ES2296006T3 - Microorganismo separado de granos de kefir, cultivo de microorganismos obtenido cultivando dicho microorganismo o microorganismos que lo incluye y producto que usa dichos microorganismos o cultivos de microorganismos. - Google Patents
Microorganismo separado de granos de kefir, cultivo de microorganismos obtenido cultivando dicho microorganismo o microorganismos que lo incluye y producto que usa dichos microorganismos o cultivos de microorganismos. Download PDFInfo
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Abstract
Una nueva especie de microorganismo que tiene propiedades antioxidantes que se extrae de granos de kéfir y pertenece a Lactobacillae SIID 1769-6b que tiene el número de acceso de depósito FERM ABP-10299.
Description
Microorganismo separado de granos de kéfir,
cultivo de microorganismos obtenido cultivando dicho microorganismo
o microorganismos que lo incluye y producto que usa dichos
microorganismos o cultivos de microorganismos.
La presente invención se refiere a un
microorganismo antioxidante derivado de una sustancia natural, usado
como un material en bruto de, o añadido a, bebidas, comidas,
cosméticos y alimentos de animales, evitando de este modo su
deterioro debido a oxidación, y recogiendo o inhibiendo generación
de oxígenos activos y radicales libres que se han generado in
vivo de seres humanos y animales que usan tales bebidas,
comidas, cosméticos y alimentos de animales. La presente invención
se refiere también a un cultivo de microorganismo obtenido
cultivando dicho microorganismo o microorganismos que lo incluyen.
La presente invención se refiere adicionalmente a bebidas, comidas,
cosméticos y alimentos de animales que usan tales microorganismos o
cultivos de microorganismos.
Las enfermedades relacionadas con el estilo de
vida tales como neoplasma maligno (cáncer), enfermedades
cerebrovasculares y diabetes están entre las causas principales de
muerte en años recientes. Las principales causas de enfermedades
relacionadas con el estilo de vida incluyen oxígenos activos y
radicales libres. Hay diferentes clases de antioxidantes: aquellos
añadidos a las bebidas, comidas, cosméticos y alimentos de animales
para evitar su deterioro y preservar su calidad y aquellos usados
para recoger o inhibir generación de oxígenos activos y radicales
libres que se generan in vivo.
Cuando aceites y grasas contenidos en un
producto de bebidas, comidas, cosméticos o alimentos de animales se
oxidan, no sólo afectan al color y aroma del producto, sino que
también causan que el producto se coloree a marrón o pierda
frescura y que su valor nutricional se deteriore. Por esta razón,
muchas bebidas, comidas, cosméticos y alimentos de animales se
adicionan con antioxidantes para preservar su calidad.
Los antioxidantes usados para tales propósitos
en los campos de bebidas, comidas, cosméticos y alimentos de
animales incluyen antioxidantes naturales tales como ácido
L-ascórbico (vitamina C), eritorbato (ácido
isoascórbico) y tocoferol (vitamina E) así como antioxidantes
sintéticos fenólicos tales como
di-n-butil-hidroxitolueno
(BHT) e hidroxianisol butilado (BHA).
El ácido L-ascórbico se disuelve
fácilmente en agua y se usa a menudo por sus propiedades
oxidorreductoras fuertes. Es, sin embargo, difícil para usarse en
aceite y grasa comestible debido a que su ácido (acidez) cambia el
sabor de la comida. Por esta razón, el uso de ácido
L-ascórbico se limita a frutas y encurtidos
procesados, etc. Los tocoferoles se usan a menudo debido a su
capacidad para evitar oxidación innecesaria de ingredientes de
aceites. Sus propiedades antioxidantes, sin embargo, no son muy
fuertes, de modo que necesitan usarse en combinación con otros
antioxidantes.
Los antioxidantes naturales son generalmente
inferiores a los antioxidantes sintéticos con respecto a sus
propiedades antioxidantes. Por otro lado, mientras que los
antioxidantes sintéticos tales como
di-n-butil-hidroxitolueno
(BHT) e hidroxianisol butilado (BHA) tienen fuertes propiedades
antioxidantes, se consideran aditivos alimentarios dudosos debido a
sus propiedades inductoras de cáncer como se ejemplifica mediante
daño génico, mutagenicidad y cromosomas anormales. Su seguridad ha
sido cuestionada.
Se usan tanto antioxidantes naturales y
sintéticos en cosméticos para evitar oxidación de aceites y grasas
usados en ellos. Pero estos antioxidantes se considera que tienen
efectos adversos sobre la piel, causan piel áspera. Su seguridad ha
sido también cuestionada.
Por las razones anteriores, se ha deseado el
desarrollo de un antioxidante que tenga propiedades antioxidantes
fuertes y que sea altamente versátil y derivado de una sustancia
natural.
Las sustancias naturales que se han presentado
que presentan propiedades antioxidantes incluyen sustancias
bronceadoras, aminoácidos, alcoholes de azúcares, fructosa (azúcar
de fruta), pieles de frutas, wasabi (rábano picante japonés) y
catecinas. Los antioxidantes derivados de cultivos de
microorganismos incluyen extractos de bacterias lácticas que
presentan efectos antioxidantes.
En el pasado, estos antioxidantes se añadieron a
bebidas, comidas, cosméticos y alimentos de animales para los
propósitos de evitar su deterioro y preservar su calidad. Estos
antioxidantes se han encontrado también para recoger o inhibir
generación de oxígenos activos y radicales libres que se generan
in vivo. Para tomar ventaja de estas propiedades, se han
intentado conseguir extractos naturales con propiedades
antioxidantes in vivo fuertes.
Se conocen cuatro clases de oxígenos activos que
se generan mediante oxidación in vivo. Son: oxígenos en
singletes, superóxidos, radicales hidroxilo y peróxidos de
hidrógeno. Se conocen más de diez clases de radicales libres que
incluyen hidroperóxidos de alquilo y radicales hidroperóxido que se
generan mediante oxidación in vivo. Las propiedades
antioxidantes se pueden determinar midiendo la capacidad recolectora
de radicales usando
1,1-difenil-2-picrilhidrazina
(DPPH).
Se considera que la oxidación in vivo es
una causa que activa el envejecimiento, las enfermedades
relacionadas con el estilo de vida y los cánceres. El
envejecimiento causa debilitamiento de las funciones físicas no
tanto como enfermedades, tales como hipocinesia, hipofunción de
órganos internos, memoria que falla, cataratas y arrugas. También
causa deteriorar vasos sanguíneos, incrementando la vulnerabilidad a
esclerosis arterial. Las enfermedades relacionadas con el estilo de
vida que se consideran especialmente relevantes para oxidación
in vivo incluyen esclerosis arterial y diabetes, así como
daño del hígado y artritis reumatoide.
En cuanto a la relevancia para cáncer, la
oxidación in vivo se considera que es una de las causas que
transmuta y daña las sustancias que constituyen DNA y mutan otras
células cuando se regeneran. Con el fin de prevenir tales
enfermedades, están atrayendo la atención antioxidantes que
previenen o inhiben la oxidación in vivo. Se han investigado
y desarrollado en las formas de alimentos con las funciones
reivindicadas, alimentos y suplementos para usos de salud
especificados.
Los antioxidantes para tales propósitos incluyen
derivados de vegetales tales como carotenoides (betacaroteno,
licopeno, fucoxantina), compuestos fenólicos (flavonoide,
antocianina, catecina), sulfuros y betadicetonas, y cultivos de
microorganismos tales como DHA (ácido docosahexaenoico) y EPA (ácido
eicosapentaenoico).
Un objetivo de la presente invención es
proporcionar un microorganismo que sea un extracto natural con
fuertes propiedades antioxidantes, altamente versátil para bebidas,
comidas, cosméticos y alimentos de animales, y capaz de mantener el
sabor y aroma originales del producto teniendo mientras propiedades
antioxidantes in vivo, así como proporcionando un cultivo de
microorganismos que se obtiene cultivando este microorganismo. Otro
objetivo de la presente invención es proporcionar diversas bebidas,
comidas, cosméticos y alimentos de animales que usan tales
microorganismos.
El kéfir es un producto de leche fermentada
compuesto tradicional de bacterias ácidas lácticas y organismos de
levadura que se piensa que se ha originado en el Cáucaso, y se
fabrica cultivando granos de kéfir en leche.
El inventor de la presente invención descubrió
que los granos de kéfir naturales fabrican productos seguros para
seres humanos y animales cuando se usan en bebidas, comidas,
cosméticos y alimentos de animales, y continuó investigando en
diversos usos de kéfir. El inventor descubrió adicionalmente que un
líquido cultivado fabricado cultivando granos de kéfir en un
extracto de té verde y retirando bacterias del cultivo de
microorganismos tuvo un efecto blanqueador de la piel y que los
granos de kéfir por sí mismos tienen propiedades antioxidantes. En
base a estos hallazgos, el inventor solicitó una patente en forma de
un cosmético que toma ventaja de tales propiedades de kéfir
(Solicitud de Patente Japonesa Nº.: 2002-315520,
fecha de presentación de la Solicitud: 30 de octubre, 2002) y
Número de Publicación JP2004149442
(27-5-2004).
Como un resultado de investigación adicional, el
inventor ha identificado un microorganismo derivado de una
sustancia natural y que tiene propiedades antioxidantes que se
pueden usar como un material en bruto de, o añadido a, bebidas,
comidas, cosméticos y alimentos de animales, evitando de este modo
su deterioro debido a oxidación y recogiendo o inhibiendo
generación de oxígenos activos y radicales libres que se generan
in vivo de seres humanos y animales. El inventor ha
descubierto también que un cultivo de microorganismos obtenido
cultivando dicho microorganismo o microorganismos es capaz de lograr
los anteriores objetivos. El inventor ha venido a desarrollar
también un producto que tiene propiedades antioxidantes añadiendo
los microorganismos en bebidas, comidas, cosméticos y alimentos de
animales.
La presente invención se refiere a:
(1) una nueva especie de microorganismo que
tiene propiedades antioxidantes que se extrae de granos de kéfir y
pertenece a Lactobacillaceae SIID 1719-6b;
(2) un cultivo de microorganismos que tiene
propiedades antioxidantes obtenidas en un cultivo único de una
nueva especie de microorganismo que se extrae de granos de kéfir y
pertenece a Lactobacillaceae;
(3) un cultivo de microorganismos que tiene
propiedades antioxidantes que se obtiene cultivando microorganismos
extraídos de granos de kéfir y que pertenecen a Lactobacillaceae
(SIID 1719-6b);
(4) una bebida que tiene efectos antioxidantes
añadidos con cultivos o bacterias obtenidos cultivando
microorganismos extraídos de granos de kéfir y una nueva especie de
microorganismo que pertenece a Lactobacillaceae SIID
1719-6b;
(5) un producto alimenticio que tiene efectos
antioxidantes añadidos con cultivos o bacterias obtenidos cultivando
microorganismos extraídos de granos de kéfir y una nueva especie de
microorganismo que pertenece a Lactobacillaceae SIID
1719-6b;
(6) un cosmético que tiene efectos antioxidantes
añadidos con cultivos o bacterias obtenidos cultivando
microorganismos extraídos de granos de kéfir y una nueva especie de
microorganismo que pertenece a Lactobacillaceae SIID
1719-6b;
(7) un alimento de animales que tiene efectos
antioxidantes añadidos con cultivos o bacterias obtenidos cultivando
microorganismos extraídos de granos de kéfir y una nueva especie de
microorganismo que pertenece a Lactobacillaceae SIID
1719-6b.
Las "propiedades antioxidantes" se definen
de forma que incluyen la capacidad de evitar oxidación preservando
de este modo la calidad del producto así como la capacidad para
recoger o inhibir oxígenos activos y radicales libres que se
generan in vivo evitando de este modo la oxidación in
vivo cuando se da a animales o humanos como bebidas, comidas o
alimentos de animales. El "cultivo de microorganismos"
significa un cultivo de microorganismos o un único microorganismo
extraídos de granos de kéfir.
La invención como se describe en la
reivindicación 1 tiene el efecto de proporcionar una nueva especie
de microorganismo que tiene propiedades antioxidantes que se extrae
de granos de kéfir y pertenece a Lactobacillaceae SIID
1719-6b. Usando este microorganismo, el cual tiene
propiedades antioxidantes, como un material en bruto para bebidas,
comidas, cosméticos y alimentos de animales, o añadiéndolo a tales
productos o sus materiales en bruto, es posible evitar su deterioro
debido a oxidación y recoger o inhibir generación de oxígenos
activos y radicales libres que se generan in vivo en seres
humanos y animales que los usan.
La invención como se describe en la
reivindicación 2 tiene el efecto de proporcionar un cultivo de
microorganismos que tiene propiedades antioxidantes que incluye una
nueva especie de microorganismo extraído de granos de kéfir y que
pertenece a Lactobacillaceae SIID 1719-6b. Este
cultivo, el cual no es tóxico y no tiene ningún efecto adverso,
tiene una diversidad de aplicaciones incluyendo materiales en bruto
y aditivos para bebidas, comidas, cosméticos, alimentos de
animales, etc.
La invención como se describe en la
reivindicación 2 tiene el efecto de proporcionar un cultivo de
microorganismos que tiene propiedades antioxidantes que se obtiene
cultivando microorganismos extraídos de granos de kéfir que
pertenecen a Lactobacillaceae SIID 1719-6b. Este
cultivo, el cual no es tóxico y no tiene efecto adverso, tiene una
diversidad de aplicaciones que incluyen materiales en bruto y
aditivos para bebidas, comidas, cosméticos y alimentos de
animales.
La invención como se describe en las
reivindicaciones 4 y 7 tiene los efectos de proporcionar bebidas,
comidas, cosméticos y alimentos de animales antioxidantes que se
añaden con cultivos o bacterias obtenidos cultivando
microorganismos extraídos de granos de kéfir y una nueva especie de
microorganismo que pertenece a Lactobacillaceae SIID
1719-6b.
La fig. 1 es una gráfica que muestra la relación
entre el tiempo de cultivo y el crecimiento del microorganismo.
La fig. 2 es una gráfica que muestra la relación
entre el tiempo de cultivo (crecimiento del microorganismo) y los
cambios de pH.
La fig. 3 es una gráfica que muestra la relación
entre el tiempo de cultivo (crecimiento del microorganismo) y las
propiedades antioxidantes.
La fig. 4 es una fotografía de SIID
1719-6b teñido con tinción de Gram.
La fig. 5 muestra los resultados del análisis de
linaje molecular de SIID 1719-6b.
Las realizaciones preferidas de la presente
invención se explicarán ahora.
Las cepas de microorganismos extraídas de granos
de kéfir incluyen Acetobacter cerevisiae SIID
1719-2b, Gluconobacter oxydans
SIID1719-3b, Lactobacillus spp. SIID
1719-6b, la cual es una nueva especie de la familia
Lactobacillaceae, Pichiamembrani faciens
SIID1719-1y, Saccharomyces cerevisiae
SIID1719-4y y Picchia anomala
SIID1719-5y.
\newpage
Con el fin de descubrir si microorganismos
extraídos de granos de kéfir y un cultivo de microorganismos
obtenido en un único cultivo de Lactobacillus spp. SIID
1719-6b, el cual es una nueva especie de la cepa
familia Lactobacillaceae, tienen propiedades antioxidantes, los
inventores llevan a cabo las siguientes pruebas de evaluación. Como
un resultado, los inventores encontraron que estos microorganismos y
el Lactobacillus spp. SIID 1719-6b por sí
mismo tienen propiedades antioxidantes. Además, los principios
activos del cultivo que se retiran de bacterias en un separador
centrífugo y esterilizado usando un filtro esterilizador se encontró
que tenían propiedades antioxidantes. De acuerdo con la presente
invención, se puede usar cualquier cosa que muestre las mismas
propiedades en simbiosis con microorganismos cuya seguridad con
Lactobacillus spp. SIID 1719-6b está
confirmada. El Lactobacillus spp. SIID
1719-6b, el cual es una nueva especie de la familia
Lactobacillaceae, se depositó en el International Patent Organism
Depository of the National Institute of Advanced Industrial Science
and Technology.
Como un ejemplo típico, se cultivó una cepa de
Lactobacillus spp. SIID 1719-6b, el cual es
una nueva especie de la familia Lactobacillaceae, y se evaluaron
sus propiedades antioxidantes como se describe en los siguientes
párrafos.
Se cultivó una cepa de Lactobacillus spp.
SIID 1719-6b, el cual es una nueva especie de la
familia Lactobacillaceae, en un medio Caldo M.R.S. (Oxoid
Inglaterra, Reino Unido). La composición del medio M.R.S. se muestra
en tabla 1. Se cultivaron estáticamente 2 x 10^{6} células/ml de
bacterias a una temperatura de cultivo de 30ºC y se tomaron
muestras cada 24 horas para medir el número de bacterias y el pH.
Los cambios de crecimiento en el número de bacterias se muestran en
la fig. 1, y los cambios de pH se muestran en la fig. 2. No hay
limitaciones como para la composición del medio, el sustrato y
temperatura del cultivo en tanto como las condiciones permitan a
las bacterias crecer bien.
Los inventores pusieron a prueba las propiedades
antioxidantes del cultivo anterior. Primero, se añadieron 190
\mul de DPPH 0,1 mM (disueltos en etanol al 100%) a cada uno de
los 96 pocillos en una microplaca. Después, se añadieron muestras
del cultivo (0, 24, 48, 72, 96 y 120 horas) y 10 \mul del medio
MRS (blanco) a cada pocillo para comenzar las reacciones de
recogida de radicales. Se midió la absorción de luz inmediatamente
después (0 minutos) y 30 minutos después de la adición de las
muestras con un lector de microplaca. La velocidad de recogida de
radicales se calculó a partir de la absorción de la luz de los
blancos y muestras.
Los resultados se muestran en la fig. 3. Según
el tiempo de cultivo llega a ser más largo, los microorganismos
crecen y cambian su pH. Según crecen los microorganismos, las
propiedades antioxidantes llegan a ser también más evidentes.
Los inventores han identificado
Lactobaccillus sp. SIID 1719-6b como que es
de una nueva especie. Nuestro procedimiento de identificación y los
resultados de las pruebas de microorganismos se describen en los
párrafos siguientes.
Como una prueba de bacterias de primera fase,
los inventores observaron la forma de las células, la capacidad de
tinción por Gram, la existencia de esporas y la movilidad de los
flagelos usando un microscopio óptico (U-LH1000,
Olympus, Japón). Los inventores han observado las formas de colonias
en un Caldo MRS (Oxoid, Inglaterra, Reino Unido) + agar. Los
inventores probaron las reacciones de catalasa, reacciones de
oxidasa, generación de ácido y gas a partir de glucosa y oxidación
y fermentación de glucosa.
Los resultados de la prueba de propiedades
micológicas se muestran en la tabla 2, y se muestra una foto de un
cultivo teñido con Gram en la figura 4.
\vskip1.000000\baselineskip
Los inventores llevaron a cabo una prueba
fisiológica y bioquímica. Los resultados se muestran en la tabla
3.
\vskip1.000000\baselineskip
Los inventores usaron el Procedimiento de
PrepMan (Applied Biosystems, CA, EE.UU.) para extracción de los DNA
genómicos. Usando los DNA genómicos extraídos como plantillas, los
inventores amplificaron la región de aproximadamente 1500 a 1600
pares de bases de toda la secuencia de bases de genes de RNA
ribosómico de 16 S (rRNA de 16 S) mediante PCR. Después de eso, los
inventores secuenciaron los RNA de 16 S amplificados y obtuvieron
una secuencia de bases. Para purificación de productos de PCR y
secuencia de ciclo, los inventores usaron el Kit de Secuenciación
Bacteriano de rDNA de 16 S Completo MicroSeq (Applied Biosystems,
CA, EE.UU.) (MicroSeq es una marca registrada). Para el ciclador
térmico, los inventores usaron el GeneAmp PCR SYSTEM 9600 (Applied
Biosystems, CA, EE.UU.), y para el secuenciador de DNA, los
inventores usaron el Secuenciador de DNA ABI PRISM 3100 (Applied
Biosystems, CA, EE.UU.). Para las operaciones básicas desde la
extracción de los DNA del genoma hasta la secuencia de ciclo,
seguimos el protocolo de Applied Biosystems (P/N4308132 Rev.
A).
La secuencia de bases de rDNA de 16 S de
SID1719-6b se muestra en la tabla 4.
\newpage
Longitud de secuencia:
1521
Tipo de secuencia:
DNA
Nombre de organismo:
Lactobacillus
mali
- Secuencia
Usando BLAST, los inventores llevaron a cabo una
búsqueda de homología de la secuencia de bases anterior comparándola
con la base de datos de secuencias base de DNA, GenBank. A partir
de la secuencia de bases de rRNA de 16 S que se ha obtenido, los
inventores llevaron a cabo una búsqueda de homología por especies
que se considera que son parientes cercanos de las muestras e
identificaron las cinco cepas superiores. Los resultados de la
búsqueda de homología se muestran en la tabla 5.
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
En base a la información obtenida en la medida
en que sea posible, los inventores construyeron un linaje molecular
usando la secuencia de bases de rDNA de 16 S y la secuencia de bases
de rDNA 16 S de cepas que se consideran que son sus parientes más
cercanos. Los inventores transfirieron el alineamiento de la
secuencia de bases y el rDNA 16 S usados en la construcción del
linaje molecular a partir del GenBank/DDBJ/EMBL sobre la base del
alineamiento derivado de cepas. Para computación del linaje
molecular, los inventores usaron el procedimiento del vecino más
cercano, en el cual se generaron 1.000 repeticiones de muestreo con
reemplazamiento para probar la validez de la topología. Para
análisis, los inventores usaron DNASIS Pro (Hitachi Software
Engineering, Yokohama). Los resultados de análisis del linaje
molecular se muestran en la figura 5.
Los inventores extrajeron y purificaron DNA a
partir de bacterias cultivadas, y obtuvieron DNA para medir el
contenido G + C. Los inventores usaron Cromatografía Líquida de Alta
Resolución (HPLC). Los inventores añadieron 20 litros de solución
de nucleasa P1 (0,1 mg/ml de nucleasa P1 (kit de
DNA-GC, fabricado por Yamasa Corporation, vendido
por Seikagaku Corporation), 40 mM de acetato de sodio y 2 mM de
sulfato de cinc [pH 5,3]) a la misma cantidad de DNA (350 g/ml) que
se disuelve en agua esterilizada y se desnaturalizada térmicamente,
y los inventores trataron la solución durante una hora a 50ºC para
disolverla en nucleótidos y usarla como una plantilla para medida
de HPLC. Los inventores llevaron a cabo la medida usando un
dispositivo de HPLC (LC-10, Shimadzu, Kioto) bajo
las siguientes condiciones.
Fase móvil: tampón de fosfato 10 mM (fosfato de
potasio 10 mM, fosfato de potasio monobásico 10 mM [pH 7,0]).
Columna: Develosil RPAQUEOUS, \phi 4,6 mm x
250 mm (Nomura Chemical, Co., Ltd., Aichi).
Velocidad de flujo: 1,5 ml/minuto.
Longitud de onda: 270 mm.
Los inventores identificaron cada nucleótido a
partir de los tiempos de retención de compuesto nucleotídico
estándar (conteniendo iguales moles de dCMP, dAMP, dGMP y dTMP)
contenido en el kit de DNA-GC (fabricado por Yamasa
Corporation, vendido por Seikagaku Corporation) y la muestra. Al
mismo tiempo, los inventores calcularon la composición de base de
DNA de la muestra expresada como un contenido en GC a partir de la
razón de las áreas de pico del compuesto nucleotídico estándar y la
muestra usando la siguiente ecuación.
G + C' mol% =
((Cx/Cs + Gx/Gs)/(Cx/Gs + Ax/As + Gx/Gs + Tx/Ts)) x
100
Nx: valor del área de pico de dCMP, dAMP, dGMP y
dTMP de la muestra.
Ns: valor del área de pico de dCMP, dAMP, dGMP y
dTMP contenidos en el compuesto nucleotídico estándar.
Los resultados de la medida del contenido G + C
se muestran en la tabla 6.
\vskip1.000000\baselineskip
De acuerdo al análisis de la secuencia de bases
de rRNA 16 S, la similitud de SIID1719-6b a su cepa
pariente más cercano Lactobacillus mali es 95,3%. Mientras
que el contenido G + C de Lactobacillus mali es
32,5-33,0%, aquel de SID1719-6b es
40,5%. En taxonomía, hay una directriz para que dos especies se
consideren la misma especie. De acuerdo con esta directriz, para
que cualesquiera dos especies se consideren la misma especie, el
resultado de su prueba de formación de híbridos
DNA-DNA debe ser del 70% o mayor. Esa es la
definición de "ser la misma especie". Para que el resultado de
una prueba de formación de híbridos DNA-DNA sea del
70% o mayor, el resultado de un análisis de secuencia de bases de
rDNA de 16 S debe exceder del 97% y la diferencia en el contenido
de G + C entre dos especies comparadas debe ser menor del 3%. Los
resultados de prueba de los inventores no cumplen con estos
criterios. De acuerdo con ello, se ha encontrado que
SIID1719-6b es una nueva especie.
<110> Kabushiki Kaisha Yonezawa Biru
Shisutemu Sabisu
\vskip0.400000\baselineskip
<120> Un microorganismo extraído de los
granos de kéfir, un cultivo de microorganismos obtenido cultivando
este microorganismo o microorganismos que lo incluyen, y un producto
que los usa.
\vskip0.400000\baselineskip
<130> WM/et/es-15738
\vskip0.400000\baselineskip
<150> JP 2004-175 369
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<151>
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<160> 1
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<210> 1
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<211> 1521
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<212> DNA
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<213> Lactobacillus mali
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<400> 1
Claims (7)
1. Una nueva especie de microorganismo que tiene
propiedades antioxidantes que se extrae de granos de kéfir y
pertenece a Lactobacillae SIID 1769-6b que tiene el
número de acceso de depósito FERM ABP-10299.
2. Un cultivo de microorganismos que tiene
propiedades antioxidantes obtenido en un cultivo único de la nueva
especie de microorganismo de acuerdo con la reivindicación 1.
3. Un cultivo de microorganismos de acuerdo con
la reivindicación 2, en el que la bacteria se retira mediante un
separador centrífugo y se esteriliza usando un filtro
esterilizador.
4. Una bebida que tiene efectos antioxidantes
añadida con cultivos o bacterias obtenidos cultivando
microorganismos extraídos de granos de kéfir y una nueva especie de
microorganismos de acuerdo con la reivindicación 1.
5. Un producto alimenticio que tiene efectos
antioxidantes añadida con cultivos o bacterias obtenidos cultivando
microorganismos extraídos de granos de kéfir y una nueva especie de
microorganismos de acuerdo con la reivindicación 1.
6. Un cosmético que tiene efectos antioxidantes
añadido con cultivos o bacterias obtenidas cultivando
microorganismos extraídos de granos de kéfir y una nueva especie de
microorganismo de acuerdo con la reivindicación 1.
7. Un alimento de animales que tiene efectos
antioxidantes añadido con cultivos o bacterias obtenidas cultivando
microorganismos extraídos de granos de kéfir y una nueva especie de
microorganismo de acuerdo con la reivindicación 1.
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