-b]피리딘-2-카복실산 메틸아미드,

3-(3-플루오로페닐설파닐-1H-피롤로[3,2-b]피리딘-2-카복실산 메틸아미드, 및

3-페닐설파닐-1H-피롤로[3,2-b]피리딘-2-카복실산 메틸아미드.

본 발명의 다른 구체예는 K는 N이며, L 및 M이 각 C가 되고, R₁, R₄ , R₅및 R₆는 각각 H이고, R₃는 헤테로사이클이 되는 화합물에 관한 것이다. 다음의 화합물 은 본 발명의 구체예 범위에 있는 대표적인 예시 화합물이 된다

3-(퀴놀린-8-일설파닐)-1H-피롤로[3,2-b]피리딘-2-카복실산 아미드,

3-(피리딘-2-설파닐)-1H-피롤로[3,2-b]피리딘-2-카복실산 아미드,

3-(피리딘-4-설파닐)-1H-피롤로[3,2-b]피리딘-2-카복실산 아미드, 및

3-(티오펜-2-일설파닐)-1H-피롤로[3,2-b]피리딘-2-카복실산 아미드.

본 발명의 다른 구체예는 K는 N이며, L 및 M이 각 C이고, R₁, R₅ 및 R₆는 각각 H이고, R₃는 아릴이 되는 화합물에 관한 것이다. 다음의 화합물은 본 발명의 구체예 범위에 있는 대표적인 예시 화합물이 된다

3-페닐설파닐-1H-피롤로[3,2-b]피리딘-2-카복실산 아미드,

3-(3-플루오로페닐설파닐)-1H-피롤로[3,2-b]피리딘-2-카복실산 아미드,

3-(3-클로로페닐설파닐)-1H-피롤로[3,2-b]피리딘-2-카복실산 아미드,

3-(3-브로모페닐설파닐)-1H-피롤로[3,2-b]피리딘-2-카복실산 아미드,

3-(2-클로로페닐설파닐)-1H-피롤로[3,2-b]피리딘-2-카복실산 아미드,

3-(4-클로로페닐설파닐)-1H-피롤로[3,2-b]피리딘-2-카복실산 아미드,

3-(2,4-디클로로페닐설파닐)-1H-피롤로[3,2-b]피리딘-2-카복실산 아미드,

3-(2-플루오로페닐설파닐)-1H-피롤로[3,2-b]피리딘-2-카복실산 아미드,

3-(2,3-디클로로페닐설파닐)-1H-피롤로[3,2-b]피리딘-2-카복실산 아미드,

3-(2-트리플로오르메틸페닐설파닐)-1H-피롤로[3,2-b]피리딘-2-카복실산 아미드,

3-(3-트리플루오로메틸-페닐설파닐)-1H-피롤로[3,2-b]피리딘-2-카복실산 아미드,

3-(2-아미노페닐설파닐)-1H-피롤로[3,2-b]피리딘-2-카복실산 아미드,

3-(2,5-디클로로-페닐설파닐)-1H-피롤로[3,2-b]피리딘-2-카복실산 아미드,

3-(2-메톡시-페닐설파닐)-1H-피롤로[3,2-b]피리딘-2-카복실산 아미드,

3-(3-메톡시-페닐설파닐)-1H-피롤로[3,2-b]피리딘-2-카복실산 아미드,

3-(3-아미노-페닐설파닐)-1H-피롤로[3,2-b]피리딘-2-카복실산 아미드,

3-(4-니트로-페닐설파닐)-1H-피롤로[3,2-b]피리딘-2-카복실산 아미드,

3-(3-니트로-페닐설파닐)-1H-피롤로[3,2-b]피리딘-2-카복실산 아미드,

3-o-톨일설파닐-1H-피롤로[3,2-b]피리딘-2-카복실산 아미드,

3-p-톨일설파닐-1H-피롤로[3,2-b]피리딘-2-카복실산 아미드,

3-(3,5-디메틸-페닐설파닐)-1H-피롤로[3,2-b]피리딘-2-카복실산 아미드,

3-m-톨일설파닐-1H-피롤로[3,2-b]피리딘-2-카복실산 아미드,

3-(2-에틸-페닐설파닐)-1H-피롤로[3,2-b]피리딘-2-카복실산 아미드,

3-(3-트리플루오로메톡시-페닐설파닐)-1H-피롤로[3,2-b]피리딘-2-카복실산 아미드,

3-(3-플루오로-페닐설파닐)-5-메톡시-1H-피롤로[3,2-b]피리딘-2-카복실산 아미드, 및

3-(3-메톡시-페닐설파닐)-5-메톡시-1H-피롤로[3,2-b]피리딘-2-카복실산 아미드.

본 발명의 화합물은 당해 분야에 공지된 것과 유사한 공정을 통하여 만들 수 있다. 반응식 1, 2, 3 및 이에 상응하는 설명에서는 본 발명의 다양한 화합물을 제조하는 방법을 설명하고 있다. 이 공개된 방법 및 실시예는 설명을 목적으로 제공되며, 본 발명의 범위를 제한하고자 함은 아니다. 개별 화합물에 이르게 하는 대안 시약, 반응 조건, 여기에서 설명하는 단계의 다른 복합 및 변환 등은 당업자에게 명백한 것이다. 표 1, 2, 3에서는 예시적 화합물의 실시예의 요약을 제공하며, 표 4에서는 본 발명의 화합물의 생물학적 자료를 요약하였다.

화학적 합성

반응식 1에서는 상업적으로 시판되는 2-클로로-3-니트로피리딘(1a-1 여기서, K는 N이고, L 및 M은 각각 C이다), 3-클로로-4-니트로피리딘 (1b-1, 여기서 L은 N이고 K 및 M은 각각 C이다) 또는 4-클로로-3-니트로피리딘 (1c-1, 여기서 M은 N이고, K 와 L은 각각 C이다), 또는 선택적으로 치환된 클로로-니트로피리딘 1을 이용하여 본 발명의 화합물을 합성하는 방법을 설명하고 있다. 화합물의 숫자에서 처음 수는 반응식 1-3에서 나타내고 있는 상응하는 화합물에 속하는데, 예를 들면, 1a-1의 숫자 1은 반응식 1의 화합물 또는 구조 1에 해당된다. 연속하여 이어지는 "a", "b" 또는 "c"는 1H-피롤로[3,2-b]피리딘-2-카복시아미드 시리즈("a", 또한 4-아자인돌 시리즈로 공지됨), 1H-피롤로[3,2-c]피리딘-2-카복시아미드 시리즈 ("b", 또한 5-아자인돌 시리즈로 공지됨) 및 1H-피롤로[2,3-c]피리딘-2-카복시아미드 시리즈 ("c", 또한 6-아자인돌 시리즈로 공지됨)에 대한 각각의 전구물질이다. 화합물 번호에서 "-" 다음의 최종 숫자는 그 구조 시리즈에서 특정 화합물을 나타낸다. 화합물을 숫자로만 나타내는 경우에 반응식 1-3에서 보여준 바와 같이 숫자는 상응하는 화합물을 말하고, 이는 상기에서 진술된 바와 같이 일반적으로 "a", "b" 또는 "c"로 확인되는 세 가지 구조 시리즈가 포함되는 것으로 이해하면 된다.

반응식 1에서, a 단계에서 클로로-니트로피리딘 1을 과량의 말론산 디에스테르 용액의 말론산 디에스테르 알칼리금속염에 첨가하는데 예를 들면, 약 50 ^oC 내지 약 70^oC의 온도에서 디에틸말로네이트 또는 디메틸말로네이트와 같은 과량의 말론산에 말론산 나트륨, 칼륨 또는 리튬에 첨가할 수 있다. 말론산 디에스테르의 알칼 리 토금속염은 알칼리 금속 예를 들면 나트륨 금속을 당해 분야에 공지된 방법으로 과량의 말론산 디에스테르에 첨가하여 만들 수 있다. 50 ^oC 내지 70^oC 온도에서 약 3시간 후에, 혼합물을 실온에서 약 12 내지 24시간 방치한다. 반응이 완료되지 않은 경우에 혼합물을 약 2 내지 4시간 동안 약 80 ^oC로 가열한 다음, 과량의 말론산 디에스테르를 제거하기 위해 농축시키고, 그 다음 황산 또는 염산과 같은 농축 미네랄 산과 물로 처리하였다. 혼합물을 약 5시간 내지 약 9시간 동안 100 ^oC 내지 110^oC로 가열하여 디카복실화시킨다. 실온에서 12 내지 약 24시간 동안 방치한 후에, 혼합물을 적절한 용매, 예를 들면 에틸에테르 및 에틸 아세테이트와 같은 것으로 세척하고, 수산화알칼리 금속 예를 들면 수산화나트륨 또는 수산화칼륨으로 약 pH 8 내지 약 pH 9로 알칼리화시키고, 에틸아세테이트와 같은 적절한 유기 용매로 추출하였다. 유기 추출물을 여과시키고, 감압하에서 농축시켜 원하는 메틸-니트로피리딘 2를 얻는다. 당해 "단계 a"에 의해 화합물 (2)를 제조하는 반응식을 "2 단계, 원 팟 합성"이라 한다.

또는, 반응식 1, 단계 a에서, 메틸-니트로피리딘 2는 화합물 (1)을 메틸붕소산에 스즈키 커플링시켜 제조할 수 있을 것이다. 따라서, 적절한 비양자성 용매 예를 들면, 디옥산과 같은 용매에 클로로-니트로피리딘(1), 메틸붕소산, 탄산칼륨 및 테트라키스(트리페닐포스핀)팔라디움(0) [Pd(PPh₃)₄] 혼합물을 약 110 ^oC에서 약 120^oC 범위로 약 12 내지 약 16 시간 동안 가열한다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 농축시키고, 크로마토그래피를 통하여 정제하여 메틸-니트로피리딘(2)을 제공한다.

유익하게는, 화합물 (2)가 또한 반응식 1, a 단계에 따라 두 단계의 원 팟으로 제조될 수도 있다는 것을 확인하였다. 따라서, 약 16^oC 온도에서 디메틸포름아미드 또는 N-메틸-2-피롤리디논과 같은 극성 용매에 약 2 내지 2.5 당량의 염기, 예를 들면, t-부톡시드 칼륨, 나트륨 에톡사이드, 수소화나트륨, t-부톡시드 나트륨 또는 헥사 메틸디실라지드 나트륨을 약 30분간 교반하면서 첨가한다. 그 다음 혼합물을 약 1 내지 4 당량의 말론산 디에스테르 예를 들면, 디에틸말로네이트로 약 20^oC 내지 약 35^oC에서 처리한다. 약 20분 후에, 약 29^oC 내지 약 44^oC에서 약 1당량의 화합물(1)과 디메틸포름아미드 또는 N-메틸피롤리돈과 같은 극성 용매의 용액으로 혼합물을 처리하였다 . 당해 분야에 공지된 HPLC 분석 또는 크로마토그래피 분석에 의해 반응이 완료되었다고 나타날 때까지 혼합물을 약 50^oC로 가열하였다. 가장 유익하게는, 화합물 (1)을 약 2.0 당량의 디에틸말로네이트로 농축시키는데, 여기서 N-메틸-2-피롤리돈이 바람직한 용매이며, 약 2.2 내지 약 2.5 당량의 t-부톡시드 나트륨이 바람직한 염기이며, 화합물 (2)의 "1 팟, 2 단계"(단계 a) 합성의 좀더 유익한 부분을 위해 상기 설명된 첨가 순서, 반응 온도, 시간을 이용한다. 반응이 완료된 경우에, 혼합물을 미네랄산 및 물, 적절하게는 약 4.2 당량의 6M 황산으로 100^oC에서 약 12시간 동안 처리하여 데카복실화시킨다. 반응을 얼음물로 중단시키고, 톨루엔과 같은 적절한 용매로 추출하면, 화합물 (2)를 얻는다. "단계 a" 공정의 이러한 장점에 의해 화합물 2a-1(2-메틸-3-니트로-피리딘)를 합성하면, 화합물 1a-1와 디에틸말로네이트의 응축 반응시간을 놀라울 정도로 감소시키고(약 3일에서 약 2시간으로), 전반적으로 수득율이 상당히 개선된(30-68%에서 약 80%) 화합물 2a-1을 제공하며, 크로마토그래피 정제 없이도 상당히 개선된 분리 순도(>96%)를 가진다. 이 방법은 수득율 및 분리된 순도에 대해 유익하게 재생성을 가진다. 이 반응식은 또한 금속 나트륨 및 상대적으로 고가의 시약 예를 들어 테트라키스(트리페닐-포스핀)팔라디움(0)을 사용하지 않아도 되는 장점이 있는데, 이들 시약은 상기에서 설명하는 다른 방법을 이용하여 화합물 (2)를 만들 경우에는 사용되어야 한다.

반응식 1, b 단계에서 볼 수 있는 것과 같이, 2-하이드록시-3-(니트로-피리디닐)-아크릴산에틸 에스테르(3)는 메틸-니트로피리딘(2)를 적절한 염기 가령, 나트륨 에톡사이드, 에톡시드 리튬, t-부톡시드 리튬, t-부톡시드 나트륨, t-부톡시드 칼륨 또는 헥사메틸디실아지드 리튬과 같은 염기를 에탄올 또는 t-부탄올와 같은 적절한 용매에서 처리하고, 반응 혼합물을 옥살레이트 디에스테르 예를 들면, 디메틸 옥살레이트 또는 디에틸 옥살레이트로 실온에서 처리하여, 반응 혼합물을 실온에서 약 12시간 내지 약 48시간 동안 방치하여 만들 수 있다. 그 다음 반응 혼합물을 미네랄 산 예를 들면 황산 또는 염산으로 처리하여 pH를 약 1로 만든다. 여과를 통하여 침전물을 수득하고, 연속하여 적절한 용매, 가령, 에탄올 및 디-이 소프로필에테르로 처리하면, 2-하이드록시-3-(니트로-피리디닐)-아크릴산에틸 에스테르(3) 또는 이의 호변이성체 케토 에스테르를 얻는다.

유익하게, 단계 1, b단계에 따른 또 다른 방법으로 화합물(3)을 형성할 수 있다는 것을 밝혀내었는데, 적절한 용매 중에서 디에틸 옥살레이트 및 적절한 염기를 미리 혼합한 것에 약 2^oC 내지 실온에서 화합물 (2)를 서서히 혼합하여 만든다. 따라서, 약 2^oC에서 나트륨 에톡사이드, 에톡시드 리튬, 리튬t-부톡시드, t-부톡시드 나트륨, t-부톡시드 칼륨 또는 헥사메틸디실아지드 리튬과 같은 적절한 염기를 테트라하이드로푸란과 같은 적절한 용매에 첨가한다. 혼합물을 약 20분간 교반시키고, 그 다음 약 -0.3^oC 내지 약 4^oC에서 약 3 당량의 디에틸 옥살레이트를 첨가한다. 약 10분 후에, 약 4^oC 내지 약 9^oC에서 약 1 당량의 화합물 (2) 및 테트라하이드로푸란과 같은 용매로 된 용액을 첨가하였다. 혼합물이 실온이 되도록 한다. 당해 분야에 공지된 HPLC 또는 다른 크로마토그래피 분석 방법으로 반응이 완료되었다는 것을 확인하였을 때, 반응 혼합물을 약 1^oC로 냉각시키고, 약 1^oC 내지 약 9^oC에서 포화 염화나트륨 용액으로 처리한다. 화합물 (3)은 물 또는 이소프로판올과 같은 공용매로 추가 희석하여 분리할 수 있다. 가장 유익하게는 화합물 (2)는 디에틸 옥살레이트로 응축시키는데, 여기서, 첨가하는 순서, 반응시간 및 조건을 따르면 나트륨 에톡사이드이 바람직한 염기이며, 테트라하이드로푸란이 바람직한 용매가 된다. 이와 같은 유익한 "단계 b" 공정에 의한 화합물 3a-1(2-하이드록시-3-(3-니트로-피리딘-2-일)-아크릴산에틸 에스테르)을 합성하면, 반응시간이 놀라울 정도로 감소되며(약 2-3일에서 약 2시간), 상당히 개선된 수득율(32-68%에서 약 88%)로 화합물 3a-1을 제공한다.

반응식 1, 단계 c에서, 원하는 1H-피롤로[3,2-b]피리딘-2-카복실산 에스테르, 1H-피롤로[3,2-c]피리딘-2-카복실산 에스테르 또는 1H-피롤로[2,3-c]피리딘-2-카복실산 에스테르 중간생성물(4)는 적절하게 치환된 2-하이드록시-3-(니트로-피리디닐)-아크릴산에스테르(3), 또는 이의 호변이성체 케토 에스테르의 니트로 기를 촉매 또는 화학적으로 환원시키고, 수반되는 피롤 고리를 형성하면, 화합물 (4)를 제공한다. 따라서, 화합물 (3)과 에탄올 또는 메탄올과 같은 적절한 용매 내 탄소 상 팔라디움 촉매(Pd/C)와 같은 적절한 촉매의 혼합물을 당업자에 공지된 방법을 이용하여 약 1시간 내지 약 3시간 동안 45 psi 내지 약 1200 psi 압력에서 수소화시키면, 정제 후 중간생성물 (4)를 얻는다. 유익하게는 화합물 (4)는 이와 같은 반응식에 의해 제조될 수 있는데, 여기서 무수 에탄올이 바람직한 용매가 되며, Pd/C가 바람직한 촉매가 된다. 이와 같은 조건들 하에서, 10 중량%의 낮은 촉매 적하률로 유익하게 수득할 수 있다.

또는, 2-하이드록시-3-(니트로-피리디닐)-아크릴산에틸 에스테르(3), 또는 이의 호변이성체 케토 에스테르를 화학적으로 환원하여 중간생성 화합물 (4)를 제공할 수도 있다. 예를 들면, 에탄올과 같은 적절한 용매에 화합물 (3), SnCl₂ 및 TiCl₄의 혼합물을 재환류하에서 약 4 시간동안 가열시키면, 당해 분야에 공지된 방법에 의해 정제한 후에 중간 생성 화합물 (4)를 얻는다.

디에틸 옥살레이트를 화합물 (3)을 제조하는데 이용하고, 연속하여 화합물 (3)을 환원시키면 에틸에스테르인 중간 생성 화합물 (4)를 얻는다. 당해 분야에 공지된 트랜스에스테르 반응을 이용하여 중간생성물 에틸 에스테르 (4)를 선택적으로 적절한 다른 에스테르로 전환시킬 수도 있다. 반응식 1, 단계 d에서 볼 수 있는 것과 같이, 탄산칼륨 또는 탄산나트륨과 같은 염기 존재하에 에틸에스테르(4) 메탄올 용액으로 처리하고, 약 50 ^oC 내지 약 80^oC에서 약 1시간 또는 반응이 완료될 때까지(박층 크로마토그래피 또는 당해 분야에 공지된 다른 적절한 크로마토그래피를 이용하여 측정하였을 때) 혼합물을 가열하면 메틸 에스테르 5를 만들 수 있다. 반응물을 물로 희석시키고, 여과 또는 당해 분야에 공지된 추출 방법을 이용하여 메틸 에스테르 5를 분리하면, 메틸 에스테르 5를 만든다.

반응식 1, 단계 e에서, 당해 분야에 공지된 방법을 이용하여 중간생성물 에스테르 (4) 또는 (5)를 아미드 (6)로 전환시킬 수 있다. 따라서, 메탄올 또는 에탄올과 같은 적절한 극성 용매에 에스테르(4) 또는 (5) 용액을 실온에서 약 1일 내지 약 3일간 약 5N 내지 7N 수산화암모늄으로 처리하거나 또는 용액을 55 ^oC로 약 10시간 동안 가열시키면, 당해 분야에 공지된 방법으로 분리한 후에 1차 아미드 (6 )를 제공한다. 또는, 에스테르 (4) 또는 (5)는 실온에서 약 3 내지 5일간 (박층크로마토그래피 또는 당해 분야에 공지된 다른 적절한 크로마토그래피 분석에 의 해 반응이 실질적으로 완료되었음이 나타날 때까지) 농축 수산화암모늄 용액 및 염화리튬 혼합물에 현탁시킨다. 당해 분야에 공지된 방법을 이용하여 반응 혼합물로부터 아미드 (6)를 분리시켰다. 중간생성물 아자인돌 에스테르(4) 또는 (5)를 당해 분야에 공지된 방법을 이용하여 C_{1 -6}-알킬 아민으로 처리하면 N-C_{1 -6}-알킬-치환된 아미드 (6)를 만들 수 있다. 예를 들면, 중간생성물 아자인돌 에스테르 (4) 또는 (5)를 C_{1 -6}-알킬 아민, 예를 들면 메틸아민과 같은 농축된 수용성 용액으로 처리하거나 과량의 C_{1 -6}-알킬 아민으로 처리하고, 박층 크로마토그래피 또는 당해 분야에 공지된 다른 크로마토그래피 방법으로 반응이 완료되었는지를 모니터한다. 반응물을 물로 희석 또는 당해 분야에 공지된 추출 방법으로 추출한 후에 원하는 N-C_{1 -6}-알킬 아미드 (6)을 수득한다. 중간생성물인 아자인돌 에스테르 (4) 또는 (5)를 C_1-6-디알킬 아민으로 유사하게 처리하면 이에 상응하는 N- C_{1 -6}-디알킬 아미드 (6)를 제공한다.

유익하게, 1차 아미드 (6)는 반응식 1, 단계 e에 따라 제조할 수 있는데, 아자인돌 에틸 에스테르 (4)를 암모니아 메탄올 용액에 첨가하고, 반응이 완료될 때 까지 압력하에 가열한다. 용매로 메탄올을 이용하면 출발 물질의 용해도를 상당히 증가시키고, 반응시간을 상당히 단축시킨다. 아자인돌 에틸 에스테르 (4)은 이와 같은 조건하에서 트란스에스테르화시켜 이에 상응하는 아자인돌 메틸 에스테르 (5) 을 만들 수 있으나, 에스테르 (4) 및 (5)는 모두 반응 조건하에서 원하는 1차 아미 드 (6)로 전환된다. 7N 암모니아 메탄올, 약 50^oC의 반응 온도, 약 35 psi의 초기 압력, 약 49 시간에서 반응을 적절하게 실행한다. 이 시간 동안에 반응용기의 압력은 약 16 psi로 떨어진다. 반응이 완료되었는지는 HPLC 크로마토그래피 또는 당해 분야에 공지된 다른 크로마토그래피 분석을 이용하여 결정할 수 있다.

반응식 1, 단계 f에서, 중간생성물아미드 (6)은 당해 분야에 공지된 방법에 의해 피롤 고리의 3-번 위치에서 티오아릴화된다. 예를 들면, 디메틸포름아미드 또는 NMP와 같은 적절한 용매에 중간생성물아미드 (6)의 현탁액을 적절한 염기 예를 들면 수산화나트륨 또는 수산화리튬으로 실온에서 처리하고, 이어서 적절한 디아릴디설파이드로 처리한 후에 혼합물을 약 12시간 내지 약 20시간 동안 약 90 ^oC 내지 약 100^oC로 가열한다. 반응 과정은 박층 크로마토그래피 또는 당해 분야에 공지된 다른 크로마토그래피 방법을 이용한 분석이 따른다. 그 다음 반응물을 농축시키고, 물로 희석시키고, 화학식 I의 원하는 화합물을 분리하고 당해 분야에 익히 공지된 방법을 이용하여 크로마토그래피를 통하여 정제한다.

또는, 디메틸포름아미드나 NMP와 같은 적절한 용매에 중간생성물아미드 (6) 및 약 1.5 당량의 탄산세슘 혼합물을 적절한 디아릴설파이드(약 1.1 당량)으로 처리하고, 그 다음 혼합물을 약 12 내지 약 20시간 동안 약 90 ^oC 내지 약 100^oC로 가열한다. 반응은 박층 크로마토그래피 또는 당해 분야에 공지된 다른 크로마토그래피 방법을 이용하여 모니터한다. 화학식 I의 화합물을 분리하고, 당해 분야에 잘 공지된 방법을 이용하여 크로마토그래피로 정제한다. 화학식 I(여기서 R₃-X는 헤테로사이클-S)의 화합물을 적절하게 치환된 디헤테로사이클디설파이드를 이용하여 유사한 방법으로 제조할 수 있다.

유익하게, 화학식 I의 화합물은 반응식 1, 단계 f에 따라 합성할 수 있는데, 적절한 용매 NMP에 약 1.5 당량의 디아릴설파이드, 약 2 당량의 탄산세슘, 약 1당량의 아미드 (6)를 첨가하여 제조한다. 혼합물을 약 21시간 동안 약 120^oC에서 가열하고, HPLC 또는 당해 분야에 공지된 다른 크로마토그래피 방법을 이용하여 모니터한다. 반응을 완료시킬 필요가 있을 때는 약 0.5 당량의 탄산세슘을 선택적으로 첨가하여 약 4시간 동안 가열을 계속한다. 크로마토그래피 분석으로 반응이 완료되었다고 판단되는 경우에, 반응물을 물에 넣어 냉각, 종료시키고, 화학식 I의 원하는 화합물을 당해 분야에 공지된 방법으로 분리 정제시킨다. 화학식 I의 화합물을 이와 같은 방법으로 제조하면, 반응시간을 놀라울 정도로 단축시키고, 화학식 I의 화합물의 수득율을 상당히 높이고 (59%에서 85%), 추가의 크로마토그래피 정제과정이 필요 없을 정도로 충분한 정도의 순도를 가진다.

반응식 1, 단계 g에서 화학식 I의 화합물의 피롤 고리의 질소는 화학식 I(여기서 R₁은 H)의 화합물 용액(여기서, 적절한 용매는 1,3-디메틸-3,4,5,6-테트라하이드로-2(1H)-피리이미디논이다)을 실온에서 약 12시간 내지 약 20시간 동안 C_{1 -6}-디알킬설페이트와 적절한 염기 예를 들면, 탄산세슘으로 처리하여 N-알킬화시킬 수 있다. 박층 크로마토그래피 또는 당해 분야에 공지된 다른 크로마토그래피 방법을 이용하여 반응이 완료되었는지를 결정한다. 완료된 경우에, 반응 혼합물을 물로 희석시키고, 화학식 I의 화합물(여기서, R₁은 C_{1 -6}-알킬이다)을 분리하고, 당해 분야에 잘 공지된 방법을 이용하여 정제한다. 화학식 I의 화합물의 피롤 고리의 질소는 화학식 I( 여기서, R₁은 H 이다)의 화합물의 피리딘 용액을 탄산세슘과 같은 적절한 염기 존재하에 C₁-C₆-알킬 할로겐화물로 약 0.25시간 내지 약 3시간 동안 가열 처리하면 알킬화된다. 반응 혼합물을 냉각시키고, 물로 희석시키거나 농축하여 건조시키고, 에틸아세테이트로 추출하였다. 당해 분야에 잘 공지된 크로마토그래피 방법을 이용하여 농축 및 정제시키면 화학식 I의 화합물(여기서, R₁는 C₁-C₆-알킬)의 화합물을 제공한다. 화학식 I( 여기서, R₁은 H 이다)의 화합물의 피롤 고리의 질소를 N-알킬화시키는 또 다른 방법은 당해 분야에 잘 공지된 방법을 이용하는데, 예를 들면, 디메틸포름아미드 또는 NMP와 같은 적절한 극성 용매 중에서 화학식 I( 여기서, R₁은 H이다)의 화합물 용액을 수산화나트륨 또는 t-부톡시드칼륨 등의 적절한 염기로 처리하고, 그 다음 요오드 프로필과 같은 C_{1 -6}-알킬 할로겐화물을 첨가하는 방법을 이용할 수 있다. 박층 크로마토그래피 분석 또는 당해 분야에 공지된 다른 크로마토그래피 방법을 이용하여 반응이 완료되었는지를 결정한다. 완료된 경우에, 반응 혼합물을 물로 희석시키고, 화학식 I의 화합물(여기서, R₁은 C_1-6-알킬이다)을 분리하고, 당해 분야에 잘 공지된 방법을 이용하여 정제한다.

반응식 2에 나타난 바와 같이, 디아릴디설파이드는 메탄올과 같은 적절한 유기 용매에 적절한 아릴설파이드를 포함하는 용액을 과붕소산나트륨 용액으로 처리하고, 실온에서 약 12시간 내지 약 24시간 혼합물을 방치하여 제조한다. 디아릴설파이드는 당해 분야에 공지된 방법을 이용하여 분리 정제할 수 있다. 디헤테로사이클디설파이드 예를 들면, 비스(2-티에닐)디설파이드도 유사한 방법으로 제조할 수 있다.

반응식 3에서는 1H-피롤로[3,2-c]피리딘-2-카복실산 메틸 에스테르 5b-1의 합성에 대해 설명한다. 반응식 3, 단계 h에서, (3-요오드-피리딘-4-일)카르바민산1,1-디메틸에틸 에스테르(7b-1), 3,3-디에톡시-1-프로핀, 트리에틸아민 또는 휴니그 염기(N,N-디이소프로필에틸아민), 디클로로비스(트리페닐포스핀)팔라디움(II) 및 요오드 구리 혼합물을 건조 DMF와 같은 적절한 용매에서 약 3시간 동안 약 90 ^oC의 비활성 분위기 하에서 가열하였다. 반응 혼합물을 약 70 ^oC로 냉각시키고, 1,8-디아자바이시클로[5.4.0]운데스-7-엔(DBU) 또는 1,5-디아자바이시클로[4.3.0]논-5-엔(DBN)와 같은 적절한 염기로 처리 후, 약 70 ^oC의 온도에서 약 3시간 동안 교반시킨 후에, 약 12시간 동안 실온에서 교반시킨다. 반응 혼합물을 에틸 아세테이트에 붇고, 물과 소금물로 세척한 후에, 유기상은 건조시키고, 여과시키고, 농축시켜, 2-(디에톡시메틸)-1H-피롤로[3,2-c]피리딘-1-카복실산 1,1-디메틸에틸 에스테르 (8b-1)를 제공하는데, 이는 크로마토그래피 또는 당해 분야에 잘 공지된 방법을 이용하여 정제한다. 반응식 3, 단계 i에서 볼 수 있는 것과 같이, 화합물 8b-1의 가수분해는 산성 조건에서 이루어지며, 1H-피롤로[3,2-c]피리딘-2-카보옥살데히드를 제공한다. 실온에서 약 20시간 동안의 적정 시간 동안 염산과 같은 미네랄 산으로 화합물 8b-1을 처리하고, 생성물 혼합물을 당해 분야에 잘 공지된 방법으로 분리 및 크로마토그래피 정제시키면 1H-피롤로[3,2-c]피리딘-2-카보옥살데히드(9b-1) 및2-포밀-1H-피롤로[3,2-c]피리딘-1-카복실산 1,1-디메틸에틸 에스테르 혼합물을 얻을 수 있다. 트리플루오로아세트산과 같은 적절한 산 및 디클로로메탄과 같은 적절한 용매로 재환류시켜 2-포밀-1H-피롤로[3,2-c]피리딘-1-카복실산 1,1-디메틸에틸 에스테르를 산 가수분해시키면, 1H-피롤로[3,2-c]피리딘-2-카르보옥살데히드, 9b-1를 얻을 수 있다. 반응식 3, 단계 j에서 볼 수 있는 것과 같이 메탄올과 같은 적절한 용매 내 1H-피롤로[3,2-c]피리딘-2-카보옥살데히드 (9b-1) 용액을 시아나이 드 나트륨 및 이산화망간을 이용하여, 약 0 ^oC로 냉각, 약 5시간 동안 교반시켜 처리한 후, 여과, 물로 세척, 당해 분야에 공지된 방법을 이용하여 분리시키면, 1H-피롤로[3,2-c]피리딘-2-카복실산 메틸 에스테르 5b-1를 얻는다.

여기에서 설명하는 본 발명의 방법에 이용된 다양한 모든 화합물의 구체예는 여기에서 설명하는 다양한 질환 및 장애를 치료하는데 이용할 수 있다. 본 발명의 방법에서 이용된 화합물은 카제인 키나제 Iε효과를 저해시키는 능력을 가진다. 본 발명의 한 구체예는 정서 장애 및 수면 장애를 치료하는 방법을 제공한다. 본 발명의 또 다른 구체예에서, 정서 장애는 울병 또는 양극성 장애가 될 수 있다. 본 발명의 또 다른 구체예는 울병을 치료하는 것에 관계하는데, 울병은 주 우울증 질환이다. 본 발명의 또 다른 구체예는 양극성 장애 치료에 관계하는데, 양극성 장애는 양극성 I 장애 또는 양극성 II 장애가 된다. 본 발명의 또 다른 구체예는 수면 장애 치료에 관한 것이다. 본 발명의 또 다른 구체예는 수면 장애를 치료하는 것에 관계하는데, 여기서 수면 장애는 서캐디안 리듬 수면 장애이다. 본 발명의 또 다른 구체예는 서캐디안 리듬 수면 장애 치료에 관계하는데, 여기서 서캐디안 리듬 수면 장애는 교대제 근무 수면 장애, 시차 증후군, 전진성 수면 주기 증후군, 지연성 수면 주기 증후군이다. 당업자는 여기에서 언급한 장애 및 질환에 본 발명의 화합물의 효능을 한정하고자 함이 아니며, 이들은 단지 예시로 설명하기 위함이라는 것을 바로 인지할 수 있을 것이다. 따라서, 본 발명의 화합물들은 카제인 키나제 Iε저해에 의해 개선되는 임의의 질환 또는 장애를 치료하는데 이용할 수 있다..

본 발명의 또 다른 구체예에서, 본 발명의 화학식 I의 화합물의 약학 조성물을 제약 분야에 잘 공지된 방법으로 제조할 수 있다. 담체 또는 부형제는 활성 성분에 대해 운반체 또는 매체로 작용할 수 있는 고체, 반고체 또는 액체가 될 수 있다. 적절한 담체 또는 부형제는 당해 분야에 잘 공지되어 있다. 약학 조성물은 경구, 흡입, 비경구 또는 국소로 이용될 수가 있으며, 정제, 캡슐, 현탁액, 시럽, 흡입제, 에어로졸, 좌약, 살브(salves), 분말, 용액 등의 형태로 환자에 투여될 수 있다. 여기에서 사용된 것과 같이, 용어 "약제학적 담체"는 하나 또는 그 이상의 부형제를 의미한다. 여기에서 설명된 것과 같이, 본 발명의 약학 조성물은 카제인 키나제 Iε를 저해하여, 카제인 키나제 Iε저해로 인하여 개선되는 질환 또는 장애를 치료에 유용할 수 있을 것이다.

본 발명의 화합물의 제형을 제조하는데 있어서, 경구, 비경구 또는 피하 경로를 포함하여 선택된 투여 경로에 의해 화합물 또는 활성 화합물들의 유효량을 생체 이용할 수 있도록 신중을 기해야 한다. 예를 들면, 효과적인 투여 경로에는 피하, 정맥, 경피, 비강, 직장, 질내로 투여, 및 임플란트로부터 방출 및 활성 성분 또는 조성물을 조직으로 바로 투여하는 등의 경로가 포함될 수 있다.

경구 투여를 위해서, 화합물은 캡슐, 알약, 정제, 트로키, 분말, 용액, 현탁액 또는 에멀젼과 같은 비활성 희석제 또는 식용 담체 유무하에 고체 또는 액체 제형으로 조제될 수 있다. 캡슐, 알약, 정제, 트로키 또는 이와 유사한 것에 다음의 보조제 포함할 수도 있다: 미결정 셀룰로오즈, 검 트래거컨트와 같은 결합제; 전분 또는 락토즈, 알긴산과 같은 분해제, 옥수수 전분 등의 부형제; 스테아린 산, 마그 네슘 스테아레이트 또는 스테로텍스(Sterotex

[참조: Stokely-Van Camp Inc., Indinapolis, Indiana] 콜로이드성 이산화실리콘과 같은 윤활제; 슈크로즈 또는 사카린과 같은 감미제; 및 페퍼민트, 메틸 살리실레이트 또는 과일향과 같은 향제; 단위 제형이 캡슐인 경우에는 폴리에틸렌글리콜 또는 지방 오일과 같은 액체가 포함될 수 있다. 이용되는 재료는 약제학적으로 순수하고 사용되는 양이 비-독성이어야 한다. 또는, 본 발명의 화학식 I의 화합물의 치료요법적 유효량을 당해 분야에 공지된 방법을 이용하여 매일 1회, 매주 1회 또는 매달 1회 제공할 수 있도록 약학 조성물을 지연 방출에 적합한 형으로 조제할 수 있다. 예를 들면, 활성 성분을 함유하고 있는 침식가능한 폴리머를 고려할 수도 있을 것이다.

비경구 투여의 경우에, 화합물은 생리학적으로 사용가능한 희석제에 화합물의 용액 또는 현탁액의 주사용 제형으로 투여할 수 있는데, 여기서 유중수(water-in-oil )형 멸균 액체와 같은 약제학적 담체를 사용하거나 계면활성제 및 다른 약리학적 허용되는 부형제를 사용하지 않을 수도 있다. 제형에 이용될 수 있는 예시적인 오일은 페트롤리움, 동물, 식물 또는 합성된 오일 예를 들면 땅콩기름, 콩기름 및 미네랄 오일이 될 수 있다. 일반적으로, 물, 소금물, 수용성 덱스트로즈 및 관련 설탕 용액, 에탄올, 및 프로필렌 글리콜과 같은 글리콜이 특히 주사용 용액에 적합한 바람직한 액체 담체가 된다. 비경구 제형은 비활성 플라스틱 또는 유리로 만든 앰플, 1회용 주사기 또는 다중 제형 바이알에 넣을 수 있다.

상기에서 설명한 용액 또는 현탁액에는 다음의 보조제 중 하나 이상이 포함된다: 주사용 물과 같은 멸균 희석제, 식염수, 고정된 오일, 폴리에틸렌 글리콜, 글리세린, 프로필렌 글리콜 또는 다른 합성 용매 또는 항균제 예를 들면 아스코르브산 또는 이황화나트륨; 에틸렌디아민테트라-아세트산과 같은 킬레이트제; 아세테이트, 구연산 또는 인산염과 같은 킬레이트제 또는 염화나트륨 또는 덱스트로즈와 같은 강장 조절용 물질.

화합물은 활성 성분을 지연 방출시키는 방법으로 조제되는 피하 패치, 데포(depot) 주사 또는 임플란트와 같은 형태로 투여될 수 있다. 활성 성분을 펠렛 또는 작은 실린더 내로 압착시키고 데포 주사 또는 임플란드처럼 피하 또는 근육에 이식시킬 수 있다. 임플란트는 생분해성 폴리머 및 합성 실리콘과 같은 비활성 물질을 이용한다. 적절한 약학 담체 및 제형 기술은 표준 참고서 예를 들면, 문헌[참조: Remington : The Science and Practice of Pharmacy, 19^th edition, Volumes 1 and 2, 1995, Mack Publishing Co., Easton, Pennsylvania, U.S.A.,]을 참고하면 되고, 참고자료로 전문을 인용한다.

여기에서 설명하는 다양한 질환 치료시에 적절한 약량 수준은 1일 체중 1kg당 약 0.01 mg 내지 약 250 mg이 되며, 적절하게는 약 0.05 mg 내지 약 100 mg이 되며, 특히 적절하게는 약 0.05 mg 내지 약 40 mg이 된다. 화합물은 치료할 질환 또는 장애의 특징에 의해 명시된 바 1일 1회 내지 4회 섭생으로 투여할 수 있다.

다음의 실시예는 본 발명을 상세하게 설명하기 위함이며 본 발명의 범위를 어떠한 방법에 의해서건 이에 한정시키고자 함은 아니다. 표 1, 2, 3에서는 여기 에서 제조한 예시적인 화합물을 요약하였다. 여기에서 설명하는 니트로 화합물은 이와 같은 화합물의 잠재적인 위험으로 인하여 취급에 주의하였다.

다른 언급이 없는 한, 모든 출발 물질, 시약 및 용매들은 시판 공급업자로부터 구입하고, 추가 정제 없이 사용하였다. 모든 반응은 건조 시약 및 용매들을 이용하여 비활성 대기하에서 실시하였다. 섬광 크로마토그래피는 용매 계를 이용하여 문헌에 따라 EM 사이언스 실리카겔 60(40 - 63 mm)을 사용하였다[참조: Still, W. C.; Kahn, M.; Mitra, A. Rapid chromatograph Technique for Preparative Separations with Moderate Resolution. J. Org. Chem., 1978, 43, 2923-2925]. 박층 크로마토그래피는 60F-254 플레이트(EM) 상에 피복된 0.25 mm 실리카겔을 이용하여 실시하고, 요오드 증기, UV 광, 또는 착색 시약 예를 들면, KMnO₄ 용액([참조: "Thin-Layer Chromatograph Laboratory Handbook" Egon Stahl, Ed.; Springer-Verlag Berlin-Heidelberg-New York, 1969]에서 언급하는 것과 같은 다른 착색 용액을 만들 수도 있다)을 이용하여 가시화하였다.

지적된 바와 같이 제조된 샘플을 넥서스 670 FTIR (니콜렛) 스펙트로메터 상에서 적외선 (IR) 스펙트럼을 기록하고, 이를 파장수(cm^-1)를 기록하였다. ¹H NMR 스펙트럼은 바리안 게미니 및/또는 수은 300, 유니티 400, 또는 유니티 플러스 및/또는 이노바 500MHz 스펙트로미터를 이용하여 참고 물질로 테트라메틸실란(0.0 ppm) 또는 클로로포름 (CDCl₃, 7.26 ppm)을 사용하여 ppm으로 상대적인 화학적 변이 (δ)를 기록하였다. ¹³C NMR 스펙트럼은 바리안 유니티 장치(100.57 MHz, 13C frequency)상에서 다른 언급이 없는 한 CDCl₃ (77.0 ppm)에 대해 상대적인 화학적 변이 (δ)를 ppm으로 기록하였다. 피나겐 맷트 모델 TSQ 700 매스 스펙트로미터 상에서 메탄(CI, 120 eV)을 이용하여 120 eV에서 화학적 이온화에 의해 질량 스펙트럼(MS)을 수득하였다. 액체 크로마토그래피 질량 스펙트로메터(LCMS)는 마이크로매스 LCT + 길손 215 액체 핸들러를 이용하여 실시하였다. 고해상 질량 스펙트로메터 분석(정확한 질량 스펙트럼)은 마이크로매스 QTOF 질량 스펙트로미터를 이용하여 10,000 질량 해상도에서 ESI 모드에서 실행하였다. 양자를 제공받은 분자 이온(M + 1)(여기서 M은 분자 이온을 말한다)에 정확한 질량 값을 결정하였다.

피롤로[3,2-b]인돌(4- 아자인돌 )

2- 메틸 -3-니트로-피리딘, 2a-1(반응식 1, 단계 a)의 제조

질소 하에서 90 ℃로 가열된 79 mL 디에틸 말로네이트을 포함하는 3구 플라스크에 금속 나트륨염(3.5g)을 1시간에 걸쳐 조금씩 첨가한다. 온도를 60℃로 낮추고 2-클로로-3-니트로피리딘(1a-1, 25.0g)을 15분에 걸쳐서 조금씩 첨가한다. 반응물의 색이 검붉은 색으로 바뀐다. 용액을 3시간 동안 60℃에서 유지시키고, 그 다음 실온에서 하룻밤 동안 방치한다. Tlc로 잔류 출발 물질을 확인한다. 용액을 추가 3시간 동안(반응이 완료) 80℃로 가열한다. 감압하에서 디에틸 말로네이트를 제거하고, 농축 H₂SO₄ (18 mL) 및 H₂O (32 mL) 혼합물에서 짙은 갈색 잔류물을 취한다. 혼합물을 7시간 동안 105℃(데카복실화 반응)에서 가열하고, 그 다음 실온에서 하룻밤 동안 방치한다. 혼합물을 3x150mL Et₂O 및 2x200mL EtOAc로 세척하고 세척물을 버린다. 수용성 상을 수산화나트륨을 이용하여 pH 8-9로 만들어 염기화시키고, 3x200mL EtOAc으로 추출한다. 복합 유기 추출물을 셀라이트(Celite

)(규조토)(Celite Corporation, 137 West Central Avenue, Lompor, California 93436) 상에서 여과시키고, 감압하에서 용매를 제거한다. 잔류물을 결정화시키면 화합물 2a-1(15.0 g, 68%), 융점 29-31℃을 얻는다.

2- 메틸 -3-니트로-피리딘, 2a-1(반응식 1, 단계 a)

2-클로로-3-니트로-피리딘 (1a-1, 7.9 g, 49.8 mmol), 메틸붕소산(1.10 당량, 54.8 mmol, 3.30 g), K₂CO₃ (3.0 당량, 150 mmol, 20.7 g) 및 Pd(PPh₃)₄ (1.2 g, 1.2 mmol) 혼합물을 디옥산(250 mL)에서 16시간 동안 110℃로 가열한다. 반응물을 실온으로 냉각시키고, 농축시키면 짙은 오일이 생성되는데 SiO₂ (헵탄/Et₂O 3:1, 오일을 제한된 양의 CH₂Cl₂ 로 희석시켜, 컬럼에 얹는다)상에서 섬광 크로마토그래피하면 화합물 2a-1[참조: Niu, C.; Li, J.; Doyle, T. W.; Chen, S-H. Tetrahedron, 1998, 6311-6318]을 얻는다.

2- 메틸 -3- 니트로피리딘 , 2a-1(반응식 1, 단계 a)

교반기, 온도 탐침, N₂에 대한 기체 어뎁터가 고정된 환류 냉각기를 갖춘 12-L, 3구 플라스크에 NMP(2.0 L)를 첨가하고, 16 ℃로 냉각시킨다. 3급-부톡시드 나트륨(0.675 kg, 6.81 mol, 2.2 당량, 97% 순도용으로 보정시킴)을 일부 첨가하면 즉각적인 발열 반응(29 ℃)을 관찰할 수 있다. 30분간 혼합물을 교반시키면, 부분적으로 NaOt-Bu가 용해되고, 그 다음 20 ℃ 내지 35 ℃에서 연속적으로 냉각시키면서 70분에 걸쳐 디에틸 말로네이트(0.943 L, 6.19 mol, 2.0 당량)을 첨가하면, 균질 용액이 형성된다. 20분간 교반시키고, 2-클로로-3-니트로피리딘(1a-1, 0.491 kg, 3.09 mol, 1.0당량) 및 NMP(1.0 L)를 29 ℃ 내지 44 ℃에서 70분간에 걸쳐 반응 혼합물에 첨가한다. 반응 혼합물을 50 ℃로 가열한다. 반응의 진행은 HPLC (Agilent series 1100; Waters Symmetry C8 (5 m) 컬럼 (3.9 x 150 mm), 유속 1.0 mL/분 일정용매: CH₃CN/0.1% aq. TFA, 50/50; l = 220 nm. R_T: 디에틸 말로네이트 = 2.6 분, 2-클로로-3-니트로피리딘 = 2.7 분, 2-(3-니트로-피리딘-2-일)-말론산 디에틸 에스테르= 3.9 분)으로 모니터한다. 일반적으로 1-2시간 내에 99% 이상의 변환이 일어난다. 가열을 중단하고, 45분에 걸쳐 50℃ 내지 59 ℃에서 6M H₂SO₄ (2.17 L)을 첨가한다. 첨가하는 동안에 두터운 고체 침전물이 형성된다. 혼합물을 100℃로 가열한다. 기체가 방출된다. 반응의 진행은 전술한 것과 같이, HPLC를 이용하여 모니터한다(R_T: 2-메틸-3-니트로피리딘 2a-1 = 2.0 분, 2-(3-니트로-피리딘-2-일)-말론산디에틸 에스테르= 3.9 분). 일반적으로 12시간 내에 99% 이상의 변환이 일어난다. 혼합물을 40 ℃로 냉각시키고, 얼음물(20 kg, pH 1.5)에 붇는다. -11℃ 내지 -6℃에서 20분에 걸쳐 25% 수성 NaOH(2.65 L)을 첨가하여, pH 11로 만든다. 톨루엔(4.0 L)을 첨가하고, 혼합물을 10분간 교반시킨다. 혼합물은 셀라이트를 통하여 여과시켜 무기 고체를 제거하고, 필터케이크를 톨루엔(6.0 L)으로 세척한다. 상을 분리하고, 수용성 상을 톨루엔(6.0 L 및 4.0 L)을 사용하여 2회 추출한다. 복합 톨루엔 상은 셀라이트를 통하여 여과시키고, 필터케이크를 톨루엔(1.0 L)으로 세척한다. 톨루엔 여과물을 합하고, 물(2 x 3.0 L)로 세척한다. 톨루엔 상을 건조(MgSO₄)시키고, 여과시키고, 농축시키면 오일 형태의 2-메틸-3-니트로피리딘 2a-1(0.34 kg, 80% 수득율, 잔류 NMP 및 톨루엔에 대해 보정함)을 얻는다. HPLC 분석에서 물질은 96% 순도를 가지는 것으로 나타났다. ¹H NMR (CDCl₃) δ 2.87 (s, 3H), 7.35 (dd, 1H, J = 4.8, 8.1 Hz), 8.27 (dd, 1H, J =1.4, 8.1 Hz), δ8.72 (dd, 1H, J =1.4, 4.8 Hz).

2- 하이드록시 -3-(3-니트로-피리딘-2-일)- 아크릴산에틸에스테르 , 3a-1(반응식 1, 단계 b)

500mL 순수 에탄올을 포함하는 3구 플라스크에 N₂하에서 2.2g(0.0956 g-원자)나트륨을 첨가한다. 나트륨이 모두 반응한 후, 디에틸 옥살레이트(98mL)를 한 방울씩 떨어뜨리고, 그 다음 화합물 2a-1(1 당량)을 첨가한다. 첨가시에 반응물의 색이 밝은 노란색에서 갈색으로 바뀐다. 생성 용액을 실온에서 2일간 방치한다. 오렌지 혼합물을 5N HCl(pH =1)으로 처리하고, 침전물을 여과를 통하여 수득하고, 필터케이크를 100 mL EtOH 및 200 mL 디-이소프로필 에테르로 세척하면 2-하이드록 시-3-(3-니트로-피리딘-2-일)-아크릴산에틸에스테르(R₄=H, 20g, 86%) 또는 이의 호변이성체 케토 에스테르 또는 케토-에놀 호변이성체 혼합물인 화합물 3a-1을 얻는다. ¹H NMR (DMSO-d ₆) δ8.83 (dd, 1H, J =1.1, 5.0 Hz), 8.65 (dd, 1H, J =1.5, 8.4 Hz), 7.56 (dd, 1H, J = 5.0, 8.4 Hz), 7.11(s, 1H), 3.47 (bs, 1H), 4.28 (q, 2H, J = 7.1 Hz), 1.30 (t, 3H, J = 7.0 Hz).

2- 하이드록시 -3-(3-니트로-피리딘-2-일)- 아크릴산에틸에스테르 , 3a-1(반응식 1, 단계 b)

교반기, 온도 탐침, 질소용 가스 유입 어뎁터가 고정된 추가 깔데기가 갖추어진 22-L, 3구 플라스크에 테트라하이드로푸란(2.7 L)를 첨가하고, 약 2 ℃로 냉각시킨다. 나트륨 에톡사이드(0.409 kg, 6.02 mol, 2.0 당량)을 일부 첨가한다. 약간의 발열 반응(2.7 ℃)을 관찰한다. 20분간 혼합물을 교반시키고, 디에틸 옥살레이트(1.22 L, 9.03 mol, 3.0 당량.)을 -0.3-4 ℃에서 50분간에 걸쳐 첨가하고(약간의 발열 반응), 10분간 혼합물을 교반시킨다. 2-메틸-3-니트로피리딘(2a-1, 0.415 kg, 3.01 mol, 1.0 당량) 및 THF (0.625 L) 용액을 4-9 ℃에서 22분간 냉각 없이 첨가한다. 혼합물을 1시간 동안 실온으로 데운다. 다음의 조건하에 HPLC를 이용하여 반응의 진행을 모니터한다(Agilent series 1100: Waters Symmetry C8 (5 m) 컬럼 (3.9 x 150 mm), 유속 1.0 mL/분; CH₃CN/0.1% aq. TFA, 55/45; l = 210 nm; R_T: 2-메틸-3-니트로피리딘 2a-1 = 1.8 분, 3a-1 = 2.7 분). 일반적으로 2-3시간 내에 생성물로의 99% 이상의 변환을 관찰한다. 반응하는 동안에, 두터운 적색 침전물이 형성된다. 반응 혼합물을 약 1℃로 냉각시키고, 포화 NH₄Cl 용액(2.0 L)을 1℃ 내지 9℃에서 첨가한다. 물(5.9 L) (pH 7.4)을 첨가하고, 그 다음 IPA (3.5 L)을 첨가한다. 1시간 동안 혼합물을 교반시키고, 여과를 통하여 붉은 색 고체를 수집한다. 필터케이크를 IPA/H₂O (1:4, 8.0 L), H₂O(15 L)으로 세척하고, 대기 건조시킨다. 필터케이크(40 ℃/Hg 중 0.1)를 건조시키면 화합물 3a-1(0.635 kg, 89%)을 얻는다. ¹H NMR (CDCl₃) δ1.40 (t, 3H, J = 7 Hz), 4.38 (q, 2H, J = 7 Hz), 7.36 (m, 2H), 8.42 (dd, 1H J = 1.5, 8.4 Hz), 8.66 (dd, 1H, J =1.5, 4.8 Hz), 14.52 (2, 1H, OH).

1H- 피롤로[3,2-b]피리딘 -2- 카복실산 에틸에스테르 , 4a-1(반응식 1, 단계 c)

화합물 3a-1(20g)을 10% PD/C (5.5g) EtOH (350mL) 용액에서 1200 psi 압력하에 실온에서 3시간 동안 수소화반응시킨다. 반응 혼합물을 셀라이트를 통하여 여과시키고, 여과물을 농축시켜, 에스테르 4a-1(R₄=H)을 얻는다. 39% 수득율.

또는, 4시간 동안 재환류시키면서 화합물 3a-1을 SnCl₂ (5.0 당량), TiCl₄ (2.5 당량)의 EtOH로 환원시키고, 실온으로 냉각시키고, 농축시키고, 실리카 겔 크 로마토그래피하여 정제시키면, 에스테르 4a-1(R₄=H)가 수득된다. 81% 수득율. ¹H NMR (DMSO-d ₆) δ13.48 (bs, 1H), 8.80 (dd, 1H, J =0.7, 5.4 Hz), 8.56 (dd, 1H, J =0.7, 8.4 Hz), 7.80 (dd, 1H, J = 5.5, 8.4 Hz), 7.37 (s, 1H), 4.40 (q, 2H, J = 7.0 Hz), 1.38 (t, 3H, J = 7.0 Hz)를 얻는다.

1H- 피롤로[3,2-b]피리딘 -2- 카복실산에틸에스테르 , 4a-1(반응식 1, 단계 c)

2 L 두꺼운 벽으로 된 파르 반응기에 화합물 3a-1(56.8 g, 0.24 mol), 에탄올(200 proof, 850 mL, 15 부) 및 10 % Pd/C (5.7 g, 10 중량%)을 첨가한다. 반응 용기를 파르 수소 생성기에 연결시키고, 수소를 제공하고, 오렌지 슬러리에 가압하여 45 psi으로 만든다. 실온에서 1시간 동안 교반시킨다(이 시간 동안 온도는 57 ^oC로 상승한다). 반응물 혼합물의 온도가 35 ^oC에서 안정화되면, 반응물을 3시간 동안 서서히 가열하여 40 ^oC로 만든다. 반응이 TLC (실리카 겔, 1% MeOH / CH₂Cl₂)로 모니터하였을 때 완료되면, 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 슬러리를 셀라이트를 통하여 여과시키고, 필터케이크는 EtOH (4 x 200 mL)으로 세척시킨다. 노란색 여과물을 농축시키면, 고체(41.6 g)를 얻고, 에틸아세테이트(302 mL)를 첨가하고 증기조에서 가열한다. 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 헵탄(600 mL)을 첨가하여 생성물을 침전시킨다. 혼합물을 얼음조에서 1시간 동안 교반시키고, 여과시키고, 필터케이크를 헵탄(100 mL)으로 세척한다. 필터케이크(50^oC/Hg 중 0.1)를 24 시간 동안 건조시키면 밝은 회색 고체 형태의 화합물 4a-1을 얻는다(36.6 g, 81% 수득율). ¹H NMR (DMSO-d ₆) 1.36 (t, 3H, J = 7.0 Hz), 4.36 (q, 2H, J = 7.0 Hz), 7.19 (s, 1H), 7.25 (dd, 1H, J = 4.5, 8.1 Hz), 7.82 (d, 1H, J = 8.1 Hz), 8.44 (d, 1H, J = 4.5 Hz), δ12.11(s, 1H).

1H- 피롤로[3,2-b]피리딘 -2- 카복실산아미드 , 6a-1(반응식 1, 단계 e)

에스테르 4a-1의 5N 암모니아 용액을 MeOH에 용해시키고, 10시간 동안 55℃로 가열시키면, 후처리 후, 아미드 6a-1(R₂=NH₂, R₄=H)을 수득하였다. 44% 수득율, 융점 332 ℃(dec.). ¹H NMR (DMSO-d ₆) δ11.72 (bs, 1H), 8.36 (dd, 1H, J =1.5, 4.5 Hz), 8.10 (bs, 1H), 7.76 (dd, 1H, J = 2.2, 8.2 Hz), 7.52 (bs, 1H), 7.24 (s, 1H), 7.17 (dd, 1H, J = 4.5, 8.2 Hz).

1H- 피롤로[3,2-b]피리딘 -2- 카복실산아미드 , 6a-1(반응식 1, 단계 e)

에스테르 4a-1의 7N 암모니아 용액을 MeOH에 용해시키고, 수일간 실온에서 교반시키고, tlc(10% MeOH/CH₂Cl₂)로 모니터한다. 반응이 완료되면, 반응물을 농축시켜 최소 용적으로 만들고, 과량의 H₂O로 희석시키고, 침전물을 여과에 의해 수득하고, 건조시키면, 적절한 수득율로 아미드 6a-1(R₂=NH₂, R₄=H)를 얻는다.

1H- 피롤로[3,2-b]피리딘 -2- 카복실산아미드 , 6a-1(반응식 1, 단계 e)

에스테르 4a-1를 농축 NH₄OH에 현탁시키고, 수일간 실온에서 교반시키고, tlc(10% MeOH/CH₂Cl₂)를 통하여 모니터한다. 반응이 완료되면, 반응물을 농축시켜 최소 용적을 만들고, 과량의 H₂O로 희석시키고, 침전물을 여과를 통하여 수득하고, 건조시키면, 적절한 수득율로 아미드 6a-1(R₂=NH₂, R₄=H)를 얻는다.

1H- 피롤로[3,2-b]피리딘 -2- 카복실산아미드 , 6a-1(반응식 1, 단계 e)

실온에서 7 N NH₃의 MeOH (1.5 L, 10.5 mol, 20 당량.) 용액을 3-L 압력 반응기에 첨가하고, 고체 형태의 아자인돌 에스테르 4a-1(100 g, 0.53 mol)를 첨가한다. 슬러리를 50^oC로 서서히 가열하면 맑은 용액을 얻는다. 초기 압력 35 psi이 4시간에 걸쳐 16 psi으로 떨어지는 것을 관찰할 수 있다. 반응은 50^oC에서 49시간 동안 유지시킨다. 최종 압력은 10psi이다. 반응의 진행은 다음의 조건하에서 HPLC를 통하여 모니터한다[참조: Agilent series 1100 : Waters Symmetry C8 (5 m) 컬럼 (3.9 x 150 mm), 유속 1.0 mL/분, 구배 용출 조건: 시간(분), 물:아세토니트릴-메탄올 비율(아세토니트릴-메탄올 1:1 용액) 0 분, 70:30; 10 분, 20:80; 15 분, 70:30; 20 분, 70:30; l₁ = 210 nm, l₂ = 220 nm, 유속 1.0 mL/분, R_T: 에틸에스테르 4a-1 = 5.6 분, 메틸 에스테르 5a-1 = 4.2 분, 아미드 6a-1 = 2.2 분). 반응에서 상응하는 메틸 에스테르 5a-1가 형성됨을 확인하고, 화합물 5a-1은 반응의 중간 생성물로 작용한다. 반응을 4^oC 로 냉각시키고, 생성된 침전물을 진공 여과를 통하여 분리한다. 필터케이크를 메틸 3급-부틸 에테르를 이용하여 세척시키고(2 x 100 mL), 20시간 동안 건조(40 ^oC/Hg 중 0.1)시키면 회색 고체형태의 화합물 6a-1을 얻는다(78.6 g, 93%). ¹H NMR (DMSO-d ₆) δ7.17 (dd, 1H, J = 4.5, 8.4 Hz), 7.53, 8.11(2s, 2H, NH₂), 7.76 (d, 1H, J = 8.1 Hz), 8.37 (d, 1H, J = 1.5 Hz), 11.72 (s, 1H, NH).

1H- 피롤로[3,2-b]피리딘 -2-카복실 산메틸아미드 , 6a-2

실온에서 16시간 동안 4-아자인돌 에스테르 4a-1(R=Et, R₄=H)의 순수 메틸아민(40 중량% 수용액)을 교반시키고, tlc (10% MeOH/CH₂Cl₂)로 모니터한다. 반응이 완료되면, 반응물을 과량의 H₂O로 희석시키고, 침전물은 여과를 통하여 수득하고, 건조시키면 아이보리 색 고체, 형태의 화합물 6a-2(R₂=NHCH₃, R₄=H)을 얻는다(일반 합성 반응식 VI 참고). MS Obs 176.07 (M + 1).

디아릴디설파이드 및 디헤테로사이클디설파이드 출발 물질의 일반 제조(반응식 2)

비치환되거나 적절하게 치환된 페닐테올 (17.2 mmol, 1.0 당량) 및 MeOH (30mL) 용액에 과붕산나트륨(22 mmol) 및 물(20mL)을 교반시키면서 첨가하고, 반응물을 하룻밤 동안 실온에서 방치한다. 고체를 여과를 통하여 수득하고, 메탄올로 세척하면, 원하는 디아릴 디설파이드를 얻는다. 디헤테로사이클디설파이드 (예를 들면, 비스(2-티에닐)디설파이드)를 포함하는 다른 디설파이드도 원하는 디아릴 디설파이드를 제조하는 반응식에서 설명된 것과 유사한 방법으로 제조할 수 있다.

일반 합성 반응식 I ( 트란스에스테르화 반응, 반응식 1, 단계 d)

에틸4-아자인돌-2-카복실레이트 4a(42.3 mmol)의 MeOH(50 mL)에 K₂CO₃ (1.20 당량, 50.7 mmol)을 첨가하고, 현탁액을 교반시키면서 1시간 동안 55 ℃로 가열시킨다. 반응은 tlc (Et₂O/hept)로 모니터한다. 반응이 완료되면 반응물을 진공에서 농축시키고, H₂O로 희석시키고, 15분 동안 교반시킨다. 여과를 통하여 고체를 수득하고, 3시간 동안 진공 오븐에서 65 ℃에서 건조시키면, 약 90% 내지 100%의 원하는 메틸 4-아자인돌 2-카복실레이트 5a를 얻는다.

일반 합성 반응식 II ( NH ₄ OH 이용한 아미드화반응 , 반응식 1, 단계 e)

실온에서 현탁액인 4-아자인돌 카복실레이트 에스테르 4a 또는 5a (40.0 mmol)를 농축 NH₄OH (100 mL) 및 LiCl (1.0 당량)에서 16시간 동안 교반시킨다. 여과를 통하여 아이보리 색 고체를 수득하고, 물로 세척하고 공기 건조시키면 1차 아미드 6a(60-75%)를 얻는다.

일반 합성 반응식 III( NH ₃ / MeOH 를 이용한 아미드화반응 , 반응식 1, 단계 e)

에틸4-아자-2-인돌 카복실레이트 4a(4.67 mmol)의 7N NH₃/MeOH (20 mL)를 교반시키고, LiCl(1.0 당량, 4.67 mmol)을 첨가한다. 반응물을 실온에서 5일간 교반시키고, 침전물이 형성되는 동안에 tlc (10% MeOH/CH₂Cl₂)로 모니터한다. 혼합물을 농축시켜 최소 용적으로 만들고, H₂O로 희석시키고, 고체는 여과를 통하여 수득한다. 필터케이크를 물로 세척하고, 진공 건조시키면(60℃), 1차 아미드 6a(>90%)를 얻는다.

일반 합성 반응식 IVa (염기로 NaH 를 이용한 3- 티오아릴화반응 , 반응식 1, 단계 f)

질소하에서 교반된 NaH(60% 오일 분산액, 1.2 당량, 9.8 mmol)의 DMF(75 mL) 현탁액에 4-아자-인돌 2-카복시 아미드 6a(8.18 mmol)의 DMF (5mL) 용액을 첨가한다. 5분 후, 디아릴디설파이드(1.0 당량., 8.18 mmol)를 일부 첨가하고, 반응물을 교반하면서 16시간 동안 95℃로 가열한다. 반응 후에, EtOAc/H₂O 사이에 반응 혼합물을 분배시키고, tlc (10% MeOH/CH₂Cl₂)를 이용하여 모니터한다. 반응이 완료된 경우에, 반응 혼합물을 진공에서 농축시키고, H₂O로 희석시키고 30분간 교반시키고, 여과시키고, 필터케이크를 대기 건조시킨다. 비정제된 고체를 SiO₂ 상에서 9:1 CH₂Cl₂/MeOH로 용출시키면서 크로마토그래피하면 3-아릴티오에테르 Ia (R₁ = H)를 얻는다.

일반 합성 반응식 IVb ( Cs ₂ CO ₃ 을 이용한 3- 티오아릴화 반응 반응식 1, 단계 f)

4-아자-인돌-2-카복시아미드 6a (0.42 mmol)가 용해된 건조 DMF (10 mL)에 Cs₂CO₃ (100 mg, 0.31 mmol) 을 첨가시키고, 그 다음 디아릴디설파이드(1.1 당량., 0.46 mmol)를 첨가한다. N₂, 95℃에서 16시간 동안 (완료는 tlc/LCMS로 모니터함) 반응물을 가열한다. 반응물을 실온으로 냉각시키고, 그 다음 교반시키면서 얼음으로 냉각시킨 H₂O에 첨가시킨다. 침전물을 여과를 통하여 수득하고, 40℃에서 진공 오븐에서 건조시키면 그을린 결정형 고체 형태의 비정제 생성물을 얻는다. SiO₂ 상에서 고체를 크로마토그래피시키면, 3-아릴티오에테르 Ia (R₁ = H)를 얻는다.

일반 합성 반응식V (피롤 고리 N-메틸화 반응, 반응식 1, 단계 g)

교반시키면서 3-치환된-4-아자인돌-2-카복실산아미드 Ia(R₁=H, 0.24 mmol) 및 1,3-디메틸-3,4,5,6-테트라하이드로-2(1H)-피리미디논(5.0 mL)에 디메틸설페이트 (1.5 당량, 0.36 mmol) 및 Cs₂CO₃ (2.0 당량, 0.48 mmol)을 첨가한다. 실온에서 16시간 동안 반응 혼합물을 교반시키고, tlc (10% MeOH/CH₂Cl₂)를 이용하여 모니터한다. 반응이 완료되면, 반응 혼합물을 농축시켜 최소 용적으로 만들고, H₂O로 희석시키고, 침전물을 여과를 통하여 수득한다. 필터케이크를 추가 H₂O로 세척시키고, 진공하에, 40 ℃에서 건조시키면, 1-메틸-3-치환된-4-아자인돌-2-카복실산아미드 Ia(R₁=CH₃, 65%)을 얻는다.

당해 분야에 공지된 방법으로 화학식 I의 화합물의 피롤 고리 질소를 N-알킬화시키는 다른 방법을 이용할 수 있다. 예를 들면, 디메틸포름아미드 또는 NMP와 같은 적절한 극성 용매에 화학식 I(R₁은 H)의 화합물을 적절한 염기 예를 들면 수소화나트륨 또는 t-부톡시드 칼륨으로 처리하고, 알킬 할로겐화물 예를 들면 요오드화 프로필을 첨가하면, 화학식 I(R₁은 프로필임)의 화합물을 얻는다.

일반 합성 반응식 VI : 인돌-2- 메틸아미드 및 다른 2차 아미드의 일반적인 제조 반응식 (반응식 1, 단계 e)

4-아자인돌 에스테르 (4) 또는 (5)를 C_{1 - 6}알킬아민 (예를 들면, 메틸 아민 40 중량% 수용액 또는 순수 메틸 아민)과 함께 실온에서 16시간 동안 교반시키고, tlc (10% MeOH/CH₂Cl₂)를 이용하여 모니터한다. 반응이 완료되면, 과량의 H₂O로 반응물을 희석시키고, 여과를 통하여 고체 침전물을 수득하고, 건조시키면, 적정한 수득율을 가진 2차 아미드 (6)(R₂=NH-C_{1 - 6}알킬)을 얻는다.

3- 페닐설파닐 -1H- 피롤로[3,2-b]피리딘 -2-카복실 산아미드 , Ia -1.

1H-피롤로[3,2-b]피리딘-2-카복실산아미드(6a-1, R₄=H; 1.0 당량)의 DMF (100 mL) 용액에 디페닐디설파이드 (1.0 당량)(일반 합성 반응식 IVb에서 설명된)을 첨가하여 그을린 결정 고체형태인 화합물 Ia-1을 얻는다(81%), 융점 251 ℃, tlc R_f = 0.49. ¹H NMR (DMSO-d ₆) δ12.48 (bs, 1H), 8.45 (dd, 1H, J =1.5, 4.4 Hz), 8.11(bs, 1H), 7.89 (dd, 1H, J =1.5, 4.0 Hz 겹침 a bs, 1H), 7.31(dd, 1H, J = 1.4, 4.5 Hz), 7.28 (dd, J = 1.5, 4.5 Hz, 1H) 7.21(m, 2H), 7.13-7.05 (m, 3H); m/z = 270.06 (M + H). 분석 계산치. C₁₄H₁₁N₃SO: C, 62.44; H, 4.12; N, 15.6. 실험치: C, 62.31; H, 4.08; N, 15.39.

과량의 Cs ₂ CO ₃ 을 이용한 3- 페닐설파닐 -1H- 피롤로[3,2-b]피리딘 -2-카복실 산아미드 , Ia -1

기계적인 교반기, 온도 탐침, 질소 하에 환류 냉각기가 갖추어진 3-L 3구 플라스크에 NMP(1.20 L)을 첨가한다. 디페닐디설파이드 (177.8 g, 1.5 당량.), Cs₂CO₃ (351.9 g, 2.0 당량.) 및 아미드 6a-1(87.5 g, 0.54 mol)를 일부로 첨가한다. 반응혼합물을 120 ^oC에서 21시간 동안 가열한다. 반응의 진행은 다음의 조건하에 HPLC로 모니터한다 (Agilent series 1100 : Waters Symmetry C8 (5 m) 컬럼 (3.9 x 150 mm), 유속 1.0 mL/분, 구배 농도 조건: 시간(분), 물:아세토니트릴-메탄올 비율 (아세토니트릴-메탄올 1:1 용액) 0 분, 70:30; 10 분, 30:70; 15 분, 30:70; 20 분, 70:30; 25 분, 70:30; l₁ = 210 nm, l₂ = 300 nm, 유속: 1.0 mL/분 (R_T: 아미드 6a-1 = 2.1 분, 생성물 Ia-1 = 5.7 분, PhSSPh = 14.0 분, NMP = 1.9 분). 반응이 완료되지 않을 경우에 추가 Cs₂CO₃ (87.97 g, 0.5 당량.)를 첨가하고, 반응물을 120^oC에서 추가 4시간 동안 유지시킨다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 얼음물에 붇고, 1시간 동안 교반시킨다. 갈색 고체를 여과를 통하여 수득하고, 필터케이크는 물로 2회 세척하고, 6시간 동안 공기 건조시킨다. 고체를 실온에서 20% EtOAc/헵탄으로 슬러리화시켜 PhSSPh를 제거한다. 비정제된 산물의 THF 용액을 숯을 이용하여 환류하면서 1시간 동안 탈색시키고, 여과하여 밝은 갈색을 띈 고체 형태의 화합물 Ia-1을 얻는다. 화합물 Ia-1의 에탄올(12부)를 슬러리화시키고, 1시간 동안 환류시킨 후 얼음조에서 교반시키면서 냉각시킨다. 고체는 여과를 통하여 수득하고, 냉각 EtOH로 세척, 건조(40 ^oC/Hg 중 0.1)시키면, 화합물 Ia-1.을 얻는다. ¹H NMR (DMSO-d ₆) δ7.05-7.32 (m, 6H), 7.91(m, 2H), 8.12 (s, 1H, NH₂), 8.45 (dd, 1H, J = 4.5, 0.9 Hz), 12.50 (s, 1H, NH). 분석: C₁₂H₁₁N₃OS의 계산치: 62.44%C, 4.12%H, 15.60%N; 실험치: 62.31%C, 4.08%H, 15.39%N

3-(3- 플로오르페닐설파닐 )-1H- 피롤로[3,2-b]피리딘 -2-카복실 산아미드 , Ia -2

1H-피롤로[3,2-b]피리딘-2-카복실산아미드 6a-1(1.20g, 74.4 mmol)의 DMF (100 mL) 용액을 비스-(3-플로오르페닐)디설파이드 (1.90g, 1.0 당량)(일반 합성 반응식 IVb에서 설명됨)으로 처리하면 아이보리 색 고체인 화합물 Ia-2을 얻는다. (1.73g, 80.8%), 융점 235-237℃, tlc R_f = 0.49. ¹H NMR (DMSO-d ₆) δ12.52 (bs, 1H), 8.45 (dd, 1H, J =1.2, 4.5 Hz), 8.10 (bs, 1H), 7.90 (dd, 1H, J =1.2, 8.2 Hz), 7.83 (bs, 1H), 7.27 (겹침 dd, 1H, J = 4.5, 8.2 Hz 및 dd, J = 7.8, 14.0 Hz, 1H), 6.97-6.82 (m, 3H); MS Obs 288 (M + 1); LC/MS: a = 100%. 분석: 계산치. C₁₄H₁₀FN₃SO: C, 58.53; H, 3.51; N, 14.62. 실험치: C, 57.95; H, 3.54; N, 14.25.

3-(3- 클로로페닐설파닐 )-1H- 피롤로[3,2-b]피리딘 -2-카복실 산아미드 , Ia -3

1H-피롤로[3,2-b]피리딘-2-카복실산아미드 6a-1(1.20g, 74.4 mmol)의 DMF(100 mL) 용액을 비스-(3-클로로페닐)디설파이드(2.13g, 1.0 당량)(일반 합성 반응식 IVb에서 설명함)으로 처리하면, 아이보리 색 고체인 화합물 Ia-3을 얻는다(1.95g, 86.3%), 융점 246.5-248 ℃, tlc R_f = 0.49. ¹H NMR (DMSO-d ₆) δ12.54 (bs, 1H), 8.45 (dd, 1H, J =1.2, 4.5 Hz), 8.11(bs, 1H), 7.90 (dd, 1H, J =1.3, 8.3 Hz) 7.84 (bs, 1H)와 겹침 7.31(dd, 1H, J = 4.5, 8.2 Hz) 7.22 (m, 2H), 7.06-6.99 (m, 2H). 분석: 계산치. C₁₄H₁₀ClN₃SO: C, 55.36; H, 3.32; N, 13.83. 실험치: C, 54.94; H, 3.26; N, 13.62.

3-(3- 브로모페닐설파닐 )-1H- 피롤로[3,2-b]피리딘 -2- 카복실산아미드 , Ia -4

1H-피롤로[3,2-b]피리딘-2-카복실산아미드 6a-1(1.0 당량)의 DMF 용액을 비스-(3-브로모페닐)디설파이드(1.1 당량)(일반 합성 반응식 IVb에서 설명됨)으로 처리하면, 아이보리 색 고체인 화합물 Ia-4을 얻는다. ¹H NMR (DMSO-d ₆) δ12.55 (bs, 1H), 8.46 (dd, 1H, J =1.2, 4.5 Hz), 8.10 (bs, 1H), 7.91(dd, 1H, J =1.2, 8.2 Hz) 7.85 (bs, 1H)와 겹침 7.33 (dd, 1H, J = 4.7, 8.5 Hz), 7.20 (m, 2H), 7.05-7.00 (m, 2H). MS Obs 348.1(M + 1).

3-(2- 클로로페닐설파닐 )-1H- 피롤로[3,2-b]피리딘 -2-카복실 산아미드 , Ia -5

1H-피롤로[3,2-b]피리딘-2-카복실산아미드 6a-1(1.0 당량)의 DMF를 비스-(2-클로로페닐)디설파이드 (1.1 당량)(일반 합성 반응식 IVb에서 설명됨)으로 처리하면, 아이보리 색 고체인 화합물 Ia-5을 얻는다. ¹H NMR (DMSO-d ₆) δ12.61(bs, 1H), 8.46 (dd, 1H, J =1.0, 4.5 Hz), 8.09 (bs, 1H), 7.95 (d, 1H, J =8.0 Hz), 7.76 (bs, 1H), 7.49 (dd, 1H, J = 1.5, 7.5 Hz), 7.34 (dd, 1H, J = 4.5, 8.0 Hz), 7.14 (dt, 1H, J = 1.5, 7.5 Hz), 7.08 (dt, 1H, J = 1.5, 7.5 Hz), 6.49 (dd, 1H, J = 1.5, 7.5 Hz). MS Obs 304.7 (M + 1).

3-(4- 클로로페닐설파닐 )-1H- 피롤로[3,2-b]피리딘 -2-카복실 산아미드 , Ia -6

1H-피롤로[3,2-b]피리딘-2-카복실산아미드 6a-1(1.0 당량)의 DMF를 비스-(4-클로로페닐)디설파이드 (1.1 당량)(일반 합성 반응식 IVb에서 설명함)으로 처리하면 아이보리 색 고체인 화합물 Ia-6을 얻는다. 융점= 266 ℃, MS Obs 304.7 (M + 1).

3-(2,4- 디클로로페닐설파닐 )-1H- 피롤로[3,2-b]피리딘 -2-카복실 산아미드 , Ia -7

1H-피롤로[3,2-b]피리딘-2-카복실산아미드 6a-1(1.0 당량)의 DMF를 비스-(2,4-디클로로페닐)디설파이드(1.1 당량)(일반 합성 반응식 IVb에서 설명함)으로 처리하면, 아이보리 색 고체인 화합물 Ia-7을 얻는다, 융점 = 266 ℃, MS Obs 339.2 (M + 1).

3-(2- 플로오르페닐설파닐 )-1H- 피롤로[3,2-b]피리딘 -2-카복실 산아미드 , Ia -8

1H-피롤로[3,2-b]피리딘-2-카복실산아미드 6a-1(1.0 당량)의 DMF를 비스-(2-플로오르페닐)디설파이드 (1.1 당량)(일반 합성 반응식 IVb에서 설명됨)으로 처리하면 아이보리 색 고체인 화합물 Ia-8을 얻는다. ¹H NMR (DMSO-d ₆) δ12.57 (bs, 1H), 8.45 (dd, 1H, J =1.2, 4.2 Hz), 8.15 (bs, 1H), 7.90 (dd, 1H, J =1.2, 8.1 Hz) 7.84 (bs, 1H)와 겹침 7.31(dd, 1H, J = 4.5, 8.2 Hz), 7.20 (m, 2H), 6.98 (m, 1H), 6.69 (m, 1H). MS Obs 288.2 (M + 1).

3-(2,3- 디클로로페닐설파닐 )-1H- 피롤로[3,2-b]피리딘 -2-카복실 산아미드 , Ia -9

1H-피롤로[3,2-b]피리딘-2-카복실산아미드 6a-1(1.0 당량)의 DMF를 비스-(2,3-디클로로페닐)디설파이드(1.1 당량)(일반 합성 반응식 IVb에서 설명함)으로 처리하면, 아이보리 색 고체인 화합물 Ia-9을 얻는다. ¹H NMR (DMSO-d ₆) δ12.62 (bs, 1H), 8.44 (dd, 1H, J =1.2, 4.5 Hz), 8.10 (bs, 1H), 7.93 (dd, 1H, J =1.2, 8.3 Hz), 7.75 (bs, 1H), 7.35 (m, 2H), 7.07 (t, 1H, J = 8.1 Hz), 6.40 (dd, 1H, J =1.4, 8.1 Hz). MS Obs 338.1(M + 1).

3-(2- 트리플로오르메틸페닐설파닐 )-1H- 피롤로[3,2-b]피리딘 -2-카복실 산아미드 , Ia -10

1H-피롤로[3,2-b]피리딘-2-카복실산아미드 6a-1(1.0 당량)의 DMF를 비스-(2-트리플로오르메틸페닐)디설파이드(1.1 당량)(일반 합성 반응식 IVb에서 설명함)으로 처리하면, 아이보리 색 고체인 화합물 Ia-10을 얻는다. ¹H NMR (DMSO-d ₆) δ12.65 (bs, 1H), 8.47 (dd, 1H, J =1.5, 4.5 Hz), 8.15 (bs, 1H), 7.92 (dd, 1H, J =1.2, 8.2 Hz), 7.75 (bs, 겹침 dd, 2H), 7.34 (m, 3H), 6.75 (d, 1H, J = 7.8 Hz); MS Obs 338.2 (M + 1).

3-(3- 트리플로오르메틸 - 페닐설파닐 )-1H- 피롤로[3,2-b]피리딘 -2-카복실 산 , 아미드 Ia -11

1H-피롤로[3,2-b]피리딘-2-카복실산아미드 6a-1(1.0 당량)의 DMF를 비스-(3-트리플로오르메틸페닐)디설파이드 (1.1 당량)(일반 합성 반응식 IVb에서 설명함)으로 처리하면 아이보리 색 고체인 화합물 Ia-11을 얻는다. MS Obs 338.06 (M + 1).

3-(2- 아미노페닐설파닐 )-1H- 피롤로[3,2-b]피리딘 -2-카복실 산아미드 , Ia -12

1H-피롤로[3,2-b]피리딘-2-카복실산아미드 (1.0 당량) 6a-1 의 DMF를 비스-(2-아미노페닐)디설파이드 (1.1 당량)(일반 합성 반응식 IVb에서 설명함)으로 처리하면, 아이보리 색 고체인 화합물 Ia-12을 얻는다. ¹H NMR (DMSO-d ₆) δ12.29 (bs, 1H), 8.49 (dd, 1H, J =1.3, 4.5 Hz), 8.18 및 8.15 (겹침bs, 2H), 7.83 (dd, 1H, J =1.4, 8.2 Hz), 7.28 (dd, 1H, J = 4.5, 8.3 Hz), 7.15 (dd, 1H, J = 1.4, 7.8 Hz), 6.93 (m, 1H), 6.62 (d, 1H, J = 6.9 Hz), 6.39 (m, 1H), 5.74 (겹침 bs, 2H); MS Obs 288.2 (M + 1).

3-(2,5- 디클로로 - 페닐설파닐 )-1H- 피롤로[3,2-b]피리딘 -2-카복실 산아미드 , Ia -13

1H-피롤로[3,2-b]피리딘-2-카복실산아미드 6a-1(1.0 당량)의 DMF를 비스-(2,5-디클로로페닐)디설파이드 (1.1 당량)(일반 합성 반응식 IVb에서 설명함)으로 처리하면, 아이보리 색 고체인 화합물 Ia-13을 얻는다. ¹H NMR (DMSO-d ₆) δ12.68 (bs, 1H), 8.46 (dd, 1H, J =1.3, 4.5 Hz), 8.10 (bs, 1H), 7.94 (dd, 1H, J =1.2, 8.2 Hz), 7.77 (bs, 1H), 7.52 (겉보기 d, 1H, J = 8.5 Hz), 7.35 (dd, 1H, J = 4.5, 8.4 Hz), 7.20 (dd, 1H, J = 2.5, 8.5 Hz), 6.37 (겉보기 d, 1H, J = 2.5 Hz); MS Obs 338.1(M + 1).

3-(2- 메톡시 - 페닐설파닐 )-1H- 피롤로[3,2-b]피리딘 -2-카복실 산아미드 , Ia -14

1H-피롤로[3,2-b]피리딘-2-카복실산아미드 6a-1(1.0 당량) 의 DMF를 비스-(2-메톡시페닐)디설파이드 (1.1 당량)(일반 합성 반응식 IVb에서 설명)으로 처리하면 아이보리 색 고체인 화합물 Ia-14을 얻는다. ¹H NMR (DMSO-d ₆) δ12.48 (bs, 1H), 8.44 (dd, 1H, J =1.5, 4.5 Hz), 8.10 (bs, 1H), 7.90 (dd, 1H, J =1.2, 8.0 Hz), 7.60 (bs, 1H), 7.30 (m, 3H), 6.71(겉보기 t, 1H), 6.50 (겉보기 d, 1H), 3.91(s, 3H); MS Obs 300.3 (M + 1).

3-(3- 메톡시 - 페닐설파닐 )-1H- 피롤로[3,2-b]피리딘 -2-카복실 산아미드 , Ia -15

1H-피롤로[3,2-b]피리딘-2-카복실산아미드 6a-1(1.0 당량)의 DMF를 비스-(3- 메톡시페닐)디설파이드 (1.1 당량)(일반 합성 반응식 IVb에서 설명)으로 처리하면 아이보리 색 고체인 화합물 Ia-15 을 얻는다. ¹H NMR (DMSO-d ₆) δ12.51(bs, 1H), 8.46 (dd, 1H, J =1.5, 4.5 Hz), 8.10 (bs, 1H), 7.89 (dd, 1H, J =1.5, 8.3 Hz 겹침 bs, 1H), 7.32 (dd, 1H, J = 4.5, 8.2 Hz), 7.13 (겉보기 t, 1H, J = 8.0 Hz) 6.62 (m, 3H), 3.64 (s, 3H); MS Obs 300.3 (M + 1).

3-(3-아미노- 페닐설파닐 )-1H- 피롤로[3,2-b]피리딘 -2- 카복실산아미드 , Ia -16

1H-피롤로[3,2-b]피리딘-2-카복실산아미드 6a-1(1.0 당량)의 DMF를 비스-3-아미노페닐)디설파이드 (1.1 당량)(일반 합성 반응식 IVb에서 설명함)으로 처리하면, 아이보리 색 고체인 화합물 Ia-16을 얻는다. ¹H NMR (DMSO-d ₆) δ12.40 (bs, 1H), 8.44 (dd, 1H, J =1.5, 4.5 Hz), 8.10 (bs, 1H), 7.86 (dd, 1H, J = 1.5, 8.3 Hz 겹침bs, 1H), 7.28 (dd, 1H, J = 4.5, 8.2 Hz), 7.13 (겉보기 t, 1H, J = 7.8 Hz) 6.28 (m, 3H), 5.08 (bs, 2H); MS Obs 288.08 (M + 1).

3-(4-니트로- 페닐설파닐 )-1H- 피롤로[3,2-b]피리딘 -2-카복실 산아미드 , Ia -17

1H-피롤로[3,2-b]피리딘-2-카복실산아미드 6a-1(1.0 당량)의 DMF를 비스-(4-니트로페닐)디설파이드 (1.1 당량)(일반 합성 반응식 IVb에서 설명됨)으로 처리하면 아이보리 색 고체인 화합물 Ia-17을 얻는다. ¹H NMR (DMSO-d ₆) δ12.63 (bs, 1H), 8.43 (dd, 1H, J =1.5, 4.5 Hz), 8.05 (m, 3H), 7.91(m, 1H), 7.50 (bs, 1H), 7.32 (dd, 1H, J = 4.5, 8.1 Hz), 7.18 (겉보기 d, 2H, J = 9.0 Hz); MS Obs 315.05 (M + 1).

3-(3-니트로- 페닐설파닐 )-1H- 피롤로[3,2-b]피리딘 -2-카복실 산아미드 , Ia -18

1H-피롤로[3,2-b]피리딘-2-카복실산아미드 6a-1(1.0 당량)의 DMF를 비스-(3-니트로페닐)디설파이드 (1.1 당량)(일반 합성 반응식 IVb에서 설명함)으로 처리하면 아이보리 색 고체인 화합물 Ia-18을 얻는다. ¹H NMR (DMSO-d ₆) δ12.59 (bs, 1H), 8.45 (dd, 1H, J =1.5, 4.6 Hz), 8.11(bs, 1H), 7.96-7.81(m, 4H), 7.50 (m, 2H), 7.33 (dd, 1H, J = 4.5, 8.4 Hz); Obs 315.1(M + 1).

3-o- 톨일설파닐 -1H- 피롤로[3,2-b]피리딘 -2-카복실 산아미드 , Ia -19.

1H-피롤로[3,2-b]피리딘-2-카복실산아미드 6a-1(1.0 당량)의 DMF를 비스-(o-톨일)디설파이드 (1.1 당량)(일반 합성 반응식 IVb에서 설명함)으로 처리하면, 아이보리 색 고체인 화합물 Ia-19을 얻는다. : ¹H NMR (DMSO-d ₆) δ12.5 (bs, 1H), 8.41(dd, 1H, J =1.5, 4.5 Hz), 8.05 (bs, 1H), 7.90 (dd, 1H, J = 1.5, 8.3 Hz) 7.87와 겹침(bs, 1H), 7.31(m, 1H), 7.29 (m, 1H), 7.00 (m, 2H), 6.4 (m, 1H), 3.3 (s, 3H). MS Obs 284.3 (M + 1).

3-p- 톨일설파닐 -1H- 피롤로[3,2-b]피리딘 -2-카복실 산아미드 , Ia -20

1H-피롤로[3,2-b]피리딘-2-카복실산아미드 6a-1(1.0 당량)의 DMF를 비스-(p-톨일)디설파이드 (1.1 당량)(일반 합성 반응식 IVb에서 설명함)으로 처리하면, 아이보리 색 고체인 화합물 Ia-20을 얻는다. ¹H NMR (DMSO-d ₆) δ12.42 (bs, 1H), 8.44 (dd, 1H, J =1.5, 4.5 Hz), 8.10 (bs, 1H), 7.91(bs, 1H) 7.86와 겹침(dd, 1H, J = 1.5, 7.9 Hz), 7.28 (dd, 1H, J = 3.7, 8.3 Hz), 7.00 (겹침ds, 4H, J = 12.5 Hz), 3.31(s, 3H); MS Obs 284 (M + 1).

3-(3,5-디메틸- 페닐설파닐 )-1H- 피롤로[3,2-b]피리딘 -2-카복실 산아미드 , Ia -21

1H-피롤로[3,2-b]피리딘-2-카복실산아미드 6a-1(1.0 당량)의 DMF를 비스-(3,5-디메틸페닐)디설파이드 (1.1 당량)(일반 합성 반응식 IVb에서 설명함)으로 처리하면 아이보리 색 고체인 화합물 Ia-21을 얻는다. ¹H NMR (DMSO-d ₆) δ12.45 (bs, 1H), 8.45 (dd, 1H, J =1.2, 4.5 Hz), 8.12 (bs, 1H), 7.90 (dd, 1H, J =1.2, 8.0 Hz) 겹침(bs, 1H), 7.3 (dd, 1H, J = 4.5, 8.2 Hz), 6.76 (s, 1H), 6.7 (s, 2H), 2.05 (s, 6H). MS Obs 298.3 (M + 1).

3-m- 톨일설파닐 -1H- 피롤로[3,2-b]피리딘 -2-카복실 산아미드 , Ia -22

1H-피롤로[3,2-b]피리딘-2-카복실산아미드 6a-1(1.0 당량)의 DMF를 비스-(m- 톨일)디설파이드 (1.1 당량)(일반 합성 반응식 IVb에서 설명함)으로 처리하면, 아이보리 색 고체인 화합물Ia-22을 얻는다. ¹H NMR (DMSO-d ₆) δ10.2 (bs, 1H), 8.62 (dd, 1H, J =1.0, 4.4 Hz), 8.19 (bs, 1H), 7.85 (dd, 1H, J =1.3, 8.4 Hz), 7.28 (겹침 dd, 1H, J = 4.5, 8.3 Hz 및 7.24 (s, 1H), 7.1-6.9 (m, 4H), 2.22 (s, 3H). MS Obs 284 (M + 1).

3-(2-에틸- 페닐설파닐 )-1H- 피롤로[3,2-b]피리딘 -2-카복실 산아미드 , Ia -23

1H-피롤로[3,2-b]피리딘-2-카복실산아미드 6a-1(1.0 당량)의 DMF를 비스-(2-에틸페닐)디설파이드 (1.1 당량)(일반 합성 반응식 IVb에서 설명함)으로 처리하면 아이보리 색 고체인 화합물 Ia-23을 얻는다. ¹H NMR (DMSO-d ₆) δ12.5 (bs, 1H), 8.42 (dd, 1H, J =1.5, 4.4 Hz), 8.1(bs, 1H), 7.91(dd, 1H, J = 1.5, 8.1 Hz), 7.82 (bs, 1H), 7.30 (m, 1H), 7.2 (m, 1H), 7.05 (m, 1H), 6.95 (m, 1H), 6.5 (m, 1H), 2.9 (q, 2H), 1.3 (t, 3H). MS Obs 298.3 (M + 1).

3-(3- 트리플로오르메톡시 - 페닐설파닐 )-1H- 피롤로[3,2-b]피리딘 -2-카복실 산 , 아미드, Ia -24

1H-피롤로[3,2-b]피리딘-2-카복실산아미드 6a-1(1.0 당량)의 DMF를 비스-(3-트리플로오르메톡시페닐)디설파이드 (1.1 당량)(일반 합성 반응식 IVb에서 설명함) 으로 처리하면 아이보리 색 고체인 화합물 Ia-24을 얻는다. ¹H NMR (DMSO-d ₆) δ12.56 (bs, 1H), 8.45 (dd, 1H, J =1.5, 4.5 Hz), 8.12 (bs, 1H), 7.92 (dd, 1H, J =1.5, 8.3 Hz), 7.85 (bs, 1H), 7.33 (dd, 1H, J = 4.4, 8.3 Hz) 7.32겹침 (m, 1H), 7.1(m, 1H) 7.03겹침 (m, 2H). MS Obs 354.1(M + 1).

3-(퀴놀린-8- 일설파닐 )-1H- 피롤로[3,2-b]피리딘 -2-카복실 산아미드 , Ia -25

1H-피롤로[3,2-b]피리딘-2-카복실산아미드 6a-1(1.0 당량)의 DMF를 비스-(8-퀴놀일)디설파이드 (1.1 당량)(일반 합성 반응식 IVb에서 설명함)으로 처리하면 아이보리 색 고체인 화합물 Ia-25 을 얻는다, MS Obs 321.1(M + 1).

3-(피리딘-2- 설파닐 )-1H- 피롤로[3,2-b]피리딘 -2-카복실 산아미드 , Ia -26

Treat 1H-피롤로[3,2-b]피리딘-2-카복실산아미드 6a-1(1.0 당량)의 DMF를 2,2디피리딜디설파이드 (1.1 당량)(일반 합성 반응식 IVb에서 설명함)으로 처리하면 아이보리 색 고체인 화합물 Ia-26을 얻는다. ¹H NMR (DMSO-d ₆) δ12.51(bs, 1H), 8.42 (dd, 1H, J =1.4, 4.5 Hz), 8.34 (dd, 1H, J =1, 4 Hz) 8.06 (bs, 1H), 7.89 (dd, 1H, J =1.4, 8.3 Hz) 7.82와 겹침(bs, 1H), 7.53 (dd, 1H, J = 1.8, 7.5 Hz), 7.30 (dd, 1H, J = 4.3, 8.2 Hz), 7.10 (dd, 1H, J = 4.9, 7.4 Hz), 6.74 (d, 1H, J = 8.1 Hz). MS Obs 271.1(M + 1).

3-(피리딘-4- 설파닐 )-1H- 피롤로[3,2-b]피리딘 -2-카복실 산아미드 , Ia -27

1H-피롤로[3,2-b]피리딘-2-카복실산아미드 6a-1(1.0 당량)의 DMF를 4,4'-디피리딜디설파이드 (Aldrithiol 4) (1.1 당량)(일반 합성 반응식 IVb에서 설명함)으로 처리하면, 아이보리 색 고체인 화합물 Ia-27을 얻는다. ¹H NMR (DMSO-d ₆) δ12.5 (bs, 1H), 8.44 (dd, 1H, J =1.5, 4.5 Hz), 8.27 (dd, 2H, J =1.5, 4.5 Hz), 8.07 (bs, 1H), 7.93 (dd, 1H, J =1.4, 8.3 Hz), 7.73 (bs, 1H), 7.33 (dd, 1H, J = 4.5, 8.2 Hz), 6.94 (dd, 2H, J = 1.5, 4.5 Hz). MS Obs 271.07 (M + 1).

3-(티오펜-2- 일설파닐 )-1H- 피롤로[3,2-b]피리딘 -2-카복실 산아미드 , Ia -28

1H-피롤로[3,2-b]피리딘-2-카복실산아미드 6a-1(1.0 당량)의 DMF를 2,2'-비스(티에닐)디설파이드(1.1 당량) (일반 합성 반응식 IVb에서 설명함)으로 처리하면 아이보리 색 고체인 화합물 Ia-28을 얻는다. ¹H NMR (DMSO-d ₆) δ12.34 (bs, 1H), 8.50 (d, 1H, J = 4.4 Hz), 8.21(bs, 1H), 8.00 (bs, 1H), 7.83 (d, 1H, J = 8.3 Hz), 7.42 (d, 1H, J = 5.3 Hz), 7.26 (dd, 2H, J = 4.5, 8.2 Hz), 6.92 (dd, 1H, J = 3.6, 5.2 Hz). MS Obs 276.01(M + 1).

1- 메틸 -3- 페닐설파닐 -1H- 피롤로[3,2-b]피리딘 -2-카복실 산메틸아미드 , Ia -29

3-페닐설파닐-1H-피롤로[3,2-b]피리딘-2-카복실산메틸아미드 Ia-33 (1.0 당량) 의 DMF를 디메틸설페이트(1.5 당량)(일반 합성 반응식 V에서 설명함)으로 처리 하면, 아이보리 색 고체인 화합물 Ia-29 을 얻는다. MS Obs 298.09 (M + 1).

1- 메틸 -3- 페닐설파닐 -1H- 피롤로[3,2-b]피리딘 -2-카복실 산메틸아미드 , Ia -29

메틸 요오드(20 mg, 0.164 mmol)를 실온에서 3-페닐설파닐-1H-피롤로[3,2-b]피리딘-2-카복실산메틸아미드(Ia-33, 47 mg, 0.166 mmol), Cs₂CO₃(65 mg, 0.2 mmol) 및 피리딘 (1.5 ml) 혼합물에 첨가한다. 밀봉된 용기 내에서 반응물을 60^oC에서 3시간 동안 가열한다. 추가 메틸 요오드 (20 mg)를 첨가하고, 반응의 진행은 크로마토그래피를 이용하여 모니터한다. 반응이 완료되면, 혼합물을 냉각시키고, 농축시켜 건조시키고, 소금물로부터 에틸아세테이트로 추출한다. 유기 상을 분리하여 농축시킨다. 잔류물을 2회 섬광 크로마토그래피하여 정제한다(SiO_{2 ,} 3 gm, MeOH 0-4%의 DCM으로 용출; 및 SiO_{2 ,} 1 gm, 헵탄:DCM, 1:1)으로 용출하여 흰색 고체인 상기 제목의 화합물(10 mg)을 얻고, ¹H NMR (CDCl₃ ) 및 LC-MS (m/e = 297)는 상기 제목 화합물의 구조에 일치한다.

3-(3- 트리플로오르메티옥시페닐설파닐 -1H- 피롤로[3,2-b]피리딘 -2-카복실 산메틸아미드 , Ia -30.

1H-피롤로[3,2-b]피리딘-2-카복실산메틸아미드 6a-2 (1.0 당량)의 DMF를 비스-(3-트리플로오르메톡시-페닐)디설파이드 (1.1 당량)(일반 합성 반응식 IVb에서 설명)으로 처리하면 아이보리 색 고체인 화합물 Ia-30을 얻는다, MS Obs 368.03 (M + 1).

3-(3- 클로로페닐설파닐 -1H- 피롤로[3,2-b]피리딘 -2-카복실 산메틸아미드 , Ia -31

1H-피롤로[3,2-b]피리딘-2-카복실산메틸아미드 6a-2 (1.0 당량)의 DMF를 비스-(3-클로로페닐)디설파이드 (1.1 당량)(일반 합성 반응식 IVb에서 설명함)으로 처리하면 아이보리 색 고체인 화합물 Ia-31을 얻는다, MS Obs 318.03 (M + 1).

3-(3- 플로오르페닐설파닐 -1H- 피롤로[3,2-b]피리딘 -2- 카복실산메틸아미드 , Ia -32

1H-피롤로[3,2-b]피리딘-2-카복실산메틸아미드 6a-2 (1.0 당량)의 DMF를 비스-(3-플로오르페닐)디설파이드 (1.1 당량)(일반 합성 반응식 IVb에서 설명함)으로 처리하면, 아이보리 색 고체인 화합물 Ia-32을 얻는다, MS Obs 305.05 (M + 1).

3- 페닐설파닐 -1H- 피롤로[3,2-b]피리딘 -2-카복실 산메틸아미드 , Ia -33

1H-피롤로[3,2-b]피리딘-2-카복실산메틸아미드 6a-2 (1.0 당량) 의 DMF를 비스-(페닐)디설파이드 (1.1 당량)(일반 합성 반응식 IVb에서 설명함)으로 처리하면 아이보리 색 고체인 화합물 Ia-33을 제공한다. ¹H NMR (DMSO-d ₆) δ12.48 (bs, 1H), 8.45 (dd, 1H, J =1.5, 4.4 Hz), 8.11(bs, 1H), 7.89 (dd, 1H, J =1.5, 4.0 Hz 겹침 bs, 1H), 7.31(dd, 1H, J = 1.4, 4.5 Hz), 7.28 (dd, J = 1.5, 4.5 Hz, 1H) 7.21(m, 2H), 7.13-7.05 (m, 3H), 2.9 (d, 3H, J = 4.2 Hz); MS Obs 284.06 (M + 1).

1- 메틸 -3- 페닐설파닐 -1H- 피롤로[3,2-b]피리딘 -2-카복실 산아미드 , Ia -34

3-페닐설파닐-1H-피롤로[3,2-b]피리딘-2-카복실산아미드 Ia-1(1.0 당량)의 DMF를 디메틸설페이트 (1.5 당량) (일반 합성 반응식V에서 설명함)으로 처리하면, 아이보리 색 고체인 화합물 Ia-34을 얻는다, MS Obs 284.06 (M + 1).

1- 메틸 -3- 페닐설파닐 -1H- 피롤로[3,2-b]피리딘 -2-카복실 산아미드 , Ia -34 (반응식 I, 단계g)

메틸 요오드(20 mg, 0.14 mmol)를 실온에서 3-페닐설파닐-1H-피롤로[3,2-b]피리딘-2-카복실산아미드 (Ia-1, 27 mg, 0.1 mmol), Cs₂CO₃ (43 mg, 0.13 mmol)의 피리딘 (0.5 ml) 혼합물에 첨가한다. 밀봉된 용기 내에서 반응물을 80C에서 15분동안 가열한다. 혼합물을 냉각시키고, 물로부터 에틸아세테이트로 추출한다. 유기 용액을 분리하여 기화시킨다. 잔류물(33 mg)을 섬광 크로마토그래피하여 정제하여(SiO_2, 3 gm, MeOH 0-4%의 DCM으로 용출) 흰색 고체인 상기 제목의 화합물(11 mg)을 얻고, ¹H NMR (CDCl₃ ) 및 LC-MS (m/e = 283)는 상기 제목 화합물의 구조에 일치한다.

3-(3- 플로오르 - 페닐설파닐 )-5- 메톡시 -1H- 피롤로[3,2-b]피리딘 -2-카복실 산아미드 , Ia -35

5-메톡시-1H-피롤로[3,2-b]피리딘-2-카복실산아미드 (1.0 당량, 상응하는 에틸에스테르로부터 제조함, Frydman, B.; Reil, S. J.; Boned, J.; Rapoport, H. J. Org. Chem. 1968, 33, 3762-6)의 DMF를 비스-(3-플로오르페닐)디설파이드 (1.1 당량)(일반 합성 반응식 IVb에서 설명함)으로 처리하면 아이보리 색 고체인 화합물 Ia-35을 얻는다, MS Obs 318.03 (M + 1).

3-(3- 메톡시 - 페닐설파닐 )-5- 메톡시 -1H- 피롤로[3,2-b]피리딘 -2-카복실 산아미드 , Ia -36

5-메톡시-1H-피롤로[3,2-b]피리딘-2-카복실산아미드 (1.0 당량, 상응하는 에틸에스테르에서 제조함, Frydman, B.; Reil, S. J.; Boned, J.; Rapoport, H. J. Org. Chem. 1968, 33, 3762-6)의 DMF을 비스-(3-메톡시페닐)디설파이드 (1.1 당량)(일반 합성 반응식 IVb에서 설명함)으로 처리하면, 아이보리 색 고체인 화합물 Ia-36을 얻는다, MS Obs 330.01(M + 1).

3- 페닐설파닐 -1-프로필-1H- 피롤로[3,2-b]피리딘 -2-카복실 산아미드 , Ia -37

일반 반응식 V에 따라 Cs₂CO₃ (1.5 당량.) 존재하에 3-페닐설파닐-1H-피롤 로[3,2-b]피리딘-2-카복실산아미드 Ia-1(1.0 당량)의 DMF를 프로필요오드 (1.5 당량)로 처리하여 크로마토그래피후에 아이보리 색 고체인 화합물 Ia-37을 얻는다, MS Obs 312.06 (M + 1).

3- 페닐설파닐 -1-프로필-1H- 피롤로[3,2-b]피리딘 -2- 카복실산아미드 , Ia -37 (반응식 I, 단계 g)

실온에서 1-브로모프로판(19 mg, 0.154 mmol)을 3-페닐설파닐-1H-피롤로[3,2-b]피리딘-2-카복실산아미드(Ia-1, 31.5 mg, 0.12 mmol), Cs₂CO₃ (60 mg, 0.185 mmol)의 피리딘 (0.5 ml)혼합물에 첨가한다. 밀봉된 용기 내 반응물을 80^oC에서 1시간 동안 가열한다. 혼합물을 냉각시키고, 물로부터 에틸아세테이트로 추출한다. 유기상을 분리하고, 기화시킨다. 잔류물(33 mg)은 섬광 크로마토그래피(SiO_{2 ,} 2 gm, 헵탄: DCM으로 용출, 이어서 MeOH 0-4%의 DCM으로 용출)하여 정제하면 흰색 고체인 상기 제목의 화합물(11.5 mg)을 얻는다. ¹H NMR(CDCl₃) 및 LC-MS (m/e = 311)는 상기 제목 화합물의 구조에 일치한다.

피롤로[3,2-c]인돌 (5- 아자인돌 )2-( 디에톡시메틸 )-1H- 피롤로[3,2-c]피리딘 -1-카복실산1,1-디메틸에틸에스테르, 8b-1(반응식 3, 단계 h)

(3-요오드-피리딘-4-일)카르바민산 1,1-디메틸에틸에스테르(13.3 g, 41.56 mmol, Darnbrough, Shelley; Mervic, Miljenko; Condon, stephen M.; Burns, Christopher J. Synthetic Communications (2001) 31(21), 3273-3280), 3,3-디에톡시-1-프로핀 (5.96 ml, 41.56 mmol), 트리에틸아민 (23 ml, 166 mmol), 디클로로비스(트리페닐-포스핀)팔라디움(II)(1.46 g, 2.08 mmol) 및 요오드화 구리 (237mg, 1.25mmol)의 건 DMF 용액을 아르곤 하에서 3시간 동안 90 ℃로 가열한다. 반응 혼합물을 70 ℃로 냉각시키고, DBU (12.5ml, 83.12 mmol)를 첨가한다. 반응물을 70℃에서 3시간 동안 교반시키고, 그 다음 실온에서 하룻밤 동안 교반시킨다. 반응 혼합물을 EtOAc에 넣고, 물(2x) 및 소금물로 세척하고, MgSO₄상에서 건조시키고, 여과 및 농축시키면, 오일 형태의 상기 제목의 화합물을 얻는다. 오일을 섬광 크로마토그래피하여 정제하면(실리카, 10-20% EtOAc/n-헵탄으로 용출), 맑은 오일 형태의 상기 제목의 화합물 9.8 g을 얻는다. tlc (실리카, 30% EtOAc/헵탄, R_f = 0.30).

1H- 피롤로[3,2-c]피리딘 -2- 카보옥사알데히드 , 9b-1(반응식 3, 단계 i)

2-(디에톡시메틸)-1H-피롤로[3,2-c]피리딘-1-카복실산1,1-디메틸에틸에스테르(8b-1, 9.8 g, 30.6 mmol)의 100ml THF 용액에, 6ml 농축 HCl을 첨가한다. 실온에서 반응 혼합물을 20시간 동안 교반시키고, 포화 중탄산 나트륨 용액으로 염기화시키고, EtOAc에 붇고, 포화 중탄산 나트륨 및 소금물로 세척시키고, 유기상을 MgSO₄상에서 건조시키고, 여과시키고, 농축시키면, 고체로 된 2-포밀-1H-피롤로[3,2-c]피리딘-1-카복실산1,1-디메틸에틸에스테르 및 1H-피롤로[3,2-c]피리딘-2- 카르복사알데히드 9b-1 혼합물을 얻는다. 혼합물을 섬광 크로마토그래피(실리카, 1-3% MeOH/CH₂Cl₂)를 통하여 분리하면 오일 형태의 2-포밀-1H-피롤로[3,2-c]피리딘-1-카복실산1,1-디메틸에틸에스테르(5.0 g)와 그을린 색의 고체 형태의 1H-피롤로[3,2-c]피리딘-2-카르복사알데히드 9b-1(1.0 g)을 얻는다. TFA (5.0 mL)를 2-포밀-1H-피롤로[3,2-c]피리딘-1-카복실산1,1-디메틸에틸에스테르(5.0 g, 20.3 mmol)의 250 ml 디클로로메탄 용액에 점적한다. 환류시키면서 반응 혼합물을 3시간 가열하고, 잔류물을 300 ml EtOAc으로 희석시키고, 포화 중탄산 나트륨 용액(3x) 및 소금물로 세척하고, 건조시키고(MgSO₄), 여과 및 농축시키면, 순수 고체인 1H-피롤로[3,2-c]피리딘-2-카르복사알데히드 9b-1(2.24 g)를 얻는다.

1H- 피롤로[3,2-c]피리딘 -2- 카복실산메틸 에스테르, 5b-1(반응식 3, 단계 j)

0 용액인 1H-피롤로[3,2-c]피리딘-2-카르복사알데히드 (9b-1, 3.24g, 22.19 mmol)의 메탄올에 아르곤 하에서 시아나이드 나트륨(5.44g, 111 mmol) 및 이산화 망간 (9.65g, 111mmol)을 첨가한다. 5시간 동안 반응 혼합물을 교반시키고, Celite 를 통하여 여과시키고, 500ml EtOAc으로 희석시킨다. 유기 층을 물(2x) 및 소금물로 희석시키고, 탄산 나트륨상에서 건조시키고, 여과 및 농축시키면 순수 그을린 색의 고체인 상기 제목의 화합물(3.27 g)을 얻는다. 에틸에스테르 4a-1으로부터 합성 화합물 6a-1의 상기 설명한 반응식들 중 하나를 이용하여 화합물 5b-1로부터 1H-피롤로[3,2-c]피리딘-2-카복실산아미드 6b-1을 제조한다.

1H- 피롤로[3,2-c]피리딘 -2-카복실 산아미드 , 6b-1( R ₄ =H, 반응식 1 , 단계 a-c, e)

화합물 1a-1으로부터 2-메틸-3-니트로-피리딘 유사체 2a-1 의 이성체 합성에서 설명된 것과 같이 3-클로로-4-니트로-피리딘 1b-1 으로부터 3-메틸-4-니트로-피리딘 (2b-1)을 만든다. 화합물 2a-1으로부터 화합물 3a-1을 만드는 반응식에서 설명된 것 중 하나를 이용하여, 화합물 2b-1으로부터 2-하이드록시-3-(4-니트로-피리딘-3-일)-아크릴산에스테르(3b-1)를 만든다. 화합물 3a-1에서 화합물 4a-1를 만드는 상기 설명된 반응식중 하나를 이용하여 3b-1로부터 1H-피롤로[3,2-c]피리딘-2-카복실산에틸에스테르, 4b-1를 만든다. 화합물 4a-1에서 합성 화합물 6a-1를 만드는 상기 설명된 반응식 중 하나를 이용하여, 4b-1로부터 1H-피롤로[3,2-c]피리딘-2-카복실산아미드 6b-1를 만든다.

3- 페닐설파닐 -1H- 피롤로[3,2-c]피리딘 -2-카복실 산아미드 , Ib -1

1H-피롤로[3,2-c]피리딘-2-카복실산아미드 6b-1(1.0 당량)의 DMF(100 mL)를 디페닐디설파이드 (1.1 당량)(일반 반응식 IVb에서 설명된)으로 처리하면 아이보리 색 고체인 화합물 Ib-1을 얻는다: ¹H NMR (DMSO-d ₆) δ12.48 (bs, 1H), 8.70 (s, 1H), 8.29 (d, J = 5.8 Hz, 1H), 8.04 (bs, 1H), 7.76 (bs, 1H), 7.44 (dd, J = 1.1, 5.7 Hz, 1H), 7.26 (m, 2H), 7.14 (m, 3H); m/z = 270.1(M + H).

3-(3- 플로오르 - 페닐설파닐 -1H- 피롤로[3,2-c]피리딘 -2-카복실 산아미드 , Ib -2

1H-피롤로[3,2-c]피리딘-2-카복실산아미드 6b-1(1.0 당량)의 DMF (100 mL)를 비스-(3-플로오르페닐)디설파이드 (1.1 당량)(일반 반응식 IVb에서 설명함)으로 처리하면 아이보리 색 고체인 화합물 Ib-2을 얻는다: ¹H NMR (DMSO-d ₆) δ12.63 (bs, 1H), 8.71(s, 1H), 8.31(d, J = 5.8 Hz, 1H), 8.06 (bs, 1H), 7.74 (bs, 1H), 7.46 (d, J = 5.8 Hz, 1H), 7.3 (m, 1H), 6.99-6.89 (겹침 m, 3H); m/z = 288.06 (M + 1).

3-(4- 클로로 - 페닐설파닐 -1H- 피롤로[3,2-c]피리딘 -2-카복실 산아미드 , Ib -3

1H-피롤로[3,2-c]피리딘-2-카복실산아미드 6b-1(1.0 당량)의 DMF (100 mL)를 비스-(4-클로로페닐)디설파이드 (1.1 당량)(일반반응식 IVb에서 설명함)으로 처리하면 아이보리 색 고체인 화합물 Ib-3을 얻는다: ¹H NMR (DMSO-d ₆) δ12.61(bs, 1H), 8.71(bs, 1H), 8.30 (d, 1H, J = 4.5 Hz), 8.07 (bs, 1H), 7.76 (bs, 1H), 7.45 (d, 1H, J = 5.7 Hz), 7.32 (d, 2H, J = 8.7 Hz), 7.12 (d, 2H, J = 8.5 Hz), m/z = 304 (M + 1).

피롤로[2,3-c]인돌 (6- 아자인돌 )

1H- 피롤로[2,3-c]피리딘 -2- 카복실산아미드 , 6c-1의 제조 ( R ₄ =H, 반응식 1, 단계 a-c, e)

화합물 1a-1에서 이성체 2-메틸-3-니트로-피리딘 유사체 2a-1를 합성하는 상기 설명된 반응식과 같이, 4-클로로-3-니트로-피리딘 1c-1 로부터 4-메틸-3-니트로-피리딘 (2c-1) 를 만든다. 화합물 2a-1에서 합성 화합물 3a-1를 만드는 상기 설명된 반응식중 하나를 이용하여, 화합물 2c-1로부터 2-하이드록시-3-(3-니트로-피리딘-4-일)-아크릴산에스테르(3c-1)를 만든다. 화합물 3a-1에서 합성 화합물 4a-1를 만드는 상기 설명된 반응식 중 하나를 이용하여, 화합물 3c-1로부터 1H-피롤로[2,3-c]피리딘-2-카복실산에틸에스테르(4c-1)를 만든다. 화합물 4a-1에서 합성 화합물 6a-1를 만드는 상기 설명된 반응식 중 하나를 이용하여, 화합물 4c-1로부터 1H-피롤로[2,3-c]피리딘-2-카복실산아미드 6c-1를 만든다.

3- 페닐설파닐 -1H- 피롤로[2,3-c]피리딘 -2-카복실 산아미드 , Ic -1

1H-피롤로[2,3-c]피리딘-2-카복실산아미드 6c-1(1.0 당량)의 DMF(100 mL)에 (디페닐)디설파이드 (1.0 당량)(일반 반응식 IVb에서 설명한 것과 같은)을 첨가하여 그을린 결정 고체 형태의 화합물 Ic-1을 제공한다: ¹H NMR (DMSO-d ₆) δ12.4 (bs, 1H), 8.86 (s, 1H), 8.18 (m, 2H), 7.84 (bs, 1H), 7.42 (d, J = 5.5 Hz, 1H), 7.24 (m, 2H), 7.14 (m, 1H), 7.03 (d, 8.3 Hz, 2H); m/z = 270.1(M + H).

3- 벤젠설포닐 -1H- 피롤로[2,3-c]피리딘 -2-카복실 산아미드 , Ic -2

3-페닐설파닐-1H-피롤로[2,3-c]피리딘-2-카복실산아미드 6c-1(1.0 mmol)를H₂O₂ (30% w/v, 131 , 2.5 mmol) 및 Na₂CO₃ (212 mg, 2.0 mmol)으로 처리한다. 실온에서 16시간 동안 교반시키고, 반응을 H₂O로 종료시키고, EtOAc로 추출한다. 추출물을 소금물로 세척하고, 유기상을 건조시키고(MgSO₄), 농축시키면, 아이보리 색 고체인 화합물 Ic-2을 얻는다; MS Obs 303 (M + 1).

3-(3- 플로오르 - 페닐설파닐 )-1H- 피롤로[2,3-c]피리딘 -2-카복실 산아미드 , Ic -3

1H-피롤로[2,3-c]피리딘-2-카복실산아미드 6c-1(1.0 당량)의 DMF (100 mL)를 비스-(3-플로오르페닐)디설파이드 (1.0 당량)(일반반응식 IVb에서 설명함)으로 처리하면 그을린 고체인 화합물 Ic-3을 얻는다: ¹H NMR (DMSO-d ₆) δ12.77 (bs, 1H), 8.87 (s, 1H), 8.2 (d, J = 5.2 Hz, 1H) 8.13와 부분적으로 겹침 (bs, 1H), 7.81(bs, 1H), 7.42 (d, J = 5.5 Hz, 1H), 7.26 (m, 1H), 6.96 (m, 1H), 6.84 (m, 2H); m/z = 288.04 (M + H).

3-(3- 메톡시 - 페닐설파닐 )-1H- 피롤로[2,3-c]피리딘 -2-카복실 산아미드 , Ic -4

1H-피롤로[2,3-c]피리딘-2-카복실산아미드 6c-1(1.0 당량)의 DMF (100 mL)를 비스-(3-메톡시페닐)디설파이드 (1.0 당량)(일반 반응식 IVb에서 설명함)으로 처리 하면, 그을린 고체인 화합물 Ic-4을 얻는다: ¹H NMR (DMSO-d ₆) δ12.8 (bs, 1H), 8.89 (s, 1H), 8.2 (d, J = 5.3 Hz, 1H) 8.19 와 겹침(bs, 1H), 7.81(bs, 1H), 7.41(d, J = 5.4 Hz, 1H), 7.19 (m, 1H), 6.61(s, 1H), 6.56와 부분적으로 겹침 (m, 2H), 3.65 (s, 3H); m/z = 300.1(M + H).

3-(3- 클로로 - 페닐설파닐 )-1H- 피롤로[2,3-c]피리딘 -2-카복실 산아미드 , Ic -5

1H-피롤로[2,3-c]피리딘-2-카복실산아미드 6c-1(1.0 당량)의 DMF (100 mL)를 비스-(3-클로로페닐)디설파이드 (1.0 당량)(일반 반응식 IVb에서 설명함)으로 처리하면 아이보리 색 고체인 화합물 Ic-5을 얻는다: ¹H NMR (DMSO-d ₆) δ12.8 (bs, 1H), 8.87 (s, 1H), 8.2 (d, J = 5.3 Hz, 1H) 8.17와 겹침(bs, 1H), 7.82 (bs, 1H), 7.41(d, J = 5.4 Hz, 1H), 7.2 (m, 2H), 7.05 (s, 1H), 6.95 (d, J = 7.3 Hz, 1H); m/z = 304 (M + H).

3-(2-트리플로오르메틸-페닐설파닐)-1H-피롤로[2,3-c]피리딘-2-카복실산아미드, Ic-6

1H-피롤로[2,3-c]피리딘-2-카복실산아미드 6c-1(1.0 당량)의 DMF (100 mL)를 비스-(2-트리플로오르메틸디페닐)디설파이드 (1.0 당량)(일반 반응식 IVb에서 설명함)으로 처리하면 아이보리 색 고체인 화합물 Ic-6을 얻는다: ¹H NMR (DMSO-d ₆) δ12.9 (bs, 1H), 8.9 (bs, 1H), 8.19 (m, 2H), 7.79 (m, 1H), 7.33 (m, 2H), 7.46 (d, J = 5.5 Hz, 1H), 7.14 (m, 1H), 6.75 (dd, J = 1.3, 7.5 Hz, 1H); m/z = 338 (M + H).

3-(2- 트리플로오르메톡시 - 페닐설파닐 )-1H- 피롤로[2,3-c]피리딘 -2-카복실 산아미드 , Ic -7

1H-피롤로[2,3-c]피리딘-2-카복실산아미드 6c-1(1.0 당량)의 DMF (100 mL)를 비스-(2-트리플로오르메톡시페닐)디설파이드 (1.0 당량)(일반 반응식 IVb에서 설명함)으로 처리하면 그을린 고체인 화합물 Ic-7을 얻는다: ¹H NMR (DMSO-d ₆) δ12.8 (bs, 1H), 8.89 (s, 1H), 8.2 (d, J = 5.3 Hz, 1H) 8.14와 겹침 (bs, 1H), 7.8 (bs, 1H), 7.36 (m, 2H), 7.1(dd, J = 1.0, 8.3 Hz, 1H), 6.98 (m, 2H); m/z = 354 (M + H).

3-(2- 메톡시 - 페닐설파닐 )-1H- 피롤로[2,3-c]피리딘 -2-카복실 산아미드 , Ic -8

1H-피롤로[2,3-c]피리딘-2-카복실산아미드 6c-1(1.0 당량)의 DMF (100 mL)를 (2-메톡시-디페닐)디설파이드 (1.0 당량)(일반 반응식 IVb에서 설명함)으로 처리하면 아이보리 색 고체인 화합물 Ic-8을 얻는다: ¹H NMR (DMSO-d ₆) δ12.40 (bs, 1H), 8.89 (bs, 1H), 8.3-8.16 (m, 1H), 7.86 (s, 1H) 7.77와 겹침 (m, 1H), 7.46 (d, J = 5.5 Hz, 1H), 7.14 (m, 1H), 7.03 (dd, J = 1.0, 8.3 Hz, 1H), 6.75 (dd, J = 1.3, 7.5 Hz, 1H), 6.50 (dd, J = 1.5, 7.8 Hz, 1H), 3.89 (s, 3H); m/z = 300.1(M + H).

3-(피리딘-2- 설파닐 )-1H- 피롤로[2,3-c]피리딘 -2-카복실 산아미드 , Ic -9

1H-피롤로[2,3-c]피리딘-2-카복실산아미드 (1.0 당량)의 DMF(100 mL)에 2,2'-디피리딜디설파이드(알드리티올 2, 1.1 당량)(일반 반응식 IVb에서 언급함)을 첨가하면 아이보리 색 고체인 화합물 Ic-9을 얻는다: ¹H NMR (DMSO-d ₆) δ12.75 (bs, 1H), 8.86 (s, 1H), 8.35 (dd, 1H, J =14, 4.5 Hz), 8.19 (dd, 1H, J =1, 4 Hz), 8.1(bs, 1H), 7.85 (bs, 1H), 7.54 (dd, 1H, J = 1.8, 7.5 Hz), 7.42 (d, J = 5.5 Hz, 1H), 7.10 (dd, 1H, J = 4.9, 7.4 Hz), 6.74 (d, 1H, J = 8.1 Hz), m/z = 271.1(M + H).

생물학적 실시예

CK1 ε저해제 스크리닝을 위한 카제인 키나제 입실론 ³³ P-ATP 필터-플레이트 검사

목적: 본 검사는 시험관내(in vitro ) ³³P-ATP 여과 검사를 이용하여 카제인 키나제 1ε 효소에 의해 기질 카제인의 인산화 반응을 저해하는 화합물의 효과를 측정한다. 화합물을 5가지 농도에서 이중 시험하여 10 마이크로몰 농도에서 IC₅₀ 값 또는 저해율(%)를 얻고, 이는 표 4에 정리하였다.

재료:

장비:

벡크맨 바이오맥 2000 액체 핸들링 로봇

벡크맨 멀티맥 96 자동화 96 채널 피펫

밀리포어 진공 매니폴드 베이직 키트 # MAVM0960R

티터택 멀티드롭 액체 분배기

팩카드 탑카운트 NXT 액체 신틸레이션 카운터

플레이트:

코스타 EIA/RIA 플레이트 #9018

팔콘 96 웰 U 바닥 폴리스티렌 플레이트 #353910

밀리포어 멀티스크린 96 웰 여과 플레이트 #MAPHNOB50

밀리포어 멀티스크린 탑카운트 어댑터 플레이트 #SE3M203V6

화학물질:

EGTA(시그마 #E-3889)

카제인 (데포스포릴화된 것)(시그마 #C-4032)

ATP (시그마 #A-7699)

DTT (피셔 버이오테크 #BP1725)

트리클로로아세트산 (시그마 #T-6399)

-³³P-ATP 1mCi / 37MBq ( 퍼킨 엘머 라이프 사이언스 #NEG-602H)

효소:

아벤티스 파마슈티칼즈 인크(프랑스)에서 실시한 발효 및 정제 공정에 의해 수득된 카제인 키나제 1ε최종 농도 0.58mg/ml. 이 효소는 - 80^oC에서 100㎕ 양으로 저장.

화합물:

테스트용 화합물은 100% DMSO에 용해된 냉동 상태의 10mM 화합물 원액으로 공급받음.

검사 조건:

웰 당 최종 전체 검사 용적은 다음과 같이 50㎕로 맞춘다:

5 ㎕ 희석된 화합물 원액(10, 1, 0.1, 0.01, 0.001μM),

5 ㎕ 데포스포릴화된 카제인 최종 농도 0.2㎍/mL,

20 ㎕ CK1ε 최종 농도 3 ng/㎕, 및

20 ㎕의

-³³P-ATP 최종 농도 0.02 μCi/mL와 혼합된 냉 ATP(최종 10μM).

방법:

1. 500 mL의 새로 검사 완충액을 만든다: 50mM 트리스 pH 7.5, 10mM MgCl₂, 2 mM DTT 및 1 mM EGTA

2. 평가할 화합물들은 10mL의 10㎕ 원액(100% DMSO에 용해된 상태)으로 수득한다. 바이오맥 2000 액체 취급 로보트를 이용하여, 연속 희석하여 10, 1, 0.1, 0.01, 0.001 μM의 최종 화합물 희석액을 얻고, 팔콘 U 자형 바닥 플레이트에 5mL 를 첨가한다. 일반적으로 8가지 화합물들을 96 웰 플레이트에서 검사하는데, 컬럼 1과 12는 대조 웰로 사용한다. 통상의 스크리닝 검사는 32가지 화합물에서 시행되는데, 4개 검사 플레이트이다.

3. 검사 플레이트 맵은 다음과 같은 패턴으로 셋업한다. Ck1ePlate Map . xls

4. 일단 5 ㎕ 화합물을 지적한 바와 같이 첨가하고, 5㎕의 데포스포릴화된 카제인(증류된 H₂0에 용해됨)(0.2㎍/mL) 및 20㎕ CK1ε(3ng/㎕)을 적정 웰에 첨가한다.

5. 최종적으로 20㎕

-³³P-ATP (0.02μCi/㎕) /10μM 냉각 ATP를 첨가한다(대략 웰 당 2x10⁶ CPM의 양에 상응한다).

6. 상기 50㎕ 반응 용적을 포함하는 팔콘 U-자형 바닥 검사 플레이트를 회전시키고, 2시간 동안 실온에서 배양한다.

7. 2시간이 경과되는 때, 65㎕ 얼음으로 냉각시킨 2mM 냉각 ATP (검사 완충액으로 만듬)을 벡크맨 멀티맥을 이용하여 검사 플레이트에 첨가함으로써 반응을 중단시킨다.

8. 동시에 25㎕ 100% 얼음으로 냉각시킨 TCA(증류수로 제조)을 밀리포어 MAPH 여과 플레이트의 메칭 챔버에 첨가한다.

9. 손으로 잡고 사용하는 8-채널 피펫을 이용하여, 100㎕ 반응 혼합물을 팔콘 U-자형 바닥 플레이트로부터 밀리포어 MAPH 필터 플레이트(TCA로 미리 적셔 놓은)으로 옮긴다.

10. 밀리포어 MAPH 필터 플레이트를 부드럽게 혼합시키고, 실온에서 적어도 30분간 방치하여 단백질을 침전시킨다.

11. 30분 후에, 여과 플레이트를 밀리포어 진공 매니폴드에 위치시키고, 8mm이하의 Hg에서 여과시켜, MAPH 필터가 더 높은 진공 세팅에서 "공기 차단" 되도록 한다.

12. 여과 플레이트를 연속하여 세척하고, 2x150㎕ 20% TCA, 2x150 ㎕ 10% TCA, 2x150㎕ 5% TCA (웰당 900㎕, 플레이트당 총 6회 세척)로 여과시킨다.

13. 플레이트를 실온에서 하룻밤 동안 건조시킨다. 다음날, 40㎕ 팩카드 마이크로신트-20 신틸레이션 유체를 웰에 티터택 멀티드롭 분배기를 이용하여 첨가하고; 플레이트를 밀봉하고, 팩카드 탑카운트 NXT 신틸레이션 카운터(웰당 CPM 값을 확인함)를 이용하여 웰 당 2분간 카운터한다.

계산:

1. 분당 카운터(CPM) 자료를 확인하여, 적절한 데이터 계산 및 보관용 데이터베이스(IDBS사의 액티비티 베이스 버젼 5.0)에 옮긴다.

2. 각 플레이트의 컬럼 1은 임의 저해 화합물 없이 효소의 전체 인산화반응 활성을 반영하여, 100%로 나타낸다. 컬럼 12는 임의 저해 화합물 및 효소 없이 비-특이적인 인산화반응/보유 방사능 활성을 나타낸다. 일반적으로 전체 CPMs의 약 1%가 "비특이적"인 것으로 본다.

3. 각 플레이트의 "전체" 및 "비특이적" CPM을 결정함으로써, 테스트 화합물의 각 농도에서 기질을 포스포릴화시키는 효소의 능력을 저해시키는 비율(%)을 결정할 수 있다. 이와 같은 저해 % 데이터를 이용하여, 액티비티 베이스 계산 프로토콜(DG0027-CK1-D-BL) (Study: RESR0290)에 포함된 비-선형 곡선 적용 프로그램을 이용하여 화합물의 IC₅₀ 값(화합물이 효소 활성을 50% 저해시킬 때의 농도)를 계산한다.

4. 이와 같은 검사 시스템에서 역학 연구로 ATP의 K_m 값이 21 μM이라는 것을 확인하였다.

CKI δ저해제용 카제인 키나제 1δ 스트렙토아비딘 친화성 막 플레이트 검사

목적: 스트렙토아비딘 친화성 막 (SAM) 바이오틴 캡쳐 플레이트(프로메가 V7542)에서 CKIδ활성에 대해 테스트 화합물을 평가하기 위함

HEPES 시그마 # H3375 MW = 238.3;

-글리세롤포스페이트 시그마 # G-9891 MW = 216.0; EDTA 0.5M, pH 8.0 깁코BRL; 오르토바나데이트 나트륨 ACROS # 205330500 MW = 183.9; DTT (DL-디티오트레톨) 시그마 # D-5545 MW = 154.2; 염화망간 ACROS # 41341-5000 MW = 203.3; ATP 시그마 # A-7699 MW = 551.1;

³³P ATP NEN # NEG602H; 카제인 키나제 1δ시그마 # C4455; 카제인 키나제 1 기질 뉴잉클런드 펩티드 비오틴-RRKDLHDDEEDEAMSITA MW = 2470

다음과 같이 키나제 완충액(KB, 100 mL)을 제조한다:

50 mM HEPES, pH 8.0 5 mL 1M 원액

10 mM MgCl 1 mL 1M 원액

10 mM

-글리세로포스페이트 1 mL 1M 원액

2.5 mM EDTA 500 ㎕ 원액 500 mM

1 mM 오르토바나데이트 나트륨 1M 원액 100 ㎕

1 mM DTT 1M 원액 100 ㎕

물 92.3 mL

다음과 같이 ATP 매스터 믹스(Master Mix)를 제조한다:

1M ATP의 수용액(1M ATP 원액) 1mL를 제조한다.

12 mL KB에:

12㎕의 1M ATP 용액을 첨가하고, 그 다음

12㎕의 ³³P ATP (10 μCi/ul), NEG602H, Perkin Elmer을 첨가한다.

반응 플레이트를 제조하고 다음과 같이 검사를 실행한다:

1. 웰 당 반응 플레이트 웰에 테스트 화합물 저해제의 유무하에 10㎕의 KB을 첨가한다.

2. 웰당 60㎕의 KB를 첨가한다.

3. 웰당 10㎕의 500 μM 펩티드 기질을 첨가한다.

4. 플레이트를 37^oC로 한다.

5. 웰당 10㎕의 1:10 희석액 CK1δ을 첨가한다 = 0.42㎍ 또는 0.68 단위

6. 웰당 10㎕의 ATP 매스터 혼합물을 첨가하여 반응을 개시시킨다.

7. 10분간 37^oC 배양기에 플레이트를 정치시킨다.

8. 10㎕의 1M ATP를 이용하여 반응을 중단시킨다. 20㎕를 SAM 플레이트에 옮기고, 실온에 10 분간 세워둔다.

9. 100㎕의 2M NaCl 용액으로 3회 세척하고, 그 다음 100㎕의 2M NaCl 및 1% H₃PO₄ 용액으로 3회 세척하고, 그 다음 진공 상에서 100㎕의 물로 세척한다.

10. 여과 플레이트를 램프 하에 30분간 건조시킨다.

11. 플레이트의 바닥을 봉하고, 20㎕의 마이크로신트 20을 첨가한다.

12. 탑카운트에서 판독한다.

세포 서캐디안 검사 실험 반응식

세포 배양: Mper1 -luc 랫트-1 섬유아세포 (P2C4) 배양물을 150 cm² 통풍이 되는 폴리스티렌 조직 배양 플라스크(팔콘 # 35-5001) 상에서 매 3-4일마다 나누고 (~10-20% 합류), 생장 배지[EMEM (셀그로 #10-010-CV); 10% 태아 송아지 혈청(FBS; 깁코 #16000-044); 50 I.U./mL 페니실린-스트렙토마이신(셀그로 #30-001-C1)], 37^oC 및 5% CO₂에서 유지시킨다.

안정적인 형질감염: 30-50% 합류에서 랫트-1 섬유아세포 배양물을 안정적인 형질감염을 위한 제오신 저항성 선택성 표식 및 mPer-1 프로모터-구동된 루시페라제 리포터 유전자를 포함하는 벡터로 공동-형질감염시킨다. 24-48시간 후에, 배양물을 96웰 플레이트상에서 나누고, 50-100 ㎍/mL 제오신 (인비트로겐 #45-0430) 이 보충된 생장 배지에서 10-14일간 유지시킨다. 제오신-저항성 안정적 형질감염체는 100 μM 루시페린(프로메가 #E1603)이 공급된 생장 배지에 의해 리포터가 발현됨으로써 평가하고, 탑카운트 신틸레이션 카운터(팩카드 모델 #C384V00)에서 루시페라제 활성을 검사한다. 제오신-저항성 및 mPer1-구동되는 루시페라제 활성을 모두 발현시키는 랫트-1 클론을 50% 말 혈청[HS(깁코 #16050-122)] 혈청 쇼크로 동기화(Synchronization)시키고, 서캐디안 리포터 활성을 평가한다. 화합물 테스트를 위해 Mper1 -luc 랫트-1 섬유아세포 클론 P2C4를 선택하였다.

동기화 프로토콜: Mper1 - luc 랫트-1 섬유아세포(P2C4)를 불투명한 96-웰 조직 배양 플레이트(퍼킨엘머 #6005680) 상에 도말하고(40-50% 합류), 100 ㎍/mL 제오신 (인비트로겐 #45-0430)이 보충된 생장 배지에 배양물이 100% 합류될 때까지 유지시킨다(48-72시간). 배양물을 2시간 동안 37^oC, 5% CO₂에서, 100 ㎕ 동기화 배지[EMEM (셀그로 #10-010-CV); 100 I.U./mL 페니실린-스트렙토마이신 (셀그로 #30-001-C1); 50% HS (깁코 #16050-122)]로 동기화시킨다. 동기화 후에, 배양물을 실온에서 10분간 100 ㎕ EMEM (셀그로 #10-010-CV)으로 세척한다. 세척 후에 배지를 300 ㎕ CO₂-독립 배지 [CO2I (깁코 #18045-088); 2mM L-글루타민 (셀그로 #25-005-C1); 100 I.U./mL 페니실린-스트렙토마이신 (셀그로 #30-001-C1); 100 μM 루시페린(프로메가 #E1603)]로 대체한다. 서캐디안에 대해 테스트받을 화합물을 CO₂-독립 배지/0.3% DMSO(최종 농도)에 첨가한다. 배양물을 즉시 탑실-A 필름 (팩카드 #6005185)을 이용하여 봉하고, 루시페라제 활성 측정을 위해 이동한다.

자동화된 서캐디안 리포터 측정: 동기화 후에, 검사 플레이트는 37^oC에서 조직 배양 배양기(VHAK 사이언티픽 모델 #3914)에 유지시킨다. 생체 내 루시페라제 활성은 탑카운트 신틸레이션 카운터(팩카드 모델 #C384V00)상에서 방출되는 관련 빛을 측정하여 평가한다. ORCA 로봇 팔(벡크맨 장치) 및 SAMI-NT 자동 조절 소프트웨어(버젼 3.3; SAGIAN/벡크맨 장치)를 이용하여 플레이트를 배양기에서 판독기로 옮긴다.

데이터 분석: 마이크로소프트 엑셀 및 XLfit (버젼 2.0.9; IDBS)을 이용하여 데이터를 이입하고, 조절하고, 그래프를 그렸다. 수일간 관련 빛 방출 간의 간격을 측정하거나 또는 푸리에 트랜스폼을 통하여 기간 분석을 실행한다. 이들 두가지 방법 모두 서캐디안 범위에서 거의 동일한 예상치를 가진다. 능력은 EC_△t+1h로 나타내는데, 이는 1시간 연장을 유도하는 효과적인 마이크로몰 농도를 나타낸다. XLfit 에서 테스트 화합물(x-축)의 농도에 대해시간 변화(y-축)로 나타낸 데이터에 쌍곡선을 맞추어 데이터를 분석하였고, 이 곡선으로부터 EC_△t+1h를 외삽하였다.

*는 평균 2회 또는 그 이상 측정한 것을 나타낸다.

Claims (44)

1. 화학식 I의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염 또는 이의 입체이성질체.

   [화학식 I]

   

   R₁는 H 또는 C_{1 - 6}알킬이고;

   R₂는 NR₅R₆이고;

   R₃는 아릴 또는 헤테로사이클이며;

   R₄는 H, C_{1 - 6}알킬, C₂-₆-알케닐, C₂-₆-알키닐, C_{1 - 6}알콕시, CF₃, 할로겐, SH, S-C_1-6알킬, NO₂, NH₂ 또는 NR₅R₆이며;

   R₅는 H 또는 C_{1 - 6}알킬이며;

   R₆는 H 또는 C_{1 - 6}알킬이며;

   X는 S 또는 S(O)_n이며;

   K, L, M 중 하나는 N이며, K, L, M의 나머지 두 개는 각각 C이며, 여기서 R₄ 는 K, L, M에만 결합되거나 C인 다른 고리 원자에만 결합되고;

   m은 1, 2 또는 3이며;

   n은 1 또는 2이다.
2. 제1항에 있어서, L이 N이고, K 및 M이 각각 C인 화합물.
3. 제2항에 있어서, R₁, R₄, R₅ 및 R₆이 각각 H이고, R₃이 아릴인 화합물.
4. 제3항에 있어서,

   3-페닐설파닐-1H-피롤로[3,2-c]피리딘-2-카복실산 아미드,

   3-(3-플루오로-페닐설파닐-1H-피롤로[3,2-c]피리딘-2-카복실산 아미드 및

   3-(4-클로로-페닐설파닐-1H-피롤로[3,2-c]피리딘-2-카복실산 아미드로 이루어진 그룹에서 선택된 화합물.
5. 제1항에 있어서, M이 N이고, K 및 L이 각각 C인 화합물.
6. 제5항에 있어서, R₁, R₄, R₅ 및 R₆이 각각 H이고, R₃이 아릴 또는 헤테로사이클인 화합물.
7. 제6항에 있어서,

   3-페닐설파닐-1H-피롤로[2,3-c]피리딘-2-카복실산 아미드,

   3-(3-플루오로-페닐설파닐)-1H-피롤로[2,3-c]피리딘-2-카복실산 아미드,

   3-(3-메톡시-페닐설파닐)-1H-피롤로[2,3-c]피리딘-2-카복실산 아미드,

   3-(3-클로로-페닐설파닐)-1H-피롤로[2,3-c]피리딘-2-카복실산 아미드,

   3-(2-트리플루오로메틸-페닐설파닐)-1H-피롤로[2,3-c]피리딘-2-카복실산 아미드,

   3-(2-트리플루오로메톡시-페닐설파닐)-1H-피롤로[2,3-c]피리딘-2-카복실산 아미드,

   3-(2-메톡시-페닐설파닐)-1H-피롤로[2,3-c]피리딘-2-카복실산 아미드, 및

   3-(피리딘-2-설파닐)-1H-피롤로[2,3-c]피리딘-2-카복실산 아미드로 이루어진 그룹에서 선택된 화합물.
8. 제1항에 있어서, K가 N이고, L 및 M이 각각 C인 화합물.
9. 제8항에 있어서, R₁이 C_{1 - 6}알킬이고, R₅가 H이고, R₆이 H이거나 C_{1 - 6}알킬이고, R₃이 아릴인 화합물.
10. 제9항에 있어서,

    1-메틸-3-페닐설파닐-1H-피롤로[3,2-b]피리딘-2-카복실산 메틸아미드,

    1-메틸-3-페닐설파닐-1H-피롤로[3,2-b]피리딘-2-카복실산 아미드, 및

    3-페닐설파닐-1-프로필-1H-피롤로[3,2-b]피리딘-2-카복실산 아미드로 이루어진 그룹에서 선택된 화합물.
11. 제8항에 있어서, R₁, R₄ 및 R₅가 각각 H이고, R₃이 아릴이고, R₆이 C_{1 - 6}알킬인 화합물.
12. 제11항에 있어서,

    3-(3-트리플루오로메티옥시페닐설파닐-1H-피롤로[3,2-b]피리딘-2-카복실산 메틸아미드,

    3-(3-클로로페닐설파닐-1H-피롤로[3,2-b]피리딘-2-카복실산 메틸아미드,

    3-(3-플루오로페닐설파닐-1H-피롤로[3,2-b]피리딘-2-카복실산 메틸아미드, 및

    3-페닐설파닐-1H-피롤로[3,2-b]피리딘-2-카복실산 메틸아미드로 이루어진 그룹에서 선택된 화합물.
13. 제8항에 있어서, R₁, R₄, R₅ 및 R₆이 각각 H이고, R₃이 헤테로사이클인 화합물.
14. 제13항에 있어서,

    3-(퀴놀린-8-일설파닐)-1H-피롤로[3,2-b]피리딘-2-카복실산 아미드,

    3-(피리딘-2-설파닐)-1H-피롤로[3,2-b]피리딘-2-카복실산 아미드,

    3-(피리딘-4-설파닐)-1H-피롤로[3,2-b]피리딘-2-카복실산 아미드, 및

    3-(티오펜-2-일설파닐)-1H-피롤로[3,2-b]피리딘-2-카복실산 아미드로 이루어진 그룹에서 선택된 화합물.
15. 제8항에 있어서, R₁, R₅ 및 R₆이 각각 H이고, R₃이 아릴인 화합물.
16. 제15항에 있어서,

    3-페닐설파닐-1H-피롤로[3,2-b]피리딘-2-카복실산 아미드,

    3-(3-플루오로페닐설파닐)-1H-피롤로[3,2-b]피리딘-2-카복실산 아미드,

    3-(3-클로로페닐설파닐)-1H-피롤로[3,2-b]피리딘-2-카복실산 아미드,

    3-(3-브로모페닐설파닐)-1H-피롤로[3,2-b]피리딘-2-카복실산 아미드,

    3-(2-클로로페닐설파닐)-1H-피롤로[3,2-b]피리딘-2-카복실산 아미드,

    3-(4-클로로페닐설파닐)-1H-피롤로[3,2-b]피리딘-2-카복실산 아미드,

    3-(2,4-디클로로페닐설파닐)-1H-피롤로[3,2-b]피리딘-2-카복실산 아미드,

    3-(2-플루오로페닐설파닐)-1H-피롤로[3,2-b]피리딘-2-카복실산 아미드,

    3-(2,3-디클로로페닐설파닐)-1H-피롤로[3,2-b]피리딘-2-카복실산 아미드,

    3-(2-트리플로오르메틸페닐설파닐)-1H-피롤로[3,2-b]피리딘-2-카복실산 아미드,

    3-(3-트리플루오로메틸-페닐설파닐)-1H-피롤로[3,2-b]피리딘-2-카복실산 아미드,

    3-(2-아미노페닐설파닐)-1H-피롤로[3,2-b]피리딘-2-카복실산 아미드,

    3-(2,5-디클로로-페닐설파닐)-1H-피롤로[3,2-b]피리딘-2-카복실산 아미드,

    3-(2-메톡시-페닐설파닐)-1H-피롤로[3,2-b]피리딘-2-카복실산 아미드,

    3-(3-메톡시-페닐설파닐)-1H-피롤로[3,2-b]피리딘-2-카복실산 아미드,

    3-(3-아미노-페닐설파닐)-1H-피롤로[3,2-b]피리딘-2-카복실산 아미드,

    3-(4-니트로-페닐설파닐)-1H-피롤로[3,2-b]피리딘-2-카복실산 아미드,

    3-(3-니트로-페닐설파닐)-1H-피롤로[3,2-b]피리딘-2-카복실산 아미드,

    3-o-톨일설파닐-1H-피롤로[3,2-b]피리딘-2-카복실산 아미드,

    3-p-톨일설파닐-1H-피롤로[3,2-b]피리딘-2-카복실산 아미드,

    3-(3,5-디메틸-페닐설파닐)-1H-피롤로[3,2-b]피리딘-2-카복실산 아미드,

    3-m-톨일설파닐-1H-피롤로[3,2-b]피리딘-2-카복실산 아미드,

    3-(2-에틸-페닐설파닐)-1H-피롤로[3,2-b]피리딘-2-카복실산 아미드,

    3-(3-트리플루오로메톡시-페닐설파닐)-1H-피롤로[3,2-b]피리딘-2-카복실산, 아미드,

    3-(3-플루오로-페닐설파닐)-5-메톡시-1H-피롤로[3,2-b]피리딘-2-카복실산 아미드, 및

    3-(3-메톡시-페닐설파닐)-5-메톡시-1H-피롤로[3,2-b]피리딘-2-카복실산 아미드로 이루어진 그룹에서 선택된 화합물.
17. 치료적 유효량의 화학식 I의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염 또는 입체이성질체 및 약제학적 담체를 포함하는 약제학적 조성물.

    [화학식 I]

    

    R₁이 H 또는 C_{1 - 6}알킬이고;

    R₂이 NR₅R₆이고;

    R₃이 아릴 또는 헤테로사이클이며;

    R₄가 H, C_{1 - 6}알킬, C₂-₆-알케닐, C₂-₆-알키닐, C_{1 - 6}알콕시, CF₃, 할로겐, SH, S-C_1-6알킬, NO₂, NH₂ 또는 NR₅R₆이며;

    R₅가 H 또는 C_{1 - 6}알킬이며;

    R₆이 H 또는 C_{1 - 6}알킬이며;

    X는 S 또는 S(O)_n이며;

    K, L, M 중 하나는 N이고, K, L, M의 나머지 두 개는 각각 C이며, 여기서 R₄가 K, L, M에만 결합되거나 C인 다른 고리 원자에만 결합되고;

    m 은 1, 2 또는 3이며;

    n 은 1 또는 2이다.
18. 치료적 유효량의 화학식 I의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염 또는 입체이성질체를 환자에게 투여하는 것을 포함하는, 카제인 키나제 Iε활성 저해 방법.

    [화학식 I]

    

    R₁이 H 또는 C_{1 - 6}알킬이고;

    R₂가 NR₅R₆이고;

    R₃이 아릴 또는 헤테로사이클이며;

    R₄가 H, C_{1 - 6}알킬, C₂-₆-알케닐, C₂-₆-알키닐, C_{1 - 6}알콕시, CF₃, 할로겐, SH, S-C_1-6알킬, NO₂, NH₂ 또는 NR₅R₆이고;

    R₅가 H 또는 C_{1 - 6}알킬이며;

    R₆이 H 또는 C_{1 - 6}알킬이며;

    X는 S 또는 S(O)n이고;

    K, L, M 중 하나는 N이고, K, L, M의 나머지 두 개는 각각 C이며, 여기서 R₄가 K, L, M에만 결합되거나 C인 다른 고리 원자에만 결합되고;

    m 은 1, 2 또는 3이며;

    n 은 1 또는 2이다.
19. 치료적 유효량의 화학식 I의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염 또는 입체이성질체를 환자에 투여하는 것을 포함하는 카제인 키나제 Iε저해에 의해 호전되는 장애 또는 질환으로 고통받는 환자의 치료 방법.

    [화학식 I]

    

    R₁이 H 또는 C_{1 - 6}알킬이고;

    R₂가 NR₅R₆이고;

    R₃이 아릴 또는 헤테로사이클이며;

    R₄가 H, C_{1 - 6}알킬, C₂-₆-알케닐, C₂-₆-알키닐, C_{1 - 6}알콕시, CF₃, 할로겐, SH, S-C_1-6알킬, NO₂, NH₂ 또는 NR₅R₆이고;

    R₅가 H 또는 C_{1 - 6}알킬이며;

    R₆이 H 또는 C_{1 - 6}알킬이며;

    X는 S 또는 S(O)n이고;

    K, L, M 중 하나는 N이고, K, L, M의 나머지 두 개는 각각 C이며, 여기서 R₄가 K, L, M에만 결합되거나 C인 다른 고리 원자에만 결합되고;

    m 은 1, 2 또는 3이며;

    n 은 1 또는 2이다.
20. 제19항에 있어서, 질환 또는 장애가 정서 장애 또는 수면 장애인 방법.
21. 제20항에 있어서, 장애가 정서 장애인 방법.
22. 제21항에 있어서, 정서 장애가 우울증 또는 양극성 장애에서 선택되는 방법.
23. 제22항에 있어서, 우울증은 주 우울증 질환인 방법.
24. 제22항에 있어서, 양극성 장애가 양극성 I 장애 및 양극성 II 장애에서 선택되는 방법.
25. 제20항에 있어서, 장애가 수면 장애인 방법.
26. 제25항에 있어서, 수면 장애는 서캐디안(circadian) 리듬 수면 장애인 방법.
27. 제26항에 있어서, 서캐디안 리듬 수면 장애가 교대제 근무 수면 장애, 시차(jet leg) 증후군, 전진성 수면주기 증후군 및 지연성 수면 주기 증후군에서 선택되는 방법.
28. 말론산 디에스테르를 적절한 용매 중 적절한 염기로 처리하는 단계, 비치환되거나 치환된 2-클로로-3-니트로피리딘, 3-클로로-4-니트로피리딘 또는 4-클로로-3-니트로피리딘을 첨가하는 단계, 반응이 완료될 때까지 반응 혼합물을 가열하는 단계, 반응 혼합물을 미네랄 산으로 처리하는 단계 및 데카복실화 반응이 완료될 때까지 반응 혼합물을 가열하여 비치환되거나 치환된 2-메틸-3-니트로피리딘, 3-메틸-4-니트로피리딘 또는 4-메틸-3-니트로피리딘을 제공하는 단계를 포함하는, 화학식 I의 화합물의 제조 방법.

    [화학식 I]

    

    R₁이 H이고;

    R₂가 NH₂이고;

    R₃이 아릴 또는 헤테로사이클이며;

    R₄가 H, C_{1 - 6}알킬, C₂-₆-알케닐, C₂-₆-알키닐, C_{1 - 6}알콕시, CF₃, 할로겐, SH, S-C_1-6알킬, NO₂, NH₂ 또는 NR₅R₆이고;

    R₅가 H 또는 C_{1 - 6}알킬이며;

    R₆이 H 또는 C_{1 - 6}알킬이며;

    X는 S이고;

    K, L, M 중 하나는 N이고, K, L, M의 나머지 두 개는 각각 C이며, 여기서 R₄가 K, L, M에만 결합되거나 C인 다른 고리 원자에만 결합되고;

    m 은 1, 2 또는 3이다.
29. 제28항에 있어서, 말론산 디에스테르가 디에틸 말로네이트이고, 염기가 t-부톡시드 나트륨이며, 용매가 N-메틸-2-피롤리디논이며, 미네랄 산이 황산인 방법.
30. 제29항에 있어서, 2-메틸-3-니트로피리딘의 제조 방법.
31. 제28항에 있어서, 비치환되거나 치환된 2-메틸-3-니트로피리딘, 3-메틸-4-니트로피리딘 또는 4-메틸-3-니트로피리딘을 적절한 용매, 적절한 염기 및 옥살레이 트 디에스테르의 혼합물에 첨가하는 단계를 추가 포함하는, 비치환되거나 치환된 2-하이드록시-3-(3-니트로-피리딘-2-일)-아크릴산에스테르, 2-하이드록시-3-(4-니트로-피리딘-3-일)-아크릴산에스테르 또는 2-하이드록시-3-(3-니트로-피리딘-4-일)-아크릴산에스테르, 또는 이의 호변이성체 케톤의 제조 방법.
32. 제31항에 있어서, 옥살레이트 디에스테르가 디에틸 옥살레이트이며, 용매가 테트라하이드로푸란이고, 염기가 나트륨 에톡사이드인 방법.
33. 제32항에 있어서, 2-하이드록시-3-(3-니트로-피리딘-2-일)-아크릴산 에틸 에스테르의 제조 방법.
34. 제28항에 있어서, 적절한 용매 중 비치환되거나 치환된 2-하이드록시-3-(3-니트로-피리딘-2-일)-아크릴산에스테르, 2-하이드록시-3-(4-니트로-피리딘-3-일)-아크릴산에스테르 또는 2-하이드록시-3-(3-니트로-피리딘-4-일)-아크릴산에스테르를 적절한 촉매로 환원시키는 단계를 추가 포함하는, 비치환되거나 치환된 1H-피롤로[3,2-b]피리딘-2-카복실산 에스테르, 1H-피롤로[3,2-c]피리딘-2-카복실산 에스테르 또는 1H-피롤로[2,3-c]피리딘-2-카복실산 에스테르의 제조 방법.
35. 제34항에 있어서, 용매가 순수 에탄올이며, 촉매가 탄소 상 팔라디움인 방법.
36. 제35항에 있어서, 1H-피롤로[3,2-b]피리딘-2-카복실산 에틸 에스테르의 제조방법.
37. 제28항에 있어서, 비치환되거나 치환된 1H-피롤로[3,2-b]피리딘-2-카복실산 에스테르, 1H-피롤로[3,2-c]피리딘-2-카복실산 에스테르 또는 1H-피롤로[2,3-c]피리딘-2-카복실산 에스테르를 적절한 용매 중 암모니아에 첨가하는 단계를 추가 포함하는, 비치환되거나 치환된 1H-피롤로[3,2-b]피리딘-2-카복실산 아미드, 1H-피롤로[3,2-c]피리딘-2-카복실산 아미드 또는 1H-피롤로[2,3-c]피리딘-2-카복실산 아미드의 제조 방법.
38. 제37항에 있어서, 용매가 메탄올인 방법.
39. 제38항에 있어서, 1H-피롤로[3,2-b]피리딘-2-카복실산 아미드의 제조 방법.
40. 제28항에 있어서, 비치환되거나 치환된 1H-피롤로[3,2-b]피리딘-2-카복실산 아미드, 1H-피롤로[3,2-c]피리딘-2-카복실산 아미드 또는 1H-피롤로[2,3-c]피리딘-2-카복실산 아미드, 과량의 적절한 염기, 및 디아릴설파이드 또는 디헤테로사이클디설파이드를 적절한 용매에 첨가하는 단계 및 이를 가열하는 단계를 추가 포함하는, R₁이 H인 화학식 I의 화합물의 제조 방법.
41. 제40항에 있어서, 과량의 염기가 약 2.0 내지 약 2.5 당량이고, 염기가 탄산세슘이고, 디아릴디설파이드가 디페닐디설파이드 또는 비스-(3-플루오로페닐)디설파이드인 방법.
42. 제41항에 있어서, 3-페닐설파닐-1H-피롤로[3,2-b]피리딘-2-카복실산 아미드의 제조 방법.
43. 제41항에 있어서, 3-(3-플루오로페닐설파닐)-1H-피롤로[3,2-b]피리딘-2-카복실산 아미드의 제조 방법.
44. a. 말론산 디에스테르를 적절한 용매 중 적절한 염기로 처리하고, 비치환되거나 치환된 2-클로로-3-니트로피리딘, 3-클로로-4-니트로피리딘 또는 4-클로로-3-니트로피리딘을 첨가하고, 반응이 완료될 때까지 반응 혼합물을 가열하고, 반응 혼합물을 미네랄 산으로 처리하고, 데카복실화 반응이 완료될 때까지 반응 혼합물을 가열하여 비치환되거나 치환된 2-메틸-3-니트로피리딘, 3-메틸-4-니트로피리딘 또는 4-메틸-3-니트로피리딘을 수득하는 단계;

    b. 비치환되거나 치환된 2-메틸-3-니트로피리딘, 3-메틸-4-니트로피리딘 또는 4-메틸-3-니트로피리딘를 적절한 용매, 적절한 염기 및 옥살레이트디에스테르 의 혼합물에 첨가하여 비치환되거나 치환된 2-하이드록시-3-(3-니트로-피리딘-2- 일)-아크릴산에스테르, 2-하이드록시-3-(4-니트로-피리딘-3-일)-아크릴산에스테르 또는 2-하이드록시-3-(3-니트로-피리딘-4-일)-아크릴산에스테르, 또는 이에 상응하는 호변이성체 케톤을 수득하는 단계;

    c. 적절한 용매 중 비치환되거나 치환된 2-하이드록시-3-(3-니트로-피리딘-2-일)-아크릴산에스테르, 2-하이드록시-3-(4-니트로-피리딘-3-일)-아크릴산에스테르 또는 2-하이드록시-3-(3-니트로-피리딘-4-일)-아크릴산에스테르를 적절한 촉매로 환원시켜 비치환되거나 치환된 1H-피롤로[3,2-b]피리딘-2-카복실산 에스테르, 1H-피롤로[3,2-c]피리딘-2-카복실산 에스테르 또는 1H-피롤로[2,3-c]피리딘-2-카복실산 에스테르를 수득하는 단계;

    d. 비치환되거나 치환된 1H-피롤로[3,2-b]피리딘-2-카복실산 에스테르, 1H-피롤로[3,2-c]피리딘-2-카복실산 에스테르 또는 1H-피롤로[2,3-c]피리딘-2-카복실산 에스테르를 적절한 용매 중 암모니아에 첨가하여 비치환되거나 치환된 1H-피롤로[3,2-b]피리딘-2-카복실산 아미드, 1H-피롤로[3,2-c]피리딘-2-카복실산 아미드 또는 1H-피롤로[2,3-c]피리딘-2-카복실산 아미드를 제공하는 단계; 및

    e. 비치환되거나 치환된 1H-피롤로[3,2-b]피리딘-2-카복실산 아미드, 1H-피롤로[3,2-c]피리딘-2-카복실산 아미드 또는 1H-피롤로[2,3-c]피리딘-2-카복실산 아미드, 과량의 적절한 염기 및 디아릴설파이드 또는 디헤테로사이클디설파이드를 적절한 용매에 첨가하여 R₁이 H인 화학식 I의 화합물을 수득하는 단계를 포함하는 공정으로 제조된 화학식 I의 화합물.

    [화학식 I]

    

    R₁이 H이고;

    R₂가 NH₂이고;

    R₃이 아릴 또는 헤테로사이클이며;

    R₄가 H, C_{1 - 6}알킬, C₂-₆-알케닐, C₂-₆-알키닐, C_{1 - 6}알콕시, CF₃, 할로겐, SH, S-C_1-6알킬, NO₂, NH₂ 또는 NR₅R₆이고;

    R₅가 H 또는 C_{1 - 6}알킬이며;

    R₆이 H 또는 C_{1 - 6}알킬이며;

    X는 S 또는 S(O)n이고;

    K, L, M 중 하나는 N이고, K, L, M의 나머지 두 개는 각각 C이며, 여기서 R₄가 K, L, M에만 결합되거나 C인 다른 고리 원자에만 결합되고;

    m 은 1, 2 또는 3이다.