ES2302229T3

ES2302229T3 - Moduladores de androgenos.

Info

Publication number: ES2302229T3
Application number: ES05779469T
Authority: ES
Inventors: Stephen Douglas Pfizer Global R & D BARRETT; Daniel Yunlong Pfizer Global R & D DU; Lain-Yen Pfizer Global R & D HU; Bruce Allen Pfizer Global R & D LEFKER; Raj Kumar Pfizer Global R & D RAHEJA; Karen Elaine Pfizer Global R & D SEXTON; Yvonne Dorothy Pfizer Global R & D SMITH
Original assignee: Warner Lambert Co LLC
Current assignee: Warner Lambert Co LLC
Priority date: 2004-08-31
Filing date: 2005-08-22
Publication date: 2008-07-01
Anticipated expiration: 2025-08-22
Also published as: NO20070953L; BRPI0514706A; AU2005278892A1; EP1789408A1; US20070207987A1; IL181447A0; ATE392419T1; JP2008511606A; EP1789408B1; DE602005006139D1; CN101044131A; KR20070049238A; MX2007002377A; WO2006024942A1; CA2578194A1; DE602005006139T2

Abstract

Un compuesto de fórmula: (Ver fórmula) o una de sus sales, en el que: a) X1 es cloro o trifluorometilo y está localizado en posición 2 ó 6; b) X2 no está presente, o representa halógeno, ciano, alcoxi C1-C8, haloalcoxi o haloalquilo; c) n representa un número entero de 1 a 4; d) R1 representa un sustituyente elegido entre el grupo que consiste en: i. hidrógeno ii. halógeno, iii. ciano, iv. hidroxi, v. alquilo (C1-C12) opcionalmente sustituido, vi. alquenilo (C2-C12) opcionalmente sustituido, vii. alquinilo (C2-C12) opcionalmente sustituido, viii. cicloalquilo (C3-C10) opcionalmente sustituido, ix. cicloalquil (C3-C10)-alquilo(C1-C6), en el que cada uno de los restos alquilo y cicloalquilo puede estar opcionalmente sustituido, x. arilo (C6-C10) opcionalmente sustituido, xi. aril (C6-C10)-alquilo (C1-C6), en el que cada uno de los restos alquilo y arilo puede estar opcionalmente sustituido, xii. (CH2)z-SR1, xiii. (CH2)z-O-R1, xiv. (CH2)z-NR1R2, xv. (CH2)z-COOR3, xvi. (CH2)z-CONR3R4, xvii. (CH2)z-NR4COR3, y xviii. (CH2)zOCOR3, d) z representa un número entero de 0 a 6, e) R3 representa un sustituyente elegido entre el grupo que consiste en hidrógeno, alquilo (C1-C12), alquenilo (C2-C12), alquinilo (C2-C12), arilo (C6-C10) opcionalmente sustituido y aril (C6 C10)-alquilo (C1-C6), en el que cada uno de los restos alquilo y arilo puede estar opcionalmente sustituido; y f) R4 representa un sustituyente elegido entre el grupo que consiste en hidrógeno o alquilo (C1-C12).

Description

Moduladores de andrógenos.

Campo de la invención

La presente invención se refiere a un nuevo tipo de 4-cicloalcoxibenzonitrilos y su uso como moduladores del receptor de andrógenos. Otros aspectos de la invención se refieren al uso de estos compuestos para disminuir la secreción de grasa y para estimular el crecimiento capilar.

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Antecedentes de la invención

La alopecia, o calvicie, es un problema común que debe ser todavía solucionado por la ciencia médica. Aunque los andrógenos están asociados con el proceso de la calvicie, el mecanismo fisiológico mediante el cual se produce la pérdida de cabello es desconocido. Sin embargo, se sabe que el crecimiento capilar está alterado en individuos afectados de alopecia.

El pelo no crece de modo continuo, sino que sufre ciclos de actividad que implican periodos de crecimiento, descanso y desprendimiento. El cuero cabelludo humano contiene, de forma típica, de 100.000 a 350.000 fibras o raquis capilares, que sufren una metamorfosis en tres etapas diferenciadas:

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(a): durante la fase de crecimiento (anágena), el folículo (es decir, la raíz del pelo) penetra profundamente en la dermis, con las células del folículo dividiéndose con rapidez y diferenciándose en el proceso de sintetizar queratina, el componente predominante del pelo. En los seres humanos que no sufren un proceso de calvicie, esta fase de crecimiento dura de uno a cinco años;

(b): la fase de transición (catágena) está marcada por el cese de la mitosis y dura de dos a tres semanas; y

(c): la fase de reposo (telógena), en la que el pelo se mantiene dentro del cuello cabelludo hasta 12 semanas, hasta que se ve desplazado por un nuevo crecimiento folicular procedente del cuero cabelludo que se encuentra por debajo.

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En los seres humanos, este ciclo de crecimiento no está sincronizado. Un individuo tendrá miles de folículos en cada una de estas tres fases. Sin embargo, la mayoría de los folículos capilares estará en la fase anágena. En adultos jóvenes sanos, la relación entre las fases anágena y telógena puede ser tan alta como 9 a 1. En individuos con alopecia, esta relación se reduce a un valor tan bajo como 2:1.

La alopecia androgénica surge de la activación de una sensibilidad heredada a las hormonas androgénicas en la circulación. Es el tipo más común de alopecia. Afecta a hombres (50%) y mujeres (30%), principalmente de origen caucásico. Se experimentan cambios graduales en el espesor y longitud del raquis capilar a lo largo del tiempo y según se envejece, en algunos de forma prematura. El pelo terminal se convierte gradualmente en cabello velloso, incoloro, delgado y corto. Como consecuencia, los hombres de más de 20 años y las mujeres a partir de los 30 y 40 empiezan a darse cuenta de que su cabello se vuelve más fino y más corto. En los hombres, la mayor parte de la pérdida de pelo se produce en la coronilla. A las mujeres se les pone el pelo más fino por todo el cuero cabelludo. Como se indicó anteriormente, la relación entre fase anágena y telógena se reduce significativamente, produciendo un menor crecimiento del cabello.

El minoxidil, un agente de apertura del canal de potasio, estimula el crecimiento capilar. El minoxidil está disponible en el mercado en Estados Unidos con la marca comercial Rogaine®. Aunque no se conoce el mecanismo exacto de la acción del minoxidil, su impacto sobre el ciclo del crecimiento capilar está bien documentado. El minoxidil estimula el crecimiento del folículo capilar y aumenta el periodo de tiempo en el que el folículo capilar se encuentra en la fase anágena (es decir, aumenta la relación entre fase anágena y telógena).

Aunque el minoxidil estimula el crecimiento capilar, la eficacia cosmética de este crecimiento puede variar mucho. Por ejemplo, Roenigk indica los resultados de un ensayo clínico que implicó a 83 hombres que utilizaron una disolución tópica de minoxidil al 3% durante un periodo de 19 meses. Se produjo un crecimiento capilar en 55% de los sujetos. Sin embargo, sólo 20% de los sujetos consideró que el crecimiento era importante desde un punto de vista cosmético (Clin. Res., 33, Nº 4, 914A, 1985). Tosti indicó un recrecimiento aceptable desde un punto de vista cosmético en 18,1% de sus sujetos (Dermatologica, 173, Nº 3, 136-138, 1986). Por tanto, existe una necesidad en la técnica de compuestos que tengan la capacidad de producir proporciones mayores de crecimiento capilar aceptable desde un punto de vista cosmético en pacientes con alopecia.

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El documento DE 102 18 963 A1 describe compuestos de fórmula:

1

que tienen actividad antiandrogénica.

Sumario de la invención

Según la presente invención, se ha descubierto un nuevo tipo de benzonitrilos. Estos compuestos, sus sales, solvatos y profármacos, pueden representarse mediante la fórmula I siguiente:

2

en la que:

a): X^{1} es cloro o trifluorometilo y está localizado en posición 2 ó 6;

b): X^{2} no está presente, o representa halógeno, ciano, alcoxi C_{1}-C_{6}, haloalcoxi o haloalquilo,

c): n representa un número entero de 1 a 4,

d): R^{1} representa un sustituyente elegido entre el grupo que consiste en:

i): hidrógeno,

ii): halógeno,

iii): ciano,

iv): hidroxi,

v): alquilo (C_{1}-C_{12}) opcionalmente sustituido,

vi): alquenilo (C_{2}-C_{12}) opcionalmente sustituido,

vii): alquinilo (C_{2}-C_{12}) opcionalmente sustituido,

viii): cicloalquilo (C_{3}-C_{10}) opcionalmente sustituido,

ix): cicloalquil (C_{3}-C_{10})-alquilo (C_{1}-C_{6}), en el que cada uno de los restos alquilo y cicloalquilo puede estar opcionalmente sustituido,

x): arilo (C_{6}-C_{10}) opcionalmente sustituido,

xi): aril (C_{6}-C_{10})-alquilo (C_{1}-C_{6}), en el que cada uno de los restos alquilo y arilo puede estar opcionalmente sustituido,

xii): (CH_{2})_{z}-SR^{3},

xiii): (CH_{2})_{z}-OR^{3},

xiv): (CH_{2})_{z}-NR^{3}R^{4},

xv): (CH_{2})_{z}-COOR^{3},

xvi): (CH_{2})_{z}-CONR^{3}R^{4},

xvii): (CH_{2})_{z}-NR^{4}COR^{3}, y

xviii): (CH_{2})_{z}OCOR^{3};

e): z representa un número entero de 0 a 6,

f): R^{3} representa un sustituyente elegido entre el grupo que consiste en hidrógeno, alquilo (C_{1}-C_{12}), alquenilo (C_{2}-C_{12}), alquinilo (C_{2}-C_{12}), arilo (C_{6}-C_{10}) opcionalmente sustituido y aril (C_{6} C_{10})-alquilo (C_{1}-C_{6}), en el que cada uno de los restos alquilo y arilo puede estar opcionalmente sustituido; y

g): R^{4} representa un sustituyente elegido entre el grupo que consiste en hidrógeno y alquilo (C_{1}-C_{12}).

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Los compuestos de fórmula I son moduladores del receptor de andrógenos. Los compuestos tienen afinidad por el receptor de andrógenos y provocarán un efecto biológico mediante la unión al receptor. Típicamente, los compuestos actuarán como antagonistas. En modos de realización elegidos actuarán como agonistas parciales, agonistas totales o agonistas selectivos de tejidos. Como moduladores del receptor de andrógenos, los compuestos pueden utilizarse para tratar o mejorar estados asociados con la activación inapropiada del receptor de andrógenos. Los ejemplos de dichos estados para antagonistas incluyen, pero sin limitarse a ellos, acné, exceso de secreción de grasa, alopecia androgénica, cánceres dependientes de hormonas, tal como el cáncer de próstata, e hirsutismo. Los compuestos que son agonistas parciales, o agonistas totales, pueden utilizarse para tratar la osteoporosis, hipogonadismo, anemia, o para estimular el aumento de la masa muscular, en especial en enfermedades debilitantes.

La invención también se refiere a composiciones farmacéuticas que contienen al menos uno de los compuestos, en una cantidad eficaz para modular la activación del receptor de andrógenos. En un modo de realización adicional, la invención se refiere a un artículo elaborado que contiene al menos uno de los compuestos envasado para la distribución al por menor, junto con instrucciones que aconsejan al consumidor sobre cómo utilizar el compuesto para mejorar un estado asociado con la activación inapropiada del receptor de andrógenos. Un modo de realización adicional se refiere al uso de un compuesto como agente de diagnóstico para detectar la activación inapropiada del receptor de andrógenos.

En un modo de realización adicional, los compuestos se utilizan por vía tópica para inducir y/o estimular el crecimiento capilar y/o para frenar la pérdida de pelo. Los compuestos también se pueden utilizar por vía tópica en el tratamiento del exceso de grasa y/o acné.

En un modo de realización adicional, los compuestos se pueden usar en ganado, tal como en ganado vacuno, cerdos, pollos, etc. Los compuestos aumentarán la tasa de crecimiento y mejorarán la relación entre la carne magra y la grasa y mejorarán la eficacia de la alimentación.

Descripción detallada de la invención

Los encabezamientos en este documento sólo se están utilizando para su comprensión por parte del lector. No deben considerarse de forma alguna como limitativos de la invención o las reivindicaciones.

Definiciones y ejemplos

Tal como se emplean a lo largo de esta solicitud, incluyendo las reivindicaciones, los siguientes términos y expresiones tienen los significados definidos a continuación, salvo que se indique específicamente lo contrario. El plural y el singular deben tratarse como intercambiables, distintos de la indicación del número:

a.: "halógeno" se refiere a un átomo de cloro, flúor o bromo.

b.: "alquilo C_{1}-C_{6}" se refiere a un grupo alquilo de cadena lineal o ramificada que contiene de 1 a 6 átomos de carbono, tales como metilo, etilo, n-propilo, isopropilo, n-butilo, isobutilo, pentilo, etc.

c.: "alquilo C_{1}-C_{6} opcionalmente sustituido" se refiere a un grupo alquilo de cadena lineal o ramificada que contiene de 1 a 6 átomos de carbono, tales como metilo, etilo, n-propilo, isopropilo, n-butilo, isobutilo, pentilo, etc. Este grupo alquilo puede estar opcionalmente sustituido, en el que hasta 6 átomos de hidrógeno están sustituidos con un sustituyente elegido entre el grupo que consiste en halógeno, haloalquilo, hidroxi, tiol, ciano y NR^{3}R^{4}, en el que R^{3} y R^{4} son como se ha definido anteriormente.

d.: "alquilo C_{1}-C_{12} opcionalmente sustituido" se refiere a un grupo alquilo de cadena lineal o ramificada que contiene de 1 a 12 átomos de carbono, tales como metilo, etilo, n-propilo, isopropilo, n-butilo, isobutilo, hexilo, octilo, decilo, etc. Dicho grupo alquilo puede estar opcionalmente sustituido, en el que hasta 8 átomos de hidrógeno están sustituidos con un sustituyente elegido entre el grupo que consiste en halógeno, haloalquilo, hidroxi, tiol, ciano y NR^{3}R^{4}, en el que R^{3} y R^{4} son como se han definido anteriormente.

e.: "alquenilo C_{2}-C_{12} opcionalmente sustituido" se refiere a un radical hidrocarbonado de cadena lineal o cadena ramificada que contiene de 2 a 12 átomos de carbono y 1 o más dobles enlaces carbono-carbono. Los ejemplos de radicales alquenilo incluyen etenilo, propenilo, 1,4-butadienilo, 1-hexenilo, 1,3-octadienilo y similares. Dicho grupo alquenilo puede estar opcionalmente sustituido, en el que hasta 8 átomos de hidrógeno están sustituidos con un sustituyente elegido entre el grupo que consiste en halógeno, haloalquilo, hidroxi, tiol, ciano y NR^{3}R^{4}, en el que R^{3} y R^{4} son como se ha definido anteriormente.

f.: "alquinilo C_{2}-C_{12} opcionalmente sustituido" se refiere a un radical hidrocarbonado de cadena lineal o cadena ramificada que contiene de 2 a 12 átomos de carbono, y que tiene 1 o más triples enlaces carbono-carbono. Los ejemplos de radicales alquinilo incluyen etinilo, propinilo, butinilo, octinilo y similares. Dicho grupo alquinilo puede estar opcionalmente sustituido, en el que hasta 8 átomos de hidrógeno están sustituidos con un sustituyente elegido entre el grupo que consiste en halógeno, hidroxi, haloalquilo, tiol, ciano y -NR^{3}R^{4}, en el que R^{3} y R^{4} son como se han definido anteriormente.

g.: "haloalquilo" se refiere a un grupo alquilo de cadena lineal o ramificada que contiene de 1 a 6 átomos de carbono, en el que al menos un átomo de hidrógeno está sustituido con un halógeno (es decir, haloalquilo C_{1}-C_{6}). Los ejemplos de haloalquilos adecuados incluyen clorometilo, difluorometilo, trifluorometilo, 1-fluoro-2-cloroetilo, 5-fluorohexilo, 3-difluoroisopropilo, 3-cloroisobutilo, etc.

h.: "alquilo (C_{1}-C_{2}) sustituido con uno o más átomos de halógeno" se refiere a un grupo alquilo de cadena lineal que contiene 1 ó 2 átomos de carbono, es decir, metilo o etilo, en el que al menos un átomo de hidrógeno está sustituido con un halógeno (es decir, por ejemplo, trifluorometilo, diclorometilo, etc.).

i.: "alcoxi (C_{1}-C_{2}) sustituido con uno o más átomos de halógeno" se refiere a un grupo alcoxi de cadena lineal que contiene 1 ó 2 átomos de carbono, es decir, metoxi o etoxi, en el que al menos un átomo de hidrógeno está sustituido con un halógeno (es decir, por ejemplo, trifluorometoxi, difluorometoxi, etc.).

j.: "alcoxi C_{1}-C_{6}" se refiere a un grupo alcoxi de cadena lineal o ramificada que contiene de 1 a 6 átomos de carbono, tales como metoxi, etoxi, n-propoxi, isopropoxi, n-butoxi, isobutoxi, pentoxi, etc.

k.: "haloalcoxi" se refiere a un grupo alcoxi de cadena ramificada o lineal que contiene de 1 a 6 átomos de carbono, en el que al menos un átomo de hidrógeno está sustituido con un halógeno (es decir, haloalcoxi C_{1}-C_{6}). Los ejemplos de haloalcoxi adecuados incluyen clorometoxi, difluorometoxi, trifluorometoxi, 1-fluoro-2-cloroetoxi, 5-fluorohexoxi, 3-difluoroisopropoxi, 3-cloroisobutoxi, etc.

l.: "arilo (C_{6}-C_{10})" opcionalmente sustituido significa un hidrocarburo cíclico aromático que contiene de 6 a 10 átomos de carbono. Los ejemplos de grupos arilo incluyen fenilo, naftilo y bifenilo. Dicho resto arilo puede estar opcionalmente sustituido con hasta 4 sustituyentes distintos del hidrógeno, eligiéndose cada sustituyente independientemente entre el grupo que consiste en halógeno, ciano, hidroxi, alquilo (C_{1}-C_{6}), alcoxi (C_{1}-C_{6}), alquilo (C_{1}-C_{2}) sustituido con uno o más átomos de halógeno, alcoxi (C_{1}-C_{2}) sustituido con uno o más átomos de halógeno, SR^{5} y NR^{5}R^{6}. R^{5} y R^{6} representan cada uno independientemente alquilo C_{1}-C_{6} o hidrógeno. Estos sustituyentes pueden ser iguales o diferentes y pueden estar localizados en cualquier posición del anillo que esté químicamente permitida.

m.: "cicloalquilo (C_{3}-C_{10})" opcionalmente sustituido se refiere a un radical alquilo monocíclico, bicíclico o tricíclico, saturado o parcialmente saturado, en el que cada resto cíclico tiene de 3 a 10 átomos de carbono. Los ejemplos de radicales cicloalquilo incluyen ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo, ciclohexilo, ciclooctilo y similares. Dicho grupo cicloalquilo puede estar opcionalmente sustituido, en el que hasta 4 átomos de hidrógeno están sustituidos con un sustituyente elegido entre el grupo que consiste en halógeno, ciano, hidroxi, alquilo (C_{1}-C_{6}), alcoxi (C_{1}-C_{6}), alquilo (C_{1}-C_{2}) sustituido con uno o más átomos de halógeno, alcoxi (C_{1}-C_{2}) sustituido con uno o más átomos de halógeno, SR^{5} y NR^{5}R^{6}, en el que R^{5} y R^{6} son como se han definido anteriormente.

n.: "andrógeno" se refiere a la testosterona y sus precursores y metabolitos, y andrógenos 5-alfa-reducidos, incluyendo, pero sin limitarse a ella, la dihidrotestosterona. Andrógeno se refiere a los andrógenos de los testículos, glándulas suprarrenales y ovarios, así como a todas las formas de andrógenos naturales, sintéticos y sustituidos o modificados.

o.: "farmacéuticamente aceptable" significa adecuado para su uso en mamíferos.

p.: "sales" pretende referirse a sales farmacéuticamente aceptables y a sales adecuadas para su uso en procesos industriales, tales como la preparación del compuesto.

q.: "sales farmacéuticamente aceptables" pretende referirse tanto a "sales de adición de ácido farmacéuticamente aceptables" como a "sales de adición de base farmacéuticamente aceptables", dependiendo de la estructura real del compuesto.

r.: "sales de adición de ácido farmacéuticamente aceptables" se pretende aplicar a cualquier sal de adición de ácidos orgánicos o inorgánicos no tóxicas de los compuestos básicos representados por la fórmula I o cualquiera de sus intermedios. Los ácidos inorgánicos ilustrativos que forman sales adecuadas incluyen ácido clorhídrico, bromhídrico, sulfúrico y fosfórico, y sales de metales ácidos, tales como monohidrogenoortofosfato de sodio e hidrogenosulfato de potasio. Los ácidos orgánicos ilustrativos que forman sales adecuadas incluyen los ácidos mono, di y tricarboxílicos. Son ilustrativos de dichos ácidos, por ejemplo, ácido acético, glicólico, láctico, pirúvico, malónico, succínico, glutárico, fumárico, málico, tartárico, cítrico, ascórbico, maleico, hidroximaleico, benzoico, hidroxi-benzoico, fenilacético, cinámico, salicílico, 2-fenoxibenzoico, p-toluenosulfónico, y ácidos sulfónicos, tales como ácido metanosulfónico y ácido 2-hidroxietanosulfónico. Dichas sales pueden existir bien en forma hidratada o bien en forma esencialmente anhidra. En general, las sales de adición de ácido de estos compuestos son solubles en agua y en diferentes disolventes orgánicos hidrófilos y, en comparación con sus formas de base libre, generalmente muestran puntos de fusión más altos.

s.: "sales de adición de base farmacéuticamente aceptables" se pretende aplicar a cualquier sal de adición de bases orgánicas o inorgánicas no tóxica de los compuestos representados por la fórmula I o cualquiera de sus intermedios. Las bases ilustrativas que forman sales adecuadas incluyen hidróxidos de metales alcalinos o alcalinotérreos, tales como hidróxidos de sodio, potasio, calcio, magnesio o bario; amoníaco y aminas orgánicas alifáticas, alicíclicas o aromáticas, tales como metilamina, dimetilamina, trimetilamina y picolina.

t.: "profármaco" se refiere a compuestos que se transforman con rapidez in vivo para producir el compuesto precursor de las fórmulas anteriores, por ejemplo, mediante hidrólisis en sangre. Puede encontrarse un análisis a fondo en T. Higuchi y V. Stella, "Pro-drugs as Novel Delivery Systems" Vol. 14, A. C. S. Symposium Series, y en Bioreversible Carriers in Drug Design, ed. Edward B. Roche, American Pharmaceutical Association y Pergamon Press, 1987, ambos se incorporan en esta memoria como referencia.

u.: "compuesto de Fórmula I", "compuestos de la invención" y "compuestos" se usan de forma intercambiable a lo largo de la solicitud y deben ser tratados como sinónimos.

v.: "paciente" se refiere a animales de sangre caliente tales como, por ejemplo, cobayas, ratones, ratas, jerbos, gatos, conejos, perros, monos, chimpancés, macacos de cola corta y seres humanos.

w.: "tratar" se refiere a la capacidad de los compuestos para disipar, mejorar o ralentizar el progreso de la enfermedad (o estado) del paciente o cualquier daño tisular asociado con la enfermedad.

x.: "ganado" se refiere a animales adecuados para el consumo de carne por los seres humanos. Los ejemplos incluyen cerdos, ganado vacuno, pollos, pavos, conejos, etc.

y.: "isómero" significa "estereoisómero" e "isómero geométrico" como se define a continuación.

z.: "estereoisómero" significa compuestos que poseen uno o más centros quirales, y cada centro puede existir en la configuración R o S. Los estereoisómeros incluyen todas las formas diasterómeras, enantiómeras y epiméricas, así como sus racematos y mezclas.

aa.: "isómero geométrico" significa compuestos que pueden existir en forma cis, trans, anti, entgegen (E), y zusammen (Z), así como sus mezclas.

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Algunos de los compuestos de fórmula (I) pueden existir como isómeros geométricos. Los compuestos de fórmula (I) pueden presentar uno o más centros asimétricos, existiendo, así, como dos o más formas estereoisómeras. La presente invención incluye todos los estereoisómeros e isómeros geométricos individuales de los compuestos de fórmula (I) y sus mezclas.

Además, los compuestos de la presente invención pueden existir en las formas no solvatadas así como solvatadas con disolventes farmacéuticamente aceptables, tales como agua, etanol y similares. En general, las formas solvatadas se consideran equivalentes a las formas no solvatadas para los propósitos de la presente invención. Los compuestos también pueden existir en uno o más estados cristalinos, es decir, polimorfos, o pueden existir como sólidos amorfos. Todas estas formas están incluidas por las reivindicaciones.

Todos los compuestos de fórmula I contienen un anillo fenilo. Para ejemplificar aún más la invención, a continuación se muestra el sistema de numeración para este anillo y su patrón de sustitución:

3

La posición 1 de este anillo fenilo está sustituida con un resto ciano como se indica anteriormente. La posición 4 está sustituida con un átomo de oxígeno que forma un resto éter. El anillo fenilo se sustituirá adicionalmente, como representa X^{1}, en la posición 2, 3, 5 ó 6 con un átomo de halógeno, un grupo ciano, un grupo alcoxi (C_{1}-C_{6}), un resto haloalcoxi o un resto haloalquilo. Típicamente, será un átomo de halógeno o un resto haloalquilo localizado en la posición 2 ó 6. Más típicamente, será trifluorometilo localizado en la posición 2 ó 6 del anillo fenilo. Opcionalmente, el anillo fenilo puede estar sustituido con un cuarto (4º) sustituyente, como se indica por X^{2}. X^{2}, si está presente, puede representar un átomo de halógeno, un grupo ciano, un grupo alcoxi (C_{1}-C_{6}), un resto haloalcoxi o un resto haloalquilo.

El átomo de oxígeno en la posición 4 del benzonitrilo forma un enlace éter con una lactona como se describe a continuación:

4

El número de átomos de carbono en la lactona puede variar, como se indica por n que representa un número entero de 1 a 4. Así, la lactona puede ser un anillo de 5, 6, 7 u 8 eslabones. Ejemplos de dichas lactonas incluyen dihidro-piran-2-onas, tetrahidro-piran-2-onas, dihidro-furan-2-onas, tetrahidro-furan-2-onas, etc.

El enlace éter puede enlazarse a cualquier átomo de carbono de la lactona que esté permitido químicamente. Por ejemplo, si la lactona es una furan-2-ona, el éter se puede unir en la posición 3, 4 ó 5 de la lactona. Típicamente, el éter se enlazará a la posición 3 de la furan-2-ona. Si la lactona es una piran-2-ona, el éter se puede enlazar en la posición 3, 4, 5 ó 6 de la lactona. Típicamente, se enlazará a la posición 3 de la piran-2-ona.

La lactona puede estar opcionalmente sustituida con cualquiera de los sustituyentes listados anteriormente para R^{1}. R^{1} puede representar hasta 6 sustituyentes distintos del hidrógeno, si está permitido químicamente. Estos sustituyentes distintos del hidrógeno se pueden enlazar a cualquier átomo de carbono de la lactona que esté permitido químicamente. Un único átomo de carbono puede estar monosustituido o disustituido. Si está disustituido, el átomo de carbono pertinente puede estar sustituido con el mismo o diferentes sustituyentes.

Los modos de realización más específicos de la invención incluyen compuestos de fórmula I en los que:

i): X^{1} es cloro o trifluorometilo y está localizado en la posición 2 ó 6 del anillo fenilo, X^{2} no está presente, n es 1 ó 2 y R^{1} es como se ha definido anteriormente;

ii): X^{1} es cloro o trifluorometilo y está localizado en la posición 2 ó o 6 del anillo fenilo, X^{2} no está presente, n es 1 y R^{1} es como se ha definido anteriormente;

iii): X^{1} es cloro o trifluorometilo y está localizado en la posición 2 ó 6 del anillo fenilo, X^{2} no está presente, n es 2 y R^{1} es como se ha definido anteriormente;

iv): X^{1} es cloro o trifluorometilo y está localizado en la posición 2 ó 6 del anillo fenilo, X^{2} no está presente, n es 1 ó 2 y R^{1} se elige entre el grupo que consiste en alquilo C_{1}-C_{6}, alcoxi C_{1}-C_{6}, halógeno, haloalquilo y haloalcoxi.

v): X^{1} es trifluorometilo y está localizado en la posición 2 ó 6 del anillo fenilo, X^{2} no está presente, n es 1 y R^{1} representa un sustituyente elegido entre el grupo que consiste en metilo, etilo, trifluorometilo, metoxi y etoxi.

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Ejemplos más específicos de los compuestos representados por la Fórmula I incluyen:

i): (\pm)-4-(4,4-dimetil-2-oxo-tetrahidro-furan-3-iloxi)-2-trifluorometil-benzonitrilo;

ii): (R)-(+)-4-(4,4-dimetil-2-oxo-tetrahidro-furan-3-iloxi)-2-trifluorometil-benzonitrilo;

iii): (S)-(-)4-(4,4-dimetil-2-oxo-tetrahidro-furan-3-iloxi)-2-trifluorometil-benzonitrilo;

iv): (\pm)-4-(2-oxo-tetrahidro-furan-3-iloxi)-2-trifluorometil-benzonitrilo;

v): (+)-4-(2-oxo-tetrahidro-furan-3-iloxi)-2-trifluorometil-benzonitrilo;

vi): (-)-4-(2-oxo-tetrahidro-furan-3-iloxi)-2-trifluorometil-benzonitrilo.

vii): (\pm)-4-(5,5-dimetil-2-oxo-tetrahidro-furan-3-iloxi)-2-trifluorometil-benzonitrilo;

viii): (\pm)-4-(4-metoxi-2-oxo-tetrahidro-furan-3-iloxi)-2-trifluorometil-benzonitrilo;

ix): (\pm)-4-(5-metoxi-4-trifluorometil-2-oxo-tetrahidro-furan-3-iloxi)-2-trifluorometil-benzonitrilo;

x): (\pm)-4-(5-ciclohexil-4-metil-2-oxo-tetrahidro-furan-3-iloxi)-2-trifluorometil-benzonitrilo;

xi): (\pm)-4-(5-bencil-4-fluoro-2-oxo-tetrahidro-furan-3-iloxi)-2-trifluorometil-benzonitrilo;

xii): (\pm)-4-(5-ciano-4-metil-2-oxo-tetrahidro-furan-3-iloxi)-2-trifluorometil-benzonitrilo;

xiii): (\pm)-4-(4-metil-2-oxo-tetrahidro-furan-3-iloxi)-2-trifluorometil-benzonitrilo;

xiv): (\pm)-4-(4-fluoro-2-oxo-tetrahidro-furan-3-iloxi)-2-trifluorometil-benzonitrilo;

xv): (\pm)-4-(4-metoxi-2-oxo-tetrahidro-furan-3-iloxi)-2-trifluorometil-benzonitrilo;

xvi): (\pm)-4-(4-metoxi-2-oxo-tetrahidro-piran-3-iloxi)-2-trifluorometil-benzonitrilo;

xvii): (\pm)-4-(2-oxo-tetrahidro-piran-3-iloxi)-2-trifluorometil-benzonitrilo;

xviii): (\pm)-4-(6-ciclopentil-2-oxo-tetrahidro-piran-3-iloxi)-2-trifluorometil-benzonitrilo; y

xix): (\pm)-4-(6-metil-5-fluoro-4-metoxi-2-oxo-tetrahidro-piran-3-iloxi)-2-trifluorometil-benzonitrilo.

Síntesis

Los compuestos de fórmula I pueden prepararse utilizando métodos conocidos en la técnica para la preparación de éteres. Para una descripción de dichas reacciones, la atención del lector debe dirigirse a la solicitud de patente europea Nº 58932, publicada el 1 de Septiembre de 1982. El esquema I siguiente proporciona un resumen de una de dichas técnicas:

Esquema 1

5

Como se representó anteriormente, uno de los materiales de partida es un alcohol, según se representa por la estructura 1. R^{1} debe representar el (los) mismo(s) sustituyente(s) que se desea(n) en el producto final. Similarmente, n debe representar el mismo número entero que es necesario en el producto final. Dichas lactonas se conocen en la técnica. Muchas pueden adquirirse de fuentes comerciales conocidas. Como alternativa, pueden prepararse como se describe en la bibliografía.

El otro material de partida es un 4-fluorobenzonitrilo como se representa por la estructura 2. X^{1} y X^{2} deben representar cada uno el mismo sustituyente que se desea en el producto final. Estos benzonitrilos se conocen en la técnica y pueden sintetizarse como se describe en la solicitud de patente japonesa Nº 01097937.

La sustitución nucleofílica representada anteriormente puede realizarse como se conoce en la técnica. El alcohol de estructura 1 se pone en contacto con un ligero exceso de una base, tal como hidruro de sodio, t-butóxido de potasio, etc., para producir un ion alcóxido. La reacción se realiza en un disolvente aprótico, tal como tetrahidrofurano, en atmósfera inerte (típicamente, nitrógeno) a una temperatura de aproximadamente 0ºC. El alcohol se agita con la base durante un periodo de tiempo que varía de 5 a 60 minutos.

Entonces se añade un equivalente del 4-fluorobenzonitrilo de estructura 2 al medio de reacción y los reactivos se agitan durante un periodo de tiempo suficiente para permitir que el ion alcóxico desplace al flúor del benzonitrilo. Esto tarda, de forma típica, de 30 minutos a 24 horas. De forma típica, se deja que la reacción se caliente hasta temperatura ambiente.

El producto deseado de fórmula I puede recuperarse mediante extracción, evaporación u otros métodos conocidos en la técnica. Después puede purificarse opcionalmente mediante cromatografía, recristalización, destilación u otros métodos conocidos en la técnica.

Como apreciarán los expertos en la técnica, algunos de los métodos útiles para la preparación de tales compuestos, como se analizó anteriormente, pueden requerir la protección de un grupo funcional particular, por ejemplo, para evitar la interferencia de dicho grupo funcional en reacciones que se producen en otros sitios dentro de la molécula o para conservar la integridad de dicho grupo funcional. Un experto en la técnica puede determinar con facilidad la necesidad y el tipo de tal protección, y variará dependiendo, por ejemplo, de la naturaleza del grupo funcional y las condiciones del método de preparación elegido. Véase, por ejemplo, T. W. Greene, Protective Groups in Organic Synthesis, John Wiley & Sons, Nueva York, 1991.

Algunos de los compuestos de esta invención son ácidos y forman sales con cationes farmacéuticamente aceptables. Algunos de los compuestos de esta invención son básicos y forman sales con aniones farmacéuticamente aceptables. Todas estas sales están dentro del alcance de esta invención y pueden prepararse por métodos convencionales tales como combinar las entidades ácidas y básicas, normalmente en una relación estequiométrica, en un medio acuoso, no acuoso o parcialmente acuoso, según sea apropiado. Las sales se recuperan por filtración, por precipitación con un no disolvente seguido por filtración, por evaporación del disolvente o, en el caso de disoluciones acuosas, por liofilización, como sea apropiado. Los compuestos se obtienen en una forma cristalina según procedimientos conocidos en la técnica, tal como mediante disolución en un(os) disolvente(s) apropiado(s), tales como etanol, mezcla de hexanos o mezclas de agua/etanol.

Usos médicos y cosméticos

Los compuestos de fórmula I son moduladores del receptor de andrógenos. Pueden utilizarse para mejorar estados asociados con la activación inapropiada del receptor de andrógenos. Los compuestos que actúan como antagonistas de andrógenos pueden utilizarse para tratar o mejorar cánceres dependientes de hormonas, tales como carcinomas de próstata, hiperplasia benigna de la próstata, acné, hirsutismo, exceso de grasa, alopecia, hipertricosis, pubertad precoz, prostamegalia, virilización, y síndrome de ovario poliquístico. Los compuestos que actúan como agonistas parciales o agonistas totales pueden utilizarse para tratar o mejorar el hipergonadismo masculino, la disfunción sexual masculina (impotencia, esterilidad dispermatogénica masculina), la diferenciación sexual anómala (hermafroditismo masculino), la pubertad retrasada masculina, la infertilidad masculina, la anemia aplástica, la anemia hemolítica, la anemia de células falciformes, la púrpura trombocitopénica idiopática, la mielofibrosis, la anemia renal, enfermedades debilitantes (inducidas por operaciones quirúrgicas, tumores malignos, traumatismos, enfermedad renal crónica, quemaduras o SIDA), la mitigación del dolor en el carcinoma terminal de genitales femeninos, el cáncer de mama inoperable, la mastopatía, la endometriosis, la disfunción sexual femenina, la osteoporosis, la cicatrización de heridas y la reparación de tejido muscular.

Con el fin de mostrar las propiedades terapéuticas descritas anteriormente, los compuestos necesitan administrarse en una cantidad suficiente para modular la activación del receptor de andrógenos. Esta cantidad puede variar dependiendo de la enfermedad/estado concreto que se está tratando, la gravedad de la enfermedad/estado del paciente, el paciente, el compuesto concreto que se está administrando, la vía de administración, y la presencia de otros estados de enfermedad subyacentes dentro del paciente, etc. Cuando se administran por vía sistémica, los compuestos muestran, de forma típica, su efecto en un intervalo de dosificación de aproximadamente 0,1 mg/kg/día a aproximadamente 100 mg/kg/día para cualquiera de las enfermedades o estados listados anteriormente. Puede ser conveniente la administración diaria repetida y variará de acuerdo con los estados señalados anteriormente.

Los compuestos de la presente invención pueden ser administrados por diversas vías. Pueden administrarse por vía oral. Los compuestos también pueden administrarse por vía parenteral (es decir, por vía subcutánea, intravenosa, intramuscular, intraperitoneal, o intratecal), rectal o tópica.

En un modo de realización típico, los compuestos se administran por vía tópica. La administración tópica es especialmente apropiada para el hirsutismo, alopecia, acné y exceso de grasa. La dosis variará pero, como guía general, el compuesto estará presente en un vehículo dermatológicamente aceptable en una cantidad de aproximadamente 0,01% al 50% p/p, y de forma más típica de aproximadamente 0,1% al 10% p/p. La preparación dermatológica se aplicará al área afectada de 1 a 4 veces diarias. "Dermatológicamente aceptable" se refiere a un vehículo que se puede aplicar en la piel o en el cabello, y que permitirá que el fármaco se difunda hasta el sitio de actuación. Más específicamente, se refiere al sitio donde se desea la inhibición de la activación de un receptor de andrógenos.

En un modo de realización adicional, los compuestos se usan por vía tópica para mejorar la alopecia, especialmente la alopecia androgénica. Los andrógenos tienen un efecto profundo sobre el crecimiento del cabello y la pérdida del cabello. En la mayoría de los sitios del cuerpo, tales como la barba o la piel púbica, los andrógenos estimulan el crecimiento del cabello prolongando la fase de crecimiento del ciclo capilar (anágena) y aumentando el tamaño del folículo. El crecimiento del cabello sobre el cuero cabelludo no requiere andrógenos pero, paradójicamente, los andrógenos son necesarios para que se produzca la calvicie en el cuero cabelludo en individuos predispuestos genéticamente (alopecia androgénica), en los que se produce una disminución progresiva en la duración de la fase anágena y en el tamaño del folículo capilar. La alopecia androgénica también es común en mujeres en las que generalmente se presenta como una pérdida capilar difusa, en lugar de mostrar el patrón observado en los hombres.

Aunque los compuestos se usarán más típicamente para mejorar la alopecia androgénica, la invención no se limita a este estado específico. Los compuestos se pueden usar para mejorar cualquier tipo de alopecia. Los ejemplos de alopecia no androgénica incluyen alopecia areata, alopecia debida a radioterapia o quimioterapia, alopecia por escaras, alopecia relacionada con el estrés, etc. Como se utiliza en esta solicitud, "alopecia" se refiere a la pérdida de cabello parcial o completa sobre el cuero cabelludo.

Por tanto, los compuestos pueden aplicarse por vía tópica al cuero cabelludo y al cabello para prevenir o mejorar la aparición de la calvicie. Además, el compuesto puede aplicarse por vía tópica para inducir o estimular el crecimiento del cabello sobre el cuero cabelludo.

En un modo de realización adicional de la invención, se aplica por vía tópica un compuesto de fórmula I con el fin de prevenir el crecimiento de cabello en zonas en las que no se desea dicho crecimiento del cabello. Uno de estos usos será para mejorar el hirsutismo. El hirsutismo es un crecimiento excesivo del cabello en áreas que, de forma típica, no tienen pelo (es decir, la cara femenina). Este crecimiento inapropiado del cabello se produce, de modo más frecuente, en mujeres y aparece con frecuencia en la menopausia. La administración tópica de los compuestos mejorará este estado, conduciendo a una reducción o eliminación de este crecimiento capilar inapropiado o indeseado.

Los compuestos también pueden utilizarse por vía tópica para disminuir la producción de grasa. La grasa está compuesta por triglicéricos, ésteres de cera, ácidos grasos, ésteres de esterol y escualeno. La grasa se produce en las células acinares de las glándulas sebáceas y se acumula a medida que estas células envejecen. En la maduración, las células acinares se destruyen, liberando la grasa al conducto lumenal de forma que puede depositarse sobre la superficie de la piel.

En algunos individuos, se segrega una cantidad excesiva de grasa sobre la piel. Esto puede tener una serie de consecuencias adversas. Puede exacerbar el acné, puesto que el grasa es la principal fuente de alimento del Propionbacterium acnes, el agente causante del acné. Puede provocar que la piel tenga un aspecto grasiento que, de forma típica, se considera estéticamente poco atractivo.

La formación de grasa está regulada por factores del crecimiento y varias hormonas, incluido el andrógeno. El mecanismo celular y molecular mediante el cual los andrógenos ejercen su influencia sobre las glándulas sebáceas no se ha aclarado por completo. Sin embargo, la experiencia clínica documenta el impacto que tienen los andrógenos sobre la producción de grasa. La producción de grasa aumenta significativamente durante la pubertad, cuando los niveles de andrógenos están en su punto más alto. Se ha demostrado que los antiandrógenos, tal como la finasterida, disminuyen la secreción de andrógenos. Para información adicional sobre la producción de grasa y el papel de los andrógenos en el metabolismo de la piel, véase Moshell et al., Progress in Dermatology, vol. 37, Nº 4, dic. 2003.

Por tanto, los compuestos de fórmula I inhiben la secreción de grasa y, por tanto, reducen la cantidad de grasa sobre la superficie de la piel. Los compuestos pueden utilizarse para tratar varias enfermedades dérmicas, tales como acné o dermatitis grasarreica.

Además de tratar las enfermedades asociadas con un exceso de producción de grasa, los compuestos también pueden utilizarse para lograr un efecto cosmético. Algunos consumidores creen que tienen glándulas sebáceas superactivas. Sienten su piel aceitosa y, por ello, sin atractivo. Estos individuos pueden utilizar los compuestos de fórmula I para disminuir la cantidad de grasa en su piel. La disminución de la secreción de grasa mejorará las pieles aceitosas en individuos afectados por estos estados.

En un modo de realización adicional, los compuestos que actúan como agonistas parciales, o agonistas totales, pueden utilizarse para tratar o mejorar la osteoporosis. La osteoporosis se caracteriza por una pérdida ósea, que resulta de un desequilibrio entre la reabsorción ósea (destrucción) y la formación de hueso, que comienza en la cuarta década y continúa a lo largo de la vida con una velocidad de aproximadamente 1-4% anual (Eastell, Treatment of postmenopausal osteoporosis, New Eng. J. Med. 338: 736, 1998). En los Estados Unidos existen en la actualidad aproximadamente 20 millones de personas con fracturas detectables en las vértebras debidas a la osteoporosis. Además, se producen aproximadamente 250.000 fracturas de cadera anuales debidas a la osteoporosis, asociadas con una tasa de mortalidad de 12%-20% en los primeros dos años, mientras que 30% de los pacientes requieren cuidados sanitarios en el hogar después de la fractura y muchos no vuelven a ser totalmente ambulatorios. En mujeres posmenopáusicas, la deficiencia en estrógenos conduce a un aumento de la reabsorción ósea que produce una pérdida ósea en las vértebras de aproximadamente 5% anual, inmediatamente después de la menopausia. Por tanto, un tratamiento/prevención de primera línea de este estado es la inhibición de la reabsorción ósea mediante bisfosfonatos, estrógenos, moduladores del receptor del estrógeno selectivos (SERM) y calcitonina. Sin embargo, los inhibidores de la reabsorción ósea no son suficientes para restablecer la masa ósea en pacientes que ya han perdido una cantidad significativa de hueso. El aumento en densidad de masa ósea (BMD) espinal logrado mediante un tratamiento con bisfosfonato puede alcanzar 11% después de 7 años de tratamiento con alendronato. Además, puesto que la velocidad de recambio óseo se diferencia de un lugar a otro (es mayor en el hueso trabecular de las vértebras que en la corteza de los huesos largos), los inhibidores de la reabsorción ósea son menos eficaces para aumentar la BMD de la cadera y evitar la fractura de cadera. Por tanto, los agentes osteoanabólicos, que aumentan la formación de hueso cortical/periosteal y la masa ósea de los huesos largos, solucionan una necesidad no cubierta en el tratamiento de la osteoporosis, en especial para pacientes con un alto riesgo de fracturas de cadera.

Varios estudios demuestran que los andrógenos son osteoanabólicos en mujeres y hombres. Se ha demostrado que los esteroides anabólicos, tales como el decanoato de nandrolona o estanozolol, aumentan la masa ósea en mujeres postmenopáusicas. Los efectos beneficiosos de los andrógenos sobre los huesos en la osteoporosis post-menopáusica están bien documentados en estudios recientes que utilizan la administración combinada de testosterona y estrógeno (Hofbauer, et al., Androgen effects on bone metabolism: recent progress and controversies, Eur. J. Endocrinol. 140, 271-286, 1999). Por tanto, los compuestos de fórmula I que muestran una actividad agonista, o agonista parcial, pueden utilizarse para tratar o mejorar la osteoporosis, incluyendo la osteoporosis primaria, tales como la osteoporosis senil, postmenopáusica y juvenil, así como la osteoporosis secundaria, tales como la osteoporosis debida al hipertiroidismo o el síndrome de Cushing (debido a un tratamiento con corticosteroides), acromegalia, hipogonadismo, disosteogénesis e hipofosfatasemia. Otras indicaciones relacionadas con los huesos susceptibles de ser tratadas con agonistas de andrógenos incluyen fracturas osteoporóticas, pérdida ósea idiopática infantil, pérdida ósea alveolar, pérdida ósea mandibular, fracturas óseas, osteotomía, periodontitis o invasión prostética.

Los compuestos que actúan como agonistas, o agonistas parciales, también pueden utilizarse para estimular la masa muscular en pacientes que padecen enfermedades debilitantes, como SIDA, cáncer, caquexia, quemaduras, enfermedad renal, etc. Los pacientes que padecen traumatismos, úlceras de decúbito, envejecimiento, etc., también pueden beneficiarse de los efectos anabólicos de los andrógenos.

Coadministración

En un modo de realización adicional de la invención, los compuestos de fórmula I pueden coadministrarse con otros compuestos para potenciar aún más su actividad, o para minimizar los efectos secundarios potenciales. Por ejemplo, se sabe que los agentes de apertura del canal de potasio, tal como el minoxidil, estimulan el crecimiento del cabello e inducen la fase anágena. Los ejemplos de otros agentes de apertura del canal de potasio incluyen (3S,4R)-3,4-dihidro-4-(2,3-dihidro-2-metil-3-oxopiridazin-6-il)oxi-3-hidroxi-6-(3-hidroxifenil)sulfonil-2,2,3-trimetil-2H-benzo[b]pirano, diaxozida, y P1075 que está desarrollándose en Leo Pharmaceuticals. Tales compuestos pueden coadministrarse con los compuestos de fórmula I para mejorar la alopecia.

También se sabe que la hormona tiroidea estimula el crecimiento capilar. También se ha demostrado que los sustitutivos sintéticos de la hormona tiroidea (es decir, tiromiméticos) estimulan el crecimiento capilar. Estos tiromiméticos se han descrito en la bibliografía previamente. La atención del lector debe dirigirse a la solicitud de patente europea Nº 1262177, cuyos contenidos se incorporan en la presente memoria como referencia, para obtener un análisis de estos compuestos y su uso para mejorar la alopecia. Un compuesto de interés concreto es la 2-{4-[3-(4-fluoro bencil)-4-hidroxifenoxi]-3,5-dimetilfenil}-2H-[1,2,4]triazin-3,5-diona. Tales compuestos pueden coadministrarse con los compuestos de fórmula I para mejorar la alopecia.

Los antiandrógenos pueden actuar a través de varios mecanismos diferentes. Por ejemplo, algunos compuestos bloquean la conversión de testosterona en 5-\alpha-dihidrotestosterona, que es responsable del efecto biológico en muchos tejidos. Se ha demostrado que los inhibidores de la 5-alfa-reductasa, tal como la finasterida, estimulan el crecimiento capilar y disminuyen la producción de grasa. La finasterida está disponible comercialmente en Merck con el nombre comercial de Propecia®. Ejemplos de otros inhibidores de la 5-\alpha-reductasa incluyen la dutasterida (Glaxo Smithkline). Tales compuestos pueden coadministrarse con los compuestos de fórmula I para mejorar la alopecia y/o para disminuir la producción de grasa.

También se ha demostrado que los inhibidores de la proteína-quinasa C estimulan el crecimiento capilar e inducen la fase anágena. Se ha demostrado que la calfostina C, que es un inhibidor selectivo de la proteína-quinasa C, induce la fase anágena. También se ha demostrado que otros inhibidores selectivos de la proteína-quinasa C, tales como la hexadecilfosfocolina, el cloruro de palmitoil-DL-carnitina y el sulfato de polimixina B, inducen la fase anágena [Skin Pharmacol. Appl. Skin Physiol., mayo-agosto 2000; 13 (3-4): 133-42]. Cualquiera de dichos inhibidores de la proteína-quinasa C puede coadministrarse con un compuesto de fórmula I para mejorar la alopecia.

Las inmunofilinas son una familia de proteínas citoplásmicas. Sus ligandos incluyen ciclosporina, FK506 y rapamicina. Se derivan de hongos y se desarrollaron en principio por sus potentes propiedades inmunosupresoras. La ciclosporina se une a las proteínas, ciclofilinas, mientras que el FK506 y la rapamicina se unen a las proteínas de unión a FK (FKBP). Se ha demostrado que todos estos compuestos estimulan el crecimiento capilar e inducen la fase anágena. Cualquier ligando de inmunofilinas puede coadministrarse con un compuesto de fórmula I para mejorar la alopecia.

Los inhibidores de la acil-CoA-colesterol-acil-transferasa (ACAT) se evaluaron inicialmente para el tratamiento del colesterol elevado en suero. Posteriormente se descubrió que estos compuestos diminuyen la producción de grasa (patente de Estados Unidos Nº 6.133.326). Cualquiera de dichos inhibidores de la ACAT se puede administrar conjuntamente con un compuesto de fórmula I para disminuir la producción de grasa, mejorar la piel aceitosa, etc.

Se han usado antibióticos, tales como la tetraciclina y la clindamicina, para mejorar el acné. El antibiótico erradica el microorganismo, Propionbacterium acnes, lo cual conduce a una reducción del acné del paciente. Los compuestos de fórmula I pueden coadministrarse con cualquier antibiótico adecuado para el tratamiento del acné.

Se ha demostrado que los retinoides, tal como la isotretinoína, disminuyen la producción de grasa y se utilizan para tratar el acné. Estos retinoides pueden coadministrarse con un compuesto de fórmula I para disminuir la producción de grasa y/o tratar el acné.

Se ha demostrado que el estrógeno y la progesterona disminuyen la producción de grasa. Estos compuestos, o cualquier agonista sintético de estos compuestos, pueden coadministrarse con un compuesto de fórmula I para disminuir la producción de grasa.

Tal como se utiliza en esta solicitud, la coadministración se refiere a administrar un compuesto de fórmula I con un segundo producto medicinal que, de forma típica, tiene un mecanismo de acción diferente, utilizando un régimen de dosificación que estimule el resultado deseado. Esto puede referirse a una dosificación simultánea, una dosificación en diferentes momentos durante un mismo día o incluso en días distintos. Los compuestos pueden administrarse por separado o pueden combinarse en una única formulación. Las técnicas para preparar estas formulaciones se describen a continuación.

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Formulaciones

Si se desea, los compuestos pueden administrarse directamente sin ningún vehículo. Sin embargo, para facilitar la administración, se formularán, de forma típica, en vehículos farmacéuticos. De modo similar, se formularán, de forma más típica, en vehículos dermatológicos o cosméticos. En esta solicitud, las expresiones "vehículo dermatológico" y "vehículo cosmético" se utilizan de modo intercambiable. Se refieren a formulaciones diseñadas para la administración directa sobre la piel o el cabello.

Las composiciones farmacéuticas y cosméticas se pueden preparar usando métodos conocidos en la técnica. De forma típica, una cantidad eficaz del compuesto se mezclará con un vehículo farmacéuticamente/cosméticamente aceptable.

Para la administración oral, los compuestos pueden formularse en preparaciones sólidas o líquidas como cápsulas, píldoras, comprimidos, pastillas, fundidos, polvos, suspensiones o emulsiones. Las formas de dosificación unitarias sólidas pueden ser cápsulas de tipo de gelatina habitual que contienen, por ejemplo, tensioactivos, lubricantes y cargas inertes, tales como lactosa, sacarosa y almidón de maíz, o pueden ser preparaciones de liberación sostenida.

En otro modo de realización, los compuestos de fórmula I pueden comprimirse con bases para comprimidos convencionales, tales como lactosa, sacarosa y almidón de maíz, junto con aglomerantes, tales como goma arábiga, almidón de maíz o gelatina, agentes disgregantes, tales como almidón de patata o ácido algínico, y un lubricante, tales como ácido esteárico o estearato de magnesio. Las preparaciones líquidas se preparan disolviendo el ingrediente activo en un disolvente farmacéuticamente aceptable acuoso o no acuoso, que también puede contener agentes de suspensión, agentes edulcorantes, agentes aromatizantes y agentes conservantes como se conoce en la técnica.

Para la administración parenteral, los compuestos pueden disolverse en un vehículo farmacéutico fisiológicamente aceptable y administrarse bien como una disolución o bien como una suspensión. Los ejemplos de vehículos farmacéuticos adecuados son agua, disolución salina, disoluciones de dextrosa, disoluciones de fructosa, etanol, o aceites de origen animal, vegetal o sintético. El vehículo farmacéutico también puede contener conservantes, disoluciones tampón, etc., como se conoce en la técnica. Cuando los compuestos se van a administrar por vía intratecal, también se pueden disolver en líquido cefalorraquídeo como se conoce en la técnica.

Los compuestos de esta invención típicamente se administrarán por vía tópica. Tal como se utiliza en la presente memoria, tópico se refiere a la aplicación de los compuestos (y el vehículo opcional) directamente sobre la piel y/o el cabello. La composición tópica según la presente invención puede estar en forma de disoluciones, lociones, bálsamos, cremas, ungüentos, liposomas, pulverizados, geles, espumas, barras o cualquier otra formulación que se utilice habitualmente en dermatología.

Por tanto, un modo de realización adicional se refiere a composiciones cosméticas o farmacéuticas, en particular composiciones dermatológicas, que comprenden al menos uno de los compuestos que se corresponden con la fórmula I anterior. Dichas composiciones dermatológicas contendrán de 0,001% al 10% en p/p de los compuestos mezclados con un vehículo dermatológicamente aceptable y, de modo más típico, de 0,1% al 5% en p/p de los compuestos. Estas composiciones se aplicarán, de forma típica, de 1 a 4 veces diarias. La atención del lector debe dirigirse a Remington's Pharmaceutical Science, 17ª edición, Mack Publishing Co., Easton, Pensilvania, para un análisis de la forma de preparación dichas formulaciones.

Las composiciones según la invención también pueden consistir en preparaciones sólidas que constituyen barras o jabones de limpieza. Estas composiciones se preparan según los métodos habituales.

Los compuestos también pueden utilizarse para el cabello en forma de disoluciones acuosas, alcohólicas o acuosas-alcohólicas, o en forma de cremas, geles, emulsiones o espumas o, como alternativa, en forma de composiciones en aerosol que también comprenden un propulsor a presión. La composición según la invención también puede ser una composición para el cuidado del cabello y, en particular, un champú, una loción para fijar el cabello, una loción tratante, un gel o crema de peinado, una composición de tinte, una loción o gel para evitar la pérdida de cabello, etc. Las cantidades de los diversos constituyentes en las composiciones dermatológicas según la invención son las que se utilizan de modo convencional en los campos considerados.

Los productos medicinales y cosméticos que contienen los compuestos de la invención se envasarán, de forma típica, para la distribución al por menor (es decir, un artículo elaborado). Tales artículos se etiquetarán y envasarán de manera que se den instrucciones al paciente sobre la forma de utilizar el producto. Dichas instrucciones incluirán el estado que se va a tratar, la duración del tratamiento, el programa de dosificación, etc.

Los compuestos de fórmula I también se pueden mezclar con cualquier vehículo inerte y usar en ensayos de laboratorio con el fin de determinar la concentración de los compuestos en el suero, orina, etc. del paciente, como es conocido en la técnica. Los compuestos también se pueden usar como una herramienta de investigación.

Uso en ganado

Además de los usos terapéuticos y cosméticos descritos anteriormente, los compuestos también se pueden utilizar para estimular el crecimiento de animales, en especial de ganado. Los compuestos aumentarán la velocidad a la que los animales ganan peso, aumentarán la proporción en carne magra de la carne resultante y mejorarán la eficacia de la utilización del pienso. Esto puede lograrse administrando una cantidad eficaz de un compuesto de fórmula I a un animal que reciba una nutrición adecuada para apoyar el crecimiento (es decir, suficientes calorías, aminoácidos, vitaminas, minerales, grasas esenciales, etc).

Para simplificar la administración, el compuesto se mezcla, de forma típica, con piensos para animales, o se prepara en forma de una premezcla, concentrado o suplemento del pienso para animales, que puede mezclarse con los piensos para animales. Independientemente del procedimiento elegido, el compuesto estará presente, de forma típica, a unos niveles desde aproximadamente 0,05 a 500 ppm en el pienso.

Las premezclas, suplementos o concentrados de pienso para animales pueden prepararse mezclando, en una base de peso, de aproximadamente 0,5% a 50% de un compuesto con aproximadamente 50% a 99,5% de un diluyente comestible. Los diluyentes adecuados para su utilización en la fabricación de suplementos, concentrados y premezclas de piensos para animales incluyen los siguientes: harina de maíz, harina de soja, harina de huesos, harina de alfalfa, harina de semilla de algodonero, urea, melazas y otros materiales similares. El uso de los diluyentes en los suplementos, concentrados y premezclas de piensos mejora la uniformidad de la distribución del ingrediente activo en el pienso terminado.

Los piensos para ganado porcino, ganado vacuno, ovejas y cabras contienen típicamente aproximadamente 0,05 a 400 gramos de ingrediente activo por tonelada de pienso. Los piensos de aves de corral y mascotas domésticas varían desde aproximadamente 0,05 a 400 gramos por tonelada de pienso.

Aunque la invención se ha descrito en relación con sus modos de realización específicos, se entenderá que se pueden hacer modificaciones adicionales y se pretende que esta solicitud incluya cualquier variación, uso o adaptación de la invención que, en general, sigan los principios de la invención y que incluyan dichas desviaciones de la presente descripción cuando estén dentro de la práctica conocida o habitual dentro de la técnica de la invención. Los siguientes ejemplos y datos biológicos se presentan con el fin de ilustrar mejor la invención. Esta memoria descriptiva no debe considerarse limitante de la invención de ninguna manera.

Ejemplos Ejemplo 1 (\pm)-4-(4,4-Dimetil-2-oxo-tetrahidro-furan-3-iloxi)-2-trifluorometil-benzonitrilo)

6

Se añadió hidruro de sodio/aceite mineral (dispersión al 60%, 11 g, 270 mmoles) en tetrahidrofurano seco (50 mL) a una disolución fría (-15ºC) con agitación que consistía en 3-hidroxi-4,4-dimetil-dihidro-furan-2-ona (37,1 g, 281 mmoles) en tetrahidrofurano anhidro (90 mL). Se diluyó la mezcla de reacción mediante la adición de más tetrahidrofurano anhidro (100 mL). A esta mezcla con agitación se le añadió a través de una cánula, después del cese de la liberación de hidrógeno gas, una disolución que consistía en 4-fluoro-2-(trifluorometil)benzonitrilo (55,4 g, 289 mmoles) en tetrahidrofurano anhidro (50 mL). Se dejó con agitación la mezcla de reacción durante la noche, mientras que se calentaba gradualmente a temperatura ambiente. Se añadió acetato de etilo (100 mL) y se lavó la disolución con cloruro de amonio acuoso saturado, agua y dos veces con cloruro de sodio acuoso saturado. La fase orgánica se secó sobre sulfato de magnesio anhidro, se filtró y se concentró. El sólido en bruto (86,72 g) se recristalizó en etanol para obtener 65,47 g (rendimiento de 79,45%) de un sólido cristalino blanco; RMN de ^{1}H (400 MHz; CDCl3) \delta 7,76 (d, 1H, J = 8,5 Hz), 7,42 (d, 1H, J = 2,7 Hz), 7,30 (dd, 1H, J = 8,5, 2,4 Hz), 4,69 (s, 1H), 4,15 (d, 1H, J = 9,0 Hz), 4,09 (d, 1H, J = 9,0 Hz), 1,27 (s, 3H), 1,27 (s, 3H); RMN ^{19}F (376 MHz; CDCl3) \delta-62,70 (s, 3F); MS (APCI+) 341,1 (M+1+acetonitrilo).

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Ejemplo 2 (R)-(+)-4-(4,4-Dimetil-2-oxo-tetrahidro-furan-3-iloxi)-2-trifluorometil-benzonitrilo

7

Los enantiómeros del (\pm) 4-(4,4-dimetil-2-oxo-tetrahidro-furan-3-iloxi)-2-trifluorometil-benzonitrilo (ejemplo 1) se separaron por HPLC quiral (Chiralcel AD, 250 x 4,6 mm; fase móvil: mezcla de hexanos-isopropanol 1:1; caudal: 0,7 mL/min).

12,57 g (recuperación en columna de 21%); temperatura de fusión: 89,9-90,7ºC; [\alpha]_{589}^{25}: +191,5º; RMN ^{19}F (376 MHz; CDCl3) \delta-62,70 (s, 3F); MS (APCI+) 341,1 (M+1+acetonitrilo). Microanálisis para el C_{14}H_{12}F_{3}NO_{3} (teórico/encontrado): C 56,19/56,25; H 4,04/3,86; N 4,68/4,67; F 19,05/18,64.

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Ejemplo 3 (S)-(-)4-(4,4-Dimetil-2-oxo-tetrahidro-furan-3-iloxi)-2-trifluorometil-benzonitrilo

8

Los enantiómeros del (\pm) 4-(4,4-dimetil-2-oxo-tetrahidro-furan-3-iloxi)-2-trifluorometil-benzonitrilo (ejemplo 1) se separaron por HPLC quiral (Chiralcel AD, 250 x 4,6 mm; fase móvil: mezcla de hexanos-isopropanol 1:1; caudal: 0,7 mL/min.)

325 g (recuperación en columna de 29,8%); temperatura de fusión: 83,1-84,4ºC;

[\alpha]_{589}^{25}: -184,2º; RMN ^{19}F (376 MHz; CDCl3) \delta-62,70 (s, 3F); MS (APCI-) 298,0 (M-1). Microanálisis para el C_{14}H_{12}F_{3}NO_{3} (teórico/encontrado): C 56,19/56,23; H 4,04/3,81; N 4,68/4,65; F 19,05/19,37.

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Ejemplo 4 (\pm)-4-(2-Oxo-tetrahidro-furan-3-iloxi)-2-trifluorometil-benzonitrilo

9

Se añadió en porciones hidruro de sodio (dispersión al 60% en aceite mineral, 0,44 g, 18,34 mmoles) a una disolución fría (-10ºC) con agitación que consistía en 2-hidroxi-\gamma-butirolactona (1,29 g, 12,6 mmoles) en tetrahidrofurano (25 mL). Se agitó la mezcla de reacción durante aproximadamente 40 minutos antes de la adición directa de 4-fluoro-(2-trifluorometil)-benzonitrilo sólido (2,0 g, 11,0 mmoles). Se dejó que la mezcla de reacción se calentara gradualmente a temperatura ambiente durante la noche. Se añadió agua y el producto se extrajo con acetato de etilo. La fase orgánica se lavó con cloruro de sodio acuoso saturado, se secó sobre sulfato de magnesio anhidro y se filtró y se concentró. El producto bruto se purificó por cromatografía ultrarrápida. Mediante elución con un gradiente de 25-50% de acetato de etilo en mezcla de hexanos se obtuvo un sólido blanco. El producto se recristalizó en acetato de etilo-mezcla de hexanos para obtener 0,45 g (rendimiento de 16%) de un sólido cristalino blanco; temperatura de fusión: 20ºC; RMN de ^{1}H (400 MHz; CDCl_{3}) \delta 7,79 (d, 1H, J = 8,5 Hz), 7,43 (d, 1H, J = 2,4 Hz), 7,33 (dd, 1H, J = 8,5,2,4 Hz), 5,08 (t, 1H, J = 7,8 Hz), 4,57 (m, 1H), 4,43 (m, 1H), 2,78 (m, 1H), 2,56 (m, 1H); RMN ^{19}F (376MHz; CDCl3) \delta-62,72 (s, 3F); MS (APCI-) 270,0 (M-1). Microanálisis para el C_{12}H_{8}F_{3}O_{3}N (teórico/encontrado): C 53,15/53,01; H, 2,97/2,81; N 5,16/4,97; F 21,02/21,24.

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Ejemplo 5 (+)-4-(2-Oxo-tetrahidro-furan-3-iloxi)-2-trifluorometil-benzonitrilo

10

Los enantiómeros del (\pm)-4-(2-oxo-tetrahidro-furan-3-iloxi)-2-trifluorometil-benzonitrilo (ejemplo 4) se separaron por HPLC quiral (Chiralcel AD, 250 x 4,6 mm; fase móvil: etanol-mezcla de hexanos 20:80; caudal: 0,8 mL/min.)

[\alpha]_{589}^{25} (CH_{2}Cl_{2}): -164º; temperatura de fusión 107-108ºC; MS (APCI-) 270,0 (M-1); Microanálisis para el C_{12}H_{8}F_{3}
O_{3}N (teórico/encontrado): C 53,15/52,98; H, 2,97/3,01; N 5,16/4,97; F 21,02/21,51.

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Ejemplo 6 (-)-4-(2-Oxo-tetrahidro-furan-3-iloxi)-2-trifluorometil-benzonitrilo

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Los enantiómeros del (\pm)-4-(2-oxo-tetrahidro-furan-3-iloxi)-2-trifluorometil-benzonitrilo (ejemplo 4) se separaron por HPLC quiral (Chiralcel AD, 250x4,6 mm; fase móvil: etanol-mezcla de hexanos 20:80; caudal: 0,8 mL/min.)

[\alpha]_{589}^{25} (CH_{2}Cl_{2}): +170º; temperatura de fusión 107-108ºC; MS (APCI-) 270,0 (M-1); Microanálisis para el C_{12}H_{8}F_{3}O_{3}N (teórico/encontrado): C 53,15/52,77; H, 2,97/2,88; N 5,16/4,97; F 21,02/20,46.

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Ejemplo 7

Los compuestos de fórmula I tienen afinidad por el receptor de andrógenos. Esta afinidad se ha demostrado para compuestos elegidos utilizando el receptor humano. La siguiente descripción describe la forma en que se llevó a cabo el ensayo.

Se realizó un análisis de unión competitiva en extractos de hAR (receptor de andrógenos humano) generados de baculovirus/Sf9 en presencia o ausencia de diferentes concentraciones de agente de ensayo y una concentración fija de ^{3}H-dihidrotestosterona (^{3}H-DHT) como marcador. Este método de ensayo de enlace es una modificación de un protocolo previamente descrito (Liao S. et. al. J. Steroid Biochem. 20: 11-17 1984). En resumen, se incuban concentraciones progresivamente decrecientes de los compuestos en presencia de extracto de hAR (Chang et al. P.N.A.S. Vol. 89, págs. 5546-5950, 1992), hidroxilapatita y ^{3}H-DHT 1nM durante una hora a 4ºC. Posteriormente, las mezclas de reacción de enlace se lavaron tres veces hasta eliminar completamente el exceso de ^{3}H-DHT sin enlazar. Se determinaron los niveles de ^{3}H-DHT enlazada al hAR en presencia de los compuestos (es decir, el enlace competitivo) y se compararon con los niveles enlazados cuando no había competidor presente (es decir, el enlace máximo). La afinidad de enlace del compuesto al hAR se expresa como la concentración del compuesto a la que se inhibe la mitad del enlace máximo. La tabla I siguiente muestra los resultados que se obtuvieron para compuestos elegidos (los datos indicados son la media de varios ensayos como se muestra a continuación).

TABLA I

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Ejemplo 8

Se determinó la capacidad de los compuestos para antagonizar los efectos de los andrógenos sobre el receptor de andrógenos en un ensayo de células enteras como se describe inmediatamente a continuación.

Procedimiento experimental para el ensayo celular de antagonistas de AR

Línea celular: MDA-MB453-MMTV clon 54-19. Esta línea celular es una línea celular transfectada de forma estable con un entorno de células MDA-MB453 (una línea celular de tumor de mama humano que expresa el receptor de andrógenos). Primero se clonó un promotor mínimo de MMTV que contenía ARE delante de un gen informador de luciferasa de luciérnaga. Después se clonó la cascada en el vector de transfección pUV120 puro. Se utilizó un método de electroporación para transfectar las células MDA-MB-453. Se eligió una línea celular estable resistente a la puromicina.

Medios de cultivo celulares y reactivos

Medio de cultivo: DMEM (alto contenido de glucosa, Gibco nº de catálogo: 11960-044), FBS al 10%, y L-glutamina al 1%

Medio para placa: DMEM (exento de rojo de fenol), suero HyClone tratado con carbón al 10%, L-glutamina al 1%

Medio de ensayo: DMEM (exento de rojo de fenol), suero HyClone tratado con carbón al 1%, L-glutamina al 1%, y penicilina/estreptomicina al1%

3X disolución tampón de luciferasa: beta-mercaptoetanol al 2%, ATP al 0,6%, luciferina al 0,0135% en tampón de lisis celular

Procedimiento de ensayo

1.: Las células se mantienen en medio de cultivo, separando las células cuando alcanzan una confluencia de 80-90%.

2.: Para ensayar los compuestos, se cultivan en placa 10.000 células/pocillo para opacificar una placa de cultivo celular 96 en 100 \muL/pocillo de medio de cultivo en placa, y se cultiva durante la noche a 37ºC en un incubador de cultivos celulares.

3.: Se retira cuidadosamente el medio de cultivo en placa, después se añade 80 \muL/pocillo de medio de ensayo precalentado, se añaden 10 \muL/pocillo de compuesto de ensayo (concentración final a 1000 nM, 200 nM, 40 nM, 8 nM, 1,6 nM, y 0,32 nM), y se incuba a 37ºC durante 30 minutos.

4.: Se añaden 10 \muL/pocillo de DHT recién preparado (concentración final a 100pM) a cada pocillo y se incuba a 37ºC durante 17 h (durante la noche).

5.: Se añade 3X disolución tampón de luciferasa 50 \muL/pocillo, se incuba a temperatura ambiente durante 5 minutos, y después se hace el recuento en un luminómetro.

Se normaliza el incremento de inducción frente al fondo por el DHT 100pM en ausencia de los compuestos de ensayo como 100%, y el resultado experimental se expresa como porcentaje de inhibición por los compuestos de ensayo.

Los resultados se muestran en la tabla II. Los resultados se indican como la media de varios ensayos como se describe a continuación (los números de los ensayos se indican en la nota al pie). N.D. indica que no se ensayó el compuesto.

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TABLA II

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Ejemplo 9 Modelo animal para la inhibición de la producción de grasa

Luderschmidt et al. describen un modelo animal para ensayar si los compuestos son capaces de modular la secreción de grasa. Arch. Derm. Res., 258, 185-191 (1977). Este modelo utiliza hámsteres sirios macho, cuyas orejas contienen glándulas sebáceas. Con este modelo se investigaron los productos de los ejemplos1 y 2.

El ensayo para la inhibición de grasa se realizó de la siguiente manera. Se introdujeron los hámsteres sirios macho de 9 a 10 semanas de edad en el entorno del laboratorio y se aclimataron durante 2 semanas antes de su uso en el estudio. Cada grupo consistía en 5 animales y se ensayaron en paralelo con controles de vehículo y positivos. Antes de la administración, se disolvió una cantidad suficiente de cada compuesto en 1 mL de un disolvente que consistía en transcutol, propilenglicol y etanol (2/2/6 v/v/v) para obtener la concentración final indicada en la tabla III.

Los animales se dosificaron por vía tópica dos veces diarias, cinco días a la semana, durante 4 semanas. Cada dosis consistía en 25 microlitros de vehículo control o fármaco. La dosis se aplicó a las superficies ventrales de ambas orejas, derecha e izquierda. Todos los animales se sacrificaron aproximadamente 18-24 horas después de la dosis final. Se recogió la oreja derecha de cada animal y se utilizó para el análisis de grasa.

Las orejas se prepararon para el análisis de HPLC de la siguiente manera. Se realizó una biopsia distal de un trozo circular de 8 mm, justo por encima de la marca anatómica en "V" de la oreja para normalizar el área de muestra. Se retiró el trozo circular. La superficie ventral de la biopsia (el área en la que se aplicó directamente la dosis tópica a las glándulas sebáceas) se conservó para el ensayo, y la superficie dorsal del trozo circular de la biopsia se rechazó.

Las muestras de tejido se soplaron con N_{2} gaseoso y se conservaron a -80ºC en atmósfera de nitrógeno hasta el análisis por HPLC. Además de las muestras de orejas, se almacenó también a -80ºC una alícuota de cada fármaco y vehículo (al menos 250 \muL) para su inclusión en el análisis por HPLC.

El análisis por HPLC se realizó con un extracto de la muestra de tejido. Se pusieron en contacto las muestras de tejido con 3 mL de disolvente (una mezcla de 2,2,4-trimetilpentano y alcohol isopropílico 4:1). La mezcla se agitó durante 15 minutos y se conservó durante la noche a temperatura ambiente, protegida de la luz. A la mañana siguiente se añadió 1 mililitro de agua a la muestra y se agitó durante 15 minutos. La muestra se centrifugó entonces a aproximadamente 1500 rpm durante 15 minutos. Se transfirieron dos mL de la fase orgánica (capa superior) a un vial de vidrio, se secaron a 37ºC, en atmósfera de nitrógeno, durante aproximadamente 1 hora y después se liofilizaron durante aproximadamente 48 horas. Las muestras se retiraron entonces del liofilizador y cada vial se reconstituyó con 600 \muL de disolvente A [trimetilpentano/tetrahidrofurano (99:1)]. Entonces las muestras se volvieron a tapar y se agitaron en centrifugadora durante 5 minutos.

200 \muL de cada muestra se transfirieron entonces a un vial de HPLC de 200 \muL etiquetado previamente con 200 \muL de insertos de vidrio. Los viales de HPLC se colocaron en la bandeja del automuestreador de la unidad de HPLC serie Agilent 1100. El sistema de HPLC Agilent 1100 consistía en un automuestreador termostatizado, una bomba cuaternaria, un calentador de columna y un módulo de interfase A/D. Todos los componentes son controlados por el programa informático Agilent ChemStation. Se mantuvo a 30ºC una columna analítica Waters Spherlsorb S3W 4,6 x 100 mm mediante la unidad calefactora de columna Agilent. El automuestreador de HPLC se programó para mantener la temperatura de muestra a 20ºC a lo largo del ensayo.

Se inyectaron 10 \muL de cada muestra por triplicado en la columna. Se utilizaron dos disolventes para el gradiente de disolvente. El disolvente A era una mezcla de trimetilpentano y tetrahidrofurano (99:1). El disolvente B era acetato de etilo. El gradiente utilizado se describe en la tabla siguiente:

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El detector evaporativo de dispersión de luz (ELSD) Sedex 75 se hizo funcionar a 45ºC con una ganancia de 5, y la presión de N_{2} se mantuvo a 3,1 bares. La señal analógica obtenida por el instrumento se envió al módulo de interfase A/D de Agilent, donde se convirtió en una salida digital. La conversión se basó en un punto de ajuste a 10000 mAU/volt, y la velocidad de datos se ajustó a 10 Hz (0,03 min). La salida digital resultante se introdujo entonces en el programa informático Agilent ChemStation para la integración del área de pico.

Los resultados del análisis por HPLC se indican en la tabla III siguiente. Los resultados se indican como la reducción de producción del éster de colesterol (CE) y éster de cera (WE), cuando se compara con el control de vehículo. Un valor negativo refleja un aumento de grasa, mientras que un valor positivo refleja una disminución.

TABLA III

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Ejemplo 10 Modelo animal para la alopecia androgénica

Como se describió anteriormente, la alopecia es un problema en el que la ciencia médica ha invertido unos recursos considerables. Como con cualquier proceso de enfermedad, se han desarrollado modelos animales para permitir a los científicos seleccionar compuestos por su potencial eficacia relativa. Aquellos compuestos que muestren la mayor eficacia en estos modelos animales se tienen en cuenta para un estudio posterior en seres humanos. Se han desarrollado dos modelos animales diferentes para obtener datos para la alopecia. El primero es un ensayo de conversión de la fase telógena, que utiliza ratones C3H/HeN hembra. El segundo modelo utiliza macacos de cola corta, que son monos que padecen alopecia androgénica.

El ensayo de conversión de la fase telógena mide el potencial de un compuesto para convertir la etapa de reposo del ciclo del crecimiento capilar ("fase telógena") en la etapa activa del ciclo de crecimiento capilar ("fase anágena") en ratones. Este ensayo aprovecha el hecho de que el pelo (es decir, el cabello) de ratones C3H/HeN de 7 semanas de edad se encuentra en la fase telógena. Esta fase continúa hasta aproximadamente 75 días de edad. En este ensayo, se afeitan áreas seleccionadas de los ratones, se ponen en contacto con un agente de ensayo, o un control, y se mide la diferencia en la velocidad de crecimiento capilar (es decir, la inducción de la fase anágena). La primera señal de fase anágena es el oscurecimiento del color de la piel a medida que los melanocitos en los folículos empiezan a sintetizar melanina, como preparación para la producción de pelos pigmentados. Este modelo tiene una serie de ventajas. Estas incluyen la disponibilidad fácil de ratones CH3HeN hembra, la capacidad de seleccionar un gran número de compuestos con rapidez y la facilidad de alojamiento y manipulación de estos animales.

La principal desventaja de este modelo es su falta de dependencia androgénica. Aunque la causa exacta de la calvicie humana no se conoce, sí está bien documentado que los andrógenos inducen una regresión de los folículos capilares en el cuero cabelludo. Este cambio regresivo postadolescente es una causa fundamental del patrón masculino de calvicie (es decir, "alopecia androgénica"). Este fenómeno se produce en hombres y mujeres que han heredado el rasgo genético para la alopecia, como se mencionó anteriormente. Para un análisis más detallado de los efectos de los andrógenos sobre el cuero cabelludo humano, los lectores deben dirigirse a Trueb, R. M., Molecular Mechanisms of Androgenic Alopecia, Exp. Gerontology, 2002, 27: 981-990.

Los investigadores buscaron otros animales cuyo crecimiento capilar fuera similar al de los seres humanos. Esto condujo a los investigadores a los macacos de cola corta. Estos primates también padecen alopecia androgénica. Prácticamente todos los macacos postadolescentes, en ambos sexos, muestran un desarrollo de calvicie. Al igual que el desarrollo del patrón masculino de calvicie en seres humanos, los andrógenos son un factor activador indispensable en la calvicie de macaco. El adelgazamiento de los pelos del cuero cabelludo frontal comienza a aparecer alrededor de la misma edad (4 años) en la que los niveles séricos de testosterona se hacen drásticamente elevados en los animales machos. Aunque el aumento de testosterona en las hembras es aproximadamente una décima parte del nivel de los machos, no existe diferencia en la incidencia y edad de la aparición de la calvicie entre machos y hembras de macacos de cola corta. La aplicación tópica de antiandrógenos ha revertido esta calvicie en animales de ambos sexos (Pan, H. J. et al., Evaluation of RU58841 as an anti-androgen in prostate PC3 cells and a topical anti-alopecia agent in the bald scalp of stump tailed macaques, Endocrine, 1998; 9: 39-43).

Aunque este modelo es una mejora significativa frente al ensayo de conversión de la fase telógena como modelo para la calvicie humana, tiene una serie de desventajas prácticas. Los macacos son caros, relativamente escasos, su mantenimiento da mucho trabajo y requieren largos periodos de descanso entre ensayos. Por tanto, el macaco no es un modelo práctico para seleccionar un gran número de compuestos.

Se ha descubierto que los ratones C3H/HeN macho pueden utilizarse en el ensayo de conversión de la fase telógena cuando se evalúan compuestos de ensayo antiandrógenos. Por tanto, el modelo se refiere a una modificación del ensayo existente de conversión de la fase telógena. Se utilizan ratones C3H/HeN macho de aproximadamente 7 semanas de edad. Estos animales también se encuentran, de forma uniforme, en la fase telógena, como sus compañeras hembras. Sin embargo, después de afeitados, los andrógenos presentes de forma inherente en estos ratones macho inhiben la conversión de los folículos capilares a la fase anágena. Un antiandrógeno bloqueará este efecto androgénico y los folículos pasarán a la fase anágena, como sus compañeras hembras.

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Ejemplo 10A

El compuesto descrito en el ejemplo 1 se sometió a un ensayo adicional utilizando el ensayo modificado de conversión de la fase telógena, como se ha descrito anteriormente. El ensayo se llevó a cabo de la siguiente manera.

Se utilizaron para el estudio ratones C3H/HeN macho de 6 a 7 semanas de edad (Charles River Laboratories, Raleigh, NC). Se cortó el pelo de la región dorsal de los ratones antes del inicio del estudio. Sólo se seleccionaron ratones con la piel rosa, una indicación visual de que estaban en la fase telógena, para su inclusión en el estudio.

El compuesto de ensayo se disolvió en un vehículo que consistía en transcutol, propilenglicol y etanol (2/2/6 v/v/v) para obtener una concentración de 1% p/v. Se aplicó tópicamente la dosis pertinente a la región dorsal afeitada del ratón en uno de los grupos de ensayo (7-10 ratones) en un volumen de 20 \muL/cm^{2}. Un segundo grupo de animales recibió sólo el vehículo para servir como control. Los tratamientos se aplicaron dos veces diarias durante 4 semanas.

Se observó el área de tratamiento y se calificó en días alternos para observar señales de crecimiento capilar. La respuesta de crecimiento capilar se cuantificó registrando, para cada animal, el día en que aparecieron por primera vez señales de crecimiento capilar en el área tratada. La primera señal de la fase anágena es el oscurecimiento del color de la piel a medida que los melanocitos en los folículos empiezan a sintetizar melanina, como preparación para la producción de pelos pigmentados. Los ratones se observaron durante 35 días o más.

La fase anágena se inició en el grupo de ensayo antes de su aparición en el grupo de control con vehículo, como se muestra a continuación en la figura 1.

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Claims

1. Un compuesto de fórmula:

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o una de sus sales, en el que:

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b): X^{2} no está presente, o representa halógeno, ciano, alcoxi C_{1}-C_{8}, haloalcoxi o haloalquilo;

c): n representa un número entero de 1 a 4;

i.: hidrógeno

ii.: halógeno,

iii.: ciano,

iv.: hidroxi,

v.: alquilo (C_{1}-C_{12}) opcionalmente sustituido,

vi.: alquenilo (C_{2}-C_{12}) opcionalmente sustituido,

vii.: alquinilo (C_{2}-C_{12}) opcionalmente sustituido,

viii.: cicloalquilo (C_{3}-C_{10}) opcionalmente sustituido,

ix.: cicloalquil (C_{3}-C_{10})-alquilo(C_{1}-C_{6}), en el que cada uno de los restos alquilo y cicloalquilo puede estar opcionalmente sustituido,

x.: arilo (C_{6}-C_{10}) opcionalmente sustituido,

xi.: aril (C_{6}-C_{10})-alquilo (C_{1}-C_{6}), en el que cada uno de los restos alquilo y arilo puede estar opcionalmente sustituido,

xii.: (CH_{2})_{z}-SR^{1},

xiii.: (CH_{2})_{z}-O-R^{1},

xiv.: (CH_{2})_{z}-NR^{1}R^{2},

xv.: (CH_{2})_{z}-COOR^{3},

xvi.: (CH_{2})_{z}-CONR^{3}R^{4},

xvii.: (CH_{2})_{z}-NR^{4}COR^{3}, y

xviii.: (CH_{2})_{z}OCOR^{3},

d): z representa un número entero de 0 a 6,

e): R^{3} representa un sustituyente elegido entre el grupo que consiste en hidrógeno, alquilo (C_{1}-C_{12}), alquenilo (C_{2}-C_{12}), alquinilo (C_{2}-C_{12}), arilo (C_{6}-C_{10}) opcionalmente sustituido y aril (C_{6} C_{10})-alquilo (C_{1}-C_{6}), en el que cada uno de los restos alquilo y arilo puede estar opcionalmente sustituido; y

f): R^{4} representa un sustituyente elegido entre el grupo que consiste en hidrógeno o alquilo (C_{1}-C_{12}).

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2. Un compuesto según la reivindicación 1, en el que n es 1.

3. Un compuesto según la reivindicación 1 ó 2, en el que R^{1} se elige entre el grupo que consiste en alquilo C_{1}-C_{6}, alcoxi C_{1}-C_{6}, halógeno, haloalquilo y haloalcoxi.

4. Un compuesto según la reivindicación 1, elegido entre el grupo que consiste en:

v): (+)-4-(2-oxo-tetrahidro-furan-3-iloxi)-2-trifluorometil-benzonitrilo; y

vi): (-)-4-(2-oxo-tetrahidro-furan-3-iloxi)-2-trifluorometil-benzonitrilo.

5. El (R)-(+)-4-(4,4-dimetil-2-oxo-tetrahidro-furan-3-iloxi)-2-trifluorometil-benzonitrilo, o una de sus sales farmacéuticamente aceptables.

6. Un compuesto según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5, como una medicina.

7. Uso de un compuesto según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5 en la elaboración de un medicamento para mejorar un estado elegido entre el grupo que consiste en cánceres dependientes de hormonas, hiperplasia benigna de la próstata, acné, hirsutismo, exceso de grasa, alopecia, síndrome premenstrual, cáncer de pulmón, pubertad precoz, osteoporosis, hipogonadismo, disminución de la masa muscular relacionada con el envejecimiento y anemia.

8. Una composición farmacéutica que comprende un compuesto según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5, mezclado con uno o más excipientes farmacéuticamente aceptables.

9. Una formulación farmacéutica tópica, que comprende un compuesto según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5 mezclado con uno o más excipientes farmacéuticamente aceptables, adecuado para la aplicación dérmica.

10. Un artículo elaborado que comprende un compuesto según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5, envasado para su distribución al por menor, que aconseja a un consumidor sobre cómo utilizar el compuesto para mejorar un estado elegido entre el grupo que consiste en acné, alopecia y piel grasa.

11. Uso de un compuesto según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5 en la elaboración de un medicamento para mejorar un estado elegido entre el grupo que consiste en alopecia, exceso de grasa e hirsutismo.

12. El (\pm)-4-(2-oxo-tetrahidro-furan-3-iloxi)-2-trifluorometil-benzonitrilo, o una de sus sales.